Uji Aktivitas Antiinflamasi Infusa Daun Afrika ( Vernonia amygdalina ) pada Tikus Putih yang Diinduksi Karagenan
Antiinflamation Activity of African Leaf Infusa ( Vernonia amygdalina ) in Carrageenan Induced White Rats
Lusi Agus Setiani, Moerfiah Moerfiah, dan Yulianita Yulianita Program Studi Farmasi, FMIPA, Universitas Pakuan, Bogor, Indonesia Email: lusi.setiani@unpak.ac.id
Received: 20 November 2019; Accepted: 12 Juni 2020; Published: 30 Juni 2020

## Abstrak
Inflamasi  merupakan  satu  dari  respon  utama  sistem  kekebalan  terhadap  infeksi  dan  iritasi.  Salah  satu tanaman  obat  yang  dapat  dimanfaatkan  sebagai  antiinflamasi  adalah  daun  afrika  karena  mengandung flavonoid.  Senyawa  flavonoid  memiliki  efek  antiinflamasi  yang  dapat  mengatur  metabolisme  asam arakhidonat  dengan  menghambat  aktivitas  siklooksigenase  (COX)  dan  lipooksigenase.  Penelitian  ini bertujuan  untuk  menentukan  efektivitas  dan  menetapkan  dosis  efektif  infusa  daun  afrika  sebagai antiinflamasi  pada  tikus  putih  jantan  yang  diinduksi  karagenan.  Metode  yang  digunakan  adalah pengukuran udema dengan induksi karagenan 1% secara subplantar. Hewan uji yang digunakan sejumlah 20 ekor tikus jantan galur sparague dawley yang dibagi dalam 5 kelompok. Setiap kelompok terdiri dari 4 ekor  tikus.  Kelompok  I  sebagai  kontrol  negatif  diberikan  larutan  CMC-Na,  kelompok  kedua  sebagai kontrol positif diberikan Natrium diklofenak dosis 1,26 mg/200g BB, kelompok III, IV dan V diberikan infusa  daun  afrika  dengan  tiga  peringkat  dosis  yakni  100,  150,  200  mg/kgBB.  Hasil  penelitian menunjukkan bahwa pemberian infusa daun afrika memiliki daya antiinflamasi dan dosis 200 mg/200 gBB merupakan dosis paling efektif terhadap penghambatan inflamasi.
Kata kunci : daun afrika ( Vernonia amygdalina ), antiinflamasi, karagenan

## Abstract
Inflammation is one of the immune system's main responses to infection and irritation. One of the medicinal plants that can be used as anti-inflammatory is African leaves because there have flavonoid compounds. Flavonoid compounds have anti-inflammatory effects that can regulate arachidonic acid metabolism by inhibiting cyclooxygenase (COX) and lipooxygenase activity.This study aims to determine the effectiveness and determine the effective dose of African leaf infusion as anti-inflammatory in sparague dawley strain induced  carrageenan  male  white  rats.  The  method  used  is  measurement  of  udema  with  subplantar  1% carrageenan induction.Test animals used were 20 male rats divided into 5 groups. Each group consisted of 4 rats. Group I as a negative control was given CMC-Na solution, the second group as a positive control was given diclofenac sodium with 1.26 mg/200 gBB body weight, group III, IV and V were given African leaf infusion with three dose ratings namely 100, 150, 200 mg/kgBB bodyweight. The results showed that the infusion of African leaves had Antiinflammatory Activity with dose 200 mg/kg body weight as the most effective dose against inhibition of inflammation.
Keywords: African leaves (Vernonia amygdalina), anti-inflammatory, carrageenan

## PENDAHULUAN
Masalah kesehatan yang sering timbul di masyarakat  adalah  radang  atau  inflamasi. Inflamasi merupakan bagian dari mekanisme pertahanan tubuh, suatu proses dimana sistem kekebalan  mengenali  dan  menghilangkan senyawa  asing  yang  berbahaya  seperti patogen,  sel  yang  rusak,  senyawa  beracun
atau iradiasi dan memulai proses penyembuhan  (Da  Silva  et  al.,  2019). Inflamasi  dapat  dikategorikan  diantaranya yang  bersifat  akut  dan  kronis  (Zhang  et  al., 2019), ditandai dengan timbulnya kemerahan, panas,  pembengkakan,  rasa  nyeri  yang mengganggu  dan  hilangnya  fungsi  dari jaringan (Medzhitov, 2010), bekerja  dengan
menghapus rangsangan berbahaya dan memulai  proses  penyembuhan  (Ferrero- Miliani  et  al,  2007).  Karena  itu,  peradangan adalah  mekanisme  pertahanan  vital  bagi kesehatan (Nathan dan Ding, 2010).
