## Efektivitas Pemberian Ekstrak Tamarindus indica terhadap Jumlah Sel Osteoblas Tulang Femur Tikus Wistar Jantan yang Diinduksi Aluminium
The Effectiveness of Tamarindus indica Extract in Total Osteoblast Cell of Male Wistar Rat’s Femur Bone Induced by Aluminium
Indah Pratiwi 1 , Rena Normasari 2 , Rony Prasetyo 3
1 Program Studi Pendidikan Dokter, Fakultas Kedokteran Universitas Jember
2 Laboratorium Patologi Anatomi, Fakultas Kedokteran Universitas Jember
3 Laboratorium Kesehatan Masyarakat, Fakultas Kedokteran Universitas Jember Alamat email korespondensi: 162010101127@students.unej.ac.id

## Abstrak
Aluminium banyak dimanfaatkan dalam kehidupan akan tetapi bersifat toksik karena meningkatkan jumlah radikal bebas sehingga terjadi stres oksidatif  penyebab apoptosis osteoblas. Tamarindus indica atau Asam Jawa memiliki efek antioksidan paling poten pada bagian bijinya. Kandungan polifenol pada biji Tamarindus indica ialah myricetin , procyanidin B2,  dan caffeic  acid .  Antioksidan  pada  biji Tamarindus  indica memiliki  mekanisme  menyumbangkan elektron  dari  gugus  –OH  pada  cincin  fenolik  untuk  menghentikan  reaksi  berantai  oksidatif  dan  mencegah terbentuknya  radikal  hidroksil  dan  peroksidasi  lipid  yang  berperan  pada  apoptosis  sel.  Tujuan  dari  penelitian  ini ialah  untuk  mengetahui  pengaruh  pemberian  ekstrak Tamarindus  indica terhadap  jumlah  sel  osteoblas  tulang femur tikus  wistar  jantan  yang  diinduksi  aluminium.  Jenis  penelitian  ini  ialah true  experimental secara in  vivo dengan randomized  post  test  only  control  group  design menggunakan  tikus  wistar  jantan  25  ekor  yang  terbagi dalam lima kelompok. Aluminium diberikan peroral dosis 300mg/kgBB bersama ekstrak Tamarindus indica dengan dosis  masing-masing  25,  50,  100mg/kgBB  selama  10  minggu.  Hasil  penelitian  ini  menunjukan  rata-rata  jumlah osteoblas kelompok K, P1, P2, P3, P4 masing masing 15.21± 1.71; 18.48± 3.65; 17.8 ± 7.05; 17.13 ± 1.16; 16.74 ± 5.71. Analisis data menggunakan uji Kruskal Wallis . Hasil analisis data menunjukan bahwa tidak terdapat perbedaan yang signifikan pada seluruh kelompok (p=0,581). Berdasarkan hasil penelitian ini, pemberian ekstrak Tamarindus indica selama 10 minggu pada tikus wistar jantan yang diinduksi aluminium tidak berpengaruh terhadap jumlah sel osteoblas tulang.
Kata kunci : aluminium, osteoblas, Tamarindus indica

## Abstract
Aluminum is widely used in life but it is toxic because it increases the number of free radicals resulting in oxidative stress that causes osteoblast apoptosis. Tamarindus indica has the most potent antioxidant effect on the seed. The polyphenol  content  in  Tamarindus  indica  seed  are  myricetin,  procyanidin  B2,  and  caffeic  acid.  Antioxidants  in Tamarindus  indica  seed  have  mechanism  of  donating  electrons  from  the  -OH  group  in  the  phenolic  ring  to  stop oxidative chain reactions and prevent the formation of hydroxyl radicals and lipid peroxidation that play a role in cell apoptosis. The purpose of this study  to determine the effect of giving Tamarindus indica extract  on the total osteoblasts of femur bone in male wistar rats induced by aluminum. This research is a true experimental in vivo with randomized  post-test  only  control  group  design  using  25  male  Wistar  rats  divided  into  five  groups.  Aluminum  is given orally dose 300mg/kgBB and Tamarindus indica extract dose 25, 50, 100mg/kgBB for 10 weeks. The results of this study indicate the average total of osteoblasts in groups K, P1, P2, P3, P4 are 15.21 ± 1.71; 18.48 ± 3.65; 17.8 ± 7.05; 17.13 ± 1.16; 16.74 ± 5.71. Data analysis used the Kruskal Wallis test. The results of data analysis showed that there was no significant differences in all groups (p = 0.581). Based on the results of this study, Tamarindus indica extract that was given to male wistar rats induced by aluminum for 10 weeks had no effect on the total osteoblasts.
