## Indonesian Journal of Pure and Applied Chemistry
journal homepage: http://jurnal.untan.ac.id/index.php/IJoPAC
EKSTRAKSI DAUN PELAWAN ( Tristaniopsis merguensis )SEBAGAI

## ANTIOKSIDAN MENGGUNAKAN MICROWAVE ASSISTED EXTRACTION (MAE)
Sito Enggiwanto 1 , Fusfita Istiqomah 1 , Kasro Daniati 1 , Occa Roanisca 1* and Robby Gus Mahardika 1
1 Departement of Chemistry, Bangka Belitung University,  Indonesia
* Corresponding author: occaroanisca@gmail.com

## ARTICLE INFO

## ABSTRACT
Article history: Received 11 July 2018 Accepted 30 Desember
2018
Available online 30 December 2018 Keywords: Tristaniopsis merguensis, Microwave
Assisted Extraction (MAE) , Antioxidant Indonesia  is  a  country  that  produces  a  wealth  of  abundant biodiversity, one of which is a plant that is often cultivated the tree of Pelawan ( Tristaniopsis merguensis ). Pelawan trees are widely spread in Indonesia  one  of  them  found  in  the  forests  of  the  Bangka  Belitung island.  Therefore,  this  study  aims  to  identify  the  secondary metabolites  and  testing  antioxidants  in  leaf of  pelawan extract  by comparing  methods  of  Microwave  Assisted  Extraction  (MAE) with maceration  method.  The  resistant  leaf  used  in  this  study  was obtained  from  Sempan, Bangka  Belitung.  The  observation  result shows  that  the  use  of  MAE  method  can  extract  with  faster  time compared  with  maceration  method.  So the  MAE  method  is  more effective than the maceration method. The using of MAE method for 30 minutes obtained the highest yield percentage of 41.3% in ethanol solvent  which  is  more  effective  than  acetone  solvent.  Extraction  by using  48  hour  maceration  yields is 28.985%.  While  the  extraction with  30  minute  maceration is 13.385%. Testing  of  antioxidant activity  using  Microwave  Assisted  Extraction  (MAE)  method  on acetone  solvent  has  the  highest  antioxidant  activity  than  ethanol extract  that  is  9,501 μ g/mL.  The use  of  the  MAE  method  is  more efficient  in  extracting  the  leaves  of  Pelawan  than  the  maceration method when viewed from the time and antioxidant activity.
© 2018 IJoPAC. All rights reserved

