Syarifain, R.I. ∙ M.R. Rashaun ∙ E.D. Anggrainy ∙ T. Simarmata
Formulasi pembawa rizobakteri penambat nitrogen dan pelarut fosfat, serta aplikasinya di pembibitan kelapa sawit yang diberi komposisi dan dosis amelioran yang berbeda
Sari Keberhasilan aplikasi pupuk hayati berkaitan dengan viabilitas mikroba dalam karier, dan aplikasinya di lapangan. Penelitian ini bertujuan mengetahui viabilitas Bakteri Penambat Nitrogen (BPN) dan Bakteri Pelarut Fosfat (BPF) pada berbagai komposisi karier, konsentrasi molase, dan aplikasinya dengan berbagai dosis serta komposisi amelioran pada pembibitan kelapa sawit. Penelitian dilaksanakan dari bulan Oktober 2019 - Mei 2020 di laboratorium dan kebun percobaan Ciparanje. Tahap pertama menggunakan Rancangan Acak Lengkap dua faktor (komposisi karier dan konsentrasi molase) dengan tiga ulangan. Tahap kedua menggunakan rancangan acak  kelompok  faktorial  dua  faktor  (komposisi  amelioran  dan  dosis  aplikasi)  pada  pembibitan  kelapa  sawit sebanyak tiga ulangan. Hasil riset tahap pertama menunjukkan bahwa perlakuan kombinasi karier 90% + zat aditif  10%  dengan  penambahan  2%  molase  merupakan  perlakuan  terbaik  dengan  viabilitas  BPN  dan  BPF tertinggi sampai dengan 12 Minggu Setelah Produksi (MSP) dengan masing-masing populasi sebesar 1,43 x 10 8 CFU g -1 dan 1,65 x 10 8 CFU g -1 . Viabilitas BPN maupun BPF dalam campuran carrier 90% + zat aditif 10% dengan penambahan  2%  molase  pada  masa  simpan  sampai  dengan  12  MSP  masih  memenuhi  standar  mutu  pupuk hayati yaitu sebesar 10 7 CFU g -1 . Hasil riset tahap kedua dosis d 3 (10%) komposisi k 3 (Kompos blotong 25% + Abu sawit 25% + biochar 40% + Dolomit 10%) memberikan hasil terbaik pada pertambahan tinggi batang, diameter batang dan jumlah daun.
Kata kunci : Amelioran ∙ Organik ∙ Bakteri penambat nitrogen ∙ Bakteri pelarut fosfat ∙ Karier ∙ Pembibitan kelapa sawit

## Carrier formulation of nitrogen fixing and phosphate solubilizing rhizobacteria and its application at oil palm nursery treated with different ameliorant dosage and composition
Abstract . The successful application of biofertilizers is related to microbial viability in the carrier, and application in the field. The research examined the viability of Nitrogen-Fixing Bacteria (NFB) and Phosphate Solubilizing Bacteria (PSB) on various carrier compositions, molasses concentrations, and field application at oil palm nursery combined with different ameliorant dosage and composition. This research was conducted from October 2019 to May 2020 at the laboratory and  Ciparanje experimental  garden.  The  first  phase  used a two-factor completely randomized  design  (carrier  composition  and  molasses  concentration)  that  was  given  three  replications.  The second phase used a two-factor randomized completely block design (ameliorant composition and dosage). First phase results showed that carrier mixture 90% + additive 10% with the addition of 2% molasses was the best treatment with the highest NFB and PSB viability until 12 weeks after biofertilizer production with population of about 1.43 x 10 8 CFU g -1 and 1.65 x 10 8 CFUg -1 , respectively. Viability of NFB and PSB in carrier mixture 90% + additive 10% with the addition of 2% molasses at the shelf life of 12 weeks after the production still meet the biofertilizer standards in the amount of 10 7 CFU g -1 . Ameliorant d 3 dose (10%) of composition k3 (25% sugarcane boiler compost + 25% palm ash + 40% biochar + 10%  dolomite) gave the best  results in  the increase of plant height, stem diameter and leaves number.
Keywords : Ameliorant ∙ Nitrogen fixing bacteria ∙ Oil palm nursery organic carrier ∙ Phosphate solubilizing bacteria
Diterima :  27 Januari 2022, Disetujui : 9 Agustus 2022, Dipublikasikan : 15 Agustus 2022 DOI: http://dx.doi.org/10.24198/kultivasi.v21i2.38053
Syarifain, R.I. 1 ∙ M.R. Rashaun 2 ∙ E.D. Anggrainy 3 ∙ T. Simarmata 4 1 Prodi Magister Ilmu Tanah, Fakultas Pertanian UNPAD, Jalan Raya Bandung Sumedang Km. 21 Jatinangor, Sumedang 45363
2 Prodi Agroteknologi, Fakultas Pertanian UNPAD, Jalan Raya Bandung Sumedang Km. 21 Jatinangor, Sumedang 45363
3 Departemen Ilmu Tanah dan Sumberdaya Lahan Fakultas Pertanian UNPAD, Jalan Raya Bandung Sumedang Km. 21 Jatinangor, Sumedang 45363
4 Prodi Doktor Ilmu Pertanian Fakultas Pertanian UNPAD, Jalan Raya Bandung Sumedang Km. 21 Jatinangor, Sumedang 45363

## ___________________________________________ Pendahuluan
Intensifikasi
pertanian meningkatkan penggunaan pupuk anorganik untuk mengoptimalkan  produksi  tanaman.  Menurut Badan  Pusat  Statistik  (2021)  impor  pupuk  pada tahun 2019 mencapai 6.134.500 t dan meningkat menjadi  6.248.700  t  pada  tahun  2020,  yang mengindikasikan bahwa produksi pupuk dalam negeri  belum  dapat  memenuhi  kebutuhan pupuk  domestik.  Hal  ini  ditunjukkan  oleh perkebunan  kelapa  sawit  yang  membutuhkan input  pupuk anorganik  yang  lebih  tinggi    1.162 kg  N  ha -1 ,  124  kg  P  ha -1 ,  dan  1.673  kg  K  ha -1 , dibandingkan dengan perkebunan karet 60 kg N ha -1 , 60 kg P ha -1 , dan 40 kg K ha -1 (Tarmizi and Tayeb,  2006;  Mandal et  al .,  2015).  Hal  ini menunjukkan  bahwa  saat  ini  ketergantungan terhadap  pupuk  anorganik  dalam  budidaya pertanian  cukup  tinggi.  Hal  ini  diperparah dengan jumlah produk pupuk hayati sawit yang relatif  lebih  sedikit  dibandingkan  pupuk  hayati untuk tanaman hortikultura, dan belum adanya formulasi  kombinasi  pupuk  hayati  dan amelioran untuk mengoptimalkan pertumbuhan tanaman  kelapa  sawit.  Penggunaan  pupuk anorganik  yang  berlebihan  akan  menyebabkan tanah  menjadi  jenuh  residu  dan  mineralisasi karbon  berlebih,  sehingga  dapat  mengganggu siklus  hara  yang  menurunkan  kesehatan  tanah ditinjau dari parameter kimia tanah (Kanchan et al .,  2018).  Berdasarkan  hal  tersebut  diperlukan upaya  untuk  mengurangi  ketergantungan penuh  terhadap  pupuk  anorganik  dengan memanfaatkan pupuk hayati yang dikombinasikan  dengan  amelioran  karena amelioran  memiliki  fungsi  untuk  memperbaiki sifat  fisik,  kimia,  dan  biologi  tanah  (Fitriatin et al ., 2021).
Menurut  Peraturan  Menteri  pertanian nomor  1    tahun  2019  pupuk  hayati  memiliki kemampuan  untuk  menurunkan  penggunaan pupuk  anorganik  secara  intensif.  Pupuk  hayati adalah  pupuk  yang  terdiri  dari  mikroba bermanfaat  dan  karier  dengan  kemampuan untuk  meningkatkan  efisiensi  pemupukan, meningkatkan ketersediaan hara  dan kesehatan tanah (Kementan, 2019).
