## Aktivitas  Antibakteri  Daun  Polyscias  scutellaria,  Carica  papaya,  dan Kombinasinya terhadap Propionibacterium acnes
Antibacterial  Activity  of  Polyscias  scutellaria  Leaves,  Carica  papaya,  and  their Combination Against Propionibacterium acnes
Ana  Mardiyaningsih,  Nur  Ismiyati,  Laras  Hariyanti,  Rizqi  Rochim  Zaenirohmah, Iramie Duma Kencana Irianto * D3 Farmasi Politeknik Kesehatan Bhakti Setya Indonesia, Yogyakarta Corresponding author: Iramie Duma Kencana Irianto: Email: iramie.d.k.i@poltekkes-bsi.ac.id
Submitted: 15-11-2022 Revised: 27-12-2023 Accepted: 27-12-2023

## ABSTRAK
Propionibacterium  acnes merupakan  salah  satu  jenis  bakteri  penyebab  jerawat.  Bakteri  ini tumbuh pada kondisi anaerob dan lipofilik di daerah pori-pori kulit yang tertutup oleh sel kulit mati dan  asam  lemak.  Kondisi  tersebut  dipicu  oleh  ketidakseimbangan  hormon  yang  menyebabkan peningkatan  produksi  sebum  yang  disertai  hiperkeratinisasi.  Klindamisin  merupakan  antibiotik yang dapat digunakan untuk mengatasi infeksi bakteri P.acnes , namun penggunaannya dalam jangka waktu lama dapat memicu resistensi dan membunuh mikroba baik pada kulit. Alternatif pengobatan jerawat yang aman dan efektif dapat dilakukan melalui pengembangan ekstrak dari P. scutellaria maupun C.papaya ,  yang  berdasar  penelitian  sebelumnya  menunjukkan  potensi  antimikroba. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas antibakteri ekstrak heksan daun P.scutellaria , C.papaya serta  kombinasinya  terhadap P.acnes .  Bahan  yang  diteliti  adalah  daun P.scutellaria dan C.papaya .  Preparasi  ekstrak  dilakukan  dengan  metode  maserasi  menggunakan  pelarut  heksan. Evaluasi ekstrak meliputi organoleptik, rendemen, susut pengeringan dan analisis kualitatif dengan KLT.  Uji  aktivitas  antibakteri  terhadap P.acnes ATCC6919  menggunakan  metode  difusi  cakram dengan  kontrol  negatif  DMSO,  dan  kontrol  positif  klindamisin.  Ekstrak  yang  diperoleh  memiliki karakteristik spesifik sesuai dengan bahan baku. Rendemen kedua ekstrak yang diperoleh ¼ dari bobot serbuk awal. Susut pengeringan kedua ekstrak sangat kecil (<1%). Baik P.scutellaria maupun C.papaya mengandung  banyak  senyawa  golongan  terpenoid.  Aktivitas  antibakteri  ekstrak  heksan daun C.papaya lebih kuat dibandingkan P.scutellaria . Kombinasi kedua ekstrak dengan perbandingan 1:1  menunjukkan  aktivitas  antibakteri  yang  tertinggi  dibandingkan  dengan  perlakuan  yang  lain. Kombinasi kedua ekstrak tergolong dalam antibakteri kuat.
Kata kunci: antibakteri; Carica papaya; Polyscias scutellaria; Propionibacterium acnes

## ABSTRACT
Propionibacterium  acnes is  a  type  of  bacteria  that  causes  acne.  These  bacteria  grow  in anaerobic and lipophilic conditions in areas of skin pores that are covered by dead skin cells and fatty acids.  This  condition  is  triggered  by  a  hormonal  imbalance  that  causes  an  increase  in  sebum production accompanied by hyperkeratinization. Clindamycin is  an antibiotic  that  can be used to treat P.acnes bacterial infections, but its long-term use can trigger resistance and kill good microbes in  the skin. Alternative acne treatment that is safer and more effective can be made through the development of extracts from P. scutellaria and C. papaya , which  based on previous studies have shown  antimicrobial  potency.  This  study  aims  to  determine  the  antibacterial  activity  of  hexane extracts  of P.scutellaria leaves, C.papaya leaves,  and  their  combined,  action  against P.acnes ATCC6919. The materials studied were the leaves of P.scutellaria and C.papaya . Extract preparation was done by maceration method using hexane solvent. Evaluation of extracts included organoleptic, yield, drying shrinkage, and qualitative, analysis by KLT. Antibacterial activity test against P.acnes using  disc  diffusion  method  with  DMSO  negative  control,  and  clindamycin  positive  control.  The extracts obtained had specific characteristics following the raw materials. The yield of both extracts obtained was ¼ of the initial powder weight. The drying shrinkage of both extracts was very small (<1%).  Both P.scutellaria and C.papaya contain  many  compounds  of  the  terpenoid  class.  The antibacterial  activity  of  hexane  extract  of C.papaya leaves  was  stronger  than P.scutellaria .  The
combination of the two extracts in a 1:1 ratio showed the highest antibacterial activity compared to the other treatments. The combination of the two extracts is classified as a strong antibacterial. Keywords: antibacterial; Carica papaya; Polyscias scutellaria; Propionibacterium acnes .

