## PENETAPAN KADAR VITAMIN C DAN UJI AKTIFITAS
ANTIOKSIDAN SARI BUAH SONGI ( Dillenia serrata Thunb.) TERHADAP RADIKAL DPPH ( DIPHENYLPICRYLHYDRAZYL )
Irnawati 1) , Mirnawati Purba 2) , Riska Mujadilah 3) , Sarmayani 3)
1) Program Studi Farmasi, Fakultas Farmasi Universitas Halu Oleo, Kendari
2) Balai Besar Pengawasan Obat dan Makanan, Kendari
3) Akademi Farmasi Bina Husada, Kendari (Koresponden: irnawati.ichang@yahoo.com)

## ABSTRACT
Songi  (Dillenia  serrata  Thunb.)  is  a  plant  wide  spread  in  Asia,  including  Indonesia.  These plants  are  found  in  Indonesia,  including  Sulawesi  region.  This  plant  has  the  particularity  in  their fruit. However, the use of fruit songi not optimal because only a few local people who can enjoy. The fruit  is  perishable  and  not  knowing  the  typical  benefits  of  this  fruit.  The  aims  of  the  study  was  to determine  of  vitamine  C  levels  and  antioxidant  activity  assays  of  fruit  juice  Songi  against  DPPH radicals using UV-Vis spectrophotometry method. Results of the vitamine C levels of fruit juice Songi (Dillenia serrata Thunb.) used the linear regression equation y = 0,053x-0.177 is 1.09% with a weak antioxidant  activity  against  free  radicals  DPPH  indicated  with  IC 50 value  of  161.63  mg/L  ,  while  a comparison of vitamine C have a very strong antioxidant activity as indicated by the IC 50 value 24.63 mg/L.
Keywords : Dillenia serrata Thunb., juice, vitamine C, antioxidant activity, DPPH

## ABSTRAK
Tumbuhan  songi  ( Dillenia  serrata Thunb.)  merupakan  tumbuhan  yang  tersebar  luas  di kawasan Asia termasuk Indonesia. Tumbuhan ini banyak ditemukan di kawasan Indonesia termasuk Sulawesi.  Tumbuhan  ini  memiliki  kekhasan  pada  buahnya.  Namun,  pemanfaatan  buah  songi  belum optimal  karena  hanya  beberapa  masyarakat  lokal  saja  yang  dapat  menikmati.  Hal  ini  dikarenakan buah  ini  cepat  busuk  serta  belum  diketahuinya  manfaat  khas  dari  buah  songi  ini.  Penelitian  ini bertujuan  untuk  menetapkan  kadar  vitamin  C  dan  menguji  aktifitas  antioksidan  sari  buah  songi terhadap  radikal  DPPH  menggunakan  metode  spektrofotometri  UV-Vis.  Hasil  pengujian  kadar vitamin  C  sari  buah  songi  ( Dillenia  serrata Thunb.)  menggunakan  persamaan  regresi  linear  y  = 0,053x-0,177 sebesar 1,09% dengan  aktifitas antioksidan yang lemah terhadap radikal bebas DPPH yang ditunjukkan dengan nilai IC 50 sebesar 161,63 mg/L, sedangkan pembanding vitamin C memiliki aktivitas antioksidan sangat kuat yang ditunjukkan dengan nilai IC 50 24,63 mg/L.
Kata kunci : Dillenia serrata Thunb., sari buah, vitamin C, aktifitas antioksidan, DPPH

