## UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK KASAR LIPID Ulva fasciata TERHADAP Bacillus cereus
Riong Seulina Panjaitan 1,2 , Fida Madayanti 1
1 Departemen Kimia, Institut Teknologi Bandung, Jalan Ganesha No. 10 Bandung
2 Fakultas Farmasi, Universitas 17 Agustus 1945 Jakarta, Jln. Sunter Permai Raya, Jakarta Utara
*E-mail: riongpanjaitan@yahoo.co.id; riong.seulina@uta45jakarta.ac.id **E-mail: fida@chem.itb.ac.id
Abstract: The increasing of antimicrobial resistance  in medical field has  become a serious problem which is have to be solved by exploring raw material on natural product. Seaweed or  macroalgae  is    one  of  marine  natural  wealth  of  Indonesia’s  sea.  In  this  research,  lipid extraction of seaweed (macroalgae) Ulva fasciata has been done according to Folch method by using sochlet and mixure of solvent namely chloroform:methanol (2:1/ (v/v)). The result gave  two  phase  namely  chloroform  phase  (0,6%  (v/b))  and  methanol  phase  (7,79%  (v/b)). Furthermore, both of phase of crude extract lipid Ulva fasciata were tested their antibacterial activities  against Bacillus  cereus bacterial  which  is  three  times.    Tetracyclin  is  used  as positive  control  and  the  solvent  (methanol-chloroform)  is  used  as  negative  control.  The results  were  both  of  phase  gave  antibacterial  activity  namely  0,02  mm/  µg  extract  for chloroform phase and 0,02 mm/ µg extract for methanol phase.
Keywords: antibacterial; lipid; Ulva fasciata
Abstrak: Peningkatan kasus resistensi antimikroba pada dunia medis telah menjadi masalah yang  serius  sehingga  perlu  dilakukan  pengeksplorasian  bahan  baku  untuk  antibiotik khususnya dari bahan alam. Rumput laut (makroalga) merupakan salah satu kekayaan alam hayati laut Indonesia yang memiliki kandungan lipid. Pada penelitian ini dilakukan ekstraksi lipid rumput laut (makroalga) Ulva fasciata berdasarkan metode Folch dengan menggunakan sokhlet  dan    campuran  pelarut  yang  digunakan  yaitu  kloroform:metanol  (2:1/  (v/v)).  Hasil ekstraksi  lipid Ulva  fasciata menghasilkan  dua  fasa  yaitu  fasa  kloroform  sebanyak  0,6  % (v/b)  dan  fasa  metanol  sebanyak  7,79  %  (v/b).  Selanjutnya  kedua  fasa  ekstrak  kasar  lipid Ulva  fasciata tersebut  diuji  aktivitas  antibakterinya  terhadap  bakteri Bacillus  cereus sebanyak  tiga  kali  pengulangan.  Kontrol  positif  yang  digunakan  adalah  tetrasiklin  dan kontrol  negatifnya  adalah  pelarut  yaitu  kloroform  dan  metanol.  Hasil  penelitian menunjukkan bahwa kedua fasa tersebut memberikan aktivitas antibakteri sebesar 0,02 mm/ µg ekstrak untuk fasa klorofrom dan 0,08 mm/ µg ekstrak untuk fasa metanol.
Kata kunci: antibakteri; lipid; Ulva fasciata

## PENDAHULUAN
Dewasa ini kasus resistensi antimikroba menjadi masalah yang serius dalam  dunia  kesehatan  tidak  hanya  di Indonesia  tetapi  juga  di  dunia  (WHO, 2016).  Besarnya  angka  kematian  yang disebabkan  oleh  resisten  antimikroba sampai  pada  tahun  2014  mencapai 700.000  jiwa/tahun  dimana  jumlah  ini mengalami peningkatan setiap tahun, dan diperkirakan  pada  tahun  2050  mencapai 10 juta jiwa (Depkes, 2016). Berdasarkan data  WHO  ( World  Health  Organization) pada  tahun  2013  ditemukan  sebanyak 480.000  kasus  baru multidrug  resistant tuberculosis (MDR-TB) di dunia (Anonim,  2016).  Oleh  karena  itu, pencarian  sumber  bahan  baku  baru antibiotik  sangat  diperlukan  khususnya dari bahan alam.
