## BIOEDUSAINS: Jurnal Pendidikan Biologi dan Sains
Volume 5, Nomor 2, Desember 2022 e-ISSN: 2598-7453 DOI: https://doi.org/10.31539/bioedusains.v5i2.3167

## PENGGUNAAN EKSTRAK BUAH KECUBUNG SEBAGAI BAHAN PEMBUNUH HEWAN PERCOBAAN PENGGANTI CHLOROFORM
Aprira 1 , Lies Winarsih 2 , Helmiyetti 3
Universitas Bengkulu 1,2,3
aprira@unib.ac.id 1

## ABSTRAK
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  efektivitas  penggunaan  ekstrak  etanol buah kecubung sebagai bahan pembunuh hewan percobaan (euthanasia) pengganti chloroform.  Metode  yang  digunakan  adalah  metode  deskriptif  dan  eksperimen. Hewan  percobaan  yang  digunakan  adalah  jangkrik,  kecoa  dan  katak.  Hasil penelitian menunjukkan bahwa  uji  euthanasia  dengan volume 10 ml pada hewan coba  kecoa  setelah  30  menit  didapatkan  hasil  kecoa  semuanya  mati  dan  LC50 didapatkan  pada  volume  5,44  ml  dengan  interval  4,59  hingga  6,24  ml.  Pada hewan  coba  jangkrik  setelah  20  menit  didapatkan  hasil  yaitu  pada  pada  10  ml hampir  semua  jangkrik  mati  dan  LC50  didapatkan  pada  volume  5,57  ml  dengan interval  3.83  hingga  6,69  ml.  Adapun  pada  hewan  coba  katak  setelah  20  menit didapatkan  hasil  semua  katak  mati  dari  volume  ektrak  terkecil  yaitu  2  ml. Simpulan,  ekstrak  buah  kecubung  dapat  digunakan  sebagai  alternatif  pengganti chloroform untuk bahan euthanasia hewan percobaan pada praktikum, hanya saja volume penggunaan ekstrak lebih banyak dari meggunakan chloroform.
Kata Kunci: Buah Kecubung, Euthanasia, Jangkrik, Katak, Kecoa

## ABSTRACT
This study aims to determine the effectiveness of using ethanol extract of amethyst fruit as an experimental animal killer (euthanasia) substitute for chloroform. The method  used is  descriptive and experimental methods. The experimental  animals used were crickets, cockroaches and frogs. The results showed that the euthanasia test with a volume of 10 ml on experimental cockroach animals after 30 minutes showed that all cockroaches were dead and the LC50 was obtained at a volume of 5.44 ml with intervals of 4.59 to 6.24 ml. In experimental animals, crickets  after 20  minutes  showed  that  at  10  ml,  almost  all  crickets  died  and  the  LC50  was obtained  at  a  volume  of  5.57  ml  with  intervals  of  3.83  to  6.69  ml.  As  for  the experimental  frogs,  after  20  minutes,  all  frogs  died  from  the  smallest  extract volume, which was 2 ml. In conclusion, amethyst fruit extract can be used as an alternative to chloroform for euthanasia of experimental animals in practicum, it's just that the volume of extract used is more than using chloroform.
Keywords: Amethyst Fruit, Euthanasia, Cricket, Frog, Cockroach

## PENDAHULUAN
Kegiatan  Tri  Darma  Perguruan  tinggi  di  laboratorium  Zoologi  yaitu kegiatan  pendidikan,  penelitian  dan  pengabdian  kepada  mayarakat  banyak mengggunankan  hewan  percobaan.  Hewan-hewan  tersebut  meliputi  jenis  jenis ikan, hewan hewan laut, serangga, ampibi reptil dan mamalia.Hewan coba adalah setiap  hewan  yang  di  pergunakan  pada  penelitian  biologis  dan  biomedik  yang dipilih  berdasarkan  syarat  atau  standar  dasar  yag  diperlukan  dalam  penelitian. Hewan coba pada penelitian digolongkan menjadi kelompok berdasarkan anatomi, kebiasaan hidup serta fisiologi yang hampir sama (Handajani, 2021).
