Pengaruh pemberian buah naga merah, jambu biji merah, dan kombinasinya terhadap kapasitas antioksidan total ...
Pengaruh  pemberian  buah  naga  merah,  jambu  biji  merah,  dan kombinasinya terhadap kapasitas  antioksidan  total  dan  kadar malondealdehid pada remaja perokok
Mohammad Zainul Ma’arif 1* , Suradi 2 , Sugiarto 1

## ABSTRACT
Background: Smoking habits enhance free radical in the body, which oxidize lipids to form malondialdehyde. One group that is vulnerable to smoking is adolescents. Red dragon fruit and red guava have the possibility as functional foods due to their vitamin and phytochemical content, which have antioxidant effects. This is an opportunity to prevent oxidative stress among adolescent smokers.
Objectives: This study aimed to analyze the effect of red dragon fruit, red guava, and its combination to total antioxidant capacity (TAC) and malondialdehyde (MDA) levels among adolescent mild smokers.
Methods: This research was an experimental study with a randomized pre-test and post-test control group design. Forty-eight subjects of male adolescent aged 16-17 years with mild smoking habits were divided into four groups: the control group (K), the intervention group with 200 grams of red dragon fruit (P1), 200 grams of red guava (P2), and the combination of both (100 grams red dragon fruit + 100 grams red guava) (P3), for 14 days. TAC examination used the DPPH method and MDA levels using the TBARS method were measured before and after the intervention.
Results: After 14 days of intervention, the mean TAC was changed by -0,10±0,76 in the K group, 0,97±1,62 in the P1 group, 0,74±1,39  in  the  P2  group,  and  0,74±1,29  in  the  P3  group.  But  the  changes  of  TAC  in  all  intervention  groups  were  not significantly different from the control group (p>0,05). The mean MDA level changed by 0,229±0,371 in the K group, decreased by -0,654±0,922 in the P1 group, -0,592±0,818 in the P2 group, and -1,166±0,670 in the P3 group. The mean difference of the MDA level in all intervention groups was significantly different from the control group (p<0,05).
Conclusion: Consumption  of  red  dragon  fruit,  red  guava,  or  a  combination  of  red  dragon  fruit  and  red  guava  can  reduce malondialdehyde levels significantly among male adolescent mild smokers. Whereas the total antioxidant capacity was changed but not significant.
Keywords : malondialdehyde; mild smokers; red dragon fruit; red guava; total antioxidant capacity

## ABSTRAK
Latar Belakang: Kebiasaan merokok dapat meningkatkan radikal bebas yang menyebabkan stres oksidatif sehingga berbahaya bagi kesehatan manusia. Salah satu kelompok yang rentan terhadap kebiasaan merokok adalah remaja karena pada masa inilah kebanyakan orang mulai mencoba untuk merokok. Buah naga merah dan jambu biji merah memiliki potensi sebagai makanan fungsional karena kandungan vitamin dan fitokimianya memiliki sifat antioksidan. Hal tersebut menjadi peluang sebagai salah satu upaya preventif pencegahan stres oksidatif pada remaja perokok.
Tujuan: Penelitian  ini  bertujuan  untuk  menganalisis  pengaruh  pemberian  buah  naga  merah,  jambu  biji  merah,  dan kombinasinya terhadap kapasitas antioksidan total (KAT) dan kadar malondealdehid (MDA) pada remaja perokok ringan. Metode: Penelitian  ini  merupakan  studi  eksperimental  dengan  pre-post  test.  Empat  puluh  delapan  subjek  remaja  laki-laki berusia 16-17 tahun dengan kebiasaan merokok  derajat  ringan dibagi menjadi  empat kelompok yaitu kelompok kontrol (K), kelompok intervensi dengan pemberian 200 gram buah naga merah (P1), kelompok intervensi 200 gram jambu biji merah (P2), dan kelompok intervensi kombinasi keduanya (100 gram buah naga merah + 100 gram jambu biji merah) (P3), selama 14 hari. Pemeriksaan  KAT  menggunakan  metode  DPPH  dan  kadar  MDA  menggunakan  metode TBARS  diukur  pada  awal  dan  akhir intervensi.
Hasil: Hasil analisis statistik menunjukkan perubahan KAT sebesar -0,10±0,76 pada kelompok K, 0,97±1,62 pada  kelompok P1, 0,74±1,39 pada  kelompok P2, dan 0,74±1,29 pada  kelompok P3. Perubahan KAT pada semua kelompok intervensi tidak berbeda  signifikan  dibandingkan  kelompok  kontrol  (p>0,05).  Terjadi  perubahan  kadar  MDA  sebesar  0,229±0,371  pada kelompok  K,  -0,654±0,922  pada  kelompok  P1,  -0,592±0,818  pada  kelompok  P2,  dan  -1,166±0,670  pada  kelompok  P3. Perubahan kadar MDA pada semua kelompok intervensi berbeda signifikan dibandingkan pada kelompok kontrol (p <0,05). Simpulan: konsumsi  buah  naga  merah,  jambu  merah,  atau  kombinasi  keduanya  dapat  menghambat  oksidan  sehingga mengurangi  kadar  malondealdehid  pada  remaja  perokok  ringan.  Sedangkan  perubahan  kapasitas  antioksidan  total  tidak berbeda signifikan.
