Pemberian hormon pertumbuhan rekombinan secara “putus dan sambung” pada tiga kelompok ukuran benih ikan kerapu bebek, Cromileptes altivelis (Valenciennes 1828)
[“Stop and go” treatment of recombinant growth hormone to different sizes of humpback grouper juveniles, Cromileptes altivelis (Valenciennes 1828)]
Suci Antoro 1 , Alimuddin 2 , Muhammad Agus Suprayudi 2 , Irvan Faizal 3 , Muhammad Zairin Junior 2
1 Balai Besar Pengembangan Budi daya Laut, Kementerian Kelautan dan Perikanan, Indonesia
2 Departemen Akuakultur, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, IPB, Indonesia
3 Badan Pengkajian dan PenerapanTeknologi, Indonesia
Diterima: 15 April 2014; Disetujui: 27 Januari 2015

## Abstrak
Penelitian bertujuan membandingkan respons pertumbuhan tiga kelompok ukuran benih ikan kerapu bebek dari kelom- pok  induk  dan  periode  pemijahan  yang  sama  terhadap  hormon  pertumbuhan  rekombinan  ikan  kerapu  kertang Epine- phelus  lanceolatus (rElGH);  melalui    eksperimen  “putus  dan  sambung”  yaitu  dengan,  tanpa,  dan  perlakuan  kembali rElGH  masing-masing  selama  42  hari.  Setiap  kelompok  ukuran  dibagi  menjadi  dua  kelompok  perlakuan,  kelompok pertama diberi perlakuan rElGH dengan dosis 50 mg rElGH-HP55 kg -1 pakan (pC) sedangkan kelompok kedua sebagai kontrol. Pertambahan bobot badan kelompok pC dibandingkan dengan kontrol pada benih berukuran kecil, sedang dan besar berturut-turut pada eksperimen tahap pertama 85,89%, 39,66% dan 16,34%; tahap kedua -34,57%, -14,76%, dan - 5,27%, dan tahap ketiga 56,16%, 50,24% dan 59,14%. Perbedaan laju pertumbuhan spesifik benih berukuran kecil, se- dang dan besar perlakuan pC terhadap kontrol pada eksperimen tahap pertama 41,6%, 19,06% dan 7,52%; tahap kedua -44,81%, -27,23% dan -14,66%; dan tahap ketiga 55,9%, 40,62% dan 48,42%. Faktor kondisi pC dan kontrol pada se- mua  kelompok  ukuran  tidak  berbeda  nyata.  Kandungan  dan  retensi  protein,  dan  kandungan  glikogen  hati  gabungan sampel dari semua kelompok ukuran ikan perlakuan pC pada eksperimen tahap kedua menurun dibandingkan eksperi- men tahap pertama, masing-masing sebesar 11,49%, 35,14% dan 84,73%. Dapat disimpulkan pemberian rElGH mema- cu pertumbuhan semua kelompok ukuran benih ikan, namun benih berukuran kecil  mempunyai respons pertumbuhan lebih  tinggi  daripada  kelompok  benih berukuran  sedang  dan besar.  Penghentian  pemberian  rElGH  menyebabkan  ber- hentinya faktor pemacu pertumbuhan, sehingga performa pertumbuhan, kandungan dan retensi protein, dan kandungan glikogen hati menurun.
Kata  penting:    faktor  kondisi,  glikogen  hati,  hormon  pertumbuhan  rekombinan,  kelompok  ukuran,  laju  pertumbuhan, retensi protein

## Abstract
The  objective  of  this  study  was  to  compare  the  growth  response  of  3  different  sizes  of  humpback  grouper  juveniles, which  were  come  from  the  same  brood  stock  group  and  spawning  season  after  “stop  and  go”  experiment  of  recom- binant Epinephelus lanceolatus growth hormone (rElGH); that are with, without and retreated with rElGH for 42 days respectively.  Each  size  group  was  divided  into  two  treatment  groups.  The  first  group  was  treated  with  50  mg  crude rElGH kg -1 in commercial diet (pC) and a second group as a control. Weight gain of pC compares to control for  small size group, medium size group and large size groups of  juveniles subsequently for first stage were 85.89%, 39.66% and 16.34%; second stage were -34.57%, -14.76%, and -5.27%; and third stage were 56.16%, 50.24% and 59.14%. Specific growth rate differences of small, medium and large size of pC compared to control in first stage were 41.6%, 19.06% and 7.52%; second stage were  -44.81%, -27.23% and -14.66%; and third stage were 55.9%, 40.62% and 48.42%. No significant difference of condition factor among all sizes of pC and control fish. Protein content and retention, and liver glycogen  content  from  pooled  sample  of  all  size  fish  groups  pC  treatment  in  the  second  stage  were  decreasing  com- pared to the first stage, respectively, 11.49%, 35.14% and 84.73%. It can be concluded that rElGH treatment improved growth performance of all size fish groups, however small juveniles have highest growth response compared to medium and large juvenile groups. The ceasing of rElGH treatment on second experiment stage is most likely causing the loss of accelerating  growth  factor  then  decreasing  growth  performance,  protein  content  and  retention,  and  liver  glycogen content.
Keywords: condition factor, different sizes, growth, liver glycogen, protein retention, recombinant growth hormone.
Alamat surel: suciantoro@yahoo .com

## Pendahuluan
Peningkatan  pertumbuhan  ikan  memberi manfaat  yang  besar  untuk  memperpendek  waktu produksi, meningkatkan efisiensi konversi pakan, meningkatkan produksi, dan mengontrol keterse- diaan  produk  (Devlin et  al .  2004),  agar  pertum- buhan  maksimum  dengan  biaya  produksi  mini- mum  dapat  dicapai.  Dengan  perkataan  lain  bah- wa  pertumbuhan  menjadi  faktor  penting  untuk menekan  biaya  produksi  dan  meningkatkan  ke- untungan.  Pertumbuhan  merupakan  proses  yang kompleks  dan  melibatkan  sejumlah  hormon  se- perti hormon pertumbuhan. Oleh karena itu Pilay &  Kutty  (2005)  menyarankan  digunakan  pende- katan  komprehensif  untuk  meningkatkan  per- tumbuhan  yang  melibatkan berbagai faktor, baik faktor  endogen  maupun  eksogen,  di  antaranya faktor genetik, nutrisi, hormon, teknik budi daya, hama dan penyakit serta lingkungan.
Dalam  beberapa  dasawarsa  terakhir  ke- mungkinan  penggunaan  hormon  pertumbuhan ( growth  hormone /GH)  untuk  meningkatkan  per- tumbuhan  ikan  budi  daya  mendapat  perhatian yang cukup besar. GH merupakan salah satu hor- mon polipeptida yang diproduksi di dalam kelen- jar pituitari. Produksinya dipicu oleh rangsangan eksternal  dan  kondisi-kondisi  fisiologis  internal yang  diproses  dan  diintegrasikan  di  dalam  otak kemudian  diteruskan  ke  organ-organ  endokrin, meliputi  hipotalamus,  kelenjar  pituitari,  dan  or- gan  target  (Moriyama  &  Kawauchi  2001).  GH terlibat di dalam pengaturan  pertumbuhan soma- tik dan  metabolisme protein, lemak, karbohidrat, dan  mineral  (Bolander  2004).  GH  juga  berperan penting dalam proses-proses reproduksi, osmore- gulasi,  nafsu  makan,  dan  perilaku  (Reinecke et al .  2005).  Di  samping  itu,  GH  merupakan  salah satu  modulator  penting  bagi  sistem  imun  ikan (Harris & Bird 2000).
