## IDENTIFIKASI DAN UJI SENSITIFITAS ISOLAT BAKTERI DARI PLAK GIGI PASIEN DENGAN TUMPATAN AMALGAM DI PUSKESMAS TIKALA BARU MANADO TERHADAP ANTIBIOTIK GOLONGAN SEFALOSPORIN
(CEFIXIME) DAN LINKOSAMIDA (LINKOMISIN)
Yuni Wahyunita 1) , Fatimawali 1) , Sri Sudewi 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
Diseases that  ofthen  occur  in  the  oral  cavity  and  teeth  are  caries  and  periodontal  disease.  The main cause is the excessive accumulation of dental plaque, one attempt to control dental plaque is done by inhibiting the growth of bacteria using antibiotics. This study aims to determine the level of bacterial sensitivity  isolated  and  identified  from  dental  plaque  agains  cephalosporin  (cefixime)  and  linkosamide (lyncomicin)  class  antibiotics.  This  research  was  conducted  by  taking  samples  of  dental  plaque  from  3 patients at Tikala Baru Communiy Health Center Manado for made the isolation and identification. The result obtained  from  15 isolated  bacteria  were  Brucella  sp.,  Staphylococcus  sp.,  and  Phenylobacterium sp.  The  identied  bacteria  were  100%  sensitive  to  cefixime  antibiotics  and  80%  resistant  to  antibiotic lyncomicin.
Keywords : Dental plaque, bacteria, identification, sensitive, cefixime, lyncomicin

## ABSTRAK
Penyakit yang sering terjadi pada rongga mulut dan gigi adalah karies dan penyakit periodontal. Penyebab  utamanya  yaitu  adanya  penimbunan  plak  gigi  yang  berlebihan,  salah  satu  usaha  untuk mengontrol  plak  gigi  dilakukan  dengan  menghambat  pertumbuhan  bakteri  menggunakan  antibiotik. Penelitian ini bertujuan untuk menentukan tingkat sensitifitas bakteri yang diisolasi dan diidentifikasi dari plak  gigi  terhadap  antibiotik  golongan  sefalosporin  (cefixime)  dan  golongan  linkosamida  (linkomisin). Penelitian  ini  dilakukan  dengan  mengambil  sampel  plak  gigi  dari  3  pasien  di  puskesmas  Tikala  Baru Manado untuk dilakukan isolasi dan idntifikasi. Hasil penelitian didapatkan dari 15 bakteri yang diisolasi adalah  bakteri  Brucella  sp.,  Staphylococcus  sp  dan  Phenylobacterium  sp..  Bakteri  yang  terindetifikasi yaitu 100% sensitif terhadap antibiotik cefixime dan 80% resisten terhadap antibiotik linkomisin.
Kata kunci : Plak gigi, bakteri, identifikasi , sensitif , cefixime, linkomisin