Kata Kunci : buah naga merah; jambu biji merah; kapasitas antioksidan total; malondealdehid; perokok ringan
1 Departemen Ilmu Gizi, Pascasarjana, Universitas Sebelas Maret. Jl. Ir. Sutami 36, Jebres, Surakarta, Jawa Tengah 57126, Indonesia
2 Departemen Kesehatan Masyarakat, Fakultas Kedokteran, Universitas Sebelas Maret. Jl. Ir. Sutami 36, Jebres, Surakarta, Jawa Tengah 57126, Indonesia
* Korespondensi : E-mail: zainmaarif01@gmail.com, HP. +6281232729840
Jurnal Gizi Indonesia (The Indonesian Journal of Nutrition) Vol. 9, No. 1, Desember 2020 (53-60) Submitted: 6 Juli 2020; Accepted: 25 Agustus 2020 Tersedia Online di https://ejournal.undip.ac.id/index.php/jgi/

## Jurnal Gizi Indonesia

## PENDAHULUAN
Selama beberapa dekade terakhir, tembakau pada rokok  telah  terbukti  memberikan  efek  merugikan  bagi kesehatan manusia. World Health Organization (WHO) melaporkan  bahwa  penggunaan  tembakau  pada  rokok telah  menghabiskan  biaya  pengobatan  hingga  ratusan milyar dollar Amerika per tahun dan membunuh sekitar 6 juta orang yang sebagian besar terjadi di negara miskin dan berkembang 1 . Kematian tersebut diperantarai oleh 3 penyakit  yang  sering  disebabkan  oleh  penggunaan tembakau  rokok  yaitu  penyakit  jantung,  kanker,  dan paru-paru. Data WHO menunjukkan bahwa pada tahun 2015  di  Indonesia  terdapat  72  juta  perokok  yang diperkirakan  akan  meningkat  menjadi  96  juta  perokok pada  tahun  2025 2 .  Salah  satu  kelompok  yang  rentan terhadap  kebiasaan  buruk  merokok  yaitu  remaja.  Hal tersebut  disebabkan  oleh  semakin  dini  usia  seseorang untuk  mulai  mencoba  merokok  yaitu  pada  usia  kurang dari  7  tahun 3 .  Kebiasaan  merokok  akan  sulit  untuk dihentikan karena sifat zat yang terkandung dalam rokok dapat menyebabkan ketergantungan hingga kecanduan 4 . Dikhawatirkan  kondisi  ini  akan  meningkatkan  risiko berbagai penyakit di masa depan.
Rokok  diketahui  mengandung  lebih  dari  7000 senyawa kimia 5 . Beberapa diantarnya yaitu nikotin, tar, dan karbon monoksida. Senyawa-senyawa tersebut jika masuk ke dalam tubuh dapat memicu pembentukan dan peningkatan Reactive  Oxygen  Species (ROS)  yang bersifat  sebagai  radikal  bebas 6 .  Keberadaan  ROS  yang tinggi  di  dalam  tubuh  memicu  kondisi  stres  oksidatif yang  sangat  reaktif  terhadap  berbagai  komponen  sel bahkan  DNA  sehingga  dapat  menyebabkan  kerusakan sel  bahkan  mengganggu  fungsi  organ.  Salah  satu komponen  sel  yang  paling  rentan  yang  menjadi  target ROS  adalah  asam  lemak  tak  jenuh.  ROS  reaktif  akan mengoksidasi asam lemak tak jenuh membentuk produk peroksidasi  lipid,  yaitu  malondealdehid  (MDA). Keberadaan  kadar  MDA  yang  tinggi  dapat  dijadikan sebagai  penanda  terjadinya  stres  oksidatif  di  dalam tubuh.  Beberapa  penelitian  telah  membuktikan  bahwa terjadi  peningkatan  kadar  MDA  pada  perokok  kronis bahkan  akut 7-11 .  Efek  ini  diperparah  dengan  terjadinya penurunan  kadar  antioksidan  di  dalam  tubuh  akibat merokok 12-14 . Penurunan  kapasitas  antioksidan  sebagai mekanisme  pertahanan  tubuh  terhadap  akumulasi oksidan  dapat  memperparah  efek  merugikan  dari oksidan. Kondisi ini berkontribusi pada sejumlah besar kondisi  patologis  seperti  penyakit  kardiovaskular (aterosklerosis, hipertensi), diabetes mellitus, gangguan neurodegeneratif,  asma,  katarak,  rematik,  berbagai kanker  (kolorektal,  prostat,  payudara,  paru-paru, kandung kemih), dan penyakit paru obstruktif kronik 15,16 . Buah  naga  merah  (Hylocereus  Polyrhizus)  dan jambu  biji  merah  (Psidium  guajava  Linn.)  merupakan jenis buah yang diketahui mengandung banyak vitamin
A,  vitamin  C,  fenolik  asam  galat,  flavonoid  rutin, catechin,  quercetin,  proanthocyanidin,  dan  betacyanin yang memiliki aktivitas antioksidan tinggi 17-23 . Aktivitas antioksidan ini memiliki dampak positif pada kesehatan manusia 24,25 .  Aktivitas  antioksidan  memungkinkan penggunaan  buah  naga  merah  dan  jambu  biji  merah untuk  menangkal  dan  menetralkan  ROS  melalui mekanisme donor elektron dan atom hidrogen sehingga dapat  mencegah  terjadinya  penyakit  yang  disebabkan oleh  akumulasi  radikal  bebas  dalam  tubuh 26-28 .  Hal tersebut  telah  dibuktikan  beberapa  penelitian  pada subjek manusia maupun hewan coba yang menunjukkan bahwa  pemberian  buah  naga  merah  atau  jambu  biji merah  dapat  meningkatkan  antioksidan  di  dalam  tubuh dan  menurunkan  kadar  malondealdehid 29-32 .  Dosis optimal penurunan kadar malondealdehid pada manusia yaitu  jambu  biji  merah  sebesar  150  gram 31 ,  dan  buah naga  merah  sebesar  200  gram 33 .  Sedangkan  untuk melihat  efeknya  terhadap  kapasitas  antioksidan  total, dibutuhkan  setidaknya  dosis  intervensi  200  gram 34 . Meski  demikian,  pemanfaatan  konsumsi  buah-buahan sebagai  sumber  antioksidan  harian  pada  remaja  masih sangat  rendah.  Berdasarkan  hasil  survei  kesehatan berbasis sekolah di Indonesia, sebanyak 64,26% remaja memiliki  kebiasaan  mengkonsumsi  buah  dan  sayur dalam jumlah kurang 35 . Selain itu, bukti efek pemberian buah naga merah dan jambu biji merah terhadap subjek perokok  masih  terbatas.  Oleh  karena  itu,  penelitian  ini bertujuan  untuk  menganalisis  pengaruh  konsumsi  buah naga  merah,  jambu  merah,  dan  kombinasinya  terhadap kapasitas antioksidan total (KAT) dan kadar malondealdehid (MDA) pada remaja perokok.

