## DESKRIPSI JAMUR ENDOFIT DARI TUMBUHAN RARU (Cotylelobium melanoxylon) GENUS BOTRYTIS
Uswatun Hasanah dan Idramsa * )
* ) Dra. Uswatun Hasanah, M.Si: Dosen Jurusan Biologi FMIPA UNIMED Idramsa: Mahasiswa Jurusan Biologi FMIPA UNIMED

## Surel: uswatunhasanah@gmail.com

## ABSTRACK
This  study  aims  to  identify  the  endophytic  fungus  from  the  bark  of  the  plant  raru  (Cotylelobium melanoxylon).  This  study  uses  identification  technique  manually  by  viewing  and  comparing  the macroscopic and microscopic morphological characteristics of each isolate endophytic fungi then seek to obtain dendogram similarity index which divides each isolate into several clusters/genus. Data  were  analyzed  using  cluster  analysis  Simple  Matching  Coefficient  in  the  Multi  Variate Statistical Package (MVSP) where each isolate that had ≥70 % similarity indices are grouped into one cluster/genus. The results of cluster analysis to get 8 cluster/genus endophytic fungi found in the bark of plants raru (Cotylelobium melanoxylon). Eighth genus included the genus Alternaria, Aspergillus,  Botrytis,  Debaromyces,  Fusarium,  Mycelia  sterile,  Nigrospora,  and  Scopulariopsis. This paper presents a description of the genus Botrytis.
Kata Kunci: Identifikasi, Jamur Endofit, Cotylelobium Malanoxylon,  Indeks Similiritas
PENDAHULUAN umbuhan Cotylelobium melanoxylon merupakan tumbuhan  yang  hidup  pada daerah  beriklim  tropis  dan tumbuh  tersebar  di  pulau Sumatera,  Kalimantan  (Kartasaputra &  Martawijaya,  1979),  hingga  ke semenanjung  Malaysia  dan  Thailand (Anonymous,  2012).  Tumbuhan C. melanoxylon adalah tumbuhan tahunan  yang  berperawakan  pohon. Tumbuhan  ini  dikategorikan  masuk
daftar  merah  ( red  list )  sebagai tumbuhan  yang  terancam  langka ( endangered )  yang  ditetapkan  oleh
International Union for Conservation of  Nature (IUCN)  pada  tahun  1998 (Anonymous,
2012). Sebagian masyarakat Tapanuli Utara
menggunakan  bagian,  kulit  batang dan  daun  tumbuhan  untuk  mengobati penyakit  diare,  malaria,  dan  diabetes (Soerianegara  &  Lemmens,  1994). Penelitian  terdahulu  oleh  Matsuda et al .  (2009)  membuktikan  bahwa  kulit batang C.  melanoxylon mengandung senyawa  yang  terdiri  dari ampelopsin F, isoampelopsin F, ε- viniferin,
vaticanol A,  E,  G,  dan lyoniresinol yang berguna sebagai obat
antidiabetes.
Mikroba  endofit  merupakan mikroorganisme yang mengkolonisasi bagian  dalam  jaringan  tumbuhan  dan berinteraksi  dengan  tumbuhan  inang tanpa menimbulkan gejala atau penyakit pada tumbuhan yang
T
Uswatun Hasanah, Deskripsi Jamur Endofit ..., hal.  62-69
ditumpangi  (Zinniel et  al .,  2002;
Hung  and  Annapurna  2004;  Lima et
al .,  2005).  Mikroba endofit  ini terdiri dari  bakteri  dan  jamur  (Strobel  &
Daisy,  2003).  Isolasi  jamur  endofit pada berbagai macam tanaman- tanaman  telah  banyak  dilakukan.
terutama  pada  tanaman  budidaya.
Pencarian senyawa metabolit sekunder  dari  mikroba  endofit  pada berbagai tanaman, menarik dan penting  untuk  dilakukan  (Tenguria et al ., 2011). Mengingat, adanya berbagai masalah di bidang kesehatan seperti  beragamnya  jenis  penyakit kanker,  adanya  resistensi  bakteri terhadap  obat-obatan,  merebaknya penyakit yang disebabkan oleh protozoa  (Strobel,  2003),  sehingga diperlukan  upaya  untuk  menemukan sumber obat alami yang baru (Castilo et al . 2006).
