## Penelitian

## PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL RIMPANG LENGKUAS
( ALPINIA GALANGA ) TERHADAP GAMBARAN HISTOPATOLOGI HEPAR MENCIT ( MUS MUSCULUS L.) YANG

## DIINDUKSI MONOSODIUM GLUTAMATE
Theodora Agverianti 1 , Muhartono 2 , Khairun Nisa Berawi 3
1 Fakultas Kedokteran, Universitas Lampung, Lampung
2 Departemen Patologi Anatomi, Fakultas Kedokteran, Universitas Lampung, Lampung
3 Departemen Fisiologi, Fakultas Kedokteran, Universitas Lampung, Lampung

## ABSTRAK
Latar Belakang: Konsumsi Monosodium Glutamate (MSG) secara berlebihan dan jangka waktu  lama  dilaporkan  memicu  kerusakan  hepar.  Dampak  toksik  pada  hepar  yaitu degenerasi,  nekrosis  hepatosit,  dan  peningkatan  peroksidasi  lipid.  Antioksidan  pada rimpang lengkuas diharapkan dapat memperbaiki derajat kerusakan hepar akibat radikal bebas  pada  MSG. Metode: Penelitian  ini  adalah  penelitian  eksperimental  dengan rancangan Post  Test  Only  Control  Group  Design .  Sampel  dalam  penelitian  ini  adalah mencit  berjumlah  25  ekor  yang  dibagi  dalam  5  kelompok,  yaitu  kontrol  negatif  (tidak diberikan perlakuan), kontrol positif (diberikan MSG 4 mg/gBB selama 14 hari), perlakuan 1 (diberikan MSG 4 mg/gBB selama 14 hari dilanjutkan ekstrak etanol rimpang lengkuas 14  mg/20  gBB  selama  7  hari),  perlakuan  2  (diberikan  MSG  4  mg/gBB  selama  14  hari dilanjutkan ekstrak etanol rimpang lengkuas 28 mg/20 gBB selama 7 hari), dan perlakuan 3 (diberikan MSG 4 mg/gBB selama 14 hari dilanjutkan ekstrak etanol rimpang lengkuas 56  mg/20  gBB  selama  7  hari).  Kemudian  dilakukan  pembedahan  untuk  pemeriksaan histopatologi. Hasil: Dari hasil rerata skoring didapatkan perhitungan degenerasi sel hepar kontrol  positif  (11,8),  kontrol  negatif  (5,2),  perlakuan  1  (10,6),  perlakuan  2  (8,4),  dan perlakuan 3 (7,6). Berdasarkan hasil uji One Way ANOVA , diperoleh nilai p=0,001 terhadap gambaran  histopatologi  hepar  mencit. Kesimpulan: Terdapat  pengaruh  pemberian ekstrak  etanol  rimpang  lengkuas  terhadap  gambaran  histopatologi  hepar  yang  diinduksi MSG
Kata Kunci: Hepar, Histopatologi, Monosodium Glutamate , Lengkuas

## ABSTRACT
Background: Long  term  consumption  of  Monosodium  Glutamate  (MSG)  in  excess  is reported  induced  liver  damage.  Toxic  effect  in  liver  are  due  to  the  degeneration  and necrosis  of  hepatocytes,  which  also  increases  lipid  peroxidation.  Antioxidant  in  galangal rhizome is expected to repair liver damage caused by free radicals in MSG. Method: This study is an experimental research with Post Test Only Control Group Design. The samples in this study are 25 mice divided into 5 groups which are, negative control (not given any treatment), positive control (given MSG 4 mg/gBW for 14 days), treatment 1 (given MSG 4 mg/gBW for 14 days continued with ethanol extract of galangal rhizome 14 mg/20 gBW for 7 days), treatment 2 (given MSG 4 mg/gBW for 14 days continued with ethanol extract of
galangal rhizome 28 mg/20 gBW for 7 days), and treatment 3 (given MSG 4 mg/gBW for 14  days  continued  with  ethanol  extract  of  galangal  rhizome  56  mg/20  gBW  for  7  days). Then  surgery  was  needed  for  histopathological  examination. Results: Based  on  mean scoring results, the results showed calculation of liver cell degeneration for positive control (11,8), negative control (5,2), treatment 1 (10,6), treatment 2 (8,4), and treatment 3 (7,6). Based  on the test results  One Way ANOVA,  the result showed the value of p=0,001 for liver  histopathological  appearance  of  mice. Conclusion: There  is  an  effect  of  ethanol extract of galangal rhizome to the liver histopathological appearance of male mice.
