BioEksakta: Jurnal Ilmiah Biologi Unsoed Volume 1, Nomor 2 (2019): 44-47 E-ISSN: 2714-8564

## Toksisitas Subletal Limbah Cair Batik Hasil Biosorpsi terhadap
Hematokrit Ikan Mas ( Cyprinus carpio )

## Nur Hidayati, Sri Lestari*, Eko Setio Wibowo
Fakultas Biologi, Universitas Jenderal Soedirman Jalan dr. Suparno 63 Purwokerto 53122 *Email: srilestari.bio@unsoed.ac.id
Rekam Jejak Artikel:
Diterima  : 08/08/2019 Disetujui  : 18/10/2019

## Abstract
Research on the hematocrit value of fish exposed to batik wastewater resulted from biosorption process needed because the blood is one indicator of contaminants present that entering the fish body. This research aims to determine the effects of batik wastewater resulted from biosorption process  exposure  on  Carp  ( Cyprinus  carpio )  hematocrit  value.  The  treatments  are  batik wastewater resulted from biosorption process with different concentrations, i.e 0; 1.32; 2.64 and 3.96 % v.v -1 . The carp maintained for 7 days and the blood was taken in the 8 days. Measured variables  was  hematocrit  value.  The  result  shows  that  the  highest  of  the  hematocrit  in  0%v/v -1 concentration was 31.67±1.49 % while the lowest in 3.96 % v.v -1 concentration was 26.00±1.15 %.The conclusion, that batik wastewater resulted from biosorption process induced a significant increase the hematocrit value.
Keyword : batik wastewater, biosorpstion, hematocrite, carp

## Abstrak
Nilai  hematkrit  ian  dapat  digunakn  indkator  cemaran  lmba  cairan  batk  hasl  biosorpsi.  Tujuan penelitian  adalah  untuk  mengetahui  pengaruh  pemaparan  limbah  cair  batik  hasil  biosorpsi terhadap nilai hematokrit Ikan Mas ( Cyrinus carpio ). Perlakuan berupa konsentrasi limbah cair batik  hasil  biosorpsi  yang  terdiri  dari  0;  1,32;  2,64  dan  3,96  %  v.v -1 .  Ikan  dipelihara  selama  7 hari  dan  sampel  darah  diambil  pada  hari  ke-8.  Parameter  yang  diukur  adalah  nilai  hematokrit. Hasil  penelitian  menunjukkan  nilai  hematokrit  tertinggi  pada  perlakuan  0  %  v.v -1 sebesar 31,67±1,49  %    dan  terendah  pada  konsentrasi 3,96  %  v.v -1 sebesar  26,00±1,15  %.  Kesimpulan penelitian yaitu limbah cair batik hasil biosorpsi berefek terhadap peningkatan nilai hematokrit. Kata kunci : biosorpsi, ikan mas, limbah cair batik, hematokrit

