ISSN: 1410-8917
e-ISSN: 2597-9914
Jurnal Kimia Sains dan Aplikasi 21 (1) (2018) : 40 – 44
Jurnal Kimia Sains dan Aplikasi

## Journal of Scientific and Applied Chemistry
Journal homepage: http://ejournal.undip.ac.id/index.php/ksa
Improvement of Bioactivity with Nanoparticle Fabrication: Cytotoxic Test of Ethanol, N-Hexane and Ethyl Acetate Extract from Red Galangal Rhizome ( Alpinia purpurata (Vieill.) K. Schum) in Bulk and Nanoparticle size using BSLT Method
Enny Fachriyah a* , Dewi Kusrini a , Pratama Jujur Wibawa a
a Organic Chemistry Laboratory, Chemistry Department, Faculty of Sciences and Mathematics, Diponegoro University, Jalan Prof. Soedarto, Tembalang, Semarang
* Corresponding author: enny.fachriyah@live.undip.ac.id
A r t i c l e   I n f o A b s t r a c t
Keywords: Red galangal, nanoparticles, maceration, ethanol, n-hexane, ethyl acetate, cytotoxic activity, BSLT, LC 50
Some of the secondary metabolites present in red algae are terpenoids, quinones, flavonoids, alkaloids,  essential  oils,  diarylheptanoids,  steroids,  cardioglycosides,  oils  and  fats,  tannins, carbohydrates. Activity of rhizomes, leaves and flowers red leaf is as antimicrobial, anti-fungal, anti-oxidants,  anti-tumor,  anti-cancer  and  vasodilator.  One  way  to  improve  the  physical, chemical and bioactivity properties of natural compounds was to make them into nanoparticles. In this study, the isolation of bioactive compounds contained in red laos rhizome by maceration method using ethanol solvent was done, then partitioned with n-hexane and ethyl acetate. The extracts thus obtained are fabricated into nanoparticles. Extracts in bulk and nanoparticles were then tested for cytotoxic activity using BSLT method. Results of analysis with PSA showed that ethanol extract had size 410,8 nm, n-hexane extract 220,7 nm and ethyl acetate extract 208,3 nm. The results  of  cytotoxic tests showed  that nanoparticle  size  increased  cytotoxic  activity. Ethyl  acetate  extract  was  most  active  compared  to  ethanol  and  n-hexane  extracts  with  LC 50 values of 17.919; 84,956; 166,526 ppm. Whereas the nanoparticle size was respectively 10,491; 74,072 and 84,197 ppm. Cytotoxic activity increases with nanoparticle fabrication.

## A b s t r a k
Kata Kunci: Laos merah, nanopartikel, maserasi, etanol, n- heksana, etil asetat, aktivitas sitotoksik, BSLT, LC 50
Beberapa  metabolit  sekunder  yang  terdapat  dalam  laos  merah  adalah  terpenoid,  kuinon, flavonoid, alkaloid, minyak atsiri, diarilheptanoid, steroid, kardioglikosida, minyak dan lemak, tanin,  karbohidrat.  Aktivitas  dari  rimpang,  daun  dan  bunga  laos  merah  adalah  sebagai antimikroba, anti jamur, anti oksidan, anti tumor, anti kanker dan vasodilator. Salah satu cara untuk  meningkatkan  sifat  fisik,  kimia  dan  bioaktivitas  senyawa  bahan  alam  adalah membuatnya  menjadi  nanopartikel.  Pada  penelitian  ini,  isolasi  senyawa  bioaktif  yang terkandung dalam rimpang laos merah dengan metode maserasi dengan menggunakan pelarut etanol  dilakukan,  selanjutnya  dipartisi  dengan  n-heksana  dan  etil  asetat.  Ekstrak  yang diperoleh  kemudian  difabrikasi  menjadi  nanopartikel.  Ekstrak  dalam  bulk  dan  nanopartikel kemudian  diuji  aktivitas  sitotoksik  menggunakan  metode  BSLT.  Hasil  analisis  dengan  PSA menunjukkan bahwa ekstrak etanol memiliki ukuran 410,8 nm, ekstrak n-heksana 220,7 nm dan ekstrak etil asetat 208,3 nm. Hasil uji sitotoksik menunjukkan bahwa ukuran nanopartikel meningkatkan aktivitas sitotoksik. Ekstrak etil asetat adalah paling aktif dibandingkan ekstrak etanol  dan  n-heksana  dengan  nilai  LC 50 masing-masing  17,919;  84,956;  166,526  ppm. Sedangkan  yang  ukuran  nanopartikel  berturut-turut  masing-masing  sebesar  10,491;  74,072 dan 84,197 ppm. Aktivitas Sitotoksik meningkat dengan fabrikasi nanopartikel.
Jurnal Kimia Sains dan Aplikasi 21 (1) (2018) : 39 – 43

