## AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK MIKROALGA Thalassiosira sp TERHADAP BAKTERI Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis dan
Propionibacterium acne
Vina Juliana Anggraeni*, Titis Setyaning Wahyu, Herni Kusriani, Dewi kurnia Sekolah Tinggi Farmasi Bandung *email: vina.juliana@stfb.ac.id
Received 20 May 2019 Accepted 28 June 2019

## Abstrak
Pengembangan  obat  dan  kosmetik  dari  biota  laut  kini  tengah  terjadi  di  dunia  farmasi. Mikroalga Thalassiosira  sp merupakan  jenis  mikroalga  yang  memiliki  kandungan senyawa-senyawa  bioaktif.  Beberapa  penelitian  sebelumnya  menunjukkan  bawa mikroalga  memiliki  aktivitas  antibakteri.    Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui aktivitas  antibakteri  dari  ekstrak  mikroalga Thalassiosira  sp terhadap  3  bakteri    yaitu Staphylococcus  aureus , Staphylococcus  epidermidis dan Propionibakterium  acne di  fasa n-heksana,  etil  asetat  dan  etanol.  Ketiga  bakteri  ini  dapat  menyebabkan  infeksi  kulit. Mikroalga Thalassiosira  sp dikultivasi  menggunakan  medium  walne  dan  dipanen  pada hari  ke-6  setelah  penanaman.  Pemanenan  mikroalga  dilakukan  dengan  teknik  sentrifuga. Ektrak  dilakukan  dengan  cara    maserasi  bertingkat  selama  3  x  24  jam.  Pengujian antibakteri  dilakukan  dengan  metode  difusi  kertas  cakram  atau  metode disc  diffusion menurut  Kirby-Bauer.  Hasil  ekstrak  mikroalga Thalassiosira  sp diperoleh  paling  banyak pada  ekstrak  etanol  sebanyak  24,24%(b/b),  ektrak  etil  asetat  sebanyak  19,75%(b/b)  dan paling sedikit adalah ekstrak heksan sebanyak 8,64% (b/b). Hasil uji difusi menunjukkan ekstrak  n-heksana,  etil  asetat  dan  etanol  mikroalga Thalassiosira  sp memiliki  aktivitas terhadap bakteri Staphylococcus aureus , Staphylococcus epidermidis dan Propionibakterium acne yang ditunjukkan dengan adanya zona bening.
Kata kunci: mikroalga, Thalassiosira sp, antibakteri, infeksi kulit, metode difusi

## Abstract
Development drugs and cosmetics from marine biota is now being happened in pharmacy word. Microalgae Thalassiosira sp is a type of microalgae that has bioactive compounds. Several previous studies have shown the existence of microalgae which have antibacterial activity.  This  study  aimed  to  study  the  antibacterial  activity  of  extracts  of  microalgae Thalassiosira  sp against  3  bacteria  which  is Staphylococcus  aureus , Staphylococcus epidermidis and propionibacterium acne in the n-hexane, ethyl acetate and ethanol phases. These three bacteria can cause skin infections. Microalgae Thalassiosira sp was cultivated using  walne  medium  and  harvested  on  the  7th  day  after  planting.  Microalgae  harvesters are carried out by centrifuge techniques. The extracttion is done by multilevel maceration for  3  x  24  hours.  Antibacterial  testing  was  carried  out  by  the  paper  diffusion  method  or Kirby-Bauer's  disc  diffusion  method.  The  results  of  the  crude  extract  of  microalgae Thalassiosira  sp were  obtained  at  most  in  ethanol  extract  as  much  as  24.24%  (w/w), extract of ethyl acetate at 19.75% (w / w) and the least hexane extract at 8.64% (w/w). The diffusion test results for n-hexane, ethyl acetate, and ethanol microalgae Thalassiosira sp extract  have  activity  on Staphylococcus  aureus , staphylococcus epidermidis and propionibacterium acne which are supported by clear zones.
Keywords: mikroalge, Thalassiosira sp , antibacteria, skin infection, diffusion method

## Pendahuluan
Infeksi  mikroba  adalah  salah  satu penyebab utama masalah kesehatan, cacat fisik,  dan  kematian  diseluruh  dunia (Pradhan et  al ,  2014).  Diketahui  bahwa bakteri  merupakan  salah  satu  jenis mikroba  yang  menyebabkan  penyakit infeksi  bagi  manusia  dalam  kondisi tertentu  (Brook et  al ,  2001).  Satu  sifat bakteri  penyebab penyakit infeksi  disebut bakteri  pathogen,  diantaranya  bakteri Staphylococcus  aureus,  Staphylococcus epidermidis,  Propionibacterium  acne dan bakteri penyebab infeksi penyakit lainnya. Jenis  penyakit  yang  disebabkan  oleh bakteri – bakteri pathogen tersebut sangat beragam  sesuai  dengan  organ  yang diserang atau diinfeksi.
