VIRULENSI BEBERAPA ISOLAT CENDAWAN ENTOMOPATOGEN TERHADAP NIMFA KEPIK HIJAU Nezara Viridula Linn. (HEMIPTERA: PENTATOMIDAE)
Muhammad Agung Permadi 1 , Rafiqah Amanda Lubis 1 , Lia Agustina Siregar
Email: muhammad.agungp@um-tapsel.ac.id
1 Staf Pengajar Fakultas Pertanian Universitas Muhammadiyah Tapanui Selatan Jl Raja Inal Siregar – Tanggal No 32, Padangsidimpuan 22716

## ABSTRAK
Kepik hijau ( Nezara viridula L.) dikenal sebagai serangga kosmopolit dan polifag. Beberapa  jenis  tanaman  kacang-kacangan  merupakan  tumbuhan  inang  utama  hama tersebut.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mempelajari  virulensi  beberapa  isolat  cendawan entomopatogen  terhadap  nimfa N.  viridula .  Penelitian  ini  dilakukan  di  Laboratorium Agroteknologi  Fakultas  Pertanian  Universitas  Muhammadiyah  Tapanuli  Selatan  pada bulan April 2018 hingga Juli 2018. Rancangan yang digunakan dalam penelitian ini adalah rancangan acak lengkap (RAL) dengan 8 perlakuan dan kontrol. Masing-masing perlakuan diulang  sebanyak  3  kali  ulangan.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  isolat  cendawan MetTmM menyebabkan mortalitas tertinggi nimfa N. viridula sebesar 85%, diikuti isolat cendawan MetKM (80%), isolat cendawan MetKPP dan KKP masing-masing sebesar 70%, isolat  cendawan  MetJM  sebesar  60%,  MetTrP  (48%), B.  bassiana (46%)  sedangkan M. anisopliae menyebabkan persentase terendah sebesar 40%. LT50 tertinggi disebabkan oleh isolat cendawan MetTmM (2,95 HSA) dan LT50 terendah disebabkan oleh M. anisopliae (8,91  HSA).  Semua  isolat  cendawan  yang  diuji  mampu  menginfeksi  nimfa N.  viridula dengan virulensi yang berbeda-beda.
Kata kunci : Metharizium, B. bassiana ,  mortalitas, infeksi, patogenisitas

## PENDAHULUAN
Kepik  hijau  ( Nezara  viridula L.) dikenal  sebagai  serangga  kosmopolit  dan polifag.  Tumbuhan  inang N.    viridula cukup  banyak  meliputi  35  spesies  yang tergolong dalam 17 famili. Beberapa jenis tanaman  kacang-kacangan  merupakan tumbuhan  inang  utamanya  (CABI  2016). Di  Amerika  Serikat N.  viridula disebut juga  dengan southern  green  stink  bug sedangkan  di  Indonesia  banyak  orang menyebut  sebagai  kepik  hijau  karena tubuhnya  yang  berwarna  hijau  rumput. Kepik dewasa maupun nimfa menusuk dan menghisap cairan tanaman yang mengakibatkan  penurunan  produksi  dan kualitas komoditi tersebut.
Teknologi pengendalian kepik hijau yang  sering  dilakukan  mengandalkan insektisida  kimia,  tetapi    perkembangan populasi di lapangan terus meningkat dari musim kemusim. Hal ini dapat disebabkan karena  aplikasi  insektisida  kimia  hanya mampu  membunuh  stadia  nimfa  dan imago.  Namun  stadia telur masih  mampu bertahan  kemudian  berkembang  menjadi nimfa hingga imago dan selanjutnya terus berkembang  biak.  Selain  itu,  penggunaan insektisida  kimia  secara  berulang,    tidak tepat jenis, tidak tepat dosis, maupun tidak tepat  cara  aplikasi  dapat  mengakibatkan serangga  hama  menjadi  kebal,  terjadi peledakan hama, munculnya hama sekunder, juga dapat menyebabkan terbunuhnya  serangga  berguna  seperti
predator,  parasitoid  maupun    polinator (Cloyd dan Bethke 2010).
