AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL DAUN KEJIBELING (Strobilanthes crispa L., Blume) DAN DAUN SAMBILOTO (Andrographis paniculata Burm. f. Nees) DAN KOMBINASINYA

## Norviria Tsalasatin Apriliani dan Tukiran*
Jurusan Kimia, FMIPA, Universitas Negeri Surabaya, Jl. Ketintang Surabaya 60231 *e-mail: tukiran@unesa.ac.id
Received 30 April 2021 Accepted 24 June 2021

## Abstrak
Kejibeling ( Strobilanthes crispa L., Blume) dan Sambiloto ( Andrographis paniculata Burm. f.  Nees)  adalah  tanaman  yang  mempunyai  kandungan  senyawa  bioaktif  yang  memiliki potensi  sebagai  antioksidan.  Penelitian  ini  memiliki  tujuan  untuk  mengetahui  aktivitas antioksidan  kombinasi  ekstrak  etanol  daun  kejibeling  dan  daun  sambiloto.  Pengujian antioksidan sampel menggunakan metode DPPH secara spektrofotometer UV-Vis. Serbuk daun kejibeling dan sambiloto dimaserasi dengan menggunakan pelarut etanol 96% sampai diperoleh ekstrak kental setelah penguapan. Hasil uji aktivitas antioksidan didapatkan nilai IC 50 untuk ekstrak  etanol  kejibeling,  ekstrak  etanol  sambiloto,  kombinasi  ekstrak kejibeling:sambiloto (1:1), kombinasi (1:2) dan kombinasi (2:1) berturut-turut sebesar 71,39, 15,55,  7,58,  7,83  dan  6,35  ppm.  Nilai  IC 50 kombinasi  ekstrak  dari  daun  kejibeling  dan sambiloto menunjukkan adanya peningkatan kemampuan antioksidan dibandingkan dengan ekstrak tunggal kejibeling dan sambiloto.
Kata kunci: Antioksidan, daun kejibeling, daun sambiloto, DPPH .

## Abstract
Kejibeling  ( Strobilanthes  crispa L.,  Blume)  and  Sambiloto  ( Andrographis  paniculate Burm.f.  Ness)  are  plants  that  contains  bioactive  compounds  that  have  potential  as  antio xidant.  This  study  aims  to  determine  the  antioxidant  activity  of  the  combination  ethanol leaves extract of kejibeling and sambiloto. Antioxidant testing of samples used the DPPH method  by  UV-Vis  spectrophotometry.  Powder  of  kejibeling  and  sambiloto  leaves  were macerated using 96% ethanol and then evaporated until a thick extract was obtained. The results of the antioxidant activity test showed that the value of IC 50 for the ethanol extract of kejibeling, ethanol extract of sambiloto, combination of kejibeling extract:sambiloto (1:1), combination  (1:2)  and  combination  (2:1)  were  71.39,  15.55,  7.58,  7.83  and  6.35  ppm respectively. The IC 50 value of the combination of extracts from kejibeling and sambiloto leaves showed an increase in antioxidant ability compared to a single extract kejibeling dan sambiloto.
Keywords: Antioxidant, kejibeling leaf, sambiloto leaf, DPPH .

## Pendahuluan
Gaya  hidup  yang  tidak  sehat  dan dampak dari lingkungan yang buruk dapat menyebabkan  sistem  kekebalan  dalam tubuh  tidak  mampu  menghadapi  radikal bebas. Radikal bebas bisa berasal dari dua
sumber, yaitu sisa metabolisme tubuh dan beberapa  faktor  dari  luar  tubuh  seperti faktor makanan, polusi udara, asap rokok serta  sinar  ultraviolet  (Ratnayani,  2012). Kandungan radikal bebas dan antioksidan
dalam  tubuh  yang  tidak  seimbang  dapat menyebabkan  stress  oksidatif  yang  bisa merusak tubuh sehingga memicu beberapa penyakit degenerative (Bherawi, 2017).
Radikal bebas dapat diartikan sebagai atom  atau  molekul  yang  sangat  reaktif karena  mempunyai  elektron  yang  tidak berpasangan pada kulit terluarnya sehingga  membuatnya  menjadi  tidak stabil  dan  cenderung  untuk  mengikat elektron senyawa lain sehingga terbentuk radikal  bebas  baru  yang  lebih  reaktif (Stankovic  S  dan  Radovanović,  2012). Radikal bebas  yang  lebih reaktif  tersebut cenderung  terus  mencari  elektron  di molekul  sekitarnya  dan  apabila  tidak dikendalikan  maka  akan  terjadi  reaksi berantai.  Reaksi  berantai  tersebut  dapat berhenti  apabila  terdapat  molekul  yang mendonorkan elektronnya kepada radikal bebas yang bisa disebut dengan antioksidan (Lamina S, 2013).
