JFFI. 2019; 6(1) 315-324 www.jurnal.farmasi.umi.ac.id/index.php/fitofarmakaindonesia
PERBANDINGAN AKTIVITAS ANTIOKSIDAN JAHE EMPRIT (Zingiber officinale var Amarum) DAN JAHE MERAH (Zingiber officinale var Rubrum) DALAM SEDIAAN CAIR BERBASIS BAWANG PUTIH DAN KORELASINYA DENGAN KADAR FENOL DAN VITAMIN C
Ike Yulia Wiendarlina 1* , Runi Sukaesih 1
1 Program Studi Farmasi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Pakuan Bogor
* yulia21760@gmail.com
Submission Date: 30-09-2018;   Review Completed: 03-11-2018; Accepted Date: 18-12-2018

## ABSTRACT
Garlic  (Allium  sativum L. ),  ginger  emprit  (Zingiber  officinale var  Amarum )  and  red  ginger  (Zingiber officinale var  Rubrum )  contain  active  compounds  from  the  phenol  group  which  have  antioxidant  properties.  This study aims to determine the ratio of antioxidant activity of red ginger and ginger in garlic-based liquid preparations using DPPH reagent (1.1 diphenyl-2 picrylhydrazyl) and determine its correlation with total phenol and vitamin C levels contained in both liquid preparations. Total phenol content was determined by reacting folin-ciocalteu and vitamin C levels were determined by titrimetric method. Total phenol levels are expressed as mg GAE (Gallic Acid Equivalent) per gram of preparation, antioxidant activity is expressed as IC 50 (µg / mL), and vitamin C is expressed as percent (%).  The results show that total phenol content of emprit and red ginger in garlic-based preparation were 80,296 mgGAE / g preparations and 159,164 mgGAE / g preparations respectively, antioxidant activity (IC 50 ) for each  preparation  were  3,310  µg  /  mL  and  2,075  µg  /  mL  respectively  and  the  vitamin  C  level  were  4.338%  and 6.372%. Correlation test showed the very strong and significant correlation existed between antioxidant activity and the  total  phenol  levels  in  both  emprit  and  red  ginger-garlic  preparation  but  no  significant  correlation  detected between antioxidant activity and vitamin C levels of both preparations.
Keywords: garlic-based preparations, emprit ginger, red ginger, antioxidant, phenol level

