## PERTUMBUHAN DAN MORFOGENESIS KRISAN (Chrisanthemum Morifolium) KULO DENGAN EKSPLAN PUCUK DAN NODUS PADA MEDIA MS YANG DIBERI
Benzil Amino Purin (BAP)
GROWTH AND MORPHOGENESIS OF KULO CHRYSANTHEMUM (Chrisanthemum Morifolium) WITH UPPER AND NODE EXSPLANTS ON MS MEDIA SUPPLIED WITH Benzyl Amino Purines (BAP)
Rieddel Toar Jullio Lintong (1) , Jeany  Polii-Mandang (2) , Edy Fredy Lengkong (2)
1) Staf dan Peneliti pada Laboratorium Kultur Jaringan Dinas Pertanian dan Perikanan Tomhohon 2) Staf Pengajar dan Peneliti pada Program Studi Agronomi Program Pascasarjana, Universitas Sam Ratulangi, Manado *Penulis untuk korespondensi : rieddeljulio@gmail.com Naskah diterima melalui Website Jurnal Ilmiah agrisosioekonomi@unsrat.ac.id : 30 Desember 2021 Disetujui diterbitkan : 28 Januari 2022

## ABSTRACT
This  study  aims  to  determine  the  effect  of  BAP  on  the  growth  and  morphogenesis  of  Kulo Chrysanthemum with shoot and node explants by in vitro. This research was conducted from July to March 2021 at the Network Culture Laboratory of the Agriculture and Fisheries Service of Tomohon City. This study used a factorial completely randomized design (CRD), namely explant type factors consisting of shoot and node explants and BAP concentration factors were 0 mg/l, 0.5 mg/l, 1 mg/l, and 1.5 mg. /l so that there were 8 treatment combinations and each treatment was repeated 5 times resulting in 40 research units and one unit containing one explant. The results of this study showed that the interaction between explant type and BAP concentration had no significant effect on plantlet height, number of shoots, number of leaves, time of root formation (DAP), and time of shoot formation (DAP). Treatment The type of shoot and node explants  had  no  significant  effect  on  plantlet  height,  number  of  shoots,  number  of  leaves,  time  of  root formation (DAP) and time of shoot formation (DAP). The concentration of BAP had a significant effect on plantlet height, number of shoots, number of leaves, time of root formation (DAP) but had no significant effect on time of shoot formation (DAP).
Keywords : Growth, Morphogenesis, Kulo Chrysanthemum

## ABSTRAK
Penelitian ini bertujuan untuk  mengetahui pengaruh pemberian BAP terhadap pertumbuhan dan morfogenesis Krisan Kulo dengan jenis eksplan pucuk dan nodus secara in vitro . Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Juli hingga Maret 2021 di laboratorium Kultur Jaringan Dinas Pertanian dan Perikanan Kota Tomohon. Penelitian ini menggunakan rancangan acak lengkap (RAL) faktorial, yaitu faktor jenis eksplan yang terdiri dari eksplan pucuk dan eksplan nodus dan faktor konsentrasi BAP yaitu 0 mg/l, 0,5 mg/l, 1 mg/l, dan 1,5 mg/l sehingga terdapat 8 kombinasi perlakuan dan setiap perlakuan di ulang 5 kali sehingga menghasilkan 40 unit penelitian dan satu unit berisi satu eksplan. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa Interaksi antara faktor jenis eksplan dan konsentrasi BAP tidak berpengaruh nyata terhadap tinggi planlet, jumlah tunas, jumlah daun, waktu terbentuk akar (HST), dan waktu terbentuk tunas (HST). Perlakuan Jenis eksplan pucuk dan nodus tidak berpengaruh nyata terhadap tinggi planlet, jumlah tunas, jumlah daun, waktu terbentuk  akar  (HST)  dan  waktu  terbentuk tunas  (HST).  Perlakuan  konsentrasi BAP  berpengaruh  nyata terhadap tinggi planlet, jumlah tunas, jumlah daun, waktu terbentuk akar (HST) tetapi tidak berpengaruh nyata terhadap waktu terbentuk tunas (HST).
Kata kunci : Pertumbuhan, Morfogenesis, Krisan Kulo

