## RESEARCH ARTICLE

## Total Phenol and Antioxidant Activity of Ethanol Extract and Water Extract from Claw Uncariaa gambir Roxb
(Total Fenol dan Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol dan Ekstrak Air dari Cakar Uncaria gambir Roxb)
Lucky Hartanti 1*) , Asri Mulya Ashari 1 , Warsidah 2 1 Fakultas Pertanian Universitas Tanjungpura Pontianak
2 Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Tanjungpura Pontianak

## Jl. Prof. Dr. Hadari Nawawi Pontianak

## ABSTRACT
Uncaria gambier Roxb is a plant from the Rubiaceae family, belongs to the Bajakah group and has been used empirically in the treatment of various types of diseases in the community. Besides being one of the industrial plants and export commodities produced in Sumatra and Kalimantan, gambier leaves is also used frequently in Indonesia, both for the pharmaceutical and cosmetic industries. As  a  result,  market  demand  both  nationally  and  internationally  have  increased.  The  aim  of  this  research  are  determination  of antioxidant  activity  of  ethanol  extract  and  aqueous  extract  of  gambir  claw  using  1,1-diphenil-2-picrylhydrazyl  (DPPH)  and determination  of  total  phenol  using  Calcetau  folin  reagent.  Gambier  plant  samples  were  taken  in  the  forest  area  around  the Tanjungpura  University  campus,  the  claws  were  separated  and  dried  at  room  temperature,  then  powdered  and  extracted  by maceration using 70% ethanol pa and aquadest, then the extract was concentrated until it was ready to be tested for antioxidant activity and determination of total phenol. The total phenolic ethanol extract and aqueous extract of  gambir claw were 224.66  mg GAE/g extract (GEA : Gallic Acid Eqivalent) and  299.08 mg  GAE/g extract, respectively, while the antioxidant potential (IC50) was 39.566 μg/mL and 65.140 μg/mL, and the IC50 for comparison of Vitamin C was 7.02 μg/mL.
Uncaria gambir Roxb adalah tanaman dari family Rubiaceae, termasuk dalam golongan bajakah dan telah digunakan secara empiris dalam pengobatan berbagai jenis penyakit di masyarakat. Selain telah menjadi salah satu tanaman industri dan komoditas eksport yang dihasilkan di wilayah Sumatera dan Kalimantan, pemakaian gambir secara nasional khususnya daun gambir juga sangat besar, baik untuk kebutuhan industri obat-obatan maupun kosmetik, akibatnya permintaan pasar baik nasional maupun dunia mengalami peningkatan. Penentuan aktivitas antioksidan dari ekstrak etanol dan ekstrak air dari cakar gambir menggunakan 1,1-diphenyl-2- pikrilhidrazil (DPPH) serta  penentuan fenol total  menggunakan pereaksi folin Calcetau. Sampel tanaman gambir diambil di daerah hutan sekitar kampus Universitas Tanjungpura, dipisahkan bagian cakarnya dan dikeringkan pada suhu kamar, lalu diserbukkan dan diekstraksi secara maserasi masing-masing dengan menggunakan etanol p.a 70% dan akuadest, selanjutnya ekstrak dipekatkan sampai siap untuk dilakukan pengujian aktivitas antioksidan dan penentuan total fenol. Total fenol ekstrak etanol dan ekstrak air dari Cakar gambir masing-masing sebesar sebesar 224,66  mg GAE/g ekstrak and  299.08 mg GAE/g ekstrak sedangkan potensi antioksidan (IC50) sebesar 39.566 μg/mL dan 65.140 μg/mL, dan IC50 pembanding Vitamin C  adalah  7.02  μg/mL.
Keywords: IC50, Uncaria gambir Roxb, antioxidant, total phenol, Gallic acid eqivalent.

## PENDAHULUAN
Radikal  bebas  menyebabkan  beberapa  kerusakan pada tubuh yang mengganggu metabolisme sel, serta mampu  mengubah  lipid,  protein, dan  DNA  sebagai sasaran utama [1]. Lipid rentan terhadap radikal bebas yang  mengakibatkan  peroksidasi  lipid  dan  dapat
menyebabkan  hilangnya  aktivitas  enzim.  Kerusakan yang  terjadi  pada  protein  dapat  mengakibatkan denaturasi protein oksidatif dan kerusakan DNA yang menyebabkan  mutagenesis  dan  karsinogenesis [2]. Kedua  hal  ini  telah  terlibat  dalam  berbagai  jenis penyakit manusia seperti radang sendi, kerusakan sel,
*)Corresponding author: Lucky Hartanti E-mail: lucky.hartanti@faperta.untan.ac.id
Hartanti et al, Total Phenol and Antioxidant …
rheumatoid  arthritis,  diabetes mellitus  dan  penuaan dini [3].
