## KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN EKSTRAK ETANOL DAUN
BERTONI ( Stevia rebaudiana ) DARI TIGA TEMPAT TUMBUH
Dian Kartikasari 1 , Nurkhasanah 2 , Suwijiyo Pramono 3 1 Pasca sarjana prodi Farmasi Universitas Ahmad Dahlan
2 Fakultas Farmasi Universitas Ahmad Dahlan
3 Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada Yogyakarta

## ABSTRAK
Khasiat  obat  tradisional  didasarkan  pada  senyawa  kimia  yang  terkandung  dalam  suatu bahan  obat.  Bahan  baku  obat  dari  hasil  pertanian  atau  kumpulan  tumbuhan  liar  tidak dapat  dijamin  kandungan  kimianya  selalu  konstan,  karena  adanya  variasi  bibit,  tempat tubuh,  iklim,  maupun  kondisi  bahan  bakunya  (umur  dan  cara  panen).  Kandungan senyawa  kimia  yang  bertanggung  jawab  terhadap  respon  biologis  harus  mempunyai spesifikasi  kimia,  yaitu  informasi  tentang  komposisinya  baik  jenis  maupun  kadarnya. Oleh  karena  itu  penetapan  karakterisasi  suatu  simplisia  dan  ekstrak  perlu  dilakukan guna menjamin mutu suatu produk obat tradisional.
Karakterisasi  dilakukan  terhadap  simplisia  dan  ekstrak  etanol  50%  daun  Stevia rebaudiana  (Bertoni).  Karakterisasi  simplisia  meliputi  organoleptis,  susut  pengeringan, kadar  sari  larut  air,  serta  kadar  sari  larut  etanol.  Cara penetapannya  dilakukan  sesuai prosedur  yang  telah  ditetapkan  Farmakope  Herbal  Indonesia  (2008).  Karakterisasi ekstrak  etanol  meliputi  karakteristik  non  spesifik  yakni  kadar  air,  kadar  abu  total,  dan kadar  abu  tidak  larut  asam.  Hasil  karakterisasi  diperoleh  nilai  rentang  dari  tiap  jenis parameter simplisia maupun ekstrak etanol daun Stevia rebaudiana yang diperoleh dari daerah Bogor, Malang, dan Tawangmangu.
Kata  kunci :  Daun  Stevia  Rebaudiana  (Bertoni),  Karakterisasi  simplisia,  Karakterisasi ekstrak etanol 50%

