## UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL 96% KULIT NANAS (Ananas comosus (L.) Merr) TERHADAP BAKTERI ESCHERICHIA COLI
(Anti-Bacterial Activity Testing Of Ethanol Extract 96% Painage Skin
( Ananas Comosus (L.) Merr) Against Escherichia Coli Bacteria )
1 Aminah. S dan 1 Dewi Abdilantri
Program Studi Farmasi Institut Kesehatan Medistra Lubuk Pakam Jln. Sudirman No.38 Lubuk Pakam, Kabupaten Deli Serdang, Sumatera Utara – Indonesia * e-mail : syarifuddinami6@gmail.com

## Abstrak
Kulit  nanas  (Ananas  comosus  (L.)  Merr)  merupakan  kerugian  dari  produk  organik nanas.  Alasan  penelitian  ini  adalah  untuk  menentukan  zat  konsentrat  strip  nanas dan  gerakan  antibakteri  pada  berbagai  fokus  yang  layak  dalam  menghambat perkembangan Escherichia coli. Escherichia coli adalah bakteri yang sebagian besar hidup di organ dalam manusia dan dapat menjadi patogen dengan asumsi ia tiba di jaringan  di  luar  sistem  pencernaan  yang  dapat  menyebabkan  kelonggaran  usus. Pengambilan  strip  nanas  dilakukan  dengan  teknik  ekstraksi  berupa  meserasi. Strategi yang digunakan dalam uji penghambatan melibatkan dua contoh ulangan di setiap kelompok perlakuan. Dilihat dari konsekuensi pendugaan zona hambatan bakteri  pada  pemisahan  strip  nanas  seperti  yang  ditunjukkan  oleh  (Coyle,  2015) dengan  sentralisasi  25  mg/ml,  maka  tidak  berpotensi  sebagai  antibakteri.  Pada pengelompokan  50  mg/ml,  75  mg/ml  dan  100  mg/ml,  mereka  mungkin  dapat menahan  perkembangan  organisme  mikroskopis  Escherichia  coli.  Dari  hasil pengamatan dan pendugaan luas zona bening bakteri, diketahui bahwa strip nanas memiliki  aksi  antibakteri.  Ini  harus  terlihat  dari  zona  wajar  yang  sesuai  dengan kertas lingkaran pada setiap fiksasi yang digunakan. Contoh terdiri dari 6 kelompok perlakuan,  khususnya  pengupasan  strip  nanas  dengan  pengelompokan  25mg/ml, 50mg/ml, 75mg/ml, dan 100mg/ml, serta kontrol tertentu dan negatif. Hasil yang diperoleh  dari  pemisahan  nanas  mengandung  alkaloid,  flavonoid,  tanin,  dan saponin.  Penyelidikan  informasi  menunjukkan  bahwa  strip  nanas  yang  terpisah dengan  pengelompokan  25mg/ml,  50mg/ml,  75mg/ml,  dan  100mg/ml  memiliki potongan hambat dalam klasifikasi sedang-padat, sedangkan ciproloksasin sebagai kontrol  memiliki  zona  hambat  padat.  Dengan  alasan  bahwa  semakin  menonjol konvergensi konsentrat, semakin besar jarak melintasi zona pengekangan.
Kata kunci: Antibakteri, Ekstrak Kulit Nanas, Escherichia coli .

