Efek  Imunomodulator  Ekstrak  Etanol  Herba  Krokot  ( Portulaca  olerace a L.)  terhadap  Tikus  Putih (Rattus  norvegicus )  Jantan  dengan  Parameter Delayed Type Hypersensitivity (DTH)
( Effect  of  Immunomodulator  of  Purslane  Herb  Ethanol  (Portulaca  oleracea  L.)  on  Rat (Rattus norvegicus) with Delayed Type Hypersensitivity (DTH) Parameter )
Bayu Putra 1* , Rizqi Nur Azizah 1 , Eka Maryam Nopriyanti 1
1* Fakultas Farmasi, Universitas Muslim Indonesia, Makassar, Indonesia. E-mail: bayu.putra@umi.ac.id
Article Info: Received: 0 1 November 2019 in revised form: 01 November 2019 Accepted: 14 Desember 2019
Available Online: 02 Maret 2020

## ABSTRACT
Portulaca oleracea L. is one of the plants empirically used as medicine and contains  flavonoid  compounds  assumed  to  have  an  immunomodulatory effect.  The  research  aimed  to  determine  the  immunomodulatory  effect  of ethanol extract of Portulaca oleracea L  by Delayed Type Hypersensitivity parameter. The research used 20 male rats ( Rattus norvegicus ) divided into 5 groups where each group consisted of 4. Group I as a normal group (without treatment),  group  II  (NaCMC  control),  group  III,  IV  and  V  (treatment groups)  were  given  EEHK  with  doses  of  100  mg/kg  BW,  200  mg/kg  BW, and 400 mg/kg BW doses. The dosage form was orally given for 7 days. On day 3, the rats were induced with SDMD antigen 10% v/v by intraperitonial and  intraplantar  on  day  7.  The  observations  were  conducted  by  measuring the  volume change of the rat's feet at the 4th, 24th, and 48th  hours  using a pletismometer. The research data obtained were statistically processed using Paired  Samples  T  Test,  One-Way  Anova  and  Post  Hoc  LSD  tests.  The results of the research showed that the ethanol extract of common purslane was effective as an immunomodulator.
Keywords : Portulaca oleracea L.
Immunomodulators Delayed Type Hypersensitivity (DTH)
Corresponding Author: Bayu Putra
Jurusan Farmasi Fakultas Farmasi
Universitas Muslim Indonesia
Makassar
90231
Indonesia email: bayu.putra@umi.ac.id
Copyright © 2019 JFG-UNTAD
This open access article is distributed under a Creative Commons Attribution (CC-BY-NC-SA) 4.0 International license.
How to cite (APA 6 th Style):
Putra, B., Azizah, R. N., Nopriyanti, E. M. (2020). Efek Imunomodulator Ekstrak Etanol Herba Krokot ( Portulaca oleracea L.) terhadap Tikus Putih ( Rattus norvegicus ) Jantan dengan Parameter Delayed Type Hypersensitivity (DTH). Jurnal Farmasi Galenika :Galenika Journal of Pharmacy (e-Journal), 6 (1), 20-25. doi:10.22487/j24428744.2020.v6.i1.14106
Jurnal Farmasi Galenika ( Galenika Journal of Pharmacy ) (e-Journal) 2020; 6 (1): 20 – 25 ISSN : 2442-8744 (electronic); 2442-7284 (printed) Journal Homepage: https://bestjournal.untad.ac.id/index.php/Galenika DOI: 10.22487/j24428744.2020.v6.i1.14106

