Pengaruh  Penambahan  Pegagan  (Centella  asiatica) dan  Vitamin  C  terhadap Kandungan  Hemoglobin dan  Hematokrit    Darah    Ayam  Broiler yang Mengalami Cekaman Panas
(Effect of pegagan (Centella asiatica) and Vitamin C on

## Blood hemoglobin and  Hematocrite  of  Heat-Stressed
Broilers)
Engkus Kusnadi

## Fakultas Peternakan Universitas Andalas Padang

## Abstrak
Penelitian  ini  dilaksanakan  untuk  mempelajari  pengaruh  pegagan (Centella  asiatica) dan vitamin  C  terhadap  hemoglobin  dan  hematokrit  darah  ayam  broiler  yang  mengalami cekaman  panas. Penelitian  ini  menggunakan  120  ekor  broiler  jantan  umur  2 – 6  minggu, temperatur  kandang  dipertahankan  31.98  ±  1.94 0 C  pada  siang  hari  dan  27.36  ±  1.31 0 C pada malam hari. Perlakuan yang diberikan adalah 0% (K), 5% (P5), 10% (P10) kandungan pegagan  dalam  pakan,  500  ppm  vitamin  C  dalam  air  minum  (C),  dan  kombinasi  5% pegagan  dan  500  ppm  vitamin  C  (P5C),  dan  kombinan  10%  pegagan  dengan  500  ppm vitamin  C  (P10C).  Hasil  penelitian  menunjukan  bahwa  perlakuan-perlakuan P5,  P10,  C, P5C dan P10C nyata meningkatkan hemoglobin dari 6,8 g/dL  menjadi 7,5; 7,8; 8,0; 8,2 dan 8,5  g/dL dan  hematokrit  darah  dari 19,4% menjadi 23,4%, 25,4%,    24,3%,  24,1%, dan 27,1%,  berturut-turut.    Hal  ini  dapat  disimpulkan  bahwa  pemberian  sebanyak  5% pegagan sangat efektif sebagao anti cekaman panas pada ayam broiler. Kata kunci: Centella asiatica, vitamin C, cekaman panas, broiler

## Abstract
This  experiment  was  conducted  to  study  the  effect  of  pegagan    (Centella  asiatica) and vitamin  C  on  blood hemoglobin and  hematocrite  of  heat-stressed  broilers.  The  research used  120  male broilers  of   2 – 6 weeks of age,  kept at   31.98 ± 1.94 0 C   poultry  house temperatures during the day and 27.36 ± 1.31 0 C at night.   The treatment are: 0% (K), 5% (P5),  10%  (P10)  of  pegagan  fed  groups,  500ppm  vitamin  C  in  drinking  water  (C  ),  and combinations of 5% pegagan and 500ppm vitamin C (P5C ), and 10% pegagan and 500ppm vitamin C (P10C ). The result indicated that : The treatments of P5, P10, C, P5C and P10C significantly (P< 0.05) increased the blood hemoglobin from 6.8 g/dL to 7.5, 7.8,   8.0, 8.2 and  8.5  g/dL    and  blood  hematokrit  from  19.4%  to  23.4,  25.4,  24.3,  24.1  and  27.1% respectively. It could be concluded that the addition 5%  pegagan  is the  most effective as anti heat-stress agent in broilers diet.
Key words: Centella asiatica, vitamin C, heat stress, broiler.

## Pendahuluan
Cekaman  panas  yang  biasanya  diikuti dengan  turunnya  produksi  dapat  merupakan masalah  serius  pada  pengembangan  ayam  broiler di  daerah  tropis.  Suhu rata-rata  di  daerah  tropis adalah  29,8 – 36,9 0 C  pada  siang  hari  dan  12,4 – 24,2 0 C pada malam hari (BPS, 2001), lebih tinggi dibandingkan  suhu  nyaman  bagi  ayam  broiler yakni 21 – 24 0 C (Charles, 1981).
