## Keberhasilan Ginogenesis Ikan Tawes ( Barbonymus gonionotus
Blkr.) pada Dua Dosis Iradiasi UV (λ 254 nm) dengan Kejut Panas 40
0 C
Reni Apriani 1 , Suhestri Suryaningsih 1 dan Yulia Sistina 1
1 Fakultas Biologi, Universitas Jenderal Soedirman Jalan dr. Suparno 63 Purwokerto 53122 email: reniassidiq@yahoo.co.id

## Abstract
Gynogenesis  is  a  reproductive  biotechnology  to  get  offspring  with  genetic  material  from  the  female  only.  This  is crucial  for  Cyprinids  fresh  water,  including  silver  barb  ( Barbonymus  gonionotus Blkr.),  which  has  been  studied  for meiogynogenesis.  The    study  aimed  (1)  to  assess  the  effectiveness  of  UV  irradiation  dose  for  male  genetic inactivation using 15 Watt UV TL light, 254 nm wave length, 15 cm distance for two irradiation time of 60 seconds or the UV dose of 1983 J/m 2 or 120 seconds or the UV dose of 3966.96 J/m 2 to damage the male genetic material, (2) to assess the effectiveness of diploidization of the mitogynogenesis applied heat shock at 40 0 C for 60 seconds at two different  times  of  10  or  15  minutes  from  fertilization  time,  in  order  to  get  normal  morphological  larvae  from mitogynogenesis  similar  to  the  positive  control  normal  diploid  larvae.  Completely  Randomized  Design  was  applied with  7  treatments,  namely:  Positive  controls:  fertilized  fresh  eggs  with  diluted  milt  without  UV  irradiation  no  heat shock; control negative1: fertilization fresh egg with diluted milt irradiated with dose of 1983 J/m 2 UV no heat shock; control negative2: fertilization of fresh egg with diluted milt dose of 3966.96 J/m 2 UV no heat shock; Gynogenesis1: fertilization of fresh eggs with diluted milt dose of 1983 J/m 2 UV irradiation, then zygote heat shocked at 10 minutes from  fertilization  time  in  40 0 C for  60  seconds;  Gynogenesis2:  fertilization  fresh  eggs  with  diluted  milt  dose  of  1983 J/m 2 UV  irradiation,  then  zygote  heat  shocked  at  15  minutes  from  fertilization  time  in  40 0 C  for  60  seconds; Gynogenesis3:  fertilization  of  fresh  eggs  with  diluted  milt  dose  of  3966,96  J/m 2 UV  irradiation,  then  zygote  heat shocked  at  10  minutes  from  fertilization  time  in  40 0 C  for  60  seconds;  Gynogenesis4:  fertilization  of  fresh  eggs  with diluted  milt  dose  of  3966,96  J/m 2 UV  irradiation,  then  zygote  heat  shocked  at  15  minutes  from  fertilization  time  in 40 0 C for 60 seconds. Each treatment was replicated three times. Observed variables were fertility rate, hatching rate, morphology larvae, and survival rate at day 28 th . Quantitative data were analyzed using analysis of variants (ANOVA) continued to HSD test the significant one, using SPSS17. Results showed that fertility, hatching and a month-age fry survival rate were statistically had no significant different ( p >0.05) among treatments. However, the average data of abnormal  morphology  of  larvae  was  highly  significant  different  ( P <0.01)  among  treatments,  meaning  that mitogynogenesis protocol applied determine or resulted in normal larvae as compared to negative control group with abnormal morphology of larvae. As conclution mitogynogenesis treatments effectively resulted in normal gynogenesis larvae,  although  consider  very  low  effectiveness.  The  effectiveness  of  treatments  proven  from  the  abnormal morphology larvae data from negative control and normal morphology larvae from mitogynogenesis treatment as well as larvae from the positive control normal diploid larvae.
Keywords : Gynogenesis, irradiation, heat shock.