## BAHAN DAN METODE
Desain penelitian ini  yaitu eksperimental  dengan pendekatan pre-post  test .  Subjek  dalam  penelitian  ini adalah  remaja  laki-laki  berusia  16-17  tahun  yang berjumlah 48. Subjek dipilih berdasarkan kriteria inklusi yaitu memiliki  kebiasaan merokok  ringan (5-10  batang per  hari)  setidaknya  selama  1  tahun  terakhir,  indeks massa tubuh normal, memiliki kebiasaan mengkonsumsi buah  dan  sayur  rendah,  dan  tidak  memiliki  riwayat penyakit  degeneratif  serta  tidak  pernah  mengkonsumsi minuman  beralkohol.  Penelitian  ini  dilakukan  di  3 Sekolah Menengah Atas (SMA) di Jember, Jawa Timur pada bulan Agustus-Oktober 2019. Semua subjek  telah memberikan persetujuan tertulis dengan menandatangani informed  consent .  Penelitian  ini  telah mendapatkan  persetujuan  etik  dari  dari  Fakultas Kedokteran, Universitas Sebelas Maret, dengan  Nomor 461/UN27.06/KEPK/2019.
Subjek dibagi secara acak dengan metode simple random  sampling menjadi 4  kelompok  yaitu  12  subjek pada  kelompok  kontrol  (K),  12  subjek  pada  kelompok intervensi  200  gram  buah  naga  merah  (P1),  12  subjek
pada  kelompok  intervensi  200  gram  jambu  biji  merah (P2), dan 12 subjek pada kelompok intervensi kombinasi keduanya (100 gram buah naga merah + 100 gram jambu biji merah) (P3). Penentuan dosis dilakukan berdasarkan penelitian  sebelumnya  bahwa  terjadi  penurunan  kadar MDA pada pemberian 150 gram jambu biji merah 31 , dan 200  gram  pada  buah  naga  merah 33 .  Sedangkan  untuk melihat parameter kapasitas antioksidan total dibutuhkan setidaknya dosis 200 gram 34 . Maka untuk membandingkan  keduanya,  ditentukan  dosis  total sebesar 200 gram baik untuk intervensi tunggal maupun intervensi  kombinasi. Penelitian  dilakukan  selama  14 hari.  Buah  intervensi  didapatkan  dari  petani  secara langsung yaitu buah naga merah dari kota Banyuwangi dan jambu biji merah dari kota Jember. Spesifikasi buah yang dipilih yaitu dengan tingkat kematangan 90-100%. Buah-buahan  dipotong  menjadi  potongan-potongan kecil  kemudian  ditimbang  sesuai  kelompok  intervensi sehingga setiap subjek mendapatkan buah sesuai dengan kelompoknya masing-masing. Buah dikemas menggunakan  sterofoam  yang  telah  dilapisi  plastik bening  berlabel food  grade .  Sedangkan  kelompok kontrol  tidak  mendapatkan  intervensi  dan  dilarang mengonsumsi  buah  naga  merah,  jambu  biji  merah, ataupun buah lainnya selama penelitian. Buah intervensi diberikan di sekolah setiap hari dan dikonsumsi saat jam makan  siang.  Selama  penelitian,  subjek  dilarang mengkonsumsi  multivitamin  dan  buah-buahan  selain yang  diintervensikan  oleh  peneliti.  Tingkat  kepatuhan subjek  dievaluasi  setiap  hari  dengan  menanyakannya kepada subjek.
Karakteristik  subjek  meliputi  usia  dan  lama merokok  didapatkan  dengan  cara  wawancara.  Data konsumsi makanan sebelum intervensi diukur 1 kali dan selama  intervensi  diukur  2  kali  menggunakan  metode food  recall  24  hour .  Data  konsumsi  makanan  yang terkumpul kemudian dikonversi menggunakan perangkat lunak nutrisurvey 2007
(http://www.nutrisurvey.de/)  untuk  dianalisis  asupan vitamin A, vitamin B2, vitamin C, vitamin E, tembaga,
dan  zink.  Indeks  massa  tubuh  menurut  usia  (IMT/U) dihitung  menggunakan  data  berat  badan  yang  diukur dengan  timbangan  digital  dan  tinggi  badan  dengan microtoise .  Pengukuran  kapasitas  antioksidan  total (KAT)  dan  kadar  malondealdehid  (MDA)  dilakukan pada  serum  darah  pada  awal  dan  akhir  penelitian. Sebelumnya, subyek diminta untuk berpuasa semalaman setidaknya  8  jam  sebelum  sampel  darah  dikumpulkan melalui  vena  mediana  kubiti  pada  pagi  hari.  Kapasitas antioksidan  total  diuji  menggunakan  metode 2,2- Diphenyl-1-picryl-hydrazyl (DPPH) 36 dan kadar malondialdehid diuji
menggunakan metode Thiobarbituric acid reactive substance (TBARS) dengan standar  Buege  dan  Aust 37 di  Laboratorium  Biokimia, Fakultas  Kedokteran,  Universitas  Jember.  Keduanya diukur  absorbansinya  menggunakan  spektrofotometer dengan spesifikasi T165762 Thermo Spectronic Genesys 20  Spectrophotometer  4001/4 .  Penerapan single  blind dilakukan  pada  analis  laboratorium  yang  tidak mengetahui  kelompok  sampel  yang  diuji.  Data karakteristik  subjek,  kapasitas  antioksidan  total,  dan kadar  MDA  dianalisis  menggunakan  uji One  way ANOVA jika  data  berdistribusi  normal, dan uji Kruskal Wallis jika  data  berdistribusi  tidak  normal.  Nilai signifikan yang digunakan adalah p <0,05. Jika hasilnya signifikan, maka dilanjutkan dengan uji post hoc .

