Bioeksperimen, Volume 5 No.1, (Maret 2019)
Salomon Christian, Wahyu Irawati. (2019). Uji Resistensi Isolat Khamir yang Diisolasi dari Limbah Industri di Rungkut, Surabaya, Indonesia. Jurnal Bioeksperimen . Vol. 5 (1) Pp. 1-10. Doi: 10.23917/bioeksperimen.v5i1.2795

## UJI RESISTENSI ISOLAT KHAMIR YANG DIISOLASI DARI LIMBAH INDUSTRI DI RUNGKUT, SURABAYA, INDONESIA
Salomo Christian 1) ; Wahyu Irawati 2)*
1 Fakultas Ilmu Pendidikan, Program Studi Pendidikan Biologi,
2 Fakultas sains dan Matematika, Program Studi Biologi, Universitas Pelita Harapan Jalan M.H. Thamrin Boulevard 1100, Lippo Karawaci, Tangerang 15811, Indonesia *Email : w.irawati3@gmail.com

## Abstrak
Pencemaran tembaga di daerah Rungkut-Surabaya telah melebihi ambang batas sehingga dapat mengancam kehidupan organisme di laut. Tembaga tidak dapat didegradasi dan beracun pada konsentrasi tinggi sehingga diperlukan pengolahan limbah yang dapat menurunkan konsentrasi tembaga di lingkungan. Khamir resisten tembaga dapat diisolasi dari daerah tercemar dan dapat dijadikan sebagai agen bioremediasi untuk mengatasi pencemaran tembaga. Penelitian ini bertujuan untuk melakukan isolasi dan uji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri. Sampel diambil dari lumpur aktif pusat pengolahan limbah PT. SIER Surabaya. Isolasi dilakukan dengan pengenceran sampel limbah kemudian diinokulasikan dengan metode sebar ke dalam medium Yeast Extract Peptone Dextrose Agar yang diperkaya dengan CuSO 4 . Uji resistensi dilakukan dengan menginokulasikan isolat murni dengan metode gores ke dalam medium Agar yang mengandung berbagai konsentrasi CuSO 4 untuk menentukan nilai Minimum Inhibitory Concentration (MIC). Hasil isolasi diperoleh delapan isolat khamir dengan kode ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, dan ES10.4. Nilai MIC isolat khamir tersebut berkisar antara 16-20 Mm CuSO 4 . Isolat yang paling resisten adalah isolat dengan kode ES9.3 dengan nilai MIC= 20 mM CuSO 4 , sehingga isolate ini dipilih sebagai isolate yang paling resisten terhadap polutan di Wilayah Rungkut, Surabaya, Indonesia.
Kata kunci: Isolasi, karakterisasi, khamir, resistensi, tembaga, isolate ES9.3
Abstract Copper pollution in Rungkut-Surabaya area has exceeded the threshold so that it can be threaten the life of organisms in the sea. Copper cannot be degraded and its very toxic at high concentrations. So that, we need to treat the water waste to reduce copper concentrations. Copper yeast can be isolated from polluted areas and can be used as a bioremediation agent to overcome copper pollution. This study aims to conduct copper isolation and yeast resistance testing from industrial waste. Samples taken from the activated sludge of PT. SIER Surabaya. Isolation was carried out by dilution of the waste sample and then inoculated with the scatter method into Yeast Extract medium Peptone Dextrose Agar enriched with CuSO 4 . The resistance test was carried out by inoculating the pure isolate with the scratch method into Agar medium containing various concentrations of CuSO 4 to determine the value of Minimum Inhibitory Concentration (MIC). The isolation results obtained eight yeast isolates with the code ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, and ES10.4. The MIC value of yeast isolates ranged from 16-20 Mm CuSO4. The most resistant isolates were isolates with code ES9.3 with MIC = 20 mM CuSO 4 , so that this isolate was chosen as the most resistant isolate to pollutants in the Rungkut Region, Surabaya, Indonesia.
Keywords: Isolation, characterization, yeast, resistance, copper, isolate ES9.3

## Pendahuluan
Logam berat merupakan polutan yang tidak dapat didegradasi dan cenderung terakumulasi di dalam tubuh organisme. Logam berat dapat menjadi polutan karena merupakan senyawa sisa yang dihasilkan dari industri (Kobya, Demirbas, Senturk, & Ince, 2005). Tembaga adalah logam
berat yang banyak digunakan di dalam industri terutama industri elektronik dan bersifat toksik bagi organisme (Davis, Volesky, & Vieira, 2000). Tembaga merupakan salah satu logam berat esensial dan diperlukan oleh manusia dalam konsentrasi yang sangat kecil, yaitu tidak lebih dari 0,05 mg/kg berat badan yaitu untuk membentuk hemoglobin dan kolagen, tetapi akan menjadi racun jika konsentrasi
Bioeksperimen, Volume 6 No. 2 (September 2020)

## KAJIAN JENIS POHON DALAM PENGEMBANGAN HUTAN KOTA KIBITAY SUKABUMI
Suhendar*, Ardika Eri Triana,  Billyardi Ramdhan Universitas Muhammadiyah Sukabumi, Jalan R. Syamsudin SH., No. 50 Kode Pos 43113 *E-mail: suhendar@ummi.ac.id Paper submit: 7 Agustus 2019, Paper publish: September 2020
Abstrak- Penelitian  ini bertujuan untuk menginventarisir jenis tumbuhan, mengetahui struktur dan komposisi vegetasi tumbuhan, menganalisis kesesuaian vegetasi tumbuhan, serta menduga keanekaragaman jenis serta merekomendasikan jenis- jenis pohon potensial untuk ditanam di Hutan Kota Kibitay Sukabumi. Metode yang digunakan pada penelitian ini adalah survei. Survey dilakukan untuk mengetahui jenis-jenis pohon dan analisis vegetasi dilakukan untuk mengetahui struktur dan komposisi jenis. Hasil survey menunjukkan bahwa jumlah tumbuhan yang ditemui sebanyak 73 jenis dan 17 jenis diantaranya ditemukan dalam petak contoh seluas 1600 m 2 . Hasil perhitungan Indeks Nilai Penting (INP) menunjukkan jenis yang mendominasi di tingkat semai yaitu jenis Mimosa pudica L. dengan INP sebesar 0.75% dan sebagai spesies kodominan yaitu dari spesies Calliandra haematocephala Hassk. dengan INP sebesar 0.5. Jenis vegetasi yang mendominasi di tingkat pancang yaitu Nephelium lappaceum L. dengan INP 1.533%. Spesies yang mendominasi pada vegetasi tingkat tiang yaitu Swietenia mahagoni (L) Jacq. dan Agathis dammara (Lamb) Rich. dengan masing-masing INP yaitu sebesar 1.711 dan 1.127%, sedangkan spesies yang mendominasi di tingkat pohon yaitu Agathis dammara (Lamb) Rich. dengan INP sebesar 2.47%. Hasil perhitungan Indeks Keanekaragaman Jenis (H’) Shannon-Wienner sebesar 4.71. Secara umum jenis- jenis pohon Hutan Kota Kibitay Sukabumi tergolong cukup sesuai dengan nilai rata-rata 60,232 yang terdiri atas 13 jenis pohon dengan kriteria sesuai, 22 jenis pohon dengan kriteria cukup sesuai dan 25 jenis pohon dengan kriteria tidak sesuai.
Kata kunci: Kesesuaian Vegetasi Tumbuhan, Indeks Nilai Penting, Indeks Keanekaragaman Jenis.

## Pendahuluan
Pengertian Hutan Kota diungkapkan oleh Yusuf (2011) dalam  salah satu dokumen dari Badan Penelitian dan Pengembangan Kehutanan (2012) mengatakan bahwa Hutan Kota seharusnya merupakan miniatur hutan dengan mempertimbangkan aspek sejarah tempat tersebut sebelum menjadi pusat perkotaan.  Dengan demikian, dalam proses pembangunan Hutan Kota tidak hanya tertuju pada pertimbangan aspek iklim lingkungan saja namun juga harus mempertimbangkan kondisi flora dan faunanya dengan tetap berpatokan kepada kearifan lokal masyarakatnya. Pertimbangan dalam pembangunan dan pengembangan Hutan Kota terutama berkaitan dengan  aspek kelestarian sumber daya alam hayati serta aspek sosial serta budaya masyarakat setempat.
Secara khusus, tujuan pembangunan dan pengembangan Hutan Kota merujuk dalam PP No 63 Tahun 2002 Pasal 3 dijelaskan bahwa tujuan penyelenggaraan hutan kota yaitu sebagai penyerap karbondioksida dan penghasil oksigen, penyerap polutan (logam berat, debu, belerang), peredam kebisingan, pelestarian plasma nutfah, mendukung keanekaragaman flora, fauna dan keseimbangan ekosistem, penahan angin dan peningkatan keindahan. Maka keberhasilan pembangunan dan pengembangan Hutan Kota bergantung terhadap ketercapaiannya syarat- syarat yang telah ditentukan berdasarkan PP tersebut.
Pohon untuk pembangunan Hutan Kota telah diungkapkan baik oleh Pemerintah maupun para peneliti sebelumnya. Kriteria-kriteria tersebut merujuk pada beberapa persyaratan antara lain: 1) silvikultural: luas area hutan, jenis pohon yang sesuai dengan persyaratan tumbuh
ISSN 2460-1365
tembaga tersebut melebihi tingkat kebutuhan harian. Akumulasi tembaga di dalam tubuh manusia dapat mengakibatkan berbagai macam penyakit seperti gagal ginjal, kanker, kerusakan liver, kerusakan otak, gangguan saraf, bahkan kematian (Hocheng, Chakankar, & Jadhav, 2018). Pencemaran tembaga di pantai timur Surabaya merupakan salah satu kasus pencemaran logam berat yang terjadi di Indonesia yang belum dapat ditanggulangi. Pencemaran ini dapat terjadi karena adanya pembuangan limbah cair ke sungai oleh industri yang berada di sekitar pantai timur Surabaya. Akibat yang ditimbulkan dari pencemaran tembaga adalah akumulasi tembaga oleh hewan yang hidup di sungai dan laut di sekitarnya seperti ikan, kerang, dan udang. Hewan-hewan yang mengakumulasi logam berat bila terkonsumsi oleh manusia dalam jangka panjang dapat menimbulkan kerusakan pada beberapa organ tubuh (Irawati, Parhusip, Christian, & Yuwono, 2017).
Data pencemaran logam berat menunjukkan bahwa kadar Cu pada ikan dan kerang dari pantai sekitar muara yang berasal dari Rungkut, yaitu pantai di kelurahan Sukolilo mengandung 2.290,20 ppb dan 5.920,20 ppb. Pencemaran di Rungkut telah melebihi ambang batas yang ditentukan oleh World Health Organization (WHO) yaitu 1.200 ppb sehingga dapat membahayakan kesehatan penduduk yang tinggal di desa tersebut. Masalah kontaminasi tembaga di lingkungan telah dilakukan di beberapa daerah industri tetapi untuk mendegradasi dan menghilangkan logam berat tidak semudah mendegradasi limbah organik karena limbah logam berat bersifat nonbiodegradable. Degradasi dan reduksi logam berat dari lingkungan untuk skala kecil dapat dilakukan dengan cara fisik dan kimia melalui pertukaran ion (ion exchange), presipitasi, koagulasi, inverse osmosis, dan adsorpsi. Metode-metode tersebut cukup efisien dalam mengurangi kontaminasi logam berat tetapi akan sangat merugikan bila digunakan untuk mengolah limbah industri yang sangat banyak sehingga akan menimbulkan masalah baru, yaitu biaya  pengolahan limbah yang relatif mahal, membutuhkan energi dan bahan kimia cukup banyak (Jianlong, 2002). Pendekatan secara bioteknologi dengan menggunakan khamir merupakan alternatif yang
dapat dilakukan untuk masa yang akan datang dan merupakan langkah yang cukup berpotensi dalam meremediasi limbah cair yang mengandung logam berat. Mikroorganisme dapat mengurangi konsentrasi logam berat di lingkungannya melalui proses adsorpsi, produksi senyawa ekstraseluler, maupun sintesis enzimatis. Berbagai mikroorganisme memiliki toleransi terhadap logam pada konsentrasi yang lebih tinggi setelah ditumbuhkan pada medium yang mengandung logam berat (Irawati, Riak, Sopiah, & Sulistia, 2017). Hasil penelitian menunjukkan bahwa beberapa jenis khamir seperti Saccharomyces pombe strain 972, Saccharomyces cerevisiae, dan Candida tropicalis dapat mengabrsopsi tembaga di dalam medium masing-masing sebesar 70%, 86%, dan 82% (Stephen, 1992; Rahman, 2007). Mekanisme detoksifikasi tembaga pada khamir pada umumnya adalah dengan cara pengikatan ion tembaga pada membran, penyerapan ke dalam sel, dan dilanjutkan dengan pengikatan ion tembaga oleh protein metallothionein (MT) (Ashish, Neeti, & Himanshu, 2013). Eksplorasi khamir resisten tembaga yang dapat mengakumulasi tembaga perlu dilakukan untuk mendukung program bioremediasi limbah tembaga di Indonesia demi terciptanya lingkungan yang terbebas dari kontaminasi logam berat. Tingkat kontaminasi limbah tembaga di banyak daerah industri di Indonesia telah melebihi ambang batas dan perlu ditanggulangi untuk menghentikan pencemaran limbah tembaga ke lingkungan. Khamir resisten tembaga merupakan mikroorganisme yang sangat berpotensi dalam mengakumulasi tembaga dari limbah dalam proses bioremediasi tetapi penelitian mengenai isolasi dan karakterisasi khamir resisten tembaga belum banyak dilakukan di Indonesia (Qayyum, Khan, Maqbool, Zhao, & Peng, 2016) (Jianlong, 2002). Eksplorasi khamir resisten tembaga dari daerah industri Rungkut-Surabaya sangat penting untuk dilakukan sebagai langkah awal dalam rangka mendapatkan solusi dalam meremediasi lingkungan yang telah tercermar logam berat. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi dan menguji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri Rungkut Surabaya.
Bioeksperimen, Volume 6 No. 2 (September 2020) ISSN 2460-1365
(Indriyanto, 2006); 2) bio-ekologi: toleran terhadap polutan, dapat mengurangi tingkat pencemaran udara, menyerap dan menjerat debu, mengurangi bau, meredam kebisingan, mengurangi erosi tanah, penahan angin dan hujan (Samsoedin, 2009) dalam Kementrian Kehutanan (2012); 3) manajemen : spesies mudah didapat,  pemeliharaannya murah serta pengamanan dan pemanfaatannya mudah (Indriyanto, 2006), 4) estetika: jenis pohon menampakkan keindahan (Indriyanto, 2006);
5) konservasi, mencakup: keragaman jenis tinggi, jenis pohon bernilai sejarah ( endemik ), sosial dan budaya (kearifan loka l ), bernilai ekonomi (kelangkaan dan keterancaman) (Yusuf, 2011) dalam Kementrian Kehutanan (2012).
Secara keseluruhan, ketersediaan Ruang Terbuka Hijau (RTH) di Kota Sukabumi belum memadai, yaitu baru seluas 1.673.193,20 m 2 atau sebesar 5.20% dari seluruh kawasan Kota Sukabumi (Shani dan Kurniawan, 2015). Kondisi ini belum mencukupi standar minimal RTH yang diamanatkan UU No 26 tahun 2007 tentang Penataan Tata Ruang Wilayah Nasional yaitu sebesar 30% dari keseluruhan luas wilayah. Hutan Kota Kibitay Sukabumi merupakan kawasan relokasi konservatif sebagai zona hijau
kota dan edukasi flora bagi masyarakat. Selain itu, Hutan Kota Kibitay Sukabumi difungsikan juga sebagai lahan konservasi air, tanah dan penyerapan karbondioksida di sekitar hutan serta kebutuhan rekreasi bagi masyarakat umum. Secara administrasi Hutan Kota Sukabumi bertempat di Kampung Kibitay Kecamatan Lembursitu Kota sukabumi yang dibangun sejak tahun 2008 oleh Pemerintah Daerah Kota Sukabumi melalui Dinas Lingkungan Hidup. Sampai saat ini, belum ada publikasi ilmiah menyajikan data yang cukup mengenai Hutan Kota Kibitay Sukabumi, baik dari segi ekologi dan vegetasinya maupun dari segi sosial dan prospek ekonominya.
Tujuan penelitian  ini yaitu untuk menginventarisasi jenis-jenis tumbuhan, mengetahui struktur dan komposisi vegetasi tumbuhan, menganalisis kesesuaian vegetasi tumbuhan Hutan Kota Kibitay, Kota Kibitay Sukabumi (HKKS).

