## DAYA HAMBAT PERTUMBUHAN Candida albicans DAN DAYA BUNUH
Candida albicans EKSTRAK DAUN KEMANGI ( Ocimum sanctum l.)

## GROWTH INHIBITION OF Candida albicans AND POWER KILL Candida albicans EXTRACT BASIL LEAVE
Antonius Komang De Ornay, Herlambang Prehananto, Amalia Sekar Shintya Dewi
Info Artikel Abstrak
Latar  Belakang: Candida  albicans merupakan  mikroorganisme  dalam  rongga mulut yang akan bersifat patogen ketika jumlahnya berlebih di dalam tubuh. Salah satu  tanaman  tradisional  yang  bersifat  antifungi  yaitu  daun  kemangi  ( Ocimum sanctum L.). Daun kemangi memiliki kandungan yaitu flavonoid (0,08%), minyak atsiri (1,76%), alkaloid (4,05%), tanin (2,17%) dan eugenol (0,31%) yang mampu menghambat  pertumbuhan  serta  membunuh Candida  albicans . Tujuan: Mengetahui  efektivitas  ekstrak  daun  kemangi  ( Ocimum  sanctum L.)  dalam menghambat pertumbuhan dan membunuh Candida albicans . Metode: Penelitian ini  menggunakan rancangan  penelitian post only grup design dengan 5 perlakuan ekstrak  1  kontrol  negatif  dan  1  kontrol  positif.  Daun  kemangi  dimaserasi  dengan etanol  96%  kemudian  dibuat  5  konsentrasi  yaitu  100%;  50%;  25%;  12,5%;  dan 6,25%. Suspensi Candida albicans yang telah diinkubasi dengan campuran ekstrak selama  18-24  jam  kemudian  ditanam  pada  media  SDA.  Jumlah  koloni  yang tumbuh dihitung dengan colony counter . Data dianalisis dengan One Way Anova dan  dilanjutkan  dengan  uji Least  Significant  Difference (LSD). Hasil: Ekstrak daun kemangi dapat menghambat pertumbuhan Candida albicans pada konsentrasi 12,5%  dan  dapat  membunuh Candida  albicans pada  konsentrasi  25%.  S impulan dan  saran: Ekstrak  daun  kemangi  ( Ocimum  sanctum L.)  dapat  menghambat pertumbuhan  dan  dapat  membunuh Candida  albicans .  Penelitian  lebih  lanjut sebaiknya dilakukan untuk mengetahui uji toksisitas ekstrak daun kemangi.
Sejarah Artikel : Diterima: 26 Januari 2017 Disetujui: 1 Juni 2017 Dipublikasikan: 16 Juni 2016

## Kata Kunci:
Daya hambat, daya bunuh, ekstrak
Keywords: Growth Inhibition, Power Kill, Extract

## Abstract
Background: Candida  albicans  are  microorganisms  in  the  oral  cavity  which would be pathogenic when excessive amounts in the body. One of the traditional crops that are antifungal namely basil (Ocimum sanctum L.). Basil leaves contain flavonoid (0.08%), essential oils (1.76%), alkaloids (4.05%), tannin (2.17%) and eugenol  (0.31%)  were  able  to  inhibit  the  growth  and  kill  Candida  albicans. Objective: To  determine  the  effectiveness  of  extracts  of  basil  (Ocimum  sanctum L.)  in  inhibiting  the  growth  of  and  kill  Candida  albicans. Methods: This  study used  only  a  post  research  design  group  design  with  5  treatments  extract  one negative  control  and  one  positive  control.  Basil  leaves  macerated  with  96% ethanol  and  then  made  5  concentration  that  is  100%;  50%;  25%;  12.5%;  and 6.25%.  Candida  albicans  suspension  that  has  been  incubated  with  a  mixture  of extract  for  18-24  hours  and  then  planted  in  the  media  SDA.  The  number  of colonies that grew were calculated by colony counter. The data analyzed by One Way  Anova  and  continued  by  Least  Significant  Difference  (LSD). Results: The extract  of  leaves  of  basil  can  inhibit  the  growth  of  Candida  albicans  at  a concentration of 12.5% and can kill Candida albicans at a concentration of 25%. Conclusion and suggestions : The extract of leaves of basil (Ocimum sanctum L.) can inhibit the growth and can kill Candida albicans. Further research should be done to determine the toxicity test of basil leaf extract.
