Jurnal Kesehatan Kusuma Husada Volume 13 No 2, Hal 181-191, Juli 2022 Universitas Kusuma Husada Surakarta ISSN : 2087 – 5002 | E-ISSN : 2549 – 371X

## PERBANDINGAN DAYA HAMBAT VARIASI EKSTRAK ETANOL BIJI PEPAYA(Carica papaya L.) TERHADAP PERTUMBUHAN Escherichia coli ESBL
Vector Stephen Dewangga 1) , Ardy Prian Nirwana 2) , Laurencia Destivani Virliana Widjayanti 3)
1,2,3 Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Nasional e-mail korespondensi : vector.stephen@stikesnas.ac.id

## ABSTRAK
Latar belakang: Extended-Spectrum Beta Lactamase (ESBL) merupakan enzim yang diproduksi oleh bakteri gram negatif salah satunya adalah E coli. Dimana bakteri jenis ini  mampu  menghasilkan  enzim  betalaktamase  yang  dapat  melawan  jenis  antibiotik beta  laktam.  Prevalensi  terjadinya  infeksi  oleh  bakteri  penghasil  ESBL  sebesar 50,60%. Tujuan: penemuan  bahan  alami  yang  dapat  menjadi  alternatif  baru  untuk mengatasi  masalah  infeksi  Escherichia  coli  ESBL. Metode: Penelitian  ini menggunakan  jenis  penelitian  analitik  eksperimental  dengan  melakukan  uji  aktivitas antibakteri untuk mengetahui adanya  perbandingan daya hambat ekstrak etanol 70% dan etanol 96% biji pepaya (Carica papaya L) terhadap pertumbuhan Escherichia coli ESBL.  Penelitian  ini  menggunakan  sampel  biji  Carica  papaya  L  yang  diambil  pada buah  pepaya  matang,  segar  dan  kemudian  dikeringkan.  Biji  Carica  papaya  L diekstraksi  menggunakan  cara  perkolasi  dengan  pelarut  etanol  70%  dan  etanol  96% yang kemudian dibuat dalam konsentrasi 100.000 ppm, 200.000 ppm, 300.000 ppm, 400.000  ppm,  dan  500.000  ppm.  Aktivitas  antibakteri  menggunakan  metode  difusi cakram dengan media MHA. Hasil: Pada penelitian  ini didapatkan hasil dengan uji Kruskal Walis dengan nilai sig sebesar <0,001 dan dapat disimpulkan bahwa terdapat perbedaan yang bermakna pada daya hambat ekstrak etanol 70% dan etanol 96% biji pepaya (Carica papaya L) terhadap pertumbuhan Escherichia coli ESBL Kata Kunci : biji pepaya; carica papaya L; etanol 70%; etanol 96%; escherichia coli ESBL.

## ABSTRACT
Background:  Extended-Spectrum  Beta  Lactamase  (ESBL)  is  an  enzyme  produced by Gram-negative bacteria, one of which is E coli. This kind of bacteria is able to produce beta-lactamase enzymes that can fight against beta-lactam antibiotics. The prevalence of infection by ESBL-producing bacteria is 50.60%.  Objective: To discover a natural ingredient  that  can  be  a  new  alternative  to  overcome  the  Escherichia  coli  ESBL infection.  Method:  This  study  was  an  experimental  analytical  research  that  tested antibacterial activity to determine the comparison of inhibition of ethanol 70% extract and  ethanol  96%  extract  of  papaya  seeds  (Carica  papaya  L)  on  the  growth  of Escherichia coli ESBL. This study used samples of Carica papaya L seeds taken from ripe and fresh papaya, that was then dried. Carica papaya L seeds were extracted using percolation method with ethanol 70% and ethanol 96% solvent which were then made in  concentrations  of  100,000  ppm,  200,000  ppm,  300,000  ppm,  400,000  ppm,  and 500,000  ppm.  Antibacterial  activity  used  disc  diffusion  method  with  MHA  media. Results: The result of this study showed that sig value of Kruskal Walis test was <0.001. Thus, it can be concluded that there is a significant difference in the inhibition of ethanol 70% extract and ethanol 96% extract of papaya seeds (Carica papaya L) on the growth of Escherichia coli ESBL.
Keywords: carica papaya L; ethanol 70%, ethanol 96%; escherichia coli ESBL; papaya seeds

## 1. PENDAHULUAN
Penyakit  infeksi  merupakan  salah satu  penyakit  yang  sering  diderita oleh  penduduk  Indonesia.  Penyakit infeksi  yang  saat  ini  masih  banyak diderita  adalah  infeksi  saluran  kemih yang  disebagian  besar  disebabkan oleh adanya bakteri yang berkembang biak didalam sistem urinaria (Ilvani et al., 2019). Menurut American Urologi Association dalam  (Syahputra et  al., 2018)  diperkirakan  bahwa  infeksi saluran  kemih  terjadi  pada  150  juta penduduk dunia pertahunnya. Kejadian  infeksi  saluran  kemih  di Amerika  Serikat  mencapai  lebih  dari
100.000  kunjungan  rumah  sakit  pada setiap tahunnya. Sedangkan Data dari Departemen Kesehatan RI tahun 2014 dalam  (Yashir  and  Apriani,  2019) menyebutkan bahwa jumlah penderita infeksi  saluran  kemih  mencapai  90-
100  kasus per  100.000 penduduk  per tahun  atau  sekitar  180.000  kasus  per tahun. Infeksi saluran kemih diakibatkan oleh masuknya mikroorganisme kedalam saluran kemih/  sistem  urinaria  manusia dimana  saluran  ini  berfungsi  untuk mengumpulkan, menyimpan dan mengeluarkan urine dari dalam tubuh dengan  bagian  yang  tersusun  dari ginjal,  ureter,  kandung  kemih  dan uretra.  Manusia  dengan  segala  usia bisa  saja  terkena  penyakit  infeksi  ini mulai dari bayi baru lahir hingga usia tua. Infeksi saluran kemih merupakan penyakit  infeksi  oleh  bakteri  dimana akan terdapat bakteri yang berkembang biak didalam urin
(bakteriuria)  dengan  jumlah  bakteri didalam  urin  >100.000/  ml  urin. Bakteriuria  ini  bisa  muncul  dengan atau tanpa gejala (Sari, 2018). Bakteri  penyebab  ISK  antara  lain adalah gram negatif seperti Escherichia  coli,  Proteus  mirabilis, Klebsiella  pneumonia,  Citrobacter, Enterobacter, Pseudomonas aeruginosa serta  dapat  pula  oleh beberapa  jenis  bakteri  gram  positif seperti Enterococcus  faecalis,  S.
