## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online)

## Formulasi Sediaan Krim Menggunakan Kolagen Tulang Itik Air (Anas platyrhynchos domesticus) Sebagai Anti Aging
Sudewi, Nilsya Febrika Zebua, Aulia Milda
Fakultas Farmasi, Program Studi Farmasi, Universitas Tjut Nyak Dhien, Medan, Indonesia Email: 1,* sudewisudewi.59@gmail.com , 2 Nilsya.zebua@gmail.com, 3 auliamilda5@gmail.com
Abstrak −Isi  kolagen  dalam  badan  manusia  menurun  bersamaan  dengan  bertambahnya  umur.  Salah  satu  pemecahan  buat menggurangi  akibat  negatif  tersebut  ialah  aplikasi  kolagen  dalam  bermacam  produk  kosmetik  serta  obat.  Di  dalam  tulang men2gandung banyak kolagen serta salah satunya ada pada tulang itik air yang sepanjang ini belum diolah serta ialah hasil buangan. Riset ini bertujuan buat membuat resep sediaan krim anti aging dari kolagen tulang itik air yang bisa melenyapkan keriput, bercak, mengecilkan  pori  serta  menghaluskan  kulit.  Riset  ini  mengenakan  tata  cara  eksperimental  memakai  bahan  uji  tulang  itik  air. Tahapan  riset  meliputi  ekstraksi  kolagen  dari  tulang  itik  air,  karakterisasi  kolagen  dengan  spektrofotomentri  infra  merah, pembuatan krim anti aging tulang itik air dengan konsentrasi 1%, 1, 5%, 2, 5%, 3, 5%, perumusan serta penilaian sediaan krim serta uji kemampuaan sediaan mengenakan perlengkapan Skin analyzer. Hasil riset menampilkan kalau tulang itik air memiliki kolagen pada bilangan gelombang 3280- 3380 cm- 1 serta 1280- 1680 cm- 1 yang menampilkan terdapatnya gugus amina serta amida.  Kolagen  tulang itik  air bisa  dirumuskan jadi sediaan  krim  dengan hasil penilaian sediaan  ialah sediaan  yang homogen, normal serta tidak merangsang kulit dengan rentang pH 6, 1- 6, 4. Hasil pengujian dari sediaan krim kolagen menampilkan kalau terus menjadi besar konsentrasi kolagen yang ditambahkan pada resep hingga hendak terus menjadi menampilkan kenaikan dampak yang signifikan.
Kata Kunci: Tulang, Itik Air, Kolagen, Anti Aging, Krim
Abstract −The  collagen  content  in  the  human  body  decreases  with  age.  One  solution  to  reduce  these  negative  effects  is  the application of collagen in various cosmetic and medicinal products. In the bones contain a lot of collagen and one of them is found in the water duck bone that has not been treated and is the result of waste. This study aims to make an anti- aging cream preparation resep from water duck bone collagen that can eliminate wrinkles, blemishes, shrink pores and smooth the skin. This research uses an experimental method using water duck bone test material. Stages of research include extraction of collagen from water duck bone, collagen characterization by infra red spectrophotomenter, making anti- aging cream of water duck bone with concentrations of 1%, 1. 5%, 2. 5%, 3. 5%, formulation and evaluation of cream preparations and test the ability of preparations using a skin analyzer. The results showed that the water duck bone contained collagen at wave numbers 3280- 3380 cm- 1 and 1280- 1680 cm- 1 which indicated the presence of amine and amide groups. Water duck bone collagen can be formulated into cream preparations with the evaluation results of preparations are homogeneous, stable and non- irritating preparations with a pH range of 6. 1 to 6. 4. Test results from collagen cream preparations show that the higher the concentration of collagen added to the resep, the more it will show a significant increase in effect.
Keywords : Bone, Water Ducks, Collagen, Anti Aging, Cream

