GAMBARAN HISTOPATOLOGI PARU PADA MENCIT ( Mus musculus ) YANG

## DIPAPAR ASAP ROKOK KRETEK AKIBAT PENGARUH
PEMBERIAN INFUSA TEH HIJAU ( Camellia sinensis )
Rondius Solfaine 1 , Olan Rahayu Puji Astuti Mussa 1 , Apriska Ayuningtias 1 , Dyah Widhowati 1 *
1 Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Wijaya Kusuma Surabaya *Email : dyahwidho@gmail.com

## Abstract
This  study  was  conducted  to  determine  the  effect  of  antioxidant  administration  from green  tea  infusion  (Camellia  sinensis)  on  damage  to  the  histological  structure  of  the  lung exposed  to  clove  cigarette  smoke  in  mice  (Mus  muscullus).  Free  radicals  in  cigarette  smoke such as tar, nicotine, and carbon monoxide can cause various damages to the lung organs due to  oxidative  stress  caused  by  the  reaction  of  ultrafine  particles  with  cells.  A  total  of  27  mice were  taken  from  the  Biochemical  Laboratory  of  Airlangga  University,  Surabaya.  In  this  study mice  (Mus  muscullus)  were  exposed  to  kretek  cigarette  smoke  in  the  smoking  chamber  for  15 minutes in a period of 2 weeks, used 2 variants of antioxidant doses of green tea infusion of 0.45 gr to 0.6 gr. After the treatment was completed, the preparation of the mice's pulmonary organ preparations  and  damage  to  the  structure  of  the  lung  organ  were  observed  in  9  visual  fields. The  results  showed  that  there  was  a  relationship  between  the  amount  of  cigarette  smoke exposed  and  damage  to  the  lung  organs  of  mice  when  given  antioxidant  green  tea.  The administration of green tea antioxidants reduced inflammation of the lung organ infiltration of inflammatory cells by 44%, edema by 55%, and destruction of septa alveoli by 88%.
Keywords :  Green  tea  (Camellia  sinensis),  mice  (Mus  muscullus),  cell  infiltration,  edema, destruction

## PENDAHULUAN
Merokok  sebenarnya  tidak  memberikan efek  yang  baik  bagi  tubuh,  namun  karena kandungan  rokok  yang  bersifat  adiktif sehingga  banyak  orang  yang  susah  berhenti merokok.    Efek  buruk  yang  terlihat  secara langsung  dari  asap  rokok  menyebabkan batuk  maupun  sesak  ketika  terhirup  asam rokok. Terdapat 7.000 bahan kimia ditembakau,  dan  lebih  dari  250  racun  itu menjadi  karsinogenik.Polisiklik  Aromatik Hidrokarbon  (PAH),  kadmium  dan  berilium (logam  beracun),  hidrogen  sianida,  karbon monoksida,  dan  amonia  (Batubara  dkk, 2013).
Asap  termasuk  radikal  bebas  yang sering  terpapar  pada  tubuh  kita,  dan  sampai saat  ini  tidak  ditemukan  cara  efektif  untuk mencegah  maupun  memperbaiki  kerusakan akibat  paparan  asap  rokok.  Radikal  bebas masuk  dan  merusak  sel  jaringan  dalam tubuh, terutama merusak organ tubuh seperti paru.  Proses  pembentukan  radikal  bebas dalam  tubuh  berasal  dari  reduksi  oksidasi
biokimiawi  yang  melibatkan  oksigen  dan merupakan  bagian  dari  proses  metabolisme sel normal.
Teh  hijau  ( Camelia  sinensis) adalah jenis tanaman herbal dari Cina. Tanaman ini merupakan  tanaman  yang  dibudidayakan  di Asia  Tenggara  sebagai  bahan  baku  obat tradisional. Kadungan polifenol dalam jumlah  yang  tinggi    dapat  memperbaiki fungsi  organ  dan  sistem  pertahanan  tubuh,
seperti flavonol, flavones, flavonem isoflavon,  antosianin  dan  katekin.Sebagai bahan  bioaktif,  antosianin  dan  katekin berfungsi menangkap radikal bebas sehingga dapat  menghambat  terjadinya  kerusakan pada membran sel . (Zhao, et al ., 2019).

