Aktivitas Achyranthes Aspera Linn.  dalam  Menurunkan Kadar Kolesterol dan Glukosa Darah Hewan Uji Resistensi Insulin
(Activity  of Achyranthes  Aspera Linn.  on  Reduction  of Cholesterol and Blood Glucose Levels in Insulin Resistance Animal Models)

## DANIEK VIVIANDHARI*, MAHARADINGGA, FARAH ZAHRIA, PUTRI HARDIYANTI
Fakultas Farmasi dan Sains, Universitas Muhammadiyah Prof. Dr. HAMKA, Jakarta Diterima 28 Desember 2020, Disetujui 24 Maret 2022
Vol. 20, No. 1 JURNAL ILMU KEFARMASIAN  INDONESIA, April 2022,  hlm. 73-80 ISSN 1693-1831, E-ISSN 2614-6495
Abstract: The  most  common  causative  factor  in  patients  with  type  2  diabetes  is  insulin  resistance. Achyranthes Aspera  Linn.  is known  as  a  medicinal  plant which  has  been  shown  based  on previous research to reduce total cholesterol, triglyceride, and blood glucose levels, but the eﬀ ective dose is not yet known in insulin resistance rats. Further study is necessary to ensure the eﬀ ect and also the dose. The  purpose  of  the  research  was  to  determine  the  activity  of  the  extract  in  reducing  levels  of  total cholesterol, triglycerides, blood glucose, and OGTT in insulin resistance rats. 7 groups (each  group consist of 4 animals) were divided, i.e. normal control (not induced), negative group (given with Na- CMC 0.5%), positive group 1 (fenoﬁ brate), positive group 2 (metformin HCl), extract group dose 250, 500, and 750 mg / kg BW for 14 days of treatment. Induction of insulin resistance using streptozotocin. Total  cholesterol,  triglyceride,  blood  glucose,  and  OGTT  levels  were  measured  using  a  clinical spectrophotometer.  Oneway ANOVA followed by the Tukey test were used to analyze the data.  Data indicated that the third dose extract (750 mg/kg BW) could lower total cholesterol, triglycerides, blood glucose, and OGTT with the percentages of reduction of 48.83%, 48.95%, and 61.31%, respectively, and at OGTT the smallest AUC value was 23,991 mg/dL per minute.
Keywords: Achyranthes Aspera Linn., cholesterols, blood glucose, insulin resistance.
Abstrak: Faktor  penyebab  terbanyak  pada  pasien  diabetes  melitus  tipe  2  adalah  resistensi  insulin. Jarong diketahui sebagai tanaman obat yang berdasarkan penelitian sebelumnya terbukti menurunkan kadar kolesterol total,  trigliserida,  dan glukosa darah, namun belum  diketahui dosis efektifnya pada tikus resistensi insulin.  Sehingga perlu penelitian lanjutan untuk menentukan efek dan dosis. Tujuan riset  ini yaitu  menilai aktivitas ekstrak etanol 70% daun jarong dalam menurunkan  kadar kolesterol total,  trigliserida,  glukosa  darah,  serta  Tes  Toleransi  Glukosa  Oral  (TTGO)  tikus  resistensi  insulin. Sebanyak  28  ekor  hewan  uji  (4  ekor  tiap  kelompok)  dibagi  dalam  7  macam  perlakuan,  terdiri  dari kontrol  normal  (tidak  diinduksi),  kelompok  negatif  (suspensi  Na  CMC  0,5%),  kelompok  positif  1 (fenoﬁ brat), kelompok positif 2 (metformin HCl), kelompok ekstrak dosis 250, 500, dan 750 mg/kgBB selama perlakuan 14 hari.  Induksi  resistensi insulin  menggunakan  streptozotocin. Kadar trigliserida, kolesterol  total,  glukosa  darah,  dan  TTGO  diukur  menggunakan  spektrofotometer  klinikal. Analisis data dengan oneway ANOVA kemudian uji Tukey. Data menunjukkan ekstrak daun jarong dosis 750 mg/kgBB mampu menurunkan kadar kolesterol total, trigliserida, glukosa darah, dan TTGO dengan persentase penurunan berturut-turut 48,83%, 48,95%, dan 61,31%, serta pada TTGO nilai AUC terkecil yaitu 23.991 mg/dL per menit pada tikus resistensi insulin.
Kata kunci: Achyranthes Aspera Linn., kolesterol, glukosa darah, resistensi insulin.
74  VIVIANDHARI ET AL.
Jurnal Ilmu Kefarmasian Indonesia
menunjukkan  bahwa  ekstrak  daun  jarong  efektif menurunkan  trigliserida  dan  kolesterol  hewan  uji yang diinduksi triton (10) . Penelitian lain menyebutkan bahwa biji tanaman jarong yang mengandung saponin secara signiﬁ kan menurunkan trigliserida, LDL, dan kolesterol total secara signiﬁ kan serta meningkatkan kadar HDL pada tikus model dislipidemia (11) .
