## KINERJA MIKROBA Zymomonas mobilis DAN Saccharomyces cerevisiae UNTUK MENGURAIKAN HIDROLISAT TONGKOL JAGUNG MENJADI BIOETANOL DENGAN PENGARUH WAKTU FERMENTASI DAN RASIO PENAMBAHAN MIKROBA
PERFORMANCE OF MICROBES Zymomonas mobilis AND Saccharomyces cerevisiae TO CHANGE OF HYDROLYSIS OF CORN COBS INTO BIOETHANOL BY THE INFLUENCE OF FERMENTATION TIME AND THE RATIO OF THE ADDITION OF MICROBES
Fatimah*, Deralisa Ginting, Veronica Sirait Departemen Teknik Kimia, Fakultas Teknik Universitas Sumatera Utara, Sumatera Utara Jl. Almamater Kampus USU Medan 20155, Indonesia
*E-mail :  fatimahagussalim@yahoo.com

## Abstrak
Bioetanol  yang  berasal  dari  biomassa  merupakan  salah  satu  bentuk  energi  yang  memiliki  potensi sebagai  bahan  bakar  alternatif.  Bioetanol  dapat  diproduksi  dengan  menggunakan  jamur  ataupun bakteri. Penelitian tentang kinerja mikroba Zymomonas mobilis dan Saccharomyces cerevisiae untuk menguraikan  hidrolisat  tongkol  jagung  menjadi  bioetanol  dengan  pengaruh  waktu  fermentasi  dan rasio  penambahan  mikroba  telah  selesai  dilakukan.  Hidrolisat  yang  digunakan  diperoleh  dari hidrolisis  tongkol  jagung  dengan  menggunakan  mikroba Trichoderma  reesei dan Aspergillus  niger . Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk  mempelajari  kinerja  dari  campuran Zymomonas  mobilis dan Saccharomyces  cerevisiae dalam  mengubah  hidrolisat  (glukosa)  menjadi  bioetanol  pada  berbagai variasi  waktu  fermentasi  (1  hari,  3  hari,  5  hari,  dan  7  hari)  dan  rasio  penambahan  mikroba ( Zymomonas  mobilis : Saccaromyces  cerevisiae =  1:1;  1:2 dan  2:1)  (v/v).  Kandungan  glukosa  awal pada  hidrolisat  tongkol  jagung  sebesar  5,869  g/ml.  Fermentasi  berlangsung  pada  suhu  25 0 C. Bioetanol  yang  diperoleh  kemudian  dianalisis  dengan  menggunakan  kromatografi  gas.  Yield bioetanol tertinggi diperoleh sebesar 6,31 % dengan menggunakan perbandingan Zymomonas mobilis : Saccharomyces cerevisiae (2:1) pada waktu fermentasi 3 hari.
Kata kunci : Bioetanol, Hidrolisat Tongkol Jagung, Saccharomyces cerevisia,  Zymomonas mobilis

## Abstract
Bioethanol from biomass is one of energy which  has a  potential as  alternative fuel. Bioethanol can be  produced  by  using  fungi  or  bacteria. The  research  was  about    the  performance  of Zymomonas mobilis  and  Saccharomyces  cerevisiae to  change  corn  cobs  hydrolyzate  into  bioethanol  by  adding microbes  to  the  influence  of  time  and  ratio  of    fermentation  had  been  done.  The  hydrolyzate    were decomposition  of  corn  cobs  using Trichoderma  reesei  and  Aspergillus  niger .  The  purpose  of  this study was to know the conversion of  hydrolysis of corn cobs into bioethanol with variation time of fermentation (1 day, 3 days, 5 days, and 7 days) and rate of adding microbes  (Zymomonas mobilis : Saccharomyces  cerevisiae  =  1:1;  1:2  and  2:1)  (v/v).  The  glucose  from  corn  cobs  hydrolyzate  was 5,869 g/ml. Fermentation wass carried out at 25 0 C . Bioethanol which obtained from this study was investigated using gas chromatography. The optimum bioethanol yield was equal to 6,31% by using Zymomonas mobilis : Saccharomyces cerevisiae (2:1) and at the 3 days  fermentation time.
