## PENDAHULUAN
Kepulauan  Riau  merupakan  salah  satu  Provinsi  di Indonesia  yang  sebagian  besar  wilayahnya  adalah
daerah  Kepulauan.  Kepulauan  Riau  terdiri  dari  pulau- pulau    kecil    sebanyak    1.796    buah    yang  dihuni penduduk  sekitar  394  buah  mencakup  Kabupaten Karimun.  Kabupaten  Karimun  memiliki  lautan  dengan

## AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK  BRONOK ( Acaudina molpadioides)

## TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI
Staphylococcus aureus dan Escherichia coli

## Antibacterial Activity Of Bronoced Extract (Acaudina Molpadioides) Against The Growth
Of Staphylococcus Aureus And Escherichia Coli Bacteria
Suhaera 1
Aprilya Sri Rachmayanti 2*
Nadya Aoliyaninda 3
*1,2,3 Institut Kesehatan Mitra Bunda 1, Kota Batam, Kepulauan Riau,
Indonesia
*email: aprilyasrirachmayanti@gmail.com

## Abstrak
Bronok  ( Acaudina  molpadioides) merupakan    jenis  biota    laut  dari filum Echinodermata kelas Holothuroidea yang  secara  empiris  dapat  meningkatkan stamina dan memberikan efek positif untuk kesehatan . Salah satu penyakit infeksi seperti  diare    disebabkan  oleh  bakteri Escherichia  coli dan Staphylococcus aureus yang  masih  menjadi  masalah  utama  dalam  kesehatan  masyarakat  serta berpotensi  mengakibatkan  kematian.  Sebagian  besar  bakteri  ini  telah  mengalami resisten terhadap antibiotik. Penelitian ini bertujuan untuk  mengetahui aktivitas antibakteri ekstrak bronok (Acaudina molpadioides) terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus  aureus dan Escherichia  coli .  Selain  itu  penelitian  ini  menggunakan metode difusi cakram dengan konsentrasi 25%, 50% dan 75% dengan sampel yang digunakan yaitu ekstrak bronok. Hasil diameter zona hambat menunjukkan bahwa ekstrak metanol mampu menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dengan diameter rata-rata 4,1 mm, 5,3 mm, dan 5,8 mm, ekstrak etil asetat yaitu 4,7 mm, 6,2 mm, dan 15,2 mm. Pada ekstrak metanol menunjukkan daya hambat terhadap bakteri Escherichia coli dengan diameter rata-rata yaitu 3,7 mm, 4,5mm, dan  5 mm . Hasil  penelitian  ekstrak  bronok (Acaudina  molpadioides) memiliki aktivitas antibakteri terhadap bakteri Staphylococcus aureus pada ekstrak metanol dan  etil  asetat.  Pada  ekstrak  metanol memiliki  aktivitas  antibakteri  terhadap bakteri Escherichia  coli .  Dengan  melihat  zona hambat  dari  masing-masing pelarut dimana  semakin  besar  zona  hambatnya  maka  semakin  kuat  aktivitas antibakterinya .

## Kata Kunci:
Escherecia coli Staphylococcus aureus Bronok (acaudina molpadioides) Difus cakram Ekstraksi
Keywords :
Escherecia coli
Staphylococcus aureus Bronok (acaudina molpadioides) Diffusion disk
Extraction

