Alami Journal: Alauddin Islamic Medical Journal p-ISSN: 2581-2513 e-ISSN: 2685-0613 Volume 8 Nomor 2, July, 2024
Evaluasi Toksisitas Teratogenik Buah Beligo (Benincasa hispida (Thunb.) Cogn.) pada Fetus Mencit Bunting
Nur Alim 1 * , Mustaina 2 , Jumrah Sudirman 3 , Emilina Jafar 4
1,2,4 Program Studi Farmasi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Islam Makassar
3 Magister Kebidanan, Sekolah Pascasarjana, Universitas Hasanuddin
Email: nuralim.dty@uim-makassar.ac.id
Submitted: 22-01-2024 Revised: 01-08-2024 Accepted: 02-08-2024
How to cite : Nur, Mustaina, Jumrah Sudirman, & Emilina Jafar. (2024). Evaluation of Teratogenic Toxicity of Beligo Fruit (Benincasa hispida (Thunb.) Cogn.) in Fetus of Pregnant Mice. Alami Journal (Alauddin Islamic Medical) Journal , 8 (2), 107-117. Retrieved from https://journal.uin- alauddin.ac.id/index.php/alami/ article/view/45132
DOI: 10.24252/alami.v8i2.45132
Copyright 2024 ©the Author(s)
This  work  is  licensed  under  a Creative  Commons  Attribution- NonCommercial-  ShareAlike  4.0 International License

## Abstract
The use of drugs during pregnancy can cause problems for the fetus. Prolonged use of synthetic drugs and herbal products risks causing accumulation in the fetus, while the fetus  does  not  yet  have  a  perfectly  functioning  metabolic  system,  which  has  the potential  to  cause  teratogenic  effects.  Beligo  ( Benincasa  hispida  ( Thunb.)  Cogn . )  is  a plant that has the potential to be developed as a herbal medicine. This study aims to determine  the  teratogenic  effect  of  ethanol  extract  of  beligo  fruit  on  the  fetuses  of female  mice.  The  method  included  extraction  by  maceration  and  teratogenic  effect testing  using  16  mice,  which  were  divided  into  four  treatment  groups — group  I  was given Sodium Carboxymethyl Cellulose (Na-CMC) 1% and groups II, III, and IV were given ethanol extract of beligo fruit flesh at doses of 140 mg, 280 mg, and 560 mg/kg BW, respectively, orally. The results showed that the ethanol extract of beligo fruit flesh at 140 mg, 280 mg and 560 mg/kgBW in mouse fetuses was 100% complete same with Na-CMC 1% as a negative control. In conclusion, the ethanol extract of beligo fruit at 140 mg, 280 and 560 mg/kgBW had no teratogenic effect.
Keyword: Benincasa hispida ( Thunb). Cogn., Teratogenic, Toxicity

## Abstrak
Penggunaan  obat  pada  masa  kehamilan  dapat  menimbulkan  masalah  pada  janin. Pemakaian obat kimia sintesis dan  obat herbal jangka panjang memiliki resiko efek teratogenik  terhadap  janin,  karena  janin  belum  memiliki  sistem  metabolisme  yang sempurna.  Beligo  ( Benincasa  hispida (Thunb.)  Cogn.)  merupakan  tanaman  yang berpotensi  dikembangkan  menjadi  obat  herbal.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui efek teratogenik ekstrak etanol daging buah beligo terhadap fetus mencit betina. Metode penelitian meliputi ekstraksi secara maserasi dan uji efek teratogenik menggunakan  mencit  sebanyak  16  ekor  sebagai  hewan  uji  dan  terbagi  dalam  4 kelompok  perlakuan.  Kelompok  I  diberi  Na-CMC  1%,  kelompok  II,  III,  IV  diberi ekstrak etanol daging buah beligo dengan dosis masing-masing 140 mg, 280 mg, dan 560  mg/kgBB  secara  per  oral.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol daging buah beligo dosis 140 mg, 280 mg dan 560 mg/kgBB pada fetus mencit lengkap 100%  yang  sama  dengan  kelompok  kontrol  negatif  Na-CMC  1%.  Kesimpulan penelitian  ini  adalah  ekstrak  etanol  buah  beligo  dosis  140  mg,  280  mg  dan  560 mg/kgBB tidak memberikan efek teratogenik.
