## Isolasi Senyawa Turunan Kuinon dari Ekstrak Aseton Daun Perepat (Sonneratia Alba) dan Uji Aktivitas Terhadap Staphylococcus Aureus
Isolation  of  Quinone  Derivative  Compound  from  Acetone  Extract  of  Perepat  Leaves (Sonneratia alba) and Activity Testing Against Staphylococcus aureus
Muhaimin Muhaimin 1* , Dwi Wahyu Ramadhan 2 , Madyawati Latief 2
1 Departemen Biologi Farmasi, Fakultas Farmasi, Universitas Padjadjaran, Jl. Raya Bandung- Sumedang Km. 21, Jatinangor 45363
2 Program Studi Kimia, Fakultas Sains dan Teknologi, Universitas Jambi, Jl. Raya Jambi-Muara Bulian Km. 15 Mendalo Darat Jambi, 36361

## ABSTRAK
Staphylococcus aureus merupakan salah satu patogen paling umum yang menyebabkan infeksi nosokomial. Kemudian dengan  cepatnya  perkembangan  resistensi  yang  ditunjukkan  S.  Aureus  terhadap  antibiotik  yang  ada,  maka pengembangan  terus  dilakukan  baik  secara  sintesis  maupun  dari  bahan  alam.  Berdasarkan  beberapa  penelitian terdahulu  S.  Alba  memiliki  aktivitas  antimikroba  yang  baik  dari  beberapa  bagian  tumbuhannya.  Penelitian  ini bertujuan untuk isolasi senyawa dari ekstrak aseton daun S. alba dan pengujian aktivitasnya terhadap pertumbuhan bakteri S. aureus. Tahapan yang dilakukan dalam penelitian ini meliputi skrining fitokimia, isolasi senyawa dengan menggunakan kromatografi vakum dan kromatografi grafitasi dan karakterisasi dengan spektrofotometri UV-vis dan FTIR serta uji antibakteri dengan metode difusi kertas cakram. Hasil isolasi diperoleh isolat F.5.2 menunjukkan hasil positif pada uji kuinon dan triterpenoid. Berdasarkan karakterisasi spektrofotometri UV-Vis diperoleh pita serapan maksimum  pada  257  nm  dan  301,2  nm  yang  menandakan  gugus  kromofor  C=O  terkonjukasi  dan  berdasarkan spektrum FTIR diperoleh beberapa serapan pada bilangan gelombang 3264,57 cm-1 (ulur O-H), 2921,06 cm-1 (C-H alifatik),  1692,80  cm-1  (C=O),  1611,28  cm-1  (ulur  C=C)  dan  1315,93  cm-1  (C-O).  Berdasarkan  uji  antibakteri terhadap S. aureus oleh ekstrak aseton daun S. Alba dan isolat F.5.2 menunjukkan adanya aktivitas penghambatan pertumbuhan bakteri S. aureus.

## ABSTRACT
Staphylococcus  aureus  is  one  of  the  most  common  pathogens  that  cause  nosocomial  infections.  Then  with  rapid development of resistance shown by S. Aureus to existing antibiotics, development continues to be carried out both synthetically and from natural products. Based on several previous studies, S. alba has good antimicrobial activity from some parts of plant. This study aimed to isolate compound from acetone extract of S. alba leaves and test its activity against growth of S. aureus bacteria. Steps carried out in this study include phytochemical screening, isolation of  compound  using  vacuum  chromatography  and  gravity  chromatography  and  characterization  using  UV-Vis spectrophotometry  and  FTIR  as  well  as  antibacterial  testing  using  paper  disc  diffusion  method.  Isolation  result obtained  isolate  F.5.2  showed  positive  results  on  the  quinone  and  triterpenoid  tests.  Based  on  the  UV-Vis spectrophotometric  characterization,  maximum  absorption  bands  were  obtained  at  257  nm  and  301.2  nm  which indicated the conjugated C=O chromophore group and based on FTIR spectrum obtained some absorption at wave number  3264.57  cm-1  (O-H  stretch),  2921.06  cm-1  (C-H  aliphatic),  1692.80  cm-1  (C=O),  1611.28  cm-1  (C=C stretch) and 1315.93 cm-1 (C-O). Based on antibacterial test against S. aureus by acetone extract of leaves of S. alba and isolate F.5.2 showed activity of inhibiting the growth of S. aureus bacteria.

## I N F O    A R T I K E L
Received: 6 Mar 2022;
Revised: 2 7 M ar 2022; Accepted: 4 May 2022
* corresponding author: muhaimin@unpad.ac.id
D OI: https://doi.org/10.22437/jisic.v14i1.18213

## Vol. 14 No. 1
JUNI 2022
Kata Kunci/ Keywords: Infeksi nosokomial, Staphylococcus aureus, Sonneratia alba, Nosocomial infection

