ANTIHYPERURICEMIA ACTIVITY TEST OF COMBINATION ETHANOL EXTRACT OF SALAM LEAVES (Syzygium polyanthum (Wight.) Walp ) AND PLANT SURUHAN (Peperomia pellucida (L.) Kunth ) IN MALE WHITE RATS (Rattus Norvegicus).

## UJI AKTIVITAS ANTIHIPERURISEMIA KOMBINASI EKSTRAK ETANOL DAUN
SALAM ( Syzygium polyanthum (Wight.) Walp) dan TUMBUHAN SURUHAN ( Peperomia pellucida (L.) Kunth) PADA TIKUS PUTIH JANTAN ( Rattus Norvegicus ).
Chintia M. Manopo 1) , Widdhi Bodhi 2) , Elly J. Suoth 3)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115 *chintiamanopo@gmail.com

## ABSTRACT
Bay leaves (Syzygium polyanthum (Wight.) Walp ) and herbs (Peperomia pellucida (L.) Kunth ) are known  to  contain  flavonoids,  where  flavonoids  have  been  known  to  have  the  ability  to  inhibit  the ksantin  oxidase,  which  causes  uric  acid  levels  in  the  blood  to  drop.  This  study  used  a  completely randomized design method. This study aims to determine whether the combined ethanol extract of bay  leaves  (Syzygium  polyanthum (Wight.)  Walp )  and  suruhan  (Peperomia  pellucida (L.)  Kunth ) has antihyperuricemic activity. There were 15 rats used and divided into 5 groups, namely negative control (CMC 1%), positive control (Allopurinol), and ethanol extracts of bay leaves and herbs with a dose of 50 m, 100 mg, 200 mg. Existing data were analyzed using the ANOVA test and LSD test. The  analysis  showed  that  the  combined  ethanol  extract  of  bay  leaves  (Syzygium  polyanthum (Wight.)  Walp )  and  suruhan  (Peperomia  pellucida (L.)  Kunth )  had  antihyperuricemic  activity against male white rats.
Keywords: Syzygium  polyanthum  (Wight.)  Walp)  and  Peperomia  pellucida  (L.)  Kunth, Antihyperuricemia, Rattus Norvegicus .

## ABSTRAK
Daun  salam  ( Syzygium  polyanthum (Wight.)  Walp)  dan  tumbuhan  suruhan  ( Peperomia  pellucida (L.)  Kunth)  diketahui  mengandung  zat  flavonoid,  dimana  flavonoid  telah  diketahui  mempunyai kemampuan  dalam  menghambat  ksantin  oksidase,  yang  menyebabkan  kadar  asam  urat  di  dalam darah turun. Penelitian ini menggunakan metode Rancangan Acak Lengkap. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui apakah ekstrak etanol kombinasi dari daun salam ( Syzygium polyanthum (Wight.) Walp  )  dan  tumbuhan  suruhan  ( Peperomia  pellucida (L.)  Kunth)  memiliki  aktivitas antihiperurisemia.  Tikus  yang  digunakan  sebanyak  15  ekor  dan  dibagi  dalam  5  kelompok  yaitu kontrol  negatif  (CMC  1%),  kontrol  positif  (Allopurinol),  dan  ekstrak  etanol  daun  salam  dan tumbuhan  suruhan  dengan  dosis  50  mg,  100  mg,  200  mg.  Data  yang  ada  dianalisis  dengan menggunakan  uji  ANOVA  dan  uji  LSD.  Hasil  analisis  menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol kombinasi  daun  salam  ( Syzygium  polyanthum (Wight.)  Walp)  dan  tumbuhan  suruhan  ( Peperomia pellucida (L.) Kunth ) memiliki aktivitas antihiperurisemia terhadap tikus putih jantan.
Kata kunci: Syzygium polyanthum (Wight.) Walp) dan Peperomia pellucida (L.) Kunth,
Antihiperurisemia, Rattus Norvegicus .

