Analisis Sistem Alir Menggunakan Dua Detektor untuk Mendeteksi Besi(II) (Fe 2+ ) dan Nitrat (NO 3 - ) Secara Simultan (Flow Analysis System Using Two Detectors to Detect Iron(II) (Fe 2+ ) and Nitrat (NO 3 - )) Simultaneously)
Lusi Ike Nurjanah, Tri Mulyono, Asnawati Jurusan Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Jember (UNEJ) Jln. Kalimantan 37, Jember 68121
E-mail : lusiikenurjanah@yahoo.co.id

## Abstrak
Artikel ini melaporkan tentang analisis besi(II) dan nitrat secara simultan dengan Flow Injection Analysis (FIA). Metode ini menggunakan   dua   detektor   yang   dihubungkan   dengan   satu   komputer. Flow   Injection   Analysis dirangkai   dengan menghubungkan Three-Way Solenoid Valve , pompa peristaltik, detektor spektrofotometri dan potensiometri serta komputer. Sinyal FIA spektrofotometri didasarkan pada reaksi pembentukan senyawa komplek antara besi(II) dengan reagen 1.10- fenantrolin.   Sinyal   FIA   potensiometri   didasarkan   pada   keberadaan   nitrat   yang   diperkuat   dengan   larutan   ISA   2M ((NH 4 ) 2 SO 4 ).   Salah   satu   parameter   yang   mempengaruhi   metode   ini   yaitu   volume   reagen.   Kinerja   sistem   injeksi   alir didasarkan pada linieritas, limit deteksi, sensitivitas, keterulangan dan uji recovery. Hasil penelitian menunjukkan bahwa volume reagen yang optimum pada penentuan besi(II) dan nitrat yaitu 0,20 mL. Persamaan kurva kalibrasi yang diperoleh dari analisis besi(II) yaitu menunjukkan nilai linieritas sebesar 0.997, sensitivitas sebesar 0.123, limit deteksi sebesar 0.016 ppm dan nilai ketelitian terendah 99.20% serta uji recovery sebesar 98.00%. Persamaan kurva kalibrasi yang diperoleh dari analisis nitrat yaitu menunjukkan nilai linieritas sebesar 0.999, sensitivitas sebesar -96.77 mV per dekade, limit deteksi sebesar 0.36 ppm dan nilai ketelitian terendah sebesar 98.22% serta uji recovery sebesar 96.00%.
Kata Kunci: Besi(II), nitrat, penentuan simultan, FIA, spektrofotometri, potentsiometri.

## Abstract
This article reports on the simultaneous analysis of iron (II) and nitrate with Flow Injection Analysis (FIA). This methode used two detectors that are connected with a single computer. Flow Injection Analysis was assembled by connecting the three-way   solenoid   valve,   peristaltic   pumps,   detector   spectrophotometry   and   potentiometry   with   computer. Spectrophotometry FIA signal is based on a complex compound forming reaction of iron (II) and an       1.10-fenantrolin reagent.   Potentiometry     FIA   signal   is   based   on   the   presence   of   nitrate   which   is   reinforced   with   a   solution   of   ISA ( (NH 4 ) 2 SO 4 ) 2 M .  One of the parameters that affect this method is the volume of reagents.  The flow injection system performance was based on linearity, limit of detection, sensitivity, repeatability and recovery test. The results showed that the optimum volume of reagents in the determination of iron (II) and nitrate is 0.20 mL. The equation of calibration curve from the analysis of iron (II) indicates the value of the linearity of 0.997,  a sensitivity of 0.123, the detection limit of 0.016 ppm and of the lowest precision values of 99.20% and %recovery of 98.00%. The equation of that from the analysis of nitrate gives the value of the linearity of 0.999, a sensitivity of -96.77 mV per decade,  the detection limit of 0.36 ppm and of the lowest precision values of 98.22% and %recovery of 96.00%.
Keywords: Iron(II), nitrate, simultaneous determination, FIA, spectrophotometry, potentiometric.

