Jurnal : Jurnal Kesehatan Prima Volume
: 11, No.1, Februari 2017, Halaman : 11-17
ISSN Print : 1978 – 1334, ISSN Online : 2460 – 8661

## ___________________________________________________________________________
Yunan Jiwintarum, Agrijati, Baiq Lilis Septiana: Jurusan Analis Kesehatan Poltekkes Kemenkes Mataram, Jl. Prabu Rangkasari Dasan Cermen Sandubaya Mataram
MOST PROBABLE NUMBER (MPN) COLIFORM DENGAN VARIASI VOLUME MEDIA LACTOSE BROTH SINGLE STRENGTH (LBSS) DAN LACTOSE BROTH DOUBLE STRENGTH (LBDS)
Yunan Jiwintarum, Agrijanti, Baiq Lilis Septiana
Abstrak : Most  Probable  Number (MPN)  merupakan  uji  yang  mendeteksi  sifat  fermentatif Coliform dalam sampel. Uji MPN terdiri dari tiga tahap, yaitu uji pendugaan ( presumptive test ), uji konfirmasi ( confirmed test ), dan  uji  kelengkapan  ( completed  test ).  Masing  –  masing  uji  tersebut  menggunakan  media  LBSS,  LBDS  dan BGLB dengan volume antara 5 ml – 10 ml. Adanya variasi volume media ini apakah akan mempengaruhi nilai positivitas dan  nilai MPN dari Coliform Merupakan permasalahan  yang dijawab dalam  penelitian ini.   Tujuan dari  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  adanya  pengaruh  variasi  volume  media  terhadap  hasil  uji  hitung bakteri Coliform metode MPN ragam 5 1 1.  Volume media yang divariasikan adalah media LBSS dan LBDS dengan  variasi  volume  4  m,  6  ml,  8  ml,  10  ml,  12  ml.  Penelitian  ini  merupakan  penelitian  eksperimen  di laboratorium. sampel yang digunakan adalah dari suspense bakteri Escherichia coli yang setara dengan standar 0,5 Mc. Farland dan diencerkan 1000 ml dengan aquadest steril, data hasil  berupa nilai MPN  yang diperoleh diuji  dengan  analisis  secara  deskriptif.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  dari  volume  media  LBDS  dan LBSS 4 ml, 6 ml, 8 ml, 10 ml, 12 ml, yang direplikasikan 5 kali didapatkan hasil positif pada semua tabung 5 1 1 dengan nilai MPN >265/100 ml. Kesimpulan dari penelitian ini adalah volume media LBSS dan LBDS tidak mempengaruhi nilai positifitas dan nilai MPN Coliform .
Kata Kunci: Coliform, Most Probable Number, LBSS, LBDS.
COLIFORM MOST PROBABLE NUMBER (MPN) WITH VARIETIES OF MEDIA VOLUME LACTOSE BROTH SINGLE STRENGTH (LBSS) AND LACTOSE BROTH DOUBLE STRENGTH (LBDS)
Abstract  : Most  Probable  Number  (MPN)  is  a  test  that  detects  the  fermentative  nature  of  Coliform  in  the sample.  The  MPN  test  consists  of  three  stages:  presumptive  test,  confirm  test,  and  completeness  test.  Each  of these tests used LBSS, LBDS and BGLB media with volume between 5 ml - 10 ml. There is the variation of this media volume, whether it will affect the positivity value and MPN value of Coliform, it is a problem that will be answered  in  this  study . The  research  objective  was  to  find  out  the  influence  of  media  volume  variation  to  the result of Coliform bacterium counting test method of MPN variety 5 1 1. The media volume which was varied namely  LBSS  and  LBDS  with  volume  variation  4  m,  6  ml,  8  ml,  10  ml,  12  Ml.  The  research  was  an experimental  in  laboratory.  The  sample  was  the  suspense  of  Escherichia  coli  bacteria  which  are  equivalent  to standard  0.5  Mc.  Farland  and  diluted  1000  ml  sterile  aquadest,  the  result  data  indicated  MPN  value  was obtained, then it is analyzed by descriptive analysis. The findings indicated that the volume of LBDS and LBSS media were 4ml, 6ml, 8ml, 10ml, 12ml, replicated 5 times obtained positive result on all tubes 5 1 1 with MPN value>  265/100  ml.  The  conclusion  of  the  research  is  media  volume  of  LBSS  and  LBDS  does  not  affect  the positive and MPN Coliform values .
