Uji  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Metanol  Daun  Kecubung ( Datura metel L.) TERHADAP Bakteri Streptococcus pneumonia dan Klabsiella pneumonia
A. Mu’thi Andy Suryadi 1 , Moh. Adam Mustapa 2 , Faramita Hiola 3 , Sintiya Basiru 4*
1,2,3,4 Jurusan Farmasi, Fakultas Olahraga dan Kesehatan, Universitas Negeri Gorontalo, Gorontalo * E-mail: sintiyabasiru4@gmail.com
Article Info: Received: 10 Juli 2021 in revised form: 18 Juli 2021
Accepted: 29 Agustus 2021 Available Online: 29 Agustus 2021

## ABSTRACT
Infectious disease is a disease caused by microbes, including bacteria. One  of  the  microorganisms  that  often  causes  infectious  disease  is Streptococcus  pneumoniae  and  Klabsiella  pneumoniae.  Based  on empirical  data,  plant  that  has  antimicrobial  potential  is  amethyst leaves (Datura metel L.). This study aims to know the antibacterial activity  and  concertration  of  amethyst  leaves  (Datura  metel  L.) against Streptococcus pneumoniae and Klabsiella pneumonia. This is an experimental study which includes antibacterial activity test, MIC (Minimum  Inhibitor  Concertration)  test,  MFC  (Minimum Fungicidal  Concertration)  test,  and  bacterial  potency  test.  The finding shows that the antibacterial activity test of amethyst leaves (Datura metel L.) methanol extract is able to inhibit bacterial growth of Streptococcus pneumonia at a minimum inhibitor concertration of 15% and an optimum concertration of 50% with an average of 16.33 mm  and  19.30  mm.  Meanwhile,  for  Klabsiella  pneumoniae,  the minimum  inhibitor  concertration  is  20%  and  the  optimum concertration is 50%, with an average of 13.82 mm and 17.73 mm. this is based on the results of One Way Anova data (a <0.01) with a 99% confidance level. Keywords :
Identification Characteritation
Alkaloid
Datura metel L.

## Corresponding Author:
Sintiya Basiru Jurusan Farmasi Fakultas Olahraga dan Kesehatan Universitas Negeri Gorontalo E-mail: sintiyabasiru4@gmail.com
Copyright © 2021  IJPE-UNG
This open access article is distributed under a Creative Commons Attribution (CC-BY-NC-SA) 4.0 International license.
How to cite (APA 6 th Style): Suryadi.A.M.A  Mustapa.M.A.,Hiola.F.,Basiru.S.(2021). Uji  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Metanol  Daun Kecubung  (Datura  metel  L.)  Terhadap  Bakteri  Streptococcus  pneumonia  Dan  Klabsiella  Indonesian  Journal  of Pharmaceutical  (e-Journal),1 (3), 179-189.
Indonesian Journal of Pharmaceutical Education (e-Journal) 2021; 1 (3): 179 – 189 ISSN : 2775- 3670 (electronic) Journal Homepage: http://ejurnal.ung.ac.id/index.php/ijpe/index DOI: 10.37311/ijpe.v1i3.11776

## ABSTRAK
Penyakit infeksi merupakan salah satu penyakit yang disebabkan oleh mikroba diantaranya bakteri.  Salah  satu  mikroorgansime  yang  sering  menyebabkan  penyakit  infeksi  yakni Streptococcus  pneumonia dan Klabsiella  pneumonia. Berdasarkan  data  empiris,  tanaman  yang memiliki potensi antimikroba yaitu daun kecubung ( Datura metel L.). Penelitian ini bertujuan untuk  mengetahui  aktivitas  dan  konsentrasi  antibakteri  daun  kecubung  ( Datura  metel L.) terhadap Streptococcus pneumonia dan Klabsiella pneumonia . Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental  yang  meliputi,  uji  aktivitas  antibakteri,  uji  KHM,  uji  KBM  dan  uji  potensi antibakteri. Hasil penelitian uji aktivitas antibakteri ekstrak metanol daun kecubung ( Datura metel L.) mampu menghambat pertumbuhan bakteri Streptococcus pneumonia pada kosentrasi hambat minimum 15% dan kosentrasi optimum 50% dengan rata-rata 16,33 mm dan 19,30 mm sedangkan Klabsiella pneumonia kosentrasi hambat minimum 20% dan kosentrasi optimum 50% dengan  rata-rata  13,82  mm  dan  rata-rata  17,73  mm.  Hasil  data  One  Way  Anova  (α  <  0,01) dengan tingkat kepercayaan 99%.
Kata Kunci: Kecubung, S.pneumonia , K.pneumonia , Antibakteri