Kata kunci: Benincasa hispida (Thunb). Cogn., Teratogenik, Toksisitas

## Pendahuluan
Masyarakat Indonesia secara tradisional telah lama mengandalkan penggunaan obat herbal untuk  menyembuhkan  penyakit. 1 Saat  ini,  tren  pengembangan  obat  herbal  semakin berkembang,  dan  beberapa  penelitian  telah  dilakukan  untuk  eksplorasi  sumber  daya  alam Indonesia  yang  berpotensi  sebagai  bahan  baku  obat  herbal. 2 Meskipun  demikian,  penelitian mengenai  obat  herbal  yang  digunakan  di  sarana  pelayanan  kesehatan  masih  terbatas  karena harus memenuhi standar keamanan yang ketat. Oleh karena itu, penting untuk melaksanakan uji toksisitas, termasuk uji toksisitas teratogenik, guna memastikan keamanan penggunaan obat herbal tersebut. 3
Penggunaan  obat  selama  kehamilan  memerlukan  perhatian  khusus  karena  dapat menimbulkan risiko tidak hanya bagi ibu tetapi juga bagi janin. 4 Obat kimia sintetik dan obat herbal yang dikonsumsi secara berulang-ulang memiliki resiko akumulasi obat di dalam janin, terutama karena sistem metabolisme janin belum sepenuhnya berkembang. Senyawa kimia atau bahan obat dapat memasuki sirkulasi janin dan memiliki pengaruh pada pembentukan organ janin, yang dapat  berefek teratogenik atau cacat pada janin. 5 Oleh karena itu, penting untuk berkonsultasi  dengan  tenaga  kesehatan  sebelum  menggunakan  obat  selama  kehamilan  untuk mengevaluasi obat tersebut. 6 Penggunaan obat pada wanita hamil umumnya banyak terjadi pada trimester  pertama  usia  kehamilan  sehingga  biasanya  diresepkan  obat  oleh  dokter  untuk menangani  keluhannya.  Beberapa  keluhan  diantaranya    gangguan  pencernaan  seperti  mual muntah dan nyeri lambung, sakit kepala yang disebabkan karena naiknya tekanan darah, dan gangguan lainnya. 7
Beberapa  penelitian  menunjukkan  penggunaan  obat  herbal  maupun  tanaman  herbal sebagai Complementary and Alternative Medicine (CAM) mendapatkan perhatian di masyarakat dan menjadi  pilihan  untuk  mengurangi  intervensi  medis. 8 Penggunaan  CAM  pada  umumnya dilakukan  dengan  harapan  bahwa  manfaat  yang  ditimbulkan  mampu  menggantikan  khasiat obat-obatan  konvensional.  Selain  itu,  CAM  juga  dijadikan  pelengkap  untuk  mendukung kesembuhan  pasien.  Penggunaan  CAM  bahkan  digunakan  oleh  ibu  hamil  dan  ibu  nifas. Penelitian yang dilakukan di beberapa negara menunjukkan bahwa kelompok ibu hamil dan ibu nifas cenderung menggunakan obat- obatan herbal dengan alasan untuk mendapatkan manfaat CAM  secara  holistik. 8,9,10 Salah  satu  tanaman  herbal  yang  potensial  digunakan  sebagai  obat alternatif adalah beligo.
Beligo merupakan  tanaman yang berpotensi dikembangkan sebagai obat herbal. Bagian yang  umum  digunakan  adalah  buahnya.  Beligo  adalah  sayuran  atau  buah  yang  tergolong Cucurbitacea e. Buah beligo mengandung karbohidrat, asam-asam organik, asam amino, alkaloid, fenolik,  flavonoid  dan  tanin  yang  bermanfaat  untuk  kesehatan.  Secara  empiris  masyarakat Sulawesi  Selatan  secara  umum  (bahkan  untuk  wanita  hamil)  menggunakan  beligo (Benincasa hispida (Thunb.) Cogn.) sebagai sayuran dan untuk meredakan rasa nyeri, menurunkan demam, menurunkan  tekanan  darah  dan  mengobati  tipes. 11,12,13,14 Sehingga  dapat  dipertimbangkan sebagai sumber nutrisi dan pengobatan alternatif pada ibu hamil.
Penelitian terdahulu mengatakan bahwa ekstrak buah beligo dengan dosis 100, 200, 400 mg/kg  menunjukan  efek  analgesik  pada  tikus. 15 Penelitian  lain  membuktikan  bahwa  ekstrak
buah  beligo  dosis  200,  400  dan  600  mg/kg  dapat  mengatasi  analgesik  dan  antipiretik  pada tikus. 16,17 Semua dosis tersebut yang menjadi rujukan dalam penelitian ini, namun dikonversi menjadi dosis mencit.
