## Sasambo Journal of Pharmacy
https://jffk.unram.ac.id/index.php/sjp
___________ Email: nashrul.far@ulm.ac.id (*Corresponding Author)
Copyright © 2024, The Author(s).
This article is distributed under a Lisensi Creative Commons Atribusi 4.0 Internasional .
Aktivitas antioksidan dan kandungan flavonoid total ekstrak etanol batang  bajakah  kalalawit  ( Uncaria  cordata (Lour)  Merr.)  asal Kecamatan Loksado Kalimantan Selatan
Nor Rezky Safarina 1 , Mia Fitriana 2 , Nashrul Wathan 1*
1 Program Studi Farmasi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam , Universitas Lambung Mangkurat , Banjarbaru, Indonesia 2 Program  Studi  Pendidikan  Profesi  Apoteker,  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam , Universitas  Lambung  Mangkurat , Banjarbaru, Indonesia
DOI: https://doi.org/10.29303/sjp.v5i1.230
Article Info
Abstract: Bajakah kalalawit ( Uncaria cordata (Lour) Merr.) is widely used by Dayak Tribes, based on empirical evidence, and often used to treat diabetes and various diseases such as cancer. This research aimed to determine the total flavonoid content and antioxidant activity of  the  ethanolic  extract  of U.  cordata stems.  The  sample  used  bajakah  kalalawit  from Loklahung  village,  Loksado  District,  South  Hulu  Sungai  Regency,  South  Kalimantan Province. Flavonoid levels were determined using quercetin standards, 10% AlCl 3 reagent, and 5% acetic acid, then measured at a wavelength of 416 nm, while the antioxidant activity using DPPH 0.4 mM in UV-Vis spectroscopy at a wavelength of 516 nm. The results obtained were  a  thick  extract  mass  with  a  dark  brown  color  and  a  distinctive  aroma.  The  total flavonoid content of the ethanol extract of U. cordata stems was found to be 3.6 ± 0.086 %
w/w equivalent quercetin and showed very strong antioxidant activity with an IC 50 value of 9.159 ppm.
Received : 2023-03-15 Revised : 2023-09-30 Accepted : 2024-04-29
Keywords: antioxidant, bajakah kalalawit, dayak tribe, Uncaria cordata (Lour ) Merr.
Citation: Safarina, N. R., Fitriani, M. & Wathan, N. (2024). Aktivitas antioksidan dan kandungan flavonoid total ekstrak etanol batang  bajakah  kalalawit  ( Uncaria  cordata (Lour)  Merr.)  asal  Kecamatan  Loksado  Kalimantan  Selatan. Sasambo Journal of Pharmacy , 5 (1), 1-8. doi: https://doi.org/10.29303/sjp.v5i1.230

## Pendahuluan
Indonesia adalah negara tropis yang mempunyai aneka  ragam  tanaman  yang  dimanfaatkan  untuk keperluan manusia. Sejak zaman dulu masyarakat telah menggunakan  tanaman  yang  memiliki  khasiat  obat untuk menyembuhkan berbagai penyakit. Kebanyakan obat  tradisional  dimanfaatkan  sebagai  pencegahan, pengobatan  dan  menambah  daya  tahan  tubuh (Suparman et al ., 2013).
Bajakah  kalalawit  atau  tanaman Uncaria  cordata (Lour)  Merr. memiliki  sepuluh  senyawa  dengan struktur  berbeda  yang  terdiri  dari  3  flavonoid  yaitu kaempferol,  kuersetin,  dan  taxifolin;  2  kumarin  yaitu skopoletin  dan  3,4-dihidroksi-7-metoksi  kumarin;  3 asam fenolik yaitu asam 2,4-dihidroksibenzoat, asam 2-
hidroksibenzoat,  dan  asam  3,4-dihidroksibenzoat; glikosida iridoid yaitu loganin dan sterol  berupa beta sitosterol (Abdullah et al ., 2016). Rahmawati et al (2016) menyebutkan  bahwa  salah  satu  hasil  isolasi  dari ekstrak batang tanaman U. cordata didapatkan senyawa terpenoid.  Tanaman U.  cordata berdasarkan  empiris dan  hasil  wawancara  dari  masyarakat  dayak  sering digunakan untuk mengobati berbagai penyakit seperti obat  kanker,  diolah  dengan  cara  merebus  batang tanaman U.  cordata dan  diminum  air  rebusannya (Almeida et al , 2023).
Flavonoid  merupakan  golongan  senyawa polifenol  yang  mempunyai  sifat  antioksidan, antimikroba,  antialergi,  antivirus,  antiinflamasi  dan (Pietta,  2000).  Penentuan  flavonoid  dalam  tanaman dapat  mengunakan  metode  kolorimetri.  Antioksidan
berguna  bagi  tubuh  kita  karena  antioksidan  dapat berikatan  dengan  radikal  bebas  dari  tubuh  sehingga tubuh  terbebas  dari  berbagai  bentuk  kerusakan  yang diakibatkan radikal tersebut (Siagian, 2012). Penentuan aktivitas  antioksidan  dapat  menggunakan  beberapa metode,  salah  satunya  adalah  menggunakan  DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl).
