## PEMISAHAN KAFEIN DENGAN METODE MICROWAVE ASSISTED EXTRACTION (MAE) TERHADAP 4 JENIS BIJI KOPI ROBUSTA

## Nabila Marthia
Program Studi Teknologi Pangan Fakultas Teknik Universitas Pasundan, Jl. Dr. Setiabudhi No. 193, Bandung, 40153, Indonesia.
Email : nabilamarthia@unpas.ac.id

## Abstrak
Penelitian  ini  untuk  melakukan  isolasi  terhadap  kafein  dari  biji  kopi  Robusta  yang  berasal  dari  4  daerah  di Jawa  Barat  dengan  metode Microwave  Assisted  Extraction (MAE)  dan  menentukan  kadar  kafein  tertinggi    dari  kopi- kopi  tersebut.  Variabel  yang  diamati  antara  lain  jenis  pelarut  dan  kadar  kafein  hasil  ekstraksi  kopi. Hasil  penelitian menunjukkan  bahwa nilai  rendemen  tertinggi  berdasarkan  berat  kering  kafein  diperoleh  ekstrak  dengan  pelarut diklorometana sebesar 0,48-0,86%. Proses isolasi kafein dinilai berhasil dari hasil pengujian KLT dan   GC-MS. Hasil pengujian kadar kafein menunjukkan kadar kafein tertinggi dimiliki oleh biji kopi Robusta Gunung Halu sebesar 2,29% dengan ekstraksi menggunakan diklorometana.
Kata kunci : kopi Robusta, Ekstraksi, Kafein, Microwave.
Received: June 22, 2021 ; Accepted: July 8, 2021; Publish online: July 31, 2021

## 1. Pendahuluan
Biji kopi merupakan salah satu jenis tanaman yang digunakan  sebagai  bahan  baku  minuman.  Selain  kopi merupakan komoditas unggulan di Indonesia. Masyarakat  di  Indonesia  sekarang  ini  semakin  banyak yang menyukai minuman kopi. Minuman kopi termasuk ke  dalam  salah  satu  minuman  penyegar  karena mengandung  kafein  yang  dapat  menstimulasi  sistem syaraf pusat dan jantung serta dapat meningkatkan kerja otak (Bhawani, dkk., 2015). Jenis biji kopi yang disukai oleh masyarakat Indonesia yaitu biji kopi jenis Arabika dan  Robusta.  Perbedaannya  biji  kopi  robusta  memiliki kandungan kafein yang lebih banyak dibanding arabika. Di  wilayah  Jawa  Barat  sendiri,  jenis  biji  kopi  yang terkenal  antara  lain  biji  kopi  arabika  dan  robusta  dari daerah  Ciwidey,  Gunung  Puntang,  Gunung  Halu,  dan Malabar.
Kafein  digunakan  sebagai  stimulan  sistem  saraf pusat dan mempercepat metabolisme (diuretik). Konsumsi kafein berguna untuk meningkatkan kewaspadaan,  menghilangkan  kantuk  dan  menaikkan mood.
Pada  penelitian  ini  dilakukan  pemisahan  kafein dari  biji  kopi  Robusta  yang  berasal  dari  4  daerah  di Jawa  Barat.  Kafein  yang  terkandung  dalam  biji  kopi dapat diisolasi dengan berbagai metode. Pada umumnya metode yang digunakan yaitu ekstraksi dan kromatografi. Metode ekstraksi padat-cair konvensional banyak digunakan karena  mudah dilakukan oleh  semua orang.  Adapun  kekurangannya  yaitu  membutuhkan waktu  yang  cukup  lama  dalam  proses  pemisahannya. Adapun  pada  penelitian  ini  metode  yang    akan digunakan  adalah Microwave  Assisted  Extraction
(MAE). Microwave assisted extraction ( MAE ) merupakan  teknik  baru  dengan  waktu  ekstraksi  lebih cepat  dan  konsumsi  energi  lebih  sedikit.  Proses ekstraksi  menggunakan  metode MAE ini  hanya dilakukan  selama  4  menit.  Sehingga  metode  ini  dapat dikatakan  cepat,  ekonomis  dan  ramah  lingkungan  serta efektif  dalam  pemisahan  kafein  dan  katekin  dari  teh hijau (Serdar, dkk . , 2016).

