## DAYA HAMBAT MINIMUM EKSTRAK DAUN JENGKOL
UNTUK  BAKTERI Streptococcus iniae DAN LC50NYA PADA IKAN NILA GIFT ( Oreochromis niloticus)
The minimum inhibitory concentration of jengkol leaves extract to Streptococcus iniae bacteria and LC50 for the tilapia fish (Oreochromis niloticus)
Rahma Mulyani 1 , Sugeng Prayogo 2 , dan M. Hanif Azhar 3
1) Mahasiswa  PPS Intitute Pertanian Bogor
2) Stasiun Karantina Ikan Kelas 1 Padang, Sumatera Barat
3) Staf Pengajar – Universitas Airlangga

## Abstrak
Kegiatan  Penyakit streptococcosis ini  merupakan  salah  satu  permasalahan  dalam  usaha  budidaya  Ikan Nila.  Penyakit streptococcosis dapat  menyebabkan  kematian  ikan  lebih  dari  50%  populasi  dalam  1 minggu.  Penggunaan  bahan-bahan  kimia  seperti  antibiotik,  saat  ini  dibatasi  dan  tidak  dianjurkan  untuk penanggulangan.  Maka, perlu dikembangkan bahan alternatif yang berfungsi sebagai antibakteri, Ekstrak Daun  Jengkol  dapat  berpotensi  sebagai  antibakteri.  Maka  dilakukan  penelitian  untuk  mengetahui  LC50 pada  benih  ikan  nila  gift  dan  daya  hambatnya  untuk  bakteri Streptococcus  iniae .  Penelitian  ini dilaksanakan  pada  bulan  Februari  2015  dan  bertempat  di  Balai  Karantina  Ikan  Pengendalian  Mutu  dan Keamanan Hasil Perikanan Kelas II Palembang dan di Kampus C Fakultas Perikanan UPGRI Palembang, dengan menggunkan metode eksperimental laboratoris  dan menggunakan metode percobaan Rancangan Acak Lengkap (RAL) untuk uji efektivitas antibakteri dan LC50. Jumlah perlakuan  uji MIC ( Minimum Inhibitory  Concentration )  ekstrak  daun  jengkol  terhadap  bakteri  Streptococcus  iniae  sebanyak  6 perlakuan dan diulang sebanyak 3 kali, sedangkan uji LC50  terhadap ikan nila gift sebanyak 7 perlakuan dan  diulang  sebanyak  3  kali.  Hasil  penelitian  ini  menunjukkan  bahwa,  nilai  MIC  pada    konsentrasi tertinggi  yaitu  10%  yang  mengandung  100  mg  ekstrak  per  ml    akuades  (100  mg/ml)  yang  memiliki diameter  zona  hambat  17,6  mm  yang  aktivitas  antibakterinya  tergolong  kuat.  Sedangkan  konsentrasi 0,001  tidak  menunjukkan  zona  hambat  (0  mm),maka  Konsentrasi  0,01  %  dapat  digunakan  sebagai konsentrasi  minimum  ( mininum  inhibitory  concentration )  yang  dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri Streptococcus  inae.  Sedangkan  pada  uji  LC50  memperoleh  hasil  bahwa  tingkat  mortalitas  dengan dilakukan uji BNT menghasilkan bahwa P6 (0,04%) berpengaruh nyata terhadap perlakuan P5 (0,032%), P4 (0,016%), P3 (0,008%), P2 (0,004%), P1 (0,002%) dan P0 (0%). Kata Kunci : Ekstrak daun jengkol, LC50, dan MIC.

## Abstract
Streptococcosis disease is one of the problems in the cultivation of Tilapia. Streptococcosis disease can lead to fish kills more than 50% of the population in one week. The use of chemicals such as  antibiotics, is  currently  limited  and  is  not  recommended  for  prevention.  Thus,  the  need  to  develop  alternative materials that function as antibacterial, Jengkol Leaf Extract can be potentially as an antibacterial. Then to  investigate  the  tilapia  fish  LC50  gift  and  power  inhibitory  to  bacteria  Streptococcus  iniae.  The research  was  conducted  in  February  2015  and  is  housed  in  fish  Quarantine  Fish  infections  agency Palembang and in Campus C Faculty of Fisheries UPGRI Palembang, by using laboratory experimental methods and using experimental methods completely randomized design (CRD) to test the effectiveness of antibacterial  and  LC50.  The  number  of  test  treatment  MIC  (Minimum  Inhibitory  Concentration)  leaf extract against Streptococcus iniae jengkol much as 6 treatments and repeated 3 times, while the LC50 test against tilapia gift as much as 7 treatments and repeated 3 times. The results of this study indicate that, MIC values at the highest concentration of 10%, which contains 100 mg of extract per ml of distilled water  (100  mg  /  ml)  which  has  a  diameter  of  17.6  mm  inhibition  zone  that  the  relatively  strong antibacterial  activity.  While  the  concentration  of  0.001  showed  no  inhibition  zone  (0  mm),  the concentration  of  0.01%  can  be  used  as  the  minimum  concentration  (mininum  inhibitory  concentration) that can inhibit the growth of bacteria Streptococcus inae. While the LC50 test to obtain the result that the rate of mortality with LSD test produce that P6 (0.04% 0 significantly affect treatment P5 (0.032%), P4 (0.016%), P3 (0.008%), P2 (0.004%), P1 (0.002%) and P 0 (0%). Keywords : Leaf Extract Jengkol, LC50, and MIC.

