Sunrixon Carmando Yuansah 1*) , Darmawan 1) , Nurdian Fitriana 1) , Amran Laga 2)
*) email Penulis Korespondensi: sunrixoncy@gmail.com

## ABSTRAK
Jerami  padi  merupakan  salah  satu  substrat  lignoselulosa  yang  belum  dimanfaatkan secara  optimal  dan  kebanyakan  hanya  menjadi  limbah  pertanian  apabila  tidak  ditangani dengan baik. Kandungan selulosa dan hemiselulosa dalam struktur lignoselulosa jerami padi memiliki potensi yang besar untuk produksi enzim termostabil dari bakteri termofilik. Tujuan dari  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  pengaruh  pretreatment  substrat  jerami  padi terhadap  pola  pertumbuhan  bakteri  selulolitik-hemiselulolitik  dan  aktivitas  enzim  yang dihasilkan.  Metode  yang  dilakukan  dalam  penelitian  ini  meliputi  pembuatan  tepung  jerami, isolasi  dan  seleksi  sistem  batch  bertingkat,  produksi  enzim  termostabil,  pengukuran  total bakteri  serta  pengukuran  aktivitas  enzim.  Hasil  yang  diperoleh  yaitu  perlakuan  kombinasi delignifikasi  basa  dan  pemanasan  uap  bertekanan  menghasilkan  pola  pertumbuhan  mikroba yang  lebih  tinggi  daripada  perlakuan  pemanasan  uap  bertekanan  saja.  Pengamatan  pH menunjukan  penurunan  pH  setiap  perlakuan.  Aktivitas  enzim  yang  diperoleh  menunjukan hasil yang fluktuatif akibat adanya fenomena diauksik.
Kata Kunci : bakteri, enzim, jerami padi, pretreatment, termostabil.

## ABSTRACT
Rice straw is one of the lignocellulosic substrate that has not been used optimally and mostly just become an agricultural waste if not handled properly. Cellulose and hemicellulose content in lignocellulose structures of rice straw has great potential for thermostable enzymes production from thermophilic bacteria. The purpose of this study were to determine the effect of pretreatment in rice straw substrate on the total number of bacteria and its enzyme activity. The  method  used  in  this  study  include  straw  flour  production,  bacteria  isolation  and  multi- level  batch  selection  system,  themostable  enzyme  production,  total  bacteria  and  enzyme activity measurement. The results obtained were combination of alkaline delignification and pressurized  steam  heating  treatment  resulting  higher  microbial  growth  pattern  than  the pressure  steam  heating  only.  Observation  of  pH  showed  pH  decreasing  in  each  treatment. The  enzyme  activity  obtained  showed  fluctuating  results  due  to  the  presence  of  diauxie phenomenon.
Keywords : bacteria, enzyme, pretreatment, rice straw, thermostable.

## I. PENDAHULUAN
Lignoselulosa  merupakan  salah  satu komponen  organik  yang  menarik  banyak perhatian  di  dunia  karena  sumberdayanya
yang  melimpah  di  alam.  Lignoselulosa telah dikembangkan dalam berbagai keperluan seperti produksi bahan bakar dan energi, pakan ternak, produksi bahan kimia hingga  bahan  pangan  (Betts  et  al.,  1991).