## ABSTRAK
Herba  krokot  ( Portulaca  oleracea L.)  merupakan  salah  satu  tanaman  yang  secara  empiris  digunakan  sebagai obat  serta  mengandung  senyawa  flavonoid  yang  diduga  dapat  memberikan  efek  sebagai  imunomodulator. Penelitian  ini  bertujuan  untuk  membuktikan  efek  imunomodulator  ekstrak  etanol  herba  krokot  (Portulaca oleracea L.) dengan parameter Delayed Type Hypersensitivity . Penelitian ini menggunakan 20 ekor tikus ( Rattus norvegicus )  jantan  yang  dibagi  menjadi  5  kelompok.  Setiap  kelompok  terdiri  dari  4  ekor  tikus.  Kelompok  I sebagai kelompok normal (tanpa perlakuan), kelompok II (kontrol NaCMC), kelompok III, IV dan V (kelompok perlakuan)  yang  diberi  EEHK  dengan  dosis  masing-masing  100  mg/kgBB,200  mg/kgBB,  dan  400  mg/kgBB. Pemberian  sediaan  uji  diberikan  secara  oral  selama  7  hari.  Pada  hari  ke-3  hewan  uji  diinduksi  dengan  antigen SDMD 10% v/v secara intraperitonial dan intraplantar pada hari ke-7. Pengamatan dilakukan dengan mengukur perubahan volume kaki tikus pada jam ke-4, ke-24 dan ke-48 menggunakan pletismometer. Data penelitian yang diperoleh diolah secara statistik  menggunakan  uji Paired Samples T Test, One-Way Anova dan Post Hoc LSD . Berdasarkan hasil penelitian dapat ditarik kesimpulan bahwa Ekstrak Etanol Herba Krokot ( Portulaca oleracea L.) efektif sebagai imunomodulator.
Kata  kunci:  Herba  Krokot  ( Portulaca  oleracea L.),  Imunomodulator, Delayed  Type  Hypersensitivity (DTH).

## PENDAHULUAN
Respon imun  tubuh tergantung  pada  kemampuan  komponen sistem  imun  dalam  mengenali  zat asing serta  membangkitkan  dan  melakukan  reaksi  yang  tepat  dalam  mengeliminasi  zat  asing  tersebut (Antari, 2017).
Sistem kekebalan tubuh manusia terbagi menjadi dua yaitu sistem kekebalan tubuh spesifik dan non- spesifik  yang  berfungsi  melindungi  tubuh  dari  paparan  zat  asing  yang  dapat  menimbulkan  suatu penyakit  bagi  tubuh.  Sistem  kekebalan  tubuh  non-spesifik  dapat  mendeteksi  adanya  benda  asing sehingga melindungi tubuh dari kerusakan yang diakibatkan, tetapi tidak dapat mengenali benda asing tersebut,  seperti  kulit,  kelenjar  keringat,  air  mata,  rambut  pada  lubang  hidung.  Sedangkan  sistem kekebalan  tubuh  spesifik  dapat  menghancurkan  zat  asing  yang  berhasil  melewati  sistem  kekebalan tubuh non-spesifik, meliputi imunitas humoral (limfosit B) dan imunitas seluler (limfosit T) (Sri Harti, 2013).
Apabila  keadaan  dimana  fungsi  dan  jumlah  sel  imun  kurang  memadai,  salah  satu  upaya  untuk meningkatkannya  adalah  dengan  pemberian  imunomodulator  menjadi  sangat  efektif  (Kusmardi  & Enif,  2007).  Imunomodulator  adalah  zat  yang  dapat  memodulasi  (mengubah  atau  mempengaruhi) sistem  imun  tubuh  menjadi  ke  arah  normal  (Praworo,  2011).  Beberapa  senyawa  alam  memiliki kemampuan dapat meningkatkan aktivitas sistem imun yaitu golongan flavanoid, kurkumin, limonoid, vitamin C, vitamin E dan katekin (Devagaran & Diantini, 2012).
Tanaman  herba  krokot  ( Portulaca  olerace L.)  merupakan  salah  satu  dari  tanaman  yang  digunakan sebagai pengobatan. Herba krokot telah banyak digunakan oleh masyarakat  sebagai obat tradisional diantaranya  obat  penurun  panas,  antiseptik,  vermifuge.  Disamping  itu  beberapa  penelitian menunjukkan  berbagai  efek  farmakologi,  termasuk  antibakteri,  antiulcerogenik,  anti-inflamasi, antioksidan, dan penyembuhan luka (Zhou e t al., 2015). Pada penilitian Devagaran & Diantini (2012) menunjukkan bahwa antara senyawa yang memiliki kemampuan dapat meningkatkan aktivitas sistem imun  adalah  golongan  flavonoid,  kurkumin,  limonoid,  vitamin  C,  vitamin  E  dan  katekin.  Menurut Zhou et al. , (2015) berbagai macam senyawa telah diisolasi dari tanaman krokot ( Portulaca oleracea L.)  seperti  flavonoid,  alkaloid,  polisakarida,  asam  lemak,  terpenoid,  sterol,  protein,  vitamin  dan mineral. Tanaman krokot juga menyediakan sumber manfaat nutrisi karena kaya asam lemak omega-3 dan sifat antioksidan.
Hasil  penelitian  uji  efek  antiinflamasi  yang  dilakukan  Andayani et  al., (2018)  menunjukkan  bahwa ekstrak  etanol  herba  krokot  memiliki  efek  antiinflamasi  pada  udem  kaki  tikus  jantan  dengan  besar daya antiinflamasi dimana dosis efektif adalah 400 mg yaitu 30,20 %.