Saat  ini  minat  masyarakat  terhadap pengobatan  dengan  obat  alam  semakin meningkat. Pemanfaatan  tanaman  baik sebagai  obat  maupun  tujuan  lain  merupakan salah  satu  fenomena  yang  terjadi  saat  ini. Tanaman obat mengandung banyak komponen  senyawa  aktif  dan  memiliki berbagai  efek  farmakologis  yang  perlu dibuktikan kebenarannya secara ilmiah. Salah satu  tanaman  obat  yang  dapat  dimanfaatkan sebagai  antiinflamasi  adalah  daun  afrika. Menurut  penelitian  (Nuryanto,  dkk,  2017) ektrak  etanol  daun  afrika  memperlihatkan aktivitas  antiinflamasi  melalui  mekanisme stabilitas  membran.  Nilai  EC50  aktivitas stabilitas  membran  ektrak  etanol Vernonia amygdalina pada  konsentrasi  1%  sebesar 131,81 ± 2,95  ug/mL  dan  pada  konsentrasi 10%  adalah  sebesar  62,54 ± 2,5  ug/mL. Semakin  kecil  konsentrasi  EC50  maka semakin efektif aktivitas antiinflamasi sebagai stabilitas membran. Senyawa flavonoid  memiliki  efek  antiinflamasi  yang dapat mengatur metabolisme asam arakhidonat  dengan  menghambat  aktivitas siklooksigenase  (COX)  dan  lipooksigenase (Tapas et. al., 2008).
Karagenan merupakan polisakarida yang diekstraksi dari rumput laut famili Euchema, Chondrus,    dan  Gigartina  (Necas  & Bartosikova,  2013).  Karagenan  sebagai senyawa iritan menginduksi terjadinya cidera sel melalui pelepasan mediator yang mengawali proses inflamasi. Pada saat terjadi pelepasan  mediator  inflamasi  terjadi  udem maksimal  dan  bertahan  beberapa  jam. Mediator  tersebut  antara  lain  histamin, serotonin dan bradikinin (Necas and Bartosikova,  2013).  Gejala  utama  inflamasi langsung  terlihat  seketika  saat  penyuntikan karagenan  dilakukan.  Gejala  tersebut  antara lain edema, hyperalgesia dan erytema. Edema
yang  disebabkan  karagenan  bertahan  selama lima jam setelah penyuntikan karagenan dan berangsur-angsur berkurang dalam waktu 24 jam (Fehrenbacher et al., 2012).
Berdasarkan  uraian  di  atas,  maka penelitian  ini  dilakukan  untuk  mengetahui aktivitas  Antiinflamasi  dari  ekstrak  daun afrika  yang  diperoleh  dengan  cara  infundasi menggunakan dosis efektif sebagai analgesik (Adedapo dan Aremu, 2014) dan antikolesterol  (Ardiani,  2017)  yaitu  100 mg/kg dan 200 mg/kg dan juga penelitian ini dilakukan untuk mengetahui persen penghambatan  Inflamasi  serta  dosis  efektif dari infusa daun afrika sebagai Antiinflamasi yang  ditinjau  melalui  penurunan  udem  pada telapak  kaki  tikus  putih  yang  diinduksi karagenan.
Dalam  penelitian  ini  metode  yang digunakan adalah pembentukan udem buatan pada telapak kaki tikus dengan menggunakan karagenan sebagai penginduksi udem. Metode  ini  dipilih  karena  merupakan  salah satu metode pangujian aktivitas antiinflamasi yang sederhana, mudah dilakukan dan sering dipakai. Pengunaan karagenan sebagai penginduksi udem memiliki beberapa keuntungan  antara  lain  tidak  meninggalkan bekas, tidak menimbulkan kerusakan jaringan dan  memberikan  respon  yang  lebih  baik terhadap obat antiinflamasi  (Fehrenbacher et al., 2012).

## METODE PENELITIAN
Penelitian telah dilakukan pada bulan Juli di Laboratorium
Farmasi
Fakultas Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam Universitas Pakuan Bogor.

## Alat dan Bahan
Alat  yang digunakan pada penelitian ini antara  lain  Neraca  analitik,  blender,  cawan uap,  oven  (Memmert ® ),  krus,  timbangan, tanur (Ney ® ), blender, kandang hewan coba, tempat  makan  tikus,  botol  minum  tikus, thermometer,  stopwatch,  spuit  injeksi,  spuit oral,  penangas  air,  panci  infusa,  jangka sorong,  dan  peralatan  gelas  laboratorium
lainnya seperti labu ukur, erlenmeyer, corong, cawan petri, pipet tetes, batang  pengaduk.
