## KLASIFIKASI WARNA CANGKANG DAN PIGMEN KAROTENOID PADA
Littoraria pallescens (Philippi, 1846) DARI WILAYAH EKOSISTEM MANGROVE DESA MOKUPA KECAMATAN TOMBARIRI DAN DESA BASAAN KECAMATAN RATATOTOK
( Shell Color Classification And Carotenoid Pigments On Littoraria pallescens (Philippi, 1846) From Mangrove Ecosystem Area On Mokupa Village, Tombariri Sub District and Basaan Village,  Ratatotok Sub
District )
Susan M. Sumampouw 1* , Desy M.H. Mantiri 1 , Farnis B. Boneka 1
Medy Ompi 1 , James J.H.Paulus 1 , Adnan Wantasen 2
1 Program Studi Ilmu Kelautan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Sam Ratulangi Manado e-mail: s.marlyn.sm@gmail.com
2 Staf Pengajar Program Studi Manajemen Sumber Daya Perairan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Sam Ratulangi, Manado
Manado

## ABSTRACT
The purpose of this study was to classify the color of the shell and to know the carotenoid pigment content in Littoraria pallescens based on color classification and  population  distribution  in  the  mangrove  ecosystem  area  of  Mokupa  Village, Tombariri Sub district and Basaan Village, Ratatotok Sub district. Sampling directly on  mangrove  trees  as  water  begins  to  recede.  Identification  of  L.  pallescens species is done by looking at the shape of the shell, the color of the shell, the color of the operculum and the shape of the genital organ. Shell color classification by inserting  into the  Color  Explorer  application.  Analysis  of  carotenoid  pigments  by extraction process with acetone and petroleum ether, further separation of pigment by  thin  layer  chromatography.  The  results  obtained  show  that  L.  pallescence dominates  life  on  mangrove  trees.  Sex  was  inversely  proportional  to  the  two research  sites,  53.8%  of  the  male  L.  pallescens  species  and  46.2%  female  in Mokupa  waters  while  from  Basaan  waters  there  were  47.1%  males  and  52.9% females. Color classification based on the percentage of occurrences of constant color that is black (18.5), black orange (16.3) brown black spots (16,3), gray (10.7), angry (6,3), yellow pale (17.8), brown yellow spots (14,1). The detected pigment based  on  the  color  classification  of  the  shell  is  located  on  the  identical  and identifiable Rf for all colors is the β-carotene pigment.
Keyword : Littoraria pallescence , Carotenoid pigments
Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengklasifikasikan warna cangkang dan  mengetahui  kandungan  pigmen  karotenoid  pada Littoraria  pallescens berdasarkan  klasifikasi  warna  dan  sebaran  populasinya  di  wilayah  ekosistem mangrove  Desa  Mokupa  kecamatan  Tombariri  dan  Desa  Basaan  Kecamatan Ratatotok. Pengambilan sampel secara langsung pada pohon mangrove saat air mulai  surut.  Identifikasi  spesies L.  pallescens dilakukan  dengan  melihat  bentuk cangkang,  warna  cangkang,  warna  operculum  dan  bentuk  organ  genital. Pendataan  untuk  klasifikasi  warna  cangkang  dengan  memasukkan  ke  dalam aplikasi  Color  Explorer.  Analisis  pigmen  karotenoid  melalui  proses  ekstraksi dengan aseton dan petroleum eter, selanjutnya pemisahan awal pigmen dengan kromatografi  lapis  tipis. Hasil  yang  diperoleh  menunjukan  bahwa  L.  pallescence
mendominasi  hidup  pada  pohon  mangrove.  Jenis  kelamin  berbanding  terbalik pada dua lokasi penelitian, spesies L. pallescens jantan 53.8% dan betina 46.2% di perairan Mokupa sedangkan dari perairan Basaan terdapat 47.1% jantan dan 52.9% betina. Klasifikasi warna berdasarkan persentase kemunculan warna yang konstan yaitu warna hitam (18,5), hitam oranye (16,3) coklat bercak hitam (16,3), abu-abu  (10,7),  Marah  (6,3),  kuning  pucat  (17,8),  kuning  bercak  coklat  (14,1). Pigmen  yang  terdeteksi  berdasarkan  klasifikasi  warna  pada  cangkang  adalah berada  pada  Rf  yang  sama  dan  yang  dapat  diidentifikasi  untuk  semua  warna adalah pigmen ß-karoten.
Kata kunci : Littoraria pallescence , Pigmen Karotenoid.