## I. PENDAHULUAN
Radikal  bebas  adalah  suatu  senyawa  yang memiliki  elektron  tidak  berpasangan  pada  orbital terluarnya  sehingga  menyebabkan  senyawa  tersebut sangat  reaktif  untuk  mencari  pasangannya  melalui penyerangan dan pengikatan elektron yang berada di sekitarnya. Reaksi ini dalam tubuh dapat menimbulkan  reaksi  berantai  yang  mampu  merusak struktur sel, jika tidak dihentikan akan menimbulkan berbagai  penyakit  seperti  kanker,  jantung,  katarak, penuaan  dini,  serta  penyakit  degeneratif  lainnya. Antioksidan  adalah  suatu  senyawa  yang  dapat memperlambat  proses  oksidasi  dari  radikal  bebas, sehingga  dapat  melindungi  sel  -  sel  dari  kerusakan yang  disebabkan  oleh  molekul  tidak  stabil  yang dikenal  sebagai  radikal  bebas.  Senyawa  ini  bekerja dengan  cara  mendonorkan  elektronnya  kepada molekul  radikal  bebas  atau  disebut  senyawa  yang
bersifat  oksidan,  yaitu  dengan  cara  pengikatan oksigen  dan  pelepasan  hidrogen.  Proses  oksidasi penting untuk metabolisme tubuh, tetapi jika molekul yang dihasilkan jumlahnya berlebihan dapat merusak kesehatan  seperti  merusak  sel  yang  mengoksidasi DNA,  sehingga  dapat  berakibat  berlangsungnya mutasi  gen.  Berdasarkan  mekanisme  kerjanya antioksidan  diklasifikasikan  menjadi  3  tipe,  yaitu Antioksidan  Primer  (Antioksidan  Endogenus), Antioksidan Sekunder (Antioksidan Eksogenus) dan Antioksidan Tersier (Musarofah, 2015).
Bawang putih ( Allium sativum L.) memiliki kandungan senyawa sulfida, yaitu Dialil sulfida atau dalam  bentuk  teroksidasi  disebut  dengan  aliin yang mempunyai  fungsi  fisiologis  yang  sangat  luas, termasuk diantaranya adalah antioksidan, antikanker, antitrombotik,  antiradang,  penurunan  tekanan  darah dan dapat menurunkan kolesterol darah (Hidayat dan
Rodame,  2015).  Umbi  batang  bawang  putih  juga mengandung saltivine yang  dapat  mempercepat pertumbuhan  sel  dan  jaringan  serta  merangsang susunan  sel  saraf, Alilpropil  -  disulfida sebagai antelmintik  (Lintas  Media,  2014).  Jahe  emprit (Zingiber officinale var Amarum ) merupakan bahan alami  yang  banyak  mengandung  komponen  fenolik aktif  seperti  sogaol , gingerol  dan  gingerone  yang memiliki  efek  antioksidan  di  atas  Vitamin  E  dan sebagai  antikanker  (Hidayat  dan  Rodame,  2015). Jahe  merah (Zingiber  officinale var  Rubrum ) memiliki rasa yang sangat pedas dengan aroma yang sangat  tajam  dan  banyak  mengandung  komponen fenolik aktif  seperti  halnya  jahe  emprit,  tetapi memiliki kandungan minyak atsiri yang lebih tinggi dibandingkan  dengan  jahe  emprit  (1,5-3,5%  untuk jahe  emprit  dan  2,58-3,90%  untuk  jahe  merah) (Setyaningrum  dan  Cahyo,  2014).  Jeruk  lemon mengandung minyak atsiri yang di dalamnya terlarut senyawa  -  senyawa  kimia  seperti,  Linalil  asetat, Geranil  asetat,  sitral,  limonene,  felandren  dan kumarin bioflavonoid. Jeruk lemon mengandung 8 % Asam sitrat dan memiliki kandungan vitamin C yang tinggi dibandingkan jeruk nipis serta sebagai sumber vitamin A, B 1 , B 2 , fosfor, kalsium, pektin dan serat. Lemon  memiliki  berbagai  macam  penggunaan seperti, membersihkan tubuh, membantu kerja sistem pencernaan dan merangsang kerja hati (Lintas Media, 2014). Menurut  Zu et.al. (2010) kandungan  minyak atsiri (monoterpen dan sesquiterpen) seperti limonene memiliki  aktivitas  antibakteri  dimana  pada  buah jeruk lemon juga memiliki kandungan minyak atsiri berupa limonene .  Menurut  Noghata et.al. (2006), tanaman  jeruk  mengandung  komponen flavonoid yang  memiliki  aktivitas  antibakteri.  Madu  ( Mel depuratum ) mengadung asam organik, asam amino, vitamin A, B kompleks, C, D, E, dan K, mineral dan enzim. Selain sebagai sumber nutrisi, energi, vitamin, dan  mineral  madu  juga  berperan  aktif  sebagai antioksidan (Nurheti, 2014). Cuka apel adalah suatu zat  yang  dibuat  dari  senyawa-senyawa  yang  berada dalam  buah  apel  melalui  proses  fermentasi menggunakan microorganisme ( Saccharomyses cerevisiae dan Zymomonas mobilis ) sebagai biokatalis  untuk  mengubah  bahan  baku  menjadi produk (Riadi, 2007) . Cuka apel mengandung nutrisi yang  sama  seperti  pada  buah  apel  yaitu  pektin, betakarotin, kalium, serat, termasuk enzim dan asam amino  yang  terbentuk  selama  proses  fermentasi. Fitokimia  di  dalam  apel  seperti  tanin  dan  flavonoid dapat  berfungsi  sebagai  antioksidan  yang  melawan kolesterol jahat ( Low Density Lipoprotein/LDL ) yang potensial  menyumbat  pembuluh  darah.  Antioksidan ini  dapat  mencegah  kerusakan  sel-sel  atau  jaringan pembuluh  darah.  Pada  saat  bersamaan,  antioksidan akan  meningkatkan  kolesterol  baik  ( High  Density
Lipoprotein/HDL ) yang bermanfaat untuk mencegah penyakit jantung, pembuluh darah dan stroke (Lintas Media, 2014).
Antioksidan  diperlukan  untuk  meredam aktivitas radikal bebas, dikenal sebagai senyawa yang dapat  mendonorkan  elektronnya  (pemberi  atom hidrogen) kepada radikal bebas, sehingga menghentikan reaksi berantai dan mengubah radikal bebas  menjadi  bentuk  yang  stabil  (Hamid, et.al. , 2010).  Musarofah  (2015)  menyatakan  bahwa  target utama radikal bebas adalah protein, asam lemak tak jenuh,  liporotein  dan  unsur  DNA  termasuk karbohidrat.  Reaksi  berantai  pada  pembentukan radikal bebas melalui tiga tahap, yaitu:
1. Tahap  inisiasi,  yaitu  awal  pembentukan  radikal bebas.
Persamaan Reaksi : RH→R* + H*
2. Tahap  propagasi  adalah  perpanjangan  rantai radikal.
Persamaan Reaksi : R* + O 2 → ROO*ROO* +
RH→ROOH +R*
3. Tahap  terminasi  ialah  bereaksinya  senyawa radikal  dengan  radikal  lain  atau  dengan penangkap radikal, sehingga potensi propagasinya rendah.
Persamaan Reaksi : R* + R* → R – R ROO* + R* → ROOR ROO* + ROO* → ROOR + O 2 Mekanisme kerja antioksidan  memiliki dua fungsi,  yakni  fungsi  utama  sebagai  pemberi  atom hidrogen (antioksidan primer) yang dapat memberikan  atom  hidrogen  secara  cepat  ke  radikal lipida (R*, ROO*) atau mengubahnya ke bentuk yang stabil.  Fungsi  kedua  yaitu  memperlambat  laju autooksidasi  dengan  berbagai  mekanisme  di  luar mekanisme  pemutusan  rantai  autooksidasi  dengan pengubahan radikal lipida ke bentuk yang lebih stabil (Musarofah,  2015).  Potensi  antioksidan  dinyatakan dengan  nilai  konsentrasi  hambat  50  %  (IC 50 ). Semakin  kecil  IC 50 menunjukkan  semakin  tinggi aktivitas antioksidan suatu senyawa atau zat. Tabel 1. Tingkat Kekuatan Antioksidan
Intensitas IC 50 Sangat Aktif < 50 Aktif 50-100 Sedang 101-250 Lemah 251-500 Tidak Aktif > 500
(Sumber: Sandhiutami, dkk., 2014) Metode  yang  sering  digunakan  untuk menentukan  aktivitas  antioksidan  pada  umumnya yaitu metode DPPH (1,1 - Difenil - 2 - Pikrilhidrazil). DPPH merupakan suatu radikal bebas yang stabil dan tidak  membentuk  dimer  akibat  delokalisasi  dari elektron  bebas  pada  seluruh  molekul  (Molyneux, 2004).  Antolovich,  et.al.  (2001)  menyatakan  bahwa
intensitas  warna  dari  hasil  uji  diinterpretasikan sebagai  IC 50 ,  yaitu  jumlah  antioksidan  yang diperlukan  untuk  menurunkan  konsentrasi  awal DPPH  sebesar  50  %.  Pada  metode  ini  tidak diperlukan  substrat  sehingga  memiliki  keuntungan, yaitu lebih sederhana dan  waktu analisis  yang lebih cepat,  namun  untuk  hasil  optimum  diperlukan ketelitian yang baik. Apak, et.al. (2007) menyebutkan  metode  DPPH  memiliki  kelemahan yaitu  kurang  sensitif  untuk  mengukur  aktivitas antioksidan selain dari senyawa fenol.
Gambar 1. Struktur Kimia Senyawa 1,1-Diphenyl- 2-Picrylhydrazyl (DPPH) Sebelum dan Sesudah
Reaksi Penghambatan Radikal Bebas (Sumber: Molyneux, 2004)
Titrasi  iodometri  langsung  melibatkan larutan  kanji  sebagai  indikator  karena  warna  biru gelap  dari  kompleks  iodin  -  kanji  bertindak  sebagai suatu tes yang amat sensitif untuk iodin. Mekanisme pembentukan kompleks yang berwarna ini dinyatakan  sebagai  molekul  -  molekul  iodin  yang bertahan  di  permukaan  β  - amylose ,  yaitu  suatu konstituen dari kanji (Day & Underwood, 2002).
Tabel  2. Penentuan  -  penentuan  melalui  Titrasi Iodometri Langsung

## (Sumber : Day & Underwood, 2002)
Hanani (2015) menyatakan bahwa senyawa fenol  memiliki  inti  aromatik  sehingga  memiliki serapan  di  daerah  sinar  UV,  dan  apabila  ditambah dengan  larutan  basa  akan  terjadi  pergeseran batokrom.  Umumnya  senyawa  fenol  memiliki absorbansi pada daerah sinar UV di bawah 300 nm.
Tabel  3. Spektrum  Kelompok  Senyawa  Fenol Sederhana dan Asam Fenolat