Riset  yang  dilakukan  oleh  Kamalakkannan dan  Balakrishnan  (2015)  menunjukkan  bahwa ekstrak  air  dosis  500  mg/kg  daun Achyranthes aspera Linn  mampu  menurunkan  glukosa  darah dan  level  glukosilat  hemoglobin  secara  signiﬁ kan pada tikus wistar albino yang diinduksi alloksan (12) . Pada penelitian potensi antidiabetes yang diinduksi STZ (Streptozotocin) ekstrak etanol 96% dosis 250 mg/kgBB  daun Achyranthes  aspera Linn.  mampu menurunkan glukosa darah dengan persentase 22,6% selama 24 jam dan 26,7% penurunan glukosa darah selama 24 jam (dosis 500 mg/kgBB) (13) .
Kebaruan pada penelitian ini adalah hewan uji yang  dikondisikan  multipatologi  (hiperkolesterol dan  hiperglikemia)  dan  membuat  model  tikus resistensi insulin agar dapat mencerminkan kondisi nyata di lingkungan saat ini bahwa DM tipe 2 yang kebanyakan dialami oleh masyarakat Indonesia adalah akibat resistensi insulin. Permasalahan penelitian ini adalah belum diketahuinya dosis potensial dari daun jarong yang mampu menyebabkan penurunan kadar trigliserida,  kolesterol  total,  TTGO  (Tes  Toleransi Glukosa  Oral),  dan  glukosa  darah  tikus  resistensi insulin.
Penelitian ini adalah riset lanjutan untuk dapat menentukan efek serta dosis daun Achyranthes aspera Linn.  dalam  menurunkan  trigliserida,  kolesterol total,  TTGO,  dan  glukosa  darah  pada  hewan  uji dengan model resistensi insulin dengan pre-treatment pakan  tinggi  lemak  dan  STZ  untuk  menyebabkan hperlipidemia dan diabetes melitus.

## BAHAN DAN METODE
BAHAN. Bahan  berupa  daun  jarong  ( Achyranthes aspera Linn.)  (Balitro,  Indonesia),  etanol  70%, aquadest, aquadest panas, amoniak (Merck, Germany), larutan HCl 2N, H 2 SO 4 pekat, buﬀ er sitrat salin  (asam sitrat,  Na  sitrat)  (Nitra  Kimia,  Indonesia),  gelatin (Merck,  10%,  Germany),  Na-CMC  (PT.  Brataco, 0,5%, Indonesia), pakan untuk diet tinggi lemak (pakan standar BR2 (Japfa Comfeed, Indonesia) (sebanyak 80%),  lemak  kambing (sebanyak 15%)  dan  kuning telur  bebek  (sebanyak  5%)),  pereaksi  dragendorf (Nitra  Kimia,  Indonesia),  pereaksi  Mayer,  pereaksi Bouchardat, serbuk magnesium (Merck, Germany), ketamine (Combiphar,  50  mg/mL,  Indonesia)

## PENDAHULUAN
PREVALENSI  penyakit  jantung,  hipertensi,  dan diabetes  melitus  (DM)  tipe  2  mengalami  kenaikan signiﬁ kan sejak 2013 hingga 2018 (1) . Penyakit DM tipe 2,  hipertensi,  dan  hiperlipidemia  merupakan  faktor risiko  penyakit  kardiovaskuler.  Untuk  pencegahan penyakit kardiovaskuler, perlu kesadaran tiap individu. Sebuah penelitian pada populasi Asia menunjukkan bahwa    potensi  ketidaksadaran  risiko  penyakit kardiovaskuler  pada  pasien  DM  tipe  2,  hipertensi, dan hiperlipidemia adalah sebesar 30,7%, 43,1% and 40,9%. Rendahnya kesadaran pasien DM tipe 2 dan hiperlipidemia  berkaitan  dengan  rendahnya  kontrol penyakit  sehingga  menyebabkan  risiko  morbiditas dan mortalitas yang tinggi (2) .
Hiperlipidemia/ dislipidemia merupakan kondisi saat  kolesterol  total  mengalami  peningkatan  lebih dari  200  mg/dl  dan  trigliserida  melebihi  150 mg/dl  dalam  serum (3) .  Faktor  risiko  penyebab terjadinya  hiperlipidemia  salah  satunya  adalah konsumsi makanan dengan pola diet tinggi lemak (4) . Dislipidemia dapat menyebabkan penyakit DM tipe 2, hal ini terjadi akibat dari peningkatan kadar lemak bebas dalam sirkulasi darah sehingga terjadi oksidasi lipid yang mengakibatkan penggunaan glukosa dalam otot  terhambat  sehingga  glukosa dalam  darah  akan meningkat (5) . Sebaliknya, penyakit DM tipe 2 dapat berefek pada gangguan metabolisme lemak sehingga umumnya  penderita  DM  tipe  2  juga  mengalami dislipidemia, oleh karena itu kedua penyakit ini sangat berkaitan.
DM dikarakterisasi dengan adanya peningkatan kadar  glukosa  darah  serta  perubahan  metabolisme lipid  serta  protein  karena  kurangnya  produksi  dan pengeluaran  insulin,  resistensi  insulin,  maupun akibat keduanya (6) . Pasien DM tidak cukup mampu memproduksi  atau  menggunakan  insulin  dengan baik  dalam  memproses  makanan  yang  dikonsumsi, sehingga  kadar  glukosa  darah  yang  tinggi  menjadi masalah  utama (7) .  Resistensi  insulin  merupakan kondisi  dimana  jumlah  insulin  memadai  namun kemampuannya  untuk  mengubah  glukosa  menjadi glikogen menjadi terbatas (8) .
