## Jurnal Kesehatan dr. Soebandi
Journal.stikesdrsoebandi.ac.id

## VALIDASI METODE SPEKTROFOTOMETRI UV-VIS UNTUK ANALISIS FORMALIN MENGGUNAKAN PARAROSANILLINE HCL PADA SAMPEL PLASMA DARAH
Lindawati setyaningrum 1,* , Wahyuni christiana 2 , Bambang kuswandi 3
1,2,3 Sekolah Ilmu Tinggi Kesehatan dr.Soebandi, Jember, Indonesia *Korespondensi : lindawati.w.setyaningrum@gmail.com

## ABSTRACT
Formaldehyde  is  as  a  solution  containing  30%  to  50%  formalin  with  0.5%  to  15% methanol  as  a  polymerization  inhibitor.  The  use  of  formaldehyde  is  a  sprayer  of  plants  (3%),  in order  to  get  harvest  is  not  decayed  and  withered  easily,  but  it  can  result  residues  in  plants  and crop  yields.  It  can  affect  in  the  body  health  when  consumed.  Formalin  is  very  dangerous  if  it accumulates in the body. The safety threshold of formaldehyde in food that enters the body is 1.5- 14 mg/day. Formaldehyde in the drinking water that can be tolerated is 0.1 ppm. Therefore, in this study, the aim was to identify the presence of formaldehyde residues in chili and human blood that consumes  the  yield  of  chili  contaminated  with  formaldehyde..  This  research  was  conducted  to develop  a  method  for  detecting  formaldehyde  in  chilli  blood  samples  as  a  detection  medium  for body  conditions  which  were  then  reacted  with  pararosanillin  HCl.  The  results  of  the  dark  pink reaction followed by detection of the UV-VIS Spectrophotometer method at a wavelength of 539.0 nm. The results showed that this method was able to detect formaldehyde in blood samples with Y = 6.364x - 0.009 and the correlation coefficient (r) of 0.996 and Vx0 < 2, the detection limit was 0.069 ppm and the quantization limit was 0.230 ppm. The accuracy results give an average value of  88.173%.  The  precision  value  is  expressed  as  a  Relative  Standard  Deviation of  1.047%.  Chili samples  collected  from  around  Mount  Bromo  were  detected  with  the  result  of  a  range  of formaldehyde  concentrations  from  2,106-4,666  ppm.  For  human  blood  samples  is  not  found  the presence of formaldehyde.
Keyword : Formaldehyde, Spectrophotometer UV-VIS, Pararosanillyne HCl, Chilli

## Abstrak
Formalin  adalah  sebagai  larutan  yang  mengandung  30%  hingga  50%  formalin  dengan 0,5%  hingga  15%  metanol  sebagai  penghambat  polimerisasi.  Formalin  digunakan  sebagai penyemprot tanaman (3%) dilakukan agar panen tidak mudah busuk dan layu. Namun hal ini dapat berakibat  adanya  residu  pada  tanaman  dan  hasil  panennya  yang  dapat  mempengaruhi  kesehatan tubuh  ketika  dikonsumsi.  Formalin  sangat  berbahaya  jika  terakumulasi  di  dalam  tubuh.  Ambang batas aman formalin pada makanan yang masuk dalam tubuh orang dewasa adalah 1,5-14 mg per hari sedangkan formalin dalam bentuk air minum yang masih bisa ditolerir adalah 0,1 ppm. Oleh karena  itu  pada  penelitian  kali  ini  bertujuan  untuk  menganalisis  keberadaan  residu  formalin  pada cabai  dan  darah  manusia  yang  mengkonsumsi  hasil  panen  cabai  yang  terkontaminasi  formalin. Penelitian ini dilakukan untuk mengembangkan metode untuk mendeteksi formalin pada cabai dan sampel  darah  sebagai  media  deteksi  untuk  kondisi  tubuh  yang  kemudian  direaksikan  dengan pararosanillin HCl. Diperoleh hasil reaksi warna merah muda gelap diikuti dengan deteksi metode Spektrofotometer  UV-VIS  pada  panjang  gelombang  539,0  nm.  Dari  hasil  yang  diteliti menunjukkan  bahwa  metode  ini  mampu  mendeteksi  formalin  pada  sampel  darah  dengan  Y  = 6,364x  -  0,009  dan  nilai  koefisien  korelasi  (r)  sebesar  0,996  dan  Vx0  <  2,  batas  deteksi  adalah 0,069  ppm  dan  batas  kuantisasi  adalah  0,230  ppm.  Hasil  akurasi  memberikan  nilai  rata-rata 88,173%.  Nilai  presisi  dinyatakan  dengan  Deviasi  Standar  Relatif  1,047%.  Sampel  cabai  yang dikumpulkan dari sekitar gunung bromo terdeteksi dengan hasil rentang konsentrasi formalin dari 2.106  -  4,  667  ppm.  namun  untuk  sampel  darah  manusia  di  sekitar  lereng  gunung  bromo  tidak ditemukan adanya formalin.
Kata kunci: Formalin, Spektrofotometer UV-VIS, Pararosanillin HCl, Cabai

