UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK DAUN TANAMAN JOHAR (Cassia siamea Lamk . ) DARI BEBERAPA TINGKAT KEPOLARAN PELARUT
[Antibacterial Activity Test of Johar Plant Leaf Extract ( Cassia siamea Lamk.) Using Several Levels of Solvent Polarity]
Fitriah 1* , Mappiratu 1 , Prismawiryanti 1
1 Jurusan Kimia Fakultas MIPA, Universitas Tadulako Jl. Soekarno Hatta Km.9, Kampus Bumi Tadulako Tondo Palu, Telp. 0451- 422611
*)Coresponding author: fitriahmipa93@gmail.com (085240302412)
Diterima  25 Juli 2017, Disetujui 5 September 2017

## ABSTRACT
A  research  about  antibacterial  activity  test  of  johar  plant  leaf  extract  ( Cassia  siamea Lamk.)  using several  levels  of  solvent  polarity  has  been  implemented.  This  study  aims  to  determine  whether  the antibacterial compounds in the leaves is polar, non-polar or semi-polar, and to determine the highest inhibition level of johar leaf extract on  both the gram-negative bacteria ( Escherichia coli and Shigella dysenteriae )  and  gram-positive  ( Staphylococcus  aureus and Micrococcus  luteus ).  The  maceration method was used in this research  with 3 levels  of solvent  polarity  namely  non-polar, semi-polar and polar.  The  bacterial  activity  test  was  done  with  diffusion  method.  The  results  showed  that  the  johar leaf contains antibacterial compounds which are polar and semi-polar. The highest inhibition level was obtained at johar leaf ethanol extract for Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Micrococcus luteu and Shigella dysentriae of 14.9, 12.9, 12, and 7.2 mm, respectively.
Keywords: Antibacterial, Inhibition Level, Johar Leaf Extract

## ABSTRAK
Penelitian uji  aktivitas antibakteri ekstrak daun tanaman johar  ( Cassia siamea Lamk.) dari  beberapa tingkat  kepolaran  pelarut  telah  dilaksanakan.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  senyawa antibakteri  dalam  daun  johar  bersifat  polar,  non  polar  atau  semi  polar,  serta  daya  hambat  tertinggi ekstrak daun johar terhadap bakteri gram negatif ( Escherichia coli dan Shigella dysenteriae ) dan gram positif  ( Staphylococcus  aureus dan Micrococcus  luteus ).  Metode  ekstraksi  yang  digunakan  dalam penelitian  yaitu  metode  maserasi  dengan  3  tingkatan  polaritas  pelarut  yang  dimulai  dari  pelarut  non polar  ( n -heksan),  diikuti  dengan  pelarut  semi  polar  (etil  asetat)  dan  pelarut  polar  (etanol).  Uji  daya hambat  ekstrak  terhadap  bakteri  uji  dilakukan  menggunakan  metode  difusi.  Hasil  yang  diperoleh menunjukkan daun johar mengandung senyawa antibakteri yang bersifat polar dan semi polar. Daya hambat  tertinggi  diperoleh  pada  ekstrak  etanol  daun  johar  berturut-turut  14,9  mm  pada  bakteri Staphylococcus  aureus ,  12,9  mm  pada  bakteri Escherichia  coli, 12  mm  pada  bakteri Micrococcus luteus dan 7,2 mm pada bakteri Shigella dysentriae.
Kata kunci : Antibakteri, Daya Hambat, Ekstrak Daun Johar

## LATAR BELAKANG
Tumbuhan  memiliki  banyak  peranan yang  penting  dalam  kehidupan  manusia, seperti  penggunaan  pada  pengobatan secara  tradisional.  Ramuan  tradisional sebagian  besar  berasal  dari  tumbuhan, baik  dari  akar,  ,  kayu,  daun,  bunga  kulit batang, ataupun bijinya. Pengobatan secara  tradisional  memerlukan  riset  ilmiah untuk  dapat  dipertanggung  jawabkan, seperti  penelitian  toksikologi,  farmakologi, dan identifikasi serta isolasi senyawa kimia aktif  yang  terdapat  dalam  tumbuhan. Tumbuhan  obat  dapat  digunakan  sebagai antibakteri  pada  beberapa  jenis  penyakit. Indonesia  yang  memiliki  iklim  tropis terdapat  beberapa  jenis  penyakit  yang disebabkan  oleh  bakteri  patogen  dan cukup  banyak  diderita  oleh  masyarakat (Sjoekoer dkk., 2013).