Upaya  pengurangan  penggunaan  pupuk anorganik  dapat  dilakukan  dengan  meman- faatkan  pupuk  hayati.  Pupuk  hayati  adalah produk  biologi  aktif  terdiri  atas  mikroba  yang dapat  meningkatkan  efisiensi  pemupukan,
kesuburan,  dan  kesehatan  tanah  (Kementerian Pertanian  Indonesia,  2019).  Raimi et  al .  (2021) menyatakan aplikasi pupuk hayati menguntungkan  tanaman  dan  mikroba,  karena menambah ketersediaan hara bagi tanaman, dan menyediakan  bahan  organik  bagi  mikroba sebagai  sumber  energi.  Contoh  rizobakteri pupuk  hayati yang  umum  diaplikasikan  adalah BPN  (Bakteri  Penambat  Nitrogen)  dan  BPF (Bakteri  Pelarut  Fosfat). P emberian  inokulan BPN  berupa Rhizobium dan Azotobacter sp. berpengaruh terhadap peningkatan pertumbuhan  tanaman  kedelai  (Febriati and Rahayu,  2019).  Penggunaan  BPF  seperti Bacillus sp.  dan Pseudomonas sp.  diketahui  mampu meningkatkan  komponen  pertumbuhan  seperti tinggi  tanaman,  jumlah  daun,  dan  jumlah anakan  pada  tanaman  padi  sawah  dan  gogo (Aryanto et al ., 2015).
Keberhasilan aplikasi pupuk hayati berkaitan dengan viabilitas (populasi sel hidup) mikroba  dalam  karier.  Viabilitas  menandakan kemampuan  isolat  untuk  tumbuh  kembali  dan dapat dijaga dengan penyimpanan mikroba dan pemilihan  karier  yang  baik  (Najmiyati  dan Akhadi,  2013).  Viabilitas  inokulan  perlu distabilkan  dalam  jumlah  tinggi  selama  masa penyimpanan  pupuk  hayati.  Hal  ini  bertujuan agar inokulan mampu bersaing dengan mikroba indigenus  dalam  tanah  ketika  inokulan diaplikasikan  ke  tanah,  sehingga  pemberian pupuk  hayati  mampu  memberikan  hasil  yang optimal untuk pertumbuhan tanaman (Arisandi et  al .,  2018).  Karier  harus  mampu  menyediakan lingkungan hidup yang mendukung pertumbuhan  dan  perkembangan  inokulan selama produksi, transportasi, dan penyimpanan  sebelum  inokulan  tersebut digunakan (Adiguna dan Aryantha, 2020).
Bahan  baku  carrier  dapat  dimanfaatkan dari  limbah  tanaman  kelapa  sawit  itu  sendiri. Salah  satu  metode  pemanfaatan  yang  dapat digunakan adalah dengan membuat biochar dari limbah  tersebut.  Penelitian  Promraksa and Rakmak  (2020)  menyatakan  bahwa  konversi limbah  padat  industri  sawit  menjadi biochar dengan  metode pyrolisis dengan  suhu  525 o C dengan  aliran  N 2 2    liter  per  menit  selama  60 menit  mampu  menghasilkan    44,91% biochar . Azeem et  al .  (2021)  menyatakan  bahwa biochar merupakan  karier  yang  baik  karena  memiliki kandungan  C-organik  yang  tinggi  yang berfungsi  sebagai  sumber  nutrisi  mikroba selama  masa  penyimpanan.    Tambahan  pula,
beberapa  karier  lain  seperti  gambut  memiliki kemampuan untuk mengabsorpsi toksin selama masa  penyimpanan  pupuk  hayati,  sehingga dapat  memperpanjang  daya  simpan  (Saif et  al ., 2021).  Kompos  memiliki  sifat  yang  baik  karena memiliki kandungan hara mikro yang bermanfaat  bagi  mikroba  selama  masa penyimpanan  dan  tanaman  saat  pupuk  hayati diaplikasikan (Pathirana and Yapa, 2020). Selain  pemilihan  karier  yang  sesuai, viabilitas  bakteri dapat  ditingkatkan  dengan menambahkan  zat  aditif  seperti  dolomit,,  abu sawit, asam humat,, dan unsur hara mikro yang mampu  menjaga  performa  mikroba  selama masa  penyimpanan  (Mindari et  al .,  2018; Promraksa and Rakmak,  2020;  Aksani et  al ., 2021).  Bahan  aditif  lain    seperti  molase  yang memiliki kandungan gula tinggi sehingga dapat dimanfaatkan  oleh  bakteri  sebagai  sumber energi  tambahan  untuk  pertumbuhan  dan perkembangannya (Satinder et al ., 2012).
Penelitian  mengenai  viabilitas  BPN  dan BPF pada komposisi karier dengan penambahan molase  yang  dipadukan  dengan  dosis  dan komposisi  amelioran  memiliki  potensi  untuk dikembangkan  untuk  menunjang  pertumbuhan kelapa sawit. Oleh sebab itu, penelitian ini perlu dilaksanakan  agar  mendapatkan  komposisi karier  dengan  penambahan  molase  yang mampu  memberikan  viabilitas  terbaik  pada BPN  dan  BPF,  serta  dosis  dan  komposisi amelioran terbaik dalam mendukung pertumbuhan tanaman kelapa sawit.
___________________________________________

## Bahan dan Metode
Penelitian  dilaksanakan  pada  Bulan  Oktober 2019  -  Mei  2020  di  unit  produksi  pupuk  hayati CV.  Bintang  Asri  Arthauily,  Laboratorium Kesuburan Tanah dan Nutrisi Tanaman (KTNT), serta  di  Kebun  Percobaan  Ciparanje  Fakultas Pertanian, Universitas Padjadjaran.
Penelitian  ini  dilaksanakan  dalam  dua tahap.  Tahap  pertama  adalah  uji  viabilitas  BPF dan  BPN  dalam  berbagai  formulasi  karier,  dan tahap  kedua  adalah  uji  aplikasi  pupuk  hayati yang dikombinasikan dengan berbagai formulasi  amelioran  lapangan  di  pembibitan kelapa sawit. Rancangan yang digunakan dalam tahap  pertama  adalah  RAK  Faktorial  yang terdiri atas dua faktor (Tabel 1).  Faktor pertama yaitu  komposisi  karier  (a)  yang  terdiri  dari  tiga taraf  yaitu  (a 1 )  campuran  100%  karier,  (a 2 )
campuran  95%  karier ditambah  5%  zat  aditif, (a 3 )  90%  campuran  karier  ditambah  10%  zat aditif. Campuran karier terdiri atas gambut 50%, biochar 25%,  kompos 25%.  Zat  aditif  terdiri  dari 50%  dolomit,  25%  abu  sawit,  20%  asam  humat, 5% unsur hara mikro (B, Zn, Cu). Faktor kedua merupakan  konsentrasi  molase  (b)  yang  terdiri dari  tiga  taraf  yaitu  tanpa  pemberian  molase (b 0 ),  pemberian  molase  1%  (b 1 )  dan  2% pemberian  molase  (b 2 )  yang  dibuat  3  ulangan. Total  seluruh  perlakuan  adalah  18  unit  untuk masing-masing  rizobakteri  penambat  nitrogen dan pelarut fosfat.

## Tabel 1. Rancangan Perlakuan Tahap 1
Perlakuan Konsentrasi Molase Komposisi Karier (a) b 0 b 1 b 2 a 1 a 1 b 0 a 1 b 1 a 1 b 2 a 2 a 2 b 0 a 2 b 1 a 2 b 2 a 3 a 3 b 0 a 3 b 1 a 3 b 2
Rancangan  yang  digunakan  dalam  tahap kedua  adalah  RAK  faktorial  Faktorial  yang terdiri  atas  dua  faktor  (Tabel  2)  dengan  tiga ulangan  dan  diuji  lanjut  dengan  uji  Tukey. Seluruh  set  percobaan  diberikan  pupuk  hayati dengan  kombinasi  karier  terbaik  (berdasarkan tahap  I)  dengan  dosis  50  g  per  tanaman  untuk mensubtitusi  kebutuhan  pupuk  50%  pupuk rekomendasi.  Faktor  pertama  adalah  komposisi amelioran  k 1 (kompos blotong 35 % + abu sawit 25%  + biochar 40%),  k 2 (kompos  blotong  30%  + abu  sawit  25%  + biochar 40%  +  dolomit  5%),  k 3 (Kompos blotong 25% + Abu sawit 25% + biochar 40%  +  Dolomit  10%).  Faktor  kedua  merupakan dosis  aplikasi  amelioran  d 1 (kontrol/  tanpa pemberian  amelioran),  d 2 (5%  =500  g polybag -1 ), d 3 (10%  =1000  g polybag -1 ),  d 4 (15%  =  1500  g polybag -1 ),  d 5 ( 20% =2000 g polybag -1 ).