## 1. Pendahuluan
Infeksi  ialah  penyakit  yang  dapat  ditularkan  dari  satu  orang  keorang  lain  atau  dari hewan  kemanusia.    Infeksi  ini  dapat  disebabkan  oleh  masuk  dan  berkembang  biaknya mikroorganisme seperti bakteri, virus, jamur, prion dan protozoa yang masuk ke dalam tubuh sehingga  menyebabkan  kerusakan  organ  [4].  Salah  satu  mikrorganisme  yang  dapat menyebabkan  kematian  tertinggi  didunia  yakni  bakteri Streptococcus  pneumonia dan Klabsiella pneumonia [15]. oleh karena itu pemberian antibakteri merupakan salah satu pilihan yang sangat penting dalam menangani penyakit infeksi yang disebabkan oleh bakteri.
Pemberian antibakteri yang tidak terkontrol menimbulkan masalah dalam pengobatan penyakit  infeksi  yakni  dapat  mendorong  terjadinya  perkembangan  resistensi  terhadap antibakteri  yang  diberikan.  Resistensi  terhadap  bakteri  yang  utamanya  peka  dalam  bahan antibakterial,  diakibatkan  adanya  mutase  kromosom  maupun  pergantian  material  genetic terhadap mikroorganisme [7]. Resistensi bakterial ditinjau dari segi biokimiawi bisa terbentuk melewati mekanisme penurunan permeabilitasan bakterial bagi obat, inaktivasi antimikroba oleh enzim yang diperoleh melalui bakteri, memperbaiki reseptor obat, serta peningkatan sintesa zat yang sifatnya antagonis pada obat [9]. Sehingga diperlukan usaha dalam mengembangkan obat tradisional  berbahan  herbal  yang  dapat  membunuh  bakteri  untuk  menghindari  terjadinya resistensi tersebut.
Salah satu tanaman yang secara empiris digunakan oleh masyarakat sebagai bahan obat yaitu kecubung. Salah satu bagian yang berkhasiat sebagai obat pada tanaman ini yaitu daun, yakni digunakan sebagai antibakteri, antiinflamasi. Efek ini muncul karena diakibatkan adanya kedudukan zat fitokimia misalnya alkaloid, flavonoid, saponin, serta tanin yang dapat bekerja untuk berbagai jenis penyakit [1] . Kecubung  ( Datura  metel L.)  kerap  dikenal  sebagai  salah  satu  tanaman  berefek  negatif yakni efeknya yang bersifat membius,  mabuk atau racun akibat penggunaan yang berlebihan Meskipun  begitu  tanaman  kecubung  di  masyarakat  pedesaan  digunakan  sebagai  obat  asma, dilakukan dengan cara membakar sedikit bagian ujung lintingan daun atau bunga kecubung lalu menghirup asap yang dihasilkan dari proses pembakaran daun atau bunga tanaman kecubung.
Sesuai  dengan  deskripsi  tersebut  serta  pemakaian  empiris  dengan  cara  meluas perawatan  warga  pedesaan  memakai  daun  kecubung  juga  tidak  terdapat  informasi  ilmiah mengenai  percobaan  aktivitasan  antibakteri  tumbuhan  tersebut  pada  Indonesia,  sehingga peneliti  tertarik    melakukan  pengamatan  mengenai  aktivitasan  antibakterial  ekstrak  metanol daun  kecubung  ( Datura  metel L.)  terhadap  bakteri Streptococcus  pneumonia dan Klabsiella pneumonia.
2. Metode Penelitian