## PENDAHULUAN
Infeksi  nosokomial  terjadi  seluruh dunia baik pada negara berkembang maupun negara miskin. Infeksi yang diperoleh selama perawatan  kesehatan  merupakan  penyebab utama pada resiko kematian dan peningkatan morbiditas  pada  pasien  rawat  inap  (World Health  Organization,  2002).    Salah  satu faktor  terbanyak  yang  menyebabkan  infeksi di  rumah  sakit  adalah  dari  mikroorgansme patogen  seperti  Staphylococcus  aureus.  S. aureus  merupakan  patogen  nosokomial keempat  paling  umum  pada  orang  dewasa dan  menyebabkan  9%  dari  seluruh  kasus infeksi nosocomial. Selain itu, S. aureus juga menjadi  kedua  paling  umum  penyebab infeksi  pasca  bedah  atau  sejumlah  14%  dari kasus yang terjadi (Bradley,2002).
S.  aureus  merupakan  bakteri  patogen gram  positif  umum  pada  manusia  yang menyebabkan  infeksi  klinis.  Lebih  kurang 30% dari populasi manusia terkolonisasi oleh S.  aureus  (Wertheim  et.al.,  2005).  S.  aureus menginfeksi  baik  pada  pasien  rumah  sakit dengan  imunitas  yang  menurun  maupun seorang dengan imunokompeten yang sehat. Bakteri  ini  secara  alami  dapat  ditemukan pada  hidung  dan  nasofaring  pada  tubuh manusia  (Harris  et.al.,  2002).  Bakteri  S. aureus  paling sering mengkontaminasi luka pascabedah sehingga menimbulkan kompilasi,  dimana  infeksi  dapat  menyebar melalui  kotak  dengan  nanah  dari  luka  yang terinfeksi  S. aureus  atau dari  kontak dengan karier ataupun barang-barang yang terinfeksi S.  aureus.  Selain  itu,  S.  aureus  dapat menyebabkan pada tingkat infeksi lebih berat dapat  menyebabkan  pneumonia,  meningitis, empiema,  endokarditis  atau  sepsis  dengan supurasi di tiap organ.
Pada  1941,  hampir  semua  strain  S. aureus di seluruh dunia dapat diatasi dengan antibiotik  penisilin,  akan  tetapi  pada  tahun 1944  dilaporkan  bahwa  S.  aureus  dapat menghancurkan  penisilin  dengan  adanya penisilinase  atau  sekarang  lebih  dikenal dengan  β-laktamase.  Setelah  itu  beberapa kelas  antibiotik  baru  seperti  mitomisin, quinopritin  dan  sebagainya  digunakan  dan
dikembangkan  untuk  mengatasi  infeks    S. aureus,  akan  tetapi  S.  aureus  menunjukkan kemampuan  yang  unik  dalam  merespon secara cepat setiap antibiotik yang digunakan dengan mengembangkann mekanisme resistensinya  yang  baru  (Pantosti  et.al., 2007).
Penelitian  untuk  mencari  antibiotik baru  terus  dilakukan  baik  melalui  sintesis maupun  dari  bahan  alam  terutama  berasal dari  tanaman.  Mangrove  merupakan  salah satu  tanaman  yang  kaya  akan  senyawa bioaktif  karena  merupakan  satu-satunya hutan yang berada diantara laut dan daratan. Seperti  Menurut  Bandaranayake  (2002) berdasarkan  tinjauan  dari  bioaktivitas  dan kandugan  kimia  beberapa  mangrove  yang dilakukan serta pemanfaatan secara tradisionalnya,  tanaman  mangrove  memiliki aktivitas sebagai anti virus, anti jamur, racun tikus, antikanker, antimalaria dan bioaktivitas lainnya. Salah satu jenis mangrove yang telah banyak  diteliti  bioaktivitasnya  dan  terbukti memiliki  aktivitas  yang  baik  yaitu  perepat (Sonneratia  alba).  S.  alba  merupakan  pohon mangrove yang paling tersebar luas dan dapat ditemukan dari afrika timur sepanjang bagian india,  asia  tenggara,  austrlia  bagian  utara, borneo  dan  kepulaan  pasifik  (Haq  et.al., 2014).
Daun  dan  buah  S.  alba  dilaporkan memiliki  aktivitas  antimikroba,  antioksidan dan  aktivitas  sitotoksik  (Saad  et.al.,  2012; Asad  et.al.,  2013;  Latief  et.al.,  2018; Muhaimin  et  al.,  2021).  Selain  itu  daun, batang,  dan  kulit  batang  menunjukkan kemampuan  antioksidan  sedangkan  kelopak bunga menunjukkan antioksidan dan antilipid peroksidasi  (Ragasa  et.al.,  2015).  Dari penelitian  sebelumnya  aktivitas  antimikroba terhadap S. aureus dari ekstrak aseton batang S. alba diperoleh daerah hambat 15 mm dan MIC  pada  5mg/ml  (Mitter,  2015a).  Lebih lanjut beberapa jenis pelarut digunakan untuk mengestraksi daun S. alba dan ekstrak aseton memberikan daerah hambat terhadap pertumbuhan lebih banyak patogen dibanding ekstrak lainnya serta menghambat pertumbuhan  S.  aureus  18mm  dengan  MIC
5mg/ml (Mitter, 2015b). Karena itu dilakukan isolasi senyawa kimia pada ekstrak aseton daun S. alba dan aktivitasnya terhadap pertumbuhan bakteri S. aureus.
Berdasarkan  uraian  tersebut  maka penulis akan melakukan penelitian  mengenai uji  bioassay  antibakteri  terhadap  S.  aureus dari  fraksi  ekstrak  aseton  daun  perepat  (S. alba).

## METODE PENELITIAN Sampel Penelitian
Sampel  penelitian  yang  digunakan adalah
ekstrak asetondaun perepat(Sonnelaria alba) yang diperoleh dari penelitian  sebelumnya  yang  diambil  dari pesisir sungai di Kelurahan Kampung Laut, Kecamatan Kuala Jambi, Kabupaten Tanjung  Jabung  Timur,  Provinsi  Jambi. Sampel kemudian dideterminasi di Laboraturium  Bioteknologi  dan  Rekayasa Fakultas  Sains  dan  Teknologi  Universitas Jambi.

## Bahan Kimia
Bahan  kimia  yang  digunakan  adalah etil asetat, aseton, n-heksan dan etanol yang di destilasi terlebih dahulu sebelum digunakan. Silika gel Merck G60 digunakan untuk  KVC.  Bahan  kimia  yang  untuk
skrining  fitokimia  yaitu  HCl  pekat,  serbuk magnesium  (Mg),  NaOH  10%,  pereaksi Bouchardat,  pereaksi  Meyer,  pereaksi Dragendorff,  pereaksi  Wagner,  H2SO42N, NaOH 1N, HCl 2N dan larutan FeCl3. Bahan kimia  untuk  uji  aktivitas  antibakteri  yaitu alkohol 70%, akuadest, Nutrient Agar (NA), NaCl steril dan kertas saring.

