## PERBANDINGAN DAYA BIOLARVASIDA EKSTRAK BIJI BUAH DAN DAUN PEPAYA (Carica papaya) TERHADAP LARVA Aedes aegypti

## COMPARISON BIOLARVICIDES POTENCIAL OF FRUIT SEEDS AND LEAF PAPAYA EXTRACTS (Carica papaya) ON Aedes aegypti
Fidel Corona 1 , Freggy Spicano Joprang 2, *
1 Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Unika Atma Jaya, Jalan Pluit Raya no. 2, Jakarta Utara, 14440
2 Departemen Parasitologi, Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Unika Atma Jaya, Jalan Pluit Raya no. 2, Jakarta Utara, 14440
* Korespondensi: freggy.spicano@atmajaya.ac.id

## ABSTRACT
Introduction: Aedes aegypti is the major vector of dengue virus. Dengue virus can cause dengue hemorrhagic fever  (DHF).  DHF  is  dangerous  because  it  can  cause  death.  World  Health  Organization  (WHO)  noted Indonesia as state with the highest dengue cases in Southeast Asia. Effort to control A. aegypti vector that can be  done  is  by  using  natural  substances  that  have  the  effect  of  biolarvicides.  This  study  aims  to  determine natural biolarvicides potencial of fruit seeds and leaf papaya (Carica papaya) extracts against A. aegypti larvae. Methods: This study was an experimental study and conducted in 2016 using two groups of samples with the design before and after intervention. Samples were A. aegypti larval instar III and IV with the number of 10 larvaeper concentration and 10  larvae of control for each types of extracts. The concentration used was 0 mg / L (control), 50 mg / L, 100 mg / L, and 150 mg / L for both types of extracts, then observed at 6 hours, 12 hours, 18 hours, and 24 hours after exposure.
Results:  This  study  using  Kruskal  Wallis  test,  p  value  =  0.352.  (P>  0.05)  means  there  is  no  significant difference in the effect of biolarvicides concentration between the two types of extracts that used to the number of dead larvae of A. aegypti.
Conclusion: Fruit seeds and leaf papaya extracts (C. Papaya L.) with concentrations of 50 mg / L, 100 mg/ L, and 150 mg / L are not effective to kill the larvae of A. aegypti. Other studies show concentrations above 21.9 ppm of leaf extract and 442 ppm  of fruit seed extract can effectively kill larvae, therefore future studies are needed to determine effective extract concentrations to kill the larvae of A. aegypti Key Words: Aedes aegypti, biolarvicides, Carica papaya L, papaya leaf, papaya seed

## ABSTRAK
Pendahuluan: Aedes aegypti merupakan vektor utama dari virus dengue. Virus dengue dapat menyebabkan demam  berdarah  dengue  (DBD).  DBD  berbahaya  karena  dapat  menyebabkan  kematian. World  Health Organization  (WHO) mencatat  Indonesia  sebagai  negara  dengan  kasus  DBD  tertinggi  di  Asia  Tenggara. Upaya  pengendalian  vektor A.  aegypti dapat  dilakukan  dengan  memakai  zat  alami  yang  mempunyai  efek biolarvasida. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui perbandingan daya biolarvisida alami ekstrak biji buah dan daun pepaya ( Carica papaya ) terhadap larva A. aegypti . Metode: Desain  penelitian  adalah  penelitian  eksperimental  pada  tahun  2016  menggunakan  dua  kelompok sampel dengan rancangan sebelum dan sesudah intervensi. Sampel penelitian adalah larva A. aegypti instar III  dan  IV  dengan  jumlah  10  ekor  per  konsentrasi  dan  10  ekor  kontrol  untuk  masing-masing  jenis  ekstrak. Konsentrasi  yang digunakan adalah  0 mg/L (kontrol),  50 mg/L, 100 mg/L, dan 150 mg/L untuk kedua jenis ekstrak, lalu diamati pada 6 jam, 12 jam, 18 jam, dan 24 jam setelah pemaparan.
