## KARAKTERISASI SCAFFOLD HYDROXIAPATITE GYPSUM PUGER
KOMBINASI ALGINAT RUMPUT LAUT COKLAT (SARGASSUM SP) SEBAGAI

## BONE GRAFT DENGAN METODE FREEZE DRYING
CHARACTERIZATION OF HYDROXYAPATITE GYPSUM PUGER (HAGP) SCAFFOLD AND BROWN SEAWEED ALGINATE ( SARGASSUM SP ) AS BONE GRAFT WITH FREEZE-DRYING METHOD
Safira Annisa Yasmin Pambudi, Amiyatun Naini, and Agus Sumono Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Jember Correspondence email to: safiraannisayp@gmail.com

## ABSTRAK
Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  menganalisis  karakterisasi  bahan Scaffold HAGP  dengan kombinasi alginat rumput laut coklat (sargassum sp) menggunakan FTIR (Fourier Transform Infra Red . Menganalisis bentuk porositas dari bahan Scaffold HAGP dengan kombinasi alginat rumput laut  coklat (sargassum  sp) dengan  SEM ( Scanning  Electron  Microscopy ) dan melihat  prosentase porositas dari bahan Scaffold HAGP dengan kombinasi alginat rumput laut coklat (sargassum sp) dengan  menggunakan  uji  porositas.  Metode  penelitian  menggunakan  metode  deskriptif.  Metode analisis  data  menggunakan  FITR,  dan  uji  porositas.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa karakterisasi  bahan Scaffold HAGP  dengan  kombinasi  alginat  rumput  laut  coklat (sargassum  sp) menggunakan  FTIR (Fourier  Transform  Infra  Red) dijelaskan  bahwa  pola  FTIR  hidroksiapatit gipsum  Puger  (HAGP)  dan  gabungan  pola  FTIR  HAGP  dengan  Alginat  nampak  ada  kemiripan pola FTIR HAGP. Bentuk porositas dari bahan Scaffold HAGP dengan kombinasi alginat  rumput laut coklat (sargassum sp) .
Kata kunci : alginate, Freeze Drying , karakterisasi, Scaffold dan gipsum Puger

## ABSTRACT
The  purpose  of  the  study  is  to  analyze  the  characterization  of  scaffold  material  combination  of Hydroxyapatite Gypsum Puger (HAGP) and brown seaweed alginate (sargassum sp) using Fourier Transform Infra-Red (FTIR). Analyzing the shape of the porosity of the HAGP scaffold material and  brown  seaweed  alginate  using  Scanning  Electron  Microscopy  (SEM)  and  observing  its percentage using the porosity test. The research method uses a descriptive approach. Meanwhile, the data analysis method used FTIR and the porosity test. The results revealed that the FTIR pattern of  HAGP  and  the  combination  of  the  FTIR  pattern  of  HAGP  with  alginate  appeared  to  have similarities  to  the  FTIR  pattern  of  HAGP.  The  shape  of  porosity  of  the scaffold HAGP material with a combination of brown seaweed alginate (sargassum sp).
