## Journal of Agromedicine and Medical Sciences
. 2022. 8(1): 34-38
JOURNAL OF AGROMEDICINE AND MEDICAL SCIENCES (AMS) ISSN: 2460-9048 (Print), ISSN: 2714-5654 (Electronic)
Available online at http://jurnal.unej.ac.id/index.php/JAMS
Aktivitas Penyembuh Luka Gel Ekstrak Metanol Bunga Galam (Melaleuca cajuputi subsp. Cumingiana (Turcz.) Barlow) pada Tikus Wistar
Wound Healing Activity of Galam Flower
(Melaleuca cajuputi subsp. Cumingiana (Turcz.) Barlow) Methanol Extract in Wistar Rats
Kartika Veranisa Putri 1 , Ika Novitasari 1 , Hilma Wardatina 1 , Lilis Tangkeallo 1 , Muhammad Dawud Ashari 1 , Isnaini 2*
1 Undergraduate Program, Faculty of Medicine, ULM Banjarmasin, South Kalimantan, Indonesia.
2 Department of Pharmacology, Medical Study Program Undergraduate Program, Faculty of Medicine, ULM Banjarmasin, South Kalimantan Indonesia

## Article Info
Article History:
Received: October 15, 2021 Accepted: February 07, 2022 Published: February 28, 2022
*)Corresponding author:
E-mail: isnaini@ulm.ac.id
How to cite this article: :
Putri,  K.V.,  Novitasari,  I.,  Wardatina,  H., Tangkeallo,  L.,  Ashari,  M.D.,  Isnaini. (2022). Wound Healing Activity of Galam Flower  ( Melaleuca  cajuputi  subsp. Cumingiana  (Turcz.)  Barlow ). Journal  of Agromedicine and Medical Sciences , 8(1): 34-38 https://doi.org/10.19184/ams.v8i1.2745 1.

## Abstrak
Luka  adalah  kondisi  inkontinuitas  jaringan  epitel  kulit  atau  mukosa  akibat  kerusakan secara fisik maupun termal. Salah satu terapi luka dapat menggunakan tanaman atau senyawa yang bersifat antiseptik atau anti bakteri, selain bersifat sebagai antiinflamasi dan reepitelisasi.  Tanaman yang berpotensi sebagai bahan alternatif penyembuh luka, yaitu  galam  (Melaleuca  cajuputi  subsp.  Cumingiana  (Turcz.)  Barlow).  Ekstrak metanol bunga galam mempunyai aktivitas antibakteri dengan kadar hambat minimal sebesar 1,7  mg/mL.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  menganalisis  aktivitas  penyembuh  luka  gel ekstrak  metanol  bunga  galam  pada  tikus  galur  wistar  yang  diinisiasi  luka  dilihat  dari histologi kulit tikus. Penelitian ini menggunakan metode posttest only with control group design.  Tiga  puluh  ekor  tikus  wistar  yang  terbagi  menjadi  5  perlakuan,  yaitu  kontrol positif, kontrol negatif, gel ekstrak bunga galam 1%, gel ekstrak bunga galam 2%, dan gel ekstrak bunga galam 4%.  Berdasarkan data histologis, kelompok perlakuan kontrol positif dan gel 4% memberikan hasil yang sama. Keduanya menunjukkan sudah mulai tersambungnya antar jaringan kulit.  Kesimpulannya ketiga formula gel ekstrak metanol bunga galam menunjukkan adanya aktivitas penyembuhan luka dan gel ekstrak metanol bunga M. cajuputi 4% memberikan aktivitas penyembuh luka yang paling besar.
Kata  Kunci :  Melaleuca  cajuputi  subsp.  Cumingiana  (Turcz.)  Barlow,  gel  bunga  Galam, aktivitas penyembuh luka, tikus galur wistar