Perlu  dikembangkan  suatu  cara pengendalian yang ramah lingkungan yang tidak  akan  menimbulkan  pencemaran lingkungan, manusia dan tumbuhan untuk mencermati  permasalahan  tersebut,  yaitu seperti penggunaan
cendawan entomopatogen (Hasnah dan Husin 2012). Oleh karena itu, untuk dapat mengendalikan hama tersebut menggunakan metode pengendalian hayati.  Pengendalian  hayati  menurut
Norris  (2003)  yaitu  pengendalian  dengan memanfaatkan musuh-musuh alami serangga  hama  seperti  predator,  parasit,
dan patogen serangga untuk mengendalikan  populasi  hama  agar  tetap berada di bawah ambang ekonomi. Cendawan entomopatogen merupakan  salah  satu  agens  hayati  yang sering digunakan dalam metode pengendalian  hayati  karena  cendawan entomopatogen  memiliki keefektifan yang tinggi  terhadap  hama  target. N.  viridula termasuk  ke  dalam  ordo  Hemiptera  yang memiliki ciri-ciri tipe alat mulut menusuk dan menghisap sehingga cendawan entomopatogen sangat cocok untuk digunakan dalam mengendalikan hama N.
viridula .  Hal  ini  disebabkan  cendawan entomopatogen dapat menginfeksi serangga melalui kutikula.
Proses cendawan entomopatogen
dalam menginfeksi  serangga terdapat  4  tahap. Tahap  pertama  adalah  inokulasi  dan kontak.  Tahap  kedua  proses  penempelan dan perkecambahan. Tahap ketiga penetrasi dan invasi pada tubuh serangga. Tahap keempat adalah dekstruksi (Tanada dan  Kaya  1993).  Sejumlah  spesies cendawan entomopatogen telah dilaporkan dapat  menginfeksi N.  viridula yaitu Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. (Prayogo 2013), Paecilomyces sp. (Raafat 2015), dan Metarhizium anisopliae (Suprayogi dan Oemry 2015).
Pengendalian  pada  stadia  nimfa menggunakan  cendawan  entomopatogen berpeluang  besar  untuk  berhasil  karena
kutikula  yang  masih  lunak  sehingga suspensi konidia cendawan yang diaplikasikan  mudah  mengenai  sasaran. Nimfa  yang  terinfeksi  cendawan  mati sehingga  populasi  nimfa  dan  imago  yang akan  merusak  tanaman  sangat  rendah. Oleh karena itu perlu dilakukan pengujian beberapa cendawan entomopatogen
terhadap nimfa N. viridula .

## METODE PENELITIAN
Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium  Agroteknologi Fakultas Pertanian  Universitas  Muhammadiyah Tapanuli  Selatan  mulai  dari  April  sampai dengan Juni 2018.

## Prosedur Penelitian
Perbanyakan Serangga N. viridula Kelompok  telur,  nimfa  maupun imago  diperoleh  dari  lahan  pertanaman padi, kacang hijau dan kacang panjang di daerah  Kota  Padangsidimpuan,  Sumatera Utara.  Kelompok  telur,  nimfa  maupun imago yang diambil kemudian dimasukkan ke dalam kotak plastik untuk dikarantinakan di
Laboratorium Agroteknologi  Fakultas  pertania  UMTS. Imago  dimasukkan  ke  dalam  kurungan kasa,  nimfa  dan  telur  dimasukkan  dalam cawan petri yang telah dialasi tisu. Nimfa dan  imago  diberi  kacang  panjang  sebagai pakan, sebelumnya kacang panjang dicuci dengan  air  agar  terbebas  dari  residu insektisida sintetis. Selanjutnya, kelompok telur,  nimfa  maupun  imago  dipelihara  di laboratorium.  Setiap  dua  hari,  pakan diganti dengan kacang panjang yang masih segar  dan  sebelumnya  juga  sudah  dicuci menggunakan air sebelum dimasukkan ke dalam kurungan.
Masing-masing  stadia  nimfa  yang umurnya sama dimasukkan ke dalam satu kurungan  untuk  menghindari  kompetisi antar  umur  stadia  serangga.  Kelompok imago  juga  dimasukkan  ke  dalam kurungan  yang  sama  untuk  mendapatkan telur.  Kelompok  nimfa  yang  umurnya
sama dikumpulkan menjadi satu ke dalam kandang kasa sebagai perlakuan nimfa.