## 1. Pendahuluan
Tristaniopsis merguensis (Griff.) Peter G. Wilson & J. T. Waterh merupakan salah satu anggota dari famili Myrtaceae . Pohon pelawan banyak tersebar di hutan-hutan Kepulauan Bangka Belitung [1] . Tanaman ini hidup di daerah gambut dan banyak ditemukan di Indonesia salah satunya di Bangka Belitung.  Pohon  pelawan  merupakan  inang  bagi  madu  pelawan  dan  jamur  pelawan  yang  memiliki banyak  manfaat  dan  bernilai  jual  tinggi.  Jamur  pelawan  termasuk  ke  dalam  genus Heimioporus mengandung komponen antioksidan dan asam amino esensial. Madu pelawan yang dihasilkan oleh Apis dorsata memiliki  rasa  pahit  bercampur  rasa  manis  dipercaya  sebagai  obat  batuk    dan    obat antidiabetes [2] .
Berdasarkan  penelitian  sebelumnya, genus Tristaniopsis mempunyai tinggi  akan  kandungan senyawa  fenolik  dengan keunikan  fenol  terglikosilasi [3] .  Ekstrak  dengan  kandungan  fenolik  yang tinggi sering dijadikan obat herba. Tingginya kandungan fenolik pada genus Tristaniopsis dan khasiat pada  pohon  pelawan Tristaniopsis merguensis yang  banyak,  membuat  peneliti  tertarik  untuk
mengungkap  kandungan  fitokimia  pada  spesies Tristaniopsis  merguensis sehingga  berpotensi dijadikan obat herbal.
Ekstraksi  dan  pemilihan  pelarut  yang  tepat  merupakan  kunci  dari  khasiat  obet  herbal. Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan hasil uji fitokimia tersebut merupakan hasil ekstraksi yang  dilakukan  terhadap  genus Tristaniopsis dengan  menggunakan  metode  konvensional  seperti maserasi  atau soxhlet .  Tetapi  metode  ini  membutuhkan  waktu  yang  tidak  sedikit.  Oleh  sebab  itu perlu  dikembangkan  metode  ekstraksi  yang  efisien  dengan  kadar  senyawa  aktif  yang  tinggi  dan waktu yang singkat.
Beberapa  metode  yang  digunakan  dalam  ekstraksi  bahan  alam  atau  tanaman seperti  refluks, perkolasi, soxhlet, microwave dan maserasi. Maserasi sendiri merupakan metode ekstraksi cara dingin yang  sederhana  tetapi  membutuhkan  waktu  lama.  Kekurangan  dari  metode  ekstraksi ini membutuhkan  proses  yang  lama  dalam  waktu  beberapa  hari  dan  proses  penyaringan  yang  tidak sempurna. Akibatnya zat aktif hanya mampu terekstraksi sebagian, yaitu 50% saja [4] . Oleh sebab itu perlu dilakukan pengembangan mengenai metode ekstraksi senyawa aktif dari tumbuhan khususnya pada spesies Tristaniopsis merguensis
Salah  satu  metode  yang  efisien  adalah Microwave  Assisted  Extraction (MAE) .  Metode  ini mengkombinasikan microwave dan  pelarut  ekstraksi.  Keunggulan  metode  ini  yaitu  hanya membutuhkan  waktu  ekstraksi  yang  cepat,  membutuhkan  sedikit  pelarut  dan  laju  ekstraksi  yang sangat tinggi dengan hasil yang tidak terlalu jauh dengan metode konvensional seperti maserasi dan soxhlet [5] .  Penggunaan microwave ini  hanya  memerlukan  waktu  beberapa  menit  saja,  hal  ini  jauh berbeda dengan metode maserasi yang membutuhkan waktu lebih dari 24 jam dan soxhlet lebih dari 20  jam [6] .  Oleh  sebab  itu  dilakukan  penelitian  mengenai  ekstraksi  daun  pelawan  ( Tristaniopsis merguensis ) dengan menggunakan metode Microwave Assisted Extraction (MAE) .

## 2. Material dan Metode

## 2.1. Preparasi Sampel
Sampel penelitian ini merupakan daun Pelawan ( Tristaniopsis merguensis ) yang berasal dari Desa  Kimak  Kecamatan  Pemali, Kabupaten      Bangka,  Povinsi  Kepulauan  Bangka  Belitung. Selanjutnya  sampel  tersebut  dikeringkan  diudara  terbuka,  setelah  itu  digiling  menjadi  serbuk kering dan diayak. Serbuk dengan ukuran 100 mesh dilakukan ekstraksi dengan menggunakan metode Microwave Assisted Extraction (MAE) dan maserasi.

## 2.2. Ekstraksi
Serbuk  kering  daun  ( Tristaniopsis  merguensis )  diambil  1  gram  dimasukkan 10  mL  pelarut dalam tabung microwave . Pelarut yang digunakan bervariasi yaitu metanol, etanol, dan aseton. Tabung selanjutnya dimasukkan dalam Microwave Accelerated Reaction System (MARS) 6 (1200 W,  2450  MHz,  80 o C) dengan  variasi  waktu  5,  10,  15,  dan  30  menit.  Setelah  itu  dipisahkan antara  filtrat  dengan  residu  menggunakan  corong.  Filtrat  yang  diperoleh  dipekatkan  dengan rotary evaporator vacum hingga diperoleh ekstrak pekat [7] .
Ekstraksi  menggunakan  maserasi  dilakukan  dengan  melarutkan  serbuk  daun  pelawan dengan  pelarut  etanol,  aseton  dan  metanol  dengan  perbandingan  ekstrak  :  pelawut  1  :  10. Setelah itu dilakukan penyaringan dengan menggunakan corong büchner.

