## UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN FRAKSI N-HEKSAN, KLOROFORM DAN ETIL ASETAT DARI EKSTRAK ETANOL UMBI PAKU ATAI
MERAH (Angiopteris ferox Copel)
Reksi Sundu*, Fitri Handayani, Sapri, Henny Nurhasnawati Akademi Farmasi Samarinda
Email: reksi.sundu@gmail.com

## ABSTRAK
Antioksidan  memegang  peranan  penting  sebagai  faktor  perlindungan kesehatan.  Salah  satu  tanaman  yang  berpotensi  sebagai  antioksidan  alami  adalah umbi paku atai merah  ( Angiopteris  ferox Copel). Tujuan dari penelitian ini  yaitu untuk  mengetahui  aktivitas  antioksidan  dari  fraksi  n-heksan,  kloroform  dan  etil asetat  dari  ekstrak  etanol  umbi  paku  atai  merah.  Metode  yang  digunakan  pada penelitian ini adalah metode DPPH ( 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl ) menggunakan spektrofotometer UV-Visible. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak etanol umbi  paku  atai  merah  fraksi  n-heksan  memiliki  nilai  IC 50 sebesar  884,14  ppm (kategori  lemah),  kloroform  sebesar  199,72  ppm  (kategori  lemah),  etil  asetat sebesar  18,81  ppm  (kategori  sangat  kuat),  sedangkan  vitamin  C  sebagai pembanding sebesar 5,09 ppm (kategori sangat kuat).
Kata kunci: antioksidan, umbi, paku atai merah, Angiopteris ferox Copel

## ABSTRACT
Antioxidants play an important role as a health protection factor. One of the plants that have the potential as a natural antioxidant is the red paku atai tuber ( Angiopteris  ferox Copel ).  The  purpose  of  this  study  was  to  determine  the antioxidant  activity  of  the  n-hexane,  chloroform  and  ethyl  acetate  fraction  from ethanol extract of red paku atai tuber. The method in this study was DPPH (1,1- diphenyl-2-picrylhydrazyl )  method  using  UV-Visible  spectrophotometer.  The results of this study showed that the extract of ethanol from red paku atai tuber n- hexane  fraction  had  IC 50 values  of  884.14  ppm  (weak  category);  chloroform  of 199.72  ppm  (weak  category);  ethyl  acetate  of  18.81  ppm  (very  strong  category) while vitamin C as comparison was 5.09 ppm (very strong category).
Keywords: antioxidants, tuber, red paku atai, Angiopteris ferox Copel

## PENDAHULUAN
Antioksidan memegang peranan penting  sebagai  faktor  perlindungan kesehatan. Bukti ilmiah menunjukkan
bahwa antioksidan mengurangi resiko penyakit  kronis  termasuk  kanker  dan jantung  (Shekar  dkk.,  2014).  Asupan antioksidan dari luar sangat diperlukan
karena  antioksidan  yang  dihasilkan tubuh  manusia  tidak  cukup  untuk melawan radikal bebas (Dalimartha & Soedibyo, 1999).
Tumbuhan paku banyak
dijumpai  di daerah  tropis dan
subtropis  termasuk  di  Indonesia. Tumbuhan  ini  dapat  ditemukan  di sekitar lereng gunung, pantai, perkebunan,  hutan,  dan  tempat  lain yang memungkinkan tumbuh (Arini & Kinho,  2012).  Masyarakat  biasa memanfaatkan tumbuhan paku sebagai  bahan  pangan,  tanaman  hias dan sebagai bahan baku obat tradisional.
Salah satu tumbuhan paku yang biasa digunakan sebagai obat tradisional  oleh  warga  lokal  (suku Dayak)  adalah  daun  paku  atai  merah ( Angiopteris ferox Copel).  Penelitian sebelumnya melaporkan bahwa
ekstrak  etanol  umbi  paku  atai  merah ( Angiopteris  ferox Copel)  memiliki nilai  IC 50 193,20  ppm  (kategori lemah).  Hal  ini  menunjukkan  bahwa tumbuhan ini memiliki potensi sebagai antioksidan alami (Sundu dkk, 2018).
Berdasarkan  latar  belakang  di atas  maka  peneliti  tertarik  untuk meneliti  aktivitas  antioksidan  dari
fraksi  n-heksan,  kloroform  dan  etil asetat  dari  ekstrak  etanol  umbi  paku atai merah ( Angiopteris ferox Copel).