Antioksidan merupakan senyawa donor elektron yang bisa digunakan untuk mencegah  pembentukan  radikal  dalam tubuh  manusia  dengan  cara  berikatan dengan  molekul  radikal  bebas.  Dengan keberadaan senyawa  antioksidan tersebut dapat  menetralisir  terbentuknya  radikal bebas  dalam  tubuh  (Salamah,  N.,  & Widyasari, 2015).
Di  dalam  tubuh  manusia  sudah terbentuk suatu senyawa antioksidan dari beberapa  macam  enzim  antioksidan, misalnya  seperti  enzim  superoksida dismutase,  glutasion  peroksidase  dan katalase  (Werdhasari,  2014).  Kurangnya senyawa antioksidan dapat  menyebabkan tingginya kandungan radikal bebas dalam tubuh (Bherawi, 2017). Namun kurangnya senyawa  Oleh  sebab  itulah,  diperlukan antioksidan  alami  yang  berasal  dari tumbuhan  yang  dapat  berpotensi  untuk mencegah  tingginya  kandungan  radikal bebas  dalam  tubuh  (Stankovic  S  dan Radovanović, 2012).
Contoh  tanaman  dengan  potensi antioksidan  adalah  tanaman  sambiloto ( Andrographis  paniculate Burm.f.  Ness)
dan  tanaman  kejibeling  ( Strobilanthes crispa L.,  Blume).  Tanaman  kejibeling mengandung  berbagai  macam  metabolit sekunder dan zat-zat kimia seperti kalium, natrium,  asam  silikat,  kalsium,  saponin, alkaloid,  polifenol  dan  flavonoid  yang berperan  sebagai  antioksidan  serta  dapat menghambat pertumbuhan dan perkembangan  sel  kanker  (Andriani, 2011).  Tanaman  kejibeling  telah  banyak digunakan  sebagai  obat  batu  ginjal,  batu empedu,  diabetes,  kolesterol  dan  tumor (Setyawan, 2016).
Sedangkan,  tanaman  sambiloto  juga dapat digunakan untuk mengobati penyakit  degeneratif  misalnya  tekanan darah  tinggi,  reumatik  dan  diabetes (Rachmani,  2018).  Tanaman  sambiloto dapat  berkhasiat  sebagai  antioksidan, antiinflamasi dan antihiperglikemik (Akbar, 2011). Berdasarkan hasil penelitian  Sari  dkk  (2014)  menyatakan bahwa  di  dalam  tanaman  sambiloto terkandung berbagai senyawa fenolik dan flavonoid  dengan  jumlah  kandungan flavonoid total dalam ekstrak etanol daun sambiloto  sebesar  4,64±0,05% 𝑏 𝑏 ⁄ dan jumlah  kandungan  fenolik  total  dalam ekstrak  etanol  daun  sambiloto  sebesar 5,38±0,05% 𝑏 𝑏 ⁄ (Sari, 2019).
Metode  untuk  pengujian  antioksidan yang  paling  sering  digunakan  adalah metode  DPPH.  Radikal  DPPH  dengan radikal  hidrogen  dari  antioksidan  akan membentuk  suatu  molekul  diamagnetik karena adanya elektron yang berpasangan dan  menjadi  lebih  stabil  (Bahriul,  2014). Molekul yang terbentuk akan menunjukkan  serapan  kuat  pada  panjang gelombang 517 nm (Jabbar, 2019).
Penelitian yang telah ada sebelumnya tentang aktivitas antioksidan pada ekstrak etanol daun kejibeling diperoleh nilai IC 50 102,85  ppm  (Adibi,  2017)  dan  nilai  IC 50 6,5  ppm  pada  ekstrak  daun  sambiloto (Saranya, 2010). Adanya potensi antioksidan  dari  kedua  daun  tersebutlah yang melatarbelakangi dilakukannya
penelitian  tentang  kombinasi  dari  kedua ekstrak  daun  tersebut  sehingga  nantinya diharapkan  akan  didapatkan  hasil  bahwa kombinasi  dari  kedua  ekstrak  tersebut dapat  dikembangkan  sebagai  antioksidan alami.
Hingga  saat  ini,  belum  ada  laporan yang mendokumentasikan interaksi negatif  antara  campuran  ekstrak  keji beling  dengan  ekstrak  lain  maupun sebaliknya.  Selain  itu,  juga  belum diketahui apakah campuran ekstrak etanol keji  beling  dan  sambiloto  mampu meningkatkan  aktivitas  antioksidan  yang dihasilkan.  Oleh  karena  itulah  perlu dilakukan  penelitian  untuk  mengetahui perbandingan  aktivitas  antioksidan  dari kombinasi ekstrak dengan masing-masing ekstrak keji beling maupun sambiloto.