## Abstract:
Pineapple  skin  (Ananas  comosus  (L.)  Merr)  is  a  loss  from  pineapple  organic product. The reason for this study was to decide the substance of pineapple strip concentrate and antibacterial movement at different focuses that were viable in hindering the development of Escherichia coli. Escherichia coli is a bacterium that for  the  most  part  lives  in  the  internal  organ  of  people  and  can  become pathogenic  assuming  it  arrives  at  tissues  outside  the  gastrointestinal  system which  can  cause  looseness  of  the  bowels.  Pineapple  strip  remove  was  made involving  the  extraction  technique  as  meseration.  The  strategy  utilized  in  the inhibitory  test  involved  two  example  replications  in  every  treatment  bunch.  In
view  of  the  consequences  of  the  estimation  of  the  bacterial  hindrance  zone  of pineapple strip separate as indicated by (Coyle, 2015) with a centralization of 25 mg/ml,  it  has  no  potential  as  an  antibacterial.  At  groupings  of  50  mg/ml,  75 mg/ml and 100 mg/ml, they can possibly restrain the development of Escherichia coli  microscopic  organisms.  From  the  consequences  of  perceptions  and estimations of the breadth of the bacterial clear zone, it was observed that the pineapple  strip  has  antibacterial  action.  This  should  be  visible  from  the reasonable  zone  conformed  to  the  circle  paper  at  every  fixation  utilized.  The example  comprised  of  6  treatment  gatherings,  in  particular  pineapple  strip remove with groupings of 25mg/ml, 50mg/ml, 75mg/ml, and 100mg/ml, as well as  certain  and  negative  controls.  The  outcomes  acquired  from  pineapple separating  contain  alkaloids,  flavonoids,  tannins,  and  saponins.  Information investigation  showed  that  pineapple  strip  separate  with  groupings  of  25mg/ml, 50mg/ml,  75mg/ml,  and  100mg/ml  had  inhibitory  pieces  in  the  moderate-solid classification,  while  ciproloxacin as  a  control  had a  solid  inhibitory  zone.  It  was reasoned  that  the  more  prominent  the  convergence  of  the  concentrate,  the bigger the distance across of the restraint zone.
Keywords : Antibacteria , Pineapple peelextract , Escherichia coli.

## 1. PENDAHULUAN
Banyak  gangguan  maupun  penyakit yang dapat ditimbulkan oleh bakteri dengan menginfeksi  bagian  tubuh  tertentu.  Salah satu bakteri yang tumbuh dan berkembang bahkan  menyebabkan  kerusakan  pada tubuh  manusia  yaitu  bakteri Escherichia coli. Escherichia  coli merupakan  salah  satu bakteri  flora  normal  pada  usus  besar manusia yang bersifat gram negatif enterik ( Enterobactericeae). Namun  bila  bakteri  ini berada  di  luar  usus  maka  akan  bersifat patogen (Nova, 2017).
Beberapa penelitian menyatakan bahwa Escherichia  coli sering menimbulkan beberapa  penyakit  infeksi  seperti  pada saluran kemih, saluran empedu dan rongga perut. Selain itu penelitian juga menyimpulkan  penyebab  utama  penyakit diare  disebabkan  oleh  bakteri Escherichia coli (Desrini, 2015).
Salah  satu  pengobatan  klinis  untuk menangani penyakit infeksi adalah pengunaan  antibiotik.  Resistensi  antibiotik adalah  salah  satu  ancaman  uatama terhadap  pengobatan  modern,  sehingga membutuhkan strategi baru dalam membangun  alternatif  dalam  kasus  infeksi (Erviani, 2018).
Diperlukan  adanya  usaha  agar  tidak terjadi  resistensi  antibiotik.  Usaha-usaha tersebut  antara  lain  mengembangkan penelitian  yang  berhubungan  dengan mekanisme resistensi, mengontrol penggunaan
antibiotik, dan
mengembangkan  agen  antibakteri  baru baik sintesis maupun alami (WHO, 2018).
Salah  satu  tanaman  yang  sering digunakan untuk pengobatan infeksi adalah kulit  nanas (Ananas  comosus  (L.)  Merr). Metabolit sekunder yang terkandung diantaranya  fenolik,  alkaloid,  flavonoid, tannin,  dan  saponin.  Senyawa  fenolik lainnya misalnya baicalein dapat menghambat S.  aureus , E.  coli , B.  subtilis dan P.  aeruginosa .  Baicalein  juga  diketahui memiliki  efek  sinergisme  bersama  dengan antibiotik β -laktam (Sari, 2021). Berdasarkan  uraian  diatas,  maka dilakukan penelitian uji aktivitas antibakteri ekstrak  etanol  96%  kulit  nanas (Ananas comosus  (L.)  Merr) terhadap  bakteri Escherichia  coli dengan  metode  difusi  agar dengan menghitung Kadar Hambat Minimum  (KHM),  maka  dari  itu  penelitian ini  dimaksudkan  untuk  menggali  dan mengembangkan  potensi  kulit  buah  nanas sebagai  antibakteri.  Penelitian  ini  meliputi pemeriksaan karakterisasi simplisia, skrining  fitokimia,  serta  diuji  aktivitas antibakteri  ekstrak  etanol  96%  kulit  nanas (Ananas  comosus  (L.)  Merr) terhadap bakteri Escherichia coli.

