ikan pelangi Iriatherina werneri (Meiken, 1974) dengan hormon estradiol-17β [Feminization of raibow Iriatherina werneri (Meiken, 1974) using estradiol-17β hormone]
Rodhi Firmansyah  , Odang Carman, Dinar Tri Soelistyowati
Departemen Budidaya Perairan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Institut Pertanian Bogor Kampus IPB Dramaga Bogor, Jawa Barat 16680
Diterima: 21 Januari 2016; Disetujui: 07 Juni 2016
Abstrak
Pembetinaan  ikan  pelangi  ( Iriatherina  werneri )  adalah  langkah  awal  untuk  mendapatkan  individu  betina  fungsional (XY).  Jika  individu  betina  fungsional  ini  dikawinkan  dengan  jantan  normal  (XY)  akan  menghasilkan  individu  ikan jantan  super  (YY).  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengevaluasi  kondisi  optimum  dosis  dan  lama  perendaman  yang berbeda  untuk  pembetinaan  ikan  pelangi  dengan  menggunakan  hormon  estradiol-17β  yang  dirancang  menggunakan rancangan acak lengkap pola faktorial yang terdiri atas faktor dosis dan lama perendaman masing-masing diulang tiga kali kemudian data dianalisis secara statistik (ANOVA). Telur ikan pelangi stadia embrio bintik mata direndam dalam larutan estradiol-17β dosis 0, 200, 400 dan 600 μg L -1 selama 6, 12, dan 18 jam, kemudian larva dipelihara selama 70 hari.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  perlakuan  estradiol-17β  dapat  meningkatkan  persentase  betina ; dosis  400 dan 600 μg L -1 selama 6 dan 12 jam meningkatkan persentase betina secara nyata (p<0,05) dengan nilai 85,56-92,22%. Lama perendaman berpengaruh nyata (p<0,05) terhadap tingkat kelangsungan hidup dan perendaman selama enam jam memberikan  hasil  yang  terbaik.  Sementara  itu,  dosis  dan  lama  perendaman  tidak  memengaruhi  tingkat  penetasan (p>0,05).
Kata penting: Estradiol-17β, Iriatherina werneri , kelangsungan hidup, pembetinaan

## Abstract
Feminization  of  the  rainbow  ( Iriatherina  werneri )  is  an  initial  step  to  get  the  functional  females  (XY).  If  those functional females crossbreeding with normal males (XY), we will produce super males (YY) individuals. This study aimed  to  evaluate  the  optimum  condition  of  feminization  on I.  werneri using  estradiol-17β  hormone  treatment  at different doses and immersion duration with a completely randomized factorial design which consists of different doses and immersion durations with three replicates. The data were analyzed statistically ( ANOVA ). Eyed stage embryos were immersed in 0, 200, 400 and 600 μg L -1 of estradiol-17β for six, 12 and 18 hours; and then the larvae were reared up to 70 days. The results showed that estradiol-17β treatments could increase the percentage of I. werneri female. The doses of 400 and 600 μg L -1 for both six and 12 hours immersion could increase the percentage of female significantly (p<0.050)  with  value  ranged  from  85,56-92,22%.  The  duration  of  estradiol-17β  immersion  significantly  affected (p<0,05) the I. werneri survival rate. The duration of immersion for six hours showed the highest survival rate. On the other hand, both of doses and duration of immersion did not affect the hatching rate of I. werneri (p>0.05)
Keywords: Estradiol-17β, feminization, Iriatherina werneri , survival rate

## Pendahuluan
Ikan hias merupakan salah satu komoditas perikanan  yang  menjadi  bisnis  perdagangan  po- tensial di dalam maupun di luar negeri. Ikan ini memiliki  daya  tarik  tersendiri  bagi  para  pecinta ikan  hias,  seperti  keindahan  warna,  corak  yang beragam dan bentuk yang berbeda dari setiap je- nis,  serta  dapat  dijadikan  sebagai  pajangan  atau hiasan.  Salah  satu  ikan  hias  adalah  kelompok ikan  pelangi  yang  umum  dikenal  dengan  nama
rainbowfish . Ikan jenis ini termasuk ke dalam fa-
mili Melanotaeniidae .  Ikan Iriatherina  werneri merupakan  spesies  tunggal  pada  genus Iriathe- rina dalam  famili Melanotaeniidae yang  dapat tumbuh hingga ukuran maksimum 5 cm. Ikan ini ditemukan  di  sepanjang  sungai-sungai  kecil  di tepi hutan lebat, laguna, dan di perairan terbuka yang  tidak  jauh  dari  rumpun  tunbuhan  dengan kedalaman 0,5-1,25 m.
