## Efektivitas Pemberian Gel Supernatan Bakteri Asam Laktat Terhadap Luas Luka Insisi pada Tikus Wistar
Olvaria Misfa 1* , Atifa Aliya Nur Rahmah 2 , Eliya Mursyida 3 , Nursal Hasbi 4
1,3 Departemen Mikrobiologi, Fakultas Kedokteran, Universitas Abdurrab, Kota Pekanbaru, Indonesia.
2 Program Studi Pendidikan Dokter, Fakultas Kedokteran, Universitas Abdurrab, Kota Pekanbaru, Indonesia.
4 Departmen Ilmu Bedah, Fakultas Kedokteran, Universitas Abdurrab, Kota Pekanbaru, Indonesia. * E-mail: olvaria.misfa@univrab.ac.id
Article Info: Received: 19  Februari 2024 in revised form: 29 April 2024 Accepted: 21 Mei 2024
Available Online: 1 Juni 2024

## ABSTRACT
Wounds are a disruption of tissue continuity due to physical, thermal,  chemical,  medical  treatments,  and  physiological conditions . In 2014, in the United States there were 17,200,000 hospital  visits  by  outpatients  (57.8%)  and  inpatients  (42.2%) resulting  from  acute  wounds  with  scar  tissue  formation  and post-operative wound infections. Infection by normal flora is one of the factors inhibiting wound healing. Lactic acid bacteria are known to have the ability to heal wounds so its can be used as another alternative in wound treatment. This  research  was  to  analyze  the  effectiveness  of  lactic  acid bacteria  supernatant  gel  on  the  area  of  incision  wounds  in Wistar rats. This study used a randomized posttest only with control  group.  The  samples  used  were  21  Wistar  rats  which were divided into 3 groups randomly (randomization), namely the positive control group (C1) given 10% povidone iodine, the negative control group (C2) given gel base, and the treatment group (P) given bacterial supernatant gel. lactic acid. The mean wound area (mm2) in groups C1, C2, and P on day 3 was 23.79; 24.85; 29.69, on the 7th day it was 8.58; 27.88; 20.01, and the 14th day  is  0.15;  5.64;  0.16.  The  One  Way  ANOVA  and  Kruskal Wallis  tests  did  not  show  significant  differences  between groups with a p value > 0.05. Lactic acid bacteria supernatant gel was able to minimize the incision wound area of Wistar rats. Keywords : Wound healing; Lactid acid bacteria; Supernatant gel

## Corresponding Author:
Olvaria Misfa Jurusan Pendidikan Dokter Fakultas Kedokteran Universitas Abdurrab Kota Pekanbaru Indonesia E-mail: olvaria.misfa@univrab.ac.id
This open access article is distributed under a Creative Commons Attribution (CC-BY-NC-SA) 4.0 International license.
How to cite (APA 6 th Style):
Misfa, O., Nur Rahmah A.A., Mursyida, E., Hasbi, N. (2024). Efektivitas Pemberian Gel Supernatan Bakteri Asam Laktat Terhadap Luas Luka Insisi pada Tikus Wistar. Indonesian Journal of Pharmaceutical (e-Journal), 4 (2), 195-204.
Indonesian Journal of Pharmaceutical Education (e-Journal) 2024; 4(2): 195 –204 ISSN : 2775- 3670 (electronic) Journal Homepage: http://ejurnal.ung.ac.id/index.php/ijpe/index DOI: 10.37311/ijpe.v4i2.26011

## ABSTRAK
Luka merupakan gangguan kontinuitas jaringan tubuh akibat trauma fisik, termal, kimia, dan tindakan medis, Pada tahun 2014, di Amerika Serikat didapatkan 17.200.000 kunjungan rumah sakit  oleh  pasien  rawat  jalan  (57,8%)  dan  rawat  inap  (42,2%)  yang  diakibatkan  luka  akut dengan pembentukan jaringan parut dan infeksi luka pasca operasi. Infeksi oleh flora normal merupakan salah  satu faktor penghambat penyembuhan luka. Terapi luka bertujuan untuk menghilangkan  barier pada  luka  melalui  debridement  dan  menghambat  infeksi  bakteri dengan  antibiotik.  Bakteri  asam  laktat  diketahui  memiliki  kemampuan  dalam  proses penyembuhan luka sehingga dapat dijadikan alternatif lain dalam pengobatan luka. Penelitian ini untuk menganalisis efektivitas pemberian gel supernatan bakteri asam laktat terhadap luas luka insisi pada tikus Wistar. Penelitian ini menggunakan randomized posttest only with control group. Sampel yang digunakan 21 ekor tikus Wistar yang dibagi menjadi 3 kelompok secara acak  (randomisasi)  yaitu  kelompok  kontrol  positif  (C1)  diberikan povidone  iodine 10%, kelompok kontrol negatif (C2) diberikan basis gel, dan kelompok perlakuan (P) diberikan gel supernatan bakteri asam laktat. Rerata luas luka (mm 2 ) kelompok C1, C2, dan P pada hari ke- 3 adalah 23,79; 24,85; 29,69, pada hari ke-7 adalah 8,58; 27,88; 20,01, dan hari ke-14 adalah 0,15; 5,64; 0,16. Pada uji One Way ANOVA dan Kruskal Wallis tidak menunjukkan perbedaan yang bermakna antar kelompok dengan nilai p > 0,05. Gel supernatan bakteri asam laktat mampu memperkecil luas luka insisi pada tikus Wistar.
