## Original Research Paper

## EKSPRESI HYPOXIA INDUCIBLE FACTOR 1 ALPHA (HIF 1α) PADA PROSTATIC INTRAEPITHELIAL NEOPLASIA (PIN) DAN BENIGN PROSTATIC HIPERPLASIA
(BPH)
Asmirani Sudin 1 , Muhammad Husni Cangara 1,2* , Tarsisia Truly Djimahit 1,2 , Upik Anderiani Miskad 1,2 , Djumadi Achmad 1,2 , Suryani Tawali 3
1 Departemen Patologi Anatomik, Fakultas Kedokteran, Universitas Hasanuddin
2 Laboratorium Patologi Anatomik, Rumah Sakit Universitas Hasanuddin
3 Departemen Kesehatan Masyarakat, Fakultas Kedokteran, Universitas Hasanuddin
*Email Corresponding: drhusni1977@gmail.com
Page : 274-281

## ABSTRAK
Prostatic Intraepithelial Neoplasia (PIN) adalah lesi premaligna yang merupakan prekusor  kanker  prostat. Benign  Prostatic  Hyperplasia (BPH)  adalah  salah  satu penyakit kronik yang paling umum yang terjadi pada laki-laki. Tujuan penelitian ini  adalah  untuk  mengetahui  pola  ekspresi Hypoxia  Inducible  Factor  1  Alpha (HIF 1α) pada PIN dan BPH. Penelitian ini merupakan suatu penelitian observasi analitik dengan desain cross sectional yang dilakukan di  Laboratorium Patologi Anatomik  Rumah  Sakit  Universitas  Hasanuddin  dan  Rumah  Sakit  Umum  Pusat Dr.  Wahidin  Sudirohusodo  Makassar  mulai  bulan  April  2023  sampai  Agustus 2023.  Kami  mengumpulkan  dan  mengelompokkan  seluruh  sampel  yang memenuhi  syarat  berdasarkan  pemeriksaan  histopatologi  PIN  dan  BPH  dan kemudian dilakukan pemeriksaan imunohistokimia untuk menilai protein HIF 1α. Hasil  penelitian  ini  adalah  protein  HIF  1α  terekspresi  kuat  pada  PIN  dan terekspresi negatif sampai lemah pada BPH.

## ABSTRACT
Prostatic  Intraepithelial  Neoplasia  (PIN)  is  a  premalignant  lesion  that  is  a precursor to prostatic cancer. Benign Prostatic Hyperplasia (BPH) is one of the most common chronic diseases that accurs in men. The aim of this study was to determine the expression pattern of Hypoxia Inducible Factor 1 Alpha (HIF 1α) in PIN and BPH. This research is an analytical observational study with a cross sectional design conducted at the Anatomic Pathology Laboratory of Hasanuddin University Hospital and Dr.Wahidin Sudirohusodo Makassar from Aprl 2023 to August  2023.We  collected  and  grouped  all  eligible  samples  based  on histopathological  examination  of  PIN  and  BPH  and  then  carried  out immunohistochemical  examination  to  assess  the  HIF  1α  protein.  The  results  of this study are that the HIF 1α protein is strongly expressedin PIN and negatively to weakly expressed in BPH.
Kata Kunci :
HIF 1α,
BPH,
PIN,
prostat Keywords:
HIF 1α,
BPH, PIN, prostat
Published by: Tadulako University, Managed by Faculty of Medicine. Email: healthytadulako@gmail.com Phone (WA): +6285242303103 Address: Jalan Soekarno Hatta Km. 9. City of Palu, Central Sulawesi, Indonesia

## PENDAHULUAN
Prostat  merupakan  organ  retroperitoneal yang  mengelilingi  leher  kandung  kemih  dan uretra, bagian inferior bergabung dengan otot. Uretra  dari  leher  kandung  kemih  menembus prostat  hingga  ke  apex  prostat. Duktus ejakulatori  dan  vesika  seminalis  menembus
prostat  dari  posterior  dan  bermuara  ke  uretra pars  prostatika.  Kelenjar  prostat  bersama kelenjar  bulbouretralis  dan  vesika  seminalis merupakan  kelenjar  asesoris  pada  sistem reproduksi  pria  yang  menghasilkan  produk sekretorik, bercampur dengan sperma membentuk  semen.  Pada  bulan  ke  3  usia
kehamilan,  kelenjar  prostat  berkembang  dari invaginasi  epitelial  dari  sinus  urogenital posterior.  Selama  periode  prepubertas,  prostat manusia  belum  begitu  terlihat  tetapi  mulai mengalami  perubahan  morfologik  ke  fenotif dewasa  pada  masa  awal  pubertas.  Kelenjar prostat terus membesar sampai mencapai berat rata-rata 20 gram pada usia 25-30 tahun 1,2 .