## MATERI DAN METODE
Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Biokimia Fakultas Kedokteran Universitas Airlangga Surabaya dan pembuatan  preparat  histopatologi  akan dilakukan di Fakultas Kedokteran Universitas  Airlangga  Surabaya.  Penelitian
dilaksanakan  pada  29  Mei  sampai  12  Juni 2020.
Penelitian  ini  bersifat  eksperimental laboratorium  murni  dengan  memberikan perlakuan terhadap sampel kemudian diobservasi dan dilakukan pengambilan data. Penelitian  ini  dilakukan  tanpa  pengulangan data  dengan  P0  sebagai  kelompok  kontrol, P1  sebagai  kelompok  perlakuan  dimana mencit  diberikan  infusa  the  hijau  peroral dengan  dosis  1  dan  dipapar  asap rokok,  dan P2  sebagai  kelompok  dimana  mencit diberikan  infusa  the  hijau  secara  peroral dengan  dosis  2  dan  dipapar  asap  rokok. Sampel  mencit  terdiri  dari  27  ekor  mencit, yang  diperoleh  dari  Laboraturium  Biokimia Universitas  Airlangga  Surabaya  dibagi menjadi 3 kelompok, masing-masing kelompok  terdiri  dari  9  ekor  mencit. Dilakukan  sortir  jenis  kelamin  jantan  dan penimbangan  mencit  untuk  penentuan  dosis dan perlakuan.
Pada  percobaan  ini  pemberian  seduhan teh  hijau  pada  mencit  dihitung  dengan menggunakan  tabel  konversi  tikus  ke mencit.  Nilai  konversi  dari  tikus  ke  mencit adalah  0,14,  sehingga  diperoleh  dosis seduhan  daun  teh  hijau  untuk  mencit,  yaitu 0,108  x  0,14  =  0,015  gr/bb/hari  (Anindita, 2012).
Dilakukan percobaan dengan P0 sebagai kontrol,  kelompok  ini  hanya  diberikan makan  dan  minum  secara  ad  libitum. Kelompok  P1  sebagai  perlakuan  diberikan infusa  teh  hijau  dengan  dosis  1  (0,015 gr/bb/hari)  secara  peroral  menggunakan spuit  1cc,  kemudian  dilakukan  pemaparan asap  rokok  sebanyak  satu  batang  selama  14 hari.  Kelompok  P2  sebagai  perlakuan diberikan  infusa  teh  hijau  dengan  dosis  2 (0,020 gr/bb/hari)
secara
peroral
menggunakan
spuit 1cc, kemudian dilakukan pemaparan asap rokok sebanyak 1 batang  dalam  sehari  selama  14  hari. Kemudian  dilakukan  euthanasi  hari  ke  15 dan dibuat preparat histopat.
Analisis data dilakukan dengan menggunakan  data  semi  kuantitatif  metode skoring,  untuk  membedakan  perlakuan dengan  kontrol  dilakukan  analisis  statistik Kruskal-Wallis dan  dilanjutkan  dengan analisis Mann  Whitney untuk  membedakan
perbedaan  antar  kelompok,  dengan  tingkat kepercayaan signifikasi.

## HASIL
Tabel  1. Rata-rata  Skoring  Histopatologi dari data Kruskal Wallis dan Mann Whitney Perlakuan Rata-rata skor ± SD Sel radang P0 0,0 a ± 0,0 P1 3,0 b ± 0,0 P2 2,4 c ± 0,7 P0 0,0 a ±0,0 Edema P1 2,1 b ±0,3 P2 1,3 b ± 1,0 P0 0,0 a ± 0,0 Destruksi P1 1,3 b ± 1,0 P2 0,6 b ± 0,9
Keterangan  :  Huruf  beda  di  belakang  nilai rata-rata  menunjukkan  perbedaan  yang sangat nyata (P < 0,01).
