## PHARMACON– PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,

## FORMULATION AND ANTIBACTERIAL ACTIVITY TEST OF TOOTHPASTE ETHYL ASETATE FRACTION OF LEILEM LEAVES (Clerodendrum minahassae L.) AGAINTS

## Streptococcus mutans

## FORMULASI DAN UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI SEDIAAN PASTA GIGI FRAKSI ETIL ASETAT DAUN LEILEM (Clerodendrum minahassae L.) TERHADAP BAKTERI

## Streptococcus mutans
Anggun C. N. Egam 1) , Hosea J. Edy 1) , Surya S. Abdullah 1)
1) Program Studi Farmasi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Sam Ratulangi, Manado 95115
*anggunegam09april@gmail.com

## ABSTRACT
Leilem leaves (Clerodendrum minahassae L.) is one type of plant that can be used as an antibacterial because it contains active chemical compounds such as phenols, flavonoids, alkaloids, steroids, and terpenoids. This study aimed to formulate the ethyl acetate fraction of leilem leaves toothpaste that is physically good and to obtain the optimum toothpaste inhibition with dosage concentrations of 7.5%, 10%, and 12.5%  against the growth  of  Streptococcus  mutans  bacteria.  This  research  uses  laboratory  experimental  method.  The  results showed that the ethyl acetate fraction toothpaste preparation filled the physical evaluation requirements, that is organoleptic, homogeneity, spreadability, adhesion and pH. The antibacterial activity testing of the leilem leaves fraction toothpaste showed that the average diameter for F1 was 9.75 mm, F2 was 11.75 mm, and F3 was 13.08 mm. Based on the results of the study, it can be concluded that all formulations of the ethyl acetate fraction of leilem leaves provide antibacterial activity and filled the requirements of the physical test of the preparation and the greatest antibacterial activity is at F3 of 13.08 mm with a dosage concentration of 12.5%.
Keywords : Leilem Leaves, Toothpaste, Antibacterial, Streptococcus Mutans

## ABSTRAK
Daun Leilem ( Clerodendrum minahassae L .) merupakan salah satu jenis tanaman yang dapat  dimanfaatkan sebagai  antibakteri  karena  mengandung  senyawa  kimia  aktif  seperti  fenol,  flavonoid,  alkaloid,  steroid,  dan terpenoid.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  memformulasikan  sediaan  pasta  gigi  fraksi  etil  asetat  daun  leilem yang baik secara fisik serta mendapatkan daya hambat pasta gigi yang optimum dengan konsentrasi sediaan 7,5%,  10%,  dan  12,5%  terhadap  pertumbuhan  bakteri Streptococcus  Mutans .  Penelitian  ini  menggunakan metode eksperimental laboratorium. Hasil penelitian menunjukkan bahwa sediaan pasta gigi fraksi etil asetat memenuhi  persyaratan  evaluasi  fisik  yaitu  organoleptik,  homogenitas,  daya  sebar,  daya  lekat  dan  pH. Pengujian aktivitas antibakteri pasta gigi fraksi daun leilem menunjukkan bahwa diameter rata-rata untuk F1 yaitu 9,75 mm, F2 yaitu 11,75 mm, dan F3 yaitu 13,08 mm. Berdasarkan hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa semua formula sediaan fraksi etil asetat daun leilem memberikan aktivitas antibakteri serta memenuhi persyaratan uji fisik sediaan dan aktivitas antibakteri yang paling besar yaitu pada F3 sebesar 13,08 mm dengan konsentrasi sediaan 12,5%.
Kata kunci : Daun Leilem, Pasta Gigi, Antibakteri, Streptococcus Mutans

## PHARMACON– PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,

## PENDAHULUAN
Berdasarkan  data  Riset  Kesehatan  Dasar (2013),  kasus  karies  gigi  di  Indonesia  terjadi peningkatan.  Pada  tahun  2007,  penderita  karies gigi  aktif  meningkat  sebesar  9,8%  dari  angka 43,4%  menjadi  53,2%,  sedangkan  penderita pengalaman  karies  meningkat  5,1%  dari  angka 67,2%  pada  tahun  2007  dan  naik  menjadi  72,3% pada tahun 2013. Karies gigi yang disebabkan oleh bakteri Streptococcus  mutans dapat  dicegah dengan  bantuan  tindakan  mekanis  maupun senyawa  kimiawi  seperti  menyikat  gigi  dengan menggunakan pasta gigi. (Mason, 2000)
Bahan  alam  yang  dapat  digunakan  untuk mencegah  karies  gigi  yaitu  Tanaman  leilem (Clerodendrum  minahassae  L.) yang  merupakan salah satu jenis tanaman yang dapat dimanfaatkan sebagai antibakteri (Bontjura S, 2015). Banyak dari genus  ini  digunakan  sebagai  obat  tradisional  dan sebagai  pengobatan  secara  turun  temurun  untuk mengobati  berbagai  macam  penyakit karena tanaman  ini  mengandung  senyawa  kimia  aktif seperti  fenol,  flavonoid,  steroid,  dan  terpenoid (Shrivastava  dan  Patel,  2007).  Senyawa  aktif seperti  flavonoid  disintesis  oleh  tanaman  sebagai sistem pertahanan dan dalam responsnya terhadap infeksi oleh mikroorganisme sehingga senyawa ini efektif  sebagai  senyawa  antimikroba  terhadap sejumlah  mikroorganisme  (Parubak  dan  Sulu, 2013).  Berdasarkan  penjelasan  di  atas  penulis melakukan penelitian mengenai formulasi sediaan pasta gigi dengan menggunakan fraksi daun leilem (Clerodendrum minahassae L .) untuk memanfaatkan daun leilem (Clerodendrum minahassae L .) yang  masih  kurang  diberdayakan dengan menjadikan sediaan pasta gigi herbal yang berkualitas,  aman  dan  sehat  sesuai  dengan  SNI sediaan  pasta  gigi  serta  dapat  menghambat pertumbuhan  bakteri Streptococcus  mutans di dalam mulut.