Keywords : Bioethanol, Corn Cobs Hydrolysis, Saccharomyces cerevisiae,  Zymomonas mobilis

## Pendahuluan
Bioetanol  yang  berasal  dari  biomassa merupakan  salah  satu  bentuk  energi  yang memiliki  potensi  sebagai  bahan  bakar  alternatif [15].  Salah  satu  biomassa  yang  dapat  dijadikan bioetanol  adalah  tongkol  jagung.  Kandungan selulosa  pada  tongkol  jagung  yang  cukup  tinggi yaitu  48%,  memungkinkan  dapat  dimanfaatkan
sebagai bahan baku pembuatan bioetanol. Tongkol jagung  di  Indonesia  tersedia  dalam  jumlah  yang banyak, diperkirakan setiap panen jagung terdapat 30% berupa limbah tongkol jagung [11].
Bioetanol  dari  tongkol  jagung  menjalani proses  hidrolisis  menjadi  glukosa  (hidrolisat) terlebih dahulu kemudian diuraikan dengan proses fermentasi  menjadi  bioetanol.  Hidrolisis  selulosa
salah satu tahapan penting karena proses hidrolisis dapat menentukan jumlah glukosa yang dihasilkan [19].
Produksi  bioetanol  dari  tanaman  yang mengandung  lignin  dan  pati  atau  karbohidrat, dapat  dilakukan  melalui  konversi  karbohidrat menjadi  gula  atau  glukosa  dengan  beberapa metode  diantaranya  dengan pretreatment dan hidrolisis  secara  enzimatik.  Pada  penelitain sebelumnya  pembuatan  bioetanol  dari bagasse menggunakan Saccharomyces  cerevisiae dan Zymomonas  mobilis dilakukan  dengan  4  tahap yaitu pretreatment ,  hidrolisis  enzim  fermentasi dan  destilasi.  Tahapan  tersebut  menghasilkan bioetanol  terbaik  dengan  menggunakan  campuran kedua mikroba pada waktu fermentasi 4 hari. [23]. Pembuatan bioetanol dari tongkol jagung menggunakan Zymomonas  mobilis memperoleh hasil terbaik dengan menggunakan hidrolisis asam (HClO 4 )  dan  pada  waktu  fermentasi  5  hari  [4]. Penelitian pembuatan bioetanol dari eceng gondok dengan  menggunakan Saccharomyces  cerevisiae dan Zymomonas mobilis memperoleh hasil terbaik dengan melakukan proses pretreatment pemanasan,  kemudian  likuifikasi  dengan A.niger . Diperoleh hasil bioetanol terbaik dengan menggunakan Saccharomyces cerevisiae saja pada waktu fermentasi 5 hari [6].
Berdasarkan  uraian  diatas,  Penelitian  ini akan menggunakan Saccharomyces cerevisiae dan Zymomonas  mobilis sebagai  penghasil  etanol dengan  waktu  fermentasi  yang  divariasikan. Dengan campuran ini diharapkan fermentasi yang dilakukan lebih efisien dibandingkan menggunakan  satu  jenis  mikroba.Penggunaan kedua mikroba tersebut diharapkan dapat meningkatkan yield bioetanol.

## Teori
Limbah  lignoselulosik  adalah  limbah pertanian yang mengandung selulosa, hemiselulosa, dan lignin. Tongkol jagung merupakan  salah  satu  limbah  lignoselulosik  yang banyak  tersedia  di  Indonesia.  Produksi  jagung dapat  bertambah  setiap  tahunnya.  Pertambahan produksi  jagung  ini  disebakan  oleh  adanya kenaikan luas panen seluas 16,51 ribu hektar dapat meningkatkan  produksi  sebanyak  0,43  %  serta peningkatan produktivitas sebesar 1,15 kuintal/hektar  dapat  meningkat  sebesar  2,37  % terhadap  tumbuhan  jagung.  Pada  tahun  2014 diperoleh  sebanyak  19,03  juta  ton  pipilan  kering. Jumlah  ini  mengalami  kenaikan  sebanyak  0,52 juta ton (2,81%) dibandingkan tahun 2013 [16].