## Abstrak
Ginogenesis  adalah  bioteknologi  reproduksi  menghasilkan  keturuann  dengan  materi  genetis  dari  betinanya  saja, yang menjadi relevan untuk kelompk Cyprinidae, termasuk tawes, penting dikaji untuk dilakukan, karena yang sudah dilaporkan  baru  meioginogenesis  tawes  dan  baru  aspek  kualitatif  pada  yang  mitogenesis.  Tujuan  penelitian  untuk mengeksplorasi  protocol  mitoginogenesis  dari  efektifitas  dosis  nonaktivasi  spermatozoa  ikan  tawes  ( Barbonymus gonionotus Blkr.)  dengen  menggunakan  sinar  UV  15  Watt  panjang  gelombang  254  nm,  jarak  15  cm,  lama  waktu berbeda  yaitu  1  menit  atau  dosis  1983  J/m 2 atau  2  menit  atau  dosis  3966,96  J/m 2 ;  dan  efektivitas  diploidisasinya dengan  kejut  temperatur  40 0 C  selama  60  detik  pada  waktu  berbeda  yaitu  10  atau  15  menit  pasca  fertilisasi. Eksperimen Rancangan Acak Lengkap, tujuh perlakuan yaitu, kontrol positif (fertilisasi normal); kontrol negatif1 telur difertilisasi  dengan  milt  encer  yang  di  UV  1983,348  J/m 2 ;  kontrol  negatif2  dosis  iradiasinya  3966,96  J/m 2 ; ginogenesis1  kontrol  negatif1  lalu  dikejut  panas  pada  10  menit  pasca  fertilisasi;  ginogenesis2  ginogenesis1  beda waktu kejut pada 15 menit pasca fertilisasi; ginogenesis3 kontrol negatif2 lalu dikejut pada 10 menit pasca fertilisasi; dan ginogenesis4 ginogenesis3 beda waktu kejut pada 15 menit pasca fertilisasi. Materi gamet segar diperoleh dari induk  yang  diinduksi  GnRH  analog  dan  domperindon  dosis  1,5  ml/kg  bobot  induk  intramuskuler,  6-10  jam sebelumnya.  Milt  segar  diencerkan  100  x  dalam  larutan  Ringer.  Data  dianalisis  dengan  uji  Anova,  yang  hasilnya signifikan  diteruskan  ke  uji  BNJ,  menggunakan  program  SPSS  17.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  data fertilitas,  data  penetasan  dan  data  kelangsungan  hidup  yang  terbukti  homogen  ( p >0,05),  menunjukkan  bahwa ketujuh  perlakuan  secara  statistik  fertilitas,  penetasan,  dan  kelangsungan  hidupnya  tidak  nyata  ( p >0,05)  antar pelakuan.  Data  persentase  morfologi  larva  abnormal  tawes  menunjukkan  bahwa  perlakuan  yang  dicobakan memberikan  pengaruh  yang  sangat  nyata  ( P <0,01).  Secara  keseluruhan  dapat  disimpulan  bahwa,  keempat perlakuan  mitoginogenesis  yang  diujikan  efektif  menghasilkan  larva  mitoginogenesis  ikan  tawes  walaupun efektifitasnya masih tergolong rendah. Efektivitas perlakuan dibuktikan dari signifikansi data morfologi larva abnormal dariklompok kontrol negatif membuktikan efektivitas dosis inaktivasi genetis jantan dan morfologi larva normal hasil perlakuan ginogenesis membuktikan efektivitas diploidisasi kejut panas tidak berbeda dari morfologi kontrol positif.
Kata kunci: :   ginogenesis, iradiasi UV, kejut panas.

## Pendahuluan
Kegunaan  bioteknologi  reproduksi  bukan hanya untuk pemenuhan kebutuhan atau pemecahan  permasalahan  pangan  namun  juga untuk  tujuan  konservasi  ke  depan  menjaga biodiversitas  tropis  kita.  Hal  ini  mendesak  karena ekosistem global dan lingkungan sekarang sudah sangat  menurun  kualitasnya.  Apalagi  jumlah spesies  yang  masuk  katagori  dilindungi  makin meningkat  demikian  juga  yang  tergolong  punah. Upaya pelestarian model konservasi in situ dan ex situ tentu  akan  tidak  memadai  di  era  perubahan iklim sekarang yang menambah masalah manajemen  konservasi  khususnya  pada  spesies yang  sangat  terdampak  di  ekosistem  rusak  ini. Teknologi reproduksi manipulasi genom, termasuk  ginogenesis,  yang  dekade  terakhir menarik  peneliti  untuk  kemungkinan  aplikasinya kelak bagi tujuan konservasi (Sistina, 2012).