Penelitian  Cooper  dan  Washburn  (1998) menunjukkan  bahwa  suhu  lingkungan  yang  tinggi dapat  menyebabkan  meningkatnya  suhu  tubuh ayam  broiler,  yang  diikuti  dengan  penurunan
konsumsi ransum dan turunnya pertambahan bobot badan. Turunnya produksi pada ayam broiler yang mengalami  cekaman  panas,  dibuktikan  pula oleh Bonnet et  al.  (1997).    Menurutnya,  konsumsi ransum dan pertambahan bobot badan ayam broiler selama  2  minggu  dari  umur  4  s/d  6  minggu  yang dipelihara pada suhu lingkungan 32 0 C adalah 1470 g/ekor  dan  515  g/ekor;  sementara  pada  suhu lingkungan 22 0 C konsumsi ransum dan pertambahan bobot badan tersebut masing-masing: 2226 g/ekor  dan 1084 g/ekor. Keadaan  sebaliknya terjadi  pada  konsumsi  air  minum  yakni  dari  3486 g/ekor  pada  suhu  22 0 C  meningkat  menjadi  4508
g/ekor  pada  suhu  32 0 C.  Naiknya  konsumsi  air minum  tersebut    diperlukan  karena  air    berfungsi terutama  untuk  menjaga  agar  suhu  tubuh  relatif konstan.
Turunnya produksi  pada kondisi cekaman panas  tersebut,  diperkuat  dengan  berkurangnya retensi nitrogen, sehingga dapat menurunkan  daya cerna protein dan beberapa asam amino (Zupprizal et  al.,    1993;    Tabiri et  al.,  2000),  peningkatan pengeluaran  beberapa  mineral  pada  urin  (Belay et al., 1992) serta menurunnya bakteri berguna dalam saluran pencernaan (Tomomatsu, 1994).
Penelitian Yahav et al.(1997) menunjukkan bahwa peningkatan suhu lingkungan nyata menurunkan kadar hematokrit dan hemoglobin  darah,  yang  ternyata  diikuti  pula dengan peningkatan bobot jantung. Untuk mensuplai  butir  darah  merah  dalam  keadaan hematokrit/hemoglobin  rendah  diperlukan  aliran darah  yang  lebih  cepat,  sehingga  jantung  harus memompa  lebih  cepat  pula.  Akibatnya  jantung lebih  aktif  sehingga  ukurannya  menjadi  lebih besar.  Begitu pula  dengan  penelitian Sandercock et  al. (2001)  di  mana  cekaman  panas  yang  akut, selain  meningkatkan  suhu  tubuh  dan  aktivitas enzim  kreatin  kinase  plasma  ternyata  menurunkan pH  dan  pCO 2 darah  vena.  Secara  keseluruhan menunjukkan  bahwa  cekaman  panas  selain  dapat menurunkan  kualitas  karkas  berupa  menurunnya kadar  protein  karkas  serta  meningkatnya    lemak karkas yang dihasilkan (Geraert et al., 1996), juga dapat  menurunkan  pertumbuhan  bulu  (Campo et al.,    2001)  serta  dapat  terganggunya  fungsi mitokondria paru-paru (Iqbal et al.,  2001).
Selain itu, tngginya suhu lingkungan dapat merupakan  salah  satu  penyebab  terjadinya  stres oksidatif  dengan  munculnya  radikal  bebas  yang berlebihan  yang  dapat  merusak  sel-sel  dengan menyebabkan  perubahan  yang  mendasar  pada materi  genetis  serta  bagian-bagian  sel  penting lainnya  (Yashikawa dan Naito, 2002. Selanjutnya dijelaskan  bahwa  radikal  bebas  akan  mudah menyerang  asam lemak tidak jenuh pada membran sel  yang  menimbulkan  lipid  peroksidasi  dengan menghasilkan  antara  lain  MDA  (malonaldehida) dan  4-hidroksinonenal.  Ke  dua  senyawa  tersebut dapat  menyebabkan  kerusakan  pada  protein dengan menghasilkan protein karbonil, hidroksileusin, hidrovalin dan nitrotirosin, sehingga  menyebabkan  protein  mudah  mengalami lisis (Noda dan Wakasugi, 2001  dan  Supartondo, 2002).