## PENDAHULUAN
Hiperurisemia adalah
gangguan metabolisme yang ditandai oleh kelebihan asam urat  dalam  darah.  Asam  urat  adalah  produk akhir  dari  metabolisme  purin  pada  manusia. Konsentrasi  serum  asam  urat  yang  tidak  lebih dari  7  mg/dL  pada  laki-laki  dan  6  mg/dL  pada perempuan (Kim et al, 2010).
Indonesia kaya akan keanekaragaman hayati yang  dapat  dimanfaatkan  dalam  semua  aspek kehidupan  manusia.  Obat  tradisional  adalah salah  satu  bentuk  nyata  pemanfaatan  sumber daya hayati tersebut. Pemanfaatan keanekaragaman hayati dalam bentuk penggunaan obat-obat tradisional ini merupakan alternatif  yang  dinilai  lebih  ekonomis,  karena penggunaan  obat-obatan  yang  diolah  secara modern sulit dijangkau harganya oleh kebanyakan orang (Sangi, 2012).
Tanaman  salam  ( Syzygium  polyanthum (Wight.)  Walp)  yang  telah  banyak  dikenal  oleh masyarakat  biasanya  dimanfaatkan  sebagai salah  satu  bumbu  dapur  atau  rempah  yaitu, penyedap  karena  memiliki  aroma  khas  yang bisa  menambah  kelezatan  masakan  (Soeharto, 2004 dan  Moeloek, 2006). Manfaat daun secara tradisional,  daun  salam  digunakan  sebagai  obat sakit  perut,  diare,  asam  urat,  stroke,  kolestrol tinggi,  melancarkan  peredaran  darah,  radang lambung,  gatal-gatal,  dan  kencing  manis (Wijayakusuma, 2002).
Tanaman  suruhan  yang  memiliki  nama ilmiah  ( Peperomia  pellucida (L.)  Kunth)  ini merupakan  tanaman  yang  berasal  dari  Amerika Selatan,  akan  tetapi  umumnya  ditemukan  di Asia  Tenggara.  Tanaman  ini  digunakan  oleh penduduk  lokal  di  Kalimantan  dengan  cara direbus  dan  air  rebusannya  diminum  untuk mengatasi sakit rematik karena asam urat tinggi (Purba et al , 2007

## METODOLOGI PENELITIAN Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian  ini  dilaksanakan  pada  bulan Maret  2020  –  Juli  2020  di  Laboratorium Terapan  Farmasi,  Fakultas  Matematika  dan Ilmu  Pengetahuan  Alam,  Universitas  Sam Ratulangi Manado.

## Rancangan Penelitian
Jenis  penelitian  ini  ialah  eksperimen laboratorium  menggunakan  Rancangan  Acak Lengkap  (RAL),  dengan  5  macam  perlakuan masing-masing  perlakuan  dengan  3  ulangan. Kelompok  1  sebagai  kontrol  negatif  diberi induksi  kalium  oksonat  untuk  meningkatkan asam urat tikus putih (hiperurisemia), kelompok 2  sebagai  kontrol  positif  diberi  induksi  kalium oksonat  dan  Allopurinol,  kelompok  3-5  diberi induksi  kalium  oksonat  dan  ekstrak  daun salam dan tumbuhan suruhan.

## Alat dan Bahan

## Alat
Alat  yang  digunakan  :Syringe  1mL,  alat ukur asam urat (Nesco), strip asam urat (Nesco), Ayakan,  oven,  sonifikator,  sonde  oral,  batang pengaduk, timbangan analitik (ADAM, KERN), gelas  ukur  (Pyrex),  bekergelas  (Pyrex),  kertas saring,  sarung  tangan  lateks,  masker  (SENSI Mask),  botol  sampel,  gunting,  blender,  cawan petri (Pyrex), kandang.

## Bahan
Bahan  yang digunakan:  Tikus  putih  jantan, daun  salam,  tumbuhan      suruhan,  CMC (carboxymethylcellulose), aquades, etanol 96%, allopurinol,  kalium  oksonat  dan  pakan  tikus putih jantan berupa beras jagung.

## Prosedur Penelitian

## Pembuatan Simplisia
Daun  salam  dan  tumbuhan  suruhan  yang telah  dikumpulkan  lalu  dicuci  dengan  air, ditiriskan,  kemudian  ditimbang  berat  basahnya. Setelah  itu  daun  salam  dan  tumbuhan  suruhan dikeringkan  dengan  cara  di  angin-anginkan, setelah  kering  kemudian  dimasukan  ke  dalam oven agar sampel benar-benar kering kemudian ditimbang  berat  keringnya,  lalu  dirajang  kecil- kecil dan diblender sampai halus.

