## Sulastri et al./Galenika Journal of Pharmacy

## UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI KRIM ASAM LAURAT TERHADAP
Staphylococcus aureus ATCC 25923 DAN Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853

## (ANTIBACTERIAL ACTIVITY TEST OF LAURIC ACID CREAM AGAINST
Staphylococcus aureus ATCC 25923 AND Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853)
Evi Sulastri 1* , Mappiratu 2 , Annisa Kartika Sari 1
1 Jurusan Farmasi, Fakultas MIPA, Universitas Tadulako, Palu, Indonesia
2 Jurusan Kimia, Fakultas MIPA, Universitas Tadulako, Palu, Indonesia
Received 25 Juli 2016, Accepted 30 Agustus 2016

## A B S T R A K
Asam  laurat merupakan  asam  lemak  jenuh  yang terdapat dalam  lemak/minyak  nabati terutama dalam minyak kelapa. Asam  laurat memiliki manfaat sebagai antivirus dan antibakteri.  Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh variasi konsentrasi asam laurat dalam sediaan krim terhadap stabilitas mutu fisik krim dan aktivitas  antibakterinya  terhadap Staphylococcus  aureus dan Pseudomonas  aeruginosa .  Pada  penelitian  ini dilakukan  variasi konsentrasi asam  laurat dalam sediaan krim  yakni 10%, 20%, dan 30% kemudian dilakukan pengujian  aktivitas  antibakteri  menggunakan  metode  difusi  sumur.  Hasil  evaluasi  sediaan  krim  asam  laurat Formula  1,  Formula  2,  dan  Formula  3  menunjukkan  bahwa  pada  pemeriksaan  organoleptis  dan  homogenitas tidak terjadi perubahan terhadap ketiga formula selama waktu simpan, tetapi  pada pemeriksaan pH, viskositas, dan  daya  sebar  terjadi  perubahan  terhadap  ketiga  formula  selama  waktu  simpan  (28  hari).  Hasil  pengujian antibakteri menunjukkan diameter daya hambat tertinggi terdapat pada penggunaan konsentrasi asam laurat 30% untuk S.aureus yakni sebesar 21,589 mm ±0,18 dan P.aeruginosa yakni sebesar 14,25 mm ±0,37. Berdasarkan analisis  statistik  krim  yang  dihasilkan  dari  tiga  konsentrasi  asam  laurat  belum  dapat  dikatakan  stabil  sebab terdapat perbedaan signifikan pada pH, viskositas, dan daya sebar selama waktu penyimpanan 28 hari.
Kata Kunci : asam laurat, krim antibakteri, Staphylococcus aureus , Pseudomonasaeruginosa .

## A B S T R A C T
Lauric acid is a saturated fatty acid found in fatty/vegetable oils, especially in palm oil. Lauric acid was reported  to  posses  antiviral  and  antibacterial  property.  This  study  aims  to  determine  the  effect  of  the concentration  variance  of  lauric  acid  in  cream  on  the  stability  of  the  cream  physical  quality  and  antibacterial activity against Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa . In this research, lauric acid concentration in cream was varied in 10%, 20%, and 30% and then tested for antibacterial activity using hole plate technique . The results of the evaluation of lauric acid cream preparation of Formula 1, Formula 2 and Formula 3 showed that the organoleptic and homogeneity tests of all formula was no difference during storage time, but the result of  pH,  viscosity,  and  dispersive  power  of  all  formula  has  difference  during  storage  time  (28  days).  The antibacterial  test  results  showed  that  the  highest  inhibition  diameter  was  found  in  the  use  of  lauric  acid concentration  of  30%  for S.aureus (21.589  mm  ±  0.18)  and P.aeruginosa (14.25  ±  0.37  mm).  Based  on statistical  analysis  of  the  cream  produced  from  the  three  concentrations  of  lauric  acid,  they  were  not  stable because there are significant differences  in pH,  viscosity, and dispersive power during storage time (28 days).
Keywords: lauric acid, antibacterialcream, Staphylococcus aureus , Pseudomonas aeruginosa .
*Coresponding Author : Evi Sulastri evisulas3@gmail.com (ph: +62-852-9913-2298)
GALENIKA Journal of Pharmacy Vol. 2 (2) : 59 - 67
October 2016

## PENDAHULUAN
Asam  laurat  adalah  suatu  asam  lemak jenuh  yang  terdapat  dalam  lemak/minyak nabati terutama dalam minyak kelapa.
Disamping  itu  asam  laurat  berfungsi  sebagai antivirus  dan  antibakteri.  Asam  laurat  dalam tubuh akan diubah menjadi senyawa Monolaurin  yang  mempunyai  kemampuan antiprotozoa,  antibakteri  serta  antivirus  dan kini  sedang  dikembangkan  sebagai  antivirus HIV ( Human Immunodeficiency Virus ) (Tuminah,  2010).  Preparasi  dari  asam  laurat dapat  melindungi  kulit  dari  infeksi  bakteri (Kabara, 1984).