Keywords : aluminium, osteoblast, Tamarindus indica

## Pendahuluan
Tulang  manusia  dewasa  berjumlah  206  tulang. Tulang  merupakan  struktur  penting  yang  memiliki fungsi  antara  lain:  penopang  tubuh,  proteksi  organ- organ  penting,  pergerakan,  penyimpanan  dan pelepasan beberapa mineral, dan untuk produksi sel darah merah (Dharmawan dkk., 2018). Tulang terdiri dari  beberapa  sel  tulang,  salah  satunya  ialah  sel osteoblas.  Sel  osteoblas  memiliki  fungsi  penting dalam  pengaturan  mineralisasi  matriks  tulang.  Sel osteoblas  dapat  ditemukan  di  periosteum  dan endosteum  permukaan  tulang.  Sel  osteoblas  matur yang  telah  terkalsifikasi  disebut  osteosit.  Osteosit merupakan  sel  utama  pembentuk  tulang  dewasa. Osteoblas yang telah berubah menjadi osteosit akan terbenam  di  dalam osteon dan  berfungsi  dalam menjaga  homeostasis  matriks  tulang.  Selain  itu, osteoblas  juga  berfungsi  dalam  pengaktifan  sel osteoklas untuk mempertahankan keseimbangan sel tulang  (Eroschenko,  2015).  Karena  sel  osteoblas mengatur  keseluruhan  proses  pemeliharaan  tulang, kerusakannya  dapat  menyebabkan  penipisan  masa tulang  dan  ketidakseimbangan  resorpsi  tulang (Rosenberg dkk., 2012).
Aluminium  merupakan  unsur  logam  mineral terbanyak  ketiga  di  kerak  bumi  dengan  jumlah  8% (Exley,  2013)  sehingga  banyak  dimanfaatkan  dalam kehidupan  sehari-hari.  Tetapi  di  sisi  lain  aluminium termasuk  unsur  logam  non-esensial  beracun  bagi manusia dan hewan. Menurut American Association of  Poison  Control  Centers tahun  2017  paparan tunggal  aluminium  pada  manusia  berjumlah  690 kasus. Dari jumlah kasus tersebut, terdapat 44 kasus keracunan  ringan  dan  9  kasus  keracunan  sedang (Gummin  dkk.,  2018).  Manusia  dapat  terpapar aluminium  dari  makanan,  air,  dan  obat-obatan (Crisponi  dkk.,  2013).  Aluminium  sangat  berbahaya bagi sel saraf, tulang, dan sel hemopoetik (Jaishankar dkk.,  2014).  Aluminium  dapat  terakumuasi  di  otak, tulang,  hati,  dan  ginjal  (Exley,  2013),  sedangkan akumulasi  terbanyak  terdapat  di  tulang  (Krewski dkk.,  2007)  khususnya femur (Pavelid  dkk.,  2017). Aluminium  bersifat  toksik  karena  meningkatkan jumlah radikal bebas  sehingga  terjadi stres oksidatif yang  menyebabkan  apoptosis  osteoblas  (Li  dkk., 2012).  Aluminium  akan  terakumulasi  di  bagian matriks  mineralisasi,  tempat  osteoblas  meletakkan kolagen  tipe  I  (Klein,  2019).  Aluminium  mencegah proses  mineralisasi  dan  menghambat  pengendapan osteoid dengan  langsung  merusak  osteoblas  (Rroji dkk., 2018). Gangguan mineralisasi pada tulang yang disebabkan kerusakan osteoblas dapat
menyebabkan  risiko  fraktur  spontan  (Nurchi  dkk., 2012).  Pada  gangguan  mineralisasi  tulang,  densitas mineral  tulang  akan  lebih  sedikit  dibagian  diafisis daripada di bagian epifisis (Weinstein dkk., 2017).