Pada  prostat  orang  dewasa  parenkim prostat  dibagi  menjadi  4  bagian,  yaitu  zona perifer,  zona  sentral,  zona  transisional  dan zona periuretral. Zona periferyang mengandung  sekitar  70%  komponen  kelenjar dan stroma yang longgar, pada zona ini sering terjadi  inflamasi  dan  karsinoma  prostat.  Zona sentral  yang  terdiri  dari  25%  komponen kelenjar  dengan  stroma  yang  padat  dan  zona ini  resisten  terhadap  karsinoma  ataupun inflamasi.  Zona  transisional,  terdiri  dari komponen  kelenjar  yang  lebih  sedikit  dari zona  perifer  dengan  stroma  yang  lebih  padat dan  serabut  otot  yang  tersusun  interlacing. Pada  zona  ini  sering  terjadi  hiperplasia  sel parenkim yang dikenal sebagai Benign Prostat Hiperplasia  (BPH).  Zona  Periuretral,  terdiri dari  mukosa  kelenjar  dan  submukosa.  Secara histologi,  prostat  terdiri  dari  kelenjar-kelenjar yang  dipisahkan  oleh  stroma  fibromuskular yang  melimpah.  Kelenjar  dilapisi  oleh  dua lapis sel yaitu sel luminal dan sel basal. Sel-sel luminal  sekretorik  berbentuk  kuboid  hingga kolumnar,  dengan  inti  kecil,  bulat,  nukleoli tidak  mencolok,  kromatin  granular  halus, sitoplasma  pucat  hingga  jernih,  yang  mengisi sebagian  besar  (73%)  dari  volume  epitel.  Sel- sel  basal  prostat  berbentuk  pipih,  memanjang di pinggiran kelenjar, di atas membran basal 3,4 .
Kanker  adalah  suatu  kondisi  dimana terjadi pertumbuhan sel yang tidak normal dan tidak  terkendali  yang  dapat  menyerang  dan menyebar  ke  struktur  jaringan  di  sekitarnya 5 . Kanker dapat terjadi di hampir seluruh bagian tubuh  manusia 6 .  Kanker  prostat  merupakan kanker  terbanyak  ke  empat  di  dunia  dan kanker  terbanyak  ke  dua  pada  laki-laki 7 .
Angka  kasus  baru  pada  tahun  2018  mencapai 1.276.106  jiwa  dengan  angka  mortalitas mencapai  358.989  jiwa  (3,8%  dari  seluruh kematian  akibat  kanker  pada  laki-laki).    Di Asia,  insiden  kanker  prostat  rata-rata  adalah 7,2  per  100.000  pria  pertahun.  Di  Indonesia, jumlah  penderita  kanker  prostat  di  tiga  RS pusat  pendidikan  (Jakarta,  Surabaya  dan Bandung)  selama  8  tahun  terakhir  adalah 1.102 pasien dengan rerata usia 67,18 tahun 8 . Selama proses transformasi keganasan, sel berevolusi  secara  bertahap  dari  tipe  jinak hingga  ganas.  Kondisi  premaligna  banyak ditemui  pada  banyak  kanker  termasuk bronkus, kulit, urothelium, saluran pencernaan,  payudara  dan  prostat 9 . Prostatic Intraepithelial  Neoplasia (PIN)  adalah  lesi premaligna  yang  merupakan  prekusor  kanker prostat.  Ditemukan anak inti  /  nukleolus yang menonjol  di  dalam  struktur  adalah  salah  satu cara untuk mengidentifikasi kelainan tersebut. Ada  empat  pola  utama  dari  PIN  yang  telah dijelaskan yaitu bentuk tufting, micropapillary , cribriform dan flat .  Belum diketahui secara jelas bagaimana PIN berkembang menjadi karsinoma. Lebih banyak kasus  dengan  fokus  PIN  ditemukan  dengan fokus  keganasan,  mengindikasikan  adanya hubungan  antara  PIN  dan  adenokarsinoma. Insiden  PIN  meningkat  seiring  bertambahnya usia.  Keduanya  secara  morfologi  berupa  lesi multifocal  yang  berada  pada  zona  perifer. Beberapa perubahan molecular yang ditemukan  pada  karsinoma,  juga  ditemukan pada PIN, seperti gen ETS 10 .