Keywords : alginate, freeze-drying, characterization, scaffold and gypsum puger

## PENDAHULUAN
Rekayasa  jaringan  adalah  teknologi
biomedis yang dikembangkan untuk membantu  regenerasi  jaringan  tubuh  dalam mengobati  defek.  Inovasi  baru  di  bidang kedokteran  gigi  dalam  teknik  rekayasa jaringan salah satunya adalah perancah Bone Graft .  Perawatan  kerusakan  tulang  yang besar  memerlukan  suatu  bahan  substitusi tulang  untuk  memacu  tumbuhnya  tulang baru  sehingga  rekontruksi  kerusakan  tulang tersebut dapat diatasi. 1 Scaffold adalah suatu struktur  tiga  dimensi  yang  digunakan sebagai  media  penyangga  sementara  untuk mendukung proses pertumbuhan dan perkembangan jaringan. 2
Salah satu bahan yang telah dimanfaatkan  sebagai  bahan Scaffold  Bone Graft adalah  hidroksiapatit  karena  memiliki kesamaan  dengan  mineral  penyusun  tulang dengan  elemen  utama  berupa  kalsium  dan fosfor. 3 Hidroksiapatit  (HA)  merupakan salah satu bahan scaffold senyawa anorganik (Ca 10 (PO 4 ) 6 (OH) 2 )  yang  memiliki  kesamaan kimia  dan  fisika  dengan  mineral  penyusun tulang  dan  gigi  serta  kalsium  dan  fosfor sebagai  elemen  utamanya. 3,4 Hidroksiapatit (HA)  yang  dapat  digunakan  berasal  dari sumber  alami  mapun  sintetis.  Material dengan  sifat  biokompatibilitas  sangat  baik pada  jaringan  rongga  mulut  dan  afinitas tinggi dimiliki oleh HA sintetis. Hidroksiapatit sintetis yang digunakan dapat diperoleh  dari  gipsum  puger  (HAGP). Penelitian  sebelumnya  menunjukkan  bahwa gipsum  puger  memiliki  kadar  kalsium  lebih tinggi  dibanding  gipsum  komersial  dan sebagai  alternatif  bahan  yang  mudah didapatkan dan harga terjangkau. 5 Salah  satu  biopolimer  dari  alam  yaitu alginat. 6 Alginat  adalah  sebuah  struktur polisakarida  dari  matriks  amorf  yang terdapat  pada  dinding  rumput  laut  coklat (phaeophyte) . Semua  jenis  dari  rumput  laut coklat  mengandung  alginat.  Rumput  laut coklat  bisa  secara  potensial  digunakan sebagai  sumber  penghasil  alginat  seperti macrocystis, turbinaria, padina dan sargassum  sp . 7 Penelitian  ini  menggunakan sargassum  sp karena Sargassum  sp . mengandung bahan  alginat  dan  iodin  yang digunakan  pada  industri  farmasi.  Selain  itu juga,  Sargassum  sp.  mengandung  senyawa- senyawa aktif steroida, alkaloida, fenol, dan
triterpenoid  berfungsi  sebagai  antibakteri, antivirus, dan anti jamur. 8
Penelitian ini menggunakan salah satu metode yang digunakan untuk
menghasilkan
Scaffold adalah  metode Freeze  drying . Pembuatan  scaffold  dapat  menggunakan metode freeze  drying yang  memiliki kelebihan  yaitu  dapat  meningkatkan  daya rehidrasi  dan  mempertahankan  stabilitas struktur bahan serta produk. 5 Metode freeze drying dapat menghasilkan scaffold dengan sifat  yang  porus  dengan  perubahan  yang sangat  kecil  terhadap  ukuran  dan  bentuk bahan aslinya.
Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  1) Menganalisis  karakterisasi  bahan  s caffold HAGP  dengan  kombinasi  alginat  rumput laut  coklat (sargassum  sp) menggunakan FTIR (Fourier Transform Infra Red) dalam diameter  pori;  2)  Melihat  prosentase porositas dari bahan Scaffold HAGP dengan kombinasi  alginat  rumput  laut  coklat (sargassum  sp) dengan  menggunakan  uji porositas
METODE PENELITIAN Jenis penelitian ini adalah eksperimental laboratoris. Penelitian
dilaksanakan  pada  bulan  Agustus  tahun 2020-Maret  2021.  Variabel  Bebas  antara lain  1)  Suhu  pembekuan  awal  -60  C scaffold HAGP-Alginat, scaffold HAGP, dan scaffold Alginat  pada  metode  freeze drying:  2)  Suhu  pembekuan  awal  -10  C scaffold HAGP-  Alginat, scaffold HAGP, dan scaffold Alginat  pada  metode freeze drying .  Variabel  terikat  pada  penelitian  ini adalah  porositas Scaffold HAGP-  Alginat dan  Gelatin, Scaffold HAGP, Scaffold Alginat.  Variabel  Kontrol  antara  lain  jenis dan  asal  rumput  laut  coklat  ( Sargassum sp.). Prosedur pembuatan Scaffold komposit HAGP-  Alginat  dengan  metode freeze drying , Metode ekstraksi alginat rumput laut coklat, Durasi waktu pembekuan pada freeze drying .

