## PERBANDINGAN METODE EKSTRAKSI MASERASI DAN SOKLETASI TERHADAP KADAR FLAVONOID TOTAL EKSTRAK ETANOL DAUN KERSEN (Muntingia calabura)
Anita Dwi Puspitasari 1) ,  Lean Syam Proyogo 2)
1) Bagian Kimia Fakultas Farmasi Universitas Wahid Hasyim Semarang
2 ) Program studi S1 Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Wahid Hasyim Semarang

## INTISARI
Telah  dilakukan  penelitian  untuk  mengetahui  pengaruh  metode  ekstraksi  terhadap  kadar flavonoid total ekstrak etanol daun kersen ( Muntingia calabura ). Ekstraksi daun kersen dilakukan dengan metode maserasi dan sokletasi. Penetapan kadar flavonoid total dilakukan dengan metode spektrofotometri UV-Visibel. Metode ini dapat digunakan untuk penentuan kadar flavonoid total yang dihitung sebagai kuersetin dengan persamaan regresi  y = 0,0560x+0,1198, koefisien korelasi r =  0,9989,  simpangan  baku 0,00415,  batas  deteksi  1,24375  µg/mL  dan  batas  kuantifikasi  4,145 µg/mL.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  kadar  flavonoid  total  dalam  ekstrak  etanol  daun kersen  dengan  metode  maserasi  adalah  0,187947%  b/b  dan  metode  sokletasi  adalah  0,215835% b/b.
Kata kunci :  daun kersen, flavonoid total, maserasi, sokletasi

## ABSTRACT
This  research  to  determine  the  effect  of  extraction  method  on  total  flavonoids  of  ethanolic extract  of  cherry  leaves.  Cherry  leaves  extraction  is  done  by  the  method  of  maceration  and soxhletasi. Total flavonoid were evaluated using spectrophotometry UV-Visible. This method can be  used  for  the  determination  of  total  flavonoid  quercetin  which  is  calculated  as  the  regression equation  y  =  0,0560x  +  0.1198,  the  correlation  coefficient  r  =  0.9989,  0.00415  standard deviation,  the detection limit  of  1.24375  mg /  mL and the  limit  quantification  of  4.145  mg /  mL. The  results  showed  that  levels  of  total  flavonoids  in  ethanol  extract  of  leaves  of  cherry  with maceration method is 0.187947% w / w and methods soxhletation is 0.215835% w / w. Keywords: leaves of cherry, total flavonoids, maceration, soxhletasi

## PENDAHULUAN
Salah  satu  tanaman  yang  dapat dimanfaatkan  sebagai  tanaman  obat  adalah daun  kersen  ( Muntingia  calabura ).  Daun kersen  berkhasiat  sebagai  obat  batuk  dan peluruh  dahak.  Chen et  al (2007)  dan
Zakaria et al  (2011)  melaporkan  bahwa kersen yang mengandung flavonoid mempunyai khasiat hipotensi, antinosiseptik, antioksidan,  antiproliferatif  dan  antimikroba melalui isolasi staphylococcus.
Kersen  ( Muntingia  calabura )  banyak tumbuh  di  pinggir  jalan,  tumbuh  di  tengah retakan  rumah,  di  tepi  saluran  pembuangan air dan tempat-tempat yang kurang kondusif untuk  hidup  karena  kersen  mempunyai kemampuan  beradaptasi  yang  baik.  Secara
empiris,  daun  kersen  dimanfaatkan  oleh masyarakat sebagai obat antidiabetes.
Penelitian mengenai kandungan kimia daun  kersen  telah  banyak  dilakukan  dan senyawa yang paling banyak diisolasi adalah flavonoid.  Flavonoid  dalam  daun  kersen memiliki potensi sebagai antioksidan, hepatoprotektor,  analgestik,  antiinflamasi, anti  kanker  dan  antiplatelet.  Daun  kersen mengandung  senyawa  flavonoid,  saponin, polifenol dan tannin sehingga dapat digunakan  sebagai  antioksidan  (Mintowati dkk,  2013).  Terdapat  penelitian  bahwa tumbuhan yang  mengandung senyawa metabolit  sekunder  berupa  flavonoid  dan fenol  berguna  sebagai  penangkap  radikal
bebas,  yang  memiliki  aktivitas  sebagai antioksidan (Nishantini et al ., 2012).
Flavonoid merupakan senyawa metabolit  sekunder  yang  terbentuk  melalui jalur  sikimat.  Senyawa  ini  diproduksi  dari unit  sinnamoil-CoA  dengan  perpanjangan rantai  menggunakan  3  malonil-CoA.  Enzim khalkhon synthase menggabungkan senyawa ini  menjadi  khalkon.  Khalkon  adalah prekursor  turunan  flavonoid  pada  banyak tanaman (Dewick, 2002). Flavonoid terutama  berupa  senyawa  yang  larut  dalam air  yang  dapat  diekstraksi  dengan  etanol 70%  dan  tetap  ada  dalam  pelarut  tersebut setelah  difraksinasi  dengan  pelarut  non polar.  Flavonoid  merupakan  senyawa  fenol yang  dapat  berubah  warna  bila  ditambah basa  atau  ammonia  sehingga  mudah dideteksi  pada  kromatogram  atau  larutan. Flavonoid  mengandung  gugus  aromatis terkonjugasi  yang  menunjukkan  serapan yang  kuat  pada  spektrofotometri  (Harborne,
1996) Tujuan penelitian adalah untuk
mengetahui  pengaruh  metode  ekstraksi terhadap kadar flavonoid total ekstrak etanol daun  kersen.  Manfaat  penelitian  yaitu memberikan  tambahan  pengetahuan  dan menjelaskan bukti empiris pengaruh metode ekstraksi  terhadap  kadar  flavonoid  total ekstrak etanol daun kersen.

