PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL JAHE MERAH ( Zingiber officinale Roxb var Rubrum) TERHADAP JUMLAH SPERMATOGENIK MENCIT ( Mus musculus L.)

## YANG DIINDUKSI SIPROTERON ASETAT
EFFECT OF FEEDING RED GINGER ETHANOL EXTRACT ( Zingiber officinale Roxb var Rubrum) ON TOTAL SPERMATOGENIC IN MICE ( Mus musculus L.) INDUCED BY CYPROTERONE

## ACETATE
Nur Bebi Ulfah Irawati 1* , Sutyarso 1 , Hendri Busman 1
1 Jurusan Biologi FMIPA Universitas Lampung * nurbebiulfah@yahoo.com

## ABSTRAK
Infertilitas  merupakan  kondisi  yang  umum  ditemukan  dan  dapat  disebabkan  oleh faktor  perempuan  atau  laki-laki,  parameter  kesuburan  dapat  dilihat  melalui kemampuan spermatozoa yang dihasilkan.  Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh  ekstrak  etanol  jahe  merah  dalam  meningkatkan  jumlah    spermatogenik mencit( Mus  musculus L.)  yang  diinduksi  siproteron  asetat.    Penelitian  ini menggunakan  25  ekor  mencit  jantan  yang  dibagi  secara  acak  menjadi  5  kelompok yaitu  kontrol  normal,  dimana  hanya  akan  diberi  pakan  dan  aquades.  Kontrol  negatif, diberikan  siproteron  asetat  1,17mg/ml  secara  oral  selama  7  hari.    Kelompok  P1,  P2 dan  P3  diinduksi  siproteron  asetat  1,17mg/ml  secara  oral  selama  7  hari  kemudian diberikan ekstrak etanol jahe merah dengan dosis P1: 6 mg/ml, P2: 12mg/ml, dan P3: 24mg/ml  selama  28  hari.    Parameter  yang  dihitung  dan  diamati  pada  penelitian  ini adalah  jumlah  sel  spermatogonium,  sel  spermatosit  primer  dan  sel  spermatid  mencit jantan.    Pengaruh  ekstrak  terhadap  parameter  dianalisis  dengan Analysis  of  Varian (ANOVA).    Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  jahe  merah  yang diberikan pada dosis yang berbeda dapat meningkatkan  jumlah sel spermatogonium, sel  spermatosit  primer  dan  sel  spermatid  mencit  jantan  yang  diinduksi  siproteron asetat.
Kata kunci: mencit jantan, sel spermatogenik, jahe merah, siproteron asetat

## ABSTRACT
Infertility  is  a  common  condition  and  can  be  caused  by  women  or  men  factors. Parameter  of  fertility  can  be  seen  through  theability  of  sperm.    This  study  aimed  to know  the  effect  of  red  ginger  ethanol  extract  in  order  to  increase  the  number  of spermatogenic  in  mice  ( Mus  musculus L.)  induced  by    cyproterone  acetate.    This study used 25 male mices which divided randomly into 5 groups which were, normal control  (K),  negative  control  (K-),  P1,  P2  and  P3.    Normal  control  only  fed  with  feed and aquadest.  Negative control induced by cyproterone acetate 1,17mg/ml orally for 7 days.    Group  of    P1,  P2  and  P3  were  induced  with  cyproterone  acetate  1,17mg/ml orally  for  7  days  then  fed  with red  ginger  ethanol  extract  with  P1  dose: 6  mg/ml,  P2: 12mg/ml, and P3: 24mg/ml for 28 days.  Parameters calculated and observed in this study  were  the  number  of  spermatogonial  cells,  primary  spermatocytes  cells  and spermatids  cells  of  male  mice.    Effect  of  extract  parameters  was  analyzed  with Analysis of Variants (ANOVA).  The results showed that the red ginger ethanol extract given  on  different  doses  can  increase  the  number  of  spermatogonial  cells,  primary spermatocytes cells and spermatids cells in cyproterone acetate induced male mice.
Keyword: mice, spermatogenic cell, red ginger, cyproterone acetate

