## JIFI (JURNAL ILMIAH FARMASI IMELDA)
Vol.2 No.2, Maret 2019, pp. 59-68 ISSN: 2597-7164 (Online), 2655-3147 (Print) https://jurnal.uimedan.ac.id/index.php/JURNALFARMASI
 59

## KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN SKRINING FITOKIMIA SERTA ANALISIS SECARA KLT
(Kromatografi Lapis Tipis) DAUN DAN KULIT BUAH JERUK LEMON ( Citrus limon (L.) Burm.f.)
Rika Puspita Sari 1 , Melfin Teokarsa Laoli 2
Program Studi S1 Farmasi STIKes Imelda Medan
Article Info ABSTRACT
Lemon Citrus (Citrus limon (L.) Burm f.) Is one of the plants that has potential  as  a  traditional  medicine,  and  is  an  excellent  source  of vitamin  C  and  calcium.  Lemon  peel  fruit  serves  to  prevent  cancer. Lemon  leaf  lemon  can  help  overcome  cancer,  heart  and  liver.  The purpose  of  this  research  is  to  characterize  simplicia  leaf  and  lemon rind and to know the chemical compound group contained in leaf and lemon  rind  and  also  TLC  analysis.  Characterization  of  simplicia include macroscopic and microscopic examination, determinations of loss on drying, determinations of water soluble extract, determination of  ethanol  soluble  concentration,  determination  of  total  ash  content, and  determination  of  acid  ash  in  soluble.  Phytochemical  screening includes  the  test  for  alkaloids,  flavonoids,  steroids/triterpenoids, tannins  and  saponins.  TLC  analysis  was  performed  using  silica  gel GF 254 as stationary phase, and mobile phase CHCl3-MeOH-NH4OH (85:15:1)  on  alkaloids  analysis,  1%  HCl  in  flavonoids  analysis,  and Hexan-MeOH  (70:30)  on  steroids/triterpenoids  analysis.  The  result obtained  from  examination  of  lemon  citrus  leaf  characteristic  gave loss  on  drying  69,29%;  total  ash  content  6,40%;  acid  insoluble  ash 1,23%; ethanol soluble extract 17,73%; water soluble extract 24,79%. The  examination  of  simplicia  characteristics  of  lemon  peel obtained by loss on drying 69,69%; total ash content 3,32%; acid insoluble ash 1,57%;  ethanol  soluble  extract  28,99%;  water  soluble  extract  25,35 %.  The  result  of  phytochemical  screening  showed  that  lemon  leaf simplicia extract contains alkaloids, flavonoids, steroids/triterpenoids and  tannins,  while  the  simplicia  extract  of  lemon  peel  contains alkaloids,  flavonoids  and  steroids/triterpenoids  compounds.  The results of identification with TLC showed that the simplicia extract of the  leaf  and  lemon  peel  contain  alkaloids,  flavonoids  and steroids/triterpenoids.

## Keywords:
Characterization Of Simplicia Leaves And Lemon Rind Screening
TLC
This is an open access article under the CC BY-SA license.

## Corresponding Author:
Rika Puspita Sari, Program Studi S1 Farmasi, STIKes Imelda Medan, Jl. Bilal No. 52 Kelurahan Pulo Brayan Darat I Kecamatan Medan Timur, Medan - Sumatera Utara. Email: rikapuspitasari@gmail.com
60

## 1. INTRODUCTION
Indonesia  kaya  akan  tanaman  obat  tradisional  yang  secara  turun  temurun  telah  digunakan  sebagai ramuan obat tradisional. Pengobatan tradisional dengan tanaman obat diharapkan dapat dimanfaatkan dalam pembangunan  kesehatan  masyarakat.  Konsep back  to  nature atau  pengobatan  dengan  menggunakan  bahan yang  berasal  dari  alam  terus  berkembang  semakin  besar,  baik  untuk  pengobatan  maupun  pemeliharaan kesehatan (Wasito, 2011).
Saat ini banyak tumbuhan obat yang dikembangkan industri farmasi menjadi obat tradisional. Salah satu  tanaman  yang  potensial  dimanfaatkan  untuk  obat  tradisional  adalah  jeruk  lemon  ( Citrus  limon (L.) Burm. f.). Jenis jeruk ini memang belum populer di Indonesia sebagai obat tradisional karena memang jeruk lemon  bukan  tanaman  asli  Indonesia.  Jeruk  lemon  sudah  digunakan  untuk  kesehatan  sejak  zaman  dahulu, yaitu untuk mengobati para pelaut yang kekurangan vitamin pada tahun 1600 di dataran Eropa. Jeruk lemon kemudian di produksi pada skala industri pada tahun 1849 di California, USA (Marwanto, 2014).
Jeruk  lemon  sebenarnya  banyak  mempunyai  kegunaan  tetapi  masyarakat  Indonesia  belum  banyak mengetahuinya. Jeruk lemon merupakan sumber vitamin C dan kalsium yang sangat baik, jeruk lemon juga bisa  digunakan  sebagai cooling  drink jika  mengalami  demam,  serta  jusnya  digunakan  dalam  kasus diaphoretic atau diuretic draughts . Jus jeruk lemon sangat di anjurkan dalam pengobatan acute rheumatism . Lemon  juga  merupakan astringent yang  bagus  dan  biasa  digunakan  untuk lotion dalam  kasus sunburn (Sediaoetama, 2004).
Kulit buah jeruk lemon mengandung kadar vitamin C yang cukup tinggi. Selain itu kulit buah jeruk lemon  digunakan  dalam  membuat  roti,  manisan,  dan  untuk  menambah  rasa  makanan.Kulit  buah  ini  juga berfungsi  untuk mencegah  kanker.  Daun  jeruk  lemon  dapat  membantu mengatasi  penyakit  kanker,  jantung dan  liver.  Beberapa  zat  yang  terkandung  dalam  daun  jeruk  lemon  yang  dapat  bermanfaat  untuk  kesehatan diantaranya limonene ,  tanin dan  fenol Limonene terdapat  diseluruh  bagian tanaman  jeruk  lemon. Tanin dan fenol ditemukan pada kulit dan daun jeruk lemon (Nuraini, 2011).
Pengembangan  obat  tradisional  juga  didukung  oleh  Peraturan  Menteri  Kesehatan  Republik Indonesia,  tentang  fitofarmaka,  yang  berarti  diperlukan  adanya  pengendalian  mutu  simplisia  yang  akan digunakan  untuk  bahan  baku  obat  atau  sediaan  galenik  (Tjitrosoepomo,  1994).  Salah  satu  cara  untuk mengendalikan  mutu  simplisia adalah  dengan  melakukan  standarisasi  simplisia  yang  diperlukan  agar dapat diperoleh  bahan  baku  yang  seragam  yang  akhirnya  dapat  menjamin  efek  farmakologi  tanaman  tersebut (BPOM, 2005).
Parameter  mutu  simplisa  meliputi  susut  pengeringan,  kadar  air,  kadar  abu,  kadar  abu  tidak  larut asam,  kadar  sari  larut  air,  kadar  sari  larut  etanol.  Sebagai  data  pelengkap,  dilakukan  pemeriksaan organoleptik,  mikroskopis,  makroskopis  serta  identifikasi  kimia  simplisia.  Pengetahuan  akan  kandungan kimia suatu tumbuhan merupakan suatu langkah awal pemahaman tumbuhan tersebut sebagai obat (BPOM, 2005).
Berdasarkan uraian diatas maka penulis melakukan penelitian dengan menggunakan tanaman jeruk lemon untuk mengetahui karakterisasi simplisia dan skrining fitokimia serta analisis golongan senyawa kimia dari ekstrak simplisia daun dan kulit buah jeruk lemon ( Citrus limon (L.) Burm.f.).