## I. PENDAHULUAN
Streptococcosis merupakan  penyakit  yang belakangan  ini  sering  dijumpai  pada  kegiatan budidaya  perikanan,    sehingga  menimbulkan kerugian  ekonomi  yang  diperkirakan  lebih  dari US$  100  juta  per  tahun  (Shoemaker et  al .,    2001 dalam Lusiastuti      dkk.,  2009).    Penyakit Streptococcosis disebabkan oleh jenis bakteri dari genus Streptococcus yang  salah  satunya  yaitu bakteri Streptococcus iniae . Penyakit
streptococcosis ini merupakan salah satu permasalahan  dalam  usaha  budidaya  Ikan  Nila Gift (Tukmechi et al ., 2009). Penyakit Streptococcosis tersebar    di  seluruh  dunia  dan dapat menginfeksi ikan air tawar maupun ikan air laut  (Austin  dan  Austin,  1999).  Penyakit streptococcosis dapat menyebabkan kematian ikan lebih  dari  50%  populasi  dalam  1  minggu,  pada umumnya  infeksi  dimulai  dari  hari  ketiga  hingga hari tujuh (Tukmechi et al., 2009).  Di Indonesia penyakit  ini  telah  menyerang  pada  budidaya  Ikan Nila Gift Oreochromisniloticus di Lubuk  Linggau, Sumatra  Selatan  pada  tahun  2002  dan  2003 (Yuasa et  al., 2008)  serta  pada  karamba  jaring apung  di  Danau  Maninjau  tahun  2010  (Supriyadi dan Gardenia,  2010).
Upaya penanggulangan penyakit Streptococosis dengan  mengunakan  antibiotik maupun bahan kimia lainnya masih belum efisien, dikarenakan pemberian antibiotik berlebihan dapat menyebakan  gangguan  keseimbangan  dinamika alami  mikroorganisme  dalam  pemeliharaan  ikan. Maka, penggunaan bahan kimia seperti antibiotik, saat  ini  dibatasi  dan  tidak  dianjurkan  (Esiobu et al .,  2002 dalam Tanbiyaskur,  2011).  Menyikapi hal  tersebut,  perlu  dikembangkan  bahan  alternatif yang  berfungsi  sebagai  antibakteri.  Salah  satu bahan  alternatif  yang  dapat  digunakan  bisa diperoleh  dari  tanaman yang mengandung senyawa antibakteri  (Agarwal et al ., 1996 dalam Joshi et  al., 2009).    Salah  satu  bahan  alternatif yang dapat digunakan yaitu Daun Jengkol, karena Daun  Jengkol  merupakan  salah  satu  tumbuhan yang  dapat  dimanfaatkan  sebagai  obat  serta berpotensi  sebagai  antibakteri,  hal  tersebut  telah dibuktikan dari hasil penelitian berupa identifikasi isolasi  senyawa  antibakteri  dari  Daun  Jengkol ( Pithecolobium  lobatun Benth)  bahwa,  Ekstrak Daun  Jengkol  mampu  menghambat  pertumbuhan bakteri  gram  positif  ( Staphylococcus  aureus ) ataupun  bakteri  gram  negatif  ( Escherichia  colli ) dari  hasil  uji  fitokimia  ekstrak  Daun  Jengkol mengandung  senyawa  jenis  Terpenoid  yang merupakan salah satu dari beberapa jenis senyawa antibakteri yang mampu menghambat pertumbuhan  bakteri  (Salni  dkk.,  2011).  Tujuan dari  penelitian  ini  yaitu  :  1).  Memperoleh
konsentrasi  daya  hambat  ekstrak  daun  jengkol terhadap  pertumbuhan bakteri Streptococcus iniae dan 2). Memperoleh konsentasi LC 50 ekstrak daun jengkol terhadap Ikan Nila Gift.

## II. METODE PENELITIAN
Penelitian ini dilaksanakan selama 1 bulan, yaitu  pada  bulan  Februari  2015  dan  bertempat  di Balai  Karantina  Ikan  Pengendalian  Mutu  dan Keamanan  Hasil  Perikanan  Kelas  II  Palembang dan  di  Kampus  C  Fakultas  Perikanan  Universitas PGRI  Palembang,  Kecamatan  Sematang  Borang Palembang.  Penelitian  ini  menggunkan  metode eksperimental laboratoris  dan menggunakan metode  percobaan  Rancangan  Acak  Lengkap (RAL) untuk uji daya hambat minimum dan LC 50 . Jumlah  perlakuan    uji  daya  hambat  minimum ekstrak daun jengkol terhadap bakteri Streptococcus  iniae sebanyak  6  perlakuan  setiap perlakuan diulang sebanyak 3 kali. untuk uji LC 50 ekstrak  daun  jengkol  terhadap  Ikan  Nila  Gift sebanyak  7  perlakuan,  setiap  perlakuan  diulang sebanyak 3 kali sedangkan jumlah perlakuan.
