## POTENSI REPELENT ESKTRAK ETANOL DAUN CENGKEH TERHADAP NYAMUK Anopheles sp.
Repellent Potency Of Clove Leaf Ethanol Extract Against Anopheles sp. Mosquito
Leny Noya 1) , Maria Nindatu 2) , Adrien Jems Akiles Unitly 3*) , Veince B. Silahooy 4) 1,2,3*,4 Program  Studi  Biologi,  Jurusan  Biologi,  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam, Universitas Pattimura, Ambon
3* Corresponding Author e-mail: adebiologi@yahoo.co.id
Informasi Abstrak. Kata kunci :
Anopheles sp., Daya tolak, Syzygium aromaticum L.
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  potensi  daya  tolak  ekstrak  daun  cengkeh ( Syzygium  aromaticum L.)  terhadap  nyamuk Anopheles sp.  Rancangan  percobaan yang  digunakan  adalah  rancangan  acak  lengkap  (RAL).  Hasil  yang  diperoleh dianalisis  dengan Analysis  of  Variance (ANOVA)  kemudian  dilanjutkan  Uji  Duncan pada  taraf  nyata  α=0,05  menggunakan  perangkat  lunak  SAS.  Sampel  berjumlah  18 ekor  tikus,yang  dibagi  menjadi  7  kelompok.  Masing-masing  kelompok  diberikan seduhan  daun  cengkeh  dengan  konsentrasi  0,50%,  konsentrasi  1%,  konsentrasi  2%, konsentrasi 4%, konsentrasi 8%, dan kelompok kontrol. Sampel diadaptasikan selama seminggu,  kemudian  diberi  perlakuan  selama  24  jam.  Hasil  penelitian  menunjukkan adanya efek daya tolak ekstrak daun cengkeh ( Syzygium aromaticum L.) pada nyamuk Anopheles sp.  yang  diolesi  pada  badan  tikus Rattus  norvegicus, dimana  konsentrasi yang  efektif  yaitu  1%,  2%,  4%,  dan  8%,  sehingga  dapat  disimpulkan  bahwa  Ekstrak etanol  daun  cengkeh  memiliki  potensi  repellent  terhadap  nyamuk Anopheles sp. dimana semakin tinggi konsentrasi ekstrak etanol daun cengkeh yang diberikan maka semakin  besar  daya  tolaknya  terhadap  nyamuk.  Pemberian  ekstrak  etanol  daun cengkeh  ( Syzygium  aromaticum L.)  memiliki  kemampuan  yang  sama  dengan  autan yang  berpengaruh  sebagai  daya  tolak  nyamuk Anopheles sp.  dimana  dosis  efektif adalah  konsentrasi  1%,  sedangkan  konsentrasi  8%  merupakan  dosis  kuat  dalam proteksi gangguan nyamuk Anopheles sp.
Received: 28 Agustus 2022 Accepted: 20 November 2022 ©2022 Jurusan Biologi FMIPA Unpatti, IAIFI Cab. Ambon

## A. PENDAHULUAN
Nyamuk  merupakan  salah  satu  ektoparasit  pengganggu  yang  merugikan  manusia.  Hal tersebut  disebabkan  kemampuannya  sebagai  vector  berbagai  penyakit.  Salah  satunya  adalah Anopheles sp,  yang  merupakan  vektor  dari  penyakit  malaria. Anopheles dapat  dinyatakan sebagai vektor penyakit malaria di suatu daerah apabila terbukti positif mengandung sporozoit dalam  kelenjar  ludahnya.  Di  Indonesia  sebanyak  22  spesies  nyamuk Anopheles yang  telah dikonfirmasi  sebagai  vektor  penyakit  malaria  dengan  tempat  perindukan  yang  berbeda-beda (Departemen Kesehatan, 2003).
