## POTENSI CRYOPRESERVASION BENIH KOPI ARABIKA: PENGARUH POTENSIAL OSMOTIK DAN DURASI OSMOCONDITIONING TERHADAP VIABILITAS DAN INDEKS VIGOR HIPOTETIK BENIH
Yosefina Lewar 1 , Maria Klara Salli 2 , Olivina S. Messakh 1
1 Jurusan Tanaman Pangan dan Hortikultura, 2 Jurusan Manajemen Pertanian Lahan Kering Politeknik Pertanian Negeri Kupang Jl. Adisucipto Penfui, P. O. Box. 1152, Kupang 85011

## ABSTRACT
Cryopreservasion  Potency  of Coffea  arabica Seed:  Influence  of Potential Osmotic and Osmoconditioning Duration to  Viability and  Hypothetic Vigor Index of Seed . This research aimed to prove the influence of potential osmotic and osmoconditioning to  cure the  seed viability  and  hypothetic  vigor  index  of Coffea arabica as  the  result  of  draining  or  degradation  of  seed  water  until  12%.  This research was an early step to test cryopreservasion potency of Coffea arabica seed, arranging factorially  in Completely  Randomized  Design,  consisting  of  two  factors that are three potential osmotic levels (P): -0.5 Mpa; -1.0 MPa and -1.5 Mpa; and 3- osmoconditioning  duration  level (D):  3, 5,  and  7  days;  and  control  (without osmoconditioning).  Variables  measured  were  electrical  conductivity, free fat acid contents, radicel growth, time required for reaching 50% seed germination (T 50 ), seed viability and hypothetic vigor index. Data obtained were analyzed using Analysis of Variance, and Duncan Multiple Range Test (DMRT) at 5%. The result indicated that potential  osmotic -0.5  MPa  of  osmoconditioning  performed  best  influence  to  T 50 . Potential osmotic of -1.5 MPa presented best effect to seed viability and hypothetic vigor  index.  Five  days  Osmoconditioning  performed  best  influence  to  time T 50 . Potential osmotic -0.5 MPa of 3-days osmoconditioning presented best influence  to free  fat  acid  contents  and seed  viability. Potential  osmotic -0.5  MPa  of  5-days osmoconditioning  performed  best  influence  to  free  fat  acid  contents  and  radicel growth. Potential osmotic -1,0 MPa and 5-days osmoconditioning were best affected to seed viability; while, potential osmotic -1.5 MPa of 5-days osmoconditioning also performed best influence to seed viability, and potential osmotic -1.5 MPa of 7-days were significant to seed viability and electrical conductivity of Coffea arabica.
Keywords:  cryopreservasion,  potential  osmotic, osmoconditioning  duration, Coffea arabica

## PENDAHULUAN
Kopi ( Coffea spp) memiliki nilai ekonomi yang tinggi bagi banyak negara di dunia,  sehingga  konservasi  terhadap  plasma  nutfahnya  memiliki  arti  penting. Metode terkini yang tersedia untuk memastikan penyimpanan jangka panjang yang aman  dan  efektif bagi  sumber-sumber  genetik  tanaman  yang  memiliki  benih  non ortodok  adalah cryopreservasion (pembekuan  dalam  nitrogen  cair -196 0 C). Cryopreservation menyebabkan  pembekuan  yaitu  terbentuknya  kristal  es  di  dalam sel sehingga dapat merusak sel tersebut. Air merupakan komponen utama dari sel- sel  hidup  dan  harus  tersedia  untuk  proses-proses  kimia  yang  mendukung kehidupan, maka metabolisme sama sekali terhenti ketika semua air yang terdapat di  dalam  sel  berubah  menjadi  es  (Simione,  1998).  Oleh  karena  itu,  tahap  kritikal terpenting  di  dalam cryopreservation bahan  hidup  tanaman  adalah  induksi ketahanan  terhadap  pembekuan.  Induksi  ketahanan  terhadap  pembekuan  dapat dilakukan dengan pengeringan.
