## PENDAHULUAN
Di  Indonesia  pada  umumnya,  pengendalian hama masih banyak menggunakan insektisida kimia yang dilakukan secara intensif, yang dapat meng- akibatkan berbagai dampak negatif, terutama ter- bunuhnya musuh alami dan akumulasi residu racun. Wereng  batang  cokelat  (WBC)  merupakan  salah
satu hama utama padi yang berkemampuan repro- duksi cukup tinggi, dengan potensi telur per betina diperkirakan 486 butir dan siklus hidup kurang lebih  25  hari  pada  varietas  IR  64  (Habibi et  al. , 2016).  Pengendalian WBC  oleh  petani  selalu  di- lakukan menggunakan insektisida kimia dan seiring dengan penggunaannya terjadi pertambahan dosis serta  frekuensi  yang  memengaruhi  terjadinya

## Research Article
Keragaan Sumber Kitin untuk Mempertahankan Virulensi Beauveria bassiana (Bals.), Jamur Pengendali Wereng Batang Cokelat ( Nilaparvata lugens Stal.)
Performance of Chitin Sources to Enhance Beauveria Bassiana (Bals.) Virulence as Rice Brown Planthopper Fungal Control
Nova Laili Wisuda 1) * & Subur Sedjati 1 )
1) Program Studi Agroteknologi, Fakultas Pertanian Universitas Muria Kudus Kampus Gondangmanis PO. BOX 53 Bae, Kudus, Jawa Tengah 59352
*Penulis untuk korespondensi. E-mail: nova.laili@umk.ac.id

## ABSTRACT
Beauvaria bassiana is an entomopathogenic insect that effectively controls brown planthopper (BPH), but will decrease it virulences if  nutrients containing chitin and protein is not added. The aim of this research is to find the best method of B. bassiana propagation with the addition of shrimp and cricket flour, both  are chitin sources. Isolates were cultured with Potato Dextrose Agar (PDA) medium and continued with  rice medium. This research method used non-factorial Completely Randomized Design (CRD) with three treatments consisting of control, addition of shrimp flour and addition of cricket flour per treatment each with six replications. The research parameters consist of percentage of mortality, percentage of conidia rising time and LT50 test. The chitin sources could increases the growth rate from 0.69 cm per day to 1.449 cm per day and increases the spore density by 4.8 × 10 6 CFU (colony forming unit) up to 8.2 × 10 6 CFU. Chitin also affects the virulence of B. bassiana in BPH where it can increase the percentage of death starting from 3% until 10% and made lethal-time of BPH faster from 0.25 to 0.45 day. There is no significant difference between the sources of chitin between shrimp and cricket flour, so it is more advisable to use cricket flour because it is less expensive.
Keywords: biological control, entomo-pathogen, fungi, insects, pest