## (Sumber : Hanani, 2015)
Beberapa  penelitian  telah  dilakukan  untuk melihat  hubungan  antara  kandungan  fenol  dengan aktivitas antioksidan. Hasil penelitian yang dilakukan oleh  Arif,  dkk.  (2014)  menunjukkan  aktivitas antioksidan  penangkapan  radikal  DPPH  memiliki hubungan  dengan  kandungan  fenolik  dan  flavonoid tanaman. Penelitian  yang dilakukan oleh Ratnayani, dkk. (2012) menunjukkan hasil total senyawa fenolat pada madu randu dan madu kelengkeng dapat dilihat bahwa adanya hubungan yang linear dengan aktivitas antiradikal  bebasnya.  Hasil  penelitian  Kusumowati dan  Sudjono  (2012)  menunjukkan  hasil  bahwa aktivitas  antiradikal  ekstrak  daun  sirih,  daun  jati belanda  dan  daun  katuk  memiliki  korelasi  positif dengan kadar fenolik totalnya, dimana semakin tinggi kadar fenolik mengakibatkan semakin besar aktivitas antiradikalnya.
Akar  penelitian  ini  dimaksudkan  untuk menentukan kadar fenol total, vitamin C dan aktivitas antioksidan  sediaan  cair  berbasis  bawang  putih dengan menggunakan metode DPPH serta korelasinya dengan menggunakan SPSS 25.

## II. METODE PENELITIAN
A. Alat
Alat yang akan digunakan dalam penelitian ini  antara  lain,  alat-alat  perebusan,  alat-alat  gelas , alumunium  foil, blender ,  cawan  uap,  kapas,  kertas saring,  lampu  spiritus,  saringan  teh, sentrifugator , spectrofotometer  UV-VIS,  stopwatch,  termomether, timbangan.

## B. Bahan
Bahan  -  bahan  yang  digunakan  dalam penelitian ini meliputi: bawang putih tunggal ( Allium sativum L.),  cuka  apel,  jahe  emprit  ( Zingiber
officinale var  Amarum),  jahe  merah( Zingiber officinale var  Rubrum),  jeruk  lemon  ( Citrus  limon [L.]  Osbeck.),  dan  madu  ( Mel  depuratum ),1,1- difenil-2-pikrilhidrazil  (DPPH),  akuades,  amonia, arsen trioksida asam asetat encer, asam klorida 1 N, asam  klorida    2  N,  asam  klorida  5  N,  asam  klorida pekat, asam galat, diklorometan, etanol 70 %, etanol 80 %, eter, besi (III) klorida 1 %, besi (III) klorida 3 %,  folin  -  ciocalteau,  gelatin  1  %,  gelatin  10  %, indikator kanji, indicator jingga metil, iodium serbuk, kalium  iodide,  metanol  50  %,  methanol  80  %, natrium borohidrida, natrium hidroksida 1 N, natrium hidrokarbonat,  natrium  karbonat  15  %,  natrium klorida  10  %,  pH  Universal,  Pereaksi  Benedict, Pereaksi Libermann - Burchard, timbal - asetat 25 %, Pereaksi  Mayer,  Pereaksi  Bouchardat,  Pereaksi Dragendorff, serbuk Magnesium (Mg),  serbuk seng (Zn).

