## Antagonistic and Antibacterial Activity of
Stapylococcus aureus and Isolates of Oral Bacteria from Endogenous Fungus Apis dorsata
Binghami Nest
Aktivitas Antagonis dan Antibakteri dari Isolat Fungi Endogenous Sarang Apis dorsata Binghami terhadap Stapylococcus aureus dan Bakteri Mulut
Mokosuli Yermia Semuel 1 (*), Masje Wurarah 2 , Reinny Silvana Tuegeh 3
1 Program Studi Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Negeri Manado, Tondano, Sulawesi Utara, 95611, Indonesia,
2 Program Studi Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Negeri Manado, Tondano, Sulawesi Utara, 95611 Indonesia
3 Program Studi S2 Biologi, Program Pascasarjana, Universitas Negeri Manado, Tondano, Sulawesi Utara, 95611, Indonesia
*Corresponding author: yermiamokosuli@unima.ac.id
Diterima 21 Mei 2022 dan disetujui 24 Juni 2022

## Abstrak
Lebah madu Apis dorsata Binghami merupakan lebah madu endemik Indonesia, hidup secara alami di  hutan  hutan  Sulawesi.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mendapatkan  isolate  dan  karakteristik aktivitas  antibiotik  fungi  endogenous  dari  sarang Apis  dorsata Binghami.  Penelitian  terdiri  atas tahap  isolasi  fungi  dari  sarang  lebah  menggunakan  potato  dextro  agar,  kultur  murni  fungi,  uji antagonis dan uji antibiotic metode difusi menggunakan cakram. Uji antibiotic dilakukan terhadap bakteri mulut dan Staphylococcus aureus . Hasil penelitian diperoleh enam isolate fungi dari sarang Apis  dorsata Binghami  yaitu  isolate  FAB1,  FAB2,  FAB3,  FAB4,  FAB5  dan  FAB6.  Hasil  uji antagonis  menunjukkan  isolate  isolate  FAB2  dan  FAB3  memiliki  sifat  antagonis  terbaik sedangkan isolaf FAB6 memiliki sifat antagonis terlemah.  Isolat FAB2 menunjukkan rata rata zona hambat tumbuh bakteri terbaik pada isolate bakteri mulut dan Staphylococcus aureus. Zona hambat  bertahan  sampai  3  x  24  jam  sehingga  aktivitas  bakteri  bersifat  bakterisida.  Dari  hasil penelitian ini dapat disimpulkan fungi endogenous sarang Apis dorsata Binghami potensial sebagai sumber bioaktif antibakteri.
Kata Kunci: Antibakteri; Antagonistis; Endogenous; Fungi; Sarang lebah

## Abstract
Apis dorsata Binghami honey bee is a honey bee endemic to Indonesia, living naturally in the forests of Sulawesi. This study aimed to obtain isolates and characteristics of endogenous fungi antibiotic activity from Apis dorsata Binghami nest. The research consisted of isolation of fungi from beehives using potato dextro agar, pure culture of fungi, antagonist test and antibiotic test using disc diffusion method.  Antibiotic  test  was  performed  on  oral  bacteria  and  Staphylococcus  aureus.  The  results obtained six isolates of fungi from the nest of Apis dorsata Binghami, namely isolates FAB1, FAB2, FAB3, FAB4, FAB5 and FAB6. The results of the antagonist test showed that the isolates FAB2 and FAB3 had the best antagonist properties, while the FAB6 isolates had the weakest antagonist properties. The FAB2 isolate showed the best bacterial growth inhibition zone average for the isolates of oral bacteria and Staphylococcus aureus. The inhibition zone lasts up to 3 x 24 hours so that the activity of the bacteria is bactericidal. From the results of this study, it can be concluded that the endogenous fungus Apis dorsata Binghami is a potential source of antibacterial bioactives.
Keywords : Antibakteri; Antagonistis; Endogenous; Fungi; honey bee nest;
Jurnal Pembelajaran dan Biologi Nukleus is Licensed Under a CC BY SA Creative Commons Attribution-Share a like 4.0 International License . https://doi.org/10.36987/jpbn.v8i2.2739