Senyawa  aktif  pada  tumbuhan  yang memiliki potensi sebagai antibakteri termasuk dalam golongan senyawa metabolit  sekunder.  Golongan  senyawa metabolit sekunder adalah alkaloid, flavonoid,  saponin,  tanin,  steroid  dan triterpenoid  (Harborne,  1987).  Metabolit sekunder yang telah ditemukan pada daun tanaman  johar  terdiri  atas  :  saponin, antrakuinon, flavonoid dan alkaloid (Smith, 2009).  Beberapa  penelitian  menunjukkan ekstrak  metanol  dan  ekstrak  air  daun tanaman  johar  memiliki  aktivitas  anti malaria (Ajaiyeoba dkk., 2008; Morita dkk., 2007),  anti  diabetes  (Kumar  dkk . , 2010), antioksidan  (Kaur  dkk ., 2006),  anti  tumor dan  insektisida  (Kardono  dkk.,  2003),
mempengaruhi  sistem  imun  (Kusmardi dkk.,  2006),  analgesik  dan  anti  inflamasi (Ntandou dkk . , 2010). Keberadaan flavonoid  dan  alkaloid  dalam  daun  johar memungkinkan ekstrak daun johar berperan  sebagai  antibakteri.  Pernyataan tersebut  didasarkan  atas  temuan  Fatimah dkk.,    (2006) dalam Junanto  dkk.,  (2008) yang  menemukan  ekstrak  etanol  daun angsana menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus
aureus , Streptococcuc  pyogenes, dan Escherichia coli ,  sedangkan  ekstrak  kloroform  dan ekstrak heksan tidak menghambat pertumbuhan bakteri
Staphylococcus aureus , Streptococcuc
pyogenes,
Escherichia coli dan Pseudomonas aeruginosa. Murhadi dkk., (2007)
melaporkan  bahwa  ekstrak  etanol  dan  etil asetat  daun  salam  dapat  menghambat pertumbuhan  bakteri Bacillus  subtilis, Escherichia  coli,  Staphylococcus  aureus , dan Pseudomonas aeruginosa.
Uji metabolit sekunder sebagai antibakteri selalu didahului dengan ekstraksi  pelarut  yang  bertujuan  untuk menarik  metabolit  sekunder  yang  bersifat antibakteri.  Jenis  kepolaran  pelarut  akan sangat  berpengaruh  terhadap  hasil  uji. Senyawa polar akan terlarut dalam pelarut polar,  begitupun  sebaliknya  senyawa  non polar akan terlarut dalam pelarut non polar. Sementara pelarut yang bersifat semi polar akan  melarutkan  senyawa  aktif  yang bersifat semi polar juga.

## METODE PENELITIAN Bahan dan Peralatan
Bahan  dasar  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  daun  tanaman  johar yang  diperoleh  dari  lingkungan  kampus Universitas Tadulako. Bahan lainnya berupa  bakteri  patogen Staphylococcus aureus,  Escherichia  coli,  Mikrococcus luteus dan Shigella  dysenteriae ,  Nutrien Agar  (NA) , Nutrient  Broth  (NB),  antibiotik, aquades, n -heksan,  etil  asetat,  etanol, pereaksi  dragendorf,  serbuk  magnesium, HCl  pekat,  H 2 SO 4 pekat  dan  FeCl 3 ,  kertas saring,  tissu,  aluminium  foil  dan  asam asetat anhidrat.
Peralatan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  meliputi  tabung  reaksi,  rak tabung  reaksi,  cawan  petri,  pembakar bunsen,  blender,  ayakan  60  mesh,  rotary evaporator  vakum,  erlenmeyer,  corong kaca,  pipet  tetes,  neraca  analitik,  batang pengaduk,  autoclave,  gelas  kimia,  gelas ukur,  alat  penyaring  vakum,  inkubator, pipet  volum,  pipet  mikro,  jangka  sorong, cork borer dan penangas air.

## Prosedur Penelitian
Penelitian  ini  dilaksanakan  dalam tiga  tahapan  yaitu tahap  pengolahan  daun johar,  tahap  ekstraksi  daun  johar  dengan metode  maserasi  dan  tahap  uji  aktivitas antibakteri.

## Tahap pengolahan daun johar
Daun  johar  dicuci  bersih,  digunting kasar,  kemudian  dikeringkan  dibawah sinar  matahari  lalu  dihaluskan  dengan blender  dan  diayak  dengan  ayakan  60
mesh  untuk  mendapatkan  daun  johar dalam  bentuk  tepung.  Tepung  daun  johar disimpan  untuk  digunakan  pada  penelitian selanjutnya.