Tamarindus  indica atau  yang  lebih  dikenal  Asam Jawa  banyak  ditemukan  di  negara  tropis  seperti Indonesia. Tamarindus indica memiliki efek antiinflamasi  dan  antioksidan  (Kuru,  2014).  Efek antioksidan Tamarindus  indica paling  poten  ialah berada  pada  bagian  bijinya  (Razali  dkk.,  2012).  Biji Tamarindus  indica memiliki  kandungan  polifenol tertinggi dari biji tanaman tropis lain seperti leci dan rambutan  (Chunglok  dkk.,  2014).  Kandungan polifenol pada biji Tamarindus indica ialah myricetin , procyanidin B2,  dan caffeic  acid (Narwanto  dkk., 2018). Salah satu kandungan polifenol yang terdapat di  bagian  biji Tamarindus  indica ialah myricetin . Myricetin merupakan  polifenol  jenis  flavonoid  yang aktivitas  antioksidannya  sangat  poten  nomer  dua diantara  dua  puluh  sembilan  jenis  flavonoid  lainnya (Santoso dkk., 2016). Efek antioksidan pada polifenol memiliki  mekanisme  menyumbangkan  elektron  dari gugus  –OH  pada  cincin  fenolik  yang  dapat menghentikan  reaksi  berantai  oksidatif  yang berperan dalam apoptosis sel (Yang dkk., 2018).

## Metode Penelitian
Jenis  penelitian  yang  digunakan  ialah true experimental  laboratories secara in  vivo dengan rancangan posttest only control group . Populasi yang digunakan  ialah  tikus  Wistar  albino  jantan.  Sampel diambil  menggunakan simple  random  sampling . Sampel  penelitian  berjumlah  25  ekor.  Sampel  yang diambil  berdasarkan kriteria inklusi antara lain tikus Wistar  albino  jantan,  Umur  2-3  bulan,  berat  badan 120–210  gram,  dan  tikus  yang  sehat  dan  bergerak aktif.  Kriteria  eksklusi  yaitu  tikus  yang  sakit  (tidak aktif bergerak  dan mengalami rambut  rontok), tikus tidak  ingin  makan  minum,  dan  tikus  yang  mati sebelum proses randomisasi. Sampel dibagi menjadi 5 kelompok yaitu kelompok kontrol (K), perlakuan 1 (P1),  perlakuan  2  (P2),  perlakuan  3  (P3).  Dan perlakuan  4  (P4).  Kelompok  K  disonde  aquabidest dan  NaCl,  P1  disonde  larutan  AlCl 3 dosis 300mg/kgBB,  P2  disonde  larutan  AlCl 3 dosis 300mg/kgBB  dan  larutan  ekstrak  Tamarindus  indica dosis  25mg/kgBB,  P3  disonde  larutan  AlCl 3 dosis 300mg/kgBB  dan  larutan  ekstrak  Tamarindus  indica dosis  50mg/kgBB,  P4  disonde  larutan  AlCl 3 dosis 300mg/kgBB  dan  larutan  ekstrak  Tamarindus  indica
dosis  100mg/kgBB.  Perlakuan  dilakukan  selama  10 minggu.
Data  diambil  melalui  pengamatan  jumlah  sel osteoblas tulang femur tikus menggunakan mikroskop  cahaya  dengan perbesaran 400 kali  pada 5 lapang pandang. Pengukuran jumlah sel osteoblas pada  perbesaran  400x  pada  lima  lapang  pandang. Rata-rata  jumlah  sel  osteoblas  tiap  sampel  dihitung dengan rumus  N= (N1+N2+N3+N4+N5)/5.