Ikan  pelangi  ( Iriatherina  werneri )  jantan memiliki ciri-ciri warna hitam kemerah-merahan pada  sirip  punggung,  anal  dan  dada,  sirip  ekor bewarna  merah  muda,  tipis  transparan  dan  ber- cagak (Tappin 2011). Bentuk tubuhnya ramping,
_____________________________
 Penulis korespondensi
Alamat surel: rodhi.aquaculture@gmail.com
pipih  lateral , bewarna  perak  metalik  dengan  se- dikit  terlihat  garis  vertikal  gelap.  Saat  dewasa akan tumbuh dua sirip punggung. Sirip punggung pertama berbentuk seperti baling pada kipas, si- rip punggung kedua dan sirip anal memiliki fila- men  yang  sangat  panjang.  Sirip  ini  digunakan untuk  memamerkan  keindahan  tubuh  di  antara ikan jantan lainnya serta untuk menarik perhatian ikan  betina.  Ikan  betina  memiliki  warna  terlihat pucat  dibandingkan  ikan  jantan,  tidak  memiliki filamen-filamen  panjang  namun  terdapat  persa- maan bentuk dan warna pada sirip ekor  (Tappin 2011). Perbedaan ini mengakibatkan ikan jantan lebih diminati dibandingkan dengan ikan betina.
Kebutuhan ikan pelangi jantan belum da- pat  terpenuhi  pada  pemijahan  alami,  sebab  nis- bah jenis kelamin yang didapat antara jantan dan betina pada pemijahan alami 1:4. Melihat nisbah kelamin  tersebut  diperlukan  alternatif  untuk mendapatkan  keturunan  kelamin  tunggal  jantan. Kelamin  tunggal  jantan  dapat  diperoleh  dengan memproduksi jantan super. Bila ikan jantan super dikawinkan  dengan  betina  normal,  maka  akan menghasilkan  keturunan  dengan  jenis  kelamin jantan semua.
Pada  produksi  ikan  jantan  secara  masal melalui  persilangan  dapat  dilakukan  dengan mengawinkan  individu  betina  dengan  jantan super  yaitu  individu  jantan  dengan  kromosom homogametik  (YY),  sehingga  menghasilkan 100% ikan jantan (XY). Ikan jantan super dapat diperoleh  dengan  cara  perkawinan  silang  antara jantan  normal  dengan  betina  fungsional  (XY) yaitu  ikan  jantan  yang  diarahkan  fungsi  kela- minnya menjadi betina sehingga akan dihasilkan 25%  betina  normal  (XX)  dan  75%  jantan  yang terdiri atas 25% jantan super (YY) dan 50% jan- tan  normal  (XY).  Teknologi  jantan  super  (YY) memiliki  potensi  yang  sangat  besar  untuk pengembangan  dan  peningkatan  nilai  komersial
budi daya (Mair et al . 1997). Untuk mendapatkan betina fungsional yang memiliki kromosom (XY) dapat dilakukan  melalui  pembetinaan, di antara- nya menggunakan hormon estradiol-17β.
Pembetinaan  pada  ikan  pelangi  bertujuan untuk  mendapatkan  individu  betina  fungsional sebagai  langkah  awal  untuk  memperoleh  indi- vidu  jantan  super.  Menurut  Pongthana et  al . (1999),  produksi  ikan  betina  dapat  ditempuh melalui  dua  pendekatan,  yaitu  cara  langsung dengan  perlakuan  hormon  dan  cara  tidak  lang- sung  melalui  manipulasi  kromosom  seks  yang dikombinasikan  dengan  manipulasi  hormonal. Cara  lain  adalah  pembetinaan  yang  dilakukan secara  kimiawi  dan  biologis  (Wihardi et  al. 2014).
Estradiol-17β  adalah  hormon  estrogen alami  yang  telah  terbukti  efektif  mengarahkan kelamin  betina  (pembetinaan)  pada Odontesthes bonariensis (Strussmann et  al .1996), Anabas testudineus (Dung  &  Komanpririn  2007), Oreo- chromis sp.  (Al-Hakim et  al. 2013,  Gennotte et al. 2014), Oryzias  latipes (Hirai et  al .  2006),
Cyprinus  carpio (Hara et  al. 2007), Silurus  gla- nis (Król et al . 2014), dan Micropterus salmoides (Arslan et al . 2009, Jarque et al . 2015). Pemberi- an  hormon  estradiol-17β  secara  langsung  dapat dilakukan  dengan  cara  oral  (Kurniasih et  al.
2006,  Wang et  al. 2008)  dan  perendaman (Grandi et al. 2007). Bila dilihat dari segi efisien- si  waktu  dan  penanganan  serta  jumlah  hormon yang digunakan, maka cara yang paling baik ada- lah dengan sistem perendaman embrio yang bia- sa  dilakukan  pada  stadia  bintik  mata  ( eyed stage ). Pada percobaan yang dilakukan oleh Pur- wati et  al. (2004),  pemberian  hormon  estradiol- 17β  melalui  perendaman  embrio  dapat  mening- katkan  persentase  jenis  kelamin  betina  ikan  cu- pang  ( Betta ) sebesar  77,47%  dengan  dosis  400 μg  L -1 dan  waktu  perendaman  12  jam.  Goetz et
al. (1979)  melaporkan  bahwa Oncorhynchus
kisutch stadia embrio bintik mata yang direndam dalam  estradiol-17β  dengan  konsentrasi  25-400 μg L-1 menghasilkan betina 95-100%.
