J. Kartika Kimia , November 2023, 6, (2), 109-115 Journal homepage : http://jkk.unjani.ac.id/index.php/jkk P-ISSN: 2655-1322     E-ISSN: 2655-0938

## Aktivitas Antioksidan Senyawa 6-propil-5,6-dihidro-2H-piran-2-on dari Jamur Endofit Fusarium oxysporum Akar Kalanchoe millotii
Antioxidant Activity of Compound 6-propyl-5,6-dihydro-2H-piran-2-on from Endophytic Fungus Fusarium oxysporum of Kalanchoe millotii root
Sari Purbaya 1 , Gina Fadlilah 1 , Lutfia Silva Aprina 1 , Dewi Meliati Agustini 1 , Lilis Siti Aisyah 1 , Unang Supratman 2 , Yenny Febriani Yun 1*
1 Program Studi Kimia, Fakultas Sains dan Informatika, Universitas Jenderal Achmad Yani, Indonesia
2 Program Studi Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Padjajaran, Indonesia *E-mail: yenny.febriani@lecture.unjani.ac.id
DOI: https://doi.org/10.26874/jkk.v6i2.211
Received : 7 Sept 2023, Revised : 27 Dec 2023, Accepted : 3 Jan 2024, O nline : 5 Jan 2024

## Abstrak
Kalanchoe  millotii atau  cocor  bebek  merupakan  salah  tanaman  sukulen  yang  kaya  akan  metabolit sekunder  dan  dimanfaatkan  sebagai  obat  tradisional.  Eksplorasi  kandungan  metabolit  sekunder  dan bioaktivitas dari Fusarium oxysporum yang merupakan jamur endofit dari akar K. millotii menarik untuk diteliti. Telah berhasil diisolasi dari ekstrak etil asetat F. oxysporum , senyawa 6-propil-5,6-dihidro-2 H - piran-2-on melalui berbagai metode kromatografi. Elusidasi struktur senyawa 6-propil-5,6-dihidro-2 H - piran-2-on berdasarkan spektrum NMR ( 1 H-NMR, 13 C-NMR, HMQC, HMBC, COSY), UV, dan FTIR. Aktivitas  antioksidan  ekstrak  etil  asetat F.  oxysporum dan  isolatnya  diketahui  berdasarkan  metode DPPH  (2,2  difenil-1-pikrilhidrazil).  Isolat  menunjukkan  aktivitas  antioksidan  sedang  dengan  IC 50 153,39 ppm.
Kata kunci: antioksidan, Fusarium oxysporum , jamur endofit, Kalanchoe millotii .

