## PENINGKATAN KEBERHASILAN IMPLANTASI TIKUS
Rattus norvegicus TERPAPAR  ASAP  ROKOK  PASCA DITERAPI EKSTRAK  ETANOL  RUMPUT KEBAR (Byophytum petersianum Klotzsch)
Jeanny Stevani Rahandity 1) , Adrien Jems Akiles Unitly 2) , La Eddy 3*) , Laury Marcia Chara Huwae 4)
,1, 2, 3*,4 Jurusan Biologi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Pattimura, Ambon
3* Corresponding Author e-mail : laeddy2@gmail.com
Informasi Abstrak. Kata kunci . Asap rokok, implantasi, ovarium, korpus luteum, Rattus norvegicus ,
Syzygium aromaticum L.,
uterus
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  peningkatan  keberhasilan  implantasi tikus Rattus  norvegicus terpapar  asap  rokok  pasca  diterapi  ektrak  etanol  rumput kebar  ( Biophytum  petersianum Klotzsch).  Penelitian  mengggunakan  metode eksperimental laboratorik dengan rancangan acak lengkap (RAL) yang terdiri dari empat  perlakuan  yang  masing-masing  diulang  tiga  kali,  yaitu  (-):  Kelompok kontrol  negatif  yaitu  tikus  yang  tidak  diberi  perlakuan,  (+):  Kelompok  kontrol positif yaitu tikus dipaparkan asap rokok selama 28 hari, (0.067): Kelompok tikus yang  dipapar  asap  rokok  selama  28  hari  kemudian  diberi  ekstrak  etanol  rumput kebar  dengan  dosis  0.067mg/ekor/hari  selama  28  hari,  dan  (0.135):  Kelompok tikus  yang  dipapar  asap  rokok  selama  28  hari  kemudian  diberi  ekstrak  etanol rumput kebar dengan dosis 0.135mg/ekor/hari selama 28 hari. Setelah itu, semua tikus dikawinkan. Pengamatan jumah korpus luteum pada organ ovarium dan titik implantasi pada organ uterus tikus dilakukan pada usia kebuntingan 12 hari. Data yang  dianalisis  dengan analysis  of  variance (ANOVA)-SPSS  versi  16.0 dilanjutkan  dengan  uji  Duncan  dengan  selang  kepercayaan  95%  (α  =  0.05)  dan metode  nonparametric.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  pemberian  ekstrak etanol  rumput  kebar  ( Byophytum  petersianum Klotzsch)  dengan  dosis  0.135 mg/ekor/hari  mampu  meningkatkan  keberhasilan  implantasi  tikus Rattus norvegicus .
Received: 10 Maret 2021 Accepted: 12 Mei 2021 © 2021 Jurusan Biologi FMIPA Unpatti, IAIFI Cab. Ambon

## A. PENDAHULUAN
Rokok  berkembang pesat dan dikonsumsi luas setelah diproduksi pada awal abad ke 20. Saat ini di seluruh dunia diperkirakan terdapat sebanyak 1.26 miliar perokok lebih dari 200 juta di  antaranya  adalah  wanita.  Merokok  tidak  hanya  berbahaya  bagi  perokok  tetapi  juga  orang  di sekitarnya  yang  terkena  asap  rokok.  Pembakaran  rokok  akan  menghasilkan  asap  rokok  yang terbagi    menjadi  asap  rokok  utama  ( mainstream  smoke )  dan  asap  rokok  samping  ( sidestream smoke ).  Asap  rokok  utama  merupakan  asap  rokok  yang  dihasilkan  dari  hisapan  perokok  aktif yang mengandung 25% kadar bahan berbahaya, sedangkan asap rokok samping merupakan asap rokok  dari  pembakaran  rokok  yang  terhirup  oleh  perokok  pasif  yang  mengandung  75%  kadar bahan berbahaya (Nurjanah et al, 2014). Asap rokok samping dapat menimbulkan polusi udara sehingga  disebut  pula  Environtment  Tobacco  Smoke  (ETS)  yang  sangat  berbahaya  dan dampaknya lebih besar.
