## PENGEMBANGAN PRODUK SEDIAAN GEL KOMBINASI EKSTRAK
DAUN SIRSAK ( Annona muricita L.) DENGAN EKSTRAK RIMPANG TEMULAWAK ( Curcuma xanthorhiza Roxb.) SEBAGAI ANTI BAKTERI PENYEBAB JERAWAT (Propionibacterium acne dan Staphylococcus epidermidis)
Christel Nataniel Sambou 1) , Agung Eru Wibowo 1) , Shelly Taurhesia 1)
1) Program Studi Magister Ilmu Kefarmasian Universitas Pancasila Jakarta, 12640

## ABSTRACT
One  of  the  causes  of  acne  is  the  presence  of Propionibacterium  acnes and Staphylococcus epidermidis on skin. The aim of this research was to develop gel product made from the combination of extracts that are effective as anti-acne against P. Acnes and S. epidermidis . This research was based on experiment method. Soursop leaf and temulawak rhizome were extracted by maceration in ethanol 96%. The viscous extract was then tested to P.Acnes and S.epidermidis to gain Minimum Inhibitory Concentration (MIC). The MIC value of soursop leaf and temulawak rhizome extract for P. Acnes and S.epidermidis were 3% b/v and 1% b/v respectively. The antibacterial potential of formulated gel was gained by evaluating the average diameter of the radical zone with three repetitions of gel contained ethanol  extract  of  temulawak  rhizome  1%  b/v  against  bacteria P.  acnes and S.  epidermis (1,33  mm and  1,67  mm),    ethanol  extract  of  soursop  leaf  3%  b/v  (1,33  mm  and  1,67  mm),  combination  of temulawak rhizome and soursop leaf 3:1% b/v (2 mm and 2,67 mm), 1,5:1% b/v (1,67 mm and 1,63 mm),  and  4,5:1%  b/v  (3,67  mm  and  3,63  mm).  The  result  showed  that  in  gels  contained  the combination  of  of  temulawak  rhizome  and  soursop  leaf  with  the  similar  concentration  of  single extract did not have the better radical zone result compared to the single extracts, and were considered as antagonist.
Keywords : Annona  muricita L., Curcuma  xanthoriza Roxb., Propionibacterium  acnes, Staphylococcus epidermidis

## ABSTRAK
Salah  satu  penyebab  munculnya  jerawat  adalah  berkembangnya  bakteri Propionibacterium acne dan Staphylococcus epidermidis . Penelitian ini bertujuan untuk mengembangkan produk sediaan gel  dari  kombinasi  ekstrak  yang    efektif  sebagai  anti  jerawat  terhadap  bakteri P.  Acnes dan S.epidermidis . Penelitian ini menggunakan metode eksperimen. Daun sirsak dan rimpang temulawak di ekstraksi menggunakan metode maserasi dengan pelarut etanol 96%. Ekstrak kental yang diperoleh kemudian dilakukan uji anti bakteri P. Acnes dan S.epidermidis untuk mendapatkan nilai Konsentrasi Hambat  Minimum  (KHM).  Nilai  KHM  ekstrak  daun  sirsak  dan  ekstrak  rimpang  temulawak  untuk bakteri P.  Acnes dan S.epidermidis berturut-turut  adalah  3%  b/v  dan  1%  b/v. Hasil  uji  anti  bakteri sediaan  di  peroleh    diameter  rataan    zona  bunuh/zona  bening  bakteri  ( radical  zone )  dengan  3  kali pengulangan untuk Gel  ekstrak etanol rimpang temulawak konsentrasi 1% b/v pada bakteri P. Acnes dan S.epidermidis (3,33 mm dan 2,67 mm), ekstrak etanol daun sirsak konsentrasi 3% b/v (1,33 mm dan 1,67 mm), kombinasi konsentrasi  ekstrak rimpang temulawak dan ekstrak daun sirsak 3:1% b/v (2  mm  dan  2,67  mm),  kombinasi  konsentrasi  1,5:1%  b/v  (1,67  mm  dan  1,63  mm),  kombinasi konsentrasi 4,5:1% b/v (3,67 mm dan 3,63 mm). Hasil uji tersebut bersifat antagonis karena pada gel kombinasi  kedua  ekstrak  dengan  konsentrasi  yang  sama  dengan  ekstrak  tunggal  tidak  memberikan zona bunuh yang lebih baik dari sediaan gel ekstrak tunggalnya.
Kata kunci : Daun sirsak, rimpang temulawak, Propionibacterium acne , Staphylococcus epidermidis

