Ekologia : Jurnal Ilmiah Ilmu Dasar dan Lingkungan Hidup
Volume 19, Nomor 1, April 2019, Hal.1-11
https://journal.unpak.ac.id/index.php/ekologia
e-ISSN: - ; p-ISSN: 1411-9447
UJI ANTIBAKTERI EKSTRAK DAUN SAMBUNG NYAWA ( Gynura procumbens (Lour.) Merr.) DAN DAUN TAPAK LIMAN
( Elephantopus  scaber L.) TERHADAP Salmonella thypi
Prasetyorini 1* , Anggita Rahmadini 2 ,  Novi Fajar Utami 2
1 Program Studi Biologi, FMIPA-Universitas Pakuan
2 Program Studi Farmasi , FMIPA-Universitas Pakuan
* e-mail: prasetyorini@unpak.ac.id
diterima:12 Februari 2019; direvisi: 26 Februari2019; disetujui: 18 Maret 2019

## ABSTRAK
Infeksi Salmonella  thypi menyebabkan  demam  tifoid  yang  penyebarannya  hampir  disemua negara,  terutama  negara-negara  berkembang  seperti  Indonesia.  Obat  yang  digunakan  untuk demam  tifoid  adalah  antibiotik  yang  pada  saat  ini  banyak  dilaporkan  beberapa  jenis  telah resisten  terhadap  bakteri S  thypi .  Dari  beberapa  penelitian  dilaporkan  bahwa  daun Gynura procumbens (Lour.)  Merr  dan Elephantopus  scaber L  mempunyai  kandungan  alkaloid, terpenoid,  steroid,  fenolik,  flavonoid  dan  saponin  yang  berpotensi  sebagai  antibakteri.  Oleh karena  itu  perlu  dilakukan  penelitian  ini  untuk  mencari  obat  alternatif  yang  dapat  digunakan untuk  mengatasi  bakteri Salmonella  thypi. Pengujian  aktivitas  antibakteri  dilakukan  dengan menentukan  Konsentrasi  Hambat  Minimum  (KHM)  menggunakan  metode  dilusi  agar  dan menentukan Lebar Daerah Hambat  menggunakan  metode  difusi  kertas  cakram. Hasil KHM menunjukkan untuk ekstrak daun G. procumbens adalah 10%, dan untuk daun E.  scaber 30%. Hasil    penelitian  LDH  menunjukkan  bahwa,  ada  daya  hambat  ekstrak  etanol  96%  daun G. procumbens dan  daun E.  scaber terhadap  pertumbuhan  bakteri S. thypi dengan daya hambat dalam  kategori  lemah.  Untuk    ekstrak  daun G.  procumbens LDH  tertinggi  4,5mm  pada konsentrasi  30%    dan  ekstrak  daun E  scaber LDH  tertinggi  adalah  4,3mm  pada  konsentrasi ekstrak 50%.
Kata  Kunci  : Gynura  procumben s, Elephantopus  scaber L, Salmonella  thypi ,  antibakteri, ekstrak etanol 96% daun
ANTIBACTERIAL TEST of LIFE LEAF EXTRACT ( Gynura procumbens (Lour.) Merr.) AND LEAF TREAD LIMAN ( Elephantopus scaber L.) AGAINST Salmonella thypi

## ABSTRACT
This  research  was  aimed  to  create  aromatic  candle,  infused  with  cinnamon  ( Cinnamomum burmanii ) bark essential oil, which is a potential repellant for house fly ( Musca domestica ).  The distillation of akar wangi samples was carried out at the Spice and Aromatic Research Unit by vapor distillation method for 9-12 hours. The aromatic candles were based on a mixture of solid paraffin and  stearin in a 2:8  proportion, respectively, enriched  with fragrant root  bark essential oils with 5 formulas, namely F1 (placebo), F2 (fixative), F3 (1% essential oil), F4 (2% essential oil), and F5 (3% essential oil).  The repellency test was carried out by inserting 20 house flies in a  of  50x50x50  cm  container  that  contains  a  lighted  aromatic  candle  according  to  the  doses mentioned above, and shrimp scalps located 15 cm from the candle that functions as a bait. The calculated parameters were the hourly number of flies that were allured to the bait for 6 hours, which  were  related  to  the  candle’s  repellency  and  the  house  fly’s  preference  of  candle.  The repulsion ability result were 89.724%, 75.28%, 68.06%, 49.17%, 9.72% for F5, F4, F3, F2, and F1, respectively. The result also showed that the F4 sample was the most preferred sample.
Keywords: Gynura procumbens , Elephantopus scaber L , Salmonella thypi, antibacteri, leaf 96% etanol extract