## PENDAHULUAN
Jerawat  merupakan  gangguan  kulit  yang  biasa  terjadi  pada  bagian  wajah,  leher,  dada,  dan punggung 1,2 .  Gangguan  ini  terjadi  akibat  ketidakseimbangan  hormon  yang  memicu  peningkatan produksi  sebum  dan  hiperkeratinisasi  pada  saluran  folikel.  Peningkatan  tersebut  menyebabkan akumulasi kulit mati dan asam lemak sehingga mendukung kondisi anaerob dan lipofilik pada kulit 1,3 . Kondisi tersebut sangat mendukung pertumbuhan Propionibacterium acnes (sinonim Cutibacterium acnes ) yang tergolong dalam bakteri Gram-positif berbentuk batang 4 – 6 . Bakteri ini  memanfaatkan sebum yang melimpah untuk menghasilkan energi dengan cara hidrolisis trigliserid sebum menjadi asam propionat. Asam tersebut menyebabkan iritasi dinding folikel dan meninduksi peradangan 1,3 . Pengobatan jerawat karena infeksi P.acnes dapat dilakukan dengan pemberian klindamisin. Obat ini tergolong dalam antibiotik berspektrum luas yang tersedia dalam bentuk oral dan topikal 7 . Inflamasi  sebagai  gejala  timbulnya  jerawat  dicegah  oleh  klindamisin  dengan  jalan  menurunkan populasi P.acnes . Penggunaan antibiotik topikal dalam jangka waktu panjang dapat menyebabkan kerugian  berkepanjangan.  Hal  ini  dikarenakan  dapat  menimbulkan  resistensi  bakteri  terhadap antibiotik  tersebut  serta  membunuh  mikroba  baik 6,8 .  Resistensi  klindamisin  terjadi  di  Spanyol (92,4%), Yunani (75,3%) dan Italia (59,5%) 1 . Akibatnya dibutuhkan kekuatan antibakteri yang lebih besar untuk penangan infeksi selanjutnya 9 . Di Indonesia, terdapat 46 produk kosmetika import yang ditarik  dari  peredaran  pada  04  Oktober  2022 10 .  Salah  satu  alasan  penarikan  tersebut  karena mengandung klindamisin 11 . Masalah ini membutuhkan solusi agen antibakteri yang potensial untuk dikembangkan dalam penanganan jerawat.
Fraksi  heksan  daun Polyscias  scutellaria menunjukkan  diameter  zona  hambat  paling  tinggi dibanding  fraksi  metanol  dan  etil  asetat  terhadap  bakteri Acinetobacter  sp. Konsentrasi  ekstrak sebesar  100 mg / mL menghasilkan  zona  hambat  sebesar  32,5±1,9mm,  tergolong  aktivitas  kuat 12 . Ekstrak  heksan  daun Carica  papaya mampu  menghambat  pertumbuhan  bakteri    Gram  positif maupun  negatif,  diantaranya E.coli,  S.aureus,  B.subtilis dan  jamur C.albicans 13 – 15 .  Kadar  hambat minimum  ekstrak  heksan C.papaya terhadap E.coli dan S.aureus sebesar  12,5 mg / mL15 .  Aktivitas antibakteri  ekstrak  heksan  baik  dari  daun P.scutellaria maupun C.papaya karena  kandungan terpenoid  dan  alkaloid 12,15 .  Metabolit  sekunder  tersebut  berpeluang  juga  untuk  menghambat pertumbuhan P.acnes . Berdasarkan state of the art yang telah dipaparkan, penelitian ini bertujuan untuk menguji aktivitas  antibakteri  dari  ekstrak  heksan  daun P.scutellaria , C.papaya ,  dan  kombinasi  keduanya terhadap pertumbuhan P.acnes penyebab jerawat. Manfaat dari penelitian ini dapat menjadi inisiator penemuan obat baru untuk alternatif pengobatan jerawat. Pengembangan penelitian berupa produk sediaan  topikal  seperti  krim,  gel  atau  salep  antijerawat  dapat  menjadi  ide  untuk  penelitian selanjutnya. Hasil penelitian tersebut harapannya menjadi solusi pengobatan antijerawat alami.

## METODE
Alat
Alat yang digunakan pada penelitian ini adalah timbangan analitik, maserator, pengaduk kayu, cawan  porselin,  corong,  erlenmeyer,  gelas  beker,  gelas  ukur,  desikator,  plat  silica  gel  F 254 ,  cawan petri, blue  tip,  yellow  tip ,  ose,  lampu  Bunsen,  tabung  reaksi,  kertas  cakram,  pinset,  autoklaf,  lilin, stoples, mikropipet dan inkubator.

## Bahan
Bahan  yang  digunakan  pada  penelitian  ini  meliputi  daun P.scutellaria ,  daun C.papaya ,  n- heksan teknis, n-heksan p.a, etil asetat p.a, biakan P.acnes ATCC6919, standar Mc Farland 0,5, media BHI, Agar, klindamisin HCl, DMSO, akuades.

## Preparasi sampel
Daun P.scutellaria diperoleh dari Desa Cawan, Kelurahan Widodomartani, Ngemplak, Sleman, DI Yogyakarta. Daun C.papaya diperoleh dari Desa Cangkringan, Kelurahan Argomulyo, Cangkringan, Sleman,  DI  Yogyakarta.  Pemanenan  dilakukan  pada  pagi  hari.  Pasca  panen  dilakukan  untuk mendapatkan  kuallitas  simplisia  yang  diinginkan.  Ekstraksi  serbuk  simplisia  dilakukan menggunakan n-heksan dengan metode maserasi dilanjutkan dengan remaserasi.