Belum adanya penelitian terkait  pembeti- naan  menggunakan  hormon  estradiol-17β  pada ikan pelangi ( Iriatherina  werneri ), maka peneli- tian  ini  merupakan  langkah  awal  untuk  menge- valuasi  kondisi  optimum  dosis  dan  lama  peren- daman  yang  berbeda  untuk  pembetinaan  ikan pelangi ( Iriatherina  werneri ) dengan mengguna- kan hormon estradiol-17β.

## Bahan dan metode
Penelitian dilakukan pada bulan April-Juli 2015 di Kolam Percobaan Babakan dan Labora- torium  Reproduksi  dan  Genetika  Organisme Akuatik  Departemen  Budidaya  Perairan,  Fakul- tas  Perikanan  dan  Ilmu  Kelautan,  Institut  Perta- nian Bogor.
Ikan  uji  yang  digunakan  pada  penelitian ini adalah embrio ikan pelangi stadia bintik mata. Jumlah embrio yang digunakan untuk setiap unit perlakuan sebanyak 200 embrio yang didapat da- ri hasil pemijahan alami secara massal 240 ekor induk  betina  dan  120  ekor  induk  jantan.  Bahan yang digunakan adalah hormon estradiol-17β.
Penelitian  dirancang  dengan  mengguna- kan acak lengkap pola faktorial yang terdiri atas faktor  dosis  perendaman  (0,  200,  400,  dan  600 μg L -1 ) dan faktor lama perendaman (6, 12, dan
18 jam), setiap perlakuan diulang tiga kali. Dosis dan lama perendaman penelitian ini mengacu pa- da  pembetinaan  ikan  cupang (Betta  splendens) menggunakan  hormon  estradiol-17β  (Purwati et al. 2004).
Induk  dipelihara  di  dalam  kolam  ukuran
180×90×60  cm 3 dengan  ketinggian  air  40  cm.
Induk ikan pelangi dipelihara secara terpisah an- tara jantan dengan betina serta diberi pakan beru- pa tepung (protein 40%) dan Moina sp. pada pa-
gi, siang, dan sore hari secara ad  libitum . Induk jantan dan betina yang siap memijah dimasukkan ke  dalam  akuarium  ukuran  30×30×30  cm 3 pada malam hari (pukul 20.00). Pada pagi hari berikut- nya  (pukul  06.00),  30  menit  setelah  ikan  diberi pakan,  dimasukkan  tali  rafia  yang  berfungsi  se- bagai substrat untuk penempelan telur. Beberapa menit setelah substrat dimasukkan ikan akan me- mijah  dan  pemijahan  berakhir  pada  sore  hari (pukul 15.00). Pada saat pemijahan berakhir telur dikoleksi dengan cara mengangkat substrat untuk perlakuan.
Total telur yang dihasilkan pada pemijah- an ikan pelangi adalah 7368. Telur kemudian di- panen dimasukkan ke dalam wadah inkubasi be- rupa  kotak  plastik  ukuran  19×13×9  cm 3 yang diisi  air  sebanyak  1  liter  sampai  stadia  bintik mata (±72 jam). Pada saat stadia bintik mata, 200 embrio dimasukkan ke dalam kantong plastik ke- mas  ukuran  35×25  cm 2 yang  di  dalamnya  telah diisi  1  liter  larutan  hormon  estradiol-17β  sesuai dengan  dosis  perlakuan  (0,  200,  400  dan  600 µg/l);  kemudian diisi oksigen dan diikat dengan karet gelang sesuai dengan prosedur pengemasan pada transportasi benih ikan. Kantong plastik ter- sebut ditempatkan di dalam akuarium  yang ber- ukuran  90×60×25  cm 3 dengan  tinggi  air  20  cm.
Perendaman dilakukan selama 6, 12, dan 18 jam.
Embrio hasil perlakuan dimasukkan kem- bali  ke  dalam  wadah  inkubasi  hingga  menetas, kemudian larva dipelihara hingga umur tujuh ha- ri.  Setelah  mencapai  umur  tersebut,  ikan  dipeli- hara  dengan  kepadatan  3-4  ekor  L -1 di  dalam akuarium ukuran 60×30×30 cm 3 yang diisi air se- tinggi 20 cm sampai umur 70 hari. Tingkat pene- tasan  ( hatching  rate )  dihitung  setelah  semua embrio menetas (hari ke tujuh setelah pemijahan) dan pada umur 70 hari setelah penetasan dihitung sintasan. Larva ikan pelangi diberi pakan Infuso- ria dan Rotifera sebanyak tiga kali sehari secara
ad  libitum ,  sedangkan  saat  juvenil  mencapai umur  21  hari  diberi  pakan  naupli Artemia dan pakan  buatan  berupa  tepung  (protein  40%). Penyifonan  dilakukan  setiap  pagi  dengan  peng- gantian  air  sebanyak  20%  untuk  menjaga  agar kualitas air tetap baik.
Parameter  yang  diamati  meliputi  persen- tase tingkat penetasan, sintasan, dan nisbah kela- min  betina.  Tingkat  penetasan  dihitung  dengan membandingkan  persentase  jumlah  telur  yang menetas dibandingkan dengan jumlah larva yang terbuahi, sintasan dihitung dengan perbandingan persentase jumlah ikan yang hidup di akhir pene- litian  dibanding  dengan  jumlah  ikan  yang  dite- bar, dan nisbah kelamin dihitung dengan perban- dingan  jumlah  persentase  ikan  berjenis  kelamin jantan  atau  betina  dibandingkan  dengan  jumlah ikan yang diamati.