Bioetanol  adalah  etanol  yang  diproduksi dengan  cara  fermentasi  gula  menggunakan  ragi [8].  Produksi  bioethanol  dapat  dilakukan  dengan beberapa  metode,  diantaranya  adalah  dengan
pretreatment bahan baku, hidrolisis dan fermentasi  [22]. Pretreatment biomassa  bertujuan untuk  meningkatkan  area  permukaan  selulosa, sehingga  dapat  meningkatkan  konversi  selulosa menjadi glukosa [5]. Hidrolisis  merupakan proses pemecahan  polisakarida  dalam  lignoselulosa menjadi  monomer  gula  penyusunnya  [22]. Hidrolisis  enzimatik  memiliki  kelebihan  yaitu kondisi proses yang lebih lunak (suhu rendah dan pH  netral)  dan  tidak  terjadi  degradasi  gula  hasil hidrolisis  [11].  Enzim  yang  dapat  menghidrolisis selulosa  ialah  selulase.    Enzim  selulase  dalam hidrolisis  selulosa  berperan  dalam  memecah ikatan β-1,4-D-glikosida, cellobiohyrolases dan β- glucosidases  untuk menghasilkan glukosa. Enzim selulase  dapat  diproduksi  dari  kapang  ataupun bakteri  [3]. Trichoderma  reesei dan Aspergillus niger merupakan  jenis  kapang  penghasil  enzim selulase  yang  sangat  efesien  dalam  memproduksi enzim  selulase  [18].  Fermentasi  adalah  proses terjadinya  dekomposisi  gula  menjadi  alcohol  dan karbondioksida  (CO 2 ).  Berdasarkan  produk  yang dihasilkan,  fermentasi  digolongkan  menjadi  dua macam, yaitu Fermentasi alkoholis dan Fermentasi  nonalkoholis.  Fermentasi  alkoholis adalah  fermentasi  yang  menghasilkan  alkohol sebagai  produk  akhir,  sedangkan  fermentasi nonalkoholis  adalah  fermentasi  yang  tidak menghasilkan  alcohol  sebagai  produk  akhir  [6]. Saccharomyces cerevisiae dan Zymomonas mobilis merupakan  jenis  jamur  dan  bakteri  yang dapat  menghasilkan  etanol  [2] .  Saccharomyces cerevisiae dapat  mengubah  glukosa,  manosa  dan galaktosa  menjadi  etanol  [21]. Zymomonas mobilis dapat  mengubah  glukosa,  sukrosa,  dan fruktosa  menjadi  etanol  [12]. Perpaduan  antara Saccharomyces cerevisiae dan Zymomonas mobilis menunjukkan keseimbangan terbaik dalam mengubah glukosa menjadi bioetanol.
Reaksi  yang  terjadi  pada  proses  produksi bioetanol  secara  sederhana  ditunjukkan  pada reaksi berikut [17]:
(C 6 H 10 O 5 )n                                  N C 6 H 12 O 6 (1) Pati Glukosa
(C 6 H 12 O 6 )n                     2 C 2 H 5 OH + 2 CO 2 (1)
Glukosa Etanol

## Metodologi Penelitian Bahan Baku dan Mikroba
Bahan  baku  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  hidrolisat  tongkol  jagung yang  digunakan  sebagai  glukosa.  Volume hidrolisat  yang  digunakan  untuk  pembuatan bioetanol yaitu sebanyak 50 ml. Mikroorganisme
Yeast (ragi) Enzim H 2 O
Zymomonas  mobilis yang  digunakan  diperoleh dari  Lab  Pangan  dan  Gizi  UGM  dan Saccharomyces  cerevisiae diperoleh  dari  Lab Mikrobiologi IPB.

## Pembenihan Isolat
Penelitian  ini  diawali  dengan  pembiakan mikroba Zymomonas mobilis dan Saccharomyces cerevisiae dengan  menggunakan  media  PDA ( Potato  Dextrose  Agar ).  Tujuan  pembiakan mikroba adalah untuk memperoleh mikroba yang siap digunakan untuk proses fermentasi. Indikasi mikroba siap yang digunakan dapat dilihat secara visual  dalam  cawan  petri  [2].  Selanjutnya, mikroba  yang  tumbuh  dalam  media  PDA diinkubasi dalam 100 ml media cair yang terdiri dari  22%  sukrosa,  1%  (NH 4 ) 2 SO 4 dan  1% KH 2 PO 4 pada  pH  5.  Inokulum Zymomonas mobilis dan Saccharomyces  cerevisiae diambil dengan  kawat  ose  lalu  dicelupkan  beberapa  saat pada  media  cair  hingga  tampak  keruh.  Media cair  ditutup  dan  diinkubasi  selama  48  jam  pada 20 0 C.