Analisis  data  menggunakan  uji One  Way  Anova dengan  syarat  data  terdistribusi  normal  dan homogen.  Apabila  tidak  memenuhi  syarat  tersebut, digunakan  uji Kruskal  Wallis untuk  mengetahui adakah  perbedaan  di  seluruh  kelompok  (p<0,05). Jika  data  signifikan  maka  dilanjutkan  uji  lanjutan
Mann  Whitney (p<0,05) untuk  mengetahui  adakah perbedaan antar kelompok.

## Hasil Penelitian
Pengamatan  jumlah  sel  osteoblas  tulang femur mikroskop cahaya Leica DM500 dengan perbesaran 400  kali.  Penelitian  ini  menggunakan  25  sampel dibagi menjadi 5 kelompok yaitu kelompok kontrol (K), perlakuan 1 (P1), perlakuan 2 (P2), perlakuan 3 (P3),  dan  perlakuan  4  (P4).  Gambaran  histologi  sel osteoblast  tiap  kelompok  dapat  dilihat  pada Gambar 1.
Gambar  1. Gambaran  sel  osteoblas  tiap  kelompok  Gambar  (a)  tanda  panah  kuning  menunjukan  osteoblas  pada  kelompok kontrol di permukaan periosteum dengan persebaran paling sedikit (b) tanda panah kuning menunjukan osteoblas pada kelompok P1 di permukaan periosteum dengan persebaran paling banyak (c) tanda panah kuning menunjukan osteoblas  pada  kelompok  P2  di  permukaan  periosteum  dengan  persebaran  tidak  sebanyak  P1    (d)  tanda  panah kuning menunjukan osteoblas pada kelompok P3 di permukaan periosteum dengan persebaran yang hampir sama dengan  P2  (e)  tanda  panah  kuning  menunjukan  osteoblas  pada  kelompok  P4  di  permukaan  periosteum  dengan persebaran yang hampir sama dengan P2 dan P3.
Pengamatan hasil rata-rata jumlah osteoblas pada seluruh kelompok dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Rata-rata jumlah sel osteoblas Kelompok Rata-Rata Jumlah N Standart Deviasi K 15.21 5 1.71 P1 18.48 5 3.65 P2 17.80 5 7.04 P3 17.13 5 1.16 P4 16.74 5 5.71
Sebelum  analisis  data  menggunakan  uji One  Way Anova , data harus diuji normalitas  menggunakan uji Shapiro-wilk dan  uji  homogenitas  menggunakan Levene’s  test .  Hasil  uji Shapiro-wilk dapat  dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2. Uji shapiro-wilk K P1 P2 P3 P4 Sig. 0.396 0.965 0.109 0.001 0.130
Keterangan : Data berdistribusi normal (p>0,05)
Untuk hasil uji homogenitas Levene’s test didapatkan p=0,006  (p>0,05).  Karena  tidak  memenuhi  syarat data terdistribusi normal dan homogen, analisis data menggunakan  uji Kruskal  Wallis .  Hasil  uji Kruskal Wallis didapatkan  p=0,581  (p<0.05).  Hal  ini menandakan  tidak  ada  perbedaan  yang  signifikan pada seluruh kelompok.

## Pembahasan
Hasil  penelitian  ini  menunjukan  rata-rata  jumlah  sel osteoblas  paling  banyak  terdapat  di  kelompok  P1 (kelompok  perlakuan  yang  diberikan  larutan  AlCl 3 dosis  300mg/kgBB)  sebesar  18.48±  3.65.  Sedangkan rata-rata jumlah sel osteoblas paling sedikit terdapat di  kelompok  kontrol  dengan  jumlah  15.21±  1.71. Untuk  kelompok  perlakuan  yang  diberikan  larutan AlCl 3 dan  ekstrak Tamarindus  indica ,  rata-rata jumlah
osteoblasnya berkurang seiring bertambahnya dosis ekstrak Tamarindus indica yaitu sebesar  17.8±7.05  untuk  kelompok  P2  (kelompok pemberian  larutan  AlCl 3 300mg/kgBB  dan  larutan ekstrak Tamarindus indica 25mg/kgBB), 17.13± 1.16 untuk  kelompok  P3  (kelompok  pemberian  larutan AlCl 3 300mg/kgBB  dan  larutan  ekstrak Tamarindus indica 50mg/kgBB), dan 16.74± 5.71 untuk kelompok
P4  (kelompok  pemberian  larutan  AlCl 3 300mg/kgBB dan larutan ekstrak Tamarindus indica 100mg/kgBB).