## Prosedur Kerja
Prosedur  penelitian  dilakukan  dalam dua tahap, yaitu tahap pembuatan sampel dan karakterisasi  sampel  dan  uji  identifikasi rumput  laut  coklat.  Identifikasi  rumput  laut coklat dilakukan di Laboraturium Botani dan
Kultur  Jaringan,  Jurusan  Biologi  FMIPA Universitas Jember. Sterilisasi alat dilakukan dengan  alat-alat  yang  terbuat  dari  plastic dicuci bersih, dikeringkan kemudia direndam alcohol  70%  selama  15  menit,  kemudian untuk alat-alat yang terbuat dari logam yang akan  digunakan  dicuci  bersih  kemudian disterilkan  dengan  autoclave  selama  15 menit  dengan  suhu  121  .  Kemudian dilakukan  pembuatan  Sampel  yaitu  1) Pembuatan Scaffold ; 2) Hidroksiapatit Gipsum Puger (HAGP) Ekstraksi Alginat dari Rumput Laut  Coklat ( Sargasum  sp );  3)  Pembuatan Scaffold HAGP-  Alginat  dan  4)  Pembuatan Scaffold Alginat

## Bahan dan Alat
Alat  penelitian  yang  digunakan  antara lain  timbangan  digital  ( Adam,  UK ),  gelas beaker  (Pyrex,  Germany) , pot  bottle  (Pyrex, Germany, gelas ukur (Pyrex, Germany) , pipet Magnetik  stirrer  ( Lab  Tech,  England) , Ultrasonic  Homogenizet  Sonic  Ruptor  400 (OMNI  INC,  US) ,  kertas  saring  Spatula, kertas pH, k. Penjepit dan indikator pH, oven, Vortex (Labinco L46), Blender, Freeze drying VaCo  5-II-D  (Zirbus,  Germany) , waterbath shaker dan Fourier  Transform  Infra  Red
(FTIR) Bahan  penelitian  ini  yaitu  akuades, rumput laut  coklat  (Sargassum  sp.),  Na 2 CO 3, HCl, NaOCl, diammonium Hydrogen Phosphate  (DHP),  HAGP  (Hidroksiapatit
Gipsum  Puger), KOH,  Gelatin,  Alumunium Foil,  Gelatin,  Phosphate  Buffer  Saline  (PBS) dan Etanol
Data kualitatif dan kuantitatif dilakukan uji normalitas dan uji homogenitas terlebih dahulu untuk mengetahui  data  yang  dihasilkan  termasuk pada  data  parametrik  ataupun  non parametrik.  Uji  normalitas  yang  digunakan adalah  uji  shapiro  wilk  test,  dan  uji homogenitas  dilakukan  menggunakan  uji levene dengan derajat kemaknaan (p ≥0,05). Kemudian  dilakukan  uji  beda  Kruskal Wallis.  Jika  hasil  uji  beda  tersebut signifikan  (p<0,05),  maka  di  lakukan  uji Mann  Whitney  untuk  menuntukan  ada tidaknya  perbedaan  yang  bermakna  antar kelompok  sampel.  Adanya  perbedaan  yang bermakna  ditandai  dengan  signifikansi p<0,05.

