ISSN: 1410-8917 e-ISSN: 2597-9914
Jurnal Kimia Sains dan Aplikasi 21 (4) (2018): 237 – 241

## Jurnal Kimia Sains dan Aplikasi
Journal of Scientific and Applied Chemistry
Journal homepage: http://ejournal.undip.ac.id/index.php/ksa
Metabolite Profiling of Java Turmeric ( Curcuma xanthoriza )

## Essential Oil with Different Harvest Times
Mohamad Rafi a,b,* , Dewi Anggraini Septaningsih a , Rudi Heryanto a,b
a Tropical Biopharmaca Research Center-Institute of Research and Community Services, Bogor Agricultural University, Jalan Taman Kencana No. 3 Kampus IPB Taman Kencana, Bogor 16128, Indonesia b Department of Chemistry, Faculty of Mathematics and Natural Sciences, Bogor Agricultural University, Jalan Tanjung Kampus IPB Dramaga, Bogor 16680, Indonesia
* Corresponding author: mra@apps.ipb.ac.id
https://doi.org/10.14710/jksa.21.4.237-241
A r t i c l e   I n fo

## A b s t r a c t
Article history: Received: 9 August 2018
Revised: 2 November 2018 Accepted: 5 November 2018 Online: 6 November 2018
Keywords: metabolite profiling; java turmeric; Curcuma xanthoriza ; gas chromatography-mass spectrometer; harvest times
Java  turmeric  ( Curcuma  xanthoriza )  is  one  of  the native  plants  from  Indonesia. Java turmeric is known as a medicinal plant with a high content of volatile oils. In this study, we  investigated  the  chemical  profile  of  java  turmeric  essential  oil  obtained  by hydrodistillation associated with different harvesting times of the rhizome (7, 9, and 11  months).  The  constituent  of  the  essential  oil  was  determined  by  using  gas chromatography-mass spectrometer. About 19, 20 and 34 compounds were identified in 7, 9, and 11-month old java turmeric. Fifteen compounds were found in all samples namely β -elemene, zingiberene, γ -elemene, β -farnesene, α -curcumene, benzofuran, α -cedrene,  epicurzerenone,  ar-curcumene,  germacrone,  aromadendrene, α – longipene,  trans-caryophilene,  curcuphenol,  and  xanthorrhizol.  This  study  showed the  level  of  all  compound  detected  in  7,  9,  and  11  months  old  of  java  turmeric  is different.

## A b s t r a k
Kata Kunci:
pemrofilan metabolit; temulawak; Curcuma xanthoriza ; kromatografi gas-spektrometer massa;
waktu panen
Temulawak  ( Curcuma  xanthoriza )  merupakan  salah  satu  tumbuhan  asli  Indonesia. Temulawak  diketahui  sebagai  tanaman  obat  dengan  kandungan  minyak  atsiri  yang tinggi.  Dalam  penelitian  ini,  kami  melakukan  investigasi  profil  kimia  dari  minyak atsiri  temulawak  yang  diperoleh  dengan  distilasi  yang  terkait  dengan  masa  panen rimpang yang berbeda (7, 9, dan 11 bulan). Kandungan dari minyak atsiri ditentukan dengan menggunakan kromatografi gas-spektrometer massa. Sekitar 19, 20, dan 34 senyawa  teridentifikasi  pada waktu  panen  ke  7,  9, dan 11  bulan.  Dua  belas senyawa ditemukan diseluruh sampel yaitu β -elemena, zingiberena, γ -elemena, β -farnesena, α -kurkumena,  benzofuran, α -cedrena,  epikurzerenon,  ar-kurkumene,  germakron, aromadendrena, α – longipena,  trans-karyofilena,  curcuphenol,  and  xanthorrhizol. Hasil  penelitian  menunjukan  komposisi  dan  jumlah  senyawa  yang  terdeteksi  pada temulawak dengan usia 7, 9, dan 11 bulan berbeda.

