## ISOLASI DAN PENAPISAN AKTINOMISET PENGHASIL SENYAWA ANTIMOKROB

## Gergonius Fallo 1)
1) Universitas Timor,
1) gergofallo@yahoo.com

## Abstrak
Telah dilakukan isolasi dan penapisan aktinomiset  yang mampu menghasilkan senyawa antimikroba.  Isolasi    dan  penapisan  dilakukan  di  laboratorium  Mikrobiologi  Institut  Pertanian Bogor (IPB). Isolasi dilakukan dengan metode pengenceran berseri dan disebar pada media HV agar.  Dari  hasil  isolasi  diperoleh  total  isolat  sebanyak    6  isolat.  Setelah  dilakukan  penapisan diperoleh 3 isolat  yang mampu  menghambat bakteri patogen E. coli , S. aureus , dan cendawan patogen Aspergillus sp, Penicillium sp , dan Fusarium sp.  Hasil  uji  antagonis    isolat  AK1 mampu  menghambat E.  coli dengan  indek  zona  hambat  tertinggi  yaitu  1.3  cm.  Sedangkan  uji antagonis  terhadap  cendawan  patogen  isolat  AK2  mampu  menghambat Penicillium sp  dengan indek zona hambat tertinggi yaitu 1.7 cm. Isolat AK1 dan AK2 merupakan isolat yang potensial sebagai  penghasil  senyawa  antimikrob.  Hasil  identifikasi  koloni,  isolat  AK1  warna  koloninya kuning  putih  dengan  karakteristi  koloni  rata  dan  tidak  berlendir.  Sedangkan  isolat  AK2  warna koloninya putih gelap dengan karakteristik koloninya rata dan tidak berlendir.
Kata kunci : Aktinomiset, penapisan, antibiotik, mikroba patogen

## Abstract
Have  done  the  isolation  and  screening  aktinomiset  capable  of  produce  antimicrobial compounds.  This  isolation  and  screening  was  conducted  at  the  Laboratory  of Microbiology,Bogor Agricultural University (IPB). The insulation was done use serial dilution and  was  plated  on  media  HV  agarose.  From  the  results  of  isolation  obtained  the  total  of  6 isolates.  After  filtering  retrieved  3  isolates  are  able  to  inhibit  pathogenic  bacteria  E.  coli,  S. aureus,  and  pathogenic  fungi    i.e    Aspergillus sp .,  Penicillium sp .,  and  Fusarium sp .  isolates AK1 antagonist test results is able to inhibit  E. coli with the highest inhibitory zone index that is  1.3  cm.  While  the  test  isolates  pathogenic  against  antagonists  fungi  AK2  is  able  to  inhibit Penicillium  sp  with  the  highest inhibitory zones  namely  index  1.7  cm.  Isolates  AK1    and  AK2 potential is as a producer of antimikrob compounds. The results colony identification, the color of AK1  isolates  is  white yellow  with the characteristics of the colony flat and not slimy. While the  color  of  AK2  isolates    is  dark  white  with  the  characteristic  of  the  colonies  is  flat  and  not slimy.
Keywords : Aktinomiset, screening of microbial pathogens, antibiotics

