## Jurnal Kesehatan
https://jurkes.polije.ac.id
Vol. 10 No. 2 Agustus 2022  Hal 77-83
https://doi.org/10.25047/j-kes. v10i2
Pengaruh Pe mberian De hydroepiandrosterone (DH EA) terhadap Aktivitas Peroksidasi Li pid dan Kadar Nitrit Oksida pada Aorta Tikus Wistar Jantan yang Terpapar Asap Rok ok
Nila Ridhaya ni 1 , Arya di  Arsyad 2* , Yulia Yusrini Djabir 3
Program Studi Ilmu Biomedik, Sekolah Pascasarjana Universitas Hasanud din, Makassar, Indonesia 1 Jurusan Fisiologi, Fakultas Kedokteran, Universitas Hasanuddin, Makassar, Indonesia 2* Jurusan Far masi, Fakultas Farmasi, Universitas Hasanuddin, Makassar, Indone sia 3 e-mail: aryadi.arsyad@med.unhas.ac.id
(Naskah masu k: 8 April 2022, diterima untuk diterbitkan: 15 Agustus 2022)

## Abstract
The  research  aimed  to  investigate  the  effect  of  dehydroepiandrosterone  (DHEA)  on  lipid peroxidation activity and nitric  oxide concentration in the aorta of male Wistar rats due to exposure to cigarette smoke. This study was a laboratory experime nt using 21 rats that were divided into 3 groups: KN-14 (negative control that is given smoke exposure within 14 days), DHEA-1 (15 mg/kgB W + smoke exposure for 14 days), and DHE A -2 (30 mg/kgB W + smoke exposure for 14 days). The exposure was carried out in 25 -45 minutes with 4 cigarettes/day. Surge ry  was  performe d  in the  15 th days  to  re move the  aorta  to  examine  malondialdehyde (MDA)  as  a  biomarker  of  lipid  peroxidation  and  nitric  oxide  (NO)  concentration  using Enzy me-linked  Immunosorbent  Assay  (ELISA).  The  results  showed  that  a  significant increase  in  MDA  concentrations  was  found  in  the  group  administered  with  DHEA, particularly at a dose of 30 mg/kgB W (p<0.05). Meanwhile, the administration of DHEA at doses  of  15  and  30  mg/kgB W  did  not  have  a  significant  effect  (p>0,05)  on  aortic  NO concentrations  compared  to  the  group  KN -14.  Therefore,  it  can  be  concluded  that  the administration  of  DHE A  could  increase  lipid  peroxidation  activity,  as  indicated  by  a significant  increase  in  aortic  MDA  concentrations,  without  affecting  aortic  NO concentrations in rats exposed to cigarette smoke for 14 day s
Keywords: cigeratte smoke , dehydroepiandrosterone, MDA, NO

## Jurnal Kesehatan
Author(s) : Nila Ridhayani, Arya di Arsya d, Yulia Yusrini Djabir

## 1. Pendahuluan
Merokok  merupakan  penyu mbang radikal bebas terbesar juga penyebab penyakit kardiovaskular,  morbiditas  dan  kematian  dini terbesar  di  seluruh  dunia  (Ganesha,  Lina wati and  Satriyasa,  2020;  Oakes et  al. ,  2020). Nikotin,  salah  satu  senyawa  aktif  utama  asap rokok, juga telah terbukti me miliki efek buruk pada  sistem  kardiovaskular  dan  telah  di doku mentasikan bahwa nikotin dengan konsentrasi
yang sama
dengan yang ditemukan dalam darah perokok dapat meng ubah  metabolisme  lipid  dan  merusak fungsi endotel  pada  hewan  (Liu et  al. ,  2017).
Mekanisme  nikotin  memicu  respon  sel endotel  sistemik  dan  melibatkan  peningkatan molekul  pensinyalan  nitrit  oksida  (N O)  dan spesies oksigen reaktif (ROS) serta pembentu kan
metabolit proapoptosis,
(Schweitzer et al. , 2015).
