## Pemodelan  Kondisi  Optimum  Ekstraksi  dan  Identifikasi Senyawa Penyusun Minyak Atsiri Lada Hitam

## (Extraction  Process  Optimation  Modelling  and  Identification Black Pepper Essential Oil)
Shintawati 1* , Analianasari 1 , Zukryandry 1
1 Jurusan    Teknologi  Pertanian,  Politeknik    Negeri    Lampung    Jl.    Soekarno-Hatta  No.  10 Rajabasa,  Bandar  Lampung,  35144, Telp.:(0721) 703995, Fax.: (0721) 787309 E-mail: shintawati@polinela.ac.id

## ARTICLE INFO ABSTRACT
Article history Submitted: June 16, 2021 Accepted: October 9, 2021 Published: October 23, 2021 Keywords: composition, extraction, GCMS, response surface method Black pepper is a spice with a spicy taste and a distinctive aroma that has become  known  as  the  King  of  Spices.  The  distinctive  aroma  of  black pepper comes from the volatile compounds that make up the essential oil of  pepper.  Black  pepper  essential  oil  has  antimicrobial  properties  that can  relieve  respiratory  infections  and  relieve  muscle  disorders.  The acquisition  of  pepper  essential  oil  from  the  distillation  process  is influenced by operating conditions. The aim of this study was to identify the  composition  of  black  pepper  essential  oil  compounds  using  GCMS and to optimize the operating conditions (material size, solvent ratio, and distillation time). The method used to determine the optimum condition is using  the  Response  Surface  Method  (RSM). The  results  showed  that  the highest yield of black pepper essential oil from this experiment is 5.14%. The  empirical  model  was  also  suitable  for  the  experiment  and  the optimum  conditions  for  producing  the  maximum  pepper  oil  yield  5,81% were  40  mesh  of  material  size,  0.12  (g.ml -1 )  of  solvent  ratio  and  162 minutes  of  distillation  time.  GCMS  test  results  showed  that  the  main constituents of pepper essential oil are caryophyllene, ocimene, limonene, carene, and  - pinene.
Copyright  ©  2021  Author(s).  This  work  is  licensed  under  a  Creative  Commons  Attribution- ShareAlike 4.0 International License.

## PENDAHULUAN
Biji lada hitam merupakan buah tanaman Piper nigrum dengan famili Piperaceae yang diperoleh dari  pengeringan  langsung  tanpa  melalui  proses  pengolahan.  Lada  digunakan  sebagai  bahan  pangan rempah,  memiliki  manfaat  bagi  kesehatan  antara  lain  meningkatkan  kemampuan  cerna  terhadap makanan,  pengobatan  batuk,  memperbaiki  permasalahan  pernafasan  dan  masalah  otot  jantung, diabetes,  analgesik  dan  anemia  (Alyaseen et  al .,  2018).  Minyak  atsiri  lada  merupakan  produk  hasil distilasi  lada  yang  kaya  akan  senyawa  volatil.  Aplikasi  minyak  atsiri  lada  hitam  banyak  digunakan sebagai  bahan  pereda  infeksi  pernafasan  dan  meringankan  nyeri  otot.  Permasalahan  dalam pengembangan  industri  berbahan  baku  lada  hitam  adalah  masih  terbatasnya  penelitian  kondisi optimum ekstraksi minyak lada dan identifikasi senyawa yang terkandung dalam minyak lada.
Kondisi  ekstraksi  seperti  suhu  dan  tekanan  operasi,  ukuran  bahan  baku,  perbandingan  jumlah bahan  baku  dan  perlarut  serta  lamanya  waktu  distilasi  akan  mempengaruhi  rendemen  minyak  atsiri
Shintawati: Pemodelan Kondisi Optimum Ekstraksi dan Identifikasi ...
hasil distilasi. Kondisi operasi proses ekstraksi dan lokasi tanam juga akan mempengaruhi komposisi senyawa yang ada di dalam produk minyak atsiri (Anggraini et al ., 2018). Ekstraksi minyak atsiri lada hitam asal Vietnam menghasilkan rendemen tertinggi 2,14% pada kondisi ukuran lada 160 mesh, rasio pelarut  0,048  g.ml -1 dan  waktu  distilasi  5,2  jam  dengan  kandungan  senyawa  terbesar  3-carene (29,21%), limonene (20,94%), caryophyllene (15,05%), dan  ß-pinene (9,77%) (Tran et al ., 2019).
Komposisi  terbesar  dalam  minyak  atsiri  lada  hitam  asal  Madagaskar  dan  Brazil  menurut Dosoky et  al .  (2019)  adalah  -pinene,  sabinene  -pinene,  3-carene, limonene, dan  -caryophyllene. Kajian  kondisi  optimum  ekstraksi  serta  komposisi  senyawa  penyusun  minyak  atsiri  lada  hitam  asal Provinsi Lampung masih terbatas. Penelitian ini bertujuan untuk mempelajari proses ekstraksi minyak lada  hitam  asal  Provinsi  Lampung  melalui  optimasi  kondisi  operasi  (perbandingan  pelarut,  waktu distilasi,  dan  ukuran  partikel  bahan  baku)  menggunakan response  surface  method (RSM)  serta mengidentifikasi  komposisi senyawa minyak atsiri lada hitam menggunakan gas cromatography and mass spectroscopy (GCMS). RSM merupakan suatu metode statistika untuk  perancangan percobaan, optimasi proses, dan pemodelan matematika untuk memprediksi perolehan di akhir proses (Kusuma & Mahfud, 2015).  RSM meninjau 2 atau lebih variabel proses yang berinteraksi satu dengan yang lain secara simultan (Anuar et al. , 2013).