## PENDAHULUAN
Kesehatan  rongga  mulut  merupakan bagian integral dari kesehatan dan kesejahteraan  tubuh  secara  umum  yang sangat  berpengaruh  terhadap  kualitas  hidup seseorang  (Putri,  2012).  Salah  satu  bagian utama  dari  rongga  mulut  adalah  gigi. Perawatan penting dilakukan  untuk menjaga  kesehatan  gigi,  apabila  gigi  tidak dirawat  dengan  baik,  maka  tidak  menutup kemungkinan  gigi  akan  berlubang  hingga gigi  menjadi  copot,  sehingga  tambalan  gigi merupakan salah satu cara untuk memperbaiki  kerusakan  gigi  agar  gigi  bisa kembali  ke  bentuknya  semula  dan  bisa kembali  berfungsi  dengan  baik.  Tambalan yang  umum  digunakan  adalah  dengan tambalan amalgam (Ramadhan, 2010).
Gigi yang telah mengalami kerusakan    akan  menyebabkan  penyakit pada  rongga  mulut  seperti  karies  dan penyakit  periodontal  (Soebroto,  2009).  Plak merupakan  Proses  awal  terjadinya  penyakit pada gigi. Plak gigi disebabkan oleh bakteri seperti Streptococcus  mutans (Pratiwi, 2005).  Salah  satu  usaha  untuk  mengontrol plak gigi dapat dilakukan dengan menghambat  pertumbuhan  bakteri  dengan cara  menggunakan  antibiotik.  Salah  satu terapi yang digunakan yaitu dengan antibiotik cefixim dari golongan sefalosporin  dan  linkomisin  dari  antibiotik golongan  linkosamid.  Sefalosporin  adalah antibiotik  spektrum  luas  yang  efektif terhadap  beberapa  jenis  bakteri  dan  kuman anaerob (Katzung, 2007), sedangkan antibiotik golongan linkosamid yaitu linkomisin merupakan antibiotik yang memiliki  spektrum  kerja  lebih  sempit  dan
hanya bekerja pada kuman gram positif dan kuman anaerob (Tjay, 2007).
Menurut  Jawtz  (2004)  pemilihan antibiotik yang kurang tepat dapat menimbulkan dampak negatif yaitu timbulnya  resistensi  bakteri  dan  efektifitas antibiotik  rendah  terhadap  bakteri  tertentu. Resistensi bakteri terhadap antibiotik mempunyai  arti  klinis  yang  amat  penting. Suatu  bakteri  yang  awalnya  peka  terhadap suatu  antibiotik,  setelah  beberapa  tahun kemudian dapat resisten, dan berakibat pada sulitnya  proses  pengobatan  karena  sulit memperoleh antibiotik yang dapat membasmi bakteri tersebut. Berdasarkan hal diatas  di  ambil  sampel  berupa  plak  gigi untuk  di  identifikasi  dan  dilakukan  isolasi bakteri  untuk  mengetahui  kepekaan  bakteri pada  plak  gigi  terhadap  antibiotik  golongan sefalosporin  (cefixime)  dan  linkosamid (linkomisin).

## METODOLOGI PENELITIAN Alat dan Bahan
Alat yang digunakan dalam penelitian  yaitu  :  Cawan  Petri  ( Normax ), Vial  sampel  plak  gigi,  Lampu  Busen, Incubator  ( Incucell ),  Alumunium  Foil, Tabung  reaksi  ( Pyrex ),  Kaca  Objek,
Mikroskop ( Olympus ), Jarum öse, Erlenmeyer  ( Approx ),  Gelas  Ukur,  Gelas Kimia,  Rak  Tabung  reaksi,  Pipet  Tetes, Plastik Wrap, Kapas, Kasa, Tissue,
Timbangan  Analitik,  Pinset,  Laminar  air flow ( Biotek ), Termometer, Autoklaf (ALP), mikropipet  ( Ecopipette ),  L-Glass,  Vortex, Mistar berskala dan  Alat fotografi.
Bahan yang digunakan dalam penelitian yaitu : Sampel Plak gigi , Alkohol 96%, Aquadest,  Cristal Violet, NaCl  0,9 %,
H 2 SO 4 , BaCl 2 , Safranin,  Luria Bertani  Agar dan Yeast extract ( Oxoid ), Simmon’s Citrate Agar  ( Oxoid ),  Lysine  Iron  Agar  ( Oxoid ), Triple  Sugar  Iron  Agar  ( Oxoid ), Nutrien
Broth (Oxoid) Antibiotik golongan sefalosporin (cefixime) dan golongan linkosamida (linkomisin).

## Jenis Penelitian
Penelitian ini merupakan jenis penelitian  Deskriptif  Analisis  Laboratorium yaitu  suatu  pengujian  yang  dilakukan  di laboratorium.