## METODOLOGI PENELITIAN Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian dilaksanakan pada bulan Desember 2021  sampai  dengan  Juni  2022  di  laboratorium Farmasi  lanjut  Program  Studi  Farmasi,  Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam
Universitas Sam Ratulangi Manado.

## Alat dan Bahan
Alat
Alat yang digunakan adalah pH meter, alat-alat gelas  (Pyrex), rotary  evaporator ,  kaca  arlogi, termometer,  timbangan  digital  (Adam),  autoklaf,
batang  pengaduk,  cawan  petri,  inkubator,  oven (Inforce),  pingset,  blender  (Miyako),  aluminium foil,  hot  plate  (Nesco  Lab),  sentrifuge  (Hettich Zentrifungen), laminar  Air  Flow  (LAF) ,  ayakan, mistar berskala.

## Bahan
Daun  leilem  ( Clerodendrum  minahassae L .) , bakteri streptococcus  mutans, aquadest,  etanol 96%,  menthol,  kalsium  karbonat,  natrium  CMC, NaCL,  natrium  benzoat,  sodium  lauril  sulfat, saccharin,  sorbitol,  media  NA,  Etil  Asetat  dan kontrol positif (Pasta Gigi Antibakteri Daun Sirih).

## Prosedur Penelitian Pengambilan Sampel
Sampel  ini  diambil  di  perkebunan  Molas, Kecamatan  Bunaken,  Kota  Manado.  Setelah diambil  dimasukkan  dalam  wadah  yang  sudah disiapkan.

## Preparasi Sampel
Daun  leilem  ( Clerodendrum minahassae  L .) dibersihkan  di bawah  air  mengalir sampai  bersih, ditiriskan, lalu dikeringkan dengan oven pada suhu 40°. Daun  yang  telah  kering  diblender  kemudian disaring.

## Ekstraksi
Serbuk  daun  leilem  ditimbang seberat  500 gram, dimasukan dalam wadah dan di tambahkan etanol 96% sebanyak 2500 ml lalu diaduk hingga homogen, tutup segera kemudian disimpan dalam ruangan  yang terhindar  dari  cahaya  matahari selama  3  hari  sambil  sesekali  di  aduk. Setelah direndam  selama  3  hari, disaring  dengan menggunakan kertas saring lalu diperoleh maserat 1 dan residu. Residu 1 dimaserasi kembali selama 2  hari  dengan  pelarut  etanol  96%  sebanyak  1500 ml.  Setelah  direndam  selama  2  hari,  disaring menggunakan  kertas  saring  dan  memperoleh maserat  2  dan  debris  2.  Kumpulan  maserat  yang diperoleh diuapkan dengan rotary vacum evaporator pada  temperature 40 o C  sampai memperoleh ekstrak kental.

## Fraksinasi
Ekstrak  kental  daun  leilem  yang  telah diperoleh,  dimasukkan  dalam  gelas  beker,  lalu dilarutkan dengan aquadest. Setelah itu dimasukkan dalam corong pisah dan ditambahkan pelarut  etil  asetat  kemudian  dikocok  hingga homogen.  Dibiarkan  beberapa  saat  hingga terbentuk  lapisan  air  dan  lapisan  etil  asetat,

## PHARMACON– PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,
kemudian masing-masing ditampung dalam wadah yang  terpisah.  Lapisan  air  ditambahkan  dengan pelarut etil asetat dan dikerjakan dengan perlakuan yang  sama  dengan  prosedur  sebelumnya,  dan dilakukan sampai tiga kali replikasi. Untuk lapisan
etil  yang  diperoleh  kemudian  dievaporasi  hingga kering  sehingga  memperoleh  fraksi  daun  leilem kemudian  ditimbang.  Untuk  perbandingan  antara aquadest,  esktrak  kental  daun  leilem  dan  juga pelarut etil asetat yaitu 10:1:10.