## Alat Penelitian
Alat yang digunakan selama penelitian ini  terdiri  dari  alat  untuk  isolasi  senyawa, skrining fitokimia dan uji aktivitas antibakteri.  Alat  yang  digunakan  untuk isolasi  senyawa  yaitu  gelas  yang  umum  di laboratorium kimia organik, kolom kromatografi, timbangan analitik, plat KLT, pipa  kapiler  dan  detektor  UV  254  nm CAMAG.  Alat  untuk  skrining  fitokimia yaitu  cawan  porselen,  sedangkan  alat  yang digunakan  untuk  uji  aktivitas  antibakteri yaitu inkubator, autoklaf, mikropipet, bunsen, cawan petri dan jarum ose

## Skrining Fitokimia
Skrining  fitokimia  dilakukan  terhadap ekstrak  etanol  daun  pedada.  Pengujian  ini didasarkan  pada  metode  Tiwari  et.  al, (2011).  Berikut  adalah  metode  pengujian skrining fitokimia dan keterangan hasilnya:
Tabel 1. Metode pengujian dalam skrining fitokimia dan keterangan hasilnya.
Pengujian Hasil positif Alkaloid Pereaksi mayer Timbul endapan kuning Pereaksi dragendorff Timbul endapan jingga Flavonoid Mg+HCl Terbentuk warna merah magenta Fenolik/Tanin FeCl 3 1% Hijau-kehitaman / Biru-kehitaman Kuinon NaOH 1N Terbentuk warna Merah Terpenoid Pereaksi Lieberman-Buchard Terbentuk warna kemerahan Steroid Pereaksi Lieberman-Buchard Terbentuk warna kehijauan Saponin Tes busa Terbentuk busa stabil 1-10 cm selama 10 menit

## Isolasi Senyawa
Isolasi  senyawa  dilakukan  pada  20 gram  ekstrak  aseton  daun  S.  alba.  Ekstrak kemudian  dilakukan  fraksinasi  menggu- nakan kromatografi kolom vakum menggunakan  fasa  diam  silika  gel  dengan fasa gerak eluen dengan kepolaran bertingkat.. Eluat ditampung dalam botol dan masing-masing  dicek  dengan  menggunakan kromatografi lapis tipis untuk dikelompokkan  ke  dalam  fraksi  kolom melalui  pola  noda  yang  sama.  Masing- masing fraksi kolom diuapkan dengan rotary evaporatoruntuk memekatkan sampel.
Selanjutnya  dilanjutkan  dengan  kolom grafitasi  dengan  eluen  bertingkat  untuk memperoleh isolate murni.

## Analisis Senyawa Murni
Spektrofotometer  UV-Vis. Isolat yang  diperoleh  dari  hasil  KLT  dianalisis dengan spektrofotometer UV-Vis
padapanjang 200-400 nm.
Spektrofotometer  FTIR. Isolat  hasil
KLT  diidentifikasi  dengan  menggunakan spektrofotometer FTIR pada bilangan gelombang 4000-400 cm-1.

## Pengujian Aktivitas Antibakteri Sterilisasi alat dan bahan.
Semua alat dan bahan yang digunakan dicuci  hingga  bersih,  lalu  dikeringkan.  Lalu disterilisasi  dengan  autoklaf  pada  suhu 1210C  selama  15  menit.  Untuk  alat  yang tidak  tahan  panas  disterilisasi  dengan menggunakan  alkohol  70%,  lalu  dipijarkan diatas bunsen.
Persiapan  media  biakan  bakteri.    0,  1 gram mediaNA (ekstrak yeast 5 g, tripton 5 g, NaCl  5  g,  tepung  agar  5  g  dalam  1  liter aquadest) dimasukkan dalam erlemenyer 250 mL, ditambahkan akuades 100 mL, dipanaskan  dan  dihomogenkan  dengan stirrer, lalu disterilkan dengan autoklaf pada suhu 1210C selama 15 menit.
Pembuatan  inokulum  bakteri.  Masing- masing bakteri dibiakkan pada larutan NaCl, dengan  cara  1  ose  bakteri  dimasukkan  pada larutan NaCl steril, lalu diinkubasi pada suhu
37 °C selama 24 jam. Biakan yang diperoleh disimpan pada suhu 5°C.
Uji aktivitas
antibakteri.
Pengujianaktivitas antibakteri dilakukan dengan  metode  difusi  cakram.  Setiap  kertas cakram steril ditetesi dengan larutan uji (0,10, 20, 30,40 dan 50 %) didiamkan ± 15 menit. Secara  aseptik  kertas  cakram  diletakkan dalam  cawan  petri  yang  sudah  mengandung bakteri  uji.  Kontrol  positif  yang  digunakan adalah  cakram  yang  ditetesi  amoksisilin sedangkan  kontrolnegatif  yang  digunakan adalah  cakram  yang  ditetesi  pelarut  ekstrak (aseton),  jumlah  kontrol  positif  dan  negatif disamakan dengan jumlah ekstrak. Pengujian dilakukan  sebanyak  3  kali  pengulangan  lalu diinkubasi  pada  37  °C  selama  24  jam,  lalu dilakukan pengukuran zona hambat disekitar cakram dengan menggunakan jangka sorong. Diameter zona hambat adalah diameter yang tidak  ditumbuhi  oleh  bakteri  pada  kertas cakram