Tujuan  penelitian  ini  yaitu  menentukan  kadar flavonoid total dari ekstrak etanol batang U. cordata dan menentukan  aktivitas  antioksidannya  berdasar  nilai IC 50 menggunakan spektrofotometer UV-Vis. Penelitian sebelumnya  terkait U.  cordata diantaranya  yaitu menguji  sitoksisitas  ekstrak  daun U.  cordata yang dilakukan  oleh  Rahmawati et  al (2016),  pengujian antioksidan dan kandungan flavonoid total fraksi aktif daun akar kaik-kaik ( U. cordata ) (Silvia et al. 2022), serta isolasi kuersetin dan kaempferol dari batang U. cordata oleh  Abdullah et  al .,  (2016).  Penelitian  yang  belum pernah  dilakukan  yaitu  penentuan  kadar  flavonoid total  dan  juga  aktivitas  antioksidan  batang  bajakah kalalawit ( U. cordata ). Peneliti tertarik untuk melakukan penelitian terkait aktivitas antioksidan dan penentuan kandungan  flavonoid  total  dengan  menggunakan sampel yang diperoleh dari daerah yang menggunakan batang  bajakah  kalalawit  ( U.  cordata )  secara  empiris sebagai  pengobatan,  yaitu  dari  Kecamatan  Loksado, Kabupaten  Hulu  Sungai  Selatan  (HSS)  Provinsi Kalimantan Selatan.

## Metode
Bahan dalam penelitian ini yaitu bagian batang dari  tanaman U.  cordata, akuades,  HCl  2%,  serbuk magnesium  (Mg),  aluminium  foil,  asam  asetat  5%, AlCl 3 10%, uap amonia, etanol p.a, etanol 96%, kloroform p.a, metanol p.a, kertas saring, pereaksi DPPH (Sigma), dan  standar  kuersetin  (Sigma).  Alat  yang  digunakan adalah  spektrofotometri  UV-Vis  (Genesis).  Sampel dalam penelitian ini adalah batang U. cordata dari Desa Loklahung,  Kecamatan  Loksado,  Kabupaten  HSS, Provinsi Kalimantan Selatan.
Sampel  dilakukan  determinasi  tanaman,  lalu dilakukan  pengumpulan  bahan  dan  pengolahan simplisia,  diekstraksi  dengan  metode  perendaman dengan pelarut etanol 96% (maserasi). Uji pendahuluan adanya  golongan  senyawa  flavonoid  dengan  reaksi warna menggunakan pereaksi Mg dan HCl. Setelah itu, dilakukan uji KLT untuk mengetahui pola pemisahan bercak  senyawanya  dan  untuk  mengetahui  apakah sampel  mengandung  flavonoid  dan  antioksidan menggunakan  pereaksi  DPPH  dan  AlCl 3 dan  uap amonia.  Kemudian,  dilakukan  analisis  kuantitatif menggunakan spektrofotometri UV-Vis untuk penentuan  kadar  flavonoid  total  dan  aktivitas
antioksidan  dari  ekstrak  etanol  batang U.  cordata. Penentuan kadar flavonoid total menggunakan metode kolorimetri  dan  aktivitas  antioksidan  menggunakan metode DPPH.

## Hasil dan Pembahasan

## Identifikasi Tumbuhan
Tanaman U. cordata dalam penelitian dilakukan determinasi  di  Laboratorium  Dasar  Fakultas  MIPA,
Universitas Lambung
Mangkurat, Banjarbaru. Determinasi  Tanaman U.  cordata mengacu  penelitian yang  sudah  dilakukan  Sibarani  (2020),  karena  tempat pengambilan  dan  tanaman  yang  akan  diteliti  sama. Determinasi  dilakuan  untuk  mengetahui  kebenaran nama  dan  jenis  tanaman  yang  akan  diteliti. Berdasarkan  hasil  determinasi,  bajakah  kalalawit termasuk famili (suku) Rubiaceae dengan nama spesies Uncaria  cordata (Lour)  Merr  sesuai  surat  Nomor: 051/LB.LABDASAR/II/2020.

## Pengumpulan Bahan dan Pengolahan Simplisia
Sampel  Batang U.  cordata diambil  dari  Desa Loklahung  Kecamatan  Loksado  pada  bulan  Januari 2021. Batang U. cordata yang telah didapatkan diawali dengan sortasi basah dan dilakukan pencucian. Sortasi basah  dilakukan  untuk  menghilangkan  zat  pengotor yang masih menempel pada sampel. Batang U. cordata kemudian dikering-anginkan dan dilakukan penyerutan,  hal  ini  dilakukan  untuk  mempermudah proses  pengeringan.  Pengeringan  batang U.  cordata dilakukan  dengan  oven  yang  bersuhu  55 0 C. Pengeringan  digunakan  untuk  menghilangkan  kadar air dalam simplisia dan mencegah tumbuhnya kapang sehingga  simplisia  tidak  mudah  rusak.  Batang U. cordata yang  sudah  kering  dilanjutkan  dengan  sortasi kering untuk memisahkan zat asing atau pengotor yang masih  ada.  Simplisia  sebelum  dilakukan  penghalusan didapatkan sebesar 1 kg. Penghalusan dengan blender dan dilanjutkan dengan ayakan mesh 14. Serbuk yang didapatkan  sebesar  320,15  g  karena  pada  proses penghalusan  sampel  cukup  sulit  dan  cenderung  liat, sehingga  ukuran  sampelnya  masih  tidak  seragam halusnya  dan  cukup  banyak  sampel  yang  tidak tersaring  melalui  ayakan.  Warna  serbuk  setelah dilakukan  penyerbukan  berwarna  coklat  muda  dan tidak berasa.