## Perumusan Masalah
Berdasarkan pendapat latar belakang tersebut, maka perumusan masalah penelitian ini adalah:
1. Bagaimana  cara mengetahui  karakteristik  simplisia daun dan  kulit  buah  jeruk lemon ( Citrus limon (L.) Burm.f.)?
2. Golongan senyawa kimia apa saja yang ada di dalam daun dan kulit buah jeruk lemon ( Citrus limon (L.) Burm.f.)?
3. Bagaimana  cara  menganalisis  kandungan  kimia  daun  dan  kulit  buah  jeruk  lemon  ( Citrus  limon (L.) Burm.f.)?

## Hipotesis Penelitian
Berdasarkan perumusan masalah tersebut, maka hipotesis pada penelitian ini adalah:
1. Karakterisasi  simplisia  daun  dan  kulit  buah  jeruk  lemon  ( Citrus  limon (L.)  Burm.  f.)  dapat  diketahui dengan melakukan pengamatan parameter simplisia.
2. Golongan senyawa kimia yang ada di dalam daun dan kulit buah jeruk lemon ( Citrus limon (L.) Burm. f.) dapat ditentukan dengan melakukan skrining fitokimia.
3. Analisis  kandungan  kimia  dari  daun  dan  kulit  buah  jeruk  lemon  ( Citrus  limon (L.)  Burm.  f.)  dapat dilakukan secara kromatografi lapis tipis (KLT).

## Tujuan Penelitian
Tujuan dari penelitian ini adalah:
1. Untuk mengetahui karakteristik simplisia daun dan kulit jeruk buah lemon ( Citrus limon (L.) Burm.f.).
2. Untuk  mengetahui  golongan  senyawa  kimia  yang  terdapat  didalam  daun  dan  kulit  buah  jeruk  lemon ( Citrus limon (L.) Burm.f.).
3. Untuk  mengetahui  cara  analisis  kandungan  kimia  dari  daun  dan  kulit  buah  jeruk  lemon  ( Citrus  limon (L.) Burm. f.) secara kromatografi lapis tipis (KLT).

## Manfaat Penelitian
Manfaat yang diharapkan dari penelitian ini adalah:
1. Dapat  memberikan  informasi  kepada  masyarakat  kandungan  dari  daun  dan  kulit  buah  jeruk  lemon ( Citrus limon (L.) Burm. f.) sehingga dapat dimanfaatkan sebagai salah satu tanaman obat tradisional.
2. Agar dapat mendorong minat para peneliti untuk menggunakan tanaman jeruk lemon ( Citrus limon (L.) Burm. f.) sebagai sampel penelitian.
3. Dapat  memberikan  informasi  kepada  peneliti  mengenai  karakterisasi  simplisia  dan  kandungan  kimia serta  analisis  secara  kromatografi  lapis  tipis  dari  daun  dan  kulit  buah  jeruk  lemon  ( Citrus  limon (L.) Burm. f.) sehingga dapat menambah data penelitian dalam usaha pemanfaatan jeruk lemon ( Citrus limon (L.) Burm.f.).

## 2. RESEARCH METHOD
Desain  penelitian  yang  diterapkan  pada  penelitian  ini  adalah  eksplorasi.  Penelitian  meliputi pengumpulan  bahan,  pembuatan  simplisia,  karakterisasi  simplisia,  pembuatan  ekstrak,  skrining  fitokimia, analisis secara KLT (kromatografi lapis tipis). Penelitian dilakukan di Laboratorium Farmasi Universitas Sari Mutiara Indonesia. Penelitian dilakukan pada tanggal 05 Juni 2017 – 28 Agustus 2017.