## Prosedur Fermentasi
Proses  fermentasi  yang  dilakukan  pada penelitian  ini  yaitu  dengan  proses  anerobik. Hidrolisat  tongkol  jagung  sebanyak  50  ml dimasukkan kedalam Erlenmeyer 250 ml. Inokulum cair Zymomonas mobilis dan Saccharomyces  cerevisiae dimasukkan  secara bersamaan  dengan  perbandingan  1:1,  1:2  dan  2:2 (v/v).  Cairan  difermentasikan  pada  suhu  ruangan dengan  waktu  yang  divariasikan  yaitu  1  hari,  3 hari,  5  hari,  dan  7  hari.  Hasil  fermentasi  disaring menggunakan  kertas  saring.  Biotanol  yang diperoleh  diukur  densitas,  pH,  viskositas  serta kadar  bioetanol  yang  dihasilkan  dengan  dengan menggunakan kromotografi gas di Pusat Penelitian Kelapa Sawit, Sumatera Utara, Medan.
Analisis Kimia
Kandungan  Glukosa,  Densitas,  Viskositas,  dan
Kadar Etanol
Kandungan  glukosa  hidrolisat  tongkol jagung
dianalisis dengan menggunakan Spektrofotometer  UV-Vis.    Analisis  densitas  dan viskositas  menggunakan  instrumen  Viscosimeter Ostwald  di  Laboratorium  Penelitian,  Departemen Teknik  Kimia,  Fakultas  Teknik,  Universitas Sumatera  Utara,  Medan.    Analisis  kadar  etanol dilakukan dengan menggunakan Gas Chromatography (GC).

## Hasil dan Pembahasan Hasil Analisis Bahan Baku
Hidrolisat  tongkol  jagung  yang  diperoleh memiliki  kadar  awal  gula  reduksi  (glukosa  awal)
hidrolisat tongkol jagung yaitu sebesar 5,869 g/ml serta  volume  hidrolisat  yang  dihasilkan  sebanyak 50 ml.

## Pertumbuhan Mikroba
Pertumbuhan  mikroba  dilihat  dari  hasil pembiakan  yang  telah  dilakukan  didalam  cawan petri. Pertumbuhan Saccharomyces cerevisiae dan Zymomonas  mobilis tentu  tidak  sama,  karena kedua  mikroba  tersebut  merupakan  mikroba dengan  kingdom  yang  berbeda. Saccharomyces cerevisiae berasal dari kingdom fungi yang secara morfologi tumbuh berbentuk blastospora berbentuk  bulat  lonjong,  silindris,  oval  atau  bulat telur yang dipengaruhi oleh strainnya (Gambar 1a)
[23].  Sedangkan Zymomonas  mobilis berasal  dari kingdom bakteri yang tumbuh menyebar dan tidak beraturan  hingga  memenuhi  cawan  (Gambar  1b) [4].
(a)                                      (b) Gambar 1. (a) Saccharomyces cerevisiae ;
(b) Zymomonas mobilis
Pengaruh  Waktu  Fermentasi  Terhadap Yield Bioetanol Waktu  fermentasi  mempengaruhi yield bioetanol yang dihasilkan. Penelitian ini dilakukan  dengan  variasi  waktu  fermentasi  untuk memperoleh  waktu  fermentasi  terbaik  dalam memproduksi  bioetanol.  Gambar  2  menampilkan grafik  pengaruh  waktu  fermentasi  terhadap yield bioetanol pada berbagai perbandingan mikroba.