## PENDAHULUAN
Air   merupakan   senyawa   yang   sangat   penting   bagi makhluk   hidup   di   muka   bumi   ini.   Penggunaan   air   yang utama bagi kehidupan yaitu digunakan sebagai air minum. Berdasarkan   kebutuhan   air   tersebut,   komponen   yang terkandung di dalamnya juga akan berperan penting bagi kesehatan makhluk hidup yang mengkonsumsinya. Besi(II) dan nitrat merupakan komponen yang terdapat di dalam air. Keberadaan besi(II) dan nitrat tidak berbahaya selama tidak melebihi   ambang   batas.   Kadar   besi(II)   yang   berlebihan dapat   menyebabkan   bau,   rasa   tidak   enak,   warna   dan kekeruhan yang tinggi serta keracunan. Kadar nitrat yang melebihi ambang batas pada air minum sangat berbahaya bila   dikonsumsi   karena   dapat   menyebabkan   kanker   dan
penyakit methemoglobinemia pada bayi [1]. Besi(II) yang terdapat di dalam air sebaiknya memiliki kadar sebanyak 0.3 mg/L, sedangkan kadar nitrat pada air sebesar 50 mg/L [2]. Oleh karena itu, diperlukan suatu metode analisa untuk menentukan kadar besi(II) dan nitrat pada air.
Salah   satu   teknik   analisa   yang   dapat   digunakan   untuk menentukan kadar besi(II) dan nitrat yaitu Flow Injection Analysis (FIA).   FIA adalah   suatu   metode   analisis   kimia dengan   cara   menyuntikkan   sejumlah   volume   sampel   ke dalam suatu aliran carrier yang kemudian membawanya ke suatu detektor yang tanggap terhadap analit. Metode FIA telah   banyak  digunakan  oleh   peneliti   untuk   mengukur logam,   ion,   senyawa   organik   dan   senyawa   anorganik. Penelitian   sinyal   tersebut   hanya   digunakan   untuk mendeteksi satu analit dalam satu waktu, sehingga kurang
efisien maka perlu dikembangkan metode yang lebih efisien yaitu metode pengukuran FIA dengan dua detektor. Metode pengukuran FIA dengan dua detektor telah dilakukan untuk mengukur fosfat dalam larutan nutrisi hidroponik [3] dan juga dikembangkan untuk penentuan tiol dan asam askorbat dalam campuran [4]. Metode ini memiliki keunggulan yaitu dalam waktu yang bersamaan dapat mendeteksi analit lebih dari satu.
Berdasarkan   penelitian   dua   detektor   tersebut   di   atas, penentuan besi(II) dan nitrat secara simultan dengan metode FIA dikembangkan. Kadar besi(II) ditentukan oleh detektor spektrofotometri visibel, sedangkan kadar nitrat ditentukan oleh   detektor   potensiometri.   Kedua   detektor   tersebut dihubungkan   pada   satu   komputer.  Metode   ini   telah   diuji cobakan pada penentuan besi(II) dan nitrat dalam air sumur serta menunjukkan hasil analisis secara cepat dan efisien.

## METODE PENELITIAN

## Peralatan
Desain   alat   yang   dirancang   pada   penelitian   ini   secara simultan seperti yang ditampilakan pada gambar 1.
Gambar 1. Desain Instrume FIA ( Flow Injection Analysis ), R 1 : Larutan ISA (NH 4 ) 2 SO 4 ,   R 2 :   Larutan
1.10-Fenantrolin,   S 1 :   Sampel/larutan   standar Nitrat, S 2 : Sampel/larutan standar Besi(II), V 1 , V 2 : Three-Way Solenoid Valve, PP : Pompa.
