Volume 12 Nomor 1 (2022) 64-68

## JURNAL KEBIDANAN
p-ISSN: 2089-7669 ; e - ISSN: 2621-2870
https://doi.org/10.31983/jkb.v12i1.6552
The Thickness of Endometrium after Given Fennel Seed Extract (Foeniculum Vulgare M.) and Mimba Leaves (Azadirachia Indica Juss): Experimental Study on Female Mice
Isnu Kurnia Nugrahaeni 1* , Melyana Nurul Widyawati 1 , Noviyati Rahardjo Putri 2 , Aida Amalia Nur Ramadhian 1 , Beniqna Maharani Besmaya 3 , Diksi Laksmita Dewi 1
1 Postgraduate Applied Midwifery, Poltekkes Kemenkes Semarang, Indonesia
2 Department of Midwifery, Medical Faculty, Sebelas Maret University Surakarta
3 Aisyah University of Pringsewu Lampung, Indonesia Jl. Tirto Agung Pedalangan Banyumanik, Semarang, Jawa Tengah, Indonesia Jl. Ir. Sutami No.36, Kentingan, Jebres, Surakarta, Jawa Tengah, Indonesia Jl. A. Yani, No.1A, Tambahrejo, Gadingrejo, Pringsewu, Lampung, Indonesia
Coressponding author: Isnu Kurnia Nugrahaeni e-mail: kurniaisnu@gmail.com
Received: December 17 th , 2020; Revised: August 18 th , 2021; Accepted: April 7 th , 2022

## ABSTRACT
Total Fertility Rate (TFR) in Indonesia is 2.6. It’s above the average TFR in ASEAN countries which is 2.44. This condition shows that Indonesia's population growth is high. The herbal plants as an alternative is  a  safe  method  of  contraception  that  can  reduce  the  negative  effects  of  using  hormonal  contraceptives method. The safe method contraception using herbal plants can reduce the negative effects in using hormonal contraceptives.  The  aim  of  this  study  is  to  determine  the  changes  in  endometrial  thickness  due  to  the administration of Foeniculum Vulgare M. and Azadirachia indica Juss extracts. The type of this study is a true experimental design with Post Test Only Control Group Design. The subjects were 15 female mice (mus musculus)  which  were  taken  randomly  and  it  divided  into  3  groups,  there  were  K-  (standard  care),  K+ (contraceptive  pills),  and  E  (fennel  seed  extract  and  neem  leaves  extract  with  a dose of 7.84: 11.2 mg / 20g BW). The treatment was given for 14 days. On the 15th day, the mice were terminated to measure the thickness of the endometrium. The result of the study were analyzed using the ANOVA test and the post hoc Scheffe  test.  The  results  study  shown  that  the  administration  of  fennel  seed  and  neem  leaf  extract  had  a significant effect in reducing endometrial thickness (p-value <0.05) so that it was proven to have an anti- fertility effect.
Keywords: antifertility, Azadirachia indica Juss , endometrial thickness, Foeniculum vulgare M.

## Pendahuluan
Jumlah  penduduk  Indonesia  mengalami peningkatan  dari  tahun  ke  tahun.  Angka  Fertilitas atau Total  Fertility  Rate (TFR)  yang  dimiliki Indonesia  sebesar  2,6  dan  berada  di  atas  rata-rata TFR  negara  ASEAN  yaitu  2,4  [1].  Pertumbuhan jumlah penduduk yang tinggi berdampak buruk bagi Indonesia, seperti peningkatan pemenuhan kebutuhan, penurunan kecukupan konsumsi, penurunan  kualitas  penduduk,  dan  penurunan produktifitas  kerja  sehingga  menyebabkan  masalah krusial terkait ketenagakerjaan [2]. Data peserta KB
baru  pada  tahun  2013,  didominasi  dengan penggunaan    metode  kontrasepsi  hormonal  berupa suntikan  (48,56%),  pil  (26,60%),  dan  implan (9,23%). Kontrasepsi hormonal dapat menyebabkan efek  negatif  bagi  wanita  diantaranya  meningkatkan risiko  trombosis  vena,  stroke,  hipertensi,  kanker payudara, dan obesitas [3][4].