## PENDAHULUAN

## Latar Belakang
Di  Sulawesi  Utara  khususnya  di  kota Tomohon, bunga menjadi maskot utama sehingga dijuluki “ city of flower ”. Potensi florikultura yang ada di Tomohon setiap tahunnya meningkat. Itu di buktikan  dengan  terlaksananya  Turnamen  Of Flower  setiap tahunnya. Direktorat Budidaya dan Pascapanen Florikultura mempunyai misi kemandirian  industri  krisan  dalam  negeri  untuk membantu peningkatan pendapatan petani. Berdasarkan  data  statistik  Dinas  Pertanian  dan Perikanan Tomohon memiliki potensi pengembangan  lahan  Florikultura  dengan  luas pengembangan  175  Ha  terdiri  dari  52  kelompok tani dan 8 perorangan, 96 Unit green house dengan luasan  per  green  gouse  18.111  m2  (Lampiran1). Potensi  inilah  yang  membuat  kota  ini  dijadikan pusat  pengembangan  krisan  untuk  wilayah Indonesia Timur.
Varietas Krisan Kulo merupakan tanaman endemik  yang  menjadi  maskot  Kota  Tomohon, diluncurkan pada rangkaian Tomohon International  Flower  Festival (TIFF)  2012 (Deskripsi  krisan  kulo  Lampiran  2).  Semakin meningkatnya  permintaan  krisan  maka  perlu diupayakan sistem budidaya tanaman krisan yang lebih  baik  terutama  dalam  hal  perbanyakan  bibit. Saat ini perbanyakan masih secara konvensional yang sering menghasilkan kualitas tanaman yang dihasilkan  kurang  baik  seperti  bibit  terserang hama  dan  penyakit.  Salah  satu  alternatif  untuk mendapatkan tanaman dalam jumlah banyak dan dalam  waktu  singkat  adalah  dengan  dilakukan perbanyakan  secara in-vitro melalui  teknik kultur jaringan (George and Sherington, 1984).
Perbanyakan dengan teknik kultur jaringan  tumbuhan  dikenal  sebagai  suatu  teknik untuk  menumbuhkan  sel  jaringan,  organ  menjadi tumbuhan  sempurna  dalam  media  buatan  yang dilakukan  secara  aseptik.  Media  tumbuh  yang dipergunakan pada teknik kultur jaringan ini terdiri dari unsur makro, mikro, asam amino, vitamin dan suplemen organik lainya seperti sumber karbohidrat,  zat  pengaruh  tumbuh  (George  and Sherington,  1984).  Keberhasilan  teknik  kultur  ini ditentukan  oleh  beberapa  faktor  seperti  genotip tanaman, media tumbuh, zat pengatur tumbuh dan lingkungan lainnya.
Dalam perbanyakan konvensional pemanfaatan  stek  secara  terus  menerus  dari  hasil tanaman induk yang diindukkan lagi menyebabkan terjadinya  degenerasi  dan    penurunan  kualitas bunga potong yang dihasilkan (Istianingrum et al., 2013).  Salah  satu  cara  untuk  dapat  menghasilkan bibit berkualitas dari tanaman induk adalah dengan cara merejuvinasi atau memperbaiki kualitasnya di tingkat  kultur  jaringan.  Rejuvinasi  merupakan tahapan penting yang dilakukan untuk memulihkan kapasitas regenerasi eksplan dengan menggunakan sitokinin  (Tunggadewi.,  2010).  Dalam  Standar Operasional Prosedur Perbenihan Balai Penelitian Tanaman  Hias,  rejuvinasi  awal  dilakukan  dengan memindahkan  tunas  pucuk  (1-1,5  mm)  yang dikultur pada medium MS yang ditambah dengan 0,5  mg/l  BAP,  0,25  mg/l  BAP  selanjutnya disubkultur  pada  media  ½  MS  (Budiarto  & Marwoto 2009).
Eksplan  yang  digunakan  berupa  nodus dengan ukuran 1-1,5 mm merupakan jaringan yang paling  efetktif  untuk  regenerasi  karena  sel-selnya lebih  aktif  membelah  (Tilaar  et  al.,  2015). Penggunaan  tunas  pucuk  mempunyai  kesulitan karena isolasi tunas pucuk ukuran 1-1,5 mm yang kurang tepat justru menghambat pertumbuhan tunas. Selain  itu,  untuk  perbanyakan  masal  penggunaan tunas  pucuk  ukuran  1-1,5  mm  menjadi  lebih  lama dibandingkan  dengan  penggunaan  eksplan  nodus tunas.  Eksplan  nodus  batang  dilaporkan  lebih  cepat pertumbuhan  tunasnya,  akan  tetapi  disinyalir kualitasnya kurang bagus dibandingkan dengan tunas ujung  (Pramanik  et  al.,  2019).  Namun  demikian belum  ada  yang  melaporkan  secara  sistematis terkait kualitas regenerasi krisan dari eksplan tunas pucuk  1-1,5  mm,  tunas  ujung  aksilar,  dan  nodus batang khususnya pada tanaman endemic tomohon yaitu krisan varietas kulo. Berbagai macam eksplan diduga  akan  mempunyai  respon  yang  berbeda terhadap  konsentrasi  BAP  yang  diberikan.  Oleh sebab  itu,  modifikasi  konsentrasi  BAP  pada  saat awal  inisiasi  juga  diperlukan  untuk  mengetahui kemampuan  regenerasi  masing-masing  eksplan secara optimal.

## Rumusan Masalah
Berdasarkan  uraian  yang  disampaikan  pada latar  belakang  diatas,  rumusan  masalah  adalah “Bagaimana  respon  pertumbuhan  dan morfogenesis jeni s  eksplan  pucuk  dan  nodus  tanaman  krisan Kulo terhadap pemberian BAP secara in vitro .”

## Tujuan Penelitian
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui pengaruh pemberian BAP terhadap pertumbuhan dan morfogenesis Krisan  Kulo  dengan  jenis  eksplan pucuk dan nodus secara in vitro .

