## EFEK ANTIBAKTERI SALEP EKSTRAK RIMPANG LENGKUAS PUTIH (Alpinia galangal [L] Swartz) PADA KULIT PUNGGUNG KELINCI YANG DIBUAT
INFEKSI Staphylococcus aureus
Debora Tandy 1) , Hosea Jaya Edy 1) , Hamidah Sri Supriati 2)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115
2) Program Studi DIII Farmasi STIKES Muhammadiyah Manado, 95115 deboratandy@rocketmail.com, hosea_tob@yahoo.com, amorrizha_zng@yahoo.com

## ABSTRAK
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  efek  antibakteri,  kosentrasi  efektif  dan  pengaruh peningkatan  kosentrasi  salep  ekstrak  rimpang  Lengkuas  putih  terhadap  penyembuhan  kulit punggung  kelinci  yang  terinfeksi  Staphylococcus  aureus.  Ekstrasi  dilakukan  dengan  cara maserasi  menggunakan  pelarut  etanol  96%.  Pengamatan  waktu  penyembuhan  dilakukan dengan  cara  mengamati  lamanya  penyembuhan  infeksi  pada  kulit  punggung  kelinci  setelah pemberian salep dengan hilangnya eritema dan nanah. Hasil penelitian ini menunjukkan salep ekstrak  rimpang  Lengkuas  putih  10%  yang  paling  efektif  menyembuhkan  infeksi Staphylococcus  aureus.  Hal  ini  ditunjukkan  dengan  waktu  penyembuhan  yang  lebih  cepat dibanding dengan kosentrasi 3% dan 5%.  Hasil analisis One way anova menunjukan bahwa ada  perbedaan  yang  bermakna  antara  kosentrasi  3%,5%  dan  10%  (Fhit  27,30  >Ftab  3,48) yang berarti bahwa semakin tinggi kosentrasi, waktu penyembuhan semakin cepat. Kata kunci :  Efek antibakteri, Alpinia galangal, L, Staphylococcus aureus, kulit punggung kelinci
ANTIBACTERIAL EFFECT OF WHITE GALANGAL (Alpinia galangal [L] Swartz) RHIZOME EXTRACT OINTMENT ON RABBIT BACK SKIN INFECTED WITH

## Staphylococcus aureus

## ABSTRACT
The aim of these research were to study antibacterial effect, effective concentration, and the effect  of  concentration  alteration  of  white  galangal  rhizome  extract  ointmentto  heal  rabbits back  skininfected  with  Staphylococcus  aureus.  Extraction  was  done  by  maceration  using ethanol 96% as solvent. Observation of healing time was done by observing infectionhealing time  on  rabbits  back  skin  after  anointment  treatment,  which  based  onthe  disappearance  of erythema  and  pus.  The  result  shows  that  10%  of  white  galangal  rhizome  extract  ointment effective  to  heal  the  infection  of  Staphylococcus  aureus.  It  shown  by  its  short  healing  time compared  with  concentration  3%  and  5%.  One  way  ANOVA  result  shows  that  there  was  a significant effect between concentrations 3%, 5%,and 10%. (Fcalculation 27,30>Ftable 3,48), it meant that high concentration resultingshorter healing time.
Keywords:     antibacterial  effect.  Alpinia  galangal  L.,  Staphylococcus  aureus,  rabbit  back skin

