Research Article

## UNPAD
Antibacterial Activity Test of Herbal and Non Herbal Bar Soap Against The Growth of Staphylococcus aureus ATCC29213

## Susi A. Rahayu, Fabbiana Zahra, Tubagus Akmal
Akademi farmasi Bumi Siliwangi, Jl. Rancabolang No. 104 Margahayu Raya Bandung, 40286
Submitted 23 October 2023; Revised 23 December 2023; Accepted 23 December 2023; Published 30 December 2023 *Corresponding author: susiafriantirahayu@gmail.com

## Abstract
It is essential to maintain skin hygiene by removing dirt and bacteria, including Staphylococcus aureus . Soap is an effective method for maintaining clean skin, particularly antibacterial bar soap that incorporates triclosan (a non-herbal component) or herbs derived from plants, including papaya fruit, betel leaves, lemongrass, and jasmine blossoms. This study aims to compare the antibacterial activity of herbal and non-herbal soaps against Staphylococcus aureus bacteria. Utilizing paper discs, the agar diffusion procedure is implemented. Four non-herbal bar soaps containing triclosan and four herbal bar soaps containing extracts of papaya fruit, betel leaves, lemongrass, and jasmine flowers comprised the samples. Comparative sample concentrations were 1.25%, 0.625%, 0.312%, 0.156%, and 0.078% (w/v), with the antibiotic clindamycin as a control. According to the findings, each sample exhibited antibacterial activity. The MIC values of herbal and non-herbal bar soap are 0.078% with an inhibition zone diameter of 0.163 + 0.012 to 0.363 + 0.045 and 0.323 + 0.012 to 0.510 + 0.057, respectively. The research results showed that non-herbal bar soap containing triclosan had better antibacterial activity compared to herbal bar soap because it had a larger inhibition zone diameter compared to herbal bar soap.
Keywords: Antibacterial, Bar soap, Herbal, Staphylococcus aureus ATCC29213.

## Uji Aktivitas Antibakteri Sabun Batang Herbal dan Non Herbal Terhadap
Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus aureus ATCC 29213

## Abstrak
Kebersihan kulit harus dijaga baik dari kotoran ataupun bakteri seperti Staphylococcus aureus . Salah satu cara menjaga kebersihan kulit yaitu dengan sabun batang khususnya sabun batang antibakteri yang mengandung triclosan (non-herbal) ataupun herbal yang mengandung bahan alami dari tumbuhan seperti daun sirih, serai, bunga melati dan buah pepaya. Penelitian ini bertujuan untuk membandingkan aktivitas antibakteri sabun batang non-herbal dan herbal terhadap bakteri Staphylococcus aureus. Metode yang digunakan adalah metode difusi agar dengan cakram kertas. Sampel yang digunakan yaitu 4 sabun batang non-herbal yang mengandung triclosan serta 4 sabun batang herbal yang mengandung ekstrak daun sirih, sereh, bunga melati dan buah papaya. Konsentrasi sampel yang digunakan 1,25%, 0,625%, 0,312%, 0,156% dan 0,078% (b/v) dengan antibiotik klindamisin sebagai pembanding. Hasil penelitian menunjukkan bahwa semua sampel memiliki aktivitas antibakteri. Nilai KHM sabun batang herbal dan non-herbal yaitu pada konsentrasi 0,078% dengan diameter zona hambat 0,163 + 0,012 sampai 0,363 + 0,045 dan 0,323 + 0,012 sampai 0,510 + 0,057 secara berturut-turut. Hasil penelitian menunjukkan bahwa sabun batang non-herbal dengan kandungan triclosan memiliki aktivitas antibakteri yang lebih baik dibandingkan dengan sabun batang herbal karena memiliki diameter zona hambat yang lebih besar dibandingkan dengan sabun batang herbal.
Kata Kunci: Antibakteri, Herbal, Sabun batang, Staphylococcus aureus ATCC29213.

