INNOVATIVE: Journal Of Social Science Research Volume 3 Nomor 6 Tahun 2023 Page 8074-8085 E-ISSN 2807-4238 and P-ISSN 2807-4246
Website: https://j-innovative.org/index.php/Innovative
Aktivitas Antibakteri Akar Kayu Bangkal ( Nauclea subdita) Terhadap Staphylococcuc aureus
Vita Mayasari 1 ✉ , Dede Mahdiyah 2 , Melviani 3 , Kunti Nastiti 4
Program Studi Sarjana Farmasi, Fakultas Kesehatan Universitas Sari Mulia Email: ovet262@gmail.com 1 ✉

## Abstrak
Senyawa  bioaktif  tanaman  bangkal  ( Nauclea  subdita)  menghasilkan  senyawa  metabolit  sekunder seperti tanin, fenolik, steroid dan senyawa alkaloid. Tetapi belum ditemukan bukti penelitian ilmiah yang  menyatakan  bahwa  akar  tanaman  bangkal  ( Nauclea  subdita)  dapat  digunakan  sebagai antibakteri.  Menguji  aktivitas  antibakteri  ekstrak  akar  kayu  bangkal  ( Nauclea  subdita),  konsentrasi hambat minimun (KHM) ekstrak akar kayu bangkal ( Nauclea subdita) dan konsentrasi bunuh minimun (KBM)  ekstrak  akar  kayu  bangkal  ( Nauclea  subdita)  terhadap  Staphylococcus  aureus.  Penelitian eksperimental sesungguhnya ( True Eksperimental Research) untuk mengetahui aktivitas antibakteri ekstrak etanol akar kayu bangkal ( Nauclea subdita) terhadap bakteri Staphylococcus aureus. Desain penelitian Posttest-Only Control Group Design. Posttest-Only Control Group Design dilakukan secara kelompok  eksperimen  maupun  kelompok  control,  baik  dalam  kelompok  eksperimen  maupun kelompok kontrol akan dibandingkan yang dimana kelas eksperimen akan mendapatkan perlakuan sedangkan kelas kontrol tidak mendapatkan perlakuan. Akar kayu bangkal ( Nauclea subdita) terhadap Staphylococcus  aureus,  memiliki  kemampuan  sebagai  antibakteri  terhadap  Staphylococcus  aureus dengan zona hambat 13,2 mm yang termasuk kedalam kategori zona hambat kuat sesuai hasil skrining aktivitas  antibakteri  serta  memiliki  kemampuan  daya  hambat  (KHM)  pada  konsentrasi  100  mg/L dengan nilai sig. Kruskal-Wallis Test adalah 1.000 dan nilai signifikansi pada Mann-Whitney Test adalah 1.000. Akar kayu bangkal ( Nauclea subdita) tidak memiliki kemampuan daya bunuh (KBM) terhadap Staphylococcus  aureus.  Penelitian  ini  menunjukkan  bahwa  akar  kayu  bangkal  (Nauclea  subdita) memiliki  kemampuan  sebagai  antibakteri  terhadap Staphylococcus  aureus,  tetapi  tidak  memiliki kemampuan daya bunuh (KBM) terhadap Staphylococcus aureus.
Kata Kunci: Akar Kayu Bangkal, Antibakteri, Kbm, Khm, Staphylococcus Aureus
Abstract
Bangkal plant bioactive compounds (Nauclea subdita) produce secondary metabolites such as tannins, phenolics, steroids and alkaloid compounds. However, scientific research evidence has not been found which states that the roots of  the bangkal plant (Nauclea subdita) can be used as an antibacterial. Testing the antibacterial activity of bangkal wood root extract (Nauclea subdita), minimum inhibitory concentration (MIC) of bangkal wood root extract (Nauclea subdita), minimum killing concentration (KBM)  of  bangkal  wood  root  extract  (Nauclea  subdita)  against  Staphylococcus  aureus.  True Experimental Research to determine the antibacterial activity of the ethanol extract of bangkal root against Staphylococcus aureus bacteria. Posttest-Only Control Group Design research design. Bangkal wood root (Nauclea subdita) against Staphylococcus aureus, has the ability as an antibacterial against Staphylococcus aureus with an inhibition zone of 13.2 mm which is included in the strong inhibition zone category according to the results of the antibacterial activity screening and has an inhibitory ability  (MIC)  at  a  concentration  of  500  mg/L  with  sig.  The  Kruskal-Wallis  Test  is  1,000  and  the significance value on the Mann-Whitney Test is 1,000. Bangkal wood root (Nauclea subdita) has no killing power (KBM) against Staphylococcus aureus. The root of bangkal wood (Nauclea subdita) has the  ability  as  an  antibacterial  against  Staphylococcus  aureus,  but  does  not  have  the  ability  to  kill Staphylococcus aureus.