Penelitian  bertujuan  mengetahui  efek  teratogenik  ekstrak  etanol  daging  buah  beligo terhadap fetus mencit betina bunting.

## Metode Penelitian
Penelitian  dilaksanakan  Juni  2023  di  Laboratorium  Farmakognosi-Fitokimia  serta Farmakologi-Toksikologi Universitas Islam Makassar setelah izinkan secara etik dari Komite Etik Penelitian  Kesehatan  FK-UMI,  nomor  175/A.I/KEPK-UMI/VI/2023.  Adapun  alat  yang digunakan terdiri atas ayakan mesh 40, bejana maserasi, peralatan gelas yang umum digunakan dalam laboratorium farmasi, gunting bedah, kapas, timbangan analitik, spoit oral sonde, kertas saring, kandang mencit, oven, papan bedah, rotary evaporator , timbangan hewan. Serta Bahan yang digunakan terdiri atas alkohol 70%, aquadest, daging buah beligo , eter, Na-CMC 1%, dan mencit betina .
Sampel penelitian adalah buah beligo yang diperoleh di Dusun Daulele, Desa Lembang Lohe, Kecamatan Kajang, Kabupaten Bulukumba, Provinsi Sulawesi Selatan. Titik Koordinat: Lintang Selatan (S) - 5º 36’ 2106”, Bujur Timur (E) 120º 35’ 7087”. Buah beligo dicuci hingga bersih,  dikupas  kulitnya  dan  dagingnya  diambil,  ditimbang  dan  dipotong-potong  serta dikeringkan (di oven, 60ºC selama 2 jam). Pengeringan dilanjutkan di suhu ruang hingga kering merata. Sampel diserbukkan dan diayak dengan mesh 40 dan dilakukan proses ekstraksi.
Proses ekstraksi dilakukan dengan cara sebanyak 311,1 g serbuk simplisia diekstraksi secara maserasi  dengan  etanol  70%,  kemudian  dimasukkan  ke  dalam  wadah  maserasi.  Simplisia dibasahi  terlebih  dahulu  dengan  cairan  penyari  etanol  70%  sebanyak  1200  mL  hingga mengembang,  kemudian  ditambah  kembali  etanol  70%  sebanyak  500  mL  hingga  seluruh simplisia  terendam  sempurna.  Didiamkan  selama  3x24  jam  dalam  wadah  tertutup  dan terlindungi  dari  cahaya  matahari  dengan  pengadukan  sesekali.  Disaring  untuk  memisahkan filtrat dan residunya. Residu diremaserasi kembali dengan pelarut etanol 70% sebanyak 700 mL. Remaserasi dilakukan sebanyak 2 kali. Filtrat diuapkan menggunakan rotary evaporator hingga ekstrak mengental, kemudian ditimbang dan dihitung rendemennya.
Selanjutnya Na-CMC 1% dibuat dengan cara: 1g Na-CMC dalam lumpang, ditambahkan aquades (suhu 70 o C) secara perlahan sambil digerus hingga menjadi larutan koloid, dipindahkan dalam  labu  tentukur  100  mL,  didinginkan.  Alasan  penggunaan  Na-CMC  dalam  penelitian karena  secara  fisik  ekstrak  etanol  buah  beligo  tidak  larut  sempurna  dalam  aquades  sehingga dibutuhkan pensuspensi agar ekstrak terdistribusi secara homogen. 12
Sebelum  dilakukan  uji  toksisitas  teratogenik  dilakukan  pembuatan  sampel  uji  suspensi ekstrak  etanol  daging  buah  beligo  sesuai  perhitungan  dosis.  Dosis  yang  digunakan  dalam penelitian ini  adalah 140 mg/kgBB, 280 mg/kgBB dan 560 mg/kgBB yang merupakan hasil konversi dari dosis tikus ke mencit. 18 Dosis tikus yang menjadi rujukan tersebut adalah 100 mg, 200 mg, 400 mg, dan 600 mg. 16,17 Ekstrak daging buah beligo ditimbang sesuai dengan dosis yang ditentukan:  140  mg/kgBB,  280  mg/kgBB,  dan  560  mg/kgBB.  Untuk  dosis  140  mg/kgBB, ekstrak etanol daging buah beligo ditimbang sebanyak 0,42 g. Untuk dosis 280 mg/kgBB, ekstrak
etanol daging buah beligo ditimbang sebanyak 0,84 g. Untuk dosis 560 mg/kgBB, ekstrak etanol daging buah beligo ditimbang sebanyak 1,68 g. Setelah ditimbang, ekstrak tersebut dimasukkan ke dalam lumpang dan ditambahkan Na-CMC 1%. Campuran kemudian dipindahkan ke dalam labu  takar  berukuran  100  mL.  Selanjutnya,  labu  diisi  volumenya  sampai  tanda  batas  yang ditentukan,  dan  diaduk  sampai  homogen.  Suspensi  ekstrak  siap  untuk  digunakan  dalam pengujian teratogenik (Gambar 1).