## Abstract
Kalanchoe millotii, also known as cocor bebek. is a succulent plant rich in secondary metabolites and traditionally used in medicine. Exploring the secondary metabolite content and bioactivity of Fusarium oxysporum, an endophytic fungus from the roots of K. millotii, is of interest. The compound 6-propyl- 5,6-dihydro-2H-piran-2-on  was  successfully  isolated  from  the  ethyl  acetate  extract  of  F.  oxysporum through various chromatographic methods. Structure elucidation of compound 6-propyl-5,6-dihydro- 2H-piran-2-on based on NMR ( 1 H-NMR, 13 C-NMR, HMQC, HMBC, COSY), UV, and FTIR spectra. The antioxidant activity of the ethyl acetate extract of F. oxysporum and its isolates was determined based on the DPPH (2,2 diphenyl-1-picrylhydrazyl) method. The isolate showed moderate antioxidant activity with an IC 50 value 153.39 ppm.
Keywords: antioxidants, Fusarium oxysporum, endophytic fungi, Kalanchoe millotii
1 Pendahuluan
National  Health  and  Nutrion  Examination Survey (NHNES III) menyatakan bahwa sekitar 50 juta  menderita  penyakit  degeneratif  [1]  yang disebabkan oleh stress oksidatif, yaitu ketidakseimbangan  antara  jumlah  oksidan  dalam
sel  yang  dipicu  oleh  kurangnya  antioksidan dengan  produksi  radikal  yang  berlebih  [2].  Oleh sebab itu, penelitian mengenai obat-obatan herbal, terutama  yang  berkaitan  dengan  antioksidan, terus-menerus  dikembangkan.  Karena  pada umunya,  obat  herbal  dinilai  lebih  aman  daripada
obat sintesis karena efek sampingnya yang relatif lebih sedikit [3].
Metabolit sekunder merupakan suatu molekul  kecil  yang  dihasilkan  oleh  tanaman dengan  beragam  struktur,  fungsi  dan  aktivitas. Karenanya  metabolit  sekunder  sering  digunakan sebagai  fokus  penelitian  maupun  pengembangan obat-obatan baru. Kandungan metabolit sekunder yang  terdapat  pada  tumbuhan,  berpotensi digunakan sebagai sumber antikanker, antiinflamasi,  antioksidan,  dan  lain  sebagainya [4].
K.  millotii merupakan  salah  satu  tanaman yang  sering  dimanfaatkan  dalam  pengobatan tradisional untuk  mengobati  demam,  batuk, penyakit  kulit,  luka  memar,  dan  radang  usus. Menurut beberapa penelitian, family ini
mengandung berbagai senyawa metabolit sekunder dengan berbagai bioaktivitasnya [5]. Hal ini  didukung  oleh  penelitian  [6]  menyatakan bahwa tanaman Kalanchoe kaya akan kandungan flavonoid,  steroid,  alkaloid,  dan  bufadienolida yang  memiliki  potensi  sebagai  antimalaria, insektisida,  antivirus,  antimikroba,  antioksidan, sitotoksik, dan lain-lain.
K.  millotii dimasukkan  ke  dalam  genus Kalanchoe  yang  mempunyai  383  spesies  namun hanya  9%  dari  spesies  ini  yang  telah  diteliti  [7]. Tanaman Kalanchoe digunakan karena mempunyai kandungan senyawa metabolit sekunder  dengan  berbagai  bioaktivitas,  salah satunya  adalah  potensi  sebagai  antioksidan. Tatsimo  [8]  telah  berhasil  mengisolasi  beberapa senyawa  metabolit  sekunder  dari  ekstrak  etanol daun Kalanchoe pinnata , di antaranya kaempferitrin  IC 50 8,73  µg/mL,  afzelin  IC 50 6,44 µg/mL,  kaempferol-3-O-α-D-glukopiranosid-7- O-α-L-rhamnopiranosid  IC 50 2,28µg/mL,  dan  α- Rhamnoisorobin  IC 50 0,71  µg/mL  menunjukkan aktivitas antioksidan yang tinggi.
Oleh  karena  itu,  diperlukan  eksplorasi  lebih lanjut  mengenai  potensi  bioaktivitas  tanaman Kalanchoe  sebagai  penangkal  radikal  bebas. Pengembangan  penelitian  pada  spesies  ini dilakukan dengan memanfaatkan mikroba endofit.
Jamur endofit merupakan salah satu mikroba penghasil  senyawa  bioaktif  yang  dapat  tumbuh dan  mengkolonisasi  jaringan  tumbuhan  (inang), terutama di bagian akar, batang dan daun. Mereka memiliki kemampuan untuk menghasilkan senyawa  metabolit  sekunder,  sehingga  dalam pemanfaatannya dapat mengurangi ketergantungan  bahan  baku  inangnya  untuk menghasilkan  senyawa  metabolit  sekunder, keanekaragaman hayati pun dapat dipertahankan.
Fusarium  oxysporum adalah  salah  satu  jamur endofit  yang  berhasil  diisolasi  dari  spesies K. millotii . Mikroba endofit dalam jaringan tanaman mampu menghasilkan senyawa khusus yang mirip dan memiliki aktivitas biologis yang sama dengan inangnya  [9].  Aktivitas senyawa  yang  dihasilkan jamur  endofit  biasanya  lebih  besar  dibandingkan aktivitas senyawa tumbuhan inangnya [10].
Berdasarkan latar belakang tersebut, kandungan  senyawa  metabolit  sekunder  dalam jamur endofit F. oxysporum yang berasal dari akar tanaman K.  millotii belum  banyak  dieksplorasi. Oleh  karena  itu,  penelitian  dan  pengkajian  lebih lanjut  terhadap  kelompok  kandungan  metabolit sekunder dan potensinya sebagai agen antioksidan alami menjadi hal yang menarik untuk dilakukan.