## 2. Bahan dan Metode Penelitian
Bahan- bahan yang digunakan dalam penelitian ini meliputi  biji  kopi  yang  ditanam  di  Perkebunan  Kopi  di daerah Ciwidey dengan jenis kopi Robusta yang berasal dari  daerah  Malabar,  Gunung  Puntang,  Gunung  Halu, dan Ciwidey .

## Metode Penelitian
Biji  kopi  sangrai  halus  diitmbang  sebanyak 5  gram  dan  dilarutkan  ke  dalam  100  mL  aquades. Kemudian  diaduk  selama  90  menit  pada  suhu  ruang. Setelah itu dipindahkan ke dalam gelas kimia teflon dan diekstraksi  dengan  alat domestic  microwave pada  suhu 180 o C  selama  2  menit  dengan  kekuatan  (daya)  600  W. Hasil  ekstraksi  lalu  didinginkan  pada  suhu  ruang  dan tutup gelas kimia teflon dibuka. eksponensial Nannochloropsis  sp. dan Porphyridium  cruentum mengalami  puncak  pertumbuhan  dan  kelimpahan biomassa atau kepadatan sel (Kawaroe et al ., 2010).
Biji kopi sangrai halus diitmbang sebanyak 5 gram dan  dilarutkan  ke  dalam  100  mL  aquades.  Kemudian diaduk  selama  90  menit  pada  suhu  ruang.  Setelah  itu dipindahkan ke dalam gelas kimia teflon dan diekstraksi
dengan  alat domestic  microwave pada  suhu  180 o C selama  2  menit  dengan  kekuatan  (daya)  600  W.  Hasil ekstraksi  lalu  didinginkan  pada  suhu  ruang  dan  tutup gelas kimia teflon dibuka.
Penentuan  rendemen  dari  kafein  dengan  cara menimbang  ekstrak  kafein  fraksi  klorofom  dan  ekstrak kafein  fraksi  diklorometana  setelah  dievaporasi  dan ekstrak dikeringkan. Adapun perhitungan dari rendemen kafein digunakan rumus sebagai berikut :
= massa ekstrak kering kafein massa sampel kopi bubuk × 100%
(Serdar dkk . , 2016)

## 3. Hasil dan Pembahasan
Kopi  bubuk  diekstraksi  menggunakan  pelarut  air. Ekstraksi  dilakukan  untuk  mendapatkan  kafein  yang terkandung dalam kopi bubuk tersebut. Adapun metode ekstraksi  yang  digunakan  adalah microwave  assisted extraction menggunakan microwave oven . Perbandingan  antara  kopi  bubuk  dengan  pelarut  air sebanyak 1:20 (b/v).
Sebelum  dilakukan  ekstraksi,  kopi  bubuk  yang telah  ditambahkan  aquadest  dilakukan  pengadukan terlebih  dahulu  selama  90  menit  pada  suhu  ruang. Setelah itu dilakukan ekstraksi menggunakan microwave  oven selama  2  menit  dengan  suhu  sekitar 80 o C dan daya 750 W. Pada penelitian ini keempat jenis kopi  robusta  yang  telah  diekstraksi  dengan microwave dipisahkan  dengan  2  jenis  pelarut  organik,  yaitu kloroform  dan  diklorometana.  Sehingga  terdapat  2 perlakuan  pemisahan  kafein  terhadap  keempat  jenis kopi  menggunakan  2  jenis  pelarut.  Setelah  dipisahkan kemudian ekstrak kafein tersebut dikeringkan.