## Jurnal Kesehatan dr. Soebandi
Journal.stikesdrsoebandi.ac.id

## PENDAHULUAN
Sampai  saat  ini  konsumsi  cabai
masih menjadi komoditas utama holtikultura.  Bahkan  pada  waktu-waktu tertentu, karena naik turunnya permintaan atas  cabai  hal  ini  menjadikan  pasokan yang  terbatas.  Sehingga  kenaikan  harga cabai sering terjadi di kalangan masyarakat.  karena,  cabai  ini  sudah menjadi  bagian  yang  sering  dihidangkan dalam  masakan  nusantara.  Tanaman cabai  akan  tumbuh  dengan  baik  pada tanah yang berhumus, subur, gembur dan terang  serta  pH  antara  5-6.  Namun Tanaman  cabai ini sangat  mudah terserang  penyakit  layu  dan  pernafasan akar  juga  sering  terganggu  hal  ini disebabkan  karena  ketidak  mampuan bertahan  dalam  tanah  yang  berbecek. Tanaman cabai tumbuh subur pada tanah yang gembur, lempung berpasir dan kaya bahan  organik;  pH  5,0  -  7,0  dan  pH optimal  6,0  -  6,5.  Namun  bila  pH  tanah berada dibawah 5,0 maka perlu dilakukan penambahan kapur sebanyak 2 - 4 ton/ha. Selain  itu  cabai  baik  ditanam  pada ketinggian 0 - 500 meter dpl, curah hujan 600  -  1.250  mm/tahun,  suhu  udara  rata- rata  antara  18  –  30 o C  per  tahun,  serta memiliki  kelembaban  60  -  80%.  Cabai juga  baik  ditanam  di  tanah  yang  datar maupun lereng-lereng gunung atau bukit, dimana  ketinggian  lereng  lahan   tanah untuk  cabai  antara  0-10  (kemiringan) (Harpenas, 2010).
Untuk memenuhi kebutuhan produksi  cabai  merah,  perlu  dilakukan peningkatan  produksi  yang  mengacu pada  sektor  ekonomi,  mutu  maupun produkstivitas salah satu diantaranya bisa dilakukan  melalui  semprotan  larutan formalin  3%  pada  tanaman  tersebut  agar terhindar  dari  pembusukan  dini.  Namun jika  hal  ini  berlangsung  secara  terus- menerus  maka  akan  berakibat  adanya penumpukan  kadar  formalin  pada  cabai, sehingga dikhawatirkan sangat berbahaya jika  dikonsumsi  masuk  ke  dalam  tubuh manusia.  Formalin  kebanyakan  dijual berupa larutan, mengandung 30% sampai
50%  formalin  dengan  0,5%  sampai  15% metanol  sebagai  inhibitor  polimerisasi (IARC, 1982).
Adanya  akumulasi  dalam  tubuh tergantung  kadar  formalin  yang  masuk. Dimana kadar formalin yang terakumulasi semakin tinggi, maka semakin  berbahaya  dari  akibat  yang ditimbulkan. Jika melebihi  ambang  batas yang  telah  ditentukan  maka  akan  timbul gejala  keracunan  diantaranya  hilangnya kesadaran, anuria, muntah, edema laring, ulserasi  pada  mukosa  gastrointestinal, diare,  gagal  ginjal  dan  ulserasi  pada mulut dan esophagus. Selain itu formalin dapat  menyebabkan  diare  berdarah, kencing  darah,  muntah  darah,  iritasi lambung  dan  akhirnya  menyebabkan kematian  jika  pada  konsentrasi  yang sangat  tinggi  (Alsuhendra  dan  Ridawati, 2013). Menurut IPCS (International Programme on Chemical Safety), lembaga khusus dari tiga organisasi PBB yaitu ILO, UNEP dan WHO  yang peduli pada  keselamatan  penggunaan  bahan kimia,  bahwa  ambang  batas  aman formalin  pada  makanan  yang  masuk dalam tubuh orang dewasa  adalah 1,5-14 mg  per  hari  sedangkan  formalin  dalam bentuk  air  minum  yang  masih  bisa ditolerir adalah 0,1 ppm.
Sehingga perlu dilakukan pengujian kadar  formalin  dalam  darah  terkait dengan  kesehatan  tubuh  manusia  yang mengkonsumsi  cabai  dari  persawahan  di lereng gunung bromo, terkait penggunaan formalin sebagai penyemprot pada cabai. Hal  ini  dilakukan  untuk  mengetahui kadar  yang  ada  dalam  cabai  tersebut, sehingga  bisa  dibilang  aman  atau  tidak jika  dikonsumsi.  Sampel  yang  diambil adalah  ketika  cabai  sebelum  dikonsumsi dan  darah  masyarakat  sekitar  lereng gunung bromo yang telah mengkonsumsi cabai hasil panennya tersebut.
Beberapa pengujian telah dilakukan terhadap formalin menggunakan instrumen diantaranya HPLC, GC, spektrofotometer  UV-VIS  yang  mana mampu diaplikasikan juga pada