## Perbanyakan Cendawan di Media PDA
Penelitian  ini  menggunakan  isolat cendawan  yang  berasal  dari  koleksi Laboratorium  Agroteknologi  Fakultas Pertanian  Universitas  Muhammadiyah Tapanuli Selatan yaitu:
Tabel  1    Isolat  yang  digunakan  dalam penelitian
Nama Isolat Asal Isolat MetKM Metharizium sp.  dari rizosfer tanaman kedelai di Madina MetTmM Metharizium sp.  dari rizosfer tanaman tomat di Madina MetJM Metharizium sp.    dari rizosfer tanaman Jagung di Madina MetTrP Metharizium sp.    dari rizosfer tanaman Terong di Padangsidimpuan MetKPP Metharizium sp.    dari rizosfer tanaman Kacang  Panjang  di Padangsidimpuan MetKP Metharizium sp.    dari rizosfer tanaman Kedelai di Padangsidimpuan M. anisopliae Koleksi  Laboratorium Agroteknologi UMTS B. bassiana Koleksi  Laboratorium Agroteknologi UMTS
Isolat  cendawan  ditumbuhkan  pada media  PDA  (potato  dextrosa  agar). Komposisi  media  PDA  yang  digunakan yaitu  kentang  400  g,  dextrose  15  g, kloramfenikol 1 g, agar 15 gr dan akuades 1 L (Goettel dan Inglis 1997). Media PDA dipadatkan dalam cawan petri berdiameter
9 cm. Cendawan diinkubasi selama 21 hari pada suhu kamar.

## Penyiapan  Suspensi  Cendawan  untuk Pengujian
Masing-masing  biakan  cendawan dibuat suspensi. Biakan cendawan diambil konidianya  dengan  cara  setiap  cawan ditambah  air  steril  10  ml  +  Tween  20 sebanyak 0.5 ml kemudian dikerok dengan kuas halus. Selanjutnya konidia dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi  dan dikocok  menggunakan  vortex  selama kurang  lebih  60  detik.  Kerapatan  konidia dari  masing-masing  suspensi  dihitung dengan hemocytometer Neubauer- improved  hingga  didapatkan  kerapatan konidia  yang  digunakan  yaitu  10 8 konidia/ml.  Kerapatan  konidia  yang diperlukan  diperoleh  dengan  membuat pengenceran  bertingkat  dengan  campuran akuades steril + tween (Goettel dan Inglis 1997).

## Aplikasi  Cendawan  Entomopatogen pada Nimfa N. viridula
Kerapatan  konidia  masing-masing suspensi  isolat  cendawan  entomopatogen disemprotkan  pada  nimfa N.  viridula dengan kerapatan 10 8 konidia/ml. Sebelum penyemprotan nimfa N. viridula diletakkan dalam cawan petri yang dialasi tisu,  setelah  penyemprotan  kemudian kacang  panjang  dimasukkan  ke  dalam cawan  petri  sebagai  pakan  serangga  uji selama  perlakuan.  Aplikasi  pada  masing- masing  perlakuan  dilakukan  dengan  cara menyemprotkan  suspensi  konidia  seba- nyak  7  kali  semprotan  menggunakan  alat semprot  dengan  volume  2  ml    tiap  unit satuan percobaan. Jumlah nimfa yang diuji sebanyak 20 nimfa, tiap perlakuan di ulang sebanyak  tiga  kali.  Nimfa  yang  diuji adalah nimfa instar II.  Selanjutnya cawan petri  ditetesi  akuades  setiap  hari  untuk menjaga kelembaban.