## 1.  Pendahuluan
Kulit merupakan organ pada tubuh manusia yeng memiliki fungsi perlindungan. Fungsi  kulit  yaitu  sebagai  penghalang  fisik, perlindungan terhadap berbagai macam bahan yang dapat menyebabkan infeksi, mengatur suhu tubuh, perlindungan terhadap sinar Ultra Violet (UV) serta berperan dalam penyembuhan luka. Semua fungsi kulit tersebut dilakukan oleh semua lapisan kulit 1 . Fungsi ini dapat terganggu atau bahkan hilang bila terjadi masalah pada kulit manusia 2 . Salah satu penyebab terjadinya masalah pada kulit adalah kondisi kulit yang kotor akibat paparan berbagai senyawa dari lingkungan luar dan bakteri seperti Staphylococcus aureus 3 . Bakteri S. aureus merupakan  flora normal yang dapat berubah menjadi patogen bila terjadi trauma atau abrasi pada permukaan mukosa dan menyebabkan beberapa masalah kesehatan pada kulit seperti peradangan, pembentukan abses, selulitis, bisul, dan nekrosis pada kulit 4,5 . Masalah kulit tersebut dapat dicegah dengan cara menjaga kebersihan kulit tubuh.
Kebersihan kulit dapat dijaga menggunakan air. Pembersihan kulit hanya menggunakan air masih kurang efektif karena tidak semua kotoran dapat dibersihkan dengan air. Daya pembersihan dapat ditingkatkan dengan penggunaan sabun batang. Sabun batang mengandung surfaktan yang mampu menarik semua kotoran dengan baik selain itu beberapa sabun juga mengandung bahan yang bersifat antibakteri sehingga dapat membunuh bakteri yang bersifat patogen 6 . Senyawa antibakteri yang sering digunakan pada sabun batang adalah triclosan . Triclosan merupakan senyawa biocide sintetik.
Senyawa biocide berbeda dengan antibiotik, biocide tidak digunakan untuk menangani kondisi infeksi tetapi hanya digunakan untuk mengeliminasi pertumbuhan mikroorganisme khususnya bakteri. Konsentrasi triclosan pada sabun batang biasanya 0,1-0,45%, namun kebanyakan menggunakan pada konsentrasi 0,3%. Meskipun triclosan memiliki efektifitas yang baik dalam mengeliminasai bakteri pada kulit, namun penggunaan jangka panjang dapat menyebabkan resistensi bakteri 7 .
Efek samping resistensi bakteri dapat dihindari dengan penggunaan antibakteri berbasis herbal atau bahan alam. Penggunaan bahan alam dipercaya dapat meminimalkan efek samping yang tidak diharapkan dengan aktivitas yang baik 8 . Beberapa bahan alam yang terkandung dalam sabun batang adalah daun sirih ( Piper betle ), sereh ( Cymbopogon citratus ), bunga melati ( Jasminum  officinale ), dan buah papaya ( Carica papaya ). Keempat bahan alam tersebut terbukti memiliki aktivitas antibakteri terhadap S. aureus 9-12 . Perbandingan aktivitas antibakteri sabun batang herbal yang mengandung daun sirih (DS), sereh (SR), bunga melati (BM), dan buah pepaya (BP) dengan sabun batang non-herbal yang mengandung triclosan belum diketahui secara jelas. Penelitian ini dimaksudkan untuk mengetahui perbandingan aktivitas antibakteri dari sabun batang herbal dengan sabun batang no-herbal.

## 2.  Metode
Jenis penelitian yang digunakan adalah penelitian eksperimental. Penentuan aktivitas antibakteri sabun batang dilakukan dengan metode difusi agar menggunakan cakram kertas.
2.1.  Alat Alat yang digunakan dalam penelitian ini  adalah  Neraca  analitik  (Fujitsu), erlenmeyer (Pyrex®), inkubator (Yenaco), cawan petri (Anormax), tabung reaksi (Pyrex®), mikropipet (Secorex), autoklaf, jangka sorong (Measuring), gelas ukur (Pyrex®), beaker glass (Pyrex®), spreader (Pyrex), kertas cakram steril dan magnetic stirrer (Faithful).