Rangkaian alat tersebut terdiri dari beberapa komponen yaitu   dua Three-Way   Solenoid   Valve (Bio-Chem),   pompa peristaltik (Tecator), detektor spektrofotometri dan detektor potensiometri   serta   komputer.   Pompa   peristaltik   untuk menggerakkan cairan dengan laju alir sebesar 0.89 mL/min, sehingga sampel mengalir melalui S 1 dan S 2 pada Gambar 1, reagen   1.10-fenantrolin   dan   larutan   ISA di input dengan menggantikan jalannya sampel dan mengalir melalui R 1 dan R 2 . Sampel dan reagen masuk melalui Three-Way Solenoid Valve yang kemudian cairan mengalir melalui pipa silikon yang yang berdiameter 0.8 mm dengan panjang koil 1.5 m dan dilanjutkan menuju ke detektor. Nilai absorbansi yang diperoleh   pada   spektrofotometer   visibel   dengan   rentang panjang gelombang 400-800 nm akan di rekam oleh web camera dan dicatat menggunakan Software LabVIEW 2012 pada komputer. Potensiometer dengan elektroda selektif ion nitrat  (ELIT 2233)  dan lithium acetate (ELIT 003)  yang dihubungkan   dengan   menggunakan   konektor   elektroda ganda   (ELIT 201)  untuk mengubah  data analog menjadi data digital sebagai output data   yang   juga   diolah menggunakan komputer ( Software LabVIEW 2012).

## Bahan
Larutan buffer asetat  pH 4 dibuat dari 36 mL larutan CH 3 COONa 0.1 M dan 164 mL larutan CH 3 COOH 0.1 M. Diukur   dengan   menggunakan   pH   meter   yang   sudah dikalibrasi   untuk   memastikan   pHnya.   Larutan Hidroksilamin   hidroklorida   10%   (Merck)   dibuat   dengan cara   melarutkan     50   g   NH 2 OH.HCl   (Merck)   yang dilarutkan dalam aquades 500 mL. Larutan induk besi(II) 200 ppm dibuat dari 0.7 g  Fe(NH 4 ) 2 (SO 4 ) 2 .6H 2 O  (Merk) yang dilarutkan dengan H 2 SO 4 (H 2 SO 4 (p.a) sebanyak 10 mL diencerkan ke dalam 50 mL aquades) dan diencerkan sampai   500   mL   dengan   aquades,   kemudian   diencerkan untuk pembuatan konsentrasi  1; 2; 3; 4 dan 5 ppm dengan menambahkan 1 mL Hidroksilamin hidroklorida dan buffer asetat   5   mL   dan   diencerkan   ke   dala   100   mL   aquades. Reagen 1.10-fenantrolin dibuat dari 0.1 g 1.10-fenantrolin monohidrat (RdH) dalam 100 mL aquades.  Larutan induk nitrat   1000   ppm   dibuat   dari  NaNO 3 anhidrat  sebanyak 1.371 gram, dilarutkan dengan aquademin sampai 1000 mL, kemudian diencerkan untuk pembuatan konsentrasi 0.3; 1; 10;   100   dan   1000   ppm.   Larutan   ISA dibuat   dari   26.4   g (NH 4 ) 2 SO 4 (Merk)   yang   dilarutkan   dalam   100   mL aquademin.

## Prosedur
Tahap   pertama   yang   dilakukan   yaitu   menentukan panjang   gelombang   maksimum   yang   dilakukan   secara manual   dengan   menggunakan   spektrofotometri   visibel. Pengukuran panjang gelombang maksimum menggunakan larutan standart besi (II) 5 ppm pada rentang 400-650 nm dengan   jarak   tiap   pengukuran   10   nm.   Setelah   diperoleh panjang gelombang maksimum maka rentangnya diperkecil menjadi 2 nm pada 10 nm  di bawah  dan 10 nm  di atas panjang gelombang maksimum yang diperoleh.
Optimasi volume reagen dilakukan dengan menggunakan larutan standar besi(II) 5 ppm dan nitrat 10 ppm. Larutan standar   ini   sebagai   larutan   yang   mengalir,   sedangkan reagen  1.10-Fenantrolin diinjeksikan pada larutan standar besi(II)   dan   larutan   ISA   (NH 4 ) 2 SO 4 diinjeksikan   pada larutan   standar   nitrat.   Larutan   diukur   secara   simultan dengan   panjang   gelombang   maksimum   besi(II).   Volume injeksi divariasikan menjadi 0.10 mL, 0.20 mL, 0.30 mL, 0.40 mL dan 0.50 mL. Kemudian ditentukan volume injeksi yang paling optimum.
