## INTERNATIONAL JOURNAL OF APPLIED CHEMISTRY RESEARCH
Volume 3 Nomor 2 2021, pp 30 - 38 E-ISSN: 2549-3671 DOI: https://doi.org/10.23887/ijacr.v3i2
History: Received : April 2 , 2021 Revised : June 10 , 2021 Accepted : July 1 , 2021
Published Publisher: Undiksha Pres s Licensed: This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License

## Uji Mikrobiologi Air Perpipaan di Dusun Mundukkunci Desa Tegallinggah
Yuliasni Mardiyati 1 * 1 Program Studi Analis Kimia, Jurusan Kimia, Universitas Pendidikan Ganesha *Corresponding author : mardiyati @ undiksha.ac.id

## Abstrak
Penelitian ini termasuk penelitian deskriptif yang bertujuan untuk (1) mengetahui ada tidaknya bakteri coliform total dan coliform tinja pada air perpipaan di Dusun Mundukkunci, Desa Tegallinggah, (2) mengetahui kualitas air perpipaan tersebut ditinjau dari nilai MPN coliform total dan coliform tinjanya. Subjek penelitian ini adalah air perpipaan di Dusun Mundukkunci, Desa Tegallinggah, Kecamatan Sukasada, Kabupaten Buleleng. Objeknya adalah kualitas mikrobiologi air perpipaan tersebut ditinjau dari nilai MPN coliform total dan coliform tinjanya. Penetapan  sampel  dilakukan  secara  area  random  sampling  berdasarkan  pertimbangan  jarak  mata  air  dengan saluran distribusi di rumah-rumah penduduk. Keberadaan bakteri coliform total dan coliform tinja dalam sampel air perpipaan diuji dengan menggunakan metode tabung ganda. Hasil penelitian menunjukkan, (1) air perpipaan di Dusun Mundukkunci, Desa Tegallinggah mengandung bakteri coliform total dan coliform tinja, (2) kualitas mikrobiologi  air  perpipaan  tersebut  layak  untuk  dijadikan  sebagai  sumber  air  bersih,  tetapi  tidak  layak digunakan  sebagai  air  minum  secara  langsung  karena  nilai  MPN  pada  mata  air  dan  bak  penampungannya melebihi standar yang telah ditetapkan oleh Pemerintah. Dalam pemanfaatannya, air tersebut perlu dilakukan pengolahan  terlebih  dahulu,  misalnya  dengan  penambahan  desinfektan  pada  bak  penampungan  atau  dengan jalan mendidihkannya untuk membunuh bakteri yang ada dalam air tersebut.
Kata Kunci: uji mikrobiologi, air perpipaan, coliform total, coliform tinja, metode tabung ganda.

## Abstract
This research is a descriptive study that aims to (1) determine the presence or absence of total coliform bacteria and fecal coliform in piped water in Dusun Mundukkunci, Tegallinggah Village, and (2) determine the quality of the piped water in terms of MPN values for total coliform and fecal coliform. The subject of this research is piped  water  in  Dusun  Mundukkunci,  Tegallinggah  Village,  Sukasada  District,  and  Buleleng  Regency.  The objective is to determine the microbiological quality of the piped water in terms of the total coliform MPN and fecal  coliform  values.  The  determination  of  the  sample  is  done  by  random  sampling  an  area  based  on consideration of the distance of the spring from the distribution channel in people's homes. The presence of total coliform  bacteria  and  fecal  coliform  in  piped  water  samples  was  tested  using  the  double  tube  method.  The results showed that (1) the piped water in Dusun Mundukkunci, Tegallinggah Village, contains total coliform bacteria and fecal coliform, and (2) the microbiological quality of the piped water is suitable for use as a source of clean water, but it is not suitable for direct drinking water because of its The MPN for springs and storage tanks  exceeds  the  standards  set  by  the  government.  In  its  utilization,  the  water  needs  to  be  treated  first,  for example by adding a disinfectant to the holding tank or by boiling it to kill the bacteria in the water.
Keywords: microbiological test, piped water, total coliform, fecal coliform, double tube method.