Berbagai  gangguan  yang  akan  ditimbulkan  dari  adanya  asap  rokok  salah  satunya  yaitu gangguan  pada  sistem  reproduksi.  Reproduksi  atau  perkembangbiakan  merupakan  suatu  proses
untuk  menghasilkan  keturunan  guna  mempertahankan  kelangsungan  hidup  dari  suatu  makhluk hidup  Meskipun  gangguan  reproduksi  tidak  menjadi  vital  bagi  kehidupan  makhluk  itu  sendiri, tetapi  sangat  penting  artinya  sehubungan  dengan  kelanjutan  keturunan  suatu  makhluk  hidup (Suprihatin,  2008).  Untuk  meneruskan  kelangsungan  hidup  dan  keberadaanya  di  dunia  ini, makhluk  hidup  harus  berkembang  biak  dan  dalam  prosesnya  mamalia  mengalami  suatu  fase kebuntingan.  Keberhasilan  kebuntingan  sendiri  di  dukung  oleh  berbagai  macam  faktor,  mulai dari faktor intrinsik  yang menyangkut  keadaan fisiologis dari induk  meliputi   organ  reproduksi yang  sehat  dan  kadar  hormon  reproduksi  yang  normal  dan  faktor  ekstrinsik  seperti  pakan  dan kondisi lingkungan yang mendukung (Tamboss, 2001)
Pada  wanita,  asap  rokok  dapat  menghambat  fungsi  saluran  telur  yang  melaksanakan transpor telur/ovum yang telah matang masuk ke dalam rahim sehingga jika terjadi pembuahan, maka  embrio  yang  terbentuk  tidak  dapat  bersarang  pada  dinding  endometrium  rahim  untuk berkembang  secara  normal.  Keadaan  ini  menyebabkan  frekuensi  pembuahan  di  luar  tuba  atau perkembangan embrio/janin  di  luar rahim (Zenzes,  2000) .Hal  ini dikarenakan organ reproduksi yang  tidak  sehat  dan  kadar  hormon  reproduksi  yang  tidak  normal  sehingga  terjadi  penurunan produktifitas  pada  organ  reproduksi  dan  akan  mempunyai  dampak  yang  signifikan  berupa kegagalan menghasilkan keturunan.
Untuk  menjaga  agar  kehamilan  berjalan  secara  normal,  maka  diperlukaan  lingkungan uterus  yang  kondusif  dan  mekanisme  pemeliharaan  kebuntingan  tersebut  sangat  di  pengaruhi oleh  mekanisme  hormonal  yang  sangat  kompleks  dan  saling  berkaitan.  Ekstradiol  dan progesteron  merupakaan  hormon  utama  penjaga  kebuntingan  di  samping  hormon-hormon  lain seperti  relaksin,  somatotropin,  dan  laktogen  plasenta  (Tamboss,  2001).  Dalam  hal  ini  peranan korpus  luteum  sangat  membantu  keberhasilan  untuk  proses  kebuntingan  tersebut.  Peningkatan jumlah  korpus  luteum  pada  awal  kebuntingan  di  perlukan  untuk  meningkatkan  produksi progesterone dalam menjaga implantasi.
Pentingnya  peranan  hormon  terhadap  organ  reproduksi  betina,  mendorong  adanya penelitian  ini  dengan    melakukan  berbagai  percobaan  untuk  mencari  sumber  hormon  dari  luar tubuh  (estrogen  eksogen)  yang  relatif  aman.  Efek  dari  radikal  bebas  dapat  dicegah  dengan mengkomsumsi  makanan  atau  minuman  yang  mengandung  antioksidan.  Masyarakat  sekarang sudah  menyadari  bahwa  pentingnya  asupan  antioksidan  sebagai  bentuk  perlindungan  terhadap kesehatan terutama antioksidan yang berasal dari tanaman (Zafar et al , 2009). Beberapa senyawa yang berasal dari tumbuh-tumbuhan diketahui mempunyai efek penyembuhan pada penampilan reproduksi  hewan  betina  termasuk  rumput  kebar  ( Biophytum  petersianum Klotzsch)  yang ditemukan  di  kecamatan  Kebar,  kabupaten  Manokwari,  Papua  Barat.  Berdasarkan  tempat ditemukannya  yaitu  di  kecamatan  Kebar  maka  tumbuhan  ini  dinamakan  rumput  kebar  yang percaya  oleh  masyarakat  setempat  secara  turun  temurun  sebagai  obat  tradisional  yang  diolah secara  sederhana  untuk  berbagai  keperluan  kesehatan.  Akan  tetapi  tumbuhan  ini  lebih  banyak digunakan  oleh  penduduk  sebagai  obat  kesuburan  wanita.  Hal  ini  dibuktikan  dengan  adanya informasi yang menyatakan bahwa banyak pasangan suami istri yang telah lama belum memiliki keturunan dengan mengkonsumsi rebusan tumbuhan rumput kebar dapat memberikan hasil yang
memuaskan,  bahkan  beberapa  wanita  yang  memiliki  ovarium  kiri  dan  kanan  tinggal  separuh akibat kista dengan mengkonsumsi rebusan rumput kebar dapat menormalkan siklus haid yakni yang semula 14 hari menjadi 28–30 hari (Sembiring dan Darmawati, 2013), meningkatkan birahi (Sadsoesitoeboen,  2005).  Oleh  sebab  itu,  perlu  dilakukan  penelitian  mengenai  perbaikan penampilan  reproduksi  tikus  dalam  hal  ini  peningkatkan  jumlah  korpus  luteum  dan  titik implantasi  tikus  yang  terapar  asap  rokok  setelah  diterapi  ekstrak  etanol  rumput  Kebar ( Biophytum petersianum Klotzsch) .