Keywords: Alpinia galanga, Hepar, Histopathology, Monosodium Glutamate
1.  PENDAHULUAN Hepar  merupakan  organ  pusat metabolisme dalam tubuh. Hepar
merupakan  organ  yang  amat  rentan karena merupakan filter dari bahan-bahan toksik yang masuk ke dalam tubuh. 1 Salah satu penyebab tersering kerusakan hepar adalah  karena  efek  toksik.  Kandungan toksik  yang  umumnya  ditemui  adalah radikal  bebas.  Radikal  bebas  dalam jumlah besar dapat menyebabkan kerusakan  hepar,  salah  satu  sumber radikal  bebas  adalah  zat  penyedap tambahan makanan. 2 Salah satu penyedap yang umum digunakan adalah Monosodium Glutamate (MSG). 3 World Health Organization (WHO)  dan Food  and Agriculture Organization (FAO) menetapkan MSG sebagai bahan
penyedap yang aman, akan tetapi ditemui banyak laporan mengenai efek konsumsi MSG. 4 Penelitian yang dilakukan dengan pemberian  MSG  pada  tikus  dewasa dengan  dosis  16  g/kgBB  selama  14  hari berturut-turut menyebabkan
terhambatnya perkembangan sel-sel hepar.  Adapun  pemberian  dengan  dosis
32  g/kgBB  selama  14  hari  berturut-turut menyebabkan  eritrosit  lisis,  dilatasi  vena sentral, kerusakan hepatosit akut, nekrosis  dan  atropi. 5 Pemberian  MSG secara  intraperitoneal  dosis  4  mg/gBB mencit  selama  15  hari  menunjukkan adanya degenerasi sel hepar akibat stres oksidatif. 6 MSG sebagai zat radikal bebas dapat memicu degenerasi struktur molekul  lemak  yang  menyusun  hepar. Peroksidasi  lipid  menjadi  ekstensif  dan mengganggu  fluiditas  membran  dan mengganggu fungsi makromolekul. 7 Berbagai  usaha  dilakukan  agar dapat  mempertahankan  tubuh  dari  efek toksik  radikal  bebas,  salah  satunya
dengan
pemberian antioksidan.
Kandungan  antioksidan  utama  yang terkandung pada  rimpang lengkuas adalah flavonoid. Ekstrak lengkuas mampu menghambat enzim cyclooxygenase
serta menurunkan volume  dan  berat  granuloma  pada inflamasi dan berperan sebagai agen anti- inflamasi  pada  mencit  yang  mengalami stres oksidatif. 8

## 2.  METODE
Penelitian  ini  dilakukan  bulan November-Desember 2017 di
Laboratorium  Fisiologi,  Biokimia,  dan Biomolekuler  dan  Laboratorium  Anatomi, Histologi,  dan  Patologi  Anatomi  Fakultas Kedokteran Universitas Lampung dengan menggunakan desain penelitian Post Test Only  Control  Group  Design .  Sampel penelitian yang digunakan adalah 25 ekor mencit  ( Mus  musculus L.)  yang  dibagi menjadi kelompok kontrol negatif, kelompok  kontrol  positif,  dan  kelompok perlakuan. Kelompok kontrol negatif tidak diberikan  perlakuan  apapun  selama  21 hari,  kontrol  positif  diberikan  4  mg/gBB MSG  selama  14  hari,  perlakuan  1 diberikan 4 mg/gBB MSG selama 14 hari dilanjutkan dengan ekstrak etanol rimpang  lengkuas  dosis  14  mg/20  gBB selama  7  hari,  perlakuan  2  diberikan  4 mg/gBB MSG selama 14 hari dilanjutkan dengan  ekstrak  etanol  rimpang  lengkuas dosis  28  mg/20  gBB  selama  7  hari,  dan perlakuan  3  diberikan  4  mg/gBB  MSG selama 14 hari dilanjutkan dengan ekstrak etanol  rimpang  lengkuas  dosis  56  mg/20 gBB selama 7 hari. Monosodium Glutamate (MSG) dilarutkan dalam 0,5ml aquades dan
diberikan secara
intraperitoneal,  sementara  ekstrak  etanol rimpang lengkuas diberikan secara peroral.  Pada  hari  ke-22  dilakukan pembedahan untuk selanjutnya dilakukan
penilaian  gambaran  histopatologi  hepar mencit ( Mus musculus L.) .
