Jurnal Biologi Edukasi Edisi 14, Volume 7 Nomor 1, Juni 2015, hal 22-28
Pengaruh ekstrak metanol daun kembang sepatu ( Hibiscus rosa-sinensis L.) terhadap bakteri Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA)
The effect of methanol extract of leaves of Hibiscus rosa-sinensis L. against Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA)
Mona Fathia 1 , Risa Nursanty 1 , dan Nurdin Saidi 2 1 Jurusan Biologi Fakultas Matematika dan Ilmu Pegetahuan Alam, Universitas Syiah Kuala 2 Jurusan Kimia Fakultas Matematika dan Ilmu Pegetahuan Alam, Universitas Syiah Kuala e-Mail: monafathia92@gmail.com

## Abstrak
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh ekstrak metanol terhadap bakteri Methicillin Resistant  Staphylococcus  aureus (MRSA)  dan  mengukur  daya hambat  yang  terbentuk.  Uji fitokimia  dan  ekstraksi  dilakukan  di  Laboratorium  Penelitian  Jurusan  Kimia  Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam (FMIPA). Uji antibakteri dilakukan di Laboratorium Mikrobiologi Jurusan Biologi FMIPA, Universitas Syiah Kuala. Sampel yang digunakan adalah daun H.  rosa-sinensis yang  diperoleh  di  Gampong  Sektor  Timur,  Darussalam.  Penelitian  ini menggunakan metode Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan lima perlakuan dan tiga ulangan yaitu; kontrol negatif menggunakan pelarut, ekstrak uji dengan konsentrasi masing-masing 0,2 g/mL, 0,3 g/mL, 0,4 g/mL, dan kontrol positif menggunakan linezolid 30 µg.  Hasil uji fitokimia didapatkan bahwa sampel segar mengandung senyawa alkaloid, terpenoid, steroid dan flavonoid, sedangkan ekstrak metanol mengandung senyawa alkaloid dan flavonoid. Hasil uji antibakteri menunjukkan  bahwa  ekstrak  metanol  mempunyai  kemampuan  yang  baik  dalam  meghambat pertumbuhan bakteri MRSA, dengan rata-rata zona hambat sebesar 15,90 mm pada konsentrasi 0,4 g/mL.
Kata-kata kunci : Hibiscus rosa-sinensis L., metanol, uji antibakteri, zona hambat, MRSA.

## Abstract
This study was aimed to determine the effect of the methanol extract against bacteria Methicillin Resistant Staphylococcus aureus (MRSA) and to measure its inhibition capacity. Phytochemical test  and  extraction  were  conducted  at  the  Research  Laboratory  of  Chemistry  Department, Faculty  of  Mathematics  and  Natural  Sciences  (MIPA).  Antibacterial  test  was  done  at  the Laboratory of Microbiology Department of Biological Science, University of  Syiah Kuala. The samples used leaves of H. rosa-sinensis collected from Gampong Sektor Timur, Darussalam.This study  used  completely  randomized  design  (CRD)  with  five  treatements  and  three  replications namely; negative control using the solvent, extract test with  concentrations 0.2 g / mL, 0.3 g / mL, 0.4 g / mL, and  positive control using 30 µg linezolid. Phytochemical test showed that the fresh samples contain alkaloids, terpenoids, steroids, and flavonoids, while the methanol extract contains  alkaloids  and  flavonoids.  Antibacterial  test  showed  that  the  methanol  extract  have inhibited  MRSA  bacterial  growth,  with  the  average  of  inhibition  zone  was  15.90  mm  at  the concentration of 0.4 g / mL.
Keywords : Hibiscus rosa-sinensis L., methanol, antibacterial test, inhibition zone, MRSA
Mona Fathia, dkk: Pengaruh ekstrak metanol daun...