## PENDAHULUAN
Sentra  Batik  Sokaraja  merupakan  kumpulan dari  beberapa  industri  batik  rumahan.  Limbah  cair yang dihasilkan langsung dibuang tanpa pengolahan ke Kali Wangan sehingga menyebabkan pencemaran. Masyarakat memanfaatkan Kali Wangan  sebagai  sumber  irigasi  dan  aktivitas  lain, seperti  mandi,  mencuci  dan  budidaya  ikan. Pencemaran  limbah  cair  batik  di  kali  Wangan berdampak  terhadap  biota  yang  hidup  di  dalamnya dan  manusia  yang  mengkonsumsinya.  Kadar Karbondioksida  terlarut  (COD),  oksigen  terlarut (BOD),  dan  TSS  air  Kali  Wangan  telah  melampaui baku  mutu  lingkungan  berturut-turut,  yaitu  672,78, 540,42,  dan  540,13  mg.L -1 ,  sementara  untuk parameter  logam  berat  yang  melebihi  baku  mutu adalah  krom  sebesar  0,231  mg.L -1 (Lestari et  al., 2015).
Kandungan logam berat pada limbah cair batik dapat dipisahkan melalui proses biosorpsi. Biosorpsi merupakan  proses  pemisahan  logam  berat  dari limbah cair batik menggunakan organisme mati atau yang  diinaktifkan  (Okuo et  al .,  2006).  Proses
biosorpsi  memiliki  keunggulan,  yaitu  bersifat efisien, murah, aman, dan memiliki laju penyerapan relatif  tinggi  (Joshi,  2017).  Penggunaan  biosorben campuran  antara  jerami  dan  limbah  baglog Pleuratus  ostreatus dengan  perbandingan  3:1  yang dikemas  dengan  kantung  teh  celup  termodifikasi telah  menunjukkan  penurunan  kadar  Cr  sebesar 75,72%  dari  konsentrasi  awal  0,0219  menjadi 0,0016  mg.L -1 (Lestari et  al., 2019).  Hal  tersebut mengindikasikan bahwa masih ada kandungan krom yang  tersisa    limbah  cair  batik  hasil  biosorpsi, sehingga perlu dilakukan uji toksisitas terhadap ikan sebelum dibuang ke lingkungan. Pemaparan Cr pada ikan  berdampak  buruk,  mulai  dari  aspek  fisiologi, histologi, enzimatis, sampai aspek genetik (Velma et al ., 2009).
Nilai  LC 50 96  jam  limbah  batik  cair  hasil biosorpsi  terhadap  Ikan  Nila  sebesar  52,876  ppm (Lestari et al., 2017),. Nilai LC 50 tersebut tergolong kurang toksik (Casarett & Klaassen, 2008). Namun, uji  toksisitas  subletal  terhadap  insang  menunjukkan kerusakan  tingkat  dua  yaitu  terjadinya  hiperplasia sedangkan  terhadap  hepar  menunjukkan  adanya edema  pada  sel  hepatosit  (Lestari,  2018).  Riset
tentang  toksisitas  subletal  limbah  cair  batik  hasil biosorpsi terhadap nilai hematokrit darah. Ikan Mas ( Cyprinus  carpio )  belum  pernah  dilakukan.  Ikan mas  merupakan  ikan  yang    banyak  dibudidayakan oleh  masyarakat  di  sekitar  Kali  Wangan.  Tujuan penelitian  adalah  untuk  mengetahui  pengaruh pemaparan  dan  konsentrasi  limbah  cair  batik  hasil biosorpsi  yang  paling  berpengaruh  terhadap  nilai hematokrit  Ikan  Mas  sehingga  dapat  dijadikan acuhan mengenai kualitas biota konsumsi.

## MATERI DAN METODE
Penelitian  ini  telah  dilaksanakan  di  Stasiun Percobaan, Laboratorium Mikrobiologi dan Laboratorium  Fisiologi  Hewan  Fakultas  Biologi, Universitas  Jenderal  Soedirman,  Purwokerto,  Jawa Tengah.  Metode  yang  digunakan  dalam  penelitian adalah  eksperimental  dengan  rancangan  acak lengkap pola  searah  menggunakan empat perlakuan dengan  enam  kali  ulangan.  Penentuan  konsentrasi berdasarkan  nilai  LC 50 96  jam  limbah  batik  hasil biosorpsi  terhadap  ikan  Nila,  yaitu  5,28  %  v.v -1 . Konsentrasi  yang  diujikan  adalah  kontrol  (0  %  v.v - 1 );25%  nilai  LC 50 (1,32  %  v.v -1 );  50%  nilai  LC 50 (2,64 % v.v -1 ) dan 75% nilai LC 50 (3,96 % v.v -1 ).
Variabel  bebas  penelitian  adalah  konsentrasi limbah cair batik hasil biosorpsi, sedangkan variabel terikatnya  adalah  nilai  hematokrit  (%)  darah  Ikan Mas.  Parameter  pendukung  meliputi  kualitas  air pada  media  berupa  suhu,  pH,  dan  oksigen  terlarut. Pengamatan  parameter  pendukung  dilakukan  satu kali setiap hari selama 7 hari pemeliharaan.