Nyamuk Anopheles  sp sering  disebut  nyamuk  malaria  karena  banyak  dari  spesies nyamuk  ini  menularkan  malaria.  Jenis  nyamuk  ini  juga  dilaporkan  menularkan  penyakit chikungunya.  Spesies Anopheles sp.  yang  berbeda  sering  menunjukkan  tingkah  laku  yang berbeda  dan  kemampuan  menularkan  penyakit  yang  berbeda  pula.  Oleh  sebab  itu,  jenis nyamuk Anopheles sp.  yang  menularkan  penyakit  di  satu  daerah  sering  berbeda  dengan
Anopheles sp.  yang  menularkan  penyakit  malaria  atau  chikungunya  di  daerah  lain  (Sembel, 2009).  Semakin  meningkatnya  kasus  malaria  maka  perlu  adanya  tindakan  untuk  mencegah hadirnya  vector  seperti Anopheles sp.  Diketahui  bahwa  secara  turun-temurun  di  Maluku, digunakan  tanaman  cengkeh  ( Syzygium  aromaticum L.)  yaitu  daun  dan  gagangnya  yang dikeringkan  kemudian  dibakar  dan  diasapin  di  dalam  rumah  untuk  mengusir  bahkan  dapat membunuh  nyamuk. Tanaman  cengkeh  ( Syzygium  aromaticum L.)  merupakan  tanaman  asli Indonesia  yang  berasal  dari  Maluku.  Tanaman  ini  tumbuh  subur  di  daerah  pegunungan  dan dataran  rendah  dengan  curah  hujan  yang  tinggi.  Daun  cengkeh  dapat  digunakan  sebagai  anti nyamuk karena mengandung senyawa eugenol (Riyanto, 2012).
Eugenol  merupakan  senyawa  yang  paling  banyak  ditemukan  di  dalam  ekstrak  daun cengkeh. Eugenol memberikan bau dan aroma yang khas, mempunyai rasa pedas, dan mudah menguap  jika  dibiarkan  di  udara  terbuka  sehingga  memungkinkan  senyawa  tersebut  dapat dijadikan  zat  penolak  ( repelent )  terhadap  nyamuk Anopheles  sp (Wahyudi,  2008).  Eugenol mempunyai sifat neurotoksik yang dapat menyebabkan serangga menjadi tidak aktif bergerak. Neurotoksik  bekerja  dalam  proses  penekanan  terhadap  sistem  saraf  serangga  yang  dapat ditandai  dengan  tubuh  serangga  yang  apabila  disentuh  terasa  lunak  dan  lemas  (Sanjaya  dan Safaria, 2006). Selain itu, masih banyak senyawa fitokimia daun cengkeh lainnya yang mampu menjadi  penolak  nyamuk  yang  perlu  untuk  dikaji  sehingga  uji  laboratorik  harus  dilakukan untuk mengetahui potensi daya tolak (repelent) ekstrak etanol daun cengkeh terhadap nyamuk Anopheles sp.

## B. METODE PENELITIAN

## Rancangan Penelitian
Penelitian  ini  dilakukan  pada  Laboratorium  Zoologi  Jurusan  Biologi  FMIPA Universitas  Pattimura  Pada  Oktober  2020  sampai  Januari  2021.  Penelitian  menggunakan Rancangan  Acak  Lengkap  dengan  tiga  kali  ulangan  yang  melibatkan  21  ekor  tikus    yang dipilih  secara  acak  dalam  penggunaan  ekstak  etanol  daun  cengkeh  dengan  konsentrasi  yang berbeda-beda.  ekstak  etanol    daun  cengkeh  terdiri  dari  kontrol  (-)  dan  kontrol  (+),  0,5%, 1%,dan    2%,4%  dan  8%.  Perlakuan  ekstrak  etanol  daun  cengkeh  ( Syzygium  aromaticum L . ) disajikan pada tabel 1.
Tabel 1.  Perlakuan Ekstrak Etanol Daun Cengkeh ( Syzygium aromaticum L . ) Perlakuan Ulangan 1 2 3 Kontrol (-) (-) 1 (-) 2 (-) 3 (+) (+)  1 (+)   2 (+)   3 Ekstrak Etanol daun Cengkeh P1 (P1) 1 (P1) 2 (P1) 3 P2 (P2) 1 (P2) 2 (P2) 3 P3 (P3) 1 (P3) 2 (P3) 3 P4 (P4) 1 (P4) 2 (P4) 3 P5 (P5) 1 (P5) 2 (P5) 3
Keterangan: Kontrol  (-),    (+)  Perlakuan  ekstrak  etanol    (P1)=  0,5%,  perlakuan  ekstrak  etanol  (P2)  =  1%, perlakuan  ekstrak etanol (P3) = 2%, Perlakuan ekstrak etanol (P4)=  4%,  Perlakuan ekstrak etanol (P5) = 8%
Biofaal Journal; Vol 3, No 2. Desember 2022. Pp 105  – 111. ISSN: 2723-4959 (online)

## Metode Kerja
Persiapan hewan Coba. Hewan coba yang digunakan dalam penelitian ini adalah tikus Rattus  norvegicus dengan  rata-rata  berat  badan  ±  200gram  sebanyak  21ekor.  Sebelum digunakan sebagai hewan percobaan, semua tikus putih di aklimatisasi terlebih dahulu selama satu minggu.