## METODE PENELITIAN
Lada  hitam  yang  digunakan  berasal  dari  petani  lada  di  Kecamatan  Kebun  Tebu  Kabupaten Lampung  Barat  Provinsi  Lampung.  Penelitian  dilaksanakan  bulan  Juni  hingga  Oktober  2020  di Laboratorium  Balai  Pengujian  dan  Sertifikasi  Mutu  Barang  Dinas  Perindustrian  dan  Perdagangan Provinsi Lampung. Bahan pembantu lainnya antara lain aquadest dan batu didih. Alat yang digunakan adalah  seperangkat  alat  hidrodistilasi  Clavenger,  termometer,  piknometer,  ayakan  10,  20,  30  dan  40 mesh, oven dan neraca analitik dan instrumen GCMS dengan detektor FID. Metode pengujian kadar air lada hitam menggunakan metode gravimetri sesuai SNI 01 2891-1992 tentang Cara Uji Makanan dan Minuman.
Penelitian ini melibatkan 3 variabel bebas yaitu perbandingan bahan baku terhadap pelarut/ X 1 (0,07 g.ml -1 , 0,12 g.ml -1 , dan 0,17 g.ml -1 ),  ukuran sampel/X 2 (-10+20 mesh, -20+30 mesh, dan -30+40 mesh),  dan  waktu  distilasi/X 3 (60  menit,  135  menit,  dan  210  menit).    Minyak  atsiri  lada    hitam dihitung perolehannya menggunakan rumus berikut (Kusuma & Mahfud, 2015):
(1)
Dimana y adalah rendemen minyak atsiri lada hitam (%), v adalah berat minyak atsiri lada hitam yang terbentuk  (gram),  dan  w  adalah  berat  lada  hitam  bubuk  (gram).  Perolehan  minyak  atsiri  lada  hitam merupakan variabel tidak bebas (respons) pada penelitian ini. Rancangan penelitian ini menggunakan RSM Box-Behnken dan diperoleh 15 perlakuan sebagaimana Tabel 1.
Shintawati: Pemodelan Kondisi Optimum Ekstraksi dan Identifikasi ...

