## Efektivitas Ekstrak Kulit dan Perasan Jeruk Lemon (Citrus limon L.) sebagai Insektisida terhadap Nyamuk Aedes aegypti
Amelia Alfatiani Putri de Deo 1 , Freshinta Jellia Wibisono 2* , Indra Rahmawati 3 , Roeswandono Wirjaatmadja 4 , Rochiman Sasmita 1
1 Departemen Parasitologi, Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Wijaya Kusuma Surabaya
2 Departemen Kesehatan Masyarakat dan Veteriner, Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Wijaya Kusuma Surabaya
3 Departemen Patologi, Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Wijaya Kusuma Surabaya
4 Departemen Reproduksi Veteriner, Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Wijaya Kusuma Surabaya *email : freshinta.uwks@gmail.com
Received : 10 Oktober 2023 Accepted : 18 Oktober 2023 Published : 21 November 2023

## Abstract
This study aims to determine the effectiveness of natural insecticides of lemon peel extract and  lemon juice (Citrus limon L.) against the death of the Aedes aegypti mosquito. The experimental animals in this study were 600 Aedes aegypti mosquitoes. This type of research is an experimental study with  a Complete  Randomized  Design  method  using  eight  treatments  and  three  replications.  The  treatment group consisted of positive control (Transflutrin), negative control (Aquadest), and lemon peel extract and juice (Citrus limon L.) with concentrations of 30%, 35% and 40%. Observations were made every 15 minutes for 1-hour exposure. The results showed that 30% lemon peel extract was able to kill 58.33% mosquitoes, a concentration of 35% was able to kill 78.33% mosquitoes and  a concentration of 40% was able to kill 86.66% mosquitoes. Lemon juice 30% can kill 25% mosquitoes, 35% concentration can kill 33.33% mosquitoes, and 40% concentration can kill 40% mosquitoes.  Based on the results of the study, treatment using lemon peel extract at various concentrations had an effect on mosquito mortality, with the highest mortality reaching 86.6%. The treatment using lemon juice at various concentrations had no effect on mosquito mortality, with the lowest mortality being 25%.  The results of the one way ANOVA  calculation  obtained  a  P-value  =  0.00  (P  ≤  0.05),  which  means  that  there  is  a  significant difference in the number of mosquitoes that die between treatment groups. Duncan's test results showed that  lemon  peel  extract  concentrations  30%,  35%,  and  40%  were  the  most  effective  concentrations compared  to  lemon  juice.  The  conclusion  of  this  study  was  lemon  peel  extract  (Citrus  limon  L.)  is effective as a natural insecticide against Aedes aegypti mosquitoes.
Keywords: Aedes aegypti, insecticide, lemon juice, lemon peel extract, limonoid.

## PENDAHULUAN
Indonesia merupakan salah satu negara beriklim  tropis  yang  baik  bagi  perkembangan penyakit  yang  berdampak  bagi  kesehatan manusia, terutama penyakit yang penularannya melalui vektor seperti nyamuk. Nyamuk Aedes aegypti adalah  salah  satu  vektor  pembawa penyakit  zoonosis  yang  dapat  mengakibatkan penyakit  Chikungunya  dan  Demam  Berdarah Dengue .    Penyakit  zoonosis  tersebut  ada  pula yang ditemukan di Indonesia, bahkan ada yang masuk  ke  dalam  kejadian  luar  biasa  (KLB),
sebagai contoh adalah wabah Demam Berdarah Dengue (Nugraheni, 2017)
Demam  Berdarah Dengue (DBD) merupakan  penyakit  yang  disebabkan  virus Dengue dari genus Flavivirus , famili Flaviviridae yang  ditularkan  m  elalui  gigitan nyamuk Aedes aegypti (Maulana et al ., 2022). Aedes  aegypti bersifat  antropofilik  dan memiliki  kesesuaian    dengan    lingkungan perkotaan  dan  sering  berkembangbiak  di kontainer  yang  berisi  genangan  air  (Astriani dan  Widawati,  2016).  Nyamuk Aedes  aegypti terinfeksi dengan mengisap darah dari sesorang yang  telah  terinfeksi  virus dengue lalu
menularkan virus tersebut kepada orang lain. Di Indonesia, kasus DBD pertama kali dilaporkan terjadi di Jakarta dan Surabaya pada tahun 1968 hingga  tahun  2010,  Indonesia  sebagai  negara dengan kasus DBD tertinggi di Asia Tenggara (Yushananta et al ., 2020). Indonesia menduduki  peringkat  2 untuk  kejadian  DBD, dengan  total  kasus hingga    Februari    Tahun 2019    sebesar 16.692   kejadian   DBD   tingkat nasional, dengan   jumlah   korban   meninggal yaitu sebanyak  169  orang.  Sedangkan  pada tahun  2020  awal, terdapat  73.35%  dengan IR kurang    dari    49    per    100.000    penduduk (Arisanti dan Suryaningtyas, 2021).
Berbagai upaya yang dilakukan pemerintah  untuk  mengusir  dan  mencegah gigitan nyamuk yaitu dengan menutup tempat- tempat  penyimpanan  air  bersih,  mengubur barang-barang  bekas,  pengasapan  ( fogging ), dan  penggunakan  bubuk  abate  pada  stadium pendewasaan  (Agustina et  al .,  2019).  Bentuk pengendalian  perkembangan  nyamuk Aedes aegypti dapat  dilakukan  secara  mekanik, biologi,  dan  kimia.  Pengendalian  yang  biasa dilakukan  yaitu  pengendalian  secara  kimiawi dengan menggunakan insektisida, karena lebih efektif  dan  hasilnya  cepat  terlihat.  Namun, penggunaan  insektisida  mempunyai  dampak negatif,  antara  lain  pencemaran  lingkungan, kematian predator, resistensi serangga sasaran, dapat  membunuh  hewan  peliharaan,  bahkan dapat  meracuni  manusia.  (Anggriany  dan Tarigan, 2018).