## Jurnal Kesehatan dr. Soebandi
Journal.stikesdrsoebandi.ac.id
pengujian  kadar  formalin  dalam  sampel cabai.  Penelitian  sebelumnya  dilakukan dengan  menggunakan  reagen  triptamin TA  menghasilkan  serapan  warna  merah keunguan  pada  panjang  gelombang  558 nm  (Yasri,  2015),  selain  itu  pernah dilakukan  pengujian  pada  sampel  udara ( flow  injection )  pada  panjang  gelombang 570 nm menggunakan reagen
pararosanillin HCl (Muiioz, 1989). Dalam  pengujian  kali  ini  dilakukan dengan mengaplikasikan spektrofotometer  UV-VIS  menggunakan reagen pararosanillin HCl yang direaksikan dengan formalin
menghasilkan  warna  merah  muda  gelap, kemudian diukur pada panjang gelombang  539  nm  dan  diperoleh  nilai absorbansinya pada sampel darah. Diketahui  bahwa  sampel  darah  memiliki matriks  yang  kompleks  dan  kadar  yang sangat  kecil,  namun  pada  pengujian  ini lebih mudah diaplikasikannya dan murah dibandingkan dengan HPLC dan GC.

## METODE PENELITIAN Bahan
Formalin 37%, Pararosanillin HCl (sigma aldrich),  aquadest,  plasma  darah,  sampel tanaman cabai.
Preparasi
Pada  penelitian  ini  digunakan standar formalin (0,2 ppm) yang direaksikan dengan reagen kimia Pararosanilline  HCl  (25  ppm)  dengan perbandingan  1  :  1.  Sampel  yang digunakan  adalah  tanaman  cabai  di lereng gunung bromo yang telah terpapar formalin  sebelumnya.  Selain  itu  juga dilakukan  pengambilan  sampel  darah manusia di sekitar lereng gunung bromo. Instrumentasi
Pada penelitian ini, untuk mengukur  digunakan  Spektrofotometer UV-Vis double beam dari Biobase, kuvet kuarsa  yang  digunakan  berisi  masing- masing pelarut dan sampel.

## Optimasi pararosanillin HCl
Pada  optimasi  kali  ini  digunakan perbandingan  antara  sampel  dengan reagen yaitu 1:0,5, 1:1, 1:2.

## Validasi Metode Analisis Linieritas dan range
Dibuat dengan metode spike placebo  yaitu  dengan  larutan  standar formalin  5  konsentrasi  berbeda  yaitu  0,5 ppm  -  0,15  ppm.  Kemudian  ditambah dengan  reagen  pararosanillin  HCl  dan diukur dengan spektrofotometer UV-VIS. Hasil  absorbansi  yang  didapat  dibuat kurva  baku  y  =  bx  +  a.  Nilai keberterimaan atas linieritas dapat dievaluasi dari nilai koefisien korelasi (r)  0,999  dan  nilai  Vx 0  2  maka  kurva dianggap  linier  (Yuwono  &  Indrayanto, 2005).