Oleh  karena  penggunaan  GH  alami  ( na- tural GH/nGH)  sangat  tidak  ekonomis  dan  tidak praktis,  maka  digunakan  teknologi  DNA  rekom- binan  untuk  memproduksi  GH  rekombinan (Sekine et al . 1985). Pemberian GH rekombinan (rGH) telah terbukti dapat meningkatkan pertum- buhan  berbagai  spesies  ikan,  yaitu salmonids Oncorhynchus keta (Sekine et al . 1985), rainbow trout Oncorhynchus  mykiss (Moriyama et  al . 1993), red seabream Pagrosomus mayor (Bin et al .  2001), flounder Paralichys  olivaceus (Liu et al . 2008), nila Oreochromis niloticus (Alimuddin et al . 2010), baronang Siganus guttatus (Funken- stein et  al .  2005),  mas  koki Carassius  auratus (Promdonkoy et al . 2004), black seabream Acan- thopagrus  schlegeli (Tsai et  al. 1997),  sidat Anguilla sp.  (Handoyo et  al .  2012),  gurami Os- phronemus  goramy (Irmawati et  al .  2012),  kera- pu  bebek C.  altivelis (Antoro et  al .  2014)  dan berbagai  spesies  ikan  lainnya.  Efek  peningkatan pertumbuhan  yang  dihasilkan  bervariasi  bergan- tung  kepada  jenis  rGH,  dosis,  umur  dan  jenis ikan uji yang digunakan (Hertz et al . 1991).
Merujuk  pada  fungsi  rGH  sebagaimana telah diuraikan sebelumnya, menunjukkan bahwa rGH  mempunyai  prospek  yang  menjanjikan  un- tuk  dapat  meningkatkan  pertumbuhan  ikan  budi daya yang mempunyai nilai ekonomi tinggi tetapi secara  alamiah  pertumbuhannya  lambat,  misal- nya ikan kerapu bebek Cromileptes altivelis (Va- lenciennes  1828).  Studi  penggunaan  rGH  pada ikan  kerapu  bebek  dengan  menggunakan  rGH ikan  kerapu  kertang Epinephelus  lanceolatus (Bloch  1790)  (rElGH),  menunjukkan  bahwa  do- sis harian 50 mg rElGH kg -1 pakan selama 42 ha- ri  mampu  meningkatkan  pertumbuhan  sebesar 40,25% lebih tinggi dibandingkan kontrol (Anto- ro et  al .  2014).  rElGH  juga  terbukti  dapat  me- ningkatkan pertumbuhan ikan sidat  melalui   me-
tode  immersi,  oral  dan  kombinasi  immersi  dan oral,  masing-masing  sebesar  37,4%,  65,7%  dan 102,9%  lebih  besar  dibandingkan  kontrol  (Han- doyo et  al .  2012).  Metode  aplikasi  yang  sama digunakan  oleh  Subaidah et  al .  (2012)  pada udang  putih  vaname,  masing-masing  dapat  me- ningkatkan pertumbuhan sebesar  109,9%, 17,7% dan 40,1% lebih tinggi dibandingkan kontrol.
Studi penggunaan rGH tersebut di atas ha- nya dilakukan pada sekelompok ikan yang relatif seragam dan rGH diberikan secara kontinyu sela- ma  eksperimen.  Belum  ada  studi  yang  menggu- nakan  benih  ikan  berukuran  besar,  sedang,  dan kecil dari kelompok induk dan periode pemijahan yang sama dan membandingkan respons pertum- buhannya  melalui  eksperimen  “putus  dan  sam- bung”,  yaitu    mendapat  perlakuan  rGH,  tidak mendapat  perlakuan  rGH,  dan  perlakuan  rGH kembali  diberikan.  Perbedaan  ukuran  benih  ikan dari kelompok induk dan periode pemijahan yang sama  mencerminkan  perbedaan  kecepatan  per- tumbuhan. Le Bail et al . (1993) mengatakan bah- wa  spesies  atau  kelompok  ikan  yang  lebih  cepat tumbuh  mampu  memproduksi  GH  endogen  dan IGF yang lebih tinggi sehingga responsnya terha- dap rGH lebih rendah. rGH dari ikan kerapu ker- tang  dipilih  karena  efisiensi  produksi  dan  bioak- tivitasnya  lebih  tinggi  daripada  jenis-jenis  rGH lainnya (Irmawati et al . 2012).
Tujuan  yang  ingin  dicapai  adalah  untuk mengevaluasi  respons  pertumbuhan  dan  faktor kondisi (FK) pada benih ikan kerapu bebek ukur- an kecil, sedang, dan besar dari kelompok induk dan periode pemijahan yang sama terhadap pem- berian rElGH secara  “putus dan sambung”. Studi ini juga ingin mengevaluasi komposisi proksimat dan kandungan glikogen hati dari gabungan sam- pel  ikan  ukuran  kecil,  sedang,  dan  besar  setelah pemberian  rElGH secara “putus dan sambung”.

## Bahan dan metode
Produksi protein rElGH dan penyiapan pakan Escherichia  coli strain  BL21  yang mengandung  vektor  ekspresi  protein  pCold- ElGH digunakan sebagai bioreaktor untuk  mem- produksi protein rElGH. Kultur bakteri, ekstraksi dan verifikasi protein rElGH mengikuti prosedur yang  digunakan  oleh  Alimuddin et  al .  (2010).
Untuk melindungi rElGH dari enzim pencernaan proteolitik, sebelum dicampurkan pada pakan ko- mersial  (PK)  protein  rElGH  dilapisi  dengan hy- droxypropylmethyl  cellulose  phthalate (HP55,
Shinetsu, Japan) sesuai dengan prosedur yang di- uraikan oleh Moriyama et al . (1993).

## Desain eksperimen
Eksperimen dilaksanakan pada bulan Juli- November  2013  di  Balai  Besar  Perikanan  Budi daya  Laut  Lampung  dan  Fakultas  Perikanan  dan Ilmu  Kelautan  IPB.  Pelaksanaan  eksperimen  di- bagi menjadi tiga periode masing-masing selama 42  hari,  yaitu  periode  pemberian  rElGH  tahap pertama,  periode  tanpa  pemberian  rElGH,  dan periode  pemberian  rElGH  tahap  kedua.  Tiga  ke- lompok ukuran benih ikan kerapu bebek yang di- gunakan,  yaitu  ukuran  kecil  (0,85  ±  0,18  g  per ekor), sedang (1,45 ± 0,14 g per ekor), dan besar (1,91  ±  0,14  g  per  ekor)  semuanya  berasal  dari satu  kelompok  induk  dan  periode  pemijahan yang  sama.  Setiap  kelompok  ukuran  ikan  dibagi menjadi  dua    perlakuan,  yaitu  (1)  kontrol  (PK) dan  (2)  pC  (PK  +  50  mg  rElGH-HP55  kg -1 pa- kan).  Dosis  pemberian  rElGH  diperoleh  dari eksperimen sebelumnya (Antoro et al . 2014).

