Jurnal Pharmascience, Vol 05, No. 02, Oktober 2018, hal: 143-152 ISSN-Print. 2355-5386 ISSN-Online. 2460-9560 http://jps.unlam.ac.id/

## Research Article
Identifikasi Kandungan Senyawa Kimia dan Uji Aktivitas Penghambatan Polimerisasi Hem dari Fraksi n- Heksana Daun Manuran ( Coptosapelta tomentosa Valeton ex K. Heyne) Asal Kotabaru Kalimantan Selatan
Arnida 1 , Sutomo 1 , dan Utsna Uhdatul Khoriah 1
1 Program Studi Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam  Universitas Lambung Mangkurat
Jl. A. Yani Km 36 Kampus UNLAM Banjarbaru Kalimantan Selatan Email: arnida01@ulm.ac.id

## ABSTRAK
Coptosapelta 2 tomentosa s Valeton 5 ex K. 6 Heyne merupakan w salah satu
tumbuhan a yang berasal dari Kotabaru, h Kalimantan a Selatan yang berpotensi sebagai n antimalaria. f Penelitian H ini  bertujuan  untuk  menentukan S kandungan  senyawa kimia h dan S aktivitas o penghambatan  polimerisasi  hem  dari  fraksi n -heksana  daun C. tomentosa Valetona  ex K. Heyne. Identifikasi  kandungan  senyawa  kimia  dilakukan dengan metode uji  tabung  sedangkan a aktivitas  penghambatan a polimerisasi hem  secara in  vitro dilakukan dengan metode Basillico yang dimodifikasi.  Hasil  uji  skrining  fitokimia  dan  uji Kromatografi  Lapis  Tipis  pada  fraksi n -heksana  daun C.  tomentosa Valeton  ex  K.  Heyne mengandung  senyawa  steroid,  terpenoid,  flavonoid,  dan  antrakuinon.  Persentase penghambatan polimerisasi yang didapatkan dari fraksi n -heksana daun C. tomentosa Valeton ex K. Heyne dengan konsentrasi 20; 10; 5; 2,5; 1,25; 0,625; 0,3125 mg/mL secara beturut- turut yaitu 98,267; 97,530; 96,001; 93,274; 89,036%; 80,965; 50,322%. Rerata IC 50 fraksi n - heksana  daun C.  tomentosa Valeton  ex  K.  Heyne  sebesar  0,196  ±  0,009 mg/mL a dan a klorokuin difosfat a sebesar 0,214 ± 0.012 mg/mL. Analisis dengan independent sample  t-test menyatakan w tidak  terdapat a perbedaan  yang a signifikan  antara a keduanya dengan nilai signifikansi sebesar 0,110. Hal ini menunjukkan bahwa fraksi n -heksana daun C. tomentosa Valeton ex K. memiliki aktivitas penghambatan polimerisasi hem.
Kata Kunci : Coptosapelta a tomentosa w Valeton a ex o K. i Heyne,  Polimerisasi  hem,  fraksi n - heksana, skrining fitokimia, KLT .

## ABSTRACT
Coptosapelta 2 tomentosa 1 Valeton 2 ex K. h Heyne is one of the native plants Kotabaru, Kalimantan Selatan which has potential as antimalarial. This study aimed to determine the
chemical  content  and  heme  polymerization  inhibition  activity  of  Manuran  leaf  n-hexane fraction. Identification of these compound contents used tube test while the inhibitory activity of  heme  polymerization  in  vitro  did  by  Basillico  modified  method.  The  results  of phytochemical  screening  test  and  Thin  Layer  Chromatography  test  on  the  C.  tomentosa Valeton  ex  K.  Heyne leaf  n-hexane  fraction  in  this  study  was  positive  steroid,  terpenoid, flavonoid,  and  anthraquinone  compounds.  Percentage  polymerization  inhibition  obtained from the C. tomentosa Valeton ex K. Heyne leaf n-hexane fraction with concentration 20; 10; 5;  2.5;  1.25;  0.625;  0.3125  mg/mL,  respectively,  i.e.  98.267;  97.530;  96.001;  93.274; 89.036%; 80.965; 50.322%. The average of IC 50 on C. tomentosa Valeton  ex  K.  Heyne n- hexane fraction was 0.196 ± 0.009 mg /mL, and chloroquine diphosphate was 0.214 ± 0.012 mg/mL. Analysis with independent sample t-test declare, there is no difference between both of them with a significance value is 0,110. This result showed C. tomentosa Valeton  ex  K. Heyne leaf n-hexane fraction and chloroquine had heme polymerization inhibitory activity as well.
Keywords: Coptosapelta  tomentosa  Valeton  ex  K.  Heyne,  Heme  polymerization,  n-hexane fraction, phytochemical screening, TLC.