## Pembuatan  Ekstrak  Daun  Salam  dan Tumbuhan Suruhan
Ekstraksi dilakukan dengan metode ekstraksi  dingin  yaitu  maserasi  menggunakan pelarut etanol  96%. Daun salam dan tumbuhan suruhan  yang  telah  menjadi  serbuk  simplisia ditimbang  dan  dimasukkan  ke  dalam  beker gelas  kemudian  diekstraksi  dengan  cara  serbuk simplisia  direndam  dalam  pelarut  etanol  96% dan  dibiarkan  selama  5  hari  kemudian  disaring menggunakan kertas saring, kemudian dilakukan  remaserasi  dan  dibiarkan  selama  2 hari. Filtrat yang diperoleh dipekatkan menggunakan  oven  pada  suhu C  sampai diperoleh ekstrak kental.

## Pembuatan Larutan CMC 1%
Larutan  stok  CMC  1%  dibuat  dengan menimbang  serbuk  CMC  sebanyak  1  gram kemudian ditambahkan sampai 100 mL aquades dihomogenkan dengan cara pemanasan menggunakan  hot  plate,  kemudian  didinginkan.
Perbandingan aquades dengan CMC adalah100:1  artinya  didalam  100  ml  aquades terdapat 1 gram CMC (Rambi, 2019).

## Pembuatan Larutan Uji
Pembuatan  larutan  uji  diawali  dengan menimbang  ekstrak  kental  daun  salam  dan tumbuhan suruhan dengan masing-masing dosis (0,9mg;  1,8mg;  3,6mg)  kemudian  kedua tanaman  dicampurkan  sesuai  masing-masing dosis  yang  digunakan  dan  dimasukkan  dalam labu ukur 10 mL dan ditambahkan larutan CMC 1%  sampai  10  mL  dan  disonifikasi  sampai homogennya selama 30 menit. Setelah homogen masing-masing  dosis  ekstrak  di  masukkan kedalam botol sampel dan diberi label. P1 untuk ekstrak  etanol  daun  salam  dan  tumbuhan suruhan  dosis  I;  P2  untuk  ekstrak  etanol  daun salam  dan  tumbuhan  suruhan  dengan  dosis  II; dan  P3  untuk  ekstrak  etanol  daun  salam  dan tumbuhansuruhan  dengan  dosis  III  (Rambi, 2019).

## Pembuatan Larutan Allopurinol
Dosis  Allopurinol  untuk  manusia  100mg dikonversikan  dalam  dosis  tikus  0,018  didapat 1,8mg.  Menurut  Farmakope  Indonesia  uji keseragaman bobot dilakukan dengan menimbang  berat  20  tablet  dan  dibagi  dengan jumlah  tablet  tersebut.  Larutan  stok  allopurinol dibuat dengan menimbang allopurinol kemudian dicampurkan dengan larutan CMC 1% sebanyak 10mL di dalam labu ukur kemudian dihomogenkan  dengan  sonifikator  selama  5 menit. Setelah homogen disimpan dalam wadah dan diberi tanda (Rambi, 2019).

## Pembuatan Larutan Kalium Oksonat
Larutan  stok  dibuat  dengan  menimbang kalium  oksonat  sebanyak  112,5mg  yang dicampurkan  dengan  aquades  steril  sebanyak 25mL di dalam labu ukur kemudian disonifikasi dengan  sonifikator  selama  30  menit  hingga larut,  setelah  dilihat  cukup  larut  dimasukan dalam wadah dan diberi tanda.
Dosis  kalium  oksonat  bagi  manusia  adalah 250mg,  maka  dosis  kalium  oksonat  pada  tikus 250mg  X  0,018  =  4,5  (0,018  merupakan  factor konversi  dosis  manusia  ke  tikus).dikonversikan ke tikus adalah 0,018 (Rambi, 2019).