0 2 4 6 8 1 Hari 3 Hari 5 Hari 7 Hari Y ie ld B ioe ta no l (% ) 1:1 (Zymomonas  : Saccharomyces)
1:2 (Zymomonas  : Saccharomyces) 2:1 (Zymomonas  : Saccharomyces)

## Gambar 2. Pengaruh Waktu Fermentasi Terhadap
Yield Bioetanol
Dari  gambar  2  diperoleh  bahwa  kadar bioetanol  pada  setiap  perbandingan  mikroba mengalami kenaikan dan penurunan. Pada gambar di  atas,  pada  waktu  fermentasi  1  hari  diperoleh yield bioetanol  sebesar  0,283%;  0,55%  dan 0,907% pada masing-masing perbandingan mikroba. Namun, pada waktu fermentasi hari ke-3 produksi  bioetanol  mengalami  peningkatan  pada tiap  perbandingan  yaitu  0,641%;  1,161%  dan 6,311%.  Setalah  mengalami  peningkatan  pada waktu fermentasi 3 hari, yield bioetanol kemudian mengalami  penurunan  pada  waktu  fermentasi  5 hari  yaitu  menjadi  0,499%;  0,643%  dan  0,669%. Pada  7  hari yield bioetanol  tetap  mengalami penurunan  yaitu  menjadi  0,258%;  0,428%  dan 0,478% pada masing-masing perbandingan mikroba.
Menurut  teori,  ada  beberapa  faktor  yang mempengaruhi yield bioetanol diantaranya pengaruh lama fermentasi. Semakin lama fermentasi berlangsung maka etanol yang dihasilkan  juga  akan  semakin  bertambah  [18]. Pada  waktu  fermentasi  3  hari  diperoleh yield bioetanol mengalami  peningkatan.  Hal  ini disebabkan karena semakin lama waktu fermentasi semakin banyak pula waktu yang dibutuhkan oleh mikroba  untuk  mengurai  gula  menjadi  etanol, sehingga etanol yang dihasilkan semakin meningkat.  Setelah  waktu  fermentasi  hari  ke-3, bioetanol  mengalami  penurunan.  Penurunan yield bioetanol  dari  hari  ke-5  hingga  hari  ke-7  ini memungkin  gula  yang  terdapat  didalam  larutan sebagian  besar  telah  diurai  menjadi  etanol, sehingga aktivitas mikroba akan berkurang karena kekurangan  gula  sebagai  makanan  yang  akan diurai  menjadi  bioetanol  [16].  Pada  gambar  2 diperoleh produksi bioetanol tertinggi pada waktu fermentasi  3  hari.  Jika  fermentasi  dilakukan  lebih dari  3  hari  maka  produksi  bioetanol  akan mengalami penurunan.
Pengaruh Waktu Fermentasi Hidrolisat Tongkol Jagung Terhadap Gula Reduksi Sisa Gula  reduksi  ialah  gula  yang  mempunyai kemampuan  untuk  mereduksi  gula  sederhana menjadi bioetanol dengan pemanfaat mikroba [7]. Penurunan ataupun kenaikan yield bioetanol pada fermentasi dipengaruhi pada konsentrasi gula sisa yang dihasilkan. Kadar gula reduksi awal sebesar 5,869  g/ml.  Gambar  3  menampilkan  grafik pengaruh  waktu fermentasi terhadap gula reduksi pada berbagai perbandingan mikroba.

## Gambar 3. Pengaruh Waktu Fermentasi Terhadap Gula Reduksi Sisa
Pada gambar 3 di atas menunjukkan bahwa adanya hasil analisis beragam terhadap konsentrasi sisa gula reduksi. Hal ini menunjukkan  bahwa  pengaruh  lama  fermentasi terhadap  konsentrasi  gula  reduksi  sisa.  Pada masing-masing gambar menunjukan bahwa konsentrasi  gula  tereduksi  pada  hari  ke-1  yaitu sebesar 2,528 (g/ml) pada 1: 1; 2,539 (g/ml) pada 1:2 dan  2,559 pada 2:1. Dari hari ke-3 mengalami penurunan  yaitu  menjadi  1,308  (g/ml)  pada  1:1; 1,096 (g/ml) pada (1:2) dan 0,767 (g/ml) pada 2:1. Pada  hari  ke-  5  tetap  terjadi  penurunan  hingga pada hari ke -7 konsentrasi sisa gula terduksi.