## LOD dan LOQ
Larutan
standar formalin disiapkan  dengan  5  konsentrasi  yaitu
0,025 ppm, 0,05 ppm, 0,1 ppm, 0,2 ppm, 0,4  ppm.  Kemudian  ditambah  dengan reagen  pararosanillin  HCl  dan  diukur dengan spektrofotometer UV-VIS. Persamaan  garis  regresi  diperoleh  dari konsentrasi  larutan  terhadap  respon detektor.  Slope  persamaan  garis  regresi digunakan  untuk  menghitung LOD dan LOQ .  Nilai  Sb  diperoleh  dari  hasil simpangan baku residual respon detektor. Nilai  batas  deteksi  diperoleh  dari perhitungan dengan menggunakan rumus:
LOD =
Keterangan : LOD = limit of detection SDY/X = simpangan baku residual Sl = Slope Batas  kuantitasi  merupakan  parameter pada  analisis  sebagai  kuantitasi  terkecil pada  analit  dalam  sampel  yang  masih dapat  memenuhi  kriteria  cermat  dan seksama (USP 38). Nilai batas kuantitasi diperoleh  dari  perhitungan  menggunakan rumus:

## Jurnal Kesehatan dr. Soebandi
Journal.stikesdrsoebandi.ac.id
LOQ = Keterangan : LOQ = limit of quantitation SDY/X = simpangan baku residual Sl = Slope Akurasi
Penentuan akurasi dilakukan
dengan  menambahkan  larutan  standar dengan  tiga  macam  konsentrasi  yang berbeda yaitu 80%, 100%, 120% ke dalam larutan  matriks.  Dilakukan  tiga  kali replikasi untuk masing-masing konsentrasi  yang  berbeda.  Kemudian ditambah  dengan  reagen  pararosanillin HCl dan diukur dengan spektrofotometer UV-VIS.  Persen  perolehan  kembali  pada larutan  matriks  dihitung  dengan  cara membagi  kadar  yang  diperoleh  dengan kadar  teoritis  dikali  100%  sedangkan Persen  perolehan  kembali    pada  sampel didapat dengan rumus :
Dimana : Cf : Konsentrasi analit dengan penambahan larutan standar Cu : konsentrasi analit tanpa penambahan larutan standar Ca : konsentrasi analit standar yang ditambahkan Larutan  sampel  tanpa  penambahan larutan  standar  (Cu)  ditentukan  kadarnya lebih  dahulu.  Persyaratan  akurasi  dinilai dari  persen  perolehan  kembali  yaitu persen  perolehan  kembali  bernilai  antara 95-102% (AOAC, 2013).
Presisi
Penentuan presisi dilakukan dengan cara repeatability yaitu pengukuran spike placebo  dari  konsentrasi  pada  akurasi 80%, 100%,  120% dilakukan  pengulangan 6  kali.  Kemudian  ditambah  dengan reagen  pararosanillin  HCl  dan  diukur dengan spektrofotometer UV-VIS. Selanjutnya ditentukan nilai RSD,
persyaratan presisi dinilai dari RSD yaitu RSD < 1,5 % (AOAC, 2013).
RSD didapatkan dengan rumus :
Dimana : RSD : standar deviasi relatif SD    : Standar deviasi x      : rata-rata kadar

## Aplikasi pada sampel
Untuk mengetahui kadar formalin dalam  cabai  maka  dilakukan  pencucian terhadap  cabai  tersebut,  selanjutnya dihaluskan  dengan  blender.  Sampel  yang telah  halus  ditimbang  100  gram,  lalu direndam  dalam  500  mL  akuades. Campuran  dimasukkan  ke  dalam  botol lalu dikocok dan dibiarkan beberapa saat. Campuran  disaring  mengunakan  kertas saring  dan  corong.  Filtrate  ditampung dalam botol dan ditutup rapat. Pengukuran  kadar  pada  cabai  dilakukan untuk  mengetahui  besar  kadar  sebelum masuk ke dalam darah.
Untuk  sampel  darah  manusia  di
sekitar  lereng  gunung  bromo,  yang diambil  adalah  bagian  plasma  darah dengan cara yaitu darah segar disentrifuse  sehingga  antara  serum  dan plasma  terpisah,    kemudian  plasma tersebut  ditambahkan  dengan  reagen Pararosanillin  HCl  kemudian  di  uji dengan spektrofotometer UV-VIS.