## Alat dan Bahan

##  Alat
Alat-alat yang digunakan selama penelitian seperti alat-alat gelas (Erlenmeyer, beaker glass, corong, gelas  ukur,  corong  pisah,  tabung  reaksi,  labu  bersumbat),  krus  porselen  bertutup,  maserator,  timbangan analitik, mikroskop, chamber, oven, kertas saring,  pengayak mesh 40, lemari pengering, blender.
 Bahan
Bahan alam  yang  digunakan adalah  daun  dan  kulit  buah  jeruk lemon  ( Citrus limon (L.)  Burm.  f.). Bahan  kimia  yang  digunakan  etanol  70%,  lempeng  silika  gel  60  F 254 ,  kloral  hidrat,  asam  klorida (p) , kloroform,  serbuk  magnesium, amil  alkohol,  etanol  95%, methanol, asam  sulfat (P) ,  asam  asetat anhidrat, n - heksan,  benzene,  NaOH,  natrium  klorida (P) jenuh,  pereaksi  Mayer,  pereaksi  Molish,  Pereaksi  Dragendorff, pereaksi  Bouchardat,  pereaksi  Liebermann-Burchad,  pereaksi  Besi  (III)  klorida  1%,  pereaksi  asam  klorida 2N, pereaksi Timbal (II) asetat 0,4M, pereaksi asam sulfat 2N, pereaksi asam nitrat 0,5N, aquadest.
Pengambilan sampel secara purposif yaitu tanpa membandingkan dengan bahan tanaman yang sama dari daerah lain. Bahan tanaman yang digunakan adalah daun dan kulit buah jeruk lemon yang diperoleh dari Jl. Bunga Sedap Malam IX Kompleks Sunrise Garden, Kelurahan Sempakata, Kecamatan Medan Selayang, Kota Medan, Provinsi Sumatera Utara. Identifikasi sampel dilakukan di Herbarium Medanense USU, Medan, Sumatera Utara.
Daun jeruk lemon segar sebanyak  2.050 g dan kulit buah jeruk lemon sebanyak 1400 g  yang telah dikumpulkan, disortasi basah yaitu memisahkan daun dan kulit buah jeruk lemon dari bagian tumbuhan yang terikut,  kotoran-kotoran  atau  bahan  asing  lainnya,  kemudian  daun  dan  kulit  buah  jeruk  lemon  yang  telah terkumpul dicuci untuk menghilangkan pengotoran yang melekat. Pencucian dilakukan dengan air kran yang mengalir,  ditiriskan,  dijemur  dibawah  sinar  matahari  selama  satu  hari  (sebelum  dirajang)  lalu  ditimbang diperoleh  berat  gram,  kemudian  kulit  buah  jeruk  lemon  dirajang.  Kemudian  dimasukkan  kedalam  lemari pengering dengan suhu 40-50 o C. Simplisia yang telah kering disortasi kering yaitu memisahkan benda-benda asing  seperti  pengotoran-pengotoran  lain  yang  terjadi  selama  pengeringan.  Setelah  disortasi,  ditimbang kembali, diperoleh berat simplisia daun jeruk lemon 540 g dan berat simplisia kulit buah jeruk lemon 370 g. Simplisia  kering  selanjutnya  diserbuk  dengan  menggunakan  blender.  Serbuk  simplisia  disimpan  dalam plastik untuk mencegah lembab dan pengotoran lainnya sebelum di ekstraksi (Depkes, 1989).

## Pembuatan Pereaksi

##  Pereaksi Mayer
Sebanyak  1,569  g  raksa  (II)  klorida  dilarutkan  dalam  air  suling  hingga  100  ml.  pada  wadah  lain ditimbang  sebanyak  5  g  kalium  iodide  lalu  dilarutkan  dalam  10  ml  air  suling.  Kedua  larutan
62
dicampurkan dan tambahkan air suling hingga diperoleh larutan 100 ml (Depkes RI, 1995).
 Pereaksi Molish
Sebanyak 3 g α-naftol dilarutkan dalam asam nitrat 0,5 N hingga 100 ml (Depkes RI, 1995).
 Pereaksi Dragendorff
Sebanyak  0,8  g  bismut  (III)  nitrat  dilarutkan  dalam  asam  nitrat  pekat  20  ml  kemudian  dicampurkan dengan kalium iodide sebanyak 27,2 g dalam 50 ml air suling. Campuran didiamkan sampai memisah sempurna.  Larutan  jernih  diambil  dan  diencerkan  dengan  air  secukupnya  hingga  100  ml  (Depkes  RI, 1995).
 Pereaksi Bouchardat
Sebanyak 4 g kalium iodide dilarutkan dalam air suling secukupnya kemudian ditambahkan 2 g iodium sedikit demi sedikit cukupkan dengan air suling hingga 100 ml (Dekes RI, 1995).
 Pereaksi Liebermann-Burchard
Sebanyak 5 bagian volume asam sulfat pekat dicampurkan dengan 50 bagian volume etanol 95%, lalu ditambahkan dengan hati-hati 5 bagian volume asam asetat anhidrida ke dalam campuran tersebut dan didinginkan (Depkes RI, 1995).
 Pereaksi Besi (III) klorida 1%
Sebanyak 1 g besi (III) klorida dilarutkan dalam air suling sampai 100 ml (Depkes RI, 1995).
 Pereaksi asam klorida 2N
Sebanyak 17 ml asam klorida pekat diencerkan dengan air suling sampai 100 ml (Depkes RI, 1995).
 Pereaksi Timbal (II) asetat 0,4 M
Sebanyak 15,17 g timbal (II) asetat dilarutkan dalam air suling bebas CO 2 hingga 100 ml (Depkes RI, 1995).
 Pereaksi Asam Sulfat 2N
Sebanyak 5,5 ml asam sulfat pekat diencerkan dengan air suling sehingga diperoleh 100 ml (Depkes RI, 1995).
 Pereaksi Asam Nitrat 0,5 N
Sebanyak  3,4  ml  asam  nitrat  pekat  diencerkan  dengan  air  suling  hingga  volume  100  ml  (Depkes  RI, 1995).

## Pemeriksaan Karakteristik Simplisia
Identifikasi simplisia dilakukan dengan memeriksa pemerian dan melakukan pengamatan simplisia baik secara makroskopik  maupun  secara  mikroskopik  penetapan  kadar air,  penetapan  kadar  sari  larut  dalam air, penetapan kadar sari larut dalam etanol, penetapan kadar abu, penetapan kadar abu tidak larut dalam asam, selanjutnya dilakukan skriningfitokimia (Depkes RI, 1989).