Konsentrasi  gula  reduksi  pada  hari  ke-1 tidak jauh berbeda pada masing-masing perbandingan mikroba. Pada hari ke-3 hingga hari ke-5 juga penuruan gula reduksi sisa tidak berbeda jauh  pada  masing-masing  perbandingan.  Semakin lama waktu fermentasi maka semakin banyak gula reduksi  awal  dimanfaatkan  oleh  mikroba  maka makin  tinggi  pula  produksi  bioetanol  yang diperoleh  dan  sebaliknya  makin  rendah  gula reduksi  yang  dimanfaatkan  oleh  mikroba  maka makin  rendah  pula  produksi  bioetanol  yang dihasilkan  [7].  Hal  ini  disebabkan  karena  adanya proses  aktivitas  mikroba  yang  berbeda-beda  pada masing-masing waktu fermentasi dalam memecahkan  monosakarida  menjadi  gula-gula sederhana  [1].  Pada  gambar  3  diperoleh  gula reduksi  sisa  yang  paling  rendah  yaitu  pada penggunaan mikroba 2:1. Semakin tinggi konsentrasi  substrat  atau  gula  reduksi  yang  dapat dipecah  oleh  sel  mikroba  menjadi  etanol  maka semakin  tinggi  pula  perolehan  etanol  yang dihasilkan.
Pengaruh Rasio Penambahan Mikroba Terhadap Yield Bioetanol Rasio  penambahan  mikroba  berpengaruh terhadap yield bioetanol  pada  berbagai  variasi waktu  fermentasi.  Ada  dua  mikroba  yang digunakan yaitu Zymomonas mobilis dan
Saccharomyces cerevisiae. Gambar 4
menampilkan  grafik  pengaruh  rasio  penambahan mikroba terhadao yield bioetanol.

## Gambar 4. Pengaruh Rasio Penambahan
Mikroba Terhadap Yield Bioetanol
Pada  gambar  di  atas  dapat  dilihat  bahwa yield biotanol yang dihasilkan semakin meningkat pada  masing-masing  rasio  penambahan  mikroba. Pada  gambar  diperoleh yield bioetanol  pada  rasio penambahan
mikroba
1:1 ( Zymomonas : Saccharomyces )  (v/v)  sebesar  0,283%;  0,641%;
0,499% dan 0,258% pada waktu fermentas 1 hari,
3 hari, 5 hari, dan 7  hari. Pada rasio penambahan mikroba 1 : 2 ( Zymomonas : Saccharomyces ) (v/v) diperoleh  peningkatan yield bioetanol  yaitu menjadi  0,557%;  1,161%;  0,643%;  dan  0,428% pada  masing-masing  variasi  waktu  fermentasi. Pada rasio penambahan mikroba 2:1 ( Zymomonas : Saccharomyces )  (v/v) yield bioetanol  tetap mengalami  kenaikan  yaitu  menjadi  0,907%; 6,311%;  0,669%;  dan  0,473%.  Peningkatan yield biotanol berpengaruh pada lama waktu fermentasi dan  jumlah  mikroba.  Jumlah  mikroba  dapat ditentukan dengan laju pertumbuhannya [20].
Menurut  teori,  mikroba Saccharomyces cerevisiae pada  fermentasi  hari  ke-3  tumbuh hanya sedikit dikarenakan Saccharomyces cerevisiae masih  dalam  fase  lag.  Fase  lag merupakan fase dimana mikroba masih beradaptasi untuk tumbuh dan  menyesuaikan diri. Pada fermentasi 5 hari dan 7 hari jumlah mikroba sudah  semakin  banyak  [14].  Sedangkan,  pada bakteri Zymomonas
mobilis
memiliki pertumbuhan  yang  berbeda.  Bakteri Zymomonas mobilis mengalami  empat  fase  diantaranya  fase lag  dimana  bakteri  menyesuaikan  diri  dengan substrat  dan  kondisi  lingkungan  di  sekitarnya yaitu  pada  hari  ke-1.  Kemudian  dilanjutkan dengan fase log yaitu pada hari ke-3 dimana pada fase  ini  bakteri  berkembang  dengan  sangat  cepat. Setelah  itu  pada  hari  ke-5  dan  hari  ke-7  terjadi fase  stasioner.  Dan  waktu  selanjutnya  merupakan fase  kematian.  Pada  fase  ini  sebagian  populasi jasad  renik  mulai  mengalami  kematian  karena
beberapa  sebab  antara  lain  nutrien  di  dalam medium sudah habis, energi cadangan di dalam sel habis [13]. Sehingga penambahan rasio Zymomonas mobilis lebih efektif dalam menghasilkan bioetanol dibandingkan Saccharomyces  cerevisiae .  Pada  penelitan  ini diperoleh  kenaikan yield bioetanol  yang  tertinggi sebesar  6,31%  pada  penggunaan  perbandingan mikroba 2:1 ( Zymomonas : Saccharomyces ) (v/v).