Pada makalah ini akan dideskripsikan salah satu genus jamur endofit yang ditemukan di dalam kulit batang  tumbuhan  raru  ( Cotylelobium melanoxylon )  berdasarkan  analisis cluster menggunakan Simple Matching  Coefficient  dalam  program
Multi  Variate  Statistical  Package (MVSP)  yaitu  Isolat    RJ-2,  13,  14, dan  2B  dikelompokkan  dalam  satu klaster/genus  karena  keempat  isolat tersebut  memiliki  indeks  similaritas berdasarkan analisis SMC yaitu 0,848
atau 84,8% dan berdasarkan karakteristik  morfologi  makroskopis dan  mikroskopisnya  keempat  isolat tersebut merupakan genus Botrytis .
METODE PENELITIAN Tempat dan Waktu Penelitian Penelitian dilakukan di Laboratorium  Mikrobiologi  Jurusan Biologi  FMIPA  Universitas  Negeri
Medan.  Penelitian    dimulai  bulan April 2014 sampai  Juli 2014
Alat dan Bahan a. Alat
Alat  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  yaitu  Autoklaf  (TOMY ES-315), Laminar Air Flow (Streamline® Model SHC-4A1), Inkubator,  Magnetik  Stirer  (BIOSAN MHS-300), Mikropipet dan tip ukuran
1µl,  Cawan  petri  (HERMA),  Jarum ose, Lampu bunsen, Mikroskop
(ZEISS Axio Imager A1 dan OLIMPUS®), Kamera (Kodak EasyShare  M530),  Jangka  Sorong,
Erlenmeyer  ukuran  250ml  dan  500ml (PYREX),  Gelas  ukur  ukuran  500ml dan  1000ml  (PYREX),  Timbangan digital  (AND  HR-200),  Gunting tanaman  steril,  Pinset  steril,  Pisau, Botol  kaca,  Sikat  gigi,  Spidol,  Objek glass, dan Cover glass.
b. Bahan
Bahan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  Kulit  batang tumbuhan
Raru ( Cotylelobium melanoxylon ) yang diperoleh langsung  dari  hutan  Desa  Sibunga- Bunga, Kecamatan Sitahuis, Kabupaten Tapanuli Tengah, Kentang, Dextrose, Agar, Malt Extract,  Yeast  Extract  Agar  (YEA), Aquades, Ethanol 96%, Ethanol 70%,
Sodium  Hypocloride,  Aquades  Steril, Amoxicillin, Akhohol 70%, Lactophenol  Blue,  Minyak  Imersi, Sabun, Kertas Saring, Kertas pembungkus,  Kertas  Label,  Kertas Aluminium Foil, Plastik Seal/ isolatip,  Kapas,  Plastik  Kaca  dan Kertas Tissue. 2.3. Prosedur Penelitian
Penelitian  dilakukan  dalam beberapa tahap yaitu (1).  Pengumpulan Sampel
(2). Pembuatan Media (2.1). Potato Dextrose Agar (PDA) (2.2). Malt Extract Agar (MEA)
(2.3). Yeast Extract Agar (YEA)
(3). Sterilisasi Permukaan
(4). Isolasi Sampel
(5). Pemurnian Isolat (6). Identifikasi dan Karakterisasi
(6.1). Karakteristik Makroskopik
Mengamati karakteristik makroskopik  jamur  endofit  yang tumbuh  pada  media  PDA  sesuai dengan  metode  identifikasi  oleh Gandjar, dkk (1999)  dan  Malloch
(2000) meliputi: (1) Warna koloni, (2) Bentuk koloni, (3) Tekstur koloni, (4) Bentuk  tepian  koloni,  (5)  Diameter koloni,  (6)  Topografi  koloni,  (7) Warna  sebalik  koloni  ( reserve  side ), (8)  Permukaan  koloni,  (9)  Tinggi koloni (mm), (10) Lingkaran konsentris  ada  atau  tidak,  (11)Garis radial  dari  pusat  koloni  ke  arah  tepi koloni ada atau tidak.