## Pemeriksaan Makroskopik
Uji  makroskopik  bertujuan  untuk menentukan  ciri khas  simplisia dengan  pengamatan  secara langsung berdasarkan  bentuk  simplisia  dan  ciri-ciri  daun  dan  kulit  buah  jeruk  lemon  ( Citrus  limon (L.)  Burm.f.) menurut literatur secara umum.
 Pemeriksaan Mikroskopik
Simplisia  yang  diperiksa  berupa  serbuk  daun  dan  kulit  buah  jeruk  lemon  dilakukan  dengan  cara meletakkan serbuk simplisia daun dan kulit buah jeruk lemon di atas objek gelas  yang ditetesi kloralhidrat. Diamati di bawah mikroskop untuk melihat fragmen pengenal dalam bentuk sel, isi sel atau jaringan tanaman serbuk simplisia daun dan kulit buah jeruk lemon.
 Penetapan Susut Pengeringan
1  g  simplisia  ditimbang  seksama  dan  dimasukkan  ke  dalam  krus  porselen  bertutup  yang  sebelumnya telah dipanaskan pada suhu 105 o C selama 30 menit dan telah ditara. Simplisia diratakan dalam krus porselen dengan  menggoyangkan  krus  hingga  merata.  Masukkan  ke  dalam  oven,  buka  tutup  krus,  panaskan  pada temperatur 100 o C sampai dengan 105 o C, timbang dan ulangi pemanasan sampai didapat berat yang kostan (Depkes, 1989).
Susut pengeringan  = berat sebelum pemanasan –  berat akhir berat sebelum pemanasan
X 100%
 Penetapan Kadar Abu Total
Sebanyak  3  g  serbuk  simplisia  yang  telah  digerus  dan  ditimbang  seksama  dimasukkan  dalam  krus porselen  yang  telah  dipijarkan  dan  ditara,  diratakan.  Krus  dipijarkan  perlahan-lahan  hingga  arang  habis, pijaran  dilakukan  pada  suhu  600º  C  selama  3  jam  kemudian  didinginkan  dan  ditimbang  sampai  diperoleh bobot  tetap.  Kadar  abu  dihitung  terhadap  bahan  yang  dikeringkan  di  udara.  Jika  cara  ini  arang  tidak  dapat dihilangkan, ditambahkan air panas, saring melalui kertas saring bebas abu. Dipijarkan sisa kertas dan kertas
saring  dalam  krus  yang  sama.  Dimasukkan  filtrat  ke  dalam  krus,  diuapkan.Dipijarkan  hingga  bobot  tetap, ditimbang dan dihitung (Depkes, 1989).
Kadar Abu Total  = berat abu sisa pijar berat simplisia X 100%
 Penetapan Kadar Abu Tidak Larut Asam
Abu  yang  diperoleh  pada  penetapan  kadar  abu,  didihkan  dengan  25  ml  asam  klorida  encer  selama  5 menit,  kumpulkan  bagian  yang  tidak  larut  dalam  asam,  saring  melalui  krus  kaca  masir  atau  kertas  saring bebas abu yang telah diketahui beratnya, lalu  sisa dipanaskan, kemudian didinginkan dan ditimbang sampai bobot tetap. Kadar abu yang tidak larut dalam asam dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan di udara (Depkes, 1989).
Kadar Abu Tidak Larut Asam   = berat abu sisa pijar berat simplisia X 100%
 Penetapan Kadar Sari Larut Etanol
5  g  serbuk  simplisa  dimaserasi  dengan  100  ml  etanol  selama  24  jam  seperti  tertera  pada  monografi, menggunakan  labu  bersumbat  sambil  sekali-sekali  dikocok  selama  6  jam  pertama,  kemudian  didiamkan. Disaring cepat, 20 ml filtrat diuapkan dalam cawan dangkal (Depkes, 1989).
Kadar sari larut etanol  = berat ekstrak x 5 berat simplisia X 100%
 Penetapan Kadar Sari Larut Air
5  g  serbuk  simplisia  dimaserasi  dengan  100  ml  kloroforom P (2,5  mL  kloroforom  dalam  1000  mL aquadest) selama 24 jam menggunakan labu bersumbat sambil sekali-sekali dikocok selama 6 jam pertama, kemudian didiamkan. Disaring cepat, 20 ml filtrat diuapkan dalam cawan dangkal berdasar rata (yang telah ditara)  di  atas  penangas  air  hingga  kering,  sisa  dipanaskan  pada  suhu  105 o C  hingga  bobot  tetap.  Kadar dihitung dalam persen terhadap bahan yang telah dikeringkan di udara (Depkes, 1989).
Kadar sari larut air  = berat ekstrak x 5 berat simplisia X 100%
 Ekstraksi Serbuk Simplisia
Ekstraksi dilakukan dengan cara maserasi, penyari yang digunakan adalah etanol atau campuran etanol- air.  Sepuluh  bagian  simplisia  dimasukkan  ke  dalam  bejana  maserasi  (maserator),  ditambahkan  75  bagian cairan  penyari  dan  direndam  selama  5  hari  sambil  sekali-sekali  diaduk.  Disaring,  maseratnya  dicukupkan menjadi 100  bagian  dengan melewatkan  cairan  penyari melalui ampas maseratnya.  Kemudian  didiamkan  2 hari.  Cairan  jernih  dienaptuangkan  dan  kemudian  maserat  diuapkan  hingga  mencapai  kekentalan  yang diinginkan (BPOM RI, 2013).

## Skrining Fitokimia

##  Pemeriksaan Alkaloida
Sampel uji ditimbang sebanyak 0,5 g kemudian ditambahkan 1 ml asam klorida 2 N dan 9 ml air suling, dipanaskan  diatas  penangas  air  selama  2  menit,  didinginkan  dan  disaring.  Filtrat  yang  diperoleh  dipakai untuk  uji  alkaloida,  diambil  3  tabung  reaksi,  lalu  kedalamnya  dimasukkan  0,5  ml  filtrat.  Masing-masing tabung reaksi ditambahkan pereaksi yang berbeda.
Tabung reaksi 1: ditambahkan 2 tetes    pereaksi Mayer Tabung reaksi 2: ditambahkan 2 tetes pereaksi Bouchardat Tabung reaksi 3: ditambahkan 2 tetes pereaksi Dragendorff
Alkaloid positif jika terjadi endapan atau kekeruhan pada paling sedikit dua dari tiga percobaan diatas (Depkes RI, 1995).
 Pemeriksaan Flavonoida
Sebanyak 10 g sampel uji ditambahkan 10 ml air panas, dididihkan selama 5 menit dan disaring dalam keadaan panas, kedalam 5 ml filtrat ditambahkan 0,1 g serbuk magnesium dan 1 ml asam klorida pekat dan 2 ml  amil  alkohol,  dikocok  dan  dibiarkan  memisah.  Flavonoida  positif  jika  terjadi  warna  merah  atau  kuning atau jingga pada lapisan amil alkohol (Depkes RI, 1995).
 Pemeriksaan Saponin
Sampel uji ditimbang sebanyak 0,5 g dan dimasukkan kedalam tabung reaksi, lalu ditambahkan 10 ml air panas, dinginkan kemudian dikocok kuat-kuat selama 10 detik. Jika terbentuk busa setinggi 1-10 cm yang stabil  dan  tidak  kurang  dari  10  menit  dan  tidak  hilang  dengan  penambahan  1  tetes  asam  klorida  2N menunjukkan adanya saponin (Depkes RI, 1995).
64
 Pemeriksaan Tanin
 Sampel uji ditimbang sebanyak 1 g, dididihkan selama 3 menit dalam 100 ml air suling lalu didinginkan dan  disaring.  Larutan  diambil  2  ml  ditambahkan  1-2  tetes  pereaksi  besi  (III)  klorida  1%.  Jika  terjadi warna biru kehitaman atau hijau kehitaman menunjukkan adanya tannin (Depkes RI, 1995).
 Pemeriksaan Steroid/Triterpenoid
Sebanyak 1 g sampel uji dimaserasi selama 2 jam dengan 20 ml n -heksan, lalu disaring. Filtrat diuapkan dalam  cawan  penguap.  Pada  sisa  ditambahkan  beberapa  tetes  pereaksi  Liebermann-Burchad.  Timbulnya warna  biru  atau  biru  hijau  menunjukkan  adanya  steroida,  sedangkan  warna  merah,  merah  muda  atau  ungu menunjukkan adanya triterpenoida (Harborne, 1987).
 Pemeriksaan Antrakuinon
Sampel uji  ditimbang  sebanyak  0,2  g, kemudian  ditambahkan  10 ml  benzen, dikocok  lalu  didiamkan. Lapisan benzen dipisahkan dan disaring, kocok lapisan benzen dengan 2 ml NaOH 2N, didiamkan. Lapisan air berwarna merah dan lapisan benzen tidak berwarna menunjukkan adanya antrakuinon (Depkes RI, 1995).

