MORFOLOGI DAN BIOMASSA SEL SPONS Aaptos aaptos DAN Petrosia sp .

## MORPHOLOGY AND CELL BIOMASS OF SPONGE Aaptos aaptos AND
Petrosia sp .
Meutia Samira Ismet 1) , Dedi Soedharma 2) , dan Hefni Effendi 3)
1) Dept.Ilmu dan Teknologi Kelautan FPIK-IPB e-mail: mymeut@yahoo.com
2) Dept.Ilmu dan Teknologi Kelautan FPIK-IPB
3) Dept. Manajemen Sumber Daya Perikanan FPIK-IPB

## ABSTRACT
Aaptos aaptos and Petrosia sp . sponges are known for their ability to produce potential marine  bioactive  compound.    As  a  metazoan  animal  with  simple  body  structure,  the morphology  and  it  association  with  symbiont-bacteria  could  influence  their  bioactive compound  both  type  and  activity,  as  much  as  their  habitat  adaptation.  In  order  to determine morphology and its cell biomass of Aaptos aaptos  dan Petrosia sp .,  samples were  taken  from  the  West  Pari  Island,  at  7  m  depth.  Preserved  samples  (in  4% formaldehyde) were examined using a histological mounting and centrifugation method to  separate  the  cells  fraction  of  sponge’s    tissues.  A.  aaptos  sponge  has  a  soft  body structure with 55.9% skeleton-forming fraction, 14.2% sponge cell fraction and 29.9% bacteria  fraction.  Meanwhile,  Petrosia sp .  sponge  has  a  rigid  body  with  dominant skeleton-forming  fraction  (68.6%),  and  lesser  sponge  cell  and  bacteria  associated (19.7% and 11.7%, respectively).
Keywords: A. aaptos, Petrosia sp, morphology, cell biomass

## ABSTRAK
Spons  Aaptos  aaptos  dan  Petrosia  sp.  diketahui    memiliki  kemampuan  menghasilkan senyawa  bioaktif  yang  poensial.  Sebagai  hewan  metazoan  dengan  struktur  tubuh  yang sederhana,  morfologi  dan  asosiasi  yang  dibentuk  oleh  spons  dengan  bakteri  simbion dapat  mempengaruhi  tipe  dan  aktivitas  senyawa  bioaktifnya,  seperti  halnya  adaptasi spons  terhadap  habitatnya.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mempelajari  morfologi  dan biomassa sel Aaptos aaptos dan Petrosia sp. Sampel spons yang siambil dari pulau Pari kemudian diawetkan dalam formalin 3,5-4% dan diamati dengan menggunakan preparat histologis  dan metode sentrifugasi  untuk  memisahkan fraksi  sel-sel  dri  jaringan spons. Spons A. Aaptos memiliki struktur tubuh yang lunak dengan komposisi 55,9% spikula dan  sel  debris,  14,2%  sel  spons  dan  29,9%  pellet  bakteri  simbion.  Sementara  itu, Petrosia sp. Memiliki morfologi yang lebih kaku dengan simbion spikula dan sel debris (68,6%),  dan  sel  spons  dan  bakteri  simbion  ditemukan  lebih  rendah  (berturut-turut 19,7% dan 11,7%).
Kata Kunci: A. aaptos, Petrosa sp ., morfologi, biomassa sel