Evaluasi ekstrak
Evaluasi  ekstrak  meliputi  organoleptik,  rendemen,  dan  susut  pengeringan  ekstrak.  Uji organoleptik  merupakan  pengamatan  ekstrak  secara  langsung  berupa  warna,  bau,  dan  tekstur. Pernyataan  “tidak  berbau”,  “praktis  tidak  berbau”,    “berbau  khas  lemah”atau  lainnya,  ditetapkan dengan pengamatan setelah bahan terkena udara selama 15 menit. Waktu 15 menit dihitung setelah wadah  yang  berisi  tidak  lebih  dari  25  g  bahan  dibuka.    Rendemen  ekstrak  adalah  perbandingan antara ekstrak yang diperoleh dengan simplisia awal. Perhitungan rendeman ekstrak menggunakan persamaan 1.
Rendemen = 𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑒𝑘𝑠𝑡𝑟𝑎𝑘 (𝑔) 𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑠𝑖𝑚𝑝𝑙𝑖𝑠𝑖𝑎 (𝑔) x 100% ………………………………………1)
Susut  pengeringan ekstrak  dilakukan terhadap 1g ekstrak kental pada botol timbang yang telah bobot tetap. Syarat bobot tetap alat merupakan persentase selisih penimbangan sebelum dan sesudah  pemanasan  sebesar  0,1%.  Pemanasan  alat  maupun  ekstrak  dilakukan  pada  suhu  105 o C selama 30 menit dalam keadaan botol timbang terbuka. Penurunan suhu pasca pemanasan dilakukan di dalam desikator dengan posisi botol tertutup hingga suhu kamar. Penimbangan dilakukan setelah ekstrak  dalam  botol  telah  mencapai  suhu  ruang.  Pemanasan  dilakukan  beberapa  kali  hingga mencapai  bobot  tetap  ekstrak.  Syarat  bobot  tetap  ekstrak  sebesar  0,25%.  Perhitungan  susut pengeringan pada persamaan 2.
Susut pengeringan = (𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑎𝑤𝑎𝑙−𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑡𝑒𝑡𝑎𝑝) 𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑎𝑤𝑎𝑙 x 100% ……………………….2)

## Analisis kualitatif dengan KLT
Sistem KLT yang digunakan adalah fase diam plat silica gel F 254 ; fase gerak heksan-etil asetat dengan perbandingan 8:2; dan reagen semprot anisaldehid asam sulfat. Pengamatan dilakukan pada sinar tampak dan UV 254 . Analisis bercak berupa nilai hRf dan warna. Perhitungan hRf sesuai dengan persamaan 3.
hRf = 𝑗𝑎𝑟𝑎𝑘 𝑏𝑒𝑟𝑐𝑎𝑘 (𝑐𝑚) 𝑗𝑎𝑟𝑎𝑘 𝑒𝑙𝑢𝑠𝑖 (𝑐𝑚) x 100 …………………………………………………..3)
Uji aktivitas antibakteri Pengujian aktivitas antibakteri dilakukan terhadap esktrak daun P.scutellaria ; daun C.papaya ; dan kombinasi keduanya dengan variasi konsentrasi pada Tabel I. Kontrol negatif yang digunakan adalah DMSO sedangkan kontrol positif berupa klindamisin HCl. Pengujian dilakukan menggunakan metode  difusi  cakram.  Bakteri  yang  digunakan  adalah Propionibacterium  acnes ATCC6919, sedangkan media yang digunakan adalah Brain Heart Infusion (BHI). Suspensi bakteri yang dibuat disamakan kekeruhannya dengan standar Mc Farland 0,5 yang setara dengan 1,5x10 8 CFU/mL. Media pertumbuhan P.acnes untuk uji difusi cakram menggunakan BHI yang ditambah dengan Agar 1,5%. Kertas  cakram  yang  digunakan  memiliki  diameter  5,3  mm.  Inkubasi  dilakukan  pada  suhu  37 o C selama 18-20jam.
Pengamatan dilakukan dengan penentuan diameter zona jernih di sekeliling kertas cakram. Zona tersebut selanjutnya disebut sebagai zona hambat. Pengambilan data dilakukan sebanyak tiga kali.  Analisis  data  dilakukan  secara  deskripsi  dari  data  yang  telah  ditabulasikan.  Diameter  zona hambat (Ø) tiap sampel selanjutnya dikelompokkan menjadi kategori antibakteri lemah (Ø < 5mm); sedang (5mm ≤ Ø < 10mm); kuat (10mm ≤ Ø < 20mm); dan sangat kuat (Ø ≥ 20mm) 16 .

