## Narrative Review

## Chemometrics  Application  for  Grouping  and  Determinating  Volatile Compound which related to Antioxidant Activity of Turmeric Essential Oil (Curcuma longa)
Aplikasi  Kemometrika  dalam  Mengelompokkan  dan  Menentukan  Korelasi  Senyawa Mudah Menguap terhadap Aktivitas Antioksidan Minyak Atsiri Kunyit (Curcuma longa)
Rosy Islamadina 1 , Adelin Chan 1 , and Abdul Rohman 2,3 *
1 Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta 55281 Indonesia
2 Departemen Kimia Farmasi, Fakultas Farmasi, Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta 55281 Indonesia
3 Institute of Halal Industry and Systems, Universitas Gadjah Mada, Yogayakarta, 55281, Indonesia
* Corresponding author: Abdul Rohman | Email: abdulrohmanugm@gmail.com
Received: 16 June 2020; Revised: 24 July 2020; Accepted: 2 August 2020; Published: 26 October 2020
Abstract: Turmeric essential oil is known to have antioxidant activity. Various in vitro antioxidant activity assays has been carried out. Related to this research, it tries to examine the antioxidant potential of turmeric essential oil and see the composition that is responsible for antioxidant activity combine with chemometrics. The research method used was a narrative review of 60 articles obtained from several databases. The review conducted on profiling  essential  oil  compounds  that  identified  using  GC-MS  and  evaluation  of  the  antioxidant  activity  of turmeric  essential  oil  with  the  most  commonly  used  method    including  scavenging  radical  2,2  diphenyl-1- picrylhydrazyl (DPPH) and 2,2-azinobis (3-ethylbenzothiazoline-6 sulfonic acid (ABTS). Analysis methods used for grouping various multivariate data subjects and determaining the relationship between the variables were Principal Component Analysis (PCA) and Cluster Analysis (CA). According to the review, turmeric essential oils are proven to have potential antioxidant activity and have variations in chemical contents. PCA was success for  grouping  subjects  with  various  correlated  variables,  determining  variables wich  the  most  influential  and correlation between variables. CA method can be used to group samples without requiring mutually correlated variables .
Keywords:  turmeric  essential  oil;  GC-MS  profiling;  antioxidant  activity;  partial  component  analysis;  cluster analysis.
Abstrak:  Minyak  atsiri  kunyit  dilaporkan  memiliki  aktivitas  antioksidan  yang  berkaitan  dengan  kandungan senyawa di dalamnya. Beberapa metode uji in vitro untuk mengevaluasi aktivitas antioksidan minyak atsiri telah banyak dilakukan. Oleh karena itu, penelitian ini bertujuan untuk melakukan review potensi antioksidan minyak atsiri  kunyit  dan  melihat  senyawa  yang  bertanggungjawab  terhadap  aktivitas  antioksidan  dengan  bantuan analisis kemometrika. Metode penelitian yang dilakukan adalah narrative review dari 60 literatur yang diperoleh dari  beberapa  database.  Review  yang  dilakukan difokuskan pada  profiling senyawa  minyak  atsiri  kunyit  yang diindentifikasi menggunakan gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS) dan evaluasi aktivitas antioksidan minyak atsiri kunyit dengan metode yang paling umum digunakan yaitu penangkapan radikal 2,2 diphenyl-1- picryhydrazyl  (DPPH)  dan  2,2-azinobis(3-ethylbenzothiazoline-6  suslfonic  acid  (ABTS).  Metode  analisis  yang
digunakan  untuk  tujuan  pengelompokan  subjek  dan  mencari  korelasi  antar  variabelnya  adalah  Principal Component Analysis (PCA) dan Cluster Analysis (CA). Menurut hasil review yang telah dilakukan, minyak atsiri kunyit  terbukti  memiliki  aktivitas  antioksidan  yang  poten  dan  kandungan  senyawa  yang  bervariasi. Penggunaan  teknik  PCA  berhasil  mengelompokkan  subjek  dengan  berbagai  variabel  yang  berkorelasi, menentukan variabel yang paling berpengaruh, dan melihat korelasi antar variabel. Begitu juga teknik CA dapat digunakan untuk mengelompokkan sampel tanpa mensyaratkan variabel yang saling berkorelasi.
Kata  kunci:  Minyak  atsiri  kunyit;  GC-MS  profiling;  antioksidan;  Principal  Component  Analysis;  Cluster Analysis

## 1. PENDAHULUAN
Kunyit  merupakan  herba  medika  yang  mudah  dibudidayakan  dan  banyak  terdapat  di seluruh  belahan  bumi.  Kunyit  dilaporkan  memiliki  banyak  khasiat  diantaranya  adalah  sebagai antioksidan  [1-5],  antiinflamasi  [6],  antimikroba  [7],  anti-fungi  [8],  dan  anti  kanker  [9].  Senyawa radikal di tubuh dalam bentuk reactive oxygen species (ROS) yang di atas kadar normal dapat memicu beberapa  penyakit  seperti  hipertensi,  aterosklerosis,  diabetes,  gagal  jantung,  stroke,  dan  penyakit kronis lainnya [10].
Kandungan  utama  rimpang  kunyit  adalah  kurkuminoid  dan  minyak  atsiri  (essential  oil). Minyak atsiri kunyit dilaporkan dapat digunakan sebagai antioksidan alami yang poten, sehingga dapat mencegah stres oksidatif pada manusia dengan mekanisme menurunkan pelepasan hormon kortisol  dan  meningkatkan  aktivitas  enzim  antioksidan  [11].  Oleh  karena  itu,  penelitian  ini  akan membahas  mengenai  profil  senyawa  minyak  atsiri  kunyit  yang  diidentifikasi  menggunakan  gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS) yang berkorelasi terhadap aktivitas antioksidannya. Hasil profiling  senyawa  yang  dikaitkan  dengan  bioaktivitasnya  memungkinkan  diperoleh  penemuan senyawa baru yang kedepannya dapat dimanfaatkan untuk pengembangan senyawa kompleks yang berasal dari bahan alam untuk tujuan terapi [12].