## Metode Penelitian
1. Bahan
Dalam  penelitian  ini,  bahan-bahan yang  dibutuhkan  adalah  daun  sambiloto kering,  kejibeling  kering,  kertas  saring, aluminium foil, etanol 96%, metanol p.a., dan DPPH.
2. Alat Dalam  penelitian  ini,  alat  yang dibutuhkan adalah blender, spatula, botol vial,  labu  ukur,  corong,  beaker  glass, mikropipet, neraca analitik, pompa vakum,  corong  buchner, vacuum  rotary evaporator, dan  spektrofotometer  UV- VIS.
3. Prosedur
a. Tahap  Pengumpulan  dan  Persiapan Sampel Sampel daun sambiloto dan kejibeling yang  didapatkan  dibersihkan  terlebih dahulu.  Selanjutnya,  daun  basah  tersebut dipotong-potong  kecil  dan  kemudian diangin-anginkan  di  dalam  ruangan selama  ±3  hari.  Sampel  kering  yang dihasilkan  kemudian  dihaluskan  sampai didapatkan  serbuk  halus  dan  ditimbang sebanyak  100  gram  serbuk  yang  siap untuk diekstraksi.
b. Tahap Ekstraksi Simplisia
Dalam toples tertutup, gunakan pelarut  etanol  96%  untuk  memaserasi bubuk  sampel  selama  1x24  jam.  Saring hasil  maserasi  dengan  menggunakan penyaring  buchner  sehingga  diperoleh filtrat dan residu. Ulangi proses maserasi selama 3 kali.
Uapkan filtrat yang dihasilkan menggunakan vacuum  rotary  evaporator suhu ±50 o C, tekanan 13 mbar dan rotasi 60  rpm.  Hasilnya  adalah  ekstrak  etanol yang kental dan ditimbang untuk menghitung  persen  rendemen  dengan menggunakan rumus berikut:
% Rendemen = 𝐵𝑒𝑟𝑎𝑡 𝐸𝑘𝑠𝑡𝑟𝑎𝑘 𝐵𝑒𝑟𝑎𝑡 𝑆𝑒𝑟𝑏𝑢𝑘 x 100%
(Mardiana, 2016).
c. Tahap Uji Aktivitas Antioksidan Dimulai  dengan  melarutkan  masing- masing  0,1  gram  ekstrak  etanol  daun kejibeling dan sambiloto dalam methanol p.a pada labu ukur 100 ml dan didapatkan larutan  induk  1000  ppm.  Selanjutnya, menyiapkan  larutan  uji  yang  dibuat  dari larutan induk yang telah dibuat sebelumnya.  Untuk  ekstrak  tunggal  dan kombinasi  1:1  digunakan  perbedaan konsentrasi  20,  40,  60  dan  80  ppm  serta 30, 60, 90 dan 120 ppm untuk kombinasi 1:2  dan  2:1  (Novatama,  S.  M.,  Kusomo, 2016).
Kemudian  ambil  larutan  uji  tiap konsentrasi sebanyak 2 ml yang diletakkan dalam vial gelap dan tambahkan  2  ml  larutan  DPPH  0,004%. Larutan  dikocok  dengan  kuat  dan dilakukan  inkubasi  larutan  pada  suhu  37 o C selama 30 menit yang kemudian diukur absorbansi dari larutan tersebut menggunakan  spektrofotometer  UV-Vis pada  517  nm.  Pada  larutan  kontrol  juga diberi  perlakuan  yang  sama  dimana penggunaan larutan sampel diganti dengan methanol p.a. Selanjutnya ditentukan  nilai  %inhibisi  (%I)  absorban larutan  DPPH  serta  nilai  IC 50 .  Nilai
%inhibisi dapat ditentukan dengan menggunakan persamaan berikut:
% Inhibisi = 𝐴 𝑏𝑙𝑎𝑛𝑘𝑜−𝐴 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 𝐴 𝑏𝑙𝑎𝑛𝑘𝑜 x 100%
Nilai %inhibisi kemudian dibuat kurva persamaan  linier  dan  persamaan  yang didapatkan  tersebut  digunakan  untuk menghitung nilai IC 50 . Nilai IC 50 didapatkan dengan cara mengganti y pada persamaan  linier  dengan  nilai  50  dan  x yang  didapatkan  merupakan  nilai  IC 50 (Pangestu, 2017).

## Hasil dan Pembahasan
Kejibeling  dan  sambiloto  adalah tanaman  yang  sering  digunakan  sebagai obat  tradisional.  Hal  tersebut  disebabkan karena pada kedua jenis tanaman tersebut terkandung  beberapa  senyawa  metabolit sekunder dan zat kimia lainnya yang dapat berpotensi  sebagai  sumber  antioksidan alami. Daun kejibeling memiliki kandungan senyawa polifenolik, saponin, alkaloid,  kumarin,  flavonoid,  kalium  dan kalsium  (Dita,  2017)  dan  dalam  daun sambiloto  terdapat  kandungan  senyawa andrographolide, terpenoid, tannin, saponin,  alkaloid,  fenolik  dan  flavonoid (Wardatun, 2011).