(6.2). Karakteristik Mikroskopik
Pengamatan karakteristik mikroskopik  jamur  endofit  meliputi: (1)  Sel  tunggal  atau  banyak,  (2)  Sel berdinding  halus  atau  kasar,  (3)  Hifa bersepta atau tidak, (4) Hifa berpigmen atau tidak, (5) Bentuk hifa (spiral,  bernodul,  atau  mempunyai rizoid),  (6)  Miselium  terang  atau keruh,  (7)  Miselium  berwarna  atau tidak,  (8)  Memproduksi  spora  atau tidak, (9) Spora seksual atau aseksual, (10) Spora aseksual berbentuk
sederhana  atau  khusus,  (11)  Spora aseksual  bersel  banyak  atau  tidak, (12) Jenis spora aseksual, (13) Bentuk spora aseksual, (14) Pengaturan spora aseksual (diproduksi tunggal, berantai, atau berbentuk klaster), (15) Spora  dibentuk  di  dalam  tubuh  buah (pycnidium)  atau  tidak,  (16)  Spora dibentuk  di  dalam  rantai  (chain)  atau tidak,  (17)  Ukuran  sporangium,  (18) Warna  sporangium,  (19)  Bentuk sporangium,  (20)  Letak  sporangium, (21)  Bentuk  spora  seksual,  (22) Kepala spora pembawa konidia (tunggal, berantai, bentuk, dan rangkaian sterigmata), (23) Penampakan sporangiofor/ konidiofor (sederhana  atau  bercabang),  (24)
Bentuk  percabangan  sporangiofor/ konidiofor, (25) Konidiofor berbentuk kompleks atau sederhana, (26) Warna konidiofor, (27) Konidiofor berdinding  kasar  atau  halus,  (28) Konidiofor diproduksi dalam kelompok  (sporokhia)  atau  tidak, (29)  Ukuran  kolumela  pada  ujung
Uswatun Hasanah, Deskripsi Jamur Endofit ..., hal.  62-69
sporangiofor,  (30)  Bentuk  kolumela pada ujung sporangiofor, (31)
Konidiofor  tunggal  atau  berkumpul, (32)  Bentuk  konidia,  (33)  Ukuran konidia,  (33)  Warna  konidia,  (34) Konidia/  spora  bercabang  atau  tidak, (35)  Permukaan  konidia  (halus  atau kasar), (36) Konidia satu atau banyak sel,  (37)  Stolon  ada  atau  tidak,  (38) Rizoid  ada  atau  tidak,  (39)  Footcell ada atau tidak Prosedur kerja penelitian yang dilakukan pada tahun pertama disajikan  dalam  bentuk  skema  pada
Gambar 1 di bawah ini.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil analisis klaster menunjukkan  bahwa  genus Botrytis yang  ditemukan  di  dalam    sampel kulit batang tumbuhan raru
( Cotylelobium  melanoxylon )  terdiri atas  empat  Isolat  yaitu  RJ-2,  13,  14, dan  2B  dikelompokkan  dalam  satu klaster/genus    karena  keempat  isolat
tersebut  memiliki  indeks  similaritas berdasarkan analisis SMC yaitu 0,848 atau 84,8% dan berdasarkan karakteristik  morfologi  makroskopis dan  mikroskopisnya  keempat  isolat tersebut  merupakan  genus Botrytis . Deskripsi  dari  masing-masing  isolat dijelaskan pada alinea berikut ini. 3.1. Isolat RJ-2
Koloni  tumbuh  sangat  cepat pada  medium  PDA,  dengan  diameter 9  cm  dalam  3  hari.  Koloni  berwarna putih kekuningan, menyebar, bertekstur  cottony  (seperti  kapas), dengan  tepian  rata  seperti  benang- benang.  Permukaan  koloni  halus,
topografi  koloni  verugose  (kusut  dan keriput), warna sebalik koloni (reserve  side)  putih  kekuningan, tinggi  koloni  7  mm,  tidak  terdapat lingkaran  konsentris  dan  garis  radial. Miselium  terang,  tidak  berwarna, bersel  banyak  dan  berdinding  halus.
Hifa tidak bersepta dan tidak berpigmen, berbentuk spiral. Memproduksi spora aseksual berbentuk  khusus,  bersel  banyak, dengan spora berjenis konidia, berbentuk  bulat,  dan  diproduksi dalam  klaster.  Sporangium  berukuran kecil  (1-5  mm),  bulat,  hialin,  dan terletak  di  ujung.  Kepala  spora pembawa  konidia  berantai  dan  bulat. Konidiofor bercabang, kompleks, berwarna  hialin,  berdinding  halus, diproduksi  dalam  kelompok,    dan tunggal. Kolumela pada ujung konidiofor berukuran kecil (1-5 mm),
dan  berbentuk  semi  bulat.  Konidia
berbentuk  bulat,  kecil  (1-5  mm), berwarna  hialin,  halus,  dan  bersel satu.
