## PEMBERIAN EKSTRAK KELOPAK ROSELLA MERAH (Hibiscus sabdariffa) MENAIKKAN KADAR SUPEROKSIDA DISMUTASE (SOD) TIKUS WISTAR YANG DIBERI MINYAK JELANTAH
Novera Herdiani 1 , Bambang Wirjatmadi 1 , Merryana Adriani 2
Departemen Gizi Kesehatan Masyarakat Fakultas Kesehatan Masyarakat Universitas Airlangga
1 Email : novera.herdiani@gmail.com

## Abstrak
Latar  belakang  : Minyak  jelantah  adalah  minyak  goreng  yang  digunakan  berkali-kali, mempunyai  ikatan  asam  lemak  jenuh  yang  mengandung  radikal  bebas.  Ekstrak  kelopak rosella  merah  mengandung  antioksidan  dengan  efek  meminimalisir  penggunaan  minyak jelantah yang dapat menaikkan kadar SOD.
Tujuan  : Menganalisis pengaruh  pemberian ekstrak  kelopak rosella merah terhadap kondisi stres oksidatif tikus wistar yang diberi minyak jelantah melalui pengujian kadar SOD serum.
Metode  : Penelitian  ini  dilakukan  secara True  Experimental  Laboratory dengan  Rancangan Acak  Lengkap  (RAL)  dan  menggunakan  post  tes.  Sampel  terdiri  atas  24  ekor  tikus  jantan dibagi 4  kelompok  yaitu kontrol negatif (diberi pakan standar); kontrol positif (diberi pakan standar + minyak jelantah sebanyak 2,1 ml/kg bb); kelompok perlakuan dosis 1 (diberi pakan standar + ekstrak kelopak rosella merah dosis 540 mg/kg bb + minyak jelantah sebanyak 2,1 ml/kg  bb); dan  kelompok  perlakuan  dosis  2  (diberi  pakan  standar  +  ekstrak  kelopak  rosella merah  dosis  810  mg/kg  bb  +  minyak  jelantah  sebanyak  2,1  ml/kg  bb).  Analisis  data menggunakan uji statistik One Way ANOVA dan Tukey HSD (α = 0,05). Hasil  : Terdapat  perbedaan  bermakna  (p=0,000)  antar  kelompok.  Kelompok  perlakuan ekstrak  rosella  merah  dosis  810  mg/kg  bb  dan  540  mg/kg  bb  berbeda  secara  signifikan dengan  kontrol  positif  (p=0,000).  Kelompok  ekstrak  rosella  merah  dosis  540  mg/kg  bb berbeda  signifikan  dengan  kontrol  negatif  (p=0,000).  Kelompok ekstrak  rosella  merah  dosis 810 mg/kg bb tidak berbeda signifikan dengan kelompok kontrol (p=0,171).
Kesimpulan  : Pemberian  ekstrak  kelopak  rosella  merah  dosis  810  mg/kg  bb  dan  dosis  540 mg/kg  bb  mampu  mencegah  terjadinya  stres  oksidatif.  Dosis  ekstrak  kelopak  rosella  merah yang  paling  efektif  adalah  dosis  810  mg/kg  bb,  karena  aktivitas  antioksidan  lebih  tinggi (67,33%) pada dosis 810 mg/kg bb dibandingkan dosis 540 mg/kg bb.
Kata kunci : SOD, ekstrak kelopak rosella merah, minyak jelantah, stres oksidatif

## ADMINISTRATION OF RED ROSELLA’S PETALS EXTRACT
(Hibiscus sabdariffa) INCREASE LEVEL OF SUPEROXIDE DISMUTASE (SOD) WISTAR RATS WHICH INDUCED BY REPETEADLY HEATED

## COOKING OIL

## Abstract
Background:   repeatedly  heated  cooking  oil  is  cooking  oil  that  is  used  many  times,  had saturated fatty acids containing free radicals. Red rosella petals extract contains antioxidants to  minimize  the  effects  of  repeatedly  heated  cooking  oil  that  can  raise  the  levels  of  SOD. The  aim  of  this  study  was  to  analyzed  the  effect  of  red  rosella’s petals  extract against oxidative  stress  of  Wistar rats were induced  by  repeatedly  heated  cooking  oil  with examine levels of  serum SOD.