Pendahuluan Antibiotik merupakan kelompok senyawa  yang  bekerja  dengan  cara menghambat  pertumbuhan  atau  membunuh bakteri.  Penggunaan  antibiotik  dengan  dosis yang  tidak  tepat  dan  secara  berlebihan  dapat menimbulkan resistensi (Kee & Heyes, 1996). Timbulnya  resistensi  pada  beberapa  jenis antibiotik  telah  menyebabkan  kegagalan dalam  penanganan  berbagai  jenis  penyakit infeksi (Uddin, et al., 2010). Saat  ini  telah  ditemukan  adanya resistensi  beberapa  jenis  bakteri  terhadap golongan  antibiotik  diantaranya  adalah
Methicillin Resistant  Staphylococcus  aureus (MRSA) . Bakteri  ini  resisten  terhadap antibiotik ß-laktam golongan penisillin seperti methicillin,  oxacillin,  cloxacillin dan flucloxacillin (Neal,  2006),  sehingga  untuk menangani penyebaran bakteri ini perlu dicari pengobatan  alternatif.  Salah  satunya  dengan penggunaan  tumbuhan  yang  berkhasiat  obat. Penggunaan  tumbuhan  obat  merupakan  salah satu  alternatif  yang  dipilih  masyarakat  untuk mengurangi  pemakaian  antibiotik.  Obat tradisional  memiliki  berbagai  campuran kompleks  zat  kimia  alami.  Bahan  aktif  yang satu dapat bekerja sinergis dengan yang lain, namun  ada  pula  yang  bersifat  antagonis sehingga  akan  menyeimbangkannya.  Oleh sebab  itu, penggunaan  obat  tradisional relatif tidak  menimbulkan  efek  samping  yang  besar (Dalimartha, 2006). Obat tradisional diharapkan  dapat  dipakai  dalam  sistem pelayanan  kesehatan.  Guna  mencapai  hal tersebut  perlu  dilakukan  pengujian  ilmiah tentang  khasiat  dan  keamanan  obat tradisional(Direktorat  Pengawasan  Obat Tradisional, 2000). Salah satu tumbuhan yang dimanfaatkan  sebagai  obat  adalah  kembang sepatu ( Hibiscus rosa-sinensis L.)(Dalimartha, 2006). Tumbuhan inimempunyai  khasiat  dalam  mengobati batuk.  Penelitian  Sarmiento,  Maramba,  dan Gonzales  (2011)  serta  Patel,  et  al.  (2012) melaporkan  bahwa  daun H.  rosa-sinensis mengandung  senyawa  kimia  berupa  tanin,
saponin, flavonoid, terpenoid dan alkaloid. Penelitian  yang  dilakukan  oleh Sunatmo  (2007)  melaporkan  bahwa  ekstrak daun  etanol H.  rosa-sinensis mampu menghambat  pertumbuhan Staphylococcus aureus dengan diameter zona hambat sebesar 22  mm  pada  konsentrasi  100  mg  dengan metode well difusi  agar.  Penelitian Wattimena(1991),  juga  membuktikan  bahwa ekstrak aseton bunga H. rosa-sinensis mampu menghambat  pertumbuhan  bakteri S.  aureus dengan  zona  hambat  sebesar  6.7 mmpada konsentrasi  50  µg/mL  dengan  metode well difusi  agar.  Berdasarkan  informasi  tersebut, menarik  untuk  dilakukan  uji  lebih  lanjut mengenai  ekstrak  metanol      daun H.  rosa- sinensis terhadap bakteri Methicillin ResistantStaphylococcus aureus (MRSA).

## Metode Penelitian
Bahan  utama  yang  digunakan  untuk ekstraksi  dan  uji  fitokimia  adalah daunkembang  sepatu  ( Hibiscus  rosa-sinensis L.)  yang  diperoleh  dari  Gampong  Sektor Timur,  Darussalam.  Isolat  bakteri  untuk  uji antibakteri  yaitu  bakteri Methicillin  Resistant Staphylococcus  aureus (MRSA)  yang diperoleh  dari  Laboratorium  Mikrobiologi Rumah  Sakit  Umum  Daerah  dr.  Zainoel Abidin.  Bahan  kimia  yang  digunakan  dalam penelitian ini meliputi, pelarut metanol dan n- heksana, ammonia pekat, etil asetat, HCl 5%., pereaksi  Liebermann  Burchard,  larutan diklorometana,  HCl  2  N,  etanol  80%,  logam magnesium,  HCl  0,5  M  dan  NaCl  fisiologis steril.  Reagen  yang  digunakan  yaitu  reagen Mayer, Dragendorff, dan Wagner. Media yang digunakan  yaitu  media Mueller  Hinton  Agar (MHA)  dan  media Nutrient  Agar (NA). Kertas  cakram  (6  mm  Oxoid,  UK)  serta antibiotik linezolid 30 µg.

