Menara Perkebunan 2013 81(1), 15-21
Pengaruh periode pra-kondisi dan penutupan sungkup terhadap daya hidup planlet karet ( Hevea brasiliensis Muell. Arg)
Effect of pre-condition period and vessel closure on the survival rate of  rubber (Hevea brasiliensis Muell. Arg ) plantlets
Masna Maya SINTA *) , NURHAIMI-HARIS & SUMARYONO
Balai Penelitian Bioteknologi Perkebunan Indonesia,  Jl. Taman Kencana No. 1, Bogor 16128 Indonesia
Diterima tanggal 7 Januari 2013/disetujui tanggal 27 Maret 2013

## Abstract
Acclimatization of plantlets is a critical stage in the micropropagation  of  many  plants.  An  experiment  was conducted to determine the effect of pre-condition period and  vessel  closure  on  the  growth  and  survival  rate  of rubber  ( Hevea  brasiliensis Muell.Arg.)  plantlets  derived from  in  vitro  microcutting  during  acclimatization. Plantlets  were  planted  in  plastic  pots  containing  mixed growing  media  after  being  conditioned  in ex  vitro environment  for  0,  3  and  6  days.    Five  closure  vessel treatments were closed pots placed in opened container, opened  pots  in  closed  glass  container,  closed  pots  in closed  glass  container,  opened  pots  in  closed  plastic container,  and  closed  pots  in  closed  plastic  container. Observation  on  leaf  conditions,  rooting  frequency,  and plant  height  were  conducted  at  1.5  months  and  on  the percentage of survive plantlets at 1.5 and 3 months after acclimatization.  The  results  showed  that  pre-condition was required to increase survival rate and growth of the plantlets.  Pre-condition period of six days gave a higher survival rate than 0 and 3 days which reached 100% and 93% on opened pot in closed plastic container and closed pot  in  opened  container,  respectively  after  1.5  months and  was  reduced  to 80%  after  three  months  of acclimatization. The highest formation of new leaves and roots  were  also  obtained  on  six  days  pre-condition period. Plantlets with pre-condition for six days and were planted  on  closed  pots  in  an  opened  container  had  the best  rooting  frequency  which  was  90%.  The  result showed  that    the  highest  survival  rate  (80%)  of  rubber plantlets  after  three  months  was  obtained  when  the plantlets were pre-conditioned in ex vitro conditions for six  days  before  acclimatization  and  planted  on  opened pots  in  a  closed  plastic  container  or  closed  pots  in  an opened container.
[Keywords : Pre-condition,  in  vitro,    rootstock,  vessel closure, acclimatization]

## Abstrak
Aklimatisasi  planlet  merupakan  tahap  kritis  dalam mikropopagasi tanaman. Penelitian dilakukan untuk me- nentukan  pengaruh  periode  pra-kondisi  dan  penyung- kupan  terhadap  pertumbuhan  dan  daya  hidup  planlet karet ( Hevea brasiliensis Muell.Arg.) asal stek mikro ( in vitro microcutting ) selama  aklimatisasi.  Planlet  ditanam pada  pot  plastik  berisi  campuran  media  tanam  setelah dikondisikan lebih dahulu pada lingkungan luar selama 0, 3  dan  6  hari.  Lima  perlakuan  penyungkupan  adalah penanaman   planlet  pada  pot  tertutup diletakkan dalam wadah terbuka, pot  terbuka  dalam wadah  kaca tertutup,
pot  tertutup  dalam  wadah  kaca  tertutup,  pot  terbuka dalam  wadah  plastik  tertutup  dan  pot  tertutup  dalam wadah plastik tertutup. Pengamatan keadaan daun, pem- bentukan  akar  dan  tinggi  tanaman  dilakukan  pada  1,5 bulan,  sedangkan  persentase  planlet  yang  hidup  diamati pada 1,5 dan 3 bulan setelah aklimatisasi. Hasil penelitian menunjukkan  bahwa  periode  pra-kondisi  diperlukan untuk  meningkatkan  daya  hidup  dan  pertumbuhan planlet.  Pra-kondisi  selama enam  hari  memberikan  daya hidup  planlet  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan  0  dan  3 hari  yaitu  100%  dan  93%  pada  perlakuan  penanaman pada  pot  terbuka  dalam  wadah  plastik  tertutup  dan  pot tertutup  dalam  wadah  terbuka  setelah  1,5  bulan  dan menjadi 80% setelah tiga bulan. Penambahan daun baru dan  pembentukan  akar  tertinggi  juga  terdapat  pada perlakuan  pra-kondisi  enam  hari.  Perlakuan  pra-kondisi enam  hari  dengan  pot  tertutup  yang  diletakkan  dalam wadah  terbuka  memperlihatkan  persentase  pembentukan akar  yang  paling  baik  yakni  90%.  Hasil  peneltian  me- nunjukkan    bahwa  daya  hidup  planlet  karet  tertinggi (80%)    pada  umur  tiga  bulan  diperoleh  apabila  planlet dipra-kondisi pada lingkungan ex vitro selama enam hari, kemudian ditanam pada pot terbuka dalam wadah plastik tertutup atau pot tertutup dalam wadah terbuka.