Spesies  oksigen  reaktif  atau  diistilahkan  dengan Reactive  Oxygen  Species (ROS)  telah  menjadi  petunjuk dalam perkembangan beberapa penyakit. Pembentukan  ROS  adalah  proses  umum  selama terjadinya metabolisme sel. Spesies oksigen aktif yang paling  penting  antara  lain  adalah  radikal  hidroksil, radikal  amnion  superoksida,  dan  oksigen  singlet  [4]. Stres oksidatif ditemukan sebagian besar terjadi pada jaringan  adiposa  yang  merupakan  sumber  utama pembentukan  ROS [5].  Keberadaan  ROS yang berlebihan  dalam  tubuh  akan  menyebabkan  stres oksidatif dan mempercepat proses penuaan [6].
Antioksidan  adalah  zat  penting  dan  memainkan peran  pencegahan yang potensial  untuk  melindungi tubuh  dari  kerusakan  yang  terkait  dengan  stres oksidatif  oleh  radikal  bebas [7].    Zat  ini  juga  dapat menghambat terjadinya oksidasi lipid dan biomolekul lainnya  dengan  menghalangi  langkah  inisiasi  dan menampung    berbagai  radikal  bebas  untuk  proses detoksifikasi  organisme  [8]. Kecukupan  antioksidan merupakan  benteng  pertahanan  untuk  mencegah dampak buruk dari ROS terhadap jaringan tubuh [6].
Beberapa  penelitian  tentang  antioksidan  telah dilakukan  dalam  mendapatkan  senyawa  aktif  dari tumbuhan  dengan  aktivitas  yang  beragam  seperti antioksidan,  antibakteri  dan  antikanker.  Bajakah adalah istilah untuk akar dari tumbuhan tertentu yang tumbuh di hutan-hutan Kalimantan dan telah banyak digunakan secara empiris dalam pengobatan berbagai macam  penyakit  seperti  kencing  manis  (diabetes mellitus),  jantung,  kolesterol  dan  kanker.  Genus Uncaria  merupakan  salah  satu  jenis  bajakah  yang secara  turun  temurun  telah  digunakan  dalam kehidupan  masyarakat  khususnya  di  wilayah Kalimantan,  untuk  pengobatan  berbagai  penyakit seperti  kanker,  antibakteri,    dan  penyakit  kulit. Penelitian  sebelumnya  tentang  Uncaria  antara  lain ekstrak  etanol  dari  cakar  bajakah Uncaria  tomentosa (Wild  ex  Schultz)  memiliki  aktivitas  antibakteri  dan antiinflamasi [9] dan  potensi  sitotoksik  ekstrak etanolnya  (LC50)  sebesar  21,754  ppm [10].  Bajakah merah  ( Spatholobus  littoralis Hassk)    dari  Kalimantan Timur,  mengandung  senyawa  flavonoid  32,49±3,21 ppm,  sedangkan  kulit  bajakah  putih  mengandung senyawa  fenolik    163,88±74,75  ppm.  Aktivitas antioksidan akar bajakah merah dikategorikan sangat kuat (26,29 ppm). Ekstrak etanol akar bajakah merah
( Spatholobus littoralis Hassk)  asal Kalimantan  Tengah menunjukkan aktivitas antioksidan tinggi yaitu sebesar 8,25  ppm  [11]  dan  memiliki  aktivitas  antibakteri Escherichia  coli dengan  konsentrasi  hambat  minimum sebesar 6,25 [12].
U.  gambir Roxb adalah  salah  satu  tanaman  dari family Rubiaceae yang bernilai ekonomi tinggi karena kandungan  kimia  antara  lain  katekin,  pirokatekol, flouresin,  sampuran  lilin  serta  minyak  pada  ekstrak daun dan ranting batangnya [13]. Uncaria gambir Roxb tergolong dalam jenis akar atau kayu bajakah. Secara tradisional, gambir telah digunakan dalam pengobatan berbagai penyakit, dan untuk beberapa daerah tertentu dijadikan  sebagai  bahan  menyirih  yang  bertujuan untuk menguatkan dan menghindarkan gigi dari rasa sakit.  Tanaman  ini  merupakan  komoditas  eksport sehingga  menjadi  tanaman  unggulan  di  beberapa wilayah  terutama  di  Sumatera  dan  Kalimantan  dan Nusa Tenggara. Kebutuhan gambir terutama daunnya baik dalam negeri maupun pasar internasional sebagai bahan  baku  kosmetik  dan sediaan  farmasi  makin tinggi,  seiring  dengan  makin  giatnya  penelitian- penelitian tentang kandungan dan aktivitasnya dalam bidang kesehatan. Cakar gambir adalah bagian dari U. gambir yang tumbuh di sekitar ketiak daun dan ketiak ranting,  dengan  bentuk  yang melengkung  dan berujung runcing. Belum ada informasi ilmiah tentang kandungan  dan  aktivitas  secara  spesifik  dari  cakar gambir.