Indonesia merupakan negara maritim di  mana  luas  wilayah  laut  Indonesia mencapai  5,8  juta  km 2 yang  memiliki kekayaan  hayati  yang  tinggi  sehingga dikenal  sebagai  negara  megadiversitas (Widyastuti,  2008).  Salah  satu  jenis kekayaan  hayati  laut  Indonesia  adalah rumput laut (makroalga) dengan beraneka ragam  jenis  seperti  jenis Gracilaria sp.,
Gelidium sp., Eucheuma sp., ( Rhodophyta ), Sargassum sp., Turbinaria sp., Padina sp.,  ( Phaeophyta ),  dan Ulva sp., ( Chlorophyta ) (Rachmaniar, 2005).
Kandungan  kimia  terbesar  yang terdapat  pada  rumput  laut  (makroalga) adalah karbohidrat, sedangkan kandungan  lainnya  adalah  protein,  lipid, vitamin,  mineral,  air,  sodium,  potassium (Chapman,  1970).  Rerata  kadar  lipid nabati  pada  rumput  laut  (makroalga) adalah 1-5% dari berat kering (Dharmananda,  2002).  Pada  tahun  2011, Wiraswasti  telah  berhasil  mengisolasi dan mengidentifikasi lipid dari Sargassum sp.  dan Ulva sp.  untuk produksi biodiesel.
Bacillus  cereus merupakan  bakteri patogen pada makanan yang menyebabkan keracunan makanan ditandai  dengan  mual  dan  diare  (Badan POM,  2011).  Bakteri  ini  bersifat  gram positif  dimana  dinding  sel  bakteri  gram positif  memiliki  teikoat  dan  asam teikoronat serta molekul polisakarida.
Defenisi antimikroba adalah senyawa yang  dapat  membasmi  infeksi  yang disebabkan  oleh  mikroba  pada  manusia sedangkan  definisi  antibiotik  secara umum  adalah  metabolit  dari  mikroba tertentu  yang  dalam  jumlah  sangat  encer akan menghambat pertumbuhan mikroorganisme.  Contoh  antibiotik  yang sudah  dibuat  secara  semisintetik,  antara lain senyawa-senyawa penisilin, sefalosporin, tetrasiklin, amikasin,
klindamisin, rifampisin dan dihidrostreptomisin (Sunaryo, 2015).
Antimikroba  mempunyai  dua  sifat yaitu  bakteriostatik  dan  bakteriosida.
Bakteriostatik adalah bersifat
menghambat
atau
menghentikan
pertumbuhan  bakteri  sehingga  bakteri yang bersangkutan menjadi stasioner dan tidak terjadi lagi  proses  multiplikasi  atau perkembangbiakan.  Contohnya  adalah sulfonamide,  tetrasiklin,  kloramfenikol, eritromisin, novobiosin, para- aminosalisilat,  linkomisin,  klindamisin, dan  nitrofurantoin  (dalam  kondisi  basa dengan  konsentrasi  rendah).  Sementara itu, bakterisida adalah bersifat membunuh  bakteri.  Contohnya  adalah penisilin, sefalosforin, streptomisin, kanamisin,  gentamisin,  novobiosin  dan lain-lain (Sunaryo, 2015).
Penelitian tentang pengujian aktivitas antibakteri  sudah  banyak  dilakukan khususnya mengenai kandungan metabolit sekunder (Yoppi (2011);
Bachtiar  (2012);  Kurniawan  (2014); Melki  (2011)).  Karena  penelitian  yang ada masih pada metabolit sekunder maka perlu  dilakukan  penelitian  terhadap metabolit primer khususnya lipid.
Penelitian ini bertujuan untuk
mengetahui  aktivitas  antibakteri  yang dihasilkan dari ekstrak kasar lipid rumput laut  (makroalga) Ulva  fasciata terhadap
bakteri Bacillus  cereus .  Penelitian  ini juga  diharapkan  dapat memberikan manfaat  bagi  pengembangan  bahan  baku antibiotik yang berasal dari alam khususnya dari laut Indonesia.

