Jurnal Vitek Bidang Kedokteran Hewan Vol.10 November 2020
PENGARUH PEMBERIAN MINYAK BUAH MERAH ( Pandanus conoideus Lam .) TERHADAP DEGENERASI SEL GINJAL MENCIT ( Mus musculus ) YANG

## DIPAPAR PLUMBUM
Siska Aprilianti 1 , Maratun Janah 1 , Candra Dwi Atma 1 , Novarina Sulsia Ista’In Ningtyas 1 *
1 Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Pendidikan Mandalika *Email: novarina.sullsia@gmail.com

## Abstract
Plumbum (Pb) pollution in environment can cause dangerous for animal. Plumbum enter the body through oral cavity and was excreted by kidney and can effect to the kidney function. Defect in kidney  can  make  distraction  of  metabolism.  An  effort  to  prevent  deffect  in  kidney  that  cause  by plumbum  can  be  used  antioxidant  from  Red  Fruit  plant  (Padanus  conoideus  Lam).  The  aim  of  this research was to know the effect of Red Fruit plant with the degrees of kidney cell degeneration that was exposed by plumbum. Type of this research was experimental research that use complete random design with 4 treatment, P0 (aquadest 0,5 ml), P1 (Pb 0,01 mg), P2 (was given with Red Fruit Oil 0,3 ml and Pb 0,01 mg), P3 (was given with Red Fruit Oil 0,8 ml and Pb0,01 mg). The data was analyzed by Kruskal Wallis using SPSS and followed with Mann-Whitney test. The result of this research show that  there  were  significant  difference  between  P0  and  P1,  P0  and  P2,  P0  and  P3,  P1  and  P3 (P<0,05), but did not showed significant difference (p>0.05) with P2 and P3. Base on this research can  be  concluded  that  giving  red  fruit  oil  can  decrease  the  degrees  of  cell  degeneration  in  mouse kidney that was exposed by plumbum.
Keywords : antioxidant, kidney degeneration, Plumbum, red fruit plant

## PENDAHULUAN
Plumbum (Pb) merupakan salah satu bahan pencemaran  bersumber  dari  gas  kendaraan bermotor  dan  limbah  industry  yang  dapat ditemukan  di  air,  udara  dan  tanah  (Naria, 2005). Intoksikasi plumbum melalui lingkungan sudah dikenal sejak lebih dari 2000 tahun  yang  lalu.  Pencemaran  udara  di perkotaan  diperkirakan  70%    disebabkan  oleh aktivitas  kendaraan  bermotor.  Asap  kendaraan bermotor  dapat  mengeluarkan  partikel  pb  yang kemudian  masuk  atau  mencemari  ke  dalam makanan  yang  dijajankan  di  pingir  jalan  atau dapat  terserap  manusia  (Cahyadi,  2004). Pencemaran plumbum (Pb) di lingkungan dapat menimbulkan bahaya bagi kesehatan baik pada manusia,hewan,  tanaman  maupun  lingkungan. Plumbum bersifat karsinogenik, dapat menyebabkan  mutasi  terurai  dalam  jangka waktu  yang  lama  dan  toksisitasnya  tidak berubah  (Brass  and  Strauss  1981).Plumbum masuk  ke  dalam  organ  melalui  oral  dan  di ekskresi    di    ginjal  dan  dapat  mempengaruhi fungsi  ginjal  yang  merupakan    suatu    organ yang    sangat    penting  untuk  mengatur  fungsi, mempertahankan volume, komposisi dan distribusi    cairan    tubuh  serta    mengeluarkan hasil    metabolisme    tubuh  yang    sudah    tidak
digunakan.  Kerusakan    pada    ginjal    membuat sisa  metabolisme    dan    air    tidak    dapat    di eksresikan. Dalam  kadar  tertentu,  Pb tersebut dapat    meracuni    tubuh,    kemudian menimbulkan    kerusakan    jaringan.  Plumbum juga  dapat  menyebabkan  stres  oksidatif  dan meningkatkan  pembentukan  radikal  bebas  dan dapat  menurunkan  sistem  antioksidan  di jaringan  Stres  oksidatif  dapat  mengakibatkan kerusakan  molekul  di  dalam  sel  (Riwayanti, dkk 2014).
Upaya  untuk  mencegah  kerusakan  ginjal yang  diakibatkan  oleh  timbal  yaitu  dapat digunakan antioksidan yang tinggi yang berasal dari  tanaman  Buah  merah (Padanus conoideus Lam) y ang merupakan salah satu tanaman yang berpotensi dalam mengobati berbagai penyakit. Buah  merah  merupakan  buah  endemik  Papua yang  mengandung  senyawa  antioksidan  untuk anti radikal bebas karena mengandung tokoferol  11.000  ppm  dan  betakaroten  12.000 ppm (Palupi dan Martosupono, 2009). Kandungan  pada  minyak  buah  merah  ini berpengaruh  juga  dalam  meningkatkan  jumlah folikel  matang  pada  mencit  infertile  (Ningtyas, 2017). Hal ini berkaitan dengan peran tokoferol dan    betakaroten  sebagai  antioksidan  alami dengan adanya gugus -OH pada tokoferol serta
ikatan rangkap pada betakaroten dapat menghambat  dan  menetralisir  radikal  bebas (Murray et al. , 2009).
Dampak paparan plumbum terhadap kerusakan  ginjal  dan  manfaat  kandungan antioksidan  buah  merah  diharapkan  dapat mengurangi kerusakan pada histopatologi ginjal sehingga penelitian  ini bertujuan untuk mengetahui  pengaruh  minyak  buah  merah terhadap kerusakan  ginjal  salah  satunya  adalah degenerasi ginjal.