Benign  Prostatic  Hyperplasia  (BPH) adalah  salah  satu  penyakit  kronik  yang  paling umum  yang  terjadi  pada  laki-laki.  Angka kejadiannya secara bertahap meningkat seiring bertambahnya  usia,  dan  sekitar  50%  pria berusia  di  atas  50  tahun.  Secara  histologi, jaringan  BPH  berubah  menjadi  hiperplasia epitel  dan  stroma  karena  ketidakseimbangan antara  antara  proliferasi  sel  dan  kematian  sel. Androgen ( dihydrotestosterone / DHT)
dibentuk  di  prostat  dari  testosterone  melalui aktivitas  enzim  yang  hampir  seluruhnya berada  pada  stroma  prostat,  yaitu  5α- reductase.  DHT  memiliki  afinitas  kuat  pada reseptornya  ( Androgen  Receptor /  AR)  di  inti sel  stromal  dan  sel  epitel  prostat.  Kompleks yang terbentuk kemudian menstimulasi transkripsi  gen  androgen-dependent,  termasuk juga  beberapa  faktor  pertumbuhan  dan reseptornya. Sel stromal memproduksi
Fibroblast Growth Factor (FGF) yang menstimulasi  perkembangan  epitel  selama perkembangan embrionik 11 .
Hypoxia  Inducible  Factor  1  (HIF  1) merupakan  faktor  transkripsi  yang  terdiri  dari 2  sub  unit  yaitu    HIF  1α  dan  HIF  1β  yang berperan  penting  dalam  respon  hipoksia.  HIF 1α  termasuk  dalam  superfamily  bHLH-PAS dari  protein  yang  mengandung-domain  basic- helix-loop-helix  (bHLH)  dab  PER-ARNT- SIM  (PAS)  yang  terlibat  dalam  pengikatan DNA dan dimerisasi. HIF 1α  juga mengandung  domain  oxygen  –  dependent degradation (ODDD) dan dua domain transaktivasi  (N-TAD  dan  C–TAD).  C-TAD berinteraksi dengan koaktivator seperti CBP/p300  memodulasi  transkripsi  gen  pada saat  hipoksia.  N-TAD  bertanggung  jawab menstabilisasi HIF-1α terhadap degradasi. HIF 1α  banyak  terekspresi  pada  beberapa  kanker, termasuk kanker prostat 12 .
Penelitian  ini  memiliki  urgensi  yang sangat  penting  karena  Prostatic  Intraepithelial Neoplasia (PIN) dan Benign Prostatic Hyperplasia (BPH) adalah dua kondisi prostat yang  memiliki  implikasi  kesehatan  yang signifikan.  Melalui  pemahaman  pola  ekspresi HIF  1α  dalam  kedua  kondisi  ini,  kita  dapat lebih mendalam memahami mekanisme biologis yang mendasari perkembangan kanker  prostat  dan  pembesaran  prostat  jinak. Hasil  penelitian  ini  dapat  memberikan wawasan  yang  berharga  untuk  pengembangan strategi pencegahan, diagnosis, dan pengobatan  yang  lebih  efektif  untuk  kedua
kondisi tersebut, sehingga dapat meningkatkan kualitas  hidup  dan  harapan  hidup  pria  yang terkena  masalah  prostat  ini.  Tujuan  penelitian ini adalah untuk mengetahui pola ekspresi HIF 1α  pada  PIN  dan  BPH,  serta  melihat  apakah ada perbedaan bermakna antara PIN dan BPH.

## BAHAN DAN CARA
Desain Penelitian. Penelitian kami merupakan  suatu  penelitian  observasi  analitik dengan desain cross-sectional untuk mengetahui  ekspresi  HIF  1α  pada  PIN  dan BPH yang dilakukan di Laboratorium Patologi Anatomik Rumah Sakit Universitas Hasanuddin Makassar mulai bulan April 2023 sampai Agustus 2023. Subjek Penelitian. Penelitian ini melibatkan  populasi  berupa  semua  arsip  blok paraffin  jaringan  prostat  yang  dikirim  ke Laboratorium  Patologi  Anatomi  RSUP  DR. Wahidin Sudirohusodo dan berdasarkan pemeriksaan histopatologi didiagnosis sebagai PIN  dan  BPH.  Kriteria  inklusinya  adalah jaringan  tumor  prostat  yang  diterima  di Laboratorium  Patologi  Anatomi  RSUP  DR. Wahidin  Sudirohusodo  Makassar  yang  di diagnosa  oleh  dua  ahli  patologi  sebagai  PIN dan  BPH,  serta  blok  paraffin  jaringan  dengan PIN  dan  BPH  yang  diproses  sesuai  standar imunohistokimia.  Kriteria  eksklusinya  adalah Jaringan  dengan  diagnosis  PIN  dan  BPH dengan informasi yang tidak legkap mengenai identitas  pasien,  data  klinik  dan  keterangan makroskopik.  Sediaan  blok  paraffin  dari jaringan  prostat  dengan  diagnosis  PIN  dan BPH  yang  sudah  rusak,  sedikit,  habis  atau tidak  dapat  diproses  ulang  untuk  pewarnaan imunohistokimia.  Kriteria  drop  out  adalah sediaan jaringan histopatologi yang mengalami kerusakan saat prosesing
Alokasi  Subjek. Kami  mengumpulkan dan  mengelompokkan  seluruh  sampel  yang memenuhi  syarat  berdasarkan  pemeriksaan histopatologi sebagai PIN dan BPH. Kemudian kami mengumpulkan seluruh
sampel  yang  memenuhi  syarat  untuk  diambil blok  paraffinnya  dan  dilanjutkan  dengan pewarnaan imunohistokimia.