## PEMBAHASAN

## Skrining Fitokimia Ekstrak Aseton Daun Sonneratia alba
Skrining  fitokimia  merupakan  tahap awal yang dilakukan dalam penelitian bahan alam,  dimana  bertujuan  untuk  mengetahui golongan  komponen  senyawa  metabolit sekunder yang terkandung dalam tumbuhan. Berdasarkan  uji  yang  telat  dilakukan  dapat diketahui bahwa senyawa metabolit sekunder yang  terdapat  pada  ekstrak  aseton  S.  alba yaitu golongan alkaloid, flavonoid, polifenol, saponin,  kuinon  dan  triterpenoid.Hal  ini sesuai  dengan  literatur  dimana  senyawa metabolit  sekunder  yang  ditemukan  dalam tanaman mangrove meliputi senyawa golongan alkaloid, fenolat, tanin, steroid, dan terpenoid  serta  senyawa-senyawa  bioaktif lainnya (Bandaranayake, 2002 dan Kusyana, 2014).    Hasil  skrining  fitokimia  ekstrak aseton daun S. alba dapat dilihat pada tabel 2
Tabel 2. Skrining Fitokimia Ekstrak Aseton S. alba PengujianFitokimia Pereaksi Uji Hasil Alkaloid Meyer Dradendorff + + Flavonoid Mg + HCl + Tanin/ polifenol FeCl 3 1% + Saponin Tes Busa + Kuinon NaOH 1N + Triterpenoid Uji Lieberman Burchard + Steroid Uji Lieberman Burchard - Keterangan : ( + ) mengandung senyawa golongan ( - ) tidak mengandung senyawa golongan

## Isolasi  Senyawa  Ekstrak  Aseton  Daun Sonneratia alba
Sebanyak 20 gram sampel
diimpregnasi  dengan  20  gram  silika  gel. Kemudian  dipisahkan  menggunakan  KVC, dengan  fase  diam  yaitu  silika  gel  dan  fasa gerak  pelarut  dengan  kepolaran  bertingkat yaitu  n-heksan:  etil  asetat  dan    etil  asetat: metanol  sampai  metanol  100%.  Kemudian diperoleh 50 vial yang selanjutnya di analisa dengan  kromatografi  lapis  tipis  (KLT). Dari hasil  KLT  yang  diperoleh  vial-vial  tersebut digabungkan  berdasarkan  berdasarkan  pola noda  yang  sama  sehingga  diperoleh  enam fraksi berbeda, yaitu vial 1-10 (fraksi 1), vial 11-14 (fraksi 2), vial 15-17 (fraksi 3), vial 18- 21 (fraksi 4),vial 22-31 (fraksi 5), dan vial 32- 50  (fraksi  6).  Setelah  digabungkan  setiap fraksi  kembali  diamati  pola  nodanya  dengn KLT  dibawah  lampu  UV  254  nm,  fraksi    1 dan  2  menggunakan  eluen  n-heksana:etil asetat 6:4, fraksi 3 dan 4 menggunakan eluen n-heksan:etil asetat 5:5, fraksi 5
menggunakan eluen n-heksan: etil asetat 8:2 dan fraksi 6 dengan eluen etil asetat:metanol 5:5. Pemilihan eluen berbeda bertujuan untuk melihat pola pemisahan pada masing-masing fraksi. Eluen yang sesuai akan menghasilkan pemisahan  terbaik  dan  dapat  menunjukkan komponen terbanyak dari sampel (Mahmiah,
2006).  Pola noda setiap fraksi    dilihat    pada Gambar 1.
Gambar  1. KLT Fraksi Hasil KVC
Selanjutnya  dipilih  fraksi  5  untuk dilakukan  tahap  pemisahan  selanjutnya dengan  menggunakan  kromatografi  kolom grafitasi  (KKG).  Pemisahan  dengan  KKG memanfaatkan gaya grafitasi untuk membuat eluen turun mengelusi senyawa pada kolom. Pada  proses  ini  diperoleh  135  vial  dan digabungkan  berdasarkan  pola  nodanya menjadi dua fraksi yaitu vial 1- 42 (F 5.1) dan 42-135 (F 5.2). Pola noda dari fraksi tersebut daat  dilihat  pada  Gambar  2  dimana  eluen yang  digunakan  adalah  n-heksan:  etil  asetat 3:7.
Gambar  2. KLT Fraksi Hasil Kromatografi
Grafitasi (a) Fraksi F.5.1 (b) Fraksi F.5.2
Dari  pola  noda  pada  Gambar  2.  dapat dilihat bawha F. 5. 2 memiliki satu pola noda yang  mengindikasikan  senyawa  murni. Untuk  membuktikan  kemurnian  senyawa F.5.2  dilakukan  uji  kemurnian  dengan  tiga sistem  eluen  dengan  tingkat  kepolaran  yang berbeda  (Pratiwi  dan  Ersam,  2013).  Uji  ini dilakukan  dengan  cara  mengelusi  sampel dengan  eluen-  eluen  tertentu  berdasarkan perbedaan  polaritasnya  sehingga  mencapai nilai  Rf  yang  kecil,  menengah  dan  tinggi. Dengan demikian, apabila terdapat campuran senyawa  dengan  tingkat  kepolaran  yang relatif  sama,campuran  ini  akan  dapat terpisahkan  melalui  salah  satu  sistem  eluen yang  digunakan.  Tiga  sistem  eluen  yang digunakan untuk menguji kemurnian
senyawa  F.5.2  yaitu  n-heksana:etil  asetat (1,5:8,5) dengan Rf 0,24, etil asetat:Metanol (8:2)  dengan  Rf  0,56  dan  Etil  asetat:  Etanol (6,5:3,5)  0,71.  Berdasarkan  uji  kemurnian dengan  tiga  sistem  eluen  tersebut  dapat menunjukkan  bahwa  fraksi  F.5.2  memiliki pola  noda  tunggal  atau  merupakan  islolat murni.  Hasil  KLT  dengan  sistem  tiga  eluen dapat dilihat pada Gambar 3.
Gambar  3. KLT Tiga Sistem Eluen Isolat (a) n-heksana:etil asetat (1,5:8,5) dengan Rf 0,24, (b) etil asetat:Metanol  (8:2)  dengan  Rf 0,56  dan  (c)  Etil  asetat:  Etanol (6,5:3,5) 0,71