## PENDAHULUAN
Tumbuhan  Songi  ( Dillenia  serrata
Thunb.)  tergolong  suku  Dilleniaceae  yang merupakan tumbuhan yang tersebar luas di kawasan Asia termasuk Indonesia. Tumbuhan  ini  banyak  ditemukan  di kawasan  Indonesia  termasuk  Sulawesi. Tumbuhan  Songi  ditemukan  tumbuh  pada daerah dengan ketinggian 80–140 meter di atas  permukaan  laut  (dpl).  Kekhasan  yang dimiliki  oleh  buah  songi  ini  terutama adalah  pada  rasa  asam  yang  menyegarkan dan warna buah  yang menarik. Tumbuhan songi  mengandung  senyawa  asam  sitrat, vitamin  C  dan  betakaroten  pada  buah. Bagian tumbuhan lainnya seperti daun dan batang  mengandung  senyawa  polifenol, seperti  tannin  dan  flavonoid.  Secara empiris tumbuhan ini dimanfaatkan sebagai  obat  sariawan,  muntah  darah, demam, dan obat luka.
Berdasarkan metabolit sekundernya tumbuhan  songi  memiliki  potensi  sebagai penangkal  radikal  bebas.  Radikal  bebas merupakan  molekul  yang  memiliki  satu atau lebih elektron yang tidak berpasangan.  Elektron-elektron  yang  tidak berpasangan  ini  menyebabkan  radikal bebas menjadi senyawa yang sangat reaktif terhadap  sel-sel  tubuh  dengan  cara mengikat  elektron  molekul  sel  (Pietta, 1999).  Radikal  bebas  diproduksi  secara normal oleh tubuh sebagai hasil dari proses biokimia.  Radikal  bebas  yang  berlebihan dapat mengakibatkan penyakit degeneratif, misalnya  jantung,  stroke,  dan  kanker. Radikal  bebas  dapat  diatasi  dengan  suatu senyawa penangkal yang disebut antioksidan.
Antioksidan merupakan suatu
senyawa  yang  dapat  menunda  atau mencegah oksidasi dengan cara menghambat terjadinya reaksi rantai oksidatif. Fungsi utama antioksidan adalah
menetralisasi  radikal  bebas,  sehingga tubuh  terlindungi  dari  berbagai  macam penyakit  degeneratif.  Antioksidan  dewasa ini  banyak  digunakan  dalam  industri pangan. Antioksidan yang sering digunakan  umumnya  berupa  antioksidan sintetik, antara lain butylated hydroxytoluene (BHT)  dan butylated hydroxyanisole (BHA). Menurut Sen et al.
(2010),  penambahan  antioksidan  sintetik pada  makanan  menyebabkan  beberapa masalah kesehatan misalnya kanker, penuaan  dini, rheumatoid  arthritis dan penyakit  jantung.  Berdasarkan  alasan tersebut,  maka  perlu  dilakukan  usaha penemuan  antioksidan  alami  dari  bahan alam.
Menurut  Sartini et  al. (2007) bahwa antioksidan alami adalah antioksidan  yang  umumnya  diisolasi  dari sumber  alami  yang  kebanyakan  berasal dari  tumbuh-tumbuhan  dan  buah-buahan. Menurut  penelitian  Lahucky et  al. (2010) bahwa beberapa tanaman diketahui memiliki  kandungan  senyawa  flavanoid dan  senyawa  fenolik  yang  memiliki kemampuan sebagai antioksidan.
Berdasarkan  hal  tersebut  maka  penelitian ini  bertujuan  untuk  menetapkan  kadar vitamin  C  sari  buah  songi  dan  menguji aktifitas  antioksidannya  terhadap  radikal DPPH

## METODE PENELITIAN
Alat dan Bahan
Inkubator (Bio-rad), Mikropipet, Timbangan  digital (Mettler  Toledo) ,  alat- alat gelas (Pyrex), juicer ( Kirin ), spektrofotometer  UV-Vis  ( JENWAY  6800 UV/VIS ), timbangan analitik ( Precisa ), dan timbangan  digital  ( Mettler  Toledo ),  buah songi  yang  telah  masak,  metanol,  vitamin C, serbuk DPPH, Aluminium foil, aquades, tissue, dan kertas saring.
Penyiapan Sampel
Buah songi ( Dillenia serrata Thunb.) yang digunakan  adalah  buah  yang  telah  masak yang  diambil  dari  Desa  Lamomea, Kecamatan  Konda,  Kabupaten  Konawe Selatan.  Buah  yang  dipilih  adalah  buah yang matang dan segar serta tidak diserang hama. Sari buah songi diperoleh menggunakan alat juicer Penetapan Kadar Vitamin C Sari Buah
Penetapan kadar vitamin C sari buah songi menggunakan  metode  Spektrofotometri UV-Vis pada range kurva kalibrasi 4 ppm, 6 ppm, 8 ppm, 12 ppm, dan 14 ppm.