## 1. PENDAHULUAN
Itik air ialah itik lokal indonesia yang mempunyai ciri jenis petelur sangat baik sebab sanggup bertelur sebanyak 200- 250  butir/  ekor/  tahun.  Itik  ini  bisa  dipelihara  secara  intensif  ataupun  ektensif,  sebab  mempunyai  ketahanan  hidup yang besar.
Kosmetik telah diketahui semenjak era dulu kala. Di Mesir, 3500 tahun saat sebelum masehi sudah digunakan bahan  natural  yang  berasal  dari  tanaman,  hewan  ataupun  bahan  mineral.  Pemakaian  susu,  daun,  kulit  tumbuhan, rempah,  minyak  hewan,  madu  serta  yang  lain  telah  jadi  perihal  yang  biasa  dalam  kehidupan  warga  dikala  itu. Kosmetika berasal dari kata kosmein( Yunani) yang berarti“ berhias”, yang dipakai buat membuat cantik diri. Saat ini kosmetika  terbuat  manusia  tidak  cuma  dari  bahan  natural  namun  pula  dari  bahan  sintetis  buat  iktikad  tingkatkan kecantikan. Di indonesia sejarah tentang kosmetologi diawali saat sebelum era penjajahan belanda.
Krim  merupakan  produk  kosmetik  yang  gampang  serta  instan  penggunaannya  serta  didefinisikan  bagaikan sediaan separuh padat  yang memiliki satu  ataupun lebih bahan obat  terlarut  ataupun terdispersi  dalam  bahan dasar yang  cocok.  Biasanya  produk  krim  tercipta  dari  minyak  yang  dimasukkan  ke  dalam  air  pada  fase  minyak  serta humektan  yang  lebih  banyak  dari  produk  lotion.  Krim  terdiri  dari  15%-  40%  fase  minyak  serta  5%-  15%  fase humektan, dengan ciri penampakannya nyaris sama dengan produk lotion.
Aging ialah pergantian manusia yang disebabkan oleh aspek umur, psikologi, serta sosial. Pada biasanya aging dimaksud bagaikan pergantian raga manusia. Pergantian raga bisa dihambat dengan salah satunya memakai anti aging semacam obat ataupun kosmetik.
Kolagen ialah salah satu kelompok protein yang tidak larut air, yang keberadaannya mencapi 30% dari segala protein  penyusun  badan  manusia.  Peranan  kolagen  dalam  badan  manusia  bagaikan  struktur  organik  pembangun tulang, gigi, sendi, otot serta kulit. Secara alamiah sedikitnya 1% kolagen dalam badan manusia lenyap tiap tahun sehingga pada umur 30 tahun manusia kehabisan kolagen dekat  15-  20% serta pada umur 40 tahun manusia tidak memproduksi  kolagen  lagi  sehingga  kolagen  yang  lenyap  menggapai  35-  40%.  Penyusutan  jumlah  kolagen  pula berkaitan dengan hormon estrogen yang berfungsi mengganti fibroblas jadi kolagen. Kerusakn kolagen pada kulit bisa diakibatkan oleh paparan radiasi UV- A serta UV- B dari cahaya matahari. Isi kolagen dalam badan manusia menurun

## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online)
bersamaan  dengan  bertambahnya  umur.  Salah  satu  pemecahan  buat  kurangi  akibat  negatif  tersebut  ialah  aplikasi kolagen dalam bermacam produk kosmetik serta obat.

## 2. METODOLOGI PENELITIAN

## 2.1 Alat
Alat- alat yang digunakan dalam riset merupakan neraca digital( AND HT- 120 ), Skin analyzer, Spektrofotometer Infrared  agilent,  blender(  Miyako ),thermometer,  penangas  air,  pisau, lemari  pengering,ayakan  mesh  100,  pH  m( ATC), serta alat- alat gelas laboratorium.

## 2.2 Bahan
Bahan yang digunakan dalam riset ini merupakan tulang itik air( Anas platyrhynchos domesticus), larutan dapar pH netral( pH 7, 01), larutan dapar pH asam( pH 4, 01), NaOH 0, 1M, CH3COOH 0, 5 Meter, serta asam stearat, setil alkohol, metil paraben, propilen glikol, trietanolamin, metil biru serta aquadest.

## 2.3 Isolasi Kolagen dari Tulang Itik Air
Itik air ( Anas platyrhynchos domesticus ) sebanyak 10 kg dicuci, kemudian direbus selama 1 jam, lalu  dipisahkan tulang dari dagingnya. Setelah ditimbang dan di cuci dengan aquadest hingga bersih kemudian keringkan. Tulang itik air diisolasi dengan larutan NaOH 0,1M dengan rasio 1:10 selama 6 jam. Setelah itu dinetralisasikan dengan pencucian menggunakkan aquadest sampai pH 7. Kemudian dilakukan penggulangan dengan direndam kembali dalam larutan Naoh  0,1  M  selama  6  jam,  setelah  itu  dinetralisasi  kembali  sampai  pH  7.  Kemudian  direndam  dengan  larutan CH 3 COOH  0,5M  dengan  rasio  1:10  selama  3  hari.  Kemudian  dicuci  dengan  aquadest  hingga  pH  4,6.  Setelah  itu sampel dikeringkan ke dalam lemari penggering pada suhu 36°C selama 7 hari sampai benar-benar kering. Sampel dihaluskan dengan menggunakan blender, kemudian diayak menggunakan mesh 100 dan di peroleh serbuk tulang itik air.

