DOI: doi.org/10.21009/SPEKTRA.033.06

## THE EFFECT OF SYNTHETIC ZEOLITES ON SENSITIVITY AND STABILITY OF URIC ACID BIOSENSOR USING CYCLE VOLTAMETRY METHOD
Iza Faizah 1, a) , Dwi Puryanti 2, b) , Afdhal Muttaqin 1, c)
1 Jurusan Fisika, Fakultas MIPA, Universitas Andalas Padang, 25163 Indonesia
2 Laboratorium Teknologi Hasil Ternak, Fakultas Peternakan , Universitas Andalas Padang, 25163 Indonesia
Email: a) izafaizah84@gmail.com, b) dwipuryanti@yahoo.com, c) allzputra@gmail.com

## Abstrak
Pembuatan material biosensor termodifikasi zeolit sintetis telah dilakukan untuk mendeteksi asam urat. Penelitian  ini  bertujuan  untuk  melihat  pengaruh  zeolit  sintetis  pada  material  biosensor  asam  urat terhadap  stabilitas  dan  sensitivitas  sensor.  Penggunaan  biosensor  untuk  mengukur  asam  urat menggunakan  urikase  yang  dihasilkan  dari  bakteri  Lactobacillus  plantarum.  Pemodifikasian  material biosensor menggunakan zeolit sintetis kandungan Sodalit yang ditambahkan dalam campuran grafit dan paraffin. Elektroda pasta karbon (EPK) dibuat dengan komposisi grafit: paraffin sebesar 70 mg: 30 mg, sedangkan elektroda pasta karbon termodifikasi zeolit (EPKZ) dengan komposisi grafit: paraffin: zeolit sebesar  50  mg:  30  mg:  20  mg.  Didalam  masing-masing  elektroda  diteteskan  7,5  μl  pelet  L.plantarum (EPKZLP).  Pengujian  kinerja  elektroda  dilakukan  menggunakan  Voltametri  Siklik.  Hasil pemodifikasian  mempengaruhi  performa  biosensor  seperti  sensitivitas,  dan  stabilitas.  Arus  tertinggi dihasilkan oleh EPKZLP dengan rentang arus 0,0143 – 0,0592 mA. Sensitivitas terbaik dihasilkan pada EPKZLP dengan nilai sebesar 0,031 mAcm -2 mM -1 . Kestabilan terbaik didapatkan pada EPKZLP dengan presentase  kestabilan  pada  hari  ke-14  sebesar  30,9  %.  Standar  deviasi  rata-rata  yang  dihasilkan  pada penelitian  ini  0.0024  mA  dengan  nilai  kesalahan  relatif  masing-masing  sebesar  7,8%.  Penambahan zeolit  pada  material  biosensor  yang  dihasilkan  pada  penelitian  ini  telah  memenuhi  beberapa  kriteria untuk dijadikan sebuah sensor.
Kata-kata kunci : biosensor asam urat, zeolit, sodalit, sensitivitas, stabilitas.

## Abstract
The synthesis of synthetic zeolite modified biosensor  material has been carried out to detect uric acid. This  study  aims  to  look  at  the  effect  of  synthetic  zeolite  on  uric  acid  biosensor  material  on  sensor stability  and  sensitivity.  The  biosensor  was  use  to  measure  uric  acid  using  uricase  produced Lactobacillus plantarum. Modification of biosensor material using synthetic zeolite content of Sodalit is added in a mixture of graphite and paraffin. Carbon paste electrode (EPK) was made with graphite and paraffin  comparison  70  mg  :  30  mg,  while  zeolite  modified  carbon  paste  electrode  (EPKZ)  with graphite, paraffin and zeolite comparison 50 mg: 30 mg: 20 mg. In each electrode, 7.5 μl of L.plantarum pellet  (EPKZLP)  was  dropped.  Electrode  performance  testing  was  carried  out  using  Cyclic Voltammetry.  Modification  results  affect  biosensor  performance  such  as  sensitivity  and  stability.  The
Received: 12 September 2018 Revised: 26 October 2018 Accepted: 30 December 2018 Published: 30 December 2018
highest  current  is  produced  by  EPKZLP  with  a  current  range  of  0.0143  -  0.0592  mA.  The  best sensitivity is produced in EPKZLP with a value of 0.031 mAcm -2 mM -1 . The best stability was found in EPKZLP with a percentage of stability on day 14 was 30.9%. The average standard deviation generated in  this  study  is  0.0024  mA  with  a  relative  error  value  was  7.8%.  Addition  of  zeolite  to  biosensor material produced in this study has met several criteria to be used as a sensor.
Keywords : uric acid biosensor, zeolite, sodalit, sensitivity, stability.