Penggunaan antibakteri atau antibiotika  adalah  salah  satu  cara  yang dilakukan  oleh  manusia  untuk  mengobati penyakit  akibat  infeksi  bakteri,  namun obat  antibakteri  sintesis  yang  digunakan secara  klinis  memiliki  kelemahan  seperti toksisitas tinggi, biaya mahal dan penggunaannya  sering  mengarah  pada munculnya bakteri resisten (Pradhan et al , 2014). Sebagai contoh bakteri Staphylococccus  epidermidis  umumnya telah resisten terhadap antibiotic penisilin dan metisilin (Bartlett, 2007).
Dari  masalah  tersebut,  muncul  upaya pengembangan  dan  pencarian  antibakteri alternatif  yang  seharusnya  memiliki  efek samping  minimal.  Bahan  alam  dipercaya memiliki  senyawa  alami  yang  bersifat lebih  ramah  lingkungan  sehingga  dapat dijadikan  sebagai  obat  tradisional  yang diharapkan  mampu  mengurangi  pengaruh negatif  dari  antibiotik  sintesis.  Eksplorasi bahan hayati dan potensinya sebagai  obat herbal  saat  ini  banyak  dilakukan.  Salah satu  komoditas  yang  belum  banyak  di eksplorasi  di  Indonesia  dan  mempunyai potensi  tinggi  dalam  pengembangan  obat herbal salah satunya adalah mikroalga.
Mikroalga memiliki beberapa senyawa bioaktif seperti eksopolisakarida, karatenoid,  asam  lemak,  asam  amino, hidrokarbon, gliserol, vitamin dan protein (Santhosh et  al ,  2016).  Senyawa  bioaktif tersebut  mampu  menghasilkan  berbagai zat  biologis  aktif  seperti  antibakteri, antivirus,  antijamur,  menghambat  enzim, imunostimulan,  aktivitas  sitotoksik  dan antispasmodial (Pradhan et al , 2014).
Senyawa  antibakteri  dari  mikroalga banyak yang belum teridentifikasi, namun beberapa  yang  telah  diketahui  komponen penyusunnya, diantaranya adalah senyawa fenol, aplysiatoxin, phlorotannins, peptide, terpen, polisakarida,
polyacetylenes,  sterol,  alkaloid,  asam organik aromatik, asam shikimat, poliketida,  hidroquinon  dan  asam  lemak (Shannon dan Abu – Ghannam, 2016).
Menurut  penelitian  Dewi  pada  tahun 2017, Mikrolaga Thalassiosira sp memiliki  kandungan  asam  lemak  jenuh dan  tidak  jenuh.  Berdasarkan  beberapa penelitian sebelumnya menyebutkan bahwa mikroalga Thalassiosira sp . memiliki  kandungan  lemak  yang  cukup tinggi  dan  belum  banyak  dilakukan  uji aktivitas antibakteri pada jenis mikroalaga Thalassiosira  sp tersebut.  Oleh  sebab  itu penelitian  ini  bertujuan  untuk  melakukan skrining  bioaktivitas  antibakteri  dari Thalassiosira sp pada beberapa bakteri uji penyebab infeksi kulit.

## Metode Penelitian

## Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  adalah  neraca analitik,  peralatan  gelas,  botol  kaca kapasitas  1  L,  pipa  L,  lampu  neon, aerator,  selang  plastik, haemocytometer , sentrifuge  Beckman  j2-Hs,  mikroskop, spektrofotometer UV-Vis Shimadzu, evaporator, sentrifuga, mikropipet, freeze dry , autoclave , dan inkubator. Sedangkan
bahan-bahan  yang  digunakan  adalah mikroalga thalasiossira  sp ,  medium walne,  air  laut  artifisial,  etanol  p.a,  etil asetat p.a, n-heksana p.a, plat KLT GF 254 , petroleum  eter,  dietil  eter,  asam  asetat, aquadest, medium nutrient agar, fosfomoblidat dan asam sulfat.

## Prosedur Penelitian
Sterilisasi  bahan  dan  alat  :  Dalam proses  pengerjaannya  diperlukan  teknik aseptik  baik  pada  alat  dan  bahan.  Alat pengembang  biakan  mikroalga  dan  uji aktvitas  seperti  air  laut,  gelas  ukur,  tip, pipa  L,  cawan  petri  dan  pinset  terlebih dahulu  disterilkan  dengan  metode  panas basah.  Sterilisasi  menggunakan  autoklaf pada  121̊C  selama  15  menit.  Sterilisasi untuk peralatan tidak tahan panas dilakukan  dengan  cara  menyemprotkan larutan  alkohol  70%  secara  merata (Andersen, 2005).