Berdasarkan  penelitian  sebelumnya  asam laurat pada  konsentrasi 1,6 mg/ml, 3,2 mg/ml, dan 6,4 mg/ml dapat menghambat pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  aureus ATCC 25923 berturut-turut sebesar 6,0 ± 0,71 mm,  10,0  ±  0,71  mm,  dan  11,0  ±  1,41  mm (Tangwatcharin and Khopaibool, 2012).
Infeksi  oleh Staphylococcus  aureus ditandai  dengan  kerusakan  jaringan  yang disertai  abses  bernanah.Beberapa  penyakit infeksi  yang  disebabkan  oleh Staphylococcus aureus adalah  bisul,  jerawat,  impetigo,  dan sebagainya  (Ryan,  et  al.,  1994;  Warsa, 1994).Selain Staphylococcus  aureus ,  bakteri yang dapat menginfeksi kulit yakni Pseudomonas  aeruginosa .  Bakteri  ini  sering terdapat  pada  kulit  manusia,  serta  merupakan patogen  utama  dari  kelompoknya.  Bakteri  ini kadang-kadang  mengkoloni  pada  manusia  dan menimbulkan infeksi apabila fungsi pertahanan  inang  abnormal.  Oleh  karena  itu, Pseudomonas  aeruginosa disebut  patogen oportunistik,  yaitu  memanfaatkan  kerusakan pada  mekanisme  pertahanan  inang  untuk memulai suatu infeksi (Mayasari, 2005; Jawetz et al, 2004).
Krim  adalah  sediaan  padat  yang mengandung  satu  atau  lebih  bahan  obat
terlarut dalam bahan dasar yang sesuai.  Istilah ini  secara  tradisional  telah  digunakan  untuk sediaan  setengah  padat  yang  mempunyai konsistensi  relatif  cair  yang  diformulasikan sebagai  emulsi  air  dalam  minyak  atau  minyak dalam air (Anonim, 1995).
Krim  dipilih  karena  sediaan  ini  mempunyai keuntungan diantaranya mudah dioleskan pada kulit,  mudah  dicuci  setelah  dioleskan,  mudah berpenetrasi  pada  kulit,  dan  terdistribusi merata.  Krim  yang  digunakan  sebagai  obat umumnya digunakan untuk mengatasi penyakit  kulit  seperti  jamur,  infeksi  ataupun sebagai  anti  radang  yang  disebabkan  oleh berbagai jenis penyakit (Anwar, 2012).
Berdasarkan  penjelasan  di  atas  maka  perlu dilakukan penelitian untuk mengetahui aktivitas  antibakteri dari  asam laurat dengan  3 variasi  konsentrasi  berbeda  (10%,  20%,  dan 30%) yang dibuat dalam suatu sediaan farmasi yang dapat memudahkan dalam penggunaannya yaitu krim.

## BAHAN DAN METODE BAHAN
Bahan-bahan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  Asam  laurat,  Aquadest, Parafin  liquidum,  Asam  stearat,  Setil  alkohol, Poloxamer  407,  Span  60,  Butil  Hidroksi Toluen (BHT), Propilen glikol, Propil paraben, Metil  paraben,  aluminium  foil,  bakteri Staphylococcus  aureus ATCC  25923,  bakteri Pseudomonas  aeruginosa ATCC  27853, media  Nutrient  Agar  (MERCK ® ),  krim Gentamisin  0,1%,  Tween  80,  etanol  96%, kapas steril, kertas label.

## METODE Formulasi krim asam laurat
Formulasi krim asam laurat dapat dilihat pada tabel dibawah ini :

## Tabel 1. Formula Krim
No Nama Bahan Kegunaan Konsentrasi (%) F0 F1 F2 F3 F4 1. Asam laurat Bahan aktif 0 10 20 30 Kontrol Positif 2. Paraffin cair Emolien 3 3 3 3 3. Poloxamer 407 + Span 60 Emulgator 5 5 5 5 4. Asam stearat Peningkat konsistensi 10 10 10 10 5. Setil alcohol Peningkat 10 10 10 10

## konsistensi
6. Propilenglikol Humektan 15 15 15 15 7. Butil Hidroksi Toluen (BHT) Antioksidan 0,1 0,1 0,1 0,1 8. Propil Paraben Pengawet 0,01 0,01 0,01 0,01 9. Metil Paraben Pengawet 0,02 0,02 0,02 0,02 10. Aquadest ad Pelarut 100 100 100 100

## Cara Pembuatan Krim Asam Laurat
Bahan-bahan  yang  terdapat  dalam  formula dipisahkan  dalam  dua  kelompok,  yaitu  fase minyak  (asam  laurat,  paraffin  cair,  asam stearat,  setil  alkohol,  span  60,  butil  hidroksi toluene,  propil  paraben)  dan  fase  air (poloxamer 407, propilenglikol, metil paraben, aquadest).  Untuk  fase  minyak,  dipanaskan pada  suhu  50°C  dan  fase  air  dipanaskan  pada suhu  70°C  di  penangas  air.  Fase  minyak  dan fase air dicampurkan sekaligus lalu dihomogenkan dengan cara digerus menggunakan  mortir  dan  stamper  sampai terbentuk massa krim yang homogen. Kemudian  disimpan  dalam  wadah  krim  yang telah disiapkan.