Hasil: Penelitian  ini  menggunakan  uji  Kruskal  Wallis  dan  ,didapatkan  nilai  p  =  0,352.(p>0,05).  Hasil  ini menunjukkan tidak ada perbedaan bermakna pada efek biolarvasida antara konsentrasi kedua jenis ekstrak yang digunakan terhadap jumlah larva A. aegypti yang mati. Simpulan: Ekstrak biji buah dan daun pepaya ( C. Papaya L. ) dengan konsentrasi 50 mg/L, 100 mg/L, dan 150 mg/L tidak efektif untuk membunuh larva A. aegypti . Studi lain menunjukkan konsentrasi diatas 21.9 ppm ekstrak  daun  dan  442  ppm  ekstrak  biji  buah  dapat  membunuh  larva A.  aegypti secara  efektif,  sehingga penelitian yang akan datang di perlukan untuk menentukan konsentrasi ekstrak yang efektif untuk membunuh larva A. aegypti .
Kata Kunci: Aedes aegypti , biji pepaya, biolarvasida, Carica papaya L., daun pepaya

## ARTIKEL PENELITIAN

## PENDAHULUAN
Aedes  aegypti merupakan  vektor utama  dari  virus  dengue.  Virus  dengue  ini dapat menyebabkan penyakit demam berdarah  dengue  (DBD).  DBD  merupakan penyakit  yang  berbahaya  karena  dapat menyebabkan  kematian. 1 Manifestasi  klinis DBD berupa demam tinggi yang berlangsung terus menerus selama 2-7 hari. 2
Vaksin  untuk  mencegah  penyakit  DBD sudah  tersedia  di  Indonesia,  namun  hingga saat  ini  hanya  diberikan  pada  anak  umur  9 sampai  16  tahun  sehingga  upaya  pengen- dalian vektor A. aegypti yang dapat dilakukan yaitu  dengan  memakai  zat  alami  yang mempunyai efek biolarvasida. 3,7 Biji buah dan daun pepaya memiliki kandungan bahan aktif yang  memiliki  potensi  sebagai  insektisida alami  yaitu  enzim  papain,  saponin,  dan alkaloid  karpain.  Senyawa-senyawa  tersebut dapat mengganggu pertumbuhan dan perkembangan dari larva nyamuk. 4
Penggunaan  etanol  sebagai  pelarut  akan memudahkan  pemisahan  dari  bahan  aktif yang terkandung di dalam biji buah dan daun pepaya.  Etanol  bersifat  polar  dan  dapat melarutkan  berbagai  senyawa  organik  yang tidak dapat larut dalam air. 8
Penelitian oleh Rawan , et al . mengenai potensi  larvasida  ekstrak  biji  pepaya  dengan pelarut alkohol absolut (etanol 99%) terhadap larva Culex quinquefasciatus . 6 Setelah pemaparan  selama  24  jam  pada  konsentrasi 30  ppm  terdapat  16,70%  larva  yang  mati, pada  konsentrasi  50  ppm  terdapat  23,30% larva  yang  mati,  pada  konsentrasi  100  ppm terdapat 36,70% larva yang mati.
Penelitian oleh Sesanti, et al. mengenai potensi larvasida ekstrak biji dan daun pepaya dengan  pelarut  etanol  70%  terhadap  larva Anopheles  sp. 7 Hasil  setelah  pemaparan esktrak daun selama 24 jam pada konsentrasi 125 ppm terdapat 16% larva yang mati, pada konsentrasi 250 ppm terdapat 20% larva yang mati, pada konsentrasi 500 ppm terdapat 52% larva  yang  mati,  dan  pada  konsentrasi  1000 ppm  terdapat  88%  larva  yang  mati.  Hasil setelah pemaparan esktrak biji selama 24 jam pada konsentrasi 10 ppm terdapat 32% larva yang mati, pada konsentrasi 20 ppm terdapat 44%  larva  yang  mati,  pada  konsentrasi  40 ppm terdapat 64% larva yang mati, dan pada konsentrasi 80 ppm terdapat 84% larva yang mati.