Aktivasi  Mikroalga:  Kultur  mikroalga thalasiossira sp diperoleh dari
oceanografi  LIPI  Jakarta  dalam  medium dengan salinitas 25 ppt. Aktivasi mikroalga  dilakukan  di  laboratorium penelitian  STFB  pada  medium  walne dengan  volume  total  900ml,  inokulum mikroalga  10%  dari  volume  total  kultur, dan  medium  0,1  %  (v/v).  salinitas medium  air  laut  diatur  pada  konsentrasi 25  ppt,  aerasi  24  jam,  suhu  ruang, fotoperiode  12:12  (gelap:terang)  dengan intensitas  cahaya  10.000  lux  (Kurnia, 2018). Proses aktivasi dilakukan selama 4 hari (Brataningtyas, 2011).
Pembuatan  kurva  pertumbuhan  dan kultivasi: Pembuatan kurva tumbuh dilakukan  selama  15  hari  dengan  kondisi sama  seperti  aktivasi.  Proses  pembuatan kurva pertumbuhan ini  dilakukan dengan melakukan  pemantauan  terhadap  jumlah sel mikroalga setiap hari dengan menggunakan counter chamber
haemocytometer di  bawah  mikroskop dengan perbesaran 40 kali.
Kultivasi dilakukan dengan menggunakan  medium  walne  dengan kondisi  yang  sama  seperti  aktivasi  dan
pemanenan  dilakukan  berdasarkan  hasil kurva pertumbuhan.
Pemanenan:  dilakukan  dengan  teknik Mikroalga thalasiossira  sp dikultivasi selama 6 hari kemudian dipanen menggunakan  sentrifuga  dengan  rotor besar  pada  kecepatan  8.670  xg  (7.000 rpm)  selama  25  menit  dan  suhu  4̊̊̊̊C (Hairunnisa,
2012). Biomassa
dikumpulkan  dan  ditimbang  sedangkan supernatant dibuang. Biomassa yang telah terkumpul disebut sebagai biomassa basah dan  dikeringkan  dengan  menggunakan alat freeze dry selama 24 jam.
(Ramdanawati, 2018) Karakterisasi Biomassa
kering:
Karakterisasi berupa penetapan kadar abu total,  kadar  abu  tidak  larut  asam,  kadar sari larut air, kadar sari larut etanol, kadar air dan susut pengeringan.
Ekstraksi dilakukan terhadap biomassa mikroalga yang  telah  siap  dengan menggunakan  metode  maserasi  dengan pelarut etanol, etil asetat dan n - heksana. Biomassa kering yang  diberi sedikit pasir kemudian digerus, kemudian
disonikasi 1 dengan sedikit pelarut ekstraksi  selama  3  kali  siklus.  Setelah disonikasi  ditambahkan  volume  pelarut dengan  total  1:3  dari  biomassa  kering. Ekstraksi  dilakukan  pada  suhu  ruang selama  3  x  24  jam  dengan  penggantian pelarut  setiap  24  jam.  Ekstrak  yang  di dapat  kemudian  dipekatkan  dengan  alat penguap  berputar  hampa  udara  ( Rotary Evaporator )  hingga  didapatkan  ekstrak pekat.  Setelah didapat ekstrak, dilakukan pemantauan  menggunakan  kromatografi lapis tipis (KLT).
Pengujian aktivitas antibakteri: dilakukan  dengan  metode  difusi  yaitu metode cakram  kertas.  Kultur bakteri uji (100 μL) diinokulasi di dalam media agar dengan  menggunakan  metode  cawan tuang.  Kemudian  pada  media  tersebut disimpan  cakram  kertas  yang  sudah dicelupkan ke dalam larutan ekstrak yang dilarutkan  dalam  DMSO.  Konsentrasi larutan yang diuji mulai dari 2% b/v, 4%, 6%,  dan  8%  pada  masing-masing  ekstrak
dan  dilakukan  2  kali  pengulangan  Pada penelitian ini Kontrol
positif menggunakan clindamisin, jenis antibiotik yang  biasa  digunakan  untuk  bakteri infeksi  kulit.  Aktivitas  antibakteri  diukur dengan  mengamati  zona  hambat  berupa zona  bening  di  sekitar  cakram.  Besarnya zona hambat diukur dengan penggaris dan jangka sorong (Panjaitan, 2018).