## Pengujian Stabilitas Fisik Krim
1. Pengamatan Organoleptik sediaan
Evaluasi  organoleptis  secara  visual mulai  dari  bentuk,  krim,  aroma,  dan  warna krim.
2. Pengujian homogenitas sediaan
Diambil 0,1 g krim asam laurat pada bagian  atas,  tengah,  dan  bawah  kemudian dioleskan  pada  sekeping  kaca  transparan.
Diamati jika terjadi pemisahan fase.
3. Pengukuran pH sediaan Krim
Ditimbang  sebanyak  1  g  krim  asam laurat  dan  diencerkan  dengan  10  ml  aquadest. Alat pH meter dikalibrasi, kemudian masukkan elektrodenya ke dalam sediaan krim yang telah dilarutkan dengan aquadest.
4. Pengukuran viskositas Pengujian viskositas dilakukan
terhadap masing-masing sediaan krim. Viskositas  diukur  dengan  alat  viscometer Brookfield  dengan  menggunakan spindle nomor 6.
5. Pengukuran Daya Sebar Ditimbang  krim  asam  laurat  sebanyak
0,5 g, kemudian diletakkan dengan hati-hati di atas  lempeng  kaca  berukuran  20  x  20  cm. Selanjutnya    ditutupi  dengan  lempeng  kaca yang  lain  dan  digunakan  pemberat  diatasnya hingga  bobot  mencapai  125  g  dan  diukur diameternya setelah 1 menit.
Penyiapan  Bakteri Staphylococcus  aureus dan Pseudomonas aeruginosa
1. Pembuatan Medium Medium Nutrien Agar (NA) ditimbang sebanyak  20  g  dan  dilarutkan  dalam  1  liter aquadest  kemudian  dipanaskan  diatas water bath atau  penangas  air  sampai  jernih  dan disterilkan  dalam  autoklaf  selama  15  menit pada suhu 121°C dan tekanan 2 atm.
2. Pembuatan suspensi bakteri
Kultur  bakteri  uji  ( Staphylococcus aureus dan Pseudomonas  aeruginosa )dalam agar  miring  Nutrient  Agar  (NA)  diambil  satu ose  dan  diinokulasikan  dalam  5  ml  NaCl fisiologis secara aseptik, homogenkan, dengan vortex kemudian  diinkubasi  pada  suhu  37°C selama  2  jam.  Hasil  kekeruhan  yang digunakan setara dengan standar Mc Farland 1 dengan konsentrasi bakteri 3 x 10 8 CFU/ml.
3. Pembuatan larutan uji
Pembuatan  larutan  uji  krim  asam laurat dilakukan dengan cara sebagai berikut :
a) Basis  krim  (kontrol  negatif)  (F 0 ) ditimbang  sebanyak  1  gram  kemudian dilarutkan dengan etanol 96%
hingga 5 ml.
b) Krim  asam  laurat  10%  (F 1 )  ditimbang sebanyak  1  gram  kemudian  dilarutkan dengan etanol 96% hingga 5 ml.
c) Krim  asam  laurat  20%  (F 2 )  ditimbang sebanyak  1  gram  kemudian  dilarutkan dengan etanol 96%  hingga 5 ml.
d) Krim  asam  laurat  30%  (F 3 )  ditimbang sebanyak  1  gram  kemudian  dilarutkan dengan etanol 96%  hingga 5 ml.
e) Krim  Gentamisin  (kontrol  positif)  (F 4 ) ditimbang sebanyak 1 gram kemudian  dilarutkan  dengan  etanol
96%  hingga 5 ml.