## 2.4 Formulasi Sediaan Krim Kolagen Tulang Itik Air
Formulasi  krim  mengikuti  formula  standar  krim  M/A  dengan  kolagen  tulang  itik  air  yaitu  F1  (tanpa  penambahan kolagen tulang itik air), F2(1%), F3(1,5%), F4(2,5%), F5(3,5%).
R/ Asam stearat 12 Setil alkohol 0,5 Nipagin 0,1 Propilen Glikol 3 Trietanolamin 1 Metil Paraben 0,1 Kolagen x Parfum q.s Aquadest ad 100
Sediaan krim dibuat dengan cara:
Ditimbang semua bahan yang diperlukan. Pisahkan bahan menjadi dua kelompok yaitu fase minyak dan fase air. Fase minyak terdiri dari asam stearat, setil alkohol, dilebur di atas penangas air dengan suhu 70 ºC. Fase air yang terdiri dari sorbitol, propilen glikol, trietanolamin dan metil paraben dilarutkan di dalam air panas yang telah ditakar dengan suhu 70°C (massa II). Direndam lumpang porselen dan alu dalam air panas, kemudian keringkan lumpang dan alu, masukkan massa I ke dalam lumpang, lalu masukkan massa II digerus konstan sampai terbentuk massa krim. Setelah terbentuk massa krim, ditambahkan kolagen tulang itik air sedikit demi sedikit, digerus sampai terbentuk krim yang homogen. Ditambahkan 3 tetes parfum, dihomogenkan sampai terbentuk massa krim. Pembuatan dilakukan dengan cara yang sama untuk semua formula dengan konsentrasi kolagen tulang itik air yang berbeda.

## 2.5 Evaluasi Sediaan Krim
Evaluasi sediaan krim anti aging kolagen itik air meliputi uji homogenitas, pengukuran pH, penetapan tipe emulsi, stabilitas selama 12 minggu, dan iritasi terhadap 10 orang sukarelawan. Semua sukarelawan diukur kondisi kulit awal sebelum  menggunakan  krim  anti  aging  meliputi:  kadar  air  ( moisture ),  kehalusan  ( evenness ),  besar  pori  ( pore ), banyaknya  noda  ( spot )  dan  keriput  ( wrinkle ).  Setelah  pengukuran  kondisi  kulit  awal,  perawatan  mulai  dilakukan dengan pengolesan krim sebutir jagung hingga merata seluas area yang telah ditandai, krim  dioleskan berdasarkan kelompok yang telah ditetapkan di atas, pengolesan dilakukan sebanyak 2 kali  sehari selama 4 minggu. Perubahan kondisi kulit diukur setiap minggu selama 4 minggu dengan menggunakan skin analyzer dan moisture checker.

## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online)