Beberapa pengujian antioksidan dari ekstrak daun U. gambir menggunakan 1,1- diphenyl-2-picrylhydrazy (DPPH) menunjukkan nilai IC50 dari daun U. gambir yang bervariasi. Sazwi dkk [13] melaporkan aktivitas antioksidan  ekstrak  daun U. gambir yang  sangat  kuat yaitu IC50  sebesar  6,4 μg/mL  sedikit  lebih  besar daripada  nilai  IC50  pembandingnya  sebesar  4,8 μg/mLngan  metode  yang  sama,  Amir dkk [14] melaporkan    antioksidan  daun U.  gambir yaitu  IC50 sebesar 18,27 μg/mL sedangkan oleh Anggraini, dkk [15] melaporkan antioksidan daun U. gambir diperoleh IC sebesar 92-93.1 % dan IC50 sebesar 25,5 μg/mL dilaporkan oleh Melia, dkk [16].
Dalam  penelitian  ini,  penentuan  total  fenol  dan kemampuan/potensi  antioksidan  dilakukan  pada ekstrak etanol dan ekstrak air dari cakar yang tumbuh di  ketiak  ranting  dan  daun U.  gambir yang  secara empiris  telah  digunakan  sebagai  afrodiasak  dan  anti penuaan  dini  oleh masyarakat  Kalimantan  Barat. Pengujian aktivitas antioksidan menggunakan metode
Hartanti et al, Total Phenol and Antioxidant …
DPPH sedangkan penentuan kadar fenol total  atau total  phenol  count  (TPC)  dari  ekstrak  etanol  dan ekstrak  air  cakar U.  gambir menggunakan  folin ciocalteu
yang selanjutnya diukur secara spektrofotometri.

## METODE PENELITIAN
Bahan dan alat yang digunakan antara lain adalah etanol 70% p.a, akuades, sampel cakar U. gambir yang diambil  di  hutan  sekitar  kampus  Universitas Tanjungpura  Pontianak  Kalimantan  Barat,  DPPH, folin  ciocalteu,  spektrofotometri  dan  peralatan  gelas secara  umum.  Pelaksanaan  penelitian  dilakukan  di Laboratorium  Kimia  Jurusan  Kimia  Fak.  MIPA Universitas Tanjungpura. Ekstraksi dilakukan dengan metode  maserasi  seperti  yang  dilakukan  oleh Warsidah, dkk  [9] yaitu sebanyak masing-masing  500 gram cakar U. gambir yang terlebih dahulu dikeringkan dan  diserbukkan, masing-masing sampel ditambahkan dengan  etanol  70%  dan  akuades  hingga  serbuk terendam selama 2 x 24 jam pada suhu ruang, filtratnya lalu  dipisahkan  dan  dilakukan  remaserasi  pada ampasnya  selama  3  x  24  jam  sampai  terjadi kesetimbangan  di  mana  warna  cairan  penyari  tidak berwarna  pekat  lagi.  Filtrat  yang  telah  dikumpulkan selanjutnya  diuapkan  dengan  rotavapor  (rotary evaporator) pada suhu didih pelarut (etanol suhu 70 o C dan  air  100 o C.  Sisa  pelarut  dapat  diuapkan  kembali menggunakan  waterbath  suhu  50°C  dan  siap  untuk dilakukan pengukuran aktivitas antioksidan dan angka total fenol.