## Hasil dan Pembahasan
Aktivasi  mikroalga  dalam  medium walne  dilakukan  untuk  mempersingkat fase sel adaptasi terhadap kondisi medium dan  kondisi  lingkungan  pertumbuhan yang  baru.  Aktivasi  dilakukan  selama  4 hari  karena  diperkirakan  dalam  waktu  4 hari mikroalga dapat tumbuh dan beradaptasi dengan medium atau lingkungan barunya. Penambahan
intensitas  warna  menunjukkan  adanya pertumbuhan  mikroalga.  Perubahan  pada kondisi  tumbuh  dapat  menjadi  penyebab gangguan  pada  pertumbuhan  mikroalga seperti  pada  perlambatan  pertumbuhan bahkan bisa menyebabkan adanya kontaminasi dan kematian pada mikroalga. (Kurnia, 2018) Pembuatan kurva pertumbuhan bertujuan  untuk  menggambarkan  siklus pertumbuhan  dari  mikroalga.  Kurva pertumbuhan ini untuk mengetahui kelayakan  dalam  produksi  biomassa mikroalga Thalassiosira  sp dan  waktu pemanenan optimum ketika proses kultivasi. Proses pembuatan kurva
pertumbuhan  ini  dilakukan  di  dalam ruangan,  selama  15  hari  mikroalga tersebut  diberi  aerasi  selama  24  jam, fotoperiode gelap terang (12:12) dan pada suhu  24-25°C.  Hal  ini  bertujuan  untuk melihat perkembangan pertumbuhan mikroalga  di  dalam  ruang  pada  medium walne  mulai  dari  fase  logaritmik  hingga memasuki fase kematian.
Selama  prosesnya  mikroalga  akan berkembang  biak  dan  terjadi  peningkatan sel  setiap  hari  serta  akan  mengalami penurunan  sel  jika  telah  sampai  fase kematian. Pemilihan waktu panen
dilakukan  ketika  mikroalga  memasuki fase  stasioner,  dimana  ketika  itu  jumlah sel  pada  mikroalga  tumbuh  dengan  baik dan  segar.  Lamanya  masa  panen  akan berbeda  tergantung  jenis  mikroalga.  Dari data  pembuatan  kurva  pertumbuhan  pada mikroalga Thalassiosira sp dengan medium  walne  di  peroleh  rata  –  rata kepadatan  sel  tertinggi  pada  hari  ke  –  6 (ke enam) dengan jumlah sel sebesar 1692 x 103 dan ke – 7 (ke tujuh) dengan jumlah sel  sebesar  1708  x  103.  Adapun  data perkembangan  sel  selama  15  hari  seperti pada tabel 1.
Dari data kepadatan sel selama 15 hari tersebut dapat dilihat pada hari ke - 6 dan ke –  7  perkembangan  mikroalga Thalassiosira  sp berada  pada  fase stasioner.
Tabel 1 Kepadatan Sel Mikroalga

## Thalassiosira sp
Hari Ke - Pengulangan (10 3 ) Rata – rata kepadatan sel (10 3 ) 1 2 3 0 50 325 275 217 1 575 550 575 566 2 650 650 625 642 3 1075 1125 1125 1108 4 1375 1375 1300 1250 5 1375 1425 1325 1375 6 1825 1650 1600 1692 7 1525 1950 1650 1708 8 1500 1800 1275 1525 9 1450 1475 1300 1408 10 1425 1375 1000 1267 11 1350 1375 950 1225 12 975 1325 1000 1100 13 700 925 775 800 14 700 1575 300 858 15 550 1200 325 692
Pada  fase  tersebut  kelayakan  produksi biomassa  berada  pada  titik  maksimal sehingga pemilihan waktu panen dilakukan  pada  hari  ke  –  6.  Pada  gambar 2 menunjukkan kurva pertumbuhan mikroalga Thalassiosira  sp selama  15 hari.
Dari grafik kurva pertumbuhan mikroalga Thalassiosira sp di atas terlihat pada  hari  pertama  mikroalga  mengalami
masa  penyesuaian  terhadap  lingkungan sekitar  baik  medium  nutrient  maupun medium tumbuh. Kemudian sel mikroalga terjadi  pembelahan  dengan  cepat  pada hari  ke  tiga  dan  ke  empat,  hal  ini mikroalga mengalami fase logaritmik atau fase  eksponensial  pada  medium  yang digunakan. Fase penurunan laju pertumbuhan  terlihat  pada  hari  ke  lima,
hal ini dikarenakan terjadi kompetisi yang tinggi  pada  medium  dan  zat  makanan yang tersedia tidak sebanding. Dilanjutkan fase stasioner selama dua hari pada  hari  ke  enam  hingga  ke  tujuh, dimana  nutrisi  yang  tersedia  telah  habis sehingga  mengakibatkan  pertumbuhan berhenti  dan  kemudian  mengalami  fase kematian hingga hari ke lima belas.