Hasil uji Kruskal Wallis pada penelitian menghasilkan nilai  p=0,581.  Hal  ini  menandakan  bahwa  tidak  ada perbedaan pada seluruh kelompok karena p>0.05.
Terjadinya  peningkatan  jumlah  osteoblas  pada kelompok  yang  diberikan  AlCl 3 dosis  300mg/kgBB disebabkan  karena  aluminium  memiliki  efek  bifasik pada  kultur  sel-sel  tulang.  Apabila  aluminium  yang diberikan  dosisnya  kurang,  maka  akan  memicu stimulasi  sel  osteoblas  dan  osteoklas.  Sedangkan aluminium pada dosis tinggi dapat menghambat sel- sel tersebut. Aluminium dosis 10 -6 M yang diberikan pada  kultur  tulang  dapat  merangsang  penyerapan kalsium,  sintesis  kolagen,  aktivitas  osteoblas,  dan jumlah  osteoblas  (Jeffery  dkk.,  1996).  Aluminium dosis rendah dapat merangsang proliferasi osteoblas dengan cara meningkatkan 1,25 dihidroksivitamin D3 atau  osteokalsin  yang  diproduksi  oleh  sel  osteoblas yang  sedang  berproliferasi.  Secara  tidak  langsung melalui mekanisme tersebut aluminium dosis rendah mengaktifkan  protein  G  yang  berfungsi  sebagai langkah  awal  penting  pada  proses  proliferasi  dan diferensiasi sel (Lau dkk., 1991).
Sedangkan pemberian aluminium dengan dosis yang lebih  tinggi  akan  memicu  terjadinya  kerusakan tulang  (Krewski  dkk.,  2007)  khususnya  pada  sel osteoblas  secara in  vitro (Li  dkk.,  2012).  Aluminium bersifat  toksik  karena  meningkatkan  jumlah  radikal bebas  sehingga  terjadi  stres  oksidatif  yang menyebabkan  apoptosis  osteoblas  (Li  dkk.,  2012). Selain  itu,  aluminium  dosis  tinggi  dapat  mencegah proses mineralisasi tulang (Rroji dkk., 2018).
Tidak adanya perbedaan signifikan antara kelompok kontrol  dengan  kelompok  P1  (kelompok  perlakuan yang  diberikan  larutan  AlCl 3 dosis  300mg/kgBB) karena  dosis  aluminium  yang  digunakan  tidak merusak  sel  osteoblas  dan  justru  meningkatkan jumlahnya,  sesuai  dengan  suatu  penelitian  yang menyebutkan bahwa pemberian aluminium hidroksida  dosis  300mg/kgBB  tidak  menyebabkan kerusakan secara mikroskopik pada saluran gastrointestinal  (Krewski  dkk.,  2007).  Perlunya  dosis aluminium  lebih  tinggi  untuk  merusak  sel  osteoblas karena  penyerapan aluminium pada  gastrointestinal dengan  rute  masuk  secara  oral  sangatlah  rendah berkisar  0,01-0,6%  (Keith  dkk.,  2008).  Kondisi lambung yang asam dan adanya proses pengadukan menyebabkan  sebagian  besar  aluminium  kompleks yang  masuk  akan  dipecah  ke  dalam  bentuk monomolekul Al 3+ ,  terlepas  dari  seluruh  senyawa
maupun  bentuk  aluminium  kompleks  yang  tertelan. Hal  ini    menyebabkan  dosis  aluminium  yang  masuk ke dalam sel akan sangat jauh berkurang (Keith dkk., 2008).  Selanjutnya  Al 3+ akan  diasorpsi  di  duodenum dan akan dibawa ke hepar untuk dimetabolisme lalu akan  beredar  ke  seluruh  tubuh  melalui  pembuluh darah (Murray dkk., 2012).