Benih  kopi  arabika  ( Coffea arabica L.)  termasuk  benih  intermediet  yang dapat dikeringkan sampai kadar air relatif rendah yaitu 15% berdasarkan berat segar (Lima et al ., 2001), namun kadar air ini masih belum cukup rendah untuk cryopreservation (Dussert et al ., 2000). Oleh karena itu, diperlukan pengeringan sehingga  benih  kopi  arabika  mempunyai  kadar  air  yang  lebih  rendah.  Upaya untuk  mempertahankan  dan  meningkatkan  viabilitas  dan  vigor  benih  kopi arabika selama dan setelah dibekukan atau diturunkan lagi kadar airnya, perlu dilakukan. Osmoconditioning dibutuhkan untuk mengaktifkan dan mengefektifkan  proses-proses  pemulihan  diri  benih  sebelum  berkecambah. Keberhasilan osmoconditioning dipengaruhi  oleh  potensial  osmotik  dan durasinya.

## METODE PENELITIAN
Penelitian telah dilaksanakan pada Juni sampai Nopember 2007 di Politeknik Pertanian  Negeri  Kupang,  dengan  memanfaatkan  fasilitas  yang  ada  pada Laboratorium Produksi Tanaman dan Laboratorium Umum.
Penelitian ini menggunakan rancangan pola faktorial 3 x 3 yang disusun dalam Rancangan Acak Lengkap (RAL). Faktor pertama adalah potensial osmotik (P) yang terdiri atas 3 taraf yaitu -0,5 MPa (P 1 ), -1,0 MPa (P 2 ), dan -1,5 MPa (P 3 ). Faktor kedua adalah durasi osmoconditioning (D) yang terdiri atas 3 taraf yaitu osmoconditioning selama  3  hari  (D 3 ), osmoconditioning selama  5  hari  (D 5 ),  dan osmoconditioning selama  7  hari  (D 7 ).  Selain  itu  ada  juga  perlakuan  tanpa osmoconditioning sebagai  kontrol.  Setiap  kombinasi  perlakuan  yang  akan  diuji diulang  sebanyak  4  kali.  Data  hasil  penelitian  akan  dianalisis  menggunakan sidik  ragam,  dan  apabila  terdapat  pengaruh  yang  signifikan  maka  akan dilanjutkan dengan Duncan Multiple Randomized Test (DMRT) taraf 5%. Benih  yang  digunakan  adalah  buahkopi  arabika  S  795  yang  telah  masak fisiologis  dan  secara  fisik  sempurna  serta  bebas  dari  penyakit. Benih  difermentasi alami,  dan  disortasi  berdasarkan bentuk  fisik,  ukuran  dan  jumlah  embrio. Selanjutnya,  benih  dikeringkan  dalam  ruangaan  berAC  pada  suhu  22 0 C  hingga mencapai  kadar  air  12%. Osmoconditioning benih  dilakukan  dengan  perendaman dalam larutan PEG-6000 -0,5 MPa, -1,0 MPa, dan -1,5 MPa selama 3, 5, dan 7 hari Perbandingan  benih  dengan  larutan  adalah  1:2  (vol:vol).  Untuk  menjamin ketersediaan oksigen digunakan aerator . Pengamatan  dilakukan  terhadap  parameter  kadar  asam  lemak bebas, daya  hantar  listrik,  pertumbuhan  radikel,  daya  tumbuh,  waktu  yang dibutuhkan untuk mencapai 50% daya tumbuh (T 50 ), dan indeks vigor hipotetik.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Benih  kopi  arabika  jenis  S  795  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini mempunyai  kadar air  awal  44,94%.  Penurunan  kadar  air  benih  atau pengeringan hingga 12% dengan menggunakan AC pada suhu 22 0 C berdampak pada  penurunan  kualitas  benih  kopi  arabika,  baik  kualitas  fisik,  kimiawi maupun  fisiologis.  Meskipun  terjadi  penurunan  kualitas  benih  akibat pengeringan,  namun  kualitas  benih  masih  tergolong  baik.  Hal  ini  diakibatkan oleh  pengeringan  atau  penurunan  kadar  air  secara  perlahan-lahan  atau  tidak secara tiba-tiba dengan suhu 22 0 C yang berasal dari AC.