## Metode Penelitian

## 1.   Subjek Penelitian
Penelitian ini dilakukan di Hutan Kota Kibitay Kota Sukabumi pada bulan Mei 2019. Lokasi penelitian disajikan pada Gambar 1.
Gambar 1. Letak Hutan Kota Kibitay Sukabumi, Jawa Barat, Indonesia

## 2.   Alat dan Bahan
Alat dan bahan yang digunakan yaitu GPS, kompas, kamera, tali pelastik/tali rapia, cleanometer , meteran, patok bambu, tally sheet dan alat tulis.
3.   Teknik Pengumpulan Data Survey dilakukan Pengumpulan data dilakukan dengan cara pengamatan pada petak seluas lebih dari 5 ha. Dibuat sebanyak 3 petak contoh dan masing-masing plot pengamatan
Bioeksperimen, Volume 5 No.1, (Maret 2019)
Salomon Christian, Wahyu Irawati. (2019). Uji Resistensi Isolat Khamir yang Diisolasi dari Limbah Industri di Rungkut, Surabaya, Indonesia. Jurnal Bioeksperimen . Vol. 5 (1) Pp. 1-10. Doi: 10.23917/bioeksperimen.v5i1.2795

## UJI RESISTENSI ISOLAT KHAMIR YANG DIISOLASI DARI LIMBAH INDUSTRI DI RUNGKUT, SURABAYA, INDONESIA
Salomo Christian 1) ; Wahyu Irawati 2)* 1 Fakultas Ilmu Pendidikan, Program Studi Pendidikan Biologi,
2 Fakultas sains dan Matematika, Program Studi Biologi, Universitas Pelita Harapan Jalan M.H. Thamrin Boulevard 1100, Lippo Karawaci, Tangerang 15811, Indonesia *Email : w.irawati3@gmail.com

## Abstrak
Pencemaran tembaga di daerah Rungkut-Surabaya telah melebihi ambang batas sehingga dapat mengancam kehidupan organisme di laut. Tembaga tidak dapat didegradasi dan beracun pada konsentrasi tinggi sehingga diperlukan pengolahan limbah yang dapat menurunkan konsentrasi tembaga di lingkungan. Khamir resisten tembaga dapat diisolasi dari daerah tercemar dan dapat dijadikan sebagai agen bioremediasi untuk mengatasi pencemaran tembaga. Penelitian ini bertujuan untuk melakukan isolasi dan uji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri. Sampel diambil dari lumpur aktif pusat pengolahan limbah PT. SIER Surabaya. Isolasi dilakukan dengan pengenceran sampel limbah kemudian diinokulasikan dengan metode sebar ke dalam medium Yeast Extract Peptone Dextrose Agar yang diperkaya dengan CuSO 4 . Uji resistensi dilakukan dengan menginokulasikan isolat murni dengan metode gores ke dalam medium Agar yang mengandung berbagai konsentrasi CuSO 4 untuk menentukan nilai Minimum Inhibitory Concentration (MIC). Hasil isolasi diperoleh delapan isolat khamir dengan kode ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, dan ES10.4. Nilai MIC isolat khamir tersebut berkisar antara 16-20 Mm CuSO 4 . Isolat yang paling resisten adalah isolat dengan kode ES9.3 dengan nilai MIC= 20 mM CuSO 4 , sehingga isolate ini dipilih sebagai isolate yang paling resisten terhadap polutan di Wilayah Rungkut, Surabaya, Indonesia.
Kata kunci: Isolasi, karakterisasi, khamir, resistensi, tembaga, isolate ES9.3

## Abstract
Copper pollution in Rungkut-Surabaya area has exceeded the threshold so that it can be threaten the life of organisms in the sea. Copper cannot be degraded and its very toxic at high concentrations. So that, we need to treat the water waste to reduce copper concentrations. Copper yeast can be isolated from polluted areas and can be used as a bioremediation agent to overcome copper pollution. This study aims to conduct copper isolation and yeast resistance testing from industrial waste. Samples taken from the activated sludge of PT. SIER Surabaya. Isolation was carried out by dilution of the waste sample and then inoculated with the scatter method into Yeast Extract medium Peptone Dextrose Agar enriched with CuSO 4 . The resistance test was carried out by inoculating the pure isolate with the scratch method into Agar medium containing various concentrations of CuSO 4 to determine the value of Minimum Inhibitory Concentration (MIC). The isolation results obtained eight yeast isolates with the code ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, and ES10.4. The MIC value of yeast isolates ranged from 16-20 Mm CuSO4. The most resistant isolates were isolates with code ES9.3 with MIC = 20 mM CuSO 4 , so that this isolate was chosen as the most resistant isolate to pollutants in the Rungkut Region, Surabaya, Indonesia.
Keywords: Isolation, characterization, yeast, resistance, copper, isolate ES9.3

## Pendahuluan
Logam berat merupakan polutan yang tidak dapat didegradasi dan cenderung terakumulasi di dalam tubuh organisme. Logam berat dapat menjadi polutan karena merupakan senyawa sisa yang dihasilkan dari industri (Kobya, Demirbas, Senturk, & Ince, 2005). Tembaga adalah logam
berat yang banyak digunakan di dalam industri terutama industri elektronik dan bersifat toksik bagi organisme (Davis, Volesky, & Vieira, 2000). Tembaga merupakan salah satu logam berat esensial dan diperlukan oleh manusia dalam konsentrasi yang sangat kecil, yaitu tidak lebih dari 0,05 mg/kg berat badan yaitu untuk membentuk hemoglobin dan kolagen, tetapi akan menjadi racun jika konsentrasi
Bioeksperimen, Volume 6 No. 2 (September 2020)
dibagi kedalam sub-sub petak pengamatan seluas (Gambar 2) petak contoh. Masing-masing petak contoh terdiri atas 4 subpetak yaitu subpetak semai, pancang, tiang dan pohon. Parameter yang dianalisis dalam analisis vegetasi mencakup Kerapatan Relatif (KR), Frekuensi Relatif (FR), Dominansi Relatif (DR) dan Indeks Nilai Penting (INP) jenis pohon yang ditanaman di Hutan Kota. Untuk menduga tingkat keanekaragaman jenis dilakukan melalui perhitungan indeks keanekaragaman jenis (H’) menggunakan pendekatan Shanon-Wienner. Analisis kesesuaian jenis vegetasi dilakukan dengan mengidentifikasi jenis dan menyusunnya ke dalam matriks kesesuaian jenis pohon Hutan Kota melalui studi pustaka. Studi pustaka untuk
menganalisis kesesuaian jenis pohon merujuk kepada ketentuan dari Kementerian Kehutanan dan para peneliti sebelumnya.

## 4.   Analisis dan Interpretasi Data
Data hasil pengukuran vegetasi dicatat dalam tally sheet dengan mengelompokan masing-masing jenis menjadi data:
a.  Semai yaitu anakan pohon mulai kecambah sampai tinggi <1,5 meter.
b.  Pancang yaitu anakan pohon yang tingginya ≥ 1,5 cm dan diameter <10 cm.
c.  Tiang yaitu pohon muda yang diameternya mulai 10 cm sampai < 20 cm.
d.  Pohon yaitu pohon dewasa berdiameter ≥ 20 cm.

