## UJI EFEKTIFITAS PERASAN AIR JERUK NIPIS (Citrus aurantifolia S) TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI
Staphylococcus aureus SECARA IN VITRO
Sartika Widia Lauma 1) , Damajanty H. C. Pangemanan 2) , Bernart S.P Hutagalung 1)
1) Program Studi Pendidikan Dokter Gigi Fakultas Kedokteran,UNSRAT
2) Bagian Fisiologi Fakultas Kedokteran, UNSRAT

## ABSTRACT
Most  of  Indonesian  people  have  been  using  herbal  plants  as  alternative  materials  of traditional  medicine.  One  of  those  natural  materials  is  lime  (Citrus  aurantifolia,  S).  Lime contains  beneficial  chemical  compound  elements,  just  like  citric  acid,  amino  acid,  and essential  oil.  Staphylococcus  aureus  is  one  of  the  cause  of  abscess.  Dental  abscess  is  a swelling which contains viscous liquid and yellowish pus that appears on teeth and gums. The  result  of  this  study  is  to  acknowledge  whether  lime  juice  (Citrus  aurantifolia,  S)  is effective  to  inhibit  the  growth  of  Staphylococcus  aureus  bacteria.  This  study  is  an experimental  study  with  the  modification  of  Kirby-bauer  method  by  using  filter  paper. Staphylococcus  aureus  is  a  pure  bacteria  stocks  that  has  been  bred.  The  result  of  this  study shows  that  the  wide-scale  of  the  inhibition  zone  average  of  lime  juice  to  Staphylococcus aureus is 735.13 mm2. The statistic calculation result by using Independent T-test is p=0.036 with  significance  p<0.05  which  means  that  H 1 is  accepted  because  there  is  a  meaningful difference between the lime juice group and the control group. This study can conclude that lime juice is effective to inhibit the growth of Staphylococcus aureus bacteria.
Keywords: Lime (Citrus Aurantifolia, S), Staphylococcus aureus.

## ABSTRAK
Masyarakat  Indonesia  telah  banyak  menggunakan  tanaman  herbal  sebagai  alternatif  bahan obat  tradisional.  Salah  satu  bahan  alami  ialah  jeruk  nipis (Citrus  aurantifolia,  S). Jeruk nipis   mengandung  unsur-unsur  senyawa  kimia  yang  bemanfaat,  seperti  asam  sitrat,  asam amino,  minyak  atsiri,. Staphylococcus  aureus merupakan  salah  satu  penyebab  terjadinya abses. Abses gigi merupakan pembengkakan yang berisi nanah cairan kental dan kekuningan yang  terjadi  pada  gigi  dan  ginggiva. Tujuan  penelitian  ini  ialah  untuk  mengetahui  apakah perasan  air  jeruk  nipis (Citrus  aurantifolia,S) efektif  terhadap  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  aureus .  Penelitian  ini  merupakan  penelitian  eksperimental  dengan  metode modifikasi  Kirby-bauer  menggunakan  kertas  saring.  Perasan  air  jeruk  nipis  murni.  Bakteri Staphylococcus aureus merupakan bakteri stok murni yang telah dibiakkan. Hasil penelitian didapatkan rata-rata luas zona hambat perasan air jeruk nipis terhadap Staphylococcus aureus sebesar  735,13  mm²  .  Hasil  perhitungan  statistik  dengn  uji Independent  T-test diketahui p=0,036  dengan  signifikansi  p  <  0.05  maka  H 1 diterima  karena  terdapat  perbedaan  yang bermakna antara kelompok perasan air jeruk nipis dan kelompok kontrol. Penelitian ini dapat disimpulkan  bahwa  perasan  air  jeruk  nipis  memilik  efek  antibakteri  dalam  menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus .
Kata Kunci : Jeruk Nipis ( Citrus Aurantifolia,S ) , Staphylococcus aureus.