## C. Prosedur Kerja
Penelitian  ini  diawali  dengan  preparasi sampel,  pengolahan  bahan,  penentuan  bobot  jenis sediaan cair berbasis bawang putih, uji fitokimia, uji aktivitas  antioksidan  menggunakan  metode  DPPH, analisis kuantitatif fenol total dan vitamin C.
1. Preparasi Sampel
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah  Bawang  putih  tunggal  ( Allium  sativum L.), cuka  apel,  jahe  emprit  ( Zingiber  officinale var Amarum),  jahe  merah  ( Zingiber  officinale var Rubrum),  jeruk  lemon  ( Citrus  limon [L.]  Osbeck.), dan madu ( Mel depuratum ) yang diperoleh dari pasar tradisional dan toko herbal di daerah Kota Bogor.
Bahan  -  bahan  yang  telah  dikumpulkan diolah sesuai formula yang digunakan secara empiris sebagai  antioksidan  oleh  masyarakat  dengan beberapa modifikasi.
Tabel 4. Formula Ramuan Tradisional (Empiris) Bahan yang diperlukan Formula Bawang putih tunggal 250 g Jahe 250 g Lemon 50 mL Cuka apel 125 mL Madu 150 mL Air ± 1 L 2. Penentuan  Bobot  Jenis  Sediaan  Cair  berbasis Bawang Putih Menurut  Martin, et  al .,  (1993),  cara penentuan  bobot  jenis  suatu  bahan  dengan menggunakanalat piknometer yaitu:
a . Piknometer  dan  tutupnya  dibersihkan  dengan akuades  dan  dibilas  dengan  alkohol  70  %. Kemudian  dikeringkan  dalam  oven  pada  suhu
100 o C  selama    60 menit, lalu didinginkan pada suhu kamar.
b . Setelah  itu,  piknometer  dan  tutupnya  ditimbang bobotnya dalam keadaan kosong pada timbangan analitik, hasilnya dicatat. Penimbangan dilakukan secara triplo.
c . Selanjutnya sampel (sediaan cair berbasis bawang putih)  dimasukkan  ke  dalam  piknometer  secara penuh sesuai volume piknometer yang digunakan kemudian  ditutup  dan  dibersihkan  dengan  kain bersih/tisu.
d . Setelah  itu,  piknometer  dan  tutupnya  yang  telah berisi sampel ditimbang bobotnya pada timbangan analitik, hasilnya dicatat.
Penimbangan dilakukan secara triplo.
e . Dihitung  bobot  jenis  sampel  dengan  persamaan berikut ini :
3. Uji Fitokimia Bahan
a. Uji Alkaloida Sampel ditimbang sebanyak ± 1 g dikocok dengan 20 mL metanol dan 3 mL amonia, kemudian dipanaskan di atas penangas air pada suhu 60 o C sambil dikocok selama 15 menit, selanjutnya didinginkan dan disaring. Filtrat yang diperoleh dipekatkan hingga lebih kurang 3 mL, kemudian ditambah 5 mL asam klorida 1 N dan digunakan untuk percobaan berikut:
1. Filtrat  dipipet  1  mL  dan  disimpan  di  atas  kaca arloji,  lalu  ditambahkan  2  tetes  pereaksi  Mayer. Hasil  positif  ditunjukkan  dengan  terbentuknya endapan berwarna putih.
2. Filtrat  dipipet  1  mL  dan  disimpan  di  atas  kaca arloji,  lalu  ditambahkan  2  tetes  pereaksi Bouchardat . Hasil  positif  ditunjukkan  dengan terbentuknya  endapan  berwarna  cokelat  sampai hitam.
3. Filtrat  dipipet  1  mL  dan  disimpan  di  atas  kaca arloji,  lalu  ditambahkan  2  tetes  pereaksi Dragendorff . Hasil  positif  ditunjukkan  dengan terbentuknya endapan berwarna jingga cokelat.
Uji Alkaloid bernilai positif jika sekurang - kurangnya  dua  dari  percobaan  di  atas  menunjukkan hasil yang positif (Hanani, 2015).
b. Uji Flavonoid
Menurut Hanani (2015), uji flavonoid dapat dilakukan dengan beberapa macam pereaksi flavonoid berikut ini:
1. Sampel  sebanyak  ±  2  g  ditimbang  dengan seksama  dikocok  dengan  30  mL  diklormetan selama  15  menit,  kemudian  disaring.  Filtrat diuapkan  hingga  kering  dan  residu  dilarutkan
dalam  1  -  2  mL  metanol  50  %,  jika  perlu dilakukan  dengan  pemanasan  di  atas  penangas air.  Filtrat  ditambah  sedikit  serbuk  magnesium (Mg)  dan  5  -  6  tetes  asam  klorida  5  M,  lalu dipanaskan  sebentar  di  atas  penangas  air.  Hasil positif  ditunjukkan  dengan  terbentuknya  warna merah hingga merah lembayung yang menandakan adanya senyawa flavanon, flavonol, flavanonol  dan  dihidroflavonol.  Uji  ini  disebut Uji Shinoda.
2. Filtrat  dibuat  sama  pada  point  a,  kemudian ditambah sedikit serbuk seng (Zn) dan 5 - 6 tetes asam klorida 5 M, lalu dipanaskan sebentar di atas penangas  air.  Hasil  positif  ditunjukkan  dengan terbentuknya  warna  merah  hingga  merah lembayung  yang  menandakan  adanya  senyawa flavanonol  dan  dihidroflavonol,  sedangkan senyawa  flavanon  dan  flavonoid  tidak  berwarna atau merah muda lemah.
3. Larutan  uji  sebanyak  1  mL  ditambah  dengan larutan  besi  (III)  klorida  sama  banyak.  Warna hijau biru yang timbul disebabkan oleh flavonoid yang memiliki gugus hidroksil bebas pada cincin A atau B.
4. Larutan  uji  diuapkan  dan  dilarutkan  dalam metanol  1  mL,  kemudian  ditambahkan  10  mg natrium borohidrida dan 2 tetes asam klorida 2 N. Setelah  1  menit,  larutan  uji  ditambah  beberapa tetes asam klorida pekat. Warna lembayung yang timbul menunjukkan adanya senyawa flavonon.
c. Uji Polifenol Sampel  sejumlah  ±  2  g  ditimbang  dengan seksama  dan  dimasukkan  ke  dalam  erlenmeyer ditambah  10  mL  HCl  2  M,  dipanaskan  di  atas penangas  air  selama  30  menit.  Setelah  disaring, kemudian filtrat dimasukkan ke dalam corong pisah. Ampas disaring lagi dengan metoda dan pelarut yang sama. Filtrat dicampur, ditambah dengan 20 mL eter, dikocok  dan  dibiarkan  kedua  larutan  terpisah. Larutan eter dipisahkan, diuapkan hingga sisa sekitar 5 mL. Larutan uji sebanyak 1 mL ditambah pereaksi folin  -  ciocalteu,  dipanaskan  sebentar  di  atas penangas  air.  Larutan  mengandung  senyawa polifenol jika terbentuk warna biru (Hanani, 2015). d. Uji Saponin Hanani  (2015)  menyatakan  bahwa  uji saponin dapat dilakukan sebagai berikut:
a. Sampel  ditimbang  sebanyak  ±  1  g  direfluks dengan 20  mL etanol 70 % di atas penangas air selama  10  menit,  lalu  disaring  dan  diuapkan hingga kental. Filtrat 1 mL ditambah pereaksi LB (Libermann  -  Burchard,  berupa  campuran  asam asetat  anhidrida  dengan  asam  sulfat  pekat). Warna  hijau  hingga  biru  menunjukkan  adanya senyawa saponin.
b. Uji  Busa,  dilakukan  dengan  cara  sampel ditimbang  sebanyak  ±  1  g  dicampur  dengan akuades sebanyak 10 mL dan dipanaskan di atas penangas  air  selama  10  menit.  Setelah  dingin, larutan  dikocok  kuat  -  kuat  selama  10  detik sehingga akan terbentuk buih yang stabil (selama tidak  kurang  dari  10  menit).  Uji  saponin menunjukkan  hasil positif jika buih tidak  hilang dengan penambahan 1 tetes asam klorida 2 N.
e. Uji Tanin Hanani (2015) menyatakan, sampel ditimbang sebanyak ± 2 g diekstraksi dengan etanol 80 % (30 mL), menggunakan pendingin tegak selama 15 menit, kemudian disaring. Filtrat  yang diperoleh diuapkan di atas penangas air. Pada sisa penguapan ditambahkan  akuades  panas,  lalu  diaduk.  Setelah dingin,  larutan  disentrifugasi.  Cairan  di  atasnya dipisahkan  dengan  cara  dekantasi,  dan  larutan digunakan  sebagai  larutan  uji.  Terhadap  larutan  uji dilakukan percobaan sebagai berikut :
a. Ditambah  larutan  10  %  gelatin,  akan  timbul endapan warna putih.
b. Ditambah  NaCl  -  gelatin  (larutan  1  %  gelatin dalam  larutan  10  %  NaCl  dengan  perbandingan 1:1).  Timbul  endapan  dan  dibandingkan  dengan hasil pada butir a.
c. Ditambah  larutan  3  %  besi  (III)  klorida,  terjadi warna hijau biru hingga kehitaman.
d. pH  larutan  uji  dibuat  sekitar  3  -  6,  jika  perlu ditambahkan  NaHCO 3 atau  asam  asetat  encer. Larutan tersebut kemudian ditambahkan beberapa tetes larutan timbal (II) asetat 25 % atau larutan  Striknin  nitrat  sehingga  dihasilkan endapan.
4. Uji  Aktivitas  Antioksidan  Metode  DPPH (1,1- Difenil-2-Pikrilhidrazil) (Molyneux, 2004)
Ditimbang  seksama  setara  100  mg  sampel sediaan berbasis bawang putih dimasukkan ke dalam labu  ukur  100  mL,  kemudian  dilarutkan  dengan metanol  sampai  tanda  batas  (1000  ppm).  Dipipet  1 mL  larutan  sampel  sediaan  berbasis  bawang  putih 1000 ppm, kemudian dimasukkan ke dalam labu ukur 10 mL dan dilarutkan dengan metanol sampai tanda batas  (100  ppm).  Larutan  uji  dibuat  deret  1  ppm,  2 ppm, 3 ppm, 4 ppm, 5 ppm dan 6 ppm dengan cara diambil masing-masing 0,1 mL; 0,2 mL; 0,3 mL; 0,4 mL; 0,5 mL; 0,6 mL dan dimasukkan ke dalam labu ukur  10  mL,  kemudian  diencerkan  dengan  metanol sampai tanda batas. Ditambahkan 1 ml larutan DPPH 1  mM  lalu  dihomogenkan.  Larutan  uji  didiamkan selama  waktu  optimum  pada  suhu  kamar.  Diukur absorbannya  pada  panjang  gelombang  maksimum (sebelumnya  labu  ukur  sudah  dilapisi  alumunium foil).  Persamaan  regresi  yang  diperoleh  dari  data konsentrasi  dengan  absorban  sehingga  didapat  nilai koefisien korelasi (r).
5. Analisis  Kuantitatif  Kadar  Fenol  Total  (Hanani, 2015)
Sampel  setara  2  g  ditimbang  dengan seksama  dan  dimasukkan  ke  dalam  erlenmeyer ditambah  10  mL  HCl  2  M,  dipanaskan  di  atas penangas  air  selama  30  menit.  Setelah  disaring, kemudian filtrat dimasukkan ke dalam corong pisah. Filtrat  ditambah  dengan  20  mL  eter,  dikocok  dan dibiarkan  kedua  larutan  terpisah.  Larutan  eter dipisahkan,  diuapkan  hingga  sisa  sekitar  5  mL  dan dilarutkan dalam akuades hingga tanda batas labu 10 mL. Kemudian larutan uji dipipet sebanyak 1 mL dan dimasukkan  dalam  labu  takar  10  mL,  ditambah dengan  500  µL  pereaksi  folin-ciocalteau  dan  2  mL natrium  karbonat  (Na 2 CO 3 )  15%  b/v,  dicampurkan secara  perlahan.  Selanjutnya  ditambahkan  akuades hingga  tanda  batas.  Larutan  dipindahkan  ke  dalam tabung  reaksi  dan  ditutup  dengan  alumunium  foil, dipanaskan  di  atas  penangas  air  pada  suhu  50 o C selama  5  menit.  Didinginkan  dan  diinkubasi  pada waktu  inkubasi  optimum,  absorban  diukur  pada panjang  gelombang  maksimum  (λ max ).  Hasil pengukuran  ini  dinyatakan  sebagai  berat  setara dengan asam galat tiap berat sediaan berbasis bawang putih.
6. Analisis  Kuantitatif  Kadar  Vitamin  C  (Filbert, et.al. , 2014) Ditimbang  10  gram  sediaan  berbasis bawang  putih  lalu  dimasukan  dalam  labu  takar  50 mL,  ditambahkan  akuades  hingga  tanda  batas. Disaring dengan corong  menggunakan kertas saring untuk  memisahkan  filtratnya.  Kemudian  diambil  5 mL  filtrat  dengan  menggunakan  pipet  volume, dimasukan ke dalam erlenmeyer, ditambahkan 2 tetes larutan amilum dan 20 mL akuades. Sampel dititrasi dengan  larutan  iodium  0,1  N  dengan  menggunakan indikator  kanji  hingga  terjadi  perubahan  warna menjadi  biru  pekat.  Kemudian  dihitung  kadarnya dengan menggunakan persamaan berikut ini:
Dimana  1  mL  iodium  0,1  N  setara  dengan 8,806  mg  C 6 H 8 O 6 (Depkes.  Republik  Indonesia, 1979).