Kata Kunci: Penyembuhan luka; bakteri asam laktat; gel supernatan

## 1. Pendahuluan
Luka  merupakan  gangguan  terhadap  kontinuitas  jaringan  tubuh  oleh  sebab- sebab fisik, termal, kimia, tindakan medis, dan kondisi fisiologis [1]. Pada tahun 2014, di Amerika Serikat didapatkan 17.200.000 kunjungan rumah sakit oleh pasien rawat jalan (57,8%)  dan  rawat  inap  (42,2%)  yang  diakibatkan  oleh  luka  akut  yang  melingkupi pembentukan scar dan fibrosis serta infeksi luka pasca operasi. Berdasarkan Central of Disease Control (CDC) pada tahun 2019, terdapat peningkatan sekitar 1.000.000 pasien rawat inap tambahan setiap tahunnya akibat infeksi luka pasca operasi [2].
Proses penyembuhan luka melalui beberapa fase antara lain yaitu hemostasis, inflamasi,  proliferasi,  dan  remodeling.  Jika  salah  satu  fase  penyembuhan  terutama angiogenesis  mengalami  kegagalan  maka  dapat  mengakibatkan  luka  gagal  sembuh sepenuhnya, bahkan luka kronis [3].
Proses penyembuhan luka dapat dihambat salah satunya akibat adanya infeksi. Infeksi  terjadi akibat  bakteri  mampu  dengan  cepat  berkolonisasi  pada  luka. Mikroba yang  mengkolonisasi  luka  biasanya  merupakan  flora  normal  atau  bisa  saja  akibat berkontak  dengan benda-benda  yang  terkontaminasi  bakteri.  Adanya  biofilm bakteri juga menjadi penyebab gagalnya penyembuhan luka dengan mengganggu kestabilan protein  penyambung  sel  yang  penting  dalam  pembentukan  barier  selama  proses penutupan luka [2].
Pengobatan  infeksi  pada  luka lokal  menggunakan  cairan  pembersih  luka  dan antimikroba  topikal  dapat  mempercepat  penyembuhan  luka  [4].  Agen topikal  dalam perawatan luka di antaranya adalah larutan salin steril dan hidrogel yang mengandung povidone  iodine,  cadexomer  iodine,  asam  hipoklorit,  dan  kolagenase.  Selain  itu,  ada pula  agen  kortikosteroid  sebagai  antiinflamasi  seperti  triamsinolon  asetat  dan  agen antimikroba topikal seperti nano gel silver. Namun, obat-obatan tersebut memiliki efek samping  terhadap  tubuh,  misalnya  penggunaan  antibiotik  yang  tidak  diaplikasikan dengan  benar  dapat  meningkatkan  risiko  resistensi  dan  memperlambat  proses
penyembuhan  luka.  Penggunaan  nano  gel  silver  secara  jangka  panjang  juga  dapat bersifat  toksik  terhadap  tubuh  sementara  itu,  kandungan  dari  povidone  iodine  10% dapat menimbulkan iritasi pada luka [1,5].
Selain penggunaan obat-obatan antimikroba topikal, saat ini bakteri asam laktat (BAL) maupun probiotik diketahui memiliki kemampuan dalam proses penyembuhan luka sehingga dapat dijadikan alternatif lain dalam pengobatan luka [5,6] . Bakteri ini mampu  menghasilkan  asam  laktat  yang  dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri patogen dan dapat berperan sebagai antiinflamasi dengan menginduksi interleukin-10 (IL-10) serta tumor growth factor- β (TGF - β) sehingga mampu mempercepat regenerasi serta pemulihan sel yang rusak [7].