## 2. METODE
Metode  penelitian  yang  digunakan adalah  metode  eksperimental  murni (True Eksperiment) .  Ekstrak  kulit  nanas  dibuat dengan  menggunakan  metode  ekstraksi berupa  meserasi ekstrak  etanol  kulit nanas terhadap  bakteri  gram  negatif  yaitu
Escherichia  coli .  Tahap  penelitian  meliputi penyiapan  sampel,  penyiapan  alat  dan bahan,  pengambilan  sampel,  penyiapan bakteri,  karakteristisasi  simplisia,  skrining fitokimia.  Pengujian  aktivitas  antibaktri dilakukan  dengan  menggunakan  metode difusi  agar  yang  menggunakan  kertas cakram  (Uji  Kirby-Bauer).  Parameter  yang diamati  yaitu  besar  diameter  daerah  dan konsentrasi yang efektif dalam menghambat pertumbuhan
bakteri Escherichia  coli. Data  hasil  penelitian dianalisis menggunakan SPSS.

## 2.1 Alat
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  adalah  autoklaf,  batang  pengaduk, beaker glass, benang wol, blender, bunsen, cawan  petri,  erlenmeyer,  gelas  ukur, gunting,  hotplate,  jangka  sorong,  jarum ose,  kain  kasa,  kamera  digital,  kapas, kertas  cakram,  kertas  perkamen,  kertas saring,  laminary  air  flow, lemari  pendingin, inkubator,  mikroskop,  oven,  penggaris, penjepit  tabung,  pembakar  bunsen,  pipet mikro,  pipet  tetes,  rotary  evaporator,  rak tabung,  serbet,  spatula,  tabung  reaksi, timbangan analitik, tisu.

## 2.2 Bahan
Bahan yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  ekstrak  kulit  nanas, media Nutrient Agar (NA) diproduksi dari E. Merek  (Jerman).  Bahan  kimia  yang digunakan  :  aquadest,  asam  asetat,  asam nitrat,  bismuth  nitrat,  etanol  96%  larutan dimetilsulfoksida  (DMSO),  ekstrak  kulit buah nanas, FeCl 3 , HCl pekat, H 2 SO 4 pekat, iodium,  kalium  iodida,  natrium  sulfat anhidrat,  pereaksi  Dragendroff,  pereaksi Mayer.

## 2.3 Pembuatan Ekstrak Kulit Nanas
Sampel  yang  digunakan  adalah  kulit buah  nanas (Ananas  comosus  (L)  Merr) . Kulit  buah  nanas  dikupas  atau  dipisahkan dari  buahnya,  sehingga  didapat  kulit  buah nanas.  Setelah  didapat  kulit  buah  nanas beratnya  ditimbang  sebagai  berat  basah. Kemudian  dicuci  hingga  bersih.  Setelah  itu kulit  buah  nanas  dipotong  tipis-tipis  untuk mempercepat  proses  pengeringan  karena semakin  kecil  diameter  sampel  untuk dikeringkan  maka  semakin  cepat  proses pengeringan,  lalu  setelah  semua  sampel kulit  buah  nanas  dipotong  tipis-tipis,
sampel dimasukkan kedalam lemari pengering dan dikeringkan selama ± 3 hari. Sampel  yang  telah  kering  biasanya ditentukan  dari  kerapuhan  dan  mudah patahnya bahan tumbuhan yang dikeringkan.  Kemudian  beratnya  ditimbang sebagai  berat  kering.  Lalu  dihaluskan dengan  menggunakan  blender,  setelah diblender  sampai  halus  kemudian  di  ayak menggunakan ayakan, sehingga didapatkan serbuk simplisia. Serbuk simplisia dimasukkan  kedalam  wadah  kaca  yang berwarna  gelap  yang  tertutup  rapat  dan disimpan pada suhu kamar.
Serbuk  simplisisa  diekstraksi  dengan cara meserasi dengan menggunakan pelarut etanol 96 %. Cara kerja : Sebanyak 500 g serbuk simplisia dimasukkan kedalam wadah  meserasi,  lalu  dilarutkan  dalam  75 bagian  etanol,  sebanyak  3,750  ml,  lalu ditutup,  dibiarkan  selama  5  hari  terlindung dari cahaya sambil sesekali diaduk. Setelah 5  hari  sampel  disaring,  setelah  itu  ampas yang  disaring  dimeserasi  kembali  dengan pelarut 25 bagian etanol sebanyak 1,250 ml hingga  diperoleh  seluruh  pelarut  5  liter. Kemudian  didiamkan  selama  2  hari. Meserasi  diuapkan  dengan  bantuan  rotary evaporator  pada  suhu  40°C  sampai diperoleh ekstrak kental (Depkes RI, 1995).
2.4 Skrining Fitokimia 2.4.1 Pemeriksaan Alkaloid Kulit Nanas yang terpisah didisintegrasi  dengan  5  mL  HCl  2N.
Susunan yang didapat kemudian dipisahkan menjadi  3  tabung  reaksi.  Silinder  utama digunakan sebagai bening, silinder berikutnya  ditambahkan  3  tetes  reagen Dragendroff, dan silinder ketiga ditambahkan  3  tetes  reagen  Mayer. Perkembangan percepatan oranye di silinder berikutnya dan mendorong putih ke kekuningan  di  silinder  ketiga  menunjukkan adanya  alkaloid  (Jones  dan  Kinghorn, 2006).

