Volume 6, No 1, Januari - Juni 2023 e-ISSN : 2598-7453 DOI: https://doi.org/10.31539/bioedusains.v6i1.5361
AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DAN ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL ADAS PAGAR ( EUPATORIUM CAPILLIFOLIUM (LAM.) SMALL)

## TERHADAP STAPHYLOCOCCUS AUREUS DAN ESCHERICHIA COLI
Feblicya Palimbunga 1 , Dwi Aditiyarini 2 , Vinsa Cantya Prakasita 3
Universitas Kristen Duta Wacana 1,2,3
dwi.aditiyarini@staff.ukdw.ac.id 2

## ABSTRAK
Tujuan  penelitian  untuk  mengkaji  secara  eksperimental  kandungan  metabolit sekunder,  aktivitas  antioksidan  dan  antibakteri  adas  pagar  terhadap S.aureus dan E.coli . Penelitian ini dilakukan melalui metode eksperimental. Metabolit sekunder diidentifikasi  melalui  skrining  fitokimia.  Aktivitas  antioksidan  diukur  melalui metode  DPPH.  Aktivitas  antibakteri  dilakukan  dengan  metode  difusi  cakram. Ekstraksi  dilakukan  melalui  maserasi  dengan  etanol  96%.  Hasil  menunjukkan kandungan flavonoid, alkaloid, tannin, saponin dan terpenoid pada ekstrak etanol adas  pagar.  Ekstrak  etanol  adas  pagar  memiliki  aktivitas  antioksidan  tinggi dengan  nilai  IC50  80,56  ppm.  Dari  potensi  antibakterinya,  ekstrak  etanol  adas pagar  mampu  menghambat  pertumbuhan  bakteri  gram  positif  Staphylococcus aureus maupun negatif Escherichia coli pada konsentrasi ekstrak adas pagar 100% dan  50%  secara  berurutan.  Simpulan  penelitian  ini  adalah  ekstrak  etanol  adas pagar  dapat  digunakan  sebagai  antioksidan  dan  antibakteri  alami  terhadap pertumbuhan S.aureus dan E.coli .
Kata Kunci: Adas Pagar, Antibakteri, Antioksidan, Ekstraksi, Metabolit

## ABSTRACT
The  purpose  of  the  study  was  to  investigate  the  presence  of  second-order metabolites and the antibacterial and antifungal activities against S. aureus and E.  coli  in  an  experimental  manner.  This  study  is  being  conducted  using  an experimental  method.  Metabolit  is  quickly  identified  by  scrining  fitokimia. Antioxidant activity was measured using the DPPH method. Antibacterial activity is carried out using the cakram diffusion method. Ekstraksi was carried out by the 96%  etanol-maseration  process.  The  results  show  that  the  extracted  etanol  adas pagar contains flavonoid, alkaloid, tanin, saponin, and terpenoid content. Ekstrak etanol  adas  pagar  has  strong  anti-oxidant  activity  with  an  IC50  of  80,56  ppm. Due to its antibacterial potential, ekstrak etanol adas pagar can kill gram-positive Staphylococcus  aureus  as  well  as  gram-negative  Escherichia  coli  bacteria  when applied in concentrations of 100% and 50%, respectively. The main finding of this study  is  that  ekstrak  etanol  adas  pagar  can  be  used  as  a  safe  antibacterial  and antifungal against the growth of S. aureus and E. coli.
Keywords: Adas Pagar, Antibacterial, Antioxidant, Extraction, Metabolite

## PENDAHULUAN
Indonesia  merupakan  salah  satu  negara  yang  memiliki  keanekaragaman hayati  yang  melimpah.  Indonesia  diketahui  termasuk  kedalam  kategori  2  setelah Brazil  sebagai  negara  tropis  dengan  sumber  tanaman  obat  terbesar  di  dunia. Terdapat 40.000 jenis tumbuhan yang ada di dunia dan terdapat 30.000 jenis yang tumbuh  di  Indonesia.  Dari  total  tanaman  obat  tersebut  diketahui  hanya  sekitar 7.500 (25%) jenis diantaranya yang berpotensi sebagai tanaman obat. Akan tetapi, hanya sekitar 1.200 jenis diantaranya  yang sudah digunakan sebagai bahan baku obat-obatan herbal (Lestari & Lagiono, 2018). Penerapan gaya hidup kembali ke alam  ( Back  to  Nature )  semakin  meningkat  di  Indonesia.  Pemanfaatan  bahan- bahan  alami  dapat  memberi  banyak  keuntungan  yang  lebih  besar.  Bahan-bahan alami dapat diolah dalam berbagai produk seperti produk kecantikan, obat-obatan herbal, pestisida alami, dan lain sebagainya yang tentunya memiliki efek samping lebih rendah, mudah dijangkau, dan relatif murah.