## PENDAHULUAN
Indonesia merupakan Negara
dengan  keanekaragaman  hayati  laut terbesar  di  dunia.  Keanekaragaman hayati laut tersebut tersebar di berbagai kawasan ekosistem pesisir yang dimiliki seperti hutan mangrove, padang lamun, terumbu  karang,  yang  sangat  luas  dan beragam (Dahuri et al ., 2001).
Gastropoda  dari  Filum  Moluska, merupakan salah satu biota yang hidup dihutan  mangrove  (Nurrudin et  al ., 2015).  Salah  satu  spesies  dari  kelas gastropoda adalah Littoraria pallescens . Spesies  ini  dikenal  dengan  nama  siput dan  bia  (bahasa  lokal). S pesies  ini tersebar  luas  di  wilayah  Indo-Pasifik, dan  memiliki  tahap  larva  planktonik dalam siklus hidupnya.
L.  pallescens bernafas  dengan insang  yang  terletak  di  bagian  depan. Umumnya  mempunyai  operculum  yang berfungsi sebagai penutup, bila
tubuhnya  masuk  ke  dalam.  Siput  laut yang termasuk subkelas Prosobranchia pada  umumnya  memiliki  alat  kelamin yang terpisah (Dharma, 1988).
Komponen  utama  yang  terdapat pada  lambung L.  pallescens adalah fungi  dan  pada L.  scabra adalah hancuran tumbuhan. Pengamatan terhadap  spesies L.  pallescens dan L. scabra ditemukan  hidup  melimpah  di hutan  mangrove.  Hal  ini  disebabkan oleh  melimpahnya  jumlah  makanan terutama  mikro-alga  yang  terdapat  di daerah  hutan  mangrove  (Christensen, 1998).
L.  pallescens yang  menghuni daun mangrove mungkin lebih terpapar
radiasi matahari dari pada L. sabra yang menempati kulit dan akar (Boneka et al., 1997).  Spesies L.  pallescens yang cenderung  pasif,  pada  saat  pasang tertinggi  umumnya  dijumpai  terbenam dalam  air  atau  terdapat  di  bawah permukaan air (Boneka, 1994).
Warna cangkang pada L.
pallescens cukup  beragam  dari  warna terang  (merah  dan  kuning)  dan  warna gelap  (hitam  dan  coklat) . Umumnya warna terang hiduppada daun mangrove  dan  warna  gelap  sering berada pada batang dan daun mangrove. Warna tersebut berasal dari pigmen-pigmen  yang  dikandungnya. Umumnya pigmen yang sering ditemukan adalah karotenoid dan melanin.  Karotenoid  terdiri  dari  pigmen karoten  dan  xantofil  dan  mempunyai kisaran  warna  kuning  sampai  merah spesies.  Tujuan  dari  penelitian  ini adalah untung mengklasifikasikan warna cangkang pada L. pallescens dan mengetahui kandungan pigmen karotenoid berdasarkan klasifikasi warna.

## METODE PENELITIAN
Pengambilan dan Penanganan Sampel
Spesimen  dalam  penelitian  ini adalah L. pallescens yang dikumpulkan dari daerah mangrove perairan Mokupa Kecamatan  Tombariri  dan  perairan Basaan  Kecamatan  Ratatotok.  Sampel diambil  dengan  tangan  pada  saat  air mulai surut. Sampel langsung
dimasukkan  ke  dalam  botol  plastik.
Selanjutnya dibawa ke Laboratorium.

## Identifikasi Sampel
Identifikasi  spesies L.  pallescens
dilakukan dengan melihat bentuk cangkang,  warna  cangkang,  warna operculum  dan  bentuk  organ  genital.
Dilakukan  pendataan  jenis  kelamin berdasarkan  buku  Identifikasi  Reid (1986). Selanjutnya dilakukan pengukuran terhadap panjang cangkang  yang  diukur  dari  puncak  ke tepi anterior bibir dengan menggunakan jangka sorong dengan ketelitian sampai 0.05 mm.

