Mandala of Health Vol.14  No.1, Juni 2021 ISSN: 0216-3098 DOI: 10.20884/1.mandala.2021.14.1.4754

## PENGARUH BERKUMUR DENGAN LARUTAN PROBIOTIK
TERHADAP KADAR IGA DALAM SALIVA STUDI TERHADAP LANSIA PANTI WREDHA HARAPAN IBU SEMARANG
Hilma Yunita Nurenda*, Recita Indraswary**, Helmi Faturrahman*** *Program Pendidikan Dokter Gigi Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Islam Sultan Agung
** Departemen Biologi Oral Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Islam Sultan Agung *** Departemen Prostodonsia Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Islam Sultan Agung
Korespondensi: recita@unissula.ac.id ,Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Islam Sultan Agung, Jl. Raya Kaligawe KM4, Semarang 50112, Jawa Tengah, ph (024) 6583584 fax. (024) 6594366

## ABSTRAK
Saliva contains  IgA which acted as the first line of  defense against  a pathogen in the  oral  cavity.  IgA  salivary  in  the  elderly  has  decreased  which  caused  prone  to  oral infection.  The  alternative  way  to  increased  salivary  IgA  levels  was  by  gargling  probiotic solution.  Gargling  was  a  mechanical  stimulation  to  increase  the  flow  rate  of  saliva. Probiotic contains bacteria which can give advantage for the human body. Probiotic can stimulate  the  immune  system  to  increased  IgA  levels.  The  purpose  of  this  study  was  to determine the effect of gargling probiotic solution to salivary IgA levels in the elderly.
This study used a quasy experimental pre and post-test design group. The number of samples was 11 people. Each sample was instructed to gargling probiotic solution 10 ml every  morning  and  evening  along  their  saliva  was  taken  before  and  after  gargle  the probiotic solution. Data analysis was done using a paired t-test.
The  result  showed  the  mean  of  salivary  IgA  levels  before  gargling  probiotic solution were 206.6818±25.17419 and salivary IgA levels after gargling probiotic solution were 223.4091±12.52042. Based on the paired t-test got a value of p=0.059 (>0.05) means there is no significant difference.
The conclusion of this study was gargling probiotic solution can increase salivary IgA but not statistically significant.
Key words: Salivary IgA, probiotic solution, elderly

## ABSTRAK
Saliva mengandung IgA yang berperan sebagai pertahanan pertama dalam melawan patogen  di  rongga  mulut.  Pada  lansia  kadar  IgA  dalam  saliva  mengalami  penurunan sehingga rentan mengalami infeksi pada rongga mulut. Cara alternatif untuk meningkatkan kadar  IgA  saliva  yaitu  dengan  berkumur  menggunakan  larutan  probiotik.  Berkumur merupakan salah satu  stimulasi  mekanik  untuk  meningkatkan laju  aliran saliva. Probiotik mengandung  bakteri  yang  daat  memberikan  manfaat  bagi  tubuh.  Probiotik  dapat menstimulasi  respon  imun  yang  dapat  meningkatkan  kadar  IgA.  Tujuan  penelitian  ini
untuk mengetahui pengaruh berkumur dengan larutan probiotik terhadap kadar IgA dalam saliva pada lansia.
Penelitian  ini  merupakan  penelitian quasy  experimental  pre  and  post-test  group design . Sampel berjumlah 11 orang. Setiap sampel diinstruksikan untuk berkumur dengan larutan  probiotik  sebanyak  10  ml  pada  pagi  dan  sore  hari  selama  14  hari  serta  dilakukan pengambilan  saliva  pada  sebelum  dan  sesudah  berkumur  larutan  probiotik.  Analisis  data menggunakan uji-t berpasangan.
Hasil  penelitian  menunjukkan  rerata  kadar  IgA  saliva  sebelum  berkumur  larutan probiotik  sebanyak  206,6818±25,17419  dan  rerata  setelah  berkumur  larutan  probiotik sebanyak  223,4091±12,52042.  Hasil  uji-t  berpasangan  didapatkan  nilai  p=0,059  (>0,05) yang menunjukkan tidak terdapat perbedaan yang signifikan.
