Wardhani et al. MKH (2020). 1-10 DOI: 10.20473/mkh.v31i1.2020.1-10
Received: 17-07-2019, Accepted: 26-10-2019, Published online: 29-01-2020 Available at https://e-journal.unair.ac.id/MKH/index
Pengaruh Endosulfan terhadap Perubahan Histopatologi Hepar Mencit ( Mus musculus )
Effect Endosulfan on Histopathological of Liver Mice ( Mus musculus )
Wardhani, H.C.P 1* , Widiyatno, T. V. 1 , Suwanti, L.T 2,3
1 Departemen Patologi. Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Airlangga, 2 Departemen Parasitologi, Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Airlangga, 3 Kelompok Studi Toxoplamosis Institute of Tropical Disease Universitas Airlangga *email: hanamoci@gmail.com

## ABSTRAK
Organ  yang  paling  banyak  terkontaminasi  oleh  paparan  adalah  hati,  karena fungsinya  sebagai  adetoksifikator.  Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui perubahan  histopatologi  hati  mencit  ( Mus  musculus )  akibat  Endosulfan.  Hewan  percobaan yaitu  20  ekor  mencit  jantan  dengan  berat  badan  20  gram.  Paparan  per-oral  menggunakan Endosulfanon  dengan  dosis  tunggal  setiap  perlakuan.  Setelah  7  hari  adaptasi,  perlakuan kelompok  pada  hari  kedelapan  sebanyak  1cc  per  oral  dengan  dosis  sebagai  berikut:  P1 6,25mg/kg  berat  badan/1cc/oral,  P2  12,5mg/kg  berat  badan/1cc/oral  dan  P3  25mg/kg berat  badan/1cc/oral.  Pada  hari  kesepuluh  dilakukan  nekropsi  untuk  pengambilan  hati mencit dan pembuatan mikro slide. Penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Lengkap dengan  undian.  Sel  hati  yang  mengalami  inflamasi,  degenerasi,  dan  nekrosis  dihitung dengan  sistem  skoring.  Hasil  penilaian  dianalisis  oleh  Kruska-Wallis.  Jika  hasil menunjukkan  P  <0,05  (berbeda  nyata)  maka  dilanjutkan  Mann-Whitney.  Hasil  penelitian menunjukkan  bahwa  Endosulfan  berpengaruh  terhadap  perubahan  histopatologi  hati mencit. Dosis tertinggi 25mg/kg berat badan dapat menyebabkan keracunan dan kematian. Dosis  terendah  6,25mg/kg  berat  badan  dapat  menyebabkan  inflamasi,  degenerasi,  dan nekrosis  secara  histopatologi  pada  hati  mencit.  Dosis  yang  lebih  tinggi  diberikan  untuk mendapatkan tingkatan yang semakin parah pada perubahan patologisnya.
Kata kunci: Endosulfan, hati, inflamasi, degenerasi, nekrosis

## ABSTRACT
The  most  contaminated  organ  by  exposure  is  liver,  because  its  function  as adetoxificator.  The  aim  of  this  research  was  to  find  outhistopathological  changes  of  mice liver ( Musmusculus ) caused by Endosulfan. Experimental animals were 20 male mice with 20 gram  bodyweight.  Per-oral  exposure  using  single  dose  of  Endosulfanon  each  treatment. After  7  days  adaptation,  group  treatment  on  eighth  day  as  much  as  1cc  per-oral  with  the following  dose:  P1  6,25mg/Kg  BW/1cc/oral,  P2  12,5mg/KgBW/1cc/oraland  P3 25mg/KgBW/1cc/oral. On the tenth day, necropsy was done to collect the liver of mice and to  make  the micro  slide.  This  research  using  Complete  Random Design with  lottery.  Liver cell  which  have  inflammation,  degeneration,  and  necrosis  counted  by  scoring  system. Scoring result analyzed by Kruska-Wallis. If the result shows P<0,05 (significantly different) then  followed  by Mann-Whitney .  The  result  of  this  research  showed  that  Endosulfan  takes effect on histopathological changes of mice liver. The highest dose 25mg/Kg BW may cause poisoned and death. The lowest dose 6,25mg/Kg BB may cause inflammation, degeneration, and necrosis on histopathological of mice liver. The higher dose to be administered the more severe the pathological changer.