## I. PENDAHULUAN
Spons  adalah  hewan  metazoa multiseluler,  yang  tergolong  ke  dalam filum  Porifera,  yang  memiliki  perbedaan struktur  dengan  metazoan  lainnya.  Hal ini  disebabkan  seluruh  tubuh  spons terbentuk  dari  sistem  pori,  saluran  dan ruang-ruang,  sehingga  air  dapat  dengan mudah mengalir keluar dan masuk secara terus  menerus    (Kozloff,  1990).  Hewan ini mencari makan dengan mengisap dan menyaring  air  yang  melalui  seluruh permukaan tubuhnya secara aktif (Romimohtarto dan Juwana, 1999).
Secara  umum  spons  terdiri  dari beberapa  jenis  sel  yang  menyusun struktur  tubuh  dan  biomassanya.  Sel-sel tersebut  memiliki  fungsi  yang  berperan dalam  organisasi  tubuh  spons.  Dinding tubuh spons terorganisasi secara sederhana.  Lapisan  luar  dinding  tubuh disusun  oleh  sel-sel  pipih  yang  disebut pinacocytes .  Pada  dinding  tubuh  spons juga  terdapat  pori-pori  tempat  masuknya air  ke  dalam  tubuh,  yang  dibentuk  oleh porocyte . Sel-sel  ini dapat  membuka dan menutup dengan adanya kontraksi.
Pada  bagian  dalam pinacoderm
terdapat mesohyl ,  yang  terdiri  dari matriks protein bergelatin yang mengandung skeleton dan sel-sel amoeboid.  Lapisan  ini  berfungsi  seperti jaringan  ikat  pada  metazoa  lainnya. Skeleton  spons  demospongia  terbentuk dari  spikula  bersilika  dan  serat  protein spongin.  Spikula  spons  memiliki  jenis yang  beragam,  sehingga  dijadikan  dasar untuk  identifikasi  spons.  Spikula  berada di  dalam mesohyl ,  namun  sering  juga ditemukan pada lapisan pinacoderm .
Sel-sel  amoeboid  dapat  ditemukan pada mesohyl , dan tersusun dari beberapa jenis sel. Archaeocyt adalah sel berukuran  besar  dengan  nukleus  yang besar  pula.  Sel  ini  merupakan  sel fagositosis  dan  berperan  dalam  digesti makanan, serta bersifat totipotent. Sel-sel lainnya  adalah collencytes , sclerocytes , dan spongocytes ,  serta choanocytes , terdapat  pada  bagian  dalam mesohyl , sejajar  dengan spongocoel .  Sel  ini berperan  dalam  pergerakan  air  dalam tubuh  spons  dan  untuk  menyediakan makanan  (Rupert  and  Barnes,  1994).
Gambar 1 menunjukkan struktur organisasi sel-sel penyusun tubuh spons.
(Sumber: dimodifikasi dari Brusca and Brusca, 1990)
Gambar 1.   Struktur morfologi spons
Selain sel-sel yang telah disebutkan di  atas,  spons  juga  bersimbiosis  dengan beberapa mikroorganisme, seperti bakteri dan  fungi.  Menurut  Friedrich et  al .
(2001) in Thakur  and  Mϋller  (2004), diperkirakan sekitar 40% biomassa beberapa  spons  disusun  oleh  komunitas bakteri. Bakteri-bakteri tersebut merupakan  simbion  dalam  tubuh  spons. Beberapa penelitian menunjukkan bahwa simbion-simbion tersebut memiliki peranan dalam produksi senyawa bioaktif yang  berfungsi  dalam  adaptasi  ekologi spons  (Faulkner et  al., 1994;  Kobayashi and  Kitagawa,  1994;  Guyot,  2000; Proksch et al ., 2003; Rahe, 2004; Thakur and  Mϋller,  2004;  dan  Zheng et  al., 2004).  Oleh  karena  itu  perlu  dilakukan penelitian  untuk  mengetahui  pengaruh dari  morfologi  dan  komposisi  penyusun biomassa spons, termasuk bakteri simbionnya, terhadap mekanisme produksi senyawa bioaktif spons.
Penelitian  ini  bertujuan  untuk mempelajari  morfologi  dan  biomassa  sel spons Aaptos  aaptos dan Petrosia sp., sebagai  langkah  awal  untuk  melihat
mekanisme  adaptasi  fisologis  kedua spons  tersebut  terhadap  lingkungan  dan produksi senyawa bioaktifnya.