## PENDAHULUAN
Zeolit  sintetis  lebih  banyak  digunakan  sebagai  adsorben,  katalis  dan  penukar  ion.  Hal  ini dikarenakan  zeolit  sintetis  memiliki  tingkat  kemurnian  yang  lebih  tinggi  serta  keseragaman  ukuran pori bila dibanding zeolit alam [1]. Struktur zeolit yang berpori membuat zeolit banyak dimanfaatkan diberbagai  bidang,  salah  satunya  yaitu  sebagai  sensor.  Nanda  dkk  telah  membuat  material  sensor termodifikasi zeolit sintetis untuk  mendeteksi glukosa [2]. Kamal juga  membuat  material biosensor termodifikasi  zeolit  alam  untuk  mendeteksi  asam  urat  [3].  Pada  penelitian  ini  akan  dibuat  material biosensor termodifikasi zeolit sintetis untuk mendeteksi asam urat.
Asam  urat  itu  sendiri  merupakan  produk  akhir  metabolisme  purin  dalam  tubuh.  Kelebihan  atau kekurangan  kadar  asam  urat  dalam  darah  sering  menjadi  indikasi  adanya  berbagai  penyakit  pada tubuh manusia. Gangguan kesehatan itu berupa gout arthritis akut, pembentukan tofus, gagal ginjal dan lain-lain. Kadar asam urat dalam darah normal pada laki-laki yaitu 3-7,2 mg/dl sedangkan pada perempuan yaitu 2-6 mg/dl [3]
Kadar  asam  urat  di  dalam  tubuh  perlu  diukur  secara  akurat  dan  cepat  agar  penyakit  asam  urat dapat dideteksi sejak dini sehingga tidak menimbulkan berbagai macam penyakit. Salah satu metode yang  banyak  digunakan  adalah  metode  spektrofotometri  [4].  Metode  ini  mulai  dialihkan,  karena kurang spesifik, sangat peka terhadap cahaya dan tidak ekonomis. Seiring berjalannya waktu banyak peneliti  menggunakan  biosensor  yaitu  perangkat  analisis  yang  menggabungkan  komponen  biologis dengan  detektor  fisikokimia  [5].  Biosensor  memiliki  banyak  kelebihan  yaitu  sensitivitas  tinggi, kecepatan waktu analisis dan efisiensi biaya.
Biosensor  didasarkan  pada  enzim  urikase.  L.  plantarum  merupakan  mikroba  penghasil  enzim urikase  yang  diketahui  memiliki  aktivitas  yang  baik  terhadap  asam  urat  [6].  Enzim  bebas  bersifat tidak stabil sehingga diperlukan imobilisasi enzim. Zeolit merupakan salah satu material yang dapat digunakan untuk media imobilisasi enzim karena strukturnya yang berpori [7]
Biosensor terdiri atas  dua komponen utama yaitu bioreseptor dan transduser. Bioreseptor adalah molekul  yang  akan  mengenali  analit  target.  Interaksi  spesifik  antara  analit  target  dan  tempat pengenalan analit pada bioreseptor akan menghasilkan perubahan kimia-fisika yang kemudian  akan dideteksi dan diukur oleh transduser.
Proses  pendeteksian pada biosensor  seperti  ditunjukkan  pada  Gambar  1  bermula  dari larutan  uji yang  memiliki  elemen pengenal terhadap transduser. Pada penelitian ini transduser yang digunakan berupa elektroda pasta karbon yang dimodifikasi dengan zeolit/L.plantarum. Elemen asam urat yang terdeteksi akan terikat spesifik sedangkan yang lain akan terpisah. Elektroda yang telah dimodifikasi akan mentransfer sinyal kimia dari reaksi pada larutan dan selanjutnya akan berubah menjadi sinyal listrik [8]. Sinyal listrik akan dikonversi menjadi ukuran pembacaan kadar asam urat pada larutan.
Ketika  ke  dalam  sel  pengukuran  ditambahkan  larutan  asam  urat,  sel L.  plantarum akan mensekresikan enzim urikase sehingga akan terjadi reaksi pemecahan purin pada struktur asam urat menghasilkan  produk  alantoin  dan  hidrogen  peroksida.  Hidrogen  peroksida  tersebut  yang  akan mengalami  reaksi  redoks.  Reaksi  redoks  ini  akan  menghasilkan  elektron  yang  akan  berinteraksi dengan transduser. Reaksi tersebut dapat dilihat pada Gambar 2.
GAMBAR 2. Mekanisme reaksi asam urat dengan enzim urikase [10]
H 2 O 2 O 2 + 2H + + 2e (1)
Pemanfaatan  zeolit  pada  biosensor  asam  urat  berfungsi  sebagai  molekul  pengenal  yang terintegrasi  pada  elektroda  agar  menghasilkan  arus  saat  proses  pendeteksian  asam  urat.  Struktur zeolit  pada  Gambar  3  terbentuk  oleh  tetrahedral  [SiO4] -4 dan  [AlO4] -5 yang  saling  terhubung  oleh atom-atom oksigen sehingga membentuk rongga-rongga. Molekul ataupun ion akan masuk ke dalam rongga/pori zeolit. Sifat ini juga yang mendasari penggunaan zeolit sebagai media imobilisasi enzim [11]. Zeolit sintetis yang digunakan pada penelitian ini merupakan zeolit hasil penelitian Nurhabibah dan  Muttaqin  dengan  kemurnian  100%  didalamnya  terkandung  zeolit jenis  sodalit  yang  dibuat  dari bahan limbah  abu  dasar batubara  menggunakan  metode  peleburan  alkali  hidrotermal  dengan  waktu peleburan selama 2 jam [12].
GAMBAR 3. Framework zeolit sodalit [13]