Kerusakan oksidatif dipicu oleh
terjadinya disfungsi dan kerusakan sel endotel yang pada akhirnya akan mengurangi bioavailabilitas nitrit oksida (NO) dan menipisnya antioksidan endogen, peradangan, aktivasi trombosit, dan kelainan lipid (Benowitz and Burban k, 2016). Dehydroepiandrosterone
(DH EA)
beserta sulfate  ester nya  (DH EA S)  adalah hormon steroid sirkulasi yang paling melimpah  dan  sebagian  besar  disekresikan oleh  zona  reticularis  korteks  adrenal,  gonad, serta  otak.  DH EA  dan  D H EA-S  ma mpu melakukan banyak peran dalam tubuh manusia  seperti  pada  tindakan  biologis  yaitu perlindungan  saraf,  pertumbuhan  neurit,  dan efek antagonis pada oksidan dan glukokortikoid,  serta  efek  metabolik  seperti mod ulasi  imun  dan  antikanker  (Tang,  Chen and Chen, 2022).
Telah dilaporkan dalam banyak penelitian  in  vitro  dan  in  vivo  bahwa  DH EA menimbulkan efek yang menguntungka n pada tingkat  spesies  oksigen  reaktif  (ROS),  sistem pertahanan antioksidan dan kerusakan oksidatif  dalam  sel  dimana  sifat  antioksidan DH EA ini dapat dihasilkan dari kema mpuannya  untuk  mengkelat  loga m  atau peningkatan aktivitas enzim antioksidan (Kiersztan et al. , 2021).
DH EA  juga  dapat  digunakan  untuk mengaktifkan  saluran  kalium  melalui  aktivasi guanylate cyclase yang larut dan mening katkan fungsi endotel melalui peningkatan  sintesis  nitrit  oksida  (NO )  untuk pelebaran arteri dan me mblokir vasokonstriksi yang  diinduksi  hipoksia.  Melalui  mekanisme yang  dipicu  oleh  me mb ran  plasma,  DH EA secara akut  menin gkatkan  pelepa san  NO  dari sel-sel  endotel  vaskular  yang  utuh  (El-Sakka, 2018).
DH EA juga digunakan sebagai suplemen tetapi penelitian pemberian suplementasi DH EA secara eksogen berkaitan dengan kardiovaskular belu m banyak dilakukan dan atas dasar inilah pada penelitia n ini peneliti akan me ngeksplorasi efek pemberian dehydroepiandrosterone (DH EA) pada  aktivitas  peroksidasi  lipid  dan  kadar nitrit  oksida  pada  aorta  tikus  wistar  jantan yang terpapar asap rokok.
2.  Metode Penelitian ini adalah penelitian eksperimental  laboratorik  yang  mengg unakan desain  penelitian Post-Test  Control  Design Group, dimana sampel sebanyak 21 ekor tikus Wistar  jantan  dikelompokkan  kedala m  3 kelomp ok secara acak yang diadaptasi terlebih dahulu  sela ma  1  minggu  sebelu m  dilakukan penelitian.

## 2.1. Meto de Peng umpulan Data

## 2.1.1. He wan
Penelitian  ini  dilakukan  pada  2 1  ekor tikus  wistar  jantan  yang  di  ambil  dari Gold Mice  Farm (Maros)  dengan  berat  sekitar  180 –  300  g  kemudian  ditempatkan  di  kandang terpisah  dan  diberikan  pakan  standar serta  air minu m,  serta  lingkungan  kandang  yang diberikan cahaya 12 jam/hari. Semua prosedur yang  diterapkan  pada  hewan  telah  disetujui oleh  Ko misi  Etik  Penelitian  Kesehatan (K EPK)  FK UH  –  RSPTN  UH  –  RSU P  Dr. Wahidin  Sudirohusodo  Makassar  dan  telah mendapatkan  reko mendasi  persetujuan  etik dengan No mor: 826/U N4.6.4.5.31/PP36/2 021 untuk Etika Eksperimen pada Hewan

## Jurnal Kesehatan
Author(s) : Nila Ridhayani, Arya di Arsya d, Yulia Yusrini Djabir
2.1.2. Alat dan bahan
Dehydroepiandrosterone
bubuk (Avanti),  rokok  kretek  dengan  kandungan nikotin  sebanyak  2.3  mg  dan  tar  s ebanyak  39 mg,  CMC  0.5%, smoke  chamber , smoke pump, Rat  MD A  Assay  kit (B T-Lab,  China), Rat NO Assay kit (BT-Lab, China).