## 1. PENDAHULUAN
Saat  ini  pengembangan  obat  tradisional  diusahakan  sejalan  dengan  pengobatan modern  sehingga  dapat  bersama-sama  masuk  dalam  jalur  pelayanan  formal. Pengembangan  obat  tradisional  juga  didukung  oleh  Peraturan  Menteri  Kesehatan Republik  Indonesia  tentang  fitofarmaka,  yang  berarti  diperlukan  adanya  pengendalian mutu simplisia yang akan digunakan untuk bahan baku obat atau sediaan galenik.
Suatu simplisia dikatakan bermutu jika memenuhi persyaratan mutu yang tertera dalam monografi simplisia, antara lain susut pengeringan, kadar abu total, kadar abu tidak larut  asam,  kadar  sari  larut  air,  kadar  sari  larut  etanol  dan  kandungan  kimia  simplisia. Persyaratan  mutu  ini  berlaku  bagi  simplisia  yang  digunakan  dengan  tujuan  pengobatan dan pemeliharaan kesehatan (Depkes RI, 2008).
Stevia  Rebaudiana (Bertoni)  adalah  bahan  pemanis  alami  yang  mempunyai tingkat kemanisan 200-300 kali lebih manis daripada gula tebu (Ratnani, 2005). Beberapa penelitian  menyebutkan  bahwa  steviosida  pada  daun  stevia  mengandung  kalori  yang rendah  bahkan  sampai  dengan  nol  kalori,  sehingga  aman  bagi  penderita  diabetes  atau konsumen  yang  sedang  melakukan  diet.  Berdasarkan  hasil  penelitian,  steviosida  aman dikonsumsi oleh masyarakat umum karena tidak mempunyai efek teratogenik, mutagenik atau  karsinogenik.  Daun  stevia  memiliki  aktivitas  antioksidan  sehingga  memiliki kemampuan  untuk  meningkatkan  sistem  kekebalan  tubuh  dan  mencegah  radikal  bebas penyebab  penyakit.  Konstituen  utama  dalam  daun  stevia  adalah  glikosida  diterpenoid
yang  berpotensi  sebagai  pemanis  diantaranya  adalah    steviosida,  rebaudiosides  dan dulcosida (Chaturvedula, 2011).
Ekstrak  sebagai  bahan  produk  kefarmasian  harus  memenuhi  persyaratan  yang telah ditetapkan untuk dapat menjadi obat herbal terstandar atau  fitofarmaka. Parameter non  spesifik  diperlukan  untuk  mengetahui  mutu  ekstrak.  Oleh  karena  itu,  penelitian  ini bertujuan  untuk  membandingkan  beberapa  nilai  parameter  spesifik  simplisia  dan parameter non spesifik ekstrak.  Parameter spesifik simplisia dan  parameter non spesifik pada  ekstrak  mengacu  pada  persyaratan  Farmakope  Herbal  Indonesia  (2008),  sehingga pada simplisia dibatasi pada penetapan kadar susut pengeringan, kadar sari larut air, dan kadar sari larut etanol. Adapun pada ekstrak dibatasi pada penetapan kadar air, kadar abu, dan kadar abu tidak larut asam.
Hasil  penelitian  diharapkan  dapat  memberi  informasi  beberapa  nilai  parameter mutu  simplisia  dan  ekstrak  daun Stevia  rebaudiana (Bertoni)  sehingga  dapat  digunakan sebagai acuan dalam penelitian berikutnya maupun penggunaannya dalam pengobatan.
2 . METODE PENELITIAN

## 2.a. Alat dan Bahan
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah timbangan analitik, alat-alat gelas  laboratorium,  krus  silikat,  kertas  saring  bebas  abu,  seperangkat  alat  soxhlet,  tanur pemanas,  oven,  dan  evaporator.  Adapun  bahan-bahannya  adalah  simplisia  daun Stevia rebaudiana (Bertoni)  diambil  dari  daerah  Cipanas  Bogor,  Malang  dan  Tawangmangu, serta pelarut etanol, toluene, aquadest.
2.b. Jalannya Penelitian
1. Pembuatan serbuk simplisia Penanganan pasca panen daun Stevia rebaudiana yang telah bersih lalu  dikeringkan di  bawah  sinar  matahari  dengan  ditutupi  kain  hitam  dan  alas  pengering  terbuat  dari bambu. Setelah kering simplisia diserbuk dengan menggunakan blender.
2. Pembuatan ekstrak 50% secara maserasi Ekstrak  etanol  daun  stevia  dibuat  dengan  metode  maserasi  menggunakan  penyari etanol  50%.  Maserat  yang  diperoleh  kemudian  diuapkan  pelarutnya  dengan menggunakan rotary  evaporator hingga  diperoleh  ekstrak  cair.  Penguapan dilanjutkan diatas waterbath pada suhu terjaga sampai diperoleh ekstrak kental.
3. Karakterisasi simplisia
Karakterisasi simplisia meliputi : susut pengeringan, kadar sari larut etanol, dan kadar sari larut air. Cara penetapan diatas dilakukan sesuai prosedur  yang  telah ditetapkan FHI (2008).
4. Karakterisasi ekstrak Karakterisasi  ekstrak  meliputi:  penetapan  kadar  air,  penetapan  kadar  abu,  dan penetapan kadar abu tidak larut asam.