## Tabel 1. Rancangan penelitian menggunakan metode RSM Box-Behnken
Perlakuan Variabel bebas X 1 X 2 X 3 1 0,07 -10+20 135 2 0,17 -10+20 135 3 0,07 -30+40 135 4 0,17 -30+40 135 5 0,07 -20+30 60 6 0,17 -20+30 60 7 0,07 -20+30 210 8 0,17 -20+30 210 9 0,12 -10+20 60 10 0,12 -30+40 60 11 0,12 -10+20 210 12 0,12 -30+40 210 13 0,12 -20+30 135 14 0,12 -20+30 135 15 0,12 -20+30 135
Keterangan:  X 1 =  perbandingan  bahan  baku  terhadap  pelarut  (g.ml -1 ),  X 2 =  ukuran  sampel  bahan  baku (mesh), dan X 3 = waktu distilasi (menit).

## Pelaksanaan Penelitian

## Persiapan bahan baku
Penyeragaman kadar air biji  lada hitam dilakukan dengan menjemur biji lada hitam di bawah sinar matahari selama 2 hari, hingga kadar air mencapai 12%.

## Ekstraksi minyak atsiri lada hitam
Lada  hitam  yang  telah  dikeringkan  digiling  lalu  diayak  dengan  ukuran  yang  telah  ditentukan (-10+20 mesh, -20+30 mesh dan -30+40 mesh). Bubuk lada yang telah diayak ditimbang sebanyak 35 gram,  dimasukkan  ke  dalam  distilator,  ditambahkan  pelarut  dan  didistilasi  menggunakan  metode hidrodistilasi  selama  waktu  tertentu  sesuai  dengan  rancangan  penelitian  pada  Tabel  1.  Minyak  atsiri lada  hitam  yang  terbentuk  ditampung  dalam oil  trap dan  berdasarkan  berat  jenis  minyak  atsiri  lada yang  lebih  rendah  dari  air  maka  minyak  atsiri  berada  pada  lapisan  atas  yang  terpisah  dari  air  yang berada  dilapisan  bawah.  Minyak  atsiri  dipisahkan  dari  air  dengan  membuka  kran  yang  ada  pada oil trap.

## Identifikasi komposisi minyak atsiri lada hitam
Minyak atsiri lada hitam yang diperoleh dari ekstraksi disimpan dalam botol dan diberi natrium sulfat  anhidrat,  ditutupi  dengan  aluminium  foil  lalu  disimpan  pada  suhu  4 0 C  untuk  kemudian diidentifikasi  komposisinya  menggunakan  GCMS  (Dosoky et  al .,  2019).  Pengujian  GCMS dilaksanakan di Laboratorium Balai Pengujian Mutu Barang Kementerian Perdagangan, Jakarta.
Pemodelan matematis  untuk  memperkirakan hasil percobaan didasarkan pada hubungan antar variabel bebas yang dinyatakan dalam persamaan polinomial kuadratik dengan bentuk umum sebagai berikut:
Shintawati: Pemodelan Kondisi Optimum Ekstraksi dan Identifikasi ...