Prosedur Pewarnaan Hematoxilin Eosin. Setelah  pengumpulan  blok  jaringan, jaringan  didinginkan  kembali  dalam  lemari  es, kemudian  dipotong  dengan  mikrotom  setebal  3 µm. Selanjutnya jaringan hasil potongan mikrotom dimasukkan  ke  dalam water  bath dengan      suhu ± 60OC.  Potongan  dalam water  bath diambil menggunakan  kaca  objek polysilane ,  ditiriskan sampai  kering,  kemudian  diletakkan  di  atas  slide warmer  bersuhu  ±  60OC  selama  15  menit, kemudian  dilakukan  pewarnaan.    Slide  jaringan yang  telah  siap  untuk  diwarnai  lalu  direndam dalam 2 wadah larutan xylol masing-masing selama 5  menit,  kemudian  direndam  dalam  2  wadah larutan  alkohol  95%  masing-masing  selama  2 menit,  dilanjutkan  dengan  merendam  slide  dalam larutan alkohol 70% selama 2 menit. Slide tersebut selanjutnya  dibilas  dengan  air  mengalir  selama  5 menit  lalu  direndam  dalam  larutan Hematoxylyn Mayer selama  15  menit  dan  dibilas  kembali dengan  air  mengalir  sampai  slide  berwarna  biru. Setelah itu slide direndam dalam larutan Eosin 1% selama  5  menit,  kemudian  direndam  kembali dalam  deretan  alkohol,  dimulai  dari  alkohol  70% selama 2-5 menit kemudian dalam 2 wadah larutan alkohol  95%  masing-masing  selama  2-5  menit. Setelah  langkah  dehidrasi  tersebut,  slide  direndam dalam  larutan carbol  xylol selama  5  menit,  lalu direndam  dalam  larutan xylol selama  2-5  menit. Slide tersebut  lalu  ditiriskan  dan  ditutup menggunakan deck  glass dengan  bantuan  entelan sebagai  cairan  perekat.  Slide-slide  yang  telah ditutup  tersebut  siap  untuk  dilihat  di  bawah mikroskop cahaya.

## Prosedur  Pewarnaan  Imunohistokimia.
Jaringan  pada  blok  parafin  dipotong  dengan ketebalan  3-4  mikron  dan  direkatkan  pada kaca  objek poly-L-lysine .  Slide  kemudian dipanaskan selama 1 jam di atas hot plate pada suhu  58-60 O C,  selanjutnya  slide  didinginkan. Kemudian  dilakukan  deparafinisasi  dengan xylene , 2 kali masing- masing selama 5 menit dan direhidrasi masing-masing selama 5 menit berturut-turut  dengan  alkohol  96%,  alkohol
80%  dan  alkohol  70%.  Kemudian  dicuci dengan  air  mengalir  selama  5  menit.  Slide dimasukkan  ke  dalam  larutan  TRS,  lalu dipanaskan  pada microwave selama  10 menit. Setelah  didinginkan  dan  dicuci  dengan  PBS  2 kali,  masing-masing  selama  5  menit.  Lalu pinggir jaringan ditandai, selanjutnya dilakukan peroksidase block selama 15 menit. Preparat  dicuci  kembali  dengan  PBS  2  kali, masing-masing  selama  5  menit.  Selanjutnya slide diwarnai dengan pewarnaan imunohistokimia berdasarkan standar protocol Detection Kit dari Cell Marque , menggunakan HIF  1α Rabbit  Monoclonal  Primary  Antibody concentrated dengan dilusi 1:100. Sediaan lalu dicuci  Kembali  dengan  PBS  2  kali,  masing- masing  selama  5  menit.  Kemudian  diberi Ultratek  HRP  ( ScyTek )  selama  10  menit. Sediaan  dicuci  kembali  dengan  PBS  2  kali, masing-masing  selama  5  menit.  Selanjutnya sediaan diinkubasi dengan chromogen Diaminobenzidine (DAB)  dan  dicuci  dengan air  mengalir  selama  5  menit,  kemudian direndam  di  larutan  hematoxylin  selama  5 menit. Sediaan lalu dicuci kembali dengan air mengalir.  Setelah  itu  dilakukan  dehidrasi dengan  alcohol  bertingkat  (alkohol  70  %, alkohol  80%,  alkohol  96%)  masing-masing selama 5 menit lalu dilakukan clearing ( xylol I, xylol II) masing-masing selama 5 menit. Slide lalu  dikeringkan,  kemudian  diberikan  entelan lalu  ditutup  dengan  deck  glass.Ekspresi  HIF 1α  dinyatakan  positif  jika  terdapat  warna coklat  pada  inti  sel  yang  terlihat  dengan mikroskop cahaya.
