## EKSPLORASI BAKTERI KANDIDAT PROBIOTIK DI LUMPUR HUTAN MANGROVE WONOREJO

## EXPLORATION THE CANDIDATE PROBIOTIC BACTERIA IN MANGROVE MUD WONOREJO
Indah Pratiwi, Rahayu Kusdarwati dan Wahju Tjahjaningsih
Fakultas Perikanan dan Kelautan Universitas Airlangga Kampus C Mulyorejo - Surabaya, 60115 Telp. 031-5911451

## Abstract
Mangrove  as  one  of  the  bacterial  community  development  area,  one  of  which  is  a  probiotic bacterium. Exploration of probiotic bacteria in the mud of mangrove forest has not been done, especially in the mud in the mangrove forest Wonorejo, Rungkut-Surabaya.
This study aims to determine the candidate probiotic bacteria species found in mangrove forests Wonorejo.  This  research  method  is  descriptive  in  the  form  of  sludge  sampling  surveys  at  five  different points area. Sampling  points are  T 1 ,  T 2 ,  T 3 ,  T 4 and  T 5 .  T 1 is an  area  of  mangrove  forest near  Wonorejo milkfish. T 2 is a region of southern estuarine mangrove forest near Wonorejo milkfish. T 3 is a region  of northern  estuary  mangrove  forest  Wonorejo  near  sewerage  drains  Wonorejo  citizens.  T 4 is  a  region  of southern  estuarine  mangrove  forest  Wonorejo  and  T 5 is  a  region  of  northern  estuarine  mangrove  forest Wonorejo.  Fifth  sludge  samples  performed  a  series  of  tests  in  the  identification  bekteri  Hall  Fish Quarantine,  Quality  Control  and  Safety  of  Fishery  Products  Class  1  Juanda.  Data  were  analyzed  by descriptive identification results by describing the data distribution of probiotic bacteria at each sampling point area Wonorejo mangrove mud.
The  results  showed  that  probiotic  candidate  bacterias  found  were Bacillus sp., B. subtilis , B. licheniformis , Pseudomonas sp., P. pseudomallei , Vibrio alginolyticus and Microccus sp.
Keywords : mud, mangrove forests Wonorejo, candidate probiotic bacteria

## Pendahuluan
Ekosistem  mangrove  adalah  ekosistem yang  bersifat  kompleks  dan  dinamis,  namun labil  karena  ekosistemnya  dipenuhi  oleh vegetasi  mangrove,  yang  merupakan  habitat berbagai  satwa  dan  biota  perairan  Menurut Anwar  dan  Gunawan  (2007),  ekosistem mangrove  adalah  ekosistem  yang  bersifat kompleks  dan  dinamis,  namun  labil  karena ekosistemnya dipenuhi oleh vegetasi mangrove, yang  merupakan  habitat  berbagai  satwa  dan biota perairan.  Hal ini tentu dapat dihubungkan dengan  banyak  permasalahan  yang  meliputi aspek  biologi  dan  fisik  perairan.  Segi  biologi hutan  mangrove  dipengaruhi  oleh  produksi serasah  (Affandi,  1996 dalam Purnobasuki, 2005),  dekomposisi,  pengambilan  mineral  oleh tumbuhan, dan aktivitas-aktivitas biologi lainnya  dari  seluruh  biota  dalam  hutan mangrove (Purnobasuki, 2005). Hutan mangrove  menjadi  tempat  berkembangnya komunitas  bakteri.  Bakteri  mengisi  sejumlah pori-pori  tanah  dan  menjadi  komponen  dasar fungsi  ekologis  lingkungan  (Wijiyono,  2009).
Salah satu jenis bakteri yang dikembangkan  pada  budidaya  adalah  bakteri probiotik. Bakteri probiotik didefinisikan sebagai  suplemen  pakan  berupa  mikroba  hidup yang  dapat  menguntungkan  inangnya  dengan menjaga keseimbangan mikrobial usus inangnya (Fuller,  1989 dalam Verschuere et  al .,  2000).