Dimana  o ,  i ,  ii ,  ij merupakan  koefisien  regresi,  Y  merupakan  variabel  tidak  bebas  yang diperkirakan,  dan  X    adalah  variabel  bebas.  Persamaan  model  matematika,  grafik  3  dimensi  yang memprediksi interaksi antar variabel serta kondisi optimum ekstraksi ditentukan menggunaan software Minitab 19 (Pawignya et al ., 2019).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Sifat Fisik dan Kimia Minyak Atsiri Lada Hitam
Minyak  atsiri  lada  hitam  dari  proses  hidrodistilasi  secara  fisik  berwarna  bening  dan  memiliki wangi yang khas. Hasil uji GCMS (Gambar 1) terhadap minyak atsiri hasil perlakuan nomor 13 yaitu perlakuan  yang  memberikan  rendemen  tertinggi,  menunjukkan  5  komponen  kimia  terbesar  dalam minyak  atsiri  lada  hitam  adalah  caryopyllene  (30,85%),  ocimene  (17,74%),  limonene  (13,81%),  3 carene  (9,62%),  dan  -pinene  (4,48%).  Jenis  senyawa  penyusun  minyak  atsiri  lada  hitam  dari Kabupaten  Lampung  Barat  memiliki  kemiripan  dengan  senyawa  penyusun  minyak  atsiri  lada  hitam dari  Kalimantan  Barat,  yaitu  trans-caryophellene  (23,77%),  limonene  (18,20%),  delta-3-carene (13,51%),  2-  -pinene  (9,54%),  dan  sabinene  (6,62%)  (Anggraini et  al .,  2018).  Minyak  atsiri  lada hitam  Lampung  mengandung  ocimene  yang  berfungsi  sebagai  antibakteri  seperti Staphylococcus aureus,  Salmonella  enterica ,  dan Helicobacter  pylori (Mahdian et  al .,  2017).  Faktor-faktor  yang mempengaruhi  komposisi  minyak  atsiri  antara  lain  teknik  pengolahan  tanah,  curah  hujan  tahunan, tingkat pemupukan, waktu panen, pengeringan dan teknologi ekstraksi yang digunakan (Andras et al., 2018).  Caryophyllene  bertindak  sebagai  analgesik,  antiinflamasi  (Klauke et  al .,  2014),  antikanker, analgesik (Fidyt et al ., 2016), bahan kosmetik, antijamur, dan  melemaskan otot akibat aktivitas fisik (Rmili et  al .,  2014).  Limonene  dan  pinene  yang  terkandung  dalam  minyak  atsiri  lada  hitam merupakan  senyawa  yang  memberikan  aroma  pada  minyak  atsiri  lada  (Lee et  al .,  2020)  dan  juga sebagai anti herpesvirus (Astani & Schnitzler, 2014).
Gambar  1.    Hasil  uji  GCMS  minyak  atsiri  lada  hitam  Kecamatan Kebun Tebu  Kabupaten  Lampung Barat
Shintawati: Pemodelan Kondisi Optimum Ekstraksi dan Identifikasi ...