## Jenis Penelitian
Penelitian ini menggunakan Rancangan
Acak  Lengkap  (RAL)  untuk  uji  antibakteri. Rancangan  ini  terdiri  dari  tiga  ulangan  dan lima  perlakuan  yaitu,  ekstrak  uji  dengan konsentrasi  masing-masing  0,2  g/mL;  0,3 g/mL; 0,4 g/mL, kontrol negatif menggunakan pelarut dan  kontrol  positif  menggunakan antibiotik  linezolid  30  µg.  Uji  fitokimia dianalisa secara deskriptif.

## Prosedur
Sampel  kering  diambil  sebanyak  500  g kemudian  dimaserasi dengan  pelarut  metanol selama 2x24 jam. Hasil maserasi tersebut lalu disaring,  sedangkan  residu  dimaserasi  lagi dengan  pelarut.  Filtrat  metanol  tersebut
Jurnal Biologi Edukasi Edisi 14, Volume 7 Nomor 1, Juni 2015, hal 22-28
kemudian  dievaporasi  hingga  diperoleh ekstrak metanol.
Uji fitokimia Uji fitokimia yang dilakukan meliputi uji flavonoid, uji alkaloid serta uji terpenoid, steroid  dan  saponin.  Sampel  yang  digunakan yaitu  sampel  daun  segar  yang  telah dikeringanginkan dan ekstrak metanol.
1. Uji flavonoid Sampel  daun  segar H.  rosa-sinensis ditimbang  sebanyak  10  g,  kemudian digerus dan  dihaluskan , diekstraksi  dengan  pelarut metanoldan  dipekatkan.  Ektrak  metanol diekstraksi  dengan  larutan    dan  disaring. Residu yang diperoleh dari hasil penyaringan, diekstraksi dengan 10 mL larutan etanol 80% Selanjutnya  ekstrak  daun  segar  dan ekstrak metanol  masing-masing ditambahkan 0,5 mg logam  Magnesium  dan  HCl  0,5  M.  Sampel positif  mengandung  senyawa  flavonoid apabila  pada  campuran  muncul  warna  ungu atau merah muda. Apabila  flavonoid  tidak  terdeteksi  dengan metode  tersebut,  maka  diuji  dengan menggunakan  uap  ammonia  yaitu  dengan cara,  ekstrak  ketiga  sampel  ditetesi  diatas kertas saring. Kertas saring tersebut kemudian diletakkan  diatas  uap  ammonia  selama  ±  10 menit. Selanjutnya diamati dibawah sinar UV.
Hasil positif ditandai apabila noda pada kertas saring berwarna ungu ketika diamati dibawah sinar UV.