[Kata  kunci:  Pra-kondisi, in  vitro ,  batang    bawah, penyungkupan, aklimatisasi]

## Pendahuluan
Seiring  dengan  meningkatnya  kebutuhan batang bawah tanaman karet, ketersediaan biji tidak mencukupi lagi karena selain tergantung pada jenis klon  tertentu  juga  pada  musim  biji  yang  hanya berlangsung  satu  kali  dalam  setahun.    Kelemahan lain penggunaan bibit karet  asal biji sebagai batang bawah  adalah  adanya  keragaman  batang  bawah sehingga potensi produksi dan karakter unggul lain dari batang atas tidak muncul karena ada perbedaan tingkat  juvenilitas.  Perbanyakan  klonal  bahan tanam  karet  melalui  stek  mikro  pada  lingkungan kultur in vitro ( in vitro microcutting ) telah berhasil dilakukan  menggunakan  eksplan  yang  berasal  dari tanaman asal biji (Carron et al. , 2000; Carron et al. , 2003). Bibit  karet  yang  dihasilkan melalui teknik ini  memiliki  perakaran  yang  kuat  dan  kokoh. Pertanaman  muda  karet  asal  bibit  stek  mikro menunjukkan  pertumbuhan  yang  seragam  dan memiliki bentuk konikal pada batang bagian bawah (Carron et  al. ,  2000;  Carron et  al. ,  2003)  dan mampu memproduksi  lateks 5,8 - 17% lebih tinggi
*) Penulis korespondensi: herculepoirot90@yahoo.com
Pengaruh periode pra-kondisi dan penutupan sungkup terhadap …….. (Sinta et al .)
dibandingkan dengan bibit asal okulasi (Dibi et al ., 2010).  Adaptasi  teknik  stek  mikro  karet  di  daerah tropik  (Nurhaimi-Haris et  al .,  2008)  menghadapi berbagai  kendala, salah  satunya adalah rendahnya daya hidup planlet saat diaklimatisasi (Sumaryono et al ., 2008). Masalah yang sama juga dialami oleh berbagai  jenis  tanaman  saat  planlet  dipindah  ke kondisi ex vitro (Hazarika, 2003). Pemindahan  planlet  dari  kultur in  vitro ke lingkungan ex  vitro dengan  kelembaban  relatif rendah,  intensitas  cahaya  yang  tinggi  dan  kondisi planlet  autotrof  memerlukan  suatu  tahap  adaptasi agar  planlet  tetap  hidup  dan  berkembang (Pospisilova et  al. ,  2007).    Perlakuan  pra-kondisi atau hardening yakni  meletakkan  planlet  yang masih dalam tabung tertutup di lingkungan luar ( ex vitro )  bertujuan  untuk  memaparkan  planlet  ke lingkungan luar terutama fluktuasi suhu dan inten- sitas cahaya  yang  ekstrem  tetapi  tanpa  kehilangan air karena masih dalam tabung tertutup.  Perlakuan pra-kondisi juga telah dilakukan dengan hasil yang baik pada aklimatisasi planlet tembakau (Kadlecek et al ., 2001), krisan (Nuraini, 2004), dan Bambusa tulda (Mishara et al. , 2011). Di samping faktor lingkungan luar, komposisi media  tumbuh  juga  berpengaruh  terhadap  pertum- buhan  dan  daya  hidup  planlet  pada  tahap  aklima- tisasi.  Penelitian  terdahulu  menunjukkan  bahwa penggunaan  campuran  media  tanah, cocopeat , pupuk  kandang  dan  zeolit  dengan  perbandingan 6:2:1:1  (v/v)  dengan  lama  penyungkupan  enam minggu  meningkatkan  daya  hidup  planlet    karet asal stek mikro hingga mencapai 73,3% pada umur 1,5 bulan (Sumaryono et al ., 2012). Namun, untuk produksi  masal  bibit  kultur  jaringan  tanaman secara  komersial,  persentase  daya  hidup  tersebut masih dianggap rendah.
Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk  menentu- kan  pengaruh  periode  pra-kondisi  dan  penyung- kupan  terhadap  pertumbuhan  dan  daya  hidup planlet  karet  hasil  stek  mikro  selama  aklimatisasi ke lingkungan ex vitro .

## Bahan dan Metode

## Bahan tanaman
Planlet karet yang digunakan dalam penelitian ini adalah hasil stek mikro karet genotipe 2 dan 63 setelah  mengalami  induksi  akar.  Kedua  genotipe tersebut  adalah  genotipe  yang  paling  responsif dalam  kultur  stek  mikro  karet  yang  diseleksi  dari 100  genotipe terpilih  asal  biji  (Nurhaimi-Haris  & Carron,  2007).  Pra-kondisi  dilakukan  dengan meletakkan  planlet  yang  masih  berada  dalam tabung  kultur  (Gambar  1a)  di  lingkungan  luar  ( ex vitro )  selama  0,  3  dan  6  hari  sebelum  diaklima- tisasi.  Perlakuan  pra-kondisi  dan  aklimatisasi dilakukan  di  rumah  plastik  di  bawah  naungan
paranet  yang  dilengkapi  dengan sprinkler untuk menurunkan suhu lingkungan pada saat udara panas di siang hari. Planlet dicuci hingga bersih dari sisa medium  dan  direndam  dalam  fungisida  Benlate 0,2%  selama  satu  menit  untuk  mencegah  konta- minasi  saat  aklimatisasi.  Ujung  daun  dipotong untuk mencegah transpirasi ber-lebihan dan sebagai penanda munculnya daun baru.
Pencatatan  data  awal  dilakukan  untuk  me- ngetahui  kondisi  planlet  pada  saat  aklimatisasi. Kondisi awal planlet yang diamati antara lain kelas akar,  jumlah  akar,  kelas  warna  daun  dan  tinggi planlet.  Pengamatan  warna  daun  dilakukan  meng- gunakan bagan warna IRRI (Anonim, 2006) untuk mengkuantitatifkan  tingkat  kehijauan  warna  daun. Daun  dengan  pigmentasi  terendah  (hijau  muda) berada  pada  kelas  dua  sedangkan  pigmentasi  ter- tinggi  (hijau  tua)  pada  kelas  lima.  Planlet  ditanam dalam  pot  plastik  bening  berbahan polyethylene terephalate (tinggi  11  cm,  diameter  8  cm)  dan dipindah ke dalam polibeg (20 cm x 30 cm) setelah dua bulan.  Media yang digunakan dalam penelitian ini  adalah  campuran  tanah, cocopeat ,  pupuk  kan- dang dan zeolit dengan perbandingan 6:2:1:1 (v/v) (Sumaryono et  al .,  2012).  Pot  kultur  kemudian diletakkan  dalam  wadah  plastik  (panjang  44  cm, lebar  30  cm,  tinggi  15  cm)  dan  wadah  kaca (panjang  53  cm,  lebar  30  cm,  tinggi  36  cm).    Pot kultur  diletakkan  dalam  rumah  plastik  mengguna- kan paranet dengan tingkat naungan 60%.

## Desain penelitian
Jumlah  planlet  yang  digunakan    sebanyak  225 planlet  dengan    tiga  perlakuan  periode  pra-kondisi yaitu  0,  3  dan  6  hari,  serta  lima  perlakuan penyungkupan  yaitu  pot  tertutup  diletakkan  dalam wadah  plastik  terbuka,  pot  terbuka  dalam  wadah kaca  tertutup  (Gambar  2a),  pot  tertutup  dalam wadah  kaca  tertutup,  pot  terbuka  dalam  wadah plastik  tertutup,  dan  pot  tertutup  dalam  wadah plastik tertutup (Gambar 2b). Penelitian ini dilaku- kan  menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap (RAL)  dengan  15  ulangan  tiap  perlakuan.  Daya hidup planlet diamati pada 1,5 dan 3 bulan setelah aklimatisasi.  Parameter  pertumbuhan  planlet  yakni kondisi  daun,  tinggi  planlet  dan  akar  diamati setelah  1,5  bulan.  Kondisi  daun  ditentukan  ber- dasarkan  kerontokan  daun  dan  terbentuknya  daun baru,  dengan  nilai    0  =  daun  rontok  (tanpa  daun), 1  =  daun  lama  (belum  terbentuk  daun  baru), 2 = terbentuk daun baru.