## 2.4.2 Pemeriksaan Glikosida
Penilaian  glikosida  diselesaikan  oleh respons  Lieberman-Buchard.  Penghilangan Kulit  nanas  dipecah  dalam  pelarut  etanol, didispersikan  di  atas  pancuran  air  dan kemudian  dilarutkan  dalam  5  mL  anhidrida asam  kemudian  ditambahkan  10  tetes asam  sulfat  pekat.  Berkembangnya  warna
biru  atau  hijau  menunjukkan  adanya glikosida (Depkes RI, 1995).
2.4.3 Pemeriksaan Sterol dan Triterpenoid Konsentrat  dipecah  dalam  0,5  mL kloroform, ditambah 0,5 mL asam anhidrida. Selain itu, campuran ini diteteskan  dengan  2  mL  asam  sulfat  pekat melalui  pembagi  silinder.  Dengan  asumsi bahwa  nada  hijau  agak  biru  terbentuk,  itu menunjukkan adanya sterol. Dengan asumsi cincin coklat atau ungu menunjukkan  adanya  triterpenoid  (Jones dan Kinghorn, 2006; Evans, 2009).

## 2.4.4 Pemeriksaan Saponin
Konsentrat  ditambahkan  dengan  10 mL  air  panas  dan  kemudian  didinginkan, dikocok  secara  vivacious  selama  10  detik. Buih yang kuat dibingkai selama setidaknya 10  menit  setinggi  1-10  cm.  Dengan pemuaian HCl 2 N buih akan hilang (Depkes RI, 1995).

## 2.4.5 Pemeriksaan Polifenol dan Tanin
Konsentrat ditambahkan 1 mL larutan Fe(III) klorida 10%. Dengan asumsi bahwa nada  biru  kusam,  biru-gelap  atau  hijau- gelap  dibingkai,  ini  menunjukkan  adanya campuran  polifenol  dan  tanin  (Robinson, 1995; Jones dan Kinghorn, 2006).

## 2.4.6 Pemeriksaan Flavonoid
2 mL konsentrat dihangatkan, kemudian ditambahkan etanol. Pada susunan  tersebut  ditambahkan  serbuk magnesium
dan
ditambahkan
HCl. Pembentukan susunan merah menunjukkan adanya flavonoid.

## 2.5 Pembuatan Media
2.5.1 Media Nutrient Agar (NA)
Dilarutkan  0,084  g  bubuk  madia  NA ( nutrient  agar )  dengan  aquadest  30  ml dalam  erlenmeyer.  Larutan  dipanaskan sampai  bubuk  benar-benar  larut  tetapi tidak  sampai  mendidih,  selanjutnya  diukur pH  hingga  pH  7,4  ±  2.  Kemudian, disterilisasi  dengan  menggunakan  autoklaf selama  15  menit  pada  suhu  121°C  dan menunggu  media  hingga  memadat  (Oxoid, 2019).

## 2.5.2 Media Nutrient Broth (NB)
Ditimbang  sebanyak  1  g  serbuk  NB dan  dimasukkan  kedalam  gelas  piala  500 ml. Kemudian ditambahkan aquades sebanyak  150  ml.  Kemudian  dipanaskan diatas  hotplate  sampai  semua  bahan  larut dan  homogen,.  Setelah  itu,  larutan dimasukkan  kedalam  tabung  Erlenmeyer dan  selanjutnya  siap untuk  diautoklaf  pada suhu  121°C  selama  45  menit.  Kemudian media  cair  dimasukkan  dalam  tabung reaksi.  Media  yang  telah  di  sterilkan tersebut  disimpan  dalam  kulkas  dan  siap untuk digunakan (Saridewi NM, 2017).