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN
Karakteristik  Sediaan  Cair  Berbasis  Bawang

## Putih
Sediaan  cair  berbasis  bawang  putih  dibuat berdasarkan  formula  empiris  dengan  berbagai modifikasi  agar  diperoleh  hasil  sediaan  yang  baik. Sediaan  cair  ini  memiliki  aroma  dan  rasa  khas  kuat yang berasal dari bawang putih tunggal, sediaan cair yang mengandung jahe emprit memiliki warna coklat
muda  sedangkan  yang  mengandung  jahe  merah memiliki warna sediaan coklat kemerah - merahan.
Gambar 2. Sediaan Cair Berbasis Bawang Putih Sediaan  cair  berbasis  bawang  putih selanjutnya  dilakukan  penentuan  bobot  jenis  untuk mengetahui  kemurnian  sediaan  dan uji  fitokimia untuk  mengetahui  senyawa  yang  terkandung  dalam sampel sediaan berbasis bawang putih sehingga dapat dilakukan  uji  aktivitas  antioksidan  serta  analisis kadar  fenol  total  dan  vitamin  C  dalam  sediaan  cair berbasis bawang putih. Pada penelitian ini penentuan bobot jenis menggunakan piknometer 25 mL sebagai alat  ukur  dan  diperoleh  hasil  bobot  jenis  sebesar 1,000532 g/mL untuk sediaan dengan komposisi jahe emprit  dan  1,000315  g/mL  untuk  jahe  merah.  Hasil ini menunjukkan bahwa kedua sediaan cair berbasis bawang putih memiliki bobot jenis yang lebih tinggi dibandingkan dengan air (bj air = 1 g/mL).