## HASIL
Hasil  pengujian  FTIR  dari  ketiga  sampel dengan  variasi  suhu.  Hasil  uji  FTIR  pada sampel Scaffold Hidroksiapatit  Gipsum Puger  (HAGP),  Ekstraksi  Alginat  dari Rumput  Laut  Coklat  ( Sargasum  sp ), Scaffold HAGP-  Alginat  dan Scaffold Alginat  dapat  dilihat  pada  Gambar
Gambar 1. Spektra FTIR Scaffold HAGP-Alginat dan Gelatin dengan  Suhu -10 o C dan-60 o C
Gambar 2. Scaffold HAGP dengan Suhu - 10 o C dan-60 o C
Gambar 3. Scaffold Alginat dengan Suhu -10 C dan-60 C
Hasil  karakteristik  FTIR  menunjukkan bahwa  semua  kelompok  sampel  memiliki setiap unsur yang terdapat dalam HAGP yaitu ion  yang  terbentuk  pada  hidroksiapatit  yaitu fosfat  (PO 4 ),  hidroksil  (OH)  dan  Carbonat. kemudian kandungan gelatin yaitu Amide dan alginat.  Hal  ini  terlihat  dari  puncak  serapan bilangan  gelombang.  Hasil uji FTIR menunjukkan Scaffold HAGP-Alginat  pada suhu  -10 0 memiliki  gugus  ion  karbonat  dari hidroksiapat  pada  bilangan  gelombang  2600 cm -1 pada  rentang  4000 – 30.000  cm -1 . Karena  dengan  intensitas melebar  maka  pada gugus  ini  teridentifikasi  O – H  yang membentuk ikatan asam karbohidrat. Kemudian  gugus  fosfat  pada  bilangan gelombang 1600 pada rentang 2500-2000 cm -1 penyerapan  yang  disebabkan  oleh  ikatan rangkap  seperti  C  =  O,  C  =  N  dan  C  =  C. Kemudian  pada  wilayah  Gugus  N-H  dari Gelatin pada Bilangan Gelombang 1.350 pada rentang  1500 cm -1 sampai  400  cm -1 terkandung gugus alkana.
Uji  FTIR  kemudian  dilakukan  juga pada  enam  sampel Scaffold yang  telah disintesis  terlihat  dari  data  yang  didapat terdapat puncak pada rentang 400-4000 cm -1 ,
yang  menandakan  adanya  karbonat  apatit pada Scaffold yang  diuji.  Teramati  pula adanya puncak-puncak pada 1.200 cm -1 , 1600 cm -1 , 2360 cm -1 . Berdasarkan spektrum FTIR menunjukkan  pola  FTIR  hidroksiapatit gipsum  Puger  (HAGP)  dan  gabungan  pola FTIR  HAGP  dengan  Alginat.  Berdasarkan gambar  tersebut  nampak  ada  kemiripan  pola FTIR HAGP. Spektra inframerah dari HAGP menunjukkan adanya ikatan molekul hidrogen  pada  bilangan  gelombang.  Spektra infra merah yang menunjukkan adanya ikatan molekul  hidrogen  terjadi  pada  bilangan gelombang  yang  ditandai  dengan  adanya vibrasi gugus fungsi dari H-O-H. Pada proses pembuatan  HAGP,  Alginat  dilarutkan  dalam PBS  0,65M  dengan menggunakan  magnetic stirrer  pada  suhu  10  C  selama  2  jam kemudian didinginkan pada suhu 37  C.
Pengujian Porositas Porositas  yang  dimiliki  oleh Scaffold HAGP-Alginat  dan  gelatin  dengan  suhu 10  C  senilai  64%, Scaffold HAGP-Alginat dengan  suhu  -60  C  dengan  nilai  74%, Scaffold HAGP  dengan  suhu  10  C  dengan nilai  69%, Scaffold HAGP dengan  suhu  -
60  C dengan nilai 54%, sedangkan Scaffold Alginat  dengan  suhu  10  C,  dan Scaffold
Alginat  dengan  suhu  -60  C  semuanya
bernilai  0.  Hal  itu  dikarenakan  uji  sampel larut  pada  etanol.  Hal  ini  dijelaskan  pada Gambar 4.
Gambar 4. Prosentase Porositas Berbagai Sampel Pada Suhu 10 0 dan 60 0 C
Prosentase porositas dari bahan Scaffold HAGP dengan kombinasi alginat rumput laut coklat (sargassum  sp) dengan  menggunakan uji porositas menunjukkan bahwa HAGP pada suhu 10 0 C memiliki hasil porositas lebih besar dibandingkan  pada  suhu  60 0 C.  Sedangkan HAGP Alginat  pada  suhu  10 0 C  menunjukkan nilai poritas  yang  lebih  besar  dibandingkan pada  suhu  60 0 C.  Sampel  yang  nilai porositasnya  semakin  kecil  dan  mendekati nilai  porositas  kontrol  menunjukkan  nilai  uji porositas yang lebih baik.