Sampel hasil ekstraksi menggunakan diklorometana  dan  juga  hasil  ektraksi  menggunakan kloroform,  dan  juga  standar  kafein,  masing-masing sebanyak 1 mL diklorometana untuk identifikasi dengan KLT.  Nilai  Rf  yang  dihasilkan  dapat  dilihat  pada Tabel 1.
Tabel 1.Nilai Rf kafein hasil ekstraksi.
Jenis Kopi Nilai Rf Pelarut Dikloromet ana Stand ar Kafei n Pelarut Klorofor m Stand ar Kafei n Malab ar 0,80 0,80 0,76 0,76 Gunun g Puntan g 0,71 0,71 0,62 0,59 Gunun g Halu 0,80 0,77 0,68 0,71 Ciwid ey 0,78 0,78 0,82 0,82
Hasil  penelitian  menunjukkan  nilai  Rf  yang berbeda-beda,  dimana  Rf  sampel  hasil  ekstraksi menggunakan  diklorometana  memiliki  nilai  Rf  antara 0,70-0,80,  sedangkan  nilai  Rf  sampel  hasil  ekstraksi menggunakan  kloroform  memiliki  nilai  antara  0,62- 0,82.  Berdasarkan  nilai  Rf  yang  didapat,  diketahui sampel  hasil  ekstraksi  mengandung  kafein  karena  hasil Rf sesuai atau mendekati nilai Rf standar kafein.
Pengujian  menggunakan  KLT  merupakan  proses pemisahan  komponen  kimia  berdasarkan  prinsip adsorbsi  dan  partisi  yang  ditentukan  oleh  fase  diam (adsorben)  dan  fase  gerak  (eluen).  Komponen  kimia bergerak  mengikuti  fase  gerak  karena  daya  serap adsorben  terhadap  komponen-komponen  kimia  tidak sama,  sehingga  komponen-komponen  kimia  dapat bergerak dengan jarak yang berbeda berdasarkan tingkat kepolarannya.  Hal  inilah  yang  menyebabkan  terjadinya pemisahan komponen-komponen kimia yang terkandung  di  dalam  ekstrak  (Alen,  dkk.,  2017)    Pada penelitian  ini  KLT  dilakukan  dengan  menggunakan  3 macam  eluen  dengan  tingkat  kepolaran  yang  berbeda. Namun beberapa nilai Rf yang diperoleh pada penelitian ini  masih  berada  diatas  0,8,  dimana  nilai  Rf  yang  baik pada  umumnya  berada  pada  rentang  0,2-0,8.  KLT sebaiknya  dilakukan  menggunakan  bermacam-macam eluen  dengan  tingkat  kepolaran  yang  berbeda  untuk mendapatkan pelarut yang mampu memberikan pemisahan yang baik serta nilai Rf yang sesuai.
Selain dengan cara KLT, karakterisasi  kafein juga dilakukan dengan menentukan titik lelehnya. Berdasarkan  hasil  penelitian,  titik  leleh  kafein  hasil ekstraksi dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2.Titik leleh kafein hasil ekstraksi.
Jenis Kopi Titik Leleh ( o C) Pelarut Diklorometana Pelarut Kloroform Malabar 230-240 225-235 Gunung Puntang 220-225 220-230 Gunung Halu 220-230 220-230 Ciwidey 218-228 218-225
Berdasarkan  hasil  penelitian  terdapat  nilai  titik leleh yang berbeda-beda pada setiap jenis sampel kafein hasil ekstraksi. Kafein murni memiliki titik leleh 238 o C. Perbedaan  titik  leleh  antara  sampel  hasil  ekstraksi dengan  kafein  murni  dikarenakan  masih  terdapat pengotor  pada  sampel  hasil  ekstraksi  sehingga diperlukan  proses  pemurnian  kembali  pada  sampel tersebut agar didapatkan isolat kafein yang lebih murni. Proses rekristalisasi kafein telah dilakukan oleh peneliti, namun  pada  saat  pengujian  titik  leleh  masih  terdapat perbedaan terhadap titik leleh kafein murni.