## Formulasi Sediaan Pasta Gigi Fraksi Daun Leilem
Tabel 1. Formula Sediaan Pasta Gigi
Nama Bahan Fungsi Konsentrasi (% b/b) I II III Ekstrak Daun Leilem Bahan aktif 7,5 10 12,5 Na CMC Basis Pasta 0,375 0,375 0,375 Sorbitol Humectants 7,5 7,5 7,5 Mentol Pengaroma 0,125 0,125 0,125 Natrium benzoat Pengawet 0,125 0,125 0,125 Sodium Lauril Sulfat Surfaktan 0,25 0,25 0,25 Sodium Saccharin Pemanis 0,05 0,05 0,05 Kalsium Karbonat Abrasive 7,5 7,5 7,5 Aquades ad Pelarut 100 % 100 % 100 %

## Pembuatan Pasta Gigi
Menimbang bahan aktif fraksi daun leilem dengan variasi  konsentrasi  7,5%,  10%,  dan  12,5%  dan bahan  tambahan  Na  CMC,  sorbitol,  kalsium karbonat,  natrium  lauril  sulfat,  natrium  benzoat, natrium sakarin, menthol dan aquadest. Kemudian Na  CMC  didispersikan  dalam  aquades  panas. Mentol dilarutkan dalam aquadest, lalu ditambahkan  sorbitol.  Ditambahkan  dispersi  Na CMC,  kalsium  karbonat  dan  larutan  natrium benzoat.  Lalu  ditambahkan  fraksi  daun  leilem, kemudian  ditambahkan  Sodium  Lauril  sulfat  dan saccharin kemudian diaduk sampai homogen.

## Evaluasi Fisik Sediaan Uji Organoleptik
Pengujian  dilakukan  secara  kualitatif  dengan melihat  bentuk,  aroma  dan  warna  dari  sediaan pasta gigi. Sediaan dikatakan baik jika memenuhi standar nasional pasta gigi  yaitu lembut, homogen, tidak ada gelembung udara, gumpalan dan partikel yang terpisah (Gratia dkk, 2021).

## Uji Homogenitas
Pengujian  dilakukan  dengan  cara  pasta  gigi dioleskan  sebanyak  3  kali  diambil  dari  3  bagian yang berbeda yaitu bagian atas, tengah dan bawah
pada kaca objek kemudian dilakukan pengamatan visual apakah sediaan sudah homogen atau belum. Sediaan  dikatakan  baik  jika  memenuhi  standar kualitas  pasta  gigi  yang  didasarkan  SNI  No.12- 3524-1995  yaitu  homogen,  tidak  ada  gelembung udara, gumpalan dan partikel yang terpisah (Gratia dkk, 2021).

## Uji Daya Sebar
Sampel seberat 1 g diletakan di antara 2 kaca. Lalu  diberi  beban  sebesar  50  g  di  atas  kaca  dan diukur diameternya  sebelum  dan  sesudah 1 menit pemberian  beban.  Beban  50  g  ditambahkan  dan ditunggu  selama  1  menit.  Lalu  diukur  kembali diameternya. Pengukuran diameter dilakukan pada 3  titik  yang  berbeda  dan  diambil  rata  -  ratanya. Pasta  gigi  yang  baik  memiliki  rentang daya  sebar yang sesuai dengan sediaan pasta gigi pasaran yaitu sebesar 2,61 – 5,32 cm (Doko, 2018).

## Uji Daya Lekat
Sediaan pasta gigi sebanyak 0,25 g ditimbang dan  diletakan  pada  kaca  objek  kemudian  ditutup dengan  kaca  objek  yang  lain  sampai  tertutup sempurna.  Beban  seberat  1  kg  diletakkan  di  atas kaca objek yang menutupi sediaan selama 5 menit. Kemudian  beban  sebesar  80  g  digunakan  untuk melepaskan  objek  gelas  dari  lekatan  pasta  gigi.

## PHARMACON– PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,
Waktu yang digunakan untuk melepas kedua kaca objek  kemudian  diukur  menggunakan stopwatch (Marchaban et al , 2017).

## Uji pH
Uji  dilakukan  dengan  cara  mengukur  sediaan secara  langsung  dengan  menggunakan  pH  meter sebanyak  3  kali  lalu  diambil  rata  –  ratanya.  pH sediaan  dikatakan  baik  jika  memenuhi  standar mutu pasta gigi berdasarkan SNI 8861:2020 yaitu sebesar 6 – 10.

## Uji Aktivitas Antibakteri Sterilisasi Alat dan Bahan
Sterilisasi  dilakukan  dengan  cara  yang  sesuai terhadap  masing-masing  alat.  Alat-alat  yang disterilkan harus dalam keadaan bersih dan kering. Tabung reaksi, gelas ukur, erlenmeyer, cawan petri ditutup  mulutnya  dengan  kapas  lalu  aluminium foil.  Kemudian  disterilkan  dalam  oven  pada  suhu 180 0 C,  selama  2  jam.  Medium  pembenihan  dan larutan  NaCl  distrerilisasi  dengan  autoklaf  pada suhu 121 0 C selama 30 menit. Pinset dan jarum ose disterilkan  dengan  cara  dipijarkan  pada  nyala Bunsen (Afni, dkk, 2015).