Tanaman  obat  yang  berasal  dari  habitat  yang  berbeda  akan  memiliki  kandungan  yang beragam  sehingga  menghasilkan  data  yang  bervariasi,  sehingga  diperlukan  metode  kemometrika dalam pengolahan datanya [13]. Perbedaan beberapa variabel terkontrol dapat dikelompokkan ke dalam  beberapa  kluster  menggunakan  teknik  analisis  kemometrika  Principal  Component  Analysis (PCA)  dan  Cluster  Analysis  (CA).  Selain  itu,  teknik  analisis  PCA  mampu  mereduksi  beberapa variabelnya menjadi Principal Components (PCs), sehingga dapat diketahui apakah terdapat korelasi antar variabel [9]. Kemometrika telah banyak digunakan untuk berbagai tujuan analisis data kimia, sehingga  diharapkan  penulisan  review  ini  akan  bermanfaat  sebagai  sumber  informasi  mengenai potensi antioksidan minyak atsiri kunyit dan aplikasi kemometrika dalam mengidentifikasi senyawa mudah menguap dalam minyak atsiri kunyit yang berkorelasi terhadap aktivitas antioksidan. Hal ini, akan bermanfaat untuk proses determinasi senyawa fitokimia dalam herba medika yang hingga saat ini terus dikembangkan untuk tujuan peningkatan efektivitas terapi penyakit tertentu.

## 2. ALAT DAN METODE

## 2.1. Alat
Alat yang digunkaan dalam penulisan narrative overview adalah search engine artikel ilmiah dalam beberapa database seperti ACS Publications, Scopus, Science Direct, Pubmed, dan Google Scholar.

## 2.2. Metode
Penulisan narrative review dilakukan dengan metode penelususran literatur melalui beberapa database elektronik. Pencarian literatur dalam database menggunakan kata kunci “Essential oil” AND “Curcuma  longa”  AND  Antioxidant  atau  Chemometric  AND  “Curcuma  longa”  AND  “Essential  oil”. Adapun bagan penelusuran review dapat dilihat pada Gambar 1.

## Gambar 1. Bagan penelusuran review

## 3. PEMBAHASAN
3.1. Profil senyawa minyak atsiri kunyit
Minyak atsiri mengandung senyawa multi-komponen dan mudah menguap. Metode yang umum  digunakan  dalam  identifikasi  senyawa  kimia  yang  terkadung  dalam  minyak  atsiri  adalah kromatografi gas. Untuk keperluan determinasi senyawa fitokimia dan standarisasi obat herbal yang dapat  meliputi  komponen  senyawa  non-polar,  minyak  atsiri,  asam  lemak,  lipid,  dan  alkaloid umumnya  diidentifikasi  menggunakan  instrumen  yang  memiliki  efektifitas  dan  sensitivitas  yang tinggi  yaitu  GC-MS  [12].  Proses  metabolite  profiling  membutuhkan  metode  yang  cepat,  reliabel, sensitif,  dan  mampu  mengidentifikasi  sejumlah  besar  senyawa/metabolit.  Teknologi  spektrometri masa  akan  meningkat  sensitivitasnya  jika  dikombinasikan  dengan  pemisahan  kromatografi  [14]. Selain itu, keuntungan dari teknologi ini adalah adanya protokol yang stabil untuk pengaturan dan pemeliharaan mesin, serta evaluasi dan interpretasi kromatogram [15].
Menurut  penulusuran  yang  telah  dilakukan  dari  beberapa  database,  studi  terkait  profiling minyak  atsiri kunyit telah  banyak dilakukan di China dan India utamanya serta  beberapa negara lainnya  seperti  Amerika  Serikat,  Bangladesh,  Brazil,  Iran,  Iraq,  Korea,  Nigeria,  Pakistan,  Perancis, Serbia,  Spanyol,  dan  Taiwan.  Profiling  minyak  atsiri  kunyit  yang  berasal  dari  berbagai  tempat menggunakan  GC-MS,  diperoleh  profil  kromatogram  yang  beragam  [16-17].  Hal  ini mengindikasikan  bahwa  senyawa  kimia  yang  terkandung  dalam  minyak  atsiri  kunyit  bervariasi, diperlihatkan dari nilai persentase dan jumlah senyawa teridentifikasi. Jika mengacu pada penelitian sebelumnya,  berdasarkan  analisis  koefisien  sensitifitas  relatif  besarnya  persentase  minyak  atisiri
yang  diperoleh  dari  rimpang  kunyit  dipengaruhi  oleh  pemberian  fosfor  dan  kalium,  sedangkan faktor lingkungan lainnya seperti suhu, pH, kelembapan, ketinggian, pemberian karbon organik dan nitrogen tidak signifikan mempengaruhi nilai persentase minyak atsiri kunyit [18].
Senyawa utama yang terkandung dalam minyak atsiri kunyit menurut banyaknya laporan penelitian sebelumnya,  memperlihatkan data yang hampir sama diantara seluruh penelitian yang telah  dilakukan  di  berbagai  negara.  Golongan  senyawa  yang  memiliki  persentase  terbesar  adalah seskuiterpen  teroksigenasi  meliputi  ar-turmerone,  α-turmerone,  β-turmerone.  Dari  keseluruhan  hasil review  literatur,  sebagian  besar  hasil  penelitiannya  menyebutkan  salah  satu  atau  lebih  dari  ketiga senyawa golongan seskuiterpen teroksigenasi merupakan senyawa utama yang memiliki persentase dominan dalam minyak atsiri kunyit (dapat dilihat dalam Tabel 1).
Selain  golongan  seskuiterpen  teroksigenasi  terdapat  senyawa  lain  yang  juga  disebutkan memiliki  persentase  dominan  dalam  minyak  atsiri  kunyit  yaitu  golongan  monoterpen  seperti  α- phellandrene  dan  1,8-cineole,  sedangkan  senyawa  lainnya  merupakan  minoritas  [3,  19-21].  Ada beberapa  senyawa  lain  yang  memiliki  persentase  dominan  kedua  setelah  golongan  senyawa seskuiterpen  teroksigenasi  adalah  α-zingiberene  (4.78%)  [22],  caryophyllene  (9.8%)  [23],  terpinolene (15.8%) (24), zingiberene (6.353%) dan curcumene (5.987%) [2], serta beberapa senyawa lainnya yang dapat dilihat pada Tabel 3. Namun  ada  beberapa penelitian yang melaporkan  hasil yang  berbeda seperti  yang  telah  dilakukan  oleh  Hassan  dkk.  (2003)  tidak  menemukan  golongan  senyawa seskuiterpen teroksigenasi, melainkan yang dominan adalah senyawa β-sesquiphellandrene.