Bahan-bahan yang digunakan yaitu daun afrika  ( Vernonia  amygdalina ),  Tikus  putih jantan galur sparague dawley umur 2-3 bulan dengan berat 200-250mg, aquadest, karagenan,  CMC,  tablet  natrium  diklofenak, asam  klorida  2N,  larutan  amonia  1%  FeCl 3 , kloroform  1%,  HCl  2N,  pereaksi  Mayer, pereaksi  Dragendrof,  pereaksi  Bouchardart, NaCl 10%, serbuk Mg dan serbuk Zn. Pembuatan Infusa Daun Afrika
Daun  Afrika  ( Vernonia  amygdalina ) diperoleh dari Balai Penelitian Tanaman Obat dan  Aromatika  (Balitro),  Bogor.  Dibuat infusa  daun  afrika  dengan  konsentrasi  10% dengan cara ditimbang sebuk simplisia daun afrika  sebanyak  10  gram  dan  ditambahkan 100  mL  aquadest  di  dalam  panci  infusa. Setelah  itu  di  tambahkan  aquadest  dua  kali bobot  simplisia,  dipanaskan  diatas  penangas air  selama  15  menit  terhitung  mulai  suhu mencapai 90ºC sambil sesekali diaduk. Infusa diserkai  selagi  panas  menggunakan  kertas penyaring,  ditambahkan  air  panas  melalui ampas  hingga  volume  100  mL  (Na’imah, 2017).
Rancangan Penelitian Pada penelitian ini digunakan Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  dengan  5 kelompok perlakuan. Hewan dipilih sebanyak 20 ekor tikus  putih jantan secara acak untuk dibagi menjadi masing – masing terdiri dari 4 ekor. Penentuan jumlah tikus tiap kelompok, dihitung  berdasarkan  rumus  Federer  :  t  (r-1) ≥  15,  dimana  t  menunjukkan  jumlah perlakuan  dan  n  menunjukkan  ulangan minimal tiap perlakuan.
Masing-masing  kelompok  perlakuan diinduksi  karagenan  1%  sebanyak  0,2  mL. Kelompok  perlakuan  pada  penelitian  ini diantaranya :
Kontrol  Negatif:  Diberikan  CMC-Na 0,5%
Kontrol  Positif:  Diberikan  Natrium dikofenak 1,26 mg/200g BB
Dosis 1: Diberikan 100mg/kg BB infusa daun afrika
Dosis 2: Diberikan 150mg/kg BB infusa daun afrika
Dosis 3: Diberikan 200mg/kg BB infusa daun afrika

## Persiapan Hewan Uji
Sebelum  dilakukan  pengujian  tikus ditimbang  dan  ditentukan  homogenitasnya dengan  menghitung Coeficient  Varian (CV) hewan  percobaan  dinyatakan  homogen  bila CV  berkisar  10-15%.  Tikus  diaklimatisasi selama  1  minggu  di  dalam  kandang Laboratorium  Farmasi  Fakultas  Matematika dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam  Universitas Pakuan Bogor agar menyesuaikan diri dengan lingkungan.  Selama  masa  aklimatisasi  tikus diberi makanan dan minum yang seragam dan dilakukan  pengamatan  yang  rutin  terhadap keadaan umum hewan uji, seperti berat badan.

## Pembuatan Larutan Uji

## Pembuatan Larutan CMC-Na 0.5%
Sejumlah  0,25  g  CMC  ditimbang  lalu dikembangkan dalam 5 mL air hangat (60ᵒC) selama 30 menit. Setelah mengembang, CMC digerus sampai homogen, setelah itu ditambahkan aquadest sampai 50 mL.

## Pembuatan Suspensi Natrium Diklofenak
Satu  tablet  natrium  diklofenak  50  mg digerus dan diambil serbuk sebanyak 45,410 mg.  Serbuk  dimasukkan  kedalam  lumpang, kemudian  ditambahkan  suspensi  CMC  0,5% sampai homogen dan dicukupkan volumenya hingga 10 mL.
Pembuatan Suspensi Karagenan 1%
Sebanyak 0,1g karagenan ditimbang lalu dilarutkan dalam natrium klorida 0,9% dalam labu ukur 10 mL.