4. Pengujian Aktivitas Antibakteri
Bakteri  uji  yang  digunakan  adalah bakteri
Staphylococcus aureus dan
Pseudomonas  aeruginosa yang  diperoleh  dari kultur  murni  UPT.  Laboratorium  Kesehatan Provinsi Sulawesi  Tengah. Pengujian  aktivitas antibakteri krim asam laurat terhadap Staphylococcus  aureus dan Pseudomonas
aeruginosa dilakukan  dengan  menggunakan metode difusi sumur sebagai berikut : Suspensi bakteri uji Staphylococcus aureus dan Pseudomonas  aeruginosa dalam  suspensi diambil  menggunakan  mikropipet  sebanyak 100  µl  dimasukkan  ke  dalam  cawan  petri, kemudian media NA (Nutrient agar)
dituangkan  ke  dalam  cawan-cawan  petri  steril secara aseptik masing-masing 25 ml, homogenkan dengan cara menggoyang membentuk  angka  8.  Cawan-cawan  petri tersebut  dibekukan  dalam  lemari  pendingin, kemudian  dibuat  lubang  (sumur)  dengan diameter  sekitar  6  mm  menggunakan  alat pelubang  steril.  Larutan  uji  krim  asam  laurat dengan konsentrasi 0% (kontrol negatif), 10%, 20%, dan 30%, sebelumnya di tambahkan 1 ml tween  80  untuk  menonaktifkan  zat  pengawet yang  terdapat  dalam  sediaan,  serta  larutan  uji kontrol  positif  (Krim  Gentamisin)  yang  akan
diuji  diambil  sebanyak  50  µl,  kemudian dimasukkan  ke  dalam  sumur  dan  dibiarkan berdifusi, selanjutnya diinkubasikan pada suhu 37°C  selama  24  jam.  Areal  bening  yang menunjukkan  daerah  hambat  disekitar  sumur diukur  mulai  dari  tepi  sumur  menggunakan alat ukur jangka sorong.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Hasil Stabilitas Sediaan Krim Asam Laurat
Pengamatan stabilitas sediaan krim Asam Laurat Formula 1, Formula 2, dan Formula 3 dilakukan selama 28 hari dengan selang waktu pemeriksaan 7 hari yang meliputi pemeriksaan organoleptik, homogenitas, pH, daya sebar, dan viskositas dapat dilihat pada tabel dibawah ini :
Tabel 2. Hasil Uji Organoleptik dan Homogenitas
Tabel 3. Hasil Uji pH, Viskositas, dan Daya Sebar
Pemeriksaan Sediaan Lama Penyimpanan (Hari) 0 7 14 21 28 Organoleptik F 1 Warna putih, aroma khas asam laurat, membentuk konsistensi semisolid Warna putih, aroma khas asam laurat, membentuk konsistensi semisolid Warna putih, aroma khas asam laurat, membentuk konsistensi semisolid Warna putih, aroma khas asam laurat, membentuk konsistensi semisolid Warna putih, aroma khas asam laurat, membentuk konsistensi semisolid F 2 Warna putih, aroma khas asam laurat, membentuk konsistensi semisolid Warna putih, aroma khas asam laurat, membentuk konsistensi semisolid Warna putih, aroma khas asam laurat, membentuk konsistensi semisolid Warna putih, aroma khas asam laurat, membentuk konsistensi semisolid Warna putih, aroma khas asam laurat, membentuk konsistensi semisolid F 3 Warna putih kekuningan, aroma khas asam laurat, membentuk konsistensi semisolid Warna putih kekuningan, aroma khas asam laurat, membentuk konsistensi semisolid Warna putih kekuningan, aroma khas asam laurat, membentuk konsistensi semisolid Warna putih kekuningan, aroma khas asam laurat, membentuk konsistensi semisolid Warna putih kekuningan, aroma khas asam laurat, membentuk konsistensi semisolid Homogenitas F 1 Homogen Homogen Homogen Homogen Homogen F 2 Homogen Homogen Homogen Homogen Homogen F 3 Homogen Homogen Homogen Homogen Homogen Pemeriksaan Sediaan Lama Penyimpanan (Hari) 0 7 14 21 28 pH F 1 5,66±0,012 5,62±0,016 5,45±0,012 5,37±0,014 5,29±0,024 F 2 5,55±0,016 5,35±0,012 5,29±0,024 5,26±0,018 5,20±0,004 F 3 5,35±0,012 5,22±0,009 5,20±0,020 5,15±0,016 5,11±0,020 Viskositas (cPs) F 1 18346±37,712 18266±73,635 18133±124,7 17620±32,659 16560±74,833
Keterangan :  F1 = Krim Asam Laurat 10% F2 = Krim Asam Laurat 20% F3 = Krim Asam Laurat 30% * Hasil yang diperoleh dalam bentuk nilai rataan (n=3) ±standardeviasi

## PEMBAHASAN
Penelitian  ini  menggunakan  asam laurat sebagai zat aktif dari sediaan krim. Krim asam  laurat  yang  dibuat  dalam  penelitian  ini adalah  F0  (0%  b/b),  F1  (10%  b/b),  F2  (20% b/b), dan F3 (30% b/b). Formula mengandung bahan aktif dan bahan tambahan yang sama tetapi jumlah asam laurat dan volume aquadest yang ditambahkan berbeda.
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa asam  laurat  dapat  diformulasikan  ke  dalam bentuk  sediaan  krim  dengan  tipe  minyak dalam  air  (m/a).  Perbedaan  konsentrasi  asam laurat yang digunakan menyebabkan rasio fase air  dan  fase  minyak  pada  penelitian  ini bervariasi,  pada  krim  asam  laurat  10%  (F1) rasio  fase  air  dan  minyak  yakni  65  :  35, sedangkan  untuk  krim  asam  laurat  20%  (F2) 55  :  45,  dan  pada  krim  asam  laurat  30%  (F3) 45  :  55.  Menurut  Anwar  (2012)  kondisi  yang baik  untuk  fase  terdispersi  yakni  antara  40- 60%.  Pencampuran  kedua  fase  menghasilkan sediaan krim yang lembut dan homogen secara visual.