Kandungan flavonoid yang terdapat di dalam  daun  kejibeling  dan  sambiloto dapat  berpotensi  sebagai  antioksidan (Lipinski, 2011). Flavonoid dapat berpotensi  sebagai  antioksidan  karena flavonoid  memiliki  sifat  sebagai  suatu akseptor yang baik terhadap radikal bebas (Sudarmanto,  2015).  Flavonoid  akan berikatan dengan radikal bebas membentuk  senyawa  baru  yang  tidak reaktif sehingga bersifat stabil. Oleh sebab itu,  flavonoid  dapat  menghambat  proses terjadinya  oksidasi  (Simanjuntak,  2012). Flavonoid  akan  melakukan  penangkapan radikal  bebas  dengan  cara  mendonorkan proton hidrogen dari gugus hidroksil yang dimilikinya  (Rachmani,  2018).  Selain flavonoid,  di  dalam  daun  sambiloto  juga terkandung  senyawa andrographolid dan neoandrographolid yang merupakan kelompok glukosida yang dapat
berpotensi sebagai suatu antioksidan kuat (Mahardika, 2020).
Dalam  penelitian  ini,  digunakan simplisia  daun  kejibeling  dan  daun sambiloto kering. Tujuannya adalah untuk memperkecil kemungkinan sampel terkontaminasi oleh jamur dan menghentikan  proses  enzimatik  dalam sampel  karena  dapat  menyebabkan  zat aktif  yang  terkandung  dalam  sampel semakin  terurai  (Pangestu,  2017),  agar sampel yang digunakan lebih awet dalam kondisi  kering  dan  kadar  airnya  menjadi berkurang  sehingga  pelarut  akan  lebih mudah menarik senyawa-senyawa bioaktif yang terkandung di dalam sampel (Dewi, 2014). Kemudian sampel dihaluskan dengan tujuan untuk memperluas  kontak  yang  terjadi  antara sampel  dengan  pelarut  yang  digunakan (Adibi, 2017). Hal ini dikarenakan ukuran partikel yang semakin kecil akan semakin memperluas permukaan partikel sehingga proses  maserasi  dapat  dilakukan  lebih efektif (Jabbar, 2019).
Pada  penelitian  ini  digunakan  proses ekstraksi dengan teknik maserasi. Dipilih proses  ekstraksi  teknik maserasi  karena teknik  tersebut  termasuk  dalam  jenis ekstraksi  dingin.  Jenis  ekstraksi  dingin dapat digunakan untuk mencegah kerusakan komponen kimia dalam sampel yang  tidak  tahan  panas,  seperti  senyawa antioksidan  (Syukur,  2011).  Antioksidan merupakan salah satu senyawa yang tidak tahan  terhadap  panas  karena  antioksidan mudah  mengalami  degradasi  jika  berada pada suhu yang tinggi dengan waktu lama sehingga akan kehilangan kemampuannya dalam  mendonorkan  elektron  untuk menetralkan  senyawa  radikal  bebas (Mahardika, 2020).
Pada proses ekstrasi ini menggunakan pelarut etanol 96%. Pelarut etanol dipilih karena mempunyai gugus polar sekaligus gugus nonpolar sehingga dapat melarutkan senyawa-senyawa kimia yang bersifat  polar,  nonpolar  maupun  semi polar  (Adibi,  2017),  seperti  flavonoid,
steroid,  alkaloid  dan  asam  lemak  yang memiliki  potensi  sebagai  antioksidan (Herman, 2013). Selain itu pelarut etanol merupakan  suatu  pelarut  yang  memiliki sifat  polar  sehingga  dapat  melarutkan senyawa  antioksidan  pada  sampel  yang umumnya  bersifat  polar  (Wardatun, 2011).
Setelah  sampel  tersebut  dimaserasi, hasil  maserasi  yang  berupa  ekstrak  cair diuapkan  menggunakan vacuum  rotary evaporator untuk  memisahkan  pelarut etanol  dari  ekstrak  yang  dihasilkan.  Alat vacuum  rotary  evaporator memiliki kemampuan untuk menguapkan pelarut di bawah  titik  didihnya.  Hal  tersebut  dapat terjadi  karena  pada  alat vacuum  rotary evaporator juga  terdapat  pompa  vakum yang  dapat  mengurangi  tekanan  pada permukaan  sehingga  membuat  pelarut yang digunakan mengalami penguapan di bawah  titik  didihnya  sehingga  dapat mencegah  kerusakan  komponen  bioaktif yang  terkandung  di  dalam  sampel  akibat adanya pemanasan pada suhu yang terlalu tinggi.
