Vol. 7, No. 3 Juni 2024, Hal. 642 – 650 p-ISSN: 2622 – 6014; e-ISSN: 2745 – 8644

## JURNAL PROMOTIF PREVENTIF
Penetapan Kadar Flavonoid Total Ekstrak Etanol Daun Binahong (Anredera Cordifolia) Dengan Metode Spektrofotometri UV-Vis
Determination of Total Flavonoid Content of Ethanol Extract Binahong Leaves (Anredera Cordifolia) with UV-Vis Spectrophotometry Method
Ratih Nurwanti, Hasty Hamzah, Sri Yolandari, Wa Ode Apriyani DS
Politeknik Baubau Article Info ABSTRACT / ABSTRAK Article History Received: 16 Jun 2024 Revised: 24 Jun 2024 Accepted: 30 Jun 2024 Binahong  leaves  are  a  medicinal  plant  that  contains  flavonoid  compounds which are a type of antioxidant, and have heat-sensitive properties. The aim of this  research  was  to  determine  the  flavonoid  content  of  ethanol  extract  in binahong  (Anredera  cordifolia)  leaves  using  the  UV-Vis  spectrophotometric method.  Testing  for  flavonoid  levels  was  carried  out  in  2  stages,  namely qualitative  testing  using  magnesium  and  HCl  reagents,  resulting  in  a  yellow color change which indicated the presence of flavonoid levels. and quantitative tests using the Uv-Vis spectrophotometric method. the results of research on the flavonoid levels of binahong leaves  (Anredera cordifolia) showed that in the ethanol extract of binahong leaves there were flavonoid compounds with an absorbance  obtained  at  a  wavelength  of  439  nm,  and  the  level  of  flavonoid compounds  in  the  ethanol  extract  contained  in  dau  binahong  (Anredera cordifolia) was 0.0889 /mg/QE/g.
Keywords: Binahong leaves, flavonoids, Uv-Vis spectrophotometry.
Daun binahong adalah tanaman obat yang mengandung senyawa flavonoid yang merupakan salah satu jenis antioksidan, dan memiliki sifat yang sensitif terhadap  panas.  Tujuan  penelitian  ini untuk  menentukan  kadar flavonoid ekstrak  etanol  pada  daun  binahong  ( Anredera  cordifolia )  menggunakan metode spektrofotometri  UV-Vis. Pengujian  Kadar  flavonoid  dilakukan dengan  2  tahap  yaitu  pengujian  secara  kualitatif  mengunakan  pereaksi magnesium  dan  HCl  sehingga  mengahasilkan  perubahan  warna  kuning dimana mendandakan adanya senyawa kadar flavonoid . dan uji kuantitatif dengan menggunakan metode spektrofotometri Uv-Vis . hasil penelitian kadar flavonoid daun  binahong (Anredera  cordifolia) diperoleh  hasil  bahwa  pada ekstrak  etanol  daun  binahong  terdapat  senyawa flavonoid dengan absorbansi  yang  diperoleh  panjang  gelombang  yaitu  439  nm,  dan  kadar senyawa flavonoid ekstrak  etanol  yang  terdapat  pada  dau  binahong (Anredera cordifolia) sebesar 0,0889/mg/QE/g.
Kata kunci: Daun binahong , flavonoid, spektrofotometri Uv-Vis.
Corresponding Author :
Name : Apt. Ratih Nurwanti, S.Farm., M.Si
Affiliate  : Program Studi Diploma Tiga Farmasi Politeknik Baubau Address  : BTN Inulgi. Kel. Bukit Wolio Indah, Kec. Wolio, Kota Baubau
Email
:  ratih.nurwanti03@gmail.com