Hasil  pengujian  menggunakan  GC-MS  pada masing-masing ekstrak dari keempat jenis kopi Robusta tersebut  ditemukan  adanya  komponen  kafein  dengan waktu  retensi  rata-rata  sekitar  14  detik.  Selain  itu  juga
masih  ditemukan  residu  dari  pelarut  yang  digunakan pada saat ekstraksi yaitu diklorometana dan kloroform.
Adapun  rendemen  kristal  kafein  yang  dihasilkan dari ekstraksi yang dilakukan dapat dilihat pada Tabel 3 berikut :
Tabel 1.Rendemen kristal kafein hasil ekstraksi dengan metode microwave . Jenis Kopi Robusta Rata-rata Rendemen Kafein Kering (%) Pelarut Kloroform Pelarut Diklorometana Malabar 0,47 0,49 Gunung Halu 0,56 0,59 Gunung Puntang 0,79 0,86 Ciwidey 0,58 0,48
Pada  proses  pengadukan  di  awal  sebelum dilakukannya  ekstraksi,  partikel  dengan  ukuran  kecil yang  lebih  besar  permukaannya  akan  kontak  langsung dengan  air.  Menurut  Severini,  dkk  (2015),  bahwa penggilingan pada biji kopi berpengaruh terhadap kadar kafein,  dimana  semakin  kecil  ukuran  partikel  bubuk kopi  maka  semakin  tinggi  kadar  kafein  yang  terukur. Hal  tersebut  juga  dipengaruhi  oleh  waktu  pengadukan dimana semakin lama waktu kontak antara air dan kopi bubuk  maka  akan  lebih  memaksimalkan  proses ekstraksi  dan  meningkatkan  rendemen  kafein  (Murray dan Laredo, 2015).
Jumlah  kafein  yang  terekstrak  dipengaruhi  oleh suhu  air  yang  digunakan,  dimana  pada  umumnya  cara refluks  digunakan  agar  kafein  banyak  yang  larut  ke dalam  air.  Sedangkan  pada  penelitian  ini  proses pemanasan  menggunakan  gelombang  mikro  dengan waktu yang lebih cepat dibandingkan proses pemanasan pada saat refluks.
Gelombang  mikro  merupakan  salah  satu  jenis radiasi  elektromagnetik  dengan  frekuensi  0,3-300  Ghz. Gelombang mikro ini terdiri dari dua bidang tegak lurus berosilasi,  yaitu  medan  magnet  dan  medan  listrik. Prinsip  pemanasan  yang  terjadi  pada  sampel  saat
diberikan  gelombang  mikro  adalah  terjadinya  konduksi ionik dan rotasi dipol. Pada saat terjadi konduksi ionik, resistensi  dihasilkan  oleh  larutan  sehingga  ion-ion melakukan  migrasi.  Migrasi  ion-ion  ini  menghasilkan gesekan  hingga  akhirnya  timbul  panas  pada  larutan. Fenomena  rotasi  dipol  terjadi  akibat  penataan  kembali dipol pada molekul-molekul  dengan  medan listrik  yang berubah  dengan  cepat.  Pada  alat microwave domestik, frekuensi  yang  dihasilkan  sekitar  2,45  GHz  dimana molekul akan berubah susunannya sebanyak 2 x 2,45 x 10 -9 kali  per  detik  sehingga  panas  dihasilkan.  Migrasi ion yang terjadi juga akan meningkatkan penetrasi air ke dalam matriks biji kopi sehingga komponen kafein akan larut lebih banyak ke dalam air (Delazar, dkk . , 2012).
Faktor  pelarut  terhadap  proses  ekstraksi  kopi  juga sangat  mempengaruhi  terhadap  kafein  yang  didapat. Pelarut  yang  terbaik  merupakan  pelarut  yang  secara selektif  mampu  melarutkan  komponen  kafein  dalam larutan  kopi  dalam  jumlah  yang  lebih  banyak dibandingkan  pelarut  yang  lain.  Kemampuan  pelarut untuk melarutkan komponen kafein ditunjukkan dengan nilai  rendemen  yang  dihasilkan.  Semakin  tinggi  nilai rendemen yang dihasilkan dari suatu pelarut dibandingkan  pelarut  lainnya,  maka  semakin  baik penggunaan pelarut tersebut untuk ekstraksi kafein.