## PENGARUH PRETREATMENT JERAMI PADI PADA PRODUKSI ENZIM TERMOSTABIL MENGGUNAKAN ISOLAT BAKTERI TERMOFILIK
( The Effect of Rice Straw Pretreatment on Thermostable Enzyme Production Using
Thermophilic Bacteria Isolate )
2) Dosen Program Studi Ilmu dan Teknologi Pangan, Fakultas Pertanian, Universitas Hasanuddin, Makassar , Indonesia 1*) Mahasiswa Program Studi Ilmu dan Teknologi Pangan, Fakultas Pertanian, Universitas Hasanuddin, Makassar , Indonesia
Lignoselulosa  banyak  menyusun  kompleks seluler  pada  dinding  sel  tumbuhan  dimana lignoselulosa terdiri dari komponen selulosa yang diselubungi oleh hemiselulosa  dan  lignin  (Mussatto  & Teixeira, 2010). Beberapa sumber lignoselulosa  berasal  dari  limbah  pertanian seperti  jerami  padi,  bagasse  tebu  dan tongkol  jagung,  hasil  hutan,  rumput  gajah dan  gandarusa  (Kumar  et  al.,  2009). Komposisi  dari  jerami  padi  adalah  32,15% selulosa,  28%  hemiselulosa  dan  19,64% lignin  (Shawky  et  al.,  2011).  Kandungan selulosa  dan  hemiselulosa  dari  jerami  padi memiliki  potensi  pengembangan  yang sangat  besar  apabila  dapat  dikonversi menjadi produk yang memiliki nilai tambah dan kebaruan. Akan tetapi, untuk mengkonversi komposisi
tersebut, pretreatment dan hidrolisis enzimatis dilakukan  sebagai  salah  satu  strategi pemanfaatan limbah lignoselulosa.
Proses delignifikasi merupakan usaha yang  dilakukan  untuk  mengubah  struktur kimia dari lignoselulosa dengan mendegradasi lignin. Proses ini mengakibatkan  ikatan  kovalen,  hidrogen dan  van  der  Walls  pada  lignoselulosa terurai  sehingga  komponen  selulosa  dan hemiselulosa telepas dari struktur lignoselulosa  (Agustini  &  Efiyanti,  2015). Delignifikasi dapat dilakukan secara kimia, fisiko-kimia,  biologi  dan thermal (panas), dimana proses ini dilakukan untuk mengefisienskan kerja enzim dengan memberikan  akses  lebih  mudah  terhadap substrat selulosa dan hemiselulosa (Agustini & Efiyanti, 2015; Rosgaard et al., 2007;  Sun  &  Cheng,  2002).  Pretreatment delignifikasi basa juga memiliki efek untuk meningkatkan  tingkat  pertumbuhan  dan densitas  sel  maksimal  mikroba  (Han  & Callihan, 1974).
Kemudahan akses terhadap komponen selulosa dan hemiselulosa dalam substrat lignoselulosa, mengakibatkan bakteri  secara  simultan  mengsekresikan enzim,  yang  dimana  enzim  ini  akan menghidrolisis  komponen  selulosa  dan
hemiselulosa sebagai sumber karbon dalam pertumbuhan  bakteri.  Pemanfaatan  enzim dalam  produksi  gula  fermentasi  dari biomassa  lignoselulosa  menjadi  strategi pemanfaatan  limbah  yang  sangat  tepat karena  lebih  ramah  lingkungan.  Enzim berkerja  secara  spesifik  pada  substrat  dan tidak menimbulkan hasil samping. Pengembangan  pemanfaatan  enzim  tidak hanya  sampai  disitu,  penggunaan  enzim meluas  untuk  mengoptimalisasi  hasil  yang didapatkan, salah satunya dengan menggunakan enzim termostabil.
Berdasarkan  uraian  di  atas,  tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh  pretreatment  substrat  jerami  padi terhadap pola pertumbuhan bakteri selulolitik-hemiselulolitik dan aktivitas enzim yang dihasilkan.

## II. METODOLOGI PENELITIAN

## 2.1 Alat
Alat  yang  digunakan  pada  penelitian ini yaitu cawan petri (Anumbra), mikropipet (Eppendorf), pipet ukur (Pyrex), autoklaf  (Yamato  SM-510),  Erlenmeyer (Pyrex), hot  plate  stirrer (Stuart  CB302), neraca analitik (Satorius), bulb (Eppendorf), laminar air flow (AdvancedLab ADV 02V) , incubator  (Quincy  Lab  Model  10-140), tabung  reaksi  (Pyrex), waterbath  shaker (Julabo SW-22), rak tabung reaksi.