## INTISARI
Beauvaria  bassiana merupakan  serangga  entomopatogen  yang  efektif  mengendalikan  wereng  batang  cokelat (WBC), namun akan mengalami penurunan virulensi bila tidak diberikan nutrisi yang mengandung khitin dan protein. Penelitian ini bertujuan menemukan metode terbaik perbanyakan B. bassiana yang dilakukan dengan penambahan tepung ebi dan penambahan tepung jangkrik yang merupakan sumber kitin. Isolat dibiakkan dengan medium perbanyakan Potato Dextrose Agar (PDA) dan diteruskan hingga perbanyakan beras. Metode penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) non-faktorial dengan 4 perlakuan dan 6 ulangan yang terdiri atas kontrol, tanpa tambahan kitin, penambahan tepung ebi dan penambahan tepung jangkrik. Parameter penelitian terdiri atas persentase mortalitas, persentase waktu munculnya konidia dan uji LT50. Pemberian sumber kitin meningkatkan kecepatan pertumbuhan hingga 0,69−1,49 cm per hari dan meningkatkan kerapatan spora berkisar 4,8×10 6 −8,2×10 6 CFU ( colony forming unit ). Kitin juga berpengaruh terhadap virulensi B. bassiana pada WBC dimana mampu meningkatkan persentase kematian 3−10% dan waktu paruh kematian WBC 0,25−0,45 hari lebih cepat. Tidak ada perbedaan yang berarti antara sumber khitin dari tepung jangkrik dan tepung ebi sehingga lebih disarankan untuk menggunakan tepung jangkrik karena lebih murah dan mudah didapat.
Kata kunci: agensia hayati, entomopatogen, hama, jamur, serangga
Diterima 19 September 2017; diterima untuk diterbitkan 30 Juli 2018
resistensi dan resurjensi. Hasil penelitian Ratna et al. (2010) menunjukkan, aplikasi insektisida pada WBC mengakibatkan peningkatan jumlah keturunan berikutnya sekitar 222 nimfa dibandingkan tanpa insektisida  yang  jumlah  keturunan  hanya  sekitar 181 nimfa. Sementara itu pada aplikasi deltametrin dengan konsentrasi yang sama (50 ppm) diperoleh hasil yang berbeda, yakni pada frekuensi 1 kali dengan jumlah keturunan 110 nimfa, sedangkan pada frekuensi 2 kali memiliki jumlah keturunan 235 nimfa.
Beauveria  bassiana (Bals.)  merupakan  jamur entomopatogen yaitu jamur yang dapat menimbul- kan penyakit pada serangga sehingga sering diguna- kan sebagai agensia biologi dalam bentuk ragi untuk pengendali beberapa serangga hama (Samson et al. , 1988), jamur ini memiliki kemampuan menyebab- kan kematian 78,14% pada ulat kubis dengan LT50 2,67  hari  (Suharto,  2004).  Jamur  entomopatogen cukup efektif diaplikasikan pada berbagai jenis wereng karena kemudahan produksi massal, penyimpanan, virulensi, dan aplikasi serta selektif hanya pada hama sasaran (Toledo et al. , 2010).
Virulensi adalah indikator penting untuk meng- ukur potensi efikasi jamur terhadap hama dan biasa- nya dilakukan bioassay skala laboratorium. Jamur entomopatogen aktif melakukan penetrasi melalui kutikula serangga dan melepaskan enzim kutikula, menghidrolisis secara ekstraseluler dalam dekom- posisi  protein,  kitin,  dan  lipid,  yang  merupakan komponen utama dari kutikula (Samson et al. , 1988). Penambahan kitin bisa menjadi penentu dari virulensi dari B. bassiana , dalam hal ini biasa ditambahkan dengan ekstrak kitin pekat yang di Indonesia cukup sulit didapatkan dan mahal. Alternatif lain dapat di- gunakan pengganti dengan ekstrak dari Artropoda seperti udang, jangkrik, dan belalang. Pada penelitian Herlinda et  al. (2012)  media Glucose Yeast  Agar (GYA) ditambahkan dengan tepung jangkrik dengan hama  sasaran  kutu  pepaya.  Pada  penelitian  ini dibandingkan keefektifan antara tepung ebi dan tepung jangkrik pada media Potato Dextrose Agar (PDA) karena hal ini dapat berpengaruh terhadap metode yang tepat untuk preparasi B. bassiana sebagai bio-insektisida khususnya pada pengendalian WBC.

## BAHAN DAN METODE

## Rancangan Penelitian
Penelitian dilakukan pada bulan Juni−Oktober 2016 di laboratorium Agronomi dan laboratorium
Proteksi, Fakultas Pertanian Universitas Muria Kudus (UMK)  pada  ketinggian  17  mdpl.  Penelitian  ini menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL) satu faktor dengan empat perlakuan:
Vol. 22 No. 2                                                               Jurnal Perlindungan Tanaman Indonesia 144
a.  Kontrol atau tanpa perlakuan Beauveria bassiana
b.  Tanpa tambahan sumber kitin pada media
(PDA dan perbanyakan beras)
c.  Penambahan tepung ebi pada media
(2% pada PDA dan perbanyakan beras)
d. Penambahan tepung jangkrik pada media (2% pada PDA dan perbanyakan beras)
Masing-masing perlakuan diulang sebanyak 6 kali, data hasil pengamatan dianalisis sidik ragam dan apabila terjadi beda nyata akan dilakukan uji lanjut  dengan  LSD  5%  menggunakan  Microsoft Excel 2016.