Definisi. Benign  Prostatic  Hyperplasia (BPH)  adalah  lesi  kelenjar  prostat  yang didiagnosa  oleh  patolog  secara  histopatologi dengan  pewarnaan Hematoxilin  Eosin ,  secara mikroskopik  menunjukkan  proliferasi  epitel kelenjar  prostat  lebih  dari  dua  lapis,  inti  non atipik,  membrane  basal  intak. Prostatic Intraepithelial  Neoplasia (PIN)  adalah  lesi kelenjar  prostat  yang  didiagnosa  oleh  patolog secara histopatologi dengan pewarnaan
Hematoxilin Eosin , secara mikroskopik menunjukkan proliferasi epitel kelenjar prostat dengan  inti  atipik,  pleomorfik,  hiperkromatik, dan  sel-sel  epitel  tersusun  dengan  jarak  tidak beraturan dan bertumpuk, sel basal tidak intak. Ekspresi HIF 1α adalah akumulasi protein HIF 1α pada inti sel yang dideteksi dengan metode imunohistokimia. Ekspresi HIF 1α  dinyatakan positif  bila  terlihat  warna  coklat  pada  inti  sel dengan  menggunakan  mikroskop  cahaya. Imunoekspresi  HIF  1α  dinyatakan  dalam estimasi semi-kuantitatif dengan Immunoreactive  Score (IR  Score)  didapatkan dari  hasil  perkalian  antara  intensitas  dengan proporsi area terwarnai, sebagai berikut: Intensitas:  skor  0  =  tidak  ada  inti  sel  tumor yang  terwarnai;  skor  1  =  inti  sel  tumor terwarnai  lemah;  skor  2  =  inti  sel  tumor terwarnai  sedang;  skor  3  =  inti  sel  tumor terwarnai kuat.
Proporsi  area  yang  terwarnai:  skor  0  =  tidak ada  area  yang  terwarnai  atau  area  yang terwarnai  sampai  <  5  %;  skor  1  =  area  yang terwarnai  5  %  sampai  25  %;  skor  2  =  area yang terwarnai > 25 % sampai 50 % dan skor 3 = area yang terwarnai > 50 %.
IR  SCORE  =  Intensitas  x  Proporsi  Area Terwarnai.  Dengan  nilai  minimal  0  dan  nilai maksimal 9.
Interpretasinya  sebagai  berikut:  Negatif (0) = skor 0; Positif Lemah (+1) = skor 1- 3; Positif Kuat (+2) = skor 4-9.
Analisis  Data. Kami  menggunakan software  statistics  SPSS  versi  26.0  untuk analisis  data.  Semua  data  yang  diperoleh dari  hasil  penelitian  dicatat,  kemudian dilakukan  analisis  yang  sesuai  tujuan  dan jenis  data,  yaitu  analisa  univariat  dan analisa bivariat. Analisis univarat , d igunakan
untuk mendeskripsi
karakteristik data diperoleh berupa distribusi f rekuensi usia,  BPH,  PIN  dan ekspresi HIF  1α  yang  disajikan  dalam bentuk  tabel.  Analisis  bivarat  dengan menggunakan  uji  Chi-Square digunakan
untuk  sampel  tidak  berpasangan  yang datanya berskala nominal dikotom. Uji ini untuk  menganalisa  variable  berskala nominal  antara  2  kelompok  atau  lebih yang  tidak  berpasangan.  Dalam  hai  ini untuk  membandingkan  frekuensi  ekspresi HIF 1α pada PIN dan BPH.

## HASIL
Total  jumlah  sampel  dalam  penelitian  ini sebanyak  20  sampel,  Data  uji  univariat karakteristik subjek disajikan pada tabel 1.

## Tabel 1. Karakteristik Subjek
Karakteristik Jumlah Persentase Usia: < 60 tahun ≥ 60 tahun 4 16 20 % 80 % Diagnosa: BPH PIN 10 10 50 % 50 % IR score HIF 1α: Negatif Positif Lemah Positif Kuat 4 6 10 20 % 30 % 50 %
PIN: Prostatic  Intraepithelial  Neoplasia ,  BPH: Benign Prostatic  Hyperplasia, IR Score : Immunoreactive Score, HIF 1α: Hypoxia Inducible Factor 1 Alpha.
Berdasarkan  kategori  usia,  ada  4  orang (20%) berusia < 60 tahun dan 16 orang (80%) berusia  ≥  60  tahun.  Dari  hasil  pewarnaan imunohistokimia  HIF  1α  yang  terekspresi positif  kuat  ada  10  sampel  (50%),  terekspresi positif  lemah  6  sampel  (30%)  dan  tidak terekspresi / negatif sebanyak 4 sampel (20%).