Hingga  saat  ini  radikal  bebas  masih  menjadi  permasalahan  dalam  bidang kesehatan,  karena  dapat  menyebabkan  berbagai  penyakit  seperti  kanker,  radang, dan  penuaan  dini.  Radikal  bebas  merupakan  senyawa  atom  yang  pada  orbit terluarnya  memiliki  satu  atau  lebih  elektron  yang  tidak  berpasangan.  Elektron tersebut  bersifat  sangat  reaktif  dan  akan  mencari  pasangannya  dengan  cara mengikat elektron yang ada disekitarnya. Radikal bebas terbentuk melalui proses metabolisme  hasil  paparan  asap  rokok,  penyinaran  sinar  UV,  makanan,  zat-zat kimia,  dan  berbagai  polutan  lainnya  (Dwimayasanti,  2018).  Reaksi  berantai radikal  bebas  dapat  diatasi  dengan  senyawa  antioksidan.  Senyawa  antioksidan bersifat stabil dan memiliki struktur molekul  yang dapat mengikat elektron tidak berpasangan pada radikal bebas (Khairun & Desty, 2018).
Selain  radikal  bebas,  timbulnya  berbagai  penyakit  juga  dapat  disebabkan oleh  bakteri-bakteri  patogen.  Kontaminasi  bakteri  patogen  dapat  terjadi  melalui makanan  dan  minuman  yang  dikonsumsi  serta  lingkungan  yang  kurang  bersih. Beberapa  contoh  bakteri  patogen  yang  sering  menyerang  manusia  adalah Staphylococcus  aureus dan Escherichia  coli. Staphylococcus  aureus dapat menyebabkan berbagai penyakit seperti infeksi pada permukaan kulit ( pioderma ), keracunan  makanan, pneumonia , mastitis ,  bisul  borok, impetigo,  osteomielitis, sindrom  syok  toksik,  meningitis,  infeksi  urogenital, dan bakteremia (Amalia  & Trimulyono,  2018). Escherichia  coli merupakan  flora  normal  pada  usus  besar yang dapat memberikan  keuntungan. Akan tetapi, pada saat tertentu seperti daya tahan tubuh sedang lemah, maka akan menjadi bakteri patogen dan menyebabkan diare, sakit kulit, dan lain sebagainya (Kardina, 2022). Saat ini, bakteri E.coli dan S.aureus diketahui  mulai  resistensi  terhadap  beberapa  produk  antibiotik.
Escherichia coli  diketahui  telah  resisten  terhadap  antibiotik  seperti  amoksisilin,
penisilin, streptomisin, dan metisilin. Pada Staphylococcus aureus diketahui mulai resisten  terhadap  meticilin  dan  ciprofloxacin  (Amalia  &  Trimulyono,  2018). Berdasarkan  uraian  tersebut,  maka  perlu  dilakukannya  upaya  pencegahan resistensi terhadap kedua bakteri tersebut, dengan menggunakan bahan baku alami berupa senyawa aktif yang terkandung dalam tanaman.
Salah  satu  tanaman  yang  diketahui  memiliki  banyak  potensi  sebagai tanaman  obat  yaitu  tanaman  dari  famili Asteraceae kelompok Eupatorium. Tanaman Eupatorium diketahui  mengandung  banyak  senyawa  aktif  seperti flavonoid,  fenolik,  dan  asetilena,  triterpenoid,  alkaloid,  serta  memiliki  aktivitas sitotoksik,  antimikroba,  antitumor,  anti  inflamasi,  dan  antioksidan.  Adas  pagar ( Eupatorium  capillifolium (Lam.)  Small)  merupakan  salah  satu  tanaman  dari kelompok Eupatorium yang  banyak  dibudidayakan  di  Indonesia.  Tanaman tersebut  memiliki  aroma  khas  yang  sangat  menyengat.  Masyarakat  umumnya menggunakan  tanaman  tersebut  sebagai  tanaman  hias.  Adas  pagar  diketahui memiliki kandungan utama senyawa minyak atsiri yaitu timol metil eter (36,3%), 2 2,5- dimethoxy-p-cymene (20,8%) dan myrcene (15,7%), serta memiliki aktivitas insektisida yang tinggi (Maryanto et al ., 2018).