## Analisis KLT (Kromatografi Lapis Tipis)
 Analisis Alkaloid
Bahan yang diperlukan untuk uji KLT:
Fase diam : Lempeng silika gel GF 254 Fase gerak : CHCl 3 -MeOH-NH 4 OH    (85:15:1) Larutan deteksi: 1. Pereaksi Dragendorff 2. Asam sulfat pekat Pengamatan  dilakukan  pada  sinar  tampak  dan  sinar  UV  366  nm,  sebelum  dan  sesudah  perlakuan. Nilai Rf noda dihitung dan warna yang timbul dicatat.
 Analisis Flavonoid
Bahan yang digunakan pada uji KLT: Fase diam : Lempeng silika gel GF 254 Fase gerak : HCl 1%
Larutan deteksi  :Asam sulfat-etanol (10:10)
Pengamatan  dilakukan  pada  sinar  tampak  dan  sinar  UV  366  nm,  sebelum  dan  sesudah  perlakuan. Nilai Rf noda dihitung dan warna yang timbul dicatat.
 Analisis Steroid/Triterpenoid
Fase diam
:Lempeng silika gel GF 254 Fase gerak
:Heksan-MeOH (7:3)
Larutan deteksi   :Pereaksi Liebermann-Burchard
Pengamatan  dilakukan  pada  sinar  tampak  dan  sinar  UV  366  nm,  sebelum  dan  sesudah  perlakuan. Nilai Rf noda dihitung dan warna yang timbul dicatat.

## 3. RESULTS AND ANALYSIS Hasil Identifikasi Tumbuhan
Hasil  identifikasi  tumbuhan  yang  dilakukan  di  Herbarium  Medanense  (MEDA),  Universitas Sumatera Utara menunjukkan bahwa tumbuhan termasuk suku Rutaceae, jenis ( Citrus limon (L.) Burm.f.).

## Hasil Identifikasi Morfologi Tumbuhan
Tumbuhan  jeruk  lemon  ( Citrus  limon (L.)  Burm.  f.)  berupa  pohon  dengan  tinggi  2-3,5  meter, berakar tunggang, berbatang kayu dan berdiri tegak serta mempunyai percabangan yang banyak. Tumbuhan jeruk  lemon  berdaun  majemuk  menyirip,  tepi  daun  bergerigi,  ujung  dan  pangkal  daun  runcing,  berbentuk jorong  atau  oval,  panjang  daun  7-10  cm,  lebar  daun  3,5-5  cm,  dan  daun  berwarna  hijau.  Bunga  tumbuhan jeruk  lemon  terdapat  diujung  batang  dan  di  ketiak  daun,  panjang  1-1,5  cm,  benang  sari  panjang  1,5  cm, kepala  sari  berbentuk  ginjal,  tangkai  putik  silindris  (panjang  ±  1  cm),  kepala  putik  bulat,  kelopak  daun  5 helai,  mahkota  daun  5x2  helai  (putih  kekuningan).  Buah  jeruk  lemon  berbentuk  agak  bulat,  mempunyai ukuran panjang 5-8 cm dan mempunyai diameter 3-4 cm, berdaging keras dan padat. Kulit buah jeruk lemon berwarna kuning tua.

## Hasil Karakterisasi Simplisia
 Hasil Pemeriksaan Makroskopik Simplisia
Hasil pemeriksaan makroskopik dari simplisia daun dan kulit buah jeruk lemon dapat dilihat pada tabel berikut:
Tabel 1. Hasil Pemeriksaan Makroskopik Daun Dan Kulit Buah Jeruk Lemon No  Pemeriksaan Daun Jeruk Lemon Kulit Buah Jeruk Lemon 1 Rupa dan Bentuk Bentuk daun jorong, tepi daun menggulung, ujung dan pangkal daun tumpul. Bentuk  kulit  buah  jeruk  lemon  menggulung dan  berkerut.  Berupa  potongan-potongan kecil kulit buah yang telah di keringkan. 2 Ukuran Panjang 9,5 - 11,5 cm Lebar 2,5 - 4,2 cm Panjang 2,5 - 4,5 cm Lebar 1,7 - 3,5 cm 3 Warna Hijau – Hijau Kecoklatan Kuning kecoklatan, bagian dalam kulit buah berwarna putih kecoklatan 4 Bau Bau Khas Jeruk Lemon Bau Khas Jeruk Lemon 5 Uraian serbuk simplisia Serbuk  simplisia  daun  jeruk lemon dicirikan dengan serbuk berwarna hijau kecoklatan. Serbuk  simplisia  kulit  buah  jeruk  lemon dicirikan  dengan  serbuk  berwarna  kuning kecoklatan.

