## AKTIVITAS INHIBISI ENZIM α-GLUKOSIDASE EKSTRAK AIR DAN ETANOL UMBI LAPIS BAWANG MERAH (Allium ascalonicum)

## Sitaresmi Yuningtyas, Dian Setiawati Artianti
Program Studi Farmasi, Sekolah Tinggi Teknologi Industri dan Farmasi Bogor Email : sitaresmi_yuningtyas@yahoo.com

## ABSTRAK
Umbi  lapis  bawang  merah  ( Allium  ascalonicum )  mempunyai  potensi  sebagai analgesik,  antiinflamasi,  antimikobakterial,  antifungi,  dan  antikanker.  Namun  mekanisme antidiabetes  pada  tanaman  ini  belum  ditentukan.  Salah  satu  varietas  bawang  merah  di Indonesia  adalah  varietas  Bima  Brebes.  Penelitian  ini  dilakukan  untuk  menguji  potensi ekstrak air dan etanol umbi lapis A. ascalonicum pada konsentrasi 1% sebagai inhibitor enzim α-glukosidase  dan  dibandingkan  aktivitasnya  dengan  akarbosa  1%  sebagai  kontrol  positif. Umbi  lapis A.  ascalonicum diekstraksi  dengan  menggunakan  metode  maserasi.  Ekstrak  air dan etanol dianalisis kandungan fitokimia dan daya inhibisinya terhadap enzim α-glukosidase secara  metode in  vitro .  Aktivitas  α-glukosidase  ditentukan  dengan  mengukur  produk  p- nitrofenol yang dihasilkan dari reaksi enzim dan substrat p-nitrofenil-α-D-glukopiranosida (p- NPG) menggunakan microplate absorbance reader pada panjang gelombang 410 nm. Hasil uji  fitokimia  menunjukkan  bahwa  ekstrak  air  umbi  lapis A.  ascalonicum mengandung flavonoid  dan  tanin.  Selain  itu,  ekstrak  etanol  96%  dan  ekstrak  etanol  70%  umbi  lapis A. ascalonicum mengandung flavonoid, tanin, dan saponin. Ekstrak air, etanol 70%, etanol 96% umbi  lapis A.  ascalonicum pada  konsentrasi  1%  (b/v)  dan  akarbosa  1%  dapat  menginhibisi aktivitas  enzim  α-glukosidase  berturut-turut  sebesar    11,75%,  4,48%,  20,92%,  dan  99,37%. Hasil  aktivitas  inhibisi  ketiga  ekstrak  ini  berbeda  nyata  (p  <  0,05)  dengan  daya  inhibisi akarbosa  1%.    Hal  ini  mengindikasikan  bahwa  ekstrak  air  dan  etanol  umbi  lapis A. ascalonicum berperan sebagai inhibitor enzim α-glukosidase.
Kata kunci: Allium ascalonicum , α-glukosidase, akarbosa, inhibitor enzim

## INHIBITION ACTIVITY α-GLUCOSIDASE ENZYME FROM WATER AND
ETHANOL EXTRACT OF BIMA BREBES VARIETIES RED ONION (Allium ascalonicum) BULBS WITH IN VITRO ASSAY