## B. METODE PENELITIAN
Penelitian  dilakukan  pada  bulan  Oktober  2017  hingga  Januari  2018,  di  Laboratorium Zoologi  Jurusan  Biologi  FMIPA  Universitas  Pattimura  dengan  menggunakan  metode eksperimental  laboratorik  dengan  rancangan  acak  lengkap  (RAL)  yang  terdiri  dari  empat perlakuan yang masing-masing diulang tiga kali. Adapun tahapan penelitiannya sebagai berikut :
Tahap  Persiapan. Tikus  yang  digunakan  adalah  tikus  putih  betina  dara  yang  sudah dewasa  berumur  10  minggu  dengan  kisaran  bobot  badan  ±  200  gr.  Tikus  diperoleh  dari laboratorium zoologi jurusan biologi, fakultas MIPA Universitas Pattimura. 12 ekor tikus betina diadaptasi  terlebih  dahulu  di  dalam  kandang.  Masing-masing  kandang  beralaskan  sekam  dan ditutupi kawat kemudian diberikan makan dan minum secara teratur.
Pemaparan Asap Rokok. Pemaparan asap rokok pada tikus dilakukan setiap hari. Satu batang  rokok  sejak  awal  dinyalakan  hingga  habis  memerlukan  waktu  10-12  menit.  Pemaparan asap rokok kretek jenis  Gudang Garam  Merah dilakukan dengan dosis 10 batang/ekor/hari dua kali  setiap  hari  pada  jam  09.00  dan  15.00  WIT.  Terdapat  penelitian  sebelumnya  yang menggunakan  10  batang  rokok  yakni  Ahmadnia et  al (2007).Tahapan  pemaparan  asap  rokok dilakukan  terlebih  dahulu  mempersiapkan  peralatan  yang  digunakan  yaitu smoking  chamber . smoking  chamber memiliki  dua  lubang,  dimana  fungsi  lubang  pertama  sebagai  jalan  arus pengeluaran  asap  yang  dipaparkan,  sedangkan  fungsi  lubang  kedua  untuk  memasukkan  ujung rokok yang dibakar. Adapun asap rokok dihembuskan berulang kali dengan bantuan spuit sampai rokok habis terbakar.
Ekstraksi  Rumput  Kebar. Rumput  Kebar  diambil  sebanyak  1  kg  dan  di  kering anginkan kemudian Rumput Kebar dihaluskan dengan menggunakan blender. Setelah didapatkan serbuk  rumput  kebar  kemudian  dilanjutkan  dengan  proses  ekstraksi  dengan  menggunakan metode maserasi. Prosedur pembuatan sebagai berikut :
a) Ditimbang sebanyak 250g serbuk rumput kebar dan dimasukkan kedalam Erlenmeyer.
b) Setelah itu, ditambahkan 1 liter etanol 70% dan di diamkan selama 24 jam.
c) Setelah  24  jam,  disaring  menggunakan  kertas  saring  Wartman  0,2  sehingga  diperoleh ekstrak cair rumput kebar. Residu ekstraksi diulang sebanyak 3x.
d) Ekstrak  cair  dari  rumput  kebar  yang  telah  diperoleh,  kemudian  dipekatkan  dengan  rotary evaporator.
e) Dari hasil pemekatan tersebut, maka diperoleh ekstrak etanol pekat rumput kebar.