## METODE PENELITIAN

## Alat dan Bahan
Alat-alat  yang  digunakan  adalah batang  pengaduk,  cawan  porselin,  gelas  arloji, gelas  kimia  (pyrex), gelas  ukur  (pyrex),  kanula,  mikropipet  (uawei),  pletismometer  (panlab),  sendok  tanduk, sentrifuge , seperangkat  alat  maserasi,  timbangan  analitik  (ohaus),  dan    timbangan  hewan  (ohaus),  dan  vial. Bahan-bahan  yang  digunakan  adalah  air  suling,  aluminium  foil,  ekstrak  herba  krokot  ( Portulaca oleracea L.),  etanol  96%,  larutan  PBS  ( Phospat  Buffered  Saline) pH  7,2,  sel  darah  merah  domba (SDMD)  10%  v/v,  NaCl  0,9%,  Na  CMC  1%  b/v,  spoit  1  mL  dan  3  mL  ( disposable  syringe ),  dan tabung eppendorf .
Metode

## Pembuatan ekstrak Herba krokot (Portulaca oleracea L.)
Serbuk simplisia herba krokot ( Portulaca oleracea L.) ditimbang sebanyak 500 gram dan dimasukkan ke  dalam  wadah.  Serbuk  direndam  dengan  pelarut  etanol  96%  selama  1  x  24  jam  pada  suhu  kamar. Pengadukan  dilakukan  sesekali  selama  6  jam  kemudian  didiamkan  selama  18  jam.  Setelah  proses maserasi selesai kemudian dilakukan penyaringan sehingga didapatkan filtrat dan residu, residu yang didapat  dimaserasi  kembali  dengan  pelarut  yang  baru  dan  didiamkan  kembali  selama  24  jam.  Hasil filtrat dari maserasi pertama dicampur dengan hasil filtrat maserasi kedua kemudian diuapkan dengan menggunakan Rotary Evaporator hingga diperoleh ekstrak kental.

## Pembuatan Na-CMC 1% b/v
Suspensi  Na-CMC  1%  dibuat  dengan  cara  ditimbang  Na-CMC  sebanyak  1  gram  kemudian dimasukkan ke dalam gelas kimia 100 mL. Dilarutkan dengan 10 mL aquades yang telah di didihkan sambil  diaduk  menggunakan  batang  pengaduk.  Kemudian  dicukupkan  dengan  aquades  hingga  100 mL. (Wati et al , 2013)
Pembuatan suspensi ekstrak Herba krokot ( Portulaca oleracea L.)
Ekstrak etanol herba krokot ( Portulaca oleracea L.) yang diperoleh dari hasil ekstraksi dibuat dalam tiga  variasi  dosis  yakni  100mg/kgBB,  200mg/kgBB,  dan  400mg/kgBB,  kemudian  masing-masing ekstrak  ditimbang  sebanyak  100mg,  200mg  dan  400mg  dan  disuspensikan  dengan  10  mL  Na  CMC 1% b/v.

## Pembuatan Suspensi Sel Darah Merah Domba (SDMD) 10% v/v
Sel darah merah domba (SDMD) ditampung dalam wadah yang bersih dan kering yang berisi EDTA sebagai  antikoagulan.  Pisahkan  sel  darah  merah  domba  dan  plasmanya  dengan  disentrifus  pada kecepatan 1500 rpm. Lapisan atas yang berupa plasma dibuang dan pada lapisan bawah yang berupa sel  darah  merah  ditambahkan  PBS  (Phosphat  Buffered  Saline)  pH  7,2  sebanyak  tiga  kali  volume SDMD  yang  tersisa  dan  dibolak-balik  beberapa  kali  lalu  disentrifus  kembali.  Pencucian  dilakukan paling sedikit 3 kali sampai lapisan atas benar-benar jernih dan tidak berwarna. Setelah selesai, PBS dipisahkan  dan  diperoleh  SDMD  100%,  kemudian  ditambahkan  PBS  dengan  jumlah  yang  sama hingga diperoleh suspensi SDMD 50%. Untuk mendapatkan suspensi SDMD 10%, selanjutnya dipipet 2 mL suspensi SDMD 50% dan ditambahkan PBS 8 mL (Effendi dan Widiastuti, 2014; Emelda et al ., 2015).