Antonius Komang | Daya Hambat Pertumbuhan Candida ….. Jurnal Wiyata, Vol. 4 No. 1 Tahun 2017

## PENDAHULUAN
Candida albicans merupakan mikroorganisme  normal  dalam  rongga mulut  yang  bersifat  lokal. Candida albicans sangat  berperan  terhadap  50% dari  seluruh  infeksi  jamur  akibat  genus Candida 1 . Saat  kondisi  imun  tubuh manusia  turun Candida  albicans akan menyebabkan  kandidiasis.  Kandidiasis merupakan  suatu  penyakit  yang  dapat menginfeksi bagian lipatan kulit ( intertriginosa ),  vagina  ( vulvovaginitis ), bagian  dalam  rongga  mulut  ( thrush ),  dan kuku ( paronikia ) 2,3 .
Salah  satu  pencegahan  kandidiasis dengan  pemberian  antifungi.  Antifungi merupakan bahan yang dapat mengganggu pertumbuhan  dan  metabolisme  jamur. Bahan  antifungi  yang  ideal  harus  bersifat membunuh jamur ( fungisid ) dan menghambat pertumbuhan
jamur
(fungistatik) 4 .
Salah  satu  tanaman  yang  bersifat antifungi  yaitu  daun  kemangi  ( Ocimum sanctum L.).  Daun  kemangi  ( Ocimum sanctum L.)  merupakan  tanaman  yang mudah didapatkan tersebar hampir diseluruh  Indonesia  karena  dapat  tumbuh liar maupun dibudidayakan. Daun kemangi memiliki  senyawa  aktif  seperti minyak  atsiri  (2%),  alkaloid  (1%), saponin,  flavonoid  (2%),  triterpenoid (2%), steroid  (2%), tanin (4,6%), eugenol (62%), dan fenol 5,6 .
Prevalensi  terjadinya  kandidiasis sebesar 20-75% pada manusia sehat tanpa gejala. Sedangkan kandidiasis pada penyakit sistemik menyebabkan
peningkatan  angka  kematian  sebesar  71- 79% 2 .  Oleh  karena  tingginya  angka
tersebut,  maka  perlu  dilakukan  terapi untuk penyakit tersebut dan yang menjadi pertimbangan  lainnya,  karena  belum banyaknya  penelitian  mengenai  daya hambat dan daya bunuh dari ekstrak daun kemangi ( Ocimum sanctum L. ). Penelitian ini  mencoba  meneliti  daya  hambat  dan daya  bunuh  ekstrak  daun  kemangi ( Ocimum sanctum L.) terhadap pertumbuhan Candida  albicans dengan konsentrasi  100%,  50%,  25%,  12,5%, 6,25%  menggunakan  metode  ekstrasi maserasi,  dengan  konsentrasi  pelarut etanol 96%.

## METODE PENELITIAN
Desain  penelitian  yang  dilakukan adalah eksperimental laboratoris.
Penelitian  ini  menggunakan  jenis post only  grup  design. Sampel  penelitian berupa  ekstrak  daun  kemangi  ( Ocimum sanctum L.)  dengan  konsentrasi  100%,
50%,  25%,  12,5%,  6,25%,  serta  koloni Candida albicans . Daun kemangi ( Ocimum sanctum L . ) sebanyak 500 gram dicuci  sampai  bersih,  kemudian  ditiriskan dan  diangin-anginkan  hingga  kering. Daun  yang  sudah  kering  kemudian dihaluskan  dengan  blender.  Serbuk  daun kemangi  dimaserasi  menggunakan  etanol 96%  sebanyak  100  ml  selama  24  jam 7 . Hasil  maserasi  disaring  menggunakan kertas  saring  dan  didapat  maserat  setelah itu  diuapkan  dengan rotary  evaporator dengan  kecepatan  5-240  rpm  pada  suhu 40-50 o C  selama  5-8  putaran 7 hingga didapat  ekstrak  dalam  bentuk  cairan  daun kemangi.
