Vol. 8 (1) : 38 - 49

## SKRINING FITOKIMIA DAN AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK KULIT
BATANG ( Eusideroxylon zwageri ) TERHADAP Escherichia coli DAN Salmonella typhi
(Phytochemicals screening and antibacterial activities of Eusideroxylon zwageri wood bark extract against Escherichia coli and Salmonella typhi)

## Hana Wila, Fathul Yusro, Yeni Mariani
Fakultas Kehutanan Universitas Tanjungpura Jalan Imam Bonjol Pontianak 78124 Email: hana.hana.hh770@gmail.com

## Abstract
Diarrhea  and  typhoid  fever  are  diseases  commonly  suffered  by  people  in  Indonesia,  and bacteria  such  as  Escherichia  coli  (diarrhea)  and  Salmonella  typhi  (typhoid  fever)  are  one  of those diseases causative agents. Various plants are potentially used as anti-bacterial including ulin  (Eusideroxylon  zwageri).  The  aims  of  this  study  were  to  analysis  the  yield  and  potential secondary  metabolite  content  in  ethanol  extract  of  E.  zwageri,  and  determine  the  optimal concentration in inhibits the growth of bacteria E. coli and S. typhi. The methods used in this study  were  measure  the  moisture  content  of  E.  zwageri  wood  bark  powder,  extraction  with ethanol  solvent,  measure  the  yield  percentage,  qualitative  of  phytochemical  analysis,  and antibacterial  assays.  The  results  showed  that  the  yield  of  ethanol  extract  of  E.  zwageri  is 21,63%  with  7,6%  of  moisture  content.  The  extract  positively  contained  alkaloids,  flavonoids, tannins, saponins, phenolics and terpenoids. The optimum concentration in inhibits the growth of  bacteria  E.  coli  is  200  mg/ml  and  categorized  as  very  strong  inhibition  response,  and  15 mg/ml  is  concentration  used  in  inhibits  the  S.  typhi  and  categorized  as  strong  inhibition response.
Keywords:  Antibacterial  activity,  Escherichia  coli,  Eusideroxylon  zwageri,  phytochemical screening, Salmonella typhi.

## PENDAHULUAN
Indonesia sebagai negara berkembang tidak  terlepas  dari  beragam  masalah kesehatan,  salah  satunya  adalah  penyakit yang  terkait  dengan  sanitasi  yaitu  diare. Diare  merupakan  suatu  kondisi  dimana frekuensi  buang  air  besar  lebih  dari  tiga kali  dalam  sehari  dengan  bentuk  feces yang  lembek  ataupun  cair  (Kemenkes, 2011).  Penyakit  ini  merupakan  salah  satu penyebab  kematian  utama  pada  balita (WHO,  2009;  Kemenkes  RI,  2011), dengan tingkat insidensi sebesar 3,5% dan prevalensi  sebesar  7%  (Kemenkes  RI, 2011).  Penyakit  lain  yang  mempunyai gejala  berupa  diare  disertai  demam,  perut kembung,  badan  terasa  lemah,  mual,
pusing  dan  muntah  adalah  demam  tifus (tifoid)  (Pelczar  dan  Chan,  2005).  Feces yang  keluar  dikarenakan  diare  akibat demam  tifus  biasanya  disertai  darah  dan terjadi pada minggu kedua selama periode sakit ataupun penyembuhan (WHO, 2009; Pelczar dan Chan, 2005). Penyebab utama penyakit  diare  dan  demam  tifoid  adalah bakteri  pathogen.  Salah  satu  jenis  bakteri penyebab  diare  adalah Escherichia  coli dan  penyebab  demam  tifus  adalah Salmonella typhi (Sari et al. 2015).
Pengobatan tradisional telah digunakan oleh masyarakat untuk
mengatasi penyakit diare dan demam tifus.
Dipilihnya  pengobatan  tradisional  karena bahan bakunya yang tersedia dilingkungan
sekitar,  harga  lebih  murah  dan  memiliki efek  samping  yang  lebih  rendah  jika dibandingkan dengan obat modern (Wasito, 2011).
Kalimantan  Barat  memiliki  beragam jenis  tumbuhan  obat,  dan  saat  ini  telah terdata  sebanyak  208  species  yang digunakan  untuk  perawatan  kesehatan maupun  untuk  pengobatan  terhadap penyakit  (Yusro et  al .  2013,  Yusro et  al.
2014).  Salah  satu  diantaranya  adalah  ulin ( Eusideroxylon zwageri ) yang termasuk ke dalam  famili  Lauraceae  (Heyne,  1987) yaitu  sebagai  obat  sakit  perut  (Mariani et al. 2016), sakit kuning (liver) dan bengkak (Yusro et al. 2013).