## Pembuatan medium nutrien agar (NA)
Menimbang  medium  Nutrien  Agar  (NA) sebanyak 4 gram dilarutkan dalam 200 ml aquadest menggunakan  erlenmeyer.  Media  dihomogenkan diatas  penangas  air  sampai  media  Nutrien  Agar benar-benar  larut.  Larutan  tersebut  kemudian disterilkan dalam autoklaf pada suhu 121 0 C selama 30  menit.  Disimpan  pada  lemari  pendingin,  dan dipanaskan Kembali ketika digunakan (Afni, dkk, 2015).

## Penyiapan Bakteri
Uji  Bakteri  uji Streptococcus  mutans dari biakan murni, diambil 1 ose lalu diinokulasikan  dengan  cara  digoreskan  pada medium  Nutrien  Agar  (NA)  miring.  Setelah  itu diinkubasi pada suhu 37 0 C selama 24 jam. Biakkan bakteri  diambil  dengan  jarum  ose  steril  lalu disuspensikan  kedalam  tabung  reaksi  yang  berisi 10  ml  larutan  NaCl  0,9%  sampai  didapat kekeruhan  suspensi  bakteri  yang  sama  dengan kekeruhan standar Mc.Farland, ini berarti konsentrasi  suspensi  bakteri  adalah  10 8 CFU/ml. Konsentrasi  suspensi  bakteri  10 8 CFU/ml  yang digunakan  pada  pengujian  aktivitas  antibakteri (Afni, dkk, 2015)

## Uji  Aktivitas  Antibakteri  Pasta  Gigi  Fraksi Daun Leilem
Uji  daya  antibakteri  pada  penelitian  ini menggunakan metode difusi dengan cara sumuran. Prosedur  yang  dilakukan  adalah  menyiapkan medium Nutrien Agar (NA) yang telah disterilkan dalam  autoklaf  suhu  121 0 C  selama  15  menit. Kemudian  dalam  keadaan  masih  hangat  nutrien agar  dituangkan  pada  3  cawan  petri  steril berukuran  9  cm  sebanyak  15  ml,  lalu  didiamkan hingga  padat.  Menyiapkan  suspensi  bakteri Streptococcus  mutans yang  telah  diinokulasikan dalam NaCl 0,9%, lalu mencelupkan kapas steril ke dalam  suspensi  bakteri  kemudian  dioleskan  pada medium NA (Afni, dkk, 2015).
Membuat  sumuran  (lubang)  pada  medium nutrien agar menggunakan alat tips diameter 7 mm dengan jarak dari tepi cawan yaitu 2 cm, jarak antar sumur 3 cm, dan untuk kedalaman sumurnya 4 mm agar  daerah  pengamatan  tidak  bertumpu  pada masing-masing cawan (Aseng dkk, 2015).
Kemudian  menyiapkan  sampel  pasta  gigi sebanyak  0,1  g  pada  variasi  konsentrasi  7,5%, 10%,  12,5%,  kontrol  negatif  dan  kontrol  positif. Pengujian  dilakukan  dengan  cara  memasukkan pasta  gigi  dengan  berbagai  konsentrasi  masing- masing  sebanyak  0,1  g  ke  dalam  sumuran, kemudian  cawan  petri  diinkubasi  selama  24  jam pada  suhu  37 0 C.  Pengukuran  menggunakan  alat ukur  mistar  berskala  dilakukan  pada  zona  bening yang  terbentuk  disekeliling  sumuran  yang menunjukkan  zona  hambat  pertumbuhan  bakteri (Afni, dkk, 2015).

## HASIL DAN PEMBAHASAN Ekstraksi dan Fraksinasi
Ekstrak  daun  leilem  sebanyak  500  gram diekstraksi  dengan  cara  dingin  yaitu  metode maserasi.  Metode  maserasi  dipilih  karena  cara pengerjaan  sederhana,  peralatan  yang  mudah  di dapat  dan  tidak  memerlukan  alat  khusus,  biaya operasionalnya  relatif  rendah,  tanpa  pemanasan. Proses  ekstraksi  dilakukan  dengan  menggunakan pelarut  Etanol  96%  karena  pelarut  ini  menyari hampir keseluruhan kandungan simplisia baik non polar,  semi  polar  maupun  polar  (Anshori,  dkk., 2009).  Pelarut  ini  bersifat  selektif,  tidak  beracun dan  bersifat  universal  yang  cocok  untuk mengekstrak  semua  golongan  senyawa  metabolit sekunder  (Kristanti  dan  Novi,  2008).  Dari  proses maserasi didapat maserat dan residu. Maserat yang didapatkan kemudian dievaporasi. Proses evaporasi  bertujuan  untuk  mendapatkan  ekstrak kental  sampel  dengan  cara  memisahkan  pelarut