2.2.  Bahan Bahan yang digunakan adalah bakteri Staphylococcus aureus ATCC 29213 (Laboraturium Mikrobiologi Bioteknologi Farmasi UNPAD Jatinangor), Nutrient Agar (Oxoid), Nutrient Broth (Oxoid), aquadest steril, sabun batang herbal yang mengandung daun sirih (DS), sereh (SR), bunga melati (BM), dan buah pepaya (BP), sabun batang
non herbal yang mengandung triclosan (Tc1, Tc2, Tc3, Tc4), Na-CMC 1%, dan kapsul klindamisin (Novel).
2.3.  Prosedur 2.3.1. Pembuatan media
Nutrien agar ditimbang menggunakan timbangan analitik sebanyak 6 gram. Kemudian ditambahkan akuades steril sebanyak 200 mL kedalam labu erlenmeyer . Kemudian dihomogenkan menggunakan magnetic stirrer pada suhu 90  ºC dengan kecepatan putaran 200 rpm sampai larut sempurna hingga larutan menjadi jernih, lalu ditutup menggunakan sumbat. Setelah itu sterilkan dengan menggunakan autoklaf pada suhu 121ºC selama 15 menit 13 .
2.3.2. Pembuatan  larutan  0,5  McFarland (McF) Larutan  standar  McFarland  skala  0,5 dibuat dengan 0,05 mL larutan barium klorida 1% dalam akuades dicampurkan dengan asam sulfat hingga volume 10mL. Larutan standar McF  0,5  digunakan  untuk  membandingkan kekeruhan biakan bakteri dalam medium cair 14 .
2.3.3. Pembuatan larutan pembanding Klindamisin Pembuatan larutan pembanding klindamisin dilakukan dengan menggunakan klindamisin kapsul 300 mg. Larutan pembanding dibuat dengan konsentrasi yang sama dengan konsentrasi sampel sabun yaitu 1,25%, 0,625%, 0,312%, 0,156%, dan 0,078%. Klindamisin dikeluarkan dari kapsul kemudian dicampurkan dengan larutan Na- CMC 1% 15 .
2.3.4. Pembuatan suspensi bakteri S. aureus
Suspensi bakteri dibuat dengan cara kultur bakteri sebanyak satu ose diinokulasikan dalam media nutrient broth (NB) kemudian diinkubasi pada 37 ºC selam 24 jam. Suspensi bakteri yang terbantuk kemudian dibandingkan kekeruhannya dengan larutan standar McF 0,5 16 .
2.3.5. Pembuatan larutan sampel sabun
batang Larutan   sampel   sabun batang herbal dan non herbal dibuat dalam 5 konsentrasi 1,25%, 0,625%, 0,312%, 0,156%, dan 0,078%. Pembuatan larutan sampel dilakukan dengan mengikis sabun batang menggunakan parutan kemudian ditimbang sebanyak 125 mg, 62,5 mg, 31,2 mg, 15,6 mg, dan 7,8 mg secara berturut-turut. Sabun batang yang telah diparut dimasukan kedalam tabung reaksi kemudian dilarutkan dalam akuades steril sebanyak 10 mL dengan pemanasan pada nyala api bunsen hingga didapat larutan homogen.
2.3.6. Uji aktivitas antibakteri sabun batang Pengujian aktivitas antibakteri dilakukan dengan metode difusi agar menggunakan cakram kertas. Sebanyak 20 mL nutrient agar dituangkan ke dalam cawan petri kemudian diamkan sampai memadat. Suspensi bakteri sebanyak 100 µL ditambahkan kedalam media agar yang telah memadat, kemudian diratakan menggunakan spreader . Cawan petri yang telah diinokulasi bakteri, kemudian diberi masing-masing cakram kertas yang telah ditetesi sampel larutan sabun batang sebanyak 20 µL dengan berbagai konsentrasi. Setelah itu cawan petri di kemas dan diinkubasi menggunakan inkubator pada suhu 37 ºC selama 24 jam.
Hasil inkubasi kemudian diamati, bila terbentuk zona bening disekitar cakram kertas maka menandakan adanya aktivitas antibakteri. Diameter zona bening diukur menggunakan alat jangka sorong 17 . Pengukuran aktivitas antibakteri larutan pembanding klindamisin dilakukan seperti perlakuan sampel sabun batang.