## 1. Pendahuluan
Indonesia  merupakan  negara  kepulauan  yang memiliki  jenis  tumbuhan  yang  dapat  dimanfaatkan sebagai  obat  tradisional,  yang  khasiatnya  telah dibuktikan  oleh  masyarakat  luas.  Pemanfaatan  zat-zat kimia  yang  terkandung  di  dalam  tumbuhan  sangat penting,  karena  senyawa  bahan  alam  yang  aktif farmakologik  yang  digunakan  sebagai  obat  umumnya efek  sampingnya  tidak  ada  atau  ringan  dibandingkan dengan  obat  dari  senyawa  sintetik.  Selain  itu  sumber daya  alam  sebagai  bahan  awal  mudah  diperoleh  dan diperbaharui [1, 2].
Salah  satu  tanaman  yang  berpotensi  sebagai  obat adalah lengkuas merah (]  ), termasuk suku Zingiberaceae . Rimpang lengkuas merah selama ini telah dimanfaatkan  untuk  obat  reumatik,  penambah  nafsu makan, panu, kadas, kurap, perut tidak enak, gangguan pernapasan pada anak dan stimulansia aromaticum [3].
Penelitian  tentang  lengkuas  merah  sudah  banyak dilakukan  [4].  Beberapa  metabolit  sekunder  yang terdapat  di  dalam  tanaman  lengkuas  adalah  terpenoid [5],  kuinon  [6],  flavonoid  [7],  alkaloid  [8], diarilheptanoid,  steroids,  kardioglikosida,  minyak  dan lemak, tannin, karbohidrat [9].
Beberapa  penelitian  sebelumnya  melaporkan aktivitas  rimpang,  daun  dan  bunga  lengkuas  merah, diantaranya antimikroba [10, 11], anti jamur, antioksidan [12], antitumor dan antikanker [13], vasodilator, anti TBC [14].
Penggalian  senyawa-senyawa  bahan  alam  dalam suatu tumbuhan umumnya berdasarkan pada pendekatan  kemotaksonomi  dengan  hipotesis  bahwa tumbuhan  dengan  jenis  atau  marga  yang  sama  akan memiliki  kandungan  kimia  sejenis  atau  bahkan  sama. Dalam  bidang  medis,  bahan  alam  memiliki  kandungan senyawa-senyawa  bioaktif  yang  digunakan  secara  luas untuk  pengobatan,  sehingga  perlu  peningkatan bioaktivitasnya  untuk  kegunaan  yang  lebih  efektif  dan efisien.  Salah  satu  cara  untuk meningkatkan  sifat  fisik, kimia  dan  bioaktivitas  senyawa  bahan  alam  adalah membuat nanopartikel. Nanopartikel memiliki sifat lebih ringan,  lebih  kuat  dan  memiliki  luas  permukaan  yang lebih besar sehingga meningkatkan bioaktivitas senyawa dibandingkan  bentuk  bulk-nya  [15].  Nanopartikel memiliki sifat-sifat yang unik, yaitu peningkatan adhesi ke dalam membran sel, peningkatan kecepatan pelarutan [16]  dan  Quantum  dot  effect  [17].  Penelitian  oleh  [18] nanopartikel katekin memiliki aktivitas anti bakteri yang lebih tinggi daripada katekin bulk;nya terhadap E coli dan S aureus .
Basniwal dkk. [19]  telah  mempelajari  bioaktivitas kurkumin  terhadap B  subtilis mengalami  peningkatan setelah  kurkumin  berukuran  nano  dengan  zona  bening dari 15 mm menjadi 20 mm. Dengan demikian, aplikasi teknologi  nano  partikel  dengan  bioaktivitas  suatu senyawa bahan alam memungkinkan dapat meningkatkan  sifat  bioaktivitasnya  menjadi  lebih  baik daripada bentuk bulk-nya.
Berdasarkan  keterangan  di  atas,  maka  perlu dilakukan  penelitian  lebih  lanjut  terhadap  rimpang lengkuas merah, membandingkan bioaktivitas ekstraknya dalam bentuk bulk dan nano partikel.
Hasil  Penelitian  ini  diharapkan  bermanfaat  bagi masyarakat  pengguna  obat  tradisional,  sehingga melengkapi  pengetahuan  khususnya  rimpang  lengkuas merah.
Penelitian  yang  akan  dilakukan  ini  sesuai  dengan road  map  penelitian  di  laboratorium  kimia  organik, dimana laboratorium kimia organik sedang mengembangkan  mengenai  eksplorasi  senyawa  alam terkait bidang kesehatan dan makanan.