Pegagan/antanan    adalah  tanaman    obat yang  telah  terbukti  dapat  digunakan  untuk mengatasi  cekaman  panas  pada  tikus  (Kumar  dan
Gupta,  2003)  dan  pada  ayam  (Kusnadi,  2004). Begitu  pula  dengan  vitamin  C,  merupakan antioksidan  yang  telah  terbukti  pula  digunakan sebagai  penagkal  cekaman  panas  pada  ayam (Mckee  dan  Harrison,    1995 dan  Kusnadi,  2006). Selanjutnya penelitian Bonte et al.(1994) menunjukkan  bahwa  zat  aktif  pegagan  berupa asiatikosida,  asam  asiatik  dan  asam  madekasik berperan  dalam  sisntesis  kolagen  yang    fungsinya meningkat dengan adanya vitamin C.
Dari  pemikiran  di  atas,  penulis  tertarik untuk  mengadakan  penelitian  tentang  “Pengaruh Penambahan  Pegagan  (Centella  asiatica)  dan Vitamin  C  terhadap  Kandungan  Hemoglobin  dan Hematokrit  Darah  Ayam  Broiler  yang  Mengalami Cekaman Panas”.

## Metode
Pada penelitian ini dicobakan pegagan dan vitamin C untuk mengatasi cekaman panas, dengan mengganti  sebagian  tepung  ikan  ransum  dengan tepung hidrolisat bulu ayam yang merupakan hasil dari penelitian sebelumnya.
Penelitian ini dilakukan pada ayam broiler jantan  umur  2  s/d  6  minggu  yang    dilaksanakan pada  kandang  terbuka  yang  pada  masing-masing sangkarnya diberi lampu pemanas sebesar 40 watt. Untuk  memantulkan  panas  tersebut,  di  atas  lampu dipasang  reflektor  yang  terbuat  dari  seng.  Suhu siang  hari  yang  merupakan  rataan    siang  dan  sore hari  mencapai  31,98  ±  1,28 0 C,  sementara  pada malam  hari  yang  merupakan  rataan  pagi  dan malam hari mencapai 27,36 ± 0,88 0 C.
Sebanyak    120  ekor  ayam  broiler  jantan umur    2  minggu    dibagi  secara  acak  dan ditempatkan  pada  24  kandang  perlakuan  (6 perlakuan  dan  4  ulangan),  sehingga  tiap  unit ulangan  ditempati  5  ekor.  Susunan  formulasi ransum  serta  kandungan  nutrisinya  dapat  dilihat pada Tabel 1.
Pemberian  vitamin C sebesar 500ppm dan pegagan  sebesar  10%,  ke  duanya    didasarkan  atas hasil  penelitian sebelumnya. Vitamin  C  dilarutkan dalam    air  minum  dan  diberikan  pada  pagi  hari. Agar  vitamin  C  yang  diberikan  cepat  terminum, maka  sekitar  2  jam  sebelumnya,  ayam  tersebut tidak  diberi  minum.  Level  pegagan  sebanyak    5% merupakan  ½  level  dari  10%  karena  pada penelitian tahap  ini  dilakukan  pada  kandang terbuka  yang  dipasangi  lampu  pemanas,  sehingga suhunya  cenderung  turun  terutama  pada  malam hari.  Pegagan  diberikan  melalui  ransum  yang dicampur  bersama  bahan  lainnya  yang    diberikan ad libitum.
