Accredited by Ministry of Education, Culture,                                      DOI: https://doi.org/10.35799/jis.v23i1,45703 Research and Technology No: 105/E/KPT/2022         Available online at https://ejournal.unsrat.ac.id/v3/index.php/jis

## Analisis Kadar Hidrokuinon dan Asam Kojic Dalam Tiga Merek Dagang Body Lotion Menggunakan Kromatografi Cair Kinerja Tinggi
Yessy Dwi Anggraini 1) , Khoirul Anwar 2*) , Aqnes Budiarti 3)
1,3) Program Studi Farmasi, Universitas Wahid Hasyim, Semarang, Indonesia
2) Departemen Kimia Analisis dan Kimia Farmasi, Fakultas Farmasi Universitas Wahid Hasyim, Semarang, Indonesia
*) Corresponding author: anwarkhoirul174@gmail.com

## ABSTRAK
Pengobatan hiperpigmentasi dapat dilakukan dengan beberapa senyawa, diantaranya adalah kombinasi hidrokuinon dan asam kojic dalam sediaan kosmetik yang dianggap aman dan efektif.  Penelitian ini bertujuan untuk menganalisis kadar hidrokuinon dan asam kojic dalam tiga  merek  dagang body  lotion menggunakan  kromatografi  cair  kinerja  tinggi  (KCKT). Penelitian  menggunakan  KCKT  pada  panjang  gelombang  283  nm.  Fase  diam  yang digunakan adalah C 18 , dan fase geraknya adalah campuran asetonitril:aquabidest (20:80, v/v) dengan  laju  alir  1,0  mL/menit.  Uji  validasi  meliputi  uji  linieritas,  sensitivitas  (LOD  dan LOQ),  selektivitas,  presisi  dan  akurasi.  Metode  analisis  diaplikasikan  terhadap  3  sediaan body  lotion. Uji  linieritas  hidrokuinon  dan  asam  kojic  memenuhi  syarat  dengan  nilai r=0,999; LOD hidrokuinon 0,274 µg/mL; LOQ hidrokuinon 0,913 µg/mL; LOD asam kojic 0,420 µg/mL; LOQ asam kojic 1,401 µg/mL; uji sensitivitas dan uji selektivitas baik; uji presisi hidrokuinon dan asam kojic menghasilkan nilai %RSD ≤ 2%; uji akurasi hidrokuinon diperoleh  99,200-100,450%;  asam  kojic diperoleh  99,454-100,497%.    Kadar  hidrokuinon rata-rata pada body lotion merek A, B dan C masing-masing sebesar 0,854%, 0,470%,  dan 1,557%.  Kadar  asam  kojic  rata-rata  pada body  lotion merek  A,  B  dan  C  masing-masing sebesar 0,823%, 0,510%, dan 1,497%.   Kadar hidrokuinon dalam tiga merek dagang body lotion memenuhi  persyaratan  menurut  BPOM  karena  kurang  dari  sama  dengan  2%. Sedangkan kadar asam kojic memenuhi persyaratan yaitu kurang dari atau sama dengan 2%. Kata kunci: Asam kojic; kadar hidrokuinon; body lotion .

## Analysis of Hydroquinone and Kojic Acid Content in Three Brand Body Lotions Using High Performance Liquid Chromatography

## ABSTRACT
Treatment  of  hyperpigmentation  can  be  done  with  several  compounds,  including  a combination  of  hydroquinone  and  kojic  acid  in  cosmetic  preparations  that  are  considered safe and effective. This study aims to analyze the levels of hydroquinone and kojic acid in three trademarks of body lotion using HPLC.  The study used HPLC at a wavelength of 283 nm.  The  stationary  phase  used  was  C18,  and  the  mobile  phase  was  a  mixture  of acetonitrile:aquabidest (20:80, v/v) with a flow rate of 1.0 mL/min. Validation tests were carried  out,  including  linearity,  sensitivity  (LOD  and  LOQ),  selectivity,  precision,  and accuracy. The analytical method was applied to 3 body lotion preparations.  The linearity test of hydroquinone and kojic acid with a value of r = 0.999; Hydroquinone LOD 0.274 g/mL; LOQ of hydroquinone 0.913 g/mL; LOD of kojic acid 0.420 g/mL; LOQ of kojic acid 1,401 g/mL; selectivity test 1.5; the precision test of hydroquinone and kojic acid resulted in the  value  of  %RSD  2%;  hydroquinone  accuracy  99.200-100.450%;  kojic  acid  99.454-
100.450%. The content of hydroquinone body lotion brand A, 0.854%, B 0.470%, and C 1.557%, kojic acid content in body lotion brand A 0.823%, B 0.510%, and C 1.497%. The results  showed  that  all  the  results  of  the  validation  test  fulfill  the  requirements  of  the validation parameters and the results of the analysis of the content of hydroquinone and kojic acid in the three trademarks of body lotion fulfill the requirements.
Keywords: Body lotion; hydroquinone levels; kojic acid
(Article History:  Received 12-01-2023; Accepted 09-04-2023; Published 31-04-2023)