Wardhani et al. MKH (2020). 1-10 DOI: 10.20473/mkh.v31i1.2020.1-10
Keywords: Endosulfan, liver, inflamation, degeneration, necrosis

## PENDAHULUAN
Populasi  hama  yang  berkembang pesat membuat petani harus mengupayakan penyelamatan lebih untuk menjaga tanaman agar tidak dirusak atau dimakan  hama,  hal  tersebut  dapat  diatasi dengan penggunaan Endosulfan.
Golongan organoklorin seperti Endosulfan paling  banyak  digunakan  karena  dengan takaran  sedikit  dapat  memberantas  hama dengan  cepat  sehingga  menghemat pemakaian  (Andarini  dkk.,  2013).  Harga pestisida  yang  relatif  terjangkau  di
pasaran membuat petani merasa diuntungkan  karena  dapat  mengurangi ataupun membunuh hama bahkan
memberantas  vektor  penyebab  penyakit (Van den Berg, 2009).
Studi  kasus  mengenai  identifikasi penggunaan  pestisida  pada  ladang  dan sawah  daerah  pertanian  Kecamatan Kertasari  Citarun  Hulu  Kabupaten Bandung, didapat persentase penggunaan pestisida  organoklorin  masih  tinggi
sebesar 22,3% (Rochmanti dan Dian, 2009). Menurut  Adhiraga  (2009)  profil  senyawa organoklorin  dalam  air  tanah  0,986 𝜇g /L, air sungai 0,695 𝜇g /L dan sedimen sungai 12,9 𝜇g /L  di  Cikapundung  terdapat konsentrasi senyawa tertinggi.
Vijgen et  al., (2011)  menjelaskan bahwa  penggunaan  pestisida  berdampak buruk  terhadap  kesehatan  hewan  dan manusia. Endosulfan merupakan insektisida paling beracun yang tersedia di pasaran  saat  ini  dan  telah  menyebabkan berbagai macam keracunan pestisida yang fatal pada manusia dan hewan di seluruh dunia. Zat ini dapat masuk kedalam tubuh melalui  traktus  intestinal,  paru-paru,  dan kulit  serta  telah  terbukti  memiliki  efek toksik  pada  berbagai  organ  seperti  otak, jantung,  organ  reproduksi,  ginjal  dan hepar (Andarini dkk., 2013).
Hepar  memiliki  peranan  yang sentral  dalam  metabolisme  bahan  toksik yang ada di dalam tubuh (Fawcett, 2002). Kerusakan  pada  hepatosit  menyebabkan
Wardhani et al. MKH (2020). 1-10 DOI: 10.20473/mkh.v31i1.2020.1-10
Received: 17-07-2019, Accepted: 26-10-2019, Published online: 29-01-2020
Available at https://e-journal.unair.ac.id/MKH/index
terjadinya  perubahan  struktur  sel,  yang berakibat  terjadinya  gangguan  fungsi  sel. Hepatosit  yang  mengalami  kerusakan struktur  mengakibatkan  gangguan  dalam metabolisme  (Graham  and  Guarrera, 2014).
Oleh  karena  itu,  perlu  dilakukan
penelitian ini untuk mengetahui pengaruh Endosulfan terhadap
perubahan histopatologi hepar.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  dilaksanakan  pada bulan  November  2014.  Penelitian  ini dilaksanakan  di  Kandang  Hewan  Coba, Laboratorium  Patologi  Veteriner  Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Airlangga Surabaya.  Hewan  coba  dibagi  dalam  4
kelompok perlakuan. Kelompok
perlakuan  dibuat  sebagai  berikut:  P0 tanpa diberi Endosulfan hanya pemberian aquadest ,  P1  pemberian  Endosulfan sebanyak  6,25mg/Kk  BB,  P2  pemberian Endosulfan  sebanyak  12,5mg/Kk  BB,  P3 pemberian Endosulfan sebanyak 25mg/Kk BB.