Uji teratogenik dilakukan dengan prosedur kerja yang diawali dengan penyiapan hewan uji mencit (20-30 g), sehat dan telah diadaptasikan selama  tujuh hari. Mencit ditimbang dan dibagi dalam empat kelompok, masing-masing kelompok terdiri dari satu ekor jantan dan tiga ekor betina dan dikawinkan. Setelah hewan dinyatakan bunting, perlakuan terhadap hewan uji dilakukan. Keempat kelompok tersebut terdiri dari atas: kelompok I yang diberikan Na-CMC 1% sebagai kontrol negatif, kelompok II diberikan ekstrak etanol daging buah beligo (EEDBB) 140  mg/kgBB,  kelompok  III  diberikan  ekstrak  etanol  daging  buah  beligo  280  mg/kgBB, kelompok IV diberikan ekstrak etanol daging buah beligo 560 mg/kgBB. Pemberian perlakuan secara per oral dosis sebanyak 1 mL/30gBB mencit selama masa organogenesis yaitu hari ke-6 sampai hari ke-15 kebuntingan.
Gambar 1. Skema Kerja Uji Teratogenik Ekstrak Etanol Daging  Buah Beligo ( Benincasa Hispida (Thunb.) Cogn.) pada Mencit (Mus musculus)
Adapun proses pengawinan yaitu mencit betina dan jantan alami ditempatkan bersama dalam  kandang  yang  sama.  Mencit  betina  yang  telah  dikawini  diperiksa  di  area  vagina  dan diamati  adanya  kongesti  vagina  menggunakan  swab  atau  tisu  kering  yang  digulung  hingga ujungnya meruncing dan diperkirakan dapat masuk ke dalam vagina mencit. Jika swab atau tisu kering menjadi basah atau terjadi bercak cairan sperma, mencit dianggap kawin dan ditentukan sebagai hari ke-0 kebuntingan. Adapun ciri-ciri hewan uji yang telah mengalami kebuntingan yaitu bersifat agresif, puting susu semakin terlihat jelas, vagina akan mengeluarkan cairan bila ditekan, peningkatan bobot badan, perut terlihat membesar dari ukuran normalnya.
Pada  hari  ke-18  kebuntingan,  mencit  betina  dibedah  untuk  pemeriksaan  fetus.  Alasan dilakukan pembedahan di hari ke-18 karena rata-rata usia kehamilan mencit 19-21 hari yang bila ditunda mencit diperkirakan telah melahirkan 19 . Mencit mula-mula di timbang (bobot akhir), dibius dengan eter hingga pingsan, dan didiamkan selama beberapa menit lalu ditarik ekor dan kepala secara bersamaan. Diletakkan terlentang di atas papan bedah. Dada mencit dioles dengan alkohol  70%  sampai  bagian  perut.  Kulit  pada  bagian  dada  mencit  dipotong  dengan  ujung gunting dan kulit dibuka, difiksasi ke samping hingga isi bagian perut terlihat. Bagian uterus dikeluarkan dengan menggunting ujungnya dan uterus kemudian direndam ke dalam larutan NaCl 0,9% dan dilakukan pemeriksaan fetus.
Jumlah fetus dalam uterus dihitung, lalu dikeluarkan dari uterus dengan cara menggunting bagian uterus dengan perlahan-lahan. Semua fetus dimasukkan ke dalam vial dan ditambahkan larutan NaCl 0,9% hingga semua fetus terbilas. Kemudian fetus dibiarkan selama 30 menit lalu dibilas kembali dengan NaCl 0,9%. Pemeriksaan anatomi dilakukan terhadap mata, telinga, ruas jari,  ekor  dan  organ  lain  yang  dianggap  abnormal  dibandingkan  dengan  kontrol  negatif. Selanjutnya dilakukan analisis data.