## Perbanyakan Wereng Batang Cokelat
Wereng batang cokelat yang digunakan dibiak- kan di Fakultas Pertanian Universitas Muria Kudus sejak 2015 dipelihara di dalam stoples (dia-meter 30 cm) yang didalamnya telah berisi padi yang beru- mur 1 minggu untuk pakan dan tempat ber-kem- bangbiak. Setelah  bertelur  dan  menetas,  nimfa selanjutnya  dipindah  ke  tempat  yang  baru  dan meng-hasilkan F2 dan seterusnya.
Pembuatan Suspensi Beauveria bassiana
Pembuatan suspensi jamur B. bassiana diawali dengan  memperbanyak  medium  beras.  Beras disterilkan  selama  5  menit  di  dalam autoclave kemudian dilakukan penanaman di dalam laminar air  flow (LAF)  yang  sebelumnya  telah  disterilkan dengan sinar ultra violet selama 15 menit. Kultur murni jamur B. bassiana yang telah disiapkan sebelum- nya dimasukkan ke dalam medium beras yang di- sediakan dengan menggunakan jarum ose. Biakan ditutup rapat dan disimpan di dalam tempat yang aman; ditunggu selama 21 hari sebelum siap diguna- kan.  Larutan  suspensi B.  bassiana dibuat  dengan mengambil dan menimbang 17 g beras yang sudah disiapkan sebelumnya, kemudian dihaluskan dan di- masukkan ke dalam botol serta ditambah 100 ml air suling  steril;  selanjutnya  digojok  menggunakan shaker merek Optima tipe OS-762 selama 24 jam untuk siap diaplikasikan dengan kecepatan 300 osilasi/menit.  Kerapatan  spora  yang  didapatkan dalam suspensi 100 ml B. bassiana adalah 6×10 7 spora/ml, suspensi ini yang digunakan untuk per- lakuan semprot.

## Kerapatan Spora
Spora dihitung menggunakan alat hemocytometer dengan metode penentuan kerapatan spora sebanyak 1 ml. Hemocytometer yang telah ditetesi suspensi B. bassiana dihitung kerapatan sporanya menggu- nakan hand-counter di bawah mikroskop binokuler dengan perbesaran 400 kali. Kerapatan spora di- hitung  dengan  menggunakan  rumus  Gabriel  & Riyatno (1989) cit . Herlinda et al. (2006).
Keterangan:
C = kerapatan spora per ml larutan t = jumlah total spora dalam kotak sampel yang diamati N = jumlah kotak sampel (5 kotak besar × 16 kotak kecil)
0,25 = faktor koreksi penggunaan kotak sampel skala kecil pada hemocytometer

## Uji Patogenitas
Pengujian dimulai dengan mempersiapkan bibit padi yang telah berusia 2 minggu selanjutnya bibit diberi suspensi jamur sesuai perlakuan. Bibit diren- dam menggunakan larutan suspensi B. bassiana selama 10 menit dan kemudian diangkat dan dikering- anginkan selama 10 detik. Bibit yang sudah direndam diletakkan  di  dalam  stoples  yang  telah  modifikasi dengan penyangga akar dan air untuk ruang hidup tanaman. Serangga uji berupa WBC kemudian  di- masukkan ke dalam stoples yang telah berisi bibit padi; selanjutnya dilakukan pengamatan sampai 10 hari setelah larutan suspensi diberikan.

## Laju Pertumbuhan Miselium Beauveria bassiana
Kecepatan pertumbuhan miselium (v) didapat- kan  menggunakan  rumus  menurut  Lilly  &  Barnet (1951) cit. Handiyanto et al. (2013):
Wisuda et al. : Keragaaan Sumber Kitin untuk Mempertahankan Virulensi Beauveria bassiana 145
V = (Diameter koloni akhir - Diameter koloni awal)
Rentang jumlah hari C = × 10 6 t n × 0,25 P = × 100 % a a+b