## PENDAHULUAN
Pada  tumbuhan, flavonoid berfungsi  sebagai  pengaturan  tumbuh,  pengaturan fotosintesis,  antimikroba  dan  antivirus. Flavonoid dapat  dijadikan  obat  tradisional  karena flavonoid dapat bekerja sebagai inhibitor pernafasan, menghambat aldoreduktase, monoamina oksidase,  protein  kinase,  DNA  polimerase  dan  lipooksigenase.  Terdapat  efek  biologis  yang sangat  kuat  yang  terbukti  pada  flavonoid  sebagai  antioksidan  yang  menghambat penggumpalan keping-keping sel darah, merangsang pembentukan produksi nitrit oksida (NO) yang  berperan  melebarkan  pembuluh  darah  ( vasorelaction )  dan  juga  menghambat pertumbuhan sel kanker. Flavonoid bersifat polar karena mempunyai sejumlah gugus hidroksil sehingga akan larut dalam pelarut polar seperti etanol, metanol, butanol, air (Rais, 2015).
Binahong  berdaun  tunggal,  bertangkai  sangat  pendek,  tersusun  berseling,  berwarna merah, berbentuk jantung. Helaian daun binahong tipis lemas, ujung runcing, pangkal berlekuk, tepi  rata,  permukaan  licin.  Daun  tersebut  bisa  dimakan.  Bagian  daun  inilah  yang  banyak dimanfaatkan  sebagai  bahan  obat.  Daun  binahong  diperkirakan  mengandung  senyawa flavonoid, alkaloid, terpenoid dan saponin (Mufid, 2021).
Kelebihan  penggunaan Spektrofotometri  UV-Vis dapat  digunakan  untuk  menganalisis zat-zat  organik  atau  anorganik,  utamanya  metode  spketrofotometri  ini  memberikan  langka sederhana untuk menetapakn kuantitasi suatu zat yang sangat kecil, keakuratan akan dibaca cepat  oleh  detektor  dan  akan  tercetak  dalam  bentuk  angka  digital  atau  grafik  yang  telah diregresi (Wardani, et al., 2021).
Spektrofotometri  UV-Vis dapat  digunakan  untuk  penetapan  kadar  flavonoid  karena flavonoid  memiliki  sistem  karbonil  yang  terkonjugasi  dengan  cincin  aromatic  sehingga karakterisasi flavonoid dapat dilakukan dengan spektrofotometri (Frida, 2018). Oleh karena itu,  spektrofotometri  UV-Vis  digunakan  untuk  menentukan  kadar  flavonoid  total,  dimana larutan standar yang digunakan adalah kuersetin. Penelitian ini bertujuan untuk penetapan kadar  flavonoid  ekstrak  etanol  daun  binahong  ( Anredera  cordifolia )  dengan  menggunakan metode spektrofotometri UV-Vis.

## BAHAN DAN METODE

## Jenis Penelitian
Jenis  penelitian  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  eksperimental Laboratorium  dengan  Penetapan  kadar  flavonoid  total  ekstrak  etanol  pada  sampel  yang digunakan ekstraksi daun binahong  ( Anredera cordifolia ).

## Persiapan Sampel
Sampel  daun  Binahong  ( Anredera  cordifolia )  diperoleh  dari  lokasi  penelitian  diKota Baubau. Sampel yang ingin di teliti adalah daun Binahong ( Anredera cordifolia ) pengambilan sampel  dilakukan  pada  jam  08.00  pagi  hari.  Selanjutnya  dilakukan  disortasi  basah  untuk menghilangkan  tanah  dan  kotoran    yang  masih  menempel  pada  sampel.  kemudian  daun Binahong ( Anredera cordifolia )  dipisahkan dari tulang-tulang daun yang menempel pada daun. Kemudian  dilakukan  pengubahan  bentuk  dengan  cara  dipotong-potong  kecil  mengunakan gunting,  selanjutnya  dikeringkan  dengan  cara  di  angin-anginkan  dan  ditutup  menggunakan kain  hitam  selama  beberapa  hari  pada  udara  terbuka  dengan  tidak  terkena  sinar  matahari
langsung.  Setelah  kering  sampel  dihaluskan  mengunakan  blender.  Selanjutnya  dilakukan preparasi dan pengujian sampel menggunakan metode Spektrofotometri UV-Vis.

## Pembuatan Ekstrak Daun Binahong
Sampel  daun  binahong  ( Anredera  cordifolia )  yang    dikeringkan  sebanyak  300  gram. Dimasukan kedalam dengan etanol 96% sebanyak 3000 mL sampai seluruh sampel terendam, kemudian  ditutup  dan  dibiarkan  selama  3x24  jam.  Maserasi  disaring  dengan  menggunakan kertas  saring.  Filtrasi  diperoleh  melalui  penyaringan  dengan  corong,  kemudian  ampas dimaserasi  kembali  dengan  etanol  96%  sebanyak  3000  mL,  sehingga  filtrasi  hampir  tidak berwarna  yang  didapatkan  sehingga  digunakan  untuk  analisis  lebih  lanjut    (Gustandy  dan Soegihardjo, 2016).