## Hasil dan Pembahasan
Daya hidup planlet karet hasil stek mikro saat aklimatisasi semakin meningkat dengan meningkat- nya periode pra-kondisi (Gambar 3). Setelah 1,5 b.
bulan,  daya  hidup  paling  rendah  tampak  pada perlakuan  tanpa  pra-kondisi  (0  hari),  dengan  rata- rata  40-46%.  Daya  hidup  planlet  dengan  pra- kondisi  tiga  hari  berkisar  antara  60  dan  73%  dan dengan  pra-kondisi  enam  hari  berkisar  73  dan 100%.  Kondisi planlet pada umur 1,5 bulan setelah diaklimatisasi  disajikan  pada  Gambar  1.  Planlet beradaptasi  pada  lingkungan  aklimatisasi  selama periode  pra-kondisi,  dengan  medium  pertumbuhan masih seperti kondisi in vitro . Pada perlakuan pra- kondisi  planlet  telah  terpapar  pada  lingkungan ex vitro ,  tetapi  masih  berada  dalam  botol  dengan media  kultur  yang  kaya  hara  mineral  dan kelembaban udara masih tinggi. Pra-kondisi selama enam hari paling baik dilakukan untuk meningkat- kan daya hidup planlet karet. Kondisi ini memung- kinkan planlet beradaptasi terhadap ling-kungan ex vitro secara  bertahap  sebelum  dipindah  ke  media baru.  Kondisi  lingkungan  aklimatisasi  yang  sangat berbeda dengan kultur in vitro mempengaruhi daya hidup  planlet  (Pospisilova et  al. ,  2007).  Kondisi transisi diperlukan untuk meningkatkan daya hidup planlet,  yaitu  dengan  memanipulasi  lingkungan dengan penggunaan sungkup yang sesuai.
Penanaman  planlet  pada  pot  terbuka  dalam wadah  plastik  tertutup  dan  pot  tertutup  dalam
wadah  kaca  tertutup  mampu  mempertahankan kelembaban relatif yang tinggi dan menjaga kondisi lingkungan,  sehingga  mengurangi terjadinya  stres pada  saat  aklimatisasi.  Kondisi  lingkungan  yang sesuai  dikombinasikan  dengan  penguatan  planlet melalui  perlakuan  pra-kondisi  terbaik  mampu meningkatkan daya hidup. Daya hidup planlet karet dengan  sistem  tanam  pada  pot  terbuka  dalam wadah  plastik  tertutup  dan  pot  tertutup  dalam wadah  kaca  tertutup  (Gambar  2)  dengan  pra- kondisi enam hari menunjukkan daya hidup planlet yang  tinggi  (100%)  setelah  1,5  bulan  (Gambar  3). Persentase daya hidup planlet karet ini lebih tinggi dari hasil yang diperoleh sebelumnya yakni sekitar 73,3% (Sumaryono et al ., 2012).
Beberapa  penelitian  adaptasi  lingkungan  telah dilakukan  pada  tanaman  lain  untuk  meningkatkan daya   hidup  planlet.  Daya   hidup   planlet  krisan ( Chrisanthemum  morifolium )  meningkat  setelah dilakukan   pra-kondisi   selama  tujuh  hari   pada ruangan  tidak  berpendingin  (AC)  dan  diletakkan dekat  jendela  (Nuraini,  2004).  Aklimatisasi  ber- tahap  juga  telah  dilakukan  pada Bambusa  tulda Roxb.   dan  mampu   meningkatkan  daya  hidup planlet  selama  aklimatisasi  hingga  91%  (Mishara et al. , 2011).
Gambar 2.  Dua dari lima metode penyungkupan: (A). pot tertutup dalam wadah kaca tertutup, (B). pot terbuka dalam wadah plastik tertutup. Bar = 5 cm.