Gambar 2 . Kurva pertumbuhan mikroalga Thalassiosira sp
Kultivasi  disebut  juga  dengan  proses penanaman  mikroalga.  Proses  kultivasi dilakukan  untuk  mendapatkan  biomassa mikroalga  sebanyak–  banyaknya.  Pada penelitian  ini  kultivasi  yang  dilakukan menggunakan  metode batch dengan menanam  sel  mikroalga  dalam  wadah dengan  periode  waktu  tertentu  dan dilakukan pemanenan ketika telah mencapai  kepadatan  sel  mikroalga  secara maksimum.  Sebelum  dilakukan  kultivasi, kultur mikroalga harus dilakukan aktivasi terlebih  dahulu  dengan  tujuan  untuk meremajakan  kultur  yang  telah  berumur tua  atau  untuk  menyesuaikan  mikroalga dengan  medium  nutrien  yang  digunakan. Ketika  di  aktivasi  kultur  telah  dalam keadaan  muda,  segar  dan  baik  dan  juga siap untuk berkembang biak.
Kultivasi  dilakukan  seperti  ketika aktivasi  pada  medium  walne  dengan
kepadatan  sel  kultur  sebesar  10 5 sel/mL. Dari proses kultivasi mikroalga Thalassiosira  sp ini  akan  dilakukan pemanenan pada hari ke 6. Dimana semua kultur  hasil  kultivasi  dari  beberapa  botol dikumpulkan menjadi satu dihitung berapa  milliliter  jumlahnya  kemudian kultur  campuran  dari  beberapa  botol dihitung kepadatan sel nya pada haemocytometer dibawah mikroskop. Selain  jumlah  sel  yang  mengalami peningkatan, pertumbuhan mikroalga juga ditandai  dengan  perubahan  warna  sesuai dengan jenis mikroalga. Mikroalga Thalassiosira  sp mengalami  perubahan warna  kuning  yang  semaikin  lama semakin pekat.
Pemanenan dilakukan dengan menggunakan  teknik  sentrifuga.  Prinsip teknik  sentrifuga  itu  sendiri  adalah memisahkan  antara  cairan  dan  padatan
dalam  waktu  tertentu,  kecepatan  tertentu dan  pada  suhu  dingin.  Tujuan  dari pemanenan  dengan  teknik  sentrifuga  ini adalah  untuk  menghindari  kerusakan  sel mikroalga  dan  meminimalisir  kehilangan biomassa. Teknik sentrifuga ini salah satu teknik pemanenan  yang  aman dan mudah dilakukan.  Dari  proses  sentrifuga  akan diperoleh  cairan  dan  padatan,  yang kemudian  padatannya  diambil  untuk dikumpulkan sebagai biomassa basah dan
cairannya dibuang. Biomassa basah selanjutnya dilakukan pengeringan dengan freeze dryer untuk menghilangkan sisa  air  laut  yang  masih  ada.  Tujuan  dari proses  freeze  dryer  ini  untuk  mencegah pembusukan biomassa dan menghindarkan  dari  cemaran  bakteri  atau jamur.  Data  kultivasi  mikroalga  yang dilakukan  pada  penelitian  ini  ditunjukkan pada tabel 2.
Tabel 2 Data Kultivasi Mikroalga Thalassiosira sp No Jumlah Sel (10 3 sel/ml) Jumlah Kultur (Liter) Biomassa Basah (gram) Biomassa Kering (gram) 1 1075 4,23 7,2 0,9 2 1375 7,79 14,9 1,89 3 1875 10,15 15,9 2,50 4 1675 13,0 21,1 2,05 5 1750 12,88 32,3 4,61 6 2000 9,40 38,2 3,44 7 1925 15,29 53,9 4,52 8 2050 13,40 58,8 6,09 9 1900 15,68 54,2 4,96
Karakterisasi  biomassa  kering  ini seperti  pada  simplisia,  ada  beberapa karakterisasi  yang  dilakukan  meliputi penetapan kadar abu total, kadar abu tidak larut  asam,  kadar sari larut  air, kadar sari larut  etanol,  kadar  air  dan  susut pengeringan dengan tujuan untuk
menjamin keseragaman mutu agar memenuhi  standar  simplisia  dan  ekstrak.
Data  karakterisasi  biomassa  dapat  dilihat pada tabel 3.
Tabel 3 Hasil Karakterisasi Biomassa Parameter Hasil (%b/b) Kadar Abu Total 41,92 Kadar Abu Tidak Larut Asam 12,83 Kadar Sari Larut Air 52,45 Kadar Sari Larut Etanol  35,56 Susut Pengeringan 0,27 *) % v/b Penetapan  kadar  abu  total  dilakukan dengan tujuan untuk memberikan
gambaran kandungan mineral internal dan eksternal  yang  berasal  dari  proses  awal
sampai terbentuknya biomassa. Kadar abu total  berkaitan  dengan  mineral  baik senyawa  organik  maupun anorganik  yang diperoleh secara internal maupun eksternal.  Sedangkan  kadar  air  abu  tidak larut  asam  bertujuan  untuk  mengetahui jumlah  abu  yang  diperoleh  dari  faktor eksternal,  bersumber  dari  pengotor  yang berasal  dari  pasir  atau  tanah  silikat. (DepkesRI, 2000)
Pada  tabel  3  dapat  dilhat  bahwa  kadar abu  total  sebesar  41,92%  dan  kadar  abu tidak larut asam 12,83%. Selisih keduanya  sebesarn  29,  09  %  yang menunjukkan  bahwa  kandungan  mineral internal dalam mikroalga Thalasissiora sp cukup tinggi. Tingginya kandungan mineral dalam mikroalga Thalasissiora sp disebabkan  oleh  keberadaan  silikat  pada dinding  sel  mikroalga Thalasissiora  sp yang merupakan mikrolaga jenis diatom.
