© Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Maarif Hasyim Latif Sidoarjo p-ISSN : 2548-8333 e-ISSN : 2549-2586

## ANALISIS JUMLAH DAN MORFOLOGI Penicillium spp PADA MEDIA AMPAS TAHU

## COUNT AND MORPHOLOGY ANALYSIS OF Penicillium spp IN TOFU WASTE MEDIA
Endah Prayekti 1) , Thomas Sumarsono 2)
Universitas Nahdlatul Ulama Surabaya 1), 2) endahphe@unusa.ac.id

## ABSTRACT
Tofu  waste  is  generally  used  for  animal  feed,  potential  for  biogas  production,  and  as  a traditional  food.  Opportunities  for  the  use  of  tofu  waste  are  very  wide  because  of  the  high  nutrient content  of  tofu  waste.  Tofu  waste  nutrient  content has  the  potential  to  be  utilized  as  an  alternative medium for mold growth. One  type of mold that  is often analyse in the laboratory is from the  genus Penicillium .  This  study  aims  to  determine  the  composition  of  an  alternative  growth  media  from  tofu waste  for Penicillium  spp .  This  study  is  an  experimental  laboratory  with  the  independent  variable  of tofu waste mass (0,1,2,3,4,5 gr) and sucrose mass (0,2,4,6 gr), while the dependent variable observed from this study  includes the amount Penicillium spp colonies and their growth characteristics  in tofu waste media. Both dependent variable observed then compared with Potato Dextrose Agar (PDA) as commercial media Tofu waste composition used in this study were (gr/100mL) : tofu waste (0, 1, 2, 3, 4, 5 gr), sucrose (0, 2, 4, 6 gr), aquadest (100mL), and agar powder (1,5gr). Statistical results using the Kruskal-Wallis  Test  showed  the  difference  of  the  use  of  sucrose  2  and  6  gr  in  the  media  on  the Penicillium spp colonies number. Colony morphology showed better performance at 5 gr of tofu waste mass.  Morphological  analysis  shows  the  differences  in  morphological  characters  which  are  quite  far from commercial media as a control using PDA. As conclusion, tofu waste media can be used to grow Penicillium  spp ,  but  it  is  necessary  to  add  some  components  both  in  the  form  of  elements  and compounds to tofu waste media to be able to display results that can approach commercial media.

## Keywords: Tofu waste, Penicillium spp, colony number, morphology

## PENDAHULUAN
Tahu  merupakan  makanan  yang biasa  dikonsumsi  oleh  masyarakat  di Indonesia.  Data  BPS  tentang  rata-rata konsumsi tahu perkapita seminggu menunjukkan  angka  0,157  kg  pada  tahun 2017  (Badan  Pusat  Statistik,  2018). Tingginya konsumsi tahu tentunya menghasilkan  limbah  ampas  tahu  dalam jumlah  yang  cukup  besar.  Kandungan  air dalam  ampas  tahu  sangat  tinggi  yaitu sekitar 89,88% (Yustina,dan Abadi, 2012),
akibatnya  bakteri  tumbuh  subur  dan menghasilkan bau tidak sedap dan berdampak  pada  pencemaran  lingkungan (Damayanti et al., 2004). Ampas tahu adalah  salah  satu  bahan  alami  dengan kandungan  nutrisi  yang  cukup  tinggi. Dalam  100  gram  ampas  tahu  mengandung protein 26,6%, lemak 18,3%, dan karbohidrat 41,3% (Wati, 2013).
Kandungan  nutrisi  ampas  tahu  yang relative  tinggi  ini  berpotensi  untuk
© Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Maarif Hasyim Latif Sidoarjo p-ISSN : 2548-8333 e-ISSN : 2549-2586
dimanfaatkan  menjadi  media  pertumbuhan jamur.
Keberadaan jamur mempunyai peran positif maupun sebagai patogen. Salah satu jenis  jamur  yang  dapat  dijumpai  patogen pada  manusia  maupun  mencemari  atau merusak  bahan  pangan  adalah  dari  genus Penicillium (Hocking, 2006). Penicillium juga mampu
memproduksi obat,
mikotoksin dan berbagai metabolit (Frisvad et al., 2004).  Untuk mendapatkan media pertumbuhan alternatif, maka dibutuhkan  evaluasi  medium  pertumbuhan yang  dapat  mendukung  pemeriksaan  di laboratorium. Evaluasi media untuk mendukung pertumbuhan jamur diantaranya  dalam  bentuk  jumlah  koloni dan karakterisasi mikroskopis.