## PENDAHULUAN
Jeruk  nipis  merupakan  buah-buahan yang  banyak  digemari  oleh  masyarakat  di Indonesia.  Jeruk  nipis  yang  bernama  latin Citrus  aurantifolia  Swingle ialah  sejenis tanaman  perdu  yang  banyak  tumbuh  dan dikembangkan  di  Indonesia.  Selain  itu jeruk  nipis  juga  dapat    digunakan  untuk obat  batuk,  peleruh  dahak,  influenza,  dan obat  jerawat.  Buah ini banyak dikonsumsi masyarakat  dan  mempunyai  harga  relatif murah,  mudah  diperoleh,  alamiah,  serta tidak menimbulkan  efek  samping  bagi pemakainya. 1
Jeruk  nipis   mengandung  unsur-unsur senyawa  kimia  yang  bemanfaat,  seperti asam  sitrat,  asam  amino,  minyak  atsiri, damar,  glikosida,  asam  sitrun,  lemak, kalsium,  fosfor, besi,  belerang vitamin B1 dan  C. 2 Kandungan  Gizi  dalam  100gram buah  jeruk  nipis  mengandung  vitamin  C sebesar 27 miligram, kalsium 40 miligram, fosfor  22  miligram,  hidrat  arang  12,4 gram,  vitamin  B1  0,04  miligram,  zat  besi 0,6  miligram,  lemak  0,1  gram,  kalori  37 gram,  protein  0,8  gram  dan  mengandung air 86 gram. 3
Minyak  atsiri  yang  terkandung  dalam jeruk  nipis  mempunyai  fungsi  sebagai antibakteri,  yang  salah  satu  kandungan minyak  atrisi  yang  mempunyai  peran paling penting dalam meghambat pertumbuhan bakteri ialah flavonoid. 4
Staphylococcus  aureus merupakan salah  satu  bakteri  gram  positif  berbentuk bulat yang merupakan bakteri patogen bagi manusia. Staphylococcus  aureus juga dapat menginfeksi jaringan atau alat tubuh lain yang menyebabkan timbulnya penyakit  dengan  tanda-tanda  yang  khas seperti nekrosis, peradangan dan pembentukan abses. 5
Abses  biasanya  terjadi  dikarenakan infeksi  bakteri.  Kebanyakan  abses  akan
menimbulkan  rasa  sakit,  sehingga  orang akan secepatnya mencari solusi untuk rasa sakitnya.  Rasa  sakit  yang  ditimbulkan akan datang tiba-tiba dan akan berlangsung selama beberapa hari ataupun beberapa  minggu.  Abses  bisa  terjadi  pada semua struktur atau jaringan rongga mulut, abses  rongga  mulut  yang  paling  sering terjadi  adalah  abses  periodontal  dan  abses periapikal dan salah satu bakteri penyebab abses  periodontal  adalah Staphylococcus aureus. 6
Berdasarkan  latar  belakang  diatas peneliti  tertarik  untuk  meneliti  apakah perasan  dari  air  jeruk  nipis  dapat menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus Aureus secara in vitro.
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui  efektivitas  perasan  air  jeruk nipis (Citrus aurentifolia Swingle) terhadap pertumbuhan bakteri
Staphylococcus aureus secara in vitro .