Hasil  ekstraksi  yang  diperoleh,  yaitu berupa ekstrak kental. Pembuatan ekstrak kental tersebut agar pelarut yang digunakan  hilang  sehingga  diharapkan dihasilkan  ekstrak  yang  hanya  berisi komponen  bioaktif  dari  serbuk  simplisia tanpa ada pengaruh dari pelarut yang telah digunakan  untuk  ekstraksi  (Setyawan, 2016). Dihasilkan ekstrak kental kejibeling  sebanyak  10,314  gram  dan sambiloto  11,791  gram  dengan  persen rendemen  10,314%  untuk  kejibeling  dan 11,791% untuk sambiloto. Nilai rendemen yang tinggi menunjukkan bahwa semakin banyak  kandungan  senyawa  bioaktif dalam sampel (Kiswandono, 2011).
Aktivitas  antioksidan  diukur  dengan menggunakan  metode  DPPH  secara spektrofotometer  UV-Vis.  Peredaman DPPH dapat ditandai dari intensitas warna yang  dihasilkan.  Besarnya  peredaman DPPH sebanding dengan konsentrasi. Jika konsentrasi  ekstrak  lebih  tinggi,  maka
reduksi  DPPH  akan  semakin  besar sehingga  warna  larutan  menjadi  lebih kuning.  Adanya  perubahan  intensitas warna  larutan  disebabkan  karena  reaksi antara  atom  hidrogen  yang  berasal  dari senyawa antioksidan dalam sampel dengan DPPH sehingga membentuk suatu senyawa  baru  difenil  pikril  hidrazin (DPPH2) yang disertai dengan terjadinya peluruhan  warna  DPPH  menjadi  warna kuning. Oleh sebab itu, dibuat konsentrasi ekstrak yang berbeda-beda untuk mengetahui  tingkat  peredaman  warna ungu  DPPH  oleh  antioksidan.  Penurunan intensitas dari warna tersebut  berbanding lurus  dengan  jumlah  senyawa  radikal bebas  DPPH  yang  dapat  diredam  oleh senyawa  antioksidan  sehingga  membuat absorbansinya  menjadi  semakin  rendah. Oleh  sebab  itulah  semakin  kecilnya  nilai absorbansi dari larutan berarti menunjukkan  semakin  banyak  senyawa antioksidan  dalam  sampel  (Rachmani, 2018).
Perubahan  warna  pada  DPPH  itulah yang  nantinya  akan  dijadikan  acuan pengukuran  intensitas  warna  larutan menggunakan  spektrofotometer  UV-Vis 517  nm.  Penelitian  ini  menggunakan  4 variasi  konsentrasi  larutan,  yaitu  20,  40, 60 dan 80 ppm untuk ekstrak tunggal dan kombinasi  1:1  serta  30,  60,  90  dan  120 ppm untuk kombinasi 1:2 dan 2:1. Tabel 1 menyajikan  tentang  hasil  uji  aktivitas antioksidan daun kejibeling dan sambiloto beserta kombinasinya.
Pada  tabel  1  terlihat  bahwa  dengan bertambahnya  konsentrasi  larutan,  nilai absorbansi semakin kecil dan nilai persen inhibisi  semakin  besar.  Penurunan  nilai absorbansi  tersebut  disebabkan  karena adanya  radikal  bebas  DPPH  yang tereduksi  oleh  senyawa  antioksidan.  Jika konsentrasi sampel semakin tinggi, maka absorbansi  larutan  menjadi  semakin menurun. Hal tersebut disebabkan karena semakin  banyaknya  senyawa  antioksidan dalam sampel sehingga peredaman DPPH juga  semakin  banyak  (Talapessy,  2013).
Berkebalikan dengan absorbansi, semakin tinggi  konsentrasi  sampel  maka  persen inhibisi  akan  semakin  meningkat  yang disebabkan karena persen inhibisi menyatakan  kemampuan  ekstrak  sebagai penghambat  terbentuknya  radikal  bebas. Ketika konsentrasi dari ekstrak meningkat maka  kemampuan  menghambat  dari antioksidan  dalam  sampel  juga  akan semakin besar (Damanis, 2020).