Adapun  pelarut  organik  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  yaitu  diklorometana  dan  kloroform.  Pada proses ekstraksi, masing-masing filtrat kopi dari 4 jenis kopi  diekstraksi  menggunakan  diklorometana  dan kloroform  dengan  rasio  1:3  v/v.  Kafein  kering  yang didapat  dari  hasil  ekstraksi  dihitung  rendemennya berdasarkan berat sampel kopi bubuk awal. Berdasarkan perhitungan  tersebut,  dapat  dilihat  pada  tabel  3  diatas bahwa nilai rendemen kafein hasil ekstraksi menggunakan  pelarut  diklorometana  lebih  tinggi dibandingkan  dengan  nilai  rendemen  kafein  hasil ekstraksi menggunakan pelarut kloroform.
Adapun  rendemen  kafein  dari  %  luas  area  puncak senyawa kafein dari kromatogram hasil analisis  4 jenis biji  kopi  Robusta  menggunakan  Kromatografi  Gas- Spektrometri  Massa  (GC-MS)  dapat  dilihat  pada Gambar 6.
Gambar 6.  Hubungan rendemen kristal kafein terhadap 2 jenis pelarut organik.
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 Malabar Gunung Puntang Gunung Halu
Ciwidey R en d em en ( %) Jenis Pelarut kloroform
Berdasarkan  grafik  pada  Gambar  6,  dapat  dilihat bahwa nilai rendemen kafein hasil ekstraksi menggunakan  pelarut  diklorometana  rata-rata  memiliki nilai  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan  nilai  rendemen kafein  hasil  ekstraksi  menggunakan  pelarut  kloroform. Meskipun terdapat perbedaan nilai rendemen pada jenis kopi  Ciwidey,  dimana  nilai  rendemen  kafein  hasil ekstraksi menggunakan kloroform lebih tinggi dibandingkan diklorometana.
Pada  proses  ekstraksi,  pemisahan  suatu  senyawa dipengaruhi  oleh  sifat  dari  kedua  pelarut,  diantaranya perbedaan  ion,  polaritas,  ikatan  hidrogen,  sifat hidrofobik dan hidrofilik. Kepolaran suatu senyawa atau pelarut  dipengaruhi  oleh  nilai  konstanta  dielektriknya, dimana  semakin  besar  nilai  konstanta  dielektrik  maka semakin  polar  tersebut.  Menurut  Soraya  (2008),  kafein merupakan  senyawa  yang  larut  dalam  air  (polar)  dan pelarut  organik  (semi  polar).  Nilai  konstanta  dielektrik air  adalah  sebesar  80  pada  suhu  20 o C,  sedangkan  nilai konstanta  dielektrik  dari  diklorometana  sebesar  8,9  dan kloroform  sebesar  4,8  pada  suhu  20 o C,  sehingga  air lebih polar dibandingkan diklorometana dan kloroform. Adapun  diantara  2  jenis  pelarut  organik  yang digunakan, diklorometana bersifat lebih polar dibandingkan  dengan  kloroform  karena  memiliki  nilai konstanta dielektrik lebih tinggi.