## 2 Metode Penelitian

## 2.1 Bahan dan Alat
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian meliputi  ekstrak  etil  asetat  jamur  endofit F. oxysporum akar K.  millotii ,  aseton  (C 6 H 6 O),  n- heksana  (C 6 H 14 ),  kloroform  (CHCl 3 ),  etil  asetat (C 4 H 8 O 2 ),  metanol  (CH 3 OH),  akuades,  etanol (C 2 H 5 OH), H 2 SO 4 10% dalam etanol dan silika gel 60 (0,0063-0,0200 mm).
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian meliputi  alat  gelas  laboratorium,  peralatan destilasi,  kolom  kromatografi  gravitasi,  neraca analitik  Mettler  AE  260  Deltarange,  lampu ultraviolet Vilber Vilber Lourmat VL-8.LC, rotary evaporator  merk  Heidolph  Laborata  4000  dan Buchi  Rotavapor  R-100,  klem,  statif,  pinset  dan chamber.
2.2 Cara Kerja
2.1 Pemisahan menggunakan Kromatografi Kolom Gravitasi
Kromatografi  Kolom  Gravitasi  (KKG)  pada ekstrak etil asetat jamur endofit F. oxysporum akar K.  millotii dilakukan  setelah  didapatkan  eluen yang  sesuai  melalui  Kromatografi  Lapis  Tipis (KLT).  KKG  dilakukan  dengan  menggunakan silika gel 60 (0,0063-0,0200). Silika gel yang telah diaktivasi  menggunakan  n-heksana  dimasukkan ke dalam kolom dengan perbandingan sampel dan silika (1:20). Sebanyak 7,5 g sampel diimpregnasi menggunakan  silika  dengan  perbandingan  (1:2), dimasukkan  tepat  di  atas  silika  fasa  diam, kemudian dielusi secara bergradien menggunakan eluen n-heksana, etil asetat, dan metanol sehingga diperoleh  18  fraksi,  Fraksi-fraksi  dimonitor menggunakan  KLT,  beberapa  fraksi  yang
memiliki  pola  noda  sama  digabungkan  sehingga sehingga diperoleh 4 fraksi, dilakukan KKG sekali lagi sehingga didapatkan satu isolat murni.

## 2.2 Uji Kemurnian
Hasil KKG diuji menggunakan KLT dengan menggunakan beberapa eluen yang berbeda. Satu noda pada KLT menunjukkan isolat relatif murni secara KLT.

## 2.3 Identifikasi FTIR, UV, dan NMR
Identifikasi UV
dilakukan untuk
mengetahui sistem  terkonjugasi  atau  terikat  pada gugus  fungsi,  sedangkan  identifikasi  FTIR dilakukan  untuk  mengetahui  gugus  fungsinya. Identifikasi  menggunakan Nuclear  Magnetic Resonance (NMR)  dilakukan  untuk  mengetahui struktur molekul, termasuk menentukan jenis dan jumlah  atom  hidrogen  pada  struktur,  ataupun menentukan  susunan  atom  karbon  pada  suatu molekul organik.

## 2.4 Uji Aktivitas Antioksidan
Isolat  murni  yang  didapatkan  diuji  aktivitas antioksidan dengan  menggunakan  metode  DPPH (1,1-diphenil-2-pikrihidrazil).  Larutan  sampel ditambahkan  1  mL  DPPH  dan  etanol,  sehingga larutan  memiliki  konsentrasi  50,  100,  150,  200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900 dan 1000 ppm. Dihomogenkan  dan  diinkubasi  selama  30  menit, kemudian  diukur  serapan  dengan  spektroskopi UV-Vis pada panjang gelombang maksimal.

## 3 Hasil dan Diskusi
3.1 Pemisahan dengan Kromatografi Kolom

## Gravitasi
Ekstrak  pekat  etil  asetat  dipisahkan  dengan KKG  sehingga  didapatkan  18  fraksi.  Fraksi dengan noda sama berdasarkan KLT digabungkan sehingga didapatkan 4 fraksi yang disebut Fraksi Series 9 (Gambar 1).
Gambar 1. KLT Fraksi Series 9
Berdasarkan  analisis hasil  KLT fraksi  series 9,  dilakukan  isolasi  terhadap  fraksi  9-2. Selanjutnya, dilakukan pemisahan kembali dengan  metode  KKG.  Pada  proses  fraksinasi fraksi  9-2  didapatkan  hasil  16  fraksi,  kemudian dilakukan  KLT  untuk  mengetahui  eluat  yang memiliki pola noda yang sama. Berdasarkan hasil KLT,  beberapa  fraksi  yang  memiliki  pola  noda yang  sama  digabungkan,  menghasilkan  5  fraksi yang disebut sebagai Fraksi Series 12 (Gambar 2), kemudian  dilakukan  kembali  KLT  pada  Fraksi Series 12.

