http://jurnal.farmasi.umi.ac.id/index.php/fitofarmakaindo/index

## Perbandingan Aktivitas Ekstrak Daun Kelor Dan Teh Hijau Serta Kombinasi Sebagai Antibakteri Penyebab Jerawat
Asri Wulandari 1* , Yunahara Farida 1 , Shelly Taurhesia 1
1 Program Studi Magister Farmasi, Fakultas Farmasi, Universitas Pancasila, Jakarta Selatan
Article info Abstract History
Submission : 04-09-2019 Review : 15-02-2020 Accepted : 13-07-2020
* Email: asriwulan43@gmail.com
DOI: 10.33096/jffi.v7i2.535

## Keywords:
Moringa leaves; greentea leaves; S. aureus; P. acne
Moringa leaves and greentea leaves have proven effective as antibacterials acne  against  S.  aureus  and  P.  acne.  The  content  of  moringa  leaves  is quercetin and greentea leaves is catechin as antibacterials. The purpose of research was to determine the antibacterial activity againts S. aureus and P.  acne  of  moringa  leaves  and  greentea  leaves  extract  concentrate  and combination of extract of moringa and greentea leaves with ratio 1:2, 1:1 and  2:1.  Extractions  were  obtained  using  kinetic  maceration  method ethanol  70%.  Antibacterial  activity  was  tested  using  hole  disc  diffusion method.  Antibacterials  test  result  gaints  S.  aureus  shows  that  MIC  of extracts of moringa and greentea leaves consicutively was 2,5% and 1,25% inhibition zone 8 and 7 mm and MIC of extracts of moringa and greentea leaves consicutively 2,5% and 1,25% inhibition zone 9 and 5 mm against P. acne. T he best antibacterial activity of combination of extract of moringa and greentea leaves activities in ratio 1:2 against  S. aureus and P. acne with inhibition zone consicutively 16 ±  0,471 mm and 16 ± 0,942 mm. Used positive control was Mediklin ® with inhibition zone 50 mm.

## I. Pendahuluan
Jerawat  adalah penyakit kulit  yang timbul akibat peradangan menahun pada folikel pilosebasea yang ditandai dengan adanya erupsi komedo, papul, pultus, nodus, dan kista pada tempat seperti muka, leher, lengan atas, dada dan punggung (Dunn et al, 2008).  Radang  saluran  kelenjar  minyak  tersebut dapat  mengakibatkan  sumbatan  pengaliran  sebum yang  dikeluarkan  oleh  kelenjar  sebasea,  sehingga timbul  erupsi  ke  permukaan  kulit  yang  dimulai dengan  terjadinya  komedo.  Proses  peradangan selanjutnya membuat komedo berkembang menjadi papul, pustul, nodus dan kista. Jika peradangan surut terjadi  jaringan  parut  sebagai  bentuk  bila peradangan  telah  berakhir  (Dunn  et  al,  2008). Bakteri  yang  men trigger terjadinya  inflamasi jerawat  diantaranya P. acnes dan S. aureus , kedua bakteri  ini  menghasilkan  enzim  lipase  yang  dapat memecah asam  lemak bebas dari lipid kulit. Asam lemak menimbulkan radang jaringan dan menyebabkan  acne  (Jawetz  dan  Adelberg,  1995). Tanaman  yang  secara  ilmiah  terbukti  berkhasiat mengobati  jerawat  salah  satunya  adalah  daun  teh hijau  (Syah,  2006;  Astutiningsih  dkk,  2014)  dan daun  kelor  (Isitua  et  al,  2016).  Daun  teh  hijau mengandung  senyawa  aktif  utama  katekin (Widyaningrum,  2013)  sedangkan  daun  kelor mengandung  senyawa  aktif  utama  kuersetin  yang berkhasiat  sebagai  antibakteri  (Isitua  et  al,  2016; Depkes RI, 2013). Kuersetin dan katekin memiliki mekanisme  kerja  yang  sama  sebagai  antibakteri penyebab jerawat yaitu dengan menghambat sintesis
asam lemak pada bakteri dan menghambat produksi metabolit  toksin  pada  bakteri (Reygaert,  2014; Siriwong  et  al,  2016).Hasil  penelitian menunjukan bahwa  ekstrak  etanol  daun  teh  hijau  memiliki aktivitas  antibakteri  terhadap Staphylococcus aureus pada Konsentrasi Hambat Minimum (KHM) 0,05% dan terhadap Propionibacterium acnes pada KHM 0,005% (Lee et al, 2009). Ekstrak etanol daun kelor memiliki KHM 0,78% terhadap Propionibacterium acnes dan memiliki KHM 0,6% terhadap Staphylococcus aureus (Hastuti et al, 2017; Ajayi et al, 2015). Berdasarkan uraian diatas, ekstrak daun  kelor  dan  teh  hijau  memiliki  khasiat  sebagai antibakteri penyebab jerawat yang jika dikombinasikan diharapkan memberikan efektivitas yang  lebih  baik.  Oleh  karena  itu  perlu  dilakukan penelitian  untuk  menguji  aktivitas  antibakteri penyebab  jerawat  ekstrak  daun  teh  hijau  dan  daun kelor  serta  kombinasi  keduanya  kemudian dibandingkan  aktivitas  antara  ekstrak  tunggal  dan kombinasi.