Berdasarkan penelitian sebelumnya oleh Zhao, et al (2021) telah menunjukkan aplikasi secara langsung Lactoccus lactis yang merupakan salah satu bakteri sama laktat terhadap  luka  meningkatkan  penyembuhan  luka  sekaligus  meningkatkan  kecepatan kontraksi, formasi epitel, dan maturasi luka [5]. Selain itu, menurut penelitian oleh Id, et al (2022) aplikasi supernatan L. lactis mampu meningkatkan penutupan, kontraksi, dan  inisiasi  formasi  jaringan  neo-dermal  luka  lewat  peningkatan  proliferasi  endotel, fibroblas, serta keratinosit diikuti stimulasi angiogenesis, granulasi dan epitelisasi [6].

## 2.  Metode
Penelitian  ini  adalah  penelitian  eksperimental  murni  dengan  rancangan penelitian randomized posttest only with control group design menggunakan hewan coba Rattus novergicus sebagai objek penelitian.
Alat  yang  digunakan  pada  penelitian  ini  adalah  tabung  reaksi,  beaker  glass, erlenmeyer,  cawan  petri,  pipet, autoclave ,  bunsen,  korek  api,  lumpang,  timbangan, tabung reaksi, mikroskop, spektrofotometer UV-Vis, sentrifus, rak tabung, kaca objek, marker/label,  inkubator,  pisau  bedah,  mesin  cukur,  penggaris,  aplikasi  ImageJ, kandang, tempat makanan, dan botol berpipet.
Bahan yang digunakan adalah Isolat BAL, Man Rogosa Sharpe Agar (MRSA), Man Rogosa  Sharpe  Broth (MRSB), povidone  iodine 10%,  alkohol  70%,  reagen  warna  Gram, minyak imersi, Carbopol 940, metilparaben, propilen glikol, TEA, aquadest , dan eter. Bakteri  asam  laktat  (BAL)  diremajakan  pada  medium  MRSA  dengan  metode  streak kuadran, lalu diinkubasi selama 24-48 jam pada suhu 37 o C. Selanjutnya dilakukan uji pewarnaan Gram untuk mengetahui bentuk dan warna sel, kemudian akan digunakan untuk uji selanjutnya [8].
Sebanyak 1 ose BAL diletakkan di atas kaca objek lalu difiksasi dan dilakukan pewarnaan  Gram  sesuai  dengan  prosedur  Cappuccino  dan  Welsh  (2019)[9]. Pengamatan  sel  bakteri  menggunakan  mikroskop  pembesaran  100x  yang  ditetesi minyak imersi. Hasil BAL ditunjukkan dengan bentuk sel kokus berwarna ungu [10].
BAL dikultur selama 24 jam pada suhu 37 o C dalam 25mL medium MRSB. Setelah 18-24 jam diamati menggunakan spektrofotometri UV-Vis dengan optical density (OD) 600nm  hingga  mencapai  1  x  10 9 CFU/mL,  yang  mana  pada  BAL  1  OD600  =  1  x  10 9 CFU/mL.  Selanjutnya  disentrifugasi  selama  10  menit  dengan  kecepatan  10.000rpm untuk mendapatkan supernatan bebas sel [11,12,13].
Sediaan gel dibuat sebanyak 50g gel supernatan BAL untuk kelompok perlakuan dan 50g basis gel untuk kelompok kontrol negatif. Pembuatan basis gel diawali dengan menimbang bahan yang diperlukan yaitu Carbopol 940, metilparaben, propilen glikol, TEA, lalu menyiapkan aquadest (tabel 1).
Misfa et al., 2024; Indonesian Journal of Pharmaceutical Education (e-Journal); 4(2): 195-204
Tabel 1. Formula Gel
Bahan Formula Gel Supernatan BAL Basis Gel Supernatan BAL 25mL - - Carbopol 940 5% 5% - TEA 3% 3% - Propilen glikol 15% 15% - Metilparaben 0,2% 0,2% - Aquadest 25mL 50mL - Povidone iodine 10% - - 2 tetes
Sebanyak  21  ekor  tikus Wistar  jantan  berumur  2-3  bulan  dengan  berat badan berkisar  150-250g  diaklimatisasi  selama  7  hari  di  dalam  kandang.  Kemudian  rambut tikus  dicukur  pada  bagian  punggung  dan  didiamkan  selama  24  jam  lalu  dilakukan pembiusan dengan eter pada tiap tikus agar tikus-tikus tersebut tidak terlalu merasakan sakit saat proses pembuatan luka [11,14].