Tahap  ekstraksi  daun  johar  (Lisnawati, 2014)
Ekstraksi  dilakukan  menggunakan metode  maserasi  menggunakan  tiga  jenis pelarut.  Ekstraksi  pertama  digunakan pelarut non polar yakni n-heksan,  dengan cara  menimbang  tepung  daun  johar sebanyak 100 g, kemudian dimasukkan ke dalam Erlenmeyer 2000 mL, lalu ditambahkan 1000 mL n-heksan (perbandingan sampel dan pelarut 1 : 10). Campuran  disimpan  selama  2  x  24  jam, kemudian  disaring  dengan  penyaringan vakum.  Filtrat  yang  diperoleh  dipisahkan pelarutnya dengan rotary vakum evaporator  sehingga  didapatkan  ekstrak kental  daun  johar.  Residu  yang  diperoleh dikering –  anginkan  dan  selanjutnya dimasukkan  ke  dalam  Erlenmeyer  untuk diekstrak  kembali  dengan  pelarut  etil asetat,  kemudian  pelarut  etanol  dengan perlakuan  yang  sama  pada  ekstrak menggunakan n -heksan.

## Uji fitokimia
Uji fitokimia dilakukan untuk mengetahui  kandungan  seyawa  metabolit sekunder  pada  ekstrak  dan  fraksi  daun johar  seperti  flavonoid,  alkaloid,  saponin, tanin dan steroid/triterpenoid dengan menggunakan  pereaksi  yang  spesifik, meliputi :

## a.  Uji Alkaloid (Harborne, 1987)
Uji  alkaloid  dilakukan  dengan  cara memasukkan  1  mL  ekstrak  ke  dalam tabung  reaksi  lalu  ditambahkan  2-3  tetes pereaksi  dragendorf.  Hasil  positif  adanya alkaloid  ditunjukkan  dengan  terbentuknya endapan oranye/jingga.
b.  Uji Flavonoid (Harborne, 1987)
Sebanyak 1 mL ekstrak ditambahkan 0,5 g serbuk magnesium dan 10 tetes HCl pekat  (pereaksi  shinoda),  bila  bereaksi positif akan menghasilkan larutan berwarna jingga, merah muda atau merah.
c.  Uji
Steroid dan Triterpenoid
(Harborne, 1987)
Sebanyak 2 mL ekstrak ditambahkan asam  asetat  anhidrat  sebanyak  10  tetes dan  asam  sulfat  pekat  sebanyak  2  tetes. Larutan  dikocok  perlahan  dan  diamati. Adanya  steroid  ditunjukan  oleh  warna  biru atau hijau, sedangkan triterpenoid memberikan warna merah atau ungu . d.  Uji  Saponin  (Uji  Busa)  (Depkes  RI,
1995)
Sebanyak 2-3 mL ekstrak dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi, kemudian  ditambahkan  10  mL  air  panas lalu  didinginkan,  kemudian  dikocok  kuat- kuat  selama  10  detik  lalu  ditambahkan  1 tetes  HCl  2  N.  Uji  positif  ditunjukkan dengan  terbentuknya  buih  yang  stabil setinggi  1-10  cm  selama  tidak  kurang  dari 10 menit.
e.  Uji Tanin (Harborne, 1987)
Untuk  uji  tanin,  sebanyak  1  mL ekstrak  ditambahkan  3  tetes  larutan  FeCl 3 5%, bila bereaksi positif akan
menghasilkan  warna  hijau,  merah,  ungu, biru atau hitam.
Persiapan  bahan  uji  antibakteri (Fitrial,

## 2009)
Sebanyak  28  gram    nutrient  agar (NA)  dilarutkan  dalam  1000  ml  aquades, kemudian  di  sterilkan  kedalam  autoclave pada  suhu  121°C  dengan  tekanan  1  atm selama 15 menit.
Pembuatan  suspensi  bakteri  uji (Fitrial,
2009)
Satu  ose  bakteri  diambil  dari  biakan agar  miring  dan  diinokulasikan  ke  dalam media  cair  steril  Nutrient  Broth,  kemudian diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37˚C. Kultur  bakteri  siap  digunakan  untuk pengujian aktivitas antibakteri.