Darussalam (2016) melaporkan
bahwa  ekstrak  kayu  ulin  mengandung alkaloid,  flavonoid,  triterpenoid,  tanin, saponin,  dan  potensial  sebagai  obat  diare yang tunjukkan dengan aktivitasnya dalam menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus  aureus .  Ekstrak  daun  ulin telah terbukti mampu mengatasi inflamasi atau peradangan pada usus (Mariani et al. 2016).  Berdasarkan  hasil-hasil  penelitian diatas  maka  ulin  berpotensi  untuk dijadikan  sebagai  obat  alternatif  untuk antibakteri.  Sejauh  ini  penelitian  yang telah  dilakukan  adalah  terhadap  bagian kayu  dan  daun E.  zwageri namun  belum ada penelitian yang dilakukan pada bagian kulit batang E. zwageri terhadap bakteri E. coli dan S. typhi.
Hasil penelitian pendahuluan
menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  kulit batang E.  zwageri dengan  konsentrasi  10 mg/ml  mampu  menghambat  bakteri S. typhi sebesar 18 mm, dan pada konsentrasi
100 mg/ml mampu menghambat pertumbuhan  bakteri E.  coli sebesar  9,5
mm.  Dengan  adanya  potensi  dari  kulit batang E.  zwageri dalam  menghambat pertumbuhan E.  coli dan S.  typhi maka perlu dilakukan penelitian untuk
mengetahui  konsentrasi  optimum  dalam menghambat pertumbuhan bakteri tersebut dan  golongan  senyawa  bioaktif  potensial yang  terkandung  dalam  ekstrak  etanol kulit  batang E.  zwageri .  Penelitian  ini bertujuan  untuk  menganalisis  rendemen dan  golongan  senyawa  bioaktif  potensial yang  terkandung  dalam  ekstrak  etanol kulit  batang E.  zwageri serta  konsentrasi optimumnya dalam menghambat pertumbuhan bakteri E. coli dan S. typhi .

## METODOLOGI PENELITIAN
Alat dan Bahan Penelitian  ini  dilakukan  di  Bagian Laboratorium Wood Work Shop , Laboratorium  Teknologi  Kayu  Fakultas Kehutanan Universitas Tanjungpura, Laboratorium Kimia Fakultas Matematika dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam  Universitas Tanjungpura,  dan  Unit  Laboratorium Kesehatan  Provinsi  Kalimantan  Barat. Alat  yang  digunakan  antara  lain hammer mill , mesh screen, s haker, rotary evaporator,  autoclave, mikroskop  digital, mikropipet,  dan  inkubator.  Bahan-bahan yang  digunakan  adalah  kulit  batang E.zwageri yang diperoleh dari Desa Bumi Emas Kecamatan Bengkayang Kabupaten Bengkayang,  isolat  bakteri E.coli dan S.typhi , etanol 96%, H 2 SO 4 2N, asam asetat anhidrat, asam sulfat pekat, dietil eter, HCl pekat, serbuk magnesium, metanol, NaOH 10%, HCl 2N, FeCl 3 1%, pereaksi meyer, pereaksi dragendorff, dan pereaksi wagner, kertas  cakram,  media PCA ( Plat  Count Agar ), etanol, dan tetracyline .
Prosedur Penelitian
Vol. 8 (1) : 38 - 49
Persiapan Sampel Kulit batang E.zwageri pada ketinggian  diatas  50  cm  diambil  dengan menggunakan pisau tanpa melukai kambiumnya.  Bagian  kulit  yang  diambil adalah  kulit  bagian  dalam  yang  berwarna merah  kecoklatan.  Kulit  kayu  yang diperoleh  selanjutnya  dibersihkan  dari kulit  luar  serta  benda  asing  (kotoran  atau lumut),  dijemur  hingga  kering  dan dipotong  kecil  dengan  ukuran ± 2cm.
Potongan kulit tersebut  selanjutnya  dibuat serbuk  mengunakan hammer  mill dan hasilnya  disaring  dengan  menggunakan saringan lolos 40 mesh tertahan 60 mesh. Pengukuran Kadar Air
Kulit batang E.zwageri dengan berat 2 gram  di  oven  dengan  suhu  103±2 0 C selama  24  jam.  Setelah  itu,  serbuk didinginkan  didalam  desikator  selama  15 menit  dan  ditimbang  perubahan  beratnya. Proses  pengovenan  dilakukan  secara berulang  seperti  prosedur  awal  hingga diperoleh  berat  yang  konstan.  Kadar  air dihitung  dengan  persamaan:  (Haygreen dan Bowyer, 1996; Manuhuwa, 2007)
% Kadar air = 𝑎−𝑏 𝑏 𝑥 100%
Dimana : 𝑎 = berat serbuk sebelum dikeringkan (g) 𝑏 = berat serbuk setelah dikeringkan (g)
Ekstraksi Pengukuran Rendemen Ekstrak
Serbuk  kulit  batang E.  zwageri dengan  berat  1  gram  diekstraksi  dengan menambahkan 50 ml pelarut etanol. Proses ekstraksi  dilakukan  selama  24  jam  dan secara  kontinyu  dikocok  menggunakan shaker . Setelah itu, ekstrak yang diperoleh disaring  dan  residu  yang  diperoleh selanjutnya  diekstraksi  kembali  seperti perlakuan  awal  hingga  diperoleh  ekstrak
yang  jernih.  Filtrat  yang  diperoleh selanjutnya diuapkan dengan menggunakan waterbath pada  suhu  60 ℃ hingga diperoleh ekstrak kering. Rendemen ekstrak diukur dengan persamaan (Rahmah et al. 2014):
% Ekstrak= 𝑎 (1−𝑥)𝑏 𝑥 100%
Dimana:
𝑎 = berat ekstrak (g)
𝑏 = berat serbuk (g) 𝑥 = kadar air Penyiapan Ekstrak untuk Sampel Pengujian
Serbuk  kulit  batang E.  zwageri dengan berat 200 gram diekstraksi dengan menambahkan  1000  ml  pelarut  etanol (perbandingan  1:5).  Proses  ekstraksi dilakukan  selama  24  jam  dan  secara kontinyu  dikocok  menggunakan shaker . Setelah itu, ekstrak yang diperoleh disaring dan  residu  yang  diperoleh  selanjutnya diekstraksi kembali seperti perlakuan awal sebanyak  4  kali.  Filtrat  yang  diperoleh selanjutnya diuapkan menggunakan rotary evaporator pada  suhu  59-60 0 C  hingga diperoleh  ekstrak  pekat  dan  selanjutnya ekstrak tersebut dikeringkan menggunakan waterbath pada  suhu  60 ℃ hingga diperoleh  ekstrak  kering.  Hasil  ekstrak tersebut  digunakan  sebagai  bahan  untuk pengujian  fitokimia  dan  aktivitas  anti bakteri.

