INNOVATIVE: Journal Of Social Science Research Volume 3 Nomor 6 Tahun 2023 Page 7907-7914 E-ISSN 2807-4238 and P-ISSN 2807-4246
Website: https://j-innovative.org/index.php/Innovative
Profil GCMS Senyawa Kimia Jamur Endofit Batang Bajakah ( Spatholobus littoralis Hassk) Dan Potensinya Sebagai Antioksidan
Dedy Karmadi Putra 1 ✉ , Kunti Nastiti 2 , Rahmadani 3 , Rohama 4

## Program Studi Sarjana Farmasi, Fakultas Kesehatan Universitas Sari Mulia
Banjarmasin
Email: dedykarmadiputra13@gmail.com 1 ✉
Abstrak
Latar Belakang: Tumbuhan Bajakah (Spatholobus littoralis Hassk) merupakan salah satu tanaman yang berpotensi dikembangkan menjadi obat tradisional dimana tanaman bajakah ini memiliki bioaktivitas sebagai penyembuh luka, antibakteri, anti kanker, dan antioksidan. Bajakah merupakan segala bentuk akar – akaran  yang  secara  empiris  digunakan  oleh  Masyarakat  Kalimantan  sebagai  obat tradisionaluntuk berbagai penyakit seperti kanker, tumor, luka penuaan dini, diabetes, dan lain – lain. Jamur endofit digunakan untuk untuk memperoleh senyawa bioaktif yang leih efisien. Jamur endofit yang  didapat  dari  tumbuhan  dapat  menghasilkan  senyawa  yang  sama  dengan  inangnya.  Jamur endofit  sebagai  penghasil  senyawa  aktif  berpotensi  sebagai  produsen  bahan  baku  obat.  Tujuan: Melihat senyawa pada jamur endofit batang bajakah pada GCMS dan potensinya sebagai antioksidan. Metode: Metode yang digunaka npada penelitian ini adalah True Experimental dengan tujuan untuk mengidentifikasi  isolate  jamur  endofit  dari  batang  bajakah  (Spatholobus  littoralis  Hassk)  sebagai antioksidan. Dengan melakukan pengamatan dan pengukuran pada nilai IC50 dan mengidentifikasi kandungan senyawa batang bajakah pada GC-MS Hasil: Berdasarkan hasil analisis GC-MS isolat jamur endofit  batang  bajakah  (Spatholobus  littoralis  Hassk)  menunjukan  banyaknya  senyawa  yang ditunjukan oleh jumlah (peak) oleh kromatogram sebesar 35 senyawa yang terdeteksi. Berdasarkan hasil uji aktivitas antioksidan isolat jamur endofit menunjukanadanya aktivitas antioksidan. Nilai IC50 dari isolat bajakah sebesar 6,505 ppm dan termasuk kategori sangat kuat. Simpulan: Didapatkan 35 senyawa  pada  pengujian  GCMS.  Nilai  IC50  dari  isolat  bajakah  sebesar  6,505  ppm  dan  termasuk kategori sangat kuat.
