Tepung Tempe Meningkatkan Jumlah Eritrosit Tikus Putih (Rattus Norvegicus) Jantan Galur Wistar yang Diberi Paparan Asap Rokok
Tempe Flour Increase The Amount of Erythrocytes of White Male Rat (Rattus norvegicus) Wistar Strain Induced by Cigarette Smoke
I Made Subhawa Harsa Departemen Ilmu Faal, Fakultas Kedokteran Universitas Wijaya Kusuma Surabaya Jalan Dukuh Kupang XXV/54 Surabaya, Indonesia, 60225 e-mail korespondensi: madesubhawah@gmail.com

## Abstrak
Asap rokok merupakan salah satu sumber radikal bebas bagi tubuh. Radikal bebas yang terdapat dalam  asap  rokok  diantaran ya  adalah  radikal  hidroksil  (•OH).  Radikal  hidroksil  akan  memacu kerusakan  eritrosit.  Antioksidan  adalah  zat  yang  dapat  menangkal  radikal  bebas.  Sumber antioksidan  alami  kini  banyak  dikembangkan,  salah  satunya  adalah  tempe  karena  mengandung zat antioksidan seperti karoten, vitamin E, isoflavon dan antioksidan faktor II yang cukup tinggi. Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  pengaruh  pemberian  tepung  tempe  terhadap jumlah  eritrosit  tikus  putih  ( Rattus  norvegicus) jantan  galur  wistar  yang  diberi  paparan  asap rokok. Penelitian bersifat eksperimental murni yang menggunakan metode post-test only-control group  design .  Sampel  penelitian  ini  adalah  tikus  putih  galur  Wistar  jantan  berumur  3-4  bulan sebanyak  30  tikus,  dengan  berat  badan  berkisar  180-220  gram.  Sampel  dibagi  menjadi  3 kelompok,  yaitu  kelompok  kontrol  (K1),  kelompok  perlakuan  1  (K2)  dan  kelompok  perlakuan  2 (K3), masing-masing kelompok terdiri dari 10 ekor tikus. Kelompok kontrol tidak diberi perlakuan khusus,  hanya  diberikanpakan  standard,  kelompok  perlakuan  1  diberi  pakan  standard  dan dipapar asap rokok, sedangkan kelompok perlakuan 2 diberi pakan standard, paparan asap rokok serta  asupan  tempe.  Analisis  data  menggunakan  Uji One  Way  Anova .  Hasil  uji  tersebut menunjukkan  signifikansi p-value =  0,0 36  yaitu  <  α  (0 ,05).  Hasil  ini  menunjukkan  pemberian tepung tempe meningkatkan jumlah eritrosit tikus putih ( Rattus norvegicus ) jantan galur Wistar yang diberi paparan asap rokok.
Kata kunci : asap rokok, radikal bebas, eritrosit, antioksidan, tempe

## Abstract
Cigarette smoke was one of the free radical sources for the body. Free radical contain in cigarette smoke  were  hydroxide  radicals  (•OH).  Hydroxide  radicals  would  cause  erythrocytes  damage. Antioxidants  were  substances  that  can  prevent  free  radicals.  Now,  natural  antioxidants  source has developed, one of that is tempe because it contains antioxidants substances such as carotene, Vitamin E, isoflavone, and factor II antioxidants. The aim of this study is knowing the influence of giving  tempe  flour  toward  the  amount  of  erythrocytes  of  white  male  rat  (Rattus  norvegicus) Wistar  strain  induced  by  cigarette  smoke.  The  experiment  used  a  post-test  only-control  group design method. The samples were white male rats Wistar strain aged of 3 to 4 months as much 30  rats  with  weight  around  180-220  gram.  The  samples  divided  into  three  groups,  that  were control group (K1), treatment group 1 (K2), and treatment group 2 (K3), each group consists of 10 rats. Control group was not given any treatment, it only got a standard feed, treatment group 1 got  treatment  and  it  was  induced  by  cigarette  smoke.  Furthermore,  treatment  group  2  got standard  feed,  it  was  induced  by  cigarette  smoke  and  was  given  tempe.  Analysis  of  data  used one-way  anova  showed  the  significance  p-value  =  0,036  that  was  < α (0,05).  The  result  showed giving  tempe  flour  increase  the  amounts  of  erythrocytes  of  white  male  rat  (Rattus  norvegicus) Wistar strain which was induced by cigarette smoke.