Polaritas suatu senyawa tergantung pada elektronegatifitas  antara  atom  dalam  suatu  ikatan. Kafein  merupakan  senyawa  polar,  dimana  dua  gugus karbonil  pada  struktur  kafein  menambah  polaritas molekul  bersamaan  dengan  adanya  pasangan  elektron bebas  dari  atom  nitrogen.  Sehingga  kafein  larut  dalam air  dan  pelarut  organik  yang  lebih  polar.  Menurut Edwards,  dkk  (2015),  kloroform  dan  diklorometana merupakan pelarut organik bersifat polar. Diklorometana  ditemukan  memiliki  nilai  koefisien distribusi  (Kd  =  9,9)  yang  sedikit  lebih  tinggi dibandingkan  kloroform  (Kd  =  9,2).  Kafein  yang bersifat polar akan larut dalam pelarut yang juga bersifat polar  atau  semi  polar  sesuai  dengan  prinsip  kelarutan “like  dissolve  like”.  Prinsip  ini  memiliki  arti  bahwa suatu  zat  akan  larut  dengan  pelarut  yang  sejenis (Edwards, dkk . , 2015). Diklorometana  atau  CH 2 Cl 2 merupakan  senyawa yang  bersifat  polar,  dimana  adanya  perbedaan keelektronegatifan  antara  C-H  dan  C-Cl  menyebabkan ikatannya  bersifat  polar.  Namun  bentuk  molekul senyawa  ini  tetrahedral  yang  tidak  simetris.  Karena bentuknya  ini  maka  momen  dipol  masing-masing  atom dihambat  sehingga  momen  dipol  senyawa  ini  1,6D. Diklorometana  memiliki  indeks  polaritas  sebesar  3,1. Nilai  mengandung  arti  bahwa  diklorometana  secara struktural polar namun nilai polaritasnya kecil  sehingga mencegah  senyawa  ini  larut  dalam  air.  Diklorometana sering  dikelompokkan  sebagai  pelarut  polar  aprotik. Umumnya molekul yang sangat polar dapat membentuk ikatan  hidrogen,  tetapi  diklorometana  kurang  mampu
membentuk ikatan hidrogen dengan air  (Edwards, dkk . , 2015).
Pada proses ekstraksi, penambahan pelarut organik dilakukan secara bertahap. Proses ekstraksi bertahap ini lebih  efektif  karena  dalam  proses  ini  kontak  antara bahan  dengan  pelarut  lebih  meningkat,  sehingga komponen-komponen yang belum terlarut pada ekstraksi  yang  pertama  akan  terlarut  pada  ekstraksi berikutnya.  Proses  ini  akan  lebih  efektif  dan menghasilkan recovery yang lebih tinggi.
Pada  penelitian  ini  rata-rata  nilai  rendemen  dari kristal kafein yang didapatkan sekitar 0,47-0,79% untuk ekstraksi  dengan  kloroform  dan      0,48-0,86%  untuk ekstraksi  menggunakan  diklorometana.  Nilai  ini  tidak sesuai dengan rendemen yang diharapkan yaitu 2%-4%. Hal ini terjadi dikarenakan beberapa faktor, diantaranya : 1. Kurangnya waktu pemanasan menggunakan gelombang  mikro.  Pada  saat  penelitian  waktu pemanasan  yang  dilakukan  selama  2  menit  dengan jeda  setiap  3  detik  dikarenakan  suhu  yang  tidak dapat dikendalikan. Jika tidak dilakukan pemberhentian setiap 3 detik maka gelas teflon akan bumping dan  larutan  akan  tumpah.  Adapun kekurangan  dari  alat microwave domestik  ini  tidak adanya  pengaturan  suhu  sehingga  perlu  dilakukan pemantauan  menggunakan  termometer  infra  merah. Akibat  waktu  pemanasan  yang  terlalu  cepat,  kafein yang  terkandung  di  dalam  biji  kopi  belum sepenuhnya  larut  ke  dalam  air.  Sehingga  pada  saat pemisahan  menggunakan  pelarut  organik,  kafein yang didapatkan hanya sedikit.
2. Jumlah  sampel  kopi  yang  ditimbang  terlalu  sedikit yaitu  7,5  gram.  Hal  ini  berakibat  pada  kafein  hasil ekstraksi  yang  didapat  juga  sedikit.  Jumlah  sampel kopi  tersebut  digunakan  karena  menyesuaikan dengan  kapasitas  volume  gelas  teflon  dan  kapasitas alat microwave .