Kata Kunci: Antioksidan, GCMS, Jamur Endofit, (Spatholobus littoralis Hassk)

## Abstract
Background: The Bajakah plant (Slopathobus littoralis Hassk) is one of the plants that has the potential to be developed into traditional medicine, where this Bajakah plant has bioactivity as a wound healer, antibacterial, anticancer and antioxidant. Bajakah is all forms of roots that are empirically used by the people of Kalimantan as traditional medicine for various diseases such as cancer, tumors, wounds, premature aging, diabetes, and others. Endophytic fungi are used to obtain more efficient bioactive compounds. Endophytic  fungi obtained from plants can produce secondary metabolites similar to their  host.  Endophytic  fungi  as  producers  of  active  compounds  have  the  potential  to  produce medicinal  raw  materials.  Objective:  To  investigate  the  secondary  metabolite  compounds  in  the endophytic fungus Stem Bajakah in GCMS and their potential as antioxidants Methods: The method used in this study was True Experimental with the aim of identifying endophytic fungal isolates from pirate stems (Spatholobus littoralis Hassk) as antioxidants. By observing and measuring the IC50 value and identifying the secondary metabolite compounds of Bajakah wood on GC-MS. Results: Based on the  results  of  GC-MS  analysis  of  the  isolate  of  the  endophytic  fungus  stem  bajakah  (Spatholobus littoralis Hassk)  it showed that the number of compounds indicated by the number (peak)  by the chromatogram  was  35  compounds  detected.  Based  on  the  results  of  antioxidant  activity  tests, endophytic fungal isolates showed antioxidant activity. The IC50 value of the Bajakah isolate is 6.505 ppm and is included in the very strong category. Conclusion: There were 35 compounds found in the GCMS test. The IC50 value of the Bajakah isolate is 6.505 ppm and is included in the very strong category.
Keywods: Antioxidants, Endophytic Fungi, GCMS, (Spatholobus littoralis Hassk)

## PENDAHULUAN
Tumbuhan Bajakah (Spatholobus littoralis Hassk) merupakan salah satu tanaman yang berpotensi dikembangkan menjadi obat tradisional, dimana tanaman bajakah ini memiliki bioaktivitas  sebagai  penyembuh  luka,  antibakteri,  antikanker  dan  antioksidan.  Bajakah merupakan  segala  bentuk  akar-akaran  yang  secara  empiris  digunakan  oleh  masyarakat Kalimantan sebagai obat tradisional untuk berbagai penyakit seperti kanker, tumor, luka, penuaan dini, diabetes, dan lain- lain (Febriyanti et al., 2021; Fitriani et al., 2020). Berdasarkan skrining fitokimia yang dilakukan oleh Saputera & Ayuchecaria (2018), bajakah (Spatholobus littoralis Hassk) mengandung senyawa flavonoid, saponin, tanin, dan polifenol. Febriyanti et. al (2021) menambahkan bahwa  bajakah tampala juga memiliki  senyawa  alkaloid dan triterpenoid.
Pemanfaatan  batang  bajakah  telah  dimanfaatkan  secara  intensif  oleh  masyarakat Kalimantan dalam pengobatan kanker payudara.Aktivitas antioksidan pada bajakah tampala dikaitkan dengan berbagai metabolit sekunder seperti flavonoid yang dimilikinya. Berbagai
senyawa yang terdapat di bajakah memiliki peran sebagai antioksidan . Fitriani et. al (2020) meneliti bahwa batang, kayu dan akar bajakah merah memiliki aktivitas antioksidan (IC50) sebesar 26,29 ppm dan tergolong aktivitas yang sangat kuat.

