Sand  Granules Ekstrak  Biji  Alpukat  ( Persea  Americana Seed  Extract) sebagai Larvasida Alami Pemberantas Demam Berdarah Dengue
( Sand  Granules  of  Avocado  Seed  Extract  (Persea  Americana  Seed  Extract)  as  Natural Larvaside of Dengue Fever )
Fef Rukminingsih 1* , Anasthasia Pujiastuti 1
1* Program Studi DIII Farmasi, Politeknik Katolik Mangunwijaya, Semarang, Indonesia. E-mail: fefrukminingsih@gmail.com
Article Info:
Received: 5 September 2019
in revised form: 6 Februari 2020 Accepted: 25 Februari 2020
Available Online: 02 Maret 2020

## ABSTRACT
Dengue hemorrhagic fever (DHF) threatens people in the rainy season. DHF is  one  of  the  major  public  health  problems  in  Indonesia.  These  problems encourage an effort to eradicate Ae. aegypti larvae by using natural larvicide. One  of  the  plants  that  can  be  used  as  natural  larvicides  is  avocado  seeds (Persea  americana  Seed)  which  contain  saponin.  This  study  aims  to determine the larvacidal activity of avocado seed extract sandgranules  with LC50  of  8.87  mg.mL-1  against Ae.  aegypti larvae.  This  study  is  an experimental  research  with  a  complete  random  design  in  a  unidirectional pattern. The independent variable in this study is the variation concentration of  Explotab  as  a  disintegrant  agent  ie  2,  3,  and  4%.  Sand  granules  of avocado  seed  extract  are  made  by  wet  granulation  method.  Results  of  the larvacidal activity test of avocado seed extract sand granules were analyzed by  calculating  the  percentage  of  larvae  mortality  and  statistical  analysis using SPSS. The results showed that the larvicidal activity of pure avocado seed  extract  with  LC50  8.87  mg.  L-1  is  greater  than  the  sand  granules  of avocado seed extract. The addition of Explotab did not affect the total larvae mortality.
Keywords :
Sand Granules Avocado seed extract Explotab Larvacidal activity

## Corresponding Author:
Fef Rukminingsih Program Studi DIII Farmasi
Politeknik Katolik Mangunwijaya Semarang
50134 Indonesia email: fefrukminingsih@gmail.com
Copyright © 2019 JFG-UNTAD
This open access article is distributed under a Creative Commons Attribution (CC-BY-NC-SA) 4.0 International license.
How to cite (APA 6 th Style): Rukminingsih,  F.,  Pujiastuti,  A.  (2020). Sand  Granules Ekstrak  Biji  Alpukat  ( Persea  Americana Seed  Extract)  Sebagai Larvasida  Alami  Pemberantas  Demam  Berdarah  Dengue. Jurnal  Farmasi  Galenika  :Galenika  Journal  of  Pharmacy  (e- Journal), 6 (1), 84-93. doi:10.22487/j24428744.2020.v6.i1.13607
Jurnal Farmasi Galenika ( Galenika Journal of Pharmacy ) (e-Journal) 2020; 6 (1): 84 – 93 ISSN : 2442-8744 (electronic); 2442-7284 (printed) Journal Homepage: https://bestjournal.untad.ac.id/index.php/Galenika DOI: 10.22487/j24428744.2010.22487/j24428744.2020.v6.i1.13607

## ABSTRAK
Penyakit  demam  berdarah  dengue  (DBD)  menjadi  salah  satu  ancaman  masyarakat  pada  musim  penghujan. Penyakit  DBD  sampai  saat  ini  masih  merupakan  salah  satu  masalah  kesehatan  masyarakat  yang  utama  di Indonesia.  Permasalahan  tersebut  mendorong  adanya  usaha  untuk  memberantas  larva Ae.  aegypti dengan menggunakan larvasida alami. Salah satu tanaman yang dapat dimanfaatkan sebagai larvasida alami adalah  biji alpukat  ( Persea  americana  Seed )  yang  mengandung  saponin.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  daya larvasida  sediaan sand  granules ekstrak  biji  alpukat  dengan  LC 50 sebesar  8,87  mg.mL -1 terhadap  larva Ae. aegypti. Penelitian  ini  termasuk  jenis  penelitian  eksperimental  dengan  rancangan  acak  lengkap  pola  searah. Variabel bebas dalam penelitian ini adalah variasi konsentrasi Explotab sebagai bahan penghancur yaitu sebesar 2,  3,  dan  4  %. Sand  granules ekstrak  biji  alpukat  dibuat  dengan  metode  granulasi  basah.  Data  hasil  uji  daya larvasida sand  granules ekstrak  biji  alpukat  di  analisis  dengan  menghitung  persentase  mortalitas  larva  dan analisis  statistik  menggunakan  SPSS.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  daya  larvasida  ekstrak  biji  alpukat murni  dengan  LC 50 8,87  mg.L -1 lebih  besar  dari sand  granules ekstrak  biji  alpukat.  Penambahan  konsentrasi bahan penghancur Explotab dalam sand granules tidak berpengaruh terhadap total mortalitas larva.
Kata kunci: Sand Granules , Ekstrak Biji Buah Alpukat, Explotab, Daya Larvasida.