## Parameter pengamatan
Parameter  yang  diamati  dalam penelitian  ini  yang  pertama  adalah  nimfa
N.  viridula yang  mati  akibat  terinfeksi cendawan  entomopatogen  yang  dihitung mulai waktu aplikasi sampai dengan 8 hari setelah  aplikasi  (HSA).  Kedua,  waktu kematian  nimfa N.  viridula setelah aplikasi dengan suspensi konidia cendawan.  Persentase  mortalitas  nimfa dihitung menggunakan rumus :
𝑀 = 𝐴 𝐷 × 100%
Keterangan : M  = Presentase mortalitas (%) A    =  Jumlah  serangga  yang  mati  akibat infeksi cendawan D  = Jumlah serangga yang diuji
S emua  data  yang  dikumpulkan dianalisis  menggunakan  sidik  ragam   dan dilanjutkan dengan pengujian nilai tengah menggunakan  uji  DNMRT  pada  taraf nyata 5%.

## HASIL PENELITIAN
Hasil penelitian menunjukkan bahwa persentase mortalitas nimfa instar II N. viridula akibat infeksi isolat cendawan selama  8  hari  pengamatan  memiliki  nilai yang berbeda-beda. Mortalitas nimfa instar II  tertinggi  disebabkan  oleh isolat cendawan  MetTmM  (85%),  diikuti  oleh MetKM  (80%),  MetKPP  (80%),  MetKP (70%),  MetTrM  (60%),  MetTrP  (48%). Isolat B.  bassiana dan M.  anisopliae menyebabkan  mortalitas  nimfa  instar  II terendah  masing-masing  sebesar  46.7% dan 40% (Gambar 1).
Pada Tabel 2 di bawah, dapat dilihat meskipun  isolat  cendawan  MetTmM menyebabkan  mortalitas  teringgi  pada nimfa  insta  II N.  viridula ,  namun  tidak berbeda  nyata  dengan  mortalitas  yang disebabkan  isolat  cendawan  MetKM, MetKP  dan  MetKPP.  Berikutnya  isolat cendawan M.  anisopliae menyebabkan
mortalitas terendah pada nimfa insta II N. viridula ,  namun  tidak  berbeda  nyata dengan  mortalitas  yang  disebabkan  isolat cendawan  MetTrM,  MetTrP,  dan B. bassiana .

## Tabel 2 Rata-rata mortalitas nimfa instar II
N. viridula setelah aplikasi isolat cendawan
Isolat cendawan  Mortalitas nimfa instar II (%) MetTmM 85.00 A MetKM 80.00 A  B MetKP 75.00 A  B MetKPP 75.00 A  B MetJM 60.00 B  C MetJP 48.33 C B. bassiana 46.67 C M. anisopliae 40.00 C Kontrol 1.67 D
Keterangan : Angka yang diikuti huruf yang sama pada kolom yang sama tidak berbeda nyata menurut uji Duncan(DNMRT) pada taraf nyata 5%
Lethal    Time    50    (LT50)    adalah waktu    dalam    hari    yang    diperlukan cendawan untuk mematikan 50% populasi serangga uji. Hasil analisis probit menunjukkan  isolat  cendawan  MetTmM yang  paling  cepat  mematikan  50%  nimfa instar  II  dengan  waktu  2.94  HSA,  dan isolat cendawan M. anisopliae yang paling lama  dalam  mematikan  50%  nimfa  instar II  dengan  waktu  6.98  HSA  (Tabel  3). Selanjutnya  pada  tabel    3  dapat  dilihat bahwa  isolat  cendawan  MetKP  memiliki nilai  R²  tertinggi  sebesar  0,978  dan  isolat cendawan  MetKPP  memiliki  nilai  R² terendah sebesar 0,878.
Gambar 1  Persentase mortalitas nimfa instar II N. viridula setelah aplikasi isolat cendawan Metarhizium sp.