Ginogenesis  adalah  teknologi  reproduksi menghasilkan  keturunan  atau  anakan  dengan genetis  dari  induk  betinanya  saja  (Horvarth  & Orban,  1995),  meliputi  tiga  tahap  prosedur, dimulai  dengan  (1)  iradiasi  genetis  spermatozoa, lalu  (2)  difertilisasikan  ke  telur,  dan  (3)  zigot hasilnya  didiploidisasikan  antara  lain  dengan pemberian  kejut  panas  (Sistina,  2012).  Iradiasi dimaksudkan  untuk  menonaktifkan  atau  merusak genetis spermatozoa sehingga tidak diturunkan ke zigot. Akibatnya zigot dapat haploid karena hanya berasal dari amteri genetis betina haploidnya saja yang  dapat  dideteksi  dengan  bentuk  larva abnormal. Tahap ketiga ginogenesis adalah tahap diploidisasi  zigot,  tidak  berbeda  denagn  cara ploidisasi lain (Gervai et al , 1980; Wu et al , 1986; Nagy,  1987;  Linhart et  al ,  1989;  Linhart et  al , 1991;  Cherfas et  al ,  1995;  Horvarth  &  Orban, 1995;  Purwaganda  dan  Sistina,  1997;  Sistina et al , 2000; da Silva et al , 2007; Sistina dan Sulistyo, 2013).  Protokol  meioginogenesis  tawes  sudah dilaporkan  Purwaganda  dan  Sistina  (1997)  dosis iradiasinya  efektif  menghasilkan  100%  larva haploid,  dan  perbandingan  meioginogensis  dan mitoginogenesis  tawes  walau  secara  kualitatif juga  dilaporkan  yaitu  hasil  protokol  ginogenesis tawes  mampu  bertahan  hidup  hingga  tiga  bulan lebih (Sistina dan Sulistyo, 2013). Oleh karena itu data kuantitatif perlu diketahui bagaimana fertilitas dan  penetasan  untuk  protokol  ginogenesis khususnya mitoginogenesis yang dilaporkan ini.
Tawes,  sebagai  ikan  air  tawar,  digunakan senagai  model  karena  belum  ada  laporan kuantitatif  protokol  mitoginogenesis  tawes  dalam hal  bagaimana  fertilitas  dan  penetasannya  pasca tiga tahap manipulasi atau perlakuan mitoginogenesis.  Biodiversitas  ikan  air  tawar sudah  lama  dalam  status  lampu  merah,  terlebih- lebih  ikan  air  tawar  jauh  lebih  rentan  dibanding ikan laut  dalam hal sensitivitas terhadap gangguan (Raharjo, 2007). Penelitian ini
melaporkan  hasil  protokol  mitoginogenesis  tawes dua  dosis  iradiasi  untuk  menonaktifkan  genom jantan  spermatozoa  dengan  variasi  dua  waktu kejut  panas  berbeda  untuk  diploidisasi  zigot. Penelitian  ini  dapat  menjadi  model  untuk  ikan  air tawar  yang  terancam  punah  diterapkan  misalnya bila  yang  ditemui  hanya  spesies  betinanya  saja, maka  ginogenesis  adalah  langkah  konservasi yang dapat ditempuh ke depan.