Prosedur Pengujian Antioksidan Pengujian antioksidan dilakukan dengan menentukan λ maks larutan DPPH. Dibuat larutan dari ekstrak etanol dan ekstrak air dari cakar gambir dalam konsentrasi  20,  40,  80,100  dan  120  µg/mL,  serta larutan kontrol positif vitamin C dalam konsentrasi 2, 4,  6,  8  dan  10  µg/mL.  Setelah  itu,  diambil  masing- masing  1 mL  dari  larutan  sampel  ekstrak  etanol, ekstrak  air  cakar  gambir  dan  kontrol  vit  C, ditambahkan  DPPH  0,1  mM  sebanyak  2  mL, diinkubasi tanpa cahaya selama 30 menit  pada suhu kamar dan dilanjutkan dengan pengukuran absorbansi pada λ maks 516  nm.  Persentase aktiviitas  antioksidan ditentukan  dengan  meghitung  data  absorbansi menggunakan persamaan :

## Prosedur Penentuan Total Fenol
Penentuan λ maks Dibuat stok larutan asam galat 100 ppm, sebanyak 1  mL dipindahkan  ke  labu  ukur  10  mL,  lalu ditambahkan  pereaksi Folin-Ciocalteu  1  mL, ditambahkan  Na 2 CO 3 10  %  sebanyak  4  mL, didiamkan  dan  15  menit  kemudian  dilakukan pengukuran λmaks  larutan  tersebut  dengan  panjang gelombang 700-800 nm
menggunakan spektrofotometer sinar tampak.
Pembuatan Kurva Kalibrasi Diambil masing-masing sebanyak 1, 3, 5 dan  7 mL dari  larutan  stok  asam  galat  100  ppm,  diencerkan dengan  dengan  akuades  sampai  10  mL dalam  labu takar sehingga diperoleh larutan konsentrasi 10, 30, 50 dan  70  ppm.  Sebanyak  0.2  mL dari  masng-masing konsentrasi  ini,  ditambahkan  dengan  1  mL reagen Folin Ciocalteu dalam labu ukur 10 mL. Selanjutnya ditambahkan  Na2CO3  10  %  sebanyak  3  mL dan dibiarkan  pada  suhu  kamar  sampai  30  menit.  Data hasil pengukuran absorbansi pada panjang gelombang maksimum dibuat kurva linier dengan persamaan y = bx + a.
Penentuan  Kandungan  Fenolik  Total  dengan Metode Folin-Ciocalteu Ekstrak etanol dan ekstrak air dari  cakar gambir Sebanyak 0,1 mL dan 7,9 mL akuades, ditambahkan reagen  Folin-Ciocalteulalu  sebanyak  0.5  mL dalam labu  takar  10  mL.  Setelah  itu,  ditambahkan  dengan sebanyak 1.5  mL Na2CO3 10 % dibiarkan  sampai 1 jam  dalam  suhu  kamar.  Pengukuran  absorbans  pada λmaks  menggunakan  spektrofotometer  UV-Vis dengan  3  replikasi.  Kadar  fenol  yang  dihasilkan ekuivalen dengan sejumlah asam galat/g sampel segar.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Cakar gambir tumbuh pada daerah ketiak daun dan ketiak  ranting, bentuknya melengkung denan ujung runcing. Sampel  cakar  gambir  dalam  penelitian  ini terlebih dahulu dikeringanginkan untuk menguapkan
Hartanti et al, Total Phenol and Antioxidant …
airnya  sampai  diperoleh  kadar  air  sekitar  10% kemudian diserbukkan untuk memperluas permukaan sampel,  sehingga  pelarut  pengekstrak  dapat  lebih mudah berpenetrasi masuk ke dalam sel dan menyari lebih banyak zat aktif dari sampel tersebut. Pemilihan etanol  70%  dan  akuades  sebagai  cairan  penyari  zat aktif dalam serbuk cakar gambir adalah karena tidak beracun  dan  tidak  berbahaya,  sehingga  ekstrak  yang dihasilkan  dengan  mudah  dan  aman  dapat diaplikasikan pada bahan makanan atau sediaan herbal yang dikonsumsi secara oral.
Gambar 1. Berbagai struktur senyawa fenol [17] Selain  itu,  berdasarkan  penelitian  sebelumnya bahwa  daun  tanaman  gambir  memiliki  kandungan fenol  yang  tinggi antara  lain senyawa  katekin  dan turunannya, di mana struktur molekulnya terdiri atas 2 cincin  aromatik  dan lebih  dari  1  gugus  hidroksil, ditunjukkan dalam gambar 2.  Menurut Robinson [18], senyawa fenol yang diekstraksi dari tanaman memiliki sifat  polar  dengan  adanya  gugus  hidroksil  pada strukturnya tersebut, sehingga pelarut etanol 70%  dan akuades yang juga bersifat polar adalah pilihan yang tepat untuk mengekstraksinya.