## Skrining Fitokimia
Pengujian  kualitatif  fitokimia  ekstrak etanol  kulit  batang E.  zwageri mengacu pada    Harborne  (1996)  dengan  sedikit modifikasi. Ekstrak kering dengan berat 1 gram  diencerkan  dengan  pelarut  metanol (10  ml)    (Mailuhu et  al. 2017)  dan selanjutnya  dilakukan  pengujian  alkaloid,
flavonoid,  steroid,  triterpenoid,  saponin dan fenolik.

## Uji Alkaloid
Sebanyak  3  buah  tabung  reaksi dimasukkan 1 ml ekstrak dan ditambahkan 10  tetes  H 2 SO 4 2N.  Selanjutnya  pereaksi dragendorff  ditambahkan  pada  tabung pertama,  pereaksi  wagner  pada  tabung kedua,  dan  pereaksi  meyer  pada  tabung ketiga.  Apabila  pada  tabung  pertama terbentuk endapan berwarna merah jingga, endapan  berwarna  coklat  pada  tabung kedua,  dan  endapan  berwarna  putih  pada tabung  ketiga  maka  ekstrak E.  zwageri positif mengandung alkaloid.
Uji Flavonoid a. HCl Pekat dan Magnesium (Mg)
Sebanyak 2 tetes HCl pekat
ditambahkan  pada  tabung  reaksi  yang telah berisi 1 ml ekstrak dan dikocok kuat. Selanjutnya, ditambahkan juga serbuk Mg dan  dikocok  kembali.  Apabila  terbentuk buih/busa  dalam  intensitas  besar  serta terjadi  perubahan  warna  menjadi  jingga maka ekstrak E. zwageri positif mengandung flavonoid
b. H 2 SO 4
Sebanyak 2 tetes H 2 SO 4 2N ditambahkan  pada  tabung  reaksi  yang telah berisi 1 ml ekstrak dan dikocok kuat. Apabila  terjadi  perubahan  warna  ekstrak E.  zwageri menjadi  kuning,  merah,  hijau atau  coklat,  maka  positif  mengandung flavonoid.
c. NaOH 10%
Sebanyak  2  tetes  NaOH  10% ditambahkan  pada  tabung  reaksi  yang telah berisi 1 ml ekstrak dan dikocok kuat. Apabila  terjadi  perubahan  warna  ekstrak E.  zwageri menjadi  kuning,  merah,  atau
coklat, maka positif mengandung flavonoid. Uji Tanin Sebanyak 10 tetes FeCl 1%
ditambahkan  pada  tabung  reaksi  yang telah  berisi  1  ml  ekstrak.  Apabila  terjadi perubahan  warna  ekstrak E.  zwageri menjadi  hijau  kehitaman  atau  biru kehitaman,  maka  positif  mengandung flavonoid.
Uji Triterpenoid dan Steroid
Ekstrak E.  zwageri diteteskan  pada  3 buah  lubang  di  plat  tetes , dimana  pada lubang  pertama  sebagai  kontrol/standar, kedua  untuk  uji  triterpenoid  dan  ketiga untuk uji steroid. Biarkan ekstrak tersebut hingga mengering, dan selanjutnya ditambahkan  1  tetes  H 2 SO 4 pekat,  1  tetes asam asetat anhidrat dan 2 tetes dietil eter. Apabila  terjadi  perubahan  warna  ekstrak E. zwageri menjadi merah, biru, ungu atau coklat maka positif mengandung terpenoid (triterpenoid),  dan  apabila  menjadi  warna biru  atau  hijau  maka  positif  mengandung steroid.