## ABSTRACT
Shoot  bulbs  ( Allium  ascalonicum )  has  potential  as  an  analgesic,  antiinflamation, antimycobacterial,  antifungi,  and  anticancer.  However  the  mechanism  of  antidiabetic  at  the plant has not been determined. One of the varieties of red onion in Indonesia are varieties of Bima Brebes. This research was conducted to test the potential of water and ethanol extracts of A . Ascalonicum bulbs at a concentration of 1% as the α-glucosidase enzyme inhibitors and compared  its  activities  with  1%  acarbose  as  a  positive  control.  Bulbs  of A.  ascalonicum extracted  by  maceration  method.  Water  and  ethanol  extracts  analyzed  the  content  of phytochemical  assay  and  inhibition  power  of  α-glucosidase  used in  vitro method.  The  α- glucosidase  activity  is  determined  by  measuring  the p -nitrophenol  which  is  produced  from the reaction of the enzyme and p -nitrophenyl-α-D-glucopyranoside ( p -NPG) substrate using microplate  absorbance  reader  at  410  nm wavelength.  The  phytochemical  result  showed  that water  exctract  of A . ascalonicum bulbs  contains  flavonoid  and  tannin.  Beside  that,  ethanol
96% and ethanol 70% extract of A . ascalonicum bulbs contain flavonoid, tannin, and saponin. Extracts  of  water,  70%  ethanol,  96%  ethanol  of A . ascalonicum bulbs  at  1%  concentration and 1% acarbose inhibits α-glucosidase enzyme activity in a row of 11.75%, 4.48%, 20.92%, and  99.37%.  Results  of  the third  extract inhibition  activity  were  significantly  different  (p  < 0.05) to inhibition activity of 1% acarbose. This indicates that the water and ethanol extracts of A . ascalonicum bulbs act as an inhibitor of α-glucosidase enzyme.
Key words: Allium ascalonicum, α-glucosidase, acarbosa, enzyme inhibitor