## METODE

## Sampling Ulva fasciata
Rumput laut (makroalga) Ulva fasciata disampling  dari  Pantai  Sayang Heulang,  Desa  Mancagahar,  Kecamatan Pameng  Peuk,  Kabupaten  Garut,  Jawa Barat. Pengambilan sampel Ulva fasciata dilakukan  dengan  mengambil  seluruh bagian  tanaman  tanpa  memperhatikan umur tanaman dan dilakukan di pagi hari. Selanjutnya  sampel Ulva  fasciata yang telah  disampling  dibawa  ke  laboratorium dengan  menggunakan  kotak  pendingin sehingga Ulva  fasciata tetap  dalam keadaan  segar.  Di  laboratorium,  sampel dibersihkan  dengan  air  mengalir  untuk menghilangkan  pasir  dan  efifit  yang menempel lalu dikeringanginkan. Sampel Ulva fasciata tersebut ditimbang masing- masing  sebanyak  100g  lalu  dimasukkan ke  plastik  dan  disimpan  di  dalam  lemari es untuk penelitian lebih lanjut.

## Ekstraksi Lipid Ulva fasciata
Proses  ekstraksi  lipid  dilakukan menggunakan metode sokhletasi menurut
metode Folch dengan  campuran  pelarut kloroform  (p.a):metanol  (p.a)  (2:1  ;  v/v). Ekstraksi  dilakukan  sampai  semua  lipid terekstrak yang ditandai dengan terbentuknya  warna  bening  di  dalam tabung sokhlet. Ekstraksi lipid menghasilkan  dua  fasa  yaitu  fasa kloroform  dan  metanol,  selanjutnya dipisahkan  menggunakan  corong  pisah dan dipekatkan dengan rotary evaporator .  Lipid  yang  diperoleh  dari setiap  fasa  (fasa  kloroform  dan  metanol) dimasukkan  di  dalam  botol  cokelat  dan disimpan  di  dalam  lemari  pendingin bersuhu 4 0 C.

## Uji Aktivitas Antibakteri
Bakteri Bacillus  cereus diperoleh dari  stok  kultur  Laboratorium  Biokimia Institut  Teknologi  Bandung  (ITB).  Uji aktivitas  antibakteri  dilakukan  menurut metode disc  diffusion .  Sebanyak  160  µL kultur bakteri Bacillus cereus diinokulasikan  ke  dalam  media Luria Bertani padat  dengan  metode spread .
Kertas  cakram  (kertas  saring  steril)  yang berukuran  6  mm  diletakkan  di  atas permukaan medium yang telah mengandung  bakteri.  Larutan  uji  yaitu ekstrak  lipid  dari  fasa  kloroform  dan
metanol  ditetesi  di  atas  kertas  cakram sebanyak 5 µL lalu diinkubasi pada suhu 37 0 C selama. Pengukuran aktivitas antibakteri  dilakukan  dengan  mengukur zona  bening  yang  terbentuk  di  sekitar kertas  cakram  dengan  penggaris.  Uji aktivitas  antibakteri  ini  dilakukan  triplo (sebanyak tiga kali pengulangan).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Sampling  rumput  laut  (makroalga) Ulva fasciata dilakukan di Pantai Sayang Heulang, Kecamatan Pameungpeuk,
Kabupaten  Garut, Jawa  Barat,  Indonesia. Dengan letak astronomis yaitu 07039’49,9”LS  dan  107042’14,6”BB. Pantai  ini  merupakan  pantai  yang berkarang.  Peta  dan  Gambar  Pantai Sayang Heulang, Pameung peuk,  Garut- Jawa Barat diberikan pada Gambar 1.
Rumput laut (makroalga) Ulva fasciata yang  diperoleh  dari  Pantai Sayang  Heulang,  Garut,  Jawa  Barat memiliki  panjang thallus rata-rata  10-15 cm,  diameter  sekitar  5  cm  dan  bewarna hijau cerah. Thallus Ulva fasciata berupa lembaran  halus  dan  licin  di  mana pinggiran thallus nya  berbentuk  ikal  dan berombak.  Penampang  rumput  laut Ulva fasciata diberikan pada Gambar 2.
(a)
(b)
Gambar 1 (a) dan (b). Peta dan Gambar Pantai Sayang Heulang, Pameung peuk,  Garut-Jawa Barat
Gambar 2. Ulva fasciata

## Hasil Ekstraksi Lipid Ulva fasciata
Hasil  ekstraksi  lipid Ulva  fasciata menghasilkan dua fasa yaitu fasa metanol dan  kloroform.  Fasa  metanol  terletak pada  lapisan  atas  dan  berwarna  hijau muda  sedangkan  fasa  kloroform  yang berada  pada  lapisan  bawah  memiliki warna  hijau  kehitaman.  Perbedaan  fasa ini  disebabkan  karena  adanya  perbedaan berat  jenis  dari  kedua  pelarut  tersebut. Selanjutnya untuk menghilangkan pelarut pada ekstrak dilakukan penguapan dengan  menggunakan rotary  evaporator.