## 1. Pendahuluan
Aktinomiset  merupakan  kelompok  bakteri  yang  terdistribusi  luas  di  tanah,  serasah,  air dan  sumber-sumber  alami  yang  lain  bahkan  di  lingkungan  yang  ekstrim  sekalipun.  Bakteri aktonomiset  dikelompokkan  ke  dalam  bakteri  Gram  positif,  memiliki  kandungan  Guanin  (G) dan  Citosin  (C)  yang  tinggi  di  dalam  DNA-nya  (>55%)  dan  dibandingkan  dengan  kelompok bakteri  lain  mempunyai  perbedaan  yang  istimewa  yaitu  mengalami  pembelahan  morfologis yang kompleks dan menghasilkan berbagai produk senyawa bioaktif (Hamdali et al . 2008). Keberadaan  aktinomiset  di  tanah  memiliki  peran  penting  dalam  membantu  proses dekomposisi  bahan-bahan  organik  kompleks  seperti  lignin,  lignoselulosa  dan  bahan  berpati. Selain  itu  aktinomisetes  melindungi  akar  tanaman  dari  serangan  infeksi  cendawan  patogen disebabkan  oleh  kemampuannya  menghasilkan  antibiotik  dan  enzim-enzim  ekstraseluler  yang merombak dinding sel cendawan patogen. Hingga saat ini sebanyak 70% antibiotik yang telah diketahui  berasal    dari  genus Streptomyces dan  Micromonospora  (Berdy  dan  Janos  2005), diikuti dengan bakteri selain aktinomisetes  (11%),  fungi (23%) dan mikroalga (1%).
Aktinomiset,  terutama  genus Streptomyces ,    mampu    mensintesis  metabolit  sekunder seperti antibiotika, herbisida, pestisida  dan  anti-parasit  (Oskay et al .  2004). Upaya pencarian dan pengembangan senyawa bioaktif aktinomisetes isolat lokal Indonesia telah dilakukan sejak tahun  2003  oleh  Pusat  Penelitian  Bioteknologi,  Lembaga  Ilmu  Pengetahuan  Indonesia  (LIPI). Pencarian dilakukan dengan  mengisolasi aktinomisetes dari tanah dan serasah dari kebun raya serta daerah lain di Indonesia. Total isolat aktinomiset yang telah diisolasi dari beberapa daerah di  Indonesia  dari  tahun  2003  sampai  dengan  2008  yaitu  sekitar  3193  isolat.  Oleh  karena  itu, isolasi  mikroba  seperti  aktinomisetes  yang  mampu  menghasilkan  senyawa  bioaktif  diperlukan sebagai dasar karakterisasi
2. Kajian Teori
2.1 Aktinomisat
Berdasarkan  klasifikasinya,    aktinomiset  termasuk    dalam  kerajaan  Bacteria    di  kelas Schizomycetes,  subkelas  Actinobacteridae,  ordo  Actinomycetales  yang  dikelompokkan    lagi menjadi    13  subordo    yang  terdiri  dari  48    famili    dengan  219  genus    (Zhi    et  al.    2009). Kelompok bakteri ini merupakan kelompok mikroorganisme yang mampu mendegradasi bahan organik  tanah  yang  kompleks.  Aktinomisetes    juga  merupakan  sumber  utama  penghasil antibiotika.    Genus  aktinomisetes    yang  paling  banyak  dan  terkenal  menghasilkan  antibiotika yaitu  genus  Streptomyces  yang  menghasilkan  streptomisin  sebagai  obat  anti-tuberkulosis (Pramudhita 2007).
Klasifikasi aktinomisetes menurut Zhi et al. (2009) adalah: Kingdom : Bacteria Filum : Actinobacteria Kelas : Schizomycetes Subkelas : Actinobacteridae Ordo : Actinomycetales
Aktinomiset  termasuk    kelompok  bakteri  Gram  positif,  memiliki  filamen,  pleomorfisme dan tumbuh dalam koloni bercabang-cabang luas dengan hifa dasar yang pendek  dan  sempit serta    miselium  yang  berdiameter  kecil    berukuran  0.05-2  μm  (Dindal  1990).  Bentuk  koloni aktinomisetes  bulat,    elevasi  timbul  dan  cembung,  tepian  rata  dan  tidak  beraturan  serta permukaan  bertepung,  licin,  kasar,  atau  keriput.  Warna  koloninya  juga  bermacam-macam, bahkan  ada  koloni  yang  dapat  mengubah  warna  medium  serta  menghasilkan  bau  menyerupai tanah yang disebut geomisin (Indriasari 1998).
Aktinomisetes  umumnya  bersifat  aerob,  namun  ada  beberapa  famili  yang  dapat  tumbuh secara  anaerob  seperti    beberapa  spesies  dari    famili  Actinomycetaceae,  Propionibactericeae,
dan  Sporichthceae  (Miyadoh  dan  Otoguro  2004).    Aktinomisetes    umumnya    ditemukan  pada substrat alam, seperti tanah,  air (Ambarwati  dan  Gama 2009),  kompos, danau, lumpur, debu, serasah  (Debananda et al.  2009),  bahkan di lingkungan yang ekstrim  sekalipun (Hamdali  et al.  2008). Keragaman dan jenis  aktinomisetes  sangat dipengaruhi oleh faktor  kimia, fisika dan biologi  lingkungan  di  sekitarnya.  Faktor  krusial  dalam  menemukan  jenis  aktinomisetes    baru yang    memiliki  senyawa  metabolit  antimikrobial  dilakukan  melalui    identifikasi  lingkungan ekologi  baru.  Lingkungan  ekologi  baru  diantaranya  adalah  lingkungan  ekstrim  seperti  gurun pasir,  dasar  lautan,  daerah  es  dan  daerah  hutan  hujan  tropis  (Saadoun    dan    Gharaibeh  2003). Khusus  untuk  daerah  hutan  hujan  tropis,  merupakan  target  lingkungan  ekologi  yang  sangat menarik  dalam  ekplorasi    aktinomisetes    penghasil    senyawa  metabolit  tertentu.    Hutan  hujan tropis sangat memungkinkan ditemukannya keragaman dan populasi  aktinomisetes  yang tinggi dan membuka peluang besar untuk memperoleh metabolit baru (Nurkanto et al. 2010).