## Skrining Fitokimia Isolat
Selanjutnya  dilakukan  uji  fitokimia senyawa isolat F.5.2 untuk mengetahui jenis golongan  senyawa  metabolitnya.  Hasil  uji fitokimia  senyawa  F.5.2  ditampilkan  pada Tabel 3. Tabel 3.Skrining Fitokimia Isolat F.5.2 PengujianFiokimia Pereaksi Uji Hasil Alkaloid Meyer Dradendorff - - Flavonoid Mg + HCl - Tanin/ Fenolik FeCl 3 1% - Saponin Tes Busa - Kuinon NaOH 1 N + Terpenoid Uji Lieberman Burchard + Steroid Uji Lieberman Burchard -
a b a.       b.      c.
Berdasarkan  Tabel  3  diketahui bahwa senyawa F.5.2 positif pada golongan kuinon  ditandai  dengan  perubahan  warna menjadi  merah  setelah  direaksikan  dengan suatu  alkali.  Selain  itu  senyawa  F.5.2  juga menunjukkan  hasil  positif  pada  golongan triterpenoid  dengan  menghasilkan  warna merah  pada  uji  lieberman  burchard. Senyawa  F.5.2  dilihat  dari  hasil  uji fitokimianya positif pada dua golongan yaitu kuinon  dan  triterpenoid,  hal  ini  bisa  terjadi karena beberapa kemungkinan salah satunya yaitu  terdapat  gugus  fungsi  pada  senyawa F.5.2  bereaksi  pada  kedua  pereaksi  uji sehingga  menunjukkan  hasil  positif  pada kedua golongan.
Selain itu senyawa-senyawa metabolit  di  alam  bisa  saling  bereaksi  dan berikatan sehingga
membentuk keanekaragaman baru baik struktur maupun aktifitas farmakologi berupa senyawa golongan  campuran  yang  tersusun  dari  dua atau  tiga  golongan  metabolit  sekendur (Saifudin, 2014). Secara fisik senyawa F.5.2 berbentuk  kristal  berwarna  kuning  pudar dimana  sesuai  dengan  literatur  senyawa golongan  kuinon  berwarna  antara  kuning pudar  sampai  hampir  hitam  (Harborne, 1973).

## Karakterisasi Senyawa
Selanjutnya  senyawa  yang  diperoleh dikarakterisasi
untuk mengelusidasi strukturnya. Karakterisasi
senyawa dilakukan  dengan  analisa  menggunakan instrumen  spektrofotometri  UV-Vis  dan Fourier Transform Infrared (FTIR)).

## Analisa Spektrofotometri UV-Vis
Analisa spektrofotometri UV-Vis dari senyawa F.5.2 dapat dilihat pada Gambar 4. Berdasarkan  spektra  UV  pada  gambar  4 diperoleh dua pita serapan maksimum untuk senyawa F.5.2 yaitu pada daerah 257 nm dan 301,2 nm dengan nilai absorbansi 2,438 dan 1,388 masing-masinng.
Gambar 4. Spektrum UV senyawa F.5.2
Pita  serapan  ini  menunjukkan  adanya Senyawa yang mengandung gugus karbonil yang  berkonjugasi  dengan  gugus  etilenik disebut  α,β-karbonil  tak  jenuh  atau  enon. Spektra  enon  dicirikan  dengan  pita  serapan dari π → π* yang kuat pada daerah 215-250 nm,  dan  pita  lemah  n  →  π*  yang  muncul pada  daerah  300-330  nm.Karena  senyawa karbonil polar, maka pita serapan dari π → π* (pita K) dan pita serapan dari n → π* (pita R)  enon  tergantung  pada  pelarut.  Pita  K mengalami  peningkatan  efek  batokromik dengan  kepolaran  pelarut  sehingga  panjang gelombang maksimum bergeser  ke  panjang gelombang yang lebih panjang (Supratman,2010).  Selain  itu,pita  serapan yang  ditunjukkan  senyawa  F.5.2  juga memiliki  karakteristik  beberapa  senyawa turunan naftokuinon yang menunjukkan pita serapan  pada  daerah  230-300  nm  dan  rata- rata  setiap  senyawa  memiliki  dua  band didaerah ini (Spruit,1949).

## Analisa spektrofotometri FTIR
Selanjutnya  analisa  FTIR  senyawa F.5.2  digunakan  untuk  mengetahui  gugus fungisional pada senyawa, dimana hasil dari spektrum FTIR senyawa F.5.2 dan pembanding  dapat  dilihat  pada  Gambar  5 dan  Gambar  6.  dan  data  perbandingan senyawa dapat dilihat pada Tabel 4.
Gambar 5. Spektrum FTIR Senyawa F.5.2
Gambar 6. Spektrum Pembanding Senyawa 2,7-dihydroxy-1,4-Naphthoquinone(SDBS No.31488)
Berdasarkan  spektrum  hasil  analisa diketahui  bahwa  adanya  serapan  pada bilangan  gelombang  3264,57  cm-1  dengan intensitas yang kuat dan lebar mengindikasikan  adanya  gugus  -O-H. Adanya  gugus  hidroksil  didukung  dengan adanya serapan pada daerah 1000-1300 cm- 1  yang  menandakan  sinyal  ulur  C-O.  Ulur gugus  –OH  akan  terlihat  pada  bilangan gelombang  sekitar  3750-3000  cm-1  dan diperkuat  dengan  serapan  C-O  pada  sekitar 1300-1000 cm-1 (Sitorus,  2009 dalam Nata, 2013).  Selain  itu  pada  daerah  bilangan gelombang  2921,06  cm-1  terdapat  pita serapan  vibrasi  ulur  C-H  alifatik  dan didukung  juga  dengan  munculnya  pita serapan tekuk C-H pada 1441,38 cm-1.
Pita serapan gugus C=O muncul pada daerah  serapan  1692,80  cm-1  dengan
intensitas  kuat.  Dimana  rentang  untuk serapan C=O yaitu pada bilangan gelombang 1650-1800  cm-1  dengan  daerah  pada bilangan  gelombang  yang  lebih  kecil menunjukkan  adanya  C=O  terkonjugasi (Solomon  dan  Fryhle,2004).  Hal  ini memperkuat dugaan senyawa F.5.2 merupakan  senyawa  golongan  kuinon. Kemudian pada daerah bilangan gelombang 1611,28  cm-1  ditemukan  pita  serapan dengan  rentang  bilangan  gelombang  1500- 1675 cm-1 yang menunjukkan karakteristik dari  pita  serapan  ulur  C=C.  Dibuktikan dengan  adanya  pada  daerah  sidik  jari  pita serapan  pada  rentang  650-1000  cm-1  yaitu pada  861,56;  773,81  dan  690,27cm-1  yang menunjukkan vibrasi tekuk C=C-H.