Tabel  1.  Susunan  serta  kandungan  nutrisi  ransum yang digunakan Bahan R1 (%) R2 (%) R3 (%) Jagung 63,00 57,60 52,35 Bungkil kedelai 17,00 17,00 17,00 Tepung ikan 11,20 11,20 11,20 Tepung bulu ayam 4,80 4,80 4,80 Pegagan 0,00 5,00 10,00 Minyak kelapa 2,25 3,05 3,50 Dikalsium fosfat 0,10 0,10 0,00 CaCO3 0,90 0,75 0,65 Premix 0,50 0,50 0,50 Total 100,00 100,00 100,00 Kandungan nutrisi 1) : Energi met. (k.kal/kg) 3245,02 3222,94 3202,87 Protein (%) 20,84 20,91 20,99 Lemak (%) 6,16 6,15 6,96 P (%) 0,65 0,65 0,63 Ca (%) 1,03 1,28 1,02 Serat kasar (%) 2,46 3,28 4,09 Lisin (%) 1,39 1,38 1,36 Metionin (%) 0,51 0,49 0,48 Vitamin C (mg/100 g) 2) 20,21 22,92 25,88
1) hasil perhitungan berdasarkan kandungan nutrisinya
2) hasil analisis di Balitbio Bogor
Perlakuan dalam penelitian ini  meliputi: K       = kontrol (tanpa antanan dan tanpa vitamin C) P5     =  pemberian pegagan  5%
P10 = pemberian pegagan 10%
C = pemberian vitamin C 500 ppm P5C    =  pemberian  kombinasi  pegagan  5%  dan  vitamin C 500 ppm P10C= pemberian kombinasi pegagan 10% dan vitamin C 500 ppm.
Kandungan  hemoglobin  dan  hematokrit darah,  diukur  pada  umur  4  dan  6  minggu. Pengukuran  hemoglobin  menggunakan  kit  reagen, kemudian  diukur  absorbannya  menggunakan spektrofotometer.  Hematokrit  diukur  dengan  cara memusing  darah  dengan  menggunakan  tabung hematokrit yang telah diberi antikoagulan.
Data  yang  dihasilkan  dianalisis  dengan Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  dengan  pola faktorial  2  x  3  (2  level  vitamin  C  dan  3  level pegagan  dengan  4  ulangan),  sedangkan  uji lanjut menggunakan    Uji    Kontras  Ortogonal  menurut Steel dan Torrie (1980).

## Hasil dan Pembahasan
Dari  hasil  analisis  keragaman  diperoleh bahwa,  pemberian  pegagan  dan  vitamin  C  pada umur  4  minggu  tidak  mempengaruhi  kadar hemoglobin dan hematokrit, sebaliknya pada umur 6  minggu  pemberian  pegagan  dan  vitamin  C tersebut  nyata  (P  <  0.05)  mempengaruhi kandungan  hemoglobin dan hematokrit. Pengaruh perlakuan  terhadap  rataan  kandungan  hemoglobin dan  hematokrit  darah  umur  4  minggu  ditampilkan pada  Tabel 2,  sementara terhadap rataan kandungan  hemoglobin  dan  hematokrit  umur  6 minggu ditampilkan pada Tabel 3.
Dari  Tabel  2  (umur  4  minggu),  nampak bahwa  semua  perlakuan  (P5  s/d  P10C)  tidak mempengaruhi    secara  nyata  (P>0.05),    baik terhadap kandungan hemoglobin maupun terhadap kandungan  hematokrit.  Keadaan  ini  mungkin karena  lama  penelitian  (pemaparan  pada  suhu panas)    baru  2  minggu,  sehingga  belum  terlihat adanya  penurunan  kandungan  hemoglobin  dan hematokrit  tersebut  pada  kontrol.  Berbeda  dengan pada  umur  6  minggu  (Tabel  3),  baik  hemoglobin maupun  hematokrit,  masing-masing:  6,8  g/dL  dan 19,4%    keduanya  lebih  rendah  dibandingkan  pada umur  4  minggu  yakni  9,1  g/dL  dan  27,4%. Turunnya  kandungan  hemoglobin  dan  hematokrit pada kontrol, dapat dijadikan indikasi bahwa ayam sudah  mengalami  cekaman  panas.  Akibatnya, sewaktu diberi penangkal cekaman panas (perlakuan pegagan dan vitamin C), ke dua peubah tersebut mengalamin peningkatan, artinya baik P5, P10,  C,  P5C  maupun  P10C,  nyata  meningkatkan baik  terhadap  hemoglobin  maupun  terhadap hematokrit.; hal ini sejalan dengan hasil penelitian Harlova et al. (2002).    Oleh karenanya pemberian pegagan  dan  vitamin  C  pada  umur  6  minggu terbukti  dapat  meningkatkan  hemoglobin  dan hematokrit
Pada  umur  6  minggu,  kadar  hemoglobin kontrol  adalah  6,8  mg/dL,  nyata  lebih  rendah dibandingkan  P5,  P10,  C,  P5C,  P10C,  masing- masing  7,5;  7,8;      8,0;  8,2  dan  8,5  mg/dL.  Antara P5  sampai  dengan  P10C  tidak  menunjukkan perbedaan  yang  nyata.  Kadar  hematokrit  kontrol adalah 19,4% nyata lebih rendah dibandingkan P5, P10,  C,  P5C  dan  P10C,  masing-masing:  23,1%; 25,4%;  24,3;  24,1  dan  27,1%.  Antara  P5  sampai dengan  P10C  tidak  menunjukkan  perbedaan  yang berarti.