## PENDAHULUAN
Demam  tifoid  merupakan  penyakit infeksi  sistemik  akut  yang  mengenai  sistem di  dalam  jaringan  dan  organ,  Penyebab utama  demam  tifoid  salah  satunya  adalah bakteri S.  thypi (Sidabutar  dan  Satari, 2010).  Kejadian  demam  tifoid  di  Indonesia masih  sangat  tinggi  berkisar  350-810  orang per 100.000 penduduk. Kasus  demam tifoid di  rumah  sakit  besar  di Indonesia, menunjukkan angka kesakitan yang cenderung meningkat setiap tahunnya dengan  rata-rata  500  orang  per  100.000 penduduk.  Angka  kematian  diperkirakan sekitar 0,6-5% sebagai akibat dari keterlambatan  mendapat  pengobatan  serta tingginya  biaya  pengobatan  (MenKes  RI, 2006).
Pengobatan  utama  demam  tifoid adalah dengan pemberian antibiotik terutama  antibiotik  kloramfenikol,  tetapi belakangan  ini  banyak  dilaporkan  bahwa kloramfenikol  resisten  terhadap  bakteri S. thypi (Trisharyanti  dkk.,  2017).  Menurut Marhamah  (2010)  di  India  telah  ditemukan adanya resistensi S. thypi terhadap amoksisilin,  kloramfenikol,  ampisilin  dan kotrimoksazol (Marhamah, 2010). Meskipun  Pratama  dan  Cucunawangsih. (2017), melaporkan bahwa tingkat resistensi S. typhi dan S. paratyphi terhadap antibiotik Rumah  Sakit  Karawaci  rendah.  Namun Brito et  al (2018)  mengungkapkan  bahwa resistensi S.  typhi akan  terus  muncul  yang mengarah  pada  kegagalan  pengobatan.  Hal senada  juga  diungkapkan  Ugboko  dan Nandita  (2014),  yang  menyatakan  bahwa resistensi  antimikroba  terus  muncul  pada S.typhi yang dapat mengakibatkan hilangnya nilai  obat.  Pernyataan  tersebut  didukung oleh  Tewari et  al (2015)  yang  menyatakan bahwa  basil  tifoid  terus  mengubah  pola kerentanan  terhadap  antimikroba.  Oleh sebab  itu  perlu  dicari  alternatif  lain pengganti  obat  infeksi S.  typhi terutama obat-obatan berbasis tumbuh-tumbuhan.
Dilaporkan beberapa jenis tumbuhan berpotensi  untuk  dikembangkan  menjadi obat  termasuk  antibakteri S.  typhi . G.
procumbens dan E.  scaber adalah  2  jenis tumbuhan  yang  patut  dipertimgbangkan untuk  diteliti  sebagai  anti  bakteri S.  typhi , karena  keduanya  mengandung  senyawa bioaktif  seperti  saponin,  tanin,  alkaloid, terpenoid  dan  senyawa  fenolik  yang berpotensi sebagai antibakteri. G. procumbens merupakan  tanaman  yang tumbuh  merayap  berwarna  hijau  keunguan dan memiliki daun berbentuk bulat memanjang  (Bakhtar  dkk.,  2018).  Menurut Fadli  (2015) G.  procumbens terbukti mengandung  flavonoid,  sterol  tak  jenuh, triterpenoid,  polifenol,  saponin,  steroid, asam klorogenat, asam kafeat, asam vanilat, asam  para  kumarat,  asam  para  hidroksi benzoat  dan  minyak  atsiri.  Daun G. procumbens memiliki  banyak  manfaat untuk kesehatan, diantaranya untuk mengendalikan tekanan darah, hipoglikemik,  antiinflamasi,  menurunkan kolesterol,  mencegah  dan  memperbaiki kerusakan  ginjal,  sebagai  obat  antibakteri, radang  tenggorokan,  batuk,  sinusitis,  polip dan  amandel  (Simarmata  dkk.,  2007). Dilaporkan  Bakhtar  dkk.,  2018,  bahwa batang  dan  daun G.  procumbens memiliki aktivitas  antibakteri  terhadap  bakteri S. aureus , E. coli , dan S. typhimurim . Rahman dan  Asad  (2013)  juga  menyatakan  ekstrak dichloromethana  dan  ekstrak  ethil  asetat daun G  procumbens konsentrasi  400μg/disc memiliki  diameter  hambat  pada  bakteri S. paratyphi sebesar 7 mm.
Tanaman E.  scaber secara  empiris telah  banyak  digunakan  sebagai  obat.  Daun E. scaber digunakan sebagai obat astringen, disentri,  laktagoga,  obat  demam,  malaria, batuk, sariawan mulut, dan akarnya digunakan untuk obat malaria, kurang darah, batuk,  mencret,  sariawan  mulut.  Hasil penapisan  fitokimia  serbuk  daun E.scaber positif  mengandung  flavonoid,  saponin, steroid/triterpenoid,  tanin  dan  minyak  atsiri (Azter, 2009). Dharma dkk. (2013) melaporkan daun daun E. scaber mengandung flavonoid sebesar 6,2%. Dilaporkan  ekstrak  etanol  daun E.  scaber dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri
Ekologia : Jurnal Ilmiah Ilmu Dasar dan Lingkungan Hidup
E.coli , S.  aureus , P.aeruginosa dan Vibrio sp (Nonci, dkk., 2014).
Berdasarkan  uraian  diatas,  perlu dilakukan  penelitian  tentang  pengembangan potensi  tumbuhan G  procumbens dan E scaber sebagai antibakteri, khususnya Salmonella  typhi .  Ekstrasi  bahan  tanaman dilakukan dengan metode maserasi menggunakan pelarut etanol 96%. Untuk uji antibakteri dilakukan dengan uji Konsentrasi Hambat Minimum  (KHM)  yang dilanjutkan dengan  pengujian  Lebar  Daerah  Hambat (LDH).  Pengujian  KHM  dilakukan  dengan menggunakan metode dilusi agar. Pengujian LDH dilakukan dengan metode difusi kertas cakram  menurut  Shryock et  al .  (2002). Tujuan penelitian ini adalah untuk menentukan  aktivitas  antibakteri  ekstrak etanol  96%  daun E  scaber dan  daun G procumbens terhadap bakteri S.thypi. Hipotesis  yang  diajukan  adalah  ekstrak etanol  96%  daun G  procumbens dan E scaber memiliki aktivitas antibakteri terhadap bakteri S. thypi