## PENDAHULUAN
Seiring dengan perubahan gaya hidup yang dilakukan masyarakat terutaman dalam hal  pola  makan  secara  tidak  langsung  dapat memicu timbulnya berbagai penyakit generatif  dan  kronis,  salah  satunya  adalah diabetes  melitus  (DM).  Diabetes  melitus merupakan  penyakit  yang  ditandai  dengan peningkatan kadar gula dalam darah melebihi  kadar  normal  atau  hiperglikemia. Hiperglikemia  disebabkan  oleh  adanya gangguan  sistem  metabolisme  dalam  tubuh, terutama akibat organ pankreas tidak mampu memproduksi hormon insulin sesuai kebutuhan  tubuh.  Menurut  Wilds et  al. , (2004),  jumlah  penderita  diabetes  melitus  di dunia  tahun  2000  mencapai  177  juta  orang dan diperkirakan meningkat menjadi 370 juta pada tahun 2030. Sebagian besar penderitanya  merupakan  kasus  diabetes melitus  tipe  2  yang  berkaitan  dengan obesitas.  Jumlah  orang  yang  terdiagnosa diabetes  melitus  di  Indonesia  sebanyak  8,4 juta  jiwa  dan  menempati  urutan  terbesar keempat  di  dunia  setelah  India,  Cina  dan Amerika.  Pada  tahun  2030  diperkirakan penderita  diabetes  melitus  di  Indonesia mencapai 21,3 juta orang.
Pengobatan  diabetes  melitus  dapat dilakukan  dengan  pemberian  injeksi  insulin atau  menggunakan  obat-obatan    modern, seperti    antidiabetik    oral  yaitu  sulfonilurea, biguanid, thiazolidindion dan  penghambatan α-glukosidase.  Obat-obatan  penghambat enzim α-glukosidase  digunakan  untuk diabetes  melitus tipe 2. Tipe obat  ini  tidak meningkatkan  sekresi    insulin.  Penggunaan obat  antihiperglikemik    penghambat  enzim α-glukosidase  bekerja  menginhibisi  secara reversibel,  berkompetisi  dengan enzim pencernaan  karbohidrat  di  usus    seperti  α-
amilase, α-glukosidase, sukrase dan maltase. Enzim-enzim ini bekerja dengan menghidrolisis    karbohidrat    menjadi glukosa.    Pada    pasien  diabetes  melitus, penghambatan terhadap enzim ini menyebabkan peghambatan terhadap absorbsi glukosa dan menurunkan hiperglikemia.
Bawang  merah  ( Allium  ascalonicum ) merupakan  famili  Liliaceae  yang  biasa digunakan  untuk  bumbu  masak  dan  obat tradisional.  Umbi  lapis  dari A.  ascalonicum mempunyai  potensi  sebagai  analgesik  dan antiinflamasi  (Owoyele et  al. ,  2006), antimikobakterial  (Amin et  al. ,  2009), antifungi  (Mahmoudabadi  &  Nasery,  2009), dan sebagai antikanker (Mohammadi- Motlagh et al ., 2011).
Penelitian  umbi lapis A. ascalonicum sebagai  antidiabetes  yang  telah  dilakukan antara  lain  oleh  Kouhsari,  S.M.  and  Sani, M.F.  (2011)  menyatakan  bahwa  pemberian ekstrak  metanol A.  ascalonicum dengan dosis  250  dan  500  mg/kg  BB  secara  peroral kepada tikus yang terinduksi diabetes melitus akan  mereduksi  kadar  glukosa  darah postprandial  serta  meningkatkan  ekspresi gen  Ins  dan  Glut4.  Selain  itu,  pemberian ekstrak  tersebut  dapat  menginhibisi  aktivitas enzim  sukrase  dan  maltase  pada  usus  tikus yang  terinduksi  diabetes  melitus.  Menurut Luangpirom, et  al. 2013,  ekstrak  jus  umbi lapis A.  ascalonicum dapat  menurunkan kadar  gula  darah  setelah  14  hari  pemberian secara  oral  pada  tikus  yang  terinduksi diabetes melitus. Penurunan kadar gula darah sebesar  43,45%  dan  59,18%  dengan  dosis ekstrak  masing-masing  0,5  g/  100  g  bb  dan 1 g/100 g bb. Penurunan kadar gula darah ini disebabkan  oleh  inhibisi  aktivitas  enzim  α-
glukosidase sehingga memperlambat penyerapan karbohidrat postprandial . Beberapa  varietas  bawang  merah yang sudah ada di Indonesia pada tahun 1984 adalah  varietas  Bima  Brebes,  varietas Medan,  varietas  Kling  dan  varietas  Maja Cipanas.  Jenis  tanaman  tersebut  cukup dominan      diusahakan  petani  di  daerah- daerah  sentra  produksi  maupun  yang  sedang berkembang. Sedangkan jenis bawang merah unggul lokal  yang banyak diusahakan petani adalah  Kuning,  Kuning  Gombong,  dan Sumenep (Putrasamedja & Suwandi, 1996).
Di Indonesia tanaman bawang merah telah  lama  diusahakan  oleh  petani  sebagai usaha  tani  komersial.  Beberapa  varietas (Probolinggo,  Bima,  Tiron  sawah,  Tiron pasir,Biru  sawah,  Biru  pasir,  Parman,  Bima, dan  kuning)  merupakan  varietas  yang tumbuh baik di lingkungan dengan produktivitas  yang  tinggi.  Varietas  Parman dan  Kuning  paling  stabil  dapat  tumbuh  di daerah  sawah  dan  pada  musim  kemarau (Erlina & Yudono, 2003).
Ekstrak  polar  dari  umbi  lapis A. ascalonicum mengandung furostanol, saponin, kuersetin, isorhamnetin, dan glikosida  (Fattorusso et  al. ,  2002).  Senyawa bioaktif  tersebut  diduga  memiliki  aktivitas inhibisi terhadap enzim α-glukosidase sehingga dapat berpotensi sebagai antidiabetes. Berdasarkan penelitian tersebut, maka  penelitian  ini  bertujuan  untuk  menguji daya  inhibisi  ekstrak  polar  (air,  etanol  96%, dan  etanol  70%)  umbi  lapis A.  ascalonicum varietas  Bima  Brebes  terhadap  aktivitas enzim  α-glukosidase  dengan  akarbosa sebagai kontrol positif.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  dilaksanakan  pada bulan  April  sampai  Juni  2013  bertempat  di Laboratoium STTIF (Sekolah Tinggi Teknologi  Industri  dan  Farmasi)  Bogor  dan Pusat Studi Biofarmaka LPPM IPB.