## Pengelompokan Warna Cangkang
Pendataan warna cangkang dengan  cara  melihat  secara  langsung kemudian  di  masukkan  ke  dalam aplikasi Color Explorer untuk mengetahui lebih jelas jenis warna dari spesimen.

## Ekstraksi Pigmen
Ekstraksi  pigmen  pada  siput L. pallescens mengikuti metode  Mantiri et al., (1996)  yang  telah  dimodifikasi. L. pallescens dibersihkan  dengan  air kemudian  dibedah  untuk  mendapatkan daging dan cangkang. Sampel
ditimbang  kemudian  direndam  dengan HCl  dan  digerus.  dengan  aseton. Larutan  hasil  penggerusan  kemudian disaring dalam labu pemisah danditambahkan larutan Petroleum Eter (PE), selanjutnya. dibilas dengan aquades secukupnya.

## Isolasi Pigmen Menggunakan KLT
Untuk identifikasi awal jenis pigmen pada ekstrak karotenoid menggunakan  metode  KLT  dengan mengikuti  Matsjeh  (1999).  Penyediaan pelat  silika  gel,  sebelum  digunakan terlebih  dahulu  diaktivasi  dengan  cara dipanaskan dalam oven pada suhu 60°C selama 24 jam.. Pada garis awal dibuat spot  dan  ditotolkan  larutan  pigmen menggunakan pipet kapiler. Pengembangan pelat yang telah ditotolkan  larutan  pigmen  dimasukkan ke  dalam chamber dengan  larutan pengembang Petroleum Eter dan Aseton  dengan  perbandingan  80:20 (Mantiri,  1997).  Proses  ini  diakhiri setelah  eluen  bermigrasi  sampai  batas yang telah ditentukan kemudian diangkat  dan  dikeringkan.  Noda-noda yang  terlihat,  kemudian  ditandai  dan ditentukan nilai Rf.

## Rf  = Jarak antara titik awal dengan titik spot yang dihasilkan Jarak antara titik awal dari larutan pengembang

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Spesimen Litoraria pallescens
Total  individu  yang  dikumpulkan sebanyak  270  individu  yang  terdiri  dari 110  individu  yang  diperoleh  dari  lokasi perairan  Mokupa  dan  160  individu  dari lokasi perairan Basaan. Kedua lokasi ini terletak opposite .
Ekosistem  mangrove  di  perairan Basaan  masuk  area  teluk  Tomini berbatasan dengan laut Maluku. Ekosistem mangrove di perairan
Mokupa  berada  di  teluk  Manado.  Dari 270  individu,  spesies L.  pallescens
sebanyak  108  individu  dan  2  individu Littoraria non pallescens dari  perairan Mokupa  dan  dari  perairan  Basaan terdapat 123 individu L. pallescens dan 37  individu Littoraria non pallescens . Perbandingan  spesies L.  pallescens dengan  spesies  lainnya  yang  hidup bersama pada pohon mangrove seperti pada gambar 1 di bawah ini.
L.  pallescens yang  ditemukan  di perairan  Mokupa  dan  di  perairan Basaan mendominasi hidup pada pohon mangrove dibandingkan
dengan kerabatnya dari genus Littoraria .
Populasi L.  pallescens ,  lebih  banyak
ditemukan  pada  daerah  mangrove perairan  Basaan.  Keberadaan  populasi
siput  ini  dipengaruhi  leh  kerapatan pohon mangrove. Gambar 1. Persentase jumlah Littoraria pallescens dari perairan Mokupa dan perairan Basaan. Morfologi Cangkang Littoraria pallescens Cangkang L. pallescens asimetrik, seperti  gulungan  benang  menyerupai piramida  dan  halus.  Bentuk  cangkang yang  mengecil  pada  bagian  atas,  tipis dan dibagian puncaknya lunak. Panjang cangkang  yang  bervariasi  dari  9  mm sampai  31  mm  (Reid,  1986).  Seperti pada  umumnya  Prosobranchia, L.
pallescens memiliki  operculum  yang berwarna gelap keunguan.
Gambar 2. Bentuk dan warna cangkang Littoraria pallescens . No Kategori warna Proporsi Foto 1 Hitam 18.5% 2 Coklat bercak hitam 16.3% 3 Abu-abu 10.7% 4 Hitam bercak oranye 16.3% 5 Merah 6.3%
6 Kuning  bercak  coklat gelap 14.1% 7 Kuning pucat 17.8%