## Manfaat Penelitian
Manfaat yang diharapkan dari penelitian ini adalah :
1.  Penelitian  ini  memberikan  kontribusi  untuk pengembangan  laboratorium  kultur  jaringan Dinas  Pertanian  dan  Perikanan  kota  Tomohon dalam hal pengembangan tanaman krisan melalui perbanyakan secara kultur jaringan.
2. Akan menghasilkan sumber benih yang berkualitas dan siap di sub kultur.
3.  Memberikan  informasi  dasar  bagi  peneliti  lebih lanjut  mengenai  kajian  kultur  in  vitro  pada tanaman Krisan varietas Kulo.

## METODE PENELITIAN

## Lokasi dan Waktu Penelitian
Penelitian dilakukan di laboratorium Kultur Jaringan  Dinas  Pertanian  dan  Perikanan  Kota Tomohon. Penelitian dimulai dari bulan Juli sampai bulan Desember 2021. Selama 5 bulan dari persiapan sampai penyusunan laporan.

## Alat dan Bahan Penelitian
Alat  Penelitian  Laboratorium  digunakan diantaranya botol kultur, bunsen, Laminar Air Flow Cabinet (LAFC), petridish, peralatan diseksi (pinset besar,  pinset  kecil,  dan  pisau  scalpel),  timbangan analitik, plastik, handsprayer , karet gelang, magnetik stirer , hot plate , labu takar, beker glass , erlenmeyer , pH  meter, autoclave ,  pipet  ukur, alumunium  foil , kertas label, oven, lemari pendingin, dan rak kultur.
Bahan  Penelitian  Bahan  tanaman  yang digunakan  sebagai  eksplan  adalah  eksplan  krisan, media Murashige  and  Skoog (MS),  zat  pengatur tumbuh  BAP,  agar,  gula,  aquadest,  sabun  cuci, chlorox , spirtus, dan alkohol 70% dan 96%.

## Metode Penelitian
Penelitian ini menggunakan rancangan acak lengkap  (RAL)  faktorial,  yaitu  faktor  jenis  eksplan yang  terdiri  dari  eksplan  pucuk  dan  eksplan  nodus dan faktor konsentrasi BAP yaitu 0 mg/l, 0,5 mg/l, 1 mg/l,  dan  1,5  mg/l  sehingga  terdapat  8  kombinasi perlakuan  dan  setiap  perlakuan  di  ulang  5  kali sehingga  menghasilkan  40  unit  penelitian  dan  satu unit berisi satu eksplan.

## Langkah Kerja
Langkah kerja terdiri dari 4 tahap yaitu:

## 1. Persiapan eksplan
Eksplan  yang  berupa  tunas  pucuk  muda dan  segar yang  berukuran  10  cm  di  panen  dari motherplan  tanaman  induk  yang  di  tanam  di  Balai Perbenian Show Window Tomohon. Tanaman induk ini  adalah  tanaman  yang  khusus  dipelihara  untuk produksi  stek  sehingga  mendapat  perawatan  khusus di antaranya mendapat tambahan siklus cahaya serta pengendalian  hama  dan  penyakit.  Tanaman  yang digunakan sebagai  eksplan adalah yang berumur 14 hari.
Eksplan  dipotong  sesuai  ruas  kemudian dipotong  daunnya  dan  dicuci  dengan  air  mengalir yang sudah ditetes dengan sabun sunlight 5%. Setelah itu  dibilas  dengan  air  steril  sebanyak  3x.  Eksplan hasil  bilasan  kemudian  di  pindahkan  ke  larutan fungisida  dan  bakterisida  5  g/l  dan  di  sterilkan menggunakan  shaker  dengan  kecepatan  20  rpm selama  30  menit.  Dibilas  kembali  dengan  air  steril sebanyak 3x, dan selanjutnya eksplan di bawah ke laminari  air  flow  untuk  di  lanjutkan  ke  tahap sterilisasi dalam laminari.
Setelah  di  dalam  laminari  eksplan  dibilas kembali  1x  dengan  air  steril  yang  sudah  di  steril kembali, gunanya untuk memastikan bahwa air itu benar  benar  steril.  Kemudian  memindahkan eksplan ke larutan HgCl 10 % dan digojok selama 5 menit, setelah itu di bilas menggunakan air steril sebanyak 5x. Dipindahkan lagi ke larutan hgcl 10% dan  digojok  kembali  selama  5  menit  dan  di  bilas kembali  sebanyak  5x.  selanjutnya  langkah sterilisasi yang terakhir yaitu digojok menggunakan alkohol 95% selama 10-15 detik dan dengan cepat langsung di bilas kembali dengan air steril sebanyak 5x.