2. Uji alkaloid
Sampel  daun  segar H.  rosa-sinensis ditimbang  sebanyak  10  g,  kemudian  digerus dan  dihaluskan.  Sampel  tersebut  lalu dibasahkan  dengan  ammonia,  selanjutnya dimaserasi dengan 5 mL CH 2 Cl 2 dan dikocok kuat-kuat  kemudian  disaring  dan  dipekatkan Filtrat  yang  dihasilkan  disaring.  Filtrat  dan estrak  metanol  masing-masing  ditambahkan HCl  40%  sebanyak  5  mL,  campuran  ini dikocok  kuat-kuat  dan  didiamkan  hingga lapisan  asam  klorida  dan  kloroform  terpisah. Lapisan  asam  klorida  dibagi  kedalam  tiga tabung reaksi dan masing-masing tabung diuji dengan  reagen  Mayer,  Dragendorff  dan Wagner.  Hasil  positif  ditandai  dengan terbentuknya endapan putih pada tabung yang diuji dengan reagen Mayer, terbentuk endapan berwarna  kemerahan  pada  tabung  yang  diuji
dengan Dragendorff. Hasil positif pada tabung yang  diuji  dengan  pereaksi  Wagner  ditandai dengan  terbentuknya  endapan  berwarna kuning. 3. Uji terpenoid, steroid dan saponin Sampel  daun  segar H.  rosa-sinensis ditimbang  sebanyak  10  g,  digerus  halus  dan ditambahkan  metanol  panas,  kemudian disaring.  Filtrat  yang  diperoleh  diuapkan dengan rotary  evaporator .  Ekstrak  metanol kemudian  diekstraksi  dengan  etil  asetat. Fraksi  yang  larut  diuji  dengan  pereaksi Liebermann-Burchard.  Apabila  terbentuk warna  biru  atau  hijau,  menunjukkan  bahwa sampel  positif  mengandung  senyawa  steroid. Apabila terbentuk warna merah, maka sampel tersebut  positif  mengandung  senyawa terpenoid.  Residu  yang  tidak  dapat  larut dalam larutan etilasetat dikocok kuat, apabila terbentuk busa selama kurang lebih 30 menit, maka  sampel  tersebut  positif  mengandung senyawa  saponin.  Ekstrak  yang  diperoleh ditambahkan HCl, jika terbentuk warna ungu atau  merah,  sampel  tersebut  mengandung senyawa  saponin  triterpen.  Jika  terbentuk warna  hijau  atau  biru  menunjukkan  sampel tersebut positif mengandung saponin steroid.

## Uji antibakteri
Pengujian  dilakukan  dengan  metode difusi  agar.  Setiap  cawan  petri  diisi  dengan media  MHA  sebanyak  15-20  mL  dan dibiarkan  beberapa  saat  hingga  memadat.
Media yang sudah padat kemudian disebarkan suspensi  bakteri  MRSA  sebanyak  0,1  mL yang telah disesuaikan dengan standar 0,5 Mc Farland secara  merata  pada  media  dengan menggunakan swab steril. Cawan  tersebut  kemudian  dibagi menjadi  3  bagian,  masing-masing  diletakkan kertas  cakram  yang  berisi  ekstrak  metanol daun H. rosa-sinensis sebanyak 20 µL dengan konsentrasi 0,2 g/mL, 0,3 g/mL dan 0,4 g/mL. Perlakuan  kontrol  menggunakan  dua perlakuan,  yaitu  kontrol  negatif  dan  positif. Kontrol  negatif  menggunakan  kertas  cakram yang  berisi  pelarut  dan  kontrol  positif menggunakan  antibiotik  linezolid  30  µg. Perlakuan kontrol dengan konsentrasi ekstrak dilakukan  pada  cawan  yang  berbeda.  Hal  ini dilakukan  agar  zona  hambat  yang  terbentuk tidak  saling  menyatu  sehingga akan  saling mempengaruhi  antara  satu  dengan  yang  lain.
Mona Fathia, dkk: Pengaruh ekstrak metanol daun...
Kertas  cakram  untuk  perlakuan  kontrol negatif  dan  positif  diletakkan  pada  cawan yang  sama.  Semua  perlakuan  dilakukan sebanyak tiga ulangan. Masing-masing cawan perlakuan  kemudian  diinkubasi  pada  suhu 37 0 C.  Setelah  24 jam,  diamati  diameter  zona hambat  yang  terbentuk  dan  diukur  dengan menggunakan jangka sorong(Sunatmo, 2007), kemudian  disesuaikan  dengan  respon hambatan pertumbuhan bakteri oleh Morales.
Teknik Analisis Data Hasil dari uji fitokimia pada penelitian ini  dianalisis  secara  deskriptif.  Data  uji antibakteri  dianalisis  dengan  menggunakan
Analisis  Varian  (ANAVA)  menggunakan aplikasi SPSS versi 21.0, data yang diperoleh tidak berdistribusi normal maka data tersebut ditransformasikan  terlebih  dulu. Data ditransformasi menggunakan software Microsoft  Office  Excel  dengan  rumus transformasi  yang  dilihat  berdasarkan  grafik sebaran  data  (Pallant,  2005).  Uji  ANAVA menunjukkan  adanya  pengaruh  yang  nyata pada  perlakuan  sehingga  dilanjutkan  dengan Uji Jarak Ganda Duncan (UJGD).