## PENDAHULUAN
Penggunaan body  lotion di  negara  tropis  penting  karena  dapat  memberikan perlindungan bagi kulit baik saat beraktivitas di dalam maupun di luar ruangan (Pamungkas F, 2016). Kebanyakan orang indonesia menilai wanita cantik dilihat dari warna kulit yang putih  dan  bercahaya,  faktor  yang  dapat  mempengaruhi  warna  kulit  salah  satunya  adalah hiperpigmentasi.  Penyebab  hiperpigmentasi  karena  zat-zat  kimia  pada  kosmetik,  paparan sinar matahari, faktor usia, pemakaian hormon kontrasepsi (Fithria, 2015).
Pengobatan hiperpigmentasi dapat dilakukan dengan beberapa senyawa, diantaranya adalah kombinasi hidrokuinon dan asam kojic dalam sediaan kosmetik yang dianggap aman dan  efektif  (Patel,  2014).  Hidrokuinon  sebagai  agen  pemutih  dengan  menghambat  enzim tyrosinase,  menghambat  pembentukan  atau  degradasi  melanosom,  serta  menghambat sintesis  DNA  dan  RNA  dalam  melanosit  (Fithria,  2015).    Latief  (2021)  menemukan kandungan hidrokuinon pada 3 krim malam dengan kadar ± 4,87%, ± 4,64%, dan ± 5,23% yang  dijual  di  kota  Tangerang.  Efek  samping  yang  terjadi  pada  penggunaan  hidrokuinon diatas 2% dapat menimbulkan kemerahan dan rasa terbakar pada kulit (BPOM RI, 2007).
Asam kojic dapat digunakan untuk mengurangi hiperpigmentasi dengan menghambat produksi tirosinase bebas dan juga antioksidan kuat (Lajis et al ., 2012). Keamanan sediaan topikal asam kojic pada konsentrasi 1% atau kurang dari 1%, karena dalam rentang ini asam kojic menunjukan sifat yang efektif dan aman. Efek samping yang terjadi jika konsentrasi lebih dari 2% yaitu menyebabkan iritasi, ruam, kulit meradang, gatal, dan nyeri (Saeedi et al ., 2019).
Metode analisis hidrokuinon dan asam kojic dapat dilakukan dengan berbagai cara, salah satunya yaitu dengan menggunakan KCKT yang ideal untuk mengukur berbagai zat dengan  kualitas  yang  sensitif  dan  selektif.  Kromatografi  cair  kinerja  tinggi  adalah  teknik pemisahan paling banyak digunakan karena mempunyai kelebihan yaitu sederhana, praktis, dan sensitif. Metode analisis harus divalidasi untuk memastikan bahwa parameter kerjanya cukup  mampu  untuk  mengatasi  masalah analisis.  Validasi metode  analis  dilakukan  untuk menjamin bahwa metode analis akurat, spesifik, reprodusibel, dan tahan pada kisaran analit yang akan dianalisis (Gandjar & Rohman, 2015).
Oyedeji  &  Akemu  (2017)  telah  melakukan  penetapan  kadar  pada  kosmetik  yang mengandung  hidrokuinon,  asam  kojic,  dan  asam  askorbat  dengan  metode  KCKT  yang dideteksi  dengan  panjang  gelombang  280  nm.  Fase  gerak  menggunakan  kalium  dihidro posfate (KH 2 PO 4 ) dengan campuran metanol (95:5, v/v). Fase diam menggunakan kolom C 18 (250 x 4,6 mm, 5 m). Kadar asam kojic telah memenuhi syarat 0,3-1,3%.
Berdasarkan latar belakang, maka dilakukan penelitian penetapan kadar hidrokuinon dan asam kojic dalam tiga merek dagang body lotion menggunakan kromatografi cair kinerja
tinggi yang bertujuan untuk mengetahui kadar hidrokuinon dan asam kojic dalam tiga merek dagang body lotion menggunakan KCKT.

## METODE PENELITIAN

## Bahan
Bahan yang digunakan untuk penelitian ini adalah standar hidrokuinon, standar asam kojic, aquabidest, asetonitril, metanol, dan tiga merek dagang sampel Body Lotion .