## PENDAHULUAN
Penyakit  demam  berdarah  dengue  (DBD)  menjadi  salah  satu  ancaman  masyarakat  pada  musim penghujan. Penyakit DBD sampai saat ini masih merupakan salah satu masalah kesehatan masyarakat yang  utama  di  Indonesia,  khususnya  Provinsi  Jawa  Tengah.  Hal  ini  terbukti  dari  35  kabupaten/kota sudah  pernah  terjangkit  DBD.  Angka  kesakitan/ Incidence  Rate (IR)  di  Provinsi  Jawa  Tengah  pada tahun 2012 sebesar 19,29/100.000 penduduk, meningkat bila dibandingkan tahun 2011 (15,27/100.000 penduduk)  (Kemenkes  RI,  2018).  Penyebab  meningkatnya  penyebaran  penyakit  DBD  dan  jumlah penderita DBD karena semakin meningkatnya arus transportasi penduduk dari satu daerah ke daerah lain. Vektor utama penyebar virus dengue penyebab DBD adalah nyamuk Ae. aegypti (Sembel, 2009). Manusia  yang  terinfeksi  virus  dengue  digigit  nyamuk Ae.  aegypti maka  virus  dengue  akan  masuk bersama  darah  yang  diisapnya.  Di  dalam  tubuh  nyamuk,  virus  dengue  akan  berkembangbiak  dengan cara  membelah  diri  dan  menyebar  diseluruh  bagian  tubuh  nyamuk.  Sebagian  besar  virus  dengue berada  dalam  kelenjar  liur  nyamuk.  Dalam  waktu  1  minggu  jumlah  virus  dengue  dapat  mencapai puluhan  atau  bahkan  ratusan  ribu  yang  siap  untuk  ditularkan  atau  dipindahkan  pada  manusia (Kemenkes RI, 2019).
Pemberantasan Ae.  aegypti sebagai  vektor  utama  DBD  dapat  dilakukan  dengan  berbagai  cara  antara lain  dengan  sanitasi  lingkungan,  yang  bertujuan  untuk  mengurangi  habitat  larva,  pemberantasan dengan  menggunakan  insektisida  ditujukan  pada  nyamuk  dewasa  maupun  larva  (Sukowati,  2010). Pemberantasan  vektor  DBD  menggunakan  bahan  kimia  menyebabkan  terjadinya  peningkatan resistensi, pencemaran lingkungan, keracunan dan kematian hewan lain yang bukan sasaran (Widiarti et al., 2011). Permasalahan tersebut mendorong adanya usaha untuk menanggulangi larva Ae. aegypti dengan menggunakan larvasida alami. Salah satu tanaman yang dapat dimanfaatkan sebagai larvasida alami adalah biji alpukat ( Persea americana Seed ) yang mengandung saponin. Penelitian tentang daya larvasida  ekstrak  biji  alpukat  terhadap  larva Ae.  aegypti telah  dilakukan  dengan  hasil Lethal Concentration 50 (LC 50 ) sebesar 8,87 mg.L -1 (Jaime, 2009). Oleh karena itu perlu dilakukan penelitian tentang bentuk sediaan ekstrak biji alpukat yang siap digunakan oleh masyarakat dengan kemampuan daya larvasida yang sama dengan ekstrak biji alpukat murni. Bentuk sediaan yang dapat dibuat yaitu sand  granules yang  mudah  larut  dalam  air. Sand  granules ekstrak  biji  alpukat  dibuat  dengan penambahan  bahan  penghancur  Explotab  atau Sodium  Starch  Glycolate (SSG)  dan  bahan  pengisi Saccharum  Lactis (Rowe, et  al .,  2009).  Explotab  merupakan superdisintegrant yang  umumnya ditambahkan dalam sediaan farmasetik (Bhusnure, et al ., 2015). Cara penambahan bahan penghancur dapat dilakukan sebelum granulasi maupun setelah granulasi atau kombinasi keduanya (Priyambodo, 2007).  Pada  formula  yang  mengandung  bahan  aktif  berbentuk  ekstrak  kental  dalam  jumlah  besar  (> 30%)  maka  tidak  perlu  ditambahkan  bahan  pengikat  (Anief,  2000).  Penelitian  ini  bertujuan  untuk
membuat sand  granules ekstrak  biji  alpukat  dengan  LC 50 sebesar  8,87  mg.mL -1 yang  memberikan daya larvasida terhadap larva Ae. Aegypti.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  termasuk  jenis  penelitian  eksperimental  dengan  rancangan  acak  lengkap  pola  searah. Variabel  bebas  dalam  penelitian  ini  adalah  variasi  konsentrasi  Explotab  sebagai  bahan  penghancur sediaan sand granules yaitu  2 %, 3 %, dan 4 %. Variabel tergantung dari penelitian ini adalah waktu larut sediaan sand granules dalam air dan jumlah mortalitas larva Ae. Aegypti.

## Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  yaitu  pisau,  penjemur  dari  bambu  yang  berlubang-lubang,  kain  hitam, Soxlet , Erlenmeyer ,  pengaduk, Rotary  vacuum  evaporator , waterbath , beaker  glass ,  pipet  tetes,  pencatat waktu, neraca digital, cawan porselen, ayakan mesh 16 dan mesh 18 serta alat fotografi.  Bahan yang digunakan yaitu buah alpukat, larva Ae. aegypti instar IV, heksan pro analisis , air, Saccharum Lactis dan Explotab.

## Metode
Determinasi tanaman
Determinasi tanaman alpukat dilakukan di Laboratorium Farmakognosi Fitokimia Prodi DIII Farmasi Politeknik Katolik Mangunwijaya dengan mencocokkan ciri-ciri tanaman dengan kunci determinasi.

## Pengumpulan dan pengeringan bahan
Buah  alpukat  diperoleh  dari  pasar  Johar  Semarang.  Buah  yang  telah  terkumpul  kemudian  dibelah untuk  memisahkan  biji  dari  daging  buahnya.  Biji  yang  terkumpul  dicuci  bersih  dengan  air  mengalir untuk menghilangkan kotoran-kotoran yang  melekat  pada  biji. Biji yang telah bersih dipotong kecil- kecil  kemudian  dihamparkan  di  atas  penjemur  yang  berlubang  dan  dijemur  di  bawah  sinar  matahari langsung  dengan  ditutup  kain  hitam.  Biji  alpukat  yang  sudah  kering  kemudian  dihaluskan  dengan blender.

## Pembuatan ekstrak heksan
Sebanyak  25  gram  serbuk  kering  biji  alpukat  dimaserasi  menggunakan  pelarut  heksan  250  mL. Maserasi  dilakukan  selama  24  jam.  Hasil  maserasi  yang  telah  terkumpul  dipekatkan  dengan Rotary vacuum evaporator dan waterbath sehingga diperoleh ekstrak pekat.

## Kolonisasi Nyamuk
Larva Ae. aegypti instar IV yang digunakan diperoleh dari Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Vektor  dan  Reservoir  Penyakit  Salatiga.  Larva  diperoleh  dengan  cara  memelihara  nyamuk  dewasa sebagai induk di dalam kurungan yang terbuat dari kawat dilapisi dengan kasa atau kelambu. Nyamuk diberi makan dengan meletakkan kelinci di dalam kurungan. Mangkuk yang diisi air sepertiga bagian dan pada bagian dinding mangkuk di atas permukaan air dilapisi kertas saring dimasukkan juga dalam kurungan.  Nyamuk  akan  bertelur  dan  telur  tersebut  menempel  pada  kertas  saring.  Kertas  saring diangkat  setiap  2-3  hari  sekali  dan  dikeringkan  pada  suhu  kamar.  Telur  yang  akan  ditetaskan dimasukkan  dalam  baki  berisi  air  dan  akan  menetas  dalam  1-3  hari.  Larva  hasil  penetasan  telur dipelihara  dan  diberi  makan dog  food ,  setelah  5-6  hari  akan  mencapai  stadium  III  atau  IV  dan  siap untuk penelitian (Widayanti, 2001).