## Tabel 4. Data Serapan FTIR Senyawa
Isolat Pustaka Pembanding (SDBS No.31488) Rentang (Creswell et. Al., 1982) Kemungkinan gugus fungsi 3264,57 3202 3000-3750 ulur O-H 2921,06 2925 2900-3300 Ulur C-H alifatik 1692,8 1650 1650-1800 ulur C=O 1611,28 1571 1500-1675 ulur C=C 1441,38 1464 1470-1380 tekuk C-H Alifatik 1315,93 1300 1000-1320 C-O 1220,37 1247 1015,81 1022 861,56 887 650-1000 C-H Alkana/ aromatik 773,81 730 690,27 694
Berdasarkan  data  analisa  spectrum FTIR  diketahui  bahwa  senyawa  F.5.2 mempunyai  karakteristik  serapan  gugus  O- H, C=O terkonjugasi, C=C dan C-H alifatik, dimana  serapan-serapan  tersebut  identik dengan  serapan  dari  salah  satu  turunan senyawa  kuinon  yaitu  2,7-dihidroksi-1,4- naftokuinon  (SDBS  No.31488)  sehingga memperkuat  dugaan  bahwa  senyawa  F.5.2 merupakan  turunan  dari  golongan  kuinon, dimana diketahui bahwa naftokuinon tersebar  luas  pada  tanaman,jamur  dan beberapa hewan (Riffel et.al., 2002). Berikut pada  Gambar  7.  merupakan  struktur senyawa 2,7-dihidroksi-1,4-naftokuinon.
Gambar 7. Struktur 2,7-dihidroksi-1,4- naftokuinon

## Uji Antibakteri
Hasil isolat yang diperoleh dari proses isolasi  yang  dilakukan  kemudian  diuji aktivitas penghambatannya terhadap
pertumbuhan bakteri S. aureus. Pengamatan dilakukan  terhadap  senyawa  F.5.2  dengan beberapa  konsentrasi  dan  kontrol  positif amoksisilin  serta  kontrol  negatif  yaitu aseton.  Metode  yang  digunakan  yaitu metode  difusi  cakram  Kirby  Bauer  dan diukur  daerah  hambat  pada  sekitar  cakram. Aktivitas  daya  hambat  yang  dihasilkan diindikasikan  dengan  nampaknya  zona bening  pada  sekitar  paper  disc.  Semakin besar diameter zona hambat, maka semakin besar  aktivitas  antibakteri,  zona  bening  di sekitar  paper  disc  menunjukkan  adanya aktivitas  antibakteri  (Pratama,  2005).  Hasil pengujian  antibakteri  terhadap  S.  Aureus dapat dilihat pada Gambar 8.

## a                                   b
Gambar 8. Pengujian Antibakteri Ekstrak dan Isolat Terhadap Bakteri S. aureus (a) Ekstrak aseton daun S. alba (b) Isolat F.5.2
Tabel 5. Data Zona Hambat Ekstrak Terhadap S. aureus
Berdasarkan  hasil  uji  pada  Tabel  5. diketahui  bahwa  ekstrak  aseton  daun S. alba memiliki  aktivitas  antibakteri  terhadap S.  alba dengan  zona  hambat  rata-rata tertinggi  1,64  mm  pada  konsentrasi  ekstrak 50% dan 2,11 mm pada kontrol positif. Hal ini  sesuai  dengan  penelitian  terdahulu  yang melaporkan adanya aktivitas antibakteri dari ekstrak  aseton  daun S.  alba terhadap S.
aureus (Mitter,  2015b).  Ekstrak  aseton memiliki aktivitas penghambatan pertumbuhan  karena  komponen  senyawa antibakteri yang terkandung dalam tumbuhan S. alba bersifat semi polar, sampai polar  sehingga  pelarut  dengan  sifat  semi polar seperti aseton efektif untuk mengekstraksi  komponen  aktif  tersebut (Herawati et. al., 2008).
Tabel 6. Data Zona Hambat Isolat Terhadap S. Aureus Konsentrasi Sampel uji (%) Zona Hambat  (mm) 1 2 3 Rata-rata 10 0,00 0,00 0,00 0,00 20 0,00 0,00 0,00 0,00 30 0,00 0,00 0,00 0,00 40 0,00 0,00 0,00 0,00 50 0,00 0,00 0,00 0,00 kontrol + (amoksisilin) 1,34 0,58 0,80 0,91 kontrol – (aseton) 0,00 0,00 0,00 0,00
Sedangkan  pada  uji  antibakteri  pada isolat  F.5.2  terlihat  pada  Tabel  6.    bahwa senyawa tidak menunjukkan adannya aktifitas  antimikroba  dengan  tidak  adanya daerah hambat pada setiap konsentrasi yang di  uji.  Dimana  dengan  adanya  zona  bening disekitar paper  disc menunjukkan  adanya aktivitas antibakteri (Pratama, 2005).
Berdasarkan penelitian sebelumnya senyawa kuinon  yang  diisolasi  dari  bagian  batang S. alba juga  tidak  menunjukkan  aktivitas antimikroba dimana senyawa yang diisolasi tersebut  yaitu  2,6-dimetoksi-p-benzokuinon
(Chaiyadej  et.  al.,  2004).  Sedangkan senyawa  golongan  kuinon  yang  memiliki aktivitas antibakteri contohnya yaitu hiperin dimana  mekanisme  dalam  penghambatan pertumbuhan  mikroba  yang  terjadi  yaitu mengikat adesin kompleks pada dinding sel dan  menginaktifakn  sel  bakteri  tersebut (Hingkua,  2012).  Selain  itu  dari  penelitian terdahulu  diketahui  beberapa  senyawa  dari turunan  naftokuinon  yang  aktif  dan  tidak aktif  terhadap S.  aureus dapat  dilihat  pada Tabel 7. Aktivitas antibakteri dibagi menjadi 2  macam  yaitu  aktivitas  bakteriostatik
Konsentrasi Sampel uji (%) Zona Hambat  (mm) 1 2 3 Rata-rata 10 0,38 0,40 0,30 0,36 20 0,30 0,48 0,40 0,39 30 1,30 0,92 0,64 0,95 40 1,10 1,20 0,80 1,03 50 2,00 2,40 0,52 1,64 kontrol + (amoksisilin) 2,50 2,54 1,30 2,11 kontrol – (aseton) 0,00 0,00 0,00 0,00
(menghambat  pertumbuhan  tetapi  tidak membunuh patogen) dan aktivitas bakterisidal  (dapat  membunuh  patogen dalam kisaran luas) (Dewi, 2010).
Tabel  7. Beberapa  Struktur  turunan  senyawa  naftokuinon  yang  aktif  dan  inaktif  terhadap S. aureus (Sanchez-Calvo et. al., 2016)
Senyawa Aktif Senyawa inaktif