## METODE

## Hewan dan perlakuan
Penelitian ini menggunakan 20 ekor mencit dengan  BB  20g  dibagi  menjadi  4  kelompok dengan  5  ulangan.  Minyak  buah  merah  yang dipakai pada penelitian ini adalah minyak buah merah  yang  telah  siap  pakai  dan  Pb  diberikan secara  oral  dengan  sonde  lambung    selama  14 hari.  P0  diberikan  aquades  setiap  ekornya sebanyak  0,5  ml/hari,  P1  diberikan  Pb  setiap ekornya  sebanyak  0,01  mg/hari,  P2  diberikan minyak  buah  merah  0,3ml dan Pb 0,01mg/hari dan kelompok P3 diberikan minyak buah merah 0,8ml dan Pb 0,01mg/hari.

## Pembuatan dan Pengamatan Preparat
Organ  ginjal  mencit  yang  sudah  dikoleksi kemudian  difiksasi    menggunakan    formalin 10%  setelah  itu  dilakukan    dehidrasi    dengan alcohol    bertingkat,    kemudian    dilakukan clearing menggunakan xylol. Tahap selanjutnya    adalah    tahap  infiltrasi    dan embedding menggunakan  paraffin  cair  dan paraffin  blok  kemudian  dilakukan sectioning dan  penempelan  pada  objek  glass.  Preparat kemudian diwarnai dengan pewarnaan
HE.Pengamatan
preparat mengunakan mikroskop  cahaya  dengan  pembesaran  400x pada  lima  lapangan  pandang  yang  berbeda dimulai  dari  sudut  kiri,  kanan,  bagian  atas, bagian  bawah,  dan  bagian  tengah  dari  preparat histopatologi  ginjal  mencit.  Pemberian  skor tingkat degenerasi mengunakan Skoring berdasarkan  Suhita  dkk  (2013)  yaitu  Skor  0 tidak  ditemukan  degenerasi  Skor  1  degenerasi tubulus atau fokal Skor 2 degenerasi  merata.
Analisis Data Data hasil pemeriksaan sediaan histopatologi dianalisis secara statistik nonparametrik  Kruskal  Wallis  dan  apabila
terdapat perbedaan yang nyata (p<0,05)dilanjutkan dengan uji Mann-Whitney. Semua analisis menggunakan SPSS

## HASIL
Hasil  analisis  pemberian  minyak  buah merah  dan di paparkan Pb terhadap degenerasi sel  tubulus  ginjal  mencit  mengunakan  uji Kruskal-Wallis Test menunjukan bahwa signifikansi  atau  p-value  adalah  0,005  (P  < 0,05),  menunjukkan  adanya  perbedaan  nyata, sehingga  pengujian  dilanjutkan  dengan  uji Mann  –  Whitney.  Hasil  uji  Mann  –  Whitney . Rata  –  rata  Degenerasi  Sel  Tubulus  Ginjal Mencit.
Tabel  1. Hasil  Skoring    Degenerasi  Sel
Tubulus Perlakuan X̅±SD P0 0,00 a ±0,000 P1 1,76 d ±0,167 P2 1,08 bc ±0,179 P3 0,88 b ±0,666
Superskrip  yang  berbeda  pada  kolom  yang sama  menunjukkan perbedaan yang nyata pada taraf kepercayaan α = 0,05 (p< 0,05).
Pada  tabel  1  dapat  dilihat  bahwa  mencit yang mengalami degenerasi ginjal paling parah pada  perlakuan  P1  dan  paling  ringan  pada perlakuan P0. Perlakuan P0 dan P1, P0 dan P2, P0  dan  P3  terdapat  perbedaan  yang  nyata (P<0,05).  Perlakuan  P1  dan  P2  terdapat perbedaan  nyata  (P<0,05).  Perlakuan  P1  dan P3,  P3  terdapat  perbedaan  nyata  (P<0,05), sedangkan perlakuan P2 dan P3  tidak terdapat perberbedaan  yang  nyata  (P>0,05).  Degenerasi sel  tubulus  ginjal  mencit  dapat  dilihat  pada Gambar 1.
Gambar  1. Gambar  mikroskopis  ginjal mencit  perbesaran  400x.  Tubulus  (panah hitam) terlihat normal, tubulus (panah kuning) terdapat sel tubulus yang mengalami degenerasi .