## Optimasi Kondisi Ekstraksi Minyak Atsiri Lada Hitam
Rendemen minyak atsiri lada hitam dari hasil eksperimen ditampilkan pada Tabel 2.
Tabel 2. Rendemen minyak atsiri lada pada berbagai perlakuan
Perlakuan Rendemen minyak atsiri lada  dari eksperimen (% w/w) Prediksi rendemen minyak atsiri lada  dari model (% w/w) 1 2,14 2,64 2 2,57 2,92 3 4,29 3,92 4 4,29 3,79 5 2,00 2,07 6 1,86 2,07 7 3,43 3,21 8 3,43 3,36 9 3,86 3,29 10 4,43 4,71 11 5,12 4,86 12 5,00 5,57 13 5,14 5,14 14 5,14 5,14 15 5,14 5,14
Berdasarkan  Tabel  2,  dari  hasil  eksperimen  diperoleh  rendemen  minyak  atsiri  lada  hitam tertinggi  yaitu  5,14%  diperoleh  pada  kondisi  ukuran  bahan  -20  +  30  mesh,  rasio  sampel  terhadap pelarut 0,12 g.ml -1 dan waktu destilasi 135 menit. Minyak atsiri merupakan campuran senyawa mudah menguap, ukuran bahan baku yang terlalu kecil -30 + 40 mesh memungkinkan terjadinya kehilangan atau  penguapan  senyawa  volatil  tersebut  selama  proses  penggilingan  (Alam et.al, 2018).  Ukuran bahan  yang  lebih  besar  -10  +  20  mesh  berkorelasi  dengan  luas  permukaan  bahan  yang  sempit, sehingga kemudahan difusi minyak atsiri dari dalam bahan ke permukaan lebih lambat. Rasio pelarut berhubungan dengan densitas bahan dalam labu destilasi. Kepadatan bahan yang tinggi mengakibatkan lambatnya penguapan minyak atsiri yang berada di permukaan bahan akibat terhambatnya ruang gerak pelarut  untuk  membawa  senyawa  volatil.  Perbandingan  jumlah  padatan  terhadap  pelarut  merupakan faktor  yang  penting  dalam  proses  hidrodistilasi  (Rmili et  al., 2014).  Rasio  jumlah  padatan  terhadap pelarut  pada  penelitian  ini,  0,12  g.ml -1 ,  lebih  tinggi  dari  penelitian  Rmili et  al. (2014)  yaitu  0,0625 g.ml -1 .  Rasio  jumlah  padatan  terhadap  pelarut  berkaitan  dengan  perancangan  alat  destilator, semakin tinggi  rasio  maka  semakin  sedikit  volume  pelarut  yang  digunakan  maka  kapasitas  alat  yang dibutuhkan  akan  semakin  kecil.  Pengaruh  ukuran  partikel  bahan  baku  dan  waktu  distilasi  berkaitan dengan intensitas kontak antara senyawa volatil dengan pelarut, semakin lama waktu kontak semakin besar  transfer  masa  senyawa  volatil  melalui  difusi  dari  bahan  padat  ke  fasa  uap.  Namun,  waktu distilasi  yang  panjang  membutuhkan  energi  yang  besar,  yang  merupakan  salah  satu  biaya  terbesar dalam industri minyak atsiri.
RSM merupakan metode statistika dalam mengolah satu kelompok data dari suatu eksperimen guna  mengoptimasi  dan  menentukan  koefisien  model  matematika  (Pawignya et  al .,  2019).  Analisis data menggunakan RSM menghasilkan model matematika sebagaimana Tabel 3.
Shintawati: Pemodelan Kondisi Optimum Ekstraksi dan Identifikasi ...
Tabel 3. Hasil analisis respons ekstraksi minyak atsiri lada hitam
Model matematika Koefisien determinasi Nilai P Y =  -12,38 + 202,8 X 1 + 0,080 X 2 + 0,0423 X 3 - 826 X 1 2
+ 0,00054 X 2 2 - 0,000105 X 3 2 - 0,225 X 1 X 2 + 0,0100 X 1 * X 3 - 0,000238 X 2 * X 3 0,9204 0,027
