ANALYSIS OF PYRENE COMPOUNDS AT THE MARINE ALGAE Eucheuma cottoni in BANTAENG REGION COASTAL
Analisis Senyawa Piren pada Alga Laut Eucheuma cottoni Di Perairan Kabupaten Bantaeng
Evana Yuslimah Yusuf *1 , Nursiah La Nafie 2 , Seniwati Dali 2
1 Department of Chemistry, Faculty of Science, University of Hasanuddin Jl. Perintis Kemerdekaan 90245, Makassar-Indonesia
2 Department of Chemistry, Faculty of Science, University of Hasanuddin Jl. Perintis Kemerdekaan 90245, Makassar-Indonesia
*Corresponding author, phone: 085255755731, eyuslimah@gmail.com
Received: June 2016 Published: July 2016

## ABSTRACT
The compounds pyrene is one of the polycyclic aromatic hydrocarbons (HAP) which is derived from petroleum. These  compounds  are  carcinogenic  and  toxic  for  the  marine  biota.  The  purpose  of  this  study  to  determine  the levels  of  pyrene  compounds  in  marine  algae.  In  this  research,  analysis  of  pyrene  compounds  in  marine  algae Eucheuma cottonii using the  method of  GC  -  MS (Gas Chromatography  - Mass spectrophotometry). Sampling was  conducted  in  the  waters  the  Bantaeng  Regency  with  a  6  point  sampling  different  locations  namely  Nipa- nipa, Bakara, Boroloe, Tapaloe, Baruga village and Baruga. The results showed that the concentration of pyrene compounds  found  in  marine  algae Eucheuma  cottonii at  6  locations  in  waters  the  Bantaeng  Regency  has  a concentration  low  enough  pyrene  compounds  that  is  0009-0063  ppm.  This  means  that  the  concentration  of pyrene was obtained below the threshold value determined by the decision of national of Environmental ministry for the marine life.
Keywords : Polycyclic Aromatic Hydrocarbons (PAH), pyrene compounds, Eucheuma cottonii