## Uji Saponin
Sebanyak 5 ml air panas ditambahkan pada  tabung  reaksi  yang  telah  berisi  1  ml ekstrak  dan  dikocok  selama  1  menit. Selanjutnya,  ditambahkan  juga  HCl  2N sebanyak  2  tetes  dan  dikocok  kembali. Apabila terbentuk buih/busa dalam intensitas  besar  dan  konsisten  selama  10 menit  maka  ekstrak E.  zwageri positif mengandung saponin.

## Uji Fenolik
Sebanyak  2–3  tetes  besi  (III)  klorida (FeCl 3 )  1%  ditambahkan  pada  tabung reaksi  yang  telah  berisi  1  ml  ekstrak. Apabila  terjadi  perubahan  warna  ekstrak
E. zwageri menjadi warna biru kehitaman maka positif mengandung fenolik.

## Uji Aktivitas Antibakteri
Sebanyak 20 µl larutan ekstrak etanol kulit batang E.zwageri dengan konsentrasi 1,5,10 dan 15 mg/ml untuk bakteri S.typhi ; 50, 100, 150 dan 200 mg/ml untuk bakteri
E.coli dan antibiotik (30 μ g/ml) diteteskan menggunakan  mikropipet  pada  kertas cakram berdiameter 5 mm. Kertas cakram
tersebut kemudian diletakkan pada biakan bakteri  dalam  cawan  petri  menggunakan pinset  steril.  Biakan  bakteri  tersebut kemudian  diinkubasi  selama  24  jam  pada suhu  35 o C.  Zona  hambat  (mm)  yang terbentuk  menunjukkan  adanya  aktivitas antibakteri. Respon ekstrak dalam menghambat  pertumbuhan  bakteri  dapat diklasifikasikan kedalam beberapa tingkatan (Anita et al. 2014), yaitu:
Tabel  1.  Klasifikasi  Respon  Hambatan  Pertumbuhan  Bakteri  ( Classification  of inhibition response ) Zona hambat (mm) Respon hambatan ≥ 20 mm Sangat Kuat 11-19 mm Kuat 5-10 mm Sedang <5 mm Lemah Data  zona  hambat  yang  diperoleh kemudian  dilakukan  analisis  statistik  dan uji  beda  nyata  jujur  (BNJ)  menggunakan SPSS 16 untuk melihat pengaruh perlakuan  terhadap  aktivitasnya  dalam menghambat pertumbuhan bakteri.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Rendemen Ekstrak E. zwageri
Rendemen ekstrak etanol kulit batang E.  zwageri yang  diperoleh  dari  hasil penelitian  ini  sebesar  21,63%  (kadar  air serbuk  7,6%).  Hasil  ini  lebih  tinggi  jika dibandingkan  dengan  bagian  lain  dari tanaman E.  zwageri dimana  pada  bagian daun  memiliki  rendemen  ekstrak  berkisar antara  4,33-8,99%  (Mariani et  al .  2016).
Mengacu  pada  pengelompokkan/kelas komponen kimia kayu Indonesia (Anonim, 1976),  rendemen  ekstrak  etanol  kulit batang E.  zwageri tergolong  tinggi  yaitu diatas 4%.
Tingginya  rendemen  ekstrak E. zwageri diduga  karena  pemilihan  bagian tanaman  dalam  hal  ini  adalah  kulit  kayu dan  penggunaan  pelarut  etanol.  Setiap
bagian  tanaman  memiliki  kadar  zat ekstraktif  yang  berbeda  dan  kadar  zat ekstraktif  yang  terdapat  pada  kulit  kayu lebih  tinggi  dengan  bagian  lain  dari  suatu tanaman  (Sjostrom,  1995).  Pelarut  etanol merupakan  pelarut  polar  yang  memiliki kemampuan  yang  baik untuk berpenetrasi kedalam membran sel, sehingga komponen-komponen  endoseluler  dapat diperoleh  secara  maksimal  yang  pada akhirnya  menyebabkan  rendemen  ekstrak menjadi  tinggi  (Silva,  1998).  Beberapa golongan  senyawa  yang  dapat  larut bersama  dengan  pelarut  etanol  antara  lain tanin, saponin, flavonoid, kuinon, minyak, lemak,  lilin,  alkaloid,  phenol,  aglikon  dan glikosida  (Hougton  dan  Raman,  1998; Filho,  2006;  Yusro,  2010).  Senyawa- senyawa  tersebut  sangat  potensial  sebagai antibakteri.

## Skrining Fitokimia
Golongan  senyawa  bioaktif  yang terdapat  pada  suatu  tanaman  dapat diketahui  dengan  melakukan  skrining fitokimia.  Hasil  penelitian  menunjukkan
bahwa  ekstrak  kulit  batang E.  zwageri positif  mengandung  beberapa  golongan
senyawa  bioaktif  yang  secara  jelas  tertera pada Tabel 2.