## II. Metode Penelitian II.1 Pembuatan Serbuk Simplisia
Daun  kelor  yang  berwarna  hijau  tua disortasi  basah  tetapi  tidak  dilakukan  pemisahan terhadap tangkainya dan ditimbang bobotnya. Daun kelor  dicuci  bersih  dengan  air  mengalir  lalu ditiriskan. Beberapa  tangkai  di  ikat  kemudian dibungkus  kertas  yang  telah  dilubangi.  Daun  kelor dikeringkan  dengan  cara  diangin-anginkan  pada suhu ruang sampai kering. Setelah kering, dilakukan sortasi kering dan dipisahkan daun dari tangkainya.
Sedangkan  daun  teh  hijau  yang  digunakan  berupa simplisia  kering  yang  siap  diserbukan.  Simplisia kering di haluskan dan diayak kemudian ditimbang bobot  serbuk.  Simplisia  disimpan  dalam  wadah bersih, tertutup rapat, kedap udara, dan diberi silika gel.

## II.2 Ekstraksi Daum Kelor dan Teh Hijau
Proses  ekstraksi  yang  digunakan  adalah maserasi  kinetik  dimana  simplisia  diekstraksi menggunakan  etanol  70%.  Masing-masing  serbuk simplisia  dimasukan  kedalam  maserator  kemudian ditambahkan  pelarut  dengan  rasio  1:10  dan  diaduk menggunakan  alat  maserator  kinetik  kemudian disaring menggunakan kertas saring Whatman no. 1. Proses ekstraksi dilanjutkan sampai filtrat jernih tak berwarna.  Filtrat  yang  terkumpul  diuapkan  dan dipekatkan menggunakan vacuum rotary evaporator hingga terbentuk ekstrak kental.

## II.3 Standarisasi Mutu Ekstrak Kental 1. Parameter Spesifik (Depkes RI, 2000)
Identifikasi  senyawa  kimia  pada  Ekstrak Buah Buni (EBB) menggunakan metode Kromatografi  Lapis  Tipis  (KLT).  Fase  diam  yang digunakan  adalah  silika  gel  60  F254  dan  fase geraknya adalah n -heksan:etil asetat (2:8). Senyawa kimia yang di identifikasi adalah senyawa golongan flavonoid  (AlCl 3 ),  fenolik  (FeCl 3 dan  Folin- Ciocalteu),  alkaloid  (Dragendorf),  dan  saponin (Vanilin asam sulfat).
a. Penetapan organoleptik ekstrak meliputi bentuk, warna, bau, dan rasa.
b. Penetapan kadar senyawa terlarut dalam pelarut tertentu
1. Kadar  senyawa  yang  larut  dalam  air: Sejumlah  5  g  ekstrak  disari  selama  24  jam dengan 100 ml air-kloroform LP, menggunakan labu bersumbat sambil berkalikali  dikocok  selama  6  jam  pertama dan  kemudian  dibiarkan  selama  18  jam, saring. Diuapkan 20 ml filtrat hingga kering dalam  cawan  penguap,  residu  dipanaskan pada  suhu  105°C  hingga  bobot  tetap. Dihitung  kadar  dalam  persen  senyawa  yang larut dalam air terhadap berat ekstrak awal.
2. Kadar  senyawa  yang  larut  dalam  etanol: Sejumlah  5  g  ekstrak  dimaserasi  selama  24 jam dengan 100 ml etanol 95% menggunakan labu  bersumbat  sambil  berkali  kali  dikocok selama  6  jam  pertama  dan  kemudian dibiarkan  selama  18  jam.  Disaring  cepat dengan  menghindari  penguapan  etanol, kemudian  diuapkan  20  ml  filtrat  hingga kering  dalam  cawan  penguap  yang  telah ditara,  residu  dipanaskan  pada  suhu  105 0 C hingga  bobot  tetap.  Dihitung  kadar  dalam persen  senyawa  yang  larut  dalam  etanol terhadap berat ekstrak awal.