Hewan  coba  sebelum  digunakan  sebagai  unit  uji  harus  melewati  proses eutanasia  (proses  mematikan  hewan  uji).  Eutanasia  dapat  dilakukan  dengan menggunakan chloroform, eter, halotan, metoksifuran nitrous oksida, CO, CO2, N dan sianida  (Mutiarahmi et  al., 2021).  Proses membunuh  hewan percobaan  yang berukuran  kecil  di  laboratorium  menggunakan  alat  bernama  killing  botol  dan menggunakan  kapas  yang  dibasahi  dengan  bahan  kimia  sebagai  bahan  untuk membunuh  hewan  percobaan  tersebut.Bahan  kimia  yang  biasa  digunakan  adalah chloroform.
Chloroform  adalah  bahan  kimia  yang  bersifat  racun. Senyawa  ini  terkenal karena  kemampuannya  untuk  bertindak  sebagai  anestesi  dan  berguna  di laboratorium  industri  dan  sains. chloroform  mengandung  zat  beracun,  dapat mengiritasi  mata,  kulit  dan  selaput  lendir  jika  tertelan,  terhirup  ataupun  dapat terpapar  (Lyo  et  al.,  2020). Efeknya  dapat  menyebabakan  kerusakan  organ  dan penyimpangan  detak  jantung. Pada  konsentrasi  tinggi,  terhirup  chloroform  dapat menekan sistem pernapasan, sehingga dapat menyebabkan kematian. Bahan kimia ini  juga  diduga  dapat  meningkatkan  risiko  kanker,  sehingga  bahan  ini  sangat berbahaya  bagi  pengguna  apalagi  bila  digunakan  secara  terus  menerus  dalam jangka  panjang.  Saat  ini  harga  bahan  kimia  semakin  mahal  dan  susah  dalam proses  pembelianya.  Oleh  karena  itu,  diperlukan  bahan    alternatif  dengan  fungsi serupa, namun berbahan dasar alami.
Kecubung  termasuk  tumbuhan  jenis  perdu.  Bentuk  bunganya  seperti terompet berwarna putih keunguan.Tanaman kecubung merupakan tanaman yang hidup  di  halaman.  Kecubung  banyak  ditemukan  di  daerah  Bengkulu  khusus  nya kabupaten Curup danKepahyang dan hanya tumbuh liar tanpa dimanfaatkan oleh masyarakat.  Tanaman  ini  juga  dapat  dijadikan  tanaman  hias.  Kecubung  ( Datura metel L.) merupakan tanaman yang mengandung berbagai senyawa kimia di setiap bagian  tanamannya  dari  akar,  tangkai,  daun,  bunga,  buah  dan  biji.  Bunga kecubung  juga  mengandung  senyawa  triterpenoid,  steroid,  flavonoid,  fenolat, tannin,  saponin  dan  alkaloid  (Patwasari,  2020). Tanaman  ini  memiliki  manfaat farmakologis  diantaranya  sebagai  anti  mikroba,  anti  fungi,  anti  inflamasi,  anti oksidan,  analgesik,  anastesi  dan  sebagainya  (Mahrani  et  al.,  2019).  Selain  itu tanaman  ini  dapat  dijadikan  salah  satu  bioinsektisida  karena  tanaman  kecubung adalah  tanaman  yang  mengandung  berbagai  senyawa  kimia  (Priwahyuni  et  al., 2020).