Pemeriksaan  nisbah  kelamin  dilakukan pada  hari  ke-70  setelah  penetasan,  nisbah  kela- min dibedakan berdasarkan pengamatan karakter sekunder  secara  morfologis  serta  pemeriksaan jaringan  gonad  dengan  menggunakan  metode asetokarmin.  Secara  morfologi  ikan  jantan  dan betina  dibedakan  berdasarkan  sirip  punggung,
sirip dada, sirip anal, dan bentuk tubuh. Metode asetokarmin  dilakukan  dengan  cara  membedah dan mengambil gonad ikan uji. Gonad ikan dile- takkan di atas gelas objek, kemudian dicacah dan diwarnai dengan larutan asetokarmink dan  sete- lah itu ditutup dengan cover  glass kemudian di- amati dengan mikroskop (Kurniasih et al. 2006).
Data tingkat penetasan, sintasan, dan per- sentase  jenis  kelamin  ditabulasi  dan  dianalisis secara statistik (ANOVA) dengan  menggunakan
Microsoft Office Excel dan SPSS 18.

## Hasil
Pengaruh perlakuan pembetinaan ikan pe- langi  melalui  perendaman  embrio  pada  stadia bintik  mata  menggunakan  hormon  estradiol-17β dengan dosis dan lama perendaman yang berbeda terhadap  persentase  tingkat  penetasan  telur,  sin- tasan, dan jumlah ikan betina yang dihasilkan di- sajikan pada Tabel 1, 2 dan 3.
Berdasarkan  data  tingkat  penetasan  telur (Tabel  1),  hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa persentase  tingkat  penetasan  pada  semua  perla- kuan bervariasi dengan kisaran 69,00-79,17%
Tabel 1. Tingkat penetasan telur ikan pelangi (%) pada setiap perlakuan
Dosis (μg L -1 ) Lama perendaman (Jam) Tingkat Penetasan (%) 0 (kontrol) 6 12 18
75,50±1,32 Aa 76,67±0,29 Aa 77,33±1,28 Aa 200 6 12 18
71,83±6,25 Aa 69,00±2,00 Aa 73,67±10,56 Aa 400 6 70,67±5,39 Aa
77,17±4,04 Aa 79,17±14,07 Aa 12 18 600 6
12 18
74,33±6,11 Aa 77,00±8,50 Aa
79,00±7,81 Aa
Keterangan: huruf kapital dan huruf kecil yang sama antarperlakuan menunjukkan tidak beda nyata dengan taraf kepercayaan 95% berturut-turut untuk dosis dan lama perendaman
dan  relatif  sama  dengan  perlakuan  kontrol  de- ngan  kisaran  75,50-77,33%  (P≥0,05).  Dengan kata  lain  perlakuan  perendaman  embrio  stadia bintik  mata  pada  dosis  dan  lama  perendaman yang  berbeda  tidak  berpengaruh  nyata  (P≥0,05) terhadap  tingkat  penetasan  ikan  pelangi . Hasil pengujian interaksi antara faktor dosis dan faktor lama perendaman, tidak ditemukan adanya inter- aksi antara kedua faktor tersebut yang memenga- ruhi tingkat penetasan.
Hasil  pengamatan  tingkat  sintasan  ikan menunjukkan  bahwa  sintasan  tertinggi  dengan nilai  67,75%  terdapat  pada  perlakuan  dosis  400 μg L -1 dengan perendaman selama 6 jam. Terjadi penurunan  sintasan  pada  perlakuan  lama  peren- daman 12 dan 18 jam dibandingkan dengan per- lakuan  lama  perendaman  6  jam.  Semakin  lama waktu perendaman menyebabkan sintasan sema- kin menurun, hal ini terlihat jelas pada perlakuan dosis 400 dan 600 μg L -1 (Tabel 2). Hasil uji sta- tistik  dengan  taraf  kepercayaan  95%  menunjuk- kan  tidak  ada  interaksi  antara  pemberian  dosis dengan lama perendaman yang berbeda terhadap
sintasan. Perlakuan lama perendaman 6 jam me- nunjukkan  perbedaan  yang  nyata  dengan  perla- kuan perendaman 12 dan 18 jam (Tabel 2).
Pemeriksaan  jenis  kelamin  berdasarkan pengamatan karakter sekunder secara morfologis antara ikan jantan dan betina dibedakan berdasar- kan  sirip  punggung,  sirip  perut,  sirip  anal,  sirip ekor,  dan  bentuk  tubuh.  Perbedaan  yang  men- colok  dapat  dilihat  pada  filamen  yang  dimiliki oleh ikan jantan pada sirip punggung ke dua dan pada  filamen  sirip  anal  yang  tidak  dimiliki  oleh ikan betina (Gambar 1).