## I. PENDAHULUAN
Penghambatan  polimerisasi  hem  pada suatu  bahan  alam  berhubungan  dengan potensinya  sebagai  antimalaria.  Plasmodium mendegradasi  hemoglobin  eritrosite  menjadi asam  amino  dan  hem.  Plasmodium memerlukan  asam  amino  untuk  pertahanan hidupnya,  sedangkan  hem  bersifat  toksik bagi pertahanan hidupnya,
sehingga
Plasmodium mengubah hem menjadi hemozoinnyang tidak bersifat toksik. Perubahan  hem  menjadi  hemozoin  dikenal dengan  proses  polimerisasi  hem  (Huyetial, 2007).
Coptosapelta tomentosa Valeton ex K.
Heyne merupakan salah satu tumbuhan yang berasal  dari  Kotabaru,  Kalimantan  Selatan. Ekstrak etanol daun C. tomentosa Valeton ex K.  Heyne  terbukti  memiliki  aktivitas penghambatan  polimerisasi  hem  (Ningsih,
2017). Pemisahan kandungan kimia terhadap ekstrak  etanol  C. tomentosa Valeton  ex  K. Heyne dilakukan dengan fraksinasi. Berdasarkan  informasi  di  atas,  identifikasi kandungan  senyawa  kimia  dan  pengujian aktivitas  penghambatan  polimerisasi  hem dari  fraksi  n-heksana  daun  C. tomentosa Valeton ex K. Heyne perlu dilakukan.

## II. METODE PENELITIAN
A. Pengumpulan dan Pengolahan
Simplisia Daun C. tomentosa Valeton ex K.

## Heyne
Sampel  yang  telah  dikumpulkan disortasi  basah  dengan  dipisahkan  antara daun dan bagian tumbuhan yang lain. Bagian yang ingin digunakan adalah daun yang segar dan tidak rusak. Kemudian dicuci dengan air mengalir  agar  daun  terbebas  dari  kotoran. Daun  yang  sudah  dicuci  dipotong-potong
menjadi haksel, kemudian haksel dikeringanginkan  pada  suhu  ruang.  Setelah haksel  kering  maka  dilakukan  sortasi  kering agar  bersih  dari  pengotor.  Simplisia kemudian dihaluskan hingga menjadi serbuk kasar.  Serbuk  kasar  disimpan  dalam  wadah terhindar dari cahaya matahari.
B.  Pembuatan  Ekstrak  Etanol  Daun
C. i tomentosa a Valeton i ex i K. i Heyne Serbuk
simplisia daun
C. a tomentosa a Valeton a ex a K. a Heyne ditimbang  sebanyak  193,73  g,  dimaserasi dengan  pelarut  etanol  96%  hingga  sekitar  1 cm di atas permukaan sampel selama 24 jam sambil  sesekali  dilakukan  pengadukan, dilakukan  remaserasi  sebanyak  4x24  jam. Hasil  maserasi  dipisahkan  dengan  cara disaring  menggunakan  kertas  Whatman  No. 1 dan diuapkan dengan menggunakan rotary evaporator ,  selanjutnya  diuapkan  dengan waterbath hingga  didapat  ekstrak  kental.
(Utami et al , 2012).
C.  Pembuatan  Fraksi n -heksana  Daun
C. i tomentosa a Valeton i ex i K. i Heyne
Ekstrak  etanol  kental  sebanyak  10  g disuspensikan  dalam  akuades  40  mL  (1:4) dan  dihomogenkan.  Campuran  dimasukkan ke  dalam  corong a pisah a dan  ditambahkan  40 mL  (1:4)  pelarut a n- heksana,  kemudian digojog  dan  didiamkan  hingga  terbentuk  2 lapisan. Lapisan bagian atas adalah fraksi n- heksana  dan  fraksi  air  berada  pada  lapisan bawah  (Ambarsari,  2013).  Proses  fraksinasi dengan n- heksana dilakukan hingga
fraksinasi  dinyatakan  selesai.  Fraksinasi  ini dilakukan  sebanyak  9  kali  replikasi  dan fraksi n- heksana  yang  diperoleh  diuapkan sampai didapatkan fraksi kental.