Salah  satu  bahan  alami  yang  dapat digunakan  sebagai  insektisida  nyamuk  adalah buah lemon. Jeruk lemon merupakan salah satu tanaman penghasil minyak atsiri yang sebagian besar mengandung terpen, siskuiterpen alifatik, turunan hidrokarbon teroksigenasi dan hidrokarbon  aromatik.  Kulit  jeruk  lemon berpotensi sebagai insektisida dengan kandungan  aktif  dari  kulit  jeruk  lemon  yaitu limonoid (Anggriany dan Tarigan, 2018). Kulit lemon terdiri dari dua lapisan yaitu lapisan luar dan  lapisan  dalam.  Lapisan  luar,  mengandung minyak  esensial  yang  terdiri  dari  citral  (5%) dan  limonen,  α-terpineol,  geranil  asetat  dan linali.  Lapisan  dalam,  mengandung  kumarin, glikosida dan flavonoid (Dev dan Nidhi, 2016).
Kandungan   senyawa   zat   aktif dari ekstrak kulit dan perasan jeruk lemon tersebut menjadi  dasar  dilakukannya  penelitian untuk melihat  apakah  bahan  alami  ini  efektivitas sebagai  insektisida  terhadap  nyamuk Aedes aegypti .  Penggunaan  insektisida  alami  yang berasal dari tanaman terbukti lebih aman karena memiliki bahan kimia atau zat aktif yang toksik terhadap  serangga  namun  mudah  terurai  di alam sehingga tidak mencemari lingkungan dan relatif  aman  bagi  manusia  (Anggriany  dan Tarigan, 2018).
Berdasarkan  uraian  di  atas,  penelitian mengenai efektivitas ekstrak kulit dan perasan jeruk  lemon  ( Citrus  limon  L. )  sebagai insektisida  terhadap  nyamuk Aedes  aegypti perlu dilakukan .

## MATERI  DAN METODE
Penelitian dilaksanakan di Laboratorium Parasitologi Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Wijaya Kusuma Surabaya. Penelitian ini dilaksanakan pada  bulan Februari  sampai  Maret  2023.  Alat yang  digunakan  adalah  kandang  ( barrel  uji ) berukuran  20×20×20  cm 3 terbuat  dari  kertas karton  dan  kawat  kasa,  alat  semprot,  pinset, gelas  ukur,  batang  pengaduk, stopwatch , lembar observasi. Bahan yang akan digunakan dalam  penelitian  ini  yaitu  ekstrak  kulit  jeruk lemon  dan  perasan  jeruk  lemon  ( Citrus  limon L .), transflutrin dan aquadest . Proses pembuatan ekstrak dikerjakan oleh tenaga ahli di  Laboratorium  Fakultas  Ilmu  Kesehatan Universitas Muhammadiyah Sidoarjo. Nyamuk Aedes aegypti sebanyak 600 ekor diperoleh dari Balai Penelitian dan Konsultasi Industri (BPKI)
Ketintang, Surabaya.
Jenis penelitian yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  penelitian  eksperimental dan Rancangan penelitian yang digunakan yaitu Rancangan  Percobaan  Acak  Lengkap  (RAL). Percobaan  ini  menggunakan  bahan  perlakuan tunggal ( Citrus limon L .) yang terdiri dari tiga konsentrasi,  yaitu:  30%,  35%,  40%  ekstrak kulit  jeruk  lemon  dan  perasan  buah  lemon ( Citrus  limon  L .)  dengan  konsentrasi  30%,
35%,  40%,    serta  dua  kontrol  yaitu  kontrol negatif  menggunakan  aquades  dan  kontrol positif menggunakan transflutrin. Sehingga ada 8  taraf  penguji  sebagai  perlakuan  dan  3 ulangan.  Setiap  satuan  perlakuan  dilakukan pengamatan  terhadap  jumlah  nyamuk  yang mati selama 1 jam dengan interval waktu setiap 15  menit.  Satuan  percobaan  perlakuan  adalah 20 ekor nyamuk Aedes aegypti dewasa.

## Pembiakan Nyamuk Aedes aegypti
Proses  pemeliharaan  nyamuk Aedes aegypti dimulai  dari  pemeliharaan  larva nyamuk, dipelihara di dalam botol plastik yang berisi  sedikit  air,  lalu  botol  berisi  larva disimpan pada suhu ruangan 26-27 o C (Septiano,  2014)  dibiarkan  2-3  hari  hingga menjadi  nyamuk  dewasa.  Nyamuk Aedes aegypti dipindahkan dari botol plastik masing- masing  20  ekor  ke  dalam  23  kandang  uji.
Pemindahan  nyamuk Aedes  aegypti dilakukan cara  mulut botol pemeliharaan  dimasukkan ke dalam lubang yang tersedia pada salah satu sisi kandang uji (Sofiana dan Rahman, 2016).
Pembuatan  ekstrak  kulit,  perasan  dan larutan  konsentrasi  jeruk  lemon  (Citrus limon L.)
Pembuatan  ekstrak  kulit  jeruk  lemon ( Citrus limon L. ) menggunakan metode ekstrasi dengan  larutan  etanol  96%  (Sari  dan  Laoli, 2019).  Pembuatan  perasan  buah  lemon  yaitu dengan  menyiapkan  buah  lemon  segar sebanyak  2  kg,  diperas  dan  dimasukkan  ke dalam beaker glass .
