## PERUBAHAN KOMPONEN KIMIA PADA BEBERAPA TINGKAT
KEMATANGAN DAUN SIRSAK ( Annona muricata L . ) MENGGUNAKAN KROMATOGRAFI GAS (KG)
Yeremia F. Malibela 1) , Julius Pontoh 2) , Jemmy Abidjulu 2)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115
1) Jurusan Kimia FMIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
Soursop leaves (Annona muricata L.) is one of the medicinal plants of Annonaceae family that has great benefits for human life. The purpose of this study is to determine the development of chemical components at several levels of leaf age development by using gas chromatography equipment on young and  old  soursop  leaves.  The  chemical  components  of  soursop  leaves  are  extracted  into  methanol  and water solvents then derivatized with MTBSTFA prior to injection into gas chromatography. Changes in chemical components of soursop leaves can be seen as peak chemical content in Gas Chromatography. From the analysis there are 13 compounds which is the peak in the sample of young soursop leaves, 11 peaks  on  the leaves of  soursop and the  oldest 14  peaks  on  old soursop leaves. The  content  of  chemical components  in  soursop  leaves  varies  according  to  the  leaf  age  progression  rate.  Some  chemical components decrease with the older leaf age, some chemical components increase in the leaves of the old half  and  decreases  in  the  old  leaves.  Some  chemical  components  do  not  change  in  young  and  half-old leaves but are reduced to older leaves. The results of this study indicate that gas chromatography method can be used to analyze chemical components in soursop leaf.
Keyworsds: Soursop leaf (Annona muricata L.) Gas Chromatography, Retention Time

## ABSTRAK
Daun  Sirsak  ( Annona  muricata  L.) merupakan  salah  satu  jenis  tanaman  obat  dari  familia Annonaceae yang  mempunyai  manfaat  besar  bagi  kehidupan  manusia.  Tujuan  penelitian  ini  untuk menentukan  perkembangan  komponen  kimia  pada  beberapa  tingkat    perkembangan  umur  daun  dengan mengunakan peralatan Kromatografi Gas pada daun sirsak muda setengah tua dan tua. Komponen kimia pada daun sirsak diekstraksi ke dalam pelarut metanol dan air kemudian diderivatisasi dengan MTBSTFA sebelum  injeksi  kedalam  kromatografi  gas.  Perubahan  komponen  kimia  pada  daun  sirsak  dapat  terlihat puncak  kandungan  kimia  pada  Kromatografi  Gas.  Dari  hasil  analisis  terdapat  13  senyawa  yang merupakan  puncak  pada  sampel  daun  sirsak  muda,  11  puncak  pada  daun  sirsak  setengah  tua  dan  14 puncak pada daun sirsak tua. Kandungan komponen kimia dalam daun sirsak berubah-ubah sesuai dengan tingkat  perkembangan  umur  daun.  Beberapa  komponen  kimia  berkurang  dengan  makin  tua  umur  daun, sebagian  komponen  kimia  meningkat  pada  daun  setengah  tua  dan  menurun  pada  daun  tua.  Sebagian komponen kimia tidak berubah pada daun muda dan setengah tua tetapi  berkurang pada daun tua. Hasil penelitian  ini  menunjukan  bahwa  metode  kromatografi  gas  dapat  digunakan  untuk  menganalisa komponen-komponen kimia pada daun sirsak.
Kata kunci: Daun sirsak ( Annona muricata L .) Kromatografi Gas, Waktu Retensi