Preparat diamati di bawah mikroskop dengan perbesaran 400x pada lima  lapang  pandang.  Kriteria  penilaian histopatologi yang diamati sesuai dengan model skoring histopatologi Manja Roegnik yaitu, degenerasi parenkimatosa,  degenerasi  hidropik,  dan nekrosis.
Data  yang  diperoleh  akan  diolah menggunakan SPSS  24.00  for  Windows lalu  dilakukan  uji Shapiro  Wilk untuk melihat  normalitas  data.  Setelah  data terdistribusi normal, dilanjutkan dengan uji
One Way
ANOVA untuk melihat perbedaan  rerata  kelompok  kontrol  dan kelompok  perlakuan  lalu  dilanjutkan dengan  uji Post  Hoc untuk  melihat perbedaan kelompok.

## 3.  HASIL PENELITIAN
Pada  hasil  pengamatan  terlihat degenerasi  sel  hepar  terbanyak  terdapat pada  kelompok  kontrol  (+)  yang  hanya diberikan MSG 4 mg/gBB saja selama 14 hari, selanjutnya terlihat penurunan perhitungan degenerasi sel hepar seiring meningkatnya dosis ekstrak etanol rimpang lengkuas pada kelompok perlakuan 1, 2, dan 3. Angka degenerasi sel  hepar  terkecil  didapatkan  pada kelompok kontrol (-)  yang tidak diberikan perlakuan apapun. Grafik
hasil perhitungan degenerasi sel dapat terlihat pada gambar 1.
Gambar 1. Hasil Perhitungan Degenerasi Sel Hepar
Pada hasil gambaran histopatologi degenerasi  sel  hepar  setelah  pemberian MSG  4  mg/gBB  dan  ekstrak  etanol rimpang lengkuas dosis 14 mg/20 gBB, 28 mg/20  gBB,  dan  56  mg/20  gBB  terlihat adanya  degenerasi  parenkimatosa  dan degenerasi  hidropik  seperti  terlihat  pada Gambar 2.
Perhitungan  degenerasi  sel  hepar mencit  ( Mus  musculus L.)  diuji  dengan One Way ANOVA untuk mengetahui efek pemberian MSG serta pemberian ekstrak etanol  rimpang  lengkuas.  Hasil  yang didapatkan adalah p=0,001 (p<0,05) yang berarti terdapat perbedaan degenerasi sel hepar  bermakna  pada  lebih  dari  2 kelompok  percobaan.  Setelah  dilakukan pengamatan  pada  penelitian  yang  telah dilakukan
didapatkan penurunan degenerasi  sel  hepar  yang  bermakna terhadap  jumlah  dosis  ekstrak  etanol rimpang  lengkuas  yang  diberikan.  Pada uji One Way ANOVA didapatkan p<0,05, sehingga  data  bermakna  secara  statistik dan  dilanjutkan  dengan  uji Post  Hoc . Pada  uji Post  Hoc terlihat  adanya pengaruh perlakuan terhadap penurunan degenerasi  sel  hepar  yang  bermakna secara  statistik  terhadap  peningkatan dosis  ekstrak  etanol  rimpang  lengkuas pada  kontrol  negatif  dan  kontrol  positif, kontrol negatif dan P1, kontrol negatif dan P2, kontrol negatif dan P3, kontrol positif dan P2, kontrol positif dan P3, P1 dan P2, P1  dan  P3.  Didapatkan  pula  hasil  tidak bermakna  secara  statistik  (p>0,05)  pada kontrol positif dengan P1, P2, dan P3.
0 5 10 15 Kontrol (+) P1 P3 Perhitungan Degenerasi Sel Hepar

## Gambar 2. Histopatologi Hepar Mencit
Keterangan: a: Sel hepatosit normal; b: Degenerasi parenkimatosa ; c: Degenerasi hidropik

## 4.  PEMBAHASAN
Monosodium  Glutamate (MSG) digunakan  oleh  masyarakat  sebagai penambah  cita  rasa  pada  makanan. Pemberian  MSG  selama  14  hari  dapat menghambat perkembangan sel hepar. 5
Terlihat  pula  adanya  degenerasi  sel hepar dengan pemberian secara intraperitoneal  dosis  MSG  4  mg/gBB mencit  selama  15  hari. 6 Kandungan glutamate pada  MSG  dapat  memicu stres oksidatif yang menyebabkan peroksidasi lipid. Peroksidasi lipid menyebabkan  kerusakan  membran  sel lalu mengakibatkan kerusakan baik pada struktur maupun fungsi sel. 7 Pada  sel  hepar  yang  mengalami kerusakan
maka dapat terlihat perubahan  struktur  sel  hepar  seperti degenerasi  dan  nekrosis.    Perubahan degeneratif  adalah  perubahan  bersifat reversibel  sehingga  jika  stimulan  yang menyebabkan kerusakan dihentikan pajanannya  maka  sel  dapat  kembali sehat seperti sebelum distimulasi, sedangkan nekrosis merupakan perubahan bersifat irreversibel sehingga tidak  dapat  kembali  seperti  semula walaupun  pajanan  stimulan  dihentikan dan  sel  telah  mencapai  titik  akhir kerusakan  sehingga  berakibat  pada kematian sel. 9 Degenerasi  merupakan  proses awal pada kerusakan sel hepar.