## 2.3. Uji Antioksidan
Pengujian aktivitas antioksidan dilakukan secara kuantitatif menggunakan metode DPPH dengan pengukuran secara spektroskopi. Ekstrak daun pelawan dibuat dalam konsentrasi 2, 5, 10, 20 dan 50 μ g/mL. Masing–masing konsentrasi dimasukkan dalam tabung reaksi sebanyak 1 mL dan ditambahkan larutan DPPH 100 μ g/mL 1  mL serta metanol p.a. 2 mL. Larutan yang
telah ditambah DPPH dan diinkubasi selama 30 menit pada suhu 37 o C. Larutan tersebut diukur absorbansinya menggunakan spektroskopi UV-Vis pada panjang gelombang 515 nm.
Aktivitas  antioksidan  ekstrak  metanol,  aseton, dan  etanol  dari  daun Tristaniopsis merguensis ditentukan  oleh  besarnya  hambatan  serapan  radikal  DPPH  melalui  perhitungan persentase inhibisi serapan DPPH dengan rumus sebagai berikut:
%Inhibisi = Ak = Absorban kontrol As = Absorban sampel
Nilai  IC 50 ( inhibition  concentration )  didefinisikan  sebagai  konsentrasi  sampel  yang  dibutuhkan untuk  menghambat  oksidasi  sebesar  50%    atau    konsentrasi  sampel  uji yang  dibutuhkan  untuk menangkap 50% radikal DPPH. Nilai IC 50 merupakan konsentrasi dimana ekstrak dapat menangkap radikal bebas sebesar 50% yang diperoleh dengan memakai persamaan regresi linier y= ax + b [8] .

## 3. Hasil dan Pembahasan
Tristaniopsis  merguensis adalah  spesies  dari  famili Myrtaceae yang  belum  banyak  dilakukan penelitian mengenai genus Tristaniopsis merguensis namun dari spesies ini telah banyak digunakan sebagai  obat  tradisional  untuk  mengurangi  kolesterol  dalam  tubuh,  mengobati  sakit  mag, meningkatkan  kinerja  jantung  dan  paru-paru  menyembuhkan  stroke,  meningkatkan  daya  tahan otak,  anti  kanker,  tumor,  bakteri,  virus  dan  penyakit  lainnya.  Daun  pelawan  ( Tristaniopsis merguensis) sendiri merupakan jenis pohon dengan batang berwarna merah dengan bagian kulit luar yang mengelupas [2] .
Genus Tristaniopsis banyak  ditemukan  di  dataran  rendah,  biasanya  ditemukan  di  hutan. Tristaniopsis merguensis merupakan tumbuhan dikotil dengan pohon yang berukuran besar. Bentuk daunnya Obovatus atau Oblanceolatus dengan  pangkal  tumpul  sampai  meruncing  ke  arah  tangkai daunnya. Tangkai daun bersayap. Panjang daun antara 6-8 inchi dan lebar 1,25-2,25 inchi [1] . Bunga majemuk  besar,  padat,  putih  dengan  ibu  tangkai  bunga  di  ketiak  daun  ( Axi-laris )  dan  berambut. Kelopak berbentuk tabung menyatu dengan bagian lobus yang tajam. Petal 5 berlekatan, benang sari banyak, berhadapan dengan petal, 5 kelompok. Ovari tenggelam atau setengah tenggelam dengan 3 ruang. Buah kapsul dengan 3 lokus, sebagian tertutup kelopak, dan biji bersayap [2] .
Spesies Tristaniopsis  merguensis merupakan  salah  satu  spesies  tumbuhan  famili myrtaceae dengan  pohon  yang  berukuran  besar.  Tinggi  tanaman Tristaniopsis  merguensis sekitar  20  meter hingga  mencapai  80  meter.  Kulit  kayu  berwarna  kemerahan  dan  cederung  mengelupas  dengan bentuk pertulangan daun menyirip.
Gambar 1 . Daun dan Taksonomi Tristaniopsis merguensis .
Taksonomi dari Tristaniopsis merguensis (Griff.): Kingdom : Plantae Divisi : Magnoliophyta Class : Magnoliopsida Ordo : Myrtales Famili : Myrtaceae Genus : Tristaniopsis Spesies : Tristaniopsis merguensis

## 3.1 Pengaruh Waktu MAE terhadap Yield Ekstraksi
Lamanya waktu merupakan hal yang perlu diperhatikan dalam proses ekstraksi. Optimasi ekstraksi  yang  pertama  dilakukan  adalah  variasi  waktu Microwave  Assisted  Extraction (MAE). Hasil  uji  variasi  waktu Microwave  Assisted  Extraction (MAE)  didapatkan  hasil  sebagaimana gambar 2.
Gambar 2. Kurva Hubungan Waktu dengan Yield (%) pada suhu 80 o C, power 1200 W.
Dilihat  dari gambar  2  menunjukkan hubungan  antara  waktu  terhadap  hasil  ektraksi dimana semakin lama waktu yang dibutuhkan maka hasil ekstraksi akan semakin besar . Hal ini disebabkan  karena pelarut  yang  berinteraksi  dengan  senyawa  aktif  semakin  banyak  sehingga senyawa  yang  terekstrakpun  semakin  banyak. Data  pengamatan  didapatkan pada  suhu  80 o C power 1200 W persentase yield yang paling tinggi pada waktu 30 menit yaitu sebesar 41,3 %.