This research was conducted True Experimental Laboratory with a completely randomized design  (CRD)  and  use  the  post  test.  The  sample  consisted  of  24  male  rats  were  divided  4 groups: negative control (fed with standard diet); positive control (fed with standard diet + administered by repeatedly heated cooking oil as much as 2.1 ml / kg bw); treatment group dose I (fed with standard diet + administered by red rosella extract dose 540 mg / kg bw + repeatedly heated cooking oil as much as 2.1 ml /  kg bw), and treatment group dose II (fed with standard diet + administered by red rosella extract dose 810 mg / kg bw + repeatedly heated cooking oil as much as 2.1 ml / kg bw). Analysis of data using statistical test One Way ANOVA and Tukey HSD (α = 0.05).
Results: There  were  significant differences  (p = 0.000) between  groups. Red rosella extract treatment group dose  810  mg  /  kg bw  and 540  mg  /  kg bw  were  significantly different  from the  positive  control  (p  =  0.000).  Red  rosella  extract  group  dose  540  mg  /  kg  bw  was significantly  different  from  the  negative  control  (p  =  0.000).  Red  rosella  extract  group dosage of 810 mg / kg bw was not differ significantly from the control group (p = 0.171). Conclusion: The red rosella’s petals extract dose of 810 mg / kg bw and dose of 540 mg / kg bw were able to prevent oxidative stress. Optimal deose of red rosella petals extract dose of 810  mg  /  kg bw  was  the  most  effective,  because  the higher  antioxidant activity  (67.33%) at dose 810 mg / kg bw dose than 540 mg / kg bw.
Keywords: SOD, red rosella’s petals extract, used cooking oil, oxidative stress

## PENDAHULUAN
Masyarakat  di  Indonesia  masih memiliki  kecenderungan  menggunakan minyak  jelantah  sebagai  alat  pengolahan bahan-bahan  makanan.  Minyak  jelantah adalah minyak goreng yang  sudah digunakan  berkali-kali  dengan  suhu  tinggi pada  proses  penggorengannya. Rata-rata penggunaan minyak goreng sekitar 137.309  per  tahun  dan  akan  terus
meningkat  pada  waktu-waktu    tertentu seperti lebaran, natal dan tahun baru1.
Tingkat  konsumsi  minyak  goreng di Indonesia yang sangat tinggi menggambarkan  potensi  yang  besar  untuk pemanfaatan  minyak  jelantah.  Minyak jelantah  dihasilkan  oleh  beberapa  sumber yaitu  rumah  tangga,  restoran,  hotel  dan industri pengolahan makanan.
Jumlah  minyak  jelantah  yang dihasilkan  dari  rumah  tangga  sebanyak 305.050,1406  ton,  jumlah  minyak  jelantah yang  dihasilkan  dari  industri  pengolahan makanan  adalah  2.079.417,5556  ton  dan jumlah  minyak  jelantah  yang  dihasilkan dari penggunaan minyak goreng oleh hotel dan restoran adalah sebanyak 1.502.218,933  ton.  Total  jumlah  minyak jelantah dari berbagai pihak yang menggunakan  minyak  goreng  adalah 3.886.686,6290 ton per tahun. 2
Gorengan  adalah  makanan  yang mengalami  proses  penggorengan  dengan menggunakan
minyak goreng. 3
Berdasarkan  data  Statistik  Konsumsi Pangan (2012), konsumsi makanan gorengan  potong  meningkat  dari  tahun 2010  ke  tahun  2011.  Pada  tahun  2010 konsumsi  makanan  gorengan  sebanyak 94,744  potong  per  kapita  sedangkan  pada tahun  2011  sebanyak  101,105  potong  per kapita  (Kementerian  Pertanian,  2012). Menurut  Suleeman  dan  Sulastri  (2006), dari  22  jenis  jajanan  yang  ditanyakan dalam  Susenas,  gorengan  adalah  jajanan yang  paling  disukai  di  Indonesia.  Data Susenas modul konsumsi 2002 menyebutkan gorengan dipilih oleh hampir separuh rumah tangga di  Indonesia (49%). Proses  penggorengan  membuat  makanan menjadi  renyah,  kering,  dan  berwarna keemasan  kecoklatan,  tapi  minyak  yang berulang  kali  digunakan  menyebabkan
penurunan  mutu  bahkan  menimbulkan bahaya bagi kesehatan. 4