Degenerasi mengakibatkan sel mengalami pembengkakan. Hal tersebut terlihat pada kelompok dengan pemberian MSG. Pemberian MSG menyebabkan  cairan  intrasel  masuk  ke sitosol dalam jumlah besar. Hal ini dapat lebih  mudah  terjadi  pada  membran  sel yang terganggu permeabilitasnya. Perubahan  sifat  membran  dari  unsur- unsur sel seperti mitokondria dan lisosom dapat  terjadi  akibat  peroksidasi  lipid karena  induksi  radikal  bebas  secara terus-menerus. Efek toksik mulanya akan merusak membran sel, selanjutnya akan merusak bagian inti sehingga
mengakibatkan  struktur  dan  fungsi  tidak normal dan lama-kelamaan akan mengakibatkan terjadinya nekrosis. 10 Pada hasil pengamatan didapatkan  terjadi  perubahan  struktur berupa  degenerasi  parenkimatosa  dan degenerasi hidropik pada semua kelompok  kecuali  kelompok  kontrol
negatif  yang  tidak  diberikan  perlakuan apapun. Degenerasi parenkimatosa merupakan  perubahan  yang  ditandai dengan  pembengkakan  sel  disertai sitoplasma yang bergranula akibat endapan  protein  sehingga  jaringan tampak keruh. Pembengkakan sel terjadi pada mitokondria dan retikulum endoplasma.  Degenerasi  ini  memiliki sifat reversibel. 11
Degenerasi  hidropik  dapat  pula ditemui  di  semua  kelompok  dengan induksi  MSG.    Degenerasi  hidropik memiliki  tingkat  kerusakan  lebih  berat dibandingkan degenerasi parenkimatosa. Degenerasi hidropik memiliki  sebab  yang  dianggap  sama dengan degenerasi parenkimatosa,
hanya intensitasnya lebih, jangka waktunya  lebih  lama,  dan  tempat terjadinya pembengkakan tidak hanya di mitokondria  dan  retikulum  endoplasma saja.    Pada  degenerasi  hidropik  terlihat gambaran pembengkakan sel, air mengumpul  dalam  rongga-rongga  sel, dan  vakuola  kecil  bersatu  membentuk vakuola  lebih  besar  sehingga  inti  sel terdesak ke pinggir. 9
Perubahan-perubahan  ini  dapat dikaitkan  dengan  penelitian  sebelumnya yaitu  pemberian  MSG  subkutan  pada mencit  sebanyak  2  mg/gBB  selama  75 hari  memperlihatkan  adanya  degradasi dan hipertrofi hepatosit, gangguan struktur  vena,  dan  munculnya  sel inflamasi  di  antara  vena  sentral  disertai dengan adanya nucleus berbagai ukuran di  hepatosit. 2 Selain  itu,  MSG  dapat memicu  perdarahan  lokal  hepar  dan piknosis  nucleus  yang  ditandai  dengan larutnya kromosom dan proses kondensasi pada nukleus. 12 Terlihat pula adanya  peningkatan  enzim  penanda fungsi  hepar Alanine  aminotransferase (ALT) dan γ glutamyle transferase (GGT) akibat stres oksidatif yang dipicu MSG. 13 Salah  satu  langkah  menurunkan efek buruk radikal bebas adalah konsumsi antioksidan. Kandungan antikosidan yang umumnya telah dikenal adalah  flavonoid. 14 Flavonoid  dapat digunakan  untuk  melawan  efek  buruk radikal  bebas  dari  MSG.    Flavonoid banyak  terkandung  pada  tumbuhan. Salah  satunya  pada  rimpang  lengkuas yang  memiliki  kandungan  flavonoid
berupa galangin, kaemferol, dan kuersetin  dengan  efek  antioksidan  yang sangat  baik. 15 Selain  itu,  pada  bagian rimpang lengkuas terdapat dua senyawa fitokimia, yaitu Acetoxy Chavicol Acetate (ACA)  dan Hydroxy  Chavicol  Acetate (HCA)  yang  memiliki  efek  antitumor, antiinflamasi, antimikroba,
dan antioksidan. 16 Kandungan  ACA  pada ekstrak  lengkuas  dapat  menghambat proses  inflamasi  dengan  menghambat Nitric Oxide (NO) dan Cyclooxygenase -
2 (COX-2) sehingga mencegah kerusakan sel. Acetoxy Chavicol Acetate juga  dapat  meningkatkan  apoptosis melalui aktivasi caspase -3 dan metabolisme polyamine , sehingga memiliki potensi
sebagai
zat
antikanker. 17 Dari hasil penelitian terlihat bahwa  dosis  ektrak  etanol  rimpang lengkuas  memberi  pengaruh  penurunan perhitungan degenerasi sel hepar. Dosis paling tinggi pada penelitian ini memberi hasil  yang  paling  baik  dibandingkan dengan  kelompok  perlakuan  lainnya. Adapun dosis tertinggi  yang mempunyai efek paling baik adalah 56 mg/20 gBB.