## Hasil Penelitian dan Pembahasan
Hasil  uji  fitokimia  daun  kembang sepatu  ( Hibiscus  rosa-sinensis L.)  dapat dilihat  pada  tabel 1.  Uji  fitokimia  dilakukan terhadap  sampel  daun  segar  dan  ekstrak metanol. Tabel  1 menunjukkan  bahwa  sampel daun  segar H.  rosa-sinensis mengandung senyawa  alkaloid,  terpenoid,  steroid  dan flavonoid.  Ekstrak  metanol  mengandung senyawa  alkaloid  dan  flavonoid.  Senyawa yang tidak terdapat pada kedua smapel adalah saponin.  Hal  ini  terlihat  dari  tidak terbentuknya  busa  ketika  dikocok  dengan akuades (Manitto, 1992).
Senyawa  alkaloid  positif  terkandung dalam  sampel  segar  dan  ekstrak  metanol, alkaloid  biasanya  diekstraksi  dari  jaringan tumbuhan  dengan  pelarut  alkohol  yang bersifat  asam  lemah  seperti  metanol (Harborne,  1987).  Penelitian  Patel  et  al., (2012)  melaporkan  bahwa  ekstrak  metanol daun H.  rosa-sinensis positif  mengandung senyawa  alkaloid.  Alkaloid  diuji  dengan menggunakan reagen mayer, Dragendorff dan wagner.  Sampel  daun  segar  dan  ekstrak
metanol  bereaksi  dengan  reagen  Dragendorff dan wagner, hal ini terlihat dari terbentuknya endapan  berwarna  merah  kecoklatan  ketika ditetesi  reagen  Dragendorff  dan  endapan berwarna  kuning  ketika  ditetesi  reagen wagner.  Kedua  sampel  menunjukkan  reaksi negatif  dengan  reagen  mayer  yang  ditandai dengan  tidak  terbentuknya  endapan  putih ketika  ditetesi  reagen  tersebut.  Hal  ini disebabkan  sampel  tersebut  tidak  memiliki sensitivitas  terhadap  pereaksi  ini,  sehingga sampel  tidak  menunjukkan  reaksi  ketika ditetesi  reagen.  Berbagai  senyawa  alkaloid memiliki  rantai  samping  yang  khas  sehingga akan  bereaksi  dengan  reagen  tertentu (Robinson, 1995)
Tabel 1. Hasil Uji Fitokimia Uji fitokimia Sampel daun segar Ekstrak metanol Alkaloid: Mayer Dragendorff Wagner - + + - + + Saponin - - Terpenoid + - Steroid + - Flavonoid + + Keterangan: (+) terdapat senyawa fitokimia, (-) Tidak terdapat senyawa fitokimia. Uji Flavonoid pada penelitian ini tidak menunjukkan hasil positif dengan penambahan  Mg  dan  HCl  0,5  M.  Hal ini diduga  karena  konsentrasi  flavonoid  pada sampel  sangat  sedikit  sehingga  sukar terdeteksi.  Semua  tumbuhan  mengandung senyawa  metabolit  sekunder  namun  dalam kadar  yang  berbeda-beda  (Robinson,  1995). Oleh  karena  itu,  perlu  diuji  dengan  metode lain  yaitu  menggunakan  uap  ammonia.  Uji flavonoid menggunakan metode ini menunjukkan  hasil  positif pada  sampel  segar dan ekstrak metanol. Terpenoid dan steroid positif terkandung  dalam  sampel  segar.  Senyawa terpenoid  dan  steroid  umumnya  merupakan senyawa  nonpolar  dan sering  diisolasi  dari tumbuhan  dengan  menggunakan  pelarut nonpolar (Robinson, 1995). Uji terpenoid dan steroid ini menggunakan pereaksi Lieberman- Burchad.  Penelitian  (Rostinawati,  2009) melaporkan  bahwa  tumbuhan Hibiscus
Jurnal Biologi Edukasi Edisi 14, Volume 7 Nomor 1, Juni 2015, hal 22-28
sabdariffa L.  terbukti  mengandung  senyawa alkaloid, flavanoid, saponin dan tanin. Hasil  ANAVA  ekstrak  metanol menunjukkan  bahwa  konsentrasi  ekstrak metanol  daun H.  rosa-sinensis berpengaruh nyata  terhadap  pertumbuhan  bakteri  MRSA (P<0,05).  Hasil  UJGD  ekstrak  metanol  dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2. Rata-rata  diameter  zona  hambat  (mm) akibat pemberian ekstrak metanol H. rosa-sinensis terhadap bakteri MRSA
Keterangan:  superskrip  huruf  yang  berbeda  pada kolom  yang  sama  menunjukkan  berbeda  nyata (P<0,05).