Pembuatan Ekstrak Etanol Batang U. cordata
Metode  ekstraksi  pada  penelitian  ini  adalah maserasi  dimana  menggunakan  pelarut  etanol  96%. Pelarut  etanol  96%  digunakan  pada  proses  ekstraksi karena  dapat  menghasilkan  rendemen  ekstrak  yang lebih  besar  dibandingkan  etanol  dengan  konsentrasi lain  (Senja et  al .,  2014).  Etanol  adalah  pelarut  yang
universal,  dapat  bercampur  dengan  air  (Rowe et  al ., 2006). Proses ekstraksi menggunakan metode maserasi selama 6 x 24 jam dengan pelarut etanol 96%. Ekstrak yang didapat berupa massa kental, berwarna coklat tua dan memiliki bau yang khas. Ekstrak yang didapatkan sebesar  17,652  g.  Hasil  rendemen  ekstrak  yang didapatkan  adalah  5,513%  dari  320,15  g  serbuk  yang diekstraksi.  Hasil  nilai  persen  rendemen  dapat menunjukkan  kemaksimalan  pelarut  dalam  menyari. Semakin  tinggi  nilai  rendemen  yang  didapatkan semakin banyak ekstrak yang didapatkan.
Hasil dari penelitian ini lebih kecil dari penelitian Rachmatiah et  al., (2020)  dimana  pada  penelitian Rachamatiah  dilakukan  pada  daun U.  cordata dan rendemen  ekstrak  yang  didapatkan  18%  dengan pelarut  yang  sama  yaitu  etanol  96%.  Hal  ini  terjadi karena  bagian  sampel  yang  diekstraksi  berbeda  yaitu daun  sedangkan  pada  penelitian  ini  menggunakan batang. Hasil persen rendemen dihitung untuk melihat banyak  ekstrak  yang  didapatkan  setalah  ekstraksi (Harbone, 1987). Selain itu, jumlah senyawa aktif yang ada  pada  sampel  ditunjukkan  dengan  tingginya  nilai rendemen  yang  dihasilkan. Perbedaan  ini  bisa  terjadi karena  adanya  perbedaan  pelarut,  suhu,  metode,  dan waktu ekstraksi.

## Uji Flavonoid dengan reaksi warna
Uji flavonoid dengan melihat perubahan warna merupakan  metode  pertama  dalam  analisis  kualitatif yang  dilakukan  untuk  memperkirakan  golongan senyawa  yang  terkandung.  Penambahan  serbuk  Mg dan  HCl  2%  dilakukan  untuk  membentuk  garam flavilium. Menurut Mailuhu et al. (2017) serbuk Mg dan HCl  mereduksi  inti  benzopiron  yang  terdapat  pada struktur flavonoid sehingga terbentuk garam flavilium berwana  merah  atau  jingga,  dan  hasil  penelitian menunjukkan  hasil  positif  mengandung  flavonoid (Gambar 1)
Gambar 1. Hasil uji flavonoid ekstrak batang U. cordata yang positif menghasilkan warna jingga

## Profil Kromatografi Lapis Tipis
Ekstrak  kental  batang U.  cordata dilakukan  uji antioksidan  dan  flavonoid  dengan  metode  kualitatif dengan  kromatografi  lapis  tipis/KLT.  Kromatografi
lapis  tipis  adalah  langkah  awal  dalam  menganalisis suatu sampel dan ini dilakukan untuk melihat aktivitas antioksidan  dan  keberadaan  flavonoid  dari  suatu sampel sebelum dilakukan uji aktivitas antioksidan dan flavonoid  secara  kuantitatif.  Untuk  penentuan  profil KLT  dilakukan  optimasi  eluen  yang  digunakan,  dan dalam  penelitian  didapatkan  eluen  optimal  berupa kloroform: metanol (9:1).
Plat dilihat di lampu UV tetapi bercak noda tidak terlihat  jelas  pemisahannya  sehingga  dilakukan penyemprotan  H 2 SO 4 kemudian  dipanaskan  di  atas hotplate sampai noda terlihat pada sinar tampak. Untuk uji  kualitatif  antioksidan  dilakukan  penyemprotan dengan  menggunakan  pereaksi  DPPH.  Tujuan dilakukan  penyemprotan  ini  adalah  untuk  melihat keberadaan  senyawa  antioksidan  yang  terkandung, hasil dapat dilihat dari noda yang berwarna kuning dan latar  berwarna  ungu yang  dapat  dilihat  dengan  sinar tampak  (Simaremare,  2014).  Untuk  uji  flavonoid dilakukan penyemprotan dengan AlCl 3 lalu diuapkan menggunakan amonia. Tujuan dilakukan penyemprotan  ini  adalah  untuk  melihat  keberadaan senyawa  flavonoid  yang  terkandung,  hasil  dapat dilihat  dari  noda  yang  berwarna  kuning.  Setelah  itu dilakukan perhitungan nilai Rf.