## Pembuatan Sand Granules
Sand  granules ekstrak  biji alpukat  dibuat  dengan  metode  granulasi  basah. Metode granulasi basah merupakan  metode  pembentukan  granul  dengan  mencampurkan  bahan  aktif  dengan  bahan pengisi,  yang  akan  bersatu  dengan  adanya  bahan  pengikat  dengan  pembawa  air  atau  pelarut yang sesuai (Agoes, 2012). Formula sand granules ekstrak biji alpukat dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Formula Sand Granules Ekstrak Biji Alpukat
Nama Bahan Jumlah Bahan (%) Formula I Formula II Formula III Ekstrak biji buah alpukat 0,0887 0,0887 0,0887 Explotab 2 3 4 Saccharum lactis hingga 100 hingga 100 hingga 100
Setiap formula dibuat dengan cara menambahkan Explotab dan Saccharum Lactis pada ekstrak heksan biji  alpukat.  Semua  bahan  diaduk  sampai  homogen  dan  terbentuk  massa  granul  yang  bagus.  Massa granul  basah  yang  sudah  terbentuk  kemudian  diayak  dengan  mesh  16.  Granul  basah  selanjutnya dikeringkan  menggunakan  oven.  Granul  yang  sudah  kering  kemudian  dilakukan  pengayakan  dengan mesh 18 (Agoes, 2012) . Granul kering yang dihasilkan selanjutnya dilakukan pengemasan dan diuji daya  larvasidanya.  Setiap  kemasan  berisi  10  g sand  granules yang  mengandung  ekstrak  heksan  biji alpukat sebesar 8,87 mg.

## Uji daya larvasida
Uji  daya  larvasida  dilakukan  dengan  4  variasi  perlakuan  yaitu  1  kontrol  positif dan  3 sand  granules dengan  variasi  konsentrasi  bahan  penghancur.  Perlakuan  kontrol  positif  dilakukan  dengan  cara melarutkan ekstrak heksan biji alpukat pekat hasil penyarian dengan konsentrasi 8,87 mg.L -1 . Kontrol positif dibuat dengan mengambil 8,87 mg ekstrak pekat dan dimasukkan dalam beaker glass kemudian ditambah air ledeng 1000 mL dan 50 ekor larva Ae. aegypti instar IV (Pujiastuti et al., 2008).
Uji  daya  larvasida  pada  3  perlakuan sand  granules digunakan  3 beaker  glass berisi  1000  mL  air ledeng  sebagai  media  uji.  Pada  setiap beaker  glass ditambahkan  15  gram sand  granules dengan  3 variasi konsentrasi bahan penghancur. Dihitung waktu yang dibutuhkan oleh tiap varian sand granules untuk melarut sempurna, yang ditunjukkan dengan tidak adanya butiran sand granules . Sand granules yang telah melarut, selanjutnya ditambahkan 50 ekor larva Ae. aegypti instar IV dalam setiap beaker glass (Pujiastuti et al., 2008).
Pengamatan  terhadap  mortalitas  larva  dilakukan  setiap  jam  selama  6  jam  berturut-turut  kemudian dihitung  total  mortalitas  larva  setelah  24  jam.  Pengujian  dilakukan  dengan  pengulangan  sebanyak  5 kali. Berdasarkan Pujiastuti (2003), persentase mortalitas larva dihitung dengan cara :
% mortalitas larva =
larva jumlah larva mortalitas jumlah
x 100%

## Analisis Hasil
Data  hasil  uji  daya  larvasida sand  granules ekstrak  biji  alpukat  di  analisis  dengan  menghitung mortalitas larva dan analisis statistik menggunakan SPSS. Jika pada kelompok kontrol negatif terjadi mortalitas larva antara 5% - 9% maka dilakukan koreksi dengan formula “Abbot” untuk menentukan % mortalitas, dengan rumus :
% mortalitas = kontrol kelompok mortalitas kontrol kelompok mortalitas uji kelompok mortalitas % 100 % %   x100%

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Biji alpukat sebelum diekstraksi dilakukan perajangan dan pengeringan. Hasil dari proses perajangan dan  pengeringan  biji  alpukat  dapat  dilihat  pada  gambar  1.  Hasil  organoleptis  rajangan  biji  alpukat yang  sudah  kering  yaitu  berwarna  hitam  kecoklatan,  berbau  khas  dan  berasa  pahit.  Ekstraksi  biji alpukat dengan metode maserasi, menghasilkan ekstrak kental. Organoleptis ekstrak biji alpukat yaitu memiliki konsistensi yang kental, berbau khas biji alpukat serta berwarna coklat bata. Hasil dari proses perajangan, pengeringan dan ekstrak biji alpukat dapat dilihat pada gambar 1.