## Gambar 2. KLT Fraksi Series 12
Hasil  KLT  fraksi  series  12  dengan menggunakan  eluen  kloroform  :  etil  asetat  (3:7) menunjukkan  satu  noda  pada  fraksi  12-3  pada lampu  UV  254  nm  dan  terbentuk  noda  saat visualisasi  dengan  H 2 SO 4 10%  dalam  etanol. Kemudian fraksi 12-3 disebut sebagai Senyawa 1.

## 3.2 Uji Kemurnian
Uji  kemurnian  isolat  dilakukan  dengan menggunakan  metode  KLT  di  berbagai  eluen (Gambar 3).
Gambar 3. KLT Senyawa 1 pada berbagai eluen
Eluen  yang  digunakan  pada  KLT  uji kemurnian  senyawa  1  adalah  etil  asetat  : kloroform  (9:1),  kloroform  :  metanol  (6:4),  dan metilen  klorida  :  metanol  (3:7).  Hasil  KLT  pada tiga  eluen  yang  berbeda  memberikan  satu  noda, menunjukkan isolat murni.

## 3.3 Analisis FTIR
Hasil identifikasi spektrum FTIR
menunjukkan  adanya  beberapa  puncak  intensitas kuat,  seperti  pada  bilangan  gelombang  3035,96
cm⁻¹  sampai  3084,96  cm⁻¹  menunjukkan  adanya serapan  khas  ikatan  C=C,  bilangan  gelombang 2093,69  –  2987,74  cm⁻¹  menunjukkan  adanya gugus  alkil,  bilangan  gelombang  1735,87 menunjukkan adanya gugus ester O=C-OR.
Gambar 4. Spektrum FTIR Senyawa 1

## 3.4 Analisis UV
Spektrum  UV  menunjukkan  dua  serapan maksimum  pada  λ maks 207  dan  257  nm.  Pada panjang gelombang 207 nm menunjukkan adanya gugus karbonil dengan transisi elektron dari π – π* menunjukkan  ikatan  C=C.  Sedangkan  panjang gelombang 257 nm menunjukkan adanya eksitasi elektron dari n – π* yang disebabkan adanya suatu kromofor C=O.
Gambar 5. Spektrum UV Senyawa 1