Bentuk  jaringan  gonad  ikan  kontrol  dan perlakuan  tidak  berbeda.  Hasil  pemeriksaan  ja- ringan gonad dengan menggunakan metode ase- tokarmin memperlihatkan bahwa jaringan gonad jantan (testis)  yang terlihat di bawah  mikroskop berupa  titik-titik  kecil  yang  merupakan  sel-sel spermatozoa,  sedangkan  jaringan  gonad  betina (ovari) berbentuk bulatan relatif besar  yang  me- rupakan  sel  telur  dengan  ukuran  yang  berbeda dan di tengahnya terdapat inti (Gambar 2).
Tabel 2. Sintasan ikan pelangi pada setiap perlakuan
Dosis (μg L -1 ) Lama perendaman (jam) Sintasan (%) 0 (kontrol) 6 12 18
52,55±8,98 Ab 37,44±12,92 Aa 44,45±7,93 Aa 200 6 12 18
53,06±12,29 Ab 36,41±10,49 Aa 38,60±3,48 Aa 400 6 12 18
67,75±1,83 Ab 49,43±12,03 Aa 41,98±17,52 Aa 600 6 12 18
48,75±2,18 Ab 45,17±17,21 Aa
42,76±5,11 Aa
Keterangan: huruf kapital dan huruf kecil yang berbeda antarperlakuan menunjukkan beda nyata dengan taraf  keperca- yaan 95% berturut-turut untuk dosis dan lama perendaman
Gambar 1. Perbedaan morfologi ikan pelangi jantan (a) dan betina (b). 1. sirip punggung pertama, 2. sirip punggung ke dua, 3. sirip dada, 4. sirip perut, 5. sirip anal, 6. filamen-filamen sirip punggung, 7. filamen-filamen sirip anal, 8. sirip ekor
Gambar 2. Perbedaan jaringan gonad ikan pelangi jantan (a) dan betina (b) perbesaran 60x. 1. spermatozoa, 2. nukleolus, 3. sitoplasma
Nilai persentase nisbah kelamin betina ter- tinggi yaitu sebesar 92,22% terdapat pada perla- kuan dosis 400 μg L -1 dengan lama perendaman 12  jam,  diikuti  oleh  perlakuan  dosis  600  μg  L -1 dengan lama perendaman 12 jam  sebesar 90 %, sedangkan  persentase  nisbah  kelamin  yang  ter- rendah terdapat pada perlakuan dosis 200 μg L -1 dengan  lama  perendaman  12  jam  yaitu  77,78%. Pada  perlakuan  kontrol  (0  μg  L -1 ),  nilai  persen- tase nisbah kelamin betina yang dihasilkan yaitu 75,51-77,73%. Hasil uji statistik dengan taraf ke- percayaan 95% menunjukkan tidak ada interaksi antara pemberian dosis dengan lama perendaman
yang berbeda, akan tetapi semua perlakuan dosis menunjukkan  perbedaan  yang  nyata  dibanding- kan dengan kontrol. Perlakuan kontrol (0 μg L -1 ) berbeda nyata dengan perlakuan dosis 200 μg L -1 dan  berbeda  sangat  nyata  dengan  dosis  400  dan 600 μg L -1 , sedangkan antara perlakuan dosis 400 dan  600  μg  L -1 tidak  menunjukkan  perbedaan yang  nyata.  Dilihat  dari  perlakuan  lama  peren- daman,  perlakuan  lama  perendaman  6  dan  12 jam  menunjukkan  hasil  yang  lebih  tinggi  dan berbeda  nyata  dibandingkan  dengan  perlakuan lama perendaman 18 jam (Tabel 3).
1 2 a b 3
Tabel 3. Jumlah ikan betina pelangi pada setiap perlakuan Dosis (μg L -1 ) Lama perendaman (Jam) Jumlah betina (%) 0 (kontrol) 6 75,51±1,89 Ab 12 76,35±0,31 Ab 18 77,73±1,96 Aa 200 6 84,33±2,04 Bb 12 84,44±5,09 Bb 18 77,78±1,92 Ba 400 6 87,78±5,09 Cb 12 92,22±5,09 Cb 18 82,93±0,69 Ca 600 6 85,56±1,93 Cb 12 90,00±3,33 Cb 18 81,11±5,09 Ca
Keterangan: huruf kapital dan huruf kecil yang berbeda antarperlakuan menunjukkan beda nyata dengan taraf  keper- cayaan 95% berturut-turut untuk dosis dan lama perendaman

## Pembahasan
Pembetinaan  pada  ikan  pelangi  menggu- nakan  hormon  estradiol-17β  dengan  dosis  200- 600  μg  L -1 dan  lama  perendaman  enam-18  jam tidak  berpengaruh  terhadap  tingkat  penetasan. Hal  tersebut  menunjukkan  bahwa  pada  kisaran perlakuan  dosis  dan  lama  perendaman  tersebut tidak  menimbulkan  efek  negatif  yang  dapat mengganggu  proses  embriogenesis  dan  pene- tasan. Hasil yang lebih tinggi ditemukan Goetz et
al . (1979) pada ikan Oncorhynchus kisutch y ang direndam  dalam  estradiol-17β  dengan  konsen- trasi  25-400  μg  L -1 stadia  embrio  bintik  mata.