Pengujian  aktivitas  antibakteri  dengan metode sumur difusi (Darmawati, 2009)
Media  Nutrien  Agar  (NA)  sebanyak 25  ml  dicampur  dengan  25  μL  suspensi bakteri  uji  ( S.  Aureus,  M.  luteus,  E.  Coli dan  S.  dysentriae ),  dihomogenkan  lalu dituang  dalam  cawan  petri  steril  dan dibiarkan  sampai  memadat.  Setelah  itu dibuat  sumur  yang  berdiameter  ±6  mm dengan  menggunakan  cork  borer.  Setiap cawan  berisi  5  lubang  atau  sumur  (lubang pertama  untuk  kontrol  negatif,  lubang kedua  untuk  kontrol  positif  dan  3  lubang untuk  3  jenis  ekstrak),  setiap  sumur  diisi ekstrak  dengan  control  sebanyak  6  µL, kemudian  diinkubasi  selama  24  jam  pada suhu 37˚C. Selanjutnya diamati dan diukur diameter  zona  hambat  dengan  jangka sorong.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Metabolit Sekunder dalam Ekstrak Daun Johar
Analisis  senyawa-senyawa  metabolit sekunder  dalam  ekstrak  daun  johar dilakukan  dengan  uji  fitokimia.  Hasil  uji ekstrak  daun  johar  dari  tiga  jenis  pelarut disajikan dalam Tabel 1.
Tabel 1  Hasil  analisis  golongan  senyawa
ekstrak  daun  johar  berdasarkan jenis pelarut Golongan senyawa Jenis Pelarut n -heksan  Etil asetat   Etanol Alkaloid              -                +               +
Flavonoid           -                -                + Saponin             -                 -               + Tanin                  -               +               +
Steroid               +               +               - Pada Tabel 1 memperlihatkan dalam ekstrak n -heksan terdeteksi adanya senyawa  steroid,  tetapi  tidak  terdeteksi adanya  alkaloid,  flavonoid,  saponin  dan tanin.  Steroid  juga  terdeteksi  ada  dalam ekstrak  etil  asetat,  tetapi  tidak  terdeteksi dalam ekstrak etanol. Hal tersebut memberikan keterangan  dalam  daun johar terdapat dua jenis senyawa steroid, steroid yang  bersifat  non  polar  dan  steroid  yang bersifat  semi  polar.  Menurut  Lestiani  dan Lanny  (2008),  tingkat  kepolaran  pelarut menentukan  jenis  dan  jumlah  senyawa yang  dapat  diekstrak  dari  bahan,  dimana Pelarut akan mengekstrak senyawa- senyawa  yang  mempunyai  sifat  kepolaran yang  sama  dengannya.  Selain  steroid, dalam  ekstrak  etil  asetat  juga  terdeteksi adanya tanin dan alkaloid. Kedua senyawa ini  juga  terdeteksi  dalam  ekstrak  etanol,
yang  berarti  tanin  dan  alkaloid  yang  ada pada  daun  johar  terdiri  atas  tanin  dan alkaloid semi polar serta tanin dan alkaloid polar. Menurut Dewi (2013) dalam Simaremare  (2014)  menyatakan  bahwa senyawa  golongan  alkaloid  mengandung nitrogen  sebagai  bagian  dari  system sikliknya  serta  mengandung  substituen yang  bervariasi  seperti  gugus  amina, amida, fenol dan metoksi sehingga alkaloid bersifat semi polar yang dapat larut dalam pelarut semi polar.
Pada  Tabel  1  juga  memperlihatkan golongan  senyawa  flavonoid  dan  saponin terdeteksi  dalam  ekstrak  etanol,  tetapi tidak  terdeteksi  dalam  ekstrak  etil  asetat maupun ekstrak n -heksan, yang menunjukkan  flavonoid  dan  saponin  yang ada  dalam  daun  tanaman  johar  adalah flavonoid  dan  saponin  yang  bersifat  polar. Menurut  Padjatmaka  (1982)  menyatakan bahwa  pelarut  etanol  dapat  mengekstraksi senyawa fenol, flavonoid, tanin terkondensasi, saponin dan alkaloid karena senyawa-senyawa tersebut mempunyai gugus fungsional, ikatan rangkap,  atom  nitrogen  dan  atom  oksigen yang bersifat polar.
Temuan  adanya  saponin,  alkaloid dan  flavonoid  dalam  daun  johar,  juga ditemukan oleh Smith (2009) yang melakukan analisis fitokimia daun tanaman johar  menggunakan  pelarut  etanol.  Smith (2009)  tidak  menemukan  adanya  steroid karena  tidak  menggunakan  pelarut  non polar  dan  pelarut  semi  polar.  Menurut Adnan  (1997),  pada  umumnya  polaritas
senyawa  organik  akan  meningkat  dengan bertambahnya gugus fungsional dan berkurang  dengan  bertambahnya  berat molekul.