## 2.2 Antibiotik
Menurut  Setyaningsih  (2004),  antibiotika  sendiri  merupakan  substansi  yang  dihasilkan oleh  organisme  tertentu  yang  memiliki  toksisitas  selektif  terhadap  satu  atau  beberapa  mikroba tujuan.    Antibakteri    adalah    senyawa  kimia    yang  dapat  membunuh  atau  menghambat pertumbuhan bakteri.  Toksisistas ini relatif lemah terhadap inangnya yaitu manusia, hewan dan tumbuhan  (Sudirman  1996).  Menurut  toksisitasnya,  antibiotika  dibedakan  menjadi bakteriostatik  (menghambat  pertumbuhan  mikroorganisme)  dan  bakterisidal  (membunuh mikroorganisme) (Pelczar dan Chan 1986).
Menurut Ganiswara (1995), suatu senyawa digolongkan antibiotik jika:
a. Produk metabolisme (meskipun dapat ditiru secara sintesis kimia),
b. Produk sintetik dengan struktur serupa dengan antibiotik di alam,
c. Mengantagoniskan  pertumbuhan  atau  kelangsungan  hidup  satu  jenis    atau  lebih mikroorganisme,
d. Efektif dalam kadar rendah.
Ruang lingkup bakteri yang dapat dipengaruhi oleh antibiotika disebut dengan spektrum aksi  antibiotika,  yang  terbagi  menjadi  3  bagian.    Pertama,  antibiotika  spektrum  luas  (broad spectrum)  yaitu    senyawa    antibiotika    yang    dapat  menghambat  berbagai  macam  mikroba. Kedua,  antibiotika  berspektrum  terbatas  (limited  spectrum)  apabila  zat  antibiotika  tersebut efektif menghambat organisme tunggal atau  penyakit tertentu.  Ketiga, antibiotika berspektrum sempit (narrow spectrum)  yang hanya efektif  menghambat sebagian bakteri  Gram negatif  atau bakteri Gram positif (Todar 2011).
Senyawa  antibiotika  dapat  bekerja  dalam  beberapa  cara  (Sullia  1998),  antara  lain:  1) merusak  dinding  sel  yang  mengakibatkansel  lisis  atau  menghambat  pembentukan  komponen dinding  sel  pada  sel  yang  sedang  tumbuh;  2)  mengubah  permeabilitas  membran  sitoplasma sehingga menyebabkan kebocoran sel; 3) menghambat sintesis protein, 4) menghambat sintesis asam nukleat, dan 5) menghambat enzim di dalam sel.