## BAHAN DAN METODE Bahan dan Alat
Penelitian dilakukan pada bulan Mei- Juli  2019  di  Laboratorium  Farmasi  dan Biologi,  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu Pengetahuan  Alam,  Universitas  Pakuan, serta di Laboratorium Mikrobiologi, Fakultas Matematika dan  Ilmu Pengetahuan Alam, Institut Pertanian Bogor. Bahan yang digunakan  adalah  daun G.  procumbens dan E.    Scaber yang  diperoleh  dari  Balai Penelitian  Tanaman  Rempah  dan  Obat  di
Bogor  dan  dideterminasi  di  Herbarium Bogoriense, Bidang Botani, Pusat Penelitian Biologi-LIPI, Cibinong. Bahan lain meliputi etanol  96%,  Dimethyl  Sulfoksida  10%, aquadestilata, asam klorida, pereaksi bouchardat,  dragendorf, mayer, magnesium, larutan  besi  (III)  klorida.  media  Nutrient Agar (NA), kertas cakram uji berdiameter 6 mm.
Alat  yang digunakan adalah alat-alat gelas  (Pyrex®),  inkubator  (Memmert®), neraca  digital  (Lab  pro®),  tabung  reaksi (Pyrex®), pengayak, krus tutup, cawan Petri (Pyrex®), oven (Memmert®),  botol  kaca warna  coklat,  eksikator, rotary  evaporator , grinder (Maxim),  penangas  air,  batang pengaduk, alumunium  foil ,  autoklaf  (All American®), moisture  balance ,  gelas  ukur (Pyrex®),  kertas  saring,  pemanas,  beaker glass (Pyrex®), kain batis, lemari pendingin (LG),  kompor  listrik,  rak  tabung,  lampu spirtus,  kertas  cakram,  candle  jar  dan  ose, cawan uap, tanur (Vulcan A-550®).
Metode Pembuatan Serbuk Simplisia dan
Ekstraksi
Daun G. procumbens dan E.  scaber dicuci  bersih  dan  dikeringkan  dalam  oven pada  suhu  50 0 C  sampai  kering,  selanjutnya dihaluskan dan diayak dengan ayakan mesh 40  hingga  diperoleh  simplisia  serbuk (DepKes  RI,  2000).  Selanjutnya  serbuk simplisia diukur rendemenya dengan persamaan,
............(1)
Kadar air dan kadar  abu juga diukur dengan metode gravimetri. Karakter organoleptis  seperti  rasa,  warna  dan  aroma juga  dicatat.  Serbuk  yang  dihasilkan selanjutnya diekstrak dengan metode maserasi. Maserasi dilakukan dengan menggunakan  pelarut  etanol  96%  (1:10) secara  bertahap.  Awalnya  simplisia  serbuk dimasukkan  kedalam  botol  ditambahkan etanol 96% sebanyak setengah pelarut total,
direndam  dan  dikocok  setiap  6  jam  selama 24 jam, kemudian disaring untuk memisahkan  ampas  dan  filtrat,  ampas dimaserasi  kembali  menggunakan  pelarut etanol  96%  sisanya.  demikian  seterusnya sampai pelarut habis. Filtrat yang dihasilkan dikumpulkan  untuk  dipekatkan  dengan rotary  evaporator hingga  didapat  ekstrak kental  (DepKes  RI,  2000).  Ekstrak  yang dihasilkan  selanjutnya  diukur  rendemen,
Prasetyorini, Dkk: Uji Antibakteri Ekstrak Daun Sambung Nyawa.....
kadar  air,  kadar  abu,  warna  dan  aroma. Kadar  air  dan  kadar  abu  dihitung  dengan metode gravimetri, sedang rendemen dihitung dengan persamaan 1.

## Penetapan Kadar Abu  yang Tidak Larut Dalam Asam
Abu  yang  diperoleh  pada  penetapan  kadar abu,  didihkan  dengan  25  mL  asam  klorida
encer  selama  5  menit,  dikumpulkan  bagian yang  tidak  larut  dalam  asam,  saring menggunakan  kertas  saring  bebas  abu,  cuci dengan  air  panas,  pijarkan  hingga  bobot tetap, timbang. Hitung kadar abu yang tidak larut dalam asam terhadap bahan yang telah dikeringkan  di  udara  (DepKes  RI,  2000).
100% Uji Fitokimia
Uji fitokimia dilakukan secara kualitatif  untuk  senyawa  flavanoid,  tanin, saponin  dan  alkaloid  dengan  metode  dari Tiwari (2011).

## Uji Flavonoid
Ditimbang  0,5g  ekstrak,  dilarutkan dalam  5ml  etanol  96%.  Larutan  sampel diambil  2  mL,  ditambahkan  0,1  g  serbuk Mg,  dan  ditambahkan  10  tetes  HCl  pekat. Warna  merah  atau  jingga  yang  terbentuk menunjukkan  adanya  flavonoid,  jika  terjadi warna  kuning  jingga  menunjukkan  adanya flavon, khalkol, dan auron.

## Uji Tanin
Sebanyak  0,5g  ekstrak  dilarutkan dalam  2mL  aquadest  di  dalam  tabung  uji. Selanjutnya kedalamnya diberi dua atau tiga tetes larutan FeClз 1%, jika terbentuk warna biru-hijau,  maka ekstrak mengandung tanin (cathecin  tanin),  jika  terbentuk  biru  hitam maka mengandung tanin (garlic tanin).

