## ACTIVITY TEST TO DECREASE URIC ACID LEVELS OF THE ETHANOL EXTRACT OF BITTER MELON (Momordica charantia L.) ON WHITE MALE RATS (Rattus norvegicus) INDUCED CAFFEINE

## UJI AKTIVITAS PENURUNAN KADAR ASAM URAT EKSTRAK ETANOL BUAH PARE
( Momordica charantia L.) PADA TIKUS PUTIH JANTAN ( Rattus norvegicus) YANG DIINDUKSI KAFEIN
Minar N. S. Gultom 1) , Edwin De Queljoe 1) , Elly J. Suoth 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115 *minarnsgultom@gmail.com

## ABSTRACT
Bitter  melon  fruit  (Momordica  charantia  L.)  is  one  of  the  plants  that  contains  flavonoid  compound supposedly  as  anti-hyperuricemic  activity.  This  study  aims  to  determine  the  potential  activity  of  reducing uric acid levels from the ethanol extract of bitter melon fruit (Momordica charantia L.) on white wistar male rats  (Rattus  norvegicus)  induced  with  caffeine.  This  study  is  a  laboratory  experiment  using  a  complete randomized  design.  A  total  of  15  rats  were  divided  into  5  groups  :  negative  control  (CMC  1%),  positive control (Allopurinol), and treatment group of bitter melon fruit (Momordica charantia L.) extract 0,9 mg, 1,8 mg, and 3,6 mg. Hyperuricemic condition was induced by oral administration of  27 mg/200 gr caffeine for 6 days. The uric acid levels was measured before the rats was induced, 6 days after induced and every 3 days of 9 days of treatment. The data obtained were analyzed by  ANOVA (Analisis of Variance) and LSD (Least Significant Different). The results show that the dose group of the ethanol  extrack of bitter melon fruit had comparable with positive control of Allopurinol in decrease uric acid levels. The conclusion was the ethanol extract  of  bitter  melon  fruit  (Momordica  charantia  L.)  had  anti-hyperuricemic  activity  in  male  white  rats (Rattus norvegicus) dose 0,9 mg, 1,8 mg and 3,6 mg.
Keywords : Momordica charantia L., antihiperuricemia, Rattus norvegicus , caffeine.

## ABSTRAK
Buah  pare  ( Momordica  charantia L.)  adalah  salah  satu  tanaman  yang  mengandung  flavonoid  yang  diduga sebagai  senyawa  yang  mempunyai  aktivitas  antihiperurisemia.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui potensi aktivitas penurunan kadar asam urat dari ekstrak etanol buah pare pada tikus putih jantan galur wistar ( Rattus  norvegicus ).  Jenis  penelitian  ini  ialah  eksperimen  laboratorium  menggunakan  Rancangan  Acak Lengkap. Sebanyak 15 ekor tikus dibagi dalam 5 kelompok perlakuan : kontrol negatif (CMC 1%), kontrol positif (Allopurinol),  dan  kelompok  dosis  uji  yaitu  pemberian  ekstrak  etanol buah  pare 0,9  mg/200  gr  BB; 1,8  mg/200  gr  BB;  3,6  mg/200  gr  BB.  Induksi  hiperurisemia  dilakukan  dengan  kafein  dosis  27  mg/200  gr selama 6 hari. Pengukuran kadar asam urat dilakukan sebelum induksi, 6 hari setelah diinduksi dan setiap 3 hari  selama  9  hari  perlakuan.  Data  yang  diperoleh  kemudian  dianalisis  secara  statistik  menggunakan ANOVA ( Analysis of Variance ) dan LSD ( Least Significant Different ). Hasil penelitian menunjukkan bahwa kelompok  dosis  ekstrak  etanol  buah  pare  memiliki  aktivitas  yang  sebanding  dengan  kontrol  positif allopurinol  dalam  menurunkan  kadar  asam  urat.  Kesimpulannya  ekstrak  etanol  buah  pare  ( Momordica charantia L.) memiliki aktivitas antihiperurisemia pada tikus putih jantan ( Rattus norvegicus ) pada dosis 0,9 mg/200 gr BB; 1,8 mg/200 gr BB; 3,6 mg/200 gr BB.
Kata kunci : Momordica charantia L., antihiperurisemia, Rattus norvegicus , kafein.