Pemberian  Endosulfan  setelah masa  adaptasi  selama  tujuh  hari. Pemberian Endosulfan dilakukan satu kali pada  hari  ke-8  karena  menggunakan sigle dose .  Pengumpulan  sampel  dilakukan dengan  cara  bedah  bangkai  untuk mengambil sampel hepar dan dimasukkan de  dalam  pot  toples.  Pembuatan  sediaan histopatologi  dilakukan  di  Laboratorium Patologi  Departemen  Patologi  Veteriner Fakultas  Kedokteran  Hewan  Universitas Airlangga.
Pengamatan dilakukan dengan
menggunakan  metode scoring  ( Brunt, 2000).  Data  yang  diperoleh  merupakan nilai  median  dan  modus  dari  empat lapangan  pandang  dari  masing-masing preparat.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  penelitian  tentang  Pengaruh Endosulfan Terhadap Perubahan Histopatologi Hepar Mencit ( Mus
musculus) berdasarkan  skor  kerusakan  sel hepar  dengan  perubahan  keradangan, degenerasi  dan  nekrosis  yang  dianalisis
Wardhani et al. MKH (2020). 1-10 DOI: 10.20473/mkh.v31i1.2020.1-10
Received: 17-07-2019, Accepted: 26-10-2019, Published online: 29-01-2020 Available at https://e-journal.unair.ac.id/MKH/index
data  dengan Kruskal  Wallis menunjukkan
perbedaan antar perlakuan p<0,05 dilanjutkan dengan pengolahan data lebih lanjut  dengan  uji Mann  Whitney .  Hasil median  dan  modus  pengamatan scoring
radang, degenerasi dan nekrosis disajikan seperti  pada  Tabel  (2,3  dan  4).  Hasil pengamatan  histopatologi  hepar  disajikan pada gambar (1), (2), dan (3).
Tabel 1 Scoring Kerusakan Radang, Degenerasi dan Nekrosis
Score Radang 0 1 3 4
Apabila tidak ada perubahan radang hepar
Perubahan radang ringan seluas < 1/3 lapangan pandang
Perubahan radang sedang seluas 1/s3 – 2/3 lapangan pandang
Perubahan radang berat seluas > 2/3 lapangan pandang Score Degenerasi 0 1 3 4 Apabila tidak ada perubahan degenerasi hepar
Perubahan degenerasi ringan seluas < 1/3 lapangan pandang
Perubahan degenerasi sedang seluas 1/3 – 2/3 lapangan pandang
Perubahan degenerasi berat seluas > 2/3 lapangan pandang Score Nekrosis 0 1 3 4
Apabila tidak ada perubahan nekrosis hepar
Perubahan nekrosis ringan seluas < 1/3 lapangan pandang
Perubahan nekrosis sedang seluas 1/3 – 2/3 lapangan pandang
Perubahan nekrosis berat seluas > 2/3 lapangan pandang

## Tabel 2 Nilai Median dan Modus Radang Hepar Mencit
Kelompok Perlakuan Median Modus P0 0,00 a 0
Wardhani et al. MKH (2020). 1-10 DOI: 10.20473/mkh.v31i1.2020.1-10
Received: 17-07-2019, Accepted: 26-10-2019, Published online: 29-01-2020
Available at https://e-journal.unair.ac.id/MKH/index
P1 1.00 b 1 P2 1,50 c 1 P3 1,50 c 1

## Tabel 3 Nilai Median dan Modus Degenerasi Hepar Mencit
Kelompok Perlakuan Median Modus P0 0,00 a 0 P1 1,25 b 1 P2 2,50 c 3 P3 4,00 c 4

## Tabel 4 Nilai Median dan Modus Nekrosis Hepar Mencit
Kelompok Perlakuan Median Modus P0 0,00 a 0 P1 0.50 b 0 P2 2,00 c 1 P3 4,00 c 4
Keterangan  :  a,  b  dan  c  superskrip  yang  berbeda  pada  kolom  yang  sama  menunjukkan perbedaan yang signifikan (p<0,05).