## Persiapan Limbah Cair Batik
Limbah  cair  batik  diperoleh  dari  Sentra  Batik Sokaraja  di  Desa  Sokaraja  Kidul,  Kecamatan Sokaraja,  Kabupaten  Banyumas,  Jawa  Tengah. Limbah  cair  batik  dibiosorpsi  menggunakan campuran  jerami  padi  dan  limbah  baglog P. ostreatus yang  dikemas  dalam  kantung  teh  celup dengan  ukuran  6  x  6  cm  dan  diratakan  dengan  las plastik.  Biosorben  ditimbang  dengan  bobot  300  mg dengan  komposisi  3:1.  Limbah  cair  batik  sebanyak 100 mL dimasukkan dalam erlenmeyer 250 mL dan ditambah  1  buah  biosorben.  Erlenmeyer  ditutup dengan  plastik  dan  dihomogenkan  dalam shaker dengan kecepatan 170 rpm pada suhu ruang selama satu jam.

## Persiapan Hewan Percobaan
Hewan  uji  yang  digunakan  adalah  ikan  mas dengan  panjang  20-25  cm  dan  bobot  90-140  g sebanyak  24  ekor.  Ikan  diperoleh  dari  pembibitan ikan  di  Desa  Beji,  Purwokerto.  Ikan  diaklimasi selama 7 hari pada bak fiber yang dilengkapi dengan aerator.  Air  disipon  3  hari  sekali.  Selama  aklimasi ikan  diberi  pakan  pelet  yang  diberikan  pada  pagi dan  sore  hari.  Pemberian  pakan  dilakukan  secara adlibitum.
Uji Subletal (Lestari et al., 2018) Eksperimen  dilakukan  secara batch  culture menggunakan  bak  plastik  volume  15  L  dengan ukuran  30x25x20  cm 3 sebanyak  24  buah.  Bak plastik dilengkapi dengan sistem aerator. Setiap bak berisi  10  L  media  sesuai  dengan  perlakukan  dan  1 ekor  ikan.    Ikan  Mas  dipelihara  dengan  dipaparkan limbah  cair  batik  hasil  biosorpsi  selama  7  hari pemaparan. Darah diambil dengan spuit 1  mL  yang telah dibilas dengan EDTA 10% sebagai antikoagulan. Sampel  darah  diambil  dengan menggunakan teknik punctie cardiac .

## Pengukuran Nilai Hematokrit
Penentuan nilai hematokrit dilakukan menggunakan  skala  ukur  hematokrit.  Sampel  darah diambil  sebanyak  ¾  bagian  tabung,  lalu  salah  satu ujung  yang  berlawanan  dengan  sampel  darah disumbat  dengan  plastisin . Tabung  kemudian  di sentrifugasi  dengan  kecepatan  10.000  rpm  selama lima  menit.  Nilai  hematokrit  yang  diperoleh  dibaca dengan  skala  ukur  hematokrit  dalam  satuan  persen (Sari et al., 2016).