## Penetapan Kadar Flavonoid Daun Binahong

## Uji Kualitatif Kandungan Flavonoid
Diambil  sebanyak  1  mg  ekstraksi  etanol  daun  Binahong  ( Anredera  cordifolia ). Ditambahkan dengan magnesium sebanyak 0,1 gram dan ditetes 2 mL HCI pekat sedikit demi sedikit  jika  terbentuk  larutan  warna  merah,  jingga,  kuning  atau  hijau  positif  mengandung flavonoid (Werdiningsih et al., 2022).

## Uji Kuantitatif Kandungan Flavonoid
1) Penetapan panjang gelombang maksimum kuersetin
Penentuan  panjang  gelombang  maksimum  kuersetin  dilakukan  dengan running larutan kuersetin pada range panjang gelombang  400-450 nm. Hasil running menunjukan panjang gelombang maksimum strandar baku kuarsetin berada pada panjang gelombang 439 nm. Panjang gelombang maksimum tersebut yang digunakan untuk mengukur serapan dari sampel ekstrak etanol daun Binahong ( Anredera cordifolia ).

## 2) Pembuatan Kurva standar kuersetin
Ditimbang sebanyak  25  mg  baku  standar  kuersetin  dan  dilarutkan  dalam  25  mL etanol.  Larutan  stok  dipipet  sebayak  1  mL  dan  dicukupkan  volumenya  sampai  10  mL dengan etanol sehingga diperoleh konsentrasi 1000 ppm. Dari larutan standar kuersetin 1000 ppm, kemudian dibuat beberapa konsentrasi yaitu 20 ppm, 40 ppm, 60 ppm, 80 ppm dan  100  ppm.  Dari  masing-masing  konsentrasi  larutan  standar  kuersetin  dipipet  1  mL. Kemudian ditambahkan 3 mL etanol 96% 0,2 mL AlCl 3 10% dan 0,2 mL kalium asetat 1 M. Sampel diinkubasi selama satu jam pada suhu kamar. Absorbansi ditentukan menggunakan metode spektrofotometri UV-Vis pada panjang gelombang maksimum 439 nm.
3) Penetapan kadar flavonoid total ekstrak daun Binahong ( Anredera cordifolia )
Ditimbang  15  mg  ekstrak,  dilarutkan  dalam  10  mL  etanol,  sehingga  diperoleh konsentrasi 1500 ppm. Dari larutan tersebut dipipet 1 mL kemudian ditambahkan 3 mL etanol 96% 0,2 mL larutan AlCl 3 10% dan 0,2 mL kalium asetat 1 M dan aquadest 10 mL. Sampel  diinkubasi  selama  30  menit  pada  suhu  kamar.  Absorbansi  ditentukan menggunakan metode spektrofotometri UV-Vis pada panjang gelombang maksimum 439 nm. Sampel yang dibuat dalam tiga replikasi untuk setiap analisis dan diperoleh nilai rata- rata absorbansi.

## Analisis Data
Untuk menghitung kadar flavonoid yang terdapat pada daun Binahong dapat dihitung dari nilai absorbansi yang diperoleh dari 6 konsentrasi Quersetin dengan persamaan regresi linier :
keterangan : y = luas kurva x = konsentrasi sampel a = intercept (perpotongan garis lurus) b = slope (kemiringan)
Kadar flavonoid dalam sampel dapat dihitung dengan rumus :
Dimana :
C = konsentrasi sampel V = volume sampel Fp = faktor pengenceran W = berat sampel