## 1. Pendahuluan
Air merupakan sumber utama kehidupan, karena semua kehidupan tidak akan berlangsung tanpa tersedianya  air.  Bagi  manusia,  air  selain  digunakan  untuk  keperluan  konsumsi  juga  digunakan  untuk berbagai keperluan, seperti untuk pertanian, industri, transportasi, sumber tenaga listrik, serta digunakan juga sebagai medium untuk berbagai reaksi kimia dan proses ekskresi. Kebutuhan akan air terus meningkat setiap  tahunnya  seiring  dengan  peningkatan  jumlah  penduduk,  terutama  mengenai  penyediaan  air bersihnya.
Penduduk Indonesia sebagian besar (81,3%) hidup di daerah pedesaan. Masalah penyediaan air bersih ternyata sudah menjadi masalah bagi penduduk di daerah pedesaan, dimana sebagian besar dari mereka  belum  memiliki  fasilitas  penyediaan  air  bersih  yang  sehat (Pelczar,  2005) .  Sebagian  besar penduduk yang tinggal di daerah pedesaan masih kesulitan untuk mendapatkan air bersih yang memenuhi standar  kesehatan.  Hal  ini  juga  dialami  oleh  penduduk  di  Dusun  Mundukkunci,  Desa  Tegallinggah, Kecamatan Sukasada, Kabupaten Buleleng. Selama ini, penduduk desa tersebut hanya memanfaatkan air perpipaan yang bersumber dari mata air untuk memenuhi kebutuhan akan air bersih. Hal ini disebabkan PDAM (Perusahaan Daerah Air Minum) Kabupaten Buleleng belum mampu menjangkau daerah tersebut yang  secara  geografis  merupakan  dataran  tinggi.  Keadaan  ini  menyebabkan  air  perpipaan  merupakan satu-satunya pilihan bagi penduduk Dusun Mundukkunci (Informasi staf Desa Tegallinggah).
Pemanfaatan  air  pipa  di  Dusun  Mundukkunci  dikelola  oleh  desa,  sehingga  air  pipa  dapat dimanfaatkan oleh penduduk tanpa dikenai biaya. Air perpipaan tersebut berasal dari mata air yang terletak di tepi sungai. Sampai saat ini sungai tersebut masih digunakan oleh penduduk setempat untuk keperluan sehari-hari, seperti untuk mandi, mencuci, dan buang air besar. Air yang keluar dari mata air ditampung di dalam bak penurap ( captering ), kemudian dialirkan ke bak penampungan ( reservoir ), selanjutnya air dalam bak penampungan tersebut langsung disalurkan ke rumah-rumah penduduk. Dilihat dari kondisinya, sangat memungkinkan air perpipaan di desa tersebut tercemar oleh berbagai kotoran yang berasal dari aktivitas manusia dan hewan di sungai dimana mata air tersebut berada. Walaupun mata air yang terletak di tepi sungai sudah dilindungi dengan bak penurap untuk menghindari kontak mata air dengan air sungai, tetapi ada  kemungkinan  bahan-bahan  pencemar  dalam  sungai  tersebut  dapat  masuk  ke  dalam  bak  penurap melalui lapisan tanah di bawahnya, apalagi konstruksi bak penurap dibangun dengan dasar yang tidak terlalu  dalam,  yang  dapat  menyebabkan  bahan-bahan  pencemar  masuk  dan  meresap  ke  dalam  bak penurap  semakin  besar.  Sementara  itu,  air  yang  ditampung  dalam  bak  penampungan  ( reservoir )  tidak mengalami pengolahan lebih lanjut, tetapi langsung disalurkan ke rumah-rumah penduduk, sehingga ada kemungkinan air yang dikonsumsi oleh penduduk di desa tersebut masih tercemar oleh berbagai kotoran yang berasal dari sungai dimana mata air tersebut berada.
Bahan  pencemar  yang  memasuki  badan  air  sebagian  besar  berupa  jasad  renik.  Pada  air  yang tercemar oleh berbagai kotoran yang berasal dari sungai, jasad renik yang paling banyak ditemukan adalah bakteri coliform tinja. Bakteri ini merupakan bakteri patogen yang dapat memfermentasikan laktosa pada suhu 44°C. Bakteri ini dapat dijadikan indikator pencemar biologis, selain itu adanya bakteri coliform total juga menjadi persyaratan dalam Peraturan Pemerintah Republik Indonesia Nomor 82 Tahun 2001, tanggal 14 Desember 2001, dimana kehadirannya sangat tidak diharapkan karena dapat menimbulkan penyakit. Apabila air yang mengandung bakteri ini dikonsumsi oleh manusia, maka dapat menimbulkan penyakit, seperti diare, peritonitis, meningitis, infeksi kandung kemih, pelviks, ginjal, hati, serta penyakit pencernaan lainnya (Kusnadi, 2003) . Dengan demikian, perlu dilakukan penelitian tentang uji mikrobiologi air perpipaan di Dusun Mundukkunci, Desa Tegallinggah.