Kesimpulan  yang  didapatkan  pada  penelitian  ini  yaitu  berkumur  larutan  probiotik mampu meningkatkan IgA tetapi tidak signifikan secara statistik.
Kata kunci: IgA saliva, larutan probiotik, lansia

## PENDAHULUAN
Saliva  mengandung  IgA  yang  berfungsi  sebagai  pertahanan  pertama  dalam melawan  patogen  di  dalam  rongga  mulut.  Jika  kadar  IgA  saliva  mengalami  penurunan maka  dapat  menyebabkan  peningkatan  resiko  infeksi  di  dalam  rongga  mulut 1,2 .  Pada kelompok usia 61-70 tahun mengalami penurunan kadar IgA dan hal ini dikaitkan dengan lansia  yang  rentan  terkena  infeksi  oral 3 .  Selain  itu,  lansia  mengalami  keluhan  xerostomia dengan  prevalensi  di  negara  Amerika  Serikat  17,2%,  Swedia  6%,  New  Zealand  10%, Jepang  8,3% 4 .  Adanya  penurunan  laju  aliran  saliva  akan  mempengaruhi  perubahan  pada komposisi saliva 5 .
Stimulasi saliva dapat dilakukan dengan beberapa cara, yaitu dengan menggunakan agen  farmakologi pilocarpine dan cevimeline tetapi  memiliki  efek  samping  berupa berkeringat,  mual  dan  rhinitis 6 .  Selain  itu,  stimulasi  saliva  dilakukan  secara  mekanik berupa  berkumur.  Tetapi  obat  kumur  mengandung  alkohol  dan  minyak  essensial  yang dapat  menyebabkan  iritasi  mulut  dan  perubahan  fisiologis  pada  penderita  xerostomia 7 . Maka  dari  itu  diperlukan  cara  alternatif  lain  dengan  cara  berkumur  menggunakan  larutan probiotik.
Bakteri  probiotik  dapat  menstimulasi  sistem  imun  yang  akan  meningkatkan produksi  IgA 8 .  Probiotiok  terdiri  dari  bakteri  menguntungkan  seperti Lactobacillus dan Bifidobacterium .  Mengunyah  permen  karet  probiotik  dapat  meningkatkan  pH,  laju  aliran saliva, menurunkan indeks plak dan menurunkan jumlah koloni Streptococcus sp 9,10 . Pada penelitian  sebelumnya,  dengan  konsumsi  suplemen  probiotik  dapat  meningkatkan  kadar IgA  saliva  pada  tikus  wistar.  Probiotik  juga  dapat  mengaktivasi  makrofag,  pro-inflamasi dan sitokin 11 .
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  berkumur  dengan  larutan  probiotik terhadap  kadar  IgA  dalam  saliva  pada  lansia.  Manfaat  penelitian  ini  adalah  memberikan pengetahuan tentang pengaruh berkumur larutan probiotik terhadap kadar IgA saliva pada lansia.  Hipotesis  penelitian  ini  adalah  terdapat  pengaruh  berkumur  dengan  larutan probiotik terhadap kadar IgA saliva.

## METODE
Penelitian ini telah disetujui oleh Komite etik Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Islam  Sultan  Agung  Semarang  No.  180/B.1-KEPK/SA-FKG/I/2020.  Penelitian  ini dilakukan  di  Panti  Wredha  Harapan  Ibu  Semarang  dan  Laboratorium  GAKI  Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro Semarang.