## A                                B
C D
Gambar 1. Hasil Perajangan dan Ekstrak Biji Buah Alpukat ( Persea americana Mill.)
Keterangan :
A = Biji buah alpukat B = Irisan biji buah alpukat basah (sebelum dikeringkan) C = Irisan biji buah alpukat kering (setelah dikeringkan) D = Ekstrak kental biji alpukat
Sediaan sand granules ekstrak biji alpukat yang dihasilkan pada ketiga formula memiliki organoleptis yang  sama  yaitu  berbentuk  granul,  berwarna  putih  dan  tidak  berbau.  Hal  ini  berarti  perbedaan konsentrasi Explotab tidak berpengaruh pada organoleptis sand granules . Sand granules formula I, II dan III dapat dilihat pada gambar 2.
Formula I Formula II Formula III Gambar 2. Sediaan Sand Granules Ekstrak Biji Buah Alpukat Formula I, II, dan III
Keterangan :
Formula I = konsentrasi explotab 2% Formula II = konsentrasi explotab 3% Formula III
= konsentrasi explotab 4%
Pengujian  daya  larvasida  dilakukan  dengan  4  perlakuan  yaitu  1  perlakuan  kontrol  positif  dan  3 perlakuan uji daya larvasida menggunakan sand granules . Hasil pengamatan jumlah larva yang  mati pada uji daya larvasida sediaan sand granules ekstrak biji buah alpukat dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2. Hasil Mortalitas Larva pada Uji Daya Larvasida Sand Granules Ekstrak Biji Buah Alpukat
Perlakuan Rata-rata Jumlah Mortalitas Larva (ekor) ∑ total mortalitas larva 1 jam  2 jam 3 jam 4 jam 5 jam 6 jam 24 jam I 0 0,33 2 4 6 4 7,67 24 II 0 0 1,33 2,67 4,33 3 8 19,3 III 0 0 1,67 2,33 3 4,67 8,33 20 IV 0 0 1,67 3,33 3,33 4,33 8,33 21
Keterangan :
I : Kontrol positif ekstrak heksan biji buah alpukat 8,87 mg/L II : Sediaan sand granules ekstrak biji buah alpukat formula I III
: Sediaan sand granules ekstrak biji buah alpukat formula II IV
: Sediaan sand granules ekstrak biji buah alpukat formula III
Analisis hasil uji daya larvasida dilakukan dengan menghitung persentase mortalitas larva dan analisis statistik menggunakan SPSS. Berdasarkan hasil pengamatan jumlah larva mati pada uji daya larvasida, nilai persentase mortalitas larva dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel 3. Mortalitas Larva Pada Uji Daya Larvasida Sand Granules Ekstrak Biji Buah Alpukat Perlakuan Jumlah larva mati dalam 24 jam (ekor) Persentase kematian (%) Nilai Normalitas p-value I 24 48,00 1,000 0,041 a II 19,33 38,66 0,00 III 20 40,00 1,000 IV 21 42,00 1,000
Keterangan :
a Kruskal Wallis Test
I : Kontrol positif ekstrak heksan biji buah alpukat 8,87 mg/L II : Sediaan sand granules ekstrak biji buah alpukat formula I III : Sediaan sand granules ekstrak biji buah alpukat formula II IV
: Sediaan sand granules ekstrak biji buah alpukat formula III
Berdasarkan  Tabel  3  diketahui  bahwa  mortalitas  larva  yang  tertinggi  yaitu  pada  perlakuan  I  dengan nilai  persentase  mortalitas  sebesar  48%.  Hal  ini  dikarenakan  pada  perlakuan  kontrol  positif  hanya digunakan  ekstrak  biji  buah  alpukat  murni  dan  air  ledeng,  tanpa  bahan  tambahan  pembentuk  granul yaitu explotab dan saccharum lactis . Hasil yang sama juga diperoleh pada penelitian uji daya larvasida ekstrak biji kelengkeng, dimana kontrol positif memberikan nilai mortalitas tertinggi (Rukminingsih & Kristiani,  2016).  Persentase  mortalitas  larva Ae  aegypti pada  perlakukan  I  lebih  tinggi  dibandingkan dengan  perlakukan  II,  III  dan  IV.  