## PENDAHULUAN
Pengetahuan  masyarakat  tentang khasiat  obat  suatu  tumbuhan  untuk penyembuhan suatu penyakit pada umumnya  didasarkan  pada  resep  nenek moyang,  kepercayaan  atau  kebiasaan masyarakat setempat maupun pengetahuan tradisional.  Penggunaan  obat  tradisional akhir-akhir ini mengalami peningkatan, hal ini  dikarenakan  banyak  orang  menyakini hidup  lebih  sehat  dengan  memanfaatkan bahan-bahan alami.
Lengkuas    (Alpinia  galanga  (L.) Swartz  merupakan  tanaman  obat  yang sudah digunakan secara turun-temurun dan khasiatnya  sudah  terbukti  secara  empiris. Secara tradisional dari sejak zaman dahulu kala,  parutan  rimpang  lengkuas  sering digunakan  sebagai  obat  penyakit  kulit, terutama  yang  disebabkan  oleh  jamur  dan bakteri,  seperti  panu,  kurap,  jerawat, koreng,  bisul,  kutu  air  dan  sebagainya. Dari  hasil  penelitian  Widawati  (2008), ekstrak  lengkuas  5%  dengan  kandungan flavonoid dapat menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus.
Di  negara  berkembang  penyakit infeksi  masih  merupakan  jenis  penyakit yang paling banyak diderita oleh masyarakat  dan  salah  satunya  disebabkan oleh bakteri. Bakteri merupakan mikroorganisme  yang  tidak  dapat  dilihat dengan  mata  telanjang,  tetapi  hanya  dapat dilihat  dengan  bantuan  mikroskop  (Radji, 2011).  Staphylococcus  aureus  merupakan salah  satu  bakteri  Gram  positif  yang menyebabkan  infeksi  kulit  seperti  jerawat atau abses, keracunan makanan, endokarditis dan infeksi paru-paru (Jawetz et  al,  2005).  Untuk  itu,  diperlukan  suatu antibakteri  yang  secara  toksisitas  selektif menghambat  atau  membunuh  bakteri menyebab infeksi.
Flavonoid  memiliki  sifat  lipofilik, sehingga sediaan topikal  yang sesuai ialah salep.  Karena  menurut  Syamsuni  (2006), salep  mempunyai  konsistensi  seperti mentega  tetapi  mudah  dioleskan  tanpa memakai  tenaga.  Penelitian  ini  bertujuan
untuk  mengetahui  efektivitas  antibakteri dan  kosentrasi  efektif  salep  ekstrak rimpang  Lengkuas  (Apinia  galangal  (L.) Swartz)  pada  kulit  punggung  kelinci  yang terinfeksi Staphylococcus aureus.

## METODOLOGI PENELITIAN
Penelitian ini dilaksanakan di
Laboratorium Advance, Laboratorium Farmasetika dan Laboratorium
Mikrobiologi  Fakultas  MIPA,  Universitas Sam  Ratulangi  pada  bulan  Agustus  – September 2012.
Alat-alat  yang  digunakan  yaitu pisau, blender, ayakan  mesh 65, oven, hot plate,  stirrer,  rotary  evaporator,  gelas ukur,  gelas  kimia,  tabung  reaksi,  kaca arloji,  cawan  porselin,  pipet  mikro, erlenmeyer,  inkubator,  laminair  air  flow, autoklaf,  jarum  ose,  lumpang  &  alu,  pot salep,  timbangan  analitik,  cawan  petri, gunting,  jarum  suntik  1  ml,  kapas,  dan kamera.
Bahan yang digunakan yaitu ekstrak Lengkuas,  adeps  lanae,  vaselin  flavum, etanol  96%,  Natrium  agar,  Brain  Heart Infussion  (BHI),  aquades,    bakteri  S. aureus,  dan  kelinci  jantan  galar  New Zealand White.
Jenis penelitian ini ialah eksperimental  laboratorium.  Sedangkan rancangan  penelitian  yang  digunakan adalah  rancangan  acak  lengkap  (RAL) dengan 5 perlakuan dan disetiap perlakuan terdiri atas 3 ulangan.

## Persiapan Sampel
Sebelum dilakukan
ekstraksi, rimpang Lengkuas terlebih dahulu dibersihkan, dicuci sampai berih kemudian diiris-iris dengan menggunakan pisau yang menghasilkan irisan setebal ±1,5 mm, lalu dikeringkan dengan cara diangin-anginkan kemudian dilanjutkan dalam alat pengering  (oven  45 ◦ C)  sampai  kering. Selanjutnya  rimpang  lengkuas  digiling
halus  dengan  blender  kemudian  diayak dengan ayakan mesh 65.

## Pembuatan Ekstrak
Ekstraksi  dilakukan  dengan  metode maserasi  berulang  selama  dua  hari menggunakan pelarut etanol 96%.  Serbuk lengkuas  putih  dimaserasi  dengan  pelarut 96%  dengan  perbandingan  1  :  10  pada suhu  ruangan  selama  24  jam.  Kemudian disaring.  Residunya  di  maserasi  kembali selama  24  jam.  Setelah  itu  filtrat  yang dihasilkan diuapkan menggunakan evaporator.  Hasil  dari  proses  evaporasi berupa ekstrak cair yang diuapkan kembali pada waterbath dengan suhu 60°C sehingga diperoleh ekstrak kental.

