Hendrival et al. :  Toksisitas Tunggal dan Campuran Serbuk Daun Pepaya dan Biduri 403
Jurnal Agrotek  Tropika, Agustus  2022,  Vol  10,  No.  3,  pp.  403  -  411 DOI  :  http://dx.doi.org/10.23960/jat.v10i3.5537 ISSN:  2337-4993  (Print),  2620-3138  (Online)

## TOKSISITAS TUNGGAL DAN CAMPURAN SERBUK DAUN PEPAYA DAN BIDURI TERHADAP KEONG MAS

## TOXICITY  SINGLE AND MIXTURE  OF LEAF  POWDER  PAPAYA AND CROWN FLOWER ON GOLDEN APPLE SNAIL
Hendrival*, Ami Safriyanur, Hafifah, Muhammad Muaz Munauwar dan Baidhawi Program Studi Agroekoteknologi, Fakultas Pertanian, Universitas Malikussaleh, Aceh Utara, Indonesia *Email: hendrival@unimal.ac.id
* Corresponding Author, Diterima:  8 Jan. 2021, Direvisi: 11 Apr. 2022, Disetujui: 10 Jul. 2022

## ABSTRACT
The golden apple snail or Pomacea canaliculata (Lamarck) (Gastropoda: Ampullariidae ) is main pest of rice plants in Indonesia. The utilization of papaya leaf powder ( Carica papaya ) and crown flower ( Calotropis gigantea ) can be used as alternative botanical molluscicide to control golden apple snails. This study was aimed to determine toxicity single from leaf powder papaya and crown flower, toxicity mixture both at two different  ratio  concentrations  against  golden  apple  snails.  Methods  research  was  a  test  for  single  and mixed toxicity of leaf powder papaya and crown flower. Observation mortality of golden apple snail was done  from  4–48  hours  after  application  botanical  molluscicide.  The  results  showed  that  application  a single and mixture leaf powder papaya and crown flower can cause mortality golden apple snails. Papaya leaf powder has a higher toxicity than crown flower on golden apple snails. Application a mixture papaya leaf powder and crown flower are more toxic than an single application. Application a mixture papaya leaf powder and crown flower with a ratio concentration of 2:1 were more toxic than 1:2 against golden apple snails. Based on index combination it is known that a mixture papaya leaf powder and crown flower with a ratio concentration of 1:2 and 2:1 was additive, synergistic weakly, and strongly. Papaya and crown flower leaf powder and their mixtures have potential to be used as botanical molluscicide to control golden apple snails.
Keywords:  Crown  flower  leaf  powder,  golden  apple  snail,  papaya  leaf  powder,  pomacea  canaliculata, toxicity.

## ABSTRAK
Keong mas atau Pomacea canaliculata (Lamarck) (Gastropoda: Ampullariidae) merupakan hama utama pada tanaman padi di Indonesia.  Penggunaan serbuk daun pepaya ( Carica papaya ) dan biduri ( Calotropis gigantea ) dan dapat dijadikan sebagai moluskisida nabati alternatif untuk mengendalikan hama keong mas. Penelitian bertujuan untuk mengetahui toksisitas tunggal dari serbuk daun pepaya dan biduri serta toksisitas campuran kedua  serbuk  tersebut  pada  dua  macam  perbandingan  konsentrasi  tehadap  keong  mas.  Metode  pengujian meliputi pengujian toksisitas secara tunggal dan campuran.  Pengamatan mortalitas keong mas sejak 4–48 jam setelah aplikasi bahan moluskisida nabati. Hasil penelitian menunjukan bahwa aplikasi secara tunggal dan campuran dari serbuk daun pepaya dan serbuk daun biduri dapat menyebabkan kematian terhadap keong mas. Serbuk daun pepaya memiliki toksisitas lebih tinggi dibandingkan dengan serbuk daun biduri pada keong mas. Aplikasi campuran serbuk daun pepaya dan biduri lebih beracun dibandingkan aplikasi secara tunggal. Aplikasi campuran serbuk daun pepaya dan serbuk daun biduri dengan nisbah konsentrasi 2:1 lebih beracun dibandingkan  dengan  nisbah  konsentrasi  1:2  terhadap  hama  keong  mas.  Berdasarkan  indeks  kombinasi diketahui bahwa campuran serbuk daun pepaya dan serbuk daun biduri dengan nisbah konsentrasi 1:2 dan 2:1 bersifat  aditif,  sinergistik  lemah  dan  sinergistik  kuat.  Serbuk  daun  pepaya  dan  biduri  serta  campurannya berpotensi untuk dimanfaatkan sebagai moluskisida nabati untuk mengendalikan keong mas.
Kata kunci:  Keong mas, pomacea canaliculata, serbuk daun papaya, serbuk daun biduri, toksisitas.