Meskipun  beberapa  metode  pengujian  aktivitas antioksidan  secara  in-vitro  seperti  FRAP  (Ferric Reducing  Ability  of  Plasma)  ,  TRAP  (Trapping Antioxidant  Parameter),  conjugated  diene  dan penangkapan  radikal  hidroksil  [18],  tetapi  pengujian antioksidan  dari  ekstrak  etanol  cakar  gambir  dalam penelitian ini dilakukan dengan menggunakan DPPH sebagai  sumber  radikal  bebas  dan  pengukuran kemampuan senyawa aktif dari ekstrak etanol gambir dalam  memblock  radikal  dari  DPPH  diukur  dengan spektrofotometer  UV.  Metode  DPPH  lebih  sering digunakan dalam pengujian antioksidan, karena lebih mudah,  efektif,  dan  lebih  cepat  pengerjaannya.
Kepekaan  zat  aktif  dalam  sampel  terhadap penambahan  radikal  DPPH  cukup  tinggi  yang ditunjukkan  dengan  perubahan  spectrum  UV  yang terukur pada spektrofotometer. Umumnya profil dan potensi  antioksidan  dari    sampel  ekstrak  tumbuhan sangat mudah diketahui dengan menggunakan metode DPPH ini [19].
Pokorny et  al., [20]  menyatakan  bahwa  senyawa fenolik antara lain seperti flavonoid,  diterpen fenolik dan  asam  fenolik  memiliki  potensi  antioksidan  yang kuat. Menurut  Niki  dan  Noguchi  [21],  mekanisme antioksidan  dari  senyawa  fenolik  terutama  flavonoid antara lain adalah :
1. Pengikatan radikal bebas dari lingkungan ataupun yang produk dari peroksidasi lipid (R’, RO’, ROO’), melalui transfer elektron (atom hidrogen). 2. Menghambat reaktivitas senyawa dalam memproduksi katalis transisi metal melalui proses pengkhelatan.
3. interaksi antar antioksidan
Gambar 2. Reaksi reduksi 1,1-diphenil-2- pikrilhidrazil (DPPH) dari antioksidan [22]
Senyawa fenolik dalam ekstrak etanol cakar gambir adalah  senyawa  organik  yang  memiliki  aktivitas antioksidan,  dengan  cara  mendonorkan  atom hidrogen yang  dimilikinya  kepada  1,1-diphenyl-2- pikrilhidrazil  (DPPH).  Menurut    Prakash,  dkk  [23] bahwa  penggunaan  metode  DPPH  lebih  luas  dalam menentukan potensi  antioksidan yang dapat berperan sebagai donor elektron ataupun hidrogen. Pada reaksi antara  senyawa aktif  dalam  sampel  dengan  DPPH sebagai  radikal  bebas,  akan  terjadi  penangkapan radikal  bebas  DPPH  dari  senyawa  aktif  antioksidan yang  akan  menyebabkan  terjadinya  elektron  yang berpasangan  pada  radikal  DPPH  sehingga  warna DPPH memucat (penghilangan warna). Penghilangan atau  pemucatan    warna  akan  sebanding    dengan banyaknya elektron yang dipakai untuk berpasangan.
Hartanti et al, Total Phenol and Antioxidant …
Dehpour dkk [23] dalam penelitiannya menegaskan bahwa keberadaan senyawa antioksidan akan merubah warna  larutan  warna  ungu  gelap    (DPPH)  menjadi lebih  pucat  (warna  kuning),  dan  semakin  besar kemampuannya  untuk  menangkap  radikal  bebas DPPH, maka intensitas warnanya makin pudar [24].