a. Uji Daya Hambat Minimum
Uji Penentuan konsentrasi uji daya hambat minimum sebelumnya telah dilakukan uji sensitivitas ekstrak daun jengkol untuk mengetahui  konsentrasi  tertinggi  yang  mampu menghambat perkembangan bakteri Streptococcus iniae . Oleh sebab itu diperoleh konsentrasi sebagai berikut untuk uji daya hambat minimum. P0 = (Kontrol) ekstrak daun jengkol 0% P1 = Ekstrak daun jengkol 0,01 mg/mL (0,0001%) P2 = Ekstrak daun jengkol 0,1 mg/mL (0,001%) P3 = Ekstrak daun jengkol 1 mg/mL (0,01%) P4 = Ekstral daun jengkol 10 mg/mL (0,1%) P5 = Ekstrak daun jengkol 100 mg/mL(1%) b. Uji LC 50
Sebelum  melakukan  uji  LC 50 atau lethal concentration  50% terlebih  dahulu  menentukan ambang  batas,  yaitu  bawah  (LC 0 )  dimana  seluruh ikan  uji  tidak  mengalami  kematian  dan  ambang atas  (LC 100 )  dimana  seluruh  populasi  ikan mengalami  kematian.  Setelah  uji  ambang  batas dilakukan,  kemudian  dilanjutkan  dengan  uji  LC 50 ekstrak  daun  jengkol  terhadap  benih  Ikan  Nila. LC 50 yaitu level konsentrasi yang dapat membunuh  50%  dari  jumlah  populasi  Ikan  Nila Gift  yang  ada  setelah  diberikan  perlakuan.  Uji LC 50 dilakukan  selama  96  jam  menggunakan metode  hayati  (Rand,  2008)  dengan  7  tingkat konsentrasi,  maka  diperoleh  konsentrasi  sebagai berikut :
P0 = Kontrol P1 = 0,002 % ekstrak daun jengkol (0,02 g/L) P2 = 0,004 % ekstrak daun jengkol (0,04 g/L) P3 = 0,008 % ekstrak daun jengkol (0,08 g/L)
P4 = 0,016 % ekstrak daun jengkol (0,16 g/L) P5 = 0,032 % ekstrak daun jengkol (0,32 g/L) P6 = 0,064 % ekstrak daun jengkol (0,64 g/L).
Parameter  penelitian  yang  diamati  pada penelitian  ini  terdiri  dari  parameter  utama  yang meliputi  diameter  zona  hambat  dan  kelangsungan hidup  Ikan  Nila  Gift  setelah  diberi  perlakuan LC 50 . Pada parameter penunjang meliputi pengamatan  kandungan  senyawa  antibakteri  (uji fitokimia)  yang  terdapat  pada  ekstrak  Daun Jengkol,  respon  terhadap  perlakuan.  Adapun parameter yang diamati pada penelitian ini, secara rinci sebagai berikut :
c. Zona Hambat Pertumbuhan Bakteri
Pengamatan zona hambat bakteri dilakukan dengan  cara  mengukur  diamter  zona  bening disekitar  kertas  cakram  pada  pada  erlenmeyer berbagai konsentrasi, yaitu diameter minimum dan diameter  maksimum  yang  dapat    menghambat perkembangan bakteri.
d. Uji  LC 50 Ekstrak  Daun  Jengkol  Pada  Ikan Nila Gift
1. Mortalitas Ikan Nila Gift
Pengamatan  jumlah  kematian  dilakukan setiap jam. Penentuan mortalitas dengan menghitung jumlah akhir pemeliharaan ikan  yang mati dibagi dengan jumlah ikan awal pemeliharaan, dikali 100% (Effendie, 1979) :
𝑀 = 𝑁𝑡 𝑁𝑜 𝑥 100 %
Keterangan: M  = mortalitas (%) No  = Jumlah ikan pada awal pemeliharaan (ekor) Nt  = Jumlah ikan pada akhir pemeliharaan (ekor)
2. Respon Terhadap Perlakuan
Pengamatan  dilakukan  setiap  hari  selama masa pemeliharaan untuk uji LC 50 . Data kumulatif SR  Ikan  Nila  Gift  pada  penelitian  menggunakan analisys  probit menggunakan  aplikasi Minitab  15 english  version dengan  tingkat  kepercayaan  95%, untuk menentukan nilai LC 50 dalam waktu 96 jam. Pengamatan Nilai uji zona hambat disajikan dalam bentuk tabel, selanjutnya dianalisis secara statistik menggunakan analisi sidik ragam atau Analisys of Variance (ANOVA).  Apabila  hasilnya  berbeda nyata  dianalisis  dengan  uji  lanjut  BNT  pada  taraf kepercayaan 95 % yang dianalisis dengan aplikasi Minitab  15.  Data  hasil  uji  sensitivitas,  fitokimia
dan  respon  terhadap  perlakuan  dibahas  secara deskriptif.