## Alat
Seperangkat  KCKT  yang  dilengkapi  dengan  detector  UV-VIS,  kolom  C 18 dengan dimensi  (125  x  4  µm),  spektrofotometer  UV-Visibel,  membran  filter  0,45  µm,  syringe, digital  ultrasonic cleaner ,  mikropipet,  timbangan analitik,  batang  pengaduk,  dan alat-alat gelas, pengolah data pada komputer.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Pengumpulan Sampel Body Lotion
Pengambilan sampel tergantung pada jenis produk body lotion dengan hidrokuinon dan asam kojic yang ada pada label. Sampel yang akan diteliti diperoleh melalui e-commerc e dengan  tiga  merek  dagang body  lotion yang  terpisah  dan  dipilih  karena  banyak  diminati pembeli, yang dilihat melalui ulasan komentar pembelian yang baik.

## Penentuan Panjang Gelombang Maksimum
Panjang  gelombang  maksimum  ditentukan  dengan  menggunakan  spektrofotometri UV  pada  panjang  gelombang  200-400  nm. Scanning yang  dilakukan  pada  penelitian  ini menghasilkan  tinggi  spektrum  pada  panjang  gelombang  maksimum  hidrokuinon 290  nm, sedangkan  tinggi  spektrum  pada  panjang  gelombang  maksimum  asam  kojic  268  nm, Pengukuran ini dilakukan karena KCKT yang digunakan memakai detektor UV sehingga perlu  diketahui  berapa  panjang  gelombang  dari  masing-masing  senyawa  yang  dianalisis. Rahmi (2017) telah melakukan penentuan panjang gelombang maksimum hidrokuinon, hasil yang  didapatkan  yaitu  290  nm.  Menurut  Chairman et  al .  (2009)  panjang  gelombang maksimum  asam  kojic  yaitu  269  nm,  Hasil  panjang  gelombang  yang  dianalisis menggunakan KCKT adalah titik potong antara hidrokuinon dan asam kojic yaitu 283 nm. Panjang gelombang 283 nm yang akan digunakan untuk menetapkan kadar hidrokuinon dan asam  kojic  dalam  tiga  merek  dagang body  lotion menggunakan  KCKT.  Hasil scanning panjang gelombang maksimum hidrokuinon dan asam kojic dapat dilihat pada gambar 1.
Gambar 1. Scanning penentuan panjang gelombang hidrokuinon dan asam kojic

## Optimasi Fase Gerak
Fase  gerak  yang  digunakan  pada  penelitian  ini  yaitu  asetonitril  dan  aquabidest. Optimasi fase gerak dilakukan pada panjang gelombang maksimum hidrokuinon dan asam kojic 283 nm dengan laju alir 1,0 mL/menit. Perbandingan fase gerak yang digunakan yaitu asetonitril : aquabidest (15:85, v/v) gambar (a) menghasilkan waktu retensi lebih cepat dan luas area yang lebih sempit. Selanjutnya perbandingan 20:80, v/v gambar (b), menghasilkan waktu  retensi  yang  relatif  lebih  cepat,  luas  area  yang  lebih  luas  dibanding  komposisi  fase gerak  lainnya,  dan  peaknya  simetris.  Sedangkan  perbandingan  (25:75,  v/v)  gambar  (c), menghasilkan  waktu  retensi  relatif  lebih  lama  dengan  luas  area  yang  lebih  sempit.  Hasil optimasi fase gerak dapat dilihat pada gambar 2 dan tabel 1 .
(a)
(b)                                           (c)
Gambar 2. Optimasi fase gerak (a) perbandingan 15:85 v/v. (b) perbandingan 20:80 v/v. (c)
perbandingan 25:75 v/v.Pembuatan Kurva Baku