## 2. Parameter Non Spesifik (Depkes RI, 2000)
1. Penetapan  kadar  air:  Ditimbang  seksama  1  g ekstrak  dalam  krus  porselen  bertutup  yang sebelumnya  telah  dipanaskan  pada  suhu  105°C selama  30  menit  dan  telah  ditara.  Ratakan dengan  menggoyangkan  hingga  merupakan lapisan setebal (5 mm – 10 mm) dan dikeringkan pada  suhu  penetapan  hingga  bobot  tetap,  buka tutupnya,  biarkan  krus  dalam  keadaan   tertutup dan  mendingin  dalam  desikator hingga  suhu kamar,  kemudian  dicatat  bobot  tetap  yang diperoleh  untuk  menghitung  persentase  susut pengeringannya.
2. Penetapan  kadar  abu  :  Ditimbang  2  g  ekstrak dengan seksama ke dalam krus yang telah ditara, dipijarkan  perlahan  lahan.  Kemudian  suhu  di naikkan  secara  bertahap  hingga  600  ±  25°C sampai  bebas  karbon,  selanjutnya  didinginkan dalam desikator, serta timbang berat abu. Kadar abu dihitung dalam persen terhadap berat sampel awal.
3. Kadar  abu  yang  tidak  larut  dalam  asam:  Abu yang  diperoleh  dari  penetapan  kadar  abu, didihkan  dengan  25  ml  asam  klorida  encer  P selama  5  menit,  bagian  yang  tidak  larut  asam dikumpulkan,  disaring  melalui  kertas  saring bebas abu, dicuci dengan air panas, disaring dan ditimbang, ditentukan kadar abu yang tidak larut asam dalam persen terhadap berat sampel awal.
4. Penetuan  cemaran  mikroba  (Metode  ALT): Dipipet  dengan  pipet  steril  1  ml  ekstrak  dari pengenceran  10 -4 ,  ditanamkan  dalam  medium PCA, lalu diinkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam.  Kemudian  diamati  dan  dihitung  jumlah koloni yang tumbuh dan dikalikan dengan faktor pengenceran.
5. Penentuan  batas  logam  berat  (Pb):  Penentuan batas  logam  Pb  di  dalam  ekstrak  ditentukan dengan spektrofotometri serapan atom.
6. Penentuan residu pelarut: Penentuan batas residu pelarut di dalam ekstrak ditentukan dengan Gas Chromatography .

## 3. Penapisan Senyawa Fitokimia Ekstrak
1. Uji Saponin: Sejumlah 0,5 g ekstrak kental yang diperiksa ke dalam tabung reaksi, tambahkan 10 mL air panas. Dinginkan dan kemudian kocok kuat-kuat selama 10 detik, akan terbentuk buih yang  mantap  selama  tidak  kurang    dari  10 menit,  setinggi  1  cm  sampai  10  cm.  Pada penambahan  1  tetes  asam  klorida  2  N,  buih tidak hilang (Depkes RI, 1980).
2. Uji  Flavonoid:  Sejumlah  sampel  ditambahkan 2-3 tetes etanol kemudian ditambahkan serbuk Mg dan beberapa tetes HCl 5M. Warna merah hingga  lembayung  yang  timbul  menandakan adanya senyawa flavanon, flavonol, flavanonol, dan dihidroflavonol (Hanani, 2015).
3. Uji  Tanin:  Sejumlah  ekstrak  yang  diperiksa dimasukkan ke dalam tabung reaksi, dilarutkan dengan  sedikit  akuades  kemudian  dipanaskan
diatas  penangas  air.  Kemudian  diangkat  lalu didinginkan,  setelah  dingin  disentrifus,  cairan atasnya  dipisahkan  dan  dijadikan  larutan  uji. Larutan  uji  diteteskan  dengan  larutan  gelatin 10%,  hasil  positif  ditandai  adanya  endapan putih.  Pada  larutan  uji  yang  lain,  ditambahkan FeCl 3 3%,  hasil  positif    terbentuknya  warna hijau biru hingga kehitaman (Hanani, 2015).
4. Uji  Alkaloid:  Sejumlah ekstrak ditambah 1 ml HCl  2N  dan  9  ml  air,  dipanaskan  selama  15 menit,  didinginkan,  lalu  disaring.  Larutan diteteskan  pada  kaca  arloji,  masing-masing ditambahkan  reagen  Mayer,  Bouchardat,  dan Dragendorff.  Dicatat  warna  endapan  (Hanani, 2015).
5. Uji  Glikosida:  Larutan  percobaan  0,2  mL diuapkan  diatas  penangas  air  lalu  ditambah asam  asetat  3  mL  dengan  sedikit  pemanasan kemudian didinginkan.
Selanjutnya ditambahkan  larutan  FeCl 3 0,3  M  lalu  dengan hati-hati  ditambahkan  campuran  3  mL  asam sulfat  dan  1  tetes  FeCl 3 0,3  M  sehingga  akan terbentuk cincin warna merah coklat pada batas cairan.  Setelah  beberapa  menit  diatas  cincin akan  berwarna  biru  hijau  atau  ungu,  ini menunjukan  adanya  glikosida  dan  glikon  gula 2-deoksi (Hanani, 2015).
6. Uji  Steroid  dan  Triterpenoid:  Sampel  disari dengan  eter,  kemudian  sari  eter  diuapkan hingga  kering.  Pada  residu  ditetesi  larutan pereaksi  Lieberman-Burchard.  Penambahan pereaksi  dilakukan  dalam  keadaan  dingin. Terbentuknya warna ungu menunjukkan senyawa kelompok triterpenoid, sedangkan bila terbentuk  warna  hijau-biru  menunjukkan adanya senyawa kelompok steroid (Farnsworth, 1966).
7. Uji Fenol: Sampel sebanyak 2 gram dimasukan dalam  Erlenmeyer  ditambahkan  10  mL  HCl 2M, dipanaskan diatas penangas air selama 30 menit  kemudian  disaring.  Filtrat  ditambahkan 20  mL  eter  dikocok  dan  dibiarkan  hingga larutan  memisah.  Fase  eter  dipisahkan, diuapkan  hingga  tersisa  sekitar  5  mL.  Filtrat sebanyak  1  mL  ditambah  reagen  Folin Ciocalteau dipanaskan  sebentar dipenangas air hingga warna berubah menjadi biru. Perubahan warna menandakan adanya kandungan senyawa fenol dalam sampel (Hanani, 2015).
II.4 Uji Aktivitas Antibakteri
Uji aktivitas antibakteri dilakukan menggunakan  metode  difusi  agar  sumuran.  Media yang  digunakan  untuk  bakteri P.  acne adalah  BHI sedangkan  bakteri S.  aureus menggunakan  media TSA.  Media  dilarutkan  dengan  akuades  dan disumbat  menggunakan  kapas  steril  kemudian disterilisasi  dalam autoclave pada  suhu  121 0 C selama  15  menit.  Media  yang  telah  disterilkan dituang  kedalam  cawan  petri  sebanyak  15  mL
kemudian ditambahkan suspense bakteri P. acne dan S. aureus dengan konsentrasi masing-masing 1x10 8 dan  1x10 6 CFU/mL  kemudian  didiamkan  hingga mengeras.  Media  yang  siap  digunakan  dibuat sumuran  dengan  diameter  7  mm,  tiap  cawan  petri dibuat lubang sumur sebanyak 5 buah. Ekstrak daun kelor dan teh hijau masing-masing ditimbang sesuai dengan  konsentrasi  yang  akan  diuji  yaitu  0.3%; 0.6%;  1.25%;  2.5%;  5%;  dan  10%  kemudian dilarutkan dalam akuades steril sampai 1 mL lalu di vortex.  Ekstrak  yang  sudah  dipreparasi  kemudian dimasukan kedalam sumuran agar sebanyak 50 µL dan  diberikan  control  positif  dan  control  negative lalu  inkubasi  selama  3x24  jam.  Setelah  diinkubasi kemudian diukur diameter zona hambat menggunakan  alat  ukur  yang  sesuai.  Kontrol positive  yang  digunakan  adalah  gel  Mediklin ® dan control negative akuabides steril.