## Pemeliharaan ikan dan protokol eksperimen
Benih ikan kerapu bebek ukuran kecil, se- dang,  dan  besar  masing-masing  sebanyak  300, 250,  dan  200  ekor  diperoleh  dari  Balai  Besar
Pengembangan Budi daya Laut Lampung. Setiap kelompok ukuran dibagi secara acak menjadi dua perlakuan  dan  masing-masing  dipelihara  di  da- lam  bak  serat  kaca  dengan  volume  2000  L.  Pe- nyesuaian  ke  dalam  kondisi  eksperimen  dilaku- kan  satu  minggu  sebelum  perlakuan,  diberi  PK dan  dipelihara  pada  kondisi  fotoperiode  alami dan  suplai  air  laut  terfiltrasi  secara  kontinu.  Pa- rameter  kualitas  air  mengikuti  kualitas  ambien lingkungan  perairan,  sedangkan  oksigen  terlarut (5-6 mg L -1 ) diperoleh dari mesin blower melalui jaringan aerasi. Komposisi proksimat pakan yang digunakan  selama  eksperimen  terdiri  atas  air (5,48%  bobot  basah),  abu  (13,64%),  serat  kasar (0,76%),  protein  (48,7%),  lemak  (13,3%),  dan karbohidrat  (18,12%).  Pakan  diberikan  secara manual  tiga  kali  sehari  (pukul  08:30,  12:30,  dan 16.30)  sampai  kenyang.  Sisa  pakan,  feses  dan kotoran  lain  dibersihkan  dua  kali  sehari.  Kon- sumsi pakan, jumlah dan bobot ikan mati dicatat setiap  hari.  Bobot  dan  panjang  total  ikan  diukur setiap dua minggu sekali dengan mengambil 30% populasi ikan di setiap kelompok ukuran.

## Analisis proksimat dan glikogen hati
Analisis  proksimat  dilakukan  sebanyak dua  kali,  yaitu  pada  akhir  pemeliharaan  dengan rElGH  tahap  pertama  dan  akhir  pemeliharaan tanpa  rElGH.  Sebanyak  sembilan  ekor  ikan  tiap perlakuan,  masing-masing  tiga  ekor  dari  kelom- pok  kecil,  sedang  dan  besar  dikumpulkan  untuk analisis  proksimat  menggunakan  prosedur  dari Association of Official Analytical Chemists Inter- national (AOAC  1995).  Spesimen  otot  dihomo- genasi,  5  g  alikuot  dikeringkan  menggunakan oven  sampai  mencapai  berat  konstan  pada  suhu 105 °C untuk memperkirakan kandungan airnya, sisa sampel diliofilisasi dan disimpan pada suhu - 20°C  untuk  analisis  kimia  berikutnya.  Metode
Kjeldahl  dan  Folch  masing-masing  digunakan untuk menentukan kandungan protein dan lemak. Glikogen  hati  diukur  menggunakan  spektrofoto- meter  melalui  serangkaian  proses  yang  meliputi pemanasan,  sentrifugasi,  dan  hidrolisis.  Setiap parameter diukur sebanyak tiga kali.

## Perhitungan dan analisis statistik
LPS = (lnBt – lnBo)×100/waktu (Elliot & Hurley 1995)
LPS=  laju  pertumbuhan  spesifik,  Bt=  bobot  badan akhir, Bo=  bobot badan awal
KH = Nt/No x 100 (Ricker 1979)
KH= kelangsungan hidup, Nt= jumlah ikan akhir, No= jumlah ikan awal
EP = (Bt+BM) - Bo/konsumsi pakan x 100
(NRC 1977)
EP= efisiensi pakan, BM= bobot ikan mati, ∆W adalah perbedaan antara Bt dan Bo
Retensi protein (RP) = Pbt - Pbo/Pc x 100 (Watanabe 1988)
RP=  retensi  protein,  Pbt=  kandungan  protein  akhir, Pbo=  kandungan  protein  awal,  Pc=  jumlah  protein dikonsumsi.
(RL) = Lbt – Lbo/Lc x 100 (Watanabe 1988) RL=  retensi  lemak,  Lbt=  kandungan  lemak  akhir, Lbo=  kandungan  lemak  awal,  Lc=  jumlah  lemak dikonsumsi.
FK = 100 Bt⁄Pt 3 (Pauly 1983) FK= faktor kondisi, Pt= panjang akhir
Nilai tengah Bt, Pt, FK, komposisi proksi- mat,  kandungan  glikogen  hati,  retensi  protein, dan  retensi  lemak  antarperlakuan  diperbanding- kan menggunakan uji F pada α= 0,05.

## Hasil
Tabel 1, 2, dan 3 masing-masing menyaji- kan  respons  pertumbuhan,  faktor  kondisi  (FK), kelangsungan  hidup  (KH),  dan  efisiensi  pakan (EP) dari  tiga periode eksperimen berbeda. Pada eksperimen tahap pertama dan tahap ketiga, pem-
berian rElGH menyebabkan bobot akhir dan pan- jang akhir ikan perlakuan pC semua ukuran nyata lebih  tinggi  daripada  kontrol  (F hitung >F tabel ;  α= 0,05)  sehingga  laju  pertumbuhan  spesifik  (LPS) dan EP juga lebih tinggi. Pada eksperimen tahap kedua,  penghentian  konsumsi  rElGH  menyebab- kan bobot dan panjang akhir kelompok pC di se- mua  ukuran  tidak  berbeda  nyata  dibandingkan kontrol (F hitung <F tabel ; α=0,05), sehingga LPS dan EP  lebih  rendah.  Persentase  pertambahan  bobot badan (ΔW) ikan perlakuan pC terhadap kontrol pada setiap eksperimen bervariasi, namun setelah pemberian rElGH dihentikan  (Tabel  2) persenta- se ΔW kelompok pC lebih kecil daripada kontrol. KH  ikan  perlakuan  pC  ukuran  kecil  dan  sedang pada  eksperimen  tahap  pertama  dan  kedua  lebih tinggi daripada kontrol, sedangkan untuk kelom- pok besar sama 100%. Sementara itu pada ekspe- rimen  tahap  ketiga  (Tabel  3) KH  ikan  perlakuan pC  semua  ukuran  lebih  rendah  daripada  kontrol, kematian  terjadi  pada  dua  minggu  pertama  sete- lah  rElGH  kembali  diberikan.  FK  sebagai  repre-
sentasi proporsi bobot terhadap panjang pada ke- tiga eksperimen (Tabel 1, 2, dan 3) tidak berbeda nyata (F hitung <F tabel ; α=0,05).