## 3.5 Analisis NMR
Hasil  spektroskopi  ¹H-NMR  menunjukkan tujuh sinyal proton. Sinyal pada δ H 0,90, 1,23, 1,32 dan 2,37 ppm menunjukkan adanya metil (-CH 3 ) dan  metilen  (-CH 2 ).  Pada  δ H 4,36  ppm menunjukkan  adanya  gugus  karboksilat  (-OCH), ikatan  C=C  ditunjukkan  dengan  adanya  sinyal doublet pada δ H 5,62 dan 7,39 ppm, kedua proton ini mempunyai tetapan kopling sebesar 7,5 dan 8 Hz, kedua proton saling berhubungan menunjukkan adanya kopling tersubstitusi cis.
Gambar 6. Nilai Pergeseran Kimia ( 1 H) Spektrum 13 C-NMR Senyawa 1 menunjukkan adanya gugus metil (-CH 3 ) pada δ C 14,15 ppm, gugus metilen (-CH 2 ) 37,83; 29,33 dan 22,86  ppm.  Adanya  gugus  O-C  alkoksi  alkana atau  eter  ditunjukkan  dengan  adanya  δ C 68,36 ppm.  Ikatan  C=C  ditunjukkan  dengan  adanya sinyal  pada  δ C 100,37  dan  142,19  ppm.  Sinyal pada  δ C 166,00  ppm  menunjukkan  keberadaan gugus karboksilat.
Gambar 7. Nilai Pergeseran Kimia ( 13 C)
Data  spektrum  DEPT  dapat  diketahui  tipe karbon senyawa 1 yaitu 1 gugus karbon primer (- CH 3 )  pada  pergeseran  14,15  ppm;  3  karbon sekunder  (-CH 2 )  ditemukan  pada  pergeseran 37,83;  29,33  dan  22,86  ppm;  2  karbon  tersier  (- CH=) pada 142,19 dan 100,37 ppm serta 1 karbon pergeseran 68,36 ppm (-CH-) sedangkan 1 karbon kuartener  (-C=)  ditemukan  pada  pergeseran 166,00 ppm.
Gambar 8. Spektrum 1 H- 1 H-COSY Senyawa 1
δ 0,90 δ 1,23 δ 1,32 δ 2,37 δ 5,61 δ 7,39 δ 4,36 δ 14,15 δ 22,86 δ 29,33 δ 68,36 δ 37,83 δ 100,37 δ 142,19 δ 166,00
Spektrum 1 H- 1 H-COSY ( Corelated
Spectroscopy )  digunakan  untuk  mengetahui korelasi  antara  proton-proton  yang  bertetangga, dan  memperkuat  korelasi  pada  cincin  yang ditandai dengan  munculnya  puncak  silang  antara proton-proton tersebut.
Gambar 9. Hasil Analisis Spektrum 1 H– 1 H COSY
Senyawa 1
Spektrum 1 H- 1 H COSY Senyawa 1 menunjukkan adanya korelasi antara proton (H-3) (2H,  d;  J=7,5)  δH  7,39  ppm  berkorelasi  dengan (H-4) (2H, d;  7.5)  δH  5,61  ppm;  dan  (H-8)  (6H, m) δH 1,32 ppm berkorelasi dengan (H-9) (1H, q) δH 0,90 ppm.
Gambar 10. Spektrum HMQC Senyawa 1
Spektrum  HMBC  ( Heteronuclear  Multiple Bond Connectivity ) menunjukkan adanya korelasi proton  dengan  karbon  pada  jarak  lebih  dari  satu ikatan.
Gambar 11. Hasil Analisis Spektrum HMBC Senyawa 1
Berdasarkan  analisis  NMR,  UV,  dan  FTIR diketahui bahwa Senyawa 1 merupakan senyawa 6-propil-5,6-dihidro-2 H -piran-2-on.
Tabel 1. Pergeseran Kimia Proton dan Karbon
Senyawa 1 (CD 3 OD, 500 MHz) Posisi ¹³C-NMR δC (125 MHz) δH (H, mult, J (Hz)) 500 MHz 1 - - 2 166.00 - 3 142,19 7,39 (2H, d; 7.5) 4 100.37 5,61 (2H, d; 7.5) 5 37.83 2.37 (1H, dd, 15,5) 6 68.36 4,36 (2H, m) 7 29.33 1,23 (2H, q) 8 22,86 1,32 (6H, m) 9 14.15 0,90 (1H, q)
Tabel 2. Pergeseran Kimia Proton dan Karbon
Senyawa 6-propil-5,6-dihidro-2H-piran-2-on (CDCl 3 ,400 MHz) [11] Posisi ¹³C-NMR δC (125 MHz) δH (H, mult, J (Hz)) 400 MHz 1 - - 2 164,5 - 3 145,0 6,9 (1H, m, 9.7) 4 121,4 6,03 (1H, ddd) 5 36,8 2,38 (2H, m) 6 77,7 4,47 (1H, m) 7 29,3 1,40 (3H, m) 8 18,0 1,76 (1H, m) 9 13,7 0,96 (3H, t) 3.6 Elusidasi Struktur Senyawa 1
Gambar 12. Struktur 6-propil-5,6-dihidro-2H-piran-
2-on 6-propil-5,6-dihidro-2 H -piran-2-on (1),
padatan berwarna putih kecoklatan; UV (MeOH) λ maks nm  257,  207  nm;  IR  v maks cm -1 :  3035,96 (C=C)  3084,96  (C=C),    2093,69  (C-H),  2987,74 (C-H),  1735,87  (C=O); 1 H-NMR  (500  MHz, CD 3 OH, TMS) δ ppm: 0,90 (1H, q), 1,23 (2H, q),
1,32  (6H,  m),  2.37  (1H,  dd,  15,5),  4,36 (2H,  m), 5,61 (2H, d; J=7.5), 7,39 (2H, d; J=7.5), 13 C-NMR
(125  MHz,  CD 3 OD,  TMS)  δ  ppm:  14,15  (CH 3 ), 22,86  (CH 2 ),  29,33  (CH 2 ),  37,83  (CH 2 ),  68,36 (CH), 100,37 (CH), 142,19 (CH), 166,00 (C=O).
1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 2 3 4 5 6 7 8 9