## Gambar 2. Desain unit contoh Vegetasi
Data hasil analisis vegetasi kemudian ditabulasi untuk diidentifikasi tingkat kerapatan, dominansi dan Indeks Nilai Pentingnya dengan rumus perhitungan (Sorianegara dan Indrawan 1998) sebagai berikut:
Indeks Nilai Penting (INP) pancang dan pohon: KR+FR+DR Indeks Nilai Penting (INP) semai : KR+FR
Untuk menduga tingkat keanekaragaman spesies tumbuhan Hutan Kota digunakan
ISSN 2460-1365
tembaga tersebut melebihi tingkat kebutuhan harian. Akumulasi tembaga di dalam tubuh manusia dapat mengakibatkan berbagai macam penyakit seperti gagal ginjal, kanker, kerusakan liver, kerusakan otak, gangguan saraf, bahkan kematian (Hocheng, Chakankar, & Jadhav, 2018). Pencemaran tembaga di pantai timur Surabaya merupakan salah satu kasus pencemaran logam berat yang terjadi di Indonesia yang belum dapat ditanggulangi. Pencemaran ini dapat terjadi karena adanya pembuangan limbah cair ke sungai oleh industri yang berada di sekitar pantai timur Surabaya. Akibat yang ditimbulkan dari pencemaran tembaga adalah akumulasi tembaga oleh hewan yang hidup di sungai dan laut di sekitarnya seperti ikan, kerang, dan udang. Hewan-hewan yang mengakumulasi logam berat bila terkonsumsi oleh manusia dalam jangka panjang dapat menimbulkan kerusakan pada beberapa organ tubuh (Irawati, Parhusip, Christian, & Yuwono, 2017).
Data pencemaran logam berat menunjukkan bahwa kadar Cu pada ikan dan kerang dari pantai sekitar muara yang berasal dari Rungkut, yaitu pantai di kelurahan Sukolilo mengandung 2.290,20 ppb dan 5.920,20 ppb. Pencemaran di Rungkut telah melebihi ambang batas yang ditentukan oleh World Health Organization (WHO) yaitu 1.200 ppb sehingga dapat membahayakan kesehatan penduduk yang tinggal di desa tersebut. Masalah kontaminasi tembaga di lingkungan telah dilakukan di beberapa daerah industri tetapi untuk mendegradasi dan menghilangkan logam berat tidak semudah mendegradasi limbah organik karena limbah logam berat bersifat nonbiodegradable. Degradasi dan reduksi logam berat dari lingkungan untuk skala kecil dapat dilakukan dengan cara fisik dan kimia melalui pertukaran ion (ion exchange), presipitasi, koagulasi, inverse osmosis, dan adsorpsi. Metode-metode tersebut cukup efisien dalam mengurangi kontaminasi logam berat tetapi akan sangat merugikan bila digunakan untuk mengolah limbah industri yang sangat banyak sehingga akan menimbulkan masalah baru, yaitu biaya  pengolahan limbah yang relatif mahal, membutuhkan energi dan bahan kimia cukup banyak (Jianlong, 2002). Pendekatan secara bioteknologi dengan menggunakan khamir merupakan alternatif yang
dapat dilakukan untuk masa yang akan datang dan merupakan langkah yang cukup berpotensi dalam meremediasi limbah cair yang mengandung logam berat. Mikroorganisme dapat mengurangi konsentrasi logam berat di lingkungannya melalui proses adsorpsi, produksi senyawa ekstraseluler, maupun sintesis enzimatis. Berbagai mikroorganisme memiliki toleransi terhadap logam pada konsentrasi yang lebih tinggi setelah ditumbuhkan pada medium yang mengandung logam berat (Irawati, Riak, Sopiah, & Sulistia, 2017). Hasil penelitian menunjukkan bahwa beberapa jenis khamir seperti Saccharomyces pombe strain 972, Saccharomyces cerevisiae, dan Candida tropicalis dapat mengabrsopsi tembaga di dalam medium masing-masing sebesar 70%, 86%, dan 82% (Stephen, 1992; Rahman, 2007). Mekanisme detoksifikasi tembaga pada khamir pada umumnya adalah dengan cara pengikatan ion tembaga pada membran, penyerapan ke dalam sel, dan dilanjutkan dengan pengikatan ion tembaga oleh protein metallothionein (MT) (Ashish, Neeti, & Himanshu, 2013). Eksplorasi khamir resisten tembaga yang dapat mengakumulasi tembaga perlu dilakukan untuk mendukung program bioremediasi limbah tembaga di Indonesia demi terciptanya lingkungan yang terbebas dari kontaminasi logam berat. Tingkat kontaminasi limbah tembaga di banyak daerah industri di Indonesia telah melebihi ambang batas dan perlu ditanggulangi untuk menghentikan pencemaran limbah tembaga ke lingkungan. Khamir resisten tembaga merupakan mikroorganisme yang sangat berpotensi dalam mengakumulasi tembaga dari limbah dalam proses bioremediasi tetapi penelitian mengenai isolasi dan karakterisasi khamir resisten tembaga belum banyak dilakukan di Indonesia (Qayyum, Khan, Maqbool, Zhao, & Peng, 2016) (Jianlong, 2002). Eksplorasi khamir resisten tembaga dari daerah industri Rungkut-Surabaya sangat penting untuk dilakukan sebagai langkah awal dalam rangka mendapatkan solusi dalam meremediasi lingkungan yang telah tercermar logam berat. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi dan menguji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri Rungkut Surabaya.
Bioeksperimen, Volume 6 No. 2 (September 2020) ISSN 2460-1365
pendekatan indeks keanekaragaman ( Shannon- Wiener ) (Ludwig dan Reynold 1988) sebagai berikut:
Keterangan: H’ : Indeks Keanekaragaman Shannon ni : Spesies ke-i
N : Jumlah seluruh spesies
Analisis kesesuaian jenis vegetasi Hutan Kota dilakukan dengan membuat matriks Kesesuaian Jenis dari Kementrian Kehutanan dan para peneliti sebelumnya. Parameter kesesuaian merujuk kepada persyaratan
silvikultura, bio-ekologi, manajemen , estetika dan konservasi. Penilaian dilakukan dengan cara memberikan skor 2 pada kolom persyaratan yang dimiliki oleh jenis pohon ( X ) dan memberikan skor 1 pada pada kolom persyaratan yang tidak dimiliki oleh jenis pohon ( Y ).
a. Silvikultural (Indrianto 2006 dan Saebo et al. 2005 dalam Mukhlison 2013)
Persyaratan silvikultura berkaitan dengan kecukupan lahan atau luas area hutan kota dan kesesuaian jenis pohon yang merujuk kepada kriteria atau syarat pertumbuhannya. Secara rinci, persyaratan silvikultura disajikan pada Tabel 1.
Tabel 1 Persyaratan silvikultural untuk jenis pohon Hutan Kota Persyaratan Skor X Y Ketinggian tempat 0-500 mdpl 2 >500 mdpl 1 Toleransi terhadap kekurangan nutrisi Toleran 2 Tidak Toleran 1 Toleransi terhadap suhu tinggi Toleran 2 Tidak Toleran 1 Toleransi terhadap intensitas sinar matahari Toleran 2 Tidak Toleran 1 Toleransi terhadap kekurangan air Toleran 2 Tidak Toleran 1 Memulihkan kesuburan tanah Dapat 2 Tidak dapat 1 Ketahanan terhadap serangan hama dan penyakit Tahan 2 Tidak tahan 1 Ketahanan terhadap risiko pengguguran daun Tahan 2 Tidak tahan 1 Ketahanan Batang pokok dan dahan terhadap terpaan angin dan hujan Tahan 2 Tidak tahan 1 Kekuatan akar Kuat 2 Tidak kuat 1 b. Bio-ekologi (Samsoedin 2009 dan Kemenhut 2012)
Persyaratan bio-ekologi merujuk kepada sifat morfologi dan fisiologi tumbuhan/ pohon serta konsekuensinya terhadap kondisi ekologis lingkungannya yang
mencakup tingkat toleransinya terhadap polutan, mampu menekan/ mengurangi tingkat pencemaran udara di sekitarnya, mampu menyerap dan menjerat debu, dapat mengurangi bau dengan aroma khas yang dimilikinya, meredam kebisingan,
Bioeksperimen, Volume 5 No.1, (Maret 2019)
Salomon Christian, Wahyu Irawati. (2019). Uji Resistensi Isolat Khamir yang Diisolasi dari Limbah Industri di Rungkut, Surabaya, Indonesia. Jurnal Bioeksperimen . Vol. 5 (1) Pp. 1-10. Doi: 10.23917/bioeksperimen.v5i1.2795

## UJI RESISTENSI ISOLAT KHAMIR YANG DIISOLASI DARI LIMBAH INDUSTRI DI RUNGKUT, SURABAYA, INDONESIA
Salomo Christian 1) ; Wahyu Irawati 2)* 1 Fakultas Ilmu Pendidikan, Program Studi Pendidikan Biologi,
2 Fakultas sains dan Matematika, Program Studi Biologi, Universitas Pelita Harapan Jalan M.H. Thamrin Boulevard 1100, Lippo Karawaci, Tangerang 15811, Indonesia *Email : w.irawati3@gmail.com

## Abstrak
Pencemaran tembaga di daerah Rungkut-Surabaya telah melebihi ambang batas sehingga dapat mengancam kehidupan organisme di laut. Tembaga tidak dapat didegradasi dan beracun pada konsentrasi tinggi sehingga diperlukan pengolahan limbah yang dapat menurunkan konsentrasi tembaga di lingkungan. Khamir resisten tembaga dapat diisolasi dari daerah tercemar dan dapat dijadikan sebagai agen bioremediasi untuk mengatasi pencemaran tembaga. Penelitian ini bertujuan untuk melakukan isolasi dan uji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri. Sampel diambil dari lumpur aktif pusat pengolahan limbah PT. SIER Surabaya. Isolasi dilakukan dengan pengenceran sampel limbah kemudian diinokulasikan dengan metode sebar ke dalam medium Yeast Extract Peptone Dextrose Agar yang diperkaya dengan CuSO 4 . Uji resistensi dilakukan dengan menginokulasikan isolat murni dengan metode gores ke dalam medium Agar yang mengandung berbagai konsentrasi CuSO 4 untuk menentukan nilai Minimum Inhibitory Concentration (MIC). Hasil isolasi diperoleh delapan isolat khamir dengan kode ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, dan ES10.4. Nilai MIC isolat khamir tersebut berkisar antara 16-20 Mm CuSO 4 . Isolat yang paling resisten adalah isolat dengan kode ES9.3 dengan nilai MIC= 20 mM CuSO 4 , sehingga isolate ini dipilih sebagai isolate yang paling resisten terhadap polutan di Wilayah Rungkut, Surabaya, Indonesia.
Kata kunci: Isolasi, karakterisasi, khamir, resistensi, tembaga, isolate ES9.3

## Abstract
Copper pollution in Rungkut-Surabaya area has exceeded the threshold so that it can be threaten the life of organisms in the sea. Copper cannot be degraded and its very toxic at high concentrations. So that, we need to treat the water waste to reduce copper concentrations. Copper yeast can be isolated from polluted areas and can be used as a bioremediation agent to overcome copper pollution. This study aims to conduct copper isolation and yeast resistance testing from industrial waste. Samples taken from the activated sludge of PT. SIER Surabaya. Isolation was carried out by dilution of the waste sample and then inoculated with the scatter method into Yeast Extract medium Peptone Dextrose Agar enriched with CuSO 4 . The resistance test was carried out by inoculating the pure isolate with the scratch method into Agar medium containing various concentrations of CuSO 4 to determine the value of Minimum Inhibitory Concentration (MIC). The isolation results obtained eight yeast isolates with the code ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, and ES10.4. The MIC value of yeast isolates ranged from 16-20 Mm CuSO4. The most resistant isolates were isolates with code ES9.3 with MIC = 20 mM CuSO 4 , so that this isolate was chosen as the most resistant isolate to pollutants in the Rungkut Region, Surabaya, Indonesia.
Keywords: Isolation, characterization, yeast, resistance, copper, isolate ES9.3

## Pendahuluan
Logam berat merupakan polutan yang tidak dapat didegradasi dan cenderung terakumulasi di dalam tubuh organisme. Logam berat dapat menjadi polutan karena merupakan senyawa sisa yang dihasilkan dari industri (Kobya, Demirbas, Senturk, & Ince, 2005). Tembaga adalah logam
berat yang banyak digunakan di dalam industri terutama industri elektronik dan bersifat toksik bagi organisme (Davis, Volesky, & Vieira, 2000). Tembaga merupakan salah satu logam berat esensial dan diperlukan oleh manusia dalam konsentrasi yang sangat kecil, yaitu tidak lebih dari 0,05 mg/kg berat badan yaitu untuk membentuk hemoglobin dan kolagen, tetapi akan menjadi racun jika konsentrasi
Bioeksperimen, Volume 6 No. 2 (September 2020)
mengurangi erosi tanah, menahan terpaan angin dan air hujan. Persyaratan bio-