## Pengujian Antiinflamasi
Tikus  dipuasakan  ±  18  jam  sebelum pengujian,  air  minum  tetap  diberikan.  Pada hari pengujian tikus ditimbang bobotnya dan dikelompokkan  secara  acak  menjadi      5 kelompok perlakuan, masing-masing kelompok terdiri dari 4 ekor tikus. Kelompok I  sebagai  kontrol  negatif  diberikan  larutan CMC-Na,  kelompok  kedua  sebagai  kontrol positif diberikan Natrium diklofenak, kelompok III, IV dan V diberikan infusa daun afrika dengan tiga peringkat dosis yakni 100,
150,  200  mg/kgBB  secara  per  oral.  Tahap selanjutnya yakni semua kaki kiri hewan yang sudah  diberi  tanda  diinjeksikan  dengan larutan karagenan 1% sebanyak 0,2 mL secara subplantar  (Zahara  dan  Saputri,  2013). Digunakan  selang  waktu  antara  pemberian senyawa  uji  dengan  karagenan  adalah  15 menit.
Selanjutnya pengukuran aktivitas antiinflamasi  dilakukan  dengan  mengukur udema  kaki  tikus  dengan  menggunakan jangka sorong selama enam jam dimulai dari menit  ke-0,  30,  60,  120,  180,  240,  300,  360 setelah  diinduksi  karagenan  1%  (Aprilianto, 2017). Nilai selisih udema dihitung menggunakan  luas  AUC  dari  ketebalan udema  kaki  tikus  terinduksi  karagenin  pada masing-masing  perlakuan  di  setiap  rentang waktu pengukuran dengan metode trapezoid. Rumus perhitungan sebagai berikut :
AUC 𝑡𝑛 𝑡𝑛 − 1 = 𝑇 tn−1 +𝑇 tn 2 (𝑡 tn − 𝑡 n-1 )
Keterangan : T tn-1 = Tebal udema kaki Tikus  pada tn-1 T n = Tebal udem kaki Tikus pada t n
Aktivitas antiinflamasi dapat di ukur dari persen penghambatan inflamasi dan dihitung dengan rumus berikut :
Penghambatan inflamasi (%)
= (𝐴𝑈𝐶0−∝)0−(𝐴𝑈𝐶𝑂−∝)𝑛
(𝐴𝑈𝐶0−∝)0
× 100%
Keterangan : (AUC 0-X )    =  AUC 0-X Rata-rata  dari  AUC ketebalan udema  kaki tikus pada kontrol negatif (AUC 0-x )n    =  AUC 0-X Rata-rata  dari  AUC ketebalan udema telapak  kaki tikus yang diberi senyawa uji dengan dosis sebesar n (mm.menit) (Tjandrawinata et al , 2015., Aprilianto, 2017)
Persen potensi  relatif daya  antiinflamasi (PRDA) dapat diketahui dengan membandingkan  terhadap  kelompok  kontrol positif, dengan  rumus
PRDA = %penghambatan inflamasi kel.perlakuan % penghambatan inflamasi Na diklofenak x 100%
(Wicaksana, 2016., Aprilianto, 2017).
Analisis Data
Analisis data dilakukan untuk mengetahui pengaruh pemberian infusa daun
afrika terhadap ketebalan udema telapak kaki tikus  yang  diinduksi  karagenan.  Data  hasil pengamatan diolah secara statistik menggunakan sidik ragam untuk  Rancangan Acak  Lengkap  dengan  metode  uji  ANOVA yang  dilanjutkan  dengan  uji  Duncan. Pengolahan data penelitian dilakukan menggunakan  program  SPSS  18.0 for windows .
Setelah  didapatkan  kesimpulan  dari analisis  sidik  ragam  selanjutnya  data dianalisis  kembali  dengan  menggunakan  Uji Lanjut  Duncan.  Uji  Lanjut  Duncan  ini dilakukan untuk mengetahui perbedaan antar perlakuan.  Uji  lanjut Duncan dengan  taraf kepercayaan  95%  dilakukan  jika  terdapat perbedaan pada setiap perlakuan, dimana uji lanjut  duncan  didasarkan  pada  sekumpulan nilai  beda  nyata  yang  ukurannya  semakin besar tergantung pada jarak diantara pangkat- pangkat dari dua nilai yang dibandingkan. Uji Duncan dapat  digunakan  untuk  menguji perbedaan diantara semua pasangan perlakuan yang mungkin tanpa memperhatikan  jumlah  perlakuan  yang  ada dari  percobaan  tersebut  serta  masih  dapat mempertahankan tingkat nyata yang ditetapkan (Calfee & Piontkowski, 2016).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pembuatan  serbuk  simplisia  daun  afrika dibuat  dengan  cara  memanen  daun  afrika segar.  Jumlah  daun  afrika  segar  yang digunakan  yaitu  sebanyak  5,5  kg.  Hasil serbuk  simplisia  daun  afrika  yang  didapat setelah  melewati  beberapa  tahap  pembuatan simplisia  yaitu  sebesar    1,2  kg,  sehingga diperoleh rendemen  sebesar 21,82%.