## Kadar Asam Lemak Bebas
Hasil  analisis  ragam  pengaruh  perlakuan  terhadap  kadar  asam  lemak bebas menunjukkan adanya interaksi sangat nyata dari kedua perlakuan yang diberikan.  Hasil  uji  DMRT  5%  terhadap  rerata  kadar  asam  lemak  bebas  benih kopi arabika disajikan pada Tabel 1.
Tabel 1. Pengaruh Potensial Osmotik dan Durasi Osmoconditioning Terhadap Rerata Kadar Asam Lemak Bebas Benih Kopi Arabika (%)
Potensial Osmotik Durasi Osmoconditioning Rerata D 3 D 5 D 7 P 1 4.5683 a 4.5995 a 7.0413 d 5.4030 P 2 7.6658 e 6.8520 c 5.9760 bc 6.3621 P 3 6.9150 d 6.3203 c 5.8510 e 6.8313 Rerata 6.3830 5.9239 6.2894 (+) Kontrol (P 0 D 0 )

## 8.0483 f
Keterangan: Angka yang diikuti oleh huruf yang sama pada baris dan kolom yang sama tidak berbeda nyata pada DMRT 5%
Dari  Tabel  1  menunjukkan  bahwa  kadar  asam  lemak bebas  tertinggi dijumpai pada perlakuan tanpa osmoconditioning . Kadar asam lemak bebas yang tinggi  tersebut  diakibatkan  oleh  terurainya  cadangan lemak  benih  dan  disertai dengan peningkatan permeabilitas kulit benih. Akumulasi asam lemak bebas ini menyebabkan  rusaknya  membran  sel,  meningkatnya  konduktivitas  listrik  dan penurunan vigor benih di lapang. Sedangkan kadar asam lemak bebas terendah dijumpai  pada  perlakuan  potensial  osmotik -0,5  MPa  dengan  durasi  proses osmoconditioning 3  dan  5  hari.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  pada  potensial osmotik -0,5 MPa dengan durasi 3 dan 5 hari mampu menurunkan kadar asam lemak  bebas  yang  diakibatkan  oleh  proses pengeringan  atau  penurunan  kadar air hingga 12%.
Hal tersebut di atas sejalan dengan pernyataan Bailly et al (2000) bahwa pengembalian  viabilitas  benih  selama osmoconditioning berhubungan  dengan penurunan  asam-asam  lemak  bebas,  yaitu  penurunan  pada  kadar malondialdehid  dan  senyawa  yang  terkonjungasi  dengannya,  yang mengindikasikan  terhentinya  proses-proses  lipid  peroksidasi  dan  peningkatan pada  protein  (berhubungan  dengan  kembalinya  aktivitas  enzim-enzim detoksifikasi dengan mengontrol laju lipid peroksidasi melalui pembersihan H 2 O 2 dan  memproduksi  antioksidan). Osmoconditioning dapat  menurunkan  kadar asam lemak bebas dan meminimalkan kebocoran sel dengan menjaga stabilitas fosfolipid  dwilapis  melalui water  replacement  hypotesis dan  induksi  senyawa- senyawa yang berfungsi sebagai antioksidan dan enzim-enzim pembersih radikal dan peroksida bebas.

## Daya Hantar Listrik
Konduktivitas  mencerminkan  tingkat  kerusakan  membran,  makin  tinggi konduktivitas  makin  tinggi  pula  tingkat  kerusakan  membran.  Hasil  analisis ragam  pengaruh  perlakuan  terhadap  daya  hantar  listrik  menunjukkan  adanya
interaksi sangat nyata dari kedua perlakuan yang diberikan. Hasil uji DMRT 5% terhadap rerata daya hantar listrik disajikan pada Tabel 2.