Kandungan  protein,  lemak  dan  glikogen hati  kedua  kelompok  perlakuan  setelah  mengon- sumsi rElGH dan setelah konsumsi rElGH dihen- tikan  masing-masing  disajikan  pada Tabel 4  dan 5. Pada eksperimen tahap pertama (Tabel 4) kan- dungan protein, lemak, dan glikogen hati pC nya- ta  lebih  tinggi  daripada  kontrol  (F hitung >F tabel ; α=0,05). Pada eksperimen tahap kedua (Tabel 5), kandungan protein dan lemak pC tetap lebih ting- gi  (F hitung >F tabel ;α=0,05) daripada kontrol; namun kandungan  protein  dan  glikogen  hati  menurun, bahkan glikogen hati pC nyata lebih rendah dari- pada  kontrol  (F hitung >F tabel ;  α=0,05). Retensi pro- tein pC pada eksperimen tahap kedua nyata lebih rendah  daripada  kontrol  (F hitung >F tabel ;  α=0,05);
sedangkan  retensi  lemak  pC  tidak  berbeda  nyata dibandingkan  dengan  kelompok  kontrol  (F hitung < F tabel ;α=0,05) (Tabel 5).
Tabel  1.  Respons  pertumbuhan,  faktor  kondisi  (FK),  kelangsungan  hidup  (KH)  dan  efisiensi  pakan  (EP) menurut  kelompok  ukuran  pada  benih  ikan  kerapu  bebek  yang  diberi  rElGH  melalui  pakan  pada eksperimen tahap pertama (minggu I - VI)
Kelompok ukuran Perlakuan Parameter pertumbuhan FK KH (%) EP (%) Bt (g) Pt (cm) LPS  % ΔW pC:K Kecil Kontrol 2,48+0,72 a 5,17+0,58 a 2,38 1,74+0,24 a 44,0 69,47 pC 3,88+1,38 b 5,91+1,07 b 3,37 85,89 > K 1,79+0,21 a 57,3 99,41 Sedang Kontrol 5,56+1,16 a 6,95+0,54 a 2,99 1,67+0,16 a 88,0 86,61 pC 7,19+1,00 b 7,46+0,34 b 3,56 39,66 > K 1,73+0,16 a 93,6  100,93 Besar Kontrol 8,94+1,58 a 8,16+0,59 a 3,59 1,63+0,20 a 100,0 94,46 pC 10,11+1,52 b 8,58+0,43 b 3,86 16,34 > K 1,67+0,19 a 100,0  104,12
Huruf tika atas berbeda pada kolom dan kelompok ukuran yang sama menunjukkan beda nyata (F hitung >F tabel ; α=0,05). Kontrol: pakan komersial (PK). pC: PK + 50 mg rElGH-HP55 kg -1 pakan. Bt: bobot akhir; Pt: panjang akhir; FK: faktor kondisi;  LPS:  laju  pertumbuhan  spesifik  (%  per  hari);  %  ΔW  pC:K=  persentase  pertambahan  bobot  pC  dibanding kontrol.
Tabel 2. Respons pertumbuhan, faktor kondisi (FK), kelangsungan hidup (KH) dan efisiensi pakan (EP) menurut kelompok ukuran pada benih ikan kerapu bebek, setelah pemberian rElGH melalui pakan dihentikan pada eksperimen tahap kedua (minggu VII - XII)
Kelompok ukuran Perlakuan Parameter pertumbuhan FK KH (%) EP (%) Bt (g) Pt (cm) LPS  % ΔW pC:K Kecil Kontrol 7,34+2,50 a 7,51+0,94 a 2,41 1,75+0,23 a 86,4 93,56 pC 7,06+2,16 a 7,41+1,00 a 1,33 -34,57>K 1,82+0,52 a 94,2 67,19 Sedang Kontrol 15,25+3,16 a 9,79+0,72 a 2,24 1,65+0,12 a 97,3 91,19 pC 14,95+3,65 a 9,59+0,77 a 1,63 -14,76>K 1,67+0,16 a 99,2 80,31 Besar Kontrol 25,44+3,21 a 11,65+0,54 a 2,32 1,62+0,10 a 100,0 93,27 pC 24,64+5,22 a 11,49+0,71 a 1,98 -5,27>K 1,64+0,16 a 100,0 90,48
Huruf tika atas berbeda pada kolom dan kelompok ukuran yang sama menunjukkan beda nyata (F hitung >F tabel ; α=0,05). Kontrol: pakan komersial (PK). pC: PK+50 mg rElGH-HP55 kg -1 pakan. Bt: bobot akhir; Pt: panjang akhir; FK: faktor kondisi;  LPS:  laju  pertumbuhan  spesifik  (%  per  hari);  %  ΔW  pC:K=  persentase  pertambahan  bobot  pC  dibanding kontrol.
Tabel  3.  Respons  pertumbuhan,  faktor  kondisi  (FK),  kelangsungan  hidup  (KH)  dan  efisiensi  pakan  (EP) menurut  kelompok  ukuran  pada  benih  ikan  kerapu  bebek  yang  diberi  rElGH  lewat  pakan  pada eksperimen tahap ketiga (minggu XIII - XVIII) Kelompok ukuran Perlakuan Parameter pertumbuhan FK KH (%) EP (%) Bt (g) Pt (cm) LPS % ΔW pC:K Kecil Kontrol 11,72+2,42 a 8,97+0,59 a 0,97 1,60+0,22 a 94,7 69,21 pC 13,90+2,70 b 9,98+0,52 b 1,51 56,16>K 1,50+0,19 a 81,5 93,97 Sedang Kontrol 23,79+6,24 a 10,84+0,89 a 0,96 1,63+0,14 a 100,0 51,65 pC 27,48+6,35 b 11,93+0,94 b 1,35 50,24>K 1,60+0,21 a 91,4 80,65 Besar Kontrol 39,47+6,31 a 13,18+0,61 a 0,95 1,73+0,24 a 100,0 65,43 pC 46,49+8,07 b 13,81+0,80 b 1,41 59,14>K 1,76+0,15 a 99,0 80,70
Huruf tika atas berbeda pada kolom dan kelompok ukuran yang sama menunjukkan beda nyata (F hitung > F tabel ; α=0,05). Kontrol: pakan komersial (PK). pC: PK+50 mg rElGH-HP55 kg -1 pakan. Bt: bobot akhir; Pt: panjang akhir; FK: faktor kondisi; LPS: laju pertumbuhan spesifik (% per hari); % ΔW pC:K= persentase pertambahan bobot pC dibanding kontrol.
Tabel 4. Komposisi proksimat (% bobot basah), glikogen hati (0,01 mg ml -1 ), retensi protein (%) dan retensi lemak  (%)  benih  ikan  kerapu  bebek  setelah  pemberian  rElGH  melalui  pakan  pada  eksperimen tahap pertama (hari ke- 42).