## HASIL PENELITIAN
Hasil pengukuran panjang gelombang  maksimal  diperoleh  dari pengukuran  absorbansi  larutan  standar formalin  0,1  ppm  yang  telah  direaksikan dengan  pereaksi  pararosanillin  HCl  pada panjang gelombang 200-800 nm. (Gambar 1) menunjukkan bahwa panjang gelombang maksimal sebesar 539 nm. Untuk  mendapatkan  hasil  yang optimum  pada  penggunaan  reagen  perlu dilakukan  optimasi  perbandingan  dengan jumlah  sampel,  karena  hal  ini  akan mempengaruhi  hasil  serapan  dari  sampel tersebut.  Hasil  optimasi  penggunaan reagen  pararosanillin  HCl  kali  ini dilampirkan dalam tabel 1.
Pada  penentuan  rentang  linieritas
50%-150% dilakukan dengan

## Jurnal Kesehatan dr. Soebandi
Journal.stikesdrsoebandi.ac.id
pengukuran  absorbansi  larutan  standar formalin  0,05 ppm, 0,075 ppm, 0,1 ppm, 0,125  ppm,  0,15  ppm.  yang  direaksikan dengan  pereaksi  pararosanillin  HCl (Gambar 2).
Berdasarkan kurva standar formalin  di  atas  diperoleh  persamaan regresi  Y  =  6,364x  -  0,009  dan  nilai koefisien  korelasi  (r)  sebesar  0,996  yang menunjukkan  korelasi  X  dan  Y  sangat kuat.  Penentuan  daerah  kerja  digunakan untuk  menentukan  konsentrasi  terendah dan  tertinggi  dimana  suatu  metode analisis menunjukkan  daerah  yang  linier. Nilai  nilai  Vx 0  2  sehingga  larutan standar formalin dengan rentang konsentrasi 0,05 - 0,15 ppm adalah linier.
Batas deteksi dan batas kuantitasi diperoleh  dari  dengan  menguji  standar formalin  konsentrasi  0,025  ppm,  0,05 ppm,  0,1  ppm,  0,2  ppm,  0,4  ppm  dan dibuat garis persamaan regresi konsentrasi  standar  formalin  versus absorbansi.  Batas  deteksi  merupakan konsentrasi analit terendah dalam sampel yang  masih  dapat  dideteksi  dengan tingkat keyakinan tinggi (USP 38).
Pada  Gambar  3  menunjukkan persamaan  kurva  untuk  penentuan  limit deteksi  dan  limit  kuantitasi,  didapatkan persamaan y =  6,617x + 0,00008 dengan harga  koefisien  korelasi  (r)  0,999, kemudian dihitung dengan menggunakan rumus  diatas  sehingga  didapatkan  limit deteksi  0,069  ppm  dan  limit  kuantitasi 0,230 ppm.
Pengujian akurasi dilakukan dengan  metode  adisi  pada  sampel simulasi  yaitu  dengan  menambahkan standar  formalin  konsentrasi  tertentu pada sampel matrix. Akurasi dari metode adisi dapat ditentukan dengan menghitung  % recovery dari  sejumlah standar  sebesar  80%,  100%,  120% kedalam  sampel  simulasi  yang  telah diketahui konsentrasinya (USP 38). Hasil akurasi  masing-masing  86,262%  untuk penambahan  standar  80%,  93,245  % untuk  penambahan  standar  100%,  dan 85,012%  untuk  penambahan  standar
120%  sehingga  memberikan  nilai  rata- rata sebesar 88,173%.
Hal ini menunjukkan  bahwa  hasil  yang  telah diperoleh  masih  berada  pada  rentang yang  telah  ditentukan  yaitu  85-110  % (AOAC, 2013).
Hasil  pengulangan  pengukuran yang  menunjukkan  kedekatan  respon disebut  presisi.  Penentuan  presisi  dapat ditentukan  dengan  menghitung    standar deviasi  relatif  (RSD)  dari  6  kali pengukuran yang dilakukan berbeda pada sampel  matrix  yang  ditambah  standar formalin 80%, 100%, 120%.  Harga RSD yang  dapat  diterima  pada  penelitian  ini adalah  jika  lebih  kecil  dari  2  %  (AOAC, 2013).  Perolehan  nilai  standar  deviasi relatif  dari  5  kali  replikasi  pada  sampel matrix  yang  ditambah  dengan  formalin adalah RSD 1,047 %.
Aplikasi metode spektrofotometer UV-VIS  pada  sampel  tanaman  cabai  dan darah  manusia  yang  mengkonsumsi tanaman  cabai  di  sekitar  lereng  gunung bromo diperoleh kadar yaitu antara 2,106 - 4,667 ppm untuk sampel tanaman cabai dan  tidak  terdeteksi  adanya  formalin untuk sampel darah manusia.