Tabel 2. Rancangan Tahap 2 Perlakuan Dosis Amelioran Komposisi Amelioran (k) d 1 d 2 d 3 d 4 d 5 k 1 k 1 d 1 k 1 d 2 k 1 d 3 k 1 d 4 k 1 d 5 k 2 k 2 d 1 k 2 d 2 k 2 d 3 k 2 d 4 k 2 d 5 k 3 k 3 d 1 k 3 d 2 k 3 d 3 k 3 d 4 k 3 d 5
Perbanyakan  Isolat  Bakteri  Penambat Nitrogen dan Bakteri Pelarut Fosfat. Perbanyakan  isolat  BPN  dan  BPF  dimulai dengan  pembuatan  media  agar  miring  Ashby
untuk  BPN  dan  media  agar  miring  Pikovskaya untuk  BPF.  Setelah  itu,  dilakukan  pengambilan isolat  bakteri  dari  agar  miring  sebelumnya menggunakan  jarum  ose  secara  aseptik  dan digoreskan  secara  zig-zag  pada  tabung  reaksi baru  yang  berisi  media  Ashby  dan  media Pikovskaya  kemudian  diinkubasi  dengan  suhu kamar (25 o C) selama 3-7 hari. Selanjutnya,  masing-masing  isolat  unggul BPN dan BPF yang diinkubasi pada suhu ruang dibuat  kultur  cair  dengan  cara  menuangkan  5 mL media cair ke dalam tabung reaksi isolat dan menggores permukaan agar miring menggunakan jarum ose kemudian menuangkannya kembali ke dalam jerigen yang berisi media Ashby dan Pikovskaya. Setelah itu dilakukan  inkubasi  pada rotary  shaker 150  rpm pada suhu kamar selama 3-7 hari.
Persiapan  Karier  (Tahap  I). Setiap  karier dikeringanginkan  terlebih  dahulu.  Selanjutnya karier  ditumbuk  dan  disaring  menggunakan saringan  ukuran  200  mesh.  Selanjutnya, dilakukan  pencampuran  setiap  karier  dan memasukkannya  ke  dalam  plastik  yang  sudah diberi  label  sesuai  perlakuan.  Kemudian, campuran karier tersebut disterilisasi menggunakan autoklaf dengan  suhu  ±  121 o C selama 15 menit.
Formulasi  Karier. Formulasi  dilaksanakan dengan  mencampur  karier  kemudian,  inokulan pada  wadah  plastik  sesuai  dengan  perlakuan karier dan dilakukan secara aseptic di laminar air flow (LAF).  Karier  yang  digunakan  yaitu sebanyak  70%  dan  konsorsium  inokulan  yang digunakan  sebanyak  30%  (15%  BPN  dan  15% BPF  kepadatan  10 9 CFUmL -1 )  dengan  total campuran  adalah  4  kg.  Setelah  itu,  campuran tersebut  dipindahkan  ke  dalam alumunium  foil sesuai  dengan  perlakuan  (100%  campuran karier, 95% campuran karier+ 5% zat aditif, dan 90%  campuran  karier  +  10%  zat  aditif    dengan total  massa  campuran  sebanyak  100  g  per kemasan.  Kemudian  masing-masing  perlakuan dalam  kemasan  homogenisasi  dan  diberi  label sesuai  dengan  perlakuan  dan  jenis  inokulan. Kemasan  karier  tersebut  dimasukkan  ke  dalam inkubator dan disimpan di dalam ruangan pada suhu  kamar  25 o C  selama  tiga  hari  serta dilakukan penentuan kandungan bahan organik sesuai  dengan  metode Walkley  and  Black pada  0 dan  12  Minggu  setelah  Perlakuan  (MSP)  (Food Agricultural Organization, 2019).
Pengujian  Viabilitas  Inokulan  dalam Karier. Pengujian  viabilitas  dilakukan  pada minggu  ke-0,  2,  4,  6,  8,  dan  12  setelah penyimpanan.  Indikator  kestabilan  isolat  dalam karier  ditentukan  oleh  jumlah  populasi  sel hidup  (viabilitas)  setelah  masa  penyimpanan. Uji  viabilitas  inokulan  dilakukan  dengan  cara memasukkan 10 g sampel karier ke dalam botol kocok yang berisi 90 ml larutan fisiologis (NaCl 0,85%),  kemudian  dikocok  menggunakan rotary shaker selama  30  menit  dan  setelah  itu  dibuat seri  pengenceran  (Hastuti  dan  Ginting,  2007). Inokulan  BPN  ditumbuhkan  pada  media  agar Ashby dan diinkubasi selama 7 hari, sedangkan inokulan  BPF  ditumbuhkan  pada  media  agar Pikovskaya  dan  diinkubasi  selama  3  hari. Penghitungan koloni dilakukan setelah inkubasi.
Persiapan Media Tanam (Tahap II). Tanah yang  digunakan  adalah  Inceptisols  dengan  sub group fluventic  eutrudepts asal  Jatinangor  yang diambil pada kedalaman 0 – 20 cm. Pengukuran sifat  kimia,  dan  biologi  diuji  pada  awal persiapan  tanam  (Tabel  3). Tanah  tersebut disaring  dengan  alat  penyaring  berupa  ayakan berukuran  2  x  3  m  dengan  ukuran  saring  1  x  1 cm.  Pross  homogenisasi  formula  amelioran dilakukan  dengan  mesin  molen  k 1 (kompos blotong 35 % + abu sawit 25% + biochar 40%), k 2 (kompos blotong 30% + abu sawit 25% + biochar 40%  +  dolomit  5%),  k 3 (Kompos  blotong  25%  + Abu  sawit  25%  + biochar 40%  +  Dolomit  10%). Kemudian setelah formulasi amelioran terhomogenisasi, maka dicampur dengan tanah. Setelah  itu,  campuran  media  tanam  (tanah  dan amelioran) dimasukkan kedalam polybag berukuran 20 x 30 cm hingga mencapai bobot 10 kg per polybag dan diberi label.
Tabel 3. Data analisis tanah awal
Parameter Nilai pH 7,4 Populasi Bakteri Pelarut Fosfat (CFU/g) 1,32 x 10 8 Populasi Bakteri Penambat Nitrogen (CFU/g) 1,24 x 10 8 Populasi Bakteri Total(CFU/g) 3,68 x 10 8 Populasi Jamur Total (CFU/g) 0 x 10 5

## Sumber: analisis pendahuluan
Penanaman
dan Pemupukan, serta Pemeliharaan. Penanaman  pada  perlakuan dilakukan  langsung  pada polybag yang berukuran  20  x  30  cm.  Penanaman  dilakukan sekaligus  dengan  pemberian  pemupukan  awal
berupa pupuk hayati (dari tahap I sebanyak 50g per  tanaman)  pada  lubang  tanam  dan  SP-36 (50% dosis atau 1,7 g per tanaman) pada sekitar lubang tanam. Penanaman dilaksanakan dengan menggali  lubang  tanam  dengan  kedalaman  20- 30 cm, menanam bibit main-nursery kelapa sawit yang  berumur  empat  bulan,  kemudian penutupan lubang tanam.
Pemupukan  susulan  dengan  pemberian pupuk  tunggal  berupa  urea  dan  KCl  dengan cara  diberi  pada  tiga  titik  media  tanam, dilubangi  dengan  kedalaman  5  cm,  disebar, kemudian  ditutup  dengan  media  tanam. Pemupukan  dilakukan  setiap  empat  minggu sekali, untuk setiap dosis pemupukan pemeliharaan  akan  disesuaikan  dengan  umur bibit  kelapa  sawit  dengan  50%  dosis rekomendasi. (Tabel. 4).
Tabel 4.Dosis Aplikasi Pupuk Urea, SP-36 dan KCl Pembibitan Kelapa Sawit Dosis 50% dari
Dosis Rekomendasi
Jenis Pupuk Waktu Aplikasi Dosis Aplikasi (g tanaman -1 ) Urea 0 MSP 1,30 4 MSP 1,95 8 MSP 1,95 12 MSP 2,60 SP-36 0 MSP 1,70 4 MSP 2,55 8 MSP 2,55 12 MSP 3,40 KCl 0 MSP 1.40 4 MSP 2,10 8 MSP 2,10 12 MSP 2,80 Sumber: (Kasno dan Anggria, 2017)
Pemeliharaan  yang  dilakukan  meliputi penyiraman setiap hari pada pagi dan sore hari, penyulaman  dilakukan  pada  tanaman  yang mati,  serta  pengendalian  OPT  (Organisme Pengganggu  Tanaman)  dilakukan  secara  fisik dengan  pengambilan  hama  secara  langsung. Pengamatan tahap kedua meliputi pertambahan tinggi  tanaman,  diameter  batang,  dan  jumlah daun mulai umur 0, 2, 4, 6, 8, hingga 16 minggu setelah perlakuan (MSP).
___________________________________________

## Hasil dan Pembahasan
Kandungan  C-organik  Awal  dan  Akhir Karier. komposisi karier dan konsentrasi molase
tidak  berinteraksi  pada  parameter  pengamatan C-organik.  Efek  mandiri  komposisi  karier  dan konsentrasi molase disajikan pada Tabel 5.