## Perlakuan Hewan Uji
Sebanyak  20  ekor  tikus  putih  ( Rattus  norvegicus )  jantan  dibagi  dalam  5  kelompok.  Masing-masing kelompok  terdiri  dari  4  ekor  tikus  jantan.  Kelompok  I  sebagai  kontrol  normal  (tanpa  perlakuan), kelompok  II  sebagai  kontrol  Na  CMC  1%,  kelompok  III  diberikan  sediaan  uji  ekstrak  etanol  herba krokot  dengan  dosis  100  mg/kgBB,  kelompok  IV  diberikan  sediaan  uji  ekstrak  etanol  herba  krokot dengan  dosis  200  mg/kgBB,  kelompok  V  diberikan  sediaan  uji  ekstrak  etanol  herba  krokot  dengan dosis 400 mg/kgBB. Selama tujuh hari semua hewan uji diberi perlakuan sediaan ekstrak uji kecuali kelompok  I  (kontrol  normal)  dan  II  (kontrol  NaCMC)  secara  peroral  sesuai  dengan  volume pemberiannya.  Pada  hari  ketiga  kelompok  II,  III,  IV  dan  V  diinduksikan  antigen  SDMD  10%  v/v sebanyak  1  mL  secara  intraperitonial  dan  dihari  ketujuh  kelompok  II,  III,  IV  dan  V  diinduksikan kembali  dengan  antigen  SDMD  10%  v/v  sebanyak  0,1  mL  secara  intraplantar.  Pengukuran  volume kaki hewan uji dilakukan  pada hari ketujuh sebelum dan setelah penginduksian antigen SDMD 10% v/v secara intraplantar pada jam ke-4, -24, dan -48 menggunakan pletismometer (Faradilla, 2013).

## Analisis Data
Data  hasil  pengukuran  perubahan  volume  kaki  tikus  dianalisis  secara  statistik  menggunakan  uji statistik Paired Samples T test dan uji statistik One-Way Anova yang dilanjutkan dengan uji lanjutan Post Hoc LSD .