Ekstraksi. Daun cengkeh diambil sebanyak 1 kg kemudian dikeringanginkan kemudian dihaluskan dengan menggunakan blender. Setelah didapatkan serbuk daun  cengkeh kemudian dilanjutkan  dengan  proses  ekstraksi  dengan  menggunakan  metode  maserasi.  Prosedur pembuatan sebagai berikut :
a. Ditimbang sebanyak 250gr serbuk daun cengkeh dan dimasukkan kedalam   erlenmeyer.
b. Setelah itu, ditambahkan 1 liter etanol 70% dan didiamkan selama 24 jam.
c. Setelah  24  jam,  disaring  menggunakan  kertas  saring  Whatman  0,2  sehingga  diperoleh ekstrak cair daun cengkeh. Residu ekstraksi diulang sebanyak 3x.
d. Ekstrak cair dari daun cengkeh yang telah diperoleh, kemudian dipekatkan dengan rotary evaporator.
e. Hasil pemekatan tersebut, diperoleh ekstrak etanol pekat daun cengkeh.
Pengamatan  daya  tolak  nyamuk. Pengamatan  daya  tolak  nyamuk  dilakukan  pada sampel dengan prosedur kerja sebagai berikut
a. Disiapkan larva nyamuk Anopheles sp sebanyak 525 ekor
b. Disiapkan 21 ekor tikus yang dipilih secara acak
c. Disiapkan Ekstrak etanol daun cengkeh
d. Disiapkan 21  kandang yang telah ditutupi dengan kelambu.
e. Ekstrak etanol daun cengkeh dimasukkan kedalam 21 gelas plastik berukuran 50 ml, setiap gelas diisi masing-masing dengan kontrol (-) dan kontrol (+) , konsentrasi 0,5%, 1%, 2%, 4% dan 8%.
f. Setelah  itu  larva  nyamuk anopheles dimasukan  ke  dalam  kandang  yang  telah  ditutupi dengan kelambu. Biarkan sampai larva berubah menjadi nyamuk.
g. Masing-masing tikus tersebut diolesi dengan konsentrasi yang berbeda-beda.
h. Kemudian masukan 21 ekor tikus yang telah dicukur rambutnya dan telah diolesi dengan masing-masing  konsentrasi  yang  berbeda-beda  kedalam  masing-masing  kandang  yang telah ditutupi dengan kelambu,
i. Setiap  3  jam    selama  1  x  24  jam  diamati,  berapa  banyak  jumlah  nyamuk  yang  hinggap pada tubuh tikus.
Metode Patch Test: Metode ini dilakukan dengan cara mengoleskan ekstrak etanol daun cengkeh  pada  tubuh  tikus  dengan  masing-masing  konsentrasi  yang  berbeda-beda,  yaitu 0,5%,1%,2%,4%, 8% (Nindatu dan Noya, 2018).

## Analisa data
Hasil yang diperoleh kemudian dianalisis dengan Analysis of  Variance (ANOVA) dan dilanjutkan  dengan  Uji  Duncan  dengan    selang      kepercayaan    95%    (α  =  0.05)  dengan menggunakan perangkat lunak SAS.

## C. HASIL DAN PEMBAHASAN

## Hasil
Hasil  penelitian  menunjukkan  adanya  daya  tolak  ekstrak  etanol  daun  cengkeh  pada nyamuk Anopheles sp.  yang  tersaji  pada  Tabel  2.  Pengolesan  ekstrak  etanol  cengkeh  dengan masing-masing  konsentrasi  yang  berbeda-beda  memperlihatkan  nyamuk Anopheles sp.  yang hinggap pada tikus berbeda nyata dengan kontrol negatif (P<0.05), namun tidak berbeda nyata dengan perlakuan autan (P>0.05).