## Preparasi Sampel
Pengambilan sampel
dilakukan dengan  cara  mengambil  plak  gigi  pada  3 pasien yang menggunakan tumpatan amalgam  di  Puskesmas  Tikala  Baru  Kota Manado.  Plak  gigi  tersebut  diambil  dengan menggunakan  alat  sonde  dan  dimasuka  ke dalam  vial  steril  yang  berisi  NaCl  0,9  % sebanyak  5  mL  dan  diberi  label  identitas pasien  dan  di  bawa  ke  laboratorium mikrobiologi jurusan farmasi.

## Sterilisasi Alat
Alat-alat  yang  digunakan  terlebih dahulu  disterilkan  menggunakan  autoklaf dengan  cara  alat-alat  gelas  yang  akan digunakan  dalam  penelitian  di  bungkus menggunakan  alumunium  foil  kemudian dimasukkan  kedalam  autoklaf.  Autoklaf dihidupkan  pada  suhu  121°C  selama  15 menit.  Sedangkan  jarum  ӧse  dan  pinset  dan L-Glass dipijarkan  dengan  pembakaran diatas api langsung (Ortez, 2005).
Pembuatan Media
a. Media Luria Bertani (LB)
Media  LB  dibuat  dengan  menimbang tripton  sebanyak  2  gram,  NaCl  sebanyak  2 gram, yeast  extract sebanyak  1  gram  dan Agar  bacteriological sebanyak  3  gram, kemudian  dimasukan  ke  dalam  Erlenmeyer dan  dilarutkan  bersama  dengan  aquadest sebanyak 300 mL hingga homogen. Kemudian disterilkan kedalam autoklaf pada suhu  121°C  selama  15  menit.  Kemudian dituangkan pada masing-masing cawan petri sebanyak  20  mL  dan  didinginkan  hingga memadat.  Media  ini  digunakan  sebagai media  pertumbuhan  bakteri  (Pangastuti, 2002).
b. Media Agar Miring
Tripton ditimbang sebanyak 0.5 gram,
NaCl  sebanyak  0.5  gram, yeast  extract sebanyak 0.25 gram dan agar bacteriological sebanyak 0.75 gram kemudian  dimasukan  ke  dalam  Erlenmeyer dan  dilarutkan  bersama  aquadest  sebanyak 50 mL kemudian dihomogenkan. Kemudian di sterilkan dalam autoklaf pada suhu 121°C selama  15  menit.  Kemudian  dimasukan  ke dalam masing-masing tabung reakasi sebanyak  5  mL  dan  didinginkan  pada  suhu ruangan  dan  biarkan  hingga  memadat  pada kemiringan 30°.

## Inokulasi Bakteri Pada Media
Sampel plak gigi dilakukan pengenceran  sebanyak  4  kali.  Selanjutnya dipipet  menggunakan  micropipet  sebanyak 1000  µL  Suspensi  bakteri  pada  masing- masing pengenceran dan dituangkan kedalam cawan petri yang telah berisi media Luria Bertani Agar . Selanjutnya cawan petri ditutup dan dibungkus menggunakan plastic Wrap. Kemudian di inkubasi dalam inkubator  pada  suhu  35-36°C,  diamati
setelah  18  jam  diinkubasi.  Tetapi  dapat direinkubasi  tambahan  selama  24  jam  jika pada pertumbuhannya kurang dari perkiraan atau hanya terdapat sedikit koloni (Vandepitte, 2010).

## Isolasi Bakteri
Setiap  koloni  yang  telah  tumbuh pada media LB diambil menggunakan jarum öse untuk dipindahkan ke media agar miring untuk  mendapatkan  isolate  bakteri  dengan membentuk garis zig-zag selanjutnya diinkubasi  dalam  inkubator  pada  suhu  35- 36°C  selama  ±  18-24  jam  (Vandepitte, 2010).