Data  yang  diperoleh  dianalisis  secara  statistik  dengan  metode  SPSS  ver.16.  Data  yang dianalisis hanya data kenaikan berat badan setelah mencit dinyatakan bunting hari ke-5, setelah pemberian ekstrak serta berat badan awal (sebelum dikawinkan) yang dianalisis menggunakan uji Uji T-berpasangan ( T-paired Test ), uji normalitas, dan uji One Way ANOVA . Pada penelitian ini tidak dilakukan analisis statistik terhadap data kecacatan (abnormalitas) fetus mencit karena tidak terjadi efek teratogenik.

## Hasil Penelitian
Penelitian diawali dengan preparasi sampel lalu dilakukan proses ekstraksi secara maserasi sehingga diperoleh ekstrak dengan rendemennya sebesar 7%. Kemudian dilakukan pengukuran bobot  badan  mencit  sebelum  dikawinkan  (bobot  badan  awal),  setelah  dikawinkan  (setelah dinyatakan bunting di hari ke-5) dan setelah pemberian ekstrak (sebelum pembedahan) (Tabel 1).

## Tabel 1. Analisis Bobot Badan Mencit pada Awal Penelitian, Kebuntingan hari ke-5 dan Setelah Pemberian Ekstrak Beligo
Kelompok Perlakuan Bobot Badan (g) p-value Awal Mean ± SD Kebuntingan hari ke-5 Mean ±SD Setelah Pemberian ekstrak Mean ±SD I Na-CMC 1% 27,00
28,66 ±3,11 31,66 33,50
± 3,31 38,00
40,83 ±4,42 0,002 * 0,00 01 ** II EEDBB 140 mg/kgBB 29,33 35,33 44,66 III EEDBB 280 mg/kgBB 28,66 35,33 42,33 IV EEDBB 560 mg/kgBB 28,66 31,66 38,33
Syarat : Signifikansi p <0,05 : test distribution is normal Keterangan :
* : p-value uji T berpasangan; awal terhadap kebuntingan hari ke-5
** : p-value uji T berpasangan; kebuntingan hari ke-5 terhadap setelah pemberian ekstrak EEDBB: Ekstrak Etanol Daging Buah Beligo
Untuk mengetahui adanya perubahan berat badan sebelum dan sesudah dikawinkan serta setelah pemberian ekstrak pada semua kelompok perlakuan dilakukan uji T-berpasangan (Tabel 1).  Hasil  uji  T-berpasangan  antara  bobot  badan  awal  dengan  bobot  badan  mencit  setelah mengalami kebuntingan hari ke-5 diperoleh nilai p=0,002 (p<0,05) artinya ada kenaikan bobot badan  yang  sangat  signifikan.  Sedangkan  uji  T-berpasangan  antara  bobot  badan  mencit kebuntingan hari ke-5 dengan bobot badan setelah pemberian ekstrak diperoleh nilai p=0,0001 ( p<0,05 ) artinya ada kenaikan bobot badan yang sangat signifikan.

## Tabel 2. Analisis Bobot Badan Mencit Sebelum dan Setelah Pemberian Ekstrak
Kelompok Perlakuan Sebelum Pemberian Ekstrak Sebelum Pemberian Ekstrak MEAN ± SD p-value* MEAN ± SD p-value* I Na-CMC 1% 27,00±2,64 0,481 38,00±4,00 0,186 II EEDBB 140mg/kgBB 29,33±1,16 44,66±3,51
III EEDBB 280mg/kgBB 28,66±2,31 42,33±4,04 IV EEDBB 560mg/kgBB 26,67±2,88 38,33±4,04
Syarat Signifikansi, p-value <0,05 *: Uji ANOVA
Hasil uji ANOVA bobot badan pada tabel 2 sebelum pemberian ekstrak menunjukkan nilai  signifikansi  sebesar  0,481  ( p  >0,05 )  artinya  tidak  ada  perbedaan  (sama)  antar  kelompok perlakuan  pada  bobot  badan  awal  mencit  sebelum  diberikan  ekstrak.  Sedangkan  setelah pemberian  ekstrak  menunjukkan  nilai  signifikansi  sebesar  0,186  ( p  >0,05 )  artinya  tidak  ada perbedaan (sama) kenaikan bobot badan mencit  antar kelompok perlakuan setelah diberikan ekstrak.