Tanaman  herbal  sering  dimanfaatkan  sebagai obat-obatan  karena  memiliki  efek  samping  yang minimal.  Tanaman  herbal  juga  dapat  dimanfaatkan sebagai agen antifertilitas yang berefek mempengaruhi  kerja  ovum  dan  endometrium, memblokir kerja hormon, dan mengganggu proses
implantasi  [5].  Tanaman  adas  dan  mimba  memiliki efek  antifertilitas  dikarenakan  memiliki  kandungan berupa  flavonoid,  saponin,  tanin,  alkaloid,  dan glikosida [6][7]. Kandungan ini bersifat antiestrogen sehingga dapat mengganggu kerja hormon reproduksi [8].
Penelitian  terdahulu  mengenai  pemberian infusa  daun  adas  selama  15  hari  dapat  menurunkan berat ovarium namun belum  dapat  menurunkan berat uterus  [9].  Pemberian  ekstrak  daun  mimba  dapat secara  signifikan  menurunkan  berat  ovarium, mengurangi      jumlah      folikel,  dan      menigkatkan frekuensi estrus sehingga  menjadi  tidak  normal [10]. Penelitian   lain   juga   menemukan   bahwa ekstrak mimba  dapat  meningkatkan  jumlah  folikel  atresia [11].  Akan  tetapi,  penelitian-penelitian  tersebut belum  meneliti  mengenai  efek  tanaman  adas  dan mimba sebagai agen antifertilitas dalam mempengaruhi ketebalan endometrium. Endometrium  adalah  salah  satu  organ  reproduksi yang  memiliki  peranan  penting  sebagai  tempat implantasi  hasil  konsepsi  dan  membantu  memberi nutrisi  pada  ovum  yang  berimplantasi  [8].  Maka dari  itu,  penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui pengaruh    dari    pemberian    ekstrak    biji    adas    dan daun  mimba  terhadap  ketebalan  endometrium. Penelitian  ini  diharapkan  berkontribusi  dalam meningkatkan pemanfaatan tanaman herbal yang ada di Indonesia sebagai agen antifertilitas.

## Metode Penelitian
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini meliputi  mencit  betina  ( Mus  musculus )  yang  subur; ekstrak  biji  adas  dan  daun  mimba  dalam  bentuk cairan;  pakan  mencit;  aquades ; dan  bahan  untuk
pembuatan      preparat  histologi  uterus.  Alat  yang digunakan  dalam  penelitian  ini  meliputi  kandang mencit;  pipet  ukur  satuan  (mL);  timbangan  satuan (gram);  d eck  glass; gelas  objek;  kanul;  alat  bedah minor ( disecting set );  timbangan  digital; mikroskop digital;  kertas  label;  lembar  observasi;  tisu;  sarung tangan;  dan masker.
Penelitian dilakukan di Laboratorium Biologi Hewan Universitas Negeri Semarang. Penelitian  ini menggunakan    metode true  eksperimen dengan posttest  only  control  group  design .  Terdapat  3 kelompok  yang  terbagi  menjadi  kelompok  kontrol negatif/  K-  (perawatan  standar),  kelompok  kontrol positif/  K+  (pemberian  pil  kontrasepsi),  dan kelompok perlakuan/ E (pemberian ekstrak biji adas dan  daun  mimba  dengan  dosis  7,84:11,2  mg/20g BB).  Pemberian  intervensi      dilakukan      dengan frekuensi   1   kali perhari selama 14 hari. Masing- masing kelompok terdiri dari 5 ekor mencit. Untuk mengantisipasi drop  out sebesar  10%  maka ditetapkan jumlah sampel perkelompok sebanyak 6 sampel.  Setelah pemberian  ekstrak    biji    adas    dan daun    mimba,  organ  uterus  diambil  untuk  dibuat sediaan histologi menggunakan pewarnaan Hematoksilin-Eosin pada  hari  ke  15.  Ketebalan endometrium  diukur  menggunakan  mikroskop digital  dengan  10  dan  40  kali  perbesaran.  Hasil penelitian  dianalisis  menggunakan      uji      ANOVA dan      uji post      hoc  scheffe. Penelitian  ini  sudah dilakukan uji etik oleh Komisi Bioetik Kedokteran/ Kesehatan  Fakultas  Kedokteran  Universitas  Islam Sultan  Agung  Semarang  dengan  Nomor ethical clearence penelitian ini adalah No.781/XII/2019/Komisi Etik. Hasil dan Pembahasan
Tabel 1.