## 3. Metode Penelitian

## 3.1 Waktu dan Lokasi Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan dalam dua tahap.  Tahap pertama pengambilan sampel tanah di perkebunan singkong Fakultas Perikanan Institut Pertanian Bogor (IPB) pada bulan  Februari 2015  dan  tahap kedua pengerjaan isolasi  dan uji antagonis di Laboratorium Mikrobiologi pada bulan Februari-Maret 2015.
3.2 Prosedur Kerja
3.2.1 Isolasi Aktinomiset
Metode pengambilan sampel tanah dilakukan dengan cara mengambil sampel tanah pada ke  dalaman  10-20  cm.  Sampel  tanah  yang  diambil  merupakan  sampel  komposit,  kemudian
dimasukan dalam wadah plastik gelap berlabel. Sebanyak 1 gram tanah dimasukkan ke dalam 9 ml  akuades  steril  dan  dilakukan  homogenisasi  selama  30  menit.  Pengenceran  serial  dilakukan dan pada pengenceran 10-3 dan 10-4 diambil 0.1 ml untuk dilakukan pelempengan pada media HV agar. Biakan kemudian diinkubasi pada suhu ruang selama 7 hari.

## 3.2.2 Pemurnian koloni aktinomiset dan pengamatan koloni
Koloni aktinomiset hasil isolasi yang tumbuh kemudian diamati secara makroskopis dan dideskripsikan  secara  morfologi.  Kemudian  memilih  koloni  yang  tumbuh  dengan  baik  dan berbeda secara morfologi koloni untuk dimurnikan dengan menggunakan tusuk gigi steril pada media ISP kemudian di inkubasi pada suhu ruang selama 7 hari.

## 3.2.3 Uji antagonis terhadap bakteri patogen
Uji  antagonis  dilakukan  dengan  menggunakan  3  koloni  aktinomiset  terhadap  bakteri target  E.  coli  dan  Staphylococus  aureus.  Uji  ini  dilakukan  dengan  pelempengan  koloni aktinomiset sebesar sedotan pada media NA yang telah tercampur  dengan bakteri  uji (24 jam) sebanyak 2 ulangan. Biakan kemudian diinkubasi pada suhu ruang selama 7 hari.

## 3.2.4 Uji antagonis aktinomoset terhadap cendawan patogen
Uji  antagonis  langsung  3  koloni  aktinomiset  terhadap  Trichoderma  sp.,  Fusarium  sp. dilakukan dengan pelempengan koloni cendawan uji sebesar pelubang gabus pada tengah media PDA. Isolate aktinomiset diletakkan sejauh 2 cm dari titik tengah sebagai tempat cendawan uji. Biakan kemudian diinkubasi pada suhu ruang selama 7 hari.

## 4. Hasil Dan Pembahasan

## 4.1 Isolasi Aktinomiset
Hasil isolasi  aktinomiset pada tanah perkebunan diperoleh 6 isolat. Ke-6 isolat sebagian besar penampakan koloni aktinomiset berwarna putih dengan bercak/serbuk putih pada bagian atasnya.  Koloni  yang  tumbuh  berada  di  bagian  permukaan  agar  HV,  rata-rata  diameter berukuran 0.2 cm dan koloni terbesar berukuran 0.4 cm  (gambar 1).
Gambar 4.1  Hasil pengenceran serial isolasi aktinomiset. (A) konsentrasi pengenceran 10 -4 dan (B) konsentrasi pengenceran 10 -5 .
Menurut Rao (1994), banyaknya kelompok aktinomiset dalam suatu area tergantung pada tipe  tanah  (karakteristik  fisik,  bahan  organik,  dan  pH  lingkungan)  karena  melimpahnya  bahan organik yang terdekomposisi dalam lingkungan dapat meningkatkan jumlah aktinomiset.

