Jurnal Farmasi,  e-ISSN: 2655-0814 Vol. 1 No.1 Edisi Mei-Oktober 2018 http://ejournal.medistra.ac.id/index.php/JFM ============================================================================================ Received: 10 April 2019 :: Accepted: 25 April 2019 :: Published: 29 April 2019

## PERBEDAAN TEKNIK PENANAMAN TERHADAP HASIL JUMLAH
KOLONI BAKTERI Escherichia coli PADA SUHU INKUBASI 36ºC

## Vincentia Ade Rizky, Sa’adah Siregar, Visensius Krisdianilo, Jhon Patar Sinurat
Institut Kesehatan Medistra Lubuk Pakam Jurusan Teknologi Laboratorium Medik Jl. Sudirman, No. 38, Lubuk Pakam, Deli Serdang, Sumatera Utara, 20512 e-mail : vincentiarizky@gmail.com
DOI: https://doi.org/10.35451/jfm.v1i2.173

## Abstract
Escherichia coli bacteria are gram-negative bacteria in form of single or paired cells it is included Enterobacteriaceae  family  and  intestinal  normal  flora.  Laboratory  tests  conducted  for  the calculation of the number of germs can be done using cultivation techniques using a loop and micropipet. The aim of this research is to know the difference of number of bacteria bacteria on calibrated  loop  and  micropipet  to  colony  of  Escherichia  coli  bacteria.    This  research  is  an analytical  observation  study  with  cross  sectional design.  The  hypothesis  was  tested  using independent t test with 95% confidence level. The results showed the average number colonies of Escherichia  coli bacteria  growing  on  PCA  media  using  calibrated  loop  technique  was  138,25 CFU/mL where as the average number of colonies of Escherichia coli bacteria grown on PCA media  using  micropipet  technique  was  104,56  CFU/mL,  and  significant  value  of  p  =  0,001. Furthemore, the result of data analysis showed that there were no any differences in the number of colonies of Escherichia coli bacteria in planting using calibrated loop technique and micropipet at incubation temperature of 36ºC.
Keywords: E. coli, incubation temperature of 36ºC , micropipet

## 1. PENDAHULUAN
Bakteri Escherichia  coli merupakan flora normal organ intestinal berbentuk batang gram negatif dari keluarga Enterobacteriaceae . Bakteri  ini  dapat  menjadi  patogen  bila mencapai  jaringan  diluar  jaringan  intestinal (Hera, 2004).
Escherichia coli
merupakan mikroorganisme  tersering  penyebab  infeksi saluran  kemih.  Infeksi  saluran  kemih  (ISK) merupakan  suatu  penyakit  dimana  jumlah bakteriuria  terdapat  ≥10 8 bakteri  per  liter (ekivalen  dengan  ≥10 5 bakteri/mL)  sampel urine  tengah  ( midstream )  segar  (Elliott et  al .,
2013).
Diagnosis  pasti  ISK  ( Gold  standard ) dapat  ditegakkan  dengan  kultur  urine  yaitu
dengan cara menghitung jumlah koloni bakteri pada media kultur dengan metode CFU/ Colony Forming Unit (Davey, 2005). Tahap  analitik  merupakan  salah  satu tahapan yang sangat penting untuk menegakkan diagnosa klinis bakteri
Escherichia coli. Tahap ini harus dhindari dari kesalahan agar pemantapan mutu laboratorium mikrobiologi dapat ditegakkan. Salah satu yang harus diperhatikan dalam tahap analitik adalah suhu inkubasi dan alat penanaman.
Bakteri Escherichia coli dapat tumbuh pada  suhu  10-40ºC  dengan  suhu  optimum pertumbuhan bakteri Escherichia coli 35-37ºC (Radji,  2010).  Pada  penelitian  ini  suhu  yang digunakan  adalah  suhu  optimum  pertengahan yaitu suhu 36ºC.
Jurnal Farmasi,  e-ISSN: 2655-0814 Vol. 1 No.1 Edisi Mei-Oktober 2018 http://ejournal.medistra.ac.id/index.php/JFM ============================================================================================ Received: 10 April 2019 :: Accepted: 25 April 2019 :: Published: 29 April 2019
Menurut  WHO  (2003)  tentang Basic Laboratory Procedures In Clinical  Bacteriology menyatakan  bahwa teknik biakan untuk kultur urine menggunakan teknik  sengkelit  dan  teknik  carik  celup  kertas saring.  Menurut  Sonnenwirth et  al .,  (1980) menyatakan bahwa teknik biakan untuk kultur urine  menggunakan  teknik  sengkelit  dan mikropipet.