## 1. Introduction
Indonesia  dikenal  memiliki  sumberdaya  alam  yang kaya,  diantaranya  tanaman  yang  memiliki  manfaat sebagai  obat  tradisional.  Penggunaan  tanaman  obat dalam  pengobatan  tradisional  telah  banyak  diuji  dan
diteliti kandungan yang terdapat dalam tanaman tersebut yang  berperan  dalam  menimbulkan  aktivitas  biologis tertentu.  Salah  satu  yang  telah  banyak  dimanfaatkan sebagai tanaman obat di Indonesia yaitu temulawak yang termasuk  dalam  family  Zingiberaceae.  Kandungan senyawa atsiri dalam rimpang segar temulawak diketahui
Jurnal Kimia Sains dan Aplikasi 21 (4) (2018): 237 – 241
sekitar 0.19% dengan kandungan utama yaitu1,8-sineol, kurzerenon,  xantorizol, β -kurkumena,  zingiberena, β - bisabolol,  dan  ar-kurkumena  [1,  2].  Senyawa α - kurkumena
pada temulawak diketahuidapat menghambat aktivitas enzimlipase sementara xantorizol bertanggung  jawab  untuk  penghambatan  pertumbuhan bakteri P. acnes [3]. Beberapa penelitian lainnya senyawa xantorizol  pada  minyak  atsiri  temulawak  menunjukan potensinya sebagai antioksidan, antiinflamasi, antihipertensi,  antihiperglikemik,  dan  antimikrobial  [4, 5].  Penelitian  lainnya  menunjukkan  minyak  atsiri temulawak dapat menurunkan LDL-kolesterol dan bobot badan pada tikus [6].
Aktivitas biologis yang dimiliki oleh suatu tanaman tidak hanya berasal dari satu komponen saja akan tetapi dapat  ditimbulkan  dari  beberapa  senyawa  yang dikandungnya  dan  dimungkinkan  saling  bersinergi dalam menimbulkan aktivitas biologis tertentu tersebut. Komposisi dan jumlah senyawa aktif terutama metabolit sekunder  dalam  suatu  tanaman  akan  menentukan kualitas maupun khasiat yang ditimbulkan dari tanaman tersebut. Komposisi dan konsentrasi metabolit sekunder pada minyak atsiri temulawak tidak dapat dijamin selalu konstan  mengingat  adanya  berbagai  faktor  yang mempengaruhinya  seperti  kondisi  lingkungan  tempat tumbuh, iklim, umur tanaman, cara panen, tahap siklus vegetatif,  variasi  musiman  serta  waktu  pemanenan  [7- 10].
Suatu  pendekatan  yang  berkembang  saat  ini  yaitu metabolomik  dapat  digunakan  dalam  menentukan  atau mengidentifikasi  senyawa  yang  terdapat  pada  suatu sampel  seperti  tanaman  obat  [11].  Dalam  metabolomik, spektrometer  massa  yang  dikombinasikan  dengan kromatografi gas dianggap sebagai kunci dalam teknologi analitik  untuk  identifikasi  senyawa  volatil.  Teknik tandem ini umumnya digunakan karena ketertiruan dan kemampuannya  yang  baik  untuk  mengidentifikasi senyawa  volatil  pada  suatu  sampel  biologis  yang kompleks  menggunakan  pangkalan  data  senyawa  yang komprehensif  [12].  Dalam  studi  ini,  kromatografi  gas- spektrometer  massa  (KG-SM)  digunakan  untuk pemrofilan  metabolit  yang  ada  dalam  minyak  atsiri rimpang  temulawak  dengan  usia  rimpang  saat  panen yaitu 7, 9, dan 11 bulan untuk pertama kalinya. Pemilihan usia  rimpang  didasarkan  pada  waktu  panen  rimpang temulawak  yang  umumnya  dilakukan  pada  bulan  ke  9, dan  ditambah  dengan  sebelum  dan  sesudah  waktu tersebut  untuk  melihat  adanya  perubahan  komposisi metabolit  volatil  jika  masa  panen  yang  berbeda. Penelitian ini akan memberikan gambaran komposisi dan konsentrasi  senyawa  dalam  minyak  atsiri  temulawak dengan  umur  rimpang  yang  berbeda.  Adanya  informasi ini  dapat  dijadikan  sebagai  suatu  kriteria  dalam menentukan  waktu  panen  temulawak  yang  bergantung pada target senyawa kimia yang diinginkan nantinya.