## METODE PENELITIAN
Bahan Penelitian
Daun kersen yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  daun  yang  berwarna hijau  tua,  masih  segar,  dipetik  dari  pohon kersen yang tumbuh di Kelurahan
Sampangan  Kota  Semarang.  Cairan  penyari yang  digunakan  dalam  proses  ekstraksi adalah  etanol  96%  (PT.  Bratacho  Chemika Tbk.).  Bahan  lain  yang  digunakan  dalam penetapan  kadar  flavonoid  total  adalah metanol  p.a,  etanol  p.a,  kuersetin,  aquades, pereaksi AlCl 3 10 %, kalium asetat 1 M

## Alat Penelitian
Alat  yang  digunakan  untuk  membuat serbuk  simplisia  daun  kersen  adalah  oven (Memmert),  blender  (Maspion),  ayakan (ukuran  40  Mesh)  dan  timbangan  elektrik ( Ohaus ).  Dalam  proses  maserasi  dan sokletasi  diperlukan  berbagai  peralatan seperti seperangkat alat maserasi, seperangkat  alat  sokletasi,  seperangkat
pompa vaccum (Rocker  600)  dan vacuum rotary  evaporator (Heidolph).  Alat-alat  lain yang  digunakan  dalam  penetapan  kadar flavonoid  total  adalah  seperangkat  alat spektrofotometer  UV-Vis,  kertas  saring, peralatan gelas dan stopwatch.

