AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK KULIT BUAH PALA ( Myristica fragrans Houtt) TERHADAP BAKTERI Escherichia coli
Alfisiane Gansareng 1) , Widya Astuty Lolo 1) , Nancy C.H. Pelealu 1)
1) PS. Framasi FMIPA Unsrat Manado, 95115

## ABSTRAK
Tanaman  pala  pada  bagian  biji,  daging,  buah  dan  fuli  telah  banyak  dimanfaatkan  sebagai antibakteri  akan  tetapi  pada  bagian  kulit  buah  pala  belum  banyak  dilakukan  penelitian  oleh  karena  itu penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  aktivitas  antibakteri  ekstrak  kulit  buah  pala.  Metode  yang digunakan dalam penelitian metode difusi agar dengan kontrol positif Ciprofloxacin dan kontrol negatif aquades serta larutan uji yang digunakan ekstrak kulit buah pala dengan seri konsentrasi 10%, 20%, 30%, 40% dan 50%. Hasil penelitian menunjukkan bahwa semakin tinggi konsentrasi larutan uji maka semakin besar zona hambat yang terbentuk. Dengan demikian dapat disimpulkan bahwa kulit buah tanaman pala memiliki aktivitas antibakteri.
Kata kunci : Myristica fragrans , Aktivitas Antibakteri, Escherichia coli

## ABSTRACT
Nutmeg plants especially the seeds, fruit flesh and fuli has been widley used as an antibacterial but there has not been much research in the skin part of the fruit, therefore this study aims to determine the  antibacterial  activity  of  nutmeg  extract.  Methods  which  carried  out  in  the  research  were  agar diffusion  method  with  positive  control  of  Ciprofloxacin  and  negative  control  of  aquades  as  well  as  test solution  used  of  nutmeg  extract  with  the  series  of  concentration  of  10%,  20%,  30%,  40%  and  50%, respectively.  The result  showed  that the  higher  concentration  of the test solution  the  greater the inhibit zone formed. Thus it can be concluded that the nutmeg skin has antibacterial activity.
Keywords : Myristica fragrans, Antibacterial Activity, Escherichia coli

## PENDAHULUAN
Kesehatan adalah keadaan sejahtera dari badan, jiwa dan sosial yang memungkinkan setiap orang hidup produktif secara  sosial  dan  ekonomis,  dimana  saat  ini tingkat  kesehatan  menghadapi  tantangan yang  sangat  berat  (Nurwidodo,  2006). Masalah kesehatan adalah masalah kompleks  yang  merupakan  hasil  dari berbagai  masalah  lingkungan  yang  bersifat alamiah  atau  buatan  manusia.  Datangnya penyakit  merupakan  hal  yang  tidak  biasa ditolak ataupun dihindari (Foster, 2006).
Infeksi  terjadi  bila  mikroorganisme yang  masuk  ke  dalam  tubuh  menyebabkan berbagai  gangguan  fisiologi  normal  tubuh sehingga  timbul  penyakit  infeksi.  Penyakit infeksi  mempunyai  kemampuan  menular pada  orang  lain  yang  sehat  sehingga populasi penderita dapat meluas (Wattimena et al , 1991). Menurut Radji (2011) penyebab infeksi  adalah bakteri.  Pengobatan  alternatif dapat  digunakan  adalah  tanaman  yang mengandung  zat  antibakteri,  dalam  hal  ini ekstrak tanaman  yang mampu menghambat pertumbuhan  bakteri.  Tanaman  yang  secara empiris  digunakan  sebagai  obat  antibakteri salah  satunya  adalah  pala  (Takikawa et  al, 2002).  Pala  mempunyai  prospek  yang  baik karena  selalu  dibutuhkan,  baik  dalam industri  makanan,  minuman,  obat-obatan dan  lain-lain.  Keperluannya  yang  lebih spesifik  yaitu  pala  dapat  dibuat  sebagai bahan  antibakteri  (Putra,  2015).  Tanaman pala  merupakan  tanaman  yang  dapat menghasilkan  minyak  atsiri  (Stahl,  1985). Minyak atsiri merupakan zat yang terkandung  sebagai  antibakteri  pada  pala (Nurdjannah et al , 2007). Menurut Mardisiswojo (1985), tanaman pala
memiliki  kandungan  senyawa  flavonoid diduga  memiliki  efek  penghambat  terhadap pertumbuhan bakteri. Ameen (2011) melakukan  penelitian  tentang  aktivitas antibakterial ekstrak biji pala terhadap E.coli dengan  pelarut  aquades  dan  etanol  pada konsentrasi  100%,  75%,  50%  dan  25%. Penelitian  tersebut  menunjukkan  bahwa zona hambat terhadap E.coli hanya terbentuk  pada  konsentrasi  100%,  75%. Berdasarkan  uraian  diatas,  peneliti  tertarik untuk melakukan penelitian tentang aktivitas antibakteri ekstrak kulit buah pala ( Myristica  fragrans Houtt)  terhadap  bakteri Echerichia coli.