Komponen  penting  dari  krim  asam laurat  ini  yakni  emulgator  yang  terdiri  dari poloxamer  407  (kolliphor  407)  dan  span  60, sebab  zat  aktif  yang  digunakan  yakni  asam laurat  memiliki  nilai  HLB  ( Hydrophilic- Liphophilic Balance ) yang hidrofilik, antara 16 hingga  17,  oleh  sebab  itu  dipilih  poloxamer 407  yang  memiliki  nilai  HLB  berkisar  antara 18  hingga  23.  Sedangkan  span  60  merupakan emulgator yang bersifat lipofilik yang memiliki  nilai  HLB  4,7  dan  dikombinasikan dengan  kolliphor  407  agar  menghasilkan sediaan  krim  yang  stabil,  kombinasi  kedua emulgator  tersebut  untuk  mendapatkan  nilai HLB  yang  sesuai  dengan  nilai  HLB  butuh  , karena  sulit  untuk  mencari  emulgator  tunggal sesuai  dengan  HLB  butuh,  maka  dari  itu,
untuk  mencapai  tujuan  tersebut  dikombinasi dua  emulgator  dengan  nilai  HLB  rendah  dan nilai  HLB  tinggi.  Nilai  HLB  butuh  untuk sediaan  ini  berkisar  antara  15,1  hingga  15,39 sedangkan nilai  HLB  campuran  kedua emulgator  tersebut  15,34.  Pada  sediaan  krim ini  juga  ditambahkan  Propilenglikol  sebagai humektan untuk mencegah terjadinya penguapan  air  baik  itu  untuk  sediaan  maupun pada  saat  pemakaian  dan  untuk  meningkatkan daya sebar sediaan.
Pengamatan organoleptis terhadap sediaan  krim  asam  laurat  selama  28  hari menunjukkan  bahwa  jumlah  asam  laurat mempengaruhi  warna,  bentuk,  dan  aroma sediaan  yang  dihasilkan.  Keempat  formula memiliki bentuk yang sama yakni krim dengan konsistensi baik dan tidak mengalami pemisahan  antara  basis  krim  dan  asam  laurat sebagai  bahan  aktif.  Semakin  banyak  jumlah asam laurat yang ditambahkan maka intensitas warna  krim  semakin  kekuningan  dan  baunya semakin  aromatik.  F3  merupakan  formula krim  dengan  kandungan  asam  laurat  terbesar sehingga  berwarna  putih  kekuningan  dan berbau sangat khas.
Selain  uji  organoleptis,  sediaan  krim asam  laurat  ini  juga  diuji  homogenitas  untuk mengetahui apakah terjadi pemisahan fase atau tidak  dengan  menggunakan  kaca  dimana diambil  sejumlah  krim  dan  dioleskan  pada sekeping  kaca  kemudian  ditutup  dengan  kaca lainnya. Dapat dilihat baik F0, F1, F2, F3, dan kontrol positif tidak terjadi pemisahan fase.
pH krim pada ketiga formula memenuhi  nilai  pH  yang  diharapkan  dan relatif  tidak  berubah  selama  penyimpanan  28 hari,  hal  ini  didukung  oleh  pH  dari  zat  aktif sendiri  yakni  4,0  dan  pH  bahan  tambahan lainnya  yang  masih  dalam  batas  pH  kulit.
F 2 5786±18,856 5593±24,944 5446±9,428 5126±92,855 4826±33,993 F 3 3563±41,096 3313±57,348 2740±16,329 2513±9,428 2280±43,204 Daya sebar (cm) F 1 4,6±0,216 4,96±0,047 5,2±0,081 5,63±0,124 6,2±0,141 F 2 4,96±0,124 5,36±0,094 5,66±0,094 6,03±0,047 6,56±0,124 F 3 5,56±0,124 5,9±0,081 6,16±0,047 6,73±0,124 7,1±0,141
Semakin  tinggi  konsentrasi  asam  laurat  dalam krim  maka  semakin  rendah  pH  dari  sediaan krim.  Profil  pH  sediaan  dari  ketiga  formula krim dapat dilihat pada Grafik 1.