Tabel  2 menunjukkan  bahwa  kontrol negatif  memperlihatkan  hasil  yang  berbeda nyata dibandingkan dengan semua konsentrasi ekstrak  dalam  menghambat  pertumbuhan bakteri  MRSA.  Masing-masing  konsentrasi ekstrak  juga  memperlihatkan  hasil  yang berbeda  nyata  antara  satu  dengan  yang  lain. Ekstrak metanol dengan konsentrasi 0,2 g/mL; 0,3  g/mL  dan  0,4  g/mL  memiliki  potensi dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri MRSA  dan  tergolong  dalam  kategori  kuat (11-20  mm)  berdasarkan  klasifikasi  respon hambatan  pertumbuhan  bakteri  Morales (Morales,  2003).  Kontrol  negatif  tidak memiliki  potensi  dalam  menghambat pertumbuhan  bakteri  MRSA  seperti  yang terlihat pada Gambar 4.1. Hal ini juga terdapat dalam  penelitian  Rosyidah  (2010),  yaitu kontrol negatif tidak membentuk zona hambat terhadap  bakteri  MRSA,  sedangkan  ekstrak dengan  konsentrasi  50%,  75%  dan  100% masing-masing  menghasilkan  zona  hambat sebesar 6 mm; 7,20 mm dan 7,67 mm.
Ekstrak metanol dengan konsentrasi 0,4 g/mL  memiliki  kemampuan  hambatan  yang berbeda  nyata  jika  dibandingkan  dengan konsentrasi  0,3  g/mL  maupun  0,2  g/mL. Ekstrak  0,4  g/mL  membentuk  zona  hambat rata-rata sebesar 15,9 mm, sementara ekstrak 0,3  g/mL  dan  0,2  g/mL  masing-masing membentuk  zona  hambat  rata-rata  sebesar
13,2  mm  dan  11,6  mm.    Zona  hambat  yang terbentuk  akibat  pemberian  ekstrak  metanol daun H. rosa-sinensis terhadap bakteri MRSA terlihat pada gambar 1.
Gambar 1 . Diameter zona hambat ekstrak metanol daun H. rosa-sinensis terhadapbakteri MRSA
Linezolid  30  µg  (kontrol  positif) membentuk  zona  hambat  sebesar 33,2  mm. Berdasarkan klasifikasi respon zona hambatan Morales, antibiotik ini memiliki potensi yang sangat kuat (>21-30 mm) dalam menghambat pertumbuhan  bakteri  MRSA.  Linezolid merupakan  antibiotik  berspektrum  sempit, antibiotik ini umumnya melawan bakteri gram positif  aerob  seperti Staphylococcus  aureus .
Mekanisme  kerja  linezolid  yaitu  dengan mengganggu proses translasi sehingga sintesis protein bakteri terhambat (Stringer, 2006). Ekstrak  metanol  dengan  konsentrasi 0,2  g/mL  dan  0,3  g/mL  masing-masing memiliki kekuatan hambatan sebesar 10,67 µg dan  12,15  µg  jika  disetarakan  dengan kemampuan  antibiotik  linezolid  30  µg.