## Tabel 1. Optimasi komposisi fase gerak
Komposisi Fase Gerak RT (menit) Luas Puncak Resolusi  Keterangan 15:85 2.167 3.347 460513 200594 0,772 20:80 1.610 2.457 561734 258360 1,694 Optimum 25:75 1.963 3.013 435184 202664 1,172
Data  hasil  fase  gerak  dengan  komposisi  asetonitril  dan  aquabidest  dengan perbandingan  (20:80,  v/v),  dipilih  sebagai  komposisi  optimum  karena  memiliki  waktu retensi lebih cepat, bentuk peak yang paling besar (Hermawan et al ., 2021). Nilai resolusi ≥ 1,5 yang menandakan pemisahan yang baik (Susanti, 2019), sehingga dipilih untuk analisis zat  dengan  perbandingan  fase  gerak  tersebut  dapat  memisahkan  analit  dengan  sempurna sehingga  terjadi  jarak  pemisahan  dan  tidak  terjadi  puncak  kecil  dibelakang  atau  disebut tailing.
Hasil regresi linier (r) harus memiliki nilai r dengan 5 titik dan lebih besar dari 0,98 dan nilai r mendekati 1 (Susanti, 2017). Persamaan regresi linier hidrokuinon yang terbaik adalah  replikasi  ketiga  dengan  nilai  regresi  linier  yaitu  Y  =  95167.6  +  48262.1X  dan koefisien korelasi (r) sebesar 0,9995. Sedangkan persamaan regresi linier asam kojic yang terbaik adalah replikasi ketiga dengan nilai regresi linier yaitu Y =210515 + 102395.6X dan nilai  (r)  sebesar  0,9993.  Persamaan  regresi  yang  didapat  tersebut  selanjutnya  digunakan untuk penetapan kadar hidrokuinon dan asam kojic dalam tiga merek dagang body lotion
(tabel  2  dan  3).  Hasil  grafik  kurva  baku  hidrokuinon  dan  asam  kojic  dapat  dilihat  pada gambar 3.

## Pembuatan Kurva Baku
Tabel 2. Kurva baku hidrokuinon Tabel 3. Kurva baku asam kojic No.  Konsentrasi (µg/mL) Luas Puncak Persamaan Regresi 2 193124
a = 128848 b = 430481 r  = 0,9958 4 291110 1. 6 378894 8 474956 10 582855 2 251417 a = 154626.9 b = 53794.55 r  = 0,9984 4 377423 2. 6 484381 8 591352 10 682398 2 193124 a = 95167.6
b = 48262.1 r  = 0,9995 4 291110 6. 6 379948 8 476438 10 583081
Gambar 3. Grafik kurva baku hidrokuinon dan Asam Kojic

## Validasi Metode Analisis

## Linieritas
Uji  linieriras  menggunakan  hasil  dari  persamaan  regresi  linier  terbaik  pada  kurva baku. Uji linieritas ditetapkan berdasarkan pada hubungan linier antara konsentrasi dengan luas  area  kromatogram.  Nilai  (r)  dikatakan  memenuhi  kriteria  baik  apabilai  nilai  r  yang diterima mendekati 1 (Susanti, 2017).
Hasil uji linieritas yang tertera pada tabel 2 dan 3.  Persamaan regresi linier terbaik hidrokuinon berdasarkan nilai r adalah replikasi ketiga dengan nilai regresi linier Y= 95167 +  48262.1X  dan  nilai  (r)  sebesar  0,9995.  Sedangkan  persamaan  regresi  linier  asam  kojic yang terbaik adalah replikasi ketiga dengan nilai regresi linier yaitu Y =210515 + 102395.6X dan  nilai  (r)  sebesar  0,9993,  hasil  koefisien  korelasi  mendekati  1  maka  uji  linieritas memenuhi  persyaratan  (Susanti,  2017).  Persamaan  garis  ini  selanjutnya  digunakan  untuk menghitung kadar hidrokuinon dan asam kojic dalam tiga merek dagang body lotion (tabel 2 dan 3).
No. Konsentrasi (µg/mL) Luas Puncak Persamaan Regresi 2 411734  a = 130949.8 b = 136245.1 r  = 0,9945 4 620622 1. 6 1017450 8 1215600 10 1476696
2 442725  a = 175153.6 b = 133406.4 r  = 0,9951 4 662857 2. 6 1039753 8 1248815 10 1483810
2
416114  a = 210515 b = 102395.6 r  = 0,9993 4 631424 3. 6 811699 8 1018848 10 1246358

## Sensitivitas
Perhitungan  LOD  dan  LOQ  pada  penelitian  ini  ditentukan  berdasarkan  persamaan garis  regresi  linier  hidrokuinon  yang  mempunyai  nilai  (r)  terbaik  dengan  Y=  95167.6  + 48262.1X dan r = 0,9995, sedangkan persamaan garis regresi linier asam kojic (r) terbaik dengan Y = 210515 + 102395.6X dan r = 0,9993. Hasil perhitungan diperoleh nilai LOD hidrokuinon  sebesar  0,274  µg/mL  dan  LOQ  sebesar  0,913  µg/mL,  sedangkan  nilai  LOD asam kojic sebesar 0,420 µg/mL dan LOQ sebesar 1,401 µg/mL. Semakin kecil nilai LOD dan LOQ maka semakin sensitif suatu metode analisis tersebut (Gandjar & Rohman,  2015).