Serbuk simplisia diekstraksi mengunakan  metode  infusa.  Dibuat  infusa daun  afrika  dengan  konsentrasi  10%. Pengujian  parameter  ekstrak  yang  dilakukan pada penelitian ini meliputi skrining fitokimia dan  uji  organoleptik.  Dari  hasil  uji organoleptik  infusa  daun  afrika  memiliki warna coklat, bau khas dan rasa pahit.
Hasil  skrining  fitokimia  menunjukkan bahwa infusa daun afrika memiliki
kandungan  alkaloid,  flavonoid,  saponin  dan tanin.  Menurut  (Ijeh  dan  Ejike,  2010)  daun afrika  mengandung  saponin,  flavonoid, alkaloid,  tanin,  koumarin,  asam  fenolat, lignin,  xanton  dan  terpen.  Berdasarkan  hasil penelitian  infusa  daun  afrika  mengandung flavonoid,  tanin  dan  glikosida  jantung (Na’imah, 2017).
Hewan percobaan tikus dalam penelitian ini sebelum dilakukan pengujian diaklimatisasi  terlebih  dahulu  selama  7  hari, agar hewan coba terbiasa dengan lingkungan barunya.  Berat  badan  tikus  ditimbang  dan dihitung nilai CV setiap harinya selama masa aklimatisasi,  dengan  parameter  apabila  CV mencapai  10-15%  maka  berat  badan  hewan coba  bisa  dipastikan  relatif  homogen. Berdasarkan  perhitungan  sebelum  hewan coba  diberi  perlakuan  diperoleh  rata-rata bobot hewan coba sebesar 222,25 g dan nilai SD sebesar 32,49 sehingga diperoleh nilai CV sebesar  14,61%  yang  berarti  bahwa  berat badan hewan coba homogen relatif.
Hewan coba diberikan larutan uji secara oral 15 menit sebelum penyuntikan karagenan.  Parameter  yang  diamati  adalah tebal  udema  yang  terbentuk  akibat  induksi karagenan yang diukur menggunakan jangka sorong. Data rata-rata hasil pengamatan tebal udema dapat dilihat pada Gambar 1.
Dari data rata-rata tebal  udema dihitung nilai  AUC  total  (mm.menit).  Semakin  kecil nilai  rata-rata  AUC  maka  semakin  tinggi aktivitas anti inflamasinya. Dosis 3 memiliki nilai  rata-rata  AUC  paling  kecil  dan  lebih mendekati kontrol positif dibandingkan dosis 2  dan  dosis  1,  hasil  ini  menunjukan  bahwa dosis 3 memiliki aktivitas antiinflamasi yang paling baik. Hasil perhitungan rata-rata AUC total dapat dilihat pada Tabel 1.
Berdasarkan hasil Uji ANOVA menunjukan  adanya  pengaruh  nyata  antara pemberian  infusa  daun  afrika  terhadap aktivitas antiinflamasi pada hewan coba (P < 0.05).  Untuk  melihat  perbedaan  antar perlakuan,  dilakukan  uji  lanjut Duncan .
Gambar 1. Grafik Hubungan Rata-Rata Tebal Udem Terhadap Waktu Setelah Pemberian Infusa
Daun Afrika 0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 0 30 60 90 120 150 180 210 240 270 300 330 360 R ata -r ata teb al u d em a (cm ) Waktu Pengamatan (menit) Kontrol (-) Kontrol (+) Dosis 1 Dosis 2 Dosis 3
Tabel 1. Rata-Rata AUC total (mm.menit)
Kelompok Rerata AUC total (mm.menit) (x±SD) Kontrol Negatif 109,74 ± 17,77 c Kontrol Positif 22,68 ± 3,18 a Dosis 1 40,94 ± 4,97 b Dosis 2 36,06 ± 18,87 ab Dosis 3 25,86 ± 12,88 ab
Berdasarkan  hasil  uji  lanjut  Duncan  dari perlakuan  dosis,  dapat  dinyatakan  bahwa dosis 3 dan dosis  2 memiliki  pengaruh  yang relatif  sama  dengan  kontrol  positif  dan pengaruhnya  sangat  berbeda  nyata  dengan kontrol negatif.