Eksplorasi  bakteri  probiotik  dalam  perikanan budidaya telah  banyak dimanfaatkan. Penelitian untuk  mengisolasi  bakteri  dalam  tanah  dan  air dari tambak telah  banyak dilakukan, sedangkan eksplorasi  bakteri  probiotik  dari  dalam    tanah mangrove  terutama  dalam  tanah  mangrove  di Surabaya  belum  banyak  dilakukan.  Dari  latar belakang  ini,  dilakukan  penelitian  eksplorasi bakteri  kandidat  probiotik  dalam  lumpur  hutan mangrove.
Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mendapat  informasi  spesies  bakteri  kandidat probiotik dari lumpur hutan mangrove Wonorejo.  Manfaat  dari  penelitian  ini  adalah dapat memberikan informasi tentang
keanekaragaman  bakteri  kandidat  probiotik dalam  lumpur  hutan  mangrove  Wonorejo  dan diharapkan hasil penelitian ini mampu
diaplikasi  oleh  masyarakat  perikanan  untuk kepentingan budidaya.

## Metodologi
Kegiatan  penelitian  ini  dilakukan  di hutan  mangrove  Wonorejo,  Rungkut-Surabaya dan  Balai  Karantina  Ikan,  Pengendalian  Mutu dan Keamanan Hasil Perikanan Kelas 1 Juanda, Surabaya pada tanggal 06-15 Maret 2013.
Alat-alat  yang  digunakan  antara  lain, laminar air flow , inkubator, autoklaf, Erlenmeyer, tabung reaksi, pemanas, alumunium foil, bunsen, cawan Petri, jarum Ose dan needle , neraca Ohauss dengan ketelitian 0,1 g,  gelas  ukur,  tabung  reaksi,  kapas,  mikropipet (100-1000 µ l),  mikroskop  binokuler,  gelas objek, vortex ,  sterofoam,  timba, cylinder  crob , dan plastik.
Bahan-bahan  yang  digunakan  pada penelitian  ini  adalah  sampel  lumpur  sedimen hutan  mangrove  Wonorejo,  Rungkut-Surabaya, NaCl,  media  agar    non  selektif Tryptone  Soya Agar (TSA),  media  selektif Thiosulphate
Citrate  Bilesalt  Sucrose (TCBS)  untuk  uji pertumbuhan Vibrio, m ethyl red- Voges Proskauer (MR-VP) Broth , KOH 40%, glukosa, arabinosa,  inositol,  manitol,  sukrosa,  maltosa, media arginin, media ornitin, media urea, media
uji oksidatif/fermentatif, Lysin Iron Agar (LIA), media Motility  Indol  Ornithin (MIO),  media Triple  Sugar  Iron  Agar (TSIA),  dan  media Simmon Citrate  Agar (SCA),  bahan  untuk  uji pewarnaan  Gram  (kristal  violet,  lugol  iodine, safranin,  etil  alkohol  96%,  dan  akuades), hidrogen  peroksida  (H 2 O 2 ),  kertas  indikator oksidase,  larutan  alpha-naftol  5%,  reagen  metil merah, reagen Kovac’s, dan minyak parafin.
Penelitian  ini  menggunakan  metode deskriptif dalam bentuk survei dengan pengambilan  sampel  yang  dilakukan  secara acak  pada  lima  area  yang  berbeda  sepanjang hutan  mangrove  Wonorejo  terhitung  mulai  dari area  sekitar  tambak  di  sepanjang  hutan mangrove  Wonorejo  sampai  area  terdekat mangrove  sekitar  wisata  hutan  mangrove Surabaya.  Berikut  peta  pengambilan  sampel lumpur si hutan mangrove Wonorejo. Pengambilan Sampel Sedimen lumpur diambil langsung dari hutan  mangrove  Wonorejo  sebanyak  10  gr dengan  menggunakan cylinder  crob sampai pada  kedalaman  10  cm  di  bawah  permukaan lumpur.  Sampel  hasil  pengambilan  disimpan dalam  plastik  dan  diberi  nomer  sampel berdasarkan  kelompok  lokasi  pengambilan sampel (T 1 , T 2 , T 3 , T 4 dan T 5 ). Tiap-tiap sampel
Gambar 1. Peta Lokasi  Pengambilan Sampel
(Sumber : Google Earth (2009) dalam Geo Eye et al. (2013)
dilakukan pengulangan pengambilan sebanyak 2 kali.