## HASIL
Sampel  tanaman  yang  digunakan  pada  penelitian  ini  yaitu  daun  binahong  ( Anredera cordifolia ). Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui kandungan senyawa flavonoid dan kadar flavonoid  yang  terdapat  dalam  ekstrak  daun  binahong  ( Anredera  cordifolia ). Penelitian dilakukan dengan menggunakan 300 gram simplisia daun binahong ( Anredera cordifolia ) yang dimaserasi dengan menggunakan larutan etanol 96% sebanyak 3000 mL. Sehingga diperoleh ekstrak sebanyak 70 gram.
Persen rendaman yang diperoleh adalah :
% rendaman = 𝐵𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑒𝑘𝑠𝑡𝑟𝑎𝑘
𝐵𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑆𝑖𝑚𝑝𝑙𝑖𝑠𝑖𝑎 𝑥 100%
% rendaman = 70 𝑔𝑟𝑎𝑚 300 𝑔𝑟𝑎𝑚 𝑥 100%
= 23,3 %
Hasil pengukuran kuersetin sebagai pembandingan 20 ; 40; 60; 80; dan 100 mg/L pada panjang gelombang 439 nm dengan perbandingan lima kosentrasi didapatkan nilai y = 0,0113x + 0,4341 dengan nilai R 2 = 0,9587.
Tabel 1. Analisis Kualitatif Kandungan Senyawa Flavonoid Daun Binahong
Sampel Kandungan senyawa Metode pengujian Hasil Keterangan Daun binahong Flavonoid (Mg + HCl) Kuning + Sumber: Data Primer, 2024
y=bx +a
𝐶𝑥𝑉𝑥𝑓 𝑊
Tabel  2. Pengukuran  Nilai  Absorbansi  Larutan  Pembanding  Kuersetin  Pada  Panjang Gelombang  439 nm. Larutan Standar Kuersetin  (ppm) Absorbansi 20 0,6589 40 0,8965 60 1,1530 80 1,2111 100 1,6270
Gambar  1. Grafik  Hubungan  Kosentrasi  (ppm)  Larutan  Standar  Kuersetin  Terhadap Absorbansi (A).
Tabel 3. Hasil pengukuran panjang gelombang maksimum nm  Absor  nm   Absor  nm  Absor   nm Absor   Nm  Absor 400  0,9319  410  1,0815  420  1,2533  430  1,3705  440  1,3904
401  0,9461  411  1,1101  421  1,2652  431  1,3757  441  1,3851
402  0,9617  412  1,1272  422  1,2773  432  1,3798  442  1,3819 403  0,9775  413  1,1432  423  1,2907  433  1,3861  443  1,3798 404  0,9935  414  1,1592  424  1,3045  434  1,3893  444  1,3757 405  1,0092  415  1,1745  425  1,3196  435  1,3904  445  1,3655
406  1,0250  416  1,1911  426  1,3325  436  1,3925  446  1,3575
407  1,0419  417  1,2090  427  1,3429  437  1,3925  447  1,3477
408  1.0579  418  1,2240  428  1,3526  438  1,3957  448  1,3353
409  1,0746  419  1,2380  429  1,3605  439  1,3968  449  1,3233
450  1,3115
y = 0.0113x + 0.4341 R² = 0.9587 0.0000 0.5000 1.0000 1.5000 2.0000 0 20 40 60 80 100 120 A b so rb an si Konsentrasi (µg/mL) Kurva standar Kuarsetin Kuarsetin Linear (Kuarsetin)

## Gambar 2. Grafik Panjang Gelombang Maksimum
Tabel 4. Hasil Operating Time Waktu Inkbasi (menit) Absorbansi Rata-Rata I II III 10 1,573 1,572 1,569 1,571 20 1,598 1,595 1,601 1,598 30 1,627 1,621 1,628 1,625 40 1,625 1,622 1,621 1,623 50 1,621 1,619 1,619 1,620 60 1,619 1,615 1,616 1,617
Gambar 3. Hasil Grafik Kurva Operating Time Kadar Flavonoid (Kuersetin Standar AICI 3 ) . Tabel 5. Hasil pengikuran absorbansi dari sampel ekstrak etanol daun binahong ( anredera cordifolia ) dengan panjang gelombang 439 nm.
Sampel Absorbansi Rata-rata Kadar total flavonoid (mgQE/g) I II III Ekstrak etanol daun binahong 0,5371  0,5386  0,5292 ,5350 0,0889
ABS nm 350 360 370 380 390 400 410 420 430 440 450 460 470 480 490 500 510 520 530 540 550 0.00 0.05 0.10 0.15 0.20 0.25 0.30 0.35 0.40 0.45 0.50 0.55 0.60 0.65 0.70 0.75 0.80 0.85 0.90 0.95 1.00 1.05 1.10 1.15 1.20 1.25 1.30 1.35 1.40 1.45 1.50 1.560 1.580 1.600 1.620 1.640 0 20 40 60 80 A b so rb an si Waktu Inkubasi (Menit) Operating Time Kadar Flavonoid (Kuarsetin Standar) Metode AlCl 3 Operating Time Kadar Flavonoid
(Kuarsetin Standar)
Metode AlCl3