Hasil  perhitungan  AUC  dari  masing- masing kelompok kemudian digunakan untuk menentukan  persen  penghambatan  inflamasi untuk  masing-masing  kelompok.  Persen penghambatan  inflamasi  dihitung  dengan membandingkan  selisih  rata-rata  AUC  total kelompok  perlakuan  dan  kontrol  positif dengan  kontrol  negatif.  Data  perhitungan persen penghambatan inflamasi dapat dilihat pada Tabel 2. Persen penghambatan inflamasi digunakan untuk mengetahui besar kemampuan senyawa uji dalam menurunkan udema  kaki  hewan  uji  akibat  injeksi karagenan  1%  dengan  membandingkan dengan kelompok kontrol negatif.
Berdasarkan  data  pada  Tabel  2,  dapat dilihat  bahwa  dosis  3  memiliki  persentase penghambatan  inflamasi  yang  paling  tinggi yaitu  sebesar  76,44%  dan  hampir  setara dengan  kontrol  positif  yaitu  79,33%.  Untuk dosis  1  dan  dosis  2  memiliki  persentase penghambatan  inflamasi  yang  tidak  berbeda jauh  yaitu  masing-masing  62,69%  dan 67,14%.  Dari  hasil  yang  diperoleh  diduga
bahwa  semakin  besar  dosis  yang  diberikan aktivitas antiinflamasinya semakin tinggi.
Dari hasil persen penghambatan inflamasi  yang  telah  diperoleh  kemudian dihitung nilai potensi relatif daya antiinflamasi  (PRDA).  Tujuannya  adalah membandingkan kemampuan bahan uji dalam menghambat  inflamasi  terhadap  kontrol positif.  Persen  PRDA  didapatkan  dari  hasil perbandingan antara penghambatan inflamasi kelompok perlakuan uji antiinflamasi dengan kelompok kontrol positif.
Berdasarkan  data  pada  Tabel  3,  terlihat persen potensi relatif antiinflamasi dari dosis 3  mencapai  96.36%  dan  hampir  mendekati PRDA kelompok kontrol positif, dari data ini dan  ditunjang  oleh  hasil  analisis  program statistik  SPSS  menunjukan  bahwa  dosis  3 merupakan  dosis  yang  paling  efektif  untuk menghambat inflamasi.
Karagenan sebagai senyawa iritan menginduksi  terjadinya  cedera  sel  melalui pelepasan  mediator  yang  mengawali  proses inflamasi.  Pada  saat  terjadi  pelepasan mediator  inflamasi  terjadi  udema  maksimal dan bertahan beberapa jam. Mediator tersebut antara lain histamin, serotonin dan bradikinin (Necas dan Bartosikova, 2013). Gejala utama inflamasi  langsung  terlihat  seketika  saat penyuntikan  karagenan  dilakukan.  Gejala tersebut  antara  lain  udema  dan  erythema
Tabel 2. Hasil persen rata-rata penghambatan inflamasi dari setiap kelompok percobaan Kelompok Rata-rata penghambatan inflamasi (%) Kontrol Negatif 0% Kontrol Positif 79,33% Dosis 1 62,69% Dosis 2 67,14% Dosis 3 76,44% Tabel 3. Persen potensi relatif daya antiinflamasi (PRDA) Kelompok Perlakuan Persen Potensi Relatif Daya Antiinflamasi Kelompok negatif 0% Kelompok positif 100% Dosis 1 79,02% Dosis 2 84,63% Dosis 3 96,36%
(Fehrenbacher  et  al.,  2012).  Udema  yang disebabkan  induksi  karagenan  bertahan selama 5 jam setelah penyuntikkan karagenan dan berangsur-angsur berkurang dalam waktu 24 jam, dari hasil penelitian terlihat kelompok kontrol negatif terus mengalami peningkatan udema mulai dari menit ke 0 sampai menit ke 180  dan  mulai  mengalami  penurunan  pada menit 240 Penurunan udema yang lebih cepat dari  teori  tersebut  dapat  disebabkan  karena beberapa faktor, hasil penelitian dipengaruhi oleh  cara  penyuntikan  yang  merupakan trauma sehingga menyebabkan respon inflamasi,  cara  pengukuran  udema  yang kurang tepat serta kemungkinan adanya stress yang terjadi pada tikus dimana yang diketahui saat  keadaan  stress  maka  hormone  kortisol mengalami peningkatan. Menurut Wolkow et al,  terdapat  hubungan  antara  gangguan  IL-6 dan  pengeluaran  kortisol  dengan  proses terjadinya  penghambatan  inflamasi,  dimana kemungkinan  dapat  menyebabkan  ketidak seimbangan  antara  system  ini.  Dari  hasil penelitian lain, terdapat korelsi positif antara peningkatan  serum  kortisol  dan  sitokin  pada beberapa pasien yang mengalami peradangan dengan  kondisi  depresi  yang  diukur  dengan skala Hamilton Depression ( Jia et al , 2019). Suatu  bahan  dinyatakan  memiliki  efek antiinflamasi  jika  pada  hewan  uji  yang diinduksi karagenan 1% mengalami pengurangan pembengkakan hingga 50% atau lebih (Utami et al , 2011). Pada penelitian ini
tiga  peringkat  dosis  perlakuan  memiliki potensi  yang  besar  dalam  menghambat inflamasi  yang  ditunjukkan  dengan  persen penghambatan inflamasi lebih dari 50%.