Pembuatan kurva kalibrasi menggunakan larutan standar besi(II)   1   ppm   dan   larutan   standar   nitrat   0.3   ppm, diinjeksikan reagen 1.10-fenantrolin dan (NH 4 ) 2 SO 4 dengan volume  injeksi  yang  maksimum. Absorbansi  diukur pada panjang   gelombang   maksimum.   Pengukuran   yang   sama dilakukan pada larutan standar besi(II) 2; 3; 4 dan 5 ppm sedangkan untuk nitrat 1; 10; 100 dan 1000 ppm. Kurva kalibrasi dibuat dengan hubungan antara absorbansi dengan konsentrasi   untuk   besi(II)   dan   hubungan   antara   beda potensial dengan Log konsentrasi untuk nitrat.
Penentuan   besi(II)   dan   nitrat   pada   sampel   air   sumur. Penentuan   besi(II)   dilakukan   dengan   cara   mengambil sampel sebanyak 100 mL dan disaring, sampel yang sudah disaring dimasukkan ke dalam beaker glass. H 2 SO 4 pekat ditambahkan   sebanyak   1   mL,   lalu   di   aduk   sampai   larut.
Hidroksilamin-HCl ditambahkan sebanyak 1 mL dan buffer asetat sebanyak 5 mL ke dalam sampel. Penentuan nitrat dengan   cara   mengambil   sampel   sebanyak   100   mL   dan disaring. sampel besi(II) dan nitrat siap di ukur dengan  λ maksimum dan volume injeksi maksimum. Sampel besi(II) dan nitrat di ukur dengan metode Flow Injection Analysis menggunakan   detektor   spektrofotometri   visibel   untuk besi(II)   dan   detektor   potensiometri   untuk   nitrat.   Sampel dialirkan,   reagen   1.10-fenantrolin   untuk   besi(II)   dan (NH 4 ) 2 SO 4 untuk   nitrat   di input dengan   menggantikan jalannya   sampel.   Sampel   dan   reagen   akan   bertemu   dan terjadi   pencampuran   di   dalam   koil   yang   kemudian   akan menuju ke detektor.
Karakterisasi   pengukuran   dari   metode   ini   dengan menentukan   daerah   linier,   limit   deteksi,   sensitivitas, keterulangan dan uji recovery .

## HASIL PENELITIAN

## Desain Instrumen Pengukuran Simultan
Desain alat analisis besi(II) dan nitrat secara simultan dengan analisis sistem alir menggunakan dua detektor yaitu spektrofotometri   dan   potensiometri   ditunjukkan   pada Gambar 1.
Nilai   absorbansi   dan   beda   potensial   yang   diperoleh diolah   menggunakan software LabVIEW   yang   didesain secara pararel sehingga mampu membaca instruksi dalam waktu   yang   bersamaan.   Desain   pada   jendela front   panel ditunjukkan pada Gambar 2.
Gambar 2. Tampilan Front Panel secara simultan
Gambar 2 menunjukkan 2 tempat pembacaan sinyal yaitu sinyal absorbansi dan beda potensial. Jendela front panel tersebut dapat membaca sinyal karena di dalamnya terdapat kontrol ( input ) dan indikator ( output ) sebagai masukan dan keluaran   instrumen.   Kontrol   dan   indikator   tersebut merupakan  instrumen  yang menampilkan data  dari block diagram . Block diagram adalah jendela tempat menuliskan perintah dan fungsi yang berupa kode seperti simbol-simbol dan garis untuk menunjukkan aliran data.

## Volume Reagen yang Diinjeksikan
Hasil   yang   diperoleh   dari   variasi   volume   1.10- fenantrolin   dengan   metode   spektrofotometri   dapat ditunjukkan pada Gambar 3.
