## EKSTRAK COCOR BEBEK TERHADAP KADAR TNF-α PADA PLASENTA, TEKANAN DARAH, ALBUMIN URINE PADA LUPUS BUNTING

## Sofia Mawaddah 
Jurusan Kebidanan Poltekkes Kemenkes Palangka Raya
ARTICLE INFO ABSTRACT Article history Submitted : 2019-01-09 Revised : 2019-02-22 Accepted : 2019-12-17 Keywords: Cocor duck extract Lupus Cocor  duck  plants  contain  alkaloids,  flavonoids,  phenolic  compounds,  tannins, vitamins,  macro  and  micro  elements,  lemon  acid,  apple  acid,  vitamin  C,  quercetin-3- diarabenoside  and  kaemferol-3-glucoside.  Inside  the  duck  duck,  there  is  a  flavonoid which  is  a  natural  phenolic  compound  which  has  potential  as  an  antioxidant  and  has bioactivity  as  a  medicine  or  as  an  herbal  medicine  to  treat  LES.  The  aim  of  the  study was to determine the effect of duck cocor extract on TNF-α levels in the placenta, blood pressure and urine albumin in the Balb/c  lupus pregnant mice  model. Female BALB/c mice were injected pristan 0.5 ml, after 12 weeks of ANA examination, if the test was positive  then  the  mice  were  pregnant.  Pregnant  lupus  mice  were  given  Coco  Duck extract in three different doses: 10.5 mg/day, 21 mg/day and 42 mg/day orally every day for  10  days  of  pregnancy.  The  percentage  of  TNF-α  was  examined  by  the  ELISA method,  MAP  was  examined  using  COD  and  urine  albumin  was  examined  by  the ELISA  method.  The  results  of  the  study  are  there  are  effects  of  giving  cocor  duck extract on TNF-α levels. Doses of 10.5 mg/day and 42 mg/day have the ability to reduce TNF-α levels. Meanwhile, in blood pressure and urine albumin, Cocor Duck extract was not able to reduce significantly. Cocor duck leaf extract can significantly reduce TNF-α levels.  Cocor  duck  leaf  extract  is  unable  to  reduce  urine  albumin  levels  and  blood pressure. The remedy for  dealing  with LES is very  limited, therefore  extra cocor duck leaves can be used as an alternative treatment for LES. Kata Kunci: Ekstrak cocor bebek Lupus Tanaman cocor bebek mengandung alkaloid, flavonoid, senyawa fenolik, tanin, vitamin, makro  dan  mikro  elemen,  zat  asam  lemon,  zat  asam  apel,  vitamin  C,  quercetin-3- diarabenoside  dan  kaemferol-3-glukoside.  Di  dalam  cocor  bebek  terdapat  flavonoid yang  termasuk  senyawa  fenolik  alam  yang  potensial  sebagai  antioksidan  dan mempunyai bioaktivitas sebagai obat atau sebagai obat herbal untuk mengatasi penyakit LES. Tujuan penelitian mengetahui pengaruh ekstrak cocor bebek terhadap kadar TNF- α  pada  plasenta,  tekanan  darah  dan  albumin  urine  pada  model  mencit  Balb/c  lupus bunting.  Mencit  Balb/c  betina  diinjeksi  pristan  0,5  ml,  setelah  12  minggu  dilakukan pemeriksaan  ANA,  jika  tes  positif  maka  mencit  dibuntingkan.  Mencit  lupus  bunting diberi  ekstrak  cocor  bebek  dengan  tiga  dosis  yang  berbeda:  10,5  mg/hari,  21  mg/hari dan 42 mg/hari secara oral setiap hari selama 10 hari masa kehamilan. Persentase TNF- α  diperiksa  dengan  metode  ELISA,  MAP  diperiksa  dengan  menggunakan  COD  dan albumin  urin  diperiksa  dengan  metode  ELISA.  Hasil  penelitian  yaitu  ada  pengaruh pemberian  ekstrak  cocor  bebek  terhadap  kadar  TNF-α.  Dosis  10,5  mg/hari  dan  42 mg/hari mempunyai kemampuan terhadap penurunan kadar TNF-α. Pada tekanan darah dan  albumin  urin,  ekstrak  cocor  bebek  tidak  mampu  menurunkan  secara  signifikan. Ekstrak daun cocor bebek mampu menurunkan kadar TNF-α secara signifikan. Ekstrak daun  cocor  bebek  tidak  mampu  menurunkan  kadar  albumin  urin  dan  tekanan  darah. Obat untuk  mengatasi penyakit LES sangat terbatas, oleh  karena  itu  ekstra daun  cocor bebek dapat dioalh sebagai salah satu alternatif pengobatan penyakit LES.