Studi  mengenai  tanaman  adas  pagar  belum  banyak  dilaporkan,  terutama efek farmakologisnya. Berdasarkan informasi  yang dikaji dalam jurnal Irsyam  & Hariri  (2016)  bahwa  bagian  tanaman  adas  pagar  yang  sering  digunakan masyarakat  luar  (Amerika  utara,  dan  Florida,  dan  Kuba)  untuk  pengobatan tradisional adalah bagian daunnya (bagian atas tanaman yang masih mudah). Oleh karena  itu,  pada  penelitian  ini  peneliti  menggunakan  sampel  pada  bagian  daun untuk  mengeksplorasi  dan  menganalisis  efek  farmakologis  adas  pagar.  Beberapa pengujian  yang dilakukan dalam penelitian ini antara lain: skrining fitokimia, uji antioksidan,  dan  uji  antibakteri.  Pada  pengujian  antibakteri  penggunaan Staphylococcus aureus sebagai bakteri Gram positif dan Escherichia coli sebagai Gram  negatif.  Hasil  penelitian  ini  diharapkan  dapat  memberi  informasi  kepada masyarakat  dan  bidang  farmasi  tentang  potensi  adas  pagar  ( Eupatorium capillifolium (Lam.) Small) sehingga dapat dijadikan sebagai salah satu tanaman obat.

## METODE PENELITIAN
Penelitian ini dilakukan melalui metode eksperimental melalui 6 tahapan. Tahapan  penelitian  ini  terdiri  atas  (1)  identifikasi  dan  preparasi  adas  pagar,  (2) ekstraksi, (3) skrining fitokimia, (4) uji aktivitas antioksidan, dan (6) uji aktivitas antibakteri  ekstrak  terhadap Escherichia  coli dan Staphylococcus  aureus . Penelitian  ini  diawali  dengan  pengambilan  sampel.  Sampel  adas  pagar ( Eupatorium  capillifolium (Lam.)  Small)  diperoleh  dari  Universitas  Atma  Jaya Yogyakarta,  Kampus  II  Babarsari.  Bagian  sampel  yang  digunakan  yaitu  bagian daun  dan  batang  adas  pagar  yang  masih  muda  dengan  ukuran  10-15  cm  dari pucuk.  Sampel  dicuci  bersih  dan  dipotong-potong  kecil.  Selanjutnya
dikeringanginkan  dan  dilanjutkan  dengan  pengeringan  dengan  pengeringan  oven pada suhu 40 o C. Sampel kering dihaluskan dan ditimbang.
Tahap  selanjutnya  adalah  ekstraksi.  Ekstraksi  dilakukan  menggunakan metode maserasi. Sebanyak 600 g serbuk adas pagar dimasukkan ke dalam toples kaca dan ditambahkan 2,5 L etanol 96%. Sampel didiamkan selama 3 hari sambil diaduk.  Setelah  itu,  dilakukan  penyaringan  untuk  mendapatkan  filtrat.  Filtrat dikentalkan  melalui  evaporasi  menggunakan rotary  evaporator pada  suhu  45 o C pada  kecepatan  60  rpm  untuk  mendapatkan  ekstrak  kental.  Kemudian  dihitung persen rendemennya dengan rumus sebagai berikut :
% = ℎ ×  100%
Tahap ketiga adalah skrining fitokimia. Dalam uji flavonoid, sebanyak 1 g ekstrak dimasukkan kedalam tabung reaksi ditambahkan 10 mL air panas. Ekstrak didihkan  selama  5  menit  dan  segera  disaring  dalam  keadaan  panas.  Filtrat  yang didapatkan dimasukkan kedalam tabung reaksi sebanyak 5 mL, ditambahkan 0,1 g serbuk  Mg,  1  mL  asam  klorida  pekat,  dan  2  mL  amil  alkohol.  Larutan dihomogenkan dan dilakukan pengamatan terhadap perubahan warna yang terjadi. Jika  terbentuk  warna  kuning  hingga  merah  menunjukkan  adanya  kandungan flavonoid.
Uji alkaloid dilakukan dengan menambahkan ekstrak sebanyak 0,5 g pada 1 mL asam klorida 2 N dan 9 mL air suling dimasukkan kedalam tabung reaksi. Ekstrak  dipanaskan  selama  2  menit,  kemudian  didiamkan  hingga  dingin  lalu disaring.  Disiapkan  3  tabung  reaksi  dan  masing-masing  dimasukkan  0,5  mL filtrat.  Setelah  itu,  masing-masing  tabung  ditambahkan  reagen mayer dan dragendroff .  Larutan  divortex  dan  dilakukan  pengamatan.  Adanya  kandungan alkaloid  ditunjukkan  dengan  adanya  endapan  putih  hingga  kekuningan  pada larutan.