Perlakuan Protein Lemak Glikogen hati Retensi protein Retensi lemak Kontrol 16,27+0,68 a 5,93+0,08 a 3,91+0,41 a 24,70+1,73 a 31,41+0,75 a pC 18,71+0,36 b 6,25+0,09 b 5,50+0,33 b 42,89+1,05 b 48,92+0,96 b
Huruf tika atas berbeda pada kolom yang sama menunjukkan beda nyata (F hitung >F tabel ; α=0,05). Kontrol: pakan komersial (PK); pC: PK + 50 mg rElGH-HP55 kg -1 pakan
Tabel 5. Komposisi proksimat (% bobot basah), glikogen hati (0,01 mg ml -1 ), retensi protein (%) dan retensi lemak  (%)  benih  ikan  kerapu  bebek  42  hari  setelah  pemberian  rElGH  melalui  pakan  dihentikan pada eksperimen tahap kedua (hari ke-84) Perlakuan Protein Lemak Glikogen hati Retensi protein Retensi lemak Kontrol 15,37±0,08 a 5,90±0,14 a 3,88±0,55 a 33,28±0,31 a 48,58±2,04 a pC 16,56±0,49 b 6,35±0,19 b 0,84±0,03 b 27,82+1,89 b 45,42±2,66 a
Huruf tika atas berbeda pada kolom yang sama menunjukkan beda nyata (F hitung >F tabel ; α=0,05). Kontrol:  pakan komersial (PK); pC : PK + 50 mg rElGH-HP55 kg -1 pakan
Gambar  1.  Profil  pertumbuhan  bobot  badan  ikan  perlakuan  pC  dan  kontrol  (K)  semua  kelompok  ukuran pada  eksperimen  tahap  pertama  (minggu  I-VI),  kedua  (minggu  VII-XII),  dan  ketiga  (minggu XIII-XVIII). K: pakan komersial (PK); pC: PK+50 mg rElGH-HP55 kg -1 pakan.
A B

## C
Gambar 2. Pola sebaran bobot benih ikan kerapu bebek semua ukuran pada eksperimen tahap pertama (A), tahap  kedua  (B)  dan  tahap  ketiga  (C).  Kontrol  (K):  pakan  komersial  (PK);  pC:  PK+50  mg rElGH-HP55 kg -1 pakan
dengan rElGH tanpa rElGH dengan rElGH
Profil  pertumbuhan  berdasarkan  data  bo- bot badan ikan pC dan kontrol dari semua kelom- pok  ukuran  pada  eksperimen  tahap  pertama,  ke dua, dan ketiga disajikan pada Gambar 1. Perbe- daan  pertumbuhan  ikan  pC  pada  semua  kelom- pok  ukuran  mulai  tampak  lebih  tinggi  daripada ikan  kontrol pada dua minggu setelah rElGH di- berikan,  selanjutnya  pertumbuhan  mulai  menu- run  pada  minggu  VIII  atau  dua  minggu  setelah konsumsi  rElGH  dihentikan.  Pada  minggu  XVII atau  42  hari  setelah  penghentian  pemberian rElGH rata-rata bobot badan ikan pC pada semua kelompok  ukuran  tidak  berbeda  nyata  dengan kontrol.  Pada  periode  eksperimen  tahap  ketiga rElGH  kembali  diberikan,  tampak  pertumbuhan ikan  pC  meningkat  pesat  dibandingkan  dengan pertumbuhan  kontrol  terutama  pada  kelompok ukuran besar dan sedang.
Sebaran  bobot  rata-rata  kelompok  ikan yang  diberi  rElGH  (pC)  dan  yang  tidak  diberi rElGH (K) pada semua  ukuran dari tiga eksperi- men ditampilkan pada Gambar 2. Dengan meng- gunakan  pedoman  garis  median  tampak  bahwa setelah  konsumsi  rElGH  dihentikan;  sebaran  bo- bot  ikan  pC  dari  ketiga  kelompok  ukuran  lebih banyak berada di bawah  median. Namun setelah rElGH  diberikan  kembali,  sebaran  bobot  ketiga kelompok ukuran ikan pC lebih banyak berada di atas garis median.

## Pembahasan
Pada studi ini baik pada eksperimen tahap pertama maupun tahap ketiga (Tabel 1 dan Tabel 3),  rGH  memberikan  pengaruh  positif  dalam mempercepat  pertumbuhan  di  semua  kelompok ukuran benih ikan kerapu bebek. Bobot akhir, la- ju  pertumbuhan  spesifik  (LPS)  dan  efisiensi  pa- kan ikan perlakuan pC lebih tinggi dibandingkan kelompok  kontrol.  Hasil  tersebut  konsisten  de- ngan  studi  penggunaan  rElGH  sebelumnya  pada
benih  ikan  kerapu  bebek  (Antoro et  al .  2014), ikan sidat (Handoyo et al . 2012), dan udang putih vaname  (Subaidah et  al .  2012).  Panjang  badan ikan perlakuan pC pada akhir percobaan baik ke- lompok ukuran kecil, sedang, maupun besar juga lebih  tinggi  dibandingkan  kontrol,  dan  ini  me- nunjukkan  bahwa  rElGH  tidak  hanya  berpenga- ruh pada pertumbuhan otot, tetapi juga pada per- tumbuhan tulang (Bolander 2004). Namun demi- kian, nilai FK sebagai manifestasi proporsi bobot terhadap  panjang  antara  ikan  kontrol  dan  perla- kuan pC pada semua kelompok ukuran ikan tidak berbeda nyata. Hal yang sama juga telah dilapor- kan  pada  ikan  turbot Scophthalmus  maximus (Liu et  al .  2007)  dan    ikan  salmon  coho Onco- rhynchus kisutch (Raven et al . 2012) bahwa pem- berian rGH tidak memengaruhi nilai FK.
Di panti pembenihan ikan kerapu, dikenal tiga  kelompok  benih  yang  dihasilkan  dari  satu kelompok induk dan periode pemijahan yang sa- ma. Ketiga  kelompok tersebut adalah benih kua- litas (KW) 1 atau kelompok besar, KW 2 (kelom- pok  sedang),  dan  KW  3  (kelompok  kecil)  yang merujuk pada kualitas dan kecepatan pertumbuh- annya.  Dengan  mengabaikan  pengaruh  rElGH, tampak bahwa pertumbuhan benih kelompok be- sar jauh lebih  unggul daripada kelompok  sedang dan  kecil  (Gambar  2).  Namun  demikian,  apabila persentase  pertambahan  bobot  badan  (∆W)  ikan perlakuan  pC  terhadap  kontrol  antar  kelompok ukuran pada eksperimen tahap pertama (Tabel 1) dan  tahap  ketiga  (Tabel  3)  dibandingkan,  benih ikan  dari  kelompok  kecil  mempunyai  respons pertumbuhan  terhadap  rElGH  yang  lebih  besar daripada  kelompok  sedang  dan  kelompok  besar. Sebaliknya,  pada  eksperimen  tahap  kedua,  yaitu setelah  asupan  rElGH  dihentikan  (Tabel  2),  ke- lompok  kecil  juga  mengalami  laju  pelambatan pertumbuhan  tertinggi  dibandingkan  ikan  ke- lompok sedang dan besar. Secara akumulatif per-
sentase ∆W pC terhadap kontrol dari eksperimen tahap pertama sampai tahap ketiga untuk kelom- pok  kecil,  sedang,  dan  besar  masing-masing  se- cara  berurutan  adalah  20,06%;  16,52%;  dan 18,69%.  Le  Bail et  al .  (2013)  menduga  bahwa spesies atau strain ikan  yang  lebih cepat tumbuh atau  telah  mengalami  seleksi  peningkatan  per- tumbuhan,  mampu  memproduksi  GH  endogen dan  IGF  yang  lebih  tinggi  sehingga  responsnya terhadap  GH  eksogen  lebih  rendah.  Hal  ini  ke- mungkinan  berkaitan  dengan  mekanisme  umpan balik, di mana peningkatan GH dan IGF sebagai akibat  pemberian  GH  eksogen  justru  mengham- bat kelenjar pituitari untuk memproduksi GH en- dogen (Moriyama & Kawauchi 2001). Studi pada ikan salmon coho membuktikan dugaan tersebut, bahwa  injeksi  rbGH  mampu  meningkatkan  plas- ma  IGF-1  pada  ikan  non-transgenik,  sedangkan plasma  IGF-1  ikan  transgenik  GH  tidak  menga- lami peningkatan (Raven et al . 2012).