Tidak  adanya  perbedaan  yang  signifikan  antara kelompok  P1  (kelompok  perlakuan  yang  diberikan larutan  AlCl 3 dosis  300mg/kgBB)  dengan  kelompok P4  (kelompok  pemberian  larutan  AlCl 3 300mg/kgBB dan larutan ekstrak Tamarindus indica 100mg/kgBB) disebabkan  karena  ekstrak  biji Tamarindus  indica pada dosis 100mg/kg lebih sedikit meregulasi enzim GSH-PX  daripada  dosis  lain  yang  lebih  tinggi. Walaupun  demikian,  dosis  100mg/kg  ekstrak Tamarindus indica tetap dapat mencegah terjadinya radikal  bebas  (Aengwanich  dan  Suttajit,  2013).  Biji Tamarindus  indica dalam  bidang  kesehatan  sering dimanfaatkan  sebagai  obat  alternatif  yang  memiliki efek  antiinflamasi  dan  antioksidan  tinggi  (Kuru, 2014).  Ekstrak  metanol  biji Tamarindus  indica dosis 50mg/kgBB  dapat  menghambat  peningkatan  stres oksidatif  dan  inflamasi  pada  osteoarthritis  dengan cara  menyeimbangkan  antioksidan  endogen  yang ada di dalam tubuh (Sundaram dkk., 2015). Selain itu menurut  penelitian  lainnya,  pemberian  ekstrak metanol  biji Tamarindus  indica dosis  100mg/kgBB dan  200mg/kgBB  pada  tikus  dapat  meningkatkan enzim  SOD,  katalase,  dan  peroksidase  pada  hepar yang  diinduksi  CCl 4 (Karbon  tetraklorida)  (Sandesh dkk.,  2014).  Efek  antioksidan  pada  biji Tamarindus indica disebabkan  karena  pada  bijinya  terkandung senyawa  polifenol  yang  lebih  poten  dari  bagian  lain (Razali dkk., 2012).
Polifenol memiliki mekanisme kerja antioksidan yang beragam  tergantung  pada  struktur  dan  jenis polifenolnya.  Macam-macam  mekanismenya  antara lain:  menghambat  pembentukan  enzim  radikal bebas, menangkap langsung radikal bebas yang ada, dan  meregulasi  pembentukan  enzim  antioksidan. Jenis  polifenol  yang  terkandung  dalam  biji Tamarindus  indica ialah procyanidin B2, myricetin , dan caffeic  acid (Narwanto  dkk.,  2018). Procyanidin B2  dapat  meningkatkan  regulasi  enzim  antioksidan SOD, katalase, dan GSH-PX (Yang,  2018). Sedangkan myricetin dapat  menangkap  langsung  radikal  bebas jenis  hidrogen  peroksida  (Barzegar,  2016).  Untuk jenis caffeic  acid memiliki  mekanisme  menangkap radikal  hidroksil  yang  sangat  reaktif  dan  dapat menghambat  proses  peroksidasi  lipid  (Khan  dkk., 2016).

## Simpulan dan Saran
Berdasarkan  hasil  penelitian  ini,  dapat  diambil kesimpulan  bahwa  pemberian  ekstrak Tamarindus indica selama  10  minggu  pada  tikus  wistar  jantan yang  diinduksi  aluminium  tidak  berpengaruh terhadap jumlah sel osteoblas.

## Ucapan Terima Kasih
Peneliti  mengucapkan  terimakasih  kepada  dr.  Rena Normasari, M. Biomed dan dr. Roni Prasetyo, M. Kes atas bimbingan yang telah diberikan dalam penulisan artikel penelitian ini.

## Daftar Pustaka
Agarwal,  D.  R.  dan  S.  Jain.  2011.  Significant  liver Aengwanich,  W.,  dan  M.  Suttajit.  2013.  Effect of  polyphenols  extracted  from  tamarind (Tamarindus indica L.) seed coat on pathophysiological  changes  and  red  blood  cell glutathione peroxidase activity in heat-stressed broilers. Int J Biometeorol . 57: 137-143.