## 4.2 Pemurnian Koloni Aktinomiset Dan Pengamatan Koloni
Koloni aktinomiset yang muncul kemudian dipurifikasi pada media ISP2 untuk dilakukan observasi terhadap morfologi koloni dan pigmentasinya (Tabel 1). Aktinomiset dapat dibedakan
A
B Koloni
dari  bakteri  lain  dengan  mudah  dengan  melihat  bentuk  koloninya  di  medium  padat.  Koloni Aktinomiset nampak keras seperti tumbuh akar di dalam agar-agar (Gambar  2).
Tabel 1 keragaman koloni isolat aktinomiset dan warna koloninya
Kode
Isolat Warna Koloni Karakteristik AK 1 Kuning putih Rata, tidak berlendir AK 2 Putih gelap Rata, tidak berlendir AK 3 Putih Rata, tidak berlendir AK 4 Putih kecoklatan Rata, tidak berlendir AK 5 Putih pucat Licin, berlendir AK 6 Putih kekuningan Licin, berlendir AK 7 Kuning oranye Rata, tidak berlendir AK 8 Kuning kecoklatan Rata, tidak berlendir AK 9 Putih Rata, tidak berlendir AK 10 Putih kehijauan Rata, tidak berlendir AK 11 Putih coklat Licin, berlendir AK 12 Putih pucat Licin, berlendir AK 13 Coklat Rata, tidak berlendir AK 14 Putih coklat Licin, berlendir

## 4.3 Hasil uji antagonis terhadap bakteri patogen
Sebanyak  3  isolat  kemudian  ditumbuhkan  pada  media  uji  antagonis  terhadap  bakteri patogen E. coly dan S. aureus. Hasil uji  menunjukkan bahwa terdapat aktivitas penghambatan terhadap bakteri patogen dengan indeks zona hambat bervariatif (Tabel 2), dan hasil uji adanya zona bening terlihat pada gambar 3.
Bakteri uji Isolat aktinimiset AK1 AK2 AK3 E. coly 1.3 0.4 0.7 S. aureus 0.6 0.5 0
1 9 10 11 12 13 14
Gambar 4.2  Hasil purifikasi kedua isolat aktinomiset pada media ISP.
ISSN Online   : 2541-1942
Gambar 4.3 Hasil uji antagonis 3 koloni aktinomiset terhadap E. coli (A) dan S. aureus (B).
Lestari  (2006)  melaporkan  bahwa  isolat  Streptomyces  spp.  yang  diisolasi  dari  tanah  di daerah  Sukabumi,  Kepulauan  Seribu,  Cipanas,  dan  Kalimantan  Timur  mampu  menghasilkan senyawa  antibakteri  yang  mampu  menghambat  pertumbuhan  bakteri  patogen  seperti  Bacillus subtilis, dan Xanthomonas axonopodis. Kemampuan aktinomiset dalam menghasilkan senyawa antibiotik sangat ditentukan oleh sumber nutrisi yang tersedia (Gesheva et al. 2005).

## 4.4 Hasil uji antagonis terhadap cendawan patogen
Hasil  uji  menunjukkan  adanya  aktivitas    penghambatan  terhadap  cendawan  uji.  Miselia Aspergillus sp, Penicillium sp, dan Fusarium sp  yang mengarah ke isolat aktinomiset uji rata- rata terhenti pada jarak ± 2mm (Tabel 3; Gambarl 4). Sehingga dapat diasumsikan bahwa isolat uji aktinomiset menghasilkan senyawa antibiotik yang menghambat pertumbuhan cendawan uji.
Tabel 3 indeks zona bening isolat-isolat aktinomiset terhadap cendawan uji
Bakteri uji Isolat aktinomiset AK1 AK2 AK3 Penicillium sp . 1.4 1.7 1 Fusarium sp. 1.2 1 1 Aspergillus sp. 0.3 0.6 0.6
Zona   bening 1 3 2 2 3 1 A B
Penghambatan merupakan salah satu parameter penting untuk mengevaluasi kinerja suatu mikroba dalam kultur Secara umum, ketiga isolat yang diujikan memiliki zona hambat terhadap pertumbuhan cendawan uji. Patil et al. (2011) melaporkan bahwa aktinomiset dapat digunakan sebagai agen hayati untuk melindungi tomat dari serangan Rhizoctonia solani. Antibiotik yang dihasilkan  oleh  aktinomiset  diantaranya  ialah  kelompok  beta-lactams,  polyethers,  nonpolyenic macrolides  and  azalomycin  B  (Gesheva  2002).  Jayasinghe  dan  Parkinson  (2008)  melaporkan bahwa aktinomiset asal tanah memiliki kemampuan bervariasi dalam menghambat Penicillium, Mortiella, dan Mucor.  Kumar et al. (2010) menjelaskan mengenai alasan memilih aktinomiset sebagai  sumber  antibiotik.  Alasan  tersebut  adalah  aktinomiset  mampu  menghasilkan  senyawa bioaktif  penting  yang  berhasil  digunakan  dalam  berbagai  bidang.  Aktinomiset  juga menghasilkan 80% dari total antibiotik yang digunakan di dunia.