## METODE
Penumbuhan  bakteri L.  plantarum dilakukan  di  Laboratorium  Teknologi  Hasil  Ternak,  Fakultas Peternakan,  Universitas  Andalas.  Untuk  melakukan  pengukuran  Voltametri  Siklik  perlu  dilakukan beberapa  persiapan  diantaranya,  pembuatan  elektroda  pembanding  Ag/AgCl,  pembuatan  elektroda pasta  karbon  (EPK/EPKZ),  dan  elektroda  pendukung  yang  berasal  dari  buatan  pabrik.  Pengujian karakteristik  elektroda  dilakukan  di  Laboratorium  Fisika  Material,  Jurusan  Fisika,  Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Andalas.

## Penumbuhan dan Pemanenan L.plantarum
Sebanyak 5 ml media MRS Broth cair dipipet ke dalam tabung reaksi. Sebanyak 1 ose bakteri L. plantarum murni ditanam ke media MRS Broth cair tersebut dan diinkubasi pada suhu 37 o C selama 24 jam. Setelah 24 jam, sebanyak 5 ml larutan MRS Broth cair yang sudah ditumbuhi L. plantarum dipipet ke tabung sentrifugasi dan diputar pada kecepatan 10.000 rpm selama  10 menit. Setelah itu, pelet dicuci 2 kali dengan akuades steril dan disentrifus pada kecepatan 10.000 rpm selama 5 menit. Pelet L. plantarum yang sudah bersih diberi larutan fisiologis (NaCl 0.85%) sebanyak 1 ml.

## Pembuatan elektroda pembanding Ag/AgCl
Pembuatan elekroda Ag/AgCl menggunakan 2 buah kawat perak sepanjang masing-masing 7 cm. Kawat  dililit  dengan  tembaga  sebagai  penghantar  arus.  Selanjutnya,  dilakukan  pelapisan  dengan metode  elektrokimia  menggunakan  50  ml  larutan  KCl  1  M  yang  diberi  tegangan  1,5  V.  Waktu pelapisan berlangsung 1,5 menit dan akan menghasilkan endapan hitam pada perak.