Pada  perlakuan  II  mengandung  explotab  dengan  jumlah  paling sedikit  menghasilkan  persentase  mortalitas  paling  rendah  yaitu  sebesar  38,66%,  selanjutnya  diikuti oleh  perlakuan  III  dan  IV.  Pada  perlakuan sand  granules yang  menghasilkan  persentase  mortalitas larva tertinggi yaitu pada perlakuan IV sebesar 42%. Perlakuan IV merupakan formula sand granules dengan  kadar  Explotab  sebagai  bahan  penghancur  paling  besar  yaitu  4%.  Hasil  tersebut  dipengaruhi oleh kadar Explotab yang semakin besar, Explotab menunjukkan disintegrasi yang sangat cepat pada pembuatan granul dengan metode granulasi basah (Kaur & Nivedita, 2016). Hasil penelitian Laksmita, 2017, menyatakan bahwa perbedaan kadar bahan penghancur berpengaruh pada waktu hancur sediaan karena semakin tinggi kadar bahan penghancur maka semakin cepat sediaan padat untuk hancur. Hal tersebut  didukung  oleh  hasil  penelitian  Endriyatno,  2018,  yang  menyatakan  bahwa  Explotab  dapat menurunkan  waktu  hancur.  Kecepatan  waktu  hancur  sediaan  dikarenakan  Explotab  mempunyai kemampuan swelling pada  air  sebesar  300  kali  volumenya  (Rowe, et  al .,  2009).  Mekanisme penghancuran sediaan  dengan  cara swelling terjadi  pada  saat  partikel  bahan  penghancur  bersentuhan langsung dengan media yang sesuai (pada penelitian ini media yang digunakan adalah akuades) maka kekuatan disintegran untuk menggembang meningkat, sehingga sediaan akan pecah dan zat aktif akan terlepas (Pahwa & Nisha, 2011). Oleh karena itu dengan waktu pemaparan sand granules yang sama (24 jam) menghasilkan jumlah mortalitas larva yang berbeda, dimana pada pada perlakuan IV sediaan sand  granules dengan  kadar  Explotab  paling  tinggi  menghasilkan  persentase  mortalitas  larva Ae aegypti yang  lebih  besar  dibandingkan  perlakukan  II  dan  III.  Hal  ini  disebabkan  karena  pada perlakuan  IV  kekuatan  disintegran  mengembang  lebih  besar,  sehingga  sediaan sand  granules lebih cepat  pecah  dan  zat  aktif  yang  terkandung  dalam  ekstrak  biji  alpukat  lebih  mudah  terlepas,  dengan demikian  dapat  lebih  banyak  mematikan  larva Ae  aegypti. Berdasarkan  Tabel  3  diketahui  bahwa perbedaan kadar Explotab mempengaruhi hasil persentase mortalitas larva.
Hasil persentase mortalitas larva selanjutnya dilakukan analisis statistik menggunakan SPSS. Hasil uji statistik  antar  perlakuan  menunjukkan  bahwa  data  jumlah  larva  mati  pada  perlakuan  I,  III  dan  IV terdistribusi normal (p = 1,000 > 0,05) sedangkan pada perlakuan II data yang dihasilkan terdistribusi tidak  normal  (p  =  0,00  <  0,05),  sehingga  dilakukan  uji Kruskal  Wallis .    Berdasarkan  uji Kruskal Wallis , jumlah larva mati pada perlakukan I-IV dengan perbedaan konsentrasi Explotab menunjukkan
adanya  perbedaan  yang  bermakna  (p  =  0,041  <  0,05).  Analisis  statistik  dilanjutkan  dengan Mann Whitney Test yang dapat dilihat pada Tabel 4.
Tabel 4. Perbedaan Mortalitas Larva pada Setiap Perlakuan
Perlakuan p-value I II III IV I 0,046 a 0,05 a 0,077 a II 0,046 a 0,346 a 0,72 a III 0,05 a 0,346 a 0,261 a IV 0,077 a 0,72 a 0,261 a
a Mann Whitney Test