Minyak  jelantah  terkandung  asam lemak  jenuh  berlebih  dan  paparan  radikal bebas,  sehingga  perlu  adanya  inovasi untuk  mengembangkan  suatu produk  yang dapat  meminimalisir  dampak  negatif  dari penggunaan  minyak  jelantah.  Upaya  yang dapat dilakukan adalah dengan pemanfaatan ekstrak kelopak rosella merah dalam  pelarut  air.  Hal  ini  dikarenakan ekstrak  rosella  dalam  pelarut  air  dapat diaplikasikan  untuk  bahan  tambahan pangan fungsional. Pelarut air sesuai untuk mengestrak  antosianin  yang  mempunyai kepolaran sama dengan air. 5
Stres  oksidatif  merupakan  suatu kondisi  ketidakseimbangan  antara  radikal bebas  dengan  sistem  antioksidan  tubuh. 6
Sumber  radikal  bebas  yang  berasal  dari minyak  jelantah  memicu  peroksidasi  lipid menghasilkan  Malondialdehid  (MDA). MDA  dalam  darah  akan  memaksa  SOD sebagai antioksidan primer untuk menetralisirnya  agar  tidak  berdampak buruk  terhadap  jaringan  yang  dialiri  oleh darah.  Kekurangan  aktivitas  antioksidan adalah  konsekuensi  atas  meningkatnya radikal  bebas  yang  menyebabkan  kondisi stres  sel  sehingga  menimbulkan  cedera yang  hebat  ( irreversible )  dan  berujung nekrosis. 7 Pada  akhirnya,  rasio  antara MDA/SOD  menjadi  indeks  dari  kondisi stres oksidatif. 8
Secara normal, radikal bebas sudah ada  dalam  tubuh.  Tubuh  secara  alami mempunyai  antioksidan  yang  bekerja menghambat oksidasi dengan cara bereaksi dengan  radikal  bebas  reaktif  membentuk radikal bebas yang lebih stabil.
Superoksida  dismutase  (SOD)  merupakan antioksidan intraseluler, sedangkan antosianin merupakan turunan dari flavonoid sebagai antioksidan ekstraseluler. 9 Namun  apabila  radikal bebas  terlalu  banyak  maka  antioksidan alami  tersebut  tidak  mampu  mengatasinya sehingga  menyebabkan kondisi  stres oksidatif. Pada keadaan ini tubuh memerlukan  asupan  antioksidan  dari  luar. Diharapkan  ekstrak  kelopak  rosella  merah dapat digunakan sebagai alternatif antioksidan alami dalam menangkal radikal bebas.

## BAHAN DAN METODA PENELITIAN
Jenis penelitian ini yaitu eksperimental  laboratorium.  Tahap in  vivo yang  digunakan  adalah True  Experimental Laboratory dengan post  test  only  control group  design .  Rancangan  perlakuan  pada penelitian  ini  yaitu  Rancangan  Acak Lengkap  (RAL).  Sampel  terdiri  atas  24 ekor  tikus  jantan  dipilih  dengan  cara random  sampling dibagi  menjadi  4 kelompok  yaitu  kelompok  kontrol  negatif, kelompok kontrol positif, dan dua
kelompok  perlakuan.  Setiap  kelompok terdiri dari 6 ekor tikus, sebagai berikut: 1. Kelompok I : kontrol negatif (kelompok  normal),  diberi  pakan standar,  tanpa  pemberian  minyak jelantah  dan  ekstrak  kelopak  rosella merah.
2. Kelompok II : kontrol positif (kelompok  paparan),  diberi  pakan standar, diberi minyak jelantah sebanyak 2,1 ml/ kg bb tikus wistar.
3. Kelompok  III  :  yang  diberi  pakan standar, ekstrak kelopak rosella merah dosis  540  mg/kg  bb  p.o  dan  diberi minyak jelantah 2,1 ml/ kg bb.
4. Kelompok  IV  :  yang  diberi  pakan standar, ekstrak kelopak rosella merah dosis  810  mg/kg  bb  p.o  dan  diberi minyak jelantah 2,1 ml/ kg bb.
Tahap in  vivo dilakukan  dengan memberikan  ekstrak  rosella  merah  dan ekstrak  rosella  ungu  sesuai  dosis  yang telah ditetapkan, selanjutnya diberi minyak jelantah  2,1  ml/  kg  bb.  Perlakuan  tersebut dilakukan selama 28 hari. Pada tahap akhir dilakukan  pembedahan,  selanjutnya  darah diambil  dan  dilakukan  pengujian  kadar SOD  serum.  Pakan  hewan  coba  merk POKPHAND  CP  591,  dengan  komposisi kadar  air  max  13,0%, protein  18,0-20,0%, lemak min 3,0%, serat max 6,0%, abu max 7,0%,  kalsium  min  0,9%,  dan  phosphor min 0,6%.