## Bahan
Umbi  lapis  bawang  merah  (Gambar 1),  akuades,  etanol  96  %,  etanol  70%,  α- glukosidase  (Sigma  G  3651-250UN),  p -
nitrofenil  α-D-glukopiranosida  (p-NPG) (Sigma  N  1337-5G),  tablet  Glucobay (Akarbosa)  (Bayer,  Jakarta-  Indonesia),  HCl 2  N,  Dimetilsulfoksida  (DMSO),  Larutan Na 2 CO 3 ,  Serum  Bovin  Albumin  (SBA), buffer fosfat pH 7.
Gambar 1. Bawang merah varietas Bima Brebes

## Alat
Alat-alat  ekstraksi,  neraca  analitik, alat-alat kaca, penguap putar ( rotary evaporator )  (BUCHI,  R-250,  Switzerland), perangkat  instrumen microplate  reader (Epoch  Microplate  Spectrophotometer),  alat microplate (Thermo  Scientific  NUNC)  dan micropipet (Thermo Scientific).

## Cara Kerja
1. Ekstraksi Ekstraksi
menggunakan metode maserasi  selama  1  x  24  jam  dengan cairan  penyari  yang  bersifat  polar  yaitu akuades,  etanol  96%,  dan  etanol  70%. Proses maserasi dilakukan dengan sebanyak  10  gram  simplisia  umbi  lapis A. ascalonicum direndam dengan masing-masing  100  ml  pelarut  akuades, etanol 96% dan etanol 70%  selama  1 x 24  jam  pada  suhu  kamar  didalam maserator. Selanjutnya rendaman disaring  menggunakan  kertas  saring halus  dan  filtratnya  disimpan.  Masing- masing filtrat yang diperoleh dipekatkan dengan  penguap  putar  ( rotavapor )  pada suhu  40ºC  sehingga  diperoleh  ekstrak (air,  etanol  96%,  dan  etanol  70%). Ekstrak yang telah dipekatkan selanjutnya dilakukan uji aktivitas inhibisi  α-glukosidase  dan  penapisan fitokimia.
2. Penapisan Fitokimia (Harbone, 1987) Penapisan  fitokimia  ekstrak  air,  etanol 96%,  dan  etanol  70%  umbi  lapis A. ascalonicum .
3. Uji Inhibisi α-Glukosidase Tabel  1. Proses  Uji  Inhibisi  α- Glukosidase  (Sancheti. et  al ., 2009) S0 (µL) S1 (µL) Ekstrak 50 50 Dapar Fosfat 50 50 p-NPG 25 25 Dapar Fosfat 25 - α-Glukosidase - 25 Inkubasi pada suhu 37 o C selama 30 menit
Na 2 CO 3 100 100 Diukur dengan microplate reader pada λ = 410 nm
Keterangan: S0 = kontrol negatif S1 = sampel
Sampel  yang  diuji  dilarutkan dalam  DMSO  kemudian  dicukupkan volumenya  dengan  dapar  fosfat  pH  7 sehingga  didapatkan  larutan  ekstrak dengan  konsentrasi  1%  (b/v).  Setelah ditambahkan  dapar  fosfat  100  mM,  dan larutan  substrat  p-NPG  0,5  mM, diinkubasi  selama  30  menit  kemudian ditambahkan  Na 2 CO 3 200  mM  lalu larutan diukur absorbansinya pada λ 410 nm  (Sancheti et  al .,  2009).  Kontrol positif menggunakan akarbosa 1% (b/v). Persentase daya hambat dihitung dengan persamaan:
Keterangan : S   :  absorbansi sampel (S 1 -S 0 ) S 1 :  absorbansi
sampel
dengan penambahan enzim
S 0 : Absorbansi sampel tanpa enzim C :  absorbansi  larutan kontrol  (DMSO) tanpa sampel (kontrol-blanko).

## 4. Analisis Data
Data aktivitas inhibisi α- glukosidase yang diperoleh dalam penelitian  ini  dianalisis  secara  statistik menggunakan  ANOVA  yaitu  RAL (Rancangan  Acak  Lengkap)  satu  faktor dengan  tiga  kali  ulangan  pada  tingkat kepercayaan  95%  dan  taraf  α  0,05  dan kemudian dilanjutkan dengan uji
DUNCAN.  Pengolahan  data  dengan SPSS 14. Model rancangan tersebut :
Y ij =  + i + ij
Keterangan:
Yij  =  Nilai pengamatan faktor perlakuan  ekstrak  taraf  ke-i  dan ulangan ke-j. =   Rataan umum
=  Pengaruh utama perlakuan ekstrak ke-i.i = 1, 2, 3, 4, 5
i =   1 adalah blanko
i =   2  adalah  ekstrak  air  bawang merah 1 %
i =   3  adalah  ekstrak  etanol  96% bawang merah 1 %
i =   4  adalah  ekstrak  etanol  70% bawang merah 1 %
i =  5 adalah pembanding atau kontrol positif akarbosa 1% ij  =  pengaruh  acak  yang  menyebar normal  pada  perlakuan  ke-i  dan ulangan ke-j. J = 1, 2, 3