## 2.2 Bahan
Bahan yang digunakan pada penelitian  ini  yaitu  Kertas  pH  (),  NaCl (Merck),  media GrancuCult TM Nutrient Agar (Merck), yeast  extract (Merck), meat extract (Merck),  pepton  (Merck),  KH 2 PO 4 (Merck),  MgSO 4 (Merck),  CaCl 2 (Merck), FeCl 3 (Merck), CMC foodgrade , Titriplex I teknis,  CaCl 2 .2H 2 O  (Merck),  MgSO 4 .7H 2 O (Merck),  KCl  (Merck),  NH 4 Cl  (Merck), metionin  (Sigma-Aldrich),  kasein  (Merck), H 3 PO 4 85%  (Merck),  FeCl 3 (Merck), MnSO 4 (Merck),  H 3 BO 3 (Merck),  ZnSO 4 (Merck) , CoCl 2 ·6H 2 O  (Merck),  Na 2 MoO 4 (Merck),  CuSO 4 (Merck),  H 2 SO 4 98%
(Merck), deionized  water (OneMed).  CMC (food  grade),  Fenol  (Merck),  Glukosa (Merck),  dan  Asam  3,5-dinitrosalisilat (Merck).
2.3 Prosedur Penelitian
2.3.1 Pembuatan Tepung Jerami
Bahan jerami padi dipreparasi menjadi  potongan  dengan  ukuran  kecil  (5- 10  cm)  kemudian  dikeringkan  dibawah sinar  matahari  langsung.  Potongan  jerami yang  telah  kering  digiling  dan  diayak hingga  diperoleh  tepung  jerami.  Tepung jerami selanjutnya dilakukan proses pretreatment . Proses
Pretreatment dilakukan  dengan  2  perlakuan,  perlakuan pertama  tepung  jerami  ditimbang  sebanyak 20g  dan  dilarutkan  dengan  NaOH  1M sebanyak  200  mL  (rasio  1:2),  ke  dalam erlenmeyer  ukuran  500  mL,  dipanaskan dengan  uap  bertekanan  (T:121 o C,  1  atm, t:30  menit).  Selanjutnya,  disaring  dan dibilas  dengan  air  hingga  pHnya  netral. Perlakuan  kedua  dilakukan  dengan  cara tepung jerami ditimbang  sebanyak 20g dan dilarutkan  dengan  akuades  sebanyak  200 mL (rasio 1:2), ke dalam erlenmeyer ukuran 500 mL, dipanaskan dengan uap bertekanan (T:121 o C,  1  atm,  t:30  menit).  Bahan  hasil perlakuan masing-masing dikeringkan dalam oven  blower pada suhu 60 o C selama 4-5  jam,  kemudian  digunakan  sebagai media  pengembangan  inokulum  dan  media produksi enzim dan sakarifikasi.
2.3.2 Isolasi  dan  Seleksi  Sistem Batch Bertingkat Isolat bakteri selulolitik-
hemiselulolitik  termofilik  diperoleh  pada tumpukan jerami yang mengalami pelapukan  pada  bagian  tengah  tumpukan. Isolat bakteri selulolitik-hemiselulolitik termofilik  dibiakkan  pada  media nutrient broth sebelum digunakan pada tahap isolasi dan  seleksi.  Tahap  isolasi  dan  seleksi dilakukan  dengan  menginokulasikan  1  mL isolat bakteri selulolitik-hemiselulolitik termofilik  ke  dalam  25  mL  medium  isolasi sistem  batch  bertingkat  dalam  erlenmeyer
100  mL  dengan  komposisi  media  per  200 mL  yaitu yeast  extract 0.4  g,  beef  extract 0.8g,  pepton  1g,  KH 2 PO 4 0.2g,  MgSO 4 0.04g, CaCl 2 0.6g, FeCl 3 0.056g, dan CMC 1g  (Azhari  et  al.,  2010)  dan  diinkubasi selama  48  jam  pada  suhu  60°C.  Hasil inkubasi kemudian diipipet kembali sebanyak  1  mL  dan  diinokulasikan  pada medium seleksi yang sama sebanyak 25 mL dalam  erlenmeyer  100  mL  dengan  3  kali tingkatan  hingga  diperoleh  isolat  bakteri termofilik. Isolat bakteri selulolitik- hemiselulolitik  termofilik  hasil  seleksi kemudian  diremajakan  pada  media  agar miring  NA  ( Nutrient  Agar )  dan  disimpan sebelum  digunakan  pada  tahap  produksi enzim termostabil.
2.3.3 Produksi Enzim Termostabil Isolat bakteri selulolitik-
hemiselulolitik  termofilik  hasil  seleksi diinokulasikan sebanyak 1 mL kedalam 100 mL  medium  produksi  enzim  yang  terdiri atas  tepung  jerami  1%  dan  larutan  mineral sebagai nutrient tambahan. Larutan mineral dibuat dari  0.1 g asam nitrilo-3-asetat, 0.05 g  CaCl 2 .2H 2 O,  0.1  g  MgSO 4 .7H 2 O,  0.01  g NaCl,  0.01  g  KCl,  0.3  g  2NH 4 Cl,  0.005  g metionin,  0.2  g yeast  extract ,  0.01  g  asam kasamino,  1.8  g  H 3 PO 4 85%,  1  ml  larutan FeCl 3 0.03%,    and  1  ml  larutan  Nitsch’s trace dalam  volume  1  L  (Rastogi  et  al., 2010).  Medium  kemudian  difermentasi pada  suhu  50 o C  pada  kecepatan  150  rpm selama  10  hari.  Pengambailan  sampel sesuai  perlakuan  diukur  pola  pertumbuhan mikroba,  pH,  dan  aktivitas  enzim.  Enzim hasil produksi dipisahkan dari biomassa dan filtrat  secara  sentrifugasi  pada  kecepatan 3000 rpm selama 15 menit.
2.3.4 Desain Penelitian
Desain penelitian ini meliputi optimalisasi  produksi  enzim  selulolitik- hemiselulotik  dari  pengaruh pretreatment substrat  tepung  jerami  dengan  lama fermentasi, dengan perlakuan (A) pretreatment dan (B) lama fermentasi.
A1 : Delignifikasi  (Larutan  NaOH  1M) Sistem Uap Bertekanan
A2 : Pemanasan Sistem Uap Bertekanan
B   : Lama  fermentasi  selama  10  hari dengan  pengambilan  sampel  setiap 24 jam