Pemanfaatan  bahan  alam  untuk  mengatasi penyakit degeneratif seperti hiperlipidemia dan DM tipe 2 banyak dilakukan oleh masyarakat. Tanaman jarong  ( Achyranthes  aspera Linn.)  diketahui  dapat dimanfaatkan  untuk  mengatasi  hiperlipidemia  dan diabetes. Tanaman obat merupakan bahan alami yang penting untuk pengembangan obat baru (9) . Penelitian pendahuluan tentang tanaman jarong mengemukakan bahwa daun jarong mengandung senyawa glikosida, triterpenoid,  saponin,  alkaloid,  dan  ﬂ avonoid  serta
Vol 20, 2022 Jurnal Ilmu Kefarmasian Indonesia 75 streptozotocin  (Sangon  Biotech,  99.09%,  China), reagen  kolesterol  (Human  Diagnostics Worldwide, Germany), reagen trigliserida, reagen glukosa (Human Diagnostics Worldwide, Germany), kapsul fenoﬁ brat (Medikon, Fenoﬁ brat 200 mg, Indonesia) dan tablet Metformin HCl 500 mg (Hexpharm Jaya, Indonesia).
M E TO D E . S t u d i   i n i   t e l a h   m e n d a p a t persetujuan  etik  (nomor:  KET-671/UN2.F1/ETIK/ PPM.00.02/2019)  yang  diterbitkan  oleh  (Fakultas Kedokteran (FK) Universitas Indonesia.
Penyiapan  Hewan. Hewan  yang  diuji  yaitu tikus galur Sprague Dawley, jenis kelamin jantan dan kisaran umur 3-4 bulan serta berat berkisar 150-200 gram  sejumlah  28  ekor  (7  kelompok),  terdiri  dari kelompok normal, kontrol negatif (diet tinggi lemak dan Na-CMC 0,5% serta diinduksi STZ 30 mg/kgBB), kontrol positif fenoﬁ brat, kontrol positif metformin HCl, dan tiga kelompok perlakuan (dosis 250, 500, dan 750 mg/kgBB)..
Pembuatan  Ekstrak  Daun  Jarong  (Metode Maserasi). Proses  maserasi  diulang  sekurang- kurangnya 2 kali menggunakan pelarut etanol 70% dengan jumlah yang sama. Lalu total hasil maserasi dijadikan  satu  selanjutnya  diuapkan  menggunakan vacuum rotary evaporator (Senco, R206D – China) pada  tekanan  rendah  dan  temperatur  ±  50°C  lalu dilanjutkan dengan penguapan di waterbath (Lokal, H-WBE-8L digital  Thermostat  Water  Bath ),  pada temperatur  50˚C  hingga  didapatkan  ekstrak  kental. Ekstrak kemudian dihitung rendemennya.
Skrining  Fitokimia  dan  Pemeriksaan  Mutu Ekstrak. Pemeriksaan  yang  dilakukan  adalah pemeriksaan organoleptik, penetapan kadar air, dan penapisan ﬁ tokimia (identiﬁ kasi alkaloid, ﬂ avonoid, saponin, tannin, triterpenoid atau steroid).
Pembuatan Pakan Induksi Diet Tinggi Lemak. Pakan  merupakan  campuran  80%  pakan  standar, 15%  lemak  dari  hewan  kambing,  serta  5%  bagian kuning dari telur bebek. Konsumsi makanan harian maksimum per hewan uji adalah 20 g. Pakan diberikan pada hewan uji selama 28 hari (14) .
Pembuatan Larutan Streptozotocin (STZ). STZ 300 mg dilarutkan dalam 30 ml buﬀ er sitrat hingga pH 4,5. STZ diinduksikan secara intraperitoneal (i.p). Dosis STZ yaitu 30 mg/kg BB.
Pembuatan  Larutan  Suspensi  Fenofibrat. Dosis fenoﬁ brat untuk tikus yaitu 20,54 mg/kg yang dilarutkan menggunakan suspensi larutan Na-CMC 0,5% sejumlah 5 mL.
. Pembuatan Larutan Suspensi Metformin HCl.
Metformin HCl yang digunakan adalah dosis 51,37 mg/kg yang dilarutkan menggunakan Na CMC 0,5% hingga 5 mL.
Induksi Hiperkolesterol dan Induksi Resistensi Insulin. Segera  setelah  aklimatisasi,  hewan  uji diberikan pakan tinggi lemak kecuali pada kelompok normal selama 28 hari (hari ke-42) lalu dipuasakan kurang lebih selama 16 jam, kemudian diinjeksi secara intraperitonial  menggunakan  STZ  dosis  30  mg/kg (dosis rendah).
Pengujian Ekstrak. Tiga hari (hari ke- 46) setelah diinjeksi STZ, hewan uji diukur glukosa darah puasa, kolesterol total dan trigiserida. Lalu perlakuan 14 hari sesuai dengan kelompoknya secara oral. Pengambilan darah  selanjutnya  dilakukan  pasca  perlakuan  (hari ke-61).  Setelah  30  menit  pengambilan  darah,  tikus diberikan larutan glukosa untuk pemeriksaan TTGO, kemudian dilakukan pengambilan darah berulang di menit ke 30, 60, 90 dan 120.