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Bahan  umbi  bawang  merah  ( A. ascalonicum )  varietas  Bima  Brebes  berumur 2  bulan  dan  diambil  dari  daerah  Brebes, Jawa  Tengah.  Umbi A.  ascalonicum yang akan  diekstraksi  dibuat  serbuk  terlebih dahulu,  ini  bertujuan  agar  proses  penyarian zat aktif  lebih maksimal. Semakin kecil atau halus  ukuran    bahan    yang  digunakan  maka semakin  luas  bidang  kontak  antara  bahan dengan pelarutmya, hal ini dapat meningkatkan efektivitas ekstraksinya. Metode  ekstraksi  yang  digunakan  untuk mengekstraksi sampel adalah metode maserasi  menggunakan  air  dan  etanol absolut. Pemililhan pelarut etanol berdasarkan  pendapat  Harbone  (1987)  yang menyatakan  bahwa  bahan  segar  dapat diekstraksi  menggunakan  alkohol  absolut. Mekanisme  metode  maserasi  yaitu  adanya difusi pelarut kedalam dinding sel tumbuhan untuk  mengekstrak  senyawa-senyawa  yang kurang tahan terhadap pemanasan.
Hasil maserasi yang diperoleh diuapkan  dengan  menggunakan rotavapor pada suhu 40 0 C. Suhu yang  digunakan  tidak boleh  terlalu  tinggi  karena  dapat merusak
senyawa    yang    terdapat    dalam    simplisia. Ekstrak  kental  yang  dihasilkan  ditimbang untuk  mendapatkan  rendemen.  Rendemen ekstrak dan hasil fitokimia dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2. Hasil Ekstraksi Umbi Lapis A.
ascalonicum varietas Bima Brebes No Ekstrak Bobot (g) Rendemen (%) 1 Ekstrak air 3,83 38,27 2 Ekstrak etanol 70% 2,76 27,49 3 Ekstrak etanol 96% 1,54 15,35
Rendemen  ekstrak  yang  tertinggi  berada pada  ekstrak  air  yaitu  sebesar  38,72%  atau sama  dengan  3,83  g  ekstrak  dalam  10  g simplisia  umbi  lapis A.  ascalonicum . Selanjutnya rendemen ekstak etanol 70% dan ekstrak  etanol  96%  berturut-turut  sebesar 27,49% dan 15,35%. Ekstrak yang diperoleh selanjutnya  dilakukan  analisis  fitokimia  dan uji aktivitas inhibisi α-glukosidase.