Tabel 5. Efek Komposisi Karier dan Konsentrasi Molase Terhadap kandungan C-organik dalam inokulan Pupuk Hayati 0 dan 12 MSP
Perlakuan C-Organik (%) 0 MSP 12 MSP Komposisi Karier: Campuran karier 100% 25,91 b 26,02 b Campuran karier 95% + zat aditif 5% 25,97 b 25,85 b Campuran karier 90% + zat aditif 10% 25,18 a 25,41 a Konsentrasi Molase: Kontrol 25,72 a 25,80 a Molase 1% 25,47 a 25,66 a Molase 2% 25,86 a 25,83 a
Keterangan: angka yang memiliki notasi yang sama tidak berbeda nyata menurut uji lanjut Duncan Multiple Range Test pada taraf nyata 5%.
Data  pada  Tabel  5  memperlihatkan  bahwa kandungan C-organik tertinggi pada 12 Minggu Setelah Produksi (MSP) terdapat pada campuran karier 100% dan Campuran karier 95% ditambah zat  aditif  5%.  Hal  ini  diduga  karena  pemberian bahan  organik  seperti  gambut, biochar ,  dan kompos  mampu  meningkatkan  kandungan  C- organik pada pupuk hayati. Bakteri memanfaatkan  karbon  sebagai  sumber  energi untuk  membentuk  sel-sel  baru,  pertumbuhan, dan  aktivitas  metabolisme  (Azeem et  al .,  2021). Selain  itu,  keberadaan  unsur  karbon  akan membantu kegiatan bakteri dalam meningkatkan  proses  dekomposisi  bahan organik  serta  reaksi-reaksi  yang  memerlukan bantuan  bakteri  seperti  fiksasi  nitrogen  dan pelarutan fosfat (Sudadi et al ., 2018).
Faktor  konsentrasi  molase  dengan  tanpa penambahan  molase,  penambahan  molase  1%, dan penambahan molase 2% tidak berpengaruh nyata  terhadap  kandungan  C-organik,  sehingga diduga  persentase  penambahan  molase  1&2% belum signifikan dalam meningkatkan kandungan  C-organik.  Penambahan  molase dengan  konsentrasi  lebih  tinggi  dibutuhkan karena  molase  mengandung  C-organik  yang cukup  tinggi  sehingga  mampu  meningkatkan kandungan  C-organik  pada  pupuk  hayati (Kusuma et al ., 2016).
Tabel 6. Efek Komposisi Karier dan Konsentrasi Molase Terhadap Viabilitas Inokulan Bakteri Penambat Nitrogen Pupuk Hayati 0-12 MSP
Perlakuan BPN 10 8 (CFUg -1 ) 0 MSP 2 MSP 4 MSP 6 MSP 8 MSP 12 MSP Komposisi Karier: Campuran karier 100% 0,70 a 4,87 a 3,64 a 2,25 a 1,73 a 0,93 a Campuran karier 95% + zat aditif 5% 0,75 a 3,88 a 3,41 a 2,41 b 1,82 a 1,08 ab Campuran karier 90% + zat aditif 10% 1,16 b 5,51 a 4,58 a 2,45 b 2,11 b 1,18 b Konsentrasi Molase: Kontrol 0,59 a 3,45 a 2,18 a 1,87 a 1,61 a 0,89 a Molase 1% 0,75 a 4,98 ab 3,72 a 1,88 b 1,71 a 0,93 a Molase 2% 1,26 b 5,83 b 5,74 b 2,97 b 2,34 b 1,26 b
Keterangan: angka yang memiliki notasi yang sama tidak berbeda nyata menurut uji lanjut Duncan Multiple Range Test pada taraf nyata 5%
Viabilitas  Bakteri  Penambat  Nitrogen. Tidak  terdapat  interaksi    komposisi  karier  dan konsentrasi  molase  terhadap  viabilitas  Bakteri Penambat  Nitrogen  (BPN).  Efek  mandiri komposisi  karier  dan  konsentrasi  molase disajikan pada Tabel 6.
Data tabel 6 menunjukkan uji mandiri efek komposisi  karier  dan  konsentrasi  molase terhadap  viabilitas  sel  pada  0  hingga  12  MSP. Populasi  BPN  pada  penambahan  molase  2% berbeda  nyata  dibandingkan  dengan  kontrol pada  0  MSP.  Hal  ini  karena  pada  penambahan molase  2%,  unsur  gula  yang  terkandung  cukup tinggi sehingga ketersediaan karbon lebih tinggi. Viabilitas  BPN  tertinggi  terdapat  pada penambahan  molase  2%  dengan  populasi sebesar  1,26  x  10 8 .  Hal  ini  diduga  karena  kadar gula  di  dalam  penambahan  molase  2%  dapat mendukung BPN untuk tumbuh secara optimal sampai  dengan  12  MSP.  Hal  ini  diperkuat dengan hasil penelitian Roslan et al . (2021)  yang menyatakan bahwa dalam setiap g Wet Matter Basis (WMB)  molase  mengandung  sumber  C organik  seperti  ,  sukrosa  (138,73  mg),  glukosa (283,53  mg),  fruktosa  (122,70  mg),  galaktosa (11.23  mg),  dan  manosa  (77,23  mg)  yang  dapat menjadi sumber nutrisi bagi BPN.
Secara  umum,  pertumbuhan  BPN  pada  0 MSP  memasuki  fase  adaptasi  ( lag  phase ).  Pada fase  ini,  bakteri  akan  membutuhkan  waktu untuk  sintesis  enzim  baru  agar  dapat beradaptasi di lingkungan yang baru (Rosariastuti et  al .,  2017) . Beberapa  faktor  yang mempengaruhi  lama  fase  adaptasi  adalah kondisi  lingkungan  selama  inkubasi,  fisiologi sel, dan ukuran inoculum  (Mhlongo et al ., 2018; Salwan et al ., 2019).
Pertumbuhan BPN mengalami fase perbanyakan  ( log  phase )  pada  2  MSP  yang ditandai  dengan  meningkatnya  jumlah  sel bakteri  secara  eksponensial  karena  terjadi pembelahan  sel  bakteri  terus  menerus  dalam laju  yang  konstan.  Salah  satu  faktor  yang mempengaruhi laju pertumbuhan bakteri adalah ketersediaan nutrisi pada media. Laju pertumbuhan menjadi lebih cepat ketika bakteri berada  dalam  media  yang  kaya  nutrisi  dan menjadi  lebih  lambat  ketika  dalam  media  yang miskin  nutrisi  (Hoe et  al .,  2016;  Kanchan et  al ., 2018)
Penurunan  secara  terus  menerus  dari populasi  BPN  mulai  terjadi  pada  4  MSP, sehingga  dapat  dikatakan  bahwa  BPN  tidak memasuki fase stasioner ( stationary phase ), tetapi langsung  memasuki fase kematian ( death phase ). Hal  ini  diduga  karena  nutrisi  telah  habis  dan terjadi akumulasi senyawa hasil metabolisme sel yang  bersifat  racun  sehingga  meningkatkan mortalitas  BPN.  Pada  fase  kematian,  masih terdapat  sel  yang  melakukan  metabolisme  dan pembelahan, namun lebih banyak sel yang mati daripada  yang  hidup,  sehingga  terjadi penurunan  jumlah  sel  bakteri  (Pepper et  al ., 2014).  Namun,  sel  yang  masih  hidup  dapat bertahan  selama  beberapa  bulan  hingga beberapa tahun (Madigan et al ., 2015).
Pengaruh mandiri komposisi karier berbeda  nyata  pada  setiap  perlakuan  dan  pada 12  MSP,  campuran  karier 90%  +  zat  aditif  10% lebih  tinggi  dibandingkan  dengan  campuran karier campuran  karier  100%.  Hal  ini diduga karena pemberian zat aditif berupa asam humat yang  mengandung  karbon  sehingga  dapat dimanfaatkan  sebagai  sumber  energi  oleh
bakteri  ketika  nutrisi  pada  molase  sudah  mulai berkurang  (Mindari et  al .,  2018).  Populasi  BPN pada seluruh perlakuan sampai dengan 12 MSP adalah  lebih  dari  10 8 CFU  g -1 yang  memenuhi standar  pupuk  hayati.  Hal  ini  karena berdasarkan  kepmentan  No.  261  tahun  2019 standar  minimal  kepadatan  pupuk  hayati majemuk  yaitu  memiliki  kepadatan  bakteri sebesar  10 7 CFU  g -1 bobot  kering  contoh (Kementerian Pertanian Indonesia, 2019).