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Ekstraksi merupakan proses penarikan metabolit sekunder dari serbuk bahan alam dengan pelarut yang sesuai 17,18 . Metabolit sekunder ini digunakan oleh tumbuhan untuk perlindungan diri selanjutkan  dikembangkan  oleh  manusia  dalam  berbagai  pengobatan 19 .  Metabolit  sekunder  yang memiliki aktivitas dan bermanfaat untuk kesehatan selanjutnya disebut sebagai zat/senyawa aktif 20 . Pelarut yang digunakan harus memiliki kesamaan polaritas dengan zat aktif yang ingin diambil. Jika zat aktif yang ingin diambil memiliki tingkat polaritas yang rendah maka pelarut yang diperlukan juga memiliki indeks polaritas yang rendah dan sebaliknya. Pelarut seperti heksan memiliki indeks polaritas yang sangat rendah, yakni 0,0, sehingga memiliki karakteristik sangat non polar 21 . Pelarut ini mampu menarik terpenoid, steroid, triterpenoid, sedikit alkaloid, resin dan senyawa non polar lainnya 15,22,23 .  Pada  penelitian  ini  digunakan  pelarut  heksan  karena  ingin  menarik  zat  aktif  yang bersifat non-polar dari daun P.scutellaria dan C.papaya yang memiliki aktivitas antibakteri. Metode  ekstraksi  daun P.scutellaria dan C.papaya yang  digunakan  adalah  maserasi  karena merupakan  metode  yang  sederhana,  ekonomis  dan  praktis 24 .  Optimalisasi  proses  ini  dilakukan dengan cara peningkatan frekuensi dan lama pengadukan, perbandingan pelarut 1:10, jenis pelarut yang digunakan, penyeragaman partikel serbuk dan remaserasi 25 . Penyeragaman ukuran partikel serbuk dilakukan dengan pengayakan serbuk menggunakan ayakan 20/40, yaitu serbuk yang lolos ayakan 20 tapi tidak lolos ayakan 40. Serbuk yang dihasilkan tidak terlalu besar dan tidak terlalu kecil sehingga proses ekstraksi dapat optimal sedangkan zat pengganggu seperti amilum tidak ikut terekstraksi. Hal ini sesuai dengan teori, ukuran partikel yang semakin kecil dapat menyebabkan luas permukaan semakin kecil sehingga proses penarikan zat aktif dari serbuk semakin efektif 26 . Proses remaserasi  bertujuan  untuk  mengekstraksi  zat  aktif  yang  mungkin  masih  ada  pada  ampas  pasca maserasi.

## Karakteristik ekstrak
Ekstrak merupakan hasil proses ekstraksi yang terdiri atas beberapa zat aktif sesuai dengan polaritas pelarut yang digunakan 17 . Kontrol kulitas ekstrak dibutuhkan untuk menghasilkan ekstrak yang terjamin mutunya 27 . Kontrol kualitas ekstrak terbagi atas parameter spesifik dan parameter non-spesifik. Organoleptik merupakan parameter spesifik suatu ekstrak sedangkan rendemen dan susut pengeringan termasuk parameter non-spesifik ekstrak 17 . Pada penelitian ini terbatas pada tiga parameter ekstrak tersebut untuk menjelaskan karakteristik ekstrak heksan daun P.scutellaria dan C.papaya yang dihasilkan (Tabel II).
Parameter susut pengeringan bertujuan untuk memberikan gambaran senyawa yang hilang selama  proses  pengeringan 27 .  Kedua  ekstrak  memiliki  susut  pengeringan  yang  sangat  kecil  dan kurang dari 10% (Tabel II). Semakin rendah nilai susut pengeringan maka semakin sedikit senyawa yang hilang selama proses pengeringan. Rendemen ekstrak mencerminkan banyaknya senyawa yang berhasil diperoleh selama proses ekstraksi. Heksan mampu menarik senyawa non polar dari daun P.scutellaria ¼  dari  bobot  serbuk  awal.  Hasil  ini  lebih  banyak  dibandingkan  dari  daun C.papaya . Rendemen  ini  dapat  digunakan  untuk  memprediksi  bobot  serbuk  yang  dibutuhkan  jika  ingin memperoleh ekstrak dalam jumlah tertentu.
Parameter keempat yang dijelaskan pada penelitian ini adalah penentuan kandungan kimia dengan kromatografi lapis tipis (KLT). Parameter ini termasuk parameter spesifik ekstrak. Senyawa yang terlarut dalam ekstrak daun P.scutellaria dan C.papaya merupakan senyawa non polar, maka penentuan sistem KLT yang digunakan juga berdasarkan polaritas dari senyawa aktif tersebut. Hasil optimasi fase gerak yang telah dilakukan terhadap kedua ekstrak diperoleh fase gerak yang mampu memisahkan  beberapa  bercak  senyawa  yakni  heksan-etil  asetat  dengan  perbandingan  8:2.  Fase gerak tersebut cocok untuk memisahkan senyawa terpenoid, triterpenoid dan steroid. Hasil analisis kualitatif  ekstrak P.scutelleria diperoleh  12  bercak  setelah  disemprot  anisaldehid  asam  sulfat (Gambar 1). Dua belas bercak tersebut memiliki nilai hRf sebesar 5, 8, 11, 15, 21, 30, 42, 55, 64, 85, 94, dan 97.
Analisis  KLT  ekstrak  daun C.papaya diperoleh  9  bercak  senyawa  setelah  disemprot anisaldehid asam sulfat (Gambar 2). Nilai hRf sembilan bercak tersebut adalah 4, 10, 15, 20, 25, 38, 48, 56, dan 80. Hasil ini terbatas pada jumlah senyawa yang mampu dideteksi oleh anisaldehid asam sulfat. Senyawa-senyawa tersebut dapat berupa terpenoid, triterpen, steroid atau senyawa non polar
lainnya. Keterbatasan penelitian ini menjadi peluang untuk kelanjutan penelitian selanjutnya untuk mengetahui lebih detail mengenai jenis senyawa dengan pembanding murni atau reagen semprot yang lebih spesifik. Selain itu juga perlu identifikasi secara kuantitatif jumlah senyawa dengan KLT- densitrometri.