Konsentrasi  ekstrak  0,4  g/mLmemiliki kekuatan  hambatan  sebesar  14,63  µg  atau setengah  kali  kemampuan  linezolid  30  µg. Berdasarkan hal tersebut, ekstrak metanol 0,4 g/mL memiliki potensi yang lebih besar dalam menghambat pertumbuhan bakteri MRSA. Kemampuan  ekstrak  metanol  daun H. rosa-sinensis dalam menghambat pertumbuhan bakteri  MRSA  disebabkan  oleh senyawa aktif yang terkandung dalam ekstrak tersebut.  Hasil  uji  fitokimia  ekstrak  metanol daun H.  rosa-sinensis menunjukkan  bahwa ekstrak inimengandung alkaloid dan flavonoid.  Kebanyakan  jenis  flavonoid mempunyai kemampuan antibakteri, antikanker  dan  antioksidan  (Achmad,  1996). Penelitian  yang  dilakukan  oleh Wattimena  et al.,  (1991),  membuktikan  bahwa  senyawa antosianin,  tannin  dan  flavonoid  dari  ekstrak etanol H.  rosa-sinensis mempunyai  aktivitas antibakteri terhadap S. aureus .
Perlakuan (konsentrasi) Rata-rata ± Standar deviasi P 0 (kontrol negatif) 0.00 a ± 0.00 P 1 (konsentrasi 0,2 g/mL) 11,63 b ± 0,85 P 2 (konsentrasi 0,3 g/mL) 13,23 c ± 1.27 P 3 (konsentrasi 0,4 g/mL) 15,90 d ± 1,39 P 4 (kontrol positif) 32.60 e ± 0.36
Mona Fathia, dkk: Pengaruh ekstrak metanol daun...
Senyawa flavonoid menghambat pertumbuhan bakteri dengan cara membentuk senyawa kompleks terhadap protein ekstraseluler  sehingga  mengganggu  keutuhan membran  sel.  Mekanisme  kerjanya  yaitu dengan  cara  mendenaturasi  protein-protein yang  terdapat  pada  membran  sel  bakteri. Senyawa  alkaloid  memiliki  mekanisme hambatan dengan cara mengganggu komponen  penyusun  peptidoglikan  sel bakteri,  sehingga  lapisan  dinding  sel  bakteri tidak terbentuk secara utuh dan menyebabkan kematian sel tersebut (Cowan, 1999).

## Simpulan
Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan  dapat  disimpulkan bahwa  Daun
Hibiscus  rosa-sinensis L.  mengandung senyawa  kimia  berupa  alkaloid,  terpenoid, steroid  dan  flavonoid. Pemberian  ekstrak metanol  daun  kembang  sepatu  dengan konsentrasi  yang  berbeda  memperlihatkan kemampuan  yang  berbeda  nyata  antara  satu dengan  yang  lain  dalam  menghambat pertumbuhan bakteri MRSA.

## Daftar Pustaka
Achmad,  S.  A. (1986). Materi pokok  kimia organik  bahan  alam .  Universitas Terbuka. Jakarta: Depertemen Pendidikan Kebudayaan. Cowan,  M.  M. (1999).  Plant products  as antimicrobial agents. [Versi elektronik]. Clinical  Microbiology Reviews . 12 (4): 504-582. Dalimartha,  S. (2006). Atlas tanaman  Obat Indonesia, Jilid  4. Jakarta: Puspa Swara. Direktorat  Pengawasan  Obat  Tradisional. (2000). Parameter standar  umum ekstrak  tumbuhan  obat . Jakarta: Direktorat Pengawasan Obat Tradisional  Ditjen POM,  Departemen Kesehatan R.I. Emma,  H.  I.  S. (2007).  Keanekaragaman floristik  dan  pemanfaatannya  sebagai tanaman  obat  di  kawasan konservasi ii taman  nasional  bogani  nani  wartabone (Kabupaten  Bolaang  Mongondow Sulawesi  Utara). (Disertasi,  tidak dipublikasikan).  Institut  Pertanian Bogor, Bogor. Harborne,  J.  B. (1987). Metode fitokimia . (Terjemahan  Kosasi  P & Iwang  S). Bandung: ITB. Kee,  J.  L., & Hayes,  E.  R. (1996). Farmakologi pendekatan proses keperawatan . (Terjemahan Peter Anugerah). Jakarta: EGC. Manitto,  P. (1992). Biosintesis produk  alam . (Terjemahan Koensoemardiyah). Semarang: IKIP Semarang Press. Morales, G., Sierra, P., Manolla, A., Parodes, A.,  Loyolla,  I.  A,.  Gallardo,  O., & Porguez, J. (2003). Secondary metabolites  from  four  medicinal  plants from  northern  chile:  Antimicrobial activity and biotoxicity against Artemia salina . J.  Chil.  Chem  Soc .  48  (2):  44-
49.