## PEMBAHASAN
Pada  penelitian  kali  ini  yaitu melakukan  validasi  metode  analisis formalin yang direaksikan dengan pararosanilline  HCl  menghasilkan  warna merah jambu kemudian dilakukan analisis  menggunakan  spektrofotometer UV  VIS  pada  panjang  gelombang  539 nm pada sampel cabai dan darah. Dipilih sampel cabai karena penggunaan formalin  sebagai  penyemprot  yaitu  3% dalam  upaya  peningkatan  produksi  agar tidak  cepat  terjadi  penuaan  dini  pada tanaman sehingga akan berpengaruh pada hasil panen. Namun dalam hal ini sampel yang  digunakan  adalah  cabai  dari  hasil panen  yang  meninggalkan  residu,  seperti diketahui  residu  pada  hasil  panen  cabai belum  diketahui  kadarnya,  namun  ketika dikonsumsi  akan  berpengaruh  pada kesehatan. Tanaman cabai yang

## Jurnal Kesehatan dr. Soebandi
Journal.stikesdrsoebandi.ac.id
digunakan  pada  penelitian  ini  adalah  di daerah  lereng  gunung  bromo,  karena curah hujan yang cukup tinggi, menyebabkan tanaman lebih cepat membusuk, sehingga akan mempengaruhi hasil panen.
Analisis  formalin  menggunakan spektrofotometer  UV-VIS  sudah  sering digunakan  dalam  berbagai  sampel,  pada kesempatan  ini,  pengujian  dilakukan dengan mereaksikan reagen pararosanillin  HCl  mampu  menghasilkan warna  serapan  merah  jambu  agak  ke ungu  pada  sampel.  Yang  pertama dilakukan  adalah  aplikasi  pada  cabai yang  mengandung  residu  formalin  dan kemudian  sampel  plasma  darah  manusia yang mengkonsumsi cabai yang mengandung  residu  formalin.  Digunakan sampel  plasma  karena  pada  dasarnya darah  memiliki  warna  merah  terang hingga  merah  tua  kebiruan  tergantung oksigen  yang  dibawa  oleh  sel  darah merah, plasma juga mengandung 92% air dan  campuran  kompleks  zat  organik  dan anorganik  (Sloane,  2004),  selain  itu warna  plasma  yang  bening  dibanding serum  membuat  analisis  formalin  pada serapan  warna  yang  didapat  dari  reaksi dengan  pararosanilline  HCl  ini  tidak mempengaruhi signifikan.
Tahapan  awal  dengan  melakukan optimasi  scanning  panjang  gelombang dan optimasi konsentrasi reagen pararosalline  HCl,  agar  mendapatkan serapan  maksimum  pada  konsentrasi yang  telah  ditentukan.  Pada  kesempatan ini digunakan konsentrasi 0,1 ppm karena diketahui  menurut  IPCS  ambang  batas aman formalin didalam tubuh. Pada hasil optimasi  diperoleh  panjang  gelombang maksimum 539 nm, dengan perbandingan sampel : pararosanillin HCl yaitu 1 : 1 pada konsentrasi 0,1 ppm pada sampel  dan  25  ppm  pada  reagen pararosanilline.
Berdasarkan  optimasi  tersebut, kemudian  dilakukan  validasi  metode analisis  pada  sampel  darah  dilakukan yaitu  dengan  parameter  spesifisitas,
linieritas,  LOD  &  LOQ,  akurasi,  presisi. Pada tahapan spesifisitas hanya dilakukan dengan  scanning  panjang  gelombang dimana hanya spesifik pada satu panjang gelombang  maksimum  yaitu  539  nm dengan  konsentrasi  0,1  ppm  diperoleh absorbansi  0,617.  Dilanjutkan  dengan pengujian  linieritas  dimana  hasil  yang diperoleh  mendapatkan  hasil  yang  linier dengan  parameter  uji  r  mendekati  1  dan Vx0 < 2. Pada pengujian  LOD dan  LOQ diperoleh  hasil  LOD  adalah  0,069  ppm dimana  hal  ini  mendekati  konsentrasi 100% pada tubuh sedangkan LOQ berada pada  konsentrasi  0,230  ppm  dimana merupakan  konsentrasi  diatas  100%  hal ini kemungkinan dipengaruhi oleh kecilnya  kadar  pada  100%  sehingga dapat  disimpulkan  bahwa  konsentrasi 100%  dalam  tubuh  ini  berada  dibawah LOQ  dan  diata  LOD  yang  mana  masih bisa  terdeteksi  namun  sulit  untuk  di kuantitasi.
Pengujian selanjutnya adalah mengukur  tingkat  akurasi  dari  metode analisis,  yaitu  dengan  berbagai  tingkat konsentrasi  sehingga  diperoleh  nilai keakuratan  pada  rentang  85-110  % sehingga  bisa  dikatakan  bahwa  metode ini  akurat,  selanjutnya  perlakuan  dari akurasi  dilanjutkan  dengan  pengukuran presisi  dimana  pengujian  dilakukan dengan  metode  interday  5  konsentrasi dan diperoleh hasil RSD < 2% menunjukkan  bahwa  metode  ini  cukup presisi.
Aplikasi pada cabai menunjukkan kadar yang cukup tinggi jika dikonsumsi, hal  ini  bisa  berpengaruh  pada  kesehatan tubuh,  dimana  didalam  tubuh  formalin bisa  menimbulkan  terikatnya  DNA  oleh protein,  sehingga  mengganggu  ekspresi genetik  yang  normal.  Hewan  coba  yang menghisap formalin terus menerus terserang  kanker  dalam  hidung  dan tenggorokannya  (ATSDR,  1999).  Seperti diketahui  penggunaan  formalin  sebagai penyemprot  pada  tanaman  sering  kali menghasilkan residu yang tidak diharapkan.  Didalam  tubuh  formalin  di