Penelitian yang dilakukan oleh Shadana membuktikan  bahwa  ekstrak  etanol  daun pepaya  dengan  metode  maserasi  dapat membunuh  larva A.  aegypti dan  didapatkan hasil  LC 50 =  945  ppm  dan  LC 90 =  1495  ppm setelah pemaparan 24 jam. 5
Berdasarkan data dari penelitian- penelitian sebelumnya, artikel ini membandingkan  konsentrasi yang diperlukan antara  ekstrak  biji  buah  dan  daun  pepaya untuk  membunuh  larva  nyamuk A.  aegypti secara efektif.

## METODE
Penelitian ini menggunakan ekstrak biji buah  dan  daun  pepaya  ( C.  papaya  L .)  yang spesiesnya  telah  diverifikasi  oleh  Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia, Bogor. Biji buah dan  daun  pepaya  diekstraksi  melalui  metode maserasi. Populasi dan sampel yang
digunakan  adalah  larva  nyamuk A.  aegypti.
Sampel  diperoleh  dari  Fakultas  Kedokteran Hewan Institut Pertanian Bogor. Kriteria inklusi sampel  adalah  larva A.  aegypti dengan  ciri memiliki satu baris comb teeth berjumlah 8-16 gigi  pada  segmen  ke  VIII  abdomen.  Pada c omb  teeth tersebut  terdapat  duri  tengah ( median  spine )  yang  besar  dan  duri-duri samping  ( subapical  spine )  (Gambar  1) . 11,14,15
Kriteria eksklusi sampel adalah larva spesies lain.

## Gambar 1 . Larva A. Aegypti
Larva A.  Aegypti memiliki  tubuh  yang terdiri  atas  kepala,  toraks,  abdomen,  siphon, dan  segmen  anal. 12,13 Sampel  larva  yang didapat  akan  dibagi  sebanyak  10  ekor  per konsentrasi  untuk  setiap  intervensi.  Ekstrak biji  buah  dan  daun  dipisahkan  ke  dalam wadah-wadah  yang  masing-masing  berisi  10 ekor larva A. aegypti lalu ditambahkan 1 liter air dengan konsentrasi ekstrak yang digunakan  sebesar  50  mg/L,  100  mg/L,  dan 150 mg/L. Pengamatan jumlah larva yang mati pada kontrol  dan masing-masing konsentrasi dilakukan  pada  jam  ke  6,  12,  18,  dan  24 setelah  pemberian  ekstrak.  Pengolahan  data dilakukan  dengan  menggunakan  perangkat lunak  pengolahan  statistik.  Analisis  dengan
menggunakan  uji  non  parametrik  Kruskal- Wallis  dengan  batas  kemaknaan  95% mendapatkan hasil p>0,05.

## HASIL
Hasil  pengamatan  yang  dilakukan terhadap ekstrak daun pepaya ( C. papaya L .) terdapat  sifat  biolarvasida  yang  berbanding lurus  dengan  konsentrasi  ekstrak  dan  waktu pemaparan terhadap ekstrak. Semakin besar konsentrasi ekstrak yang digunakan, semakin banyak  larva  yang  mati  dan  semakin  lama waktu pemaparan terhadap ekstrak, semakin banyak juga larva yang mati. Hal-hal tersebut dapat  dibuktikan  dengan  persentase  rerata efek  letal  yang  meningkat  pada  setiap peningkatan konsentrasi
dan waktu pemaparan  ekstrak. Konsentrasi  minimal yang  diperlukan  ekstrak  daun  buah (C. papaya) untuk  membunuh  larva  nyamuk A. aegypti adalah  100  mg/L  dan  150  mg/L. Namun nilai persentase rerata efek letal pada konsentrasi  100  mg/L  dan  150  mg/L  hanya 6,7% menunjukkan bahwa konsentrasi ekstrak  tersebut  belum  dapat  secara  efektif membunuh larva A. aegypti. (Tabel 1).