## II. METODE PENELITIAN

## 2.1. Waktu dan Tempat Penelitian
Pengamatan dan pengambilan sampel  spons  dilakukan  pada  bulan September  2006  di  sekitar  perairan terumbu  karang  Pulau  Pari,  yaitu  pada bagian  Barat  Pulau  Pari  Kepulauan Seribu, DKI Jakarta (Gambar 2). Sampel spons yang diambil, selanjutnya dianalisis  di  Laboratorium  Mikrobiologi Pusat  Penelitian  Lingkungan  Hidup (PPLH)-IPB.

## 2.2. Metode Kerja
Pengambilan sampel segar dilakukan  pada  kedalaman  7  m,  di bagian Barat (106-35’-712” BT dan 05-
52’-055”  LS)  pulau  Pari,  dengan menggunakan  peralatan scuba  diving set . Sampel kemudian dipreparasi
dengan formaldehid 4% sebelum dianalisis lebih lanjut.
Gambar 2. Lokasi pengambilan sampel spons di perairan pulau Pari
Untuk  observasi  biomassa  sel Spons  dilakukan  dengan  menyiapkan sampel  spons    dalam  formalin  3,5-4% yang  diencerkan  dengan  air  laut  yang telah  disaring  dengan  filter  0,2  µm. Sampel  spons  kemudian  dihancurkan dengan  menggunakan  blender,  kemudian suspensi sel diamati di bawah mikroskop fase  kontras  untuk  melihat  tipe  sel  dan menghitung  jumlah  sel  dengan  memakai haemasitometer.
Suspensi  sel  disentrifugasi  untuk memisahkan  biomassa  sel  spons  dengan bakteri  simbion,  serta  fraksi  bakteri, dengan  dua  kali  proses  sentrifugasi:  (1) Sentrifugasi  pertama  pada  1000  rpm selama  5  menit,  untuk  mendapatkan supernatannya, dan (2) Kemudian supernatannya  disentrifugasi  pada  4000 rpm selama 10 menit untuk mendapatkan pellet  bakteri  (Gambar  3).  Setelah  itu hasil sentrifugasi ditimbang, untuk mendapatkan  bobot  (%)  masing-masing
fraksi sel (Richelle-Maurer and
Braekman, 2001). Selain itu, pengamatan morfologi  sel  spons  juga  dilakukan dengan  menggunakan  preparat  histologi sel spons.

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN

## 3.1. Hasil 3.1.1. Pengamatan Biomassa Sel Spons
Hasil  fraksinasi  sel  spons  dengan metode sentrifugasi (Richelle-Maurer and Braekman,  2001)  menunjukkan  bahwa bobot  spikula  dan  sel  debris  spons A. aaptos mencakup  55,9%  bobot  total  sel, dan  pellet  bakteri  simbion  mencapai sekitar 29,9%. Berbeda dengan A aaptos, Petrosia sp.  memiliki  fraksi  komponen skeleton  (spikula  dan  sel  debris)  yang lebih  besar,  yaitu  mencapai  68,6%. Fraksi sel lainnya hanya mencapai 19,7% (sel  spons/  choanosome)  dan  11,7  % (pellet bakteri simbion).   (Tabel 1).
Gambar 3.  Distribusi fraksi sel spons setelah sentrifugasi
Tabel 1. Persentase fraksi sel spons  setelah sentrifugasi
Spesies Fraksi Sel (%) Spikula + sel debris Sel spons (choanosome) Pellet bakteri simbion A. aaptos 55,9 14,2 29,9 Petrosia sp. 68,7 19,7 11,7
Sentrifugasi  1000 rpm 5 menit SUPER NATAN Sel spon yang                                   Sel spons + cyanobacteria
telah dihancurkan                            (choanosome)
spikula + sel debris Sentrifugasi 4000 rpm 10 menit Sel spons (choanosome) Pellet bakteri Pellet bakteri Sentrifugasi 4000 rpm 10 menit Sel spons (choanosome) Pellet bakteri