## PENDAHULUAN
Kabupaten  Bantaeng  sekarang  ini  menjadi Kabupaten  yang  mengalami  pertumbuhan  dan perkembangan  ekonomi  yang  sangat  pesat. Beberapa  wilayah  di  sekitar  pesisir  sudah dijadikan  sebagai  kawasan  industri  dan  kawasan ekonomi  yang  lainnya.  Perkembangan  ini  selain akan  memberikan  pengaruh  positif  terhadap perekonomian daerah dan pendapatan masyarakat,  juga  tidak  kalah  pentingnya  akan memberikan  dampak  buruk  bagi  wilayah perairan.  Dampak  buruk  itu  bisa  berupa pencemaran di perairan laut oleh limbah industri atau kegiatan antropogenik dan aktivitas bongkar muat  kapal  nelayan  yang  mengarah  kepada peningkatan  buangan  kapal,  terutama  yang mengandung minyak sehingga minyak merupakan  polutan  yang  memiliki  potensi  besar mencemari laut (Yaqin, dkk., 2014).
Salah  satu  senyawa  pencemar  yang  berasal dari  tumpahan  minyak  di  sekitar  perairan  laut adalah  senyawa  hidrokarbon  aromatik  polisiklik
(HAP).  Senyawa  HAP  merupakan  golongan senyawa  organik  yang  memiliki   dua  atau  lebih cincin  aromatik  yang  dapat  dihasilkan  dari pembakaran  yang  tak  sempurna  (pirogenik) ataupun  dari  kegiatan  perminyakan  (petrogenik) dan  harus  mendapat  perhatian  karena  bersifat karsinogen  (Haritash  dan  Kaushik,  2009;  Diaz, dkk.,  2014).  Senyawa  ini  dapat  dijumpai  di hampir  seluruh  kompartemen  lingkungan,  mulai udara,  danau,  lautan,  tanah,  sedimen  dan  biota. Menurut  Maskaoui  dkk.,  (2001)  senyawa  ini pada  perairan  laut  ditemukan  dalam  bentuk minyak  mengapung,  emulsi  dan  fraksi  terendap di dasar perairan  serta dapat berinteraksi dengan partikel  lain  sehingga  bersifat  persisten  terhadap lingkungan. Pencemaran yang disebabkan senyawa  HAP  telah  menyebabkan  penurunan populasi  alga  laut.  Kehadiran  senyawa  HAP  di lingkungan  menjadi  ancaman  serius  terhadap kesehatan  manusia,  karena  umumnya  senyawa HAP bersifat toksik, karsinogenik dan mutagenik (Seo, dkk., 2009). Salah satu senyawa HAP yang bersifat karsinogen yaitu senyawa piren.
Senyawa  piren  terdiri  atas  penggabungan empat  cincin  benzena  dengan  rumus  kimia C 16 H 10 .  Senyawa  ini  berupa  padatan  kecil,  tidak berwarna  dan  terbentuk  selama  pembakaran tidak  sempurna  dari  senyawa  organik.  Selain  itu senyawa  piren  juga  lebih  sulit  didegradasi, persisten  di  lingkungan,  hidrofobik,  lipofilik, serta  berpotensi  terakumulasi  melalui  rantai makanan  sehingga  membahayakan  lingkungan dan  komponen  biotik  (Hilyard,  dkk ., 2008). Senyawa  piren  biasa  ditemukan  sebagai  polutan pada  udara,  air,  dan  tanah,  bersifat  karsinogenik dan  berbahaya  bagi  kesehatan  serta  dapat meningkatkan resiko kanker kulit dan  kerusakan paru-paru  (Sarbini,  2012).  Berdasarkan  Kepmen LH No.128 tahun 2003 senyawa piren dimasukkan  sebagai  salah  satu  daftar  bahan pencemar  dan  Badan  Perlindungan  Lingkungan Amerika  (EPA)  menetapkan  senyawa  piren sebagai  salah  satu  zat  sangat  berbahaya  dan beracun (Febria, 2012).
Salah  satu  potensi  biota  laut  yang dibudidayakan  di  perairan  Kabupaten  Bantaeng adalah  alga  laut  yang  berasal  dari  jenis Rhodophyceae  yaitu  alga  laut Eucheuma cottonii .  Menurut  penelitian  alga  laut Eucheuma cottonii memiliki  kandungan  kimia  karagenan dan senyawa fenol, terutama flavonoid. Karagenan, senyawa polisakarida
yang
dihasilkan  dari  beberapa  jenis  alga  merah memiliki sifat antimikroba, antiinflamasi, antipiretik,  antikoagulan  dan  aktivitas  biologis lainnya  (Iskandar, dkk.,  2009).
Klasifikasi Eucheuma  cottonii menurut Doty (1985):
Kingdom  : Plantae Divisi : Rhodophyta Kelas : Rhodophyceae Ordo : Gigartinales Famili : Solieracea Genus : Eucheuma Spesies : Eucheuma cottonii
Kirso dkk., (2010) telah melakukan penelitian tentang konsentrasi senyawa benzopiren (BaP) dengan menggunakan berbagai jenis  alga  laut  ( Phillophora,  Fucus  vesiculosus, Furcellaria  lumbricalis,  Pilayella  litoralis,
Ectocarpus
confervoides,
Rhodomela confervoides, Cladophora
glomerata,
Enteromorpha intestinalis, dan Ceramium
tenuicorne )  di  laut  baltik  adalah  berkisar  0,70  - 4,51 µg kg -1 berat kering.
Gambar 1. Alga laut Eucheuma cottonii Kabupaten Bantaeng, Makassar.
Sifat senyawa piren yang lipofil menyebabkan senyawa ini cenderung teradsorbsi pada partikel-partikel organik maupun teradsorbsi dalam jaringan lipid biota yang hidup di  sekitarnya  (Lukitaningsih  dan  Sudarmanto, 2010). Organisme yang tidak mencerna senyawa piren sama sekali atau hanya dalam jumlah yang sangat kecil seperti alga laut dapat mengakumulasi  senyawa  piren  dalam  tubuhnya. Sifat  akumulasi  ini  dapat  dipindahkan  dari organisme  satu  ke  organisme  lain  melalui  rantai makanan.

## METODOLOGI Alat
Alat-alat  yang  akan  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  alat-alat  gelas  yang  biasa digunakan di laboratorium, spatula, pipet volum, autoklaf,  GC-MS  QP-2010  Ultra  Shimadzu, neraca  digital,  alat  ultrasonik, rotary  vacuum evaporator ,  sentrifugasi,  mikropipet,  pinset, botol  vial, Ice  box ,  mesin  PCR (GaneAmp  PCR System  9700,  Applied  Biosystem,  Foster  City, CA, USA ) , botol semprot, kertas pH, salinometer.

## Bahan
Bahan-bahan  yang  akan  digunakan  dalam penelitian ini adalah alga laut Eucheuma cottonii , air  laut  steril,  senyawa  piren  (sigma),  larutan diklorometan  (DCM)  (merk),  Na 2 SO 4 anhidrat, naftalen,  aquades,  gas  nitrogen,  kertas  label, aluminium foil, tissue, plastik wrap.
Prosedur Kerja
Pembuatan  Larutan  Induk  Senyawa  Piren 1000 mg/L
Larutan  induk  senyawa  piren  1000  mg/L dibuat  dengan  melarutkan  0,025  gram  senyawa piren  dengan  diklorometan.  Setelah  larut dimasukkan  ke  dalam  labu  ukur  25  mL kemudian  diencerkan  dengan  diklorometan hingga tanda batas dan dihomogenkan.
Pembuatan Larutan Internal Standar Senyawa Piren 50 mg/L
Larutan  internal  standar  senyawa  piren  50 mg/L  dibuat  dari  larutan  induk  1000  mg/L. Larutan induk dipipet sebanyak 0,5 mL kedalam labu  ukur  10  mL  kemudian  diencerkan  dengan diklorometan hingga tanda batas dan dihomogenkan.