## 3.2. Metode Ekstraksi Terhadap Yield Ekstraksi
Variasi  metode  dilakukan untuk  mengetahui  metode  yang  paling  efektif  dalam  melakukan proses ekstraksi. Sebagaimana hasil yang didapatkan pada gambar 3.
Gambar 3. Grafik Hasil Analisis Perbandingan Metode Ekstraksi Terhadap Persentase Yield (MAS : maserasi; MAE: Microwave Assisted Extraction )
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 0 10 20 30 40 Yi el d (% ) Waktu Pengaruh Waktu Terhadap Yield (%) Menit
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 MAS 30 Menit MAS 48 jam MAE 30 Menit Yield (%) Etanol Aseton
Berdasarkan diagram diatas dapat dilihat bahwa, persentase yield yang diperoleh dengan Microwave  Assisted  Extraction (MAE)  lebih  besar  dibandingkan  dengan metode maserasi pada waktu yang sama, baik pelarut etanol maupun aseton. Proses ektraksi berlangsung selama 30 menit yang menghasilkan  persentase yield Microwave  Assisted  Extraction (MAE)  lebih baik daripada  metode maserasi.  Diperoleh  persentase yield yang  paling  besar  dengan  metode Microwave  Assisted  Extraction (MAE) pada  pelarut  etanol  yaitu  sebesar  41,3%.  Hal  ini menunjukkan  bahwa  metode  MAE  lebih  efektif  dibandingkan  maserasi  jika  dilihat  dari  segi waktu.  Tetapi jika  pada  pelarut  aseton  menggunakan  metode  maserasi  selama  48  jam menghasilkan  rendemen  yang  lebih  tinggi  dibandingkan Microwave  Assisted  Extraction (MAE) selama  30  menit.  Hal  ini  disebabkan  waktu  yang  lama  dari  metode  maserasi  memperbanyak senyawa aktif yang terekstrak oleh pelarut aseton.

## 3.3. Pengaruh Metode Ekstraksi dan Pelarut Terhadap Aktivitas Antioksidan
Aktivitas  antioksidan  ekstrak  pucuk  pelawan  ditentukan  melalui  metode  DPPH. Berdasarkan gambar 4 terlihat bahwa metode ekstraksi sangat berpengaruh terhadap IC 50 . Hasil IC 50 dengan Microwave  Assisted  Extraction (MAE)  (11,3117 µg/mL)  memiliki  nilai  yang  lebih rendah dibandingkan dengan metode maserasi 48 jam (18,2772 µg/mL). Artinya ekstrak hasil Microwave  Assisted  Extraction (MAE)  memiliki  aktivitas  antioksidan  yang  lebih  baik dibandingkan aktivitas ekstrak maserasi. Hal ini sebanding dengan yield yang dihasilkan, pada waktu yang sama dengan Microwave Assisted Extraction (MAE) yang memiliki yield lebih bagus dibandingkan maserasi.
Gambar 4. Pengaruh Metode Ekstraksi Terhadap IC 50
Berdasarkan  penelitian  terdahulu,  kajian  fitokimia dari  daun  pada  genus Tristaniopsis mengandung  0,03%  flavonoid,  0,95%  saponin,  dan  1,04%  tanin.  Senyawa  aktif  mayor  dari genus Tristaniopsis yaitu senyawa golongan fenolik seperti flavonoid dan tanin. Senyawa fenolik yang  terkandung  dalam  genus Tristaniopsis mempunyai  keunikan  fenol  terglikosilasi [3] . Aktivitas  antioksidan  yang  tinggi  dari  ekstrak  etanol  Pelawan  ( Tristaniopsis  merguensis ) ini disebabkan oleh kandungan senyawa fenolik yang tinggi seperti flavonoid, dan tanin. Kekuatan senyawa  fenolik  sebagai  antioksidan  tergantung  dari  beberapa faktor seperti ikatan gugus hidroksil  pada  cincin  aromatik,  posisi  ikatan,  posisi  hidroksil  pada    cincin  aromatik. Kemampuan  dalam  memberi  donor  hidrogen  radikal  mengakibatkan  terbentuknya  radikal fenoksil  yang  relatif  stabil.  Hidrogen  radikal  akan  mengurangi  radikal  bebas  yang  terbentuk dalam tubuh sehingga daya tahan tubuh meningkat dan terhindar dari beberapa penyakit [10] . Oleh  sebab  itu  ekstrak  etanol  daun  pelawan  berpotensi  sebagai  antioksidan  yang  tinggi  yang kedepannya dapat menjadi prekursor obat herbal.
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 MAE Maserasi IC 50 (µg/mL) Etanol