## Jalan Penelitian

## Determinasi Tanaman
Determinasi dilakukan untuk mengetahui  identitas  bahan  tanaman  yang digunakan  pada  penelitian,  yaitu  daun kersen. Pembuatan Serbuk Simplisia Daun Kersen Daun kersen dicuci dengan air bersih mengalir kemudian ditiriskan lalu dikeringkan dengan oven pada suhu 40-50 o C sampai  kering.  Daun  kersen  yang  sudah kering  dibuat  dalam  bentuk  serbuk  dengan cara diblender, diayak dengan menggunakan ayakan  mesh  40  serta  diukur  kadar  airnya dengan alat moisturebalance Pembuatan Ekstrak a. Metode Maserasi Seratus  gram  serbuk  simplisia  daun kersen  dimasukkan  ke  dalam  bejana gelap,  lalu  ditambahkan  750  mL  pelarut etanol  96%  dan  ditutup  rapat  serta terhindar dari cahaya matahari langsung. Proses perendaman selama 3 hari sambil diaduk  tiap  8  jam  sekali.  Setelah  3 hari, campuran simplisia dan metanol diserkai sehingga  diperoleh  maserat  (1).  Ampas direndam  kembali  dengan  250  mL metanol  selama  1  hari,  disaring  kembali dan  diperoleh  maserat  (2).  Maserat  (1) dan  (2)  dienapkan  semalam  kemudian dipisahkan  dari  residu  dan  dipekatkan menggunakan rotary  evaporator pada suhu  40 o C  sampai  diperoleh  ekstrak kental etanol.
b. Metode Sokletasi Alat sokletasi dipasang, kemudian serbuk daun kersen 100 gram dibungkus dengan  kertas  saring,  diikat  dengan benang,  dimasukkan  kedalam  labu  alas bulat  pada  soklet.  Sokletasi  dilakukan pada  suhu  70 o C  sampai  tetesan  siklus tidak  berwarna  lagi.  Ekstrak  cair  yang diperoleh  kemudian  dipekatkan  dengan menggunakan  rotary  evaporator  pada suhu  40 o C  sampai  diperoleh  ekstrak kental etanol.
Pengujian  Karakteristik  Ekstrak  Secara Organoleptik (Depkes RI, 2000) Parameter organoleptik ekstrak adalah  mendeskripsikan,  warna,  rasa  dan bau.
Pembuatan Larutan Kuersetin induk (100 ppm)
Sepuluh  mg  kuersetin  ditimbang  lalu dilarutkan  dengan  metanol  hingga  larut. Larutan  tersebut  dimasukkan  dalam  labu takar  100  mL,  ditambahkan  metanol  p.a sampai tanda batas atas. Pengukuran Panjang Gelombang maksimum Pengukuran panjang gelombang maksimum dilakukan menggunakan spektrofotometer UV-Vis dengan pembanding kuersetin 50µg/mL. berdasarkan  Manik  et  al  (2014),  panjang gelombang maksimum yang diperoleh untuk kuersetin adalah 428 nm Penentuan Operating Time Penentuan operating time berdasarkan (Manik  dkk  2014)  dilakukan  selama  30 menit Pembuatan Kurva Baku Kuersetin Kurva standar kuersetin dibuat berdasarkan  metode  yang  dilakukan  oleh Manik et al. (2014). Larutan kuersetin dalam metanol dibuat dalam konsentrasi 2, 4, 6, 8, 10 dan 12 ppm.

## Pengukuran Flavonoid Total
Analisis  kuantitatif  flavonoid  total pada  ekstrak  daun  kersen  dilakukan  dengan metode  kolorimetri  menggunakan  pereaksi aluminium klorida. Sebanyak 0,2 mL larutan sampel  ditambah  3,7  mL  metanol  0,1  mL AlCl 3 10%,  0,1  mL  Kalium  Asetat  dan
ditambahkan aquades hingga 5 mL. Pengukuran  juga  dilakukan  terhadap  blanko berupa larutan sampel yang belum ditambahkan dengan pereaksi AlCl 3 . Kandungan flavonid total dinyatakan sebagai  jumlah  gram  kuersetin  yang ekuivalen tiap gram ekstrak.

## Analisa Data
Data  deret  konsentrasi  yang  dibuat dari  baku  kuersetin  kemudian  dibuat persamaan  kurva  baku.  Persamaan  kurva baku  y=bx+a  dengan  y=absorbansi  dalam nm, x=kadar dalam ppm (mg/L). Absorbansi ekstrak  daun  kersen  yang  telah  diperoleh dimasukkan ke dalam persamaan kurva baku sehingga  didapatkan  kadar  flavonoid  total daun kersen dalam persen berat

## HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN
1. Determinasi Tanaman
Dalam  penelitian  ini  daun  kersen ( Muntingia calabura)  yang  digunakan seperti  diperlihatkan  pada  gambar  1. Tanaman  ini  biasa  tumbuh  di  pinggir jalan,  tumbuh  di  tengah  retakan  rumah, di  tepi  saluran  pembuangan  air  dan tempat-tempat  yang  kurang  kondusif untuk  hidup  karena  kersen  mempunyai kemampuan  beradaptasi  yang  baik. Pengambilan sampel daun kersen berasal dari  daerah  Sampangan  Kota  Semarang.
Untuk memastikan kebenarannya,
tumbuhan  ini  telah  dideterminasikan  di Laboratorium Ekologi dan Biosistematik Tumbuhan  Jurusan  Biologi  Fakultas Sains dan Matematika Universitas Diponegoro.
Gambar 1. Daun Kersen (Muntingia calabura)
Daun Muntingia calabura merupakan daun  tunggal, berseling, berbentuk jorong,  panjang  6-10  cm,  ujung  daun runcing,  pangkal  berlekuk,  tepi  daun
bergerigi,  permukaan  daun  berbulu halus,  pertulangan  menyirip,  hijau, mudah  layu,  daging  daun  seperti  kertas ( papyraceus ).
2. Hasil Parameter Simplisia
Serbuk  daun  kersen  yang  dihasilkan memiliki  kadar  air  4%.  Secara  umum kadar  air  simplisia  tanaman  obat
maksimum 10%.  Serbuk simplisia daun kersen yang diperoleh sebesar 1575 gram dari  3500  gram  daun  kersen.  Serbuk daun  kersen  yang  digunakan  dalam penelitian  sebesar  200  gram  terbagi dalam  2  metode  ekstraksi.  Tiap  metode ekstraksi  menggunakan  serbuk  daun kersen sebanyak 100 gram.

## 3. Hasil Organoleptik Ekstrak
Hasil  organoleptik  ekstrak  etanol daun kersen ( Muntingia calabura ) metode maserasi dan sokletasi berbentuk kental,  berwarna  hijau  pekat  kehitaman dan  berbau  khas.  Hasil ini  sesuai  seperti yang  dijelaskan  oleh  Manic  dkk  (2014)
bahwa  ekstrak  daun  kersen  memiliki bentuk  kental,  warna  hijau  kehitaman, dan berbau khas.
4. Hasil rendemen
Nilai  rendemen  ekstrak  etanol  daun kersen  ( Muntingia  calabura )  dapat dilihat pada Tabe Tabel I. Hasil Rendemen Ekstrak Daun Kersen
Dari  tabel  diatas,  hasil  rendemen ekstrak daun kersen yang menunjukkan nilai rendemen  lebih  tinggi  adalah  metode sokletasi  sebesar  28,92  %.  Berdasarkan penelitian Mukhriani (2014), Kelebihan dari metode  sokletasi  adalah  proses  ekstraksi yang  kontinyu  dan  sampel  terekstraksi  oleh pelarut  murni  hasil  kondensasi  sehingga rendemen  yang  dihasilkan  lebih  banyak disbanding metode ekstraksi maserasi.