## METODOLOGI PENELITIAN
Waktu dan tempat penelitian
Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental  dengan  25  perlakuan  dengan dua  kali  ulangan.  Penelitian  dilaksanakan  di laboratorium
mikrobiologi, Fakultas Kesehatan,  Universitas  Nahdlatul  Ulama Surabaya, pada bulan April hingga Juli 2019.

## Alat dan Bahan penelitian
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini meliputi  autoklaf  vertikal,  colony  counter, mikroskop,  oven,  neraca  analitik,  inkubator, cawan  petri,  pH  meter,  obyek  glass,  beaker glass, ayakan 100 mesh, dan gelas ukur. Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini meliputi media PDA Himedia, sucrosa, tepung ampas  tahu,  NaOH  0,5  N,  HCl  0,25N, BaCl 2 .2H 2 O  1,175%,  H 2 SO 4 1%,  dan  NaCl.
Kultur  jamur  yang  digunakan  merupakan
Penicillium sp (1) dari Laboratorium Mikrobiologi,Fakultas  Kesehatan,  Universitas Nahdlatul Ulama Surabaya dan dari Laboratorium  Mikrobiologi,  Biologi,  FMIPA Universitas  Brawijaya.  Ampas  tahu  diperoleh di pabrik produksi tahu di kawasan Sidoarjo.

## Metode penelitian

## Pembuatan tepung ampas tahu
Ampas  tahu  yang  didapatkan  dari  pabrik  di sidoarjo  diperas  dahulu  menggunakan  kain untuk  selanjutnya  diolah  dengan  direbus terlebih  dahulu  selama  30  menit.  Setelah direbus,  ampas  tahu  agak  dikeringkan  dengan
cara  sangrai.  Ampas  tahu  yang  telah  disangrai kemudian  di  oven  selama  2  jam  dan  diselingi dengan  pengadukan.  Ampas  tahu  selanjutnya diblender  dan  diayak  dengan  ukuran  pori 100mesh.

## Pembuatan media tepung ampas tahu
Tepung ampas tahu yang sudah jadi selanjutnya  ditimbang  dan  dimasukkan  ke dalam  100mL  aquadest  kemudian  dididihkan selama  15  menit.  Kaldu  tepung  ampas  tahu dipisahkan  dari  endapannya  dengan  cara disaring.  Kaldu  yang  didapatkan  kemudian ditambahkan aquadest hingga volume mencapai  100mL.  Selanjutnya  ke  dalam  kaldu tepung  ampas  tahu  di  tambahkan  sucrosa  dan dilakukan  penyesuaian  pH  pada  5,5  –  5,7.  Ke dalam  media  kemudian  ditambahkan  agar powder sebanyak 1,5gr/100mL. Media selanjutnyadisterilkan  menggunakan  autoklaf selama 15 menit pada 121oC selama 15 menit. Dalam  penelitian  ini,  variasi  massa  tepung ampas tahu yang diujikan adalah 0,1,2,3,4, dan 5gr  untuk  tiap  100mL.  Massa  sucrosa  yang diujikan adalah 2,4, dan 6gr untuk tiap 100mL. Sebagai kontrol digunakan media PDA.

## Persiapan kultur
Kultur  diremajakan  pada  media  PDA  miring. Kultur yang digunakan  untuk uji adalah kultur dengan  usia  3  hari.  Kultur  selanjutnya  dibuat
© Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Maarif Hasyim Latif Sidoarjo p-ISSN : 2548-8333 e-ISSN : 2549-2586
suspensinya  dalam  0,85%  NaCl  dengan kekeruhan mengikuti standar McFarland 0,5.

## Inokulasi jamur
Media  tepung  ampas  tahu  yang  telah dipadatkan dalam cawan, selanjutnya diinokulasikan  suspensi  jamur  menggunakan ose standar 100uL dengan metode streak untuk pengamatan  jumlah  koloni  dan  menggunakan metode  spot  atau  totol  untuk  mengamati morfologi  pertumbuhan.  Inkubasi  dilakukan pada  suhu  ruang  selama  48  jam  untuk
pengamatan  jumlah  koloni,  dan  inkubasi  3 hingga 5 hari untuk pengamatan morfologi.