Hasil  pengamatan  yang  dilakukan terhadap  ekstrak  biji  pepaya  ( C.  papaya  L .) tidak  dapat  menentukan  sifat  biolarvasida pada ekstrak. Hal ini karena persentase rerata efek  letal  sebesar  0%  setelah  pemaparan terhadap  ekstrak  biji  pepaya  ( C.  papaya  L .) selama 24 jam. (Tabel 2). Konsentrasi minimal yang diperlukan ekstrak biji buah (C. papaya) untuk  membunuh  larva  nyamuk A.  aegypti secara efektif juga tidak dapat ditentukan.
Tabel 1. Jumlah dan Presentase Larva A.aegypti yang Mati pada Berbagai Konsentrasi Ekstrak Etanol Daun C. Papaya L.
Tabel 2. Jumlah dan Presentase Larva A. Aegypti yang Mati pada Berbagai Konsentrasi Ekstrak Etanol Biji C. Papaya L.

## DISKUSI
Efek  biolarvasida  ekstrak  etanol  biji buah  dan  daun  pepaya  ( C.  papaya  L. ) terhadap larva A. aegypti didapatkan dengan uji  non-parametrik.  Pada  uji  non-parametrik
Kruskal  Wallis  dengan  distribusi  data  tidak normal  didapatkan  nilai  p=0,335  (p>0,05) untuk  biji  buah  dan  nilai  p=1,000  (p>0,05) untuk daun sehingga dapat dinyatakan bahwa tidak  ada  perbedaan  yang  bermakna  pada
Waktu Percobaan Kontrol 50 mg/L 100 mg/L 150 mg/L 6 Jam I 0 0 0 0 II 0 0 0 0 III 0 0 0 0 Persentase rerata (%) 0% 0% 0% 0% 12 Jam I 0 0 0 0 II 0 0 0 0 III 0 0 0 0 Persentase rerata (%) 0% 0% 0% 0% 18 Jam I 0 0 0 0 II 0 0 0 0 III 0 0 0 0 Persentase rerata (%) 0% 0% 0% 0% 24 Jam I 0 0 0 0 II 0 0 1 1 III 0 0 1 1 Persentase rerata (%) 0% 0% 6,7% 6,7% Waktu Percobaan Kontrol 50 mg/L 100 mg/L 150 mg/L 6 Jam I 0 0 0 0 II 0 0 0 0 III 0 0 0 0 Persentase rerata (%) 0% 0% 0% 0% 12 Jam I 0 0 0 0 II 0 0 0 0 III 0 0 0 0 Persentase rerata (%) 0% 0% 0% 0% 18 Jam I 0 0 0 0 II 0 0 0 0 III 0 0 0 0 Persentase rerata (%) 0% 0% 0% 0% 24 Jam I 0 0 0 0 II 0 0 0 0 III 0 0 0 0 Persentase rerata (%) 0% 0% 0% 0%
efek  biolarvasida  antara  konsentrasi  ekstrak biji buah pepaya dan daun pepaya ( C. papaya L. ) dengan besar jumlah larva A. aegypti yang mati. Penelitian ini menggunakan konsentrasi 50  mg/L,  100  mg/L,  dan  150  mg/L  karena keterbatasan  jumlah  ekstrak  biji  buah  dan daun papaya (C. Papaya L.) dan waktu dalam proses ekstraksi.
Hasil pada penelitian disesuaikan de-
ngan penelitian literatur lain untuk mengetahui perbandingan  konsentrasi  yang  diperlukan antara ekstrak biji buah dan daun pepaya (C. Papaya L.) untuk membunuh larva nyamuk A. aegypti secara efektif. Penelitian oleh Sesanti 7 , et  al. mengenai  potensi  larvasida ekstrak  biji  dan  daun  pepaya  dengan  pelarut etanol  70%  terhadap  larva Anopheles  sp (Tabel 3) .