## METODE PENELITIAN
Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium  Mikrobiologi  Farmasi  dan Laboratorium  Farmakognosi  dan  Fitokimia, Program  Studi  Farmasi  Fakultas  MIPA, Universitas  Sam  Ratulangi  Manado  pada bulan  Juli  –  September  2017.  Dari  larutan stok  100%  dibuat  larutan  uji  10%,  20%, 30%, 40%, dan 50% dengan cara dipipet 0,2 ml, 0,4 ml, 0,6 ml,  0,8 ml dan 1 ml ekstrak kulit  buah  pala  dan  dicukupkan  volumenya hingga  2  ml.  Nutrient  Agar  (NA)  sebanyak 0,56  g  dilarutkan  dalam  20  ml  aquades  (28 g/1000 ml) menggunakan erlenmeyer. Setelah  itu  dihomogenkan  dengan  stirrer  di atas  pemanas  air  sampai  larut.  Media  dasar dibuat dengan cara ditimbang Nutrient Agar (NA)  sebanyak  2,8  g  lalu  dilarutkan  dalam 100 ml aquades (28 g/1000 ml) menggunakan erlenmeyer. Sedangkan media pembenihan dibuat dengan cara ditimbang 7 g NA, lalu dilarutkan dalam 250 ml akuades (28  g/1000)  menggunakan  erlenmeyer. Larutan  H 2 SO 4 1%  sebanyak  9,95  ml
dicampurkan  dengan  larutan  BaCl 2 .2H 2 O 1,175% sebanyak 0,05 ml dalam Erlenmeyer.  Kemudian  dikocok  sampai terbentuk larutan yang keruh. Kekeruhan ini dipakai  sebagai  standar  kekeruhan  suspense bakteri uji. Bakteri uji yang telah diinokulasi diambil  dengan  jarum  ose  steril  lalu disuspensasikan kedalam tabung berisi 2 ml larutan  NaCl  0,9%  hingga  diperoleh kekeruhan  yang  sama  dengan  standar kekeruhan  Mc.  Farland.  Lapisan  dasar dibuat  dengan  menuangkan  masing  masing 10  ml  NA  dari  media  dasar  kedalam  15 cawan  petri,  lalu  di  biarkan  sampai memadat. Setelah memadat pada permukaan lapisan  dasar  diletakan  3  pencadang  baja yang  diatur  sedemikian  rupa  jaraknya  agar daerah  pengamatan  tidak  saling  bertumpuh. Kemudian,  suspense  bakteri  dicampurkan kedalam media pembenihan NA. Setelah itu di  tuangkan  15  ml  campuran  suspense  dan media  pembenihan  tersebut  kedalam  tiap cawan  petri  yang  diletakan  pencadang sebagai  lapisan  ke  dua.  Selanjutnya, pencadang  diangkat  secara  aseptik  dari cawan  petri,  sehingga  terbentuklah  sumur- sumur  yang  akan  di  gunakan  dalam  uji antibakteri.  Larutan  uji  ekstrak  kulit  buah pala  dengan  berbagai  konsentrasi  (10%, 20%, 30%, 40%, dan 50%); aquades sebagai kontrol negatif; larutan ciprofloxacin sebagai  kontrol  positif,  masing-masing diteteskan  pada  sumur  yang  berbeda sebanyak  50µl.  Kemudian  cawan  petri diinkubasi  dalam  inkubator  pada  suhu  37 o C selama  24  jam.  Pengamatan  dilakukan terhadap zona bening yang terbentuk setelah 24  jam  masa  inkubasi.  Diameter  zona hambat  diukur  dalam  satuan  millimeter (mm) menggunakan mistar berskala.
kemudian  diameter  zona  hambat  tersebut dikategorikan  kekuatan  daya  antibakterinya berdasarkan penggolongan Davis and Stout.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Kulit  buah  pala  mentah  yang digunakan  sebanyak  2  kg,  lalu  dibersihkan dan dicuci terlebih dahulu dengan air sampai bersih.  Setelah  bersih  sampel  tersebut dikeringkan  dengan  cara  di  angin-anginkan sehingga  diperoleh  sampel  sebanyak  350  g. Setelah  itu  sampel  dihaluskan  dengan menggunakan blender. Serbuk yang dihasilkan kemudian diayak dengan menggunakan  ayakan  mesh  65  sehingga diperoleh serbuk kering (simplisia) sebanyak 250  g.  Sampel  kulit  buah  pala  diekstrasi dengan  menggunakan  metode  maserasi dengan  pelarut  etanol  96%.  Sebanyak  1250 ml  selama  5  hari  dan  sesekali  dilakukan pengadukan. Kemudian debris yang diperoleh diremaserasi dengan pelarut etanol 96%  sebanyak  750  ml  selama  2  hari  dan sesekali  diaduk.  Hasil  proses  maserasi berupa  filtrat  berwarna  coklat  kehitaman sebanyak  1  liter.  Selanjutnya  dipekatkan menggunakan rotary  evaporator hingga diperoleh ekstrak kental sebanyak 9,74 gram yang  berwarna  coklat  kehitaman.  Menurut Davis  and  Stout  (1971),  kriteria  kekuatan daya antibakteri yaitu diameter zona hambat 5  mm  atau  kurang  dikategorikan  lemah, zona hambat 5-10 mm dikategorikan sedang, zona  hambat  10-20  mm  dikategorikan  kuat dan  zona  hambat  20  mm  atau  lebih dikategorikan  sangat  kuat.  Berdasarkan kriteria  tersebut,  maka  daya  antibakteri ekstrak  kulit  buah  pala  pada  bakteri Escherichia  coli dengan  konsentrasi  ekstrak
10% (6,66 mm) termasuk sedang, konsentrasi ekstrak 20% (7,83 mm) termasuk  sedang,  konsentrasi  ekstrak  30% (8,16  mm)  termasuk  sedang,  konsentrasi ekstrak 40% (10,16 mm) termasuk kuat, dan pada  konsentrasi  ekstrak  50%  (10,33  mm) termasuk  kuat.  Sehingga  diketahui  bahwa konsentrasi  ekstrak  10%,  20%,  30%,  40% dan  50%  merupakan  konsentrasi  efektif untuk menghambat bakteri Escherichia coli . Menurut Robinson (1995), flavonoid
berfungsi  sebagai  antibakteri  dengan  cara mengikat protein bakteri sehingga menghambat  aktivitas  enzim  yang  pada akhirnya  mengganggu  proses  metabolisme bakteri.  Sifat  lipofilik  flavonoid  dapat merusak  membran  sel  bakteri  karena membran  sel  mengandung  lipid  sehingga memungkinkan  senyawa  tersebut  melewati membran.