## PEMBAHASAN
Pada penelitian ini sampel yang digunakan adalah daun binahong ( Anredera cordifolia ) yang masih segar. Daun binahong ( Anredera cordifolia ) dipetik pada pagi hari jam 08:00 WITA di kelurahan Lipu. Pembuatan ekstrak etanol daun binahong ( Anredera cordifolia ) dilakukan dengan metode maserasi menggunakan pelarut etanol 96% dimasukan kedalam dengan etanol 96% sebanyak 3000 mL sampai seluruh sampel terendam, kemudian ditutup dan dibiarkan selama 3x24 jam. Pelarut yang digunakan dalam penelitian ini adalah etanol 96% yaitu untuk menyari  senyawa  flavonoid.  Pemilihan  pelarut  ini  disebabkan  karena  senyawa  flavonoid umumnya dalam bentuk glikosida yang bersifat polar sehingga harus digunakan pelarut yang bersifat polar. Maserasi disaring dengan menggunakan kertas saring. Filtrasi diperoleh melalui penyaringan  dengan  corong,  kemudian  ampas  dimaserasi  kembali  dengan  etanol  96% sebanyak  3000  mL,  sehingga  filtrasi  hampir  tidak  berwarna.  Semua  filtrasi  disatukan  dan dipekatkan  dengan  menggunakan  rotavapor  sampai  tidak  ada  lagi  cairan  yang  menetes sehingga diperoleh ekstraksi etanol daun Binahong ( Anredera cordifolia ) dengan berat ekstrak kental 70 gram dengan rendeman sebanyak 23,3 %.
Uji  Fitokimia    untuk  mengetahui  kandungan  senyawa  flavonoid  pada  ekstrak  daun binahong  ( Anredera  cordifolia )  yang  dilakukan  penambahan  serbuk  Mg  serta  ditambahkan larutan  HCl.  Penguji  analisis  kualitatif  daun  binahong  ditandai  dengan  perubahan  warna menjadi kuning seperti pada (tabel 1). Penambahan serbuk magnesium dan beberapa tetes HCl pekat adalah untuk mereduksi inti benzopiron sehingga terbentuk garam flavilium berwarna merah atau kuning. Penambahan HCl mengakibatkan terjadihnya reaksi oksidan reduksi antara logam Mg sebagai pereduksi dan senyawa flavonoid (Ergina et al., 2014).
Uji kuantitatif senyawa flavonoid total dengan mengunakan metode spektrofotometri UV-Vis  dilakukan  untuk  mengetahui  seberapa  besar  kadar  flavonoid  total  yang  terkandung pada ektrak etanol daun binahong (Anredera cordifolia) . Digunakan metode spketrofotometri UV-Vis  karena  flavonoid  mengandung  sistem  aromatik  yang  terkonsungasi  sehingga menunjukan pita serapan kuat pada daerah spektrum sinar ultraviolet  dan sinar tampak.
Pada  pengukuran  senyawa  flavonoid  total,  larutan  sampel  ditambahkan  AICI 3 yang dapat membentuk kompleks, sehingga terjadih pergeseran panjang gelombang kearah visible (tampak)  yang  ditandai  dengan  larutan  menghasilkan  warna  yang  lebih  kuning.  Dan penambahan kalium asetat yang bertujuan untuk mempertahankan panjang gelombang pada daerah  visible  (tampak).  Perlakukan  inkubasi  selama  30  sebelum  pengukuran  dimaksutkan agar reaksi berjalan sempurna, sehingga intensitas warna yang dihasilkan lebih maksimal.
Pengukuran  serapan  panjang  gelombang  maksimum  dilakukan running dari  panjang gelombang  400-450  nm.  Hasil running menunjukan  Panjang  gelombang  maksimum  standar baku  kuersetin  berada  pada  panjang  gelombang  439  nm.  dari  hasil  pengukuran  panjang gelombang  maksimum  dengan  nilai  absorbansi  tertinggi  sebesar  1,3968  dapat  dilihat  pada (Tabel 3). kadar flavonoid dihitung dengan menggunakan kurva kalibrasi kuersetin yang telah diukur  sebelumnya.  Kadar  flavonoid  dihitung  sebagai  kadar  flavonoid  dalam  sampel. Perhitungan ini berdasarkan hukum lambert Beer yang menunjukan hubungan lurus antara absorbansi dan kadar analit.
Penentuan kadar Flavonoid dilakukan dengan menggunakan larutan standar kuersetin pada kosentrasi 20 ppm, 40 ppm, 60 ppm, 80 ppm, 100 ppm. Pengukuran absorbansi dilakukan
menggunakan spektrofotometri UV-Vis  dengan panjang gelombang 439 nm dimana kosentrasi 20  ppm  nilai  absorbansinya  (0,6589),  40  ppm  nilai  absorbansinya  (0,8965),  60  ppm  nilai absorbansinya (1,1530), 80 ppm nilai absorbansinya (1,2111), 100 ppm nilai absorbansinya (1,6270). Hasil yang diperoleh dari pengukuran kurva baku, yaitu semakin tinggi kosentrasi, maka semakin tinggi absorbansinya.
Menghitung kadar flavonoid dari sampel daun binahong pertama-tama masing-masing hasil  absorbansi  yang  telah  dibuat  dengan  tiga  kali  pengukuran  dihitung  nilai  rata-ratanya. Hasil rata-rata sampel yang telah didaptkan dimasukan kedalam persamaan garis linear y = 0,0113x + 0,4341 dengan nilai koefisien korelasi sebesar 0,9587. Sehingga diperoleh kadar total flavonoid  sebesar  0,0889mg/g.  Artinya  didalam  1  gram  sampel  ekstrak  daun  binahong dipeoleh kadar total flavonid sebesar 0,0889/mg/QE/g.