## Mortalitas dan LT50
Persentase  mortalitas WBC  dilakukan  dengan cara menghitung jumlah WBC yang telah mati, dengan menggunakan rumus Prijono (1989) cit. Herlinda et al ., 2006):
Keterangan: P = Persentase mortalitas a = Jumlah WBC yang mati b = Jumlah WBC seluruhnya (yang hidup dan mati) LT 50 diperoleh dari regresi linier dengan persamaan : y= ax+b dimana “y” untuk mortalitas , “x” untuk waktu kematian.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Laju Pertumbuhan Miselium Beauveria bassiana Laju  pertumbuhan  miselium B.  bassiana me- nunjukkan bahwa penambahan kitin berpengaruh pada kecepatan pertambahan panjangnya. Perbedaan signifikan terlihat pada jangkrik dan non kitin, namun demikian tidak ada perbedaan nyata antara non kitin dan  ebi  maupun  dibandingkan  dengan  jangkrik. Laju pertumbuhan secara nyata didominasi oleh pe- nambahan sumber kitin dari jangkrik dimana mem- peroleh kelajuan 1,88 cm per hari dan hasil terendah yaitu pada non kitin dengan kelajuan 0,39 cm per hari. Kemampuan pertumbuhan yang lebih cepat karena tambahan tepung jangkrik disebabkan karena tepung ini banyak mengandung protein dan kadar kitinnya tinggi. Protein merupakan nutrisi yang digunakan jamur untuk perbanyakan sel, pembentukan miselium dan spora, sedangkan kitin merangsang serangga untuk membentuk enzim kitinase yang bersifat sebagai pemecah kutikula.  Menurut  Ummidi  dan Vadlamani (2014), kutikula serangga mengandung fibril kitin dalam matriks protein membentuk ikatan dengan lipid, lilin, jumlah kecil dari fenol dan pigmen yang merupakan ikatan kompleks, yang dalam hal ini kitinase berperan aktif  untuk  memecahnya (Gambar 1).
Afandhi et al. (2012) menyatakan bahwa biakan B. bassiana asal isolat Spodoptera litura memiliki laju pertumbuhan yang lebih cepat yaitu 2,2 mm per hari dibandingkan asal isolat tanah yang berkisar 0,83  mm/hari,  diperkuat  Li et  al. (2014)  jamur Beauveria brongniarti asal isolat Anomala corpulenta memiliki aktivitas kitinase 18,7 U/ml, paling tinggi dibanding Beauveria isolat lain. Aktivitas kitinase juga berbanding lurus dengan laju pertumbuhan koloni dengan B. brongniarti asal isolat A. corpulenta memiliki  hasil  tertinggi  yaitu  pada  umur  15  hari mampu mencapai 3,7 mm per hari (Li et al. , 2014). Laju pertumbuhan sangat berkaitan erat dengan nutrisi fungi yang harus terpenuhi dengan menambahkan
sumber kitin, dalam hal ini tambahan tepung ebi dan jangkrik mampu meningkatkan laju pertumbuhan (Gambar 1).
Kerapatan Spora Beauveria bassiana
Perhitungan spora menunjukkan terjadinya pe- ningkatan jumlah pada perlakuan penambahan sumber kitin, hasil tertinggi diperoleh sumber kitin dari ebi yaitu 5,52×10 7 colony forming unit (CFU) dan hasil terendah pada non kitin dengan jumlah 4,70×10 7 CFU. Dari semua perlakuan tidak terjadi perbedaan nyata pada analisa ANOVA dan uji lanjut LSD taraf 5%. Kerapatan spora tertinggi pada perlakuan dengan penambahan kitin dengan menambahkan tepung ebi dan  disusul  perlakuan  tambahan  tepung  jangkrik. Tidak  ada  beda  nyata  pada  perlakuan  nonkitin, namun hal ini mengindikasikan bahwa tambahan kitin memberikan nutrisi yang lebih baik pada biakan B. bassiana . Senada dengan penelitian Li et al. (2014) kerapatan spora yang tertinggi yaitu 1,39×10 8 CFU pada biakan entomo-patogen B. brongniarti dengan aktivitas enzim kitinase tertinggi yang diperoleh dari substrat  kitin  kumbang  Anomala.  Afandhi et  al . (2012) menyatakan bahwa biakan B. bassiana asal isolat S. litura yang merupakan serangga hama me- miliki koloni dengan berbentuk cekung. Bentuk ini adalah  indikasi  dari  isolat  yang  virulen,  berbeda dengan isolat asal tanah yang memiliki bentuk cem- bung yang mengindikasikan sifat tidak virulen. Nuryanti et al. (2012) melaporkan rata-rata jumlah spora B. bassiana berkisar antara 2,38×10 8 CFU sampai dengan 2,61×10 8 CFU dengan hasil terbaik pada tepung belalang. Beauveria bassiana akan lebih
virulen bila mendapatkan nutrisi kaya  akan  kitin, baik  itu  diperoleh  secara  alami  maupun  buatan (Gambar 2).