Pengukuran Kolesterol Total (KT), Trigliserida dan Glukosa Darah. Pengukuran dilakukan dengan cara  mencampurkan  serum  sejumlah  10  μL,  lalu ditambahkan reagen enzim (kit) kolesterol, trigliserida dan glukosa sejumlah 1000 μl, kemudian campuran dihomogenkan  dengan  menggunakan vortex  mixer (Gemmy, VM 300 – Taiwan), lalu diinkubasi sepuluh menit menggunakan temperatur antara 20-25˚C (atau 5  menit  dengan  temperatur  37˚C),  lalu  ditentukan kadarnya  menggunakan  spektrofotometer  klinikal Varta-506  (ELITechGroup,  Microlab  300  -  The Netherlands).
Penentuan Tes Toleransi Glukosa Oral (TTGO). Sampel  darah  diambil  dari  sinus  orbitalis.  Data  ini dianggap  sebagai  kadar  glukosa  darah  permulaan (awal) (T0). Hewan uji lalu diberi bahan uji secara per oral. 30 menit selanjutnya tikus diberikan glukosa dalam  bentuk  larutan  dengan  dosis  2  g/kg  (po). Pengukuran kadar glukosa darah berulang saat menit ke-30, 60, 90, serta 120 (15) .
Analisis  data. Hasil  berupa  data  penurunan trigliserida, kolesterol total, glukosa darah, dan TTGO. Penurunan kadar dihitung dengan selisih kadar hari ke 14 setelah perlakuan dengan kadar awal sebelum perlakuan dibagi kadar awal sebelum perlakuan lalu dikalikan  100%,  kemudian  dirata-rata  dalam  setiap kelompok. Analisis  dilanjutkan  menggunakan  uji OneWay ANOVA (α = 0.05). Kemudian diteruskan uji Tukey  jika  terdapat  perbedaan  yang  signiﬁ kan, agar dapat diketahui adanya kelompok yang berbeda bermakna diantara semua kelompok perlakuan. SPSS 24.0  digunakan  untuk  pengolahan  data  yang  telah didapatkan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  Ekstraksi  Daun  Jarong. Daun  jarong  segar yang digunakan sebanyak 4 kg. Setelah dikeringkan,
Jurnal Ilmu Kefarmasian Indonesia
76 VIVIANDHARI ET AL.
kolesterol  total  terbesar  yaitu  pada  kontrol  positif (fenoﬁ brat)  lalu  diikuti  oleh  ekstrak  dosis  ketiga (ekstrak daun jarong dosis 750 mg/kgBB) dengan nilai berturut-turut sebesar 53,16% dan 48,83%. Ekstrak dosis  250    dan  500  mg/kgBB  mampu  menurunkan kolesterol total  namun tidak sebaik pada dosis 750 mg/kgBB.  Hal  ini  kemungkinan  terkait  dengan kandungan ekstrak pada dosis 750 mg/kgBB yag lebih banyak dibandingkan pada dosis lain. Penurunan kadar kolesterol juga terjadi pada kelompok negatif. Hal ini disebabkan karena hewan uji sudah tidak diberikan pakan tinggi  lemak sehingga  hewan  uji  tetap  turun kadar  kolesterol  total  darah  walau  tanpa  diberikan sediaan uji.
Uji  statistik  (ANOVA)  terhadap  penurunan kolesterol total ditunjukkan dalam tabel 1. Hasil uji membuktikan P=0,001 (P<0,05), yang bermakna ada pengaruh perlakuan pada penurunan kolesterol total pada  masing-masing  kelompok. Artinya,  ekstrak dosis 1, 2, dan 3 memiliki potensi menurunkan kadar kolesterol  total.  Pada uji Tukey  terdapat  perbedaan bermakna  (Sig.<0,05)  pada  tiap  kelompok.  Dosis terbaik  yang  mampu  menurunkan  kadar  kolesterol total  adalah  ekstrak  dosis  3,  dibandingkan  dengan ekstrak  dosis  1  dan  2,  namun  tidak  sebaik  kontrol positif (fenoﬁ brat).
berat  daun  jarong  menjadi  1,2  kg.  Penyerbukan daun  dengan  ayakan  no.40  menghasilkan  serbuk seberat 844g. Hasil maserasi sebanyak 16,5 L. Hasil pemekatan diperoleh ekstrak kental 234,1093g dengan rendemen 27,73%.
Hasil Karakteristik Mutu. Hasil Organoleptis. Ekstrak etanol daun jarong berbentuk kental, dengan bau khas, rasa pahit, dan warna coklat kehitaman.
Hasil Kadar Air. Hasil kadar air yang diperoleh sebesar 6,75% (memenuhi persyaratan mutu).