## D. Skrining Fitokimia
1. Alkaloid: Sebanyak  2  mL  larutan  fraksi n- heksana  ditambahkan  dengan  HCl  2  N kemudian larutan dimasukkan ke dalam 2 tabung  reaksi  yang  berbeda.  Tabung pertama  ditambahkan  pereaksi  Mayer sebanyak  3  tetes  dan  tabung  kedua ditambahkan pereaksi Dragendorff sebanyak  3  tetes.  Jika  tabung  1  terbentuk endapan  putih  kuning  dan  pada  tabung  2 terbentuk  endapan  jingga  menunjukkan adanya alkaloid (Harborne, 2006).
2. Flavonoid: Sebanyak  2  tetes  larutan fraksi n -heksana  diteteskan  pada  kertas saring,  kemudian  dilewatkan  pada  tabung reaksi  yang  berisi  ammonia.  Perubahan warna  kertas  saring  menjadi  kuning  atau jingga  menandakan  adanya  flavonoid (Harborne, 2006).
3. Terpenoid  dan  steroid: Sebanyak  2  mL fraksi n -heksana  ditambah  pereaksi Lieberman Burchard. Hasil positif adanya terpenoid  ditandai  dengan  adanya  cincin kecoklatan  atau  violet,  sedangkan  adanya steroid  ditandai  dengan  perubahan  warna menjadi  hijau  kebiruan  (Ikalinus et  al ., 2015).
4. Tanin: Sebanyak  10  tetes  fraksi n - heksana  dari  sampel  ditambahkan a 2 a tetes FeCl 3 a 1%.
Hasil a positif a apabila a terjadi a perubahan a warna  larutan  menjadi  biru  tua  atau  hijau kehitaman (Kusumawati et al ., 2017).
5. Saponin: Sebanyak  5  tetes  fraksi n - heksana  dari  sampel  ditambahkan a air panas i dan i dikocok  selama  15  menit. jika a terbentuk a busa permanen memberikan  indikasi  adanya  saponin (Kusumawati et al ., 2017).
6. Antrakuinon: Sebanyak  2  mL  fraksi n - heksana  dari  sampel  ditambah  dengan  1 mL  KOH-metanol  10%  hasil  positif  jika larutan  tersebut  akan  berubah  warna menjadi merah (Kristanti et al. , 2008).
Identifikasi Kromatografi i Lapis i Tipis (KLT)
Fase a diam i yang i digunakan i pada penelitian  ini i adalah i plat  silika a gel a GF 254 , dan ia fase ii gerak  yang  digunakan  adalah n - heksana  :  etil  asetat  (7:3)  v/v. Pengamatan dilakukan  di  bawah  sinar  UV  254  dan  366 sedangkan penampakan noda yang digunakan adalah sebagai berikut :
1. Alkaloid: Kromatogram disemprot dengan  pereaksi  Dragendorff.  Apabila positif  menghasilkan  noda  berwarna coklat atau jingga (Sani et al ., 2014).
2. Flavonoid: Kromatogram diberikan
penampak  noda  yaitu  uap  ammonia. Apabila  menimbulkan  noda  berwarna kuning (cepat memudar) maka
mengandung flavonoid (Sani et al ., 2014).
3. Steroid: Kromatogram  disemprot  dengan penampak noda, yaitu Lieberman
burchard.  Apabila  muncul  noda  berwarna hijau-biru  maka  positif  mengandung senyawa steroid (Yuda et al., 2012)
4. Terpenoid: Kromatogram disemprot
dengan  penampak  noda  yaitu  anisaldehid asam  sulfat.  Jika  menghasilkan  warna ungu-merah atau ungu setelah penyemprotan  pereaksi  menunjukkan adanya  terpenoid/steroid  dalam  sampel (Marliana, 2007).
5. Antrakuinon: Kromatogram  disemprot dengan pereaksi semprot kalium hidroksida metanolik. Apabila
memberikan  warna  violet  merah  maka hasil  dikatakan  positif  mengandung senyawa  antrakuinon  (Wagner  &  Bland, 1996).