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  merupakan  penelitian eksperimental laboratoris dengan rancangan penelitian post test only control group  design .  Penelitian  ini  dilaksanakan pada  bulan  Juni  -  Juli  2015.  Subjek  dari penelitian  ini  adalah  jamur Candida albicans .  Variabel  penelitian  ini  yaitu perasan  air  jeruk  nipis  dan  pertumbuhan Staphylococcus aureus yang diperoleh dari hapusan  mukosa  rongga  mulut  yang  telah dibiakkan.
Perasan  air  jeruk  nipis  diperas  dan disaring airnya sebanyak 100 ml menggunakan saringan dimasukkan kedalam  tabung  Erlenmeyer  steril,  lalu ditutup  dengan  aluminium  foil  steril  dan disimpan  pada  suhu  4°C  sampai  saat digunakan.
Candida albicans yang digunakan diambil apusan  dari  pengguna  gigi  tiruan  lepasan
akrilik  yang  memenuhi  kriteria  inklusi menggunakan kapas lidi steril.
Staphylococcus aureus kemudian dikembangbiakkan  selama  1x24  jam dengan  suhu  37 0 C  pada  lima  cawan  petri untuk selanjutnya diberi  perlakuan dengan kertas  saring.  Pengukuran  zona  hambat perasan  air  jeruk  nipis  dilakukan  pada  5 cawan  petri  dengan  tiga  perlakuan  yang berbeda  yaitu  kelompok  perasan  air  jeruk nipis  ,  kontrol  positif  klindamisin,  dan kontrol negatif akuades.
Metode  pengujian  yang  digunakan dalam  penelitian  ini  ialah  metode  Kirby- Bauer dengan menggunakan kertas saring, bakteri staphylococcus aureus yang diambil  dari  hapusan  langsung  dari  dalam rongga  mulut  diambil  dengan  jarum  ose steril,  lalu  ditanamkan  pada  media  miring dengan cara diratakan dengan menggunakan dry glass. Bakteri yang telah diratakan  pada  media  agar  diinkubasi dalam inkubator pada suhu 37°C selama 1 x  24  jam.  Bakteri  yang  telah  diinkubasi diambil  dari  koloninya  dari  media  agar miring  dengan  menggunakan  jarum  ose steril  kemudian  dimasukkan  kedalam media  BHI-B  sampai  kekeruhannya  sama dengan  standar  McFarland.  Media  MHA yang  telah  berisi  bakteri  diratakan  dengan menggunakan  dry  glass  diputar  searah jarum  jam  sampai  permukaannya  merata. Selanjutnya  kertas  saring  yang  telah  di potong  seperti  cakram  dengan  ukuran  0,5 mm  menggunakan  perforator  sebanyak  15 cakram,  setiap  cawan  petri  berisi  dari  1 cakram  yang  telah  dicelupkan  kedalam perasan  air  jeruk  nipis  murni  100%,  1 cakram  kontrol  positif  yaitu  antibiotic clindamycin, dan 1 cakram kontrol negatif akuades.  Setelah  itu  di  letakkan  pada media  MHA,  perlakuan  yang  sama dilakukan  sebanyak  5  kali  pada  masing cawan  petri.  Setelah  itu  cawan  petri
diinkubasi  dalam  inkubator  pada  suhu 37°C selama 24 jam.
Pengamatan  dilakukan  setelah  24  jam masa  inkubasi.  Zona  bening  disekitar cakram  merupakan  petunjuk  kepekaan bakteri  terhadap  bahan  antibakteri  yang digunakan sebagai bahan uji dan dinyatakan dengan luas zona hambat. Zona hambat  yang  terbentuk  disekitar  cakram kertas  saring  diukur  menggunakan  jangka sorong dan dihitung luasnya dengan rumus luas lingkaran :
Data  hasil  penelitian  dihitung secara  manual,  dan  diuji    dengan  analisis independent T-test. Data yang telah diolah kemudian disajikan dalam bentuk  gambar, tabel, dan tulisan.

## HASIL PENELITIAN
Petridish  yang  telah  di  inkubasi selama 1x24 jam pada suhu 37°C di dalam inkubator  diambil  dan  dilihat  zona hambatnya.
Gambar  1 .  Zona  hambat  yang  terbentuk pada media MHA.
Zona hambat yang dihasilkan dari masing- masing  pengulangan  memiliki    diameter yang  berbeda-beda  dan  bentuk  yang  tidak beraturan.  Oleh  karena  itu,  pengamatan dilakukan  dengan  mengukur  diameter

## L = π r 2
horizontal  dan  diameter  vertikal  dari  zona yang  terbentuk  di  sekitar  cakram.  Kedua diameter tersebut masing-masing dikurangi  0,5  mm  (ukuran  kertas  saring) hasilnya  di  tambahkan  dan  dibagi  dua untuk  mendapatkan  nilai  diameter  zona hambat.  Untuk  mencari  luas  zona  hambat hasil  dari  diameter  zona  hambat  di pangkatkan dua dan dikalikan dengan 3,14 hasil  pengukuran  diameter  zona  hambat dan  luas  zona  hambat  yang  terbentuk  di sekitar cakram (Tabel 1 dan 2).
Rerata dari diameter zona hambat yang terbentuk  pada  perasan  air  jeruk  nipis sebesar  14,22  mm,  diameter  zona  hambat klindamisin  25,1  mm,  dan  pada  akuades tidak terdapat zona hambat.
Tabel  1. Diameter  Zona  Hambat  Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus.
Diamater zona hambat (mm) Perlakua n Perasan air jeruk nipis Klindamisi n (kontrol postif) Akuade s (kontrol negatif) 1 13,3 23,3 0 2 14,0 26,5 0 3 8,9 24,4 0 4 10,1 24,8 0 5 24,8 26,5 0 Rerata 14,22 25,1 0
Tabel  2. Luas  Zona  Hambat  Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus.
Luas zona hambat (mm 2 ) Perlakuan  Perasan
air jeruk nipis Klindamisin (kontrol postif) Akuades (kontrol negatif) 1 555,43 1711,99 0
2 617,19 2205,06 0 3 251,52 1869,43 0 4 320,31 1931,22 0 5 1931,22 2205,06 0 Rerata 735,13 1844,55 0
Rerata  dari  luas  zona  hambat  yang terbentuk  pada  perasan  air  jeruk  nipis 735,13mm², luas zona hambat klindamisin 1844,55  mm²,  dan  pada  akuades  tidak terdapat zona hambat.