saprohyticus,  S.  haemolyticus dan group  B  Streptococci (Syahputra et al., 2018) . Menurut  penelitian  yang ada di Australia menyebutkan bahwa Escherichia coli merupakan penyebab dari  infeksi  saluran  kemih  pada  95% pasien penderita (Yashir and Apriani, 2019).  Sekitar  90%  infeksi  saluran kemih disebabkan oleh bakteri
Escherichi coli (Sari, 2018) . Infeksi  saluran  kemih  merupakan penyakit infeksi yang dapat dilakukan pengobatan dengan pemberian
antibiotik  yang  tepat.    Pemberian antibiotik  yang  tidak  tepat  akan menimbulkan adanya resistensi  suatu bakteri  terhadap  antibiotik  (Ilvani et al., 2019). Adanya resistensi antibiotik menjadi permasalahan yang ada  dimasyarakat  menjadikan  terapi pengobatan terbatas, sulit dan mahal. Salah  satu  kasus  resistensi  bakteri terhadap  antibiotik  pada  penyakit infeksi  saluran  kemih  adalah  adanya tipe  bakteri Extended-Spectrum  Beta Lactamase (ESBL)  dimana  tipe bakteri  ini  resisten  terhadap  jenis antibiotik  beta-laktam  (Putra  et  al., 2020).  Dimana Escherichia  coli dan Klebsiella  pneumoniae adalah  jenis bakteri  yang  dapat  menghasilkan extended-spectrum beta-lactamase yang  paling  sering  (Nazmi et  al., 2017). Extended-Spectrum Beta Lactamase (ESBL)  pertama  kali ditemukan  di  Jerman  tahun  1983.
Enzim Beta Lactamase di identifikasi pada  bakteri Escherichia  coli .  Pada tahun 2013 menurut survei oleh CDC ( Centers  for  Disease  Control  And Prevention ) di Amerika terjadi 26.000
infeksi yang disebabkan oleh
Enterobacteriaceae penghasil  ESBL dan  1.700  diantaranya  dinyatakan tidak  selamat.  Sedangkan  di  Asia didapatkan  prevalensi Escherichia coli dan Klebsiella sp penghasil ESBL dari  infeksi  intra  abdominal  adalah 42,27%  dan  35,8%  menurut  survei yang  dilakukan  oleh Study  for
Jurnal Kesehatan Kusuma Husada Volume 13 No 2, Hal 181-191, Juli 2022 Universitas Kusuma Husada Surakarta ISSN : 2087 – 5002 | E-ISSN : 2549 – 371X
Monitoring  Antimicrobial  Resistance
Trends (SMART)  pada  tahun  2007
(Fahirah  Arsal,  2019).  Di  Indonesia prevalensi  infeksi  oleh  bakteri E  coli dan K  pneumoniae penghasil  ESBL adalah 29% dan 36% (Muhajir et al., 2016). Extended-Spectrum Beta Lactamase (ESBL) merupakan enzim yang  diproduksi  oleh  bakteri  gram negatif  salah  satunya  adalah  E  coli. Dimana  bakteri  jenis  ini  mampu menghasilkan  enzim  betalaktamase yang  dapat  melawan  jenis  antibiotik beta  laktam  contohnya  cefotaxime, ceftriaxone  (Putra et  al., 2020). Antibiotik  golongan  beta  laktam menjadi tidak aktif disebabkan karena enzim betalaktamase memutus cincin amida  pada  cincin  beta  laktam. Penggunaan antibiotik golongan sefalosporin  generasi  ketiga  untuk pengobatan  infeksi  secara  luas  dan tidak  tepat  merupakan  salah  satu faktor terbentuknya ESBL ( Extended- Spectrum Beta Lactamase ) (Ilvani et al., 2019). Gen pengkode enzim beta laktamase  dan  ESBL  paling  banyak berada  didalam  plasmid  karena plasmid  sangat  mobile  sehingga mempermudah  perpindahan/  transfer gen resistensi kepada bakteri lain dan menyebabkan  adanya  peningkatan kasus  infeksi  oleh  bakteri  penghasil ESBL  di  seluruh  dunia (Julia
Garamina  and  Wulan  Sumekar, 2017).  Menurut  Winarto  (2019)
dalam (Ilvani et al., 2019) prevalensi terjadinya infeksi oleh bakteri penghasil  ESBL  sebesar  50,60%. Oleh  karena  terus  meningkatnya angka  infeksi  oleh  bakteri  penghasil ESBL  yang  menimbulkan  tantangan dalam mengatasinya, maka diperlukan  adanya  penemuan  bahan alami  yang  dapat  menjadi  alternatif baru untuk mengatasi masalah tersebut.