## PENDAHULUAN
Jerawat disebabkan oleh bakteri Propionibacterium
acne dan Staphylococcus  epidermidis .  Bakteri  ini tidak  patogen  pada  kondisi  normal,  tetapi bila  terjadi  perubahan  kondisi  kulit,  maka bakteri  tersebut  berubah  menjadi  invasif. Sekresi  kelenjar  keringat  dan  kelenjar sebasea    menghasilkan  air,  asam  amino, urea, garam dan asam lemak yang menjadi sumber  nutrisi  bagi  bakteri.  Bakteri  ini berperan pada proses kemotaktik inflamasi dan pembentukan enzim lipolitik pengubah  fraksi  sebum  menjadi  massa padat, yang  menyebabkan  terjadinya penyumbatan pada saluran kelenjar sebasea (Jawetz,2005).
Pemanfaatan  bahan  alam  di  Indonesia akhir-akhir ini meningkat, bahkan beberapa  bahan  alam  telah  diproduksi dalam  skala  besar.  Penggunaan  bahan tradisional  dinilai  memiliki  efek  samping yang  lebih  kecil  dibandingkan  dengan yang  berasal  dari  bahan  kimia  dan harganya  lebih  terjangkau.  Keuntungan lainnya  penggunaan  bahan  tradisional yaitu bahan bakunya yang mudah diperoleh dan harganya yang relatif murah (Putry ZF, 2010).
Menurut  hasil  penelitian  ekstrak  daun sirsak  ( Annona  muricita L)  mengandung senyawa  metabolit  sekunder  flavonoid, yang  dapat  berfungsi  sebagai  antibakteri (Hasmila,  2015).  Hasil  pengujian  KHM (Konsentrasi  Hambat  Minimum)  yang dilakukan  Yulianti  (2015)  ekstrak  daun sirsak  memiliki  kemampuan  menghambat pertumbuhan Propionibacterium acne pada  konsentrasi  1%  b/v  (Yulianti  R, 2015)  sedangkan  hasil  Uji  KHM  yang dilakukan  Haryoto  (2012)  menunjukkan kemampuan  menghambat  pertumbuhan bakteri Staphylococcus  epidermidis pada konsentrasi  3%  b/v  (Kusworo,  2012).
Kandungan  asetogenin  pada  daun  sirsak dapat  dimanfaatkan  untuk  mengobati penyakit  kulit  yang  disebabkan  oleh beberapa  bakteri  seperti Staphylococcus aureus dan Propionibacterium  acnes (Sousa,2010). Hasil penelitian yang dilakukan  Boesro  S,  (2006)  menunjukkan ekstrak  Rimpang  Temulawak  memiliki nilai KHM terhadap bakteri
Staphylococcus epidermidis pada konsentrasi  0,03%  b/v  .  Sedangkan  hasil Uji  KHM  yang  dilakukan  Nurhabibah (2013) menunjukan kemampuan
menghambat pertumbuhan bakteri Propionibacterium  acne pada  konsentrasi
1% b/v.
Penelitian  tentang  kombinasi  ekstrak daun sirsak dan ekstrak rimpang temulawak belum pernah dilakukan sehingga  pada  penelitian  ini  akan  dicoba dikembangkan  dalam  bentuk  sediaan  gel dengan  tujuan  untuk  mendapatkan  efek sinergi sebagai antibakteri.
Untuk  memanfaatkan  ekstrak  daun sirsak  dan  ekstrak  rimpang  temulawak sebagai  kosmetik  bahan  alam  dalam mengatasi  jerawat,  dilakukan  formulasi kombinasi ekstrak daun sirsak dan ekstrak rimpang temulawak menjadi bentuk sediaan  yang  mudah  digunakan,  yaitu sediaan  gel.  Gel  merupakan  sediaan semisolid dengan basis yang mudah dicuci sehingga  besar  harapan  dapat  disukai masyarakat. Menurut Kepala Badan Pengawasan  Obat  dan  Makanan  Republik Indonesia Nomor HK.03.1.23.12.10.12459 Tahun  2010  tentang  Persyaratan  Teknis Kosemtik  menyatakan  bahwa  kosmetik yang beredar harus memenuhi  persyaratan teknis  meliputi  keamanan,  kemanfaatan, mutu, penandaan dan klaim.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  dilaksanakan  pada  bulan Februari  sampai  dengan  Agustus  2017  di Laboratorium  Farmasi  Program  Studi Farmasi  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sam Ratulangi Manado.
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  yaitu  Ayakan  mesh  60,  Oven,  Rotary evaporator,  Waterbath,  Lumpang  dan  alu, Cawan petri, Tanur, Jarum Ose, Timbangan  digital,  Elektroda  pH  meter, Wadah  tertutup,  pot  gel,  spektrofotometer UV-Vis.
Bahan-bahan  yang  digunakan  yaitu Daun sirsak, Rimpang Temulawak, Etanol 96  %,  HNO 3 ,  Kloroform,  HCl  2  N, Pereaksi  Mayer,  Peraksi  Dragendorff, Logam  Mg,  Amil  alcohol,  Gelatin  1%, Eter,  Peraksi  Lieberman-Burchard,  Media Muller-Hinton  Agar  (MHA),  NaCl  0,9%, Larutan  Mc  Farland.  Nutrien  Broth  (NB), Gel Clindamycin (Kontrol Positif) , CMC- Na,  propilenglikol,  Gliserin,  Aquadest.  , Bakteri  Propionibacterium  acne  (ATCC 11827) dan Bakteri Staphylococcus epidermidis (ATCC 12228).

## Pengambilan Sampel
Daun  sirsak  dan  rimpang  temulawak yang  telah  dikumpulkan  dibersihkan  dari pengotor  selanjutnya  dicuci  di  bawah  air mengalir  sampai  bersih,  ditiriskan,  lalu dikeringkan  di  dalam  oven.  Sampel  yang telah kering diserbuk dengan menggunakan blender, serbuk yang dihasilkan  diayak  menggunakan  ayakan mesh  60  hingga  diperoleh  serbuk  yang halus  dan  seragam.  Hasilnya  dimasukkan ke dalam wadah tertutup.