## Jurnal Biologi Eksperimen dan Keanekaragaman Hayati

## PENDAHULUAN
Infertilitas  merupakan  kondisi  yang  umum ditemukan  dan  dapat  disebabkan  oleh  faktor baik  betina,  dan  jantan,  maupun  keduanya. Menurut  Hardjopranjoto  (1995)  kesuburan pada hewan jantan dapat diukur dari kemampuan  spermatozoa  yang  dihasilkan dalam  melakukan  proses  fertilisasi.  Proses tersebut  dipengaruhi  oleh  banyak  faktor, diantaranya  adalah  kemampuan  organ  dan hormon yang mempengaruhi proses reproduksi  untuk  bekerja  secara  optimal. Pengoptimalan  kerja  dari  organ  dan  hormon reproduksi  selain  dipengaruhi  oleh  unsur genetik juga dipengaruhi oleh faktor lingkungan.
Faktor lingkungan dapat
meningkatkan kualitas dan kuantitas spermatozoa yang dihasilkan.
Jahe  ( Zingiber  officinale Roxb.)  merupakan salah  satu  tumbuhan  yang  berasal  dari  suku Zingiberaceae. Jahe merah sebagai tumbuhan  etnobotani  memiliki  posisi  yang penting  dalam  berbagai  aspek  antara  lain aspek  kesehatan  dan  perekonomian,  aspek kegunaan,  adat  serta  kepercayaan.    Jahe banyak digunakan masyarakat sebagai minuman dan bahan makanan, bahan pewarna  serta  obat-obatan.    Zat  aktif  yang terdapat  pada  jahe  adalah  limoen,  1-8  sinoel, 10-dehidrogingerdion,
10-gingerdion, 6-
gingerdion, 6- gingerol,  α-asam  linolenik,
arginin,  asam  aspartate,  β-sithoserol,  asam saprilik,  capsaicin,  asam  klorogenik,  farnesol (Hariana,  2002).    Zat-zat  tersebut  mampu mengurangi  serta  mencegah  terbentuknya radikal-radikal  bebas.    Oleh  karena  itu,  jahe merah  dianggap  sebagai  obat  herbal  yang aman  dengan  efek  samping  yang  sangat minimal.  Hasil  dari  aktivitas  antioksidan,  jahe
akan  memacu  aktivitas  androgenik  untuk organ  testis  melalui  peningkatan  hormon  LH, FSH, dan testosteron (Ali et al ., 2008).
Siproteron  asetat  merupakan  salah  satu  obat golongan antiandrogen yang dapat menginduksi  terjadinya  infertilitas  pada  pria.
Pada penelitian ini siproteron asetat merupakan  obat  yang  digunakan  untuk menginduksi hewan uji menjadi infertil.

## METODE
Penelitian  ini  menggunakan  25  ekor  mencit jantan  dengan  berat  badan  berkisar  25 –  30 g/ekor.    Metode  yang  digunakan  adalah Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  dengan  5 kelompok  yaitu  kontrol  normal  (K),  kontrol negatif (K-), P1, P2, dan P3 yang berlangsung selama  35  hari  (lama  siklus  spermatogenik mencit)  dengan pengulangan  sebanyak 5  kali. Kontrol  normal,  hanya  diberi  pakan  dan aquades.    Kontrol  negatif,  diinduksi  siproteron asetat  1,17mg  secara  oral  selama  7  hari  . Kelompok  P1,  P2  dan  P3  diinduksi  siproteron asetat  1,17mg  secara  oral  selama  7  hari bertuturt-turut  selanjutnya  diberikan  ekstrak etanol  jahe  merah  dengan  dosis  P1:6  mg/ml, P2: 12mg/ml, and P3: 24mg/ml selama 28 hari. Pembedahan  dilakukan  setelah  35  hari perlakuan  untuk  pengambilan  organ  testis, selanjutnya  dilakukan  pembuatan  preparat histologi testis.
Pengawetan jaringan dan pembuatan preparat terdiri dari proses trimming , dehidrasi, clearing, impregnasi, dan embedding . Trimming
menggunakan  formalin  10%  untuk  fiksasi testis. Dehidrasi menggunakan  alkohol  70 %,
80  %,  90  %,  96  %,  dan  alkohol  absolut  untuk menarik air dari sediaan.
Clearing
menggunakan  xylol  untuk  menarik  alkohol
kembali. Impregnasi (infiltrasi  parafin)  dan
embedding
(pengeblokan jaringan) menggunakan  parafin  selanjutnya  dilakukan pemotongan  jaringan  menggunakan  mikrotom putar  dengan  ketebalan  4  µm.    Pewarnaan menggunakan Hematoxylin Eosin.
Penempelan  jaringan  dan cover  glass pada object  glass menggunakan  canada  balsam. Perhitungan  dilakukan  dengan  mengamati preparat histologi dari irisan testis menggunakan  mikroskop  dengan  perbesaran 400x.
Parameter  yang  dilihat  pada  penelitian  ini adalah  sel  spermatogonium,  sel  spermatosit primer  dan  sel  spermatid.    Data  dianalisis dengan  menggunakan Analysis  of  Variance (ANOVA) untukmengetahui ada tidaknya perbedaan  antar  perlakuan.    Apabila  terdapat perbedaan yangnyata maka dilanjutkan dengan  uji  beda  nyata  terkecil  (BNT)  pada taraf 5 %.