## Pemberian Perlakuan
Pemberian  perlakuan  untuk  penelitian  ini masing-masing  kelompok  menggunakan  3 hewan  uji.  Semua  hewan  uji  terlebih  dahulu dibuat  hiperurisemia  dengan  menginduksi kalium oksonat secara intraperitoneal kemudian ekstrak  etanol  daun  salam  dan  tumbuhan suruhan diberikan sesuai dosis perlakuan secara oral  dengan  pensuspensi  CMC  1%  sebanyak  1 mL  menggunakan  alat  penyekok  oral  (Sonde) dengan dispo. Kelompok 1 tikus diberikan CMC 1%  sebagai  control  negatif.  Kelompok  2  tikus diberikan  allopurinol  sebagai  control  positif. Kelompok  3  diberi  dosis  1  kombinasi  daun salam  0,9mg  dan  tumbuhan  suruhan      0,9  mg  . Kelompok  4  diberi  dosis  2  kombinasi  daun salam  1,8  mg  dan  tumbuhan  suruhan  1,8mg. Kelompok  5  diberi  dosis  3  kombinasi  daun salam  3,6  mg  dan  tumbuhan  suruhan  3,6  mg (Rambi, 2019).

## Pengambilan Sampel
Hewan  uji  dipuasakan  terlebih  dahulu selama  12  jam  sebelum  diambil  darahnya. Pengambilan darah untuk pengujian kadar asam urat  serum  dilakukan  sebanyak  5  kali  yaitu: Pertama,  setelah  dipuasakan.  Kedua,  setelah  1 jam  diinduksi  kalium  oksonat  dimana  setelah  1 jam  diinduksi  kalium  oksonat  diberi  larutan  uji atau  sediaan  oral.  Ketiga,  setelah    2  jam diinduksi  kalium  oksonat,  dimana  sudah termasuk  1  jam  diberikan  sediaan  secara  oral, setelah 4 jam dan 6 jam diinduksi. Sampel darah diambil melalui vena ekor tikus putih kemudian dianalisis  kadar  asam  urat  nya  pada  strip Autocheck (Rambi, 2019).

## Analisis Data
Data  kuantitatif  yang  diperoleh  dianalisis menggunakan Analysis  of  Variance (ANOVA) untuk mengetahui pengaruh ekstrak etanol daun salam  dan  tumbuhan  suruhan  terhadap  kadar asam  urat  pada  tikus  dan  menggunakan Least Significant  Difference (LSD)  untuk  menguji signifikansi  dari  perbedaan  rata-rata  antar kelompok  perlakuan.  Untuk  pemberian  dosis ekstrak,apabila  pemberian  dilakukan  secara berulang, maka interval waktu tidak kurang dari 3 jam (BPOM,2014).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Daun salam ( Syzygium polyanthum (Wight.) Walp)  dan  tumbuhan  suruhan  ( Peperomia pellucida (L.) Kunth)  yang digunakan memiliki senyawa  flavonoid.  Dimana  senyawa  flavonoid telah  diketahui  mempunyai  kemampuan  dalam menghambat  enzim  ksantin  oksidase,  yang menyebabkan  kadar  asam  urat  di  dalam  darah turun (Nagao et al ., 1999).
Pengujian  antihiperurisemia  dilakukan  pada tikus  yang  memiliki  penyakit  asam  urat,  maka dari itu dibutuhkan peningkatan kadar asam urat buatan. Peningkatan kadar asam urat pada tikus dilakukan  dengan  memberi  induksi  kalium oksonat yang diinjeksikan secara intraperitoneal.  Penggunan  kalium  oksonat sebagai  agen hiperurisemia dipilih karena dapat meningkatkan  kadar  asam  urat  dengan  cara menghambat  enzim  urikase  dalam  proses pemecahan asam urat menjadi alantoin (Suhendi,  2011).  Pada  kebanyakan  mamalia terdapat enzim urikase yang berfungsi mengubah  asam  urat  menjadi  alantoin  yang lebih  mudah  larut  dalam  air  (Katzung et  al, , 2012).
Penggunaan  allopurinol  sebagai  kontrol positif  ini  dikarenakan  menurut  (Marks,1996) allopurinol  berguna  untuk  mengobati  penyakit pirai karena menurunkan kadar asam urat.
Pada  penelitian  ini  menggunakan  15  ekor tikus  putih  jantan  ( Rattus  Norvegicus )  dan dalam  penelitian  ini  juga  terdapat  5  kelompok perlakuan  yaitu  kontrol  negatif,  kontrol  positif,
ekstrak  0,9  mg,  1,8  mg,  3,6  mg  dan  tiap  1 kelompok  menggunakan  3  ekor  tikus  putih jantan.

