## PENGARUH INFUSA DAUN SAMBILOTO (Andrographis paniculata Nees)

## TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI Shigella dysenteriae SECARA IN VITRO
Fitri Nadifah, Siti Fatimah, Indah Yuliana Barekola Lamablawa STIKes Guna Bangsa Yogyakarta

## ABSTRACT
Background: Bacteria Shigella dysenteriae is pathogenic bacterium which cause diarrheal diseases that  enter  into  inside  the  body  through  intestine. Shigella  dysenteriae constitute  one  of  the  gram negative bacterium which causes inflammation on intestinal, pain abdominal, tenesmus, and a bowel movements which accompanied with blood and mucus. Bad impact irational use of synthethic drugs and  antibiotics  can  cause  organ  damage  and  germs  resistance.  Utilization  of  herbs  as  traditional medicine  evolving  rapidly  and  alternatively  used  by  most.  Traditional  medicine  has  relatively  low  of side  effect  and  affordable  prices.  Sambiloto (Andrographis  paniculata  Nees) is  a  plant  which  is ordinary  used  as  a  traditional  medicine  that  can  easily  found  around  Indonesian  islands.  Sambiloto constitute  one  of  the  medicinal  plants  which  is  allegedly  has  the  antibacterial  effect  because  its chemical content of flavonoid saponins and tannin.
The  objective  of  this  study  is  to  know  the  influence  of  sambiloto (Andrographis  paniculata  Nees) leaves infuse against the growth of Shigella dysenteriae bacteria . Method: This  is  an  experimental  research  using  diffusion  method.  Statistical test  who  used  namely analysis of variant one road (One Way anova) . Analysis data were done descriptively and statistically and presented with of tables or graphs.
Results: There  is  influence  of  sambiloto  leaf  infusa (Andrographis  paniculata Nees) against  the growth  of Shigella  dysenteriae bacteria  in  vitro  with  a  mean  diameter  zone  of  radical  on concentrations the smallest 20% is 12 mm and the greatest concentration 100% is 24.3 mm. Conclusion : Infuse leaf has a strong and positive influence in inhibit the growth of bacteria Shigella dysenteriae bacterium. Key words: Antibacterials, Andrographis paniculata Nees , Shigella dysenteriae.

## PENDAHULUAN
Shigella  dysenteriae adalah  bakteri intestinal  patogen  yang  telah  lama  dikenal sebagai  agen  penyebab  penyakit  disentri basiller.  Shigella  merupakan  bakteri  gram negatif,  berbentuk  bacillus,  non-motil,  tidak membentuk  spora,  dan  merupakan  bakteri anaerob  fakultatif  yang  tidak  berkapsul. Bakteri  ini  menyebabkan  disentri  yang  berat dan invasif. Manifestasi klinis yang ditimbulkannya  dapat  berupa  diare  sedang sampai banyak, yang disertai panas dan mual, dengan  sifat watery (diare  dengan  komposisi feses  didominan  cairan/air)  ataupun  diare berdarah.  Kadang  manifestasinya  mungkin tidak  menunjukkan  gejala  (McKane  and Kandel, 1986).
Selama ini antibiotik direkomendasikan  untuk  mengobati “bloody diarrhea” (diare disertai darah) untuk memperpendek  masa  sakit,  menurunkan morbiditas, dan mengurangi durasi perubahan siklus  hidupnya  (McKane  and  Kandel,  1986). Pemakaian obat-obatan antibakteri yang kurang rasional  menyebabkan timbulnya resistensi  sejumlah  bakteri  dan  efek  samping yang merugikan bagi penderita sehingga perlu
dilakukan  suatu  penelitian  untuk mencari  obat antibakteri  alternatif  yang  efektif  murah  dan mudah didapat dengan memanfaatkan tanaman obat yang diduga efektif menghambat  pertumbuhan  atau  membunuh bakteri penyebab penyakit (Supriadi, 2001).