## HASIL
Data  hasil  penelitian  rerata  jumlah  sel spermatogenik mencit jantan pada sel spermatogonium menunjukkan bahwa kelompok kontrol negatif memiliki rerata jumlah sel  spermatogonium  paling  rendah  sedangkan kelompok  P3  memiliki  rerata  jumlah  sel spermatogonium paling tinggi.
Berdasarkan  data  penelitian  rerata  jumlah  sel spermatosit  primer,  terdapat  penurunan  rerata jumlah  sel  spermatosit  primer  mencit  jantan pada  kelompok  kontrol  negatif  dibandingkan dengan  kontrol  normal,  selanjutnya  terjadi peningkatan  kembali  pada  kelompok  P1,  P2 dan P3.  Kelompok P3  memliki rerata tertinggi dibandingkan  kelompok  lainnya  sedangkan
kelompok kontrol negatif memiliki rerata paling rendah.
Data  hasil  penelitian  rerata  jumlah  sel spermatid  pada  kontrol  normal  terhadap kontrol negatif mengalami penurunan, selanjutnya terdapat peningkatan rerata jumlah sel  spermatid  pada  kelompok  perlakuan  (P1, P2  dan  P3)  terhadap  kontrol  negatif.    Pada rerata kelompok 3 memiliki rerata tertinggi dan melebihi kelompok normal dibandingkan kelompok perlakuan lainnya yaitu P1 dan P2.
Uji  Anova  memberikan  hasil  yang  signifikan secara  statistik  terhadap  rerata  jumlah  sel spermatogonium mencit jantan dan dilanjutkan uji  BNT.    Hasil  uji  lanjut  menunjukkan  adanya perbedaan  bermakna  pada  kelompok  kontrol normal  terhadap  kelompok  kontrol  negatif  dan kelompok  kontrol  normal  terhadap  kelompok P3, selanjutnya pada kelompok kontrol negatif terhadap kelompok perlakuan (P1, P2 dan P3). Perbedaan  tidak  bermakna  terdapat  pada kelompok  normal  terhadap  kelompok  P1  dan P2, lalu pada kelompok P1 terhadap kelompok P2  dan  P3,  serta  pada  kelompok  P2  terhadap kelompok P3. (Gambar 1)
Gambar 1. Rerata jumlah sel spermatogonium mencit jantan (sel/lapang pandang) tiap kelompok perlakuan.
Uji  Anova  memberikan  hasil  yang  signifikan secara  statistik  terhadap  rerata  jumlah  sel spermatosit primer mencit jantan dan dilanjutkan  uji  BNT. Hasil  uji  lanjut menunjukkan  adanya  perbedaan  bermakna pada  kelompok  kontrol  normal  terhadap kelompok  kontrol  negatif,  kelompok  P1  dan kelompok P2, selanjutnya perbedaan bermakna  juga  didapatkan  pada  kelompok kontrol negatif terhadap kelompok P3.
Perbedaan  tidak  bermakna  didapatkan  pada kelompok  normal  terhadap  kelompok  P3, kelompok  kontrol  negatif  terhadap  kelompok P1  dan  P2,  kelompok  P1  terhadap  kelompok P2. (Gambar 2)
Gambar  2. Rerata  jumlah  sel  spermatosit primer  mencit  jantan  (sel/lapang pandang) tiap kelompok perlakuan.
Uji  Anova  memberikan  hasil  yang  signifikan secara  statistik  terhadap  rerata  jumlah  sel spermatid  mencit  jantan  dan  dilanjutkan  uji BNT.    Berdasarkan  hasil  uji  lanjut  didapatkan perbedaan  bermakna  pada  kelompok  normal terhadap  kelompok  kontrol  negatif,  lalu  pada kelompok  kontrol  negatif  terhadap  kelompok P3.  Perbedaan tidak bermakna terdapat pada kontol  normal  terhadap  kelompok  perlakuan P1,  P2  dan  P3  selanjutnya  pada  kelompok kontrol  negatif  terhadap  kelompok  P1  dan  P2, kelompok  P1  terhadap  P2  dan  P3,  kelompok P2 terhadap P3. (Gambar 3)
Gambar 3. Rerata jumlah sel spermatid mencit jantan  (sel/lapang  pandang)    tiap kelompok perlakuan.
(1) (2) (3) (4) (5)
Gambar  4. Penampang  melintang  tubulus seminiferus  mencit  jantan  pada  tiap kelompok  (Keterangan  :  1)  Kontrol Normal;  2)  Kontrol  Negatif;  3) Perlakuan  1;  4)  Perlakuan  2;  5) Perlakuan 3).
Pada  Gambar  4  kelompok  kontrol  normal terlihat dalam keadaan baik, sel-sel spermatogenik tampak tersusun rapih, meliputi spermatogonium,
spermatosit primer,
spermatosit sekunder, spermatid dan spermatozoa.    Pada  kelompok  kontrol  negatif terlihat  penurunan  jumlah  sel  spermatogenik dan  susunan  sel-sel  spermatogenik  tidak beraturan.  Pada kelompok perlakuan 1 terjadi
peningkatan  jumlah  sel-sel  spermatogenik dibandingkan kelompok kontrol negatif, namun sel-sel  belum  tersusun  secara  baik  seperti kontrol  normal.    Pada  kelompok  perlakuan  2 sel-sel  spermatogenik  terlihat  lebih  rapih  dan tersusun dibandingkan  kelompok perlakuan 1. Kepadatan  sel-sel  spermatogenik  terlihat cenderung  hampir  sama  dengan  kelompok kontrol  normal.    Pada  kelompok  3  (Gambar 9.e),  terlihat  adanya  peningkatan  jumlah  sel- sel spermatogenik pada tubulus seminiferus.