## Hasil Uji Fitokimia
Hasil  analisis  fitokimia  terhadap ekstak  air  dan  etanol  umbi  lapis A. ascalonicum varietas  Bima  Brebes  disajikan pada  Tabel  3.  Berdasarkan  uji  fitokimia diperoleh  bahwa  ekstrak  air  mengandung flavonoid, dan tanin. Sedangkan pada ekstrak etanol  96%  dan  etanol  70%  mengandung flavonoid, tanin, dan saponin. Jenis senyawa fitokimia yang menonjol pada ekstrak etanol 96%  (flavonoid,  tanin,  dan  saponin)  lebih banyak  dibandingkan  yang  ditemukan  pada ekstrak etanol 70%.
Skrining  fitokimia  ekstrak  air  dan etanol umbi lapis A. ascalonicum menunjukkan hasil positif pada uji flavonoid dan  tanin.  Flavonoid  memiliki  gugus hidroksi  yang  tidak  tersubstitusi  sehingga bersifat  polar  dan  tanin  termasuk  golongan polifenol yang bersifat polar. Oleh sebab itu, pelarut  polar  seperti  air  dan  etanol  dapat menarik  senyawa  yang  bersifat  polar.  Pada ekstrak  etanol  70%  dan  96%  umbi  lapis A. ascalonicum menunjukkan  hasil  positif  pada uji saponin. Saponin memiliki gugus glikosil
yang  berfungsi  sebagai  gugus  polar  dan gugus steroid sebagai gugus non polar. Pada ekstrak  air  tidak  dideteksi  adanya  saponin karena  air  bersifat  lebih  polar  dibandingkan etanol  70%  dan  etanol  96%  sehingga  tidak mampu  menarik  senyawa  yang  bersifat semipolar.  Hal  ini  sesuai  dengan  Fattorusso et al. (2002) mengungkapkan bahwa ekstrak polar  dari  umbi  lapis A.  ascalonicum mengandung  furostanol,  saponin,  kuersetin, isorhamnetin, dan glikosida.
Tabel  3. Data  Hasil  Pemeriksaan  Fitokimia Ekstrak  Air,  Ekstrak  Etanol  70%, dan  Ekstrak  Etanol  96%  Umbi Lapis A.  ascalonicum varietas Bima Brebes Golongan Ekstrak Air Ekstrak Etanol 70% Ekstrak Etanol 96% Alkaloid - - - Flavonoid ++ ++ +++ Tanin +++ ++ +++ Saponin - + +++ Triterpenoid - - - Steroid - - - Keterangan:  (-)  =  tidak  terdeteksi,  (+)  = terdeteksi sedikit, (++) = terdeteksi  sedang,  dan  (+++)  = terdeteksi banyak.