## HASIL

## Karakterstik Umum Subjek Penelitian
Tabel 1 menunjukkan sebaran karakteristik umum subjek pada masing-masing kelompok sebelum dilakukan  intervensi.  Karakteristik  tersebut  meliputi usia,  lama  merokok,  dan  indeks  massa  tubuh  menurut umur  (IMT/U).  Data  ini  sudah  ditetapkan  pada  kriteria inklusi yaitu subjek remaja laki-laki berusia 16-17 tahun, memiliki  kebiasaan  merokok  ringan  (5-10  batang  per hari)  setidaknya  selama  1  tahun  terakhir,  dan  memiliki indeks  massa  tubuh  menurut  umur  (IMT/U)  dengan kategori normal (-2 SD sd +3 SD).
Tabel 1. Karakteristik Umum Subjek Penelitian Karakteristik Kelompok Total (n=48) K (n=12) P1 (n=12) P2 (n=12) P3 (n=12) Usia 16 tahun 17 tahun 2 10 3 9 4 8 3 9 12 36 Lama merokok 1 tahun 2 tahun 3 tahun 4 tahun 7 4 1 - 3 6 2 1 2 5 4 1 4 5 2 1 16 20 9 3 IMT/U Normal 12 12 12 12 48
Tabel 2. Data Rerata Asupan Zat Gizi Sebelum Intervensi Asupan zat gizi Rerata p-value K (n=12) P1 (n=12) P2 (n=12) P3 (n=12) Protein (gr) 44,5 56,7 31,5 29,8 0,071 b Lemak (gr) 47,9 59,0 43,0 43,0 0,190 a Karbohidrat (gr) 119,6 154,4 112,2 142,1 0,102 a Vit. A (µg) 521,8 505,0 361,6 382,8 0,341 a Vit. B2 (mg) 0,58 0,56 0,40 0,46 0,278 a Vit. C (mg) 12,7 8,1 6,2 4,2 0,267 b Vit. E (mg) 3,62 2,86 1,65 1,70 0,004 a * Cu (mcg) 610,8 686,6 471,6 416,6 0,030 a * Zn (mg) 4,28 4,45 3,53 3,61 0,288 a Keterangan: a Uji one way anova , b Uji kruskal wallis , *Signifikan < 0,05
Tabel 3. Efek Buah Naga Merah, Jambu Biji Merah, dan Kombinasinya terhadap KAT dan MDA
Parameter Kelompok Hari 0 Rerata ± SD Hari 14 Rerata ± SD Selisih Rerata ± SD p-value KAT (%) K 10,06 ± 0,97 9,96 ± 0,95 -0,10 ± 0,76 0,203 P1 10,23 ± 1,04 11,21 ± 1,51 0,97 ± 1,62 P2 10,33 ± 0,83 11,07 ± 0,97 0,74 ± 1,39 P3 9,71 ± 0,86 10,45 ± 1,12 0,74 ± 1,29 MDA (nmol/ml) K 4,796 ± 0,327 5,026 ± 0,349 0,229 ± 0,371 0,001* P1 4,520 ± 0,444 3,865 ± 0,695 -0,654 ± 0,922 P2 4,789 ± 0,504 4,197 ± 0,590 -0,592 ± 0,818 P3 5,015 ± 0,496 3,849 ± 0,771 -1,166 ± 0,670
Keterangan: * Signifikan < 0,05 ( One way ANOVA )
Tabel 4. Perbandingan Selisih Perubahan Kadar MDA
Kelompok Perbandingan selisih rerata MDA p-value K : P1 0,229 ± 0,371 -0,654 ± 0,922 0,028* K : P2 0,229 ± 0,371 -0,592 ± 0,818 0,049* K : P3 0,229 ± 0,371 -1,166 ± 0,670 0,001* Keterangan: *Signifikan < 0,05 ( Post hoc benferroni )
Tabel 5. Data Rerata Asupan Zat Gizi Selama Intervensi
Asupan zat gizi Rerata p-value K (n=12) P1 (n=12) P2 (n=12) P3 (n=12) Protein (gr) 44,1 43,7 56,1 45,5 0,072 a Lemak (gr) 53,7 53,3 55,3 44,9 0,449 b Karbohidrat (gr) 168,6 214,8 200,5 206,9 0,026 b * Vit. A (µg) 417,4 665,4 972,8 681,1 0,003 b * Vit. B2 (mg) 0,55 0,60 0,98 0,54 0,007 a * Vit. C (mg) 6,15 59,7 187,6 121,5 0,001 a * Vit. E (mg) 2,85 3,10 4,87 3,84 0,001 b * Cu (mcg) 550 700 600 600 0,488 a Zn (mg) 4,90 5,40 5,16 4,78 0,544 a
Keterangan: a Uji one way anova , b Uji kruskal wallis , *Signifikan < 0,05

## Data Asupan Zat Gizi Sebelum Intervensi
Tabel 2 menunjukkan data asupan zat gizi sebelum intervensi.  Secara  umum,  semua  kelompok  memiliki karakteristik  asupan  zat  gizi  yang  sama  kecuali  pada asupan vitamin E dan mineral tembaga (Cu).
Efek  Buah  Naga  Merah,  Jambu  Biji  Merah,  dan Kombinasinya terhadap KAT dan MDA
Tabel  3  menunjukkan  efek  intervensi  buah  naga merah,  jambu  biji  merah,  dan  kombinasinya  terhadap KAT  dan  MDA.  Berdasarkan  uji One  way  ANOVA,
selisih  perubahan  rerata  kapasitas  antioksidan  total (KAT) pada semua kelompok tidak berbeda signifikan. Sementara  itu,  kadar  MDA  pada  kelompok  intervensi buah  naga  merah,  jambu  merah,  dan  kombinasinya mengalami penurunan dan selisih penurunannya berbeda signifikan.  Maka  dilanjutkan  dengan  uji posthoc untuk mengetahui  kelompok  mana  yang  berbeda  dengan kelompok  kontrol  (Tabel  4).  Berdasarkan  uji posthoc , penurunan kadar MDA pada semua kelompok intervensi berbeda  signifikan  dibandingkan  dengan  kelompok
kontrol  ( p <  0,05).  Penurunan  terbesar  terjadi  pada kelompok  kombinasi  dengan  penurunan  sebesar  1,166 nmol/ml ( p = 0,001).