## Ekstraksi Sampel
Serbuk  kering  di  ekstraksi  dengan cara  maserasi  dengan  pelarut  etanol  96%
dengan  pergantian  pelarut  5  x  24  jam sebanyak  2  kali.  Filtrat  disaring  dan dipekatkan  dengan  rotary  evaporator  dan waterbath hingga diperoleh ekstrak kental .
Skrining Fitokimia (budiputra, 2013) a. Pemeriksaan Golongan Senyawa
Alkaloid
Simplisia  ditambahkan  dengan  HNO 3 encer  digerus  dalam  mortir,  lalu ditambahkan  beberapa  mL  klorofom sambil  digerus  homogen.  Kemudian disaring, setelah disaring filtrat dikocok dengan HCl 2 N. lapisan asam dipisahkan, kemudian dibagi menjadi 3 bagian.  Bagian  pertama  digunakan sebagai  blangko,  bagian  kedua  ditetesi dengan  larutan  pereaksi  Mayer  dan bagian ketiga ditetesi pereaksi Dragedorff. Hasil positif adanya alkaloid  bila  terbentuk  endapan  putih dengan  pereaksi  Mayer,  dan  jingga dengan pereaksi Dragendorff .
b. Pemeriksaan Golongan Senyawa Flavonoid
Simplisia digerus dalam mortir dengan sedikit  air,  kemudian  dimasukkan  ke dalam tabung reaksi  yang berisi logam Mg  dan  larutan  HCl  2N.  Seluruh campuran  dipanaskan  beberapa  saat. Kemudian filtrat ditambah amil alkohol dan dikocok kuat-kuat. Adanya flavonoid  akan  menyebabkan  filtrat berwarna merah.
c. Pemeriksaan Golongan Senyawa Saponin
Simplisia  dimasukkan  dalam  tabung reaksi  yang  ditambahkan  sedikit  air dan  dipanaskan.  Setelah  dingin  tabung dikocok  kuat-kuat  selama  beberapa menit.  Pembentukan  busa  sekurang- kurangnya setinggi 1 cm dan konsisten selama  beberapa  menit  dan  tidak hilang menunjukkan adanya saponin.
d. Pemeriksaan Golongan Senyawa
Tannin Simplisia  digerus  dalam  mortir  dan dipanaskan dengan air di penangas air, lalu  disaring.  Filtrat  ditambahkan dengan  larutan  gelatin  1%,  adanya endapan  putih  menunjukkan  bahwa dalam simplisia terdapat tanin.
e. Pemeriksaan Golongan Senyawa
Triterpenoid dan Steroid Simplisia disari dengan eter, kemudian sari  eter  diuapkan  hingga  kering.  Pada residu ditetesi larutan pereaksi Lieberman-Burchard. Penambahan pereaksi  dilakukan  dalam  keadaan dingin.  Terbentuknya  warna  ungu
menunjukkan  bahwa  dalam  simplisia terkandung senyawa kelompok triterpenoid,  sedangkan  bila  terbentuk warna  hijau-biru  menunjukkan  adanya senyawa kelompok steroid.

## Pemantauan Mutu Ekstrak
a. Penetapan Kadar Air
Penetapan  kadar  air  dilakukan  secara pemanasan. Serbuk bahan uji ditimbang  sebanyak  1-2  gram  dalam cawan  yang  telah  diketahui  beratnya. Kemudian keringkan dalam  oven pada suhu  100-105 0 C  selama  3-5  jam.
Kemudian  dinginkan  dalam  eksikator dan  ditimbang.  Panaskan  lagi  dalam oven  selama  30  menit,  dinginkan dalam eksikator dan ditimbang.
Pengurangan
berat merupakan banyaknya  air  dalam  bahan  (Maharani ,2013).
b. Penetapan Kadar Abu Total Ditimbang  seksama  2  sampai  10  gram bahan  dalam  cawan  yang  kering  dan telah  diketahui  beratnya,  kemudian pijarkan  dalam  tanur  sampai  diperoleh abu berwarna keputih-putihan.
Masukkan  cawan  dan  abu  kedalam
eksikator  dan  ditimbang  berat  abu setelah dingin (Djajadisastra, 2009).

## Sterilisasi Alat
Semua  alat  yang  digunakan  uji aktivitas antibakteri, terlebih dahulu dilakukan proses sterilisasi dengan menggunakan  autoklaf  pada  suhu  121 o C selama 15 menit.

## Pembuatan Media Pembiakan
Sebanyak  38  gram  Mueller  Hinton Agar  (MHA)  di  timbang  dan  dilarutkan dengan  1  liter  aquades  dan  dipanaskan hingga  homogen.  Kemudian  disterilisasi dengan  menggunakan  autoklaf  pada  suhu 121 o C selama 15 menit .

## Pembuatan Suspensi Bakteri
Suspensi  bakteri  dibuat  dengan  cara mengambil  koloni  bakteri  dari  koloni strain  murni  dengan  menggunakan  ose bulat  steril,  lalu  dimasukkan  ke  dalam tabung  reaksi  yang  berisi  NaCl  fisiologis 0,9%  steril  campurkan  sampai  kekeruhan sama  dengan  larutan  Mc  Farland  1  yang diukur secara visual .