## Pembuatan  Salep  Ekstrak  Rimpang Lengkuas Putih
Pembuatan  salep  ekstrak  rimpang lengkuas  dengan  konsentrasi  3%,  5%  dan 10%  di  mulai  dengan  mensterilkan peralatan  yang  akan  digunakan.  Basis salep  ditimbang  dalam  cawan  porselen dengan  menggunakan  neraca  analitik. Setelah  itu  basis  salep  dituang  dalam mortar  yang  telah  disterilkan  lalu  diaduk sampai  homogen,  saat  basis  salep  agak dingin  lalu  ekstrak  lengkuas  dituang kedalam  basis  kemudian  diaduk  lagi sampai  benar-benar  homogen  dan  dingin. Salep yang sudah jadi kemudian ditempatkan pada pot salep yang disterilkan. Formula standart: R/  Adeps lanae 15 g Vaselin Flavum ad 85 g Aquades qs m.f. salep    100 g
Pembuatan  salep  ekstrak  rimpang lengkuas putih dengan berbagai kosentrasi:
a. Cara  pembuatan  salep  ekstrak  rimpang lengkuas putih 3%
R/  Ekstrak  rimpang  lengkuas  putih 0.6 g
Basis salep 19.4 g
m.f. salep  20    g
Digerus sampai homogen dalam lumpang panas
b. Cara pembuatan salep ekstrak rimpang lengkuas putih 5% R/  Ekstrak  rimpang  lengkuas  putih 1 g Basis salep 19 g m.f. salep  20 g Digerus sampai homogen dalam lumpang panas
c. Cara pembuatan salep ekstrak rimpang lengkuas putih 10% R/  Ekstrak  rimpang  lengkuas  putih 2  g Basis salep 18 g m.f. salep  20 g Digerus sampai homogen dalam lumpang panas Pembuatan Standar Kekeruhan Larutan (Larutan Mc. Farland)
Larutan  H 2 SO 4 0,36  N  sebanyak 99,5  ml  dicampurkan  dengan  larutan BaCl 2 .2H 2 O  1,175%  sebanyak  0,5  ml dalam  erlenmeyer.  Kemudian  dikocok sampai  terbentuk  larutan  yang  keruh. Kekeruhan  ini  dipakai  sebagai  standar kekeruhan  suspense  bakteri  uji  (Victor, 1980).

## Pembuatan Suspensi Bakteri
Pembuatan  suspensi  bakteri  dari biakan  murni  :  Bakteri  uji  S.  aureus berumur  24  jam  pada  Nutrient  agar  yang berupa  biakan  murni  dimasukan  kedalam tabung  media  yang  berisi  media  Brain Heart  Infussion  menggunakan  jarum  ose secara aseptis kemudian disetarakan dengan  Larutan  Mc.  Farland  yang  setara dengan  758  juta  bakteri  S.  aureus  dan diinkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam.
Pengujian  Efektivitas  Salep  Ekstrak Rimpang Lengkuas Putih Dengan Kosentrasi 3%, 5% dan 10%
Salep  ekstrak  lengkuas  dengan berbagai  kosentrasi  diuji  efek  bakterinya
dengan menggunakan 3 ekor kelinci jantan putih  (New  Zealand  White)  yang  berumur ±2-3  bulan  dengan  berat  badan  ±1,5-2  kg kemudian  bulu  pada  punggung  kelinci dicukur  dan  dipilih  3  lokasi  di  bagian kanan  dan  2  lokasi  dibagian  kiri  dengan masing-masing  jarak  ±5  cm.  Suspensi  S. aureus  disuntikan  sebanyak  0,2  ml  pada masing-masing lokasi yang telah disiapkan.

## Pengamatan  Hasil  Pengujian  Efek Antibakteri
Pengamatan  waktu  penyembuhan dilakukan dengan cara mengamati lamanya  penyembuhan  infeksi  S.  aureus pada  kulit  punggung  kelinci  setelah pemberian salep dengan hilangnya eritema dan  nanah.  Salep  dioleskan  3x  sehari sebanyak 0.1 g.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Ekstraksi
Hasil maserasi berupa filtrat berwarna  kuning  kecoklatan  sebanyak 1276 ml. Kemudian diuapkan menggunakan evaporator hingga diperoleh ekstrak  cair  79,78  gram.  Selanjutnya diuapkan  kembali  dengan  menggunakan waterbath  dengan  suhu  60°C  hingga diperoleh ekstrak kental 6,25 g. Ekstrak ini digunakan  untuk  pembuatan  salep  yang dilanjutkan  dengan  pengujian  efektivitas antibakteri.