Bahan  -  bahan  yang  dipakai  dalam formulasi pakan  antara  lain jagung, dedak, tepung  ikan,  bungkil  kedelai,  bungkil kelapa, tepung daging dan tulang, pecahan gandum,  bungkil  kacang  tanah,  tepung daun,  canola,  vitamin,  kalsium,  fosfat  dan trace mineral.
Minyak  jelantah  yang  digunakan dalam penelitian  ini mengandung bilangan peroksida  6,99  mek/1000gram.  Dosis pemberian  minyak  jelantah  2,1  ml/kg  bb. Proses pemeberian minyak jelantah dilaksanakan  setelah  pemberian  ekstrak rosella p.o (per-oral/ sonde lambung) pada kelompok  perlakuan.  Pemberian  minyak jelantah  untuk  kelompok  kontrol  positif dan kelompok perlakuan. Penelitian dilaksanakan selama 3 bulan dan dilakukan  di  beberapa  tempat,  yaitu  : laboratorium In  Vivo dan  biokimia  FK Universitas  Wijaya  Kusuma  Surabaya, laboratorium Pengujian
Mutu dan Keamanan  Pangan  Universitas  Brawijaya dan  laboratorium  Faal  FK  Universitas Brawijaya.
Sampel  untuk in  vivo adalah  tikus
putih jenis Rattus norvegicus strain Wistar jantan dewasa usia 3-4 bulan dengan berat rata-rata 180-200 g. Masing-masing kelompok  perlakuan  terdiri  atas  lima  ekor tikus.  Pada  tahap  awal  akan  dilakukan
analisis normalitas dengan uji
Kolmogorov-smirnov dan  uji  homogenitas dengan Levene statistic . Apabila
didapaatkan  data  normal  dan  homogen, maka selanjutnya dilakukan analisis perbandingan  antar  kelompok  dengan  uji One  Way  Anova .  Apabila  ada  perbedaan yang signifikan, maka pengujian dilanjutkan  dengan  uji Tukey    HSD untuk melihat lebih jelas seberapa besar perbedaan tiap kelompok perlakuan kepercayaan α=5%.

## HASIL
Tabel  1.  Hasil  Aktivitas  Antioksidan  (Uji DPPH) Ekstrak Rosella Merah
Pada  Tabel  1  diketahui  bahwa aktivitas  antioksidan  (uji  DPPH)  yang tertinggi  yaitu  ekstrak  kelopak  rosella merah  dosis  810  mg/kg  bb  (67,33%)  dan terendah  pada  ekstrak  kelopak  rosella merah dosis 540 mg/kg bb yaitu 44,31%.
Tabel 2. Hasil Bilangan Peroksida Minyak
Jelantah Kode Sampel % Inhibisi Dosis 1 (540 mg/kg bb) 44,31 Dosis 2 (810 mg/kg bb) 67,33
Kode Sampel Bilangan Peroksida (miliekuivalen/1000 g) Minyak Jelantah 6,99
Pada  Tabel  2  menunjukkan  bahwa hasil  analisis  bilangan  peroksida  minyak jelantah  sebesar  6,99  mek/1000  gram. Standar  mutu  minyak  goreng  dalam  SNI- 3741-1995  mensyaratkan  nilai  bilangan peroksida  yang  aman  untuk  dikonsumsi maksimal  2  mek/kg,  sedangkan  nilai ambang  batas  mutu  minyak  sawit  yang dikeluarkan  oleh  Direktorat  Jenderal Perkebunan  Republik  Indonesia  adalah sebesar 6 mek/kg.
Berdasarkan  hasil  penelitian,  telah didapatkan  kadar  SOD  serum.  Hasil analisis  rerata  kadar  SOD  serum  disajikan pada Gambar 1 dibawah.
Gambar 1. Rerata SOD Serum Berdasarkan Kelompok
Berdasarkan  Gambar  1.  diketahui bahwa rerata kadar SOD kelompok ekstrak kelopak rosella merah dosis 810 mg/kg bb yaitu  2,696  U/ml.  Rerata  kadar  SOD kelompok  ekstrak  kelopak  rosella  merah dosis  540  mg/kg  bb  yaitu  2,456  U/ml.
Rerata  kadar  SOD  kontrol  positif  yaitu 1,344  U/ml.  Rerata  kadar  SOD  kelompok kontrol  negatif  yaitu  3,113  U/ml.  Kadar SOD  serum  paling  tinggi  yaitu  pada kontrol  negatif,  sedangkan  kadar  SOD paling  rendah  yaitu  pada  kontrol  positif. Pada  kelompok  perlakuan,  kadar  SOD serum  yang  paling  mendekati  kelompok kontrol  negatif  yaitu  pada  perlakuan rosella merah dosis 810 mg/kg bb.