Pengaruh  Pemberian  Ekstrak  Biji  Adas  dan  Daun  Mimba  terhadap  Ketebalan  Endometrium Pada  Mencit Betina
No. Kelompok mean±SD P value P value (Post Hoc Test) 1. K- 354,00±39,62 2. K+ 322,80±36,48 0,006 K-  terhadap E (0,006) 3. E1 270,80±19,72
Berdasarkan  Tabel.1,  terlihat  bahwa  ada pengaruh  signifikan  pemberian  ekstrak  biji  adas dan  daun  mimba  terhadap  ketebalan  endometrium ( p-value=0,006 ).  Hasil  analisis  juga  menunjukkan perbedaan signifikan ketebalan endometrium terlihat antara  kelompok  kontrol  negatif/  K - dengan kelompok intervensi/ E ( p value =0,006).

## Gambar 1.
Hasil  preparat   histologi   endometrium  kelompok kontrol negatif
Gambar 2 .
Hasil  preparat   histologi   endometrium  kelompok kontrol positif

## Gambar 3.
Hasil  preparat   histologi   endometrium  kelompok intervensi
Penelitian ini membuktikan  bahwa pemberian ekstrak  biji  adas  dan  daun  mimba  berpengaruh signifikan dalam menurunkan ketebalan endometrium. Hal ini disebabkan karena kandungan senyawa   dalam   kedua   tanaman   ini
memberikan  efek  antifertilitas.  Kedua  tanaman  ini megandung  saponin,  flavonoid,  alkaloid,  tanin  dan triterpenoid.  Saponin  dan  flavonoid  bersifat antiestrogen  yang  dapat  disintesis  di  dalam  tubuh. Antiestrogen memberikan pengaruh berupa mengganggu oogenesis, antigonadotropin, mencegah  ovulasi,  mengentalkan  lendir  serviks sehingga     menghalangi     pertemuan      ovum     dan sperma,  menyebabkan      atrofi  endometrium,  dan mengganggu    proses    implantasi    saat    proses fertilisasi  [6][7].  Sekresi gonadotrophin  relaxing hormone (GnRH)    akan    terganggu    akibat kandungan  saponin  dan  triterpenoid  sehingga menyebabkan  gangguan  pada  jalur  hipotalamus hipofisis [12]. Kandungan senyawa dalam tanaman adas  dan  mimba  dapat  mengganggu  kerja  hormon reproduksi  salah  satunya  adalah  hormon  estrogen. Endometrium  sebagai  salah  satu  organ  yang memiliki  reseptor  estrogen  akan  mengalami perubahan  lapisan  dinding  penyusun  uterus  akibat adanya  regulasi  hormon.  Terganggunya  regulasi hormon  estrogen  akan  mengakibatkan  proliferasi endometrium    ikut    terganggu    sehingga menyebabkan  endometrium  tidak  siap  menerima implantasi hasil konsepsi [8].
Endometrium  adalah  organ  reproduksi  yang berfungsi      sebagai      tempat      implantasi      dan perkembangan  embrio  bagi  mencit.  Adanya perubahan   stroma   mesenkim   yang   merupakan jaringan  ikat  endometrium  di  antara  sel  epitel permukaan  dan  miometrium  yang  mempengaruhi ketebalan   endometrium   [13].   Hormon   estrogen yang merupakan hormon reproduksi akan mempengaruhi     perubahan     mikroskopik     pada struktur  dan  fungsi  kelenjar  endometrium terutama ketebalan     selaput     lendir     dan     vaskularisasi. Endometrium  adalah  lapisan  dalam  uterus  yang memiliki  perubahan  siklus  berupa  proliferasi, sekresi,      menstruasi,      dan      implantasi     [14]. Menurunnya kadar  hormon estrogen  akibat kandungan senyawa dari tanaman adas dan mimba akan  mengganggu  proliferasi  dari  ketebalan endometrium   sehingga   ketebalan   endometrium juga menurun.