 Corresponding Author:
Sofia Mawaddah Jurusan Kebidanan Poltekkes Kemenkes Palangka Raya Telp. 082251474861 Email: sofizline@gmail.com

## PENDAHULUAN
Terganggunya  mekanisme  pengaturan imun  seperti  eliminasi  dari  sel-sel  imun  yang mengalami apoptosis dan penumpukan kompleks  imun  berperan  penting  terhadap
terjadinya  LES.  Penumpukan  kompleks  imun di  jaringan  dapat  mengakibatkan  terjadinya inflamasi yang dapat mengakibatkan terjadinya kerusakan  jaringan.  Inflamsi  dapat  lokal,

## Jurnal Kesehatan Manarang
Volume 5, Nomor 2, Desember 2019, pp. 87 – 94 ISSN 2528-5602 (Online), ISSN 2443-3861 (Print) Journal homepage: http://jurnal.poltekkesmamuju.ac.id/index.php/m
sistemik,  akut  dan  kronis  (Baratawijaya  & Rengganis, 2014).
Penderita  LES  didominasi  oleh  wanita usia  reproduktif  dibandingkan  pria  dengan rasio  9:1.  Hal  ini  disebabkan  karena  pengaruh hormon  seks  wanita  terhadap  aspek  sistem imun  tubuh.  Hormon  seks  wanita  yaitu estrogen  dapat  memfasilitasi  respon  humoral yang  menyebabkan  terjadinya  peningkatan proliferasi  dan  produksi  sel  B.  Estrogen dengan  kosentrasi  tinggi  akan  menghambat respon  sel  T,  seperti  proliferasi  produksi  IL-2. Hal ini menunjukkan bahwa sel T lebih sensitif terhadap estrogen. Estrogen dapat memperburuk  kondisi  pasien  LES  dengan memperpanjang  kelangsungan  hidup  dari  sel- sel  autoimun,  meningkatkan  sel  Th2  dan merangsang sel  B untuk  memproduksi autoantibodi.  Penghambatan  respon  Th1  dan peningkatan  ekspresi  CD40  pada  sel  T  lupus menyebabkan peningkatan Th2 dan mengakibatkan  sel  B  menjadi  hiperaktif (Josephine, 2014).
Sistemik  Lupus  Eritematosus  adalah penyakit  kronis  pada  system  autoimun  yang terjadi terutama pada wanita usia subur. Semua kehamilan dengan wanita yang menderita LES dianggap  sebagai  kehamilan  dengan  resiko tinggi. Terlebih lagi, kehamilan dapat meyebabkan  flare  (kekambuhan)  aktivitas penyakit lupus  (Josephine, 2014). Sekitar 75% kehamilan  mencapai  masa  kelahiran,  25% diantaranya prematur, 25% sisanya mengalami keguguran. Resiko keguguran lebih tinggi pada wanita dengan antibodi antifosfolipid, penyakit ginjal  aktif    atau  hipertensi,  atau  kombinasi lainnya. Selama kehamilan antibodi antifosfolipid  dapat  melintasi  plasenta  dan menyebabkan  trombositopenia  pada  janin, namun  biasanya  bayi  tetap  dapat  lahir  dengan aman.
Prognosa  ibu  hamil  yang  menderita LES  ditentukan  pada  saat  konsepsi,  bila konsepsi  terjadi  pada  masa  remisi  maka prognosanya  akan  lebih  baik.  Penderita  LES yang telah mengalami masa remisi lebih dari 6 bulan sebelum masa kehamilannya mempunyai resiko  kambuh  (eksaserbasi)    25%  pada  masa kehamilan  dibandingkan  dengan  masa  remisi LES  sebelum  hamil  kurang  dari  6  bulan  yaitu menjadi  50%  dan  memperburuk  kondisi kehamilan.
Autoantibodi  yang  terbentuk  pada  ibu yang  menderita  LES  dapat  memberikan
dampak  yang  buruk  pada  plasenta  dan  janin sehingga  dapat  berakhir  dengan  kegagalan kehamilan  (Varghese et  al ,  2011).  Komplikasi umum pada kehamilan yang sering terjadi pada wanita  yang  menderita  LES  ialah  adanya faktor prediktor diantaranya hipertensi, preeklamsi,  eklamsi,  perdarahan  anterpartum, IUGR,  prematuritas,  abortus  dan still  birth serta  diabetes  dalam  kehamilan  (Varghese et al , 2015).
Kondisi  penyakit  LES  yang  buruk pada  wanita  hamil  akan  mengakibatkan terjadinya flare pada kehamilan sehingga dapat berpengaruh  terhadap  kondisi  ibu  maupun janin. Flare ialah  kekambuhan  atau  serangan yang  tidak  terduga  dari  penyakit  setelah periode  remisi. Flare pada penyakit  LES  pada kehamilan  merupakan  prediktor  yang  sangat kuat  berhubungan  dengan  dampak  buruk  yang terjadi  selama  kehamilan  seperti  pengakhiran kehamilan, kelahiran prematur dan Intrauterine  Growth  Retardation (IUGR).  Ibu hamil  dengan  LES  mempunyai  risiko  tinggi terjadi  Preeklamsi.  Komplikasi  yang  terjadi pada  ibu  dan  janin  adalah  stroke,  kelahiran prematur,  bahkan  kematian  (Arfaj  &  Khail, 2014).