## PEMBAHASAN
Berdasarkan hasil penelitian dan analisis data, pemberian ekstrak etanol jahe merah mempunyai  pengaruh  yang  bermakna  secara statistik pada peningkatan jumlah sel spermatogonium,  sel  spermatosit  primer  dan sel spermatid.  Hal ini sesuai dengan penelitian Khaki  (2009),  pemberian  ekstrak  jahe  dengan dosis 50mg/kgBB dan 100mg/kgBB selama 20 hari  sudah  memberikan  pengaruh  positif terhadap sistem reproduksi tikus putih jantan.
Hasil  penelitian  Kikuzaki  dan  Nakatani  (1993) menunjukkan  bahwa  jahe  ( Zingiber  officinale.
Roxb.)  memiliki  senyawa  aktif  fenolik  seperti gingerol,  shagaol,  zingeron,  gingerdiol  dan zingiberen  yang  terbukti  memiliki  aktivitas antioksidan.Jahe  juga  dilaporkan  memiliki androgenik  karena  mampu  meningkatkan konsentrasi hormon  testosterone dalam serum (Kamtchouing et al., 2002). Hormon
testosterone berfungsi untuk mengontrol proses  spermatogenik,  memelihara  sel  sertoli dan  berperan  dalam  menentukan  kualitas spermatozoa.Pada  penelitian  yang  dilakukan oleh  Morakinyo  A.  O  dkk.  (2008),  pemberian ekstrak  jahe  merah  terhadap  tikus  jantan dewasa  dengan  dosis  500mg/kgBB  dan
1000mg/kgBB  selama  14  hari  dan  28  hari didapatkan  bahwa  jahe  merah  memiliki pengaruh  positif  pada  fungsi  reproduksi  tikus dewasa  jantan.    Pengaruh  tersebut  berupa peningkatan  jumlah  dan  motilitas  sperma, jumlah  testosteron,  dan  penurunan  level malonhydialdehyde .
Pada  penelitian ini terdapat  penurunan  jumlah sel  spermatogenik  pada  kelompok  kontrol negatif  disebabkan  induksi  siproteron  asetat yang  menghasilkan  radikal  bebas  berupa antiandrogen  yang  dapat  menghambat  proses spermatogenesis dan merusak struktur spematozoa.    Radikal  bebas  menyebabkan karsinogen dan toksisitas pada kulit dan organ reproduksi.    Radikal  bebas  juga  dapat menyebabkan  menurunnya  produksi  hormon LH  dan  FSH  yang  merangsang  terbentuknya hormon  testosteron.  Hal  ini  mengakibatkan jumlah  testosteron  menurun  dan  akhirnya spermatogenesis pun ikut terhambat (Mostafa, 2010).
Penggunaan  siproteron  asetat  pada  pria menyebabkan perlu adanya pengganti hormon androgen  akibat  efek  antiandrogen  pada siproteron asetat. Siproteron asetat menyebabkan  penurunan  sel  spermatogenik yang  disebabkan  oleh  efek  langsungnya terhadap  testis  dimana  siproteron  asetat menghambat  ikatan  antara  testosterone  dan dehidrotestosteron dengan reseptor androgennya (Rajalakshmi, 2005).