Hasil uji normalitas persentase porositas menunjukkan  signifikansi  P  >  0,05 pada  seluruh  kelompok  sampel  (Tabel  1), sehingga  data  dikategorikan  berdistribusi normal yaitu HAGP pada suhu 10 0 C. Sedangkan  hasil  uji  homogenitas persentase porositas menunjukkan
signifikansi  p<  0,05  (Tabel  2),  sehingga data  dikategorikan  berdistribusi  tidak homogen.  Selanjutnya  dilakukan  uji  beda persentase  porositas  menunjukkan  p>0,05 (Tabel  3),  sehingga  data  dikategorikan terdapat perbedaan signifikan. Uji perbedaan  bermakna  pada  persentase porositas sampel menunjukkan p>0,05 yaitu tidak  adanya  perbedaan  yang  bermakna antar kelompok sampel.
Tabel 1.  Hasil  Uji  Normalitas  Data  Shapiro
Wilk Kelompok Prosentase Prosoitas t statistik Prosentase Prosoitas Signifikan (P) HAGP pada suhu 10 0 C 0,864 0,274 HAGP pada suhu 60 0 C 0,630 0,001 HAGP Alginat pada suhu 60 0 C.
Tabel 2.  Hasil  Uji  Normalitas  Data Shapiro  Wilk Persentase Porositas Scaffold
HAGP Kelompok Prosentase Prosoitas t statistik Prosentase Prosoitas Signifikan (P) HAGP Alginat pada suhu 10 0,698 0,011 HAGP Alginat pada suhu 60 0,847 0,215 Tabel 3. Uji Homogenitas Levene Statistic HAGP Levene Statistic Sig. 4,206 ,030
Tabel 4. Uji Homogenitas Levene Statistic HAGP     Alginat Levene Statistic Sig. 3,206 ,045 Selanjutnya dilakukan uji beda Kruskal Wallis  Test  untuk  melihat  perbedaan signifikan  pada  sampel  HAGP  dan  HAGP Alginat pada suhu  -10 0 C dan suhu  -60 0 C dan scaffold HAGP  Alginat  memiliki  signifikansi <  0,05.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  semua sampel  memiliki  perbedaan  yang  signifikan antar  kelompoknya.  Data scaffold HAGP Alginat pada suhu 10 0 C dan suhu -60 0 C dilihat pada Tabel 5.
Tabel 5. Hasil Uji Beda dengan Persentase
Porositas Scaffold HAGP Alginat Uji Beda Porositas Chi-square 4,460 Molekul Asymp. Sig. 0,216
Berdasarkan hasil uji maka dapat dijelaskan karakteristik  HAGP  Alginat  pada berbagai  suhu dengan metode Freeze Drying seperti Tabel 6.
Tabel 6. Karakteristik HAGP Alginat pada berbagai suhu dengan metode Freeze Drying Karakteri stik HAGP pada suhu 100 HAGP pada suhu 600 HAGP Alginat pada suhu 100 HAGP Alginat pada suhu 600 Diameter Pori 72,59- 107,6 µm 92,68- 480,3 µm 31,9- 117,8 µm 36,89- 217,9 µm Diameter Pori (Mean± SD) 311,90 ±238,5 4 µm 227,21 ± 94,77 µm 178,01 ± 147,10 µm 121,16± 53,22 µm Porositas (Mean± SD) 69,11% ± 8,39% 54,17% ± 8,33% 74,41% ±27,73 % 63,81% ±5,07%

## PEMBAHASAN
Penelitian ini menggunakan
hidroksiapatit  dari  limbah  gypsum  Puger yang dipadukan dengan Gelatin dan Alginat. Metode  yang  digunakan  adalah Freeze Drying dengan  variasi  suhu  pembekuan awal.  Scaffold  HAGP  Gelatin  Alginat  yang dihasilkan  pada  variasi  suhu  pembekuan  - 10 0 C  dan  -60 0 C  memiliki  karakteristik  yang berbeda.  Hal  itu  dapat  diketahui  dengan
melihat hasil karakteristik FITR, SEM dan uji porositas.