## Jurnal Kesehatan dr. Soebandi
Journal.stikesdrsoebandi.ac.id
metabolisme  menjadi  formaldehid  yang memiliki  waktu  paruh  yang  cepat  yaitu T½  1,5  menit  di  plasma  darah.  Dalam kesempatan  ini  sampel  plasma  manusia dimana  sampel  yang  diambil  adalah darah  masyarakat  sekitar  lereng  gunung bromo yang sering menggunakan formalin  dalam  aktivitas  pertaniannya. Plasma darah di uji menggunakan metode tersebut  diatas  dan  hasil  yang  diperoleh bahwa  tidak  terdeteksi  adanya  formalin pada sampel tersebut. Hal ini kemungkinan disebabkan karena
formalin  yang  dikonsumsi  sudah  sangat kecil  konsentrasinya  sehingga  tidak terakumulasi  dalam  tubuh.  Menurut Owen  et  al  (1990),  sebanyak  22  mg formaldehid  mampu  diubah  menjadi CO 2 /menit  dihati  manusia,  sehingga penyerapan  formaldehid  melalui  darah tidak
menyebabkan
akumulasi
formaldehid  di  dalam  tubuh  karena proses  konversi  menjadi  asam  format cepat  terjadi.  Selain  itu  menurut  Federal Provincial  Territorial  Committee  on Drinking  Water,  formaldehid  merupakan metabolit  yang  bersifat  sitotoksik  pada dosis  tinggi  yang  dapat  menyebabkan tumor.  Namun  adanya  kadar  tinggi formalin  dalam  bentuk  residu  pada  cabai juga perlu diwaspadai.

## KESIMPULAN
Hasil  penelitian  menunjukkan panjang gelombang maksimal adalah 539 nm.  Uji  linieritas  menunjukkan  bahwa ada  hubungan  linier  antara  konsentrasi dengan  absorbansi  dengan  persamaan  Y =  6,364x  -  0,0092  dan  nilai  koefisien korelasi  (r)  sebesar  0,996,  limit  deteksi 0,069  ppm  dan  limit  kuantitasi  0,230 ppm.  Nilai  presisi  dinyatakan  dengan Relative  Standard  Deviation sebesar 1,047%  yang  berarti  presisi  baik.  Hasil akurasi  masing-masing  86,262%  untuk penambahan  standar  80%,  93,245  % untuk  penambahan  standar  100%,  dan 85,012%  untuk  penambahan  standar 120%  sehingga  memberikan  nilai  rata- rata  sebesar  88,173%.  Sampel  cabai
diambil dari sekitar lereng gunung bromo dengan deteksi range konsentrasi formalin  adalah  2,106  –  4,  667  ppm, namun  untuk  sampel  darah  manusia  di sekitar  lereng  gunung  bromo  tidak ditemukan adanya formalin.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terima  kasih  ditujukan  kepada  Institusi Stikes dr. Soebandi Jember yang berkontribusi  pada  penelitian  ini  dan segala  segenap  saran  dan  prasarana  yang telah  disediakan. ketua  Stikes  dr.
Soebandi  Jember  Drs.  Said  Mardjianto, S.  Kep.,  Ns.,  M.M  dan  Kepala  program studi  Farmasi  Dhina  Ayu  Susanti., M.Kes.,  Apt  atas  kesempatan  yang diberikan  untuk  terlaksananya  penelitian ini.  Kepada  Prof.  Bambang  kuswandi., PhD sebagai pembimbing dalam menyelesaikan penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
ATSDR, 1999, Toxicological profile for formaldehyde  (final  report).  NTIS Accession No. PB99-166654, Atlanta,  GA: Agency  for  Toxic Substance  and  disease  Registry,
451 pp
Alsuhendra  dan  Ridawati,  2013, Bahan Toksik  Dalam Makanan , Bandung: PT. Remaja Rosdakarya. Association of Official Analytical Chemists,  2013, AOAC  Appendix K : Guidelines for Dietary Supplements and Botanicals , pp. 1- 32.
Dermawan,R  dan  Asep  Harpenas,  2010,
Budi  Daya  Cabai  Unggul,  Cabai Besar, Cabai keriting, Cabai Rawit, dan Paprika , Penebar
Swadaya: Jakarta. Federal Provincial Territorial Committee on Drinking Water. 1997. Formaldehyde . Guidelines for Canadian  Drinking  Water  Quality, Canada.
Harpenas,  Asep  &  R.  Dermawan.  2010.
Budidaya  Cabai  Unggul .  Penebar Swadaya. Jakarta.