Hasil superscrip dari infiltrasi sel radang dan  edema  menujukkan  perbedaan  yang sangat  nyata  antara  nilai  mean  dan  skor defiasi  dengan  nilai  p  <  0,01.  Sedangkan untuk hasil superscrip dari destruksi menujukkan  perbedaan  yang  tidak  berbeda nyata  antara  nilai  mean  dan  skor  defiasi dengan  nilai p < 0,05. Nilai p adalah derajat probabilitas. Berikut adalah gambaran mikroskopis  paru  dengan  pemberian  infusa teh hijau yang dipapar asap rokok
Gambar 1. infiltrasi sel radang (Pewarnaan HE; Pembesaran 400x)
Gambar  2.  edema  (Pewarnaan  HE;
Pembesaran 400x)
Gambar  3.    Destruksi  septa  alveolus (Pewarnaan HE; Pembesaran 400x)

## PEMBAHASAN
Berdasarkan data skoring yang diperoleh  menunjukkan  kerusakan  struktur histologis  paru  mencit  berupa  infiltrasi  sel radang  mengalami  penurunan  44%,  edema mengalami  penurunan    55%,  dan  destruksi septa  alveolus  mengalami  penurunan  88%. Hal  ini  menunjukkan  bahwa  zat  yang terkandung pada teh hijau mampu memberikan  efek  proteksi  terhadap  struktur histologis  paru  mencit  yang  dipapar  asap rokok.Data  yang  diperoleh  dari  penelitian yang  telah  dihitung  dengan  uji Kruskal Wallis dan Mann  Whitney membuktikan adanya  pengaruh  pemberian  teh  hijau terhadap  struktur  histologis  paru  yang dipapar asap rokok kretek pada mencit. Pada penelitian  ini  kerusakan  histologis  paru mencit  dinilai  berdasarkan  adanya  infiltrasi sel  radang,  edema  dan  destruksi  septum
alveolus. Dari hasil uji statistik, menunjukkan  perbedaan  yang  bermakna antara  kelompok  kontrol  dan  kelompok perlakuan  1,  kelompok  perlakuan  1  dengan kelompok perlakuan 2. Oksidan  yang  terkandung  pada  asap rokok  menyebabkan  kerusakan  oksidatif yang  signifikan  yang  disebabkan  oleh ketidakseimbangan  antara  protease  dan  anti protease. Proteolisis dan  kerusakan oksidatif dapat  menimbulkan  kerusakan  dinding alveolus  yang  lama-kelamaan  merusak seluruh  organ  paru.  Menurut  Ravindranath, N.H.,  dan  Ravindranath,  M.H  (2011) mengungkapkan  bahwa  EGCG  merupakan polifenol  yang  paling  banyak  dalam  teh hijau  dan  memiliki  aktivitas  anti  inflamasi serta  anti  proliferasi  yang  poten,  selektif dalam  menghambat  pertumbuhan  sel  dan menginduksi  terjadinya  apoptosis  pada  sel kanker  tanpa  menganggu  sel  yang  normal. EGCG  mampu  menekan  aktivasi  NF- kappaB  sehingga  dapat  menekan  terjadinya inflamasi, proliferasi, dan angiogenesis yang didinduksi  oleh  asap  rokok.  EGCG  yang diberikan  sebagai pre  treatment pada  sel epitel  memberikan  efek  penghambatan terhadap proses inflamasi dan proliferasi.

## KESIMPULAN
Pemberian  teh  hijau  dengan  dosis  P2 0,020gr/bb/hari dalam 1  ml aquadest selama 14  hari  berturut-turut  dapat  mencegah kerusakan  struktur  histologist  alveolus  paru mencit  yang  disebabkan  oleh  paparan  asap rokok.Pemberian paparan asap rokok selama 14  hari  menyebabkan  kerusakan  struktur histologis paru mencit  yang ditandai  dengan adanya  destruksi  septum  alveolar,  infiltrasi sel radang dan edema.