## Pembuatan elektroda kerja EPK dan EPKZ
Bahan yang digunakan untuk pembuatan elektroda kerja adalah grafit 70 mg dan paraffin 30 mg untuk jenis EPK+LP. Sedangkan untuk EPKZ+LP, pemodifikasian menggunakan variasi jenis zeolit sintetis dengan perbandingan komposisi bahan yaitu grafit 50 mg, paraffin 30 mg, dan zeolit 20 mg. Seluruh bahan dicampur dalam wadah dan diletakkan di atas magnetic stirrer bersuhu 60 o C. Bahan yang  telah  homogen  dimasukkan  setinggi  0,5  cm  pada  bagian  bawah  tabung  kaca  berdiameter  0,3 cm.  Kawat  tembaga  sebagai  penghubung  elektroda,  dimasukkan  ke  dalam  tabung  agar  dapat menempel  pada  bahan.  Sebanyak  7,5  μl  pelet L.  plantarum diteteskan  pada  permukaan  elektroda pasta karbon yang telah dibuat tanpa maupun dengan penambahan zeolit.

## Karakterisasi menggunakan Voltametri Siklik
Voltametri  adalah  teknik  elektroanalitik  yang  mengukur  arus  sebagai  fungsi  potensial.  Pada analisis  secara  voltametri,  potensial  divariasi  secara  sistematis  sehingga  analit  mengalami  oksidasi dan  reduksi  dipermukaan  elektroda.  Syarat  terjadinya  proses  pengukuran  adalah  adanya  larutan elektrolit  dan  elektroda  [14].  Larutan  elektrolit  yang  digunakan  untuk  pendeteksian  yaitu  larutan asam urat sebagai sel elektrokimia yang dapat dioksidasi oleh elektroda kerja. Elektroda pasta karbon yang  dimodifikasi  berfungsi  sebagai  oksidator  dan  perubahan  arus  yang  dihasilkan  akan  sebanding dengan  perubahan  konsentrasi  asam  urat.  Data  yang  dihasilkan  dari  pengukuran  menggunakan metode  voltametri  siklik  ini  selanjutnya  dapat  diolah  sebagai  parameter-parameter  standar  sebuah sensor seperti selektivitas, sensitivitas, dan stabilitas.
Kinerja  sensor  diuji  menggunakan  metode  Voltametri  Siklik  dengan  melakukan  input  tegangan dalam  program  Echem  sehingga  akan  menghasilkan  arus  terbaca.  Ketiga  elektroda  tersebut dimasukkan  ke  dalam  2  ml  larutan  bufer  borat,  lalu  puncak  arus  yang  terbentuk  diamati  sebagai puncak blanko. Setelah itu ketiga elektroda dimasukkan juga ke dalam larutan asam urat 0,1 mM  – 0,5  mM  0,1  ml  seperti  ditunjukkan  Gambar  4.  Hasil  pendeteksian  menghasilkan  grafik voltammogram  yang  berarti  siklus  oksidasi  dan  reduksi  larutan  telah  berlangsung.  Nilai  maksimal dan data yang diambil sebagai pembacaan adalah nilai arus puncak oksidasi pada voltammogram.
GAMBAR 4. Skema pengukuran elektrokimia sistem 3 elektroda [2]