Gambar 2. RJ-2 koloni (a) dan morfologi mikroskopis koloni (b)

## Isolat RJ-13
Koloni  tumbuh  sangat  cepat pada  medium  PDA,  MEA, dan YEA, dengan  diameter  9  cm  dalam  3  hari. Koloni  berwarna  putih  kekuningan, meyebar,  cottony,  dengan  tepian seperti  benang-benang.  Permukaan koloni halus, verugose, warna sebalik koloni putih kekuningan, tinggi
koloni 8 mm, tidak terdapat lingkaran knsentris  dan  garis  radial.  Miselium terang, tidak berwarna, bersel
bannyak  dan  berdinding  halus.  Hifa tidak  bersepta,  tidak  berpigmen,  dan berbentuk  spiral.  Memproduksi  spora aseksual  berbentuk  khusus,  bersel banyak, berjenis konidia, bulat, berbentuk  klaster,  dan  dibentuk  di dalam  rantai.  Sporangium  berukuran kecil,  hialin,  bulat  hingga  semi  bulat, dan  terletak  di  ujung.  Kepala  spora pembawa  konidia  berantai  berbentuk bulat. Konidiofor bercabang, kompleks,  hialin,  berdinding  halus, diproduksi  dalam  kelompok  dan berkumpul.  Kolumela  pada  ujung konidiofor berukuran kecil dan berbentuk  elips  hingga  semi  bulat.
Konidia bulat, kecil (1-5 mm), hialin, halus, dan bersel satu.
a
b
Uswatun Hasanah, Deskripsi Jamur Endofit ..., hal.  62-69

## c
Gambar 3. RJ-13 koloni (a) dan morfologi mikroskopis konidia (b dan c)

## Isolat  RJ-2B
Koloni tumbuh sangat cepat pada medium  PDA,  dengan  diameter  8,7  cm dalam  3  hari,  8,3  cm  pada  medium  MEA dalam  3  hari,  dan  5,8  cm  pada  medium YEA dalam 3 hari. Koloni berwarna putih kehijauan,  menyebar,  bertekstur  cottony (seperti  kapas),  dengan  tepian  seperti benang-benang.  Permukaan  koloni  halus, topografi  koloni  verugose  (kusut  dan keriput),  warna  sebalik  koloni  (reserve side) putih kehijauan, tinggi koloni 2 mm, dan terdapat lingkaran konsentris.
Miselium  terang,  tidak  berwarna,  bersel banyak  dan  berdinding  halus.  Hifa  tidak bersepta  dan  tidak  berpigmen,  berbentuk spiral. Memproduksi spora aseksual berbentuk sederhana,  bersel  banyak, dengan spora berjenis blastospora, berbentuk  bulat,  berantai  dan  dibentuk  di dalam rantai. Sporangium berukuran kecil (1-5  mm),  bulat,  hialin,  dan  terletak diujung.  Kepala  spora  pembawa  konidia berantai. Konidiofor bercabang, sederhana,  berwarna  hialin,  berdinding halus,diproduksi  dalam  kelompok,    dan tunggal.  Kolumela  pada  ujung  konidiofor berukuran  kecil  (1-5  mm),  berbentuk bulat,  dan  berkumpul.  Konidia  berbentuk
bulat,  kecil  (1-5  mm),  berwarna  hialin, halus, dan bersel satu.
a

## b
Gambar 5. RJ-2B koloni (a) morfologi mikroskopis konidia (b)
Menurut  Gandjar, dkk (1999),
koloni semula berwarna hialin hingga putih,  kemudian  menjadi  abu-abu hingga abu-abu kecoklatan. Konidiofor muncul tidak teratur tanpa pembengkakan basal, mempunyai panjang  750  µm  hingga  lebih  dari  2 mm,  mempunyai  lebar  16-30  µm, pada  bagian  basis  berwarna  coklat, berdinding  halus,  dan  pada  bagian apikal tterdapat percabangan. Konidia berbentuk  obovoid,  berwarna  coklat pucat, berdinding halus, dan berukuran (8-14) x (6-9) µm. Pembentukan konidia umumnya
simultan  pada  pembengkakan  dari ujung  percabangan  konidiofor,  dan membentuk  sporangiola.  Sedangkan
Malloch  (2000)  berpendapat  bahwa spora (konidia) terbentuk dari percabangan yang terakhir dan diproduksi  secara  synchron.  Ketika koloni  mulai  menjadi  kering,  sel konidiofor  sering  merata  satu  sama lain.