## ekologi tumbuhan Hutan Kota disajikan pada Tabel 2
Tabel 2 Persyaratan bio-ekologi untuk jenis pohon Hutan Kota Persyaratan Skor X Y Sifat pertumbuhan Cepat 2 Lambat 1 Diameter Mencapai ≥ 10 cm 2 Tidak mencapai 10 cm 1 Tinggi pohon Mencapai ≥ 5 m 2 Tidak mencapai 5 m 1 Kekuatan batang Kokoh 2 Tidak Kokoh 1 Kedalaman akar Dalam 2 Dangkal 1 Kerapatan tajuk Rapat 2 Tidak Rapat 1 Daun terurai Mudah 2 Sulit 1 Ketebalan helai daun Tebal 2 Tipis 1 Ukuran daun Kecil 2 Besar 1 Kelengkapan helai daun Berambut 2 Tidak berambut 1 Manfaat bunga bagi satwa Dimanfaatkan 2 Tidak dimanfaatkan 1 Manfaat buah bagi satwa Dimanfaatkan 2 Tidak dimanfaatkan 1 c. Manajemen (Indrianto 2006 dan Saebo et al. 2005 dalam Mukhlison 2013) Persyaratan manajemen merujuk kepada prinsip efektifitas dan efisiensi berdasarkan sifat mudah dan murahnya dalam mendapatkan jenis pohon serta proses
pemeliharaannya. Selain itu persyaratan manajemen harus memenuhi segi keamanan serta kemudahan dalam segi pemanfaatannya. Secara rinci, persyaratan manajemen pohon Hutan Kota disajikan dalam Tabel 3.
Tabel 3 Persyaratan manajemen untuk jenis pohon Hutan Kota
Persyaratan Skor X Y Cara penanaman Mudah dan murah 2 Sulit dan mahal 1 Cara pengamanan Mudah 2 Sulit 1
ISSN 2460-1365
tembaga tersebut melebihi tingkat kebutuhan harian. Akumulasi tembaga di dalam tubuh manusia dapat mengakibatkan berbagai macam penyakit seperti gagal ginjal, kanker, kerusakan liver, kerusakan otak, gangguan saraf, bahkan kematian (Hocheng, Chakankar, & Jadhav, 2018). Pencemaran tembaga di pantai timur Surabaya merupakan salah satu kasus pencemaran logam berat yang terjadi di Indonesia yang belum dapat ditanggulangi. Pencemaran ini dapat terjadi karena adanya pembuangan limbah cair ke sungai oleh industri yang berada di sekitar pantai timur Surabaya. Akibat yang ditimbulkan dari pencemaran tembaga adalah akumulasi tembaga oleh hewan yang hidup di sungai dan laut di sekitarnya seperti ikan, kerang, dan udang. Hewan-hewan yang mengakumulasi logam berat bila terkonsumsi oleh manusia dalam jangka panjang dapat menimbulkan kerusakan pada beberapa organ tubuh (Irawati, Parhusip, Christian, & Yuwono, 2017).
Data pencemaran logam berat menunjukkan bahwa kadar Cu pada ikan dan kerang dari pantai sekitar muara yang berasal dari Rungkut, yaitu pantai di kelurahan Sukolilo mengandung 2.290,20 ppb dan 5.920,20 ppb. Pencemaran di Rungkut telah melebihi ambang batas yang ditentukan oleh World Health Organization (WHO) yaitu 1.200 ppb sehingga dapat membahayakan kesehatan penduduk yang tinggal di desa tersebut. Masalah kontaminasi tembaga di lingkungan telah dilakukan di beberapa daerah industri tetapi untuk mendegradasi dan menghilangkan logam berat tidak semudah mendegradasi limbah organik karena limbah logam berat bersifat nonbiodegradable. Degradasi dan reduksi logam berat dari lingkungan untuk skala kecil dapat dilakukan dengan cara fisik dan kimia melalui pertukaran ion (ion exchange), presipitasi, koagulasi, inverse osmosis, dan adsorpsi. Metode-metode tersebut cukup efisien dalam mengurangi kontaminasi logam berat tetapi akan sangat merugikan bila digunakan untuk mengolah limbah industri yang sangat banyak sehingga akan menimbulkan masalah baru, yaitu biaya  pengolahan limbah yang relatif mahal, membutuhkan energi dan bahan kimia cukup banyak (Jianlong, 2002). Pendekatan secara bioteknologi dengan menggunakan khamir merupakan alternatif yang
dapat dilakukan untuk masa yang akan datang dan merupakan langkah yang cukup berpotensi dalam meremediasi limbah cair yang mengandung logam berat. Mikroorganisme dapat mengurangi konsentrasi logam berat di lingkungannya melalui proses adsorpsi, produksi senyawa ekstraseluler, maupun sintesis enzimatis. Berbagai mikroorganisme memiliki toleransi terhadap logam pada konsentrasi yang lebih tinggi setelah ditumbuhkan pada medium yang mengandung logam berat (Irawati, Riak, Sopiah, & Sulistia, 2017). Hasil penelitian menunjukkan bahwa beberapa jenis khamir seperti Saccharomyces pombe strain 972, Saccharomyces cerevisiae, dan Candida tropicalis dapat mengabrsopsi tembaga di dalam medium masing-masing sebesar 70%, 86%, dan 82% (Stephen, 1992; Rahman, 2007). Mekanisme detoksifikasi tembaga pada khamir pada umumnya adalah dengan cara pengikatan ion tembaga pada membran, penyerapan ke dalam sel, dan dilanjutkan dengan pengikatan ion tembaga oleh protein metallothionein (MT) (Ashish, Neeti, & Himanshu, 2013). Eksplorasi khamir resisten tembaga yang dapat mengakumulasi tembaga perlu dilakukan untuk mendukung program bioremediasi limbah tembaga di Indonesia demi terciptanya lingkungan yang terbebas dari kontaminasi logam berat. Tingkat kontaminasi limbah tembaga di banyak daerah industri di Indonesia telah melebihi ambang batas dan perlu ditanggulangi untuk menghentikan pencemaran limbah tembaga ke lingkungan. Khamir resisten tembaga merupakan mikroorganisme yang sangat berpotensi dalam mengakumulasi tembaga dari limbah dalam proses bioremediasi tetapi penelitian mengenai isolasi dan karakterisasi khamir resisten tembaga belum banyak dilakukan di Indonesia (Qayyum, Khan, Maqbool, Zhao, & Peng, 2016) (Jianlong, 2002). Eksplorasi khamir resisten tembaga dari daerah industri Rungkut-Surabaya sangat penting untuk dilakukan sebagai langkah awal dalam rangka mendapatkan solusi dalam meremediasi lingkungan yang telah tercermar logam berat. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi dan menguji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri Rungkut Surabaya.
Bioeksperimen, Volume 6 No. 2 (September 2020) ISSN 2460-1365
Persyaratan
Skor X Y Cara pemanfaatan Mudah 2 Sulit 1 Harga tanaman Murah 2 Mahal 1 Manfaat tajuk Dapat dijadikan sebagai peneduh 2 Tidak dapat dijadikan sebagai peneduh 1 Respon terhadap pencemaran Mampu mengurangi 2 Tidak mampu mengurangi 1 Ukuran buah Kecil 2 Besar 1 Kelengkapan buah Tidak berduri tajam 2 Berduri tajam 1 Sifat getah Tidak beracun 2 Beracum 1 Potensi menimbulkan alergi Tidak berpotensi 2 Berpotensi 1 d. Konservasi (Yusuf 2011)
Persyaratan konservasi merujuk kepada beberapa indikator mencakup keragaman jenis dan sifat endemisitas sehingga memiliki makna dari segi sejarah. Mampu menggambarkan
kondisi sosial dan budaya masyarakat (kearifan lokal) serta bernilai ekonomi, baik karena sifat kelangkaan maupun keterancamannya. Secara rinci, persyaratan konservasi disajikan dalam Tabel 4.
Tabel 4 Persyaratan konservasi untuk jenis pohon Hutan Kota
Persyaratan Skor X Y Endemisitas Bersifat endemik 2 Tidak bersifat endemik 1 Kelangkaan Termasuk tumbuhan langka 2 Tidak termasuk tumbuhan langka 1 Nilai sejarah Bernilai 2 Tidak bernilai 1 Nilai budaya Bernilai 2 Tidak bernilai 1 Nilai ekonomi Bernilai Tidak bernilai 1 e. Estetika (Indrianto 2006 dan Saebo et al. 2005 dalam Mukhlison 2013) Persyaratan estetika merujuk kepada sifat pohon yang mampu menampakan sifat keindahannya. Sifat morfologi tersebut
mencakup bentuk serta ukuran (morfologi) akar, batang, ranting, daun dan bunga serta buah yang memiliki mampu menyediakan sarana bagi kepentingan rekreasi serta edukasi.
Bioeksperimen, Volume 5 No.1, (Maret 2019)
Salomon Christian, Wahyu Irawati. (2019). Uji Resistensi Isolat Khamir yang Diisolasi dari Limbah Industri di Rungkut, Surabaya, Indonesia. Jurnal Bioeksperimen . Vol. 5 (1) Pp. 1-10. Doi: 10.23917/bioeksperimen.v5i1.2795

## UJI RESISTENSI ISOLAT KHAMIR YANG DIISOLASI DARI LIMBAH INDUSTRI DI RUNGKUT, SURABAYA, INDONESIA
Salomo Christian 1) ; Wahyu Irawati 2)* 1 Fakultas Ilmu Pendidikan, Program Studi Pendidikan Biologi,
2 Fakultas sains dan Matematika, Program Studi Biologi, Universitas Pelita Harapan Jalan M.H. Thamrin Boulevard 1100, Lippo Karawaci, Tangerang 15811, Indonesia *Email : w.irawati3@gmail.com

## Abstrak
Pencemaran tembaga di daerah Rungkut-Surabaya telah melebihi ambang batas sehingga dapat mengancam kehidupan organisme di laut. Tembaga tidak dapat didegradasi dan beracun pada konsentrasi tinggi sehingga diperlukan pengolahan limbah yang dapat menurunkan konsentrasi tembaga di lingkungan. Khamir resisten tembaga dapat diisolasi dari daerah tercemar dan dapat dijadikan sebagai agen bioremediasi untuk mengatasi pencemaran tembaga. Penelitian ini bertujuan untuk melakukan isolasi dan uji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri. Sampel diambil dari lumpur aktif pusat pengolahan limbah PT. SIER Surabaya. Isolasi dilakukan dengan pengenceran sampel limbah kemudian diinokulasikan dengan metode sebar ke dalam medium Yeast Extract Peptone Dextrose Agar yang diperkaya dengan CuSO 4 . Uji resistensi dilakukan dengan menginokulasikan isolat murni dengan metode gores ke dalam medium Agar yang mengandung berbagai konsentrasi CuSO 4 untuk menentukan nilai Minimum Inhibitory Concentration (MIC). Hasil isolasi diperoleh delapan isolat khamir dengan kode ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, dan ES10.4. Nilai MIC isolat khamir tersebut berkisar antara 16-20 Mm CuSO 4 . Isolat yang paling resisten adalah isolat dengan kode ES9.3 dengan nilai MIC= 20 mM CuSO 4 , sehingga isolate ini dipilih sebagai isolate yang paling resisten terhadap polutan di Wilayah Rungkut, Surabaya, Indonesia.
Kata kunci: Isolasi, karakterisasi, khamir, resistensi, tembaga, isolate ES9.3

## Abstract
Copper pollution in Rungkut-Surabaya area has exceeded the threshold so that it can be threaten the life of organisms in the sea. Copper cannot be degraded and its very toxic at high concentrations. So that, we need to treat the water waste to reduce copper concentrations. Copper yeast can be isolated from polluted areas and can be used as a bioremediation agent to overcome copper pollution. This study aims to conduct copper isolation and yeast resistance testing from industrial waste. Samples taken from the activated sludge of PT. SIER Surabaya. Isolation was carried out by dilution of the waste sample and then inoculated with the scatter method into Yeast Extract medium Peptone Dextrose Agar enriched with CuSO 4 . The resistance test was carried out by inoculating the pure isolate with the scratch method into Agar medium containing various concentrations of CuSO 4 to determine the value of Minimum Inhibitory Concentration (MIC). The isolation results obtained eight yeast isolates with the code ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, and ES10.4. The MIC value of yeast isolates ranged from 16-20 Mm CuSO4. The most resistant isolates were isolates with code ES9.3 with MIC = 20 mM CuSO 4 , so that this isolate was chosen as the most resistant isolate to pollutants in the Rungkut Region, Surabaya, Indonesia.
Keywords: Isolation, characterization, yeast, resistance, copper, isolate ES9.3

