## SENYAWA 4-HIDROKSI SINAMAMIDA DARI EKSTRAK ETIL ASETAT (EtOAc) KULIT AKAR PALIASA
( Kleinhovia hospita
Linn)
Asriani Ilyas*
*) Dosen Pada Jurusan Kimia Fakultas Sains dan Teknologi
UIN Alauddin Makassar e-mail : ayyi_ilyas@yahoo.co.id
Abstract  : Isolation  and  identification  of  secondary  metabolites  from EtOac extract of  the  root  bark of  Kleinhovia hospita Linn. plant had been  performed.  Separation  techniques  used  consisted  of  extraction, fractionation,  and  purification.  The  compounds  obtained  were  tested and  elucidated  based  on  UV,  IR,  and  NMR  spectroscopy  data.  A compound obtained was 4-hydroxy cinnamamide.
Keyword : Kleinhovia hospita Linn., 4-hydroxy cinnamamide

## I. PENDAHULUAN
etabolit  sekunder  merupakan  senyawa  organik  yang  dapat mempengaruhi  aktivitas  fisiologis  organ,  jaringan,  atau  sel  tertentu sehingga dijadikan bahan dasar obat. Lebih dari 30% bahan obat yang beredar di perdagangan adalah berasal dari bahan alam (Atun, 2005). Pengobatan dipandang  sebagai  suatu  proses  interaksi  molekular  antara  obat  dengan  molekul biologis  dari  sumber  penyakit.  Interaksi  tersebut  bersifat  dinamis  sesuai  dengan kondisi dan situasi sehingga resistensi obat terhadap penyakit dapat terjadi. Hal ini adalah suatu tantangan dan sekaligus peluang bagi para peneliti kimia bahan alam pada masa-masa yang akan datang. Penelitian kimiawi tumbuhan sebagai sumber metabolit  sekunder  baru  adalah  salah  satu  alternatif  yang  dapat  menjawab  dan memecahkan  permasalahan  kesehatan  tersebut  (Ersam,  2004).  Penelitian  ini didasarkan pada penyelidikan etnobotani yang didukung dengan sifat farmakologi dan potensi kimia tumbuhan.
Hasil  survei etnobotani  yang dilakukan memperlihatkan bahwa  salah  satu tumbuhan yang potensial adalah tumbuhan tropika Indonesia yang dikenal dengan nama  kayu  katimahar. Tumbuhan tersebut banyak ditemukan di daerah Sulawesi Selatan  dengan  nama  daerah paliasa (Makassar)  atau aju  pali (Bugis)  (Heyne,
1987), dan nama  latinnya Kleinhovia hospita Linn. (famili Sterculiaceae). Daun K.  hospita digunakan  untuk  pengobatan  penyakit  hati,  penyakit  kuning,  dan
M
Asriani , Senyawa 4-Hidroksi Sinamamida dari Ekstrak Etil Asetat ( EtOAc ) Kulit Akar Paliasa _ 153
hepatitis  yang  didukung  dengan  sifat  farmakologis  sebagai  anti  radang  hati (Raflizar et  al. ,  2006).  Potensi  kimia K.  hospita terlihat  dari  metabolit  sekunder yang  telah  diisolasi,  diantaranya  adalah  kaemferol  dan  quercetin  yang  diperoleh dari daun (Latiff, 1997) dengan aktivitas anti  inflamasi dan anti  viral (Lyu et al. , 2005), scopoletin, dan beberapa  senyawa dari  kulit batang  yang belum diketahui strukturnya namun bersifat toksik terhadap udang Artemia salina Leach (korelasi positif sebagai anti  kanker) (Anderson et al ., 1990) , yaitu turunan stilben dengan LC50 198,67 μg/mL, turunan asam karboksilat dengan LC50 128,99 μg/mL (Dini, 2005);  dua  senyawa  fenilpropanoid  bentuk  ester  dengan  LC50  86,62  dan  29,14 μg/mL,  triterpenoid  asam  karboksilat  dengan  LC50  42,97  μg/mL,  dan  golongan alkaloid dengan LC50 5,07 μg/mL (Ulfa, 2006).