Tabel  2.  Pengaruh  Potensial  Osmotik  dan  Durasi Osmoconditioning terhadap Rerata Daya Hantar Listrik Benih Kopi Arabika (mS/cm) Potensial Osmotik Durasi Osmoconditioning Rerata D 3 D 5 D 7 P 1 0,0325 ab 0,0175 ab 0,0725 c 0,0408 P 2 0,0425 b 0,0325 ab 0,0175 ab 0,0308 P 3 0,0200 ab 0,0325 ab 0,0100 a 0,0208 Rerata 0,0317 0,0275 0,0333 (+) Kontrol (P 0 D 0 )

## 0,1475 d
Keterangan:  Angka  yang  diikuti  oleh  huruf  yang  sama  pada  baris  dan  kolom  yang sama tidak berbeda nyata pada DMRT 5%
Tabel  2  menunjukkan  bahwa  nilai  daya  hantar  listrik  tertinggi  dijumpai pada  perlakuan  tanpa osmoconditioning ,  hal  ini  disebabkan  telah  terjadinya kebocoran  membran  akibat  pengeringan  benih.  Daya  hantar  listrik  tinggi menunjukkan  permeabilitas  sel  meningkat  akibat  ketidakteraturan  membran. Ketidakteraturan  membran  sel  menunjukkan  membran  sel  rusak.  Hilangnya integritas membran juga sebagai akibat perombakan lipid yang mengakibatkan sel  tidak mampu  melakukan  penyerapan  osmosa,  kegagalan  sel mempertahankan turgor, sel tidak dapat bermetabolisme dengan baik, sehingga perombakan  cadangan  makanan  dan  sintesis  senyawa  baru  juga  terganggu, akibatnya daya tumbuh dan vigor menurun. Daya hantar listrik terendah dijumpai pada perlakuan potensial osmotik - 1,5  MPa  dengan  durasi osmoconditioning 7  hari  (P 3 D 7 ),  tetapi  tidak  berbeda dengan perlakuan P 1 D 3 , P 1 D 5 , P 2 D 5 , P 2 D 7 , P 3 D 7 P 3 D 3 , dan P 3 D 5 . Osmoconditioning memiliki  peran  penting  dalam  mencegah  kebocoran  membran  melalui water replacement  hypotesis dan  induksi  senyawa-senyawa  yang  berfungsi  sebagai antioksidan  dan  enzim-enzim  pembersih  radikal  dan  peroksida  bebas. Keberhasilan osmoconditioning tergantung  pada  potensial  osmotik  dan  juga durasi osmoconditioning .

## Pertumbuhan Radikel
Hasil analisis ragam pengaruh perlakuan terhadap pertumbuhan radikel menunjukkan  adanya  interaksi  sangat  nyata  dari  kedua  perlakuan  yang diberikan.  Hasil  uji  DMRT  5%  terhadap  rata-rata  daya  tumbuh  benih  kopi arabika disajikan pada Tabel 3.
Pada Tabel 3 di bawah terlihat bahwa perlakuan osmoconditioning dengan potensial  osmotik  dan  durasi osmoconditioning yang  berbeda  memberikan pengaruh  terhadap  pertumbuhan  radikel  dari  benih  kopi  arabika  berkadar  air 12%.  Pertumbuhan  radikel  terbaik  dijumpai  pada  perlakuan  P 1 D 5 ,  akan  tetapi tidak berbeda dengan perlakuan P 2 D 7 , P 3 D 3 , P 3 D 5 , dan P 3 D 7 .