Daya Hambat Ekstrak Daun Johar
Pengujian daya hambat ekstrak daun johar  terhadap  pertumbuhan  bakteri S. aureus, M. luteus, E. coli dan S. dysentriae menggunakan  tiga  jenis  ekstrak  yaitu ekstrak n -heksan,  ekstrak  etil  asetat  dan ekstrak etanol. Antibiotik ( Penicillin,
Ofloxacin  dan  Chloramphenicol )  sebagai kontrol  positif.  Pengujian  ini menggunakan metode sumur difusi yang ditandai dengan terbentuknya  zona  bening  disekeliling sumur.  Pengamatan  pengukuran  diameter zona  hambat  dari  masing-masing  ekstrak menggunakan jangka sorong analitik. Hasil pengukuran diameter zona hambat disajikan pada Gambar 1 dan Tabel 2.
(a)                           (b)
(c)                           (d)
Gambar 1  Hasil  uji  aktivitas  antibakteri ekstrak n -heksan,  ekstrak  etil asetat dan ekstrak etanol terhadap bakteri : (a) Staphylococcus aureus, (b) Micrococcus luteus, (c)
Escherichia coli dan (d)
Shigella dysentriae.
Tabel 2 Hasil  pengamatan  uji  daya  hambat  ekstrak  daun  terhadap  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus.  aureus,  Mikrococcus  luteus,  Escherichia.  coli dan Shigella dysentriae .
Pada Tabel 2 memperlihatkan ekstrak  heksana  tidak  memberikan  daya hambat  terhadap  semua  bakteri  uji. Dengan  demikian  steroid  non  polar  dalam daun  johar  tidak  bersifat  antibakteri.
Ekstrak  etil  asetat  yang  mengandung steroid  semi  polar  dan  tanin  semi  polar memberikan zona hambat terhadap semua bakteri  uji,  meskipun  diameter  zona hambatnya  berbeda-beda.  Diameter  zona
Ekstrak

## Diameter Rata-rata Zona Hambat (mm)
S. aureus          M. luteus         E. coli        S.dysentriae
n -heksan                                                 0                      0                    0                      0 Etil asetat                                             12,6                   5,1                9,2                  5,8 Etanol                                                   14,9                   12                12,9                 7,2 Kontrol Positif Penicillin 15,6                    -                  14,7 - Ofloxacin -                      29,4                - -
Chloramphenicol -                       -                     -                   21,5
Kontrol Negatif (0 ekstrak)                     0                      0                     0                      0
hambat  tertinggi  (12,6  mm)  ditemukan pada  bakteri S.  aureus dan  zona  hambat terendah  (5,1  mm)  terdapat  pada  bakteri uji M.  luteus. Kelompok  senyawa  dalam ekstrak  etil  asetat  yang  berperanan sebagai antibakteri belum dapat ditemukan,  perlu  pengujian  lanjut  sebab dalam  ekstrak  etil  asetat  terdapat  3 kelompok  senyawa.  Jika  diasumsikan hanya satu jenis senyawa yang berperanan  sebagai  antibakteri,  maka senyawa  semi  polar  dalam  daun  johar memiliki  spektrum  penghambatan  yang luas terhadap bakteri dibandingkan dengan Penicillin, Ofloxacin dan Chloramphenicol yang hanya menghambat satu  jenis  bakteri  dari  4  jenis  bakteri  yang dicobakan, kecuali Penicillin yang memberi zona  hambat  pada  dua  jenis  bakteri. Menurut Renhoran (2012) umumnya kelompok  bakteri  gram  positif  lebih  peka terhadap  senyawa  yang  memiliki  aktivitas antimikroba dibanding dengan gram negatif.  Perbedaan  sensitifitas  bakteri gram  positif  dan  bakteri  gram  negatif dapat  disebabkan  oleh  perbedaan  struktur dinding  sel  yang  dimiliki  oleh  masing- masing bakteri.
