## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online)
DOI 10.47065/jharma.v5i2.4669

## Perbandingan Aktivitas Antioksidan Ekstrak Biji Mangga Arumanis (Mangifera indica L.) Segar dan Kering dengan Metode DPPH (1,1 Diphenyl-2-picrylhidrazyl)
Ifmaily, Sandra Tri Juli Fendri, Mifta Husyalam, dan Annisa Rahmawati
Fakultas Farmasi, Universitas Perintis Indonesia, Padang, Indonesia Email: ifmaily.72baru@gmail.com*, sandra89tjf@gmail.com, miftahusyalam17@gmail.com, rahmawatianisa08031@gmail.com Email Penulis Korespondensi: ifmaily.72baru@gmail.com
(* : coressponding author)
Abstrak −Tanaman  mangga  arumanis  pada  riset  terdahulu,  salah  satunya  terbukti  memiliki  khasiat  sebagai  antioksidan,  karena mengandung metabolit sekunder flavonoid.  Berdasarkan riset tersebut, biji buah mangga arumanis pun mengandung flavonoid dan berpotensi  sebagai  antioksidan.  Biji  buah  mangga  arumanis  merupakan    bentuk  limbah  organik  yang  sering  dibuang  setelah  kita memakan buah mangga arumanis dan berpotensi sebagai bahan dasar untuk pembuatan produk farmasi antioksidan. Tujuan penelitian ini dibuat untuk mengetahui aktivitas antioksidan dan membandingkan kekuatan antioksidannya pada sampel ekstrak biji buah mangga arumanis segar dan kering dengan metode DPPH (1,1-difenil-2-pikrihidrazil). Hasil yang diperoleh dari panjang gelombang serapan maksimum DPPH adalah 518 nm, dengan absorban 0,647. Hasil aktivitas antioksidan pembanding asam galat diperoleh IC 50 = 2,8997 µg/mL, dan sampel ekstrak biji buah mangga arumanis segar dengan nilai IC 50 = 20,4806 µg/ml, dan biji buah mangga kering IC 50 = 21,1501 µg/mL. Berdasarkan hasil penelitian yang diperoleh, aktivitas antioksidan dari sampel ekstrak biji buah mangga arumanis segar dan kering tergolong sangat kuat (<50 µg/mL). Aktivitas antioksidan dari sampel ekstrak biji mangga arumanis segar lebih kuat daripada sampel kering, karena semakin tinggi nilai IC 50 maka semakin berkurang kekuatan antioksidannya.
Kata Kunci: Antioksidan; Biji Buah Segar; Biji Buah Kering; DPPH; Mangga Arumanis
Abstract- In previous research, the arumanis mango plant was proven to have antioxidant properties, because it contains secondary metabolites of flavonoids and tannins. Based on this research, arumanis mango seeds also contain flavonoids and have the potential to act as antioxidants. Arumanis mango seeds are a form of organic waste that is often thrown away after we eat arumanis mango fru it and have the potential to be used as a basic ingredient for making antioxidant products. The aim of this research was to determine the antioxidant  activity  and  compare  the  antioxidant  of  fresh  and  dried  arumanis  mango  seed  extract  samples  using  the  DPPH  (1,1 - diphenyl-2-picryhydrazyl)  method.  The  results obtained  from  the  maximum  absorption wavelength  of DPPH  are  518 nm,  with  an absorbance of 0.647. The results of comparative antioxidant activity for gallic acid obtained IC 50 = 2.8997 µg/mL, and a sample of fresh arumanis mango seed extract with an IC 50 value = 20.4806 µg/mL, and dried mango seed extract IC 50 = 21.1501 µg/mL. Based on the research results obtained, the antioxidant activity of fresh and dried arumanis mango seed extract samples was classified as very strong  (<50  µg/mL).  The  antioxidant  activity of  fresh extracted  seed  samples  was  higher  than  that of  dried  arumanis  mango  seed samples, because if IC 50 higher, its mean antioxidant activity is lower.
Keywords : Antioxidants; Fresh Fruit Seeds; Dried Fruit Seeds; DPPH; Arumanis Mango

## 1. PENDAHULUAN
Mangga  Arumanis  ( Mangifera  indica L)  termasuk  kelompok  tanaman  buah  utama  yang  memberi  kontribusi  sebagai sumber  vitamin,  mineral,  dan  obat-obatan  di  Indonesia.(Oktavianto  et  al.,  2015).  Produksi  mangga  di  Indonesia merupakan urutan ke-5 di dunia dengan jumlah 2,18 juta ton per tahun. Produksi mangga lima tahun terakhir mengalami peningkatan. (Fitranto et al., 2020).
Mangga  arumanis  mengandung  beberapa  metabolit  sekunder  seperti  favonoid,  steroid,  alkaloid  dan  tanin  yang dapat  digunakan  sebagai  bahan  baku  obat.  Flavonoid  merupakan  senyawa  golongan  fenol  yang  tersebar  di  alam  dan memiliki  sifat  sebagai  penangkal  radikal  bebas.  Radikal  bebas  dapat  merusak  komponen-komponen  sel  tubuh  seperti lipid, protein dan DNA, karena itu radikal bebas sangat berbahaya bagi tubuh manusia. (Taswin & Toyibah, 2020).
Senyawa yang dapat  menangkal radikal bebas dinamakan antioksidan. Antioksidan adalah senyawa yang dapat menghambat  dan  mencegah  terjadinya  proses  oksidasi  (Werdhasari,  2014).  Antioksidan  bekerja  dengan  cara menghentikan  reaksi  radikal  bebas  dari  metabolisme  di  dalam  tubuh  ataupun  dari  lingkungan,  sehingga  diharapkan dengan pemberian antioksidan tersebut dapat mencegah terjadinya kerusakan tubuh dan timbulnya penyakit degeneratif (Wahyu,  2021).  Pemilihan  antioksidan  alami  menjadi  perhatian  masyarakat  karena  telah  ditemukannya  efek  samping pada antioksidan sintetik yang bersifat karsinogenik jika digunakan dalam jangka waktu yang lama dan dalam jumlah yang  berlebihan.  Aktivitas  antioksidan  dapat  dideteksi  menggunakan  beberapa  metode,  salah  satunya  adalah  metode transfer elektron menggunakan radikal DPPH(1,1-difenil-2- pikrilhidrazil). Uji DPPH adalah suatu metode yang efektif dan cepat untuk memperkirakan aktivitas antioksidan. Prinsip metode ini adalah mengukur daya peredaman ekstrak suatu bahan terhadap radikal bebas DPPH.(Wahyu, 2021).
Selama ini pemanfaatan bagian tanaman mangga hanya banyak digunakan pada daging buahnya saja, sedangkan bijinya belum banyak digunakan sehingga menjadi limbah rumah tangga. Kandungan biji mangga arumanis yang tumbuh di  Indonesia  mestinya  dapat  dimanfaatkan  dan  dikembangkan  sebagai  bahan  obat.  Biji  mangga  arumanis  juga mengandung  senyawa  metabolit  sekunder  seperti  :  flavanoid,  tanin,  dan  kaya  akan  antioksidan  yang  bermanfaat  bagi kesehatan.(Sari & Sujarwati, 2023).  Hasil penelitian menunjukkan bahwa fraksi dietil eter ekstrak etanol buah mangga

## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online)
DOI 10.47065/jharma.v5i2.4669
arumanis memiliki  aktivitas  antioksidan  dengan  nilai  IC 50 sebesar  75,22  ppm  dan  1,18  ppm  untuk Vitamin  C.  Fraksi dietileter ekstrak etanol buah mangga Arumanis memiliki potensi lemah sebagai antioksidan jika dibandingkan dengan Vitamin C.(Lestari et al., 2021).
Berdasarkan  uraian  diatas,  maka  peneliti  tertarik  untuk  meneliti  aktivitas  antioksidan  pada  sampel  biji  buah mangga  arumanis  segar  maupun  yang  telah  dikeringkan,  menggunakan  metode  DPPH,  karena  metode  DPPH  sangat efektif  digunakan  untuk  uji  aktivitas  antioksidan.  Penelitian  ini  untuk  mengetahui  aktivitas  antioksidan  dan membandingkannya dari ekstrak biji buah mangga arumanis dalam bentuk sampel segar dan kering ( Mangifera indica L) dengan metode DPPH.

## 2. METODE PENELITIAN

## 2.1 Alat dan Bahan

## Alat
Peralatan yang digunakan yaitu blender (SHARP®), seperangkat alat rotary evaporator (IKA®)) , spektrofotometer UV- Vis  (GENESYS®),  botol  maserasi  atau  bejana  berwarna  gelap,  timbangan  analit  (  BOECO®),  gelas ukur(PYREX®),furnace (SH SCIENTIFIC), krus porselen, tang krus dan pipet takar (PYREX®).

## Bahan
Bahan-bahan  yang  digunakan  adalah  biji  dari  buah  mangga  arumanis  yang  segar  dan  yang  dikeringkan  lebih  dahulu, bahan-bahan kimia yang digunakan etanol 96%(Sari Kimia®), alkohol 70 %(Sari Kimia®), metanol p.a (Merck®)), Asam Galat (Sigma®)), DPPH (2,2-difenil-1-pikrilhidrazil) ( Sigma®)).

## 2.2. Prosedur Penelitian

## 2.2.1. Pengambilan sampel
Sampel yang digunakan adalah biji buah mangga arumanis yang diperoleh dari buah mangga arumanis yang diambil di daerah Lubuk Alung Kota Padang Pariaman Sumatera Barat. Sampel yang akan digunakan adalah sampel biji segar bagian endocarpnya sebanyak 2 kg yang akan diuji dan sampel biji buah mangga arumanis yang dikeringkan lebih dulu sebanyak 2 kg yang akan diuji.

## 2.2.2. Identifikasi Sampel
Identifikasi  tanaman dan buah dari  mangga arumanis dilakukan di  Herbarium ANDA, Jurusan Biologi, Fakultas Ilmu Pengetahuan Alam (FMIPA), Universitas Andalas Padang, kemudian diambil bagian endocarp bijinya.

## 2.2.3. Persiapan Sampel Uji
Biji  buah mangga dibersihkan , lalu dicuci  bersih dengan air mengalir, setelah itu ditiriskan agar kadar air berkurang, selanjutnya  biji  buah  mangga  bagian  endocarpnya,  diambil  kemudian  dirajang  lebih  kecil  untuk  mendapatkan  ukuran yang lebih kecil untuk mempermudah saat proses pengeringan lalu selanjutnya sampel dikeringkan ± 5 hari tanpa terkena cahaya matahari secara lansung. setelah itu dihaluskan untuk mendapatkan serbuk simplisia, serbuk direndam. Sedangkan untuk  biji  segar  dibersihkan  ,  lalu  dicuci  bersih  dengan  air  mengalir,  setelah  itu  ditiriskan  agar  kadar  air  berkurang, selanjutnya  biji  buah  mangga  diambil  bagian  endocarpnya  dirajang  lebih  kecil  untuk  mendapatkan  ukuran  yang  lebih kecil untuk mempermudah proses perendaman

## 2.2.4. Pembuatan Ekstrak Etanol dengan Maserasi
Sampel yang digunakan adalah biji  buah mangga arumanis ( Mangifera indica L) bagian endocarpnya segar dan yang telah  dikeringkan.  Biji  mangga  arumanis  yang  diambil  dibersihkan  dari  pengotor  dan  ditimbang  masing-masingnya sebanyak 2 kg, untuk sampel biji mangga arumanis yang kering lalu dikeringkan di udara terbuka yang terlindungi dari cahaya matahari  langsung. Setelah kering biji mangga dirajang dan ditimbang, kemudian diblender. Kemudian serbuk sampel dimasukan dalam botol maserasi dan ditambahkan etanol 70% sampai terendam. Biarkan di tempat gelap selama 5 hari sambil sesekali diaduk. Saring hasil maserasi dengan menggunakan kertas saring. Ulangi maserasi hingga larutan maserat  sudah  tidak  berwarna  pekat  lagi,  gabungkan  hasil  maserasi  yang  diperoleh,  uapkan  dengan  rotary  evaporator hingga diperoleh eksktrak kental.
Untuk sampel biji mangga arumanis yang segar, setelah dibersihkan dari pengotor dan ditimbang sebanyak 2 kg, kemudian dirajang kecil-kecil dimasukkan ke dalam botol coklat untuk direndam dengan etanol 96% sampai terendam. Biarkan di tempat gelap selama 5 hari sambil sesekali diaduk. Saring hasil maserasi dengan menggunakan kertas saring. Ulangi  maserasi  hingga  larutan  maserat  sudah  tidak  berwarna  pekat  lagi,  gabungkan  hasil  maserasi  yang  diperoleh, uapkan dengan rotary evaporator hingga diperoleh eksktrak kental.

## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online)
DOI 10.47065/jharma.v5i2.4669

## 2.2.5. Uji Karakteristik Ekstrak

## 2.2.5.1. Pemeriksaan Organoleptis
Pemeriksaan organoleptis dilakukan dengan cara pengamatan melalui panca indera meliputi bentuk, warna, rasa dan bau dari ekstrak.
2.2.5.2. Penentuan Rendemen (Kemenkes RI, 2017)
Ditimbang  masing-masing  simplisia  segar  dan  kering  dari  biji  buah  mangga  arumanis,  kemudian  diesktraksi  sampai diperoleh ekstrak kental, dan ekstrak yang diperoleh ditimbang kembali beratnya, lalu hitung persentase rendemen ekstrak dengan persamaan :
% Rendemen  = Berat ekstrak yang diperoleh
Berat sampel segar (atau kering) × 100 % (1)

## 2.2.5.3. Pemeriksaan Susut Pengeringan (Kemenkes RI, 2017)
Keringkan krus porselen dan tutupnya di dalam oven pada suhu 105°C selama 30 menit, kemudian keluarkan dari oven, dibiarkan  dingin,  lalu  ditimbang  beratnya.  Masukkan  ekstrak  ke  dalam  krus  tersebut  hingga  beratnya  1-2  gram  diluar berat  krus  dengan  penutup  yang  telah  diketahui  sebelumnya.  Secara  perlahan  krus  digoyang  agar  ekstrak  merata  dan dimasukkan kembali ke dalam oven, buka tutupnya dan biarkan tutup tetap berada di dalam oven. Krus yang telah berisi ekstrak dipanaskan dalam oven dengan suhu 105°C selama 1 jam. Setelah itu krus dikeluarkan dan didinginkan dalam desikator, lalu ditimbang. Lakukan pengulangan seperti cara di atas hingga diperoleh berat  yang konstan. Perhitungan persentase susut pengeringan dapat dilakukan dengan persamaan :
% Susut Pengeringan  = (B−A)−(C−A) (B−A) ×  100%
(2) Keterangan : A = Berat krus kosong
B = Berat krus & ekstrak sebelum di oven
C = Berat krus &  ekstrak setelah di oven
2.2.5.4. Penentuan Kadar Abu (Kemenkes RI, 2017)
Abu ekstrak ditimbang sebanyak 2 gram, kemudian dimasukkan ke dalam krus porselen yang telah dipijar dan ditara, kemudian ekstrak diratakan. Pijarkan perlahan-lahan hingga membentuk arang. Krus dimasukkan ke dalam furnes pada suhu 600 0 C selama 8 jam, kemudian didinginkan dalam desikator dan ditimbang berat abu, kadar abu ditentukan dalam persen dari berat sampel yang digunakan :
% Kadar Abu  = (C−A) (B−A) × 100%
(3)
Keterangan : A = Berat cawan kosong setelah dipanaskan B = Berat cawan & ekstrak sebelum dipanaskan C = Berat cawan & ekstrak setelah dipanaskan

## 2.2.5.5. Identifikasi Metabolit Sekunder Ekstrak biji buah Mangga Arumanis
Ekstrak  biji  buah  mangga  ditimbang  masing-masing  sebanyak  0,5  gram,  dilanjutkan  dengan  penambahan  campuran kloroform dengan aquadest (1 : 1) sebanyak 10 ml masing-masing dikocok dalam tabung reaksi biarkan sejenak hingga terbentuk dua lapisan :lapisan air untuk pemeriksaan : flavonoid, fenolat, dan saponin s edangkan lapisan kloroform untuk pemeriksaan : terpenoid, steroid, dan alkaloid.(Kemenkes RI, 2017)

## a. Uji Fenolik
Lapisan air diambil 1-2 tetes dan diletakkan pada plat tetes atau tabung reaksi, lalu tambahkan 1 - 2 tetes pereaksi FeCl 3 5%, terbentuknya warna biru menunjukkan adanya senyawa fenolik.

## b. Uji Flavonoid
Lapisan air diambil 1-2 tetes dan diletakkan pada plat tetes atau tabung reaksi, lalu ditambahkan logam Mg dan 1-2 tetes HCl pekat. Timbulnya warna orange kemerahan menunjukkan adanya senyawa flavonoid.(Thahira et al., 2021)

## c. Uji Saponin
Lapisan air diambil 1-2 tetes dan diletakkan pada plat tetes atau tabung reaksi, lalu dikocok kuat dalam tabung reaksi hingga terbentuk busa yang tidak hilang selama ±15 menit, ini menunjukkan adanya saponin.

## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online)
DOI 10.47065/jharma.v5i2.4669

## d. Uji Terpenoid dan Steroid
Lapisan  kloroform  diambil  sebanyak  1-2  tetes  disaring  dengan  norit  aktif.  Hasil  saringan  diteteskan  pada  plat  tetes. Biarkan  kering  lalu  tambahkan  asam  asetat  anhidrat  dengan  H2SO4  2N,  warna  merah  menunjukkan  adanya  senyawa terpenoid dan warna hijau menunjukkan adanya senyawa steroid.