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Data  hasil  penelitian  uji  efek  imunomodulator  ekstrak  etanol  herba  krokot  (Portulaca  oleracea  L.) dengan  menggunakan  parameter  Delayed  Type  Hypersensitivity  (DTH)  dapat  dilihat  pada  tabel dibawah ini.
Tabel 1. Hasil pengukuran rata-rata perubahan volume kaki tikus setelah pemberian antigen sel darah merah domba (SDMD) 10% v/v.
Kelompok Rata-rata volume kaki tikus + SD pada waktu (jam) T0 T4 T24 T48 I  (Normal) 0,33+0,03 0,30+0,05 0,32+0,04 0,31+0,009 II (NaCMC 1% b/v) 0,30+0,03 0,57+0,04 0,51+0,04 0,46+0,02 III (EEHK 100 mg/kgBB) 0,31+0,02 0,62+0,12 0,38+0,02 0,35+0,02 IV (EEHK 200 mg/kgBB) 0,32+0,02 0,48+0,05 0,40+0,02 0,34+0,01 V (EEHK 400 mg/kgBB) 0,34+0,02 0,54+0,005 0,43+0,01 0,37+0,02 Keterangan : EEHK  : Ekstrak Eanol Herba Krokot SDMD : Sel Darah Merah Domba T0 : Pengukuran volume kaki awal hewan coba
T4 : Pengukuran pada jam ke-4 setelah induksi antigen
T24 : Pengukuran pada jam ke-24 setelah induksi antigen
T48 : Pengukuran pada jam ke-48 setelah induksi antigen
Sistem imun merupakan suatu sistem pertahanan tubuh yang berfungsi melindungi, mempertahankan dan menghancurkan antigen seperti bakteri, virus dan mikroorganisme lain yang dapat menyebabkan berbagai  penyakit.  Salah  satu  upaya  untuk  mempertahankan  sistem  imun  adalah  dengan  pemberian
imunomodulator.  Imunomodulator  adalah  zat  yang  dapat  memodulasi  sistem  imun  sehingga  dapat bekerja lebih baik.
Penelitian ini dilakukan dengan tujuan untuk menentukan efek imunomodulator dan dosis efektif dari ekstrak etanol herba krokot ( Portulaca oleracea L.) dengan parameter Delayed Type Hypersensitivity (DTH) terhadap tikus putih ( Rattus norvegicus ) jantan yang diinduksi dengan sel darah merah domba (SDMD).
Hasil  pengukuran  berdasarkan  tabel  diatas  menunjukkan  bahwa  semua  kelompok  perlakuan mengalami perubahan sebelum dan sesudah diinduksi dengan antigen. Induksi ditandai dengan adanya proses inflamasi pada kaki hewan coba . Pada kelompok normal, tidak terjadi perubahan volume kaki tikus,  dikarenakan  tidak  adanya  perlakuan  terhadap  kelompok  tersebut  dari T0 hingga  T48  sehingga volume kaki dari kelompok tersebut tetap. Pada kelompok NaCMC dan kelompok ekstrak uji dengan dosis  100  mg/kgBB,  200  mg/kgBB,  dan  400  mg/kgBB  mengalami  peningkatan  pembengkakan volume  kaki  pada  T4  setelah  penginduksian  antigen  sel  darah  merah  domba  (SDMD),  dikarenakan antigen  yang  mengandung  lipopolisakarida  merangsang  makrofag  untuk  melepaskan  TNF  ( Tumor Necrosis Factor ) dan IL-1 yang merupakan mediator inflamasi. Pada T24 terjadi pembengkakan yang disebabkan oleh aktivasi sel T yang dapat merangsang pelepasan sitokin (IL-12) dalam memproduksi IFN-ɣ dengan meningkatkan fungsi sitolitik dari sel NK dan sel T sehingga merangsang tersekresinya IFN-ɣ  yang  akan  mengaktivasi  makrofag  untuk  mengeliminasi  antigen.  Pembengkakan  yang  terjadi pada T24 disebabkan oleh peningkatan aktivasi dari makrofag dalam  memproduksi sitokin sehingga terjadi  penumpukan  sitokin  (IL-12)  ditempat  penginduksian.  Hal  ini  menunjukkan  reaksi hipersensitivitas tipe lambat yang berlangsung lambat. Berdasarkan teori hipersensitivitas tipe lambat (tipe  IV),  peningkatan  volume  kaki  tidak  terjadi  selama  6-12  jam  dan  mencapai  intensitas  maksimal sesudah 24-72 jam (Bellanti, 1989). Pada T48 terjadi penurunan volume kaki tikus ( Rattus norvegicus ) pada  semua  kelompok  uji  kecuali  pada  kontrol  NaCMC.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  pemberian ekstrak  dapat  mempercepat  terjadinya  respon  imun  sehingga  proses  penurunan  pembengkakan  lebih cepat terjadi.
Dari  hasil  penelitian  dan  analisis  data  menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  herba  krokot  memiliki kemampuan  sebagai  imunomodulator.  Berdasarkan  volume  kaki  pada  T24  menunjukkan  bahwa kelompok uji ekstrak dosis 400 mg/kgBB mengalami pembengkakan paling besar diantara kelompok uji ekstrak yang lain, sehingga dianggap bahwa dosis tersebut yang efektif sebagai imunomodulator.
Pada penelitian ini diketahui bahwa ekstrak etanol herba krokot ( Portulaca oleracea L.) dapat berefek sebagai  imunomodulator.  Hal  tersebut  didasarkan  pada  penelitian  yang  telah  dilakukan  oleh  Park et al., (2019)  bahwa Portulaca  oleracea L.  berbasis  ekstrak  kompleks  dapat  digunakan  sebagai  agen imunostimulan  dalam  obat-obatan  maupun  makanan.  Hal  ini  diduga  karena  adanya  kandungan senyawa  flavonoid  berdasarkan  penelitian  oleh  Zhou  et  al.,  (2015)  bahwa  pada  herba  krokot ditemukan kandungan senyawa flavonoid. Menurut Devagaran & Diantini (2012) salah satu senyawa yang  memiliki  kemampuan  dapat  meningkatkan  sistem  imun  adalah  senyawa  flavonoid.  Mekanisme flavonoid sebagai imunomodulator yaitu dengan meningkatkan aktivitas IL-12 dan proliferasi limfosit. Sel  CD4+  akan  mempengaruhi  proliferasi  limfosit  kemudian  menyebabkan  sel  Th-1  teraktivasi.  Sel Th-1 yang teraktivasi akan mempengaruhi IFN- Ɣ  yang dapat mengaktifkan makrofag yang ditandai dengan  meningkatnya  aktivitas  fagositosis  secara  cepat  dan  lebih  efisien  dalam  membunuh  antigen (Patroni & Yuniarti, 2003).