## KESIMPULAN DAN SARAN
Berdasarkan    hasil  penelitian  maka  dapat  disimpulkan  bahwa  ekstrak  etanol  daun binahong ( Anredera cordifolia ) positif mengandung senyawa flavonoid ditandai dengan adanya perubahan warna kuning. Kadar senyawa flavonoid ekstrak etanol yang terdapat pada daun bonahong ( Anredera cordifolia ) adalah sebesar 0,0889 mgQE/g.
Diharapkan  pada  penelitian  ini  nantinya  dapat  dijadikan  acuan  atau  referensi  untuk penelitian selanjutnya.

## DAFTAR PUSTAKA
Aminah A, Tomayahu N, Abidi  Z. 2017. Penetapan Kadar Flavonoid Total Ekstrak Etanol Kulit Buah Alpukat ( Persea Americana Mill .) dengan Metode Spektrofotometri UV-Vis. Jurnal Fitofarmaka Indonesia. 4 (2) : 226.
Anwar TM & Soleha TU. 2016. Manfaat Daun Binahong (Anredera Cordifolia) Seb agai Terapi Acne Vulgaris. Jurnal Majority . 5 (4) : 179-183.
Dadiono MS, Andayani S. 2022. Potensi Tanaman Binahong ( Anredera Cordifolia ) Sebagai Obat Alternatif Pada Bidang Akuakultur. Jurnal Perikanan Pantura. 5 (1) : 156-158.
Dewatisari WF. 2020. Perbandingan Pelarut Kloroform dan Etanol terhadap Rendeman Ekstrak Daun  Lidah  Mertua  (Sansevieria  trifasciata  prain.)  Menggunakan  Metode  Maserasi. Jurnal Biologi, Fakultas Sains Dan Teknologi, UIN Alaudin Makassar . 6 (1) : 128 – 132.
Ergina Nuryanti S, Pursitasari ID. 2014. Uji kualitatif senyawa metabolite sekunder pada daun Palado (Agave  agustifolia) yang  diekstraksi  dengan  pelarut  air  dan  etanol. journal Akademik Kimia. 3(3) : 165-172.
Fauznah  W,  Hasibuan  YH,  Nasution  YS  &  Batubara  MS.  2019.  Pemanfaatan  Daun  Pacar ( Lawsonia inermis L .) Sebagai Anti Jamur Pada Kuku. Jurnal Penelitian dan Pembelajaran MIPA 4 (2) : 110-119.
Frida F. 2018. Perbandingan Kadar Flavonoid Total Ekstrak Etanol Daun Jamblang ( Syzgium cumini  (L.) Skeels)  Pada  Dua  Tempat  Tumbuh.  Skripsi.  Program  Studi  Ilmu  Farmasi. Fakultas Farmasi. Universitas Wahid Hasyim. Semarang.
Gustandy  M dan Soegihardjo CJ.  2016. Uji Aktivitas Antioksidan Menggunakan Radikal 1, 1- Difenil-2-Pikrihidrazil  dan  Penetapan  Kandungan  Fenolik  Total  Fraksi  Etil  Asetat Ekstrak Etanol Buah Anggur Bali ( Vitis vinifera L .). Jurnal Farmasi Sains dan Komunitas . 10( 2).
Hohakay  JJ,  Pontoh  J  &  Yudistira  A.  2019.  Pengaruh  metode  pengeringan  terhadap  kadar flavonoid  daun  sesewanua (Clerodendron  squamatum  Vahl. ). Pharmacon , 8 (3)  :  748- 757.