## Gambar 1. Histopatologi Hepar Mencit yang Mengalami Radang (      ) (Pewarnaan H.E Perbesaran 400x)
Wardhani et al. MKH (2020). 1-10 DOI: 10.20473/mkh.v31i1.2020.1-10
Received: 17-07-2019, Accepted: 26-10-2019, Published online: 29-01-2020 Available at https://e-journal.unair.ac.id/MKH/index
Berdasarkan  hasil  analisis  statistik untuk  radang  hepar  dengan  uji Kruskal Wallis menunjukkan bahwa terdapat hasil yang  berbeda  nyata  (p<0,05).  Pada  uji
Mann  Whitney didapatkan  P0  berbeda nyata  dengan  P1,  P2,  P3  dan  P1,  P2,  P3 tidak berbeda nyata.

## Gambar 2.Histopatologi Hepar Mencit yang Mengalami Degenerasi
(      )(Pewarnaan H.E Perbesaran 400x)
Berdasarkan  hasil  analisis  statistik untuk  radang  hepar  dengan  uji Kruskal Wallis (lampiran  5)  menunjukkan  bahwa
terdapat  hasil  yang  berbeda  nyata
(p<0,05).  Pada  uji Mann  Whitney didapatkan  P0  berbeda  nyata  dengan  P1, P2,  P3.  P1  berbeda  nyata  dengan  P2  dan P2 dengan P3 tidak berbeda nyata.
Gambar 3.Histopatologi Hepar Mencit yang Mengalami Nekrosis (      ) (Pewarnaan H.E Perbesaran 400x)
Wardhani et al. MKH (2020). 1-10 DOI: 10.20473/mkh.v31i1.2020.1-10
Received: 17-07-2019, Accepted: 26-10-2019, Published online: 29-01-2020 Available at https://e-journal.unair.ac.id/MKH/index
Berdasarkan  hasil  analisis  statistik untuk  radang  hepar  dengan  uji Kruskal Wallis menunjukkan bahwa terdapat hasil yang  berbeda  nyata  (p<0,05).  Pada  uji Mann  Whitney didapatkan  P0  berbeda nyata dengan P1, P2, P3. P1 berbeda nyata dengan  P2  dan  P2  dengan  P3  tidak berbeda nyata.
Kelompok perlakuan P0 yaitu tanpa diberikan  Endosulfan  hanya  diberi aquadest ,  kondisi  hepar  normal  sel  hepar
tidak mengalami jejas. Kelompok perlakuan  P1,  P2  dan  P3  pemberian Endosulfan dengan dosis berbeda menunjukkan  kelainan  patologi  radang dengan skor 1, karena radang merupakan reaksi pertahanan diri suatu organ sebagai respon  terhadap  cedera  berupa  reaksi vaskular akibat zat toksik yang masuk ke dalam tubuh (Arimbi dkk., 2013).Kelompok P1 pemberian Endosulfan
paling kecil mengalami sedikit perubahan degenerasi.  Hal  tersebut  sesuai  dengan pernyataan Junqueria dan Cameiro (2012) bahwa  hepatosit  yang  mengalami  jejas
ringan  akan  mudah  meregenerasi  akibat zat-zat  toksik  yang  masuk  ke  dalam tubuh. Kelompok P2 mengalami perubahan  degenerasi  sedang,  karena menurut  penelitian  Khofiyah  (2014)  sifat dari  degenerasi  yaitu reversible sehingga pemberian  dosis  tertentu  masih  dapat mengalami  degenerasi  tetapi  tidak  parah sehingga  dapat  regenerasi  baru  pada hepatosit.  Keparahan  degenerasi  terlihat pada  kelompok  P3  dapat  disebabkan karena  dosis  yang  tinggi  sehingga menghambat  peredaran  darah  menuju jantung  serta  perusakan  sistem  saraf utama  pada  otak  karena  sifat  dari golongan  organoklorin  menimbulkan mekanisme  kerja  terutama  pada  akson saraf  dan  jaringan  lemak,  segera didistribusi dan terakumulasi di kandung empedu  dalam  bentuk  Chlordecon. Sehingga  dapat  memicu  stress  disertai imunitas  menurun  dan  cedera  sel  lebih banyak  (Kneeman,  2012).  Pada  penelitian