## PHARMACON– PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,
dengan ekstrak melalui mendidihkan  atau menguapkan pelarut pada suhu tertentu. Diperoleh ekstrak  kental  sebanyak  61,2  g.  Rendemen  yang diperoleh 12,24%.
Fraksinasi  dilakukan  untuk  memisahkan  zat cair  dengan  zat  cair  berdasarkan  tingkat kepolarannya . Penggunaan  pelarut  etil  asetat bertujuan  untuk  memisahkan  seyawa  golongan polifenol ataupun flavonoid (kusumaningtyas, dkk, 2008).  Dari  fraksinasi  yang  dilakukan,  diperoleh hasil  fraksi  8,2  g  dan  rendemen  yang  diperoleh yaitu 13,4%.

## Evaluasi Sediaan Fisik
Uji yang dilakukan pada penelitian ini yaitu uji organoleptik,  uji  homogenitas,  uji  daya  lekat,  uji daya  sebar,  dan  uji pH. Uji  evaluasi  fisik  sediaan pasta  gigi  dilakukan  untuk  mengetahui  apakah sediaan  sudah  sesuai  atau  tidak  dengan  standar pasta  gigi  yang  telah  ditetapkan  oleh  Standar Nasional Indonesia.

## Uji Organoleptik
Uji organoleptik pasta gigi yang diamati antara lain bentuk sediaan, warna dan aroma. Hasil dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2. Hasil Uji Organoleptik
Formula Pengamatan Bentuk Sediaan Warna Bau F1 Semi Padat Hijau Tua Khas Daun Leilem F2 Semi Padat Hijau Tua Khas Daun Leilem F3 Semi Padat Hijau Tua Khas Daun Leilem
Hasil pengujian organoleptik pasta gigi fraksi etil  asetat  daun  leilem  menunjukkan  memiliki warna  hijau  tua,  beraroma  khas  daun  leilem,  dan bentuk  sediaan  semi  padat.  Warna  dan  bau  yang dihasilkan  merupakan  hasil  dari  penambahan fraksi,  tampak  dari  perubahan  warna  pasta  gigi yang  semula  berwarna  putih dan berbau  menthol, setelah  ditambahkan  fraksi  daun  leilem  menjadi berwarna  hijau  tua  dan  bau  khas  daun  leilem.
Semakin  tinggi  konsentrasi  fraksi  pada  pasta  gigi maka semakin kuat bau dan semakin pekat warna yang dihasilkan.

## Uji Homogenitas
Pengujian  homogenitas  dilakukan  untuk mengetahui  proses  pembuatan  pasta  gigi  bahan aktif  obat  dengan  bahan  tambahan  lainnya tercampur  secara  homogen.  Persyaratannya  harus homogen  sehingga  pasta  gigi  yang  dihasilkan mudah  digunakan  dan  terdistribusi  secara  merata pada  permukaan  gigi  (Masduqi,  2017).  Hasil  uji homogenitas dapat dilihat pada tabel 3.
Tabel 3. Hasil Uji Homogenitas
Formula  Pengamatan F1 Homogen F2 Homogen F3 Homogen
Hasil  pengujian  homogenitas  menunjukkan bahwa  pasta  gigi  fraksi  daun  leilem  memenuhi persyaratan  homogenitas  karena  tidak  adanya butir-butir  kasar  atau  bahan-bahan  yang  masih menggumpal. Hal ini menunjukkan bahwa sediaan yang  dibuat  sesuai  dengan  syarat  homogenitas yaitu sediaan harus homogen, tidak ada gelembung udara, gumpalan dan partikel yang terpisah  (Ditjen POM, 2020).

## Uji Daya Sebar
Uji daya sebar sediaan pasta gigi dimaksudkan untuk  mengetahui  kemampuan  menyebar  pasta gigi  pada  saat  pemakaian.  Hasil  uji  daya  sebar dapat dilihat pada tabel 4.

## Tabel 4. Hasil Uji Daya Sebar
Formula Pengamatan (cm) Rata- Rata±SD P1 P2 P3 F1 3,50 3,45 3,45  3,46±0,02 F2 3,40 3,45 3,30  3,38±0,07 F3 3,10 3,20 3,20  3,16±0,05
Pasta  gigi  yang  baik  memiliki  rentang  daya sebar  yang  sesuai  dengan  sediaan  pasta  gigi pasaran yaitu sebesar 2,61 – 5,32 cm. Daya sebar yang terlalu tinggi menunjukkan konsistensi pasta terlalu  encer  serta  mudah  hancur  atau  meluruh seperti lotion dan  sulit  diaplikasikan  pada  saat pemakaiannya (Doko, 2018). Hasil pengujian daya

## PHARMACON– PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,
sebar  pasta  gigi  fraksi  daun  leilem  memliki  daya sebar  dengan  rata-rata  3,46  (F1),  3,38  (F2),  dan 3,16  (F3),  sehingga  dapat  disimpulkan  bahwa sediaan  pasta  gigi  fraksi  daun  leilem  memenuhi persyaratan uji daya sebar.