## 2. Metode Penelitian

## Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  adalah  alat  gelas  standar penelitian, lampu UV 254 nm dan 365 nm, satu set alat maserator, plat tetes, Bunsen, rotary evaporator Buchii, akuarium, mikro pipet, pipet tetes, pipa kapiler, prosesor ultrasonik dan PSA ( Particle Size Analyzer ) Horiba SZ-100. Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah serbuk  rimpang  laos  merah,  pelarut  berderajat  teknis: etanol,  n-heksana,  etil  asetat,  kloroform,  bahan berderajat  pa  (E.Merck):  Amonia,  asam  klorida,  amil alkohol, feri klorida, asam sulfat pekat, anhidrida asetat, pereaksi  Steasny,  pereaksi  Meyer,  pereaksi  Dragendorf dan  telur Artemia  salina, garam  krosok,  tween  20, aquabides dan virgin coconut oil (VCO).

## Persiapan Bahan
Sampel  penelitian  ini  adalah  rimpang  lengkuas merah yang diperoleh dari daerah Jepara. Sebanyak 20 kg rimpang  lengkuas  merah dibersihkan dengan air  untuk menghilangkan pengotor-pengotor kemudian dikeringkan  dengan  cara  diangin-anginkan,  dan dihaluskan hingga menjadi serbuk.

## Skrining Fitokimia
Serbuk rimpang lengkuas merah dilakukan skrining fitokimia  yaitu  uji  steroid/triterpenoid,  flavonoid, saponin, alkaloid, dan tannin.

## Uji Alkaloid
Serbuk  rimpang  lengkuas  merah  sebanyak  5  gram dilembamkan dengan 5 mL ammonia 25%, lalu digerus dalam  kurs  porselin.  Setelah  itu,  20  mL  kloroform dituang  ke  dalam  hasil  gerusan,  digerus  kuat-kuat  dan disaring.  Untuk  pemeriksaan  alkaloid,  10  mL  larutan organik  diekstraksi  2  kali  dengan  larutan  asam  klorida (1:10). Sebanyak 5 mL larutan ini masing-masing dituang ke  dalam  2  tabung  reaksi.  Keberadaan  alkaloid  diuji dengan pereaksi Dragendroff maupun Meyer. Uji positip ditunjukkan dengan terbentuknya endapan putih dengan pereaksi Meyer dan endapan merah bata dengan pereaksi Dragendroff.

## Uji Saponin
Serbuk  rimpang  lengkuas  merah  dididihkan  dalam 100  mL  air  selama  5  menit,  kemudian  disaring  dalam
keadaan  panas  (Larutan  A).  Selanjutnya  10  mL  larutan tersebut  dikocok  kuat-kuat  secara  vertikal  selama  10 detik.  Setelah  kurang  lebih  10  menit,  ditetesi  dengan asam  klorida  2  N.  Jika  terbentuk  busa  setinggi  1-10  cm yang stabil tidak kurang dari 10 menit dan tidak hilang pada  penambahan  satu  tetes  asam  klorida  2  N menunjukkan positif adanya saponin.

## Uji Flavonoid
Sebanyak 5  mL dari  larutan  A  ditambahkan  serbuk magnesium,  1  mL  asam  klorida  pekat  dan  2  mL  amil alkohol, dikocok kuat dan dibiarkan memisah. Jika timbul warna  merah,  kuning  atau  jingga  pada  lapisan  amil alkohol, berarti positip adanya flavonoid.

## Uji Tanin
Serbuk rimpang lengkuas merah sebanyak 10 gram dididihkan  dalam  10  mL  air  selama  5  menit  kemudian didinginkan  dan  disaring.  Filtrat  yang  diperoleh ditambahkan larutan besi (III) Klorida 1 %. Adanya tanin ditunjukkan dengan timbulnya warna biru kehitaman.