Pembuatan  konsentrasi  ekstrak  kulit dan  perasan  jeruk  lemon  ( Citrus  limon  L. ) terdiri  atas  tiga  konsentrasi  yaitu  30%,  35%, dan  40%.  Cara  pembuatan  konsentrasi  ini dengan  cara  mengencerkan  ekstrak  kulit  jeruk lemon  dan  perasan  buah  lemon  ( Citrus  limon L. )  dengan  aquades  steril.  Rumus  pembuatan konsentrasi ini adalah sebagai berikut (Hidayah et al ., 2021) :
M1 × V1 = M2 × V2 dimana :
VI = Volume awal (ml) M1 = Konsentrasi awal (%)
V2 = Volume akhir (ml) M2 = Konsentrasi akhir (%)
Pembuatan ekstrak konsentrasi 30% dilakukan dengan  mencampur    30  ml  ekstrak  kulit  jeruk lemon  ditambah  70  ml  aquades.  Pembuatan ekstrak  konsentrasi  35%  dilakukan  dengan mencampur  35  ml  esktrak  kulit  jeruk  lemon ditambah  65  ml  aquades.  Pembuatan  ekstrak konsentrasi 40% dilakukan dengan mencampur 40 ml esktrak kulit jeruk lemon ditambah 60 ml aquades. Pembuatan perasan lemon konsentrasi 30% dilakukan dengan mencampur  30 ml perasan lemon ditambah 70 ml aquades.
Pembuatan  perasan  lemon  konsentrasi  35% dilakukan  dengan  mencampur  35  ml  perasan lemon  ditambah  65  ml  aquades.  Pembuatan perasan  lemon  konsentrasi  40%  dilakukan dengan  mencampur  40  ml  perasan  lemon ditambah 60 ml aquades ( Moekti, 2022).
Uji potensi ekstrak kulit dan perasan jeruk lemon (Citrus limon L.)
Nyamuk Aedes  aegypti dewasa  yang berada di dalam kandang pemeliharan dimasukkan ke dalam barrel uji masing-masing sebanyak  20  ekor  nyamuk.  Kemudian  sprayer berisi  transflutrin,  aquadest,  ekstrak  kulit  dan perasan  jeruk  lemon  dengan  masing-masing konsentrasi disemprotkan barrel uji yang berisi nyamuk sebanyak 5 kali atau maksimal 10 kali semprot.  Kemudian  amati  nyamuk  yang  mati setiap  15  menit  dan  sisihkan  ke  bagian  yang kosong  di  dalam  barrel  uji Kematian  nyamuk dapat  diamati  secara  fisik  dengan  tanda-tanda antara lain: nyamuk tidak bergerak sama sekali walaupun  telah  mendapat  ransangan  berupa sentuhan  maupun  hembusan  angin  serta  tubuh nyamuk telah menujukkan kekakuan  (Saleh et al ., 2017).

## Analisis data
Analisis  data  statistik  pada  penelitian ini menggunakan program aplikasi IBM SPSS Statistics  20,  diolah  secara  bertahap  untuk mendapatkan  hasil  akhir  penelitian.  Setelah  1 jam  pemaparan  hitung  berapa  banyak  total
nyamuk  yang  mati.  Setelah  itu  data  kematian larva nyamuk dimasukan kedalam tabel dan di analisis dengan uji one-way ANOVA, kemudian  dilanjutkan  uji Duncan (Hidayah et al ., 2021).

## HASIL
Hasil  pengujian  ekstrak  kulit  dan perasan  jeruk  lemon  ( Citrus  limon  L. )  dengan beberapa  konsentrasi  terhadap  nyamuk Aedes aegypti menunjukkan  angka  mortalitas  yang berbeda pada tabel berikut.
Tabel 1. Persentase kematian nyamuk Aedes aegypti selama 1 jam pemaparan ekstrak kulit dan perasan jeruk lemon ( Citrus limon L. ) pada salah satu ulangan. Perlakuan Jumlah nyamuk Waktu pemaparan(menit) Mortalitas 15 30 45 60 Kontrol (+) 20 4 10 17 20 100% (20/20) Kontrol (-) 20 0 0 0 0 0% (0/20) Ekstrak kulit lemon 30% 20 2 4 7 13 65% (13/20) Ekstrak kulit lemon 35% 20 3 6 10 16 80% (16/20) Ekstrak kulit lemon 40% 20 3 8 13 18 90% (18/20) Perasan lemon 30% 20 0 1 3 5 25% (5/20) Perasan lemon 35% 20 1 3 5 7 35% (7/20) Perasan lemon 40% 20 1 3 5 8 40% (8/20)
Berdasarkan  hasil  analisa  statistic menggunakan  uji  ANOVA  dan  uji Duncan dapat dilihat bahwa terdapat pengaruh perlakuan  terhadap  mortalitas  nyamuk Aedes aegypti (p≤0,05).  Penelitian  ini  dilakukan dengan  mengamati  kematian  nyamuk Aedes aegypti dengan interval pengamatan dilakukan setiap  15  menit,  kemudian  dihitung  rerata mortalitas  yang  hasilnya  dapat  dilihat  pada tabel berikut.
Tabel 2. Rerata dan standar deviasi mortalitas nyamuk pasca penyemprotan.
Perlakuan Rerata mortalitas ± standar deviasi Sign. Kontrol negatif 0,000±0,000 a Perasan 30% 2,583±1,729 b Perasan 35% 3,583±2,429 c Perasan 40% 4,416±2,678 d 0,00 Ekstrak 30% 6,250±3,695 e Ekstrak 35% 8,750±5,065 f Ekstrak 40% 10,333±5,482 g Kontrol positif
12,416±5,946 h a,b,c superskrip  yang  berbeda  pada  kolom  yang sama  memperlihatkan  perbedaan  yang  nyata (p≤0,05).