## BAHASAN
Penelitian ini merupakan uji eksperimen  untuk  mengetahui  adanya efektivitas  antibakteri  dari  perasan  air jeruk nipis dalam menghambat
pertumbuhan koloni bakteri Stahylococcus aureus. Penelitian  dilakukan  dengan  cara membiakkan bakteri Staphylococcus aureus dalam  media Muller-Hinton  Agar disertai  dengan  perlekatan  kertas  saring yang  diberi  perasan  air  jeruk  nipis  dan antibiotik  clindamycin  sebagai  kontrol positif  dan  akuades  sebagai  kontrol negatif, lalu diinkubasi ke dalam inkubator dengan  suhu  37°C  selama  24  jam. Hasilnya  terlihat  zona  hambat  disekitar kertas  saring  perasan  air  jeruk  nipis mampu  menghambat  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus aureus .
Zona  hambat  yang  terbentuk  pada kertas  saring  yang  berisi  perasan  air  jeruk nipis menunjukkan bahwa efek antibakteri dari  perasan  air  jeruk  nipis  memiliki  daya hambat. Penilaian zona hambat dilihat dari hasil pengukuran diameter yang digolongan  menjadi  (1)  tidak  ada  zona hambat,  (2)  lemah  yaitu  zona  hambat kurang  dari  5mm,  (3)  sedang  yaitu  zona hambat  5-10  mm,  (4)  kuat  yaitu  zona hambat  11-20  mm,  dan  (5)  sangat  kuat yaitu  zona  hambat  21-30  mm  pada penelitian  Davis  dan  Stout  pada  tahun
1971 7 .  Berdasarkan  kriteria  diatas  zona hambat  yang  terbentuk  disekitar  kertas saring  yang  berisi  perasan  air  jeruk  nipis dapat  dikategorikan  daya  hambat  yang kuat  dengan  rerata  diameter  zona  hambat sebesar  14,22  mm  .  Zona  hambat  yang terbentuk  pada  antibiotik  clindamycin lebih kuat dibandingan dengan rerata zona hambat  yang  terbentuk  pada  perasan  air jeruk  nipis  dengan  rerata  diameter  zona hambat  sebesar  25,1  mm,  sedangkan  pada akuades tidak terbentuk zona hambat, yang berarti  akuades  sebagai  control  negatif tidak  dapat  menghambat  pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureu.
Hasil penelitian luas zona hambat yang terbentuk bervariasi pada setiap perlakuan  pada  cawan  petri  berisi  perasan air  jeruk  nipis  yaitu  sebesar  13,3  mm  : 14,0  mm  :  8,9  mm  :  10,1  mm  :  24,8  mm sedangkan pada kontrol positif Clindamycin  yaitu  sebesar  23,3mm  :  26,5 mm : 24,4 mm:24,8 mm: 26,5 mm. Hal ini disebabkan  oleh  jumlah  perasan  air  jeruk nipis dan kontrol positif yang terserap oleh kertas  saring  berbeda  dan  juga  di pengaruhi  perbedaan  waktu  pada  saat perendaman  kertas  saring  pada  kelompok intervensi  dan  kelompok  kontrol.  Tetapi dari  selisih  antara  luas  zona  hambat membuktikan  bahwa  efek  antibakteri clindamycin masih lebih besar dibandingkan dengan  antibakteri  yang ada pada  perasan  air  jeruk  nipis  tetapi  dengan penelitian  ini  juga  membuktikan  bahwa perasan air jeruk nipis juga memiliki daya hambat    terhadap  pertumbuhan  bakteri