## METODE PENELITIAN Jenis Penelitian
Jenis  penelitian  yang  digunakan  adalah True Experimental (Eksperimen sesungguhnya)
dengan  pendekatan Post  Test  Only  Control Group Desain.

## Lokasi dan Waktu Penelitian
Penelitian ini berlokasi di Universitas Brawijaya  Malang  (UB)  dan  RS  dr.  Soetomo Surabaya.  Penelitian  dilaksanakan  pada  bulan Mei – Oktober tahun 2015.

## Populasi dan Sampel
Populasi  penelitian  adalah  mencit Balb/c  lupus  betina.  Jumlah  sampel  pada penelitian ini yaitu 25 mencit galur Balb/c.
Kriteria  inklusi  subjek  penelitian adalah  Mencit  galur  Balb/c  bunting,  umur  26- 28  minggu.  Kriteria  eksklusi  adalah  Mencit mati setelah injeksi pristan sebelum dibuntingkan.
Pengumpulan Data Peneliti
menggunakan hewan
percobaan  dengan  proses  sebagai  berikut.
Hewan  percobaan  yang  digunakan  adalah mencit bunting galur BALB/c betina yang (20- 25  gr)  usia  10  -  12  minggu  sejumlah  20  ekor
yang  diperoleh  dari  LPPT  Universitas  Islam Negeri  (UIN)  Malang,  mencit  dikelompokkan menjadi 5 kelompok:
Kelompok  kontrol  negatif  (mencit bunting  sehat),  kelompok  kontrol  positif (mencit  bunting  lupus),  kelompok  perlakuan  I (mencit  bunting  lupus  +  ekstrak  cocor  bebek dosis  10,5  mg/hari),  kelompok  perlakuan  II (mencit  bunting  lupus  +  ekstrak  cocor  bebek dosis  21  mg/hari)  dan  kelompok  perlakuan  III (mencit  bunting  lupus  +  ekstak  cocor  bebek dosis 42 mg/hari). Mencit di adaptasi selama 7 hari, kemudian diinjeksi Pristan 0,5 mg setelah lebih dari 12 minggu dan mempunyai hasil tes ANA  yang  positif  maka  mencit  dibuntingkan. Pada  hari  ke  9  gestasi  mencit  diberi  ekstrak daun cocor bebek.
Pembuatan mencit model lupus dilakukan dengan cara menyuntikan Pristan 0,5 ml  secara  intraperitonal  satu  kali  selama penelitian dan dilakukan setelah masa aklimasi selesai  yaitu  setelah  hari  ke  7.  Proses pembuntingan  dilakukan  3  tahap:  LeeBoot Effect,  Pheromon  Effect  dan  Whitten  Effect. Mencit  dikawinkan  dengan  mencit  jantan dengan  perbandingan  2  mencit  betina  dan  1 mencit jantan  selama 1 malam. Plug vagina  di periksa pada pagi hari. Betina yang menunjukkan plug vagina positif (VP+) segera dipisahkan  dengan  jantan.  Hari  terlihatnya
VP+  dianggap  sebagai  hari  ke  1  gestasi (Tanko, 2014).
Daun  cocor  bebek  kering  diperoleh dari  UPT  Materia  Medika  Batu  Malang.  Daun kering  cocor  bebek  diproses  dengan  metode maserasi  dengan  pelarut  Etanol  96%  (Miyake, 2011)  di  laboratorium  farmakologi  FKUB. Hasil  ekstraksi  berupa  esktrak  kental  (pasta) dan di encerkan dengan normal saline. Metode maserasi adalah proses mengekstrak menggunakan  pelarut  dengan  beberapa  kali pengocokan atau pengadukan pada suhu kamar (Bahua, et al , 2011).
Ekstrak  cocor  bebek  yang  telah diencerkan diberikan secara oral dengan sonde khusus  selama 10 hari/masa  kehamilan mencit dengan  dosis  10,5  mg/hari,  21  mg/hari,  42 mg/hari  (Yu et  al ,  2018).  Pengukuran  kadar TNF-α dilakukan  menggunakan  metode ELISA  (LEGEND  MAX TM ELISA  kit  with pre-coated  plates,  Mouse  TNF-α  cat.  No 430907)  dan  hasil  ukur  menggunakan  ratio dengan satuan pg/Ml.