## 2. Metode

## 2.1. Preparasi sampel
Rimpang  temulawak  dipanen  pada  bulan  7  (Mei 2016), 9 (Juli 2016) dan 11 (September 2016) setelah masa
tanam di kebun Pusat Studi Biofarmaka Tropika, Institut Pertanian  Bogor,  Indonesia.  Sampel  segar  temulawak selanjutnya dicuci dan dipotong. Sebanyak 2.5 kg rimpang segar  ditimbang  dan  diekstraksi  metabolit  volatilnya dengan  cara  distilasi  menggunakan  perangkat  distilasi (Gambar 1). Distilasi dilakukan selama 4 jam pada suhu 95-105 °C untuk menghasilkan minyak atsiri temulawak. Distilat  yang  diperoleh  didiamkan  beberapa  saat  dan minyak  atsiri  dipisahkan  dari  campurannya  dengan  air menggunakan corong pisah.
Gambar 1. Peralatan distalasi untuk proses penyulingan minyak atsiri rimpang temulawak

## 2.2. Penentuan metabolit minyak atsiri rimpang temulawak dengan KG-SM
Minyak  atsiri  temulawak  yang  diperoleh  dari  hasil distilasi  selanjutnya  dianalisis  menggunakan  KG-SM Agilent  seri  GC  7890  dan  MS  6950.  Kondisi  alat  yang digunakan  yaitu  gas  pembawa  helium  diatur  alirannya sebesar 1 mL/menit, suhu injektor sebesar 250 ⁰ C dengan teknik injeksi split . Kolom kapiler KG dari J&W, tipe HP- 5ms,  30  m  x  0.25  mm,  ketebalan film  0.25  μm  dengan suhu kolom 40-280 ⁰ C diatur dengan laju kenaikan suhu sebesar  10 ⁰ C/menit.  Sebanyak  2  μL  minyak  atsiri temulawak  diinjeksikan  ke  dalam  KG-SM.  Total  waktu elusi  ditetapkan  selama  30  menit.  Kromatogram  yang diperoleh  dari  kromatografi  gas  kemudian  dianalisis dengan  spektrometri  massa  untuk  mendapatkan  pola spektrum massa.

## 2.3. Evaluasi Data
Hasil  analisis  selanjutnya  dievaluasi  untuk mendapatkan informasi senyawa yang terkandung dalam minyak  atsiri  temulawak.  Identifikasi  komponen  kimia ditentukan  melalui  evaluasi  spektrum  massa  dengan menyocokkan pola spektra pada mass spectra library Wiley 8  dan  National  Institute  of  Standards  and  Technology (NIST).  Proporsi  relatif  masing-masing  komponen minyak  ditunjukkan  sebagai  persentase  relatif  terhadap luas puncak total.
Jurnal Kimia Sains dan Aplikasi 21 (4) (2018): 237 – 241 239