## Gambar 2. Struktur kimia komponen utama minyak atsiri kunyit

## 3.2. Aktivitas antioksidan minyak atsiri kunyit
Beberapa  metode  untuk  mengevaluasi  aktivitas  antioksidan  telah  banyak  dikembangkan diantaranya adalah 1) radical scavenging methods (metode penangkapan radikal) meliputi radikal 2,2’- diphenyl-1-picrylhydrazyl  (DPPH),  2,2′-azinobis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic  acid  (ABTS •+ ), hidrogen, natrium oksida, dan peroksinitrit, 2)  reducing power (kekuatan mereduksi) meliputi ferric reducing  antioxidant  power  (FARP),  ferotiosianat,  metode  fosfomolibdenum,  dan  cupric  reducing antioxidant  capacity,  3)  metal  chelating  power,  4)  inhibisi  lipid  peroksida  menggunakan  β-carotene bleaching linoleic-ferric-thiocyanate, dan metode TBA (thiobarbituric acid) (25-26). Metode penangkapan
radikal merupakan metode yang paling umum digunakan untuk mengevaluasi aktivitas antioksidan [26].  Parameter  yang  digunakan  untuk  mengevaluasi  aktivitas  antioksidan  pada  metode penangkapan  radikal  adalah  IC 50 yang  merupakan  konsentrasi  sampel  yang  dibutuhkan  untuk menangkap 50% radikal [6]. Semakin kecil nilai IC 50 dari suatu sampel uji, menunjukkan kapasitas antioksidan yang semakin poten.
Penetralan senyawa radikal umumnya melalui 2 mekanisme yaitu transfer atom hidrogen atau transfer elektron untuk mengubah senyawa radikal menjadi spesies senyawa yang stabil  [25]. Mekanisme tersebut dikenal dengan hydrogen atom transfer (HAT) dimana atom H ditransfer ke target radikal, sehingga dapat terjadi rekombinasi radikal dan diperoleh produk yang stabil.
ROO• + AH → ROOH + A• (1) ROO• + A•· → ROOA (2)
Mekanisme  kedua  yaitu  single  slectron  transfer  (SET)  dimana  satu  atau  lebih  elektron ditransfer untuk menstabilkan senyawa radikal.
ROO• + AH → ROO - + AH +
A• + H3O + (3)
ROO - + H3O + → ROOH + H 2 O (4)
Berdasarkan hal tersebut, pembahasan review ini akan berfokus pada aktivitas antioksidan minyak atsiri rimpang kunyit yang dievaluasi menggunakan metode penangkapan radikal DPPH dan  ABTS.  Metode  penangkapan  radikal  DPPH  memiliki  mekanisme  reaksi  single  electron  transfer dan metode penangkapan radikal ABTS diklasifikasikan dalam mekanisme hydrogen atom transfer [2]. Metode  ABTS  dievaluasi  berdasarkan  kemampuan  penangkapan  radikal  kation  ABTS •+ yang  ada dalam  larutan.  Penangkapan  radikal  ABTS •+ merupakan  metode  yang  bagus  untuk  mengevaluasi kapasiatas antioksidan beberapa senyawa lipofilik atau hidrofilik, karena metode ini mengevaluasi kemampuan penangkapan lipid atau radikal hidrogen peroksil dalam cairan [36].
Menurut penelitian yang telah dilakukan oleh Zhang dkk. (2017) disebutkan bahwa 19 dari 20 sampel minyak atsiri kunyit yang diperoleh dari berbagai tempat yang berbeda di China memiliki nilai  IC 50 yang  lebih  kecil  dibandingkan  trolox  sebagai  kontrol  positif.  Uji  aktivitas  antioksidan menggunakan metode penangkapan radikal DPPH diperoleh nilai IC 50 trolox sebesar 10,72 μg/mL, sedangkan  minyak  atsiri  yang  paling  poten  diantara  20  sampel  dari  berbagai  tempat  tersebut memiliki  IC 50 4,37  μg/mL.  Menurut  penelitian  yang  telah  dilakukan  oleh  Zhang  dkk.  (2017) disebutkan bahwa 19 dari 20 sampel minyak atsiri kunyit yang diperoleh dari berbagai tempat yang berbeda di China memiliki nilai IC 50 yang lebih kecil dibandingkan trolox sebagai kontrol positif.
Tabel 1. Komponen senyawa kimia dalam minyak atsiri rimpang kunyit Asal Sampel (Metode) Komponen kimia utama Referensi Faisalabad, Pakistan Fresh rizhome (HD) Ar-turmerone (25,3 %); α-turmerone (18,3 %); curlone (12,5 %); caryophyllene (2,26%); 1,8-cineole (1,62%) (21) Kerala, India Dried rizhome (SD) Ar-turmerone (61,78%); curlone (12,48%); ar-curcumene (6,11%); phenol (3,45%); zingiberene (2,97%); β- sesquiphellandrene (2,81%); 1-ethyl-4-isobutylbenzene (2,62%); α–bisabolene (1,48%); benzene (1,47%); benzaldehyde (1,44%); 4-methyl-carbanilonitrile (1,09%) (27) Chittagong, Bangladesh Fresh rizhome (HD) Ar-turmerone (27,78%); tumerone (17,16%); curlone (13,82%); β-sesquiphellandrene (5,57%); 2-carene (4,78%); zingiberene (4,37%) (22) Chittagong, Bangladesh Fresh rizhome (HD) Carvacrol (21,14%); citral (13,91%); methyleugenol (7,31%); geraniol (6,99%); menthol (5,11%); caryophyllene oxide (4,14%) (22) Vlasotince, Serbia Turmeric powder (HD) α-Turmerone (26%); ar-turmerone (22,7%); curlone (16,8%); eugenol (8,0%); zingiberene (2,8%), β- sesquiphellandrene (2,8%); caryophyllene (2,0%); ar-curcumene (1,8%) (7) Guangxi, Sichuan, Chongqing, Yunnan, Cihna Fresh rizhome (HD) Ar-turmerone (10,43-42,85%); β-turmerone (5,13-39.54%); α-zingiberene (0,50-25,05%); ar-curcumene (1,74- 15,70%); β-sesquiphelladrene (4,94-11,3%); (28) Anhui market, China Rizhome powder (HD) Ar-turmerone (6,63-35.17%); curcumene (2.39–11.17%); zingiberene (4,27-20,93%); β-sesquiphelladrenen (7,85-18,1%); cendrenol (0,85-13.53%); α-bisabolene (1,01-12,19%) (9) Sichuan, Taiwan Dried rizhome (SDE) Ar-turmerone (24,7%); turmerone (29,5%); turmerol (25,7%) (29) Tehran, Iran Turmeric powder (HD) Ar-turmerone (24,61%); curlone (11,73%); tumerone (9,658%); β-sesquiphellandrene (7,589%); zingiberene (6,353%); curcumene (5,987%) (2) Pulau Reunion, Perancis Fresh rizhome (SD) α-Turmerone (21,4%); zingiberene (11,8%); terpinolene (15,8%); β-sesquiphellandrene (8,8%); ar-α-turmerone (7,7%); β-turmerone (7,1%), β-caryophyllene (5,7%), ar-curcumene (4,5%), 1,8-cineole (2,0%) (24)