## Selektivitas
Selektivitas  sering  kali  dinyatakan  sebagai  derajat  penyimpangan  metode  yang dilakukan terhadap sampel yang mengandung metode yang dilakukan terhadap sampel yang mengandung  bahan  lain.  Selektifitas  dinyatakan  berdasarkan  resolusi  (r)  (Susanti,  2017). Kromatogram hidrokuinon dan asam kojic dapat dilihat pada gambar 4.
Gambar 4. Kromatogram hidrokuinon dan asam kojic
Hasil  kromatogram  hidrokuinon  dan  asam  kojic  dalam  tiga  merek  dagang body lotion, dapat dilihat hanya peak asam kojic pada kromatogram pertama dan hidrokuinon pada kromatogram kedua yang terlihat sedangkan peak komponen lain tidak terlihat. Nilai r yang diperoleh yaitu 2,415, dengan demikian dapat disimpulkan bahwa metode analisis KCKT yang digunakan memiliki selektifitas yang baik dengan memperoleh nilai r ≥ 1,5 dan mampu menganalisis senyawa hidrokuinon dan asam kojic tanpa adanya gangguan komponen yang lain dalam tiga merek dagang body lotion (Susanti, 2019).
Uji  presisi  ditentukan  berdasarkan  nilai  RSD  ( Relative  Standard  Deviasi )  waktu retensi,  luas  puncak  dan  tinggi  puncak  kromatogram.  Hasil  uji  presisi  hidrokuinon  pada konsentrasi 4; 6; dan 8 µg/mL masing-masing memperoleh nilai % RSD sebesar 0,041%, 0,069% dan 0,009%. Hasil uji presisi asam kojic pada konsentrasi 4; 6; dan 8 µg/mL masing- masing  memperoleh  nilai  %RSD  sebesar  0,006%,  0,025%,  dan  0,037%.  Hasil  yang diperoleh menunjukkan bahwa metode analisis yang divalidasi memiliki ketelitian yang baik karena  semua  nilai  memenuhi  persyaratan  nilai  %  RSD  yang  dapat  diterima  yaitu  ≤  2% (Susanti, 2017) (tabel 4 dan 5).
Presisi
Tabel 4. Uji presisi hidrokuinon Tabel 5. Uji presisi asam kojic Kadar (µg/mL) Waktu Retensi (menit) Luas Area Tinggi Puncak Kadar 4 2,473 291325 23870 4,0644 4 2,473 291290 23657 4,0637 4 2,472 291299 23470 4,0639 4 2,474 291495 23659 4,0679 4 2,472 291347 23650 4,0649 4 2,473 291418 23537 4,0663 RATA-RATA SD %RSD 4,0652 0,0016 0,041% 6 2,474 385898 35181 6,0240 6 2,472 385398 35185 6,0136 6 2,474 385418 35175 6,0140 6 2,474 385402 35169 6,0137 6 2,473 385396 35173 6,0136 6 2,473 385421 35180 6,0141 RATA-RATA SD %RSD 6,0155 0,00442 0,069% 8 2,475 481312 39758 8,0010 8 2,474 481358 39685 8,0019 8 2,474 481402 39833 8,0029 8 2,475 481310 39573 8,0009 8 2,473 481348 39478 8,0017 8 2,473 481325 39245 8,0013 RATA-RATA SD %RSD 8,0016 0,0007 0,009%

## Akurasi
Uji akurasi menunjukkan kedekatan hasil penetapan kadar dengan kadar sebenarnya. Uji akurasi dilakukan sebagai uji perolehan kembali dengan cara menambahkan baku. Uji dilakukan  dengan  cara  sejumlah  bahan  baku  (80,  100  dan  120%  dari  kadar  analit  target) ditambahkan ke dalam sampel. Hasil uji akurasi hidrokuinon dan asam kojic dengan metode penambahan baku dapat dilihat pada tabel 6 dan 7.