## 2. Metode

## 2.1. Rancangan Penelitian
Penelitian ini merupakan penelitian deskriptif yang bertujuan untuk memberikan gambaran tentang kualitas  mikrobiologi  air  perpipaan  di  Dusun  Mundukkunci,  Desa  Tegallinggah,  Kecamatan  Sukasada, Kabupaten Buleleng. Penelitian ini diawali dengan tahap persiapan yang meliputi persiapan ijin dan survei ke lapangan, serta persiapan alat dan bahan. Pengambilan sampel air dilakukan pada 2 titik pada distribusi air sepanjang 2 Km di Dusun Mundukkunci, Desa Tegallinggah dengan pertimbangan berdasarkan jarak mata air dengan saluran distribusi di rumah-rumah penduduk, yaitu sebagai berikut:
• 1 sampel untuk jarak distribusi terdekat (± 1 Km dari bak penampungan/ reservoir ).
• 1 sampel untuk jarak distribusi terjauh (± 2 Km dari bak penampungan/ reservoir ).
Sampel  juga  diambil  pada  mata  air  dan  bak  penampungan  ( reservoir )  masing-masing  1  titik. Selanjutnya,  dilakukan  uji  mikrobiologi  di  Laboratorium  Pengawasan  Kualitas  Air  Dinas  Kesehatan Kabupaten  Buleleng.  Data  kuantitatif  yang  diperoleh,  kemudian  dianalisis  dan  dibandingkan  dengan standar kualitas air menurut Peraturan Pemerintah Republik Indonesia Nomor 82 Tahun 2001, tanggal 14 Desember 2001 tentang kualitas air bersih, sehingga dapat diambil simpulan tentang kualitas mikrobiologi air perpipaan di Dusun Mundukkunci, Desa Tegallinggah.

## 2.2. Lokasi dan Waktu Penelitian
Penelitian  ini  dilakukan  di  Dusun  Mundukkunci,  Desa  Tegallinggah,  Kecamatan  Sukasada, Kabupaten  Buleleng  sebagai  tempat  pengambilan  sampel  dan  Laboratorium  Pengawasan  Kualitas  Air Dinas Kesehatan Kabupaten Buleleng sebagai tempat pengujian sampel. Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Maret 2008. Pengambilan sampel dilakukan pada tanggal 26 Maret 2008 pukul 8.00-10.00 WITA sedangkan pengujian sampel dilakukan pada tanggal 26 s/d 31 Maret 2008.

## 2.3. Subjek dan Objek Penelitian
Subjek  dalam  penelitian  ini  adalah  air  perpipaan  di  Dusun  Mundukkunci,  Desa  Tegallinggah, Kecamatan Sukasada, Kabupaten Buleleng. Objek dalam penelitian ini adalah kandungan bakteri coliform total dan coliform tinja ditinjau dari nilai MPN coliform total dan coliform tinjanya.

## 2.4. Instrumen Penelitian
Alat dan bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah sebagai berikut (Alaerts, 1984). a. Alat:
- Beaker gelas
- Timbangan
- Batang pengaduk
- Rak tabung dan tabung reaksi
- Ose
- Tabung Durham
- Pipet
- Oven
- Inkubator
- Autoklap
- Pembakar Bunsen
- Kapas
b. Bahan:
- Media Lactose Broth , komponennya terdiri dari pepton, ekstrak daging, dan laktosa.
- Media  BGLB  ( Brilliant  Green  Lactose  Bile  Broth ),  komponennya  terdiri  dari  pepton,  laktosa, oxgall , dan brilliant green .
- Akuades

## 2.5. Teknik Pengambilan Data

## 2.5.1. Tahap Persiapan
Pada tahap ini dilakukan persiapan alat dan bahan, serta persiapan media bakteri  yang akan digunakan dalam pengujian sampel.

## 2.5.2. Pembuatan Media Bakteri
Media yang digunakan untuk menumbuhkan bakteri dalam penelitian ini ada 3 jenis, yaitu media Lactose Broth kekuatan tunggal, Lactose Broth kekuatan ganda, dan media BGLB ( Brilliant Green Lactose Bile Broth ).
1). Pembuatan Larutan Media Lactose Broth kekuatan tunggal Lactose Broth sebanyak 13 gram ditimbang dan dilarutkan dalam 1 L aquades dan diaduk hingga larut. pH diatur menjadi 6,9 ± 0,2 pada suhu 25 ° C, bila pH larutan lebih dari  6,9 ± 0,2, ditambahkan HCl 0,1 N, dan bila pH kurang dari 6,9 ± 0,2, ditambahkan NaOH 0,1 N. Larutan sebanyak ± 10 mL dituangkan pada tabung reaksi yang berisi tabung Durham, tabung ditutup rapat dengan kapas, kemudian disterilkan dalam autoklap pada tekanan 15 psi dengan suhu 121 ° C selama 15 menit, lalu didinginkan.
2). Pembuatan Larutan Media Lactose Broth kekuatan ganda
Lactose Broth sebanyak 26 gram ditimbang dan dilarutkan dalam 1 L aquades, dan diaduk hingga larut. pH diatur menjadi 6,9 ± 0,2 pada suhu 25 ° C, bila pH lebih dari 6,9 ± 0,2, ditambahkan HCl 0,1 N, dan bila pH kurang dari 6,9 ± 0,2, ditambahkan NaOH 0,1 N. Larutan sebanyak ± 5 mL dituangkan pada tabung reaksi yang berisi tabung Durham, tabung ditutup rapat dengan kapas, kemudian disterilkan dalam autoklap pada tekanan 15 psi dengan suhu 121 °C selama 15 menit, lalu didinginkan.
3). Pembuatan Larutan Media BGLB ( Brillian Green Lactose Bile Broth )
Brillian Green Lactose Bile Broth sebanyak 40 gram ditimbang dan dilarutkan dalam 1 L aquades, dan  diaduk  hingga  larut.  pH  diatur  menjadi  7,2  ±  0,2  pada  suhu  25 ° C,  bila  pH  lebih  dari  7,2  ±  0,2, ditambahkan HCl 0,1 N, dan bila pH kurang dari 7,2 ± 0,2, ditambahkan NaOH 0,1 N. Larutan sebanyak ± 5  mL  dituangkan  pada  tabung  reaksi  yang  berisi  tabung  Durham,  tabung  ditutup  rapat  dengan  kapas, kemudian  disterilkan  dalam  autoklap  pada  tekanan  15  psi  dengan  suhu  121  °C  selama  15  menit,  lalu didinginkan.