## II.5 Analisis Data
Data  hasil  pengujian  aktivitas  kombinasi ekstrak  daun  teh  hijau  dan  daun  kelor  terhadap diameter  zona  hambat  pertumbuhan  bakteri Propionibacterium acne dan Staphylococcus aureus dianalisis secara statistik menggunakan metode One way  anova  (analisa  varians  satu  arah)  dengan program  SPSS  ( Trial  Version )  dengan  taraf kepercayaan  95%  atau  α  =  0,05  menggunakan  uji paired t-test .
III. Hasil Dan Pembahasan III.1 Hasil Pembuatan Simplisia dan Standarisasi Mutu Simplisia
Tanaman  daun  teh  hijau  kering  diperoleh dari  Perkebunan  Pusat  Penelitian  Teh  dan  Kina di Gambung, Ciwidey, Jawa Barat dan tanaman kelor diperoleh  dari pekarangan  rumah  daerah  Bogor Barat. Rendemen simplisia  daun teh hijau  sebesar 98,6% dan daun kelor 15,2%.
Hasil  pengujian  bahan  organic  asing terhadap  simplisia  rajangan  daun  teh  hijau  sebesar 0,8%  dan  memenuhi  syarat  kurang  dari  2% (14) . Kadar  senyawa  yang  terlarut  dalam  etanol  dari simplisia  daun  kelor  dan  teh  hijau  masing-masing adalah 17,30% dan 23,59% dan untuk senyawa yang larut  dalam  air  masing-masing  adalah  36,46%  dan 31,70%  dan  memenuhi  syarat  sesuai  Farmakope Herbal (2013) (Depkes RI, 2013). Hasil uji kadar air simplisia daun kelor dan teh hijau masing-masing yaitu 0,82% dan 3,06% dan sesuai dengan syarat kadar air untuk simplisia daun yaitu kurang dari 5%. Hasil uji kadar abu simplisia daun kelor dan teh hijau masing-masing yaitu 6,55% dan  4,55%.  Hasil  yang  diperoleh  telah  memenuhi syarat  yang  telah  ditetapkan  untuk  kadar  abu simplisia  daun  kelor  dan  teh  hijau  masing-masing kurang dari 7,5% dan 5,6% (Depkes RI, 2013). Nilai kadar abu tak larut asam pada simplisia daun kelor yaitu  0,73%  dan  untuk  teh  hijau  tidak  terdeteksi adanya  abu  tak  larut  asam  dan  memenuhi
persyaratan  yaitu  kurang  dari  0,6%  dan  0,9% (Depkes RI, 2013).
Hasil  uji  skrining  fitokimia  menunjukan bahwa  simplisia  daun  kelor  dan  daun  teh  hijau positive  mengandung  senyawa  alkaloid,  saponin, tannin,  fenol,  flavonoid,  steroid,  triterpenoid  dan glikosida.