Salah satu tanaman obat yang banyak dimanfaatkan adalah daun sambiloto ( Andrographis paniculata ) yang banyak dijumpai di hampir seluruh kepulauan Nusantara.  Daun  sambiloto  mengandung saponin,  flavonoid,  alkaloid,  fenol  dan  tanin. Kandungan  kimia  lain  yang  terdapat  pada daun  dan  batang  adalah  laktone,  panikulin, kalmegin  dan  hablur  kuning  yang  memiliki rasa  pahit.  Secara  tradisional  sambiloto  telah dipergunakan  untuk  mengobati  gigitan  ular atau  serangga,  demam,  disentri,  rematik, tuberculosis, infeksi pencernaan, dan lain-lain. Sambiloto juga dimanfaatkan untuk antimikroba/antibakteri,  anti  sesak  napas  dan untuk memperbaiki fungsi hati (Yusron, 2005). Daun sambiloto mempunyai beberapa kandungan  kimia  yang  sudah  diketahui dengan  jelas  antara  lain  tanin,  flavonoid, saponin,  andrografolida,  deoksiandrografilia, neo-andrografilia,  panikolina,  apigenin  dan
beberapa  mineral  (kalium,  kalsium,  natrium) asam  kresik  dan  damar  yang  terdapat  pada daunnya  (Mangan,  2003).  Penelitian  ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh berbagai  konsentrasi  infusa  daun  sambiloto (Andrographis  paniculata  Nees) terhadap pertumbuhan  bakteri Shigella  dysenteriae secara in vitro.

## METODE PENELITIAN
Objek  penelitian  ini  adalah  daun sambiloto yang diperoleh dari daerah Godean, Yogyakarta.  Sampel  daun  sambiloto  diolah menjadi  infusa  dengan  cara:  simplisia  (daun sambiloto  yang  sudah  dikeringkan)  ditimbang sebanyak 10 gram. Daun sambiloto dimasukan  ke  dalam  erlenmeyer  yang  berisi aquadest steril 10 ml. Daun sambiloto tersebut dipanaskan  di  atas  penangas  air  selama  15 menit  terhitung  mulai  dari  suhu  mencapai
90°C  sambil  sesekali  diaduk.  Infusa  daun sambiloto  disaring  dengan  menggunakan corong  yang  di  atasnya  sudah  diberi  kertas saring  steril  dan  didapatkan  infusa  daun sambiloto  100%.  Infusa  daun  sambiloto  yang sudah  diperoleh  dimasukkan  dalam  sumuran media Muller  Hinton (MH)  yang  telah  ditanam bakteri Shigella  dysenteriae dan  diinkubasi dalam  inkubator  selama  24  jam.  Diamteter zona hambat (bening) di sekitar sumuran pada media MH dihitung menggunakan mistar.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Setelah proses inkubasi, terlihat adanya zona hambat yang berwarna bening di sekitar  sumuran.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa infusa daun sambiloto mempunyai kemampuan dalam menghambat pertumbuhan  bakteri Shigella  dysenteriae (Gambar 1).
Gambar 1. Zona hambat infusa daun sambiloto terhadap pertumbuhan bakteri Shigella dysenteriae pada media MH. Zona hambat yang digunakan sebagai parameter adalah zona di sekitar sumuran yang tampak bening tidak ada pertumbuhan bakteri.