## Pembuatan kurva baku hematin
Seri  konsentrasi  hematin  dibuat dengan i konsentrasi 250;  125;  62,5;  31,25; 15,625; 7,8125 dan 3,90625 µM dalam lautan NaOH  0,1  M  dari  larutan  hematin  1  mM (dalam larutan NaOH 0,2M). Masing-masing konsentrasi dibuat sebanyak 800 µL. Masing- masing  konsentrasi  tersebut  dimasukkan sebanyak  100  µL  ke  dalam  mikroplate  96 sumuran,  dilakukan  3  kali  replikasi. Pembacaan i absorbansi  menggunakan i ELISA reader i pada  panjang  gelombang  405  nm (Purwanto, 2011).

## Pembuatan seri konsentrasi sampel
Stok  larutan  sampel  dengan  konsentrasi  20 mg/mL  dibuat  dengan  ditimbang  sebanyak 20  mg,  dimasukkan  ke  dalam  mikrotube  1,5
mL, ditambahkan DMSO 10% hingga 1 mL, lalu  digojok  dan  divortex  hingga  homogen. Seri  konsentrasi  sampel  dibuat  dari konsentrasi  20;  10;  5;  2,5;  1,25;  0,625; 0,3125 mg/mL dengan pengenceran bertingkat  menggunakan  DMSO  10% (Ningsih, 2017).

## Uji aktivitas penghambatan polimerisasi
hem
Larutan  hematin  1  mM  sebanyak  200  µL dimasukkan i ke i dalam i mikrotube,
ditambahkan bahan i uji sebanyak 100 µL dari berbagai tingkatan kadar, yaitu 20; 10; 5; 2,5; 1,25; 0,625; dan 0,3125 mg/mL untuk fraksi n-heksana  dan  klorokuin  difosfat.  Larutan asam  asetat  glasial  100%  sebanyak  100  µL ditambahkan untuk memulai reaksi polimerisasi  hem,  lalu  di- vortex dan diinkubasi  pada  suhu  37 o C  selama  24  jam.
Kontrol  negatif  adalah  larutan  DMSO  10% untuk  fraksi  n-heksana  dan  akuades  sebagai kontrol  negatif  untuk a klorokuin  difosfat.
Setelah inkubasi berakhir mikrotube disentrifuse, supernatan ai dibuang dan a endapan  yang  terbentuk a dicuci  dengan 400 a µL  DMSO  100%  kemudian  divortex menggunakan vortex  mixer .  Pencucian dilakukan  sebanyak  3  kali  dengan  cara disentrifuse berkecepatan 8000 a rpm a selama a 10 menit. a Endapan yang i diperoleh a ditambahkan  dengan  400  µL NaOH  0,1 a M,  di- vortex sampai  larutan homogen,  larutan  dipipet  sebanyak  100 µL a dan dimasukkan a ke i dalam a mikroplate 96
sumuran,  dilakukan a 3  kali  replikasi  dan absorbansinya a dibaca a dengan ELISA reader a pada a panjang gelombang 405 nm. a Nilai  absorbansi a yang  diperoleh a diplot ke a persamaan a garis  regresi a linear  kurva baku  sehingga a dapat a ditentukan i konsentrasi β -hematin i bahan  uji a pada  setiap i sumuran (Purwanto, 2011).