Banyak  masyarakat  yang  tidak  mengetahui  kegunaan  tanaman  kecubung sebagai  bioinsektisida, sehingga keberadaan tanaman ini diabaikan dan dianggap sebagai  racun  karena  penggunaan  yang  salah.  Tanaman  kecubung  sangat berpotensi sebagai bioinsektisida karena kandungan senyawa alkaloid dan steroid yang  dimiliki  dapat  menghambat  dan  menghentikan  pertumbuhan  serangga
(Wardianti  et  al.,  2020).  Berdasarkan  hal  tersebut,  maka  pada  studi  ini  peneliti melakukan  kajian  tentang  euthanasia  hewan  coba  dengan  menggunakan  bahan alternatif dari bahan alami yang murah dan relatif lebih aman bagi pengguna yaitu menggunakan ekstrak dari buah kecubung yang diektraksi ke dalam etanol teknis 96%  sebagai  bahan  pembunuh  hewan  coba  pengganti  chloroform  serta mengetahui  pengaruh  konsentrasi  ekstrak  buah  kecubung  terhadap  mortalitas hewan coba.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  menggunakan  model  penelitian  deskriptif  dan  eksperimen yang  dilakukan  di  laboratorium  Biologi  sub  lab  Zoologi  FMIPA  Universitas Bengkulu.Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  Buah  Kecubung, yang diambil di sekitar kota Bengkulu, Alkohol 96%, kertas saring Whatman 42, kain jala, kapas, jangkrik, kecoa katak, reagen meyer, reagen dragendrof, reagen, wagner, H 2 SO 4 4N. Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah oven, neraca, pisau/cuter, nampan, loyang, talenan, killing botol, pinset, erlemeyer, botol gelap corong sarung tangan, tabung reaksi, rak tabung reaksi pipet tetes, sarung tangan lateks dan masker.
Penelitian  ini  dimulai  dengan  pembuatan  ekstrak  etanol  buah  kecubung, dengan  langkah  yaitu  perajangan  buah  kecubung  lalu  dioven  dengan  suhu  35 o C selama 3 hari, buah kecubung yang telah kering dihaluskan menggunakan blender lalu  dii  timbang  dan  di  maserasi  selama  3  hari  dengan  alcohol  96%  dengan perbandingan  1  banding  3  dengan  alkohol.  Lalu  ekstrak  sdi  sring  dengan mengunakan kain dan kertas saring. Ekstrak disimpan dalam botol tertutup rapat.
Langkah  Selanjutnya  yaitu  melakukan  verifikasi  tanaman  buah  kecubung dan  uji  alkaloida  dengan  cara  ekstrak  diisikan  masing-masing  2  ml  ke  3  tabung reaksi  lalu  masing  masing  tabung  reaksi  di  tambahkan  3  tetes  H 2 SO 4 dan  4N  3 tetes.  Tabung  pertama  ditambahkan  reagen  wagner,  tabung  ke  dua  ditambahkan reagen dragendrof dan tabung ketiga  ditambahkan reagen mayer lalu  amati  yang terjadi.  Langkah  selanjutnya  yaitu  pengaplikasian  ekstrak  etanol  buah  kecubung ke hewan uji yaitu kecoa, jangkrik dan katak. Dengan cara masing masing hewan percobaan  di  lakukan  euthanasia  dengan  3  perlakuan  yaitu  P0  sebagai  kontrol negatif  dengan  penambahan  etanol  sebagai  bahan  eutanasianya  sebagai  blangko. P1  sebagai  kontrol  positif  menggunakan  chloroform  sebagai  bahan  euthanasia pembanding.  P2,  P3  dan  P4  adalah  perlakuan  dengan  ekstrak  buah  kecubung sebagai bahan euanasia.
Langkah  pelaksanaan  penelitian  diawali  dengan  mempersiapkan  hewan percobaan  serangga  jangkrik  masing-masing  berjumlah  10  individu,  kemudian dimasukkan  ke  dalam  alat  bernama kiliing botol.  Kapas  dibasahi  dengan  bahan euthanasia (etanol, chloroform dan ekstrak buah kecubung) dengan varisi volume 2,  4,  6,  8,  10  ml,  lalu  kapas  tersebut  di  masukkan  kedalam killing botol  dan  di tutup biarkan selama 10-20 menit. Setelah 20 menit diamati berapa jumlah hewan yang mati. Pada perlakuan ekstrak buah kecubung dilakukan dengan 3x ulangan. Tidak  berbeda  jauh  dengan  hewan  uji  pertama,  perbedaan  perlakuan  pada hewan  uji  lainnya  hanya  pada  jumlah  individu  dan  lama  perlakuan.  Hewan percobaan  serangga  kecoa  masing-masing  perlakuan  berjumlah  5  individu  dan katak  berjumlah  2  ekor.  Hewan  uji  tersebut  dimasukkan  ke  dalam kiliing botol.