## Alat Dan Bahan
Alat  yang  digunakan  pada  penelitian  kali  ini  adalah  Api  bunsen,  Autoklaf,  Batang pengaduk, Cawan petri,Gelas kimia 100 ml (Pyrex IWAKI), Gelas ukur 10 ml, Gelas ukur 100 ml (Pyrex IWAKI), Inkubator, Jarum ose,Kamera digital, Lemari pendingin (kulkas), Mistar, Neraca analitik, Oven, Penangas air, Pinset, Pipet mikro , Rak tabung reaksi, Tabung reaksi, Timbangan digital, V acummrotary evaporator, Wadah maserasi.
Bahan yang digunakan pada penelitian ini adalah tanaman kecubung ( Datura metel L.) yang  diperoleh  dari  kabupaten  Gorontalo  desa  dulamayo,  Media  NutrientAgar  (NA),  Media Nutrient Broth (NB), Reagen mayer, Pereaksi Lieberman-burchard, Pereaksi dragendroff,Metanol,Bakteri  S treptococcus  pneumonia dan Klabsiella  pneumonia ,  Cakram  kertas, Kertas saring, Korek api,Kloramfenikol, Tissue, Spritus, Kapas, Aquades.
Prosedur Penelitian Pembuatan Simplisia Daun kecubung ( Datura metel L.) dikumpulkan terlebih dahulu, setelah dikumpulkan dilakukan  sortasi  basah  dimana  tujuannya  untuk  memisahkan  kotoran-kotoran  atau  bahan- bahan  asing  lainnya.  Kemudian  daun  kecubung  dicuci  untuk  menghilangkan  tanah  atau pengotor  lainnya  yang  melekat  pada  sampel,  lalu  dicuci  dengan  menggunakan  air  mengalir. kemudian dilakukan perajangan untuk mempermudah proses pengeringan, pengepakan serta penggilingan.  Pengeringan  dilakukan  dengan  cara  diangin-anginkan  diudara  yang  terbuka terlindung  dari  sinar  matahari  dimana  tujuannya  untuk  menghilangkan  kadar  air  hingga didapat berat kosntan. Sampel diserbuk menggunakan bleander dan kemudian ditimbang berat sampel.

## Pembuatan Ekstrak
Pembuatan  ekstrak  ini  dilakukan  dilaboratorium  Fitokimia  Farmasi  di  Universitas Negeri Gorontalo. Pada proses sampel di ekstrak dengan menggunakan metode maserasi dengan cara merendam sampel menggunakan pelarut metanol selama 1 x 24 jam.
Sebelum melakukan proses ekstraksi yang dilakukan terlebih dahulu yakni menimbang sampel daun kecubung sebanyak 150 gr, kemudian sampel daun kecubung direndam dengan menggunakan  pelarut  metanol  sebanyak  2  liter  yang  ditempatkan  di  dalam  toples  kaca, usahakan sampel tersebut terendam sempurna kemudian diaduk menggunakan magnetic stirer . Setelah  itu  sampel  didiamkan  selama  24  jam  dan  dengan  sesekali  diaduk.  Kemudian  sampel disaring  menggunakan kain saring  sampai mendapatkan ekstrak cair. Residu yang tertinggal direndam  dengan  pelarut  yang  sama  dalam  waktu  1  x  24  jam  dan  filtrat  di  saring. Rotary evvaporator digunakan  untuk  memekatkan  hasil  filtrat  yang  sudah  di  dapatkan  hingga memperoleh ekstrak metanol kental [11].
Skrining Fitokimia
Dilakukan pengujian skrining fitokimia ekstrak metanol daun kecubung ( Datura metel L.) meliputi uji Alkaloid, Flavonoid, Saponin, Tanin dan Steroid [6].

## Persiapan Uji Aktivitas Antibakteri
Persiapan uji akitivtas antibakteri meliputi sterilisasi alat, pembuatan media nutrien agar (NA) dengan melarutkan media NA bersama aquades hingga tercampur homogen, kemudian dimasukkan kedalam erlenmeyer disumbat menggunakan kapas, kemudian disterilkan dengan autoklaf  [2],  pembuatan  media  nutrien  broth  (NB),  pembuatan  Mc.Farland  0,5%  setelah  itu dibandingkan  suspensi  bakteri  dengan  standar  kekeruhan  dilihat  dengan  menggunakan  latar belakang  kertas  putih,  apabila  suspensi  kurang  keruh  maka  ditambahkan  koloni  dan  apabila lebih keruh perlu ditambahkan dengan NaCI 0,9% [10]. Kekeruhan suspensi mikroba uji diukur dengan  alat  spektrofotometer  UV-Vis  dengan  panjang  gelombang  580  nm  dengan  transmitan 25% [3].  inokulasi bakteri uji digors pada permukaan agar menggunakan jarum ose steril untuk melakukan  peremajaan,  kemudian  diinkubasi  dalam  kondisi  anaerob  selamam  24  jam [8].pembuatan suspensi bakteri, pembuatan larutan uji, pembuatan larutan kontrol. Tahap awal pengujian yaitu uji skrining antimikroba pada ekstrak  metanol daun kecubung menggunakan metode Streak Plate (gores). Hal pertama yang dilakukan yaitu masing-masing ekstrak dicampur
bersamaan dengan DMSO, lalu diaduk hingga larut. Setelah larut, ditambahkan media nutrien agar yang telah dicairkan, dicukupkan hingga volume larutan menjadi 10 mL. Kemudian dituang ke dalam cawan petri, dihomogenkan  hingga rata dan dibiarkan  memadat. Setelah memadat, diambil 1 ose biakan bakteri yang telah disuspensikan dan digoreskan pada media yang telah memadat.  Dilakukan  hal  yang  sama  untuk  kloramfenikol  sebagai  kontrol  positif  dan  DMSO sebagai  kontrol  negatif.  Kemudian  diinkubasi  selama  1  x  24  jam  pada  suhu  37 o C.  Kemudian diamati hasilnya.