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN

## 3.a. Hasil Ekstraksi
Metode maserasi dipilih sebagai metode dalam proses ekstraksi karena sifat daun yang  lunak  dan  mudah  mengembang  dalam  cairan  pengekstraksi.  Selain  itu,  maserasi merupakan cara penyarian yang sederhana karena cairan penyari akan menembus dinding sel dan masuk ke dalam  rongga  sel  yang mengandung zat  aktif. Zat aktif  akan  larut dan adanya  perbedaan  konsentrasi  antara  larutan  zat  aktif  di  dalam  dengan  di  luar  sel menyebabkan  larutan  yang  terpekat  keluar  hingga  terjadi  keseimbangan  konsentrasi antara larutan di dalam dengan di luar sel (Markham, 1988).

## 3.b. Hasil Pengamatan Organoleptik
Parameter  organoleptik  bertujuan  memberikan  pengenalan  awal  simplisia  dan ekstrak  berupa  bentuk,  warna,  bau,  dan  rasa.  Data  ini  dapat  digunakan  sebagai  dasar untuk  menguji  simplisia  dan  ekstrak  selama  penyimpanan,  dan  hal  tersebut  tentu  saja dapat  mempengaruhi  khasiatnya.    Hasil  pemeriksaan  organoleptik  dapat  dilihat  pada tabel I.
Tabel I. Data Organoleptik Simplisia dan Ekstrak Daun S.rebaudiana
Hasil penelitian menunjukkan simplisia daun S. rebaudiana yang berasal dari daerah Malang,  Bogor,  dan  Tawangmangu    berbentuk  serbuk,  berwarna  hijau  kecoklatan,  berbau khas,  dan  berasa  manis,  sedangkan  ekstrak  etanol  50%  daun S.  rebaudiana dari  ketiga tempat  tumbuh  berbentuk  kental,  berwarna  hitam,  berbau  karamel,  dan  berasa  manis  agak pahit.

## 3.c. Hasil Karakterisasi Simplisia
Daun S.  rebaudiana diperoleh  dari  3  tempat  tumbuh  yang  memiliki  ketinggian berbeda-beda.  Daerah Malang mempunyai ketinggian sekitar 500 m di atas permukaan laut (dpl),  daerah  Tawangmangu  sekitar  700  m  dpl,  dan  Bogor  sekitar  200  m  dpl.  Parameter senyawa  terlarut  dalam  pelarut  tertentu  memberikan  gambaran  tentang  kandungan  senyawa yang  dapat  diekstraksi.  Penentuan  parameter  ini  dilakukan  secara  gravimetri  dan mempersyaratkan  untuk  menggunakan  dua  pelarut,  yaitu  air  dan  etanol.  Pelarut  air dimaksudkan untuk melarutkan senyawa  polar sedangkan etanol untuk melarutkan senyawa yang  kurang  polar  yang  terdapat  dalam  simplisia.    Pada  penelitian  ini  persentase  kadar senyawa terlarut dalam air  dapat dilihat pada tabel II dan persentase  kadar senyawa terlarut dalam etanol dapat dilihat pada tabel III.
Tabel II. Kadar Sari Larut Air Simplisia Daun S. rebaudiana
Parameter organoleptik Jenis Daerah Pengambilan Simplisia Tawangmangu Bogor Malang Bentuk Simplisia Serbuk Serbuk Serbuk Ekstrak Kental Kental Kental Warna Simplisia Hijau kecoklatan Hijau kecoklatan Hijau kecoklatan Ekstrak Hitam Hitam Hitam Bau Simplisia Khas Khas Khas Ekstrak Caramel Caramel Caramel Rasa Simplisia Manis Manis Manis Ekstrak Manis agak pahit Manis agak pahit Manis agak pahit Nama daerah Repli kasi Berat awal simplisia (g) Cawan porselen (g) Cawan porselen + sari II (g) Cawan porselen + sari I (g) Sari I (g) Sari II (g) Kadar sari (%) Rata- rata±SD Malang 1 2,500 50,820 51,227 51,219 0,399 0,406 81,200 89,933± 51,955 2 89,233 89,681 89,675 0,442 0,447 89,400 3 90,843 91,340 91,320 0,477 0,496 99,200 Bogor 1 2,500 49,233 49,711 49,706 0,473 0,478 95,600 95,666± 2,646 2 77,914 78,399 78,387 0,473 0,485 97,000 3 89,674 90,148 90,140 0,466 0,474 94,400 Tawang mangu 1 2,500 78,058 78,465 78,458 0,400 0,407 81,400 86,266± 31,259 2 49,315 49,773 49,759 0,444 0,457 91,400 3 89,293 89,724 89,711 0,418 0,430 86,000