Grafik 1. Grafik hubungan antara pH dan lama penyimpanan terhadap sediaan krim
Berdasarkan  analisis  statistik  dapat  dilihat bahwa  terdapat  perbedaan  bermakna  pada masing-masing  formula  setiap  minggu  selama waktu simpan (28 hari). Perubahan pH sediaan selama  penyimpanan  menandakan  kurang stabilnya sediaan selama penyimpanan. Ketidak  stabilan  ini  dapat  merusak  produk selama penyimpanan atau penggunaan. Perubahan  nilai  pH  dapat  dipengaruh  oleh komponen  dalam  formulasi  yang  terdegradasi oleh  suhu  tinggi  saat  pembuatan  atau penyimpanan  yang  menghasilkan  asam  atau basa.  Asam  atau  basa  ini  yang  mempengaruhi pH.  Selain  itu  perubahan  pH  juga  disebabkan faktor  lingkungan  seperti  suhu,  maupun penyimpanan  yang  kurang  baik  (Young  et  al., 2002).
Pemeriksaan  viskositas  sediaan  menggunakan alat  viskometer Brookfield ,  dapat  dilihat bahwa  semakin  besar  konsentrasi  asam  laurat dalam  sediaan  maka  viskositas  krim  akan semakin menurun, dimana  viskositas  F 1 > F 2 > F 3 .  Hal  ini  disebabkan  karena  asam  laurat membentuk  ikatan  hidrogen  dengan  air.  Jadi semakin  tinggi  konsentrasi  asam  laurat  dalam formula, maka asam laurat yang berlebih tidak dapat  berikatan  dengan  air  yang  jumlahnya lebih  sedikit,  ikatan  hidrogen  antara  asam laurat  dan  air  semakin  berkurang,  sebab viskositas  air  naik  seiring  dengan  adanya ikatan  hidrogen  (Bird,  1987).  Oleh  karena  itu, viskositas sediaan akhir akan semakin menurun  seperti  yang  diperlihatkan  oleh  F1,
F2,  dan  F3.Hasil  pengujian  viskositas  krim dapat dilihat pada Grafik 2.

## Grafik 2. Grafik hubungan antara viskositas (kekentalan) danlama penyimpanan terhadap sediaan krim
Berdasarkan  analisis  statistik  dapat  dilihat bahwa  pada  uji  viskositas  terdapat  perbedaan signifikan  pada  formula  itu  sendiri  selama waktu  penyimpanan  (28  hari),  perubahan viskositas  sediaan  dapat  disebabkan  karena peralatan  yang  digunakan  untuk  proses pengadukan yakni mortir dan stamper, dimana kecepatan  pengadukan  tidak  dapat  dikontrol seperti  peralatan  yang  lebih  modern  yakni stirrer yang  dapat  dikontrol  kecepatan pengadukannya  (rpm),  hal  ini  memengaruhi diameter  globul  yang  terbentuk  (Anwar, 2012). Sementara itu, pada proses pengadukan terjadi  pembentukan  busa  sehingga  seiring dengan  peningkatan  masa  simpan  maka  busa tersebut  akan  terus  berkurang,  oleh  karena  itu batasan  antara  partikel  satu  dan  lainnya menjadi renggang dan menyebabkan viskositas semakin  menurun  (Lachman et  al ,  2008). Terbentuknya  busa  tersebut  dapat  disebabkan surfaktan  yang  digunakan  dalam  formulasi memiliki  nilai  HLB  yang  tinggi  ( detergent )
(Anwar, 2012).
Evaluasi  stabilitas  mutu  fisik  lainnya  adalah daya  sebar.  Pengujian  daya  sebar  sediaan menggunakan  lempeng  kaca  berukuran  20  x 20  cm,  mulai  dari  hari  ke-0  sampai  dengan hari  ke-28  menunjukkan  bahwa  semakin  lama sediaan  disimpan  maka  semakin  besar  daya sebarnya.  Pengujian  daya  sebar  penting dilakukan  untuk  mengetahui  sifat  alir  krim. Daya  sebar  berbanding  terbalik  dengan viskositas. Viskositas merupakan tahanan yang dimiliki oleh sediaan untuk bisa menyebar atau
mengalir  (Martin et  al. ,  1993).  Dimana semakin  besar  viskositas  maka  tahanan  krim untuk  bisa  menyebar  juga  semakin  besar  dan daya  sebarnya  menjadi  lebih  kecil.  Hal  ini disebabkan  karena  semakin  besar  viskositas krim,  semakin  keras  krim  tersebut,  sehingga semakin  sukar  menyebar.  Pada  krim  yang mengandung  asam  laurat  30%  (F3)  memiliki daya sebar paling besar karena nilai viskositasnya  paling  kecil  sehingga  tahanan untuk  dapat  mengalir  lebih  kecil  dibanding formula  lain.Hasil  pengujian  daya  sebar krimdapat dilihat pada Grafik 3.
Grafik 3. Grafik hubungan antara daya sebar dan lama penyimpanan terhadap sediaan krim
Berdasarkan analisis statistik diperoleh hasil  yang  berbeda  signifikan  pada  daya  sebar formula itu sendiri selama waktu penyimpanan 28  hari.  Perubahan  daya  sebar  sediaan  dapat dipengaruhi oleh perubahan viskositas sediaan. Dapat  dilihat  dari  data,  viskositas  sediaan selama  28  hari  penyimpanan  mengalami penurunan,  hal  ini  menyebabkan  daya  sebar sediaan  semakin  meningkat  seiring  dengan menurunnya viskositas sediaan.