## 2.5.3 Pembuatan Agar Miring
Sebanyak  3  ml  media  Nutrient  Agar cair,  dimasukkan  kedalam  tabung  reaksi, diletakkan  pada  sudut  keiringan  30°-45°C dan  biarkan  memadat,  kemudian  disimpan dilemari pendingin (Lay, 1994).

## 2.5.4 Pembuatan Inokulum Bakteri
Kultur  bakteri  yang  telah  tumbuh dengan  menggunakan  jarum  ose  steril, kemudian  disuspensikan  kedalam  10  ml Nutrient  Agar  (NA)  steril  lalu  diinkubasi pada suhu 36°-37°C selama 24 jam.

## 2.5.5  Pembuatan  Larutan  Uji  dengan Berbagai Konsentrasi
Dibuat larutan uji  dengan  konsentrasi 25mg/ml,  50mg/ml,  75mg/ml,  100mg/ml ekstrak  etanol  96%  kulit  nanas (Ananas comosus  (L)  Merr) kemudian  masing- masing  dilarutkan  dalam  10  ml  DMSO. Cairan  DMSO  diukur  volumenya  digelas ukur sebanyak 10 ml.
2.6  Pengujian  Ekstrak  Kulit  Buah Nanas  Terhadap  Pertumbuhan  Bakteri

## Escherichia coli
Sebanyak  1  ml  inokulasi  dimasukkan kedalam  cawan  petri  steril,  setelah  itu dituangkan  media  Nutrient  Agar  (NA) sebanyak  20  ml  dengan  suhu  45°-50°C, selanjutnya  cawan  dihomogenkan  diatas permukaan  meja  agar  media  dan  suspensi bakteri  tercampur  rata.  Pada  media  yang telah  padat  diletakkan  kertas  cakram  yang telah  dimasukkan  kedalam  larutan  uji ekstrak  etanol  kulit  nanas  dengan  masing- masing  konsentrasi  25mg/ml,  50mg/ml, 75mg/ml,  100mg/ml.  Selama  1  menit kemudian diinkubasi di incubator pada suhu 36°-37°C  selama  1  x  24  jam,  setelah
diinkubasi  selama  1  x  24  jam  lalu  diukur diameter  zona  bening  dis  ekitar  kertas cakram  yang  telah  direndam  selama  1 menit  dengan  ekstrak  etanol  kulit  nanas dengan menggunakan jangka sorong.
2.7 Pengukuran Zona Hambat

## Pertumbuhan Bakteri
Zona  hambat  adalah  area  hambat ekstrak  dalam  menghambat  pertumbuhan bakteri  yang  ditandai  dengan  adanya  area bening  disekitar  ekstrak.  Diameter  zona hambat  diukur  dengan  penggaris  atau jangka sorong
. 2.8 Analisis Data Dari  penelitian  tersebut  data  yang diperoleh  dilanjutkan  dengan  menganalisa data kemudian ditarik kesimpulan menggunakan uji statistik parametik.
Jika  data  berdistribusi  norml  dan homogen maka  dilanjutkan  dengan uji  One way  ANOVA  (Analysis  Of  Variances).  Kalau data  tidak  berdistribusi  normal  dan homogen  dilanjutkan  dengan  uji kruskal wallis ,  uji kruskal  wallis merupakan alternatif dari uji anova . Dimana uji kruskal wallis tidak  berasumsi  data  yang  diteliti berdistribusi normal dan homogen.