## 3. Hasil dan Pembahasan
Minyak  atsiri  rimpang  temulawak  segar  dengan perbedaan  waktu  panen  diperoleh  kadarnya  sebesar 0.0353%,  0.0467%,  dan  0.0611%  masing-masing  pada bulan  ke  7,  9,  dan  11.  Masa  panen  yang  lebih  lama menunjukkan  kadar  minyak  atsiri  yang  lebih  besar. Perbedaan waktu panen ini juga memberikan perbedaan komposisi  maupun  jumlah  metabolit  kimia  yang terkandung dalam minyak atsiri rimpang temulawak. Hal ini membuktikan bahwa umur tanaman merupakan salah satu  faktor  yang  dapat  menyebabkan  perbedaan  kadar metabolit  yang  terkandung  dalam  temulawak.  Profil metabolit  dalam  minyak  atsiri  rimpang  temulawak menggunakan  KG-SM  menunjukan  kemiripan  pola kromatogram  (Gambar  2).  Intensitas  tiap  puncak mengalami  peningkatan  seiring  dengan  umur  rimpang temulawak  yang  semakin  tua.  Identifikasi  metabolit volatil  pada  tiap  sampel  dilakukan  menggunakan pangkalan data berdasarkan kecocokan pola fragmentasi spektrum massanya.
Gambar 2. Profil kromatogram KG-SM minyak atsiri temulawak pada waktu panen yang berbeda (hitam = bulan ke 7, jingga = bulan ke 9, hijau = bulan ke 11)
Sebanyak  29  senyawa  kimia  berhasil  diidentifikasi dalam  minyak  atsiri  rimpang  temulawak  yang  dipanen pada  bulan  ke  11.  Delapan  belas  senyawa  teridentifikasi pada rimpang temulawak yang dipanen bulan ke 7 dan 20 senyawa  pada  bulan  ke  9  (Tabel  1).  Secara  keseluruhan sebanyak  34  senyawa  kimia  berhasil  diidentifikasi  dari tiga  sampel  minyak  atsiri  temulawak  yang  digunakan. Senyawa  penyusun  minyak  atsiri  temulawak  tersebut didominasi oleh senyawa kimia dari golongan terpenoid khususnya  monoterpena  dan  seskuiterpena.  Secara umum genus Curcuma memang mayoritas mengandung senyawaan terpenoid. Terpenoid berasal dari pembentukan  isoprena  dari  asam  asetat  melalui  jalur asam mevalonat. Penggabungan kepala dan ekor dua unit isoprena akan membentuk mono-, seskui-, di-, sester- dan  poli-terpenoid,  dan  penggabungan  ekor  dan  ekor dari unit C-15 atau C-20 akan menghasilkan triterpenoid dan steroid [13].
Tabel 1. Senyawa kimia dalam minyak atsiri rimpang temulawak dengan waktu panen 7, 9, dan 11 bulan
No Waktu Retensi (menit) Senyawa % Area Bulan 7  Bulan 9 Bulan Ke-11 1. 4.394 Terpineol 0.24 2. 5.422 Asam hidroksinamat, metil ester 0.18 3. 6.186 α -terpinena 0.25 0.16 4. 6.722 Asam sinamat, metil ester 0.52 5. 6.827 β -elemena 0.78 0.77 0.44 6. 7.04 Zingiberena 1.28 1.33 0.90 7. 7.104 trans-karyofilena 0.35 0.34 0.31 8. 7.332 γ -elemena 1.90 1.85 0.92 9. 7.69 β -farnesena 1.89 1.75 1.39 10. 7.778 Kurkumena 18.67 18.70 16.43 11. 8.103 Benzofuran 4.89 4.26 3.91 12. 8.204 α -cedrena 20.10 19.83 16.15 13. 8.405 Zingiberena 0.62 14. 8.417 α -kopaena 0.57 15. 8.695 Germakrena B 1.17 1.31 1.87 16. 8.768 Zingiberena 0.94 0.91 0.88 17. 9.062 α -cedrena 0.23 18. 9.181 trans-2-(Okt-1-enil)pyridin 0.62 19. 9.326 Epikurzerenon 6.70 6.89 4.74 20. 9.443 Aromadendrena 0.38 0.94 0.84 21. 9.535 α – Longipena 0.53 0.75 1.06 22. 9.736 1H-indena, 1-etillidenaoktahidro-7a- metil-, (1E,3a.alfa.,7a.beta.) 0.34 23. 9.737 β -Eudesmol 0.75 24. 9.783 β -Guaiena 0.57 25. 10.028 γ -kurkumena 1.40 26. 10.042 Bergamotena 2.34 27. 10.232 Germakron 4.19 3.74 7.40 28. 10.567 Kurkufenol 1.14 1.01 1.97 29. 11.010 Xantorizol 31.89 31.79 28.95 30. 11.644 α -Guaiena 0.27 31. 12.701 Metil palmitat 0.11 32. 16.756 Asam heksanadioat, bis(2-etilheksil) ester 0.98 33. 22.923 2-Benzyl-6-metil-4(3H)- pirimidinon 0.46 34. 25.236 Metil oleanonat 0.24