Lanjutan Tabel 1... Lucknow, India Fresh rizhome (HD) α-Turmerone (23,35%); β-turmerone (19,74%); myrcene (10,51%); 1,8-cineole (5,93%); ar-curcumene (4,24%); ar-turmeron (3,87%); p-cymene (3,24%); γ-terpinene (2,32%); 231imachala-4-ol (1,41%) (30) Goias State, Brazil Fresh Rizhome (SD) α-Turmerone (42,6%); β-turmerone (16,0%); ar- turmerone (12,9%); α-phellandrene (6,5%); 1,8-cineole (3,2%); α-zingiberene (1,9%); β-sesquiphelladren (1,4%) (3) Umuarama, PR, Brazil Fresh rizhome (HD) Ar-turmerone (50,70% - 61,70%); β-turmerone (19,50% - 22,01%); 1.8-cineole (1,07% - 3,14%); α- zingiberene (2,77% - 4,41%); β-sesquiphellandrene (0,30% - 3,10%) (20) Gorakhpur, India Fresh rizhome (HD) Ar-turmerone (24,4 %); α-tumerone (20,5 %); β-turmerone (11,1%); β-sesquiphellandrene (2,9%); terpinolenen (2,7%); α-zingiberene (2,5%); 6R,7R-Bisabolone (1,7%) (1) Zongkhai, China Fresh rizhome (SD) Ar-turmerone (11,81%); zingiberene (8,62%); β-sesquuiphelladren (6,66%); curionen (4,08%); ar-curcumene (2,61%); (6) Aromaland Company, China Turmeric oil Ar-curcumene (16,4%); zingiberene (16,5%); β-sesquiphelladerene (14,4%); ar-turmerone (16,8%); turmerone (16,5%) (31) Peshawar, Khyber Pakhtunkhwa, Pakistan Dried Rizhome (SD) β-sesquiphellandrene (38,69%); α-curcumene (18,44%); p-mentha-1,4(8)-diene (16,29%); 7-hexamethyl (6,11%); α-caryophyllen (4,72%) (32) Lucknow, India Dried rizhome (SD) 1,8-Cineole (11,2%); α-turmerone (11,1%); caryophyllene (9,8%); ar-turmerone (7,3%), α-phellendrene (8,0%); sesquiphellendrene (7,1%); zingibrene (5,6%); β-turmerone (5,0%); ar-curcumene (4,4%); p- cymene (4,3%); β-bisabolene (2,8%) (23) Cameroon, Gerona, Spain Fresh rizhome (SD) α-Turmerone (43,1%); ar-turmerone (17,6%); β-turmerone (17,5%); α-phellandrene (3,9%) (33) Plaine-Magnien, Mauritius, Iraq Fresh rizhome (SD) α-Turmerone (31,4%); ar-turmerone (16,1%); turmerol (14,6%); terpinolene (11,0%); α-zingiberene (5,2%); β-sesquiphelladrene (4,8%); β-caryophyllene (3,5%) (5) Delapan daerah di Odisha, India Fresh rizhome (SD) Ar-turmerone (39,54 – 45,33%); curlone (9,76 -11,65%); α-phelladrene (5,48% - 7,66%); 1,8-cineole (3,24 – 5,52 %);  231imachalane (1,65 – 5,49%), α-copen-11-ol (2,32 – 5,38%) (17)
Lanjutan Tabel 1... Sembilan daerah di Roma, India Fresh rizhome (SD) α-Turmerone, curlone, ar-turmerone, β-sesquiphelladrenen, terpinolene, curcumene (16) Ondo, Nigeria Fresh rizhome (SD) α-Turmerone (35,9%); curlone (12,9%); ar-tumerone (10,0%); 1,8-cineole (10,3%); α-phellandrene (15,5%); p-cymene (2,1%); terpinolene (3,2%), α-zingiberene (2,0%); β-sesquiphellandrene (1,8%) (19) Delapan Provinsi di China Fresh rizhome (LEP) β-Turmerone (8,26 - 31.43%); α-turmeron (4,27 – 21,87%); ar-turmerone (0,92 -12,63%); zingiberene (1,94 - 13,19%); β-sesquiphelladrene (1,02-5,92%); beta-bisabolene (0,79-3,43%);    ar-curcumene (0,85-3,48%) (34) Zongkhai, China Fresh Rizhome (SD) Ar-turmerone (36,04 %); curlone (8,78 %); β-turmerone (7,05 %); 8,9-dehydro-9-formyl- cycloisolongifolene (5,69 %); β-sesquiphellandrene (5,39 %); germacrone (4,51 %); ar-curcumene (2,19 %); α-himachalene (2.14 %); ledane (2,13%) (35) Keterangan : HD: hydrodistillation SD: steam distillation LEP: liquid extraction pressurized SDE: steam distillation and solvent extraction
Uji aktivitas antioksidan menggunakan metode penangkapan radikal DPPH diperoleh nilai IC 50 trolox sebesar 10,72 μg/mL, sedangkan minyak atsiri yang paling poten diantara 20 sampel dari berbagai tempat tersebut  memiliki IC 50 4,37 μg/mL. Selain itu, kapasitas antioksidan minyak atsiri kunyit yang dievaluasi dengan penangkapan radikal ABTS juga menunjukkan potensi yang serupa. Hasil uji ABTS diperoleh nilai IC 50 trolox sebesar 11,42 μg/mL dan minyak atsiri yang paling poten memiliki nilai IC 50 sebesar 4,21 μg/mL. Nilai IC 50 yang lebih kecil dibandingkan dengan trolox sebagai kontrol positif menunjukkan bahwa minyak atsiri kunyit memiliki aktivitas antioksidan yang sangat poten. Terbukti secara in vitro minyak atsiri kunyit mampu menentralkan radikal DPPH dan ABTS lebih  banyak  dibandingkan  dengan  trolox  (kontrol  positif).  Pada  studi  sebelumnya  potensi antioksidan pada minyak atsiri kunyit dikaitkan dengan kandungan utama dari minyak atisiri kunyit yang  terdiri  dari  senyawa  ar-turmerone,  β-turmerone,  ar-curcumene,  β-sesquiphellandrene,  curlone, curdione yang memiliki persentase dominan dari senyawa lainnya [37].