## KESIMPULAN
Simpulan Genus Botrytis memiliki koloni  berwarna  putih  kekuningan, menyebar,  cottony,  dengan  tepian seperti  benang.  Permukaan  koloni halus,  verugose, warna sebalik koloni putih  kekuningan,  dengan  tinggi koloni 8 mm, tidak terdapat lingkaran konsentris dan garis radial. .
Saran
Dari  hasil  penelitian  yang telah dilakukan, peneliti menyarankan agar  melakukan  penelitian  lanjutan dengan  menggunakan  analisis  tingkat molekuler untuk mengetahui kekerabatan antara isolat jamur endofit  dari  kulit  batang  tumbuhan Raru  ( Cotylelobium  melanoxylon ) pada genus Botrytis.

## DAFTAR PUSTAKA
Anonymous.  2012. The  IUCN  Red List  of  Treatened  Species:
Cotylelobium melanoxylon.
( www.iucnredlist.org/details/33070/
0 ). Diakses tanggal 22
Desember 2012.
Castillo, U.F., Strobel, G.A.,
Mullenberg, K., Condron, M.M., Teplow, D.B., Folgiano, V. Gallo, M. Ferracane,  R.  Mannina,  L., Viel,  S.,  Codde,  M.  Robison, R.  Porter,  H.,  and  Jensen,  J. 2006. Munumbicin E-4 and E- 5: novel broad-spectrum antibiotics  from  streptomyces NRRL  3052. Microbiol  Lett . 255: 296-300.
Gandjar,  I.,  Robert  A.  S.,  Karin,  T. V., Ariyanti, O., dan Iman, S., (1999), Pengenalan  Kapanng Tropik  Umum, Yayasan  Obor
Indonesia, Jakarta.
Hung, P.Q., and Annapurna, K. 2004. Isolation  and  characterization of  endophytic  bacteria  in soybean (Glycine sp.). Omonrice . 12: 92-101. Lima,  A.O.,  Quecine, M.C., Fungaro, M.H.P., Fernando, D.A., Maccheroni  Jr,  W.,  Araujo, W.L., Silva-Filho, M.C., Pizzirani-Kleiner,  A.A.,  and Azevedo, J.L. 2005. Molecular characterization  of  a  β-1,4- endoglucanase from an endophytic Bacillus  pumilus strain. Appl. Microbiol Biotechnol . 68: 57-65. Matsuda,  H.,  Aso,  Y.,  Nakamura,  S.,
Hamao,  M.,  Sugimoto,  S.,
Hongo,  M.,  Pongpiriyadacha, Y.,  and  Yoshikawa,  M.  2009. Antidiabetogenic  constituents
from the  thai  traditional medicine Cotylelobium melanoxylon . ( http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubme
d/19420780 ).  Diakses  tanggal 13 April 2010.
Malloch,  D.,  (2000), Moulds:  Their Isolation, Cultivation, and Identification ,  University  of
Toronto Press, Toronto.
Soerianegara,  I  dan  R.H.J.  Lemmens.
1994.  Plant  Resources  of
South-East Asia No.5(1). Timber Trees: Minor Comercial  Timbres.  Prosea Foundation,  Bogor,  Indonesia. Leiden: Backhuys.
Strobel  G.A.,  2003.  Endophytes  as
sources  of  bioactive  products. Microbes  and  Infection.  5.
535-544.
Strobel  G,  and  Daisy  B,  2003. Bioprospecting  for  microbial endophytes  and  their  natural products,  Microbiology  and
Molecular Biology Review 67 :
491–502.
Tenguria, R.K., Khan, F.N., and
Quereshi, S. 2011. Endophytes-
mines pharmacological
therapeutics. World Journal of Science and Technology . 1(5):
127-149
Zinniel,  D.K.,  Lambrecht,  P.,  Harris, N.B., Feng, Z., Kuczmarski, D., Higley,  P.,  Ishimaru,  C.A., Arunakumari, A., Barletta, R.G.,  and  Vidaver,  A.K.  2002.
Isolation and characterization of endophytic  colonizing  bacteria from  agronomic  crops  and prairie  plants. Applied  and
Enviromental Microbiology . 68:
2198-2208.