## Uji Triterpenoid dan Steroid
Serbuk  rimpang  lengkuas  merah  sebanyak  5  gram dimaserasi dengan 20 mL eter selama 2 jam, kemudian disaring. Selanjutnya 5 mL filtrat diuapkan dalam cawan penguap  sampai  kering.  Kemudian  diberi  2  tetes anhidrida  asam  asetat  dan  1  tetes  asam  sulfat  pekat. Terbentuknya  warna  biru/hijau  menunjukkan  adanya steroid  sedangkan  terbentuknya  warna  merah/ungu menunjukkan adanya triterpenoid.

## Pembuatan Ekstrak Lengkuas merah
Serbuk  Lengkuas  merah  seberat  1  Kg  dimaserasi dengan etanol, setiap 24 jam pelarut diganti baru hingga pelarut  jernih.  Maserat  yang  diperoleh  diuapkan pelarutnya  dengan  menggunakan  Evaporator  Buchii. Esktrak  etanol  kemudian  dipartisi  dengan  pelarut  n- heksana,  sehingga  diperoleh  fraksi  n-heksana.  Ekstrak etanol  selanjutnya  dipartisi  dengan  pelarut  etil  asetat sehingga diperoleh fraksi etilasetat.

## Fabrikasi nanopartikel
Sebanyak  10  mg  ekstrak  etanol,  ditambah  6  mL akuabides  dan  1  tetes  VCO  dilakukan  ultrasonikasi menggunakan prosesor ultrasonik dengan tegangan 220 volt  dan  daya  50  watt  dan  frekuensi  40  KHz  selama  30 menit.  Analisis  nanopartikel  dilakukan  menggunakan instrumen  PSA  ( Partical  Size  Analyzer ).  Pekerjaan  yang sama dilakukan pada ekstrak n-heksana dan etil asetat.

## Uji Sitotoksisitas
Untuk mengetahui sitotoksisitas ekstrak etanol, n- heksana dan etil asetat, baik dalam bentuk bulk maupun nano digunakan  metode  BSLT  [20].  Sebanyak  38  gram garam  krosok  ditambahkan  1L  aquades,  kemudian disaring dan ditempatkan dalam aquarium yang terbagi menjadi 2 bagian (gelap dan terang). Pada bagian gelap aquarium  ditambahkan  telur Artemia  salina .  Larva Artemia  salina siap  digunakan  setelah  umur  2  hari. Larutan ekstrak etanol, n-heksana dan etil asetat dalam bentuk bulk dan  nano  masing-masig  dibuat  dengan
konsentrasi 1000 ppm, 100 ppm dan 10 ppm dimasukkan ke dalam botol vial. Ke dalam masing-masing botol vial ditambahkan 10 ekor larva Artemia salina dan diletakkan di  bawah  penerangan  lampu  selama  24  jam  kemudian diamati  kematian  larva Artemia  salina .  Data  yang diperoleh kemudian diproses dengan program komputer probit analysis untuk menentukan harga LC 50 nya.

## 3. Hasil Dan Pembahasan

## Pembuatan Ekstrak Etanol, n-heksana dan Etil asetat
Serbuk rimpang lengkuas merah sebanyak 400 gram dimaserasi menggunakan etanol beberapa kali pengulangan,  maserat  yang  diperoleh  diuapkan menggunakan rotary  evaporator .  Dari  ekstrak  etanol dipartisi  menggunakan  n-heksana  dan  dilanjutkan  etil asetat.  Hasil  ekstrak  etanol,  n-heksana,  dan  etil  asetat dapat ditunjukkan pada tabel 1.
Tabel 1: Hasil ekstraksi rimpang lengkuas merah dengan pelarut etanol, n-heksana dan etilasetat Ekstrak Berat ekstrak Rendemen Etanol 1,02 gram 0,255 % n-heksana 0,41 gram 0,1025 % Etil asetat 0,99 gram 0,25 %
Dari  ke  tiga  ekstrak  masing-masing  difabrikasi menjadi  nanopartikelnya,  selanjutnya  diuji  aktivitas sitotoksik menggunakan metode BSLT.