## 1.  PENDAHULUAN
Keong  mas  atau Pomacea  canaliculata (Lamarck)  (Gastropoda: Ampullariidae)  atau Golden Apple Snail merupakan jenis keong invasif tidak  hanya  di  Indonesia  tetapi  juga  di  negara- negara  lain  terutama  di  wilayah Asia  Tenggara (Isnaningsih  &  Marwoto,  2011).  Keong  mas pertama kali masuk ke Asia Tenggara pada 1980- an sebagai pangan penghasil protein (Suharto & Kurniawati, 2008). Keong mas masuk ke Indonesia pada tahun 1981 sampai 1984 yang didatangkan sebagai hewan hias di akuarium (Brito & Joshi, 2016). Keong mas menjadi hama utama tanaman padi  di  Indonesia  dan Asia Tenggara  (Halwart, 1994).  Keberadaan  keong  mas  mengakibatkan kerusakan dengan memakan bagian pangkal batang padi terutama bibit padi yang baru pindah tanam dan menghancurkan tanaman saat tanaman muda sehingga petani harus menyulam kembali tanaman padi  (Suharto  &  Kurniawati,  2008; Yuliani  & Aidannisa, 2019).
Pada  serangan  keong  mas  yang  parah  juga dapat mengakibatkan tanaman padi yang ditanam habis tidak tersisa (Wijayanti et al ., 2016). Hama keong mas tersebar di daerah ketinggian <500 dan >500 mdpl dan bersifat mengelompok (Kasidiyasa et  al .,  2018).    Keong  mas  dapat  menyebabkan kerusakan tanaman padi berkisar 10–40% bila tidak dikendalikan secara baik dan benar. Serangan dapat terjadi pada persemaian sampai tanaman berumur dibawah empat minggu setelah tanam. Serangan keong emas yang berat dapat mengakibatkan bibit padi yang ditanam habis dimakan dan tidak tersisa lagi.  Gangguan  keong  mas  terjadi  pada  anakan, sehingga  jumlah  anakan  produktif  menjadi berkurang. Pada tingkat serangan yang berat, keong mas mampu merusak banyak rumpun tanaman padi, sehingga petani harus menanam ulang.
Penggunaan moluskisida sintetis secara terus menerus  dapat  menyebabkan  pencemaran lingkungan agroekosistem sawah. Niklosamida dan metaldehid merupakan moluskisida sintetik yang banyak  digunakan  untuk  mengendalikan  hama keong  mas  di  sawah  (Nongnutch  &  Nanuam, 2016).  Penggunaan moluskisida tersebut secara berlebihan  berdampak  terhadap  kesehatan  dan peningkatan keracunan lingkungan di ekosistem padi sawah serta berdampak juga pada organisme bukan target.  Pemanfaatan moluskisida nabati dari tumbuhan untuk mengendalikan hama keong mas merupakan alternatif pengendalian untuk mengurangi mengurangi kerusakan yang disebabkan oleh hama
keong mas yang lebih aman dan kurang beracun dibandingkan dengan moluskisida sintetik. Aplikasi moluskisida nabati merupakan pengendalian hama keong mas yang ramah lingkungan karena senyawa aktif dari tumbuhan diformulasikan secara alami. Beragam  dan  banyak  jenis  bahan  kimia  dari tumbuhan  dikenal  sebagai  metabolit  sekunder tumbuhan  yang  berfungsi  sebagai  penolak, antifeedant ,  dan  serta  kematian  seperti  lakton, fenol, terpen, furan, flavonoid, dan saponin (Prakash et al ., 2008; Latip et al ., 2018).
Penggunaan  serbuk  daun  biduri ( Calotropis gigantea )  dan  serbuk  daun  pepaya  ( Carica papaya )  dapat  dijadikan  alternatif  untuk mengendalikan hama keong mas. Tumbuhan biduri merupakan tumbuhan yang banyak dimanfaatkan, baik dari bagian daun, batang, ataupun akarnya. Kandungan kimia pada daun diantaranya flavonoid, polifenol, tanin, dan kalsium oksalat serta saponin (Sulaibi et al ., 2020). Tanaman pepaya berpotensi sebagai moluskisida nabati karena kandungan enzim papain, saponin, tanin dan flavonoid yang sangat beracun bagi hewan bertubuh lunak. Kandungan tersebut memiliki efek pestisida terhadap hama dan infeksi  penyakit  tanaman  (Ayoola  & Adeyeye, 2010;  Baskaran et  al .,  2012).  Kedua  tumbuhan tersebut diketahui dapat mengendalian keong mas. Oleh karena itu, perlu dilakukan penelitian untuk mengetahui  tingkat  toksisitas  dari  serbuk  daun pepaya  dan  biduri  pada  keong  mas.  Penelitian bertujuan  untuk  mengetahui  toksisitas  tunggal serbuk  daun  pepaya  dan  biduri  serta  toksisitas campuran  kedua  serbuk  tersebut  pada  dua perbandingan konsentrasi terhadap keong mas.

## 2.  BAHAN  DAN  METODE
Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Hama  dan  Penyakit  Tanaman,  Program  Studi Agroekoteknologi, Fakultas Pertanian Universitas Malikussaleh.  Waktu  Pelaksanaan  penelitian dilaksanakan pada bulan Mei sampai Agustus 2020. Pembiakan keong mas bertujuan untuk memperoleh keong mas dengan umur seragam. Induk jantan dan betina keong mas diperoleh dari areal persawahan dan diperlihara sampai bertelur. Pembiakan keong mas dilakukan dalam stoples (ukuran volume 5 liter) dengan makanan berupa sayuran kangkung. Pada setiap stoples tersebut ditempatkan sebanyak tiga pasang induk keong mas. Telur keong mas yang diletakkan pada kayu, dipindahkan ke stoples lain (ukuran volume 2,5 liter) untuk penetasan, setelah 8–14 hari telur sudah menetas dan diberi  air ke
dalam stoples tersebut dan diberikan makan. Keong mas yang digunakan dalam penelitian dengan ukuran diameter 2 cm.
Bahan nabati berupa daun pepaya dan biduri segar diperoleh dari lokasi yang memiliki keadaan geografis  yang  sama.  Pembuatan  moluskisida nabati dilakukan dengan memotong daun papaya dan biduri menjadi ukuran tipis (0,5–1 mm). Bahan nabati dari daun biduri dan pepaya dikering anginkan selama satu minggu, kemudian dihancurkan dengan menggunakan  blender  sampai  menjadi  serbuk. Serbuk dari hasil penghancuran kemudian disaring dengan menggunakan ayakan dengan ukuran 50 mesh, untuk mendapatkan serbuk nabati yang lebih halus  dan  dapat  digunakan  sebagai  bahan moluskisida nabati untuk penelitian.