## 4. Kesimpulan
Berdasarkan  penelitian  yang  dilakukan  waktu Microwave  Assisted  Extraction (MAE) berpengaruh  terhadap yield ekstraksi  daun  pelawan  yang  dihasilkan.  Semakin  lama  ekstraksi maka  semakin  besar  yield  ekstraksinya.  Penggunaan  metode  MAE  lebih  efisien  dalam mengekstrak  daun  pelawan  dibandingkan  metode  maserasi  jika  dilihat  dari  segi  waktu  dan aktivitas antioksidan. Sedangkan pengaruh pelarut terhadap aktivitas antioksidan menunjukkan bahwa aseton memiliki aktivitas antioksidan yang sangat aktif dibandingkan pelarut etanol.

## Ucapan Terimakasih
Peneliti mengucapkan terima kasih kepada Kementrian Riset, Teknologi, dan Pendidikan Tinggi Direktorat  Jendral  Pembelajaran  dan  Kemahasiswaan  yang  telah  memberikan  bantuan  dana penelitian berdasarkan Surat Penugasan No 1020/B3.1/KM/2018.

## Daftar Pustaka
[1] Yarli, N., 2011. Ekologi pohon pelawan ( Tristaniopsis merguensis Griff.) sebgaai Inang Jamur Pelawan di Kabupaten Bangka Tengah, Bogor: Sekolah Pascasarjana institut Pertanian Bogor.
[2]. Abarini,  D.,  2016.  Pohon  pelawan ( Tristaniopsis  merguensis ):  Spesies  Kunci  Keberlanjutan Tanaman Keanekaragaman Hayati Namang-Bangka Belitung. Al-kauniyah Jurnal Biologi, 9: 66- 73.
[3]. Verotta, L, 2001. In vitro antiplasmodial activity of extracts  of Tristaniopsis species and identification of the active constituents: ellagic acid and 3,4,5- trimethoxyphenyl-(6`-o- galloyl)-o-betha-d-glucopyranoside. Journal Natural Product, 64 : 603-607.
[4]. Dungir, S.G., Katja D.G., Kamu S.V., 2012. Aktivitas Antioksidan Ekstrak Fenolik dari Kulit Buah Manggis ( G. Mangostana L.). Jurnal MIPA UNSRAT Online 1,1 : 11-15.
[5]. Ganzler, K., Salgo, A. & Valko, K. 1986. Microwave extraction- a novel sample
[6]. Mandal, V., Mohan, Y., Hemalatha, S. 2007. Microwave Assisted Extraction- An Innovative and Promosing Extraction Tool For Medicinal Plant Research. Pharmaconosy Reviews, 1 : 7-18.
[7]. Dahmoune, F. 2015. Optimization   of microwave-assisted extraction   of polyphenols from M. communis L. leaves. Food Chemistry, 166 : 585-595.
preparation method. Journal of Chromatography, 371 : 299-306.
[8]. Lisdawati,  V.,  & Kardono,  B.S.  (2006).  Aktivitas  antioksidan    dari    berbagai    fraksi    ekstrak daging    buah    dan    kulit    biji    mahkota    dewa  (Phaleria    macrocarpa).    Media    Litbang Kesehatan, 16, 1-7.
[9]. Harborne J.B. 1987. Metode Fitokimia. Edisi Ke-2 Padmawinata K, Soediro I, penerjemahan. Bandung: Institut Teknologi Bandung. Terjemahan dari: Phytochemical methods.
[10]. Mokgope, L. B. 2006. Cowpea Seed Coats and Their Extracts : Phenolic Composition and Use as Antioxidants in Sunflower Oil . South Africa: University of Pretoria