## PENDAHULUAN
Indonesia  merupakan  negara  tropis  yang  memiliki  banyak  keanekaragaman tumbuhan dan hewan. Lebih dari tujuh spesies lebah madu endemik terdapat di Indonesia yang  merupakan  terbanyak  di  dunia.  Dua  spesies  endemik  tersebut  berada  di  pulau Sulawesi  yaitu Apis  dorsata Binghami  dan Apis  nigrocincta (Hepburn  &  Radloff,  2011); (Mokosuli,  2013) .  Lebah  madu  termasuk  dalam  kelas  insekta  dan  memiliki  berbagai manfaat untuk manusia serta berperan penting secara ekologis. Sejak zaman prasejarah manusia telah memanfaatkan produk metabolit sekundernya yang dihasilkan lebah madu seperti  :  madu,  propolis,  dan  racun  sebagai  bahan  pangan  serta  bahan  obat-obatan (Semuel et al., 2017) . Sebagai organisme pollinator, untuk setiap tahunnya spesies  lebah madu menyerbuki lebih dari 70% tumbuhan berbunga serta sebanyak 6,1 miliar dollar pertanian menghasilkan  produk dari penyerbukan lebah madu (Semuel, Sherly, et al., 2019) . Apis dorsata adalah lebah madu yang paling produktif dalam menghasilkan madu, dan  memiliki  sarang  hanya  dengan  satu  sisiran  besar,  yang  biasanya  menggantung  di dahan dan ranting pohon, langit-langit terbuka dan tebing atau jurang bebatuan (Hepburn & Radloff, 2011); (Hadisoesilo, 2001) . Maka dari itu sampai saat ini para ilmuan belum dapat membudidayakan A. dorsata diluar habitat aslinya. Pulau Sulawesi adalah daerah transisi  biogeografi  bagi  flora  dan  fauna  Asia  dan  Australia.  Lebah  madu Apis  dorsata Binghami)  adalah    satu  dari  spesies  endemik  Sulawesi  dengan  variasi  sumber  pakan terbesar dibandingkan lebah madu Apis mellifera. Variasi sumber pakan mempengaruhi komponen bioaktif madu dan sarang lebah (Semuel, Kaunang, et al., 2019).
Sarang  lebah  madu  merupakan  susunan  kompleks  yang  digunakan  oleh  lebah sebagai  tempat  tinggal,  sebagai  ruang  untuk  menyimpan  madu,  untuk  membesarkan keturunannya, telur, larva, bee pollen dan kepompong lebah (Viuda-Martos et al., 2008); (Mokosuli, 2013) . Sarang lebah juga memiliki kandungan senyawa metabolit sekunder berupa  flavonoid  yang  fungsinya  untuk  melindungi  dan  menentukan  kualitas  madu (Prestianti et al., 2017) . Propolis merupakan komponen utama yang digunakan oleh lebah madu dalam pembuatan sarang. Ciri-ciri umum propolis yaitu bergetah, lengket, dan zat resin  dari  berbagai  tumbuhan  yang  dikumpulkan  oleh  lebah  madu.  Getah  dari  tunas tanaman yang terdapat pada lebah merupakan bahan utama dalam pembuatan propolis (Galeotti et al., 2018); (Semuel, Kaunang, et al., 2019) .
Kandungan senyawa pada sarang lebah madu berfungsi sebagai pelindung dan penentu kualitas madu antara lain flavonoid yang merupakan senyawa fenol alami dan bees wax (Viuda-Martos et al., 2008). Sudah ada laporan penelitian pemanfaatan bagian sarang  lebah  madu Trigona spp  sebagai  antibakteri Streptococcus  mutans (Mursalim  & Jamaluddin,  2019) .  Walaupun  demikian,  berdasarkan  studi  literasi  laporan  penelitian
tentang potensi antibakteri fungi endogeneous sarang Apis dorsata Binghami masih sangat sedikit  bahkan  belum  ada.  Secara  alamiah  pun  sarang  lebah  memiliki  komponen antibaktero. Jenis antimikrobia yang dihasilkan sarang lebah madu termasuk kelompok antibiotik  tetrasiklin,  streptomisin,  sulfonamid,  tylosin,  erytromisin,  lincomisin,  dan kloramfenikol (Al-Ani et al., 2018). Hal tersebut menunjukkan bahwa sarang lebah madu berpotensi  digunakan  sebagai  antibiotik  untuk  menekan  sampai  mematikan  berbagai macam  bakteri  patogen  sehingga  kualitas  madu  terjaga.  Senyawa  agen  antimikrobia sarang lebah madu dapat dijadikan sebagai sumber antimikrobia alami yang berasal dari alam.  Dalam  penelitian  ini,  diisolasi  fungi  endogeneous  sarang  lebah  potensial menghasilkan antibiotik. Sejak lama telah diketahui fungi menghasilkan antibiotic dalam spektrum yang luas. Disamping itu, diperolehnya isolate fungi endogenous sarang Apis dorsata yang  memiliki  aktivitas  antibakteri,  memungkinkan  untuk  kultivasi  fungi dilaboratorium sehingga tidak bergantung pada sarang lebah di alam.
Prevelensi  infeksi  bakteri  patogen  terus  meningkat  dalam  beberapa  dekade  ini diseluruh  dunia.  Perubahan  iklim,  transmisi  antar  hewan,  resistensi  antibiotik menyebabkan  munculnya  banyak  species  bakteri  patogen  baru  pada  manusia  yang resisten  terhadap  antibiotik (Semuel  et  al.,  2015)  ;  (Kanan  et  al.,  2020);  (Przyby ł ek  & Karpi ń ski,  2019). Oleh  karena  itu  penelitian  untuk  mendapatkan  sumber  bioaktif antibiotik baru perlu terus menerus dilakukan. Penelitian dilakukan untuk mendapatkan isolat fungi endogenous pada sarang lebah Apis dorsata Binghami dan mengkarakterisasi aktivitas antagonis dan antibakteri isolate fungi.