Viabilitas Bakteri
Pelarut Fosfat. Komposisi  karier  dan  konsentrasi  molase  tidak menunjukkan  interaksi  terhadap  parameter viabilitas  Bakteri  Pelarut  Fosfat  (BPF).  Efek mandiri  komposisi  karier  dan  konsentrasi molase disajikan pada Tabel 7.
Data  pada  Tabel  7  memperlihatkan  bahwa populasi  BPF  pada  campuran  karier 95%  +  zat aditif  5%  dan  campuran  karier 90%  +  zat  aditif 10%  dari  4  MSP  sampai  dengan  6  MSP  lebih tinggi  dibandingkan  dengan  pada  campuran karier 100%.  Hal  ini  diduga  karena  pemberian zat aditif berupa asam humat yang mengandung karbon  sehingga  dapat  dimanfaatkan  sebagai sumber  energi  bagi  bakteri  ketika  nutrisi  pada molase  sudah  berkurang.  Pada  12  SMP kepadatan  sel  tidak  berbeda  nyata  yang mengindikasikan  bahwa  perkembangan  bakteri telah  mencapai  fase  stasioner  pada  masa  akhir penyimpanan isolat di dalam karier.
Secara  umum,  populasi  BPF  pada penambahan  molase  2%  berbeda  nyata dibandingkan  dengan  tanpa  penambahan molase. Hal ini diduga karena unsur gula yang
terkandung  di  dalam  penambahan  molase  2% mampu  mendukung  aktivitas  BPF  untuk tumbuh secara optimal sampai dengan 12 MSP. Tambahan  pula,  selain  tinggi  akan  kandungan gula  (60%),  molase  juga  memiliki  kandungan asam  amino,  dan  mineral  yang  mampu mendukung pertumbuhan bakteri pelarut fosfat seperti Pseudomonas  fluorescent selama  masa penyimpanan hingga 4 minggu pada konsentrasi  40  gL -1 tanpa  penambahan  substrat lain (Advinda et al ., 2020).
Pertumbuhan  BPF  pada  0  MSP  memasuki fase  adaptasi  ( lag  phase ).  Pada  fase  ini,  bakteri akan membutuhkan waktu untuk sintesis enzim baru agar dapat beradaptasi di lingkungan yang baru  (Rosariastuti et  al .,  2017).  Beberapa  faktor yang  mempengaruhi  fase  adaptasi  adalah kondisi  lingkungan  selama  inkubasi,  fisiologi sel, dan ukuran inoculum  (Mhlongo et al ., 2018; Salwan et al ., 2019). Fase  perbanyakan  ( log  phase )  pada  BPF terjadi mulai dari 2 MSP sampai 6 MSP, kecuali pada  penambahan  molase  1%  yang  mengalami fase ini mulai dari 2 MSP sampai 4 MSP. Hal ini ditandai  dengan  meningkatnya  jumlah  sel bakteri  secara  eksponensial  karena  terjadi pembelahan  sel  bakteri  terus  menerus  dalam laju  yang  konstan.  Salah  satu  faktor  yang mempengaruhi laju pertumbuhan bakteri adalah ketersediaan nutrisi pada media. Laju pertumbuhan menjadi lebih cepat ketika bakteri berada  dalam  media  yang  kaya  nutrisi  dan menjadi  lebih  lambat  ketika  dalam  media  yang miskin nutrisi (Teng et al ., 2020).
Tabel 7. Efek Komposisi Karier dan Konsentrasi Molase Terhadap Viabilitas Inokulan Bakteri Pelarut Fosfat Pupuk Hayati 0-12 MSP
Perlakuan BPF 10 8 (CFUg -1 ) 0 MSP 2 MSP 4 MSP 6 MSP 8 MSP 12 MSP Komposisi Karier: Campuran karier 100% 0,97 a 1,81 a 2,62 a 2,92 a 1,89 a 0,90 a Campuran karier 95% + zat aditif 5% 1,16 ab 3,10 a 3,55 b 4,20 b 2,43 a 0,82 a Campuran karier 90% + zat aditif 10% 1,23 b 4,08 a 3,69 b 5,54 c 2,66 b 1,23 a Konsentrasi Molase: Kontrol 0,95 a 2,86 a 2,97 a 3,16 a 1,37 a 0,72 a Molase 1% 1,00 a 2,86 a 3,46 b 3,29 a 1,86 a 0,85 a Molase 2% 1,40 b 3,34 a 3,58 b 6,22 b 3,75 c 1,39 b
Keterangan: angka yang memiliki notasi yang sama tidak berbeda nyata menurut uji lanjut Duncan Multiple Range Test pada taraf nyata 5%
Tabel 8. Efek Dosis dan Komposisi Amelioran plus terhadap Pertambahan Tinggi Tanaman Bibit Kelapa Sawit (mm)
Perlakuan Formulasi amelioran plus ∆ 0 -2 MSP ∆ 4 -6 MSP ∆ 8 -10 MSP ∆ 14 -16 MSP Dosis k 1 k 2 k 3 k 1 k 2 k 3 k 1 k 2 k 3 k 1 k 2 k 3 d 1 29.922 b B 13.22 a A 12.78 a A 4.22 a A 1.89 a A 5.22 a AB 1.05 a A 1.55 a A 5.33 a AB 0.83 a A 0.61 a A 2.83 a A d 2 17.22 a A 30.33 b A 20.00 ab AB 10.11 a A 5.89 a AB 11.66 a B 4.94 a A 2.66 a A 2.33 a A 3.27 a B 2.55 a B 3.44 a A d 3 19.18 a A 30.48 a A 24.11 a ABC 6.88 a A 7.00 a AB 7.11 a AB 12.00 a A 5.72 a AB 4.05 a AB 3.83 ab BC 3.28 a B 4.50 b A d 4 23.33 a AB 28.56 a A 27.22 a BC 10.11 a A 11.55 a BC 11.33 a B 6.00 a A 15.83 a B 4.89 a AB 9.55 a D 8.61 a D 5.89 a A d 5 31.78 a B 33.22 a A 37.00 a C 6.78 a A 5.23 a C 3.66 a A 5.89 a A 7.05 a AB 16.95 a B 5.00 a C 5.72 a C 6.66 a A Keterangan: k 1 (kompos blotong 35 % + abu sawit 25% + biochar 40%), k 2 (kompos blotong 30% + abu sawit 25% + biochar 40% + dolomit 5%), k 3 (Kompos blotong 25% + Abu sawit 25% + biochar 40% + Dolomit 10%). Faktor kedua merupakan dosis aplikasi amelioran d 1 (kontrol), d 2 (5% =500 g polybag -1 ), d 3 (10% =1000 g polybag -1 ), d 4 (15% = 1500 g polybag -1 ),  d 5 ( 20% =2000 g polybag -1 ), angka-angka yang diikuti huruf yang sama tidak berbeda nyata menurut uji lanjut Tukey pada taraf 5% (angka yang diikuti huruf  kapital  dibaca  vertikal  menunjukkan  interaksi  komposisi  dengan  berbagai  dosis,  sedangkan  yang  diikuti  huruf  kecil dibaca dengan notasi horizontal merupakan interaksi dosis dengan berbagai komposisi).
Penurunan  secara  terus  menerus  dari populasi  BPF  mulai  terjadi  pada  8  MSP, sehingga  dapat  dikatakan  bahwa  BPF  tidak memasuki fase stasioner ( stationary phase ), tetapi langsung  memasuki fase kematian ( death phase ). Hal  ini  diduga  karena nutrisi  telah  habis  dan terjadi akumulasi senyawa hasil metabolisme sel yang  bersifat  racun  sehingga  meningkatkan mortalitas  BPF.  Pada  fase  kematian,  masih  ada sel yang melakukan metabolisme dan pembelahan, namun lebih banyak sel yang mati daripada  yang  hidup,  sehingga  terjadi penurunan jumlah sel bakteri (Raimi et al ., 2021). Madigan et al . (2015) menambahkan bahwa laju kematian sel lebih lambat dibandingkan dengan laju  pertumbuhan  dan  sel  yang  masih  hidup dapat  bertahan  selama  berbulan-bulan  bahkan bertahun-tahun.
Populasi  BPF  pada  seluruh  perlakuan sampai  dengan  12  MSP  masih  memenuhi populasi  standar  berdasarkan  Keputusan Menteri  Pertanian  nomor  261  tahun  2019  untuk pupuk  hayati  majemuk  dengan  karier  serbuk yaitu  sebesar  10 7 CFU  g -1 (Kementerian Pertanian Indonesia, 2019).