## Uji Saponin
Sebanyak 0,5 g ekstrak dilarutkan ke dalam  10  mL  air  panas,  dalam  tabung reaksi,  dinginkan,  dan  kocok  kuat-kuat selama  10  detik.  Bila  terbentuk  buih  stabil selama tidak lebih dari 1 menit maka positif mengandung tanin.

## Uji Alkaloid
Sebanyak  0,5g  ekstrak  ditambah 1mL HCl 2N dan 9mL aquades,  dipanaskan di  atas  penangas  air  selama  2  menit
didinginkan  dan  disaring.  Kemudian  di  uji dengan  3  pereaksi  alkohol  yaitu  pereaksi Bouchardat, Dragendorf dan pereaksi Mayer.  Hasil  uji  positif  diperoleh  bila terbentuk  endapan  coklat  merah  dengan bouchardat,  endapan  merah  hingga  jingga dengan  Dragendorf  dan  endapan  putih kekuningan dengan pereaksi Mayer.

## Penyiapan Inokulum Pembuatan Media Bakteri
Media yang digunakan adalah media Nutrient  Agar  (NA).  Media  NA  dibuat dengan  cara  melarutkan  28g  serbuk  NA dalam  1000mL  aquadest,  dipanaskan  dan diaduk  hingga  homogen  sampai  berwarna bening, kemudian disterilkan dalam autoklaf pada  suhu  121 o C  selama  15  menit  dengan tekanan  1  atm.  Pada  saat  media  masih hangat,  masukkan  20  mL  kedalam  setiap cawan  Petri  yang  telah  steril  dan  dibiarkan sampai memadat.

## Regenerasi Bakteri Uji
Bakteri sebelum dipakai diregenerasi terlebih dahulu kedalam media baru. Bakteri yang  berasal  dari  kultur  primer,  dibiakkan ke  dalam  media  NA  dalam  cawan  Petri, dengan cara diambil satu ose dan digoreskan ke  dalam  media  agar  dan  selanjutnya diinkubasi  selama  24  jam  dengan  suhu  37 o C.  Biakan  yang  sudah  tumbuh  disimpan  di lemari  pendingin  pada  suhu  4 o C  sebagai stok.
Ekologia : Jurnal Ilmiah Ilmu Dasar dan Lingkungan Hidup

## Penetapan KHM dan LDH
Penetapan  KHM  dilakukan  dengan menggunakan metode dilusi agar. Sebanyak 0,2  mL  biakan  bakteri S.  typhi konsentrasi 10 -6 dimasukkan ke dalam 20 mL media NA pada  suhu  40 0 C,  kemudian  ditambahkan  1 mL ekstrak pada konsentrasi uji, selanjutnya diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37 o C di inkubator. Konsentrasi terendah dari ekstrak
yang  tidak  ditumbuhi  bakteri  merupakan KHM. Konsentrasi hambat minimum terukur  dijadikan  dasar  dalam  penentuan konsentrasi  uji  LDH  selanjutnya.  Kontrol positif yang digunakan adalah khloramfenikol  10  ppm  Konsentrasi  uji ekstrak  dalam  penetapan  KHM  disajikan dalam Tabel 1.
Tabel 1. Konsentrasi Uji Ekstrak dalam Penetapan KHM pada S. typhi Jenis ekstrak Konsentrasi uji ekstrak (%) ke- 1 2 3 4 5 G. procumbens 2,5 5 7,5 10 12,5 E.  scaber 20 25 30 35 40
Pengujian  LDH  dilakukan  dengan  metode difusi  kertas  cakram.  Sebanyak  0,2  mL bakteri  dengan  konsentrasi  10 -6 dituangkan kedalam  cawan Petri  yang berisi  media  NA pada  suhu  40 o C,  kemudian  digerakkan melingkar  untuk menyebarkan  bakteri secara  merata.  Setelah  agar  memadat diatasnya  diletakkan  kertas  cakram  yang mengandung  ekstrak  sesuai  konsentrasi,
selanjutnya di  inkubasi selama 24 jam pada suhu  37 o C.  Aktivitas  antibakteri  dilihat  dari terbentuknya zona bening atau zona hambat disekitar  kertas  cakram.  Penghambatan pertumbuhan bakteri pada metode ini dilihat dari  lebarnya  zona  hambat  disekitar  kertas cakram  (Mukti,  2012).  Lebar  Daerah Hambat dihitung dengan persamaan:
Rancangan  percobaan  yang  digunakan dalam penelitian ini adalah Rancangan Acak lengkap  dengan  3  perlakuan  konsentrasi ekstrak  dan  tiga  ulangan.  Apabila  dalam analisis ragam menunjukkan bahwa perlakuan  memberikan  pengaruh  yang berbeda nyata, maka untuk mengetahui yang berbeda  nyata  dilanjutkan  dengan  uji Duncan’s

## HASIL DAN PEMBAHASAN Hasil Ekstraksi
Metode  ekstraksi  yang  digunakan adalah  metode  maserasi,  menggunakan metode  ini  karena  tidak  melaui  pemanasan, sehingga  bahan  alam  tidak  mudah  rusak. Pelarut  yang  digunakan  adalah  etanol  96% karena  pelarut  ini  merupakan  pelarut  yang dapat  senyawa  organik,  baik  polar  maupun non  polar  dengan  titik  didih  yang  rendah sehingga  mudah  diuapkan  (Tiwari,  2011).
Hasil  ekstraksi  semua  bahan  yang  diekstrak berupa  ekstrak  kental  dengan  karakterisasi disajikan dalam Tabel 2.