Uji tanin dilakukan dengan melarutkan sebanyak 5 g ekstrak pada 10 mL air suling dan disaring menggunakan kertas saring. Filtrat yang didapatkan dibagi kedalam 2 tabung, masing-masing sebanyak 3 mL. Pada tabung 1 ditambahkan 5 mL NaCl 10% dan 3 tetes gelatin 1%. Pada tabung ke-2 ditambahkan 3 tetes FeCl 3 10%. Pada tabung 1, jika terdapat endapan putih menunjukkan adanya kandungan tanin.  Pada  tabung  2  jika  terjadi  perubahan  warna  menjadi  hijau  kehitaman menunjukkan adanya kandungan tanin.
Uji  saponin  dilakukan  dengan  melarutkan  0,5  g  ekstrak  dalam  10  mL  air panas di tabung reaksi. Larutan ekstrak didinginkan kemudian divortex selama 10 detik hingga terbentuk busa. Larutan ditambahkan sebanyak 1 tetes HCl 2 N, dan diamati  ketahanan  buih.  Buih  yang  terbentuk  pada  larutan  menunjukkan  adanya kandungan saponin.
Uji  Terpenoid  dilakukan  dengan  melarutkan  ekstrak  sebanyak  0,5  g dengan  etanol dalam cawan petri dan dibiarkan  menguap hingga kering.  Ekstrak yang  telah  kering  ditambahkan  5  tetes  H 2 SO 4(p) dan  3  tetes  asam  asetat  anhidrat ( Lieberman-Bouchard ). Adanya kandungan terpenoid ditandai dengan terbentuknya warna ungu atau merah.
Tahap  keempat  adalah  pengukuran  aktivitas  antioksidan  ekstrak  etanol adas  pagar  dengan  metode  DPPH  yang  diukur  dengan microplate  reader , beberapa  perubahan  pada  variasi  konsentrasi  yang  digunakan.  Larutan  induk dibuat  dalam  1000  ppm  yaitu  sebanyak  10  mg  ekstrak  dan  10  mL  metanol  PA (pro  analysis).  Larutan  induk  kemudian  diencerkan  dengan  beberapa  variasi konsentrasi  yaitu  100  ppm,  150  ppm,  200  ppm,  250  ppm,  dan  300  ppm. Pembuatan larutan DPPH 50 ppm yaitu sebanyak 0,25 mg bubuk DPPH dan 5 mL metanol  PA.  Pada  larutan  kontrol  yaitu  100  μL  metanol  PA  dan  50  μL  larutan DPPH 50 ppm. Tahap selanjutnya adalah memasukkan sampel ke dalam 96-well clear  polystyrene  microplate .  Sebanyak  100  μL  diambil  dari  masing-masing konsentrasi larutan sampel uji dan dimasukkan kedalam 96-well clear polystyrene microplate ditambahkan  50  μL  larutan  DPPH  50  ppm.  Masing-masing  larutan sampel  uji  dan  kontrol  dibuat  dalam  3  kali  pengulangan.  Setelah  itu,  larutan diinkubasi  pada  suhu  37 o C  selama  30  menit  hingga  terjadi  perubahan  warna. Larutan sampel uji selanjutnya dilakukan pengukuran nilai absorbansinya dengan microplate  reader pada  panjang  gelombang  520  nm.  Kontrol  positif  yang digunakan  adalah  vitamin  C  yang  dibuat  dalam  beberapa  konsentrasi  yaitu  0,8 ppm, 2 ppm, 4 ppm, dan 6 ppm. Pengujian kontrol positif sama seperti pengujian sampel.  Nilai  absorbansi  yang  didapatkan  dithiung  persen  inhibisinya  dengan rumus sebagai berikut :
% ℎ = . !" #$ .%&'()# . !" # × 100%

## Ket : A = Nilai absorbansi
Hasil  perhitungan  persen  inhibisi  yang  didapatkan,  kemudian  dihitung dengan persamaan regresi linear. Sumbu x = konsentrasi sampel uji dan sumbu y =  %  inhibisi.  Selanjutnya,  dilakukan  uji  aktivitas  antibakteri.  Tahap  ini  diawali dengan  pengecatan  gram  pada  bakteri  uji  yaitu Staphylococcus  aureus dan Escherichia  coli. Pengujian  antibakteri  dilakukan  dengan  metode  difusi  cakram pada  konsentrasi  dan  kontrol  negatif  yang  digunakan.  Sampel  uji  dibuat  dalam beberapa konsentrasi yaitu 0,78%, 1,56%, 3,12%, 6,25%, 12,5%, 25%, 50%, dan 100%.  Kontrol  negatif  menggunakan  akuades  dan  kontrol  positif  menggunakan antibiotik  kloramfenikol.  Masing-masing  larutan  uji,  serta  kontrol  positif  dan negatif diteteskan pada kertas cakram. Media yang digunakan adalah media MHA ( Mueller Hinton Agar ). Media diinokulasi dengan suspensi bakteri Staphylococcus  aureus dan Escherichia  coli menggunakan cotton  swab .  Setelah itu,  kertas  cakram  yang  telah  direndam  diletakkan  pada  media  inokulum
kemudian  diinkubasi  pada  suhu  37 o C  selama  24  jam.  Aktivitas  antibakteri diamati dengan melihat terbentuknya zona bening di sekeliling cakram.