Keywords: Coliform, Most Probable Number, LBSS, LBDS .

## PENDAHULUAN
Makanan  dan  minuman  merupakan  sesuatu yang  dibutuhkan  oleh  manusia  untuk  senantiasa hidup  yang  berasal  dari  hewan,  tumbuhan,  mineral, maupun  dari  zat-zat  kimia  sintetik.  Pada  umumnya makanan  dan  minuman  tersebut,  diproduksi  oleh industri secara besar-besaran dan biasanya memakan waktu yang cukup lama dalam produksi, penyimpanan,  distribusi  dan  akhirnya  sampai  ke tangan  konsumen.  Jadi  kemungkinan  dapat  terjadi pertumbuhan  mikroba  di  dalamnya  (Fardiaz  S, 1992). Coliform merupakan suatu grup bakteri yang digunakan  sebagai  indicator  adanya  polusi  kotoran dan  kondisi  yang  tidak  baik  terhadap  air,  makanan, susu dan produk-produk susu. Coliform sebagai suatu kelompok  dicirikan  sebagai  kelompok  bakteri berbentuk  batang,  gram  negatif,  tidak  membentuk spora,  aerobilik  fakultatif  yang  memfermentasi lactose  dengan  menghasilkan  asam  dan  gas  dalam waktu  48  jam  suhu  37 0 C  .  adanya  bakteri  coliform dalam makanan dan minuman menunjukkan kemungkinan  adanya  mikroba  enteropatogenik  dan toksigenik  yang  berbahaya  bagi  kesehatan  (Widianti dan  Ristianti,  2004).  .Standar  Air  Minum  dan makanan, menurut standar WHO semua sampel tidak boleh  mengandung Escherichia  coli dan  sebaiknya juga  bebas  dari  bakteri Coliform .  Standar  WHO dalam  setiap  tahun,  95%  dari  sampel-sampel  tidak boleh mengandung Coliform dalam 100 ml, tidak ada sampel  yang  mengandung Escherichia  coli dalam 100  ml,  Tidak  ada  sampel  yang  mengandung coliform lebih dari 10 dalam 100 ml, tidak boleh ada coliform  dalam  100  ml  dan  dua  sampel  yang berurutan  (Broks et  al ,  2005).      Perhitungan  jumlah
mikroba  dapat  dilakukan  dengan  uji  hitung  jumlah bakteri  dengan  beberapa  metode  : Metode  Plate Count , Penentuan volume total, Metode turbidometri , Metode  MPN ( Most  Probable  Number), Metode perhitungan cawan ( Pratiwi, Sylvia T. 2008).
Salah  satu  metode  yang  digunakan  adalah metode  MPN  ( Most  Probable  Number) ,  dalam metode  MPN  digunakan  medium  cair  di  dalam tabung  reaksi  ,  dalam  hal  ini  perhitungan  dilakukan berdasarkan  jumlah  tabung  positif.  Pengamatan tabung  yang  positif  dapat  dilihat  dengan  mengamati timbulnya kekeruhan, atau terbentuknya gas di dalam tabung  durham  untuk  bakteri    pembentuk  gas. Umumnya  untuk  setiap  pengenceran  digunakan  3 atau  5  seri  tabung.  Makin  banyak  tabung  yang digunakan  dalam  perhitungan  nilai  MPN,  akan menunjukkan  tingkat  ketelitian  yang  lebih  tinggi. Metode  MPN  biasanya  dilakukan  untuk  menghitung jumlah  bakteri  di  dalam  contoh  berbentuk  cair, meskipun  dapat  pula  digunakan  untuk  contoh berbentuk padat dengan terlebih dahulu disuspensikan  dengan  perbandingan  1  :  10  dari contoh tersebut dalam buffer. Kelompok bakteri yang dapat  dihitung  dengan  metode  MPN  juga  bervariasi bergantung  pada  media  yang  digunakan  untuk pertumbuhannya  (  Supardi  I  &  Sukamto,  1999). Metode Most  Probable  Number (MPN)  mempunyai beberapa  kelebihan,  salah  satunya  pada  volume media  LBSS  dan  LBDS  menggunakan  10  ml  dan  5 ml.  Pemeriksaan  kehadiran  bakteri  coli  dari  air dilakukan   berdasarkan  penggunaan  media  kaldu laktosa  yang  ditempatkan  di  dalam  tabung  reaksi berisi  tabung  durham  (tabung  kecil  yang  letaknya terbalik,  digunakan  untuk  menangkap  gas  yang