## 5. Hasil Penetapan Kadar Flavonoid
Penentuan panjang gelombang maksimum  dilakukan  dengan  mengukur absorbansi  senyawa  kuersetin  pada  daerah visibel sehingga diperoleh serapan yang
maksimum. Blangko yang digunakan adalah etanol  dengan  penambahan  pereaksi  kalium asetat  dan  aluminium  klorida.  Blangko digunakan  sebagai  faktor  koreksi.  Panjang gelombang  maksimum  yang  diperoleh  pada penelitian  ini  yaitu  428,8  nm.  Hasil pengukuran  yang  diperoleh  sesuai  dengan Manik et al (2014) yang menjelaskan bahwa pengukuran  panjang  gelombang  maksimum dengan  kuersetin  terletak  pada  428  nm. Pengukuran  dilakukan  pada  puncak  kurva karena  pada  puncak  tersebut  memiliki sensitivitas  yang  tinggi  ditunjukkan  dengan nilai  basorbansi  yang  paling  tinggi.  Hasil penentuan  panjang  gelombang  maksimum dapat dilihat pada Gambar 2.
Metode ekstraksi Berat serbuk yang diekstraksi (gram) Berat ekstrak hasil ekstraksi (gram) Nilai rendemen (%) maserasi 100 26,58 26,58 sokletasi 100 28,92 28,92
Gambar 2. Hasil penentuan panjang gelombang maksimal kuersetin
Penentuan Operating Time ditentukan dengan  membaca  serapan  larutan  kuersetin pada  konsentrasi  6  ppm  pada  panjang gelombang  428,8 nm  tiap 5  menit  selama  1 jam.  Absorbansi  yang  stabil  menandakan bahwa  pada  waktu  tersebut  terjadi  reaksi yang stabil antara kuersetin dengan pereaksi aluminium  klorida.  Waktu  pengukuran
dihitung  sejak  dicampurkannya  larutan kuersetin dengan pereaksi aluminium klorida.  Absorbansi  stabil  dari  larutan kuersetin dengan pereaksi aluminium klorida pada penelitian ini terjadi pada menit ke-15. Data hasil penentuan Operating Time dapat dilihat pada Tabel II.
Tabel II. Hasil Penentuan Operating Time Waktu (menit) Absorbansi 5 0,395 10 0,399 15 0,399 20 0,400 25 0,401 30 0,402 35 0,404 40 0,403 45 0,403 50 0,404 55 0,405 60 0,405
Penentuan  kurva  baku  kuersetin dilakukan dengan mengukur larutan kuersetin pada seri konsentrasi 2, 4, 6, 8, 10 dan 12 ppm pada panjang gelombang 428,8 ppm.  Penentuan  kurva  baku  kuersetin dilakukan  pada  seri  konsentrasi  tersebut karena dihasilkan absorbansi yang
memenuhi  kisaran  absorbansi  yang  baik, yaitu  0,2-0,8.  Hasil  penentuan  kurva  baku kuersetin  dapat  dilihat  pada  Gambar  3.
Gambar 3. Hasil Penentuan Kurva Baku Kuersetin
Dari  kurva  baku  yang  diperoleh digunakan untuk mmebuat persamaan regresi  linier,  dimana  diperoleh  persamaan regresi  linier  y  =  0,0560x  +  0,1198  dengan nilai  koefisien  korelasi  r  =  0,9989.  Nilai  r yang  mendekati  1  menunjukkan  kurva
kalibrasi linier dan terdapat hubungan antara konsentrasi  larutan  kuersetin  dengan  nilai serapan.  Persamaan  regresi  linier  ini digunakan  untuk  menghitung  kandungan flavonoid  total  dalam  ekstrak  etanol  daun kersen. Penetapan  kadar  flavonoid  pada penelitian  ini  dilakukan  pada  kedua  metode ekstraksi  yaitu  metode  maserasi  dan sokletasi.  Hasil  penetapan  kadar  flavonoid total  dari  metode  maserasi  dan  sokletasi dapat dilihat pada Tabel III. Tabel III. Hasil Penetapan Kadar Flavonoid Total Metode Ekstraksi Kadar Flavonoid (%) Maserasi 0,1879 Sokletasi 0,2158 Dilihat dari nilai kadar flavonoid total dari  kedua  metode  ekstraksi,  metode  yang menghasilkan  kadar  flavonoid  total  paling besar  adalah  metode  sokletasi.  Berdasarkan
rendemen ekstrak daun kersen yang diperoleh,  metode  sokletasi  juga  lebih banyak dibandingkan dengan metode maserasi.  hal inilah yang mendasari mengapa  kadar  flavonoid  total  metode sokletasi  lebih  besar  dibandingkan  metode maserasi.  selain  itu  kemungkinan  flavonoid total  yang  terdapat  pada  daun  kersen  lebih mudah  tersari  dengan  metode  sokletasi dibandingkan metode maserasi.

## KESIMPULAN
Kadar  flavonoid  total  ekstrak  etanol daun kersen ( Muntingia calabura ) menggunakan  metode  sokletasi  lebih  besar disbandingkan  metode  maserasi..  Kadar flavonoid  total  dalam  ekstrak  etanol  daun kersen  dengan  metode  maserasi  adalah 0,1879%  b/b  sedangkan  metode  sokletasi adalah 0,2158% b/b.

## SARAN
Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai kandungan flavonoid total dengan berbagai metode ekstraksi yang lain.

