## Isolation and Identification of  Bacteria from Dumai Marine Waters that Have Potencial as Lead Bioremediation Agents
Della Hijri Yanti 1* , Nursyirwani 1 , Dessy Yoswaty 1
1 Department of Marine Science, Faculty of Fisheries and Marine Universitas Riau Corresponding Author: della.hijri2397@student.unri.ac.id
Diterima/Received: 26 Agustus 2021; Disetujui/Accepted: 15 September 2021

## ABSTRACT
One  of  the  harmful  pollutants  to  human  health  is  the  heavy  metal  Lead  (Pb).  A  high concentration of lead that has can accumulate in the body of living things if in a long period of time. Lead  concentrations  that  exceed  the  threshold  in  an  environment  can  cause  damage  that  affects aquatic  biota  and  other  living  things.  This  research  was  carried  out  in  February-April  2021.  The purpose of this study was to isolate and identify bacteria that have the potential as lead bioremediation agents  from  Dumai  marine  waters.  Isolation  and  identification  of  bacteria  were  carried  out  at  the Laboratory of Marine Microbiology, Department of Marine Science, Faculty of Fisheries and Marine Sciences,  and  the  lead  concentration  test  at  the  Laboratory  of  Chemical  Testing  and  Analysis, Department of Chemical Engineering, Faculty of Engineering. The results of the isolation on Marine Agar media  which was added with Pb acetate (Pb(CH 3 COO 2 )) obtained three bacterial isolates from Dumai sea waters, namely D1, D2, and D3. The isolate that had the best growth was isolated D1. The isolate D1 was able to reduce the highest Pb concentration from 10 ppm by 80.53%, at a concentration of 20 ppm Pb, the isolate D1 was able to reduce Pb concentration by 78.8% and at a concentration of Pb 30 ppm, isolate D1 was able to reduce Pb concentration by 77.21%.
Keywords: Bacteri, bioremediation, Dumai, Pollution

## 1. PENDAHULUAN
Bahan  pencemar  yang  berbahaya  bagi kesehatan  manusia  salah  satunya  adalah  logam berat  Timbal  (Pb)  yang  termasuk  golongan logam berat nonesensial, dan bersifat racun jika masuk  ke  dalam  tubuh  organisme  hidup.  Pb bersifat  karsinogenik  dan  dapat  mencemari udara,  air,  tanah,  tumbuhan,  hewan,  bahkan manusia  (Juniawan et  al. ,  2013).  Timbal  dapat masuk ke dalam tubuh manusia melalui saluran pernafasan, pencernaan dan kulit (Usman et al., 2013).  Apabila  timbal  masuk  ke  dalam perairan, maka  akan mengganggu sistem  rantai makanan  dan  berpengaruh  terhadap  kehidupan organisme (Junopia, 2015).
Perairan yang terkontaminasi oleh timbal dapat menyebabkan penurunan  kualitas air dan kematian  biota  pada  perairan  tersebut.  Apabila konsentrasi timbal melebihi ambang batas yang telah  ditentukan  maka  dapat  mengakibatkan kerusakan  pada  lingkungan  perairan  yang berdampak  pada  biota  perairan  dan  makhluk hidup  lainnya  yang  mengkonsumsi  biota perairan  yang  tercemar  timbal  sehingga mengakibatkan toksisitas pada makhluk hidup.
Melihat  dari  efek  negatif  timbal  di  atas,
maka diperlukannya upaya-upaya untuk mengatasi bahan pencemar tersebut. Salah satu penanganan  yang  dapat  dilakukan  untuk mengatasi  masalah  kontaminasi  logam  Pb adalah  bioremediasi  menggunakan  mikroba dari kelompok bakteri.
Berbagai  aktifitas  industri  mencakup pengilangan  minyak  bumi  ( hydrocracker ), pengilangan  minyak  sawit, docking kapal, aktifitas  pelabuhan,  aktivitas  pabrik  wilmar menjadi potensial sumber utama ( point sources )  pencemaran  timbal  di  wilayah  pesisir laut  Dumai.  Berbagai  aktivitas  tersebut  tentu saja  dapat  menjadi  penyebab  bertambahnya jumlah  pencemar  yang  masuk  ke  perairan sehingga  mempengaruhi kondisi  perairan secara  fisika,  kimia  dan  biologi.  Kondisi perairan  yang  berubah  dapat  berpengaruh terhadap  keberadaan  dan  kemampuan  biota perairan  untuk  bertahan  pada  habitatnya. Berdasarkan  hal  tersebut  perlu  dilakukan penelitian  tentang  bakteri  yang  berpotensi sebagai  agen  bioremediasi  timbal  (Pb)  dari perairan laut Dumai.