## 3.1.2. Pengamatan Histologi Spons
Pengamatan  preparat  histologi menunjukkan  bahwa  spons A.  aaptos memiliki  spikula  oxea  yang  tersebar  di bagian  ektosom  (korteks)  dan  spikula style serta  strongyle  yang  terdapat  di bagian  ektosom  (korteks)  dan  endosom (medulla).  Gambar  4  menunjukkan struktur  sel  spons A  aaptos .  Pada gambar tersebut  juga dapat  diamati sel- sel archaeocyt (amoebocyt)  dengan nukleus  berukuran  besar  (Richelle- Maurer and Braekman,  2001).
Hasil yang didapatkan dari pengamatan histologi kedua jenis spons, dengan  menggunakan  mikroskop  fase kontras, menunjukkan bahwa komponen struktur yang dapat diidentifikasi adalah komponen penyusun skeleton (spikula dan jaringan spongin), serta sel yang berukuran besar yang  diperkirakan  sebagai  archaeocyt (Gambar 4).
Struktur  sel  spons Petrosia sp. yang  teramati  dari  preparat  histologi menunjukkan  jaringan  skeleton  yang terdiri  dari  susunan  spikula  isotropik (seragam)  yang  padat.  Susunan  spikula tersebut  terdiri  dari  spikula oxea , style dan strongyle . Archaeocyte tidak terlihat  jelas  pada  preparat  histologi yang  diamati  dengan  mikroskop  fase kontras. Jaringan spongin terlihat sedikit  transparan,  mengikat  spikula yang  padat,  terutama  pada  bagian ektosom (korteks). Gambar 5 memperlihatkan  spikula  yang  terdapat pada jaringan spons Petrosia sp.