## Uji Kadar Hambat Minimum (KHM)
Penentuan kosentrasi hambat minimum dapat dilakukan dengan cara membuat variasi kosentrasi sampel ekstrak  daun kecubung yaitu 1%, 5%, 10%, 15%, 20%, 30%, 40%, dan 50%. Pada uji ini digunakan metode dilusi cair dengan cara menyiapkan beberapa tabung reaksi yang sudah    disterilkan  terlebih  dulu,  untuk  kontrol  negatif  digunakan  larutan  DMSO  dan  untuk larutan kontrol positif digunakan larutan kloramfenikol, kemudian dimasukkan 20 µL suspensi bakteri S treptococcus pneumonia dan Klabsiella pneumonia , kemudian ditambahkan sampai 10 ml Nutrient  Broth  pada  masing-masing    tabung  reaksi,  setelah  itu  larutan  uji  di  vortex. Diinkubasikan  pada  inkubator  dalam  temperature  37 o C  hingga  1  x  24  jam  dan  ditinjau kekeruhan,  perbandingan  menggunakan  kontrol  positif  (Kloramfenikol)  dan  kontrol  negatif (DMSO). Konsentrasi terendah yang tidak menunjukan kejernihan adalah KHM.

## Uji Kadar Bunuh Minimum (KBM)
Hasil  yang  telah  didapatkan  pada  pengujian  Konsentrasi  Hambat  Minimum  (KHM), maka  selanjutnya  dilakukan  uji  untuk  kadar  bunuh  minimum  KBM).  Disiapkan  cawan  petri yang berisi media padat nutrient agar (NA) sebagai tempat kultur bakteri. Selanjutnya dilakukan penggoresan  menggunakan  jarum  ose  steril  pada  masing-masing  kosentrasi  hasil  dari  kadar hambat minimum di atas permukaan media padat. Kemudian media kultur diinkubasi selama 1 x 24 jam pada suhu 37 o C. Diamati kadar bunuh minimum dengan ada tidaknya pertumbuhan koloni bakteri diatas permukaan media padat itulah hasil dari Kadar Bunuh Minimal (KBM).

## Uji Potensi Antibakteri
Pengujian aktivitas antibakteri dilakukan denganmenggunakan metode difusi cakram dan  dilusi  cair.  Tahapan  pertama  yaitu  kertas  cakram  yang  berdiameter  0,5  cm  diambilkan dengan  cara  aseptis memakai    pinset  yang  sudah  disterilisasikan.  Kertas cakram  tercelupkan kedalam masing-masing konsentrasi ekstrak daun kecubung selama ± 30 menit sampai 1 jam, setelah  itu    diletakkan  diatas  permukaan  media  yang  berisi  bakteri  uji,  kontrol  negatif  yang digunakan  DMSO  10%  dan  Kloramfenikol  sebagai  kontrol  positif.  Perlakuan  ini  dilakukan sebanyak 3 kali. Media yang telah diberi perlakuan diinkubasi selama 48 jam pada suhu 37 o C. Aktivitas  antibakteri  ekstrak  daun  kecubung  dilihat  berdasarkan  zona  hambatan  yang diperoleh.  Zona  hambatan  ditinjau  sangat  bening  dibanding  kawasan  sekeklilingnya  serta belum  dihidupi  bakteri.  Zona  hambatannya  terukur  memakai  jangka  sorong  melalui  batasan terluar kertas saring hingga batasan terpanjang serta batasan terpendek kawasan hambatan yang dibentuk  sampai  bisa  didapatkan  jari-jari  zona  hambatan  terpanjang  serta  jari-jari  zona hambatan terpendek.