Pengukuran
tekanan darah menggunakan  alat  Kent  Scientific  CODA. Pengukuran  tekanan  darah  dihitung  dengan cara  menghitung  rata-rata  tekanan  darah
sistolik lalu dibandingkan dengan rata-rata dari kelompok  kontrol  (Ryan et  al ,  2016). Pengukuran  Albumin  Urin  menggunakan ELISA  (Elabscience,  USA,  nomor  katalog  E- EL-M0656).

## Pengolahan dan Analisis Data
Semua  data  dihitung  mean  ±  SD.  Data  diuji normalitas, dilanjutkan uji statistik menggunakan uji one way annova.

## HASIL PENELITIAN
Berdasarkan  gambar 1 diketahui kadar TNF-α  yang  terbentuk  pada  plasenta  mencit Balb/c  lupus  bunting  rata-rata  TNF-α  yang dihasilkan  oleh  kelompok  mencit  lupus bunting  paling  tinggi  terdapat  pada  kelompok kontrol  positif  dengan  rerata  sebesar  21.175  ± 2.368,  diikuti  oleh  kelompok  perlakuan pemberian  ekstrak  cocor  bebek  dosis  21  mg dengan  rerata  18.333  ±  1.106.  Kemudian, kelompok  perlakuan  pemberian  ekstrak  cocor bebek  dosis  10.5  mg  dengan  rerata  sebesar 17.167 ± 0.751. Selanjutnya, kelompok mencit bunting  sehat  dengan  rerata  sebesar  15.975  ± 3.223  dan  paling  rendah  persentase  TNF-α sebesar  13.067  ±  0.551  dihasilkan  oleh kelompok  mencit  lupus  bunting  diberi  ekstrak cocor bebek dosis 42 mg.
Gambar 1. Rata-Rata TNF-α pada Mencit
Balb/c Lupus Bunting berdasarkan Pemberian Esktrak Cocor Bebek
Berdasarkan  gambar  2  diketahui  rata- rata  tekanan  darah  yang  dihasilkan  oleh kelompok mencit lupus bunting tanpa pemberian  ekstrak  cocor  bebek  paling  tinggi sebesar  103.5  ±  22.782.  Kemudian,  paling tinggi  kedua  adalah  kelompok  mencit  lupus bunting diberi ekstrak cocor bebek dosis 42 mg menghasilkan  rata-rata  tekanan  darah  sebesar 88.333 ± 9.238. Kemudian, paling tinggi ketiga adalah  kelompok  mencit  lupus  bunting  diberi
ekstrak cocor bebek dosis 10.5 mg menghasilkan  rata-rata  tekanan  darah  sebesar 84  ±  13.  Selanjutnya,  tekanan  darah  sebesar 81.667  ±  15.308  dihasilkan  kelompok  mencit lupus bunting diberi ekstrak cocor bebek dosis 21  mg  dan  yang  paling  rendah  persentase tekanan  darah  yaitu  dihasilkan  oleh  kelompok mencit bunting sehat sebesar 69.250 ± 5.852.

## Gambar 2. Rata-Rata Tekanan Darah Pada
Mencit  Balb/c  Lupus  Bunting Berdasarkan  Pemberian  Ekstrak Cocor Bebek
Berdasarkan tabel 1. Diketahui terdapat  perbedan  pengaruh  yang  signifikan pemberian  ekstrak  cocor  bebek  pada  mencit Balb/c  lupus  bunting  terhadap  perkembangan kadar  TNF-α.  Pemberian  ekstra  cocor  bebek dosis  III  (42  mg)  menghasilkan  TNF-α  yang paling  optimal  dalam  menurunkan  TNF-α dibandingkan  dengan  pemberian  ekstra  cocor bebek dosis I (10.5 mg) dan pemberian ekstrak cocor bebek dosis II (21mg).
Tabel  1.  Uji  Pengaruh  Pemberian  Ekstrak
Cocor  Bebek  terhadap  Kadar  TNF-α pada Mencit Balb/c Lupus Bunting Perlakuan Jumlah Kuadrat db Kuadrat Tengah F Sig. Ekstrak 124.595 4 31.149  7.259  0.003 Error 51.490 12 4.291 Total 176.085  16
Berdasarkan tabel 2. diketahui hasil uji statistik  F  sebesar  2.761  dengan  probabilitas sebesar  0.007.  Hal  ini  dapat  diketahui  bahwa probabilitas  >alpha  (5%),  sehingga  H0 diterima.  Oleh  karena  itu,  dapat  dinyatakan tidak  ada  perbedaan  pengaruh  signifikan pemberian  ekstrak  cocor  bebek  pada  mencit Balb/c  lupus  bunting  terhadap  perkembangan tekanan darah.