## Abstract
Bronok (Acaudina molpadioides) is a type of marine biota of the phylum Echinoderms class Holothuroidea that can empirically increase stamina and have positive effects on health. One of the infectious diseases such as diarrhea is caused by Escherichia coli and Staphylococcus  aureus  bacteria  which  are  still  a  major  problem  in  public  health  and have the potential to cause death. Most of these bacteria have developed resistance to antibiotics    This  study  aims  to  determine  the  antibacterial  activity  of  extracts  of bronchus  (Acaudina  molpadioides)  against  the  growth  of  Staphylococcus  aureus  and Escherichia  coli  bacteria.  In  addition,  this  study  uses  the  disc  diffusion  method  with concentrations  of  25%,  50%  and  75%  with  the  sample  used  is  bronchoconstriction extract. The results of the bland zone diameter showed that methanol extract was able to inhibit the growth of Staphylococcus aureus bacteria with an average diameter of 4.1 mm, 5.3 mm, and 5.8 mm, ethyl acetate extract which is 4.7 mm, 6.2 mm, and 15.2 mm. Methanol extract showed resistance to Escherichia  coli bacteria with an average diameter  of  3.7  mm,  4.5mm,  and  5  mm.  The  results  of  the  bronok  extract  study (Acaudina  molpadioides)  had  antibacterial  activity  against  Staphylococcus  aureus bacteria  in  methanol  and  ethyl  acetate  extracts.  Methanol  extract  has  antibacterial activity against Escherichia coli bacteria. By looking at the inhibition zone of each solvent where the larger the inhibition zone, the stronger the antibacterial activity.
©  year  The  Authors.  Published  by  Institute  for  Research  and  Community  Services  Universitas  Muhammadiyah Palangkaraya. This is Open Access article under the CC-BY-SA License (http://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0/). DOI: https://doi.org/10.33084/jsm.vxix.xxx .
berbagai  spesies  biota  laut  yang  melimpah,  namun masih  banyak  yang  belum  bisa  dimanfaatkan  secara optimal  salah  satunya  adalah  bronok  sehingga  belum bisa menjadi komoditi yang bernilai tinggi. (Syah et al ., 2019).
Bronok ( Acaudina molpadioides) adalah  jenis biota  laut dari filum  Echinodermata kelas Holothuroidea seperti teripang  yang  biasa  hidup  di  kawasan  pesisir  pantai yang  berlumpur  dan  bergelombang.  Bronok  ( Acaudina molpadioides) sering  dikonsumsi  secara  mentah  oleh masyarakat  melayu  dalam  bentuk  lalapan,  bahkan bronok hanya  dijadikan  sebagai umpan  nelayan untuk menangkap ikan, sehingga bronok belum bisa  diperjual belikan  di  pasaran  karena  banyak  masyarakat  umum yang  belum  mengetahui  akan  manfaatnya.  Di Kabupaten  Karimun  biota  laut  ini  secara  empiris diyakini  dapat  meningkatkan  stamina  dan  memberikan efek positif untuk kesehatan bagi tubuh manusia. (Syah et al., 2019).
Infeksi yang sering terjadi yaitu infeksi yang disebabkan oleh  bakteri Staphylococcus  aureus dan Escherichia  coli .
Beberapa  jenis  penyakit  yang  dapat  disebabkan  oleh Staphylococcus  aureus adalah  mastitis,  dermatitis (inflamasi  kulit),  infeksi  saluran  pernafasan,  impetigo, abses,  sindrom  syok  toksik,  dan  keracunan  makanan dengan  gejala seperti mual, muntah, dan diare  (Rasyid et al ., 2000).
Menurut penelitian yang telah dilakukan oleh  (Syah et al., 2019),  Hewan  bronok  ini  memiliki  kandungan vitamin  A,  vitamin  B 12, fosfor,  kalsium,  kalium  dan mineral.  Berdasarkan  penelitian  yang  telah  dilakukan oleh  (Li et  al .,  2020)  bronok  memiliki  kandungan    zat bioaktif,  seperti  kolagen,  saponin,  dan  polisakarida, kandungan  dari  bronok  inilah  seperti  saponin  yang melatarbelakangi  peneliti  untuk  melakukan  penelitian ini karena parameter untuk aktivitas antibakteri adalah saponin
Tujuan  penelitian  ini  untuk  mengetahui  mengenai aktivitas  antibakteri  ekstrak  bronok  ( Acaudina molpadioides) terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus  aureus dan Escherichia  coli. Adapun manfaat dalam penelitian ini adalah untuk memberikan informasi  kepada  masyarakat  sekitar  bahwa  bronok yang  sering  dikonsumsi  tidak  hanya  dapat  digunakan sebagai  lalapan  atau  umpan  ikan  tetapi  bisa  juga berfungsi sebagai antibakteri

## METODOLOGI

## Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini,  yaitu inkubator,  autoklaf,  timbangan  digital (Kenko ® ), erlenmeyer ( Pyrex iwaki ®), gelas ukur ( Pyrex iwaki ®) , botol  kaca  coklat, rotary  evaporator  (heidolph  made  in germany ® ) ,  pipet  volume  ( Pyrex ®),  pipet  tetes, corong (Pyrex  iwaki ® ) ,  tabung  reaksi (pyrex  iwaki ® ), pinset,  pipet  mikro  50 μ l,  batang  pengaduk,  cawan petri (Normax ® ), jarum ose, inkubator (memmert ® ) , kertas  cakram,  penggaris, autoclave ,  LAF  ( laminar  air flow) (magnehelic ® ),hot plate (Maspion s.302 ® ), vortex, magnetic stirrer, jangka sorong, label.
Bahan    yang  digunakan  pada  penelitian  ini  adalah Bronok (Acaudina  molpadioides) ,  biakan  murni  bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli, Nutrient Agar, metanol  (Merck®),  etil  asetat  (Merck®),  n-heksan (Merck®),  HCl  (Merck®),    reagen  mayer  (Merck®), FeCl 3 1%  (Merck®),  serbuk  magnesium  (Mg) (Merck®),  H 2 SO4  (Merck®),  BaCl2.2H2O  (Merck®), aquadest  (Mercks®),  kloramfenikol,  kertas  cakram, kertas label, aluminium foil, cotton swab.