## 2.5.3. Pengambilan Sampel Air Perpipaan
Pada  saat  pengambilan  sampel,  dilakukan  pengukuran  suhu  air  menggunakan  termometer  dan pengukuran pH menggunakan kertas pH indikator.  Sampel air dalam penelitian ini diambil pada titik-titik sampling yang telah ditentukan dengan prosedur sebagai berikut (Anonim, 1991) .
1). Pengambilan sampel air perpipan pada mata air dapat dilakukan dengan tahapan sebagai berikut.
- Mulut botol sampel dipanaskan selama 1 menit dengan menggunakan nyala api.
- Sampel air diambil pada sumber mata air.
- Sampel air dimasukkan ke dalam botol (pengisian sampel air dalam botol diusahakan tidak sampai penuh supaya bisa dikocok pada waktu pengambilan sebelum dianalisis).
- Leher botol dipanaskan kembali dengan menggunakan nyala api.
- Botol ditutup dengan segera, dan dibungkus dengan kertas  aluminium.
- Sampel diisi keterangan tempat dan waktu.
2).  Pengambilan  sampel  air  pada  bak  penampungan  ( reservoir )  dapat  dilakukan  dengan  tahapan sebagai berikut.
- Botol sampel diberi pemberat dan diikat dengan tali sepanjang 2 m dibagian tengah botol.
- Mulut botol dipanaskan selama 1 menit dengan menggunakan nyala api.
- Botol diturunkan perlahan sampai mencapai bagian tengah bak penampungan (± 1,5 m).
- Botol diupayakan agar tidak menyentuh dinding bak penampungan.
- Botol diangkat setelah terisi penuh.
- Isi botol dibuang sampai volume air yang tersisa 2/3 volume botol (pengisian sampel air dalam botol diusahakan tidak sampai penuh)
- Leher botol dipanaskan kembali dengan nyala api.
- Botol ditutup dengan segera, dan dibungkus dengan kertas aluminium.
- Sampel diisi keterangan tempat dan waktu.
3). Pengambilan sampel air perpipaan di rumah-rumah penduduk diambil melalui kran dengan tahapan sebagai berikut.
- Kran dibersihkan dari setiap kotoran dan debu agar tidak mengganggu hasil pengukuran.
- Kran dibuka agar air mengalir secara maksimal, dan dibiarkan selama 1-2 menit kemudian kran ditutup dulu.
- Kran disterilkan selama 1 menit dengan menggunakan nyala api.
- Kran dibuka secara hati-hati dan biarkan air mengalir 1-2 menit dengan aliran sedang.
- Botol yang sudah steril disiapkan untuk tempat sampel.
- Sampel air dimasukkan ke dalam botol (pengisian sampel air dalam botol diusahakan tidak sampai penuh supaya bisa dikocok pada waktu pengambilan sebelum dianalisis).
- Leher botol dipanaskan kembali dengan nyala api.
- Botol ditutup dengan segera, dan dibungkus dengan kertas aluminium.
- Sampel diisi keterangan tempat dan waktu.

## 2.5.4. Pemeriksaaan Coliform Total dan Coliform Tinja
Sampel air yang telah diambil pada beberapa titik sampling kemudian diperiksa keberadaan coliform total dan coliform tinja dengan menggunakan metode tabung ganda. Pengujian dilakukan melalui 2 tahapan berikut.