## Analisis Data
Untuk  mengetahui  perbedaan  yang  bermakna  dari  uji  potensi  pada  ekstrak  metanol daun kecubung (Datura metel L.) sebagai antimikroba digunakan One Way ANOVA pada α= 0,01, dengan taraf kepercayaan 99%.

## 3. Hasil dan Pembahasan

## Rendamen Ekstrak
Berdasarkan hasil rendamen ekstrak (Tabel 1)  menunjukkan hasil % rendamen dari ekstrak daun kecubung, dimana ekstrak daun kecubung dengan berat sampel sebelumnya yaitu 150 gram diekstraksi dengan menggunakan pelarut metanol sebanyak 2 liter menghasilkan ekstrak kental daun kecubung sebanyak 20 gram dengan persen rendamen 13,33 %.
Tabel 1.  Hasil Rendamen Ekstrak Berat Sampel Metanol (L) Berat Ekstrak (gr) Rendamen (%) 150 gram 2 liter 20 gram 13,33 %
Hal ini menunjukkan bahwa proses ekstraksi mengugunakan  pelarut metanol daun  kecubung  ( Datura  metel L.)  berlangsung  baik.  Persentase  rendamen  dapat  dikatakan sempurna jika hasilnya berkisar anatra 10-15% [5].
Uji Penapisan Fitokimia
Pada uji penapisan fitokimia ekstrak metanol daun kecubung ( Datura metel L.) dengan menggunakan metode kualitatif uji warna didapatkan hasil positif alkaloid yang ditandai dengan adanya endapan merah jingga. Senyawa flavonoid yang ditandai dengan warna jingga, senyawa saponin yang ditandai dengan timbulnya busa setinggi 1 cm, senyawa tanin hijau kehitaman dan senyawa steroid ditandai dengan warna hijau kebiruan.
Tabel.2 Hasil Uji Penapisan Fitokimia Senyawa Pereaksi Hasil Keterangan Alkaloid HCL + pereaksi Liberman Bourchard Endapan berwarna coklat sampai hitam Positif Alkaloid Flavonoid Serbuk magnesium + HCL + etanol Jingga kemerahan Positif Flavonoid Saponin Aquadest Berbusa Positif Saponin Steroid/Triterpen Kloroform + asam Asetat Anhidrat + Asam Sulfat pekat Hijau kebiruan Positif Steroid Negatif Triterpen Tanin FeCL 3 Hijau kehitaman Positif Tanin
Uji Aktivitas Antibakteri
Hasil penelitian menunjukkan bahwa, pada media NA yang mengandung ekstrak metanol daun kecubung tidak terdapat pertumbuhan bakteri S treptococcus pneumonia dan Klabsiella pneumonia.
Gambar 1 : Pertumbuhan bakteri Ekstrak Metanol Daun kecubung terhadap bakteri Streptococcus pneumonia
Gambar 2 : Pertumbuhan bakteri Ekstrak Metanol Daun Kecubung terhadap bakteri Klabsiella pneumonia
Gambar   3  : Pertumbuhan bakteri Streptococcus  pneumonia pada kontrol positif (kloramfenikol)
Gambar   4 :   Pertumbuhan bakteri Klabsiella  pneumonia pada kontrol positif (Kloramfenikol)
Gambar   5  : Pertumbuhan bakteri Streptococcus  pneumonia pada kontrol negatif (DMSO)
Gambar   6  : Pertumbuhan bakteri Klabsiella  pneumonia pada kontrol negatif (DMSO)
Uji Kadar Hambat Minimum Tabel 3. Hasil Uji KHM Ekstrak Bakteri Kosentrasi Aktivitas Keterangan S treptococcus pneumonia 0,1 % Keruh Tidak menghambat 1 % Keruh Tidak menghambat 5 % Keruh Tidak menghambat 10 % Tidak keruh Menghambat 15 % Tidak keruh Menghambat 20 % Tidak keruh Menghambat 30 % Tidak keruh Menghambat
Daun
kecubung ( Datura metel L.) 40 % Tidak keruh Menghambat 50 % Tidak keruh Menghambat Klabsiella pneumonia 0,1 % Keruh Tidak menghambat 1 % Keruh Tidak menghambat 5 % Keruh Tidak menghambat 10 % Keruh Tidak menghambat 15 % Tidak keruh Menghambat 20 % Tidak keruh Menghambat 30 % Tidak keruh Menghambat 40 % Tidak keruh Menghambat 50 % Tidak keruh Menghambat Keterangan :