Tabel  2.  Kandungan  hemoglobin  serta  hematokrit  darah  ayam  broiler  jantan  unur  4  minggu      yang  tidak diberi pegagan dan vitamin C (K), pegagan 5% (P5), 10% (P10) dan vitamin C 500 ppm (C) serta kombinasi P5C dan P10C.
Peubah P e r l a k u a n K P5 P10 C P5C P10C Hemoglobin  (g/dL) Hematokrit (%) 9,1±1,0 27,4±3,4 7,9 ±0,5 24,8±0,5 8,3±1,0 25,3±3,1 8,3±1,0 25,3±1,9 8,2 ±0,7 22,6±3,6 8,8±0,6 25,8±3,0
- Huruf yang sama ke arah baris menunjukkan tidak berbeda nyata pada taraf 5%.
- Nilai dinyatakan dengan rerata ± standar deviiasi
Tabel 3.  Kandungan  hemoglobin  serta  hematokrit  darah  ayam  broiler  jantan  unur  6  minggu      yang  tidak diberi pegagan dan vitamin C (K), pegagan 5% (P5), 10% (P10) dan vitamin C 500 ppm (C) serta kombinasi P5C dan P10C.
Peubah P e r l a k u a n K P5 P10 C P5C P10C Hemoglobin (g/dL) Hematokrit (%) 6,8±1,9 a 19,4±6,2 a 7,5 ±0,6 b 23,1±3,1b 7,8 ±0,5 b 25,4±1,1b 8,0±0,5 b 24,3±2,2 b 8,2±1,0 b 24,1±3,7 b 8,5±0,6 b 27,1±0,9 b
- Huruf yang sama ke arah baris menunjukkan tidak berbeda nyata pada taraf 5%.
- Nilai dinyatakan dengan rerata ± standar deviiasi
Hasil ini membuktikan bahwa pegagan dan vitamin  C  dapat  berperan  dengan  baik  sebagai antioksidan  yang  mampu  melindungi  khususnya membran  sel  darah  merah  dari  serangan  radikal bebas.   Penelitian Baig et al. (2001) membuktikan bahwa  pemberian  obat yang  berasal  dari  tanaman obat  ( cinkara)  dapat  meningkatkan  hemoglobin dari  10,62  menjadi  13,58  g/dL.  Dijelaskan  pula bahwa  hasil  tersebut  erat  pula  kaitannya  dengan kandungan  zat  besi  pada cinkara itu.  Pegagan ternyata  mengandung  Fe  yang  tidak  sedikit  yakni 3,1 mg setiap 100 g  (Pramono, 1992).  Mineral Fe merupakan  mineral  penting  dalam  hemoglobin yang berfungsi mengikat oksigen untuk didistribusikan  ke  jaringan  serta  mengikat  CO 2 untuk  dibuang  ke  paru-paru.  Oleh  karenanya  Fe sangat  penting  dalam  pembentukan  dan  fungsi  sel darah  merah,  dan  dengan  adanya  vitamin  C ternyata absorpsinya dapat meningkat (Voet et al., 1999).  Penelitian  Jaja et  al.  (2002)  membuktikan bahwa pemberian vitamin C pada anak-anak umur 4 – 11  tahun,  selain  meningkatkan  kandungan hemoglobin  dan  hematokrit  darah,  juga  terbukti dapat  menurunkan  tekanan  darah  baik  sistolik maupun  diastolik.    Bahkan  pemberian  vitamin  C terhadap  sejumlah  orang  yang  mengalami  anemia dan  kekurangan  Fe  karena  hanya  mengkonsumsi tumbuh-tubuhan  (vegetarian),  dilaporkan  dapat memperbaiki gambaran hematologik yang
bersangkutan.  Hemoglobin  meningkat  dari  10,1 menjadi  10,9  g/dL;  Fe  dari  63,7  menjadi  74,5 ug/dL;  Ferritin  dari  39,9  mejadi    44,7  ng/ml, walaupun total  iron  binding  capasity mengalami penurunan  dari  325,3 menjadi  301,7  ug/dL (Sharma dan Mathur, 1995).