Pertambahan Tinggi Tanaman. Komposisi dan  dosis  amelioran  menunjukkan  interaksi pada  parameter  tinggi  tanaman  terhadap pertambahan  tinggi  tanaman.  Data  Tabel  8 memperlihatkan  pemberian  amelioran  pada komposisi  yang  berbeda  mampu  meningkatkan penambahan tinggi tanaman.
Pemberian  amelioran  sebanyak  dosis  d 3 (10%  =  1000  g polybag -1 )  dengan  komposisi    k 3 (Kompos blotong 25% + Abu sawit 25% + biochar
40%  +  Dolomit  10%)  memiliki  pengaruh terhadap penambahan tinggi tanaman Penggunaan  berbagai  bahan  pada  komposisi amelioran  juga  berdampak  secara  langsung meningkatkan  pertumbuhan  bibit  kelapa  sawit setelah  16  MSP.  Hal  ini  disebabkan  komposisi amelioran  mengandung  unsur  hara  yang  dapat langsung digunakan oleh tanaman. Hasil analisa pH, N, P, K, dan C pada kompos blotong sebesar 6,5-7,5  pada  pH    1,02%  pada  kandungan  N, 0,75%  kandungan  P 2 O 5 ,  0,93%  pada  kandungan K,  dan  17,88%  kandungan  C  (Baroroh  dan Setyono,  2015).  Hasil  analisa  unsur  hara  pada dolomit yaitu, pH tanah 8,5 kandungan N 0,1%, kandungan  P  <0,1%,  kandungan  K  0,51%,  dan kandungan C 1,5% (Aryanti et al ., 2016). Hastuti et  al .  (2018)  menyatakan  kombinasi  amelioran pupuk  organik  arang  20%  memberikan pengaruh  efektif  dibandingkan  dengan  kontrol, karena  arang  dapat  mengkhelat  seperti  Cu,  Zn, dan  Mn  secara  berlebih,  sehingga  terbentuk ketersediaan  hara  yang  optimal (Sa’diyah et  al ., 2021).  Sari et  al .  (2019)  menyatakan  bahwa kompos  blotong  kaya  akan  kandungan  N, sehingga  berperan  dalam  meningkatkan  tinggi tanaman.
Perlakuan amelioran pada berbagai komposisi  dan  dosis  terhadap  pertambahan tinggi  bibit  kelapa  sawit  memiliki  pengaruh nyata  pada  2,  6,  10,  dan  16  MSP.  Hal  tersebut disebabkan  oleh  pertambahan  tinggi  tanaman memiliki  korelasi  tinggi  terhadap  ketersediaan unsur  hara  makro  pada  tanah.  Menurut Kholifah  dan  Sampoerno  (2016),  unsur  N memiliki  fungsi  meningkatkan  tinggi  tanaman.
Tambahan  pula,  menurut  Kholifah  dan Sampoerno,  (2016)  hara  N  sangat  diperlukan dalam  sintesis  asam  amino  dan  protein, khususnya  pada  titik  tumbuh  dan  ujung tanaman  guna  mempercepat  pertumbuhan tanaman  seperti  proses  perpanjangan  sel  dan pembelahan  sel.  Menurut  Hakim et  al. (2010) dalam  Kholifah  dan  Sampoerno,  (2016) pertumbuhan  tinggi  tanaman  terjadi  karena adanya  perpanjangan  sel  dan  pembelahan  sel yang  didominasi  pada  ujung  dan  pucuk tanaman. Proses ini memerlukan bahan organik seperti  amelioran  di  dalam  tanah  untuk mensintesis protein.
Pertambahan Diameter Batang. Komposisi (k 3 )  dengan  dosis  (d 3 )  berinteraksi  dan berpengaruh  terhadap  pertambahan  diameter batang  (Tabel  9).  Data  Tabel  9  memperlihatkan pemberian  amelioran  pada  komposisi  yang berbeda  mampu  meningkatkan  pertambahan diameter  batang  pada  setelah  16  MSP dibandingkan dengan kontrol laju pertumbuhan diameter  batang  meningkat  sekitar  39,10%. Secara  keseluruhan  terlihat  bahwa  diameter batang  terbaik  dihasilkan  dari  pemberian amelioran  sebanyak  dosis  10%  dengan komposisi kompos blotong 25% + abu sawit 25% + biochar 40% + dolomit 10% memiliki pengaruh yang  paling  tinggi  terhadap  pertambahan diameter batang.
Amelioran    k 2 dan  k 3 memberikan peningkatan  diameter  batang  pada ∆  4 -6  MSP, namun tidak menunjukkan perbedaan signifikan hingga pengamatan terakhir.
Amelioran k 2 dan k 3 mengandung dolomit yang tidak terdapat pada k 2 . Hal tersebut disebabkan oleh  pemberian  dolomit  meningkatkan  pH, mengandung Ca yang berfungsi pada pembelahan sel, penyusun dinding sel tanaman. Selain itu dolomit memiliki kandungan Mg yang berfungsi  dalam  pembentukan  klorofil  dan pembentukan  enzim,  sehingga  mendukung aktivitas  mikroorganisme  di  dalam  tanah  yang akan  mampu  memenuhi  kebutuhan  unsur  hara yang  diperlukan  oleh  bibit,  mendukung  proses fotosintesis. Dolomit membantu pembelahan sel dan berpengaruh terhadap pertambahan diameter  batang  (Simangunsong et  al .,  2015). Pengaplikasian  amelioran  berbagai  komposisi dengan  dosis  terhadap  pertambahan  diameter batang  berbeda  nyata  disebabkan  oleh  unsur hara  N,  P,  dan  K  yang  terkandung  di  dalam berbagai  amelioran  lebih  cepat  tersedia  dan diserap oleh tanaman (Bahri et al ., 2018). Adnan et  al .  (2015)  menyatakan  batang merupakan  tempat  akumulasi  pertumbuhan pada tanaman muda, sehingga keberadaan hara meningkatkan  laju  fotosintesis  yang  berkorelasi positif  dengan  produksi  fotosintat  (mendukung pertumbuhan bonggol batang).
Laju  Pertambahan  Jumlah  Daun. Efek interaksi  beberapa  komposisi  dengan  dosis amelioran  berpengaruh  terhadap  jumlah  daun (Tabel 10). Hasil terbaik atau tertinggi dihasilkan dari  pemberian  amelioran  sebanyak  dosis  d 3 (10%  =1000  g polybag -1 )  dengan  formula  k 3 (Kompos blotong 25% + Abu sawit 25% + biochar 40% + Dolomit 10%).
Tabel 9. Efek Dosis dan Komposisi Amelioran Plus terhadap Pertambahan Diameter Batang Bibit Kelapa Sawit (mm)
Perlakuan Formulasi Amelioran Plus ∆ 0 -2 MSP ∆ 4 -6 MSP ∆ 8 -10 MSP ∆ 14 -16 MSP Dosis k 1 k 2 k 3 k 1 k 2 k 3 k 1 k 2 k 3 k 1 k 2 k 3 d 1 2.86 a A 3.41 a B 1.91 a A 9.88 a A 1.07 a A 0.61 a A 0.79 a A 1.02 a B 0.64 a AB 0.35 a A 0.77 b C 0.46 a A d 2 1.04 a A 1.45 a A 3.01 a A 0.74 a A 0.52 a A 1.03 a AB 0.69 a A 0.95 a B 0.83 a CD 0.48 a A 0.55 a AB 0.51 a A d 3 2.81 a A 0.43 a A 1.94 a A 1.03 a A 0.42 a A 0.92 a A 0.87 a A 0.92 a B 0.94 a D 0.58 ab A 0.47 a A 0.64 b B d 4 1.88 a A 1.52 a A 1.90 a A 0.60 a A 0.99 b A 1.64 c B 0.73 a A 0.65 a A 0.69 a BC 0.48 a A 0.72 b BC 0.43 a A d 5 1.41 a A 1.66 a AB 1.44 a A 0.62 a A 1.06 b A 1.04 b AB 0.71 a A 0.60 a A 0.50 a A 0.58 a A 0.44 a A 0.48 a A Keterangan: k 1 (kompos blotong 35 % + abu sawit 25% + biochar 40%), k 2 (kompos blotong 30% + abu sawit 25% + biochar 40% + dolomit 5%), k 3 (Kompos blotong 25% + Abu sawit 25% + biochar 40% + Dolomit 10%). Faktor kedua merupakan dosis aplikasi amelioran d 1 (kontrol), d 2 (5% =500 g polybag -1 ), d 3 (10% =1000 g polybag -1 ), d 4 (15% = 1500 g polybag -1 ),  d 5 ( 20% =2000 g polybag -1 ), angka-angka yang diikuti huruf yang sama tidak berbeda nyata menurut uji lanjut Tukey pada taraf 5% (angka yang diikuti huruf  kapital  dibaca  vertikal  menunjukkan  interaksi  komposisi  dengan  berbagai  dosis,  sedangkan  yang  diikuti  huruf  kecil dibaca dengan notasi horizontal merupakan interaksi dosis dengan berbagai komposisi).