## METODE PENELITIAN
Metode penelitian yang digunakan pada penelitian ini adalah observasionall deksriptif dengan  tujuan  untuk  mengidentifikasi  isolasi  jamur  endofit  dari  batang  bajakah (Spatholobus littoralis Hassk) sebagai antioksidan. Rancangan penelitian adalah eksplorasi dengan cara mengisolasi jamur endofit dari batang bajakah dan melakukan pengamatan atau  pengukuran  antioksidan,  kemudian  dilakukan  pengujian  senyawa  menggunakan GCMS. Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Mikrobiologi Universitas Sari Mulia. Populasi yang  diuji  pada  penelitian  ini  yaitu  kayu  bajakah  (Spatholobus  littoralis  Hassk)  yang didapatkan  dari  lokasi  penelitian  di  Kecamatan  Mihing  Raya  Kabupaten  Gunung  Mas Provinsi  Kalimantan  Tengah.  Sampel  pada  penelitian  ini  adalah  bagian  kayu  bajakah (Spatholobus  littoralis  Hassk)  dengan  diameter  3-3,5  cm.  Instrumen  pengumpulan  data yang digunakan pada penelitian ini ini adalah observasional deskriptif. Penelitian meliputi beberapa tahapan yaitu mulai dari pengumpulan bahan tumbuhan, identifikasi tumbuhan, pembuatan  simplisia,  fraksi,  dan  pengujian  aktivitas  antioksidan  jamur  endofit  batang bajakah  dengan  metode  DPPH  (1,1-diphenyl-2-  picrylhydrazyl)  yang  diukur  dengan menggunakan spektrofotometri Uv-Vis kemudian ditentukan nilai IC50 dan diukur kadar antioksidan menggunakan spektrofotometri Uv-Vis dan GCMS untuk identifikasi senyawa.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pada penelitian ini sampel Batang Bajakah (Spatholobus littoralis Hassk) yang diambil dari  lokasi  penelitian  di  Kecamatan  Mihing  Raya,  Kabupaten  Gunung  Mas,  Provinsi Kalimantan  Tengah  Isolasi  Jamur  Endofit.  Sampel  Batang  Bajakah  (Spatholobus  littoralis Hassk) yang telah bersih kemudian dilakukan isolasi jamur endofit yang memiliki senyawa sama dengan  inangnya (Ramadhani et al., 2017). Pada isolasi  jamur endofit  dari Batang Bajakah  (Spatholobus  littoralis  Hassk)  didapatkan  jamur  endofit  yang  tumbuh  disekitar sampel.  Ada  beberapa  faktor  yang  mempengaruhi  pertumbuhan  jamur  endofit  seperti faktor lingkungan disekitar tanaman inang, jenis jaringan pada tumbuhan inang (Fitriyah et al., 2023).

## Isolat Jamur Endofit
Hasil isolasi dari Batang Bajakah (Spatholobus littoralis Hassk) selanjutnya dimurnikan berdasarkan  morfologinya  agar  menghasilkan  suatu  isolat  murni.  Setelah  itu  dilakukan pengamatan  karakteristik  morfologi  jamur  endofit  secara  makroskopis  dan  mikroskopis, dimana  isolat  jamur  endofit  yang  dimurnikan,  diamati  secara  makroskopis.  Pengamatan morfologi koloni dapat dilihat memiliki warna putih keaabu-abuan dengan bentuk bulat melingkar  dan  memiliki  karakteristik  seperti  serabut  atau  kapas.  Pada  pengamatan mikroskopis dengan perbesaran 40x hanya terdapat dari hifa steril. Jamur ini diduga mirip dengan jamur Mycelia sterilia, jamur ini tumbuh dengan cepat, dalam waktu 7 hari diameter dapat  mencapai  57  mm  areal  myceliumnya  berbentuk  kapas  dan  berwarna  putih.  Pada kultur Mycelia sterilia ini tidak ditemukan adanya spora (Mukrimaa et al., 2016).
(a) Gambar isolat bajakah  (b) Gambar jamur Mycelia Sterilia Gambar 1. Gambar morfologi isolat Bajakah dan jamur Myceliasterilia

## Uji Aktivitas Antioksidan
Pengujian  antioksidan  yang  dilakukan  secara  kuantitatif  menggunakan spektrofotometri  UV-Vis.  Adapun  metode  yang  dipakai  untuk  pengujian  aktivitas antioksidan metode DPPH (1,1-difenil-2- pikrilhidrazil) sebab memiliki keuntungan diantara lain  metode  yang  sederhana,  cepat,  mudah,  serta  cukup  memakai  sampel  yang  sedikit dengan waktu yang tidak lama (Hanani, 2005). Sedangkan keuntungan lainnya yaitu terbukti akurat dan praktis dalam pemakaiannya (Pratimasari, 2009).