2.1.3. Desain Penelitian Penelitian ini adalah penelitian eksperimental  laboratorik  yang  menggunakan desain  penelitian Post-Test  Control  Design Group, dimana setelah  adaptasi  selama  7  hari sampel  dikelompokkan  kedalam  3  kelompok secara acak dengan jumlah yang sama (n = 7) pada setiap kelompoknya, sebagai berikut :
a. Kelo mpok pertama yaitu KN-14 (kontrol negatif  yang  diberi  paparan  asap  rokok selama 14 hari)
b. Kelo mpok  DH EA-1  (diberikan  DH EA dengan  dosis  15  mg/KgB B  +  paparan asap rokok selama 14 hari)
c. Kelo mpok  DH EA-2  (diberikan  DH EA dengan  dosis  30  mg/KgB B  +  paparan asap rokok selama 14 hari).
Pembuatan  suspensi  DH EA  dibuat
dalam  dua  dosis  yang  berbeda  sesuai  dengan perhitungan  konversi,  yaitu  dosis  pertama 0,030  g  dan  dosis  kedua  yaitu  0,060  g  yang keduanya didispersikan dengan larutan koloidal  CMC  0.5%  sebanyak  20  mL. Pemberian  DH EA  dilakukan  secara  oral meng gunakan  kanula  dengan  volume  1 mL/100  g  tubuh  tikus  setiap  satu  kali  sehari selama 14 hari.
Adapun pe maparan asap rokok dilakukan 30 menit  setelah pemberian suplementasi  DH E A  didalam smoke  cham ber dengan  menggunakan smoke  pump dan  rokok yang  digunakan  yaitu  rokok  kretek  dengan kandungan  nikotin  sebanyak  2,3  mg  dan  tar sebanyak  39  mg.  Paparan  asap  rokok dilakukan setiap hari selama
25 -40
menitsebanyak 4 batang/hari.
Untuk  pengambilan  aorta  dilakukan dengan pembeda han, kemudian aorta dibekukan  menggunakan  nitrogen  cair  dan dilakukan  pemeriksaan  kadar  M D A  dan  NO meng gunakan metode ELISA secara duplo.

## 2.2. Meto de Analisis Data
Data  dinyatakan  sebagai  mean  ±  SD. Uji  yang  dilakukan  berupa  uji One-Way AN O VA ( Analysis of Variance ) dan dilanjutkan  uji Post  Hoc Tukey mengg unakan bantuan  aplikasi  ko mputer.  Nilai  p<0,05 dianggap signifikan secara statistik .
3. Hasil dan Pe mba hasa n
3.1  Berat  Badan  Tikus  Sebelum  dan

## Sesuda h Perlakua n
Bobot  badan  tikus  sebelum  dan sesudah perlakuan termuat dalam Tabel 1.
Tabel 1. Bob ot Badan Tikus
Kelompo k N  Mean ± S D Bobot Mean ± SD Selisih Bobot P Awal Ak hir KN-14 7 190,57 ± 9,24 235,14 ± 22,84 44,57 ± 19,42 0,014 DHEA-15 6 206,5 ± 36,99 242,66 ± 37,20 36,16 ± 28,97 DHEA-30 7 223,85 ± 34,002 231,57 ± 24,74 7,71 ± 15,89
Berdasarkan Tabel 1, penguk uran berat badan  tikus  sebelu m  dan  sesudah  pemberian DH EA  dan  paparan  asap  rokok  dilakukan untuk  me mantau  apakah  ada  pengaruh perlakuan  yang  diberikan  terhadap  bobot badan  tikus  selama  14  hari  dan  berdasarkan hasil  analisis  statistik  menunjukkan  bahwa terdapat  perbedaan  signifikan  berat  badan tikus  awal  dibandingka n  dengan  berat  badan tikus  diakhir  penelitian  (p<0,05)  dimana terdapat pengaruh pe mberian perlakuan terhadap kenaikan berat badan tikus.