Tabel 3. Perbedaan antara Penelitian oleh Sesanti, et al. dengan Penelitian ini
Sesanti, et al. Penelitian ini Topik Potensi larvasida ekstrak biji dan daun pepaya dengan pelarut etanol 70% terhadap larva Anopheles sp. Ekstraksi biji dan daun pepaya dengan etanol 90% terhadap larva A. aegypti Asal tanaman Taman Komunitas Jayapura Papua Pasar Lokal Jakarta Utara Metode Biji pepaya diekstraksi dengan menggunakan soxhlet Daun pepaya diekstraksi dengan metode maserasi Biji dan daun pepaya diekstraksi dengan metode maserasi Besar konsentrasi Biji: 10 ppm, 20 ppm, 40 ppm, 80 ppm Daun: 125 ppm, 250 ppm, 500 ppm, 1000 ppm Biji: 50 mg/L, 100 mg/L, 150 mg/L Daun: 50 mg/L, 100 mg/L, 150 mg/L Jumlah larva mati setelah pemaparan 24 jam Biji 10 ppm  32% 20 ppm  44% 40 ppm  64% 80 ppm  84% Biji 50 mg/L  0% 100 mg/L  0% 150 mg/L  0% Daun 125 ppm  16% 250 ppm  20% 500 ppm  52% 1000 ppm  88% Daun 50 mg/L  0% 100 mg/L  6,7% 150 mg/L  6,7%
Ekstrak biji dididapatkan dengan metode  soxhletasi  dan  ekstrak  daun  didapat dengan  metode  maserasi.  Penelitian  Sesanti memakai  spesies  pepaya  yang  didapat  dari Jayapura Papua. Penelitian ini menggunakan 4  konsentrasi  yaitu  125  ppm,  250  ppm,  500 ppm dan 1000 ppm pada ekstrak daun. Hasil setelah  pemaparan  esktrak  daun  selama  24 jam pada konsentrasi 125 ppm terdapat 16% larva  yang  mati,  pada  konsentrasi  250  ppm
terdapat  20%  larva  yang  mati,  pada konsentrasi 500 ppm terdapat 52% larva yang mati, dan pada konsentrasi 1000 ppm terdapat 88% larva yang mati. Empat konsentrasi yang digunakan pada ekstrak biji yaitu 10 ppm, 20 ppm,  40  ppm  dan  80  ppm.  Hasil  setelah pemaparan  esktrak  biji  selama  24  jam  pada konsentrasi 10 ppm terdapat 32% larva yang mati, pada konsentrasi 20 ppm terdapat 44% larva  yang  mati,  pada  konsentrasi  40  ppm
terdapat  64%  larva  yang  mati,  dan  pada konsentrasi 80 ppm terdapat 84% larva yang mati.  Pada  penelitian  ini  terdapat  perbedaan hasil yang dapat disebabkan perbedaan pada sampel pepaya yakni pada penelitian Sesanti didapat  dari  taman  komunitas  di  Jayapura, sedangkan  pada  penelitian  ini  mengambil sampel dari pasar lokal di Jakarta. Perbedaan pada  metode  ekstraksi  biji  juga  dapat berperan  sehingga  terdapat  perbedaan  hasil pada penelitian ini.
Penelitian oleh Shadana mengenai daya bunuh  ekstrak  etanol  daun  pepaya  dengan metode  maserasi  terhadap  larva A . aegypti (Tabel 4) didapatkan hasil LC 50 = 945 ppm dan LC 90 = 1495 ppm setelah pemaparan 24 jam. 5
Pada penelitian ini setelah pemaparan selama 24  jam  konsentrasi  50  mg/L  tidak  mampu membunuh larva, konsentrasi 100 mg/L hanya membunuh  6,7%  larva,  dan  konsentasi  150 mg/L  juga  membunuh  6,7%  larva.  Pada penelitian  Shadana  ekstrak  etanol  daun pepaya  konsentrasi  yang  dipakai  400  ppm, 600  ppm,  800  ppm,  1000  ppm,  1200  ppm, 1400  ppm,  1600  ppm,  1800  ppm,  dan  2000 ppm. Penelitian
Shadana dibutuhkan konsentrasi minimal 400 ppm untuk membunuh  8,3%  larva.  Perbedaan  hasil disebabkan  perbedaan  jumlah  konsentrasi yang  digunakan  sehingga  pada  penelitian berikutnya dibutuhkan konsentrasi yang lebih tinggi untuk membunuh larva secara efektif.