Jenis penelitian ini adalah Quasy Experimental dengan pre post-test group design . Jumlah  subjek  penelitian  ini  adalah  11  orang  penghuni  panti  Wredha  Harapan  Ibu Semarang yang sesuai dengan kriteria inklusi yaitu bersedia mengikuti prosedur penelitian, mengisi informed  consent dan  berusia  diatas  60  tahun  serta  kriteria  eksklusi  yaitu mengkonsumsi  obat  antibiotik,  OHI  buruk  dan  perokok.  Alat  yang  digunakan  pada penelitian  ini  adalah  botol  ukuran  10  ml, diagnostic  set (kaca  mulut,  sonde,  ekskavator), sample  cup ,  label,  gelas  kumur, disposable  pipette dan ice  pack  gel .  Bahan  yang diperlukan adalah serbuk sachet LBio dan aquadest 10 ml. Cara membuat larutan probiotik dengan melarutkan satu sachet LBio ke dalam 10 ml aquadest di botol berukuran 10 ml. Prosedur penelitian yang dilakukan adalah pengecekan OHI terlebih dahulu setelah itu dilakukan pengambilan saliva pada subjek di hari pertama sebagai pre-test . Setelah itu subjek  diinstruksikan  untuk  berkumur  dengan  larutan  probiotik  selama  14  hari,  dalam sehari berkumur sebanyak 2 kali pada pagi dan sore hari, sekali berkumur selama 15 detik. Pada  hari  ke-14  dilakukan  pengambilan  saliva post-test .  Setelah  itu  saliva  dikirim  ke laboratorium GAKI Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro untuk dilakukan analisis IgA  menggunakan  uji  ELISA.  Selanjutnya  dilakukan  analisis  data  menggunakan  uji normalitas dengan Saphiro-Wilk. Data yang terdistribusi normal selanjutnya dilakukan uji parametrik dengan uji-t berpasangan.

## HASIL PENELITIAN
Hasil  rata-rata  kadar  IgA  saliva  sebelum  dan  sesudah  berkumur  dengan  larutan probiotik didapatkan hasil sebagai berikut:
Tabel 1 . Rata-rata dan standar deviasi kadar IgA saliva sebelum dan sesudah perlakuan
Perlakuan Rata-rata Standar Deviasi Peningkatan kadar IgA Sebelum 205,6818 25,17419 16,7273 Sesudah 223,4091 12,52042
Rata-rata  kadar  IgA  saliva  sebelum  berkumur  larutan  probiotik  adalah  205,6818 µg/ml  dengan  standar  deviasi  25,171419.  Sedangkan  rata-rata  kadar  IgA  saliva  sesudah berkumur  larutan  probiotik  adalah  223,4091  µg/ml  dengan  standar  deviasi  12,52042. Sehingga  dapat  disimpulkan  kadar  IgA  saliva  mengalami  peningkatan  sebesal  16,7273 µg/ml  setelah  berkumur  larutan  probiotik.  Selanjutnya  dilakukan  uji  normalitas  dengan Shapiro-Wilk.
Tabel 2. Hasil uji normalitas dengan Saphiro-Wilk Perlakuan p-value Sebelum 0,474 Sesudah 0,793
Hasil  uji  Saphiro-Wilk  pada  kelompok  sebelum  perlakuan  didapatkan p-value sebesar  0,474  dan  pada  kelompok  sesudah  diberi  perlakuan  adalah  0,793.  Karena  kedua
data  memiliki  nilai  p>0,05  maka  dapat  disimpulkan  bahwa  pada  kelompok  sebelum  dan sesudah  perlakuan  data  terdistribusi  normal.  Selanjutnya  bisa  dilakukan  uji  parametrik dengan uji-t berpasangan.
Tabel 3 . Hasil uji-t berpasangan Variabel p-value Sebelum – sesudah 0,059
Hasil uji-t berpasangan didapatkan p-value sebesar 0,059 dimana nilai p>0,059. Hal ini menunjukkan bahwa tidak terdapat perbedaan yang signifikan antar kelompok sebelum dan sesudah diberi perlakuan.