Analisis Data pada uji skrining fitokimia dianalisis secara deskriptif. Data hasil uji antioksidan dianalisis menggunakan kurva Regresi Linear. Data hasil uji antibakteri  dianalisis  dengan  analisis  statistik One  Way ANOVA  ( Analysis  Of Variance ) dan uji lanjut Duncan.

## HASIL PENELITIAN
Penelitian  ini  menghasilkan  ekstrak  etanol  adas  pagar  sebesar  1,85% dengan  berat  simplisia  sebesar  600  g.  Rendemen  menunjukkan  banyaknya  kadar senyawa aktif yang terekstrak. Nilai rendemen yang rendah dapat disebabkan oleh beberapa faktor baik dari proses ekstraksi maupun karakteristik sampel. Aktivitas farmakologis  suatu  tanaman  dipengaruhi  oleh  kandungan  fitokimianya.  Skrining fitokimia  terhadap  adas  pagar  mengidentifikasi  kandungan  flavonoid,  alkaloid, tanin, saponin dan terpenoid (Tabel 1).
Tabel 1. Fitokimia Adas Pagar
Fitokimia Larutan Pereaksi Hasil Keterangan Flavonoid Serbuk Mg, HCl (p) + Terbentuk warna merah Alkaloid Dragendrof + Terdapat endapan coklat orange Tanin Fecl 3 10% + Terbentuk warna hijau hitam Saponin HCl 2 N + Terbentuk buih Terpenoid H 2 SO 4(p), Asam asetat anhidrat + Terbentuk warna merah
Keterangan : + = ada; - = tidak ada
Metabolit  sekunder  yang  terkandung  dalam  ekstrak  etanol  adas  pagar menunjukkan  adanya  potensi  farmakologisnya.  Oleh  karena  itu,  selanjutnya dilakukan  pengukuran  aktivitas  antioksidan  dan  antibakteri  ekstrak  tersebut. Aktivitas  antioksidan  adas  pagar  ditentukan  melalui  metode  DPPH (diphenylpicrylhydrazyl).  Hasil  pengukuran  ditunjukkan  pada  Gambar  1. Kemampuan peredaman radikal bebas ditunjukkan melalui nilai % inhibisi. Hasil menunjukkan bahwa kemampuan penghambatan ekstrak etanol adas pagar dalam menangkal  radikal  bebas  meningkat  seiring  dengan  peningkatan  konsentrasi ekstrak  etanol  adas  pagar  yang  digunakan.  Nilai  IC50 (Inhibitory  concentration 50)  ekstrak  etanol  adas  pagar  sebesar  80,56  ppm.  Nilai  ini  menunjukkan kemampuan ekstrak etanol adas pagar sebagai antioksidan kuat. Akan tetapi, nilai IC50  ekstrak  etanol  adas  pagar  lebih  rendah  dibandingkan  dengan  vitamin  C sebagai kontrol positif. Nilai IC50 vitamin C yang diperoleh dalam penelitian ini sebesar 4,217 ppm.
Gambar 1. Daya Peredaman Ekstrak Adas Pagar ( Eupatorium capillifolium (Lam.) Small) terhadap Radikal Bebas DDPH.
Aktivitas  antibakteri  adas  pagar  ditentukan  melalui  metode  difusi  cakram (tes  Kirby-Bauer).  Pengujian  ini  diawali  dengan  tahap  pengecatan  gram  untuk mengkonfirmasi  bakteri  uji  yang  digunakan.  Media  selektif  yang  digunakan adalah media BPA ( Baird Parker Agar) untuk Staphylococcus aureus dan media CCA ( Chromocult Coliform Agar ) untuk Escherichia coli .
(a) Staphylococcus aureus (b) Escherichia coli Gambar 2. Penampakan (a) Staphylococcus aureus dan (b) Escherichia coli.