## III.2 Hasil Pembuatan Ekstrak dan Standarisasi Mutu Ekstrak
Ekstrak  kental  daun  kelor  dan  teh  hijau diperoleh  dengan  metode  maserasi  kinetic menggunakan etanol 70%. Rendemen ekstrak daun kelor  sebesar  59,25%  sedangkan  serbuk  daun  teh hijau  sebesar  38,03%.    Ekstrak  kental  daun  kelor memiliki  karakteristik  berwarna  hijau  kecoklatan, bau khas, dan rasa pahit sesuai dengan persyaratan. Ekstrak kental daun teh hijau memiliki karakteristik berwarna  coklat  kehitaman,  tidak  berbau  dan  rasa khelat sesuai dengan persyaratan (Depkes RI, 2013).
Kadar senyawa yang terlarut dalam etanol dari ekstrak daun kelor dan teh hijau masing-masing adalah 74,49% dan 81,51% dan untuk senyawa yang larut  dalam  air  masing-masing  adalah  74,12%  dan 36,80%.  Hasil  uji  menunjukan  bahwa  senyawa dalam  ekstrak  lebih  banyak  terlarut  dalam  etanol dibandingkan  dalam  air.  Kadar  zat  terlarut  ini merupakan  uji  kemurnian  ekstrak  yang  dilakukan untuk  mengetahui  jumlah  terendah  bahan  kimia kandungan  ekstrak  yang  terlarut  dalam  pelarut tertentu.  Untuk  syarat  kemurnian  dari  simplisia maupun  ekstrak  minimum  harus  dilakukan  uji penetapan  kadar  zat  terekstraksi  dalam  air  dan etanol.
Penetapan  kadar  air  bertujuan  untuk memberikan  batasan  minimal  tentang  besarnya kandungan air di dalam bahan (Farnsworth, 1966). Kadar  air  yang  tinggi  dapat  menyebabkan pertumbuhan mikroorganisme yang akan mempengaruhi perubahan kimia pada senyawa aktif. Hasil uji kadar air ekstrak daun kelor dan teh hijau masing-masing yaitu 4,68% dan 5,53%. Hasil yang diperoleh  telah  memenuhi  syarat  yang  telah ditetapkan untuk kadar air ekstrak kental daun kelor dan teh hijau masing-masing  kurang dari  10% dan 16% (Depkes RI, 2013).
Prinsip  penetapan  kadar  abu  yaitu  bahan yang dipanaskan pada suhu dimana senyawa organik dan  turunannya  terdestruksi  dan  menguap  menjadi abu  sehingga  tinggal  unsur  mineral  dan  zat anorganik.  Tujuan  dari  penetapan  kadar  abu  yaitu memberikan gambaran kandungan mineral internal dan eksternal yang berasal dari proses awal sampai terbentunya  ekstrak  (Depkes  RI,  2000).  Hasil  uji kadar abu ekstrak daun kelor dan teh hijau masing- masing  yaitu  6,10%  dan  1,88%.  Hasil  yang diperoleh  telah  memenuhi  syarat  yang  telah ditetapkan untuk kadar abu ekstrak kental daun kelor dan teh hijau masing-masing kurang dari 9,0% dan 2,0%  (Depkes  RI,  2013).  Penetapan  kadar  abu  tak larut  asam  menunjukan banyaknya pasir dan silika
yang  ada  dalam  suatu  sampel.  Nilai  kadar  abu  tak larut  asam  pada  ekstrak  daun  kelor  dan  teh  hijau masing-masing  yaitu  0,48%  dan  0,02%  dan memenuhi  persyaratan yaitu kurang dari  0,9% dan 0,4% (Depkes RI, 2013).
Pengujian cemaran bakteri termasuk salah satu  uji  untuk  syarat  kemurnian  ekstrak.  Uji  ini mencakup penentuan jumlah mikroorganisme yang diperbolehkan dan untuk menunjukan tidak adanya bakteri  tertentu  dalam  ekstrak.  Cemaran  mikroba pada ekstrak kelor dan teh hijau masing-masing 9,2 x  10 3 koloni/g  dan  9,5  x  10 3 dan  berada  dibawah batas maksimum persyaratan mutu bahan baku obat tradisional  yaitu  10 6 koloni/g.  Rendahnya pertumbuhan bakteri ini juga bisa disebabkan karena ekstrak  yang  digunakan  adalah  ekstrak  etanol, dimana etanol juga dapat menghambat pertumbuhan bakteri atau mikroba dalam ekstrak (BPOM, 2014). Hasil  pengujian  cemaran  logam  berat  Pb menunjukan  bahwa  dalam  ekstrak  daun  kelor  dan teh hijau tidak terdapat kandungan logam berat Pb. Menurut  BPOM  kandungan  Pb  dalam  ekstrak kurang dari  10 mg/kg atau 10 ppm, adanya timbal (Pb)  dalam  sampel  dapat  disebabkan  oleh  proses pengeringan simplisia yang akan digunakan sebagai tanaman  obat.  Pengeringan  dengan  sinar  matahari langsung  di  udara  terbuka  dapat  menyebabkan simplisia tersebut mengalami pencemaran lingkungan  termasuk  logam  berat  timbal  (Pb) (Hernani  dan  Nurdjanah,  2009).  Pencemaran lingkungan  tersebut  dapat  berasal  dari  limbah industri  maupun  bahan  bakar  kendaraan  bermotor yang  mengandung  timbal  (Pb)  dan  keluar  dari knalpot  sehingga  menyebabkan  polusi  di  sekitar tempat  pengeringan  simplisia  tersebut.  Adanya timbal  (Pb)  yang  terkandung  dalam  air  yang digunakan untuk irigasi dalam pertanian juga dapat menyebabkan  cemaran  timbal  (Pb)  dan  kadmium (Cd) dalam tanaman (Sudarmaji et al, 2006). Pengujian  sisa  residu  pelarut  bertujuan memberikan  jaminan  bahwa  selama  proses  tidak meninggalkan  sisa  pelarut  yang  seharusnya  tidak boleh  ada  dan  nilai  yang  dihasilkan  menunjukan tingkat  kemurnian  suatu  sampel.  Pelarut  yang dimaksud  adalah  etanol  (Depkes  RI,  2000).  Sisa residu  pelarut  yang  terdapat  dalam  ekstrak  kental etanol daun kelor dan teh hijau masing-masing yaitu 0,2859%  dan  0,1946%.  Hasil  yang  diperoleh telah memenuhi syarat sisa residu pestisida untuk ekstrak tanaman tidak lebih dari 1%.