Dalam penelitian lain yang dilaporkan oleh Avanco dkk. (2017) diperoleh hasil bahwa nilai IC 50 dari minyak atsiri kunyit yang dievaluasi dengan metode DPPH adalah 10,03 mg/mL. Hasil ini sangat  berbeda dengan  nilai IC 50 minyak  atsiri kunyit 4,50 mg/mL yang dilaporkan oleh  Gounder dan Lingamallu (2012). Dalam artikel Avanco dkk. (2017) dijelaskan bahwa hal tersebut dikarenakan oleh  perbedaan  persentase  dari  senyawa  ar-turmerone.  Oleh  karena  itu,  senyawa  ar-tumerone dikaitkan dengan kemampuan menangkap radikal DPPH dalam minyak atsiri [3].

## 3.3. Aplikasi Kemometrika untuk Mengelompokkan dan Melihat Korelasi antar Variabel pada Minyak Atsiri Kunyit
Kemometrika  merupakan  cabang  ilmu  pengetahuan  yang  mengaplikasikan  teori matematika  dan  statitistika  untuk  mengolah  data  kimia.  Kemometrika  banyak  berkaitan  dengan pengukuran data multivariat [13]. Data yang diperoleh dalam proses penelitian dengan banyaknya variabel  dapat  dianalisis  dengan  mudah  menggunakan  kemometrika.  Pemetaan  senyawa  yang sangat beragam dan banyak kemiripan dalam suatu sampel yang dianalisis menggunakan metode konvensional,  tidak  dapat  membuktikan  adanya  variasi  kualitas  atau  aktivitas  yang  terkandung dalam  sampel  tersebut.  Oleh  karena  itu,  kemometrika  yang  merupakan  ilmu  gabungan  antara statistika dan matematika dapat dijadikan sebagai solusi untuk determinasi keberagaman senyawa kimia yang ada di alam dengan berbagai macam aktivitasnya yang terus diteliti dan dikembangkan.
Minyak  atsiri  kunyit  yang  diisolasi  dari  rimpang  kunyit  dan  berasal  dari  tempat  yang berbeda  memiliki  profil  senyawa  yang  beragam  dengan  nilai  aktivitas  antioksidan  yang  juga bervariasi  [28],  untuk  mengilustrasikan  perbedaan  kandungan  konstituen  kimia  diantara  minyak atsiri  kunyit  dari  beberapa  tempat  dapat  menggunakan  metode  PCA  dan  CA.  Penelitian  dengan tujuan  tersebut  telah  dilakukan  oleh  beberapa  peneliti,  namun  belum  ada  desain  penelitian  yang mengkorelasikan profil senyawa minyak atsiri rimpang kunyit dengan nilai aktivitas antioksidannya menggunakan teknik PCA. Variasi analisis korelasi menggunakan PCA dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2. Variabel analisis korelasi menggunakan PCA (28) Sampel IC 50 (μg/mL) DPPH
IC 50 (μg/mL) ABTS Persentase kandungan senyawa (%) 1 2 3 4 5 6 7 8 C1 5,21 4,21 25,04 0 12,9 4,78 7,49 1,79 7,59 0,74 C2 7,42 6,22 0,92 0 0 0 0,67 1,94 25,18 3,27 C3 8,69 8,52 27,26 5,13 15,7 6,57 11,3 1,91 7,77 0,5 C4 9,31 8,61 19,02 15,04 0 9,08 10,26 1,95 6,2 9,66 C5 8,43 8,6 6,57 21,22 3,07 6,5 14,88 1,15 4,22 25,05 C6 7,3 7,75 23,59 18,51 4,35 12,89 8,09 0,56 1,59 9,64 C7 9,2 8,64 9,99 37,53 1,74 11,13 8,9 0,49 0 14,05 C8 5,59 4,79 12,76 38,32 1,71 13,28 6,35 0,69 0 9,75 C9 7,13 7,93 16,5 39,54 1,45 14,61 4,94 0,72 0 5,5 C10 4,74 5,44 15,34 21,23 5,8 8,61 0 10,11 4,06 15,7 C11 7,41 6,61 27,11 12,54 9,09 12,55 0,14 8,89 2,78 6,35 C12 7,41 6,47 23,1 6,93 14,8 6,8 11,78 0 0 7,81 C13 7,46 7,57 19,59 11,23 15,2 8,17 0 14,15 1,93 10,6 C14 7,13 8 22,2 13,53 10,75 8,74 0,07 10,36 2,03 10,43 C15 7,08 6,88 36,88 10,12 6,01 12,67 0 4,05 0 1,67 C16 5,83 6,2 11,92 42,54 1,21 14,25 5,78 0,75 0 8,25 C17 4,64 5,44 42,85 0 0 11,75 2,1 2,87 2,12 0,25 C18 4,37 5,17 35,28 18,15 3,13 16,24 2,62 0 0,8 0 Keterangan: 1: ar-turmerone 2: β-turmerone 3: ar-curcumene 4: curlone 5: β-sesquiphellandrene 6: cubenol 7:    germacrone 8: α-zingiberene
PCA  telah  banyak  digunakan  sebagai  teknik  analisis  yang  mampu  mereduksi  dimensi dataset original dengan menjelaskan korelasi antar nilai variabel yang begitu banyak menjadi nilai variabel  yang  lebih  kecil  dengan  sebutan  principal  components  (PCs)  tanpa  menghilangkan  banyak informasi [9]. Setelah mengurangi dimensi variabel yang kompleks menjadi PCs, PCA score plot akan mampu  menampilkan  pemisahan  kelas,  sedangkan  untuk  melihat  korelasi  antar  variabel  akan dinterpretasikan dalam loading plot.