Isolasi Bakteri Masing-masing sampel
lumpur ditimbang seberat 1  gr kemudian dihomogenasi dalam 9 ml larutan fisiologis (NaCl 0,9%) pada pH  2  dengan  bantuan vortex .  Suspensi  isolat lumpur  sebanyak  1  ml  diteteskan  di  atas  media kultur TSA dengan mikropipet kemudian distrik dengan  jarum  Ose.  Setelah  diperoleh  koloni yang  mampu  hidup  pada  media,  maka  setiap koloni yang diperoleh, diisolasi kembali dengan tujuan pemurnian koloni.
Identifikasi Bakteri Isolat  murni  hasil  pemurnian  koloni dilanjutkan  dengan  identifikasi  bakteri  dengan serangkaian uji morfologi koloni, uji pewarnaan Gram, uji biokimia dan uji Thiosulphate Citrate Bilesalt  Sucrose (TCBS).  Hasil  serangkaian  uji tersebut  kemudian  diidentifikasi  jenis  bakteri kandidat  probiotik  yang  diperoleh  berdasarkan buku pedoman Bergey’s Determinative Bacteriology (Holt et al ., 2005) dan disimpulkan  hasil  identifikasi  bakteri  kandidat probiotik.

## Hasil dan Pembahasan
Hasil  isolasi  dan  identifikasi  bakteri kandidat probiotik dalam lumpur hutan Mangrove  Wonorejo  ditemukan  tujuh  spesies bakteri kandidat probiotik, yaitu Bacillus sp., B. subtilis , B.licheniformis , Pseudomonas sp., P. pseudomallei , Micrococcus sp.  dan Vibrio alginolyticus .  Berikut  hasil  uji  morfologi,  uji pewarnaan Gram, uji biokimia dan uji TCBS.
Data pengukuran parameter pendukung pada  sampel  lumpur  dan  air  dari  T 1 , T 2 , T 3 , T 4 , dan  T 5 menunjukkan  kisaran  salinitas  antara  3- 11  ppt  dan  kisaran  pH  antara  5,8-6,4.  Data diambil  saat  lokasi  pengambilan  sampel mengalami  hujan  dan  kondisi  perairan  muara sedang surut.
Bacillus ditemukan pada semua sampel lumpur yang diambil pada lima titik pengambilan  yang  berbeda.  Kelima  lokasi pengambilan  sampel  memiliki  kondisi  yang berbeda,  dengan  demikian  bakteri  dari  genus Bacillus dapat  tumbuh  pada  kondisi  yang bervariasi baik dalam kondisi ekstrim sekalipun. Widyawati  (2008)  menyatakan  bahwa, Bacillus sp.  merupakan  salah  satu  kelompok  bakteri
Tabel 1. Hasil Identifikasi Isolat Bakteri dalam Lumpur Hutan Mangrove Wonorejo.
Nama Uji Hasil Uji Isolat Bakteri 1 2 3 4 5 6 7 Morfologi sel Pewarnaan Gram Oksidase Katalase O/F TSIA Urease Arginin Simmon Citrate Lisin Iron Gelatin Motilitas Indol Ornitin Methyl Red Voges Proskauer Uji gula - Glokusa - Sukrosa - Laktosa Uji TCBS Batang + - + NR Al/As, Gas - , H 2 S – - - - - + - - - - - + - - - Batang + - + NR As/As, Gas - , H 2 S – + - - + + - - - - - + + + - Batang + - + F As/As, Gas - , H 2 S + + - + + + - - - - - + + + - Batang - + + O Al/As, Gas - H 2 S - - - - + , H 2 S + + - - + - - + - - - Batang - + + O Al/As, Gas - H 2 S + - + - + + - - - - - + - - - Batang - + + F As/As, Gas - , H 2 S - - + + + + + + + + - + + + + ( Yellow )
Bulat - + + O/F As/As, Gas -, H 2 S + - - -
+ , H 2 S +
+ - - - - - + + + -
Keterangan:  isolat  1) Bacilus sp.;  2) B.  subtilis ;  3) B.licheniformis ;  4) Pseudomonas sp.;  5) P. pseudomallei ; 6) Vibrio alginolyticus ; dan 7) Micrococcus sp. + (reaksi positif perubahan media);  -  (reaksi  negatif  perubahan  media).  NR  ( Not  Reaction ).  Al  (alkali).  As  (asam). Gas – (isolat tidak memproduksi gas). Gas + (isolat memproduksi gas). H 2 S - (isolat tidak memproduksi H 2 S). H 2 S + (isolat memproduksi H 2 S).