Bagian  punggungnnya  seluas  3cm  x  2,5cm,  kemudian  dilakukan  pembiusan dengan eter dan setelah itu dilakukan insisi dari arah distal ke kaudal menggunakan pisau  bedah  sepanjang  2cm  dengan  kedalaman  0,25cm.  Pisau  bedah  dipegang menggunakan tangan kanan dengan membentuk sudut 30-40 o dari kulit [15].
Selanjutnya,  tikus  Wistar  secara  acak  dibagi  menjadi  empat  kelompok  yang masing-masing  berisi  6 ekor  tikus,  yaitu  kelompok  kontrol  positif  diberikan povidone iodine 10%  (C1),  kelompok  kontrol  negatif  diberikan  basis  gel  (C2),  dan  kelompok perlakuan dioleskan gel supernatan BAL (P) yang tiap kelompok diberikan dosis dua kali sehari pada pagi dan sore menggunakan cotton bud dengan sekali oles [16].
Perubahan  yang  dinilai  adalah  luas  luka  pada  hari  ke  3,  7,  dan  14  setelah perlakuan [17]. Perhitungan waktu dimulai sejak pemberian gel supernatan BAL hari pertama  setelah  tikus  dilukai.  Ukuran  luka  dinilai  dengan  mengukur  luas  luka menggunakan ImageJ.
Setelah  data  dari  luas  luka  pada  hari  ke-14  terkumpul,  data  hasil  penelitian diolah  dalam  bentuk  grafik  dan  tabel.  Dilakukan  uji  normalitas  data  dilakukan  uji normalitas menggunakan Saphiro Wilk . Bila data terdistribusi normal maka dilakukan uji One  Way  ANOVA untuk  melihat  adanya  perbedaan  luas  luka  pada  keempat kelompok perlakuan. Pada data yang sebarannya tidak normal dan varians data tidak homogen meskipun sudah ditransformasikan, maka digunakan uji Kruskal Wallis untuk melihat adanya perbedaan luas luka pada ketiga kelompok perlakuan.

## 3.  Hasil dan Pembahasan
Hasil penelitian ini didapatkan dari penelitian yang dilakukan di laboratorium Mikrobiologi  dan  Parasitologi,  laboratorium  Farmasetika,  dan  laboratorium Animal House di  Universitas  Abdurrab,  Pekanbaru.  Analisis  univariat  dilakukan  untuk menganalisis  karakteristik  dari  setiap  variabel  penelitian.  Hasil  analisis  univariat terhadap kelompok kontrol dan kelompok perlakuan didapatkan bahwa luas luka insisi mengalami perbedaan rerata luas luka.
Tabel 2. Analisis deskriptif data jumlah rerata luas luka pada hari ke-3
Kelompok N Min (mm 2 ) Max (mm 2 ) Rerata  ± SD C1 6 12.84 31,57 23,79 ±6,92 C2 6 8,57 44,91 24,85 ±16,62 P 6 13,91 48,47 29,69 ±14,29
Berdasarkan tabel 2 di atas menunjukkan bahwa jumlah rerata luas luka terkecil oleh  kelompok  kontrol  positif  yang  diberikan povidone  iodine 10%,    sedangkan  rerata tertinggi adalah kelompok perlakuan dengan gel supernatan BAL.
Tabel 3. Analisis deskriptif data jumlah rerata luas luka pada hari ke-7 Kelompok N Min (mm 2 ) Max (mm 2 ) Rerata  ± SD C1 6 4,11 14.50 8,58 ±4,50 C2 6 8,08 54,34 27,88 ±16,63 P 6 2,52 41,64 20,01 ±15,98
Pada hari ke-7 (tabel  3), jumlah rerata terendah oleh kelompok kontrol positif yang diberikan povidone iodine 10%, sedangkan rerata tertinggi adalah kelompok kontrol negatif yang diberikan basis gel.
Tabel 4. Analisis deskriptif data jumlah rerata luas luka pada hari ke-14 Kelompok N Min (mm 2 ) Max (mm 2 ) Rerata  ± SD C1 6 0,00 0,64 0,15 ±0,26 C2 6 0,00 18,52 5,64 ±8,57 P 6 0,00 0,58 0,16 ±0,23
Pada  hari  ke-14  (tabel  4)  menunjukkan  bahwa  jumlah  rerata  terendah  oleh kelompok kontrol positif yang diberikan povidone iodine 10%, sedangkan rerata tertinggi adalah  kelompok  kontrol  negatif  yang  diberikan  basis  gel. Berikut adalah gambar luas luka insisi setelah diberi gel supernatant BAL pada hari ke 3, ke 7, dan ke 14.