## PEMBAHASAN
Hasil  penelitian  menunjukkan  adanya  peningkatan  kadar  IgA  saliva  setelah berkumur  larutan  probiotik  tetapi  perbedaan  tersebut  tidak  signifikan  secara  statistik. Meningkatnya  kadar  IgA  saliva  berkaitan  dengan  probiotik  yang  mampu  menstimulasi sistem  imun  lokal  dan  memodulasi  respon  inflamatori,  dimana  bakteri  probiotik  akan mengekspresikan ligand yang akan berikatan dengan TLR di permukaan sel epitel mukosa. Selanjutnya TLR akan menginisiasi respon imun inate dan adaptif 12 .
Saat  APC  teraktivasi,  sel  T  akan  berproliferasi  dan  berdiferensiasi  menjadi  sel  T CD4 + dimana  sel  T  CD4 + akan  berdiferensiasi  dan  berproliferasi  menjadi  sel  Th2. Selanjutnya sel Th2 akan membentuk sitokin IL-4 dan IL-5 yang akan mengaktivasi sel B dan sel B akan berdiferensiasi menjadi sel plasma 13,14 . Sel plasma akan memproduksi sIgA. Sel epitel sekretori dari acinus sel kelenjar akan mensintesis secretory component (SC) dan akan  berikatan  dengan  IgA.  sIgA  yang  terbentuk  akan  dikeluarkan  melalui  duktus ekskretorius lumen dan dilepaskan ke dalam rongga mulut 15 .
Adanya  peningkatan  pada  kadar  IgA  saliva  pada  penelitian  ini  sejalan  dengan penelitian  sebelumnya  telah  dilakukan  pada  tikus  wistar  dengan  pelakuan  mengkonsumsi suplemen  probiotik  dengan  kandungan  bakteri L.  casei selama  14  hari 11 .  Begitu  pula dengan  penelitian  lain  yang  serupa  yaitu  dengan  mengunyah  permen  karet  probiotik mengandung L. reuteri selama 12 minggu dapat meningkatkan kadar IgA saliva 8 .
Pada  penelitian  ini  didapatkan  hasil  uji  statistik  yang  tidak  signifikan.  Hal  ini disebabkan adanya perbedaan sediaan probiotik, jenis bakteri dan waktu penelitian dengan penelitian sebelumnya serta terdapat  beberapa faktor yang dapat  mempengaruhi viabilitas bakteri  probiotik  dan  mempengaruhi  kadar  IgA  saliva.  Efektivitas  bakteri  probiotik tergantung  dari  kemapuan  bakteri  dalam  melakukan  perlekatan  dan  berkolonisasi  agar dapat  memberikan  efek  yang  positif 16 .  Beberapa  jenis  bakteri  pun  memiliki  kemampuan yang  berbeda  dan  memiliki  tingkat  modulasi  imun  yang  berbeda  pula 17 .  Hal  yang  dapat mempengaruhi  viabilitas  probiotik  adalah  jumlah  dan  penyimpanan  bakteri  probiotik. Jumlah bakteri yang tepat adalah 10 7 -10 9 cfu/g dan penyimpanan probiotik yang lebih baik adalah di suhu dingin (4 ) dibandingkan di suhu ruang untuk menjaga viabilitas bakteri 18 . Faktor  yang  dapat  mempengaruhi  kadar  IgA  saliva  diantaranya  kondisi  oral, kondisi  sistemik,  aktivitas  fisik  dan  nutrisi.  Kondisi  oral  seperti  adanya  karies  dan penggunaan gigi tiruan menunjukkan adanya penurunan kadar IgA saliva 19,20 . Pada kondisi gingivitis dan periodontitis terdapat peningkatan kadar IgA saliva dengan subjek gingivitis yang  memiliki  kadar  IgA  yang  lebih  tinggi 21 .  Pada  kondisi  sistemik  seperti  diabetes memiliki kadar IgA yang lebih tinggi dengan diabetes tipe I memiliki kadar IgA yang lebih tinggi daripada diabetes tipe II 22 . Aktivitas fisik seperti olahraga dengan intensitas sedang dan berat dapat menurunkan kadar IgA saliva 23,24 .