## Fabrikasi Nanopartikel Ekstrak Etanol, n-heksana dan Etil asetat
Pembuatan nanopartikel ekstrak etanol, n-heksana dan etil asetat menggunakan metode sonikasi bertujuan untuk mengetahui ukuran ekstrak yang telah berukuran nano  menggunakan  alat  PSA,  serta  membandingkan kemampuan  bioaktivitasnya  sebelum  dan  setelah berukuran  nano.  Metode  sonikasi  menggunakan aquabides  pada  proses  pemancaran  ultrasonik  akan mengalami  sonolisis.  Molekul  H 2 O  terjadi  kavitasi  yang akan  mengalami  proses  pembentukan,  pertumbuhan, dan  pemecahan  gelembung  dalam  sistem  koloid. Pembentukan  gelembung  terjadi  karena  adanya pemutusan ikatan antara atom H dan OH pada molekul aquabides,  sedangkan  pertumbuhan  gelembung  terjadi karena uap-uap yang dihasilkan zat terlarut ekstrak dan H 2 O berdifusi di dalam gelembung. Selanjutnya partikel- partikel  tersebut  akan  mengelilingi  permukaan gelembung,  pada  keadaan  maksimum  gelembung  akan pecah dan membentuk partikel - partikel yang berukuran kecil  (nano)  [21]. Nanopartikel  ekstrak n-heksana  yang dihasilkan  dari  fabrikasi  dapat  ditentukan  ukurannya. Hasil pengukuran menggunakan PSA ekstrak etanol, n- heksana dan etil asetat diajikan pada tabel 2.
Tabel 2: Pengukuran hasil fabrikasi nanopartikel ekstrak etanol, n-heksana dan etil asetat dengan PSA
Ekstrak Ukuran (nm) Etanol 410,8 n-heksana 220,7 Etil asetat 208,3
Hasil  yang  diperoleh  dari  fabrikasi  nanopartikel masih kurang baik karena ukuran yang dihasilkan sekitar 200 – 400  nm.  Hal  ini  kemungkinan  kurangnya  waktu yang digunakan untuk ultrasonikasi.

## Uji Aktivitas Sitotoksik
Hasil  yang  diperoleh  dari  pengujian  aktivitas sitotoksik  ekstrak  etanol,  n-heksana,  dan  etil  asetat dapat dilihat pada tabel 3.

## Tabel 3: Hasil uji sitotoksisitas ekstrak etanol, n- heksana dan etil asetat rimpang lengkuas merah
Berdasarkan  data  yang  diperoleh,  hasil  analisis probit menggunakan program SPSS, aktivitas sitotoksik ekstrak etanol, n-heksana, dan etil asetat menunjukkan nilai  LC 50 berturut-turut  sebesar  84,956  ppm,  166,526 ppm dan 17,919 ppm. Dari data ini menunjukkan bahwa ekstrak  etil  asetat  yang  paling  aktif,  disusul  etanol, kemudian ekatrak n-heksana. Adapun hasil uji sitotoksik terhadap nanopartilel ekstrak etanol, n-heksana dan etil asetat disajikan pada Tabel 4.
Tabel 4: Hasil uji sitotoksisitas nanopartikel ekstrak etanol, n-heksana dan etil asetat lengkuas merah
Berdasarkan  data  yang  diperoleh,  hasil  analisis probit  aktivitas  menggunakan  program  SPSS,  aktivitas sitotoksik  ekstrak  nanopartikel  etanol,  n-heksana,  dan etil asetat menunjukkan nilai LC 50 berturut-turut sebesar 74,072  ppm,  84,197  ppm  dan  10,491  ppm.  Hasil  ini menunjukkan bahwa ekstrak teraktif adalah nanopartikel  ekstrak  etil  asetat,  kemudian  etanol  dan kemudian  nanopartikel  n-heksana,  urutan  aktivitas sitotoksiknya sama seperti pada tabel 3.
Perbandingan  harga  LC 50 pada  ekstrak  etanol,  n- heksana  dan  etil  asetat  dalam  ukuran bulk dan  ukuran nano disajikan pada tabel 5 berikut.
Tabel 5: Perbandingan harga LC 50 ekstrak etanol, n- heksana dan etil asetat dalam ukuran bulk dan ukuran nano
Hasil  yang  diperoleh  pada  nanopartikel  ekstrak  n- heksana  memiliki  nilai  LC 50 yang  lebih  kecil dibandingkan  ekstrak  n-heksana  yang  berukuran  bulk. Hal  ini  disebabkan  senyawa  yang  berukuran  nano memiliki  luas  permukaan  yang  kecil  sehingga  akan mengalami peningkatan kemampuan bioaktivitas karena adanya  suatu  pengaruh  dimana  atom  akan  naik  ke permukaan ketika materi berukuran 1-100 nm, sehingga larutan akan dipengaruhi oleh sifat-sifat permukaaannya  yaitu  ukuran  dan  bentuk  bukan komposisi larutannya [22].