Hasil  uji  statistik  ragam Anova menunjukkan  bahwa  jenis  kelompok perlakuan pada uji  i n vivo ini memberikan pengaruh  nyata  (α=0,05)  terhadap  kadar SOD.  Sehingga  perlu  dilakukan  uji lanjutan  Tukey  HSD untuk  melihat kelompok  perlakuan  mana  yang  berbeda. Tabel  3  berikut  menunjukkan  rerata  dan standar deviasi hasil uji.
Tabel  3.  Perbedaan  Kadar  SOD  Serum pada Berbagai Kelompok
Keterangan  :  Rerata  yang  didampingi huruf  yang  sama  menyatakan  tidak berbeda nyata.
Kelompok Rerata ± SD Ekstrak kelopak rosella merah dosis 810 mg/kg bb 2,696 ab ± 0,358 Ekstrak kelopak rosella merah dosis 540 mg/kg bb 2,456 b ± 0,329 Kontrol Positif 1,344 c ± 0,277 Kontrol Negatif 3,113 a ± 0,355
Hasil  uji  Tukey  HSD  kadar  SOD serum,  menunjukkan  bahwa  kadar  SOD serum  pada  kelompok  pemberian  ekstrak kelopak rosella merah dosis 810 mg/kg bb, tidak  berbeda  nyata  dengan  ekstrak kelopak rosella merah dosis 540 mg/kg bb dan kontrol negatif, dimana nilai signifikansi  ekstrak  kelopak  rosella  merah dosis  540  mg/kg  bb  yaitu p =  0,607  ( p > 0,05)  dan  kontrol  negatif  yaitu p =  0,171
( p >  0,05).  Ekstrak  kelopak  rosella  merah dosis  810  mg/kg  bb berbeda  nyata  dengan kontrol  positif,  dimana  nilai  signifikansi p =  0,000  ( p <  0,05).  Sedangkan  untuk ekstrak  kelopak  rosella  merah  dosis  540 mg/kg  bb,  tidak  berbeda  nyata  dengan ekstrak  kelopak  rosella  merah  dosis  810 mg/kg  bb  dengan  nilai  signifikansi p =
0,607  ( p >  0,05).  Ekstrak  kelopak  rosella merah  dosis  540  mg/mg  bb  berbeda  nyata dengan  kontrol positif dan  kontrol  negatif, dimana nilai signifikansi ( p < 0,05).
Kadar  SOD serum kelompok
positif  berbeda  nyata  dengan  semua kelompok  yaitu  kontrol  negatif,  ekstrak kelopak rosella merah dosis 810 mg/kg bb, dan  ekstrak  kelopak  rosella  merah  dosis 540 mg/kg bb dengan nilai signifikansi p = 0,000  ( p <  0,05).  Sedangkan  kelompok kontrol negatif tidak berbeda nyata dengan ekstrak  kelopak  rosella  merah  dosis  810 mg/kg  bb  dengan  nilai  signifikansi p = 0,171  ( p >  0,05).  Kontrol  negatif  berbeda nyata  dengan  ekstrak  kelopak  rosella
merah  dosis  540  mg/kg  bb  dan  kontrol positif,  nilai  signifikansi  ekstrak  kelopak rosella  merah  dosis  540  mg/kg  bb yaitu p = 0,014 dan kontrol positif yaitu p = 0,000.

## PEMBAHASAN
Superoksida Dismutase (SOD)
merupakan  antioksidan  enzimatis  dan tergolong sebagai antioksidan primer  yang berasal  dari  dalam  tubuh  (intraselular). SOD bersifat protektif dan memiliki peran dalam  mencegah  radikal  bebas.  Kadar SOD tersebut menandakan status antioksidan di dalam tubuh dan digunakan sebagai bioindikator kondisi stres oksidatif. Kelompok kontrol negatif memiliki  kadar  SOD  dalam  darah  yang lebih  tinggi  dari  pada  kelompok  lain.  Hal ini  dikarenakan  SOD  pada  kelompok kontrol  negatif  belum  banyak  terpakai dalam  menangkal  radikal  bebas  sehingga kadar  SOD-nya  masih normal dan cenderung tinggi.