Berdasarkan  tabel  4.2  diperoleh  hasil bahwa jumlah kematian nyamuk Aedes aegypti setelah disemprotkan ekstrak kulit dan perasan jeruk  lemon  ( Citrus  limon  L. )  menghasilkan nilai  signifikansi  yaitu p-value =  0.000  (P  ≤ 0.05), sehingga H 0 ditolak dan H 1 diterima atau
dapat  dinyatakan  bahwa  terdapat  hubungan perbedaan  yang  signifikan.  Kemudian  untuk mengetahui  perbedaannya  maka  dilakukan analisis lanjutan yaitu uji Duncan agar  dapat mengetahui  konsentrasi  ekstrak  kulit  dan perasan  lemon  ( Citrus  limon  L. )  yang  paling efektif  dalam  membunuh  nyamuk Aedes aegypti

## PEMBAHASAN
Hasil penelitian yang dilakukan menunjukkan  bahwa  terdapat  perbedaan  hasil kematian nyamuk Aedes aegypti (tabel 1) antar tiap  perlakuan  pada  berbagai  ulangan  baik dengan menggunakan ekstrak kulit jeruk lemon maupun  perasan  jeruk  lemon.  Penggunaan ekstrak  kulit  jeruk  lemon  dengan  konsentrasi 30%  presentasi  kematian  nyamuk  sebesar 58,33%,  pada  konsentrasi  35%  kematian nyamuk sebesar 78,33%, dan pada konsentrasi 40%  kematian  nyamuk  sebesar  86,66%.  Jadi persentase  terendah  kematian  nyamuk  yaitu pada konsentrasi 30% dan persentase tertinggi kematian nyamuk yaitu pada konsentrasi 40%. Berdasarkan hasil tersebut diketahui penggunaan  ekstrak  kulit  jeruk  lemon  dengan konsentrasi  30%,  35%,  dan  40%  mampu membunuh hampir keseluruhan nyamuk Aedes aegypti dalam kandang uji dalam waktu 1 jam.
Menurut penelitian yang dilakukan oleh Nelma dan Sriwahyuni (2022) bahwa pada konsentrasi 25%  ekstrak  kulit  jeruk  lemon  tidak  efektif
membunuh  nyamuk Aedes  aegypti ,  sehingga penelitian yang dilakukan ini dapat menyempurnakan  penelitian  sebelumnya yaitu dengan menambah konsentrasi ekstrak. Hal ini karena  semakin  tinggi  konsentrasi  yang digunakan  semakin  tinggi  pula  kandungan bahan  aktif  yang  ada  pada  ekstrak  sehingga tingkat  mortalitas  nyamuk Aedes  aegypti semakin tinggi (Saleh et al ., 2017).
Perlakuan menggunakan perasan jeruk lemon  dengan  konsentrasi  30%  presentasi kematian nyamuk sebesar 25%, pada konsentrasi  35%  kematian  nyamuk  sebesar 33,33%,  dan  pada  konsentrasi  40%  kematian nyamuk  sebesar  40%.  Hasil  penelitian menunjukkan  bahwa  pada  pemberian  perasan jeruk lemon dengan konsentrasi 30%, 35%, dan 40% pada nyamuk Aedes aegypti selama 1 jam pemaparan  tidak  efektif  sebagai  insektisida karena  tidak  mencapai  LC  50.  Dari  hasil tersebut  dapat  disimpulkan  bahwa  diperlukan konsentrasi yang lebih tinggi agar perasan jeruk lemon  efektif  dijadikan  sebagai  insektisida alami yang mampu membunuh nyamuk Aedes aegypti .  Menurut  penelitian  yang  dilakukan Kekang  (2019)  bahwa  perasan  buah  lemon pada konsentrasi 30% terbukti efektif membunuh  nyamuk  selama  2  jam  pemaparan dengan  metode  penguapan.  Oleh  karena  itu, metode pengaplikasian dan konsentrasi larutan yang lebih tinggi sangat berpengaruh pada hasil kematian  nyamuk Aedes  aegypti karena interaksi  zat  racun  pada  suatu  sistem  biologis dapat ditentukan oleh konsentrasi dan lamanya waktu uji (Yunus et al ., 2018).
Hasil perlakuan memperlihatkan bahwa  kontrol  positif  (transflutrin)  memiliki daya insektisida yang lebih tinggi dibandingkan perlakuan  dengan  ekstrak  kulit  dan  perasan jeruk  lemon  ( Citrus  limon  L. ).  Transflutrin merupakan  salah  satu  insektisida  golongan piretroid  yang  bekerja  cepat  melumpuhkan serangga  sasaran  dan  bersifat repellent .  Sifat sintetik  piretroid  yaitu  tidak  mudah  menguap, memiliki  potensi  insektisida  tinggi  dan toksisitas  rendah  terhadap  manusia,  selain  itu memiliki  daya  bunuh  cepat  dengan  dengan dosis yang rendah. Transflutrin termasuk racun pada sistem saraf dan mempunyai suatu protein dalam  saraf  yang  disebut  VGSC  ( Voltaged- gated  sodium  channel )  yang  mengatur  denyut impuls  saraf.  Protein  ini  akan  terbuka  untuk memberikan  rangsangan  pada  saraf  dan  akan menutup untuk menghentikan sinyal saraf. Hal
ini  menyebabkan  serangga  yang  keracunan akibat  terpapar  transflutrin  akan  tremor  dan inkoordinasi gerakan (Hasanah et al ., 2015). Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui  efektivitas  ekstrak  kulit  dan perasan  jeruk  lemon  ( Citrus  limon  L. )  sebagai insektisida  terhadap  nyamuk Aedes  aegypti . Penelitian  ini  menggunakan  perasan  buah lemon dan ekstrak kulit jeruk lemon yang telah diekstraksi  dengan  metode  maserasi  dengan menggunakan  pelarut  etanol  96%  untuk mendapatkan  kandungan  dalam  kulit  jeruk lemon  yang  diduga  memiliki  efek  insektisida terhadap nyamuk Aedes aegypti . Pelarut etanol 96% yang digunakan dalam pembuatan ekstrak kulit  jeruk  lemon  adalah  pelarut  yang  lebih selektif,  sifat  toksik  yang  rendah  dari  pada pelarut lainnya dan bersifat semipolar sehingga dapat melarutkan zat kimia yang bersifat polar maupun non polar (Nirma et al ., 2017)
Nyamuk  yang  ada  di  dalam  kandang disemprot  dengan  ekstrak  kulit  dan  perasan jeruk lemon dengan masing-masing konsentrasi kemudian  dilakukan  pengamatan  terhadap nyamuk  yang  mati.  Metode  yang  paling  tepat dalam  penelitian  ini  adalah  metode  semprot karena  pengaplikasiannya  mudah  dan  mirip dengan penggunaan insektisida di masyarakat. Jarak  dan  cara  penyemprotan  nyamuk  pada penelitian  ini  dilakukan  secara  mendatar  pada setiap  sisi  kandang  dan  diberi  jarak  antara kandang  dengan  alat  semprot  agar  residu ekstrak  kulit  dan  perasan  buah  lemon  dapat menyebar rata. Residu ekstrak kulit dan perasan buah lemon yang disemprotkan dapat bertahan beberapa waktu tertentu, dimana selama waktu itu  pula  daya  racun  serangga  toksisitasnya masih  cukup  untuk  membunuh  serangga  yang hinggap (Armayanti dan Rasjid, 2020).