## Abstract
Wound is an incontinence condition of skin or mucosal epithelial tissue due to physical or thermal  damage.  One  of  the  wound  therapies  can  use  plants  or  compounds  that  are antiseptic or anti-bacterial, in addition to being anti-inflammatory and re-epithelializing. The plant that has the potential as a wound healing is galam (Melaleuca cajuputi subsp. Cumingiana (Turcz.) Barlow). Galam flower methanol extract has antibacterial activity with a minimum inhibitory level of 1.7 mg/mL. This research analyze the wound healing activity of galam flower extract  in Wistar strain rats that were initiated by the wound seen  from  the  histology  of  the  rat  skin.  This  research  uses  posttest  only  method  with control  group  design.  Thirty  wistar  rats  were  divided  into  five  groups  consisting  of  a positive control group, a negative control group, 1% galam flower extract gel, 2% galam flower  extract  gel,  and  4%  galam  flower  extract  gel.  Based  on  histological  data,  the positive control treatment group and 4% gel treatment group gave the same results. Both indicate that the skin tissue has begun to connect. The conclusions the three galam flower methanol extract gel formulas showed wound healing activity and the 4% galam flower

## Pendahuluan
Luka  adalah  kondisi  inkontinuitas  jaringan  epitel  kulit  atau mukosa akibat kerusakan secara fisik maupun termal (Negut et al ., 2018). Berdasarkan durasinya, luka dibagi atas luka akut dan luka  kronik.  Angka  kejadian  luka  akut  di  Kalimantan  Selatan cukup  besar,  yaitu  luka  lecet/memar  sebesar  60,5%  dan  luka robek  sebesar  22,1%  (Kemenkes,  2013).  Angka  kejadian  luka kronik yang banyak terjadi adalah ulkus diabetik sebesar 66,7% dan luka kanker sebesar 24,6% (Risma et al. , 2018). Salah satu penyembuh  luka  adalah  povidone  iodine.    Povidone  iodine mempunyai  efek  samping  yaitu  iritasi,  pada  pasien  yang hipersensitif  dapat  menimbulkan  kulit  kemerahan,  terjadi bengkak  dan  gatal.  Perlu  di  cari  penyembuh  luka  yang mempunyai  efek  samping  yang  minimal  (Nurdiantini et  al ., 2017).
Tanaman yang berpotensi sebagai obat penyembuh luka yaitu Galam (Melaleuca cajuputi subsp. Cumingiana (Turcz.) Barlow ) . Galam    merupakan  tanaman  yang  dapat  digunakan  untuk pengobatan  luka  (Commander et  al .,  2016).  Hal  ini  diperkuat bahwa  tanaman  ini  memiliki  senyawa  terpinen-4-ol  yang berperan  penting  dalam  penyembuhan  luka  terutama  dalam proses  inflamasi  dan  dapat  menstimulasi  fibroblas  (Han  dan Tory., 2017). Penelitian Al-Abd et al (2015) menunjukan bahwa aktifitas antibakteri pada bagian bunga lebih tinggi dibandingkan pada  bagian  daun.  Berdasarkan  penelitian  Isnaini et al (2021) ekstrak metanol bunga galam mempunyai aktivitas antibakteri lebih  besar  bila  dibandingkan  dengan  ekstrak  metanol  buah galam pada bakteri Escherichia coli . Nilai kadar hambat minimal dan  kadar  bunuh  minimal  ekstrak  metanol  bunga  galam berturut-turut sebesar 1,7 mg/mL dan 2,1 mg/mL. Bakteri E.coli merupakan bakteri yang menginfeksi luka (Negut et al ., 2018), sehingga ekstrak metanol bunga galam berpotensi mempunyai aktivitas sebagai obat penyembuh luka.
Galam  adalah  tanaman  yang  menyukai  kondisi  tanah  dengan genangan air serta keasaman dan salinitas yang tinggi terutama di  lahan  gambut  (Nurmilatina  dan  Fatmir,  2015)  sehingga tanaman ini banyak ditemukan di Banjarmasin. Bagi masyarakat Banjarmasin,  tumbuhan  ini  seringkali  dimanfaatkan  kayunya, sedangkan  bagian  tanaman  yang  lain  belum  di  manfaatkan. Mengingat  ketersediaan  yang  melimpah  dan  kandungannya yang berpotensi dalam mempercepat penyembuhan luka, maka perlu  dilakukan  upaya  pengkajian  lebih  lanjut  aktivitas penyembuh luka dari tanaman ini.
Belum  ada  penelitian  mengenai  Galam  sebagai  tanaman  yang dapat  mempercepat  penyembuhan  luka,  sehingga  perlu dilakukan penelitian mengenai pengaruh pemberian gel ekstrak metanol bunga Galam terhadap penyembuhan luka pada tikus galur wistar.   Sediaan gel merupakan sediaan yang mempunyai aktivitas  penyembuh  luka  lebih  baik  dibandingkan  dengan sediaan krim (Isnaini et al ., 2020).
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  menganalisis  aktivitas
penyembuh  luka  gel  ekstrak  metanol  bunga  galam  pada  tikus yang diinisiasi luka dilihat dari luas luka dan histologi kulit tikus galur wistar.