## III.3  Hasil  Penapisan  Senyawa  Fitokimia Ekstrak
Hasil  penapisan  senyawa  fitokimia  dalam ekstrak daun kelor dan teh hjau menunjukan positif mengandung  senyawa  alkaloid,  saponin,  tannin, fenol, flavonoid, steroid, triterpenoid dan glikosida. Beberapa  hasil  penelitian  ilmiah  membuktikan bahwa  ekstrak  daun  kelor  mengandung  tannin, alkaloid,  saponin,  flavonoid,  steroid,  triterpenoid dan  glikosida  (Roopalatha  dan  Mala,  2013)
sedangkan  ekstrak  daun  teh  hijau  mengandung senyawa  flavonoid,  fenol,  alkaloid,  glikosida (Bashir et al, 2014), tannin, dan saponin (Andrayekti et al, 2015).

## III.4 Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak
Uji aktivitas antibakteri ekstrak daun kelor dan teh hijau serta kombinasi ekstrak daun kelor dan teh hijau  terhadap  bakteri P.  acne dan S.  aureus menggunakan  metode  difusi  agar  dengan  cara sumuran. Hasil uji aktivitas antibakteri menunjukan
bahwa  ekstrak  daun  teh  hijau  memiliki  aktivitas antibakteri  terhadap P.  acne dan S.  aureus yang lebih baik dibandingkan ekstrak daun kelor, hal ini dilihat dari konsentrasi hambat minimum dan zona hambat  yang  dihasilkan.  Kontrol  positive  yang digunakan  Mediklin ® dengan  zona  hambat  50  mm dan  control  negative  yang  digunakan  akuabides steril dengan zona hambat 0 mm. Hasil pengukuran rata-rata  diameter  zona  hambat  dapat  dilihat  pada Tabel 1 dan Tabel 2.

