## PEMBUATAN EKSTRAK DAUN MANGGA DENGAN CARA EKSTRAKSI SOXHLET SEBAGAI PENGHAMBAT PERTUMBUHAN BAKTERI PATOGEN KHUSUSNYA ESCHERICHIA COLI
D Darnengsih, Mustafiah, Zakir Sabara, Munira, Darwiah Rezki, Nur Ulfa Zulhulaifa
Jurusan Teknik Kimia, Fakultas Teknologi Industri, Universitas Muslim Indonesia, Jl. Urip Sumoharjo Km.05 Kota Makassar Email : darnengsih.darnengsih@umi.ac.id ; mustafiah.mustafiah@umi.ac.id ; zakir.sabara@umi.ac.id ; munira@umi.ac.id

## INTISARI
Pohon mangga adalah pohon yang berbatang tegak bercabang banyak dan bertajuk rindang hijau sepanjang tahun.  Daun  mangga  mempunyai  sejumlah  besar  kandungan  mangiferin  yang  telah  diteliti  menjadi antioksidan, analgesik, antidiabetes, anti inflammatory, antitumor, antimikrobia dan peningkat stamina atau daya  tahan  tubuh.  Oleh  karena  itu,  pada  penelitian  ini  akan  menguji  ekstrak  daun  mangga  sebagai antimikrobia  khususnya  daya  hambat  ekstrak  daun  mangga  terhadap  bakteri  pathogen Escherichia  Coli ( E. Coli )  dengan  cara  ekstraksi  soxhlet.  Pada  penelitian  ini  dilakukan  proses  pengambilan  ekstrak  dari  daun mangga golek, dengan menggunakan pelarut ethanol p.a, hasil ekstrak yang dihasilkan akan diencerkan dengan larutan  salin  menjadi  4  konsentrasi  yang  berbeda  yaitu  25%,  50%,  75%  dan  100%.  Kemudian  dilakukan perendaman  paper  disc  kedalam  masing  masing  konsentrasi  selama  15  menit  dan  meletakkan  paper  disc tersebut kedalam cawan petri yang berisi Nutrien Agar dan biakan bakteri E. Coli, lalu di inkubasikan pada suhu 35 0 C selama 24 jam. Dari hasil penelitian yang diperoleh bahwa ekstrak mulai melakukan penghambatan tumbuh pada konsentrasi 75% akan tetapi belum signifikan, sedangkan daya hambat pada konsentrasi 100% sebesar 0,5 mm.
Kata kunci : E. Coli, Ekstraksi, Soxhlet, Mangga,  antimikrobia

## ABSTRACT
The mango tree is a tree that stems erect, branched up and titled green shoots throughout the year. Mango Leaf has a large amount of mangiferin content that has been studied to be antioxidant, analgesic, antidiabetic, anti inflamatory, antitumor, antimicrobial and stamina enhancer or endurance. Therefore, in this study will test mango leaf extract as antimicrobial  especially  inhibition  of  mango  leaf  extract  to  pathogen  bacteria  Escherichia  Coli  (E. coli)  by  way  of soxhlet extraction. In this research, extracts from mango leaf extract using solvent ethanol p.a, the resultant extract will be diluted with saline solution to 4 different concentrations of 25%, 50%, 75%, and 100%. then immersed the paper disc into each concentration for 15 minutes and placed the paper disc into a Petri dish containing Nutrien Agar and E. coli bacteria cultures, then incubated at 35 ° C for 24 hours. From the result of the research, it was found that the extract started to inhibit the growth at 75% concentration but not yet significant, while the inhibitory concentration at 100% was 0.5 mm.
Keywords : E. Coli, Extraction, Soxhlet. Mango, Antimicrobial