Kemampuan  infusa  daun  afrika  dalam meningkatkan  efek  antiinflamasi  pada  tikus putih  yang  terinduksi  karagenan  dapat dikaitkan  dengan  kandungan  senyawa  yang terdapat didalamnya. Menurut (Astuti, 2016) dan  (Tapas  et  al,  2008)    senyawa  flavonoid memiliki efek antiinflamasi dengan mekanisme  pengaturan  metabolisme  asam arakhidonat  dengan  menghambat  aktivitas siklooksigenase (COX) dan lipooksigenase.
Pada  penelitian  ini  Natrium  diklofenak digunakan  sebagai  kontrol  positif.  Natrium diklofenak merupakan antiinflamasi nonsteroid  dari  derivate  fenil  asetat  yang mempunyai  efek  farmakologi  menghambat sintesis  prostalglandin.  Natrium  diklofenak dipilih  karena  natrium  diklofenak  dan metabolitnya  dapat  mencapai  konsentrasi yang  cukup  tinggi  pada  telapak  kaki  yang mengalami  peradangan  (Schweitzer et  al , 2009, Zahara dan Saputri 2013).

## KESIMPULAN
Semua dosis  infusa daun afrika memiliki aktivitas  sebagai  antiinflamasi.  Dosis  efektif infusa daun afrika sebagai antiinflamasi pada tikus  putih  yakni  dosis    200  mg/200  gBB dengan persen potensi relatif daya antiinflamasi sebesar 96,36%.

## Daftar Pustaka
Adedapo A.A. and Aremu O.J. 2014. Anti-Inflammatory, Analgesic and Antioxidant Activities OF Aqueous  Leaf  Extract Vernonia Amygdalina In some Laboratory Animals, Academic Journal of sciens, 3 (3), 253-256.
Aprilianto,  E.  2017.  Uji  Efek  Antiinflamasi  Infusa  Kulit  Alpukat (Persea  Americana  Mill.) Pada  Mencit  Jantan  Galur  Swiss  Terinduksi  Karagenin.  Skripsi.  Yogyakarta.  Program Study Farmasi Universitas Sanata Dharma.
Ardiani,  R..  2017.  Efek  Antikolesterol  Ekstrak  Etanol  Daun  Afrika  (Vernonia  amygdalina DEL.) pada tikus . Journal penelitian pendidikan mipa . Universitas Muslim Nusantara Al- Washliyah
Astuti, P. (2016). The Ability of Anti-Inflammatory Jatropha curcas  Leaf Extract  at  COX-2
Expression on Monocytes were Exposed LPS. Proceeding ICMHS , 154–157.
Calfee,  R.,  &  Piontkowski,  D.  (2016).  Design  and  analysis  of  experiments.  Handbook  of Reading Research, 63–90. https://doi.org/10.2307/2983009
Da Silva, D. M., Langer, H., & Graf, T. (2019). Inflammatory and molecular pathways in heart failure-ischemia,  HFpEF  and  transthyretin  cardiac  amyloidosis.  International  Journal  of Molecular Sciences, 20 (9). https://doi.org/10.3390/ijms20092322
Fehrenbacher,  J.  C.,  Vasko,  M.  R.,  &  Duarte,  D.  B.  (2012).  Models  of  inflammation: Carrageenan-  or  unit  5.4  complete  freund’s  adjuvant  (CFA)-induced  edema  and hypersensitivity  in  the  rat. Current  Protocols  in  Pharmacology , SUPPL.56 ,  1–7. https://doi.org/10.1002/0471141755.ph0504s56
Ferrero-Miliani L, Nielsen OH, Andersen PS, Girardin SE. Chronic inflammation: importance of  NOD2  and  NALP3  in  interleukin-1beta  generation. Clin  Exp  Immunol. 2007;147(2):227‐235. doi:10.1111/j.1365-2249.2006.03261.x
Ijeh, I.L., dan Ejike, C.E.C.C. 2010. Current Prespective on The medical Potential of Vernonia amygdalina Del . Pharmacol Res. 51(2):177-123.