## KESIMPULAN
Ekstrak  kulit  buah  pala  ( Myristica fragrans Houtt)  memiliki  aktivitas  sebagai antibakteri  terhadap  bakteri Escherichia coli .  Perbedaan  konsentrasi  ekstrak  kulit buah    pala  ( Myristica  fragrans Houtt) mempengaruhi  penghambatan  pertumbuhan bakteri Escherichia  coli ,  dimana  semakin tinggi  konsentrasi  yang  diberikan  semakin tinggi pula aktivitas penghambatan pertumbuhan bakteri Eschericia coli .

## DAFTAR PUSTAKA
Ajizah,  A.  2004.  Sensitivitas Salmonella typhimurium Terhadap Ekstrak Daun Psidium guajava L. Bioscientiae .
Ameen,  Sabah  J.,  2011.  Antimicrobial Activity  of  Nutmeg  Extract  Against
Staphylococcus aureus and Escherichia coli . Institute of Medical Technology, Baghdad.
Anonim,  2014. Informasi  Spesialis  Obat . ISFI: Jakarta.
Davis  dan  Stout,  1971. Disc  Plate  Method Of Microbiological Antibiotic Essay . Journal Of Microbiology.
Departemen  Kesehatan  RI.  1985.  Cara Pembuatan  Simplisia.  Departemen Kesehatan RI, Jakarta.
Departemen  Kesehatan  RI.  1986.  Sediaan Galenik.  Departemen  Kesehatan  RI, Jakarta.
Diah  P.,  Diniatik.,  Dwi  H.  2011.  Studi
Etnofarmakologi  Obat  Tradisional Sebagai Anti Diare. Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah. Purwokerto. Direktur  Jenderal  POM.  2000.  Parameter Standar  Umum  Ekstrak  Tumbuhan
Obat.  Departemen  Kesehatan  RI, Jakarta.
Foster,  A.  2006. Antropologi  Kesehatan . Jakarta: Penerbit Universitas Indonesia. Gandjar,  I.G.,  Abdul,  2008. Kimia  Farmasi Analisis . Pustaka Pelajar,
Yogyakarta.
Harborne,  J.B.  1987.  Metode  Fitokimia.
ITB, Bandung.
Hasanah,  Y.,  2011. Budidaya  Tanaman Obat  dan  Rempah .  USU  Press. Medan.
Hedetniemi,  Kevin  dan  Liao,  Min-Ken. 2006. Luria  Broth  (LB)  and  Luria
Agar
(LA)  Media  and  Their  Uses  : Bacillus
cereus .
www.microbelibrary.org[22 November 2009].
Jawetz, et al . 2001. Mikrobiologi Kedokteran. Salemba Medika, Jakarta. Jawetz, et al . 2005. Mikrobiologi
Kedokteran. Edisi 1. Salemba Medika, Jakarta. Jawetz, et al . 2007. Mikrobiologi Kedokteran.  Edisi  23.  Salemba Medika, Jakarta.
Nurdjannah,  N.  and  Mulyono,  E.,  2007. Teknologi  Pengolahan  Pala. Badan Penelitian Dan Pengembangan Pertanian.  Balai  Besar  Penelitian dan Pengembangan Pascapanen Pertanian. Bogor
Nurwidodo.  2006.  Pencegahan  dan  Promosi Kesehatan Secara Tradisional. Jurnal Humanity.
Pelczar,  M,  Chan.  1988. Dasar-Dasar
Mikrobiologi  (Jilid1) Jakarta:  UI
Press. Post, K.W., G.J. Songer. 2005.
Microbiology:  Bacterial  and  Fungal Agent  of  Animal  Disease. Elsevier saunders. Microbiology.
Pratiwi,  S.  2008.  Mikrobiologi  Farmasi.
Erlangga, Jakarta.
Putra, D.P. and Verawati, V., 2015. Analisa Kandungan  Flavonoid  dan  Aktivitas Antioksidan dari Rempah Tumbuhan Obat  Sumatera  Barat. Scientia-

