Jurnal Farmasi,  e-ISSN: 2655-0814 Vol. 4 No.1 Edisi Mei-Oktober 2021 http://ejournal.medistra.ac.id/index.php/JFM ============================================================================================ Received: 12 April 2021 :: Accepted: 31 Oktober 2021 :: Published: 31 Oktober 2021
KARAKTERISASI DAN IDENTIFIKASI MOLEKULER BAKTERI PENGHASIL ENZIM PROTEASE DARI TEMPE YANG DIPERJUALBELIKAN DI PASAR LUBUK PAKAM
VISENSIUS KRISDIANILO 1 ,SA’ADAH SIREGAR 2 ,VICENTIA ADE

## RIZKY 3

## PROGRAM STUDI D IV TEKNOLOGI LABORATORIUM MEDIK, FAKULTAS
FARMASI, INSTITUT KESEHATAN MEDISTRA LUBUK PAKAM.
e-mail : chrizdianilo@gmail.com
DOI : https://doi.org/10.35451/jfm.v4i1.616

## Abstract
Protease enzyme is an enzyme that is important in protein breakdown. Animals, plants as well as microorganisms such as bacteria can  produce this protease enzyme. In its application protease enzymes can be used in the pharmaceutical industry, detergent industry, skin products as well as food products. Tempe is one  of  the  traditional  food  products  that  have  been  known  for  a  long  time, tempeh  is  made  from  soybean  seeds  fermented  by  mushrooms.  Molecular identification  can  use  polymerase  chain  reaction  (PCR)  method,  PCR  is  the process of multiplying a certain nucleotide sequence using enzymatic processes in vitro. The presence of protein content in tempeh can be possible the presence of bacteria that can break down proteins in the tempeh, especially tempeh that has been fermented about 48-72 hours. Based on the results of characterization and identification of 5 isolates of tempeh post-fermentation 72 hours, positive results of protease enzymes found in isolate TPLP-1, TPLP-2 and TPLP-5, with the largest zone diameter in isolate TPLP-2 50 mm, then isolate with the highest protease enzyme activity isolate TPLP-2 molecularly identified by identifying the gene  16S  rRNA  which  is  subsequently  included  in  the  BLAST  program  and obtained by isolate TPLP-2 identified as Pseudomons stuastzeri .
Keywords : Bacterial, Enzyme Protease, Pseudomons stuastzeri , Tempe

## 1.PENDAHULUAN
Semakin  berkembangnya  ilmu dan teknologi mendorong peneliti untuk terus  mencari  bahan  bahan  yang berpotensi  sebagai  sumber  enzim protease.Enzim protease bersifat esensial  serta  sangat  diperlukan  oleh semua  mahluk  hidup  dalam  proses
metabolism protein (Baehaki dan Rinto, 2011)
Enzim protease merupakan enzim  yang  penting  dalam  pemecahan protein.Hewan, tanaman serta mikroorganisme  seperti  bakteri  dapat menghasilkan enzim protease ini. Dalam aplikasinya  enzim  protease  dapat digunakan  dalam  industry  farmasi,
Jurnal Farmasi,  e-ISSN: 2655-0814 Vol. 4 No.1 Edisi Mei-Oktober 2021 http://ejournal.medistra.ac.id/index.php/JFM ============================================================================================ Received: 12 April 2021 :: Accepted: 31 Oktober 2021 :: Published: 31 Oktober 2021
industry  detergen,  produk-produk  kulit serta produk-produk
makanan (Fatonidkk., 2008).
Tempe menjadi salahsatu produk makanan tradisional yang telah dikenal lama, tempe dibuat dari biji kedelai yang di  fermentasi  oleh  jamur,  membentuk padatan kompak. Kandungan dalam 100 g  tempe  terdapat  karbohidrat  350.5 – 380.8  kalori,  lemak  20  -20.1  g  dan protein  16.7-17.9  g  (Efriwati  dan Nuraida  2013).  Adanya  kandungan protein dalam tempe dapat dimungkinkan  adanya  bakteri  yang dapat  memecah  protein  pada  tempe tersebut, terutama tempe yang telah di fermentasi sekitar 48 – 72 jam.
Identifikasi molekuler dapat menggunakan metode Polymerase Chain  Reaction  (PCR),  PCR  adalah proses melipat gandakan suatu sekuens nukleotida tertentu menggunakan proses  enzimatik  secara  in  vitro. (Darmawati dkk. 2014).
Penelitian  yang  dilakukan  oleh Inayatul dkk pada tahun 2018,  tentang Isolasi  Dan  Identifikasi  Molekuler Bakteri  Penghasil  Enzim  Protease Pseudomonas  Stutzeri  ISTD4  Dari Tempe  Gembus  Pasca  Fermentasi  1 Hari, didapatkan hasil analisis molekuler bebasis  sekuen  gen  16S  rRNA,  isolate ISTD4 teridentifikasi sebagai Pseudomonas  stutzeri strain  ISTD-1.
Sedangkan  penelitian  yang  dilakuakn oleh  Mony  dkk.  Pada  tahun  2018, tentang
Isolasi Dan Identifikasi
Molekuler  Bakteri  Penghasil  Enzim Protease  Pada  Tempe  Gembus  Pasca Fermentasi 48 Jam Berdasarkan Analisis Gen  16S  rRNA,  di  dapatkan  hasil  dari isolate ISTD 2.1 adalah Bacillus cereus .