## METODE
Persiapan Sampel
Sampel sarang lebah Apis dorsata diperoleh dari Minahasa Utara. Sarang lebah A. dorsata Binghami  selanjutnya  dipreparasi  untuk  digunakan  sebagai  sumber  fungi endogenous.  Sarang  lebah  yang  digunakan  dalam  keadaan  segar  dan  dibersihkan  dari cemaran. Sarang yang digunakan adalah sarang yang belum ditempati larva lebah, berisi madu dan berwarna kuning keemasan (Gambar 1).
Gambar 1. Sarang Apis dorsata Binghami
Isolasi Fungi
Media Potato dextro agar (PDA) Merck dibuat berdasarkan protocol produsen media. Sebanyak 2 gram sarang ditempatkan pada media potato dextro agar (PDA) Merck dalam cawan petri. Inkubasi dilakukan pada suhu 37 ⁰ C selama limah sampai tujuh hari
tergantung tingkat pertumbuhan fungi (Izzatinnisa et al., 2020). Isolat fungi yang tumbuh selanjutnya dikultur murni pada media PDA dan diinkubasi selama tiga sampai lima hari pada suhu 37 ⁰ C.

## Uji Antagonis Fungi
Uji antagonis mengacu pada metode dua biakan ( dual culture metod ). Pada media PDA dalam satu pertidish dilakukan inokulasi pada dua tempat yang berbeda. Kemudian diinkubasi selama tujuh hari pada suhu ruang.  Pengamatan karakteristik pertumbuhan kedua isolate dilakuka nsetiap hari (Izzatinnisa et al., 2020).

## Uji Aktivitas Antibiotik
Media PDA ditimbang sebanyak 7,25 gram dan media nutrient agar (NA) Merck ditimbang sebanyak 7 gram kemudian masing-masing dilarutkan dalam 250 mL akuades steril  dan  diaduk  hingga  larutan  sempurna.  Masing  masing  larutan  media  disterilkan dalam autoklaf pada suhu 121 ⁰ C selama 15 menit. Bakteri S. aureus dan isolat bakteri dari mulut yang akan digunakan masing-masing dibiakan dengan menggunaka metode agar miring  pada  media  nutrien  agar  dan  diinkubasi  selama  24  jam  pada  suhu  ruangan (Rosalina et al., 2018). Isolat fungi yang tumbuh dipanen dan dimasukkan dalam tabung sentrifus yang berisis 100 µl aquades steril dan disentrifus sampai akuades dan isolat fungi terpisah dan isolat fungi terendap di dasar tabung sentrifus.
Penyiapan bakteri uji dilakukan dengan menyiapkan media NA dituang ke dalam cawan petri steril, kemudian bakteri dari Mulut yang telah di biakan dari agar miring di pindahkan ke dalam cawan petri dengan cara digoreskan sampai permukaan tertutupi dengan  bakteri  dan  kertas  cakram  yang  telah  di  buat  bulat-bulat  di  letakan  di  atas permukaan bakteri uji dan diteteskan dengan larutan dari hasil ektrak fungi. Pellet dari hasil  ektraksi  diletakan  dalam  sumuran  ditengah media  agar  yang  telah  diinokulasi S. aureus . Inkubasi dilakukan selama tujuh hari. Pengamatan daya hambat dilakukan setelah 24 jam sampai hari ketujuh.