Keywords : cigarette smoke, free radicals, erythrocytes, antioxidants, tempe

## Pendahuluan
Dewasa  ini,  kebiasaan  merokok  bukanlah hal  yang  tabu  lagi  bagi  masyarakat Indonesia.  Diperkirakan  jumlah  perokok  di dunia  sebesar  1,3  milyar  orang  dan kematian yang diakibatkan  rokok mencapai 4,9  juta  orang  pertahun  (WHO,  2010). Menurut  Global  Adults  Tobacco  Survey (GATS)  tahun  2011,  Indonesia  memiliki jumlah  perokok  aktif  terbanyak  dengan prevalensi 67% pada laki-laki dan 2,7% pada wanita  (Sirait  dkk.,  2002).  Asap  rokok merupakan salah satu sumber radikal bebas bagi  tubuh  (Tendra,  2003).  Salah  satu diant aranya  adalah  radikal  hidroksil  (•OH)
(Allen  dan  Tressini,  2000).  Radikal  hidroksil merupakan  salah  satu  jenis  radikal  oksigen yang paling  reaktif. Di  dalam tubuh, radikal hidroksil merusak makromolekul pembentuk sel seperti DNA, membran lipid,
dan protein (Aoshiba  dan Nagai, 2003). Hal ini  akan  memacu  kerusakan  sel.  Salah  satu sel  yang  dirusak  adalah  eritrosit  terutama pada  membrannya  yang  menyebabkan  lisis membran  sehingga  sel  akan  mati  (Widodo,
1995). Hal tersebut mengakibatkan turunnya  kadar  eritrosit  dan  perubahan bentuk  eritrosit  (Alviventiasari  dan  Rizka. 2012).
Antioksidan  adalah  zat  yang  menangkal radikal  bebas  khususnya  radikal  hidroksil sehingga  dapat  menghalangi  kerusakan eritrosit sebelum waktunya. Sumber antioksidan alami kini banyak dikembangkan, salah satunya adalah kacang kedelai  beserta  olahannya  yaitu  tempe. Tempe mengandung zat antioksidan seperti karoten, vitamin E, isoflavon, dan antioksidan  faktor  II  yang  cukup  tinggi
(Cahyadi,  2006).  Isoflavon  sendiri  berfungsi menghentikan  proses  pembentukan  radikal bebas. Berdasarkan uraian tersebut peneliti tertarik untuk meneliti
“Pengaruh
Pemberian Tempe terhadap Jumlah Eritrosit Tikus Putih ( Rattus Norvegicus ) Jantan Galur Wistar yang Diberi Paparan Asap Rokok”.

## Metode
Penelitian  ini  adalah  penelitian  analitik eksperimental  murni  dengan  menggunakan rancangan randomized  post  test  only control  group  design (Zainuddin,  2000).
Sampel  dalam  penelitian  ini  adalah  tikus putih ( Rattus norvegicus ) galur wistar jantan dewasa dengan berat badan sekitar 180-220 gram. Sebanyak 30 tikus dibagi secara acak dalam  3  kelompok  (Federer,  1991).  Tiap kelompok  terdiri  dari  10  ekor  tikus  diberi perlakuan  selama  30  hari.  Kelompok  (K1): diberi  pakan  standard,  Kelompok  (K2): diberi  pakan  standard,  dipapar  asap  rokok filter sebanyak 4 batang/hari, dua kali sehari pada  pagi  hari  pukul  9.00  WIB  dan  sore pukul  15.00  WIB  tanpa  diberikan  asupan tepung tempe,  Kelompok (K3): diberi pakan standard, dipapar asap rokok filter sebanyak 4 batang/hari, dua kali sehari pada pagi hari pukul  09.00 WIB dan sore pukul 15.00 WIB serta  diberikan  asupan  tepung  tempe sebanyak  1  mL  30  menit  setelah  dipapar asap  rokok  (Rachim,  2012).  Analisis  data dilakukan dengan menggunakan uji ANOVA (Prawira, 2006).