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN

## 3.1 Pola Pertumbuhan Bakteri
Gambar 01. Pengaruh Pretreatment dan Lama Fermentasi Terhadap Pola Pertumbuhan Bakteri (a) DEL+SUB = Delignifikasi Basa+Pemanasan Uap Bertekanan), (b) SUB = Pemanasan Uap Bertekanan
Pada  Gambar  01  menunjukan  bahwa perlakuan pretreatment dan lama fermentasi  memiliki  pengaruh  terhadap pola  pertumbuhan  bakteri  selulolitik  dan hemi-selulolitik termofilik yang diinokulasikan  ke  dalam  substrat  jerami padi.  Perlakuan pretreatment jerami  padi dengan  kombinasi  delignifikasi  basa  dan pemanasan  uap  bertekanan  (DEL+SUB) memiliki  pola  pertumbuhan  bakteri  yang cenderung  lebih  tinggi  daripada  perlakuan pemanasan uap bertekanan (SUB).
Perbedaan  tingkat  pertumbuhan  bakteri  ini dapat  disebabkan  oleh  peningkatan  daya cerna (digestibilitas) bakteri terhadap substrat.  Menurut  Han  &  Callihan  (1974), pretreatment meningkatkan  digestibilitas dari substrat yang ditandai dengan peningkatan  jumlah  sel  dan  penurunan konsentrasi  substrat  tidak  larut  selama fermentasi.
Selain
itu, perlakuan delignifikasi  basa  juga  menghilangkan kandungan lignin yang menghambat pertumbuhan  bakteri.  Jönsson  &  Martín
(2016),  menyatakan  bahwa  perlakuan  basa dapat menghilangkan lignin dan
meningkatkan digestibilitas selulosa. Sedangkan, substrat jerami padi yang diberi perlakuan pemanasan uap bertekanan (SUB)  lebih  rendah  daripada  perlakuan kombinasi delignifikasi basa dan pemanasan  uap  bertekanan  (DEL+SUB). Pertumbuhan  sel  bakteri  cenderung  lebih lambat  pada  jerami  padi  yang  diberi perlakuan pemanasan uap bertekanan (SUB)  dapat  disebabkan  karena  perlakuan pemanasan  uap  bertekanan  (SUB)  hanya membuat  sedikit  kandungan  lignin  hilang dan  melarutkan  kebanyakan  kandungan hemiselulosa dari jerami. Kandungan lignin yang  tinggi  menghambat  bakteri  untuk dapat  menjangkan  substrat  selulosa  dan hemiselulosa sehingga pertumbuhan bakteri menjadi  terhambat.  Menurut  Jönsson  & Martín  (2016),  proses  hidrotermal  seperti pemanasan uap bertekanan mengakibat uap air  menembus  biomassa,  menghidrasi selulosa  serta  menghilangkan  kebanyakan kandungan hemiselulosa dan sedikit bagian dari lignin.
Gambar 01 juga menggambarkan pola pertumbuhan bakteri dimana lama fermentasi  hari  ke-1  sampai  hari  ke-3 merupakan  fase  eksponensial,  sedangkan pada lama fermentasi hari ke-3 sampai hari ke-5  telah  memasuki  fase  stasioner  dan lama  fermentasi  hari  ke-6  dan  seterusnya telah memasuki fase kematian.