Keywords: Antibacterial, Bangkal Wood Root, Kbm, Khm, Staphylococcus Aureus

## PENDAHULUAN
Penyakit infeksi adalah penyebab angka kesakitan dan angka kematian tertinggi di negara berkembak salah satunya di Indonesia. Tidak lepas dari banyaknya bakteri patogen yang  menyerang  manusia  sehingga  muncul  berbagai  penyakit  bakteri  patogen  lebih berbahaya dan menyebabkan infeksi  baik  secara  sporadik maupun endemik, antara  lain Staphylococcus aureus (Mpila et al., 2012).
Staphylococcus aureus ialah bakteri yang sering muncul di dunia, tingkat keparahan infeksinya bermula dari infeksi biasa di kulit, bakteri ini juga merupakan bakteri yang sering muncul  di  kulit  dan  bersifat  asing.  Infeksi  dari Staphylococcus  aureus  terjadi  akibat melemahnya  sistem  imun  tubuh.  Penyakit  karena  bakteri Staphylococcus  aureus  sering terjadi di lingkungan sekitar salah satunya yaitu jerawat. Di Indonesia, studi dermatologi kosmetika Indonesia mencatat sekitar 60% penderita jerawat di tahun 2006, dan tahun 2007 meningkat 80%. Faktor penyebab jerawat muncul dari genetik, endokrin, stresm makanan, infeksi bakteri, dan bahan kimia (Rahmadani et al., 2017).
Jerawat  bisa  disebabkan  karena  produksi  kelenjar  minyak  yang  berlebih  dan diperburuk infeksi bakteri, salah satu bakteri penyebab jerawat yaitu Staphylococcus aureus,
bakteri ini tidak patogen pada kondisi normal, tetapi bila terjadi perubahan kondisi kulit lalu sekresi kelenjar keringat dan kelenjar sebasea yang menghasilkan asam lemak, asam amino, urea, air dan garam merupakan sumber nutrisi bagi pertumbuhan bakteri sehingga, kondisi tersebutlah yang dapat menyebabkan inflamasi. Sehingga asam lemak dan minyak pada kulit tersumbat dan mengeras menjadi benjolan jerawat (Meilina dan Hasanah 2018).
Di  alam  khususnya  daerah  Kalimantan  Selatan  banyak  tanaman  yang  berkhasiat sebagai  antibakteri,  masyarakat    menggunakan  obat  tradisional  secara  turun-temurun untuk mengobata berbagai penyakit, termasuk penyakit infeksi.  Salah obat tradisional yang digunakan  yaitu  tanaman bangkal ( Nauclea subdita). Tanaman bangkal dijumpai daerah yang  habitatnya  lahan  basah  seperti  rawa  dan  tepi  sungai.  Banyak  masyarakat menggunakan  tanaman  bangkal  bagian  akar  secara  empiris  untuk  mengurangi  jerawat akibat infeksi dengan cara merebus akarnya.