## 4. Kesimpulan
Hasil pengukuran PSA diperoleh pada ekstrak etanol sebesar  410,8;  n-heksana  sebesar  220,7  dan  etil  asetat sebesar  208,3nm.  Pada  uji  sitotoksik  dengan  metode BSLT ukuran nano meningkatkan aktivitas sitotoksiknya baik pada ekstrak etanol, n-heksana maupun etil asetat. Ekstrak  etil  asetat  paling  aktif  dibandingkan  ekstrak etanol dan n-heksana dengan harga LC 50 masing-masing sebesar  17,919;  84,956;  166,526  ppm  sedangkan  yang ukuran nano masing-masing sebesar 10,491; 74,072 dan 84,197 ppm.

## 5. Daftar Pustaka
[1] Ayu  Ni’mah  Azifa,  Dewi  Kusrini,  Enny  Fachriyah, Identifikasi  Senyawa  Sitotoksik  dalam  Ekstrak Kloroform  Daun  Tempuyung  (Sonchus  arvensis  L.) Menggunakan  GC-MS, Jurnal  Kimia  Sains  dan Aplikasi , 17, 1, (2014) 23-26
[2]  Ika Pratiwi Khosimah Adinata, Khairul Anam, Dewi Kusrini,  Identifikasi  Senyawa  Metabolit  Sekunder Fraksi  Aktif  Daun  Jarak  Pagar  (Jatropha  curcas  L.) dan Uji Aktivitas Larvasida terhadap Larva Nyamuk Aedes aegypti, Jurnal Kimia Sains dan Aplikasi , 16, 2,
(2013) 42-45
[3]  PN  Ravindran,  I  Balachandran,  Under  utilized medicinal spices, Spice India , 17, 12, (2004) 2-14
[4]  Fajar  Budi  Laksono,  Enny  Fachriyah,  Dewi  Kusrini, Isolasi  dan  Uji  Antibakteri  Senyawa  Terpenoid Ekstrak  N-Heksana  Rimpang  Lengkuas  Merah ( Alpinia  purpurata ), Jurnal  Kimia  Sains  dan  Aplikasi , 17, 2, (2014) 37-42
[5]  Yuharmen,  Yum  Eryanti,  Nurbalatif,  Uji  Aktivitas Antimikroba  Minyak  Atsiri  dan  Ekstrak  Metanol Lengkuas  (Alpinia  galanga),  FMIPA,  Universitas Riau, Riau
[6]  Chinthamony  Arul  Raj, Paramasivam  Ragavendran, Dominic Sophia, Muthaiyan Ahalliya Rathi, Velliyur Kanniappan  Gopalakrishnan,  Evaluation  of  in  vitro antioxidant  and  anticancer  activity  of Alpinia purpurata , Chinese Journal of Natural Medicines , 10, 4,
(2012)  263-268 http://dx.doi.org/10.1016/S1875- 5364(12)60053-3
[7]  CP  Victório,  RM  Kuster,  CLS  Lage,  Detection  of flavonoids  in Alpinia  purpurata (Vieill.)  K.  Schum. leaves using high-performance liquid chromatography, Revista  Brasileira  de  Plantas
Medicinais , 11, 2, (2009) 147-153
[8]  Ratna  Susilaningsih,  Isolasi,  Identifikasi  dan  Uji Toksisitas  Senyawa  Alkaloid  Fraksi  Etil  Asetat
Jurnal Kimia Sains dan Aplikasi 21 (1) (2018) : 39 – 43
Rimpang Lengkuas Merah (Alpinia galanga), Kimia,
Universitas Diponegoro, Semarang
[9]  Enock  Kiage  Oirere,  Palanirajan  Anusooriya, Chinthamony  Arul  Raj,  Velliyur  Kanniappan Gopalakrishnan,  Phytochemical  Analysis  of  N- Hexane  Leaf  Extract  of Alpinia  purpurata (Vieill.)  K. Schum Using Uv-Vis, FTIR and GC-MS, International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences 7, 8,
(2015) 387-389
[10] Yuharmen,  Yum  Eryanti,  Nurbalatif,  Uji  Aktivitas Antimikroba  Minyak  Atsiri  dan  Ekstrak  Metanol Lengkuas  (Alpinia  galanga),  in,  Jurusan  Kimia, FMIPA, Universitas Riau, 2002.