Hasil  analisis  proksimat  ikan  perlakuan pC pada eksperimen tahap pertama studi ini me- nunjukkan  bahwa  kandungan  protein  dan  lemak berbeda  nyata  dibandingkan  kontrol  (Tabel  4). Hasil  ini  relatif  konsisten  dengan  hasil  analisis proksimat  pada  studi  sebelumnya  dengan  dosis dan jenis rElGH yang sama serta jenis ikan studi yang juga sama (Antoro et al . 2014). Pada ekspe- rimen  tahap  kedua  tanpa  rElGH  (Tabel  5),  kan- dungan  protein  ikan  perlakuan  pC  tetap  lebih tinggi dibandingkan kontrol namun retensi prote- innya lebih rendah. Kandungan lemak ikan perla- kuan  pC  pada  eksperimen  kedua  tanpa  rElGH walaupun  lebih  tinggi  dibandingkan  kontrol, tetapi  retensi  lemaknya  tidak  berbeda  nyata (Tabel 5).
Telah disinggung sebelumnya bahwa rGH mempunyai  efek  penting  dalam  metabolisme protein,  lipid  dan  karbohidrat.  Metabolisme  pro- tein meliputi uptake asam amino, sintesis protein
dan  menurunkan  oksidasi  protein.  Metabolisme lemak  meliputi  peningkatan  penggunaan  lemak melalui  perangsangan  pemecahan  dan  oksidasi trigliserida  di  dalam  jaringan  adiposit  (Bolander 2004).  Dengan  memperhatikan  peranan  rGH  da- lam  metabolisme  tersebut  dapat  dijelaskan  me- ngapa  setelah  mengkonsumsi  rGH,  retensi  pro- tein meningkat, dan menurun setelah tidak meng- konsumsi rGH. Berbagai studi yang telah dilaku- kan sebelumnya, yaitu Liu et al . (1999) pada ikan flounder  Paralichys  olivaceus ,  Silverstein et  al .
(2000) pada ikan channel catfish Ictalurus punc- tatus , dan Irmawati et al . (2012) pada ikan gura- mi Osphronemus goramy juga mendapatkan hasil bahwa  kandungan  protein  meningkat  setelah mengkonsumsi rGH.
Hasil  yang  tidak  konsisten  ditunjukkan dari analisis kandungan lemak. Pada studi ini dan sebelumnya (Antoro et al . 2014) diketahui bahwa kandungan  lemak  benih  ikan  kerapu  bebek  sete- lah  mendapat  perlakuan  rGH  meningkat  signifi- kan,  sama  seperti  yang  diperoleh  Silverstein et al .  (2000)  dan  Liu et  al .  (1999).  Sebaliknya  Liu et al . (2008) dan Irmawati et al . (2012) mengata- kan  bahwa  kandungan  lemak  tidak  terpengaruh oleh perlakuan rGH. Walaupun ukuran dan umur ikan,  jenis  pakan,  dan  beberapa  faktor  eksperi- mental  dapat  memengaruhi  komposisi  kimiawi tubuh;  penyebab  berbedanya  hasil  penelitian- penelitian  tersebut  lebih  disebabkan  oleh  perbe- daan  respons  spesies,  jenis  rGH  dan  dosis  yang berbeda-beda  (Liu et  al .  2008).  Studi  yang  dila- kukan  oleh  Irmawati et  al .  (2012)  menunjukkan bahwa  aktivitas  enzim  lipase  pada  ikan  gurami yang  diberi  perlakuan  rGH  lebih  tinggi  diban- dingkan  kontrol sehingga  kandungan lemak ikan perlakuan  lebih  rendah.  Namun  demikian  studi pada  mamalia  menunjukkan  bahwa  efek  GH  pa- da  metabolisme  lipid  adalah  ambigu,  di  dalam jaringan  adipose  GH  menginduksi  lipolisis,  se-
dangkan di dalam jaringan hati GH menginduksi penyimpanan  trigliserida  (Vijayakumar et  al . 2010).  Belum  ada  informasi  yang  jelas  apakah metabolisme lemak pada mamalia dan ikan sama. Pada  studi  ini  material  yang  digunakan  untuk analisis  proksimat  berasal  dari  seluruh  tubuh ikan,  sehingga  kandungan  lemak  yang  terukur berasal  baik  dari  jaringan  adipose  maupun  hati. Oleh  karena  diskusi  tentang  kandungan  lemak pada ikan konsumsi merupakan topik yang mena- rik,  maka  diperlukan  studi  lebih  mendalam  me- nyangkut  hubungan  antara  metabolisme  lemak dengan perlakuan rGH pada ikan kerapu bebek.
Hasil  analisis  kandungan  glikogen  hati ikan  perlakuan  pC  setelah  mengkonsumsi  rGH pada eksperimen tahap pertama studi ini berbeda nyata  dibandingkan  dengan  kontrol  (Tabel  4). Sementara itu, pada eksperimen tahap kedua (Ta- bel 5), penghentian konsumsi rGH menyebabkan kandungan glikogen hati lebih rendah dibanding- kan kontrol dengan besaran kuantitatif yang juga lebih rendah dibandingkan eksperimen tahap per- tama  (Tabel  5)  dan  studi  sebelumnya  (Antoro et al .  2014).  Bolander  (2004)  mengatakan  bahwa dalam metabolisme karbohidrat, GH mempunyai efek  diabetogenesis,  yaitu  mendorong  resistensi periferal  terhadap  insulin  dan  menjaga  glukosa darah dalam batas-batas normal; selanjutnya me- ningkatkan sintesis glukosa di dalam hati menja- di  glikogen  sebagai  cadangan  energi.  Glikogen hati  merupakan  cadangan  energi  pertama  yang digunakan,  kemudian  glikogen  otot,  lemak  dan terakhir cadangan protein (Pottinger et al . 2003).