## 2. Penanaman Eksplan Pada Media ½ Ms
Isolasi tunas pucuk dilakukan dengan cara mengambil  eksplan  steril  yang  telah  ditiriskan menggunakan  pinset  dan  meletakkannya  di  atas cawan petri steril yang beralaskan tisu steril. Eksplan dipegang  dengan  pinset  dalam  posisi  tegak  lurus, selanjutnya dengan menggunakan pisau kultur yang lancip,  lakukan  isolasi  tunas  pucuk  dan  nodus. Dengan  hati-hati  pisau  kultur  digunakan  untuk membuang  sisa  tangkai  daun  yang  masih  melekat tahap demi tahap hingga mencapai daun paling ujung dan dekat sekali dengan titik tumbuh.
Eksplan  di  tanam  pada media  ½  MS  dan selanjutnya  di  inkubasi  pada  suhu  23  derajat celcius. Kemudian setelah mencapai umur 7 hari
Pertumbuhan Dan Morfogenesis Krisan…………………………..(Rieddel Lintong, Jeany Polii-Mandang, Edy Lengkong)
eksplan  di  resque  kembali  guna  untuk  mendapat eksplan  yang  benar  benar  bebas  dari  bakteri  dan cendawan. Hal yang sama pada tahap 1 dan 2 ini di ulang  kembali  sebanyak  8-10x  agar  kwantitas eksplan yang akan dipindahkan ke media yang di beri perlakuan sudah benar benar cukup.

## 3. Pesiapan Media Perlakuan
Pembuatan  media  perlakuan  dilakukan dengan  menimbang  MS  sebanyak  8,86  gram  dan gula sebanyak 60 gram kemudian di larutkan ke air sterir  sebanyak  2  liter  dan  di  aduk  menggunakan magnetik  stirrer.  Setelah  homogen,  larutan  yang sudah di campur MS dan gula tersebut di tuangkan ke gelas ukur dengan kapasitas masing masing 500 ml, sehingga terbagi menjadi 4 bagian. Kemudian masing  masing  bagian  di  beri  tambahan  BAP masing masing 0 mg/l sebagai kontrol, 0,5 mg/l, 1 mg/l, dan 1,5 mg/l. Setelah itu pH di ukur dengan menggunakan  pH  meter  dan  di  atur  pada  5,8 dengan menggunakan HCL/NaOH.
Selanjutnya memasukan pemadat media/agar  (7g/l)  kedalam  larutan  media.  Setelah itu  media di  masak  di  atas  kompor  gas,  dengan catatan selama media di panaskan hendaknya media diaduk  terus  menerus  hingga  media  terlihat  bening dan mulai terlihat gelembung udara yang menandakan  media  telah  mencapai  titik  didih. Dimasukan ke dalam botol kultur berdasarkan 4 jenis perlakuan  yaitu  maising-masing  15  botol,  sehingga didapatkan  60  botol  untuk  semua  perlakuan.  Botol yang  terisi  media  kemudian  di  sterilkan  ke  dalam autoclave  pada  suhu  120  derajat  celcius  selama  20 menit  dan  selanjutnya  disimpan  selama  7  hari  di ruangan inkubasi .

## 4. Penanaman Eksplan Penelitian
Eksplan  yang  digunakan  terdiri  dari  20 eksplan pucuk dan 20 eksplan nodus di tanam pada 4 macam  media  sesuai  (Tabel  1),  hasil  penanaman selanjutnya  dipindahkan  dan  tata  pada  rak    kultur berdasarakan denah tata letak (Gambar 1). Kemudian eksplan  di  inkubasi  di  ruangan  bersuhu  23  derajat celsius selama 50 HST.
Tabel 1. Susunan Perlakuan Dalam Penelitian Perlakuan Jenis eksplan MS+BAP (ppm) Jumlah eksplan A Pucuk 0 1 B Pucuk 0.5 1 C Pucuk 1 1 D Pucuk 1.5 1 A Nodus 0 1 B Nodus 0.5 1 C Nodus 1 1 D Nodus 1.5 1 Total 8

## Dengan ulangan sebanyak 5x sehingga didapatkan
40 unit

## Parameter Pengamatan
Variabel yang diamati pada penelitian ini: 1. Tinggi tunas
Variabel ini diamati dengan cara mengukur tinggi tunas dari batas media sampai titik tumbuh paling tinggi  dengan  menggunakan  kertas  milimeter. Variabel ini diamati pada akhir penelitian.
2. Jumlah tunas Dilakukan  pengamatan  secara  visual  dengan menghitung  jumlah  tunas  pada  tanaman. Variabel ini diamati pada akhir penelitian.
3. Jumlah daun Dilakukan  pengamatan  secara  visual  dengan menghitung  jumlah  daun  pada  tanaman.  Variabel ini diamati pada akhir penelitian.
4. Waktu pembentukan akar Dilakukan secara visual dengan mengamati waktu (hari) kemunculan akar pertama. Pengamatan saat muncul  akar  dilakukan  saat  1  hari  setelah  tanam (HST)
5. Waktu pembentukan tunas
Dilakukan secara visual dengan mengamati waktu (hari) kemunculan tunas pertama. Pengamatan saat muncul  tunas  dilakukan  saat  1  hari  setelah  tanam (HST).