Tahap Pemberian Dosis Ekstrak Etanol Rumput Kebar . Pemberian dosis I sebanyak 0.067mg/ekor/hari,  dan  dosis  II  sebanyak  0.135mg/ekor/hari.  Pemberian  ekstrak  etanol  rumput kebar  dilakukan  pada  tikus  yang  telah  terpapar  asap  rokok,  untuk  melihat  perbedaan  dosis ekstrak etanol rumput kebar yang diberikan pada tikus model :
(-) :  Kelompok  kontrol  negatif  yaitu  tikus  yang  tidak  diberi  pemaparan  asap  rokok  dan ekstrak etanol rumput kebar
(+) :  Kelompok kontrol positif yaitu tikus yang dipaparkan asap rokok selama 28 hari 0.067  :  Kelompok  tikus  yang  dipapar  asap  rokok  selama  28  hari  kemudian  diberi  ekstrak etanol rumput kebar dosis 0.067mg/ekor/hari selama 28 hari
0.135  :  Kelompok  tikus  yang  dipapar  asap  rokok  selama  28  hari  kemudian  diberi  ekstrak etanol rumput kebar dosis 0.135mg/ekor/hari selama 28 hari
Perkawinan. Setelah  perlakuan,  tikus  jantan  dan  betina  dikawinkan  dengan  rasio  1  :  1 dalam satu kandang. Untuk mengetahui terjadinya fertilisasi maka dilakukan pemerikasaan ulas vagina  pada  keesokan  harinya  dan  apabila  ditemukan  sperma  maka  dinyatakan  sebagai  hari pertama  kebuntingan  sampai  pada  hari  kebuntingaan  ke  12  maka  tikus  akan  dinekropsi  untuk melihat  variabel  penelitian  yakni  jumlah  korpus  luteum  dan  titik  implantasi  untuk  menentukan keberhasilan implantasi.
Pengamatan  Terhadap  Jumlah  Korpus  Luteum  Dan  Titik  Implantasi. Untuk mengamati  parameter  yaitu  jumlah  korpus  luteum  dan  jumlah  titik  implantasi,  pertama-tama dilakukan pembedahan pada tikus dengan umur kebuntingan 12 hari  (hari pertama kebuntingan sampai hari ke-12 merupakan masa sebelum plasentasi dimana masa ini, proses produksi hormon progesteron lebih banyak sehingga lingkungan uterus lebih baik. Satyaningtijas (2001) di bagian abdomen  kemudian  diambil  organ  ovarium  dibersihkan  dari  jaringan  sekitarnya,  dicuci  dengan NaCL fisiologis 90 % agar lebih bersih untuk mempermudah perhitungan jumlah korpus luteum. Pada ovarium terdapat bulatan-bulatan kecil yang berwarna kuning bening kemudian dilakukan penghitungan dari bulatan tersebut  yang menunjukkan jumlah korpus luteum  selain itu diambil juga  organ  uterus  dibersihkan  dari  jaringan  sekitarnya,  dicuci  dengan  NaCL  fisiologis  90  % untuk menghitung Jumlah titik implantasi. Jumlah titik implantasi dapat dihitung dari sederatan titik  pada  tanduk  uterus  tempat  menempelnya  embrio.  Perhitungan  variabel  penelitian  dapat dilakukan secara visual.
Analisis Data . Data yang diperoleh diolah dengan Analysis of Variance (ANOVA)-SPSS versi  16,0  dan  metode  nonparametrik  untuk  menghitung  keberhasilan  impantasi.  Nilai keberhasilan implantasi dapat dilihat melalui rasio jumlah titik implantasi dengan korpus luteum.
Rasio  = ∑ 𝑻𝑰 ∑ 𝑲𝑳 × 100%

## C. HASIL DAN PEMBAHASAN

## Hasil
Data  hasil  penelitian  mengenai  korpus  luteum  disajikan  pada  gambar  6  dan  titik implantasi  disajikanpada  gambar  7  serta  nilai  keberhasilan  implantasi  berupa  Rasio  jumlah
korpus  luteum  dan  titik  implantasi  disajikan  pada  tabel  1.  Pengaruh  pemberian  ekstrak  etanol rumput kebar pada tikus kelompok kontrol (-), kontrol (+), dosis 0.067, dan dosis 0.135 terhadap nilai keberhasilan implantasi pada usia kebuntingan ke-12 hari disajikan pada Tabel 1.
Berdasarkan  data  jumlah  korpus  luteum  dan  titik  implantasi  dapat  dihitung  nilai    rasio jumlah  titik  implantasi  terhadap  jumlah  korpus  luteum.  Rasio  jumlah  titik  implantasi  terhadap jumlah  korpus  luteum  menggambarkan  keberhasilan  implantasi  yang  terjadi.  Tikus  kelompok kontrol  negatif  dan  Kelompok  dosis  memiliki  nilai  rasio  lebih  besar  jika  dibandingkan  dengan kelompok  kontrol  positif.  dibuktikan  dengan  hasil  analisis  varians  yang  menunjukan  bahwa terdapat  terdapat  perbedaan  jumlah  korpus  luteum  dan  titik  implantasi  yang  signifikan  (beda nyata) P<0.05.
Tabel 1. Nilai  keberhasilan  implantasi pada  kelompok  tikus  kontrol  (-),  (+),  0.067,  dan  0.135 usia kebuntingan ke-12 hari.