Benih yang memiliki pertumbuhan radikel baik dengan persentase pertumbuhan tinggi,  maka  akan  berkorelasi  positif  terhadap  daya  tumbuh  dan  vigor  bibit selanjutnya.  Selama osmoconditioning terjadi  aktivasi  enzim  dan  proses-proses metabolisme  yang  penting  untuk  perkecambahan,  sehingga  benih  siap  untuk berkecambah.  Menurut  Bray,  1995 dalam Come et  al (1997) osmoconditioning berdampak  positif  terhadap  aktivasi  enzim  dan  proses-proses  metabolisme perkecambahan dipengaruhi oleh potensial osmotik dan durasi osmoconditioning .  Potensial  air  selama osmoconditioning bervariasi  antara -0,5 dan -1,5 MPa tergantung spesies, tapi umumnya kadar air benih dipertahankan sekitar  40-45%  (Bray,  1995 dalam Come et  al .,  1997).  Pengaruh osmoconditioning pada  proses  perkecambahan  juga  akan  meningkat  dengan durasi  perlakuan  (sampai  batas  tertentu) dan  pada  umumnya menjadi  optimal setelah 7 hari (Corbineau et al ., 1998 dalam Come et al ., 1997).

## Daya Tumbuh Benih
Hasil  analisis  ragam  pengaruh  perlakuan  terhadap  daya  tumbuh menunjukkan  adanya  interaksi  nyata  dari  kedua  perlakuan  yang  diberikan. Menurut Bray, 1995 dalam Come et al (1997) bahwa pengaruh osmoconditioning tergantung pada potensial air dan durasinya. Hasil uji DMRT 5% terhadap rata- rata daya tumbuh benih kopi arabika disajikan pada Tabel 4.
Tabel 4. Pengaruh Potensial Osmotik dan Durasi Osmoconditioning Terhadap Rerata Daya Tumbuh Benih Kopi Arabika (%) Potensial Osmotik Durasi Osmoconditioning Rerata D 3 D 5 D 7 P 1 100,00 a 96,00 ab 96,00 ab 97,33 P 2 89,00 b 98,00 a 94,00 ab 93,67 P 3 89,00 b 97,00 a 97,00 a 94,33 Rerata 92,67 97,00 95,67 (+) Kontrol (P 0 D 0 ) 72 ,00 c
Keterangan:  Angka  yang  diikuti  oleh  huruf  yang  sama  pada  baris  dan  kolom  yang sama tidak  berbeda nyata pada DMRT 5%
Dari  Tabel  4  terlihat  bahwa  daya  tumbuh  terendah  dijumpai  pada perlakuan  tanpa osmoconditioning ,  hal  ini  menunjukkan  bahwa  benih  kopi
Tabel  3.  Pengaruh  Potensial  Osmotik  dan  Durasi Osmoconditioning Terhadap
Rerata Pertumbuhan Radikel Benih Kopi Arabika (%) Potensial Osmotik Durasi Osmoconditioning Rerata D 3 D 5 D 7 P 1 87,50 c 97,50 a 90,00 bc 91,67 P 2 90,00 bc 85,00 cd 96,25 ab 90,42 P 3 95,00 ab 96,25 ab 95,00 ab 95,42 Rerata 90,83 902,92 93,75 (+) Kontrol (P 0 D 0 ) 80,00 d
Keterangan:  Angka  yang  diikuti  oleh  huruf  yang  sama  pada  baris  dan  kolom  yang sama tidak  berbeda nyata pada DMRT 5%
arabika  yang  telah  dikeringkan  atau  diturunkan  kadar  air  hingga  12% mengalami  deteriorasi  atau  kemunduran  kualitas.  Sedangkan, daya  tumbuh tertinggi  dijumpai  pada  perlakuan  potensial  osmotik -0,5  MPa  dengan  durasi osmoconditioning 3  hari  atau  72  jam.  Selama osmoconditioning terjadi  aktivasi enzim  dan  proses-proses  metabolisme  yang  penting  untuk  perkecambahan, sehingga  benih  siap  untuk  berkecambah Lima et  al (2000)  meng- conditioning benih  kopi  arabika  kadar  air  ±  15%  (berdasarkan  berat  basah)  dengan  cara pelembaban  dalam -0,4  MPa  PEG-6000  mampu  meningkat  perkecambahan sebesar 70,5% bila dibandingkan tanpa osmoconditioning (54%). Come et  al (1997)  menyatakan  bahwa osmoconditioning dapat meningkatkan viabilitas benih yang telah mundur, selama benih tersebut masih viabel.  Semakin  rendah  viabilitasnya,  maka  semakin  lama  benih. Akan  tetapi benih kopi arabika yang mengalami pengeringan ini tingkat viabilitasnya masih cukup tinggi, sehingga potensial osmotik -0,5 MPa dengan durasi 3 hari sudah mampu  memulihkan  benih  yang  terdeteriorasi  tersebut.  Potensial  air  selama osmoconditioning dapat  dipertahankan  sekitar  40-45%  (berdasarkan  berat basah).