Berdasarkan  Tabel  4  dapat  diketahui  bahwa  antara  perlakuan  I  dan  II  serta  perlakuan  I  dan  III menghasilkan  nilai  signifikansi  <  0,05  yang  berarti  antar  perlakuan  terdapat  perbedaan  yang bermakna. Pada perlakuan I dan IV, II dan III, II dan IV serta perlakuan III dan IV menghasilkan nilai signifikansi  >  0,05  yang  berarti  antar  perlakuan  berbeda  tidak  bermakna.  Hal  ini  berarti  konsentrasi Explotab  berpengaruh  pada  mortalitas  larva  pada  perlakuan  I  dan  II,  serta  pada  perlakuan  I  dan  III, tetapi tidak berpengaruh pada mortalitas larva di perlakuan yang lain.
Hasil  uji  mortalitas  larva  pada  Tabel  2  diketahui  bahwa  pada  pemaparan sand granules biji  alpukat selama 1 jam disetiap perlakuan (I – IV) menghasilkan nilai yang konstan yaitu tidak ada larva yang mati.  Data  mortalitas  larva  pada  pemaparan sand  granules selama  2  jam  hingga  24  jam  selanjutnya dilakukan analisis statistik menggunakan SPSS. Hasil analisis statistik dapat dilihat pada Tabel 5.
Tabel  5.  Normalitas  Mortalitas  Larva  Pada  Waktu  Pemaparan Sand  Granules Ekstrak  Biji  Buah Alpukat
Perlakuan Nilai Normalitas 2 jam 3 jam 4 jam 5 jam 6 jam 24 jam I 0,000 1,000 1,000 0,000 1,000 0,000 II - 0,000 0,000 0,000 1,000 1,000 III - 0,000 0,000 1,000 0,000 0,000 IV - 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 p-value 0,392 a 0,725 a 0,103 a 0,043 a 0,190 a 0,571 a
a Kruskal Wallis Test
Pada Tabel 5 dapat diketahui bahwa terdapat sebaran data yang tidak terdistribusi normal < 0,05 dan terdapat data yang terdistribusi normal dengan nilai signifikansi > 0,05. Oleh karena itu data di analisis statistik  menggunakan Kruskal  Wallis  Test .  Berdasarkan  hasil Kruskal  Wallis  Test diketahui  bahwa nilai  signifikansi  pada  pemaparan sand  granules selama  2,  3,  4,  6,  dan  24  jam  menghasilkan  nilai signifikansi >  0,05  sedangkan  pada  5 jam  pemaparan  dihasil  nilai  signifikansi  sebesar  0,043  <  0,05. Analisis statistik dilanjutkan dengan Mann Whitney Test untuk mengetahui perbedaan mortalitas larva pada  5  jam  pemaparan sand  granules .  Hasil  analisis  statistik Mann  Whitney  Test dapat  dilihat  pada Tabel 6.
Tabel 6. Perbedaan Mortalitas Larva pada 5 Jam Pemaparan Sand Granule Perlakuan p-value I II III IV I 0,099 a 0,046 a 0,043 a II 0,099 a 0,105 a 0,099 a III 0,046 a 0,105 a 0,637 a IV 0,043 a 0,099 a 0,637 a
a Mann Whitney Test
Pada Tabel 6 diketahui bahwa perbedaan mortalitas larva antar perlakuan I dan II, II dan III, II dan IV serta perlakuan III dan IV menghasilkan nilai signifikansi > 0,05 yang berarti tidak terdapat perbedaan yang  bermakna.    Hasil  tersebut  berbeda  dengan  perlakuan  I  dan  III  serta  perlakuan  I  dan  IV  yang menghasilkan  nilai  signifikansi  <  0,05  yang  berarti  terdapat  perbedaan  yang  bermakna.  Berdasarkan hasil  analisis  statistik  dapat  disimpulkan  bahwa  konsentrasi  Explotab  berpengaruh  pada  mortalitas larva pada perlakuan I dan III, serta perlakuan I dan IV di 5 jam pemaparan sand granules ekstrak biji buah  alpukat,  tetapi  tidak  berpengaruh  pada  mortalitas  larva  di  perlakuan  yang  lain.  Hal  ini  terjadi karena di 5 jam pemaparan sand granules ekstrak biji buah alpukat, rata-rata jumlah mortalitas larva Ae  aegypti pada  perlakuan  I  di  tiap  jam  perlakuan  jumlahnya  paling  tinggi  dibandingkan  mortalitas larva pada perlakukan II, III dan IV.