## KESIMPULAN
Berdasarkan  penelitian  yang  telah dilakukan  dapat  ditarik  kesimpulan  sebagai berikut, senyawa yang berhasil diisolasi dari ekstrak aseton daun S. alba tidak menunjukkan adanya aktivitas
penghambatan terhadap pertumbuhan bakteri  S  aureus.  Golongan  senyawa  yang terdapat  pada  ekstrak  aseton  daun  S.  alba yaitu  alkaloid,  flavonoid,  tannin,  saponin, kuinon,  dan  triterpenoid,  sedangkan  isolat
F.5.2  yang  diperoleh  merupakan  golongan kuinon dan triterpenoid.

## SARAN
Perlu dilakukan eksplorasi dan isolasi pada  senyawa  pada  fraksi  lain  dari  ekstrak aseton  daun  S  alba  serta  uji  aktivitas  lain pada  senyawa  isolat  yang  diperoleh  untuk melihat kemampuan bioaktivitasnya.

## DAFTAR PUSTAKA
Asad,  S.,  M.  Hamiuzzaman,  A.T.  M.  Z.  Azam, M.  Ahsan  and  M.  M.  Masud.  2013. Lupeol,  Oleanic  Acid  &  Streroids  from Sonneratia alba j.e . Sm (sonneratiaceae)
and Antioxidant, Antibacterial &
Cytotoxic  Activities  of  Its  Extracts.
International  Journal  of  Advanced Research  in  Pharmaceutical  &  Bio Science. 3 (4): 1-10.
Bandaranayake,  W.  M.  2002.  Bioactivities, Biactive  Compounds  and  Chemical Constituents of Mangrove Plant. Wetland
Ecology and Management. 10 : 421-452.
Bradley,S.F.  2002. Staphylococcus  aureus Infections  and  Antibiotic  Resistane  in Older Adults. CID 34: 211-216.
Chaiyadej,  K.,  H.  Wongthap,  S.  Vadhanavikit and  Chantrapormma.  2004.  Bioactive Constituents  from  The  Twigs  og Sonneratia  alba.Walailak  J  Sci  &  Tech . 1(1): 15-22.
Dewi,  F.K.  2010.  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak
Etanol Buah Mengkudu ( Morinda Citrifolia,  Linnaeus )  terhadap  Bakteri
Pembusuk Daging Segar. Skripsi. Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan  Alam  Universitas  Sebelas
Maret. Surakarta.
Harborne,  J.  B.  1973. Phytochemical  Methods.
Chapman and Hall. New York.
Harris,  L.  G.,  Foster  S.  J.,  dan  Richards  R.  G., 2002. An Introduction to Stsphylococcus aureus  for  Identifying  and  Quantifying Staphylococcus  aureus  Adhesins  in Relation  to  Adhesion  to  Biomaterial: Review.  European  Cell  and  Material 4:
39-60.
Haq, I., A. B. M. S. Hossain, M. M.Khandaker,
A. F. Merican, G. Faruq, A. N. Boyce dan
M.  S.  Azirun.  2014.  Antioxidant  and Antibacterial  Activities  of  Different Ekstracts  and  Fractions  of  Mangrove Plant Sonneratia  alba.  International
Journal  of  Agriculture  &  Biology. 14:
707-714.
Herawati, N., N. Jalaluddin, L. Daha dan Firdaus, 2008. Aktivitas Antibakteri dan Antioksidan Ekstrak Tumbuhan Sonneratia  alba (Kayu  Buli).  Makalah Seminar  Nasional  Kimia  Jurusan  Kimia FMIPA Universitas Hasanudin. Makassar.
Hingkua,  S.S.,  Julaeha,  E.  &  Kurnia,  D.  2013.
Senyawa  Triterpenoid  dari  Batang Tumbuhan  Mangrove Avicennia  marina yang Beraktivitas Anti Bakteri. Prosiding  Seminar  Nasional  Sains  dan Teknologi Nuklir . PTNBR-BATAN.
Bandung.
Kusyana, D. Y. 2014. Eksplorasi Potensi Bahan Aktif Berkhasiat Antioksidan pada Daun dan  Buah  mangrove  Jenis Sonneratia alba (JE Smith,1816). Skripsi. Departemen Ilmu dan teknologi Kelautab Fakultas  Perikanan  dan  Ilmu  Kelautan
Institut Pertanian Bogor.
Latief,  M.,  Nazarudin  dan  Nelson.  2018. Aktivitas Antioksidan Ekstrak Daun dan Buah  Perepat  ( Sonneratia  alba )  Asal Tanjung  Jabung  Timur  Propinsi  Jambi. Prosiding  SEMIRATA  2015  bidang MIPA KS-PTN Barat. Universitas Tanjungpura, Pontianak. Hal. 112-117.