## Metode

## Desain Penelitian
Penelitian ini menggunakan metode post-test only with control group design dengan menggunakan 25 ekor tikus wistar jantan yang  memiliki  berat  antara  200  gram — 250  gram,  selanjutnya dipilih secara acak untuk dibagi menjadi 5 kelompok perlakuan yaitu  kontrol  positif  (Betadine ® ),  kontrol  negatif  (bahan  dasar gel),  perlakuan  1  (gel  ekstrak  metanol  bunga  galam  1%), perlakuan  2  (gel  ekstrak  metanol  bunga  galam  2%),  dan perlakuan 3 (gel ekstrak metanol bunga galam 4%).  Penelitian dilakukan di Laboratorium Farmakologi FK Universitas Lambung Mangkurat Banjarmasin.

## Bahan
Penelitian ini menggunakan bunga Galam, metanol 50%, asam asetat pekat, carbopol 940, TEA, profilen glikol, metil paraben, profil  paraben,  aquadest,  ketamine,  betadine,  dan  25  tikus jantan galur wistar.

## Pengumpulan Bunga Galam
Bunga  Galam  dipetik  di  area  kampus  Universitas  Lambung Mangkurat  Kayu  Tangi  Banjarmasin.  Bunga  ini  selanjutnya dipisahkan dari tangkai dan buahnya.

## Pembuatan Ekstrak Metanol Bunga Galam
Bunga  diletakkan  diatas  kertas  koran  dan  dikeringkan  selama dua  hari  tanpa  terkena  sinar  matahari  secara  langsung  pada suhu  ruang.  Bunga  Galam  kering  dihaluskan  menggunakan blender.  Ekstraksi  metanol  bunga  galam  dilakukan  dengan metode  maserasi.  Serbuk  bunga  galam  dimasukkan  ke  dalam wadah  dan  direndam  dengan  metanol  50%  dan  asam  asetat pekat sebanyak 5% sampai larutan berada 1 cm di atas simplisia selama  24  jam.  Setelah  itu,  rendaman  serbuk  bunga  galam tersebut disaring dan ampas direndam kembali selama 24 jam. Hal tersebut diulang hingga tiga kali penyaringan. Larutan hasil rendaman  bunga  galam  dikentalkan  dengan  menggunakan rotary evaporator . Kemudian dimasukkan ke dalam water bath sehingga ekstrak menjadi kental (Isnaini et al., 2021).