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN

## A. Ekstraksi dan Fraksinasi
Serbuk  simplisia  daun C. tomentosa Valeton ex  K.  Heyne  sebanyak  193,73  gram  yang telah dimaserasi menghasilkan ekstrak kental sebanyak  12,35  gram.  Rendemen  ekstrak etanol  yang  diperoleh  yaitu  6,37%.  Ekstrak kental  etanol  ditimbang  sebanyak  10  gram kemudian  difraksinasi  dengan a pelarut n - heksana.  Fraksi n -heksana a kental  yang didapat  sebesar  2,32  gram  Rendemen  fraksi n -heksana yang diperoleh sebesar 23,2 %.
B. Hasil Skrining i Fitokimia a
Skrining a fitokimia a fraksi n-heksana daun  C.  tomentosa  Valeton  ex  K.  Heyne positif  mengandung  senyawa  flavonoid, steroid, terpenoid, dan antrakuinon, sedangkan  alkaloid,  tanin,  dan  saponin menunjukkan  hasil  negatif  (Tabel  1). Penelitian a ekstrak a etanol daun C. tomentosa a Valeton a ex a K. a Heyne positif mengandung ai senyawa ai flavonoid, A tanin, a s aponin, ai antrakuinon, A dan terpenoid (Ningsih,  2017).    Hal  ini  menunjukkan bahwa  pelarut  n-heksana  menarik  senyawa
yang  bersifat  non  polar  sesuai  dengan  sifat yang dimilikinya (Gritter et al., 1987). Tabel  1.  Hasil  skrining  fitokimia  dari  fraksi n-heksana daun C. tomentosa Valeton ex. K.
Heyne Golongan Senyawa Fitokimia Jenis Pereaksi Hasil Alkaloid Meyer - Dragendorff - Flavonoid Ammonia + Steroid Lieberman Burchard + Terpenoid Lieberman Burchard + Tanin FeCl 3 - Saponin Tes busa - Antrakuinon KOH +

## C.  Hasil  Identifikasi  Kromatografi  Lapis Tipis
Identifikasi  KLT  dilakukan  bertujuan untuk  memperkuat  hasil  skrining  fitokimia yang  telah  dilakukan.  Berdasarkan  hasil identifikasi  KLT,  fraksi n- heksana  daun C. tomentosa Valeton  ex  K.  Heyne positif mengandung  senyawa  flavonoid,  steroid, terpenoid, dan antrakuinon (Tabel 2). Hal ini menunjukkan  kesesuaian  hasil  dengan pengujian pada skrining fitokimia yang telah dilakukan sebelumnya.
Table 2. Hasil identifikasi kromatografi lapis tipis  dari  fraksi n- heksana  daun
C.  tomentosa Valeton  ex.  K.
Heyne
Senyawa Penampak bercak Warna Bercak Kesimpulan Alkaloid Dragendorff - (-) Flavanoid Uap ammonia Jingga (+) Steroid Lieberman burchard Hijau- kebiruan (+) Terpenoid Anisaldehid- asam Sulfat Merah- ungu (-) Antrakuinon KOH- metanolik Merah (+)