3.2 Pengar uh  Papar an  Asap  Rokok  dan Pe mberian  D HE A  Terha dap  Ka dar M DA da n N O
Untuk  melihat  pengaruh  pemberian asap  rokok  dan  DH EA  terhadap  kadar  MD A (Ga mbar  1),  data  dianalisis Analysis  of Varians (A NO V A)  karena  data  berdistribusi normal dan homo gen. Berdasarkan Ga mbar 1, rata-rata  nilai  kadar  MD A  aorta  tertinggi ditunjukkan  pada  kelompok  DH EA  dosis  30 mg/KgB B  sebesar  2,48  ±  1,02  µg/ml. Selanjutnya  untuk  DH EA  dosis  15  mg/kg BB me miliki rata-rata nilai kada M D A aorta yang

## Jurnal Kesehatan
Author(s) : Nila Ridhayani, Arya di Arsya d, Yulia Yusrini Djabir
tidak  jauh  berbeda  dengan  DH EA  dosis  30 mg/kg BB  yaitu  1.98  ±  0,69  µg/ml.  Adapun rata-rata  nilai  kadar  MD A  aorta  terendah ditunjukkan pada kelompok kontrol negatif 14 hari sebesar 1.35 ±  0,50 µg/ml.
Gambar 1. Diagram rata-rata kadar M DA aorta setelah pemberian DHEA dosis 15 mg/Kg BB dan 30 mg/KgBB selama 14 hari. (*) me nunjukkan perberbedaan signifikan dengan kelompok KN- 14.
Berdasarkan  hasil  analisis  statistik dengan  menggunakan  uji Analysis  of  Varians (AN O VA ) dengan Post Hoc Tukey menu njukkan  perbedaan  yang  signifikan dengan  kelompok  D H EA  dosis  30  mg/Kg BB dengan  nilai  p=0,013  (p<0,05),  adapun kelomp ok  D H EA  dengan  dosis  15  mg/Kg BB tidak menunjukkan perbedaan yang signifikan terhadap  kadar  MD A  aorta  pada  kelompok kontrol negatif 14 hari (p>0,05).
Untuk  melihat  pengaruh  pemberian asap  rokok  dan  DH EA  terhadap  kadar  NO (Ga mbar  2),  data  dianalisis  menggunakan Analysis  of  Varians (AN O VA)  karena  data berdistribusi normal dan homogen.
Gambar 2. Diagram rata-rata kadar NO aorta setelah pemberian DHEA dosis 15 mg/Kg BB dan 30 mg/KgBB selama 14 hari
Berdasarkan  Gambar  2,  rata-rata  nilai kadar  N O  aorta  tertinggi  ditunjukkan  pada kelomp ok  DH EA  dosis  30  mg/Kg BB  sebesar 91,44  ±  18,96  µmol/L.  Selanjutnya  untuk DH EA  dosis  15  mg/kgB B  me miliki  rata -rata nilai  kadar  N O  aorta  yang  tidak  jauh  berbeda dengan DH EA dosis 30 mg/kg BB yaitu  92,08 ±  17,33  µmol/L.  Adap un  rata-rata  nilai  kadar NO aorta terendah ditunjukkan pada kelomp ok  kontrol  negatif  14  hari  sebesar 85,73  ±  18,14  µmol/L.  Berdasarkan  hasil analisis  statistik  dengan  menggu nakan  uji Analysis  of  Varians (AN OV A)  dengan  uji Post-Hoc  Tukey ,  tidak  di  temu kan  perbedaan kadar NO yang signifikan pada tiap kelompok (p>0.05).