## Analisis Data
Data  nilai  hematokrit  dianalisis  menggunakan analysis of variance dengan bantuan software SPSS 16.0  pada  tingkat  kesalahan  5%  untuk  mengetahui efek  pemaparan  limbah  cair  batik  hasil  biosorpsi terhadap  nilai  hematokrit  darah  Ikan  Mas.  Hasil dilanjutkan  dengan  uji  Duncan  pada  tingkat kesalahan  yang  sama  untuk  mengetahui  konsentrasi yang paling berpengaruh terhadap nilai hematokrit.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  penelitian  toksisitas  subletal  limbah  cair batik  terhadap  nilai  hematokrit  Ikan  Mas  selama  7 hari disajikan pada Gambar 1. Berdasarkan Gambar 1.  nilai  hematokrit  ikan  berkisar  antara  31,67±1,49
%  hingga  26,00±1,15  %.  Nilai  kisaran  hematokrit tersebut  masih  berada  di  batas  normal.  Kadar normal  hematokrit  ikan  berkisar  antara  20-45% Hrubec  &  Smith  (2010).  Perlakuan  0  %v/v -1 memiliki  rata-rata  tertinggi  sebesar  31,67±1,49  %, diikuti  dengan  perlakuan  1,32  %  v.v -1 dengan  nilai rata-rata  sebesar  28,17±0,90  %  dan  2,64  %  v.v -1 dengan  nilai  rata-rata  sebesar  27,50±1,12  % sedangkan terendah 3,96 % v.v -1 sebesar 26,00±1,15
%.  Nilai  hematokrit  terjadi  berbanding  terbalik dengan konsentrasi limbah cair batik hasil biosorpsi yang dipaparkan.
Parameter nilai hematokrit merupakan gambaran  dari  proporsi  besarnya  jumlah  eritrosit yang terdapat di dalam darah ikan. Nilai hematokrit dapat  digunakan  untuk  menggambarkan  fluktuasi jumlah eritrosit dan hemoglobin. Hasil analisis yang menunjukkan  terjadinya  penurunan  nilai  hematokrit sesuai  dengan  penelitian  Uttamrao et  al .  (2017), yang  melaporkan  bahwa  perlakuan  sublethal pemaparan  logam  Cr(III)  dalam  bentak  kromium klorida dengan konsentrasi 2 mg.L -1 pada C. carpio
telah  mempengaruhi  parameter  hematologis  darah berupa penurunan jumlah eritrosit, kadar hemoglobin dan nilai hematokrit.
31,67
28,17 27,50 26,00 0,00 5,00 10,00 15,00 20,00 25,00 30,00 35,00 0 1,32 2,64 3,96 N il ai H em at ok ri t (%) Konsentrasi (% v.v -1 ) c b ab a
Gambar  1. Histogram  jumlah  rata-rata  nilai  hematokrit ikan mas yang terpapar limbah cair batik hasil biosorpsi. Keterangan:  Huruf  superskipt  yang  sama  menunjukkan tidak ada perbedaan nyata (P>0,05)
Perubahan  nilai  hematokrit  di  dalam  darah ikan  menurut  Prayogo et  al. (2016),  telah menggambarkan  terjadinya  hipoksia  akibat  adanya logam  berat  dalam  organ  insang.  Hal  tersebut menyebabkan  hemoglobin  yang  berperan  sebagai transpor CO 2 dan O 2 terhambat, sehingga hemoglobin mengalami kondisi turun naik dan akan diikuti oleh  nilai  hematokrit.  Penelitian  sebelumnya terkait  kondisi  stres  diketahui  dapat  memicu terjadinya gangguan keseimbangan osmotik. Kondisi  tersebut  dapat  menurunkan  nilai  pH  darah dan  meningkatkan  volume  eritrosit  dan  selanjutnya akan mempengaruhi nilai hematokrit (Tripathi et al., 2004).  Reaksi  stres  juga  diketahui  dapat  mengarah kepada  pelepasan  hormon  epinefrin  menyebabkan premature melepaskan  jenis  eritrosit immature dan eritrosit rusak dari limfa, sehingga akan mempengaruhi nilai hematokrit (Zaki et al., 2009).