## 5. Penutup 5.1 Simpulan
Sebanyak  enam  isolat  aktinomiset  dari  tanah  perkebunan  singkong  Institut  Pertanian Bogor  (IPB)  dapat menghasilkan senyawa bioaktif yang berpotensi  sebagai antimikroba. Hasil uji antagonis terhadap bakteri patogen E. coly dan S. aureus, yang indeks  zona hambat tertinggi dihasilkan isolat AK1  sebesar  1.3 cm terhadap bakteri patogen uji E.coly. Selanjutnya hasil uji antagonis  terhadap  cendawan  patogen  Aspergillus  sp,  Penicillium  sp,  dan  Fusarium  sp  yang indeks  zona  hambat  tertinggi  dihasilkan  oleh  isolat  AK2  terhadap  cendawan  patogen  uji Penicillium sp. sebesar 1.7 cm.
Gambar 4.4 Hasil uji antagonis isolat aktinomiset dengan  3 cendawan
A  :  Uji  antagonis  aktinomiset
dengan Fusarium sp.
B  :  Uji  antagonis  aktinomiset dengan Aspergillus sp.
C  :  Uji  antagonis  aktinomiset dengan Penicillium sp. A B C D

## 5.2 Saran
Bagi  peneliti  mikroba  khususnya  aktinomiset  diharapkan  menemukan  antibiotik  yang sesuai  terhadap  patogen.  Oleh  karena  itu,  di  era  yang  semakin  berkembang  ini  diperlukan pendekatan  baru  dalam  memanen  antibiotik  dari  suatu  mikroba.  Salah  satu  pendekatan  baru yang  dapat  dilakukan  adalah  dengan  mengisolasi  mikroba  dari  lingkungan  ekstrim  atau lingkungan yang belum banyak studi mengenainya.