Hasil perhitungan aktivitas antioksidan dan kadar total  fenol  dalam  ekstrak  cakar  gambir  dapat ditunjukkan  pada  gambar  3. Berdasarkan  parameter Molyneux P [25] kandungan antioksidan dari ekstrak
etanol cakar gambir tergolong sangat kuat karena lebih kecil dari 50 μg/mL sedangkan ekstrak air termasuk dalam kategori kuat karena berada pada range antara 50 – 100 μg/ml. Pelarut etanol dan pelarut air memiliki kepolaran  yang  hampir  sama, digolongkan  sebagai pelarut  polar  sehingga  digunakan  sebagai  larutan penyari  dalam  penelitian  ini.  Senyawa  fenol  dalam bahan  alam  sangat  efektif  diekstraksi  dengan menggunakan pelarut polar, contohnya etanol dan air [26]
Gambar 3. Diagram aktivitas antioksidan (IC50) dan kandungan total Fenol dari ekstrak cakar gambir Afinitas    setiap  senyawa  organik  dari  suatu spesimen    tanaman  akan  berbeda  berdasarkan polaritas  pelarut  sehingga  untuk  mengekstraksi senyawa-senyawa  organik tersebut,  termasuk  fenolik dalam  suatu  jaringan  tanaman  direkomendasikan menggunakan  pelarut dengan tingkat polaritas yang berbeda. Dari tabel 1 menunjukkan bahwa kandungan total fenol dalam ekstrak air cakar gambir lebih tinggi dibanding  dengan  ekstrak  etanolnya.  Hal  ini kemungkinan disebabkan oleh kepolaran yang sangat tinggi  dari  pelarut  air dengan  konstanta  dielektrik sebesar  80,37  dibandingkan  dengan  etanol  yang memiliki konstanta dielektrik sebesar 24,30, sehingga pelarut air memiliki kemampuan untuk mengekstraksi semua  senyawa    fenol  termasuk  senyawa  kompleks fenol yang terdapat dalam cakar gambir tersebut [27].
Sebaliknya  pada  ekstrak  etanol  yang  kepolarannya lebih  rendah  daripada  air  kandungan  fenolnya  lebih kecil,  karena  selektivitasnya  lebih  rendah  dalam mengekstraksi senyawa fenol dari suatu matriks.
Menurut  Prior,  dkk  [28], senyawa fenol  dapat dideteksi  dengan  pelarut  Folin-Ciocalteau  di  mana pada reaksi menunjukkan terjadinya perubahan warna kuning  dari  larutan  menjadi  warna  biru  tua. Komposisi  dari  Folin-Ciocalteau  adalah  asam fosfomolibdat-fosfotungsat  akan  direduksi  oleh senyawa feol dalam sampel sampai terbentuk  senyawa kompleks  warna  biru  dari  molibdenum  tungstate. Intensitas  warna  biru  hasil    reaksi    setara  dengan konsentrasi  ion  fenolat  yang  terjadi,  yang menunjukkan  besaran  atau  nilai  kandungan  senyawa fenolnya.
39,566 65,14 7,02 124,66 199,08 0
Ekstrak Etanol Ekstrak Air Vitamin C (Pembanding Positif) Rata-rata Aktivitas antioksidan (IC50) (μg/mL) Rata-rata Total Fenol (mg GAE/g ekstrak)
Hartanti et al, Total Phenol and Antioxidant …
(a) (b)

## (c)
Gambar 4. Kurva baku “Konsentrasi vs % inhibisi” (a)  esktrak etanol; (b) ekstrak air; (c) vitamin C
Potensi antioksidan dari ekstrak etanol dan ekstrak air cakar gambir termasuk dalam kategori antioksidan sangat kuat dan antioksidan kuat. Nilai IC50 ekstrak etanol  cakar  gambir  lebih  besar  dari  pada  ekstrak airnya  karena  kemungkinan  kandungan  komponen aktif  pada  ekstrak  etanol  tergolong  fenol  sederhana ataupun  dari  jenis  tannin  yang  terkondensasi  dan memiliki  aktivitas  antioksidan  yang  lebih  kuat dibandingkan  dengan  senyawa  fenol  yang  terikat dengan senyawa kompleks dalam ekstrak airnya. Efek antioksidan terjadi dengan mekanisme pelepasan atom hidrogen  dari  kandungan  fenol  dari  cakar  gambir untuk  berpasangan  dengan  elektron  bebas  (radikal) yang  terdapat  dalam  DPPH  (Gambar  3).  Tomsone, dkk [29] menyatakan bahwa aktivitas penangkal radikal bebas dari DPPH dari suatu senyawa yang diekstraksi dalam  tanaman  atau  bahan  pangan  akan  berbeda tergantung  pelarut  yang  digunakan  dan  karakteristik
dari  suatu    bahan  pangan.  Gambar  4  menunjukkan kecenderungan  meningkatnya  persen  penghambatan radikal  bebas  DPPH  berbanding  lurus  dengan konsentrasi ekstrak etanol dan ekstrak air cakar gambir serta  konsentrasi    Vitamin  C  sebagai  antioksidan pembanding  dalam  penelitian  ini.  Besarnya  aktivitas dari  penangkalan  radikal  bebas  DPPH  akan tergantung  pada  penambahan  ekstrak  hingga  batas konsentrasi tertentu, dan akan mengalami penurunan kembali  dengan  penambahan  konsentrasi  yang  lebih besar [30].