## Metode
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitin  ini adalah milt segar  dan  telur  segar  yang  diperoleh dari  induk  ikan  tawes  jantan  dan  betina  yang matang gonad, medium pengenceran milt ( Ringer )  ikan/katak  (NaCL  6,50  g,  KCL  0,14  g, CaCl 2 0,12  g,  NaHCO 3 0,20  g,  NaH 2 PO 4 0,01  g, akuades  1L),  methylene  blue  3  ppm,  GnRH- analog  dikombinasi  dengan  anti  dopamine Domperidon  (Syndel  Inc.,  Canada),  spirulina, pelet (PF-1000, PT. Matahari Sakti),  deterjen dan air.  Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah:  pompa  airasi  akuarium  (SONIC  P-125), selang  dan  batu  airasi,  regulator,  baskom  plastik, bak  plastik,  cawan  petri,  sendok  plastik  (spatula), pipet  tetes,  saringan, spuit ,  tisu,  kain  lap,  lampu UV  (245  nm)  15  Watt  merk  Philips,  mikroskop cahaya  Olympus  CH-20, waterbath (Jeio  tech, wb-20E), stopwatch , counter, heater , gelas objek, kamera digital SONY dan alat tulis.
Penelitian  eksperimen  Rancangan  Acak Lengkap,  tujuh  perlakuan  yaitu;  (1)  kontrol fertilisasi  normal;  (2)  UV1  :  milt  encer  satu  lapis tipis  diiradiasi  UV  dosis  1983,348  J/m 2 lalu digunakan  untuk  memfertilisasi  telur  segar (sebagai  kontrol  negatif1);  (3)  UV2  :  seperti  yang negatif1  bedanya  dosis  iradiasinya  3966,96  J/m 2 (sebagai  kontrol  negatif2)  ;  (4)  UV1HS10: perlakuan  UV1,  lalu  zigot  pada  10  menit  dari fertilisasi  dikejut  panas  40 0 C  selama  60  detik (sebagai  ginogenesis1);  (5)  UV1HS15  :  mirip ginogensis1 bedanya adalah waktu kejutnya pada 15  menit  dari  fertilisasi  (sebagai  ginogenesis2); (6)    UV2HS10:  perlakuan  kontrol  negatif2,  lalu zigot  pada  10  menit  dari  fertilisasi  dikejut  panas 40 0 C selama 60 detik (sebagai ginogenesis3); (7) UV2HS15:  mirip  ginogenesis  3  bedanya  waktu kejutnya  pada  15  menit  dari  fertilisasi  (sebagai perlakuan ginogenesis4).
Cara kerja memperoleh  materi  telur  dan milt  segar  induk  diinduksi  intramuskuler  dosis  0,5 mL/kg bobot ikan dengan GnRH-analog Domperidon (Syndel Vancouver Inc.,
Canada),selanjutnya  di stripping 6-8  jam  pasca induksi. Milt segar segera diencerkan 100x dalam larutan Ringer. Satu lapis milt encer dalam cawan petri  diiradiasi  sesuai  dosis  perlakuan,  sehingga ada  tiga  cawan  petri  berisi  milt  encer  untuk  3 dosis  iradiasi  (0;1983;  dan  3966,96  J/m 2 ).  Telur
Keberhasilan Ginogenesis Ikan Tawes ...                                                             Apriani, R., dkk.
segar  di stripping ,  dibuahkan  dengan  milt  encer yang  telah  disiapkan.  Stopwatch  dijalankan bersamaan  waktu  telur  ditetesi  milt  encer perlakuan  (fertilisasi).  Sesuai  masing-masing perlakuan,  kecuali  kontrol,  setelah  waktu  10  atau 15  menit  dari  fertilisasi  zigot  dikejut  panas  40 0 C selama  60  detik.  Seluruh  unit  penelitian  dikultur dalam  bak  penetasan  beraerator  yang  telah disiapkan.  Tiap  unit  penelitian  diamati  dan dihitung  mulai  3  jam  dari  waktu  fertilisasi,  telur yang  jernih  transparent  terbuahi  dan  yang  keruh tidak  terbuahi.  Jumlah  larva  menetas  setelah  12 jam  dari  waktu  fertilisasi  dihitung  juga.  Morfologi larva diamati di bawah mikroskop dan didokumentasikan.  Data  dianalisis  dengan  uji Anova,  yang  signifikan  diteruskan  ke  uji  BNJ, menggunakan program SPSS17.