## PENDAHULUAN
Indonesia  adalah  salah  satu  negara  yang memiliki kasus kelebihan asam urat (hiperurisemia)  yang  cukup  tinggi.  Berdasarkan laporan  Riset  Kesehatan  Dasar  (RISKESDAS) pada  tahun  2018  prevalensi  penyakit  sendi  di Indonesia  berdasarkan  diagnosis  dokter  pada penduduk  umur  ≥15  tahun  sebesar  7,30%, prevalensi penyakit sendi di Sulawesi Utara berada pada urutan ke-8 di Indonesia yaitu sebesar 8,35%. Berdasarkan  diagnosis  dokter  prevalensi  tertinggi pada  penduduk  umur  ≥  75  tahun  (18,95%).
Prevalensi  penyakit  sendi  yang  didiagnosis  dokter lebih  tinggi  pada  perempuan  (8,46%)  daripada pada laki-laki (6,13%). Prevalensi yang didiagnosis  dokter  di  pedesaan  (7,83%)  lebih tinggi dari perkotaan (6,87%).
Hiperurisemia  merupakan  keadaan  yang ditandai  dengan  peningkatan  kadar  asam  urat diatas  7,0  mg/dl  pada  pria  dan  diatas  6,0  mg/dl pada  wanita  (Sitanggang  dan  Dewani,  2006). Disebabkan  karena  tubuh  memproduksi  asam  urat berlebihan  atau  ginjal  tidak  efisien  untuk melakukan penyaringan dan mengeksresikan asam urat  melalui urin (Longe et al , 2002).
Asam  urat  merupakan  produk  akhir  dari degradasi  purin  dalam  tubuh  yang  tidak  memiliki fungsi fisiologis sehingga dianggap sebagai produk buangan  (Dipiro et  al ,  2009).  Peningkatan  kadar asam  urat  dapat  dipengaruhi  oleh  usia,  jenis kelamin,  berat  badan,  konsumsi  makanan  tinggi purin,  konsumsi  alkohol,  penggunaan  obat-obat tertentu, dan gangguan fungsi ginjal. Pembentukan asam  urat  dipengaruhi  oleh  suatu  enzim  xantin oksidase yang dapat mengubah hipoxantin menjadi xantin  dan  selanjutnya  menjadi  asam  urat  (Tjay dan Raharja, 2007).
Beberapa  negara  di  Asia  (India  dan Malaysia) menggunakan daun, biji serta buah pare sebagai obat tradisional untuk mengatasi gout yang merupakan manifestasi dari hiperurisemia.
(Kapoor et  al ,  2017  dan  Abu  Bakar et  al ,  2018).
Menurut  hasil  uji  fitokimia  yang  dilakukan,  buah pare  memiliki  kandungan  flavonoid,  saponin  dan polifenol  (Yuda et  al, 2013).  Salah  satu  metabolit sekunder  yang  diduga  mempunyai  aktivitas
antihiperurisemia  adalah  senyawa  flovonoid. Senyawa  flavonoid  adalah  senyawa  yang  dikenal sebagai  inhibitor  poten  untuk  beberapa  enzim, seperti  xantin  oksidase  (XO),  cyclooksigenase (COX),  lopoxygenase  dan  phospoinositide  3- kinase (Metodiewa et al , 1997).
Berdasarkan penggunaan secara tradisional pada  buah  pare  yang  telah  terbukti  mengandung senyawa  flavonoid  dan  diduga  memiliki  potensi untuk  menurunkan  kadar  asam  urat  dalam  darah, hal  ini  mendorong  peneliti  untuk  melakukan penelitian  berkaitan  dengan  pengujian  aktivitas penurunan  kadar  asam  urat  ekstrak  etanol  buah pare  ( Momordica  charantia L.)  pada  tikus  putih jantan ( Rattus norvegicus ).

## METODOLOGI PENELITIAN

## Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian  ini  dilakukan  di  Laboratorium Penelitian dan Laboratorium Farmakologi Program Studi  Farmasi,  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu Pengetahuan  Alam,  Universitas  Sam  Ratulangi Manado mulai pada Januari 2020-Juni 2020.

## Rancangan Penelitian
Penelitian ini menggunakan jenis penelitian  eksperimental  laboratorium  dengan menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL), dengan  5  macam  perlakuan  masing-masing perlakuan dengan 3 replikasi.
Penentuan  dosis  pemberian  kepada  hewan uji lebih dahulu dikonversikan dengan menggunakan faktor konversi untuk manusia 70 kg BB ke tikus 200 g BB adalah 0,018 (Laurence dan Bacharach,  1964).  Berdasarkan  tabel  konversi Laurence  dan  Bacharach    maka  perhitungan  dan pembagian perlakuan sebagai berikut:
Kelompok  pertama:  diberikan  larutan  CMC  1%
(kontrol negatif) Kelompok kedua :  diberikan  allopurinol  dosis 1,8 mg (kontrol positif) Kelompok ketiga :  diberikan  ekstrak  etanol buah  pare  dengan  dosis  50
mg    (konversi  ke  tikus menjadi 0,9 mg)
Kelompok keempat  :  diberikan  ekstrak  etanol buah  pare  dengan  dosis  100 mg (konversi ke tikus menjadi 1,8 mg) Kelompok kelima :  diberikan  ekstrak  etanol buah  pare  dengan  dosis  200 mg (konversi ke tikus
menjadi 3,6 mg)
Setiap  kelompok  diberikan  kafein  untuk meningkatkan  asam  urat  darah  (hiperurisemia) pada tikus putih.