Gambar 1. Luka Insisi Kelompok Gel Supernatan BAL pada hari ke-3 (a), ke-7 (b), dan ke-14 (c).
Hasil uji normalitas luas luka tikus pada hari ke-3 terdistribusi normal dengan hasil p > 0,05, lalu pada hari ke-7 awalnya data tidak terdistribusi normal, namun setelah ditransformasikan data dapat terdistribusi normal dengan hasil p > 0,05, dan pada hari ke-14  data  tidak  terdistribusi  normal  walaupun  data  sudah  ditransformasikan  yang
a b c
Misfa et al., 2024; Indonesian Journal of Pharmaceutical Education (e-Journal); 4(2): 195-204
mana hasil p < 0,05. Saat uji homogenitas didapatkan hasil yang homogen pada hari ke- 3 dan  ke-7 yang ditunjukkan dengan p > 0,05, sedangkan pada hari  ke-14 data tidak homogen dimana hasil yang didapatkan adalah p < 0,05. Bagi data yang terdistribusi normal dan homogen akan dilanjutkan dengan uji One Way ANOVA , sedangkan data yang tidak terdistribusi normal akan dilanjutkan dengan uji Kruskal Wallis .
Tabel 5. Hasil analisis uji One Way ANOVA pada hari ke-3 dan ke-7 Luas Luka P value Hari ke-3 0,712 Hari ke-7 0,076
Seperti  yang  terlihat  pada  tabel  5  di  atas  tidak  terdapat  perbedaan  yang bermakna antara kelompok kontrol dengan kelompok perlakuan yang ditandai dengan nilai p > 0,05.
Tabel 6. Hasil analisis uji Kruskal Wallis pada hari ke-14 Luas Luka P value Hari ke-14 0,319
Berdasarkan  hasil uji Kruskal Wallis tidak  terdapat  perbedaan  yang  bermakna antara kelompok kontrol dengan kelompok perlakuan yang ditandai dengan nilai p > 0,05.
Berdasarkan  hasil  penelitian,  pada  peremajaan  isolat  BAL  yang  dilakukan menggunakan  medium  MRSA  setelah  masa  inkubasi  selama  48  jam  didapatkan pertumbuhan koloni berbentuk sirkular kecil berwarna putih pada media tersebut. Hal ini sesuai dengan Booney et al., (2015) yang menyatakan bahwa pertumbuhan koloni akan menghasilkan koloni kecil translusen hingga keputihan yang sirkular, halus, dan utuh dalam waktu inkubasi selama satu hingga dua hari ketika dikultur [18].
Pada uji pewarnaan Gram, BAL pada penelitian ini menunjukkan bentuk ovoid dan berwarna ungu yang menandakan bakteri tersebut merupakan bakteri Gram positif (gambar 2). Menurut Booney et al., (2015) BAL dapat merupakan Gram positif, fakultatif anaerob,  tidak  motil,  tidak  berspora,  homofermentatif,  selnya  berbentuk  kokus  atau ovoid, dapat ditemukan secara tunggal, berpasangan, atau berantai, tidak β -hemolitik, dan katalase negatif [18]. Bakteri Gram positif merupakan bakteri yang dinding selnya memiliki peptidoglikan tebal dan menyerap kristal violet dengan baik sehingga akan tampak berwarna ungu ketika dilakukan uji pewarnaan Gram [9].
Gambar 2 . Pewarnaan Gram dari Bakteri Asam Laktat
Supernatan yang disentrifugasi berasal dari bakteri  asam laktat yang dikultur pada  medium  MRSB  yang  kekeruhannya  telah  mencapai  1  OD600  ketika  diukur menggunakan spektrofotometer UV- Vis yang mana menurut Zahirović et al., (2022) [13] 1 OD600 = 1 x 109 CFU/mL setelah dilakukannya pengenceran serial terhadap BAL. Proses  penyembuhan  luka  terdiri  dari  fase  penyembuhan  yang  saling berkesinambungan  yakni  hemostasis,  inflamasi,  proliferasi,  dan  remodeling  [3]. Penyembuhan  luka  pada  penelitian  ini  didasarkan  pada  pengecilan  luas  luka  insisi tikus. Pengukuran penyembuhan luka dilakukan pada hari ke-3, ke-7, dan hari ke-14 terhadap kelompok kontrol positif ( povidone iodine 10%), kelompok kontrol negatif (basis gel),  dan  kelompok  perlakuan  (gel  supernatan  BAL).  Berdasarkan  hasil  analisis univariat pada tiap kelompok tikus menunjukkan bahwa jumlah rerata luas luka luka insisi mengalami pengecilan baik pada hari ke-3, hari ke-7, maupun hari ke-14.