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  penelitian  pemeriksaan  skrining fitokimia  ekstrak  kulit  buah  nanas  dilihat pada tabel 1 dibawah ini.
Tabel 1 Hasil Skrining Fitokimia Ekstrak Kulit Buah Nanas Golongan Senyawa Hasil Keterangan Alkaloid + Endapan coklat/ jingga kecoklatan Flavonoid + Warna merah, jingga, kuning pada lapisan amil alkohol Tanin + warna biru tua hujau kehitaman Saponin + Timbul buih Keterangan : (+)  Positif  :  Mengandung  golongan senyawa (-)  Negatif  :  Tidak  mengandung  golongan senyawa
Berdasarkan hasil uji skrining fitokimia  ekstrak  etanol  96%  kulit  buah nanas ( Ananas  comosus (L.) Merr)
menunjukkan  hasil  positif  mengandung senyawa  alkaloid  karena  saat  campuran ekstrak ditambahkan beberapa tetes pereaksi  Dragendroff  terbentuk  endapan berwarna coklat atau jingga kecoklatan.
Mekanisme  kerja  alkaloid  sebagai antibakteri  yaitu  dengan  cara  menganggu komponen penyusun peptidoglikan pada sel bakteri,  sehingga  lapisan  dinding  sel  tidak terbentuk
secara utuh dengan menyebabkan kematian sel tersebut (Darsana, et al, 2012). Berdasarkan hasil uji skrining fitokimia  ekstrak  etanol  96%  kulit  buah nanas ( Ananas  comosus (L.) Merr) menunjukkan  hasil  positif  mengandung senyawa  flavonoid  karena  saat  campuran ekstrak  ditambahkan  serbuk  magensium, ditambahkan asam klorida dan ditambahkan  amil  alkohol  terbentuk  warna merah  jingga pada lapisan amil alkohol.
Senyawa metabolit sekunder flavonoid  berkerja  untuk  menghancurkan bakteri  dengan  cara mendenaturasi  protein yang  dapat  menyebabkan  penghentian aktivitas metabolisme (Osong et al, 2019). Berdasarkan  hasil  uji  skrining  fitokimia ekstrak  etanol  96%  kulit  buah  nanas ( Ananas  comosus  (L.)  Merri) menunjukkan hasil  positif  mengandung  senyawa  tanin karena saat campuran ekstrak ditambahkan beberapa  tetes  FeCl3  1%  terbentuk  warna biru tua kehijauan.
Mekanisme  kerja  antibakteri  tanin mempunyai  daya  antibakteri  dengan  cara memprepitasi protein. Efek antibakteri tanin melalui  reaksi  dengan  membran  sel, inaktivasi  enzim  dan  inaktivasi  fungsi materi  genetik.  Mekanisme  kerja  tanin sebagai  antibakteri  adalah  menghambat enzim  reverse  transkriptase  dan  DNA topoisomerase  sehingga  sel  bakteri  tidak terbentuk (Bartlett, et al, 2009).
Berdasarkan hasil uji skining fitokimia ekstrak  etanol  96%  kulit  buah  nanas ( Ananas  comosus  (L.)  Merr )  menunjukkan hasil  positif  mengandung  senyawa  saponin karena saat campuran ekstrak dikocok kuat – kuat selama 10  menit  menimbulkan  buih dan  dengan  penambahan  1  tetes  asam klorida buih tidak hilang.
Mekanisme  kerja  senyawa  saponin sebagai  antibakteri  adalah  mengurangi
tegangan  permukaan  yang  mengakibatkan kebocoran  sel  dan  menyebabkan  keluarnya cairan intraseluler (Nuria et al, 2009).
Hasil  uji  mikrobiologi  ekstrak  kulit  buah nanas  ( Ananas  comosus  (L.)  Merr) dilihat dari pengukuran zona hambat bakteri. Hasil pengukuran  zona  hambat  didapatkan  dari hasil  penelitian  yang  dapat  dilihat  pada tabel 3.2 dibawah ini.