## Hasil dan Pembahasan
Hasil  analisis  ragam  data  fertilitas  terbukti homogen  ( p >0.05),  menunjukan  bahwa  ketujuh perlakuan  tidak  berpengaruh  nyata  ( p >0,05) terhadap  fertilitas  (Gambar  1).  Artinya  rerata fertilitas  perlakuan  kontrol  positif  sama  dengan perlakuan kontrol negatif1 (UV1’), kontrol negatif2 (UV  2’),  ginogenesis1  (UV  1’  HS  10’), ginogenesis2 (UV 1’ HS 15’), ginogenesis3 (UV 2’ HS  10’),  ginogenesis4  (UV  2’  HS  15’).  Dengan kata  lain  tidak  ada  beda  nyata  ( P >0,05)  fertilitas antar ketujuh perlakuan ginogenesis tawes.
Gambar 1. Rerata  (±  SD)  derajat  fertilitas  telur  ikan tawes  ( Barbonymus  gonionotus Blkr.) pasca  perlakuan  iradiasi  UV  dua  dosis berbeda  dilanjutkan  kejut  temperatur panas 40 0 C selama 60 detik pada waktu berbeda  (10  atau  15  menit)  pasca fertilisasi perlakuan ginogenesis.
Hasil  analisis  ragam  data  penetasan terbukti  homogen  ( p >0.05)  dan  menunjukan bahwa ketujuh perlakuan tidak berpengaruh nyata ( p >0,05) terhadap penetasan (Gambar 2). Artinya rerata  penetasan  perlakuan  kontrol  positif  sama dengan perlakuan kontrol  negatif1 (UV1’), kontrol negatif2  (UV  2’),  ginogenesis1  (UV  1’  HS  10’), ginogenesis2 (UV 1’ HS 15’), ginogenesis3 (UV 2’ HS 10’), ginogenesis4 (UV 2’ HS 15’).
Hasil  pengamatan  dan  perhitungan  data larva  abnormal  menunjukkan  bahwa  rerata peresentase  abnormalitas  larva  ikan  tawes  pada masing-masing perlakuan bervariasi.
Gambar 2. Rerata  (±  SD)  derajat  penetasan  telur tawes  ( Barbonymus  gonionotus Blkr.) pasca  perlakuan  iradiasi  UV  dua  dosis berbeda  dilanjutkan  kejut  temperatur panas 40 0 C selama 60 detik pada waktu berbeda  (10  atau  15  menit)  pasca fertilisasi untuk ginogenesis.
Data  rerata  abnormalitas  larva  perlakuan ginogenesis  dari  yang  tertinggi  ke  terendah berturut-turut  7,40  ±  0,12%  dari  perlakuan ginogenesis2, selanjutnya diikuti perlakuan ginogenesis3  =  7,01  ±  0,30%,  dari  perlakuan ginogenesis4  =  6,82  ±  0,30%,  berikutnya  kontrol negatif2  =  6,52  ±  0,32%,  diikuti  perlakuan  kontrol negatif1  =  6,01  ±  1,83%,  kemudian  diikuti perlakuan ginogenesis1 = 6,00 ± 0,23%, dan yang terendah  dari  perlakuan  kontrol  positif  =  1,73  ± 0,42% (Gambar 3).
Gambar 3. Rerata  (±  SD)  presentase  abnormalitas larva  pada  penelitian  ginogenesis  ikan tawes  ( Barbonymus  gonionotus Blkr.) pasca  perlakuan  iradiasi  UV  dua  dosis berbeda  dilanjutkan  kejut  temperatur panas 40 0 C selama 60 detik pada waktu berbeda  (10  atau  15  menit)  pasca fertilisasi untuk ginogenesis. Huruf berbeda  menunjukkan  berbeda  sangat nyata ( p <0,01) atau nyata ( p <0,05)
Hasil  analisis  ragam  data  morfologi  larva abnormal  tawes  terbukti  homogen  ( p >0.05), menunjukkan  bahwa  ketujuh  perlakuan  morfologi larva abnormal tawes memberikan pengaruh yang sangat  nyata  ( p <0,01)  antar  perlakuan.  Hasil  uji lanjut BNJ membuktikan bahwa perlakuan kontrol positif berbeda sangat nyata ( p <0,01) dengan ke- dua  perlakuan  kontrol  negatif  dan  ke-empat perlakuan mitoginogenesis. Kontrol negatif1 berbeda nyata ( p <0,05) dengan mitoginogenesis2 (atau inaktivasi dosi UV1 dengan diploidisasi pada 15  menit  pasca  fertilsasi).  Data  morfologi  larva tersebut  membuktikan  bahwa  morfologi  larva kelompok  kontrol  negative  berbeda  sangat  nyata
dengan  kelompok  perlakuan  mitoginogenesis. Artinya  bahwa  protokol  mitoginogenesis  efektif menentukan,  persentase  abnormal  larva  ikan tawes  perlakuan  kontrol  negative  berbeda  nyata dengan morfologi normal kelompok mitoginogenesis.