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN
a. Uji Fitokimia Ekstrak Daun Jengkol Uji fitokimia ekstrak daun jengkol dilakukan  untuk  mengetahui  jenis  senyawa  yang terkandung  di  dalam  ekstrak  daun  jengkol.  Dari hasil  uji  fitokimia  secara  kualitatif  diperoleh senyawa  yang  terkandung    yaitu  terpenoid, streroid, tanin, saponin, flavonoid dimana senyawa-senyawa  tersebut  merupakan  senyawa antibakteri  (Robinson,  1995 dalam Lathifah, 2008)
Tabel  1. Analisa  Kualitatif  Senyawa  Antibakteri dalam Ekstrak Daun Jengkol Senyawa Aktif Antibakteri Hasil uji Alkaloid Terpenoid Tanin Saponin Flavonoid - + + +
+
Sumber  :  Laboratorium  Pengujian  Terpadu  Jurusan  Kimia FMIPA UNSRI

## b. Uji Sensitivitas Ekstrak Daun Jengkol
Hasil  uji  sensitivitas  ekstrak  daun  jengkol terhadap Streptococcus iniae menunjukkan bahwa ekstrak  daun  jengkol  dapat  menghambat  bakteri Streptococcus  iniae yang telah dibuktikan dengan terbentuknya  diameter  zona  hambat    disekitar kertas  cakram  yang  telah  ditetesi  20 µ g/ml menggunakan mikropipet dengan berbagai konsentrasi  (10%,  25%,  50%,75%,  dan  100%). Semakin  tinggi  konsentrasi  ekstrak  daun  jengkol maka  semakin  besar  menghambat  pertumbuhan bakteri Streptococcus iniae . Pengujian sensitivitas antibakteri dilakukan untuk mengetahui konsentrasi  tertinggi  yang  mampu  menghambat perkembangan  bakteri Streptococcus  iniae dan selajutnya konsentrasi terendah yang menunjukkan  diameter  terkecil  akan  diturunkan lagi  konsentrasinya  untuk  mengetahui  konsentrasi daya  hambat  minimum  ekstrak  daun  jengkol terhadap bakteri Streptococcus iniae .
Tabel 2. Hasil uji sensitivitas ekstrak daun jengkol pada bakteri Streptococcus iniae Konsentasi Ekstrak Daun Jengkol Rata-rata Diameter Zona Hambat (mm) Terhadap Bakteri S.iniae Golongan Aktivitas Antibakteri 100 % 75 % 50% 25% 10% 21,6 20,7 19,3 18 17,6 Sangat kuat Sangat kuat kuat kuat kuat
Masing-masing  kertas  cakram  terlihat kenaikan diameter zona hambat dari kertas cakram yang  mengandung  konsentrasi  ekstrak  daun jengkol  10%  sampai  100%.  Konsentrasi  tertinggi zona hambat terdapat pada konsentrasi 100% yang mengandung  ekstrak  daun  jengkol  murni  yang menunjukkan  diameter  zona  hambat  sebesar  21,6 mm  yang  berarti  memiliki  aktivitas  antibakteri yang  sangat  kuat.  Davis  dan  Stout    (1971) menyatakan  bahwa  apabila  zona  hambat  yang terbentuk  berkisar  antara  >20  mm  dinyatakan sebagai  memiliki  kekuatan  aktivitas  antibakteri yang  sangat  kuat,  apabila  zona  hambat  berkisar antara 10-20 mm dinyatakan kuat, apabila zona
hamabatan berkisar 5-10 mm dinyatakan kekuatan antibakteri yang sedang, dan apabila zona hambat <5  maka  kekuatan  antibakteri  tergolong  lemah. Diameter  zona  hambat  terendah  terdapat  pada konsentrasi 10% yaitu sebesar 17,6 mm. Semakin kecil  konsentrasi  maka  semakin  kecil  pula  zona hambat yang terbentuk, hal tersebut terjadi karena adanya  zona  hambat  pada  masing–masing perlakuan  konsentrasi  ekstrak  daun  jengkol terdapat  adanya  zat-zat  aktif  yang  terkandung seperti  tanin,  terpenoid,  saponin,  dan  flavonoid dimana  zat  tersebut  berfungsi  sebagai  antibakteri. Kerja  antibakteri  menurut  Ganiswarna  (1995) diuraikan  pada Tabel  3. sebagai  berikut  : Tabel 3. Mekanisme Kerja Senyawa Antibakteri pada Bakteri
Senyawa antibakteri Mekanisme kerja terhadap bakteri Flavonoid menyebabkan terjadinya kerusakan permeabilitas dinding sel bakteri, mikrosom, dan lisosom sebagai hasil interraksi antara flavonoid dan DNA bakteri Tanin berkerja  dengan  mengkerutkan  dinding  sel  atau  membran  sel  sehingga mengganggu permeabilitas sel bakteri itu sendiri. Saponin mengganggu permeabilitas membran sel mikroba, yang menyebabkan kerusakan membran  sel  dan  menyebabkan  keluarnya  berbagai  komponen  penting  dari dalam sel mikroba yaitu protein, asam nukleat, dan lain-lain. Terpenoid (Gunawan, 2008) menghambat  pertumbuhan  bakteri  dimana  terpenoid  bereaksi  dengan  porin (Protein transmembran) pada membran luar dinding sel bakteri yang membentuk ikatan polimer yang kuat sehingga mengakibatkan rusaknya porin yang membuat sel  bakteri  kekurangan  nutrisi  sehingga  pertumbuhan  bakteri  terhambat  atau mati.