## Mortalitas Wereng Batang Cokelat
Mortalitas pada hari ke-3 menunjukkan bahwa pemberian kitin menyebabkan peningkatan kematian yang  signifikan  dibanding  tanpa  tambahan,  hasil tertinggi pada tepung jangkrik (38%) dengan tidak berbeda  nyata  dengan  tepung  ebi  (32%).  Kedua tambahan sumber kitin ini berbeda nyata dengan hasil pada suspensi jamur yang tidak diberi tambahan kitin dengan mortalitas sebesar 19%. Kontrol mem- peroleh  hasil  yang  terendah  (3,4%)  dan  berbeda nyata dengan semua perlakuan dengan aplikasi B. bassiana . Hari ke-4 perlakuan B. bassiana tambahan tepung ebi memiliki mortalitas tertinggi (72%) dan tidak berbeda nyata dengan sumber kitin dari tepung jangkrik  (66%),  namun  terjadi  beda  nyata  di- bandingkan dengan aplikasi B. bassiana tanpa tam- bahan kitin (59%). Hari ke-5 perlakuan B. bassiana dengan  tambahan  ebi  masih    menunjukkan  hasil tertinggi  kematian  WBC  (91%)  dan  masih  tidak berbeda  nyata  dengan  tambahan  tepung  jangkrik (85%), serta memiliki pola yang sama dengan hari sebelumnya yaitu berbeda nyata dengan perlakuan B. bassiana tanpa tambahan kitin (82%). Kontrol pada hari ke-4 dan ke-5 berbeda nyata dengan semua perlakuan lain dengan kematian WBC kurang dari 5% (Tabel 1).
Efek ramuan B. bassiana pada WBC mengakibat- kan kehilangan nafsu makan pada 2 hari pertama, yang  dalam  pengamatan  gerakannya  cenderung pasif dibandingkan kontrol. Kematian terjadi pada hari ke- 3, namun munculnya miselium terjadi pada satu hari setelah kematian (Gambar 3), dan karena
Gambar  1.  Laju  Pertumbuhan  miselium  isolat  murni Beauveria bassiana dibiakkan pada media Potato Dextrose Agar (PDA)
Non kitin Non kitin Ebi Jangkrik Laju p er tu mb u h an me d iu m (c m/ h ar i) Beauveria bassiana pada media PDA dengan tambahan Angka yang diikuti huruf yang sama tidak berbeda nyata pada uji LSD taraf 5 %
Gambar 2. Kerapatan spora Beauveria bassiana dibiakkan pada media beras umur 25 hari Non kitin Ebi Jangkrik Ju ml ah s p or a (× 10 7 C F U ) u mu r 25 h ar i p ad a me d ia P D A Beauveria bassiana pada media PDA dengan tambahan
*Tidak menunjukkan beda nyata pada ANOVA dan uji lanjut LSD taraf 5 %
tubuh WBC  cukup  kecil  serta  cairan  tubuh  yang sedikit, perkecambahan miselium hanya bertahan sampai hari ke-3 setelah kematian. Aplikasi B. bassiana dengan tambahan khitin menunjukkan pengaruhnya terhadap  tren  kenaikan  kematian  pada  hari  ke-3. Semua perlakuan B. bassiana secara signifikan ber- beda dengan kontrol. Mortalitas pada hari ke-3 me- nunjukkan  pemberian  kitin  mampu meningkatkan kematian yang signifikan dibanding tanpa tambahan. Secara umum perlakuan B. bassiana dengan tambah- an tepung ebi memberikan hasil kematian tertinggi WBC dan diikuti oleh perlakuan tambahan tepung jangkrik. Walaupun demikian, meski perlakuan B. bassiana dengan tambahan tepung ebi berbeda nyata dengan perlakuan tanpa kitin, pada perlakuan jangkrik terjadi kematian yang lebih tinggi namun tidak me- nunjukkan perbedaan signifikan dengan perlakuan tanpa kitin (Gambar 4).
Pemberian tambahan nutrisi mengandung kitin jelas berimplikasi terhadap kemampuan virulensi jamur entomopatogen, dalam hal ini adalah B. bassiana . Peneltian sebelumnya pemberian tepung jangkrik pada biakan Saborroud Dextrose Broth (SDB) dapat
menyebabkan  mortalitas  larva Plutella  xylostella antara 69,47% dan 71,97%, dimana berbeda signi- fikan dengan biakan tanpa tambahan kitin (Herlinda et al ., 2006). Aplikasi B. bassiana dengan substrat jagung giling mampu menyebabkan kematian pada Wereng  Punggung  Putih  (WPP)  hingga  66,67% ketika pada biakan tersebut diberi tambahan nutrisi berupa  kitin  yang  berasal  dari  Ekstrak  Kompos Kulit Udang (EKKU) sehingga dapat meningkatkan virulensi jamur B. bassiana (Herlinda et al. , 2008). Penelitian selanjutnya oleh Herlinda (2012), masih menggunakan  EKKU  pada  media  biakan  beras dengan bahan pembawa kompos yang mengandung jamur Trichoderma virens , ternyata mampu mem- bunuh 82,86% nimfa pada kutu putih Paracoccus marginatus .
Gambar 3. Wereng batang cokelat (WBC) normal posisi dorsal dan ventral (A), WBC terinfeksi Beauveria bassiana posisi dorsal dan ventral (B)
Tabel 1. Mortalitas wereng batang cokelat (WBC) akibat
perlakuan Beauveria bassiana
Keterangan: Angka yang diikuti huruf yang sama pada kolom yang sama tidak berbeda nyata pada uji LSD taraf 5%.
Perlakuan B. bassiana Mortalitas (%) pada hari ke- 3 4 5 Kontrol 3,4 c 4,4, c 4,8 c Tanpa sumber kitin 19,0 b 59,0 b 82,0 b Tambahan tepung jangkrik 38,0 a 66,0 ab 85,0 ab Tambahan tepung ebi 32,0 a 72,0 a 91,0 a
A B Wisuda et al. : Keragaaan Sumber Kitin untuk Mempertahankan Virulensi Beauveria bassiana 147
Pada kasus lain penambahan sumber kitin pada media beras sebagai media perbanyakan B. bassiana juga  berpengaruh  pada  mortalitas  walang  sangit. Penambahan tepung belalang secara nyata menye- babkan mortalitas tertinggi yaitu 78%, disusul per- lakuan penambahan tepung dedak dengan mortalitas walang sangit mencapai 71% dan penambahan tepung kulit  udang  hanya  sekitar  54%  (Nuryanti et  al. , 2012). Sumber kitin dari Kelas Insecta akan mem- berikan pengaruh yang baik terhadap spora fungi entomopatogen, karena kitinnya memiliki karakter- istik yang sesuai dengan inangnya, dalam penelitian ini antara tepung ebi dan tepung jangkrik tidak ter- jadi beda nyata namun terlihat jelas bahwa tambahan kitin mampu meningkatkan kemampuan virulensi B.  bassiana terhadap  WBC  (Tabel  1).  Tidak  ada perbedaan yang berarti antara sumber kitin dari tepung jangkrik dan tepung ebi sehingga lebih disarankan untuk menggunakan tepung jangkrik karena lebih murah dan lebih mudah didapatkan.