Aktivitas antibakteri ekstrak terhadap Propionibacterium acnes Bakteri Propionibacterium  acnes merupakan  bakteri  Gram  positif,  anaerob,  yang  secara normal ada pada permukaan kulit bagian stratum korneum. Jika jumlah bakteri ini berlebih dalam kulit  maka  dapat  menstimulasi  timbulnya  jerawat 28 .  Preparasi  bakteri  dilakukan  dengan
Tabel I. Komposisi bahan untuk sampel uji antibakteri
Perlakuan Komposisi bahan P.scutellaria C.papaya DMSO Klindamisin HCl Akuades Kontrol negatif - - 20% - Ad 5 mL Kontrol positif - - - 10% Ad 5 mL P1 10% - 20% - Ad 5 mL P2 20% - 20% - Ad 5 mL P3 40% - 20% - Ad 5 mL P4 - 10% 20% - Ad 5 mL P5 - 20% 20% - Ad 5 mL P6 - 40% 20% - Ad 5 mL P7 15% 5% 20% - Ad 5 mL P8 10% 10% 20% - Ad 5 mL P9 5% 15% 20% - Ad 5 mL Tabel II. Karakteristik ekstrak yang dihasilkan Sampel Warna Bau Tekstur Rendemen  Susut pengeringan Ekstrak heksan daun P.scutellaria Hijau tua kehitaman Berbau khas lemah daun P.scutellaria Kental, homogen, tidak ada butiran 25% 0,24% Ekstrak heksan daun C.papaya Hijau tua kehitaman Berbau khas kuat daun C.papaya Kental, homogen, tidak ada butiran 19% 0,26% Sinar tampak sebelum disemprot anisaldehid asam sulfat Sinar UV 254 Sinar tampak setelah disemprot anisaldehid asam sulfat
Gambar 1. Analisis ekstrak heksan daun P.scutellaria dengan KLT.
pengkondisian wadah bebas oksigen. Pada penelitian ini digunakan stoples sebagai wadah inkubasi yang diberi lilin. Petri yang berisi sampel dan bakteri dimasukkan ke dalam stoples tersebut. Setelah lilin  dinyalakan,  stoples  ditutup  rapat.  Pada  kondisi  ini  oksigen  di  dalam  stoples  akan  digunakan untuk pembakaran agar lilin tetap dapat menyala. Pada saat lilin mati menunjukkan bahwa oksigen dalam stoples telah habis sehingga kondisi tanpa oksigen ini dapat dimanfaatkan sebagai kondisi yang tepat untuk menumbuhkan P.acnes . Stoples tetap dikondisikan tertutup rapat saat dimasukkan pada inkubator suhu 37 o C selama 18-20 jam.
Ekstrak heksan bersifat non polar sedangkan media pertumbuhan bakteri berbasis air yang bersifat polar. Pembuatan variasi konsentrasi dilakukan dengan pelarut air. Ketidakcampuran antara ekstrak heksan dan air membutuhkan suatu emulgator yang dapat mengemulsi keduanya. Emulgator yang  digunakan  adalah  dimetil  sulfoksid  (DMSO)  20%.  Pada  konsentrasi  tersebut,  ekstrak  dapat teremulsi dalam air dan tidak mempengaruhi aktivitas antibakteri dari ekstrak. Hal ini dibuktikan dari  uji  antibakteri  terhadap P.acnes yang  menunjukkan  bahwa  DMSO  20%  tidak  menunjukkan aktivitas antibakteri (Tabel III).
Klindamisin  digunakan  sebagai  kontrol  positif  karena  memiliki  aktivitas  antibakteri  yang sangat kuat terhadap P.acnes (Tabel III). Antibiotik ini serinig digunakan dalam pengobatan jerawat karena infeksi. Walau aktivitas yang sangat kuat, penggunaan antibiotik dalam jangka waktu lama dapat  menyebabkan  resistensi  bakteri  terhadap  antibiotik  tersebut  sehingga  dibutuhkan  agen antibakteri dengan spektrum dan kekuatan yang lebih besar pada pengobatan selanjutnya 8,9 . Tabel III menunjukkan bahwa semakin tinggi konsentrasi ekstrak, baik P.scutellaria maupun C.papaya maka  semakin  besar  diameter  zona  yang  dapat  menghambat  pertumbuhan P.acnes ATCC6919.  Aktivitas  antibakteri C.papaya lebih  kuat  dibandingkan P.scutellaria .  Ekstrak  heksan daun P.scutellaria hingga  konsentrasi  20%  masih  tergolong  dalam  kategori  sedang.  Aktivitas antibakteri P.scutellaria menunjukkan aktivitas kuat pada konsentrasi 40%. Ekstrak heksan daun C.papaya dalam konsentrasi kecil saja (10%) sudah menunjukkan aktivitas antibakteri kuat terhadap P.acnes . Hal ini membuktikkan bahwa ekstrak heksan daun C.papaya merupakan agen antibakteri yang potensial untuk dikembangkan lebih lanjut dalam pengobatan jerawat karena infeksi P.acnes . Pengembangan  sediaan  topikal  antijerawat  biasanya  digunakan  zat  aktif  dalam  konsentrasi serendah mungkin agar menghasilkan sifat fisik yang bermutu, berkhasiat dan aman. Oleh karena itu,  diperlukan  penelitian  lanjutan  untuk  mengetahui  konsentrasi  terendah  yang  masih  mampu menghambat  pertumbuhan  dan  membunuh  bakteri P.acnes .  Metode  yang  dapat  digunakan  yakni dilusi  atau  mikrodilusi  untuk  mencari  nilai  kadar  hambat  minimum  (KHM)  dan  kadar  bunuh minimum (KBM).