Lama  waktu  kontak  antara  nyamuk Aedes aegypti dengan ekstrak kulit dan perasan jeruk  lemon  berpengaruh  terhadap  jumlah kematian  nyamuk.  Waktu  kontak  yang  terlalu singkat  juga  akan  mengurangi  lama  interaksi antara  senyawa  kimia  dengan  nyamuk  sasaran sehingga  akan  menurunkan  jumlah  nyamuk yang mati. Berdasarkan penelitian sebelumnya, waktu  pemaparan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  1  jam,  karena  semakin lama  interaksi  antara  senyawa  kimia  dengan nyamuk  sasaran  jumlah  nyamuk  yang  mati akan  meningkat.  Suhu  juga  merupakan  salah satu faktor penting yang sangat mempengaruhi pertumbuhan  nyamuk.  Suhu  ruangan  yang
digunakan pada penelitian ini yaitu 30 0 C yang sesuai  dengan  kriteria  Depkes,  2004,  yaitu pertumbuhan nyamuk akan terhenti sama sekali apabila  suhu  ruangan  kurang  dari  10 o C  atau lebih dari 40 o C (Musdalifah, 2016).
Berdasarkan  hasil  penelitian,  ekstrak kulit dan perasan jeruk lemon ( Citrus limon L. ) memiliki  potensi  sebagai  insektisida  alami dengan konsentrasi tertentu untuk menggantikan  insektisida  sintetik  yang  dapat merusak lingkungan. Kemampuan ekstrak kulit dan  perasan  jeruk  lemon  ( Citrus  limon  L. ) sebagai  insektisida  hayati  disebabkan  karena adanya  beberapa  bahan  aktif  yang  terkandung dalam ekstrak tersebut sehingga dapat menyebabkan  kematian  pada  nyamuk Aedes aegypti .  Hal  ini  sesuai  dengan  pengertian insektisida  hayati  yaitu  bahan  alami  dari tumbuhan dengan berbagai kelompok metabolik sekunder yang mengandung beribu- ribu  senyawa  bioaktif  untuk  dimanfaatkan sebagai  pengendali  serangga  pengganggu  di lingkungan rumah. Beberapa senyawa bioaktif yang diduga terkandung pada ekstrak kulit dan perasan  jeruk  lemon  diantaranya,  limonoid, tanin,  flavonoid,  saponin  dan  minyak  atsiri yang terbukti bersifat racun kontak, racun perut dan racun pernafasan pada serangga khususnya nyamuk Aedes aegypti (Naria, 2015).
Hasil  pengamatan  nyamuk Aedes aegypti yang  telah  diberi  perlakuan  ekstrak kulit  dan  perasan  buah  lemon  dengan  metode semprot  akan  mengalami  perubahan  tingkah laku,  dimana  gerakan  yang  sebelumnya  aktif akan  menjadi  lamban,  sulit  bergerak,  dan kemudian mati. Limonoid merupakan senyawa yang beraroma tajam atau menyengat sehingga dapat  menganggu  saraf  sensorik,  perifer  dan olfaktori  sistem  pada  serangga.  Limonoid masuk  ke  pencernaan  melalui  rendaman konsentrasi ekstrak yang termakan dan diserap oleh  dinding  usus  kemudian  beredar  bersama darah  yang  akan  mengganggu  metabolisme tubuh  nyamuk  sehingga  akan  kekurangan energi  untuk  aktivitas  hidupnya  yang  akan mengakibatkan  nyamuk  itu  kejang  dan akhirnya  mati  (Nirma et  al .,  2017).  Nyamuk Aedes  aegypti dikatakan knockdown apabila jatuh,  menggelepar  dalam  keadaan  telentang, dengan  pergerakan  semakin  lambat.  Nyamuk Aedes aegypti dikatakan mati apabila tidak ada pergerakan  apapun  setelah  adanya  pengusikan (Utami dan Cahyati, 2017)
Kandungan  senyawa  insektisida  alami ekstrak  kulit  dan  perasan  buah  lemon  juga masuk ke dalam tubuh nyamuk melalui mulut. Senyawa tanin memiliki rasa yang sangat pahit, sehingga pada saat nyamuk memakannya dapat menimbulkan keracunan dan gangguan pencernaan.  Senyawa  tanin  yang  masuk  ke dalam  sel  tubuh  nyamuk  dapat  menghambat metabolisme  sehingga  nyamuk  tidak  dapat beraktifitas sempurna lalu nyamuk mati. Hal ini sesuai  dengan pendapat Armayanti  dan  Rasjid (2020),  bahwa  senyawa  kimia  tanin  berfungsi sebagai  insektisida  terutama  sebagai  racun perut karena dapat menghambat enzim dengan jalan  membentuk  ikatan  kompleks  dengan protein  pada  enzim  dan  substrak  yang  dapat menyebabkan  gangguan  pencernaan  serta merusak dinding sel pada nyamuk.