Profil KLT yang didapatkan adalah pada noda 1 nilai Rfnya 0,63, noda 2 yaitu nilai Rfnya 0,54, noda 3 didapatkan  nilai  Rfnya  0,42  dan  noda  4  didapatkan nilai  Rfnya  0,36 (Gambar  2.a). Hasil (Gambar  2.b) untuk  pengujian  flavonoid  menunjukkan  hasil  positif karena  pada  pengujian  didapatkan  bercak  yang berwarna  kuning  yang  dilihat  pada  sinar  tampak, disebutkan bahwa bercak berwarna kuning menunjukkan positif mengandung flavonoid (Nuari et al ., 2017). Hasil uji kualitatif antioksidan (Gambar 2.c) juga  didapatkan  positif  mengandung  antioksidan karena adanya warna kuning dengan latar warna ungu yang  diakibatkan  oleh  pereaksi  DPPH  yang  bereaksi dengan senyawa yang mempunyai aktivitas antioksidan, ini sudah sesuai literatur menurut Wathan et al. (2020).
Gambar 2. Kromatogram Hasil Analisa KLT dengan sinar tampak: (a) plat yang disemprot H 2 SO 4 ; (b) plat yang disemprot AlCl 3 dan diuapkan dengan amonia; (c) plat disemprot dengan DPPH
Penetapan Kadar Flavonoid Total Ekstrak Batang U. cordata
Pengoperasian  spektrometer  menggunakan panjang  gelombang/lambda  416  nm  sesuai  dengan penelitian yang dilakuan oleh anwar et al., (2017) yang menyatakan panjang gelombang maksimum kuersetin adalah  416  nm. Panjang  gelombang  maksimum bertujuan untuk menetapkan lambda paling maksimal yang akan menghasilkan nilai absorbasi tertinggi dari larutan  baku  kuersetin,  umumnya  dalam  penentuan lambda maksimal pengukuran dilakukan pada panjang gelombang  350-450  nm.  Adapun  o perating  time yang dilakukan  pada  penelitian  adalah  30  menit  dimana sesuai dengan penelitian Ipandi et al ., (2016). Penelitian Munawaroh et  al. (2018)  menyebutkan  bahwa  waktu operating time kuersetin berada dikisaran 30-50 menit.
Gambar 3. Grafik kurva baku konsentrasi vs absorbansi kuersetin
Hasil  yang  didapatkan  dari  grafik  kurva  baku (Gambar  3) yaitu  persamaan  linearnya  adalah  y  = 0,004x  +  0,170.  Nilai  linearitas  (r)  yang  didapatkan sebesar  0,999.  Hasil  ini  sudah  sesuai  karena  nilai linearitas  yang  dikatakan  baik  jika  nilai  koefisien korelasi (r) mendekati 1 (Nafisa et al ., 2015). Linieritas tersebut menyebutkan bahwa adanya hubungan yang linear  antara  konsentrasi  dan  absorbansi  larutan  seri kadar, semakin mendekati 1 hasil semakin linier.
Pada  penelitian  sampel  dibuat  dengan konsentrasi 1000 ppm lalu sampel tersebut diambil 0,5 ml dan ditambahkan AlCl 3 , asam asetat, dan aquadest. Penambahan AlCl 3 berfungsi
untuk
reaksi kompleksasi, sehingga menyebabkan terjadi pergeseran  panjang  gelombang  ke  arah  tampak (visible) yang dapat dilihat dari larutan menghasilkan warna  yang  lebih  kuning.  Penambahan  asam  asetat bertujuan untuk mempertahankan lambda pada daerah visible (tampak) (Chang et al ., 2002).