Biji Carica  papaya L.  merupakan salah  satu  bahan  alami  yang  dapat digunakan.  Biji  pepaya  diketahui mengandung beberapa senyawa
seperti tokoferol, terpenoid, flavonoid,  alkaloid  karpain,  enzim papain dan lisozim. Dimana kandungan  terpenoid,  karpain,  dan flavonoid memiliki aktivitas antibakteri  yang  mampu  membunuh bakteri  dengan  merusak  integritas membran  sel  bakteri  (Torar et  al., 2017). Ekstraksi adalah proses perpindahan massa simplisia kedalam pelarut organik yang digunakan dalam prosesnya  dimana  pelarut    akan menembus  dinding  sel  kemudian masuk ke dalam rongga sel tumbuhan yang mengandung zat aktif yang akan larut dalam pelarut organik diluar sel untuk  selanjutnya  masuk  ke  dalam pelarut dn akan terus berulang sampai terjadi  keseimbangan  konsentrasi  zat aktif didalam dan diluar sel (Mubarak et al., 2018).
Etanol memiliki dua gugus dengan kepolaran  yang  berbeda  yaitu  gugus hidroksil  yang  bersifat  polar  dan gugus  alkil  yang  bersifat  nonpolar sehingga diharapkan dengan digunakannnya etanol sebagai pelarut mampu mengekstrak senyawa dengan kepolaran yang berbeda (Lumempouw et  al., 2012).  Pelarut etanol  banyak  digunakan  didalam penelitian  dikarenakan  jenis  pelarut ini merupakan pelarut universal yang dapat  melarutkan  hampir  semua senyawa  organik  baik  polar  dan  non polar  yang  ada  didalam  sampel (Noviyanti, 2016)

## 2. METODE
Penelitian  ini  menggunakan  jenis penelitian eksperimental dengan melakukan  uji  aktivitas  antibakteri untuk mengetahui adanya
perbandingan  daya  hambat  ekstrak etanol  70%  dan  etanol  96%  biji pepaya  ( Carica  papaya L)  terhadap pertumbuhan Escherichia coli ESBL. Obyek dari penelitian ini adalah daya hambat  ekstrak  etanol  70%  biji pepaya  ( Carica  papaya L)  dan  daya hambat  ekstrak  etanol  96%  biji
Jurnal Kesehatan Kusuma Husada Volume 13 No 2, Hal 181-191, Juli 2022 Universitas Kusuma Husada Surakarta ISSN : 2087 – 5002 | E-ISSN : 2549 – 371X
pepaya  ( Carica  papaya L)  dengan beberapa  konsentrasi  yang  berbeda yaitu  konsentrasi  100.000  ppm, 200.000  ppm,  300.000 ppm, 400.000 ppm  dan  500.000  ppm  dan  diujikan pada  bakteri Escherichia  coli ESBL dengan pengulangan sebanyak 4 kali.
a. Ekstraksi biji pepaya Ekstraksi dilakukan dengan mengeringkan  biji  pepaya  dibawah sinar matahari dan dihaluskan kemudian diperoleh serbuk halus dan ditimbang sebanyak 100 gram kemudian  dilakukan  ekstraksi  cara perkolasi  dengan  pelarut  etanol  70% dan ditimbang 100 gram serbuk halus biji  pepaya  dan  dilakukan  ekstraksi perkolasi dengan pelarut etanol 96%. Ekstraksi dihentikan ketika didapatkan ekstrak yang jernih. Hasil ekstraksi dilakukan evaporasi menggunakan rotary  evaporator dan dipekatkan diatas waterbath atau oven sehingga dihasilkan ekstrak kental.
b. Uji Fitokimia Uji  kualitatif  fitokimia  dilakukan untuk  memastikan  bahwa  ekstrak etanol  biji  pepaya  yang  digunakan pada  penelitian  ini  mengandung senyawa flavonoid, saponin, tanin dan alkaloid.
1) Uji  Flavonoid  :   1  ml  ekstrak  + 2 tetes  asam  klorida  (HCl)  pekat  + serbuk Magnesium (Mg) kemudian  dikocok.  Terbentuknya warna merah atau cokelat menunjukkan adanya flavonoid.
2) Uji  Saponin  :  2  ml  ekstrak  + aquadest panas kocok kuat selama 10 menit dan diamkan selama 1-3
menit,  kemudian  tambahkan  2 tetes  HCl  2N.  Adanya  saponin ditunjukkan  dengan  buih  yang stabil.
3) Uji  Tanin  :  3ml  +  3  tetes  FeCl3, adanya  tanin  ditunjukkan  dengan terbentuknya  warna  biru  tua  atau hitam kehijauan.
4) Uji Alkaloid : 2ml ekstrak + 3 tetes kloroform  +  2  tetes  ammonia kemudian dipanaskan 2 menit dan disaring,  bagi  menjadi  2  tabung.
Tabung  1  diteteskan  pada  kertas saring  dan  disemprotkan  reagen dragendorf,  tabung  2  ditetesi reagen dragendorf. Alkaloid ditunjukkan dengan adanya warna merah atau jingga c. Persiapan Bakteri Uji Bakteri Escherichia  coli ESBL dibuat  suspensi  pada  media Brain Heart Infusion (BHI) di dalam tabung reaksi kecil lalu diinkubasi pada suhu 37°C  selama  24  jam.  Inokulasi suspensi tersebut ke media MC ( Mac Conkey )  dan  diinkubasi  pada  suhu 37°C  selama  24  jam.  Koloni  yang tumbuh  pada  media  MC  dilakukan identifikasi  dengan  pengecatan  gram dan uji biokimia dan diinokulasi pada media  NA  miring  dan  inkubasi  pada suhu  37°C  selama  24  jam.  Koloni pada  media  NA  miring  di  inokulasi pada  media  MHA  untuk  kemudian dilakukan test ESBL dengan menggunakan  antibiotik cefotaxime
dan ceftazidime ,  inkubasi  pada  suhu 37°C  selama  24  jam.  Bakteri  yang tumbuh  didalam  media  NA  miring dibuat  suspensi  menggunakan  NaCl 0,9% dengan kekeruhan yang distandarisasi  dengan  larutan Mac Farland 0,5  dan  suspensi  siap digunakan untuk uji antibakteri.