## Pendahuluan
Logam berat merupakan polutan yang tidak dapat didegradasi dan cenderung terakumulasi di dalam tubuh organisme. Logam berat dapat menjadi polutan karena merupakan senyawa sisa yang dihasilkan dari industri (Kobya, Demirbas, Senturk, & Ince, 2005). Tembaga adalah logam
berat yang banyak digunakan di dalam industri terutama industri elektronik dan bersifat toksik bagi organisme (Davis, Volesky, & Vieira, 2000). Tembaga merupakan salah satu logam berat esensial dan diperlukan oleh manusia dalam konsentrasi yang sangat kecil, yaitu tidak lebih dari 0,05 mg/kg berat badan yaitu untuk membentuk hemoglobin dan kolagen, tetapi akan menjadi racun jika konsentrasi
Bioeksperimen, Volume 6 No. 2 (September 2020)
Tabel 5 Persyaratan estetika untuk jenis pohon Hutan Kota Persyaratan Skor X Y Habitus Pohon bertajuk 2 Pohon tidak bertajuk 1 Keindahan tajuk Indah 2 Kurang indah 1 Sifat bunga Kontras 2 Tidak kontras 1 Manfaat bagi dunia pendidikan Dapat dijadikan sarana pendidikan 2 Tidak dapat dijadikan sarana pendidikan 1 Aroma pohon Tidak berbau tak sedap 2 Bau tak sedap 1 Aroma bunga Harum/ aromatik 2 Tidak harum/ aromatik 1
Untuk menduga kesesuaian setiap jenis pohon hutan kota dilakukan menggunakan pendekatan dari Mukhlison (2013), yaitu skoring berdasarkan karakteristik yang harus dimiliki oleh setiap jenis pohon dengan memberikan nilai (2) pada kriteria suatu jenis pohon yang tepat atau harus dimiliki oleh pohon kawasan hutan kota dan nilai (1) pada kriteria yang kurang tepat atau tidak dimiliki oleh pohon kawasan hutan kota. Kriteria kesesuaian jenis pohon diklasifikasikan ke dalam kelas menurut Indriyanto (2006) dalam Mukhlison (2013), yaitu sesuai (S), cukup sesuai (CS) dan tidak sesuai (TS) dengan rumus perhitungan Interval Kelas ( IK ) sebagai berikut:
Tabel 6 Kriteria kesesuaian tiap jenis pohon Hutan Kota Kriteria Skor Tidak sesuai (TS) ≥ 72,67 Cukup sesuai (CS)  > 58,67 sd ≤ 72 Sesuai (S) >38,33-46

## Kriteria kesesuaian jenis pohon Hutan
Kota disajikan pada Tabel 6.

## Hasil dan Pembahasan

## 1.  Struktur dan Komposisi Vegetasi Hutan Kota Kibitay Sukabumi
Hasil penelitian menemukan bahwa jumlah tumbuhan yang ditemui di Hutan Kota Kibitay Sukabumi sebanyak 73 jenis yang terdiri atas 60 jenis tumbuhan dengan habitus pohon dan perdu serta 13 jenis tumbuhan dengan habitus herba (Lampiran1). Berbeda dengan hasil survey penemuan jenis, pengamatan jenis tumbuhan dalam petak contoh analisis hanya ditemui sebanyak 17 jenis tumbuhan dalam luasan 1600 m 2 . Hasil perhitungan Indeks Nilai Penting (INP), menunjukan bahwa jenis yang mendominasi komunitas tumbuhan Hutan Kota di tingkat semai yaitu jenis Mimosa pudica dengan INP sebesar 0.75% dan sebagai spesies kodominan yaitu dari spesies Calliandra haematocephala dengan INP sebesar 0.5. Hasil perhitungan INP pada vegetasi tingkat semai (Tabel 7).
ISSN 2460-1365
tembaga tersebut melebihi tingkat kebutuhan harian. Akumulasi tembaga di dalam tubuh manusia dapat mengakibatkan berbagai macam penyakit seperti gagal ginjal, kanker, kerusakan liver, kerusakan otak, gangguan saraf, bahkan kematian (Hocheng, Chakankar, & Jadhav, 2018). Pencemaran tembaga di pantai timur Surabaya merupakan salah satu kasus pencemaran logam berat yang terjadi di Indonesia yang belum dapat ditanggulangi. Pencemaran ini dapat terjadi karena adanya pembuangan limbah cair ke sungai oleh industri yang berada di sekitar pantai timur Surabaya. Akibat yang ditimbulkan dari pencemaran tembaga adalah akumulasi tembaga oleh hewan yang hidup di sungai dan laut di sekitarnya seperti ikan, kerang, dan udang. Hewan-hewan yang mengakumulasi logam berat bila terkonsumsi oleh manusia dalam jangka panjang dapat menimbulkan kerusakan pada beberapa organ tubuh (Irawati, Parhusip, Christian, & Yuwono, 2017).
Data pencemaran logam berat menunjukkan bahwa kadar Cu pada ikan dan kerang dari pantai sekitar muara yang berasal dari Rungkut, yaitu pantai di kelurahan Sukolilo mengandung 2.290,20 ppb dan 5.920,20 ppb. Pencemaran di Rungkut telah melebihi ambang batas yang ditentukan oleh World Health Organization (WHO) yaitu 1.200 ppb sehingga dapat membahayakan kesehatan penduduk yang tinggal di desa tersebut. Masalah kontaminasi tembaga di lingkungan telah dilakukan di beberapa daerah industri tetapi untuk mendegradasi dan menghilangkan logam berat tidak semudah mendegradasi limbah organik karena limbah logam berat bersifat nonbiodegradable. Degradasi dan reduksi logam berat dari lingkungan untuk skala kecil dapat dilakukan dengan cara fisik dan kimia melalui pertukaran ion (ion exchange), presipitasi, koagulasi, inverse osmosis, dan adsorpsi. Metode-metode tersebut cukup efisien dalam mengurangi kontaminasi logam berat tetapi akan sangat merugikan bila digunakan untuk mengolah limbah industri yang sangat banyak sehingga akan menimbulkan masalah baru, yaitu biaya  pengolahan limbah yang relatif mahal, membutuhkan energi dan bahan kimia cukup banyak (Jianlong, 2002). Pendekatan secara bioteknologi dengan menggunakan khamir merupakan alternatif yang
dapat dilakukan untuk masa yang akan datang dan merupakan langkah yang cukup berpotensi dalam meremediasi limbah cair yang mengandung logam berat. Mikroorganisme dapat mengurangi konsentrasi logam berat di lingkungannya melalui proses adsorpsi, produksi senyawa ekstraseluler, maupun sintesis enzimatis. Berbagai mikroorganisme memiliki toleransi terhadap logam pada konsentrasi yang lebih tinggi setelah ditumbuhkan pada medium yang mengandung logam berat (Irawati, Riak, Sopiah, & Sulistia, 2017). Hasil penelitian menunjukkan bahwa beberapa jenis khamir seperti Saccharomyces pombe strain 972, Saccharomyces cerevisiae, dan Candida tropicalis dapat mengabrsopsi tembaga di dalam medium masing-masing sebesar 70%, 86%, dan 82% (Stephen, 1992; Rahman, 2007). Mekanisme detoksifikasi tembaga pada khamir pada umumnya adalah dengan cara pengikatan ion tembaga pada membran, penyerapan ke dalam sel, dan dilanjutkan dengan pengikatan ion tembaga oleh protein metallothionein (MT) (Ashish, Neeti, & Himanshu, 2013). Eksplorasi khamir resisten tembaga yang dapat mengakumulasi tembaga perlu dilakukan untuk mendukung program bioremediasi limbah tembaga di Indonesia demi terciptanya lingkungan yang terbebas dari kontaminasi logam berat. Tingkat kontaminasi limbah tembaga di banyak daerah industri di Indonesia telah melebihi ambang batas dan perlu ditanggulangi untuk menghentikan pencemaran limbah tembaga ke lingkungan. Khamir resisten tembaga merupakan mikroorganisme yang sangat berpotensi dalam mengakumulasi tembaga dari limbah dalam proses bioremediasi tetapi penelitian mengenai isolasi dan karakterisasi khamir resisten tembaga belum banyak dilakukan di Indonesia (Qayyum, Khan, Maqbool, Zhao, & Peng, 2016) (Jianlong, 2002). Eksplorasi khamir resisten tembaga dari daerah industri Rungkut-Surabaya sangat penting untuk dilakukan sebagai langkah awal dalam rangka mendapatkan solusi dalam meremediasi lingkungan yang telah tercermar logam berat. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi dan menguji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri Rungkut Surabaya.
Bioeksperimen, Volume 6 No. 2 (September 2020) ISSN 2460-1365
Tabel 7 Hasil perhitungan Indek Nilai Penting (INP)
tumbuhan tingkat semai Nama Jenis Kerapatan Relatif (KR%) Frekuensi Relatif (FR%) INP (%) Agathis dammara 0.125 0.125 0.25 Gmelina arborea 0.125 0.125 0.25 Calliandra haematocephala 0.375 0.125 0.5 Caladium sp 0.25 0.125 0.375 Nephelium lappaceum 0.125 0.125 0.25 Mimosa pudica 0.625 0.125 0.75 Musa paradisiaca 0.125 0.125 0.25
Hal ini mengindikasikan bahwa intensitas pengelolaan hutan kota Kibitay perlu ditingkatkan khususnya dalam fungsi
pengawasan atau monitoring mengingat seluruh spesies kaliandra termasuk invasif. Spesies invasif harus dihindari dalam upaya konservasi tumbuhan baik secara insitu maupun eksitu karena apabila dibiarkan terus berkembang akan berdampak buruk bagi biodiversitas alami/ lokal. Jenis lainnya ditemukan meliputi Agathis dammara (Lamb) Rich., Gmelina arborea Roxb, Nephelium lappaceum L. dan Musa paradisiaca L. (pro sp.). Hanya terdapat 2 jenis tumbuhan yang ditemukan pada tingkat vegetasi pancang, yaitu Swietenia mahagoni (L.) Jacq. dan Nephelium lappaceum L. Spesies Nephelium lappaceum L. lebih mendominasi dari pada Swietenia mahagoni (L.) Jacq. dengan INP masing-masing yaitu 1.533% dan 1.466%. Jadi selisih INP kedua spesies ini hanya 0.666% (Tabel 8).
Tabel 8 Hasil perhitungan Indek Nilai Penting (INP) tumbuhan tingkat pancang
Nama Jenis Kerapatan Relatif (KR%) Frekuensi Relatif (FR%) Dominasi Relatif (DR%) INP (%) Swietenia mahagoni (L.) Jacq. 0.5 0.5 0.467 1.467 Nephelium lappaceum L. 0.5 0.5 0.533 1.533 Hanya sedikit vegetasi pancang yang ditemukan pada petak contoh seluas 100 m 2 (Tabel 8). Hal ini menyatakan bahwa kedua jenis pohon ini secara biologis memiliki karakteristik yang kurang cocok ditanam di Hutan Kota dengan luasan terbatas. Nephelium lappaceum L. kurang toleran terhadap naungan yang rapat, defisit air dan nutrisi sedangkan Swietenia mahagoni (L.) Jacq. Sifat pertumbuhannya sangat lambat sehingga tidak bisa tumbuh dan berkembang bersamaan spesies lainnya. Spesies yang mendominasi pada vegetasi tingkat tiang yaitu Swietenia mahagoni (L.) Jacq. dan Agathis dammara (Lamb) Rich. dengan masing-masing INP yaitu sebesar 1.711 dan 1.127% (Tabel 9). Tabel 9 Hasil perhitungan INP tingkat tiang Nama Jenis Kerapatan Relatif (KR%) Frekuen- si Relatif (FR%) Dominasi Relatif (DR%) INP (%) Artocarpus communis J.R. Forst. & G. Forst. 0.2 0.2 0.129 0.529 Swietenia mahagoni (L.) Jacq. 1 0.4 0.41 1.709 Agathis dammara (Lamb) Rich 0.4 0.4 0.327 1.126 Nephelium lappaceum L. 0.4 0.2 0.117 0.717 Anthocephalus cadamba (Roxb.) Miq. 0.4 0.2 0.117 0.717
Hasil penelitian, menunjukkan bahwa jenis Swietenia mahagoni (L.) Jacq. memiliki nilai INP tertinggi yang juga merupakan spesies introduksi. Spesies introduksi kurang baik bagi biodiversitas lokal karena akan mempengaruhi stabilitas sistem yang dibangun antar vegetasi
Bioeksperimen, Volume 5 No.1, (Maret 2019)
Salomon Christian, Wahyu Irawati. (2019). Uji Resistensi Isolat Khamir yang Diisolasi dari Limbah Industri di Rungkut, Surabaya, Indonesia. Jurnal Bioeksperimen . Vol. 5 (1) Pp. 1-10. Doi: 10.23917/bioeksperimen.v5i1.2795

## UJI RESISTENSI ISOLAT KHAMIR YANG DIISOLASI DARI LIMBAH INDUSTRI DI RUNGKUT, SURABAYA, INDONESIA
Salomo Christian 1) ; Wahyu Irawati 2)* 1 Fakultas Ilmu Pendidikan, Program Studi Pendidikan Biologi,
2 Fakultas sains dan Matematika, Program Studi Biologi, Universitas Pelita Harapan Jalan M.H. Thamrin Boulevard 1100, Lippo Karawaci, Tangerang 15811, Indonesia *Email : w.irawati3@gmail.com