Ekstrak  yang  sudah  dipekatkan  ini  akan digunakan  dalam  uji  aktivitas  antibakteri tanpa adanya pembuatan variasi konsentrasi  ekstrak.  Kadar  lipid  rumput laut (makroalga) per berat basah
disajikan pada Tabel 1.
Tabel 1. Kadar Lipid Ulva fasciata (per berat
basah) Jenis Rumput Laut (Makroalga) Jenis fasa Kadar lipid (% v/b) Kadar lipid (% b/b) Ulva fasciata Kloroform 0,6 % 0,56% Metanol 7,79% 7,75% Rumput laut (makroalga) Ulva fasciata tergolong  tumbuhan  tingkat rendah (dimana akar, batang dan daunnya belum  jelas)  yang  menyimpan  cadangan makanannya  dalam  bentuk  karbohidrat terutama polisakarida. Hewan menyimpan cadangan makanannya dalam bentuk  lemak  di  dalam  jaringan  lemak (Sediaoetama,  2000).  Hal  inilah  yang menjadi  faktor  penyebab  rendahnya kadar lipid  rumput laut  ditambah dengan pengaruh  variasi  musim  dan  faktor lingkungan seperti temperatur, air, salinitas,  cahaya  dan  nutrisi  (Dawes, 1998).  Lipid yang diperoleh dari rumput laut  (makroalga) Ulva  fasciata di  fasa kloroform  dan  methanol  diberikan  pada Gambar 3.

## Hasil Uji Aktivitas Antibakteri
Penelitian  ini  menguji  aktivitas antibakteri  ekstrak  lipid Ulva  fasciata (fasa  kloroform  dan  metanol)  terhadap bakteri Bacillus  cereus secara  in  vitro menggunakan  metode disc  diffusion/
kertas  cakram  (menurut Kirby-Bauer) dengan  melihat  terbentuk  atau  tidaknya diameter  zona  bening  di  sekitar  kertas cakram/saring. Pada penelitian ini, kontrol  positif  yang  digunakan  adalah tetrasiklin  dan  kontrol  negatif  adalah pelarut klorofom dan metanol.
Diameter  zona  bening  pada  kontrol negatif    yaitu  pelarut  kloroform  tidak terbentuk. Hal ini berarti bahwa aktivitas antibakteri  tidak  dipengaruhi  oleh  faktor pelarut  sehingga  aktivitas  antibakteri yang  diuji  merupakan  potensi  yang dimiliki  ekstrak  lipid.  Sementara  itu, pada  pelarut  metanol  memberikan  zona bening dalam ukuran yang kecil dibandingkan  ukuran  zona  bening  yang
dihasilkan ekstrak. Demikian juga halnya dengan  antibiotic,  dimana  etanol  yang digunakan sebagai pelarut dalam pembuatan  antibiotik  tidak  memiliki aktivitas  antibakteri  karena  tidak  adanya zona bening yang terbentuk.
Zona  bening  (zona  hambat)  sampel ditentukan dengan mengurangkan diameter  zona  bening  yang  terbentuk  di sekitar kertas cakram/saring yang mengandung  sampel  dengan  diameter kertas  saring  itu  sendiri  (0,6  cm). Tetrasiklin  dengan konsentrasi 50 µg/mL sebagai  kontrol  positif  dengan  besarnya zona  bening  yang  terbentuk  sebesar  1,4 cm.  Besarnya  aktivitas  antibakteri  dari ekstrak kasar lipid Ulva fasciata diperoleh  dari  selisih  nilai  zona  bening (zona  hambat)  sampel  dengan  nilai  zona bening  (zona  hambat)  kontrol  negatif (pelarut).  Zona  hambat  yang  diberikan oleh  kedua  fasa  ekstrak  kasar  lipid Ulva fasciata disajikan pada Gambar 4 dan 5.