Figure 2.   Two out of five vessel closure treatments: (A). closed  pot  in  closed glass container, (B). open pot in closed plastic container. Bar = 5 cm.
Gambar 1.  Aklimatisasi  planlet  karet  asal  stek mikro, (A).  pra-kondisi  planlet  sebelum diaklimatisasi, (B). setelah 1,5 bulan dalam pot plastik, dan (C). setelah tiga bulan dalam polibeg. Bar = 1 cm.
Figure  1.  Acclimatization    of    rubber  plantlets  derived  from  microcutting,  (A).  pre-condition  of  plantlets    prior  to acclimatization, (B). after 1.5 month on a plastic pot, and (C). after three months on a  plastic bag. Bar = 1 cm .
b c a A B C b a A B
Pengaruh periode pra-kondisi dan penutupan sungkup terhadap …….. (Sinta et al .)
Gambar  4.  menunjukkan  kondisi  daun  planlet karet  setelah  1,5  bulan  berdasarkan  kerontokan daun  dan  kemunculan  daun  baru.  Pada  perlakuan pra-kondisi enam hari daun baru rata-rata terbentuk setelah 1,5 bulan. Pada pra-kondisi tiga hari umum- nya  belum  terbentuk  daun  baru  dan  tidak  terjadi kerontokan  daun,  sedangkan  pada  perlakuan  tanpa pra-kondisi  responsnya  bervariasi.  Tanpa  pra- kondisi,  planlet  yang  ditanam  dalam  pot  tertutup dalam  wadah  plastik  tertutup  sebagian  telah  me- miliki  daun  baru,  bahkan  lebih  baik  dibandingkan dengan penyungkupan yang sama pada pra-kondisi tiga  dan  enam  hari.  Kecuali  planlet  yang  ditanam dalam  wadah  plastik  tertutup  tanpa  pra-kondisi, kondisi daun planlet tidak banyak dipengaruhi  oleh cara  penyungkupan,  tetapi lebih dipengaruhi oleh ada  dan  tidak  adanya  tahapan  pra-kondisi.  Hal  ini bisa dimengerti karena daun mengalami perubahan selama  periode  pra-kondisi  yang menyebabkan daun menjadi lebih kuning.  Pra-kondisi planlet di- lakukan  pada  media in  vitro yang  sama,  yaitu media penginduksi akar (Nurhaimi-Haris & Carron, 2007) yang digunakan selama satu minggu. Periode induksi  akar  yang  lebih  lama  dikhawatirkan  akan menyebabkan perubahan warna daun menjadi lebih pucat (klorosis) atau rontok (nekrosis).
Pra-kondisi  juga  mempengaruhi  induksi  per- akaran.  Gambar 5 menunjukkan pengaruh periode pra-kondisi  terhadap  induksi  planlet  setelah  1,5 bulan.  Planlet  yang  diaklimatisasi  pada    umumnya belum berakar (82,2% belum berakar) meski sudah dilakukan  induksi  akar  selama  satu  minggu  saat kultur in  vitro .  Hal  ini  menunjukkan  bahwa penanaman  planlet  karet pada  pot  tertutup  dalam wadah  plastik  terbuka  dengan  pra-kondisi  enam hari mampu menginduksi akar hingga 81,8%.
Keberadaan  akar  penting  dalam  menunjang  daya hidup  planlet,  sehingga  pada  perlakuan  tersebut, daya  hidup  planlet  setelah  tiga  bulan  juga  masih tinggi,  yaitu  80%  setara  dengan  perlakuan  pena- naman  planlet  pada  pot  terbuka  dalam  wadah plastik  tertutup  (Gambar  5).  Planlet  yang  telah memiliki  akar  akan  lebih  mudah  beradaptasi  pada saat  aklimatisasi  sehingga  dilakukan  induksi  akar dalam  kondisi in  vitro pada  planlet  yang  belum berakar  sebelum  aklimatisasi  (Nizam  &  Te-Chato, 2009).