## PENDAHULUAN
Indonesia  kaya  akan  sumber  bahan obat  alam  dan  tradisional  yang  secara  turun temurun  telah  digunakan  sebagai  ramuan obat  tradisional.  Pengobatan  tradisional dengan  tanaman  obat  diharapkan  dapat dimanfaatkan dalam pembangunan kesehatan masyarakat. Sekarang ini pemerintah sedang mengalakan  pengobatan dengan bahan alam (Wijayakusuma,1999).
Daun  sirsak  ( Annona  muricata L.) merupakan  salah  satu  jenis  tanaman  obat dari  familia  Annonaceae  yang  mempunyai manfaat  besar  bagi  kehidupan  manusia. Tanaman ini digunakan sebagai sumber gizi dan merupakan sumber bahan obat tradisional.  Dalam  industri  makanan,  sirsak dapat  diolah  menjadi  selai  buah,  sari  buah, sirup  dan  dodol  sirsak  (Jannah,  2010). Tanaman  sirsak  banyak  juga  digunakan sebagai  tanaman  obat,  karena  berbagai bagian  tanaman  ini  memiliki  khasiat  untuk penyembuhan maupun pencegahan penyakit.
Untuk  pemisahan  bahan-bahan  yang mudah menguap, kromatografi gas merupakan metode terpilih karena kecepatannya,  resolusinya  yang  tinggi  dan mudah digunakan (McNair & Miller, 1998). Penggunaan  Kromatografi  gas  relative sederhana  dan  kurang  menggunakan  bahan namun  demikian  metode  ini  mengharuskan senyawa  yang  dianalisa  dapat  diubah menjadi  gas,  untuk  itu  teknik  derivatisasi sangat  diperlukan.  Derivatisasi  dilakukan untuk  mengubah  suatu  senyawa  menjadi senyawa  lain,  sehingga  senyawa  tersebut memiliki  sifat-sifat  yang  sesuai  untuk dilakukan analisis menggunakan KG (Gandjar & Rohman, 2007).
Komponen kimia dalam tanaman akan bervariasi  dari  satu  organ  ke  organ  yang lain. Demikian juga komponen tersebut akan terus berubah pada berbagai fase perkembangan suatu organ misalnya komponen  kimia  dalam  buah  atau  daun muda, setengah tua dan  tua akan bervariasi. Sampai  pada  saat  ini  belum  banyak diketahui tentang perubahan-perubahan komponen  kimia  dalam  perkembangan tanaman  daun  sirsak  (Gandjar  &  Rohman, 2007).
Berdasarkan hal-hal diatas maka penulis terdorong untuk melakukan penelitian  menganalisis  komponen  kimia pada  berbagai  tingkat  perkembangan  daun sirsak  ( Annona  muricata L.)  menggunakan Kromatografi Gas.

## METODE PENELITIAN

## Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  ialah,  mortir, stopwatch,  multi-vortexer,  Kromatografi Gas (Shimadzu GC-2014), timbangan analitik, tabung eppendorf 2 mL, centrifuge, rak  tabung,  mikropipet,  oven  dan  pemanas air.
Bahan-bahan  yang  digunakan  ialah daun  sirsak  muda,  daun  sirsak  setengah  tua dan  daun  sirsak  tua,  metanol  (pa),  aqua bidestilata (pa), n-heksan (pa) dan MTBSTFA ( N-tert -Butyl-dimethylsilyl -N- methyltrifluoraoacetamide),

## Prosedur Penelitian Pengambilan Sampel
Sampel  daun  sirsak  diambil  dari lingkungan  perumahan  PLN  Bahu  Kota Manado.  Semua  sampel  diambil  dalam
keadaan segar dengan tiga kematangan yaitu daun  sirsak  muda,  daun  sirsak  setengah  tua dan daun sirsak tua.
Uji Kadar Air (AOAC, 1995)
Daun  sirsak  dipotong-potong  kecil dihancurkan dalam mortar ditimbang sampel yang sudah hacur sebanyak 5 g, dimasukkan ke  dalam  cawan  kosong  yang  telah ditimbang, kemudian dimasukan dalam oven pada  suhu105 selama  semalaman,  setelah kering  dan  dingin  kemudian  ditimbang kembali  cawan  yang  berisi  sampel.  Kadar air dihitung dengan persamaan berikut :
Kadar air (%) =