## 2. METODE PENELITIAN
Metode  yang  digunakan  pada penelitian  ini  adalah  deskriptif  analitik. Sampel  pada  penelitian ini  diambil  dari penjual  tempe  di  pasar  lubuk  pakam, kemuduan  dibawa  ke  laboratorium
Mikrobiologi  Fakultas  Farmasi  Institut Kesehatan  Medistra  Lubuk  Pakam, sedangkan  objek  pada  penelitian  ini adalah  enzim  protease  dari  bakteri Pseudomonas  Stutzeri  pada  tempe pasca fementasi 72 jam. Sampel tempe yang  didapat  sejumlah  17  sampel, kemudian  dari  masing  masing  sampel diambil  3  g  dan  dihaluskan  serta  di homogenkan menggunakan lumpang.
Pengisolasian  dilakukan  dengan terlebihdengan  memberi  label  pada tabung  reaksi  10 -1 – 10 -5 ,memasukan NaCl  fisiologis  sebanyak  9  ml  kedalam semua  tabung  reaksi.  Menimbang  1 gram  sampel  tempe  pasca  fermentasi 72  jam,  kemudian  memasukanya kedalam  tabung  reaksi  yang  tidak dilakukan pengenceran yang berisi NaCl fisiologis  kemudian  di  homogenkan menggunakan  vortex.Mengambil  1ml dari tabung tanpa pengenceran kemudian  dimasukan  kedalam  tabung 10 -1 kemudian di homogenkan, lakukan langkah tersebut sampai pada pengenceran  10 -5 .langkah  selanjutnya yaitu menanam dari tabung pengenceran  10 -1 – 10 -5 di  media nutrient agar dan diinkubasi pada suhu 37 o C  selama  24  jam,  setelah  24  jam dilakukan pengamatan makroskopis dan mikroskopis. Kemudian melakukan tahapan  permurniankoloni    bakteri sampai  diperoleh  beberapa  isolate murni.
Identifikasi  makroskopis  dapat diamati  dengan  melihat  bentuk  koloni, ukuran  koloni,  pinggiran  koloni,  warna koloni, permukaan koloni, dan konsistensi  koloni  pada  media  isolasi.
Identifikasi mikroskopis mikroba dilakukan  dengan  pewarnaan,  yaitu dengan  mengambil  koloni  bakteri  yang telah  dibiakan  menggunakan  ose, kemudian  diletakan  pada  objek  gelas dan  memfiksasinya  menggunakan  api bunsen,  selanjutnya  mewarnai  bakteri dengan menetesi bakteri dengan reagen gentian violet sekitar 2 – 3 tetes, tunggu
Jurnal Farmasi,  e-ISSN: 2655-0814 Vol. 4 No.1 Edisi Mei-Oktober 2021 http://ejournal.medistra.ac.id/index.php/JFM ============================================================================================ Received: 12 April 2021 :: Accepted: 31 Oktober 2021 :: Published: 31 Oktober 2021