## Analisis Data
Data yang diperoleh dari hasil pengamatan dianalisis  dengan  analisis  ragam,  apabila  berbeda nyata, maka dilanjutkan dengan Uji Duncan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Tinggi Tunas
Berikut  ini  adalah  hasil  dari  rerata  tinggi tanaman berdasarkan 5 kali ulangan:
Gambar 2. Tinggi tunas pada jenis eksplan dan konsentrasi BAP
Dari  Gambar  2  diatas  dapat  dilihat konsentrasi  BAP  0  mg/l  menghasilkan  tinggi  tunas yang paling tinggi yaitu 4,26 cm untuk tunas pucuk dan 4,43 cm untuk tunas nodus. Hasil rata-rata tinggi tanaman berdasarkan jenis eksplan pucuk adalah 2,66 cm  sedangkan  untuk  jenis  eksplan  nodus  memiliki rata-rata  2,57  cm.  Begitu  juga  dengan  perlakuan konsentrasi BAP 0 mg/l memiliki rata-rata 4,28 cm, BAP 0,5 mg/l = 2,46 cm, BAP 1 mg/l = 1,92 cm, dan BAP 1,5 mg/l = 1,80 cm. Sehingga di dapat juga total rata-rata seluruh perlakuan yaitu 2,61 cm.
Dari  hasil  analisis  ragam  tinggi  tunas, dapat diketahui  perlakuan  jenis  eksplan  tidak berpengaruh sedangkan perlakuan BAP berpengaruh signifikan  terhadap  tinggi  tunas  Oleh  sebab  itu selanjutnya  dilakukan  uji  Duncan.  Uji  Duncan  ini bertujuan  untuk  mengetahui  konsentrasi  BAP  mana yang akan memiliki hasil yang optimal untuk tinggi tanaman  pada  planet  krisan  hasil  inisiasi.  Hasil  uji Duncan di sajikan pada Tabel 2.
Tabel  2  diatas  didapatkan  konsentrasi  BAP 0,5  mg/l,  BAP  1  mg/l,  BAP  1,5  mg/l  memberikan pengaruh yang sama, dan nyata lebih pendek dengan konsentrasi BAP 0 mg/l.
Gunawan  (1995)  juga  menyebutkan  bahwa interaksi  antara  media  dan  ZPT  dapat  menentukan arah  suatu  kultur  dan  untuk menginduksi  eksplan diperlukan ZPT yang dikombinasi dengan media dasar. Dan (Anggit 2008) mengatakan pemberian zat  pengatur  tumbuh  sitokinin  dapat  memacu pertumbuhan  sel  dan  pembelahan  organ.  Secara
alamiah, tanaman sudah dapat memproduksi hormon atau  fitohormon  yang  dalam  konsentrasi  rendah sudah  dapat  mempengaruhi  proses  fisiologis  suatu tanaman, sehingga penambahan zpt  dapat  dikatakan menghambat pertumbuhan tinggi tanaman. Pertumbuhan dan organogenesis planlet bahwasannya menunjukan semakin tinggi konsentrasi  BAP  maka  akan  semakin  rendah  rataan tinggi  planlet  krisan.  Sesuai  dengan  pendapat (Saiffudin  2016).  Zat  pengatur  tumbuh  yang diberikan  terlalu  tinggi  akan  menghasilkan  rerata tinggi tanaman yang rendah.

## Jumlah Tunas
Berikut  ini  adalah  hasil  dari  rerata  jumlah tunas berdasarkan 5 kali ulangan:
Gambar 3. Jumlah Tunas pada jenis eksplan dan konsentrasi BAP
Gambar 3 diatas dapat dilihat konsentrasi BAP  1,5  mg/l  menghasilkan  jumlah  tunas  yang paling banyak yaitu 12,20 tunas pucuk dan 11,80 tunas  nodus.  Hasil  rata-rata  jumlah  tunas berdasarkan  perlakuan  jenis  eksplan  pucuk  yaitu 5,55  tunas  sedangkan  untuk  jenis  eksplan  nodus memiliki rata-rata 6,50 tunas. Perlakuan konsentrasi BAP 0 mg/l = 0,5 tunas, BAP 0,5 mg/l = 5,40 tunas, BAP 1 mg/l = 6,20 tunas, dan BAP 1,5 mg/l = 12,00 tunas. Sehingga di dapat juga total rata-rata jumlah tunas pada kedua faktor yaitu 6,02 tunas.
Dari  hasil  analisis  ragam  jumlah  tunas, dapat diketahui perlakuan yang memperoleh hasil yang signifikan terhadap jumlah tunas yaitu hanya pada  faktor  konsentrasi  BAP.  Selanjutnya dilakukan uji Duncan.
Tabel 2. Konsentrasi BAP Pada Tinggi Tanaman
Perlakuan (Ms+BAP) Rata-rata tinggi tanaman MS + 0 4.28 b MS + 0.5 mg/l 2.46 a MS + 1 mg/l 1.92 a MS + 1.5 mg/l 1.80 a BNT 5% 0.70
Keterangan : Angka yang diikuti dengan huruf yang sama, tidak berbeda nyata berdasarkan Uji BNT  5%.
Pertumbuhan Dan Morfogenesis Krisan…………………………..(Rieddel Lintong, Jeany Polii-Mandang, Edy Lengkong)
Tabel 3 terlihat bahwa konsentrasi BAP
memberikan  pengaruh  signifikan  terhadap jumlah tunas dimana konsentrasi BAP 1,5 mg/l menghasilkan jumlah tunas terbanyak dibandingkan dengan perlakuan lainnya. Hal ini membuktikan bahwa BAP memiliki kemampuan dalam  pembelahan  sel.  BAP  termasuk  ZPT golongan sitokinin yang berfungsi meningkatkan pembelahan sel, proliferasi pucuk, dan morfogenesis pucuk (Zulkarnain, 2009).
Mok  et  al.  (2002)  melaporkan  bahwa  benzyl amino  purin  adalah  sitokinin  tipe  adenin  yang meningkatkan  pembelahan  sel  dan  pembesaran pada  sel  kultur  jaringan.  Hasil  penelitian  yang dilakukan  oleh  Maryono  et  al.  (2013) menunjukan bahwa konsentrasi BAP 3 ppm pada planlet Dendrobium jayakarta memberikan hasil terbaik untuk tinggi planlet.
Pemilihan  konsentrasi  BAP  1,5  mg/l yang adalah perlakuan tertinggi dalam penelitian ini awalnya  didasari  pada  penghematan pemakaian BAP yang bisa saja berlebihan dan tidak  tepat  guna,  hal  itu  juga  selaras  dengan hasil yang peneliti dapat dalam penelitian ini. Mengingat  diameter  botolan  harus  sesuai dengan  banyaknya  tunas  yang  tumbuh  di dalamnya.    George  dan  Sherrington  (1984) menyatakan bahwa untuk pembentukan tunas membutuhkan  sitokinin  dengan  auksin  yang rendah  atau  tanpa  auksin.  Maka  hal  tersebut selaras  dengan  penelitian  yang  peneliti lakukan bahwa semakin tinggi konsentrasi BAP maka  akan  semakin  bertambah  banyak  jumlah tunas yang muncul.