Sediakan  tabung  steril  kemudian ditandai  no.  1  sampai  no.  5.  Tiap  tabung memiliki  konsentrasi  yang  berbeda  yaitu
Antonius Komang | Daya Hambat Pertumbuhan Candida ….. Jurnal Wiyata, Vol. 4 No. 1 Tahun 2017
100%, 50%, 25%, 12,5%, dan 6,25% yang nantinya  akan  diencerkan  sebanyak  5  ml. Pembuatan  ekstrak  daun  kemangi  100% yaitu  dengan  mengisi  tabung  1  dengan ekstrak  murni  daun  kemangi  sebanyak  10 ml,  kemudian    pada  tabung  2-4    masing- masing  diisi  5  ml  media Broth .  Tabung  2 ditambahkan  5  ml  ekstrak  dari  tabung  1, kemudian dicampur dan seterusnya sampai tabung 5. Identifikasi dilakukan menggunakan Germinating  Tube  Test .
Hasil  yang  didapat  berupa  gambaran pseudohifa yang  menunjukkan  bahwa
Candida yang dikultur merupakan
Candida  albicans. Pembuatan  suspensi Candida  albicans dilakukan  pada  media SDB  dalam  tabung  reaksi.  Pembuatan larutan  suspensi  jamur  dilakukan  dengan menggunakan larutan Standart Mc Farland. Tabung 1-5 ditambahkan Candida  albicans yang  sudah  homogen dengan Mc.  Farland 0,5  (1,5  x  10 8 ) sebanyak 0,1 ml.
Inkubasi  dilakukan  selama 18-24 jam dengan  suhu  37°C.  Tabung  dikeluarkan dari inkubator. Tabung no. 1-5 ditentukan KHM  dan  KBM.  KHM  dan  KBM  dapat dilihat  apabila  pertumbuhan  koloni  dalam media    berkurang  atau  menurun    pada konsentrasi  ekstrak.  Ambil  1 osse dari setiap tabung dan ditanam di media SDA . Memasukkan petri dish ke dalam inkubator dan  diinkubasi  selama  24  jam pada suhu 37 0 C. Keluarkan perti dish dari inkubator. Jumlah  koloni  pada  masing- masing  plate  dihitung  dengan Colony counter . Colony  counter dapat  digunakan dengan  menyambungkan  dengan  stop kontak,  tombol ON ditekan,  petridish ditaruh diatas kaca hitung Colony counter
dalam posisi  terbalik, tekan tombol resert untuk  mengkondisikan  dalam  posisi  nol (0),  kemudian  koloni  jamur  dihitung dengan  cara  menekan  koloni  dengan ujung pensil. Jika terlalu dalam,
menghitung koloni jamur dilakukan dengan  menekan  tombol average 1  kali untuk  mengurangi  tekanan,  kemudian tekan  tombol resert untuk  mengurangi sejumlah  nilai,  dan  dilanjutkan  dengan menghitung jumlah koloni.
Data yang diperoleh kemudian dianalisis  dengan One  Way  Anova dan dilanjutkan  dengan  uji Least  Significant Difference (LSD).

## HASIL PENELITIAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  daya hambat  dan  daya  bunuh  ekstrak  daun kemangi  ( Ocimum  Sanctum  L .)  terhadap pertumbuhan candida albicans didapatkan hasil sebagai berikut :
Tabel 1.   Hasil pengukuran daya hambat  dan  daya  bunuh ekstrak daun kemangi Kelompok Rata-rata Standar Deviasi 100% 0 0 50% 0 0 25% 0 0 12,5% 6 2 6,25% 18 2 Positif 0 0 Negatif 114 2 Berdasarkan hasil di atas, konsentrasi  ekstrak  daun  kemangi  100%,
50%,  dan  25%,  tidak  ditemukan  adanya
Candida albicans . Namun, pada
konsentrasi  12,5%  ditemukan  jumlah Candida  albicans rata-rata  sebesar  6 CFU/ml  dan  pada  konsentrasi  6,25% ditemukan  jumlah Candida  albicans rata- rata sebesar 18 CFU/ml.  Jumlah Candida
Antonius Komang | Daya Hambat Pertumbuhan Candida ….. Jurnal Wiyata, Vol. 4 No. 1 Tahun 2017
albicans pada  kontrol  positif  adalah  rata- rata  sebesar  114  CFU/ml.  Uji  statistika yang digunakan adalah uji Anova. Asumsi dalam  uji  Anova  adalah  data  harus terdistribusi  normal  dan  varian  data homogen.