Selain  itu,  asupan  nutrisi  turut  mempengaruhi  dimana  nutrisi  berperan  agar  sel dapat  berfungsi  secara  optimal  sehingga  dapat  mendukung  fungsi  sitem  imun  dalam merespon  secara  efektif  dan  cepat  terhadap  patogen 25 .  Kurangnya  nutrisi  dihubungkan dengan  menurunnya  respon  imun.  Malnutrisi  protein  dan  energi  dihubungkan  dengan penurunan  dari  sIgA 26 .  Perbedaan  waktu  pengambilan  saliva pre-test dan post-test bisa mempengaruhi  hasil  dikarenakan  kadar  IgA  paling  tinggi  di  pagi  hari  dan  mengalami penurunan hingga malam hari 27 .

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  didapatkan  kesimpulan  bahwa  berkumur  dengan larutan probiotik mampu meningkatkan kadar IgA saliva namun peningkatan tersebut tidak signifikan secara statistik.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Vianney  AY,  Saleh  NN,  Iljas  AP.  Perbedaan  Kadar  Imunoglobulin  A  (IgA)  Pada Saliva Sebelum dan Setelah Pengunyahan Permen Karet Xylitol. BIMKG . 2016;4.
2. Khan  SF,  Katti  G,  Baba  I,  Khan  N.  Age-related  changes  of  salivary  IgA  among healthy  subjects. Journal  of  Indian  Academy  of  Oral  Medicine  and  Radiology . 2015;27(2):2013–206.
3. Jafarzadeh  A,  Sadeghi  M,  Karam  GA,  Vazirinejad  R.  Salivary  IgA  and  IgE  in Healthy  Subject:  Relation  to  Age  ang  Gender. Brazilian  Oral  Research. 2010;24(1):21-7.
4. Salampessy  GR,  Mariati  NW,  Mintjelungan  C.  Gambaran  Xerostomia  Pada Kelompok Lansia Yang Menggunakan Gigi Tiruan di Kabupaten Minahasa 1. Jurnal e-Gigi . 2015;3:1–4.
5. Misch,  C.  and  Resnik,  R.  Misch’s  Avoiding  Complications  in  Oral  Implantology. China:Elsevier;2017.
6. Plemons  JM.  Managing  xerostomia  and  salivary  gland  hypofunction. American Dental Association . 2015.
7. Rawung  F,  Wuisan  J,  Leman  M.  Pengaruh  Obat  Kumur  Beralkohol  Terhadap  Laju Aliran Saliva dan pH Saliva. Jurnal e-GiGi . 2017;5(2).
8. Ericson  D,  Hamberg  K,  Brathall  G,  Sinkiewicz-Enggren  G,  Ljunggren  L.  Salivary IgA  Response  to  Probiotic  Bacteria  and  Mutans  Streptococci  After  The  Use  of Chewing  Gum  Containing  Lactobacillus  Reuteri. Pathogens  and  Disease . 2013;68:82-87.
9. Oinike  I,  Prihatiningsih  T,  Hardini  N.  Efektivitas  Permen  Karet  Probiotik  Dalam Meningkatka pH dan Laju Aliran Saliva. Jurnal Kedokteran Diponegoro. 2018;7(1)
10. Himawan A, Prihatiningsih T, Hardini N. Efektivitas Permen Karet Probiotik Dalam Menurunkan  Indeks  Plak  dan  Jumlah  Koloni  Streptococcus  sp.  Saliva. Jurnal Kedokteran Diponegoro . 2018;7(1).
11. Hayati  M,  Herman  H,  Rezano  A.  The  Effect  of  Probiotic  Lactobacillus  Casei Supplementation on the Secretory Immunoglobulin A Level in The Saliva of Wistar Rats. Bali Medical Journal . 2018;7(3).