Gambar 3. Kurva penentuan volume 1.10-Fenantrolin yang diinjeksikan   dengan   metode   Spektrofotometri pada laju alir = 0.89 mL/min
Berdasarkan Gambar 3 diketahui bahwa variasi volume 1.10-Fenantrolin   berpengaruh   terhadap   sinyal   yang diperoleh.   Variasi   volume   1.10-Fenantrolin   memberikan nilai  absorbansi  puncak  yang  naik   dari  volume  0.10  mL sampai 0.20 mL dan mengalami penurunan setelah volume 0.20 mL. Penyebab nilai  absorbansi  yang menurun  yaitu karena komplek besi(II) yang terbentuk mengalami proses dispersi,   dan   juga   menyebabkan   molekul   analit dipertahankan   terlalu   lama   dalam   koil   sehingga menyebabkan pendakian puncak lebih lambat sehingga nilai absorbansi kecil dan terjadi pelebaran puncak. Hasil yang diperoleh   menunjukkan   bahwa   variasi   volume 1.10-Fenantrolin   yang   maksimum   yaitu   terdapat   pada volume 0.20 mL dengan nilai absorbansi puncak tertinggi yaitu 0.662 dan tidak terjadi pelebaran puncak.
Penentuan   variasi   volume   larutan   ISA   ((NH 4 ) 2 SO 4 ) dengan metode potensiometri diperoleh data hasil penelitian yang ditunjukkan pada Gambar 4.
Gambar 4. Kurva penentuan volume larutan ISA (NH 4 ) 2 SO 4 yang   diinjeksikan   dengan metode potensiometri pada laju alir = 0.89 mL/min
Berdasarkan Gambar 4 diketahui bahwa variasi volume larutan ISA ((NH 4 ) 2 SO 4 ) berpengaruh  terhadap  nilai  beda potensial.   Larutan   ISA   ((NH 4 ) 2 SO 4 )   yang   digunakan berfungsi   untuk   menguatkan   ion   yang   terdapat   di   dalam larutan.   Gambar   4   tersebut   menunjukkan   bahwa   volume larutan   ISA   ((NH 4 ) 2 SO 4 )   0.10   mL   sampai   0.20   mL
mengalami   penurunan   nilai   puncak   dan   nilai   puncak mengalami   kenaikan   ketika   volume   larutan   ISA ((NH 4 ) 2 SO 4 ) 0.30 mL sampai 0.50 mL. Penyebab dari nilai beda potensial yang semakin menurun dan melebar yaitu karena   volume   larutan   ISA   yang   ditambahkan   terlalu banyak   atau   terlalu   sedikit   yang   menyebabkan   elektroda kerja   dan   elektroda   pembanding   tidak   dapat   membaca respon   nitrat   dengan   optimal.  Hasil   pada   Gambar   4 menunjukkan   volume   larutan   ISA   ((NH 4 ) 2 SO 4 )   yang optimal   yaitu   0.20   mL   dengan   nilai   puncak   sebesar -254.842   mV.  Volume   larutan   ISA   ((NH 4 ) 2 SO 4 )   tersebut menghasilkan nilai puncak terendah yang dianggap sebagai respon optimum sehingga dapat meningkatkan kekuatan ion pada tingkat yang optimum dan tidak mengalami pelebaran puncak.  Elektroda  kerja  dan elektroda  pembanding  dapat merespon nitrat dengan baik pada jumlah volume tersebut.
Kurva   Kalibrasi   Besi(II)   dengan   Detektor Spektrofotometri
Hasil yang diperoleh dari penentuan panjang gelombang maksimum   (λ max )   yang   menggunakan   larutan   standar besi(II) dengan konsentrasi 5 ppm dengan rentang 10 nm pada panjang gelombang 400-650 yaitu diperoleh puncak tertinggi 510 nm yang ditunjukkan pada Gambar 5.