Berdasarkan hasil data spketrum FTIR diketahui  bahwa  scaffold  HAGP-Gelatin- Alginatmemiliki  pola  spektrum  yang  mirip. Scaffold  HAGP-Gelatin-Alginat  dibuat  dari tiga bahan utama yaitu hidroksiapatit gipsum Puger,  gelain  dan  alginat.  Hal  itu  dijelaskan masing-masing struktur kimia khas. Menurut Naini  dkk  (2014)  menjelaskan  bahwa hidroksiapatit  gipsum  Puger  pada  gambar berikut  dengan  jangkauan  400  sampai  4000 cm  untuk  melihat  ikatan  molekulmolekul pada hidroksiapatit, secara umum ada tiga ion yang  terbentuk  pada  hidroksiapatit  yaitu fosfat  (PO4),  hidroksil  (OH)  dan  Ca-O. Puspawati  dkk  (2015)  menerangkan  bahwa gelatin  memiliki  daerah  serapan  kurva puncak serapan khas gelatin dibagi menjadi 4 bagian  yaitu  daerah  serapan  amida  A  pada 3600-2300  cm-1,  amida  I  pada  1636-1661 cm-1,  amida  II  pada  1560-1335  cm-1,  dan amida  III  pada  ν 1300-1200  cm-1.  Hasil  uji FTIR  menunjukkan Scaffold HAGP  pada suhu -600C memiliki gugus ion karbonat dari hidroksiapat  pada  bilangan  gelombang  900 cm-1 sampai  1500 cm-1 memiliki  gugus ion karbonat  dari  hidroksiapatt  pada  bilangan gelombang  900  cm-1,  Gugus  Fosfat  pada bilangan gelombang 1500 cm-1 Sampai 2000 cm-1  Gugus  N-H  dari  gelatin  pada  bilangan gelombang  3.200  cm-1.  Uji  FTIR  kemudian dilakukan  juga  pada  enam  sampel Scaffold yang  telah  disintesis  terlihat  dari  data  yang didapat  terdapat  puncak  pada  rentang  400 cm-1-4000  cm-1,  yang  menandakan  adanya karbonat apatit pada Scaffold yang diuji.
Menurut  Cimdina  dan  Natalija  (2012), HAp komersial yaitu gugus fosfat (PO 4 ) 3 - pada bilangan gelombang 1156-1000 cm -1 , 960 cm - 1 , 600-560 cm -1 dan 460 cm -1 , gugus karbonat (CO 3 ) 2- pada  bilangan  gelombang  1640  cm -1 , 1460  cm -1 ,  1450  cm -1 ,  1418  cm -1 ,  1384  cm -1 dan  gugus  hidrogen  fosfat  (HPO 4 ) 2- pada bilangan  gelombang  875  cm -1 .  Menurut Harahap  (2015),  adanya  gugus  PO 4 3- dan  OH - yang  merupakan  gugus  fungsional  dari  HAp mengindikasikankan  adanya  kandungan  HAp pada  sampel  Gugus  PO 4 3- dan  OH - yang muncul  dengan  puncak  yang  lebih  tajam menandakan  intensitas  absorbsi  yang  lebih tinggi.  Semakin  tinggi  intensitas  absorbsi, semakin  banyak  kandungan  PO 4 3- dan  OH -
Semakin tajam puncak gugus PO 4 3-
mengindikasikan  pertumbuhan  kristalinitas yang  semakin  baik,  yang  artinya  HAp  yang didapat  semakin  baik.  Berdasarkan  analisis puncak  FTIR  dapat  dikatakan  semua kelompok  sampel  memiliki  puncak  setiap bilangan  gelombang  HAGP  gelatin  dan Alginat.  Hal  ini  menunjukkan  tidak  ada kehilangan  unsur  kimia  penyusunan  pada scaffold HAGP Gelatin Alginat  pada metode Freeze Drying dengan variasi suhu pembekuan.