## Kesimpulan
Dari  hasil  dan  pembahasan  di  atas  dapat ditarik  kesimpulan  bahwa  pemberian  pegagan sebesar  5%  dan  vitamin  C  sebesar  500ppm  dapat mengatasi  turunnya  kandungan  hemoglobin  dan hematokrit  darah  ayam  broiler  umur  6  minggu yang mengalami cekaman panas.

## Daftar Pustaka
Baig  SG,  Ahmed  SP,  Zafar  N,    Ahmed  SI,  Takween.S 2001. Role of alternative medicines in erythropoiesis.  Hamdard  Medicus,  XLIV:  22 – 33.
Belay  T,  Wiernusz  CJ,    Teeter  RG.  1992. Mineral balance  and  urinary  and  fecal  mineral  excretion profile  of  broilers  housed  in  thermoneutral  and heat-distressed  environments.  Poultry  Sci.  71: 1043 – 1047.
[BPS]  Badan  Pusat  Statistik.  2001.  Statistik  Indonesia 2001,  Jakarta - Indonesia.
Bonnet  S,  Geraert  PA, Lessire  M,  Cerre  MB, Guillaumin  S.  1997. Effect  of  high  ambient temperature  on  feed  digestibility  in  broilers.
Poultry Sci. 76:857-863 Bonte  F,  Dumas  M,  Chaudagne  C,  Meybeck  A.  1994. Influence  of  asiatic  acid,  madecassic  acid,  and asiaticoside  on  human  collagen  I  synthesis. Planta Med. 60: 133 – 135.
Charles DR. 1981. Practical ventilation and temperature control  for  poultry,  in  Environmental  Aspects  of Housing  for  Animal  Production,  by  J.A.Clark, University of Nottingham.
Compo  JL,  Davila  SG.  2002.  Estimation  of  heritability for  heterophil:lymphocyte  ratio  in  chickens  by restricted  maximum  likelihood.  Efects  of  age, sex, and crossing . Poultry Sci. 81: 1448 – 1453. Cooper MA,  Washburn KW. 1998.  The relationship of body temperature to weight gain, feed consumption,  and  feed  utilization  in  broilers under heat stress. Poultry Sci 77:237-242.
Geraert  PA,  Padilha  JCF,  Guillaumin  S.  1996.
Metabolic  and  endocrine  changes  induced  by chronic heat exposure in broiler chickens: growth performance,  body  composition  and  energy retention. Br. J. Nutr.79:195-204.
Harlova  H,  Blaha  J,  Koubkova  M,  Draslarova  J,
Fucikova A. 2002. Influence of heat stress on the metabolic  response  in  broiler  chickens.  Scientia Agriculturae Bohemica 33: 145 – 149.
Iqbal M, Cawthon D, Wideman RF,  Bottje WG. 2001. Lung  mitochondrial  dysfunction  in  pulmonary hypertention  syndrome.II.  oxidative  stress  and inability  to  improve  function  with  repeated addition  of  adenosine  diphosphate  .  Poultry  Sci 880: 656-665.