## 2. METODE PENELITIAN

## Waktu dan Tempat
Penelitian  telah  dilaksanakan  dari  bulan Februari  hingga  April  2021  di  perairan  laut Dumai. Isolasi dan Identifikasi bakteri dilakukan  di  Laboratorium  Mikrobiologi  Laut Jurusan  Ilmu Kelautan, Fakultas Perikanan dan Kelautan Universitas Riau dan  uji konsentarasi timbal  (Pb)  di  Laboratorium  Pengujian  dan Analisa  Kimia  Jurusan  Teknik  Kimia  Fakultas Teknik.

## Metode Penelitian
Metode  yang  digunakan  pada  penelitian ini  adalah  metode  survei  dan  eksperimen  yaitu mengisolasi  dan  identifikasi  bakteri  dan menguji  kemampuan  bakteri  dalam  menyerap timbal (Pb) dengan konsentrasi yang berbeda di laboratorium.

## Prosedur Penelitian Pengambilan Sampel
Pengambilan  sampel  air  dilakukan  pada tiga  titik  stasiun  dan  berbeda  berdasarkan lokasi.  Sampel  air  diambil  sebanyak  500  ml pada masing-masing titik pengambilan. Sampel air  permukaan  diambil  dengan  menggunakan ember.  Sampel  air  dimasukkan  ke  dalam  botol sampel yang diberi label. Setelah itu, sampel air dimasukkan  ke  dalam ice  box dan  diberi  es, kemudian dibawa ke Laboratorium Mikrobiologi Laut untuk dianalisis.

## Isolasi Bakteri
Isolasi  bakteri  dari  sampel  air  diawali dengan  mengambil  5  ml  sampel  air  dan dimasukkan  ke  dalam  45  ml  akuades,  lalu dihomogenkan sehingga didapatkan pengenceran  10 -1 .  Pengenceran  dilakukan secara bertingkat sampai 10 -6 dengan cara 1 ml dari  pengenceran  10 -1 ditambahkan  ke  dalam tabung  reaksi  yang  berisi  9  ml  aquades sehingga  didapat  pengenceran  10 -2 ,  dan seterusnya hingga didapatkan pengenceran 10 -6 . Setelah  itu  dilakukan  proses plating , suspensi  dari  pengenceran  10 -6 diinokulasikan pada media marine agar dengan metode Spread Plate ,  lalu  diinkubasi  dalam  inkubator  pada suhu  37°C  selama  ±24  jam,  kemudian  diamati koloni  yang  tumbuh  (Harley  dan  Prescot, 2002). Koloni tunggal yang tumbuh dimurnikan kembali  dengan  metode streak  plate .  Satu koloni  isolat  bakteri  diambil  secara  aseptis menggunakan jarum ose dan diinokulasikan  ke
permukaan media marine agar yang ditambahkan  Pb  asetat  10  ppm,  kemudian diinkubasi pada suhu 37°C selama 48 jam
Identifikasi Bakteri

## Morfologi
Karakteristik koloni bakteri hasil inokulasi  pada  media  MA  datar  yaitu berdasarkan,  bentuk  koloni,  permukaan  koloni, tepi koloni, warna koloni, dan motilitas.