## Prosedur Penelitian
Jenis  penelitian  ini  merupakan  jenis  penelitian experimental  laboratorium  dimana  pengambilan sampel  bronok  ( Acaudina  molpadioides) dilakukan  di Pulau  Moro,  Kabupaten  Karimun  Provinsi  Kepulauan Riau. Pengambilan  sampel  dilakukan  dengan  cara
menyelam  pada  saat  air  surut  dengan  kedalaman sekitar ± 1  meter.  Kemudian  tangan  meraba  ke  dasar lumpur  yang  menjadi  habitat bronok  ( Acaudina molpadioides). Kemudian  dilakukan  pembuatan  ekstrak bronok terlebih dahulu  dengan cara dimaserasi dengan tiga  jenis  pelarut  yakni  methanol,  etil  asetat  dan  N- heksan  selama  3  hari,  hasil  maserat  kemudian  yang didapat digabungkan dan diuapkan menggunakan rotary evaporatory sehingga  diperoleh  ekstrak  kental  bronok.
Setelah  diperoleh  ekstrak  kental  kemudian  dilakukan skrining  metabolit  sekunder  untuk  melihat  kandungan alkaloid,  saponin,  tannin,  flavonoid.  Kemudian dilakukan  uji  aktivitas  antibakteri  dan  peremajaan bakteri.
Pembuatan Larutan Mcfarland Larutan H 2 SO4 0,36 N sebanyak 99,5 mL dicampurkan dengan  larutan  BaCl2.2H2O  1,175%  sebanyak  0,5  mL dalam  erlenmeyer.  Kemudian  dikocok  hingga terbentuk  larutan  keruh.  Kekeruhan  ini  digunakan sebagai  standar  kekeruhan  suspensi  bakteri  uji. (Muljono et al ., 2016)

## Pembuatan Suspensi Bakteri
Bakteri  uji  yang  telah  diinokulasi  diambil  dengan menggunakan  kawat  ose  steril  lalu  disuspensikan kedalam  tabung  yang  berisi  2  mL  larutan  NaCl  0,9% hingga di peroleh kekeruhan yang sama dengan standar kekeruhan  larutan  Mc.  Farland.  Perlakuan  yang  sama dilakukan pada setiap jenis bakteri uji.  (Muljono et al ., 2016)

## Uji Aktivitas Antibakteri
Penelitian  ini  menggunakan  metode  difusi  kertas cakram.  Uji  aktivitas  antibakteri  menggunakan konsentrasi ekstrak yaitu 25%, 50%, dan 75%. Kontrol positif  yang  digunakan  adalah  Kloramfenikol  dan kontrol  negatif  yang  digunakan  adalah  aquadest. Langkah  pertama  yaitu  membuat  variasi  konsentrasi ekstrak dan kontrol sesuai konsentrasi di atas. Kertas cakram  diresapkan  dalam  ekstrak.  Proses  peresapan dilakukan  dengan  cara  merendamkan  kertas  cakram
pada  ekstrak,  kontrol  positif  Kloramfenikol  dan kontrol negatif pelarut.
Langkah  kedua,  nutrient  agar  dipanaskan  hingga  larut dengan  suhu  ±40 o C,  kemudian  dituangkan  dan didinginkan ke dalam cawan petri. Larutan biakan aktif bakteri  diambil  sebanyak  50 μ L  dan  dimasukkan  ke dalam cawan petri yang berisi nutrient agar yang sudah memadat. Kertas cakram diletakkan di atas permukaan media  bakteri  menggunakan  pinset,  selanjutnya diinkubasi pada suhu 37 o C selama ±24 jam, lalu diukur zona hambatnya dengan menggunakan jangka sorong .