## Tabel 2 Hasil Uji Aktivitas Antibakteri
Kulit Buah Nanas Terhadap Bakteri
Escherichia coli Konsentrasi Diameter Zona Hambat (mm) Dengan Pengulangan Rata – Rata Diameter Zona Hambat (mm) I II Kontrol (+) 28,3 mm 28,5 mm 28,4 mm Kontrol (-) 0 mm 0 mm 0 mm 25 mg/ml 8,1 mm 9,9 mm 9 mm 50 mg/ml 9,2 mm 11,9 mm 10,55 mm 75 mg/ml 12,6 mm 12,8 mm 12,7 mm 100 mg/ml 12,7 mm 13,9 mm 13,3 mm Berdasarkan  hasil  pengukuran  zona hambat  ekstrak  kulit  nanas  ( Ananas comosus  (L.)  Merr) terhadap  bakteri Escherichia  coli menghasilkan  ukuran diameter  yang  berbeda-beda  dimana  pada konsentrasi  25  mg/ml  menghasilkan  rata- rata  diameter  zona hambat sebesar 9 mm, sedangkan  pada  konsentrasi  50  mg/ml menghasilkan  rata-rata  diameter  zona hambat  sebesar  10,55  mm,  dan  pada konsentrasi  75  mg/ml  menghasilkan  rata- rata  diameter  zona  hambat  sebesar  12,7 mm,  sedangkan  pada  konsentrasi  100 mg/ml  menghasilkan  rata-rata  diameter zona  hambat  sebesar  13,3  mm.  Rata-rata diameter zona hambat pada masing-masing konsentrasi  mengalami  kenaikan.  Dimana pada  konsentrasi  100  mg/ml  memiliki aktivitas  antibakteri  yang  paling  besar dibandingkan dengan konsentrasi 25 mg/ml,  50  mg/ml,  75  mg/ml.  Hal  ini disebabkan  karena  adanya  kandungan metabolit  sekunder  alkaloid,  flavonoid, tanin  dan  saponin  yang  lebih  banyak erdapat pada konsentrasi 100 mg/ml. Maka
hal  ini  yang  menunjukkan  bahwa  semakin tinggi  konsentrasi  ekstrak kulit  buah nanas maka  akan  menghasilkan  diameter  zona hambat  yang  semakin  besar  pula  terhadap pertumbuhan bakteri Escherichia coli. Berdasarkan  hasil  pengukuran  zona hambat  bakteri  ekstrak  kulit  buah  nanas menurut  (Coyle,  2015)  dengan  konsentrasi 25  mg/  ml  termasuk  tidak  berpotensi sebagai  antibakteri.  Pada  konsentrasi  50 mg/ml, 75 mg/ml dan 100 mg/ml termasuk berpotensi dalam menghambat pertumbuhan  bakteri Escherichia  coli. Dari hasil pengamatan dan pengukuran diameter zona  bening  bakteri  didapat  bahwa  kulit buah  nanas  memiliki  aktivitas  sebagai antibakteri. Hal ini terlihat dari zona bening yang  terbentuk  disekitar  kertas  cakram pada setiap maing-masing konsentrasi yang digunakan.

## 3.1 Hasil Uji Normalitas Data
Hasil
uji normalitas data
menggunakan  uji  Shapiro  wilk  test,  data yang dihasilkan berdistribusi normal karena nilai signifikan ≥0,05.
Hasil uji homogenitas data menggunakan  levene  test,  data  yang dihasilkan  homogen  karena  nilai  signifikan (0,179) ≥ 0,05.

## 3.2  Hasil  Uji  Analisa  Data  One  Way Anova
Hasil  Uji  Analisa  Data  One  Way Anova, hasil nilai signifikan (0,000) < 0,05. Berdasarkan ketentuan apabila nilai signifikan  <  nilai  (0,05)  maka  H0  ditolak dan  H1  diterima.  Ada  pengaruh  pemberian ekstrak kulit buah nanas terhadap pertumbuhan bakteri Escherichia coli.

## 4. KESIMPULAN DAN SARAN
4.1 Kesimpulan
Dari  hasil  penelitian  yang  dilakukan terhadap  ekstrak  kulit  buah  nanas  ( Ananas comosus (L.) Merr) diperoleh kesimpulan :
a. Berdasarkan hasil uji skrining fitokimia  ekstrak  kulit  buah  nanas ( Ananas comosus (L.) Merr) menunjukkan hasil positif mengandung  senyawa  metabolit sekunder  alkaloid,  flavonoid,  tanin dan saponin. Pada senyawa metabolit  sekunder  seperti  alkaloid, flavonoid, tanin dan saponin mampu

## menghambat  pertumbuhan  bakteri
Escherichia coli.
b. Pada konsentrasi 25 mg/ml memiliki aktivitas (tidak ada potensi) menghambat  pertumbuhan  bakteri dengan zona hambat sebesar 9 mm. Pada konsentrasi 50 mg/ml memiliki aktivitas  (berpotensi)  menghambat pertumbuhan  bakteri  dengan  zona hambat  sebesar  10,55  mm.  Pada konsentrasi  75  mg/ml  memiliki aktivitas  (berpotensi)  menghambat pertumbuhan  bakteri  dengan  zona hambat  sebesar  12,7  mm.  Pada konsentrasi  100  mg/ml  memiliki aktivitas  (berpotensi)  menghambat pertumbuhan  bakteri  dengan  zona hambat sebesar 13,3 mm.