## Hasil Uji Inhibisi α-Glukosidase
Uji  inhibisi  terhadap  enzim  α- glukosidase  menggunakan  sampel  ekstrak air,  ekstrak  etanol  70%  dan  ekstrak  etanol 96%  umbil  lapis A.  ascalonicum varietas Brebes.  Masing-masing    sampel  dibuat konsentrasi sebesar 1% (b/v). Kontrol positif menggunakan akarbosa 1% (b/v). Konsentrasi  sampel  dibuat  setara  dengan konsentrasi kontrol positif guna membandingkan  aktivitas  inhibisi  enzim  α- glukosidase  oleh  sampel  maupun  akarbosa. Dari  hasil  penelitian  yang  telah  dilakukan menunjukkan  bahwa  ekstrak  air,  ekstrak etanol  96%  dan  ekstrak  etanol  70%  umbil lapis A.  ascalonicum mampu  menghambat aktivitas  enzim  α-glukosidase.  Gambar  2 menunjukkan  aktivitas  inhibisi  enzim  α- glukosidase  oleh  ekstrak  air,  ekstrak  etanol 70%, ekstrak etanol 96%, dan akarbosa 1%.
Gambar  2. Aktivitas  inhibisi  enzim  α- glukosidase  umbi  lapis A. ascalonicum
Keterangan:  A=  ekstrak  air,  B=  ekstrak etanol70%,  C=  ekstrak  etanol 70%,  D=  Akarbosa  1%.  Huruf kecil yang berbeda menunjukkan  nilai  beda  nyata pada p<0,05.
Ekstrak  etanol  96%  umbi  lapis A. ascalonicum 1%  (b/v)  mampu  menginhibisi aktivitas α-glukosidase dengan rerata sebesar 20,92%  kemudian  daya  inhibisi  yang dihasilkan  oleh  ekstrak  air    umbi  lapis A. ascalonicum 1%  (b/v)  dengan  rerata  sebesar 11,75%  sedangkan  daya  inhibisi  yang dihasilkan  oleh  ekstrak  etanol  70%  umbi lapis A. ascalonicum 1% (b/v) dengan rerata sebesar    4,48%.  Larutan  kontrol  positif (akarbosa) menghasilkan daya inhibisi aktivitas α-glukosidase dengan rerata sebesar 99,37%. Daya inhibisi yang terbesar ditunjukkan  oleh  akarbosa  yang  merupakan inhibitor α-glukosidase dan sudah digunakan sebagai  obat  diabetes  mellitus  dengan mekanismenya  penghambatan  aktivitas  α- glukosidase.  Ekstrak  etanol  96%  umbi  lapis A.ascalonicum 1% (b/v) memiliki daya inhibisi  yang  lebih  tinggi  dibandingkan dengan  ekstrak  lainnya,  hal  ini  dikarenakan senyawa  yang  bersifat  antidiabetes  seperti saponin, flavonid, dan tannin secara kualitatif  lebih  banyak  terkandung  di  dalam ekstrak etanol 96%.
Data  aktivitas  inhibisi  α-glukosida dianalisis  statistik  menggunakan  ANOVA dan  taraf  α=0.05  yang  menunjukkan  bahwa pemberian  ekstrak  air,  ekstrak  etanol  96% dan  ekstrak  etanol  70%  umbi  lapis A. ascalonicum dapat  menghambat  aktivitas
inhibisi  α-glukosidase  dengan  aktivitas inhibisi  α-glukosidase  yang  berbeda  nyata (p<0,05)  satu  sama  lain.  Aktivitas  inhibisi tertinggi  dari  ekstrak  etanol  96%  sebesar 20,92%  berbeda  nyata  dengan  aktivitas inhibisi  akarbosa  1%  sebesar  99,37%.  Oleh karena  itu,  aktivitas  inhibisi  α-glukosidase oleh  ekstrak  etanol  96%  umbi  lapis A. ascalonicum 1%  belum  setara  aktivitasnya dengan akarbosa 1%. Hal ini diduga aktivitas antidiabetes  yang  dimiliki  ekstrak  tersebut mekanismenya
tidak sepenuhnya berdasarkan pada enzim α-glukosidase.
Analisis fitokimia menunjukkan bahwa  ekstrak  etanol  96%  umbi  lapis A. ascalonicum mengandung senyawa flavonoid  yang  ditandai  dengan  tingginya intensitas  warna  merah  tua  pada  uji flavonoid.  Melalui  analisis  tersebut  dapat diperkirakan komponen aktif yang menghambat  aktivitas  α-glukosidase  adalah flavonoid.  Menurut  Tan et.al .  (2013) komponen  fenolik  seperti  kuersetin,  rutin, kaemferol-3-O-β-D-glukopiranosida, kaemferol-3-O-rutinosida, dan 3,5- dicaffeoylquinic  acid  methyl  ester )  dapat menginhibisi  α-glukosidase.  Kemampuan aktivitas  inhibitor  α-glukosidase  yang dimiliki  oleh  ekstrak  air  dan  etanol  umbi lapis A.  ascalonicum tidak  lepas  dari  kerja senyawa  fitokimia  yang  dikandungnya. Tingginya  aktivitas  inhibisi  α-glukosidase pada  ekstrak  etanol  96%  dibandingkan dengan  ekstrak  air  dan  ekstrak  etanol  70% adalah sejalan dengan hasil yang ditunjukkan secara  kualitatif  pada  penapisan  fitokimia dimana  jenis  senyawa  yang  menonjol ditemukan pada ekstrak etanol 96%.

## SIMPULAN DAN SARAN Simpulan
Ekstrak air umbi lapis A. ascalonicum varietas Bima Brebes mengandung flavonoid dan  tanin.  Sedangkan  ekstrak  etanol  96% serta  esktrak  etanol  70%  umbi  lapis A. ascalonicum varietas Bima Brebes mengandung  flavonoid,  tanin,  dan  saponin. Ketiga ekstrak tersebut mampu menginhibisi aktivitas enzim α-glukosidase secara in vitro. Daya inhibisi α-glukosidase oleh ekstrak air,
A B C                D
ekstrak  etanol  70%,  dan  ekstrak  etanol  96% umbi lapis A. ascalonicum 1% (b/v) berturut- turut  sebesar  11,75%,  4,48%,  dan  20,92%. Ketiga  aktivitas  inhibisi  tersebut  berbeda nyata dengan aktivitas inhibisi α-glukosidase oleh akarbosa 1% sebesar 99,37%.