## PENDAHULUAN
Mikroorganisme  terdapat  di  mana  -  mana, seperti  pada  tanah,  debu,  udara,  air,  makanan ataupun  permukaan  jaringan  tubuh  kita. Keberadaan  mikroorganisme  tersebut  ada  yang bermanfaat  bagi  kehidupan  manusia,  tetapi banyak  pula  yang  merugikan  manusia  misalnya dapat  menimbulkan  berbagai  penyakit  atau bahkan  dapat  menimbulkan  kerusakan  akibat kontaminasi  (Ratna S, 1990). Patogen merupakan beberapa jenis mikroorganisme atau organisme lain yang  berukuran  yang  lebih  besar  yang  mampu menyebabkan penyakit.
.  Meningkatnya  penyebaran  bakteri  patogen (bakteri  yang  menyebabkan  penyakit)  seperti bakteri  gram  negatif  ( E.coli) yang  dapat menyebabkan  penyakit  seperti  diare,  mual,  sakit perut,  demam  akibat  dari  tercemarnya  makanan oleh bakteri-bakteri tersebut. Oleh karena masalah tersebut maka perlu diadakan penelitian mengenai bahan  atau  produk  yang  dapat  mencegah  dan menghambat  pertumbuhan  bakteri  pathogen tersebut.  Salah  satu  bahan  yang  befungsi  sebagai antimikrobia  adalah  tanaman  mangga.  Daun mangga  (Mangifera  indica  L.)  mengandung senyawa  tanin,  alkaloid,  glikosid,  steroid,  dan triterpenoid,  saponin,  kaumarin,  komponen fenolik,  dan  flavonoid  dan  juga  mangiferin mempunyai  sifat  antimikrobia  sehingga  dapat digunakan  sebagai  makanan  fungsional  (Cipta 2013).  Oleh  karena  kandungan  senyawa  daun manga tersebut yang mempunyai sifat antimikrobia  sehingga  dilakukan  penelitian “Pembuatan  Ekstrak  Daun  Mangga  dengan  cara ekstraksi Soxhlet sebagai Penghambat Pertumbuhan Bakteri Patogen Khususnya E. Coli Beberapa penelitian sebelumnya telah melakukan metode ekstraksi maserasi dalam proses pembuatan ekstrak daun mangga, dalam penelitian ini  peneliti  mencoba  cara  ekstraksi  soxhlet  dalam proses  pengambilan  ekstrak  daun  mangga. Rumusan  masalah  Dalam  penelitian  ini  adalah berapa konsentrasi optimum ekstrak daun mangga yang  baik  untuk  menghambat  pertumbuhan bakteri  pathogen  dan  bagaimana  kemampuan ekstrak  daun  mangga  dalam  menghambat  bakteri pathogen.  Sedangkan  tujuan  penelitan  adalah
mengetahui  konsentrasi  optimum  ekstrak  daun mangga yang baik untuk menghambat pertumbuhan  bakteri  pathogen  dan  mengetahui kemampuan  ekstrak  daun  mangga  dalam menghambat bakteri pathogen.
.
Gambar  1  Struktur  Kimia  Mangiferin  (Soetarno dkk, 1991)
Rumus molekul : C 19 H 18 O 11 Berat molekul : 422,3396 Titik didih : 842,7 0 C at 760 mmHg Titik nyala : 303,6 0 C
Escherichia  coli  merupakan  bakteri komensal  yang  dapat  bersifat  patogen,  bertindak sebagai penyebab utama morbiditas dan mortalitas diseluruh dunia (Kusuma, 2010).
Berdasarkan taksonominya E. coli diklasifikasikan sebagai berikut : Kingdom : Bacteria Divisio : Proteobacteria Kelas : Gamma Proteobacteria Ordo : Enterobacteriales Famili : Enterobacteriaceae Genus : Esherichia coli.
Ekstrak merupakan  sediaan  sari  pekat tumbuh-tumbuhan  atau  hewan  yang  diperoleh dengan  cara  melepaskan  zat  aktif  dari  masing- masing bahan obat, menggunakan menstrum yang cocok,  uapkan  semua  atau  hampir  semua  dari pelarutnya  dan  sisa  endapan  atau  serbuk  diatur untuk  ditetapkan  standarnya  (Ansel,  1989). Ekstraksi adalah proses pemisahan satu atau lebih komponen  dari  suatu  campuran  homogen  dengan menggunakan  pelarut  cair  (solvent) sebagai  mass separating (tenaga pemisah).
Sokletasi  adalah  ekstraksi  menggunakan pelarut  yang  selalu  baru  yang  umumnya
( ( ( (
dilarutkan  dengan  alat  khusus  sehingga  terjadi ekstraksi  kontinu  dengan  jumlah  pelarut  yang relatif  konstan  dengan  adanya  pendingin  balik. Biomasa  ditempatkan  dalam  wadah  soklet  yang dibuat  dengan  kertas  saring,  melalui  alat  ini pelarut  akan  terus  direfluks.  Alat  soklet  akan mengosongkan  isinya  ke  dalam  labu  dasar  bulat setelah  pelarut  mencapai  kadar  tertentu.  Setelah pelarut  segar  melewati  alat  ini  melalui  pendingin refluks,  ekstraksi  berlangsung  sangat  efisien  dan senyawa dari bioasa secara efektif ditarik ke dalam pelarut karena konsentrasi  awalnya rendah  dalam pelarut (Depkes RI, 2000).
Destilasi adalah metode pemisahan zat-zat cair  dari  campurannya  berdasarkan  perbedaan titik  didih.  Pada  proses  destilasi  sederhana,  suatu campuran dapat dipisahkan bila zat-zat penyusunnya  mempunyai  perbedaan  titik  didih cukup tinggi.