## Tabel III. Kadar Sari Larut Etanol Simplisia Daun
S. rebaudiana Nama daerah Replikasi Berat awal simpli sia (g) Cawan porselen (g) Cawan porselen+ sari II (g) Cawan porselen+ sari I (g) Sari II(g) Sari I (g) Kadar sari (%) Rata- rata±SD Malang 1 2,500 49,134 49,250 49,189 0,116 0,055 23,200 27,733± 346,89 2 89,122 89,343 89,319 0,221 0,197 44,200 3 77,863 77,942 77,936 0,079 0,073 15,800 Bogor 1 2,500 89,172 89,435 89,424 0,262 0,252 52,400 45,800± 29,76 2 77,942 78,173 78,170 0,230 0,228 46,000 3 49,254 49,450 49,421 0,195 0,167 39,000 Tawang mangu 1 2,500 49,272 49,466 49,452 0,194 0,180 38,800 30,933± 51,178 2 81,787 81,948 81,942 0,161 0,155 32,200 3 77,995 78,105 78,096 0,109 0,101 21,800
Pada  penelitian  ini  diperoleh  kadar  sari  larut  air  tertinggi  pada  simplisia  dari Bogor  yaitu  95,666  ±  2,646,  sedangkan  kadar  sari  larut  etanol  tertinggi  pada  simplisia dari  Bogor juga yaitu 45,800 ± 29,76.
Hasil uji susut pengeringan merupakan indikator tentang besarnya senyawa yang hilang pada proses pengeringan. Persentase susut pengeringan dapat dilihat pada tabel IV. Penelitian ini menunjukkan bahwa  persentase susut pengeringan tertinggi pada simplisia dari Tawangmangu yaitu 11,972 ± 0,188.
Tabel IV. Kadar Susut Pengeringan Simplisia Daun S. rebaudiana