## Uji Aktivitas Antibakteri Salep Ekstrak Rimpang Lengkuas Putih
Kosentrasi ekstrak rimpang
Lengkuas  putih  yaitu  3%,  5%  dan  10%, jumlah  bakteri  yang  diinfeksikan  0,2  ml. Efek  antibakteri  dapat  terlihat  dari  cepat sembuhnya  infeksi  yang  dapat  diamati dengan  hilangnya  nanah  dan  keringnya luka dalam ukuran hari. Hasil pengamatan dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1.  Hasil Pengamatan Eritema Dan Perkembangan Infeksi Setelah Pemberian Salep
Ekstrak Rimpang Lengkuas Putih Dengan Basis Salep Pada Ketiga Kosentrasi Basis Salep Repli kasi Pengamatan infeksi Staphylococcus aureus setelah pemberian salep (jam) Waktu Sembuh (hari) 4 24 48 72 96 120  144  168  192  216  240 Kontrol (+) I II III + + + n n n n n n n n n n nh nh nh k k k s s s s s s s s s s s s s s 5 4 4 Kontrol (-) I II III + + + n n n n n n n n n n n n n n n n n n n n n n n nh nh nh k k k s 9 9 8 3% I II III + + + n n n n n n n n n n n n n n n n n n nh n n k nh nh s k k s s s 7 8 8 5% I II III + + + n n n n n n n n n n n n n n n n nh n nh k nh k s s s s s s s s 7 6 7 10% I II III + + + n n n n n n n n n n n n nh nh n k k nh s s k s s s s s s s s s 5 5 6 Ket : +  :  eritema nh  : nanah hilang      s  : sembuh
n  :  nanah
k    : kering
Data menunjukan
waktu penyembuhan  setelah  pemberian  salep dengan  kosentrasi  3%,  5%  dan  10% terhadap  Staphylococcus  aureus  pada  3 ekor  punggung  kelinci,  salep  ekstrak rimpang Lengkuas putih dengan kosentrasi 3%  dapat  menyembuhkan  dalam  waktu  7- 8 hari, kosentrasi 5% dapat menyembuhkan  dalam  waktu  6-7  hari, kosentrasi  10%  dapat  menyembuhkan dalam  waktu  5-6  hari,  kontrol  negatif dapat  menyembuhkan  dalam  waktu  8-9 hari,  sedangkan  kontrol  positif  dapat menyembuhkan dalam waktu 4-5 hari.
Hasil  uji  daya  antibakteri  salep ekstrak rimpang Lengkuas putih pada kulit punggung kelinci yang terinfeksi S. aureus menunjukan  bahwa  sediaan  salep  tersebut mampu  menghambat  pertumbuhan  bakteri uji,  yang  waktu  penyembuhan  infeksi ditandai  dengan  hilangnya  nanah  sampai keringnya  luka  pada  kulit  punggung kelinci.  Perbandingan  daya  anti  bakteri salep  ekstrak  rimpang  Lengkuas  putih dengan  kosentrasi  3%,  5%  dan  10% menunjukan bahwa kosentrasi 10% memiliki  daya  antibakteri  paling  efektif dibandingkan  dengan  kosentrasi  yang  lain dan dibuktikan dengan waktu penyembuhan  yang  lebih  cepat.  Salep ekstrak rimpang Lengkuas putih kosentrasi 3%  dan  5%  memiliki  daya  antibakteri yang  kurang  efektif,  hal  ini  karena kosentrasi  zat  aktif  terlalu  kecil  sehingga pelepasan  zat  aktif  dari  basis  salep  terlalu sedikit.  Penyembuhan  luka  infeksi  pada punggung kelinci oleh bakteri Staphylococcus aureus dikarenakan adanya kandungan flavonoid pada rimpang Lengkuas putih.
Data  yang  didapat  kemudian  diuji sebaran datanya menggunakan uji Levene’s  Test  of  Equality  of  Error Variances  (uji homogenitas), dari hasil uji tersebut didapatkan hasil signifikan sebesar  1.000  (data  dapat  dilihat  pada lampiran  10).  Karena  nilai  signifikan  uji homogenitas lebih besar dari 0.05 (P>0.05)  maka  dapat  dikatakan  bahwa sebaran datanya homogen hingga
memenuhi  syarat  dilakukan  uji  statistik untuk  melihat  apakah  ada  perbedaan  yang signifikan dari lima perlakuan menggunakan One Way Anova (Analisis of variant) dengan taraf kepercayaan 95%.
Hasil  pengujian  anova  dengan menggunakan  uji  F  menunjukan,  nilai  F hitung  sebesar  27,000  sedangkan  F  tabel sebesar 3,348. Sehingga dapat disimpulkan salep  ekstrak  rimpang  Lengkuas  putih memiliki  efek.  Karena  hasil  anova menyatakan  H 1 diterima,  maka  perlu dilanjutkan dengan uji perbandingan untuk melihat  adanya  perbedaan  efektivitas antibakteri antar perlakuan dengan menggunakan  uji  LSD  (Least  Significant Difference).  Hasil  LSD  menunjukkan pasangan  kelompok  perlakuan  antara kontrol  negatif,  salep  ekstrak  rimpang Lengkuas  putih  3%,  5%,  10%  dan  kontrol positif  ada  perbedaan.  Berdasarkan  hasil uji lanjut menggunakan LSD, dapat dilihat bahwa kelompok kontrol negatif menunjukkan perbedaan yang nyata terhadap  kelompok  salep  ekstrak  rimpang Lengkuas  putih  5%,  10%  dan  kelompok kontrol  positif  (P  <  0,05),  sedangkan kelompok salep ekstrak rimpang Lengkuas putih 3% menunjukkan tidak ada perbedaan  yang  nyata  dengan  kelompok kontrol    negatif    dan  kelompok  salep ekstrak  rimpang  Lengkuas  putih  5%  (P  > 0,05).  Selain  itu,  kelompok  salep  ekstrak rimpang Lengkuas putih 10% menunjukkan  tidak  ada  perbedaan  yang nyata  dengan  kelompok  kontrol  positif  (P >  0,05).  Hal  ini  berarti  kosentrasi  ekstrak tersebut  menunjukkan  efek  yang  sama dalam penyembuhan luka punggung kelinci  yang  terinfeksi  S.  aureus.  Efek antibakteri  yang  paling  baik  terlihat  pada salep  ekstrak  rimpang  Lengkuas  putih dengan  kosentrasi  10%.  Sedangkan  efek antibakteri  terkecil  terlihat  pada  salep ekstrak rimpang Lengkuas putih 3%. Luka pada  punggung  kelinci  yang  terinfeksi  S. aureus yang diolesi salep ekstrak Lengkuas putih 10% menunjukkan penyembuhan lebih cepat dibanding dengan  salep  ekstrak  rimpang  Lengkuas
3%  dan  10%.  Ini  membuktikan  bahwa semakin  tinggi  kosentrasi  ekstrak  rimpang Lengkuas  putih  dalam  salep,  maka semakin  cepat  pula  penyembuhan  pada luka  punggung  kelinci  yang  terinfeksi  S. aureus.  Hal  ini  dikarenakan  semakin meningkatnya senyawa-senyawa berkhasiat  dalam  ekstrak  yang  dapat menghambat pertumbuhan bakteri.
Dalam  penelitian  ini,  aktivitas antibakteri rimpang Lengkuas putih diduga karena adanya kandungan senyawa- senyawa  berkhasiat,  seperti  flavonoid. Flavonoid  berfungsi  sebagai  antibakteri dengan  cara  mengikat  protein  bakteri sehingga  menghambat  aktivitas  enzim yang  pada  akhirnya  mengganggu  proses metabolisme bakteri. Sifat lipofilik flavonoid  dapat  merusak  membran  sel bakteri  karena  membran  sel  mengandung lipid  sehingga  memungkinkan  senyawa tersebut  melewati  membran  (Robinson, 1995).