## Hasil  Uji  Fitokimia  Sediaan  Cair  Berbasis Bawang Putih
Uji  fitokimia  dilakukan  untuk  mengetahui golongan  senyawa  yang  terkandung  dalam  suatu tanaman atau sediaan. Berdasarkan hasil uji fitokimia diketahui  kedua  sediaan  cair  berbasis  bawang  putih mengandung  sejumlah  senyawa,  yaitu  alkaloid, fenolik, flavonoid, dan glikosida.
Tabel  5. Hasil  Uji  Fitokimia  Sediaan  Cair  Berbasis Bawang Putih
Keterangan: (+) = Positif mengandung golongan senyawa Keterangan: (+) = Positif mengandung golongan senyawa
Hasil  Pengujian  Aktivitas  Antioksidan  Metode DPPH
Metode  radikal  1,1-Difenil-2-Pikrilhidrazil (α,α-Difenil-β-Pikrilhidrazil)  (DPPH)  merupakan suatu metode yang telah digunakan secara luas untuk mengetahui aktivitas antioksidan dengan mekanisme kerja  uji  bioaktivitas  penangkapan  radikal  bebas. Aktivitas  radikal  bebas  ini  yaitu  dengan  cara mendelokasi elektron bebas pada suatu molekul dan menyebabkan molekul tersebut tidak reaktif sebagaimana radikal bebas yang lain. Suatu senyawa dapat  dikatakan  memiliki  aktivitas  antioksidan apabila senyawa tersebut mampu mendonorkan atom hidrogennya untuk berikatan dengan DPPH membentuk  DPPH  tereduksi  yang  ditandai  dengan semakin  hilangnya  warna  ungu  (Molyneux,  2004). Penentuan  aktivitas  antioksidan  dinyatakan  dalam IC 50 (µg/mL)  sebagai  kapasitas  antioksidan.  Hasil penentuan  aktivitas  antioksidan  pada  sediaan  cair berbasis bawang putih dibandingkan dengan standar asam  galat  dengan  menggunakan  metode  DPPH ditunjukkan dalam Tabel 6.
Tabel 6. Aktivitas Antioksidan Metode DPPH Sampel Aktivitas Antioksidan (IC 50 (µg/mL)) Sediaan Cair Berbasis Bawang Putih (Jahe Emprit) 3,310 Sediaan Cair Berbasis Bawang Putih (Jahe Merah) 2,075 Standar Asam Galat 1,878 Berdasarkan data tersebut diketahui perbandingan  nilai  aktivitas  antioksidan  antara standar  asam  galat  dan  kedua  sediaan  cair  berbasis bawang  putih,  dimana  kedua  sediaan  cair  berbasis bawang  putih  memiliki  nilai  IC 50 yang  lebih  besar daripada  standar  asam  galat.  Sedangkan  di  antara kedua sediaan cair berbasis bawang putih, kandungan jahe  merah  memiliki  nilai  IC 50 yang  lebih  baik dibandingkan  dengan  sediaan  dengan  kandungan jahe emprit. Meskipun demikian aktivitas antioksidan kedua  sediaan  cair  berbasis  bawang  putih  termasuk ke  dalam  taraf  yang  sangat  baik,  hal  ini  disebabkan dari  IC 50 yang  nilainya  <  50.  Perbedaan  signifikan nilai  aktivitas  ini  dikarenakan  asam  galat  memiliki kandungan  senyawa  fenol  asam  organik  yang sifatnya  murni.  Di  samping  itu,  Apak, et.al. (2007) menyebutkan DPPH kurang sensitif untuk mengukur aktivitas  antioksidan  selain  dari  senyawa  fenol, sehingga  kapasitas  antioksidan  metode  DPPH  ini
akan  memberikan  nilai  positif  untuk  uji  aktifitas senyawa fenol.

## Hasil Pengujian Kadar Fenol Total
Senyawa fenol diketahui memiliki aktivitas antioksidan.  Senyawa  fenol  merupakan  metabolit sekunder yang memainkan peranan dalam pemeliharaan  tubuh  manusia.  Adanya  kandungan kimia  pada  tumbuhan  seperti  fenol,  flavonoid  dan tannin mengindikasikan kemungkinan adanya aktivitas  antioksidan  yang  mampu  membantu mencegah  terjadinya  penyakit  melalui  aktivitas penangkalan radikal bebas (Meenaksi, et.al. , 2012). Pengujian kandungan senyawa fenol merupakan  dasar  dilakukannya  pengujian  aktivitas antioksidan, karena diketahui bahwa senyawa fenolat berperan  dalam  mencegah  terjadinya  peristiwa oksidasi. Kadar fenol total sediaan berbasis bawang putih  pada  penelitian  ini  ditentukan  dengan menggunakan prinsip follin-ciocalteu yang didasarkan  pada  reaksi  oksidasi  reduksi  dimana terbentuknya  senyawa  kompleks  berwarna  biru. Pereaksi ini mengoksidasi fenolat (garam alkali) atau gugus  fenolik  -  hidroksi  mereduksi  asam  heteropoli (fosofomolibdat - fosfotungstat) yang terdapat dalam pereaksi  follin-ciocalteu  menjadi  suatu  kompleks molibdenum  -  tungsten.  Senyawa  fenolik  bereaksi dengan reagen follin - ciocalteu hanya dalam suasana basa  agar  terjadi  disosiasi  proton  pada  senyawa fenolik  menjadi  ion  fenolat.  Agar  tercipta  kondisi basa  digunakan  Na 2 CO 3 15  %  b/v.  Semakin  besar konsentrasi  senyawa  fenolik  maka  semakin  banyak ion  fenolat  yang  mereduksi  asam  heteropoli (fosofomolibdat  -  fosfotungstat)  menjadi  kompleks molibdenum  -  tungsten  sehingga  warna  biru  yang dihasilkan semakin pekat (Apsari dan Susanti, 2011).
Penentuan  kadar  fenol  total  sediaan  cair berbasis  bawang  putih  dihitung  berdasarkan  nilai absorbansi yang diperoleh dari masing - masing deret yang telah dibuat berdasarkan jumlah sampel uji yang diambil.  Nilai  absorbansi  yang  diperoleh  kemudian dimasukkan  ke  dalam  persamaan  regresi  linear standar  asam  galat  sebagai  nilai  (y)  untuk memperoleh  nilai  konsentrasi  fenolik  (x).  Kadar fenol total dinyatakan sebagai mgGAE/g sediaan cair berbasis  bawang  putih.  Kadar  fenol  total  yang dihasilkan  oleh  sediaan  cair  berbasis  bawang  putih dengan ulangan sebanyak tiga kali dapat dilihat pada Tabel  7.  Dimana  tinggi  rendahnya  kandungan  fenol total  menunjukkan  aktivitas  antioksidan  dalam sediaan cair berbasis bawang putih tersebut.
Tabel  7. Kadar  Fenol  Total  Sediaan  Cair  Berbasis Bawang Putih