## 3.2. Pembahasan
Spons A.  aaptos menunjukkan persentase komponen penyusun skeleton  (spikula  dan  sel  debris) mencapai  55,9  %,  sementara  sel  spons
( choanosome ) dan pellet bakteri simbion  masing-masing  mencapai  14,2 %  dan  29,9%.  Komposisi  fraksi  sel  ini lebih dipengaruhi oleh morfologi spons.
A.  aaptos memiliki  morfologi  yang tidak  keras,  dengan  susunan  spikula oxea,  yang  tidak  terlalu  padat,  tersebar pada  bagian  ekstosom.  Selain  itu ditemukan  juga  spikula style dan strongyle pada  bagian  ektosom  dan endosom.  Hasil  pengamatan  secara histologi menunjukkan bahwa sel archaeocyte ditemukan  pada  lapisan mesohyl,  dalam  jumlah  yang  cukup banyak. Berbeda dengan A aaptos,
Petrosia sp.  memiliki  fraksi  komponen skeleton  (spikula  dan  sel  debris)  yang lebih  besar,  yaitu  mencapai  68,6%. Fraksi  sel  lainnya  hanya  mencapai 19,7%  (sel  spons/  choanosome)  dan 11,7 % (pellet bakteri simbion).  Hal ini menyebabkan  morfologi  spons  yang lebih  kaku  dan  mengandung  spikula yang  tersebar  secara  padat.  Susunan spikula  tersebut  terdiri  dari  spikula oxea,  style  dan  strongyle.  Spikula  ini terutama  ditemukan tersebar  pada lapisan  ektosom.  Sementara  itu,  sel archaeocyte  pada  lapisan mesohyl tidak terlihat  dengan  jelas,  dan  hanya  dalam jumlah  yang  tidak  terlalu  banyak. Persentase  fraksi  pellet  bakteri  simbion yang  rendah  dapat  mendukung  teori bahwa  spons  ini  hanya  mengandung bakteri  simbion  dalam  jumlah  kecil. Selain  itu,  pengamatan  histologi  juga menunjukkan serat spongin yang berlimpah, mendukung terciptanya morfologi yang keras dan padat (kasar). Menurut Rupert and Barnes (1994), jika sebagian  atau  keseluruhan  spikula bersilika ditutupi oleh serat spongin ini, maka struktur spons akan menjadi lebih kaku. Dengan demikian, dapat dikatakan bahwa biomassa spons
Petrosia sp.  lebih  dipengaruhi  oleh  sel- sel  spons  dan  komponen  penyusun skeleton.  Wilkinson  (1987) in Steindler (2002)  menyatakan  bahwa  spons  yang hidup pada daerah yang subur atau kaya
bahan organik, akan memiliki biomassa sel yang tinggi, namun hanya mengandung  sedikit  sekali  bakteri simbion.  Hal  ini  diduga  dikarenakan tersedianya cukup nutrisi untuk pertumbuhan  dan  kebutuhan  hidup spons, sehingga asosiasi dengan mikroba/  bakteri  simbion  tidak  terlalu dibutuhkan  dalam  mekanisme  adaptasi fisiologis spons tersebut.
Gambar 4.  Struktur sel Aaptos aaptos (perbesaran 200x)
Gambar 5.  Struktur  sel  spons Petrosia sp.  (a-c,  perbesaran  200  x):  spikula  dan  (d ) : bagian medulla spons (perbesaran 400x)
spikula archaeocyt strongyle c d a oxea style b
Secara umum, bakteri simbion dapat ditemukan  di  dalam  sel-sel amoebocyte ( archaeocyte )  dan  pada  lapisan mesohyl secara  ekstraseluler,  atau  tidak  berada  di dalam  sel  spons.  Selain  itu,  bakteri simbion  juga  dapat  ditemukan  pada bagian  permukaan  luar  tubuh  spons,  atau biasa  dikenal  dengan  sebutan  bakteri epibiotik/epibion (Gomez, 2001;
Wilkinson,  1978;  Faulkner et  al., 1994; Guyot, 2002; Carpenter, 2002; Chelossi et al .,  2004;  Oren et  al .,  2005;  Steindler, 2005;  dan    Thacker,  2005).  Mikroba simbion  (bakteri  dan  fungi)  dapat  berada di  dalam  tubuh  spons  karena  aktivitas penyaringan  makanan  ( filter  feeder )  dari lingkungan perairan, kemudian mengalami  adaptasi  dan  mekanisme simbiosis  dengan  spons  inang.  Bakteri- bakteri  kemungkinan  bukan  merupakan bakteri  yang  bersimbiosis  secara  obligat ( host-spesificity ), melainkan bersifat komensalisme  atau  mutualisme.  Namun demikian,  mekanisme  simbiosis  simbion dan  spons  belum  banyak  diketahui  dan masih harus diteliti lebih lanjut. Beberapa penelitian  berhasil  membuktikan  bahwa komposisi bakteri simbion dan
kelimpahannya  sangat  dipengaruhi  oleh perubahan  suhu,  iklim,  dan  tingkat fotosintesis  spons  (cahaya  matahari) (Steindler et al,. 2002; Zocchi et al,. 2002; Thakur and Mϋller, 2004).
Mikroba simbion spons (bakteri dan fungi)  juga  dapat  berada  di  dalam  tubuh spons  karena  adanya  transmisi  vertikal, atau  secara  genetis,  dari  induk  ke  larva spons.  Simbion  yang  diturunkan  secara vertikal, biasanya memiliki sifat simbiosis yang cenderung obligat, dan
keberadaannya  tidak  dipengaruhi  oleh faktor  lingkungan.  Hal  ini  berhasil dibuktikan  oleh  beberapa  penelitian  yang menyimpulkan  bahwa    simbion  tersebut memiliki  sifat host-spesificity pada  spons inang, dan ditemukan pada semua spesies spons inang yang berasal dari lokasi yang letaknya  sangat  berjauhan  (Maldonado et
al., 2005;  Oren,  2005;  Steindler et  al,. 2005).
Hasil  fraksi  sel  spons Petrosia sp. dengan menggunakan metode sentrifugasi (Richelle-Maurer  and  Braekman,  2001), menunjukkan bahwa fraksi spikula dan sel debris  spons  merupakan  fraksi  yang paling  besar  (68,7%),  sementara  pellet bakteri  simbion  yang  ditemukan  hanya mencapai 11,7 %. Hal ini mengindikasikan  bahwa  biomassa  spons Petrosia sp. lebih dipengaruhi oleh sel-sel penyusun  skeleton  spons,  daripada  bobot simbionnya.
Penghitungan  jumlah  dan    jenis  sel spons serta bakteri simbion  pada spons A aaptos dan Petrosia sp. dilakukan setelah fraksi  spons  berhasil  dipisahkan.  Namun, jumlah  masing-masing  sel  tidak  berhasil diketahui. Hal ini disebabkan fraksi-fraksi sel  tersebut  bersifat  transparan,  sehingga sulit  untuk  diamati.  Oleh  karena  itu  akan sangat  menarik  untuk  dilakukan  studi lanjutan  dengan  menggunakan  reagent pewarna  yang  sesuai  dan  menggunakan mikroskop  dengan  resolusi  yang  lebih tinggi seperti mikroskop elektron. Dengan demikian  data  yang  diperoleh  akan  lebih terperinci,  dan  diharapkan  bisa  menjadi batu loncatan untuk mempelajasri mekanisme  asosiasi  bakteri  simbion  dan pengaruhnya terhadapp produksi senyawa bioaktif spons.