1  menit  dan  bilas  pada  air  mengalir, kemudian meneteskan lugol/iodine sebanyak  2-3  tetes,  tunggu  sekitar  1 menit  dan  cuci  di  air  mengalir, dilanjutkan  meneteskan  alcohol  96%, tunggu  30  detik  dan  cuci  pada  air mengalir  kembali,  setelah  lumayan kering,  tahap  selanjutnya  meneteskan safranin sebanyak 2-3 tetes dan tunggu sekitar  10  detik  dan  bilas  dengan  air mengalir dan keringkan, setelah kering bakteri  yang  telah  diwarnai  diamati  di bawah  mikroskop  dengan  pembesaran 1000x  dengan  penambahan  oil  imercy, hasil  pengamatan  dilihat  bentuk  sel bakteri  nya  dan  warna  dari  bakteri  ( Prescot, 1990).
Pengujian
bakteri secara biokimia dilakukan dengan pengujian uji motilitas,  uji  triple  sugar  iron  agar (TSIA), uji simon sitrat, dan uji gelatin. Pemerikisaan    adanya  enzim  protease dilakukan  menggunakan  media skim milk  agar .  Koloni  murni  yang  didapat ditanam  secara  dotting  dengan  kertas wattman pada    media skim  milk  agar selanjutnya media diinkubasi pada suhu 37 o C  selama  24  jam.  Adanya  zona bening  disekitar  koloni  menunjukan adanya enzim protease.
Pemeriksaan  molekuler  pada isolate  dilakukan  dengan  analisa  gen 16S  rRNA.  Langkah  awal  dengan mengekstraksi DNA genom menggunakan kit isolasi DNA
GeneaidTM.  DNA  template  sebanyak 1μL  dicampur dengan  larutan  PCR sebanyak 25  μL  yang  terdiri  dari  1  μL forward  primer,  1  μL  reverse  prim er, 12,5 μL GoTaq Green Master Mix, 0,5 μL DMSO  dan  9  μL  nuclease -free  water. Larutan  Primer  yang  dipakai  adalah  27 F: 5`- AGA GTT TGA TCC TGG CTC AG - 3` dan 1492 R: 5`- GGT TAC CTT GTT ACG ACT T - 3` ( Srinivasan, 2015).
Hasil  campuran  PCR  kemudian diletakan  ke  dalam  mesin  PCR  dengan pengaturan  yaitu  proses  denaturasi awal 96 ° C selama 5 menit, dilanjutkan
dengan proses denaturasi sebanyak 30 siklus pada suhu 96 ° C selama 30 detik, untuk proses annealing  pada suhu  55 ° C selama 30 detik, dan pemanjangan untaian  pada  72  °  C  selama  1  menit. Setelah selesai 30 siklus, final extension pada suhu 72 ° C selama 7 menit. Hasil amplifikasi PCR kemudian dielektroforesis  pada  gel  agarosa (1,5%)  dalam  buffer  TAE,  selanjutnya divisualisasikan  dengan  pewarnaan dengan Gel Red serta  dianalisis dengan Gel  Documentation.  Hasil  amplifikasi diurutkan dengan menggunakan sekuenser  DNA  otomatis  (ABI  PRISM
3130 Genetic
Analyzer) untuk menentukan  urutan  dari    untai DNA.Data  untaian  DNA  yang  didapat kemudian dilakukan pemangkasan data dan  dirangkai  menggunakan  program BioEdit(http://www.mbio.ncsu.edu/Bio Edit/bioedit.html). Untuk melihat takson /  spesies  dengan  kemiripan  molekul terbesar  dan  terdekat,  menggunakan program  BLAST,  data  terdaftar  di GenBank,  dan  perangkat  dari  NCBI  / National  Center  for  Biotechnology Information (http: //www.ncbi.nlm.nih) .gov / BLAST /)(Kumar et al., 2018 dan Facrial et al., 2020).