Neal,  M.  J. (2006). At  a glance  farmakologi medis (5  Ed.). (Terjemahan  Juwalita Surapsari). Jakarta: Erlangga. Ogata,  Y.,  Kasahara,  Y., Mulyadi,.  Agus,.R., Jamaluddin,. Bambang, P., Simanulang, P., & Fauzi, A. (1995). Indeks tumbuh- tumbuhan  obat  di  indonesia (Edisi  II). Jakarta: PT. Eisai Indonesia. Patel,  R.,  Patel.,  A.,  Desai,  S., & Nagee,  A., (2012). Study of secondary metabolites and    antioxidant  properties  of  leaves, stem  and  root  among Hibiscus  rosa- sinensis cultivars. Asian  J.  Exp.  Biol.
Sci 3(4): 719-725. Pallant,  J. (2005). SPSS survival  manual:  A step  by step  guide  to  data  analysis using  spss  for  windows . Australia: Allen and Unwin. Robinson,  T., (1995). Kandungan organik tumbuhan  tinggi . (Terjemahan  Kosasih Padmawinata). Bandung: ITB. Rostinawati,  T. (2009).  Aktivitas antibakteri ekstrak  etanol  bunga  rosella ( Hibiscus sabdariffa L.) terhadap Escherichia coli , Salmonella typhi dan Staphylococcus  aureus dengan metode difusi  agar. Penelitian  Mandiri. Jatinangor: Universitas Padjajaran. Rosyidah,  K.,  Nurmuhaimina,  S.  A.  Komari, N., & Astuti,  M.  D. (2010).  Aktivitas antibakteri  fraksi  saponin  dari  kulit batang  tumbuhan  kasturi ( Mangifera
Jurnal Biologi Edukasi Edisi 14, Volume 7 Nomor 1, Juni 2015, hal 22-28
casturi ). Jurnal  Bioscientiae 7(2):  25- 31. Sarmiento, W. C., Maramba, C. C. Gonzales, & M.  L. (2011).  An in-vitro  study  on the  antibacterial  effect  of  neem ( Azadirachta  indica ) leaf  extract  on methicillin  sensitive  and  methicillin resistant Staphylococcus aureus . PIDSP Journal . 12(1): 40-45. Mooryati  Soedibyo. (1998). Alam  sumber kesehatan: Manfaat  dan  kerugian . Jakarta: Balai Pustaka Stringer,  J.  L. (2006). Konsep dasar farmakologi: Panduan untuk mahasiswa (Edisi  Ke  3) . (Terjemahan Huriawati Hartanto). Jakarta: EGC. Sunatmo,  T.  I. (2007). Eksperimen mikrobiologi  dalam  laboratorium . Jakarta: Ardy Agency. Uddin,  B.,  Hossan.  T.,  Paul.  S.,  Ahmed,  T., Nahar,  T., & Ahmed  S. (2010). Antibacterial  activity  of  the  ethanol extracts  of Hibiscus  rosa-sinensis leaves  and  flowers  against  clinical isolates  of  bacteria. J.  Life  Sci .  22(2): 65-73.
Wattimena,  J.  R,  Sugiarso,  N.  C,  Widianto,
M. B, Sukandar, E. Y, Soemardji, A. A, & Setiabudi, A. R. (1991). Farmakologi dan  terapi  antibiotik .  Yogyakarta: Gadjah Mada University Press. Yin, W. M., Li, O. C., Ahmad, R., & Bhat, R. (2013).  Antioxidant  and  antibacterial activities  of Hibiscus ( Hibiscus  rosa- sinensis L.)  and  Cassia  ( Senna bicapsularis L.)  flower  extracts. J.  of King Saud University–Science . Volume 25, Issue 4, October 2013, Pages 275– 282