3.  Hasil dan Pembahasan Hasil uji aktivitas antibakteri sabun batang herbal dan non herbal menunjukan adanya zona hambat dari sabun batang tersebut dapat dilihat pada Tabel 1 (sabun batang herbal) dan Tabel 2 (sabun batang non-herbal).
Hasil aktivitas antibakteri yang efektif dapat dinilai berdasarkan diameter zona
Tabel 1. Hasil pengukuran diameter zona hambat sabun batang herbal
Konsentrasi (%) Diameter zona hambat (mm) DS SR BM BP 1,25 0,693 + 0,037 0,763 + 0,012 0,330 + 0,008 0,693 + 0,061 0.625 0,570 + 0,008 0,630 + 0,098 0,313 + 0,021 0,633 + 0,005 0,312 0,653 + 0,029 0,650 + 0,024 0,363 + 0,012 0,550 + 0,065 0,156 0,463 + 0,021 0,563 + 0,005 0,293 + 0,061 0,443 + 0,110 0,078 0,363 + 0,045 0,333 + 0,012 0,163 + 0,012 0,280 + 0,073 bening terbesar dengan konsentrasi terkecil. Diameter zona hambat dapat dipengaruhi oleh banyak faktor lain seperti kurang meratanya dari metode sebar suspensi bakteri yang ditanam di media, konsentrasi zat pada cakram, dan sensitivitas bakteri terhadap zat.  Klasifikasi  respon  hambat  pertumbuhan bakteri terdiri dari atas 4 kelompok yaitu respon lemah (0-3 mm), sedang (3-6 mm), dan kuat (>6 mm) 18 . Berdasarkan klasifikasi tersebut didapatkan hasil bahwa larutan sabun batang herbal dan non herbal memiliki daya hambat terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus . Dari uji aktivitas antibakteri sabun batang herbal dan non herbal menunjukan adanya zona hambat dari sabun batang tersebut dapat dilihat pada Tabel 1 dan Tabel 2.
Hasil pengukuran diameter zona hambat antibakteri pada sabun batang herbal semuanya menunjukkan hasil bahwa sampel memiliki aktivitas antibakteri. Sampel DS mengandung zat aktif daun sirih dimana daun sirih sendiri dikenal sebagai antibakteri terhadap beberapa jenis bakteri, dikarenakan mengandung senyawa fenolik dan derivat kavikol dalam minyak atsirinya yang memiliki daya antiseptik lima kali lebih efektif dibandingkan fenol biasa 19 . Sampel SR memiliki zat aktif dari daun serai ( Cymbopogon ciratus ) dapat digunakan sebagai bahan sabun alami karena
memiliki senyawa aktif flavonoid yang dapat berperan sebagai antifungi, antimikroba, dan antibakteri 20 . Sampel BM mengandung zat aktif bunga melati yang mengandung minyak atsiri dimana komponen dari minyak atsiri tersebut memiliki aktivitas antibakteri yang berasal  dari  senyawa  flavonoid,  saponin, alkaloid, dan tanin 21 . Pada sampel BP yang mengandung buah pepaya ( Carica papaya ) pada ekstak daging buah pepaya didapatkan senyawa antibakteri seperti alkaloid, flavanoid,  tannin,  steroid,  dan  saponin  yang berperan sebagai antibakteri 22 . Hasil pengukuran diameter zona hambat antibakteri pada sabun batang non- herbal yang mengandung triclosan yang dapat membunuh bakteri dengan menghambat enzim yang berfungsi dalam sintesis asam lemak sehingga mikroba kehilangan kekuatan dan fungsinya untuk berkembang biak. Triclosan telah menunjukkan kemampuannya dalam menghambat pertumbuhan bakteri gram positif maupun negatif 23 . Berdasarkan data pengukuran zona hambat sabun batang herbal dan non herbal terdapat  perbedaan diameter zona bening pada masing-masing konsentrasi disebabkan karena perbedaan zat aktif yang terkandung di dalamnya dan konsentrasi yang berbeda sehingga zona bening yang terbentuk akan berbeda-beda pada setiap konsentrasi.