Tabel 1 . Hasil Uji Aktivitas Antioksidan
Sampel Sampel C (ppm) Abs. blanko Abs. sampel %I Daun Kejibeling 20 40 60 80 0,5665 0,5386 0,5341 0,53 0,5279 4,92 5,71 6,44 6,81 Daun Sambiloto 20 40 60 80 0,5665 0,3841 0,3743 0,3686 0,3632 32,19 33,92 34,93 35,88 Kombinasi Kj:Sb (1:1) 20 40 60 80 0,5665 0,3972 0,3854 0,3675 0,344 29,88 31,96 35,12 39,27 Kombinasi Kj:Sb (1:2) 30 60 90 120 0,5665 0,477 0,4475 0,4163 0,3935 15,79 21,00 26,51 30,53 Kombinasi Kj:Sb (2:1) 30 60 90 120 0,5665 0,3271 0,319 0,3111 0,3024 42,25 43,68 45,08 46,61
Untuk  mengetahui  nilai  IC 50 dari ekstrak, dibuat  kurva  persamaan  linear terlebih  dahulu  dengan  memplotkan konsentrasi dan persen inhibisi. Hasil dari pembuatan  kurva  persamaan  linear  dari
ekstrak tunggal dan kombinasinya ditunjukkan dalam gambar 1-5 berikut.
Gambar  1. Kurva  Antioksidan  Ekstrak Etanol Daun Kejibeling
Gambar  2. Kurva  Antioksidan  Ekstrak Etanol Daun Sambiloto
Gambar
3. Kurva Antioksidan Kombinasi Ekstrak kejibeling : Sambiloto
(1:1)
Gambar 4. Kurva Antioksidan Kombinasi Ekstrak Kejibeling : Sambiloto (1:2) Gambar 5. Kurva Antioksidan
Kombinasi Ekstrak Kejibeling : Sambiloto C
Berdasarkan hasil analisis nilai regresi linier maka didapatkan persamaan regresi yang  digunakan  dalam  menghitung  nilai IC 50 dari  ekstrak  sampel  dan  diperoleh nilai  IC 50 yang  disajikan  pada  tabel  2 dibawah ini.
Tabel 2. Nilai IC 50 Ekstrak Etanol
Kejibeling dan Sambiloto beserta Kombinasinya Sampel IC 50 Ekstrak Etanol Kejibeling 71,39 Ekstrak Etanol Sambiloto 15,55 Ekstrak Etanol Kombinasi 1:1 7,58 Ekstrak Etanol Kombinasi 1:2 7,83 Ekstrak Etanol Kombinasi 2:1 6,35
Nilai  IC 50 memiliki  arti  bahwa  pada konsentrasi tersebut ekstrak yang digunakan  dapat  meredam  50%  dari DPPH.  Berdasarkan  tabel  2,  didapatkan nilai  IC 50 dari  ekstrak  etanol  daun kejibeling dan sambiloto yang lebih kecil dari hasil penelitian yang dilakukan Adibi,
dkk.  (2017)  diperoleh  nilai  IC 50 daun kejibeling 102,85 ppm dan dari Saranya et al. (2010)  diperoleh  nilai  IC 50 daun sambiloto  6,5  ppm.  Adanya  perbedaan nilai  IC 50 yang  dihasilkan  tersebut  dapat disebabkan karena adanya faktor geografis,  faktor  genetik,  kondisi  iklim, asal  benih  dan  tingkat  kesuburan  tanah yang mempengaruhi kandungan senyawa dalam tanaman (Giridhari, 2011).
Berdasarkan nilai IC 50 yang dihasilkan tersebut  dapat  diketahui  bahwa  daun kejibeling  dan  daun  sambiloto  dapat berpotensi sebagai antioksidan alami. Hal tersebut disebabkan karena di dalam daun kejibeling dan sambiloto terdapat senyawa antioksidan seperti flavonoid dan fenolik. Senyawa  flavonoid  dan  fenolik  dapat digunakan  sebagai  antioksidan  karena mampu menyumbangkan proton hidrogen dari gugus hidroksilnya sehingga senyawa DPPH  akan  tereduksi  menjadi  senyawa non-radikal yang stabil (DPPH2).
Apabila diperoleh  nilai IC 50 < 50 ppm maka  tergolong  antioksidan  sangat  kuat, IC 50 50-100 ppm kuat,  IC 50 100-150 ppm sedang, IC 50 151-200 ppm lemah dan IC 50 > 200 ppm merupakan antioksidan sangat lemah (Rachmani, 2018). Berdasar literatur,  dapat  disimpulkan  bahwa  pada penelitian  ini  ekstrak  etanol  daun kejibeling  tergolong  antioksidan  kuat, sedangkan  ekstrak  etanol  sambiloto, kombinasi ekstrak 1:1, kombinasi ekstrak 1:2  dan  kombinasi  ekstrak  2:1  tergolong ke dalam antioksidan sangat kuat. Dengan demikian, ekstrak  kombinasi  dari  kedua jenis tumbuhan tersebut dapat dikembangkan lebih lanjut sebagai senyawa  antioksidan  alami  khususnya pada kombinasi ekstrak kejibeling: sambiloto  2:1  karena  pada  perbandingan kombinasi  tersebut  memiliki  aktivitas antioksidan yang paling tinggi dibandingkan
dengan variasi perbandingan kombinasi yang lain.