## METODE PENELITIAN
Alat, Bahan dan Metode : Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah Daun mangga golek, ethanol p.a, aquadest, paper disc, alcohol 70%, Nutrien Agar, mikroba uji Alat  utama  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  yaitu  alat  soxhlet,  kondensor, hotplate, labu  didih alas  bulat, dan  beberapa alat gelas yang biasa dipakai di laboratorium.
Gambar 2. Rangkaian alat ekstraksi
Gambar 3 Proses ekstraksi daun mangga
Gambar  4 Proses  inokulasi  ekstrak  pada  biakan mikroba

## Proses pengolahan sampel
Daun  mangga  golek  di  potong  kecil-kecil kemudian dikeringkan menggunakan oven pada suhu 105 0 C.  Selanjutnya  daun  mangga  golek  kering  di haluskan

## Ekstraksi Daun Mangga
Serbuk  daun  mangga  golek,  kemudian ditimbang  sejumlah  20  gr  dan  dimasukkan kedalam  thimble  (selongsong  kertas  saring),  lalu dimasukkan kedalam soxhlet. Selanjutnya dimasukan  etanol  96%  sebanyak  180  ml  kedalam labu  alas  bulat  dan  di  ekstraksi  sampai  cairan pelarut  yang  menetes  di  atas  bahan  telah  jernih. Kompor  listrik  dinyalakan  pada  suhu  70 0 C. Ekstrak yang diperoleh akan berbentuk cair.

## Pemisahan Ekstrak dengan Solvent
Serbuk  daun  mangga  golek,  kemudian ditimbang  sejumlah  20  gr  dan  dimasukkan kedalam  thimble  (selongsong  kertas  saring),  lalu dimasukkan kedalam soxhlet. Selanjutnya dimasukan  etanol  96%  sebanyak  180  ml  kedalam labu  alas  bulat  dan  di  ekstraksi  sampai  cairan pelarut  yang  menetes  di  atas  bahan  telah  jernih. Kompor  listrik  dinyalakan  pada  suhu  70 0 C. Ekstrak yang diperoleh akan berbentuk cair.
Pembuatan Konsentrasi Ekstrak Daun Mangga Menimbang  ekstrak  daun  mangga  golek masing-masing 10 gram; 7,5 gram; 5 gram; dan 2,5 gram  kemudian  diencerkan  menggunakan  10  ml larutan saline ke  dalam  petridisk  steril. Menghomogenkan  larutan  sehingga  diperoleh variasi  konsentrasi  yaitu  100%,  75%,  50%  dan 25%.