## Pembuatan Gel Ekstrak Metanol Bunga Galam
Basis  gel  dibuat  dengan  mencampur  carbopol  940  dengan aquadest kemudian menambahkan profilen glikol, metil paraben propil paraben dan TEA (trietanolamin), lalu diaduk rata hingga menjadi  gel.  Untuk  pembuatan  gel  ekstrak  metanol  bunga galam,  ekstrak  metanol  bunga  galam  ditambahkan  pada  basis gel, lalu dikocok hingga tercampur rata.
Uji Penyembuh Luka Pada Tikus Wistar Jantan
methanol extract gel gave the greatest wound healing activity.
Keywords : Melaleuca cajuputi subsp. Cumingiana (Turcz.) Barlow, antibacterial activity, wound   initiated healing
Tikus  diadaptasikan  selama  minimal  7  hari  dan  di  hari  ke-8 dilakukan perlakuan. Tikus diberi ketamine 40 mg/KgBB sebagai anestesi.  Selanjutya,  bulu  tikus  bagian  punggung  dicukur  dan kulit  tikus  di  sayat  dengan  diameter  luka  sebesar  1,5  cm, sehingga kulit tikus terlepas.
Bagian luka pada kulit tikus diberi gel atau kontrol positif sesuai kelompok  perlakuan.  Pemberian  gel  atau  kontrol  positif dilakukan setiap hari selama 10 hari. Setelah perlakuan hari ke- 10,  tikus  dianestesi  dengan    ketamine  40  mg/kgBB  secara intraperitoneal, kemudian diambil sampel kulit tikus yang akan dilihat histologi kulitnya (modifikasi) (Rupina et al ., 2016)

## Analisis Data dan Persetujuan Etik
Data deskriptif histologi kulit tikus akan dilihat re-epitelisasi sel pada kulit tikus. Penelitian ini sudah mendapatkan izin penelitian dari  komisi  etik  FK  ULM  dengan  No.  632/KEPK-FK ULM/EC/VI/2021.

## Hasil
Berdasarkan data histologi di atas kelompok yang diberi kontrol positif  dan  gel  4%  memberikan  hasil  yang  sama.  Keduanya menunjukkan sudah mulai tersambungnya antar jaringan kulit (Gambar 1 dan Tabel 1).