Tabel 2. Daya  tolak  ekstrak  daun  cengkeh  ( Syzygium  aromaticum L . )  Terhadap  Nyamuk Anopheles sp .
No Jam Ke Perlakuan ( - ) ( + ) 0,5% 1% 2% 4% 8% 1. 3 2.3 ± 0.02 ab 0.3 ± 0.03 c 2.6 ± 0.01 a 1.3 ± 0.03 abc 1.0 ± 0.02 bc 0.6 ± 0.02 c 0.3 ± 0.01 c
2. 6 1.3 ± 0.03 a 0.3 ± 0.03 a 1.6 ± 0.02 a 0.6 ± 0.03 a 0.6 ± 0.02 a 0.3 ± 0.03 a 0.3 ± 0.03 a
3. 9 1.3 ± 0.02 ab 0.3 ± 0.03 bc 2.0 ± 0.01 a 0.3 ± 0.02 bc 0.3 ± 0.02 bc 0.3 ± 0.02 bc 0.0 ± 0.01 c
4. 12 1.0 ± 0.03 a 0.0 ± 0.03 a 1.0 ± 0.02 a 0.6 ± 0.03 a 0.3 ± 0.02 a 0.3 ± 0.02 a 0.3 ± 0.01 a
5. 15 1.0 ± 0.03 a 0.0 ± 0.03 b 0.3 ± 0.02 b 0.3 ± 0.03 b 0.0 ± 0.01 b 0.0 ± 0.02 b 0.0 ± 0.01 b
6. 18 0.6 ± 0.01 a 0.0 ± 0.02 b 0.0 ± 0.02 b 0.0 ± 0.02 b 0.0 ± 0.01 b 0.0 ± 0.02 b 0.0 ± 0.01 b
Keterangan:   huruf superscript yang  berbeda  dalam  satu  baris  menunjukan  hasil  yang  berbeda  nyata  (P<0.05) antar kelompok perlakuan.
Jumlah  nyamuk Anopheles sp.  paling  banyak  yang  hinggap  pada  tikus  terdapat  pada kontrol  (-)    jam  ke  I  berjumlah  2  ekor  (2  ekor)  dan  paling  sedikit  pada  konsentrasi  1%  pada waktu  keI  berjumlah  1.0  ekor  (1  ekor).  Pada  konsentrasi,  2%,  4%,  8%  menunjukkan  bahwa hanya  sedikit  nyamuk    yang  hinggap  pada  badan  tikus.  Seperti  yang  kita  lihat  pada  hasil, kontrol  (-)  tidak  berbeda  nyata  dengan  konsentrasi  0.5  %,  sedangkan  pada  kontrol  (+)  yang diberi autan memiliki daya tolak yang sama dengan konsentrasi 1% sampai 8%.
Gambar 3.   Grafik  Daya  tolak  ekstrak  etanol  daun  cengkeh  ( Syzygium  aromaticum L . )  Terhadap Nyamuk Anopheles sp . 0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3 6 9 12 15 18 Jam Ke - (-) (+) 0.50% 1% 2% 4%
8%
Biofaal Journal; Vol 3, No 2. Desember 2022. Pp 105  – 111. ISSN: 2723-4959 (online)
Gambar  grafik  hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  adanya  daya  tolak  ekstrak  etanol daun cengkeh  ( Syzygium  aromaticum L . )  terhadap  nyamuk  dimana  semakin  meningkat konsentrasi  dan  lama  waktu  perlakuan  menunjukan  penurunan  jumlah  nyamuk  yang  hinggap pada tubuh tikus.