Berdasarkan hasil pengujian menunjukkan  porositas  dari  bahan Scaffold HAGP dengan kombinasi alginat rumput laut coklat (sargassum  sp) menunjukkan  bahwa HAGP  pada  suhu  10 0 C  memiliki  hasil porositas lebih besar dibandingkan pada suhu 60 o C.  Sebaliknya  pada  pengujian  HAGP Alginat  pada  suhu  60 0 C  menunjukkan  nilai poritas  yang  lebih  besar  dibandingkan  pada suhu  10 o C.  Berdasarkan  hasil  uji  beda persentase  porositas scafold menunjukkan bahwa ada perbedaan hasil uji porositas. Nilai porositas  pada  suhu  -10°C  mempunyai  nilai porositas  lebih  besar  dari  suhu  -  60°C. Menurut  Saraswati  (2015),  hal  ini  karena semakin  rendah  suhu  yang  digunakan  dan semakin  cepat  waktu  yang  digunakan  maka pada  saat  pembekuan  akan  menyebabkan partikel  hidroksiapatit  akan  diisi  oleh filler kolagen lebih  cepat,  hal  ini  karena  suhu pembekuan  yang  digunakan  lebih  rendah maka dendrite kristal  es  akan  semakin  kuat ketika  mendesak  partikel  hidroksiapatit  dan kolagen  sehingga  ikatan  antara kolagen  dan hidroksiapatit lebih rapat dan nilai porositasnya kecil. 10
Scaffold HAGP  porositas  yang  lebih besar  tersebut  mungkin  disebabkan  oleh perbedaan konsentrasi alginat. Semakin tinggi konsentrasi  polimer  yang  digunakan  akan menghasilkan  porositas  yang  semakin  kecil, sebaliknya  semakin  rendah  konsentrasi polimer  yang  digunakan maka  porositas  akan semakin besar.
Porositas
Scaffold hidroksiapatit/alginat lebih besar dari porositas Scaffold dengan konsentrasi alginat 11 ,  Hal  ini  disebabkan  pada  larutan alginat memiliki viskositas yang lebih rendah terkandung  lebih  banyak  pelarut  (DDW), sehingga  ketika  dilakukan  proses Freeze Drying terjadi sublimasi sehingga meninggalkan pori- pori yang berukuran besar dan  jumlah  lebih  banyak  pada Scaffold . Porositas Scaffold hidroksiapatit/alginat  dan
Scaffold hidroksiapatit/alginat yang dihasilkan oleh  penelitian  ini  masih  dalam  rentang  nilai porositas  yang  menjadi  syarat  pada Scaffold untuk  rekayasa  jaringan  tulang  yaitu  adalah 80-90%.  Porositas  yang  besar  meningkatkan adanya  perlekatan  sel  yang  lebih  banyak karena menghasilkan area permukaan Scaffold yang  lebih  luas.  Penelitian  ini  sesuai  dengan Aufan et  al .,  (2012)  dimana  hasil  dari pengujian SEM menyatakan; pertama, berhasil didapatkannya scaffold dengan  sifat  porus menggunakan metode Freeze Drying/ karbonat apatit yang ditambahkan teramati keberadaannya pada permukaan scaffold . Interaksi  antar  rantai  polimer  alginat berupa  struktur egg-box yang  kemungkinan hanya  terjadi  di  permukaan Scaffold dapat berpengaruh  pada  sifat  yang  lain  yaitu  sifat mekanis  dan  biodegradasi.  Hal  ini  karena Scaffold dengan  tingkat crosslink yang  tinggi atau  terdapat  lebih  banyak  struktur egg-box memiliki  integritas  mekanis Scaffold yang lebih  baik  dibanding Scaffold dengan  tingkat crosslink yang  rendah.  Penggunaan  alginat yang  diekstrak  dari  spesies Sargassum  sp menjadi  perhatian  tersendiri  karena  spesies tersebut  merupakan  spesies  alga  coklat  yang banyak  terdapat  di  perairan  Indonesia.  Hal tersebut  dapat  menekan  biaya  produksi  dari persiapan  material  alginat  dan  meningkatkan pemanfaatan bahan alam dari dalam negeri.