Bawaningrum dkk. (2014) tentang
desinfektan  Didecy  Dimethylammonium
Wardhani et al. MKH (2020). 1-10 DOI: 10.20473/mkh.v31i1.2020.1-10
Received: 17-07-2019, Accepted: 26-10-2019, Published online: 29-01-2020
Available at https://e-journal.unair.ac.id/MKH/index
Cloride  jejas  akibat  toksik  biasanya diawali  dengan  degenerasi  dengan pemberian  lima  hari  sudah  terlihat perubahan histopatologi
berupa degenerasi.Kelompok  P0  dan  kelompok
P1  berbeda  nyata  tetapi  memiliki  modus yang  sama  sehingga  kelompok  P0  dan kelompok P1 tidak ditemukannya
nekrosis  karena  menurut  penelitian Bawaningrum  dkk.  (2014)  dibutuhkan waktu  lebih  dari  lima  hari  untuk  terjadi nekrosis  karena  dengan  dosis  yang  kecil belum  berarti  mengakibatkan  perubahan atau kematian inti sel pada hepar sehingga hanya  ditemukan  degenerasi.  Kelompok P2  terdapat  nekrosis  ringan.  Penggunaan dosis  15mg/Kk  BB  dapat  mengakibatkan nekrosis dikarenakan dapat meningkatkan apoptosis  pada  inti  hepatosit,  karena apoptosis adalah salah satu perubahan inti hepatosit yang menandakan bahwa terjadi nekrosis  selain  karioreksis  dan  kariolisis (Ozmen, 2003). Kelompok P3 dengan dosis 25mg/Kg  BB  mengalami  nekrosis  paling berat  diantara  kelompok  lain.  Pada
laporan POPs Elimination Network (2009) dengan  dosis  35mg/Kg  BB  dapat mematikan pada manusia, karena Endosulfan  menyerang  sistem  jaringan saraf terutama pada otak yang menghambat  transpor  kalium  melalui membran  sel,  menghambat  transpor  aktif natrium  keluar  sel,  menghambat  kalsium, menghambat  kemampuan  kalmodulin sebagai  kalsium  mediator.  Akibat  yang ditimbulkan  terjadi  perpanjangan  aksi potensial  sampai  terjadi  hiperpolarisasi. Berpengaruh  pada  jaringan  lemak,  terjadi biomagnifikasi yaitu penimbunan senyawa  yang  bersifat  permanen  (Meles dkk., 2012).

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  histopatologi mencit  yang  dipapar  Endosulfan  dapat ditarik  kesimpulan  bahwa  pemberian Endosulfan  pada  mencit  berpengaruh terhadap histopatologi hepar mencit yaitu terjadi  infiltrasi  radang,  degenerasi  dan nekrosis.  Semakin  tinggi  dosis  perubahan histopatologi hepar mencit semakin parah.
Wardhani et al. MKH (2020). 1-10 DOI: 10.20473/mkh.v31i1.2020.1-10
Received: 17-07-2019, Accepted: 26-10-2019, Published online: 29-01-2020
Available at https://e-journal.unair.ac.id/MKH/index

## DAFTAR PUSTAKA
Adhiraga,  M.  2009.  Profil  Penyebaran Konsentrasi  Pestisida  Organoklorin pada  Air  Sungai  Subdas  Citarum Hulu  [Thesis].  Institut  Teknologi Bandung. Bandung.