## Tabel 1 . Hasil pengukuran rata-rata kadar asam urat
*Keterangan:  Kontrol  (-):  Kontrol  negatif,  Kontrol  (+):  Kontrol  positif,  Dosis  1:  Kombinasi  ektrak 0,09mg:0,09mg,  Dosis  2:  Kombinasi  ektrak  1,8mg:1,8mg,  Dosis  3:  Kombinasi  ektrak  3,6mg:3,6mg,  t0:  Kadar asam urat awal, t1: Kadar asam urat 1 jam setelah diberikan kalium oksonat, t2: Kadar asam urat 2 jam setelah diberikan kalium oksonat, t4: Kadar asam urat 4 jam setelah diberikan kalium oksonat, t6: Kadar asam urat 6 jam setelah diberikan kalium oksonat.
Gambar 1 . Grafik Pengukuran Kadar Asam Urat
Pengukuran  kadar  asam  urat  dilakukan sebanyak  5  kali  dalam  waktu  6  jam  dimana kadar  asam  urat  diukur  dengan  interval  waktu yang  berbeda.  Kadar  asam  urat  yang  pertama diukur setelah puasa (t 0 ) diambil setelah 12 jam tikus putih jantan dipuasakan  tetapi  tetap diberi minum.  Ini  dilakukan  untuk  menghilangkan resiko kenaikan atau penurunan kadar asam urat yang  dipengaruhi  oleh  makanan  tikus,  hasilnya berkisar  antara  3,2-7,5  mg/dL.  Pemeriksaan kadar  asam  urat  kedua  dilakukan  setelah  1  jam diinduksi kalium oksonat secara intraperitoneal. Hal  ini  dilakukan  untuk  melihat  penyerapan kalium  oksonat  yang  dipengaruhi  oleh  respon
tubuh  tikus  dan  mendapatkan  hasil  10,7-16,9 mg/dL.  Pemberian  kontrol  negatif,  kontrol positif, dosis 1; 2; 3 saat setelah 1 jam diberikan induksi. Pemeriksaan ketiga, yaitu setelah 2 jam diinduksi  kalium oksonat dimana  sudah termasuk  1  jam  pemberian  sediaan  oral. Pemeriksaan  keempat,  yaitu  setelah  4  jam diinduksi  kalium oksonat dimana  sudah termasuk  3  jam  pemberian  sediaan  oral. Pemeriksaan  yang  kelima  saat  6  jam  diinduksi kalium  oksonat  dan  sudah  termasuk  5  jam pemberian  sediaan  oral.  Menurut  Huang et  al (2008)  puncak  tertinggi  efektivitas  kalium oksonat  di  jam  ke-  2  setelah  pemberian  kalium oksonat.  Pengukuran  kadar  asam  urat    pada tikus bias dilihat pada table 1 dan gambar 1. Tabel  1  dan  gambar  4  menunjukkan  bahwa perlakuan kontrol negatif yang diinduksi kalium oksonat  dapat  meningkatkan  kadar  asam  urat hingga  mencapai  16,63  mg/dL  pada  t 2 dan mengalami  peningkatan  pada  t4  dan  kembali mengalami  penurunan  pada  t 6 .  Pada  kelompok positif  penurunan  kadar  asam  urat  pada  tikus terjadi  pada  t 2 sampai  t 6 .  Pada  kelompok
Perlakuan Rata-rata Kadar Asam Urat t0 t1 t2 t4 t6 Kontrol (-) CMC 1% 7,5 13,83 16,63 17,9 16,53 Kontrol (+) Allopurinol 6,23 16,9 10,3 5,63 4,2 Dosis 1 6,3 15,3 8,87 9,67 6,9 Dosis 2 3,2 10,73 8,03 4,2 3,37 Dosis 3 6,73 15,77 10,13 6,77 4,17