Tikus Rasio  Keberhasilan Implantasi - + 0.067 0.135 1 2 3 54 70 66
55 50 50
66 63 64 75 72 69 Rata-rata ± sd 63.33  ± 8.327 b 51.67 ± 2.887 a 64.33 ± 1.528 b 75.33 ± 3.512 c
Keterangan:   (-)  =  kontrol  negatif,  (+)  =  kontrol  positif,  (0.067)  =  kelompok  tikus  dosis  0.0675,  (0.135)  = kelompok tikus dosis 0.135
Rasio  jumlah  titik  implantasi  terhadap  korpus  luteum  menggambarkan  keberhasilan implantasi yang terjadi. Nilai keberhasilan implantasi didapat dari jumlah titik implantasi dibagi jumlah korpus luteum dikali 100 %. Rasio tersebut pada kelompok tikus yang diberikan ekstrak etanol  rumput  kebar  secara  umum  cenderung  menunjukan  rasio  yang  lebih  baik  sebesar  64  % dan 75 % dibandingkan dengan kelompok tikus kontrol positif atau yang diberikan paparan asap rokok yakni 52 %. Hal tersebut menunjukan keberhasilan implantasi pada kelompok tikus yang diberikan  ekstrak  etanol  rumput  kebar  lebih  banyak  dari  pada  kelompok  tikus  kontrol  positif. Semakin tinggi rasio jumlah titik implantasi terhadap jumlah korpus luteum, semakin tinggi juga tingkat  keberhasilan  embrio  untuk  bertahan  hidup  dan  berkembang  menjadi  fetus/anak  bila lingkungan mikro uterus diperbaiki atau ditingkatkan.
Pengamatan terhadap korpus luteum pada organ ovarium tikus putih ( Rattus norvegicus ) pada usia kebuntingan ke-12 hari disajikan pada gambar 1.
Gambar  1.  Korpus  Luteum  Tikus  putih  Pada  Umur  Kebuntingan  Ke-12  hari.  Anak  panah  menunjukan  korpus luteum.  A=kontrol  negatif.  B=  kontrol  positif.  C=  kelompok  tikus  dosis  0.067  mg/ekor/hari.  D= kelompok tikus dosis 0.135 mg/ekor/hari.
A B C
D
Parameter  yang  kedua  mengenai  titik  implantasi  pada  organ  uterus  tikus  putih  ( Rattus norvegicus ) pada usia kebuntingan ke-12 hari disajikan pada gambar 2.
Gambar 2.  Titik  implantasi  Tikus  putih  Pada  Umur  Kebuntingan  Ke-12  hari.  Anak  panah  menunjukan  titik implantasi.  A=kontrol  negatif.  B=  kontrol  positif.  C=  kelompok  tikus  dosis  0.067  mg/ekor/hari.  D= kelompok tikus dosis 0.135 mg/ekor/hari.
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  disajikan  pada  Tabel  1,  diketahui  bahwa  pemberian ekstrak  etanol  rumput  kebar  pada  kelompok  dosis  0.067  tidak  berbeda  nyata  dengan  kelompok kontrol  negatif  tetapi  berbeda  nyata  dengan  kelompok  kontrol  positif,  dan  peningkatan  secara signifikan dihasilkan oleh kelompok dosis 0.135. Hal ini dibuktikan dengan hasil penelitian pada gambar  1  (jumlah  korpus  luteum  pada  organ  ovarium  )  dan  gambar  2  (jumlah  titik  implantasi pada organ uterus).

## Pembahasan
Pemberian  ekstrak  etanol  rumput  kebar  berpengaruh  terhadap  keberhasilan  implantasi. Seperti yang disajikan pada tabel 1, tikus kelompok dosis 0.135 memiliki nilai beda nyata yang signifikan  (P<0.05)  apabila  dibandingkan  dengan  tikus  kelompok  kontrol  (+)  kemudian  tikus kelompok  kontrol  negatif    dan  kelompok  dosis  0,067  menunjukkan  jumlah  korpus  luteum  dan titik implantasi yang tidak berbeda nyata hal ini menandakan bahwa ekstrak etanol rumput kebar memiliki kemampuan dalam memperbaiki efek negatif  radikal bebas yang mengganggu kinerja reproduksi.  Menurut  Wajo  (2005)  rumput  kebar  memiliki  senyawa  kimia  yang  dapat memperbaiki  kinerja  reproduksi.  Selain  itu,  Sadsoeitoeboen  (2005)  menyatakan  bahwa  hasil komposisi  zat-zat  makanan  yang  terdapat  pada  ekstrak  rumput  Kebar  ( Biophytum  petersianum Klotzsch) mengandung zat-zat gizi khususnya asam-asam amino yang sangat dibutuhkan untuk aktivitas reproduksi sehingga mampu menjaga proses perkembangan embrio sampai lahir.