## 2.1  Pengujian Toksisitas  Tunggal
Konsentrasi  serbuk  daun  pepaya  dan  biduri yang diuji secara tunggal terdiri dari lima taraf yaitu 2,5; 5, 7,5; 10, dan 12,5 g serbuk/2 liter air. Setiap konsentrasi terdiri atas tiga ulangan dengan 20 ekor keong mas per ulangan. Aplikasi bahan serbuk daun papaya  dan  biduri  dengan  melarutkan  serbuk tersebut  bersama  air  sebanyak  2  liter  (b/v). Campuran  tersebut  dan  air  ditempatkan  dalam stoples plastik dengan ukuran volume 5 liter. Keong mas yang berumur 17 hari dengan tingkat populasi 20 ekor keong mas dimasukkan ke dalam stoples plastik dan disimpan selama pelaksanaan penelitian. Makanan keong mas yang diberikan berupa batang dan daun kangkung. Pengamatan mortalitas keong mas mulai di catat sejak 4–48 jam setelah aplikasi (JSA) moluskisida nabati. Mortalitas keong mas dihitung dengan menggunakan rumus mortalitas = (jumlah keong mas yang mati/jumlah keong mas keseluruhan) x 100%. Hubungan mortalitas keong mas dengan konsentrasi serbuk daun pepaya dan biduri  ditentukan  dengan  analisis  probit menggunakan program POLO-PLUS.

## 2.2  Pengujian Toksisitas  Campuran
Pengujian  toksisitas  campuran  serbuk  daun pepaya  dan  biduri  menggunakan  perbandingan konsentrasi  berdasarkan  perbandingan  nilai konsentrasi  letal  50%  (LC 50 )  secara  tunggal pengamatan 48 JSA 1:2 dan 2:1. Konsentrasi serbuk daun papaya dan biduri pada perbandingan 1:2 yaitu 2,54; 5,09; 10,19; 20,38; dan 40,77 g serbuk/2 liter air, dan perbandingan 2:1 yaitu 2,39; 4,79; 9,59; 19,18; dan 38,37 g serbuk/2 liter air, dan kontrol.
Pengujian toksisitas campuran serbuk daun papaya dan biduri menggunakan metode yang sama pada pengujian  secara  tunggal.  Campuran  serbuk moluskisida nabati yang komponennya berasal dari jenis  tumbuhan  yang  berbeda,  sifat  aktivitas campuran serbuk daun papaya dan biduri dianalisis berdasarkan model kerja bersama berbeda dengan menghitung  indeks  kombinasi  pada  taraf  LC 50 . Indeks kombinasi (IK) pada taraf LCx (campuran) tersebut dihitung dengan rumus berikut (Chou & Talalay, 1984).
LCx 1 dan LCx 2 masing-masing merupakan LCx serbuk  daun  papaya  dan  biduri  pada  pengujian tunggal; LCx 1(cam) dan LCx 2(cam) masing-masing LC serbuk daun pepaya dan biduri dalam campuran yang mengakibatkan mortalitas x (misal 50% dan 90%).  Nilai  LC  tersebut  diperoleh  dengan  cara mengalikan  LCx  campuran  dengan  proporsi konsentrasi  serbuk  biduri  dan  pepaya  dalam campuran. Kategori sifat interaksi campuran yaitu 1.  bila IK      0,5 maka komponen campuran bersifat sinergistik kuat
2.  bila 0,5     IK      0,77 maka komponen campuran bersifat sinergistik lemah
3. bila 0,77     IK     1,43 maka komponen campuran bersifat aditif
4.  bila  IK          1,43  maka  komponen  campuran bersifat antagonistik

## 3.  HASIL  DAN  PEMBAHASAN

## 3.1  Toksisitas Tunggal  Serbuk  Daun  Pepaya dan Biduri
Hasil  pengamatan  menunjukkan  bahwa kematian keong mas mulai terjadi pada 4 JSA pada kedua serbuk nabati. Kematian keong mas paling tinggi  terjadi  pada  aplikasi  serbuk  daun  pepaya dibandingkan  serbuk  daun  biduri  sampai pengamatan 48 JSA. Aplikasi serbuk daun pepaya pada  konsentrasi  2,5–7,5  g  serbuk/2  liter  air menyebabkan kematian keong mas berkisar antara 46,67–83,33%, sedangkan pada konsentrasi 10–12,5 g serbuk/2 liter air sebesar 90% dan 100%. Aplikasi serbuk daun biduri pada konsentrasi 2,5–7,5 g/liter air  menyebabkan  kematian  keong  mas  berkisar antara  41,67–70%,  sedangkan  pada  konsentrasi tinggi  dari  10–12,5  g  serbuk/2  liter  air  berkisar antara 85–96,67%. Peningkatan konsentrasi serbuk
(1)
˂ ˂ ≤ ≤ ≤ ˃
daun pepaya dan biduri mengakibatkan peningkatan kematian keong mas. Aplikasi serbuk daun pepaya dan biduri menyebabkan kematian keong mas yang bervariasi  pada  berbagai  konsentrasi.  Secara keseluruhan kematian keong mas tertinggi untuk semua konsentrasi serbuk daun  pepaya pada  48 JSA dengan sebaran kematian mencapai 46,67– 100%.  Serbuk  daun  biduri  menunjukan  efek kematian  keong  mas yang  rendah  dibandingkan dengan serbuk daun pepaya (Gambar 1A dan 1B).
Penilaian hubungan konsentrasi serbuk daun pepaya  dengan  kematian  keong  mas  ditentukan
pada  16–48  JSA,  sedangkan  pada  serbuk  daun biduri  ditentukan  pada  20–48  JSA.  Penentuan berdasarkan  data  kematian  keong  mas  pada sebagian besar taraf konsentrasi telah melampui > 50%.  Nilai  LC 50 pada  16–48  JSA  serbuk  daun pepaya yaitu 13,327; 10,005; 7,534; 6,040; 5,106; 4,055; 3,272; 3,069; dan 2,998 g/2 liter. Nilai LC 50 untuk serbuk daun biduri pada 20–48 JSA yaitu 14,020; 10,768; 8,153; 5,938; 5,162; 5,099; 4,175; dan 3,598 g/2 liter (Tabel 1). Nilai LC 50 dari kedua serbuk  daun  mengalami  penurunan  karena terjadinya  peningkatan  jumlah  keong  mas  yang
A B C D
Gambar 1. Perkembangan kumulatif mortalitas keong mas. A. aplikasi serbuk daun papaya secara tunggal, B. aplikasi serbuk daun biduri secara tunggal, C. aplikasi serbuk daun pepaya + biduri pada nisbah konsentrasi 1:2, dan D. aplikasi serbuk daun pepaya + biduri pada nisbah konsentrasi 2:1
mati. Berdasarkan hasil analisis probit diketahui bahwa  toksisitas serbuk daun  pepaya lebih kuat daripada serbuk daun biduri.