Ekstrak  etanol  yang  mengandung senyawa –senyawa polar (alkaloid, flavonoid saponin dan tanin) juga memberikan zona hambat terhadap semua bakteri  uji.  Zona  hambat  tertinggi  (14,9 mm)  ditemukan  pada S.  aureus dan  zona hambat  terendah  (7,2  mm)  terdapat  pada S.  dysentriae. Menurut  Davis  dan  Stout (1971) dalam Arista  (2013),  berdasarkan
zona  jernih  atau  zona  bening  yang terbentuk,  daya  hambat  dikelompokkan menjadi  4 kelompok  yaitu  sangat kuat  bila zona  hambat  >20  mm,  kuat  10-20  mm, sedang  5-10  mm  dan  lemah  <5  mm. Berdasarkan  pernyataan  Davis  dan  Stout (1971) dalam Arista  (2013),  senyawa antibakteri  dalam  ekstrak  etil  asetat termasuk  antibakteri  zona  hambat  kuat terhadap S.  aureus dan  zona  hambat sedang  terhadap M.  luteus,  E.  coli dan S. dysenteriae . Demikian pula senyawa antibakteri  dalam  ekstrak  etanol  termasuk zona  hambat  kuat  terhadap S.  aureus,  M. luteus dan E.  coli, tetapi  zona  hambat sedang terhadap S. dysentriae.
Berdasarkan hasil pengamatan diperoleh  daya  hambat  terbesar  terdapat pada  ekstrak  etanol  yang  mengandung senyawa  alkaloid,  flavonoid,  saponin  dan tanin  terhadap  bakteri Staphylococcus aureus . Menurut Newall dkk.,(1996) senyawa  tanin  dan  flavonoid  mempunyai aktivitas antibakteri untuk melawan Staphylococcus  aureus. Senyawa  tanin dapat  berperan  sebagai antibakteri karena dapat  mengganggu  sintesa  peptidoglikan sehingga  pembentukan  dinding  sel  bakteri menjadi  kurang  sempurna.  Mekanisme kerja tanin sebagai antibakteri berhubungan  dengan  target  penyerangan tanin terhadap kerusakan polipeptida yang terdapat pada dinding sel bakteri sehingga mengganggu  sintesa  peptidoglikan  yang menjadikan pembentukan dinding sel tidak sempurna  dan  mengakibatkan  inaktivasi sel  bakteri  pada  sel  inang  (Naim,  2004).
Menurut  Sabir  (2005)  dalam  penelitiannya menjelaskan  bahwa  gugus  hidroksil  yang terdapat  pada  struktur  senyawa  flavonoid menyebabkan perubahan komponen organik dan transport nutrisi yang akhirnya akan mengakibatkan timbulnya  efek toksik terhadap bakteri.
Hasil  uji  aktivitas  antibakteri  pelarut etanol  menunjukkan  dapat  menghambat pertumbuhan  bakteri  gram  negatif    tetapi tidak  dapat  menghambat  pertumbuhan bakteri  gram  positif . Hal  ini  dapat disebabkan  oleh  tingginya  konsentrasi etanol  yang  digunakan  (>98%).  Etanol absolut  memiliki  efek  bakterisidal  yang lebih lemah dibandingkan campuran antara alkohol dan air. Meskipun demikian, etanol  pada  konsentrasi  60-99%  masih dapat  menghambat  pertumbuhan  gram negatif  (Ali  dkk.,  2001). n -Heksan  tidak menunjukkan aktivitas antibakteri terhadap bakteri  gram  positif  dan  negatif.  Hal  ini sesuai  dengan  hasil  penelitian  Abhishek dkk.,  (2013)  dan  Ekwenchi  dkk.,  (2014) yang menunjukkan bahwa heksan sebagai kontrol  negatif  tidak  memiliki  aktivitas antibakteri  terhadap bakteri  gram  positif dan  gram  negatif.  Menurut  Parekh  dkk., (2005)  aktivitas  antibakteri  dipengaruhi oleh  polaritas  senyawa  yang  diekstraksi oleh masing-masing pelarut dengan kemampuan  zat  tersebut  untuk  menyebar pada  media  berbeda  yang  digunakan dalam pengujian aktivitas antibakteri.
Menurut  Schlegel  (1993),  bahwa setiap golongan senyawa dapat memberikan  efek  yang  berbeda  dalam
menghambat pertumbuhan bakteri.
