Jurnal Mandala Pharmacon Indonesia, Vol 5.No.1 Juni 2019 Avaiable online at www.jurnal-pharmaconmw.com/jmpi p -ISSN : 2442-6032 e -ISSN :  2598-9979
Pengaruh Tomat ( Solanum lycopersicum ) terhadap Diameter Tubulus Seminiferus Tikus Putih ( Rattus norvegicus ) Galur Sprague dawley yang Diinduksi Gentamisin

## Fahmi Ikhtiar
Program Studi Pendidikan Dokter, Universitas Lampung

## ABSTRAK
Infertilitas  adalah  masalah  kesehatan utama  bagi  pasangan  suami  istri.  Sekitar 30%  infertilitas  disebabkan  oleh  faktor laki-laki.  Salah  satu  penyebab  infertilitas pada  laki-laki  adalah  penggunaan  obat- obatan  seperti  gentamisin.  Gentamisin dapat  meningkatkan  suatu  radikal  bebas yaitu Reactive Oxygen Species (ROS) yang meningkatkan peroksidasi lipid, kerusakan membran sel, dan DNA dalam testis.  Hal  ini  memengaruhi  fungsi  dan anatomi  testis.  Efek  radikal  bebas  dapat dicegah  dengan  senyawa  antioksidan seperti  likopen.  Likopen  yang  banyak ditemukan dalam tomat mampu mengikat radikal  bebas  sehingga  mencegah  reaksi antara  radikal  bebas  dengan  sel-sel  di testis.  Likopen  juga  menurunkan  kerja enzim  penghasil  ROS  dalam  sel.  Jenis penelitian ini
adalah penelitian eksperimental  dengan  desain post  test
only control group design . Sampel terdiri dari  29  ekor  tikus  jantan  yang  dibagi dalam  5  kelompok  yaitu  K-  yang  tidak diberikan  apapun,  K+  yang  diberikan gentamisin  20  mg/kgBB,  P1  P2  dan  P3 yang  diberikan  gentamisin  20  mg/kgBB dan  jus  tomat  persentasi  25%,  50%,  dan 100%.  Perlakuan  diberikan  selama  24 hari.  Pemberian  jus  tomat  memiliki  efek protektif  terhadap  penurunan  diameter tubulus, tebal epitel, jumlah sel spermatosit primer, dan spermatid akibat gentamisin.
Kata  Kunci  : Gentamisin,  Infertilitas,  Likopen, ROS
Penulis korespondensi : Fahmi Ikhtiar Program Studi Pendidikan Dokter, Universitas Lampung E-mail : fahmiikhtiar@gmail.com

## PENDAHULUAN
Infertilitas  adalah  pasangan  yang telah aktif dan rutin berhubungan seksual selama  satu  tahun  tanpa  kontrasepsi, namun belum ada tanda-tanda kehamilan (World  Health  Organization,  2012). Infertilitas  menjadi  masalah  kesehatan utama bagi pasangan suami istri dan 30% kasus ini disebabkan oleh faktor laki-laki yang bisa disebabkan karena penggunaan obat,  kemoterapi,  toksin,  dan  faktor lingkungan  yang  dapat  memperburuk spermatogenesis  dan  produksi  sperma (Khaki et al. , 2009).
Obat-obatan  menjadi  salah  satu penyebab  infertilitas  pada  pria.  Contoh antibiotik  yang  menyebabkan  infertilitas adalah  golongan  aminoglikosida  seperti gentamisin  dan  neomisin.  Efek  samping obat ini dapat memengaruhi struktur dan fungsi testis (Olayemi, 2010). Berdasarkan penelitian  yang  dilakukan  Narayana, pemberian  gentamisin  selama  35  hari dengan  dosis  5  mg/kgBB  pada  tikus terjadi  penurunan  diameter  tubulus seminiferus  dan  tebal  epitel  seminiferus (Narayana, 2008).