Penelitian  induksi  akar  juga  pernah  dilaku-kan oleh  Ebrahim et  al. (2007 ) pada  kopi  ( Coffea arabica L) untuk meningkatkan daya hidup planlet hingga 100%. Setelah tiga bulan dalam lingkungan ex  vitro ,  daya  hidup  planlet  karet  dengan  pra- kondisi  enam  hari  masih  tetap  paling  tinggi (Gambar  6).  Planlet  yang  mampu  beradaptasi dengan  baik  terhadap  kondisi  lingkungan  akan mampu  bertahan  hidup  dan  menjalankan  proses fisiologis dengan baik. Daya hidup tertinggi setelah tiga  bulan  pada  penelitian  ini  didapatkan  pada perlakuan  penanaman  planlet  pada  pot  tertutup dalam wadah plastik terbuka dan pot terbuka dalam wadah  plastik  tertutup,  dengan  daya  hidup  men- capai  80%.  Akar  terinduksi  dengan  baik  pada planlet  yang  ditanam  pada  pot  tertutup  dalam wadah  plastik  terbuka  dengan  pra-kondisi  enam hari selama 1,5 bulan (Gambar 5), sehingga planlet menjadi lebih kuat dan persentase kematian planlet rendah  pada  umur  tiga  bulan.  Daun  baru  pada perlakuan  penanaman  dalam  pot  terbuka  dalam wadah plastik tertutup  terbentuk setelah  1,5 bulan (Gambar  4),  oleh  karena  itu  daya  hidup  planlet tetap  tinggi  meskipun  induksi  akar  pada  perlakuan tersebut rendah (Gambar 5).
Gambar 3. Pengaruh periode pra-kondisi dan penyungkupan terhadap daya hidup planlet karet setelah 1,5 bulan. Lima perlakuan penyungkupan: (1). Pot tertutup dalam wadah plastik terbuka, (2). Pot terbuka dalam wadah kaca tertutup, (3). Pot tertutup dalam wadah kaca tertutup, (4). Pot terbuka dalam wadah plastik tertutup, dan (5). Pot tertutup dalam wadah plastik tertutup.
Figure 3.   Effect of pre-condition period and vessel closure on the survival rate of rubber plantlets after 1.5 month. Five vessel closure treatments: (1). Closed pot in open plastic container, (2). Open pot in closed glass container, (3). Closed pot in closed glass container, (4). Open pot in closed plastic container, and (5). Closed pot in closed plastic container .
1 2 Daya hi dup pada 1 ,5 bul an (% ) Survi val rate at 1 .5 m onth (% ) Periode pra-kondisi (hari) Pre-condition period (day)
Menara Perkebunan 2013 81(1), 15-21
1 2 ko nd is idaun Le af c on di tio n Periode pra-kondisi (hari) Pre-condition period (day) 1 2 Induk si a ka r (% ) Root ing induct ion (% ) Periode pra-kondisi (hari) Pre-condition period (day) 1 2 Daya hi dup pada 3 bu lan (% ) Survi val rate at 3 m onths (% ) Periode pra-kondisi (hari) Pre-condition period (day) Gambar  4.  Pengaruh  periode  pra-kondisi  dan  penyungkupan  terhadap  kondisi  daun  planlet  karet    setelah  1,5 bulan. Keterangan perlakuan penyungkupan sama dengan catatan pada  Gambar 3.  Kondisi daun: 0 = tanpa daun, 1= daun lama, 2 = terbentuk daun baru. Figure 4.  Effect of pre-condition period and vessel closure on the leaf conditions of rubber plantlets after 1.5 month. Description of vessel closure treatment is the same as the note at Figure 3.  Leaf conditions: 0=without leaf, 1=old leaves, 2=new leaves were formed.
Gambar  5.  Pengaruh  periode  pra-kondisi  dan  penyungkupan  terhadap  induksi  akar  planlet  karet  setelah
1,5 bulan. Keterangan perlakuan penyungkupan sama dengan catatan pada Gambar 3.
Figure 5.   Effect of pre-condition period and vessel closure on rooting induction of rubber plantlets after 1.5 month. Description of vessel closure treatments is the same as the note at Figure 3.
Gambar 6.  Pengaruh periode pra-kondisi dan penyungkupan terhadap persentase daya hidup planlet karet setelah tiga bulan.  Keterangan perlakuan penyungkupan sama dengan catatan pada Gambar 3.
Figure 6 .   Effect of pre-condition periods and vessel closure on the survival rate of rubber plantlets after three  months.  Description of vessel closure treatments is the same as the note at Figure 3.
Pengaruh periode pra-kondisi dan penutupan sungkup terhadap …….. (Sinta et al .)