Waktu yang Dibutuhkan untuk Mencapai Daya Tumbuh 50% (T 50 )
Hasil  analisis  ragam  pengaruh  perlakuan  terhadap  waktu  yang dibutuhkan  untuk  mencapai  kecambah  fase  serdadu  50%  menunjukkan  tidak adanya  interaksi  dari  kedua  perlakuan  yang  diberikan. Potensial  osmotik  dan durasi osmoconditioning berperan  secara  sendiri-sendiri  terhadap  T 50 .  Hal  ini juga  dilaporkan  oleh  Adisyahputra,  dkk  (2001)  bahwa  waktu  yang  dibutuhkan untuk  mencapai  50%  (T 50 )  pertumbuhan akar  bagi  tanaman  tomat  dapat dikurangi  dengan  menggunakan  PEG.  PEG  efektif  menurunkan  waktu  yang dibutuhkan  untuk  perkecambahan  dan  munculnya  semai  (mempercepat), meningkatkan ketahanan melawan pengaruh-pengaruh lingkungan (Heydecker, 1973; Khan et al., 1978 dalam Fu, Lu, Chen, Zhang, Liu, Li dan Cai, 1988). Hasil uji DMRT 5% terhadap rata-rata T 50 benih kopi arabika disajikan pada Tabel 5.
Tabel 5. Pengaruh Potensial Osmotik dan Durasi Osmoconditioning Terhadap
Rerata T 50 Benih Kopi Arabika (hari) Potensial Osmotik Durasi Osmoconditioning Rerata D 3 D 5 D 7 P 1 22,00 15,00 22,00 19,67 a P 2 28,00 22,00 27,75 25,92 b P 3 28,00 21,50 28,00 25,83 b Rerata 26,00 b 19,50 a 25,92 b (-) Kontrol (P 0 D 0 ) 37,00 c
Keterangan:  Angka  yang  diikuti  oleh  huruf yang  sama  pada  baris  dan  kolom  yang sama tidak  berbeda nyata pada DMRT 5%
Tabel 5 memperlihatkan bahwa waktu yang dibutuhkan untuk mencapai 50%  kecambah  fase  serdadu  (T 50 )  terlama  dijumpai  pada  perlakuan  tanpa osmoconditioning ,  hal  ini  menunjukkan  bahwa benih  kopi  arabika  yang  telah dikeringkan atau diturunkan kadar air hingga 12% mengalami deteriorasi atau kemunduran  kualitas.  Sedangkan  T 50 tercepat  dijumpai  pada  perlakuan potensial osmotik -0,5 MPa, dan juga pada durasi osmoconditioning 5 hari atau 120 jam.  Hal  ini  membuktikan  bahwa  pada  potensial  osmotik -0,5  MPa  telah
mampu memulihkan benih sehingga waktu yang dibutuhkan benih kopi arabika untuk  berkecambah  lebih  cepat.  Semakin  meningkatnya  potensial  osmotik semakin memperlama waktu yang yang dibutuhkan benih untuk berkecambah atau bertumbuh. Hal ini didukung oleh penelitian yang dilakukan oleh Agustin Kusyati dkk (1991) bahwa daya berkecambah semakin menurun seiring dengan peningkatan tekanan osmotik.