Tabel 3  LT50 beberapa isolat cendawan Metarhizium sp. pada nimfa instar II N. viridula
Cendawan LT50 Persamaan regresi R 2 MetTmM 2,94 y = 11,429x + 16,429 0,881 MetKPP 3,54 y = 10,238x + 13,81 0,878 MetKM 3,88 y = 12,381x + 1,905 0,936 MetKP 4,52 y = 11,369x - 1,429 0,978 MetTrM 5,86 y = 9,881x - 7,857 0,976 B. bassiana 6,98 y = 6,310x + 5,952 0,947 MetTrP 7,15 y = 8,155x - 8,333 0,966 M. anisopliae 8,91 y = 5,476x + 1,191 0,972
Gambar 2 di bawah memperlihatkan bahwa  mortalitas  nimfa  instar  II N. viridula mulai  terjadi  pada  1  HSA. Mortalitas  pada  1  HSA  disebabkan  oleh infeksi isolat cendawan MetKP sebanyak 5 ekor,  MetKM  dan B.  bassiana masing- masing  sebanyak  1  ekor.  Selanjutnya mortalitas akibat infeksi cendawan lainnya
dimulai  pada  2  HSA.  Isolat  cendawan MetTmM paling banyak banyak menyembabkan  kematian  pada  2  HSA sebanyak  11  ekor,  dan  isolat  cendawan MetTrP  menyebabkan  paling  sedikit kematian  pada  2  HSA  yaitu  sebanyak  2 ekor.
85,00 80,00 75,00 75,00 60,00 48,33 46,67 40,00 1,67 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 M ort al it as N im fa (%) Isolat Cendawan
Gambar 2  Grafik akumulasi mortalitas harian nimfa instar II N.viridula (a) MetTrP (b) MetTmM,  (c)  MetKPP,  (d)  MetKM,  (e)  MetKP,  (f)  MetTrM,  (g) M. anisopliae , (h) B. bassiana
Gambar  3    (A)  Nimfa  sehat,  (B)  Nimfa terinfeksi cendawan Metarhizium sp.  (C)  Nimfa terinfeksi B. bassiana Nimfa  instar  dua  memiliki  warna dasar  coklat  kehitam-hitaman  dengan bintik putih pada abdomen (Gambar 3 A). Nimfa yang terserang cendawan
Metharizium sp.  yang  memiliki  ciri-ciri nimfa  mengeras  dan  diselimuti  konidia yang  berwarna  hijau  (Gambar  3  B). Gambar  3  (C)  nimfa  yang  terserang cendawan B.  bassiana yang  mengeras
y = 8,155x - 8,333 R² = 0.966 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 1 2 3 4 5 6 7 8 R at a -r at a m o rt al it as ( % ) Hari setelah inokulasi MetTrP (a) y = 11,429x + 16,429 R² = 0.881 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 1 2 3 4 5 6 7 8 R at a -r at a m o rt al it as ( % ) Hari setelah inokulasi MetTmM (b) y = 10,238x + 13,81 R² = 0.878 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 1 2 3 4 5 6 7 8 R at a -r at a m o rt al it as ( % ) Hari setelah inokulasi Met KPP (c) y = 12,381x + 1,905 R² = 0.936 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 1 2 3 4 5 6 7 8 R at a -r at a m o rt al it as ( % ) Hari setelah inokulasi MetKM (d) y = 11,369x - 1,429 R² = 0.978 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 1 2 3 4 5 6 7 8 R at a -r at a m o rt al it as ( % ) Hari setelah inokulasi MetKP (e) y = 9.881x - 7,857 R² = 0.976 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 1 2 3 4 5 6 7 8 R at a -r at a m o rt al it as ( % ) Hari setelah inokulasi MetTrM (f) y = 5.476x + 1.191 R² = 0.972 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 1 2 3 4 5 6 7 8 R at a -r at a m o r ta li ta s ( % ) Hari setelah inokulasi M. anisopliae (g) y = 6.310x + 5.952 R² = 0.947 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 1 2 3 4 5 6 7 8 R at a -r at a m o rt al it as ( % ) Hari setelah inokulasi B. bassiana (h)
seperti mumi dan diselubungi miselia yang berwarna putih.