perlakuan  dosis  1  menunjukkan  hasil  kadar asam  urat  pada  tikus  menurun  pada  t 2 dan meningkat  pada  t 4 dan  mengalami  penurunan lagi  pada  t 6 .  Kelompok  perlakuan  dengan  dosis 2  menunjukkan adanya respon penurunan asam urat  yang  dapat  dilihat  pada  t 2 dan  mengalami penurunan  sedikit  demi  sedikit  hingga  t 6 .  Pada kelompok  perlakuan  dengan  dosis  ke  3  hasil menunjukkan  adanya  respon  atau  adanya penurunan asam urat sedikit demi sedikit dari t 2 sampai  t 6 .  Hal  ini  menunjukkan  bahwa kelompok  perlakuan  dosis  ekstrak  maupun kontrol  positif  efektif  dapat  menurunkan  asam urat secara bermakna.
Data-data yang ada dilakukan uji normalitas, uji ini dilakukan untuk mengetahui apakah data yang  ada  berasal  dari  populasi  yang  sama  atau normal  dimana  menurut  Trihendradi  (2005) apabila  nilai  signifikan  lebih  dari  0,05  maka data  tersebut  terdistribusi  normal.    Dalam penelitian  ini  uji  normalitas  didapat  nilai kelompok kontrol negatif sig= 0,131, kelompok kontrol  positif  sig=  0,395,  kelompok  dosis  1 sig=  0,099,  kelompok  dosis  2  sig=  0,180,  dan kelompok  dosis  3  sig=  0,471.  Hal  ini menunjukkan bahwa kelima kelompok memiliki nilai signifikan lebih dari 0,05 yang berarti data yang ada terdistribusi normal
Gambar 2 . Uji normalitas
Uji  homogenitas  yang  digunakan  untuk mengetahui apakah beberapa kelompok perlakuan berasal dari populasi dan varian yang sama  atau  tidak,  yang  berarti  data  tersebut terdistribusi homogen dengan kriteria pengambilan  keputusan  apabila  nilai  signifikan lebih  dari  0,05  (Purnomo,  2016).  Hasil  uji homogenitas dalam penelitian ini yaitu nilai sig
=  0,977  (>0,05)  yang  berarti  data  terdistribusi homogen
Gambar 3. Uji homogenitas
Analisis  varians  satu  jalur  (One  Way Anova)  merupakan  teknik  statistika  parametric yang  digunakan  untuk  pengujian  perbedaan beberapa  kelompok  rata-rata,  dimana  hanya terdapat  satu  variable  terikat  atau  dependen (Widiyanto,  2013).  Uji Anova pada  penelitian ini didapatkan kadar asam urat akhir tikus putih berbeda  secara  bermakna  dengan  nilai  sig  = 0,046  (<0,05)  dimana  hasil  yang  ditunjukkan hipotesis  menolak  H0  dan  menerima  H1,  maka didapatkan  hasil  bahwa  efek  penurunan  kadar asam urat ekstrak etanol kombinasi antara daun salam dan tumbuhan suruhan terdapat perbedaan yang signifikan  yaitu <0,05
Gambar 4 . Uji ANOVA
Dalam  penelitian  ini  juga  dilakukan  uji  LSD ( Least Significant Different ). Dari data yang ada didapat  bahwa  antara  kelompok  negatif  dan kelompok  dosis  terdapat  perbedaan  bermakna yaitu  nilai  signifikan  <0,05.  Sedangkan  antara kelompok  positif  dan  kelompok  dosis  memiliki nilai signifikan >0,05 yang berarti tidak terdapat perbedaan  bermakna.  Hal  ini  menunjukkan bahwa  pemberian  ekstrak  etanol  kombinasi daunsalam dan tumbuhan suruhan memiliki efek untuk mengurangi kadar asam urat pada tikus
Gambar 5 . Uji LSD