Konsentrasi 0,1%, 1%, 5%, 10%, 15%, 20%, 30%, 40%, 50%, Kontrol positif dan Kontrol negatif (dilihat dari kiri ke kanan)
Gambar 7. Hasil Uji KHM Streptococcus pneumonia
Keterangan : Konsentrasi 0,1%, 1%, 5%, 10%, 15%, 20%, 30%, 40%, 50%, Kontrol positif dan Kontrol negatif (dilihat dari kiri ke kanan)
Gambar 8. Hasil Uji KHM Klabsiella pneumonia
Kadar  hambat  minimum  (KHM)  pada  penelitian  ini  menunjukkan  bahwa  pada kosentrasi  ekstrak  daun  kecubung  ( Datura  metel L.)  0,1%,  1%,  5%  menunjukkan  adanya pertumbuhan  bakteri Streptococcus  pneumonia pada  media  Nutrient  Broth,  sedangkan  pada kosentrasi  10%,  15%,  20%,  30%,  40%  50%  tidak  menunjukkan  adanya  pertumbuhan  bakteri Streptococcus pneumonia pada media Nutrient Broth. Selanjutnya untuk hasil kosentrasi ekstrak daun kecubung ( Datura metel L.) 0,1%, 1%, 5%, 10% menunjukkan adanya pertumbuhan bakteri Klabsiella pneumonia pada media Nutrient Broth, sedangkan pada kosentrasi 15%, 20%, 30%, 40% 50% tidak menunjukkan pertumbuhan bakteri Klabsiella pneumonia pada media Nutrient Broth. Aktivitas  Antibakteri  dibagi  menjadi  4  yakni,  aktivitas  sangat  kuat  jika  nilai  kadar  hambat minimum kurang dari 100 µg/ml, aktivitas antibakteri cukup kuat apabila nilai kadar hambat 100-500 µg/ml, aktivitas antibakteri lemah jika kadar hambat minimum 500-1000 µg/ml [8].
Uji Kadar Bunuh Minimum Tabel 4. Hasil Uji KBM Ekstrak Bakteri Kosentrasi Aktivitas Keterangan
Daun kecubung ( Datura metel
L.) S treptococcus pneumonia 0,1 % Tumbuh Tidak membunuh 1 % Tumbuh Tidak membunuh 5 % Tumbuh Tidak membunuh 10 % Tumbuh Tidak membunuh 15 % Tidak tumbuh Membunuh 20 % Tidak tumbuh Membunuh 30 % Tidak tumbuh Membunuh 40 % Tidak tumbuh Membunuh 50 % Tidak tumbuh Membunuh Klabsiella pneumonia 0,1 % Tumbuh Tidak membunuh 1 % Tumbuh Tidak membunuh 5 % Tumbuh Tidak membunuh 10 % Tumbuh Tidak membunuh 15 % Tumbuh Tidak membunuh 20 % Tidak tumbuh Membunuh 30 % Tidak tumbuh Membunuh 40 % Tidak tumbuh Membunuh 50 % Tidak tumbuh
Membunuh
Gambar 9. Hasil uji KBM Streptococcus pneumonia
Gambar 10. Hasil uji KBM Klabsiella pneumonia Kadar Bunuh Minimum (KBM) ekstrak daun kecubung ( Datura metel L.) pada kosentrasi 0,1%,  1%,  5%,  10%  menunjukkan  adanya  pertumbuhan  bakteri Streptococcus  pneumonia pada media Nutrient Agar, sedangkan pada kosentrasi 15%, 20%, 30%, 40% 50% tidak menunjukkan adanya pertumbuhan bakteri Streptococcus pneumonia pada media Nutrient Agar.
Kadar  Bunuh  Minimum  (KBM)  ekstrak  daun  kecubung  ( Datura  metel L.)  pada konsentrasi  0,1%,  1%,  5%,  10%,  15%  menunjukkan  adanya  pertumbuhan  bakteri Klabsiella pneumonia pada  media  Nutrient  Agar,  sedangkan  pada  kosentrasi  20%,  30%,  40%  50%  tidak menunjukkan pertumbuhan bakteri Klabsiella pneumonia pada media Nutrient Agar. Kemampaun ekstrak metanol daun kecubung ( Datura metel L.) dalam menghambat bakteri diduga karena adanya kandungan  senyawa golongan flavonoid, saponin, tanin,  alkaloid, dan steroid  yang  memiliki  aktivitas  sebagai  antibakteri  pada  ekstrak  tersebut.  Adanya  senyawa alkaloid  menunjukkan  bahwa  ekstrak  metanol  daun  kecubung  ( Datura  metel L.)  memiliki aktivitas antibakteri [12].