Asap  rokok  mengan dung  sejumlah besar  oksidan  yang  me miliki  efek  buruk  pada jaringan  melalui  kerusakan  oksidatif  (de Carlos et  al. ,  2014).  Berdasarkan  penelitian Joshi et  al .  (2020),  menyatakan  bahwa  durasi merok ok  secara  signifikan  me mpe ngaruhi oksidan-oksidan pada subjek mero kok dimana asap  rokok  kaya  akan  RO S  dan  RN S  dapat menyebab kan  produksi  radikal  bebas  dan mening katkan stres oksidatif melalui pembentu kan  RO S  yang  pada  akhirnya  dapat menyebab kan  peroksidasi  lipid  dan  disfungsi sel endotel, sehingga antioksidan dalam  tubuh menurun  sementara  M DA  sebagai  salah  satu biomarker dari peroksidasi lipid mening kat.
Asap  rokok  juga  kaya  akan  molekul karsinogenik,  mutagenik,  radikal  bebas,  dan logam  berat,  yang  menghasilkan  ROS  dan spesies  nitrogen  reaktif  (R NS)  yang  mudah bereaksi  dengan  biomolekul,  men yebabkan cedera  DN A  dan  peroksidasi  lipid  dalam jaringan  serta  merokok  dapat  me ngkon versi asam  lema k  tak  jenuh  ganda  menjadi hidroperoksida, endoperoksida, aldehida (misalnya, MDA) dan alkana (misalnya, etana dan pentana) (Boehm et al. , 2020).
Hasil penelitian tentang pengaruh
DH EA  terhadap  kadar  MD A  pada  aorta  tikus jantan yang terpapar asap rokok menunju kkan bahwa  pemberian  DH EA  terutama  dengan dosis 30 mg/KgB B meningkatkan kadar MD A aorta secara signifikan pada tikus wistar j antan yang  terpapar  asap  rokok  (p <0,05).  Jacob et al . (2010) me maparkan bahwa efek pemberian DH EA  secara  eksogen  dapat  bersifat  ganda,
0 0 ,5 1 1 ,5 2 2 ,5 3 3 ,5 4 K N  1 4  H ari D H E A 1 5 m g /K gB B D H E A 3 0 m g /K gB B Ka da r M DA ( µg /m l ) Kelo m p o k  Perlak u an Kad ar  MDA * 0 2 0 4 0 6 0 8 0 K N  1 4  H a ri D H E A  1 5 m g /K gB B D H E A  3 0 m g /K gB B Ka da r NO ( µm ol /L ) K elo m p o k  Perla k u a n

## Jurnal Kesehatan
Author(s) : Nila Ridhayani, Arya di Arsya d, Yulia Yusrini Djabir
anti-oksidan  atau  pro-oksidan,  tergantung pada  dosis  yang  digunakan  serta  spesifisitas jaringan. Berdasarkan penelitian yang dilakukan  Prakash et  al .  (2019)  menunju kkan bahwa  DH EA  dosis  30  mg/KgB B  yang diberikan  selama  14  dan  21  hari  pada  tikus epilepsi  yang  di  induksi  zat  besi  melalui  jalur sinyal yang dimediasi Nrf2 ma mpu menurunkan  M DA  yang  merupakan  penanda stress  oksidatif  sementara  pada  penelitian  in vitro  pemberian  DH EA  pada  sel  liver    oleh Gallo et  al .  (1999)  menunjukkan  dua  efek berlawanan  DH EA terhadap  peroksidasi  lipid tergantung  pada  konsentrasinya,  yaitu  pada konsentrasi  0,01  µ mol/L  (di  atas  yang ditemukan  dalam  jaringan  manusia)  DH EA melindun gi  sel  dari  lipid  peroksidasi  yang diinduksi  oleh  stres  oksidatif  berupa  kumena (stimulus pro-oksidan) sedangkan pada konsentrasi  farmakologis  (10-50  µmol/L) DH EA  menunjukkan  aktivitas  pro-oksidan, dan  efek  DH EA  secara  intraperitoneal  ketika diberikan  dalam  jangka  pendek  (6  atau  24 jam)  menunjukkan  pengaruh  pro -oksidan dalam model in vivo pada jantung tikus wistar yang  sehat  dengan  dosis  yang  berbeda  (1,  10 dan  50  mg/kg),  namun  setelah  24  jam  50 mg/kg  dosis  tunggal  D H EA  menghasilkan peningkatan  kadar  protein  rasio  p -A kt/Akt yang dievaluasi oleh Western Blot .