Gentamisin  dapat  meningkatkan jumlah Reactive  Oxygen  Species (ROS) dalam  testis.  (El-maddawy,  2014).  ROS adalah  salah  satu  radikal  bebas  yang memicu  peroksidasi  lipid  dalam  testis (Kim et  al. ,  2014).  Jaringan  testis  dan membran sel sperma kaya akan polyunsaturated  fatty  acid (PUFA)  yang berfungsi  sebagai  penyedia  struktur  dan kekentalan  yang  dibutuhkan  sperma untuk kapasitasi. Tingkat ROS yang tinggi dapat  merusak  jaringan  testis  dan membran  sel  sperma  (Aly  and  Hassan, 2018).
ROS  menyebabkan  kondisi  stres oksidatif  dalam  testis.  Stres  oksidatif dapat  menghambat  sekresi  hormon Luitenizing  Hormon (LH)  dan  akhirnya mengurangi  sintesis  hormon  testosteron (Al-Damegh,  2014).  Menurunnya  kadar testosteron  dan  LH  menyebabkan  atropi tubulus seminiferus (Eboetse Yama et al. , 2011).
ROS dapat dinetralkan menggunakan  antioksidan  (Nouri et  al. , 2009).  Banyak  antioksidan  yang  dapat melindungi  tubuh  dari  radikal  bebas seperti polifenol, tokoferol, vitamin C, dan karotenoid.  Salah  satu  karotenoid  adalah likopen  yang  ada  dalam  buah  tomat. Likopen dapat menurunkan risiko kanker paru-paru, payudara dan prostat. Berdasarkan  penelitian  yang  dilakukan Jeong,  likopen  menurunkan  jumlah  ROS di mitokondria dan intraselular sel (Jeong, Lim and Kim, 2019).
Dari  latar  belakang  tersebut, peneliti  ingin  mengenai  pengaruh  tomat ( Solanum lycopersicum ) terhadap diameter  tubulus  seminiferus  tikus  putih yang diinduksi gentamisin.

## METODE PENELITIAN
Penelitian ini adalah penelitian eksperimental  dengan  desain Post  test only  control  group  design .  Penelitian dilakukan  di Animal  House Fakultas
Kedokteran  Universitas  Lampung  selama 24 hari. Populasi penelitian ini adalah 25 ekor tikus putih jantan ( Rattus norvegicus )  galur Sprague  dawley yang didapat  dari  Institut  Penelitian  Bogor. Bahan penelitian yang digunakan ada dua yaitu jus tomat dosis 1 ml dengan masing masing persentasi 100% (tanpa pengenceran), 50% (pengenceran
setengah), dan 25% (pengenceran seperempat).  Persentasi  jus  tomat  100% mengandung  sekitar  4,5  mg  likopen didalamnya. Selain itu digunakan gentamisin dengan dosis 20 mg/kgBB.
Sampel  penelitian  sebanyak  25 ekor  dipilih  secara  acak  dan  dibagi kedalam lima kelompok dengan pengulangan  sebanyak  5  kali.  Kelompok kontrol  negatif  (K(-))  sebagai  kontrol normal  yang  tidak  diberikan  gentamisin dan  tomat.  Kelompok  kontrol  positif (K(+))  adalah  kontrol  patologis  yang diberi gentamisin 20 mg/kgBB. Kelompok perlakuan  satu  (P1)  adalah  kelompok perlakuan  dengan  pemberian  gentamisin 20  mg/kgBB  dan  jus  tomat  persentasi 25%.  Kelompok  perlakuan  dua  (P2) adalah  kelompok  perlakuan  dengan pemberian  gentamisin  20  mg/kgBB  dan jus  tomat  persentasi  50%.  Kelompok perlakuan  tiga  (P3)  adalah  kelompok perlakuan  dengan  pemberian  gentamisin 20  mg/kgBB  dan  jus  tomat  persentasi 100%.
Kelompok  K(+),  P1,  P2,  dan  P3 diberikan gentamisin 20 mg/kgBB secara bergantian.  Setelah  dua  jam,  Kelompok P1, P2, dan P3 diberikan jus tomat dosis 1 ml  dengan  persentasi  25%,  50%,  dan 100%.  gentamisin  diberikan  selama  10 hari  dan  jus  tomat  diberikan  selama  24 hari. Semua tikus tetap diberi makan dan minum ad  libitum .  Setelah  perlakuan, mencit  dikorbankan  untuk  diambil testisnya. Testis difiksasi dengan formalin 10%  dan  dibuat  sediaan  mikroskopis dengan  metode  parafin  dan  pewarnaan
Haematoksilin Eosin. Selanjutnya sediaan diperiksa dibawah mikroskop cahaya.