## Uji Biokimia Pewarnaan Gram
Isolat  bakteri  diambil  satu  ose  dengan jarum  ose  secara  aseptis  dan  disuspensikan dengan  akuades  yang  ada  di  atas objek  glass . Preparat  difiksasi  diatas  api  bunsen  sampai kering.  Preparat  ditetesi  dengan  Gram  A (kristal  violet),  didiamkan  selama  1  menit  dan dicuci dengan aquades mengalir dan dikeringkan.  Preparat  ditetesi  dengan  larutan Gram B (larutan iodine) dan didiamkan selama 1    menit,  dicuci  dengan  aquades  mengalir  dan dikeringkan. Preparat digenangi dengan larutan Gram  C  (alkohol)  sampai  warna  ungu  hilang. Preparat  ditetesi  dengan  larutan  Gram  D (safranin)  dan  didiamkan  selama  1  menit, dicuci  dengan  air  mengalir  dan  dikeringkan. Preparat  ditetesi  dengan  minyak  imersi, preparat berwarna merah (Hadioetomo, 1993).
Uji  Gula. Isolat  bakteri  diinokulasikan ke dalam tabung reaksi yang berisi media TSIA ( Triple  Sugar  Iron  Agar )  agar  tegak  dan  agar miring.    Kemudian  dilakukan  inkubasi  pada suhu 29°C selama 24 jam.
Uji  Katalase. Isolat  bakteri  diambil menggunakan  jarum  ose  dan  diletakkan  gelas objek.  Kemudian  diteteskan  reagen  H 2 O 2 3% beberapa tetes.
Uji Methyl Red . Isolat bakteri diinokulasikan  pada  media  MR-VP  ( Methyl Red  Vogen  Proskaeur )  agar  dan  diinkubasi selama pada suhu 37°C selama 24 jam. Setelah diinkubasi,  reagen methyl  red 1%  diteteskan beberapa tetes pada media.
Uji  VP. Isolat  bakteri  diinokulasikan pada media MR-VP agar dan diinkubasi selama pada  suhu  37°C  selama  2×24  jam.  Setelah diinkubasi, reagen a napthol 5% dan KOH 40% diteteskan pada media.
Uji Sulfida (H 2 S). Isolat bakteri diambil menggunakan  jarum  ose  lalu  digoreskan  ke media  TSIA  ( Triple  Sugar  Iron  Agar ).
Selanjutnya  bakteri  diinkubasi  selama  24  jam pada suhu 28°C diamati perubahannya.

## Isolation and Identification of Bacteria from Dumai Marine Waters
Uji  Indol. Isolat  bakteri  diinokulasikan pada media Motilitas Indol Ornithin (MIO) dan diinkubasi  pada  suhu  37°C  selama  24  jam. Setelah  diinkubasi,  reagen  indol  diteteskan pada dinding tabung reaksi.
Uji  Sitrat. Isolat  bakteri  diinokulasikan secara  zig-zag  pada  media Simmon’s  Citrate Agar (SCA)  dan  diinkubasi  pada  suhu  37°C selama 24 jam.
Pembuatan Larutan McFarland. Menurut  Haris et  al., (2013) McFarland adalah  peyetaraan  konsentrasi  mikroba  dengan menggunakan  larutan  BaCl 2 1%  dan  H 2 SO 4 1%.  Prosedur  pembuatan  larutan McFarland yaitu  dengan  memasukkan  BaCl 2 terlebih dahulu lalu ditambahkan H 2 SO 4 sesuai komposisi  dari  skala  larutan McFarland , kemudian  larutan  di vortex dan  ditutup  dengan aluminium  foil  lalu  disimpan  pada  suhu  ruang. Skala  standard McFarland yang  digunakan dalam  penelitian  ini  adalah  0,5  dengan komposisi  0,05  ml  BaCl  1%  +  9,95  ml  H 2 SO 4 1%  dengan  perkiraan  jumlah  bakteri  pada suspensi  1,5×10 8 CFU’s/ml.  Larutan  0,5
McFarland diuji menggunakan spektrofotometer UV-Vis dan memiliki absorbansi 0,08-0,1 pada saat panjang gelombang 625 nm (Dalynn, 2014).