Hasil penelitian tentang pengaruh DH EA  terhadap  kadar  NO  pada  aorta  tikus jantan yang terpapar asap rokok menunju kkan tidak  adanya  pengaruh  yang signifikan (p>0,05),  namun  asap  rokok sendiri  diketahui mengan dung bahan kimia berbahaya terutama nikotin  yang  secara  substansial  menggan ggu relaksasi  jantung  yang  bergantung  pada  NO endotel dan juga berperan terhadap penurunan bioavailibilitas  NO  pada  sis tem  vaskular (Ta wa et al. , 2020).
NO  adalah  radikal  bebas  gas  yang sangat  reaktif  dan  mudah  terdifusi  dengan sifat oksidan intrinsik yang kuat dan disintesis oleh  3  subtipe  yang  berbeda  dari  enzim  N O sintase  (NO S),  masing-masing  dengan  pola ekspresi  unik  dan  sifat  fungsional:  NO S neuronal  (nN OS,  N OS1),  NOS  yang  dapat diinduksi  (iN OS,  NOS2),  dan  NO S  endotel (eNO S, NO S3) (Cyr et al. , 2020).
Secara fisiologis, NO bertindak sebagai
vasodilator endogen dan pemba wa pesan antar
sel  yang  penting  dalam  aliran  darah  otak  dan perifer  (Zhu,  Hon g  and  Yang,  2021),  anti- inflamasi,  dan  antioksidan  yang  kuat  yang me mainkan peran sentral dalam pemeliharaan home ostasis  vascular  (Cyr et  al. ,  2020).
Na mun  karena  NO  adalah  gas  radikal  bebas aktif  dengan  kema mpuan  pengoksidasi  yang kuat  secara  patologis  NO  dapat  bereaksi dengan  anion  superoksida  (O 2 ·− )  membentuk oksidan  kuat  peroksinitrit  (ON O O − )  yang dapat  me micu  stres  oksidatif  dan  kemudian menyebab kan kerusakan sel, seperti degenerasi  dan inaktivasi  protein,  peroksidasi lipid,  dan  kerusakan  D NA  yang  semakin me mperparah  kerusakan  patologis  tubuh. Ketidakseimbangan  oksidan  dan  antioksidan di  dalam  tubuh  menyebabka n  stress  oksidatif yang  dapat  men yebabkan  perubahan  dan kerusakan jalur NO S/N O yang akan me mperb uruk  stress  oksidatif  itu  sendiri sehingga berbagai keadaan patologis akut dan kronis dapat me mp otensiasi kelebihan produksi  RO S  dan  pembentu kan  O NO O berikutnya (Zhu, Ho ng and Yang, 2021).
Ada  tiga  jalur  sinyal  penting  dalam proses  pembe ntukan,  degradasi,  dan  aktivitas produksi  N O  di  pembuluh  darah:  (1)  jalur eNO S/N O di mana eN OS adalah enzim kunci untuk  membentuk  NO;  (2)  jalur  radikal oksida/NO  di  mana  radikal  oksida  yang terbentuk  dari  pendekatan  yang  berbeda ma mpu menetralkan, mendeg ra dasi dan mele mahkan  NO,  dan  (3)  jalur  NO/cG M P  di mana  hanya  dengan  NO mengaktifkan GM Pase yang tidak larut dalam sel otot polos pemb uluh  darah  sehingga  cGM P  dapat dibentuk  yang  kemu dian  mengendu rkan  otot polos dan merelaksasikan pembuluh darah .