Hasil  Uji  Skrining  Fitokimia .  Hasil  skrining fitokimia  ekstrak  etanol  70%  daun  jarong  yang diperoleh  menunjukkan  hasil:  (1)  positif  alkaloid (endapan  dengan  warna  merah  kecoklatan menggunakan  reagen Dragendorff dan  endapan berwarna coklat menggunakan reagen Bouchardat ); (2)  positif  ﬂ avonoid  (perubahan  warna  merah  tua atau jingga setelah pemberian logam Mg dan HCl); (3)  positif  saponin  (terbentuknya  buih  yang  stabil setelah pemberia HCl 2N); (4)  positif tanin (warna berubah  menjadi  hijau  kehitaman  dengan  pereaksi FeCl 3 ) dan (5) positif terpenoid (warna merah muda setelah pemberian eter, AAA, dan H 2 SO ) (16,17) . Adanya kandungan alkaloid, ﬂ avonoid, saponin, tannin, dan terpenoid menguatkan bahwa daun jarong berpotensi memiliki  efek  antihiperlipidemia  dan  antidiabetes melitus
Hasil Uji Aktivitas Ekstrak Dalam Menurunkan Kadar Trigliserida, Kolesterol Total, TTGO dan Glukosa  Darah .  Penelitian  ini  menggunakan  STZ dosis rendah. Pada dosis rendah, STZ bekerja dengan menganggu  aksi  dan  sekresi  insulin  pada  reseptor insulin  yang  menyebabkan  resistensi  sehingga akan membuat kondisi DM tipe 2, sedangkan pada dosis tinggi akan membuat rusaknya sel-β pankreas sehingga kondisi yang dihasilkan adalah DM tipe 1 (18) . Gambar 1 menunjukkan aktivitas  ekstrak etanol 70% dan jarong dalam menurunkan kadar kolesterol total.
Gambar  1  menunjukkan  peningkatan  rata-rata penurunan  kolesterol  total  (persen)  dengan  adanya peningkatan  dosis  sediaan  uji.  Penurunan  kadar
Gambar 1. Rata-rata penurunan kolesterol total.
Tabel 1. Efek ekstrak terhadap kolesterol total.
Keterangan : n=4, angka yang tercantum merupakan rata-rata ± standar deviasi. *terdapat perbedaan bermakna antar tiap-tiap kelompok perlakuan (P <0,05).
No Kelompok Kolesterol total (mg/dL) (Rata-rata ± SD) Awal Akhir % Penurunan 1 Normal 130,5 ± 3,109 122,5 ± 16,176 6,28% ± 0,105 * 2 Negatif 277 ± 8,165 222,25 ± 5,737 19,76% ± 0,006 * 3 Positif (Fenofibrat) 285,5 ± 5,446 133,75 ± 5,737 53,16% ± 0,014 * 4 Dosis 1 234 ± 7,438 153,5 ± 5,686 34,41% ± 0,006 * 5 Dosis 2 261 ± 10,295 152,75 ± 6,849 41,48% ± 0,010 * 6 Dosis 3 271 ± 13,391 138,75 ± 8,995 48,83 % ± 0,008 *
Jurnal Ilmu Kefarmasian Indonesia  77

## Vol 20, 2022
Penurunan  kadar  trigliserida  ditunjukkan  pada gambar 2. Peningkatan persentase penurunan kadar trigliserida terjadi seiring peningkatan dosis sediaan uji. Penurunan kadar trigliserida terbesar yaitu pada kelompok positif (fenoﬁ brat) lalu diikuti oleh ekstrak dosis  ketiga  (ekstrak  daun  jarong  dosis  750  mg/ kgBB) dengan nilai berturut-turut sebesar 51,04% dan 48,94%. Ekstrak daun jarong dosis 1 dan  2 mampu menurunkan trigliserida  meskipun tidak setara dengan dosis  3.  Penurunan  kadar  trigliserida  juga  terjadi pada kelompok negatif karena hewan uji sudah tidak diberikan pakan tinggi lemak sehingga hewan uji tetap turun kadar trigliserida darah walau tanpa diberikan sediaan uji.
Uji  statistik  (ANOVA)  pada  penurunan  kadar trigliserida  darah  ditunjukkan  dalam  tabel  2.  Uji ANOVA  terhadap  penurunan  kadar  trigliserida didapatkan P=0,001, artinya ada pengaruh perlakuan pada penurunan kadar trigliserida dari masing-masing kelompok. Hal ini menunjukkan ekstrak dosis 1, 2, dan 3 memiliki potensi menurunkan kadar trigliserida.
Uji  Tukey  menunjukkan  penurunan  kadar trigliserida antara kelompok ekstrak dosis 3 (750 mg/ kg) dan positif (fenoﬁ brat) tidak terdapat perbedaan bermakna  (P=  0,163)  (P>0,05).  Dengan  kata  lain, daun jarong dosis 3 mempunyai aktivitas yang hampir sama bila dibandingkan dengan fenoﬁ brat sebagai anti hipertrigliseridemia.
Penurunan  glukosa  darah  ditunjukkan  dalam gambar 3. Penurunan glukosa darah meningkat dengan adanya peningkatan dosis sediaan uji. Ekstrak etanol daun jarong 70% dosis 3 mampu menurunkan glukosa darah  lebih  baik  dibanding  dosis  1  dan  2,  namun lebih  rendah  dibandingkan  dengan  kontrol  positif (metformin).