Sebagian besar senyawa bioaktif yang telah diisolasi dari K. hospita termasuk dalam  golongan  senyawa  fenol  seperti  flavonoid,  stilben,  dan  fenilpropanoid (Latiff, 1997; Dini, 2005; Ulfa, 2006). Penelitian tentang kandungan fenol dalam tumbuhan  menunjukkan  bahwa  senyawa  fenol  terdistribusi  berdasarkan  jenis pelarut  yang  digunakan,  dan  jumlah  fenol  tertinggi  terdapat  pada  ekstrak  etil asetat (Pambayun et al., 2007). Penelitian  ini didukung oleh penemuan  senyawa- senyawa  bioaktif  golongan  fenol  yang  diisolasi  dari  ekstrak  EtOAc,  misalnya morusin  dan  artonin  E  dari  kulit  batang,  serta  sikloartobilosanton  dari  kulit  akar Artocarpus  altilis (Moraceae)  yang  bersifat  toksik  terhadap A.  salina dengan LC50  berturut-turut:  55,0;  5,6  dan  33,7  μg/mL  (Ersam et  al. ,  2000);  dan  satu senyawa fenilpropanoid turunan kumarin pada batang Garcinia balica Miq. yang memiliki  aktivitas  yang  tinggi  sebagai  antioksidan  (Mudjirahmini  dan  Ersam, 2006). Berdasarkan uraian di atas maka dalam penelitian  ini eksplorasi metabolit sekunder  pada  kulit  akar  tumbuhan K.  hospita dilakukan  dengan  menggunakan pelarut  EtOAc.  Penelitian  ini  diharapkan  dapat  memberikan  informasi  yang berharga  terhadap  pemberdayaan  keanekaragaman  hayati  Indonesia,  terutama yang berpotensi sebagai tumbuhan obat.
Pada  artikel  ini  akan  dibahas  mengenai  penemuan  satu  senyawa,  yaitu senyawa 4-hidroksi  sinamamida (1) dari ekstrak EtOAc  kulit akar tumbuhan  ini. Struktur molekul senyawa tersebut ditetapkan berdasarkan data spektroskopi UV, IR dan NMR.
154 _ Jurnal Teknosains, Volume 8 Nomor 2, Juli  2014 , hlm. 152 – 160

## II. METODE
Pada penelitian  ini digunakan bahan-bahan organik, yaitu  larutan metanol teknis,  n-heksan  teknis,  metilen  klorida  (CH 2 Cl 2 )  teknis,  etil  asetat  (EtOAc) teknis,  aseton  teknis  dan  aseton  p.a.,  kloroform  (CHCl 3 )  p.a.,  silika  gel  kasar (merck, no.katalog 7733),  silika  gel (merck, no.katalog 7734),  silika  gel (merck, no.katalog  7730),  plat  KLT  (merck,  no.katalog  1.05553),  CeSO 4 .H 2 SO 4 ,  NaCl laut  (sigma,  no.katalog  S-9883),  DMSO  (merck,  no.katalog  802912),  telur Artemia salina Leach, dan aquades. Alat-alat yang digunakan antara lain alat gelas yang  umum  di  Laboratorium,  rotary  evaporator,  timbangan  digital,  kromatografi kolom  vakum,  kromatografi  kolom  gravitasi,  kromatografi  kolom  flash,  mikropipet, penyaring kristal, alat titik leleh, wadah penetasan, Alat KLT (chamber KLT, pipa kapiler, pensil, cutter, dan mistar), Lampu UV, spektroskopi UV Cary Varian 100 Conc., spektroskopi Shimadzu FT-IR, dan NMR ( Jeol ECA 500).
Bahan  tumbuhan  yang  digunakan  adalah  serbuk  kulit  akar Kleinhovia hospita Linn., diperoleh dari Kabupaten  Bone. Spesimen tumbuhan diidentifikasi oleh Herbarium Bogoriense, LIPI Bogor.