c. Uji Daya Hambat Minimum  Ekstrak Daun
Jengkol Pengujian  daya  hambat  minimum  atau minimum inhibitory concentration (MIC)
dilakukan  dengan  meneteskan  sebanyak  20 µ g/ml
isolat bakteri Streptococcus iniae pada MHA plate dan  Ekstrak  daun  jengkol  20 µ g/ml  pada  kertas cakram  berdiameter  6  mm  diinkubasi  selama  24- 48  jam.  Data  yang  diperoleh  dapat  dilihat  pada hasil pengujian diperoleh data sebagai berikut:
Tabel 4. Hasil uji MIC Ekstrak Daun Jengkol pada Bakteri Streptococcus iniae Konsentrasi (%) Ulangan Totoal diameter Zona hambat  (mm) 1 2 3 P5       10 % P4        1 % P3      0,1 % P2    0,01 % P1   0,001 % P0    Kontrol 18,3 14,5 8,8 8,1 0 0 16 12 8,2 7,4 0 0 18,6 12,5 10 7,9 0 0 17,6 13 9 7,8
0 0 a b c c d
d
Keterangan: (a,b,c,d) hasil uji BNT taraf 95%.
Pada Tabel 4 menunjukkan bahwa perlakuan  P5  (10%)  berpengaruh  nyata  terhadap perlakuan  P4,  P3,  P2,  P1,  dan  P0.    Pada konsentrasi tertinggi yaitu 10%(P6) yang mengandung 100 mg ekstrak per ml  akuades (100 mg/ml) yang memiliki diameter zona hambat 17,6 mm  yang  aktivitas  antibakterinya  tergolong  kuat. Sedangkan  konsentrasi    0,001  (P1)  tidak menunjukkan  zona  hambat  (0  mm),  diduga konsentasi  ekstrak  daun  jengkol  terlalu  kecil sehingga  tidak  mempu  menghambat  pertumbuhan bakteri Streptococcus  iniae ,.  Menurut  Wrigth
(1989) dalam Utami (2011), salah satu faktor yang mempengaruhi  kemampuan  zat  antibakteri  untuk menghambat  pertumbuhan  bakteri  tergantung pada  besar  atau  kecilnya  konsentrasi  zat antibakteri  yang  digunakan.  Semakin  kecil konsentrasi  yang  digunakan  maka  aktivitas antibakteri  yang  terbentuk  semakin  kecil.    Pada perlakuan  kontrol  tidak  terbentuk  zona  hambat  (0 mm) dikarenakan kertas cakram tidak mengandung  ekstrak  daun  jengkol,  melainkan hanya ditetesi menggunakan akuades. Konsentrasi 0,01  %  dapat  digunakan  sebagai  konsentrasi
minimum  ( mininum  inhibitory  concentration ) yang  dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri Streptococcus  inae ,  karena  dari  Tabel  4, konsentrasi  0,01  %  memilikikonsentrasi  yang rendah,  dan  membentuk  zona  hambat  (7,8  mm) terhadap bakteri Streptococcus inae.
d. Lc 50 Ekstrak Daun Jengkol Sebelum dilakukan pengujian Lethal Concentration  50% (LC 50 )  atau  konsentrasi  yang menyebabkan  kematian  50%,  telah  dilakukan  uji pendahuluan  untuk  menentukan  ambang  batas, yang diperoleh konsentrasi dengan rumus Suparjo (2010),  ambang  batas  atas  (LC 100 )  sebesar  0,1  %
(1 g/L ekstrak daun jengkol) dimana  seluruh ikan uji  mengalami  kematian.  Konsentrasi  ambang batas  bawah  (LC 0 )  yaitu  sebesar  0,001  %  (0,01 g/L  ekstrak  daun  jengkol)  dimana  seluruh  ikan pengujian  tidak  mengalami  kamatian.  Setelah diperoleh  konsentrasi  ambang  batas  ekstrak  daun jengkol,  maka  diperoleh  konsentrasi  untuk  uji LC 50 sebagai  berikut;  0,002%,  0,004%,  0,008%,
0,016%, 0,032%, dan 0,064%. Hasil mortalitas uji LC 50 dapat dilihat pada (Gambar 1).