(a) (b) (c)
Gambar 4 (a, b, c). Zona hambat yang dihasilkan oleh fasa kloroform ekstrak kasar lipid Ulva fasciata
E K  LK A E A K  LK E A K  LK
(a) (b) (c)
Gambar 5 (a,b,c). Zona hambat yang dihasilkan oleh fasa metanol ekstrak kasar lipid Ulva fasciata
Keterangan: E = Pelarut etanol (digunakan pada pembuatan antibiotik) A = Antibiotik tetrasiklin
K = Pelarut kloroform M   = Pelarut methanol LK   = Lipid Ulva fasciata fasa kloroform LM   = Lipid Ulva fasciata fasa methanol
Besarnya  aktivitas  antibakteri  yang dihasilkan  dari  kedua  fasa  ekstrak  kasar lipid  Ulva  fasciata  disajikan  pada  Tabel 2.
Tabel 2. Rerata Besarnya Aktivitas Antibakeri
Dari Ekstrak Kasar Lipid Ulva fasciata
Jenis Fraksi Besarnya Aktivitas Antibakteri Kloroform 0,02 mm/ µg ekstrak Metanol 0,08 mm/ µg ekstrak
Selanjutnya,  besarnya  diameter  zona bening  yang  terbentuk  dari  kedua  fasa ekstrak kasar lipid Ulva fasciata disajikan pada Tabel 3 dan Tabel 4.
Tabel 3. Hasil Pengukuran Diameter Zona Bening yang Terbentuk Pada Ekstrak Kasar Lipid Ulva fasciata Fasa Kloroform Terhadap Pertumbuhan Bakteri Bacillus cereus Diameter Zona Bening Yang Terbentuk Pada Pengulangan ke-… (mm) I II III Antibiotik 19 22 25 Kloroform 7 7 9 Ekstrak Kasar Lipid Ulva fasciata Fasa Kloroform 18 14 15
Tabel 4. Hasil Pengukuran Diameter Zona Bening yang Terbentuk Pada Ekstrak Kasar Lipid Ulva fasciata Fasa Metanol Terhadap
Pertumbuhan Bakteri Bacillus cereus Diameter Zona Bening Yang Terbentuk Pada Pengulangan ke-… (mm) I II III Antibiotik 15 16 28 Metanol 10 10 12 Ekstrak Kasar Lipid Ulva fasciata Fasa Metanol 11 12 14
E A M LM E  A M LM E A M LM
Berdasarkan  data  pada  tabel  di  atas, dapat disimpulkan bahwa aktivitas antibakteri    dari  ekstrak  kasar  lipid Ulva fasciata fasa  kloroform  dan  metanol terhadap Bacillus  cereus lebih  besar  dari kontrol  negatif  akan  tetapi  lebih  kecil daripada kontrol positif yaitu tetrasiklin.
Penggolongan kekuatan daya antibakteri  menurut  Davis  dan  Stout  di dalam Deby (2012) terbagi tiga golongan yaitu:  pertama,  golongan  daya  hambat lemah jika zona bening  yang terbentuk 5 mm  atau  kurang,  kedua,  golongan  daya hambat  sedang  jika  zona  bening  yang terbentuk  5-10  mm,    ketiga,  golongan daya  hambat  kuat  jika  zona  bening  yang terbentuk 10-20 mm dan keempat adalah golongan  daya  hambat  sangat  kuat  jika zona bening yang terbentuk lebih dari 20 mm.  Berdasarkan  kriteria  penggolongan di  atas,  maka  daya  antibakteri  ekstrak kasar  lipid Ulva  fasciata fasa  kloroform dan  metanol  terhadap Bacillus  cereus dikategorikan golongan daya hambat kuat seperti yang tertera pada Tabel 3 dan 4.
Prinsip  kerja  antimikroba  ada  enam yaitu:  antimetabolit,  penghambat  sintesis dinding sel, penghambat fungsi membran sel,  bekerja  langsung  pada  membran  sel, penghambat sintesis protein dan menghasilkan  protein  abnormal  dan penghambat sintesis asam nukleat
melalui penghambatan enzimnya (Sunaryo, 2015).