Namun,  penelitian  tentang  uji  aktivitas antioksidan  pada  kombinasi  kedua  jenis tanaman  dengan  menggunakan  metode
yang  berbeda  perlu  dilakukan  untuk mengkaji  lebih  luas  terkait  dengan mekanisme dari kombinasi kedua ekstrak sebagai suatu agen antioksidan.

## Kesimpulan
Berdasarkan  data  yang  dihasilkan dapat  disimpulkan  bahwa  dari  nilai  IC 50 yang  diperoleh  pada  penelitian  ini menunjukkan adanya peningkatan aktivitas antioksidan dari ekstrak kombinasi daun kejibeling dan sambiloto dibandingkan  ekstrak  tunggalnya  dengan nilai  terbaik  terdapat  pada  perbandingan kombinasi  2:1.  Hasil  uji  aktivitas antioksidan menghasilkan nilai IC 50 untuk ekstrak  etanol  kejibeling,  ekstrak  etanol sambiloto, kombinasi ekstrak kejibeling:sambiloto  (1:1),  kombinasi (1:2)  dan  kombinasi  (2:1)  berturut-turut sebesar 71,39, 15,55, 7,58, 7,83 dan 6,35 ppm.  Pada  kedua  jenis  ekstrak  tanaman ini,  yang  paling  berperan  sebagai antioksidan adalah senyawa flavonoid dan fenolik.

## DAFTAR PUSTAKA
Adibi, S. d. (2017). Aktivitas Antioksidan
dan Antibakteri Ekstrak Daun
Strobilanthes  crispus  Bl  (Keji  Beling) Terhadap  Staphylococcus  aureus  dan Escherichia  coli. Alotrop , 1 (2),  148– 154.
Akbar, S. (2011). Andrographis paniculata: A Review of Pharmacological Activities and
Clinical  Effects. Journal  of  AMR , 16 (1), 66–77.
Andriani,  Y.  M.  (2011).  Antibacterial, radical scavening activities and cytotoxicity  properties  of  Phaleria macrocarpa  (scheff.)  Boerl.  Leaves  in Hepg2 cell lines. International Journal of Pharmaceutical Sciences and Research , 2 (1), 1700–1706.
Bahriul, D. (2014). Uji Aktivitas
Antioksidan  Ekstrak  Daun  Salam (Szygium polyanthum) Dengan Menggunakan 1,1-difenil-
2picrilhidrazyl. Jurnal Akademika Kimia , 3 (3), 143–149.
Bherawi,  K.  N.  dan  T.  A.  (2017).  Efek Aktivitas Fisik pada Proses Pembentukan  Radikal  Bebas  sebagai Faktor Risiko Aterosklerosis. Majority ,
6 (2), 85–90.
Damanis,  D.  (2020).  Uji  Aktivitas Antioksidan  Ekstrak  Etanol  Ascidian (Herdmania  Momus)  dengan  Metode DPPH (1,1-difenil-2-pikrilhidrazil). Pharmacon , 9 (3), 464–469.
Dewi,  D.  (2014).  Aktivitas  Antioksidan Senyawa Flavonoid Ekstrak Etanol Biji Terong  Belanda  (Solanum  Betaceum,
Syn)  dalam  Menghambat  Reaksi Peroksidasi Lemak Pada Plasma Darah Tikus Wistar. Cakra Kimia , 2 (1), 7–16. Dita,  A.  &  S.  F.  (2017).  Efektivitas Perasan Daun Keji Beling (Sericocalyx crispus  Linn)  dalam  Menghambat Pertumbuhan  Staphylococcus  aureus.
The Journal Of Muhammadiyah
Medical Laboratory Technologist ,
2 (1), 78–83.
Giridhari,  V.  V.  (2011).  Anti-diabetic properties  of  drumstick  (Moringa oleifera) leaf tablets. Int J Health Nutr ,
2 (1), 1–5.
Herman.  (2013).  Aktivitas  Antioksidan Beberapa Tumbuhan Obat Kalimantan Timur. Journal  of  Tropial  Pharmacy and Chemistry , 2 (2), 100–104.
https://doi.org/doi:10.25026/jtpc.v2i2.
54
Jabbar,  D.  (2019).  Aktivitas  Antioksidan Ekstrak  Etanol  Buah,  Daun,  Batang Dan  Rimpang  Pada  Tanaman  Wualae (Etlingera  Elatior  (Jack)  R.M  Smith). Jurnal  Farmasi  Galenika  (Galenika Journal of Pharmacy) , 5 (2), 189–197. Kiswandono,  D.  (2011).  Uji  antioksidan ekstrak  heksana,  etil  asetat,  etanol, metanol  80%  dan  air  daun  kelor (Moringa oleifera Lamk). Jurnal Sains Natural  Universitas  Nusa  Bangsa ,
1 (1), 39–44.
