## GC-MS ANALYSIS OF METHANOLIC AND N-HEXANE EXTRACTS FROM BUTTERFLY
PEA FLOWERS (Clitoria ternatea L.)

## ANALISIS GC-MS EKSTRAK METANOL DAN N-HEKSAN DARI BUNGA TELANG
( Clitoria ternatea L.)
Nurul Qalbiyyah Ma’ruf 1)* , Irma Antasionasti 1) , Fatimawali 1) , Trina Tallei 2)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115
2) Program Studi Biologi FMIPA UNSRAT Manado, 95115 *nurulmaruf07@gmail.com

## ABSTRACT
The butterfly pea flower (Clitoria ternatea L.) is a flower can grow as an ornamental plant or a wild  plant with  a  single  purple  petal.  This  study  aims  to  analyze  the  phytochemical  compounds  from  butterfly  pea flower.  The  method  used  is  the  extraction  of  dried  powder  of  butterfly  pea  flowers  using  methanol  and  n- hexane  solvent  then  analyzed  using  GC-MS.  The  analysis  showed  that  there  were  48  possible  compounds detected in the methanol extract and 18 possible compounds  detected in the n-hexane extract of butterfly pea flower. The compound from the methanol extract which had the highest peak were  d-Mannose, d-Glycero-d ido-heptose,  and  Galacto-heptulose.  While  the  compounds  from  the  n-hexane  extract  that  had  the  highest peak  were  Longipinocarvone,  Acetic  acid,  3-hydroxy-6-isopropenyl-4,8a-dimethyl-1,2,3,5,6,7,8,8a- octahydronaphthalen-2 -yl ester, and 10-12-Pentacosadiynoic acid.

## Keywords
: Clitoria ternatea L, butterfly pea flower, GC-MS

## ABSTRAK
Bunga  Telang  ( Clitoria  ternatea L.)  merupakan  bunga  yang  dapat  tumbuh  sebagai  tanaman  hias  maupun tanaman  liar  dengan  kelopak  tunggal  berwarna  ungu.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  menganalisis  senyawa fitokimia  dari  bunga  Telang.  Metode  yang  digunakan  yaitu  ekstraksi  serbuk  kering  bunga  Telang menggunakan  pelarut  metanol  dan  n-heksan  kemudian  dianalisis  menggunakan GC-MS .  Hasil  analisis menunjukkan  bahwa  terdapat  48  kemungkinan  senyawa  yang  terdeteksi  dalam  ekstrak  metanol  dan  18 kemungkinan senyawa yang terdeteksi dalam ekstrak n-heksan bunga Telang. Senyawa dari ekstrak metanol yang  memiliki  puncak  tertinggi  yaitu d-Mannose , d-Glycero-d  ido-  heptose ,  dan Galacto-heptulose . Sedangkan  senyawa  dari  ekstrak  n-heksan  yang  memiliki  puncak  tertinggi  yaitu Longipinocarvone , Acetic acid,  3-hydroxy-6-isopropenyl-4,8a-dimethyl-1,2,3,5,6,7,8,8a-octahydronaphthalen-2-yl  ester ,  dan 10-12- Pentacosadiynoic acid .
Kata kunci : Clitoria ternatea L, kembang Telang, GC-MS

## PENDAHULUAN
Bunga  Telang  ( Clitoria  ternatea L.) merupakan bunga majemuk, terbentuk pada ketiak daun,  memiliki  tangkai  silindri,  panjangnya kurang lebih 1,5 cm, memiliki kelopak berbentuk corong,  mahkota  berbentuk  kupu-kupu  dan berwarna  biru,  tangkai  benang  sari  berlekatan membentuk  tabung,  kepala  sari  bulat,  tangkai putik  silindris,  dan  kepala  putik  bulat  (Hartono, dkk.  2013).  Pada  bunga  telang  juga  terkandung flobatanin,  karbohidrat,  triterpenoid,  flavanol glikosida, protein, alkaloid, antrakuinon, stigmasit 4-ena-3,6  dion,  minyak  volatil  dan  steroid. Komposisi  asam  lemak  dalam  bunga  telang meliputi asam palmitat, stearat, oleat lonoleat, dan linolenat  (Budiasih,  2017).  Hasil  penelitian Chayaratanasin  (2015),  menunjukkan  kandungan fenolat  total,  flavonoid  dan  antosianin  dalam bunga  telang  sebesar  53  ±  0,34  mg  asam  galat setara/g  ekstrak  kering,  11,2  ±  0,33  mg  katekin setara/g  ekstrak  kering,  dan  1,46  ±  0,04  mg  yang setara sianidin-3-glukosida/g ekstrak kering.
Gass Chromatography and Mass Spectroscopy ( GC-MS ) merupakan teknik analisis yang  menggunakan  dua  metode  analisis  yaitu kromatografi gas dan spektrometri massa. Paduan keduanya  dapat  menghasilkan  data  yang  lebih akurat  dalam  pengidentifikasian  senyawa  yang dilengakapi dengan struktur molekulnya (Rubiyanto, 2017).
Penelitian ini bertujuan untuk menganalisis  senyawa  fitokimia  dari  ekstrak bunga  Telang  yang  dilarutkan  dalam  pelarut metanol  dan  n-heksan  menggunakan  metode GC- MS .  Pelarut  yang  digunakan  dalam  proses ekstraksi sangat menentukan terhadap komponen- komponen fitokimia yang terekstrak. Penggunaan pelarut  metanol  dan  n-heksan  didasarkan  tingkat kepolarannya dari paling polar dan non polar.