## 1). Tahap Perkiraan
Media  yang  digunakan  adalah Lactose  Broth yang  sudah  steril  dan  siap  pakai.  5  tabung  yang masing–masing berisi 5 mL media Lactose Broth berkekuatan ganda  disiapkan (tabung a 1 sampai dengan a 5 ) dan 2 tabung yang berisi 10 mL media Lactose Broth berkekuatan tunggal disiapkan (tabung b 1 dan tabung b 2 ). Ke dalam tabung a 1 s/d a 5 diinokulasikan masing–masing 10 mL sampel air, sedangkan ke dalam tabung b 1 diinokulasi 1 mL sampel, dan ke dalam tabung b 2 diinokulasi 0,1 mL sampel air. Selanjutnya, tabung reaksi tersebut diinkubasi (dieramkan) pada suhu 35°C ± 0,5°C selama 1 x 24 jam sampai 2 x 24 jam. Masing-masing tabung diamati untuk melihat ada atau tidaknya gas. Adanya gas menunjukan uji perkiraan positif, dan harus dilanjutkan dengan tahap penegasan.

## 2). Tahap Penegasan
Media yang digunakan adalah Brillian Green Lactose Bile Broth (BGLB) yang sudah steril dan siap pakai.  Sampel  masing-masing  tabung    yang  menghasilkan  gas  (positif)    pada  tahap  perkiraan  diambil mengunakan ose yang telah dibakar membara sebanyak 1-2 ose , kemudian dimasukkan ke dalam tabung tahap penegasan yang berisi 5 mL media BGLB. Satu seri tabung BGLB kemudian diinkubasi pada suhu 37 ° C ± 0,5°C selama 1 x 24 jam sampai 2 x 24 jam untuk memastikan adanya bakteri coliform total. Adanya gas  pada  tabung  Durham  menunjukkan  bahwa  sampel  air  positif  mengandung  bakteri  coliform  total. Kemudian dari masing-masing tabung media BGLB yang menunjukkan reaksi positif untuk bakteri coliform total diambil 1-2 ose dan dimasukkan ke dalam masing-masing tabung media BGLB yang disediakan dan diinkubasi pada suhu 44°C ± 0,5°C, adanya gas pada tabung Durham menunjukkan bahwa sampel air positif  mengandung  bakteri  coliform  tinja.  Jumlah  tabung  positif  pada  tahap  penegasan  untuk  bakteri coliform total dan coliform tinja dicatat dengan melihat banyaknya tabung BGLB yang menujukkan adanya gas.

## 2.6. Analisis Data
Data yang diperoleh berupa data kuantitatif tentang nilai MPN coliform total dan coliform tinja pada air  perpipaan  di  Dusun  Mundukkunci,  Desa  Tegallinggah.  Data  dalam  penelitian  ini  dianalisis  secara deskriptif,  berupa  jumlah  tabung  positif  yang  ditandai  dengan  adanya  gas  pada  tabung  Durham  untuk mengetahui  bakteri  coliform  total  dan  coliform  tinja.  Nilai  MPN  pada  air  perpipaan  yang  diambil  pada masing-masing titik sampling di Dusun Mundukkunci, Desa Tegalinggah termasuk pada sumber mata air dan bak penampungan dibandingkan dengan Peraturan Pemerintah Republik Indonesia Nomor 82 Tahun 2001, tanggal 14 Desember 2001 untuk mengetahui kualitas mikrobiologi air perpipaan tersebut.

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN

## 3.1. Hasil
Berdasarkan  pengujian  sampel  yang  dilakukan  di  Laboratorium  Pengawasan  Kualitas  Air  Dinas Kesehatan  Kabupaten  Buleleng  pada  tanggal  26  s/d  31  Maret  2008  terhadap  sampel  air  perpipaan  di Dusun Mundukkunci, Desa Tegallinggah, diperoleh data tentang nilai MPN coliform total dan coliform tinja pada  air  perpipaan  tersebut.  Penelitian  ini  terdiri  dari  dua  tahap,  yaitu  tahap  perkiraan  dan  tahap penegasan. Tahap perkiraan dilakukan untuk mengetahui ada tidaknya bakteri coliform total dan coliform tinja di dalam sampel. Pada tahap ini sampel diinokulasi pada media LB ( Lactose Broth ). Adanya gas dalam tabung Durham menunjukkan bahwa sampel positif mengandung bakteri. Pada tahap perkiraan, dari empat titik pengambilan sampel seluruhnya positif menghasilkan gas, dengan jumlah tabung positif setiap sampel adalah  7  tabung,  kecuali  pada  saluran  distribusi  ke  rumah-rumah  penduduk  (±  2  Km  dari  bak
penampungan), dari 7 tabung hanya 6 tabung yang positif. Hasil yang diperoleh pada tahap perkiraan dapat dilihat pada Tabel 1.
Pengujian tahap ke dua (tahap penegasan) merupakan kelanjutan dari tahap perkiraan bertujuan untuk memastikan ada atau tidaknya bakteri coliform total pada sampel. Dalam penelitian ini dari 4 sampel yang diuji semuanya positif mengandung bakteri coliform total. Hasil tahap penegasan dapat dilihat pada Tabel 2.