Tabel 2. Uji Pengaruh Pemberian Eksrak Cocor Bebek terhadap Perkembangan Tekanan  Darah  pada  Mencit  Balb/C Lupus Bunting Perlakuan Jumlah Kuadrat db Kuadrat Tengah F Sig. Ekstrak 2427.152  4 606.788  2.761  0.077 Error 2637.083  12  219.757 Total 5064.235  16
Berdasarkan  gambar  3  diketahui  tidak ada  perbedaan  pengaruh  yang  signifikan pemberian  ekstrak  cocor  bebek  pada  mencit Balb/c  lupus  bunting  terhadap  albumin  urine pada setiap kelompok.
Gambar  3.  Rata-Rata  Albumin  Urine  pada Mencit  Balb/c  Lupus  Bunting berdasarkan  Pemberian  Ekstrak Cocok Bebek
Berdasarkan  tabel  3.  diketahui  tidak ada  perbedaan  pengaruh  yang  signifikan pemberian  ekstrak  cocor  bebek  pada  mencit Balb/c  lupus  bunting  terhadap  albumin  urine pada setiap kelompok perlakuan.
Tabel  3.  Pengujian  Pengaruh  Pemberian Ekstrak  Cocor  Bebek  terhadap Albumin Urine pada Mencit Balb/C Lupus Bunting Perlakuan Jumlah Kuadrat db Kuadrat Tengah F Sig. Ekstrak 1154236.694 4 288559.173 2.748  0.78 Error 1260268.222 12 105022.352 Total 2414504.915 16

## PEMBAHASAN
Pengaruh  Ekstrak  Daun  Cocor  Bebek Terhadap Kadar TNF-α
Hasil  penelitian  menunjukkan  rerata TNF-α  pada  kelompok  kontrol  positif  lebih tinggi dibandingkan dengan kelompok negatif. Penelitian  yang  dilakukan  oleh  Aringer  pada tahun  2014  menyatakan  bahwa  kadar  TNF-α ditemukan  meningkat  dalam  serum  pasien dengan  LES  aktif  dan  terbukti  berkolerasi dengan  aktivitas  penyakit  SLE.  TNF-α,  selain sebagai  imunosupresif,  juga  terlibat  dalam kerusakan  jaringan  organ  pada  pasien  SLE, khususnya  lupus  nefritis.  Tumor  Nekrosis Factor-Alpha (TNF-α) adalah sitokin proinflamasi  yang  banyak  terlibat  dalam regulasi kekebalan tubuh (Boos et al, 2015). TN Freceptor1 (TNFR1) TNFR terkait domain  kematian fas-associated  death  domain (FADD)  sistem  yang  mengarah  ke  sinyal apoptosis,  regulasi  dwon  tradd.  Cacat  dalam ekspresi genini dapat meningkatkan kemungkinan  bahwa  limfosit  menghindari proses  norma  yang  digunakan  oleh  sistem kekebalan tubuh untuk menghilangkan limfosit yang  diinginkan  atau  down  regulate  respon imun.
Hal  ini,  mungkin  mengakibatkan limfosit membebaskan diri dan bertahan  hidup sehingga  meningkatkan  autoimun  penyakit. Penelitian Calleja pada tahun 2015
menemukan bahwa TNF-α adalah sitokin yang sangat  serbaguna,  memainkan  peran  penting pada  apoptosis  dan  peradangan  pada  pusat reproduksi. TNF-α disintesis sepanjang saluran reproduksi  wanita  dalam  plasenta  dan  embrio. TNF-α adalah sitokin pro inflamasi dan terlibat selama  perkembangan  folikel  dan  ovulasi, pembentukan  korpus  luteum  dan  regresi  dan fungsi endometrium.
Pada  awal  kehamilan  hormon  rahim ibu  yang  diatur  TNF-α  sangat  penting  untuk invasi  trofoblast  sedangkan  peningkatan  TNF- α oleh makrofag dapat memfasilitasi terjadinya persalinan.  Pemeriksaan  TNF-α  pada  plasenta berdasarkan  hasil  uji  perbandingan  berganda dengan  uji  LSD  didapatkan  bahwa  ada perbedaan  pengaruh  pemberian  ekstrak  cocor bebek  pada  mencit  Balb/c  lupus  bunting terhadap  kadar  TNF-α.  Kelompok  mencit lupus  bunting  tanpa  pemberian  ekstrak  cocok bebek  menghasilkan  TNF-α  paling  tinggi  dan berbeda  signifikan  dengan  kelompok  mencit lupus bunting diberi ekstrak cocor bebek dosis 10.5  mg  dan  kelompok  mencit  lupus  bunting diberi ekstrak cocok bebek 42 mg.