## Analisis Data
Data  yang  hasil  penelitian  dianalisis  deskriptif.  Data  hasil  penelitian  berupa  gambar dideskripsikan  berdasarkan  karakter  yang  diperoleh.  Data  penelitian  berupa  hasil pengukuran dianalisis rata-rata dan standar deviasinya.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil Isolat Fungi dari Sarang Apis dorsata Binghami
Kultur murni isolat fungi bertumbuh optimal mulai hari kedua setelah dilakukan penanaman.  Identifikasi  fungi  menggunakan  buku  determinasi  dan  identifikasi  online diperoleh hasil identifikasi genus terdekat yaitu Syncephalastrum, Mortierella, Spacelia, Virgaria, Alternaria Sp, dan Aureobasidium (Tabel 1).
Tabel 1. Hasil Isolat Fungi Mikroskopis dari Sarang Apis dorsata

## Uji Aktifitas Antagonis Isolat FAB1 dan Isolat FAB2
Dari uji antagonis isolate FAB1 dan FAB2 pada hari pertama setelah inokulasi kedua isolat  bertumbuh  secara  normal.  Aktivitas  antagonis  mulai  terjadi  pada  hari  ketujuh. Pada hari ketiga tampak FAB2 mulai menjalar tapi belum mempengaruhi  pertumbuhan FAB1    Hasil  uji  antagonis  kedua  isolate  menunjukkan  isolate  FAB2  lebih  dominan dibandingkan isolate FAB1 (Gambar 2).
Gambar 2. Uji antagonis FAB1 dan FAB2 (A. hari pertama; B. hari kedua; dan C. hari ketujuh)

## Isolat FAB2 dan FAB3
Aktivitas antagonis isolat FAB2 dan FAB3 mulai nampak pada hari ketiga. Pada hari ketiga pola pertumbuhan menyebar baik isolat FAB2 maupun isolat FAB3. Walaupun
demikian  pada  hari  ketujuh  sangat  nampak  dominansi  pertumbuhan  isolat  FAB2 terhadap isolat FAB3 (Gambar 3).
Gambar 3. Uji antagonis fungi isolate FAB2 dan FAB3 A. hari pertama; B. hari kedua; dan C. hari ketujuh

## Isolat FAB3 dan FAB4
Uji  antagonis  hari  pertama  dan  kedua  belum  menunjukkan  pertumbuhan  yang  saling menghambat. Pada hari ketiga terlihat hifa dari kedua isolate tersebar keseluruh media tumbuh. Pada hari ketujuh tidak terlihat zona hambat karena hifa dari kedua isolate yang telah menutupi seluru permukaan media tumbuh (Gambar 4).
Gambar 4. Uji antagonis fungi isolate FAB2 dan FAB3. A. hari pertama; B. hari kedua; dan C. hari ketujuh

## Isolat FAB4 dan FAB5
Pada  hari  pertama  dan  kedua  uji  antagonis,  belum  terjadi  interaksi  penghambatan tumbuh.  Antagonistis  mulai  nampak  pada  hari  ketiga.  Pada  hari  ketiga  sampai  hari ketujuh  terlihat  isolate  FAB4  telah  menutupi  seluruh  permukaan  petridish  sedangkan isolate FAB5 tidak mengalami pertumbuhan (Gambar 5).
Gambar 5. Uji antagonis isolat fungi FAB4 dan FAB5. A. hari pertama; B. hari kedua; dan C. hari ketujuh

## Isolat FAB5  dan FAB6
Uji antagonis pada hari ketiga sampai hari ketujuh terlihat ISolat FAB5 telah menutupi seluruh  permukaan  media  tumbuh  sedangkan  isolate  FAB6  tidak  mengalami pertumbuhan  optimal.  Dengan  demikian  isolate  FAB5  mampu  menghambat pertumbuhan isolate FAB6 (Gambar 6).
Gambar 6. Uji antagonis isolat fungi FAB5 dan FAB6 A. hari pertama; B. hari kedua; dan C. hari ketujuh