## METODOLOGI PENELITIAN Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian dilakukan di Universitas Gadjah  Mada  Yogyakarta  untuk  uji GC-MS dan Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas  Sam  Ratulangi  Manado  untuk  proses analisis  data  hasil  uji GC-MS selama  bulan Oktober 2020 hingga Januari 2021.

## Alat dan Bahan Alat
Blender,  alumunium  foil,  alat-alat gelas, wadah, ayakan mess 100, oven, batang pengaduk,  kromatografi  gas  dan  spektrometri
massa. Perangkat keras laptop Lenovo-Ideapad 3i dengan  spesifikasi  Intel®  Core  I3  Gen10, CPU(@1,2GHz TurboBoost up to 3,5GHz), RAM ( Random Access Memory ) 4 gigabyte dan Garphic Card (Intel UHD Graphics G1). Laptop terhubung dengan internet.

## Bahan
Bahan-bahan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  antara  lain  bunga  Telang  ( Clitoria ternatea L.),  pelarut  metanol  dan  pelarut  n- heksan.

## Prosedur
Sampel  yang  digunakan  yaitu  bunga Telang  yang  diperoleh  dari  daerah  Jawa  Barat. Bunga  tersebut  kemudian  dibersihkan  dari pengotor dan dicuci di bawah air mengalir sampai bersih.  Setelah  itu  sampel  dikeringkan  dengan cara  di  oven  dengan  suhu  40°C.  Selanjutnya sampel  yang  telah  kering  dihaluskan  sampai menjadi serbuk. Serbuk kemudian diayak menggunakan ayakan mesh 100 sehingga didapatkan serbuk halus dan homogen. Pembuatan  ekstrak  Bunga  Telang  menggunakan metode  perendaman  atau  yang  lebih  dikenal dengan maserasi, kemudian dimasukkan ke dalam micro  tube ,  lalu  di- vortex dan  disentrifugasi. Supernatan  yang  terbentuk  digunakan  untuk analisis GC-MS .  Waktu  diatur  selama  60  menit dengan  suhu  injektor  260°C,  detektor  250°,  dan kolom  325°C  .  Gas  helium  digunakan  sebagai pembawa  laju  aliran  kosntan  1  ml/menit.  Proses identifikasi menggunakan alat GC-MS mengahasilkan  daftar  senyawa  yang  di  dalamnya terdapat campuran gas dan berat molekul masing- masing  senyawa  yang  disajikan  dalam  bentuk kromatogram.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Analisis GC-MS
Kromatografi gas dan spektrometri massa menunjukkan  kromatogram  dari  ekstrak  metanol dan  n-heksan  bunga  Telang  ( Gambar  1  dan  2 ). Penggunaan  kromatografi  gas  dipadukan  dengan spektrometri  massa  merupakan  instrumen  yang digunakan  untuk  pemisahan  dan  identifikasi. Kromatografi  gas  mampu  membaca  senyawa dengan  konsentrasi  terendah,  sehingga  metabolit sekunder  dalam  tanaman  dapat  teridentifikasi dengan  hasil  berupa  kromatogram  dan  spektrum massa.  (Al-Rubaye et  al. ,  2017).  Hasil  analisis menunjukkan  bahwa  terdapat  48  kemungkinan komponen senyawa yang berhasil diekstraksi dari
Gambar 2. Hasil Kromatogram GC-MS dari Ekstrak N-Heksan Bunga Telang
Gambar 1. Hasil Kromatogram GC-MS dari Ekstrak Metanol Bunga Telang
pelarut  metanol  dan  18  kemungkinan  komponen senyawa  dari  ekstrak  n-heksan  bunga  Telang dengan Similarity  Index (SI)  berbeda  ( Tabel  1 dan 2 ).
Tabel  1  dan  2 menunjukkan  komponen senyawa  terbanyak  bunga  Telang  dalam  ekstrak metanol  terletak  pada peak 7  dengan  presentase
kadar  ( retention  area )  yaitu  75.41%.  Ketiga senyawa  tersebut  adalah d-Mannose , d-Glycero-d ido-  heptose ,  dan Galacto-heptulose .  Sedangkan, untuk  ekstrak  n-heksan  bunga  Telang  memiliki komponen  senyawa  terbanyak  pada peak 4 dengan presentase 34.14%.
Tabel 1. Senyawa yang diidentifikasi menggunakan analisis GC-MS dari dari ekstrak metanol bunga Telang
Pe ak RT Nama senyawa #Hit1 Nama senyawa #Hit2 Nama senyawa #Hit3 Retent ion Area (%) 1 4.79 1,3,5-Pentanetriol, 3- methyl- 1-Nitro-2 acetamido-1,2- dideoxy-d- mannitol Mannosami ne (karbohidrat ) 1.22 2 4.93 Acetic acid, 2,2'[oxybis(2,1eth anediyloxy)]bis- Tetraacetyl-d-xylonic nitrile l-Gala-l-ido- octose 1.00 3 6.02 1-Nitro-2 acetamido-1,2- dideoxy-d- mannitol Tetraacetyl-d-xylonic nitrile d-Glycero-d-ido- heptose 0.66