Irawan A. 2019. Kalibrasi Spektrofotometer Sebagai Penjaminan Mutu Hasil Pengukuran Dalam Kegiatan Penelitian dan Pengujian. Indonesian Journal of Laboratory . 1 (2) : 1-2.
Kumalasari E, Nazir MA & Putra AMP. 2018. Determination of Total Flavonoid Content of 70% Ethanol  Extract  of  Dayak  Leeks  ( Eleutherine  palmifolia  L .)  Using  UV-VIS Spectrophotometric Method. Jurnal Insan Farmasi Indonesia. 1 (2) :  201 – 209.
Marliana E. 2016. Hubungan Struktur Senyawa Flavonoid  Macaranga kalimantan Terhadap Aktivitas  Antioksidan  dan  Aktivitas  Antiplasmodial.  [Disertai].  Surabaya:  Universitas Airlangga: Surabaya.
Marzuki RD & Nova A. 2018. Pembinaan Masyarakat Tentang Pemanfaatan Tanaman Binahong (Anredera Cordifolia) Sebagai Obat Tradisional Digampong Sidorejo Langsa Lama. Jurnal Jeumpa . 5 (2) : 112-115.
Mufid  FM. Ishman, FE. Samik. Sismono dan Sanjaya, MGI. 2021. Perbedaan Karakter Fisiko- Kimia Ekstrak Daun Binahong Berbatang Merah Dan Daun Binahong Berbatang Hijau. Indonesia Chemistry And Application Journal . 4 (2) : 16-17.
Mustafa. 2015. Analisi Kadar Senyawa Flavonoid Ekstraksi Metanol Daun Lamtaro ( Leucaena leucocephala )  Dengan  Metode  Spektrofotomerti  UV-Vis. Jurusan  Farmasi FIKK  UNG  : Gorontalo.
Mustamin I, Rustam N,  Kasman  K. 2016. Analisis Nilai Absorbansi Kadar Flavonoid Daun Sirih Merah ( Piper Crocatum ) Dan Daun Sirih Hijau ( Piper Betle L ). Gravitasi.15 (1) : 1-3.
Neldawati  Ratnawulan,  Gusnedi.  2013.  Analisis  Nilai  Absorbansi  Dalam  Penentuan  Kadar Flavonoid Untuk Berbagai Jenis Daun Tanaman Obat. Pillar Of Physics .  2 (1) : 76-78.
Sanjaya  IGM, Ismono I, Samik S, Ishma EF,  Mufid MF. 2021. Perbedaan Karakter Fisiko-Kimia Ekstrak  Daun  Binahong  Berbatang  Merah  dan  Daun  Binahong  Berbatang  Hijau. Indonesian Chemistry And Application Journal . 4 (2) : 16-17.
Wardani  AD. 2021. Validasi Metode dan Penentuan Kadar Alkaloid Total Fraksi Etil Astat Daun Sirsak (Annina muricata L.,) secara spektrofotometri UV-Vis di Desa Kemiri Kabupaten Jembe r. Universitas Dr.Soebandi.
Werdunigsih  W,  Nurjana  TP,  Ninis  Y.2022.  penetapan  Kadar  Flavonoid  Ekstrak  70%  daun Binahong (Anredera cordifolia [Ten] Steenis) di Desa Pelem, Tanjunganom, kab, Nganjuk. Jurnal sintesis . 3 (2) : 54-61.