## Pembuatan Sampel Kering
Sampel  daun  sirsak  dipotong  kecil- kecil  kemudian  ditimbang  sebanyak  10  g untuk masing-masing tiga tingkat umur daun yaitu  daun  muda,  daun  setengah  tua  dan daun tua. Sampel dimasukan kedalam cawan poslen  lalu  dimasukan  kedalam  oven  pada suhu  50 selama 3 x 24 jam.  Sampel  yang tela  kering  timbang  dan  disimpang  dan digunakan sebagai analisis selajutnya.
Persiapan Sampel
Kering Untuk

## Pengujian Kromatografi Gas
Sampel daun sirsak kering ditimbang sebanyak  100  mg  dan  dimasukan  ke  dalam mortal  dan  dihaluskan.  Tambahkan  2  mL campuran  metanol  dan  air  (perbandingan 4:1).  Pindahkan  larutan  ke  dalam  2  mL tabung  Ependorf  kemudian  divortex  selama 5  menit.  Tabung  ependorf  disentrifuge selama1 15 menit. Pindakan 100 mL ekstrak kedalam  tabung  Ependorf  yang  baru kemudian ditiup dengan gas nitrogen sampai kering.
Selanjutnya ditambahkan MTBSTFA sebanyak 100 µL dan
dipanaskan  pada  suhu  50 o C  selama  1  jam. Selanjutnya  ditabahkan  aquades  sebanyak 200 µL lalu dikocok-kocok dan ditambahkan  lagi    heksan  sebanyak  200  µL lalu  dikocok  dan  di  sentrifuge  kembali selama  15  menit.  Bagian  atas  diambil  lalu dimasukkan  ke  dalam  tabung  ependorf  baru lalu diuji menggunakan kromatografi gas.

## Kondisi Kromatografi Gas
Sebanyak  1  mikroliter  (μl)  sampel diinjeksikan  ke  dalam  kromatografi  gas. Kondisi  alat  yang  digunakan  yaitu  suhu ruang  sampel  290 ,  tekanan  ruang  injeksi
/sampel  1000 .  Suhu  detector  290 . Suhu  kolom  didiamkan  pada  temperature 100 kemudian  dinaikkan  secara  bertahap dengan  kenaikan  10 sampai  suhu
240 selanjutnya suhu 240 dipertahankan selama  10  menit.  Kolom  adalah  RTX-Wax, panjang  kolom  30  meter,  ketebalan  lapisan fase diam 0,25 Micron, diameter kolom 0,25 mm.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Hasil Pengujian Kadar Air Daun Sirsak
Kadar  air  sampel  daun  sirsak  adalah sebesar sekitar ± 3.98%. Hasil pengujian ini memenuhi persyaratan simplisia oleh Menteri  Kesehatan  Republik  Indonesia No.661/MENKES/SK/VII/1994 bahwa kadar air simplisia standar yaitu ≤ 10%.