Pada hari ke-3 rerata luas luka insisi yang paling cepat mengalami pengecilan adalah kelompok yang diberikan povidone iodine 10%. Menurut Bigliardi et al., (2017), povidone  iodine 10%  memiliki  aktivitas  antibakteri  dengan  mengoksidasi  nukleotida asam lemak dan asam amino pada membran sel bakteri, selain itu enzim sitosolik yang terlibat  dalam  rantai  respirasi  sel  yang  menyebabkan  sel  bakteri  terdenaturasi  dan ternonaktifkan [19]. Selain aktivitas  antibakteri  yang membantu mempercepat proses inflamasi, povidone iodine 10% juga memiliki aktivitas antiinflamasi dengan menginhibisi mediator inflamasi seperti TNF- α dan β -galaktosidase sekaligus meningkatkan sitokin proinflamasi yang dihasilkan oleh monosit, limfosit T, dan makrofag. Rerata luas luka insisi  lebih kecil pada kelompok basis gel dibandingkan kelompok gel supernatan L. lactis. Kelompok perlakuan gel supernatan BAL memiliki aktivitas antibakteri karena mengandung  asam  laktat  dan  bakteriosin  nisin  Z,  serta  aktivitas  antiinflamasi[5,20]. Berdasarkan  penelitian  oleh  Zhao  et  al.,  (2021),  asam  laktat  tidak  hanya  mencegah pertumbuhan bakteri patogen dengan menurunkan pH, tetapi juga bertindak sebagai
molekul pensinyalan yang menginduksi polarisasi dari makrofag M1 menjadi M2 yang pro-perbaikan [5]. Menurut Saravanan et al., (2023) nisin Z dapat memodulasi respons imun  non-spesifik  dengan  menginduksi  sintesis  kemokin  dan  menekan  sitokin proinflamasi [20]. Sejalan dengan penelitian oleh Zurita-Turk et al., (2020) supernatan Lactococcus lactis yang merupakan BAL mampu meningkatkan produksi IL-10 sekaligus menurunkan produksi sitokin-sitokin proinflamasi [21]. Selain itu, metilparaben pada basis gel kelompok kontrol negatif juga memiliki kemampuan antibakteri. Metilparaben memiliki aktivitas antimikroba pada spektrum yang luas [22].
Pada pengukuran hari ke-7, rerata luas luka insisi terkecil adalah pada kelompok perlakuan povidone  iodine 10%.  Seperti  yang  terdapat  pada  literatur  Bigliardi  et  al., (2017)[19], povidone  iodine 10%  mampu  membantu  penyembuhan  luka  lewat  TGF- β sehingga meningkatkan granulasi dan neovaskularisasi. Rerata luas luka insisi terkecil berikutnya diikuti oleh kelompok perlakuan gel BAL, dan terakhir oleh kelompok basis gel. Berdasarkan penelitian oleh Lu et al., (2021), supernatan L. lactis mampu membantu proses  penyembuhan  luka  dan  meningkatkan  angiogenesis  [23].  Rerata  luas  luka  C2 pada  hari  ke-7  mengalami  peningkatan  dan  luas  luka  pada  beberapa  ekor  tikus mengalami  pembesaran.  Menurut  Bakar  et  al.,  (2013)[24]  luka  tikus  mengalami pembesaran  pada  hari  ke-7  dikarenakan  inflamasi,  lalu  berdasarkan  Giusto  et  al., (2017)[25], terjadinya pembesaran area luka dapat diakibatkan oleh tekanan gravitasi yang melebarkan luka dari garis tengah ke tepi abaksial. Pada penelitian oleh Cai et al., (2022)[26],  pelebaran  luka  terjadi  akibat  kontraksi  muskulus  dan  infliksi  dari  luka terhadap kulit di sekitarnya.
Pada pengukuran hari  ke-14, rerata luas luka insisi terkecil merupakan rerata dari  kelompok  perlakuan povidone  iodine 10%,  diikuti  oleh  kelompok  perlakuan  gel supernatan BAL, dan kelompok basis gel, Apabila diperhatikan rerata luas luka masing- masing kelompok secara keseluruhan maka dapat diketahui bahwa penyembuhan luka pada  kelompok  povidone  iodine  10%  terjadi  lebih  cepat  diikuti  oleh  kelompok  gel supernatan  BAL  dan  kelompok  basis  gel.  Pada  penelitian  ini  didapatkan  bahwa  gel supernatan  BAL  memiliki  kemampuan  mengecilkan  luas  luka  yang  diketahui  dari rerata luas luka yang mengecil dari hari ke-3 (29,69mm2), hari ke-7 (20,01mm2), dan hari ke-14 (0,16mm2).