Gambar 1. Mortalitas Ikan Nila selama Uji LC 50 Berdasarkan  grafik  diatas  menunjukkan bahwa mortalitas benih Ikan Nila selama uji LC 50 meningkat  dengan  naiknnya  tingkat  konsentrasi ekstrak  daun  jengkol  disetiap  perlakuan  selama 96  jam.  Mortalitas  pada  kontrol  (perlakuan  P0 0%)  yaitu  sebesar  0%  sehingga  tidak  ada  faktor koreksi  untuk  menentukan  nilai  LC 50 .  Pada konsentrasi  0,064%  menunjukkan  mortalitas tertinggi  dengan  nilai  53,33%  dan  konsentrasi terendah  dengan  nilai  mortalitas  sebesar  6,67% terdapat  pada  berlakuan  P1  dengan  konsentrasi 0,002%.
Pada  gambar  1,  tingkat  mortalitas  setelah dilakukan  uji  BNT  menghasilkan  bahwa  P6 berpengaruh nyata terhadap perlakuan P5, P4, P3, P2,  P1  dan  P0.  Respon  yang  tampak  pada  benih Ikan  Nila  Gift  setelah  diberikan  berbagai perlakuan  ekstrak  daun  jengkol  memberikan respon  yang  berbeda    yaitu  sebagai  berikut:  pada perlakuan P0 (0%),P1 (0,002%), P2 (0,004%),  P3 (0,008%),  P4  (0,016%),  P5  (0,032%),  dan  P6 (0,042%)  ikan  terlihat  berenang  aktif  saat dimasukkan  di  dalam  setiap  perlakuan.  Pada konsentrasi 0,008%, 0,016%, 0,032% dan 0,064%
ikan  terlihat  gelisah  saat  setelah  direndam  dalam perlakuan
Pada  perlakuan  P6  benih  Ikan  Nila    terlihat megap-megap  diatas  permukaan  air  dan  kembali lagi  ke  dasar  pada  3  jam  pertama.  Selanjutnya pada  7  jam  pertama  ikan  menunjukkan  respon terhadap  perlakuan  berupa  pergerakan  ikan menjadi  tidak  stabil  ( parkiston  syndrome ),  susah untuk  berenang  keatas  permukaan,  lemas,  dan mulai  mati  pada  8  jam  kemudian.  Jumlah mortalitas  ikan  banyak  terjadi  pada  24  -  48  jam pertama  perendaman.  Berikut  tabel  frekuensi bukaan  operkulum  Ikan  Nila  Gift  saat  diberikan berbagai  perlakuan  perendaman  ekstrak  daun jengkol.
Tabel  5. Frekuensi  Bukaan  Operkulum  Ikan  Nila Gift ( Oreochromis niloticus ) Perlakuan Rata-rata (Kali/menit) P0  (kontrol) P1 P2 P3 P4 P5 P6 119 139 145 153 161 170 179 Dari tabel 5. menunjukkan bahwa bukaan
operkulum  Ikan  Nila  Giftkondisi  normal  terdapat pada  perlakuan  P0  (kontrol)  dengan  rata-rata bukaan operkulum 119. Sedangkan pada perlakuan  P1,P2,P3,P4,  P5  dan  P6  dari  hasil pengamatan  menunjukkan  adanya  peningkatan keseringan bukaan operkulum dengan peningkatan jumlah  konsentrasi  pada  tiap  perlakuan.  semakin tinggi  konsentrasi  ekstrak  daun  jengkol  maka semakin  sering  bukaan  operkulum,  hal  ini menunjukkan bahwa sistem kerja pernapasan Ikan Nila  Gift  terganggu  yang  pada  akhirnya  dapat menyebabkan  kematian.  Kondisi  yang  demikian diduga  akibat  dari  kerja  senyawa  aktif  yang terkandung  dalam  ekstrak  daun  jengkol  yang terlarut  dalam  air  mempengaruhi  sistem  kerja insang dan peredaran darah.
Ekstrak  daun  jengkol  pertama  masuk  ke dalam  tubuh  ikan  melaui  insang,  dengan  bantuan insang  maka  proses  difusi  oksigen  dari  dalam  air ke seluruh peredaran darah di tubuh dapat terjadi, yaitu  mulai  dari  jantung,  insang,  kemudian dialirkan keseluruh tubuh dan akhirnya kembali ke jantung  melalui  sistem  peredaran  darah  (Prayogo, 2010).  Diduga  ekstrak  daun  jengkol  yang mengandung senyawa terpenoid mampu menghambat kinerja sel darah  yang terdapat pada lamela  insang,  setelah  itu  senyawa  tanin  bekerja dengan  mengganggu  kinerja  sel-sel  tersebut, ditambah  lagi  dengan  kinerja  dari  senyawa flavonoid  yang  bekerja  merusak  sel-sel  pada lamela  insang.  Terakhir  sel-sel  yang  telah  rusak komponen  penting  yang  terdapat  pada  sel  darah
pada  lamela  insang  dikeluarkan  oleh  senyawa saponin. Kerusakan yang terjadi maka menyebabkan  ikan  mengalami  kesulitan    dalam bernafas,  menurut  Prayogo  (2010),  hal  tersebut terjadi  karena  fungsi  insang  tidak  dapat  berjalan dengan normal, tersumbatnya pembuluh darah dan bahkan menyebabkan kematian.