Kelompok mencit lupus bunting diberi ekstrak cocor bebek dosis 42 mg menghasilkan TNF-α  paling  rendah  dan  tidak  berbeda signifikan  dengan  kelompok  mencit  kontrol negatif. Hal  ini  sejalan dengan  hasil penelitian yang  dilakukan  Nair,  dkk  yang  menyatakan bahwa  quercetin  yang  merupakan  senyawa paling  aktif  dalam  flavonoid  yang  terkandung pada ekstrak  cocor bebek mampu menurunkan TNF-α  yang  merupakan  salah  satu  sitokin proinflamasi  yang  terlibat  dalam  patogenesis SLE.  Quercetin  berada  dalam  jumlah  sekitar 60-75%  dari  flavonoid.  Penelitian  lainnya menunjukkan  quercetin  dapat  menekan  tanda- tanda  klinis  pada  tikus  arthritis  dengan  cara menghambat  generasi  TNF-α  dan  nitric  oxide (NO)  oleh  makrofag  (Gomalada et  al, 2005; Matsuda et al , 2014).
Berdasarkan  uraian  di  atas,  ekstrak daun  cocor  bebek  mampu  menurunkan  kadar TNF-α  secara  signifikan,  karena  kandungan flavonoid  terutama  quercetin  sebagai  senyawa aktifnya  mampu  memblokir  I k B  kinase sehingga tidak  terjadi degradasi  IkB yan dapat mencegah  aktifasi  dari  NF-kβ  yang  berfungsi dalam  mengontrol  ekspresi  dari  gen  yang mengkode  sitokin  proinflamasi  sehingga  tidak terjadi peningkatan kadar TNF-α.

## Pengaruh  Ekstrak  Daun  Cocor  Bebek Terhadap Tekanan Darah/MAP Mencit
Hasil  penelitian  ini  menunjukkan bahwa  rerata  tekanan  darah  paling  tinggi terdapat  pada  kelompok  mencit  bunting  lupus tanpa  pemberian  ekstrak  cocor  bebek  yaitu kelompok  kontrol  positif.  Penelitian  yang dilakukan  oleh  Berg  pada  tahun  2014 menyatakan bahwa kadar TNF-α yang melebihi  kadar  normal  berhubungan  dengan terjadinya  peningkatan  tekanan  darah  karena terjadinya disfungsi endotel.
TNF-α menyebabkan terjadinya infeksi dan berperan dalam kerusakan sel  endotel.  Sel endotel  merupakan  lapisan  sel  mempunyai fungsi  utama  mempertahankan  permiabilitas dinding vaskuler. Sel endotel merupakan organ yang  dinamis,  heterogen,  mempunyai  fungsi sekresi,  sintesis,  metabolic  dan  imunologis (Cines, 2013).
Inflamasi  kronik  dan  aktifasi  endotel adalah    proses  patologis  yang  berperan  pada terjadinya  peningkatan  tekanan  darah.  Faktor yang  mempengaruhi  sitokin  proinflamasi  ini adalah peran sel endotel, dimana sel endotel ini
berperan menjaga keseimbangan sekresi faktor-faktor  seperti  nitrit  oksida,  sitokin proinflamasi,  agen  protrombotik  dan  faktor antikoagulan.  Adanya  peningkatan  tekanan darah  ini  merubah  sel  endotel  dan  menggangu keseimbangan tersebut (Manabe et al , 2015).
Salah  satu  faktor  potensial  yang mengkibatkan  tingginya  prevalensi  terjadinya peningkatan  tekanan  darah  pada  pasien  LES adalah akibat meningkatnya sitokin proinfalamasi  seperti  TNF-α,  IFN-y  dan  IL-6 yang  terlibat  dalam  patogenesis  LES.  Hasil penelitian lainnya, melaporkan adanya hubungan  langsung  antara  sirkulasi  sitokin inflamasi (TNF-α dan IL-6) dan tekanan darah pada  pasien  dengan  hipertensi.  Teori  diatas sesuai dengan penelitian ini, dimana ditemukan peningkatan pada sitokin inflamasi yaitu TNF- α  yang  dapat  dihubungkan  dengan  terjadinya peningktana pada tekanan darah mencit Balb/c lupus bunting.
Sekresi  TNF-α  yang  berlebihan  akan merusak  sel  endotel,  menyebabkan  oklusi pembukuh  darah,  mengurangi  aliran  darah regional,  dan  meningkatkan  permeabikitas endothelium.  NF-kβ  adalah  tanda  terjadinya inflamasi.  Di  nucleus  NF-kβ  akan  berikatan dengan  regio  promoter  genes  yang  terlibat dalam  respon  inflamasi  termasuk  ICAM,  IL-8 dan  COX-2.  NF-kβ  merupakan  konduktor regulasi sitokine yang berperan pada terjadinya peningkatan tekanan darah (Shah, 2015).