Hasil   dari   penelitian   ini   sejalan   dengan penelitian  terdahulu  dimana  lapisan  endometrium mengalami  penipisan  setelah  diberikan  ekstrak tanaman kunyit. Tanaman kunyit memiliki kandungan   senyawa   kimia   yang   hampir   sama dengan  tanaman  adas  dan  mimba  yaitu  senyawa saponin, flavonoid, alkaloid, dan tanin [15].
Perubahan    ketebalan    endometrium    pada penelitian   ini   terjadi   pada   kelompok   perlakuan yang  diberikan  ekstrak  biji  adas  dan  daun  mimba daripada kelompok yang lain dikarenakan konsentrasi   bahan   aktifnya.   Kerja   hormon   dan
metabolisme  sel  dipengaruhi  oleh  zat  aktif  dalam
“Hormonal   Contraception   And   Obesity,”
tanaman   tersebut   sehingga   tebal   endometrium
Fertil.  Steril. ,  Vol.  106,  No.  6,  Pp.  1282– menipis pada kelompok perlakuan [16].
1288,                       2016,                       Doi:
Penelitian  ini  memiliki  keterbatasan  dalam 10.1016/J.Fertnstert.2016.07.1094.
menentukan  jumlah  sampel  penelitian  yang  hanya [5] S.     Ainur     And     M.     N.     Widyawati, 5   ekor   mencit   sesuai   dengan   jumlah  minimum
“Indonesian     Herbs     With     Antifertility sampel     hewan     coba     menurut     WHO     [17].
Effects  On  Men:  A  Systematic  Review,”
Keterbatasan lainnya  adalah dosis yang digunakan
Proc. Int. Conf. Appl. Sci. Heal. , No. 4, Pp. dalam  penelitian  ini  tidak  beragam  sehingga  tidak
571–578, 2019.
bisa  dieksplorasi  lebih  jauh  terkait  dosis  optimal
[6] B.  Akbar, Tumbuhan  Dengan  Kandungan yang dapat mempengaruhi ketebalan endometrium.
Senyawa   Aktif   Yang   Berpotensi   Sebagai Bahan  Antifertilitas . Jakarta:  Adabia  Press, Simpulan 2010. [7] N.    L.    Hidayati,    “Penurunan    Motilitas
Penelitian  ini  membuktikan  bahwa  terdapat
Spermatozoa       Tikus       Putih       (Rattus
perbedaan  signifikan  pada  ketebalan  endometrium
Norvegicus)    Jantan    Akibat    Pemberian
antara kelompok yang diberikan kombinasi ekstrak
Infusa   Buah   Adas   (Foeniculum   Vulgare
biji   adas   dengan   dosis   7,84   mg/   20g   BB   dan
Mill,),” Kesehat. Bakti Tunas Husada , Vol. ekstrak  daun  mimba  dengan  dosis  11,2  mg  /  20g
12, No. 1, Pp. 112–127, 2014.
BB   dengan   kelompok   kontrol   negatif   maupun [8] Muhammad  A.  .  Alfian,  A.  .  Sitasiwi, And positif.  Penelitian  ini  dapat  dikembangkan  dengan
Muhammad        A.        Djaelani,        “Efek
menguji  coba  berbagai  macam  dosis  kombinasi
Antifertilitas    Ekstrak    Air    Biji    Pepaya
ekstrak   biji   adas   dan   daun   mimba   agar   dapat
(Carica  Papaya  L.)  Terhadap  Jumlah  Dan
diketahui dosis optimal yang dapat mempengaruhi
Diameter  Folikel  De  Graaf  Mencit  (Mus
ketebalan  endometrium.  Selain  itu,  penelitian  ini
Musculus) Betina,” J. Pro-Life , Vol. 5, No. perlu   waktu   penelitian   yang  lebih   panjang   dan
1, Pp. 476–486, 2018.
jumlah  sampel  yang  lebih  banyak  agar  diketahui [9] Lailatul     Soimah,     “Morfometri     Organ waktu     optimum     yang     dapat     mempengaruhi
Reproduksi Tikus Putih (Rattus Sp,) Betina
ketebalan   endometrium   dalam   efeknya   sebagai
Pasca Melahirkan  Dengan Pemberian  Infus
antifertilitas.