## Pengambilan dan pengolahan data
Data  yang  didapatkan  dari  hasil  pertumbuhan adalah  jumlah  koloni  untuk  tiap  perlakuan yang  kemudian  dianalisis  secara  statistik menggunakan kruskal wallice test dengan galat 0,05.
Data  morfologi  pertumbuhan  jamur  secara makroskopis  selanjutnya  dilakukan scoring dan dianalisis dalam bentuk grafik

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Dalam  penelitian  ini  digunakan  dua  jenis Penicillium  sp dengan  karakter  yang  berbeda.
Keduanya  diujikan  pada  medium  ampas  tahu dengan  komposisi  ampas  tahu  dan  sukrosa yang  yang  berbeda.  Untuk  selanjutnya,  hasil dan pembahasan akan dikelompokkan menjadi tiga berdasarkan massa sukrosa yang digunakan dalam media ampas tahu.

## Jumlah koloni Penicillium spp
Jumlah  koloni Penicillium  spp pada  media PDA  memiliki  jumlah  yang  sedikit  berbeda. Untuk  mengetahui  bagaimana Penicillium  spp menggunakan  komponen  dari  media,  maka digunakan  control  0/0  yaitu  komposisi  media tanpa  ampas  tahu  dan  tanpa  sukrosa. Kemampuan  daya  dukung  dari  ampas  tahu dapat  dilihat  pada  perlakuan  pemberian  hanya ampas tahu tanpa sukrosa ke dalam media.
Secara umum, pada perlakuan 0/0, kedua Penicillium  sp mampu  tumbuh  di  media.  Hal ini dapat dimungkinkan
kemampuan
Penicillium  sp untuk  mampu  tumbuh  pada media miskin nutrisi.
Pengaruh  penggunaan  gula    sukrosa  dengan konsentrasi  2,  4,  dan  6  gram  dalam  media dapat dilihat pada table 1 hingga 3.
Penicillium  sp (1)  memberikan  hasil  yang cenderung tidak beraturan dengan
penambahan gula maupun penambahan tepung.    Sebaliknya  dengan Penicillium  sp (2)
memberikan  hasil  yang  lebih  cenderung  naik seiring dengan penambahan massa  ampas tahu dan massa  sukrosa dalam media.
Hasil statistic menggunakan uji Kruskal-wallis menunjukkan  bahwa      kelompok  perlakuan yang  diujikan  dengan  variasi  ampas  tahu (0,1,2,3,4,5  gr)  dengan  massa  sukrosa  2  gram (Tabel  1),    mempunyai  hasil  yang  signifikan berbeda untuk kedua Penicillium sp .   Adapun untuk Penicillium  sp (1)  menunjukkan  hasil signifikansi  sebesar  0,035. Penicillium  sp (2)
menunjukkan hasil signifikansi sebesar 0,027.
Kelompok  perlakuan  yang  diujikan  dengan variasi  ampas  tahu  (0,1,2,3,4,5  gr)  dengan massa  sukrosa  4  gram  (Tabel  2)  menunjukkan hasil  signifikansi  yang  berbeda  antara  kedua Penicillium  sp .  Hasil  signifikansi Penicillium sp (1)  menunjukkan  hasil  sebesar  0,074 sedangkan Penicillium    sp (2)  menunjukkan hasil sebesar 0,019.
Kelompok  perlakuan  yang  diujikan  dengan variasi  ampas  tahu  (0,1,2,3,4,5  gr)  dengan massa  sukrosa  6  gram  (Tabel  3)  menunjukkan hasil  perbedaan  yang  signifikan  untuk  kedua Penicillium  sp yang  diuji.  Hasil  signifikansi dari uji Kruskal-wallis untuk kedua Penicillium sp masing – masing sebesar 0,049 dan 0,027.
© Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Maarif Hasyim Latif Sidoarjo p-ISSN : 2548-8333 e-ISSN : 2549-2586
Tabel  1.  Rerata  jumlah  koloni Penicillium  spp dengan  massa  ampas  tahu  (0,1,2,3,4,5  gr)  dan  massa sucrosa 2 gr
Perlakuan (Massa ampas tahu (gr)/Massa sucrosa (gr)) Rerata jumlah koloni Penicillium sp (1) (CFU/100µL) Rerata jumlah koloni Penicillium sp (2) (CFU/100µL) PDA 8,5 ± 0,7 5 ± 0,0 0/0 14 ± 5,7 2,5 ± 0,7 0/2 17 ± 1,4 2 ± 0,0 1/0 23,5 ± 0,7 7 ± 1,4 2/0 13 ± 1,4 14 ± 0,0 3/0 13 ± 0,0 11,5 ± 2,1 4/0 10,5 ± 7,8 15,5 ± 0,7 5/0 7,5 ± 0,7 14,5 ± 4,9 1/2. 30,5 ± 2,1 19 ± 1,4 2/2. 15,5 ± 6,4 22,5 ± 2,1 3/2. 36,5 ± 4,9 19,5 ± 2,1 4/2. 3 ± 0,0 14 ± 2,8 5/2. 23,5 ± 4,9 18,5 ± 3,5
Tabel  2.  Rerata  jumlah  koloni Penicillium  spp dengan  massa  ampas  tahu  (0,1,2,3,4,5  gr)  dan  massa sucrosa 4 gr
Perlakuan (Massa ampas tahu (gr)/Massa sucrosa (gr)) Rerata jumlah koloni Penicillium sp (1) (CFU/100µL) Rerata jumlah koloni Penicillium sp (2) (CFU/100µL) PDA 8,5 ± 0,7 5 ± 0,0 0/0 14 ± 5,7 2,5 ± 0,7 0/4 12 ± 0,0 1 ± 0,0 1/0 23,5 ± 0,7 7 ± 1,4 2/0 13 ± 1,4 14 ± 0,0 3/0 13 ± 0,0 11,5 ± 2,1 4/0 10,5 ± 7,8 15,5 ± 0,7 5/0 7,5 ± 0,7 14,5 ± 4,9 1/4. 49,5 ± 0,7 12,5 ± 2,1 2/4. 15,5 ± 0,7 30 ± 0,0 3/4. 19 ± 1,4 34,5 ± 4,9 4/4. 14,5 ± 4,9 4 ± 0,0 5/4. 16,5 ± 0,7 24,5 ± 0,7
© Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Maarif Hasyim Latif Sidoarjo p-ISSN : 2548-8333 e-ISSN : 2549-2586
Tabel  2.  Rerata  jumlah  koloni Penicillium  spp dengan  massa  ampas  tahu  (0,1,2,3,4,5  gr)  dan  massa sucrosa 6 gr
Perlakuan (Massa ampas tahu (gr)/Massa sucrosa (gr)) Rerata jumlah koloni Penicillium sp (1) (CFU/100µL) Rerata jumlah koloni Penicillium sp (2) (CFU/100µL) PDA 8,5 ± 0,7 5 ± 0,0 0/0 14 ± 5,7 2,5 ± 0,7 0/6 31 ± 2,8 2 ± 0,0 1/0 23,5 ± 0,7 7 ± 1,4 2/0 13 ± 1,4 14 ± 0,0 3/0 13 ± 0,0 11,5 ± 2,1 4/0 10,5 ± 7,8 15,5 ± 0,7 5/0 7,5 ± 0,7 14,5 ± 4,9 1/6. 27,5 ± 0,7 15,5 ± 0,7 2/6. 10,5 ± 3,5 18 ± 2,8 3/6. 6 ± 0,0 21 ± 2,8 4/6. 11,5 ± 3,5 19 ± 0,0 5/6. 20 ± 0,0 18,5 ± 2,1
Untuk  dapat  mendukung  pertumbuhan,  suatu media  haruslah  memiliki  syarat  –  syarat  yang dibutuhkan  termasuk  kandungan  karbohidrat, protein,  dan  mineral  dalam  media.  Beberapa jenis  media  alternative  untuk  pertumbuhan jamur  dapat  dipilih  berdasarkan  kandungan karbohidrat,  semisal  dari  jenis  buah  (Aliyu et al .,  2017),  umbi  maupun  dari  tanaman  sago (Tharmila et  al .,  2011).  Selain  itu,  kandungan karbohidrat dan nutrisi lainnya bisa didapatkan dari  limbah  sayuran,  sehingga  dapat  juga dibuat  media  pertumbuhan  baik  untuk  jamur maupun  bakteri  dari  jenis  limbah  sayuran tersebut  (Berde  dan  Berde,  2015).  Media alternative  dengan  kandungan  protein  tinggi dari  kacang-kacangan  juga  dapat  digunakan untuk media tumbuh dari beberapa jenis jamur dari genus Aspergillus, Fusarium, Trichoderma,  Sclerotium, dan Penicillium (Ravimannan et al ., 2014).
Pengamatan morfologi Penicillium spp.
Secara    umum,  kedua Penicillium  sp tumbuh dengan  baik  di  medium  PDA,    sedangkan pertumbuhan pada media ampas tahu menunjukkan  karakter  pertumbuhan  yang berbeda (gambar 1). Perbedaan mencolok yang terlihat  adalah  dari  pemebentukan  koloni mengumpul  di  tengah  pada  media  PDA, sedangkan pada media ampas tahu, pertumbuhan  menyebar  di  permukaan.  Pada perlakuan  0/0,  koloni  menunjukkan  adanya serabut  pendek  dan  tidak  memiliki  pigmen. Sedangkan pada perlakuan hanya menggunakan  sukrosa  saja  (0/2,  0/4,  0/6), koloni  menunjukkan  adanya  pertumbuhan massa  hifa  yang  lebih  bagus  dibandingkan perlakuan  0/0.  Penggunaan  ampas  tahu  dalam media  memungkinkan  jamur  untuk  memiliki pertumbuhan  yang  lebih  bagus,  diantaranya dengan  disintesisnya  pigmen  warna  pada koloni.
Penicillium sp (1) memiliki
kecenderungan  mensintesis  pigmen  merah muda  ke  media  (Tabel  5).  Sedangkan Penicillium  sp (2)  memiliki  koloni  dengan
© Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Maarif Hasyim Latif Sidoarjo p-ISSN : 2548-8333 e-ISSN : 2549-2586
pigmen  hijau  saat  ditumbuhkan  pada  media ampas  tahu,  baik  dengan  atau  tanpa  sukrosa (Tabel 6).
Pertumbuhan Penicillium  spp secara  morfologi pada media dengan ampas tahu jauh lebih baik dibandingkan  pertumbuhan  pada  media  yang mengandung sukrosa saja (Tabel 5 dan 6). Hal tersebut dapat dilihat pada jumlah skoring yang didapatkan  pada  tiap-tiap  karakter  morfologi
yang diamati. Adapun cara skoring untuk tiap- tiap  karakter  morfologi Penicillium  spp dapat dilihat pada tabel 4.
Ampas  tahu  dapat  mendukung  pertumbuhan Penicillium spp dalam penelitian ini dikarenakan kandungan ampas tahu yang lebih kompleks, yaitu selain mengandung karbohidrat,  ampas  tahu  juga  mengandung protein dan lemak (Wati, 2013).
Gambar  1.  Karakter  morfologi Penicillium  spp pada  media  PDA  dan  ampas  tahu.  (a) Penicillium  sp (1) pada media PDA; (b) Penicillium sp (2) pada media PDA; (c) Penicillium sp (1) pada media ampas tahu; (d) Penicillium sp (2) pada media ampas tahu.