Tabel 2. Ekspresi Hypoxia Inducible Factor 1 Alpha (HIF 1α)  Pada Benign Prostatic
Hyperplasia (BPH)  dan Prostatic  Intraepithelial Neoplasia (PIN) Diagnosa Ekspresi HIF 1α Jumlah (%) P Value Negatif (%) Lemah (%) Kuat (%) BPH 4 (40%) 6 (60%) 0 (0%) 10 (100%) 0,000 PIN 0 (0%) 0 (0%) 10 (100%) 10 (100%) Total 4 (20%) 6 (30%) 10 (50%) 20 (100%)
Tabel  2  menunjukkan  hasil  uji  analis mengunakan  metode  chi  square  antara ekspresi  HIF  1α  dengan  BPH  dan  PIN.  Hasil analisis  menunjukkan  nilai  p=0,000  (p<0,05) yang  berarti  terdapat  perbedaan  bermakna antara  kelompok  BPH  dan  PIN  dengan ekspresi  HIF  1α.  Pada  kelompok  BPH sebanyak  10  sampel  (100%),  ditemukan  4 sampel  (40%)  menunjukkan  HIF  1α  tidak terekspresi/negatif, 6 sampel (60%)
menunjukkan HIF 1α terekspresi positif lemah dan  HIF  1α  yang  terekspresi  positif  kuat sebanyak 0 sampel (0%). Pada kelompok PIN sebanyak  10  sampel  (100%)  menunjukkan  10 sampel (100%) menunjukkan HIF 1α terekspresi  positif  kuat,  tidak  ditemukan  HIF 1α  dengan  ekspresi  positif  lemah  ataupun negatif pada kelompok ini.
.
Gambar 1. Ekspresi HIF 1α pada BPH dan PIN. (A) BPH, HIF 1α terekspresi negatif. (B) BPH, HIF 1α terekspresi positif lemah pada inti sel tumor. (C) PIN, HIF 1α terekspresi positif kuat pada inti sel tumor.

## PEMBAHASAN
Hiperplasia prostat adalah penyakit urologi umum yang menyerang sebagian besar pria lanjut usia. Dapat diklasifikasikan sebagai Benign prostatic hyperplasia (BPH), Prostatic Intraepithelial  Neoplasia (PIN), atau  kanker prostat  berdasarkan  tingkat  keparahannya. Gejalanya berupa urgensi, frekuensi, nocturia , berkurangnya kekuatan aliran urin, sulit untuk memulai  dan  menghentikan  urinasi  yang dikenal sebagai lower urinary tract symptoms 13 .
Pada penelitian ini didapatkan karakteristik  usia  dengan  prevalensi  tertinggi kejadian BPH dan PIN berada pada usia ≥ 60 tahun.  Hal  ini  sejalan  dengan  penelitian Herman  et  al,  yang  menunjukkan  bahwa kejadian  BPH  lebih  banyak  pada  usia  ≥  60 tahun  67,5%  dan  usia  <60  tahun  sebanyak 32,5% 9 .  Penelitian  lainnya  dari  Josephine  A, menjelaskan  bahwa  pada  pemeriksaan  otopsi ditemukan  hiperplasia  nodular  terjadi  sekitar
20% pada usia <40 tahun, angka ini meningkat menjadi 70% pada usia 60 tahun dan menjadi 90% pada dekade kedelapan kehidupan 14 . HIF1α  ditemukan  dominan  terekspresi kuat  pada  PIN  sebanyak  10  sampel  (50%), sedangkan  pada  BPH  terekspresi  lemah sebanyak 6 sampel (30%) dan tidak terkspresi sebanyak  4  sampel  (20%).  Hal  ini  sejalan dengan  studi  dari  Zhong  et  al  dimana overekspresi  HIF1α    terjadi  pada  11  dari  14 sampel  PIN  dan  normal  ekspresi  atau  negatif terjadi pada 0 dari 3 BPH 15 .
Oksigen sangat penting untuk kelangsungan  hidup  dan  fungsi  normal  sel eukariotik,  karena  berperan  dalam  produksi energi  mitokondria  dan  sebagai  co-faktor  / substrat  untuk  banyak  enzim.  Dalam  kondisi tekanan  oksigen  rendah,  sel-sel  normal mengalami peralihan metabolisme dari mitokondria  menuju  peningkatan  glikolisis untuk  mempertahankan  tingkat  ATP  yang cukup. Keadaan hipoksia merupakan ciri khas
A B C
tumor  padat.  Pembuluh  darah  yang  ada mendukungpertumbuhan  sel  kanker  hingga massa  tumor  melebihi  2  mm3.  Setelah  itu, pertumbuhan  tumor  bergantung  pada  suplai oksigen yang disediakan oleh pembuluh darah baru  dalam  proses  angiogenesis.  Namun, vaskularisasi seringkali mengarah pada pembentukan  pembuluh  darah  yang  tidak terorganisr  atau  bocor,  yang  mengakibatkan terciptanya area hipoksia atau bahkan anoksik.Meskipun  demikian,  korelasi  antara terjadinya  daerah  hipoksia  dan  peningkatan regulasi  faktor  yang  diinduksi  hipoksia  tidak konsisten,  hal  ini  menunjukkan  adanya mekanisme  lain  yang  mendasari  aktivitas faktor tersebut 16,17 .