Penurunan  degenerasi  sel  hepar yang  bermakna  terhadap  peningkatan dosis  ekstrak  etanol  rimpang  lengkuas yang  diberikan  dapat  terjadi  akibat pengaruh  kandungan  flavonoid  pada rimpang  lengkuas  sebagai  antioksidan yang  dapat  menangani  dampak  buruk radikal  bebas  akibat  induksi  MSG. Antioksidan  dapat  mengurangi  dampak buruk radikal bebas dalam tubuh dengan menstabilkan radikal bebas melalui cara melengkapi  elektron  yang  kurang  pada radikal bebas, menghambat  reaksi berantai dan pembentukan radikal bebas yang  dapat  menimbulkan  stres  oksidatif dan kerusakan sel hepar. 18 Pada hasil pengamatan didapatkan ekstrak etanol rimpang
lengkuas  dosis  28  mg/20  gBB  dan  56 mg/20 gBB memiliki hasil secara statistik bermakna terhadap
perhitungan degenerasi  sel  hepar,  sedangkan  dosis 14  mg/20  gBB  secara  statistik  tidak bermakna.  Hal  ini  dapat  terjadi  karena antioksidan  yang  terkandung  dalam dosis  14  mg/20  gBB  belum  dapat menangani  kerusakan  yang  diakibatkan oleh    radikal  bebas  pada  MSG  secara efektif.    Seperti  diketahui  berdasarkan hasil  konversi,  didapatkan  dosis  efektif ekstrak  etanol  rimpang  lengkuas  adalah
28 mg/20 gBB, sehingga dapat disimpulkan  dosis  lebih  kecil  dari  dosis efektif  akan  mengakibatkan  kurang efektifnya  kerja  antioksidan.  Hal  ini berkaitan dengan penelitian sebelumnya yang menyebutkan pemberian antioksidan dosis bertingkat dapat menurunkan  jumlah  degenerasi  sel hepar  dan  menghentikan  penyebaran radikal bebas. 4
Pada  penelitian  ini,  peneliti  juga menghadapi keterbatasan yaitu,
penelitian  ini  hanya  melihat  struktur histopatologi saja sehingga tidak menjelaskan  perubahan  fungsi  pada organ  hepar  mencit  ( Mus  musculus L.) dan  metode  pengenceran  MSG  yang masih  sederhana  sehingga  kesesuaian perhitungan  dosis  tidak  dapat  dilakukan secara presisi.

## 5.  SIMPULAN
Terdapat  pengaruh  pemberian ekstrak etanol rimpang lengkuas terhadap  gambaran  histopatologi  hepar mencit ( Mus musculus L.) yang diinduksi MSG.

## 6.  SARAN
Pada penelitian selanjutnya diperlukan  penelitian  untuk  melihat perubahan  fungsi  hepar  mencit  ( Mus musculus L.)  yang  diinduksi  MSG  serta penggunaan  alat  ukur  yang  lebih  teliti untuk  penentuan  dosis  pengenceran MSG yang lebih presisi.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Muliartha IKG, Endang S, Yuliawati.