Tabel 2. Hasil pengukuran diameter zona hambat sabun batang non-herbal Konsentrasi (%) Diameter zona hambat (mm) Tc1 Tc2 Tc3 Tc4 1,25 0,690 + 0,049 0,640 + 0,016 0,830 + 0,008 0,880 + 0,073 0.625 0,650 + 0,024 0,490 + 0,033 0,760 + 0,024 0,793 + 0,053 0,312 0,643 + 0,021 0,440 + 0,016 0,620 + 0,041 0,693 + 0,045 0,156 0,503 + 0,078 0,400 + 0,033 0,473 + 0,053 0,583 + 0,061 0,078 0,393 + 0,061 0,323 + 0,012 0,443 + 0,005 0,510 + 0,057
Dari hasil data tersebut Konsentrasi Hambat Minimum (KHM) pada sabun batang herbal dan non herbal yang dapat membunuh bakteri Staphylococcus aureus yaitu pada konsentrasi 0,078%. Jika dilihat dari nilai rata-rata seluruh sampel dengan Konsentrasi Hambat Minimum (KHM) dengan kosentrasi 0,078% zona hambat sabun batang non herbal lebih besar dari pada sabun batang herbal. Sehingga dapat dikatakan bahwa sabun batang non herbal lebih efektif dibandingkan sabun herbal dalam menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus .
4.  Kesimpulan Kesimpulan dari seluruh sampel sediaan sabun batang yang diteliti memiliki aktivitas antibakteri terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus ATCC 29213. Konsentrasi Hambat Minimum (KHM) sabun batang herbal dan sabun non herbal terhadap bakteri Staphylococcus aureus terdapat pada konsentrasi 0,078%. Perbandingan efektivitas antibakteri sabun batang herbal dan non- herbal yaitu lebih efektif sabun batang non- herbal dalam menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus , karena pada konsentrasi terkecil sabun batang non herbal memiliki nilai rata-rata diameter zona hambat nya lebih besar dibandingkan sabun herbal. Semua sampel termasuk kedalam klasifikasi katagori lemah.

## Referensi
1.  Zamli, Ryadinency R, Yuliastuti S, and  Montolalu  FC.  Personal  Hygiene Relationship with Symptom of Skin Disease in Scavengers. Journal Wetenskap Health. 2023; 4(1): 1-4.
2.  Kasenda J C, Yamlean PVY, dan Lolo WA. Ekstrak Etanol Daun Ekor Kucing (Acalypha  hispida  Burm.F)  Terhadap Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus aureus . PHARMACON Jurnal Ilmiah Farmasi. 2016; 5(3): 40–47.
3.  Irjayanti A, Wambrauw A, Wahyuni I, dan Maranden AA. Personal Hygiene dengan Kejadian Penyakit Kulit. Jurnal Ilmiah Kesehatan Sandi Husada. 2023; 12(1): 169-175.
4.  Puji W, Wicaksana AW, dan Novalina D. Literature Review: Efektivitas Madu dalam Menghambat Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus aureus . Journal of Mandalika Literature. 2022; 3(1): 102- 105.
5.  Kurniawan HM, Zuhdi N, dan Nasution AN. Uji Sensitivitas Antibiotik Terhadap Bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus secara In Vitro. Prosiding Seminar Nasional Teknologi Komputer dan Sains. 2023; 1(1): 1-7.
6. Nurrosyidah IH, Asri M, dan Ma’ruf AF. Uji Stabilitas Fisik Sediaan Sabun Padat Ekstrak Rimpang Temugiring ( Curcuma heyneana Valeton & Zijp). Pharmacy. 2019; 16(2): 209-215.
7. Giuliano CA, and Rybak MJ. Efficacy of Triclosan as an Antimicrobial Hand Soap and Its Potential Impact on Antimicrobial Resistance:  A Focused Review. Pharmacotherapy: The Journal of Human Pharmacology and Drug Therapy. 2015; 35(3): 328-336.
8.  Tiwari M, Pandey A, Agrawal A, and Dubey GP. Herbal Sources Of Antibacterial Potential: A Review. World Journal Of Pharmacy And Pharmaceutical Sciences. 2014; 3(7): 388-399.
9.  Ngamsurach P and Praipipat P. Antibacterial activities against Staphylococcus aureus and Escherichia coli of extracted Piper betle leaf materials by  disc  diffusion  assay  and  batch experiments. RSC Advances. 2022; 12: 26435-26454.