## Uji Antibiotik Ekstrak Fungi
Ekstrak  fungi  yang  diperoleh  dengan  metode  sentrifuse  digunakan  untuk  uji antibiotik.  Rata-rata  diameter  zona  hambat  tumbuh  bakteri  mulut  dari  semua  ekstrak fungi dari hari pertama sampai hari ketujuh mengalami peningkatan. Rata-rata diameter zona hambat tumbuh bakteri tertinggi ditunjukkan pada ekstrak isolat FAB2 yaitu 16.27 mm, sedangkan terendah pa5da ekstrak isolate FAB5 (Tabel 2).
Tabel 2. Daya Hambat Isolate Fungi Terhadap Bakteri Mulut Hari Rata rata diameter zona hambat tumbuh (satuan: mm) FAB1 FAB2 FAB3 FAB4 FAB5 FAB6 1 12.53±0.15  14.23±0,06 8.07±0.28 10.30±0.10 9.93±0.15 12.60±0.20 2 13.60+0.10  15.40±0.10 13.57±0.32 11.77±0.15  10.43±0.15  13.70±0.10 3 14.43±0.12  15.63±0.06 14.43±0.12 12.37±0.32  11.17±0.15  14.27±0.06 4 15.20±0.10  16.07±0.12 14.43±0.21 13.30±0.26  11.37±0.15  14.27±0.31 5 15.40±0.10  16.27±0.12 14.43±0.32 13.27±0.12  11.67±0.15  15.33±0.15 6 15.63±0.21  16.27±0.15 14.63±0.06 13.40±0.20  11.53±0.31  15.43±0.15 7 15.40±0.26  16.20±0.10 14.70±0.17 13.33±0.15  11.67±0.23  15.27±0.06
Dari hasil uji antibiotik fungi terhadap bakteri S. aureus dan bakteri dari mulut dapat dilihat bahwa daya hambat yang terbentuk dari hari pertama sampai hari ke lima mengalami  perkembangan  pertumbuhan  yang  baik  dan  dari  hari  kelima  sampai  hari ketujuh  pertumbuhan  perkembangan  dapat  dibilang  sedikit  atau  konstan.  Rata-rata diameter zona hambat tumbuh bakteri tertinggi ditunjukkan pada ekstrak isolate FAB2 yaitu  26,73  mm.  Sedangkan  rata-rata  diameter  zona  hambat  tumbuh  bakteri  terkecil adalag ekstrak isolate FAB3. Untuk ekstrak isolate FAB5 tidak diperoleh zona hambat tumbuh bakteri yang jelas (Tabel 3).
Tabel 1. Daya Hambat Isolate Fungi Terhadap Bakteri S. aureus Hari Rata-rata Diameter zona hambat tumbuh (mm) FAB1 FAB2 FAB3 FAB4 FAB5 FAB6 1 17.43±0.21  15.40±0.20  8.30±0.10  16.40±0.17 ND 9.57±0.12 2 18.3±0.10 19.27±0.25  9.67±0.15  18.27±0.12 ND   10.23±0.06 3 19.30±0.10  23.50±0.20  10.37±0.15  12.97±0.35 ND 10.33±0.15 4 20.10±0.10  17.33±0.14  11.23±0.25  20.80±0.10 ND 11.30±0.17 5 20.33±0.21  26.30±0.10  11.30±0.10  21.37±0.21 ND 11.40±0.17 6 20.20±0.10  26.63±0.32  11.33±0.12  21.60±0.10 ND 11.40±0.26 7 20.67±0.50  26.73±0.25  11.50±0.17  21.57±0.06 ND 11.67±0.15
Keterangan : ND= tidak terbentuk zona hambat tumbuh bakteri