Pada  saat  hipoksia  mengaktifkan  jalur pensinyalan  yang  sebagian  besar  diatur  oleh hypoxia-inducible  faktor .  Studi  sebelumnya telah  menunjukkan  HIF  1α  diregulasi  lewat jalur  pensinyalan  PI3K  /  AKT  /  mTOR  dan PI3K / AKT /  FRAF. Pada kondisi normoksia HIF  1α  terdegradasi  dengan  cepat.  Pertama, protein  HIF  1α    dikenali  oleh  protein  prolyl hidroksilase  (PHD),  yang  menghidroksilat prolin  (OH)  dalam  domain  degradasi  yang bergantung pada oksigen. Prolin terhifdroksilasi  dikenali  oleh  protein  von Hippel-Lindau  (VHL)  dan  ubiquitinated  (Ub) untuk  didegradasi  oleh  proteasome.  Dalam kondisi hipoksia HIF 1α masuk ke dalam inti, kemudian  berasasosiasi  dengan  HIF  1β  di mana mereka membentuk heterodimer, berikatan  dengan  hipoksia  elemen  responsif (HRE)  di  DNA  dan  berfungsi  sebagai  faktor transkripsi.  yang  dapat  menginduksi  ekspresi dari  ratusan  gen  yang  terkait  dengan metabolisme, angiogenesis, invasi dan survival  sel.  Ekspresi  HIF1α  dapat  dideteksi pada  lebih  dari  separuh  jenis  kanker,  seperti kanker prostat, kanker payudara, kanker paru- paru,  kanker  pancreas,  kanker  otak,  kanker perut,  kanker  ovarim,  kanker  ginjal  dan melanoma.    Daerah  hipoksia  dapat  ditemukan pada adenokarsinoma prostat yang
terlokalisasi  dan  terjadi  peningkatan  ekspresi penanda  hipoksia  termasuk  HIF  1α  dan vascular  endothelial  growth  factor (VEGF) yang berperan pada angiogenesis dan proliferasi tumor 18,19 .
PIN  merupakan  lesi  premaligna  yang merupakan  prekursor adenokarsinoma  prostat. Beberapa  proses  antara  lain  penuaan  seluler, stres  oksidatif  serta  perubahan  lingkungan mikro  terkait  dengan  perkembangan  PIN menjadi  adenokarsinoma  yang  bisa  memakan waktu  puluhan  tahun.  HIF  1α  telah  terbukti meningkat  pada  beberapa  kanker  manusia, daerah hipoksia ditemukan pada adenokarsinoma  prostat  lokal.  peningkatan HIF 1α dan VEGF terlihat pada pasien dengan adenokarsinoma  prostat.  Meskipun  telah  ada penelitian  sebelumnya  tentang    peningkatan HIF  1α  pada  PIN  pada  hewan  coba,  tapi perannya belum dapat diketahui secara pasti 20 . Jalur  pensinyalan  yang  diinduksi  HIF-1 termasuk HIF 1α mempromosikan angiogenesis  dengan  cara  meningkatkan VEGF serta bFGF, dan itu berkontribusi pada perkembangan  berbagai  penyakit  hiperplastik termasuk BPH 21 .

## KESIMPULAN DAN SARAN
Pada  penelitian  ini,  kami  menemukan protein HIF 1α terekspresi kuat pada PIN dan terekspresi  negatif  sampai  lemah  pada  BPH. Serta  terdapat  perbedaan  bermakna  ekspresi HIF 1α antara PIN  dengan BPH. Penelitian ini perlu  dikembangkan  dengan  jumlah  sampel yang  lebih  besar  agar  memiliki  hasil  yang lebih akurat.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Kami  ucapkan  terima  kasih  kepada
Laboratorium Patologi Anatomik RS Universitas Hasanuddin, Laboratorium Patologik  Anatomik  RSUP  Dr.  Wahidin Sudirohusodo dan Departemen Patologi Anatomik  Universitas  Hasanuddin  Makassar yang  telah  membantu  dan  memfasilitasi penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
1.  Bott  Simon  RJ,  Ng  Keng  Lim. Prostate Cancer .; 2021.
2.  Ittmann M. Anatomy and histology of the human  and  murine  prostate. Cold  Spring
Harb Perspect Med . 2018;8(5):1-6. doi:10.1101/cshperspect.a030346
3.  Rosai  J.  Rosai  and  Ackerman’s  surgical pathology.  In:  Tallini  G,  Giordano  TJ, eds. Rosai  and  Ackerman’s  Surgical
Pathology .  8th  ed.  Elsevier  Health Sciences; 2018:289-366.