Tabel 3. Data Parameter Teratogenik dan Persentase Kecacatan Dosis Parameter Teratogenik Jumlah fetus setiap induk Total jumlah fetus Jumlah Kecacatan Persentase Kecacatan Kelompok 1 Na-CMC 1 % Mencit 1 = 9 Mencit 2 = 6 Mencit 3 = 8 23 0 Lengkap 100% Kelompok II EEDBB 140 mg/kgBB Mencit 1 = 9 Mencit 2 = 10 Mencit 3 = 10 29 0 Lengkap 100% Kelompok III EEDBB 280 mg/kgBB Mencit 1 = 9 Mencit 2 = 10 Mencit 3 = 10 29 0 Lengkap 100% Kelompok IV EEDBB 560 mg/kgBB Mencit 1 = 6 Mencit 2 = 9 Mencit 3 = 9 24 0 Lengkap 100%
Tabel 3 dan gambar 2 memperlihatkan bahwa, pada semua kelompok perlakuan  setiap induk  memiliki  jumlah  fetus  normal,  yaitu  antara  6-15  ekor.  Data  parameter  teratogenik menunjukkan  semua  kelompok  perlakuan  tidak  terdapat  kecacatan  (100%  organ  lengkap) artinya tidak ada efek teratogenik.
KELOMPOK I
KELOMPOK II
KELOMPOK III KELOMPOK IV

## Gambar 2. Fetus pada Masing-masing Kelompok Perlakuan

## Pembahasan .
Penelitian diawali dengan dengan mengekstraksi serbuk simplisia secara maserasi dengan etanol  70%,  alasan  menggunakannya  sebagai  pelarut  karena  bersifat  universal.  Mampu mengekstraksi sebagian besar kandungan fitokimia tanaman. 20
Hewan uji yang digunakan pada penelitian ini adalah mencit ( Mus musculus ). Alasannya karena mencit seringkali  digunakan dalam penelitian di  laboratorium yang berkaitan dengan bidang  farmakologi  karena  siklus  hidupnya  relatif  pendek,  jumlah  fetus  berkisar  6-15  ekor, 21 penanganannya  mudah,  karakteristik,  reproduksi,  struktur  anatomi,  fisiologi  dan  genetiknya memiliki kemiripan dengan hewan mamalia lain termasuk manusia. 22
Pemberian  ekstrak  dilakukan  pada  sore  hari  dan  dilakukan  pengamatan.  Perkawinan mencit jantan dan betina  umumnya terjadi  pada sore hari  hingga malam hari  karena mencit termasuk hewan yang nokturnal (aktif di malam hari). Setiap pagi dilakukan pengecekan sumbat vagina sebagai penanda mencit telah mengalami kopulasi dan berada pada hari kehamilan ke-0. Mencit yang telah hamil dipisahkan dan yang belum hamil dicampur kembali dengan mencit jantan.
Salah  satu  parameter  pengukuran  di  penelitian  ini  adalah  bobot  badan  (BB).  Hasil pengukuran  BB  rata-rata  mencit  (Tabel  1)  menunjukkan  bahwa  semua  kelompok  perlakuan memiliki kenaikan yang sama berdasarkan uji T-berpasangan (Tabel 1) baik dari bobot badan awal menjadi bunting di hari ke-5 serta dari hari ke-5 hingga ke-18 kebuntingan (setelah diberi ekstrak). Pengukuran bobot badan awal hingga menjadi bunting bertujuan untuk memastikan hewan  uji  mencit  benar-benar  bunting.  Ciri-ciri  lain  hewan  uji  yang  sudah  mengalami kebuntingan yaitu bersifat agresif, puting susu semakin terlihat jelas, vagina akan mengeluarkan cairan bila ditekan, peningkatan bobot badan, perut terlihat membesar dari ukuran normalnya. 21 Tujuan pengukuran bobot badan pada mencit yang telah diberikan ekstrak uji adalah sebagai parameter  kecacatan  di  masa  organogenesis  pada  uji  teratogenik. 21 Analisis  statistik  one  way ANOVA  (Tabel  2)  menunjukkan  tidak  ada  perbedaan  (sama)  kenaikan  bobot  badan  mencit antar kelompok perlakuan setelah diberikan ekstrak dengan nilai  signifikansi 0,186 ( P>0,05 ). Artinya tidak ada efek teratogenik berdasarkan pengukuran bobot badan.