Senyawa  bioaktif  tanaman  bangkal  ( Nauclea  subdita)  menghasilkan  senyawa metabolit  sekunder  seperti  tanin,  fenolik,  steroid  dan  senyawa  alkaloid  (Aisiah,  2012). Namun, bukti penelitian ilmiah tentang pengunaan akar tanaman bangkal ( Nauclea subdita) sebagai antibakteri masih belum ditemukan, meski sudah digunakan masyarakat sebagai obat  tradisional  secara  empiris.  Untuk  uji  aktivitas  antibakteri  ekstrak  akar  kayu  Bangkal ( Nauclea  subdita)  dilakukan  dengan  metode  dilusi,  metode  ini  melakukan  uji  aktivitas antibakteri  berdasarkan  pengamatan  konsentrasi  rendah  yang  mampu  menghambat tumbuhnya mikroorganisme  dengan  media cair atau  padat yang dicairkan   yang sudah dicampur zat antimikroba. Metode dilusi  ini dilakukan karena  metode  yang  tepat untuk menentukan nilai KHM (Konsentrasi Hambat Minimun) dan dilusi padat digunakan untuk melihat KBM (Konsentrasi Bunuh Minimum) dengan cara menginokulasi bakteri uji pada media yang mengandung antibakteri.
Berdasarkan uraian di atas, alasan peneliti mengangkat penelitian ini karena peneliti ingin  mengetahui  kebenaran  akar  kayu  bangkal  ini  dapat  mengurangi  jerawat  yang diperburuk oleh  bakteri staphylococcus aureus penyebab infeksi seperti yang digunakan masyarakat.

## METODE PENELITIAN
Metode  penelitian  yang  digunakan  pada  penelitian  ini  adalah  metode  penelitian eksperimental  sesungguhnya  ( True  Eksperimental  Research)  yang  bertujuan  untuk mengetahui  aktivitas  antibakteri  ekstrak  etanol  akar  kayu  bangkal  ( Nauclea  subdita) terhadap bakteri Staphylococcus aureus. Desain penelitian yang digunakan yaitu Posttest-
Only  Control  Group  Design.  Posttest-Only  Control  Group  Design  merupakan  desain penelitian  yang  dilakukan  secara  kelompok  eksperimen  maupun  kelompok  control. Penelitian  ini  dilakukan  di  Laboratorium  Mikrobiologi  Universitas  Sari  Mulia.  Alat  yang digunakan adalah Alat yang digunakan dalam penelitian adalah Erlenmeyer ( Pyrex), gelas ukur  ( Pyrex),  tabung  reaksi  (Pyrex),  rak  tabung  reaksi,  pipet  tetes,  hot  plate  (Thermo Scientific-Cimarec), blender, ayakan mesh 40, kaca arloji (Pyrex), timbangan analitik (AciS AD-600i), batang pengaduk, stirer, cawan petri (Pyrex), rotary evaporator (Dragonlab RE 100 Pro),  jarum  ose,  pinset,  inkubator  (ESCO  Isotherm),  Biological  Safety  Cabinet  (Thermo Scientific),  autoklaf  (GEA  YX-280D),  botol  coklat  untuk  maserasi,  corong  (Pyrex),  kertas saring, aluminium foil, label, lemari pendingin, mistar berskala, dan spriritus.
Bahan yang digunakan adalah akar kayu Bangkal ( Nauclea subdita) sebagai bahan uji yang  dijadikan  sampel ,  bakteri  uji  (Staphylococcus  aureus)  yang  diperoleh  dari Laboratorium Mikrobiologi Universitas Sari Mulia, larutan DMSO, aquades steril, etanol 96%, kloramfenikol sebagai antibiotik pembanding, Nutrient Broth dan Nutrient Agar (NA).
Prosedur Penelitian
1. Ekstrak Akar Kayu Bangkal
Ekstrak  akar  kayu  bangkal  (Nauclea  subdita)  didapatkan  dengan  cara  maserasi. Maserasi dilakukan dengan cara merendam simplisia akar kayu Bangkal sebanyak 100 gram dengan pelarut etanol 96%, hingga didapatkan larutan jernih yaitu keadaan semua ekstrak dianggap sudah larut oleh pelarut dengan mengganti pelarut setiap 3x24 jam. Jika maserat sudah  terkumpul  maka  dipekatkan  dengan rotary  evaporator menggunakan  suhu  50°C , sehingga  didapatkan  ekstrak  kental  akar  kayu  Bangkal.  Ekstrak  tersebut  kemudian ditimbang dan disimpan dalam gelas tertutup sebelum diuji (Mustarichie., 2020).