terjadi  akibat  fermentasi  laktosa  menjadi  asam  dan gas).  Tergantung  kepada  kepentingan,  menggunakan ragam 5 1 1 , 5 ml media LBDS pada 5 tabung dan 5 ml  media  LBSS  pada  2  tabung  (PDAM,  2015). Sampel ditumbuhkan pada seri tabung 5 atau ragam 5 1  1.  Media  pada  tabung  adalah Lactose  Broth yang diberi  indikator  perubahan  pH  dan  ditambah  tabung durham.  Pemberian  sampel  pada  tiap  seri  tabung berbeda-beda.  Untuk  sampel  sebanyak  10  ml ditumbuhkan  pada  media  LBDS  ( Lactose  Broth Double Strength ) dengan volume media 10 ml. Untuk sampel  1  ml  dan  0,1  ml  dimasukkan  pada  media LBSS  ( Lactose  Broth  Single  Strength )  dengan volume  media  10  ml  (Lay  B  W  ,  1992).  Apakah variasi  volume  media  LBSS  dan  LBDS  akan mempengaruhi  nilai  positifitas  dan  nilai  MPN Coliform  ?  merupakan  permasalahan  yang  akan dijawab dalam penelitian ini.

## METODE
Rancangan penelitian ini merupakan penelitian  eksperimen  dilaboratorium,  dengan  5 perlakuan  variasi  volume  media  LBSS  dan  LBDS, variasi  volume  media  LBDS  dan  LBSS  dengan komposisi beef  extract, lactose, pepton,  aquadest yang  sudah  dilarutkan  dan  disterilisasi  kemudian dimasukkan ke dalam tabung dengan volume 4 ml, 6 ml,  8  ml,  10  ml  dan  12  m.  Setiap  perlakuan dilakukan  replikasi  5  kali,  sehingga  besar  unit eksperimen adalah 25 unit. Populasi dan Sampel dari penelitian  ini  adalah  suspensi  bakteri Escherichia coli 0,5 Unit Mc. Farland dengan jumlah sel bakteri 0,15  x  10 9 /ml.  Metode  pemeriksaan  yang  digunakan dalam  uji  hitung  bakteri coliform adalah  metode
Most  Probable  Number (MPN),  dengan  langkah- langkah sebagai berikut : Persiapan  sampel,  mencari nilai  MPN  sampel,  menghitung  hasil  dan  mengolah data. Variable bebas dari penelitian ini adalah variasi volume  media  LBSS  dan  LBDS,    Variable  terikat  : hasil  uji  MPN  ragam    5  1  1.  Hasil  uji  MPN  adalah pembacaan hasil uji dari suspensi bakteri Escherichia coli standar  0,5  Mc  farland  setelah  dilanjutkan  dari media  LBDS  ,  LBSS  ke  media  BGLB  dengan membaca  adanya  gelombang  gas.  Data  yang dikumpulkan  dari  penelitian  ini  adalah  hasil  uji hitung bakteri coliform metode MPN dengan volume media  LBDS,  LBSS  yang  di  variasikan  dari  4  ml,  6 ml, 8 ml, 10 ml, 12 ml.
Alat  penelitian  :  Tabung  durham,  Tabung reaksi,  Rak  tabung,  Ose,  Autoclave,  Beaker  glass, Incubator,  Lampu  spritus,  Pipet  ukur  10  ml,  Batang pengaduk,  Plate,  Neraca  analitik,  Hot  plate, Erlenmeyer,Kapas,Tissue.  Bahan  :Suspensi  bakteri Escherichia coli, Aquadest, Alcohol 70%. Media dan Reagensia : Lactose Broth Double Strength (LBDS), Lactose  Broth  Single  Strength (LBSS), Brilliant Green  Lactose  Broth (BGLB)  dan  Nutrient  Broth NB).