Meskipun  PCA  dapat  menampakkan  beberapa  kelompok  dalam  analisis data  multivariat, akan tetapi PCA tidak selalu sukses melakukannya. Ada metode lain yaitu CA yang memiliki tujuan eksplisit untuk mencari kelompok [38]. CA merupakan suatu metode untuk membagi sekelompok objek  (sampel)  ke  dalam  suatu  kelompok  (kelas),  sehingga  objek  yang  sejenis  akan  berada  dalam kelompok  yang  sama  [9].  Pengelompokan  didasarkan  pada  perolehan  jarak  Euclidean  dan  dapat ditampilkan dalam suatu dendogram. Jika beberapa sampel terklasifikasi dalam 1 kluster itu berarti bahwa  sampel  tersebut  memiliki  jarak  Euclidean  yang  dekat  dan  mengindikasikan  bahwa  sampel tersebut memiliki kemiripan [13].
Dalam  penelitian  yang  dilakukan  oleh  Li  dkk.,  (2009)  dari  33  sampel  simplisia  rimpang kunyit yang diperoleh dari berbagai daerah di China dikelompokkan menggunakan teknik PCA dan CA  berdasarkan  variasi  kromatogram  yang  diperoleh  dari  hasil  identifikasi  minyak  atsiri  kunyit
menggunakan GC-MS. Menurut hasil analisis, pengelompokan menggunakan menggunakan PCA dan CA menunjukkan kemiripan [39].
Beberapa  penelitian  yang  melakukan  evaluasi  aktivitas  antioksidan  minyak  atsiri  kunyit mengkorelasikan  aktivitas  antioksidannya  dengan  senyawa  kimia  yang  memiliki  persentase tertinggi  dalam  minyak  atsiri  tanpa  membuktikannya  dengan  bantuan  metode  analisis  tertentu. Seperti yang dilaporkan Legault dan Pichette (2007), potensi antioksidan pada minyak atsiri kunyit dikaitkan  dengan  kandungan  utama  dari  minyak  atisiri  kunyit  yang  terdiri  dari  ar-turmerone,  β- turmerone,  ar-curcumene,  β-sesquiphellandrene,  curlone,  dan  curdione.  Menurut  penelitian  yang  telah dilakukan  oleh  Singh  dkk.,  (2010)  melaporkan  hasil  yang  serupa  bahwa  minyak  atsiri  kunyit memiliki kapasitas antioksidan yang tinggi dan dikorelasikan dengan senyawa  ar-tumerone dan α- turmerone sebagai komponen utama yang banyak terkandung dalam minyak atsiri kunyit. Penjelasan terkait  hal  ini  dalam  beberapa  literatur  belum  didukung  dengan  analisis  menggunakan kemometrika.
Kemometrika  dapat  diaplikasikan  untuk  melihat  korelasi  antar  variabel.  Menurut  hasil penelusuran  literatur,  penulis  tidak  menemukan  desain  penelitian  yang  sesuai  dengan  tujuan  ini. Oleh karena itu, penulis melakukan analisis kemometrika menggunakan metode PCA untuk melihat senyawa  yang  berkorelasi  terhadap  aktivitas  antioksidan  dengan  menggunakan  variasi  profil senyawa minyak  atsiri kunyit  dalam penelitian Zhang dkk. (2017 b ) [28]. Variabel yang digunakan untuk analisis PCA dalam hal ini adalah senyawa mudah menguap yang terkandung dalam minyak atsiri  kunyit  dan  aktivitas  antioksidan  yang  diidentifikasi  menggunakan  metode  pengangkapan radikal  DPPH  dan  ABTS.  Senyawa  yang  dianalisis  merupakan  senyawa  utama  yaitu  sejumlah  8 senyawa yang memiliki persentase dominan. Diantaranya adalah senyawa ar-turmerone, β-turmerone, ar-curcumene, curlone, β-sesquiphellandrene, cubenol, germacrone, dan α-zingiberene. Data analisis korelasi variabel  terdapat  dalam  Tabel  2.  Jenis  matriks  yang  digunakan  dalam  analisis  PCA  adalah “correlation” karena variabel yang dianalisis memiliki satuan yang berbeda. Korelasi antar variabel dapat dilihat dalam loading plot yang ditampilkan pada Gambar 3.
Gambar 3. Loading plot hasil analisis PCA profil senyawa dan aktivitas antioksidan minyak atsiri
Sudut antar vektor menunjukkan korelasi antar variabel. Menurut loading plot yang diperoleh dari  hasil  analisis  kemometrika  PCA,  variabel  aktivitas  antioksidan  (IC 50 )  hasil  uji  menggunakan metode penangkapan radikal DPPH dan ABTS berpencar membentuk sudut yang dekat dengan 180 0 yang menunjukkan korelasi negatif terhadap senyawa ar-turmerone. Hal ini berarti bahwa semakin besar  konsentrasi  senyawa  ar-turmerone  dalam  minyak  atsiri  kunyit  maka  semakin  kecil  nilai  IC 50 menurut  hasil  uji  penangkapan  radikal  DPPH  dan  ABTS atau  dapat  dijelaskan  bahwa  kenaikan konsentrasi  senyawa  ar-turmerone  berbanding  lurus  dengan  potensi  aktivitas  antioksidan  minyak atsiri  kunyit.  Hasil  ini  sesuai  dengan  penjelasan  dalam  penelitian  Avanco  dkk.  (2017)  yang menyatakan bahwa penangkapan radikal DPPH dikorelasikan dengan adanya senyawa ar-turmerone dalam minyak atsiri.

## 4. KESIMPULAN
Analisis  data  multivariat  dari  minyak  atsiri  kunyit  yang  meliputi  profil  senyawa  dan aktivitas antioksidan dapat dikelompokkan menggunakan kemometrika dengan teknik analisis PCA dan  CA.  Identifikasi  senyawa  mudah  menguap  dalam  minyak  atsiri  kunyit  yang  berkorelasi terhadap aktivitas antioksidan menurut data penelitian Zhang dkk, (2017) dianalisis menggunakan matriks “correlation” dengan teknik PCA diperoleh hasil bahwa tingginya kandungan senyawa  ar- turmerone  dalam  minyak  atsiri  kunyit  berbanding  lurus  dengan  potensi  antioksidan  minyak  atsiri kunyit. Menurut hasil uji aktivitas antioksidan yang telah dilakukan peneliti sebelumnya, minyak atsiri kunyit dapat digunakan sebagai antioksidan alami yang poten karena memiliki nilai IC 50 yang lebih kecil dari control positif (trolox).
Ucapan  terima  kasih:  Penulis  mengucapkan  terima  kasih  yang  sebesar-besarnya  kepada  seluruh peneliti yang telah melakukan penelitian yang terkait dalam review ini. Penulis juga berterima kasih kepada  Universitas  Gadjah  Mada  atas  fasilitas  open  access  e-journal  dalam  beberapa  database  yang sangat dibutuhkan dalam penelusuran literatur untuk penulisan review.