Pemberian  Kombinasi  Vitamin  C dan E Peroral Memperbaiki Kerusakan  Hepar  Akibat  Paparan Rokok  Kretek  Subkronik .  Jurnal Kedokteran Brawijaya. 2009;25(1):23-7. 2. Bhattacharya  T,  Bhakta  A,  Ghosh SK. Long Term Effect of Monosodium  Glutamate  in  Liver  of Albino Mice After Neo-natal
Exposure .  Nepal  Med  Coll  J. 2011;13(1):11-16.
3. Suci EN. Histologi Hasil Ulas Vagina dan  Waktu  Siklus  Estrus  Mencit (Mus musculus, L.) Setelah Pemberian  Monosodium  Glutamat (MSG) . Skripsi. Kendari: Universitas Halu Oleo. 2015.
4. Maulida A, Syafruddin I, Salomo H. Pengaruh Pemberian Vitamin C dan E  terhadap  Gambaran  Histologis Hepar  Mencit  (Mus  musculus  L.) yang Dipajankan Monosodium Glutamat  (MSG) .  Repository  USU. 2013;1(2):15-20.
5. Eweka AO , Om’iniabosh F. Histological Studies of the Effects of Monosodium  Glutamate  on  the Small Intestine of Adult Wistar Rats . Journal of Gastroenterology. 2008;2(1):14-8.
6. Kanti  EAA,  Susianti. Pengaruh
Pemberian  Vitamin  C  terhadap Gambaran  Histologis  Hepar  Mencit Jantan  Dewasa  (Mus  musculus) yang Diinduksi Monosodium Glutamate . Juke Unila. 2012;81-95.
7. Reiter  RJ. Oxidative  Process  and Antioxidative Defense Mechanism in the  Aging  Brain .  FASEB  Journal. 2005;9(1):526-33.
8. Baldo  DEB,  Serrano  JE. Screening for Intestinal Anti-inflammatory Activity  of  Alpinia  galangal  Against Acetic  acid-Induced  Colitis  in  Mice (Mus musculus) . Journal of Medicinal Plants Studies. 2016;1(4):72-7.
9. Price  S,  Lorraine  M. Patofisiologi:
Konsep Klinis Proses-proses Penyakit . Jakarta: EGC, 2004. 10.  Haryatmi. Kemampuan  Vitamin  E sebagai Antioksidan
terhadap
Radikal  Bebas  pada  Lanjut  Usia . Tesis. Semarang: FKIP UMS. 2004. 11.  Bhara  MLA. Pengaruh  Pemberian
Kopi  Dosis  Bertingkat  per  Oral  30 hari  terhadap  Gambaran  Histologis Hepar Tikus Wistar . Tesis.
Semarang: Universitas Diponegoro.
2009.
12.  Khumbare  V,  Gajbe  U,  Singh  BR,
Reddy AK, Shukla S. Histological &
Histochemical  Changes  in  Liver  of Adult Rats Treated with Monosodium  Glutamate:  A  Light Microscopic Study . World Journal of Pharmacy and Pharmaceutical
Sciences. 2015:4(4):898-911.
13.  Tawfik  MS,  Al-Badr  N. Adverse
Effects  of  Monosodium  Glutamate on  Liver  and  Kidney  Functions  in Adult  Rats  and  Potential  Protective Effect of Vitamin C and E . Scientific Research. 2012:3(1):651-9.
14.  Mahae  N,  Siree  C. Antioxidant Activities and Antioxidative Components  in  Extract  of  Alpinia galanga (L.) Sw . Nat.Sci.
2009;43(1):358-69.
15.  Wathoni  N,  Rusdiana  T,  Hutagaol
RY. Formulasi  Gel  Antioksidan Ekstrak Rimpang Lengkuas (Alpinia galanga L.Willd) dengan Menggunakan  Basis  Aqupec  505 HV . Farmaka. 2009;7(1):15-27. 16.  Samarghandian  S,  Afshari  JT, Davoodi S. Honey Induces Apoptosis in Renal Cell Carcinoma . Pharmacogn  Mag.  2014;7(25):46-
52. 17.  Hartono,  NWB. Pengaruh  Alpinia galanga (Lengkuas) terhadap Aktivitas  Proliferasi  Sel  dan  Indeks Apoptosis  pada  Adenokarsinoma Mamma Mencit C3H . Tesis.
Semarang: Universitas Diponegoro.
2009.
18.  Schram DD, Karim M, Schrader HR, Holt  RR,  Cardetti  M,  Keen  CL. Honey with High Levels of
Antioxidants Can Provide Protection to Healthy Human Subjects. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 2003;51(6):1732-5.