Uji  normalitas  data  dilakukan dengan  menggunakan  uji Shapiro  wilk . Kesimpulan  dari  hasil  uji Shapiro  Wilk adalah  daya  hambat  dan  daya  bunuh konsentrasi Ekstrak daun kemangi 12.5%, Ekstrak  daun  kemangi  6.25%  dan  kontrol positif  telah  berdistribusi  normal  karena setiap  kelompok  perlakuan  memiliki  nilai signifikansi  lebih  besar  dari  tingkat kesalahan  penelitian  (α)  yang  digunakan yaitu sebesar 5% (p= 0.05).
Uji  asumsi  yang  di  lakukan selanjutnya  adalah  uji  homogen  varian dengan  menggunakan  uji Levene’s  Test . Hasil uji Levene’s Test menghasilkan nilai siginifikansi  p=  0.061,  dengan  nilai tersebut  dapat  ditarik  kesimpulan  bahwa
varian  data  antar  kelompok  perlakuan adalah  homogen  karena  memiliki  nilai siginifikansi lebih besar dari p= 0.05.
Setelah  kedua  asumsi  tersebut telah terpenuhi, maka uji One Way Anova dapat  di  lakukan.  Hasil  uji One  Way Anova menghasilkan  nilai  signifikansi sebesar  p=  0.000.  Dengan  nilai  ini,  maka dapat  ditarik  suatu  kesimpulan  bahwa terdapat  perbedaan  daya  bunuh  atau  daya hambat dari 7 kelompok perlakuan.
Untuk  melihat  letak  perbedaan, maka pengujian dilanjutkan dengan melakukan  uji Least  Significant  Different (LSD) dengan hasil disajikan dalam Tabel 2. Berdasarkan Tabel 2, kelompok ekstrak daun kemangi 100%, 50%, 25%, memiliki daya  bunuh Candida  albicans yang  sama (adanya  nilai sig. lebih  dari  p=0,05).
Sedangkan pada kelompok 12.5%, memiliki  daya  bunuh  dan  daya  hambat yang berbeda dengan kelompok perlakukan lainnya.
Tabel 2.   Uji Least Significant Different (LSD)  pertumbuhan candida albicans dan daya  bunuh Candida  albicans ekstrak  daun  kemangi  ( Ocimum  sanctum L.)
100% 50% 25% 12,5% 6,25% Negatif Positif 100% - 1.00 1.00 0.00 0.00 1.00 0.00 50% 1.00 - 1.00 0.00 0.00 1.00 0.00 25% 1.00 1.00 - 0.00 0.00 1.00 0.00 12,5% 0.00 0.00 0.00 - 0.00 0.00 0.00 6,25% 0.00 0.000 0.00 - 0.00 0.00 0.00 Negatif 1.00 1.00 1.00 0.00 0.00 - 0.00 Positif 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 -

## PEMBAHASAN
Ekstrak  daun  kemangi  ( Ocimum sanctum L .) dapat menghambat pertumbuhan Candida  albicans pada konsentrasi 12,5% dan membunuh Candida  albicans pada  konsentrasi  25%.