## Pengukuran Aktivitas Antioksidan Sari Buah
Pengukuran aktivitas antioksidan sari buah menggunakan  metode  DPPH  (Brand- Williams et  al .,  1995).  Sari  buah  songi yang  diperoleh  dengan  menggunakan juicer dibuat  dalam  variasi  konsentrasi  8 µg/mL,  16  µg/mL,  32  µg/mL,  64  µg/mL, dan 128 µg/mL. Masing-masing konsentrasi  sari  buah  dipipet  sebanyak  1 mL  dimasukkan  dalam  tabung  reaksi, ditambahkan 1 mL larutan DPPH kemudian  ditambahkan  dengan  2  mL metanol. Dikocok hingga homogen, kemudian  diinkubasi  pada  suhu  37 ° C selama  30  menit,  diukur  serapannya  pada panjang  gelombang  515,5  nm  (panjang gelombang  maksimum  DPPH).  Sebagai pembanding, digunakan vitamin C.
Perhitungan  perendaman  radikal  DPPH menggunakan rumus :
%
inhibisi =
x 100%

## HASIL DAN PEMBAHASAN
a. Penetapan Kadar Vitamin C
Vitamin  C  merupakan  salah  satu vitamin  yang  dalam  jumlah  kecil dibutuhkan  oleh  tubuh  manusia  untuk memelihara  metabolisme,  pertumbuhan dan  pemeliharaan  normal.  Vitamin  C penting  dalam  pembuatan  sel-sel  intra seluler,  kolagen.  Vitamin  ini  tersebar keseluruh  tubuh  dalam  jaringan  ikat, rangka,  matriks,  dan  lain-lain.  Vitamin C  berperan  penting  dalam  hidroksilasi prolin dan lisin  menjadi  hidroksi  prolin dan hidroksi lisin. Senyawa ini merupakan  komponen  kolagen  yang penting  dalam  proses  penyembuhan luka  serta  daya  tahan  tubuh  melawan infeksi  dan  stress  (Poedjiadi  dan  Titin, 2009; Winarno, 2004).
Hasil  penetapan  kadar  vitamin  C  sari buah songi berdasarkan metode spektrofotometry  UV-Vis  mengunakan persamaan  regresi  linear  dari  kurva baku  vitamin  C  standar  y  =  0,053x  – 0,175  diperoleh  rata-rata  vitamin  C sebesar  1,09  %.    Pengukuran  secara keseluruhan dapat dilihat pada Tabel 1.

## Tabel 1. Kadar Vitamin C Sari Buah Songi
Sampel   Replikasi Absorban pada λ maks Kadar Vitamin C (%) Rata-rata % A A 1 0,1110 1,15 1,09 A 2 0,1054 1,06 A 3 0,1115 1,06
b. Aktifitas Antioksidan Sari Buah Songi Pengukuran  aktivitas  antioksidan  sari buah songi dilakukan dengan mengukur nilai aktivitas hambatan terhadap radikal  bebas  DPPH  menggunakan metode spektrofotometri UV-Vis.
Metode  ini  didasarkan  pada  perubahan warna  radikal  DPPH  yang  disebabkan oleh  reaksi  antara  radikal  bebas  DPPH dengan satu elektron atau atom hidrogen  yang  dilepaskan  senyawa yang terkandung dalam bahan uji untuk membentuk senyawa 1,1-difenil-2-
pikrilhidrazil yang berwarna kuning.
Untuk  mengetahui  seberapa  besar aktivitas  antioksidan  sari  buah  songi ( Dillenia  serrata Thunb .) digunakan parameter nilai IC 50 (Inhibition Concentration  50%) .  IC 50 didefinisikan sebagai konsentrasi senyawa antioksidan yang menyebabkan hilangnya  50%  aktivitas  DPPH.  Hasil pengukuran antioksidan sari buah songi dan  vitamin  C  berdasarkan  hambatan yang  diberikan  pada  radikal  DPPH dapat dilihat pada Tabel 2.