Parameter  utama  pada  uji  teratogenik  adalah  pemeriksaan  morfologi  anatomi organ. 23,24,25,26 Hasil  pengamatan  yang  dilakukan  secara  morfologi  berdasarkan  pengamatan secara  langsung  terhadap  mata,  telinga,  ruas  jari,  ekor  dan  organ  lain  (Tabel  3).  Kelompok pertama  kontrol  negatif  Na-CMC  1%  dengan  rata-rata  jumlah  fetus  23  fetus  tidak  terjadi kecacatan dan mempunyai kelengkapan 100%. Kelompok ke-2 dosis 140 mg/kgBB terdapat rata- rata jumlah fetus 29 fetus dengan keterangan tidak terjadi kecacatan dan mempunyai persentase kelengkapan 100%. Kelompok ke-3 dosis 280 mg/kgBB terdapat rata-rata jumlah fetus sebanyak 29 dengan keterangan tidak terjadi kecacatan dan mempunyai persentase kelengkapan 100% dan  kelompok  ke-4  dosis  560  mg/kgBB  terdapat  rata-rata  jumlah  fetus  sebanyak  24  dengan keterangan tidak terjadi kecacatan dan mempunyai persentase kelengkapan 100%. Hal ini sesuai dengan  penelitian  sebelumnya  bahwa  ekstrak  daging  buah  beligo  tidak  menunjukkan  efek toksisitas oral akut dan kronik bahkan pada dosis 2000 mg/kgBB tikus. 27 Dalam penelitian ini tidak  dilakukan  pemeriksaan secara mikroskopik  untuk melihat kelainan sel dari  organ fetus secara spesifik sehingga pada penelitian selanjutnya diharapkan dilakukan pemeriksaan secara mikroskopik.

## Kesimpulan dan Saran
Berdasarkan hasil penelitian disimpulkan bahwa ekstrak etanol daging buah beligo dosis 140 mg/kgBB, 280 mg/kgBB dan 560 mg/kgBB tidak memberikan efek teratogenik terhadap fetus mencit betina bunting.
Disarankan pada penelitian selanjutnya dilakukan pemeriksaan secara mikroskopik.

## Daftar Pustaka
1.   Sumarni  W,  Sudarmin  S,  Sumarti  SS.  The  scientification  of  jamu:  A  study  of Indonesian’s traditional medicine. Jurnal of Physics: Conference Series . 2019;1321(3):032057.
2.   Widjaja  G.  The  Role  And  Existence  Of  Herbal  Medicine  In  Traditional  Medicine Indonesia. Jurnal Kesehatan . 2024;2(5):296 – 308.
3.   Munaeni W, et al. Perkembangan & Manfaat Obat Herbal sebagai Fitoterapi . Gowa, Sulawesi Selatan: CV. Tohar Media; 2023.
4.   Alema  NM,  et  al.  Patterns  and  determinants  of  prescribed  drug  use  among  pregnant women  in  Adigrat  general  hospital,  northern  Ethiopia:  a  cross-sectional  study. BMC Pregnancy Childbirth . 2020;20(1):1 – 9.
5.   Barrier HP, et al. Fetus Exposure to Drugs and Chemicals : A Holistic Overview. Diseases . 2024;12:114.
6.   Direktorat  Jenderal  Pelayanan  Kesehatan  KRI. Penggunaan  Obat  Pada  Ibu  Menyusui. Humas Yankes Kemenkes RI [Internet]. 2022;1 – 3. Available from: https://yankes.kemkes.go.id/view_artikel/670/penggunaan-obat-pada-ibu-menyusui
7.   Wen SH, Chang WC, Shen HS, Wu HC. Prescription patterns and factors influencing the use of Chinese herbal medicine among pregnant women in Taiwan: A population- based retrospective study. BMC Complementary Medicine and Therapies . 2020;20(1):1 – 10.
8. Barnes  LAJ,  Barclay  L,  McCaffery  K,  Aslani  P.  Factors  influencing  women’s  decision - making  regarding  complementary  medicine  product  use  in  pregnancy  and  lactation. BMC Pregnancy Childbirth. 2019;19(1):1 – 14.
9.   Jabir  NR,  et  al.  A  literature  perspective  on  the  pharmacological  applications  of yohimbine. Annals of Medicine. 2022;54(1):2849 – 63.
10.  Quzmar Y, et al. The use of complementary and alternative medicine during pregnancy: a  cross-sectional  study  from  Palestine. BMC  Complementary  Medicie  and  Therapies . 2021;21(1):1 – 10.
11.  Alim N, Hasanuddin R, Haqq AI, Linda N. Aktivitas Antipiretik Ekstrak Etanol Daging Buah  Beligo  (Benincasa  hispida  (Thunb.)  Cogn.)  pada  Tikus  Putih  Wistar  (Rattus norvegicus). Jurnal Ilmiah Sains. 2023;23(2):89 – 98.
12.  Alim N, Rasyid H, Bukhari A, Djide N. The Potency of Beligo Seeds (Benincasa hispida (Thunb.) Cogn.) as Antihyperlipidemic in L-NAME-induced Hyperlipidemic Rats. Fabad Journal of Pharmaceutical Sciences. 2023;48(2):231 – 40.