## Hasil Pembuatan Simplisia Serbuk
Hasil  pembuatan  simplisia  serbuk  daun G. procumbens berwarna hijau kecoklatan, bau khas,  rasa  agak  pahit,  dengan  rendemen sebesar  14,34%.  Hasil  rendemen  yang diperoleh  adalah  14,34%,  hasil  ini  berbeda dengan hasil penelitian yang dilakukan oleh Lau  dkk.,  (2018)  yaitu  sebesar  25%,  hal  ini dipengaruhi oleh lokasi tumbuh serta bagian tanaman  yang  digunakan  pada  penelitian sebelumnya  yaitu  batang  dan  daun.  Serbuk simplisia daun E scaber berwarna hijau, bau khas, mula-mula tidak berasa, lama kelamaan  agak  pahit.  Rendemen  serbuk simplisia  daun E  scaber yang  diperoleh sebesar 16,67%. Hasil karakterisasi simplisia  sebuk  disajikan  dalam  Tabel  2.
Prasetyorini, Dkk: Uji Antibakteri Ekstrak Daun Sambung Nyawa.....

## Tabel 2. Hasil Karakterisasi Simplisia Serbuk
Simplisia Rendemen (%) Kadar air (%) Kadar Abu (%) Kadar Abu Tidak Larut Asam (%) Terukur Syarat Terukur Syarat Terukur Syarat G. procumbens 14,34 2,21 < 10 6,33 <7 0,37 <0,4 E.  scaber 16,67 3,50 < 10 13,44 <7 0,57 <8,8 Farmakope Herbal Kemenkes (2013)
Penetapan  kadar  air  dilakukan  dengan tujuan  untuk  menentukan  jumlah  air  yang terkandung  dalam  simplisia  serbuk  dan ekstrak. Kadar air yang tinggi dapat menjadi media pertumbuhan mikroba sehingga dapat menyebabkan  senyawa  yang  dikandung menjadi  rusak.  Penetapan  kadar  abu dilakukan  untuk  mengetahui  kandungan mineral yang terdapat dalam serbuk simplisia  dan  ekstrak.  Penetapan  kadar  abu tidak  larut  dalam  asam  dilakukan  untuk melihat kandungan mineral, kemurnian serta kebersihan  bahan.  Kadar  abu  tidak  larut
dalam  asam  dilakukan  untuk  mengetahui kadar  abu  nonfisiologis  dan  kandungan mineral  dalam  serbuk  simplisia.  Hasil pengukuran  kadar  air,  kadar  abu  dan  kadar abu tidak larut  dalam asam  semua simplisia serbuk  memenuhi  persyaratan  Farmakope Herbal Indonesia (2013) yaitu  <10%  untuk kadar air, <7 % untuk kadar abu dan <8,8% kadar  abu  larut  dalam  asam  (Tabel  1). Gambar serbuk simplisia daun G. procumbens dan daun E scaber dapat dilihat pada Gambar 1.
(a) (b)
Gambar 1. (a) Serbuk Simplisia Daun G, procumbens
(b) Serbuk Simplisia Daun E. scaber

## Hasil Pembuatan Ekstrak
Metode  ekstraksi  yang  digunakan pada penelitian ini adalah metode  maserasi. Metode ekstraksi maserasi digunakan karena  peralatan  yang  digunakan  dan  cara kerja yang sederhana serta bahan alam tidak mudah  terurai  akibat  pemanasan.  Pelarut yang  digunakan  adalah  etanol  96%  karena pelarut  ini  merupakan  pelarut  yang  dapat melarutkan hampir semua senyawa organik, baik  polar  maupun  non  polar  dengan  titik didih yang rendah sehingga mudah diuapkan. Rendemen hasil ektraksi disajikan dalam Tabel 3.
Tabel 3. Rendemen Hasil Ekstraksi Simplisia Rendemen (%) G. procumbens 10,03 E.  scaber 11,75
Hasil  ekstraksi  daun G.  procumbens yang  diperoleh  tidak  jauh  berbeda  dengan hasil  penelitian  sebelumnya  yang  dilakukan oleh Bakhtar dkk. (2018),  bahwa persentase rendemen  yang  diperoleh  sebesar  10,07%. Hasil  persentase  rendemen  ekstrak  daun E. scaber yang diperoleh lebih besar dari hasil penelitian yang dilakukan oleh Dharma dkk. (2013),  bahwa  persentase  rendemen  yang diperoleh  sebesar  9,13%,  perbedaan  ini dikarenakan  penggunakan  pelarut  yang berbeda.  Dharma  dkk  (2013)  menggunakan
Ekologia : Jurnal Ilmiah Ilmu Dasar dan Lingkungan Hidup
Volume 19, Nomor 1, April 2019, Hal.1-11
pelarut  etanol  70%,  sedangkan  dalam penelitian ini pelarut yang digunakan  etanol
96%.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  semakin
tinggi  konsentrasi  pelarut,  rendemen  hasil ekstraksi makin tinggi pula.
(a) (b)
Gambar 2. (a) Ekstrak Daun G. procumbens (b) Ekstrak Daun E. scaber