Tabel  2.  Hasil  skrining  fitokimia  ekstrak  kulit  batang E.  zwageri ( Results  of phytochemical screening analysis of wood bark E. zwageri extract ) Parameter Uji Hasil Alkaloid a) Mayer ++ b) Wagner ++ c) Dragendorff ++ Flavonoid a) HCL + Mg +++ b) H 2 SO 4 2N + c) NaOH +++ Terpenoid ++ Steroid - Fenolik +++ Tanin +++ Saponin ++ Keterangan: - = Tidak ada
+ = Sedikit ++ = Sedang +++ = Banyak
Tabel 2 diatas menunjukkan bahwa ekstrak kulit batang E. zwageri mengandung tannin, phenol dan flavonoid  dalam  level  yang  banyak; saponin,  terpenoid  dan  alkaloid  dalam level  sedang;  dan  tidak  terdapatnya golongan  senyawa  steroid.  Beberapa hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa senyawa  alkaloid,  flavonoid,  terpenoid (Anita et  al. 2014),  lipid  dan  saponin (Dasopang, 2017) serta tanin (Nurviana, 2016)  dapat  berfungsi  sebagai  anti bakteri.  Hasil  ini  mengindikasikan bahwa  ekstrak  kulit  batang E.  zwageri memiliki  golongan  senyawa  bioaktif yang potensial sebagai antibakteri.
Uji Aktivitas Antibakteri
Uji Aktivitas Antibakteri E.coli Pada penelitian ini, aktivitas antibakteri  ekstrak  kulit  batang E. zwageri diuji  terhadap  bakteri E.  coli pada  beberapa  level  konsentrasi  yaitu 50,  100,  150  dan  200  mg/ml.  Hasil penelitian  menunjukkan  bahwa  ekstrak kulit batang E. zwageri dapat menghambat  pertumbuhan  bakteri E.
coli yang ditunjukkan dengan
terbentuknya  zona  bening  disekitar kertas  cakram,  yang  hasilnya  secara jelas dapat dilihat pada Gambar 1 dan 2.
Vol. 8 (1) : 38 - 49
Gambar 1. Grafik zona hambat ekstrak kulit batang E. zwageri terhadap pertumbuhan E. coli. ( Graph of  inhibition zone of wood bark extract  of  E. zwageri  againts the growth of E. coli ) Keterangan: c- = kontrol negatif
c+ = kontrol positif
a,b,c,d,e=  angka  yang  ditandai  dengan  huruf  yang  tidak  sama  menunjukkan  pengaruh  berbeda nyata atau signifikan pada taraf kepercayaan 99%.
Dari  Gambar  1  terlihat  bahwa konsentrasi  200  mg/ml  memiliki  daya hambat  lebih  tinggi  yang  ditunjukkan dengan  zona  hambatnya  sebesar  24,33 mm, diikuti oleh konsentrasi 150 mg/ml sebesar  14,67  mm,  100  mg/ml  sebesar 9,67  mm,  50  mg/ml  sebesar  7,67  mm, sedangkan untuk kontrol negatif
(pelarut etanol) tidak menunjukkan daya hambat  terhadap  pertumbuhan E.  coli .
Jika dibandingkan dengan obat
antibiotik  ( tetracycline) sebagai  kontrol positif  yang  memiliki  daya  hambat sebesar  25  mm,  maka  konsentrasi  50, 100 dan 150 mg/ml ekstrak kulit batang E.  zwageri mempunyai  daya  hambat yang rendah.
Konsentrasi  50,  100,  150  dan  200 mg/ml, serta kontrol positif memberikan
pengaruh  yang  signifikan  atau  berbeda nyata  dalam  menghambat  pertumbuhan E.  coli jika  dibandingkan  dengan kontrol  negatif.  Hasil  respon  hambatan pada  zona  hambat  pertumbuhan E.  coli menunjukkan  bahwa  konsentrasi  200 mg/ml memiliki respon hambatan sangat kuat , diikuti 150 mg/ml memiliki respon  hambatan  kuat,  100  mg/ml  dan 50  mg/ml  memiliki  respon  hambatan sedang.
Level  konsentrasi  optimum  ekstrak kulit  batang E.  zwageri adalah  yang memiliki  respon  hambatan  kuat  atau sangat  kuat  terhadap  pertumbuhan E.coli yaitu pada konsentrasi 150 mg/ml dan  200  mg/ml.  Pada  konsentrasi  200 mg/ml,  zona  hambat  yang  terbentuk sudah setara dengan antibiotik
a e b c d e 0 5 10 15 20 25 30 c- c+ 50 mg/ml 100 mg/ml 150 mg/ml 200 mg/ml d ia m et er zo na ha m ba t (m m ) Perlakuan
( tetracycline )  yang  ditunjukkan  dengan tidak adanya perbedaan  yang signifikan diantara keduanya. Hal ini
menunjukkan  bahwa  ekstrak  tersebut pada  konsentrasi  200  mg/ml  memiliki kemampuan  yang  sebanding  dengan tetracycline dalam menghambat pertumbuhan bakteri E.coli. Tetracycline merupakan  golongan  obat
antibiotik yang memiliki spektrum yang luas  dan  sensitif  terhadap  bakteri  gram negatif seperti E.coli . Tetracycline akan terakumulasi  didalam  sel  bakteri  dalam bentuk ionik ketika melewati membrane sitoplasma, sehingga dapat menghambat sistesis  protein  dan  pada  akhirnya menyebabkan  kematian  sel  bakteri (Pratiwi, 2008).