## DAFTAR PUSTAKA
Ambarwati,  Gama,  A.T.    2009.  Isolasi  aktinomisetes  dari  tanah  sawah  sebagai  penghasil antibiotik. J  Penel Sains Teknol . 10 (2): 101-111. Berdy, Janos. 2005. Bioactive Microbial Metabolites (review article). J.Antibiot. 58(1):1-26
Debananda,  Ningthoujam,  S.,  Sanasam,    S.,  Nimaichand,S.  2009.  Screening  of  actinomycete isolates  from  niche  habitats  in  manipur  for  antibiotic  activity. J  Biochem  Biotechnol .  5 (4): 221-225.
Dindal, D.L. 1990. Soil Biology Guide. Kanada (CA) : J Willey. Ganiswara,    S.G.    1995. Farmakologi  dan  Terapi .    Edisi  IV.    Jakarta    (ID):  Fakultas Kedokteran UI.
Gesheva,  V.  2005.  Rhizosphere  microflora  of  some  citrus  as  a  source  of  antagonistic atinomycetes. European J of Soil Biol 38:85-88.
Gesheva  V,  Ivanova,  Gesheva  R  .2005.  Effects  of  nutrients  on  the  production  of  AK-111-81 macrolide antibiotic by Streptomyces hygroscopicus . Microb Research .160 243-248.
Hamdali,  H.,  Bouizgarne,  B.,  Hafidi,  M.,  Lebrihi,  A.,  Virolle,  M.J,  Ouhdouch,  Y.  2008. Screening  for  rock  phosphate  solubilizing    actinomycetes  from    moroccan  phosphate mines. App Soil Ecol . 38 : 12-19.
Indriasari,  V.  1998.  Eksplorasi  Aktinomisetes  dari  sedimen  ekosistem  air  hitam  serta  uji  daya hambatnya  terhadap    Staphylococcus  aureusdan Escherichia  coli KCAM  11823 [internet]. [diakses pada tanggal 16 Februari 2016.
Jayasinghe,  B.A.T.D.,  Parkinson,  D.  2008.  Actinomycetes  as  antagonists  of  litter  decomposer fungi. Applied soil ecology 38 : 109-118.
Kumar  N,  Singh,  R.K.,  Mishra,    S.K.,  Singh,    A.K.,  Pachouri,  U.C.  2010.  Isolation  and screening  of  soil  Actinomycetes  as  source  of  antibiotics  active  against  bacteria.
International Journal of Microbiology Research 2 (2): 12-16. Lestari,  Y.  2006.  Identification  of  indigenous Streptomyces spp.  producing  antibacterial compounds. J Mikrobiol Indones .11(2):99-101. Miyadoh,  S.,  Otoguro,  M.  2004. Workshop  on  Isolation  Methods  and  Classification  of Actinomycetes . Bogor (ID): Biotechnology Centre, LIPI. Nurkanto,  A.,  Listyaningsih,  F.,  Julistiono,  H.,  Agusta,  A.  2010.  Eksplorasi  Keanekaragaman Aktinomisetes Tanah Ternate Sebagai Sumber Antibiotik. J  Biol Indones . 6 (3): 325-339. Oskay,  M.,  Tamer,  U.,  Azeri,  C.  2004.  Antibacterial  activity  of  same  actinomycetes  isolated from farming soils of turkey. Af J Biotech . 3(9): 441-446.
Patil,  H.J,  Srivastava,  A.K,  Singh,  D.P,  Chaudhari,  B.L,  Arora,  D.K.  2011.  Actinomycetes mediated  bichemical  responses  in  tomato  ( Solanum  lycopersicum )  enhances bioprotection againts Rhizoctonia solani . Crop Prot .30:1269-1273.
Pelczar,  M.J,  Chan,  E.C.S.,  1986. Dasar-dasar  Mikrobiologi .  Hadioetomo  RS,  Imas  T, Tjitrosomo SS, Angka SL, Penerjemah. Jakarta  (ID): UI-Pr.  Terjemahan dari: Elements of Microbiology.
Pramudhita,  V.G.  2007. Seleksi  isolat  aktinomisetes  penghasil  protein  antibakteri [skripsi]. Bogor  (ID):  Program Studi Biokimia-Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Institut Pertanian Bogor.
Rao    NS.  1994. Mikroorganisme  Tanah  dan  Pertumbuhan  Tanaman .  Ed-2.  Jakarta  (ID):  UI- Press.
Saadoun,  I.,  Gharaibeh,  R.  2003.  The  Streptomyces  flora  of  Badia  region  of  Jordan  and  its potential as a source of antibiotic-resistant bacteria. J  Arid Environ . 53: 365-371.
Setyaningsih, I.  2004. Resistansi bakteri dan antibiotik alami dari laut [Internet]. [diakses pada tanggal 17 Februari 2016]. Tersedia pada: http://tumoutou.net/pps702.9145/Iriani_setyaningsih.pdf.2004 .
Sullia, S.B, Shantharam, S. 1998. General Microbiology .  New Hampshire (US): Science. Sudirman, L.M. 1996. Bioteknologi senyawa antimikroba . Di dalam:  seminar   berkala PERMI cabang Bogor. Bogor  (ID): Laboratorium  Mikologi-FMIPA dan PAU Ilmu Hayat IPB. Todar, K. 2011. Staphylococcus aureus and staphylococcal disease [Internet]. [diakses pada tanggal 17 Februari 2016]. Tersedia pada: http://www.textbookofbacteriology.net/staph.html .
Zhi,  X.Y,  Li,  W.J,  Stackebrandt,  E.  2009.  An  update  of  the  structure  and  16S  rRNA  gene sequence-based  definition of  higher ranks  of  the  class  Actinobacteria,  with  the proposal of  two  new  suborders  and  four  new  families  and  emended  descriptions  of  the  existing higher taxa. Int J Syst Evol Microbiol . 59:589–608.