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  didapatkan bahwa  ekstrak  etanol  kombinasi  antara  daun salam  ( Syzygium  polyanthun (Wight.)  Walp) dan  tumbuhan  suruhan  ( Peperomia  pellucida (L.)  Kunth)  dengan  dosis  0,9  mg,  1,8  mg,  3,6 mg  memiliki  pengaruh  terhadap  aktivitas penurunan  kadar  asam  urat  pada  tikus  putih jantan  ( Rattus  norvegicus ),  tetapi  pada  dosis 3,6mg  memiliki  hasil  yang  lebih  bagus  untuk penurunan kadar asam urat pada tikus.

## SARAN
Disarankan  untuk  melakukan  penelitian lebih lanjut untuk mengetahui zat atau senyawa aktif  yang  terdapat  dalam  daun  salam  dan tumbuhan  suruhan  yang  mampu  beraktivitas sebagai penurun kadar asam urat.

## DAFTAR PUSTAKA
Badan  Pengawas  Obat  dan  Makanan  Republik Indonesia  (BPOM  RI).  2014.  Peraturan Kepala  Badan  Pengawas  Obat  dan Makanan  Republik  Indonesia  Nomor  17 tentang  Perubahan  atas  Peraturan  Kepala Badan  Pengawas  Obat  dan  Makanan Tahun 2011 Tentang Persyaratan Cemaran Mikroba dan Logam Berat dalam
Kosmetika.  Jakarta:  Badan  Pengawas
Obat dan Makanan Republik Indonesia.
Huang,  Shang,  Zhang  Li,  dan  Jiao.  2008.
Hypouricemic Effects of Phenylpropanoid Glycosides  Acteoside  of Scrophularia ningpoensis on Serum Uric Acid Levels in
Potassium  Oxonate-Pretreated  Mice. The American Journal of Chinese Medicine. 36
(1): 149-157.
Katzung,  B.G.,  Masters,  S.B  dan  Trevor,  A.J.
2012. Basic  and  Clinical  Pharmacology . Edisi  12.Mc  Graw  Hill  Medical,  New York
Kim et  al. 2010.  Application  of  Critical Reflective  Inquiry  in  Nursing  Education. Dalam Handbook  of  Reflection  and
Reflective and Reflective Inquiry:
Mapping  a  Way  of 159 Knowing  for Professional  Reflective  Inquiry, Springer
Science-Business Media, LLC. Marks, D.B., Allan D.Marks., Collen,M.S.,1996. Basic Medical Biochemistry: A clinical approach.
William and Wilkins ; 131-133.
Moeloek,  F.  A.,  2006,  Herbal  And  Traditional Medicine:  National  Perspectives  And Policies  In  Indonesia  (Obat  Herbal  Dan Tradisional:  Perspektif  Dan  Kebijakan Nasional  Di  Indonesia), Jurnal  Bahan Alam Indonesia , 5 (1) , 293-297.
Nagao  A.,  Seki  M.  and  Kobayashi  H.,  1999,
Inhibition of xanthine oxidase by flavonoids,  Bioscience,  Biotechnology, and Biochemistry, 63 (10): 1787– 1790.
Purba, Ritson & Nugroho D. S. (2007). Analisis Fitokimia dan Uji  Bioaktivitas Daun kaca (Peperomia  pellucida  (L.)  Kunth). Jurnal Kimia Mulawarman . 5(1), 5-8
Purnomo. 2016. Analisis Statistik Ekonomi Dan Bisnis  Dengan  SPSS.  Penerbit  Wade Group, Ponorogo: 83-94
Rambi, C., de Queljo, E., Simbala, H. 2019. Uji Aktivitas  Penurunan  Kadar  Asam  Urat Ekstrak  Etanol  Buah  Pinang  Yaki  (Areca Vestiaria)  Pada  Tikus  Putih  Galur  Wistar (Rattus  Norvegicus)  Yang  Diinduksi Kalium Oksonat. Jurnal Pharmacon . 8(2):
465-471
Sangi,  M,  dkk.  2012.  Uji  Toksisitas  Dan
Skrining Fitokimia Tepung Gabah
Pelapah  Aren  ( Arenga  pinnata ). Jurnal Ilmiah Sains . 12(2): 128-134
Soeharto  I. 2004. Penyakit jantung koroner dan serangan  Jantung,  edisi  3.  Jakarta: Gramedia Pustaka Utama: 226-243
Suhendi, Nurcahyanti, Muhtadi, dan Sutrisna.2011. Aktivitas Antihiperurisemia  Ekstrak  Air  Jinten Hitam  ( Coleus  ambonicus  Lour )  pada Mencit  Jantan  Galur  Wistar  Balb-C  dan Standarisasinya. Majalah Farmasi Indonesi . 22 (2): 77-84.
Trihendradi.  2005.  Step  by  Step  SPSS  13:
Analisis  Data  Statistik.  Penerbit  Andi, Yogyakarta.
Widiyanto,  M.A.  2013.  Statistika  terapan.  PT Elex  Media  Komputindo,  Jakarta:  260- 293.
Wijayakusuma, H.S. 2002. Tumbuhan
Berkhasiat Obat Indonesia  Rempah, Rimpang  dan  Umbi.  Prestasi  Instan Indonesia, Jakarta.