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN

## 3.1 Spektrum Infra Merah Kolagen Tulang Itik Air
Hasil isolasi diperoleh 500 gram serbuk kolagen dari 10000 gram itik air dengan rendemen yang diperoleh sebesar 50%. Berdasarkan dari karakterisasi  kolagen, gugus fungsi  yang terdapat  pada kolagen tulang itik  air dapat  dilihat pada
Gambar 1. Hasil spektrum merah kolagen pada tulang itik
Berdasarkan  Gambar  1  menunjukkan  puncak  serapan  amina  A,  amina  B,  amida  I,  amida  II  dan  amina  III. Wilayah  puncak  serapan  amina  A  secara  umum  berada  pada  bilangan  gelombang  3400-3440  cm -1 merupakan streching  dari  gugus. Wilayah puncak serapan amina A kolagen tulang ikan itik air yaitu 3280 cm -1 . Hasil analisis spektrum infra merah kolagen tulang itik air seperti yang terlihat pada Tabel 1.
Tabel 1 . Hasil analisis spektrum merah kolagen tulang itik Jenis Amida Wilayah Serapan  (cm -1 ) Puncak Serapan Keterangan Amina A 3400-3440 3280 Gugus NH Amina B 2922-2924 2920 Gugus CH 2 Amida I 1600-1700 1675 Gugus karbonil (ikatan C=O) Amida II 1480-1575 1575 CN stretching , NH bending Amina III 1229-1301 1280 CN stretching , NH bending
Wilayah puncak serapan amina A kolagen tulang itik air yaitu 3280 cm -1 dan baku kolagen 3280 cm -1 . Gugus amina  A  dengan  NH  streching  yang  bebas  biasanya  terdeteksi  pada  bilangan  gelombang  3400-3440  cm -1 ,  namum ketika grup NH pada peptida terlibat dalam ikatan hidrogen, maka posisinya akan bergeser ke frekuensi yang lebih rendah. Maka dapat disimpulkan bahwa kolagen tulang itik air terdapat gugus NH berikatan dengan hidrogen. Amina B kolagen tulang itik air terletak pada panjang gelombang 2920 cm -1 , menyatakan bahwa puncak serapan amina B berada pada kisaran 2922-2924 cm -1 merupakan gugus CH 2 . Wilayah serapan amida I kolagen tulang itik sertai yaitu 1675 cm -1 sedangkan baku kolagen 1630 cm -1 . Gugus amida I berada pada kisaran panjang gelombang 1600-1700 cm - 1 , hal tersebut terkait dengan vibrasi streching C- atau O- (ikatan C=O) sepanjang rantai polipeptida. Wilayah puncak serapan 1630, 1650, dan 1675 cm -1 merupakan karakterisktik dari residu asam amino (β-sheet), random coil dan β- turn, amida I memiliki 4 komponen struktur sekunder protein yaitu α-heliks, β-sheet, β-turn, dan random coil. Hal ini menunjukkan bahwa kolagen dari  tulang itik air ( Anas platyrhynchos domesticus) memiliki struktur β-sheet belum terdenaturasi  menjadi  α-heliks  yang  merupakan  ciri  khas  gelatin.  Amida  II  dan  amina  III  kolagen  tulang  itik  air memiliki panjang gelombang 1575 cm -1 dan 1280 cm -1 .

## 3.2 Hasil Evaluasi Sediaan Krim Anti Aging
Sediaan krim menggunakan kolagen itik air memberikan hasil yang homogen, pH 6,0 – 6,3, tipe emulsi M/A, stabil pada penyimpanan 12 minggu, dan tidak mengiritasi kulit 10 sukarelawan. Persen pemulihan krim anti aging kolagen itik air terhadap kadar air, kehalusan, pori, noda dan keriput dapat dilihat pada tabel berikut:
Tabel 2. Kadar air ( Moisture ) Formula Sukarelawan Awal Kadar air Persen Pemulihan Minggu 1 2 3 4 A 1 29 29 29 29 30 3,4 % 2 30 30 30 30 31 3,3 % Rata-rata 29,5 29,5 29,5 29,5 30,5 3,3% 1 29 29 30 30 31 6,8%

## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online)
Formula Sukarelawan Awal Kadar air Persen Pemulihan Minggu 1 2 3 4 B 2 28 29 30 31 31 10,7% Rata-rata 28,5 29 30 30,5 31 8,7% C 1 27 29 29 30 32 18,5% 2 29 30 30 31 32 10,3% Rata-rata 28 29,5 29,5 30,5 32 14,2% D 1 29 32 33 35 36 24,1% 2 30 31 33 34 35 16,6% Rata-rata 29,5 31,5 33 34,5 35,5 20,3% E 1 28 30 33 34 37 32,1% 2 27 29 32 35 38 40,7% Rata-rata 27,5 29,5 32,5 34,5 37,5 36,3%
Keterangan:  Normal 30-50; Dehidrasi 0-29; Hidrasi 51-100.
Berdasarkan data diatas menunjukkan adanya perubahan kondisi kulit wajah menjadi lebih baik dari kondisi kulit wajah yang sebelumnya.
Gambar 2. Grafik kadar air
Tabel 3. Kehalusan ( Evenness ) Formula Sukarelawan Awal Kadar air Persen Pemulihan Minggu 1 2 3 4 A 1 35 35 35 34 34 2,8% 2 37 37 37 37 36 2,7% Rata-rata 36 36 36 35,5 35 2,7% B 1 39 39 38 37 37 5,1% 2 41 39 39 38 36 12,1% Rata-rata 40 39 38,5 37,5 36,5 8,7% C 1 42 40 38 35 31 26,1% 2 44 42 39 34 31 29,5% Rata-rata 43 41 38,5 34,5 31 27,9% D 1 44 42 41 39 37 15,9% 2 42 41 39 38 35 16,6% Rata-rata 43 41,5 40 38,5 36 16,2% E 1 39 38 35 32 30 23% 2 42 40 37 34 31 26,1% Rata-rata 40,5 39 36 33 30,5 24,6%
Keterangan: Normal 32-51; Halus 0-31; Kasar 52-100.
Berdasarkan data diatas menunjukkan adanya perubahan kondisi kulit wajah menjadi lebih halus dari kondisi kulit wajah yang sebelumnya.
0 10 20 30 40 50 N il ai P engu k ur an Kadar Air Formula A Formula B Formula C Formula D Formula E

## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online)
Gambar 3. Grafik kehalusan
Tabel 4. Besar pori ( Pore ) Formula Sukarelawan Awal Kadar air Persen Pemulihan Minggu 1 2 3 4 A 1 23 23 23 23 22 4,3% 2 25 25 25 25 24 4% Rata-rata 24 24 24 24 23,5 2% B 1 24 24 23 23 23 4,1% 2 26 26 25 25 25 3,8% Rata-rata 25 25 24 24 24 4% C 1 23 23 22 22 21 8,6% 2 24 24 23 21 20 16,6% Rata-rata 23,5 23,5 22,5 21,5 20,5 12,7% D 1 21 21 20 20 18 14,2% 2 22 22 21 19 19 13,6% Rata-rata 21,5 21,5 20,5 19,5 18,5 13,9% E 1 27 25 24 22 19 29,6% 2 25 23 20 18 16 36% Rata-rata 26 24 22 20 17,5 32,6%
Keterangan: Kecil 0-19; Beberapa besar 20-39; Sangat besar 40-100.
Berdasarkan data diatas menunjukkan adanya perubahan kondisi pori kulit wajah menjadi lebih kecil dari kondisi pori kulit wajah yang sebelumnya.
0 10 20 30 40 50 awal minggu 1 minggu 2 minggu 3 minggu 4 NI LA I P ENG U K U RA N KEHALUSAN formula A formula B formula C formula D formula E
0 5 10 15 20 25 30 awal minggu 1 minggu 2 minggu 3 minggu 4 NI LA I P ENG
U K U RA N PORI (PORE) formula A formula B formula C formula D formula E

## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online)
Tabel 5. Banyaknya noda ( Spot ) Formula Sukarelawan Awal Kadar air Persen Pemulihan Minggu 1 2 3 4 A 1 38 38 38 38 37 2,6% 2 36 36 36 36 35 2,7% Rata-rata 37 37 37 37 36 2,7% B 1 40 40 40 39 39 2,5% 2 42 42 41 40 38 9,5% Rata-rata 41 41 40,5 39,5 38,5 6% C 1 43 42 40 38 36 16,2% 2 44 43 41 39 37 15,9% Rata-rata 43,5 42,5 40,5 38,5 36,5 16% D 1 46 44 41 38 35 23,9% 2 48 45 42 37 33 31,2% Rata-rata 47 44,5 41,5 34,5 34 27,6% E 1 48 43 35 29 19 60,4% 2 50 42 32 23 17 66% Rata-rata 49 42,5 33,5 26 18 63,2%
Keterangan: Sedikit 0-19; Beberapa noda 20-39; Banyak noda 40-100.
Berdasarkan  data  diatas  menunjukkan  adanya  perubahan  kondisi  noda  kulit  wajah  menjadi  lebih  kecil  dari kondisi noda kulit wajah yang sebelumnya.
Gambar 5. Grafik noda ( Spot )
Tabel 5. Keriput ( Wrinkle ) Formula Sukarelawan Awal Kadar air Persen Pemulihan Minggu 1 2 3 4 A 1 28 28 28 28 27 3,5% 2 27 27 27 27 26 3,7% Rata-rata 27,5 27,5 27,5 27,5 26,5 3,6% B 1 38 38 38 36 36 5,2% 2 35 35 35 35 33 5,7% Rata-rata 36,5 36,5 36,5 35,5 34,5 5,4% C 1 40 39 37 33 31 22,5% 2 38 36 33 32 29 23,6% Rata-rata 39 37,5 35 32,5 29,5 24,3% D 1 42 41 39 37 34 19% 2 44 43 41 39 36 18,1% Rata-rata 43 42 40 38 35 18,6% E 1 28 26 23 20 17 39,2% 2 25 22 20 18 15 40% Rata-rata 26,5 24 21,5 19 16 39,6%
Keterangan: Tidak berkeriput 0-19; Berkeriput 20-52; Berkeriput parah 53-100.
0 10 20 30 40 50 60 awal minggu 1 minggu 2 minggu 3 minggu 4 NI LA I P ENG U K U RA N NODA (SPOT) formula A formula B formula C formula D formula E

## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online)
Berdasarkan data diatas menunjukkan adanya perubahan kondisi keriput kulit wajah menjadi lebih kecil dari kondisi keriputkulit wajah yang sebelumnya.