Hasil pengamatan
pertumbuhan bakteri  pada  media  MH  yang  telah  diamati kemudian  di  masukan  ke  dalam  tabel  hasil untuk  mengetahui  besarnya  pengaruh  daya
hambat  sambiloto  terhadap  bakteri Shigella dysenteriae dapat  dilihat  pada  Tabel  1 dibawah ini: Tabel 1. Hasil pengukuran diameter zona hambat infusa daun sambiloto Ulangan Diameter zona hambat (mm) Kontrol - 20% 40% 60% 80% 100% 1 0 11 15 17 20 26 2 0 13 16 21 22 25 3 0 12 17 19 21 22 Rata-rata 0 12 16 19 21 24.3 Dari  Tabel  1  diatas  dapat  diketahui  bahwa infusa  daun  sambiloto  memiliki  daya  hambat terhadap bakteri Shigella dysenteriae . Diameter  zona  hambat  terkecil  adalah  pada Konsentrasi infusa 20% dengan rerata diameter  zona  12  mm  dan  diameter  terbesar adalah  pada  konsentrasi  100%  sebesar  24,3 mm.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  pada konsentraasi  terendah  (20%)  sudah  mampu menghambat pertumbuhan bakteri dan semakin  tinggi  konsentrasi  infusa  daun sambiloto  akan  menghasilkan  diameter  zona
hambat  yang  semakin  tinggi  atau  daya hambatnya semakin kuat.
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang telah  diolah  dengan  Anova  satu  jalan didapatkan  nilai  F  hitung  sebesar  29,456  dan F  tabel  sebesar  3,478  yang  berarti  F  hitung lebih  besar  dari  F  tabel  (29,456  >  3,478)  dan nilai signifikansinya lebih kecil dari 0,05. Hal ini hipotesis  yang  diajukan,  yaitu  berbagai konsentrasi infusa daun sambiloto mempunyai pengaruh  yang  signifikan  dalam  menghambat pertumbuhan  bakteri Shigella  dysenteriae dapat  diterima . Hasil  uji  regregasi  linier  juga
a b c d e f g
menunjukan  bahwa  nilai  R  Square  (r2) diperoleh  angka  sebesar  0,911  yang  berarti besarnya  pengaruh  daya  hambat  antibakteri Shigella dysenteriae adalah  sebesar  91,1  % dan  yang  lain  sisanya  sebesar  8,9  %  yang dapat dipengaruhi oleh faktor lain.
Peristiwa penghambatan pertumbuhan  bakteri  pada  media  ditunjukkan dengan  daerah  bening.  Pada  daerah  tersebut tidak  ada  pertumbuhan  bakteri.  Peristiwa penghambatan  terhadap  pertumbuhan  bakteri Shigella  dysenteriae terutama  karena  adanya flavonoid,  tanin  dan  saponin.  Senyawa flavonoid  dan  tanin  merupakan  turunan senyawa fenol. Fenol bekerja dengan mengubah  molekul  protein  dan  asam  nukleat melalui denaturasi protein bakteri dan merusak  sel  membran.  Membran  sel  bakteri bersifat  permeabel  selektif  berfungsi  transpor aktif  dan  mengontrol  komposisi  internal  sel. Jika fungsi integritas membran sel rusak maka makromolekul  dan  ion  keluar  dari  sel,  zat-zat yang seharusnya tidak masuk sel akan masuk menyebabkan  metabolisme  sel  terganggu kemudian  sel  rusak  dan  berakibat  pada kematian sel (Jawetz, 2005).
Senyawa  Flavonoid  adalah  suatu kelompok  senyawa  fenol  yang  terbesar  yang ditemukan  dalam  senyawa  fenol  larut  dalam air, sangat mudah larut dalam eter dan dalam minyak  menguap,  agak  sukar  larut  dalam mineral, sehingga pengolahan dan pembuatan air  infusa  daun  sambiloto  tidak  perlu  terlalu lama (15 menit) karena dikhawatirkan kandungan  kimia  (turunan  fenol)  dalam  daun sambiloto menguap.