Penurunan  juga  terjadi  pada  kelompok  negatif karena hewan uji sudah tidak diberikan pakan tinggi lemak  sehingga  asam  lemak  bebas  di  dalam  darah dapat menurun dan mengakibatkan sensitivitas insulin dapat  meningkat  kembali,  sehingga  insulin  dapat memasukkan  glukosa  ke  dalam  jaringan,  sehingga hewan uji tetap turun kadar glukosa darah walau tanpa diberikan sediaan uji.
Pada  kelompok  normal  dalam  penelitian  ini terjadi  penurunan,  baik  pada  kadar  kolesterol  total (6,28%),  trigliserida  (10,41%),  glukosa  darah (6,78%),  maupun AUC  (19.095  mg/dL  per  menit). Kemungkinan penyebabnya adalah aktivitas ﬁ sik yang dilakukan oleh hewan uji selama perlakuan di dalam kandang. Banyaknya aktivitas ﬁ sik seperti berlarian dalam  kandang  dapat  mengontrol  kadar  lipid  dan glukosa darah. Aktivitas ﬁ sik menyebabkan lipid dan glukosa diubah menjadi energi, sehingga kadar lipid dan glukosa dalam darah akan berkurang (19) .
Tabel 2. Efek ekstrak terhadap trigliserida.
Keterangan : n=4, angka yang tercantum merupakan rata-rata ± standar deviasi. * terdapat perbedaan bermakna antar tiap-tiap kelompok perlakuan (P < 0,05).
Gambar 2. Rata-rata penurunan trigliserida. Gambar 3. Rata-rata penurunan glukosa darah puasa. No Kelompok Trigliserida (mg/dL) (Rata-rata ± SD) Awal Akhir % Penurunan 1 Normal 132,25 ± 4,349 118,25 ± 10,626 10,41% ± 0,101 * 2 Negatif 275,5 ± 13,404 224,25 ± 10,935 18,59% ± 0,015 * 3 Positif (Fenofibrat) 248,75 ± 12,365 121,75 ± 5,500 51,04% ± 0,006 4 Dosis 1 260 ± 5,944 166,75 ± 2,500 35,85% ± 0,007 * 5 Dosis 2 245,75 ± 7,274 145 ± 6,055 41,00% ± 0,014 * 6 Dosis 3 253,25 ± 18,391 129,25 ± 9,358 48,95% ± 0,014
Tabel  3  menunjukkan  hasil  uji ANOVA  pada parameter  penurunan  glukosa  darah.  Hasil  yang diperoleh  yaitu  P=0,001,  artinya  terdapat  pengaruh perlakuan terhadap penurunan glukosa darah puasa pada tiap kelompok. Artinya, ekstrak dosis 250, 500, dan  750  mg/kg  memiliki  potensi  sebagai  penurun kadar glukosa darah. Uji Tukey menunjukkan ekstrak dosis 750 mg/kg memiliki potensi dalam menurunkan glukosa darah puasa yang lebih baik daripada dosis lainnya,  namun  tidak  sebaik  kontrol  positif  yaitu metformin HCl. Penurunan glukosa darah puasa dosis 750 mg/kg  yaitu  61,31% sedangkan  kontrol  positif (metformin) sebesar 65,09%.
Pada TTGO, data yang diperoleh dihitung nilai luasan  area  di  bawah  kurva  selanjutnya  dilakukan uji  statistik. Hasil secara lengkap ditunjukkan pada gambar 4. Nilai AUC terkecil kedua setelah kontrol normal yaitu pada kelompok positif (metformin) yaitu dengan nilai AUC 20.997,72 mg/dL per menit yang berarti  pemberian  kontrol  positif  metformin  dapat menurunkan kadar glukosa darah. Kelompok negatif mempunyai nilai AUC terbesar yaitu 35.648,37 mg/dL per menit yang menandakan masih terjadi gangguan pengendalian  glukosa  darah.  Dari  ketiga  ekstrak, ekstrak ke 3 dengan dosis 750 mg/kgBB mempunyai nilai AUC  yang  mendekati  nilai AUC  kelompok positif (metformin).
Data hasil uji statistik (ANOVA) AUC glukosa darah  ditunjukkan  pada  tabel  4.  Uji ANOVA  satu arah  pada  rata-rata AUC  glukosa  darah  diperoleh P=0,001,  artinya  terdapat  pengaruh  perlakuan terhadap penurunan glukosa darah pada tiap kelompok yang  diberikan  perlakuan.  Hal  ini  membuktikan bahwasanya potensi penurunan glukosa darah dimiliki oleh ekstrak dosis 1, 2, dan 3.
Jurnal Ilmu Kefarmasian Indonesia 78 VIVIANDHARI ET AL.
Tabel 3. Efek ekstrak terhadap glukosa darah puasa.
Keterangan : n=4, angka yang tercantum merupakan rata-rata ± standar deviasi. * terdapat perbedaan bermakna antar tiap-tiap kelompok perlakuan (P < 0,05).
Tabel 4. Rata-rata AUC glukosa darah.
Uji  Tukey  menunjukkan  adanya  perbedaan bermakna  (Sig.<0,05)  pada  tiap  perlakuan.  Ekstrak dosis 3 (750 mg/kg) adalah dosis terbaik dalam hal TTGO jika dibandingkan dengan ekstrak dosis 1 dan 2,  namun  tidak  sebaik  kontrol  positif  (metformin). Nilai AUC dosis 3 yaitu 23.991 mg/dL  sedangkan kelompok positif (metformin) sebesar 20.997,73 mg/ dL.