## Uji Potensi Antibakteri
Tabel 5. Hasil Uji Potensi Antibakteri Ekstrak Daun Kecubung terhadap bakteri
Streptococcus pneumonia No Perlakuan Diameter Zona Hambatan (mm) Rata-Rata (mm) Ket Replikasi 1 2 3 1. Kontrol Negatif - - - - Tidak ada 2. Kosentrasi 15% 16,06 16,28 16,06 16,13 Kuat 3. Kosentrasi 20% 17,38 18,16 16,54 17,36 Kuat 4. Kosentrasi 30% 18,21 16,82 18,45 17,82 Kuat 5. Kosentrasi 40% 17,98 19,20 19,03 18,73 Kuat 6. Kosentrasi 50% 19,32 18,90 19,68 19,30 Kuat 7. Kontrol Positif 21,67 22,20 22,45 22,15 Sangat Kuat Tabel 6. Hasil Uji Potensi Antibakteri Ekstrak Daun Kecubung terhadap bakteri Klabsiella pneumonia No Perlakuan Diameter Zona Hambatan (mm) Rata-Rata (mm) Ket Replikasi 1 2 3 1. Kontrol Negatif - - - - Tidak ada 2. Kosentrasi 20% 13,09 14,17 14,22 13,82 Kuat 3. Kosentrasi 30% 13,87 14,09 14,52 14,16 Kuat 4. Kosentrasi 40% 15,21 15,84 16,11 15,72 Kuat 5. Kosentrasi 50% 17,46 17,52 18,22 17,73 Kuat 6. Kontrol Positif 21,27 21,34 22,26 21,62 Sangat kuat
Gambar 11. Daya Hambat Ekstrak Daun Kecubung terhadap Streptococcus pneumonia
Gambar 12. Daya Hambat Ekstrak Daun Kecubung terhadap Klabsiella pneumonia
Hasil  uji  zona  hambat  Ekstrak  Daun  Kecubung  ( Datura  metel L.)  terhadap  bakteri Streptococcus pneumonia dapat  dilihat  pada  tabel  5.  dimulai  pada  kosentrasi  15%  dimana  zona hambat yang dihasilkan 16,13 mm sampai pada kosentrasi ekstrak 50% yaitu 19,30 mm, zona hambat yang dihasilkan oleh kontrol positif (kloramfenikol) yaitu rata-rata 22,15 mm dan untuk kontrol negatif (DMSO) yaitu 0 mm dapat dikatakan tidak memiliki daya hambat.
Hasil  uji  zona  hambat  Ekstrak  Daun  Kecubung  ( Datura  metel L.)  terhadap  bakteri Klabsiella pneumonia dapat dilihat pada tabel 6. Dimulai pada kosentrasi 20% dimana zona hambat yang dihasilkan 13,82 mm, sedangkan zona hambat terbesar dihasilkan oleh kosentrasi ekstrak 50%  dengan  zona  hambat  17,73  mm,  zona  hambat  yang  dihasilkan  oleh  kontrol  positif (kloramfenikol) yaitu rata-rata 21,62 mm dan untuk kontrol negatif (DMSO) yaitu 0 mm dapat dikatakan tidak memiliki daya hambat.
Ketentuan diameter zona hambat bakteri yaitu zona hambat diatas 20 mm termasuk daya hambat yang sangat kuat, diameter zona hambat 10-20 mm kategori kuat, diameter zona hambat 5-10 kategori sedang, dan diameter zona hambat dibawah 5 termasuk ategori zona hambat lemah [13].