## Gambar 3. Kategori warna Littoraria pallescens
Cangkang  dari L.  pallescens ini memiliki  warna  yang  beragam  yaitu merah,  kuning,  kisaran  coklat,  abu-abu dan  hitam.  Menurut  beberapa  peneliti, warna  cangkang  dari  siput  laut  ini dikategorikan atas warna cerah : merah, kuning  dan  warna  gelap  :  coklat  dan kehitaman (Boneka, 2013). Variasi warna yang diperoleh cukup luas dan didasarkan atas persentase jumlah organisme  pada  setiap  warna  maka dalam  penelitian  ini  variasi  warna  di kelompokan dalam tujuh kategori warna.

## Rasio Kelamin
L. pallescens memiliki alat kelamin yang terpisah antara jantan dan betina. Spesies ini melakukan reproduksi seksual  dengan  internal  fertilisasi.  Dari
hasil  pengamatan,  proses  reproduksi terjadi  tanpa  ada  pemilihan  warna cangkang. (a) (b) Gambar  4. L.pallescens betina  (a)  dan jantan (b) Hasil pemisahan berdasarkan jenis  kelamin,  spesies L.  pallescens jantan  53.8%  dan  betina  46.2%  di perairan Mokupa sedangkan dari perairan Basaan terdapat 47.1% jantan dan 52.9% betina.
Gambar 5. Persentase jenis kelamin Littoraria pallescens di mangrove perairan Mokupa dan perairan Basaan
Ukuran Tubuh L. pallescens mempunyai ukuran  cangkang  berkisar  antara  4-18 mm. Distribusi ukuran panjang cangkang L. pallescens jika digambarkan  akan  tampak  ada  dua puncak  yang  tidak  sama  tinggi.  Di perairan Mokupa L. pallescens mempunyai ukuran dominan antara 10- 16 mm. Siput yang diambil dari perairan Basaan  dominan  berukuran  10  mm sebanyak 39 individu dan ditemukan L.
pallescens yang  berukuran  4  mm  yang merupakan juvenil. Kemungkinan kedua
lokasi ini juga turut mempengaruhi siklus hidup dari L. pallescens .
Gambar 6. Persentase ukuran Littoraria pallescens di mangrove perairan Mokupa dan perairan Basaan

## Analisis Pigmen
Berdasarkan  klasifikasi  warna- warna  cangkang,  dilakukan  penelitian tentang pigmen karotenoid yang dikandung  oleh  spesies L.  pallescens . Pemisahan berdasarkan polaritas ekstrak  total  cangkang  menunjukan bahwa walaupun terdapat variasi warna cangkang namun jenis pigmen karotenoid yang dikandung mempunyai Rf  yang  relative  sama.  Kurva  yang diperoleh merupakan pigmen karotenoid  yang  berada  pada  panjang gelombang  380-550  nm.  Baik  pada daging maupun pada cangkang mempunyai Rf yang relatif sama. Faktor makanan  dapat  mempengaruhi  jenis pigmen yang dikandung oleh organisme (Mantiri et  al., 1995).    Isolasi  jenis pigmen  menurut  pada  Rf  1,0  seperti pada gambar 7 menunjukan pigmen ß- karoten.
.
Gambar 7. Kromatogram dari pigmen Rf 1,0 (cangkang dan daging).
Hasil penelitian menunjukan bahwa walaupun L. pallescens
mempunyai  warna  cangkang  yang berbeda, namun pigmen yang dikandung  adalah  sama.  Pigmen  ß- karoten  adalah  pigmen  dasar  dari pigmen  karotenoid  dan  berasal  dari makanan  (Mantiri et  al., 2004). L.
pallescens adalah hewan yang
herbivore pemakan mikro alga (Dharma, 1988)  dan  daun  mangrove  seperti terlihat  secara  langsung  di  lokasi.  Spot lainnya  tidak  dapat  diperoleh  karena serapan  kurvanya  tidak  teridentifikasi dengan  jelas.  Perlu  dilakukan  analisis lanjut  untuk  mengetahui  jenis  pigmen
yang  lain  dengan  pengembang  yang berbeda.