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Gambar 5 menampilkan perbedaan pembacaan dari tiga larutan. Perbedaan pembacaan pada tiga larutan  tersebut  ditunjukkan  dengan  kemunculan  puncak  arus  yang  menandai  terjadinya  proses oksidasi.  Proses  oksidasi  ternyata  hanya  terjadi  pada  larutan  asam  urat  yang  ditambahkan  dengan larutan  blanko buffer borat,  dan  tidak  terlihat  pada  larutan  lainnya.  Kehadiran  larutan buffer borat dapat  membantu  mempertahankan  pH  larutan  yang  akan  diuji  agar  tetap  pada  keadaan  asam.  Ini menunjukkan  bahwa  enzim  urikase  bekerja  pada  keadaan  asam.  Hal  ini  terjadi  karena  enzim  yang dihasilkan dari bakteri L.plantarum dapat menjadi tidak aktif atau rusak apabila berada pada kondisi pH yang jauh berbeda dari pH optimal.
GAMBAR 5. Voltammogram arus oksidasi larutan asam urat, buffer borat, dan buffer borat + larutan asam urat
Karakterisasi  dengan  voltametri  siklik  pada  material  biosensor  tanpa  dimodifikasi  dengan  zeolit (EPKLP)  dan  material  biosensor  termodifikasi  zeolit  (EPKZLP),  keduanya  menghasilkan  puncak arus  anodik  yang  menandakan  terjadinya  proses  oksidasi.  Pengukuran  dilakukan  dengan  variasi konsentrasi  larutan  asam  urat  0,1;  0,2;  0,3;  0,4  dan  0,5  mM.  Voltamogram  dari  kedua  material biosensor  tersebut  dapat  dilihat  pada  Gambar  6.  Pada  Gambar  6  puncak  arus  oksidasi  EPKLP dihasilkan  pada  rentang  potensial  0,224  –  0,354  V,  sedangkan  puncak  arus  oksidasi  EPKZLP dihasilkan  pada  rentang  potensial  0,166  –  0,240  V.  Kecilnya  potensial  yang  dihasilkan  dari pengukuran  pada  EPKZLP  menunjukkan  bahwa  untuk  mendeteksi  sebuah  larutan  uji  hanya dibutuhkan  sedikit  energi.  Begitu  pula  pada  waktu  responnya,  waktu  respon  yang  menunjukkan terbentuknya proses oksidasi pada EPKZLP juga lebih cepat dibanding waktu respon yang dihasilkan EPKLP  (Tabel  1).  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  penggunaan  material  biosensor  termodifikasi  zeolit (EPKZLP) lebih efektif dalam mendeteksi larutan uji.
(a) EPKLP
(b) EPKZLP
GAMBAR 6. Voltamogram (a) EPKLP dan (b) EPKZLP pada konsentrasi 0,1 – 0,5 mM
TABEL 1. Potensial puncak oksidasi, respon arus dan waktu respon pada pengukuran EPKLP dan EPKZLP
Konsentrasi (mM) EPKLP EPKZLP Arus Puncak Oksidasi (mA) Potensial (V) Waktu Respon (s) Arus Puncak Oksidasi (mA) Potensial (V) Waktu Respon (s) 0.1 0.0019 0.352 13.52 0.0190 0.216 12.16 0.2 0.0021 0.354 13.54 0.0204 0.172 11.72 0.3 0.0026 0.278 12.78 0.0227 0.240 12.40 0.4 0.0037 0.224 12.24 0.0229 0.166 11.66 0.5 0.0048 0.250 12.50 0.0239 0.188 11.88
Variasi  konsentrasi  larutan  asam  urat  dilakukan  untuk  mengamati  kerja  elektroda  terhadap perubahan  konsentrasi  yang  diberikan  seperti  ditunukkan  pada  Gambar  7.  Respon  arus  yang dihasilkan  dari  pengukuran  menggunakan  material  biosensor  tanpa  dimodifikasi  dengan  zeolit (EPKLP) memiliki nilai yang lebih rendah dibanding material biosensor setelah dimodifikasi dengan zeolit (EPKZLP). Respon arus tertinggi dihasilkan dari pengukuran menggunakan material biosensor yang  dimodifikasi  dengan  zeolit  (EPKZLP).  Respon  EPKZLP  ini  salah  satunya  berkaitan  dengan penambahan zeolit sebagai bahan pemodifikasian pada material biosensor.  Struktur dan sifat zeolit yang  berpori  menyebabkan  zeolit  dapat  bertindak  sebagai  adsorben  pada  pengimobilisasiannya terhadap L.plantarum. Selain itu, peningkatan konsentrasi larutan juga menyebabkan banyaknya ion yang terurai sehingga arus semakin  meningkat. Arus yang terbaca dalam pengukuran pada material biosensor  setelah  dimodifikasi  dengan  zeolit  mengalami  peningkatan  sebesar  121%  dari  arus  pada pembacaan menggunakan elektroda tanpa dimodifikasi zeolit.