## Pembuatan Gel
Pembuatan  gel  dilakukan  dengan  cara CMC-Na di timbang kemudian dikembangkan  di  cawan  porselin  dengan sedikit aquadest panas, kemudian dilakukan  pengadukan  secara  terus  – menerus  sehingga  terdispersi  sempurna dan  membentuk  basis  gel.  Selanjutnya ditambahkan  gliserin,  propilenglikol  dan aquadest  dan  terus  dilakukan  pengadukan hinga terbentuk sediaan gel dan ditambahkan dengan dengan ekstrak sesuai jumlah dalam formula (Sasanti TJ,2012).
Uji  Aktivitas  Anti  Bakteri  Gel  Ekstrak Tunggal  dan  Kombinasi  Ekstrak  Daun
Sirsak dan Ekstrak
Rimpang

## Temulawak Secara In Vitro
Uji  aktivitas  antibakteri  sediaan  gel dilakukan  menggunakan  metode  difusi. Sebanyak  0,2  mL  suspensi  bakteri  uji dicampurkan dengan 20 mL media Muller Hinton Agar (MHA) steril dan dituangkan dalam  cawan.  Dibuat  lubang  pada  media agar,  selanjutnya  sediaan  gel  ekstrak tunggal  maupun  kombinasi  ekstrak  daun sirsak  dan  ekstrak  rimpang  temulawak ditotolkan  kedalam  lubang  dan  kemudian diinkubasi  pada  suhu  37 0 C  selama  18-24 jam. Selanjutnya diamati area zona bening di  sekitar  sumur  dan  diukur  dengan menggunakan  jangka  sorong.  Sebagai kontrol positif dibuat dari gel Clindamycin yang ada di pasaran dan dilakukan juga uji aktivitas antibakterinya (Maswadeh,2006).

## Evaluasi Sediaan Gel
a. Organoleptik
Pengamatan
dilakukan terhadap berbagai perubahan gel secara organoleptik,  sediaan  disimpan  pada suhu  kamar  dan  yang  diamati  yaitu warna, bau dan bentuk.
b. Pengukuran pH Diambil  1  gram  sediaan  gel  kemudian dilarutkan  dengan  aquadest  sampai  10 ml.  Elektroda  pH  meter  dicelupkan  ke dalam  larutan  yang  akan  diukur  jarum pH  meter  dibiarkan  bergerak  sampai menunjukkan  posisi  tetap,  pH  yang ditunjukkan pH meter di catat.
c. Uji Daya Sebar Sediaan  sebanyak    0,5  g  diletakkan pada kaca transparan, dibiarkan sediaan melebar pada diameter tertentu.  Kemudian  ditutup  dengan plastik transparan dan diberi beban 150 g  kemudian  diukur  luas  daerah penyebarannya.
d. Uji Homogenitas
Uji  homogenitas  dilakukan  dengan meletakkan  sejumlah  sediaan  gel  pada kaca  transparan  dan  dilihat  susunan partikel dari sediaan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Daun Sirsak dan Rimpang Temulawak yang  telah  diambil  dari  Kecamatan  Pasan Kabupaten  Minahasa  Tenggara  kemudian di  potong  kecil-kecil  (perajangan).  Hal  ini bertujuan  untuk  memperluas  permukaan yang  akan  berinteraksi  dengan  pelarut, sehingga akan lebih banyak senyawa yang dapat  ditarik  oleh  pelarut.  Setelah  itu lakukan  proses  ekstraksi  yang  bertujuan untuk  memisahkan  atau  menyari  senyawa aktif  yang  ada  di  dalam  sampel,  sehingga adanya  suatu  proses  pemisahan  dua  atau lebih  komponen  yang  terkandung  dalam sampel,  oleh  suatu  pelarut ( Suryanto E.,2012). Sampel diekstraksi dengan
menggunakan  metode  maserasi.  Tujuan pemilihan  metode  maserasi  karena  cara pengerjaan  dan  peralatan  yang  digunakan sederhana serta mudah dilakukan, walaupun  kekurangan  dari  metode  ini adalah pengerjaannya lama dan penyariannya  kurang  sempurna  .  Agar senyawa  kimia  di  dalam  sampel  dapat terekstrak  secara  menyeluruh  maka  di lakukan  remaserasi  atau  pengulangan dengan  penggantian  pelarut  sebanyak  tiga kali.  Ekstraksi  sampel  ini  menggunakan pelarut  etanol  96%  karena  pelarut  etanol menyari  hampir  keseluruhan  kandungan simplisia  baik  non  polar,  semi  polar maupun  polar ( Iswanti  DA,2009).  Pelarut ini  bersifat  selektif,  tidak  beracun,  dan bersifat  universal  yang  cocok  untuk mengekstrak  semua  golongan  senyawa metabolit sekunder ( Kristanti A,2008).
Hasil  ekstraksi  sampel  basah  daun sirsak  memiliki  berat  624  gram  kemudian
melalui  proses  pengeringan  memperoleh sampel kering 213 gram dan ekstrak kental 26  gram.  Sedangkan  untuk  rimpang temulawak  memiliki  berat  sampel  basah 1.283  gram  kemudian  melalui  proses pengeringan  memperoleh  sampel  kering 221  gram  dan  ekstrak  kental  36,6  gram. Hasil  ini  menunjukkan  bahwa  untuk sampel  daun  sirsak  memiliki  rendemen 12,20%  dan  rimpang  temulawak  memiliki rendemen sebesar 16,54 %.
Setelah  diperoleh  ekstrak  kental  dari masing-masing sampel, selanjutnya dilakukan skrining fitokimia untuk mengetahui  senyawa  golongan  apa  saja yang  terdapat  di  dalam  simplisia  tersebut. Dari  hasil  pengujian  diperoleh  hasil  yang ditujukan pada tabel 1.
Tabel 1 . Skrining Fitokimia Ekstrak Daun Sirsak dan Ekstrak Rimpang Temulawak
TANAMAN METABOLIT SEKUNDER HASIL
Daun Sirsak
Alkaloid ADA Flavonoid ADA Saponin ADA Tanin ADA Triterpenoid TIDAK Steroid ADA Rimpang Temulawak
Alkaloid ADA Flavonoid ADA Saponin ADA Tanin TIDAK Triterpenoid ADA Steroid TDAK
Dari hasil skrining fitokimia tersebut dapat  dilihat  bahwa  ekstrak  daun  sirsak mengandung  senyawa  metabolit  sekunder yaitu  alkaloid,  flavonoid,  saponin,  tanin, dan  steroid.  Sedangkan  ekstrak  rimpang temulawak mengandung senyawa metabolit sekunder yaitu alkaloid, flavonoid, saponin dan triterpenoid.
Senyawa  alkaloid,  flavononoid  dapat berfungsi  sebagai  antibakteri.  Senyawa alkaloid memiliki mekanisme kerja dengan cara  mengganggu  komponen  penyusun peptidoglikan  pada  sel  bakteri  sehingga lapisan  dinding  sel  tidak  terbentuk  secara utuh.  Senyawa  Flavonoid  dapat  merusak membrane sitoplasma yang dapat menyebabkan  bocornya  metabolit  penting dan  menginaktifkan system  enzim bakteri. Kerusakan  ini  memungkinkan  nukleotida dan  asam  amino  merembes  keluar  dan mencegah masuknya bahan-bahan aktif ke dalam  sel  dan  mengakibatkan  kematian bakteri ( Rakhel NP,2017).
Selanjutnya  dilakukan  pemantauan  mutu ekstrak  yaitu  penetapan  kadar  air  dan kadar  abu  total.  Dari  pengujian  diperoleh nilai  kadar  air  untuk  daun  sirsak  yaitu 6,72% dan untuk rimpang temulawak yaitu 8,73  %.  Penetapan  kadar  air  simplisia sangat  penting  untuk  memberikan  batasan maksimal  kandungan  air  dalam  simplisia, karena  jumlah  air  yang  tinggi  menjadi media  tumbuhnya  bakteri  dan  jamur  yang dapat  merusak  senyawa  yang  terkandung di  dalam  simplisia.  Persyaratan  kadar  air dari  simplisia  menurut  parameter  standar yang  berlaku  adalah  tidak  lebih  dari  10%, hal ini  menunjukkan  bahwa  kedua tanaman  memiliki  kadar  air  yang  sesuai persyaratan.  Untuk  kadar  abu  total  daun sirsak  dan  rimpang  temulawak  masing- masing  9,54%  dan  4,69%.  Penetapan kadar  abu  total  dilakukan  dengan  tujuan untuk  memberikan  gambaran  kandungan mineral  internal  maupun  eksternal  yang berasal dari proses awal sampai terbentuknya  simplisia.  Kadar  abu  total berkaitan  dengan  mineral  baik  senyawa organik maupun anorganik  yang diperoleh secara  internal  maupun  eksternal  (Depkes RI,2000).  Secara  ringkas  di  sajikan  dalam tabel 2.