Analisis  data  dilakukan  terhadap diameter  tubulus  seminiferus  secara statistik. Pertama dilakukan uji normalitas  dengan  menggunakan  uji Shapiro Wilk dan uji homogenitas Levene (Dahlan,  2014).  Hasil  uji  menunjukkan data  normal  dan  homogen,  selanjutnya dilakukan  uji  parametrik One  Way Annova dan dilanjutkan uji Post Hoc.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  penelitian  berupa  preparat dilihat dibawah mikroskop cahaya dengan perbesaran 200 kali. Diambil tiga tubulus seminiferus  yang  dianggap  bulat  setiap preparat,  selanjutnya  dihitung  rata- ratanya. Diameter tubulus diukur dengan mengukur jarak terpanjang dan terpendek dari tubulus seminiferus.
K(-)                                                 K(+)

## P1                                                       P2

## P3
Gambar 1. Diameter Tubulus Seminiferus
Hasil  penelitian  menunjukkan  diameter tubulus  seminiferus  berkurang  karena pemberian  gentamisin.  Hal  tersebut terlihat  pada  kelompok  K(+)  yang memiliki diameter tubulus lebih kecil dari K(-)  yang  tidak  diberikan  gentamisin. Selanjutnya terjadi peningkatan diameter tubulus  secara  bertahap  dari  P1,  P2,  dan P3 Setelah  dihitung  rata-rata  diameter tubulus  seminiferus  tiap  kelompok perlakuan,  dilakukan  uji  normalitas  dan homogenitas dan didapatkan data terdistribusi  normal  dan  homogeny (p>0,005).  Selanjutnya  dilakukan  uji parametrik One Way Annova dan didapat
Tabel 1. Rerata Jumlah Diameter Tubulus tiap Kelompok
Ulangan ke Kelompok Perlakuan K(-) K(+) P1 P2 P3 1 343,5 334,2 319,7 343,1 376 2 325,8 217,3 327,7 333,9 367,9 3 305,9 279,5 319,6 352,1 377,9 4 311,6 280,8 352,2 388,6 377,6 5 282,1 296,8 330,9 343,5 369,5 Rerata±SD 313,9±23,1 281,7±42,2 330±13,3 352,2±21,3 373,7±4,7 hasil p<0,005 sehingga
didapat perbedaan  bermakna  besar  diameter tubulus seminiferus pada setiap kelompok perlakuan. Selanjutnya dilakukan analisis Post  Hoc  LSD untuk  melihat  perbedaan setiap  kelompok.  Tabel  2  menunjukkan ada perbedaan signifikan ukuran diameter tubulus  seminiferus  dari  kelompok  K(+) dengan  kelompok  lain.  Hal  ini  sesuai
dengan  penelitian  Narayana  dan  Khaki bahwa  gentamisin  dapat  mengurangi diameter  testis  (Narayana,  2008;  Khaki, 2015). Besar diameter kelompok K(-), P1, P2,  dan  P3  lebih  besar  dari  kelompok K(+).
Mengecilnya ukuran diameter tubulus  seminiferus  terjadi  karena  efek radikal  bebas  dari  gentamisin  yang
Ikhtiar,  Jurnal Mandala Pharmacon Indonesia 5(1);2019 : 38-42
menyebabkan  penurunan  jumlah  sel leydig  akibat  peroksidase  lipid  dan spermatogenesis terhambat.
Spermatogenesis yang terhambat mengakibatkan  penurunan  jumlah  sel dalam tubulus sehingga ketebalan tubulus seminiferus  berkurang  (Gurmeet et  al. , 2014).  Berdasarkan  penelitian  Yama, diameter tubulus mengecil karena penghambatan  hormon  testosteron  dan FSH akibat dari radikal bebas. Hal ini yang diduga  sebagai  penyebab  atropi-atropi tubulus seminiferus.(Eboetse Yama et al. , 2011).