## Identifikasi Bakteri
a. Uji Biokimia Identifikasi bakteri secara uji
biokimia  menggunakan  uji  indol,  uji katalase, uji H2S, uji fermentasi karbohidrat, uji lysine, dan uji sitrat.
b. Uji Morfologi
Kaca objek dibersihkan dengan  kapas  yang  telah  diberi  alkohol  lalu diberi  label.  Biakan  bakteri  pada  nutrient agar  miring  di  ambil  dengan  menggunakan jarum ose, kemudian di totolkan pada bagian tengah  kaca  objek  sampai  merata  dan ditambahkan satu tetes NaCl 0,9%. Preparat selanjutnya difikasi di atas lampu Bunsen.Sediaan  yang  sudah  direkatkan diwarnai  dengan  Kristal  violet  selama  1 menit.  Kemudian  Kristal  violet  dicuci  pada air mengalir dan diganti dengan larutas lugol (larutan  J2+KJ)  dibiarkan  selama  1  menit. Larutan  lugol  di  bilas  dengan  alkohol  96% selama  1  menit.  Selanjtnya  sediaan  dicuci dengan  air  dan  diwarnai  dengan  safarin selama  1  menit.  Sediaan  dicuci  pada  air
yang mengalir, dikeringkan dan diperiksa di mikroskop  dengan  penambahan  minyak imersen. (Fatimawali, 2016).
c. Uji Fisologi
Uji  fisiologi  dilakukan  dengan  Uji Motilitas  yang  bertujuan  untuk  mengetahui apakah  bakteri  yang  diuji  dapat  melakukan pergerakan atau tidak.
Uji Kepekaan Bakteri Terhadap Antibiotik a. Pembuatan Larutan Mc Farland 0,5
Larutan  H 2 SO 4 1%  sebanyak  99,5  mL dicampurkan dengan larutan BaC12 1,175% sebanyak  0,5  mL  dalam  Erlenmeyer. Kemudian dikocok sampai terbentuk larutan yang  keruh.  Kekeruhan  ini  dipakai  sebagai standar  kekeruhan  suspense  bakteri  uji (Bresson, 2004)

## b. Pembuatan suspensi Bakteri Uji
Bakeri  uji  yang  telah  diinokulasi diambil  dengan  jarum  ose  steril  lalu disuspensikan ke dalam tabung yang berisi 5 mL  larutan  NaCl  0,9%  hingga  diperoleh kekeruhan  yang  sama  dengan  standar kekeruhan larutan Mc. Farland 0,5. Perlakuan  yang  sama  dilakukan  pada  setiap jenis bakteri uji.

## c. Penanaman Cakram Antibiotik
Dipipet  suspense  bakeri  uji  sebanyak 200  µg.  Dan  dituangkan  ke  seluruh permukaan media LB. Selanjutnya diratakan menggunakan L-Glass dan didiamkan selama 5 menit.  Tempatkan cakram  cefixim obat  golongan  sefalosporin  5  µg  dan linkomysin  2  µg.  Pada  permukaan  media LB. Cakram antibiotik ditekan menggunakan  pinset  agar  dapat  menempel secara  sempurna  di  permukaan  agar.
Selanjutnya  diinkubasi  pada  suhu  37  C selama  18-24  jam.  Dibuat  tiga  kali  ulangan pada  cawan  petri  yang  berbeda  (Kumala, 2010).

## d. Pengukuran  dan  penetapan  zona
hambat Setelah  diinkubasi,  diamati  zona
pertumbuhan bakteri disekitar cakram antibiotik.  Koloni  bakteri  yang  sensitive terhadap  antibiotik  cefixim  dan  linkomisin dilihat  dengan  adanya  zona  hambatan berupa  daerah  bening  disekitar  cakram antibiotik.  Daerah  hambatan  antibiotik terhadap pertumbuhan bakteri diukur menggunakan  mistal  berskala  atau  jangka sorong  dengan  satuan  mm.  kemudian  zona hambatan dibandingkan
berdasarkan pedoman Clinical  and  Laboratory  Standars
Instutute (CLSI).
Tabel 1. Zona Hambat berdasarkan CLSI Nama Obat Sensitif Intermediet Resisten Cefixime ≥19 16-18 ≤15 Linkomisin ≥15 10-14 ≤9