## Hasil Pengujian Kadar Vitamin C
Sebelum dilakukan penetapan kadar vitamin C sampel  kedua sediaan cair  berbasis bawang putih dilakukan  uji  kualitatif  terlebih  dahulu  untuk mengetahui ada atau tidaknya kandungan vitamin C di  dalam  sediaan  cair  berbasis  bawang  putih.  Uji kualitatif  pada  penelitian  ini  menggunakan  pereaksi Benedict.  Setelah  dipanaskan  di  atas  lampu  spiritus selama  kurang  lebih  1  menit,  sediaan  cair  berbasis bawang  putih  menunjukkan  adanya  endapan berwarna hijau kekuningan seperti yang terlihat pada Gambar 3. Hal ini membuktikan bahwa sediaan cair berbasis bawang putih  memiliki  kandungan  vitamin C.
Gambar 3. Hasil Uji Kualitatif Vitamin C Sediaan Cair Berbasis Bawang Putih ( A) Jahe Merah (B) Jahe Emprit Berdasarkan  hasil  uji  kualiatif  yang ditunjukkan  oleh  Gambar  3  diketahui  adanya perubahan  warna  sebelum  dan  setelah  pemanasan terhadap  kedua  sediaan  cair  berbasis  bawang  putih. Sebelum  diberi  perlakuan  kedua  sediaan  berbasis bawang  putih  yang  direaksikan  dengan  pereaksi Benedict  berwarna  biru,  sedangkan  setelah  diberi perlakuan campuran larutan berubah  menjadi warna hijau  kekuningan  dengan  membentuk  endapan. Pereaksi  Benedict  akan  bereaksi  dengan  gugus aldehid,  kecuali  aldehid  dalam  gugus  aromatik  dan alpha  hidroksi  keton.  Sehingga  dapat  disimpulkan bahwa  kedua  sediaan  cair  berbasis  bawang  putih benar mengandung senyawa vitamin C.
Hasil  penetapan  kadar  vitamin  C  yang terkandung  dalam  kedua  sediaan  berbasis  bawang putih adalah 6,372 % untuk jahe merah dan 4,338 % untuk  jahe  emprit.  Rauf  (2015)  menyatakan  bahwa komponen utama kanji yaitu amilosa dan amilopektin.  Dimana  amilosa  memiliki  rantai  lurus dan  memberikan  warna  biru  jika  bereaksi  dengan iodium.  Sedangkan  amilopektin  memiliki  rantai bercabang dan memberikan warna merah violet saat bereaksi  dengan  iodium.  Secara  kimia,  amilopektin memiliki  lebih  banyak  gugus  hidroksil  yang  reaktif dibandingkan  dengan  amilosa.  Gugus  hidroksil merupakan  penentu  sifat  hidrofilik  dari  suatu molekul,  sehingga  amiloektin  memiliki  kelarutan dalam  air  yang  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan amilosa.  Mekanisme  reaksi  indikator  kanji  adalah sebagai berikut:
Vitamin C mengalami oksidasi dengan melepas dua atom hidrogen menjadi asam dehidroaskorbat untuk menstabilkan komponen radikal seperti terlihat pada reaksi di bawah ini:
(Sumber: Rauf, 2015)
Gambar 4. Oksidasi Asam askorbat menjadi Asam dehidroaskorbat
Iodin merupakan agensia pengoksidasi lemah, sehingga vitamin C (C 6 H 8 O 6 ) segera teroksidasi menjadi asam dehidroaskorbat (C 6 H 6 O 6 ). Sedangkan iodin tereduksi menjadi iodida. Kelebihan iodium yang bereaksi dengan indikator kanji menyebabkan terbentuknya kompleks warna biru.

## Hasil Analisis Data
Data dianalisis menggunakan uji asosiasi yaitu uji korelasi.  Uji  korelasi  digunakan  untuk  mengetahui hubungan antara dua variabel dengan signifikan. Pada penelitian  ini  data  yang  tersaji  dalam  bentuk  interval atau rasio  yang  mempunyai beberapa varian sehingga menggunakan uji korelasi bivariate sebagai metode uji yang  terdapat  pada  analisis  data  SPSS  25.  Hasil  uji korelasi antara kadar fenol total dan vitamin C dengan aktivitas antioksidan ditunjukkan pada    Tabel 8.
Tabel 8. Uji Korelasi Kadar Fenol Total dan Vitamin C dengan Aktivitas Antioksidan
Berdasarkan  data  pada  Tabel  8  diperoleh nilai pearson correlation pada  masing  -  masing variabel  dimana  nilai  ini  menunjukkan  nilai  r (korelasi).  Hasil  uji  korelasi  aktivitas  antioksidan dengan kadar fenol total yaitu 0,999 pada probabilitas 0.05  %  yang  menunjukkan  bahwa  korelasi  antar variabel tersebut memiliki korelasi yang sangat kuat (0,91  -  0,99).  Pada  output  korelasi  diketahui  nilai probabilitas  kadar  fenol  total  terhadap  aktivitas antioksidan lebih kecil dari probabilitasnya (0,023 < 0,025),  maka  dapat  disimpulkam  bahwa  varibel tersebut  berkorelasi  secara  signifikan  dimana aktivitas antioksidan dapat disebabkan oleh kandungan  total  fenol  dari  kedua  sediaan  cair berbasis  bawang  putih.  Sedangkan  untuk  kadar vitamin  C  terhadap  aktivitas  antioksidan  memiliki nilai pearson correlation 0,968  dengan  nilai signifikan  0,161  pada  probabilitas  0,05  %  (0,025) menunjukkan adanya hubungan korelasi yang sangat kuat (0,91 - 0,99). Akan tetapi karena nilai signifikan lebih  besar  daripada  probabilitas  0,05  %  (0,025), maka  hasil  ini  menunjukkan  korelasi  antara  kadar vitamin  C  dengan  aktivitas  antioksidan  tidak signifikan.

## IV. KESIMPULAN
a. Hasil  uji  kadar  fenol  total  sediaan  cair  berbasis bawang  putih  yaitu  sebesar  80,296  mgGAE/g sediaan untuk jahe emprit dan 159,164 mgGAE/g sediaan  untuk  jahe  merah.  Hasil  uji  kadar vitamin C sediaan cair berbasis bawang putih nilai rata - rata pada 3 kali ulangan yaitu sebesar 4,338 % pada jahe emprit dan 6,372 % pada jahe merah. Nilai  rata  -  rata  aktivitas  antioksidan  (IC 50 )  dari sediaan berbasis bawang putih dengan menggunakan metode DPPH adalah 3,310 µg/mL untuk jahe emprit dan   2,075 µg/mL untuk jahe merah.
b. Terdapat korelasi yang sangat kuat dan signifikan antara kadar fenol total sediaan berbasis bawang
putih  dengan  aktivitas  antioksidan  (metode DPPH)  dengan  nilai  koefisien  korelasi  (r 2 ) 0,999*.  Hanya  menunjukkan  adanya  korelasi yang  sangat  kuat  tetapi  tidak  signifikan  antara kadar  vitamin  C  kedua  sediaan  cair  berbasis bawang  putih  dengan  aktivitas  antioksidan (metode  DPPH)  dengan  nilai  koefisien  korelasi (r 2 ) 0,968.