yang  dapat  diisolasi  dari  tanah  mempunyai kemampuan membentuk endospora pada kondisi  lingkungan  yang  tidak  menguntungkan sehingga dapat toleran  pada  kondisi lingkungan kritis.
Spesies Bacillus yang  ditemukan  pada kelima sampel lumpur hutan mangrove Wonorejo adalah Bacillus sp., B . subtilis dan B . licheniformis .  Genus Bacillus termasuk  salah satu  probiotik  yang  berperan  sebagai  agen biokontrol  dalam  akuakultur,  baik  sebagai biokontrol terhadap penyakit pada ikan maupun aktivator  perbaikan  nutrisi  pada  pakan  ikan (Verschuere et  al .,  2000). Bacillus sp., B . subtilis dan B . licheniformis telah  dilakukan penelitan  terkait  peranannya  dalam  akuakultur, baik
sebagai probiotik
penghambat pertumbuhan  bakteri  patogen  dan  probiotik dalam  proses  pencernaan  (Vaseeharan  and Ramasamy, 2003; Li et al ., 2007; dan Lin et al. , 2004 dalam Subagiyo  dan  Djunaedi,  2011). Feliatra dkk. (2004)  menyatakan  bahwa, sedikit spesies  dari  genus Bacillus yang  bersifat patogen  terhadap  vertebrata  atau  invertebrata. Menurut  Jusadi  dkk.  (2004), Bacillus sp.  yang ditambahkan ke dalam pakan dapat memperbaiki konversi pakan dan meningkatkan laju  pertumbuhan  ikan  patin.  Far  (2009) menyatakan  bahwa,  pencampuran B.  subtilis dalam  pakan  memberikan  perbedaan  yang signifikan  terhadap  tingkat  kelangsungan  hidup dan meningkatkan pertumbuhan udang vannamei.  Menurut  Sarker et al .  (2010), B. licheniformis menunjukkan  aktivitas  vibriosidal (anti  vibrio)  dan  mampu  membunuh  60% populasi Vibrio sp. Pseudomonas ditemukan  pada  sampel T 1 , dan  T 4 .    T 1 merupakan  wilayah  hutan mangrove  Wonorejo  yang  berada  di  dekat tambak,  sedangkan  T 4 merupakan  wilayah muara bagian selatan hutan mangrove Wonorejo yang  tidak  ada  tambak.  Spesies Pseudomonas yang ditemukan adalah Pseudomonas sp. dan P. pseudomallei . Pseudomonas sp. ditemukan pada sampel  lumpur  T 4 yang  berasal  dari  wilayah muara bagian selatan hutan mangrove Wonorejo.  Vijayan et al .  (2005)  menyatakan bahwa, Pseudomonas sp.  PS-102  memiliki toleransi  yang  tinggi  terhadap  lingkungan karena  dapat  diisolasi  pada  lingkungan  yang memiliki pH 6-8 dan salinitas 0-36 ppt dan pada suhu  25-40 o C. Pseudomonas  pseudomallei ditemukan pada sampel lumpur T 1 yang berasal dari  area  sekitar  tambak  bandeng  milik  warga sekitar. Menurut Masithah (2011), P. pseudomallei dapat diisolasi dari tambak. Genus Pseudomonas termasuk  salah satu  probiotik  yang  berperan  sebagai  agen
biokontrol  dalam  akuakultur,  baik  sebagai biokontrol terhadap  penyakit pada ikan  maupun aktivator  perbaikan  nutrisi  pada  pakan  ikan (Verschuere et  al .,  2000).  Menurut  Vijayan et al . (2005), Pseudomonas sp. PS-102
menunjukkan aktivitas yang signifikan terhadap sejumlah Vibrio patogen udang dan Aeromonas , yaitu Vibrio harveyi , V . vulnificus , V . parahaemolyticus , V . alginolyticus , V. fluvialis , dan Aeromonas spp.  Hal  ini  disebabkan  karena karakteristik  unik  dari Pseudomonas sp.  PS- 102, yaitu memproduksi antibakteri berspektrum yang luas terhadap bakteri patogen. Prayogo  dkk.  (2012)  menyatakan  bahwa, gabungan  bakteri Pseudomonas pseudomallei dan P . stutzeri efektif  menurunkan  kadar protein,  karbohidrat, biological  oxygen  demand (BOD)  dan chemical  oxygen  demand (COD) serta  efektif  meningkatkan  laju  pertumbuhan dan tingkat kelulushidupan (SR) benih ikan lele pada  metode  pembenihan  resirkulasi  tertutup. Menurut  Masithah  (2011),  ekstrak  enzim pektinase  dari  bakteri P . pseudomallei dapat menurunkan  dominansi Microcystis  aeruginosa pada  perairan  yang  mengalami blooming  M. aeruginosa . Vibrio ditemukan  pada  sampel  lumpur T 5 yang berasal dari wilayah muara bagian utara hutan  Mangrove  Wonorejo  yang  dekat  dengan lingkungan  pertambakan  masyarakat  hutan mangrove  Wonorejo.  Bakteri  yang  ditemukan pada  sampel  T 5 ini  adalah V . alginolyticus . Genus Vibrio termasuk  salah  satu  probiotik yang  berperan  sebagai  agen  biokontrol  dalam akuakultur,  baik  sebagai  biokontrol  terhadap penyakit pada ikan  maupun aktivator perbaikan nutrisi  pada  pakan  ikan  (Verschuere et  al ., 2000).  Darmayati  dkk.  (2009)  menyatakan, V . alginolyticus adalah salah satu bakteri ditemukan pada sampel sedimen muara Cisadane  yang  bersalinitas  10-28  ppt.  Menurut Widanarni  dkk.  (2003), V . alginolyticus memiliki  kemampuan  dalam  menghambat pertumbuhan V . harveyi pada  uji in vitro dan menurunkan angka kematian larva udang windu pada  uji  tantang  dengan V . harveyi secara in vivo . Micrococcus ditemukan  pada  sampel lumpur  T 4 yang  berasal  dari  wilayah  muara bagian utara hutan mangrove Wonorejo. Spesies bakteri yang ditemukan adalah Micrococcus sp. Irianto  dan  Hendrati  (2003)  menyatakan, Micrococcus sp.  adalah  salah  satu  bakteri  yang ditemukan  pada  perairan  pantai  Baron  yang bersalinitas  0-20  ppt.  Menurut  Greenbalt et  al . (2004) dalam Ardiansyah dkk. (2011), Micrococcus dapat  ditemukan  pada  berbagai jenis  lingkungan  dan  pada  dasarnya  mampu
tumbuh  dengan  baik  pada  lingkungan  dengan konsentrasi  air  yang  rendah  dan  tinggi kandungan  garamnya.  Bakteri Micrococcus tidak  menghasilkan  spora  namun  mampu bertahan  hidup  dalam  kurun  waktu  yang  relatif panjang. Micrococcus telah  diteliti  peranannya sebagai  probiotik  dalam  akuakultur (Irianto dan Austin  2002;  Choudhury et  al .,  2005  dan Panigrahi et  al .,  2005 dalam Osman et  al .,
2010).  Menurut  Feliatra  dkk.  (2004)  dan Suwarsih (2011), Micrococcus sp. sebagai salah satu  bakteri  yang  diidentifikasi  dari  saluran pencernaan ikan kerapu yang berpotensi sebagai bakteri  kandidat  probiotik. Osman et al . (2010) menyatakan  bahwa,  bakteri  probiotik  dari spesies Micrococcus tidak menunjukkan patogen  bagi  ikan  nila  ( Oreochromis  niloticus ) dan  memiliki  efek  antagonis  terhadap  patogen Aeromonas hydrophila secara in vitro . Keanekaragaman jenis bakteri kandidat probiotik  dengan  kondisi  sampel  lumpur  dan perairan  menunjukkan  bahwa  pada  area  muara (T 4 dan T 5 ) lebih beragam jenis bakteri kandidat probiotik  yang  ditemukan  dibandingkan  pada area  yang  jauh  dari  muara  (T 1 ,  T 2 dan  T 3 ). Supriadi  (2001)  menyatakan  bahwa,  estuaria (muara)  merupakan  ekosistem  yang  produktif. Tingginya  produktifitas  di  wilayah  estuaria didukung  oleh  tersedianya  kandungan  nutrien yang cukup  bagi organisme di perairan tersebut demikian  pula  bagi  mikroorganisme  salah satunya bakteri.