## Hewan Uji
Hewan  uji  yang  digunakan  merupakan tikus  putih  jantan  ( Rattus  norvegicus )  yang berumur  2-3  bulan  dan  berat  badan  100-200  gram dengan jumlah 15 ekor (Hakim, 2002).

## Alat dan Bahan

## Alat
Kandang,  tempat  air  minum  dan  makan hewan, blender ,  oven, vacuum  rotary  evaporator , hotplate ,  batang  pengaduk,  spatula,  lumpang,  alu, timbangan analitik, sonde oral, dispo , kapas, gelas ukur, gelas beker, ayakan, kertas saring, strip asam urat dan alat pengukur asam urat.

## Bahan
Buah  pare  ( Momordica  charantia L.), tikus  putih jantan  galur  wistar ( Rattus  norvegicus ) sebanyak  15  ekor,  CMC,  larutan  etanol  96%, aquades,  allopurinol,  kafein,  dedak  padi dan  beras jagung.
.

## Prosedur Penelitian

## Pengambilan dan Penyiapan Sampel
Sampel  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  diambil  dari  Kota  Tomohon.  Buah  pare ( Momordica charantia L.) dicuci bersih dengan air
mengalir, ditiriskan dan ditimbang berat basahnya. Buah pare yang telah dibersihkan dipotong-potong lalu  dianginkan  di  dalam  ruangan  sampai  kering. Setelah  kering,  dihaluskan  menggunakan blender kemudian  diayak  menggunakan  ayakan  200  mesh untuk  menghasilkan  serbuk  simplisia  (Rambi  dkk, 2019).

## Identifikasi Tanaman
Identifikasi  tanaman  dilakukan  di  bagian Taksonomi  Tumbuhan  Jurusan  Biologi  Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Sam Ratulangi Manado.

## Pembuatan Ekstrak Etanol Buah Pare
Ektraksi dilakukan dengan metode ektraksi dingin  yaitu  maserasi  dengan  pelarut  etanol  96%. Buah  pare  ( Momordica  charantia L.)  yang  sudah menjadi serbuk simplisia ditimbang dan dimasukkan  ke  dalam  gelas  beker  kemudian diekstraksi  dengan  merendam  serbuk  simplisia  ke dalam pelarut etanol 96%, dibiarkan selama 5 hari kemudian  disaring  menggunakan  kertas  saring. Lalu dilakukan  remaserasi dan  dibiarkan selama  2 hari. Filtrat yang diperoleh dipekatkan menggunakan  oven  sampai  diperoleh  ekstrak kental.
Pembuatan Larutan CMC 1%
Sebanyak  1  gram  serbuk  CMC  ditimbang kemudian  dicampurkan  dengan  aquades  yang dicukupkan  sampai  100  mL,  dihomogenkan dengan  cara  pemanasan  dengan  menggunakan hot plate , kemudian didinginkan (Anief, 1987).

## Pembuatan Suspensi Allopurinol
Dosis  allopurinol  untuk  manusia  adalah 100  mg,  sehingga  dosis  allopurinol  untuk  tikus adalah 100 mg x 0,018 = 1,8 mg (0,018 merupakan faktor konversi dosis untuk manusia ke dosis untuk tikus).  Dilakukan  uji  keseragaman  bobot  dengan menimbang  sebanyak  20  tablet  obat  allopurinol 100  mg,  kemudian  digerus  lalu  ditimbang  berat
serbuk dan dihitung bobot rata-ratanya (Depkes RI, 1995).  Dari  hasil  uji  keseragaman  bobot,  rata-rata berat  tablet  allopurinol  adalah  3,5  mg.  Untuk membuat larutan stok allopurinol sebanyak 10 ml, serbuk  allopurinol  ditimbang  sebanyak  35  mg kemudian  disuspensikan  dalam  larutan  CMC  1% sedikit  demi  sedikit  sambil  diaduk  hingga homogen  kemudian  dimasukkan  ke  dalam  labu ukur dan volumenya dicukupkan sampai 10 mL.

## Pembuatan Larutan Uji
Dosis  ekstrak  kental  buah  pare  yang digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  dosis  0,9 mg/200 gr BB; 1,8 mg/200 gr BB; dan 3,6 mg/200 gr  BB.  Untuk  membuat  larutan  stok  sebanyak  10 ml,  pembuatan  larutan  uji  diawali  dengan menimbang ekstrak kental buah pare sesuai dengan masing-masing  dosis  (9  mg;  18  mg;  dan  36  mg), kemudian  masing-masing  ekstrak  yang  telah ditimbang dimasukan dalam labu ukur 10  mL dan ditambahkan larutan CMC 1% dicukupkan sampai 10  mL  dan  disonifikasi  sampai  homogen.  Setelah homogen, masing-masing dosis ekstrak di masukkan kedalam botol sampel dan diberi label.