Lamina  S,    dkk.  (2013).  Effects  of  free radicals  and  antioxidants  on  exercise
performance. Oxidants and Antioxidants in Medical Science , 2 (2), 83–91.
Lipinski, B. (2011). Hydroxyl Radical and
Its  Scavengers  in  Health  and  Disease. Review  Article.  Oxidative  Medicine and Cellular Longevity , 11 , 1–9.
Mahardika,    dkk.  (2020).  Ekstrak  Etanol
Daun Sambiloto (Andrographis Paniculata) Menurunkan HAI (Histology  Activity  Indeks)-Knodell
Score  Pada  Hepar  Mencit  (Mus Musculus)  Jantan  Yang  Diinduksi CCl4. Jurnal  Medika  Udayana , 9 (4), 75–80.
Mardiana,  R.  N.  &  N.  H.  (2016).  Uji Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Daun Sambiloto  (Andrographis  paniculata)
terhadap Bacillus cereus dan
Pseudomonas  aeruginosa. Biofarmasi , 14 (1), 19–24.
Novatama,  S.  M.,  Kusomo,  E.  &  S. (2016).  Identifikasi  betasianin  dan  uji antioksidan  ekstrak  buah  bit  merah (Beta vulgaris L.). Indo. J. Chem. Sci ,
5 (3), 217–220.
Pangestu, dkk.  (2017).  Aktivitas Antioksidan  dan  Antibakteri  Ekstrak Daun Jatropha gossypifolia L. Alotrop ,
1 (1), 15–19.
Rachmani,  E.  P.  N.  (2018).  Aktivitas Antioksidan  Fraksi  Flavonoid  Bebas Andrografolid  dari  Herba  Sambiloto (Andrographis  paniculata). Pharmacy Medical Journal , 2 (1), 42–49.
Ratnayani,  K.  A.  (2012).  Kadar  total senyawa fenolat pada madu randu dan madu  kelengkeng  serta  uji  aktivitas antiradikal  bebas  dengan  Metode DPPH (difenilpikril hidrazil). J. Kim , 6 , 163–168.
Salamah,  N.,  &  Widyasari,  E.  (2015).
Aktivitas  antioksidan  ekstrak  metanol daun kelengkeng (Euphoria longan L.) dengan  metode  penangkapan  radikal 2,2’-difenil-1-pikrilhidrazil.
Pharmaciana , 5 (1), 25–34.
Saranya,  e. a. (2010). The antioxidant and h+  k+  atpase  inhibitory  effect  of
andrographis paniculata and andrographolide  in  vitro  and  in  vivo studies. Pharmacologyonline , 1 ,  356– 376.
Sari,    dkk.  (2019).  Efek  Ekstrak
Kombinasi Herba Andrographis
paniculata  (Burm.f)  Ness  dan  Daun Gynura  Procumbens  (Merr)  dalam Penangkapan Senyawa Radikal Bebas. Majalah Farmaseutik , 15 (1), 16–21.
Setyawan,  A.  W.  (2016).  Pembuktian Ekstrak Daun Kejibeling Dalam
Meningkatkan  Sistem  Imun. Jurnal
Kesehatan Masyarakat, KEMAS ,
11 (2), 96–100. Simanjuntak, K. (2012). Peran Antioksidan Flavonoid dalam
Meningkatkan Kesehatan. Bina Widya , 23 (3), 135–140. Stankovic  S  dan  Radovanović.  (2012). Oxidative  stress  and  physical  activity. Sportlogia , 8 (1), 1–11.
Sudarmanto,  I.  &  T.  S.  (2015).  Aktivitas Antioksidan  Senyawa  Flavonoid  Pada Kulit  Akar  Tanaman  Ara  (Ficus racemosa,  L). Jurnal  Kesehatan , 6 (2), 137–141.
Syukur, R. A. (2011). Aktivitas Antiradikal  Bebas  Beberapa  Ekstrak Tanaman  Familia  Fabaceae. JST Kesehatan , 1 (1), 61–67.
Talapessy,  S.  S.  (2013).  Uji  Aktivitas
Antioksidan dari Ampas Hasil
Pengolahan  Sagu  (Metroxylon  sagu rottb). Jurnal  Ilmiah  Farmasi , 2 (3), 40–44.
Wardatun,  S.  (2011).  Uji  Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Akar, Kulit Batang dan Daun Tanaman Sambiloto (Andrographis paniculata Ness.) Dengan  Metode  Linoleat-Tiosianat.
Fitofarmaka , 1 (2), 9–13.
Werdhasari, A. (2014). Peran antioksidan bagi  kesehatan. J.  Biotek  Medisiana Indonesia , 3 (2), 59–68.