Prinsip  pengukuran  aktivitas  antioksidan  secara  kuantitatif  menggunakan  metode DPPH karena adanya perubahan warna ungu yang sebanding dengan konsentrasi larutan DPPH tersebut. Adapun radikal bebas DPPH mempunyai elektron tidak berpasangan akan memberikan warna ungu. Sehingga berubah warna kuning saat elektronnya berpasangan. Terjadinya  perubahan  warna  karena  terdapat  peredaman  radikal  bebas  yang  dihasilkan yaitu  bereaksinya  DPPH  terhadap  pelepasan  atom  hidrogen  yang  berasal  dari  molekul senyawa sampel. Sehingga terciptanya senyawa difenil pikril hidrazil yang ditandai dengan perubahan  warna.  Adapun  perubahan  warna  ini  menyebabkan  terjadinya  perubahan
absorbansi dari panjang gelombang maksimum DPPH memakai spektrofotometri UV-Vis dengan cara diketahui nilai IC50.
Tahapan  pertama  dilakukan  penentuan  panjang  gelombang  maksimal  dari  DPPH. Pengukuran  aktivitas  antioksidan  ini  memakai  spektrofotometri  UV-Vis  dimulai  dari menentuka  pengukuran  absorbasi  larutan  DPPH  0,4  mM  pada  rentang  450-  550  nm. Adapun  hasil  yang  didapatkan  yakni  menunjukkan  pada  panjang  gelombang  515  nm sehingga  sesuai  dengan  literatur  bahwa  rentang  panjang  gelombang  maksimal  DPPH berkisar antara 515 – 520 nm.
Selanjutnya  dilakukan  pencarian  operating  time  dengan  tujuan  untuk  mengetahui waktu  yang  diperlukan  DPPH  sudah  bereaksi  sempurna  dengan  senyawa  yang mengandung  antioksidan  hingga  mencapai  titik  absorbansi  yang  stabil.  Proses  untuk menentukan operating time dimulai dengan dilakukan pengukuran absorbansi. Dalam hal ini, dipilih sampel 40 ppm yang berisi larutan pembanding kuersetin dan DPPH yangtelah direaksikan  dimulai  dari  menit  ke  5  sampai  menit  ke  60  dengan  menggunakan spektrofotometri UV- Vis. Hasil penentuan operating time diperoleh titik absorbansi yang stabil dimulai dari menit ke 35 (dapat dilihat grafik operating time di Gambar 5. Penelitian ini menggunakan kuersetin sebagai validasi untuk mengetahui kebenaran dari uji yang telah dilakukan  dan  sebagai  pembanding  atau  kontrol  positif  karena  mampu  menunjukkan penangkapan  radikal,  sehingga  dinyatakan  bahwa  metode  pengujian  yang  dilakukan dengan quersetin diketahui mempunyai aktivitas antioksidan yang kuat. Semakin kecil nilai IC50 suatu senyawa maka bisa dikatakan bahwa semakin efektif senyawa tersebut sebagai antioksidan.
Absorbansi blangko yang dipakai untuk prosedur ini adalah absorbansi DPPH dengan metanol  pro  analisa.  Rumus  tersebut  menunjukkan  bahwa  semakin  tinggi  tingkat diskolarisasi (absorbansi semakin kecil) begitu juga semakin tinggi aktivitas penangkapan terhadap  radikal  bebas.  Persentase  inhibisi  dengan  diperoleh  nilai  IC50  kuersetin didapatkan dengan cara memasukkan nilai 50% aktivitas inhibisi pada persamaan regresi.