## Hasil Kromatogram Kromatografi Gas
Hasil  analisa  komponen  kimia  pada daun sirsak dapat diliihat dalam Gambar 3, 4 dan  5.  Dari  gambar  tersebut  terlihat  bahwa teknik  kromatografi  gas  dapat  digunakan untuk  analisis  komponen-komponen  kimia
Datafile Name:Sirsak 7.gcd Sample Name:Sirsak Sample ID:Sirsak 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0 22.5 25.0 27.5 min 0 5000 10000 15000 20000 25000 30000 35000 40000 uV SFID1 1 .9 6 3 2 .0 6 3 2 .3 5 8 3 .0 1 4 4 .2 3 6 5 .9 0 2 7 .6 7 1 7 .7 6 2 9 .4 3 9 9 .7 4 1 1 0 .1 9 3 1 1 .0 4 1 1 2 .5 7 2 1 2 .6 1 5 1 4 .0 0 0 Datafile Name:Sirsak 8.gcd Sample Name:Sirsak Sample ID:Sirsak 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0 22.5 25.0 27.5 min 0 2500 5000 7500 10000 12500 15000 17500 20000 uV SFID1 1 .9 5 9 2 .1 0 5 2 .3 9 1 2 .9 5 6 5 .8 6 3 7 .6 2 1 7 .7 1 8 9 .3 8 5 9 .6 9 4 1 0 .0 7 5 1 0 .1 5 1 1 0 .9 8 2 1 1 .6 5 1 1 1 .7 9 8 1 2 .1 1 3 1 2 .5 5 8 1 3 .9 4 3 Datafile Name:Sirsak 9.gcd Sample Name:Sirsak Sample ID:Sirsak 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0 22.5 25.0 27.5 min 0 2500 5000 7500 10000 12500 15000 17500 20000 uV SFID1 1 .9 7 0 2 .1 3 1 2 .3 6 1 3 .4 1 0 4 .0 9 9 4 .2 0 2 5 .8 4 8 6 .8 0 3 7 .6 0 1 7 .7 1 7 9 .3 3 5 9 .3 8 5 9 .6 9 8 1 0 .9 6 6 1 2 .5 2 6 1 2 .5 6 2 1 3 .9 3 5
yang  ada  dalam  daun  sirsak  muda,  daun
sirsak setengah tua dan daun sirsak tua.
Gambar 3. Kromatogram  sampel  daun  sirsak  muda  menggunakan pelarut  metanol terdapat  13  luas puncak  senyawa  yang teretensi.
Gambar 4. Kromatogram  sampel  daun  sirsak  setengah  tua menggunakan  pelarut  metanol  terdapat  11  luas puncak senyawa yang teretensi.
Gambar 5. Kromatogram  sampel  daun  sirsak  tua  menggunakan pelarut  metanol  terdapat  14  luas  puncak  senyawa  yang teretensi.
Pada  gambar  diatas  terdapat  dua  puncak besar  yang terlihat pada awal waktu retensi. Puncak  yang  pertama  dan  kedua  adalah pelarut  dan  senyawa  derivatisasi  yang  tidak terurai secara baik. Puncak-puncak selanjutnya adalah senyawa yang terkandung dalam daun sirsak.  Pada gambar diatas  terdapat  13  puncak  pada  daun  sirsak muda  11  puncak  pada  daun  sirsak  setengah tua dan 14 puncak pada daun sirsak tua.