## Kesimpulan
Berdasarkan  penelitian  yang  dilakukan dapat  disimpulkan  bahwa  rasio  penambahan mikroba  dengan  perbandingan  2:1  ( Zymomonas mobilis : Saccharomyces  cerevisiae )  (v/v)  pada konsentrasi  gula  reduksi  sisa  yaitu  0,767  (g/ml) memberikan yield bioetanol  yang  tertinggi  yaitu sebesar 6,311 % pada waktu fermentasi 3 hari.
Daftar Pustaka [1] A.A.N Firmana dan Siti Tjahjani.
Karakterisasi  Hasil  dan  Penentuan  Laju
Reakso Fermentasi Bonggol Pisang (Musa paradisiaca)  Menjadi  Etanol  Dengan Saccharomyces cerevisiae.
UNESA Journal Of Chemistry. Vol.3, No.3.2014
[2] A.  Ernes  dan  Agustin  Krisna  Wardani.
Pembuatan  Bioetanol  Dari  Pati  Biji Nangka  Oleh  Zymomonas  mobilis  CP4 (Kajian Konsentrasi Inokulum dan Amonium Sulfat. Jurnal Agrina. Vol.01/No.01. 2014 [3] A. Limayem, Steven C. Ricke.
Lignocellulosic  Biomass  for  Biothanol Production : Curret Perspectives, Potential Issue  and  Future  Prospects. Journal Progress  in  Energy  and  Combustion
Science-Elsever.  Vol  38.  Hal.  449-467. 2012 [4] A.N Idiawati, dan Rudiyansyah. Pembuatan Bioetanol Menggunakan Zymomonas  Mobilis  dari  Limbah  Tongkol Jagung. Jurnal  Kimia  Khatulistiwa.  Vol.
4(2). ISSN 2303-1077. 2015
[5] A.Rasyidi Fachry., Puji Astuti dan Tri Gita Puspitasari. Pembuatan  Bietanol  Dari Limbah  Tongkol  Jagung  Dengan  Variasi Konsentrasi  Asam  Klorida  Dan  Waktu Fermentasi . Jurnal Teknik Kimia Sriwijaya
. No.1, Vol 19. 2013
[6] F.Talebnia,  Dimitar  Karakashev,  Irini Angelidaki. Production  of  Biothanol From
Wheat Straw : An Overview On Pretreament,  Hydrolysis  and  Fementation. Journal Bioresourse Technology - Elsevier.
Vol 101, Hal : 4744-4753. 2012
[7] F.Merina  dan  Yulinah  Trihadiningrum.
Produksi  Bioetanol  Dari  Eceng  Gondok
(Eichhornia crassipes) Dengan Zymomonas mobilis  dan  Saccharomyces  cerevisiae. Prosiding  Seminar  Nasional  Manajemen Teknologi XIII. 2011 [8] I.Truaswaati dan Lani Nurhayati.
Pembuatan  Bioetanol  Gel  Sebagai  Bahan Bakar Alternatif Pengganti Minyak Tanah . Jurusan  Teknik  Kimia,  Fakultas  Teknik Universitas Diponegoro : Semarang. 2014
[9] J.Itelima,  A.Ogbonna,  S.Pandukur,  dkk. Simultaneous Saccharification and Fermentation of Corn Cobs to Bio-Ethanol by  Co-Culture  of  Aspergillus  Niger  and
Saccharomyces  cerevisiae. Internasional Journal  Of  Enviromental  Science  and Development. Vol 4, No.2. 2013
[10] K. Zhang, Feng, H. Fermentation Potentials  of  Zymomonas  Mobilis  and  its Application  in  Ethanol  Production  From Low-Cost  Raw  Sweet  Potato. African Journal  of  Biotechology.  9.37.  Hal:  6122- 6128. 2011
[11] M.A  Kusumaningati,  Sri  Nurhatika  dan Anto  Muhibuddi. Pengaruh  Konsentrasi Inokulum  Bakteri  Zymomonas  mobilis  dan Lama  Fermentasi  Pada  Produksi  Etanol dari  Sampah  Sayur  dan  Buah  Pasa Wonokromo  Surabaya. Jurnal  Sains  dan Semi Pomits. Vol 2, No.2. 2013
[12] M.  Balat,  Havva  Balat,  Cahide  Oz. Progress in Bioethanol Processing . Journal Progress  In  Energy  And  Combustion Science-Elsever.  Vol  34,  Hal  :  551-573. 2011
[13] Nasrun, Jalaluddin dan Mahfuddhah.