## Tabel 2 Pemantauan Mutu Ekstrak
No . Ekstrak Tanaman Paramete r Standar Simplisia Hasil Pemeriksaa n (%) 1. Daun Sirsak Kadar Air 6,72 Kadar Abu Total 9,54 2. Rimpang Temulawa k Kadar Air 8,73 Kadar Abu Total 4,69
Masing-masing  ekstrak  yang  diperoleh, dibuat  kedalam  bentuk  sediaan  Gel  baik dalam konsentrasi tunggal maupun kombinasi  dari  ekstrak  daun  sirsak  dan rimpang temulawak. Pengamatan dilakukan setelah inkubasi pada suhu 37˚C selama  1x24  jam.  Konsentrasi  ekstrak dalam  sediaan  gel  yaitu  pada  gel  ekstrak daun  sirsak  mengandung  ekstrak  daun sirsak 3% b/v dan gel rimpang temulawak 1%  b/v.  Untuk  sediaan  Gel  kombinasi ekstrak  antara  lain  Gel  kombinasi  1 perbandingan  ekstrak  daun  sirsak  dan rimpang  temulawak  yaitu  3  :  1  %  b/v, sementara untuk gel kombinasi 2 yaitu 1,5
:  1  %  b/v  dan  gel  kombinasi  3  yaitu  4,5  :
1% b/v dengan pembanding sebagai kontol negative yaitu basis gel dan control positif yaitu Gel Clindamycin. Pengujian aktivitas antibakteri  dari  ekstrak  daun  sirsak  dan ekstrak  rimpang  temulawak  pada  bakteri
Propionibacterium acne dan Staphylococcus  epidermidis menggunakan metode difusi sumur.
Metode lubang/sumuran  yaitu  membuat  lubang pada  agar  padat  yang  telah  diinokulasi dengan  bakteri.  Pada  lempeng  agar  yang telah  diinokulasikan  dengan  bakteri  uji dibuat  suatu  lubang  yang  selanjutnya  diisi dengan  zat  antimikroba  uji..  Setelah diinkubasi  pada  suhu  dan  waktu  yang sesuai  dengan  mikroba  uji,  dilakukan
pengamatan  dengan  melihat  ada  atau tidaknya  zona  bunuh  ( radical zone)  di sekeliling  lubang  (Prayoga  E.,2013). Metode  ini  menjadi  metode  yang  dipilih dalam  uji  aktivitas  karena  memiliki keuntungan yaitu prosedurnya yang sederhana  (mudah  dan  praktis)  untuk dilakukan  dan  dapat  digunakan  untuk melihat sensitivitas berbagai jenis mikroba terhadap  antimikroba  pada  konsentrasi tertentu  (Mawaddah  R,2008).  Zona  yang dimaksud yaitu zona bunuh ( radical zone) dan  zona  hambat  ( irradikal zone).  Zona bunuh  ditunjukkan  dengan  adanya  area bening disekeliling sumur sedangkan zona hambat  ditunjukan  oleh  area  yang  terlihat tidak  subur  atau  lebih  keruh  jika dibandingkan  dengan  daerah  yang  tidak terpengaruh oleh zat (Ayu, 2014).
Tabel 3. ZONA BUNUH ( radical zone)