Daun  Adas  (Foeniculum  Vulgare  M,),” J. Bakti Saintek , Vol. 6, Pp. 654–660, 2016. [10] P.   Singh,   C.   Drug,   E.   Sitapur,   And   U. Ucapan Terimakasih Pradesh,   “Effect   Of   IVNT   On   Ovarian Weight, Follicle Number, Estrus Frequency Penulis   mengucapkan   terima   kasih   atas And  Reversibility  Of  Reproductive  Cycle
bantuan    dan    dorongan    dari    keluarga,    Pusat
In  Albino  Rat,” Int.  J.  Pharm.  Sci.  Res. , Penelitian   dan   Pengabdian   Kepada   Masyarakat
Vol.  5,  No.  6,  Pp.  2095–2112,  2014,  Doi:
(PPM)    Poltekkes    Kemenkes    Semarang,    dan 10.13040/Ijpsr.0975-8232.5(6).2095-12. petugas       laboratorium       Universitas       Negeri [11] N.   Hidayah,   A.   J.   Sitasiwi,   And   S.   M. Semarang. Mardiati,   “Efek   Ekstrak   Ethanol    Daun Mimba   Terhadap   Gonadosomatic   Index (Gsi),  Jumlah  Dan  Ukuran  Folikel  Atresia Daftar Pustaka Pada  Mencit  (  Mus  Musculus  L.)  Betina,” J.  Pro-Life ,  Vol.  5,  No.  2,  Pp.  589–597, [1]       Kemenkes    RI,    “Situasi    Dan    Analisis 2017. Keluarga  Berencana,” Infodatin  Pusat  Dan [12] I.   Hashmat,   H.   Azad,   And   A.   Ahmed, Informasi Kementerian  Kesehatan  Ri .  P.  2, “Neem ( Azadirachta Indica A . Juss )  - A
2014.
Nature  ’  S  Drugstore :  An  Overview,” Int.
[2]       E.     Rochaida,     “Dampak     Pertumbuhan Res. J. Biol. Sci. , Vol. 1, No. 6, Pp. 76–79, Penduduk Terhadap Pertumbuhan Ekonomi
2012. Dan    Keluarga    Sejahtera    Di    Provinsi [13] M.     Mihm,     S.     Gangooly,     And     S. Kalimantan Timur,” Forum Ekon. , Vol. 18,
Muttukrishna,    “The    Normal    Menstrual
[3] No. 1, Pp. 14–24, 2016. G.       Plu-Bureau, Female       Hormonal
Cycle  In  Women ଝ ,” Anim.  Reprod.  Sci. , Vol. 124, No. 3–4, Pp. 229–236, 2011, Doi: Contraception , 2nd Ed. Elsevier Inc., 2018. 10.1016/J.Anireprosci.2010.08.030.
[4] K.   B.   Simmons   And   A.   B.   Edelman, [14] M  Rizky Ramadhan, “Pengaruh  Pemberian
Ekstrak  Biji  Pepaya  (Carica  Papaya  L,) Terhadap  Struktur  Lapisan  Endometrium Pada Mencit (Mus Musculus),” J. Bakti Sains Dan  Teknol. ,  Vol.  66,  No.  1,  Pp.  1–
15,                         2018,                         Doi:
10.3109/08830185.2014.902452.
[15]     T.    W.    Titiglory    And    H.    Kristanto,
“Gambaran  Histopatologi  Endometrium Mencit Balb / C Dalam Periode Gestasi Yang Diberi  Ekstrak  Kunyit  Asam  (  Curcuma
Domestica    Dan    Tamarindus  Indica  ) Dengan  Dosis  Bertingkat,” J.  Kedokt.
Diponegoro ,  Vol.  5,  No.  4,  Pp.
1815–1823, 2016.
[16]     A.  Alfiyanti,  A.  J.  Sitasiwi,  And  S.  M. Mardiati,   “Pengaruh   Pemberian   Ekstrak Etanol   Daun  Mimba   (Azadirachta  Indica A.Juss)  Terhadap  Berat  Uterus  Dan  Tebal Endometrium  Mencit  (Mus  Musculus  L.),”
Bul. Anat. Dan Fisiol. , Vol. 4, 2019.
[17]     World     Health     Organization.     " General Guidelines  for  Methodologies  on  Research and  Evaluation  of  Traditional  Medicine ." 27–32 p. 2000