## 3.7 Aktivitas Antioksidan
Untuk  mengetahui  aktivitas  antioksidan isolat  yang  diperoleh  dilakukan  pengujian aktivitas  antioksidan  dengan  metode  DPPH. Metode  ini  dilakukan  berdasarkan  adanya kemampuan senyawa antioksidan untuk mengurangi  radikal  bebas  dengan  adanya  donor proton.
Vitamin C digunakan sebagai kontrol positif dalam  pengujian  ini  karena  mempunyai  gugus hidroksil bebas yang berfungsi sebagai penangkap radikal bebas dan bersifat stabil, dengan IC 50 2,78 ppm.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  kontrol memiliki  aktivitas  antioksidan  yang  sangat  baik dan efektif dalam menghabat radikal bebas DPPH.
Nilai  IC 50 adalah  parameter  yang  digunakan untuk  mengetahui  konsentrasi  antioksidan  yang dibutuhkan  untuk  menghambat  radikal  DPPH sebesar  50%. Sehingga semakin  kecil  nilai  IC 50 maka aktivitas antioksidan sampel semakin tinggi (Tabel 3).
Tabel 3. Hasil Uji Antioksidan Larutan Uji Persamaan Regresi IC 50 (ppm) Vitamin C (kontrol) y = 12,381x + 15,585 R² = 0.9982 2,78 Isolat Murni 6- propil-5,6- dihidro-2 H - piran-2-on y= 0,3056x + 2,96 R²= 0,9971 153,94
Pada struktur Vitamin C, terdapat suatu fenol yang  dapat  mengikat  radikal  bebas,  dengan  cara mendonorkan  proton  H  melalui  proses  transfer elektron,  sehingga  fenol  dapat  berubah  mrnjadi radikal  fenoksil.  Sementara  itu  isolat  murni  6- propil-5,6-dihidro-2 H -piran-2-on menunjukkan nilai IC 50 153,94 ppm, menandakan bahwa isolat tersebut  memiliki  aktivitas  antioksidan  yang sedang. Meskipun demikian, nilai ini menunjukkan  daya  nilai  antioksidan  yang  lebih baik  daripada  nilai  IC 50 dari  ekstraknya.  Oleh karena itu isolat 6-propil-5,6-dihidro-2 H -piran-2- on dapat dinyatakan  memiliki  daya  hambat  yang lemah terhadap radikal bebas. Senyawa 6-propil- 5,6-dihidro-2 H -piran-2-on  tidak  memiliki  gugus fenol  dalam  strukturnya,  namun  memiliki  gugus oksi yang berada dalam bentuk heterosiklik suatu piran,  sehingga  menyebabkan  daya  hambatnya antioksidannya bersifat sedang.
Berdasarkan  hasil  analisis  uji  antioksidan isolat  ekstrak  etil  asetat  jamur  endofit F. oxysporum dari  akar K.  millotii atau  senyawa 6- propil-5,6-dihidro-2 H -piran-2-on menunjukkan aktivitas  antioksidan  sedang  dengan  nilai  IC 50 153,94  ppm.  Perbandingan  ini  dilakukan  dengan aktivitas  antioksidan  Vitamin  C  yang  memiliki IC 50 sebesar  2,78  ppm,  termasuk  dalam  kategori sangat aktif.
4 Kesimpulan
Hasil penelitian menunjukkan bahwa senyawa 6-propil-5,6-dihidro-2-on berhasil diisolasi  dari  ekstrak  etil  asetat  jamur  endofit F. oxysporum dari  akar K.  millotii .  Senyawa  ini menunjukkan  aktivitas  antioksidan  yang  sedang, dengan nilai IC 50 sebesar 153,93 ppm.