## Abstrak
Pencemaran tembaga di daerah Rungkut-Surabaya telah melebihi ambang batas sehingga dapat mengancam kehidupan organisme di laut. Tembaga tidak dapat didegradasi dan beracun pada konsentrasi tinggi sehingga diperlukan pengolahan limbah yang dapat menurunkan konsentrasi tembaga di lingkungan. Khamir resisten tembaga dapat diisolasi dari daerah tercemar dan dapat dijadikan sebagai agen bioremediasi untuk mengatasi pencemaran tembaga. Penelitian ini bertujuan untuk melakukan isolasi dan uji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri. Sampel diambil dari lumpur aktif pusat pengolahan limbah PT. SIER Surabaya. Isolasi dilakukan dengan pengenceran sampel limbah kemudian diinokulasikan dengan metode sebar ke dalam medium Yeast Extract Peptone Dextrose Agar yang diperkaya dengan CuSO 4 . Uji resistensi dilakukan dengan menginokulasikan isolat murni dengan metode gores ke dalam medium Agar yang mengandung berbagai konsentrasi CuSO 4 untuk menentukan nilai Minimum Inhibitory Concentration (MIC). Hasil isolasi diperoleh delapan isolat khamir dengan kode ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, dan ES10.4. Nilai MIC isolat khamir tersebut berkisar antara 16-20 Mm CuSO 4 . Isolat yang paling resisten adalah isolat dengan kode ES9.3 dengan nilai MIC= 20 mM CuSO 4 , sehingga isolate ini dipilih sebagai isolate yang paling resisten terhadap polutan di Wilayah Rungkut, Surabaya, Indonesia.
Kata kunci: Isolasi, karakterisasi, khamir, resistensi, tembaga, isolate ES9.3
Abstract Copper pollution in Rungkut-Surabaya area has exceeded the threshold so that it can be threaten the life of organisms in the sea. Copper cannot be degraded and its very toxic at high concentrations. So that, we need to treat the water waste to reduce copper concentrations. Copper yeast can be isolated from polluted areas and can be used as a bioremediation agent to overcome copper pollution. This study aims to conduct copper isolation and yeast resistance testing from industrial waste. Samples taken from the activated sludge of PT. SIER Surabaya. Isolation was carried out by dilution of the waste sample and then inoculated with the scatter method into Yeast Extract medium Peptone Dextrose Agar enriched with CuSO 4 . The resistance test was carried out by inoculating the pure isolate with the scratch method into Agar medium containing various concentrations of CuSO 4 to determine the value of Minimum Inhibitory Concentration (MIC). The isolation results obtained eight yeast isolates with the code ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, and ES10.4. The MIC value of yeast isolates ranged from 16-20 Mm CuSO4. The most resistant isolates were isolates with code ES9.3 with MIC = 20 mM CuSO 4 , so that this isolate was chosen as the most resistant isolate to pollutants in the Rungkut Region, Surabaya, Indonesia.
Keywords: Isolation, characterization, yeast, resistance, copper, isolate ES9.3

## Pendahuluan
Logam berat merupakan polutan yang tidak dapat didegradasi dan cenderung terakumulasi di dalam tubuh organisme. Logam berat dapat menjadi polutan karena merupakan senyawa sisa yang dihasilkan dari industri (Kobya, Demirbas, Senturk, & Ince, 2005). Tembaga adalah logam
berat yang banyak digunakan di dalam industri terutama industri elektronik dan bersifat toksik bagi organisme (Davis, Volesky, & Vieira, 2000). Tembaga merupakan salah satu logam berat esensial dan diperlukan oleh manusia dalam konsentrasi yang sangat kecil, yaitu tidak lebih dari 0,05 mg/kg berat badan yaitu untuk membentuk hemoglobin dan kolagen, tetapi akan menjadi racun jika konsentrasi
Bioeksperimen, Volume 6 No. 2 (September 2020)
dan substrat serta satwa liar yang berinteraksi dengannya. Selain itu, monitoring terhadap dampak spesies introduksi perlu ditingkatkan untuk menjaga sistem dan  dan nilai-nilai sosial serta budaya serta kearifan lokal masyarakat setempat. Salah satu dampaknya yaitu masyarakat kurang memiliki kepedulian terhadap potensi tumbuhan lokal. Perlu
edukasi yang menyeluruh agar masyarakat memahami baik dari segi karakteristik maupun dampak dari spesies introduksi tersebut. Indeks Nilai Penting tertinggi pada tingkat pohon yaitu pada Agathis dammara sebesar 2.47% dengan kodominan spesies Gmelina arborea Roxb. sebesar 1.309% (Tabel 10). Tabel 10 Hasil perhitungan INP tingkat pohon Nama Jenis Kerapatan Relatif (KR%) Frekuensi Relatif (FR%) Dominasi Relatif (DR%) INP (%) Gmelina arborea Roxb 1.182 0.063 0.065 1.309 Agathis dammara (Lamb) Rich. 2.182 0.188 0.048 2.417 Paraserianthes falcataria L. 0.273 0.188 0.054 0.514 Canarium vulgare L. 0.091 0.063 0.008 0.162 Anthocephalus cadamba (Roxb.) Miq. 0.636 0.125 0.012 0.776 Nephelium lappaceum L. 0.091 0.063 0.018 0.17 Toona sinensis (Juss.) M. Roem 0.091 0.063 0.017 0.17 Cinnamomum burmannii (Nees & T. Nees) 0.091 0.063 0.011 0.164 Artocarpus communis J.R. Forst. & G. Forst. 0.091 0.063 0.024 0.177 Tectona grandis L. f. 0.182 0.063 0.027 0.271 Havea brasiliensis (Willd. ex A. Juss.) Müll. Arg. 0.091 0.063 0.016 0.169 Secara khusus, adanya spesies kodominan yaitu spesies Gmelina arborea Roxb. (Tabel 10). Spesies ini tidak memiliki karakteristik yang sesuai dengan kebutuhan Hutan Kota di Sukabumi maka sebaiknya dipertimbangkan baik dari segi  manajemen maupun dari segi bio-ekologi. Secara umum, vegetasi tingkat pohon menunjukan adanya pola perkembangan tanaman yang relatif stabil. Hal ini ditandai dengan nilai INP yang
homogen  dengan selisih nilai INP yang sedikit. Kondisi ini akan tampak secara kasat mata dari penampakan Hutan Kota Sukabumi dengan kanopi pohon yang rapat, subur dan tingg pohon yang relatif seragam (Tabel 11). Secara estetik, pohon-pohon ini menampakan nilai keindahan. Kondisi ini merupakan salah satu keberhasilan pengelola Hutan Kota Kibitay dalam menjalankan tugas dan fungsi manajemen pohon hutan kota.
Tabel 11 Data ketinggian pohon Hutan Kota Sukabumi Spesies Tinggi (m) Gmelina arborea Roxb. 7.2 – 9.1 Agathis dammara (Lamb) Rich. 6.7-10.5 Paraserianthes falcataria L. 3.5-7.5 Canarium vulgare L. 4.6 Nephelium lappaceum L. 3.6 – 7 Toona sinensis (Juss.) M. Roem 8 Tectona grandis L. f. 3.9-4.98 Cinnamomum burmannii (Nees & T. Nees) 3.88 Artocarpus communis 3.2-8.90
ISSN 2460-1365
tembaga tersebut melebihi tingkat kebutuhan harian. Akumulasi tembaga di dalam tubuh manusia dapat mengakibatkan berbagai macam penyakit seperti gagal ginjal, kanker, kerusakan liver, kerusakan otak, gangguan saraf, bahkan kematian (Hocheng, Chakankar, & Jadhav, 2018).
Pencemaran tembaga di pantai timur Surabaya merupakan salah satu kasus pencemaran logam berat yang terjadi di Indonesia yang belum dapat ditanggulangi. Pencemaran ini dapat terjadi karena adanya pembuangan limbah cair ke sungai oleh industri yang berada di sekitar pantai timur Surabaya. Akibat yang ditimbulkan dari pencemaran tembaga adalah akumulasi tembaga oleh hewan yang hidup di sungai dan laut di sekitarnya seperti ikan, kerang, dan udang. Hewan-hewan yang mengakumulasi logam berat bila terkonsumsi oleh manusia dalam jangka panjang dapat menimbulkan kerusakan pada beberapa organ tubuh (Irawati, Parhusip, Christian, & Yuwono, 2017).
Data pencemaran logam berat menunjukkan bahwa kadar Cu pada ikan dan kerang dari pantai sekitar muara yang berasal dari Rungkut, yaitu pantai di kelurahan Sukolilo mengandung 2.290,20 ppb dan 5.920,20 ppb. Pencemaran di Rungkut telah melebihi ambang batas yang ditentukan oleh World Health Organization (WHO) yaitu 1.200 ppb sehingga dapat membahayakan kesehatan penduduk yang tinggal di desa tersebut. Masalah kontaminasi tembaga di lingkungan telah dilakukan di beberapa daerah industri tetapi untuk mendegradasi dan menghilangkan logam berat tidak semudah mendegradasi limbah organik karena limbah logam berat bersifat nonbiodegradable. Degradasi dan reduksi logam berat dari lingkungan untuk skala kecil dapat dilakukan dengan cara fisik dan kimia melalui pertukaran ion (ion exchange), presipitasi, koagulasi, inverse osmosis, dan adsorpsi. Metode-metode tersebut cukup efisien dalam mengurangi kontaminasi logam berat tetapi akan sangat merugikan bila digunakan untuk mengolah limbah industri yang sangat banyak sehingga akan menimbulkan masalah baru, yaitu biaya  pengolahan limbah yang relatif mahal, membutuhkan energi dan bahan kimia cukup banyak (Jianlong, 2002). Pendekatan secara bioteknologi dengan menggunakan khamir merupakan alternatif yang
dapat dilakukan untuk masa yang akan datang dan merupakan langkah yang cukup berpotensi dalam meremediasi limbah cair yang mengandung logam berat. Mikroorganisme dapat mengurangi konsentrasi logam berat di lingkungannya melalui proses adsorpsi, produksi senyawa ekstraseluler, maupun sintesis enzimatis. Berbagai mikroorganisme memiliki toleransi terhadap logam pada konsentrasi yang lebih tinggi setelah ditumbuhkan pada medium yang mengandung logam berat (Irawati, Riak, Sopiah, & Sulistia, 2017). Hasil penelitian menunjukkan bahwa beberapa jenis khamir seperti Saccharomyces pombe strain 972, Saccharomyces cerevisiae, dan Candida tropicalis dapat mengabrsopsi tembaga di dalam medium masing-masing sebesar 70%, 86%, dan 82% (Stephen, 1992; Rahman, 2007). Mekanisme detoksifikasi tembaga pada khamir pada umumnya adalah dengan cara pengikatan ion tembaga pada membran, penyerapan ke dalam sel, dan dilanjutkan dengan pengikatan ion tembaga oleh protein metallothionein (MT) (Ashish, Neeti, & Himanshu, 2013). Eksplorasi khamir resisten tembaga yang dapat mengakumulasi tembaga perlu dilakukan untuk mendukung program bioremediasi limbah tembaga di Indonesia demi terciptanya lingkungan yang terbebas dari kontaminasi logam berat. Tingkat kontaminasi limbah tembaga di banyak daerah industri di Indonesia telah melebihi ambang batas dan perlu ditanggulangi untuk menghentikan pencemaran limbah tembaga ke lingkungan. Khamir resisten tembaga merupakan mikroorganisme yang sangat berpotensi dalam mengakumulasi tembaga dari limbah dalam proses bioremediasi tetapi penelitian mengenai isolasi dan karakterisasi khamir resisten tembaga belum banyak dilakukan di Indonesia (Qayyum, Khan, Maqbool, Zhao, & Peng, 2016) (Jianlong, 2002). Eksplorasi khamir resisten tembaga dari daerah industri Rungkut-Surabaya sangat penting untuk dilakukan sebagai langkah awal dalam rangka mendapatkan solusi dalam meremediasi lingkungan yang telah tercermar logam berat. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi dan menguji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri Rungkut Surabaya.
Bioeksperimen, Volume 6 No. 2 (September 2020) ISSN 2460-1365
Spesies Tinggi (m) Anthocephalus cadamba J.R. Forst. & G. Forst. 4.3-5.4 Havea brasiliensis (Willd. ex A. Juss.) Müll. Arg. 9.7 Swietenia mahagoni (L.) Jacq. 6.1-6.7
Hasil analisis vegetasi mengindikasikan bahwa aspek strategis pengembangan hutan kota Kibitay Sukabumi perlu mempertimbangkan kepentingan ekologi dan konservasi demi tercapainya tujuan- tujuan yang tertuang dalam  Peraturan Pemerintah No. 63 tahun 2002. Berdasarkan PP ini aspek strategis pembangunan dan pengembangan hutan kota harus memperhatikan beberapa rambu- rambu potensi bio-fisik wilayah yang merupakan upaya konservasi dan rehabilitasi lahan di wilayah perkotaan. Upaya-upaya tersebut harus dituangkan melalui telaah kriteria bentuk, pengembangan jenis dan peran serta fungsi pembangunan hutan kota (PP No 63 Tahun 2002)
2. Keanekaragaman Jenis ( H’ ) Vegetasi Hutan Kota Kibitay Sukabumi Hasil perhitungan Indeks Keanekaragaman Jenis ( H’ ) Shannon-Wienner, diketahui bahwa nilai
H’ yaitu sebesar 4.71. Nilai ini cukup tinggi apabila dibandingkan dengan beberapa tipe Hutan Kota Bandung (Tabel 12). Meskipun demikian, terdapat temuan jumlah individu pada dua jenis vegetasi yaitu pada spesies Aghatis dammara (27 individu) dan Gmelina arborea (17 individu) yang kurang sesuai dengan prinsip keanekaragaman jenis. Banyaknya jumlah individu kedua spesies ini melebihi jumlah seluruh jenis vegetasi (17 jenis) yang ditemukan pada petak 3 contoh (1600 m). Kondisi ini tidak memperlihatkan adanya kemerataan jenis pada suatu kawasan yang menunjukan adanya keseimbangan pola distribusi pada beberapa jenis pohon. Padahal konsep keanekaragaman selalu merujuk pada dua indikator yaitu jumlah jenis dan distribusinya  (Morrison et al . 1992).
Tabel 12 Perbandingan nilai H’ di berbagai tipe Hutan Kota Nama/ Tipe Hutan Kota H’ Lokasi/ Sumber PT PINDAD 3.45 Bandung/ Mulyana (2012) Kebun Binatang 3.78 Taman Tegalega 3.43 Taman Pramuka 2.26 Taman Lalulintas 2.65 Taman Maluku 3.03 Taman Cilaki 2.75 Pasir Impun 1.18 Cicabe 2.17 Kibitay 4.71 Sukabumi/ Penelitian ini