## Pembuatan Larutan Stok Kafein
Dosis  kafein  yang  digunakan  sebagai penginduksi  asam  urat  adalah  dosis  27  mg/200  gr BB  tikus  (Azizahwati  et  al,  2005).  Larutan  stok dibuat dengan menimbang kafein sebanyak 270 mg yang dicampurkan dengan aquades steril dicukupkan  sampai  10  mL  di  dalam  labu  ukur kemudian disonikasi dengan sonifikator selama 30 menit  hingga  larut,  setelah  dilihat  cukup  larut dimasukan dalam wadah dan diberi tanda.

## Penyiapan Hewan Uji
Penelitian  ini  menggunakan  tikus  putih jantan  galur  wistar  ( Rattus  norvegicus) sebagai hewan  uji  yang  dibagi  dalam  5  kelompok  dimana masing-masing terdiri dari 3 ekor tikus putih jantan galur  wistar  yang  dipelihara  dalam  kandang  yang dibuat  dari  keranjang  yang  berisi  dedak  padi  dan diberi  pangan  berupa  beras  jagung.  Kelompok  1
sebagai kontrol negatif diberikan larutan CMC 1%, kelompok  2  sebagai  kontrol  positif  diberikan supensi  allopurinol,  kelompok  3,  kelompok  4  dan kelompok  5  diberikan  ekstrak  etanol  buah  pare ( Momordica  charantia L.)  dengan  dosis  yang berbeda-beda yaitu 0,9 mg; 1,8 mg; 3,6 mg.
Hewan  uji  diaklimasi  selama  kurang  lebih 2  minggu  sebelum  perlakuan.  Semua  tikus diadaptasikan  dengan  tempat  tinggal  yang  baru dengan  pemberian  makanan  dan  minuman  yang rutin.  Aklimatisasi  ini  bertujuan  supaya  hewan  uji dalam kondisi tidak stres dan dalam keadaan yang sama saat dimulai penelitian (Rahmi, 2017).