Hasil uji lanjut BNJ terhadap data persentase morfologi  abnormal  larva  tawes  menunjukan bahwa  perlakuan  kontrol  positif  berbeda  sangat nyata  ( p <0,01)  dengan  kontrol  negatif1,  kontrol negatif2, ginogenesis1, ginogenesis2, ginogenesis3,  dan  ginogenesis4.  Artinya  bahwa rerata  morfologi  larva  perlakuan  kontrol  positif tidak sama dengan morfologi larva dengan semua perlakuan.  Perlakuan  kontrol  negatif1  berbeda nyata  ( p <0,05)  dengan  perlakuan  ginogenesis2. Perlakuan  ginogenesis1  berbeda  nyata  ( p <0,05) dengan perlakuan ginogenesis2. Perlakuan ginogenesis2  berbeda  nyata  ( p <0,05)  dengan perlakuan  kontrol  negatif1  dan  ginogenesis1 (Gambar  3).  Hasill  ini,  hasil  analsis  uji  lanjut tersebut, membuktikan bahwa perlakuan mitoginogenesis penelitian ini efektif dari parameter morfologi larva.
Hasil  analisis  ragam  menunjukan  bahwa  tingkat prosentase  kelangsungan  hidup  larva  ikan  tawes antar  perlakuan  tidak  berbeda  nyata  ( p >0.05). Artinya  rerata  perlakuan  kontrol  positif  sama dengan  perlakuan  kontrol  negatif1  ( UV1’), kontrol negatif2  (UV  2’),  ginogenesis1  (UV  1’  HS  10’), ginogenesis2 (UV 1’ HS 15’), ginogenesis3 (UV 2’ HS 10’), ginogenesis4 (UV 2’ HS 15’).
Gambar  4.  Rerata  (±  SD)  persentase  kelangsungan hidup  benih  penelitian  ginogenesis  ikan tawes  ( Barbonymus  gonionotus Blkr.) menggunakan  iradiasi  UV  dan  kejut temperatur panas 40 0 C.
Hasil  penelitian  ini  secara  statistik  terbukti efektif,  artinya  keseluruhan  perlakuan  dosis iradiasinya  dan,  pemberian  kejut  temperatur efektif  walaupun  tingkat  efektivitasnya  sangat rendah,  karena  data  larva  abnormal  yang diperoleh rerata prosentase tertinggi yang diperoleh  hanya  7,40%  yaitu  dari  perlakuan ginogenesis2.  Idealnya  tentu  efektivitasnya  100% yaitu sebagai bukti bahwa iradiasi sinar UV efektif merusak 100% materi genetiknya. Hasil penelitian ini lebih tinggi dibandingkan ikan nila dimana larva abnormal  tingginya  juga  hanya  5,8%  (Karayucel, 2003).  Pada  sisi  lain,  hasil  penelitian  ini  lebih rendah  dibandingkan  laporan  penelitian  Oktavia (2011) dan Sistina et al . (2011b) pada nilem hasil hasil  morfologi  larva  abnormalnya  65%;  pada
ikan  selais  morfologi  ikan  abnormalnya  45% (Alawi et  al., 2009);  pada  ikan Rosy  barb yang 100%  efektif  (Kirankumar  dan  Pandian,  2004), dan  pada  ikan  mas  82,7%  (Bonger et  al., 1993). Rendahnya  efektivitas  dosis  iradiasi  ini  bisa  juga disebabkan  karena  lapisan  milt  yang  diiradiasi tidak  cukup  tipis,  spermatozoa  yang  tertumpuk  di bawah  pada  cawan  petri  tidak  teriradiasi, walaupun  dalam  penelitian  ini  sudah  diusahakan setipis mungkin.