Nilai IC50 quersetin didapatkan sebesar 15,183 ppm sehingga menunjukan nilai IC50 nya  kurang  dari    50  ppm.  Hasil  tersebut  menunjukkan  kuersetin  memiliki  aktivitas antioksidan  yang  sangat  kuat.  Kuersetin  juga  mampu  mendonorkan  atom  hidrogen fenoliknya pada radikal DPPH menjadi DPPH-H, hal ini mengakibatkan radikal mengalami stabilisasi  (Wardani,  2014).  Faktor  terjadinya  perubahan  warna  larutan  DPPH  dalam menentukanaktivitas  antioksidan  terjadi  karena  kurangnya  senyawa  DPPH  radikal  akibat dari reaksi penangkapan atom H pada senyawa yang memiliki aktivitas antioksidan. Serta
terdapat adanya efek subtitusi terhadap senyawa DPPH radikal menjadi DPPH non radikal mengakibatkan  terjadinya  pergeseran  absorbansi  ke  panjang  gelombang  yang  lebih pendek yaitu di antara 450-495 nm. Pergeseran panjang gelombang ini ditandai dengan ciri-ciri terjadinya penurunan intensitas warna larutan  dari ungu muda berubah menjadi kuning  pucat.  Semakin  berkurang  absorbansi  larutan  menunjukkan  bahwa  aktivitas antioksidan semakin meningkat (Kurniawan, 2011).
Selanjutnya  dilakukan  penentuan  nilai  IC50  terhadap  isolate  jamur  endofit  batang bajakah yang didapatkan dari persamaan regresi linier antara hubungan konsentrasi kayu bajakah. Dari nilai IC50 batang bajakah yang dihasilkan adalah sebesar 6,505 ppm. Hal ini menunjukkan  bahwa  fraksi  etil  asetat  batang  bajakah  tergolong  memiliki  aktivitas antioksidan yang sangat kuat. Kandungan kimia yang bertanggung jawab terhadap aktivitas antioksidan batang bajakah yaitu dari alkaloid, fenolik, dan flavonoid. Alkaloid, fenolik dan flavonoid  memiliki  kemampuan  dalam  menghentikan  rantai  radikal  bebas  atau  sebagai antioksidan.
Berdasarkan nilai IC50 isolat jamur endofit bajakah yang diperoleh, dapat disimpulkan bahwa  isolate jamur endofit batang bajakah menunjukkan aktivitas antioksidan kategori sangat kuat. Senyawa yang berperan sebagai antioksidan didalam batang bajakah ini antara lain alkaloid, fenolik, dan flavonoid.
Uji Senyawa Metabolit Sekunder Jamur Endofit dengan GC-MS (Gas Chromotography-Mass Spectrometry)
Berdasarkan hasil analisis GC-MS ekstrak jamur endofit batang bajakah (Spatholobus littoralis Hassk) pada Gambar 6 terdapat banyaknya puncak puncak (kromatogram). Puncak tersebut menunjukkan sebagai komponen atau senyawa yang terindentifikasi pada waktu retensi tertentu. Waktu retensi diukur melalui kromatogram dari menit ke-0 selain puncak dari  retensi  waktu  pada  kromatogram  akan  terlihat  persen  area  senyawa.  Persen  area menunjukkan  besar  atau  tidaknya  konsentrasi  senyawa  yang  berada  dalam  sampel. Berdasarkan kromatogram diatas menunjukan banyaknya senyawa yang ditunjukan oleh jumlah (peak) oleh kromatogram sebesar 35 senyawa yang terdeteksi (Agie novilda et al., 20 ).
Hasil analisis GC-MS menunjukan jamur endofit batang bajakah adanya komponen mayor (utama) adalah senyawa 9- Octadecenoic acid, methyl ester, (E)- (CAS) yang memiliki fungsi sebagai antioksidan, antikanker dan antidiabetes dengan % area sebesar 25,82 (Agie novilda et al., 2022).