Tabel 2. Aktivitas Antibakteri Ekstrak Adas Pagar (Eupatorium capillifolium (Lam.) Small) Bakteri Uji Perlakuan Diameter  Zona  Hambat (mm) ± STD Kategori Daya Hambat Staphylococcus aureus Kontrol Negatif 0,00 ± 0,000 a Lemah Kontrol Positif 37,00 ± 0,000 d Sangat Kuat 0,78% 0,00 ± 0,000 a Lemah 1,56% 0,00 ± 0,000 a Lemah 3,12% 0,00 ± 0,000 a Lemah 6,25% 0,00 ± 0,000 a Lemah 12,5% 0,00 ± 0,000 a Lemah 25% 0,00 ± 0,000 a Lemah 50% 9,00 ± 0,000 b Sedang 100% 10,50 ± 0,707 c Kuat scherichia coli Kontrol Negatif 0,00 ± 0,000 a Lemah Kontrol Positif 30,00 ± 0,000 d Sangat Kuat 0,78% 0,00 ± 0,000 a Lemah 1,56% 0,00 ± 0,000 a Lemah 3,12% 0,00 ± 0,000 a Lemah 6,25% 0,00 ± 0,000 a Lemah 12,5% 7,00 ± 0,000 b Sedang 25% 7,00 ± 0,000 b Sedang 50% 8,50 ± 0,707 c Sedang 100% 8,50 ± 0,707 c Sedang
Ket:  Notasi  yang  berbeda  menunjukkan  subset  yang  berbeda  secara  nyata  berdasarkan  hasil pengujian Duncan (P>0,05).
Hasil  pewarnaan  gram  mengkonfirmasi  bahwa  bakteri  yang  digunakan dalam  pengujian  adalah Staphylococcus  aureus dan Escherichia  coli. Hal  ini ditunjukkan  dengan  morfologi  bakteri  yang  berbentuk  bulat  dan  bergerombol, serta  menghasilkan  warna  ungu  untuk Staphylococcus  aureus (Gambar  2.a). Staphylococcus  aureus merupakan  bakteri  gram  positif  yang  memiliki peptidoglikan  dalam  struktur  dinding  selnya  sehingga  mampu  mempertahankan warna  ungu  setelah  dicuci  dengan  alkohol.  Bakteri Escherichia  coli ditunjukkan dengan bentuk bakteri batang dan warna merah setelah pewarnaan gram. Bakteri ini  merupakan  gram  negatif  yang  dinding  selnya  terdiri  atas  lipid  sehingga  saat
pencucian dengan alkohol, lapisan lipid akan terlarut dan mengikat warna merah dari  safranin.  Setelah  konfirmasi  bakteri,  dilakukan  pengujian  aktivitas antibakteri.  Kemampuan  antibakteri  ditentukan  melalui  pengukuran  zona  bening yang  terbentuk.  Hasil  ditunjukkan  pada  Tabel  2.  Taraf  signifikansi  melalui  uji One  Way  ANOVA  sebesar  95%  (P>0,5).  Nilai  ini  menunjukkan  bahwa  ekstrak etanol adas pagar, kontrol positif dan negatif memiliki perbedaan yang signifikan dalam menghambat pertumbuhan S.aureus dan E.coli .
Data menunjukkan adanya kemampuan penghambatan ekstrak etanol adas pagar  terhadap S.aureus pada  konsentrasi  50-100%  dan E.coli pada  12,5-100%. Aktivitas  antibakteri  kuat  ditunjukkan  oleh  ekstrak  etanol  adas  pagar  100% terhadap S.aureus dengan  diameter  zona  hambat  10,50  ±  0,707  mm.  Aktivitas antibakteri  ekstrak  etanol  adas  pagar  untuk E.coli tergolong  dalam  aktivitas antibakteri  sedang  pada  konsentrasi  ekstrak  50%.  Namun  aktivitas  antibakteri ekstrak etanol adas pagar masih lebih rendah dibandingkan dengan kontrol positif, kloramfenikol,  yang  memberikan  diameter  zona  hambat  sebesar  37  mm  untuk S.aureus dan 30 mm untuk E.coli .

## PEMBAHASAN
Ekstrak  etanol  adas  pagar  yang  diperoleh  dalam  penelitian  ini  tergolong rendah dibandingkan ekstrak etanol daun adas pada penelitian Safitri et al. (2020) sebesar 10,65%. Metode dan durasi ekstraksi sama yaitu maserasi selama 3 hari. Namun  hasil  yang  diperoleh  berbeda.  Hal  ini  dikarenakan  oleh  perbedaan  rasio sampel  dan  pelarut  yang  digunakan.  Dalam  studi  ini,  rasio  sampel:pelarut  yang digunakan adalah sebesar 1:4, sedangkan Safitri et al. (2020) sebesar 1:10. Hal ini menunjukkan  bahwa  volume  pelarut  menentukan  ekstrak  yang  diperoleh.  Selain itu,  faktor  lain  yang  perlu  diperhatikan  adalah  umur  tanaman  yang  digunakan. Menurut  Gultom et  al. (2020),  produksi  senyawa  aktif  dipengaruhi  oleh  umur tanaman.  Umur  tanaman  yang  lebih  lama  cenderung  memiliki  kandungan metabolit sekunder yang tinggi. Dalam studi ini, sampel tanaman yang digunakan masih muda sehingga kandungan metabolit sekundernya masih rendah.