Tabel 2. Hasil perhitungan kadar flavonoid total
Sampel Abs samp el X abs   RSD (%) Flavo noid total (%b/ b EK) X flavo noid total (%b/b EK) RSD % Replikasi 1 0,312 0,314 ±0,00 3 1,10 3 3,55 3,6 ± 0,086 2,40 5 Replikasi 2 0,312 3,55 Replikasi 3 0,318 3,7 Abs : absorbansi X : rata-rata ± SD
Hasil  penentuan  kadar  flavonoid  total  yang didapatkan  yaitu  3,6  ±  0,086%b/b  EK (Tabel  2) yang artinya tiap  100g  ekstrak  sampel  mengandung  3,6  ± 0,086  g  flavonoid  setara  kuersetin . Nilai  persen  RSD ekstrak etanol batang U. cordata dari penelitian adalah 2,405 %. Persen RSD yang baik adalah ≤ 4 % maka dapat disimpulkan  bahwa  syarat  validitas  telah  terpenuhi (Gonzales et  al .,  2012).  Hasil  penelitian  lain  terhadap daun  kaik-kaik  ( U.  cordata )  didapatkan  kadar 0,521%b/b  EK  pada  fraksi  n-heksan,  0,354%b/b  EK pada fraksi etanol, dan 0,908%b/b EK pada fraksi etil asetat (Silvia et al , 2022). Hal ini disebabkan perbedaan bagian tumbuhan yang digunakan untuk sampel, dan bentuknya  sudah  terfraksi-fraksi,  sehingga  kadar flavonoid totalnya lebih kecil bila dibanding penelitian ini. Penelitian lain terkait bajakah (Fitriani et al ., 2020) menyebutkan  kadar  flavonoid  total  bakajah  tampala ( Spatholobus littoralis Hassk) adalah 3,21 ppm. Hasil ini menunjukkan nilai yang didapatkan pada penelitian ini lebih  besar.  Hal  ini  bisa  dikarenakan  tanaman  yang digunakan  memiliki  perbedaan  spesies,  selain  itu perbedaan  pelarut  yang  digunakan  saat  maserasi, tempat  tumbuh  dan  kondisi  lingkungan  bisa  menjadi faktor pembeda. Begitu juga pada penelitian Kassim et al. (2011)  menyebutkan  kadar  flavonoid  total  pada bajakah kalalawit merah ( Uncaria gambir ) adalah 70,94 mg  setara  katekin  dan  ekstraksinya  menggunakan pelarut metanol.

## Uji aktivitas antioksidan dengan metode DPPH
Uji aktivitas antioksidan ekstrak etanol batang U. cordata menggunakan metode DPPH dan menggunakan  kuersetin  sebagai  pembanding.  Ini dilakukan untuk melihat besarnya aktivitas antioksidan  dalam  ekstrak  yang  dapat  menangkal radikal  bebas.  Metode  ini  digunakan  karena  relatif mudah,  sederhana,  sensitif,  cepat  dan  bisa menggunakan  sedikit  sampel  (Handayani et  al .,  2018; Molyneux, 2004). Aktivitas antioksidan menggunakan metode DPPH ditentukan dengan nilai IC 50 . Nilai IC 50 adalah  nilai  konsentrasi  sampel  yang  dapat
menghambat radikal bebas sebesar 50%. Semakin kecil nilai IC 50 maka sifat antioksidan lebih baik (Molyneux, 2004).
Penentuan  lambda  maksimal  dan operating  time didasarkan  pada  literatur.  Pengukuran  panjang gelombang maksimum DPPH biasanya dilakukan pada rentang 450-550 nm (Saputro & Sudarsono, 2014). Pada penelitian  ini  panjang  gelombang  maksimum  yang digunakan adalah 516 nm. Panjang gelombang tersebut sama  dengan  warna  larutan  pada  daerah  visibel dengan warna keunguan (Philips, 2013). Penelitian ini sesuai  dengan  penelitian  Rastuti  &  Purwati  (2012) dimana panjang gelombang maksimum DPPH berada pada 516 nm. Pengujian ini menggunakan operating time menit ke-30. Beberapa penelitian menyebutkan bahwa operating  time pada  penentuan  aktivitas  antioksidan adalah selama 30 menit (Bakti et al ., 2017). Penentuan nilai IC 50 larutan pembanding dengan menggunakan  kuersetin.  Pemilihan  kuersetin  sebagai pembanding  karena  kuersetin  merupakan  salah  satu flavonol  yang  didapatkan  hampir  di  setiap  jenis tanaman. Selain itu, kuersetin merupakan antioksidan alami yang memiliki aktivitas antioksidan yang sangat kuat (Wathan et al. 2020).  Konsentrasi larutan kuersetin yang digunakan yaitu 2, 3, 4, 5, dan 6 ppm. Larutan ini dibaca  menggunakan  spektrofotometri  UV-Vis  lalu dibuat  kurva  kalibrasi  hubungan  antara  konsentrasi kuersetin (x) dengan persen inhibisi (y). Persen inhibisi adalah  persentase  kemampuan  suatu  sampel  dalam menghambat radikal bebas yang berhubungan dengan konsentrasi sampel yang digunakan.
Gambar 4 . Grafik kurva baku konsentrasi vs persen inhibisi dari pembanding kuersetin
Hasil yang didapatkan dari penelitian ini adalah persamaan  regresi  yang  diperoleh  berdasarkan hubungan konsentrasi kuersetin dengan rerata persen inhibisi  yaitu  y=15,255x  +  0,263  dengan  koefisien kolerasi  (r)  0,998 (Gambar  4). Nilai  koefisien  korelasi yang diperoleh telah memenuhi persyaratan untuk uji linearitas yaitu sebesar 0,99≤ r ≤1 (Gandjar & Rohman, 2007).