## Tabel 6. Uji akurasi hidrokuinon
Sampel Sampel : Penambahan Bahan Baku Replikasi Kadar A (ppm) Kadar B (ppm) Kadar C (ppm) Perolehan Kembali (%) Rata- Rata SD % RSD 100:80 1 6,308 3,517 2,813 99,236 99,956 0,625 0,626% 2 6,340 3,517 2,813 100,364 3 6,337 3,517 2,813 100,268 A 100:100 1 7,036 3,517 3,517 100,068 99,977 0,142 0,142% 2 7,027 3,517 3,517 99,814 3 7,035 3,517 3,517 100,050 100:120 1 7,753 3,517 4,219 100,416 100,361 0,054 0,054% 2 7,751 3,517 4,219 100,358 3 7,749 3,517 4,219 100,308 100 : 80 1 3,634 2,019 1,614 100,119 100,204 0,105 0,105% 2 3,638 2,019 1,614 100,322
Kadar (µg/mL) Waktu Retensi (menit) Luas Area Tinggi Puncak Kadar 4 1,610 628513 68481 4,0822 4 1,611 628504 68228 4,0821 4 1,611 628459 68108 4,0817 4 1,610 628461 68433 4,0817 4 1,610 628507 68278 4,0821 4 1,611 628473 68108 4,0818 RATA-RATA SD %RSD 4,0819 0,0002 0,006% 6 1,611 828592 102656 6,0362 6 1,611 828437 102451 6,0347 6 1,613 828348 102534 6,0338 6 1,613 828156 102463 6,0319 6 1,611 828269 102453 6,0330 6 1,612 828283 102632 6,0331 RATA-RATA SD %RSD 6,0338 0,0015 0,025% 8 1,612 1040793 118566 8,1085 8 1,612 1040581 117228 8,1065 8 1,611 1039912 116108 8,0999 8 1,611 1040245 117362 8,1032 8 1,613 1040482 117582 8,1055 8 1,612 1040583 116362 8,1065 RATA-RATA SD %RSD 8,1050 0,0030 0,037%

## Lanjutan Tabel 6…………
3 3,635 2,019 1,614 100,171 B 100 : 100 1 4,046 2,019 2,019 100,450 100,282 0,156 0,156% 2 4,042 2,019 2,019 100,254 3 4,040 2,019 2,019 100,141 100:120 1 4,449 2,019 2,422 100,352 100,276 0,106 0,106% 2 4,444 2,019 2,422 100,155 3 4,448 2,019 2,422 100,323 100 : 80 1 8,104 4,497 3,597 100,286 100,130 0,300 0,300% 2 8,086 4,497 3,597 99,784 3 8,105 4,497 3,597 100,320 C 100 : 100 1 8,995 4,497 4,497 100,017 99,802 0,528 0,530% 2 9,002 4,497 4,497 100,189 3 8,958 4,497 4,497 99,200 100 : 120 1 9,897 4,497 5,396 100,077 100,073 0,062 0,062% 2 9,893 4,497 5,396 100,009 3 9,900 4,497 5,396 100,132
Tabel 7. Uji akurasi asam kojic
Sampel Sampel : Penambahan Bahan Baku Replikasi Kadar A (ppm) Kadar B (ppm) Kadar C (ppm) Perolehan Kembali Rata- Rata SD %RSD 100 : 80 1 5,885 3,270 2,616 99,991 100,037 0,185 0,185% 2 5,883 3,270 2,616 99,897 3 5,892 3,270 2,616 100,240 A 100 : 100 1 6,545 3,270 3,270 100,159 99,716 0,386 0,387% 2 6,524 3,270 3,270 99,535 3 6,522 3,270 3,270 99,454 100 : 120 1 7,209 3,270 3,923 100,423 100,404 0,090 0,090% 2 7,212 3,270 3,923 100,482 3 7,205 3,270 3,923 100,305 100 : 80 1 3,599 1,997 1,597 100,323 100,377 0,052 0,052% 2 3,601 1,997 1,597 100,426 3 3,600 1,997 1,597 100,383 B 100 : 100 1 4,003 1,997 1,997 100,492 100,435 0,061 0,61% 2 3,002 1,997 1,997 100,443 3 4,001 1,997 1,997 100,370 100 : 120 1 4,401 1,997 2,395 100,385 100,411 0,059 0,059% 2 4,400 1,997 2,395 100,369 3 4,403 1,997 2,395 100,479 100 : 80 1 9,805 5,444 4,355 100,123 100,124 0,286 0,286% 2 9,817 5,444 4,355 100,411 3 9,792 5,444 4,355 99,839 C 100 : 100 1 10,912 5,444 5,443 100,462 100,188 0,283 0,283% 2 10,899 5,444 5,443 100,206 3 10,882 5,444 5,443 99,896 100 : 120 1 12,010 5,444 6,533 100,497 100,386 0,132 0,132% 2 12,005 5,444 6,533 100,422 3 11,993 5,444 6,533 100,240
Menurut  Susanti  (2017)  semua  nilai  perolehan  kembali  yang  dihasilkan  pada penelitian ini memenuhi kriteria rentang nilai untuk senyawa dalam matriks yaitu diterima jika  berada  pada  rentang  98-102%.  Hasil  uji  akurasi  yang  diperoleh  dapat  disimpulkan bahwa metode analisis pada penelitian ini menghasilkan data kadar hidrokuinon dan asam kojic dekat dengan kadar yang sebenarnya.