Tabel 4. Perbedaan antara Penelitian oleh Shadana, et al. dengan Penelitian Ini
Shadana, et al. Penelitian ini Topik Efek larvasida ekstrak etanol daun pepaya dengan pelarut etanol terhadap larva A. aegypti Ekstraksi daun pepaya dengan etanol 90% terhadap larva A. aegypti Metode Daun pepaya diekstraksi dengan metode maserasi Daun pepaya diekstraksi dengan metode maserasi Besar konsentrasi 400 ppm, 600 ppm, 800 ppm, 1000 ppm, 1200 ppm, 1400 ppm, 1600 ppm, 1800 ppm 50 mg/L, 100 mg/L, 150 mg/L Jumlah larva mati setelah pemaparan 24 jam 400 ppm  8,3% 600 ppm  23,30%
800 ppm  43,30% 1000 ppm  56,7% 1400 ppm  76,7% 1800 ppm  100% 50 mg/L  0% 100 mg/L  6,7% 150 mg/L  6,7%
Keterbatasan  penelitian  ini  terdapat pada  metode  ekstraksi  yang  dilakukan  dan pengambilan sampel tanaman pepaya. Meto- de  maserasi  merupakan  proses  pengeks- trakan simplisia dengan menggunakan pelarut dengan  beberapa  kali  pengocokan  atau pengadukan  pada  temperatur  ruangan  (ka- mar).  Metode  sokletasi  merupakan  ekstraksi
menggunakan  senyawa  pelarut  yang  selalu baru  dan  umumnya  dilakukan  dengan  alat khusus  sehingga  terjadi  ekstraksi  berlanjut dengan  jumlah  pelarut  yang  relatif  konstan disertai  adanya  pendingin.  Metode  sokletasi ini  merupakan  suatu  metode  dengan  pema- nasan  dengan  pelarut  yang  digunakan  akan mengalami sirkulasi sehingga ekstraksi sokle-
tasi menghasilkan ekstrak dengan kandungan lebih  tinggi,  sedangkan  pada  penelitian  ini digunakan  metode  maserasi  sehingga  kan- dungan ekstrak yang didapat lebih sedikit dan memengaruhi hasil penelitian. 9,10
Spesies  tanaman  pepaya  yang  diguna- kan  didapat  dari  pasar  lokal  di  Jakarta.  Be- berapa  faktor  biologis  dapat  memengaruhi mutu  ekstrak  seperti  lokasi  tumbuhan  asal yaitu  lingkungan  (tanah  dan  atmosfer),  inte- raksi  tanaman  dengan  temperatur,  cahaya, air, senyawa organik dan senyawa anorganik. Periode panen tanaman yaitu proses kehidup- an tanaman terutama metabolisme juga akan menentukan  senyawa  kandungan.  Pada penelitian  ini  tidak  diketahui  periode  panen tanaman pepaya yang dipakai sehingga dapat memengaruhi hasil penelitian. 10

## SIMPULAN
Ekstrak  daun  pepaya  ( C.  Papaya  L. ) dengan  konsentrasi  50  mg/L,  100  mg/L,  150 mg/L  tidak  efektif  untuk  membunuh  larva A. aegypti. Ekstrak  biji  pepaya  ( C.  Papaya  L. ) dengan  konsentrasi  50  mg/L,  100  mg/L,  150 mg/L  tidak  efektif  untuk  membunuh  larva A.
Aegypti. Tidak dapat dilakukan perbandingan konsentrasi yang diperlukan antara ekstrak biji buah dan daun pepaya (C. Papaya L.) untuk membunuh  larva  nyamuk A.  aegypti secara efektif. Sebaiknya untuk penelitian yang akan datang dapat menggunakan metode sokletasi untuk ekstraksi biji buah dan daun pepaya ( C. Papaya  L. )  dan  memakai  konsentrasi  yang lebih tinggi agar terdapat efek letal yang dapat membunuh  larva A.  aegypti secara  efektif dalam waktu singkat serta mengambil sampel
tumbuhan  pepaya  yang  diketahui  periode panen,  dan  kondisi  lingkungan  tanaman tersebut karena dapat memengaruhi kandungan  senyawa  organik  dan  anorganik dalam tanaman.