## Pengujian  Aktivitas  Penurunan  Kadar  Asam Urat
Hewan  uji  dipuasakan  terlebih  dahulu selama 12 jam  namun tetap diberi minum sebelum diinduksi  kafein  (Fahri,  2004).  Selanjutnya dilakukan pengukuran kadar asam urat puasa pada masing-masing  kelompok  perlakuan.  Setelah didapat  hasil  pengukuran  kadar  asam  urat  puasa, semua hewan uji terlebih dahulu dibuat hiperurisemia  dengan  diinduksi  kafein  secara  oral selama  6  hari.  Kemudian  diukur  kadar  asam  urat setelah  6  hari  pemberian  kafein  untuk  melihat peningkatan kadar asam uratnya. Setelah itu hewan uji  diistirahatkan  dalam  kandang  masing-masing dan  diberikan  makan  dan  minum.  Selanjutnya hewan  uji  diberikan  perlakuan  sesuai  dengan kelompok  menggunakan  sonde  oral  dengan dispo selama  9  hari.  Pengukuran  asan  urat  selama pemberian perlakuan dilakukan setiap 3 hari sekali. Sampel  darah  diambil  melalui  vena  ekor  mencit putih  kemudian  dianalisis  kadar  asam  urat  dengan menggunakan strip asam urat.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Ekstraksi Sampel
Dari  5.000  gram  berat  basah  buah  pare didapatkan  245  gram  serbuk  simplisia  kemudian diekstraksi  dengan  pelarut  etanol  96%  selama  7 hari dan diperoleh 33,5 gram ekstrak kental etanol buah  pare.  Ekstraksi  buah  pare  dilakukan  dengan
cara  maserasi  meggunakan  pelarut  etanol.  Etanol digunakan  sebagai  pelarut  karena  etanol  bersifat polar,  universal,  yang  dapat  melarutkan  metabolit sekunder  dari  berbagai  tingkat  polaritas  (Hakim, 2002).
Pengujian  Aktivitas  Penurunan  Kadar  Asam Urat Ekstrak Etanol Buah Pare
Tikus  dipuasakan  selama  12  jam  sebelum dilakukan  pengambilan  darah,  hal  ini  bertujuan agar  tidak  terjadi  perubahan  kadar  asam  urat karena  asupan  makanan  (Fahri,  2004).  Sebelum dilakukan  penginduksian,  dilakukan  pengukuran
kadar  asam  urat  tikus  untuk  mengetahui  seluruh kelompok  tikus  mempunyai  kadar  asam  urat  yang normal.  Pengukuran  kadar  asam  urat  tikus  dalam percobaan  selama  15  hari  dilakukan  sebanyak  5 kali  yaitu  sebelum  dilakukan  induksi  kafein  yang merupakan  kadar  asam  urat  puasa  (Hari  ke-0), setelah diinduksi kafein dengan dosis 27 mg/200 gr BB  tikus  (Hari  ke-6),  setelah  diberikan  perlakuan sesuai  dengan  kelompok  pada  hari  ketiga perlakuan  (Hari  ke-9),  hari  keenam  perlakuan (Hari  ke-12)  dan  hari  kesembilan  (Hari  ke-15) (Azizahwati, 2005).
Tabel 1. Hasil pengukuran rata-rata kadar asam urat tikus
Rata-rata Penurunan Kadar Asam Urat (mg/dL) Perlakuan H0 H6 H9 H12 H15 K (-) 3,43 7.87 7,40 7,00 6,73 K (+) 3,27 7,53 4,20 3,73 2,87 D1 3,33 7,53 5,03 3,60 3,10 D2 3,37 7,03 5,37 4,33 3,33 D3 3,27 7,73 5,83 4,67 3,73
Keterangan  :  K  (-)  :  Kontrol  negatif  (CMC  1%),  K(+)  :  Kontrol  positif  (Allopurinol  dosis  1,8  mg/200  gr  BB),  D1  : Dosis 1 (0,9 mg/200 gr BB) ekstrak etanol buah pare, D2 : Dosis 2 (1,8 mg/200 gr BB) ekstrak etanol buah pare, D3 : Dosis 3 (3,6 mg/200 gr BB) ekstrak etanol buah pare, H0 : Kadar asam urat sebelum diinduksi kafein, H6 : Kadar asam urat pada hari ke-6 setelah diinduksi kafein, H9 : Kadar asam urat setelah diberi perlakuan selama 3 hari, H12 : Kadar asam urat setelah diberi perlakuan selama 6 hari, H15 : Kadar asam urat setelah diberi perlakuan selama 9 hari
Gambar 1. Rata-rata penurunan kadar asam urat tikus
Pada  tabel  1  rata-rata  kadar  asam  urat puasa  tikus  (H0)  adalah  3,27-3,43  mg/dL.  Kadar asam  urat  normal  pada  tikus  putih  jantan  berkisar 4,37±1,11  mg/dL  sedangkan  pada  tikus  betina sebesar  2,92±0,241  mg/dL  (Taconic  Technical Laboratory,  1998).  Kondisi  hiperursemia  pada tikus  dicapai  setelah  dilakukan  pemberian  kafein