## Pembahasan
Hasil  penelitian  menunjukkan  konsentrasi  1%  merupakan  konsentrasi  efektif  karena telah  memiliki  daya  tolak  nyamuk  yang  sama  dengan  autan.  Konsentrasi  8%  merupakan konsentrasi  yang  paling  tinggi  dan  memiliki  bau  yang  sangat  menyengat  menyebabkan nyamuk Anopheles sp.  menghindar  dan  pergi.    Dapat  dijelaskan  bahwa  ekstrak  etanol  daun cengkeh  yang  dioleskan  merata  di  tubuh  tikus  akan  meresap  ke  pori-pori  kulit,  karena  panas tubuh,  minyak  atsiri  pada  ekstrak  daun  cengkeh  akan  menguap  ke  udara.  Bau  ini  akan terdeteksi  oleh  reseptor  kimia  (chemoreceptor)  yang  terdapat  pada  antena  nyamuk  dan diteruskan  ke  impuls  saraf.  Bau  dari  minyak  atsiri  ini  tidak  disukai  nyamuk.  Hal  itulah  yang kemudian  diterjemahkan  ke  dalam  otak  nyamuk  sehingga  nyamuk  akan  mengekspresikan untuk menghindar dari sumber bau sehingga tikus terhindar dari gigitan (Sanjaya dan Safaria, 2006).  Hal  tersebut  membuktikan  bahwa  daun  cengkeh  yang  mengandung  minyak  atsiri mampu menjadi penolak nyamuk Anopheles sp. ( repellent ) (Nindatu dan Noya, 2018).
Selain  itu,  daun  cengkeh  juga  mengandung  senyawa  eugenol,  saponin  dan  tanin. Senyawa  eugenol memberikan bau dan aroma yang khas, mempunyai rasa pedas, dan mudah menguap  jika  dibiarkan  di  udara  terbuka  sehingga  memungkinkan  senyawa  tersebut  dapat menjadi zat penolak ( repelent ) terhadap nyamuk Anopheles sp. Ketika nyamuk Anopheles sp. menggigit  tikus  yang  diolesi  ekstrak  etanol  daun  cengkeh  maka  diduga  rasa  pedas  eugenol membuat  nyamuk  akan  pergi  dan  apabila  eugenol  masuk  melalui  pencernaan  nyamuk  maka sifat  neurotoksiknya  dapat  menyebabkan  nyamuk  akan  susah  bergerak.  Neurotoksik  bekerja dalam  proses  penekanan  terhadap  sistem  saraf  nyamuk  dan  serangga  pada  umumnya  yang dapat  ditandai  dengan  lunaknya tubuh  nyamuk apabila disentuh, sehingga dapat  mengganggu kemampuan  reseptor  nyamuk  untuk  mengenal  bahan  atraktan  yang  dikeluarkan  oleh  kulit probadus  sehingga  nyamuk  terorientasi  untuk  menghindar.  Hal  ini  telah  dibuktikan  oleh Sanjaya  dan  Safaria,  (2006).  Ditambahkan  Ferdinanti  (2001),  eugenol  juga  dapat  merusak mukosa  kulit  nyamuk,  menyebabkan  kerusakan  pada  kutikula  nyamuk  dan  mengganggu saluran  pernafasan  pada  nyamuk.  Hal  ini  menyebabkan  jika    terpapar  eugenol,  nyamuk  akan menghindar.
Menurut  Ferdinanti  (2001)  selain  eugenol,  cengkeh  juga  mengandung  saponin  dan tanin. Kedua senyawa ini di duga mampu membunuh nyamuk Anopheles sp. Saponin bekerja dengan cara menurunkan tegangan  permukaan tubuh  nyamuk  sehingga mempermudah  proses penyerapan bahan aktif sehingga aktivitas insektisida dapat bekerja secara optimal. Selain itu, saponin  juga  memiliki  rasa  pahit  sehingga  menurunkan  nafsu  makan  nyamuk  (Mardiana, 2005). Tanin pada ekstrak etanol daun cengkeh di duga mampu menekan nafsu makan nyamuk sehingga  jika  terpapar  maka  nyamuk  akan  menghindar  dan  tidak  akan  mendekati  atau
menggigit nyamuk. Hal ini dibuktikan Novizan, (2002) bahwa tanin merupakan senyawa yang mampu menekan nafsu makan serangga, sehingga serangga akan menjauh dan tidak menggigit.