Mekanisme  daun  jarong  dalam  menurunkan kadar trigliserida dan kolesterol total diduga dengan cara mengurangi penyerapan kolesterol eksogen dan meningkatkan konversi kolesterol endogen menjadi asam empedu (meningkatkan ekskresi asam empedu) dan  menghambat  biosintesis  kolesterol (10,20,21) . Penelitian  lain  menjelaskan  bahwa  mekanisme daun  jarong  dalam  menurunkan  kadar  trigliserida adalah  melalui  peningkatan  aktivitas  lipase  yang menghidrolisis trigliserida dalam kondisi normal atau peningkatan ekskresi trigliserida melalui feses (11) .
No Kelompok Glukosa darah puasa (mg/dL) (Rata-rata ± SD) Awal Akhir % Penurunan 1 Normal 110,5± 6,8068 102,75 ± 6,2915 6,79% ± 0,0720* 2 Negatif 298,5 ± 10,2143 238,25 ± 6,1846 20,16% ± 0,0152* 3 Positif (metformin) 312,25 ± 3,3040 109 ± 2,4494 65,09% ± 0,0052* 4 Dosis 1 287,5 ± 10,7857 162 ± 8,7559 43,67% ± 0,0163* 5 Dosis 2 283,75 ±11,4418 131,25 ± 5,7951 53,73% ± 0,0141* 6 Dosis 3 304 ± 15,9164 117,5 ± 5,8022 61,32 % ± 0,0166* Perlakuan n Rerata ± SD (mg/dL per menit) Kelompok normal 4 19.095,62 ± 334,7865* Kelompok negatif 4 35.648,37 ± 1087,3932* Kelompok positif (metformin) 4 20.997,72 ± 400,5225* Kelompok dosis 1 4 28.344,75 ± 494,7705* Kelompok dosis 2 4 25.305,75 ± 617,9367* Kelompok dosis 3 4 23.991,00 ± 971,9537*
Keterangan : angka yang tercantum merupakan rata-rata ± standar deviasi.  * terdapat perbedaan bermakna antar tiap-tiap kelompok perlakuan (P < 0,05).
Jurnal Ilmu Kefarmasian Indonesia  79

## Vol 20, 2022
Efek penurunan glukosa darah dari daun jarong diduga  dengan  mekanisme  kerja  penghambatan absorbsi  glukosa  di  usus  dan  peningkatan pengambilan glukosa di darah (22) . Berdasarkan hasil penelitian pendahuluan, daun jarong bekerja dengan meningkatkan  aktivitas  enzim  glukokinase  di  hati, sehingga  dapat  menstimulasi  sekresi  insulin  yang menyebabkan penurunan kadar glukosa darah yang besar (12) .
Studi  baru  mengungkapkan  bahwa  teh  herbal Achyranthes  aspera Linn.  yang  terdiri  dari  bagian batang, daun, dan bunga tanaman jarong (mengandung alkaloid, tannin, fenolik, saponin, ﬂ avonoid, ﬁ tosterol, dan  glikosida  jantung)  mampu  menurunkan  kadar glukosa  darah  serta  trigliserida  secara  signiﬁ kan, namun tidak demikian halnya dalam menurunkan kadar kolesterol total (efek tidak bermakna) pada hewan uji yang  diinduksi  aloksan.  Efek  penurunan  terbesar didapatkan dari dosis teh sebesar 3 g/100mL (23) . Hasil penelitian  tersebut  cukup  selaras  dengan  penelitian yang  dilakukan  bahwa   daun  jarong  memiliki  efek utama yaitu penurunan trigliserida dan glukosa darah.

## SIMPULAN
Daun jarong (dalam bentuk ekstrak) memiliki aktivitas dalam menurunkan kadar trigliserida, kolesterol total, glukosa darah, serta TTGO pada hewan uji DM akibat resistensi  insulin.  Dosis  efektif  yang  mempunyai persentase  penurunan  terbesar  yaitu  dosis  3  (750 mg/kgBB).  Persentase  penurunan  kolesterol  total, trigliserida, dan glukosa darah terbaik adalah dosis 750 mg/kgBB dengan persentase penurunan berturut-turut 48,83%, 48,95%, dan 61,31%, serta pada TTGO nilai AUC terkecil yaitu 23.991 mg/dL per menit.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Peneliti  menyampaikan  terima  kasih  untuk LEMLITBANG UHAMKA atas pendanaan penelitian ini (nomor kontrak penelitian: 694/F.03.07/2019).

## DAFTAR PUSTAKA
1.  Riskesdas.  Hasil  Utama  Riskesdas  Penyakit  Tidak Menular 2018. Has Utama Riskesdas Penyakit Tidak Menular. 2018;8.
2.  Man REK, Gan AHW, Fenwick EK, Gan ATL, Gupta P, Sabanayagam C, et al. Prevalence, determinants and association of unawareness of diabetes, hypertension and hypercholesterolemia with poor disease control in a multi-ethnic Asian population without cardiovascular disease. Popul Health Metr. 2019;17(1):1–10.