d. Uji Antibakteri Uji antibakteri pada ekstrak etanol biji pepaya dimulai dengan memasukkan  suspensi  bakteri  yang telah disamakan kekeruhannya
dengan  standar  Mac  Farland  0,5  ke media MHA menggunakan kapas lidi steril dan ratakan dipermukaan media MHA.  Diletakkan  30µl  pengenceran masing-masing konsentrasi ekstrak ke cakram/disk  dengan  mikropipet  dan bantuan  pinset  sesuai  dengan  label konsentrasi yang tertera yaitu 100.000 ppm,  200.000  ppm,  300.000  ppm, 400.000  ppm  dan  500.000  ppm. Diinkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam,  kemudian  diamati  adanya  zona hambat  dengan  mengukur  zona bening  yang  terbentuk  disekitar
Jurnal Kesehatan Kusuma Husada Volume 13 No 2, Hal 181-191, Juli 2022 Universitas Kusuma Husada Surakarta ISSN : 2087 – 5002 | E-ISSN : 2549 – 371X
cakram/disk  menggunakan  penggaris atau jangka sorong.
e. Pengumpulan Data Pengumpulan data dilakukan dengan cara mengukur diameter zona hambat  yang  telah  diperoleh  melalui eksperimen pengujian perbedaan daya  hambat  ekstrak  etanol  70% dan etanol  96%  biji  pepaya  ( Carica papaya L)  terhadap  pertumbuhan Escherichia coli ESBL menggunakan jangka sorong yang kemudian dinyatakan  dalam  satuan  milimeter (mm).
f. Teknik Analisis Data Data  yang  diperoleh  akan  diuji menggunakan  uji  One  Way  Anova yang  sebelumnya  harus  dilakukan pengujian terhadap sebaran distribusi data dan homogenitas data.

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  determinasi  tanaman  yang digunakan  didalam  penelitian  ini menunjukkan  bahwa  tanaman  yang digunakan  adalah Carica  papaya L.Pada  hasil  ekstraksi  didapatkan ekstrak  kental  dengan  pelarut  etanol 70%  sebanyak  8,1  gram  sedangkan pada  pelarut  etanol  96%  didapatkan ekstrak  kental  sebanyak  20,6  gram yang  berwarna  coklat  dengan  bau khas  biji  pepaya.  Hasil  uji  fitokimia dapat dilihat pada tabel 1.
Tabel 1. Hasil Uji Fitokimia Ekstrak Etanol 70% Biji Pepaya ( Carica papaya L.) dan Ekstrak Etanol 96%
Biji Pepaya ( Carica papaya L.) Uji Fitokimia Ekstrak Etanol 70% Biji Pepaya Ekstrak Etanol 96% Biji Pepaya Flavonoid (+) terdapat warna coklat (+) terdapat warna coklat Saponin (-) buih tidak stabil (-) buih tidak stabil Tanin (+) larutan hitam kehijauan (+) larutan hitam kehijauan Alkaloid (+) warna jingga (+) warna jingga Tabel  1  menunjukkan  bahwa  pada ekstrak  etanol  70%  dan  etanol  96%  biji
pepaya  ( Carica  papaya L)  mengandung senyawa  flavonoid,  tanin  dan  alkaloid dan  tidak  menunjukkan  bahwa  ekstrak tersebut  mengandung  senyawa  saponin. Zona  hambat  ditentukan  menggunakan metode  difusi  cakram  dengan  masing masing  konsentrasi  yaitu  100.000  ppm, 200.000  ppm,  300.000  ppm,  400.000 ppm  dan  500.000  ppm  pada  kedua ekstrak.  Diukur  zona  hambat  yang ditandai dengan terbentuknya zona jernih disekitar cakram/disk menggunakan jangka sorong. Hasil  uji  antibakteri  ekstrak  etanol 70%  biji  pepaya  ( Carica  papaya L) dengan  berbagai  konsentrasi  100.000 ppm  sampai  kosentrasi  500.000  ppm yang dilakukan pengulangan uji sebanyak  4  kali  dapat  dilihat  pada  tabel 2.
Tabel 2. Hasil Luas Zona Hambat Ekstrak Etanol 70% Biji Pepaya ( Carica papaya L.)
B ak te ri U ji Konsentrasi Ekstrak Etanol 70% Biji Pepaya Luas Zona Hambat (mm) P1 P2 P3 P4 Mean E sc he richia coli E S B L 100.000 ppm 8 8 8 7 7,75 200.000 ppm 8 7 8,5 7 7,6 300.000 ppm 7 8 6 6 6,75 400.000 ppm 8 8 9 8 8,25 500.000 ppm 7,5 8 9 8,5 8,25 DMSO 10% 6 6 6 6 6 Cip 5µg 25 24 25 24 24,5 Tabel 2 menunjukkan bahwa zona hambat  terbesar  dihasilkan  pada penambahan  ekstrak  400.000  ppm dan  500.000  ppm  dengan  rata-rata diameter sebesar 8,25 mm.
Sedangkan  zona  hambat  terkecil berada  pada  penambahan  ekstrak 300.000  ppm  dengan  rata-rata  zona hambat  sebesar  6,75  mm.  Diameter zona  hambat  ekstrak  konsentrasi 500.000  ppm  tidak  lebih  besar  dari zona hambat kontrol positif Ciprofloxacin (Cip) 5µg yang memiliki  rata-rata  zona  hambat sebesar 24,5 mm. Sedangkan hasil uji antibakteri  ekstrak  etanol  96%  biji pepaya  ( Carica  papaya L)  dengan berbagai  konsentrasi  100.000  ppm
Jurnal Kesehatan Kusuma Husada Volume 13 No 2, Hal 181-191, Juli 2022 Universitas Kusuma Husada Surakarta ISSN : 2087 – 5002 | E-ISSN : 2549 – 371X
sampai kosentrasi 500.000 ppm yang dilakukan pengulangan uji sebanyak 4 kali dapat dilihat pada tabel 3
Tabel 3. Hasil Luas Zona Hambat Ekstrak Etanol 96% Biji Pepaya (Carica papaya L.)