Pengaruh Jumlah Ragi dan Waktu Fermentasi Terhadap Kadar Bietanol yang
Dihasilkan  dari  Fermentasi  Kulit  Pepaya. Jurnal  Aplikasi  Teknologi  Pangan.  Vol.  1, No.2. 2012
[14] P.P  Utomo. Pemanfaatan  Nanas  (Ananas comosus) Sebagai Bahan Baku Pembuatan Bioetanol  Dengan  Metode  Sakarifikasi Dan Fermentasi Serentak. Jurnal Biopropal
Industri.  Vol.02,  No.01.  ISSN  2089-0877.
2011
[15] R  Endah,  Dyah.,  Margono,  Sunu  H Pranolo, Budai Setiani, dan Anni
Nurhayati. Bioethanol from Sorghum Grain (Sorghum  bicolor)  with  SSF  Reaction Using Biocatalyst Co-immobilization
Method  of  Glucoamylase  and  Yeast . Journal  Energy  Procedia  68,  Hal.  132  – 137. 2015 [16] S.  Bahri  Fitriani,  Nurhaeni. Produksi Bioetanol Tongkol Jagung (Zea Mays) dari Hasil  Proses  Delignifikasi. Jurnal  of
Natural  Science.  Vol  2(3),  Hal:  66-74. ISSN: 2338-0950. 2013)
[17] Sipriyadi,  S.Si,  M.Si.  Thesis, Pembuatan Nira  Nipah  (Nypa  Fruticans)  untuk
Produksi  Bioetanol  Menggunakan  Bakteri Zymomonas  mobilis  dan  khamir  Pichia kudriavzeavii. Universitas Bengkulu, Bengkulu, 2013.
[18] S.  Kim,  Bruce  E.Dale. Global  Potential Bioethanol Production From Wasted Crops And  Crop  Residues .  Journal  Biomass  and Bioenergy-Elsever.  Vol  26  :  Hal:  361-375.
2011
[19] S.K  Wahono,  Vita  Taufika  Rosyida,  dkk. Optimization of Simultaneous Saccharification and Fermentation Incubation  Time  Using  Cellulose  Enzyme for  Sugarcane  Bagasse  on  The  Second- Generation Biothanol Production Technology .  Journal  Energy  Procedia- Elsevier. Vol 65, Hal : 331-336. 2014
[20] Sumindar.  Skripsi, Produksi  Bioetanol
Dari  Limbah  Tanaman  Jagung  Melalui Sakarifikasi  dan  Fermentasi  Simultan dengan Kultur Campuran SaccharomycesCereviseae dan Pichia
Stipitis .  Fakultas  Teknologi  Pertanian,
Institut Pertanian Bogor : Bogor. 2010.
[21] T.Paschos,  Charilaos  Xiro  dan  Paul
Christako poulus.
Simultaneous Saccharification  and  Fermentation  by  Co- Cultures  of  Fusarium  Oxysporum  and Saccharomyces cerevisiae Enhances
Ethanol  Production  From  Liquefied  Wheat Straw  at  High  Solid  Content Elsevier Publishing,  www.elsevier. om  Industrial Crops  and  Production-Elsevier.  Vol.76: 789-802. 2013
[22] Victor. Skripsi, Pembuatan Bioetanol Dari Ubi  Kayu  (Manihot  utilissima  Pohl.)
Dengan  Jamur  Aspergillus  awamori  Dan Ragi  Saccharomyces  cerevisia. Fakultas Farmasi.  Universitas  Sumatera  Utara  : Medan. 2010.
[23] V.R  Reis,  Ana  Teresa  Burlamauqui  Faraco Antonangelo,  dkk. Bioethanol  Strain  of Saccharomyces  cerevisiae  Characterised by  Microsatellite  and  Stress  Resistance . Brazil Journal of Microbiology-SBM (Sociedade  Brasileira  De  Microbiologia).
No.of Pages 7. 2016