## Uji Resistensi Bakteri Terhadap Timbal (Pb)
Setelah  didapatkan  isolat    yang  tumbuh pada  media marine  agar  + Pb  asetat  dengan konsentrasi 10 ppm. Lalu bakteri diinokulasikan  sebanyak  2  ml  ke  dalam medium  cair  TSB  ( Tryptic  Soy  Broth )  dengan volume  50  ml  yang  telah  diperkaya  dengan timbal asetat (Pb(CH 3 COO) 2 ) dengan konsentrasi  masing-masing  0,  10,  20,  dan  30 ppm.  Setelah  itu  dilakukan  pengukuran pertumbuhan bakteri pada jam ke 0, 24, 48, dan 72 dengan metode TPC  dan spektrofotometri.
Uji  Penurunan  Konsentrasi  Timbal  (Pb) oleh  Bakteri  Menggunakan  AAS  ( Atomatic Absorption Spectrophotometer ) Setelah  dilakukan  uji  pertumbuhan bakteri  terhadap  Pb,  selanjutnya  dilakukan  uji penurunan  pada  masing-masing  perlakuan konsentrasi  Pb  yakni  10,  20  dan  30  ppm menggunakan  AAS  ( Atomatic Absorption Spectrophotometer ) (Lewaru et al ., 2012).
Pengukuran  Efisiensi  Penurunan  Kadar  Pb oleh Bakteri
Menurut  Fauziyah  (2011),  perhitungano konsentrasi  logam  Pb  terserap  dilakukan dengan menggunakan metode Langmuir dengan persamaan sebagai berikut:
C s = Ca –Cb Perhitungan  persentase  (%)  Penurunan Kadar  Logam  Penentuan  persentase  logam berat Pb sesuai dengan persamaan:
( )    ( )
( )
Keterangan:
D      = Daya penurunan kadar Pb C s = Pb yang kadarnya berkurang(ppm) C(a )  = Konsentrasi awal Pb (ppm) C(b) = Konsentrasi akhir Pb (ppm)

## Analisis Data
Data  jumlah,  jenis  dan  penurunan konsentrasi  timbal  yang  diperoleh  disajikan dalam  bentuk  tabel  dan  gambar.  Selanjutnya, data  dianalisis  secara  deskriptif  kualitatif dengan  merujuk  kepada  referensi  terkait.  Data uji penurunan kadar Pb oleh bakteri,  dianalisis secara  statistik  menggunakan  uji Anova  One Way

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN Deskripsi Lokasi Penelitian
Kota  Dumai  terletak  pada  bagian  pesisir Timur  Pulau  Sumatera  antara  101°  23’27’’  - 101°  28’  13”  BT  dan  1°  23’23’’  –  1°  24’23’’ LU.  Secara  geografis  Kota  Dumai  sebelah Utara berbatasan dengan Pulau Rupat, Kabupaten Bengkalis, sebelah Selatan berbatasan dengan Kecamatan Mandau, sebelah Barat  berbatasan  dengan  Kecamatan  Bangko, sebelah  Timur  berbatasan  dengan  Kecamatan Bukit Batu.
Perairan Laut Dumai berbatasan langsung dengan Selat Malaka yang merupakan dataran  rendah  yang  sebagian  wilayahnya masih  terdiri  dari  rawa-rawa  dan  hutan  bakau. Perairan  Dumai  selain  dimanfaatkan  sebagai daerah  pelabuhan,  industri  dan  jalur  pelayaran, juga merupakan tempat penangkapan  ikan oleh penduduk  yang  tinggal  di  tepi  pantai. Pelabuhan  penyeberangan  penumpang  juga menggunakan  perairan  Dumai  untuk  fasilitas bongkar  muat.  Kondisi  tersebut  menjadikan perairan ini  sebagai jalur pelayaran  antar pulau dan  antar  negara  yang  padat.  Berbagai  macam kegiatan  disekitar  perairan  tersebut  merupakan
penyumbang  terbesar  bahan  pencemar  pada perairan laut Dumai termasuk logam berat.