## 3.2 Toksisitas Campuran Serbuk Daun Pepaya dan Biduri
Hasil  pengamatan  menunjukkan  bahwa kematian keong mas mulai terjadi pada 4 JSA pada kedua nisbah konsentrasi dengan tingkat kematian yang  masih  rendah. Aplikasi  campuran  pada perbandingan konsentrasi 1:2 dan 2:1 menyebabkan kematian keong mas mencapai 100% terjadi pada 36 JSA. Aplikasi campuran serbuk dengan nisbah 1:2  pada konsentrasi  2,54  dan  5,09  g/2  liter  air menyebabkan kematian keong mas berkisar antara 68,33–80%  dan  pada  konsentrasi  10,19–20,38 berkisar antara 90–98,33%, sedangkan konsentrasi 40,77 g/2 liter air mencapai 100%. Campuran serbuk daun pepaya dan biduri pada nisbah 2:1 dengan konsentrasi 2,39 dan 4,79 g/2 liter air menyebabkan kematian berkisar antara 71,67–83,33% dan pada konsentrasi  9,59  dan  38,37  berkisar  antara  95– 100% (Gambar 1C dan 1D). Aplikasi campuran serbuk daun pepaya dan biduri dapat menyebabkan kematian keong mas yang bervariasi pada berbagai konsentrasi. Aplikasi  campuran  pada  nisbah konsentrasi 2:1 memiliki kecepatan kematian keong mas yang tinggi dibandingkan dengan nisbah 1:2.
Penilaian  hubungan  konsentrasi  campuran kedua  serbuk  dengan  mortalitas  keong  mas ditentukan  pada  pengamatan  16–48  JSA  karena telah  mencapai  mortalitas  50%.  Nilai  LC 50 campuran  serbuk  daun  pepaya  dan  biduri  pada konsentrasi 1:2 dan 2:1 pada 4–48 JSA terjadinya peningkatan jumlah keong mas yang mati. Nilai toksisitas yang diperoleh terhadap data mortalitas pada  16–48  JSA  diketahui  bahwa  nilai  LC 50 mengalami  peningkatan  seiring  dengan meningkatnya  waktu  pengamatan.  Nilai  LC 50 campuran  serbuk  daun  pepaya  dan  biduri  pada nisbah  konsentrasi  1:2  dan  2:1  mengalami penurunan tajam pada 16–48 JSA. Penurunan nilai toksisitas tersebut karena terjadinya peningkatan jumlah keong mas yang mati. Nilai LC 50 campuran serbuk  daun  pepaya  dan  biduri  pada  nisbah konsentrasi 1:2 dan 2:1 pada 48 JSA yaitu 1,545 dan 1,382 g/2 liter. Nilai LC 50 campuran serbuk daun pepaya dan biduri pada nisbah konsentrasi 1:2 lebih tinggi dibandingkan dengan 2:1 (Tabel 2).
Aplikasi serbuk daun pepaya dan biduri dapat menyebabkan  mortalitas  pada  keong  mas. Perbedaan  mortalitas  keong  mas  pada  berbagai konsentrasi moluskisida nabati dipengaruhi oleh perbedaan kandungan senyawa aktif moluskisida dari  pengujian  secara  tunggal  dan  campuran. Semakin tinggi konsentrasi moluskisida nabati yang digunakan  semakin  banyak  kandungan  senyawa
Jenis serbuk daun Waktu pengamatan (JSA) 1 Intersep garis probit (a 2 ± g.b 4 ) Kemiringan regresi probit (b 3 ± g.b 4 ) LC 50 (sk 95%) 5 (b/v) Serbuk daun pepaya 16 1,226 ± 0,534 3,356 ± 0,560 13,327 (11,465–17,158) 20 1,924 ± 0,594 3,075 ± 0,649 10,005 (7,383–20,336) 24 2,449 ± 0,320 2,908 ± 0,364 7,534 (6,657–8,589) 28 2,612 ± 0,302 3,058 ± 0,355 6,040 (5,314–6,799) 32 3,286 ± 0,398 2,421 ± 0,477 5,106 (2,727–7,280) 36 3,248 ± 0,278 2,881 ± 0,348 4,055 (3,382–4,663) 40 3,357 ± 0,287 3,192 ± 0,384 3,272 (2,679–3,792) 44 3,553 ± 0,284 2,972 ± 0,379 3,069 (2,435–3,613) 48 3,617 ± 0,283 2,900 ± 0,378 2,998 (2,349–3,552) Serbuk daun biduri 20 2,322 ± 0,372 2,335 ± 0,406 14,020 (11,408–20,089) 24 2,785 ± 0,317 2,147 ± 0,355 10,768 (9,004–14,078) 28 3,017 ± 0,293 2,176 ± 0,335 8,153 (6,957–9,860) 32 3,360 ± 0,273 2,119 ± 0,320 5,938 (4,949–6,989) 36 3,514 ± 0,267 2,085 ± 0,319 5,162 (4,194–6,094) 40 3,537 ± 0,267 2,068 ± 0,318 5,099 (4,125–6,029) 44 3,681 ± 0,264 2,125 ± 0,321 4,175 (3,252–4,982) 48 3,694 ± 0,408 2,349 ± 0,509 3,598 (1,021–5,327)