Garg et  al. (2002)  menyatakan  daya sebar yang menunjukkan konsistensi semisolida  dalam  memberikan  kenyamanan pada  saat  penggunaaan  adalah  sebesar  5  -  7 cm.  Krim  yang  memiliki  daya  sebar  pada rentang  tersebut  diperkirakan  akan  dengan mudah  dioleskan  dan  disebarkan  pada  kulit. Beberapa  formula  yang  diujikan  memenuhi rentang  daya  sebar  yang  ditetapkan,  yakni  5 cm hingga 7 cm.
Berdasarkanhasil pengujian yang dilakukan  pada  sediaan  krim  asam  laurat menunjukkan  adanya  aktivitas  antibakteri dengan  terbentuknya  diameter  daya  hambat untuk  konsentrasi  10%,  20%,  dan  30%
terhadap Staphylococcus  aureus berturut-turut sebesar 10,479 mm, 14,8 mm, dan 21,589mm, sedangkan  untuk Pseudomonas  aeruginosa berturut-turut  9,82  mm,  11,8  mm,  dan  14,256 mm. Pada kontrol positif untuk Staphylococcus  aureus dengan  menggunakan krim  gentamisin  mempunyai  diameter  daya hambat rata-rata sebesar 25,25 mm, sedangkan kontrol positif untuk Pseudomonas aeruginosa mempunyai  diameter  daya  hambat  rata-rata sebesar  15,23  mm.  Zona  hambat  krim  asam laurat dapat dilihat pada gambar 1 dan 2.
Gambar 1. Hasil aktivitas antibakteri krim asam laurat terhadap Staphylococcus aureus ATCC 25923
Gambar 2.  Hasil aktivitas antibakteri krim asam laurat terhadap Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853
Berdasarkan  analisis  statistik  pada  diameter zona  hambat  bakteri S.  aureus untuk  kontrol negatif  dan  ketiga  formula  didapatkan  hasil yang  berbeda  nyata  pada  keempat  sediaan, sama  halnya  untuk  bakteri P.aeruginosa didapatkan  hasil  yang  berbeda  nyata  pada keempat  sediaan.  Perbedaan  tersebut  bisa terjadi  karena  konsentrasi  asam  laurat  pada masing-masing  formula  cukup  berbeda  jauh, dimana  daya  hambat  terbesar  ditemukan  pada F 3 yang mengandung asam laurat paling besar diantara  formula  lainnya.  Proses  pembuatan larutan  uji  dilakukan  dengan  menggunakan etanol  96%,  sebab  asam  laurat  memiliki kelarutan  yang  tinggi  terhadap  etanol  96% (Rowe et  al ,  2009).  Digunakan  pelarut  yang sesuai  dengan  asam  laurat  agar  memudahkan proses  difusi  dari  sediaan  krim  asam  laurat.
Dapat  dilihat  bahwa  etanol  96%  tidak membentuk daya hambat, hal ini mengindikasikan  bahwa  daya  hambat  yang terbentuk  tidak  dipengaruhi  oleh  pelarut melainkan  karena  aktivitas  asam  laurat  yang terdapat dalam sediaan krim. Mekanisme kerja asam  laurat  sebagai  antibakteri  yakni  dengan mempengaruhi  membran  sel  bakteri  sehingga sifat  fluiditas  membran  berubah.  Perubahan sifat  fluiditas  tersebut  meningkatkan  daya penetrasi  asam  laurat  masuk  ke  dalam  sel. Asam  laurat  dalam  sel  menghambat  aktivitas enzim-enzim  yang  berperan  dalam  produksi energi dan transpor nutrien (Wang et al , 1993).
Dilihat  dari  efektivitasnya,  sediaan krim ini cenderung lebih efektif pada S.aureus dibanding P.aeruginosa .  Hal  ini  disebabkan karena  kedua  bakteri  ini  memiliki  struktur dinding  sel  yang  berbeda.  Struktur  membran sel  bakteri  Gram  positif  ( S.aureus )  berbeda dengan  bakteri  Gram  negatif  ( P.aeruginosa ).