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Dari  hasil  pemurnian  ini  didapatkan  15 isolat  bakteri  dan  di  beri  kode.  Setelah  di lakukan pemurnian, bakteri yang berkembang  diinokulasi  kembali  ke  media agar  miring  yang  akan  digunakan  sebagai kultur stok dari kelima belas bakteri Bakteri diregenerasi  setiap  dua  minggu  sekali dengan cara yang sama
.Tabel 2. Kode isolat
Identifikasi Bakteri

## a. Uji Fisologi
Hasil  pengujian  Motilitas  pada  lima belas  isolat  bakteri  menunjukan  bahwa  ke lima belas isolat bakteri tersebut menunjukan hasil negatif, hal ini disebabkan tidak  adanya  penyebaran  pertumbuhan bakteri  di  sekitar permukaan media.  Bakteri dikatakan  motil  jika  adanya  pertumbuhan melebar  atau  penyebaran  yang  berwarna putih seperti akar disekitar inokulasi.
Pasien Isolat Kode 10 1 1 1 10 2 1 2 I 10 3 1 3 10 4A 1 4 10 2A 2 5 10 2B 2 6 II 10 3 2 7 10 4A 2 8 10 4B 2 9 10 1 3 10 10 2 3 11 III 10 3A 3 12 10 3B 3 13 10 4A 3 14 10 4B 3 15

## b. Uji biokimia
Tabel 3. Hasil Pengujian Biokimia

## c. Uji Morfologi
Pada  penelitian  uji  pewarnaan  gram ini  dilakukan  dan  dilihat  pada  mikroskop, dan  hasi  ke  lima  belas  bakteri  menunjukan bentuk  kokus.10  Isolat  bakteri  menunjukan sel bakteri gram positif dalam bentuk kokus sedangkan  5  isolat  bakteri    menunjukan  sel bakteri gram negatif dalam bentuk kokus. Tabel 4. Hasil pewarnaan gram
Kode Isolat Bentuk Bakteri Gram 1 Kokus Positif 2 Kokus Positif 3 Kokus Positif 4 Kokus Negatif 5 Kokus Positif 6 Kokus Negatif 7 Kokus Positif 8 Kokus Positif 9 Kokus Negatif 10 Kokus Positif 11 Kokus Positif 12 Kokus Positif 13 Kokus Positif 14 Kokus Negatif 15 Kokus Negatif

## Hasil Idenifikasi Bakteri
Dari identifikasi bakteri yang meliputi uji biokimia , uji morfologi dan uji fisiologi diperoleh semua hasil ini digabungkan dan digunakan untuk menetukan  bakteri  yang  terkandung  pada masing-masing  isolat  bakteri,  penentuan bakteri  dilakukan  dengan  membandingan hasil  uji  yang  diperoleh  dengan  data-data yang  terdapat  dalam  buku Bergey’s  Manual Determinative of Bacteriology .
Tabel 5. Hasil Identifikasi Bakteri
Kode Isolat Hasil identifikasi bakteri 1 Staphylococcus sp. 2 Staphylococcus sp. 3 Staphylococcus sp. 4 Brucella sp. 5 Staphylococcus sp . 6 Phenylobacterium sp. 7 Staphylococcus sp. 8 Staphylococcus sp. Kode Isolat Indol Sitrat H 2 S Fermentasi Karbohidrat Lisin Katalase G L S Gas 1 - + + + - - - + + 2 - + + - - - - + + 3 - + - + - - + + + 4 - + + + - - - + + 5 - + - + - - + + + 6 - + - + - - + + + 7 - + - + - - - + + 8 - + - + - - + + + 9 - + - + - - + + + 10 - + - + - - + + + 11 - + + - - - - + + 12 - + - + - - + + + 13 - + - + + + + + + 14 - + - + - - + + + 15 - + - + - - + + +
9 Phenylobacterium sp. 10 Staphylococcus sp. 11 Staphylococcus sp. 12 Staphylococcus sp. 13 Staphylococcus sp. 14 Phenylobacterium sp. 15 Phenylobacterium sp.