2. Uji Aktivitas Antibakteri Akar Kayu Bangkal
a. Pembuatan Larutan Kontrol Negatif Dibuat  dengan  cara Nutrient  Broth  sebanyak  0,5  ml  dalam  tabung  reaksi  dan ditambhkan larutan DMSO sebanyak 0,5 ml. Ambil lagi 0,5 ml dari campuran tersebut lalu buang. Selanjutnya tambahkan 0,1 ml bakteri uji dan Nutrient Broth sampai 0,4 ml (Fiana., 2020).
b. Pembuatan Larutan Kontrol Positif
Larutan  kontrol  positif  ini  diolah  dari  sediaan  obat  antibiotik  yaitu  kloramfenikol, timbang kloramfenikol sebanyak 1 mg dan larutkan dengan aquades steril sebanyak 1 ml. Ambil larutan kloramfenikol sebanyak 0,5 ml kemudian tambahkan 0,1 ml bakteri
dan juga Nutrient Broth sampai 0,4 ml (Fiana., 2020).
c. Pembuatan Larutan Uji
Larutan  uji  diolah  dengan  mencampurkan  0,02  gram  ekstrak  akar  kayu  bangkal dengan  pelarut  DMSO  10%  sebanyak  10  ml.  Dengan  konsentrasi  yang  digunakan adalah 500%, 250%, 100% (Fiana., 2020).
d. Pembuatan Media
• Media Nurient Agar (NA)
Media ini diolah dengan cara melarutkan 3,6 gram NA kedalam 180 ml aquades. Selanjutnya  media  dipanaskan  hingga  homogen.  Setelah  tercampur,  media kemudian  disterilkan  menggunakan  autoklaf  pada  suhu  121°C  dalam  waktu  15 menit (Mpila et al., 2012) .
• Medium Nurtien Broth (NB)
Diolah dengan cara menimbang serbuk NB sebanyak 0,56 gram, lalu tambahkan aquades  sebanyak  70  ml.  Kemudian  panaskan  campuran  hingga  mendidih  lalu disterilkan dengan autoklaf 121°C dalam waktu 15 menit dan jika  susdah sedikit dingin simpan di lemari pendingin (Mpila et al., 2012) .
e. Persiapan Inokulum Bakteri uji yang diremajakan pada media Nutrient Agar (NA) miring steril. Bakteri uji yang digunakan adalah Staphylococcus aureus. Bakteri uji ini diinokulasi sebanyak satu ose ke dalam media NA lalu diinkubasi selama 24 jam dengan suhu 37°C. Peremajaan dilakukan di Laminar Air Flow (LAF) agar tetap steril (Mpila et al., 2012).
Pembuatan Suspensi Bakteri Uji
Mencampurkan larutan BaCL 2 dan H 2 SO 4 dan 0,4 mL Nutrient Broth (Hafizah, 2015).
Tabel  1. Pembuatan Suspensi Bakteri Uji
Standar Mc Farland Kepadatan Sel (×10 3 /ml) A620 nm 0.5 1.5 0.05 ± 0.01 1 3 0.17 ± 0.01 2 6 0.18 ± 0.01 3 9 0.37 ± 0.01 4 12 0.55 ± 0.01 5 15 0.74 ± 0.01 6 18 0.81 ± 0.01 7 21 0.83 ± 0.05 8 24 0.84 ± 0.01
9 27 0.94 ± 0.01 10 30 1.01 ± 0.02

## 3. Uji Aktivitas Antibakteri Akar Kayu Bangkal ( Nauclea subdita)
Aktivitas  antibakteri  Akar  Kayu  Bangkal  ( Nauclea  subdita)  terhadap  bakteri Staphylococcus aureus diuji dengan metode dilusi cair. Metode dilusi cair dilakukan dengan menyiapkan beberapa tabung reaksi yang sudah steril, larutan uji dan bakteri uji sebagai kontrol  negatif,  larutan  antibiotik  pembanding  dan  bakteri  uji  sebagai  kontrol  positif. Selanjutnya tiap-tiap tabung diisi dengan 0,5 mL medium NB. Selanjutnya ditambahkan 0,5 mL ekstrak. Dari tabung pertama dengan konsentrasi 500% diambil 0,5 mL dipindahkan kedalam tabung kedua dengan konsentrasi 250%, dan seterusnya sampai konsentrasi 100%, kemudian  diambil 0,5 mL  larutan  pada tabung terakhir dan  dibuang,  sehingga masing- masing  tabung  berisi  0,5  mL.  Kemudian  masing-masing  tabung  ditambahkan  0,1  mL suspensi  bakteri  dengan  volume  total  masing-masing  tabung  adalah  1  mL.  Selanjutnya diinkubasi  dalam  inkubator  pada  suhu  37ºC  selama  24  jam.  Diamati  kekeruhan  dan dibandingkan  dengan  kontrol  positif  (kloramfenikol),  dan  kontrol  negatif  (DMSO). Kosentrasi paling rendah yang tidak menunjukan kejernihan adalah KHM (Fiana., 2020).