## Pembahasan
Berdasarkan hasil skrinning fitokimia, bunga galam
mengandung  zat  aktif  terpenoid,  flavonoid,  fenol,  saponin, kuinon,  steroid,  dan    tanin  (Isnaini et  al .,  2021).  Senyawa metabolit  sekunder  pada  tanaman  galam  ini  memiliki  potensi dalam  penyembuhan  luka.  Proses  penyembuhan  luka  dapat terhambat  oleh  keberadaan reactive  oxygen  species (ROS). Adanya sifat antioksidan dari fenol, flavonoid, dan tanin mampu meningkatkan  proses  penyembuhan  luka  dengan  mengurangi kerusakan yang disebabkan oleh radikal oksigen bebas. Dalam hal ini antioksidan bertindak sebagai penangkap radikal bebas (Juneja et al ., 2020).
Selain itu, tanin mendorong proses penyembuhan luka dengan menyusutkan protein, meningkatkan kontraksi luka, meningkatkan pembuluh kapiler, dan pembentukan fibroblast. Senyawa steroid dan saponin mempunyai aktivitas penyembuh luka  berkaitan  dengan  kontraksi  luka  yang  cepat  dan  periode epitelisasi  yang  lebih  pendek  (Tessema  dan  Yalew.,  2021). Kuinon  berperan  sebagai  antibakteri  dengan  menghambat sintesis  asam  amino  yang  menyebabkan  inaktivasi  protein sehingga bakteri kehilangan fungsinya (Kemegne et al ., 2017).
Flavonoid memainkan peran penting sebagai penyembuh luka. Flavonoid terlibat dalam aktivitas antiulkus dengan memperkuat sistem pertahanan mukosa dan juga meningkatkan  resistensi  kapiler  (Jena et  al .,  2020).  Flavonoid mengurangi  peroksidasi  lipid  dengan  mencegah  atau memperlambat  timbulnya  nekrosis  sel  dan  meningkatkan vaskularisasi  yang  pada  gilirannya  meningkatkan  viabilitas kolagen  fibrils  dengan  meningkatkan  sirkulasi,  mencegah kerusakan sel, dan mempromosikan sintesis DNA (Tessema dan Yalew, 2021).
Perbesaran
40x
Perbesaran 100 x K(-)                        K(+)                   Gel 1%              Gel 2%                 Gel 4% Gambar 1.  Gambaran Histologi Kulit Tikus Setelah Diberi Perlakuan pada Perbesaran 40x dan 100x
Tabel 1. Interpretasi Hasil Uji histologi No Kelompok Adneksa Epidermis Fibrosis Radang Ulkus 1. Normal + Tersambung - - - 2. Kontrol negatif - - - Padat + 3. Kontrol positif - Tersambung + Minimal - 4. Gel 1% - - - Padat + 5. Gel 2% - Mendekat - Minimal Erotio 6. Gel 4% - Tersambung + Minimal -
Proses  penyembuhan  luka  merupakan  proses  tubuh mengembalikan  fungsi  jaringan  yang  rusak  untuk  kembali kepada keadaan normal. Proses penyembuhan luka terdiri dari empat fase, yaitu hemostatis, infalamasi, proliferasi remodelling atau  re-epitelisasi.  (Guo  dan  DiPietro,  2010).  Jaringan  pada lapisan  epidermis  kulit  mayoritas  merupakan  sel-sel  epitel sehingga  proses  ini  didominasi  oleh  proses  re-epitelisasi (Anderson  dan  Hamm,  2012).  Proses  re-epitelisasi  dapat diperlambat  oleh  kondisi  luka  yang  kering  dan  juga  adanya kontaminasi oleh bakteri. Luka yang kering akan memungkinkan sel-sel  untuk  dehidrasi  dan  mati  sehingga  mendorong terbentuknya keropeng (Hess, 2011). Pada pemberian betadine dan gel ekstrak galam 4% sudah memasuki fase proliferasi, hal ini ditandai dengan adanya  proses re-epitelisasi dari kulit.
Bakteri  pada  permukaan  kulit  sangat  rentan  untuk  masuk  ke bagian  yang  luka  karena  lingkungan  luka  dirasa  lebih  kaya dengan  nutrisi  dan  lebih  lembab  dibandingkan  dengan permukaan  kulit  sehingga  hal  ini  dapat  menyebabkan  infeksi dan dapat mengganggu proses re-epitelisasi. Kedua hal tersebut termasuk  faktor  yang  mendorong  terjadinya  luka  akut  yang berlanjut  kepada  luka  kronik  serta  dapat  dikatakan  sebagai pemberat  luka  kronik  sehingga  luka  menjadi  tidak  kunjung sembuh.  Infeksi  akibat  masuknya  bakteri  pada  luka  dapat dicegah dengan pemberian gel antibakteri (Negut et al ., 2018).
Hal ini terjadi pada perlakuan kontrol negatif, gel ekstrak galam 1% dan 2%, yang ditandai dengan adanya peradangan.
Selain  sebagai  anti  bakteri,  sediaan  gel  dapat  memberikan kelembaban pada luka (Commander et al ., 2016).  Sediaan gel merupakan  sediaan  yang  apabila  bersentuhan  dengan  udara akan membentuk lapisan tipis, sehingga mencegah menguapnya air yang ada di bawahnya.  Lembabnya daerah di bawah  lapisan  gel  inilah  yang  mempermudah  perkembang biakan bakteri, sedangkan konsentrasi ekstraknya sendiri tidak mampu melawan bakteri.  Hal ini berbeda dengan pemberian gel  ekstrak  4%  yang  mempunyai  kemampuan  untuk  melawan bakteri, sehingga pada histologi tidak terlihat adanya sel radang.

## Kesimpulan
Gel ekstrak metanol bunga galam ( Melaleuca cajuputi subsp. Cumingiana  (Turcz.)  Barlow.)  dengan  konsentrasi  4% mempunyai aktivitas paling besar di antara gel lainnya dalam mempercepat  proses  penyembuhan  luka  dilihat  dari histologi kulit.

## Ucapan Terima Kasih
Kami  mengucapkan  terima  kasih  kepada  Fakultas Kedokteran  Universitas  Lambung  Mangkurat  Banjarmasin yang  telah  menfasilitasi  penelitian  ini.  Selain  itu,  ucapan terima  kasih  juga  kami  berikan  kepada  Dikti  yang  telah memberikan dana penelitian pada program PKM.