Sedangkan  dengan  durasi osmoconditioning 5  hari  mampu  mempercepat benih untuk berkecambah. Menurut Corbineau et al ., (1998) dalam Come et al .,
(1997)  bahwa  pengaruh osmoconditioning pada  proses  perkecambahan  akan meningkat dengan durasi perlakuan (sampai batas tertentu) dan pada umumnya menjadi  optimal  setelah  7  hari.  Dari  hasil  penelitian  ini  menunjukkan  bahwa proses osmoconditioning benih kopi arabika akan optimal setelah 5 hari. Apabila kurang  dari  durasi  tersebut  proses osmoconditioning belum  berlangsung sempurna,  sedangkan  bila  lebih  dari  durasi  tersebut  akan  menurunkan  peran dari osmoconditioning .

## Indeks Vigor Hipotetik
Hasil analisis ragam pengaruh perlakuan terhadap indeks vigor hipotetik menunjukkan  tidak  adanya  interaksi  dari  kedua  perlakuan  yang  diberikan. Indeks  vigor  hipotetik  hanya  dipengaruhi  oleh  perlakuan  potensial  osmotik. Hasil  uji  DMRT  5%  terhadap  rata-rata  indeks  vigor  hipotetik kopi  arabika disajikan pada Tabel 6.
Tabel  6.  Pengaruh  Potensial  Osmotik  dan  Durasi
Osmoconditioning Terhadap Rerata Indeks Vigor Hipotetik Bibit Kopi Arabika Potensial Osmotik Durasi Osmoconditioning Rerata D 3 D 5 D 7 P 1 1,400 1,426 1,435 1,420 b P 2 1,449 1,443 1,500 1,464 ab P 3 1,496 1,490 1,605 1,530 a Rerata 1,448 1,453 1,513 (-) Kontrol (P 0 D 0 ) 1,126 c
Keterangan:  Angka  yang  diikuti  oleh  huruf  yang  sama  pada  baris  dan  kolom  yang sama tidak berbeda nyata pada DMRT 5%
Tabel 6 memperlihatkan bahwa indeks vigor hipotetik terendah dijumpai pada  perlakuan  tanpa osmoconditioning (tanpa  potensial  osmotik),  hal  ini disebabkan  benih  yang  telah  dikeringkan  hingga  kadar  air  12%  terdeteriorasi atau  mengalami  kemunduran  kualitas.  Deteriorasi  ini  berpengaruh  pada pertumbuhan bibit sehingga vigor bibitpun rendah. Indeks vigor hipotetik bibit tertinggi  dijumpai  pada  perlakuan  potensial  osmotik -1,5  MPa,  tetapi tidak berbeda dengan perlakuan potensial osmotik -1,0 MPa. Semakin tinggi potensial osmotik  sampai  batas  tertentu  semakin  meningkatkan  indeks  vigor  hipotetik kopi arabika berkadar air 12%.