Mereka  menyatakan  bahwa  kurang  dari  1% tingkat  kematian  yang  ditemukan  mulai  dari stadia  bintik  mata  hingga  penetasan  akan  tetapi tingkat  kematian  meningkat  setelah  telur  me- netas.
Tappin  (2011)  menyatakan  bahwa  pada habitat  alaminya  pemijahan  ikan  pelangi dapat berlangsung  dengan  tingkat  keberhasilan  pem- buahan  umumnya  sekitar  70-80%.  Daya  tetas telur dipengaruhi oleh banyak faktor, antara lain kualitas  air  media  penetasan  meliputi  suhu  dan pH (Putri et  al. 2013), tekanan osmotik, cahaya,
dan  oksigen  (Burmansyah et  al. 2013),  jenis ikan, ukuran  telur, dan ikan  predator (Heltonika 2014), serta faktor intrinsik embrio (Said & Ma- yasari 2010). Secara umum tingkat penetasan te- lur  yang  dihasilkan  pada  penelitian  ini  menun- jukkan nilai pada kisaran habitat alaminya.
Sintasan pada perlakuan lama perendaman
6 jam menunjukkan nilai tertinggi di semua level dosis yang diuji dan berbeda nyata dengan perla- kuan lama perendaman 12 dan 18 jam. Hal ini di- duga akibat dari efek negatif perlakuan lama pe- rendaman  hormon  estradiol-17β  baru  nampak pada  masa  pemeliharaan.  Hasil  serupa  terjadi pada  pembetinaan  ikan  cupang.  Purwati et  al.
(2004)  melaporkan  bahwa  sintasan  ikan  umur dua  minggu  cenderung  menurun  dengan  me- ningkatnya  lama  waktu  perendaman  yaitu  42,7- 80,4%  dan  terus  menurun  pada  akhir  pemeliha- raan  (umur  3  bulan)  yaitu  31,0-44,8%.  Hal  ini menunjukkan  bahwa  semakin  lama  waktu  pe- rendaman  cenderung  menurunkan  sintasan  ikan pelangi.
Pada penelitian ini perbedaan faktor dosis hormon estradiol-17β 200-600 μg L -1 tidak mem- berikan  pengaruh  yang  nyata  terhadap  sintasan
ikan  pelangi  dan  kisaran  dosis  hampir  sama  di- bandingkan  dengan  yang  digunakan  pada  ikan
Oncorhynchus  tshawytscha (dosis  400  μg  L -1 ) dengan  menggunakan  metode  yang  sama (pe- rendaman)  yaitu  sebesar  83,2%  (Weithermer  & Barnum 1984).
Penelitian ini menunjukkan bahwa pembe- tinaan  menggunakan  hormon  estradiol-17β  de- ngan cara perendaman pada embrio stadia bintik mampu  meningkatkan  jumlah  persentase  indivi- du  betina  dari  kontrol  sebesar  75,51-77,73% menjadi  77,78-92,22%  untuk  perlakuan,  sehing- ga  dari  selisih  persentase  jumlah  betina  kontrol dengan  perlakuan  tersebut,  berpeluang  menda- patkan betina fungsional sebanyak 1,63-20,50%. Hasil  ini  menunjukkan  bahwa  pembetinaan menggunakan hormon estradiol-17β  dengan cara perendaman menunjukkan efektivitas yang relatif sama dengan metode oral seperti yang dilakukan oleh Carvalho et al . (2014) pada ikan Centropo- mus  undecimalis dengan  persentase  betina  ter- tinggi 90% dan lebih tinggi daripada pembetina- an pada ikan Cyprinus carpio dengan 53,5% be- tina (Komen et al. 1989). Akan tetapi, hasil yang diperoleh  dari  penelitian  ini  kurang  efektif  bila dibandingkan  dengan  hasil  pembetinaan  pada ikan  chinook  salmon  dengan  dosis  400  μg  L -1
dengan  durasi  perendaman  selama  8  jam  yang menghasilkan 100% betina (Piferre & Donaldson 1992).
Pada Tabel 3 dapat dilihat bahwa pening- katan dosis estradiol-17β dari dosis 200 ke dosis 400 μg L -1 dapat meningkatkan persentase betina ikan, akan tetapi peningkatan dosis estradiol-17β dari dosis 400 ke dosis 600 μg L -1 menyebabkan penurunan persentase betina. Hasil ini mengindi- kasikan adanya hubungan parabolik antara peng- gunaan  dosis  estradiol  dengan  persentase  betina yang  dihasilkan  dengan  puncak  tertinggi  pada dosis 400 μg L -1 . Hasil serupa terjadi pada pem-
betinaan  ikan  cupang  menggunakan  hormon  es- tradiol-17β dosis 400 μg L -1 selama 6, 12, 18, dan 24  jam  yang  menunjukkan  puncak  perendaman yang efektif pada perlakuan perendaman 12 jam (Purwati et al . 2004). Walaupun tidak ditemukan adanya  interaksi  antara  faktor  dosis  hormon  es- tradiol-17β  dengan  faktor  lamanya  perendaman, pengaruh  lama  perendaman  terhadap  persentase betina cenderung parabolik, puncaknya ditunjuk- kan pada lama perendaman 12 jam. Pola hubung- an  seperti  ini  relatif  sering  dijumpai  dalam  riset pengarahan kelamin pada ikan sebagaimana yang dilaporkan oleh Wang et al. (2008) yang menya- takan  bahwa  pemberian  dosis  hormon  estradiol- 17β  yang  berlebihan  pada  ikan Lepomis  macro- chirus dapat  menurunkan  persentase  betina.  Fe- nomena hubungan parabolik antara kedua faktor perlakuan pembetinaan dengan persentase betina yang  dihasilkan  diduga  berkaitan  erat  dengan efek  paradoksial  yang  menyebabkan  pengaruh kontra  produktif  dengan  target  jenis  kelamin yang diharapkan (Sakdiah et al. 2003). Selain itu, perlakuan perendaman hormon yang terlalu lama menyebabkan organ tubuh rusak sehingga proses metabolisme  di  dalam  tubuh  ikan  tidak  berjalan normal (Wihardi et al . 2014).