## Hasil Uji Mutu Ekstrak
Penetapan kadar air dilakukan dengan tujuan untuk menentukan jumlah air yang  terkandung  dalam  ekstrak.  Kadar  air yang  tinggi  menjadi  tempat  pertumbuhan mikroba  sehingga  dapat  menyebabkan
senyawa  yang  dikandung  menjadi  rusak. Hasil  pengujian  kadar  air  ekstrak  daun G. procumbens dan E. scaber memenuhi syarat yaitu  5-30%    (Voight,  1994)  Hasil karakterisasi  ekstrak  disajikan  dalam  Tabel 4.
Tabel 4. Hasil Karakterisasi Ekstrak Simplisia Rendemen (%) Kadar air (%) Kadar abu (%) Kadar abu tidak larut asam % Terukur Syarat Terukur Syarat Terukur Syarat G. procumbens 10,03 18,62 5-30 3,46 <5 0,35 <3,0 E.  scaber 11,75 11,50 5-30 4,23 <10.3 0,34 <2,8
Penetapan  kadar  abu  dilakukan untuk  mengetahui  kandungan  mineral  yang terdapat  dalam  ekstrak.  Hasil  penetapan kadar  abu  ekstrak  daun G.  procumbens dan E.    scaber yang  diperoleh  memenuhi  syarat yaitu  kurang  dari  5%  (DepKes  RI,  1977) dan  kurang  dari10,3%  (DepKes  RI,  2008). Kadar abu tidak larut dalam asam dilakukan untuk melihat kandungan mineral,
kemurnian bahan, dan kadar abu nonfisiologis.  Kadar  abu  tidak  larut  dalam asam ekstrak daun G. procumbens dan daun E.  scuber dua-duanya  memenuhi  syarat
yaitu  kurang  dari  3%  untuk  daun G. procumbens (DepKes RI, 1977) dan kurang dari 2,8% untuk daun E. scuber (DepKes RI, 2008),

## Hasil Uji Fitokimia
Hasil uji fitokimia dilakukan untuk mengetahui senyawa yang terkandung dalam ekstrak, dalam penelitian ini uji fitokimia dilakukan secara kualitatif menurut metode Tiwari (2011). Hasil uji fitokimia disajikan dalam Tabel 5.
Tabel 5. Uji Fitokimia Kualitatif Daun G procumbens dan Daun E scaber
Senyawa Hasil Ekstrak daun G procumbens Ekstrak daun E. scuber Alkaloid + + Flavonoid + + Saponin + + Tanin + +
Prasetyorini, Dkk: Uji Antibakteri Ekstrak Daun Sambung Nyawa.....
Hasil  uji  fitokimia  menunjukkan bahwa  ekstrak  etanol  96%  daun G. procumbens dan E. scaber keduanya positif mengandung  alkaloid,  flavonoid,  saponin dan  tanin.  Berdasarkan  senyawa  yang terkandung didalamnya, maka kedua ekstrak tersebut berpotensi digunakan  sebagai antibakteri.  Hal  ini  seperti  yang  dinyatakan Rahman dkk (2016) bahwa  flavonoid dapat berfungsi  sebagai  antibakteri  melalui  3 mekanisme  yaitu,  menghambat  sintesis asam nukleat, menghambat fungsi membrane sel dan menghambat metabolisme  energi.    Alkaloid  juga  dapat berfungsi  sebagai  antibakteri  dengan  cara mengganggu komponen
penyusun peptidoglikan  pada  sel  bakteri,  sehingga lapisan  dinding  sel  tidak  terbentuk  secara utuh  dan  dapat  menyebabkan  kematian  sel tersebut (Afnizar dkk., 2016).
Senyawa  lain  yang  bersifat  sebagai antibakteri  adalah  tanin,  senyawa  ini  dapat bersifat sebagai antibakteri dengan membentuk  ikatan  yang  stabil  dengan protein sehingga terjadi koagulasi protoplasma  bakteri.  tanin  juga  memiliki kemampuan  menyamak  kulit  dan  dikenal sebagai  astringensia  (Miranti  dkk.,  2013). Senyawa  saponin  juga  dilaporkan  dapat berfungsi sebagai antibakteri, dengan mengganggu  tegangan  permukaan  dinding sel, pada saat tegangan permukaan terganggu  zat  antibakteri  akan  masuk dengan  mudah  ke  dalam  sel  dan  akan mengganggu  metabolisme  hingga  akhirnya terjadi  kematian  bakteri  (Afnizar  dkk., 2016).

## Hasil  Pengujian  Kosentrasi  Hambat Minimum
Hasil  pengujian  KHM  menunjukkan bahwa  koloni  bakteri  dalam  cawan  Petri yang  mengandung  ekstrak  etanol  daun G. procumbens pada  konsentrasi  10%  sudah tidak  ditemukan  lagi,  dengan  demikian dapat  dinyatakan  bahwa  KHM  ekstrak etanol daun G. procumbens terhadap bakteri S.  thypi pada  konsentrasi  10%.  Untuk ekstrak  etanol  96%  daun E.  scaber sudah tidak ditemukan koloni bakteri S thypi pada konsentrasi  35%,  menunjukkan  bahwa KHM  ekstrak  etanol  daun E,  scaber adalah pada konsentrasi 35%.