## Referensi
1. Singh, G., Kapoor, I.P.S., Singh, P., Heluani, C.S. De, Lampasona, M.P. De & Catalan, C.A.N. Comparative study of chemical composition and antioxidant activity of fresh and dry rhizomes of turmeric (Curcuma longa Linn.), Food and Chemical Toxicology, 2010, 48(4):1026–1031.
2. Nasiri, S.L., Hosseini, S.E. & Shekarchi, M., Chemical Composition and Antioxidant Activity of Essential Oil from Turmeric (Curcuma longa) Rhizomes, International Journal of Food and Safety, 2015, 6(3):185–196.
3. Avanco, G.B., Ferreira, F.D., Mallmann, C.A., Brugnari, T., Abreu Filho, B.A. de, Mikcha, J.M.G. & Machinski, M. Curcuma longa L. essential oil composition, antioxidant effect, and effect on Fusarium verticillioides and fumonisin production, Food Control, 2017, 73:806–813.
4. Dosoky,  N.S.  &  Setzer,  W.N.  Chemical  composition  and  biological  activities  of  essential  oils  of  curcuma species, Nutrients, 2018, 10(9):10–17.
5. Jugreet,  B.S.,  Mahomoodally,  M.F.,  Sinan,  K.I.,  Zengin,  G.  &  Abdallah,  H.H.  Chemical  variability, pharmacological potential, multivariate and molecular docking analyses of essential oils obtained from four medicinal plants, Industrial Crops and Products, 112394, 2020.
6. Zhang,  L.,  Yang,  Z.,  Chen,  F.,  Su,  P.,  Chen,  D.,  Pan,  W.,  Fang,  Y.,  Dong,  C.,  Zheng,  X.  &  Du,  Z.,  2017 a ,
Composition and bioactivity assessment of essential oils of Curcuma longa L. collected in China, Industrial
Crops and Products, 2020, 109, August, 60–73.
7. Stanojević, J.S., Stanojević, L.P., Cvetković, D.J. & Danilović,  B.R. Chemical Composition, Antoxidant and Antimicrobial Activity of the Turmeric Essential Oil (Curcuma longa L.), Advanced Technology, 2015, 4(2): 19–25.
8. Ferreira, F.D., Kemmelmeier, C., Arrotéia, C.C., Da Costa, C.L., Mallmann, C.A., Janeiro, V., Ferreira, F.M.D., Mossini, S.A.G., Silva, E.L. & Machinski, M., Inhibitory effect of the essential oil of Curcuma longa L. and curcumin on aflatoxin production by Aspergillus flavus Link, Food Chemistry, 2013, 136(2):789–793.
9. Hu, Y., Kong, W., Yang, X., Xie, L., Wen, J. & Yang, M., 2014, GC-MS combined with chemometric techniques for the  quality  control  and  original  discrimination  of  Curcumae  longae  rhizome:  Analysis  of  essential  oils,  Journal  of Separation Science, 37(4):404–411.
10. Leverve, X., Oxidative stress and antioxidants, Cahiers de Nutrition et de Dietetique, 2009, 44(5):219–224.
11. Saccol, E.M.H., Londero, É.P., Bressan, C.A., Salbego, J., Gressler, L.T., Silva, L.V.F., Mourão, R.H.V., Oliveira, R.B.,  Llesuy,  S.F.,  Baldisserotto,  B.  &  Pavanato,  M.A.  Oxidative  and  biochemical  responses  in  Brycon amazonicus anesthetized and sedated with Myrcia sylvatica (G. Mey.) DC. and Curcuma longa L. essential oils, Veterinary Anaesthesia and Analgesia, 2017, 44(3):555–566.
12. Al-Rubaye, A.F., Hameed, I.H. & Kadhim, M.J. A Review: Uses of Gas Chromatography-Mass Spectrometry (GC-MS) Technique for Analysis of Bioactive Natural Compounds of Some Plants, International Journal of Toxicological and Pharmacological Research, 2017, 9(01):81-85.
13. Gad,  H.A.,  El-Ahmady,  S.H.,  Abou-Shoer,  M.I.  &  Al-Azizi,  M.M.  Application  of  chemometrics  in authentication of herbal medicines: A review, Phytochemical Analysis, 2013, 24(1):1–24.
14. Fiehn, O., Kopka, J., Dörmann, P., Altmann, T., Trethewey, R. & Willmitzer, L., Metabolite profiling for plant functional genomics, Nature Biotechnology, 2000, 18(11):1157–61.
15. Lisec, J., Schauer, N., Kopka, J., Willmitzer, L. & Fernie, A.R. Gas chromatography mass spectrometry-based metabolite profiling in plants, Nature Protocols, 2006, 1(1):387–396.
16. Sandeep, I.S., Kuanar, A., Akbar, A., Kar, B., Das, S., Mishra, A., Sial, P., Kumar, P., Nayak, S. & Mohanty, S. Agroclimatic  zone  based  metabolic  profiling  of  turmeric  (Curcuma  Longa  L.)  for  phytochemical  yield optimization, Industrial Crops & Products, 2016, 85:229–240.
17. Sahoo, A., Kar, B., Jena, S., Dash, B., Ray, A., Sahoo, S. & Nayak, S. Qualitative and Quantitative Evaluation of Rhizome Essential Oil of Eight Different Cultivars of Curcuma longa L. (Turmeric), Journal of Essential Oil-Bearing Plants, 2019, 22(1): 239–247.
18. Sandeep,  I.S.,  Das,  S.,  Nayak,  S.  &  Mohanty,  S.  Chemometric  Profile  of  Curcuma  longa  L  .  Towards Standardization of Factors for High Essential Oil Yield and Quality, Proceedings of the National Academy of Sciences, India Section B: Biological Sciences, 2016b, 1-6.
19. Oyemitan,  I.A.,  Elusiyan,  C.A.,  Onifade,  A.O.,  Akanmu,  M.A.,  Oyedeji,  A.O.  &  McDonald,  A.G. Neuropharmacological  profile  and  chemical  analysis  of  fresh  rhizome  essential  oil  of  Curcuma  longa (turmeric) cultivated in Southwest Nigeria, Toxicology Reports, 2017, 4:391–398.