## D. Penghambatan Polimerisasi Hem
Hasil  absorbansi  kurva  baku  hematin secara berturut-turut dari konsentrasi terbesar,  yaitu  3,553;  1,791;  0,923;  0,458; 0,231;  0,134;  dan  0,086.  Absorbansi  yang tinggi  menandakan  banyaknya  hemozoin atau  dalam  hal  ini  kristal-hematin  yang terbentuk  (Arnida  &  Sutomo,  2017). Persamaan  regresi  yang  didapatkan  pada penelitian  ini  adalah  y  =  0,014  x  +  0,024. Syarat  linieritas  kurva  baku  jika  nilai  r  > 0,9970  (Gandjar  &  Rohman,  2013). Berdasarkan syarat tersebut maka kurva baku pada  penelitian  ini  telah  memenuhi  syarat (Gambar  1).  Penentuan  kadar β -hematin diperoleh a dengan  cara  memasukkan a data absorbansi a masing-masing a bahan a uji a dan kontrol a ke a dalam  persamaan I kurva  baku hematin,  dimana  y  adalah a absorbansi  dan  x adalah kadar β -hematin.
Kadar β -hematin yang diperoleh berbanding terbalik dengan konsentrasi fraksi n-heksana  daun  C.  tomentosa  Valeton  ex  K. Heyne,  yaitu  semakin  tinggi  konsentrasi fraksi  n-heksana,  semakin  rendah  kadar β - hematin  yang  terbentuk  (Tabel  3).  Kadar β - hematin  digunakan  untuk  menentukana persentase penghambatan polimerisasi hem.
Nilai  persen  penghambatan  selanjutnya dianalisis probit untuk menentukan nilai IC 50 pada setiap perlakuan. a Inhibition Consentration 50% (IC 50 ) yaitu a kadar bahan uji  yang aI mampu  menghambat  polimerisasi hem hingga a 50%.
Nilai  IC 50 berbanding  terbalik  dengan aktivitas  penghambatan  polimerisasi  hem.
Semakin kecil nilai IC 50 yang dimiliki maka semakin  besar  penghambatan  polimerisasi hemnya (Tabel 3). Rerata IC 50 pada fraksi n - heksana  sebesar  0,196  ±  0,009  mg/mL a dan pada a klorokuin  difosfat  sebesar a 0,214  ± 0,012 a mg/mL.  Nilai  IC 50 fraksi n -heksana daun C.  tomentosa Valeton  ex  K.  Heyne lebih  kecil  dari  pada  nilai  IC 50 klorokuin difosfat.  Berdasarkan  literatur  diketahui bahwa semakin kecil nilai IC 50 menunjukkan semakin  besar  aktivitas  penghambatan polimerisasi  hem  (Salenussa et  al .,  2014).
Nilai  IC 50 diuji Independent  Sample  t-test dengan I tingkat I kepercayaan 95%. Nilai signifikansi pada uji t tersebut sebesar 0,110 (> 0,05), berarti H 0 diterima artinya tidak ada perbedaan  yang  signifikan  antara  nilai  IC 50 fraksi n- heksana  dengan  klorokuin  difosfat.
Berdasarkan  data  tersebut  menunjukkan bahwa  nilai  IC 50 fraksi n -heksana  daun C. tomentosa Valeton  ex  K.  Heyne  memiliki aktivitas  yang  sebanding  dengan  klorokuin difosfat  dalam  menghambat  polimerisasi hem.
Konsentrasi
Gambar 1.  Kurva baku hematin
Tabel 3. Rerata kadar β -hematin, a persen penghambatan, dan IC 50 dari bahan uji
Bahan Uji Konsentrasi (mg/mL) Rerata Kadar β -Hematin (µM) ± SD Rerata % Penghambatan ± SD IC 50 (mg/mL) 20 2,238 ± 0,11 98,268 ± 0,084 Fraksi n - heksana
10 3,190 ± 0,04
97,531 ± 0,032 0,196 ± 0,009 5 5,167 ± 0,08 96,001 ± 0,064 2,5 8,690 ± 0,16 93,274 ± 0,128 1,25 14,167 ± 0,22 89,036 ± 0,169 0,625 24,595 ± 0,46 80,966 ± 0,355 0,3125 64,190 ± 1,40 50,322 ± 1,087 20 2,310 ± 0,109 98,170 ± 0,086 Klorokuin 10 3,476 ± 0,149 97,246 ± 0,118
0,214 ± 0,012 5 5,667 ± 0,230 95,510 ± 0,182
2,5 9,619 ± 0,330 92,379 ± 0,261 1,25 15,738 ± 0,918 87,531 ± 0,728 0,625 27,024 ± 0,723 78,589 ± 0,572 0,3125 64,452 ± 1,940 48,934 ± 1,537