## Jurnal Farmasi dan Kesehatan.
Quinn,  P.J,  B.K.  Markey.,  M.E.  Carter., W.J.  Donelly.,  F.C.  Leonard.  2002.
Veterinary Microbiology and
Microbial  Disease. Iowa:  Blackwell Publishing.
Radji,  M.  2011. Mikrobiologi .  Buku Kedokteran ECG. Jakarta Rismunandar,  1990,  1992. Budidaya  dan
Tataniaga pala . PT. Penebar swadaya Jakarta.
Robinson,  T.  1995.  Kandungan  Organik
Tumbuhan  Tinggi.  Edisi  6.  ITB Press, Bandung.
Schlegel,  H.  G.  1994. Mikrobiologi  Umum . Gadjah  Mada  University  Press, Jogyakarta.
Setiabudy,  R.  2007. Antimikroba :  Dalam Farmakologi  dan  Terapi.  Edisi  5. Balai Penerbit FKUI. Jakarta.
Soetjipto,  H.  2008.  Aktivitas  Antibakteri
Minyak Atsiri dan Toksisitas Esktrak Bunga Legetan ( Spilanthes paniculata Wall). Berkala  Ilmiah Biologi . Songer,  J.G.,  K.W.  Post.  2005. Veterinary Microbiologi  Bacterial  and  Fungal Agent  of  Animal  Disease. USA:
Elsevier Saunders.
Stahl  E.,  1985,  Analisis  Obat  Secara
Kromatografi dan Mikroskopi, Padmawinata K, penerjemah. Bandung: Penerbit ITB. Drug Analysis by Chromatography. Sunanto,  1993. Budidaya  Pala  Komoditi Ekspor Penerbit Konisius, Yogyakarta. Suriawiria, Unus. 2005. Mikrobiologi Dasar.
Papas Sinar Sinarti: Jakarta Suryanto,  E.  2012. Fitokimia  Antioksidan . Penerbit  Putra  Media  Nusantara.
Surabaya.
Sutomo,  B.  2006.  Buah  Pala,  mengobati gangguan insomnia, mual dan masuk angin. Diakses 30 april 2017.
Syukur  dan  Hermani.  2001.  Budidaya
Tanaman Obat Komersial. PT
Penebar Swadaya, Jakarta.
Takikawa  A.,  Abe  K.,  Yamamoto  M.,
Ishimaru S., Yasui M., Okubo Y. and Yokoigawa  K.,  2002,  Antimicrobial activity of nutmeg against Escherichia coli O157., Journal  of bioscience and bioengineering .
Todar, K. 2008. Staphylococcus  aureus and Escherichia  coli .  University  of Wisconsin  Madison  Departement  of Bacteriology.
Wattimena,  J.R.,  Nelly,  C.,  Sugiarso, Widianto,  M.A.,  Sukandar,  E.Y., Soemardji,  A.A.  &  Setiadi,  A.R. 1991.  Farmakodinamika  dan  Terapi Antibiotik.Gadjah  Mada  University Press.Yogyakarta.
World  Health  Organization.  1977.  WHO Expert  Committee  on  Biological Standardization  (Technical  Report Series,  no.  610).  World  Health Organization, Geneva.