## KESIMPULAN
1. Daya larvasida ekstrak biji alpukat murni dengan LC 50 8,87 mg.L -1 lebih besar dari sand granules ekstrak biji alpukat.
2. Penambahan  konsentrasi  bahan  penghancur  Explotab  dalam sand  granules tidak  berpengaruh terhadap total mortalitas larva.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Terimakasih  kepada  Akademi  Farmasi  Theresiana  Semarang  yang  telah  mendukung  dan  mendanai penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Agoes, G. (2012). Sediaan Farmasi Padat (SFI-6) . Bandung: Institut Teknologi Bandung.
Anief, M. (2000). Ilmu Meracik Obat Teori dan Praktek . Yogyakarta: UGM Press.
Bhusnure,  O.  G.,  Gholve,  S.,  Giram,  P.,  Thonte,  S.  S.,  Mane,  J.  M.,  Kazi,  P.  A.,  &  Bhange,  M.  A. (2015).  Role  of  Superdisintegratings  in  Fast  Dissolving  Tablets. International  Journal  of Pharmacy & Pharmaceutical Research, 4 (2): 263- 281.
Endriyatno,  N.  C.  (2018). Optimasi  Formula  Tablet  Ekstrak  Daun  Sirsak ( Annona  muricata L.) Dengan  Bahan  Pengikat  Cmc  Na  Dan  Penghancur  Explotab  Menggunakan  Metode  Factorial Design (Unpublished undergraduate thesis), Universitas Muhammadiyah Surakarta. Indonesia.
Jaime,  J.  GL.  (2009).  Chemical  Composition,  Toxicity  and  Larvicidal  and  Antifungal  Activities  of Persea  america  (Avocado)  Seed  Extracts. Revista  da  Sociedade  Brasilleira  de  Medicina Tropical, 42 (2):110-113.
Kaur,  V.,  &  Nivedita,  M.  (2016).  A  Review  on:  Importance  of  Superdisintegrants  on  Immediate Release Tablets. IJRSI, 3 (2): 39-43.
Kemenkes  RI.  (2018).  Situasi  Penyakit  Demam  Berdarah Tahun  2017. Jakarta: Infodatin  Pusat  Data dan Informasi Kementerian Kesehatan Republik Indonesia.
Kemenkes RI. (2019). Nyamuk DBD Mudah Menyerang.
http://www.depkes.go.id/article/print/19011400002/nyamuk-dbd-mudah-menyerang.html (Diakses pada tanggal 1 September 2019).
Laksmita,  M.  M.  (2017). Pengaruh  Perbedaan  Penggunaan  Bahan  Penghancur  Pati  Pisang  Kepok (Musa  paradisiaca  var  ABB)  Pregelatinasi  Dan  Explotab  Terhadap  Sifat  Fisik  Dan  Disolusi Tablet  Parasetamol ,  (Unpublished  undergraduate  thesis),  Universitas  Muhammadiyah Surakarta. Indonesia.
Pahwa, R. & Nisha G. (2011). Superdisintegrant in the Development of Orally Disintegrating Tablets:
A Review. International Journal of Pharmaceutical Science and Research, 2 (11): 2767-2780.
Priyambodo, B. (2007). Manajemen Farmasi Industri , 121-122. Yogyakarta: Global Pustaka Utama.
Pujiastuti, A. (2003). Daya Larvasida Ekstrak Etanol dan Infusa Daging Buah Lerak ( Sapindus rarak DC.) terhadap  Larva Aedes  aegypti (Unpublished  undergraduate  thesis),  Universitas  Sanata Dharma, Indonesia.
Pujiastuti,  A.,  Priamsari,  M.  R.,  &  Rukminingsih,  F.  (2008).  S and  Granules Daging  Buah  Lerak sebagai  Larvasida  Alami  Pemberantas  Demam  Berdarah  Dengue, Laporan  Penelitian  Dosen Muda , Akademi Farmasi Theresiana Semarang.
Rowe,  R.  C.,  Sheskey  P.  J.,  &  Quinn,  M.  E.  (2009). Handbook  of  Pharmaceutical  Excipients 6 th Edition . London: Pharmaceutical Press. 663-666.
Rukminingsih, F., & Kristiani, M. (2016). Sandgranules Ekstrak Biji Kelengkeng ( Euphorian longan Seed  Extract)  sebagai  Larvasida  Alami  Pemberantas  Demam  Berdarah  Dengue, Prosiding Seminar Nasional Pengembangan Sumber Daya Perdesaan dan Kearifan Lokal Berkelanjutan VI , Universitas Jenderal Soedirman.
Sembel, D. T. (2009). Entomologi Kedokteran . Yogyakarta: Penerbit Andi.
Sukowati,  S.  (2010).  Masalah  vektor  demam  berdarah  dengue  (DBD)  dan  pengendaliannya  di Indonesia.  Dalam:  Pusat  Data  dan  Surveilans  Epidemiologi  Kemenkes  RI. Buletin  Jendela Epidemiologi . Volume ke-2.
Widayanti, Y. (2001). Daya Larvasida Ekstrak Etanol dan Perasan Daun Mimba ( Azadiracta indica A. Juss)  Terhadap  Larva Aedes  aegypti (Unpublished  undergraduate  thesis),  Universitas  Sanata Dharma, Indonesia.
Widiarti., Heriyanto, B., Boewono, D.T., Widyastuti, U., Mujiono., Lasmiati. (2011). Peta Resistensi Vektor Demam Berdarah Dengue Aedes aegypti terhadap Insektisida Kelompok Organofosfat, Karbamat  dan  Pyrethroid  di  Propinsi  Jawa  Tengah  Dan  Daerah  Istimewa  Yogyakarta, Buletin Penelitian Kesehatan, 39 (4) : 176-89.