Serbuk  kulit  akar Kleinhovia  hospita Linn.  seberat  3,2  kg  dimaserasi dengan  pelarut  metanol  selama  24  jam  sebanyak  empat  kali.  Maserat  metanol tersebut  dievaporasi  hingga  diperoleh  residu  kental  yang  kemudian  dipartisi secara  kontinyu, mulai dari pelarut nonpolar  yaitu n-heksan  kemudian semipolar CHCl 3 dan pelarut polar etil asetat. Hasil partisi etil asetat berupa residu berwarna merah bata seberat 15,59 gram.
Hasil  partisi  dianalisis  dengan  KLT  dan  difraksinasi  awal  melalui kromatografi  kolom  vakum  dengan  eluen  n-heksan,  EtOAc  :  n-heksan,  EtOAc, aseton,  dan  metanol  dengan  urutan  kepolaran  yang  terus  meningkat.  Proses  ini menghasilkan sepuluh fraksi  A-J. Fraksi F  seberat 241,7 mg difraksinasi melalui kromatografi  kolom  tekan  dengan  eluen  2%  aseton/ n -heksan  dan  30%  aseton/ n - heksan. Berdasarkan  kromatogram hasil  analisis dengan KLT diperoleh 11 fraksi utama,  yaitu  fraksi  F1-F11.  fraksi  F8  dikristalisasi  dengan  30%  aseton  dalam n - heksan dan direkristalisasi dengan CHCl 3 sehingga diperoleh kristal putih seberat 5  mg  dengan  titik  leleh  210 o C.  Pada  analisis  dengan  KLT,  kristal  tersebut memberikan 1 noda dan selanjutnya dinyatakan sebagai senyawa (1).
Asriani , Senyawa 4-Hidroksi Sinamamida dari Ekstrak Etil Asetat ( EtOAc ) Kulit Akar Paliasa _ 155

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN
Senyawa 4-hidroksi sinamida  (1). Senyawa (1) (5 mg) berbentuk kristal putih  dengan  titik  leleh  210 o C.  Analisis  data  spektroskopi  UV  (MeOH) menunjukkan  adanya  serapan  maksimum  pada  λ ma ks 291  nm  yang mengindikasikan  adanya  sistem  ikatan  rangkap  terkonjugasi  (-C=C-C=C-)  yang khas  untuk  senyawa  fenol.  Pola  konjugasi  ini  didukung  dengan  pola  spektrum pada penambahan pereaksi geser NaOH dengan pergeseran batokromik sepanjang 42  nm  (291  →  333  nm)  yang  mengindikasikan  adanya  gugus  hidroksil  bebas. Analisis  data  spektroskopi  IR  (KBr)  memperlihatkan  pita  serapan  (υ maks )  cukup tajam pada 1674 cm -1 yang menunjukkan adanya gugus karbonil (C=O) dari suatu amida  yang  didukung  dengan  serapan  pada  1627  cm -1 untuk  vibrasi  N-H  primer dan  overtone  pada  3188  cm -1 .  Serapan  pada  1598  dan  1510  cm -1 menunjukkan vibrasi  C=C  aromatik  yang  didukung  dengan  serapan  =C-H  aromatik  pada  3066 dan 3026 cm -1 dan overtone pada 2000 – 1667 cm -1 serta serapan yang tajam pada 831  cm -1 yang  menunjukkan  pola  aromatik di substitusi para. Sedangkan  pada 2964, 2900, dan 2839 cm -1 menunjukkan serapan C-H alifatik. Satu pita serapan yang  tajam  juga  terlihat  pada  975  cm -1 yang  menunjukkan  suatu  alkena  dengan pola trans 1,2-di substitusi. Berdasarkan hasil analisis spektrum UV dan IR, maka dapat  diusulkan  bahwa  senyawa (1) mempunyai  gugus  hidroksi,  gugus  karbonil amida, gugus C-H alifatik, alkena, dan aromatik (fenol).