## PEMBAHASAN
Hasil  penelitian  ini  menunjukkan bahwa persentase mortalitas nimfa instar II N. viridula tertinggi sebesar 85%, berbeda dengan hasil penelitian Sari dan Thursana (2012)  yang  melaporkan  cendawan M. anisopliae mematikan  nimfa  instar  I N. viridula sampai  100%.  Perbedaan  ini terjadi  karena  jenis  isolat  cendawan  yang digunakan  dan  juga  perbedaan  stadia nimfa  yang  diaplikasikan  cendawan. Mortalitas  nimfa  instar  II  tertinggi disebabkan  isolat  cendawan  MetTmM. Isolat  cendawan  MetTmM  merupakan isolat  cendawan Metarhizium sp.  yang berasal  dari  rizosfer  tanaman  tomat  di Madina. Tingginya mortalitas nimfa yang disebabkan  isolat  cendawan  MetTmM dapat terjadi karena akar tomat mengeluarkan  senyawa  yang  berfungsi merangsang perkecambahan konidia sehingga memudahkan untuk menginfeksi dan mematikan nimfa, sesuai dengan Rao (1994)  yang  menyatakan  senyawa  yang dikeluarkan  oleh  akar  tomat  berfungsi sebagai  faktor  penarik  nematoda  dan perangsang perkecambahan spora.
Mortalitas N.  viridula yang  rendah akibat  infeksi  isolat  cendawan M. anisopliae dan B. bassiana dapat disebabkan karena kedua isolat cendawan tersebut  sudah  lama  diperbanyak  di laboratorium  tanpa  diinokulasi  ulang, sehingga dapat menurunkan virulensi dan viabilitasnya. Menurut Nahar et al. (2008) perbanyakan Metharizium anisopliae
(Sorokin) (Deuteromycotina: Hypho-
mycetyes) secara berulang-ulang sebanyak 20  kali  akan  mengakibatkan  penurunan virulensi  sebanyak  20%.  Sedangkan Soekamto dan Yuliantoro (2006)
mengungkapkan  bahwa  cendawan B. bassiana yang disimpan pada suhu kamar mulai  dari  4  minggu  sampai  16  minggu menyebabkan  penurunan  virulensi  akibat penurunan daya kecambah.
Perbedaan mortalitas nimfa instar II N.  viridula akibat  infeksi  cendawan  juga dipengaruhi  oleh  sumber  atau  asal  isolat cendawan  tersebut.  Isolat  yang  diperoleh dari  serangga  yang  sama  tetapi  dari geografi  yang  berbeda  atau  isolat  yang diperoleh  dari  serangga  yang  berbeda namun dari geografi yang sama kemungkinan  memiliki  virulensi  yang berbeda  (Fatiha et  al. 2007).  Altre et  al.
(1999) melaporkan bahwa virulensi cendawan  entomopatogen  berkaitan  erat dengan ukuran konidia, kecepatan perkecambahan  konidia,  dan  produksi enzim yang berfungsi sebagai
pendegradasi  kutikula  inang.  Beberapa karakter  fisiologi  yang  disebut  di  atas memiliki  peran  yang  cukup  besar  bagi cendawan  entomopatogen  sebagai  agens hayati,  baik  pada  kondisi  di  laboratorium untuk perbayakan masal maupun pertumbuhan  cendawan  di  lapangan. Alavo et  al. (2004)  juga  menyatakan bahwa  kisaran  inang  dan  kondisi  ekologi dapat  mempengaruhi  keragaman  genetik yang akan berpengaruh langsung terhadap tingkat virulensi cendawan.
Tingginya mortalitas nimfa intstar II N.  viridula akibat  infeksi  cendawan entomopatogen diduga berhubungan dengan  struktur  integumen  tubuh  nimfa yang  lebih  muda  lebih  lentur  karena lapisan  lilin  ( wax )  maupun  lipid  belum optimal  sehingga  konidia  yang  sudah berkecambah  tidak  banyak  mengalami hambatan dibandingkan pada stadia nimfa yang  lebih  tua  maupun  imago.  Lapisan lilin pada permukaan integument serangga merupakan  faktor  penghalang  untuk proses penetrasi konidia cendawan (Lecuona et al. 1997).