Dilihat  dari  hasil  kadar  abu  dan  kadar abu  larut  asam  maka  biomassa  dari mikroalga ini banyak mengandung mineral  dan  hal  tersebut  sejalan  dengan jenis  mikroalga thalasiossira  sp yang merupakan  diatom  yang  memiliki  silika pada dinding selnya.
Penetapan  kadar  sari  larut  air  dan etanol  dilakukan  untuk  memberikan gambaran  awal  jumlah  senyawa  yang dapat tersari dengan pelarut air dan etanol (Depkes RI, 2000:31). Dari hasil pengujian  menunjukkan  senyawa  polar yang  dapat  terlarut  dalam  air  lebih  besar daripada  senyawa  kurang  polar  (semi polar  maupun  non  polar)  yang  dapat terlarut dalam etanol.
Penetapan susut pengeringan dilakukan dengan tujuan untuk
memberikan  batasan  maksimal  mengenai besarnya  senyawa  yang  hilang  pada  saat proses  pengeringan  (Depkes  RI,  2000: 13).  Dari  hasil  menunjukkan  susut pengeringan  sebesar  0,27%  hal  ini menunjukkan  jumlah  senyawa  yang hilang  (menguap)  pada  saat  proses pengeringan adalah 0.27%.
Ekstraksi
Tahap ekstraksi yang dilakukan
terhadap mikroalga
Thalassiosira sp ini menggunakan metode cara dingin yaitu maserasi. Pada prosesnya  dilakukan  maserasi  bertingkat dengan tiga pelarut yang berbeda. Pelarut yang  digunakan  adalah  etanol,  etil  asetat dan  n-heksanaa.  Pertama,  Biomassa kering mikroalga Thalassiosira sp sebanyak 20 gram dengan 100 ml pelarut n-heksana  disonikasi  terlebih  dahulu selama  10  menit  (1  siklus)  dan  diulangi hingga  beberapa  siklus.  Proses  sonikasi bertujuan  untuk  menghancurkan  dinding sel  sehingga  ekstraksi  lebih  maksimal. Kemudian  proses  maserasi  dilakukan dengan menggunakan shaker untuk memberikan  goyangan  selama  24  jam. Proses  shaker  selama  maserasi  bertujuan untuk  memberikan  tumbukan  antara pelarut dengan biomassa sehingga senyawa  yang  terkandung  didalamnya akan  lebih  mudah  larut  dan  tertarik  oleh pelarut.
Dari  proses  ekstraksi  akan  didapatkan tiga  bentuk  ekstrak  cair  dari  masing– masing  pelarut,  kemudian  ekstrak  cair yang  didapatkan  diuapkan  pada  suhu ruang atau dibawah blower sehingga yang tersisa  hanya  ekstrak  pekat.  Dilihat  pada tabel 4 hasil ekstrak pekat serta rendemen pada setiap pelarut.
Tabel 4 . Berat Ekstrak dan % Rendemen
Jenis Pelarut Berat Sampel (g) Ekstrak Kental (g) % Rende men n-heksanaa 20,01 1,73 8,64 % Etil Asetat 20,01 3,96 19,79 % Etanol 20,01 4,85 24,24 %
Randemen  yang diperoleh sejalan dengan hasil karakterisasi biomassa yang menunjukkan pada biomassa lebih banyak senyawa  polar  dibanding  semipolar  dan non  polar.  Pemantauan  ekstrak  dilakukan setelah  mendapatkan  ekstrak  yang  telah diuapkan  menggunakan  KLT  dengan beberapa fasa gerak.
Dari  gambar  2  dapat  dilihat  bahwa ekstrak  positif  mengandung  senyawa fenol,  hal  tersebut  ditunjukkan  dengan adanya  noda  hitam  dibawah  lampu  uv  λ 254 dengan pereaksi  FeCl 3 dan noda biru pada lampu uv  λ 366. (Nuria, 2009)
Dari  gambar  3  menunjukkan  adanya senyawa  lipid  dan  asam  lemak  dengan
pereaksi  untuk  lipid  yaitu  petroleum  eter: dietil  eter:  asetat  glasial  (9:1:0,1). Sedangkan  pada  gambar  4  menunjukkan hasil  positif  terhadap  asam  lemak.  Hasil positif  lipid  dan  asam  lemak  dilihat  dari munculnya bercak hitam setelah disemprot  fosfomolibdat.  (Shanti  2007)
Gambar  2 .  Hasil  Pemantauan  ekstrak  dengan  fasa  gerak  n-heksana:  etil  asetat  (5:5)  dengan beberapa penampak bercak
Pengujian
Aktivitas Antibakteri
dilakukan  dengan  proses  difusi  cawan.