Kelompok  perlakuan  kontrol  (+)  memiliki  jumlah  korpus  luteum  dan  jumlah  titik implantasi  yang  lebih  sedikit  (gambar  1  dan  gambar  2)  sehingga  terjadi  penurunan  pada  nilai keberhasilan  implantasi  (Tabel  1)  hal  ini    membuktikan  bahwa  masuknya  radikal  bebas  dalam tubuh dapat mempengaruhi kinerja organ reproduksi pada tikus putih betina. Pada penelitian ini pada organ uterus terlihat kurang sehat dan terdapat banyak bintik-bintik hitam (gambar 2). Hal ini  diduga  karena  kandungan  nikotin  yang  terdapat  di  dalam  rokok  yang  berpengaruh  terhadap kerusakan  korpus  luteum  sehingga  terjadi  penurunan  korpus  luteum  dan  mengakibatkan lingkungan uterus yang kurang optimal sehingga menggagalkan implantasi atau implantasi yang dihasilkan hanya sedikit.
Pemberian  nikotin  secara  langsung  maupun  tidak  langsung  dapat  menghambat  proses pembelahan  sel,  menghambat  pembentukan  blastosit,  dan  mengganggu  masuknya  embrio  ke
A B D C
rongga  rahim  dan  bahkan  mencegah  terjadinya  implantasi.  pemaparan  asap  rokok  ,yang mengandung  nikotin  dapat  menyebabkan  lingkungan  uterus  yang  kurang  optimal  ditandai dengan  penurunan  jumlah  korpus  luteum.  Hal  ini  didukung  dengan  penelitian  yang  dilakukan oleh Winarsi (1985) menyatakan bahwa nikotin dapat menyebabkan gangguan pematangan pada sel  telur  sehingga  sulit  terjadi  kehamilan.  Hal  ini  dapat  disebabkan  oleh  adanya  kandungan hidrokarbon  polisiklik  yang  terdapat  dalam  asap  rokok  bersifat  toksik  terhadap  sel  ovarium. Selain itu, komponen alkaloid dalam asap rokok yakni nikotin bersifat menekan kadar estrogen yang berpengaruh terhadap penurunan fertilitas ovarium sehingga kemungkinan keguguran lebih tinggi.
Komponen  lain  dari  asap  rokok  yang  juga  mempengaruhi  fungsi  ovarium  diduga komponen tar yang terdiri dari piridin, pirazin dan phenol. Hal ini diakui Febriyeni (2010) yang juga menambahkan bahwa  asap rokok menurunkan hormon estradiol pada tikus putih sehingga sangat berpengaruh pada proses implantasi. Komponen lain dari asap rokok yang mempengaruhi kegagalan  implantasi  adalah  cadmium  (Zenzes  2000),  yang  merupakan  salah  satu  komponen karsinogenikutama dalam tar yang dapat menyebabkan kegagalan dalam proses implantasi.
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan, dapat  dibuktikan bahwa terdapat  pengaruh yang  nyata  akibat  pemberian  ekstrak  etanol  rumput  kebar  terhadap  keberhasilan  implantasi. Penentuan keberhasilan implantasi  berkaitan erat  dengan jumlah korpus luteum.  Jumlah korpus luteum  menggambarkan  jumlah  ovum  yang  berhasil  diovulasikan.  Pada  kelompok  tikus  yang diberi  pemaparan  asap  rokok  rata-rata  jumlah  korpus  luteum  lebih  sedikit  jika  dibandingkan dengan  tiga  kelompok  lainnya  (gambar  1).  hal  ini  membuktikan  bahwa  dengan  pemberian ekstrak  etanol  rumput  kebar  dapat  mengoptimalkan  kinerja  organ  reproduksi.    Penambahan ekstrak  etanol  rumput  kebar  diduga  dapat  menambah  estrogen  endogen  karena  kandungan steroid  yang  ada  dalam  rumput  kebar.  Steroid  adalah  prekursor  hormon  estrogen.  Estrogen mempunyai  2  fungsi  dalam  pengaturan  sekresi  gonadotropin  (FSH  dan  LH).  Estrogen  ini menekan  produksi  FSH,  sehingga  hipofisis  mengeluarkan  hormon  LH.  Produksi  hormon  LH maupun FSH berada di bawah pengaruh Releasing Hormones (RH) yang disalurkan hipotalamus ke  hipofisis.  Produksi  hormon  gonadotropin  (FSH  dan  LH)  yang  baik  akan  menyebabkan pematangan  dari  folikel  de  graaf  yang  mengandung  estrogen.  LH  yang  bekerja  pada  sel granulosa dan sel teka akan  menimbulkan luteinisasi. Luteinisasi adalah suatu proses perubahan sel granulosa  Korpus Luteum Folikel dan sel teka menjadi sel lutein yang merupakan bagian sel dari  korpus  luteum  (Guyton  and  Hall  1997).  Fungsi  estrogen  pada  kebuntingan  adalah  untuk mengawali  terjadinya  proliferasi  sel-sel  kelenjar  uterus  sehingga  dapat  mempertebal  dinding endometrium  sebagai  tempat  implantasi  agar  terbentuk  lebih  banyak  titik  implantasi.  Estrogen dapat  merangsang  pertumbuhan  uterus  dengan  mempertebal  dinding  endometrium  dan miometrium,  merangsang  kontraktil  uterus,  merangsang  peningkatan  pertumbuhan  epithelium vagina,  merangsang  estrus,  merangsang  perkembangan  duktus  kelenjar  ambing  dan mempengaruhi perkembangan alat kelamin sekunder. Selain itu, protein pada rumput kebar juga mengandung  asam-asam  amino  yang  sangat  dibutuhkan  untuk  aktivitas  reproduksi (Sadsoeoetubun, 2005).