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  dari  isolasi  pada  sampel tempe  disapatkan  5  isolat,  dengan masimg-masing  diberi  koding  TPLP-1, TPLP-2, TPLP-3, TPLP-4, dan TPLP-5. Isolat yang didapat kemudian
dilakukankan identifikasi secara makroskopis  dan  mikroskopis  dengan pewarnaan  gram.  Hasil  makroskopis didapat  didominasi  bentuk  koloni  nya circular,  untuk  permukaan  koloni didominasi  berbentuk  Entire,  dengan tepian  koloni  seluruhnya  Flat,  serta warna koloni yang didominasi berwarna krim,  selain  itu  terdapat  juga  warna coklat,  krim  kuning  dan    krim  bening. Pemeriksaan makroskopis bakteri digunakan  untuk  membedakan  jenis
Jurnal Farmasi,  e-ISSN: 2655-0814 Vol. 4 No.1 Edisi Mei-Oktober 2021 http://ejournal.medistra.ac.id/index.php/JFM ============================================================================================ Received: 12 April 2021 :: Accepted: 31 Oktober 2021 :: Published: 31 Oktober 2021
dari  bakteri  berdasarkan  dari  bentuk koloni,  permukaan,  tepi  koloni  dan warna koloni.
Pemeriksaan makroskopis bakteri  sebagian  besar  menggunakan pewarnaan  gram,  pemeriksaan  ini digunakan sebagai pemeriksaan awalan terhadap identifikasi suatu bakteri. Hasil yang didapat dari pewarnaan gram pada 5  isolat  yang  didapat  yaitu  sebagian besar  isolate  merupakan  bakteri  Gram (-),  Basil,  sedangkan  yang  Gram  (+), Basil  hanya  pada  isolate  TPLP-3  dan TPLP-4.  Pewarnaan  gram  digunakan sebagai  pembeda  dari  jenis  bakteri berdasarkan  struktur  dinding  sel  nya. Pada  dinding  bakteri  gram  positif memiliki  peptidoglikan  yang  tebal, bakteri  yang  diberi    pewarna  gentian violet  maka  baik  bakteri  gram  positif atau negative seluruhnya
akan
menyerap zat warna gentian violet akan
tetapi ketika diberi alcohol bakteri gram negative  akan  luntur  dikarenakan sebagian  besar  tersusun  dari  lipid, sehingga  pada  saat  diberikan  pewarna safranin  maka  bakteri  gram  negative tersebut akan menyerap zat warna dari safranin  yang  menyebabkan  bakteri gram  negative  akan  berwarna  merah, sedangkan  bakteri  gram  positif  akan tetap  mempertahankan  warna  violet yang  diakibatkan  karena  tebalnya lapisan  peptidoglikan  pada  dinding  sel bakteri tersebut (Baehaki et al., 2019).
Identifikasi bakteri secara biokimia terhadap 5 isolat yang didapat, hasil  uji  motilitas  didominasi  motilitas (+),  uji  simonsitrat  dan  gelatin  di dominasi  hasil  negative  (-),  sedangkan uji TSIA di dominasi warna media merah kuning (MK), serta seluruh isolate tidak terdapat H 2 S.