Hasil  pengukuran  diameter  zona  bening yang terbentuk disajikan pada tabel 5.
Gambar 3 . Hasil Pemantauan ekstrak dengan fasa gerak petroleum eter: dietil eter:  asetat glasial (9:1:0,1)
Gambar  4 .  Hasil  Pemantauan  ekstrak  dengan  fasa  gerak  Heksana  :  as.  Asetat  glacial  :  air (10:0,5:0,25)
Hasil pengujian semua ekstrak menghasilkan zona bening dengan diameter  yang  hampir  mirip  pada  setiap ekstrak  dan  konsentrasi.  Menurut  davis dan  stout  di  dalam  dwijendra  (2014) apabila  zona  hambat  yang  terbentuk    5 mm  maka  aktivitas  penghambatannya dikategorikan  lemah.  Jika  memiliki  zona hambat  sekitar  5-10  mm  digolongkan kekukatannya  sedang  dan  10-19  mm digolongkan  kuat  dan    20  digolongkan sangat  kuat.  Semua  ekstrak  berada  pada rentang  5-10  mm  maka  kekuatan  ekstrak mikroalga thalasiossira sp ini digolongkan sedang.
Senyawa  metabolit  sekunder  yang terkandung dalam ekstrak thalasiossira sp menunjukkan memiliki aktivitas
antibakteri dengan menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus,  Staphylococcus  epidermidis,  dan Propionibacterium  acne. Penghambatan yang  terjadi  terhadap  bakteri  dipengaruhi oleh  adanya  kandungan  senyawa  yang terkandung  di  dalam  ekstrak.  Senyawa antibakteri  menurut  Pelczar  dan  Chan (2005)  memiliki  aktivitas  antibakteri dengan menggunakan berbagai mekanisme dalam merusak sel,
menghambat  kerja  enzim  dan  mengubah molekul protein. (Widyana, 2014)
Tabel  5 diameter  rata-rata  zona  Hambat  eksrak  mikroalga Thalasiossira  sp terhadap Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, dan Propionibacterium acne
Bakteri Konsentrasi (%) Diameter Rata – Rata Zona Hambat (mm) Ekstrak Etanol Ekstrak Etil Asetat Ekstrak Heksana Staphylococcus aureus 8 % 6% 4% 2% 7,55
7,55 7,35
7,3 8,2
8,05 7,7 7,6
8,35 7,95
7,5
7,1 Staphylococcus epidermidis 8 % 6 % 4 % 2 %
8,6 8,25 7,25
7,2 7,4
7,15 6,85 6,45
8,85 8,2
7,8
7,4 Propionibacterium acne 8 % 6 %
4 %
2 %
7,7 7,45 7,45
7,2
8,7 7,45 7,2 7,0
7,05 6,9 6,65 6,3 Bakteri Staphylococcus aureus, Staphylococcus
epidermidis, dan Propionibacterium acne merupakan bakteri  gram  positif.  Menurut  brown dalam  Panjaitan,  komposisi  dinding  sel yang terdiri dari membrane lipida tunggal yang  dikeliling  dinding  sel  yang  terdiri dari lapisan tebal  asam  peptidoglikan dan lipoteikoat yang menuju ke membrane sel dengan  bantuan  diasilgliserol.  (Panjaitan, 2018)
Penelitian terdahulu melaporkan fungsi asam  lemak  dari  alga  berperan  sebagai penghambat dalam rantai transport elektron dan fosfolirasi oksidasi normal di dalam membrane sel bakteri dan menyebabkan  rusaknya  membrane  sel. (Shanon and Ghannam, 2016).
Dari hasil pemantauan ekstrak diketahui  bahwa  mikroalga  memiliki komponen  metabolit  sekunder  berupa fenol dan flavonoid dan juga mengandung lipid  dan  asam  lemak.  Kedua  jenis senyawa  ini  memiliki  potensi  sebagai senyawa antibakteri dari mikroalga Thalasissiora sp terhadap bakteri uji pada penelitian ini.

## Kesimpulan
Ekstrak  mikroalga thalasiossira  sp diperoleh  randemen  paling  banyak  pada ekstrak etanol sehingga dapat disimpulkan bahwa  senyawa  yang  banyak  terkandung dalam  mikroalga thalasiossira sp  adalah senyawa  polar.  Aktivitas  antibakteri  dari mikroalga thalasiossira sp  terhadap Staphylococcus  aureus,  Staphylococcus epidermidis, dan  Propionibacterium acne
tergolong berkekuatan sedang pada ekstrak n-heksana, etil asetat dan etanol.