Perlakuan untuk kecoa berlangsung selama 10 - 30 menit, sedangkan pada katak yaitu selama 10-20 menit.

## HASIL PENELITIAN
Penelitian ini menggunakan buah kecubung sebagai bahan euthanasia hewan percobba,Tanaman kecubung dilakukan pengujian verifikasi taksonomi tembuhan dan dinyatakan bahwa benar taksonominya bernama daerah kecubung dari spesies Datura  metel L.  yang  dinyatakan  di  surat  dengan  nomor  403/UN.30I2.LAB BIOLOGI/PM/2021.
Tabel 1. Hasil Analisa Alkaloida Sampel Pereaksi Hasil Ekstrak 2 ml + 3 tetes H 2 SO 4 + ReagenWagner Tidak ada endapan Ekstrak 2 ml + 3 tetes H 2 SO 4 + Reagen drgendrof Endapan putih kekuningan Ekstrak 2 ml + 3 tetes H 2 SO 4 + Reagen mayer Endapan merah jingga
Berdasarkan  hasil  analisa  pada  tabel  1,  hasil  uji  fitokimia  kecubung menunjukkan  bahwa  tumbuhan  ini  mengadung  alkaloid.  Ekstrak  buah  kecubung menunjukkan adanya endapan setelah diberi peraksi dragendrof dan mayer.
Data  mortalitas  hewan  percobaan  berdasarkan  hasil  eksperimen  yaitu jangkrik,  kecoa  dan  katak  setelah  dilakukan  proses  euthanasia  dengan  kontrol negatif  (P0)  perlakuan  menggunakan  blangko  (etanol),  kontrol  positif  (P1) perlakuan  menggunakan  bahan  chloroform  dan  perlakuan  ekstrak  etanol  buah kecubung  dengan  variasi  volume  2,4,6,8,10  ml  dan  3x  ulangan  adalah  sebagai berikut:
Tabel 2. Hasil Pengujian Mortalitas Hewan Uji Kecoa Variasi Volume (ml) N Jumlah Kecoa yang Mati Mortalitas Kecoa (%) P0 P1 P2 P3 P4 2 5 0 5 0 0 0 0 4 5 0 5 1 2 1 26.6 6 5 0 5 3 2 2 46.6 8 5 0 5 4 4 5 86.6 10 5 0 5 5 5 5 100
Tabel  2  memperlihatkan  bahwa  semakin  banyak  volume  ekstrak  kecubung yang ditambahkan, maka semakin tinggi persentase mortalitas kecoa.
Tabel 3. Hasil Mortalitas Hewan Uji Jangkrik Variasi Volume (ml) N Jumlah Jangkrikyang Mati Mortalitas Jangkrik (%) P0 P1 P2 P3 P4 2 10 0 10 0 0 0 0 4 10 0 10 2 2 3 43.0 6 10 0 10 6 5 5 53.3 8 10 0 10 8 7 9 80 10 10 0 10 9 10 10 93.3
Data  tabel  3  menunjukkan  bahwa  pada  jangkrik  yang  mendapat  perlakuan penambahan  ekstrak  buah  kecubung  mortalitasnya  meningkat  seiring  dengan meningkatnya jumlah volume ekstrak.