Aktivitas antibakteri  dari ekstrak tanaman diklasifikasikan kuat  jika nilai KHM  < 100 mg/mL, sedangkan jika 100 < KHM ≤ 500 mg/mL dan lemah jika nilai KHM > 500 mg/mL (Paula et al., 2018). Untuk mengetahui KBM, dilakukan penggoresan dari tabung larutan dengan  konsentrasi  500  mg/mL,  250  mg/mL,  100  mg/mL  dari  KHM  pada  media  padat, kemudian  diinkubasi  pada  suhu  37°C  selama  24  jam.  Setelah  24  jam,  Kosentrasi  paling rendah  yang  tidak  menunjukan  adanya  pertumbuhan  koloni  bakteri  pada  media  padat adalah KBM (Nuraina, 2015).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil
Rendemen Ekstrak Akar Kayu Bangkal
Tabel  2. Hasil Rendemen Ekstrak Daun Beluntas Berat Simplisia (gram) Berat Ekstrak (gram) Rendemen (%) 225,75 2,48 1,1
Tabel  3. Hasil Skrining Aktivitas Antibakteri Akar Kayu Bangkal ( Nauclea subdita) terhadap Staphylococcus aureus
Perlakuan Replikasi (mm) Rata-rata ± SD Gambar I II II Kontrol Positif 26,7  19,3  16,2 20,7 ±5,3 Kontrol Negatif 0 0 0 0 ± 0 Ekstrak Akar Kayu Bangkal 500mg/L 17,2  12,1  9,3 12,8 ± 4,0 Ekstrak Akar Kayu Bangkal 250mg/L 6,1 0 0 2,0 ± 3,5 Ekstrak Akar Kayu Bangkal 100mg/L 19,4  18,7  19,6 12,7 ± 11,0
Tabel  4. Hasil pengamatan nilai Konsentrasi Hambat Minimum (KHM) ekstrak akar kayu
Bangkal ( Nauclea subdita) terhadap Staphylococcus aureus Perlakuan Replikasi P value Gambar I II III Kontrol positif Jernih  Jernih  Jernih - Kontrol negatif Keruh  Keruh  Keruh - Konsentrasi 500mg/L Jernih  Jernih  Keruh
1.000 a 0.317 b 1.000 c
Konsentrasi 250mg/L Keruh  Jernih  Jernih 1.000 a 0.317 b 0.317 d
Konsentrasi 100mg/L
Jernih  Jernih  Jernih
1.000 a 1.000 c
0.317 d
Keterangan:
Kontrol positif  : Kloramfenikol dan suspensi bakteri
Kontrol negatif  : DMSO 10% dan suspensi bakteri
Tabel  5. Hasil Pengamatan Nilai Bunih Minimun (KBM) Ekstrak Akar Kayu Bangkal
( Nauclea subdita) terhadap Staphylococcus aureus
Perlakuan Replikasi Gambar I II III Kontrol positif - - - Kontrol negatif + + +
Konsentrasi 500mg/L + + + Konsentrasi 250mg/L + + + Konsentrasi 100mg/L + + +
Keterangan:
Tanda positif (+) : Ada pertumbuhan bakteri
Tanda negatif (-) : Tidak ada pertumbuhan bakteri

## Pembahasan
Ekstraksi  dilakukan  menggunakan  metode  maserasi  dengan  pelarut  etanol  96% dengan waktu 3x24jam. Pelarut yang digunakan adalah etanol 96%, karena etanol dapat menarik hampir semua senyawa kimia yang terkandung dalam tanaman, baik yang bersifat polar maupun non polar. Metode maserasi dipilih dikarenakan metode  ini mudah untuk dilakukan,  cepat,  dan  dapat  menarik  senyawa  metabolit  pada  ekstrak  tanpa  merusak senyawa tersebut (Mustarichie et al., 2020). Setelah maserat terkumpul maka dipekatkan menggunakan waterbath 50 0 C, hasil pemekatan diperoleh ekstrak kental berwarna kuning pekat sebanyak 2,48 gr dengan rendemen 1,1% yang dikarenakan pada akar kayu bangkal
( Nauclea subdita) itu memiliki metabolit sekunder yang sedikit.