## Jumlah Daun
Dari hasil pengamatan yang dilakukan berikut ini adalah hasil dari rerata jumlah daun berdasarkan 5 kali ulangan:
Gambar 4. Jumlah Daun pada jenis eksplan dan konsentrasi BAP
Gambar  4  diatas  dapat  dilihat  konsentrasi BAP 1,5 mg/l menghasilkan jumlah daun yang paling banyak yaitu 77,00 daun tunas pucuk dan 63,80 daun tunas nodus. Hasil rata-rata jumlah daun berdasarkan perlakuan  jenis  eksplan  pucuk  yaitu  50,80  daun sedangkan untuk jenis eksplan nodus memiliki rata- rata 53,40 daun. Perlakuan konsentrasi BAP 0 mg/l = 22,00 daun, BAP 0,5 mg/l = 59,50 daun, BAP 1 mg/l = 56,50, dan BAP 1,5 mg/l = 70,40 daun. Sehingga didapat  juga  total  rata-rata  jumlah  daun  pada  kedua faktor yaitu 52,10 daun.
Dari hasil analisis ragam jumlah daun, dapat diketahui  perlakuan  yang  memperoleh  hasil  yang signifikan  terhadap  jumlah  daun  yaitu  hanya  pada faktor  konsentrasi  BAP.  Selanjutnya  dilakukan  uji pembandingan ganda Duncan.
Tabel  4  dapat  dilihat  bahwa  tidak  ada interaksi antara jenis eksplan dan BAP. Hanya BAP yang nyata berpengaruh terhadap jumlah daun yaitu BAP 1,5 mg/l nyata memiliki jumlah daun terbanyak dan berbeda nyata dengan perlakuan lainnya. Hal ini membuktikan  bahwa  BAP  memiliki  kemampuan dalam meningkatkan jumlah daun. Dengan pemberian  konsentrasi  BAP  yang  tinggi,  terjadi peningkatan  jumlah  daun,  hasil  ini  hampir  sama dengan  penelitian  yang  dilakukan  oleh  Djumat (2012)  yang  menghasilkan  rata-rata  jumlah  daun terbanyak dengan konsentrasi 1 mg/l yaitu 10.6 dari eksplan tunas dan pucuk aksilar samama ( Anthocephalus  macrophyllus ). Begitu  juga  dengan Armana  (2014)  menemukan  bahwa  BAP  1  ppm menghasilkan  rata-rata  jumlah  daun  tertinggi  dari tunas kentang ( Solanum Tuberosum L ).
Tabel 3. Jumlah tunas krisan kulo pada media yang diberi BAP.
Perlakuan (Ms+BAP) Rata-rata Jumlah Tunas MS + 0 0.05 a MS + 0.5 mg/l 5,40  b MS + 1 mg/l 6,20  b MS + 1.5 mg/l 12,00 c BNT 5% 4,19
Keterangan : Angka yang diikuti dengan huruf yang sama, tidak berbeda nyata berdasarkan Uji BNT  5%.
Tabel 4.   Jumlah daun krisan kulo pada media yang diberi BAP. Perlakuan (Ms+BAP) Rata-rata Jumlah Daun/Tanaman Ms + 0 22,00 a Ms + 0.5 mg/l 59,50 b Ms + 1 mg/l 56,50  b Ms + 1.5 mg/l 70,40 c BNT 5% 18,67
Keterangan : Angka yang diikuti dengan huruf yang sama, tidak berbeda nyata berdasarkan Uji BNT  5%.