Table 4. Hasil Mortalitas Hewan Uji Katak
Variasi Volume (ml) N Jumlah Katak yang Mati Mortalitas Katak (%) P0 P1 P2 P3 P4 2 2 0 2 2 2 2 100 4 2 0 2 2 2 2 100 6 2 0 2 2 2 2 100 8 2 0 2 2 2 2 100 10 2 0 2 2 2 2 100
Hasil  pengujian  mortalitas  pada  katak  yang  mendapat  perlakuan  dengan penambahan  ekstrak  buah  kecubung  menunjukkan  bahwa  mortalitas  katak mencapai  nilai  100%. Dilihat  dari data kematian  hewan uji  pada kecoa, jangkrik dan  katak  yang  mengalami  kematian,  Sehingga  nilai  LC50  dapat  ditentukan dengan  metode  Probit  yaitu  menggunakan  program  aplikasi  SPSS  versi  22.0, sehingga  didapatkan  nilai  LC50  untuk  hewan  uji  kecoa  adalah  5,44  dengan interval 4,59 ml hingga 6,24 ml, Nilai LC 50 pada Jangkrik adalah 5,57ml dengan interval 3,83 ml hingga 6,695 ml. Karena mortalitas pada katak 100%, maka tidak bisa dihitung LC50 dari katak.
Data hasil uji hewan, baik  pada kecoa, jangkrik dan katak pada  P0 kontrol negatif  tidak  ada  data  kematian  hewan  percobaan.Hal  ini  dikarenakan  yang  di tambahkan hanya etanol tidak ada ekstrak dari buah kecubung di dalamnya. Pada P1 kontrol positif didapatkan data bahwa semua hewan percobaan mati dari mulai volume terkecil yaitu 2 ml. bahan euthanasia pada control positi yaitu chloroform itu  terbukti  bahwa  chloroform  adalah  bahan  yang  sangat  kuat  untuk  mematikan hewan percobaan.
Berdasarkan  hasil  eksperimen  euthanasia  pada  hewan  percobaan  dengan perlakuan menggunakan ekstrak buah kecubung sebagai bahan euthanasia (P2, P3 dan  P4  )  pada  pemberian  volume  ekstrak  2  ml  terhadap  kecoa,  setelah  30  menit tidak  ada  kecoa  yang  mati,tetapi  keadaan  kecoa  sudah  tidak  bergerak  aktif  lagi. Pada volume 10 ml kecoa semuanya mati dan LC50 nya di dapatkan pada volume 5,44  ml  dengan  interval  4,59  hingga  6,24  ml.  Adapun  pada  jangkrik,  setelah  20 menit  perlakukan  dengan  volume  ekstrak  2  ml  tidak  ada  jangkrik  yang  mati, hanya  keadaan  jangkrik  sudah  tidak  bergerak  aktif  lagi.  Namun  pada  10  ml, hampir  semua  jangkrik  mati  dan  LC50  nya  didapatkan  pada  volume  5,57  ml dengan  interval  3.83  hingga  6,69  ml.  Pada  hewan  percobaan  katak  setelah  20 mentit didapatkan data pada volume terkecil 2ml semua katak mati.

## PEMBAHASAN
Penelitian  ini  mengunakan  ekstrak  etanol  buah  kecubung  sebagai  bahan pembunuh  (euthanasia)  hewan  percobaan.  Buah  kecubung  dipilih  karena  buah kecubung  mengandung  allkaloida  yang  telah  di  buktikan  dengan  uji  fitokomia yang  di  lakukan  dimana  buah  kecubung  memberi  reaksi  endapan  pada  saat  dii reaksikan  dengan  pereaksi  meyer  dan  dragendrof.  Menurut  Priwahyuni  et  al.,
(2020) tanaman kecubung mengandung alkaloid yang di buktikan dengan endapan putih  pada  larutan  yang  diamati  setelah  dii  uji  fitokimia  alkaloid.  Menurut Rumape  et  al.,  (2021)  ekstrak  metanol  biji  kecubung  yang  diuji  fitokimia  positif mengandung  senyawa  flavonoid,  alkaloid,  terpenoid  dan  saponin.  Adapun  isolat murni  dari  ekstrak  biji  kecubung  mengandung  senyawa  yang  diduga  sebagai terpenoid.