## 4.2 Saran
Diharapkan
penelitian ii dapat dilanjutkan dengan membuat formulasi dari ekstrak  kulit  buah  nanas  ( Ananas  comosus (L.) Merr) sebagai pengobatan untuk infeksi yang  di  sebabkan  oleh  bakteri Escherichia coli dan  penelitian  ini  juga  dikembangkan dengan menguji aktivitas antibakteri ektkrak  kulit  buah  nanas  ( Annas  comosus (L.)  Merr) terhadap  bakteri  dan  jamur lainnya.

## DAFTAR PUSTAKA
Depkes  RI.  (2009). Pedoman  Instalasi Pusat  Sterilisasi  (Central  Sterile Supply Departement/CSSD) Di Rumah Sakit. Depkes RI: Jakarta.
Depkes  RI.  1995.  Farmakope  Indonesia, Edisi  IV.  Jakarta:  Departemen Kesehatan RI.
Dwisatyadini,  M.  (2017). Pemanfaatan tanaman  obat  untuk  pencegahan dan pengobatan penyakit degeneratif. In  :  Optimalisasi  Peran Sains dan Teknologi untuk Mewujudkan Smart City. Tanggerang Selatan:  Universitas  Terbuka.  ISBN
978-602-392-158-4(e).
Erviani  EA.  (2018). Analisis  Multidrug Resisten  Antibiotik  Pada  Salmonella typhi  Dengan  Teknik  Multiplex  PCR.
J. Ilmiah Biologi. Vol 1, 1, pp 51-60.
Fahrurroji,  A.,  &  Riza,  H.  (2020).
Karakterisasi  Ekstrak  Etanol  Buah Citrus amblycarpa (L), Citrus aurantifolia  (S.),  dan  Citrus  sinensis (O.). JURNAL  FARMASI  DAN  ILMU

## KEFARMASIAN
INDONESIA , 7 (2), 100-113.
Jones,  W.P.  dan  Kinghorn,  A.D.,  2006.
Extraction of plant secondary metabolites,  In:  Sarker,  S.D.,  Latif, Z.  dan  Gray,  A.I.,  eds.  Natural Products  Isolation.  2nd  Ed.  New Jersey: Humana Press.
Lay,  B.W.  (1994). Analisa  Mikroba  di Laboratorium. Edisi 1. Raja Grafindo
Persada: Jakarta. Nova,  Suryati.  (2017). Uji  Efektivitas Antibakteri Ekstrak Aloe vera Terhadap  Pertumbuhan  Escherichia coli secara In Vitro. Jurnal Kesehatan Andalas : 6 (3).
Nuria,  MC,  Faizatun,  A.,  Sumantri.  (2009). Uji  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak Etanol  Daun  Jarak  Pagar  (Jatropha curcas L.) terhadap Bakteri Staphylococcus  aureus ATCC 25923, Escherichia  coli  ATCC  25922,  dan Salmonella thypi ATCC 1408. MEDIARGO  :  Jurnal  Ilmu-Ilmu Pertanian. 5 (2): 26-37.
Osonga,  FJ,  Akgul,  A.,  Miller,  RM,  Eshun, GB, Yazgan, I., Akgul, A., Sadik, OA.
(2019). Aktivitas  antimikroba  kelas baru  flavonoid  fosforilisasi  dan modofikasi. ACS  Omega.  4(7):
12865-12871. Saridewi, N.M., Meiskha, B., Anisa. (2017). Uji  Efektivitas  Antibakteri  Perasan Jus Buah Nanas (Ananas comosus)Terhadap Pertumbuhan Isolat Bakteri Plak Gigi di Puskesmas Kecamatan Tanah Abang. J. Biogenesis ; vol.6(2): pp 104-110.
Sari,  N.  P.  D.  P.,  Cahyo,  B.  D.,  Sugijanto, N.  E.  N.,  &  Suciati,  S.  (2021). Aktivitas  Antibakteri  dari  Jamur Endofit  Penicillium  oxalicum  Hasil Isolasi  dari  Spons  Homaxinella

## tanitai. JURNAL  FARMASI  DAN  ILMU KEFARMASIAN
INDONESIA , 8 (1), 10-15.