## Gambar 6. Grafik keriput

## 4. KESIMPULAN
Krim kolagen itik air sebagai anti aging( Anas platyrhynchos domesticus ) mempunyai nilai puncak serapan Amina A kolagen  tulang  itik  air  sebesar  3280  cm -1 .Hasil  evalusai  krim  kolagen  itik  air  memiliki  kadar  air  yang  baik  pada Formula E dengan persen pemulihan kulit yang lebih baik dari sebelumnya sebesar 36,3%,kehalusan yang baik pada formula E dengan persentase 27,9%,besar pori yang baik pada formula A dengan persentase 2%,banyaknya noda  pada formula A dengan persentase 2,7%,dan tingkat keriput pada formula dengan persentase 3,6%.

## DAFTAR PUSTAKA
Kanisius. (2010). Buku Usaha Ternak Itik . Yogyakarta: Kanisius. Hal.98. Wasitaatmadja, S. M. (1997). Penuntun Ilmu Kosmetik Medik . Jakarta: Universitas Indonesia. Hal. 62-63, 111-112. Windarwati, S. (2011). Pemanfaatan Fraksi Aktif Ekstrak Tanaman Jarak Pagar Sebagai Zat Antimikroba dan antioksidan Dalam Sediaan Kosmetik . Tesis. Sekolah Pascasarjana Institut Pertanian Bogor. Bogor. Rahmi, D., R. Yunilawati, dan E. Ratnawati. (2013). Pengaruh nano partikel terhadap aktivitas anti aging pada krim. Jurnal sains material Indonesia 4 (3) :235-238.
Draelos, Z. D dan Thaman, L. A. (2006). Cosmetic Science and Technology Series. Vol. 30. Cosmetic Formulation of Skin Care Products . New York: Taylor & Francis Group. Hal.126-128. Laras Ayu Pringgandini, Ghinna Yulia Indarti, Melinda, Morita Sari.  (2018). Efektivitas Spray Nanokolagen Limbah Sisik Ikan Mas  (Cyprinus  carpio)  untuk  Mempercepat  Proses  Penyembuhan  Luka  Insisi .Fakultas  Kedokteran  Gigi,Universitas Muhammadiyah Surakarta, Indonesia. Hal.116.
Sonave, A. E., Koli, J. M., Patange, S. B., Naik, S. D and Mohite, A. S. (2018).   Isolation of Acid and Pepsin Soluble Collagens from The Skin of Indian Mackerel (Rastrellinger   kanugarta) (Cuvier, 1817). Journal of Enromology and Zoologi Studies. 6(2): 2509.
Young, A.(1972). Practical Cosmetic Science. London: Mills and Boon Limited. Hal.51. Veeruraj, A., et al. (2013). Isolation and characterization of Thermosable Collagen from The Marine Ell-fish ( Evenchelys macrura ). Journal Process Biochemistry (48). Hal.1592-1602.
Li, z., Wang., B.., Chi, C.,  Zhang,  Q., Gong, Y., Tang, J., Luo, H dan Ding, G.(2013). Isolation and Characterization of Acid SolubleCollagens and Pepsin Soluble Collagens from The Skin and Bone of Spanish Mackerel ( Scomberomorous niphonius ). Journal Food Hydrocolloids . Zhoushan: 31(1): 103.
Hashim P, Ridzwan M. S. M dan Bakar J. (2014). Isolation and   Characterization of Collagen from Chicken Feet. Engineering and Technology International Journal of Bioengineering and Life Sciences . 8(3):250. Aramo.(2012). Skin and Hair Diagnosis System . Sungna: Aram Huvis Korea Ltd. P : 1-10.
0 10 20 30 40 50 awal minggu 1 minggu 2 minggu 3 minggu 4 NI LA I P ENG U K U RA N KERIPUT (WRINKLE) formula A formula B formula C formula D formula E