## Uji Kepekaan Antibiotik
Tingkat  kepekaan  bakteri  dibedakan menjadi 3 yaitu, sensitif dimana bateri  yang bersifat  sensitif  adalah  jika  terbentuk  zona bening  disekitar  cakram  antibiotik.  Bakteri bersifat  resisten  jika  tidak  terbentuk  zona bening disekitar cakram antibiotik. Sedangkan  akan  bersifat  intemediet  jika terbentuk zona bening dengan diameter yang kecil  disekitaran  cakram  antibiotik.  Daerah hambatan  antibiotik  terhadap  pertumbuhan bakteri diukur menggunakan mistar berskala atau  jangka  sorong  dengan  satuan  mm. Kemudian  zona  hambatan  dibandingkan berdasarkan pedoman Clinical and Laboratory Standars Instutute (CLSI).
Table 6. Hasil pengukuran zona hambat Kode isolat Cefixim Linkomisin Rata-rata Kepekaan Rata-rata kepekaan 1 28 S 7,8 R 2 25,3 S 7,8 R 3 23,1 S 8,1 R 4 23 S 12 I 5 25,3 S 8,6 R 6 29,6 S 10,3 I 7 25,3 S 9 R 8 20,1 S 7,8 R 9 22 S 12,8 I 10 27 S 7,6 R 11 27,1 S 9,5 R 12 28 S 8 R 13 25,6 S 9,1 R 14 26,3 S 8,3 R 15 27,1 S 9,1 R
Tabel 7. Persentase kepekaan bakteri dari isolat plak gigi terhadap   antibiotik Cefixime dan Linkomisin.
Antibio tik S I R Persentase (%)
S I R Cefixim e 15 0 - 100% 0 0 Linkom isin - 3 12 0 20% 80%
pada  Tabel  7.  menunjukan  bahwa antibiotik cefixime memiliki tingkat sensitifitas sebesar 100 % tidak menunjukan adanya  intermediet  dan  resisten  terhadap antibiotik . hal ini dapat menunjukan bahwa antibiotik cefixime bisa membunuh pertumbuhan bakteri yang diisolasi dari plak gigi.  Dimana  antibiotik  cefixime  tersebut dapat  membunuh  bakteri  dengan  cara menghambat  sintesa  dinding  sel  bakteri karena  tanpa  adanya  dinding  sel  maka bakteri  akan  mati,  selain  itu  cefixim  juga memiliki spectrum kerja yang lebih luas dan aktif terhadap bakteri gram positif dan gram negatif  (Tjay,2007)  sedangkan  linkomisin memiliki  tingkat  intermediet  20%  dan resisten  sebesar  80%.  Resisten  terhadap linkomisin terjadi karena linkomisin memiliki  spectrum  kerja  yang  lebih  sempit dan  hanya  bekerja  pada  gram  positif  (Tjay, 2007).  Resistensi  dapat  terjadi  dikarenakan antibiotik golongan Linkosamida (lincomisin) ini bekerja dengan menghambat sintesa  protein  organisme  yang  berikatan pada  subunit  50S  ribosom  mikroba  dengan tempat  ikatan,  aktivitas  antibakteri  dan  cara kerjanya  seperti  makrolid.  Mutasi  pada kromosom  menimbulkan  resistensi  karena
tidak  terjadi  ikatan  pada  subunit  50S ribosom (sugiarto, 2009).