4 8.25 DL-Arabinose Desulphosinigrin a-D Galactopyranose, 2 (acetylamin)-2- deoxy- 1.23 5 8.76 1-Nitro-2-acetamido- 1,2-dideoxy-d-mannitol Isosorbide Dinitrate Chlorozotocin 0.90 6 20.04 d-Gala-l-ido octonic amide 2-Myristynoyl pantetheine l-Gala-l-ido octonic lactone 1.28 7 22.27 d-Mannose d-Glycero-d ido- heptose Galacto- heptulose 75.41 8 24.62 l-Gala-l-ido-octose Pterin-6 carboxylic acid Tetraacetyl-d- xylonic nitrile 1.04 9 26.91 d-Gala-l-ido-octonic amide [1,1'-Bicyclopropyl]- 2-octanoic acid, 2'- hexyl-, methyl ester l-Gala-l-ido- octose 0.70 10 28.36 Acetic acid, 3-hydroxy- 6-isopropenyl-4,8a- dimethyl- 1,2,3,5,6,7,8,8a- octahydronaphthalen-2- yl ester 12,15-Octadecadiynoic acid, methyl ester Ambrosin 5.21 11 30.22 Desulphosinigrin d-Gala-l-ido-octonic amide 2-Myristynoyl pantetheine 0.80 12 31.84 Hexadecanoic acid, methyl ester Pentadecanoic acid, 14- methyl-, methyl ester Cyclopropanebuta noic acid, 2-[[2- [[2-[(2- pentylcyclopropyl) methyl]cyclopropy l]methyl]cyclopro pyl]methyl]-, methyl ester 3.70 13 32.68 Desulphosinigrin [1,1'-Bicyclopropyl]-2- octanoic acid, 2'-hexyl-, methyl ester Ethyl iso- allocholate 1.57 14 35.14 10-Octadecenoic acid, methyl ester 11-Octadecenoic acid, methyl ester 16-Octadecenoic acid, methyl ester 3.01
15 35.61 Heptadecanoic acid, 16- methyl-, methyl ester Cyclopropanebutanoic acid, 2-[[2-[[2-[(2- pentylcyclopropyl)methy l]cyclopropyl]methyl]cy clopropyl]methyl]-, methyl ester Cyclopropanedod ecanoic acid, 2- octyl-, methyl ester 1.68 16 39.07 Ethyl iso-allocholate Cyclopropanedodecanoi c acid, 2-octyl-, methyl ester Ergosta-5,22- dien-3-ol, acetate, (3ß,22E)- 0.65
Tabel 2. Senyawa yang diidentifikasi menggunakan analisis GC-MS dari dari ekstrak n-heksan bunga Telang
Pe ak RT Nama senyawa #Hit1 Nama senyawa #Hit2 Nama senyawa #Hit3 Retent ion Area (%) 1 4.01 2-Ethyl-oxetane 1,6-Anhydro-2,4- dideoxy-ß-D-ribo- hexopyranose 1- Hexanamin e, 3,5,5- trimethyl- 9.07 2 22.27 Butyl 6,9,12,15- octadecatetraeno ate Methyl stearidonate 1-Hexanamine, 3,5,5-trimethyl- 10.47 3 24.62 Caryophyllene oxide Z,Z,Z-4,6,9- Nonadecatriene 10-12- Pentacosadiynoic acid 10.22 4 28.37 Longipinocarvone Acetic acid, 3-hydroxy- 6-isopropenyl-4,8a- dimethyl- 1,2,3,5,6,7,8,8a- octahydronaphthalen-2- yl ester 10-12- Pentacosadiynoic acid 34.14 5 35.18 11-Octadecenoic acid, methyl ester 10-Octadecenoic acid, methyl ester 9-Octadecenoic acid (Z)-, 2- hydroxy-1- (hydroxymethyl)et hyl ester 20.25 6 35.64 Heptadecanoic acid, 9-methyl-, methyl ester Cyclopropanedodecanoi c acid, 2-octyl-, methyl ester Cyclopropanepent anoic acid, 2- undecyl-, methyl ester, trans- 15.84 Ketiga senyawa pada peak 4 yaitu Longipinocarvone , Acetic  acid,  3-hydroxy-6- isopropenyl-4,8a-dimethyl-1,2,3,5,6,7,8,8a- octahydronaphthalen-2-yl ester , dan 10-12- Pentacosadiynoic  acid .  Metabolit  sekunder  yang terkandung  pada  bunga  Telang  berdasarkan  hasil diindentifikasi  dengan GC-MS yaitu  golongan karbohidrat,  terpenoid,  asam  lemak,  antosianin dan flavonoid.
Menurut  penelitian  Ezzudin  dan  Rabeta (2018)  senyawa  utama  pada  bunga  Telang  yaitu
flavonoid, antosianin, alkaloid, tertanins, saponin, tanin,  taraxerol,  dan  taraxerone.  Menurut  (Al- Sanafi, 2016) bunga Telang mengandung senyawa tanin,  saponin,  triterpenoid,  flavonoid,  alkaloid, fenol,  flavanol  glikosida,  antrakuinon,  antosianin, minyak  esensial,  protein  dan  karbahidrat  yang memiliki manfaat untuk kesehatan tubuh.
Berdasarkan  tinjauan  fiokimia,  bunga Telang  dapat  bermanfaat  untuk  kesehatan  tubuh karena  mengandung  bahan  aktif  yang  memiliki potensi  farmakologi.  Potensi  farmakologi  bunga
Telang  sebagai  antioksidan,  antibakteri,  anti inflamasi,  analgesik,  antikanker,  antihistamin, imunomodulator dan potensi yang berperan dalam susunan saraf pusat (Budiasih, 2017).