Perbedaan  aktivitas  yang  terjadi  tersebut disebabkan  oleh  metabolit  sekunder  yang terkandung  memiliki  efek  sinergis  yang berbeda tergantung dari sifat dan morfologi dari  bakteri  tersebut.  Faktor  lain  yang menyebabkan  perbedaan  diameter  zona hambat  dari  ekstrak  tersebut  adalah perbedaan  senyawa  aktif  yang  terdapat pada  ekstrak.  Hal  ini  sesuai  dengan pendapat  Prescott  (2005),  bahwa  ukuran dari zona hambat dipengaruhi oleh beberapa  hal,  seperti  tingkat  sensitifitas dari  organisme  uji,  kecepatan  difusi  dari senyawa antibakteri dan konsentrasi senyawa antibakteri.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang diperoleh  dapat  disimpulkan  bahwa,  daun johar  mengandung  senyawa  antibakteri yang  bersifat  polar  dan  semi  polar,  tetapi tidak  mengandung  senyawa  antibakteri yang bersifat non polar.
Daya  hambat  tertinggi  ekstrak  daun johar  terhadap  bakteri  gram  negatif diperoleh dari ekstrak etanol yaitu 12,9 mm pada  bakteri Escherichia  coli ,  sedangkan pada  bakteri  gram  positif  yaitu  14,9  mm pada bakteri Staphylococcus aureus .

## UCAPAN TERIMAKASIH
Secara
khusus peneliti menyampaikan ucapan terima kasih kepada  Laboran  Jurusan  Kimia  dan Himpunan  Mahasiswa  Kimia  (HIMAKIM) FMIPA UNTAD.

## DAFTAR PUSTAKA
Abhishek,  S.,  Ujwala,  P.,  Shivani,  K.,  dan
Meeta, B. 2013. Antibacterial activity of Tecomella undulata leaves  crude  extracts. International Journal  of  Biological  Sciences. 2 (6): 60-62.
Adnan,  M.  1997. Teknik  Kromatografi untuk  Analisis  Bahan  Makanan.
Edisi  Pertama.  Cetakan  Pertama. Yogyakarta: Penerbit Andi.
Ajaiyeoba,  E.O  ;  J.S.  Ashidi;  L.C  Okpako; P.J.  Houghton  dan  C.W.Wright. 2008.  Antiplasmodial  compounds from  Cassia  siamea  stem  bark extract. Phytoteraphy  Research 22 (2): 254 – 255.
Ali,  Y.,  Dolan,  M.  J.,  Fendler,  E.  J.,  dan
Larson, E. L. 2001. Alcohols . Dalam
Block, S. S. (ed.). 2001. Disinfection,
Sterilization,  and  Preservation .  Edisi ke-  5.  Lippincott  Williams  and Wilkins,  Philadelphia.  Halaman  231
dan 234.
Arista,  Y.  N.  2013.  Formulasi  dan  Uji Aktivitas  Gel  Antijerawat  Ekstrak
Umbi Bakung (Crinum Asiaticum L.) terhadap  Bakteri  Staphylococcus aureus secara In Vitro .
( http://ejournal.unstrat.ac.  id/index. php/pharmacon/article/  view/1552 ).
Diakses 1 November 2016.
Darmawati,  S.  2009.  Keanekaragaman
Genetik Salmonella  typhi . Jurnal Kesehatan, 2 (1): 28-32
Depkes  RI.  1995. Farmakope  Indonesia.
Jakarta:  Departemen  Kesehatan
Republik Indonesia.
Ekwenchi, M.  M., Oluigbo,  J., Akpuaka, A. 2014.  Antibacterial  activity  of  n-
hexane extract of Ocimum
gratissimum leaves. IOSR  Journal of Applied Chemistry 7(5): 6 -10.
Fitrial,  Y.  2009.  Analisis  Potensi  Biji  dan Umbi Teratai ( Nymhaea pubescens Willd)  untuk  Pangan  Fungsional Prebiotik dan Antibakteri Escherichia  coli.  Enteropatogenik K1.1. ( Tesis). Bogor: Pasca Sarjana Institut Pertanian Bogor. Harborne, J.B. 1987. Phytochemical methods . Diterjemahkan oleh Kosasih  Padmawinata  dan  Iwang
Sudiro. Bandung: Penerbit ITB.
Junanto,  T.,  Sutarno.,  Supriyadi.  2008.
Aktivitas Antimikroba Ekstrak Angsana ( Pterocarpus indicus ) terhadap Bacillus subtilis dan
Klebsiella pneumonia . Jurnal
Bioteknologi. 5 (2): 63 - 69.
Kardono, L.B.S; N. Artanti, I.D Dewi Yanti,
T. Basuki. 2003. Selected Indonesian Medicinal Plants.
Monographs  and  Descriptions  Vol.
1.  Jakarta:  Gramedia  Widiasarana Indonesia.
Kaur,  G.,  M.S.  Alam,  Z.  Jabbar,  K.  Javed dan  M.  Athar.  2006.  Evaluation  of antioxidant activity of Cassia siamea flowers.