Cara Kerja penelitian meliputi :
1.  Pembuatan  sampel  :  Suspensi Escherichia  coli dengan  kepekatan  sel  bakteri  0,5  unit Mc.  Farland dibuat  dalam  media  BHI  (seperti  terlihat  pada gambar  1).  Jika  kepekatan  sudah  sama  dengan standar  0,5 Mc  farland ,  lalu  masukkan  1  ml  dari media BHI tersebut ke dalam 1000 ml aquadest steril (sebagai sampel air uji).
Gambar 1. Suspensi Escherichia coli dengan kepekatan sel bakteri 0,5 unit Mc. Farland dalam media BHI
2.  Uji  pendugaan  ( Presumptive  test )  :  Disiapkan media  LBSS  dan  LBDS  sesuai  dengan  dasar  MPN yang digunakan ragam 5 1 1, selanjutnya disiapkan 5 deret tabung reaksi sesuai jumlah volume media yang divariasikan  12,  10,  8  ,  6  ,  4  ml,  dengan  jumlah tabung  reaksi  dalam  1  deret  7  tabung,dimasukkan tabung  durham  ke  semua  tabung  dengan  posisi terbalik,  dimasukkan  media  LBDS  pada  5  tabung pertama  disemua  deret  tabung  sesuai  volume  media yang  divariasikan,  dimasukkan  media  LBSS  pada  2 tabung dari semua deret tabung variasi sesuai volume media yang di variasikan. Dimasukkan 10 ml sampel pada  5  tabung  dari  semua  deret  tabung  variasi, kemudian  2  tabung  yang  berisi  media  LBSS dimasukkan 1 ml sampel pada satu tabung dan 0,1 ml pada  tabung  sisanya.  Dan  dialkukan  inkubasi  pada suhu  37 0 C  selama  48  jam.  Hasil  positif  apabila terjadi terdapat gas dalam tabung durham. 3.  Uji  penegas  ( Confirmed  test )  :  Disiapkan  tabung reaksi  sesuai  jumlah  tabung  yang  positf  pada  uji penduga.  Setiap  tabung  diisi  10  ml  media  BGLB  , dan  masukka  1  ose  dari  tabung  positif  uji  penduga, masukkan tabung durham ke semua tabung. Inkubasi pada suhu 37 0 C selama 48 jam. Hasil positif apabila terdapat  gas  dalam  tabung  durham  (seperti  terlihat
pada  gambar  2).  Hasil  dibacal  dengan  mencocokan pada  tabel  MPN  5-1-1  Formula  Thomas  seperti terlihat pada tabel 1.
Gambar 2.  Interpretasi hasi pada uji penegas ( Confirmed test ) menggunakan tabel MPN 5-1-1
Formula Thomas
Tabel 1. Tabel  MPN 511 Menurut Formula Thomas
Jumlah Tabung (+) Gas Pada Penanaman Index Mpn Per 100 ML 5x10 ml 1x1 ml 1x 0,1 ml 0 0 0 0 1 1 1 1 2 2 2 2 3 3 3 3 4 4 4 4 5 5 5 5 0 0 1 1 0 0 1 1 0 0 1 1 0 0 1 1 0 0 1 1 0 0 1 1 0 1 0 1 0 1 0 1 0 1 0 1 0 1 0 1 0 1 0 1 0 1 0 1 0 2 2 4 2 4 4 7 5 8 8 10 9 13 12 16 17 21 22 27 67 84 265 ≤ 979

## HASIL PENELITIAN
Hasil  uji  hitung  bakteri Coliform metode MPN    dengan  menggunakan  variasi  volume  media LBSS dan LBDS di tunjukkan pada tabel 2.