156 _ Jurnal Teknosains, Volume 8 Nomor 2, Juli  2014 , hlm. 152 – 160
Gambar 1 . Spektrum UV dan IR senyawa 1
Analisis  data  spektroskopi 1 H-NMR  memperlihatkan  beberapa  sinyal diantaranya pada daerah geseran kimia aromatik, yaitu pada δ 7,55 ppm (2H, dd , J = 8,6 & 2,9 Hz) dan δ 6,89 ppm (2H, dd , J =8,6 & 3 Hz) yang menunjukkan pola kopling orto/meta untuk dua atom H yang identik. Pola ini menggambarkan suatu unit aromatik di-substitusi pada posisi para dalam sistem spin AA’BB’. Salah satu substituen  dari  unit  aromatik  ini  adalah  OH  dengan  adanya  sinyal  pada  δ  3,00 ppm ( brs ). Pada δ 7,61 ppm (1H, d, J = 15,9 Hz) dan δ 6,33 ppm (1H, d, J = 15,9 Hz)  juga  menunjukkan  suatu  pola  kopling  namun  bukan  untuk  sistem  aromatik. Pola  ini  menunjukkan  satu  ikatan  rangkap  (alkena)  dengan  posisi trans ,  dan berada pada lingkungan dishelding sehingga geseran kimianya berada pada daerah aromatik.  Spektrum 1 H-NMR  juga  memperlihatkan  satu  sinyal  pada  δ  7,91  ppm ( s ) yang khas untuk gugus NH 2 yang mendukung adanya gugus amida.
Analisis  data  spektroskopi 13 C-NMR  memperlihatkan  7  sinyal  C  namun ada  dua  sinyal  yang  menunjukkan  2C  yang  identik  sehingga  total  karbonnya  9, yang  teridentifikasi  sebagai  berikut:  pada  δ  168,1  ppm  menunjukkan  karbon karbonil  yang  spesifik  untuk  gugus  amida;  pada  δ  160,5  ppm  menunjukkan karbon  oksi-aril;  pada  δ  116,7,  127,1,  dan  130,9  ppm  menunjukkan  karbon
Asriani , Senyawa 4-Hidroksi Sinamamida dari Ekstrak Etil Asetat ( EtOAc ) Kulit Akar Paliasa _ 157
aromatik;  dan  pada  δ  145,5  dan  115,8  ppm  menunjukkan  karbon  alkena,  yang didukung  dengan  spektrum  DEPT  yang  memperlihatkan  4  sinyal  karbon  tersier (CH). Spektrum 1 H-NMR dan 13 C-NMR pada Gambar 2.
Hubungan  antara  sinyal  proton  ( 1 H)  dan  karbon  ( 13 C)  ditunjukkan  pada spektrum  2Dimensi-NMR.  Berdasarkan  analisis  data  spektroskopi  UV,  IR  dan NMR  dapat  diusulkan  struktur  untuk  senyawa (1), yaitu 4 -hidroksi  sinamamida. Pembuktian  struktur  senyawa (1) diperlihatkan  pada  spektrum  HMBC  yang menunjukkan adanya  korelasi jarak jauh H  → C. Pada  spektrum HMBC terlihat adanya korelasi jarak jauh antara H-2/H-6 dengan C-3/C-5, C-1, dan C-4; H-3/H- 5  dengan  C-1  dan  C-4;  H-1’  dengan  C-2/C-6  dan  C-2’;  serta  H-2’  dengan  C-1’ dan  C-3’  sehingga  dapat  dipastikan  bahwa  senyawa (1) adalah 4 -hidroksi sinamamida . Data lengkap senyawa (1) dapat dilihat pada Tabel 1.