## 3.d. Hasil Karakterisasi ekstrak
Rendemen ekstrak yaitu perbandingan berat ekstrak yang diperoleh setelah proses pemekatan dengan berat simplisia awal. Penetapan rendemen bertujuan untuk mengetahui jumlah  kira-kira  simplisia  yang  dibutuhkan  untuk  pembuatan  sejumlah  tertentu  ekstrak kental. Besarnya rendemen masing-masing ekstrak dapat dilihat pada tabel V.
Tabel V. Rendemen Ekstrak Etanol Daun S. rebaudiana No. Asal simplisia Berat (gram) Rendemen (%) Simplisia Ekstrak kental 1. Malang 1300,00 338,41 26,03 2. Tawangmangu 2000,00 369,14 18,46 3. Bogor 1300,00 409,06 31,47 Nama daerah Repl ikasi Berat awal simplisia (g) Berat Cawan (g) Berat Cawan + simplisia (g) Berat cawan stlh susut pengeringan II (g) Berat cawan stlh  susut pengeringan I (g) Susut penger ingan I (g) Susut pengering an II (g) Kadar (%) Rata- rata ± SD Malang 1 2,003 91,572 93,575 93,473 93,469 1,897 1,901 5,092 4,859± 0,253 2 93,480 93,476 1,904 1,908 4,743 3 93,480 93,477 1,905 1,908 4,742 Bogor 1 2,002 82,663 84,665 84,475 84,468 1,823 1,812 9,490 11,188± 10,015 2 84,474 84,470 1,807 1,811 9,540 3 84,374 84,369 1,706 1,711 14,535 Tawang mangu 1 1,999 86,385 88,385 88,148 88,140 1,755 1,763 11,805 11,972± 0,188 2 88,145 88,137 1,752 1,760 11,955 3 88,141 88,134 1,749 1,756 12,156
Tabel V merupakan rendemen ekstrak yang diperoleh dari ketiga tempat tumbuh dan hasilnya berkisar antara 18,46 - 31,47 %.  Hasil rendemen yang tinggi menunjukkan bahwa senyawa-senyawa  kimia  yang  dapat  tersari  dalam  ekstrak  juga  cukup  besar.  Hal  ini dimungkinkan  karena  banyaknya  senyawa  kimia  yang  ada  dalam  simplisia.  Dalam  rangka memperoleh  ekstrak  yang  dikehendaki  sebagai  produk  kefarmasian,  maka  ekstrak  tersebut harus  memenuhi  persyaratan  mutu  ekstrak  berdasarkan  beberapa  parameter  pengujian  yang telah  ditetapkan  Farmakope  Herbal  Indonesia  (2008).  Hasil  penetapan  kadar  air  dalam ekstrak dapat dilihat pada tabel VI.
Tabel VI. Kadar Air Ekstrak Etanol Daun S. rebaudiana
Nama daerah Replikasi Berat aluminium foil (g) Berat Aluminium foil + ekstrak (g) Berat Ekstrak (g) Jumlah air (ml) Kadar air (%) Rata- rata ±SD Malang 1 0,406 9,765 9,359 0,800 8,547 8,372± 0,207 2 0,392 10,158 9,766 0,800 8,191 3 0,405 10,001 9,596 0,800 8,378 Bogor 1 0,375 9,923 9,548 0,800 8,378 8,562± 0,383 2 0,357 11,357 10,024 0,900 8,978 3 0,424 11,226 10,802 0,900 8,331 Tawang mangu 1 0,373 10,859 10,486 0,900 8,582 8,759± 0,189 2 0,389 10,633 10,243 0,900 8,786 3 0,373 10,473 10,100 0,900 8,910
Penentuan  kadar  air  menggunakan  metode  gravimetri  dengan  cara  dipanaskan menggunakan pereaksi toluene hingga seluruh air yang terkandung di dalam ekstrak terpisah. Hasil  penelitian  menunjukkan  persentase  kadar  air  dalam  ekstrak  daun S.  rebaudiana memenuhi syarat. Menurut literatur, kadar air dalam ekstrak tidak boleh melebihi 10%.  Hal ini  bertujuan  untuk  menghindari  cepatnya  pertumbuhan  jamur  dalam  ekstrak  (Soetarno  dan Soediro, 1997).
Hasil  penelitian  kadar  abu  total  dan  kadar  abu  tidak  larut  asam  dalam  ekstrak  daun S. rebaudiana dapat  dilihat  pada  tabel  VII  dan  VIII.    Abu  adalah  zat  anorganik  sisa  hasil pembakaran suatu bahan organik. Kandungan abu dan komposisinya tergantung pada macam bahan  dan  cara  pengabuannya.  Kadar  abu  ada  hubungannya  dengan  mineral  suatu  bahan. Mineral yang terdapat dalam suatu bahan dapat berasal dari dua macam garam yaitu:
1. Garam-garam organik, misalnya garam dari asam malat, oksalat, asetat, pektat, dan lain- lain.
2. Garam-garam anorganik, misalnya fosfat, karbonat, klorida, sulfat nitrat dan logam alkali. Selain  kedua  garam  tersebut,  kadang-kadang  mineral  dapat  terbentuk  sebagai senyawa  kompleks  yang  bersifat  organik.  Apabila  akan  ditentukan  jumlah  mineral  dalam bentuk  aslinya  adalah  sangat  sulit.  Oleh  karena  itu  biasanya  dilakukan  dengan  menentukan sisa pembakaran garam mineral tersebut yang dikenal dengan pengabuan (Sudarmadji dkk., 1986).