Penelitian  ini  juga  mempelajari  tentang  hubungan  perbandingan  konsentrasi  kombinasi ekstrak heksan daun P.scutellaria dan C.papaya terhadap aktivitas antibakterinya yang ditunjukkan dengan diameter zona hambat (mm). Gambar 3 memperlihatkan bahwa semakin banyak proporsi C.papaya maka akan meningkatkan aktivitas antibakteri kombinasi tersebut hingga perbandingan
Sinar tampak sebelum disemprot anisaldehip asam sulfat Sinar UV 254 Sinar tampak setelah disemprot anisaldehid asam sulfat
Gambar 2. Analisis ekstrak heksan daun C.papaya dengan KLT.
1:1. Hal ini dapat terjadi jika senyawa aktif dari kedua ekstrak memiliki hubungan saling melengkapi (komplementer)  atau  bersinergis  dalam  melawan  pertumbuhan  bakteri.  Setelah  perbandingan kombinasi  kedua  ekstrak  sama  banyak,  penambahan C.papaya justru  menurunkan  aktivitas antibakterinya. Semakin tinggi konsentrasi C.papaya maka akan menimbulkan hubungan antagonis antara kandungan senyawa dari kedua ekstrak. Zona hambat C.papaya dalam kondisi tunggal tetap lebih  tinggi  dibandingkan P.scutellaria tunggal.  Hal  ini  membuktikan  bahwa  komponen  senyawa kedua  ekstrak  mempengaruhi  aktivitas  antibakterinya.  Kombinasi  ekstrak  daun P.scutellaria dan C.papaya pada perbandingan 1:1 adalah ekstrak yang paling optimal dengan diameter zona hambat tertinggi, yakni 18mm.
Aktivitas suatu agen antibakteri tidak lepas dari zat aktif yang terkandung dalam ekstrak. Baik ekstrak P.scutellaria maupun C.papaya mengandung  berbagai  macam  zat  aktif  non  polar.  Hal  ini dibuktikan dari hasil analisis KLT pada Gambar 1 dan 2. Kandungan non polar tersebut diantaranya senyawa golongan terpenoid, triterpen, dan steroid. Hal ini sejalan dengan hasil penelitian terdahulu bahwa  ekstrak  heksan  dari P.scutellaria mengandung  terpenoid  yang  memiliki  aktivitas
Tabel III. Aktivitas antibakteri ekstrak P.scutellaria dan C.papaya terhadap P.acnes Perlakuan Diameter zona hambat (mm) Kategori antibakteri Kontrol negatif 0±0 Tidak memiliki aktivitas Kontrol positif 21,33±0,94 Sangat kuat P1 7,33±0,47 Sedang P2 8,67±1,25 Sedang P3 11,67±1,89 Kuat P4 11,33±0,94 Kuat P5 12,67±0,47 Kuat P6 14,00±0,82 Kuat P7 11,33±1,70 Kuat P8 18,00±1,63 Kuat P9 16,33±2,49 Kuat

## Keterangan:
Pengukuran menggunakan jangka sorong dengan ketelitian 0,05mm. Hasil zona hambat sudah dikurangi dengan diameter kertas cakram (5,34mm).
Gambar 3. Grafik hubungan konsentrasi kombinasi ekstrak dengan diameter zona hambat.
antibakteri 12,29,30 .  Ekstrak  heksan  dari C.papaya memiliki  aktivitas  antibakteri  karena  kandungan monoterpenoid dan alkaloid 13 – 15,30 .
Terpenoid  merupakan  golongan  senyawa  terbesar,  yang  dikelompokkan  lagi  menjadi monoterpenoid,  seskuiterpenoid,  hingga  triterpenoid.  Monoterpenoid  merupakan  golongan terpenoid utama sebagai antibakteri. Mekanisme senyawa golongan terpenoid sebagai antibakteri diantaranya merusak dinding dan membran sel bakteri, menggangu homeostatis ATP, menghambat sintesis protein, mengganggung kesetimbangan pH, menghambat efflux pump , menginduksi reactive oxygen  species (ROS) ,  serta  menghambat  terbentuknya quorum  sensing  (QS) sehingga  memicu kematian sel bakteri 30 . Mekanisme alkaloid dalam menghambat pertumbuhhan bakteri antara lain merubah permeabilitas membran sel, mengganggu metabolisme, menghambat sintesis asam nukleat dan  protein  pada  sel  bakteri.  Gangguan-gangguan  tersebut  menyebabkan  kerusakan  sel  bakteri sehingga menyebabkan kematian sel 31 .