## IV. KESIMPULAN

## 1. Fraksi n -heksana  daun C.  tomentosa
Valeton  ex  K.  Heyne  mengandung senyawa flavonoid, steroid, terpenoid,
dan antrakuinon.
2. Persentase  pengambatan  polimerisasi hem  fraksi n -heksana  daun C. tomentosa Valeton  ex  K.  Heyne  pada konsentrasi 20; 10; 5; 2,5; 1,25; 0,625;
0,3125  mg/mL  rerata  secara  berturut- turut  yaitu  98,267;  97,530;  96,001;
93,274; 89,036; 80,965; 50,322%.
3. Fraksi n -heksana  daun C.  tomentosa
Valeton  ex  K.  Heyne  memiliki aktivitas  penghambatan  polimerisasi
hem  dengan  IC 50 sebesar  0,196  ± 0,009 mg/mL.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Penulis  mengucapkan  terima  kasih atas  segala  kerjasamanya  kepada  Lia Rosyida,  Siti  Humairah,  Silfia  Rizki Maulida.
Terima kasih kepada
Kemenristekdikti  melalui  hibah  PPT  atas dukungan pembiayaan.

## DAFTAR PUSTAKA
Ambarsari, M.A.
2013. Aktivitas
Antibakteri  Fraksi  n-Heksan  Ekstrak Etanol  Daging  Buah  Sirsak  (Annona mucirata  L)  terhadap  Pseudomonas
aeruginosa,  Staphylococcus  aureus, Sligella sonnei dan Serta Bioautografinya. Naskah  Publikasi Universitas Muhammadiyah Surakarta , Surakarta. Arnida  &  Sutomo.  2017.  In  Vitro
Antiplasmodial  Activity  of  Ethanol Extract  of  Manuran  ( Coptosapelta tomentosa Valeton  Ex  K.  Heyne)
Roots. RJPBCS . 8 : 43-48
Basilico,  N.,  E.  Pagani,  D.  Monti,  P.
Olliaro,  &  D.  Taramelli.  1998.  A
Microtitre- Based Method for Measuring  the  Haem  Polymerization Inhibitory Activity (HPIA) of Antimalarial  Drugs. Journal  of Antimicrobial Chemotherapy . 42 :  55–
60.
Gandjar, I. G. & Rohman, A. 2013. Kimia Farmasi  Analisis .  Pustaka  Pelajar,
Yogyakarta.
Gritter,  R,  J.,  J.  M.  Bobbits  &  A.  E.
Schwarting.  1987. Introduction  to
Chromatography (Penghantar Kromatografi) . Edisi ke-2,
diterjemahkan  oleh  K.  Padmawinata, Bandung : Penerbit ITB.
Harborne,  J.B.  2006. Metode  Fitokimia:
Penuntun  Cara Modern  Menganalisis Tumbuhan .  Edisi  ke-2.  Penerbit  ITB,
Bandung.
Hayati,  E.  K.,  A.  Jannah,  &  R.  Ningsih. 2012.  Identifikasi  Senyawa  dan Aktivitas Malaria In Vivo Ekstrak Etil
Asetat Tanman Anting-Anting ( Acalypha  indica L.) Molekul . 7 :20-
32.
Huy,  N.T.,  A.  Maeda,  D.T.  Uyen,  D.T.X. Trang,  M.  Sasai,  T.  Shiono,  T.  Oida, S.  Harada,  &  K.  Kamei.  2007.
Alcohols Induce β -hematin
Formation  Via  The  Dissociation  of Aggregated  Hem  and  Reduction  in Interfacial  Tension  of  the  Solution.
Acta Tropica . 101 : 130–138.