Tetrasiklin  adalah  antimikroba  yang berspektrum luas, diekstraksi dari Streptomyces sp. dan bersifat bakteriostatik.  Prinsip  kerja  antimikroba ini  adalah  menghambat  sintesis  protein dan  menghasilkan  protein  abnormal.  Di mana  antimikroba  ini  memengaruhi fungsi  ribosom  bakteri  dengan  mengikat ribosom 30S dan menyebabkan terjadinya hambatan pengikatan aminoasil-tRNA dengan kompleks mRNA-ribosom sehingga sintesis protein terhambat  (Sunaryo,  2015).  Hal  inilah yang  menyebabkan  zona  hambat  yang dihasilkan  oleh  tetrasiklin  jauh  lebih besar dibandingkan dengan ekstrak kasar lipid Ulva  fasciata fasa  kloroform  dan metanol.

## KESIMPULAN
Hasil  ekstraksi  lipid Ulva  fasciata menghasilkan  dua  fasa  yaitu  fasa kloroform  dan  fasa  metanol.  Ekstrak kasar  lipid  fasa  kloroform  berwarna cokelat  kehitaman,  sedangkan  ekstrak kasar  lipid  fasa  metanol  berwarna  hijau dan  kadar  lipid Ulva  fasciata fasa metanol  (7,79%  (v/v))  lebih  banyak daripada fasa kloroform (0,6% (v/v)).
Ekstrak kasar lipid Ulva fasciata baik pada  fasa  kloroform  maupun  metanol
terbukti memberikan aktivitas antibakteri terhadap bakteri Bacillus cereus .
Besarnya  aktivitas  antibakteri  pada  fasa
kloroform  sebesar  0,02  mm/ µg  ekstrak dan  fasa  metanol  sebesar  0,08  mm/ µg ekstrak.

## DAFTAR RUJUKAN
Anonim  2016, Mencari  Harapan  Baru Resistensi  Antibiotik  di  Indonesia,
diakses 15 September 2016,
(http://www.koran- jakarta.com/mencari  -harapan-baru- resistensi-antibiotik-di-indonesia/).
Bachtiar  2012,  Pengaruh  Ekstrak  Alga Cokelat  ( Sargassum sp.)  terhadap Pertumbuhan  Bakteri Escherichia coli , Journal  of  Marine  and  Coastal
Science , vol. 1, no. 1, hh. 53 – 60.
Badan  POM,  2011, Keracunan  Pangan Akibat  Bakteri  Patogen, diakses  15
September
2016,
(http://www2.pom.go.id).
Chapman,  V.  J.  and  Chapman,  D.  J. 1980, Seaweed  and  Their  Uses , London, Chapman and Hall.
Depkes  2016, Mari  Bersama  Atasi
Resistensi Antimikroba (AMR) , diakses 18 September 2016,, (http://www.depkes.go.id).
Dharmananda.  S.  2002, The  Nutritional and  Medicinal  Value  of  Seaweeds Used  in  Chinese  Medicine ,  diakses
31 Agustus 2016,, (http://www.itmonline.org/arts/seaw eed.htm).
Iskandar, Y. 2012, Uji Aktivitas Antibakteri  Ekstrak  Etanol  Rumput Laut  (Eucheuma  cottonii)  Terhadap Bakteri Escherichia coli dan Bacillus cereus ,  Skripsi  tidak  diterbitkan, Bandung,  Jurusan  Farmasi  Fakultas MIPA Universitas Padjadjaran Melki  2011, Uji  Aktivitas  Antibakteri Ekstrak Gracilaria sp. (Rumput Laut) terhadap  Bakteri  Escherichia  coli dan  Staphylococcus  aureus, diakses
6 September 2016, (http://eprints.unsri.ac.id). Mpila, D. 2012, Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Mayana ( Coleus  atropurpureus [L]  Benth Terhadap Staphylococcus  aureus,  E. coli dan Pseudomonas  aeruginosa Secara In Vitro. Journal Pharmacon ,
vol. 1, no. 1, hh 165-172.
Sunaryo 2015, Kimia Farmasi . Yogyakarta, EGC.
WHO,  2016, Antimicrobial  Resistance, diakses 18 September 2016, (http://www.who.int).
Widyastuti,  2008,    Kadar  Alginat Rumput  Laut  yang  Tumbuh  di Perairan Laut Lombok, Jurnal
Teknologi  Pertanian, vol.  10,  no.  3 hh 144-152. Waraswasti,  H.  L.  2011, Isolasi  dan Identifikasi  Lipid  dari  Rumput  Laut
Untuk  Produksi  Biodiesel ,  Tesis tidak  diterbitkan,  Bandung,  Kimia  - FMIPA Institut Teknologi Bandung.