Tabel 10. Efek Dosis dan Komposisi Amelioran Plus terhadap Pertambahan Jumlah Daun Bibit Kelapa Sawit
Perlakuan Formulasi Amelioran Plus ∆ 0 -2 MSP ∆ 4 -6 MSP ∆ 8 -10 MSP ∆ 14 -16 MSP Dosis k 1 k 2 k 3 k 1 k 2 k 3 k 1 k 2 k 3 k 1 k 2 k 3 d 1 2.86 a A 3.41 a B 1.91 a A 9.88 a A 1.07 a A 0.61 a A 0.79 a A 1.02 a B 0.64 a AB 0.35 a A 0.77 b C 0.46 a A d 2 1.04 a A 1.45 a A 3.01 a A 0.74 a A 0.52 a A 1.03 a AB 0.69 a A 0.95 a B 0.83 a CD 0.48 a A 0.55 a AB 0.51 a A d 3 2.81 a A 0.43 a A 1.94 a A 1.03 a A 0.42 a A 0.92 a A 0.87 a A 0.92 a B 0.94 a D 0.58 ab A 0.47 a A 0.64 b B d 4 1.88 a A 1.52 a A 1.90 a A 0.60 a A 0.99 b A 1.64 c B 0.73 a A 0.65 a A 0.69 a BC 0.48 a A 0.72 b BC 0.43 a A d 5 1.41 a A 1.66 a AB 1.44 a A 0.62 a A 1.06 b A 1.04 b AB 0.71 a A 0.60 a A 0.50 a A 0.58 a A 0.44 a A 0.48 a A Keterangan: k 1 (kompos blotong 35 % + abu sawit 25% + biochar 40%), k 2 (kompos blotong 30% + abu sawit 25% + biochar 40% + dolomit 5%), k 3 (Kompos blotong 25% + Abu sawit 25% + biochar 40% + Dolomit 10%). Faktor kedua merupakan dosis aplikasi amelioran d 1 (kontrol), d 2 (5% =500 g polybag -1 ), d 3 (10% =1000 g polybag -1 ), d 4 (15% = 1500 g polybag -1 ),  d 5 ( 20% =2000 g polybag -1 ), angka-angka yang diikuti huruf yang sama tidak berbeda nyata menurut uji lanjut Tukey pada taraf 5% (angka yang diikuti huruf  kapital  dibaca  vertikal  menunjukkan  interaksi  komposisi  dengan  berbagai  dosis,  sedangkan  yang  diikuti  huruf  kecil dibaca dengan notasi horizontal merupakan interaksi dosis dengan berbagai komposisi).
Menurut  Ariyanti et al . (2018) kelapa sawit umumnya  hanya  memunculkan  satu  daun setiap  bulannya.  Menurut  Corley and Tinker (2016)  pada  masa  pembibitan  rata-rata pertambahan  jumlah  daun  kelapa  sawit  sebesar satu  helai/daun  sampai  bibit  berumur  enam bulan.  Menurut  Salibury  dan    (Ariyanti et  al ., 2018)  pertambahan  jumlah  daun  pada  setiap interval  pengamatan  dalam  satuan  waktu  atau indeks  plastokhron  (selang  waktu  yang dibutuhkan per daun tambahan yang terbentuk) relatif  konstan  apabila  tanaman  ditanam  pada level  suhu  udara  dan  intensitas  cahaya  yang konstan.
___________________________________________

## Kesimpulan
Perlakuan campuran karier 90% + zat aditif 10% dengan  penambahan  2%  molase  merupakan perlakuan  terbaik  dengan  viabilitas  BPN  dan BPF tertinggi sampai dengan 12 Minggu Setelah Produksi  (MSP).  Viabilitas  pada  BPN  maupun BPF dalam campuran karier 90% + zat aditif 10% dengan penambahan 2% molase sampai dengan 12  MSP  seluruh  perlakuan  komposisi  karier masih  memenuhi  standar  mutu  pupuk  hayati. Pada  uji  pot  bibit kelapa  sawit,  terjadi  interaksi antara  komposisi  dengan  dosis  amelioran  plus (diperkaya  BPF  dan  BPN)  berpengaruh  nyata terhadap  kenaikan  tinggi  tanaman,  diameter batang,  dan  jumlah  daun.  Pemberian  amelioran dosis d 3 komposisi  k 3 memberikan hasil terbaik terhadap  tinggi  tanaman,  diameter  batang,  dan pertambahan daun.

## Ucapan Terima Kasih
Ucapan  terima  kasih  penulis  tunjukkan  kepada PT.  Pupuk  Kaltim  yang  telah  mendanai penelitian ini, juga kepada PT. Kalianusa sebagai lokasi pengambilan sampel penelitian ini.
___________________________________________

## Daftar Pustaka
Adiguna,  G.S.  dan  I.N.P.  Aryantha.  2020. Aplikasi  fungi  rizosfer  sebagai  pupuk hayati  pada  bibit  kelapa  sawit  dengan memanfaatkan  limbah  tandan  kosong kelapa  sawit  sebagai  media  pertumbuhan. Manfish J., 1(1): 32 – 42.
Adnan,  I.S.,  B.  Utoyo,  dan  Kusumastuti.  2015. Pengaruh pupuk NPK dan pupuk organik terhadap  pertumbuhan  bibit  kelapa  sawit ( Elaeis guineensis Jacq.) di Main Nursery. J. AIP, 3(2): 69 – 81.
Advinda,  L.,  M.  Fifendy,  and  A.  Anhar.  2020.
The  utilization  of  coconut  water  and molasses  as Fluorescent  Pseudomonad propagation  medium.  Int.  J.  Progress.  Sci. Technol., 19(2): 25 – 28.
Arisandi, A., M.K. Wardhani, K. Badami, dan A. Sopiyanti.  2018.  pengaruh  perbedaan salinitas terhadap viabilitas bakteri
Pseudomonas spp. Rekayasa, 10(1): 16. Ariyanti,  M.,  S.  Rosniawaty,  dan  H.A.  Utami. 2018.  Pertumbuhan  bibit  kelapa  sawit ( Elaeis guineensis Jacq.)  dengan pemberian kompos  blotong  disertai  dengan  frekuensi
penyiraman  yang  berbeda  di  pembibitan utama.  Jurnal  Kultivasi,  17(3):  723 – 731. Aryanti, E., Yulita, A. Rani,  and Annisava. 2016.  Giving  some  ameliorants  to  changes chemical  properties  of  peat  soil.  J. Agroteknologi, 7(1): 19 – 26.
Aryanto,  A.,  Triadiati,  and  Sugiyanta.  2015.
Lowland  and  upland  rice  growth  and production with application of biofertilizer based  on  plant  growth  promoting  bacteria in acid soil. J. Ilmu Pertan. Indones., 20(3): 229 – 235.
Azeem,  M.,  T.U.  Hassan,  M.I.  Tahir,  A.  Ali, P.G.S.A. Jeyasundar, Q. Hussain, S. Bashir, S.  Mehmood,  and  Z.  Zhang.  2021.  Tea leaves biochar as a carrier of bacillus cereus improves  the  soil  function  and  crop productivity.  Appl.  Soil  Ecol.,  157(August 2020): 103732.
Badan  Pusat  Statistik.  2021.  Impor  pupuk menurut  negara  asal  utama.  Badan  Pus. Stat.:
1. https://www.bps.go.id/statictable/2014/ 09/08/1044/impor-pupuk-menurut- negara-asal-utama-2000-2020.html (accessed 18 October 2021).
Bahri,  S.,  C.  Mulyani,  dan  S.  Alfarizi.  2018. Respon bibit kelapa sawit ( Elaeis guineensis Jacq.)  di  main  nursery  pada  media  tanam sub  soil  terhadap  bahan  pembenah  tanah dan pupuk organik. J. Penelirian Agrosamudra, 5(1): 41 – 52.
Baroroh,  A.U.L.  dan  P.  Setyono.  2015.  Analisis kandungan  unsur  hara  makro  dalam kompos  dari  serasah  daun  bambu  dan limbah  padat  pabrik  gula  (blotong). Bioteknologi, 12(November): 46 – 51.
Corley,  R.H.  and  P.  Tinker.  2016.  The  palm  oil. Fifth. Willey Blackwell.