## Uji Daya Lekat
Uji  daya  lekat  bertujuan  untuk  melihat kekuatan  pasta  gigi  untuk  melekat  pada  sikat  dan permukaan gigi. Hasil uji daya lekat dapat dilihat pada tabel 5.
Tabel 5. Hasil Uji Daya Lekat
Formula Pengamatan (detik) Rata- Rata±SD P1 P2 P3 F1 1,50 1,55 1,52  1,52±0,02 F2 1,58 1,53 1,56  1,56±0,02 F3 1,57 1,59 1,62  1,59±0,02
Untuk nilai daya lekat tidak terdapat parameter yang  pasti  namun  berdasarkan  penelitian  Bangun (2014), pasta gigi idealnya memiliki daya lekat 1 – 6  detik.  Daya  lekat  yang  tinggi  menunjukkan konsistensi sediaan lebih padat, elastis dan mudah melekat  pada  sikat  gigi  akan  tetapi  memiliki penyebaran  yang  kurang  baik.  Sebaliknya,  daya lekat  yang  rendah biasanya  dimiliki  pasta  dengan konsistensi  yang  lebih  encer  dan  tidak  begitu melekat pada sikat gigi tetapi mampu menyebarkan bahan  aktif  dengan  baik  (Bangun,  2014;  Doko, 2018).  Hasil  pengujian  daya  lekat  sediaan  pasta gigi  fraksi  daun  leilem  memiliki  rata-rata  yaitu 1,52  (F1),  1,56  (F2),  dan  1,59  (F3),  sehingga memenuhi syarat daya lekat sediaan pasta gigi.

## Uji pH
Uji  pH  bertujuan  untuk  menguji  kesesuaian derajat  keasaman  sediaan  dengan  mukosa  mulut. Hasil uji pH dapa dilihat pada tabel 6.
Tabel 6. Hasil Uji pH
Formula Pengamatan Rata- Rata P1 P2 P3 F1 7,9 7,9 7,9 7,9±1,08 F2 7,9 7,9 7,9 7,9±1,08
F3 7,9 8 8 8±0,05
Nilai pH pasta gigi yang baik ialah nilai yang termasuk  pada  rentang  yang  ditetapkan  SNI 8861:2020  dan  rentang  pH  yang  dapat  diterima mukosa  mulut.  pH  pasta  gigi  yang  baik  menurut SNI  ialah  6  –  10.  Apabila  pasta  gigi  dengan  pH yang terlalu rendah dapat menyebabkan iritasi dan mempermudah  pertumbuhan  bakteri  asidogenik yang  hidup  pada  lingkungan  asam  seperti Streptococcus  mutans dan Lactobacillus pada  pH 4,5-5,5. Selain itu, apabila pH berada dibawah 5,5 akan  berpotensi  dapat  menyebabkan  terjadinya demineralisasi  gigi  dan  kerusakan  email  gigi sehingga menyebabkan karies gigi (Widodo et al , 2015;  Shetty et  al 2013  dan  Tanabe et  al ,  2013). Jika pasta gigi dengan pH yang terlalu tinggi maka dapat  menekan  pertumbuhan  bakteri  seperti Streptococcus mutans dan memungkinkan terjadinya  remineralisasi  gigi  serta  memperkuat lapisan  enamel  sehingga  mencegah  terjadinya karies gigi (Khamisli et al , 2019). Hasil pengujian pH  seluruh  sediaan  pasta  gigi  fraksi  daun  leilem memenuhi  persyaratan  SNI  8861:2020 dengan rata-rata masing-masing sediaan yaitu 7,9 (F1), 7,9 (F2), dan 8 (F3).

## Uji Aktivitas Antibakteri
Uji  aktivitas  antibakteri  sediaan  pasa  gigi fraksi  daun  leilem  dilakukan  untuk  mengetahui konsentrasi  sediaan  yang  paling  besar  dalam menghambat  pertumbuhan  bakteri  Streptococcus mutans. Uji dilakukan 3 kali replikasi.
Tabel 7. Hasil Uji Aktivitas Antibakteri
Pengujian  aktivitas  antibakteri  dilakukan terhadap  sediaan  pasta  gigi  fraksi  daun  leilem dengan  berbagai  konsentrasi  sebagai  sampel  uji, basis pasta gigi sebagai kontrol negatif, dan pasta gigi  antibakteri  daun sirih  sebagai  kontrol  positif. Metode  yang  digunakan  yaitu  metode  difusi dengan  cara  sumuran.  Metode  sumuran  memiliki
Formula Replikasi (mm)
𝒙 ̅ ± SD Ket. R1 R2 R3 K- 0 0 0 - - K+ 14,25  14,75 14 14,33±0,38 Kuat F1 9,25 10,25 9,75 9,75±0,50 Sedang F2 10,75  12,75 11,75  11,75±1,00 Kuat F3 12,75  14,25 12,25  13,08±1,04 Kuat