Gambar  5.  Profil serapan  panjang gelombang maksimum senyawa  komplek  [Fe(phen) 3 ] 2+ pada  panjang gelombang 400-650 nm
Puncak tertinggi pada Gambar 5 diperkecil rentangnya menjadi   2   nm   antara   panjang   gelombang   500-520   nm. Panjang gelombang tersebut diperoleh puncak tertinggi 510 nm dengan nilai  absorbansi  0.335.  Berdasarkan scanning diperoleh panjang gelombang maksimum 510 nm dengan absorbansi   0.335,   maka   panjang   gelombang   maksimum yang diperoleh tersebut  yang selanjutnya akan digunakan untuk   mencari   absorbansi   dari   deret   larutan   standar   dan sampel.
Kurva   kalibrasi   untuk   Fe(II)   yang   diperoleh menunjukkan nilai absorbansi dan konsentrasi berbanding lurus yaitu semakin besar konsentrasi besi, maka semakin tinggi   puncak   dari   kurva   tersebut.   Hasil   tersebut   sesuai dengan   hukum   Lambert-Beer,   A  =  εbc.   Kurva   kalibrasi antara   konsentrasi   terhadap   absorbansi   ditunjukkan   pada Gambar 6.
Gambar   6.   Kurva   larutan   standar   Fe(II)   dengan   metode Flow   Injection   Analysis pada  λ=510   nm dengan volume 1.10-Fenantrolin maksimum = 0.20 mL dan laju alir = 0.89 mL/min
Berdasarkan   kurva   kalibrasi   pada   Gambar   6   tersebut dapat diperoleh nilai linieritas sensitivitas, limit deteksi dan keterulangan.   Nilai   korelasi   (r)   yang   diperoleh  sebesar 0.997, artinya ± 99.7% perubahan absorbansi dipengaruhi konsentrasi sedangkan ± 0.3% dipengaruhi oleh faktor lain. Hasil tersebut  menunjukkan nilai  korelasi  (r)  yang linier. Nilai sensitivitas ditentukan oleh besarnya nilai slope yaitu sebesar   0.123.  Limit   deteksi   yang   diperoleh   pada pengukuran besi(II) dengan metode analisis sistem alir yaitu 0.016   ppm.  Apabila   konsentrasi   analit   lebih   rendah   dari batas tersebut,  maka spektrofotometer  visibel  tidak dapat menghasilkan   respon   yang   signifikan.   Keterulangan   pada Gambar 6 dapat diperoleh nilai ketelitian yang di tunjukkan pada Gambar 7.
Gambar   7.   Nilai   ketelitian   Besi(II)   pada   masing-masing konsentrasi
Hasil   penelitian   pada   Gambar   7   menunjukkan   bahwa nilai   absorbansi   yang   dihasilkan   bersifat   reprodusibel terhadap variasi konsentrasi besi(II), karena nilai ketelitian dari   tiga   kali   pengulangan   memberikan   nilai   terendah 99.20%   pada   konsentrasi   5   ppm.   Berdasarkan   nilai ketelitian tersebut menunjukkan bahwa alat yang digunakan cukup baik karena memberikan nilai ketelitian ≥ 98% yang berarti  memiliki  nilai  Kv  < 2% dari  setiap pengulangan. Hasil tersebut menunjukkan perbedaan yang diperoleh dari setiap   pengukuran   cukup   kecil,   sehingga   hasil   tersebut sesuai dengan literatur bahwa nilai Kv ≤ 2% [5].

## Kurva Kalibrasi Nitrat dengan Detektor Potensiometri
Kurva   kalibrasi   untuk   nitrat   (NO 3 - )   yang   diperoleh menunjukkan   hubungan   antara   log   [NO 3 - ]   terhadap   nilai beda potensial ditunjukkan pada Gambar 8.