sebanyak  27  mg/200  gr  BB  selama  6  hari  secara oral  pada  tikus,  rata-rata  kadar  asam  urat  setelah dilakukan  penginduksian  kafein  yaitu  7,03-7,87 mg/dL.  Nilai  yang  dihasilkan  menunjukkan  nilai kadar  asam  urat  lebih  tinggi  daripada  rata-rata kadar  asam  urat  pada  hari  ke-0,  hal  ini menunjukkan  bahwa  pengkondisian  hiperurisemia
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 H0 H6 H9 H12 H15 Kad ar A sam Ur at ( mg /d l) Waktu Pengukuran Kadar Asam Urat Rata-rata Penurunan Kadar Asam Urat Kontrol Negatif Kontrol Positif Dosis 1 Dosis 2 Dosis 3
berhasil  dilakukan.  Peningkatan  kadar  asam  urat tikus  tergantung  pada  kondisi  fisiologis  tikus,  hal ini  yang  menyebabkan  kenaikan  kadar  asam  urat pada tikus bervariasi (Kusmiyati, 2008).
Hasil  penurunan  kadar  asam  urat  pada tikus dapat dilihat pada gambar 1. Setiap kelompok perlakuan  mengalami  kenaikkan  asam  urat  pada H6  setelah  diinduksi  kafein.  Kelompok  perlakuan kontrol  positif,  dosis  1,  dosis  2  dan  dosis  3 menunjukkan  penurunan  kadar  asam  urat  yang lebih  besar  daripada  kelompok  perlakuan  kontrol negatif  pada  H9  sampai  H15.  Penurunan konsentrasi  asam  urat  pada  kelompok  perlakuan yang  diberikan  ekstrak  etanol  buah  pare  tidak memberikan  efek  penurunan  yang  lebih  besar dibandingkan  dengan  kelompok  perlakuan  yang diberikan  allopurinol.  Berdasarkan  hasil  tersebut dapat  dikatakan  bahwa  efektivitas  ekstrak  etanol buah  pare  lebih  rendah  dibandingkan  dengan allopurinol  dalam  menurunkan  konsentrasi  asam urat.
Dari  hasil  yang  diperoleh,  terlihat  bahwa perlakuan  kontrol  negatif  yang  diinduksi  kafein meningkatkan  kadar  asam  urat  darah  mencapai puncak  7,87  mg/dl  pada  H6  dan  mengalami penurunan  kadar  asam  urat  sedikit  demi  sedikit sampai H9 setelah pemberian induksi namun kadar asam  urat  tikus  kelompok  ini  masih  termasuk dalam  kondisi  hiperurisemia.  Hasil  tersebut menunjukan bahwa na-CMC tidak begitu berpengaruh  dalam  penurunan  kadar  asam  urat tikus.
Kelompok  kontrol  positif  yang  diberikan allopurinol  memiliki  penurunan  kadar  asam  urat yang  lebih  besar  dibandingkan  dengan  pemberian ekstrak  etanol  buah  pare.  Allopurinol  telah diketahui  mampu  menghambat  aktivitas  xantin oksidase melalui proses inhibisi kompetitif (Nelson dan  Cox,  2005).  Obat  allopurinol  memiliki mekanisme  kerja  menghambat  kerja  enzim  xantin oksidase  yang  berperan  mengubah  hipoxantin menjadi  asam  urat  (Dipiro et all,  2009).  Hal  ini disebabkan  oleh  kemiripan  struktur  allopurinol dengan hipoxantin yang merupakan substrat dalam pembentukan asam urat dalam tubuh.
Semua kelompok pemberian ekstrak etanol buah pare dengan variasi dosis 0,9 mg; 1,8 mg; dan 3,6  mg  menunjukkan  adanya  penurunan  kadar asam  urat.  Kemampuan  ekstrak  etanol  buah  pare dalam  menurunkan  kadar  asam  urat  darah  tikus belum  diketahui  secara  pasti  tapi  di  duga disebabkan  oleh  senyawa  flavonoid  yang  terdapat dalam  ekstrak  tumbuhan  tersebut.  Chaerul  (2001) melaporkan  bahwa  senyawa  aktif  tumbuhan  obat
yang  memiliki  potensi  sebagai  antihiperurisemia adalah senyawa alkaloid dan flavonoid. Berdasarkan  penelitian  Yuda et  all (2013)  dalam uji  fitokimia  buah  pare,  buah  pare  memiliki kandungan  flavonoid,  saponin  dan  polifenol. Senyawa  flavonoid  dapat menurunkan  kadar  asam urat  dengan  mekanisme  kerja  inhibisi  kompetitif dengan  menghambat  kerja  enzim  xantin  oksidase (Iswantini et  all ,  2009).  Uji in  vitro beberapa senyawa  flavonoid  seperti  kuersetin,  kaempreol dan  apigenin  mampu  bekerja  sebagai  inhibitor xantin  oksidase  dengan  daya  hambat  yang  hampir sama dengan allopurinol (Ahmad et all , 2006).