## METODE PENELITIAN
Bahan  yang  digunakan  dalam penelitian adalah simplisia umbi paku atai merah (UPAM),  aquadest,  etanol 70%, n-heksan, kloroform, etil asetat,
DPPH ( 1,1-diphenyl-2- picrylhydrazyl ), vitamin C, dan DMSO  (dimethyl  sulfoxide).  Alat yang digunakan adalah alat-alat gelas, spektofotometer  UV-Visible,  rotary evaporator,  corong  pisah  dan  mikro pipet.
Ekstrak etanol UPAM sebanyak 5  gram  dilarutkan  dalam  etanol  70% hingga  larut  sempurna.  Kemudian ekstrak  tersebut  ditambahkan  50  mL larutan  n-heksan  dalam  corong  pisah sebanyak 2 kali pengulangan.
Campuran digojok hingga terbentuk 2 lapisan dan dipisahkan fase-fase yang terbentuk.  Sisa  fase  etanol  70% ditambah 50 mL larutan kloroform dan digojok  hingga  terjadi  pemisahan kembali.
Dilakukan  cara  yang  sama hingga fase dari larutan penyari  yang ditambahkan jernih (tidak ada zat yang
tersari).  Larutan  penyari  diuapkan dengan rotary  evaporator sehingga diperoleh ekstrak kering dari fraksi n- heksan,  kloroform  dan  etil  asetat.
Selanjutnya  ekstrak  kering  masing- masing fraksi diuji aktivitas antioksidannya. Metode  uji  antioksidan  yang digunakan pada penelitian ini berdasarkan  metode  yang  pernah dilakukan oleh Wang dkk. (2008). Uji dilakukan dengan menggunakan spektrofotometer  UV-Visible  pada temperatur  ruangan  (25 º C)  dan aktivitas antioksidan dapat ditentukan melalui  dekolorisasi  dari  larutan DPPH ( 1,1-diphenyl-2- picrylhydrazyl ) pada panjang
gelombang 517 nm.
Sebanyak  1  mL  sampel  dari masing-masing fraksi dengan berbagai konsentrasi ditambahkan 2 mL DPPH 40  ppm  dalam  etanol  dan  dibiarkan selama 20 menit dalam ruangan yang minim  cahaya  pada  suhu  kamar.
Semua  percobaan  diulang  tiga  kali.
Vitamin C digunakan sebagai pembanding  atau  kontrol  positif.
Rumus persentase inhibisi adalah:
Persentase =  [1 - (A 1 - A 2 ) / A 0 ] x 100%
Dimana A 0 adalah absorbansi  kontrol (tanpa  ekstrak)  dan  A 1 adalah absorbansi dengan adanya ekstrak, A 2 adalah absorbansi tanpa DPPH.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Metode  yang  digunakan  pada pengujian aktivitas antioksidan ekstrak  UPAM  adalah  metode  DPPH ( 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl ).
Adanya  perubahan  intensitas  warna ungu  DPPH  yang  sebanding  dengan konsentrasinya adalah prinsip pengukuran  aktivitas  antioksidan secara kuantitatif dari metode DPPH. Warna ungu yang terbentuk merupakan radikal bebas DPPH yang memiliki  elektron  tidak  berpasangan dan  warna  akan  berubah  menjadi kuning saat elektronnya berpasangan. Perubahan  warna  DPPH  dari  ungu menjadi kuning dikarenakan peredaman radikal bebas oleh bereaksinya  molekul  DPPH  dengan atom  hidrogen  yang  dilepaskan molekul  senyawa  sampel  sehingga terbentuk senyawa difenilpikrilhidrazin. Aktivitas peredaman  radikal  bebas  dinyatakan dengan nilai IC 50 ( Inhibitory concentration ) yaitu besarnya
konsentrasi  senyawa  uji  yang  dapat meredam radikal bebas sebanyak 50% (Molyneux, 2004).
Hasil analisis menunjukkan bahwa interaksi  jenis  dan konsentrasi pelarut berpengaruh terhadap aktivitas antioksidan. Nilai rata-rata persentase aktivitas  antioksidan  sampel  tiap fraksi dapat dilihat pada tabel 1.
Tabel  1  menunjukkan  bahwa fraksi  etil  asetat  memiliki  aktivitas antioksidan lebih tinggi dibandingkan fraksi n-heksan dan kloroform. Persen aktivitas antioksidan vitamin C sebagai kontrol positif dengan
konsentrasi  2,  4,  6,  8  dan  10  ppm berturut-turut  16,03;  37,95;  55,21; 78,84  dan  91,07.  Semakin  besar konsentrasi  ekstrak  (ppm)  maka semakin  besar  pula  %  inhibisi  yang diperoleh.  Berdasarkan  hasil  analisis regresi linier hubungan antara konsentrasi  ekstrak  dengan  persen peredaman diperoleh persamaan regresi  linier    dari  fraksi  n-heksan yaitu  y  =  0,056x  +  0,479;  fraksi kloroform (y = 0,228x + 1,358); fraksi etil  asetat  (y  =  2,652x  –  0,082)  dan vitamin C adalah y = 9,548x – 1,471.