## 4.  Kesimpulan
Pemberian  gel  supernatan  BAL  dapat  membantu  dalam    penyembuhan  luka dilihat  dari  luas  luka  yang  mengecil  pada  pengukuran  hari  ke-3,  ke-7,  dan  ke-14. Penyembuhan luka pada kelompok povidone iodine 10% terjadi lebih cepat diikuti oleh kelompok  gel  supernatan  BAL,  diikuti  oleh  kelompok  basis  gel.  Tidak  terdapat perbedaan yang bermakna antara kelompok perlakuan yang diberi gel supernatan BAL dengan kelompok kontrol pada hari ke-3, ke-7, dan ke-14

## Ucapan Terima Kasih
Terima  kasih  kepada  Universitas  Abdurrab  atas  segala  dukungannya  pada penelitian ini dan semua pihak yang telah membantu dalam jalannya penelitian ini.

## Referensi
[1] Nugroho  AA,  Adianto  C,  Patria  Y.  (2020)  Nano-Androcerum.  Inovasi  Wound Healing Gel dari Nanopartikel Daun Binahong dan Kayu Manis pada Luka Kronis. B I M F I. 7(1), 26 – 42.
[2]   Sen  CK.  (2021)  Human  Wound  and  Its  Burden , Updated  2020  Compendium  of Estimates. Adv Wound Care . 5(9), 281 – 292.
[3]   Singh  S,  Young  A,  McNaught  CE.  (2017) The  physiology  of  wound  healing .  Surg (United Kingdom) [Internet]. 35(9), 473-487. Available from:
http://dx.doi.org/10.1016/j.mpsur.2017.06.004.
[4]   Wintoko R, Dwi A, Yadika N. (2020) Manajemen Terkini Perawatan Luka Update Wound Care Management. JK Unila ( e-Journal ). 4, 183 – 189.
[5]   Zhao X, Li S, Ding J, Wei J, Tian P, Wei H. (2021) Combination of an engineered Lactococcus lactis expressing CXCL12 with light-emitting diode yellow light as a treatment for scalded skin in mice. Microb Technol (e-Journal) . 14, 2090 – 100.
[6]   Id  JK,  Mierau  I,  Wirth  T,  Samaranayake  H,  Smith  W.  (2022)  Four  in  one Combination  therapy  using  live  Lactococcus  lactis  expressing  three  therapeutic proteins for the treatment of chronic non- healing wounds. PLoS One . 1 – 26.
[7]   Ashraf R, Vasiljevic T, Day SL, Smith SC, Donkor ON. (2013)  Lactic acid bacteria and probiotic organisms induce different cytokine profile and regulatory T cells mechanisms. J Funct Foods [Internet]. 1-15 Available from: http://dx.doi.org/10.1016/j.jff.2013.11.006.
[8]   Hasan  AEZ,  Artika  IM,  Abidin  S.  (2016)  Produksi  Asam  Laktat  dan  Pola Pertumbuhan  Bakteri  Asam  Laktat  dengan  Pemberian  Dosis  Rendah  Propolis Trigona spp asal Pandeglang Indonesia. Curr Biochem . 1(3), 126 – 135.
[9]   Cappuccino JG, Welsh C. (2019) Microbiology : a Laboratory Manual. Student. New York: Pearson.
[10]  Hutkins RW. (2019) Microbiology and Technology of Fermented Foods. 2nd ed. USA: Wiley Blackwell.
[11]  Sinha A, Sagar S, Madhumathy M, Osborne WJ. (2019) Probiotic bacteria in wound healing; an in-vivo study. Iran J Biotechnol . 17(4), 11 – 15.
[12]  Dubey AK, Podia M, Priyanka, Raut S, Singh S, Pinnaka AK, et al. (2021) Insight Into  the  Beneficial  Role  of  Lactiplantibacillus  plantarum  Supernatant  Against Bacterial  Infections,  Oxidative  Stress,  and  Wound  Healing  in  A549  Cells  and BALB/c Mice. Front Pharmacol . 12(11), 1 – 14.
[13] Zahirović  A, Plavec  TV,  Berlec  A. (2022)  Dual  Functionalized  Lactococcus  lactis Shows  Tumor  Antigen  Targeting  and  Cytokine  Binding  in  Vitro. Front  Bioeng Biotechnol . 10(1), 1 – 17.