## SIMPULAN
Berdasarkan  hasil  uji pada bab sebelumnya  maka  dapat  disimpulkan  bahwa Scaffold HAGP – Gelatin-Alginat  rumput  laut coklat (sargassum  sp) menggunakan  metode Freeze Drying pada  variasi  suhu  pembekuan menghasilkan  karakteristik  morfologi  dan porositas  yang  berbeda-beda.  Scaffold  HAGP – Gelatin-Alginat pada suhu pembekuan -60oC menghasilkan  diameter  pori  yang  lebih  besar daripada  Scaffold  HAGP – Gelatin-Alginat pada  suhu  pembekuan  -10oC.  HAGP  Gelatin- Alginat  pada  suhu  10 0 C  memiliki  hasil porositas  lebih  besar  dibandingkan  pada HAGP Gelatin-Alginat pada suhu suhu 60 o C.

## SARAN
Saran  yang  dapat  diberikan  dalam penelitian ini antara lain
a. a.  Scaffold  hydroxiapatite gypsum  puger dengan  kombinasi  alginat  rumput  lautcoklat (sargassum  sp) sebagai Bone  Graft dapat
diujikan  in  vivo  agar  peran  dan  fungsinya lebih dapat dipastikan manfaatnya. b.  Penelitian  selanjutnya  hendaknya  menguji pengaruh  perendaman Scaffold pada  larutan yang  dilakukan  pada  penelitian  ini  terhadap sifat-sifat
Scaffold hidroksiapatit/alginat seperti sifat mekanis dan biodegradasi.
DAFTAR PUSTAKA 1. Murugan,Ramalingan., Ramakreshna seeram.  Design  Strategies  Of  Tissue Engineering  Scaffolds  With  Controlled Fiber Orientation. PMID. 2007.7(12):4595-603. 2. Bariyah.,Naim,  Andries  Pascawinata,
Firdaus. Gambaran Karakteristik
Scaffold Hidroksiapatit  Gigi  Manusia Dengan  Metode  Planetary  Ball  Mill Menggunakan  Uji Scanning  Electron Microscope (SEM).  FKG  Universitas Baiturrahma. 2016
3. Milla  Lalita  El,  Decky  J.  Indrani  dan Bambang  Irawan.  Sintesis  Dan  Uji Porositas Scaffold Hidroksiapatit Alginat. ODONTO  Dental  Journal .
2018. 5(1): 24-45
4. Scaffold s of Chitosan- Graphene Oxide by  the  Freeze-Drying  Method  for Tissue  Regeneration. Molecules .  2018. 3(10):2651. doi: 10.3390/molecules23102651.
5. Naini,  dkk.  Effect  of  Hydroxyapatite Gypsum Puger Scaffold Applied to Rat
Alveolar  Bone  Sockets on Osteoclasts, Osteoblasts  and  The Trabecular  Bone Area. Dental Journal. 2               0          1           9. 52(1): 13-17
6. Hamrun,  dkk.  Physical  Characteristic Test  (Water  Content  and  Viscosity)  of extraction  Sodium  Alginate  Brown Algae  (Phaeopyta)  Species  Padina  sp. As  Basic  Material  For  production Dental  Impression  Material. Journal  of
Dentomaxillofacial  Science 2018.  3(2):
84-87
7. Rasyidah.  Kelimpahan  Lumut  Kerak ( Lichens )  sebagai  Bioindikator Kualitas Udara  Di  Kawasan  Perkotaan  Kota Meda . Klorofil . 2018. 1 (2): 88-92
8. Pujihastuti.  Teknologi  Pengawetan Buah  Tomat  Dengan Metode Freeze
Drying. METANA. 2009. 6 (01): 20-29
9. Kim,  J.H.,  Kim,  R.H.,  Lee,  J.  and Chang,H.W.Hydrogeochemical
Characterization  of  Major  Factors Affecting  the  Quality  of  Shallow Groundwater  in  the  Coastal  Area  at Kimje in South Korea. Environmental Geology . 2003. 44: 478-489. https://doi.org/10.1007/s00254- 003- 0782-5
10. Naini,  Amiyatun,  Ardhiyanto,  Hengky Bowo  dan  Yustisia,  Hengky  Bowo. Sintesis dan karakterisasi Hidroksiapatit dari  Limbah Dental  Gypsum Tipe  2 Bahan  Baku Bone  Graft.  Proccedings Book  Forkinas VI  FKG  UNEJ  14th- 15th 2016