Tabel 3. menunjukkan bahwa zona hambat  terbesar  dihasilkan  pada penambahan  ekstrak  300.000  ppm dan  400.000  ppm  dengan  rata-rata diameter sebesar 7,25 mm. Sedangkan  zona  hambat  terkecil berada  pada  penambahan  ekstrak
100.000  ppm  dengan  rata-rata  zona hambat  sebesar  6,4  mm.  Diameter zona  hambat  ekstrak  konsentrasi
500.000  ppm  tidak  lebih  besar  dari zona hambat kontrol positif Ciprofloxacin 5µg  yang  memiliki rata-rata  zona  hambat  sebesar  25,25 mm. Data yang diperoleh diolah distribusinya menggunakan uji normalitas Shapiro-Wilk dan didapatkan  hasil  nilai  signifikan  <
0,05 (Tabel 4), sehingga disimpulkan bahwa data tidak berdistribusi normal.
Tabel 4. Hasil Uji Normalitas Shapiro-Wilk Pelarut Konsentrasi Sig Etanol 70% 100.000 ppm 0,001 200.000 ppm 0,224 300.000 ppm 0,272 400.000 ppm 0,001 500.000 ppm 0,972 DMSO 10% 0,024 Cip 5µg -
Etanol 96% 100.000 ppm 0,001 200.000 ppm 0,272 300.000 ppm 0,001 400.000 ppm 0,001 500.000 ppm 0,683 DMSO 10% 0,001 Cip 5µg - Kemudian  dilanjutkan  dengan  uji homogenitas dan diperoleh hasil nilai signifikan > 0,05 (Tabel 5), sehingga dapat disimpulkan data telah homogen. Tabel 5. Hasil Uji Homogenitas Levene Statistic df1 df2 Sig. Zona Hambat (mm) Based on Mean 2,284 13 42 ,022 Mased on Median 1,157 13 42 ,343 Based on Median and with adjusted df 1,157 13 26,694  ,360 Based on trimmed mean 2,111 13 42 ,034
Berdasarkan  uji  normalitas  yang telah  dilakukan  maka  dilakukan  uji non  parametrik  kruskal  walis  dan  uji lanjut  mann-whitney.  Uji  kruskal walis dilakukan sebagai salah satu uji non parametrik yang digunakan untuk menguji  adanya  perbedaan  yang signifikan  antar  kelompok  perlakuan (Jamco dan Abdul, 2020). Pada uji Kruskal Wallis (Tabel 6) diperoleh nilai sig < 0,01 yang berarti terdapat  perbedaan  yang  signifikan antar kelompok perlakuan Tabel 6. Hasil Uji Kruskal Wallis Test Statistics a,b Zona_Hambat (mm) Kruskal-Wallis H 42,572 Df 13 B ak te ri u ji Konsentras i Ekstrak Etanol 70% Biji Pepaya Luas Zona Hambat (mm) P1 P2 P3 P4 Mea n E sc he richia coli E S B L 100.000 ppm 6 7,5 6 6 6,4 200.000 ppm 6 8 6 7 6,75 300.000 ppm 7 8 7 7 7,25 400.000 ppm 7 8 7 7 7,25 500.000 ppm 6 8 7 7 7 Cip 5µg 25 25 26 25 25,25 DMSO 10% 6 6 6 6 6
Asymp. Sig. <,001 a. Kruskal Wallis Test b. Grouping Variable: Konsentrasi Uji  berlanjut  ke  Mann  Whitney untuk mengetahui kelompok manakah yang berbeda secara signifikan, perbedaan signifikan diperoleh apabila signifikansi perlakuan  bernilai  <0,05.  Dari  uji Mann Whitney akan diperoleh informasi  konsentrasi  tertinggi  dari ekstrak etanol 70% dan ekstrak etanol 96% terhadap masing-masing kontrol positifnya. Tabel 7. Hasil Uji Mann Whitney Uji Mann Whitney Asymp. Sig (2-tailed) Etanol 70% 500.000 ppm dan Cip 5µg 0,14 Etanol  96% 500.000 ppm dan Cip 5µg 0,46 Dari  Tabel  7  diperoleh  hasil kelompok perlakuan konsentrasi
500.000 ppm dari ekstrak etanol 70% sebesar  0,14,  yang  artinya  tidak terdapat perbedaan signifikan dengan kontrol  positif Ciprofloxacin 5µg. Hasil kelompok perlakuan konsentrasi 500.000 ppm dari ekstrak etanol  96%  sebesar  0,46,  pula  tidak memiliki  perbedaan  yang  signifikan dengan  kontrol  positif Ciprofloxacin 5µg.
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang telah  dilakukan  pada  ekstrak  etanol 70%  dan  ekstrak  etanol  96%  biji pepaya  ( Carica  papaya L)  yang dilakukan pengujian fitokimia menunjukkan  bahwa  didalam  kedua ekstrak mengandung senyawa flavonoid,  tanin  dan  alkaloid  serta tidak mengandung saponin.  Senyawa tersebut  merupakan  senyawa  yang terkandung  didalam  ekstrak  biji pepaya dan berperan penting didalam menghambat  pertumbuhan  bakteri Escherichia coli ESBL. Pada hasil uji antibakteri yang telah dilakukan pada ekstrak etanol 70% dan ekstrak etanol
96%  biji  pepaya  ( Carica  papaya L) konsentrasi  100.000  ppm,  200.000 ppm, 300.000 ppm, 400.000 ppm dan 500.000 ppm diperoleh diameter rata- rata  masing  masing  konsentrasi ditunjukkan pada Tabel 2 dan Tabel 3. Pada  konsentrasi  100.000  ppm ekstrak  etanol  70%  biji Carica papaya L  mampu  menghambat pertumbuhan bakteri dengan rata-rata zona  hambat  sebesar  7,75  mm  dan pada konsentrasi 100.000 ppm ekstrak etanol  96%  biji Carica  papaya L mampu  menghambat  pertumbuhan bakteri dengan rata rata zona hambat sebesar 6,4 mm. Hal ini menunjukkan bahwa  konsentrasi  terendah  dari ekstrak  sudah  mampu  menghambat pertumbuhan bakteri Escherichia coli ESBL  dikarenakan  adanya  senyawa aktif pada konsentrasi ekstrak tersebut dan  mampu  memberikan  potensi aktivitas antibakteri.