[14]  Fuadi MI, Elfiah U, Misnawi. (2015) Jumlah Fibroblas pada Luka Bakar Derajat II pada  Tikus  dengan  Pemberian  Gel  Ekstrak  Etanol  Biji  Kakao  dan  Silver Sulfadiazine  (  The  Total  Fibroblast  on  the  Second  Degree  Burns  of  Rats  after Treatment using Ethanolic Extract of Cocoa Beans ). Pustaka Kesehatan . 3(2),244 – 248.
[15]  Misfa O, Yuniati R, Prajoko YW. (2020) Effectiveness of Spirulina platensis Extract on Wound Area and TNF- α Levels on Blood : Experimental Studies In Wistar Rats Made  Artificially  by  Vulnus  Scissum  and  Infected  by  Staphylococcus  aureus.
Indonesian Journal Environmental Management and Sustain (e-Journal) . 4, 55 – 58.
[16]  Nasution  MFW,  Yenita.  (2021)  Uji  Efektivitas  Madu  Dibandingkan  dengan Povidone Iodine terhadap Penyembuhan Luka Sayat pada Mencit (Mus Musculus). JIMKI (e-Journal) . 8(3), 47 – 53.
[17]  Barzegari AA, Hashemzaei M, Alihemmati A, Soltani S, Naseri B. (2018) Effects of Lactobacillus rhamnosus (ATCC 7469) ointment on second-degree burn wound in Wistar rat. J Bas Res Med Sci (e-Journal) . 5(1), 1 – 9.
[18]  Booney DR, Castenholz RW, Garrity GM. (2015) Lactococcus. Vol. 3. New York: Springer. 1 – 21.
[19]  Bigliardi  PL,  Abdul  S,  Alsagoff  L,  El-kafrawi  HY,  Pyon  K,  Tse  C,  et  al.  (2017) Povidone iodine in wound healing: A review of current concepts and practices . Int J Surg [Internet]. Available from: http://dx.doi.org/10.1016/j.ijsu.2017.06.073.
[20]  Saravanan  P,  Nanditaa  PR,  Kesav  B,  Singh  R,  Rupachandra  KSS.  (2023) Anti ‑ inflammatory and wound healing properties of lactic acid bacteria and its peptides . Folia Microbiol (Praha) [Internet]. Available from: https://doi.org/10.1007/s12223-022- 01030-y.
[21]  Zurita-Turk M, Mendes Souza B, Prósperi De Castro C, Bastos Pereira V, Pecini Da Cunha V, Melo Preisser T, et al. (2020) Attenuation of intestinal inflammation in IL- 10 deficient mice by a plasmid carrying Lactococcus lactis strain. BMC Biotechnol (e- Journal) . 20(1), 1 – 12.
[22]  Sheskey PJ, Cook WG, Cable CG. (2017) Handbook of Pharmaceutical Excipients. 8th ed. Washington DC: Pharmaceutical Press; 2017.
[23]  Lu  Y,  Li  H,  Wang  J,  Yao  M,  Peng  Y,  Liu  T,  et  al.  (2021)  Engineering  Bacteria- Activated Multifunctionalized Hydrogel for Promoting Diabetic Wound Healing. vol. 31, Advanced Functional Materials.
[24]  Bakar A, Hilmi M, Halim AS, Jaafar H, Asiah AB, Hassan A. (2013) Chitosan Dermal Substitute and Chitosan Skin Substitute Contribute to Accelerated Full-Thickness Wound Healing  in  Irradiated  Rats .  Biomed  Res  Int  [Internet].  Available  from: http://dx.doi.org/10.1155/2013/795458.
[25]  Giusto G, Vercelli C, Comino F, Caramello V, Tursi M, Gandini M. (2017) A New, Easy-to-make  Pectin-Honey  Hydrogel  Enhances  Wound  Healing  in  Rats. BMC Complement Altern Med . 17(266), 1 – 7.
[26]  Cai  EZ,  Ang  CH,  Raju  A,  Tan  KB,  Chor  E,  Hing  H,  et  al.  (2022)  Creation  of Consistent Burn Wounds : A Rat Model. Arch Plast Surg. 41, 317 – 324.
[27]  Lu YF, J Deng JW, Luo GX. (2020 ) Effects and mechanism of Lactococcus lactis thermo- sensitive hydrogel on the wound healing of full-thickness skin defects in diabetic mice . Chin J Burn [Internet]. 20(2), 1-23 Available from: https://www.yiigle.com/LinkIn.do?linkin_type=DOI&DOI=10.3760%2Fcma.j.cn 501120-20201004-00427.