## Tabel 1. Pendugaan Parameter Toksisitas Tunggal Serbuk Daun Pepaya dan Biduri terhadap Mortalitas Keong Mas
Keterangan: JSA : jam setelah aplikasi, a : kemiringan garis probit, b : kemiringan regresi, gb : galat baku, sk : selang kepercayaan pada taraf.
aktif moluskisidal, sehingga menyebabkan semakin tinggi mortalitas keong mas.  Kandungan senyawa aktif  moluskisidal  dari  serbuk  daun  papaya menyebabkan  kematian  keong  mas  lebih  tinggi dibandingkan serbuk daun biduri. Spesies-spesies tumbuhan  tersebut  diketahui  memiliki  aktivitas moluskisidal yang menyebabkan mortalitas keong mas.  Seperti yang dikemukakan oleh Latip et al . (2018) dan Rosli et al . (2021) bahwa kandungan senyawa aktif molukisidal dari daun pepaya yang efektif  untuk  mengendalikan  hama  keong  mas. Farista et  al .  (2013)  dan Arma et  al .  (2019) menyatakan bahwa tumbuhan biduri memiliki sifat anti moluska terhadap keong mas.
Kandungan  kimia  dari  daun  pepaya  yaitu alkaloid,  saponin,  papain,  tannin,  dan  ûavonoid (Baskaran et al ., 2012; Ayoola & Adeyeye, 2010; Akhila & Vijayalakshmi, 2015), sedangkan pada daun biduri yaitu alkaloid, steroid, asam fenolat, dan saponin (Farista et al ., 2013; Sulaibi et al ., 2020). Latip et  al .  (2018)  menyatakan  bahwa  senyawa bioaktif yang paling banyak dari daun pepaya adalah saponin.  Keong  mas  yang  diberi  serbuk  daun pepaya dan biduri mengalami keracunan  karena kedua  serbuk  tersebut  mengandung  zat  yang bersifat toksik yaitu saponin.  Gejala keracunan saponin  menyebabkan  keong  mas  memproduksi lendir sehingga mengakibatkan proses pernafasan
keong  mas  terhambat  (Francis et  al .,  2002; Manueke, 2016). Saponin mampu menyebabkan gangguan sel dan mempengaruhi organ pernafasan pada keong mas melalui interaksi hidrofobik (Latip et al ., 2018).  Saponin bersifat sebagai surfaktan yang  mempunyai  struktur  bipolar  yang  bersifat hidrofilik  dan  hidrofobik  sehingga  dapat menyatukan  senyawa  nonpolar  dan  senyawa polar, termasuk mengikat lapisan lemak dalam air. Saponin berinteraksi dengan membran sel dengan cara menurunkan tegangan permukaan membran sel  sehingga  terjadi  peningkatan  permeabilitas membran sel (Tekeli et al ., 2007; Wina, 2012). Dampak yang terjadi  mengakibatkan kebocoran membran sel dan gangguan metabolisme pada sel- sel  lainnya  sehingga  menyebabkan  kematian keong mas.
Serbuk daun pepaya juga memiliki kandungan senyawa bioaktif yaitu papain (Jaiswal et al ., 2008; Latip et al ., 2018). Papain merupakan enzim yang terdapat  pada  semua  bagian  tanaman  pepaya kecuali akar  (Islam et  al .,  2015).  Enzim  papain yang  merupakan  racun  kontak  yang  langsung masuk ke dalam tubuh hama melalui lubang-lubang alami  dan  menyebar  ke  seluruh  tubuh  dan menyerang sistem saraf. Enzim ini secara signifikan menghambat aktivitas asetilkolinesterase (AChE) pada  keong  mas.  AChE  bekerja  dengan
Perbandingan konsentrasi Waktu pengamatan (JSA) 1 Intersep garis probit (a 2 ± g.b 4 )
Kemiringan regresi probit (b 3 ± g.b 4 ) LC 50 (sk 95%) 5 (b/v) Serbuk daun pepaya dan biduri (1:2) 16 3,603 ± 0,213 0,862 ± 0,186 41,779 (24,862–122,758) 20 3,976 ± 0,197 0,902 ± 0,178 13,688 (9,408–21,919) 24 4,034 ± 0,196 1,128 ± 0,184 7,188 (4,975–9,733) 28 4,127 ± 0,198 1,255 ± 0,192 4,963 (3,308–6,649) 32 4,193 ± 0,239 1,445 ± 0,209 3,622 (2,369–4,839) 36 4,200 ± 0,222 1,762 ± 0,252 2,841(1,881–3,739) 40 4,264 ± 0,239 1,942 ± 0,292 2,394 (1,539–3,168) 44 4,480 ± 0,248 1,877 ± 0,311 1,891(1,059–2,640) 48 4,665 ± 0,254 1,772 ± 0,310 1,545 (0,731–2,296) Serbuk daun pepaya dan biduri (2:1) 16 3,617 ± 0,207 0,927 ± 0,186 31,096 (19,924–71,233) 20 4,009 ± 0,192 0,946 ± 0,179 11,158 (7,742–16,810) 24 4,128 ± 0,191 1,171 ± 0,187 5,556 (3,744–7,488) 28 4,201 ± 0,194 1,301 ± 0,197 4,110 (2,695–5,519) 32 4,210 ± 0,206 1,650 ± 0,229 3,007 (2,019–3,952) 36 4,207 ± 0,230 2,007 ± 0,289 2,483 (1,682–3,211) 40 4,319 ± 0,250 2,149 ± 0,340 2,074 (1,324–2,727) 44 4,526 ± 0,265 2,102 ± 0,372 1,681 (0,931–2,325) 48 4,711 ± 0,279 2,054 ± 0,404 1,382 (0,636–2,026)
Tabel 2. Pendugaan Parameter Toksisitas Campuran Serbuk Daun Pepaya dan Biduri pada Perbandingan Konsentrasi 1:2 dan 2:1 terhadap Mortalitas Keong Mas
Keterangan: JSA : jam setelah aplikasi, a : kemiringan garis probit, b : kemiringan regresi, gb : galat baku, sk : selang kepercayaan pada taraf.
mendegradasi asetilkolin (ACh) menjadi kolin dan asam asetat pada celah sinapsis (Mukherjee et al ., 2007).  Saat  aktivitas  AChE  dihambat, mengakibatkan terjadi penumpukkan pesan yang berlebihan  tanpa  kendali  sehingga  terjadi kelumpuhan, kejang, dan kematian (Ezemonye & Ikpesu,  2011).  Keong  mas  yang  mati  ditandai dengan  tubuh  menjorok  keluar  dan  operculum terbuka  serta  dan  mengeluarkan  lendir  yang berlebihan, karena otot keong mas berkontraksi dan kejang akibat pemberian moluskisida nabati dari serbuk daun pepaya dan biduri.