Selain tanin, senyawa flavonoid pada daun cengkeh di duga berperan sebagai repelent nyamuk.  Menurut  Nurjannah  (2004)  dan  Djojosumarto  (2008),  flavonoid  berfungsi  sebagai inhibitor  pernafasan  sehingga  pada  saat  nyamuk Anopheles sp.  melakukan  pernapasan, flavonoid  akan  masuk  bersama  oksigen  (O 2 )  melalui  alat  pernapasannya.  Setelah  nyamuk melakukan  pernapasan  maka  flavonoid akan  bekerja  menghambat  sistem  kerja  pernapasan  di dalam tubuh nyamuk Anopheles sp. , hal ini menyebabkan nyamuk akan kesulitan bernafas dan meninggalkan  tikus.  Selain  itu,  menurut  Hayatie et  al .  (2015)  flavonoid  diduga  dapat  masuk melalui  kutikula  yang  melapisi  tubuh  nyamuk  sehingga  dapat  merusak  sistem  pernafasan nyamuk.
Selain  flavonoid,  daun  cengkeh  juga  mengandung  Alkaloid.  Menurut  Munhoz et  al ., (2014), alkaloid memiliki aktivitas sebagai insektisida. Senada dengan Laksmanahardja (2002), alkaloid dapat dimanfaatkan untuk pembuatan pestisida dan pewangi ruangan. Menurut Putri et al., (2022),  senyawa  alkaloid  memiliki  rasa  pahit  serta  dapat  menurunkan  intensitas  makan sehingga dapat berperan sebagai repelen nyamuk.

## D. KESIMPULAN
Adapun kesimpulan dari penelitian ini adalah sebagai berikut:
1. Ekstrak  etanol  daun  cengkeh  memiliki  potensi  daya  tolak  ( repelent )  terhadap  nyamuk Anopheles sp.  dimana  semakin  tinggi  konsentrasi  ekstrak  etanol  daun  cengkeh  yang diberikan maka semakin besar daya tolaknya terhadap nyamuk.
2. Pemberian  ekstrak  etanol  daun  cengkeh  memiliki  kemampuan  yang  sama  dengan  autan yang berpengaruh sebagai daya tolak ( repelent ) nyamuk Anopheles sp. dimana konsentrasi efektif adalah konsentrasi 1%.

## E. DAFTAR PUSTAKA
Cania,  E.  setyaningrum,  E.  2013.  Uji  Efektivitas  Larvasida  Ekstrak  Daun  Legundi  (Vitex Trifolia)  terhadap  Larva Aedes  Aegepty .  Lampung. Medical  jurnal  of  Lampung University.
Dharmawan  R.  1993. Metode  Identifikasi  Spesies  Kembar  Nyamuk  Anopheles .  Surakarta: Sebelas Maret University Press, pp: 43-53.
Departemen Kesehatan. 2003. Vector Malaria Di Indonesia. Jakarta: Ditjen PPM dan PL.
Djojosumarto. 2008. Teknik Aplikasi Pestisida Pertanian. Yogyakarta: Kanisius Ferdinanti,  E,  2001. Uji  aktivitas  antibakteri  obat  kumur  minyak  cengkeh  (Syzygium aromaticum  (L)  Merr  &  Perry)  asal  bunga,  tangkai  bunga,  dan  daun  cengkeh terhadap  bakteri. (Skripsi).  Fakultas  Matematika  dan  Pengetahuan  Alam.  Institut Sains dan Teknologi Nasional. Jakarta.
Gandahusada S, H.DIlahude dan.,  W. Pribadi . 1998. Parasitologi Kedokteran. Jakarta : Balai Penerbit FK UI, pp: 220-231.
Hayatie  L,  A.  Biworo,  and  E.  Suhartono, Journal  of  Medical  and  Bioengineering  Vol ,  vol.  4, no. 5, 2015.
Hidayati  N.  2003.  Ekstraksi  Eugenol  dari  Minyak  daun  Cengkeh. Jurnal  Teknik  Gelegar .  14 (2) : 49-54.
Kardinan  A.  2003.  Tanaman  Pengusir  dan  Pembasmi  Nyamuk  vol  1.  Jakarta:  Agro  Media Pustaka, pp: 2-5, 22-23, 28-29.
Kardinan,  A.  2005.  Tanaman  Pengusir  dan  Pembasmi  Nyamuk,  vol  11.  Jakarta:  Agro  Media Pustaka, hal 5-8, 12-14, 18, 34-35.
Kardinan  A.  2007.  Tanaman  Pengusir  dan  Pembasmi  Nyamuk.  Jakarta:  Ago  Media  Pustaka.