Gambar   8.   Kurva   kalibrasi   larutan   standar   nitrat   dengan metode Flow   Injection  Analysis dengan volume (NH 4 ) 2 SO 4 maksimum = 0.20 mL
Berdasarkan Gambar 8 diketahui hubungan antara log konsentrasi dengan beda potensial menghasilkan garis yang mengalami   penurunan.  Berdasarkan   persamaan   tersebut, penyebab beda potensial pada pengukuran nitrat mengalami penurunan seiring dengan meningkatnya konsentrasi yaitu dikarenakan nilai z i pada persamaan Nernst. Dimana nilai z i (muatan   analit)   pada   nitrat   bernilai   -1   sehingga   akan memberikan nilai slope (-) pada persamaan kurva kalibrasi. Berdasarkan kurva kalibrasi tersebut dapat diperoleh nilai linieritas, sensitivitas, limit deteksi dan keterulangan. Nilai korelasi   (r)   sebesar   0.999,   artinya   ±99.9%   perubahan potensial   dipengaruhi   oleh   konsentrasi   sedangkan   ±0.1% dipengaruhi oleh faktor lain. Hal ini menunjukkan bahwa nilai   korelasi   yang   diperoleh   mendekati   1   sehingga hubungan   antar   kedua   peubah   linier.   Nilai   sensitivitas ditentukan   oleh   besarnya   nilai slope yaitu   sebesar -96.77 mV per dekade konsentrasi. Limit deteksi diperoleh pada pengukuran nitrat dengan  metode analisis sistem alir yaitu 0.36 ppm. Apabila konsentrasi analit lebih rendah dari batas  tersebut  maka  elektroda tidak  dapat  menghasilkan respon yang signifikan. Keterulangan pada Gambar 8 dapat diperoleh nilai ketelitian yang ditunjukkan pada Gambar 9.
Gambarr   9.   Nilai   kebenaran   pada   masing-masing konsentrasi
Gambar   9   menunjukkan   bahwa   nilai   beda   potensial yang dihasilkan juga bersifat reprodusibel terhadap variasi konsentrasi   nitrat,   karena   nilai   ketelitian   terendah   yang diperoleh   yaitu   98.22%   pada   konsentrasi   100   ppm. Berdasarkan   nilai   ketelitian   tersebut   menunjukkan   bahwa alat yang digunakan cukup baik karena memberikan nilai ketelitian ≥ 98% yang berarti memiliki nilai Kv < 2% dari setiap pengulangan. Hasil tersebut menunjukkan perbedaan yang   diperoleh   dari   setiap   pengukuran   cukup   kecil, sehingga hasil tersebut sesuai dengan literatur bahwa nilai Kv ≤ 2% [5].

## Uji Recovery
Penentuan suatu zat dengan menggunakan suatu metode tertentu   selalu   terbuka   kemungkinan   adanya   pengganggu komponen   dalam   suatu   campuran,   sehingga   kadar   analit sebenarnya dalam sampel tidak dapat diketahui secara pasti. % recovery adalah salah satu validasi yang dilakukan dalam metode ini dengan tujuan untuk melihat kemampuan kadar analit   sebenarnya   dan   ketepatan   suatu   metode   untuk campuran.   Persen recovery yang   dapat   diterima   yaitu sekitar  80%-120% [6].   Uji Recovery sampel   besi(II)  dan nitrat   di spike dengan   larutan   standar   besi(II)   dan   nitrat dengan perbandingan 1:1 sebagai konsentrasi total sampel. Hasil dari suatu penelitian besi(II) dan nitrat (NO 3 - ) dapat ditunjukkan pada Tabel 3.
Tabel 3. Hasil pengukuran Besi(II) dan Nitrat (NO 3 - ) dala sampel air sumur Komponen [S] L. Standar S + L. Standar Recover y (%) Besi(II) 1.06 ppm 1 ppm 1.02 ppm 98.00 Nitrat 16.12 ppm 10.72 ppm 13.18 ppm 96.00
Hasil dari Tabel 3 menunjukkan data konsentrasi yang digunakan untuk mencari % recovery . Nilai recovery yang diperoleh untuk penentuan  besi(II)  dengan analisa sistem alir   menggunakan   metode   spektrofotometri   yaitu   sebesar 98.00%.   Nilai recovery untuk   penentuan   nitrat   (NO 3 - ) dengan   analisa   sistem   alir   menggunakan   metode potensiometri juga diperoleh sebesar 96.00%. Uji recovery ini   juga   dilakukan   untuk   mengetahui   kemampuan   desain alat yang digunakan dalam mendeteksi keberadaan besi(II) dan   nitrat.   Berdasarkan   hasil   yang   diperoleh   % recovery menggunakan   metode   analisis   sistem   alir   untuk spektrofotometri  dan  potensiometri  dapat  diterima karena nilai % recovery tersebut > 80%.