## PEMBAHASAN
Respon  sel  terhadap  paparan  toksik umumnya  menyebabkan  perubahan  pada  ginjal yang memperlihatkan degenerasi tubulus ginjal (Fahrimal  dkk.,2016).  Hasil  dari  penelitian  ini menunjukan  bahwa  degenerasi  paling  tinggi terjadi  pada  kelompok  mencit  yang  diberikan Pb  tanpa  minyak  buah  merah,  dibandingkan dengan  kelompok  yang  diberikan  Pb  dengan minyak  buah  merah.  Adanya  akumulasi  zat toksik,  dalam  hal  ini  Pb  pada  ginjal  dapat menyebabkan  terganggunya  proses  eksresi sehingga  menyebabkan  gangguan  struktur  sel ginjal(Schnellman,  2001).  Plumbum juga memicu terjadinya ROS dan terbentuknya ROS dalam  tubuh  kita  disebabkan  oleh  stres oksidatif.  ROS  merupakan  radikal  bebas  yang berada  dalam  tubuh  yang  terdiri  dari  satu  atau lebih  elektron  yang  tidak  berpasangan  sehinga tidak  stabil  dan  reaktif,  untuk  menstabilkan maka  ROS  akan  mengoksidasi  organ  yang dikenal  dengan  keadaan  stres  oksidatif  yang memicu terjadinya peroksidasi lipid, yaitu suatu proses  dimana  radikal  bebasyang  bersifat lipofilik merusak membran sel yang terdiri atas Poly  Unsaturated  Fatty  Acid (  PUFA). Degenerasi  sel terjadi  akibat adanya kerusakan pada  membran  sel,  rusaknya  membran  akan memicu    terjadinya  oksidasi    asam  amino  dan peningkatan permibilitas membran sel, sehingga reaksi seluler tidak berjalan sebagaimana mestinya (Allen, 2000).
Kelompok yang diberikan Pb dan diberikan  minyak  buah  merah  0,3  ml  dan kelompok yang diberikan Pb danberikanminyak buah  merah  0,8  ml  menunjukkan  tingkat degenerasi  yang  lebih  rendah  dibandingkan dengan  kelompok  yang  diberikan  Pb  tanpa diberikan  minyak  buah  merah.  Hal  ini disebabkan karena pemaparan  Pb yang diberikan  disertai  dengan  pemberian  minyak buah  merah.  Minyak  buah  merah  mengandung zat  aktif    yang  relatif  tinggi,  karoten  dan betakaroten. Minyak buah merah juga memiliki kandungan  asam  lemak  tidak  jenuh  dalam jumlah  yang  tinggi  seperti  asam  oleat  serta mengandung  antioksidan  yang  berperan  dalam menangkal oksidasi radikal bebas dalam tubuh. Kandungan  minyak  buah  merah  berpengaruh terhadap  jumlah  folikel  de  Graff  pada  mencit yang  dipapar  plumbum  (Ningtyas  dkk.,  2019). Kegunaan utama antioksidan ini untuk
menghentikan    atau    memutus  reaksi  berantai dari  radikal  bebas  yang  terdapat  dalam  tubuh (Swantara  dan  Parwata,  2011).  Adapun pendapat  Utomo  dkk  (2008)  tentang  kegunaan antioksidan  ini  adalah  untuk  menetralkan radikal bebas sehingga dapat melindungi sistem biologi tubuh  dari  efek  merugikan  yang timbul dari  proses  ataupun  reaksi  yang  menyebabkan oksidasi yang berlebihan.
Fungsi senyawa betakaroten dikenal sebagai  antioksidan  penangkal  yang  kuat  bagi oksigen  reaktif.  Selain  itu,  betakaroten  juga mampu  meningkatkan  kekebalan  tubuh  karena intraksi  vitamin  dengan  protein  (asam-asam amino)  yang  berperan  dalam  pembentukan antibodi (Sakkir dkk.,2008) Betakaroten memiliki  kelebihan  elektron  pada  struktur kimianya,  maka  partikel  radikal  bebas  yang pada  awalnya  kekurangan  elektron  dari senyawa betakaroten. Tokoferol yang terkandung dalam minyak buah merah merupakan  antioksidan  alami  yang  mampu untuk memperlambat proses oksidatif (Rohman dan Sugeng, 2012).