Gambar 2. Zona hambat terhadap bakteri E. coli : A. Kontrol negatif; B. Kontrol positif;
C. ekstrak kulit batang E. zwageri (50,100,150, dan 200 mg/ml) ( Diameter of inhibition zone on bacteria E. coli: A. Negative control; B. Positive control; C. E. zwageri wood bark extract concentration levels (50, 100, 150, and 200 mg/ml ) Uji Aktivitas Antibakteri S.typhi
Pada penelitian ini, aktivitas antibakteri ekstrak etanol kulit batang E.
zwageri diuji  terhadap  bakteri S.  typhi pada beberapa level konsentrasi yaitu 1, 5,  10  dan  15  mg/ml.  Hasil  penelitian menunjukkan bahwa ekstrak kulit
batang E.  zwageri dapat  menghambat pertumbuhan  bakteri S.  typhi yang ditunjukkan  dengan  terbentuknya  zona bening  disekitar  kertas  cakram,  yang hasilnya  secara  jelas  dapat  dilihat  pada Gambar 3 dan 4.
A B C
Vol. 8 (1) : 38 - 49
Gambar 3. Grafik zona hambat ekstrak kulit batang E. zwageri terhadap pertumbuhan S. typhi. ( Graph of inhibition zone of wood bark extract of E. zwageri againts the growth of S. typhi ).
Keterangan: c- = kontrol negatif c+ = kontrol positif
a,b,c,d,e= angka yang ditandai dengan huruf yang tidak sama menunjukkan pengaruh berbeda nyata atau signifikan pada taraf kepercayaan 99%.
Gambar  4.  Zona  hambat  terhadap  bakteri S.  typhi : A.  Kontrol  negatif;  B.  Kontrol positif; C.   Ekstrak kulit batang E. zwageri (1,5,10 dan 15 mg/ml). ( Diameter of  inhibition  zone  on  bacteria  S.  typhi;  A.  Negative  control;  B.  Positive control; C. E. zwageri wood bark extract concentration levels ( 1 , 5, 10, and15 mg/ml).
Gambar 3 dan 4 menunjukkan bahwa ekstrak  kulit  batang E.  zwageri dapat menghambat pertumbuhan S.typhi dimana pada konsentrasi 15 mg/ml memiliki daya hambat  lebih  tinggi,  yang  ditunjukkan dengan  zona  hambatnya  sebesar  14,33
mm,  diikuti  oleh  konsentrasi  10  mg/ml sebesar  12,33  mm,  5  mg/ml  sebesar  9,33 mm, 1 mg/ml sebesar 7,33 mm, sedangkan untuk kontrol negatif (pelarut etanol) tidak menunjukkan  daya  hambat  terhadap pertumbuhan S.  typhi .  Jika  dibandingkan
A B C a f b c d e 0 5 10 15 20 25 30 c- c+ 1 mg/ml 5 mg/ml 10 mg/ml 15 mg/ml dia m et er zo na ha m ba t (m m ) Perlakuan
dengan  obat  antibiotik  ( tetracycline) sebagai kontrol positif yang memiliki daya hambat  sebesar  25  mm,  maka  seluruh konsentrasi  ekstrak  etanol  kulit  batang E. zwageri mempunyai  daya  hambat  yang lebih rendah.
Konsentrasi  1,  5,  10  dan  15  mg/ml, serta kontrol positif memberikan pengaruh yang  signifikan  atau  berbeda  nyata dibandingkan  dengan  kontrol  negatif dalam menghambat pertumbuhan S. typhi . Hasil respon hambatan  pada zona hambat pertumbuhan S. typhi menunjukkan bahwa konsentrasi  10  dan  15  mg/ml  memiliki respon hambatan kuat dan pada konsentrasi  1  dan  5  mg/ml  memiliki respon hambatan sedang. Level
konsentrasi  optimum  ekstrak  kulit  batang E.  zwageri adalah  yang  memiliki  respon hambatan  kuat  terhadap  pertumbuhan S.typhi yaitu  pada  konsentrasi  10  dan  15 mg/ml . Namun  hasil  ini  masih  lebih rendah jika dibandingkan dengan antibiotik  ( tetracycline )  yang  memiliki respon  hambatan  sangat  kuat  dalam menghambat pertumbuhan S.typhi.
Ekstrak  kulit  batang  E.  zwageri mengandung  golongan  senyawa  berupa alkaloid,  flavonoid,  terpenoid,  fenolik, tanin,  dan  saponin.  Diduga  senyawa- senyawa tersebut
menyebabkan
penghambatan  terhadap  pertumbuhan E.
coli dan S.  typhi. Struktur  dinding  sel  sel bakteri E.  coli dan S.  typhi tersusun  atas peptidoglikan,  lipoprotein  dan  membran luar fosfolipid yang mengandung lipopolisakarida.  Membran  sel  berfungsi sebagai  pembungkus  sel  yang  berada diluar membran sitoplasma dan perubahan-perubahan  tekanan  osmotik yang  terjadi  akan  dilindungi  oleh  lapisan
ini  (Johnson et  al .  2011).  Terjadinya penghambatan pertumbuhan bakteri disebabkan  oleh  kontak  senyawa  yang terdapat  dalam  ekstrak  yang  berdifusi kedalam  sel  bakteri,  dimana  beragamnya senyawa  yang  terdapat  dalam  ekstrak menyebabkan  aktivitas  biologisnya  juga berbeda-beda (Sumito et al . 2016).