12. Stamatova  I,  Meurman  JH.  Probiotics:  Health  Benefits  in  The  Mouth. American Journal of Dentistry . 2009;22(6).
13. Azad  AK,  Sarker  M,  Wan  D.  Immunomoduatory  Effects  of  Probiotics  on  Cytokine Profiles. BioMed Research International . 2018;1-10.
14. Sudiono J. Sistem Kekebalan Tubuh. Jakarta:EGC;2014.
15. Yohana  W.  Secretory  IgA  Sebagai  Bagian  Reaksi  Sistem  Imunitas  Mukosa  Oral
Akibat Aplikasi Material Kurang Tepat. JMKG . 2013;2(1):83-89.
16. Kusumaningsih T. Peran bakteri probiotik terhadap Innate Immune Cell (The role of probiotic bacteria on Innate Immune Cells). Oral Biology Journal . 2014;6(2):45–50.
17. Hseish  PS,  An  Y,  Tsai  YC,  Chen  YC,  Chuang  CJ,  Zeng  CT,  dkk.  Potential  of Probiotic  Strains  to  Modulate  The  Inflammaatory  Responses  of  Epithelial  and Immune Cells In Vitro. New Micribiologica . 2013;36:167-179.
18. Yulinery T, Nurhidayat N. Analisis Viabilitas Probiotik Lactobacillus Terenkapsulasi Dalam  Penyalut  Dekstrin  dan  jus  Markisa  ( Passiflora  edulis ). J.  Tek.  Ling . 2012;13(1):109-121.
19. Nireeksha,  Hegde  MN,  Kumari  S,  Ulal  H,  Kedilaya  V.  Salivary  Protein  as Biomarkers  in  Dental  Caries:m  In  Vivo  Study. Dent  Oral  Craniofac  Res . 2017;3(2):1-7
20. Dehis  WM,  Farahat  A,  Zawahary  M,  Badawy  MS.  Influence  of  Two  Acrylic Denturea  on  Salivary  Immunoglobulin  A  (SIgA):  An In-vivo Study. EC  Dental Science . 2015;2(1).
21. Khare  AR,  Shettar  L,  Marks  L,  Thakur  SL,  Sattur  A.  Estimation  of  Secretory  Iga Levels  in  Saliva  and  its  Correlation  withTongue  Coating  and  Oral  Malodour  in Periodontal  Health  and  Disease-  A  Clinico-Biochemical  Study. IOSR  Journal  of Dental and Medical Sciences . 2015;14(10):73-79.
22. Sardari F, Tahmasbi A, Ghanbarzadegan A. Salivary  IgA Concentration in Diabetic Patients Compared to Healthy Controls. Dental Hypotheses . 2015;6(2).
23. Sapulete IM. Kajian Terhadap Kadar Imunoglobulin A (IgA) Serum yang Diinduksi Olahraga Pada Pagi Hari. Jurnal e-Biomedik . 2015;3(2).
24. Leicht  CA,  Goosey-Tolfrey  VL,  Bishop  NC.  Exercise  Intensity  and  Its  Impact  on Relationships  Between  Salivary  Immunoglobulin  A,  Saliva  Flow  Rate  And  Plasma Cortisol  Concentration. European  Journal  of  Applied  Physiology .  2018;118:1179- 1187.
25. Childs CE, Calder PC, Miles EA. Diet and Immune Function. Nutrient . 2019;11.
26. Saeed F, Nadeem M, Ahmad RS, Nadeem MT, Arshad MS, Ullah A. Studying The Impact  of  Nutritional  Immunology  Underlying  The  Modulation  of  Immune Responses  by  Nutritional  Compounds  –  A  Review. Food  and  Agricultural Immunology . 2015;27(2):205-229.
27. Rani DP, Budiardjo SB, Suharsini M. Salivary Secretory Immunoglobulin A Level of Children With Acute Lymphoblastic Leukimia in Maintenance Phase. Asian Journal of Pharmaceuetical and Clinical Research . 2018;11(3).50-52.