Journal of
Ethnopharmacology 108  (3):  340 –
348.
Kumar,  S.,  V.  Kumar  dan  O.  Prakash.
2010.  Antidiabetic  and  anti-lipemic effects  of  Cassia  siamea  leaves extract  in  streptozotocin  induces diabetic  rats. Asian  Pasific  Journal of Tropical Medicine , 871 – 873.
Kusmardi, S. Kumala, D. Wulandari. 2006.
Pengaruh pemberian ekstrak etanol daun  johar  (Cassia  siamea  Lamk) terhadap  peningkatan  aktivitas  dan kapasitas  fagositosis  sel  makrofag.
Makara Kesehatan. 10 (2): 89 – 93 Lestiani,  Lanny.  2008. Vitamin  Larut  Air. Universitas Indonesia. Jakarta.

## Lisnawati.  2014.  Aktivitas  Antioksidan
Ekstrak Daun Kelor ( Moringa oleifera L.)  Dari  Berbagai  Tingkat Kepolaran Pelarut. ( Skripsi). FMIPA Kimia. Universitas Tadulako. Palu.
Morita,  H.;  S.  Oshimi,  Y.  Hirasawa,  K.
Koyama,  T.  Honda,  W.  Ekasari,  G.
Indrayanto, N.C. Zaini. 2007.
Cassiarins A end B, novel antiplasmodial alkaloid from Cassia siamea. Organic  Letters. 9  (18):
3691 – 3693.
Murhadi, Suharyono AS., Susilawati. 2007. Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Daun Salam  ( Syzygium  polyanta )  dan Daun Pandan ( Pandanus amaryllifolius ). Jurnal Teknologi dan  Industri  Pangan. 18  (1):  17  - 24.
Naim, R. 2004.  Senyawa Antimikroba Dari Tumbuhan. ( http://www2.kompas. com/kompas-cetak/0409/15/sorotan /1265265.htm) .  Diakses  Tanggal  6 Desember 2016.
Newall,  CA.  Anderson  LA.,  Phillipson,JD. 1996. Herbal Medicines A Guide for
Health-care  Prefessionals. London: The Pharmaceutical Press.
Ntandou, G.F.N., J.T. Banzouzi, B.
Mbatchi,  R.D.G.  Elion-Itou,  A  W. Eou-Ossibi,  S.  Ramos,  F.  Benoit Vical,  A.A.  Abena,  J.M.  Oumba. 2010. Analgesic and anti- inflammatory  effects  of Cassia siamea Lamk.  Stem  bark  extracts.
Journal of Ethnopharmacology. 127
(1): 108 – 111.
Padjatmaka.  1982. Kimia  Organik  I .
Erlangga. Jakarta. Terjemahan:
Organic  Chemistry. Fessenden,  R,
J., and Fessenden, J, S.,
Wardsworth.
Inc., Belmont.
California.
Parekh,  J.,  Jadeja,  D.,  Chanda,  S.  2005. Efficacy  of  Aqueous  and  Mathanol
Extracts  of  Some  Medicinal  Plants for  Potential  Antibacterial  Activity.
Turk J Biol. 29: 203 - 210.
Prescott,  LM.  2005. Microbiology .  New York: Mc.Grow-Hill.
Renhoran,  W.  2012.  Aktivitas  Antioksidan
dan Mikrobiologi Ekstrak
Sargassum  polycistum.  ( Skripsi).
Bogor: Departemen Teknologi Hasil
Perairan  Fakultas  Perikanan  dan Ilmu Kelautan IPB.
Sabir A. 2005. Aktivitas antibakteri flavonoid propolis Trigona sp terhadap    bakteri Streptococcus mutans (in  vitro). Maj.  Ked.  Gigi . 38: 135 – 141.
Schlegel, G. Hans. 1993. General
Microbiology . Seventh Edition. England: Cambridge University Press. Simaremare, E. S., 2014. Skrining Fitokimia  Ekstrak  Etanol  Daun Gatal (Laporteae decumana (Roxb) Wedd). Pharmachy .  11  (1):  98  - 107.
Sjoekoer,  D.M.,  Roetiningsih,  Sinarto,  S.
2003. Bakteriologi  Medik .  Jakarta: Banyumedika.
Smith,  Y.R.A.  2009.  Determination  of chemical  composition  of Senna- siamea (Cassia  leaves). Pakistan Journal of Nutrition 8 (2); 119 –121.