Kadar  SOD  paling  rendah  adalah pada  kelompok  kontrol  positif  diikuti tendensi  peningkatan  kadar  SOD  pada kelompok  perlakuan  (pemberian  ekstrak kelopak  rosella  merah)  seiring  dengan peningkatan  dosis  yang  diberikan,  dimana peningkatan  dosis  ekstrak  kelopak  rosella merah  yang  diberikan  berbanding  lurus dengan  peningkatan  kadar  SOD  serum tikus. Kelompok positif merupakan kelompok dengan pemberian pakan
standar  dan  diberi  minyak  jelantah  tanpa disertai  asupan  antioksidan  dari  ekstrak kelopak rosella merah, sehingga menunjukkan  kondisi  stres  oksidatif  yang ditandai  oleh  menurunnya  jumlah  kadar SOD  sebagai  antioksidan  utama  di  dalam tubuh karena digunakan dalam menetralisir radikal  bebas.  SOD  yang  banyak  terpakai akan menyebabkan hasil pengukuran kadar SOD serum akan rendah akibat berkurangnya  jumlah  enzim  yang  masih aktif . 10
Berdasarkan  hasil  uji  statistik menunjukkan  bahwa  pada  kelompok perlakuan  pada  uji in  vivo memberikan pengaruh  nyata  ( p <  0,05)  terhadap  kadar SOD.  Sehingga  perlu  dilakukan  uji lanjutan  statistik  untuk  melihat  perlakuan mana  yang  berbeda  (perbedaan  tersebut dapat  dilihat  pada  lampiran).  Hasil  uji lanjutan  menunjukkan  bahwa  kelompok kontrol  positif  berbeda  nyata  ( p <  0,05) dengan  kelompok  kontrol  negatif.  Hal  ini disebabkan  karena  kelompok  kontrol negatif  merupakan  kelompok  tikus  yang hanya  diberi  pakan  standar  saja  tanpa pemberian  minyak  jelantah  dan  ekstrak kelopak rosella merah, sehingga mengakibatkan  kadar  SOD  serum  tikus berlangsung  normal  dan  cenderung  tinggi karena tidak berpengaruh pada penggunaan  aktivitas  enzim  antioksidan SOD dalam menetralisir radikal bebas.
Pada  kelompok  kontrol  positif merupakan  kelompok  tikus  yang  diberi pakan  standar  disertai  pemberian  minyak jelantah yang mengandung bilangan peroksidasi sejumlah 6,99
miliekuivalen/1000  gram.  Indikator  yang biasa  digunakan  untuk  menunjukkan tingkat  oksidasi  adalah  bilangan  peroksida sebagai  komponen  radikal  peroksi  lemak. Dapat  dikatakan  bahwa  minyak  jelantah tersebut  mengandung  sejumlah  radikal bebas  berbahaya  bagi  tubuh  yang  terukur sebagai  bilangan  peroksida.  Hal  ini memaksa SOD sebagai antioksidan primer di  dalam  tubuh  bereaksi  dengan  cara menetralisirnya.  Oleh  karena  itu,  kadar SOD  dalam  kelompok  kontrol  positif mengalami  penurunan    dibandingkan kelompok  kontrol  negatif (Christina, 2010).
Kelompok kontrol positif menunjukkan  kondisi  stres  oksidatif  yang ditandai  oleh  menurunnya  jumlah  kadar SOD  (1,344  U/ml)  sebagai  antioksidan utama  di  dalam  tubuh  akibat  adanya radikal  bebas.  (Bureau et  al .,  2003  dalam Christina 2010). Pada kelompok perlakuan ekstrak  kelopak  rosella  merah  dosis  810 mg/kg bb dan dosis 540 mg/kg bb, berbeda nyata  terhadap  kelompok  kontrol  positif. Hal  ini  dikarenakan  perbedaan  jenis perlakuan  pada  masing-masing  kelompok. Kelompok perlakuan merupakan kelompok  yang  diberi  pakan  standar,
pemberian  minyak  jelantah,  serta  diberi perlakuan  berupa  antioksidan  ekstrak kelopak  rosella  merah  dengan  dosis  yang telah  ditentukan  yaitu  ekstrak  kelopak rosella  merah  dosis  810  mg/kg  bb  dan dosis 540 mg/kg bb. Sedangkan  kelompok kontrol positif  hanya diberi pakan standar, dan  pemberian  minyak  jelantah  tanpa antioksidan. Ekstrak kelopak rosella merah mengandung  antosianin  yang  memiliki efek  antioksidan  sehingga  memberikan pengaruh  terhadap  kenaikkan  kadar  SOD yang dibandingkan dengan kontrol positif.