3.   DiPiro JT, Wells BG, Schwinghammer TL, DiPiro C V. Pharmacotherapy Handbook. 9th ed. United States of America: McGraw-Hill Education Companies; 2015. 66, 72–74, 161–175 p.
4.   Price  S.,  Willson  LM.  Patoﬁ siologi:  Konsep  Klinis Proses  Penyakit  Kronis.  Jakarta:  Buku  Kedokteran EGC; 2005.
5.   Purwandari  H.  Hubungan  Obesitas  Dengan  Kadar Gula Darah pada Karyawan Di RS Tingkat IV Madiun. Efektor. 2014;1(25):65–72.
6.   Dipiro  JT, Talbert  RL, Yee  GC,  Matzke  GR, Wells BG, Posey LM. Pharmacotherapy: A Pathophysiologic Approach. 2017. 762–826 p.
7.   Kemenkes RI. Riset Kesehatan Dasar 2013. Jakarta: Balitbang Kemenkes RI; 2013.
8.   Wang  X, Yu  C,  Zhang  B,  Wang  Y.  The  Injurious Eﬀ ects  of  Hyperinsulinism  on  Blood Vessels.  Cell Biochemistry and Biophysics. 2014.
9.   Yuan  H,  Ma  Q,  Ye  L,  Piao  G.  The  traditional medicine and modern medicine from natural products. Molecules. 2016;21(5).
10.   S a r v es h   C N ,   F e r na nd e s   J .   E v al ua ti o n   of antihyperlipidemic activity of leaves of Achyranthes aspera Linn. Using hyperlipidemic rats. Asian J Pharm Clin Res. 2017;10(4):211–5.
11.   Khan N, Akhtar MS, Khan BA, De Andrade Braga V, Reich A. Antiobesity, hypolipidemic, antioxidant and hepatoprotective eﬀ ects of Achyranthes aspera seed saponins in high cholesterol fed albino rats. Arch Med Sci. 2015;11(6):1261–71.
12.   Kamalakkannan  K,  Balakrishnan  V.  Studies  on  the eﬀ ect of antidiabetic activity of Achyranthes aspera L. on alloxan induced wistar rats. Int J Pharm Pharm Sci. 2015;7(9):61–4.
13.   Lakshmi  V,  Mahdi AA,  Mishra  V, Agarwal  SK. Biopharmaceutics  and  Therapeutic  Challenges Antidiabetic Potential of Achyranthes Aspera Leaves in Rats. 2018;1(1):1–3.
14.   Tatto D, Dewi NP, Tibe F. Efek Antihiperkolesterol dan Antihiperglikemik Ekstrak Daun Ceremai ( Phyllantus acidus (L.) Skeels) pada Tikus Putih Jantan ( Rattus norvegicus ) Hiperkolesterol Diabetes. Galen J Pharm. 2017;3(2):157–64.
15.   Purnomo Y.  Potensi  toleransi  oral  glukosa  ekstrak biji  kedelai  ( Glycine  max ),  rimpang  jahe  ( Zingiber officinale )  dan  kombinasinya  pada  tikus  model diabetes. eJKI. 2018;7(1):45–50.
16.   Hanani  E. Analisis  Fitokimia.  Egc.  Jakarta:  Buku Kedokteran EGC; 2015.
17.   Harborne  JB.  Metode  Fitokimia :  Penuntun  Cara Modern  Menganalisa  Tumbuhan.  Bandung:  ITB; 1987.
18.   Firdaus,  Rimbawan,  Marliyanti,  S A,  Roosita  K. Model Tikus Diabetes yang Diinduksi Streptozotocin- Sukrosa  untuk  Pendekatan  Penelitian  Diabetes Gestasional. J MKMI. 2016;12(1):29–34.
19.   Betteng R. Analisis Faktor Resiko Penyebab Terjadinya Diabetes Melitus Tipe 2 Pada Wanita Usia Produktif Dipuskesmas Wawonasa. J e-Biomedik. 2014;2(2).
20.   Krishnakumari  S,  Priya  K.  Hypolipidemic  Eﬃ cacy of Achyranthes aspera on Lipid Proﬁ le in Sesame oil fed Rats. Anc Sci Life. 2006;25(3–4):49–56.
21.   Lakshmi V, Agarwal S, Mahdi A, Khanna A. Steroidal saponin from Chlorophytum nimonii (Grah) with lipid- lowering and antioxidant activity. Chronicles Young Sci. 2012;3(3):227.
22.   Kumar  A,  Gnananath  K,  Gande  S,  Goud  E, Rajesh  P,  Nagarjuna  S. Anti-diabetic Activity  of
Jurnal Ilmu Kefarmasian Indonesia
80 VIVIANDHARI ET AL.
Ethanolic  Extract  of Achyranthes  aspera Leaves  in Streptozotocin  induced  diabetic  rats.  J  Pharm  Res. 2011;4(June):3124–5.
23.   Njideka  BE,  Nwankwo AET,  Ugochukwu  NT.  Use of Achyranthes  aspera Linn  tea  as  antidiabetic and  hypolipidemic  herbal  tea.  Int  J  Heal  Sci  Res. 2019;9(2):32–8.