## Tabel 2. Persen Penghambatan Sari Buah Songi dan Pembanding Vitamin C
Sampel Konsentrasi (mg/L) Absorbansi Kontrol Absorbansi Sampel % Penghambatan Sari buah songi 8
0,7528 0,6960 7,545 16 0,6746 10,387 32 0,6727 10, 640 64 0,6564 12,805 128 0,4204 44,155 Vitamin C 8 0,7528 0,4207 44,115 16 0,3866 48,645 32 0,3538 52,869 64 0,3000 60,148 128 0,1810 75,956
Data  Tabel  2  memperlihatkan  bahwa nilai  absorbansi  makin  kecil  seiring peningkatan  konsentrasi  pada  kedua larutan uji (sari buah songi dan vitamin C).  Data  ini  menunjukkan  bahwa radikal bebas yang diberikan dari DPPH semakin  berkurang  seiring  dengan peningkatan  konsentrasi  kedua  larutan uji,  seperti data yang ditunjukkan pada data % hambatan. Data persen
penghambatan    selanjutnya  dianalisis
menggunakan  persamaan  regresi  linear untuk mendapatkan nilai IC 50 Nilai  IC 50 ditentukan  menggunakan persamaan regresi linear yang diperoleh.  Semakin  kecil  nilai  IC 50 maka semakin besar aktivitas antioksidan  (Molyneux,  2004).  Hasil analisis  regresi  linear,  diperoleh  nilai IC 50 sari  buah  songi  dan  vitamin  C seperti pada Tabel 3.
Tabel 3. Nilai IC 50 Sari Buah Songi dan Vitamin C No Sampel Nilai IC 50 (mg/L) 1 Buah songi 161,63 mg/L 2 Vitamin C 24,63 mg/L
Tabel  3  menunjukan  bahwa  IC 50 dari vitamin  C (24,63  mg/L)  jauh  lebih  besar aktivitas  antioksidan  dibanding  IC 50 dari sari  buah  songi  (161,63  mg/L).  Aktivitas antioksidan vitamin C dikategorikan sebagai antioksidan sangat kuat sedangkan sari buah songi memiliki aktivitas antioksidan  lemah.  Menurut  Molyneux (2004),  suatu    senyawa  dikatakan  sebagai antioksidan  yang  sangat  kuat  apabila  nilai IC 50 kurang  dari  50  mg/L,  kuat  apabila nilai  IC 50 50–100  mg/L,  sedang  apabila nilai  IC 50 100–150  mg/L,  lemah  bila  nilai IC 50 antara  150–200  mg/L,  dan  sangat lemah bila nilai IC 50 lebih dari 200 mg/L.

## KESIMPULAN
1. Rata-rata  kadar  vitamin  C  sari  buah songi  yang  diperoleh  adalah  sebesar 1,09 %
2. Sari  buah  songi  ( Dillenia  serrata Thunb.)  memiliki  aktivitas  antioksidan lemah  yang  ditunjukkan  dengan  nilai
IC 50 161,63 mg/L, sedangkan vitamin C memiliki  aktivitas  antioksidan  sangat kuat yang ditunjukkan dengan nilai IC 50 24,63 mg/L.

## Daftar Pustaka
Brand-William, W., M.E. Cuvelier, and C. Berset.    1995. Use of a free radical method to evaluate antioxidant activity .
Lebensmittel-Wissenschaft und Technologie,  28:25–30.
Lahucky R, Nuernberg K, Kovac L, Bucko O, Nuenberg. 2010. Assesment of the antioxidant potential of selected  plant  extract  in  vitro  and in  vivo  experiments  on  pork.
Journal of Meat Science 85(2):779-7784
Poedjiadi,  Anna  dan  Titin  Supriyanti.
2009. Dasar-Dasar Biokimia .
Bandung : UI Press. Pietta P-G., 1999. Flavonoids as
Antioxidants,  Reviews, J.  Nat. Prod ., 63 , 1035-1042.
Sartini,  Djide  MN,  Alam  G.  2007.
Ekstraksi  komponen  bioaktif  dari limbah buah kakao dan pengaruhnya  terhadap  aktivitas antioksidan dan antimikroba.
Jurnal  Farmasi  Indonesia 5(1):1- 7.
Sen  S,  Chakraborty  R,  Sridahar  C,  Reddy YSR,  De  B.  2010.  Free  radical, antioxidant, disease and phytomedicines:  current  status and  future  prospect. International Journal of Pharmaceutical Sciences Review and Research. 3(1):91-100
Winarno,  F.G.  2004. Kimia  Pangan  dan Gizi .  Jakarta  :  PT  Gramedia Pustaka Utama