## KESIMPULAN
Kesimpulan yang didapat dari penelitian ini antara lain: variasi   volume   reagen   yang   diinjeksikan   berpengaruh terhadap   nilai   absorbansi   dan   nilai   beda   potensial   serta puncak yang dihasilkan.  Volume  reagen  yang baik untuk besi(II) dan nitrat yaitu 0.20 mL.
Hasil analisis data penentuan besi(II) diperoleh linieritas dengan  persamaan  y = 0.123x +  0.057 dengan koefisien korelasi   sebesar   0.997,   limit   deteksi      0.016   ppm, sensitivitas 0.123 dan keterulangan diperoleh nilai ketelitian terendah dari pengukuran yaitu  99.20% dan nilai ketelitian tertinggi   99.82%   serta recovery yang   diperoleh   yaitu 98.00%.   Hasil   analisis   data   penentuan   nitrat   diperoleh linieritas dengan persamaan  y = -96.77x + 821.8 dengan koefisien   korelasi  sebesar   0.999,  limit   deteksi  0.36  ppm, sensitivitas   -96.77   mV  per   dekade  dan   keterulangan diperoleh   nilai   ketelitian   tertinggi   dari   pengukuran   yaitu 99.78% sedangkan  nilai  ketelitian terendah  yaitu 98.22% serta recovery sebesar 96.00%.
Kadar   besi(II)   yang   terdapat   dalam   air   sumur   sebesar 1.06 ppm dan kadar nitrat dalam sampel yang sama yaitu 16.12 ppm.
Saran dari penelitian ini yaitu perlu dikembangkan lebih lanjut mengenai optimasi laju alir agar mampu memberikan hasil yang lebih optimal dari suatu pengukuran.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis   mengucapkan   terimakasih   kepada   Bapak   Tri Mulyono S.Si., M.Si dan Ibu Asnawati S.Si., M.Si   yang telah   membimbing   dalam   pelaksanaan   penelitian. Terimakasih   juga   kepada   jurusan   KIMIA   FMIPA Universitas Jember yang telah memberikan izin dan fasilitas atas terlaksananya penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
[1] Manampiring,  A.   E.   2009.   Studi   Kandungan   Nitrat (NO 3 - )   Pada   Sumber   Air   Minum   Masyarakat Kelurahan Rurukan Kecamatan Tomohon Timur Kota Tomohon. Skripsi .  Manado:   Departemen   Pendidikan Nasional   RI   Fakultas   Kedokteran   Universitas Samratulangi.
[2] Keputusan   Menteri   Kesehatan   Republik   Indonesia. Nomor   907/MENKES/SK/VII/2002.   Syarat-Syarat dan Pengawasan Kualitas Air Minum. 29 Juli 2002. Jakarta.
[3] Marco, R. D., dan C. Phan. 2003. Determination of phosphate in hydroponic nutrient solutions using flow injection potentiometry and a  cobalt-wire phosphate ion-selective electrode. Talanta . 60(1): 1215-1221.
[4] Martinovic, A., S. C. Stefenovic, dan N. Radic. 2008. Flow   injection   analysis   with   two   parallel   detectors: potentiometric and  spectrophotometric  determination of thiols and ascorbic in mixture. J. Chem. Metrl . 2(1):
1-12.
[5] Riyanto.   2014. Validasi   dan   Verifikasi   Metode   Uji . Yogyakarta: CV Budi Utama.
[6] Harmita.   2004. Petunjuk   Pelaksanaan   Validasi Metode dan Cara Perhitungannya . 1 (3): 117-135.