## DAFTAR PUSTAKA
1. World  Health  Organization.  Dengue  and  severe dengue. WHO. [cited 2015 Sep 09]. Available from: http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs117/en/.
2. World Health Organization. Dengue/dengue haemo- rrhagic fever. WHO. [cited 2015 Sep 09]. Available from: http://www.who.int/csr/disease/dengue/en/.
3. World  Health  Organization.  Dengue  vaccine  re- search. WHO. [cited 2015 Sep 09]. Available from: http://www.who.int/immunization/research/develop ment/dengue_vaccines/en.
4. Begum  M.  Phytochemical  and  pharmacological investigation  of  Carica  papaya  leaf  [document  on the Internet]. East West University [cited 2015 Sep 09].  Available  from:  ttp://dspace.ewubd.edu/han- dle/123456789/685.
5. Efek larvasida ekstrak etanol daun pepaya (Carica papaya)  terhadap  larva  Aedes  aegypti  [document on the Internet]. Riau University [cited 2015 Sep 09]. Available from: http://jom.unri.ac.id/index.php/ JOMFDOK/article/viewFile/2850/2765.
6. Rawani  A,  Ghosh  A,  Laskar  S,  Chandra  G. Aliphatic  amide  from  seeds  of carica  papaya as mosquito  larvicide,  pupicide,  adulticide,  repellent and smoke toxicant. J Mosq Res. 2012;2(2):8-18.
7. Sesanti  H,  Arsunan  AA,  Ishak  H.  Potential  test  of papaya  leaf  and  seed  extract  (carica  papaya)  as larvicides  against  anopheles  mosquito  larvae mortality.  sp  in  Jayapura,  Papua  Indonesia.  Int  J Sci Res Publ. 2014;4(6).
8. Hadinegoro  SR,  Arredondo-García  JL,  Capeding MR, Deseda C, Chotpitayasunondh T, Dietze R, et al .  Efficacy  and  long-term  safety  of  a  dengue vaccine  in  regions  of  endemic  disease.  N  Engl  J Med. 2015 Sep 24;373(13):1195 –206.
9. Perbandingan  metode  ekstraksi  maserasi  dan sokletasi  terhadap  kadar  piperin  buah  cabe  jawa (Piperis  retrofracti  fruncus)  [document  on  the
Internet].  Syarif  Hidayahttulah  University  [cited 2015  Des  1].  Available  from:  http://repository. uinjkt.ac.id/dspace/bitstream/123456789/24306/1/I stiqomah-fkik.pdf.
10.  Parameter  standar  umum  ekstrak  tumbuhan  obat [document on the Internet]. Jambi University [cited 2015  Des  1].  Available  from:  http://putrimayasari. unja.ac.id/?media_dl=16.
11.  Staf Pengajar Departemen Parasitologi FKUI. Buku ajar  parasitologi  kedokteran.  4th  ed.  Jakarta: Badan Penerbit FKUI; 2013.
12.  Pictorial  keys  for  the  identification  of  mosquitoes associated with dengue  virus transmission [document  on  the  Internet].  [cited  2015  Oct  08]. Available from: http://www.sandfly catalog.org/files/
pdfs/113995-0.pdf .
13.  Key  characters  for  larval  Aedes  sp.  identification [document  on  the  Internet].  California  Department of Public Health [cited 2015 Oct 08]. Available from: https://www.cdph.ca.gov/HealthInfo/discond/Docu ments/AedesLarvalPictureKey.pdf .
14.  Life cycle of mosquito [document on the Internet]. [cited  2015  Oct  08].  Available  from:  http://www. biologydiscussion.com/experiments/life-cycle-of- mosquito-with-diagram/1754
15.  Centers  for  Disease  Control  and  Prevention. Mosquito life cycle Dengue. CDC. [cited 2015 Oct 14].  Available  from:  http://www.cdc.gov/Dengue/ entomologyEcology/m_lifecycle.html