Tanaman kecubung ini hidup liar dan jarang dimanfaatkan oleh masyarakat. Kecubung  dapat  dimanfaatkan  sebagai  bioinsektisida,  tidak  ada  penimbunan residu  di  alam  sehingga  aman  untuk  kesehatan,  ramah  lingkungan,  murah  dan mudah  didapat  serta  memanfaatkan  kecubung  sebagai  tanaman  multiguna (Wardianti et al., 2020). Masyarakat suku Dawan Fatuleu Tengah memanfaatkan tanaman  kecubung  untuk  meracuni  ikan  di  sungai,  sebagai  pestisida  alami  bagi organisme penggangu tanaman dan membunuh serangga (Hendrik et al., 2021).
Data hasil uji hewan, baik  pada kecoa, jangkrik  dan  katak pada 0 ml tidak ada  kematian.  Hal  ini  dikarenakan  pada  perlakuan  tidak  ada  ekstrak  dari  buah kecubung,  isinya  hanya  blangko  (etanol).  Perlakuan  kontrol  positif  baik  pada kecoa,  jangkrik  dan  katak  pada  volume  2  ml  dan  waktu  10  menit  semua  hewan percobaan mati karena menggunakan chloroform sebagai bahan pembunuh hewan percobaannya.  Berdasarkan  hasil  uji  hewan  coba  kecoa,  maka  didapatkan  hasil setelah  30  menit  dengan  pemberian  ekstrak  uji  volume  ekstrak  2  ml  tidak  ada kecoa  yang  mati,  tetapi  keadaan  kecoa  sudah  tidak  bergerak  aktif  lagi.  Pada volume 10 ml, semua kecoa mati dan LC50 nya didapatkan pada volume 5,44 ml dengan interval 4,59 hingga 6,24 ml.
Hasil pengamatan pada jangkrik yaitu setelah 20 menit pada volume ekstrak 2 ml, tidak ada jangkrik yang mati, hanya keadaan jangkrik sudah tidak bergerak aktif lagi, pada 10 ml hampir semua jangkrik mati dan LC50 nya didapatkan pada volume 5,57 ml dengan interval 3,83 hingga 6,69 ml. Sementara pada hewan coba katak,  didapatkan hasil setelah 20 menit  perlakuan  bahwa semua katak mati  dari volume ektrak terkecil yaitu 2 ml. Hasyim et al., (2019) menyatakan bahwa LC50 adalah  konsentrasi  yang  dapat  menyebabkan  kematian  50%  serangga  Uji. Menurut  Armyandi  et  al.,  (2022)  semakin  tinggi  nilai  LC50  suatu  sampel,  maka semakin  rendah  senyawa  bioaktifnya,  zat  yang  memiliki  nilai  kosentrasi  LC50 kurang dari 1000 ppm adalah zat yang toksik.
Semua  konsentrasi  ekstrak  buah  kecubung  yang  diuji  menunjukkan  bahwa bahan ini  dapat  mengakibatkan mortalitas dari hewan kecoa, jangkrik dan katak. Dari pengamatan menunjukkan setelah pemberian ekstrak buah kecubung hewan tersebut  menjadi  kurang  aktif  bergerak  dan  akhirnya  mengalami  kematian. Kematian  hewan  uji  terbukti  pada  serangga  dengan  tanda-tanda  yaitu  kakinya menjadi  kaku  tidak  bergerak  lagi  dan  posisi  badanya  terlentang.  Hal  ini  sesuai dengan  hasil  penelitian  Wahyuni  &  Muktitama  (2019)  bahwa  kecoa  amerika mengalami mortalitas dengan tanda-tanda kaki menjadi kaku, tidak bergerak dan posissi  badan  terlentang.  Jika  tanda-tanda  itu  muncul,  maka  kecoa  mengalami kematian.