Tabel 5 menyajikan rerata asupan zat gizi subjek selama intervensi. Asupan zat gizi antar kelompok yang berbeda signifikan meliputi asupan karbohidrat, vitamin A,  vitamin  B2,  vitamin  C,  dan  vitamin  E  ( p <0,05). Sedangkan  asupan  protein,  lemak,  Cu  dan  Zn  tidak mengalami  perbedaan  yang  signifikan.  Adapun  untuk melihat  pengaruhnya  terhadap  perubahan  kapasitas antioksidan  total  (KAT)  dan  kadar  malondealdehid (MDA), maka dilakukan uji analisis kovariat.

## Tabel 6. Hasil Analisis Kovariat Asupan Zat Gizi Selama Intervensi terhadap KAT dan MDA
Variabel kovariat p- value Variabel  dependen:  Kapasitas  Antioksdan Total Asupan protein Asupan lemak Asupan karbohidrat Asupan vitamin A Asupan vitamin B2 Asupan vitamin C Asupan vitamin E Asupan Cu Asupan Zn Kelompok 0,211 0,221 0,975 0,155 0,883 0,372 0,246 0,948 0,305 0,092

## Variabel dependen: Kadar Malondealdehid
Asupan protein Asupan lemak Asupan karbohidrat Asupan vitamin A Asupan vitamin B2 Asupan vitamin C Asupan vitamin E Asupan Cu Asupan Zn Kelompok 0,615 0,649 0,304 0,304 0,613 0,742 0,639 0,499 0,611 0,039*
Keterangan: Uji Ankova *Signifikan < 0,05
Tabel  6  menyajikan  hasil  analisis  kovariat (ANKOVA)  antara  variabel  asupan  zat  gizi  selama intervensi terhadap perubahan kapasitas antioksidan total (KAT) dan kadar malondealdehid (MDA). Hasil analisis kovariat  menunjukkan  tidak  ada  variabel  yang mempengaruhi kapasitas antioksidan total (KAT) secara signifikan. Sedangkan perubahan kadar malondealdehid (MDA) dipengaruhi oleh variabel kelompok ( p <0,05).

## PEMBAHASAN
Konsumsi 200 gram buah naga merah, 200 gram jambu  merah,  dan  kombinasinya  selama  14  hari  dapat meningkatkan  kapasitas  antioksidan  total  dalam  darah meskipun  secara  statistik  tidak  signifikan.  Pengukuran kapasitas  antioksidan  total  pada  serum  darah  diawali
dengan proses deproteinasi untuk menghilangkan protein sehingga  tidak  mengganggu  hasil  pengukuran 36 .  Tetapi hasilnya tidak signifikan yang mungkin disebabkan oleh pengukuran  kapasitas  antioksidan  total  tidak  dilakukan pada  waktu  optimal.  Pada  penelitian  ini,  kapasitas antioksidan total diukur lebih dari 8 jam setelah subjek mengkonsumsi buah intervensi. Sedangkan berdasarkan beberapa penelitian lain diketahui bahwa waktu optimal untuk mengukur peningkatan kapasitas antioksidan total yaitu  2  hingga  8  jam  setelah  subjek  mengonsumsi sumber makanan antioksidan, kemudian secara bertahap kapasitas  antioksidan  total  akan  kembali  menuju baseline 36,38 . Selain itu, peningkatan kapasitas antioksidan  total  yang  tidak  signifikan  mungkin disebabkan  oleh  metabolit  antioksidan  di  dalam  darah telah bereaksi untuk menetralisir radikal bebas sehingga ketika diukur kapasitasnya tidak meningkat 39 . Kemungkinan  ini  didukung  oleh  variabel  kadar  MDA sebagai  produk  peroksidasi  lipid  yang  menurun  secara signifikan setelah intervensi 200 gram buah naga merah, 200 gram jambu biji, atau kombinasi 100 gram buah naga merah dan 100 gram jambu merah selama 14 hari pada subjek remaja perokok ringan.
Peningkatan kadar MDA pada perokok disebabkan oleh kandungan yaitu nikotin, tar, dan karbon monoksida  yang  memicu  pembentukan  ROS  di  dalam tubuh 6 . Akumulasi ROS ini akan mengoksidasi lipid di dalam  tubuh.  Peroksidasi  lipid  secara  umum  dapat dijelaskan melalui tiga fase yaitu inisiasi, propagasi, dan terminasi 40 . Pada fase inisiasi, prooksidan seperti radikal hidroksil  (OH•)  menghilangkan  atom  hidrogen  dari karbon  lipid  sehingga  membentuk  radikal  lipid  (L•). Pada  fase  propagasi,  radikal  lipid  (L•)  dengan  cepat bereaksi  dengan  oksigen  untuk  membentuk  radikal peroksil  lipid  (LOO•)  yang  mengambil  hidrogen  dari molekul lipid lain untuk menghasilkan radikal lipid baru (L•)  yang  melanjutkan  reaksi  berantai.  Pada  fase terminasi, radikal peroksil lipid (LOO•) yang mengambil hidrogen akan membentuk lipid hidroperoksida (LOOH) sebagai  produk  primer  dan  malondealdehid  (MDA) sebagai produk sekunder 41 .
Hasil  penelitian  menunjukkan  penurunan  kadar malondealdehid terjadi pada semua kelompok intervensi. Pemberian  200  gram  buah  naga  merah  selama  14  hari dapat menurunkan kadar MDA sebesar 0,654 nmol/ml. Hasil  penelitian  ini  serupa  dengan  hasil  beberapa penelitian lain bahwa intervensi buah naga merah dapat menurunkan  kadar  malondealdehid 33,42-44 .  Pemberian 200  gram  jus  buah  naga  merah  selama  7  hari  dapat menurunkan kadar MDA pada perokok 33 . Penelitian lain pada  tikus  model  hiperlidemia  dengan  pemberian 60mg/hari  ekstrak  buah  naga  merah juga  menunjukkan hasil serupa 42 . Penurunan kadar MDA setelah pemberian buah  naga  merah  dapat  dimediasi  oleh  kandungan antioksidan berupa vitamin A, vitamin C, dan senyawa fitokimia  meliputi  asam  fenolik  (asam  galat),  dan
flavonoid (rutin, catechin), serta kandungan betacyanin 17-19,24 .