Perlakuan  dengan  semprotan  ekstrak dan  perasan  jeruk  lemon  mengeluarkan kandungan berupa flavonoid yang menyebabkan keracunan dan gangguan metabolisme  hingga  kematian  nyamuk Aedes aegypti .  Flavonoid  merupakan  golongan  fenol dan banyak ditemukan di dalam tumbuhan yang memiliki sifat insektisida. Flavonoid berfungsi sebagai  racun  pernapasan  atau  inhibitor pernapasan,  sehingga  saat  nyamuk Aedes aegypti melakukan pernapasan  flavonoid  akan masuk  bersama  udara  (O2)  melalui  alat pernapasannya. Setelah melakukan pernapasan, maka flavonoid akan menghambat sistem kerja pernapasan  di  dalam  tubuh  nyamuk Aedes aegypti .  Flavonoid  juga  menyerang  bagian syaraf  pada  beberapa  organ  vital  serangga sehingga  timbul  suatu  perlemahan  syaraf, seperti pernafasan dan menimbulkan kematian (Setiawan, 2015). Kematian nyamuk dikarenakan adanya kontak  dengan  ekstrak  kulit  dan  perasan  jeruk lemon yang mengandung zat saponin. Saponin merupakan  senyawa  yang  termasuk  ke  dalam senyawa  terpenoid  yang  apabila  mengenai permukaan  kulit  serangga,  mukosa  kulit serangga  tersebut  akan  rusak  dan  dapat mengakibatkan  hemolisis  sel  darah,  sehingga pernapasan  menjadi  terhambat  dan  dapat mengakibatkan  kematian.  Menurut  Armayanti dan  Rasjid  (2020),  saponin  akan  masuk  ke tubuh dan mengganggu kerja enzim pernapasan serangga,  kemudian dapat menimbulkan kelayuan  pada  saraf  serta  kerusakan  pada spirakel  yang  mengakibatkan  serangga  tidak
bisa  bernafas  dan  akhirnya  mengalami kematian.
Kandungan senyawa-senyawa tersebut relatif  aman  bagi  lingkungan,  manusia  dan hewan  ternak  karena  berasal  dari  bahan  alami yang sifatnya mudah terurai di lingkungan serta tidak  akan  cepat  menimbulkan  resistensi. Keunggulan insektisida hayati ini yaitu mudah terurai di alam meskipun dosis yang digunakan tinggi,  selain  itu  senyawa  insektisida  ini  juga tidak  akan  menganggu  organisme  lain  yang bukan sasaran. Sifat insektisida sintetik adalah tidak  bisa  terurai  di  alam  sehingga  akan mencemari  lingkungan  dan  mempengaruhi organisme  lain.  Oleh  karena  itu,  penggunaan insektisida  hayati  merupakan  suatu  alternatif pengendalian  serangga  yang  aman,  dan membantu  meminimalkan  risiko  pencemaran lingkungan (Saleh et al., 2017).
Analisis  data  statistik  pada  penelitian ini menggunakan program  aplikasi IBM SPSS Statistics  20,  diolah  secara  bertahap  untuk mendapatkan  hasil  akhir  penelitian.  Sebelum melakukan uji one-way ANOVA dilakukan uji normalitas dan uji homogenitas, kemudian jika data yang dimasukkan merupakan data normal dan  homogen,  maka  dapat  dilanjutkan  dengan uji one-way ANOVA.  Uji one  way dilakukan untuk  menguji  apakah  H 0 dan  H 1 ditolak  atau diterima  dan  menguji  suatu  efek,  akibat  atau pengaruh  dari  suatu  variabel  tertentu  yang diteiti.  Hasil  uji  pada  tabel  4.2  uji one  way ANOVA  didapatkan  nilai  signifikansi  P  = 0,000  (P  ≤  0,05),  artinya  terdapat  hubungan yang  signifikan  atau  dapat  dinyatakan  bahwa ekstrak  kulit  dan  perasan  jeruk  lemon  ( Citrus limon  L. )  efektif  sebagai  insektisida  hayati terhadap nyamuk Aedes aegypti . Hal ini sejalan dengan penelitian yang dilakukan oleh Puspita et  al .,  (2022)  yang  berjudul  “Pengaruh Penambahan Kulit Jeruk Lemon ( Citrus limon ) pada  Pemanfaatan  Serbuk  Batang  Singkong sebagai Obat Nyamuk Bakar” yang menunjukkan hasil P = 0.000 (P ≤ 0,05), maka ekstrak  kulit  dan  perasan  jeruk  lemon  ( Citrus limon ) memiliki potensi sebagai insektisida.
Data  hasil  uji  Duncan  pada  penelitian ini  menunjukkan  masing-masing  kelompok perlakuan kontrol positif, kontrol negatif, serta ekstrak  kulit  dan  perasan  jeruk  lemon  ( Citrus limon  L. )  konsentrasi  30%,  35%,  dan  40% berbeda  secara  nyata  yang  ditandai  superskrip yang berbeda-beda. Perlakuan yang menghasilkan  rerata  mortalitas  nyamuk  paling
tinggi  yaitu  transflutrin,  diikuti  ekstrak  kulit lemon  konsentrasi  40%,  35%,  30%,  dan  yang terendah perasan lemon konsentrasi 40%, 35%, 30%,  kontrol  negatif.  Uji  lanjutan  ANOVA yaitu uji Duncan dilakukan untuk menentukan perlakuan yang efektif berdasarkan nilai rerata serta  digunakan  untuk  membandingkan  hasil dari  setiap  kelompok  perlakuan  apakah memiliki  perbedaan  nyata  atau  tidak  yang hasilnya  akan  muncul  dalam  kolom  subset. Hasil  uji  Duncan  menunjukkan  pada  kolom subset  masing-masing  kelompok  perlakuan memperlihatkan  perbedaan  yang  nyata  pada berbagai  periode  waktu  pengamatan.  Hal  ini sama seperti penelitian yang dilakukan Kekang (2019) yang berjudul “Efektivitas Air Perasan Buah  Lemon  ( Citrus  limon  L. )  terhadap Kematian Nyamuk Culex quenquefaciatus Say ” yaitu  hasil  uji  duncan  menunjukkan  bahwa perlakuan  kelompok  kontrol  positif,  kontrok negatif  serta  perasan  lemon  konsentrasi  10%, 20%, dan 30% berada pada kolom subset yang berbeda yang artinya terdapat perbedaan nyata pada masing-masing perlakuan dimana perlakuan  yang  paling  efektif  yaitu  mulai  dari kontrol positif (transflutrin), kemudian perasan lemon konsentrasi 30%, 20%, 10%.