## KESIMPULAN
Dari hasil penelitian ini dapat disimpulkan kandungan fenol ekstrak air dari cakar gambir  199.08 mg GAE/g ekstrak  lebih besar daripada ekstrak  etanolnya 124.66 mg  GAE/g  ekstrak, aktivitas  antioksidan  (IC50)
Hartanti et al, Total Phenol and Antioxidant …
ekstrak etanol cakar gambir 39.566 μg/mL lebih besar daripada  aktivitas  antioksidan  (IC50)  ekstrak  airnya sebesar 65.140 μg/mL, dengan IC50 dari antioksidan pembanding Vitamin C sebesar 7.02 μg/mL.

## DAFTAR PUSTAKA
[1] Young,  I.  S.,  Woodside,  J.  V.  2001.  Antioxidants  in health and disease. J Clin Pathol. 54:176–86.
[2] Sivanandham, V. 2011. Free Radicals In Health And Diseases - A  Mini  Review,  Pharmacologyonline  1: 1062-1077.
[3] Jang, H.D., Chang, K.S., Huang, Y.S., Hsu, C.L., Lee, S.H.  and  Su,  M,S.  2007.  Principal Phenolic Phytochemicals  and Antioxidant Activities  of Three Chinese Medisinal Plants. Food Chemistry 103: 749– 756.
[4] Buyukokurodlu,  M.E,  Ggulcin,  I.,  Oktay,  M., Kufreviodlu,  O.I.  2001.  In Vitro Antioxidant Properties of Dantrolene Sodium, Pharmacol Res., 44, 491-495.
[5] Novanty  N,  Pangkahila  W,  Ayu  DN.  2021.
Administration  of Ethanol Extract  of  Bajakah Tampala  (Spatholobus  littoralis  Hassk) Stem Decreased Reactive Oxygen Species, Visceral Fat and Body Weight  of Obese Rats,    Neurologico  Spinale Medico Chirurgico, 4(1), hal. 32-36.
[6] Fernández-Sánchez A, Madrigal-Santillán E, Bautista M. 2011. Inflammation, Oxidative Stress, and Obesity. International Journal of Molecular Sciences. 12(5) pp. 3117-3132.
[7] Ozsoy, N., Can, A., Yanardag, R. and Akev, N. 2008.
Antioxidant activity of  Smilax excelsa L. leaf  extracts. Food Chemistry 110: 571–583. Rismana, E., Ningsih, S. & Fachrudin, F., 2017. In Vitro Study of Xanthine Oxidase Inhibitory  of Gambir  (Uncaria  gambir) Hunter Roxb extracts. Pharmacogn J, 9(6), pp. 862-865 [8] Kumaran,  A.,  Karunakaran,  R.  2006.  Nitric Oxide Radixal Scavenging Active Components From Phyllanthus Emblica L. Plant Foods Hum. Nutr, 61, 1-5.
[9] Warsidah,  Fadly,  D.,  Bohari.  2020.  Antibacterial  and Anti-inflammatory  Activities  of   Ethanol  Extract Obtained  from  The  Hooks  of   Uncaria  tomentosa (Wild.  Ex  Schult)  DC  Originated  Kalimantan, Indonesia. Syst. Rev. Pharm. 11, 65–70.
[10] Mega  Sari  Juane  Sofiana,  Warsidah,  Dodi  Iskandar. 2020.  Cytotoxicity  Activities  of   Ethanol  Extract  of Hooks  Uncaria  tomentosa  West  Kalimantan.  The Journal of  Food and Medicinal Plants. 1 (1) hal. 1-4.
[11] Iskandar,  D,  Warsidah.  2020.    Qualitative Phytochemical Screening and Antioxidant Activity of Ethanol Root Extract of  Spatholobus littoralis Hassk.
The Journal of  Food and Medicinal Plants. 1 (1) hal. 13-15.
[12] Saputera,  Mochammad  MA,  Marpaung,  T.  W.  A.,  & Ayuchecaria, N. 2019. Konsentrasi Hambat Minimum (KHM)  Kadar  Ekstrak  Etanol  Batang  Bajakah Tampala LA (Spatholobus littoralis Hassk) Terhadap Bakteri Escherichia  Coli  Melalui  Metode  Sumuran. Jurnal Ilmiah Manuntung, 5(2), 167
[13] Sazwi,  N.  N.,  Nalina,  T.  &  Rahim,  Z.  H.  A.  2013. Antioxidant  and Cytoprotective Activities  of   Piper Betle, Areca catechu, Uncaria Gambir and Betel Quid With  and Without Calcium Hydroxide.  BMC Complementary and Alternative Medicine, Volume 13, pp. 351.