## Isolasi dan Identifikasi Bakteri
Hasil  kultur  bakteri  secara  berulang- ulang yang ditumbuhkan pada media MA yang
telah  ditambahkan  timbal  (Pb)  10  ppm diperoleh  3  isolat  bakteri  dilihat  berdasarkan identifikasi morfologi, yaitu isolat D1, D2, dan D3.  Hasil  identifikasi  dari  ketiga  isolat  dapat dilihat pada Tabel 1 dan Tabel 2.
Tabel 1. Uji Biokimia Bakteri
Tabel 2. Hasil Identifikasi Morfologi
Berdasarkan identifikasi hasil uji biokimia    terhadap  ketiga  isolat,  didapatkan hasil  bahwa  ketiga  isolat  tersebut  merupakan bakteri  dari  genus  Bacillus.  Hal  ini  sesuai dengan  karakteristiknya  yang  tertera  dalam buku Bergey’s Manual Determinative
Bacteriology 9th  Edition  (Holt et  al., 1994), isolat Bacillus sp.  memiliki  ciri-ciri  berbentuk batang berantai, gram positif, memiliki endospora,  reaksi  positif  terhadap  pengujian katalase, motil pada medium SIM, memfermentasi  glukosa,  maltosa,  sukrosa  dan reaksi  negatif  terhadap  uji  indole  serta  tidak menunjukkan perubahan warna pada medium.

## Uji Degradasi Bakteri terhadap Timbal (Pb)
Pada  uji  resistensi  ini  diambil  satu  isolat berdasarkan  kemampuan  pertumbuhan  bakteri pada media MA yang ditambahkan Pb 10 ppm. Maka  dari  itu  isolat  bakteri  yang  memiliki tingkat  pertumbuhan  yang  palingbaik  yaitu isolat D1. Perbedaan pertumbahan isolat bakteri ini  menunjukkan,  bahwa  masing-masing  isolat memiliki  batas  maksimum  toleransi  terhadap logam Pb.
Uji  resistensi  dilakukan    untuk  melihat pertumbuhan bakteri selama 72 jam pada media yang  mengandung  Pb.  Pada  uji  resistensi  ini isolat  bakteri  diberikan  perlakuan  Pb  awal
sebesar  0  ppm,  10  ppm,  20  ppm  dan  30  ppm dan menghitung pertumbuhan bakteri selama 0 jam,  24  jam,  48  jam  dan  72  jam    dengan menggunakan metode TPC. Hasil pertumbuhan bakteri menggunakan metode TPC dapat dilihat pada Tabel 2.
Bakteri yang memperlihatkan karakteristik yang resisten terhadap logam berat dan  berasal  dari  daerah  yang  terpapar  logam berat berpotensi untuk dijadikan agen bioremediasi  cemaran  logam  berat  (Chihomvu et  al. ,  2014).  Kemampuan  bakteri  dalam menurunkan  konsentrasi  logam  berat  di lingkungan tumbuhnya dapat disebabkan karena kemampuan bakteri dalam mengakumulasi  logam  berat  tersebut  (Satya dan  Larashati,  2012).  Mikroorganisme  yang mampu  bertahan  pada  kondisi  lingkungan dengan  kadar  logam  berat  yang  tinggi bergantung  pada  kemampuan  detoksifikasi mikroorganisme tersebut.

## Uji  Penurunan  Konsentrasi  Timbal  Oleh Bakteri
Uji  ini  dilakukan  untuk  bertujuan  untuk melihat konsenterasi akhir Pb yang diserap oleh bakteri.  Instumen  yang  digunakan  dalam mengukur  kadar  Pb  adalah Atomic  Absorption Spectrofotometer (AAS).  Hasil  pengukuran
Kode Isolat Uji Biokimia Uji Gram Uji Gula (TSIA) Uji Katalase Uji MR Uji VP Uji Sulfida Uji Indol Uji Sitrat Motil D.1 (+) Basil Glukosa Gas (-) Negatif (-) Anaerob + - - - + + D.2 (+) Basil Glukosa Gas (-) Positif (+) Aerob + - - - + + D.3 (+)Basil Glukosa Gas (+) Positif (+) Aerob + - - - + + Kode Isolat Identifikasi Morfologi Diameter (cm) Bentuk Koloni Permukaan Koloni Tepian Koloni Warna Koloni D 1 3,3 Berbenang -benang Datar Bercabang Putih susu D 2 0,8 Bundar Datar Licin Putih susu D 3 1,25 Tidak beraturan menyebar Datar Licn Putih susu
Isolation and Identification of Bacteria from Dumai Marine Waters
kadar Pb dengan AAS dapat dilihat pada Tabel
3.