## Kesimpulan
Berdasarkan  hasil  penelitian  dapat disimpulkan  bahwa  dari  lima  sampel  lumpur hutan  mangrove  Wonorejo  yang  diambil  pada titik pengambilan mulai dari muara utara sampai muara selatan hutan mangrove, ditemukan tujuh spesies  bakteri  kandidat  probiotik  yaitu, Bacillus sp., B.  subtilis , B.  licheniformis , Pseudomonas sp., P . pseudomallei , Vibrio alginolyticus dan Microccus sp.
Hasil  penelitian  ini  masih  dalam bentuk  bakteri  kandidat  probiotik  sehingga diperlukan  uji tantang terhadap bakteri patogen secara in  vitro dan  uji  patogenitas  pada  ikan secara in  vivo agar  dapat  diketahui  manfaatnya pada bidang perikanan.

## Daftar Pustaka
Anwar,  C.  dan  H.  Gunawan.  2007.  Peranan
Ekologis  dan  Sosial  Ekonomis  Hutan Mangrove dalam Mendukung Pembangunan Wilayah Pesisir. Prosiding Ekspose Hasil-Hasil Penelitian. hal 1-12.
Ardiansyah, M. A. Baiduri, Dahlia dan Yuliadi. 2011.  Isolasi  dan  Identifikasi  Bakteri Probiotik Potensial dari Kerapu Macan Epinephelus  uscuguttatus in  South Sulawesi  Waters.  Aqua  Hayati  7  (3)  : 163-173 . Darmayati,  Y.,  D.  H.  Kunarso  dan  Ruyitno. 2009.  Dinamika  Bakteri  Indikator
Pencemaran di Perairan Estuari Cisadane. Jurnal Oseanologi dan Limnologi Indonesia 35(2): 273-290.
Far,  H.  Z.  2009.  Effects  Of  Probiotics  on  The Growth  And  Survival  of  Whiteleg Shrimp  ( Litopenaeus v annamei )  and Their  Inhibitory  Roles  Against Vibrio parahaemolyticus .  Thesis.  School  of Graduate  Studies.  Universiti  Putra Malaysia. hal vi-vii. Feliatra., I. Efendi dan E. Sugandi. 2004. Isolasi dan  Identifikasi  Bakteri  Probiotik  dari Ikan  Kerapu  Macan  ( Ephinephelus fuscogatus )  dalam  Upaya  Efisiensi Pakan  Ikan.  Jurnal  Natur  Indonesia  6 (2): 75-80.
Geo  Eye,  Tele  Atlas,  Terrametrics  and  Digital Globe.  2013.  Wonorejo,  Rungkut,
Surabaya, East Java. Global Positioning System (GPS). England. Holt,  G.J.,  N.R.  Krieg,  P.H.A.  Sneath,  J.T. Stanley  and  S.T.  Williams.  2005. Bergeys Manual Determinative Bacteriology .  Lippincott  Williams  and Wilkins. Philadelphia. pp. 93-562. Irianto,  A.  dan  P.  M.  Hendrati.  2003. Keragaman Hayati Bakteri Heterotrofik Aerobik Perairan Pantai Baron, Gunung Kidul, Yogyakarta. Biodiversitas 4 (2) : 80-82. Jusadi, D.,  E.  Gandara dan  I.  Mokoginta. 2004. Pengaruh Penambahan Probiotik Bacillus  Sp.  pada  Pakan  Komersil Terhadap Konversi Pakan dan Pertumbuhan  Ikan  Patin Pangasius hypophthalmus . Jurnal Akuakultur
Indonesia. 3 (1): 15-18.