Tabel 1. Parameter kualitas air media pemeliharaan
Konsentrasi (%
v.v -1 ) Parameter Temperatur ( o C) pH DO (mg.L -1 ) 0,00 23-24 6 6,0-7,6 1,32 23-24 6 6,4-8,0 2,64 23-24 6 7,0-7,8 3,96 23-24 6 6,0-7,6
Berdasarkan  hasil  analisis  statistik,  jumlah rata-rata  nilai  hematokrit  berbeda  nyata  (p<0,05) pada  setiap  perlakuan  konsentrasi  terhadap  kontrol. Konsentrasi  1,32  %  v.v -1 memiliki  pengaruh  yang sama  terhadap  nilai  hematokrit  dengan  konsentrasi 2,64%  v.v -1 ,  sedangkan  konsentrasi  2,64  %  v.v -1 memiliki  pengaruh  yang  sama  dengan  konsentrasi 3,69  %v.v -1 (Gambar  1).  Hal  tersebut  menunjukkan bahwa konsentrasi berpengaruh terhadap penurunan nilai hematokrit.
Faktor  lingkungan  perairan  ikan  hidup  atau dipelihara  seperti  temperatur,  pH,  dan  oksigen
terlarut  sangat  berpengaruh  terhadap  kondisi fisiologis  Ikan.  Pada  Tabel  1 menunjukkan  bahwa kualitas  air  media  pemeliharaan  berada  dalam kondisi  masih  normal  untuk  pemeliharaan  atau budidaya  ikan,  sehingga  tidak  mempengaruhi perlakuan penelitian . Hasil pengamatan menunjukkan bahwa temperatur  air  media  pemeliharaan  relatif  stabil berkisar  antara  23-24oC.  Kisaran  tersebut  masih dapat  tergolong  baik  untuk  pemeliharaan  atau budidaya ikan. Menurut Flajšhans & Hulata (2007), pada kisaran 23-30 o C ikan mas masih dapat tumbuh dengan  baik.  Parameter  temperatur  dinilai  sangat penting  karena  akan  berpengaruh  terhadap  aktivitas metabolik  dan  tingkah  laku  organisme. Ikan  yang dipelihara pada temperatur dingin akan menyebabkan  respon  imun  yang  rendah  jika dibandingkan dengan dipelihara pada air bertemperatur  lebih  hangat  (Nikoskelainen et  al.,
2004).  Kisaran  pH  air  media  pemeliharaan menunjukkan  nilai  yang  relatif  stabil  dan  masih berada pada kondisi layak untuk pemeliharaan ikan. Menurut  (Boyd,  1988),  nilai  kisaran  pH  untuk pemeliharaan  ikan  adalah  6-9.  Hasil  pengukuran untuk  nilai  oksigen  terlarut  memiliki  kisaran  antara 6,0-8,0. Kondisi tersebut masih berada pada kondisi baik  dan  mendukung  untuk  pemeliharaan  ikan.  Hal tersebut  sesuai  dengan  PP  No  82  Tahun  2001 tentang  Pengelolaan  Kualitas  Air  dan  Pengendalian Pencemaran air yang menjelaskan bahwa untuk ikan yang  termasuk  ke  dalam  famili  Cyprinadae  batas minamal kadar oksigen terlarut adalah 4.