## KESIMPULAN
1. Salep  ekstrak  rimpang  Lengkuas  putih terbukti dapat memberikan efek antibakteri terhadap infeksi Staphylococcus aureus pada kelinci.
2. Salep  ekstrak  rimpang  Lengkuas  10% merupakan  salep  dengan  kosentrasi terbaik  pada  aktifitas  antibakteri  S. aureus.

## SARAN
Perlu  dilakukan  penelitian  lebih lanjut  untuk  mengetahui  apakah  salep ektrak  rimpang  Lengkuas  putih  memiliki aktivitas  antibakteri  terhadap  bakteri  uji lain.

## DAFTAR PUSTAKA
J a w e t z ,   E . ,   J .   L   M e l n i c k   d a n   F .
A .   A d e l b e r g .   2005. Mikrobiologi
Kedokteran. Edisi 1. Salemba Medika, Jakarta.
Radji, M. 2011. Mikrobiologi. Buku Kedokteran. EGC, Jakarta.
Robinson, T. 1995. Kandungan Organik Tumbuhan Tinggi. Edisi 6. ITB Press, Bandung.
Syamsuni H.A. 2006. Ilmu Resep. EGC, Jakarta
Viktor, L. 1980. Antibiotics in Laboratory
Test. The Williams and Wilkins Company, USA.
Widawati, R. 2008. Efek Kosentrasi Ekstrak Rimpang Lengkuas Terhadap Pertumbuhan Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermis Marples dan Escherichia coli Castellani et Chalmers [Tesis]. Program Pascasarjana, Universitas Andalas.