## Waktu Terbentuk Akar (HST)
Pengamatan dilakuan ketika planlet krisan kulo  mengeluarkan  akar  berdasarkan  hari  setelah tanam  (HST)  dan  dari  hasil  pengamatan  yang  di lakukan  berikut ini  adalah hasil  dari rerata  waktu saat muncul akar berdasarkan 5 kali ulangan:

## Gambar 5. Waktu Terbentuk Akar (HST)
Gambar  5  menunjukkan  waktu  terbentuk akar pada hari setelah tanam HST, akar yang muncul berwarna  putih  kehijauan  dan  bentuknya  seperti benang  tipis.  Parameter  ini  menunjukan  hasil  rata- rata  waktu  terbentuk  akar  (HST)  berdasarkan perlakuan  jenis  eksplan  pucuk  yaitu  1,5  HST sedangkan  untuk  jenis  eksplan  nodus  1,6  HST. Perlakuan  konsentrasi  BAP  0  mg/l  =  6,2  HST, konsentrasi BAP 0,5 mg/l = 0 HST, Konsentrasi BAP 1 mg/l = 0 HST, Konsentrasi BAP 1,5 mg/l = 0 HST. Sehingga di dapat total rata-rata yaitu 1,55 HST.
Tabel  5  dapat  dilihat  bahwa  BAP  0  mg/l nyata  memiliki  rata-rata  waktu  terbentuk  akar  6,20 HST  dan  berbeda  nyata  dengan  perlakuan  lainnya yang sama sekali tidak memiliki waktu terbentuk akar bahkan  sampai  50  HST  di  akhir  pengamatan  sama sekali tidak terlihat pertumbuhan akarnya. Perlakuan tanpa  menggunakan  BAP  menunjukan  satu-satunya perlakuan yang terbentuk akar.
Menurut Mattjik (2005), pembentukan akar pada  kultur  jaringan  dapat  terjadi  langsung  pada eksplan  yang  ditanam,  baik  dari  jaringan,  maupun dari kalus jika ke dalam media diberikan sitokinin dan auksin yang mencukupi. Akar adalah salah satu organ tanaman  yang  mempunyai  fungsi menyerap  nutrisi
dari  media  tanam  yang  digunakan  untuk  proses pertumbuhan dan perkembangan. Menurut Pucchooa dan Sookum (2000) pengakaran eksplan pada  kultur in  vitro didapat  dari  medium  tanpa penambahan BAP. Dari tabel 4 di atas konsentrasi BAP  0,5  mg/l,  1  mg/l,  dan  1,5  mg/l  memberikan pengaruh  yang  sama  pada  waktu  terbentuk  akar (HST)  tetapi  berbeda  dengan  BAP  0  mg/l.  Dari hasil  pada  Tabel  5  didapatkan  faktor  konsentrasi BAP  yang  baik  untuk  waktu  muncul  akar  yaitu konsentrasi BAP 0 mg/l.

## Waktu Terbentuk Tunas (HST)
Pengamatan dilakuan ketika planlet krisan kulo pertama kali mengeluarkan tunas berdasarkan hari  setelah  tanam  (HST)  dan  dari  hasil pengamatan yang dilakukan berikut ini adalah hasil dari  rerata  waktu  terbentuk  tunas  (HST) berdasarkan 5 kali ulangan:

## Gambar 6. Waktu Terbentuk Tunas (HST)
Gambar  6  menunjukkan  waktu  terbentuk tunas pada hari setelah tanam HST, parameter ini menunjukan  hasil  rata-rata  waktu  terbentuk tunas (HST) berdasarkan perlakuan jenis eksplan pucuk  yaitu  7,05    HST  sedangkan  untuk  jenis eksplan nodus 6,35 HST. Perlakuan konsentrasi BAP 0 mg/l = 6,30  HST, konsentrasi BAP 0,5 mg/l = 6,60 HST, Konsentrasi BAP 1 mg/l = 7,10 HST,  Konsentrasi  BAP  1,5  mg/l  =  6,80  HST. Sehingga didapat total rata-rata yaitu 6,70 HST.
Dari hasil analisis ragam waktu terbentuk tunas  dapat  diketahui  bahwa  tidak  ada  pengaruh signifikan  antara  interaksi  konsentrasi  BAP  dan jenis  eksplan  terhadap  waktu  terbentuk  tunas planlet krisan kulo hasil inisiasi. Begitu juga pada masing-masih  faktor  jenis  eksplan  dan  BAP  baik pada  faktor  jenis  eksplan  di  dalamnya  eksplan pucuk  dan  nodus,  maupun  perlakuan  konsentrasi
Tabel 5. Pengaruh BAP Pada Pembentukan Akar.
Perlakuan
(Ms+BAP) Rata-rata Waktu Terbentuk Akar HST MS + 0 6,20 HST MS + 0.5 mg/l Tidak Terbentuk Akar MS + 1 mg/l Tidak Terbentuk Akar MS + 1.5 mg/l Tidak Terbentuk Akar
Pertumbuhan Dan Morfogenesis Krisan…………………………..(Rieddel Lintong, Jeany Polii-Mandang, Edy Lengkong)
BAP dalam 4 taraf. Perlakuan BAP 0 mg/l secara umum menunjukan hasil yang sama dengan media MS yang di beri perlakuan. Diduga, Tunas apikal krisan mengandung auksin dan sitokinin endogen, maka  perlakuan  MS  tanpa  BAP  sudah  mampu membentuk tunas dan akar.