## FORMULASI
SEDIAAN GEL Zona bunuh (radical zone) (mm) P.acne S.epidermidis Kontrol Negatif (Basis Gel) 0 0 Kontrol Negatif (Medi-Klin Gel ® ) 10,67 10 Gel Ekstrak Rimpang Temulawak (1% b/v) 3,33 2,67 Gel Ekstrak Daun Sirsak (3% b/v) 1,33 1,67 Gel Kombinasi 1 (1 + 3) % b/v 2 2,67 Gel Kombinasi 2 (1 + 1,5) % b/v 1,67 1,33 Gel Kombinasi 3 ( 1 + 4,5)% b/v 3,67 3,33
Hasil  tersebut  menunjukkan  bahwa  kedua ekstrak setelah
dikombinasikan memberikan  efek  antagonis.  Hal  ini  dapat dilihat  bahwa  diameter  zona  bunuh ( radical zone)  kombinasi  ekstrak  1  dan  2 tidak lebih besar dari ekstrak tunggal.  Hal ini disebabkan adanya persamaan kandungan  senyawa  dalam  ekstrak  yang berfungsi  sebagai  antibakteri  sehingga kombinasi tidak menghasilkan efek sinergis.  Selain  itu,  kombinasi  lebih  baik dilakukan pada ekstrak yang telah difraksinasi  atau senyawa murni  dari pada ekstrak  kasar.  Hal  ini  dikarenakan  pada ekstrak kasar masih terdapat senyawa yang dimungkinkan  dapat  bereaksi  satu  dengan yang  lain  sehingga  dapat  mempengaruhi aktivitasnya.  Selain  itu  aksi  ntagonis reseptor  terjadi  saat  suatu  bentuk  kimia inaktif  yang  menyerupai  agonis  akan berkompetisi  menduduki  sisi  aktif  dari reseptor  sehingga  efek  yang  diharapkan tidak  muncul.  Efek  antagonis  yang  juga dapat  terjadi  adalah  non-kompetitif  yaitu suatu  bentuk  kimia  inaktif  yang  akan menduduki  sisi  alosterik  dari  suatu reseptor  sehingga  kimia  aktif  lain  yang bersifat  agonis  menjadi  tidak  memiliki afinitas  sehingga  akan  menurunkan  efek yang  dikehendaki  (Hu  ZQ,2002).  Selain itu  dengan  melihat  pada  nilai  Fractional Inhibitory Concentration (FIC) yang menyatakan  bahwa  nilai  FIC  ≤  0,5  akan menghasilkan efek sinergis, =1,00 memberikan  hasil  aditif  dan  ≤2,00  akan bersifat  antagonis (Soemiati  A,2002).
Selain  itu,  kandungan  tanin  dalam  ekstrak dapat  mengikat  berbagai  senyawa  aktif sehingga  sukar  di  absorpsi  hal  ini mengakibatkan  khasiat  dari  zat  aktif  tidak maksimal  karena  jumlah  yang  di  absorpsi terbatas.  Pada  formula  kombinasi  3 menunjukkan zona bunuh yang lebih besar dari  ekstrak  tunggal.  Hal  ini  dikarenakan
kandungan  dalam  ekstrak  masih  berfungsi dalam  membunuh  bakteri  tetapi  tidak maksimal karena terjadi saling menurunkan efektivitasnya.
Dalam  pengujian  ini  digunakan kontrol  positif  dan  negatif.  Kontrol  positif yang  digunakan  yaitu  gel  clindamycin . Pemilihan clindamycin ini di dasari karena peredaraannya  yang  paling  banyak  di pasaran  sebagai  zat  kimia  anti  jerawat. Clindamycin  bekerja  dengan  menghambat sintesis  protein  dari  bakteri  dengan menghambat translokasi ribosom, clindamycin  akan  berikatan  dengan  50S dari  bakteri,  secara  khusus  ia  mengikat terutama ke subunit RNA 23S. Penggunaan  kontrol  positif  berfungsi sebagai  kontrol  dari  zat  uji,  dengan membandingkan  diameter  zona  bunuh ( radical zone) yang terbentuk. Dengan ada nya  pembanding  ini  kita  dapat  melihat apakah  sediaan  gel  bahan  alam  yang  kita buat  memiliki  hasil  yang  lebih  baik dibandingan  sediaan  dengan  zat  aktif bahan  kimia  yang  beredar  di  pasaran sebagai  anti  jerawat  dalam  hal  ini clindamycin gel. Hasil pengujian menunjukan  bahwa  diameter  zona  bunuh ( radical zone)  untuk  control  positif  lebih baik  dibandingkan  dengan  sediaan  gel ekstrak  bahan  alam  yang  dibuat.  Hal  ini dikarenakan  adanya  senyawa  lain  dalam ekstrak  tanaman  yang  menurunkan  efek antibakteri  karena  masih  dalam  bentuk ekstrak  kasar  yang  memiliki  banyak kandungan  dibandingkan  sediaan  gel clindamicyn  yang  sudah  dalam  bentuk tunggal dan pembuatannya sudah memenuhi  standar  sediaan  gel  antijerawat yang baik.
Untuk  kontrol  negatif  digunakan basis sediaan gel. Kontrol negatif digunakan untuk  mengetahui  ada tidaknya pengaruh  basis  gel  terhadap  pertumbuhan
bakteri  uji,  sehingga  dapat  diketahui bahwa  aktivitas  yang  ditunjukan  oleh ekstrak  ialah  zat  yang  terkandung  dalam sampel  bukan  berasal  dari  basis  gel  yang digunakan.  Dari  pengujian  tersebut  di peroleh  hasil  bahwa  zona  bunuh  ( radical zone) untuk kontol negatif (basis gel) yaitu 0  mm,  hal  ini  menunjukkan  bahwa  basis gel  yang  digunakan  tidak  mempengaruhi penghambatan bakteri penyebab jerawat.
Sediaan  gel  yang  telah  dibuat kemudian  dilakukan  evaluasi  sediaan untuk  melihat  apakah  sediaan  gel  yang  di buat  sudah  memiliki  karakteristik  sediaan sesuai  dengan  peruntukannya.  Secara keseluruhan  hasil  evaluasi  sediaan  gel memberikan  hasil  yang  baik  dan  sesuai secara  farmasetis.  Untuk  evaluasi  sediaan untuk  pengujian  pH  memberikan  nilai  pH yang  sesuai  dengan  nilai  pH  kulit  yaitu berkisar  4  –  6,5 18 .  Pada  pengujian  daya sebar  memberikan  hasil  yang  sesuai dengan  standar  daya  sebar  sediaan  gel yaitu  berkisar  antara  5-7  cm  (Depkes RI.1995).