Tabel 3. Persentase inhibisi dan IC 50 kuersetin terhadap radikal DPPH
Konsentrasi (ppm) 𝑥̅ % inhibi si IC 50 𝑥̅ IC 50 ± SD (ppm) RSD (%)
R1 R2 R3 2 30,091 3 47,244 3,260 ±0,000 1 4 59,855  3,26 0 3,25 8 3,26 1 0,05 3 5 76,331 6 92,220

## 𝑥̅ : rata-rata
Persamaan  regresi  lalu  digunakan  untuk menghitung  nilai  IC 50 atau  nilai  x  pada  persamaan, dimana  nilai  y  diganti  dengan  50.  Dalam  penentuan nilai IC 50 dilakukan 3 kali replikasi hingga didapat nilai rerata IC 50 pembanding kuersetin sebesar 3,260±0,0001 ppm (Tabel 3) dapat dinyatakan kuersetin mempunyai aktivitas  antioksidan  sangat  kuat.  Hasil  ini  sesuai dengan  penelitian  sebelumnya  oleh  Auliany  (2017), dimana penelitian tersebut mengatakan bahwa larutan kuersetin  memiliki  aktivitas  antioksidan  sangat  kuat. Penentuan  nilai  IC 50 ekstrak  etanol  batang U.  cordata dilakukan dengan cara membuat larutan uji dalam seri konsentrasi 1, 5, 10, 15, dan 20 ppm.
Gambar 5. Grafik hubungan antara konsentrasi ekstrak etanol batang U. cordata dengan persen inhibisi
Hasil  yang  didapatkan  setelah  dibaca  pada panjang gelombang 516 nm adalah persamaan regresi (Gambar  5) yaitu  y=  3,234x  +  20,379  dengan  nilai  r  = 0,991 yang menyatakan bahwa terdapat korelasi 99,1 % antara  konsentrasi  ekstrak  kental  dengan  persen inhibisi. Sedangkan, literatur menyebutkan nilai r yang baik  mendekati  1  (Wathan et  al .,  2023).  Literatur  lain juga  menyebutkan  kriteria  untuk  nilai  linieritas  yang baik yaitu 0,99≤ r ≤1 (Gandjar & Rohman, 2007).
Tabel 4. Persentase inhibisi dan IC 50 ekstrak etanol batang U. cordata terhadap DPPH Konsentrasi (ppm) 𝑥̅ % inhibisi IC 50 𝑥̅ IC 50 ± SD (ppm) RSD (%) R1 R2 R3 1 22,46 5 39,758 9,159 10 51,235 9,156  9,148  9,172  ±0,012  0,136 15 76,611 20 86,765 𝑥̅ : rata-rata
Nilai rerata IC 50 ekstrak etanol batang U. cordata yang  didapatkan  dari  hasil  perhitungan  adalah  9,159 ppm.  Nilai  ini  bisa  dikatakan  memiliki  aktivitas antioksidan  yang  sangat  kuat (Tabel  4). Penelitian Ahmad et  al (2011)  menyebutkan  batang U.  cordata mempunyai  aktivitas  antioksidan  yang  kuat  dengan nilai  IC 50 80  µg/ml.  IC 50 dari  penelitian  ini  memiliki nilai yang lebih kecil dari penelitian Ahmad et al (2011). Perbedaan nilai IC 50 dapat dikarena karena perbedaan tempat  hidup  sampel  dan  pelarut,  dimana  penelitian Ahmad et  al (2011)  tanaman  berasal  dari Agriculture departement Malaysia  dan  pelarut  yang  digunakan adalah metanol. Tempat tumbuh sampel berbeda maka lingkungannya pun berbeda, misal perbedaan asupan nutrisi  dari  tanah  dan  banyaknya  paparan  cahaya matahari,  sedangkan  pelarut  metanol  tentunya  lebih polar  dari  pelarut  etanol  96%  sehingga  ada kemungkinan perbedaan metabolit yang terekstraksi.

## Kesimpulan
Berdasarkan  hasil  pengujian  dan  analisa  data yang telah dilakukan, dapat disimpulkan bahwa kadar flavonoid  total  dari  ekstrak  etanol  batang U.  cordata adalah 3,6 ± 0,086 %b/b EK dan aktivitas antioksidan ekstrak  etanol  batang U.  cordata dapat  dikategorikan sangat  kuat dengan  nilai  IC 50 sebesar  9,159  ppm  (<50 ppm).

## Daftar Pustaka
Abdullah N. H., Salim F & Ahmad R. 2016. Isolation of flavonols  from  the  Sems  of  Malaysian  Uncaria cordata  var.  ferruginea  (BLUME)  RIDSD. Malaysian  Journal  of  Analytical  Sciences . 4 :  844– 848.
Ahmad, R., Hashim, H. M., Noor, Z. M., Ismail, N. M., Salim,  F.,  Lajis,  N.  H  &  Shaari,  K.  2011. Antioxidant  and  antidiabetic  potential  of Malaysia Uncaria. Research  Journal  of  Medicinal Plant. 5 : 587-595.
Almeida,  M.,  Salam,  S.,  Rahmadani,  A.,  Helmi,  H., Narsa, A. C., Kusuma, S. A. F., & Sriwidodo, S. 2022. The potency of the genus Uncaria from east Borneo  for  herbal  medicine  purposes:  A  mini- review.  Journal  of  Tropical  Pharmacy  and Chemistry, 6(2), 167–176.