Barzegar, A. 2016. Antioxidant activity of polyphenolic  myricetin  in  vitro  cell-free  and cell-based systems. Molecular Biology Research Communications . 5(2): 87-95.
Chunglok,  W.,  T.  Utaipan,  N.  Somchit  ,  M.
Lertcanawanichakul, Y. Sudjaroen. 2014.
Antioxidant  dan  Antiproliferative  Activities  of Non-Edible Parts of Selected Tropical Fruits.
Sains Malaysiana . 43(5): 689-696.
Crisponi, G., D. Fanni, C. Gerosa, S. Nemolato, V. M.
Nurchi, M. C. Alonso, J. I. Lachowicz, G. Faa.
2013.  The  meaning  of  aluminium  exposure  on human health and aluminium-related diseases. Biomolecular  Concepts .  4(1):  77– 87.
Dharmawan,  Dion.  Krismashogi.,  U.  Elfiah,  S.S.
Wahyudi. 2018. Anatomi berdasarkan kepentingan  klinis.  Jember :  UPT  Percetakan  & Penerbitan Universitas Jember.
Eroschenko, V.P. 2015. Atlas Histologi difiore dengan Korelasi Fungsional .  Jakarta: EGC.
Exley,  C.  2013.  Human  exposure  to  aluminium.
Environmental  Science  Processes  &  Impacts. 15(10):1807–1816.
Jaishankar,  M.,  T.  Tseten,  N.  Anbalagan,  B.B.
Mathew,  K.N.  Beeregowda.  2014.  Toxicity, mechanism  and  health  effects  of  some  heavy metals. Interdiscip Toxicol . 7(2): 60-72.
Jeffery, E.H., K. Abreo., E. Burgess., J. Cannata. 1996. SYSTEMIC  ALUMINUM  TOXICIITY  EFFECTS  ON BONE,  HEMATOPOIETIC  TISSUE,  AND  KIDNEY. Journal  of  Toxicology  and  environmental Health . 48(6): 649-666.
Keith,  S.  D.  Jones,  Z.  Rosemond.  2008. Toxicological Profile for Aluminum. Georgia: ATSDR.
Khan,  F.A.,  A.  Maalik,  G.  Murtaza.  2016.  Inhibitory mechanism  against  oxidative  stress  of  caffeic acid. Journal  of  Food  and  Drug  Analysis .  24(4): 695-702.
Klein,  G.L.  2019.  Aluminium  toxicity  to  bone:  A multisystem effect?. Osteoporosis and Sarcopenia . 5(1): 2-5. Krewski,  D.,  R.  A.  Yokel,  E.  Nieboer,  D.  Borchelt,  J. Cohen, J. Harry, S. Kacew, J.  Lindsay,  A.  M.
Mahfouz, dan V. Rondeau. 2007. Human health risk assessment for
aluminium,
aluminium  oxide,  and  aluminium  hydroxide. Journal  of  Toxicology  and  Environmental Health . 10(1): 1–269.
Kuru,  Pinar.  2014.  Tamarindus  indica  and  its  health related effects. Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine . 4(9): 676-681.
Lau.,  K.  H.  William.,  A.  Yoo.,  S.  P.  Wang.  1991. Aluminium  Stimulates  the  proliferation  and differentiation  of  osteoblass  in  vitro  by  a mechanism  that  is  different  from  fluoride. Molecular  and  Celluler  Biochemistry .  105:  93- 105.
Li,  Xinwei.,  Y.  Han,  Y,  Guan,  L.  Zhang,  C.  Bai,  Y.  Li. 2012.  Aluminum  Induces  Osteoblas  Apoptosis Through  the  Oxidative  Stress-Mediated  JNK Signaling  Pathway. Biol  Trace  Elem  Res . 2012(150): 502-508.