158 _ Jurnal Teknosains, Volume 8 Nomor 2, Juli  2014 , hlm. 152 – 160
Gambar 2 . Spektrum 1 H-NMR dan 13 C-NMR senyawa (1)
Tabel 1. Data NMR lengkap senyawa (1)
Asriani , Senyawa 4-Hidroksi Sinamamida dari Ekstrak Etil Asetat ( EtOAc ) Kulit Akar Paliasa _ 159
Gambar 3 . Struktur 4 -hidroksi sinamamida (1)

## IV. KESIMPULAN
Proses  isolasi dari ekstrak EtOAc  kulit akar Kkleinhovia hospita Linn. ini diperoleh satu senyawa  yaitu  senyawa 4-hidroksi  sinamamida (1)  yang memiliki pola struktur  fenilpropanoid (golongan fenolik). Berdasarkan data yang diperoleh dapat  disimpulkan  bahwa Kkleinhovia  hospita Linn.  termasuk  tumbuhan  yang mengandung  senyawa  fenol,  sehingga  spesies  ini  merupakan  salah  satu  sumber senyawa kimia yang unik.

## DAFTAR RUJUKAN
Anderson, J.E., Goetz, C.M. and McLaughlin, J. L. 1990. A Blind Comparison of Simple  Bench-top  Bioassays  and  Human  Tumour  Cell  Cytotoxicities  as Antitumor Prescreen. Phytochemical analysis 6: 107 - 111.
Atun,  S.  2005. Pengembangan  Potensi  Bahan  Alam  sebagai  Sumber  Penemuan Obat Baru . Makalah disajikan dalam Seminar Nasional Kimia, Universitas Negeri Yogyakarta, Yogyakarta, 24 September.
Dini,  I.  2005. Penelusuran  Metabolit  Sekunder  Ekstrak  Kulit  Batang  Tumbuhan Paliasa ( Kleinhovia hospita Linn.) dan Bioaktivitasnya  terhadap Artemia salina Leach.  Tesis  tidak  diterbitkan.  Makassar:  Program  Pascasarjana Universitas Hasanuddin.
Ersam, T., Achmad, S.A., Ghisalberti, E.L., Hakim, E.H., Tamin, R. 2000. Some Phenolic Compounds from Artocarpus Altilis (Park.) Fosb . Proceeding  in
160 _ Jurnal Teknosains, Volume 8 Nomor 2, Juli  2014 , hlm. 152 – 160
International  Seminar  on  The  Role  of  Chemistry  in  Industry  and Enviromental, Andalas University, Padang, August 30th – 31st.
Ersam,  T.  2004. Keunggulan  Biodiversitas  Hutan  Tropika  Indonesia  dalam Merekayasa  Model  Molekul  Alami .  Makalah  disajikan  dalam  Seminar Nasional Kimia VI, Jurusan Kimia FMIPA ITS.
Heyne, K. 1987. Tumbuhan Berguna Indonesia. Jakarta: Departemen Kehutanan.
Latiff.  1997;  dalam  Hanum,  I.F.  and  van  der  Maesen,  L.J.G.  2007. Plant Resources of South-East Asia No. 11 . Auxiliary Plants . LIPI Press, Jakarta (Online),
( http://www.worldagroforestrycentre.org/sea/products/afdbases/af/as p/Spe ciesInfo.asp?SpID=18130).
Lyu et al. 2005; dalam Berenguer, B., Trabadela, C., Sánchez-Fidalgo, S., Quílez, A.,  Miño,  P.,  De  la  Puerta,  R.  and  Martín-Calero,  M.J.  2007. The  Aerial Parts Of Guazuma Ulmifolia Lam. Protect Against NSAIDInduced Gastric Lesions. Journal of Ethnopharmacology , 114(2) : 153-160.
Raflizar, Adimunca, C., dan Tuminah, S. 2006. Dekok Daun Paliasa ( Kleinhovia hospita Linn.) sebagai Obat Radang Hati Akut. Cermin Dunia Kedokteran 50: 10 – 14.
Ulfa,  M.  2006. Isolasi,  Karakterisasi,  dan  Uji  Bioaktivitas  Metabolit  Sekunder Ekstrak  Kulit  Batang  Tumbuhan  Paliasa ( Kleinhovia  hospita L.).  Tesis tidak diterbitkan. Makassar: Program Pascasarjana Universitas Hasanuddin.