## Pengujian  Sampel  untuk  Analisis  Senyawa Piren
Kadar senyawa piren yang terkandung pada alga  laut  di  analisis  dengan  cara:  Sampel  alga laut dibersihkan dari material pengotor menggunakan  aquadest  kemudian  dikeringkan dalam  oven  pada  suhu  60 o C  sampai  berubah menjadi  coklat  kehitaman.  Sampel  yang  sudah kering  kemudian  dihancurkan  menjadi  serbuk halus  dan  dihomogenisasi  dengan  mortar  lalu disimpan  dalam  aluminium  foil.  Sampel  yang sudah  halus  ini  ditimbang  sebanyak  5  g  dan diekstraksi  dengan  10  mL  larutan  diklorometan (DCM)  menggunakan  ultrasonik  selama  10 menit.  Selanjutnya  supernatan  dipindahkan  ke dalam  erlenmeyer,  residu  diekstraksi  kembali dengan  cara  yang  sama  sebanyak  3  kali  dengan 10  mL  diklorometan  menggunakan  ultrasonik selama  10  menit.  Hasil  ekstrak/supernatant kemudian  disentrifugasi  dan  dikumpulkan  pada erlenmeyer. Pelarut diuapkan dengan menggunakan  gas  nitrogen  hingga  2  mL, kemudian  ditambahkan  Na 2 SO 4 anhidrat  dan dipipet  0.5  mL  ke  dalam  botol  vial  untuk diinjeksikan ke alat Kromatografi Gas Spektrofotometri Massa (GC - MS).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Analisis  Senyawa  Piren  pada  Alga  Laut

## Eucheuma cottonii
Hasil  pengukuran  konsentrasi  senyawa piren  pada  alga  laut Eucheuma  cottonii di  6 lokasi  pada  Kabupaten  Bantaeng  dengan menggunakan metode kromatografi gas– spektrofotometer  massa  (GC-MS)  dapat  dilihat pada Gambar 2.
Gambar 2. Kadar rata-rata senyawa piren pada alga laut Eucheuma cottonii .
Dari  hasil  yang  diperoleh  dari  data  pada Gambar  2,  kandungan  senyawa  piren  pada  alga laut Eucheuma  cottonii di  beberapa  titik  lokasi sampling  pada    Kabupaten  Bantaeng  yaitu  desa nipa-nipa  sebesar  0.052  ppm,  desa  bakara sebesar  0.009  ppm,  desa  boroloe  sebesar  0.053 ppm,  desa  tapaloe  sebesar  0.051  ppm,  desa baruga  0.063  ppm  dan  desa  baruga  0.026  ppm. Konsentrasi  senyawa  piren  yang  diperoleh  di setiap  lokasi  sampling  perairan  Kabupaten Bantaeng  memiliki  nilai  konsentrasi  yang  cukup rendah  dan  dibawah  nilai  ambang  batas  yang telah  ditetapkan  oleh  Kementrian  KLH  No.  52 tahun  2004  untuk  biota  laut  yakni  3  ppm (Khozanah, 2014).
Data hasil penelitian menunjukkan bahwa 6 titik  lokasi  sampling  di  perairan  Kabupaten Bantaeng  cukup  rendah  oleh  senyawa  piren karena  memiliki  kadar  senyawa  piren  <0.1-0.5 ppm,  mengingat  kadar  senyawa  HAP  sebesar 0.1-0.5 ppm sudah dapat menyebabkan keracunan semua larva biota perairan  (Munawir, 2007). Bila alga laut mengandung senyawa HAP yang  tinggi  dan  dimakan  oleh  manusia,  maka senyawa  ini  akan  terakumulasi  dalam  tubuh manusia,  dan  sampai  batas  tertentu  dapat menimbulkan gangguan kesehatan pada manusia.
0 0.01 0.02 0.03 0.04 0.05 0.06 0.07 K o n se n tr a si ( p p m )
Adanya  perbedaan  konsentrasi  senyawa piren di setiap lokasi  disebabkan oleh pengaruh arus.  Arah  dan  kecepatan  arus  yang  selalu berubah menyebabkan pola penyebaran senyawa piren tidak merata di permukaan laut. Kontaminasi senyawa piren dalam suatu perairan dapat  bersumber  dari  berbagai  aktivitas  baik aktivitas  alami  (perembesan  minyak)  ataupun sumber antropogenik (kegiatan industri, transportasi dan aktivitas rumah tangga).