Melihat dari uraian di atas menunjukkan  hipotesis  yang  diajukan  dapat diterima  bahwa  ada  pengaruh  yang  signifikan antara  air  infusa  daun  sambiloto  terhadap Shigella  dysenteriae secara invitro. Infusa daun  sambiloto  terbukti  mampu  menghambat pertumbuhan Shigella  dysenteriae sehingga infusa daun  sambiloto bersifat bakterisida dan diharapkan  dapat  dijadikan  obat  alternatif terhadap penyakit diare yang disebabkan oleh bakteri Shigella dysenteriae. Peristiwa penghambatan  pertumbuhan  bakteri  pada media  ditunjukkan  dengan  daerah  bening. Pada  daerah  tersebut  tidak  ada  pertumbuhan bakteri.  Peristiwa  penghambatan  terhadap pertumbuhan  bakteri Shigella  dysenteriae terutama  karena  adanya  flavonoid,  tanin  dan saponin. Senyawa flavonoid dan tanin merupakan  turunan  senyawa  fenol.  Fenol bekerja  dengan  mengubah  molekul  protein dan  asam  nukleat  melalui  denaturasi  protein bakteri  dan  merusak  sel  membran.  Membran sel bakteri bersifat permeabel selektif berfungsi  transpor  aktif  dan  mengontrol
komposisi  internal  sel.  Jika  fungsi  integritas membran  sel  rusak  maka  makromolekul  dan ion  keluar  dari  sel,  zat-zat  yang  seharusnya tidak  masuk  sel  akan  masuk  menyebabkan metabolisme  sel  terganggu  kemudian  sel rusak  dan  berakibat  pada  kematian  sel (Jawetz, 2005).
Senyawa  Flavonoid  adalah  suatu kelompok  senyawa  fenol  yang  terbesar  yang ditemukan  dalam  senyawa  fenol  larut  dalam air, sangat mudah larut dalam eter dan dalam minyak  menguap,  agak  sukar  larut  dalam mineral, sehingga pengolahan dan pembuatan air  infusa  daun  sambiloto  tidak  perlu  terlalu lama (15 menit) karena dikhawatirkan kandungan  kimia  (turunan  fenol)  dalam  daun sambiloto menguap.

## KESIMPULAN DAN SARAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang telah  dilakukan  maka  dapat  disimpulkan bahwa    infusa  daun  sambiloto  ( Andrographis paniculata Nees) berpengaruh dalam menghambat pertumbuhan Shigella dysenteriae secara in vitro. Besarnya pengaruh  berbagai  konsentrasi  infusa  daun sambiloto  dalam  menghambat  pertumbuhan bakteri Shigella  dysenteriae adalah  sebesar 91,1  %.  Konsentrasi  terbesar  infusa,  yaitu 100%  mampu  menghambat  pertumbuhan bakteri  dengan  rata-rata  diameter  zona hambat  24,3  mm.  Kami  menyarankan  agar dilakukan penelitian lanjut tentang penggunaan  ekstrak  daun  sambiloto  untuk pengobatan penyakit disentri yang disebabkan bakteri Shigella  dysenteriae .  Infusa  daun dapat  digunakan  sebagai  langkah  awal  dalam penelitian  menggunakan  ekstrak  sehingga  ke depannya dapat dihasilkan sediaan yang lebih praktis diaplikasikan oleh masyarakat.

## DAFTAR PUSTAKA
Jawetz,  E.,  J.  L.  Melnick  and  E.  A. Adelberg.1986. Mikrobiologi untuk Profesi Kesehatan . Edisi 16. EGC, Jakarta. Mangan. M. 2003. Budidaya dan Pemanfaatan Tanaman Obat . Jakarta. Penebar Swadaya.
McKane, L and J. Kandel. 1986. Microbiology:
Essentials  and  Applications .  Singapore. McGraw-Hill.
Supriadi.  2001. Tumbuhan  Obat  Indonesia Penggunaan  dan  Khasiatnya .  Jakarta. Pustaka Populer Obor.
Yusron, M. 2005. Budidaya Tanaman Sambiloto . Badan Penelitian dan Pengembangan Pertanian, Balai Penelitian Tanaman Obat dan Aromatika. Yogyakarta.