Penelitian  ini  menjadi  salah  satu  stimulan  untuk  penelitian  lebih  lanjut.  Penemuan  terkait senyawa  yang  lebih  spesifik  yang  berperan  dalam  aktivitas  antibakteri  ekstrak  heksan  daun P.scutellaria dan C.papaya diperlukan untuk menambah bukti ilmiah dari penggunaan kedua bahan tersebut.  Berdasarkan  potensi  aktivitas  antibakteri  kombinasi P.scutellaria dan C.papaya ,  dapat menjadi  inisiator  pengembangan  produk  topikal  berbahan  dasar  bahan  alam  sebagai  alternatif pengobatan antijerawat.

## KESIMPULAN
Aktivitas  antibakteri  ekstrak  heksan  daun C.papaya lebih  kuat  dibandingkan P.scutellaria . Kombinasi  kedua  ekstrak  dengan  perbandingan  1:1  menunjukkan  aktivitas  antibakteri  yang tertinggi  dibandingkan  dengan  perlakuan  yang  lain.  Kombinasi  kedua  ekstrak  tergolong  dalam antibakteri kuat.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan  terima  kasih  diberikan  kepada  Bapak  apt.  Purwanto,  M.Sc.,Ph.D.  yang  telah memberikan biakan P.acnes ATCC6919 dan bahan-bahan yang dibutuhkan pada penelitian ini serta Politeknik  Kesehatan  Bhakti  Setya  Indonesia  atas  dukungan  menyediakan  sarana  dan  prasarana sehingga penelitian ini dapat berjalan dengan baik.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Alkhawaja E, Hammadi S, Abdelmalek M, Mahasneh N, Alkhawaja B, Abdelmalek SM. Antibiotic resistant Cutibacterium acnes among acne patients in  Jordan: a cross sectional study. BMC Dermatol . 2020;20(1):1-9. doi:10.1186/s12895-020-00108-9
2. Kuehnast T, Cakar F, Weinhäupl T, et al. Comparative analyses of biofilm formation among different  Cutibacterium  acnes  isolates. Int  J  Med  Microbiol .  2018;308(8):1027-1035. doi:10.1016/j.ijmm.2018.09.005
3. Castillo  DE,  Nanda  S,  Keri  JE.  Propionibacterium  (Cutibacterium)  acnes  Bacteriophage Therapy  in  Acne:  Current  Evidence  and  Future  Perspectives. Dermatol  Ther  (Heidelb) . 2019;9(1):19-31. doi:10.1007/s13555-018-0275-9
4. Platsidaki  E,  Dessinioti  C.  Recent  advances  in  understanding  Propionibacterium  acnes (Cutibacterium acnes) in acne [version 1; referees: 2 approved]. F1000Research . 2018;7(0). doi:10.12688/f1000research.15659.1
5. Borrel  V,  Thomas  P,  Catovic  C,  et  al.  Acne  and  Stress:  Impact  of  Catecholamines  on Cutibacterium acnes. Front Med . 2019;6(July):1-13. doi:10.3389/fmed.2019.00155
6. O’Neill AM, Nakatsuji T, Hayachi A, et al. Identification of a Human Skin Commensal Bacterium that  Selectively  Kills  Cutibacterium  acnes. J  Invest  Dermatol .  2020;140(8):1619-1628.e2. doi:10.1016/j.jid.2019.12.026
7. Powale  S,  Chandel  VK,  Asati  S.  Preparation  and  Characterization  of  Ethosomes  for  Topical Delivery of Clindamycin. J Drug Deliv
Ther . 2022;12(1):109-113.
doi:10.22270/JDDT.V12I1.5190
8. Waranuch N, Phimnuan P, Yakaew S, et al. Antiacne and antiblotch activities of a formulated combination of Aloe barbadensis leaf powder, Garcinia mangostana peel extract, and Camellia
sinensis leaf extract. Clin Cosmet Investig Dermatol . 2019;12:383. doi:10.2147/CCID.S200564
9. Madelina W, Sulistiyaningsih. Review: Resistensi Antibiotik pada Terapi Pengobatan Jerawat. J Farmaka . 2018;16(2):105-117.
10.   BPOM RI. Kosmetika Mengandung Bahan Dilarang/Bahan Berbahaya Hasil Pengawasan Badan POM Oktober 2021 - Agustus 2022 . BPOM RI; 2022.