## Staphylococcus aureus.
Berdasarkan  hasil  pengamatan  dari  5 kali  pengujian  dengan  menggunakan kertas  saring  yang  di  rendam  didalam perasan air jeruk nipis semuanya
menunjukkan adanya daya hambat
terhadap pertumbuhan Staphylococcus
aureus .  Hal  ini  karena  adanya  senyawa aktif  antibakteri  dalam  air  perasan  buah jeruk  nipis  yang  diduga  diperoleh  dari kandungan kimia yang terdapat di dalamnya,  seperti  minyak  atsiri,  yang mampu  menghambat  pertumbuhan  dari bakteri Staphylococcus aureus 8 .
Hasil  penelitian  diolah  dalam  uji Independent T-test untuk melihat perbedaan  secara  statistik.  Nilai  taraf signifikansi (p) untuk penelitian laboratorium  0,05.  Jika  p  >  0,05  maka  H 0 diterima  tetapi  jika  p  <  0,05  maka  H 1 diterima. Dari hasil uji statistik independent T-test diperoleh nilai p=0,036 dengan  signifikansi  p  <  0,05  maka  H 1 diterima,  Uji  statistik  juga  membuktikan bahwa  terdapat  perbedaan  bermakna antara  luas  zona  hambat  perasan  air  jeruk nipis dengan luas zona hambat clindamycin.
Hasil  penelitian  ini  juga  didukung dengan  penelitian  sebelumnya  tentang  uji daya  hambat  air  jeruk  nipis  terhadap pertumbuhan candida albicans pada gigitiruan  lepasan  akrilik.  Hasil  yang diperoleh  terbukti  perasan  air  jeruk  nipis dapat  menhambat  pertumbuhan  koloni candida albicans.

## KESIMPULAN
Perasan air jeruk nipis (citrus aurantifolia) memiliki efektivitas terhadap pertumbuhan    bakteri Staphylococcus aureus, dibuktikan dengan  didapatkannya perbedaan  rerata  luas  zona  hambat  antara kelompok  intervensi  dengan  kelompok kontrol dan telah teruji secara statistik.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Adina  AB,  Handoko  FF, Setyarini II,
Sulistyorini E . Jeruk Nipis (Citrus aurantifolia)  CCRC  Farmasi  UGM
[artikel
online]
https://ccrcfarmasiugm.wordpress.c om/ensiklopedia/ensiklopedia- tanaman-anti-kanker/j/jeruk-nipis/ [dikutip 15 Maret 2015].
2. Sherli . Kesehatan khasiat jeruk nipis.
[artikel    online  ]  September  2007 [dikutip  26  Maret  2015]  Diakses
dari :
http://www.greenthesky.com/artike l/kesehatan/9/khasiat_jeruk_nipis/7 0/ .
3. Lusi, I. N. Pemanfaatan Kandungan Air Jeruk Nipis (The Utilization of Content Water Lime). Jurnal UNEJ
2013 : I (1) : h. 1-4.
4. Sudirman, A. T. Uji Efektivitas Daun
Salam (Eugenia polyantha) terhadap Pertumbuhan Staphylococcus  aureus  secara  in vitro. [skripsi]. Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Hassanudin.  Makassar  :  2014.  h. 11-4.
5. Wiguna,  I. Mengetahui  Daya  Hambat
dari
Air  Perak  dalam  Produk  Ionic
Silver  Gt  dalam  menghambat Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus  Aureus.  [skripsi]. Fakultas Kedokteran Gigi Universitas  Hassanudin.  Makassar
: 2011.
6. Fernando, N . Dental abscess / abses gigi. [article online]. Februari
2012  [dikutip  20  maret  2015] Diakses dari :
http://doktergigibatam.com/dental- abscess-abses-gigi/ .
7. Davis WW, Stout TR . Disc Plate Method
Of Microbiology Antibiotic  Assay.  Microbiology.
1971. 22 (4). p.659-65.
8. Hariana, Arief. Tumbuhan Obat
&  Kasiatnya  seri  1.  Jakarta  :
Penebar  Swadaya.  2006.  h.149-5