## Uji Daya hambat
Disiapkan paper disc (kertas  cakram)  sebanyak  15 pcs,  kemudian  masing-masing  direndam  didalam ekstrak  yang  telah  diencerkan  yaitu  100%,  75%, 50%,  dan  25%  selama  15  menit. Paper  disc diletakkan  didalam  petridisk  yang  berisi Nutrient Agar (NA)  yang  telah  diinokulasikan  kultur Escherichia  coli .  Diinkubasikan  pada  suhu  35 0 C selama  24  jam.  Dilakukan  pengamatan  terhadap daya  hambat  dari  ektrak  daun  mangga berdasarkan  luas  area  disekitar paper  disc yang tidak ditumbuhi oleh bakteri.
HASIL DAN PEMBAHASAN :
1. Hasil  Inkubasi  Ekstrak  daun  mangga  dengan bakteri E.Coli
Gambar. 5 paper disc yang telah dimasukkan dalam biakan bakteri e.coli
Dari gambar 5 menunjukkan keadaan awal setelah proses meletakkan  paperdish  yang telah  direndam kedalam ekstrak daun manga dengan  konsentrasi 25%, 50%, 75% dan 100%. Cawan Petridish yang berisi  biakan  bakteri Escherichia  coli akan  di inkubasi  selama  24  jam  pada  suhu  35 o C.  Pada gambar  belum  memperlihatkan  tumbuhnya bakteri dan proses penghabatan oleh ekstrak daun manga .
Gambar  6.  Hasil  inkubasi  ekstrak  daun  mangga terhadap mikroba uji
Pada  gambar  6  adalah  keadaan  setelah  proses inkubasi  24  jam  suhu  35 o C,  terlihat  bahwa  pada konsentrasi  ekstrak  daun  manga  25%  belum  bisa menghambat pertumbuhan Bakteri Escherichia coli yang  ditandai  dengan  masih  terlihatnya  goresan bakteri  disekitar  paperdish  yang  telah  direndam dalam  larutan  ekstrak  25%  daun  manga. Sedangkan  untuk  konsentrasi  50%  ekstrak  daun manga  sudah  mulai  terlihat  bahwa  bakteri  mulai menjauhi  area  paperdish  yang  telah  terendam ekstrak daun manga tapi belum seluruhnya karena masih  ada  bakteri  yang  tumbuh  meskipun  dalam populsai  kecil.  Untuk  konsentrasi  ekstrak  daun manga  75%  terlihat  bahwa  zona  penghambatan terjadi pada jarak 0.1 mm dari sekitaran paperdish yang telah direndam dengan ekstrak daun manga, dan  untuk konsentrasi  100%  ekstrak  daun manga terlihat bahwa zona penghambatan sudah semakin besar  yakni  sekitar  0.5  mm  di  sekitaran  area paperdish  yang  tidak  ditumbuhi  oleh  bakteri Escherichia coli.
KESIMPULAN : 1. Konsentrasi  optimum  ekstrak  daun  mangga yang  baik  untuk  menghambat  pertumbuhan bakteri  pathogen  adalah  100%  ekstrak  daun mangga
2. Kemampuan  ekstrak  daun  mangga  dalam menghabat  bakteri  pathogen  adalah  sebesar  0,5 mm  pada  konsentrasi 100%  daun  mangga dengan menggunakan Bakteri E. Coli
UCAPAN TERIMA KASIH : Terima kasih disampaikan kepada Fakultas Teknologi  Industri,  Para  Pengelolah Journal  Of Chemical Process Engineering yang telah mendanai dan membantu keberlangsungan jurnal ini.
DAFTAR PUSTAKA :
Cipta,  H.,  2013.  Aktivitas  antimikrobia  daun mangga.Universitas Pembangunan "Veteran" Jawa Timur. Surabaya.
Imani, dkk. 2014. Uji Aktivitas Antijamur Ekstrak Etanol  Daun  Mangga  Bacang  (Mangifera  Foetida
L.)  Terhadap  Candida  Albicans  Secara  In  Vitro. Fakultas  Kedokteran  Universitas  Tanjungpura. Pontianak
Kusuma,  S.A.F.,  2010.  Escherichia  coli.  Fakultas Sain  s  dan  Teknologi  Universitas  Islam  Negeri. Makassar
Mone,  A.T.,  2013.  Aktivitas  antimikrobia  daun mangga.  Universitas  Pembangunan  "Veteran" Jawa Timur. Surabaya.
Muhriani,  2011.  Ekstraksi,  pemisahan  senyawa, dan identifikasi senyawa aktif.
Mukhriani,  2011.  Ekstraksi,  pemisahan  senyawa, dan identifikasi senyawa aktif. ekstraksi, pemisahan senyawa, dan identifikasi senyawa aktif .
Poeloengan,  M.,  Komala,  I.  &  Susan  M.  Noor, 2001.  Bahaya  salmonella  terhadap  kesehatan.  , (30), pp.216–224.
Soetarno  dkk.  1991.  Molasi  Dan  Karakterisasi Mangiferin  Dart  Daun  Mangga  Arumans  Dan Pembandingan  Kadarnya  Pada  Daun  Tujuh Kultivar Inaivwera  Iivvica  L. KBK  Biologi Farmasi, Jurusan Farmasi FMIPA – TTB