## Jurnal Kesehatan dr. Soebandi
Journal.stikesdrsoebandi.ac.id
Int.  A.  Research.  Cancer,  1982,  Some Industrial  Chemicals  and  Dyestuffs .
IARC Monographs on the Evaluation of Carcinogenic Risk of Chemicals  to  Humans ,  vol.  29. Lyon, France: 416 pp.
Int. P. Chemical safety, 1989, Formaldehyde . IPCS Environmental Health , Vol 89: 8-9 Muiioz, Maria Pedrero, F. Javier Manuel de  Villena  Rueda  and  Luis  M.  Polo Diez, 1989, Determination of Formaldehyde  in  Air  by  Flow Injection Using Pararosaniline and Spectrophotometric Detection , Department of Analytical Chemistry, Faculty  of  Chemistry,  University
Complutense of Madrid , 28040- Madrid, Spain : Vol 114 Owen,  B.  A.,  C.  S.  Dudney,  E.  L.  Tan, and C. E. Easterly. 1990.
Formaldehyde In Drinking Water .
Regul.  Toxicol.  Pharmacol.  11:  220- 236.
Sloane, E. 2004, Anatomi dan Fisiologi untuk pemula, Jakarta : EGC
The USP Convention, 2015, The United States Pharmacopoeia 38 th
Edition-National  Formulary  33 , Rockvile  :  The  United  States Pharmacopoeia Convention.
Yasri,  Nael  G,  Hasan  Seddik,  Maha  A. Mosallb,  2015,  Spectrophotometric determination of formaldehyde based on  the  telomerization  reaction  of tryptamine, Arabian  Journal  of Chemistry, 8, 487–494
Yuwono,  M.,  and  Indrayanto,  G.,  2005,
Validation  of  Chromatographic Methods  of  Analysis ,  Profiles  of drug  Substances,  Excipients,  and Related  Methodology,  Volume  32, Elsevier Inc., pp. 243-258.

## Jurnal Kesehatan dr. Soebandi
Journal.stikesdrsoebandi.ac.id
Tabel 1. Hasil optimasi penggunaan reagen pararosanillin HCl No. Perbandingan sampel : pararosanillin HCl Absorbansi yang diperoleh 1. 1 : 0,5 0,322 2. 1 : 1 0,617 3. 1: 2
1,294
Gambar 1. Penentuan panjang gelombang Gambar 2. Kurva linieritas y = 6,364x - 0,0092 R² = 0,9929 0 0,2 0,4 0,6 0,8 1 0 0,05 0,1 0,15 0,2 Abs or b as n i konsentrasi  (ppm) Kurva Linieritas

## Jurnal Kesehatan dr. Soebandi
Journal.stikesdrsoebandi.ac.id
Gambar 3. Kurva untuk limit deteksi dan limit kuantitasi y = 6,169x + 8E-05 R² = 0,999 0 0,5 1 1,5 2 2,5 3 0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 A b sor b an si Konsentrasi (ppm) Kurva untuk limit deteksi dan limit kuantitasi LOD LOQ