## SIMPULAN
1. Ekstrak  Daun  Sirsak  memiliki  nilai Konsentrasi Hambat Minimum (KHM)
3%  b/v  dan  Rimpang  Temulawak  1%
b/v .
2. Ekstrak  daun  sirsak  dan  ekstrak rimpang temulawak
dapat diformulasikan  dalam  bentuk  sediaan Gel  yang  memiliki  homogenitas  lebih baik dari pada bentuk larutan.
3. Sediaan  Gel  Kombinasi  ekstrak  daun sirsak  dan  ekstrak  rimpang  temulawak memberikan
efek
antagonis.
Kombinasi  kedua  ekstrak  dengan konsentrasi  yang  sama  dengan  ekstrak tunggal  tidak  memberikan  hasil  yang lebih  baik  dari  ekstrak  tunggalnya.
Sediaan gel kombinasi 3 memiliki zona
bunuh  lebih  besar  dari  gel  ekstrak tunggal tetapi tidak secara signifikan.
4. Sediaan  Gel  kombinasi  ekstrak  daun sirsak  dan  ekstrak  rimpang  temulawak dapat  menekan  jumlah  pertumbuhan bakteri Propionibacterium  acne dan bakteri Staphylococcus  epidermidis namun  tidak  lebih  kuat  dibandingkan sediaan  kontrol  positif  (Sediaan  gel anti jerawat komersial).

## SARAN
Melakukan  isolasi  senyawa  yang berfungsi sebagai antibakteri dalam ekstrak  daun  sirsak  dan  ekstrak  rimpang temulawak  yang  memiliki  mekanisme kerja  yang  berbeda  untuk  mengatasi  efek antagonis  yang  dihasilkan  dari  kombinasi kedua ekstrak.

## DAFTAR PUSTAKA
Ayu  ND,  Recita  I,  Sandy  C.  2014.
Efektivitas  Ekstrak  Daun  Jambu  Mete (Anacardium  occidentale  L)  Terhadap pertumbuhan Aggregatibacter Actinomycetemcomitans pada
Gingivitis  –  In  Vitro .  Odonto  Dental Journal I. 1 (1) : 44-48.
Boesro  S.  2006 .  Pembuatan  Sedian  Krim
Antiakne Ekstrak Rimpang Temulawak (Curcuma Xanthorrhiza Roxb.) . FMIPA UNDIP.
Budiputra  DK.  2013. Pengembangan Formula dan Karakterisasi Nanoemulsi dan Nanosuspensi
Kurkumin  Dalam  Bentuk  Gel  Untuk Rute  Transdermal (Tesis).  Bandung  :
Institut Teknologi Bandung.
Depkes  RI.  1995. Farmakope  Indonesia. Edisi IV . Jakarta: Depkes RI.
Departemen Kesehatan Republik Indonesia.  2000. Parameter  Standar Umum Ekstrak tumbuhan Obat . Departemen Kesehatan republic Indonesia.
Dick  RM.  2011. General  Pharmacologic Concepts,  Jones  and Bartlet  Learning. Londong, 17-19.