## Tabel 1. Persen inhibisi tiap fraksi
Keterangan: A = Fraksi n-heksan B = Fraksi kloroform C = Fraksi etil asetat
Nilai  IC 50 yang  diperoleh  dari hasil  perhitungan  akhir  yaitu  untuk fraksi  n-heksan  sebesar  884,14  ppm, kloroform  sebesar  199,72  ppm,  etil asetat  sebesar  18,81  ppm,  sedangkan nilai  IC 50 untuk  vitamin  C  sebagai pembanding  yaitu  sebesar  5,09  ppm. Hal ini menjelaskan bahwa
kemampuan menangkap radikal bebas fraksi  n-heksan  dan kloroform  adalah kategori  lemah  sedangkan  etil  asetat termasuk kategori sangat kuat dikarenakan nilai  IC 50 kurang dari 50 ppm  (Molyneux,  2004).  Vitamin  C sebagai  pembanding  atau  kontrol positif  lebih  kuat  dibanding  sampel
Konsentrasi (ppm) % Inhibisi Konsentrasi (ppm) % Inhibisi A B C 12,5  1,64 4,61 5 13,78 25,0  1,85 7,03 10 24,09 50,0  3,11  13,67 20 55,93 100,0  5,73  22,30 30 78,21
yang  digunakan  dalam  penelitian  ini.
Semakin  kuat  daya  antioksidannya maka nilai IC 50 semakin kecil.

## KESIMPULAN
Ekstrak  etanol  umbi  paku  atai merah  fraksi  n-heksan  memiliki  nilai IC 50 sebesar  884,14  ppm  (kategori lemah), kloroform sebesar 199,72 ppm (kategori  lemah),  etil  asetat  sebesar 18,81  ppm  (kategori  sangat  kuat) sedangkan  vitamin  C  adalah  sebesar 5,09 ppm (kategori sangat kuat).

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapakan  terima  kasih  ini disampaikan  kepada  Kementerian Riset,  Teknologi  dan  Pendidikan Tinggi Republik Indonesia yang telah mendanai  penelitian  ini  lewat  hibah Penelitian Dosen Pemula (PDP). Juga kepada  LPPM  Akademi  Farmasi Samarinda  yang  sudah  membantu selama proses penelitian berlangsung.

## REFERENSI
Arini,  D.  Dan  Kinho,  J.,  2012, Keragaman  Jenis  Tumbuhan
Paku (Pterodophyta) Di Cagar Alam Gunung Ambang Sulawesi Utara , Balai Penelitian Kehutanan Manado. Dalimartha, S dan Soedibyo, M., 1999, Awet Muda Dengan Tumbuhan  Obat  dan  Diet Suplemen,  Trubus  Agriwidya, Jakarta, Hal: 36-40. Molyneux,  P.,  2004,  The  Use  of  The Stable Free Radical Diphenylpicrylhydrazyl (DPPH) for Estimating Antioxidant Activity . Songklanakarin J. Sci. Technol . Vol. 26 (2): 211-219 .
Shekar,  T.C., Anju,  G.,  2014,
Antioxidant Activity by DPPH Radical Scavenging Method of Ageratum  conyzoides Linn. Leaves, American  Journal  of
Ethnomedicine , Vol. 1(4): 244-249 . Sundu,  R.,  Sapri,  Nurhasnawati,  H.,
2018, Uji Fitokimia dan Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak Etanol Umbi Paku Atai Merah ( Angiopteris ferox Copel),
Jurnal  Ilmiah  Ibnu  Sina, Vol. 3(1):97-105 .
Wang, H., Gao, X.D., Zhou, G.C., Cai,
L.,  Yao,  W.B.,  2008.  In  Vitro and  In  Vivo  Antioxidant Activity  of  Aqueous  Extract from Chobrospondias Axillaris. Food  Chemistry, Vol. 106(3): 888-895.