## Pembahasan
Penelitian ini membuktikan bahwa sarang lebah Apis dorsata Binghami memiliki fungi endogenous yang potensial sebagai sumber bioaktif antibiotic.  Enam genus fungi endogenous  sarang  lebah  yang  berhasil  diisolasi  memiliki  kandungan  bioaktif  yang spesifik. Hal ini dibuktikan dengan hasil uji antagonis menunjukkan zona hambat tumbuh berbeda. Beberapa isolate menunjukkan dominasi pertumbuhan pada media PDA dalam uji  antagonis.  Isolat  FAB2  mampu  menghambat  pertumbuhan  isolate  FAB1.  Hal  ini menunjukkan bahwa kandungan bioaktif yang terdapat pada isolate FAB2 menghambat perkembangan  hifa  FAB1.  Walaupun  demikian  pertumbuhan  FAB2  dihambat  oleh isolate  FAB3  pada  uji  antagonis.  Uji  antagonis  FAB3  dan  FAB4  menunjukkan  pola pertumbuhan seimbang. Pola pertumbuhan seimbang ini mengindikasikan bioaktif yang dihasilkan kedua isolate tidak mampu saling menghambat pertumbuhan isolate lainnya. Hasil yang sama juga ditemukan pada uji antagonis isolate FAB4 dan FAB5 serta FAB5 dan FAB6. Dari hasil uji antagonis ini, isolate FAB2 dan FAB3 potensial diteliti lebih lanjut sebagai sumber bioaktif antibiotic.
Uji ekstrak fungi pada isolate bakteri mulut menunjukkan trend peningkatan daya hambat  dari  hari  pertama  sampai  hari  ketujuh.  Daya  hambat  tumbuh  bakteri  terbaik ditunjukkan oleh isolate FAB2 dimana rata rata diameter zona  hambat tumbuh bakteri terbesar dibandingkan semua isolate (Tabel 2). Daya hambat tumbuh bakteri ditentukan oleh  kandungan  bioaktif  yang  ada.  Tingginya  daya  hambat  tumbuh  bakteri  FAB2 menunjukkan hasil ekstraksi isolate FAB2 mengandung metabolit sekunder antibakteri mulut yang kuat. Walaupun demikian semua isolate fungi menunjukkan daya hambat yang  tinggi  apabila  dibandingkan  dengan  standar  klinis  uji  aktivitas  antibakteri.  Isolat bakteri  mulut  digunakan dengan  alas  an  penelitian  ke depan,  akan  diteliti  lebih  lanjut potensi antibiotic bakteri mulut dari bioaktif fungi endogenous sarang lebah. Lebih lanjut, uji  ekstrak  fungi  pada  bakteri  biakan  murni S.  aureus justru  menunjukkan  rata-rata diameter  zona  hambat  yang  lebih  besar  dibandingkan  dengan  isolate  bakteri  mulut. Dengan  demikian  kandungan  bioaktif  yang  ada  pada  ekstrak  fungi  memiliki  aktifitas antibakteri S. aureus yang kuat. Seperti halnya dengan pada uji antibakteri mulut, isolate
FAB2  menunjukkan  aktivitas  antibakteri  terbaik.  Dengan  demikian  isolate  FAB2 potensial dikembangkan lebih sebagai sumber antibiotic.
Isolat  fungi  genus  Syncephalastrum    dilaporkan  memiliki  aktifitas  antagonistic dengan  bakteri  pathogen (Aziz  et  al.,  2020) .  Fungi  genus  Virgaria  juga  dilaporkan menghasilkan  senyawa  antibiotic  sinatrin  dan  virgaricin (Gao  et  al.,  2020). Ekstrak Virgaria mampu menghambat pertumbuhan S. aureus  9.6 mm ± 0.3 (Tan et.al. 2018). Mikotoksin  yang  dihasilkan  oleh  fungi  Alternaria  dilaporkan  mampu  menghambat pertumbuhan Pseudomonas (Bhagat et al., 2016) . Liamocin yang dihasilkan oleh fungi Aureobasidium  mampu  menghambat  kuat  pertumbuhan  bakteri  resisten  antibiotik Streptococcus (Leathers et al., 2019). Fungi Aureabasidium bersama dengan Aspergillus, Penicsillum dan Saccharomyces menjadi fungi mikroskopik yang potensial dimanfaatkan dalam  bioteknologi  dan  eksplorasi  antibiotic (Bozoudi  &  Tsaltas,  2018). Dengan demikian penelitian ini berhasil melaporkan isolate fungi yang prospek sebagai sumber bioaktif  antibiotic  dimasa  mendatang.  Penelitian  mendalam  terutama  identifikasi senyawa antibiotic dan uji antibiotikl spesifik ke depan perlu dilakukan.