## Tabel 2. Perhitungan Jumlah Sel Bakteri Menggunakan Metode TPC
Tabel 3. Penurunan Konsentrasi Timbal oleh Bakteri
Hasil  uji  penurunan  konsentrasi  Pb terlihat  pada  Tabel  3.  Isolat  D1  mampu menurunkan  konsentrasi  Pb  tertinggi  dari  10 ppm sebesar 80,53%. Sedangkan pada konsentrasi  Pb  20  ppm  isolat  bakteri  mampu menurunkan  konsentrasi Pb sebesar 78,8% dan pada  konsentrasi  Pb  30  ppm  isolat  bakteri mampu  menurunkan  konsentrasi  Pb  sebesar 77,21%.
Dari  kemampuan  dalam  menurunkan konsentrasi  Pb  pada  konsentrasi  yang  berbeda, dapat  dikatakan  isolat  bakteri  yang  didapatkan pada  penelitian  berpotensi  menjadi  agen
bioremediasi. Bakteri resistensi terhadap logam berat  mampu  mengubah  struktur  polutan  yang beracun menjadi tidak kompleks dan menghasilkan  produk  metabolit  seperti  asam organik  dan  metabolit  lainnya  sehingga  dapat menghilangkan  ion-ion  logam  berat  yang terdapat di lingkungan (Priadie, 2012).

## 4. KESIMPULAN DAN SARAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  telah dilakukan,  terdapat  tiga  isolat  yang  berpotensi sebagai  agen  bioremediasi  timbal  (Pb)  dari perairan  laut  Dumai.  Isolat  yang  memiliki
Kode Isolat Jam Ke- Konsentrasi (ppm) Ulangan Rata- Rata (× 10 8 CFU) 1 2 3 D 1 0 0 8,5 7,9 5,2 7,2 ± 1,758 10 7,3 7 4,6 6,3 ± 1,480 20 5,8 5,2 4,6 5,2 ± 0,600 30 4,7 3,3 2,5 3,5 ± 1,114 24 0 10,4 9,5 9,8 9,9 ± 0,458 10 9,5 8,7 7,9 8,7 ± 0,800 20 8,3 7,1 6,5 7,3 ± 0,917 30 7,1 5,6 5 5,9 ± 1,082 48 0 16 15,5 14,8 15,4 ± 0,603 10 14,7 15,5 13,9 14,7 ± 0,800 20 12,9 11,8 12,5 12,4 ± 0,557 30 10,9 12,3 11,7 11,6 ± 0,702 72 0 13,8 12,9 12,6 13,1 ± 0,624 10 11,3 9,8 11,2 10,8 ± 0,839 20 9,5 8,7 8,3 8,8 ± 0,611 30 7,7 6,6 7,8 7,4 ± 0,666 Konsentrasi Awal (ppm) Konsentrasi Akhir (ppm) Total Akumulasi (ppm) Rata-rata Akumulasi (ppm) Efisiensi Penurunan (%) Rata-rata Penurunan (%) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 10 1,97 8,03 8,05 80,3 80,53 10 1,95 8,05 80,5 10 1,92 8,08 80,8 20 4,27 15,73 15,76 78,65 78,8 20 4,2 15,8 79 20 4,25 15,75 78,75 30 6,87 23,13 23,16 77,1 77,21 30 6,8 23,2 77,3 30 6,83 23,17 77,23
pertumbuhan yang paling baik adalah isolat D1. Isolat  D1  mampu  menurunkan  konsentrasi  Pb tertinggi  dari  10  ppm  sebesar  80,53%,  pada konsentrasi  Pb  20  ppm  isolat  D1  mampu menurunkan  konsentrasi Pb sebesar 78,8% dan pada  konsentrasi  Pb  30  ppm  isolat  D1  mampu
menurunkan konsentrasi Pb sebesar 77,21%.
Pada  penelitian  selanjutnya  disarankan untuk mengidentifikasi bakteri secara molekular  agar  dapat  mengetahui  jensi  bakteri secara spesifik.