Hasil  analisis  probit  menunjukkan isolat  cendawan  MetTmM  yang  paling cepat  mematikan  50%  nimfa  instar  II dengan  waktu  2.94  HSA,  dan  isolat cendawan M. anisolpliae yang paling lama dalam  mematikan  50%  nimfa  instar  II dengan  waktu  8.91  HSA.  Hal  ini  sesuai dengan  hasil  penelitian  Said  dan  Baco (1988)  yang  menyatakan  bahwa  daya
bunuh cendawan M.anisopliae di laboratorium  pada  awalnya  agak  lambat, baru  terlihat  pada  5  HSA.  Perbedaan kecepatan  waktu  mematikan  50%  nimfa instar II N. viridula masih diterkait karena perbedaan  asal  isolat  cendawan  yang digunakan  dan  karakter  fisiologi  masing- masing  isolat  cendawan  (Widayat  dan Rayati  1994).  Isolat  cendawan  MetKP memiliki  nilai  R²  tertinggi  sebesar  0,978 dan  isolat  cendawan  MetKPP  memiliki nilai  R²  terendah  sebesar  0,878.  Apabila nilai R 2 semakin mendekati angka 1 maka data  yang  diperoleh  akan  semakin seragam. Artinya masing-masing individu nimfa  instar  II  yang  diaplikasikan cendawan memiliki kepekaan yang relatif sama.
Kematian  serangga  terjadi  karena rusaknya jaringan jaringan tubuh serangga dan  kadang  kala  oleh adanya  toksin  yang dihasilkan oleh cendawan. Serangga yang terinfeksi  oleh  cendawan  pada  umumnya menjadi  lemah  dan  tidak  aktif,  dua  atau tiga  hari  mengalami  kematian  dan ditumbuhi oleh miselium cendawan. Pada umumnya  semua  cairan  tubuh  serangga habis  digunakan  cendawan,  sehingga menyebabkan serangga mati dengan tubuh yang  mengeras  seperti  mumi.  Beberapa toksin yang dihasilkan cendawan
Metarhizium sp.  adalah  cyclopeptida, destruxin  A,  B,  C,  D,  E  dan  desmethyl destruxin  (Widiyanti  dan  Muyadihardja 2004).
Nimfa  instar  dua N.  viridula memiliki  warna  dasar  coklat  kehitam- hitaman  dengan bintik  putih  pada abdomen,  sedangkan  imfa  yang  terserang cendawan Metharizium sp. yang memiliki ciri-ciri  nimfa  mengeras  dan  diselimuti konidia yang berwarna hijau. Hal ini sesuai dengan penyataan Simbolon (2010) bahwa awal  pertumbuhan  koloni  cendawan M. anisopliae bewarna  putih,  kemudian berubah  menjadi  hijau  gelap  dengan bertambahnya  umur  koloni.  Nimfa  yang terserang  cendawan B.  bassiana yang mengeras  seperti  mumi  dan  diselubungi miselia  yang  berwarna  putih.  Cendawan
entomopatogen memerlukan keadaan yang lembab  untuk  dapat  berkecambah.  Oleh karena itu tidak semua bangkai nimfa yang terinfeksi  cendawan  akan  muncul  miselia keluar dari tubuhnya. Hal ini terjadi karena kondisi  lingkungan  yang  kurang  sesuai untuk perkembangan miselia cendawan di luar tubuh inangnya (Trizelia 2005).

## UCAPAN TERIMAKASIH
Penulis mengucapkan terima kasih kepada  Kemenristekdikti  yang  telah membantu pendanaan  sehingga penelitian ini dapat terlaksana.

## DAFTAR PUSTAKA
Alavo  TBC,  Sermann  H,    Bochow  H. 2002.  Biocontrol  of  Aphid  Using Verticillium  lecanii in  greenhouse: Factor Reducing the Effectiveness of the Entomopathogenic Fungus. Arch Phytopathol  and  Plant  Protect. 34(6): 407- 424.
Altre JA, Vandenberg, Cantone FA. 1999.
Pathogenicity of Paecilomyces fumosoroseus isolates yo the diamondback moth Plutella xylostella :  correlation  with  spore size, germonation speed. and attachment  to  cuticule. J  Invertebr Pathol . 13: 332-338.
CABI. 2016. Nezara viridula (green stink bug).
http://www.cabi.org/isc/datasheet/3 6282. Diakses tanggal 3 Juli 2018.
Cloyd  RA,  Bethke  JA.  2010.  Impact  of neonicotinoid insecticides on natural enemies in greenhouse and interiorscape  environments. Pest Manag. Sci. 67: 3-9.