13.  Rasyid  H,  et  al.  antioxidant  potential  and  total  phenolic  of  ethanol  extract  beligo (Benincasa Hispida (Thunb.) Cogn.) Seeds. Azerbaijan Medical Journal . 2022;62(09):4895- 907.
14.  Hasanuddin R, Alim N, Fauzan A. Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daging Buah Beligo (Benincasa hispida (Thunb.) Cogn.) terhadap Escherichia coli dan Staphylococcus aureus. Jurnal Novem Medika Farmasi . 2023 Aug 31;1(3):14-21.
15.  Islam  MT,  et  al.  A  literature ‐ based  update  on  Benincasa  hispida  (Thunb.)  Cogn.: Traditional uses, nutraceutical, and phytopharmacological profiles. Oxidative medicine and cellular longevity. 2021;2021(1):6349041.
16.  Alim  N,  Sulastri  D,  Pratama  AS.  Aktivitas  Antipiretik  Ekstrak  Etanol  Daun  Beligo (Benincasa  hispida  (Thunb.)  Cogn.)  pada  Tikus. Jurnal  Novem  Medika  Farmasi . 2022;1(2):40 – 9.
17.  A.Baso Amri A., Alim N, Nuraynung A. Evaluasi Aktivitas Antiinflamasi Ekstrak Etanol Kulit  Beligo  Buah  (  Benincasa  hispida  (  Thunb  .)  Cogn  .)  Pada  Tikus  Putih  (  Rattus norvegicus ). Jurnal Farmasi dan Bahan Alam: FARBAL . 2023;11(1):22 – 9.
18.  Jacob  S,  Nair  AB,  Morsy  MA.  Dose  Conversion  Between  Animals  and  Humans:  A Practical  Solution. Indian  Journal  of  Pharmateutical  Education  and  Research . 2022;56(3):600 – 7.
19.  Schoenfeld  T. Standard  Operating  Procedures  for  Animal  Care .  Fitchbg  State  University [Internet].2022;01:1 – 7. Available from: https://www.google.com/url?sa=t&source=web&rct=j&opi=89978449&url=https://w ww.fitchburgstate.edu/media/5558&ved=2ahUKEwjJ5aLjzcyHAxXQT2wGHS75OysQ FnoECCEQAQ&usg=AOvVaw0j5qRCEmU9Su5rvvkbR1Qv
20.  Alim N, et al. Phytochemical Screening , Relationship of Total Phenolic with Antioxidant Activity Of Ethanol and Methanol Extracts of Kesambi (Schleichera oleosa (Lour .) Oken) Bark. Jurnal Ilmiah Sains . 2022;22(2):118 – 24.
21.  Alim N, et al. Uji Teratogenik Ekstrak Etanol Biji Beligo (Benincasa hispida (Thunb.) Cogn.) Pada Mencit Betina (Mus Musculus). Jurnal Yoga dan Kesehatan . 2023;6(2):243 – 53.
22.  Mutiarahmi  CN,  Hartady  T,  Lesmana  R.  Use  of  Mice  as  Experimental  Animals  in Laboratories  That  Refer  To  the  Principles  of  Animal  Welfare:  a  Literature  Review. Indonesia Medicus Veterinus. 2021;10(1):134 – 45.
23.  Cabrera RM, et al. The teratogenic effects of sertraline in mice. Birth Defects Research . 2020 Aug 1;112(13):1014 – 24.
24.  Gomolin T, Cline A, Pereira F. UC Davis Dermatology Online Journal Title Treatment of rosacea during pregnancy Publication Date Copyright Information. Dermatology Online Journal . 2021;27(7):1-10.
25.  Stoev SD. Studies on teratogenic effect of ochratoxin A given via mouldy diet in mice in various sensitive periods of the pregnancy and the putative protection of phenylalanine. Toxicon . 2022 Apr 30;210:32 – 8.
26.  Nunes RCS, et al. The Ethanolic Extract of Piper glabratum Kunth Is Teratogenic and Interferes  with  the  Ossification  Process  of  Swiss  Mice  Fetuses. Pharmaceuticals. 2023;16(3):1 – 14.
27.  Shakya A, Chaudhary SK, Bhat HR, Ghosh SK. Acute and sub-chronic toxicity studies of Benincasa hispida (Thunb.) cogniaux fruit extract in rodents. Regulatory Toxicology and Pharmacology . 2020;118:104785.