## KESIMPULAN DAN SARAN
Osmoconditioning berpengaruh  terhadap  pemulihan  viabilitas  dan  vigor benih kopi arabika akibat pengeringan atau penurunan kadar air benih hingga 12%.  Potensial  osmotik -0,5  MPa  memberikan  pengaruh  terbaik  terhadap  T 50 ,
potensial  osmotik -1,5  MPa  berpengaruh  terbaik  terhadap  daya  tumbuh  dan indeks  vigor  hipotetik.  Durasi osmoconditioning selama  5  hari  memberikan pengaruh terbaik terhadap waktu yang dibutuhkan untuk mencapai 50% benih berkecambah (T 50 ). Potensial osmotik -0,5 MPa dengan durasi osmoconditioning selama 3 hari memberikan  pengaruh  terbaik terhadap  kadar  asam  lemak  bebas  dan  daya tumbuh  benih.  Pada  potensial  osmotik -0,5  MPa  dengan  durasi  5  hari  juga memberikan  pengaruh  terbaik  terhadap  kadar  asam  lemak  bebas  dan pertumbuhan  radikel.  Kombinasi  perlakuan  potensial  osmotik -1,0  MPa  dan durasi 5  hari  berpengaruh  terbaik  terhadap  daya  tumbuh.  Sedangkan  pada potensial osmotik -1,5 MPa dengan durasi 5 hari memberikan pengaruh terbaik terhadap daya tumbuh benih, potensial osmotik yang sama dengan durasi 7 hari juga berpengauh baik terhadap daya tumbuh dan daya hantar listrik benih kopi arabika.

## DAFTAR PUSTAKA
Adisyahputra.,  S.  Ilyas  dan  Sudarsono. 2001. Efektivitas  PEG  Untuk  Menguji Tanggap  Kacang  Tanah  Terhadap  Cekaman  Kekeringan  Pada  Tahapan Perkecambahan  Secara  Ex-Vitro . Panduan  Seminar  dan  Peluncuran Buku Retrospeksi Perjalanan Industri Benih di Indonesia. Kerjasama PT. Sang Hyang Seri dan Laboratorium Ilmu dan Teknologi Benih. Bogor. Agustin K.,  E. Murniati &  T.  Budiarti. 1991. Kemungkinan  Perlakuan  Priming Untuk  Pematahan  Dormansi  Pada  Benih Terung .  Keluarga  Benih  Vol.  II No. 2. Forum Komunikasi Antar Peminat dan Ahli Benih. Bogor. Bailly, C., A. Benamar, F. Corbineau & C. Come. 2000. Antioxidant Dystems  in Sunflower  (Helianthus  annuus  L)  Seed  as  Effected  by  Priming .  Seed Science Research. 10 (1):35-42. Come,  D.,  N.  Ozbingol,  M.A.  Picard & F.  Corbineau. 1997. Beneficial  Effects  of Priming on Seed Quality . In A.G. Taylor & X.L, Huang (Eds.). Progress in Seed  Research,  Conference  Proceedings  of the Second  International Conference on Seed Science and Technology 12-16, 1997. Hal: 257-263. Dussert,  S.,  N. Chabrillange,  F.  Engelmann,  F.  Anthony & S.  Hamon.  2000. Cryopreservasion of Coffee ( Coffea arabica L.) Seeds: Toward a Simplified Protocol  for  Routine  Use  in  Coffee  Genebanks. In F.  Engelman & H. Takagi (Eds.). “Cryopreservasion of Tropical Plants Germplasm”. Current Research Progress and Application. Japan International Research Center for Agricultural  Sciences,  Tsukuba,  Japan/International  Plant  Genetic Resources Institute. Rome, Italy. 161-166 p.
Fu,  J.R.,  X.L.  Lu,  R.Z.  Chen,  B.Z. Zhang,  Z.S.  Liu,  Z.S.  Li & D.Y.  Cai.  1988. Osmoconditioning  of  Peanut  (Arachis  hypogaea  L.)  Seeds with PEG  to Improve Vigor and  Some  Biochemical  Activities .  Seed  Science  and Technology 16:197-211.
Lima, W. A. A., D. C. F. S. Dias., E. M. Alfarenga., M. S. Reis dan P. R. Cecon. 2001. Preconditioning  of  Coffee  (Coffea  Arabica  L.)  Seeds:  Effects  on Germination, Vigor, and Storability . Seed Science and Technology. 29 (3): 549-555. Simione,  F.  P.  1998. Cryopreservasion Manual . Nalge  Nunc  International  Corp. http.www.Nalgenunc.com/cryo.