Berdasarkan  hasil  penelitian,  ekstrak daun  cocor  bebek  mampu  menurunkan  kadar TNF-α dengan  cara  menekan  sitokin proinflamasi  seperti  TNF-α,  maka  penurunan tekanan  darah  yang  ditemukan  pada  mencit bunting  dengan  LES  dihubungkan  dengan penurunan  sitokin  proinflamasi  seperti  TNF-α melalui  pemberian  ekstrak  daun  cocor  bebek. Namun,pemberian  ekstrak  daun  cocor  bebek dengan dosis 10.5 mg/hari, 21 mg/hari, dan 42 mg/hari  belum  mampu  menurunkan  tekanan darah secara signifikan.

## Pengaruh  Ekstrak  Daun  Cocor  Bebek Terhadap Albumin Urine Mencit
Hasil  penelitian  diperoleh  hasil  kadar albumin  urine  pada  kelompok  kontrol  positif lebih  tinggi  secara  signifikan  dibandingkan dengan  kelompok  kontrol  negatif,  penelitian sejalan dengan  hasil penelitian yang dilakukan oleh  Satoh  pada  tahun  2016  yang  menemukan bahwa  mencit  Balb/c  yang  diinjeksi  Pristan
secara intraperitoneal tidak hanya menunjukkan  peningkatan  autoantibodi  tetapi juga  peningkatan  protein  urine  signifikan. Selain itu, pemeriksaan menggunakan mikroskop  cahaya  pada  ginjal  menunjukkan adanya  deposit  kompleks  imun  subepitel  dan mesangial  dan  hasil imunofluoresen juga menunjukkan  adanya  penumpukan  dari  IgM, IgD, dan C3 pada glomerulus.
Keluarnya  albumin  melalui  urine diakibatkab  oleh  peningkatan  permeabilitas  di tingkat  glomerulus  yang  menyebabkan  protein lolos  ke  dalam  filtrat  glomerulus.  Konsentrasi protein  ini  melebihi  kemampuan  sel-sel tubulus ginjal mereabsopsi dan memprosesnya.
Berdasarkan  uraian  diatas,  pemberian ekstrak  daun  cocor  bebek  menunjukkan penurunan pada albumin urin namun, penurunan tersebut tidak signifikan. Penurunan ini  kemungkinan  akibat  kemampuan  ekstrak daun cocor bebek dalam menurunkan persentase  sel  TNF-α  yang  berhubungan dengan  proses  inflamasi  yang  terjadi  pada ginjal  tidak  hanya  melibatkan  sitokin  Th1, namun  sitokin  proinflamasi  lainnya  seperti Th17,  IL-17,  IL-23  dan  IL-6  berperan  dalam proses  inflamasi  pada  ginjal.  Disisi  lain,  dosis ekstrak  daun  cocor  bebek  10,5  mg/hari,  21 mg/hari  dan  42  mg/hari  yang  diberikan  belum mampu  memperbaiki  kerusakan  ginjal  pada mencit lupus bunting.

## KESIMPULAN
Pengaruh  ekstrak    daun  cocor  bebek terhadap  tekanan  darah  mencit  dengan  hasil ekstrak daun cocok bebek mampu memurunkan  kadar  TNF-α  secara  signifikan karena kandungan flavonoid terutama quercetin  sebagai  senyawa  aktifnya  mampu memblokir  Ikβ  kinase  sehingga  tidak  terjadi degdradasi  Ikβ  yang  berfungsi  dalam mengontrolkan eskpresi dari gen yang mengkode  sitokin  proinflamasi  sehingga  tidak terjadi  peningkatan  kadar  TNF-α.  Sementara untuk  penurunan  ablumin  urine  mencit, pemberian  daun  cocor  bebek  menurunkan albumin urine namun, penurunan tersebut tidak signifikan.  Jadi  dapat  disimpulkan,  ekstrak daun  cocor  bebek  mampu  menurunkan  kadar TNF-α  secara  signifikan,  tetapi  ekstrak  daun cocor  bebek  tidak  mampu  menurunkan  kadar albumin urien dan tekanan darah.
Sampai  saat  ini,  obat  untuk  penyakit LES  masih  terbatas  pada  obat-obat  sintentik,
daun  cocor  bebek  dapat  dijadikan  alternatif pengobatan herbal untuk penyakit LES dengan cara  diolah  menjadi  ekstra.  Kita  tidak  selalu bergantung pada obat-obatan yang ketersediannya  terbatas,  daun  cocor  bebek tergolong tanaman yang mudah ditemukan dan mudah untuk ditanam.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Peneliti sangat berterima kasih kepada LPPT  Universitas  Islam  Negeri  (UIN)  yang telah  menyediakan  hewan  mencit  sebagai bahan  percobaan  pada  penelitian  ini  dan peneliti berterima kasih juga kepada Universitas Brawijaya Malang (UB) yang telah memfasilitasi selama proses penelitian ini baik dari awal pengambilan data, proses eksperimen sampai selesainya penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Aringer, M., & Smolen, J. S. (2014). Complex Cytokine Effects in a Complex
Autoimmune  Disease  Tumor  Necrosis Factor  in  System  Lupus  Erythematosus. Arthritis  Research  and  Therapy,  5(4),
172-177.