## Tabel 1. Aktivitas antibakteri ekstrak daun kelor dan teh hijau
Sampel Bakteri Diameter zona hambat (mm) ± SD 0,3% 0,6% 1,25% 2,5% 5% 10% Ekstrak daun kelor P. acne S. aureus 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 9 ± 0 8 ± 0 12 ± 0 12 ± 0 14 ± 0 14 ± 0 Ekstrak daun teh hijau P. acne S. aureus 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 5 ± 0 7 ± 0 13 ± 0 15 ± 0 18 ± 0 17 ± 0 24 ± 0 20 ± 0
Tabel 2. Aktivitas antibakteri kombinasi ekstrak daun kelor dan teh hijau Kombinasi Ekstrak Daun Teh Hijau : Kelor Diameter zona hambat (mm) ± SD P. acne S. aureus 1,25% : 2,5% 16 ± 0,942 16 ± 0,471 2,5% : 2,5% 24 ± 0 23 ± 0,471 5% : 2,5% 30 ± 0 29 ± 0 Uji aktivitas antibakteri kombinasi bertujuan  untuk  mengetahui  aktivitas  antibakteri yang dimiliki oleh kombinasi ekstrak daun kelor dan teh hijau terhadap bakteri P. acne dan S. aureus dan hasil  yang  diperoleh  dapat  bersifat  sinergis  atau antagonis.  Aktivitas  antibakteri  kombinasi  ekstrak bersifat  sinergis jika efek dari  kombinasi  memiliki zona hambat yang lebih besar dibandingkan dengan efek  antibakteri  pada  ekstrak  tunggal  sedangkan bersifat  antagonis  jika  efek  kombinasi  yang diperoleh zona hambat lebih kecil atau sama dengan efek tunggal (Astri, 2015).
Analisis  uji paired  t-test dilakukan  untuk melihat  perbedaan  luas  zona  hambat  antibakteri yang  dihasilkan  oleh  ekstrak  daun  kelor  dan  teh hijau  secara  tunggal  dibandingkan  dengan  ekstrak yang  dikombinasi  dengan  berbagai  konsentrasi. Interpretasi hasil analisis yaitu nilai signifikan <0,05 maka terdapat perbedaan yang nyata pada luas zona hambat  yang  dihasilkan  oleh  ekstrak  tunggal  dan kombinasi.  Nilai  signifikansi  >0,05  menunjukan bahwa bahwa tidak ada perbedaan yang nyata pada luas  zona  hambat  yang  dihasilkan  oleh  ekstrak tunggal  dan  kombinasi.  Hasil  analisis  yang diperoleh  memiliki  nilai  signifikansi  <0,05  pada ekstrak  daun  kelor  dan  teh  hijau  dan  kombinasi ekstrak  terhadap  bakteri  penyebab  jerawat P.  acne dan S.  aureus .  Variasi  konsentrasi  ekstrak  daun kelor  dan  teh  hijau  dan  kombinasi  ekstrak memberikan  hasil  yang  berbeda  nyata  dengan melihat  luas  zona  hambat  yang  dihasilkan.
Perbedaan tersebut dapat disebabkan semakin tinggi konsentrasi ekstrak maka semakin luas zona hambat karena kandungan senyawa aktif antimikroba yang terkandung  dalam  ekstrak  berpengaruh  terhadap daya  hambat  yang  dihasilkan.  Kombinasi  ekstrak daun  kelor  dan  teh  hijau  memberikan  efek  yang sinergis karena zona hambat yang dihasilkan lebih tinggi  dibandingkan  aktivitas  antibakteri  ekstrak secara tunggal.
Kandungan senyawa utama yang berkhasiat  sebagai  antibakteri  pada  ekstrak  daun kelor memiliki mekanisme kerja yang sama dengan kandungan  senyawa  utama  katekin  pada  ekstrak daun  teh  hijau.  Kuersetin  merupakan  golongan senyawa  flavonol  yang  memiliki  mekanisme  kerja antibakteri dengan menghambat sintesis peptidoglikan  yang  mengakibatkan  kerusakan morfologi  bakteri,  menghambat  aktivitas  β- laktamase, menghambat sintesa asam lemak, tetapi meningkatkan protein amida I dan II pada sel bakteri (Siriwong  et  al,  2016).  Ekstrak  etanol  daun  kelor juga  memiliki  efek  anti  inflamasi  dengan mengurangi  udem  dilanjutkan  dengan  analisis ekspresi COX-2 melalui pengamatan sel neutrophil (Sulistyawati  dan  Pratiwi,  2016)  dan  dapat dimanfaatkan  sebagai  salah  satu  alternative pengobatan jerawat. Katekin dalam ekstrak daun teh hijau  memiliki  efek  antimikroba  langsung  dengan mekanisme  kerja  merusak  membrane  sel  bakteri, menghambat sintesa asam lemak dan penghambatan aktivitas enzim. Efek lain yang dapat berkontribusi
terhadap  efek  antimikroba  keseluruhan  pada individu  yang  terinfeksi  dapat  menghambat peradangan (terutama peradangan yang disebabkan oleh  stres  oksidatif,  seperti  vaskular)  dengan meningkatkan  sintesis  oksida  nitrat  (Reygaert, 2014).

## IV. Kesimpulan
Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak daun kelor  dan  teh  hijau  dan  kombinasi  ekstrak  pada berbagai  konsentrasi  memberikan  perbedaan  nyata terhadap  bakteri  penyebab  jerawat P.  acne dan S. aureus dengan  melihat  luas  zona  hambat  yang dihasilkan  pada  setiap  konsentrasi  ekstrak  tunggal dan  kombinasi.  Hasil  uji  aktivitas  antibakteri terhadap S.  aureus menunjukan  bahwa  KHM ekstrak daun kelor dan daun teh hijau berturut-turut adalah 2,5% dan 1,25% dengan zona hambat 8 mm dan 7 mm dan KHM ekstrak daun kelor dan daun teh hijau  berturut-turut  2,5%  dan  1,25%  terhadap P. acne adalah dengan zona hambat 9 mm dan 5 mm. Aktivitas antibakteri terbaik kombinasi ekstrak daun teh hijau dan kelor pada rasio 1:2 terhadap bakteri S. aureus dan P.  acne dengan  zona  hambat  berturut- turut 16 ±  0,471 mm dan 16 ± 0,942 mm.