## DAFTAR PUSTAKA
Anindita,  R.,  Soeprobowati,  T.R.,  dan Suprapti, N.H., 2012. Potensi The Hijau (Camellia  sinensis  L.)  dalam  Perbaikan Fungsi  Hepar  Pada  Mencit  yang Diinduksi  Mono  Sodium  Glutamat (MSG).  Buletin  Anatomi  Fisiologi. Semarang: Universitas Diponegoro.
Jurnal Vitek Bidang Kedokteran Hewan Vol.10, November 2020
Aulia,  L.  E.  2010.  Stop  Merokok.
Yogyakarta : Garailmu. Bakhtiar,  A.,  Amran,  W.S.,  2016.  Faal Paru Statis. Departemen Pulmonologi  dan  Ilmu  Kedoktersn Respirasi. Fakultas Kedokteran Universitas  Airlangga.  J  Respirasi Vo. 2 No. 3. Batubara,  I.V.D.,  Wantouw,  B.,  dan Tendean, L., 2013.Pengaruh Paparan Asap Rokok Kretek Terhadap Kualitas Spermatozoa Mencit Jantan. J. e-Biomedik. 1(1): 331. Chaturvedula,  V.S.P.,  dan  Prakash,  I., 2011.  The  aroma,  taste,  color  and bioactive constituents of tea.J Medicinal Plants Research.Vol. 5(11). Eroschenko,  V.P.,  2012.  Atlas  Histologi diFiore Dengan Korelasi Fungsional, Edisi Ke-11. Ahli Bahasa,  Brahm  U  Pendid.  ;  Editor Edisi  Bahasa  Indonesia,  Didiek Dharmawan, Nella Yesdelita. Jakarta : EGC Fajar,  R.I.,  Wrasiati,  L.P.,dan  Suhendra, L.,  2018.  Kandungan  Senyawa Flavonoid Dan Aktivitas Antioksidan Ekstrak Teh Hijau Pada Perlakuan  Suhu  Awal  Dan  Lama Penyeduhan.  Jurnal  Rekayasa  dan Manajemen  Agroindustri  Vol.  6,
No.3, 196-202.
Habiburrohman,  D.,  dan  Sukohar,  A., 2018.Aktivitas Antioksidan dan Antimikrobial pada Polifenol Teh  Hijau.  J  Agromedicine  Unila 5(2): 587. Hidayat,  N.R.,  Ramadhan,  M.A.,  dan Rusli,  R.,  2016.  Analisis  Kadar Nikotin Rokok Herbal Indonesia.Buku  Prosiding  Seminar Nasional Kefarmasian Ke III. Fakultas Farmasi Universitas Mulawarman.  Samarinda,  20  –  21 April 2016. Hussain,  A.,  Dulay,  P.,  Rivera,  M.N., Aramouni,  C.,  dan  Saxena,  V.,  2019.
Neoplastic Pathogenesis  Asociated  with
Cigarette Carcinogens.