## SIMPULAN
Dari hasil penelitian yang dilakukan, pemberian  ekstrak  etanol  jahemerah  memicu peningkatan    jumlah  sel-sel  spermatogenik berupa sel-sel spermatogonium, sel-sel spermatosit  dan  sel-sel  spermatid  mencit
jantan  pasca  diinduksi  siproteron  asetat meningkat.

## DAFTAR PUSTAKA
Ali,  B.H.,  Blunden,  G.,  Tanira,  M.O.  dan Nemmar,  A.  2008.  SomePhytochemical, Pharmacological and Toxicological Properties  of  Ginger  ( Zingiber  officinale Roscoe):  a  review  of  recent  research. Food Chem Toxicol (46) 409 –420.
Hardjopranjoto,  S.  1995. Ilmu  Kemajiran  pada
Ternak .  Airlangga  University  Press. Surabaya.
Hariana,  H.A. 2002 . Tumbuhan  Obat  dan
Khasiatnya , Penebar Swadaya, Jakarta.
Hestiantoro, A. dan Soebijanto, S. 2013. Konsensus Penanganan Infertilitas .HIFERI.Jakarta.
Kamtchouing, P., Mbongue, G.Y., Dimo, T. dan Jatsa, H.B. Evaluation of androgenic activity of Zingiber officinale and Pentadiplandra brazzeana in male rats. Asian J. Androl. 2002; 4(4): 299.
Khaki, A., Fathiazad F., Nouri M., Khaki AA., Ozanci CC., Novin MG., dkk. 2009. The Effect of ginger on spermatogenesis and sperm parameters of rat. Iranian Journal of Reproductive Medicine (7) (1) pp 7 – 12.
Kikuzaki dan Nakatani. 1993. Antioxidant effects of some ginger constituents. J Food Sci . 58(6) 1407.
Morakinyo, A.O., Adeniyi, O.S. dan Arikawe,
A.P. 2008. Effect of zingiber officinale on reproductive function in the male rats.
African Journal of  Biomedica Research . Vol.11: 329-334.
Mostafa, T. 2010. Cigarette Smoking and Male
Infertility .
Journal of Advanced
Research . (1) hal 179 –196.
Rajalakshmi, M. 2002.  Male contraception: expanding reproductive choice. India Institute of Medical Science. Indian J. Experimantal Biology . 43 pp 1032-1041.