## 3.  Kesesuaian Jenis Vegetasi Hutan Kota Kibitay Sukabumi
Berdasarkan kajian ini, secara umum jenis-jenis pohon Hutan Kota Kibitay Sukabumi tergolong cukup sesuai dengan nilai rata-rata 60,232 yang
terdiri atas 13 jenis pohon dengan kriteria sesuai, 22 jenis pohon dengan kriteria cukup sesuai dan 25 jenis pohon dengan kriteria tidak sesuai. Apabila nilai-nilai tersebut dikelompokan berdasarkan persentase kesesuaian jenis (KS)  (Gambar 3).
Bioeksperimen, Volume 5 No.1, (Maret 2019)
Salomon Christian, Wahyu Irawati. (2019). Uji Resistensi Isolat Khamir yang Diisolasi dari Limbah Industri di Rungkut, Surabaya, Indonesia. Jurnal Bioeksperimen . Vol. 5 (1) Pp. 1-10. Doi: 10.23917/bioeksperimen.v5i1.2795
UJI RESISTENSI ISOLAT KHAMIR YANG DIISOLASI DARI LIMBAH INDUSTRI DI RUNGKUT, SURABAYA, INDONESIA
Salomo Christian 1) ; Wahyu Irawati 2)*
1 Fakultas Ilmu Pendidikan, Program Studi Pendidikan Biologi,
2 Fakultas sains dan Matematika, Program Studi Biologi, Universitas Pelita Harapan Jalan M.H. Thamrin Boulevard 1100, Lippo Karawaci, Tangerang 15811, Indonesia *Email : w.irawati3@gmail.com
Abstrak Pencemaran tembaga di daerah Rungkut-Surabaya telah melebihi ambang batas sehingga dapat mengancam kehidupan organisme di laut. Tembaga tidak dapat didegradasi dan beracun pada konsentrasi tinggi sehingga diperlukan pengolahan limbah yang dapat menurunkan konsentrasi tembaga di lingkungan. Khamir resisten tembaga dapat diisolasi dari daerah tercemar dan dapat dijadikan sebagai agen bioremediasi untuk mengatasi pencemaran tembaga. Penelitian ini bertujuan untuk melakukan isolasi dan uji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri. Sampel diambil dari lumpur aktif pusat pengolahan limbah PT. SIER Surabaya. Isolasi dilakukan dengan pengenceran sampel limbah kemudian diinokulasikan dengan metode sebar ke dalam medium Yeast Extract Peptone Dextrose Agar yang diperkaya dengan CuSO 4 . Uji resistensi dilakukan dengan menginokulasikan isolat murni dengan metode gores ke dalam medium Agar yang mengandung berbagai konsentrasi CuSO 4 untuk menentukan nilai Minimum Inhibitory Concentration (MIC). Hasil isolasi diperoleh delapan isolat khamir dengan kode ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, dan ES10.4. Nilai MIC isolat khamir tersebut berkisar antara 16-20 Mm CuSO 4 . Isolat yang paling resisten adalah isolat dengan kode ES9.3 dengan nilai MIC= 20 mM CuSO 4 , sehingga isolate ini dipilih sebagai isolate yang paling resisten terhadap polutan di Wilayah Rungkut, Surabaya, Indonesia.
Kata kunci: Isolasi, karakterisasi, khamir, resistensi, tembaga, isolate ES9.3

## Abstract
Copper pollution in Rungkut-Surabaya area has exceeded the threshold so that it can be threaten the life of organisms in the sea. Copper cannot be degraded and its very toxic at high concentrations. So that, we need to treat the water waste to reduce copper concentrations. Copper yeast can be isolated from polluted areas and can be used as a bioremediation agent to overcome copper pollution. This study aims to conduct copper isolation and yeast resistance testing from industrial waste. Samples taken from the activated sludge of PT. SIER Surabaya. Isolation was carried out by dilution of the waste sample and then inoculated with the scatter method into Yeast Extract medium Peptone Dextrose Agar enriched with CuSO 4 . The resistance test was carried out by inoculating the pure isolate with the scratch method into Agar medium containing various concentrations of CuSO 4 to determine the value of Minimum Inhibitory Concentration (MIC). The isolation results obtained eight yeast isolates with the code ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, and ES10.4. The MIC value of yeast isolates ranged from 16-20 Mm CuSO4. The most resistant isolates were isolates with code ES9.3 with MIC = 20 mM CuSO 4 , so that this isolate was chosen as the most resistant isolate to pollutants in the Rungkut Region, Surabaya, Indonesia.
Keywords: Isolation, characterization, yeast, resistance, copper, isolate ES9.3

## Pendahuluan
Logam berat merupakan polutan yang tidak dapat didegradasi dan cenderung terakumulasi di dalam tubuh organisme. Logam berat dapat menjadi polutan karena merupakan senyawa sisa yang dihasilkan dari industri (Kobya, Demirbas, Senturk, & Ince, 2005). Tembaga adalah logam
berat yang banyak digunakan di dalam industri terutama industri elektronik dan bersifat toksik bagi organisme (Davis, Volesky, & Vieira, 2000). Tembaga merupakan salah satu logam berat esensial dan diperlukan oleh manusia dalam konsentrasi yang sangat kecil, yaitu tidak lebih dari 0,05 mg/kg berat badan yaitu untuk membentuk hemoglobin dan kolagen, tetapi akan menjadi racun jika konsentrasi
Bioeksperimen, Volume 6 No. 2 (September 2020)
Gambar 3 Persentase Kesesuaian Jenis (KS) pohon Hutan Kota Kibitay Sukabumi
Berdasarkan hasil scoring pada tiap jenis pohon Hutan Kota nilai kesesuaian berkisar antara 36 (nilai terendah) sampai dengan 80 (nilai tertinggi).  Terdapat 13 jenis pohon tergolong dalam kriteria sesuai yaitu Antidesma bunius, Agathis dammara,
Pterospermum javanicum, Spathodea campanulata, Tectona grandis, Pometia pinnata, Bouea macrophylla,
Altingia excelsa, Eugenia aquea, Ficus Glomerata,
Ficus elastica, Bridelia glauca dan Cinnamomum burmannii . Artinya, spesies tersebut memiliki kriteria yang dapat memenuhi persyaratan- persyaratan secara silvikultura, bio-ekologi, manajemen, konservasi dan estetika. Terdapat 22 jenis pohon tergolong cukup sesuai yaitu Pouteria campechiana , Diospyros blancoi , Michelia campaca , Swietenia mahagoni , Syzygium malaccense , Mangifera indica , Melia azedarach , Garcinia mangostana, Lansium domesticum , Manglietia glauca , Melia azedarach , Toona sinensis , Canarium vulgare , Samanea saman , Psidium guajava , Moringa oleifera , Mimusops elengi , Aleurites moluccana, Miristica fragran, Artocarpus heterophyllus, Dendrocalamus asper dan Asparagus cochinchinensis. Spesies-spesies lainnya seperti Gmelina arborea , Paraserianthes falcataria , Anthocephalus cadamba, Havea brasiliensis, Durio zibethinus dan yang lainnya tergolong tidak sesuai.
Secara kualitatif, jenis-jenis vegetasi hutan kota tergolong baik dengan berbagai karakteristik yang dimilikinya sehingga dapat berperan sebagai mana mestinya. Oleh sebab itu, perlu pengkajian ulang mengenai peran,
fungsi dan Tipe Hutan Kota Kibitay Sukabumi kemudian ditetapkan baik dalam bentuk Surat Keputusan maupun bentuk kelengkapan administrasi lainnya. Perlu spesifikasi fungsi pembangunan dan pengembangan Hutan Kota Sukabumi seperti untuk kepentingan pendidikan, wisata, penyerap polusi udara dan kebisingan, konservasi keanekaragaman hayati dan lahan, menjamin fungsi hidrologis melalui jasa ekosistem Hutan Kota bagi masyarakat setempat. Hal ini bertujuan agar pengelola tidak kesulitan dalam upaya pengadaan jenis pohon berdasarkan sifat dan fungsinya yang lebih spesifik ditanam dalam berbagai tipe Hutan Kota dengan fungsi yang lebih spesifik pula.