Setelah  tiga  bulan  semua  planlet  telah  berakar dan  sebagian  besar  telah  membentuk  daun  baru berwarna  hijau  muda (Gambar  1c).  Penggunaan wadah  plastik  pada  penelitian  ini  lebih  baik dibandingkan  dengan  wadah    kaca,  hal  ini  diduga karena pada wadah yang terbuat dari kaca, suhu di dalam  wadah  meningkat.  Kaca  mampu  menahan panas,  sehingga  suhu  di  dalam  wadah  lebih  panas yang  berakibat  meningkatnya  kematian  planlet karet.
Aklimatisasi  merupakan  periode  kritis  setelah proses in  vitro di  laboratorium.  Perubahan  media dari  keadaan  heterotrof  menjadi  autotrof  serta perubahan lingkungan yang ekstrem dari lingkung- an  terkondisi  di  dalam  ruangan  ke  lingkungan  tak terkondisi di luar ruangan menyebabkan rendahnya daya  hidup  planlet  hasil  kultur in  vitro (Hazarika, 2003;  Pospisilova et  al. ,  2007).  Penelitian  untuk mengoptimalkan  aklimatisasi  dilakukan  oleh  Chen et  al .  (2006)  dengan  penggunaan  penutup  botol kultur berventilasi yang mampu meningkatkan daya hidup Scrophularia  yoshimurae hingga  66,7%. Perlakuan  pra-kondisi  pada  planlet  karet  hasil  stek mikro dilakukan untuk menguatkan planlet sebelum tahap  induksi  perakaran  dan  aklimatisasi,    serta untuk  menghilangkan  komponen  bahan  kimia tertentu  seperti  zat  pengatur  tumbuh  yang  ter- akumulasi pada saat kultur in vitro (Nurhaimi-Haris &  Carron,  2007).  Di  samping  itu,  peningkatan kualitas  planlet  karet  dapat  dilakukan  dengan menggunakan micro-box yang  tutupnya  dilengkapi filter  sehingga  pertukaran  udara  terjadi  dengan lebih baik (Nurhaimi-Haris et al ., 2011). Pengguna- an microbox tersebut  menyebabkan  planlet  mem- punyai  morfologi,  stomata  dan  kandungan  klorofil yang  lebih  baik  dibandingkan  dengan  planlet  yang ditumbuhkan dalam tabung tertutup rapat. Kualitas planlet  yang  baik  selama  proses in  vitro turut menentukan  keberhasilan  proses  aklimatisasi (Zobayed, 2005).

## Kesimpulan
Planlet  karet  hasil  stek  mikro  dengan  per- lakuan  pra-kondisi  selama  enam  hari  sebelum aklimatisasi memiliki daya hidup yang lebih tinggi dibandingkan  perlakuan  pra-kondisi  0  atau  3  hari. Planlet  karet  dengan  pra-kondisi  enam  hari  yang ditanam  pada  pot  terbuka  dalam  wadah  plastik tertutup atau pada pot tertutup dalam wadah plastik terbuka  memiliki  daya  hidup  tertinggi  yaitu  80% setelah  tiga  bulan,  sehingga  kedua  perlakuan  pe- nyungkupan  ini  dapat  direkomendasikan  untuk aklimatisasi planlet karet hasil stek mikro.

## Ucapan Terima Kasih
Ucapan  terima  kasih  disampaikan  kepada  PT Perkebunan Nusantara III atas  kerjasama penelitian yang dilakukan.

## Daftar Pustaka
Anonim  (2006). Bagan  Warna  Daun Diunduh  dari: http://www.knowledgebank.irri.org/indonesia/  Juknis BWD.pdf, [ 22 September 2011].
Carron  MP,  L  Lardet,  A  Leconte,  C  Boko,  BG  Dea  &
J  Keli  (2003).  Field  growth  and  rubber  yield  of Hevea brasiliensis (Muell. Arg.) from budded versus in vitro micropropagated plants from clone IRCA 18. In : Economou & Read (eds.). Proc the First Internat. Symp  on  Acclim  &  Establish  of  Micropropagated Plants p. 283-293.
Carron MP, Y Le Roux, J Tison, BG Dea,  V Caussanel,
J  Clair  &  J  Keli  (2000).    Compared  root  system architectures  in  seedlings  and in  vitro plantlets  of Hevea  brasiliensis ,  in  the  initial  years  of  growth  in the field. Plant & Soil 223(2), 73-85.