## KESIMPULAN DAN SARAN

## Kesimpulan
Berdasarkan analisis penelitian, maka dapat di simpulkan sebagai berikut:
1.  Interaksi  antara  faktor  jenis  eksplan  dan konsentrasi  BAP  tidak  berpengaruh  nyata terhadap tinggi planlet, jumlah tunas, jumlah daun,  waktu  terbentuk  akar  (HST),  waktu terbentuk tunas (HST).
2.  Perlakuan  Jenis  eksplan  pucuk  dan  nodus tidak  berpengaruh  nyata  terhadap  tinggi planlet,  jumlah  tunas,  jumlah  daun,  waktu terbentuk  akar  (HST)  dan  waktu  terbentuk tunas (HST).
3.  Perlakuan  konsentrasi  BAP  berpengaruh nyata  terhadap  tinggi  planlet,  jumlah  tunas, jumlah  daun,  waktu  terbentuk  akar  (HST) tetapi tidak berpengaruh nyata terhadap waktu terbentuk tunas (HST).

## Saran
Perlu  adanya  penelitian  lebih  lanjut untuk  mendapatkan  kombinasi  yang  optimal dengan cara menambah taraf jenis eksplan dalam bentuk ruas serta peningkatan konsentrasi BAP.

## DAFTAR PUSTAKA
Anggit, W.S.S. 2008. Pengaruh Konsentrasi BAP dan Macam Media terhadap Pertumbuhan Awal ( Anthurium  hookeri ).  Skripsi.  Fakultas Pertanian. Universitas Sebelas Maret
Surakarta. Budiarto,  K  &  Marwoto,  B.  2009.  ‘ Mother  plant productivity and cutting quality of chrysanthemum  varietas  grown  under plastichouse and open conditions’ , Indonesian  Journal  of  Agriculture ,  vol.  2, no. 2, pp. 115-20.
George,  E.  F.  and  P.D  Sherington.  l984 .  Plant Propagation  by  Tissue  culture.  Hand  book and Directory of Commercial Laboratories.
Exegetic LTD England.
Gunawan  LW.  1995.  Teknik  kultur  in  vitro  dalam hortikultura. Penebar Swadaya. Jakarta.
Istianingrum,  P,  Damanhuri  &  Soetopo,  L  2013,
‘Pengaruh generasi benih terhadap pertumbuhan dan pembungaan krisan ( Chrysanthemum )  Varietas  Rhino’,  Jurnal Produksi Tanaman, vol. 1, no, 3, pp. 1-8. Maryono,  M.Yuniawati  dan  L.  Harsanti.  2013.
Pertumbuhan Planlet Galur Mutan
Dendrobium  Jayakarta  pada  media  VW ( Vacin and went ) dengan penambahan BAP ( Benzyl  Amino  Purin ).  Prosiding  Seminar Nasional  Sains  dan  Teknologi  Nuklir PTNBR-BATAN Bandung.
Mattjik, N. A., 2005. Peranan Kultur Jaringan Dalam Perbaikan  Tanaman.  Orasi  Ilmiah  Guru Besar IPB. FP IPB, Bogor.
Mok,  M.C.  ,R.C.  Martin  dan  D,W,S.  Mok,  2002.
Cytokinins:  Byosinthesis  Metabolism  and Perception. In vitro cell dev. Biologyc. Plant . 36(2):102-107.
Pramanik,  d.,  shintiavira,  h.,  &  winarto,  b.  (2019). studi  kualitas  regeneran  phalaenopsis  hasil kultur  in  vitro  dari  eksplan  tangkai infloresen,  tunas  pucuk,  dan,  28(1),  13. Jurnal Hortikultura Vol. 28 No. 1 2019. Pucchooa dan Sookum, 2000. Induced Mutation and In vitro Culture of Anthurium andraeanum .www.gov.mu /portal/sites/ncb/moa/farc/ presen/s1/
s1.3_files/frame.htm. Di akses bulan desember 2021.
Saifuddin,  F.  2016.  Pengaruh Indole  Acetic  Acid (IAA)  terhadap  Hasil  Berat  Basah  Akhir Planlet  Kultur  Jaringan  Tanaman  Jernang (Daemonorops  Draco  (WILLD.)  Blume). Jesbio Vol 5 No.1  Mei 2016.
Tilaar,  WJ,  Runtung  &  Tulung,  S.  2015.  ‘Induksi tunas  dari  nodul  krisan  kulo  dalam  media Murashige dan Skoog yang diberi sitokinin’, Eugenia, vol. 21, no. 2, hlm. 94-104.
Tunggadewi, u. t. (2010). penggunaan alar dan ba ( benzyl adenine ).Buana Sains Vol 10 No 1:
77-82,2010.
Zulkarnain.  2009.  Kultur  Jaringan  Tanaman  Solusi Perbanyakan  Tanaman  Budidaya.  Bumi Aksara. Jakarta.