Tiga  puncak  dengan  intensitas  terbesar  dari  ketiga waktu  panen  yang  terdeteksi  memiliki  waktu  retensi sebesar 7.778, 8.204, dan 11.010 menit (Gambar 1). Ketiga puncak  tersebut  secara  berturut-turut  diidentifikasi sebagai α -kurkumena, α -cedrena,  dan  xantorizol berdasarkan spektrum massanya (Gambar 3). Xantorizol merupakan komponen yang memiliki intensitas terbesar dan  terdeteksi  pada  tiap  waktu  panen/umur  rimpang. Berdasarkan profil kromatogram KG-SM yang diperoleh, xantorizol  dengan  konsentrasi  terbesar  terdapat  dalam minyak atsiri temulawak yang dipanen pada bulan ke-11 dibandingkan  dengan  waktu panen  lainnya.  Akan  tetapi untuk  persentase  area  relatif  xantorizol  berbanding terbalik dengan luas puncaknya karena pada waktu panen bulan  ke-11  senyawa  yang  teridentifikasi  lebih  banyak dibandingkan  pada  dua  waktu  panen  lainnya.  Dua komponen  utama  selanjutnya  adalah α -cedrena  (8.204 menit) dan α -kurkumena (7.778 menit). Telah diketahui secara  umum  xantorizol  merupakan  senyawa  mayor dalam temulawak dan telah digunakan sebagai senyawa penciri  untuk  menentukan  kualitas  rimpang  maupun minyak  atsiri  temulawak  [2,  14].  Senyawa  lain  yang berhasil  diidentifikasi  pada  tiga  waktu  panen  yang digunakan  yaitu α – longipena,  germakron,  kurkufenol,
Jurnal Kimia Sains dan Aplikasi 21 (4) (2018): 237 – 241
epikurzerenon,  aromadendrena,  germakrena  B, β - elemena,  trans-karyofilena, γ -elemena, β -farnesena, ar-kurkumena, benzofuran, dan zingiberena.
Gambar 3. Spektrum massa tiga puncak utama minyak atsiri temulawak kurkumena (a), α -cedrena (b), dan xantorizol (c).
Zingiberena  terbentuk  melalui  biosintesis  farnesil difosfat  dengan  pergeseran  1,3-hidrida.  Melalui  proses yang  sama  dapat  terbentuk γ -kurkumena  dengan pergeseran  1,2-hidrida,  tetapi γ -kurkumena  hanya terdeteksi  pada  bulan  ke  9.  Senyawa β -elemena  yang terdeteksi  meningkat  seiring  dengan  waktu  panen berasal dari produk degradasi termal dari germakrena A [15].  Beberapa  senyawa  terdeteksi  hanya  di  bulan  ke  7 yaitu  terpineol  dan α -kopaena.  Senyawa α -terpinena mulai  terdeteksi  pada  bulan  ke  9  dan  mengingkat kandungan di bulan ke 11. Senyawa yang hanya terdeteksi pada  bulan  ke  11  yaitu  trans-2-(okt-1-enil)piridin (0.62%),  asam  sinamat,  metil  ester  (0.52%),  asam hidroksinamat, metil ester (0.18%), β -eudesmol (0.75%), bergamotena  (2.34%),  metil  palmitat  (0.11%),  asam heksanadioat, bis(2-etilheksil) ester (0.98%), 2-Benzil- 6-metil-4(3H)-pirimidinon  (0.46%),  metil  oleanonat (0.24%), α -guaiena  (0.27%),  dan β -guaiena  (0.57%). Berdasarkan  hasil  yang  diperoleh  dapat  memberikan
informasi bahwa temulawak merupakan sumber senyawa seskuiterpenoid  yang  melimpah  terutama  untuk xantorizol sebagai senyawa mayornya. Selain itu dengan kemungkinan adanya proses degradasi beberapa senyawa menjadi  bentuk  lainnya  memungkinkan  pada  umur rimpang  temulawak  11  bulan  terdeteksi  senyawa  yang lebih  banyak  dibandingkan  dengan  dua  waktu  panen lainnya. Akan tetapi masih perlu dilakukan studi lanjutan apakah  waktu  panen  yang  lebih  lama  akan  lebih meningkatkan jumlah metabolit volatil pada temulawak.