## e. Uji Alkaloid
Lapisan kloroform diambil 1 ml lalu ditambahkan 1 ml kloroform amoniak 0,05 N dan 1 ml asam sulfat 2 N, kemudian kocok  perlahan  dan  biarkan  memisah.  Lapisan  asam  dipipet  dan  dipindahkan  ke  dalam  tabung  reaksi  lain  kemudian tambahkan beberapa tetes pereaksi mayer. Reaksi positif ditandai dengan adanya kabut putih hingga gumpalan putih.

## 2.2.5.6. Pengujian Aktivitas Antioksidan Ekstrak dari biji buah mangga
Pengujian aktivitas antioksidan dilakukan dengan mengunakan metode DPPH dan absorbannya diukur dengan Spektrofotometer UV-Visibel.

## 2.2.5.7. Pembuatan Larutan DPPH 35 µg/mL
Timbang10 mg DPPH (2,2-difenil-1-pikrilhidrazil) dimasukkan ke dalam labu ukur 100 mL, lalu ditambahkan metanol sampai tanda batas. Kemudian pipet 35 mL larutan DPPH masukkan dalam labu ukur 100 mL, lalu ditambahkan metanol sampai tanda batas sehingga diperoleh larutan konsentrasi 35 µg/mL.
2.2.5.8. Penetapan Panjang Gelombang (λ) Serapan Maksimum DPPH 35 µg/mL
Dipipet sebanyak 4 mL larutan DPPH 35 µg/mL yang baru dibuat, masukkan ke dalam vial gelap dan tambahkan dengan 2 mL campuran metanol dan aquadest (1:1), tutup vial lalu dibiarkan selama 30 menit ditempat yang gelap, selanjutnya diukur serapannya pada panjang gelombang 518 nm menggunakan spektrofotometri UV-Visibel.

## 2.2.5.9. Penyiapan Larutan Induk Asam Galat 500 µg/mL
Sebanyak  12,5  mg  asam  galat  dimasukkan  kedalam  labu  ukur  25  mL  dilarutkan  dengan  0,5  mL  metanol  kemudian ditambahkan dengan aquadest sampai tanda batas sehingga diperoleh konsentrasi larutan 500 µg/mL

## 2.2.6. Penetapan Aktivitas Antioksidan Pembanding Asam Galat.
Dibuat larutan pembanding asam galat dengan dipipet sebanyak 10 mL larutan induk asam galat (500 µg/mL). kemudian dilarutkan dalam campuran metanol dan aquadest (1:1) dalam labu ukur 100 mL sampai tanda batas, sehingga diperoleh larutan  asam  galat  dengan  konsentrasi  50  µg/mL.  Dari  larutan  ini  masing-masing  dipipet  (0,2;0,4;0,6;0,8,1)  mL  lalu masukkan  ke  dalam  labu  ukur  10  mL,  tambahkan  campuran metanol  dan  aquadest  (1:1)  sampai  tanda  batas  sehingga diperoleh konsentrasi 1 µg/mL, 2 µg/mL,3 µg/mL,4 µg/mL, dan 5 µg/mL. Dipipet masing-masing larutan sebanyak 2 mL lalu masukkan ke dalam vial, tambahkan 4 mL larutan DPPH sebanyak 35µg/mL. Diamkan selama 30 menit ditempat gelap.  Serapan  larutan  diukur  dengan  menggunakan  alat  Spektrofotometer  UV-Vis  pada  panjang  gelombang  serapan maksimum yaitu 518 nm.

## 2.2.7.Pembuatan Larutan Sampel dan Penetapan Aktivitas Antioksidan Sampel dari biji buah Mangga Arumanis
Ditimbang ekstrak etanol dari biji buah Mangga Arumanis sebanyak 25 mg dilarutkan dengan 0,5 mL metanol, kemudian ditambahkan metanol dalam labu ukur 25 mL sampai tanda batas, sehingga diperoleh larutan induk ekstrak 1000 µg/mL. Dari larutan sampel dipipet (0,5;1 ;1,5; 2 ;2,5) mL. Kemudian ditambahkan metanol : aquadest (1:1) dalam labu ukur 10 mL sampai tanda batas. Sehingga diperoleh sampel dengan konsentrasi 5µg/mL, 10 µg/mL, 15 µg/mL, 20 µg/mL, dan 25µg/mL. Pipet masing-masing konsentrasi sebanyak 2 mL larutan sampel dengan pipet ukur dan dimasukkan ke dalam vial,  kemudiantambahkan  4  mL  DPPH  35µg/mL.  Campuran  dihomogenkan  dan  dibiarkan  selama  30  menit  ditempat gelap. Serapan diukur pada panjang gelombang.

## 2.3. Analisis Data
Besarnya  persentase  penghambatan  serapan  radikal  DPPH  dihitung  sebagai  presentase  berkurangnya  warna  DPPH dengan menggunakan rumus perhitungan persentase inhibisi serapan DPPH. Data rata-rata kemudian dianalisis dengan menggunakan rumus regresi linier sederhana.(Asgarirad et al., 2010).

## 2.3.1.Perhitungan % inhibisi
Persentase Inhibisi adalah selisih antara absorban kontrol dengan absorban sampel ditambah larutan DPPH 35 µg/mL dibagi absorban kontrol kemudian dikali dengan 100%
Data yang diperoleh dari hasil pengukuran absorbansi terhadap ekstrak etanol dari biji buah Mangga Arumanis dan sebagai pembanding digunakan asam galat dan pengukuran absorban menggunakan spektrofotometri UV-Vis pada panjang gelombang serapan maksimum.

## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online)
DOI 10.47065/jharma.v5i2.4669

## 2.3.2. Penentuan Nilai IC50
Penentuan  IC 50 merupakan  besarnya  konsentrasi  larutan  uji  untuk  meredam  50%  aktivitas  radikal  bebas.  Untuk mendapatkan nilai IC 50 aktivitas antioksidan. Maka terlebih dahulu dibuat kurva standar aktivitas yang dibentuk dari data nilai persentase inhibisi dari minimal 5 deret konsentrasti ekstrak sebagai sumbu y dan konsentrasi ekstrak antioksidan sebagai  sumbu  X.  Dari  hasil  kurva  standar  diperoleh  persamaan  regresi  linear.  Nilai  IC50  dihitung  dengan  cara memasukkan  nilai  50%  kedalam  persamaan  kurva  standar  sebagai  sumbu  yang  kemudian  dihitung  nilai  x  sebagai konsentrasi IC 50 dalam persamaan y = a + bx Sehingga pada akhirnya diperoleh nilai konsentrasi hambat 50% (x = IC 50 ). Semakin kecil nilai IC 50 menunjukkan semakin  tinggi  aktivitas  antioksidannya.(Ayyun  et  al.,  2023).  Metode  penelitian  menjelaskan  pendekatan,  rancangan kegiatan, ruang lingkup atau objek, bahan dan alat utama, tempat, teknik pengumpulan data, definisi operasional variabel penelitian, dan teknik analisis.

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN

## 3.1. Hasil
Setelah dilakukan penelitian mengenai  aktivititas antioksidan terhadap ekstrak biji buah mangga arumanis ( Mangifera indica L.) segar dan kering dengan metode DPPH maka didapatkan hasil sebagai berikut : Hasil  Identifikasi  tanaman  menyatakan  Mangga  Arummanis  yang  termasuk  family Anacardiaceae dibuktikan dengan nomor identifikasi 033A/K-ID/ANDA/I/2022. Sebanyak 2kg biji buah mangga arumanis ( Mangifera indica L.) segar diperoleh simplisia kering sebanyak 700 gram yang telah dirajang yang selanjutnya menghasilkan ekstrak kental sebanyak 60,135 gram dengan rendemennya dari berat sampel kering adalah 8,59 %. Sebanyak 2 kg biji buah mangga diperoleh  simplisia  segar  900  gram  setelah  dirajang,  selanjutnya  menghasilkan  ekstrak  kental  sebanyak  85,675  gram dengan rendemen dari berat sampel segar setelah dirajang adalah 9,52%.
Hasil pemeriksaan organoleptis ektrak menunjukkan bahwa ekstrak dari biji buah mangga arumanis ( Mangifera indica L.) kering dan segar berupa cairan kental, berwarna coklat, berbau khas dan rasa pahit.  Hasil pemeriksaan susut pengeringan dari ekstrak sampel kering dan sampel segar yaitu : 4,3046 % dan 5,8475%Hasil pemeriksaan kadar abu dari ekstrak sampel kering  dan segar yaitu :  0,37 % dan 0, 53%. Hasil pemeriksaan skrining fitokimia menunjukan bahwa kedua ekstrak biji  buah mangga arumanis ( Mangifera indica L.) mengandung saponin, fenolik, flavonoid, steroid  dan terpenoid.
Hasil pemeriksaan panjang gelombang serapan maksimum DPPH yang diukur pada rentang panjang gelombang 400-800 nm adalah 518,00 nm dengan absorban 0,647. Nilai IC 50 yang diperoleh untuk asam galat adalah : 2,8097 ppm, membuktikan aktivitas antioksidannya sangat kuat. Nilai IC 50 untuk ekstrak biji buah mangga arumanis segar + DPPH adalah  :  20,4806  ppm,  membuktikan  aktivitas  antioksidannya  sangat  kuat.  Nilai IC 50 untuk  ekstrak  biji  buah  mangga arumanis kering + DPPH adalah : 21,1501 ppm, membuktikan aktivitas antioksidannya sangat kuat.

## 3.2. Pembahasan
Pada penelitian ini dilakukan penggujian aktivitas antioksidan dari ekstrak Biji buah Mangga Arumanis ( Mangifera incica L )  dengan  menggunakan  metode  DPPH.  Dimana  sampel  ini  diambil  dari  daerah  Lubuk  Alung,  Kecamatan  Sangir, Kabupaten  Padang  Pariaman,  Sumatera  Barat.  Adapun  sampel  yang  digunakan  dari  Biji  buah  Mangga  Arumanis  ini adalah bagian dalam biji ( Endocarp ).
Berdasarkan  hasil  identifikasi  yang  telah  dilakukan  diketahui  spesies  dari  sampel  yang  digunakan  adalah ( Mangifera  Indica L)  Sampel  diidentifikasi  di  Herbarium  ANDA,  Jurusan  Biologi,  Fakultas  Ilmu  Pengetahuan  Alam (FMIPA), Universitas Andalas Padang. Identifikasi ini bertujuan untuk memastikan spesies dari tanaman yang digunakan dalam penelitian merupakan Mangga Arumanis, yang dibuktikan dengan nomor identifikasi 033A/K-ID/ANDA/I/2022, termasuk kedalam family Anacardiaceae.
Sampel  biji  mangga  arumanis  ini  merupakan  limbah  organik  setelah  orang  memakan  buah  mangga  arumanis, dalam hal ini kita ambil bagian endocarp dari biji mangga arumanis. Kemudian diolah dengan 2 cara, cara pertama setelah diambil  bagian  endocarp  biji  kemudian,  dikeringanginkan  selama  2  hari  di  suhu  ruangan  setelah  itu  baru  dimaserasi, sedangkan cara kedua biji mangga arumanis, tidak dikeringkan, langsung direndam pada pelarut di wadah botol gelap.

## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online)
DOI 10.47065/jharma.v5i2.4669
Gambar 1 .Biji Buah Mangga Arumanis Gambar 2 . Sampel Kering Gambar 3. Sampel Segar
Penelitian ini dilakukan dengan cara mengekstraksi sampel menggunakan metode maserasi selama 24 jam dengan menggunakan etanol sebagai pelarutnya. Proses ekstraksi dilakukan dengan metode maserasi. Metode ini dipilih karena prosesnya sederhana, efektif untuk menarik zat zat yang diinginkan dan tidak mengunakan proses pemanasan, sehingga dapat menghindari terjadinya kerusakan zat aktif pada sampel. Pelarut yang digunakan untuk sampel adalah etanol karena harganya  murah,  relatif  tidak  toksik,  dan  bersifat  universal  yang  mampu  menarik  senyawa  polar  maupun  non  polar sehingga mempermudah menarik senyawa antioksidan pada simplisia. Saat proses memaserasi kita sesekali melakukan pengadukan supaya terjadi keseimbangan konsentrasi antara pelarut dan simplisia. Proses ekstraksi dilakukan selama 3 x 24 jam, ekstraksi pada sampel kering dilakukan dengan mengunakan etanol 70 % , dimana etanol 70% disini berfungsi untuk membuka pori-pori sampel kerena sampel dalam simplisia kering
Untuk  ekstraksi  yang  selanjutnya  yaitu  mengunakan  etanol  96%  bertujuan  untuk  menarik  senyawa  metabolik sekunder yang ada pada sampel segar. Hasil maserasi disebut dengan maserat, setelah masing-masing maserat terkumpul, selanjutnya hasil maserat diuapkan dengan rotary evaporator hingga didapatkan ekstrak kental sampel Biji buah Mangga Arumanis dari sampel kering dan sampel segar.
Penentuan  rendemen  ekstrak  dari  Biji  buah  Mangga  Arumanis  bertujuan  untuk  untuk  melihat  bagaimana perbandingan ekstrak kental dari sampel kering dan sampel kental (Kemenkes RI, 2017). Didapatkan persentase rendemen esktrak Biji buah Mangga Arumanis dengan rendemen 8,59% dan rendemen dari sampel segar 9,52%.
Gambar 4. Ekstrak kental dari sampel kering Gambar 5. Ekstrak kental dari sampel segar
Jika jumlah rendemen semakin banyak maka jumlah senyawa aktif yang terkandung dalam sampel juga semakin banyak.  Sebagaimana  yang  telah  dilaporkan  (Wahyu,  2021)  bahwa  tingginya  senyawa  aktif  yang  terdapat  pada  suatu sampel ditunjukkan dengan persentase jumlah rendemen yang dihasilkan. Kemudian dilakukan pemeriksaan organoleptis diperoleh data bahwa berupa cairan kental berwarna coklat, berbau khas dan rasa pahit.
Berat  susut  pengeringan  yang  diperoleh  dari  ekstrak  biji  buah  mangga  arumanis  ( Mangifera  indica L . )  sampel kering yaitu 4,3046% dan untuk sampel segar 5,8475%, menurut dari literature susut pengeringan yang diperoleh masih termasuk baik, karena rentang susut pengeringan yang baik menurut Farmakope Herbal Indonesia (Kemenkes RI, 2017) adalah  tidak  lebih  dari  10%.  Tujuan  dilakukan  susut  pengeringan  adalah  untuk  mengetahui  persentasi  senyawa  yang hilang selama proses pemanasan, tidak hanya air tapi juga senyawa menguap lainnya (Kemenkes RI, 2017).
Kadar abu yang diperoleh dari ekstrak biji mangga arumanis sampel kering yaitu 0,37 % dan dari sampel segar 0,53% dari hasil yang didapat menurut (Kemenkes RI, 2017) termasuk kadar abu yang baik, diimana rentang kadar abu yang baik adalah < 2,9%. Tujuan dilakukan kadar abu adalah untuk mengetahui dan memberikan gambaran kandungan mineral  yang  berasal  dari  proses  awal  sampai  akhir  terbentuknya  ekstrak,  dimana  senyawa  organik  dan  turunannya terdekstruksi  dan  menguap  sehingga  tinggal  unsur  mineral  dan  senyawa  anorganik  (Kemenkes  RI,  2017).  Pada pemeriksaan  metabolit  sekunder  (fitokimia)  ekstrak  biji  mangga  mengandung  fenolik,  saponin,  flavonoid,  tannin  dan steroid.
Hasil panjang gelombang dari senyawa DPPH dengan menggunakan spektrofotometer dengan panjang gelombang berkisar 400 - 800 nm adalah sebagai berikut:

## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online)
DOI 10.47065/jharma.v5i2.4669
Gambar 6 . Hasil Spektrum Panjang Gelombang
Berikut tabel dari senayawa DPPH dengan panjang gelombang maksimum 518 nm dengan absorban 0,647
Tabel 1 . Hasil Spektrum Panjang Gelombang Max DPPH Panjang Gelombang Serapan Maksimum Absorban 518  nm 0,647
Berikut ini adalah hasil penentuan IC 50 dari Larutan Pembanding Asam Galat adalah sebagai berikut;
Tabel 2. Data Hasil Penentuan IC 50 Larutan Pembanding Asam Galat Konsentrasi Asam Galat ( µg / ml ) Absorban DPPH  Absorban Asam Galat + DPPH % Inhibisi IC 50 ( µg / ml ) 1 0,647 0,449 30,60 2,8097 2 0,647 0,380 41,26 3 0,647 0,305 52,85 4 0,647 0,220 65,99 5 0,647 0,154 76,19
Berikut grafik yang menggambarkan  kurva kalibrasi dari senyawa asam galat dengan 5 konsentrasi :
Gambar 7. Kurva Kalibrasi Asam Galat
Berikut ini adalah hasil dari larutan asam galat sebagai larutan standar yang baku, dengan 5 macam konsentrasi:
y = 11,593x + 17,427 R² = 0,998 0 20 40 60 80 0 2 4 6 … KONSENTRASI Asam Galat

## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online)
DOI 10.47065/jharma.v5i2.4669
Gambar 8 . Dokumentasi Kerja Asam Galat + DPPH
Untuk mendapatkan nilai IC 50 dimasukkan ke dalam persamaan regresi linear dengan menganggap nilai Y sebagai 50 %
𝑎 = 17,427; 𝑏 = 11,593; 𝑟 = 0,999 𝑦 = 𝑎 + 𝑏𝑥 𝑌 = 17,427 + 11,593 𝑋 50 = 17,427 + 11,593 𝑋 𝑋 = 2,8097 𝜇𝑔/𝑚𝑙
Untuk pengujian aktivitas antioksidan terhadap sampel mengunakan metode DPPH ( 1,1 Dipheny-2-picryhydrazil ) dimana  DPPH  berfungsi  sebagai  radikal  bebas  metode  ini  dipakai dikarenakan  metode  ini  sederhana,  tepat,  serta mengunakan sampel yang sedikit.(Pourmorad et al., 2006)Selain itu metode ini terbukti akurat dan praktis DPPH sebagai larutan  kontrol  menggunakan  pelarut  metanol  p.a  dan  aquadest  dengan  tujuan  untuk  mendapatkan  serapan  daerah maksimum  DPPH  yang  diukur  pada  rentang  400-800  nm  dengan  menggunakan  spektris  (Sari  &  Sujarwati,  2023). Berdasarkan  penelitian  yang  didapatkan  panjang  gelombang  maksiumum  dari  DPPH  maksimum  gelombang  serapan adalah 518 nm pada konsentrasi 35µg/mL dengan absorban 0,647. Pengujian ini dilakukan dengan menggunakan metode DPPH  untuk  menentukan  seberapa  besar  aktivitas  suatu  sampel  untuk  menghambat  DPPH  radikal  dengan  cara mendonorkan  atom  hidrogen.  Sampel  yang  memiliki  aktivitasantioksidan  akan  mereduksi  DPPH  menjadi  DPPH-H (Wahyu, 2021).
Pengurangan DPPH yang terjadi ditandai dengan adanya perubahan warna dari ungu violet menjadi kuning karena terjadi donor atom hidrogen dari antioksidan ke DPPH. Semakin besar konsentrasi senyawa antioksidan dalam sampel maka  semakin  besar  aktifitas  penangkapan  radikal  DPPH  oleh  sampel  tersebut(Bahriul,  2014).  Besarnya  aktivitas antioksidan ditandai dengan nilai IC 50 yaitu larutan sampel yang dibutuhkan untuk menghambat 50% radikal bebas DPPH. Terlihat pada tabel 4 bahwa persentase inhibisi dapat dihitung melalui hasil absorban DPPH yang dihitung melalui alat spetktrofotometer, dan hasil absorban ekstrak dari sampel segar biji buah mangga arumanis.(Yakubu, 2019)
Tabel 4. Data Hasil Penentuan IC 50 Larutan DPPH dan Ekstrak Biji Buah Mangga Arumanis segar
Konsentrasi Asam Galat ( µg / ml ) Absorban DPPH Absorban Sampel Segar + DPPH % Inhibisi IC 50 ( µg / ml ) 5 0,647 0,541 16,38 20,4806 10 0,647 0,462 28,59 15 0,647 0,400 38,17 20 0,647 0,314 51,46 25 0,647 0,255 60,58
Tabel 4 dituangkan menjadi grafik garis dengan 5 konsentrasi untuk melihat tren dari hasil persentase inhibisi dari sampel.

## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online)
DOI 10.47065/jharma.v5i2.4669
Gambar  9 . Kurva Ekstrak Biji Mangga segar
Berikut di bawah ini adalah gambar sampel yang diambil absorban dan dihitung persentase inhibisinya dari 5 konsentrasi yang digunakan dalam satuan ppm :
Gambar 10 .  Dokumentasi Sampel segar + DPPH
Untuk mendapatkan nilai IC 50 dimasukkan ke dalam persamaan regresi linear dengan menganggap nilai Y sebagai 50 % 𝑎 = 4,41 ; 𝑏 = 2,226 ; 𝑟 = 0,997 𝑦 = 𝑎 + 𝑏 𝑦 = 4,41 + 2,226 𝑥 50 = 4,41 + 2,226 𝑥 𝑥 = 20,4806
Setelah nilai IC 50 diperoleh maka kita dapat menghiting Kesetaraan Aktivitas Antioksidan dengan Pembanding Asam Galat
Tabel 9. Kesetaraan Aktivitas Antioksidan Sampel segar dengan Pembanding Asam Galat Sampel IC 50 (µg/mL) Kesetaraan / mg asam galat Ekstrak Biji buah Mangga Arumanis segar 20,48 7,2890 Asam Galat 2,8097 1 mg
Perhitungan kesetaraan antioksidan = 1 mg asam galat IC50 Asam Galat x IC 50 Sampel
Perhitungan kesetaraan antioksidan Ekstrak Biji buah Mangga Arumanis segar
= 1 2,8097 x 20,48  = 7,2890 mg
y = 2,226x + 4,41 R² = 0,9977 0 50 100 0 5 10 15 20 25 30 % IN H IB ISI KONSENTRASI … Ekstrak Biji Mangga segar +DPPH

## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online)
DOI 10.47065/jharma.v5i2.4669
Tabel 6 . Data Hasil Penentuan IC 50 Larutan DPPH Ekstrak Biji Mangga Arumanis kering
Konsentrasi Asam Galat ( µg / ml ) Absorban DPPH Absorban Sampel Kering + DPPH % Inhibisi IC 50 ( µg / ml ) 1 0,647 0,537 17,001 21,1501 2 0,647 0,449 30,603 3 0,647 0,389 39,876 4 0,647 0,313 51,622 5 0,647 0,255 60,587
Gambar 11 . Kurva Sampel kering + DPPH
Gambar 12 . Dokunentasi Kerja Sampel kering + DPPH
Untuk mendapatkan nilai IC 50 dimasukkan ke dalam persamaan regresi linear dengan menganggap nilai Y sebagai 50 % (Rahmawati et al., 2016)
𝑎 = 4,21 ; 𝑏 = 2,165 ; 𝑟 = 0,9777 𝑦 = 𝑎 + 𝑏𝑥 𝑦 = 4,21 + 2,165 𝑥 50 = 4,21 + 2,165 𝑥 𝑥 = 21,1501 𝜇𝑔/𝑚𝑙
Kesetaraan Aktivitas Antioksidan dengan Pembanding Asam Galat
Tabel 9. Kesetaraan Aktivitas Antioksidan dengan Pembanding Asam Galat
Sampel IC 50 (µg/mL) Kesetaraan / mg asam galat Ekstrak Biji buah Mangga Arumanis kering 21,1501 7,5275 Asam Galat 2,8097 1 mg y = 2.165x + 4.21
R² = 0.9777 0 20 40 60 80 0 5 10 15 20 25 30 % IN H IB ISI KONSENTRASI … Ekstrak Biji Mangga kering +DPPH

## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online)
DOI 10.47065/jharma.v5i2.4669
Perhitungan kesetaraan antioksidan = 1 mg asam galat IC50 Asam Galat x IC 50 Sampel
Perhitungan kesetaraan antioksidan Ekstrak Biji buah Mangga Arumanis kering adalah
= 1 2,8097 x 21,1501  = 7,5275 mg

## 4. KESIMPULAN
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan, dapat disimpulkan bahwa ekstrak etanol biji buah Mangga Arumanis baik dalam  bentuk  sampel  segar  maupun  kering,  memiliki  aktivitas  antioksidan  yang  tergolong  sangat  kuat  karena  <  50 µg/mL (Mulangsri et al., 2017) , dimana ekstrak bji buah mangga arumanis segar mempunyai nilai IC 50 yaitu 20,4806 µg/mL dan yang kering memiliki IC 50 yaitu 21,1501 µg/mL berarti kekuatan antioksidan sampel segar biji buah mangga arumanis lebih kuat dari pada sampel kering biji buah mangga arumanis, karena semakin tinggi nilai IC 50 maka semakin rendah aktivitas antioksidannya

## REFERENCES
Asgarirad, H., Pourmorad, F., Hosseinimehr, S. J., Saeidnia, S., Ebrahimzadeh, M. A., & Lotfi, F. (2010). In vitro antioxidant analysis of Achillea tenuifolia. African Journal of Biotechnology , 9 (24), 3536–3541.
Ayyun,  K.,  Khafidz,  Y.,  Rosydah,  I.,  Atikah,  N.,  &  Arianti,  S.  P.  (2023). Artikel  Riview :  Profil  Studi  Fitokimia  Dan  Aktivitas Farmakologi Buah Mangga ( Mangifera Indica L .) . 01 (02), 60–68. Bahriul, P. (2014). Uji Antioksidan Ekstrak Daun Salam ( Syzygium polyanthum ) Dengan Metode DPPH. Jurnal Akademika Kimia . 3 (August), 143–149.
Fitranto, R., Dwi Wahyono, N., & Wibisono, Y. (2020). Strategi Pengembangan Pemasaran Buah Mangga Arumanis 143 Pt. Trigatra Rajasa Situbondo Jawa Timur. Jurnal Agribisnis Indonesia , 8 (1), 58–68. https://doi.org/10.29244/jai.2020.8.1.58-68 Kemenkes RI. (2017). Farmakope Herbal Indonesia Edisi 2 . 561.
Lestari, D., Fitriani, D., & Anngraeni, S. (2021). Skrining Fitokimia dan Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi Etil Asetat dan n -Heksana dari  Daun  Mangga  Kasturi  (Mangifera  casturi  Kosterm.). KOVALEN:  Jurnal  Riset  Kimia , 7 (3),  227–233. https://doi.org/10.22487/kovalen.2021.v7.i3.15599
Mulangsri, D. A. K., Budiarti, A., & Saputri, E. N. (2017). Aktivitas Antioksidan Fraksi Dietileter Buah Mangga Arumanis (Mangifera indica L.) dengan Metode DPPH. Jurnal Pharmascience , 4 (1), 85–93. https://doi.org/10.20527/jps.v4i1.5760
Oktavianto, Y., Sunaryo, & Suryanto, A. (2015). KABUPATEN KEDIRI CHARACTERIZATION OF PLANT MANGO ( Mangifera Indica L .) CANTEK , IRENG, EMPOK, JEMPOL. Jurnal Produksi Tanaman , Volume 3 (2), 91–97. Pourmorad, F., Hosseinimehr, S. J., & Shahabimajd, N. (2006). Telecommunication management; {Configuration} {Management} ({CM});  {Signalling}  {Transport}  {Network}  ({STN})  interface  {Network}  {Resource}  {Model}  ({NRM})  {Integration} {Reference}  {Point}  ({IRP}):  {Common}  {Management}  {Information}  {Protocol}  ({CMIP}). African  Journal  of Biotechnology , 5 (TS32.744), 1142–1145. Rahmawati,  R.,  Muflihunna,  A.,  &  Sarif,  L.  M.  (2016).  ANALISIS  AKTIVITAS  ANTIOKSIDAN  PRODUK  SIRUP  BUAH MENGKUDU  (Morinda  citrifolia  L.)  DENGAN  METODE  DPPH. Jurnal  Fitofarmaka  Indonesia , 2 (2),  97–101. https://doi.org/10.33096/jffi.v2i2.177
Sari, N., & Sujarwati, S. (2023). Phytochemical Screening and Antioxidan Activity of Several Types of Mango Seeds. Jurnal Biologi Tropis .
Taswin, M., & Toyibah, U. (2020). Aktivitas Antioksidan Kulit Buah Mangga Arumanis (Mangifera Indica L. Var. Arumanis) Dengan Metode Dpph. JKPharm Jurnal Kesehatan Farmasi , 2 (1), 60–68. https://doi.org/10.36086/jkpharm.v2i1.1771
Thahira,  D.  I.,  Perdana,  F.,  &  Noviyanti,  N.  (2021).  Potensi  Aktivitas  Antioksidan  Alstonia  Scholaris  dan  Alstonia  Macrophyll a.
Parapemikir : Jurnal Ilmiah Farmasi , 10 (1), 11. https://doi.org/10.30591/pjif.v10i1.2073 Wahyu, N. F. (2021). Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Daun Mangga Arum Manis Daerah Kabupaten Banyuwangi Dengan Metode DPPH (1,1-Diphenyl-2-Picryl Hidrazil) .
Werdhasari, A. (2014). Asri Wedhasari. Peran Antioksidan Bagi Kesehatan , 03 (Jurnal Biotek Medisiana Indonesia), 59–68. Yakubu, O. E. (2019). In vitro Determination of Antioxidant Activities of the Fractions Obtained from Adansonia Digitata L. (baobab) Stem  Bark  Ethanolic  Extract  using  Different  Parameters. Current  Trends  in  Biomedical  Engineering  &  Biosciences , 17 (5). https://doi.org/10.19080/ctbeb.2019.17.555973