## Tabel 2. Hasil Nilai MPN Coliform dengan variasi volume LBSS dan LBDS
Perlakuan Hasil uji MPN Replikasi 1 2 3 4 5 5 1 1 5 1 1 5 1 1 5 1 1 5 1 1 T0 + + + + + + + + + + + + + + + T1 + + + + + + + + + + + + + + + T2 + + + + + + + + + + + + + + + T3 + + + + + + + + + + + + + + + T4 + + + + + + + + + + + + + + + T5 + + + + + + + + + + + + + + + Keterangan : T0 :  Kontrol  (  menggunakan  volume  media LBDS LBSS 10ml ) T1 : variasi volume media LBDS LBSS 4 ml
T2 : variasi volume media LBDS LBSS 6 ml
T3 : variasi volume media LBDS LBSS 8 ml
T4 : variasi volume media LBDS LBSS 10 ml
T5
: variasi volume media LBDS LBSS 12 ml
(+) :  adanya  gelembung  gas  pada  tabung
durham
(-) :  tidak  adanya  gelembung  gas  pada  tabung durham

## PEMBAHASAN
MPN  ( Most  Probable  Number )  merupakan uji yang mendeteksi sifat fermentatif Coliform dalam sampel,  MPN  terdiri  dari  tiga  tahap,  yaitu  uji pendugaan  ( Presumptive  test ),  uji  konfirmasi ( Confirmed  test ),  dan  uji  kelengkapan  ( Completed test ). Dalam uji tahap pertama, keberadaan Coliform masih  dalam  tingkat  probabilitas  rendah,  masih dalam  dugaan  (Suriawiria,  2005).  Metode  MPN ( Most  Probable  Number )  mempunyai  beberapa kelebihan,  salah  satunya  pada  volume  media  LBSS dan  LBTS  menggunakan  10  ml  dan  5  ml. Pemeriksaan  adanya  bakteri  coli  dari  air  dilakukan berdasarkan  penggunaan  media  kaldu  laktosa  yang
ditempatkan  di  dalam  tabung  reaksi  berisi  tabung durham  (tabung  kecil  yang  letaknya  terbalik, digunakan  untuk  menangkap  gas  yang  terjadi  akibat fermentasi laktosa menjadi asam dan gas). Tergantung  kepada  kepentingan,  menggunakan ragam 5 1 1 , 5 ml media LBTS pada 5 tabung dan 5 ml  media  LBSS  pada  2  tabung  (  PDAM  ,  2015).
Sampel ditumbuhkan pada media LBDS dan LBSS  dengan  ragam  5  1  1.  Media  pada  tabung adalah Lactose  Broth yang  diberi  indikator perubahan  pH  dan  ditambah  tabung  durham. Pemberian  sampel  pada  tiap  seri  tabung  berbeda- beda.  Untuk  sampel  sebanyak  10  ml  ditumbuhkan pada  media  LBDS (Lactose  Broth  Double  Strength ) dengan volume media 10 ml. Untuk sampel 1 ml dan 0,1 ml dimasukkan pada media LBSS ( Lactose Broth Single Strength ) dengan volume media 10 ml (Lay B W  ,  1992).  Dalam  penelitian  ini  dengan  volume media LBDS dan LBSS yang di variasikan dari 4 ml , 6  ml, 8  ml, 10  ml, 12  ml , sampel  yang digunakan dari  suspensi  bakteri Escherichia  coli yang  setara dengan standar 0,5 Mc. farland kemudian diencerkan 1000  ml  dengan  aquadest  steril.  Prinsip  utama metode  ini  adalah  mengencerkan  sampel  sampai tingkat  tertentu  sehingga  didapatkan  konsentrasi mikroorganisme yang sesuai dan jika ditanam dalam
tabung  menghasilkan  frekuensi  pertumbuhan  tabung positif.  Semakin  besar  jumlah  sampel  yang dimasukkan  (semakin  rendah  pengenceran  yang dilakukan)  maka  semakin  “sering”  tabung  positif yang  muncul.  Semakin  kecil  jumlah  sampel  yang ditambahkan  (semakin  tinggi  pengenceran)  maka semakin “jarang” tabung positif yang muncul. Semua tabung  positif  yang  dihasilkan  sangat  tergantung dengan probabilitas sel yang terambil oleh pipet saat memasukkannya  kedalam  media. Media LB ( lactose broth) yang  digunakan  ada  dua  tipe  yaitu double strength dan single  strength .  