## KESIMPULAN
Ekosistem mangrove di perairan Mokupa  dan  Basaan  didominasi  oleh spesies L.  pallescens .  Spesies  ini mempunyai  warna  cangkang  yang bervariasi yang dikategorikan 7
kelompok  yaitu  merah,  kuning  pucat, kuning  bercak  coklat  gelap,  coklat bercak  hitam,  abu-abu,  hitam  bercak oranye  dan  hitam.  Variasi  warna  dari cangkang L.  pallescens mengandung pigmen yang sama yaitu ß-karoten.

## DAFTAR PUSTAKA
Boneka,  F.  B.  1994. Coexistence  of Littoraria  scabra  and  Littoraria pallescens (gastropoda : Littorinidae) in Northtern Sulawesi, Indonesia. Phuket Marine Biological Center Special Publication, 1(3):147-151. Boneka, F.B., Lumingas, L.L.J., Saroinsong, V. 1997. Growth and Mortality  of  Littoraria  pallescens, with  emphasis  on  two  colour morphs,  in  northern  Sulawesi,
Indonesia . Phuket Marine Biological Center Special Publication. Boneka, F. B. 2013. Pengantar Ekologi
Laut. Press UNSRAT.
Chang,  R.  2010. Chemistry.  Published The  By  McGraw-Hill  companies.
New York.
Christensen,  J.  T.  1998. Diet  in Littoraria. Kluwer Academic Publisher . Printed in Belgium. Dahuri,  R,  J.  Rais,  S.  P.  Ginting,  M.  J. Sitepu. 2001. Pengelolaan Sumberdaya  Wilayah  Pesisir  dan lautan Secara Terpadu . PT.
Pradnya Paramita Jakarta.
Dharma,  B.  1988. Siput  dan  Kerang Indonesia  (Indonesian  Shells). P.T. Sarana Graha, Jakarta.
Mantiri,  D.  M.  H.  1997.  Nature, Localisation  et  Metabolisme  des Carotienoides  et  des  Complexes
Carotenoid  Proteiques  au  Cours de  I’Evolution  Embrionnaire  et
Larvaire  du  Homard  Eurepeen Homarus gammarus (linne 1758). These Universite de Droit, d’Economie et des Sciences d’Aix Marseille, Faculte des Sciences et Techniques de Saint Gerome. Mantiri, D.M.H., G Nègre-Sadargues, R Castillo, JP Trilles.1995. Evolution of carotenoid metabolic capabilities during the early development  of  the  European lobster Homarus gammarus (Linné, 1758) . 111(4):553-558. Mantiri D. M. H., G. Nègre- Sadargues,  G.  Charmantier,  J-P Trilles, J-C. G. Milicua, R. Castillo. 1996.  Nature  and  Metabolism  of Carotenoid  Pigments  during  the Embryogenesis  of  the  European Lobster Homarus gammarus (Linne, 1758). Comparative Biochemistry  and  Physiology-- Part  A:  Physiology  3(115):237- 241. Mantiri, D. M. H., Nègre-Sadargues G., Milicua  J-C.  G,  Castillo  R.  2004. The Carotenoproteins During Embryogenesis and Larval Development  of  the  European Lobster Homarus Gammarus .
Journal  of  Crustacean  Biology ,
24(4):592-602.
Matsjeh,  S.  1999. TLC.  Thin  Layer Chromatography. Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan  Alam.  Uniersitas Gajah Mada. Yoyakarta.
Nurrudin, A. Hamidah dan W. D. Kartika.
2015 .  Keanekaragaman  Jenis Gatropoda  di  Sekitar  Tempat Pelelangan Ikan (TPI) Parit 7 Desa Tungkal I Tanjung Jabung Barat.
Nybaken , J. W. 1992. Biologi Laut Suatu Pendekatan Biologis . PT Gramedia. Jakarta. Reid,  D.  G.  1986.  The  Littorinids Molluscs  of  Mangrove  Forests  in Indo-Pasific  Region  :  the  genus Littoraria. British museum (Natural history). London. p 228. .