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian dan analisis data statistik, maka dapat disimpulkan bahwa :
1. Ekstrak etanol herba krokot ( Portulaca oleracea L.) memiliki efek sebagai imunomodulator pada tikus putih ( Rattus norvegicus ) jantan.
2. Ekstrak etanol herba krokot ( Portulaca oleracea L.) dengan dosis 100 mg/kgBB, 200 mg/kgBB, dan 400 mg/kgBB efektif berkhasiat sebagai imunomodulator pada tikus putih ( Rattus norvegicus ) jantan.

## DAFTAR PUSTAKA
Andayani,  D.,  Suprihartini,  E.,  &  Astuti,  M.  (2018).  Efek  Antiinflamasi  Ekstrak  Etanol  Krokot (Portulaca  oleracea  L.)  pada  Udema  Tikus  yang  di  Induksi  Karagenin. Journal  of Pharmaceutical Science and Clinical Research, 3 (1), 43-49.
Antari, A. L. (2017). Imunologi Dasar . Yogyakarta: Deepublish.
Bellanti, A. J. (1989). Imunologi III. Yogyakarta: Gajah Mada University Press.
Devagaran, T. & Diantini, A. (2012). Senyawa Imunomodulator Dari Tanaman. Bandung : Student e- Journal .
Effendi, N. & Widiastuti, H. (2014). Identifikasi Aktivitas Imunoglobulin M (IgM) Ekstrak Etanolik Daun Ceplukan (Physalis Minima Linn .) pada Mencit. Jurnal Kesehatan, 7 (2), 353-360.
Emelda, A., Rahman, S., Hardianti. (2015). Efek Imunostimulan Infus Buah Mahkota Dewa ( Phaleria Macrocarpa (Scheff.)  Boerl.)  Asal  Kab.  Sidrab  Sulawesi  Selatan  Terhadap  Sekresi  Antibodi Tikus  Putih  ( Rattus  Norvegicus )  Jantan  Dengan  Teknik  Hemaglutinasi  (Skripsi) . Makassar: Fakultas Farmasi Universitas Muslim Indonesia.
Faradilla,  M.  (2013).  Efek  Imunomodulator  Polisakarida  Rimpang  Temu  Putih  ( Curcuma  zedoaria (Chrtetm.) Roscoe). Jurnal Ilmu Kefarmasian Indonesia, 12 , 273-278
Kusmardi,  Shirly.  K.  &  Enif,  E.  T.  (2007).    Efek  Imunomodulator  Ekstrak  Daun  Ketepeng  Cina ( Cassia alata . L) Terhadap Aktivitas dan Kapasitas Fagositosis Makrofag. Makara Kesehatan, 11 (2), 50-53.
Park,  Y.  M.,  Lee,  H.  Y.,  Kang,  Y.  G.,  Park,  S.  H.,  Lee,  B.  G.,  Park,  Y.  J.,  …  Lee,  Y.-R.  (2019). Immune-enhancing  effects  of Portulaca  oleracea L.–  based  complex  extract  in cyclophosphamide-induced  splenocytes  and  immunosuppressed  rats. Food  and  Agricultural Immunology, 30 (1), 13–24.
Patroni,  R.,  &  Yuniarti,  A.  (2003). Pengaruh  pemberian  ekstrak  etanol  umbi  bidara  upas  ( Merremia mammosa )  terhadap  fagositosis  makrofag  dan  produksi  NO  makrofag  studi  eksperimental Infeksi Salmonella Typhimurium pada mencit Balb/C. Semarang: Universitas Diponegoro.
Praworo, K. (2011). Terapi Medipic, Medical Picture . Jakarta: Penebar Plus.
Sri Harti, A. (2013). Imunologi Dasar & Imunologi Klinis. Yogyakarta: Graha Ilmu.
Wati,  A.,  Herman,  H.,  Sari,  D.  P.  (2013) . Uji  Hepatoterapi  Ekstrak  Etanol  Buah  Merah  (Pa ndanus conoideus Lam.)  Asal Kabupaten Jayawijaya  Papua Dengan  Parameter  SGPT Terhadap Tikus Putih Jantan. Jurnal Bionature, 2 (14), 100-104.
Zhou,  Y.,  Xin,  H.,  Rahman,  K.,  Wang,  S.,  Peng,  C.,  Zhang,  H.  (2015).  Poleracea  L.:  A  Review  of Phytochemistry and Pharmacological Effects. Biomed Res Int. 2015;2015:925631.