## 3.3  Sifat Aktivitas  Campuran  Serbuk  Daun Pepaya dan Biduri
Berdasarkan nilai indeks kombinasi diketahui bahwa campuran serbuk daun pepaya dan serbuk daun biduri dengan nisbah konsentrasi 1:2 dan 2:1 bersifat aditif, sinergistik lemah dan sinergis kuat. Sifat  campuran  tersebut  yang  dominan  adalah sinergistik lemah pada taraf LC 50 (Tabel 3). Sifat aditif menunjukkan bahwa tingkat mortalitas keong mas  akibat  perlakuan  campuran  serbuk  tidak berbeda dengan jumlah tingkat mortalitas akibat perlakuan kedua serbuk tunggal secara terpisah, sementara  sifat  sinergistik  lemah  menunjukkan bahwa perlakuan dengan campuran serbuk tersebut mengakibatkan tingkat mortalitas keong mas yang sedikit lebih tinggi dibandingkan dengan jumlah tingkat mortalitas akibat  perlakuaan kedua serbuk tunggal  secara  terpisah.  Sifat  sinergistik  kuat mencerminkan bahwa terjadinya peningkatan mortalitas
keong mas yang tinggi pada perlakuan campuran serbuk dibandingkan dengan peningkatan mortalitas pada perlakuan serbuk tunggal. Aplikasi campuran serbuk daun pepaya dan serbuk daun biduri lebih beracun dibandingkan aplikasi secara tunggal.
Sifat campuran dari serbuk daun pepaya dan serbuk daun biduri pada perbandingan 1:2 dan 2:1 cenderung berubah pada setiap waktu pengamatan. Trijanti et al . (2015) mengemukakan pernyataan yang  sama  bahwa  sifat  campuran  dari  ekstrak Piper  retrofractum , Anonna  squamosa ,  dan Tephrosia  vogelii terhadap  imago  kutu  putih pepaya  cenderung  berubah  pada  setiap  waktu pengamatan. Sifat campuran  pada perbandingan 1:2 belum stabil pada pengamatan 20 sampai 28 JSA dan mengalami perubahan pada pengamatan 32 sampai 48 JSA, terlihat sifat dari sifat aktivitas campurannya  yang  cenderung  sama  yaitu sinergistik lemah. Sifat perbandingan 2:1 terlihat stabil pada pengamatan 24 sampai 44 JSA dengan sifat  aktivitas  campuran  sama  yaitu  sinergistik lemah dan menjadi sinergistik kuat pada 48 JSA, hal tersebut menunjukkan bahwa serbuk daun biduri memerlukan senyawa sinergis pada proporsi yang lebih  tinggi  dari  serbuk  daun  pepaya.  Hasil penelitian yang sama dilaporkan oleh Russianzi & Prijono (2019), spinetoram memerlukan senyawa sinergis pada proporsi yang lebih tinggi daripada abamektin dan klorfenapir. Sementara itu, menurut Irondi et al . (2012) dan Izah et al . (2018), daun pepaya mengandung senyawa yang dapat bersifat sinergis bila dicampurkan dengan senyawa dari akar pepaya  atau  daun  nimba.  Pada  penelitian  ini
Perbandingan konsentrasi Waktu pengamatan (JSA) Indeks kombinasi Sifat aktivitas campuran Serbuk daun pepaya dan biduri (1:2) 20 1,404 Aditif 24 0,791 Aditif 28 0,739 Aditif 32 0,553 Sinergistik lemah 36 0,628 Sinergistik lemah 40 0,633 Sinergistik lemah 44 0,569 Sinergistik lemah 48 0,530 Sinergistik lemah Serbuk daun pepaya dan biduri (2:1) 20 1,100 Aditif 24 0,675 Sinergistik lemah 28 0,639 Sinergistik lemah 32 0,600 Sinergistik lemah 36 0,541 Sinergistik lemah 40 0,540 Sinergistik lemah 44 0,500 Sinergistik lemah 48 0,449 Sinergistik kuat
Tabel 3. Sifat Aktivitas Campuran Serbuk Daun Pepaya dan Biduri pada Perbandingan Konsentrasi 1:2 dan 2:1 terhadap Mortalitas Keong Mas
diketahui  bahwa  serbuk  daun  pepaya  bersifat sinergistik ketika dicampurkan dengan serbuk daun biduri dengan perbandingan 1:2 dan 2:1.
Aplikasi  campuran serbuk daun pepaya dan biduri dapat meningkatkan aktivitas dan efisiensi karena bersifat sinergi sehingga penggunaannya sangat dianjurkan untuk mengendalikan keong mas di  sawah.  Pemanfaatan  campuran  moluskisida nabati  dalam  pengendalian  hama  keong  mas merupakan  alternatif  pengendalian  untuk mengurangi dampak negatif yang ditimbulkan dari penggunaan  pestisida  kimia  sintetik.  Campuran serbuk daun pepaya dan biduri tersebut, khususnya dengan nisbah konsentrasi 1:2 dan 2:1, berpotensi untuk digunakan sebagai alternatif pengendalian hama  lain.  Penggunaan  campuran  moluskisida nabati  pada  dosis  yang  lebih  rendah  juga  dapat mengurangi dampak samping terhadap organisme bukan sasaran dan lingkungan. Russianzi & Prijono (2019) menyatakan bahwa penggunaan campuran yang bersifat sinergis terhadap hama sasaran dapat menurunkan  dosis  aplikasi  insektisida  sehingga dapat memperkecil kemungkinan dampak negatif terhadap  organisme  bukan  sasaran.  Selain  itu, penggunaan  campuran  moluskisida  nabati  yang komponennya memiliki cara kerja berbeda dapat menunda terjadinya resistensi hama.