## Tabel 1. Hasil pemeriksaan makroskopis
Isolat Bentuk Koloni Permukaan Koloni Tepi Koloni Warna Koloni TPLP-1 TPLP-2 TPLP-3 TPLP-4
TPLP-5 Circular Circular
Irregular Circular Circular
Entire Entire Undulate Entire Undulate Flat Flat Flat Flat Flat Krim Coklat Krim Kuning Krim Krim Bening Tabel 2. Hasil pemeriksaan mikroskopis Isolat Hasil Pewarnaan Gram TPLP-1 TPLP-2 TPLP-3 TPLP-4
TPLP-5
Gram (-), Basil
Gram (-), Basil
Gram (+), Basil
Gram (+), Basil
Gram (-) ,Basil
Gambar 1. (a) Isolate TPLP-2 (Gram Negative) , (b) Isolat TPLP-3 ( Gram Positif )
Jurnal Farmasi,  e-ISSN: 2655-0814 Vol. 4 No.1 Edisi Mei-Oktober 2021 http://ejournal.medistra.ac.id/index.php/JFM ============================================================================================ Received: 12 April 2021 :: Accepted: 31 Oktober 2021 :: Published: 31 Oktober 2021
(a) (b)

## Tabel 3. Hasil identifikasi biokimia
Isolat Uji Motilitas Uji TSIA Uji Simon Sitrat Uji Gelatin TPLP-1 TPLP-2 TPLP-3 TPLP-4 TPLP-5 (+) (+) (+) (-) (-) KK KK MK MK MK (+) (+) (-) (-) (-) (+) ( + ) (-) (-) (+)
Pemeriksaan adanya enzim
protease  pada5  isolate  menggunakan media  skim  milk  agar,  dengan  hasil positif  ditandai  dengan  terbentuknya zona transparan disekitar koloni bakteri. Hasil  uji  enzim  protease  didapat  hasil positif pada isolate TPLP-1, TPLP-2 dan TPLP-5,  sedangkan  hasil  negative terdapat pada isolate TPLP-3 dan TPLP- 4.  Diameter  yang  dihasilkan  dari  zona transparan  paling  besar  pada  isolate TPLP-2. Zona transparan disekitar koloni besaran  nya  sangat  dipengaruhi  oleh jumlah  enzim  protease  yang  dihasilkan oleh  bakteri  tersebut  serta  jumlah nutrisi yang terkandung pada medianya, media  skim  milk  agar  mengandung nutrisi yang sangat banyak dab variatif seperti  adanya  fosfor,  magnesium, kalsium dan kasein sehingga bila jumlah nutrisinya  kurang  akan  mempengaruhi hasil  dari  aktivitas  enzim  proteasenya (Chekireb et al., 2009 dan Gupta et al., 2005).
Isolalat  yang  telah  di  periksa adanya  enzim  protease  dari  kelima isolate didapat hasil isolate yang positif adanya  enzim  protease  serta  memiliki zona paling lebar terdapat pada isolate TPLP-2,  isolate  tersebut  kemudian diidentifikasi  secara  molekuler  dengan pemeriksaan  sekuens  Gen  16S  rRNA, hasil  sekuens  Gen  16S  rRNA  pada isolate  TPLP-2 kemudian  dimasukan  ke program
BLAST
untuk melihat
kemiripan/takson dengan spesies bakteri  lain.  Hasil  yang  didapat  pada isolate  TPLP-2  memiliki  kemiripan dengan Pseudomonas stutzeri.
Hasil  tersebut  serupa  dengan penelitian yang dilakukan oleh Inayatul dkk  pada  tahun  2018,    tentang  Isolasi Dan  Identifikasi  Molekuler  Bakteri Penghasil Enzim Protease Pseudomonas Stutzeri  ISTD4  Dari  Tempe  Gembus Pasca  Fermentasi  1  Hari,  didapatkan hasil  analisis molekuler  bebasis  sekuen gen 16S rRNA, isolate ISTD4 teridentifikasi  sebagai Pseudomonas stutzeri strain ISTD-1. Bakteri
Pseudomonas stutzeri merupakan bakteri gram negative basilyang bersifat aerobik,  bakteri  tesebut  menghasilkan uji  katalase  dan  oksidase  positif  serta dapat  tumbuh  pada  maltose  dan pati.Bakteri Pseudomonas stutzeri memiliki bentuk koloni berwarna coklat kemerahan  serta  koloni  yang  kering (Zahra, 2016).
Dapat diketahu bawasanya tempe pasca fermentasi selama 72 jam memiliki  potensi  sebagai  tempat  dari bakteri  penghasil  enzim  protease dikarenakan  pada  tempe  terdapat kandungan proteinnya, sehingga tempe pasca fermentasi selama 72 jam  dapat dimanfaatkan  sebagai  sumber  bakteri penghasil enzim protease yang nantinya enzim protease nya dapat dimanfaatkan dalam skala industri.
Jurnal Farmasi,  e-ISSN: 2655-0814 Vol. 4 No.1 Edisi Mei-Oktober 2021 http://ejournal.medistra.ac.id/index.php/JFM ============================================================================================ Received: 12 April 2021 :: Accepted: 31 Oktober 2021 :: Published: 31 Oktober 2021

## Tabel 4. Hasil uji adanya enzim protease
Isolat Hasil Uji Enzim Protease Diameter TPLP-1 TPLP-2 TPLP-3 TPLP-4
TPLP-5 (+) (+)
(-) (-) (+) 28mm
50mm 0 0 17mm

## 4. KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  karakterisasi dan identifikasi terhadap 5 isolat tempe pasca  fermentasi  72  jam,  didapatkan hasil  positif  adanya  enzim  protease terdapat  pada  isolate  TPLP-1,  TPLP-2 dan  TPLP-5,  dengan  diameter  zona paling besar pada isolate TPLP-2 50 mm, selanjutnya  isolate  dengan  aktivitas enzim  protease  paling  tinggi  yaitu isolate  TPLP-2  di  identifikasi  secara molekuler  dengan mengidentifikasi  gen 16S  rRNA  yang  selanjutnya  dimasukan di  program  BLAST  dan  didapatkan bawasanya isolate TPLP-2 teridentifikasi sebagai Pseudomonas stutzeri.