## Saran
Penelitian  dapat  dilanjutkan  dengan meningkatkan  konsentrasi  ekstrak  etanol 96%  umbi  lapis A.  ascalonicum varietas Bima  Brebes  guna  meningkatkan  daya inhibisi    enzim  α-glukosidase.  Pemurnian ekstrak dari ekstrak etanol 96% umbi lapis A. ascalonicum diperlukan  untuk  memperoleh senyawa  aktif  yang  berperan  sebagai antidiabetes.  Selain  itu,  perlu  dilakukan pengujian  antidiabetes  dengan  metode  lain sehingga  dapat  diketahui  mekanisme  kerja ekstrak  umbi  lapis A.  ascalonicum varietas Bima Brebes sebagai obat antidiabetes.

## DAFTAR PUSTAKA
Amin, M., Segatoleslami, S., and Hashemzadeh, M. 2009. Antimycobacterial  activity  of  partial purified extract of Allium ascalonicum . Jundishpur  Journal  of Microbiology . 2 (4): 144-147.
Erlina,  A.,  dan  Yudono,  P.  2003.  Keragaan stabilitas  hasil  bawang  merah.  The performance  of  yield  stability  of shallot. Ilmu Pertanian. 10 (2):1-10.
Fattorusso,  E.,  Iorizzi,  M.,  Lanzotti,  V.,  and Taglialatela-Scafati, O.
2002.
Chemical  composition  of  shallot ( Allium ascalonicum Hort.). J. Agric. Food Chem. 50 (20): 5686–5690. Harborne,  J.B.  1987. Metode  Fitokimia, Penuntun Cara Modern Menganalisis Tumbuhan. Bandung: Penerbit ITB.
Kouhsari,  S.M  and  Sani,  M.F.  2011. Antidiabetic effects of Allium ascalonicum methanolic  extract  in
experimental  diabetes. Planta  Med .
77: 87.
Luangpirom,
A., Kourchampa, W.,
Junaimuang,  T.,  Somsapt,  P.,  and
Sritragool, O. 2013.  Effect of Shallot
( Allium ascalonicum L.) bulb juice on hypoglycemia  and  sperm  quality instreptozotocin induced diabetic mice . ABAH Bioflux . 5 (1): 49-54.
Mahmoudabadi,  A.Z.,  and  Nasery,  M.K.B.
2009.  Anti  fungal  activity  of  Shallot, Alium  ascalonicum Linn.  (Liliaceae), In  vitro . Journal  of  Medicinal  Plants Research 3 (5): 450-453.
Mohammadi-Motlagh,  H-R,  Mostafaie,  A, and  Mansouri,  K.  2011.  Anticancer and  anti-inflammatory  activities  of Shallot  ( Allium  ascalonicum )  extract. Arch Med Sci. 7 (1): 38-44.
Owoyele,  B.V.,  Abioye,  A.I.R,    Afinowi, N.O, Jimoh, S.S, and Soladoye,  A.O. 2006.  Analgesic  and  anti-inflamatory effects  of Allium  ascalonicum.  The Tropical  Journal  of  Health  Sciences .
13 (1): 28-30.
Putrasamedja, S., dan Suwandi.1996.
Bawang Merah di Indonesia. Monograf No. 5 : 1-23.
Sancheti,  S.,    Sancheti,  S.,  and    Seo,  S.Y.
2009.  Chaenometes sinensis a potent α  and  β-  Glucosidase  inhibitor. America  Journal  of  Pharmacology and Toxicology . 4(1): 8-11.
Tan, C., Wang, Q., Luo, C., Chen, S., Li, Q.,
and Li. P. 2013. Yeast α-Glucosidase inhibitory phenolic compounds isolated  from Gynura  medica leaf.
Int.J. Mol. Sci. 14: 2551-2558.
Wilds,  S.,  Roglic,  G.,  Green,  A.,  Sincre,  R., and King, H. 2004. Global prevalence of  diabetes:  estimates  for  the  year 2000  and  projections  for  2030.
Diabetes Care 27: 1047-1053.