20. Ferrari,  M.P.  de  S.,  Queiroz,  M.  dos  S.,  Andrade,  M.M.  de,  Alberton,  O.,  Gonçalves,  J.E.,  Gazim,  Z.C.  & Magalhães,  H.M.  Substrate-associated  mycorrhizal  fungi  promote  changes  in  terpene  composition, antioxidant activity, and enzymes in Curcuma longa L. acclimatized plants, Rhizosphere, 2020, 100191.
21. Naz, S., Ilyas, S., Parveen, Z. & Javed, S. Chemical Analysis of Essential Oils from Turmeric (Curcuma longa) Rhizome Through GC-MS, Asian Journal of Chemistry, 2010a, 22(4):3153–3158
22. Chowdhury,  J.U.,  Nandi,  N.C.,  Bhuiyan,  M.N.I.  &  Mobarok,  M.H.,  Essential  Oil  Constituents  of  The Rhizomes of Two Types of Curcuma longa of Bangladesh, Bangladesh Journal of Scientific and Industrial
Research, 2008, 43(2):259–266.
23. Raina,  V.K.,  Srivastava,  S.K.,  Jain,  Ł.N.,  Ahmad,  A.,  Syamasundar,  K.  V  &  Aggarwal,  K.K.,  Essential  oil composition of Curcuma longa L . cv . Roma from the plains of northern India, Flavour and Fragance Journal, 2002, 17: 99–102.
24. Taylor,  P.,  Chane-ming,  J.,  Vera,  R.,  Chalchat,  J.,  Cabassu,  P.  &  Chane-ming,  J.  Chemical  Composition  of Essential  Oils  from  Rhizomes  ,  Leaves  and  Flowers  of  Curcuma  longa  L.  from  Reunion  Island,  Journal Essential Oil. 2002, 14:45–48.
25. Schaich, K.M., Tian, X. & Xie, J. Reprint of Hurdles and pitfalls in measuring antioxidant efficacy: A critical evaluation of ABTS, DPPH, and ORAC assays, Journal of Functional Foods, 2015, 18:782–796.
26. Rohman, A., Widodo, H., Lukitaningsih, E., Windarsih, A.,  Rafi, M. & Nurrulhidayah, A.F. Review on in vitro  antioxidant  activities  of  curcuma  species  commonly  used  as  herbal  components  in  Indonesia,  Food Research, 2020, 4(2):286–293.
27. Liju,  V.B.,  Jeena,  K.  &  Kuttan,  R.,  An  evaluation  of  antioxidant,  anti-inflammatory,  and  antinociceptive activities of essential oil from Curcuma longa. L, Indian Journal of Pharmacology, 2011, 43(5):526–531.
28. Zhang, L., Yang, Z., Wei, J., Su, P., Chen, D., Pan, W., Zhou, W., Zhang, K., Zheng, X., Lin, L., Tang, J. & Du, Z., Contrastive analysis of chemical composition of essential oil from twelve Curcuma species distributed in China, Industrial Crops and Products, 2017b, 108:17–25.
29. Tsai, S.-Y., Huang, S.-J., Chyau, C.-C., Tsai, C.-H., Weng, C.-C. & Mau, J.-L. Composition and antioxidant properties of essential oils from Curcuma rhizome, Asian J.Arts Sci., 2011, 2(1):57–66.
30. Bansal, R.P., Bahl, J.R., Garg, S.N., Naqvi, A.A., Kumar, S. & Plants, A. Differential Chemical Compositions of the Essential Oils of the Shoot Organs , Rhizomes and Rhizoids in the Turmeric Curcuma longa Grown in Indo-Gangetic Plains, Pharmaceutical Biology, 2002, 40(5):384–389.
31. Yu, Y., Chen, F., Wang, X., Adelberg, J., Barron, F.H., Chen, Y. & Chung, H.Y.  Evaluation of Antioxidant Activity  of  Curcumin-Free  Turmeric  (Curcuma  longa  L.)  Oil  and  Identification  of  Its  Antioxidant Constituents, American Chemical Society, 2008, 14:152-164.
32. Hassan, W., Gul, S., Rehman, S., Kanwal, F., Siddique, M., Fazal, H., Shah, Z., Rahman, A.U. & Bt, J.  Gas chromatography  coupled  with  mass spectrometric  characterization  of  Curcuma  longa :  Protection  against pathogenic microbes and lipid peroxidation in rat’s tissue homogenate, 2003, 29(2):615–621.
33. Sado, K.S.L., Belletti, N., Tchoumbougnang, F., Essia-Ngang, J.J., Montanari, C., Tabanelli, G., Lanciotti, R. & Gardini, F., Effect of mild heat treatments on the antimicrobial activity of essential oils of Curcuma  longa, Xylopia aethiopica, Zanthoxylum xanthoxyloides and Zanthoxylum leprieurii against Salmonella enteritidis, Journal of Essential Oil Research, 2015, 27(1):52–60.
34. Qin,  N.Y.,  Yang,  F.Q.,  Wang,  Y.T.  &  Li,  S.P.  Quantitative  determination  of  eight  components  in  rhizome (Jianghuang)  and  tuberous  root  (Yujin)  of  Curcuma  longa  using  pressurized  liquid  extraction  and  gas chromatography – mass spectrometry, Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 2007, 43:486–492.
35. Zheng, Y., Pan, C., Zhang, Z., Luo, W., Liang, X., Shi, Y., Liang, L., Zheng, X., Zhang, L. & Du, Z. Antiaging effect of Curcuma longa L. essential oil on ultraviolet-irradiated skin, Microchemical Journal, 2020, 104608.
36. Gounder, D.K. & Lingamallu, J. Comparison of chemical composition and antioxidant potential of volatile oil from fresh, dried and cured turmeric (Curcuma longa) rhizomes, Industrial Crops and Products, 2012, 38(1):124–131.
37. Legault,  J.  &  Pichette,  A.  Potentiating  effect  of  β-caryophyllene  on  anticancer  activity  of  α-humulene, isocaryophyllene and paclitaxel, Journal of Pharmacy and Pharmacology, 2007, 59(12):1643–1647.
38. Miller,  J.C.  &  Miller,  J.N.  Statistic  and  Chemometrics  for  Analytical  Chemistry,  Fifth  Edition,  Ashford  Colour
Press, Hants, 2005.
39. Li, S.-Y. & Li, S.-P. Antioxidant activities of essential oil of Curcuma longa and Curcuma wenyujin, International Journal of Essential Oil Therapeutics, 2009, 3:31–34.
© 2020 by the authors. Submitted for possible open access publication under the terms and  conditions  of  the  Creative  Commons  Attribution  (CC  BY)  license (http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/).