## DAFTAR PUSTAKA
Antolovich,  M.,  P.D.  Prenzler,  E.  Patsalides,  S. McDonald and K. Robards .2001. Methods for Testing Antioxidant Activity. Jurnal The Royal Society of Chemistry 127 : 183 - 198. Apak,  R.,  Guclu,  K.,  Demirata  B.,  Ozyurek,  M., Celik, S.E., Bektasoglu, B., Berker, K.I., and Birsen, D. 2007. Comparative Evaluation of Various  Total  Antioxidant  Capacity  Assay Applied to Phenolic Coumpounds with The CUPRAC  Assay.  Molecules  12  :  1496  - 1547.
Apsari,  P.D.  dan  Susanti,  H . 2011.Perbandingan Kadar  Fenolik  Total  Ekstrak  Metanol Kelopak  Merah  dan  Ungu  Bungan  Rosella ( Hibiscus sabdariffa, Linn.) secara
Spektrofotometri . ISBN  978-979-18458-4-
7.
Arif,  D.Y.,  C.  Jose  dan  H.Y.  Teruna  .2014.  Total
Fenolik, Flavonoid serta Aktivitas Antioksidan Ekstrak n-heksan, Diklorometan  dan  Metanol  Amarantus spinosus  L.  EM5  -  Bawang  Putih.  JOM FMIPA. Vol. 1 (2) : 359 - 369. Depkes.RI.1979. Farmakope  Indonesia.  Edisi  III. Jakarta  :  Direktorat  Jendral  Pengawasan Obat Dan Makanan. Departemen Kesehatan Republik Indonesia.
Filbert, et.al .2014. Penentuan Aktivitas  Antioksidan Berdasarkan Nilai IC 50 Ekstrak Metanol dan Fraksi  Hasil  Partisinya  pada  Kulit  Biji Pinang  Yaki  ( Areca  vestiaria Giseke). Jurnal MIPA UNSRAT Online. Vol. 3  (2) : 149-154.
Hamid,  A.A.,  O.O.  Aiyelaagbe,  L.A.  Usman,  O.M. Ameen  and  A.  Lawal  .2010. Antioxidants: Its Medicinal and Pharmacological
Applications. African  Journal  of  Pure  and Applied  Chemistry .  Vol.  4(8),  pp.  142- 151ISSN 1996 – 0840.
Hanani . 2015. Analisis  Fitokimia. Jakarta  :  EGC. ISBN 978-979-044-606-9.
Harmita  .2006. Analisis  Fitokimia. Jakarta  :  Cipta Kreasi  Bersama,  hal  15-20.  ISBN  979- 96846-9-2.
Hidayat, S. dan Rodame M.N. 2015. Kitab Tumbuhan Obat. Jakarta:  AgriFlo  (Penebar  Swadaya Grup), hal 51.
Hidayat, S. dan Rodame M.N. 2015. Kitab Tumbuhan Obat. Jakarta:  AgriFlo  (Penebar  Swadaya Grup), hal 147-148.
Kusumowati,  I.T.D.  dan  Sudjono,  T.A  .2012.
Korelasi  Kandungan  Fenolik  dan  Aktivitas
Antiradikal  Ekstrak  Etanol  Daun  Empat
Tanaman  Indonesia  ( Piper  betle,  Sauropus androgynus, Averrhoa bilimbi dan Guazuma ulmifolia ). Pharmacon. Vol.13 (1) : 1 - 5. Martin,  A.,  S.  James  dan  C.  Arthur  .1993. Farmasi Fisika  :  Dasar  -  dasar  Kimia  Fisik  dalam
Ilmu Farmaseutik.
Edisi
Ketiga, (Diterjemahkan  oleh  Yoshita).  Depok: Universitas  Indonesia  Press.  ISBN:  979- 456-117-7. Meenakshi,  S.,  Umayaparvath,  S.,  Arumugam,  M., and  Balasubramanian,  T.2012.  In  vitro antioxidant properties and FTIR analysis of two  seeweeds  of  Gulf  of  Mannar. Asian Pacific  Journal  of  Tropical  Biomedicine. Vol. 2 : 66 - 70. Molyneux,  P  .2004.  The  Use  of  The  Stable  Free
Radical Diphenylpicrylhydrazyl (DPPH) for Estimating
Antioxidant
Activity.
Songklanakarin J. Sci. Technol . 26 (2): 211 - 219 Musarofah .2015. Tumbuhan Antioksidan. Bandung : Remaja  Rosdakarya.  ISBN  978-979-692- 588-9. Nurheti, Y .2014. Khasiat Madu untuk Kesehatan dan
Kecantikan. Jakarta : ANDI. ISBN 978-979- 29-4688-8. Ratnayani,  K.,  A.A.I.A.M.  Laksmiwati  dan  N.P.I. Septian  P  .2012.  Kadar  Total  Senyawa Fenolat  pada  Madu  Randu  dan  Madu Kelengkeng  serta  Uji  Aktivitas  Antiradikal Bebas  dengan  Metode  DPPH  (Difenil Pikrilhidrazil). Jurnal Kimia. Vol. 6 (2) : 163 - 168. Rauf, Rusdin.2015. Kimia Pangan. Yogyakarta : Andi Offset. ISBN: 978-979-29-5203-2 Riadi,  L.  2007. Teknologi  Fermentasi. Yogyakarta  : Graha Ilmu. ISBN: 978-979-756-233-5 Sandhiutami,  N.M.D.,  L.  Rahayu,  T.  Oktaviani  dan Lili  Y.S.2014. Uji  aktivitas  Antioksidan Rebusan Daun Sambang Getih
(Hemigraphis bicolor Boerl .) dan Sambang Solok  (Aerva  sanguinolenta (L.)  Blume ) Secara  In  Vitro. Jakarta  :  Universitas Pancasila. Setyanigrum, Hesti Dwi dan Cahyo Saparinto. 2014. Jahe . Jakarta: Penebar Swadaya, hal 13 – 25.
Tim Lintas Media. 2014. Jombang : Lintas Media. Zu, Y., H.Yu, L.Liang, Y.Fu, T.Efferth, X.Li, N.Wu.
(2010). Activities  Of  Ten    Essential  Oil Towards Propionibacterium acnes And PC- 3,  A-549  And  MCF-7  Cancer  Cells, Molecules 15. ISSN 1420-3049.