10. Naik  MI,  Fomda  BA,  Jaykumar  E, and Bhat JA. Antibacterial activity of lemongrass ( Cymbopogon citratus ) oil against some selected pathogenic bacterias.  Asian  Pacific  Journal  of Tropical Medicine. 2010; 3(7): 535-538.
11. Al-Khazraji SM. Evaluation of Antibacterial Activity of Jasminum officinale. IOSR Journal of Pharmacy and Biological Sciences. 2015; 10(1): 121- 124.
12. Dagne E, Dobo B, and Bedewi Z. Antibacterial Activity of Papaya ( Carica papaya ) Leaf and Seed Extracts Against
some Selected Gram-Positive and Gram- Negative Bacteria. Pharmacognosy Journal. 2021; 13(6S): 1727-1733.
13. Fuadah L, Nugraha D, dan Yusuf AL. Uji Aktivitas Antibakteri Granulasi Getah Buah Pepaya( Carica papaya L.) terhadap Bakteri Staphylococcus aureus . Pharmacy Genius. 2023; 2(2): 113-118.
14. Aviany HB dan Pujiyanto S. Analisis Efektivitas Probiotik di dalam Produk Kecantikan sebagai Antibakteri terhadap Bakteri Staphylococcus epidermidis . Berkala Bioteknologi. 2020; 3(2): 24-30 15. Kamal SE dan Saputri DS. Uji Aktivitas Infusa Daun Lidah Buaya ( Aloe Veral .) terhadap Propionibacterium acnes Penyebab Jerawat. Jurnal Farmasi Sandi Karsa. 2018; 4(7):1–4.
16. Ramadhani A, Saadah S, dan Sogandi. Efek Antibakteri Ekstrak Daun Cengkeh
( Syzygium aromaticum ) terhadap Escherichia coli dan Staphylococcus aureus . Jurnal Bioteknologi dan Biosains Indonesia. 2020; 7(2): 203-214.
17. Katrin D, Idiawati N, dan Sitorus B. Uji Aktivitas Antibakteri dari Ekstrak Daun Malek ( Litsea graciae Vidal ) terhadap Bakteri Stapylococcus aureus dan Escherichia coli . Jurnal Kimia Khatulistiwa. 2015; 4(1): 7-12.
18. Oktavia N dan Pujiyanto S.Isolasi dan  Uji  Antagonisme  Bakteri  Endofit Tapak Dara ( Catharanthus roseus L.)

## Terhadap Bakteri
Escherichia coli dan Staphylococcus aureus . J. Berkala Bioteknologi. 2018; 1(1): 6–12.
19. Bustanussalam B, Apriasi D, Suhardi E, dan Jaenudin D. Efektivitas Antibakteri Ekstrak Daun Sirih ( Piper betle Linn) Terhadap Staphylococcus aureus ATCC 25923.  Fitofarmaka:  Jurnal  Ilmiah Farmasi. 2015; 5(2): 58–64.
20. Jalaluddin J, Aji A, dan Nuriani, S. Pemanfaatan Minyak Sereh ( Cymbopogon nardus L) sebagai Antioksidan pada Sabun Mandi Padat. Jurnal Teknologi Kimia Unimal. 2018; 7(1): 52-60.
21. Adiwibowo MT. Aditif Sabun Mandi Berbahan Alami: Antimikroba Dan Antioksidan. Jurnal Integrasi Proses.

## 2020; 9(1), 29–36.
22. Dimpudus SA, Yamlean PVY, dan Yudistira  A.  Formulasi  Sediaan  Sabun Cair Antiseptik Ekstrak Etanol Bunga Pacar Air ( Impatiens Balsamina L.) dan Uji Efektivitasnya Terhadap Bakteri Staphylococcus Aureus Secara in Vitro. Pharmacon. 2017; 6(3): 208–215.
23. Yazdankhah SP, Scheie AA, Høiby EA,  Lunestad  BT,  Heir  E,  Fotland  TØ, Naterstad K, and Kruse H. Triclosan and antimicrobial resistance in bacteria: an overview. Microb Drug Resist. 2006;12(2): 83-90.