## 4. Simpulan
Minyak atsiri rimpang temulawak dengan perbedaan waktu panen menunjukan kadar yang meningkat dengan masa  waktu  panen  yang  lebih  lama.  Minyak  atsiri temulawak yang dipanen pada baik bulan ke 7, 9 dan 11 terdiri atas 18, 20, dan 29 penyusun dengan 3 komponen tertinggi  yaitu  xantorizol,  kurkumena,  dan α -cedrena. Berdasarkan  profil  kromatogram  KG-SM,  kandungan ketiga senyawa ini meningkat jumlahnya seiring dengan lamanya waktu panen.

## 5. Daftar Pustaka
[1]  S. Jarikasem, S. Thubthimthed, K. Chawananoraseth, T.  Suntorntanasat,  Essential  Oils  from  Three Curcuma  Species  Collected  in  Thailand, ActaHortic. , 677, (2005) 37-41 https://doi.org/10.17660/ActaHortic.2005.677.4 [2]  Ibrahim Jantan, Fadlina Chany Saputri, Muhammad Naeem  Qaisar,  Fhataheya  Buang,  Correlation between  Chemical  Composition  of  Curcuma domestica  and  Curcuma  xanthorrhiza  and  Their Antioxidant  Effect  on  Human  Low-Density Lipoprotein Oxidation, Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine , 2012, (2012) 1-10 http://dx.doi.org/10.1155/2012/438356
[3]  Irmanida Batubara, Iren Julita, Latifah K. Darusman, Ali  Mahmoud  Muddathir,  Tohru  Mitsunaga,  Flower Bracts  of  Temulawak  (Curcuma  Xanthorrhiza)  for Skin Care: Anti-acne and Whitening Agents, Procedia Chemistry , 14, (2015) 216-224
https://doi.org/10.1016/j.proche.2015.03.031
[4]  Helen P. A. Mary, Gomathy K. Susheela, S. Jayasree, A. M.  Nizzy,  B.  Rajagopal,  S.  Jeeva,  Phytochemical characterization  and  antimicrobial  activity  of Curcuma  xanthorrhiza  Roxb, Asian  Pacific  Journal  of Tropical Biomedicine , 2, 2, Supplement, (2012) S637- S640 https://doi.org/10.1016/S2221-1691(12)60288- 3
[5]  Seok  Fang  Oon,  Meenakshii  Nallappan,  Thiam  Tsui Tee,  Shamarina  Shohaimi,  Nur  Kartinee  Kassim, Mohd Shazrul Fazry Sa'ariwijaya, Yew Hoong Cheah, Xanthorrhizol:  a  review  of  its  pharmacological activities  and  anticancer  properties, Cancer  cell international , 15, (2015) 100-100
http://dx.doi.org/10.1186/s12935-015-0255-4
[6]  Endang Darmawan, Suwijiyo Pramono, Essential Oil of Javanese Turmeric (Curcuma xanthorrhiza, Roxb) Decrease Level of LDL-Cholesterol and Body Weight In Rats, Indonesian Journal of Cancer Chemoprevention , 7, 1, (2016) 6-8 http://dx.doi.org/10.14499/indonesianjcanchemopr ev7iss1pp6-8
[7]  Hussein  El-Zaeddi,  Juan  Martínez-Tomé,  Ángel Calín-Sánchez,  Francisco  Burló,  Ángel  Carbonell- Barrachina,  Volatile  Composition  of  Essential  Oils from  Different  Aromatic  Herbs  Grown  in Mediterranean Regions of Spain, Foods , 5, 2, (2016)
41 https://doi.org/10.3390/foods5020041
[8]  H.  R.  Khazaie,  F.  Nadjafi,  M.  Bannayan,  Effect  of irrigation frequency and planting density on herbage biomass  and  oil  production  of  thyme  (Thymus vulgaris)  and  hyssop  (Hyssopus  officinalis), Industrial  Crops  and  Products ,  27,  3,  (2008)  315-321 https://doi.org/10.1016/j.indcrop.2007.11.007
[9]  Nancy  W.  Callan,  Duane  L.  Johnson,  Malvern  P. Westcott, Leon E. Welty, Herb and oil composition of dill (Anethum graveolens L.): Effects of crop maturity and plant density, Industrial Crops and Products , 25, 3,
(2007)
282-287
https://doi.org/10.1016/j.indcrop.2006.12.007
[10] SA  Petropoulos,  D  Daferera,  CA  Akoumianakis,  HC Passam, MG Polissiou, The effect of sowing date and growth stage on the essential oil composition of three types  of  parsley  (Petroselinum  crispum), Journal  of the  Science  of  Food  and  Agriculture ,  84,  12,  (2004)
1606-1610 http://dx.doi.org/10.1002/jsfa.1846
[11]  B.J.  Nikolau,  Eve  Syrkin  Wurtele,  Concepts  in  Plant Metabolomics, Springer Netherlands, 2007.
[12] Katja Dettmer, Pavel A. Aronov, Bruce D. Hammock, Mass  spectrometry-based  metabolomics, Mass Spectrometry  Reviews ,  26,  1,  (2007)  51-78 http://dx.doi.org/10.1002/mas.20108
[13] Tri Dewanti Widyaningsih, Novita Wijayanti, Nur Ida Panca  Nugrahini,  Pangan  Fungsional:  Aspek Kesehatan,  Evaluasi,  dan  Regulasi,  Universitas Brawijaya Press, Malang, 2017.
[14] Hideji Itokawa, Koichi Takeya, Antitumor substances from higher plants, ChemInform , 24, 52, (1993)
[15] Hyun  Jo  Koo,  David  R.  Gang,  Suites  of  Terpene Synthases Explain Differential Terpenoid Production in  Ginger  and  Turmeric  Tissues, PLOS  ONE ,  7,  12,
(2012)
e51481 http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0051481