## Ucapan Terima Kasih
Terima  kasih  penulis  ucapkan  kepada Kementerian Pendidikan, Kebudayaan, Riset dan Teknologi, khususnya Direktorat Jenderal Pendidikan  Tinggi,  Riset  dan  Teknologi  (Ditjen Dikti)  atas  hibah  yang  diberikan  sehingga penelitian dapat dilakukan. Penulis juga berterima kasih  kepada  Laboratorium  Kimia  Unjani  dan BRIN  Serpong  yang  telah  membantu  kelancaran jalannya  penelitian,  sehingga  penelitian  dapat diselesaikan dengan baik.

## Daftar Pustaka
[1] Yunas, R. and Listyarini, A.D. 2019. Studi Deskriptif Kejadian Hipertensi di Posyandu Lansia Desa Piji Wilayah Kerja Puskesmas  Dawe  Kabupaten  Kudus. Jurnal  Keperawatan  Dan  Kesehatan Masyarakat  Cendekia  Utama ,  STIKES Cendekia  Utama  Kudus.  8  (1)  55.
10.31596/jcu.v8i1.305 [2] Santosa,  W.N.  and  Baharuddin,  B.  2020. Penyakit Jantung Koroner dan Antioksidan. KELUWIH: Jurnal Kesehatan Dan Kedokteran , University of Surabaya. 1 (2) 98–103. 10.24123/kesdok.v1i2.2566 [3] Sumayyah, S. and Salsabila, N. 2017. Obat
Tradisional :  Antara  Khasiat  dan  Efek
Sampingnya. FarmasetikaCom  (Online) , Universitas Padjadjaran. 2 (5) 1. 10.24198/farmasetika.v2i5.16780
[4] Chattopadhyay,  R.R.  and  Bhattacharyya, S.K.  2007.  Plant  Review  Terminalia chebula:  An  update. Pharmacognosy Reviews , 1 (1) 151–6.
[5] Saputra,  T.R.,  Ngatin,  A.  and  Sarungu, Y.T.  2018.  Penggunaan  metode  ekstraksi maserasi dan partisi pada tumbuhan cocor bebek (kalanchoe pinnata) dengan kepolaran  berbeda. Fullerene  Journal  of Chemistry , Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan  Alam,  Universitas  Negeri Manado. 3 (1) 5. 10.37033/fjc.v3i1.26
[6] Milad,  R.  2014.  Genus  Kalanchoe (Crassulaceae): A Review of Its
Ethnomedicinal,  Botanical,  Chemical  and Pharmacological  Properties. European Journal of Medicinal Plants , Sciencedomain  International.  4  (1)  86– 104. 10.9734/ejmp/2014/5901
[7] Nascimento,  L.B.D.S.,  Casanova,  L.M. and Costa, S.S. 2023. Bioactive Compounds from Kalanchoe Genus Potentially Useful for the Development of
New  Drugs. Life  (Basel,  Switzerland) , Switzerland. 13 (3) 646. 10.3390/life13030646 [8] Tatsimo,  S.J.N.,  Tamokou,  J.  de  D., Havyarimana,  L.,  Csupor,  D.,  Forgo,  P., Hohmann, J. et al. 2012. Antimicrobial and antioxidant activity of kaempferol rhamnoside derivatives from Bryophyllum pinnatum. BMC Research Notes , England.
5 158. 10.1186/1756-0500-5-158
[9] Septiana, E. 2020. Kapang endofit sebagai sumber  senyawa  aktif  antivirus  yang menjanjikan: Suatu Kajian Pustaka. Jurnal Biologi Udayana , Universitas Udayana. 24 (1) 26. 10.24843/jbiounud.2020.v24.i01.p04
[10] Jha,  D.K.  2015.  Bioprospecting  for microbial  endophytes  and  their  natural products. NBU Journal of Plant Sciences , University  of  North  Bengal.  9  (1)  1–13.
10.55734/nbujps.2015.v09i01.001
[11] Wickel, S.M., Citron, C.A. and Dickschat,
J.S. 2013. 2H‐Pyran‐2‐ones from
Trichoderma  viride  and  Trichoderma asperellum. European Journal of Organic Chemistry ,  Wiley.  2013  (14)  2906–13.
10.1002/ejoc.201300049