Studi  pada  manusia  mendapatkan  fakta bahwa penghentian perlakuan rGH menyebabkan terjadinya  penurunan  laju  metabolisme  basal sampai mencapai level yang sama dengan kontrol satu  tahun  setelah  penghentian  perlakuan  rGH (Cowan et  al .  1999).  Prodam et  al .  (2014)  juga mendapatkan  hasil  yang  relatif  sama,  penghen-
tian perlakuan rGH pada pasien yang mengalami defisiensi  GH  menyebabkan  terjadinya  penurun- an  plasma  glukosa  sampai  mencapai  level  yang sama dengan kontrol satu tahun setelah penghen- tian perlakuan rGH. Penurunan laju metabolisme basal dan plasma glukosa dapat dimengerti kare- na  dengan  berhentinya  perlakuan  rGH,  berhenti pula faktor pemicu yang dapat meningkatkan laju metabolisme  dan  sintesis  plasma  glukosa.  Hasil studi ini menghasilkan pertanyaan besar yang be- lum  dapat  dijawab,  yakni  (1)  mengapa  setelah penghentian  konsumsi  rGH  kandungan  glikogen hati menurun drastis bahkan lebih rendah daripa- da  kontrol,  (2)  apakah  penghentian  perlakuan rGH  menyebabkan  ketidakseimbangan  energi masuk dan keluar sehingga glikogen hati diguna- kan sebagai tambahan energi, dan (3) apakah ke- tidakseimbangan  energi  terus  berlanjut  hingga dua  minggu  pertama  setelah  konsumsi  rElGH kembali diberikan pada eksperimen tahap ketiga, sehingga  membuat  ikan  uji  menjadi  lemah  dan mudah  terserang  penyakit.  Data  kelangsungan hidup ikan perlakuan pC semua ukuran pada eks- perimen tahap ketiga lebih rendah daripada kon- trol dan sebagian besar kematian terjadi pada dua minggu  pertama  (Tabel  3).  Pada  studi  sebelum- nya (Antoro et al . 2014) diketahui bahwa setelah mendapat  perlakuan  rGH  melalui  pakan,  imuni- tas bawaan ikan kerapu bebek 71,4% lebih tinggi dibandingkan  kontrol.  Untuk  menjawab  perta- nyaan-pertanyaan tersebut di atas, maka perlu di- lakukan  analisis  lebih  mendalam  tentang  efek yang ditimbulkan bila konsumsi rGH dihentikan.
Hasil  yang  diperoleh  dari  studi  ini  mem- beri  informasi  yang  berguna  untuk  menentukan strategi  penerapan  penggunaan  rGH  yang  tepat untuk  mempercepat  pertumbuhan  spesies  target. Budi daya pembesaran kerapu bebek dimulai dari ukuran  gelondongan  (sekitar  15  g)  sampai  men- capai  ukuran  konsumsi  (sekitar  500  g)  dibutuh-
kan  waktu  rata-rata  20  bulan.  Penggunaan  rGH diharapkan dapat memperpendek waktu yang di- perlukan agar dapat menghemat biaya pakan dan tenaga  kerja.  Afero et  al .  (2010)  mengatakan bahwa dalam budi daya pembesaran ikan kerapu bebek,  biaya  pakan  dan  tenaga  kerja  menempati peringkat  kedua  dan  ketiga  setelah  biaya  benih sehingga penurunan biaya pakan dan tenaga kerja akan  menurunkan  biaya  produksi  secara  signifi- kan.  Manfaat  lain  adalah  peningkatan  produksi sebagai  akibat  meningkatnya  imunitas  bawaan dan  kelangsungan  hidup.  Oleh  karena  itu  diper- lukan informasi lengkap tentang  metode aplikasi rGH yang efektif, efek yang ditimbulkan, analisis ekonominya  dalam  rentang  waktu  budi  daya sampai mencapai ukuran konsumsi serta evaluasi penggunaan  rGH  terkait  dengan  keamanan  pa- ngan ikan konsumsi.

## Simpulan
Respons pertumbuhan terhadap rElGH pa- da  benih  ikan  kerapu  bebek  kelompok  ukuran kecil lebih besar dibandingkan dengan yang ber- ukuran  sedang,  dan  besar;  namun  nilai  FK  pada ke  tiga  kelompok  ukuran  tidak  berbeda  nyata. Kecepatan  pertumbuhan,  kandungan  dan  retensi protein,  kandungan  glikogen  hati,  dan  kelang- sungan  hidup    benih  ikan  kerapu  bebek  semua ukuran menurun drastis setelah perlakuan rElGH dihentikan,  namun  kembali  meningkat  setelah rElGH  kembali  diberikan.  Eksperimen  “putus dan  sambung”  berpeluang  dapat  digunakan  seb- agai  metode  penerapan  rElGH untuk  meningkat- kan pertumbuhan ikan kerapu bebek secara lebih efisien.

## Persantunan
Ucapan  terima  kasih  disampaikan  kepada Badan  Pengembangan  Sumber  Daya  Manusia, Kementerian  Kelautan  dan  Perikanan  atas  bea-
siswa  yang  diberikan  untuk  melaksanakan  studi. Ungkapan terima kasih juga disampaikan kepada Shinetsu-Japan  karena  telah  menyediakan  HP55 untuk penelitian ini.

## Daftar Pustaka
Afero  F,  Miao  S,  Perez  AA.  2010.  Economic analysis  of  tiger  grouper Epinephelus  fus- coguttatus and  humpback  grouper Cromi- leptes altivelis commercial cage culture in
Indonesia. Aquaculture International , 18(5): 725-739.
Alimuddin, Lesmana I, Sudrajat AO, Carman O, Faizal  I.  2010.  Production  and  bioactivity potential of three recombinant growth hor- mones  of  farmed  fish .  Indonesian  Aqua- culture Journal, 5 (1): 11-16.
Antoro  S,  Junior  MZ,  Alimuddin,  Suprayudi MA, Faizal I. 2014. Growth, muscle com- position,  innate  immunity  and  histological performance  of  the  juvenile  humpback grouper  ( Cromileptes  altivelis )  after  treat- ment  with  recombinant  fish  growth  hor- mone. Aquaculture Research, . (in press).
AOAC.  1995. Official  Methods  of  Analysis,  16 th ed .  AOAC  International,  Arlington,  VA.,
USA.
Bin  X,  Kang-sen  M,  Ying-li  X,    Hong-zhii  M, Zhen-hui L, Yong D, Shan L, Rao W, Pei- jun Z. 2001. Growth promotion of red sea- bream Pagrosomus  mayor by  oral  admi- nistration  of  recombinant  eel  and  salmon growth hormone. Chinese Journal of Oce- anology and Limnology , 19(2): 141-146.
Bolander  FF.  2004. Molecular  Endocrinology, 3 rd ed .  Elsevier  Academic  Press.  London, 617 p
Cowan FJ, Evans WD, Gregory JW. 1999. Meta- bolic  effects  of  discontinuing  growth  hor- mone  treatment. Archives  of  Disease  in Childhood, 80(6): 517–523.
Devlin  R,  Biagi  CA,  Yesaki  TY.  2004.  Growth, viability and genetic characteristics of GH transgenic  coho  salmon  strains. Aquacul- ture, 236 (1-4): 607–632.
Elliot JM, Hurley MA. 1995. The functional rela- tionship  between  body  size  and  growth rate  in  fish. Functional  Ecology ,  9(4): 625–627
Funkenstein  B,  Dyman  A,  Lapidot  Z,  de  Jesus- Ayson  EG,  Gertler  A,  Ayson  FG.  2005.
Expression  and  purification  of  a  biologi- cally  active  recombinant  rabbitfish  ( Siga-
nus  guttatus )  growth  hormone. Aqua- culture, 250 (1-2): 504-515.