Pada bakteri Gram positif mengandung banyak lapisan peptidoglikan yang membentuk struktur yang tebal dan kaku, dan asam teikoat yang  mengandung  alkohol  (gliserol  atau ribitol).  Ada  2  macam  asam  teikoat,  yaitu asam  lipoteikoat  yang  merentang  di  lapisan peptidoglikan  dan  terikat  pada  membran plasma,  dan  asam  teikoat  dinding  yang  terikat pada lapisan peptidoglikan. Dinding sel bakteri Gram  negatif  mengandung  satu  atau  beberapa lapis  peptidoglikan  dan  membran  luar. Peptidoglikan  terikat  pada  lipoprotein  pada membran  luar.  Terdapat  daerah periplasma , yaitu  daerah  yang  terdapat  diantara  membran plasma  dan  membran  luar.  Periplasma  berisi enzim  degradasi  konsentrasi  tinggi  serta protein-protein  transpor.  Dinding  sel  bakteri Gram negatif tidak  mengandung asam teikoat, dan  karena  hanya  mengandung  sejumlah  kecil peptidoglikan,  maka  dinding  sel  bakteri  Gram negatif  ini  relatif  lebih  tahan  terhadap kerusakan  mekanis.  Hal  ini  menyebabkan asam  laurat  lebih  sulit  untuk  menembus  dan merusak membran sel P.aeruginosa dibanding S.aureus (Pratiwi, 2008). Oleh sebab itu, daya
hambat  krim  jauh  lebih  besar  terhadap S.aureus dibanding P.aeruginosa .

## DAFTAR PUSTAKA
Anonim. (1995). Farmakope Indonesia . Edisi IV. Jakarta: Departemen  Kesehatan Republik Indonesia.
Anwar, E. (2012). Eksipien   dalam    Sediaan Farmasi : Karakterisasi  dan Aplikasi . Jakarta: Dian Rakyat. 197, 229-230.
Bird, T. (1987). Kimia Fisik untuk Universitas . (Alih  bahasa  :  Kwee  le  Tjien). Jakarta. Gramedia.
Garg,  A.,  Aggarwal,  D.,  Garg,  S.,  &  Sigla, A.K.  (2002). Spreading  of  Semisolid
Formulation  :  An
Update,
Pharmaceutical  Technology. 84 –102. [Serial Online]. www.pharmtech.com
Jawetz, E.,  J. L.    Melnick.,  E. A.  Adelberg.,
G. F.   Brooks.,    J. S.   Butel.,    L.  N. Ornston.         (2004) .      Mikrobiologi Kedokteran . Edisi  ke-23(Alih bahasa :
Huriawati.H.,   Chaerunnisa .R.,  Alifa .D., dan Aryana  .D).  Jakarta   :  EGC.
Kabara,  J.    J.      (1984).      Antimicrobial Agents Derived   From   Fatty   Acids. Journal  American  Oil  Chemists’ Society . USA. 397-403
Lachman,  L.,  Lieberman,  H.A.,  &  Kanig, J.L.  (2008). Teori  dan  Praktek Farmasi  Industri .  Edisi  Ketiga.Jakarta
: UI-Press. 1083-1085.
Martin,  A.,    Swarbrick,    J.,  &  Cammarata, A. (1993). Farmasi Fisik II . Jakarta  : UI Press. 113-  117.
Mayasari, E. (2005) . Pseudomonas aeruginosa
;
Karakteristik, Infeksi dan Penanganan .  Diakses  pada  tanggal  5 Januari, 2015, from http://library.usu.ac.id/
Pratiwi, T. S., (2008). Mikrobiologi   Farmasi . Jakarta: Erlangga. 27-28,  188-190.
Rowe,  R.  C.,    Paul,    J.  S.,  &  Marian,  E.  Q. (2009). Handbook Of Pharmaceutical. Exipients Sixth Edition .Pharmaceutical Press. London.  75-76,  155-156,  383- 384, 441-444, 506-508, 596-598, 697-
699.
Ryan, K. J., Champoux, J. J., Falkow, S., Plonde J.J.,    Drew,  W.L.,  Neidhardt,
F.C.,  &  Roy,  C.G.  (1994). Medical
Microbiology  An  Introduction  to Infectious Diseases . 3rd
ed.
Connecticut: Appleton&Lange. 254.
Tangwatcharin,  P.  &  Khopaibool,  P.  (2012).
Activity  of  Virgin  Coconut  Oil, Lauric   Acid or Monolaurin in Combination with Lactic Acid Against Staphylococcus  aureus.
Southeast Asian  Journal  Trop  Med  Public Health. 43 (4), 974.
Tuminah,  S.  (2010). Efek  Perbedaan  Sumber dan  Struktur  Kimia  Asam  Lemak Jenuh          terhadap        Kesehatan .
Buletin  Penelitian  Kesehatan.  Vol.38 No.1.   Pusat Penelitian dan Pengembangan Biomedis dan Farmasi. Jakarta. 46.
Wang, L., Yang, B., Parkin, K, L., Johnson, E, A.,  (1993).  Inhibition  of  Listeria monocytogenes by Monoacylglycerols Synthesized  from  Coconut  Oil  and Milkfat    by    Lipase  -  Catalyzed Glycerolysis. Journal  Agric  Food Chem. 41
Warsa, U.C. (1994). Staphylococcus   dalam Buku   Ajar Mikrobiologi  Kedokteran . Edisi      Revisi.  Jakarta    :     Penerbit Binarupa Aksara. 103-110.
Young,  Anne.  (2002). Practical   Cosmetic Science .   Mills   and   Boon  Limited. London.39-4.