Anwar, K., Fadillaturrahmah & D. P. Sari. 2017. Analisis Kandungan  Flavonoid  Total  Ekstrak  Etanol Daun  Binjai  ( Mangifera  caesia Jack.)  dan Pengaruhnya  Terhadap  Kadar  Glukosa  Darah Tikus  Yang  Diinduksi  Fruktosa-Lemak  Tinggi. Jurnal Ibnu Sina . 2 : 20-30.
Auliany,  R.  2017. Penetapan  Kadar  Fenol  dan  Flavonoid Total  serta  Aktivitas  Antioksidan  Fraksi  Etil  Asetat Akar Tawas Ut (Ampelocissus Rubiginosa Lauterb.) . Skripsi  Program  Studi  Farmasi,  Universitas Lambung Mangkurat, Banjarbaru.
Bakti,  A.  A.,  L.  Triyasmono,  &  M.  I.  Rizki.  2017. Penentuan  Kadar  Flavonoid  Total  dan  Uji Antioksidan  Ekstrak  Etanol  Daun  Kasturi ( Mangifera  casturi Kosterm.)  dengan  Metode DPPH. Jurnal Pharmascience . 4 : 102-108.
Chang C. Yang M, Wen Hand Chern J. 2002. Estimation of  Total  Flavonoid  Content  in  Propolis  by  Two Complementary  Colorimetric  Methods, J.  Food Drug Anal .
Departemen  Kesehatan  RI.  2008. Parameter  Herbal Indonesia .  Edisi  ke-I.  Departemen  Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta.
Fitriani,  Eldha,  S.  &  Suroto  H.  S.  2020.  Karakteristik Tanaman  Akar  Bajakah  ( Spatholobus  littoralis Hassk)  Dari  Loa  Kabupaten  Kutai  Kartanegara, Jurnal Riset Teknologi Industri. 2 : 1-12.
Gandjar,  I.  G.  &  A.  Rohman.  2007.  Kimia  Farmasi Analisis. Pustaka Pelajar, Yogyakarta.
Gonzales, C. S., C. Pizarro., N. P. D. Notario & J. M. G. Saiz. 2012. Development of a Dispersive Liquid- Liquid  Microextraction  Method  for  The Simultaneous  Determination  of  The  Main Compounds  Causing  Cork  Taint  and  Brett Character in Wines Using Gas Chromatography- Tandem  Mass  Spectrometry. Journal  of Chromatography A. 1218 : 1576-1584.
Handayani, S., A. Najib & N. P. Wati. 2018. Uji Aktivitas Antioksidan  Ekstrak  Daun  Daruju  (Acanthus ilicifolius L.) dengan Metode Peredaman Radikal
Bebas  1,1-Diphenyil-2-Picrylhidrazil  (DPPH). Jurnal Fitofarmaka Indonesia. 5 : 299-308.
Harborne, J.B. 1987. Metode Fitokimia Penuntun Cara Modern  menganalisis  Tumbuhan,  Edisi  4, terjemahan  Kosasih  P  dan  Soediro  L.  Institut Teknologi Bandung Press, Bandung
Ipandi, I., Liling, T. & Budi, P. 2016. Penentuan Kadar Flavonoid  Total  dan  Aktivitas  Antioksidan Ekstrak  Etanol  Daun  Kajajahi  ( Leucosyke capitellata Wedd.). Jurnal Pharmascience, 3 : 93-100.
Kassim, M. J., M. H. Hussin, A. Achmad, N.H. Dahon,
T. K. S. & H. S. Hamdan. 2011. Determination of Total Phenol, Condensed Tannin and Flavonoid Content  and  Antioxidant  Activity  of Uncaria gambir Extract. Majalah Farmasi Indonesia. 1 : 50-59.
Mailuhu, M., M. R. J. Runtuwene & H. S. J. Koleangan. 2017.  Skrining  Fitokimia  dan  Aktivitas Antioksidan  Ekstrak  Metanol  Kulit  Batang Soyogik ( Saurauia bracteosa DC). Chem. Prog. 10 : 1-7.
Molyneux, P. 2004. The Use of the Stable Free Radical Diphenylpicryl-hydrazyl (DPPH) For Estimating Antioxidant  Activity. Songklanakarin  Journal  of Science Technology . 26 : 211 – 216.
Munawaroh, R., Siswadi, E. P. Setyowati, R. Murwanti &  T.  Hertiani.  2018.  Korelasi  Antara  Kadar Flavonoid  Total  dan  Aktivitas  Fagositosis Makrofag Fraksi-Fraksi dari Ekstrak Etanol Kulit Batang Faloak ( Sterculia quadrifida R. Br.) Secara In Vitro . Traditional Medicine Journal . 23 : 47-55.
Nafisa,  R.,  N.  Kurniaty  &  D.  Herawati.  2015. Pengembangan  Metode  Analisis  Kualitatif  dan Kuantitatif  Residu  Antibiotik  Tetrasiklin  dalam Sarang Lebah dengan Metode Kromatografi Cair Kinerja  Tinggi  (KCKT). Prosiding Penelitian SPeSIA UNISBA : 372-381.