## Hasil Penelitian
Hasil  analisis  rerata  ( )  eritrosit  pada kelompok  K1,  K2  dan  K3  disajikan  dalam Tabel 1.
Tabel  1.  Deskripsi  Rata-Rata  Eritrosit
Perkelompok Perlak uan N Mean Std. Deviation  Std. Error K1 10 4,5620  0,56672  0,17921 K2 10 4,3920  0,39276  0,12420 K3 10 5,0120  0,58721  0,18569 Total  30 4,6553  0,57039  0,10414
Analisis  analitik  dengan  uji  Analisis  Varians Satu  Arah  ( One  Way  Anova )  ditunjukkan pada Tabel 2.
Tabel  2.  Analisis  Varians  Satu  Arah  ( One
Way Anova ) Variabel Penelitian F P Keterangan Eritrosit (U/L) 3,754  0,036 Ada perbedaan

## Pembahasan
Berdasarkan  Tabel  1  diketahui  bahwa  rata- rata  nilai  eritrosit  tertinggi  ada  pada
kelompok  yang  diinduksi  asap  rokok  dan diberi  perlauan  tepung  tempe  (K3),  yaitu sebesar  5,012  juta/mm 3 dan  nilai  eritrosit terendah ada pada kelompok yang diinduksi asap  rokok  (K2),  yaitu  sebesar  4,392 juta/mm 3 .  Hasil  uji  analitik  dengan  uji Analisis Varians Satu Arah ( One Way Anova ) pada  tabel  2  menunjukkan  signifikansi p- value =  0,036  yaitu  <  α  (0 ,05),  maka pemberian  tepung  tempe  meningkatkan jumlah eritrosit tikus putih ( rattus norvegicus )  jantan  galur  wistar  yang  diberi paparan asap rokok secara signifikan.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa terdapat  perbedaan  yang  bermakna  rata- rata  eritrosit  antar  kelompok  perlakuan  2 (K3)  dengan  kelompok  kontrol  (K1)  dan kelompok  yang  diberi  paparan  asap  rokok (K2) , terbukti  dengan  tingkat  signifikansi  di bawah  0,05.  Asap  rokok  merupakan  salah satu  sumber  radikal  bebas  bagi  tubuh. Radikal  bebas  yang  terdapat  dalam  asap rokok  jumlahnya  sangat  banyak,  salah  satu di  antaranya  adalah  radikal  hidroksil  (•OH) (Leventhal & Cleary, 1980). Radikal hidroksil merupakan  salah  satu  jenis  radikal  oksigen yang paling  reaktif. Di  dalam tubuh, radikal hidroksil merusak makromolekul pembentuk sel seperti DNA, membran lipid, dan  protein.  Hal  ini  akan  memacu kerusakan  sel.  Salah  satu  sel  yang  dirusak adalah eritrosit terutama pada membrannya  yang  akan  menyebabkan  lisis membran  sehingga  sel  akan  mati  (Widodo, 1995). Menurut Sauriasari (2006) membran eritrosit  merupakan  lapisan  lipid  bipolar yang  mengandung  protein  struktural  dan kontraktil. Membran eritrosit sangat rentan terhadap  serangan  radikal  hidroksil.  Jika radikal  hidroksil  menyerang  membran eritrosit, maka fluiditas membran terganggu yang  dapat  menyebabkan  lisis  bahkan kematian  sel.  Hal  tersebut  mengakibatkan turunnya  kadar  eritrosit  dan  perubahan bentuk  eritrosit,  yang  akhirnya  dapat berpengaruh pada penurunan kadar haemoglobin  darah  sehingga  tubuh  akan kekurangan oksigen (Murray, 2009). Apabila hal ini berlangsung lama, bisa menimbulkan kematian  bagi  penderitanya.  Oleh  karena itu, tubuh memerlukan senyawa yang dapat
melindungi  sel  dari  serangan  radikal  bebas ini, salah satunya adalah antioksidan.