Selain  asam  amino,  rumput  kebar  juga  mengandung  vitamin  A  dan  vitamin  E  yang berpengaruh  terhadap  reproduksi  betina.  Vitamin  A  berperan  dalam  menjaga  keutuhan  lapisan epitel  dan jaringan reproduksi hewan dan vitamin E juga diduga turut berperan dalam menjaga pertumbuhan embrio,  dimana salah satu  fungsi vitamin E adalah menjaga pertumbuhan embrio dari fase awal sampai lahir. Vitamin E berperan dalam mekanisme penghambatan produksi nitric oxide  saat  proses  produksi  estrogen  dari  sel  granulosa  sehingga  aktivitas  folikulogenesis  dan ovulasi dapat berlangsung. Pada mencit, vitamin E mempercepat siklus estrus dan meningkatkan kejadian  konsepsi,  karena  vitamin  E  merupakan  antioksidan  yang  menstimulasi  proses steroidogenesis dan merangsang kelenjar pituitari anterior untuk mensekresikan hormon steroid serta menginisiasi kejadian folikulogenesis pada ovarium (Prasdini et al. , 2015).
Korpus  luteum  merupakan  penghasil  hormon  progesteron  terbesar  bersama  plasenta. Peningkatan  korpus  luteum  pada  awal  kebuntingan  diperlukan  untuk  meningkatkan  produksi progesteron  dalam  menjaga  kebuntingan.  Progesteron  mempunyai  peranan  penting  dalam memelihara  kebuntingan.  Konsentrasi  progesteron  dalam  serum  induk  sangat  berpengaruh terhadap kematian fetus dalam uterus (Refsal et al. 1991). Apabila hormon progesteron ini tidak cukup  akan  menyebabkan  kontraksi  uterus  secara  terus  menerus  yang  menyebabkan  kegagalan implantasi  embrio  sehingga  terjadi  aborsi  (Arkaraviehin  dan  Kendle,  1990).  Hormon  estrogen berperan untuk memelihara korpus luteum agar tetap mensekresikan progesterone. Endometrium akan  berproliferasi  akibat  pengaruh  progesterone  dengan  meningkatkan  efektifitas  kelenjar  dan sekresinya ke uterus. Sekresi ini akan membentuk cairan uterus yang dikenal dengan istilah susu uterus.  Cairan  uterus  ini  akan  mempengaruhi  perkembangan  blastula  hingga  menjadi  fetus  . Cairan ini akan menjadi nutrisi bagi ovum dimulai dari proses pematangan sampai  terimplantasi pada uterus (Guyton, 1994). Progesteron bisa mempertahankan kebuntingan dengan menciptakan lingkungan endometrial yangsesuai untuk kelanjutan hidup dan perkembangan embrio (Tamboss, 2001).

## D. KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  dapat  disimpulkan  bahwa  terdapat  pengaruh  akibat pemberian  ekstrak  etanol  rumput  kebar  ( Byophytum  petersianum Klotzsch )  terhadap keberhasilan  implantasi.  Dosis  yang  paling  baik  dalam  mempengaruhi  keberhasilan  implantasi dihasilkan oleh pemberian dosis 0.135 mg/ekor/hari.