## 4.  KESIMPULAN
Aplikasi secara tunggal dan campuran serbuk daun  pepaya  dan  biduri  dapat  menyebabkan kematian keong mas. Serbuk daun pepaya memiliki toksisitas lebih tinggi dibandingkan serbuk daun biduri pada keong mas. Aplikasi campuran serbuk daun pepaya dan serbuk daun biduri dengan nisbah konsentrasi 2:1 lebih beracun di bandingkan dengan nisbah konsentrasi 1:2 terhadap hama keong mas.
Berdasarkan indeks kombinasi diketahui bahwa campuran  serbuk  daun  pepaya  dan  serbuk daun biduri dengan nisbah konsentrasi 1:2 dan 2:1 bersifat aditif, sinergistik lemah dan sinergistik kuat. Serbuk daun  pepaya  dan  biduri  serta  campurannya berpotensi untuk dimanfaatkan sebagai moluskisida nabati untuk mengendalikan keong mas.

## 5.  DAFTAR  PUSTAKA
Akhila,  S  &  N.G.  Vijayalakshmi.  2015. Phytochemical Studies on Carica  papaya Leaf Juice. IJPSR . 6 (2): 880–883. Arma,  R.,  D.E.  Sari,  St.  Zulaiha &  N.  Fauziah. 2019.  Mortalitas  Keong  Mas  ( Pomacea
cannaliculata ) terhadap Aplikasi Beberapa Ekstrak Tanaman. Jurnal  Agrominansia . 4 (2): 176–182.
Ayoola, P. B. & A. Adeyeye. 2010. Phytochemical and Nutrient Evaluation of Carica papaya (Pawpaw) Leaves. IJRRAS . 5 (3): 325–328. Baskaran, C., V. R. Bai, S. Velu & K. Kumaran. 2012. The Efficacy of Carica papaya Leaf Extract on Some Bacterial and A Fungal Strain by  Well  Diffusion  Method. Asian  Pacific Journal of Tropical Disease. 2: S658–S662. Brito, F. C. & R. C. Joshi. 2016. The Golden Apple Snail Pomacea canaliculata : A Review on Invasion, Dispersion and Control. Outlooks on Pest Management. 27: 157–163. Chou,  T.C.  &  P.  Talalay.  1984.  Quantitative Analysis of Dose-effect Relationships: the Combined  Effects  of  Multiple  Drugs  or Enzyme  Inhibitors. Advances  in  Enzyme Regulation. 22: 27–55.
Ezemonye L. I. & T. O. Ikpesu. 2011. Evaluation of  Sub-lethal  Effects  of  Endosulfan  on Cortisol Secretion, Glutathione S-transferase and  Acetylcholinesterase Activities  in Clarias  gariepinus . Food  Chemical Toxicology . 49 (9): 1898–903.
Farista, B., Suripto, E. R. Gunawan & K. Sukenti. 2013. Konsorsium Tumbuhan Anti Moluska untuk  Mengendalikan  Keong  Mas  Hama Tanaman  Padi. Jurnal  Biologi  Tropis .  13 (1): 87–101.
Francis, G., Z. Kerem, H. P. S. Makkar & K. Becker. 2002. The Biological Action of Saponins in Animal  Systems: A  Review. The  British Journal of Nutrition . 88 (6): 587–605. Halwart, M. 1994. The golden apple snail Pomacea canaliculata in  Asian  Rice  Farming Systems: Present Impact and Future Threat. International Journal of Pest
Management . 40 (2): 199–206.
Irondi, A.E., G.  Oboh & J. K. Akintunde. 2012. Comparative  and  Synergistic Antioxidant properties  of Carica  papaya and Azadarichta  indica Leaves. International Journal  of  Pharmaceutical  Sciences  and Research . 3 (12): 4773–4779. Islam, A., M. A. Al-Mamun, S. Parvin, M. Sarker, M.  K.  Zaman,  P. Farhana,  Z.  Shahriar,  & U.  M.  Salah.  2015.  Evaluation  of Antibacterial  Activities  of  Latex  of Caricaceae  ( Carica  papaya L.). Asian Journal  of  Pharmaceutical  and  Clinical Research . 8 (1): 308–311.
Isnaningsih, N.R. & R.M. Marwoto. 2011. Keong Hama Pomacea di  Indonesia:  Karakter Morfologi  dan  Sebarannya  (Mollusca, Gastropoda: Ampullariidae). Berita Biologi . 10 (4): 441–447.