4.  Amin  MB,  Tickoo  SK. Diagnostic
Pathology: Genitourinary .; 2016. doi:10.1016/B978-0-323-37714-0.50202- 9 5.  Hutasoit  GA,  Sari  P,  Rupawan  IK,
Salman M. Tumor Phyllodes dan Prognosisnya. Heal Tadulako J . 2022;8(3):204-213.
6.  Purwati  Y,  Andiani  D.  Penerapan  Komik Digital  Pada  Edukasi  Kanker  Payudara Terhadap  Minat  Pemeriksaan  Payudara Sendiri. Heal  Tadulako  J .  2023;9(3):273- 278.
7.  Globocan. International Agency for Research on Cancer. Globocan . 2020;23(7):323-326. 8.  Kementrian Kesehatan Republik I. Pedoman Nasional Pelayanan  Kedokteran Tata Laksana Kanker Prostat. Kementrian
Kesehat  Republik  Indones .  2018;63(2):1-
3.
9.  Thaha  R,  Widajadnja  IN,  Hutasoit  GA. Hubungan  Tingkat  Pengetahuan  Tentang
Kanker Payudara dengan Perilaku
Pemeriksaan Payudara Sendiri (SADARI)
Pada  Wanita  Usia  20-45  Tahun  di  Desa Sidera  Kecamatan  Sigi  Biromaru. J Kesehat Tadulako Vol . 2017;3(2):40-46.
10.  Cheng  L,  MacLennan  GT,  Bostwick  DG. Urologic  Surgical  Pathology .;  2020. doi:10.1016/C2016-0-03492-7
11.  Kumar  V,  Abbas  A,  Aster  J,  Turner  J. Robbins  &  Cotran  Pathologic  Basis  of Disease Tenth Edition .; 2021.
12.  Zhang  Q,  Han  Z,  Zhu  Y,  Chen  J,  Li  W. Role  of  hypoxia  inducible  factor‑1  in cancer stem cells (Review). Mol Med Rep .
2021;23(1):1-14. doi:10.3892/mmr.2020.11655
13.  Udensi  UK,  Tchounwou  PB.  Oxidative stress in prostate hyperplasia and carcinogenesis. J  Exp  Clin  Cancer  Res . 2016;35(1):1-19. doi:10.1186/s13046- 016-0418-8
14.  Josephine A. Clinicopathological study of prostatic  biopsies. J  Clin  Diagnostic  Res .
2014;8(9):FC04-FC06.
doi:10.7860/JCDR/2014/8591.4843
15.  Zhong  H,  Semenza  GL,  Simons  JW,  De Marzo  AM.  Up-regulation  of  hypoxia- inducible  factor  1α  is  an  early  event  in prostate  carcinogenesis. Cancer  Detect
Prev .
2004;28(2):88-93. doi:10.1016/j.cdp.2003.12.009 16.  Lee  SH,  Golinska M,  Griffiths JR.  Hif-1- independent mechanisms regulating metabolic  adaptation  in  hypoxic  cancer cells. Cells . 2021;10(9). doi:10.3390/cells10092371
17.  Kozal  K,  Krześlak  A.  The  Role  of Hypoxia-Inducible  Factor  Isoforms  in Breast  Cancer  and  Perspectives  on  Their Inhibition  in  Therapy. Cancers  (Basel) . 2022;14(18).
doi:10.3390/cancers14184518
18.  Ikeda  H,  Kakeya  H.  Targeting  hypoxia- inducible  factor  1  (HIF-1)  signaling  with natural products toward cancer chemotherapy. J Antibiot (Tokyo) .
2021;74(10):687-695.
doi:10.1038/s41429-021-00451-0
19.  Tran  MGB,  Bibby  BAS,  Yang  L,  et  al.
Independence  of  HIF1a  and  androgen signaling  pathways  in  prostate  cancer. BMC Cancer . 2020;20(1):1-12. doi:10.1186/s12885-020-06890-6 20.  Abu el Maaty MA, Terzic J, Keime C, et al.  Hypoxia-mediated  stabilization  of
HIF1A in prostatic intraepithelial neoplasia  promotes  cell  plasticity  and malignant progression. Sci Adv .
2022;8(29):1-15. doi:10.1126/sciadv.abo2295
21.  Chen  Y,  Xu  H,  Shi  Q,  et  al.  Hypoxia- inducible factor 1α (HIF-1α) mediates the epithelial-mesenchymal transition in benign  prostatic  hyperplasia. Int  J  Clin Exp Pathol . 2019;12(1):295-304.