Dari  hasil  uji post  hoc  LSD, terdapat  peningkatan  diameter  tubulus seminiferus  dari  kelompok  perlakuan  P1,
P2,  dan  P3.  Pemberian  tomat  sebagai antioksidan  dapat  mengurangi  efek radikal  bebas  dari  gentamisin.  Likopen dalam  tomat  dapat  menghambat  enzim penghasil ROS dalam sel dan merangsang produksi  enzim  antioksidan  dalam  sel yang melindungi sel dari ROS (Palozza et al. , 2011).
Walaupun  terjadi  peningkatan ukuran  diameter  tubulus,  kelompok  P2 dan  P3  tidak  signifikan  (p>0,005).  Hasil analisis  data  yang  tidak  signifikan  ini mungkin  bisa  disebabkan  oleh  berbagai hal seperti dosis yang tidak sesuai, waktu penelitian  yang  singkat,  dan  kesalahan pemberian jus tomat dan gentamisin.
Tabel 2. Hasil uji Post Hoc LSD Kelompok Perlakuan K(-) K(+) P1 P2 P3 K (-) - 0,05* 0,310 0,022* 0,001* K (+) 0,05* - 0,005* 0,000* 0,000* P1 0,310 0,005* - 0,165 0,010* P2 0,022* 0,000* 0,165 - 0,178 P3 0,001* 0,000* 0,010* 0,178 -
Keterangan : * Jika p<0,05 = terdapat perbedaan yang signifikan
Dosis  gentamisin  yang  digunakan sudah  sesuai  karena  menurut  Narayana, dosis  gentamisin  3  mg/kgBB  dan  5 mg/kgBB  intra  peritoneal  (IP)  sudah memberikan efek stres oksidatif terhadap diameter  testis  (Narayana,  2008).  Lebih lanjut  penelitian  Khaki  didapatkan kerusakan testis dengan dosis yang sama yaitu  5  mg/kgBB  (Khaki et  al. ,  2009). Dosis  jus  tomat  juga  bukan  menjadi penyebab  karena  dari  penelitian  Suciati, dosis tomat 1 mg/kgBB sudah memberikan  efek  protektif  (Suciati, Ismono and Iwan, 2012).
Rute  pemberian  yang  digunakan dalam penelitian ini adalah peroral untuk jus  tomat  dan  intraperitoneal  untuk gentamisin.  Pemberian  jus  tomat  secara peroral  sudah  sesuai  karena  berdasarkan Research  Guidline  for  Evaluating  the Safety  and  Efficacy  of  Herbal  Medicine pemberian  obat  yang  paling  tepat
diberikan pada hewan uji adalah melewati rute peroral (World Health Organization, 2012). Pemberian obat gentamisin secara intraperitoneal  juga  tindakan  yang  benar karena  selain  peneliti  banyak  yang menggunakan  metode  tersebut,  absorbsi obat melewati IP  lebih banyak dibanding melewati intraperitoneal (Susianti, 2013). Kemungkinan  kesalahan  dari  pemberian obat  ketika  melakukan  penyuntikan gentamisin dan pencekokkan jus tomat.

## KESIMPULAN
Kesimpulan  hasil  penelitian  ini adalah  terdapat  pengaruh  jus  tomat terhadap  diameter  tubulus  seminiferus tikus  putih  ( Rattus  norvegicus )  yang diinduksi gentamisin.

## DAFTAR PUSTKA
Al-Damegh,  M.A.  2014.  Stress-Induced Changes  in  Testosterone  Secretion  in Male Rats: Role of Oxidative Stress and
Ikhtiar,  Jurnal Mandala Pharmacon Indonesia 5(1);2019 : 38-42
Modulation  by  Antioxidants  Open Journal of Animal Sciences 04(02):70 – 78.
Aly,  H.  A.  A.  and  Hassan,  M.  H.  2018.
‘Potential testicular toxicity of
gentamicin  in  adult  rats.  Biochemical and Biophysical Research
Communications.  Elsevier  Inc  497(1):
362 – 367.