Pemberian  200  gram  buah  jambu  biji  merah selama  14  hari  dapat  menurunkan  kadar  MDA  sebesar 0,592 nmol/ml. Hasil penelitian ini sejalan dengan hasil penelitian Sinaga et al. (2017) yaitu pemberian jus jambu biji  merah  setelah  melakukan  latihan  fisik  intensitas berat dapat menghambat pembentukan MDA 45 . Adapun hasil  penelitian  Maryanto  (2013)  menunjukkan  bahwa dengan  pemberian  0,72  gram  serbuk  jambu  pada  tikus hiperkolesterolemia  juga  dapat  menurunkan  kadar MDA 46 . Mekanisme penghambatan pembentukan MDA oleh  jambu  biji  merah  dimediasi  oleh  kandungan antioksidan berupa vitamin C yang tinggi, senyawa asam fenolik (gallic acid), dan flavonoid (catechin, quercetin, rutin, proanthocyanidin) 18 .
Pemberian kombinasi 100 gram buah naga merah dan 100 gram jambu biji merah juga dapat menurunkan kadar  MDA  sebesar  1,166  nmol/ml.  Penelitian  lain tentang  kombinasi  buah  naga  merah  dan  jambu  biji merah  terhadap  kadar  MDA  belum  ditemukan.  Tetapi hasil  penelitian  pemanfaatan  kombinasi  sumber antioksidan  oleh  Suwimol et  al. (2012)  menunjukkan bahwa konsumsi kombinasi berbagai buah dan sayuran dapat menurunkan kadar MDA 47 . Efek kombinasi buah naga merah dan jambu biji merah tergolong baik karena mampu menurunkan kadar MDA lebih besar dibandingkan pada kelompok intervensi lainnya.
Penurunan  kadar  MDA  pada  semua  kelompok intervensi  dimediasi  oleh  mekanisme  sumbangan elektron atau atom hidrogen dari kandungan antioksidan kepada radikal bebas anion superoksida (O2•-) ataupun hidroksil  (OH•)  sehingga  membuatnya  lebih  stabil 26-28 . Selain  itu,  karakter  fisikokimia  betacyanin  dapat menetralkan  radikal  peroksil  (LOO•)  pada  tahap propagasi  untuk  memutus  rantai  pembentukan  radikal lipid baru (L•) 48 .  Mekanisme  ini  dapat  memutus  reaksi berantai  peroksidasi  lipid  sehingga  menurunkan pembentukan  MDA  sebagai  produk  sekundernya. Aktivitas antioksidan sangat tergantung pada jumlah dan lokasi  kelompok  fenolik  (-OH),  yang  berperan  dalam menetralkan  radikal  bebas 27 .  Penurunan  MDA  oleh kombinasi  buah  naga  dan  jambu  biji  merah  yang  lebih besar  dibandingkan  pada  kelompok  lain  dapat disebabkan  oleh  efek  sinergistik  dari  berbagai antioksidan  yang  terkandung  di  dalamnya.  Mekanisme ROS  dalam  mengoksidasi  target  dapat  melalui mekanisme  yang  kompleks,  maka  dibutuhkan  berbagai antioksidan  yang  bekerja  pada  jalur  berbeda  dalam menunjukkan respon antioksidannya. Kombinasi berbagai senyawa kompleks akan memiliki bioaktivitas yang lebih tinggi dibandingkan senyawa tunggal dalam mempengaruhi berbagai target 49 .
Kelebihan  penelitian  ini  yaitu  pengukuran kapasitas  antioksidan  total  diawali  dengan  melakukan deproteinasi dengan tujuan menghilangkan protein yang
bersifat  antioksidan  sehingga  meminimalkan  bias  yang disebabkan oleh keberadaan protein dalam serum darah. Hanya saja juga terjadi keterbatasan dalam pengukuran kapasitas  antioksidan  total  yang  tidak  dilakukan  pada waktu  optimal  sehingga  efek  pengaruh  intervensi tidak tergambarkan secara akurat. Oleh karena itu diperlukan penelitian  lanjutan  dengan  melakukan  pengukuran kapasitas antioksidan total pada waktu yang optimal dan dilakukan  pada  subjek  dengan  karakteristik  perokok derajat berat dan kronis yang diketahui mengalami stres oksidatif dalam tingkat yang lebih berat.

## SIMPULAN
Pemberian  buah  naga  merah,  jambu  biji  merah, atau  kombinasi  keduanya  dapat  menurunkan  kadar malondealdehid  pada  remaja  perokok  ringan.  Hasil terbaik ditunjukkan pada kelompok kombinasi. Hasil ini membuktikan  bahwa  buah  naga  merah  dan  jambu  biji merah  memiliki  potensi  yang  baik  sebagai  sumber antioksidan.  Sedangkan  efeknya  terhadap  kapasitas antioksidan total tidak signifikan.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan  terima  kasih  kepada  Universitas  Sebelas Maret  dan  Universitas  Jember  yang  telah  memberikan dukungan atas terlaksananya penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
1. World  Health  Organization  (WHO).  WHO  urges more  countries  to  require  large,  graphic  health warnings on tobacco packaging: the WHO report on the  global  tobacco  epidemic,  2011  examines  anti- tobacco  massmedia  campaigns.  Cent  Eur  J  Public Health. 2011;19(3):133-51.
2. World  Health  Organization  (WHO).  WHO  Global Report  on  Trends  in  Prevalence  of  Tobacco Smoking  2015.  Geneva: WHO  Library  Catalogue. 2015.
3. World Health Organization (WHO). Global Youth Tobacco  Survey  (GYTS):  Indonesia  report,  2014. New Delhi: WHO-SEARO. 2015.