## 2. METODE
Jenis  penelitian  yang  digunakan  adalah observasi  analitik  dengan  rancangan  penelitian cross  sectional .  Sampel  yang  digunakan  pada penelitian  ini  adalah Escherichia  coli ATCC 25922. Data yang didapatkan dianalisa menggunakan SPSS dengan uji Independent t test.

## 3.Hasil dan Pembahasan
Hasil jumlah koloni bakteri yang tumbuh pada  suhu  36ºC  menggunakan  sengkelit  dan mikropipet (tabel 1).
Tabel 1. Hasil Jumlah Koloni No Teknik Sengkelit Teknik Mikropipet 1 140 119 2 133 103 3 156 121 4 135 71 5 126 115 6 137 91 7 144 110 8 130 75 9 136 89 10 138 124 11 139 116 12 132 92 13 140 117 14 143 113 15 142 105 16 141 112 Jumlah 2212 1673
Rata-rata 138.25 104.56 Pada penelitian yang telah dilakukan dan dianalisa berdasarkan hasil uji independent t  test  didapatkan  nilai signifikan  =  0,001  lebih  kecil dari  nilai alpa  =  0,05,  artinya  terdapat  perbedaan jumlah  koloni  bakteri
Escherichia  coli pada media Plate Count Agar menggunakan teknik sengkelit dan teknik mikropipet. Adanya  perbedaan  jumlah  koloni pada kedua teknik dapat dilihat dari  pertumbuhan  koloni  pada  media. Pertumbuhan koloni pada media yang ditanam menggunakan teknik sengkelit  hampir  tersebar  merata,  hal  ini dikarenakan  teknik  yang  digunakan  pada saat menggores permukaan media  membentuk  satu  garis  lurus kemudian  disebarkan  secara  zig-zag menggunakan sengkelit. Sedangkan pertumbuhan koloni yang ditanam menggunakan teknik mikropipet bertumpuk,  hal  ini  dikarenakan  teknik yang  digunakan  untuk  menyebarkan cairan menggunakan spreder atau batang  gelas  bengkok.  Hal  ini  pula didukung  oleh  penelitian  yang  telah dilakukan Kadri (2015).

## 4. Kesimpulan
Berdasarkan  hasil  penelitian  bakteri Escherichia  coli pada  penanaman  menggunakan teknik sengkelit dan mikropipet yang ditunjukkan dengan  pertumbuhan  koloni  bakteri  pada  media dengan  jumlah  koloni  yaitu  rata-rata  jumlah koloni  menggunakan  teknik  sengkelit  adalah 138,25  CFU/mL,  sedangkan  teknik  mikropipet adalah  104,56  CFU/mL.  Sehingga,  dapat disimpulkan  terdapat  perbedaan  jumlah  koloni bakteri Escherichia  coli pada  penanaman menggunakan  teknik  sengkelit  dan  teknik mikropipet.
Adapun  saran  dari  penelitian  ini  adalah perlu  dilakukan  penelitian  lebih  lanjut  untuk jumlah koloni bakteri yang ditanam menggunakan
Jurnal Farmasi,  e-ISSN: 2655-0814 Vol. 1 No.1 Edisi Mei-Oktober 2018 http://ejournal.medistra.ac.id/index.php/JFM ============================================================================================ Received: 10 April 2019 :: Accepted: 25 April 2019 :: Published: 29 April 2019
teknik sengkelit pada suhu inkubasi 35ºC, 36 ºC, dan 37 ºC.

## 5. DAFTAR PUSTAKA
Davey P (2005). At a Glance Medicine. Jakarta : Erlangga
Elliott  T,  Worthington  T,  Osman  H,  Gill  M
(2013).  Mikrobiologi  Kedokteran  &  Infeksi
Edisi 4. Jakarta : EGC
Hera,  Noviana  (2004).  Pola  kepekaan  antibiotik Eschericia  coli yang  diisolasi  dari  berbagai spesimen klinis. Jakarta : Universitas Katolik Atma Jaya Jakarta
Kadri  AN,  Gelgel  KTP,  Suarjana  IGK  (2015).
Perbedaan cara Penyebaran Suspensi  Terhadap  Jumlah  Bakteri  Pada Media  Eosin  Methylene  Blue  Agar.  Jurnal Indonesia  Medicus  Veterinus,  4  (3)  :  205  –
212
Radji M (2010). Buku Ajar Mikrobiologi Panduan
Mahasiswa Farmasi & Kedokteran. Jakarta : EGC
Sonnenwirth  AC,  Jarett  L  (1980).  Gradwohl’s Clinical  Laboratory  Method  and  Diagnosis, Vol. II. St Louis : CV Mosby Company
World  Health  Organization  (2003).  Basic
Laboratory Procedures In
Clinical
Bacteriology, 2nd Ed. Switzerland, Geneva.