Ekstrak  daun  kemangi  ( Ocimum  sanctum
L.) memiliki kandungan flavonoid
Antonius Komang | Daya Hambat Pertumbuhan Candida ….. Jurnal Wiyata, Vol. 4 No. 1 Tahun 2017
(0,08%),  minyak  atsiri  (1,76%),  alkaloid (4,05%), tanin (2,17%)  dan eugenol (0,31%) 2 . Aktivitas  antijamur  minyak  atsiri tergantung
pada komposisi dan konsentrasi  minyak  atsiri  juga  pada  tipe dan  banyaknya  mikroorganisme  target. Minyak  atsiri  dapat  mengganggu  proses terbentuknya  membran  sel  jamur.  dan dinding sel jamur, sehingga membran dan dinding  sel  jamur  tidak  terbentuk  secara sempurna 8,9 . Flavonoid juga bersifat antioksidan. Flavonoid dapat menghambat sintesis asam nukleat, menghambat fungsi membran  sitoplasma,  dan  menghambat metabolisme  energi sel 10 .  Flavonoid merupakan  senyawa  kelompok  fenol. Fenol  dapat  menghambat  aktivitas  jamur dengan cara menghambat proses pembentukan  dinding  sel  jamur  maupun dengan  cara  melisiskan  dinding  sel  yang sudah terbentuk 11 .
Alkaloid mempunyai aktivitas antijamur  dengan  menghambat  proliferasi pembentukan  protein,  serta  respirasi  pada sel  yang  dapat  mengakibatkan  kematian jamur. Alkaloid dapat merusak  komponen penyusun  peptidoglikan  pada  dinding  sel sehingga komponen tersebut tidak terbentuk  utuh.  Alkaloid  membentuk lubang  atau  saluran  yang  menyebabkan membran  sel  bocor  dan  kehilangan beberapa  bahan  intrasel  seperti  elektrolit (terutama  senyawa  kalium)  dan  molekul- molekul lainnya. Hal ini dapat mengakibatkan  kerusakan  dan  kematian tetap pada sel jamur 12 . Aktifitas tanin mampu
menyebabkan  pengerutan  dinding  sel jamur,  sehingga  akibatnya  aktivitas  hidup
sel  terganggu,  pertumbuhannya  terhambat bahkan pada dosis tertentu dapat menyebabkan  kematian  jamur.  Turunan fenol salah  satunya eugenol berinteraksi dengan  sel  bakteri  melalui  proses  absobsi yang  melibatkan  ikatan  hidrogen.  Pada kadar  rendah  terbentuk  kompleks  protein fenol dengan  ikatan  yang  lemah  dan segera  mengalami  penguraian,  diikuti penetrasi ke dalam sel  dan menyebabkan presipitasi serta denaturasi protein 13 .
Semakin  besar  konsentrasi  ekstrak yang  diberikan  maka  semakin  besar  pula daya  bunuh  yang  terbentuk,  karena semakin  banyak  konsentrasi  komponen bioaktif  yang  terkandung  di  dalam ekstrak.  Efektivitas  suatu  zat  antimikroba dipengaruhi  oleh  konsentrasi  zat  yang diberikan. Meningkatnya konsentrasi ekstrak mengakibatkan tingginya kandungan  bahan  aktif  yang  berfungsi sebagai antimikroba sehingga kemampuan untuk  membunuh  pertumbuhan  mikroba juga semakin besar 14 .

## SIMPULAN
Ekstrak  daun  kemangi  ( Ocimum sanctum L.) dapat menghambat pertumbuhan Candida  albicans pada konsentrasi  12,5%  dan  dapat  membunuh Candida albicans pada konsentrasi 25%.

## SARAN
Perlu  dilakukan  penelitian  lebih lanjut  untuk  mengetahui  uji  toksisitas ekstrak  daun  kemangi  ( Ocimum  sanctum L.)  dan  untuk  membuat  sediaan  daun kemangi  ( Ocimum  sanctum L.)  yang dilakukan secara in vivo dengan menggunakan hewan coba.
Antonius Komang | Daya Hambat Pertumbuhan Candida ….. Jurnal Wiyata, Vol. 4 No. 1 Tahun 2017

## REFERENSI
1. Williams dan Wilkins. 1994. Microbiology  and  Immunology .  Alih bahasa: Dr. Yulius E.S. Jakarta: Binarupa Aksara. p.183.
2. Alfiah,  R,  Khotimah,  S.,  dan  Turnip,  M. 2015.  Efektivitas  Ekstrak  Metanol  Daun Sembung  Rambat  ( Mikania  micrantha Kunth)  terhadap  Pertumbuhan  Jamur Candida  albicans . Journal  Protobiont . 4(1): p.52-57.