Pengujian  kadar  kafein  dilakukan  menggunakan alat  spektrofotometer  UV-Visibel.  Spektrum  panjang gelombang  maksimum  dari  kafein  murni  yang dilarutkan dengan akuades menunjukkan 2 puncak yaitu 224  nm  dan  276  nm.  Gambar  spektrum  kafein  murni dapat dilihat pada Gambar 9.
Gambar 9. Spektrum kafein murni dengan pelarut akuades.
Sehingga  pengujian  kadar  kafein  dilakukan  pada sampel hasil ekstraksi
menggunakan alat spektrofotometer UV-Visibel dengan
panjang
gelombang  276  nm.  Pengujian  ini  dilakukan  dengan
membuat larutan standar kafein dengan konsentrasi 2; 4; 6;  8  dan  10  ppm.  Adapun  kurva  standar  kafein  dapat dilihat pada Gambar 10.
Gambar 10. Kurva standar kafein dengan pelarut akuades
Setelah  dilakukan  pengukuran  terhadap  larutan standar  kafein,  kemudian  dilakukan  pengukuran absorbansi  sampel  kafein  hasil  ekstraksi.  Setelah  itu dilakukan  perhitungan  terhadap  kadar  kafein  sampel hasil  ekstraksi.  Adapun  hasil  pengujian  kadar  kafein dapat dilihat pada Tabel 4.
Tabel 4. Kadar kafein hasil ekstraksi pada 4 jenis kopi
di Jawa Barat. Jenis Kopi Kadar Kafein (%) Diklorometana Kloroform Malabar 2,22 1,56 Gunung Puntang 2,11 1,75 Gunung Halu 2,29 1,62 Ciwidey 2,27 1,67

## 4. Kesimpulan
Berdasarkan  hasil  penelitian  dapat  disimpulkan bahwa nilai rendemen tertinggi berdasarkan berat kering kafein  diperoleh  ekstrak  dengan  pelarut  diklorometana sebesar  0,48-0,86%.  Proses  isolasi  kafein  dinilai berhasil  dari  hasil  pengujian  KLT  dan  GC-MS.  Hasil pengujian  kadar  kafein  menunjukkan  kadar  kafein tertinggi  dimiliki  oleh  biji  kopi  Robusta  Gunung  Halu sebesar 2,29% dengan ekstraksi menggunakan diklorometana.

## 5. Daftar Pustaka
1. Bhawani,  S.  A.,  Fong,  S.  S.  dan  Mohamad Ibrahim,  M.  N.  (2015):  Spectrophotometric Analysis  of  Caffeine, International  Journal  of Analytical Chemistry , 2015. doi: 10.1155/2015/170239. 2. Delazar, A. (2012): Microwave-Assisted Extraction in Natural Products Isolation, in Sarker, S.  D.  and  Nahar,  L.  (eds) Natural  Products Isolation . Humana Press, pp. 89–115.
3. Edwards,  Q.  A.  (2015):  Distribution  of  Caffeine Between  Selected  Water-Organic  Solvent  Media, 13(3), pp. 1218–1226.
4. Murray, C. dan Laredo, T. (2015): Effect of Home Grinding on Properties of Brewed Coffee, Journal of  Food  Research ,  4(1),  pp.  77–87.  doi: 10.5539/jfr.v4n1p77.
5. Serdar,  G. et  al. (2016):  New  Approaches  for Effective  Microwave  Assisted  Extraction  of Caffeine  and  Catechins  from  Green  Tea, International  Journal  of  Secondary  Metabolite , 3(1), pp. 3–13. doi: 10.21448/ijsm.240697.
6. Severini,  C.  (2015):  How  the  variance  of  some extraction  variables  may  affect  the  quality  of espresso coffees served in coffee shops, J Sci Food Agriculture ,  96(May),  pp.  3023–3031.  doi: 10.1002/jsfa.7472.
y = 0,1131x + 0,0208 R² = 0,9998 0 0,2 0,4 0,6 0,8 1 1,2 1,4 0 2 4 6 8 10 12 A b so rb an si Konsentrasi (ppm)

## Kurva Standar Kafein