## Hasil  Analisis  Komponen  Kimia  Pada Daun sirsak
Dari tabel 1 ini terlihat bahwa luas area dari komponen- komponen kimia dalam sampel  daun  sirsak  muda,  daun  sirsak setengah  tua  dan  daun  sirsak  tua  sebagai berikut (190765, 158580 dan 32939) hal  ini
menujukkan total kandungan senyawa dalam daun  sirsak  muda  lebi  tinggi  dari  dalam daun setengah tua, sedangkan pada daun tua relatife lebi rendah
Pada  daun  sirsak  muda,  senyawa- senyawa yang paling tinggi mempunyai luas area  atau  kosentrasi  berturut-turut  adalah senyawa  yang  mempuyai  waktu  retensi 12.56  menit,    9.39  menit,  10.08  menit  dan 13.94 menit.  Pada daun sirsak setengah tua, senyawa-senyawa  yang  mempunyai  luas area  tertingi  berturut-turut  adalah    senyawa dengan  waktu  retensi  9.44  menit,  7.67 menit,  10.19  menit  dan  14.00  menit.  Pada daun  tua,  senyawa-senyawa  yang  paling tinggi  adalah  senyawa  yang  mempunyai waktu retensi 4.10 menit dan 4.20 menit
Tabel 1. Hasil pengujian Kromatografi gas No Punca k Daun sirsak Muda
Daun sirsak setengah Tua
Daun sirsak Tua Waktu Retensi Luas Puncak Persentatsi % Waktu Retensi Luas Puncak Persentatsi % Waktu Retensi Luas Puncak Persentatsi % 1 3.41 1066 3.24 2 4.10 11402 34.62 3 4.24 14498 9.14 4.20 5639 17.12 4 5.86 11415 5.98 5.85 678 2.06 5 5.90 13802 8.70 6 6.80 2330 7.07 7 7.62 13073 6.85 7.67 17861 11.26 7.60 2232 6.78 8 7.72 11220 5.88 7.76 14829 9.35 7.72 1141 3.46 9 10 9.39 24255
12.71
9.44 24337 15.35 9.34 1427 4.33 11 9.39 1524 4.63 12 9.69 8106 4.25 9.74 7137 4.50 9.70 608 1.85 13 10.08 20969 10.99 10.19 17035 10.74 14 10.15 9969 5.23 15 10.98 14331 7.51 11.04 13985 8.82 10.97 1849 5.61 16 11.65 15984 8.38 17 11.80 12779 6.70
Komponen kimia dengan waktu retensi 9.44 menit  mempuyai  kandungan  yang  tertinggi pada  daun  setengah  tua,  kosentrasinya berkurang  pada  daun  muda  dan  tua,  namun demikian  komponen  ini  berkurang  sangat signifikan  pada  daun    muda  dan  semakin lebih kecil pada daun tua ( luas area 24337, 24255 dan 1427 )
Komponen  kimia  dengan  waktu retensi 10.08 menit pada daun muda, dengan kosentrasinya berkurang pada daun setengah tua  dan  menghilang  pada  daun  tua  (  luas area  20969  dan  17035  ).  Komponen  kimia pada daun sirsak muda dengan waktu retensi 13.94  menit  kosentrasinya  sedikit  menurun pada  daun  sisak  setengah  tua  dan  menurun sangat  darstis  pada  daun  sirsak  tua  (  luas area  17699,  15951  dan  1209  ).  Komponen kimia pada daun muda dengan waktu retensi 7.62  menit  mempunyai  luas  area  13073 kosentrasi  ini  relatif  lebih  kecil  dari  dalam daun  setengah  tua  tetapi  masih  lebih  tinggi luas area dari dalam daun sirsak tua.
Komponen  kimia  dengan  waktu retensi  4.10  menit  adalah  komponen  kimia terutama terbesar pada daun sirsak tua tetapi tidak  terdapat  pada  daun  sirsak  muda  dan daun sirsak setengah tua. Dari uraian-uraian diatas  terlihat bahwa  kosentrasi dari berbagai komponen kimia dalam daun sirsak berubah-ubah  dari  dalam  daun  sirsak  muda setengah tua dan tua namun demikian dapat dikatakan  bahwa  komponen  kimia  dalam
daun sirsak relatif lebih tinggi kosentrasinya. Namun demikian penelitian ini belum dapat mengidentifikasi komponen-komponen kimia yang terdapat pada tingkat perkembangan  daun  sehinga  di  temukan analisa yang lebi lanjut dengan mengunakan GC-MS untuk menentukan senyawa- senyawa lain.

## KESIMPULAN
1. Hasil  penelitian  ini  menunjukan bahwa  metode  kromatografi  gas dapat  digunakan  untuk  menganalisis komponen-komponen  kimia  pada daun sirsak.
2. Kandungan  komponen  kimia  dalam daun  sirsak  berubah-ubah  sesuai dengan  tingkat  perkembangan  umur daun.  Beberapa  komponen kimia berkurang  dengan  makin  tua  umur daun,  sebagian  komponen  kimia meningkat  pada  daun  setengah  tua dan menurun pada daun tua. Sebagian  komponen  kimia  tidak berubah  pada  daun  muda  dan setengah  tua  tetapi  berkurang  pada daun tua.