## KESIMPULAN
Penambahan  sumber  kitin  pada  media  per- banyakan PDA maupun beras mampu meningkat- kan laju pertumbuhan, kerapatan spora, dan virulensi Beauveria bassiana. Pemberian sumber kitin mampu meningkatkan laju pertumbuhan hingga 0,69−1,49 cm  per  hari  dan  meningkatkan  kerapatan  spora berkisar 4,8×10 6 −8,2×10 6 CFU, hal ini menunjuk- kan  bahwa  nutrisi  yang  terkandung  pada  tepung jangkrik dan tepung ebi berdampak terhadap per- tumbuhan jamur entomopatogen B. bassiana . Kitin juga berpengaruh terhadap virulensi B. bassiana pada WBC  dimana  mampu  meningkatkan  persentase kematian 3−10% dan waktu paruh kematian WBC 0,25−0,45 hari lebih cepat. Studi tentang komposisi serta  kombinasi  tambahan  perlu  dilakukan  untuk mendapatkan hasil biakan yang baik dan berviru- lensi memadai.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penelitian terlaksana atas dukungan dana dari Lembaga  Penelitian  Universitas  Muria  Kudus. Apresiasi juga penulis tujukan kepada Fakultas Pertanian atas dukungan fasilitas dan kemudahan akses selama penelitian berlangsung.