##  Pemeriksaan Mikroskopik
Hasil  pemeriksaan  serbuk  simplisia  daun  jeruk  lemon  warna  hijau  kecoklatan,  terdapat  jaringan pengangkut, stomata, fragmen rambut penutup dan fragmen sel minyak. Hasil pemeriksaan serbuk simplisia kulit  buah  jeruk  lemon  warna  kuning  kecoklatan, terdapat berkas  pembuluh, kristal  kalsium  oksalat  bentuk prisma, stomata, fragmen sel minyak dan fragmen rambut penutup.

## Hasil Pemeriksaan Karakteristik Simplisia
Hasil  pemeriksaan  penetapan  susut  pengeringan,  penetapan  kadar  abu  total,  penetapan  kadar  abu tidak larut asam, penetapan kadar sari larut etanol, dan penetapan kadar sari larut air dapat dilihat pada tabel dibawah ini:
Tabel 2. Hasil Pemeriksaan Karakteristik Simplisia No  Penetapan Hasil (%) Daun Jeruk Lemon Kulit Buah Jeruk Lemon 1 Penetapan susut pengeringan 69,29% 69,69% 2 Penetapan kadar abu total 6,40% 3,32% 3 Penetapan kadar abu tidak larut asam 1,23% 1,57% 4 Penetapan kadar sari larut etanol 17,73% 28,99% 5 Penetapan kadar sari larut air 24,79% 25,35%
Karakterisasi simplisia untuk simplisia daun dan kulit buah jeruk lemon belum tertera pada Materia Medika Indonesia. Namun sebagian besar hasil yang diperoleh mendekati persyaratan karakterisasi simplisia kulit buah jeruk nipis yang tertera dalam Farmakope Hebal Indonesia Edisi I 2011.
Penetapan  kadar  sari  dilakukan  terhadap  kadar  sari  air  dan  sari  larut  etanol.  Penetapan  kadar  sari menyatakan jumlah zat yang terlarut dalam air atau etanol (Depkes RI, 1995).
Penetapan  kadar  abu  dilakukan  untuk  mengetahui  kandungan  senyawa  anorganik  dalam  simplisia misalnya  Mg,  Ca,  Na  dan  K.  Kadar  abu tidak  larut  asam  untuk  mengetahui kadar  senyawa  anorganik  yang tidak larut dalam asam misalnya silika (WHO, 1998).

## Hasil Skrining Fitokimia
Hasil skrining fitokimia dari simplisia daun dan kulit buah jeruk lemon dapat dilihat pada tabel 3. Tabel 3. Hasil Skrining Fitokimia Daun Dan Kulit Buah Jeruk Lemon
No Pemeriksaan Daun Jeruk Lemon Kulit Buah Jeruk Lemon 1 Alkaloid + + 2 Flavonoid + + 3 Steroid/Triterpenoid + + 4 Saponin - - 5 Tanin + - 6 Antrakuinon - - Keterangan:
Positif (+): Mengandung golongan senyawa Negatif (-): Tidak mengandung golongan senyawa
Hasil di atas menunjukkan bahwa simplisia daun dan kulit buah jeruk lemon mengandung senyawa alkaloid,  flavonoid,  steroid/triterpenoid,  tanin  dan  minyak  atsiri.  Kulit  buah  jeruk  lemon  mengandung tangerin  yaitu  sejenis  antioksidan  kuat  yang  disebut  super-flavonoid.  Daun  dan  kulit  buah  jeruk  lemon mengandung tannin dan minyak esensial (Sutraningsih, 2005).
66
Hasil  uji  alkaloid  serbuk  simplisia  daun  jeruk  lemon  dengan  pereaksi  Bouchardat  memberikan endapan coklat jingga, dengan pereaksi Dragendorff memberikan endapan coklat jingga dan pereaksi Mayer memberikan  endapan  putih  kekuningan,  sedangkan  pada  serbuk  simplisia  kulit  buah  jeruk  lemon  dengan pereaksi Bouchardat memberikan endapan jingga, dengan pereaksi Dragendorff memberikan endapan kuning jingga  dan  dengan  pereaksi  Mayer  memberikan  endapan  putih.  Hasil  uji  flavonoid  serbuk  simplisia  daun jeruk lemon terjadi warna jingga pada lapisan amil alkohol, sedangkan pada serbuk simplisia kulit buah jeruk lemon terjadi warna kuning pada lapisan amil alkohol. Hasil uji tanin pada serbuk simplisia daun jeruk lemon terjadi warna hijau kehitaman, sedangkan pada serbuk simplisia kulit buah jeruk lemon terjadi warna coklat kehitaman.
Hasil uji steroid/triterpen pada serbuk simplisia daun jeruk lemon menimbulkan warna biru hijau, ini menunjukkan bahwa daun jeruk lemon mengandung senyawa steroid, sedangkan pada serbuk simplisia kulit buah  jeruk  lemon  menimbulkan  warna  merah  muda,  ini  menunjukkan  bahwa  kulit  buah  jeruk  lemon mengandung senyawa terpen. Hasil uji saponin pada serbuk simplisia daun dan kulit buah jeruk lemon tidak menunjukkan adanya senyawa saponin dengan ditandai tidak terjadi busa. Hasil uji antrakuinon pada serbuk simplisia  daun  dan  kulit  buah  jeruk  lemon  tidak  menunjukkan  adanya  senyawa  antrakuinon  ini  ditandai dengan tidak terjadi warna merah pada lapisan air.