Lebih  lanjut  mengenai  dampak  kerusakan yang  terjadi  pada  insang,  maka  akan  mengurangi jumlah  oksigen  yang  di  ikat  oleh  sel  darah  untuk sistem  peredaran  darah  yang  dimulai  dari  jantung ke insang, ke keseluruh tubuh ikan dan kembali ke jantung.  Apabila  jantung  atau  bagian  organ  tubuh yang  lain  kekurangan  asupan  oksigen  dari  sel darah, maka akan menyebabkan ketidak normalan kinerja  fungsinya.  Dari  sistem  organ  ekskresi seperti  Ginjal  dan  hati  yang  berfungsi  sebagai pembentuk  sel  darah  pada  ikan.  Selain  itu  ginjal jugaberfungsi  sebagai  menyaring  cairan  tubuh melalui glomerulus ,  mengambil  kembali  cairan tubuh,  dan  menyingkirkan  hasil  fitrasi  (racun) keluar  dari  tubuh  ikan    (Rahardjo,  dkk., 2011).Tetapi  jika  bahan  (racun)  dalam  jumlah besar  masuk  ke  dalam  tubuh  ikan  maka  akan meningkatkan  kerja  ginjal  untuk  menetralkan tubuh  dari  racun.  Dengan  meningkatnya  kerja ginjal  yang  terus  menerus  lama-lama  akan menyebabkan  kerja  ginjal  yang  lain  juga  kan terganggu.  Hal  ini  didukung  dari  data  hasil pengamatan  mortalitas  pada  masing-  masing perlakuan  yaitu,  P1dengan  tingkat  mortalitas sebesar  6,6%,    P2  sebesar  10  %,  P3  sebesar 13,3%,  P4  sebesar  20%,  P5  sebesar  30%  dan  P6 sebesar  53,33%.  Bahwa  kematian  yang  terus meningkat  diduga  dipengaruhi  oleh  faktor-faktor tersebut.
e. Potensi Ekstrak Daun Jengkol
Nilai konsentrasi MIC ekstrak daun jengkol pada  bakteri Streptococcus  iniae yaitu  sebesar 0,01  %  (0,1g/L),  sedangkan  konsentrasi  yang mampu  mematikan  50%  ikan  uji    (LC 50 )  selama
96  jam  pengujian  atau lethal  concentration 50%, diperoleh  konsentrasi  sebesar  0,050%  (0,5  g/L) yang  diperoleh  dengan  pengelolahan  data  dengan analisis  probit  menggunakan  aplikasi  minitab  15 tingkat  kepercayaan  95%.  Jika  dilakukan  untuk aplikasi  pengobatan  pada  ikan,  maka  konsentrasi yang  diberikan  harus  lebih  tinggi  dibandingkan dengan  nilai  MIC  minimal  yaitu  minimal  4x konsentrasi  MIC(Angka,  2005),  jika  nilai  MIC 0,01%,  maka  konsentrasi  0,05%  (0,5  g/L)  adalah nilai konsentrasi minimal untuk pengobatan, tetapi nilai  konsentrasi  yang  menyebabkan  kematian 50%  atau  LC 50 ekstrak  daun  jengkol  terhadap benih Ikan Nila Gift yaitu sebesar 0,05% (0,5g/L).
Pada  pengujian  LC 50 ikan  uji  yang digunakan  dalam  keadaan  sehat,  sedangkan pengobatan,  menggunakan  ikan  yang  telah
terinfeksi  suatu  penyakit.  Ikan  yang  terserang penyakit  tentu  dalam  keadaan  lemah  serta  daya tahan  tubuh  menurun,  akibat  bakteri  yang  terus berkembang  ditubuh  ikan,  sehingga  rentan  mati, maka  ekstrak  yang  digunakan  untuk  pengobatan tidak  bersifat  toksik  atau  tidak  menambah  faktor kematian ikan. Oleh sebab itu, pada penelitian ini ekstrak  daun  jengkol  belum  dapat  diaplikasikan untuk  pengobatan  ikan  yang  terserang  penyakit yang disebabkan oleh bakteri Streptococcus iniae , tetapi  dapat  diaplikasikan  untuk  pencegahan bakteri Streptococcus iniae pada Ikan Nila dengan menggunakan 2x dosis MIC yaitu  sebesar 0,02% (0,2g/L).  Hal  tersebut  sesuai  dengan  pernyataan dari  Angka  (2005),  yang  menyebutkan  bahwa penggunaan bahan herbal tertentu sebagai pencegahan penyakit yang disebabkan oleh bakteri yaitu 2x dosis MIC.