Chen  U,  CH  Hsia,  DC  Agrawall  &  HS  Tsay  (2006).
Influence  of  ventilation  closures  on  plant  growth parameters, acclimation and anatomy of leaf surface in Scrophularia yoshimurae Yamazaki - a medicinal plant native to Taiwan. Bot Studies 47 , 259-266.
Dibi K , C Boko,  S  Obouayeba,  M  Gnagne,  GB  Dea, MP Carron  &  AP  Anno  (2010).    Field  growth  and rubber  yield  of in  vitro micropropagated  plants  of clones  PR  107,  IRCA  18  and  RRIM  600  of Hevea brasiliensis (Muëll.  Arg.). Agric  Biol  J  North America 1(6), 1291-1298.
Ebrahim  N,  R  Shibli,  I  Makhadameh,  M  Shatnawi  &
A  Abu-Ein  (2007). In  vitro propagation  and in  vivo acclimatization  of  three  coffee  cultivars  ( Coffea arabica L.)  from  Yemen .  J World  Appl  Sci 2(2),
142-150.
Hazarika BN (2003).  Acclimatization of tissue-cultured plants. Current Sci 85(12), 1704-1712.
Kadlecek P, I Ticha, D Haisel, V Capkova & C Schafer (2001).  Importance  of in  vitro pretreatment  for ex vitro acclimatization and growth. Plant Sci 161, 695- 701.
Mishara Y, P Patel & SA Ansari (2011). Acclimatization and  micropropagation  of  micropropagated  plants  of Bambusa tulda Roxb. Asian J Exp Biol Sci 2(3), 498- 501.
Nizam  K  &  S  Te-Chato  (2009).  Optimizing  of  root induction in oil palm plantlets for acclimatization by some potent plant growth regulators (PGRs). J Agric Technol 5(2), 371-383.
Nuraini  (2004).  Upaya  aklimatisasi  planlet  krisan ( Chrisanthemum  morifolium ):  Pengaruh  prakondisi, media  tanam  dan  jenis  naungan. Tesis, Palembang,
Fakultas  Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam. Universitas Sriwijaya.
Nurhaimi-Haris  &  MP  Carron  (2007).  Toward  the development  of  rootstock  clones  for  high productivity  in  rubber  plants  ( Hevea  brasiliensis Muell.Arg.). Progress Report . Indonesian Biotechnol Res Inst for Estate Crops
Nurhaimi-Haris,  Sumaryono,  PD  Kasi,  Siswanto, Sumarmadji  &  MP  Carron  (2008).  Achievements  in the  implementation  of  microcutting  technology  for clonal  rubber  rootstock  propagation. In :  Proc Internat  Workshop  Rubber  Planting  Materials. Bogor, 28-29 October 2008, p.117-128.
Nurhaimi-Harris, NS Ayuningtyas & JH Suparto (2011). Pengaruh  ventilasi  terhadap  morfologi,  stomata  dan kadar  klorofil  tunas  karet  yang  diperbanyak  melalui microcutting. Menara Perkebunan 79(2), 58-64.
Pospisilova  J,  H  Synkova,  D  Haisel  &  S  Semoradova (2007).  Acclimation  of  plantlets  to ex  vitro conditions:  Effects  of  air  humidity,  irradiance,
CO 2 concentration and abscisic acid (a review). Acta
Hort 748, 29-38.
Sumaryono,  PD  Kasi,  Nurhaimi-Haris  &  MP  Carron (2008).  Aklimatisasi  planlet  karet  yang  diperbanyak melalui  teknologi  microcutting. Dalam : Pros Lokakarya  Nasional  Agribisnis  Karet ,  Yogyakarta, 20-21 Agustus 2008, p.323-329.
Sumaryono,  MM  Sinta  &  Nurhaimi-Haris  (2012).  Daya hidup  planlet  karet  asal in  vitro microcutting pada berbagai  periode  penutupan  sungkup  plastik  dan komposisi media tumbuh. Menara Perkebunan 80(2),
25-31.
Zobayed  SMA  (2005).  Ventilation  in  micropopagation. In :  T.  Kozai et  al .  (eds.) Photoautotropic  (Sugar- Free  Medium)  Micopopagation  as  A  New  Micro- propagation and Transplant Production System . The Netherlands , Springer. p.147-186.