Mekanisme  kerja  alkaloid,  flavonoid, fenolik  dan  terpenoid  (  Robinson,  1995; Cowan,  1999;  Anita et  al. 2014)  yaitu: alkaloid dalam menghambat pertumbuhan bakteri yaitu dengan menghambat pembentukan  dinding  sel  khususnya komponen penyusun peptidoglikan sehingga  berdampak  pada  kematian  sel. Flavanoid  dapat  berikatan  dengan  protein ekstraseluler membentuk senyawa komplek yang berdampak pada terganggunya  integritas  dan  rusaknya membran  sel  khususnya  pada  bagian fosfolipid sehingga permeabilitasnya menjadi menurun. Aktivitas protein
(enzim)  yang  terdapat  pada  membran  sel akan  mati  akibat  adanya  senyawa  fenol. Terpenoid dapat berikatan dengan protein, karbohidrat  dan  lipid  pada  membran  sel yang  berakibat  pada  menurun  atau hilangnya  permeabilitas  membran  dan pada akhirnya menyebabkan lisis sel.
Tanin  memiliki  kemampuan  dalam mengganggu  kerja  enzim,  adhesin  dan pengangkutan protein yang berakibat pada menurunnya permeabilitas dinding sel dan pada  akhirnya  sel  akan  mati  (Cowan, 1999;  Nurviana,  2016).  Aktivitas  saponin dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri yaitu dengan mengganggu kerja enzim dan merusak  membrane  sitoplasma  yang berakibat  pada  terhambatnya  transport nutrisi  yang  pada  akhirnya  menyebabkan
kematian bakteri (Robinson, 1995; Dasopang, 2017) Kesimpulan Rendemen  ekstrak  kulit  batang E. zwageri sebesar 21,63% (kadar air 7,6%).
Kulit  batang E.zwageri mengandung golongan senyawa bioaktif berupa alkaloid,  flavonoid,  terpenoid,  fenolik, tanin, dan saponin. Ekstrak kulit batang E. zwageri memiliki  aktivitas  antibakteri terhadap E.  coli dan S.  typhi. Konsentrasi optimum dalam menghambat pertumbuhan E. coli pada level 200 mg/ml dengan  kategori  respon  hambatan  sangat kuat,  sedangkan konsentrasi  optimum dalam  menghambat  pertumbuhan S.  typhi pada  level  15  mg/ml  dengan  respon hambatan kuat.
Saran
Perlu dilakukannya penelitian lanjutan terkait  penentuan  nilai  MIC  (minimum inhibitory concentration) dan MBC (minimum bactericidal concentration) dari ekstrak  kulit  batang E.  zwageri terhadap pertumbuhan E.  coli dan S.  typhi .  Selain itu  perlu  dilakukannya  isolasi  dan identifikasi senyawa tunggal  yang bersifat sebagai antibakteri.
DAFTAR PUSTAKA [Anonim].  1976.  Vademikum  Kehutanan Indonesia. Departemen  Pertanian
Direktorat Jendral Kehutanan .
Jakarta.
Anita  A,  Khotimah  S,  Yanti  AH.  2014.
Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Daun Benalu  Jambu  Air  ( Dendropthoe pentandra L.  Miq). JProtobiont . 3(2):268-272.
Cowan, M.M. Plant Products as Antimicrobial Agents. Clinical Microbiology  Reviews. 1999;  12:
564-582.
Darussalam  H.  2016.  Uji  Sensitivitas Ekstrak  Kayu  Ulin  ( Eusideroxylon zwageri)  Terhadap  Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus aureus Secara In  Vitro.Mahakam  Med  Lab Tech J . 1(2):81-90. Dasopang  ES.  2017.  Skrining  Fitokimia dan Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak  Etanol  Daun  Sangitan ( Sambucus javanica Reinw) terhadap Pertumbuhan Bakteri Escherichia  coli dan Salmonella thypi . J  Bio  Lingkungan,  Industri, Kesehatan . 4(1):54-62. Filho M. 2006 . Bioactive Phytocompounds:  New  Approaches in the Phytosciences. Dalam Modern Phytomedicine. Iqbal Ahmad, Farrukh Aqil dan Mohammad  Owais  (Ed) Wiley- VCH. Germany. Harbone  JB.  1996 . Metode  Fitokimia: Penuntun Cara Modern Menganalisis  Tumbuhan,  Ed  ke-2, Penerjemah  Kosasih  Padmawinata dan Iwang Soediro. Bandung. ITB.