## References
Al-Abd NM, et al. 2015. Antioxidant, antibacterial activity, and phytochemical  characterization  of  Melaleuca  cajuputi extract . BMC  Complementary  and  Alternative  Medicine
15(1): 1 – 13.
Anderson K, Hamm RL. 2012. Factors that impair wound healing . Journal  of  the  American  College  of  Clinical  Wound Specialists 4(4): 84 – 91.
Commander  SJ, et  al. 2016. Update  on  postsurgical  scar management. Seminars in plastic surgery. Thieme Medical Publishers: 122 – 128.
Guo  S,  DiPietro  LA.  2010. Factors  affecting  wound  healing. Journal of Dental Research 89(3): 219 – 229.
Han  X,  Tory  PL.  2017. Melaleuca  (Melaleuca  alternifolia) essential  oil  demonstrates  tissue-remodeling  and metabolism-modulating  activities  in  human  skin  cells . Cogent Biology 3(1): 1 – 7.
Hess  CT.  2011. Checklist  for  factors  affecting  wound  healing . Advances in Skin & Wound Care 24(4): 192.
Isnaini, et al. 2021. Aktivitas antibakteri dan antijamur ekstrak galam  (Melaleuca  cajuputi  subsp.  Cumingiana  (Turcz) terhadap  bakteri  E.coli  dan  jamur  C.albicans. Journal  of Agromedicine and Medical Sciences 7(2): 79 – 83.
Isnaini, et al . 2020. Comparison wound healing activity of gel and cream extract ethanolic fruits of melastoma malabathricum , in: Hesicon.
Jena R. et al. 2020. A review on genus Millettia: Traditional uses, phytochemicals  and  pharmacological  activities . Saudi Pharmaceutical Journal 28(12): 1686-1703.
Juneja  K, et  al. 2020. Metabolite  profiling  and  wound-healing activity of Boerhavia diffusa leaf extracts using in vitro and in vivo models. Journal of traditional and Complementary Medicine 10(1): 52 – 59.
Kemegne  GA, et  al. 2001. Antimicrobial  structure  activity relationship  of  five  anthraquinones  of  emodine  type isolated from Vismia laurentii. BMC Microbiology 17(1): 1- 8.
Kemenkes.  2013.    Riset  Kesehatan  Dasar  2013 . Jakarta:  Badan Penelitian dan Pengembangan Kementerian Kesehatan RI.
Negut I, Valentina G, Alexandru MG. 2018. Treatment strategies for infected wounds. Molecules 23(9): 1 – 23.
Nurdiantini I, Swito P, Tri N. 2017. Perbedaan efek penggunaan povidone  iodine  10%  dengan  minyak  zaitun  terhadap penyembuhan  luka  robek  (lacerated  wound). Jurnal  Nurs
News 2(1): 511 – 523.
Nurmilatin,  Fatmir  E.  2015.  Pemanfaatan  cuka  kayu  galam (Melaleuca  sp.)  dengan  berbagai  perlakuan  sebagai pengawet alami telur asin. Jurnal Riset Industri Hasil Hutan 7(2): 10 – 16.
Risma, Takdir T, Saldy Y. 2018. Gambaran karakteristik luka dan perawatannya di ruangan Poliklinik Luka di RS dr. Wahidin Sudirohusodo Makassar’. Jurnal Luka Indonesia 4(3): 153 – 163.
Rupina W, Heru FT, Lit F.  2016.  Efek salep ekstrak etanol 70% daun  karamunting  terhadap  re-epitelisasi  luka  insisi  kulit tikus wistar. eJournal Kedokteran Indonesia 4(1): 26 – 30.
Tessema  Z,  Yalew  M.  2021 .  Evaluation  of  the  wound  healing activity  of  the  crude  extract  of  root  bark  of  Brucea antidysentrica,  the  leaves  of  Dodonaea  angustifolia  and Rhamnus prinoides in mice. Heliyon 7(1): 1-8.