Efek  D H EA  telah  diselidiki  pada  jalur pensinyalan  N O  Karena  N O  yang  diturunkan dari  endotel  adalah  mediator  kunci  dalam fungsi  vaskular.  DH EA  secara  langsung merangsang fosforilasi eNO S di sel endothelium  dan selama  proses  penuaan  pada tikus  ekspresi  eNO S  dan  produ ksi  NO  dan cGM P di aorta lebih rendah dan suplementasi DH EA  (1  mg/kg)  me mperbaiki  jalur  sinyal terkait  NO  di  dinding  pembulu h  darah (Savineau, Marthan and Du mas d. l. R ., 2013).

## Jurnal Kesehatan
Author(s) : Nila Ridhayani, Arya di Arsya d, Yulia Yusrini Djabir
4. Simpulan dan Saran 4.1 Simpulan Pemberian suplementasi
dehydroepiandrosterone (DH EA)  pada  tikus yang terpapar asap rokok dapat meningkatkan aktivitas  peroksidasi  lipid  pada  aorta  tikus wistar  jantan,  dima na  peningkatan  kadar MD A  me njadi  signifikan  dengan  pemberian DH EA dosis 30 mg/kgBB.
Pemberian
suplementasi dehydroepiandrosterone (DH EA)  dosis  15 mg/kg BB  dan  30  mg/kgBB  pada  tikus  yang terpapar  asap  rokok  tidak  me mpe ngaruhi kadar  nitrit  oksida  pada  aorta  tikus  wistar jantan.

## 4.2 Saran
Perlu  dilakukan  penelitian  lebih  lanjut dengan menggunakan dosis yang lebih rendah untuk
mendapatkan
efek protektif
dehydroepiandrosterone (DH EA), serta dapat
meng gunakan tikus betina sebagai pemban ding,  juga  penambahan  parameter penilaian  atau  pengukuran  untuk  melihat  hal - hal  berpengaruh  lainnya  seperti  pe meriksaan hormon, pemeriksaan antioksidan dan sebagainya.

## Daftar Pustaka
Benowitz,  N.L.  and  Burbank,  A.D.  (2016) “Cardiovascular  toxicity  of  nicotine: Implications for electronic cigarette use,”
Trends  in  Cardiovascular  Medicine .
Elsevier  Inc.,  pp.  515–523.  Available  at: https://doi.org/10.1016/j.tcm.2016.03.00
1.
Boeh m, R.E. et al. (2020) “Cigarette smoking and  antioxidant  defences  in  packed  red blood  cells  prior  to  storage,” Blood transfusion  =  Trasfusione  del  sangue .
2019/11/20,  18(1),  pp.  40–48.  Available at: https://doi.org/10.2450/2019.0166 - 19.
de  Carlos,  S.P. et  al. (2014)  “Oxidative damage  induced  by  cigarette  smoke exposure  in  mice:  impact  on  lung  tissue and diaphragm
muscle,”
Jornal Brasileiro  de  Pneumologia ,  40(4),  pp. 411–420. Available at:
https://doi.org/10.1590/S1806 - 371320 14000 4000 09.
Cyr,  A.R. et  al. (2020)  “Nitric  Oxide  and Endothelial  Dysfunction,” Critical  Care Clinics , 36(2), pp. 307–3 21. Available at:
https://doi.org/10.1016/j.ccc.2 019.12.00
9.
El-Sa kka, A.I. (2018) “Dehydroepiandrosterone  and  Erectile
Function:  A  Review,” World  J  Mens Health , 36(3), pp. 183–1 91. Available at: https://doi.org/10.5534/wjmh.180005.
Gallo,  M. et  al. (1999)  “Protective  effect  of dehydroepiandrosterone against lipid peroxidation  in  a  human  liver  cell  line,” European  Journal  of  En docrinology , 141, pp. 35–39. Available at:
http://w ww.eje.org. Ganesha, I.G.H., Linawati, N.M. and
Satriyasa,  B.K.  (2020)  “Pemberian Ekstrak  Etanol  Kubis  Un gu  (Brassica oleraceae L.) Menurunkan Kadar Malondialdehid  dan  Ju mlah  Makro fag Jaringan Paru Tikus yang Terpapar Asap Rokok,” Jurnal  Ilmiah  Medicame nto , 6(1). Available at: https://doi.org/10.36733/medica mento.v
6i1.714.