Kedua  tipe  memiliki perbedaan  pada  jumlah  komposisi  penyusunya. Media  LBDS  ( lactose  broth  double  strength ) memiliki  komposisi  ekstrak  daging  sapi  (3  gram), pepton (5 gram), laktosa (10 gram) , dan bromotimol biru  (0,2%)  per  liternya,  sedangkan  media  LBSS ( lactose  broth  single  strength )  memiliki  komposisi yang sama tapi hanya kadar laktosanya setengah dari LBDS yaitu 5 gram (Volk, 1988).  Laktosa, sukrosa, fruktosa,  glukosa  yaitu  jenis  karbohidrat  yang umumnya sering digunakan, karbohidrat ditambahkan  untuk  memperkaya  pembentukan  asam dan  gas  dari  karbohidrat.  Konsentrasi  yang ditambahkan  untuk  analisis  fermentasi  adalah  0,5  - 1%. Berdasarkan hasil penelitian yang dilakukan bahwa  semua  tabung  menunjukan  hasil  positif  dari perlakuan volume media 4 ml, 6 ml, 8 ml, 10 ml, dan 12  ml  .  ada  beberapa  faktor  yang  memungkinkan hasil  positif  pada  tabung  yaitu  tingkat  pengenceran sampel  yang  masih rendah, sehingga semakin sering tabung  positif  yang  muncul,  diperlukan  tingkat pengenceran  yang  lebih  tinggi  dan  komposisi  media LBDS dan  LBSS dari volume media tertinggi 12  ml
dan  terendah  4  ml  mengandung  lactose  yang  dapat memfermentasikan  asam  dan  gas  dengan  jumlah yang  sama  meskipun  jumlah  volume  berbeda .Penelitian  ini  didukung  dari  beberapa  sumber  buku tentang  prosedur  kerja Most  Probable  Number (MPN) yang menggunakan volume media LBDS dan BLSS yang berbeda-beda misalnya volume 5 ml dan 10  ml  .  perbedaannya  dari  penelitian  ini  adalah menggunakan  volume  media  yang di variasikan dari volume  4  ml,  6  ml,  8  ml,  10  ml,  12  ml.
Penelitian yang telah dilakukan ini memiliki kelemahan,  yaitu  peneliti  menggunakan  tingkat pengenceran  sampel  yang  terlalu  tinggi  yaitu 15.000/100  ml  sehingga  hasil  yang  didapatkan  pada tabung ragam 511 semua positif, seharusnya peneliti menggunakan  tingkat  pengenceran  sampel  di  bawah 15.000/100  ml  sampel  sehingga  memaksimalkan hasil penelitian.

## KESIMPULAN DAN SARAN

## Kesimpulan
Hasil    MPN  dengan  kepadatan  bakteri Escherichia coli 0,5 unit Mc. Farland dengan jumlah sel  0,15  x  109/ml  dengan  menggunakan  variasi volume media LBSS dan LBDS  4 ml, 6 ml, 8 ml, 10 ml,  12  ml,  adalah  >265/100  ml.  Adanya  variasi volume  media  LBSS  dan  LBDS  tidak  berpengaruh terhadap nilai MPN Coliform .

## Saran
Untuk  pemeriksaan  nilai  MPN  Coliform dengan  menggunakans  ampel    isolat  murni Escherichia  coli  dapat  menggunakan  media  LBSS dan  LBDS  dengan  volume  antara  4  ml  sampai dengan  12  ml.  Perlu  dilakukan  penelitian  lanjutan
dengan  menggunakan  sampel  air  sungai  untuk pembuktian aplikatif dari penggunaan variasi volume media LBSS dan LBDS.

## DAFTAR PUSTAKA
Brooks, Geo F, Butel, Janet S, Morse, Stephen A, et al .  2005.  Mikrobiologi  Kedokteran  (edisi  1).
Jakarta : Salemba Medika.
Fardiaz,  Srikandi.  1992. Mikrobiologi  Pangan  1.
Jakarta : PT. Gramedia Pustaka Utam
Lay  ,  bibiana  W  ,  1994  .  Analisis  mikroba  di laboratorium  ,  institute  pertanian  bogor  ,  raja grafindo persada , Bogor .
Pratiwi,  Sylvia  T.  2008.  Mikrobiologi  Farmasi. Jakarta: Erlangga. Hal 107-110.
Protap,PDAM Giri Menang. 2015.
Supardi ,M dan sukamto  , 1999. Mikrobiologi dalam pengolahan  dan  keamanan  pangan  ,  penerbit alumni  Bandung .
Suriawiria,  2005.  Mikrobilogi  air  dan  dasar-dasar pengolahan  buangan  secara  biologis.  Alumni.
Bandung.
Widiyanti,  N.L.P.M.  dan  N.P.  Ristanti.  2004. Analisis Kuantitatif Bakteri.