Skrining  aktivitas  antibakteri  akar  kayu  bangkal  ( Nauclea  subdita)  terhadap Staphylococcus  aureus  dilakukan  dengan  metode  difusi  sumuran,  terdapat  3  perlakuan yang diberikan  terhadap Staphylococcus aureus yaitu  sampel ekstrak akar kayu bangkal ( Nauclea subdita) dengan konsentrasi 500 mg/L, 250 mg/L, dan 100 mg/L, kontrol positif (kloramfenikol), dan kontrol negatif (DMSO). Kontrol positif menggunakan kloramfenikol yang memiliki mekanisme kerja menghambat sintesis protein bakteri dengan cara berikatan pada ribosom sehingga menghambat tumbuhnya rantai peptide (Abdurrahman & Febriana, 2018).  Sedangkan  kontrol  negatif  menggunakan  DMSO  karena  tidak  memiliki  fungsi antibakteri sehingga tidak memberi pengaruh terhadap uji bakteri (Prasetyo, 2020). Untuk penentuan hasil skrining aktivitas antibakteri dilakukan dengan jangka sorong, yang mana hasil penelitian menunjukan terdapat zona bening disekitar lubang sumuran sampel ekstrak akar kayu bangkal ( Nauclea subdita) dan kontrol positif (kloramfenikol), namun tidak ada zona bening pada kontrol negatif (DMSO).
Diameter  rata-rata  zona  hambat  yang  diperoleh  dari  pengujian  ekstrak  akar  kayu bangkal  ( Nauclea  subdita)  adalah  13,2  mm  yang  termasuk  kedalam  zona  hambat  kuat. Adapun kategori zona hambat menurut (Suriaman et al., 2016) terbagi menjadi 4 kategori yaitu kategori sangat kuat (diameter ≥20mm), kategori kuat (diameter 10 -20mm), kategori sedang (diameter 5- 10) dan kategori lemah (diameter ≤5mm). Sedangkan diameter pada kontrol  positif  20,7  yang  termasuk  zona  hambat  kuat,  dan  pada  kontrol  negatif  tidak memiliki kemampuan antibakteri sehingga tidak memberikan pengaruh.
Uji  aktivitas  antibakteri  dilakukan  menggunakan  ekstrak  akar  bangkal  dengan konsentrasi 500 mg/L, 250 mg/L, dan 100 mg/L. Pengujian ini dilakukan terhadap bakteri Staphylococcus aureus yang merupakan bakteri Gram positif, dengan metode dilusi, yang mana  metode  dilusi  ini  merupakan  metode  pengujian  aktivitas  antibakteri  berdasarkan pengamatan pada konsentrasi terendah yang menghambat pertumbuhan mikroorganisme dengan  media  cair  atau  media  padat  yang  dicairkan  setelah  dicampur  dengan  zat antimikroba (Rollando, 2019). Metode dilusi digunakan dalam penelitian ini karena metode ini  adalah  metode  yang  paling  tepat  untuk  penentuan  nilai  KHM  (Konsentrasi  Hambat Minimum) dan nilai Konsentrasi Bunuh Minimum (KBM).