Hasil  skrining  fitokimia  menunjukkan  adanya  flavonoid,  alkaloid,  tanin, saponin  dan  terpenoid  pada  ekstrak  etanol  adas  pagar.  Kelompok  metabolit sekunder  yang  terdeteksi  pada  ekstrak  etanol  adas  pagar  berbeda  dengan  hasil penelitian  Armadany et  al. (2017)  yaitu  pada  ekstrak  daun  komba-komba ( Eupatorium odoratum ). Ekstrak daun komba-komba juga mengandung senyawa alkaloid,  flavonoid,  tanin,  dan  saponin,  namun  tidak  mengandung  senyawa terpenoid.  Perbedaan  kandungan  metabolit  sekunder  dari  tanaman  dengan  genus yang sama dapat disebabkan oleh beberapa faktor baik dari sisi tanaman maupun lingkungan.  Dalam  studi  ini,  adas  pagar  yang  digunakan  tumbuh  di  lingkungan yang intens dengan cahaya dan tanah yang subur.
Mengacu  pada  hasil  skrining  fitokimia,  dilakukan  pengukuran  aktivitas antioksidan dan antibakteri terhadap ekstrak etanol adas pagar. Hasil uji aktivitas
antioksidan ekstrak etanol adas pagar menunjukkan nilai IC50 sebesar 80,56 ppm yang  termasuk  kategori  antioksidan  yang  kuat.  Menurut  Egra et  al. (2019), semakin  banyak  bobot  simplisia  yang  digunakan  maka  semakin  banyak  pula bobot  ekstrak  dan  senyawa  aktif  yang  terekstrak.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa bobot  ekstrak  serta  kandungan  senyawa  aktif  ekstrak  etanol  adas  pagar  lebih banyak sehingga memiliki aktivitas antioksidan yang tinggi dibandingkan ekstrak daun prasman.
Hasil  uji  aktivitas  antibakteri  ekstrak  etanol  adas  pagar  menunjukkan adanya  aktivitas  antibakteri  pada Staphylococcus  aureus dan Escherichia  coli .
Ekstrak etanol adas pagar dapat menghambat pertumbuhan Staphylococcus aureus pada  konsentrasi  100%  dengan  diameter  zona  hambat  10,50  ±  0,707  mm  dan termasuk  kategori  daya  hambat  yang  kuat.  Pada Escherichia  coli terbentuk diameter  zona  hambat  sebesar  8,50  ±  0,707  mm  pada  konsentrasi  50%  dan termasuk kategori daya hambat yang sedang. Namun nilai daya hambat adas pagar masih  lebih  rendah  dibandingkan  kontrol  positif  berupa  kloramfenikol.  Hal  ini dapat  disebabkan  oleh  kuantitas  metabolit  sekunder  dalam  ekstrak  etanol  adas pagar yang rendah sehingga aktivitas penghambatannya kurang maksimal.
Aktivitas  antibakteri  ekstrak  etanol  adas  pagar  berbeda  dengan  hasil penelitian Wangkanusa et al. (2016) pada daun prasman ( Eupatorium triplinerve Vahl.) terhadap Staphylococcus aureus . Ekstrak daun prasman memiliki diameter zona  hambat  pada  konsentrasi  100%  sebesar  4,67  mm  yang  tergolong  lemah. Perbedaan  daya  hambat  yang  dihasilkan  dari  kedua  sampel  tersebut  dikarenakan kandungan senyawa metabolit sekunder  yang berbeda. Ekstrak etanol adas pagar lebih  banyak  mengandung  senyawa  metabolit  sekunder  dibandingkan  ekstrak daun  prasman.  Ekstrak  daun  prasman  mengandung  senyawa  fenolik,  flavonoid, alkaloid,  dan  tanin  namun  tidak  mengandung  senyawa  terpenoid  dan  saponin (Munte et al ., 2015). Data dalam studi ini menunjukkan potensi adas pagar untuk dikembangkan  sebagai  sumber  senyawa  obat  dikarenakan  keragaman  senyawa yang memiliki aktivitas sebagai antioksidan dan antibakteri.

## SIMPULAN
Ekstrak  etanol  adas  pagar  dapat  digunakan  sebagai  antioksidan  dan antibakteri alami terhadap pertumbuhan S.aureus dan E.coli . Hal ini dikarenakan ekstrak  etanol  adas  pagar  mengandung  flavonoid,  alkaloid,  saponin,  tanin  dan terpenoid yang berkontribusi dalam aktivitas antioksidan dan antibakteri.