## DAFTAR PUSTAKA
Baehaki A, Nopianti R, Saputra E, Gofar N.  2019.  Exploration  of  protease enzyme  producing  bacteria  from water  in  tanjung  senai  swamp Indralaya  South  Sumatra. In : Herlinda  S et  al. ( Eds. ),  Prosiding Seminar Nasional Lahan Suboptimal 2019,  Palembang  4-5  September 2019.  pp.  121-131.  Palembang: Unsri Press.
Baehaki.A dan Rinto.2011. Karakteristik Protease  dari  Isolat  Bakteri  Asal
Tumbuhan Rawa dari Indralaya.Jurnal.  Program  Studi Teknologi  Hasil  Perikanan,  Fakultas
Pertanian  Universitas  Sriwijaya. Palembang.
Chekireb  D,  Tahar  A  and  Cochet  N. 2009.Acid  Protease  Production  by Isolated Species of
Penicillium.European Journal of Scientific Research.25: (3) 469-477. Darmawati,S., Sembiring,L., Asmara,S.,
Artama.W.T.,  Kawaichi.M.  2014.
Phylogenetic  relationship  of  Gram Negative
Bacteria of
Enterobacteriaceae  Family  in  the Positive Widal Blood Cultures based on  16S  rRNA  Gene  Sequences.
Indonesian Journal of
Biotechnology.Vol. 19, No. 1, pp.64- 70.
Fachrial EDY, Roro R, Satyo J, Lister INE, Anggraini  S,  Nugroho  TT.  2020. Molecular  identification  of  cellulase and  protease  producing  Bacillus tequilensis  UTMSA14  isolated  from the  geothermal  hot  spring  in  Lau Sidebuk  Debuk  ,  North  Sumatra  , Indonesia. 21(10):4719 – 25.
Fatoni,  A.  Z.  dan  Puji,  L.  2008.Isolasi dan Karakterisasi
Protease
Ekstraseluler  dari  Bakteri  dalam  Air
Tahu.Jurnal Natur Indonesia.
Gupta  R,  Beg  Q,  Lorenz  P.  2002.
Bacterial alkaline proteases: molecular approaches and industrial applications.  Applied  microbiology and biotechnology. 59(1):15-32.
Inayatul  dkk.  2019.  Isolasi  dan identifikasi molekuler
bakteri
penghasil
enzim
protease Pseudomonas  stutzeri  ISTD4  dari tempe  gembus  pasca  fermentasi  1 hari.  Seminar  Nasional  Edusainstek FMIPA UNIMUS.
Kumar  S,  Stecher  G,  Li  M,  Knyaz  C, Tamura K. 2018. MEGA X: Molecular
Jurnal Farmasi,  e-ISSN: 2655-0814 Vol. 4 No.1 Edisi Mei-Oktober 2021 http://ejournal.medistra.ac.id/index.php/JFM ============================================================================================ Received: 12 April 2021 :: Accepted: 31 Oktober 2021 :: Published: 31 Oktober 2021
Evolutionary Genetics Analysis across computing platforms. Mol Biol Evol 35 . (6): 1547-1549. Mony  Nining.  2018.  Isolasi  Dan Identifikasi Molekuler Bakteri Penghasil  Enzim  Protease  Pada Tempe Gembus Pasca Fermentasi 48 Jam  Berdasarkan  Analisis  Gen  16S
rRNA. Repository Unimus.
Prescot, Harley, Klein. 1990. Microbiology. Second edition.WCB Publisher. England.
Srinivasan  R,  Karaoz  U,  Volegova  M, MacKichan  J,  Kato-Maeda  M,  Miller
S, Nadarajan R, Brodie EL, Lynch SV. 2015.  Use  of  16S  RRNA  gene  for identification  of  a  broad  range  of clinically relevant bacterial
pathogens. PLoS ONE 10 (2): 1-22. DOI:
10.1371/journal.pone.0117617.
Zahra Kamil Kadhim. 2019.Isolation and Identification of Pseudomonas
stutzeri  Isolated  from  Intrauterine Devices.  Al-Kufa  University  Journal for Biology / VOL.8/ NO.3.