Handoyo B, Alimuddin, Utomo NBP. 2012. Per- tumbuhan, konversi dan retensi pakan, dan proksimat  tubuh  benih  ikan  sidat  yang  di- beri  hormon  pertumbuhan  rekombinan ikan  kerapu  kertang  melalui  perendaman.
Jurnal  Akuakultur  Indonesia ,  11(2):  132- 140.
Harris  J,  Bird  DJ.  2000.  Modulation  of  the  fish immune  system  by  hormones. Veterinary Immunology  and  Immunopatology ,  77(3- 4): 163-176
Hertz  Y,  Tachelet  A,  Madar Z,  Gertler  A.  1991. Absorption  of  bioactive  human  growth hormone  after  oral  administration  in  the common  carp  and  its  enhancement  by deoxycholate. Journal  of  Comparative Physiology B, 161(2):159-163.
Irmawati,  Alimuddin,  Junior  MZ,  Suprayudi MA, Wahyudi AT. 2012. Peningkatan laju pertumbuhan  benih  ikan  gurame  ( Osphro- nemus goramy Lac)  yang direndam dalam air  yang  mengandung hormon pertumbuh- an  ikan  mas .  Jurnal  Iktiologi  Indonesia, 12(1): 13-23.
Le Bail P-Y, Perez-Sanchez J, Yao K, Maisse G. 1993. Effect of GH treatment on salmonid growth.  Study  of  the  variability  of  res- ponse. In : Lahlou  B,  Vitiello  P  (eds). Aquaculture:  Fundamental  and  Applied research .  Wahington  American  Geophy- sical Union. pp. 173-197
Liu Z  Zh, Xu YL, Xu DW, Zhang PJ. 1999. Ef- fects  of  exogenous  growth  hormone  on muscle  composition  of  flounder  ( Para- lichys olivaceus ). Marine Scence, 5: 51–53 (dalam  bahasa  China  dengan  abstrak  ber- bahasa Inggris).
Liu  S,  Zang  X,  Liu  B,  Zhang  X,  Arunakumara KKIU, Zhang X, Liang B. 2007. Effect of growth  hormone  transgenic Synechocystis on growth, feed efficiency, muscle compo- sition, haematology and histology of turbot ( Scophthalmus  maximus L.). Aquaculture Research, 38(12): 1283-1292.
Liu  S,  Zhang  X,  Zang  X,  Liu  B,  Arunakumara KKIU,  Xu  D,  Zhang  X.  2008.  Growth, feed efficiency, body muscle composition, and  histology  of  flounder  ( Paralichthys olivaceus )  fed  GH  transgenic Synecho- cystis . Aquaculture, 277(1-2): 78–82.
Moriyama S, Yamamoto H, Sugimoto S, Abe T,
Hirano  T,  Kawauchi  H.  1993.  Oral  admi- nistration  of  recombinant  salmon  growth
hormone  to  rainbow  trout, Oncorhynchus mykiss. Aquaculture, 112(1): 99–106.
Moriyama S, Kawauchi H. 2001. Growth regula- tion  by  growth  hormone  and  insulin-like growth factor-I in teleosts. Otsuchi Marine Science, 26: 23-27.
[NRC]  National  Research  Council.  1977. Nutri- tion  Requirement  of  Warm  Water  Fishes . National  Academic  Press,  Washington DC. 124 p
Pauly  D.  1983.  Some  simple  methods  for  the assessment  of  tropical  fish  stocks. FAO Fisheries Technical Paper , No.234, 52 p.
Pilay TVR, Kutty MN. 2005. Aquaculture, Prin- ciples  and  Practices .  2 nd edition.  Black- well Publications, Oxford. 624 p
Pottinger  TG,  Rand-Weaver  M,  Sumpter  JP. 2003. Overwinter fasting and re-feeding in rainbow  trout:  plasma  growth  hormone and  cortisol  levels  in  relation  to  energy mobilization. Comparative  Biochemistry and Physiology Part B, 136(3): 403-417.
Prodam  F,  Savastio  S,  Genoni  G,  Babu  D,  Gio- rdano M, Ricotti  R,  Aimaretti G, Bona G, Bellone  S.  2014.  Effects  of  growth  hor- mone (GH) therapy withdrawal on glucose metabolism in not confirmed GH deficient adolescents  at  final  height. PLoS  ONE 9(1): e87157.
Promdonkoy  B,  Warit  S,  Panyim  S.  2004.  Pro- duction  of  a  biologically  active  growth hormone  from  giant  catfish  ( Pangasiano- don  gigas )  in Escherichia  coli.  Biotech- nology Letters, 26(8): 649–653.
Raven PA, Sakhrani D, Beckman B, Neregård L, Sundström  LF,  Björnsson  B  Th,  Devlin RH.  2012.  Growth  and  endocrine  effects of  recombinant  bovine  growth  hormone treatment  in  non-transgenic  and  growth hormone transgenic coho salmon. General and  Comparative  Endocrinology, 177(1):
143–152.
Reinecke  M,  Björnsson  BT,  Dickhoff  WW, McCormick  SD,  Navarro  I,  Power  DM, Gutiérrez  J.  2005.  Growth  hormone  and insulin-like  growth  factors  in  fish:  Where we are and where to go. General and Com- parative Endocrinology, 142(1): 20–24.
Ricker  WE.  1979.  Growth  rate  and  models. In : Hoar WS, Randall DJ, Brett JR (eds.) Fish Physiology  Vol.  VIII .  Academic  Press,
New York. pp 678-744.
Sekine S, Mizukami T, Nishi T, Kuwana Y, Saito A,  Sato  M,  Itoh  S,  Kawauchi  H.  1985.
Cloning  and  expression  of  cDNA  for salmon  growth  hormone  in Escherichia coli . Proceeding  of  National  Academic Sicences, 82: 4306-4310.
Silverstein  JT,  Wolters  WR,  Shimizu  M,  Dick- hoff  WW.  2000.  Bovine  growth  hormone treatment  of  channel  catfish:  strain  and temperature  effects  on  growth,  plasma IGF-I  levels,  feed  intake  efficiency  and body  composition. Aquaculture, 190(1-2): 77–88.
Subaidah  S,  Carman  O,  Sumantadinata  K,  Su- kenda, Alimuddin. 2012. Respons pertum- buhan dan ekspresi gen udang vaname Lit- openaeus  vannamei setelah  direndam  da- lam  larutan  hormon  pertumbuhan  rekom-
binan  ikan  kerapu  kertang. Jurnal  Riset Akuakultur , 7(3): 337-352
Tsai  HJ,  Hsih  MH,  Kuo  JC.  1997. Escherichia coli -produced  fish  growth  hormone  as  a feed additive to enhance the growth of ju- venile  black  seabream (Acanthopagrus schlegeli ). Journal of Applied Ichthyology , 13(2): 79-82.
Vijayakumar  A,  Novosyadlyy  R,  Wu  YJ,  Yakar S,  LeRoith  D.  2010.  Biological  effects  of growth hormone on carbohydrate and lipid metabolism. Growth  Hormone  and  IGF Research, 20(1): 1-14
Watanabe  T.  1988. Fish  Nutrition  and  Maricul- ture. JICA Textbook the General Aquacul- ture Course, Tokyo. 233 p.