Fehrenbacher,  J.  C.,  Vasko,  M.  R.,  &  Duarte,  D.  B.  (2012).  Models  of  inflammation: Carrageenan-  or  unit  5.4  complete  freund’s  adjuvant  (CFA)-induced  edema  and hypersensitivity  in  the  rat. Current  Protocols  in  Pharmacology , SUPPL.56 ,  1–7. https://doi.org/10.1002/0471141755.ph0504s56
Medzhitov  R.  Inflammation  2010:  new  adventures  of  an  old  flame. Cell.  2010;  140(6):771- 776. doi:10.1016/j.cell.2010.03.006
Nathan  C,  Ding  A.  Nonresolving  inflammation. Cell.  2010;  140(6):  871-882. doi:10.1016/j.cell.2010.02.029
Na’imah, M. 2017. Efek Analgesik Infusa Daun Afrika (Vernonia amygdalina L.) Pada Mencit Yang Diinduksi Asam Asetat. Skripsi. Surakarta. Universitas Muhamadiyah Surakarta
Necas, J., & Bartosikova, L. (2013). Carrageenan: A review. Veterinarni Medicina , 58 (4), 187– 205. https://doi.org/10.17221/6758-VETMED
Nuryanto,  M.K.,  Paramita,  S.,  Iskandar,  A.,  Ismail,  S.,  Ruslim,  A.K.  2017.  Aktivitas  Anti- inflamasi  In  Vitro  Ekstrak  Etanol  Daun  Vernonia  amydalina  Delile  Dengan  Pengujian Stabilitas Membran. Jurnal Sains dan Kesehatan. Vol, 1. No. 8.
Schweitzer, A., Hasler-Nguyen, N., Zijlstra, J. 2009. Prefential uptake of the non steroid anti- inflammatory drug diclofenak into inflamed tissues after a single oral dose in rats. BMC Pharmacology, 9:5
Tapas, R, Sakarkar, M., & Kakde, B. 2008. Flavonoid as Nutraceutical: A Review . Tropical Journal of Pharmaceutical Research .
Tjandrawinata.  R.R.,  Djunarko,  I.,  Fenty,  dan  Hendra,  P.,  2015.  Antiinflamation  Effect  of Bioactive  Fraction  DLBS0553  Containing  Phaleria  Macrocarpa  an  Nigella  Sativa  on Animal Model . International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences.,7(1), 1- 4.
Utami, E.T., Kuncoro, R.A., Hutani, I.R., Sari, F.T., Handajani, J. 2011. Efek Antiinflamasi Ekstrak Daun Sembukan (Paederia scandes) Pada Tikus Wistar. Majalah Obat Tradisional,
16 (2), 95-100
Wolkow, A., Aisbett, B., Reynolds, J., Ferguson, S. A., & Main, L. C. (2015). Relationships between inflammatory cytokine and cortisol responses in firefighters exposed to simulated wildfire  suppression  work  and  sleep  restriction.  Physiological  Reports,  3(11). https://doi.org/10.14814/phy2.12604
Wicaksana, L. D. 2016. Uji Efek Antiinflamasi Dekokta Herba Baru Cina (Artemesia vulgaris L.) Pada Mencit Betina Galur Swis Terinduk Karegenin Menggunakan Plethysmometer. Skripsi. Universitas Sanata Dharma. Yogyakarta.
Zahara,  R.,  Saputri,  F.C.  2013.  Uji  Aktivitas  Antiinflamasi  Minyak  Atsiri  Daun  Kemangi (Ocium americanum L.) Pada Tikus Jantan Yang Dinduksi Kragenan. Skripsi. Universitas Indonesia.
Zhang, X., Wu, X., Hu, Q., Wu, J., Wang, G., Hong, Z., & Ren, J. (2019). Mitochondrial DNA in liver inflammation and oxidative stress. Life Sciences , 236 (April). https://doi.org/10.1016/j.lfs.2019.05.020