## Tabel VII. Kadar Abu Total Ekstrak Etanol Daun S. rebaudiana
Nama daerah Replikasi Krus+tutup (g) Krus+tutup + ekstrak (g) Ekstrak (g) Krus+tutup + abu I (g) Abu I (%) Krus+tutup + abu II (g) Abu II (%) Rata- rata±SD Malang 1 35,452 38,164 2,999 35,750 9,936 35,753 10,036  9,819± 0,238 2 34,807 37,812 3,005 35,097 9,650 35,098 9,683 3 32,612 35,610 2,998 32,900 9,606 32,904 9,739 Bogor 1 34,683 37,675 2,992 34,918 7,854 34,921 7,954 7,993± 0,089 2 35,109 38,113 3,004 35,352 8,089 35,355 8,189 3 36,957 39,956 2,999 37,190 7,769 37,192 7,835 Tawang mangu 1 36,642 39,647 3,005 36,909 8,885 36,913 8,985 10,632± 5,032 2 35,033 38,034 3,001 35,328 9,830 35,330 9,896 3 35,462 38,458 2,996 35,849 12,917  35,852 13,017
Tabel VIII. Kadar Abu Tidak Larut Asam Ekstrak Etanol Daun S.rebaudiana Nama daerah Replikasi Krus+tutup (g) Krus+tutup + ekstrak (g) Ekstrak (g) Krus+tutup + abu I (g) Abu I (%) Krus+tutup + abu II (g) Abu II (%) Rata- rata±SD Malang 1 35,483 38,482 2,999 35,500 0,566  35,502 0,633  0,654± 0.023 2 34,842 37,847 3,005 34,861 0,632  34,863 0,698 3 32,624 35,622 2,998 32,640 0,533  32,643 0,633 Bogor 1 34,684 37,676 2,992 34,711 0,902  34,713 0,969  0,889± 0,088 2 34,692 37,696 3,004 34,714 0,732  34,716 0,798 3 37,008 40,007 2,999 37,031 0,766  37,035 0,900 Tawang mangu 1 36,642 39,647 3,005 36,651 0,299  36,653 0,366  0,422± 0,057 2 35,046 38,047 3,001 35,055 0,299  35,059 0,433 3 35,510 38,506 2,996 35,520 0,333  35,524 0,467
Besarnya  kadar  abu  total  dalam  setiap  ekstrak  daun S.rebaudiana mengindikasikan bahwa  ekstrak  yang  diperoleh  dari  proses  maserasi  banyak  mengandung  mineral.  Adanya kandungan abu tidak larut dalam asam yang rendah menunjukkan adanya pasir atau pengotor yang lain dalam kadar rendah.

## 4. KESIMPULAN
Hasil  penelitian  ini  telah  memperoleh  nilai  rentang  pada  karakterisasi  simplisia  maupun ekstrak  daun S.  rebaudiana (Bertoni)  yang  diperoleh  dari  daerah  Bogor,  Malang,  dan Tawangmangu.

## 5. DAFTAR PUSTAKA
Chaturvedula,  V.S.P.,    2011,  Diterpen  Glycosides  from Stevia  rebaudiana , Molecules , Vol.
16 , 3552-3562. Depkes RI., 2008, Farmakope Herbal Indonesia , Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta
Markham, K.R., 1988, Cara Mengidentifikasi Flavonoid, terjemahan Kosasih Padmawinata,
Penerbit ITB, Bandung
Ratnani,  R.D.  dan  Anggraeni,  R.,  2005,  Ekstraksi  Gula  Stevia  dari  Tanaman Stevia rebaudiana (Bertoni), Momentum, Vol.1, No.2. Sudarmadji,  S.,  Haryono,  B.,  dan  Suhardi,  1986, Analisa  Bahan  Makanan  dan  Pertanian . Penerbit Liberty. Yogyakarta
Soetarno,  S.  dan  Soediro,  I.S.,  1997,  Standarisasi  Mutu  Simplisia  dan  Ekstrak  Bahan  Obat Tradisional, Presidium Temu Ilmiah Nasional Bidang Farmasi .