## 3.2 pH
Gambar 02. Pengaruh Lama Fermentasi dan Pretreatment Terhadap Perubahan pH (a)
0 5 10 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 Jum la h S el ( L o g) Lama Fermentasi (Hari) Pola Pertumbuhan Bakteri DEL+SUB SUB 0 2 4 6 8 10 12 2 4   4 8   7 2   9 6   1 2 0  1 4 4  1 6 8  1 9 2  2 1 6  2 4 0 Pe ru b ah an p H Lama Fermentasi (Jam) pH DEL+SUB SUB
DEL+SUB = Delignifikasi Basa + Pemanasan Uap Bertekanan), (b) SUB =

## Pemanasan Uap Bertekanan
Lama  fermentasi  substrat  jerami  padi akan  mempengaruhi  pH  media  fermentasi. Hal ini ditunjukan pada Gambar 02, dimana pH  mengalami  penurunan  secara  bertahap seiring  dengan  semakin  lamanya  proses fermentasi  berlangsung.  Penurunan  pH yang  terjadi  disebabkan  karena  adanya aktivitas metabolisme mikroba yang menghasilkan enzim untuk memecah substrat menjadi gula. Gula yang dihasilkan beberapa  dikonversi  menjadi  asam  akibat proses  ini.  Perlakuan pretreatment yang dilakukan baik dengan kombinasi delignifikasi  basa  dan  pemanasan  uap bertekanan  (DEL+SUB)  serta  dengan pemanasan  uap  bertekanan  saja  (SUB), mengalami penurunan pH selama fermentasi berlangsung.

## 3.3 Aktivitas Enzim
Gambar 03. Pengaruh Pretreatment dan Lama Fermentasi Terhadap Aktivitas Enzim (a) DEL+SUB = Delignifikasi Basa+Pemanasan Uap Bertekanan), (b)
SUB = Pemanasan Uap Bertekanan
Pada  Gambar  03  menunjukan  bahwa perlakuan pretreatment jerami  padi  dan lama fermentasi memiliki pengaruh terhadap  aktivitas  enzim.  Pada  substrat
jerami padi yang diberi perlakuan kombinasi delignifikasi basa dan pemanasan  uap  bertekanan  (DEL+SUB) serta pemanasan uap bertekanan (SUB) saja menghasilkan  data  yang  fluktiatif.  Hal  ini dapat  terjadi  karena  adanya  fenomena diauksik.  Fenomena  diauksik  merupakan fenomena  dimana  ketika  terdapat  dua sumber  karbon  yang  dimana  keberadaan sumber karbon satu mengakibatkan peningkatan  pertumbuhan  sel  dan  aktivitas enzim  (Chu  dan  Barnes  2016;  Loomis  dan Magasanik 1967).
Pada  substrat  jerami  padi  yang  diberi perlakuan  kombinasi  delignifikasi  basa  dan pemanasan  uap  bertekanan  (DEL+SUB) menunjukan  bahwa  adanya  penurunan aktivitas  enzim  di  awal  fermentasi.  Hal  ini dapat disebabkan karena ketersediaan gula- gula  sederhana  yang  dihasilkan  dari perlakuan pretreatment ini  mengakibatkan penurunan  aktivitas  enzim.  Sedangkan, pada substrat jerami padi yang hanya diberi perlakuan pemanasan uap bertekanan (SUB), menunjukan bahwa terjadi kenaikan aktivitas  enzim.  Hal  ini  disebabkan  karena pretreatment pemanasan  uap  bertekanan (SUB)  tidak  menyediakan  sumber  karbon yaitu  gula  sederhana  yang  cukup  sehingga memaksa enzim meningkatkan aktivitasnya memecah  substrat  kompleks  yaitu  selulosa dan  hemiselulosa  untuk  memperoleh  gula sederhana.