## KESIMPULAN
Berdasarkan    penelitian  yang  telah dilakukan,  Bakteri  yang  teridentifikasi  dari plak  gigi  pasien  dengan  tumpatan  amalgam di  puskesmas  Tikala  Baru  Manado  adalah jenis  bakteri Staphylococcus sp., Brucella sp., dan Phenylobacterium sp.,   dan  Bakteri yang  sensitif  terhadap  Cefixime  adalah Staphylococcus sp., Brucella sp., Phenylobacterium sp.,  dan  tidak  terdapat bakeri  yang  resisten  ataupun  intermediet terhadap  cefixime.  Bakteri  yang  resisten terhadap  linkomisin  adalah Staphylococcus sp.,  dan Phenylobacterium sp.,  intermediet terhadap linkomisin adalah Brucella sp., dan Phenylobacterium sp.,  dan  tidak  terdapat bakteri yang sensitif terhadap linkomisin.

## SARAN
1. Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan, perlu di pertimbangkan kembali  penggunaan  linkomisin  pada infeksi  di  dalam  mulut  terutama  pa  gigi karena  ada  beberapa  bakteri  seperti Staphylococcus
sp., dan Phenylobacterium sp.,    yag telah  resisten terhadap antibiotik tersebut.
2. Perlu dilakukan penelitian kembali dengan  menggunakan  antibiotik  yang berbeda  dan  sampel  yang  lebih  banyak untuk  mengetahui  antibiotik  yang  tepat digunakan  sebagai  terapi  antibiotik  pada masalah plak gigi.

## DAFTAR PUSTAKA
Bresson,W.  dan  Borges,  M.T.  2004. Delivery  Methods  for  Introducing Endophitic  Bacteria  into  Maize. Biocontrol . 49 : 315-322.
Clinical  dan  Laboratory  Standart  Institute.
2016. Performance  Standart  for Antimicrobial Suspenceblity Tessting : Seventeenth Informational  Supplement.  M100- S17. 27(1) : 35 Fatimawali, 2016. Toksikologi: Detoksifikasi Merkuri . Unsrat Press, Manado Jawetz,  Melnick,  dan  Adelbergs.  2004.
Mikrobiologi  Kedokteran  Ed  23 . Jakarta  :  Penerbit  Buku  Kedokteran EGC page 233, 235, Jakarta.
Katzung,  B.  G.  2007. Basic  &  Clinical
Pharmacology, Tenth Edition . United  States  :  Lange  Medical Publications.
Kumala, S., D.A.M. Pasanema, dan Mardiastuti.  2010.  Pola  Resistensi Antibiotik  Terhadap  Isolat  Bakteri Sputum  Penderita  Tersangka  Infeksi Saluran Nafas Bawah. Jurnal Farmasi Indonesia . 5 : 24-32.
Ortez,  J.H.  2005. Disk  Diffusion  Testing  in Manual of Antimicrobial Susceptibility Testin g. American Society For Microbiology, America. Putri, A. 2012. Hubungan Tingkat Pendidikan Ibu, Pendapatan Keluarga, Kecukupan Protein dan Zinc dengan Stunting  (Pendek)  pada  Balita  Usia
6-
35  Bulan  di  Kecamatan  Tembalang Kota  Semarang.  Jurnal  Kesehatan Masyarakat  (JKM) .  Volume  1, Nomor 2, Tahun 2012, Halaman 617 – 626.
Pratiwi,S.  2008 .  Mikrobiologi  Farmasi .
Erlangga, Jakarta.
Ramadhan.  2010. Serba-serbi  Kesehatan Gigi dan Mulut . Bukune, Jakarta.
Tjay,  T.H.,  dan  K.  Rahardja.  2007. Obat- obat  Penting  Khasiat,  Penggunaan, dan  Efek-Efek  Sampingnya.  Edisi  ke VI .  PT  Elex  Media  Komputindo, Jakarta.
Vandepitte. J,, 2005. Prosedur Laboratorium Dasar Untuk Bakteriologis  Klinis .  Edisi  2.Buku Kedokteran EGC, Jakarta.