Pada  penelitian  yang  dilakukan oleh (Ilvani et al., 2019) 2019 ekstrak etanol  96%  biji  pepaya  dalam konsentrasi 500 ml/mg dapat menghambat  pertumbuhan  bakteri
Escherichia  coli ESBL  dengan  rata rata  diameter  zona  hambat  sebesar 14,05  mm.  Apabila  dibandingkan dengan  penelitian  ini  pada  ekstrak etanol  96%  biji Carica  papaya L
memiliki rentang yang jauh dikarenakan  pada  penelitian    ini konsentrasi  500.000  ppm  ekstrak etanol  96%  biji Carica  papaya L hanya  mampu  memberikan  zona hambat  sebesar  7  mm.  Hal  ini kemungkinan dapat disebabkan
karena  adanya  pengunaan  metode pengujian  aktivitas  antibakteri  yang kurang optimal, dimana pada penelitian  (Ilvani et  al., 2019) pengujian  dilakukan  menggunakan metode sumuran dan didalam penelitian  ini  pengujian  dilakukan dengan  metode  difusi  cakram  atau disk,  maka  didapatkan  kemungkinan bahwa  metode  sumuran  lebih  efektif dalam  menghambat  pertumbuhan
Jurnal Kesehatan Kusuma Husada Volume 13 No 2, Hal 181-191, Juli 2022 Universitas Kusuma Husada Surakarta ISSN : 2087 – 5002 | E-ISSN : 2549 – 371X
bakteri  dibandingkan  dengan  metode difusi cakram/ disk.
Hal  ini  didukung  oleh  penelitian (Nurhayati et  al., 2020)  bahwa aktivitas  antibakteri  menggunakan metode sumuran lebih tinggi dibandingkan dengan aktivitas antibakteri  dengan  metode  cakram yang dapat disebabkan karena sampel yang  dimasukkan  kedalam  sumuran menghasilkan  proses  osmosis  yang lebih  homogen  dan  efisien  sehingga lebih  efektif  dalam  menghambat pertumbuhan bakteri dimana didapatkan rataan aktivitas antibakteri yang  lebih  besar  dan  zona  hambat yang  lebih  luas (Nurhayati  et  al., 2020). Pada  konsentrasi  tertinggi  ekstrak etanol 70% biji Carica papaya L yaitu pada konsentrasi 500.000 ppm didapatkan  rata  rata  diameter  zona hambat sebesar 8,25 mm. Sedangkan pada  konsentrasi  tertinggi  ekstrak etanol 96% biji Carica papaya L yaitu pada konsentrasi 500.000 ppm didapatkan  diameter  rata  rata  zona hambat sebesar 7 mm. Semakin tinggi konsentrasi etanol maka akan menurunkan kepolaran larutan etanol, sehingga akan meningkatkan kemampuan  pelarut  etanol  dalam mengekstraksi senyawa senyawa yang kurang polar. Pelarut  etanol  yang  bersifat  semi polar  dapat  menyebabkan  degradasi dinding  sel,  sehingga  senyawa  aktif yang  terdapat  dalam  sampel  menjadi lebih  mudah  terekstraksi.  Namun, semakin  kurang  polar  pelarut  etanol yang digunakan maka jumlah senyawa  yang  bersifat  polar  yang dapat  terekstraksi  akan  semakin berkurang  (Permatasari et  al. ,  2020).
Etanol  merupakan  jenis  pelarut  yang dapat  melarutkan  alkaloid  basa, glikosida, kurkumin, kumarin, flavonoid, steroid, klorofil, anrakinon namun  hanya  sedikit  melarutkan lemak,  tanin  dan  saponin  (Sa’adah and Nurhasnawati, 2017).
Pada  ekstrak  etanol  70%  biji Carica papaya L didapatkan rata rata diameter  zona  hambat  yang  lebih besar  dibandingkan  dengan  ekstrak etanol 96% biji Carica papaya L, hal ini  kemungkinan  dapat  disebabkan karena  etanol  70%  lebih  polar daripada etanol 96% dimana semakin tinggi  konsentrasi  etanol  maka  akan berkurang kepolarannya.
Etanol  70%  bersifat  lebih  polar dibandingkan dengan etanol 96%, hal ini  dapat  menjadi  salah  satu  faktor penyebab diameter zona hambat lebih besar  pada  ekstrak  dengan  pelarut etanol  70%  dikarenakan  senyawa senyawa  yang  kemungkinan  berada didalam  biji  pepaya  bersifat  polar lebih  tertarik  kepada  pelarut  yang bersifat  polar  sehingga  terekstraksi lebih  baik.  Senyawa  polar  didalam biji  pepaya  sendiri  antara  lain  adalah alkaloid,  dimana  alkaloid  merupakan golongan senyawa polar yang banyak ditemukan  pada  pelarut  polar.  Selain itu terdapat flavonoid yang merupakan senyawa golongan polifenol  yang  larut  dalam  pelarut polar  (Sa’adah  and  Nurhasnawati, 2017). Berdasarkan penelitian dari (Mubarak et  al., 2018)  didapatkan bahwa  ekstrak  etanol  70%  lebih banyak  menarik  zat  yang  bersifat antibakteri dengan baik sehingga pada ekstrak  buah  Bligo    ( B.  hispida Thunb)  dengan  pelarut  etanol  70% dapat  memiliki  daya  hambat  yang terbaik sebesar 25,223 mm
dibandingkan  dengan  ekstrak  etanol 96%  dan  50%,  maka  dengan  hasil penelitian  ini  dan  didukung  dengan penelitian  lainnya  dapat  disimpulkan bahwa  ekstrak  dengan  pelarut  etanol 70% lebih baik dibandingkan ekstrak yang  menggunakan  etanol  96% sebagai pelarutnya dibuktikan dengan hasil  zona  hambat  yang  lebih  besar pada ekstrak etanol 70%.