## DAFTAR PUSTAKA
Abidondifu,  Y.V.  2013.  Efikasi  beberapa jenis  bubuk  pestisida  nabati  sebagai seedtreatment pada  benih  padi  yang disimpan  terhadap  hama  bubuk  padi
18 12.11 5275 2.77 19 12.56 25690 13.47 12.57 8873 5.60 12.53 1388 4.21 20 12.62 10272 6.48 12.56 446 1.35 21 13.94 17699 9.28 14.00 15951
10.06 13.94 1209 3.67
190765 158580 32939
( Sitophilus  oryzae l).  Program  Studi
Agroteknologi Fakultas Pertanian Dan Teknologi Pertanian Universitas Negeri Papua, Manokwari. Skripsi
Association  of  Official  Analytical  Chemist (AOAC).  2005. Official  Methods  of Analysis  (18  Edn). Association  of Official Analytical Chemist Inc. Mayland. USA.
Gandjar, I. G., & Rohman, A. ( 2007). Kimia Farmasi Analisis. Yogyakarta : Pustaka pelajar.
Grob,  R.L..  1995. Modern  Practice  of  Gas Chromatography .  3th  Ed.  Jhon  Wiley and Sons, New York.
Hendayana,  S.,  A.  Kodarohman,  A.A. Sumarna,  dan  A.  Supriana.  1994.
Kimia Analitik Instrumen . IKIP
Semarang press, Semarang.
Jannah  RN.  2010. Uji  Efektifitas  Daun Sirsak  (Annona  maricata  L.)Sebagai Peptisida Nabati Terhadap Pengendalian HamaTanama sawi (Brassica  jenscea  L) .[Sripsi].  Jurusan Bioligi  Fakultas  Keguruan  dan  Ilmu pendidikan Universitas Muhammadiyah Surakarta.
Johnson,  E.  L.,  &  Stevenson,  R.  1991 .
Dasar  Kromatografi  Cair .  Kosasih
Padmawinata,  Penejemah.  Bandung:
Penerbit ITB.
Markham, K.R., 1988, Cara Mengidentifikasi Flavonoid, diterjemahkan oleh Kosasih Padmawinata, 15, Penerbit ITB,
Bandung.
Katzung,  B.  G.  (2002).  Farmakologi  Dasar dan  Klinik.  Penerjemah  dan  Editor: Bagian Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Erlangga. Edisi  VIII.  Jakarta:  Penerbit  Salemba Medika.
Kealey,  D  and  Haines,  P.J.  2002. Instant Notes:  Analytical  Chemistry .  BIOS Scientific  Publishers  Limited,  New York.
Kenkel,  J.,  2002. Analytical  Chemistry  for Technicians , 3th. Edition., CRC Press, U.S.A.
Mangan, Yellia. 2009. Solusi Sehat Mencegah  dan  Mengatasi  Kanker .
Jakarta: Agromedia Pustaka.
Mardiana,  L.,  dan  Ratnasari,  J.  (2011).
Ramuan  dan  Khasiat  Sirsak.  Jakarta: Penebar Swadaya. Hal. 17.
McNair, H. M.,and J. M. Miller. 1997. Basic
Gas  Chromatography.John  Wiley  &
Sons, Inc.
Sastrohamidjojo, H. 2005. Kromatografi.Liberty : Yogyakarta.
Schauer,  N., Steinhausen,  D.,  Strelkov,  S., Schombururg,  D.,  Allison,  G.,  Moritz, T.,et al. 2005, GC-MS libraries for the rapid  indentification  of  metabolites  in complex  biologica  sampel, FEBS Letters , 579,1332-1337.
Settle, F.(Ed.), 1997, Instrumental
Techniques  for  Analytical  Chemistry,
Prentice Hall Inc., New Jersey.
Sunarjono  H.  2005. sirsak  dan  Srikaya: Budidaya  untuk  Menghasilkan    Buah Prim a. Penebar Swadaya: Depok
Wijayakusuma, H. 1996. Tanaman
Berkhasiat  Obat  di  Indonesia.  Jilid  I.
Jakarta:       Pustaka Kartini.
Widyaningrum H. 2012. Sirsak si buah ajaib
10.000 x lebih hebat dari kemoterapi.Yogyakarta: Media Presindo.
Zarrabal, C.O., Waliszewski, S.M., Barradas dermitz  D.M.,  Nolascohipolito  Z.C., Rican,  S.,  dan  Trujillo,  P.R.L.,  2005, The Consumption Of Hibiscus
Sabdariffa  Dried  Calyx  Ethanolic Extract Reduced Lipid Profile In Rats, 60,  Journal  Plant  Foods  for  Human Nutrition, 153-159.