Ikalinus,  R.,  S.K.  Widyastuti,  &  N.L.E.
Setiasih.  2015.  Skrining  Fitokimia Ekstrak  Etanol  Kulit  Batang  Kelor
( Moringa oleifera ). Indonesia Medicus Veterinus . 4 (1): 71-79
Kristanti,  A.  V.,  N.  S.  Aminah,  M.
Tanjung,  &  B.  Kurniadi.  2008. Buku Ajar  Fitokimia .  Airlangga  University Press, Surabaya.
Kusumawati, E., A. Apriliana &
Selvitawati. 2017. Identifikasi Senyawa Metabolit Sekunder Dan Uji
Aktivitas  Ekstrak  Etanol  Herba
Meniran  ( Phyllanthus  Niruri L.)
Terhadap Candida Albicans
Menggunakan Metode Difusi Cakram.
Jurnal Ilmiah Manuntung . 3 (1): 1-6.
Marliana,  E.  2007.  Analisis  Senyawa Metabolit  Sekunder  dari  Batang Spstholobus  ferrugineus (Zoll  &
Moritzi) Benth yang berfungsi Sebagai Antioksidan. Jurnal
Penelitian MIPA Universitas Mulawarman, Kalimantan Timur. Ningsih, R.N.M. 2017. Identifikasi Kandungan  Senyawa  Kimia  dan Aktivitas  Pengambatan  Polimersasi Hem  Ekstrak  etanol  Daun  Manuran Asal  Kota  Baru  Kalimantan  Selatan .
Skripsi Program  Studi  Farmasi,
Universitas  Lambung  Mangkurat,
Banjarbaru.
Nurani, L.H., D. Utami, W. Widyaningsih,
I. Narwanti, E. Nurwening, & Junina. 2014.  Uji  Aktivitas  Penghambatan Polimerisasi Heme (1)N-(2- Nitrobenzil)-1,10- Fenantrolinium Iodida  secara In  Vitro . Pharmaciana.
4 : 171-176.
Purwanto.  2011.  Isolasi  dan  Identifikasi
Senyawa  Penghambat  Polimerisasi Hemdari  Fungi  Endofit  Tanaman Artemisia annua L . Tesis .  Universitas
Gadjah Mada, Yogyakarta.
Salenussa, J., J. Wijaya, C. N. Labetubun,
S. E.  Belseran.  2014.  Potensi  Ekstrak
Heksan  Daun  Kapur  ( Harmsiopanax
aculeatus, Harms)  Sebagai  Obat
Antimalaria. Prosiding  KIMIA  FKIP ,
Universitas Pattimura.
Sani,  R.N.,  F.C.  Nisa,  R.D.  Andriani  &
J.M. Maligan. 2014. Analisis
Rendemen  Dan  Skrining  Fitokimia
Ekstrak  Etanol  Mikroalga  Laut
Tetraselmis Chuii. Jurnal Pangan dan
Agroindustri . 2 (2): 121-126
Utami, W. S., Nuri, & Y. Armiyanti. 2012. Effect Tithonia Diversifolia ((Hemley)
A.  Gray )  Ethanol  Extract  As Antimalarial On Mice Strain Balb / C Before  And  After  Infected  By Plasmodium berghei. Jurnal  Medika Planta . 1 :56-66.
Wagner, H. & S. Bland. 1996. Plant Drug Analysis; A Thin Layer Chromatography  Atlas.  2nd  Edition . Springer. Berlin Heidelberg
Yuda,  P.E.S.K.,  E.  Cahyaningsih  &
N.L.P.Y. Winariyanthi. 2017.
Skrining  Fitokimia  dan  Analisis Kromatografi  Lapis  Tipis  Ekstrak Tanaman  Patikan  Kebo  ( Euphorbia Hirta L.). Medicamento. 3 (2) : 61-70.