## DAFTAR PUSTAKA
Amalia,  R.,  Trimulyono,  G.  2018.  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Lichen  Usnea Subfloridana terhadap Pertumbuhan Bakteri Escherichia coli FNCC 0091 dan Staphylococcus aureus FNCC 0047. LenteraBio . 8 (2), 175-181. Armadany,  F.  I.,  Mallarangeng,  A.  N.  T.  A.,  Fiyana,  A.  S.,  Novi.  2017.  “Uji Aktivitas  Ekstrak  Etanol  Daun  Komba-komba  ( Eupatorium  odoratum )
Berbunga  Putih  dan  Berbunga  Kuning  sebagai  Antinyamuk. Pharmauho: Jurnal Farmasi, Sains, dan Kesehatan . 3,(2), 18-21.
Dwimayasanti,  R.  (2018).  Rumput  Laut:  Antioksidan  Alami  Penangkal  Radikal Bebas. Oseana . 43(2), 13-23.
Egra,  S.,  Mardhiana.,  Rofin,  M.,  Adiwena,  M.,  Jannah,  N.,  Kuspradini,  H.,  & Mitsunaga,  T.  2019.  Aktivitas  Antimikroba  Ekstrak  Bakau  ( Rhizophora mucronata )  dalam  Menghambat  Pertumbuhan Ralstonia  Solanacearum Penyebab Penyakit Layu”. AGROVIGOR . 12 (1) 26-31. Gultom,  E.  S.,  Sakinah,  M.,  Hasanah,  U.  2020.  Eksplorasi  Senyawa  Metabolit Sekunder Helaian Daun Kirinyuh ( Chormolaena odorata ) dengan GC-MS. Jurnal Biosains . 6 (1), 23-26. Irsyam, A. S. D., & Hariri, M. R. 2016. Eupatorium capillifolium (Lam.) Small ex Porter  &  Britton  (Asteraceae:  Eupatorieae), Rekaman  Baru  untuk  Flora Jawa. AL-KAUNIYAH : Journal of Biology . 9(2), 80-86. Kardina, D. (2022). Hubungan antara Faktor Lingkungan terhadap Kejadian Diare pada  Balita  di  Desa  Sidaraja  Kecamatan  Ciawigebang  Kabupaten Kuningan Tahun 2022 ( Doctoral dissertation, Universitas Siliwangi ).
Khairun,  N.  B.,  &  Desty,  M.  2018.  Efektivitas  kulit  batang  bakau  minyak ( Rhizopora  apiculata )  sebagai  antioksidan. Jurnal  Agromedicine , 5(1), 412-417.
Lestari,  E.,  &  Lagiono.  2018.  Pemanfaatan  Tanaman  sebagai  Obat  oleh Masyarakat  Desa  Karang  Dukuh  Kecamatan  Belawang  Kabupaten  Barito Kuala. Jurnal Pendidikan Hayati . 4 (3), 114-119. Malik,  N.  2014.  “Pertumbuhan  Tinggi  Tanaman  Sambiloto  ( Andrographis paniculata. Ness ) Hasil Pemberian Pupuk dan Intensitas Cahaya Matahari yang Berbeda. JURNAL AGROTEKNOS . 4 (3), 189-193. Maryanto, M. A., Sukiyono, K., & Priyono, B. S. (2018). Analisis efisiensi teknis dan  faktor  penentunya  pada  usahatani  kentang  ( Solanumtuberosum  L .)  di Kota  Pagar  Alam,  Provinsi  Sumatera  Selatan. AGRARIS:  Journal  of Agribusiness and Rural Development Research , 4(1), 1-8. Munte,  L.,  Runtuwene,  M.  R.,  &  Citraningtyas,  G.  2015.  Aktivitas  Antioksidan dari Ekstrak Daun Prasman ( Eupatorium triplinerve Vahl .). PHARMACON : Jurnal Ilmiah Farmasi . 4 (3), 41-50.
Safitri, F. W., Abdul, A., & Qonitah, F. 2020. Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Daun Adas ( Foeniculum Vulgare Mill) dengan Metode DPPH dan FRAP”. Pharmed:  Journal  of  Pharmaceutical  Science  and  Medical Research. 3(2), 43-54.
Wangkanusa,  D.,  Lolo,  W.  A.,  &  Wewengkang,  D.  S.  2016.  Uji  Aktivitas Antibakteri  dari  “Ekstrak  Daun  Prasman  ( Eupatorium  triplinerve  Vahl .) terhadap  Pertumbuhan  Bakteri Staphylococcus  aureus dan Pseudomonas aeruginosa . PHARMACON : Jurnal Ilmiah Farmasi . 5 (4), 203-210.