## PHARMACON– PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,
kelebihan dibandingkan dengan metode lain seperti cakram, yaitu lebih mudah dalam pengukuran zona hambat  yang  terbentuk  dan  lebih  sensitif.  Hal  ini dikarenakan sampel tidak hanya beraktivitas diatas media  saja,  tetapi  juga  sampai  dibawah  (Junanto dkk, 2008). Daya hambat menurut Davis dan Stout (1971) terbagi atas : sangat kuat (zona hambat > 20 mm), kuat (zona hambat 10-20 mm), sedang (zona hambat  5  10  mm)  dan  lemah  (zona  hambat  <5 mm).  Pengujian  aktivitas  antibakteri  ditentukan berdasarkan  diameter  zona  hambat  disekitar pencadangan/sumuran  media Nutrien  Agar (NA).
Hasil  pengujian  yang  didapat  dengan  konsentrasi 7,5%,  10%,  dan  12,5%  menunjukan  aktivitas antibakteri  dengan  adanya  zona  hambat  disekitar sumuran. Diameter zona hambat disekitar sumuran diukur  menggunakan  mistar  berskala  dengan cara mengukur secara horizontal dan vertikal kemudian hasil yang didapatkan dikurangi diameter sumuran 7  mm.  Pasta  gigi  fraksi  daun  leilem  konsentrasi 7,5%  memberikan  daya  hambat  9,75  mm  yang dikategorikan  memiliki  daya  hambat  sedang, konsentrasi  10%  memberikan  daya  hambat  11,75 mm  dan  konsentrasi  12,5%  memberikan  daya hambat  13,08  mm  yang  dikategorikan  memiliki daya hambat yang kuat. Kontrol positif memberikan  daya  hambat  14,33  mm  dan  kontrol negatif  tidak  memberikan  daya  hambat  karena menghasilkan  zona  hambat  0  mm. Dari  hasil tersebut dapat dilihat bahwa pasta gigi fraksi daun leilem dengan konsentrasi 7,5%, 10%, dan 12,5% bisa  menghambat  aktivitas  bakteri Streptococcus mutans dengan  menjadikan  konsentrasi  terbesar yaitu 12,5% dikarenakan pada konsentrasi tersebut memiliki  daya  hambat  yang  paling  besar.  Zona hambat  yang  terbentuk  karena  adanya  senyawa antibakteri  pada  daun  leilem  fenol,  terpenoid, steroid,  alkaloid  dan  flavonoid.  Dari  hasil  yang didapat  menunjukkan  semakin  tinggi  konsentrasi sediaan  fraksi  daun  leilem  maka  semakin  besar daya hambat yang dihasilkan.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  maka  dapat disimpulkan  bahwa  fraksi  daun  leilem  dapat diformulasikan  menjadi  sediaan  pasta  gigi  herbal antibakteri  yang  sudah  memenuhi  syarat  uji evaluasi fisik yang meliputi, pegujian organoleptik, homogenitas, daya sebar, daya lekat, dan pH.
Sediaan  pasta  gigi  herbal  fraksi  daun  leilem memiliki  aktivitas  antibakteri  pada  bakteri Streptococcus  Mutans ,  dimana  sediaan  pasta  gigi yang  paling  baik  yaitu  pasta  gigi  dengan konsentrasi 12,5%.

## SARAN
Penelitian  selanjutnya  diharapkan  melakukan evaluasi  fisik  yang  belum  dilakukan  yaitu  uji viskositas  dan  pengujian  stabilitas  fisik  sediaan untuk mengetahui mutu dari sediaan.

## DAFTAR PUSTAKA
Abdullah,  S.  S.,  Djide  N.,  Natsir,  S.  2021.  KLT Bioautografi  Hasil  Partisi  Esktrak  Etanol Herba Bandotan ( Ageratum conyzoides L.) terhadap Shigella  dysentriae,  Chem.  Prog. 14(1) : 14-21.
Afni,  N.,  Said,  N.,  &  Yuliet,  Y.  (2015).  Uji Aktivitas  Antibakteri  Pasta  Gigi  Ekstrak BijiPinang  (Areca  Catechu  L.)  Terhadap Streptococcus  Mutans dan Staphylococcus Aureus . Jurnal Farmasi Galenika (Galenika Journal of Pharmacy) (e-Journal) , 1(1), 48- 58 .
Aseng,  Khotimah,  S.,  Armyanti,  I.  2015.  Uji Aktivitas  Antibakteri  Kombinasi  Infusa Daun Mangga  Bacang  ( Mangifera  foetida L.)  dan  Infusa  Lidah  Buaya  ( Aloe Vera L.) Terhadap Staphylococcus aureus . [Skripsi]. Fakultas Kedokteran, Pontianak. Badan  Standarisasi  Nasional.  2020. Standar Nasional  Indonesia  Pasta  Gigi. SNI 8861:2020.  Jakarta  :  Badan  Standardisasi Nasional.
Bangun,  F.  O.  2014.  Pengaruh  Peningkatan
Konsentrasi  Sorbitol  dalam  Sediaan  Pasta Gigi Karbopol yang Mengandung Minyak Kayu Manis ( Cinnamomum burmanii ). [Skripsi]. Yogyakarta: Universitas Sanata Dharma
Bontjura,  S.,  Waworuntu,  O.  A.,  Siagian,  K.  V.
2015.  Uji  Efek  Antibakteri  Ekstrak  Daun Leilem  ( Clerodendrum  Minahassae L.) Terhadap  Bakteri  Streptococcus  Mutans. Jurnal  Ilmiah  Farmasi. 4(4)  :  99.  Fakultas Kedokteran  Universitas  Sam    Ratulangi Manado.
Doko,  Kamelia  Intany.  2018.  Uji  Aktivitas Antibiofilm  terhadap  Streptococcus  mutans dan  Optimasi  CMC  Na  dan  Sorbitol  pada Formula Pasta Gigi Gel Ekstrak Daun Kelor (Moringa oleifera Lmk.). [Skripsi]. Fakultas Farmasi USD, Yogyakarta.
Davis,  W.W.,  &  Stout,  T.  R.  1971.  Disc  Plate Methods  of  Microbiological  Antibiotic Assay .Microbiology . 22(4): 659-665.
Ditjen POM, Depkes RI. 2000. Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat.