## GAMBAR 7. Perbandingan konsentrasi larutan asam urat terhadap arus terdeteksi pada EPKLP dan EPKZLP
Nilai pembacaan pada Gambar 7 menunjukkan bahwa setiap elektroda memiliki sensitivitas yang berbeda sebagai respon terhadap nilai konsentrasi larutan asam yang diukur. Hal tersebut ditunjukkan dengan  besarnya  nilai  slope  yang  menyebabkan  perubahan  arus  yang  besar  sehingga  sensitivitas elektroda dikatakan baik jika nilai slope kurva tinggi [15]. Pada Gambar 7 dapat dilihat bahwa nilai slope  kurva  yang  dihasilkan  EPKZLP  lebih  besar  dibanding  EPKLP,  sehingga  sensitivitas  yang dihasilkan juga semakin baik. EPKZLP menghasilkan nilai sensitivitas sebesar 0,031 mAcm -2 mM -1 , sedangkan sensitivitas yang dihasilkan EPKLP sebesar 0,023 mAcm -2 mM -1 .
Keberulangan  dari  material  biosensor  yang  dibuat  pada  penelitian  ini  telah  dicoba.  Data  pada Gambar 7 merupakan sampel pembacaan arus yang dihasilkan dari material biosensor baik sebelum dimodifikasi dengan zeolit maupun setelah dimodifikasi dengan zeolit yang dilakukan dalam tiga kali pengukuran  pada  tiap  konsentrasinya.  Pengukuran  tersebut  menghasilkan  nilai  standar  deviasi masing-masing elektroda yaitu sebesar 0,0014 mA dan 0,0031 mA. Sedangkan standar deviasi relatif atau kesalahan relatif yang dihasilkan dalam pengukuran pada EPKLP dan EPKZLP masing-masing sebesar 7,7% dan 7,8%.
Selain itu pengukuran stabilitas diperlukan untuk melihat berapa lama material biosensor tersebut dapat digunakan. Pada Gambar 7 dapat dilihat bahwa material biosensor setelah dimodifikasi dengan
zeolit  Z2  (EPKZLP)  menunjukan  daya  tahan  material  yang  lebih  lama  yaitu  hingga  14  hari dibandingkan dengan tanpa dimodifikasi dengan zeolit (EPKLP) yang hanya mampu bertahan hingga 6  hari.  Material  biosensor  tanpa  dimodifikasi  dengan  zeolit  (EPKLP)  pada  hari  ke-6  kestabilannya telah  menurun  hingga  15,7%.  Sedangkan  pada  material  biosensor  lain  yang  telah  dimodifikasi dengan  zeolit  (EPKZLP)  kestabilannya  terus  menurun  hingga  hari  ke-14  dengan  persentase  sisa kestabilan sebesar 30,9%.
GAMBAR 8. Kurva stabilitas elektroda (EPK+LP dan EPKZ2+LP) pada konsentrasi 0,5 mM

## SIMPULAN
Berdasarkan  hasil  dan  pembahasan  dapat  disimpulkan,  material  biosensor  yang  dihasilkan  pada penelitian  ini  telah  mampu  mengenali  larutan  uji  yang  menandakan  terbentuknya  puncak  arus oksidasi.  Penambahan  zeolit  pada  material  biosensor  berhasil  meningkatkan  kemampuan  elektroda dalam membaca arus dibuktikan dengan semakin tinggi arus yang dihasilkan saat material biosensor tersebut  dimodifikasi  dengan  zeolit.  Arus  tertinggi  dihasilkan  dari  material  biosensor  termodifikasi zeolit  (EPKZLP)  dengan  rentang  arus  0,0143  mA  -  0,0592  mA.  Sedangkan  sensitivitas  tertinggi dihasilkan  pada  EPKZLP  yaitu  sebesar  0,031  mAcm -2 mM -1 .  Penambahan  zeolit  pada  material biosensor  juga  meningkatkan  daya  tahan  material  yang  lebih  lama  hingga  14  hari  dibandingkan dengan  tanpa  dimodifikasi  yang  hanya  bertahan  selama  6  hari.  Kestabilan  terbaik  didapatkan  pada EPKZ2+LP dengan presentase sisa kestabilan pada hari ke-14 sebesar 30,9 %. Nilai kesalahan relatif dari  pengukuran-pengukuran  pada  elektroda-elektroda  yang  telah  dilakukan  rata-rata  dibawah  20% dimana  itu  merupakan  syarat  minimum  sebuah  sensor.  Hal  ini  membuktikan  bahwa  material biosensor  yang  dihasilkan  pada  penelitian  ini  telah  memenuhi  beberapa  kriteria  untuk  dijadikan sebuah sensor.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Terimakasih yang sebesar-besarnya kepada Ibuk Dr. Dwi Puryanti dan Bapak Afdhal Muttaqin, M.Si atas bimbingan, motivasi, ilmu dan waktunya. Terimakasih juga atas bantuan dan diskusi yang sangat berharga selama penelitian ini dilakukan.