## Hasil Pengujian Lebar Daya Hambat
Berdasarkan  analisis  ragam,  hasil pengujian LDH menunjukkan bahwa konsentrasi  ekstrak  daun G.  procumbens berpengaruh  nyata  pada  terhadap  LDH S. typhi pada  α=5%.  Demikian  juga  untuk E scaber ,  menunjukkan  bahwa  konsentrasi ekstrak  menunjukkan  pengaruh  yang  nyata terhadap LDH bakteri S. typhi α=5%.. Rata- rata  hasil  pengujian  LDH  disajikan  dalam Tabel 6.
Hasil  uji  Duncans  menunjukkan LDH  ekstrak  daun G.  procumbens terhadap S  typhi konsentrasi  10%    nyata  lebih  kecil dibandingkan  dengan  konsentrasi  20%, demikian  juga  untuk  konsentrasi  20%  LDH nya  lebih  kecil  dari  konsentrasi  30%.  Ada kecenderungan  semakin  tinggi  konsentrasi ekstrak,  semakin  lebar  juga  LDH.  Namun demikian    semua    konsentrasi  yang  diuji sangat berbeda nyata lebih kecil dibandingkan  dengan  kontrol  positif  dan masih tergolong dalam katagori lemah (Rini dkk, 2018).
Ekologia : Jurnal Ilmiah Ilmu Dasar dan Lingkungan Hidup
Tabel 6. Hasil Pengujian LDH (mm) Ekstrak daun G. procumbens dan E. scuber terhadap
Bakteri S. typhi Ekatrak daun Konsentrasi (%) Ulangan ke...... Rata-rata 1 2 3 G. procumbens 10 3,5 3,5 3 3,3 a ±0.29 20 4 4 3,5 3,8 b ±0,29 30 4 5 4,5 4,5 c ±0,29 Klorampenicol 10 ppm 8 8 8 8,0 d ±0.0 E. scaber 35 3,5 4 3,5 3,7 a ±0.29 45 4 4.5 4 4,2 b ±0.29 50 4,5 4 4,5 4,3 b ±0.29 Klorampenicol 10 ppm 8 8 8 8,0 c ±0.0
Angka yang diikuti huruf sama dalam kolom yang sama menunjukkan tidak berbeda nyata pada α=5% menurut uji Duncan’s
Demikian  halnya  dengan E.  scaber, Hasil  uji  Duncans  menunjukkan  LDH ekstrak  daun E.  scaber terhadap S  typhi konsentrasi  35%    nyata  lebih  kecil dibandingkan  dengan  konsentrasi  45%, demikian  juga  untuk  konsentrasi  45%  LDH nya  lebih  kecil  dari  konsentrasi  50%.  Ada kecenderungan  semakin  tinggi  konsentrasi
ekstrak,  semakin  tinggi  juga  LDH  nya. Namun  demikian    semua    konsentrasi  yang diuji masih sangat berbeda nyata lebih kecil dibandingkan  dengan  kontrol  positif  dan masih tergolong dalam katagori lemah (Rini dkk  2018).  Gambar  hasil  pengujian  LDH disajikan dalam Gambar 3.
Daun G. procumbens Daun E. scaber Gambar 3. Hasil pengujian LDH ekstrak etanol 96% daun
G. procumbens dan daun E. scaber terhadap bakteri S. thypi

## KESIMPULAN
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan maka  dapat  diambil  kesimpulan  bahwa, ekstrak etanol 96% daun G. procumbens dan daun E.  scaber mengandung  senyawa flavanoid,  tanin,  saponin  dan  alkaloid. Ekstrak  etanol  96%  daun G.  procumbens mempunyai  LDH  terhadap S.  typhi yang berbeda  nyata  dengan  kontrol  positif  dan masuk  dalam  katori  lemah.  LDH  paling tinggi  4.50  mm  pada  konsentrasi  ekstrak 30%.  Ekstrak  etanol  96%  daun E  scaber mempunyai  LDH  terhadap S.  typhi yang berbeda  nyata  dengan  kontrol  positif  dan masuk  dalam  katori  lemah  dengan  rata-rata
LDH paling tinggi 4.33 mm pada konsentrasi ekstrak 50% .