Antioksidan adalah zat yang dapat menangkal  radikal  bebas  khususnya  radikal hidroksil  dengan  cara  memberikan  salah satu  elektronnya  kepada  radikal  hidroksil sehingga  dapat  menghalangi  kerusakan eritrosit  sebelum  waktunya.  Antioksidan sendiri  dapat  diperoleh  secara  alami maupun sintetis atau kimiawi. Secara alami dapat  diperoleh  dari  sayur-sayuran,  buah- buahan  dan  kacang-kacangan,  sedangkan secara kimiawi dengan sintetis di laboratorium.  Sumber  antioksidan  yang alami  kini  banyak  dikembangkan,  salah satunya  adalah  kacang  kedelai  beserta olahannya yaitu tempe. Tempe mengandung zat antioksidan seperti
karoten,  vitamin  E  dan  isoflavon,  serta antioksidan  faktor  II  yang  cukup  tinggi (Puslitbang  Gizi,  1991).  Isoflavon  sendiri berfungsi  untuk  menghentikan  proses pembentukan radikal bebas
(Pawiroharsono, 2001).
Isoflavon  pada  tempe  mencegah  aktivitas sel  menjadi  sel  kanker,  dapat  memperbaiki metabolisme  hormon  steroid,  menurunkan kolesterol dan trigleserida, serta melindungi sel-sel  hati  dari  paparan  senyawa  beracun (Koswara,  2006).  Selain  itu  isoflavon  juga berfungsi  memperlancar  sirkulasi  darah. Isoflavon  mempunyai  beberapa  efek  posifif antara  lain  anti  adrenalin,  yang  membuat jantung  bekerja  lebih  santai,  di  samping anti-peradangan  serta  mencegah  ketidak teraturan  denyut  jantung  (Ganong,  1995). Khususnya isoflavon pada tempe yang aktif sebagai  antioksidan,  yaitu  Antioksidan Faktor-II,  terbukti  berpotensi  sebagai  anti- konstriksi  pembuluh  darah  dan  juga berpotensi  menghambat  pembentukan  LDL ( low  density  lipoprotein )  (Guyton  and  Hall, 2006).  Antioksidan  Faktor-II  dipandang sebagai  senyawa  yang  sangat  prospektif sebagai  antioksidan  (10  kali  aktivitas  dari vitamin  A  dan  sekitar  3  kali  dari  senyawan isoflavon aglikon lainnya pada tempe) serta memiliki  aktivitas  antihemolitik,  sehingga lisis sel dapat dihindarkan (Jha, 1985).
Tempe  juga  banyak  mengandung  vitamin B12  (cyanokobalamin).  Vitamin  B12  sangat berguna  untuk  membentuk  sel-sel  darah merah  dalam  tubuh,  sehingga  dapat
mencegah  terjadinya  penyakit  anemia (kurang  darah).  Selain  itu,  tempe  juga banyak  mengandung  mineral,  kalsium  dan fosfor (Supriyono, 2003).

## Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa  pemberian  tepung tempe  meningkatkan  jumlah  eritrosit  tikus putih  ( Rattus  Norvegicus) jantan  galur wistar yang diberi paparan asap rokok.

## Daftar Pustaka
Aoshiba  dan  Nagai,  2003,  Oxidative  Stress, Cell  Death,  and  Other  Damage  to Alveolar  Epithelial  Cells  Induced  by Cigarette  Smoke, Tobacco  Induced Diseasse. 1(3):219-226.
Allen,  R.G.  dan  Tressini,  M.,  2000, Oxidative
Stress  And  Gene  Regulation ,  Free  Radical BiolMed.