## Tabel 1. Hasil Pengujian Sampel pada Tahap Perkiraan
No Lokasi Pengambilan Sampel Jumlah tabung positif pada masing- masing volume sampel Total tabung positif Total tabung negatif 10 mL (5 tabung) 1 mL (1 tabung) 0,1 mL (1 tabung) 1. Mata air 5 1 1 7 - 2. Bak penampungan 5 1 1 7 - 3. Rumah penduduk (± 1 Km dari bak penampungan) 5 1 1 7 - 4. Rumah penduduk (± 2 Km dari bak penampungan) 5 0 1 6 1
Tabel 2. Hasil Pengujian Sampel pada Tahap Penegasan Coliform Total (Inkubasi pada suhu 37 °C)
No Lokasi Pengambilan Sampel Jumlah tabung positif pada masing- masing  volume sampel Nilai MPN Coliform Total Ket. 10 mL (5 tabung) 1 mL (1 tabung) 0,1 mL (1 tabung) 1. Mata air 5 1 1 240 Baik 2. Bak penampungan 5 1 1 240 Baik 3. Rumah pendu- duk (± 1 Km dari bak penam- pungan) 4 0 1 20 Baik 4. Rumah pendu- duk (± 2 Km dari bak penam- pungan) 5 0 1 96 Baik
Keterangan:  Kadar maksimal yang diperbolehkan berdasarkan Peraturan Pemerintah Nomor 82 Tahun 2001, tanggal 14 Desember 2001 untuk air bersih dilihat dari bakteri coliform total sebesar 1000 (Jumlah per 100 mL).
Tahap penegasan ini menggunakan media Brillian Green Lactose Bile Broth (BGLB), dan seluruh sampel positif mengandung bakteri coliform total. Untuk menguji adanya bakteri coliform tinja pada sampel, dilakukan langkah yang sama dengan tahap penegasan coliform total, menggunakan media BGLB, tetapi suhu inkubasi dinaikkan menjadi 44 °C. Data yang diperoleh dibandingkan dengan nilai MPN jumlah bakteri per 100 mL. Hasil dari tahap penegasan coliform tinja dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel 3. Hasil Pengujian Sampel pada Tahap Penegasan Coliform Tinja (Inkubasi pada suhu 44 °C).
No Lokasi Pengambilan Sampel Jumlah tabung positif pada masing- masing  volume sampel Nilai MPN Coliform Tinja Ket. 10 mL (5 tabung) 1 mL (1 tabung) 0,1 mL (1 tabung) 1. Mata air 5 1 1 240 Tidak baik 2. Bak penampungan 5 1 1 240 Tidak baik 3. Rumah pendu- duk (± 1 Km dari bak penam- pungan) 4 0 1 20 Baik 4. Rumah pendu- duk (± 2 Km dari bak penam- pungan) 5 0 1 96 Baik
Keterangan: Kadar maksimal yang diperbolehkan berdasarkan Peraturan Pemerintah Nomor 82 Tahun 2001, tanggal 14 Desember 2001 untuk air bersih dilihat bakteri coliform tinja sebesar 100 (Jumlah per 100 mL).
Dalam penelitian ini diukur juga parameter fisika (suhu, bau, rasa) dan parameter kimia (pH). Hasil pengukurannya dapat dilihat pada Tabel 4.

## Tabel 4. Hasil Pengukuran Parameter Fisika dan Kimia
No Lokasi Pengambilan Sampel
Parameter Fisika
Parameter Kimia Suhu ( ° C) Bau Rasa pH 1. Mata air 26 Tidak berbau  Tidak berasa 7,0 2. Bak penampungan 26 Tidak berbau  Tidak berasa 7,0 3. Rumah penduduk (± 1 Km dari bak penampungan) 27 Tidak berbau  Tidak berasa 7,0 4. Rumah penduduk (± 2 Km dari bak penampungan) 27 Tidak berbau  Tidak berasa 7,0