Izah, S. C. , E. J. Uhunmwangho & K. E. Dunga. 2018.  Studies  on  The  Synergistic Effectiveness  of  Methanolic  Extract  of Leaves  and  Roots  of Carica  papaya L. (Papaya) Against Some Bacteria Pathogens. International  Journal  of  Complementary & Alternative Medicine. 11(6): 375–378. Jaiswal,  P.,  V.  K.  Singh  &  D.K.  Singh.  2008. Enzyme  Inhibition  by  Molluscicidal Component  of Areca  catechu and Carica papaya in  The  Nervous Tissue  of Vector Snail Lymnaea  acuminata . Pesticide  Bio- chemistry and Physiology . 92 (3): 164–168.
Latip, S. N. H. M., F. W. M. Nawi, E. S. Shari &
S. H. P. Mansur. 2018. Potential of Carica papaya and Artocarpus  integer Extracts as  Botanical  Pesticides  for  Controlling, Golden Apple Snail, Pomacea canaliculata . In:  Yacob,  N.A., Noor, N.A.M.,  Yunus, N.Y. M., Yussof, R. L. & Zakaria, S. A. K. Y.  (editor). Regional  Conference  on Science,  Technology  and  Social  Sciences . 963–973.
Manueke,  J.  2016.  Pengendalian  Hama  Keong Emas  ( Pomacea  canaliculata Lamarck) pada    Tanaman  Padi  Sawah  dengan Menggunakan  Ekstrak  Buah  Bitung ( Barringtonia asiatica L.). Jurnal  LPPM Bidang Sains dan Teknologi. 3 (1): 19–26.
Mukherjee,  P.  K.,  V.  Kumar,  M.  Mal  &  P.J. Houghton.  2007.  Acetylcholinestease Inhibitors  from  Plants. Phytomedicine . 14 (4): 289–300.
Nongnutch, K. & J. Nanuam. 2016. Alternative Bio- pesticide for Golden Apple Snail ( Pomacea canaliculata ). Suranaree  Journal  of Science and  Technology . 23(1):  1–4. Prakash, A., J. Rao & V. Nandagopal. 2008. Future of  Botanical  Pesticides  in  Rice,  Wheat, Pulses  and  Vegetables  Pest  Management. Journal Biopesticides . 1 (2): 154–169. Rosli, R., S. N. H. M. Latip, A. S. N. Othman & F. W.  M.  Nawi.  2021.  Potential  Control  of Pomacea  canaliculata Using  Botanical
Extracts  in  Paddy  Field. International
Transaction  Journal  of  Engineering, Management,  &  Applied  Sciences  & Technologies . 12  (9):  1–11.
Russianzi,  W.  &  D.  Prijono.  2019. Aktivitas Sinergistik Campuran Ekstrak Buah Piper aduncum dan Tiga Jenis Insektisida Turunan Metabolit  Mikrob Terhadap  Ulat Plutella xylostella . Jurnal Cropsaver . 2 (1): 7–14. Suharto & N. Kurniawati. 2008. Keong Mas, dari Hewan  Peliharaan  Menjadi  Hama  Utama Padi Sawah. 385–403. dalam Darajat, A.A., A.  Setyono,  A.  K.  Makarim  &  A. Hasanuddin.  (Editor). Padi:  Inovasi Teknologi Produksi .  Balai Besar  Penelitian Tanaman Padi. LIPI Press. Jakarta.
Sulaibi, M. A. A., C. Thiemann & T. Thiemann. 2020.  Chemical Constituents and Uses  of Calotropis  procera and Caloropis gigantea –A  review  (Part  I–The  Plants  as Material  and  Energy  Resources). Open Chemistry Journal . 7: 1–15.
Tekeli, A.,  L.  Çelik  &  H.R.  Kutlu.  2007.  Plant Extracts;  A  New  Rumen  Moderator  in Ruminant  Diets. Journal  of  Tekirdag Agricultural Faculty. 4: 71–79.
Trijanti, A., W. Asnan, D. Sartiami, R. Anwar & Dadang.  2015.  Keefektifan  Ekstrak Piper retrofractum Vahl., Anonna  squamosa L. dan Tephrosia  vogelii Hook.  serta Campurannya terhadap Imago Kutu Putih Papaya Paracoccus  marginatus Williams &  Granara  de  Willink  (Hemiptera: Pseudococcidae). Jurnal  Entomologi Indonesia. 12 (2): 80–90.
Wijayanti,  R.,  L.  Wibowo  &  Solikhin.  2016. Pengaruh Varietas  Padi  ( Oryza  sativa L.) dan Jenis Kelamin Keong Emas ( Pomacea sp.) terhadap  Daya  Rusak  Keong  Emas  pada Tanaman  Padi. Jurnal  Agrotek  Tropika . 4 (2): 141–145.
Wina,  E.  2012.  The  Use  of  Plant  Bioactive Compounds to Mitigate Enteric Methane in Ruminants and Its Application in Indonesia.
Wartazoa. 22: 24–34
Yuliani & Aidannisa. 2019. Uji Ketertarikan Hama Keong  Mas  ( Pomacea  canaliculata L.) terhadap  Berbagai  Umpan  Perangkap  di Lahan Padi Pandanwangi. Jurnal Pro-Stek. 1 (2): 80–88.