Pp: 2-5, 22-23, 28-29.
Laksmanahardja, P. 2002. Perbaikan Sistem Penyulingan Minyak Atsiri dan Pengembangannya. Bogor: Balai Penelitian Pasca Panen.
Mardiana M, Y. Yusniar, A. Aminah, and Y. Yunanto, “Fauna Dan Tempat Perkembangbiakan Potensial  Nyamuk  Anopheles  Spp  Di  Kecamatan  Mayong,  Kabupaten  Jepara,  Jawa Tengah,” Media Penelitian dan Pengembangan Kesehatan , vol. 15, no. 2 Jun, 2005. Munhoz  V.  M.,  Longhinia  R.,  Souzab  J.R.P.,  Zequic  J.,  Mellod  E.,  Lopesa  G.,  Mello  J.P., 2014.  Extraction  of  flavonoids  from  Tagetes  patula:  process  optimization  and screening for biological activity. Rev. Bras. Farmacogn.Vol. 24 No.5.
Nindatu  dan  Noya.  2018  Uji  Efektivitas  Daya  Tolak  Seduhan  daun  Cengkeh  ( Syzygium aromaticum L.) Terhadap nyamuk Anopheles sp. 10 (2) : 17-20. Novizan I. “Membuat dan Memanfaatkan Pestisida Ramah Lingkungan,” Agromedia Pustaka. Jakarta , 2002.
Nurdjannah.  2004.  Diversifikasi  Penggunaan  Cengkeh. Balai  Besar  Penelitian  Dan Pengembangan Pasca Panen Pertanian . 3 (2) : 61-70
Putri Z.A, E. Wydiamala, L. Y.Budiarti. 2022. Efektivitas Repelen Ekstrak Kulit Buah Limau Kuit ( Citrus hystrix DC) Terhadap Nyamuk Aedes aegypti . Homeostasis, Vol. 5 No. 1, Pp: 145-150
Rattanarithikul  R  dan  B  Harrison.  2005.  Ilustrated  Keysto  the  Mosquitoes  of  Thailand  I. Background;  Geografic  Distribution;  List  of  Genera,  Subgenera,  dan  species;  dan  a key to the Genera. The Southeast Asian Journal Of Tropical Medicine . 36 (1) Riyanto  R.  2012.  Mengenal  Cengkeh  dan  Manfaatnya. Prosiding  Seminar  Nasional Tengembangan Teknologi Pertanian. Pp: 271-277
Sanjaya Y dan T. Safaria. 2006 . Toksisitas Racun  Laba – laba Nephila sp. Pada Larva Aedes aegypti L. Biodiversitas . 7(2): 191-194
Sembel D. 2009. Entomologi Kedokteran. Yokyakarta: Penerbit Andi. Pp: 49-105 Sunaryo. 2001. Bionomik vector Malaria di Kabupaten Banjarnegara. SLPV, Banjarnegara Kes Malaria di Kabupaten Banjarnegara.SLPV. Banjarnegara. Jurnal Biologi . 2 (4): 25-34. Thomas A.N.S. 2007. Tanaman Obat Tradisional. Yogyakarta: Kanisus. Pp: 22-24.
Waluyo  S.  2004.  Aneka  Tip  Obat  Alami  Dalam  Buah  dan  Sayuran  (1008).  Jakarta  :  Elex Media Kompotindo. Pp: 51-52.
Wahyudi T. 2008 . Biokompatibilitas Semen Zinc Oxide Eugenol. Jakarta: USU Library. Yunita  L.  2014.  Potensi  Ekstrak  Daun  Cengkeh  ( Syzygium  aromaticum L.)  Dalam  Bentuk Lotion  Sebagai  Zat  Penolak  Terhadap  Nyamuk Aedes  Aegepty .  Skripsi.  Universitas Politeknik Negeri Lampung. Bandar Lampung.
Zulchi  T.P.H.,  dan  A.R.  Nurul.  2006.  Pengaruh  Berbagai  Organ  Tanaman  Dan  Lama Penyulingan Terhadap Kuantitas Dan Kualitas Minyak Atsiri Cengkeh ( Caryo phallus aromaticus ). Skripsi Universitas Sebelas Maret. Surakarta.