## Tabel 3. Skoring Morfologi Makroskopis Koloni
Penicillium spp Skoring Ukuran Bentuk Warna Koloni Tekstur Permukaan Pertumbuhan Warna eksudat 0 tidak berwarna sangat kurang tidak ada 1 Small berserabut putih Serabut kurang sedikit pink di sekitar koloni 2 Medium bulat hijau Granul baik Pink di sekitar koloni dan media 3 Large Bludru sangat baik
© Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Maarif Hasyim Latif Sidoarjo p-ISSN : 2548-8333 e-ISSN : 2549-2586
Tabel 4. Skoring Pengamatan Morfologi Makroskopis Koloni Penicillium sp (1) Perlakuan Karakter Morfologi Makroskopis Penicillium sp (1) Ukuran Bentuk Warna koloni Tekstur Permukaan Pertumbuhan koloni Warna eksudat Jumlah skor PDA 2 1 2 2 3 1 11 Media Tanpa ampas tahu dan tanpa sucrose 0 1 0 1 0 0 2 Media ampas tahu saja tanpa sucrose 1 1 1 1 1 0 5 Media ampas tahu dan sucrose 1 1 1 1 1 2 7
Tabel 5. Skoring Pengamatan Morfologi Makroskopis Koloni Penicillium sp (2) Perlakuan Karakter Morfologi Makroskopis Penicillium sp (2) Ukuran Bentuk Warna koloni Tekstur Permukaan Pertumbuhan koloni Warna eksudat Jumlah skor PDA 2 1 2 2 3 0 10 Media Tanpa ampas tahu dan tanpa sucrose 0 1 0 1 0 0 2 Media ampas tahu saja tanpa sucrose 1 1 1 1 1 0 5 Media ampas tahu dan sucrose 1 1 2 1 2 0 8