## Hasil Analisis Secara KLT

##  Golongan Alkaloid
Hasil analisis KLT golongan alkaloid dapat dilihat pada tabel berikut.
Tabel 4. Hasil Analisis KLT Golongan Alkaloid Sebelum Perlakuan No Bercak Harga Rf ekstrak daun jeruk lemon Harga Rf ekstrak kulit buah jeruk lemon 1 Bercak 1 0,71 0,86 2 Bercak 2 0,80 0,87 3 Bercak 3 0,90 - Tabel 5. Hasil Analisis KLT Golongan Alkaloid Dengan Penyinaran Dibawah Sinar UV No Bercak Harga Rf ekstrak daun jeruk lemon Harga Rf ekstrak kulit buah jeruk lemon 1 Bercak 1 0,54 - 2 Bercak 2 0,95 - Tabel 6. Hasil Analisis KLT Golongan Alkaloid Dengan Pereaksi Dragendorff No Bercak Harga Rf ekstrak daun jeruk lemon Harga Rf ekstrak kulit buah jeruk lemon 1 Bercak 1 0,14 0,19 2 Bercak 2 - 0,53 3 Bercak 3 - 0,70
Pada  analisis  golongan  senyawa  alkaloid  sebelum  perlakuan  pada  ekstrak  daun  jeruk  lemon diperoleh harga Rf 1 0,71; Rf 2 0,80; Rf 3 0,90; sedangkan pada ekstrak kulit buah jeruk lemon diperoleh harga Rf 1 0,86; Rf 2 0,87. Dibawah sinar UV harga Rf dari ekstrak daun jeruk lemon Rf 1 0,54; Rf 2 0,95. Pada ekstrak daun jeruk lemon setelah penyemprotan pereaksi Dragendorff didapat harga Rf 0,14, sedangkan pada ekstrak kuli  buah  jeruk  lemon  didapat  harga  Rf 1 0,19;  Rf 2 0,53;  Rf 3 0,70.  Eluen  yang  digunakan  adalah  CHCl 3 – MeOH–NH 4 OH (85:15:1).
Campuran  kloroform-metanol-ammonia  (85:15:1)  memiliki  sifat  kepolaran  yang  berbeda. Kloroform bersifat non polar, sedangkan metanol dan ammonia bersifat polar. Namun karena perbandingan kloroform  lebih  besar  dibandingkan  metanol  dan  ammonia,  maka  campuran  eluen  cenderung  bersifat  non polar.  Pemisahan  alkaloid  dengan  KLT  dapat  menggunakan  pereaksi  penyemprot  Dragendorff.  Setelah disemprot,  plat  akan  menunjukkan  bercak  coklat-jingga/orange-merah/coklat  berlatar  belakang  kuning (Harborne, 1987).
 Golongan flavonoid
Hasil analisis KLT golongan flavonoid dapat dilihat pada tabel berikut:
Tabel 7. Hasil Analisis KLT Golongan Flavonoid Sebelum Perlakuan No Bercak Harga Rf ekstrak daun jeruk lemon Harga Rf ekstrak kulit buah jeruk lemon 1 Bercak 1 0,45 0,93 2 Bercak 2 0,94 - Tabel 8. Hasil Analisis KLT Golongan Flavonoid Dengan Penyinaran Dibawah Sinar UV No Bercak Harga Rf ekstrak daun jeruk lemon Harga Rf ekstrak kulit buah jeruk lemon 1   Bercak 1 - 0,39
Tabel 9. Hasil Analisis KLT Golongan Flavonoid Dengan Asam Sulfat (p) : etanol (10:10) No Bercak Harga Rf ekstrak daun jeruk lemon Harga Rf ekstrak kulit buah jeruk lemon 1 Bercak 1 0,80 -
Pada  analisis  golongan  senyawa  flavonoid  sebelum  perlakuan  pada  ekstrak  daun  jeruk  lemon diperoleh harga Rf 1 0,45; Rf 2 0,94. Sedangkan pada ekstrak kulit buah jeruk lemon diperoleh harga Rf 0,93. Pengamatan  dibawah  sinar  UV  pada  ekstrak  kulit  buah  jeruk  lemon  diperoleh  harga  Rf  0,39.  Setelah menyemprotkan  pendeteksi  bercak  asam  sulfat (p) -etanol  (10:10)  pada    ekstrak  daun  jeruk  lemon  kemudian dipanaskan pada suhu 100 o C selama 10-15 menit diperoleh harga Rf 0,80.  Eluen yang digunakan adalah HCl 1%.
 Golongan Steroid/Triterpenoid
Hasil analisis KLT golongan steroid/triterpenoid dapat dilihat pada tabel berikut.
Tabel 10. Hasil Analisis KLT Golongan Steroid/Triterpenoid Sebelum Perlakuan No Bercak Harga Rf ekstrak daun jeruk lemon Harga Rf ekstrak kulit buah jeruk lemon 1 Bercak 1 0,05 0,21 2 Bercak 2 0,24 0,40 Tabel 11. Hasil Analisis KLT Golongan Steroid/Triterpenoid Dengan Penyinaran Dibawah Sinar UV No Bercak Harga Rf ekstrak daun jeruk lemon Harga Rf ekstrak kulit buah jeruk lemon 1 Bercak 1 0,48 0,69 2 Bercak 2 0,80 0,95 Tabel 12. Hasil Analisis KLT Golongan Steroid/Triterpenoid Dengan Pereaksi Liebermann-Burchard No Bercak Harga Rf ekstrak daun jeruk lemon Harga Rf ekstrak kulit buah jeruk lemon 1 Bercak 1 - 0,46 2 Bercak 2 - 0,96
Pada  analisis  golongan  senyawa  steroid/triterpenoid  sebelum  perlakuan  pada  ekstrak  daun  jeruk lemon diperoleh harga Rf 1 0,05; Rf 2 0,24; sedangkan pada ekstrak kulit buah jeruk lemon diperoleh harga Rf 1 0,21; Rf 2 0,40. Pengamatan dibawah sinar UV pada ekstrak daun jeruk lemon diperoleh harga Rf 1 0,48; Rf 2 0,80, sedangkan pada ekstrak kulit buah jeruk lemon diperoleh harga Rf 1 0,69; Rf 2 0,95.
Setelah menyemprotkan pendeteksi bercak menggunakan pereaksi Liebermann-Burchard kemudian dipanaskan pada suhu 100 o C selama 10-15 menit diperoleh harga Rf pada ekstrak kulit buah jeruk lemon Rf 1 0,46; Rf 2 0,96. Pada analisis golongan senyawa steroid/triterpen digunakan eluen heksan: metanol (70:30). Analisis  KLT  dilakukan  untuk  menegaskan  hasil  yang  didapat  dari  skrining  fitokimia.  Pemisahan senyawa  dilakukan menggunakan plat  silika  gel  GF 254 sebagai  fase  diamnya  dengan  ukuran 2  cm  x  10  cm. Sebelum  digunakan  plat  kromatografi  lapis  tipis  diaktifkan  terlebih  dahulu  dengan  pemanasan  pada  suhu diatas  100 o C  selama  setengah  jam,  tujuannya  untuk  menghilangkan  molekul  air  yang  terjerap  pada  plat kromatografi lapis tipis yang mengganggu proses pemisahan dan analisis. Kemudian plat kromatografi lapis tipis yang telah kering disimpan dalam desikator untuk menjaga agar tetap kering dan bersih (Miller, 2005) Selanjutnya ekstrak ditotolkan sebanyak 5-10 totolan pada tempat yang sama menggunakan pipa kapiler pada tepi bawah plat.
Sebelum dilakukan pengelusian eluen dalam bejana dijenuhkan terlebih dahulu agar campuran eluen dapat  mengelusi  ekstrak  dengan  baik  dan  untuk  mempercepat  reaksi  yang  nantinya  dapat  bercampur
68 sempurna. Eluen yang baik adalah eluen yang bisa memisahkan senyawa dalam jumlah yang banyak ditandai dengan munculnya noda. Noda yang terbentuk tidak berekor dan jarak noda yang satu dengan yang lainnya jelas  (Harborne,  1987).  Plat  yang  sudah  ditotolkan  dengan  sampel  dimasukkan  dalam  bejana,  diamati prosesnya.  Plat  bisa  diangkat  dari  bejana  jika  eluennya  sudah  naik  sampai  batas  garis  atas,  kemudian  plat didiamkan sebentar dan ditunggu sampai kering.