Jacob,  M.H.V.M. et  al. (2010)  “Age-related effects  of  DH EA  on  peripheral  markers of  oxidative  stress,” Cell  Biochemistry and Function , 28(1), pp. 52–57. Available at: https://doi.org/10.1002/cbf.1619 .
Joshi,  B. et  al. (2020)  “Effect  of  Cigarette
Smoking on Selected Antioxidant Enzy mes and Oxidative Stress Biomarkers,” JOU RN AL  O F  CLINIC AL AN D DIAGN OS TIC RES EARC H [Preprint]. Available at: https://doi.org/10.7860/jcdr/202 0/45948.
14138.
Kiersztan, A. et al. (2021)  “DHEA- pretreatment  attenuates  oxidative  stress in  kidney-cortex  and  liver  of  diabetic rabbits  and  delays  development  of  the

## Jurnal Kesehatan
Author(s) : Nila Ridhayani, Arya di Arsya d, Yulia Yusrini Djabir
disease,” Biochimie ,  185,  pp.  135–14 5. Available at: https://doi.org/10.1016/j.biochi.2021.03. 010.
Liu, C. et al. (2017) “Oral nicotine aggravates endothelial  dysfunction  and  vascular inflammation  in  diet-induced  obese  rats:
Role of macrophage TNFα,” PLOS O N E , 12(12),  pp.  e0188439-.  Available  at: https://doi.org/10.1371/journal.pone.018 8439.
Oakes, J.M. et  al. (2020)  “Effects  of  Chronic Nicotine  Inhalation  on  Systemic  and Pulmonary  Blood  Pressure  and  Right Ventricular  Remodeling  in  Mice,”
Hypertension  (Dallas,  Tex. :  1979 ) , 75(5),  p.  1305 —1314.  Available  at: https://doi.org/10.1161/hypertensionaha. 119.14608.
Prakash, C. et al. (2019) “Dehydroepiandrosterone alleviates oxidative  stress  and  apoptosis  in  iron - induced  epilepsy  via  activation  of
Nrf2/AR E signal pathway,”
Brain Research  Bulletin ,  153,  pp.  181–19 0. Available at: https://doi.org/10.1016/j.brainresbull.20 19.08.019.
Savineau,  J.-P.,  Marthan,  R.  and  Dumas  d.  l. R.,  E.  (2013)  “Role  of  DHEA  in cardiovascular  diseases,” Biochemical Phar macology ,  85(6),  pp.  718–72 6. Available at: https://doi.org/https://doi.org/10.1016/j.b cp.2012.12.004.
Schweitzer,  K.S. et  al. (2015)  “En dothelial disruptive  proinfla mmatory  effects  of nicotine
and e-cigarette vapor exposures,” Am J  Physiol  Lung  Cell  Mol Physiol ,  309,  pp.  175– 187.  Available  at: https://doi.org/10.1152/ajplung.00411.2
014.-The.
Tang,  J.,  Chen,  L.R.  and  Chen,  K.H.  (2022)
“The Utilization of Dehydroepiandrosterone  as  a  Sexual Hormone  Precursor  in  Pre menopausal and Postmenopausal Wo men: An Overview,” Phar maceuticals , 15(1). Available at:
https://doi.org/10.3390/ph 15010 046.
Tawa,  M. et  al. (2020)  “Impact  of  cigarette smoking  on  nitric  oxide-sensitive  and nitric oxide-insensitive soluble guanylate cyclase-mediated vascular tone regulation,” Hypertension Research ,
43(3), pp. 178–18 5. Available at: https://doi.org/10.1038/s4144 0 -019 - 0363-y.
Zhu,  H.-Y.,  Ho ng,  F.-F.  and  Yang,  S.-L.
(2021)  “The  Roles  of  Nitric  Oxide Synthase/Nitric  Oxide  Pathway  in  the
Pathology  of  Vascular  De mentia  and Related Therapeutic Approaches,” International journal of molecular sciences ,  22(9),  p.  4540.  Available  at: https://doi.org/10.3390/ijms220945 40.