Hal  ini  sejalan  dengan  penelitian yang  dilakukan  Maulana  (2014)  bahwa pemberian effervescent rosela ungu mampu memberikan efek antioksidan yang signifikan  dalam  mencegah  timbulnya kondisi  stres  oksidatif  akibat  minyak jelantah.  Hal  ini  ditunjukkan  dengan peningkatan  kadar SOD serum darah tikus kelompok  perlakuan  dibandingkan  kontrol positif  yang  diberi  minyak  jelantah  yang mengalami stres oksidatif.
Berdasarkan  hasil  uji,  pemberian asupan antioksidan tambahan  yang berasal dari  ekstrak  kelopak  rosella  merah  dengan dosis  yang  telah  ditentukan  terbukti mampu  memberikan  pengaruh  yang  nyata terhadap  peningkatan  kadar  SOD  serum. Penambahan  antioksidan  dari  luar  berupa antosianin  tersebut  mampu  memberikan peningkatan  terhadap  kadar  SOD  yang berarti  mengurangi  kinerja  enzim  SOD
dalam  mencegah  timbulnya  stres  oksidatif (Christina, 2010).
Peningkatan  dosis  ekstrak  kelopak rosella merah yang diberikan juga meningkatkan  kadar  SOD  serum  secara rerata.  Dalam  penelitiannya,  Arief  (2000) mengatakan  bahwa  semakin  tinggi  dosis antioksidan  yang diberikan, maka semakin besar  kadar  SOD.  Artinya,  antioksidan tersebut  dapat  membantu  SOD  dalam menetralisir  radikal  bebas  sehingga  SOD yang  digunakan  berkurang.  Tujuan  yang ingin  dicapai  dalam  penelitian  ini  adalah untuk mengetahui bahwa pemberian ekstrak  kelopak  rosella  merah  dengan dosis  yang  telah  ditentukan  yaitu  ekstrak kelopak rosella merah dosis 810 mg/kg bb dan  dosis 540 mg/kg bb  mampu memberikan
pengaruh dalam meningkatkan  kadar  SOD  serum  dalam darah terhadap kondisi stres oksidatif tikus wistar  yang  diberi  minyak  jelantah. Parameternya  adalah  adanya  peningkatan kadar SOD kelompok perlakuan dibanding kelompok kontrol positif.
Hasil penelitian ini juga menunjukkan  bahwa  kelompok  perlakuan berupa ekstrak kelopak rosella merah dosis 810  mg/kg  bb  tidak  berbeda  nyata  ( p > 0,05)  terhadap  kelompok  kontrol  negatif, sehingga  mencapai  kadar  SOD  pada kelompok  kontrol  negatif.  Sedangkan kelompok  perlakuan  ekstrak  kelopak rosella merah dosis 540 mg/kg bb berbeda
nyata  ( p <  0,05)  terhadap  kelompok kontrol  negatif.  Hal  ini  menunjukkan bahwa ekstrak kelopak rosella merah dosis 540 mg/kg bb berpengaruh dalam peningkatan  kadar  SOD  serum,  namun belum  efektif  dalam  meningkatkan  kadar SOD  hingga  mencapai  kadar  SOD  pada kelompok kontrol negatif. Pemberian dosis yang  lebih  besar  diduga  akan  memberikan keefektifan dalam peningkatan  kadar SOD serum  hingga  mencapai  kadar  SOD  pada kelompok kontrol negatif.
Ekstrak  rosella  merah  dosis  810 mg/kg  bb  dan  dosis  540  mg/kg  bb memberikan efek antioksidan yang signifikan dalam mencegah stres oksidatif. Hal  ini  ditunjukkan  dengan  kadar  SOD serum  yang  meningkat,  dibandingkan kelompok  kontrol  positif  yang  kadar  SOD serum rendah. Berdasarkan hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa semua kelompok perlakuan  dengan  pemberian  ekstrak kelopak rosella merah dosis 810 mg/kg bb dan  dosis  540  mg/kg  bb  efektif  mencegah penurunan  kadar  SOD  serum  yang  diberi minyak  jelantah, sehingga ekstrak  kelopak rosella  merah  yang  diberikan  mampu meningkatkan kadar Superoksida Dismutase (SOD) serum tikus wistar.