Hasil  pengukuran  kadar  asam  urat  tikus dianalisis  secara  statistika  dengan  menggunakan program  SPSS  versi  25.  Sebagaimana  uji parametrik  pada  umumnya,  maka  pada  uji ANOVA  terdapat  beberapa  prasyarat  yang  harus dipenuhi  melalui  uji  asumsi,  yaitu  uji  normalitas (data  terdistribusi  normal)  dan  variansi  sama  (uji homogenitas)  (Tyastirin  dan  Hidayati,  2017).  Uji normalitas  bertujuan  untuk  mengetahui  apakah masing-masing  variabel  terdistribusi  normal  atau tidak.  Uji  normalitas  dilakukan  dengan  tingkat signifikan  0,05.  Jika  nilai  probabilitas  lebih  kecil dari  0,05  maka  variabel  tidak  terdistribusi  secara normal  (Ghozali,  2009).  Berdasarkan  pengujian normalitas  diketahui  bahwa  nilai  kadar  asam  urat tikus  seluruh  kelompok  terdistribusi  normal  (p  > 0,05),  didapat  nilai  probabilitas  dari  perlakuan kontrol  negatif  (p  =  0,056),  perlakuan  kontrol positif (p  =  0,074), perlakuan  dosis  1 (p =  0,133), perlakuan dosis 2 (p = 0,383) dan perlakuan dosis 3 (p = 0,652).
Selanjutnya  dilakukan  uji  homogenitas untuk  menguji  apakah  kedua  data  tersebut homogen dengan membandingkan kedua variansinya  (Moleong,  2002).  Adapun  kriteria pengujian uji homogenitas jika nilai signifikansi > 0,05  maka  data  dari  populasi  yang  mempunyai varians  sama  atau  homogen.  Hasil  pengujian homogenitas  didapat  nilai  probabilitas  0,592  yang menunjukkan  varian  data  yang  ada  homogen  (p  > 0,05).
Berdasarkan  hasil  yang  diperoleh  data terdistribusi  secara  normal  dan  homogen,  maka dapat  dilanjutkan  dengan  pengujian  ANOVA. Analisis  of  variance atau  ANOVA  merupakan salah  satu  teknik  analisis  multivariate  yang berfungsi  untuk  membedakan  rerata  lebih  dari  2 kelompok  data  dengan  cara  membandingkan variansinya  (Ghozali,  2009).  Pengujian  ANOVA dilakukan  untuk  melihat  pengaruh  ekstrak  etanol buah  pare  terhadap  penurunan  kadar  asam  urat
Berdasarkan uji ANOVA apabila nilai signifikansi <  0,05,  berarti  H0  ditolak  dan  H1  diterima  maka dapat  disimpulkan  bahwa terdapat perbedaan  rata- rata  penurunan  kadar  asam  urat  pada  kelompok perlakuan yang berbeda (p = 0,005).
Berdasarkan  hasil  uji  ANOVA  yang menolak H0, maka dilakukan uji post hoc . Uji post hoc dipakai  untuk  menguji  kelompok  mana  yang berbeda  dengan  cara  melakukan  perbandingan terhadap semua kelompok ( multiple comparasion ). Uji  statistik  untuk post  hoc dikelompokkan menjadi dua kelompok, yaitu jenis uji post hoc bila semua  varian  yang  sama  (homogen)  dan  bila varian  tidak  homogen.  Jenis  uji post  hoc untuk varian homogen antara lain LSD, Scheffe, Duncan, dll  dan  untuk  varian  tidak  homogen  adalah Thamhane,  Dunnet,  dll  (Putra  dkk,  2016).  Dari data  yang  diperoleh  menggunakan  uji  LSD, terdapat  perbedaan  penurunan  kadar  asam  urat yang  bermakna  antara  kontrol  negatif  dengan kontrol  positif  dan  kelompok  dosis  (p  <  0,05). Sedangkan  antara  kelompok  positif  dan  kelompok dosis tidak terdapat perbedaan bermakna p > 0,05. Hal  ini  berarti  bahwa  kelompok  dosis  ekstrak etanol buah pare mempunyai efek antihiperurisemia  yang  dapat  menurunkan  kadar asam urat.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  didapatkan bahwa  ekstrak  etanol  buah  pare  ( Momordica charantia L.)  memiliki  aktivitas  antihiperurisemia yang  dapat  menurunkan  kadar  asam  urat  tikus putih  jantan  ( Rattus  norvegicus )  pada  dosis  0,9 mg/200 gr BB; 1,8 mg/200 gr BB; dan 3,6 mg/200 gr BB.