## 3.2. Pembahasan
Berdasarkan  hasil  pengujian  mikrobiologi  yang  telah  dilakukan,  terbentuknya  gas  pada  tabung Durham  menunjukkan  air  perpipaan  di  Dusun  Mundukkunci,  Desa  Tegallinggah,  mengandung  bakteri. Bakteri tersebut mampu memfermentasi media Lactose Broth pada suhu 37 °C, menghasilkan gas CO 2. Beberapa  jenis  bakteri  yang  dapat  melakukan  aktivitas  tersebut  adalah  bakteri  Coliform ,  Enterobacter , Citrobacter , Klebsiella dan  bakteri  lain  yang  berasal  dari  tanah  dan  tumbuh-tumbuhan  yang  telah  mati. Dengan demikian, hasil penelitian tersebut belum dapat menjawab rumusan masalah dalam penelitian ini, sehingga perlu dilakukan pengujian pada tahap penegasan.
Pengujian pada tahap penegasan dilakukan untuk memastikan keberadaan bakteri coliform total dan coliform tinja dalam sampel air menggunakan media Briliant Green Lactose Bile Broth . Pada tahap ini, sampel  diinkubasi  pada  suhu  37  °C  selama  24  jam.  Adanya  gas  pada  tabung  Durham,  berarti  bahwa sampel mengandung bakteri coliform total. Untuk menguji adanya bakteri coliform tinja pada sampel, maka dilakukan langkah yang sama dengan tahap penegasan bakteri coliform total menggunakan media BGLB,
tetapi suhunya dinaikkan menjadi 44 °C selama 24 jam. Adanya gas pada tabung Durham menunjukkan bahwa air perpipaan tersebut positif mengandung bakteri coliform tinja. Hal ini disebabkan karena bakteri coliform  tinja  mampu  memfermentasi  media Brilliant  Green  Lactose  Bile  Broth pada  suhu  44  °C.  Pada proses fermentasi tersebut terjadi pemecahan glukosa yang terdapat pada media BGLB menjadi etanol dan gas CO 2 . Reaksi pembentukan gas CO 2 oleh bakteri coliform total dan coliform tinja dapat dituliskan sebagai berikut.
C 6 H 12 O 6  (aq) Coliform total  (37 ° C) 2 CO 2  (g) + 2 C 2 H 5 OH (aq)
C 6 H 12 O 6  (aq) Coliform tinja  (44 ° C) 2 CO 2  (g) + 2 C 2 H 5 OH (aq) Glukosa Etanol
Tabung yang positif menghasilkan gas CO 2 kemudian dibandingkan dengan Tabel MPN Metode 511 untuk menentukan nilai MPN nya.
Data pada Tabel 4 menunjukkan tentang hasil pengukuran parameter fisika dan kimia mencakup suhu,  bau,  rasa  dan  pH.  Suhu  air  sampel  berkisar  antara  26 ° C  –  27 ° C,  sehingga  tidak  mengganggu perkembang biakan bakteri, walaupun tidak pada suhu optimumnya sebesar 37 ° C. Kondisi air yang tidak berbau dan tidak berasa menunjukkan bahwa air tersebut memenuhi persyaratan etika untuk dipergunakan sebagai sumber air bersih. Berikutnya, pH air sebesar 7,0 juga menunjukkan bahwa air tersebut memenuhi kriteria standar air bersih menurut Peraturan Pemerintah RI Nomor 82 Tahun 2001 yang mengatur tentang kadar maksimal (pH) air, yaitu berkisar antara 6-9.
Data pada Tabel 2 menunjukkan bahwa air perpipaan di Dusun Mundukkunci, Desa Tegallinggah tergolong  baik  untuk  dimanfaatkan  sebagai  sumber  air  bersih,  karena  nilai  MPN  coliform  total  masih memenuhi standar mikrobiologi air bersih, yaitu sebesar 1000 (jumlah per 100 mL) berdasarkan Peraturan Pemerintah Republik Indonesia Nomor 82 Tahun 2001, tanggal 14 Desember 2001.
Berdasarkan data pada Tabel 3 menunjukkan bahwa nilai MPN untuk coliform tinja air pada mata air  dan  bak  penampungan  sebesar  240,  dimana  nilai  MPN  nya  melebihi  standar  kualitas  air  bersih berdasarkan Peraturan Pemerintah Republik Indonesia Nomor 82 Tahun 2001, tanggal 14 Desember 2001 yaitu  sebesar  100  (Jumlah  per  100  mL),  hal  ini  menunjukkan  bahwa  air  tersebut  tidak  layak  untuk dimanfaatkan langsung sebagai air minum, karena kemungkinan besar mata air tersebut mengalami intrusi oleh  air  sungai.  Walaupun  nilai  MPN  coliform  tinja  pada  distribusi  air  di  rumah-rumah  penduduk  yang berjarak ± 1 Km dan berjarak ± 2 Km dari bak penampungan secara berturut-turut sebesar 20 dan 96, menunjukkan bahwa air perpipaan tersebut layak untuk dijadikan sebagai sumber air bersih. Berdasarkan nilai  MPN  coliform  total  dan  coliform  tinja,  dimana  kecenderungan  nilai  MPN  nya  sama  pada  tahap penegasan,  menunjukkan  bahwa  kemungkinan  besar  pencemaran  coliform  total  pada  air  perpipaan tersebut disebabkan oleh bakteri coliform tinja.
Perbedaan nilai MPN coliform tinja pada distribusi air di rumah-rumah penduduk, kemungkinan disebabkan karena kadar oksigen di dalam air berkurang, sehingga nilai MPN pada saluran distribusi yang berjarak ± 1  Km  dari  bak  penampungan  nilainya  lebih  kecil,  sedangkan  pada  saluran  distribusi  yang berjarak ± 2 Km dari bak penampungan memiliki nilai MPN yang lebih besar, kemungkinan disebabkan berkurangnya kadar oksigen di dalam air menyebabkan bakteri aerobik berubah menjadi bakteri anaerobik fakultatif. Dimana pada kondisi tersebut bakteri mampu bertahan hidup dan dapat berkembang biak.
Berdasarkan  pembahasan  di  atas,  adanya  bakteri  coliform  tinja  pada  mata  air  dan  bak penampungan yang digunakan untuk air perpipaan di Dusun Mundukkunci, Desa Tegallinggah berada di atas kadar maksimum dan air yang berada pada saluran distribusi yang berjarak ± 1 Km  dan ± 2 Km dari bak  penampungan  berada  di  bawah  kadar  maksimum.  Hal  ini  mengindikasikan  bahwa  air  perpipaan tersebut dapat dijadikan sebagai sumber air bersih tetapi tidak dapat dijadikan sebagai sumber air minum, menurut Peraturan Pemerintah Republik Indonesia Nomor 82 Tahun 2001, tanggal 14 Desember 2001. Supaya air perpipaan tersebut dapat dimanfaatkan sebagai air minum maka perlu dilakukan pengolahan terlebih  dahulu,  misalnya  dengan  penambahan  desinfektan  pada  bak  penampungan,  seperti  klor  dan kaporit untuk mendesinfeksi bakteri tersebut atau dengan jalan mendidihkannya untuk membunuh bakteri yang ada dalam air tersebut.