4. Kendler  KS, Myers  J, Damaj  MI,  Chen  X.  Early smoking  onset  and  risk  for  subsequent  nicotine dependence: a monozygotic co-twin control study. Am J Psychiatry. 2013;170(4):408-13.
5. Centers for Disease Control and Prevention (CDC). How  tobacco  smoke  causes  disease:  The  biology and  behavioral  basis  for  smoking-attributable disease:  A  report  of  the  surgeon  general.  Atlanta (GA):  Centers  for  Disease Control and  Prevention (US). 2010.
6. Zhao  J,  and  Hopke  PK.  Concentration  of  reactive oxygen species (ros) in mainstream and sidestream
cigarette smoke. Aerosol Sci Tech. 2012;46(2):191- 7.
7. Lymperaki  E, Makedou  K, Iliadis  S, Vagdatli  E. Effects  of  acute  cigarette  smoking  on  total  blood count and markers of oxidative stress in active and passive smokers. Hippokratia. 2015; 19(4):293-7.
8. Jaggi  S,  and  Yadav  AS.  Increased  serum malondialdehyde levels among cigarette smokers. Pharma Innovation. 2015;4(4):94-6.
9. Bello  HA,  Dandare  A,  Danmaliki  GI.  Effects  of cigarette smoking on lipid peroxidation ands erum antioxidant vitamins. IOSR-JPBS. 2017;12(2):40-4.
10. Kashinakunti  SV, Kollur  P, Kallaganada  GS,
Rangappa M, Ingin JB. Comparative study of serum MDA and vitamin C levels in non-smokers, chronic smokers  and  chronic  smokers  with  acute myocardial  infarction  in  men.  J  Res  Med Sci. 2011;16(8):993-8.
11. Nagaraj,  Kumar  SD,  Paunipagar  PV.  Study  of serum malondialdehyde and vitamin c in smokers. J Sci Innov Res. 2014;3(6):569-71.
12. Lymperaki  E,  Makedou  K,  Iliadis  S,  Vagdatli  E. Effects  of  acute  cigarette  smoking  on  total  blood count and markers of oxidative stress in active and passive smokers. Hippokratia. 2015;19(4):293-7.
13. Bakhtiari S, Azimi S, Mehdipour M, Amini S, Elmi Z, Namazi Z. Effect of Cigarette Smoke on Salivary Total  Antioxidant  Capacity.  J  Dent  Res  Dent  Clin Dent Prospects. 2015;9(4):281-4.
14. Ugochukwu OBIL, Anyadike N, Okaforchidimma, Dioka  CE,  Meludu  SC.  Evaluation  of  total antioxidant  status,  superoxide  dismutase  and malondialdehyde  in  apparently  healthy  active tobacco  smokers  in  Nnewi  Metropolis,  SouthEast, Nigeria. JSIR. 2017;6(3):105-12.
15. Birben  E, Sahiner  UM, Sackesen  C, Erzurum S, Kalayci  O.  Oxidative  stress  and  antioxidant defense. World Allergy Organ J. 2012;5(1):9-19.
16. Phaniendra  A, Jestadi  DB, Periyasamy  L.  Free radicals:  properties,  sources,  targets,  and  their implication  in  various  diseases.  Indian  J  Clin Biochem. 2015;30(1):11-26.
17. Kim  H, Choi  HK, Moon  JY, Kim  YS, Mosaddik A, Cho SK. Comparative antioxidant and antiproliferative activities of red and white pitayas and their correlation with flavonoid and polyphenol content. J Food Sci. 2011;76(1):C38-45.
18. Recuenco  MC,  Lacsamana  MS,  Hurtada  WA, Sabularse  VC.  Total  phenolic  and  total  flavonoid contents of selected fruits in the philippines. Phil J Sci. 2016;145(3):275-81.
19. Grzesik  M,  Naparło  K,  Bartosz  G,  Sadowska- Bartosz  I.  Antioxidant  properties  of  catechins: comparison  with  other  antioxidants.  Food  Chem. 2018;241:480-92.
20. Wong  YM,  and  Siow  LF.  Effects  of  heat,  pH, antioxidant,  agitation  and  light  on  betacyanin stability using red-fleshed dragon fruit (Hylocereus polyrhizus) juice and concentrate as models. J Food Sci Technol. 2015;52(5):3086-92.
21. Naderi  N,  Ghazali  HM,  Hussin  ASM,  Amid  M, Manap  MYA.  Characterization  and  quantification of dragon fruit (Hylocereus polyrhizus) betacyanin pigments  extracted  by  two  procedures. Pertanika J Trop agric Sci. 2012;35(1):33-40.
22. Woo KK, Ngou FH, Ngo LS, Soong WK, Tang PY. Stability of betalain pigment from red dragon fruit (Hylocereus polyrhizus). Am J Food Technol. 2011;6(2):140-8.
23. Kumari N, Gautam S, Ashutosh C. Psidium guajava a  fruit  or  medicine  -  an  overview.  Pharma Innovation. 2013;2(8):63-7.
24. Lima GPP, Vianello F, Corrêa CR, da Silva Campos RA,  Borguini  MG.  Polyphenols  in  fruits  and vegetables  and  its  effect  on  human  health.  Food Nutr Sci. 2014;5(11):1065-82.
25. Alam MN, Bristi NJ, Rafiquzzaman M. Review on in  vivo  and  in  vitro  methods  evaluation  of antioxidant activity. Saudi Pharm J. 2013;21(2):143-52.
26. Dai J, and Mumper RJ. Plant phenolics: extraction, analysis  and  their  antioxidant  and  anticancer properties. Molecules. 2010;15(10):7313-52.
27. Brewer  MS.  Natural  antioxidants:  sources, compounds,  mechanisms  of  action,  and  potential applications. Compr Rev Food Saf. 2011;10(4):221- 47.
28. Pereira DM, Valentão P, Pereira JA, Andrade PB. Phenolics:  from  chemistry  to  biology.  Molecules. 2009;14:2202-11.