Dimana Y adalah rendemen minyak atsiri lada hitam (% w/w), X 1 adalah rasio pelarut (g.ml -1 ), X 2 adalah  ukuran  sampel  (mesh),  dan  X 3 adalah  waktu  destilasi  (menit).  Nilai  koefisien  determinasi mencapai  0,9204  artinya  92,04%  dari  total  data  sesuai  dengan  hasil  rendemen  yang  diprediksi  oleh model  dan  hanya  7,96%  data  yang  salah  (Pawignya et  al., 2019).  Rendemen  minyak  atsiri  hasil prediksi dari model matematika disajikan pada Tabel 2. Dari hasil uji ANOVA diperoleh nilai P <0,05 yaitu  0,027,    hal  ini  menunjukkan  bahwa  model  matematika  bisa  diterima  pada  selang  kepercayaan 97,3%.
Tabel 4. Pengaruh koefisien korelasi terhadap model matematika
Sumber Derajat bebas Jumlah kuadrat Rata-rata kuadrat Nilai F Nilai P X 1 1 0,0102 0,0102 0,03 0,868 X 2 1 2,2959 2,2959 6,86 0,047 X 3 1 2,9490 2,9490 8,81 0,031 X 1 2 1 12,9808 12,9808 38,78 0,002 X 2 2 1 0,0106 0,0106 0,03 0,866 X 3 2 1 1,2822 1,2822 3,83 0,108 X 1 X 2 1 0,0459 0,0459 0,14 0,726 X 1 X 3 1 0,0051 0,0051 0,02 0,907 X 2 X 3 1 0,1276 0,1276 0,38 0,564
Nilai  P-Value  pada  Tabel  4  menunjukkan  signifikansi  koefisien  regresi  terhadap  model. Variabel  X 2 ,  ukuran  bahan  dan  X 3 ,  waktu  distilasi    memiliki  P-Value  <0,05  menunjukkan  koefisien kedua  variabel  bebas  pada  model  memiliki  pengaruh  signifikan  terhadap  rendemen  minyak  atsiri. Nilai  P-value  dari  interaksi  antar  variabel  bebas  lebih  besar  dari  0,05  yang  menunjukkan  interaksi antar variabel tidak berpengaruh terhadap rendemen minyak atsiri dan hal yang sama untuk kuadratik variabel X 2 dan X 3 .
Gambar 2. Pengaruh waktu distilasi dan ukuran bahan terhadap rendemen minyak atsiri
Shintawati: Pemodelan Kondisi Optimum Ekstraksi dan Identifikasi ...
Pengaruh  ukuran  bahan  dan  waktu  distilasi  terhadap  rendemen  diperlihatkan  pada  Gambar  2. Gambar  2  memperlihatkan  rendemen  minyak  atsiri  akan  meningkat  dengan  bertambahnya  waktu distilasi  dan  bertambahnya  ukuran  mesh  bahan  baku.  Rendemen  cenderung  konstan  untuk  waktu distilasi lebih dari 162 menit. Hal ini menunjukkan keseluruhan minyak atsiri lada terekstraksi  setelah 162 menit.
Gambar 3. Pengaruh waktu distilasi dan rasio pelarut terhadap rendemen minyak atsiri
Gambar  3  memperlihatkan  rendemen  minyak  atsiri  meningkat  dengan  bertambahnya  waktu distilasi  dan  rasio  pelarut. Rendemen  mengalami  penurunan  pada  rasio  pelarut lebih  dari  0,12  g.ml -1 dan  waktu  distilasi  lebih  dari  162  menit.  Gambar  4  memperlihatkan  peningkatan  rasio  pelarut  dan ukuran  bahan  akan  meningkatkan  rendemen  minyak  atsiri.  Rendemen  akan  mengalami  penurunan pada rasio pelarut lebih dari 0,12 g.ml -1 . Peningkatan ukuran mesh bahan akan memperluas permukaan bahan sehingga kontak antara pelarut dengan bahan akan meningkat dan senyawa volatil lebih mudah teruapkan (Rmili et al., 2014).
Gambar 4. Pengaruh rasio pelarut dan ukuran bahan terhadap rendemen minyak atsiri
Berdasarkan  Gambar  5,  kondisi  operasi  optimum  ekstrasi  minyak  lada  diperoleh  pada  kondisi rasio  pelarut  0,12  g.ml -1 ,  ukuran  bahan    40  mesh  dan  waktu  distilasi  162  menit  dengan  rendemen maksimum 5,81%.
Shintawati: Pemodelan Kondisi Optimum Ekstraksi dan Identifikasi ...