## KESIMPULAN
Hasil analisis GC-MS terdapat  48 komponen senyawa yang berhasil di ekstraksi dari pelarut  metanol  dan  18  komponen  senyawa  dari ekstrak  n-heksan  bunga Telang  ( Clitoria ternatea L.)  yang  memiliki Similarity  Index (SI)  yang berbeda.  Metabolit  sekunder  yang  terkandung didalamnya  yaitu  karbohidrat,  terpenoid,  asam lemak, dan flavonoid.

## SARAN
Penelitian ini merupakan hasil identifikasi  senyawa  dengan  metode  analisis GC-MS , sehingga perlu dilakukan uji in vitro dan in  vivo untuk  memperjelas  aktivitas senyawa-senyawa tersebut.

## DAFTAR PUSTAKA
Al-Rubaye,  Abeer  Fauzi,  Imad  Hadi  Hameed2  , Mohanad Jawad Kadhim. A Review: Uses
of Gas
Chromatography-Mass Spectrometry  (GC-MS)  Technique  for
Analysis of Bioactive Natural Compounds of  Some  Plants.  2017. International Journal of Toxicological and Pharmacological  Research 2017;  9(1); 81-85. University of Babylon: Iraq. Budiasih, K.S. 2017.
Kajian Potensi
Farmakologis  Bunga  Telang ( Clitoria
ternatea ). Yogyakarta: Universitas Negeri Yogyakarta.
Chayaratanasin,  Poramin.,  dkk.  2015.  Inhibitory Effect  Of  Clitoria  Ternatea  Flower  Petal Extract  On  Fructose-Induced  Protein Glycation, And Oxidation-Dependent Damages  To  Albumin  In  Vitro. BMC Complementary and Alternative Medicine .  15:27.  Research  Group  of Herbal  Medicine  for  Prevention  and
Therapeutic of Metabolic Diseases. Chulalongkorn University: Bangkok Thailand.
Hartono,  M.A.,  dkk.  2013.  Pemanfaatan  Ekstrak Bunga  Telang  ( Clitoria  ternatea,  L .) sebagai Pewarna Alami Es Lilin. [Skripsi]. Fakultas Teknobiologi.
Universitas Atma Jaya: Yogyakarta. 1-49.
Rubiyanto,  D.  2017. Metode  Kromatografi .  CV Budi Utama: Yogyakarta.
Al    Sanafi,    A.E.  2016.    Pharmacologial importance    of  Clitoria    ternatea .  IOSR Journal  of Pharmacy . 6(3), 57-67.
Ezzudin,  Muhammad  dan  Rabeta,  M.  S.  2018.  A potential of Telang tree ( Clitoria ternatea ) in human health. Food Research Journal .  Minden,  Penang:  Universiti
Sains Malaysia .