Andarini,  S.,  H.  Sjuti  dan  F.  Ariadi.  2013. Pengaruh  Endosulfan  Terhadap Peningkatan Kadar lL-6 Serum pada Anak  Tikus  Strain  Wistar (Rattus norvegincus) [Skripsi]. Program Studi
Pendidikan  Kedokteran  Fakultas Kedokteran.  Universitas  Brawijaya. Malang.
Arimbi.,  A.  Azmijah.,  R.  Darsono.,  H.
Plumeriastti., T. V. Widiyatno dan J. Legowo.  2013.  Buku  Ajar  Patologi Umum Veteriner. Airlangga University Press. Surabaya. Bawaningrum,  C.  R.,  E.  Koestanti  dan  C. Anwar.  2014.  Pengaruh  Pemberian Desinfektan Didecydimethyl ammonium Chloride Terhadap Gambaran  Histopatologi  Hepar pada Bebek Hibrida ( Anas
Platyrhynchos  Domesticus ).  Fakultas Kedokteran  Hewan.  Universitas Airlangga Surabaya. Surabaya.
Fawcett,  D.W.  2002.  Buku  Ajar  Histologi.
Ed 12. EGC. Jakarta. 583-603.
Graham,  J.  A.  and  J.  Guarrera.  2014.
Resucitation  of  Marginal  Liver Allografts  for  Transplantation  with Machine Perfution Technology. Department  of  Surgery.  Colombia University. USA. 1-14.
International  POPs  Elimination  Network.
2009.  Endosulfan  in  West  Africa Adverse  Effects  its  Banning  and Alternatives. POPs Pesticides Working Group. Africa. Khofiyah,  S.  N.  2014.  Efek  Pemberian Ekstrak  Ethanol  Daun  Kenikir (Cosmos caudatus) Terhadap Gambaran  Histopatologis  Hepar pada Mencit (Mus musculus) Babb/C Jantan  yang  Diinduksi  Parasetamol.
Fakultas Kedokteran Hewan.
Wardhani et al. MKH (2020). 1-10 DOI: 10.20473/mkh.v31i1.2020.1-10
Received: 17-07-2019, Accepted: 26-10-2019, Published online: 29-01-2020
Available at https://e-journal.unair.ac.id/MKH/index
Universitas  Airlangga  Surabaya. Surabaya.
Kneeman,  J.  M.,  J.  Misdraji  and  K.E.
Korey.  2012.  Secondary  Causes  Of Nodalcoholic  Fatty  Liver  Disease. Department of Pathology Massachusetts General Hospital and
Harvard  Medical  School.  Bostom. SA 199-207.
Meles, D. K., S. A. Sutjarwo., T. Juniastuti.,
I.  S.  Hamid  dan  R.  Kurnijasanti. 2012.  Buku  Ajar  Farmakoterapi  dan Toksikologi.  Pusat  Penerbitan  dan Percetakan  Universitas  Airlangga
(AUP). Surabaya.
Ozmen, O. 2003. Pathology of Endosulfan.
University  of  Mehmet  Akif  Ersoy.
Turkey.
Rocmanti  dan  M.  Dian.  2009.  Identifikasi
Penggunaan  Pestisida  pada  Ladang dan Sawah [Thesis]. Institut
Teknologi Bandung. Bandung.
Van  den  Berg,  H.  2009.  Global  Status  of
DDT and Its Alternatives for Use in
Vector  Control  to  Prevent  Disease. Health  Persp.  Environ.  117:  1656– 1663.
Vijgen, J., P. C. Abhilash and Y. F. Li. 2011.
Hexachlorocyclohexane  (HCH)  as new  Stockholm  Convention  POPs-a Global Perspective on the Management  of  Lin-dane  and  its Waste Isomers.. Sci. Pollut. Environ. 18: 152-162.