Hewan  uji  mengalami  penurunan  aktivitas  di  karenakan  keracunan  dan mengalami  kematian.  Hal  ini  karena  pada  kecubung  mengandung  senyawa alkaloid, hyoscine dan  atropine (Priwahyuni  et  al., 2020).  Zat  aktif dari  tanaman kecubung  dapat  menimbulkan  halusinasi  bagi  penggunanya.  Jika  alkaloida  dari tanaman  kecubung  diisolasi  terdapat  senyawa  yang  mempunyai  efek  relaksasi
pada otot gerak yaitu methyl cristallin. Alkaloid dapat mempengaruhi sistem saraf pada  larva  yang  mengakibatkan  penurunan  koordinasi  otot,  sehingga menyebabkan  kematian  larva  nyamuk  (Yulistyana,  2021).  Senyawa  alkaloida dapat dijadikan sebagai racun untuk serangga yaitu kecoa amerika (Priwahyuni et al., 2020).
Etanol  dipilih  sebagai  pelarut  maserasi  karenaetanol  dalam  penggunaanya sangat  mudah  dan  murah  harganya  serta  aman.  Etanol  bersifat  polar  dan mempunyai  sifat  dapat  menarik  metabolit  sekunder  di  dalam  simplisia  dengan jumlah  optimal. Like  dissolves  like adalah  prinsip  dari  proses  ekstraksi  dimana larutan  yang  bersifat  polar  akan  larut  dalam  pelarut  polar  dan  larutan  non  polar akan  larut  dalam  senyawa  non  polar.  Senyawa  aktif  dalam  suatu  tanaman  akan mudah  terikat  oleh  pelarut  sesuai  dengan  sifat  kepolarannya,  sehingga  larutan etanol  yang  bersifat  polar  akan  dapat  lebih  mudah  dalam  proses  mengekstrak senyawa flavonoid dalam jaringan tanaman (Noviyanty et al., 2019).

## SIMPULAN
Ekstrak  buah  kecubung  dapat  digunakan  sebagai  alternatif  pengganti chloroform  untuk  bahan  euthanasia  hewan  percobaan  pada  praktikum.  Namun untuk memperoleh efektivitas optimalnya, volume penggunaan ekstrak harus lebih banyak dibandingkan saat meggunakan chloroform.

## DAFTAR PUSTAKA
Armyandi,  A.  R.,  Wahyuni,  D.,  &  Fikri,  K.  (2022).  Toksisitas  Ekstrak Terpurifikasi dengan N-Heksan Buah Kecubung ( Datura metel L.) terhadap Mortalitas  Larva  Nyamuk Aedes  aegypti . Saintifika , 24 (1),  55-67. https://doi.org/10.19184/saintifika.v24i1.26579
Handajani, F. (2021). Metode Pemilihan Dan Pembuatan Hewan Model Beberapa Penyakit pada Penelitian Eksperimental . Sidoarjo: Zifatama Jawara Hasyim,  A.,  Setiawati,  W.,  Lukman,  L.,  &  Marhaeni,  L.  S.  (2019).  Evaluasi Konsentrasi  Lethal  dan  Waktu  Lethal  Insektisida  Botani  terhadap  Ulat Bawang  ( Spodoptera  exigua )  di  Laboratorium. Jurnal  Hortikultura , 29 (1), 69-80. http://dx.doi.org/10.21082/jhort.v29n1.2019.p69-80
Hendrik,  A.  C.,  Pinat,  A.  I.,  &  Ballo,  A.  (2021).  Studi  Etnobotani  Jenis-Jenis Tumbuhan  Beracun  pada  Suku  Dawan  Kecamatan  Fatuleu  Tengah, Kabupaten  Kupang. Journal  Penelitian  Kehutanan  FALOAK , 5 (1),  31-46. https://doi.org/10.20886/jpkf.2021.5.1.31-46