## IV. KESIMPULAN
Komponen  struktur  yang  berhasil diidentifikasi  dari  masing-masing  spons secara histologi adalah komponen penyusun  skeleton  (spikula  dan  jaringan spongin) serta sel archaeocyte . Selain itu, dilakukan  pula  pengukuran  persentasi fraksi  sel.  Spons Aaptos  aaptos memiliki komponen  penyusun  skeleton  (spikula dan  sel  debris)  mencapai  55,9%.  Jenis spikula  yang  teridentifikasi  adalah  oxea, style  dan  strongyle.  Komponen  lainnya, yaitu  sel  spons  (choanosome)  mencapai
14,2  %  dan  pellet  bakteri  mencapai 29,9%. Sel archaeocyte yang teridentifikasi  ditemukan  dalam  jumlah banyak pada bagian mesohyl spons.
Spons Petrosia sp.  menunjukkan komposisi  yang  cukup  berbeda  dengan Aaptos aaptos . Komponen skeleton spons Petrosia sp.  merupakan  bagian  yang sangat dominan, mencapai 68,7%. Sementara  fraksi  lainnya,  yaitu  sel  spons dan pellet bakteri hanya sekitar 19,7% dan 11,7 %.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis  mengucapkan  terima  kasih kepada  Proyek  Hibah  Pasca  VII,  yang diketuai  oleh  Prof.  Dr.  Dedi  Soedharma, DEA, yang telah mendanai sebagian besar penelitian ini; dan kepada Pusat Penelitian Lingkungan  Hidup  (PPLH)  -IPB  yang telah menyediakan fasilitas laboratorium.