Alviventiasari, S. dan Rizka. 2012, Pengaruh Pemberian  Dosis  Bertingkat  Jus Mengkudu  ( Morinda  citrifolia  L ) terhadap Jumlah Eritrosit Tikus Galur Wistar  ( Rattus  norvegicus )  yang Diberi Paparan Asap  Rokok, Fakultas
Kedokteran  Universitas  Diponegoro, Semarang, Karya Tulis Ilmiah. Prawira,  B.  P.,  2006,  SPSS  13.0  Terapan Riset Statistik Parametrik, Yogyakarta, Andi Offset. Cahyadi,  S.  2006. Analisis  dan  Aspek Kesehatan Bahan Tambahan Pangan .  Cetakan  Pertama.  PT.  Bumi
Aksara. Jakarta.
Federer,  W.  1991, Statistics  and  society: data  collection  and  interpretation , 2nd ed. New York, Marcel Dekker.
Guyton,  A.C.  and  Hall,  J.E.  2006. Transport of  Oxygen  and  Carbon  Dioxide  in Blood and Tissue Fluids. In: Textbook of  Medical  Physiology .  11th  ed. Pennsylvania, Elsavier Saunders: 509.
Tendra,  H.,  2003,  Merokok  dan  Kesehatan, http://id.scribd.com/doc/231849710 /rokok, 12 Juli 2014.
Jha,  H.C.  1985. Novel  Isoflavanoids  and  It’s Derivates, New Antioxydant Derived  from  Fermented  Soybean (Tempeh). Asian  Symposium  Non- salted Soybean Fermentation, Tsukaba, Japan, July 14-16. Koswara, S. 2006, Isovlavon Senyawa Multi- Manfaat Dalam Kedelai, Ebookpangan.com, Bogor. Leventhal,  H.,  &  Cleary,  P.  D.  1980. The smoking  problem:  A  review  of research  and  theory  in  behavioral risk modification . Psychological Bulletin. 88:370-405. Sirait, M. A. dkk, 2002, Perilaku Merokok di Indonesia, Buletin Penelitian Kesehatan . 30(3):139 – 152.
Murray,  R.K.,  2009, Sel  darah  merah  dan putih , Biokimia harper, Ed 25, EGC, Jakarta, Halaman 727-3.
Pawiroharsono,  S.  2001, Prospek  dan Manfaat  Isoflavon  untuk  Kesehatan ,
Direktorat  Teknologi  Bioindustri, Badan  Pengkajian  dan  Penerapan Teknologi.
Puslitbang  Gizi.  1991,  Komposisi  Zat  Gizi Pangan Indonesia Depkes RI, Dir. Bin. Gizi Masyarakat dan Puslitbang Gizi.
Rachim, M., 2012, Pengaruh Pemberian Jus Mengkudu  ( Morinda  citrifolia  L ) dengan  Pemberian  Dosis  Bertingkat terhadap  Jumlah  Trombosit  pada Tikus  Galur  Wistar  yang  Terpapar Asap  Rokok,  Fakultas  Kedokteran Universitas  Diponegoro,  Semarang, Karya Tulis Ilmiah.
Sauriasari, R. 2006. Mengenal dan Menangkal Radikal Bebas. Retrieved on 20 Apr 2006 00:58:30 GMT. Di akses tanggal 22 Juli 2014. Supriyono,  2003,  Cara  Pembuatan  Tempe.
http://202.152.31.170/modul/pert anian/agroindustri/agroindustripan gan/  memproduksi  tempe.pdf, Trubus  Agriwidya,  Jakarta,  17  Juli 2014.
Widodo,  MA.  1995. Efek  Pemicu  Radikal Bebas dan Vitamin E pada Diabetes
Komplikasi  Pembuluh  Darah  Tikus Diabetes .Laporan  Penelitian  Hibah
Bersaing 1992-1995. Malang,
Fakultas  Kedokteran  Universitas Brawijaya, Malang.
Ganong,  W.  F.  1995. Fisiologi  Kedokteran. Edisi 14, EGC, Jakarta. World Health Organization.  2010. Data and Statistics of Stroke 2010, http://www.who.int/stroke/wntd/20 10/statisticalreports/en /index.html/, Diakses 12 Juli 2014. Zainuddin. 2000. Metode Penelitian, Program  Pasca  Sarjana,  Universitas Airlangga. Surabaya.