Kemungkinan  lain,  kejut  temperatur  panas 40 0 C  menyebabkan ‘cacat’  (untuk  membedakan dari  istilah  abnormal  akibat  perlakuan)  dilihat secara  morfologi.  Argumentasi  ini  didukung  oleh laporan  penelitian  Mukti  (2005)  dan  Alawi et  al . (2009)  bahwa  perlakuan  kejut  temperatur  (panas atau  dingin)  menyebabkan  abnormalitas  pada ikan  secara  nyata  ( p <0,05).  Dilaporkan  bahwa makin  lama  kejut  diberikan  meningkatkan  jumlah larva  yang  cacat  atau  abnormal  (Alawi, et  al ., 2009).  Laporan  Mukti  (2005)  bahwa  kejut  panas 40 0 C  selama  1,5  menit  menghasilkan  larva  cacat yang  meningkat,  pada  penelitian  ini  memang hanya  satu  menit  lama  kejut  yang  diterapkan pada tawes.
Secara keseluruhan hasil perlakuan mitoginogenesis ikan tawes membuktikan efektivitas  perlakuan  berbagai  dosis  iradiasi  UV dan  kejut  panas  yang  di  berikan.    Efektivitas iradiasi UV dalam menonaktifkan material genetik jantan  ikan  tawes  dapat  dilihat  dari  data  derajat abnormalitas larva tawes hasil perlakuan mitoginogenesis  ini.  Dengan  demikian  hipotesis penelitian  ini,  yaitu  dosis  iradiasi  3966,96  J/m 2 efektif merusak material genetik spermatozoa ikan tawes diterima.

## Simpulan
Berdasarkan  hasil  dan  pembahasan  dapat disimpulkan  bahwa  empat  perlakuan  ginogenesis yang  diujikan  efektif  menghasilkan  menghasilkan larva ikan tawes abnormal untuk perlakuan kontrol negative dan normal untuk perlakuan ginogenesis sesuai yang diharapkan walaupun rendah persentasenya.  Efektivitas  perlakuan  dibuktikan dari data morfologi larva abnormal pada perlakuan  kontrol  negatif  dibandingkan  morfologi larva  normal  mitoginogenesis  maupun  kontrol positif.

## Ucapan Terimakasih
Ucapan  terima  kasih  disampaikan  kepada LPPM  UNSOED  yang  telah  mendanai  penelitian ini  dan  semua  staf  di  Laboratorium  Fisiologi Hewan  Fakultas  Biologi  Unsoed  disampaikan terima kasih.

## Daftar Referensi
Alawi,  H.,  Nuraini  dan  Sapriana.  2009.  Induksi Triploidisasi Ikan Selais ( Kryptopteus lympok )  Menggunakan  Kejutan  Panas.
Jurnal  Perikanan  dan  Kelautan ,  14(1):  37- 47.
Bongers ABJ., EH. Eding, dan CJJ. Richter. 1993. Androgenesis  in  Common  Carp, Cyprinus carpio L. Dalam :  Penman,  D.,  Roongratri, N.,  dan  McAndrew,  B.  (Eds.) Genetics  in Aquacultur  and  Fisheries  Management . AADCP Worksh.
Cherfas,  NB;  G.  Hulata;  B.  Gomelsky;  N.  Ben- Dom;  &  Y.  Peretz.  1995.  Chromosome  set manipulation  in  the  common  carp  Cyprinus carpio L. Aquaculture 129 : 217
da  Silva,  FSD;  RG.  Moreira;  CR.  Orozco-Zapata; &  AWS.  Hilsdorf.  2007.  Triploidy  induction by cold shock in the South American catfish Rhamdia  quelen  (Siluriformes)  (Quoy  & Gaimard,  1824).  Aquaculture  272S1  : S110-S114
Gervai,  J;  S.  Peter;  A.  Nagy;  L.  Horvath;  &  V. Csanyi.  1980.  Induced  triploidy  in  carp, Cyprinus carpio L. J Fish Biol. 17 : 667-671.