Pada  penelitian  yang  dilakukan oleh  Mauti et  al. (2018)  diperoleh hasil  penelitian  aktivitas  antibakteri
Jurnal Kesehatan Kusuma Husada Volume 13 No 2, Hal 181-191, Juli 2022 Universitas Kusuma Husada Surakarta ISSN : 2087 – 5002 | E-ISSN : 2549 – 371X
ekstrak  etanol  70%  biji  pepaya ( Carica papaya L) terhadap pertumbuhan Escherichia coli , dengan rata-rata diameter zona hambat pada konsentrasi ekstrak 50% sebesar 9,5 mm dan rata-rata diameter zona hambat pada konsentrasi tertinggi  (500.000  ppm)  sebesar  8,25 mm.  Hal  ini  mungkin  disebabkan karena perbedaan spesies bakteri yang digunakan,  dimana  pada  penelitian Mauti et  al. (2018)  digunakan suspensi bakteri Escherichia coli non ESBL, sedangkan pada penelitian ini digunakan  bakteri Escherichia  coli ESBL. Escherichia coli ESBL memiliki enzim yang mampu menghidrolisis antibiotik dan menyebabkan resistensi kepada golongan  antibiotic,  salah  satunya adalah  antibiotik  golongan penicilin, cephalosporin generasi satu, dua dan tiga, serta antibiotik golongan monobactam (Biutifasari, 2018) . Bakteri yang memproduksi ESBL biasanya berhubungan dengan resistensi banyak obat seperti kuinolon  dan  aminoglikosida,  ESBL biasanya  dimediasi  oleh  plasmid karena  gen  yang  terlibat  dalam mekanisme  resistensi  ini  biasanya terletak di plasmid yang sama dengan gen ESBL (Anggraini et al., 2018).
4. KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian terhadap  perbandingan  daya  hambat ekstrak  etanol  70%  dan  etanol  96%
biji  pepaya  ( Carica  papaya L)
terhadap  pertumbuhan Escherichia coli ESBL yang telah dilakukan maka dapat disimpulkan bahwa :
a. Semua  variasi  konsentrasi  ekstrak etanol  70%  dan  ekstrak  etanol  96% biji  pepaya  ( Carica  papaya L)
membentuk  zona  radikal  terhadap pertumbuhan Escherichia coli ESBL.
b. Pada  ekstrak  biji  pepaya  ( Carica papaya L) dengan pelarut etanol 70%
memiliki  daya  hambat  tertinggi
terhadap  pertumbuhan Escherichia coli ESBL.
c. Konsentrasi  tertinggi  dari  ekstrak etanol  70%  dan  etanol  96%  biji pepaya  ( Carica  papaya L)  mampu membentuk  zona  radikal  terhadap pertumbuhan Escherichia  coli ESBL namun  tidak  setara  dengan  kriteria sensitif  antibiotik Ciprofloxacin 5µg menurut CLSI.
d. Terdapat  perbedaan  bermakna  antara luas zona hambat ekstrak etanol 70% dan  etanol  95%  biji  pepaya  ( Carica papaya L)  terhadap  pertumbuhan Escherichia coli ESBL secara statistik yang  ditunjukkan  dengan  hasil  uji Kruskal-Wallis dengan nilai signifikansi < 0,001.

## 5. SARAN
Bagi peneliti selanjutnya :
a. Menggunakan metode ekstraksi yang berbeda  misalnya  maserasi,  soklet atau refluks.
b. Menggunakan  jenis  pelarut  yang berbeda seperti air, n-heksan, kloroform, atau etil asetat.
c. Memperbanyak  pengulangan  supaya peluang  mendapatkan  data  yang normal semakin besar.

## 6. UCAPAN TERIMA KASIH
Berisi      ucapan      terima      kasih kepada      suatu  instansi        jika penelitian        ini        didanai        atau mendapat  dukungan  oleh  instansi tersebut, atau jika    ada    pihak    yang secara        signifikan  membantu langsung  penelitian  atau  penulisan artikel  ini,  jika  pihak  tersebut  sudah tercantum sebagai penulis, maka tidak perlu disebutkan lagi disini.