## KESIMPULAN
Secara  umum,  media  ampas  tahu  dapat digunakan sebagai media pertumbuhan
Penicillium  spp ,  namun  secara  morfologi belum mendekati karakter morfologi
Penicillium  spp dari  media  PDA.  Oleh  karena itu  perlu  ditambahkan  baik  unsur  maupun senyawa  ke  dalam  media  ampas  tahu  untuk meningkatkan hasil yang didapatkan.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Terima  kasih  atas  bantuan  dari  tim Laboratorium Mikrobiologi, Fakultas Kesehatan,  Universitas  Nahdlatul  Ulama Surabaya  hingga  penelitian  ini  dapat  berjalan dengan baik.

## DAFTAR PUSTAKA
Aliyu,  M.S.,  Mohammed,  H.I.  Tijjani,  M.B. Doko,  M.H.I.  and  Garba,  I.2017.  Use of  Tomato  Juice  Supplemented  With Glucose  as  a  Medium  for  Growing Fungi. UMYU Journal of Microbiology Research . 2 (1): 206-209
Badan  Pusat  Statistik.  2018.  Rata-Rata
Konsumsi per Kapita Seminggu
Beberapa  Macam  Bahan  Makanan
Penting, 2007-2017 .
Berde,C. V. dan Berde, V. B. 2015. Vegetable waste  as  alternative  microbiological media  for  laboratory  and  industry.
World  Journal  of  Pharmacy  and Pharmaceutical Sciences . 4 (5) : 1488- 1494
© Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Maarif Hasyim Latif Sidoarjo p-ISSN : 2548-8333 e-ISSN : 2549-2586
Damayanti,  A.,  Hermana,  J  dan  Masduqi,  A.
2004. Analisis Risiko Lingkungan dari Pengolahan  Limbah  Pabrik  Tahu dengan Kayu Apu (Pistia Stratiotes L). Jurnal Purifikasi . 5 (4) : 151-156 Frisvad,  J.C.,  Smedsgaard,  J.,  Larsen,  T.O., dan  Samson,  R.A.  2004.  Mycotoxins, drugs and other extrolites produced by species in Penicillium subgenus Penicillium. Studies  In  Mycology .  49:
201-241. Hocking, A.D. 2006. Food Spoilage Microorganisms. Woodhead Publishing. UK. 437-449. Ravimannan, N., Arulanantham, R., Pathmanathan,  S.,  dan  Niranjan,  K. 2014.  Alternative  culture  media  for fungal growth using different
formulation  of  protein  sources. Annals of Biological Research . 5 (1):36-39
Tharmila, S., Jeyaseelan, E. C. dan Thavaranjit,  A.  C.  2011.  Preliminary screening  of  alternative  culture  media for  the  growth  of  some  selected  fungi. rch. Appl. Sci. Res. 3 (3):389-393. Wati, R. 2013. Pengaruh Penggunaan Tepung Ampas  Tahu Sebagai  Bahan  Komposit Terhadap  Kualitas  Kue  Kering  Lidah Kucing .  Skripsi.Teknologi  Jasa  dan Produksi  Fakultas  Teknik  Universitas
Negeri Semarang. Semarang. Yustina,  I.  dan  Abadi,  F.R.  2012. Potensi Tepung dari Ampas Industri Pengolahan  Kedelai  Sebagai  Bahan Pangan . Seminar Nasional Kedaulatan Pangan dan Energi, Fakultas Pertanian, Universitas Trunojoyo Madura.