## SARAN
Perlu  dilakukan  penelitian  lebih  lanjut untuk  dapat  menentukan  dosis  optimum,  serta perlu  dilakukan  penelitian  serupa  dengan  metode fraksinasi  dan  isolasi  senyawa  yang  memberikan efek antihiperurisemia.

## DAFTAR PUSTAKA
Abubakar, F. I., F. M. Abubakar, A. Rahmat, A, N. Abdullah,  S.  F.  Sabran  &  S.  Endrini.  2018. Anti-gout  Potential  of  Malaysian  Medical Plants. Journal  Frontiers  in  Pharmacology . 9(261) :1-14.
Ahmad,  N.  S.,  M.  H.  Farman,  K.  B.  Mian  &  A. Hasan. 2006. Activity of Polyphenolic Plant Extracts as Scavengers of Free Radicals and Inhibitors  of  Xanthine  Oxidase. Journal  of Basic and Applied Sciences. 2(1) : 1-6.
Anief.  1987. Ilmu  Meracik  Obat .  Gadjah  Mada University Press, Yogyakarta.
Azizahwati.,  S.  Wiryowidagdo  &  K.  Prihardini. 2005.  Efek  Penurunan  Kadar  Asam  Urat Dalam  Darah  Tikus  Putih  Jantan  Dari Rebusan  Akar  Tanaman  Akar  Kucing ( Acalypha  indica L.). Jurnal  Bahan  Alam Indonesia . 4(1) :213-218.
Chaerul.  2001.  Tempuyung  untuk  menghadang asam urat. http://www.anekaplanta.com/2008/02/28/te mpuyung-untuk-menghadang-asam-urat/ [16 Agustus 2020].
Depkes  RI.  1995 Farmakope  Indonesia  Edisi  IV . Departemen  Ksehatan  Republik  Indonesia, Jakarta.
Dipiro et  al. 2009. Pharmacotherapy  Handbook 7 th . MC GRAW-Hill, New York.
Fahri. 2004. Kadar Glukosa dan Kadar Kolesterol Tikus Putih (Rattus norvegicus)
Hiperglikemik  Setelah  Pemberian  Ekstrak MetanolAkar Meniran (Phylantus niruri L.) .
[Skripsi]. FMIPA UNS, Surakarta.
Ghozali, Imam. 2009. Aplikasi Analisis Multivariate Dengan Program SPSS .
Universitas Diponegoro, Semarang.
Hakim, L. 2002. Uji Farmakologi dan Toksikologi Obat  Alam  pada  Hewan  Coba .  Prosiding
Seminar Herbal Medicine Universitas Muhammadiyah, Purwerkerto.
Iswantini, D., L. K. Darusman & R. Hidayat. 2009. Indonesian Sidaguri ( Sida rhombifolia L.) as Antigout and Inhibiton Kinetics of Flavonoids Crude Extract on the Activity of Xanthine  Oxidase. Journal  of  Biological Sciences . 9(5) :504-508.
Kapoor, B., G. Kaur, M. Gupta & R. Gupta. 2018. Indian  Medical  Plants  Useful  in  Treatment of  Gout:  A  Review  for  Current  Status  and Future  Prospective. Asian  Journal  of
Pharmaceutical  and  Clinical  Research . 10(11) : 407-416.
Kemenkes  RI.  2018. Laporan  Nasional  Riskesdas 2018 .  Badan  Penelitian  dan  Pengembangan Kesehatan, Jakarta.
Kusmiyati, A. 2008. Kadar Asam Urat Serum dan Urin  Tikus  Putih  Hiperurikemia  Setelah Pemberian Jus Kentang ( Solanum tuberosum
L.).  [Skripsi].  Jurusan  Biologi  Fakultas MIPA UNS, Surakarta.
Laurence,  D.  R.,  dan  Bacharach,  A.  L.  1964.
Evaluation of Drug Activities :
Pharmacometrics  1 th Edition .  Academic Press, London.
Longe et  al .  2002. The  Gale  Encyclopedia  of Medicine Vol 3 . Gale Group, America.
Metodiewa,  D.,  A.  Kochman  &  S.  Karolczak. 2000. Evidence for Antiradical and Antioxidant  Properties  of  Four  Biologically Active  N,  N,  Diethylamoniethyl  Ethers  of Flavanone  Oximes:  A  Comparison  with Natural  Polyphenolic  Flavonid  (Rutin) Action.  1997. Biochem  Mol  Biol  Int . 41(5) :1067-1075.
Moleong,  Lexy.  2002. Metodologi  Penelitian Kualitatif . PT Remaja Rosdakarya, Bandung.
Nelson,  D.  L.,  dan  M.  M.  Cox.  2005. Lehniger  : Principles  of  Biochemistry .  WH  Freeman,
New York.
Putra,  I.  W.  G.  A.  E.,  T.  Widarsa  &  P.  A.  Astuti. 2016. Modul Manajemen Data dan Statistika Dasar . Fakultas Kedokteran Universitas Udayana, Denpasar.
Rahmi,  Yuni.  2017. Uji  Antihiperurusemia
Kombinasi  Ekstrak  Etanol  70%  Daun Sidaguri (Sida rhombifolia L.) dan Allopurinol Terhadap Tikus Sprague-
Dawley  yang  Diinduksi  Kafein .  [Skripsi].
UIN Syarif Hidayatullah, Jakarta.
Rambi, dkk. 2019. Uji Aktivitas Penurunan Kadar Asam  Urat  Ekstrak  Etanol  Buah  Pinang Yaki  ( Areca  vestiaria )  pada  Tikus  Putih Jantan  Galur  Wistar  ( Rattus  norvegicus ) yang Diinduksi Kalium Oksonat. Pharmacon . 8(2) :465-471.
Sitanggang,  M  dan  Dewani.  2006. 33  Ramuan Penakluk  Asam  Urat .  Agromedia  Pustaka, Jakarta.
Taconic Technical Laboratory. 1998. Hematological  and  Clinical  Chemistry Values Wistar Rats http://www.taconic.com/health/hematology/ wkheme.htm [16 Agustus 2020] Tjay  dan  Raharja.  2007. Obat-obat  Penting Khasiat, Penggunaan dan Efek-efek
Sampingnya Edisi 6. Gramedia, Jakarta.
Tyastirin,  Esti  dan  Hidayati,  Irul.  2017. Statistik Parametrik  Untuk  Penelitian  Kesehatan .
Program  Studi  Arsitektur  UIN  Sunan Ampel, Surabaya.
Yuda, A. K., S. A. Made & G. O. K. Agung. 2013. Identifikasi  Golongan  Senyawa  Kimia Ekstrak  Etanol  Buah  Pare  ( Momordica charantia )  dan  Pengaruhnya  Terhadap Penurunan  Kadar  Glukosa  Darah  Tikus Putih  Jantan  ( Rattus  norvegicus )  yang
Diinduksi Aloksan. Buletin Veteriner Udayana . 5(2) :87-95.