Lyo,  A.  B.,  Rollando,  R.,  &  Susanto,  F.  H.  (2020).  Tingkat  Pengetahuan Mahasiswa  Program  Studi  Farmasi  dan  Kimia  di  Universitas  Ma  Chung terhadap  Bahaya  Senyawa  Kimia  (Diklorometan,  Etil  Asetat,  Kloroform, dan  Ester). Sainsbertek  Jurnal  Ilmiah  Sains  &  Teknologi , 1 (1),  312-327. https://sainsbertek.machung.ac.id/index.php/sbtek/article/view/106
Mahrani, I. T., Suhartini, S., & Sucipto, S. (2019). Optimasi Ekstraksi Ultrasonik Daun  Kecubung  sebagai  Agen  Anti  Bakteri  Jerawat Propionibacterium acnes (Kajian:  Rasio  Pelarut  terhadap  Bahan  dan  Lama  Waktu  Sonikasi). Jurnal  Keteknikan  Pertanian  Tropis  dan  Biosistem , 7 (2),  137-147. http://dx.doi.org/10.21776/ub.jkptb.2019.007.02.4
Mutiarahmi,  C.  N.,  Hartady,  T.,  &  Lesmana,  R.  (2021).  Use  of  Mice  as Experimental Animals in Laboratories that Refer to the Principles of Animal
Welfare: A Literature Review. Indonesia Medicus Veterinus, 10 (1), 134–45. http://dx.doi.org/10.19087/imv.2020.10.1.134
Noviyanty,  A.,  Salingkat,  C.  A.,  &  Syamsiar,  S.  (2019).  Pengaruh  Jenis  Pelarut terhadap  Ekstraksi  dari  Kulit  Buah  Naga  Merah  ( Hylocereus  polyrhizus ). KOVALEN: Jurnal Riset Kimia, 5 (3), 271–79.
http://dx.doi.org/10.22487/kovalen.2019.v5.i3.14037
Patwasari,  N.  P.  S.  (2020). Uji  LD50  Ekstrak  Etanol  Bunga  Kecubung  (Datura metel  L.)  terhadap  Mencit  (Mus  musculas) .  Skripsi.  Sekolah  Tinggi  Ilmu Kesehatan Bakti Tunas Husada Kota Tasikmalaya
Priwahyuni,  R.,  Wardianti,  Y.,  &  Sepriyaningsih,  S.  (2020).  Pengaruh  Biji Kecubung ( Datura metel ) sebagai Bioinsektisida terhadap Mortalitas Kecoa Amerika  ( Periplaneta  americana ). BIOEDUSAINS:  Jurnal  Pendidikan Biologi dan Sains, 3 (1), 24-32.
https://doi.org/10.31539/bioedusains.v3i1.1180
Rumape,  O.,  Adam,  R. F.,  Botutihe,  D.  N.,  Alio,  L.,  La  Kilo,  J.,  &  Paputungan, M.  (2021).  Isolasi  dan  Karakterisasi  Senyawa  Metabolit  Sekunder  dari Ekstrak Metanol Biji Kecubung. Jambura Journal of Chemistry , 3 (2), 105- 112. https://doi.org/10.34312/jambchem.v3i2.10577
Wahyuni,  D.,  &  Muktitama,  R.  E.  (2019).  Uji  Mortalitas  Kecoa  Amerika ( Periplaneta  americana )  Menggunakan  Ekstrak  Kulit  Durian  ( Durio zibethinus Murr). Photon:  Jurnal  Sain  dan  Kesehatan, 9 (2),  9–18. https://doi.org/10.37859/jp.v9i2.1353
Wardianti,  Y.,  Ulpa,  L.,  &  Febrianti,  Y.  (2020).  Efek  Bioinsektisida  Biji Kecubung  ( Datura  metel )  terhadap  Mortalitas  Ulat  Grayak  ( Spodoptera litura ). BIOEDUSAINS:  Jurnal Pendidikan Biologi  dan Sains , 3 (2), 85-92. https://doi.org/10.31539/bioedusains.v3i2.1713
Yulistyana,  A.  D.,  Wilson,  W.,  &  Iswara,  A.  (2021).  Test  Effectiveness  of Biolarvasides  on  the  Extract  of  Cucumber  ( Cucumis  sativus L.)  and  Pare Leaves  ( Momordica  charantia )  on Aedes  aegypti Mosquito  Larva. Jurnal Labora  Medika , 4 (2),  38-41.  https://doi.org/10.26714/jlabmed.4.2.2020.38- 41