Mahmiah.  2006.  Isolation  and  Identification Flavonoid  Compound  From  The  Stem Bark of Saccopetalum hordfieldii BENN. Indo.J.Chem 6 (3): 312-315.
Mitter,  C.  S.2015a.  Antibacteril  Spectrum  and Acivity  Guided  Evaluation  of  Bark  of Sonneratia alba.IJSR 4 (6): 11224-1227.
Mitter,  C.  S.  2015b.  Investigation  of  Bioactive Principles  from  Leaf  Extracts  of Onneratia alba.AIJCSR 2 (4): 75-41.
Muhaimin,  Kurnia  Nastira  Ningsih,  Madyawati
Latief. 2021. Senyawa Turunan Terpenoid  dari  Ekstrak  Aseton  Daun Perepat ( Sonneratia alba ) dan Aktivitasnya Terhadap Escherichia  coli . Journal  of  The  Indonesian  Society  of Integrated Chemistry 13 (2): 75-83.
Nata, Rudi. 2013. Eksplorasi senyawa metabolit sekunder  pada  fraksi  polar  ekstrak        n- heksan dari kulit batang bulian ( Eusideroxylon zwageri T. et B). Skripsi. Fakultas Sains dan Teknologi Universitas Jambi. Jambi.
Pantosti, A. A. Sanchini dan M. Monaco. 2007.
Mechanisms  of  antibiotic  resistance  in Staphylococcus aureus . Future
Microbial 2 (3): 323-334.
Pratama,  Moch  Rachdie.  2005.  “ Pengaruh
Ekstrak  Serbuk  Kayu  Siwak  (Salvadora Persica)  terhadap  Pertumbuhan  Bakteri Streptococcus Mutans dan Staphylococcus  Aureus  dengan  Metode Difusi Agar ”.  Skripsi.    Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Institut  Teknologi Sepuluh Nopember
Pratiwi, A. dan T. Ersam. 2013. Uji Kemurnian DUa  Senyawa  dari  Ekstrak  Metanol Kayu  Batang Garcinia  cylindrocarpa , Jurnal  Sains  dan  Seni  POMITS 2  (2): C72-C75.
Ragasa,  C.  Y.,  V.  D.  Ebajo  Jr.,  M.  M.  D.  L.
Reyes, M. H. Mandia, R. Brkljaka and S. Urban.  2015.  Triterpenes  and  Sterols from Sonneratia alba.International Journal  of  Current  Pjarmaceutical Review and Research. 6 (6): 256-261.
Riffle, A., L.F. Medina., V. Stefani, R.C. Santos, D. Blizard dan A. Brandelli. 2002. Invitro Antimicrobial  Activity  of  a  New  Series of 1,4-naphthoquinone.
Brazilian
Journalof Medical and Biological Research 35: 811-818.
Saad, S., M. Taher, D. Susanti, H. Qaralleh, A. F.
I. Bt Awang. 2012. In vitro Antimicrobial Activity  of  Mangrove  Plant Sonneratia alba.Asian  Pasific  Journal  of  Tropical Biomedicine. 426-429.
Saifudin,  A.  2014. Senyawa  Alam  Metabolit Sekunder . Deepublish. Yogyakarta.
Sancez-Calvo, J., G. R. Barbero, G.G. Vasqurz, A.  G.  Duran,  M.  Macias,  M.  A. Rodrigues-Iglesias,  J.  M.  G.  Molinillo dan  F.  A.  Macias.  2016.  Synthesis,
Antibacterial  and  Antifungal  Activities of Naphthoquinone Derivatives; a Structure-ativity  Relationship  Study. Med Chem Res 25 (5). SDBS No.31488. 2,7-dihydroxy-1,4- naphthoquinone. SDBSWeb : http://sdbs.db.aist.go.jp (National Institute of Advanced Industrial Science and Technology,12 Agustus 2017)Solomon,  T.  W.  G.  dan  C.  B. Fryhle.  2004.  Organic  Chemistry;  8th ed.; John Wiley & Sons, Inc.: USA.
Spruit,  C.  J.  P.  1949.  Absorption  spectra  of quinones. I. Naphthoquinones and naphthohydroquinones. Recl. Trav.
Chim. Pays-Bas 68 (4): 309–324.
Supratman,  Unang.  2010. Elusidasi  Struktur Senyawa  Organik .  Widya  Padjadjaran,
Bandung.
Tiwari, P., B. Kumar, M. Kaur, G. Kaur dan H. Kaur.  2011.  Phytochemical  Screening and Extraction : A Review. International Pharmaceutica Scienca. 1 (1) : 98-106.
Wertheim, H. F., D.C Melles, M. C Vos., W. V. Leeuwen, A. V. Belkum, H. A. Verbrugh dan  J.  L.  Nouwen.  2005.  The  Role  of Nasal  Carriage  in Staphylococccus aureus Infections. Lancet  Infect  Dis 5 (12): 751-762.
World Health Organization. 2002. Prevention of Hospital-aquired  Infection  2 nd Ed. World Health Organization. Geneva.