Murray,  R.,D.A.  Bender,  P.J.  Kennely,  V.W.  Rodwell,
P.A. Weil. 2012. Happer Illustrated Biochemistry .  29 th edition.  Asia:  McGraw-Hill Companies,  Inc.  Terjemahan  L.R.  Manurung dan L.I. Mandera. 2014. Biokimia Harper . Edisi 29. Jakarta: EGC.
Narwanto,  M.I.,  M.  Rahayu,  S.  Soeharto,  dan Widodo.  M.A.  2018.  Identifikasi  dan  Uji  Silico Potensi  Anti  Inflamasi  Dan  Antioksidan
Senyawa  Polifenol  Ekstrak  Metanol  Biji Tamarindus  indica. Journal  of  Agromedicine and Medical Science . 4(1): 13-17.
Nurchi,  V.M.,  G.  Crisponi,  V.  Bertolasi,  G.  Faa,  M. Remelli.  2012.  Aluminium-dependent  human diseases and chelating properties of aluminium chelators  for  biomedical  applications. Metal Ions in Neurological Systems . 142(4): 103-124.
Pavelid,  Sandra  Kraljevid.,  V.  Micek,  A.  Filoševid,  D. Gumbarevid,  P.  Žurga,  A.  Bulog,  T.  Orct,  Y. Yamamoto,  T.  Preočanine,  J.  Plavec,  R.  Peter, M.  Petravid,  D.  DraženVikid-Topid,  K.  Pavelid. 2017.  Novel,  oxygenated  clinoptilolite  material efficiently removes aluminium from aluminium chloride-intoxicated  rats in vivo . Microporous and Mesoporous Materials . 249:146-15.
Razali,  N.,  S.  Mat-Junit,  A.F.  Abdul-Muthalib,  S. Subramaniam,  A.  Abdul-Aziz.  2012.  Effects  of various  solvents  on  the  extraction  of antioxidant  phenolics  form  the  leaves,  seeds, veins,  and  skin  of  Tamarindus  indica  L. Food Chemistry . 131(2012): 441-448.
Rosenberg,  N.,  O.  Rosenberg,  M.  Soudry.  2012.
Osteoblass in bone physiology-
mini review. Rambam  Maimonides  medical  journal . 3(2): e0013.
Rroji,  Merita.,  N.  Spahia,  M.  Barbullushi,  dan  S. Seferi. 2018. The Bone and Mineral Disorder in Patient Undergoing Chronic Peritoneal Dialysis. IntechOpen .
Sandesh.  P.,  V.  Velv.,  R.  P.  Singh.  2014.  Antioxidant activities of tamarind ( Tamarindus Indica ) seed coat extracts using in vitro and in vivo models. Journal of Food Science and Technology . 51(9):
1965-1973.
Santoso,  B.,  R.S.  Utomo,  dan  M.D.  Wiyoga.  2016.
Analisis Hubungan Senyawa Golongan Flavonoid  Dari  24  Famili  Tanaman  Terhadap
Aktivitas  Penangkap  Radikalnya.  Bandung:
Prosiding Seminar Nasional Kimia UNJANI-HKI
Sundaram,  M.S.,  M.  Hemshekhar,  M.S.  Santosh,  M.
Paul, K. Sunitha, R.M.Thushara, S.K. NaveenKumar,  S.  Naveen,  S.  Devaraja,  K.S. Rangappa,  K.  Kemaraju,  K.S.  Girish.  2015. Tamarind Seed (Tamarindus indica) ExtractAmeliorates  Adjuvant-Induced  Arthritis via  Regulating the Mediators of  Cartilage/Bone Degeneration,  Inflammation  and  Oxidative
Stress. Scientific reports . 5(11117).
Weinstein,  Robert.S.,  P.  Madhavaram.  2017.
Endocrinology Metabolism Osteomalacia.https://www.endocrinologyadvis or.com/home/decision-support-in medicine/endocrinology- metabolism/osteomalacia-2/.  [Diakses  pada  9 Desember 2019].
Yang, L., D. Xian, X.  Xiong, R.  Lai, J. Song, J.  Zhong.
2018. Proanthocyanidins
against  Oxidative
Stress : From Molecular Mechanisms to Clinical
Application. Biomed Research International.