## Daftar Pustaka
Ajayi  AO  &  Fadeyi  TE.  (2015).  Antimicrobial Activities  and  Phytochemical  Analysis  of Moringa oleifera Leaves on Staphylococus aureus and Streptococcus species . AJPCT ,
3; 10 643-653.
Andrayekti  R,  Mufrod  &  Munisih  S.  (2015). Pengaruh  Basis  Gel  Sediaan  Masker Ekstrak Daun Teh Hijau ( Camellia sinensis Linn.)  Pada  Karakteristik  Fisik  Dan Aktivitas  Antibakteri S.  aureus ATCC 25923. Majalah Farmaseutik , 11 (2). Astutiningsih C, Setyani W & Hindratna H. (2014). Uji Daya Antibakteri dan Identifikasi Isolat Senyawa Katekin Dari Daun Teh ( Camellia sinensis L. var Assamica). Jurnal Farmasi Sains dan Komunitas , 11 (2).
Astri DY. (2015). Aktivitas Antibakteri Kombinasi
Ekstrak  Etanol  Biji  dan  Batang  Pepaya ( Carica papaya L.) Terhadap Staphylococcus  epidermidis dan Shigella sonnei . Naskah  Publikasi .  Universitas Muhammadiyah Surakarta. p. 1-9. Badan  Pengawas  Obat  dan  Makanan.  (2014). Peraturan Kepala BPOM Indonesia Nomor 12 Tahun 2014 Tentang Persyaratan Mutu Obat Tradisional . Jakarta. Bashir S, Khan BM, Babar M, Andleeb S, Hafeez M, Ali S & Khan MF. (2014). Assesment of  Bioautography  and  Spot  Screening  of TLC  of  Green  Tea  (Camellia)  Plant Extracts  as  Antibacterial  and  Antioksidan Agents. Indian J.Pharm Sci, 74 (4). p. 364- 370.
Departemen Kesehatan RI. (1980). Materia Medika Indonesia Jilid IV . Jakarta. Departemen Kesehatan Republik Indonesia. (2000).
Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan  Obat  Edisi  I .  DirJen  POM. Jakarta. Departemen Kesehatan Republik Indonesia. (2013).
Farmakope Herbal Indonesia . p 64-65. Dunn J A, Robert A C, Richatd T, Enas, Robert J G.
(2008). Novel Topically Active Antimicrobial  and  Anti-Inflammatorry Compounds  For  Acne.  In:  Walters, Kenneth A, editor. Dermatologic, Cosmoceutic  And  Cosmetic  Development .
New York: Informa Healthcare. h 243. Farnsworth NR. (1966). Biological and
Phytochemical  Screening  of  Plants.
J.Pharm.Sci , 55; 3. p. 225-269. Hanani  E.  (2015). Analisis  Fitokimia .  EGC  Press:
Jakarta.
Hastuti  NS,  Taurhesia  S  &  Wibowo  AE.  (2017). Aktivitas  Secara In  Vitro dan In  Vivo Kombinasi  Ekstrak  Daun  Kelor  ( Moringa oleifera Lam.)  dan  Pegagan  ( Centella asiatica (L). Urb.) Sebagai Gel Antijerawat. Majalah Farmasi . Hernani  &  Nurdjanah  R.  2009. Perkembangan Teknologi Tro . 21 (2), 33-39.
Isitua  CC,  Ibeh  IN  &  Olayinka  JN.  (2016). Antibacterial Activity Of Moringa oleifera Lamk.  Leaves  on  Enteric  Human Pathogens. Indian  Journal  of  Applied Research ,  6  (9)  :  553-556.  ISSN  2249- 555X.
Jawetz  M  &  Adelberg.  (1995). Mikrobiologi Kedokteran Edisi XX Terjemahan Nugroho Edi dan Maulany FF . Jakarta. EGC. p. 208,
291.
Lee JH, Shim JS, Mi-Sook Chung, Lim ST & Kim KH.  (2009).  In  Vitro  Anti-Adhesive Activity  of  Green  Tea  Extract  against Pathogen  Adhesion. Phytother.  Res ,  23, 460–466.
Roopalatha  UC,  Mala  V.  (2013).  Phytochemical Analisis  of  Succesive  Reextracts  of  The Leaves  of Moringa  oleifera Lamk. Int  J Pharm Pharm Sci , 5 (3). p. 629-634. Reygaert  WC.  (2014).  The  Antimicrobial Possibilities  of  Green  Tea. Frontiers  in Microbiology , 5 (434).
Siriwong  S,  Teethaisong  Y,  Thumanu  K, Dunkhunthod  B,  Eumkeb  G.  (2016).  The Synergy and Mode of Action of Quercetin Plus  Amoxicillin  Against  Amoxicillin- Resistant Staphylococcus  epidermidis . BMC  Pharmacology  and  Toxicology ,17 (39). DOI 10.1186/s40360-016-0083-8. Sudarmaji,  Mukono  J  &  Corie  I.P.  (2006). Toksikologi  Logam  Berat  B3  dan
Dampaknya  Terhadap  Kesehatan. Jurnal Kesehatan Lingkungan , 2 (2). p. 129-142. Sulistyawati  R  &  Pratiwi  PY.  (2016).  Pengaruh Pemberian  Ekstrak  Etanol  Daun  Kelor ( Moringa  oleifera L.)  Terhadap  Aktivitas
Analgesik  dan  Antiinflamasi  Melalui Ekspresi Enzim Siklooksigenase. Pharmaciana , 6 (1). p. 31-38.
Syah A. 2006. Taklukan Penyakit dengan Teh Hijau Cetakan 1 . Agromedia Pustaka. Jakarta. p 4. Widyaningrum  N.  (2013).  Epigallocatechin-3- Gallate  (EGCG)  Pada  Daun  Teh  Hijau Sebagai Antijerawat. Majalah Farmasi dan Farmakologi , 17 (03).