## E. DAFTAR PUSTAKA
Ahmadnia  H.,  M.  Ghanbari.,  M.R.  Moradi,  and  M.  Khaje-Dalouee.  2007.  Effect  of  cigarette smoke on spermatogenesis in rats.  Uro Journal. 4(3):154-163.
Arkaraviehien W. and K.E. Kendle. 1990. Critical progesterone requirement for maintenance of pregnancy in ovariectomized rats. J Reprod Fertil 90:63-70. Febriyeni  2010. Pengaruh  asap  rokok  terhadap  kadar  hormon  estradiol  danprogesteron  pada tikus putih (Rattus norvegicus). Tesis. Padang:Universitas Andalas.
Guyton A.C. 1994. Fisiologi Kedokteran . Ed. ke-7. Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC.
Guyton A.C. and J.E. Hall. 1997. Buku Ajar Fisiologi Kedokteran. Ed ke-9. Setiawan, Tengadi, Santoso,  penerjemah;  Setiawan,  editor.  Jakarta:  EGC.  Terjemahan  dari: Textbook  of Medical Phisiology .
Nurjanah., K. Lily dan  M. Abdun. 2014. Gangguan Fungsi Paru dan  Kadar Cotinine pada Urin Karyawan  yang  Terpapar  Asap  Rokok  Orang  Lain.  Jurnal  Kesehatan  Masyarakat,  10 (1): 43–52
Prasdini W.A., S. Rahayu dan M.S Djati. 2015. Penentuan keberhasilan involusiuterus sapi perah friesian  holstein berdasarkan  kadar  estrogen  setelahbeberapa  penginjeksian  Selenium- Vitamin  E.  Jurnal  fakultas  matematikadan  ilmu  pengetahuan  alam.  Universitas Brawijaya. Vol. 16 No. 3 : 351-356.
Refsal K.R., J.V Marteniuk., C.S.F. Williams and R.F. Nachreiner. 1991.Cosentration of estrone sulfate  in  peripheral  serum  of  pregnant  goats  :  relationsips  with  gestation  length,  fetal number and the occurance of the fetal death i utero. Theriogenology 36: 449-461. Sadsoeitoeboen  P.D.  2005.  Manfaat  Ekstrak  Rumput  Keba  (Biophytum  PetersianumKlotzsch) Terhadap  Penampilan  Reproduksi  Mencir  Putih  Betina.  [Tesis].  Bogor  :  Sekolah prasarjana institute Pertanian Bogor
Satyaningtijas  A.S.  2001.  Efektifitas  pemberian  ekstradiol  dan  progesterone  pada  kinerja reproduksi tikus bunting. Tesis. Bogor : Sekolah prasarjana institute Pertanian Bogor.
Sembiring  B  dan  Darmawati  I.  2013.  Rumput  Kebar  ( Biophytum  petersianum )  sebagai peningkatan fertilitas. Warta Puslitbanbun . Agustus 2013.19(2):15-18
Suprihatin,  2008.  Optimalisasi  Kinerja  Reproduksi  Tikus  Betina  Setelah  Pemberian  Tepung Kedelai  Dan  Tepung  Tempe.  Pada  Usia  Prapubertas.  [Tesis].  Bogor  :  Sekolah prasarjana institute Pertanian Bogor
Tamboss  C.  2001.  Efektifitas  Penyuntikan  PMSG  Sebelum  Perkawinan  Dalam  Peningkatan Jumlah  Korpus  Luteum,Jumlah  Titik  Implantasi  Dan  Jumlah  Anak  Pada  Tikus  Putih. skripsi.bogor : fakultas kedokteran hewan institute pertanian bogor
Wajo M.J. 2005. Pengaruh pemberian ekstrak rumput kebar melalui air minum terhadap fertilitas ayam  buras.  Skripsi.  Fakultas  peternakan  Perikanan  dan  Ilmu    Papua.  Universitas Negeri Papua. 69 hlm
Winarsi  H.  1985. Antioksidan  Alami  dan  Radikal  Bebas:  Potensi  dan  Aplikasinya  dalam Kesehatan. Penerbit: Kanisius.
Zafar  R.,  A.  Nahid.,  N.A  Arivarasu.,  R.  Sangeetha.,  S.  Meenakshi  and  M.H  Tariq.  2009. polyphenolrich  pomegranate  fruith  extract  (POMx)  suppresses  PMACI  induced expression  of  pro-inflamatory  cytokines  by  inhibiting  the  activation  of  MAP  kinases and NF-kB in human KU812 cell. Journal of inflammation.6:1.abstract
Zenzes  M.T.  2000.  Smoking  and  reproduction:  gene  damage  to  human  gametes  and  embryos.
Europ of society human reproduction and embryology . 6: 122 – 123.