Hasil  penelitian  menunjukan  bahwa efikasi  suatu  insektisida  dipengaruhi  oleh berbagai  macam  faktor  seperti  intrinsik  dan ekstrinsik. Faktor intrinsik berupa bahan aktif, dosis,  konsentrasi,  formulasi  serta  kepekaan spesies  serangga  sedangkan  faktor  ekstrinsik, yaitu  suhu,  sinar  matahari,  angin  serta dipengaruhi  oleh  cara  pengaplikasian  (cara, waktu,  alat  yang  digunakan  dan  cara penyimpanan)  (Kekang,  2019).  Perbedaan keefektifitas daya bunuh nyamuk antara ekstrak kulit dan perasan jeruk lemon ( Citrus limon L. ) ditentukan  oleh  metode  pembuatan  yang berbeda dan diketahui ekstrak etanol kulit buah lemon  memang  mempunyai  daya  insektisida yang kuat dibanding perasan buah (Suja et al .,
2017).
Penelitian mengenai efektivitas ekstrak kulit dan perasan jeruk lemon ( Citrus limon L. ) sebagai  insektisida  terhadap  nyamuk Aedes aegypti sebagai vector DBD memiliki beberapa keterbatasan  yaitu  peneliti    kesulitan  karena nyamuk  yang  dibawa  kebanyakkan  mati  di perjalanan  menuju  tempat  penelitian  akibat faktor  suhu  dan  intensitas  cahaya.  Peneliti kesulitan  memindahkan  nyamuk  dari  kandang pemeliharaan  ke  masing-masing  kandang  uji
menggunakan  aspirator.    Oleh    karena    itu diharapkan    pada  penelitian            selanjutnya untuk            lebih  diperhatikan    faktor    faktor tersebut    untuk  lebih  mengoptimalkan  hasil penelitian

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  dan pembahasan,  dapat  diperoleh  kesimpulan bahwa  konsentrasi  ekstrak  kulit  jeruk  lemon pada  berbagai  konsentrasi  mampu  membunuh nyamuk Aedes  aegypti dengan  persentase kematian  hampir  100%  dalam  waktu  1  jam pemaparan, sehingga ekstrak kulit jeruk lemon dapat berpotensi sebagai anti nyamuk walaupun tidak sebaik kontrol positif.
Hasil  penelitian      ini  menunjukkan bahwa  ekstrak  kulit  dan  perasan  jeruk  lemon dapat dijadikan suatu alternatif dalam pencegahan  dan  pengendalian  penyakit  yang ditularkan  vektor  karena  terbukti  efektif  dan aman,  serta  membantu  meminimalkan  risiko pencemaran lingkungan karena  kandungan  zat pestisidiknya lebih   cepat   terurai   di   alam.

## REFERENSI
Agustina, A., Kurniawan, B., Yusran, M. 2019. Efektivitas  Dari  Tanaman  Zodia ( Evodia Suaveolens ) Sebagai Insektisida  Nabati  Nyamuk Aedes aegypti Penyebab  Demam  Berdarah. Medical Profession Journal of Lampung , 9(2), 351-358.
Anggriany,  V.,  Tarigan,  J.  2018.  Efektifitas Sediaan  Lotion  Ekstrak  Kulit  Jeruk Lemon  ( Citrus  limon )  sebagai  Anti Nyamuk Aedes aegypti . Jurnal Dunia Farmasi , 2(3), 170-179.
Arisanti,  M.,  Suryaningtyas,  N.  H.  2021.
Kejadian  demam  berdarah dengue (DBD)  di  Indonesia  tahun  2010- 2019. Spirakel , 13 (1), 34-41.
Armayanti,  A.,  Rasjid,  A.  2020.  Efektivitas ekstrak  daun  mengkudu  dengan metode  spray  dalam  pengendalian nyamuk Aedes  aegypti . Sulolipu:
Media Komunikasi Sivitas Akademika dan Masyarakat , 19(2), 157-161.
Astriani,  Y.,  Widawati,  M.  2016.  Potensi tanaman di Indonesia sebagai larvasida alami untuk Aedes
aegypti . Jurnal Litbang , 8(2), 37-46.
Dev,  C.,  Nidhi,  S.  R.  R.  S.  2016.  Basketful benefit of Citrus limon . International Research Journal of Pharmacy , 7(6),
1-3.
Hasanah,  Y.  N.,  Wahyuningsih,  N.  E.  2015. Perbedaan  Daya  Hidup  Nyamuk Aedes  aegypti Setelah  Dipapar  Lc50
Ekstrak Bangle (Zingiber Purpureum) Dan  Anti  Nyamuk  Cair  Berbahan Aktif D-allethrin Dan Transflutrin. Jurnal Kesehatan Masyarakat , 3(1), 599-609. Hidayah,  N.,  Kurnianto,  A.,  Bhelo,  A.,
Palgunadi,  B.  U.  2021.  Efektivitas campuran ekstrak daun kelor ( Moringa  oleifera )  dan  serai  wangi ( Cymbopogon  nardus  l )  terhadap mortalitas  larva  nyamuk Aedes aegypti . VITEK:  Bidang  Kedokteran Hewan , 11(2), 64-70.
Kekang,  Y.  Y.  2019. Efektivitas  air  perasan buah  lemon  ( Citrus  limon  L. ) terhadap  kematian  nyamuk Culex quenquefasciatus say . [Skripsi]. Fakultas Kedokteran Hewan. Universitas Wijaya Kusuma Surabaya. Kemenkes  RI.  2015.  Pedoman  Pengendalian Demam Berdarah Dengue di
Indonesia. Pusat Data dan Surveilans
Epidemiologi Jakarta. vol. 2, (5).