3. Kusuma,  A.  L.  2014.  Hubungan  Kadar Cd4  dengan  Kejadian  Kandidiasis  Oral pada  Penderita  HIV/AIDS  di  RSUD Moewardi  Surakarta. Naskah  Publikasi . Fakultas  Kedokteran  Gigi,  Universitas Muhamadiyah.
4. Febriani,  T.H.  2014.  Uji  Daya  Antifungi
Jus  Buah  Pare  ( Momordicacharantia L.) terhadap  Daya  Hambat  Pertumbuhan Candida albicans secara In Vitro. Naskah Publikasi .  Fakultas  Kedokteran  Gigi. Universitas Muhamadiyah .
5. Angelina, M., Turnip, M., dan Khotimah, S. 2015. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol  Daun  Kemangi  ( Ocimum  sanctum
L.) terhadap Pertumbuhan Bakteri Escherichia  coli dan Staphylococcus aureus.  Journal  Protobiont .  4(1):  p.184- 189.
6. Lutfiyah, I. 2014. Pengaruh Ekstrak Daun
Kemangi  terhadap  Pertumbuhan Candida albicans serta  Pemanfaatannya  sebagai Bahan  Ajar  dalam  Pembelajaran  Biologi Siswa  SMA. Naskah  Publikasi .  Fakultas Pendidikan Matematika dan Ilmu
Pengetahuan  Alam,  Universitas  PGRI Semarang.
7. Candrasari,  A.,  Romas,  M.A.,  Hasbi,  M., dan  Astuti,  O.R.  2012.  Uji  Daya Antimikroba  Ekstrak  Etanol  Daun  Sirih
Merah  ( Piper  Crocatum Ruiz  &  Pav.) terhadap  Pertumbuhan Staphylococcus
Aureus atcc  6538, Eschericia  Coli atcc 11229  dan Candida  albicans atcc  10231 secara in vitro. Jurnal Biomedika Fakultas Kedokteran  Universitas  Muhammadiyah Surakarta . 4(1): p.9-16.
8. Ajizah,  A.  2004.  Sensitivitas Salmonella tyhimurium terhadap Ekstrak Daun Psidium  guajava L . Journal  Bioscientiae .
1(1): p.34-45.
9. Kan,Y.,  Uçan,  U.S.,  Kartal,  M.,  Altun, M.L., Aslan, S., Sayar, E., dan Ceyhan, T. 2006. Analysis and  Antibacterial Activity of  Cultivated Satureja  cuneifolia Ten. Essential  Oil. Turkey  Journal  Chemitry
3(2): p.253–259.
10. Yuhana,  S.  A.,  Kusdarwati,  R.,  &  Meles, D.  K.  2011.  Daya  Antibakteri  Ekstrak Daun  Kemangi  ( Ocimum  Sanctum  L. ) terhadap  Bakteri Streptococcus  iniae secara In  Vitro . Jurnal  Ilmiah  Perikanan dan Kelautan. 4(3). p.122-123.
11. Ardo.,  S.  2005.  Aktivitas  Antibakteri Flavonoid  Propolis Trigona  sp terhadap Bakteri Streptococcus  mutans (in  vitro). Muhammadiyah  Journal  of  Nurshing .
5(1): p.32-38.
12. Mycek,  M.J.,  Harvey,  R.A.,  Champe, P.C., dan Fisher, B.D. 2001. Farmakologi Ulasan Bergambar : Obat-obat Antijamur .
Edisi 2. Jakarta: Widya Medika. p. 341-7.
13. Juliantina,  F.  R.,  dan  Nurmasitoh , T.
2011.  Manfaat  Sirih  Merah  ( Piper crocatum )  sebagai  agen  anti  bakterial terhadap  Bakteri  Gram  Positif  dan  Gram
Negatif . Jurnal Kedokteran dan Kesehatan Indonesia . 7(1): p.121-126.
14. Brooks, G. F., Carroll, K. C., Butel, J. S.,
Morse,  S.  A.,  dan  Mietzner,  T.  A.  2007. Jawetz, and Adelberg’s Medical Microbiology. 24 th Ed.  New  York:  Mc Graw hill Comp p.218.