Konsentrasi Hambat Minimum (KHM) merupakan konsentrasi dari zat antibakteri yang menghambat pertumbuhan bakteri pada tabung uji yang berisikan media cair (Radji, 2015). Hasil Konsentrasi Hambat Minimum (KHM) pada ekstrak akar Bangkal ( Nauclea subdita.) didapatkan dengan melihat kejernihan (tidak ada pertumbuhan bakteri) dan kekeruhan (ada
pertumbuhan bakteri) yang terjadi pada tabung setelah diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37°C. Hasil KHM ekstrak akar Bangkal ( Nauclea subdita.) terhadap bakteri Staphylococcus aureus dapat dilihat pada tabel 4. Berdasarkan Tabel 4. dapat diketahui bahwa pada tabung kontrol positif tidak terjadi adanya pertumbuhan bakteri yang artinya kloramfenikol memiliki aktivitas antibakteri, dan juga tidak adanya pertumbuhan bakteri pada kontrol negatif. Nilai KHM dapat ditentukan dengan melihat konsentrasi terkecil yang masih jernih atau tidak menunjukan adanya bakteri. Maka dari itu, dilihat berdasarkan tabel 4. pada konsentrasi 500 mg/L  menunjukan kekeruhan pada replikasi ketiga, konsentrasi 250 mg/L menunjukan kekeruhan  pada  replikasi  pertama,  dan  pada  konsentrasi  100  mg/L  menunjukan  tidak adanya kekeruhan. Hal ini memiliki persamaan pada penelitian sebelumnya pada tanaman Bangkal  ( Nauclea  subdita)  dengan  konsentrasi  200%,  150%,  100%,  dan  50%  yang menunjukan  bahwa  ekstrak  air  Bangkal  (Nauclea  subdita)  mampu  menghambat  bakteri Staphylococcus  aureus  pada  konsentrasi  100%  dengan  zona  hambat  sebesar  12  mm (Okwori et al, 2008).
Konsentrasi  Bunuh  Minimum  (KBM)  merupakan  konsentrasi  terendah  dari  zat antibakteri yang membunuh pertumbuhan bakteri pada media padat. Nilai KBM ekstrak akar  Bangkal  ( Nauclea  subdita.)  didapatkan  dengan  melihat  pertumbuhan  bakteri  pada media padat setelah diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37°C. Hasil Konsentrasi Bunuh Minimum (KBM) dapat dilihat pada Tabel 5. menunjukan hanya kontrol positif yang tidak ditumbuhi  koloni  bakteri,  sedangkan  pada  kontrol  negatif,  konsentrasi  500mg/L, konsentrasi 250 mg/L, dan konsentrasi 100 mg/L ditumbuhi koloni bakteri. Hal ini berarti akar  kayu  Bangkal  ( Nauclea  subdita)  tidak  memiliki  potensi  membunuh  bakteri Staphylococcus aureus.

## SIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  aktivitas  antibakteri  ini  akar  kayu  bangkal  (Nauclea subdita) terhadap Staphylococcus aureus, dapat disimpulkan bahwa akar kayu bangkal (Nauclea  subdita)  memiliki  kemampuan  sebagai  antibakteri  terhadap  Staphylococcus aureus dengan zona hambat 13,2 mm yang termasuk kedalam kategori zona hambat kuat sesuai hasil skrining aktivitas antibakteri serta memiliki kemampuan daya hambat (KHM) pada konsentrasi 100mg/L dengan nilai signifikansi pada Kruskal-Wallis Test adalah 1.000 yang berarti memiliki perberdaan yang tidak signifikan dan nilai signifikansi pada Mann- Whitney  Test  adalah  1.000.  Akar  kayu  bangkal  (Nauclea  subdita)  tidak  memiliki kemampuan daya bunuh (KBM) terhadap Staphylococcus aureus.

## DAFTAR PUSTAKA
Aisiah,  S.  (2012).  Kandungan  Biokatif  Daun  Bangkal  (Nauclea  subdita  (Korth.)  Steud.) Sebagai Antibakteri Aeromonas hydrophila. Prosiding Seminar Nasional Perikanan Dan Kelautan, 86 – 94.