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  dari  penelitian  yang  dilakukan  untuk  melihat aktivitas  antibakteri  menunjukkan  bahwa  ekstrak metanol dan etil asetat bronok ( Acaudina molpadioides ) dapat menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dengan  terbentuknya  zona  hambat  disekitar cakram.  Pada  konsentrasi  ekstrak  metanol  25% diperoleh nilai rata-rata diameter zona hambat sebesar 4,1 mm, konsentrasi 50% nilai rata-rata diameter zona hambat  sebesar  5,3  mm,  sedangkan  pada  konsentrasi 75%  diperoleh  nilai  rata-rata  diameter  zona  hambat sebesar  5,8  mm.  Pada  konsentrasi  ekstrak  etil  asetat didapatkan  nilai  rata-rata  diameter  zona  hambat dengan  masing-masing  konsentrasi  yaitu  25%  sebesar 4,7  mm,  konsentrasi  50%  sebesar  6,2  mm,  dan konsentrasi  75%  sebesar  15,2  mm.  Sedangkan  pada ekstrak n-heksan tidak menghasilkan zona hambat pada setiap  konsentrasi  yang  diujikan.  Diameter  zona hambat  pada  setiap  masing-masing  ekstrak  lebih  kecil jika  dibandingkan  dengan  diameter  zona  hambat  pada setiap  masing-masing  kontrol  positif  yaitu  ekstrak metanol  sebesar 20,9 mm, etil asetat 21,4 mm dan n- heksan 20,6 mm.
Uji  aktivitas  antibakteri  yang  diperoleh  berbeda-beda terhadap  masing-masing  bakteri.  Adanya  perbedaan aktivitas  antibakteri  dapat  dipengaruhi  oleh  jumlah kandungan  metabolit  sekunder  dan  konsentrasi  yang terkandung dalam sampel serta kecepatan difusi bahan
antibakteri  dalam  medium  agar.  Semakin  tinggi konsentrasi  maka  semakin  banyak  pula  kandungan  zat aktif didalamnya sehingga memiliki laju difusi yang lebih besar (Sumiwati et al ., 2018).
Bakteri Escherichia  coli menunjukkan  adanya  zona hambat  pada  ekstrak  metanol  dengan  terbentuknya zona hambat disekitar cakram. Ekstrak metanol dengan konsentrasi  25%  diperoleh  nilai  rata-rata  diameter zona hambat sebesar mm, konsentrasi 50% sebesar 4,5 mm  dan  konsentrasi  75%  sebesar  5  mm.  Ekstrak  etil asetat  dan  n-heksan tidak  menghasilkan  zona  hambat pada  setiap  konsentrasi  yang  diujikan.  Diameter  zona hambat  pada    ekstrak  metanol  lebih  kecil  jika dibandingkan  dengan  diameter  zona  hambat  pada setiap  masing-masing  kontrol  positif  yaitu  ekstrak metanol  sebesar  26,3  mm,  ekstrak  etil  asetat  sebesar 23,7  mm,  dan  ekstrak  n-heksan  sebesar  20,8  mm. Sedangkan  pada  kontrol  negatif  yaitu  aquadest  tidak terbentuk zona hambat.
Zona  hambat  yang  terbentuk  berkaitan  dengan golongan  senyawa  metabolit  sekunder  yaitu  saponin. Hal  ini  menandakan  bahwa  senyawa  saponin  memiliki mekanisme sebagai antibakteri dengan cara menurunkan  tegangan  permukaan  dinding  sel,  dimana tegangan  permukaan  dinding  sel  bakteri  akan diturunkan  dan  permeabilitas  membran  bakteri dirusak,  Kemudian  saponin  akan  berdifusi  melalui membran  sitoplasma  sehingga  kestabilan  membran akan  terganggu  yang  menyebabkan  sitoplasma mengalami kebocoran dan keluar dari dinding sel yang mengakibatkan kematian pada sel (Sani et al ., 2014).
Senyawa  antibakteri  dari  ekstrak  metanol  dapat dikategorikan  sebagai  antibakteri  daya  hambat  lemah pada setiap konsentrasi.
Tabel  1. uji  aktivitas  abtibakteri  terhadap Staphylococcus aureus
Tabel  2. Uji  aktivitas  abtibakteri  terhadap Escherichia coli
Tanin  merupakan  senyawa  metabolit  sekunder  yang terkandung dalam ekstrak etil asetat bronok ( Acaudina molpadioides ). Tanin memiliki peran sebagai antibakteri yang  berhubungan  dengan  kemampuannya  untuk menginaktifkan  adhesin  sel  mikroba,  menginaktifkan enzim,  dan  menggangu  transport  protein  pada  lapisan dalam sel. (Rijayanti, 2014)
Berdasarkan  hasil  pengujian  bahwa  ekstrak  metanol dan  etil  asetat  bronok  ( Acaudina  molpadioides )
menunjukkan adanya aktivitas  antibakteri pada bakteri Gram positif Staphylococcus aureus. Tetapi pada ekstrak n-heksan tidak menunjukkan adanya zona hambat yang terbentuk  hal  ini  kemungkinan  dikarenakan  senyawa yang  terkandung  pada  ekstrak  n-heksan  bronok ( Acaudina  molpadioides )  tidak  dapat  menurunkan tegangan  permukaan  dinding  sel  pada  bakteri Staphylococcus  aureus seperti  kontrol  positif  sehingga tidak  berpotensi.  Uji  aktivitas  antibakteri  yang diperoleh  berbeda-beda  terhadap  masing-masing bakteri.  Adanya  perbedaan  aktivitas  antibakteri  dapat dipengaruhi oleh jumlah kandungan metabolit sekunder dan  konsentrasi  yang  terkandung  dalam  sampel  serta kecepatan difusi bahan antibakteri dalam medium agar. Semakin  tinggi  konsentrasi  maka  semakin  banyak  pula kandungan  zat  aktif  didalamnya  sehingga  memiliki  laju difusi yang lebih besar (Sumiwati et al ., 2018).
Perbedaan  zona  hambat  antara  S.  aureus  dan  E.  coli dikarenan  faktor  perbedaan  kepolaran  dari  senyawa yang  terkandung  dalam  sampel  uji.  Diduga  ekstrak bronok ( Acaudina molpadioides ) yang aktif lebih bersifat semi  polar,  sehingga  senyawa  aktif  yang  keluar  lebih banyak  bersifat  semi  polar  dan  membuat  lebih  mudah terikat  pada  dinding  sel  bakteri  Gram  positif. Sedangkan  pada  bakteri  Gram  negatif Escherichia  coli hanya dapat menghambat pada ekstrak metanol dengan kategori  lemah.  Hal  ini  sesuai  dengan  sifat  dinding  sel yang  dimiliki  bakteri  tersebut  sehingga  pada  bakteri Gram negatif lebih sukar masuk ke dalam sel.