[14] Amir, M. et al. 2012. Phytochemical Analysis and In Vitro Antioxidant Activity  of   Uncaria Gambir. International Journal of  Green Pharmacy, Volume 6, pp. 67-72
[15] Anggraini,  T.,  Tai,  A.,  Yoshino,  T.  &  Itani,  T.  2011. Antioxidative Activity and Catechin Content of Four Kinds  of  Uncaria Gambir Extracts  from  West Sumatra, Indonesia. African Journal of  Biochemistry Research, 5(1), pp. 33-38.
[16] Melia, S., Novia, D. & Juliyarsi, I. 2015. Antioxidant and Antimicrobial Activities  of Gambir  (Uncaria gambir  Roxb) Extracts  and Their Application  in Rendang.  Pakistan  Journal  of   Nutrition,  14(12),  pp. 938-941.
[17] Robinson,  T.  1995.  Kandungan  Organik  Tumbuhan Tinggi,  diterjemahkan oleh  Kokasih  Padmawinata, ITB, Bandung, pp. 47.
[18] Shivaprasad, H.N., Mohan, S., Kharya, M.D.,Shiradkar, M.R.,dan  Lakshman,  K.,  2005.  In-Vitro  Models  for Antioxidant  Activity  Evaluation:  a  review, http://www.pharmainfo.net/reviews/vitro-models- antio
[19] Shalaby,  E.A.,  Shanab,  S.M.M.  2013.  Antioxidant Compounds, Assays of Determination and Mode of Action.  African  Journal  of   Pharmacy  and Phamacology 7(10):528–539.
[20] Pokorny,  J., Yanishlieva,  N.,  dan  Gordon,  M.  2001. Antioxidant  in  Food;  Practical  Applications,  Wood Publishing Limited, Cambrodge, England, pp. 1-123.
[21] Niki,  E.,  dan  Noguchi,  N.  2000.  Evaluation  of Antioxidant  Capacity  :  What  Capacity  is  Being Measured by Which Method, IUBMB Life, 50, 323- 329.
[22] Ningsih,  S.  et  al.  2014.  Evaluation  of Antilipid Peroxidation Activity  of Gambir Extract  on Liver Homogenat In Vitro. Int.J. PharmTech Res, 6(3), pp. 982-989.
Hartanti et al, Total Phenol and Antioxidant …
[23] Prakash,  A.,  Rigelhof,  F.,  dan  Miller,  E.  2001. Antioxidant  Activity.  Medallliaoan  Laboratories,  Vol 19 no : 2, 1-4
[24] Dehpour,  A.A.,  Ebrahimzadeh,  M.A.,  Nabavi,  S.F. 2009.  Antioxidant  Activity  of   Methanol  Extract  of Ferula Assafoetida and its Essential Oil Composition. Grasas Aceites, 60 (4), 405-412.
[25] Dhalimi  A.  2006.  Permasalahan  Gambir  (Uncaria gambir)  di  Sumatera Barat  dan  Alternatif Pemecahannya. Jurnal Perspektif, 5(4): 46-59.
[26] Kuncahyo, I., dan Sunardi. 2007. Uji Aktivitas Ekstrak Belimbing Wuluh ( Averhoa bilimbi L.) terhadap DPPH, SNT, 1-9.
[27] Sirwutubun, M., Ludong, M. M., & Rawung, D. 2016. Pengaruh Konsentrasi Etanol Terhadap Karakteristik Ekstrak  Pewarna  Alami  Buah  Merah  (Pandanus Conoideus  Lamk.)  Dan  Aplikasinya  Pada  Produk Pangan. In COCOS, Vol. 7, No. 5.
[28] Prior, R.L., Wu, X. & Schaich, K. 2005. Standardized Methods  for The Determination  of Antioxidant Capacity  and Phenolics  in Foods  and Dietary Supplements. Journal of  Agricultural and Food Chemistry . 53(10), 4290-4302
[29] McDonald,  S.,  Prenzler,  P.D.,  Antolovich,  M.  and Robards, K. 2001. Phenolic Content and Antioxidant Activity of Olive Extracts. Food Chemistry, 73: 73- 84.
[30] Molyneux,  P.  2004.  The  Use  of  The  Stable  Free Radical Diphenylpicrylhydrazyl (DPPH) for Estimating Antioxidant Activity, Songklanakarin, J.Sci. Technol., 26 (2), 211-219.