## Gambar 5. Kondisi optimum ekstraksi yang menghasilkan rendemen tertinggi

## KESIMPULAN
Rendemen minyak lada tertinggi dari hasil penelitian ini adalah 5,14% dan melalui pemodelan diperoleh  rendemen  tertinggi  sebesar 5,81%  yang  dicapai  pada  kondisi  optimum  yaitu  ukuran  bahan 40 mesh, rasio pelarut 0,12 (g.ml -1 ) dan waktu distilasi 162 menit. Senyawa utama penyusun minyak atsiri lada asal Provinsi Lampung adalah caryopyllene, ocimene, dan limonene.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terima  kasih  disampaikan  kepada  Unit  Penelitian  dan  Pengabdian  Masyarakat  Politeknik Negeri Lampung yang telah mendanai penelitian ini melalui dana DIPA Politeknik Negeri Lampung Nomor: 193.27/PL.15.8/PT/2020 tanggal 5 Juni 2020.

## DAFTAR PUSTAKA
Alyaseen,  F.  F.,  Hassan,  B.  A.,  &  Abdulhussein,  H.  S.  (2018).  Extraction,  isolation  and  chemical identification  of  piperine  alkaloid  from  black  pepper  seeds  and  its  antibacterialactivity. Plant Archives , 18 (2), 2171–2176.
Alam,  P.  N.,  Husin,  H.,  Asnawi,  T.  M.,  &  Adisalamun.  (2018).  Extraction  of  citral  oil  from lemongrass ( Cymbopogon Citratus ) by steam-water distillation technique. IOP Conf. Ser.: Mater. Sci. Eng. 345 012022. https:// doi:10.1088/1757-899X/345/1/012022
Anggraini,  R.,  Jayuska,  A.,  &  Alimuddin,  A.  H.  (2018).  Isolasi  dan  karakterisasi  minyak  atsiri  lada hitam  ( Piper  nigrum  L .)  asal  sajingan  kalimantan  barat. Jurnal  Kimia  Khatulistiwa , 7 (4),  124– 133.
Anuar, N., Mohd Adnan, A. F., Saat, N., Aziz, N., & Mat Taha, R. (2013). Optimization of extraction parameters  by  using  response  surface  methodology,  purification,  and  identification  of anthocyanin  pigments  in  melastoma  malabathricum  fruit. The  Scientific  World  Journal , 2013 . https://doi.org/10.1155/2013/810547
Astani,  A.,  &  Schnitzler,  P.  (2014).  Antiviral  activity  of  monoterpenes  beta-pinene  and  limonene against herpes simplex virus in vitro. Iranian Journal of Microbiology , 6 (3), 149–155.
Dosoky, N. S., Satyal, P., Barata, L. M., Da Silva, J. K. R., & Setzer, W. N. (2019). Volatiles of black pepper fruits (Piper nigrum L.). Molecules , 24 (23), 1–13. https://doi.org/10.3390/molecules24234244
Fidyt, K., Fiedorowicz, A., Strządała, L., & Szumny, A. (2016). β‐caryophyllene and β‐caryophyllene
Shintawati: Pemodelan Kondisi Optimum Ekstraksi dan Identifikasi ...
oxide—natural compounds of anticancer and analgesic properties. Cancer medicine , 5 (10), 3007- 3017. https://doi.org/10.1002/cam4.816
Klauke, A. L., Racz, I., Pradier, B., Markert, A., Zimmer,  A. M., Gertsch, J., & Zimmer, A. (2014). The  cannabinoid  CB2  receptor-selective  phytocannabinoid  beta-caryophyllene  exerts  analgesic effects in mouse models of inflammatory and neuropathic pain. European Neuropsychopharmacology , 24 (4), 608–620. https://doi.org/10.1016/j.euroneuro.2013.10.008
Kusuma, H. S., & Mahfud, M. (2015). Preliminary study: Kinetics of oil extraction from sandalwood by microwave-assisted hydrodistillation. ASEAN Journal of Chemical Engineering , 15 (2), 62–69. https://doi.org/10.22146/ajche.49687
Lee, J. G., Kim, D. W., Shin, Y., & Kim, Y. J. (2020). Comparative study of the bioactive compounds, flavours  and  minerals  present  in  black  pepper  before  and  after  removing  the  outer  skin. Lwt , 125 (January), 109356. https://doi.org/10.1016/j.lwt.2020.109356
Mahdian, F., Mahboubi, M., Rahimi, E., & Shad, M. M. (2017). Chemical composition, antimicrobial and  antioxidant  activities  of  Echinophora  platyloba  essential  oil. Infectio , 21 (3),  176–181. https://doi.org/10.22354/in.v21i3.675
Pawignya,  H.,  Kusworo,  T.  D.,  &  Pramudono,  B.  (2019).  Optimization  for  Production  Tert-Butyl Glycoside  Nonionic  Surfactant  Using  Response  Surface  Methodology. Journal  of  Physics: Conference Series , 1295 (1). https://doi.org/10.1088/1742-6596/1295/1/012003
Rmili,  R.,  Ramdani,  M.,  Ghazi,  Z.,  Saidi,  N.,  &  El  Mahi,  B.  (2014).  Composition  comparison  of essential  oils  extracted  by  hydrodistillation  and  microwave-assisted  hydrodistillation from  Piper nigrum L. Journal of Materials and Environmental Science , 5 (5), 1360–1367.
Tran, T. H., Ha, L. K., Nguyen, D. C., Dao, T. P., Nhan, L. T. H., Nguyen, D. H., Nguyen, T. D., Vo, D.  V.  N.,  Tran,  Q.  T.,  &  Bach,  L.  G.  (2019).  The  study  on  extraction  process  and  analysis  of components  in  essential  oils  of  black  pepper  (Piper  nigrum  L.)  seeds  harvested  in  Gia  Lai Province, Vietnam. Processes , 7 (2). https://doi.org/10.3390/pr7020056
Shintawati: Pemodelan Kondisi Optimum Ekstraksi dan Identifikasi ...