Amalia, S., Wahdaningsih, S., & Untari, E. K. (2016). Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi n-Heksan Kulit  Buah  Naga  Merah  (Hylocereus  polyrhizus  Britton  &  Rose)  Terhadap  Bakteri Staphylococcus  aureus  ATCC. Jurnal  Fitofarmaka  Indonesia,  1(2),  61 – 64. https://doi.org/10.33096/jffi.v1i2.191
Arinda, Y., Fitriana, N., Arfiana, V., Fatimah, N., & Shabrina, A. (2019). Aktivitas Anti Bakteri Daun Sirih : Uji Ekstrak KHM ( Kadar Hambat Minimum ) dan KBM ( Kadar Bakterisidal Minimum ). 16(2), 101 – 108.
Dhurhania, C. E., & Novianto, A. (2019). Uji Kandungan Fenolik Total dan Pengaruhnya terhadap  Aktivitas  Antioksidan  dari  Berbagai  Bentuk  Sediaan  Sarang  Semut (Myrmecodia  pendens). Jurnal Farmasi Dan Ilmu Kefarmasian Indonesia, 5(2), 62. https://doi.org/10.20473/jfiki.v5i22018.62-68
Hidayah,  N.,  Mustikaningtyas,  D.,  &  Bintari,  S.  H.  (2017).  Aktivitas  Antibakteri  Infusa Simplisia Sargassum muticum terhadap Pertumbuhan Staphylococcus aureus. Life Science, 6(2), 51.
Listianto Raharjo, M., Rahmi, N., Khairiah, N., Salim, R., Rufida, R., & Tri Cahyana, B. (2021). Standarisasi  Ekstrak  Kulit  Kayu  Bangkal  (Nauclea  subdita)  Sebagai  Bahan  Baku Sediaan Kosmetika. Jurnal  Penelitian  Hasil  Hutan,  39(1),  55 – 64. https://doi.org/10.20886/jphh.2021.39.1.55-64
Mpila, D., Fatimawali, Wiyono, & Weny, I. (2012). Uji Aktivitas Antibakteri Daun Mayana (Coleus atropurpureus [L] Benth) Terhadap Staphylococcus aureus, Escherichia coli dan Pseudomonas aeruginosa secara in-vitro. Uji Aktivitas Antibakteri Daun Mayana (Coleus Atropurpureus [L] Benth) Terhadap Staphylococcus Aureus, Escherichia Coli Dan Pseudomonas Aeruginosa Secara in-Vitro, 13.
Rahmadani,  A.,  Budiyono,  &  Suhartono.  (2017).  Gambaran  Keberadaan  Bakteri Staphylococcus  Aureus,  Kondisi  Lingkungan  Fisik,  Dan  Angka  Lempeng  Total  Di Udara  Ruang  Rawat  Inap  Rsud  Prof.  Dr.  M.a  Hanafiah  Sm  Batusangkar. Jurnal Kesehatan Masyarakat (e-Journal), 5(5), 492 – 501.
Rollando, R. (2019). Uji Antimikroba Minyak Atsiri Masoyi (Massoia aromatica) Terhadap Bakteri  Streptococcus  mutans. Majalah  Farmasi  Dan  Farmakologi,  23(2),  52 – 57.
https://doi.org/10.20956/mff.v23i2.6585
Sapara,  T.  U.,  &  Waworuntu,  O.  (2016). Efektivitas  Antibakteri  Ekstrak  Daun  Pacar  Air( Impatiens balsamina L .) Terhadap Pertmbuhan Porphyromonas gingivalis. 5(4), 10 – 17.
Senduk, T. W., Montolalu, L. A. D. Y., Dotulong, V., Ratulangi, S., Ratulangi, U. S., & Bahu, K. U. (2020). Rendemen Ekstrak Air Rebusan Daun Tua Mangrove Sonneratia alba (The rendement of boiled water extract of mature leaves of mangrove Sonneratia alba ). 11(1), 9 – 15.
Sulistyarini, I., Sari, D. A., & Wicaksono, T. A. (2019). Skrining Fitokimia Senyawa Metabolit Sekunder  Batang  Buah  Naga  (Hylocereus  polyrhizus). Jurnal  Ilmiah  Cendekia Eksakta, 56 – 62.
Sylvia,  O.,  &  Ginting,  B.  (2021). Perbandingan  Aktivitas  Antibakteri  Biji  Pepaya  (  Carica papaya L .) Terhadap Bakteri Escherichia coli DAN Staphylococcus aureus. 1(1), 19 – 25.