## DAFTAR PUSTAKA
Anonim, 2015, Farmakope  Indonesia. Edisi V. Departemen Kesehatan RI, Jakarta Ansel,  H.C.,  1989, Pengantar  Bentuk Sediaan Farmasi , diterjemahkan oleh Farida  Ibrahim,  Asmanizar  &  Iis Aisyiah, Edisi IV, 607-608
Chen, J.J., Lee, H.H., Shih, C.D., Liao, C.H., Chen,  I.S.  and  Chou,  T.H.,  2007, New  Dihydrochalcones  and  Anti- platelet  Agregation  Constituens  from The  Leaves  of Muntingia  calabura,
Planta Med., 73, 572-577 Dewick,  P.P.,  2002, Medicinal  Natural Products,  A  Biosynthetic  Approach, John  Willey  and  Sons,  Ltd.,  School of Pharmaceutical Sciences University of Nottingham, UK.P.149 Dehpour, A.A., Ebrahimzadeh, M.A., Fazel, N.S.,  dan  Mohammad,  N.S.,  2009, Antioxidant  Activity  of  Methanol Extract  of  Ferula  Assafoetida  and  Its Essential  Oil  Composition, Grasas Aceites , 60(4), 405-412.
Depkes  RI.,  2000, Parameter  Standar Umum  Ekstrak  Tumbuhan  Obat,
Departemen Republik Indonesia,
Jakarta
Harbone,  J.B.  1996. Metode  Fitokimia Penuntun Cara Modern Menganalisa Tumbuhan ., ITB, Bandung Koleva, I.I., van Beek, T.A., Linssen, J.P.H., de  Groot,  A.,  dan  Evstatieva,  L.N., 2002, Screening of Plant Extracts For
Antioxidant Activity: A Comparative Study  on  Three  Testing  Methods,
Phytochemical Analysis , 13, 8-17. Manic,  D.F.,  Hertiana,  T.  dan  Anshory,  H., 2014,  Analisis  Korelasi  antara  Kadar Flavonoid dengan Aktivitas Antibakteri  Ekstrak Etanol dan Fraksi-fraksi Daun Kersen ( Muntingia  calabura L.)  terhadap Staphylococcus aureus , Khazanah, 6 ,
2, 1-11 Markham,  K.  R.  1988. Techniques  of Flavonoids Identification , diterjemahkan oleh Kosasih Padmawinata. ITB. Bandung Mintowati,  E.,  Kuntorini,  Setya  dan  Maria. 2013.  Struktur  Anatomi  dan  Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Metanol  Daun  Kersen  (Muntingia calabura).  Program  Studi  Biologi FMIPA. Universitas Lambung Mangkurat. http://jurnal.fmipa.unila.ac.id/index.p hp/semirata/article/download/685/50 5.  Diakses  pada  tanggal  8  Februari 2014. Orak, H.H, 2006,  Total Antioxidant
Activities,  Phenolics,  Anthocyanins, Polyphenoloxidase  Activities  In  Red
Grape  Varieties, Journal  of  Polish Agricultural University Food Science and Technology , 9 (118) Pourmourad,  F.,  Hosseinimehr,  S.J.,  and Shahabimajd,  N.  2006.  Antioxidant Activity,  Phenol  And  Flavonoid Contents  Of  Some  Selected  Iranian Medicinal  Plants, African  Journal  of Biotechnology vol  5  (11):  1142  – 1145, 2006 Race,  S.,  2009, Antioxidant  :  The  Truth About  BHA,  BHT,  TBHQ  and  Other Antioxidants Used As Food Additives, Tigmor Book : London Robinson,  T.,  1995. Kandungan  Organik Tumbuhan  Tinggi .  Institut  Teknologi Bandung. 191
Prakash,  A.,  Rigelhof,  F.,  dan  Miller,  E.,
2010, Antioxidant Activity , http://www.medallionlabs.com, diakses tanggal 14 September 2010.
Shirmila Jose g and Radhamany P M. 2013.
Invitro  Antioxidant  Activities,  Total Phenolics  and  Flavonoid  of  Wild Edible Mushroom Macrolepiota mastoidea (fr.)  Singer. International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences , 5 (2) : 161- 166 Winarsi Herry. 2011. Antioksidan Alami dan Radikal Bebas . Yogyakarta: Kanisius
Zakaria,  Z.A.,  Mohamed,  A.M.,  Jamil,
N.S.M., Rofiee, M.S., Hussain, M.K., Sulaiman,  M.R.,  The,  L.K.  and Salleh, M.Z., 2011, In Vitro Antiproliverative  and  Antioxidant Activities of The Extracts of Muntingia  calabura Leaves, The American Journal of Chinese Medicine, 39, 1, 183-200