Febriati,  N.  and  Y.  Rahayu.  2019.  The  effect  of biochar  and  nitrogen  stimulating  bacteria ( Rhizobium  &  Azotobacter sp.)  on  the
Growth  of  Soybean  ( Glycine  max )  in Calcarouse Soil. LenteraBio 8(1): 62 – 66. Fitriatin, B.N., D.D.M. Ambarita, M.R. Setiawati, and  T.  Simarmata.  2021.  The  role  of rhizobacterial  inoculum  and  formulated soil  amendment  in  improving  soil chemical-biological  properties,  chlorophyll content and agronomic efficiency  of maize under  marginal  soils.  Jordan  J.  Biol.  Sci., 14(3): 601 – 605.
Food  Agricultural  Organization.  2019.  Standard operating procedure for soil organic carbon
Walkley-Black method. FAO. Hastuti,  R.D.  dan  R.C.B.  Ginting.  2007. Enumerasi bakteri, cendawan, dan aktinomisetes.  Metode  Analisis  Biologi Tanah. Balai PenelitianTanah.
Hastuti, N., D. Hendra, and R.E. Pangersa Gusti. 2018.  Theeffect  of  organic  ameliorant addition into the growth of three seedlings. J. Penelit. Has. Hutan, 36(3): 171 – 180. Hoe, T.K., M.R. Sarmidi, S.S.R. Syed Alwee, and Z.A.  Zakaria.  2016.  Recycling  of  oil  palm empty  fruit  bunch  as  potential  carrier  for biofertilizer  formulation.  J.  Teknol.  doi: 10.11113/jt.v78.7375.
Kanchan,  A.,  K.  Simranjit,  K.  Ranjan,  R. Prasanna,  B.  Ramakrishnan,  M.C.  Singh, M. Hasan, and Y.S. Shivay. 2018. Microbial biofilm inoculants benefit growth and yield of chrysanthemum varieties under protected  cultivation  through  enhanced nutrient  availability.  Plant  Biosyst.,  153(2):
306 – 316. Kasno,  A.  and  L.  Anggria.  2017.  Increasing growth  of  oil  palm  seedling  with  NPK fertilization.  J.  Penelit.  Tanam.  Ind.,  22(3): 107.
Kementan.  2019.  Keputusan  menteri  pertanian No. 261/KPTS/SR.310/M/4/2019. : 1 – 18. Kementerian Pertanian Indonesia. 2019. Peraturan  menteri  pertanian  nomor  01 tahun  2019  tentang  pendaftaran  pupuk organik,  pupuk  hayati,  dan  pembenah tanah.
Kholifah,  M.  dan  Sampoerno.  2016.  Pemberian amelioran  pada  bibit  kelapa  sawit  ( Elaeis guineensis Jacq.)  di  pembibitan  awal.  JOM Faperta, 3(2): 1 – 8.
Kusuma, C.A., K.S. Wicaksono, dan B. Prasetya. 2016. Perbaikan sifat fisik dan kimia tanah lempung  berpasir  melalui  aplikasi  bakteri Lactobacillus  fermentum .  J.  Tanah  dan Sumberd. Lahan, 3(2): 401 – 410.
Madigan, M.T., J.M. Martinko, K.S. Bender, D.H. Buckley, and  D. Sthal. 2015. Brock  biology of  microorganism.  14th  ed.  Pearson Education, United States of America.
Mandal, B.D., B. Datta, M. Chaudhury, and S.K. Dey.  2015.  Nutrient  requirement  for natural rubber. Better Crop., 99(2): 19 – 20.
Mhlongo,  M.I.,  L.A.  Piater,  N.E.  Madala,  N. Labuschagne,  and  I.A.  Dubery.  2018.  The chemistry  of  plant – microbe  interactions  in the  rhizosphere  and  the  potential  for metabolomics  to  reveal  signaling  related  to
defense priming and induced systemic resis- tance. Front. Plant Sci., 9(February): 1 – 17. Mindari,  W.,  P.E.  Sassongko,  U.  Khasanah,  & Pujiono.  2018.  Rasionalisasi  peran  biochar dan humat terhadap ciri fisik-kimia tanah. Journla Folium, 1(2): 34 – 42.
Najmiyati,  E.  dan  D.H.  Akhadi.  2013.  Viabilitas dan kinerja
konsorsium
mikroba pendegradasi hidrokarbon setelah penyimpanan  dalam  pendingin  dan penyimpanan beku. J. Ecolab, 6(2): 81 – 89. Pathirana,  B.K.W.  and  P.N.  Yapa.  2020. Evaluation  of  different  carrier  substances for the development of an effective pelleted biofertilizer for rice ( Oryza sativa L.) Using co-inoculated  bacteria  and  arbuscular mycorrhizal  fungi.  Asian  J.  Biotechnol. Bioresour. Technol., 6(1): 1 – 10. Pepper,  I.L.,  C.P.  Gerba,  and  T.J.  Gentry.  2014.
Environmental microbiology: Third Edition.
Promraksa,  A.,  and  N.  Rakmak.  2020.  Biochar production from palm oil mill residues and application of the biochar to adsorb carbon dioxide. Heliyon, 6(5): 1 – 9. Raimi, A., A. Roopnarain, and R. Adeleke. 2021. Biofertilizer  production  in  Africa:  Current status,  factors  impeding  adoption  and strategies for success. Sci. African, 11(1 – 19):
1 – 22.
Rosariastuti,  R.,  S.  Sumani,  S.  Supriyadi,  M.A. Nursetyawan, and P.Y. Daniswara. 2017. The utilization of modified cassava flour (mocaf) industrial  waste  and  peat  as  carrier  of nitrogen-fixing bacteria (NFB) and phosphate solubilizing bacteria (PSB) Inoculant. Microbiol. Indones., 11(4): 111 – 116. Roslan, M.A.M., I. Sohedein, P.S. Ling, Z.M. Sobri, A.T.K.  Zuan,  S.C.  Cheak,  and  N.A.A. Rahman.  2021.  Sustainable  agronomic valorization  of  unsulfured  molasses  and defatted  soybean  meal  as  an  optimized formulation of bio-organic fertilizer enriched with high cell density p-solubilizing bacteria. Agronomy, 11(5): 1 – 16.
Sa’diyah,  K.,  P.H.  Suharti,  N.  Hendrawati,  F.A. Pratamasari,  dan  O.M.  Rahayu.  2021. Pemanfaatan  serbuk  gergaji  kayu  sebagai karbon  aktif  melalui  proses  pirolisis  dan aktivasi  kimia.  CHEESA  Chem.  Eng.  Res. Artic., 4(2): 91. doi:
Saif,  S.,  Z.  Abid,  M.F.  Ashiq,  M.  Altaf,  and  R.S.
Ashraf.  2021.  Biofertilizer  formulations. biofertilizers.  Scrivener  Publishing  LLC, Pakistan.
Salwan,  R.,  A.  Sharma,  and  V.  Sharma.  2019. Microbes mediated plant stress tolerance in saline  agricultural  ecosystem.  Plant  Soil, 442(1 – 2): 1 – 22.
Sari,  K.,  M.  Wahyuni,  dan  H.  Wijaya.  2019. Pengaruh  pemberian  kompos  blotong limbah pabrik gula dan mikoriza terhadap pertumbuhan  bibit  kelapa  sawit  ( Elaeis guineensis Jacq). Agrotekma J.
Agroteknologi dan Ilmu Pertan., 4(1): 64.
Satinder,  K.B.,  S.J.  Sarman,  and  E.  Chaabouni. 2012.  Shelf-life  of  biofertilizers:  an  accord between  formulations  and  genetics.  J. Fertil. Pestic., 03(05): 1 – 2. Simangunsong,  D.,  Wardati,  dan  M.A.  Khoiri. 2015.  Pemanfaatan  endapan  limbah  cair pabrik  kelapa  sawit  dan  kapur  dolomit pada  bibit  kelapa  sawit.  Jom  Faperta,  2(1): 70 – 75. Sudadi,  Suryono,  and  E.  Triharyanto.  2018.  The application  of  biofilm  biofertilizer-based organic  fertilizer  to  increase  available  soil nutrients and spinach yield on dry land (a study case in Lithosol soil type). IOP Conf. Ser.  Earth  Environ.  Sci.,  200(1):  0 – 6.
Tarmizi,    A.M.  and  M.  Tayeb.  2006. Nutrient  demands  of  tenera  oil  palm planted  on  inland  soils  of  Malaysia.  J.  Oil Palm Res., 18(June): 204 – 209. Teng, Z., W. Shao, K. Zhang, F. Yu, Y. Huo, and M.  Li.  2020.  Enhanced  passivation  of  lead with  immobilized  phosphate  solubilizing bacteria  beads  loaded  with  biochar/ nanoscale  zero  valent  iron  composite.  J. Hazard. Mater., 384: 121505.