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan, maka diperoleh  kesimpulan  sebagai  berikut.  Ekstrak  bronok ( Acaudina  molpadioides )  memiliki  aktivitas  antibakteri terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus dengan  ketiga jenis  pelarut  dengan  kategori  lemah  sampai  kuat. Sedangkan  terhadap  bakteri Escherichia  coli memiliki aktivitas antibakteri dengan kategori lemah .

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan  terima  kasih  penulis  ucapkan  kepada  Institut Kesehatan Mitra Bunda yang telah menyediakan sarana dan  prasarana  sehingga  penelitian  ini  dapat  berjalan dengan lancar .

## REFERENSI
1. Syah,  M.,  Putri,  R.  M.  S.,  &  Pratama,  G.  (2019). Craracterization  of  the  Vitamins  and  Minerals Paracaudina  australis  from  Pelawan  and . 02 (April), 39–52.
2. Li,  J.,  Li,  Y.,  Li,  Y.,  Yang,  Z.,  &  Jin,  H.  (2020). Physicochemical properties of collagen from acaudina molpadioides and its protective effects against H2O2- induced  injury  in  RAW264. 7  cells. Marine  Drugs ,
18 (7). https://doi.org/10.3390/MD18070370
3. Muljono, P., . F., & Manampiring, A. E. (2016). Uji aktivitas  antibakteri  ekstrak  daun  mayana  jantan (Coleus atropurpureus Benth) terhadap pertumbuhan bakteri Streptococcus Sp. dan Pseudomonas Sp. Jurnal
E-Biomedik , 4 (1), 164–172. https://doi.org/10.35790/ebm.4.1.2016.10860
4. Sumiwati, M., Diharmi, A., Mora, E., & Susanti, E. (2018). Dari  Perairan  Natuna  Kepulauan  Riau Coastal Sea of Riau Islands . 21 , 328–335.
5. Sani, R. N., Nisa, F. C., Andriani, R. D., & Maligan, J.  M.  (2014). Analisis  Rendemen  Dan  Skrining Fitokimia Ekstrak Etanol Mikroalga Laut Tetraselmis chuii  Yield  Analysis  and  Phytochemical  Screening Ethanol Extract of Marine Microalgae Tetraselmis chuii. Jurnal  Pangan  Dan  Agroindustri , 2 (2),  121– 126.
6. Rijayanti,  R.  P.  (2014). Uji  Aktivitas  Antibakteri Ekstrak  Etanol  Daun  Mangga  Bacang . Skripsi, Universitas Tanjungpura , 13–14.