## REFERENSI
Anggraini,  D.,  Sholihin,  U.H.,  Savira,
M., Djojosugito, F.A., Irawan,  D.,  Rustam,  R.P., 2018.  Prevalensi  dan  Pola Sensitivitas Enterobacteriaceae
Jurnal Kesehatan Kusuma Husada Volume 13 No 2, Hal 181-191, Juli 2022 Universitas Kusuma Husada Surakarta ISSN : 2087 – 5002 | E-ISSN : 2549 – 371X
Penghasil  ESBL  di  RSUD Arifin  Achmad  Pekanbaru. J. Kedokt. Brawijaya 30, 47. Biutifasari, V., 2018. Extended Spectrum Beta-Lactamase  (  ESBL  ). Ocean. Biomed. J. 1, 1–11. Fahirah  Arsal,  A.S.,  2019.  Deteksi  dan Pola  Kepekaan  Antibiotik pada  Extended  Spectrum Beta Lactamase (Esbl) Eschericia Coli dari Sampel Urin  Petugas  Kesehatan  di Rumah  Sakit  Ibnu  Sina Makassar Tahun 2018. UMI Med. J. 3, 1–13. Ilvani,  E.,  Wilson,  W.,  Muhammad  Evy Prastiyanto, 2019. Uji Antibakteri  Ekstrak  Etanol Biji  Pepaya  (Carica  papaya L.)  terhadap  Pertumbuhan Escherichia coli ESBL Antibacterial Test of Papaya Seeds  (Carica  papaya  L.) Ethanol  Extract  on  the Growth  of  Escherichia  coli ESBL.  Semin.  Nas.  Publ. Hasil-Hasil  Penelit.  dan Pengabdi. Masy. 2, 24–31. Julia Garamina, H., Wulan Sumekar, D., 2017. Analisis Perbandingan Uji Sensitivitas  Antibiotik  dan Keberadaan Extended Spectrum Beta Lactamase  ( ESBL  )  pada  Escherichia coli  dari  Feses  Tenaga Medis di Ruang Rawat Inap Dewasa  dan  Ruang  Rawat Inap  Anak  Comparative Analysis of Antibiotic Sensitivity Te. Artik. Penelit.  Fak.  Kedokt. Univ. Lampung 4, 275–282. Lumempouw, L., Suryanto, E., Paendong, J., 2012. Aktivitas Anti UV-B Ekstrak Fenolik dari Tongkol  Jagung  (Zea  mays L.). J. MIPA 1, 1. Mauti I M, Rini D R, Rante S D T, 2018. Uji  in  Vitro  Aktivitas Antibakteri  Ekstrak  Etanol 70  %  Biji  Pepaya  (Carica papaya L) Terhadap Pertumbuhan Escherichia coli.  Univ.  Nusaa  Cendana 15, 317–326. Mubarak, F., Sartini, S., Purnawanti, D., 2018.  Effect  of  Ethanol Concentration on Antibacterial  Activity  of Bligo Fruit Extract (Benincasa  hispida  Thunb) to Salmonella typhi. Indones.  J.  Pharm.  Sci. Technol. 5, 76. Muhajir, A., Purwono, P.B., Handayani, S.,  2016.  Gambaran  Terapi dan  Luaran  Infeksi  Saluran Kemih oleh Bakteri Penghasil Extended Spectrum  Beta  Lactamase pada  Anak  di  RSUD  Dr. Soetomo  Surabaya.  Sari Pediatr. 18, 111. Nazmi,  M.,  Made,  N.,  Mahardik,  A., Gunardi, W.D., 2017. Kejadian  Infeksi  Saluran Kemih oleh Bakteri Escherichia coli dan Klebsiella pneumoniae Extended  Spectrum  Beta Lactamase:  Studi  Kasus  di Rumah Sakit Swasta Periode 2012-2015. J. Penelit. 23, 56. Noviyanti,  2016.  Pengaruh  Kepolaran Pelarut  Terhadap  Aktivitas Antioksidan Ekstrak  Etanol Daun  Jambu  Brazil  Batu (Psidium guineense L.) Dengan  Metode  DPPH.  J. Farm. Bahari 7, 29–35. Nurhayati, L.S., Yahdiyani, N., Hidayatulloh, A.,  2020. PERBANDINGAN PENGUJIAN  AKTIVITAS ANTIBAKTERI STARTER YOGURT DENGAN METODE DIFUSI  SUMURAN  DAN METODE DIFUSI CAKRAM.  J.  Teknol.  Has. Peternak. 1, 41.
Jurnal Kesehatan Kusuma Husada Volume 13 No 2, Hal 181-191, Juli 2022 Universitas Kusuma Husada Surakarta ISSN : 2087 – 5002 | E-ISSN : 2549 – 371X
Permatasari, A., Batubara, I., Nursid, M., Kelautan, K., 2020. Pengaruh Konsentrasi Etanol dan Waktu Maserasi Terhadap Rendemen, Kadar Total  Fenol  dan  Aktivitas Antioksidan Ekstrak Rumput Laut Padina australis.  Maj.  Ilm.  Biol. Biosf.  A Sci. J. 37, 78–84. Putra,  B.,  Dewanti,  L.,  Wasito,  E.B., 2020. Perbandingan kecepatan pertumbuhan Escherichia  coli  non  ESBL dengan  Escherichia  coli ESBL.  J.  Kedokt.  Syiah Kuala 20, 67–69.
Sa’adah,  H.,  Nurhasnawati,  H.,  2017.
PERBANDINGAN PELARUT ETANOL DAN AIR PADA PEMBUATAN EKSTRAK UMBI BAWANG TIWAI (Eleutherine americana Merr)  MENGGUNAKAN METODE  MASERASI.  J. Ilm. Manuntung Sari, R.P., 2018. Angka Kejadian Infeksi Saluran  Kemih  (ISK)  Dan Faktor Resiko Yang Mempengaruhi Pada Karyawan Wanita Di
Universitas Lampung Event Numbers Urinary Tract Infection  (Uti)  and  Risk Factor  that  Affecting  on Female Employees In University  of  Lampung. Majority 7, 115–120. Syahputra, R.R.I., Agustina, D., Wahyudi,  S.S.,  2018.  The Sensitivity Pattern of Bacteria Against Antibiotics in Urinary Tract Infection  Patients  at  RSD DR.  Soebandi  Jember.  J. Agromedicine  Med.  Sci.  4, 171. Torar, G.M.J., Lolo, W.A., Citraningtyas, G., 2017. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak  Etanol  Biji  Pepaya (Carica Papaya L.) Terhadap Bakteri Pseudomonas  Aeruginosa Dan Staphylococcus Aureus.  Pharmacon  6,  14– 22. Yashir, M., Apriani, A., 2019. VARIASI BAKTERI PADA PENDERITA INFEKSI SALURAN  KEMIH  (ISK). J.  MEDIA  Kesehat.  12, 102–109.