## IV. KESIMPULAN DAN SARAN

## a. Kesimpulan
Kesimpulan  yang  diperoleh  dari  hasil penelitian  ini  adalah  :  1).  MIC  atau  konsentrasi daya hambat minimum, dengan konsentrasi 0,01% ekstrak  daun  jengkol  sudah  mampu  menghambat perkembangan  bakteri Streptococcus  iniae ,  2). Pada  konsentrasi  0,05%  ekstrak  daun  jengkol merupakan  konsentrasi  LC 50 terhadap  benih  Ikan Nila, dan 3). Ektrak daun jengkol dapat digunakan untuk  pencegahan  infeksi  yang  disebabkan  oleh bakteri Streptococcus  iniae pada  Ikan  Nila ( Oreochromis niloticus ).
b. SARAN
Penelitian  ini  perlu  dilakukan  penelitian lebih  lanjut  mengenai  aplikasi  pencegahan  dan pengobatan  Ikan  Nila  akibat  infeksi  bakteri Streptococcus  iniae dengan  menggunakan  ekstrak daun  jengkol  ( Pithecolobium  lobatun  Benth. ) dengan  menggunakan  metode  ekstraksi  yang berbeda  atau  mengisolasi  senyawa  antibakteri tertentu.

## DAFTAR PUSTAKA
Angka,  S.L.  2005. Kajian  Penyakit  Motile Aeromonad  Septicaemia  (MAS)  pada  ikan lele dumbo (Clarias sp): Patologi, pencegahan  dan  Pengobatannya  dengan Fotofarmaka .  Tesis  sekola  pascasarjana IPB. Bogor.
Austin,  B  dan  D.  A.  Austin.  1999. Bacterial  Fish Patogens:  Disease  of  farmed  and  Wild Fish . Praxis publising, Chichester, UK. Davis,  W.W  and  Stout,  T.R.  1971. Disc  Plate Methods  of  Microbiological  Antibiotic Assay . Microbiology. 22(4): 659-665.
Effendie.  1979. Biologi  Perikanan .  Yayasan Dewi Sri. Bogor. Ganiswarna,  S.,G.  1995. Farmakologi  Daun Terapi . Gaya baru. Jakarta. Gunawan.  2008. Antibakteri  pada  Meniran ( Phylanthus  niruri  Linn .)  Jurnal  kimia,  2 (22). Joshi,  B.,  S.  Lekhak,  and  A.  Sharma.  2009. Antibacterial Property of Different Medical Plants:Ocimumsanctum,Cinnamomumzeyl anicum,Xanthoxylum armatum, and
Origanum
majorana .
Kathmandu
University J. Sci, Eng, and Tech., 5(1). Lusiastuti,  A.M.,  Soraya,  S.D.,  dan  Wahyudi,  A. 2009. Tingkat  resistensi  antibiotika  dan virulensi  klinis  Streptococcus  iniae  dan Streptococcus  agalactiae  Pada  Ikan  Nila
(Oreochromis
niloticus ). Prosiding Semnaskan  UGM  Jogjakarta  2009  (in press). Prayogo,  S.  2010. Uji  Toksisitas  Asap  Cair Tempurung  Kulit  Kelapa  Sawit  terhadap Ikan  Nila  (Oreochromis  niloticus)  dan daya  hambatnya  terhadap  Aeromonas hydrophila .  Tesis  Program  Pascasarjana UNSRI. Indralaya. Rahardjo,  M.F.,  Djadja,  S.S.,  Ridwan,  A.,  dan Johannes H. 2011. Iktiologi . Lubuk Agung. Bandung Salni,  Marisa  H,  dan  Mukti  R.,W.  2011. Isolasi Senyawa  Antibakteri  dari  Daun  Jengkol dan  Penentuan  niali  KHM-nya .  Jurnal Penelitian  Sains,  FKIP  MIPA  UNSRI,  14 (1) D-14109. Supriyadi, H. dan L. Gardenia. 2010.
Streptococcosis
pada
Ikan Nila (Oreochromis niloticus) Budidaya di Danau Maninjau . Prosiding Forum Inovasi Teknologi Akuakultur: 905- 910. Tanbiyaskur. 2011. Efektifitas penambahan probiotik  dan  sinbiotik  melalui  pakan untuk  pengendalian  infeksi  Streptococcus agalactiae  pada  Ikan  Nila  (Oreochromis niloticus ). Tesis Sekolah Pascasarjana IPB. Bogor. Tukmechi, A., R. Hobbenaghi, H. R. Holasso, and A.  Morvaridi.  2009. Streptococcosis  in  a Pet  Fish,  Astronotus  ocellatus:  A  Case Study . Int. J. Biol. Life Sci. Utami,  I.,A.,N.,S.  2011. Efektifitas  ekstrak  daun sirih (piper betle Linn) sebagai antibakteri terhadap Edwardsiella tarda yang menginfeksi Ikan Nila (Oreochromis niloticus) .  Tesis  Program  pasca  sarjana UNSRI. Inderalaya. Yuasa,  K.,  T.  Kamaishi,  K.  Hatai,  M.  Bahnnan, and  P.  Borisuthpeth.  2008. Two  Cases  of
Streptococcal  Infections  of  Cultured  Tilapia  in Asia . In Bondad-Reantaso, MG