## 4. Simpulan
Berdasarkan hasil penelitian dan pembahasan didepan, dapat ditarik simpulan sebagai berikut.
1.  Air perpipaan di Dusun Mundukunci, Desa Tegallinggah mengandung bakteri coliform total dan coliform tinja.
2.  Kualitas mikrobiologi air perpipaan di Dusun Mundukkunci, Desa Tegallinggah ditinjau dari nilai MPN coliform total tergolong baik karena tidak melebihi kadar maksimum air bersih sebesar 1000 (Jumlah per 100 mL) dan nilai MPN coliform tinja pada mata air dan bak penampungan tergolong tidak baik karena nilai MPN nya sebesar 240, yang melebihi kadar maksimum air bersih sebesar 100 (Jumlah per 100 mL), bahkan nilai MPN nya sama, antara coliform total dan coliform tinja. Kemungkinan besar seluruh bakteri yang ada di air perpipaan tersebut adalah bakteri coliform tinja, sehingga tidak layak dikonsumsi langsung. Walaupun pada saluran distribusi nilai MPN nya tergolong baik yaitu sebesar 20 dan  96.  Hal  ini  sesuai  dengan  Peraturan  Pemerintah  Republik  Indonesia  Nomor  82  Tahun  2001, tanggal 14 Desember 2001.

## DAFTAR PUSTAKA
Alaerts, G. dan Sri Sumestri Santika. 1984. Metode Penelitian Air . Surabaya: Usaha Nasional Anonim.  1991. Petunjuk  Pemeriksaan  Bakteriologi  Air .  Jakarta:  Departemen  Kesehatan  RI  Pusat Laboratorium Kesehatan.
Darmono. 2001. Lingkungan Hidup dan Pencemaran . Jakarta: Universitas Indonesia.
Kusnadi. 2003. Common Text Book Microbiologi . Bandung: Universitas Pendidikan Indonesia. Mahayanti,  M.R.  2006. Analisis  Kualitas  Mikrobiologi  Air  Perpipaan  di  Dusun Lebah  Siung  Desa  Panji Anom . Skripsi. Singaraja: IKIP N Singaraja.
Pelczar, Michael J. Dan E.C.S. Chan. 2005. Dasar-Dasar Mikrobiologi . Jakarta: UI Press Pemerintah  Republik  Indonesia.  2001. Peraturan  Pemerintah  RI  Nomor  82  Tahun  2001,  Tanggal  14 Desember  2001  tentang  Pengelolaan  Kualitas  Air  dan  Pengendalian  Pencemaran  Air .  Jakarta: Proyek Penyediaan dan Pengawasan Air Bersih Sutrisno, T. 1991. Teknologi Penyediaan Air Bersih . Jakarta: Rineka Cipta.