## KESIMPULAN
1. Pemberian ekstrak rosella merah dosis
810  mg/kg  bb  secara  efektif  mampu mencegah  penurunan  kadar  SOD
serum.  Hal  ini  dikarenakan  aktivitas antioksidan  (67,33%)  ekstrak  kelopak rosella  merah  dosis  810  mg/kg  bb paling  tinggi  dibandingkan  ekstrak kelopak  rosella  merah  dosis  540 mg/kg bb (44,31%)
2. Pemberian  ekstrak  kelopak  rosella merah  dosis  540  mg/kg  bb  mampu meningkatkan kadar Superoksida Dismutase  (SOD)  tikus  wistar  yang diberi  minyak  jelantah,  tetapi  secara rerata tidak lebih efektif dibandingkan ekstrak  kelopak  rosella  merah  dosis 810 mg/kg bb sebesar 2,696 U/ml . 3. Pada  kelompok  kontrol  negatif,  kadar MDA serum  paling rendah,  kadar NO serum  dan  kadar  SOD  serum  paling tinggi  dibandingkan  kelompok  lain. Sedangkan  kelompok  positif  kadar MDA  serum  paling  tinggi,  kadar  NO dan kadar SOD  paling  rendah dibandingkan kelompok lain.
4. Untuk  pencegahan  agar  tidak  sampai kondisi stres oksidatif, semua kelopok perlakuan  pemberian  ekstrak  kelopak rosella  merah  mampu  mencegah kondisi  stres  oksidatif  yang  diberi minyak jelantah.

## SARAN
1. Disarankan  mengkonsumsi  rosella merah,  terutama  dengan  dosis  rosella merah  6  (kelopak)  x  3  (frekuensi
konsumsi) dalam sehari untuk memberikan  efek  antioksidan  dalam tubuh dan mencegah timbulnya kondisi stres oksidatif.
2. Perlu dilakukan pengujian  lebih  lanjut terkait  pemberian  ekstrak  rosella merah  merah  dosis  810  mg/kg  bb terhadap keamanan lambung.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Rifqi,  Khaerur,  Kadarwati,  S.,
Wahyuni,  S.,  (2012)  Preparasi, Karakteristik, dan Uji Aktivitas Ni- Mo/Zeolit  Alam  dalam  Proses Catalytc Cracking Jelantah Menjadi  Biogasoline.  Indonesian Journal  of  Chemical  Science  No. ISSN No 2252-6951. Kimia FMIPA Universitas Negeri Semarang. 2. Purbo  Kayun,  Saraswati.,  (2007) Kajian Strategi Pengembangan
Industri Biodiesel Berbasis Minyak Jelantah  di  Indonesia.  Bogor:
Penerbit IPB
3. Suleeman,  E.  dan  Sulastri,  E., (2006) Jajanan  Favorit  Rumah Tangga  di  Indonesia  Mengandung Zat  Berbahaya .  Insan  Hitawasana Sejahtera.
4. Widayat, Suherman & Haryani, K.,
(2006)  Optimasi  Proses  Adsorbsi Minyak  Goreng  Bekas  Dengan Adsorbent  Zeolit  Alam:  Studi Pengurangan Bilangan asam.
Jurnal Teknik Gelagar , 17, 77 - 82.
5. Esa,  N.M.,  Hern,  F.S.,  Ismail,  A., and  Yee,  C.I.,  (2010)  Antioxidant Activity  in  Different  Parts  of Roselle  (Hibiscus  sabdariffa  L.) Extracts  and  Potential  Exploitation of  the  Seeds. Food  Chemistry 122
(2010) 1055-1060
6. Myers,  Ronald.  K  and  McGavin, M.  Donald.,  (2007) Pathologic Basic  of  Veterinary  Disease  4 th Edition . Mosby Elsevier Publishing Company. Illinois. 7. Jyothi P., Riyaz Najeeba, Nandakumar  G.,  Binitha  M.P., (2008) A Study of Oxidative Stress in Paucibacillary and Multibacillary Leprosy. Indian Journal of Dermatology, Venereology  and  Leprology ;  Vol. 74. No.1. pp. 80. (http://ndt.oxfordjournals.org/conte nt/24/7/2212.full). (sitasi 10 Januari 2015) 8. Novi, C, Sundah., (2008) Pembuatan  Serbuk  Effervescent
Rosella  ( Hibiscus  sabdariffa  L. ), Kajian  Konsentrasi  Maltodekstrin dan Suhu Pengeringan yang Berbeda  Terhadap  Sifat  Fisik,
Kimia,  dan  Organoleptik, skripsi . Fakultas Teknologi Pertanian,
Universitas Brawijaya. Malang.
9. Christina,  S.,  (2010) Efek  Ekstrak Kacang Tunggak (Vigna Unguiculata) terhadap Kadar Superoxide Dismutase (SOD) Serum Tikus Putih (Rattus norvegicus)  Strain  Wistar  yang Telah Diovarektomi . Skripsi. Fakultas  Kedokteran.  Universitas
Brawijaya. Malang.
Reviewer
Dr. Merryana Adriani, S.KM., M.Kes