## Analisis Data
Berdasarkan hasil analisis statistic, kosentrasi ekstrak daun kecubung ( Datura metel L.) berpengaruh terhadap diameter zona hambat pertumbuhan bakteri Streptococcus pneumonia dan Klabsiella  pneumonia .  Hasil  analisis  anova,  diperoleh  nilai  signifikan  lebih  kecil  daripada  0,01 (p<0,01) yang berarti terdapat perbedaan yang nyata atau perbedaan secara bermakna terhadap diameter zona hambat 15%, 20%, 30%, 40% dan 50%. Dimana konsentrasi 50% dinilai kuat dalam menghambat pertumbuhan bakteri Streptococcus pneumonia dan Klabsiella pneumonia.
4. Kesimpulan
Ekstrak Daun Kecubung ( Datura metel L.) memiliki aktivitas dalam menghambat pertumbuhan dari bakteri Streptococcus pneumonia dan Klabsiella pneumonia. Kosentrasi ekstrak daun kecubung ( Datura metel L.) dalam menghambat pertumbuhan  bakteri Streptococcus pneumonia yaitu pada kosentrasi 15% sebesar 16,13 mm, 20% sebesar 17,36 mm, 30% sebesar 17,86 mm,  40%  sebesar  18,73  mm  dan  50%  sebesar  19,30  mm.  Kosentrasi  ekstrak  daun  kecubung ( Datura  metel L.)  dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri Klabsiella  pneumonia yaitu  pada kosentrasi 20% sebesar 13,82 mm,  30%  sebesar  14,16  mm,  40%  sebesar  15,72  mm  dan  50% sebesar 17,73 mm.
Referensi:
[1] Astuti (2009). Sifat Organoleptik Tempe Kedelai yang dibungkus plastic, Daun Pisang, Daun Jati. Karya tulis Ilmiah diterbitkan Universitas Muhammadiyah Surakarta : Surakarta
[2] Aziz. 2010. Metode Penelitian Kesehatan Paradigma Kuantitatif . Health Books  Publishing: Surabaya
[3] Cappuccino, James G. 2009. Manual Laboratorium Mikrobiologi . EGC: Jakarta
[4] Darmadi. 2008. Infeksi Nosokomial Problematika dan Pengendaliannya . Jakarta.
[5] Ditjen POM. (2000). Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat . Cetakan Pertama. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halaman 3-5, 10-11.
[6]             Harborne, H. 1987. Metode Fitokimia. ITB: Bandung
[7]           Herwin dkk. 2018. Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Ampas The Hijau (Camellia sinensis L.) terhadap Bakteri Penyebab Jerawat (Propionibacterium acne dan Staphylococcus epidermidis ) Secara Difusi Agar . Makasar: UMI
[8] Holetz,  F.B.,  G.  L.  Pessini,  N.R.  Sanchez,  D.  Aparicio,  G.  Cortez,  C.V.  Nakamura,  & B.P.D. Filho. 2002.Screening of Some Plants Used in The Brazillian Folk Medicine for The Treatment of Infectious I.Journal of Bioline.
[9] Jawetz et al., 2001. Mikrobiologi Kedokteran Edisi XXII . Jakarta: Penerbit Salemba Madika
[10] Lamapha, Yulia F. Dan Rupilu Novie S.2008. potensi Lengkuas sebagai Antimikroba (Studi In Vitro pada Bakteri Gram Negatif) .
[11] Mould, FL dkk. 2005. In Vitro Microbial Inculum: A Review of its function and properties. Anim Feed Sci Technol. Part 1:31-50. Doi: 10.1016/j.anifeedsci
[12]          Mukhriani,  2011. Ekstraksi  Pemisahan  Senyawa  dan  Identifikasi  Senyawa  Aktif, Jurnal Kesehatan
[13] Robinson,  T.,  1995, Kandungan  Organik  Tumbuhan  Tinggi,  Edisi  IV .  Hal  191-216, Diterjemahkan Oleh Kosasih Padmawinata, ITB., Bandung
[14] Shandar, H.K., B. Kumar, S. Prasher, P. Tiwari, M. Salhan, & P. Sharma. 2011. A Review Of Phytochemistry And Pharmacology Of Flavonoids. Internationale Pharmaceutica Sciencia , Vol. 1
[15]       WHO.  Pneumonia  : The  forgetten  killer  of  children .  2006.  Geneva  :  the  United  Nations Children’s Fund/world Health Organization.