## DAFTAR PUSTAKA
Afandhi, A., S.R.C. Syamsidi, S.M. Mimbar & B. Wiroatmojo.  2012.  Isolation  and  Phenotypic Characterization  of  Morphology  in  Fungus Beauveria bassiana (Balsamo) Vuillemin Colony Naturally from Leaf Surface, Soil, and Insect as Host in Tomato Plantation. AGRIVITA 34: 303– 310.
Habibi, I., Witjaksono, & A. Wijonarko. 2016. On the Migration Process of Brown Planthopper Fed Using Susceptible and Resistant Rice Varieties. Jurnal  Perlindungan  Tanaman  Indonesia 20: 72–78.
Handiyanto, S., U.S. Hastuti & S. Prabaningtyas. 2013.  Pengaruh  Medium  Air  Cucian  Beras terhadap Kecepatan Pertumbuhan Miselium Biakan  Murni  Jamur  Tiram  Putih,  hlm.  1–6. Dalam S. Kubikazari, H. Rahmawati & A. N. Khalifah (ed.), Seminar Nasional X Pendidikan Biologi 6 Juli 2013. UNS Press, Surakarta.
Herlinda,  S.,  K.A.  Darmawan,  Firmansyah,  T.
Adam,  C.  Irsan,  &  R.  Thalib.  2012.  Bioesai Bioinsektisida Beauveria bassiana dari Sumatera Selatan terhadap Kutu Putih Pepaya, Paracoccus marginatus Williams  &  Granara  De  Willink (Hemiptera: Pseudococcidae). Jurnal Entomologi Indonesia 9: 81–87.
Herlinda,  S.,  Hartono,  &  C.  Irsan.  2008.  Efikasi Bioinsektisida Formulasi Cair Berbahan Aktif Beauveria  bassiana (BALS.)  VUILL.  dan Metarhizium sp., hlm. 1–15. Dalam A. Hayati, A. Yanuarti, T.W. Widowati, H. Agustina, Hersyamsi, F. Pratama, A.N. Triana & Puspitahati (ed.), Seminar Nasional dan Kongres PATPI 14−16
Oktober 2008. PATPI, Palembang.
Herlinda, S., M.D. Utama, & Y. Pujiastuti. 2006.
Kerapatan dan Viabilitas Spora Beauveria bassiana (BALS.) Akibat Subkultur dan Pengayaan Media, serta  Virulensinya  terhadap  Larva Plutella xylostella (Linn.). Jurnal  Hama  dan  Penyakit Tumbuhan Tropika 6: 70–78.
Nuryanti, N.S.P., L. Wibowo, & A. Azis. 2012. Penambahan Beberapa Jenis Bahan Nutrisi pada Media  Perbanyakan  untuk  Meningkatkan Virulensi Beauveria  bassiana terhadap  Hama Walang  Sangit. Jurnal  Hama  dan  Penyakit Tumbuhan Tropika 12: 64–70.
Ratna, Y., Y.A. Trisyono, Witjaksono, & D. Indradewa. 2010.  Pengaruh  Konsentrasi  dan  Frekuensi Aplikasi  Deltametrin  terhadap  Resurjensi Nilaparvata lugens . Jurnal Perlindungan Tanaman Indonesia 16: 6–14.
Samson,  R.A.,  H.C.  Evans  &  J.-P.  Latge.  1988. Atlas of Entomopathogenic Fungi . Springer- Verlag, Berlin. 187 p.
Suharto.  2004.  Patogenisitas  Beberapa  Isolat Beauveria bassiana pada Plutella xylostella . Jurnal Perlindungan Tanaman Indonesia 10: 8–12.
Toledo, A.V., A.M.D.  Lenicov,  &  C.C.L.  Lastra.
2010. Histopathology Caused by the Entomo- pathogenic  Fungi, Beauveria  bassiana and
Metarhizium anisopliae , in the Adult Planthopper,
Peregrinus maidis , a Maize Virus Vector. Journal of Insect Science 10: 1−10.
Ummidi, V.R.S. & P. Vadlamani. 2014. Preparation and Use of Oil Formulations of Beauveria bassiana and Metarhizium anisopliae against Spodoptera litura Larvae. African Journal of Microbiology Research 8: 1638–1644.
Wisuda et al. : Keragaaan Sumber Kitin untuk Mempertahankan Virulensi Beauveria bassiana 149