## DAFTAR PUSTAKA
Chihomvu P., P. Stegmann, dan M. Pillay. (2014). Identification and Characterization of Heavy Metal Resistant  Bacteria  from  the  Klip  River. International  J  Biol  Biomol  Agri  Food  Biotechnol Enginee 8(11): 1178-1188.
Dalynn, B.   (2014). McFarland Standard. Canada: Dalynn Biological.
Hadioetomo,  R.S.  (1993) .  Mikrobiologi  Dasar  dalam  Praktek  Teknik  dan  Prosedur  Dasar Laboratorium . PT. Gramedia Pustaka Utama.
Haris, A., Arniati, dan S. Werorilangi. (2013). Uji Antibakteri Patogen Ekstrak Sponge Menggunakan Metode High Troughput  Screening (HTS) dengan indikator MTT  (3-[4,5- dimethylthiazol -2- yl ]- 2,5- diphenyltetrazolium bromide ). Jurusan Ilmu Kelautan , FIKP, UNHAS.
Harley,  J.P.  dan  L.M.  Prescott.  (2002) .  Laboratory  Exercises  in  Microbiology . Fifth  Edition .  The McGraw−Hil.
Holt,  J.G.,  N.R.  Krig,  P.H.A.  Snearth,  J.T.  Staley,  dan  S.T.  Williams.  (1994), ‘Bergey’s  Manual  of Determinative  Bacteriology  9th  Edition’ :  Lipincott  Williams  and  Wilkins  Company, Philadelphia (USA).
Juniawan A., B. Rumhayati dan B. Lamuyanto. (2013). Karakteristik Lumpur Lapindo dan Fluktuasi Logam Berat Pb dan Cu pada Sungai Porong dan Aloo. Jurnal Sains dan Terapan Kimia 7(1) : 1-10.
Junopia,  A.C.  (2015).  Isolasi  dan  Identifikasi  Bakteri  Pendegradasi  Logam  Timbal  (Pb)  yang Bersumber  dari  Danau  Tempe  Kabupaten  Wajo  Sulawesi  Selatan. Skripsi .  Fakultas  Sains  dan Teknologi. UIN Alauddin Makassar.
Lewaru,  S.,  R.  Indah.  dan  M.  Yuniar.  (2012).  Identifikasi  Bakteri  Indigeneus  Logam  Berat  Cr  (VI) dengan  Metode  Molekuler  di  Sungai  Cikijing  Rancaekek  Jawa  Barat. Jurnal  Perikanan  dan Kelautan, 3(4) : 81-92.
Priadie,  B.  (2012).  Teknik  Bioremediasi  Sebagai  Alternatif  dalam  Upaya  Pengendalian  Pencemaran Air. Jurnal Ilmu Lingkungan, 10(1): 38-48.
Satya,  A.,  dan  S.  Larashati.  (2012).  Kemampuan  Isolat  Bakteri  dari  Sedimen  Situ  Sebagai  Aquatic Bioremoval  Agent  Ion  Logam  Timbal (Pb). Prosiding Seminar Nasional Limnologi IV 19: 50- 60.
Usman,  S.,  L.N.  Nafie,  dan  M.  Ramang.  (2013).  Distribusi  Kuantitatif  Logam  Berat  Pb  dalam  Air, Sedimen  dan  Ikan  Merah  ( Lutjanus  erythropterus )  di  Sekitar  Perairan  Pelabuhan  Parepare. Marina Chimica Acta, 14(2):1411-2132.