Fatiha  L,  Ali  S,  Ren  S,  Afzal  M.  2007.
Biological characteristic and pathogenicity of Verticillium lecanii against Bemisia tabaci (Homoptera: Aleyrodidae)  on  eggplant. J  Pak Entomol. 29 (2): 63-72.
Hasnah  S  dan  S  Husin.  2012.  Keektifan Cendawan Beauvaria  bassiana
Vuill  terhadap  Mortalitas  Kepik Hijau Nezara  viridula L.  pada stadia  nimfa  dan  imago. J.
Floratek. 7: 13-24.
Lecuona R, Clement JL, Riba G, Joulie C, Juarez  P.  1997.  Spore  germination and hyphal growth of Beauveria spp.
on  insect  lipids .  J.  Econ.Entomol . 89:119-123.
Nahar PB et al . 2008. Effect of repeated in vitro subculturing on the virulence of Metharizium  anisopliae against
Helicoverpa armigera (Lepidoptera:  Noctuidae). Biol
Contr  Sci  and  Technol. 18;4:337- 355.
Norris  KR,  Caswell-Chen,  Kogan  M.
2003. Concept  in  integrated  pest manage-ment .  New  Jersey  (US): Prentice Hall.
Prayogo  Y.  2013.  Efikasi  cendawan entomopatogen Beauveria  bassiana
Bals.  Terhadap  kepik  hijau  ( Nezara viridula L.). Jurnal  HPT  Tropika . 13(1):75-86.
Raafat  I,  Meshrif  WS,  El-Husseiny  EM,
El-Hariry M, Seif AI. 2015. Nezara viridula (Hemiptera:  Pentatomidae)
cuticle  as  a  barrier  for Beauveria bassiana and Paecilomyces sp.
Infection. African Entomology .
23(1):75-87. Rao S. 1994. Mikroorganisme Tanah dan
Pertumbuhan Tanaman . Jakarta (ID): UIPress.
Simbolon  MO.  2010.  Pengaruh  Jamur
Entomopatogen Beauveria bassiana Balsamo dan Metarhizium anisopliae (Metch)  Sorokin  dan Ketahanan Beberapa Varietas Tanaman  Cabai  terhadap  Hama
Thrips Spp.  di  Lapangan.  [skripsi].
Medan (ID): USU.
Sukamto S, Yuliantoro K. 2006. Pengaruh
suhu penyimpanan terhadap viabilitas Beauveria bassiana (Bals.)  Vuill.  Dalam  beberapa bahan pembawa. Pelita Perkebunan. 22 (1): 40-57. Suprayogi  M,  Oemry  S.  2015.  Uji efektifitas  jamur  entomopatogen Beauveria bassiana dan Metarhizium  anisopliae terhadap kepik  hijau  ( Nezara  viridula L). (Hemiptera:  Pentatomidae)  pada tanaman  kedelai  ( Glycine  max L).
di  rumah  kasa. Jurnal  Online Agroteknologi . 3 (1): 320-327.
Tanada  Y,  Kaya  HK.  1993. Insect Pathology . California (US):
Academic Pr. Inc.
Trizelia. 2005. Cendawan entomopatogen Beauveria  bassiana (Bals.)  Vuill. (Deutero-mycotina:  Hypomycetes): keragaman  genetik,  karakterisasi fisiologi  dan  virulensinya  terhadap Crocidolomia pavonana (F.)
(Lepidoptera:  Pyralidae).  [disertasi] Bogor (ID): IPB.
Widayat  W,  Rayati  DJ.  1993.  Hasil penelitian  jamur  entomopatogenik lokal dan
prospek penggunaannya  sebagai  insektisida hayati,  hlm.61−74.  Dalam  E.
Martono,  E.  Mahrub,  N.S.  Putra dan Y Trisetyawati (peny.).
Simposium Patologi Serangga  I.
Yogyakarta, 12−13 Oktober 1993.
Widiyanti NLPM, Muyadihardja S. 2004.
Uji  toksisitas  jamur Metarhizium anisopliae terhadap  larva  nyamuk Aedes  aegypti .  Media  Litbang Kesehatan. 14 (3): 25-30.