## REFERENSI
[1] Sugiarti,  S.,  Charlena.  dan  Aflakhah,  N.A.,  2017,  “Zeolit  Sintetis  Terfungsional  3- (Trimetoksisilil)-1-Propantiol  sebagai  Adsorben  Kation  Cu(II)  dan  Biru  Metilena”, Jurnal Kimia Valensi , Volume 3, hal 11-19.
[2] Nanda, F., Puryanti, D. dan Muttaqin, A., 2018, “Pengaruh Jenis Zeolit Terhadap Sensitivitas Material Sensor  Non-Enzimatik Untuk Mendeteksi Glukosa”, Jurnal Fisika Unand , Volume 6, hal 394-399.
[3] Putra,  T.R., Hiperurisemia,  Reumatologi  dalam  Buku  Ajar  Ilmu  Penyakit  Dalam ,  Fakultas Kedokteran, Universitas Indonesia, Jakarta, 2006.
[4] Mateo,  C.,  Palomo,  J.M.,  Lorente,  G.F.,  Guisan,  G.F.dan  Lafuente,  R.F.,  2007, “Improvement  Of  Enzyme  Activity,  Stability,  and  Selectivity  Via  Immobilization Technique”, Enzymitech , Volume 40, hal. 1451-1463.
[5] Arslan, F., 2008, “An Amperometric Biosensor for Uric Acid Determination Prepared from Uricase Immobilized in Polyaniline-Polypyrrole Film”, Sensors Articels , Volume 8, hal. 492- 500.
[6] Diana,  N.R.,  2016,  “Imobilisasi  Urikase  Dari L.  plantarum pada  Karboksimetilselulose- Gelatin-Zeolit untuk Meningkatkan Stabilitas Biosensor Asam Urat”, Tesis , Institut Pertanian Bogor, Bogor.
[7] Mardiah,  E., Trivadila, Nurhidayat, N. dan Iswantini, D., 2009,   “Aktivitas  Urikase  yang dihasilkan  dari  berbagai  Sel Lactobaciilus  Plantarum dan  Parameter  Kinetiknya”, Jurnal Ilmu Pertanian Indonesia ,  Volume 14, hal. 163-169.
[8] Tribidasari,  A.  dan  Ivandini,  2006,  “Electrochemical  Detection  of  Arsenic  (III)  Using Iridium-Implanted  Boron-Doped  Diamond  Electrodes”, Journal  Analytical  Chemistry , Volume 78, hal. 6291-6298.
[9] Istiqomah,  2008,  “Modifikasi  Elektroda  Karbon  dengan  Zeolit  dan  Aplikasinya  sebagai Sensor  Arsen  (III)”, Tesis ,  Ilmu  Kimia  Universitas  Indonesia,  Depok.  Logam  Tembaga (Cu)”, Skripsi , Departemen Kimia, Universitas Indonesia, Depok.
[10] Lestari,  W.,  2016,  “Imobilisasi    Sel L.  plantarum Pada  Membran  Zeolit/Kappa-Karaginan untuk Meningkatkan Stabilitas Biosensor Asam Urat”, Tesis , Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Institut Pertanian Bogor, Bogor.
[11] Xing,  G.W.,  Li,  X.W.,  Tian,  G.L.  dan  Ye,  Y.H.,  2000,  “Enzymatic  peptide  synthesis  in organic  solvent  with  different  zeolites  as  immobilization  matrixes”, Tetrahedron ,  Volume 56, hal. 3517-3522.
[12] Nurhabibah  dan  Muttaqin,  A.,  2017,  “Pengaruh  Waktu  Peleburan  Terhadap  Konduktivitas Listrik  Zeolit  Sintetis  dari  Abu  dasar  Batubara  dengan  Metode  Peleburan  Alkali Hidrotermal”, Jurnal Fisika Unand , Volume 6, hal 240-246.
[13] Database  of  Zeolite  Structures,  2007,  “Framework  Zeolite”, asia.iza-structure.org .,  diakses pada 28 Maret 2018.
[14] Saputro,  S.,  Rahmat,  W.  dan  Dita,  A.,  2014,  “Sensor  Glukosa  Non-Enzimatik  Berbasis Deposit
[15] Miller,  J.C.,  dan  Miller  J.  N.,  1988,  Statistic  for  Analytical  Chemistry,  3 th edition,  Ellis Horward Limited, New York.