## DAFTAR PUSTAKA
Brusca,  RC.,  dan  GJ.  Brusca.  1990.
Invertebrates. Sunderland, Massachusetts;  Sinauer  Associates, Inc. Publishers. hlm 181 – 207. Carpenter, EJ. 2002. Marine cyanobacterial symbioses. Proceeding  of  The  Royal  Irish Academy : 1:15-18. http://www.ria.ie. Chelossi,  E.,  M.  Milanese,  A.  Milano,  R.
Pronzato,  dan  G.  Riccardi.  2004.
Characterisation    and  antimicrobial activity  of  epibiotic  bacteria  from Petrosia ficiformis (Porifera, Demospongia). J    Experimental
Mar Biol & Ecol : 309: 21-33. Faulkner.  DJ,  MD.  Unson,  dan  CA. Bewley.  1994.  The  chemistry  of some  sponges  and  their  symbionts. Pure  and  Appl  Chem: 66:1983- 1990.
Gomez,  R.  2001.  In  Situ  detection  of microsymbionts  in  sponge  tissue.
http://www.science.uva.nl.  Retrive on15 March 2006.
Guyot,  M.  2002.  Intricate  aspects  of sponge chemistry. Publications Scientifique  du  Muséum  National d’histoire Naturelle, Paris. http://www.mnhn.fr/publications Kobayashi,  M.,  dan  I.  Kitagawa.  1994. Bioactive  substances  isolated  from marine sponge, a miniature conglomerate  of  various  organisms. Pure  and  Appl  Chem :  66(4):  819- 826. Kozloff, EN. 1990. Invertebrates . Saunders  College  Publishing.  Hal.:
73–92.
Maldonado,  M.,  N.  Corrtadellas,  MI., Trillas,  dan  C.  Rϋtzler.  2005. Endosymbiotic  yeast  matternally transmitted in a marine sponge. Biol Bull : 209:94-106. Oren, M., L. Steindler, dan M. Ilan. 2005. Transmission,  plasticity,  and  the molecular identification of cyanobacterial symbionts in the Red Sea  sponge Diacarnus  erythraneus : Mar Biol (2005).
Proksch,  P.,  R.  Ebel,  RA.  Edrada,  P. Schuup,  WH.  Lin,  Sudarsono,  V. Wray.  dan  K.  Steube.  2003. Detection of pharmacologically active natural products using ecology.  Selected  examples  from Indopasific marine invertebrates and sponge-derived  fungi. Pure  and Appl  Chem  2003 :  75  (Nos  2-3):
343-352.
Richelle-Maurer  E.,  dan  JC.  Braekman. 2001. Sponge Extraction. http://www.science.uva.nl [15 Maret 2006]. Rahe,  E.  2004.  Quorum-sensing  signal production  in  bacteria  associated with  marine  sponges .  IBASM; 6  (2
Jan 2005). http://users.ipwf.edu. Romimohtarto,  K.,  dan  S.  Juwana.  1999. Biologi  Laut.  Ilmu  Pengetahuan tentang Biota Laut. Pusat Penelitian
dan  Pengembangan  Oseanologi- LIPI. Jakarta. 115 – 128p. Rupert,  EE.,  dan  RD.  Barnes.  1994.
Invertebrate  zoology .  Ed  ke-6.
United  State  of  America:  Saunders College Publishing.
Steindler, L., S. Beer., dan M. Ilan. 2002.
Photosymbiosis  in  intertidal  dan subtidal tropical sponges. Symbiosis: 33:1-11. Balaban,
Philadelphia.
Steindler, L. D. Huchon, A. Avni, dan M. Ilan.  2005.  16S  rRNA  phlogeny  of sponges-associated cyanobacteria. Apll Environ Microbiol: 71(7):4127-4131. Thakur,  NL.,  dan  WEG.  Müller.  2004. Biotechnological potential of marine  sponges. Current  Science: 10 June 2004 ; 86 (11).
Thacker,  RW.  2005.  Impacts  of  shading on  sponge-cyanobactera  symbiose: A Comparison between host- specific  and  generalis  association. Integr  Comp  Biol: 45:369-376. http://icb.oxfordjournals.org.
Wilkinsson, CR. 1978. Microbial Associaton in sponges II: Numerical analysis  of  sponges  and  water bacterial  population. Mar  Biol  J: 49(2):69-176. Zheng, L., H. Chen, X. Han, dan X. Yan.
2005.  Antimicrobial  screening  and active  compound  isolation  from marine bacterium NJ6-3-1 associated with the sponge Hymeniacidon parleve . World Journal  of  Microbiol  and  Biotech 2005: 21:201-206. http://www.paper.edu.cn  [26  Nov 2005]. Zocchi,  E.,  G.  Basile,  C.  Cerrano,  G. Bavestrello, M. Giovine, S. Bruzzone,  L.  Guida,  A.  Carpaneto, R.  Magrassi,  dan  C.  Usai.  2002. ABA- and cADPR- mediated effects on respiration and filtration downstream  of  the  temperature- signaling cascade in sponges .
Journals  of  Cell  Science: 116:  629- 636.