[11]  KP  Kochuthressia,  S  John  Britto,  MO  Jaseentha,  L Joelri  Michael  Raj,  SR  Senthilkumar,  Antimicrobial efficacy of extracts from Alpinia purpurata (Vieill.) K. Schum.  against  human  pathogenic  bacteria  and fungi, Agriculture  and  Biology  Journal  of  North
America , 1, 6, (2010) 1249-1252
http://dx.doi.org/10.5251/abjna.2010.1.6.1249.1252
[12] T. Juntachote, E. Berghofer, Antioxidative properties and stability of ethanolic extracts of Holy basil and Galangal, Food  Chemistry ,  92,  2,  (2005)  193-202 http://dx.doi.org/10.1016/j.foodchem.2004.04.044
[13] Hideji Itokawa, Koichi Takeya, Antitumor substances from higher plants, ChemInform , 24, 52, (1993)
[14] Cristiane  Pimentel  Victório,  Ricardo  Machado Kuster,  Roberto  Soares  de  Moura,  Celso  Luiz Salgueiro  Lage,  Vasodilator  activity  of  extracts  of field Alpinia  purpurata (Vieill)  K:  Schum  and  A. zerumbet  (Pers.)  Burtt  et  Smith  cultured  in  vitro, Brazilian  Journal  of  Pharmaceutical  Sciences ,  45,  3,
(2009) 507-514
[15] R. Kelmani Chandrakanth, C. Ashajyothi, A. K. Oli, C. Prabhurajeshwar,  Potential  Bactericidal  Effect  of Silver Nanoparticles Synthesised from Enterococcus Species, Oriental  Journal  of  Chemistry ,  30,  3,  (2014)
1253-1262 http://dx.doi.org/10.13005/ojc/300341
[16] Rainer H. Müller, Sven Gohla, Cornelia M. Keck, State of  the  art  of  nanocrystals – Special  features, production, nanotoxicology aspects and intracellular delivery, European  Journal  of  Pharmaceutics  and Biopharmaceutics , 78, 1, (2011) 1-9
http://dx.doi.org/10.1016/j.ejpb.2011.01.007
[17] Matthew N. Rhyner, Andrew M. Smith, Xiaohu Gao, Hui Mao, Lily Yang, Shuming Nie Nie, Quantum dots and  multifunctional  nanoparticles:  new  contrast agents for tumor imaging, Nanomedicine , 1, 2, (2006)
209-217 http://dx.doi.org/10.2217/17435889.1.2.209
[18] Huanhuan Li, Quansheng Chen, Jiewen Zhao, Khulal Urmila,  Enhancing  the  antimicrobial  activity  of natural  extraction  using  the  synthetic  ultrasmall metal nanoparticles, Scientific reports , 5, (2015) 11033 http://dx.doi.org/10.1038/srep11033
[19] Rupesh Kumar Basniwal, Harpreet Singh Buttar, V. K. Jain, Nidhi Jain, Curcumin Nanoparticles:
Preparation,  Characterization,  and  Antimicrobial
Study, Journal of Agricultural and Food Chemistry , 59,
5, (2011)
2056-2061 http://dx.doi.org/10.1021/jf104402t
[20] B.  N.  Meyer,  N.  R.  Ferrigni,  J.  E.  Putnam,  L.  B. Jacobsen,  D.  E.  Nichols,  J.  L.  McLaughlin,  Brine Shrimp:  A  Convenient  General  Bioassay  for  Active
Plant Constituents, Planta Med , 45, 05, (1982) 31-34 http://dx.doi.org/10.1055/s-2007-971236
[21] Inbar  Yariv,  Anat  Lipovsky,  Aharon  Gedanken,
Rachel Lubart, Dror Fixler, Enhanced
pharmacological  activity  of  vitamin  B12  and penicillin  as  nanoparticles, International  journal  of nanomedicine , 10, (2015) 3593
[22] Stephanie  M  Reimann,  Matti  Manninen,  Electronic structure  of  quantum  dots, Reviews  of  Modern Physics , 74, 4, (2002) 1283