Haygreen JG dan JL Bowyer. 1996 . Hasil Hutan  dan  Ilmu  Kayu,  Suatu Pengantar  (Terjemahan  Sutjipto, AH). Gadjah  Mada  University
Press . Yogyakarta.
Heyne  K.  1987. Tumbuhan  Berguna Indonesia .  Jilid  1.  Yayasan  Sarana Wana Jaya. Jakarta
Houghton  PJ  dan  Raman  A.  1998.
Laboratory  Handbook  for  the Fractionation  of  Natural  Extracts . Chapman and Hall. London.
Johnson  AG,  Ziegler  RJ,  Hawley  L. 2011. Essential  Mikrobiologi  dan Imunologi .  Ed  ke-5.  Surjawidjaja
JE, penerjemah; Saputra L, editor.Tangerang: Binarupa Aksara.
Kemenkes RI. 2011. Buletin Jendela Data dan  Informasi  Kesehatan .  Jakarta. Kementerian  Kesehatan  Republik Indonesia. 2(2):1-3.
Mailuhu  M,  Runtuwene  MRJ,  Koleangan HSJ. 2017. Skrinning Fitokimia dan Aktivitas Antioksidan Ekstrak Metanol  Kulit  Batang  Soyogik ( Saurauia bracteosa ). Chem.Prog.
10(1):1-7. Manuhuwa E. 2007.  Kadar Air dan  Berat Jenis pada Posisi Aksial dan Radial Kayu Sukun ( Arthocarpus communis ,  J.R  dan  G.  Frest). J
Agroforestri . 2(1):49-55.
Mariani  Y,  Yusro  F,  Konishi  Y,  Taguchi
T,  Tominaga  A.  2016. Regulatory effects of five  medicinal plants used by  Dayak  Uud  Danum  in  West Kalimantan Indonesia on the delayed type hypersensitivity and the inflammation  of  human  colon epithelial  cells.  Kuroshio  Science., 10:59-71.
Nurviana V. 2016. Skrining Fitokimia dan Uji  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak Etanol  Kernel  Biji  Buah  Bacang ( Mangifera  foetida L)  terhadap Escherichia  coli . J  Sains  dan  Ilmu Farmasi. 1(2):66-74.
Pelczar MJJr dan Chan ECS. 2005. Dasar-
Dasar  Mikrobiologi .  Volume  ke-1. Hadioetomo RS, Imas T, Tjitrosomo SS, Angka SL, penerjemah. Elements  of  microbiology .  Jakarta: UI Pr ess.
Pratiwi SUT. 2008. Mikrobiologi Farmasi . Yogyakarta: Penerbit Erlangga. Rahmah  SH,  Suharti,  Subandi.  2014.  Uji Antibakteri  dan  Daya  Inhibisi Ekstrak  Kulit  Manggis  ( Garcinia Mangostana L.)  terhadap  Aktivitas
Xantin Oksidase yang Diisolasi dari
Air  Susu  Segar  Sapi. JOM  Bidang Kimia UM . 2(2):1-11. Robinson,  T.  1995.  Kandungan  Organik
Tumbuhan Tingkat Tinggi. Penerbit ITB. Bandung. Hal. 36-45.
Sari  RP,  Roza  RM,  Fitmawati.  2015. Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Daun Mahang ( Macaranga triloba (Muell.) Arg.) Terhadap Escherichia coli dan Salmonella  typhi.  JOM FMIPA UNRI . 2(2)1-8. Sjostrom  E.  1995. Kimia  Kayu,  Dasar- Dasar  dan  Penggunaannya .  Ed  ke- 2. Cetakan pertama. Sastrohamidjojo H, Prawirohatmodjo  S,  penerjemah. Wood Chemistry, Fundamentals and Application. Yogyakarta:  Gadjah Mada University Press .
Sumito  RJ,  Khotimah  S,  Linda  R.  2016. Uji  Bioktivitas  Fraksi  Metanol  dan Etil  Asetat  Tumbuhan  Paku  Sisik Naga  ( Drymoglossum  piloselloides (L) pressl.) terhadap bakteri Staphylococcus aureus dan Salmonella typhi. J Protobiont . 5(1): 30-38.
Wasito  H.  2011. Obat  Tradisional Kekayaan  Indonesia .  Ed  ke-1. Cetakan pertama. Yogyakarta: Graha Ilmu. WHO.  2009. Recommendation  on  global use  of  rotavirus  vaccine.  Weekly Epidemiological record , no 23.
Yusro F. 2010. Rendemen Ekstrak Etanol dan  Uji  Fitokimia  Tiga  Jenis Tumbuhan  Obat  Kalimantan  Barat.
J Tengkawang . 4(2): 29-36.
Yusro  F,  Diba  F,  Mariani  Y,  Etis  EP,
Leonardo,  Randi  A.  2013. Ragam Tumbuhan  Berkhasiat  Obat  di Kalimantan Barat. Jilid 1. Pontianak: FU Press.
Yusro  F,  Diba  F,  Mariani  Y,  Etis  EP,
Leonardo,  Randi  A.  2014. Ragam Tumbuhan  Berkhasiat  Obat  di Kalimantan Barat. Jilid 2. Pontianak: FU Press.