Jaja.S.I,  Ikotun  AR,  Gbenebitse  S,  Temiye  EO.  2002. Blood  pressure,  hematologic  and  erytrocyte fragility changes in children suffering from sickle cell anemia following ascorbic acid supplementation.  J  Tropic  Prediatrics    48:366 – 370.
Kumar  VMH,    Gupta  YK.  2003. Effect  of Centella asiatica on  cognition  and  oxidative  stress  in  an intracerebroventricular  streptozotocin  model  of Alzheimers  disease  in  rat.  Clin    Exp    Pharmacol Physiol  30: 336-342.
Kusnadi E. 2004. Pegaruh Pemberian Pegagan (Centella asiatica)  terhadap  Respon  Ayam  Broiler  yang Dipelihara pada Suhu Lingkungan yang Berbeda. Jurnal Peternakan dan Lingkungan 10(02): 10-14. Kusnadi  E.  2006.  Suplementasi  Vitamin  C  sebagai
Penangkal  Cekaman  Panas  pada  Ayam  Broiler.
JITV, 11 (3): 167-171.
Mckee JS, C.Harrison P. 1995. Effects of supplemental ascorbic  acid  on  the    performance  of  broiler chickens exposed to multiple concurrent stressors. Poultry Sci  74:1772-1785. Noda  N,    Wakasugi  H.  2001.  Cancer  and  oxidative stress. JMAJ, 44: 535-539.
Pramono  S.  1992.  Profil  kromatogram  ekstrak  herba pegagan  yang  berefek  antihipertensi. Di  dalam: Warta Tumbuhan Obat Indonesia  1:  37 – 39. Sharma DC, Mathur R. 1995. Correction of anemia and
iron deficiency in vegetarian by administration of ascorbic  acid.  Indian.J  Physiol    Pharmacol 39:403-406.
Steel RGD, Torrie JH. 1980. Principles and procedures of  statistic,  second  ed,  Graw-Hall,  Book  Comp, New York.
Sandercock  DA,  Hunter  RR,  Nute  GR,  Mitchel  MA, Hocking  PM.  2001. Acute  heat  stress-induced alterations  in  blood  acid-base  status  and  skeletal muscle membrane integrity in broiler chickens at two  ages:Implication  for  meat  quality. Poultry Sci  80: 418-425.
Supartondo.  2002.  Antioksidan  dan  proses  menua. Di dalam:  Penatalaksanaan  Pasien  Geriatri/Usia Lanjut  secara  Terpadu  dan  Paripurna.  Prosiding Temu Ilmiah Geriatri 2002, Jakarta 25 Mei 2002. Pusat  Informasi  dan  Penerbitan  Bagian  Ilmu Penyakit  Dalam,  Fak.Kedokteran  UI – Jakarta. Hlm 1-6.
Tabiri HY, Sato K, Takahashi K, Toyomizu M,   Akiba Y.  2000. Effects  of  acute  heat  stress  on  plasma amino  acids concentration  of  broiler  chickens. Jpn Poult Sci  37: 86-94.
Tomomatsu  H.  1994.  Health  effects  of  oligosaccarides. Food Technol 61: 61-65.
Voet.D,  Voet  JG,  Pratt  CW.  1999. Fundamentals  of biochemistry,  John  Wiley  and  Sons,  Inc.  New York
Yahav  S,  Straschnow  A,  Plavnik  I,  Hurwitz  S.  1997. Blood system response of chickens to changes in environmental  temperature.  Poultry  Sci    76:  627 – 633.
Yoshikawa T,  Naito Y. 2002. What is oxidative stress ?
JMAJ, 45: 271-276.
Zupprizal, Larbir M,  Chagneau AM, Geraert PA. 1993. Influence  of  ambient  temperature  on  true digestibility  of  protein  and  amino  acids  of rapessed  and  soybean  meals  in  broilers.  Poultry Sci  72: 289 – 295.