Masithah,  E.D.  2011.  Upaya  Menurunkan Dominansi Microcystis  Aeruginosa Menggunakan  Enzim  Pektinase  dari Pseudomonas  Pseudomallei .  Berkala Penelelitian  Hayati  Edisi  Khusus:  4C (83–86).
Osman,  H.A.M., T.B. Ibrahim, W. Soliman and O. Aboud. 2010. Improvement Growth
And  Immune  Status  Using  A  Potential Probiotic Bacteria Micrococcus species Among Cultured Oreochromis niloticus .  New  York  Science  Journal.
3(10) : 5-11.
Prayogo,  B.S.Rahardja  dan  A.  Manan.  2012.
Eksplorasi Bakteri Indigen pada Pembenihan Ikan Lele Dumbo ( Clarias
Sp ) Sistem Resirkulasi Tertutup. Jurnal Ilmiah  Perikanan  dan  Kelautan  4  (2)  : 193-197.
Purnobasuki,  H.  2005.  Tinjauan  Perspektif Hutan Mangrove. Airlangga University Press, Surabaya. hal. 2-8. Sarker,  A.  S.,  Rahman,  S.N.  Khan,  and  M.  N. Naser.  2012.  Optimization  and  Partial Characterization of a Putative Probiotic Bacterium  Antagonistic  to  Vibrios  in Shrimp Larval Rearing System. Journal Pharmacy Science. 9(1): 23-29. Subagiyo  dan  A.  Djunaedi.  2011.  Skrining
Kandidat Bakteri Probiotik dari Saluran Pencernaan Ikan Kerapu Berdasarkan  Aktivitas  Antibakteri  dan Produksi Enzim Proteolitik Ekstraseluler.  Ilmu  Kelautan.16  (1)  : 41-48. Suwarsih. 2011. Isolasi Dan Identifikasi Bakteri
Probiotik  dari  Ikan  Kerapu  Macan ( Ephinephelus f uscogatus ) dalam Upaya Efisiensi Pakan Ikan. Prospektus, IX (1) : 48-55.
Supriadi, I. H. 2001. Dinamika Estuaria Tropik. Oseana, XXVI (4) : 1-11. Verschuere,  L.,  G.  Rombaut,  P.  Sorgeloos,  and W. Verstraete. 2000. Probiotic Bacteria as  Biological  Control  Agents  in Aquaculture.
Microbiology
and
Molecular  Biology  Review,  64  (4)  : 655-671.
Vijayan,  KK.,  I.S.  B.  Singh,  N.S.  Jayaprakash, S.V.  Alavandi,  S.  Somnath  Pai,  R. Preetha, J.J.S. Rajan, and T.C. Santiago.  2005.  A  Brackishwater Isolate  Of  Pseudomonas  PS-102,  A Potential Antagonistic Bacterium
Against Pathogenic Vibrios  In Penaeid and  Non-Penaeid  Rearing  Systems. Aquaculture 251 : 192–200. Widanarni.  A.  Suwanto,  Sukenda,  and  B.  W. Lay.  2003.  Potency  of Vibrio Isolates for  Biocontrol  of  Vibriosis  In  Tiger Shrimp (Penaeus  Monodon) Larvae. Biotropia No. 20 : 11 – 23. Widyawati, A. 2008. Bacillus sp. Asal Rizosfer Kedelai    Yang  Berpotensi  Sebagai Pemacu  Pertumbuhan  Tanaman  Dan Biokontrol  Fungi  Patogen  Akar.  Tesis.
Sekolah Pasca Sarjana. Institut Petanian Bogor. hal iii. Wijiyono,  2009.  Keanekaragaman  Bakteri Serasah  Daun  Avicenia  marina  yang Mengalami Dekomposisi pada
Berbagai  Tingkat  Salinitas  di  Teluk
Tapian  Naupli,  Tesis,  Sekolah  Pasca
Sarjana  Universitas  Sumatera  Utara, Medan. hal 1-3.