## IV. KESIMPULAN
Perlakuaan pretreatment kombinasi delignifikasi  basa  dan  pemanasan  uap bertekanan  (DEL+SUB)  serta  pemanasan uap  bertekanan  (SUB)  memiliki  pengaruh terhadap total mikroba dan aktivitas enzim. Pretreatment kombinasi  delignifikasi  basa dan pemanasan uap bertekanan (DEL+SUB)  memiliki  pola  pertumbuhan mikroba yang lebih tinggi daripada pemanasan uap bertekanan (SUB). Sedangkan  pemanasan  uap  bertekanan memiliki  pertumbuhan  mikroba  yang  lebih rendah  daripada  perlakuan  (DEL+SUB)
0 0,02 0,04 0,06 0,08 0,1 0,12 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 A kt iv it as E n zi m Lama Fermentasi (Hari) Aktivitas Enzim Termostabil DEL+SUB SUB
karena  adanya  perbedaan  daya  cerna (digestibilitas) substrat oleh mikroba.
Perlakuan  pemanasan  uap  bertekanan (SUB) dan perlakuaan kombinasi deliginifikasi  basa  dan  pemanasan  uap bertekanan  (DEL+SUB)  memiliki  nilai yang fluktiatif disebabkan fenomena diauksik.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan terima kasih kepada Kementerian Riset, Teknologi dan Pendidikan  Tinggi  yang  telah  memberi pendanaan  dalam  penelitian  ini  sehingga penelitian ini dapat terselenggara.

## DAFTAR PUSTAKA
Agustini,  L.,  &  Efiyanti,  L.  (2015).  The Effects  of  Delignification  Treatments on  Cellulose  Hydrolysis  and  Ethanol
Production from Lignocellulosic Wastes. Jurnal  Penelitian  Hasil Hutan , 33 (1), 69–80.
Betts, B., Dart, R. K., Ball, A. S., & Pedlar, S. L. (1991). Biosythesis and Structure  of  Lignocelullose.  In  W.  . Betts  (Ed.), Biodegradation .  London: Springer-Verlag London Limited. https://doi.org/10.1007/978-1-4471- 3470-1
Han,  Y.  W.,  &  Callihan,  C.  D.  (1974). Cellulose  fermentation:  effect  of substrate  pretreatment  on  microbial growth. Applied  microbiology , 27 (1),
159–165. Diambil dari http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed
/4809907%0Ahttp://www.pubmedcen tral.nih.gov/articlerender.fcgi?artid=P MC379986 Jönsson,  L.  J.,  &  Martín,  C.  (2016). Pretreatment of lignocellulose:
Formation  of  inhibitory  by-products and  strategies  for  minimizing  their effects. Bioresource Technology , 199 ,
103–112.
https://doi.org/10.1016/j.biortech.201 5.10.009
Kumar, P., Barrett, D. M., Delwiche, M. J., &  Stroeve,  P.  (2009).  Methods  for pretreatment of lignocellulosic biomass  for  efficient  hydrolysis  and biofuel  production. Industrial  and Engineering  Chemistry  Research , 48 (8), 3713–3729. https://doi.org/10.1021/ie801542g
Mussatto,  S.  I.,  &  Teixeira,  J.  A.  (2010).
Lignocellulose  as  raw  material  in fermentation processes, 897–907.
Rosgaard, L., Pedersen, S., & Meyer, A. S.
(2007).  Comparison  of  Different Pretreatment Strategies for Enzymatic Hydrolysis  of  Wheat  and  Barley Straw Comparison of Different Pretreatment Strategies for Enzymatic Hydrolysis  of  Wheat  and  Barley
Straw. Appl Biochem Biotechnol , 143 ,
284–296.
https://doi.org/10.1007/s12010-007-
8001-6
Shawky, B. T., Mahmoud, M. G., Ghazy, E.
A., Asker, M. M. S., & Ibrahim, G. S. (2011).  Enzymatic  hydrolysis  of  rice straw and corn stalks for monosugars production. Journal of Genetic Engineering and Biotechnology , 9 (1),
59–63.
https://doi.org/10.1016/j.jgeb.2011.05 .001
Sun, Y., & Cheng, J. (2002). Hydrolysis of lignocellulosic  materials  for  ethanol production : a review q, 83 , 1–11.