## Preparasi Sampel
Preparasi sampel dimulai dengan mereplikasikan masing-masing sampel sebanyak 3 kali. Sampel body lotion ini tidak memerlukan proses ekstraksi karena  merupakan sediaan emulsi (Arwibiyantari, 2018). Dilakukan pemisahan senyawa secara langsung menggunakan nylon membran filter untuk menetapkan kadar hidrokuinon dan asam kojic dalam tiga merek dagang body lotion .

## Penetapan Kadar
Penetapan kadar hidrokuinon dan asam kojic dalam tiga merek dagang body lotion menggunakan KCKT bertujuan untuk mengetahui kadar hidrokuinon dan asam kojic yang ada dalam tiga merek dagang body lotion, dikarenakan produsen tidak mencantumkan kadar hidrokuinon dan asam kojic dalam tiga merek dagang body lotion, sehingga dapat digunakan untuk pengembangan metode analisis. Penetapan kadar hidrokuinon dan asam kojic dalam tiga merek dagang body lotion dilakukan dengan cara mensubsitusikan luas puncak (Y) pada sampel dengan persamaan regresi linier sampel hidrokuinon yang telah diperoleh yaitu Y = 95167.6 + 48262.1X.  Sedangkan persamaan regresi linier sampel asam kojic yang diperoleh yaitu Y = 210515 + 102395.6.  Hasil analisis kandungan hidrokuinon dan asam kojic dalam tiga merek dagang body lotion secara KCKT dapat dilihat pada tabel 8 dan 9.

## Tabel 8. Analisis kandungan hidrokuinon
Sampel  Replikasi Luas Puncak Kadar Hidrokuinon (ppm) Kandungan Hidrokuinon (%) Rata- rata SD %RSD 1 260128 3,418
0,855
0,854 0,0001 0,0002 2 260090 3,417 0,854 A 3 260058 3,417 0,854 4 260166 3,419 0,855 5 260126 3,418 0,854 6 260089 I3,417 0,854 1 184155 1,844 0,461 0,470 0,0172 0,0366 2 187300 1,909 0,477 B 3 181182 1,782 0,446 4 185272 1,867 0,467 5 191144 1,989 0,497 6 186159 1,885 0,471 1 399295 6,302 1,575 1,557 0,0379 0,0243 2 399611 6,308 1,577 C 3 398902 6,293 1,573 4 397939 6,273 1,568 5 398222 6,279 1,570 6 380927 5,921 1,480
Tabel 9. Analisis kandungan asam kojic
Sampel Replikasi Luas Puncak Kadar Asam Kojic (ppm) Kandungan Asam Kojic (%) Rata- rata SD %RSD 1 547202 3,288
0,822
0,823 0,0050 0,0060 2 545700 3,273 0,818 A 3 549710 3,313 0,828 4 545145 3,268 0,817 5 549210 3,308 0,827 6 542602 3,313 0,828 1 420729 2,053 0,513 0,510 0,0102 0,0201 2 416161 2,008 0,502 B 3 420370 2,049 0,512 4 420195 2,048 0,512 5 425761 2,102 0,526 6 413573 1,983 0,496 1 822984 5,981 1,495 1,497 0,0214 0,0143 2 832803 6,077 1,519 C 3 824374 5,995 1,499 4 816441 5,918 1,479 5 834437 6,093 1,523 6 812055 5,875 1,469
Penetapan kadar ini diketahui dari hasil penginjeksian dengan menggunakan KCKT. Pengujian ini dilakukan dengan cara penginjeksian sampel sebanyak 6 kali dengan tujuan untuk  mendapatkan  hasil  yang  akurat.  Hasil  penelitian  berdasarkan  tabel  diatas  diketahui bahwa kadar hidrokuinon memenuhi syarat yang ditetapkan oleh BPOM yaitu sebesar ≤ 2%. Hidrokuinon dalam sampel A memiliki kadar 0,854%, sampel B  memiliki kadar 0,470%, dan sampel C memiliki kadar 1,557%.  Sedangkan asam kojic memenuhi syarat ≤ 2 menurut Burnett  dkk.  (2010)  dalam  sampel    A  memiliki  kadar  0,823%,  sampel  B  memiliki  kadar 0,510%, dan sampel C memiliki kadar 1,497%.