## Daftar Pustaka
Andersen,  R.  (2005): Algal  Culturing Techniques , Elsevier Academic press, United Kingdom. 21-82.
Barsanti,  L.,  dan  Gualteri,  P.  (2006): Algae  Anatomy,  Biochemistry,  and Biotechnology ,  CRC  Taylor  and Francis. USA.
Bartlett,  J.G.  (2007):  Staphylococcus epidermidis [Online]. Tersedia: http://prod.hopkinsabxguide.org/pat hogens/bacteria/aerobic_grampositi ve_cocci/staphylococcus_epidermid is.html?contentInstan  ceId=2558  70 (15 Juli 2008).
Brataningtyas, D.S. (2011). Potensi
Mikroalga Laut Tropis Untuk
Bahan  Baku  Senyawa  Karoten  dan
Klorofil.  Tesis.  Program  Studi Kimia: Institut Teknologi Bandung Brook, I. (2001): Recorvery of Anaerobic Bacteria  From  Four  Children  With Postthoracotomy  Sternal  Wound Infection Pediatrics.
Departemen Kesehatan RI. (2000). Parameter  Standar  Umum  Ekstrak Tumbuhan Obat, Direktorat Jenderal Pengawas Obat dan
Makanan, Jakarta
Dewi,  Rosmaya.  (2017):  Produktivitas Minyak  dan  Kandungan  Asam Lemak Thalassiosira  sp .  yang  di Kultivasi dengan Makronutrien Pupuk, Jurnal
Kimia dan Pendidikan. 2(2). 222-234. Dwijendra, I Made et al , (2014): Aktivitas Antibakteri dan Karakterisasi Senyawa Fraksi Spons Lamellodysidea herbacea Yang diperoleh dariTeluk  Manado. Jurnal Pharmacon, 3 (4), 1-10 Kurnia, Dewi,. Asri, Revi,. Dinata, Deden Indra,. Nurachman Zeily,.
(2018).:Analisis Asam Lemak Mikroalga  Laut Chlorella  sp. Pada Medium
Modifikasi dengan
Kromatografi Gas Spektrometri Massa.Journal of Pharmacopolium.1(1). 1-8
Nuria,  Cut  Maulita,.  Arvin  Faizatun,.
Sumantri,.  (2009):  Uji  Aktivitas Antibakteri  Ekstrak  Etanol  Daun Jarak  Pagar  ( Jatropha  curcas  L ) terhadap  bakteri Staphylococcus aureus ATCC  25023, Escheria  coli ATCC  25922  dan Salmonella  thypi ATCC 1408 Ramdanawati,  Liska,.  Kurnia,  Dewi,.
Tyas, Vita Aji Kusumaning,. Nurachman, Zeily,. (2018): Analisis Komposisi Asam Lemak dari Mikroalga Laut Navicula salinicola . Alkimia.6(2). 141-149 Panjaitan,  Riong  Seulina,.  Warganegara, Fida  Madayani,.  (2017):  Aktivitas Antibakteri Ekstrak Lipid Sargasum polycistum terhadap Bacillus cereus dan Staphylococcus  Aereus .  Jurnal Kimia dan Pendidikan. 3(3). 29-39.
Pelczar,  MJ,  and  Chan.  (2005).  Dasar- dasar  mikrobiologi,  Jilid  II,  UI Press, Jakarta
Pradhan,  J.,  Das,  S    Das  Kumar,  B.
(2014):  Antibacterial  activity  of freshwater  microalgae:  A  review, African  Journal  of  Pharmacy  and ,Doi: 10.5897/AJPP2013.0002.
Santhi,  Agatha  Vilma,.  (2007):  Potensi Antibakteri Fraksi Kloroform-
Etanol-Asam  Asetat  dari  Ekstrak Etil  Asetat  Kulit  Batang  Kemiri (Aleurites  moluccana  L,  Willd) terhadap  Staphylococcus  aereus. Skripsi:
Universitas Sangata Dharma, Yogyakarta Santhosh, S., Dhandapani, R., Hemalatha,  N.  (2016):  Bioactive compounds from Microalgae and its different applications-a review. Advances in Applied Science Research . 7(4). 153-158.
Shannon,  E.    Nissreen  A.G.  (2016):
Antibacterial  derivatives  of  marine algae: An Overview of pharmacological  mechanisms. Mar. Drug. 14(4). doi:10.3390/md14040081. Widyana,  W.  Khotimah,  S.    Lovadi,  I. (2014): Aktivitas Antibakteri Ekstrak Lumut Octoblepharum albidium Hedw terhadap Pertumbuhan Staphylococcus epidermidis dan Pseudomonas
aeruginosa ,  Jurnal  Protobiont.  3(2). 166-170.