Maulana,  M.,  Hidayah,  N.,  Nugraha,  D.  F., Kusuma, I. K. G. 2022. Uji Efektifitas Ekstrak Etanol Daun Pepaya ( Carica Papaya  Linn )  Sebagai  Larvasida Aedes  aegypti . An-Nadaa:  Jurnal Kesehatan Masyarakat (e- Journal) , 9(1), 14-21.
Moekti, B. S. 2022. Uji efektivitas ekstrak dan perasan daun pepaya ( Carica papaya L. )  sebagai  larvasida  nyamuk  ( Culex quinquefasciatus Say ). [Skripsi]. Fakultas Kedokteran Hewan. Universitas Wijaya Kusuma Surabaya.
Musdalifah,  M.  2016. Uji  Efektivitas  Ekstrak
Kulit  Buah  Jeruk  Nipis  ( Citrus aurantifolia ) sebagai Insektisida Hayati  terhadap  Nyamuk Aedes aegypti. [Skripsi].  Universitas  Islam Negeri Alauddin Makassar.
Naria, E. 2015. Insektisida nabati untuk rumah tangga. Info  Kesehatan  Masyarakat. 9(1): 28-32.
Nelma,  N.,  Wahyuni,  S.  2022.  Uji  Efektivitas Daya Tolak Uap Ekstrak Kulit Jeruk Lemon  ( Citrus  Limon,  Swingle ) Terhadap  Nyamuk Aedes  aegypti (Diptera: Culicidae ). Scientific Proceedings of Islamic and Complementary Medicine , 1(1), 109- 118.
Nirma,  N.,  Susilawaty,  A.,  Ibrahim,  H.,
Amansyah,  M.  2017.  Efektivitas larvasida  ekstrak  kulit  buah  jeruk nipis  ( Citrus  aurantifolia )  dalam membunuh  jentik  nyamuk Aedes  sp
(studi  di  daerah  epidemi  DBD  di wilayah  kerja  Puskesmas  Antang Kecamatan Manggala). HIGIENE:
Jurnal  Kesehatan  Lingkungan , 3(2), 87-96.
Nugraheni, R. A. 2017. Identifikasi Morfologi Telur  Dan  Larva  Nyamuk  Pembawa Vektor  Penyakit  Zoonosis  Berbasis Citra Mikroskopis.
Puspita,  R.,  Asmara,  S.,  Rahmawati,  W.,
Kuncoro, S. 2022. Pengaruh Penambahan  Kulit  Jeruk  Lemon
( Citrus  limon )  pada  Pemanfaatan Serbuk  Batang  Singkong  sebagai Obat Nyamuk Bakar. Jurnal Agricultural Biosystem Engineering , 1(3), 291-298. Saleh,  M.,  Susilawaty,  A.,  Syarfaini,  S., Musdalifah,  M.  2017.  Uji  efektivitas ekstrak kulit buah jeruk nipis (C itrus aurantifolia ) sebagai insektisida hayati terhadap nyamuk Aedes aegypti . HIGIENE: Jurnal Kesehatan Lingkungan , 3(1), 30-36.
Sari,  R.  P.,  Laoli,  M.  T.  2019.  Karakterisasi
Simplisia  Dan  Skrining  Fitokimia Serta Analisis Secara Klt (Kromatografi Lapis Tipis) Daun Dan
Kulit  Buah  Jeruk  Lemon  ( Citrus Limon (L.)  Burm.  f.). JIFI  (Jurnal Ilmiah Farmasi Imelda) , 2(2), 59-68.
Septianto,  A.  2014.  Hubungan  Antara  Praktik
Pemberantasan Sarang Nyamuk (PSN)  Dengan  Keberadaan  Jentik Nyamuk Aedes  aegypti Di  Rw  7 Kelurahan Sukorejo Kecamatan Gunungpati  Kota  Semarang. Kota Semarang . UNS.
Setiawan  S.  2015.  Efektivitas  Ekstrak  Daun Jambu  Biji  Merah  (Psid ium  guajava Linn )  sebagai  Insektisida  Aedes Aegypti dalam Sediaan Anti Nyamuk Elektrik. [Skripsi]. Fakultas Kedokteran Universitas Lampung. Sofiana, L., Rahman, M. S. 2016. Perbedaan status  kerentanan  nyamuk Aedes aegypti terhadap malathion di Kabupaten Bantul Yogyakarta. KEMAS: Jurnal Kesehatan  Masyarakat , 11(2),  302-
309.
Suja,  D.,  Bupesh,  G.,  Nivya,  R.,  Mohan,  V., Ramasamy,  P.,  Muthiah,  N.  S.,  ... Prabu,  K.  2017.  Phytochemical screening,  antioxidant,  antibacterial activities  of  citrus  limon  and  citrus sinensis  peel  extracts. International Journal  of  Pharmacognosy  and Chinese Medicin , 1(2), 1-7.
Utami, I., Cahyati, W. H.  2017. Potensi ekstrak daun kamboja  ( Plumeria  acuminata ) sebagai Insektisida terhadap Nyamuk Aedes  aegypti . HIGEIA  (Journal  of
Public Health Research and
Development) , 1(1), 22-28.
Yunus,  R.,  Afrindayanti,  A.,  Petrus,  P.  2018. Efektivitas  Sari  Buah  Belimbing Wuluh  ( Averrhoa  Bilimbi  Linn )
sebagai  Larvasida  Alami  terhadap Nyamuk Aedes sp . Health Information: Jurnal Penelitian , 10(2), 113-122.
Yushananta,  P.,  Setiawan,  A.,  Tugiyono,  T. 2020.  Variasi  Iklim  dan  Dinamika Kasus  DBD  di  Indonesia:  Systematic Review. Jurnal Kesehatan , 11(2), 294- 301.