Dahlan,  S.2014.Statistik  Untuk  Kedokteran Dan  Kesehatan.  6th  edn.  Jakarta: Salemba Medika.
Eboetse Yama, O. et al. 2011. Sperm quotient in Sprague-Dawley rats fed graded doses of seed extract of Momordica charantia. Middle  East  Fertility  Society  Journal. Middle East Fertility Society 16(2): 154 – 158.
El-maddawy,  Z.  K.  2014.  Modulation  of
Gentamicin-induced  Testicular  and Brain Damage in Rats. 8(3): 284 – 293. Gurmeet,  K.  S.  S. et  al. 2014.  Detrimental effects  of  bisphenol  a  on  development and  functions of  the  male  reproductive system  in  experimental  rats.  EXCLI Journal 13:. 151 – 160.
Jeong,  Y.,  Lim,  J.  W.  and  Kim,  H.  2019. Lycopene  inhibits  reactive  oxygen species-mediated  nf-kb  signaling  and induces  apoptosis  in  pancreatic  cancer cells. Nutrients 11(4).
Khaki, A. et al. 2009. Ultra structural study of gentamicin and ofloxacin effect on testis tissue  in  rats :  Light  and  transmission
electron microscopy. Journal
of Pharmacy and Pharmacology 3(4): 105 – 109.
Khaki,  A.  2015.  Assessment  on  the  adverse effects of aminoglycosides and flouroquinolone  on  sperm  parameters and  male  reproductive  tissue:  A systematic  review.  Iranian  Journal  of Reproductive Medicine 13(3): 125 – 134. Kim,  S.  H. et  al. 2014.  Melatonin  prevents gentamicin-induced  testicular  toxicity and oxidative stress in rats. Andrologia 46(9): 1032 – 1040.
Narayana,  K.  2008.  An  aminoglycoside antibiotic gentamycin induces oxidative stress,  reduces  antioxidant  reserve  and impairs  spermatogenesis  in  rats.  The
Journal  of  toxicological  sciences  33(1): 85 – 96. Nouri, M. et al. 2009. The protective effects of carrot  seed  extract  on  spermatogenesis and cauda epididymal sperm reserves in gentamicin  treated  rats. Yakhteh 11(3): 327 – 333.
Olayemi, F. O. 2010. A review on some causes of  male  infertility.  African  Journal  of Biotechnology 9(20): 2834 – 2842.
Palozza, P. et al. 2011. Role of Lycopene in the Control  of  ROS-Mediated  Cell  Growth: Implications  in  Cancer  Prevention. Current  Medicinal  Chemistry  18(12):. 1846 – 1860.
Suciati,  T.,  Ismono,  D.  and  Iwan,  J.  2012. Pengaruh Likopen Terhadap Gambaran Tubulus  Seminiferus  dan  Kualitas Sperma Mencit (Mus Musculus L) yang Terpapar  Asap  Rokok.  Universitas Sriwijaya.
Susianti.  2013.  Pengaruh  Ekstrak  Jintan Hitam  (  Nigella  Sativa  L  .)  terhadap Gambaran Histopatologi Hepar , Paru , dan  Testis  Tikus  Putih  (  Rattus
Norvegicus ) yang Diinduksi
Gentamisin.  Jurnal  Sainsmat  II(2):
107 – 118.
World Health Organization. 2012. The Pursuit of  Responsible  Use  of  Medicines: Sharing  and  Learning  from  Country Experiences. Available at: https://www.who.int/medicines/public ations/responsible_use/en/.
World Health Organization (2012)  Meeting to develop  a  global  consensus  on preconception  care  to  reduce  maternal and  childhood  mortality  and  morbidity WHO  Headquarters,  Geneva  Meeting report.  Geneva: 78.  Available  at: http://scholar.google.com/scholar?hl= en&btnG=Search&q=intitle:Meeting+to +Develop+a+Global+Consensus+on+P reconception+Care+to+Reduce+Mater nal+and+Childhood+Mortality+and+M orbidity#0%5Cnhttp://scholar.google
Ikhtiar,  Jurnal Mandala Pharmacon Indonesia 5(1);2019 : 38-42