## 4.  Rekomendasi Jenis Vegetasi Hutan Kota Kibitay Sukabumi
Berdasarkan kajian ini, terdapat beberapa jenis pohon yang disarankan untuk ditanam pada program pengembangan jenis pohon Hutan Kota Sukabumi di masa yang akan datang. Jenis-jenis pohon tersebut secara umum telah memiliki persyaratan-persyaratan yang perlu dimiliki oleh setiap jenis pohon Hutan kota, yaitu persyaratan silvikultura, bio-ekologi, manajemen, konservasi dan estetika. Selain itu, jenis-jenis vegetasi yang direkomendasikan pada tulisan ini juga merujuk kepada hasil temuan para peneliti dengan beberapa kriteria yang digunakan antara lain: 1) Jenis-jenis pohon yang efektif menyerap nitrogen (N) (Sulistijorini 2009 dalam Mukhlison 2013); 2) Jenis- jenis pohon efektif menyerap karbon monoksida
ISSN 2460-1365
tembaga tersebut melebihi tingkat kebutuhan harian. Akumulasi tembaga di dalam tubuh manusia dapat mengakibatkan berbagai macam penyakit seperti gagal ginjal, kanker, kerusakan liver, kerusakan otak, gangguan saraf, bahkan kematian (Hocheng, Chakankar, & Jadhav, 2018). Pencemaran tembaga di pantai timur Surabaya merupakan salah satu kasus pencemaran logam berat yang terjadi di Indonesia yang belum dapat ditanggulangi. Pencemaran ini dapat terjadi karena adanya pembuangan limbah cair ke sungai oleh industri yang berada di sekitar pantai timur Surabaya. Akibat yang ditimbulkan dari pencemaran tembaga adalah akumulasi tembaga oleh hewan yang hidup di sungai dan laut di sekitarnya seperti ikan, kerang, dan udang. Hewan-hewan yang mengakumulasi logam berat bila terkonsumsi oleh manusia dalam jangka panjang dapat menimbulkan kerusakan pada beberapa organ tubuh (Irawati, Parhusip, Christian, & Yuwono, 2017).
Data pencemaran logam berat menunjukkan bahwa kadar Cu pada ikan dan kerang dari pantai sekitar muara yang berasal dari Rungkut, yaitu pantai di kelurahan Sukolilo mengandung 2.290,20 ppb dan 5.920,20 ppb. Pencemaran di Rungkut telah melebihi ambang batas yang ditentukan oleh World Health Organization (WHO) yaitu 1.200 ppb sehingga dapat membahayakan kesehatan penduduk yang tinggal di desa tersebut. Masalah kontaminasi tembaga di lingkungan telah dilakukan di beberapa daerah industri tetapi untuk mendegradasi dan menghilangkan logam berat tidak semudah mendegradasi limbah organik karena limbah logam berat bersifat nonbiodegradable. Degradasi dan reduksi logam berat dari lingkungan untuk skala kecil dapat dilakukan dengan cara fisik dan kimia melalui pertukaran ion (ion exchange), presipitasi, koagulasi, inverse osmosis, dan adsorpsi. Metode-metode tersebut cukup efisien dalam mengurangi kontaminasi logam berat tetapi akan sangat merugikan bila digunakan untuk mengolah limbah industri yang sangat banyak sehingga akan menimbulkan masalah baru, yaitu biaya  pengolahan limbah yang relatif mahal, membutuhkan energi dan bahan kimia cukup banyak (Jianlong, 2002). Pendekatan secara bioteknologi dengan menggunakan khamir merupakan alternatif yang
dapat dilakukan untuk masa yang akan datang dan merupakan langkah yang cukup berpotensi dalam meremediasi limbah cair yang mengandung logam berat. Mikroorganisme dapat mengurangi konsentrasi logam berat di lingkungannya melalui proses adsorpsi, produksi senyawa ekstraseluler, maupun sintesis enzimatis. Berbagai mikroorganisme memiliki toleransi terhadap logam pada konsentrasi yang lebih tinggi setelah ditumbuhkan pada medium yang mengandung logam berat (Irawati, Riak, Sopiah, & Sulistia, 2017). Hasil penelitian menunjukkan bahwa beberapa jenis khamir seperti Saccharomyces pombe strain 972, Saccharomyces cerevisiae, dan Candida tropicalis dapat mengabrsopsi tembaga di dalam medium masing-masing sebesar 70%, 86%, dan 82% (Stephen, 1992; Rahman, 2007). Mekanisme detoksifikasi tembaga pada khamir pada umumnya adalah dengan cara pengikatan ion tembaga pada membran, penyerapan ke dalam sel, dan dilanjutkan dengan pengikatan ion tembaga oleh protein metallothionein (MT) (Ashish, Neeti, & Himanshu, 2013). Eksplorasi khamir resisten tembaga yang dapat mengakumulasi tembaga perlu dilakukan untuk mendukung program bioremediasi limbah tembaga di Indonesia demi terciptanya lingkungan yang terbebas dari kontaminasi logam berat. Tingkat kontaminasi limbah tembaga di banyak daerah industri di Indonesia telah melebihi ambang batas dan perlu ditanggulangi untuk menghentikan pencemaran limbah tembaga ke lingkungan. Khamir resisten tembaga merupakan mikroorganisme yang sangat berpotensi dalam mengakumulasi tembaga dari limbah dalam proses bioremediasi tetapi penelitian mengenai isolasi dan karakterisasi khamir resisten tembaga belum banyak dilakukan di Indonesia (Qayyum, Khan, Maqbool, Zhao, & Peng, 2016) (Jianlong, 2002). Eksplorasi khamir resisten tembaga dari daerah industri Rungkut-Surabaya sangat penting untuk dilakukan sebagai langkah awal dalam rangka mendapatkan solusi dalam meremediasi lingkungan yang telah tercermar logam berat. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi dan menguji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri Rungkut Surabaya.
Bioeksperimen, Volume 6 No. 2 (September 2020) ISSN 2460-1365
(CO) (Kusminingrum 2008); 3) Jenis- jenis tanaman yang memiliki daya serap terhadap karbondioksida (CO 2 ) (Dahlan 2008); 4) Jenis- jenis pohon efektif menyerap dan menjerap timbal (Pb) (Dahlan et al . 1989); 5) Jenis-jenis tumbuhan langka yang terancam punah dan telah berhasil direintroduksi (Dodo 2018).

## Simpulan
Berdasarkan penelitian ini, terdapat beberapa spesies introduksi dan spesies invasif yang mendominasi kawasan Hutan Kota Kibitay Sukabumi yang ditandai dengan INP yang tinggi dibandingkan dengan kebanyakan spesies lokal lainnya.  Ketinggian berbagai jenis
pohon relatif seragam sehingga menampakan nilai keindahan atau memiliki aspek estetika yang cukup baik. Indeks keanekaragaman lebih tinggi dibandingkan dengan beberapa tipe Hutan Kota yang ada di Bandung. Kesesuaian jenis vegetasi pohon berkisar antara sesuai, cukup sesuai dan tidak sesuai. Perlu perbaikan agar jenis-jenis vegetasi Hutan Kota dapat memenuhi persyaratan silvikultura, bio- ekologi, manajemen, konservasi dan estetika. Selain itu, perlu pengkajian ulang sekaligus penetapan berdasarkan spesifikasi tipe, fungsi dan tujuan pembangunan dan pengembangan Hutan Kota Sukabumi demi mempermudah dalam aktivitas pengelolaannya.

## Daftar Pustaka
Dahlan EN. 2008. Jumlah Emisi Gas CO 2 dan Pemilihan jenis tanaman berdaya rosot sangat tinggi: Studi Kasus di Kota Bogor. Jurnal Media Konservasi 13 (2) : 85-89
Dahlan EN, Ontaryo Y, & Umasda. 1989. Kandungan Timbal pada Beberapa Jenis Pohon Pinggir Jalan di Jalan Sudirman, Bogor. Jurnal Media Konservasi 2 (4) : 45-50
Dodo. 2018. Evaluasi reintroduksi tumbuhan langka. Pros Sem Nas Masy Biodiv Indon . 4(2): 280- 283 DOI: 10.13057
Kusminingrum N. 2008. Potensi tanaman dalam menyerap CO2 dan CO untuk mengurangi dampak pemanasan global. Jurnal Permukiman 3 (2) : 96-105.
Ludwig JA, Reynolds JF. 1988 . Statistical Ecology: a Primer on Methods and Computing. New-York (US): Wiley and Sons Eds.
Morrison ML, Marcot BG, Mannan RW. 1992. Wildlife-habitat Relationships, Consept and Application. Wisconsin (US): The University of Wisconsin Press.
Mukhlison. 2013.  Pemilihan jenis pohon untuk pengembangan Hutan Kota di kawasan perkotaan Yogyakarta. Jurnal Ilmu Kehutanan. VII (1):37-47
Mulyana S. 2012. Kajian jenis pohon potensial untuk Hutan Kota di Bandung, Jawa Barat. Jurnal Analisis Kebijakan Kehutanan. 10(1):58-71
Badan Penelitian dan Pengembangan Kehutanan. 2012. Jenis pohon potensial untuk pengembangan Hutan Kota. Policy brief. 6 (11) ISSN : 2085-787X
Peraturan Pemerintah Republik Indonesia Nomor 63 tahun 2002 tentang Hutan Kota.
Samsoedin, I. 2009. Rencana Penelitian Integratif (RPI) Tahun Anggaran 2010-2014: Pengembangan Hutan Kota/Lansekap Perkotaan . Pusat Penelitian Sosial Ekonomi dan Kebijakan Kehutanan, Bogor.
Shani FM. 2015. Kajian ketersediaan dan kebutuhan ruang terbuka hijau kawasan perkotaan di Kota Sukabumi. Jurnal Bumi Indonesia. 4(3):1-8
Bioeksperimen, Volume 5 No.1, (Maret 2019)
Salomon Christian, Wahyu Irawati. (2019). Uji Resistensi Isolat Khamir yang Diisolasi dari Limbah Industri di Rungkut, Surabaya, Indonesia. Jurnal Bioeksperimen . Vol. 5 (1) Pp. 1-10. Doi: 10.23917/bioeksperimen.v5i1.2795
UJI RESISTENSI ISOLAT KHAMIR YANG DIISOLASI DARI LIMBAH INDUSTRI DI RUNGKUT, SURABAYA, INDONESIA
Salomo Christian 1) ; Wahyu Irawati 2)*
1 Fakultas Ilmu Pendidikan, Program Studi Pendidikan Biologi,
2 Fakultas sains dan Matematika, Program Studi Biologi, Universitas Pelita Harapan Jalan M.H. Thamrin Boulevard 1100, Lippo Karawaci, Tangerang 15811, Indonesia *Email : w.irawati3@gmail.com

## Abstrak
Pencemaran tembaga di daerah Rungkut-Surabaya telah melebihi ambang batas sehingga dapat mengancam kehidupan organisme di laut. Tembaga tidak dapat didegradasi dan beracun pada konsentrasi tinggi sehingga diperlukan pengolahan limbah yang dapat menurunkan konsentrasi tembaga di lingkungan. Khamir resisten tembaga dapat diisolasi dari daerah tercemar dan dapat dijadikan sebagai agen bioremediasi untuk mengatasi pencemaran tembaga. Penelitian ini bertujuan untuk melakukan isolasi dan uji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri. Sampel diambil dari lumpur aktif pusat pengolahan limbah PT. SIER Surabaya. Isolasi dilakukan dengan pengenceran sampel limbah kemudian diinokulasikan dengan metode sebar ke dalam medium Yeast Extract Peptone Dextrose Agar yang diperkaya dengan CuSO 4 . Uji resistensi dilakukan dengan menginokulasikan isolat murni dengan metode gores ke dalam medium Agar yang mengandung berbagai konsentrasi CuSO 4 untuk menentukan nilai Minimum Inhibitory Concentration (MIC). Hasil isolasi diperoleh delapan isolat khamir dengan kode ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, dan ES10.4. Nilai MIC isolat khamir tersebut berkisar antara 16-20 Mm CuSO 4 . Isolat yang paling resisten adalah isolat dengan kode ES9.3 dengan nilai MIC= 20 mM CuSO 4 , sehingga isolate ini dipilih sebagai isolate yang paling resisten terhadap polutan di Wilayah Rungkut, Surabaya, Indonesia.
Kata kunci: Isolasi, karakterisasi, khamir, resistensi, tembaga, isolate ES9.3

## Abstract
Copper pollution in Rungkut-Surabaya area has exceeded the threshold so that it can be threaten the life of organisms in the sea. Copper cannot be degraded and its very toxic at high concentrations. So that, we need to treat the water waste to reduce copper concentrations. Copper yeast can be isolated from polluted areas and can be used as a bioremediation agent to overcome copper pollution. This study aims to conduct copper isolation and yeast resistance testing from industrial waste. Samples taken from the activated sludge of PT. SIER Surabaya. Isolation was carried out by dilution of the waste sample and then inoculated with the scatter method into Yeast Extract medium Peptone Dextrose Agar enriched with CuSO 4 . The resistance test was carried out by inoculating the pure isolate with the scratch method into Agar medium containing various concentrations of CuSO 4 to determine the value of Minimum Inhibitory Concentration (MIC). The isolation results obtained eight yeast isolates with the code ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, and ES10.4. The MIC value of yeast isolates ranged from 16-20 Mm CuSO4. The most resistant isolates were isolates with code ES9.3 with MIC = 20 mM CuSO 4 , so that this isolate was chosen as the most resistant isolate to pollutants in the Rungkut Region, Surabaya, Indonesia.
Keywords: Isolation, characterization, yeast, resistance, copper, isolate ES9.3

## Pendahuluan
Logam berat merupakan polutan yang tidak dapat didegradasi dan cenderung terakumulasi di dalam tubuh organisme. Logam berat dapat menjadi polutan karena merupakan senyawa sisa yang dihasilkan dari industri (Kobya, Demirbas, Senturk, & Ince, 2005). Tembaga adalah logam
berat yang banyak digunakan di dalam industri terutama industri elektronik dan bersifat toksik bagi organisme (Davis, Volesky, & Vieira, 2000). Tembaga merupakan salah satu logam berat esensial dan diperlukan oleh manusia dalam konsentrasi yang sangat kecil, yaitu tidak lebih dari 0,05 mg/kg berat badan yaitu untuk membentuk hemoglobin dan kolagen, tetapi akan menjadi racun jika konsentrasi
Bioeksperimen, Volume 6 No. 2 (September 2020)
Soerianegara I, Indrawan A. 1998. Ekologi Hutan Indonesia. Bogor (ID): IPB press.
Undang-Undang RI No. 26 Tahun 2007 tentang Penataan Tata Ruang Wilayah Nasional