## KESIMPULAN
Hasil penelitian diperoleh enam isolat jamur dari sarang Apis dorsata Binghami, yaitu  isolat  FAB1,  FAB2,  FAB3,  FAB4,  FAB5  dan  FAB6.  Hasil  uji  antagonis menunjukkan bahwa isolat FAB2 dan FAB3 memiliki sifat antagonis yang paling baik, sedangkan  isolat  FAB6  memiliki  sifat  antagonis  yang  paling  lemah.  Isolat  FAB2 menunjukkan  rerata  zona  hambat  pertumbuhan  bakteri  terbaik  untuk  isolat  bakteri rongga mulut dan Staphylococcus aureus. Zona hambat berlangsung hingga 3 x 24 jam sehingga aktivitas bakteri bersifat bakterisida. Dari hasil penelitian ini dapat disimpulkan bahwa  jamur  endogen Apis  dorsata Binghami  berpotensi  sebagai  sumber  bioaktif antibakteri.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Disampaikan  terima  kasih  kepada  Lembaga  Penelitian  dan  Pengabdian Masyarakat  Universitas  Negeri  Manado  yang  telah  membiayai  penelitian  ini  melalui skim penelitian terapan unggulan perguruan tinggi tahun 2022.

## DAFTAR PUSTAKA
Al-Ani, I., Zimmermann, S., Reichling, J., & Wink, M. (2018). Antimicrobial Activities of  European  Propolis  Collected  from  Various  Geographic  Origins  Alone  and  in Combination with Antibiotics. Medicines , 5 (1), https://doi.org/10.3390/medicines5010002
Aziz, L., Iftikhar, K., Kamdar, H., & Khalid, S. (2020). Significance of Soil Fungi as an Inexaustible Source of Antibiotics . 1 (1), 24-35.
Bhagat,  J.,  Kaur,  A.,  Kaur,  R.,  Yadav,  A.  K.,  Sharma,  V.,  &  Chadha,  B.  S.  (2016). Cholinesterase  inhibitor  (Altenuene)  from  an  endophytic  fungus  Alternaria
alternata:  optimization,  purification  and  characterization. Journal  of  Applied Microbiology , 121 (4), 1015–1025. https://doi.org/10.1111/jam.13192
Bozoudi, D., & Tsaltas, D. (2018). The multiple and versatile roles of Aureobasidium pullulans in the vitivinicultural sector.
Fermentation , 4 (4), 1–15. https://doi.org/10.3390/fermentation4040085 Galeotti, F., Maccari, F., Fachini, A., & Volpi, N. (2018). Chemical composition and antioxidant activity of propolis prepared in different forms and in different solvents useful for finished products. Foods , 7 (3), 57-63. https://doi.org/10.3390/foods7030041
Gao,  Y.,  Stuhldreier,  F.,  Schmitt,  L.,  Wesselborg,  S.,  Guo,  Z.,  Zou,  K.,  Mándi,  A.,
Kurtán, T., Liu, Z., & Proksch, P. (2020). Induction of New Lactam Derivatives From  the  Endophytic  Fungus  Aplosporella  javeedii  Through  an  OSMAC Approach. Frontiers in Microbiology , 11 (2), 1–13. https://doi.org/10.3389/fmicb.2020.600983
Hadisoesilo,  S.  (2001).  Keanekaragaman  Spesies  Lebah  Madu  Asli  Indonesia. Biodiversitas , 2 (1), 123–128.
Hepburn, H. R., & Radloff, S. E. (2011). Honeybees of Asia. Honeybees of Asia , 1–669. https://doi.org/10.1007/978-3-642-16422-4
Izzatinnisa,  Utami,  U.,  &  Mujahidin,  A.  (2020).  Uji  Antagonisme  Beberapa  Fungi Endofit  pada  Tanaman  Kentang  terhadap  Fusarium  oxysporum  secara  In  Vitro Antagonistic Effect of Several Endophyte Fungi in Potato Plants against Fusarium oxysporum  In  Vitro. Jurnal  Riset  Biologi  Dan  Aplikasinya , 2 (1),  18–25. https://journal.unesa.ac.id/index.php/risetbiologi
Kanan, M., Salaki, C., & Mokosuli, Y. S. (2020). Molecular identification of bacterial species from musca domestica L. And Chrysomya megachepala L. And luwuk City, Central  sulawesi,  indonesia. Journal  of  Pure  and  Applied  Microbiology , 14 (2),  1595– 1607. https://doi.org/10.22207/JPAM.14.2.58