## KESIMPULAN
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan dapat disimpulkan pemberian minyak  buah  merah  dapat  mengurangi  tingkat degenerasi  sel  ginjal  mencit  yang  dipapar Plumbum (Pb).

## REFERENSI
Allen,  G.  2000.  Marine  Fishes  Of  South-East Asia.  Pariplus  edition  (HK)  Ltd. Australia Brass,  G.M.  and    W.  Strauss.  1981.
Airpollution  Control.  John  Willey  & Sons. New York.
Budi    Utomo,    Anang.  Suprijono,    Agus. Risdianto,    Ardan.    2008.  “Uji AktivitasAntioksidan Kombinasi Ekstrak    Sarang    Semut    (Myrmecodia pendans)    dan  Ekstrak    Teh    Hitam (Camellia    sinensis  O.K.var.assamica (mast.))    DenganMetode    DPPH    (1,1- difenil-2-pikrilhidrazil)”, Sekolah
Tinggi Ilmu FarmasiYayasan Pharmasi Semarang Cahyadi, M. 2004. Bahaya Pencemaran Timbal pada Makanan dan Minuman.
Bandung:  Fakultas  Teknik  Unpas Departemen Farmasi Pascasarjana ITB. Fahrimal,    Y.,    Rahmiwati,    dan    D.    Aliza. 2016.  Gambaran    histopatology    ginjal tikur    putih  ( Rattus  norvegicus )  jantan yang      diinfeksikan    Trypanosoma evansi    dan    diberi    ekstrak    daun sernai (Wedelia biflora). Jurnal Medika Veterineria. 10(2):166-170.
Murray  R.K.,  Granner  D.K.,  Rodwell  V.W. 2009.  Biokimia  Harper.  Edisi  27.
Penerbit  B  uku  Kedokteran  EGC. Jakarta.
Naria  E.  2005.  Mewaspadai  Dampak  Bahan Pencemar  Timbal  (Pb)  di  Lingkungan Terhadap  Kesehatan.  Jurnal  Komunikasi Penelitian. 17(4): 2 Ningtyas,  N.S.I.,  Kunti  T,  Alfiana  laili  D.A. 2019.  Proteksi  Minyak  Buah  Merah ( Padanus  conoideus  Lam )  Terhadap Jumlah  Folikel  yang di Papar Plumbum. vol.5.No.4 (2019). Hal 7-9 Ningtyas,N.S.I..  2017.  Pengaruh  Pemberian
Minyak Buah Merah Terhadap Histopatologi  Folikel  De  Graap  Pada Mencit Model Infertil. Jurnal
Sangkareang  Mataram  volume.3,No.3. Hal 36-38 Palupi,  I.A.  dan  Martosupono,  M.  2009.  Buah Merah : Potensi dan Manfaatnya Sebagai
Antioksidan.  Jurnal  Tumbuhan  Obat
Indonesia 2(1):42-48. Riwayanti I, Hartati I, Purwanto H, Suwardiyono. Prosiding saseminar
Nasional    Aplikasi  Sains  &  Teknologi (SNAST);  2014  Nov  15;  Yogyakarta. Indonesia: 1979-911X. SNAST; 2014. Rohman,  R  Sugeng,  YB  Che  Man.  2012. ( Padanus conoideus Lam ) oil. Internatioonal  Food  Research  Journal. 2012; 19(2):563-7 Sakkir B,  Khidri, M.A  dan  Sjafruddin  Ahmad. 2008.  Kadar  Timbal  Dalam  Darah  Pada
Anak-anak  di  kota  Makassar.  Jurnal
Kesehatan Masyarakat Madani 01(02) 1- 10 Schnellman    R.    G,    Goldstein    R.    S.,    2001, Toxic  Responses  of  kidney,  Di  dalam: Dellyani    R    Sari,    Pengaruh    Timbal (Pb)   pada    Udara   Jalan   Tol    Terhadap Gambaran Mikroskopis Ginjal dan Kadar Timbal (Pb) dalam Darah Mencit Balb/C
Jantan,  Skripsi,  Semarang:  Universitas
Diponegoro
Suhita,Ni  Luh  Putu  Rata.,  Sudira,  I  Wayan.,
Winaya, Ida Bagus Oka. 2013.
Histopatologi  Ginjal  Tikus  Putih  Akibat Pemberian  Ekstrak  Peganggan  (Centella asiatica)  Peroral. Buletin Veteriner Udayana. Universitas Udayana. Denpasar-Bali. 5(2).
Swantara,  I.  M.  D.,  dan  Parwata,  I.  M.  O.  A. 2011. Kajian Senyawa Antioksidan Pada Rumput Laut Dari Pantai Sekitar Bali.