## PHARMACON– PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,
Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Jakarta.
Edy, H., J., dan Marchaban, dan S. Wahyuno, dan A.  E.  Nugroho.  2016.  Formulasi  dan  Uji Sterilitas  Hidrogel  Ekstrak  Etanol  Daun Tagetes erecta L. Pharmacon. 5(2): 9-16.
Edy, H., J., dan Marchaban, dan S. Wahyuno, dan A.  E.  Nugroho.  2019.  Pengujian  Aktivitas
Antibakteri  Hidrogel  Ekstrak  Etanol  Daun Tagetes erecta L. Jurnal MIPA. 8(3): 96-98. Edy,  H.,  J.,  Parwanto,  M.  L.  E.  2020.  Aktivitas antimikroba dan potensi penyembuhan luka ekstrak tembelekan (Lantana camara Linn.). Jurnal Biomedika dan Kesehatan. 3(1) : 33 Gratia, B., Yamlean, P. V. Y., Mansauda, K. L. R. 2021.  Formulasi  Pasta  Gigi  Ekstrak  Etanol Buah  Pala  (Myristica  Fragrans  Houtt.). Jurnal  Ilmiah  Farmasi. 10(3)  :  969-970. Program Studi Farmasi FMIPA Universitas Sam Ratulangi.
Junanto,  T.,  Sutarno,  dan  Supriyadi.  2008. Aktivitas  antimikroba  ekstrak  angsana (Pterocarpus  indicus)  terhadap  Bacillus subtilis dan Klebsiella pneumoniae.
Bioteknologi 5(2): 63-69 Kemenkes  RI.  2013. Situasi  Kesehatan  gigi  dan Mulut. Pusat  Data  dan  Informasi.  Jakarta  : Indonesia. Legi,  A.P.,  Edy,  H.J.,  Abdullah ,  S.  S.,  (2021), Formulasi  Dan  Uji  Aktivitas  Antibakteri Sediaan  Sabun  Cair  Ekstrak  Etanol  Daun Sirsak  ( Annona  Muricata Linn)  Terhadap Bakteri Staphylococcus ,  Pharmacon, 10(3), 1058–1065.
Mason,  S.  2000.  Dental  Hygiene,  dalam  :  Butler, H. (Ed.), Poucher’s Perfume, Cosmetics and Soap .  Kliwe  Academy  Publishers,The
Netherlands.
Marchaban, Fudholi, A., Saifullah, T.N., Martien, R., Kuswahyuning, R., Bestari, A. N. 2017.
Teknologi  Formulasi  Sediaan  Cair  Semi Padat 3rd Edition . UGM Press, Yogyakarta. Mopangga, E., Yamlean, P. V. Y., & Abdullah, S. S. (2021). Formulasi Sediaan Sabun Mandi
Padat Ekstrak Etanol Daun Gedi ( Abelmoschus manihot L.) Terhadap Bakteri Staphylococcus  epidermidis .  Pharmacon, 10(3), 1017–1024. Parubak, Apriani  Sulu.  2013. Senyawa Flavonoid yang  Bersifat  Antibaktri  dari  Akway ( Drimys  becariana.  Gibbs). Chem.  Prog. Vol. 6, No.1. Sinrang, V.N.S., Edy, H.J., Abdullah, S.S.,, (2022), Formulasi  Sediaan  Obat  Kumur  Ekstrak
Etanol  Biji  Pinang  ( Areca  catechu  L. ), Pharmacon, 11(1), 1342–1349.
Shrivastava  N,  Patel  T.  2007.  Clerodendrum  and Heathcare:  an  Overview.  Medicinal  and Aromatic Plant Science and Biotechnology. Gujarat : India