29. Anand-Swarup  KR,  Sattar  MA,  Abdullah  NA, Abdulla MH, Salman IM, Rathore HA, et al. Effect of dragon fruit extract on oxidative stress and aortic stiffness in streptozotocin-induced diabetes in rats. Pharmacognosy Res. 2010;2(1):31-5.
30. Hakim  ALR,  Ambardini  RL,  Nugroho  WA, Burhaein  E.  Dragon  fruit  giving  effect  against malondealdehıde  (MDA)  levels  in  muay  thaı athletes with hıgh intensıty interval traınıng (HIIT) method.  Journal  of  Education,  Health  and  Sport. 2018;8(10):190-8.
31. Winara  W,  Rumini  R,  Nasuka  N.  Pengaruh pemberian  jus  jambu  biji  merah  dan  denyut  nadi sub-maksimal
terhadap kadar MDA
(Malondialdehyde)  pada  SSB  Garuda  Bintang Sumatera Utara. Journal of Physical Education and Sports. 2017;6(1):95-100.
32. Thadeus  MS,  Fauziah  C,  Zulfa  F,  Anisah  A.  The Effect  of  Red  Dragon  Fruit  Extract  (Hylocereus Polyrhizus)  on  Membrane  Lipid  Peroxidation  and Liver Tissue Damage Triggered by Hyperlipidemia
in  White  Rats  (Rattus  Norvegicus).  AHSR. 2019;13:187-95.
33. Panjaitan  P,  Annisa  N,  Rijai  L.  Observasi  klinik perubahan kadar malondealdehid pada perokok dan non-perokok dengan pemberian minuman antioksidan  jus  buah  naga  merah  (H.Polyrhizus). Proceeding  of  Mulawarman  Pharmaceuticals Conference. 2017;6:54-7.
34. Prior  RL,  Gu  L,  Wu  X,  Jacob  RA,  Sotoudeh  G, Kader AA, Cook RA. Plasma antioxidant capacity changes following a meal as a measure of the ability of  a food to  alter in  vivo  antioxidant status.  J  Am Coll Nutr. 2007;26:170-81.
35. Kementerian Kesehatan Republik Indonesia.
Perilaku Berisiko Kesehatan pada Pelajar SMP dan SMA di Indonesia. Badan Litbangkes Kementerian Kesehatan Republik Indonesia. Jakarta; 2015.
36. Chrzczanowicz  J, Gawron  A, Zwolinska  A, de Graft-Johnson  J, Krajewski  W, Krol  M,  et  al. Simple method for determining human serum 2,2- diphenyl-1-picryl-hydrazyl (DPPH) radical scavenging activity - possible application in clinical studies  on  dietary  antioxidants.  Clin  Chem  Lab Med. 2008;46(3):342-9.
37. Buege  JA,  and  Aust  SD.  Microsomal  lipid peroxidation. Methods Enzymol. 1978;52:302-10.
38. Perez-Jimenez J, Serrano J, Tabernero M, Arranz S, Diaz-Rubio ME, Garcia-Diz L, et al. Bioavailability of  phenolic  antioxidants  associated  with  dietary fiber:  Plasma  antioxidant  capacity  after  acute  and long-term intake in humans. Plant Foods Hum Nutr. 2009;64:102-7.
39. Damayanthi  E,  Kustiyah  L,  Khalid  M,  Farizal  H. Antioxidant  activity  rice  bran  higher  than  tomato juice and the decreasing of total antioxidant activity serum after high antioxidant beverage intervention. Journal of Nutrition and Food. 2010;5(3):205-10.
40. Yin  H, Xu  L, Porter  NA.  Free  radical  lipid peroxidation: mechanisms and analysis. Chem Rev.
2011;111(10):5944-72. 41. Ayala A, Muñoz MF, Argüelles S. Lipid peroxidation: production, metabolism, and
signaling  mechanisms  of  malondialdehyde  and  4- hydroxy-2-nonenal. Oxid Med Cell Longev. 2014;360438.
42. Thadeus  MS,  Fauziah  C,  Zulfa  F,  Anisah  A.  The effect  of  red  dragon  fruit  extract  (hylocereus polyrhizus)  on  membrane  lipid  peroxidation  and liver tissue damage triggered by hyperlipidemia in white rats (Rattus Norvegicus). AHSR. 2019;13:187-95.
43. Herdiani N, and Putri EBP. Pengaruh ekstrak buah naga  merah  terhadap  kadar  mda  tikus  yang  diberi paparan asap rokok. IJOBB. 2018;2(1):1-7.
44. Maigoda  TC,  Sulaeman  A,  Setiawan  B,  Wibawan IWT.  Effects  of  red  dragon  fruits  (Hylocereus polyrhizus)  powder  and  swimming  exercise  on inflammation,  oxidative  stress  markers,  and physical  fitness  in  male  obesity  rats  (Sprague dawley). IJSBAR. 2016;25(1):123-41.
45. Sinaga  FA,  Hasibuan  R,  Risfandi  M.  Decrease  of malondialdehyde  levels  by  consuming  red  guava fruit  juice  in  maximal  physical  activity.  IJSR. 2017;7(11):449-51.
46. Maryanto  S.  The  effects  of  red  guava  (Psidium guajava  L)  fruits  on  lipid  peroxidation  in hypercholesterolemic  rats. Basic  Res  J  Med  Clin Sci. 2013;2(11):116-21.
47. Suwimol  S,  Pimpanit  L,  Aporn  M,  Pichita  S, Ratiyaporn  S,  Wiroj  J.  Impact  of  fruit  and vegetables on oxidative status and lipid profiles in healthy  individuals.  Food  and  Public  Health. 2012;2(4):113-8.
48. Tesoriere  L,  Allegra  M,  Gentile  C,  Livrea  MA. Betacyanins as phenol antioxidants. Chemistry and mechanistic  aspects  of  the  lipoperoxyl  radical- scavenging activity in solution and liposomes. Free Radic Res. 2009;43:706-17.
49. Schmidt  B,  Ribnicky  DM,  Poulev  A,  Logendra  S, Cefalu WT, Raskin I. A natural history of botanical therapeutics. Metab. 2008;57(7 Suppl 1):S3-9.