## SIMPULAN
Berdasarkan  dari  hasil  penelitian  yang  telah  dilakukan  dapat  disimpulkan  bahwa jamur  endofit  yang  dihasilkan  dari  isolat  batang  bajakah  (Spatholobus  littoralis  Hassk) memiliki morfologi yang mirip dengan jamur Mycelia yaitu tumbuh dengan cepat, dalam waktu  7  hari,  myceliumnya  berbentuk  kapas  dan  berwarna  putih  keabu-abuan.  Jamur endofit yang dihasilkan dari isolasi batang bajakah (Spatholobus littoralis Hassk) hanya menghasilkan1  isolat  jamur  endofit.  Hasil  uji  aktivitas  antioksidan  isolat  jamur  endofit menunjukan adanya aktivitas antioksidan. Nilai IC50 dari isolat bajakah sebesar 6,505 ppm dan termasuk kategori sangat kuat. Berdasarkan hasil analisis GC-MS ekstrak jamur endofit batang  bajakah  (Spatholobus  littoralis  Hassk)  menunjukan  banyaknya  senyawa  yang ditunjukan oleh jumlah (peak) oleh kromatogram sebesar 35 senyawa yang terdeteksi.

## DAFTAR PUSTAKA
Agie  novilda, C., Tutik, T., & Marcellia, S. (2022). Analisis Senyawa Metabolit Sekunder Menggunakan GC-MS Ekstrak Metanol Kulit Bawang Merah (Allium cepa L.) Dengan Metode Refluks Dan Perkolasi. Jurnal Sains Dan Teknologi Farmasi Indonesia, 11(2), 100. https://doi.org/10.58327/jstfi.v11i2.199
Febriyanti, R., Mahardika, M. P., & Ardiyanto, R. (2021). Skrining Fitokimia pada Ekstrak Hasil Proses Infundasi Akar Bajakah. Doctoral Dissertation.
Fitriani,  Sampepana,  E.,  &  Saputra,  S.  H.  (2020).  Karakterisasi  Tumbuhan  Akar  Bajakah (Spatholobus Littoralis Hassk) dari LOA KULU Kabupaten Kutai Kartanegara. Jurnal Riset Teknologi Industri,  14(2),  365 – 376. https://doi.org/10.26578/jrti.v14i2.6590
Mukrimaa,  S.  S.,  Nurdyansyah,  Fahyuni,  E.  F.,  YULIA  CITRA,  A.,  Schulz,  N.  D., ناسغ , د .,
Taniredja, T., Faridli, E. M., & Harmianto, S. (2016). BUKU MIKROBIOLOGI. In Jurnal Penelitian Pendidikan Guru Sekolah Dasar (Vol. 6, Issue August).
Kurniawan.  A.  2011.  Uji  Aktivitas  Antioksidan  Menggunakan  Radikal  1,1-difenil2- pikrilhidrazil (DPPH) dan Penetapan Kandungan Fenolik Total Fraksi Etil Asetat Ekstrak  Etanolik  Herba  Seledrin  (Apium  graveolens  L.)  [skripsi].  Fakultas  Farmasi
Universitas Sanata Dharma. Tersedi pada:
https://repository.usd.ac.id/17539/2/0781140 76_Full.pdf.
Mukrimaa,  S.  S.,  Nurdyansyah,  Fahyuni,  E.  F.,  YULIA  CITRA,  A.,  Schulz,  N.  D., ناسغ ,  ., Taniredja, T., Faridli, E. M., & Harmianto, S. (2016). BUKU MIKROBIOLOGI. In Jurnal Penelitian Pendidikan Guru Sekolah Dasar (Vol. 6, Issue August).
Pratimasari.  D.  2009.  Uji  Aktivitas  Penangkap  Radikal  Buah  Carica  Papaya  L.  Dengan Metode  DPPH  dan  Penetapan  Kadar  Fenolik  Serta  Flavonoid  Totalnya  [skripsi].
Surakarta: Universitas Muhammadiyah Surakarta. Tersedia pada: K100050090.pdf. Wardani R.R. 2014. Isolasi dan Identifikasi Senyawa Aktif Antioksidan dari Fraksi Etil Asetat Etanol  Herba  Meniran  (Phyllantus  niruri  L.).  Naskah  Publikasi.  Fakultas  Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta. Tersedia pada: NASKAH_PUBLIKASI.pdf.