Berdasarkan  pertimbangan  dari  hasil  ter- tinggi  terhadap  persentase  betina  sebesar  87,78- 92,22%  pada  perlakuan  dosis  400  dan  600  µg/l dengan  lama  perendaman  masing  6  dan  12  jam dan nilai tertinggi sintasan sebesar 67,75% pada perlakuan  dosis  400  μg  L -1 dengan  lama  peren- daman 6 jam, serta mempertimbangkan efisiensi lama waktu perendaman dan dosis  hormon estra- diol  yang  digunakan,  maka  pembetinaan  pada ikan  pelangi  melalui  perendaman  embrio  pada stadia bintik mata dengan dosis 400 μg L -1 yang direndam  selama  6  jam  memberikan  hasil  yang baik dan dapat memberikan peluang untuk meng- hasilkan betina fungsional sebanyak 20,50%.

## Simpulan
Pembetinaan  ikan  pelangi  melalui  peren- daman  hormon  estradiol-17β  dengan  dosis  400 µg/l selama enam jam pada embrio stadia bintik mata  merupakan  perlakuan  terbaik  yang  dapat menghasilkan  persentase  betina  sebesar  87,78% dan sintasan 67,75% dengan peluang menghasil- kan betina fungsional sebanyak 20,50%.

## Daftar pustaka
Al-Hakim  NFA,  Rizkalla  EH,  Hessen  MS, Hegazi  AZ,  Tahoun  AM,  Khalfalla  AI. 2013.  Comparative  study  for  the  produc- tion of the male Nile tilapia between inter- specific  hybridization  and  hormonal  sex reversal. Aquaculture,  Biology  and  Fish , 17(2): 73–89
Arslan T, Phelps RP, Osborne JA. 2009. Effects of estradiol-17β or 17α-methyltestosterone administration  on  gonadal  differentiation of largemouth bass
Micropterus salmoides (Lacepède). Aquaculture Research , 40(16): 1813-1822 Burmansyah, Muslim, Fitrani M. 2013. Pemijah- an  ikan  betok Anabas  testudineus semi alami  dengan  sex  ratio  berbeda .  Jurnal Akuakultur Rawa Indonesia
, 1(1): 34-45
Carvalho  CVA,  Passini  G,  Costa  WM,  Vieira BN, Cerqueira VR. 2014. Effect of estra- diol-17β on the sex ratio, growth and sur- vival  of  juvenile  common  snook Centro- pomus  undecimalis . Acta  Scientiarum Animal Sciences , 36(3): 239-245
Dung  SJ,  Komanpririn  K.  2007.  Study  of  17β- estradiol  hormone  on  feminization  of climbing  perch, Anabas testudineus
(Bloch,  1792).  Chumphon  Fisheries  Test and Research Center Aquatic Animal Ge- netics Research and Development Institute Department  of  Fisheries.  Thailand. Tech- nical Paper 7: 1-20
Gennotte  V,  Melard  C,  D’cotta  H,  Baroiller  JF, Rougeot C. 2014. The sensitive period for male-to-female  sex  reversal  begins  at  the embryonic stage in the Nile tilapia and is associated  with  the  sexual  genotype. Mo- lecular  Reproduction  and  Development , 81(12): 1146–1158
Goetz  FW,  Donaldson  EM,  Hunter  GA,  Dye HM.  1979.  Effects  of  estradiol-17β  and 17α-methyltestosterone  on  gonadal  dif- ferentiation  in  the  coho  salmon,  ( Onco-
rhynchus  kisutch ). Aquaculture 17(4):
267-278.