Joseph,  V.,  2016.  Efek  Akut  Merokok
Kretek  Terhadap  Fungsi  Ventrikel Kanan.J Biomedik. Vol. 8 No. 2(23-25). Kartika,  A.A.,  Siregar,  H.C.H.,  dan  Fuah, A.M.,  2013.  Strategi  Pengembangan Usaha Ternak Tikus (Rattus norvegicus) Dan Mencit (Mus musculus)  Di  Fakultas  Peternakan IPB.J Ilmu Produksi dan Tekhnologi  Hasil  Peternakan.Vol.  01 No. 3. Putra,  A.S.,  2019.  Pengaruh  Pemberian Ekstrak  Teh  Hijau  (Camellia  sinensis) Terhadap Gambaran Histopatologi Silia Pada  Trakea  Tikus  Putih  Jantan  Galur Sporague  Dawley  Yang  Dipapar  Uap Rokok  Elektronik.  [Skripsi].  Fakultas Kedokteran. Universitas Lampung Bandar Lampung. Putra,  A.S.,  2015.  Perbandingan  Efek  Asap Rokok Konvensional Dan Rokok Herbal  Terhadap  Kerusakan  Histologis Paru Mencit (Mus musculus). [Skripsi]. Fakultas Kedokteran. Universitas Muhammadiyah Surakarta. Putra,  Y.,  2014.  Pengaruh  Rokok  Teradap Jumlah Sel Spermatozoa Mencit Jantan (Mus musculus,  Strain  Jepang).  J Sainstek1 : 30 – 42. Putra,  A.I.,  2019.  Pengaruh  Paparan  Asap Rokok  Elektrik  Dan  Paparan  Asap Rokok Konvensional Terhadap Gambaran  Histopatologi  Paru  Mencit Jantan. [Skripsi].  Fakultas Kedokteran. Universitas Lampung. Rabb,  H.,  Griffin,  M.D.,  McKay,  D.B., Swaminathan,  S.,  Pickkers,  P.,  Rosner, M.H., Kellum, J.A., and Ronco, C., 2016.  Inflammation  in  AKI:  Current Understanding, Key Question, and
Knowledge  Gaps.  J  Am  Soc  Nephrol 27: 371-379.
Rani Dwi Nurjanah, “Pengertian Merokok dan Akibatnya”,http://ranidwi68.wordpr ess.com/2013/01/09/pengertian- merokok-dan akibatnya/,  diakses 16 Januari 2020.
Ravindranath,  N.H.,  and  Ravindranath,
.H.,    2011.  Green  tea  catechins suppress NF-ĸB- mediated inflammatory  responses:  relevance to nutritional management of
inflammation.  British  Journal  of Nutrition 105 : 1715-1717. Rohmani, A., Yazid, N., dan Rahmawati, A.A.,  2018.Rokok  Elektrik  dan Rokok Konvensional Alveolus Paru.Fakultas Kedokteran Universitas Muhammadiyah Semarang. Sofianto,  Hulfron.  2010.  Mengenal
Bahaya  Rokok  Bagi  Kesehatan. Bogor: Yudhistira. 56  halaman.
Solfaine, 2019. Patogenesis Dasar
Penyakit  Hewan.  Surabaya.  Hal.187 – 188. Tortora, Gerard, J., and Bryan Derrickson, 2012.Principle of Anatomy  and  Physiology.USA  : John Wiley and Sons Inc
Towaha, J., dan Balittri., 2013. Kandungan  Senyawa  Kimia  Pada Daun  Teh (Camellia sinensis).
Warta Penelitian dan Pengembangan Tanaman Industri 19(3): 13.
Tirtosastro,  S.,  dan  Murdiyati,  A.S.,
2010.  Kandungan  Kimia  Tembakau dan Rokok. Balai
Penelitian
Tanaman  Tembakau  dan  Serat, Malang.
Yildirim,  A.O.,  Muyal,  V.,  John,  G.R.,
Muller,  B.,  Seifart,  C.,  Kasper,  M., and Fehrenbach, H., 2010. Palifermin Induces Alveolar Maintenance Programs in
Emphysematous  Mice.  J  Respir Crit Care Med. 181: 705-706. Yusni.,  Husni,  T.,  dan  Achamd, T.H.,  2015. Aktivitas Polifenol Teh Hijau (Camellia sinensis (L) O. Kuntze) Sebagai Imunomodulator melalui Respons Supresi Imunoglobulin E (IgE) pada Rinitis Alergika. 47(3): 161. Yuslianti,  E.R.,  2018.  Pengantar  Radikal Dan Antioksidan. Yogyakarta. 4 – 5. Zhao,  C.N.,  Tang,  G.Y.,  Cao,  S.Y.,  Xu, X.Y.,  Gan,  R.Y.,  Liu,  Q.,  Mao,  Q.Q., Shang, A., and Li,  H.B., 2019. Phenolic Profiles and Antioxidant Activities  of  30  Tea  Infusions  from Green, Black, Oolong, White, Yellow  and  Dark  Teas.Sun  Yat-Sen University, Guangzhou,China.