Leathers, T. D., Rich, J. O., Bischoff, K. M., Skory, C. D., & Nunnally, M. S. (2019). Inhibition  of  Streptococcus  mutans  and  S.  sobrinus  biofilms  by  liamocins  from Aureobasidium pullulans. Biotechnology Reports , 21 , e00300. https://doi.org/10.1016/j.btre.2018.e00300
Mokosuli,  Y.  S.  (2013).  Karakter  Morfologi,  Sumber  Pakan  dan  Bioaktivitas Farmakologis  Racun  Lebah  Madu  Endemik  Sulawesi Apis  dorsata Binghami  dan Apis  nigrocincta  Smith  (Hymenoptera:  Apidae).  [Disertasi]. Program  Pascasarjana Universitas Sam Ratulangi Manado .
Mursalim,  M.  F.,  &  Jamaluddin,  A.  W.  (2019).  AKTIVITAS  ANTIMIKROBA KOMBINASI EKSTRAK PROPOLIS Trigona sp DAN JAHE (Zingiber officinale ROSCOE)  TERHADAP  BAKTERI  Salmonella  thypimurium. Jurnal  Ilmiah  As- Syifaa , 11 (1), 70–74. https://doi.org/10.33096/jifa.v11i1.471
Nagir, M. T. (2016). The distribution and nest-site preference of Apis dorsata binghami at Maros Forest , South Sulawesi , Indonesia . 4 (23), 1–14.
Przyby ł ek, I., & Karpi ń ski, T. M. (2019). Antibacterial properties of propolis. Molecules ,
24 (11), 11–13. https://doi.org/10.3390/molecules24112047
Rosalina, R., Ningrum, R. S., & Lukis, P. A. (2018). Aktifitas Antibakteri Ekstrak Jamur Endofit Mangga Podang ( Mangifera indica L .) Asal Kabupaten Kediri Jawa Timur.
Majalah  Ilmiah  Biologi  Biosfera:  A  Scientific  Journal , 35 (3),  139–144. https://doi.org/10.20884/1.mib.2018.35.3.757
Semuel, M. Y., Kaunang, E. S. N., & Manoppo, J. S. S. (2019). Potensi Bioaktif dari Apis dorsata  Binghami,  Lebah  Madu  endemik  Sulawesi .  Universitas  Negeri  manado.  98 halaman.
Semuel, M. Y., Repi, R. A., Worang, R. L., Mokosuli, C., & Semuel, Y. (2017). Potential antioxidant  and  anticancer  effect  of Apis  dorsata Binghami  Crude  Venom  from Minahasa, North Sulawesi. Journal of Entomology and Zoology Studies JEZS , 112 (52), 112–119.
Semuel, M. Y., Rudi, D., & Repi, A. (2015). The Characteristics Of Bioactive Peptides And  Antibacterial  Activity  Of  Honey  Bee  (Apis  nigrocincta)  Smith  Venom, Endemic To Sulawesi. Molekul , 10 (2), 135–144. https://ojs.jmolekul.com/ojs/index.php/jm/article/view/4
Semuel,  M.  Y.,  Sherly,  E.,  Kaunang,  N.,  Manopo,  J.  S.,  Tondano,  K.  U.,  Utara,  S., Mathematics, F., Science, N., Tondano, U., Utara, S., Mathematics, F., Science, N.,  Tondano,  K.  U.,  & Utara,  S.  (2019).  The  bioactive contents  and  antioxidant activity of honey bee nest extract of Apis dorsata Binghami from the North Sulawesi. Molekul , 14 (2), 92–102. https://doi.org/Articles
https://doi.org/10.20884/1.jm.2019.14.2.502
Viuda-Martos,  M.,  Ruiz-Navajas,  Y.,  Fernández-López,  J.,  &  Pérez-Álvarez,  J.  A.
(2008).  Functional  properties  of  honey,  propolis,  and  royal  jelly. Journal  of  Food Science , 73 (9), 117–124. https://doi.org/10.1111/j.1750-3841.2008.00966.x
Sitasi APA style :
Semuel.  M.Y.,  Wurarah  M.,  Tuegeh  R.S.  (2022).  Antagonist  and  Antibacterial Activity of Isolate of Endogeneous Fungi of Apis dorsata Binghami Nest against Staphylococcus  aureus and  Oral  Bacterial. Jurnal  Pembelajaran  dan  Biologi Nukleus , 8(2), 273-283. https://doi.org/10.36987/jpbn.v8i2.2739