## Djajadisastra, Munim  A, Dessy  NP. 2009.
Formulasi  Gel  Topikal  dari  Ekstrak Nerii  Folium  dalam  Sediaan  Anti
Jerawat .  Jurnal  Farmasi  Indonesia,  4:
4.
Hasmila  I,  Amaliah,  Danial  M.  2015.
Efektivitas  Salep  ekstrak  Daun  Sirsak (Annona  Muricita  L)  Pada  Mencit yang  Terinfeksi  Bakteri  Staphylococus aureus . UIN Alauddin Makassar..
Hu  ZQ,  Zhao  WH,  Yoda  Y,  Asano  N, Hara Y, Shimamura T. 2002. Additive, indifferent  and  antagonistic  effects  in combinations of epigallocatechin gallate with 12 non-β-lactam antibiotics against methicillin-resistant
Staphylococcus  aureus. Journal  of
Antimicrobial Chemotherapy.
Iswanti DA. 2009. Uji Aktivitas Antibakteri  Fraksi  N-Heksan,  Fraksi Etil  Asetat,  Dan  Fraksi  Etanol  96% Daun  Ekor  Kucing  (Acalypha  Hispida Burm. F) Terhadap Bakteri Staphylococcus  aureus  ATCC  25923 Secara Dilusi [skripsi]. Fakultas
Farmasi Universitas Setia Budi,
Surakata.
Jawetz M dan Adelbergs. 2005.
Mikrobiologi  kedokteran.  (Buku  2) .
Penerjemah:  N.  Widorini.  Jakarta: Penerbit Salemba Medika.
Kristanti  A,  Aminah  NS,  Tanjung  M,
Kurniadi B. 2008. Buku Ajar
Fitokimia . Unair Press, Surabaya. Kusworo.  2012. Aktivitas  antibakteri  dan bioautografi fraksi polar ekstrak etanol  daun  sirsak  terhadap  klebsiella pneumonia dan staphylococcus epidermidis .  Naskah  publikasi  ;  UMS. Surakarta.
Maharani  RK,  Sulaiman,  Munawaroh.
2014. Formulasi Sediaan Gel
Antiseptik Tangan Minyak Atsiri Daun Kemangi (Ocimum Basilicum) Dengan
Basis HPMC dan Aktivitas Antibakteri Terhadap Staphylococus aureus.
(NASKAH  PUBLIKASI).  Universitas Muhamadiyah Surakarta.
Maswadeh,  Semreen  M,  Naddaf  A.  2006.
Anti-inflammatory  Activity  of  Achillea and Ruscus Topical Gel On Carragenan-induced  Paw  Edema  in Rats .  Acth  Poloniae  Pharmaceutica- Drug Research. 63(4).
Mawaddah  R.  2008. Kajian  Hasil  Riset
Potensi Antimikroba Alami dan Aplikasinya  dalam  Bahan  Pangan  di Pusat  Informasi  Teknologi  Pertanian Fateta
IPB [skripsi]. Fakultas Teknologi Pertanian ITB, Bogor.
Nurhabibah.  2013. Formulasi  Emulgel Anti  Jerawat  dari  Ekstrak  Rimpang Temulawak dan Uji Aktivitasnya terhadap  bakteri  Propionibacterium acnes . Jurnal.
Prayoga  E.  2013. Perbandingan  Efek Ekstrak Daun Sirih Hijau ( Piper betle
L.)  dengan  Metode  Difusi  Disk  dan Sumuran terhadap Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus aureus. Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah. Skripsi. Jakarta.
Putri  ZF.  2010. Uji  aktivitas  antibakteri ekstrak  etanol  daun  sirih  (Piper  betle
L.)  terhadap  Propionibacterium  acne
dan Staphylococcus aureus multiresisten (skripsi).  Surakarta  : Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah.
Rakhel  NP.  2017 .  Perbandingan  Aktivitas
Antibakteri  Infusa  Kombinasi  Daun
Sirih  dan  Daun  Sirih  Merah  Dengan
Infusa Tunggalnya Terhadap
Antibakteri  Staphylococcus  aureus.
Skripsi ; SADHAR. Yogyakarta.
Sasanti  TJ,  Wibowo  MS,  Fidrianny  I,
Caroline  S.  2012. Formulasi  gel ekstrak  air  teh  hijau  dan  penentuan aktivitas antibakterinya terhadap propionibacterium acnes. , Bandung  : School  of  Pharmacy  ITB,  Gedung
LabTek VII.
Soemiati  A,  dan    Elya  B.  2002. Uji Pendahuluan Efek Kombinasi Antijamur  dan  Infusa  Daun  Sirih (Piper  betle  L.)  Kulit  Buah  Delima
(Punica  granatum  L.)  dan  Rimpang Kunyit  (Curcuma  domestica  Val.) Terhadap  Jamur  Cndida  Albicans.
FMIPA UI : Depok.
Sousa.  2010. Efek  Ekstrak  Etanol  Daun
Sirsak Terhadap Hambatan Pertumbuhan Dan Perubahan Struktur Dinding Sel Dan Aktivitas Acinobacter baumannii. ADLN Perpustakaan
UNAIR.
Suryanto  E.  2012. Fitokimia  Antioksidan .
Putra Media Nusantara, Surabaya.
Yulianti  R,  Abdassah  M,  Abdulah  R,
Surachman  E.  2015. Gel  Kombinasi Ekstrak Daun Sirsak dan Daun Jambu Biji  Sebagai  Obat  Anti  Jerawat . Universitas Padjajaran, Sumedang. Vol. 7 No.3.