Grandi G, Giovannini S, Chicca M. 2007. Gona- dogenesis  in  early  developmental  stages of Acipenser  naccarii and  influence  of estrogen  immersion  on  feminization . Journal of Applied Ichthyology, 23(1): 3-8 Hara A, Hirano K, Shimizu M, Fukada H, Fujita T, Ito F, Takada H, Nakamura M, Iguchi T.  2007.  Carp Cyprinus  carpio vitelo- genin:  Characterization  of  yolk  proteins, development of immunoassays and use as biomarker  of  exposure  to  environmental estrogens. Environmental  Sciences , 14(2): 95-108
Heltonika  B.  2014.  Pengaruh  salinitas  terhadap penetasan  telur  ikan  jambal  siam Panga- sius  hypophthalmus . Jurnal  Akuakultur Rawa Indonesia , 2(1):13-23
Hirai  N, Nanba  A, Koshio  M, Kondo  T, Morita M , Tatarazako  N.  2006.  Feminization  of Japanese medaka Oryzias  latipes exposed to  17β-estradiol:  formation  of  testis-ova and sex-transformation during early-onto- geny . Aquatic Toxicology , 77(1): 78-86
Jarque  S,  Quiros  L,  Grimalt  JO,  Gallego  E, Catalan J, Lackner R, Pina B. 2015. Back- ground  fish  feminization  effects  in  Euro- pean  remote  sites. Scientific  Reports, 5. http://www.nature.  com/  articles/  srep 11292. [2 Desember 2015]
Komen J, Lodder PAJ, Huskensi F, Richter CJJ, Huisman  EA.  1989.  Effects  of  oral administration  of  17a-methyltestosterone and 17β-estradiol on gonadal development in  common  carp, Cyprinus  carpio . Aqua- culture, 78 (3-4): 349-363
Król KJ, Pobłocki W, Bockenheimer T, Hliwa P. 2014.  Effect  of  diethylstilbestrol  (DES) and 17β-estradiol (E2) on growth, survival and  histological  structure  of  the  internal organs  in  juvenile  European  catfish Silu- rus glanis (L.). Aquaculture International , 22(1): 53-62
Kurniasih T, Arifin OZ,  Marizal. 2006. Femini- sasi nila (Gift), Oreochromis  niloticus sp. menggunakan  hormon  estradiol-17β. Jur- nal Perikanan , 8(1):74-80.
Mair  GC,  Abucay  JS,  Skibinski  DOF,  Abella TA,  Beardmore  JA.  1997.  Genetic  mani- pulation  of  sex  ratio  for  the  large-scale production  of  all-male  tilapia. Oreochro- mis niloticus. Canadian Journal of Fishe- ries and Aquatic Sciences 54(2): 396-404
Piferrer  F,  Donaldson  EM.  1992.  The  compara- tive effectiveness of the natural and a syn- thetic estrogen for the direct feminization of  Chinook  salmon Oncorhynchus  tsha- wytscha . Aquaculture 106 (2): 183–193 Pongthana  N,  Penman  DJ,  Baoprasertkul  P, Hussain  MG,  Shahidul  MI,  Powell  SF, McAndrew  BJ.  1999.  Monosex  female production  on  the  silver  barb  ( Puntius gonionotus Bleeker). Aquaculture , 173(1): 247-256
Purwati S, Carman O, Zairin MJ. 2004. Femini- sasi  ikan  betta Betta  splendens,
Regan melalui perendaman embrio dalam larutan hormon  estradiol-17β    dengan  dosis  400 mg L -1 selama 6,12,18 dan 24 jam. Jurnal Akuakultur Indonesia , 3(3): 9-13
Putri  DA,  Muslim,  Fitrani  M.  2013.  Persentase penetasan  telur  ikan  betok  ( Anabas  testu- dineus ) dengan suhu inkubasi yang berbe- da. Jurnal  Akuakultur  Rawa  Indonesia , 1(2): 184-191
Said  MS,  Mayasari  N.  2010.  Pertumbuhan  dan pola  reproduksi  ikan  bada
Rasbora  argy-
rotaenia pada nisbah kelamin yang berbe- da. Limnote k, 17(2): 201-209
Sakdiah M, Carman O, Zairin MJ. 2003. Penga- ruh  lama  perendaman  di  dalam  larutan hormon  triiodotironin  terhadap  perkem- bangan,  pertumbuhan  dan  kelangsungan
hidup  larva  ikan  gurame (Osphronemus gouramy Lac.). Jurnal  Akuakultur  Indo- nesia , 2(1): 1-6
Strussmann  CA,  Takashima  F,  Toda  K.  1996. Sex  differentiation  and  hormonal  femini- zation in pejerrey Odontesthes bonariensi. Aquaculture. 139(1-2): 31-45 Tappin AR. 2011. Pelangi fisher - Their Care & Keeping  in  Captivity .  Art  Publication. Australia. 484 p Wang  H,  Gao  Z,  Beres  B,  Ottobre  J, Wallat  G, Tiu L, Rapp D, O’Bryant P, Yao H. 2008. Effects  of  estradiol-17β  on  survival, growth performance, sex reversal and go- nadal structure of bluegill sunfish Lepomis macrochirus.  Aquaculture ,  285(1):  216-
223
Weithermer  AC,  Barnum  J.  1984.  Use  of  estra- diol and methyltestosterone to change sex ratios  of Chinook  salmon .  Northwest  and Alaska  Fisheries  Center  Auke  Bay  Labo- ratory. National Marine Fisheries Service. Alaska. 15 p
Wihardi Y, Yusanti IA, Haris RBK. 2014. Femi- nisasi pada ikan mas Cyprinus  carpio de- ngan  perendaman  ekstrak  daun-tangkai buah terung cepoka Solanum torvum pada lama  waktu  perendaman  berbeda. Ilmu- ilmu  Perikanan  dan  Budidaya  Perairan , 9(1): 338-345