Horvart,  L  &  L.  Orban.1995.  Genome  and  gene manipulation in the common carp. Aquaculture 129: 157-181.
Karayucel, I. and S. Karayucel. 2003. Optimisation  of  UV  Treatment  Duration  to Induce  Haploid  Androgenesis  in  the  Nile tilipia (Oreochromis niloticus L.). Truk J Vet Anim Sci. 27 : 401-407
Kirankumar  and  Pandian.  2004.  Interspecific Androgenesis  Restoration  of  Rosy  barb using  Cadaveric  Sperm.  Genome.  47  :  66- 73.
Linhart, O; V. Slecthova; P. Kvasnicka; P. Rab; & I.  Prikryl.  1989.  Chromosome  manipulation in  tench  (Tinca  tinca  L)  and  carp  (Cyprinus carpio  L)  in  Czechoslovakia.  RIFCH  18  : 53-60
Linhart,  O;  M.  Flasjshans;  &  P.  Kvasnicka.  1991. Induced  triploidy  in  the  common  carp (Cyprinus  carpio  L)  :  a  comparation  of  two methods. Aquat.Living Resour. 4 : 139-145 Nagy,  A.  1987.  Genetic  manipulations  performed on warm water fish. In: Proceedings, World Symposium on Selection, hybridization, and Genetic  Engeneering  in  Aquaculture,  vol  II Berlin, : 163-174.
Oktavia,  S.  2011.  Fertilitas  Telur  Ikan  Tawes (Barbonymus gonionatus Blkr.) yang Diiradiasi Sinar Ultra Violet Berbagai Dosis. Skripsi. Fakultas Biologi, Universitas Jendral  Soedirman,  Purwokerto.  (Tidak dipublikasikan) Purwaganda, D dan Y. Sistina. 1997. Embryogenesis Manipulation of Tawes Fish (Puntius javanicus), a Gynogenesis Protokol, Proceeding, The Australian Society  for  Reproductive  Biology  (ASRAB) 28th conference held in Canberra. 204-214.
Raharjo,  MF.  2007.  Lampu  merah  biodiversitas ikan  di  perairan  tawar  Indonesia.  Makalah Kunci  Semnaskan  UGM  ke-4  Juli  2007, Jogyakarta.
Sistina,  Y;  I.  Setiadi;  and  R.  Widiastuti.  2000.
Induced  triploidy  by  heat  shock  in  nilem (Osteocillus  hasselti  C.V)  fish.  Proceeding, Australian Society for Reproductive  Biology (ASRB)  31th  conference  held  in  Canberra Australia.
Sistina,  Y.,  Oktavia,  T.  Windari  dan  S.  Rukayah. 2011b.  Genome  Inactivated  Affects  Quality Of Egg’s And Offspring Shark Minnow Fish (Osteocillus  hasselti  Valanciennes  1842). Proceeding Regional: Advances In Tropical Genomics,  Conservation  and  Sustainable Utilization of Tropical Biodiversity. Bogor.
Sistina,  Y.  2012. Genome  Manipulation  for Optimum  Utilization  and  Conservation  : Shark  Minnow fish  (Osteochilus  hasselti Valenciennes,  1842)  model.  Proceeding International
Seminar Indonesian Ichtiological Society, July , Makasar.
Sistina,  Y  dan  I.  Sulistyo.  2013.  Bioteknologi reproduksi  Cyprinidae  dengan  manipulasi genom  hormone  untuk  optimum  utilization dan konservasi. Prosiding Seminar Nasional  Pangan  dan  Gizi  di  Universitas Jenderal  Soedirman,  November  2013. Purwokerto.
Wu,  C;  Y.  Ye;  &  R.  Chen.  1986.  Genome manipulation  in  carp  (Cyprinus  carpio  L). Aquaculture 54 : 57-61.