Baratawidjaja.  K.  G  dan  Rengganis.  I.  (2014).
Imunologi  Dasar.  Edisi  ke  sebelas. Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia. Jakarta. Berg,  A  and  Scherer,  P.  (2014).  Adipose Tissue,  Inflamation,  and  Cardiovascular Disease.Journal  of  American  Heart Asociation, 21(12): 1873-1879.
Boos,  Christopher  J.  and  Gregory  Y.  H.  Lip.
(2015). Is Hypertension and Inflamatory Process  Current  Pharmaceutical  Design, 12, 1623-1635.
Calleja-Agius, J., Muttukrishna, S., & Jauniaux,  E.  (2015).  Role  of  TNF-α  in Human Female Reproduction.
Chae, C. U., Lee, R. T., Rifai, N., & Ridker, P.
M. (2012). Blood Pressure and Inflammation  in  Apparently  Healthy Men. Hypertension, 38(3), 399-403.
Cines,  D.  B.,  Pollak,  E.  S.,  Buck,  C.  A., Loscalzo,  J.,  Zimmerman,  G.  A., McEver,  R.  P.,  &  Barmathan,  E.  S.
(2013).  Endothelial  Cells  in  Physiology and in The Pathophysiology of Vascular Disorders. Blood, 91(10), 3527-3561. Kelley,  V.  R.,  &  Wuthrich,  R.  P.  (2014). Cytokines  in  The  Pathogenesis  of Systemic  Lupus  Erythematosus. In
Seminar  in  Nephrology (Vol.  19,  No.1, pp.57-66).
Kim,  S.,  &  Iwao,  H.  (2012).  Molecular  and
Cellular  Mechanisms  of  Angiotensin  II- Mediated  Cardiovascular  and  Renal Diseases. Pharmacological  Reviews,  52 (1), 11-34.
Manabe,  S.,  Okura,  T.,  Watanabe,  S., Fukuoka,T., & Higaki, J. (2015). Effects of  Angiotensin  II  Receptor  Blockade with  Valsartan  On  Pro-Inflammatory Cytokines  in  Patiens  with  essential hypertension.  Journal  of  Cardiovascular Pharmacology, 46(6), 735-739.
Miyake,  K.,  Akahoshi,  M.,  Nakasihma,  H.,
(2011).  The  Subset  Balance  in  Lupus Nephritis. Biomed Research International. Nair, M., Mahajan, S., Reynolds, J., Aalinkeel,
R., Nair, H., Schwartz, S and Kandaswami,  C.  (2013).  The  Flavonoid Quercetin Inhibits Proinflammatory Cytokine ( Tumor Necrosis Factor
Alpha) Gene  Expression  in  Normal Peripheral  Blood  Mononuclear  Cell  via Modulation  of  The  NF- kβ System. Clinical  and  Vaccine  Immunology ,  13 (3): 319-328.
Ryan, M. J., Mc Lemore, G. R., Hendrix, S. T. (2015).  Insulin  Resistance  and  Obesity
in  a  Mouse  Model  of  Systemic  Lupus Erythematosus. Hypertension .  48(5): 988-993.
Savoia,  C.,  &  Schiffrin,  E.  L.  (2015).
Inflammation  in  Hypertension. Current Opinion in Nephrology and Hypertension , 15(2), 152-158.
Sturgis,  L.  C.,  &  Brands,  M.  W.  (2013).  Role of  TNF-α  in  The  Dependency  of Angiotensin  II  Hypertension  on  IL- 6. The FASEB Journal, 21 (5), A590. Sumariyono.  (2013). Spektrum  Autoantibodi Pada  LES  dan  Hubungannya  Dengan Gambaran  Klinik. In;  Setiyohadi  B, Kasjmir  YI,  editors.  Naskah  Lengkap Temu  Ilmiah  Reumatologi  ASEAN meeting  on  Gout  and  Hyperuricemia. Jakarta: EGC; p.149-153.
Varghese Stephy, Crocker  Ian, Bruce N  Ian  & Tower  Clare.  (2015).  Systemic  Lupus Erythematosus  Regulatory  T  Cells  and
Pregnancy. From www.expert- reviews.com/toc/eci/7/5. Yu,  E.  S.,  Min,  H.J.,  An,  S.Y.,  Won,  H.Y., Hong,  J.  H.,  &  Hwang,  E.  S.  (2014). Regulatory  Mechanisms  of  IL-2  and IFNγ  Suppression  by  Quercetin  in Thelper Cells. Biochemical Pharmacology, 76(1), 70-78.