11.   BPOM RI. Peraturan Badan Pengawas Obat Dan Makanan Tahun 2019 . Jilid 1. BPOM RI; 2020. 12.   Rosa D, Halim Y, Kam N, Sugata M, Samantha A. Antibacterial Activity of Polyscias scutellaria Fosberg  Against  Acinetobacter  Sp. Asian  J  Pharm  Clin  Res .  2019;12(1):516. doi:10.22159/ajpcr.2019.v12i1.30270
13.   Ashish  B. Wadekar, Minakshee G. Nimbalwar, Wrushali A.  Panchale, Bhushan R. Gudalwar, Jagdish  V.  Manwar,  Ravindra  L.  Bakal.  Morphology,  phytochemistry  and  pharmacological aspects  of  Carica  papaya,  an  review. GSC  Biol  Pharm  Sci .  2021;14(03):234-248. doi:10.30574/gscbps.2021.14.3.0073
14.   Roni  A,  Maesaroh  M,  Marliani  L.  Aktivitas  Antibakteri  Biji,Kulit  dan  Daun  Pepaya  (Carica papaya L.) terhadap Bakteri Escherichia Coli dan Staphylococcus Aureus. Kartika  J Ilm Farm . 2019;6(1):29. doi:10.26874/kjif.v6i1.134
15.   Mbah-omoje KN, Ugwu CC, Ezugwu RI, Illoputaife EJ. Antimicrobial and Phytochemical Studies of Carica Papaya Leaves Against Escherichia Coli and Staphylococcus aureus. World J Pharm Pharm Sci . 2018;7(1):180-189. doi:10.20959/wjpps20181-10626 16.   Purba PY, Yoswaty D, Nursyirwani. Antibacterial Activity of Avicennia alba Leaves and Stem Extracts  Against  Pathogenic  Bacteria  (Pseudomonas  aeruginosa,  Aeromonas  salmonicida, Staphylococcus aureus). J Coast Ocean Sci . 2022;3(2):144-151. 17.   Kemenkes  RI. Farmakoper  Herbal  Indonesia .  2nd  ed.  Kemenkes  RI;  2017. doi:10.1201/b12934-13
18.   Alara OR, Abdurahman NH, Ukaegbu CI. Extraction of phenolic compounds: A review. Curr Res Food Sci . 2021;4:200-214. doi:10.1016/J.CRFS.2021.03.011
19.   Kuhnert E, Collemare  J. A genomic  journey  in the secondary  metabolite  diversity  of fungal plant  and  insect  pathogens:  from  functional  to  population  genomics. Curr  Opin  Microbiol . 2022;69:102178. doi:10.1016/J.MIB.2022.102178
20.   Mera  IFG,  Falconí  DEG,  Córdova  VM.  Secondary  metabolites  in  plants:  Main  classes, phytochemical  analysis  and  pharmacological  activities. Bionatura .  2019;4(4). doi:10.21931/RB/2019.04.04.11
21.   Kusmayadi  A,  Adriani  L,  Abun  A,  Muchtaridi  M,  Tanuwiria  UH.  The  effect  of  solvents  and extraction  time  on  total  xanthone  and  antioxidant  yields  of  mangosteen  peel  (Garcinia mangostana L.) extract. Drug Invent Today . 2018;10(12):2572-2576.
22.   Aruan  DGR,  Barus  T,  Haro  G,  Siburian  R,  Simanjuntak  P.  Phytochemical  Screening  and Antidiabetic Activity of N-Hexane, Ethyl Acetate and Water Extract from Durian Leaves (Durio Zibethinus L.). Orient J Chem . 2019;35(1):487-490. doi:10.13005/ojc/350166
23. Bahadır - Acıkara Ö, Özbilgin S, Saltan - Işcan G, et al. Phytochemical analysis of Podospermum and  Scorzonera  n-hexane  extracts  and  the  HPLC  quantitation  of  triterpenes. Molecules . 2018;23(7). doi:10.3390/molecules23071813
24.   Wijaya  H,  Jubaidah  S,  Rukayyah.  Perbandingan  Metode  Esktraksi  Maserasi  Dan  Sokhletasi Terhadap Rendemen Ekstrak Batang Turi (Sesbania Grandiflora L.). Indones J Pharm Nat Prod . 2022;5(1):1-11.
25. Uysal  S,  Cvetanović  A,  Zengin  G,  Zeković  Z,  Mahomoodally  MF,  Bera  O.  Optimization  of Maceration Conditions for Improving the Extraction of Phenolic Compounds and Antioxidant Effects of Momordica Charantia L. Leaves Through Response Surface Methodology (RSM) and Artificial  Neural  Networks  (ANNs). https://doi.org/101080/0003271920191599007 . 2019;52(13):2150-2163. doi:10.1080/00032719.2019.1599007
26.   Tambun R, Limbong HP, Pinem C, Manurung E. Pengaruh Ukuran Partikel, Waktu Dan Suhu Pada  Ekstraksi  Fenol  Dari  Lengkuas  Merah. J  Tek  Kim  USU .  2017;5(4):53-56. doi:10.32734/jtk.v5i4.1555
27.   Hanwar D, Elisafitri O, Suhendi A. Standardisasi Ekstrak Rimpang Lempuyang Gajah (Zingiber Zerumbet Smith). 9th Univ Res Colloqium 2019 . 2019;9(1):345-351.
28.   Beylot  C,  Auffret  N,  Poli  F,  et  al.  Propionibacterium  acnes:  An  update  on  its  role  in  the pathogenesis  of  acne. J  Eur  Acad  Dermatology  Venereol .  2014;28(3):271-278. doi:10.1111/jdv.12224
29.   Kurniawan MR, Humaedi A, Ritonga AF. Direct Investigation of Synthesis of Gold Nanoparticles Using  Polyscias  scutellaria  Leaf  Extract  in  the  Hexane-Water  System  Using  the  Centrifugal Liquid  Membrane-Spectrophotometry  Method. J  Kim  Sains  dan  Apl .  2020;23(7):255-260. doi:10.14710/jksa.23.7.255-260
30.   Purwanto,  Irianto  IDK. Senyawa  Alam  Sebagai  Antibakteri  Dan  Mekanisme  Aksinya .  Gadjah Mada University Press; 2022.
31.   Liu Y, Liu J, Zhang Y. Research Progress on Chemical Constituents of Zingiber officinale Roscoe. Biomed Res Int . 2019;2019. doi:10.1155/2019/5370823