## KESIMPULAN
Kandungan  senyawa  piren  pada  alga  laut Eucheuma  cottonii di  6  titik  lokasi  sampling pada  perairan  Kabupaten  Bantaeng  memiliki nilai  yang  cukup  rendah  yakni  berkisar  antara 0.009  –  0,063  ppm  dan  dibawah  nilai  ambang batas  untuk  biota  laut  sehingga  alga  laut Eucheuma  cottoni yang  terdapat  di  perairan Kabupaten  Bantaeng  layak  dikonsumsi  oleh manusia.

## DAFTAR PUSTAKA
Diaz,  M.,  Mora,  V.,  Pedrozo,  F.,  Nichela,  D.,
Baffico,  G.,  2014.  Evaluation  of  Native
Acidophilic  Algae  Species  as  Potential Indicators of Polycyclic Aromatic
Hydrocarbon  (PAH)  Soil  Contamination. J. Appl. Phycol . Febria, F.A., 2012. Penapisan Bakteri Pendegradasi  Piren  dari  Tanah  Kawasan Tambang  Minyak  Bumi  serta  Identifikasi Berdasarkan  Gen  Penyandi  16s  rRNA  dan Piren Dioksigenase . Disertasi Tidak
Diterbitkan .  Padang:  Program  Doktor  Ilmu Biologi - Universitas Andalas.
Haritash,  A.K.,  dan  Kaushik,  C.P.,  2009.
Biodegradation aspects of Polycyclic Aromatic  Hydrocarbons  (PAHs):  A  Review.
J. Haz. Mat ., 169: 1–15.
Hilyard,  E.J.,  Meehan,  J.M.J.,  Spargo,  B.J  dan Hill,  R.T.,  2008.  Enrichment,  Isolation,  and Phylogenetic  Identification  of  Polycyclic Aromatic  Hydrocarbon-Degrading  Bacteria from  Elizabeth  River  Sediments. Appl. Environ. Microbiol ., 74(4): 1176–1182
Iskandar, Y., Rusmiati, D., Dewi, R.R., 2009. Uji Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Etanol  Rumput Laut  (Eucheuma  cottonii)  Terhadap  Bakteri
Escherichia  coli  dan  Bacillus  cereus. Jatinangor: Universitas Padjajaran.
Kirso, U., Paalme, L., Voll, M.,  Irha, N., Urbas, E.,  2010.  Distribution  of  The  Persistent Organic  Pollutants,  Polycyclic  Aromatic Hydrocarbons Between Water, Sediments and Biota.  Aquat.  Ecosystem.  Health.  Manage., 4(2): 151-163.
Lukitaningsih,  E.  dan  Sudarmanto,  A.,  2010. Bioakumulasi Senyawa Poli-Aromatik Hidrokarbon  dalam  Plankton,  Ganggang  dan Ikan  di  Perairan  Laut  Selatan  Jogjakarta. Majalah Farmasi Indonesia., 21(1): 18-26
Munawir,  K.  2007.  Kadar  Polisiklik  Aromatik Hidrokarbon (PAH) dalam Air, Sedimen, dan Sampel  Biota  di  Perairan  Teluk  Klabat Bangka. Oseanol. Limnol. Indonesia. 33:441- 453.
Maskaoui,  K.,  Zhou,  J.L.,  Hong,  H.S.,  dan Zhang,  Z.L.,  2001.  Contamination  by Polycyclic  Aromatic  Hydrocarbons  in  The Jiulong  River  Estuary  and  Western  Xiamen Sea, China. Environ. Pollut ., 118: 109-202.
Seo,  J.S.,  Keum,  Y.S.,  and  Li,  Q.X.,  2009.
Bacterial Degradation of Aromatic
Compounds. Int.  J.  Environ.  Res.  Public Health . , 6(1):  278-309. Sarbini, K., 2012. Biodegradasi Pyrena menggunakan  Bacillus  subtilis  C19 . Skripsi Tidak  Diterbitkan .  Depok:  Program  Studi Teknologi  Bioproses  Departemen  Teknik Kimia. Fakultas Teknik – UI.
Yaqin,  K.,  Fachruddin,  L.,  Suwarni.,  Umar M.T., dan Nadiarti., 2014. Status Pencemaran Logam  di  Perairan  Kabupaten  Bantaeng, Sulawesi  Selatan . Skripsi  Tidak  Diterbitkan .
Makassar:  Jurusan  Perikanan  Fakultas  Ilmu Kelautan dan Perikanan - UNHAS.