## KESIMPULAN
Uji linieritas hidrokuinon dan asam kojic memenuhi syarat dengan nilai 0,999; LOD hidrokuinon 0,274 µg/mL; LOQ hidrokuinon 0,913 µg/mL; LOD asam kojic 0,420 µg/mL; LOQ  asam  kojic  1,401  µg/mL;  uji  sensitivitas  dan  uji  selektivitas  baik;  uji  presisi hidrokuinon  dan  asam  kojic  menghasilkan  nilai  %RSD  ≤  2%;  uji  akurasi  hidrokuinon diperoleh  99,200-100,450%;  asam  kojic diperoleh  99,454-100,497%.    Kadar  hidrokuinon rata-rata pada body lotion merek A, B dan C masing-masing sebesar 0,854%, 0,470%,  dan 1,557%.  Kadar  asam  kojic  rata-rata  pada body  lotion merek  A,  B  dan  C  masing-masing sebesar 0,823%, 0,510%, dan 1,497%.   Kadar hidrokuinon dalam tiga merek dagang body lotion memenuhi  persyaratan  menurut  BPOM  karena  kurang  dari  sama  dengan  2%. Sedangkan kadar asam kojic memenuhi persyaratan yaitu kurang dari atau sama dengan 2%.

## DAFTAR PUSTAKA
Arwibiyantari,  A.P.  2018.    Analisis  Kandungan  Hidrokuinon  Pada  Kosmetik  Lotion  Dan Serum Pemutih Wajah Yang Mengandung Arbutin Dengan Metode Spektrofotometri UV-VIS.  Universitas AL-Ghifari, Bandung.
Badan POM RI. 2007. Tentang Kosmetik Mengandung Bahan Berbahaya Dan Zat Warna Yang Dilarang.  BPOM RI, Jakarta.
Chairman, B.W.F., Belsito, D.V., Hill, R.A., Klaasen, C.D., Liebler, D.C., Marks, J.G., & Andersen, A.  2009.  Kojic Acid as Use Cosmetic, Cosmetic Ingredient Review. 2–71. Fithria,  R.F.  2015.    Mengatasi  Hiperpigmentasi  Ringan  Dengan  Produk  Sediaan Topikal. Wahid Hasyim University Press, Semarang.
Gandjar, I, G., dan Rohman, A. 2015. Kimia Farmasi Analisis.  Pustaka Pelajar, Yogyakarta. Hermawan, D., Cacu., Anggraini, A. O., Irmanto. 2021. Optimasi Metode Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT) Untuk Analisis Obat Ofloxacin. Prosiding Seminar Nasional dan Call for Paper 1–9, Purwakarta 12-14 Oktober 2021.
Lajis, A.F.B., Hamid, M., Ariff, A.B.  2012.  Depigmenting Effect of Kojic Acid Ester in Hyperpigmented B16F1 Melanoma Cell. Jurnal of Biomedicine and Biotechnology, 2012, 1–9.
Latief,  M.S.  2021.  Analisa  Kandungan  Hidrokuinon  dan  Merkuri  Dalam  Krim  Malam Menggunakan High Perfom Liquid Chromatography (HPLC) dan Inductively Coupled Plasma Mass Spectrometry (ICP-MS). Jurnal Health Sains, 2(9), 1209-1215. Oyedeji,  F.O.,  &  Akemu,  O.C.O.  2017.    Simultaneous  Determination  of  Hydroquinone,
Kojic Acid and L-Ascorbic Asid in Some Cosmetic Emulsions. International Journal of Sciences, 6(8), 1–7.
Pamungkas F. A. 2016.  Perancangan Video Iklan ‘Natural Honey Hand and Body Lotion’ Bagi Wanita Indonesia. Jurnal Desain Komun Vis, 1(2), 1–12. Patel  A.B.  2014.  Postinflammatory  Hyperpigmentation:  Review  of  Pathogenesis, Prevention, and Treatment. Pigmen Int, 1(2), 59-69.
Rahmi,  S.  2017.    Identifikasi  Senyawa  Hidrokuinon  Dan  Merkuri  Pada  Krim  Kecantikan Yang Beredar Di Pasaran. Jurnal Penelitian Pendidikan MIPA, 2(1), 118–122. Saeedi, M., Eslamifar, M., & Khezri, K. 2019.  Kojic Acid Applications in Cosmetic and Pharmaceutical Preparation. Biomedicine and Pharmacotherapy, 110, 582-593.
Susanti,  M.,  &  Dachriyanus.  2017.  Kromatografi  Cair  Kinerja  Tinggi.  Lembaga Pengembangan Teknologi Informasi Dan Komunikasi,  Universitas Andalas, Padang . Susanti, S. 2019.   Optimasi Metode Analisis Highh Performance Liquid Chromatography Terbalik Pada Penetapan Kadar Piperin Dalam Ekstrak Piper Ningrum Linn . [Skripsi].
Fakultas Farmasi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.