Nuari,  S.,  S.  Anam  &  A.  Khumaidi.  2017.  Isolasi  dan Identifikasi  Senyawa  Flavonoid  Ekstrak  Etanol Buah  Naga  Merah  ( Hylocereus  polyrhizus (F.A.C Weber) Briton & Rose. Jurnal Farmasi Galenika. 2 : 118-125
Philips,  M.  2013.  The  Use  of  The  Stable  Free  Radical Diphenylpicrylhydrazyl  (DPPH)  for  Estimating Antioxidant Activity. Songklanarin Journal Science Tecnology. 26 : 211-219.
Pietta, P. G. 2000. Flavanoid and Antioxidant. J. Nat. Prod.
63 : 1035-1042.
Rachmatiah,  T.,  Vilya  S.  &  F.  Helma.  2020.  Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Akar Kaik-Kaik ( Uncaria  cordata (Lour.)  Merr.)  terhadap Staphylococcus aureus dan Salmonella typhi. Jurnal Ilmiah Kesehatan, 3 :107-114.
Rahmawati,  N.,  Utami  R.  dan  Azwendah  2016.  Isolasi dan  uji  aktivitas sitotoksik  senyawa  murni  dari ekstrak etil asetat daun tumbuhan akar kaik-kaik Uncaria cordata (Lour.) Merr. Scienta . 6 :122-126.
Rastuti, U & Purwati. 2012. Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak  Daun  Kalba  ( Albixia  falcataria) dengan Metode  DPPH  ( 1,1-Difenil-2-pikrilhidrazil )  dan Identifikasi  Senyawa  Metabolit  Sekundernya. Molekul. 7 : 33-42
Rowe, R. C., P. J. Sheskey & S. O. Owen. 2006. Handbook of Pharmaceutical Excipients 5th Ed . Pharmaceutical Press, London.
Saputro, A. H & Sudarsono. 2014. Potensi Penangkapan Radikal  2,2-difenil-1-pikrilhidrazil  (DPPH)  oleh Buah  Pisang  Susu  ( Musa  paradisiaca L.  “Susu”) dan  Pisang  Ambon  ( Musa  paradisiaca L. “Ambon”). Tren. Med. J. 19: 7-13.
Senja, R. Y., E. Issusilaningtyas, A. K. Nugroho & E. P. Setyowati.  2014.  The  Comparison  of  Extraction Method  and  Solvent  Variation  on  Yield  and Antioxidant  Activity  Of Brassica  oleracea L.var. capitata  f.  rubra  Extract. Traditional  Medicine Journal. 1 : 43-48.
Siagian,  P.  2012. Keajaiban  Antioksidan .  PT  Gramedia Pustaka Utama, Jakarta.
Sibarani,  P.  R.  2020.  Karakterisasi  Simplisia  dan Standarisasi  Ekstrak  Etanol  Batang  Bajakah Kalalawit  ( Uncaria  cordata (Lour)  Merr.)  Asal Kecamatan Loksado Kalimantan Selatan. Skripsi Program  Studi  Farmasi,  Universitas  Lambung Mangkurat, Banjarbaru.
Simaremare,  E.  S.  2014.  Skrining  Fitokimia  Ekstrak Etanol  Daun  Gatal  ( Laportea  decumana (Roxb.) Wedd). Pharmacy. 11: 98-107
Silvia, S. D., Nadia Rahma, E., Celloce Njurumana, V.,
& Yanuarti, R. (2022). Pengujian Flavonoid Total Dan Uji Aktivitas Antioksidan Fraksi Aktif Daun Akar  Kaik-Kaik  (Uncaria  cordata  (Lour.)  Merr)
Yang  Berpotensi  Sebagai  Obat  Diare.  Jurnal Biologi  Dan  Pembelajarannya  (JB&P),  9(2),  105- 112
Suparman, I. P., I. W. Sudira & I. K. Berata. 2013. Kajian Ekstrak  Daun  Kedondong  ( Spomdias  dulcis G. Forst)  Diberikan  Secara  Oral  Pada  Tikus  Putih Ditinjau Dari Hispatologi Ginjal. Buletin Veteriner Udayanan. 5 : 49-56.
Wathan,  N  &  M.  I.  Rizki.  2020.  Penentuan  Aktivitas Antioksidan  Ekstrak  Etil  Asetat  Dan  Ekstrak Metanol  Akar  Saluang  Belum  ( Luvunga sarmentosa ), Prosiding  Seminar  Nasional  Lahan Basah , 5(1), 126-128.
Wathan, N., M. I. Rizki., Khairunnisa, A., Simamora, H., 2023.  Total  Flavonoids  Determination  and Antioxidant  Activity  of  Ethyl  Acetate,  Ethanol, and Methanol Extracts from Seluang Belum Root (Luvunga  sarmentosa  (Blume)  Kurz.).  Berkala Kedokteran. 19(1). 101-106.
Wijaya,  D.  P.,  J.  E.  Paendong,  &  J.  Abidjulu.  2014. Skrining Fitokimia dan Uji Aktivitas Antioksidan dari  Daun  Nasi  ( Phrynium  capitatum )  dengan Metode DPPH (1,1-difenil-2-pikrilhidrazil). Jurnal Mipa Unsrat Online . 03 : 11-15.