## SIMPULAN
Pemaparan  limbah  cair  batik  hasil  biosorpsi terhadap Ikan Mas berpengaruh terhadap penurunan nilai  hematokrit  dan  konsentrasi  limbah  cair  batik hasil  biosorpsi  yang  paling  berpengaruh    adalah 75% dari nilai LC 50 sebesar 3,96% v.v -1 . Penurunan nilai  hematokrit  seiring  dengan  penambahan konsentrasi limbah cair batik hasil biosorpsi.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan  terimakasih  disampaikan  kepada Lembaga  Penelitian  dan  Pengabdian  kepada Masyarakat  Universitas  Jenderal  Soedirman  atas pembiayaan  penelitian  melalui  Skim  Peningkatan Kompetensi
dengan Nomor Kontrak 2461/UN23.14/PN/2018.

## DAFTAR REFERENSI
Boyd,  C.E.,  1988. Water  Quality  in  Warmwater Fish Pond. Faurth Printing. Auburn Aniversity  Agricultural  Experiment  Station: Alabama, US.
Casarett, L.J. & Klaassen, C.D., 2008. Casarett and Doull’s  Toxicology:  The  Basic  Science  of Poisons . New York: McGraw-Hill Medical. Flajšhans, M. & Hulata, G., 2007. Genetic Impact of Aquaculture Activities on Native Populations:
Common  Carp-Cyprinus  carpio .  Framework plan of the European Commission: Eropa.
Hrubec,  T.C.  &  Smith,  S.A.,  2010. Hematology  of Fishes .  In  Weiss  DJ  &  Wardrop  KJ  (Eds.). Veterinary  Hematology  6rd  Edition.  New Jersey: Wiley-Blackwell Ltd.
Joshi,  N.C.,  2017.  A  Brief  Discussion  on Biosorption  and  Biosorption  Technology. Journal  of  Pharmaceutical,  Chemical  and Biological Sciences , 5(4), pp.330-336. Lestari,  S.,  Sudarmadji,  S.D.  Tandjung,  S.D.  & Santosa,  S.J.,  2015.  Kajian  Kualitas  Air  Kali Wangan  yang  Tercemar  Limbah  Cair  Batik. Prosiding. Seminar  Nasional  Pengelolaan Sumberdaya  Alam  dan  Lingkungan,  pp:553- 556 ISBN:978-602-73313-0-3.
------------.,  2017.  Lethal  Toxicity  of  Batik  Waste Water  Bio-Sorption  Result  in  Tilapia. Advanced Science Letter , 23, pp. 2611-2613. ------------.,  2018.  Biosorpsi  Krom  Pada  Limbah Cair  Batik  Menggunakan  Biosorben  dalam Kantung  Teh  Celup  dan  Uji  Toksisitasnya terhadap  Ikan  Nila  ( Oreochromis  niloticus Linnaeus, 1758). Disertasi. Sekolah Pascasarjana,  Universitas  Gadjah  Mada, Yogyakarta.
------------.,  Dewi,  R.S.,  Wibowo,  E.S.  &  Atang. 2019.  Biosorption  Cr  and  Dye  Using Biosorbent  Modified  Tea  Bag. Journal  of Microbal  Systematics  and  Biotechnology , 1(1), pp. 38-43.
Nikoskelainen, S.,  Bylund, G. & Lilius, E.M., 2004.
Effect  of  Environmental  Temperature  on Rainbow Trout ( Oncorhynchus mykiss)
Innate Immunity. Developmental and Comparative Immunology , 28(6), pp.58-592. Nordberg,  G.F.,  Bruce,  A.F.  &  Monica,  N.,  2015. Handbook  on  the  Toxicology  of  Metals. Fourth  Edition. United  Kingdom:  Elsevier Science, Academic Press.
Okuo,  J.  M.,  Sanni,  S.  B.  &  Aigbedio,  S.,  2006. Selective  Biosoption  of  Heavy  Metal  Ions from  Aqueous  Solutions  by  Pre-Treated Negerian  Fresh  Water  Algae. Trends  in Applied Sciences Research , 1(1), pp.83–90.
Prayogo,  N.A.,  Atik,  H.,  Asrul,  S.S.  &  Yunasfi., 2016.  Uji  Toksisitas  Letal  dan  Subletal Logam  Berat  Merkuri  (Hg)  Terhadap  Ikan Nilem ( Osteochilus hasselti ). Omni Akuatika , 12(1), pp.86-94.
Sari,  Y.,  Djong,  H.T.  &  Resti,  R.,  2016.  Gambaran Darah  Katak Fejervarya  limnocharis di
Lahan Pertanian yang Menggunakan
Pestisida di Sumatera Barat. Biogenesis, 4(2), pp.115-121.
Tripathi,  N.K.,  Latimer,  K.S.  &  Burnley,  V.V., 2004.  Hematologic  Reference  Intervals  for Koi  ( Cyprinus  carpio ),  Including  Blood  Cell Morphology, Cytochemistry, and
Ultrastructure. Vet.  Clin.  Pathol .  33(2), pp.74-83.
Uttamrao,  B.M.,  Jaiswal,  N.R.  &  Kadam,  M.S., 2017.  Hematological  Profile  of  Common Carp  ( Cyprinus  carpio )  Under  Sublethal Effect  of  Trivalent  Chromium. International, Res.  J.  of  Science  and  Engineering ,  5(6), pp.104-108.
Velma,  V.,  Vutukuru,  S.S.  &  Tchounwou,  P.B., 2009. Ecotoxicology of Hexavalent Chromium  in  Freshwater  Fish:  A  Critical Review. Rev  Environ  Health ,  24(2),  pp.129- 145.
Zaki,  M.S.,  Moustafa ,  S.,  Rashad,  H.  &  Sharaf,  N., 2009. Assessment  of  Hazardous  Effect  of Pollution on Oreochromis niloticus Including
Hematological, Biochemical & Immunological  Parameters .  J.  Agricult.
Environ. Sci ., 3(1), pp.91-95.