## DAFTAR PUSTAKA
Afnizar,  M.,  Mahdi,  N.,  dan  Zuraidah. (2016).  Uji  Aktivitas  Antibakteri Ekstrak Daun Mahkota Dewa Phaleria macrocarpa Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus . Prosiding Seminar Nasional Biotik.
Azter, A.A. (2009). Uji Efek Ekstrak Etanol Herba  Tapak  Liman  ( Elephantopus scaber L.)  Terhadap  Penurunan Kadar  Asam  Urat  Darah  Pada  Tikus Putih Jantan Yang Diinduksi Kafein. Skripsi .  Program  Studi  Farmasi.
Fakultas  Kedokteran  Dan  Ilmu Kesehatan.  Universitas  Islam  Negeri (UIN) Syarif Hidayatullah. Jakarta. Bakhtar,  D.D.A.,  Jubahar,  J.,  Yusdi,  E. (2018).  Uji  Aktivitas  Fraksi  Dari Ekstrak  Daun  Sambung  Nyawa ( Gynura  procumbens (Lour)Merr.) Terhadap Bakteri Shigella dysenteriae . Jurnal  Farmasi  Higea , Vol. 10, No. 1.
Dharma,  S.,  Adirman,  dan  Elisma.  (2013). Efek Analgetik Ekstrak Etanol Daun Tapak  Liman  ( Elephantopus  scaber L.) Pada Mencit Putih Jantan. Jurnal Farmasi Higea , Vol. 5, No. 1. DepKes  RI.  (1977).  Material  Medika
Indonesia Jilid I. Departemen Kesehatan RI. Jakarta.
_________.  (2000). Parameter  Standar
Umum  Ekstrak  Tumbuhan  Obat
Cetakan Pertama.
Departemen
Kesehatan RI. Jakarta.
_________.    (2008). Farmakope  Herbal Indonesia Edisi I. Jakarta. Fadli,  M.Y.  (2015).  Benefits  of  Sambung
Nyawa (Gynura procumbens)
Subtance  as  Anticancer.  Faculty  of Medicine.  Lampung  University. J Majority . 4 (5).
Lau, S.H.A., Wahyudin, E., Lallo, S. (2018).
Potensi  Antioksidan  Ekstrak  Etanol Daun  Sambung  Nyawa  ( Gynura procumbens ) Terenkapsulasi Maltodextrin dan Pengaruhnya
Terhadap  Kadar  MDA  Darah  Tikus Wistar  Jantan  yang  Diinduksi  CCl 4 .
Majalah  Farmasi  dan  Farmakologi ; 22(3):93-98.
Marhamah.  (2010).  Evalebari  Penggunaan Antibiotik  Pada  Pasien  Demam Tifoid  Dewasa  di  Instalasi  Rawat Inap  RS  Umum  Daerah  Pambalah Batung  Kabupaten  Hulu  Sungai Utara  Kalimantan  Selatan  2009.
Skripsi . Fakultas
Farmasi. Universitas Muhamadiyah Surakarta. Surakarta.
Menteri  Kesehatan  Republik  Indonesia.
(2006). Keputusan Menteri Kesehatan Republik Indonesia
Nomor 364/MENKES/SK/V/2006 Tentang Pedoman Pengendalian Demam Tifoid . Jakarta. Miranti,  M.,  Prasetyorini,  dan  Suwarg,  C. (2013). Perbandingan Aktivitas Antibakteri  Ekstrak  Etanol  30%  dan 96% Kelopak Bunga Rosella
( Hibiscus  sabdariffa  L .)  terhadap bakteri Staphylococcus aureus .
Ekologia . Vol. 13 No. 1.
Mohsina  Mukti,  Asma  Ahmed,  Shuvro Chowdhury,  Zubaida  Khatun,  3 Piplu  Bhuiyan,  3  Kallol  Debnath,  3 Mohammed  Rahmatullah.  (2012). Medicinal  plant  formulations  of Kavirajes in several areas of Faridpur and Rajbari districts,
Bangladesh. American-Eurasian
Journal  of  Sustainable  Agriculture ,
6(4): 234-247
Nonci,  F.Y.,  Rusli,  Atqiyah,  A.  (2014). Antimikroba  Ekstrak  Etanol  Daun Tapak  Liman  ( Elephantopus  scaber L .)  Dengan  Menggunakan  Metode KLT  Bioautografi. JF  FIK  UINAM . 2(4).
Pratama  N.H.  L.  and  Cucunawangsih.
(2017).  Antimicrobial  Resistance  of Salmonella  enterica  Serovars  typhi and Paratyphi Isolates  from  a General Hospital in Karawaci. International journal of Microbiology Volume 2017.
F.A.,  Haniastuti,  T.,  Utami,  T.W.  (2016). Skrining  Fitokimia  Dan  Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Sirsak ( Annona muricata  L .)  Pada Streptococcus mutans ATCC  35668. Majalah Kedokteran Gigi Indonesia . 3(1).
F. M. Rahman  and. Sharif Al Asad. (2013). Chemical and biological investigations  of  the  leaves  of Gynura  procumbens,.  Int  J  of  Bio (IJB). 3(4).
Rini,  E.P.,  dan  Nugraheni,  E.R.  (2018).  Uji Daya  Hambat  Berbagai  Merk Hand Sanitizer Gel Terhadap Pertumbuhan Bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus  aureus. Journal  of Pharmaceutical Science and Clinical
Ekologia : Jurnal Ilmiah Ilmu Dasar dan Lingkungan Hidup
Research .
Sidabutar,  S.,  dan  Satari,  H.I.  (2010). Pilihan  Terapi  Empiris  Demam Tifoid  Pada  Anak:  Kloramfenikol atau  Seftriakson?. Sari  Pediatri .
11(6).
Simarmata,  R.,  Lekatompessy,  S.,  dan
Sukiman, H. (2007). Isolasi Mikroba Endofitik Dari Tanaman Obat Sambung Nyawa ( Gynura procumbens ) Dan Analisis Potensinya  Sebagai  Antimikroba. Berk. Panel. Hayati : 13.
Shryock, T.R. and NCCLS, (2002). Performance
standards for
antimicrobial disk and  dilution susceptibility tests for bacteria isolated  from  animals:  approved standard. 2nd Edn., pp: 86
Tewari  R,  Saltanat  J.  and  Mridu  D.  (2015).
Antimicrobial  resistance  pattern  of
Salmonella enterica servars in Southern Delhi. International Journal of  Community  Medicine  and  Publik
Health. 2(3).
Tiwari  P.  Ritesh  Jain,  Kuldeep  Kumar, Rajnikant  Panik,  Pratap  Kumar Sahu.  (2011).  An  evaluation  Of Antimicrobial  Activities  Of  Root Extrac  Of  Calendula  officinalis (Linn). Pharmacologyonline 2:886-
892
Trisharyanti  D.K.,  Ika,  dan  Febriani,  R.
(2017). Skrining Aktivitas Antibakteri  Ekstrak  Etanol  Daun Terhadap Salmonella thypi
Resistensi Kloramfenikol. Journal of Pharmaceutical Science and Clinical Research.
Ugboko  H.  and  Nandita  De.  (2014).
Mechanisms  of  Antibiotic  resistance in Salmonella
typhi.
Int.J.Curr.Microbiol.App.Sci .  3(12): 461-476 Voight,  Rudolf.  (1994). Buku  Pelajaran Teknologi  Farmasi .  Gajah  Mada University Press. Yogyakarta.