## 4. CONCLUSION
1. Hasil pemeriksaan  karakterisasi simplisia daun jeruk lemon ( Citrus limon (L.) Burm. f.) diperoleh susut pengeringan 69,29%, kadar sari larut etanol 17,73%, kadar sari larut air 24,79%, kadar abu total 6,40%, dan kadar abu tidak larut asam 1,23%.
2. Hasil  pemeriksaan  karakterisasi  simplisia  kulit  buah  jeruk  lemon  ( Citrus  limon (L.)  Burm.  f.)  diperoleh susut  pengeringan  69,69%,  kadar  sari  larut  etanol  28,99%,  kadar  sari  larut  air  25,35%,  kadar  abu  total 3,32% dan kadar abu tidak larut asam 1,57%.
3. Hasil skrining fitokimia dari daun dan kulit buah jeruk lemon ( Citrus limon (L.) Burm. f.) menunjukkan adanya golongan senyawa alkaloid, flavonoid, tanin dan steroid/triterpen.
4. Analisis golongan senyawa yang terkandung dalam ektrak daun kulit buah jeruk lemon ( Citrus limon (L.) Burm.  f.)  dilakukan  secara  KLT  (kromatografi  lapis  tipis)  untuk  menegaskan  hasil  yang  didapat  dari skrining fitokimia.
SARAN
1. Disarankan  kepada peneliti  selanjutnya  untuk  melakukan  isolasi zat  berkhasiat  dari  daun  dan  kulit  buah jeruk lemon serta melakukan uji khasiat atau uji aktivitas dari zat yang terkandung dalam daun dan kulit buah jeruk lemon.
2. Disarankan kepada masyarakat untuk dapat memanfaatkan daun dan kulit buah jeruk lemon sebagai salah satu pilihan obat tradisional.

## REFERENCES
Andarmoyo, S. (2013). Konsep & proses keperawatan nyeri . Yogyakarta: ar-ruzzmedia. Anief, M. (2000). Ilmu meracik obat: teori dan praktik . Yogyakarta: Gadjah Mada University Press. Badan POM. (2008). Informatorium Obat Nasional Indonesia. Jakarta: Sagung Seto. Dayer, P., Collart, L., Desmeules, J. (1994). The Pharmacology Of Tramadol, Drugs, Springer. 47 (1): 3–7. Ganiswara, S.G . (1995). Farmakologi dan terapi Edisi 4 . Jakarta: Bagian Farmakologi FKUI. Ganiswarna, S.G. (1995). Antihipertensi, dalam Ganiswarna. Farmakol dan Ter Ed IV . 315–42. Hulliana, M. (2001). Panduan menjalani Kehamilan sehat . Jakarta: Niaga Swadaya. Info RSU Tanjung Pura. http://listrumahsakit.com/info-rsu-tanjung-pura/. Kasdu, D. (2003). Operasi caesar: Masalah dan solusinya . Jakarta: Puspa Swara. Levy, M.H. (1996). Pharmacologic Treatment Of Cancer Pain. N Engl J Med. Mass Medical Soc; 335 (15): 1124–32.
Notoatmodjo, S. (2010). Metodologi Penelitian Kesehatan . Jakarta: Rineka Cipta. Prawirohardjo, S. (2010). Ilmu Kebidanan Edisi IV Cetakan ke-2 . Jakarta: Tridasa Printer. Septiawan,  E.,  Yennita,  Y.,  Ruyani,  A. Pengaruh  Ekstrak  Daun  Sirih  Merah  (Piper  Crocatum)  Terhadap Penurunan  Suhu  Tubuh  Mencit  (Mus  Musculus)  Sebagai  Media  Belajar  Pada  Pembelajaran  Biologi Sma . Bengkulu: Universitas Bengkulu.
Setyawati, E . (2012). Evaluasi  Penggunaan  Obat Analgetik Antipiretik  Sebagai  Upaya  Pengobatan  Sendiri Di Kelurahan Pondok Karanganom Klaten. Surakarta: Universitas Muhammadiyah Surakrta. Siregar, C.J.P. (2006). Kumolosasi E. Farmasi Klinik teori dan penerapan . Jakarta: EGC. Sugiyono, P. (2003 ). Metode Penelitian Administrasi . Bandung: Alfabeta. Sulistyawati, A . (2009). Asuhan Kebidanan Pada Masa Kehamilan . Jakarta: Salemba Medika.
Supardi,  S.,  Sampurno,  O.D.,  Notosiswoyo,  M.  (2002). Pengaruh  Metode  Ceramah  Dan  Media  Leaflet Terhadap Perilaku Pengobatan Sendiri Yang Sesuai Dengan Aturan. Buletin Penelitian Kesehatan. 30 (3 Sep).
Tjay, T.H. (2015). Obat-obat Penting Edisi Ketujuh. Jakarta: Elex Media Komputindo. Wiknjosastro, H. (2010). Ilmu Bedah Kebidanan . Jakarta: Yayasan Bina Pustaka.