Induksi pematangan gonad ikan patin siam Pangasianodon hypopthalmus (Sauvage, 1878) jantan dengan pemberian ekstrak cabe jawa Piper retrofractum Vahl. melalui pakan
[Induction on gonadal maturation of male striped catfish Pangasianodon hypopthalmus (Sauvage,
1878) using Javanese long pepper extract Piper retrofractum Vahl. enriched feed]
Yeni Elisdiana 1  , Muhammad Zairin Jr 2 , Dinar Tri Soelistyowati 2 , Widanarni 2
1 Program Studi Ilmu Akuakultur, Sekolah Pascasarjana, Institut Pertanian Bogor
2 Departemen Budidaya Perairan, FPIK-IPB Jl. Agatis, Kampus IPB, Dramaga, Bogor 16680
Diterima: 8 Mei 2015; Disetujui: 1 Desember 2015

## Abstrak
Cabe jawa merupakan salah satu tanaman yang memiliki efek hormonal sebagai afrodisiak. Penelitian ini bertujuan un- tuk mengevaluasi pemberian ekstrak cabe jawa (ECJ) melalui pakan terhadap akselerasi pematangan gonad ikan patin siam jantan. Perlakuan yang diberikan meliputi ECJ dengan dosis 37,5 dan 187,5 mg kg ikan -1 hari -1 , dibandingkan de- ngan 17-α Metiltestosteron (50 µg kg ikan -1 minggu -1 ) dan kontrol selama 8 minggu. Perlakuan ECJ menunjukkan in- deks  kematangan  gonad  lebih  tinggi  dibandingkan  kontrol  sejak  minggu  ke-2  (p<0,05).  Kadar  testosteron darah  pada perlakuan ECJ 187,5 mg kg ikan -1 hari -1 lebih tinggi dibandingkan kontrol (p<0,05). Pada minggu ke-8, sebaran sper- matozoa perlakuan ECJ mencapai 75%, sedangkan sebaran spermatozoa kontrol kurang dari 50%. Kepadatan, volume, dan motilitas sperma perlakuan ECJ dan 17α-metiltestosteron lebih tinggi dibandingkan dengan kontrol (p<0,05) pada minggu  ke-8,  namun  kadar  spermatokrit  menunjukkan  hasil  yang  sama  (p>0,05).  Perlakuan  ECJ  187,5  mg  kg  ikan -1 hari -1 meningkatkan performa reproduksi dan kualitas sperma ikan patin siam jantan.
Kata penting: ekstrak cabe jawa, ikan patin siam, kadar testosteron, kualitas sperma, pematangan gonad

## Abstract
Javanese long pepper is an aphrodisiac plants that have hormonal effects. This study aimed to evaluate the using of Ja- vanese long pepper extract (JLPE) enriched feed to accelerate the gonadal maturation of male striped catfish. The dose 37.5 and 187.5 mg kg body weight -1 day -1 JLPE enriched feed were given on treatments compared to 17-α methyl tes- tosterone (50 µg kg body weight -1 week -1 ) and control. The treatments were given for 8 weeks on male striped catfish fish weighed 250±18.6 g. Gonadosomatic index of JLPE treatment higher than control since the second week (p<0.05), also testosterone levels in 187.5 mg kg body weight -1 day -1 JLPE treatment to control (p<0.05). The spermatozoa dis- persion reached 75% in JPLE treatment higher than control (p<0.05), althought there was not significant difference on spermatocrite level (p> 0.05). Therefore, JLPE treatment at dose 187.5 mg kg body weight -1 day -1 increased the repro- ductive performance and sperm quality of male striped catfish.
Keyword: java long pepper extract, striped catfish, testosterone levels, sperm quality, gonadal maturation

## Pendahuluan
Ikan  patin  siam Pangasianodon  hypo- pthalmus (Sauvage  1878)  merupakan  salah  satu komoditas perikanan Indonesia yang mempunyai nilai  ekonomi  tinggi  karena  dagingnya  yang  di- minati oleh masyarakat. Permintaan ikan patin si- am  di  dalam  negeri  semakin  meningkat  dari  ta- hun  ke  tahun.  Produksi  ikan  patin  siam  secara masal  dapat  dilakukan  dengan  budi  daya  secara intensif  yang  membutuhkan  ketersediaan  benih dalam jumlah yang besar dan berkesinambungan
sehingga dibutuhkan peningkatan populasi induk yang siap digunakan untuk pembenihan yang me- madai. Namun, terdapat kendala yaitu pematang- an  gonad  ikan  patin  yang  relatif  lambat.  Induk jantan yang umumnya digunakan dalam pemijah- an  berumur  2  tahun  dengan  bobot  1,5-2  kg. Pematangan  gonad  ikan  melibatkan  mekanisme hormonal yang dipengaruhi oleh rangsangan dari sinyal lingkungan seperti suhu, musim, intensitas cahaya, dan pasang surut (Schwassmann 1971).
Hormon  yang  berperan  dalam  proses  pe- matangan  gonad  ikan  jantan  antara  lain  hormon
_____________________  Penulis korespondensi Surel: elisdiana.yeni@gmail.com
steroid dan Follicle Stimulating Hormone (FSH).
Hormon  steroid  berfungsi  untuk  merangsang  di- ferensiasi  gonad,  spermatogenesis,  pemijahan, dan tingkah laku seksual. Pematangan gonad jan- tan  tidak  terlepas  dari  peran  hormon  androgen yaitu  hormon  testosteron  (Liley  1969,  Fostier et al. 1983). FSH berfungsi dalam menstimulasi pe- lepasan androgen oleh sel-sel interstitial pada in- dividu  jantan  untuk  mematangkan  sperma  (Hoar 1969).  Hormon  steroid  yang  umum  digunakan merupakan  hormon  steroid  sintetis.  Namun, penggunaan hormon sintetis membutuhkan biaya yang  mahal  dan  tidak  ramah  lingkungan  karena meninggalkan  residu  di  air  dan  di  dasar  kolam (Contreras-Sanchez et al . 2001). Bahan alternatif sebagai  penginduksi  pematangan  gonad  jantan diantaranya berasal dari tanaman yang disebut fi- tosteroid.  Salah  satu  fitosteroid  yang  dapat  di- manfaatkan  untuk  memacu  pematangan  gonad adalah cabe jawa Piper retrofractum Vahl.
Cabe jawa  merupakan salah satu tanaman yang  diketahui  memiliki  efek  stimulan  terhadap sel-sel saraf dan efek hormonal sebagai afrodisi- aka  (Moeloek et  al .  2010).  Secara  umum  kan- dungan kimiawi atau senyawa kimiawi yang ber- peran sebagai afrodisiaka adalah turunan steroid, saponin, alkaloid, tannin, dan senyawa lain  yang dapat  melancarkan  peredaran  darah.  Alkaloid utama  yang  terdapat  di  dalam  buah  cabe  jawa adalah piperin (Isnawati et al .  2002). Disamping piperin,  didalam  cabe  jawa  terkandung  senyawa β-sitosterol  (termasuk  senyawa  sterol).  Sterol merupakan  kolesterol  khas  dari  tumbuhan  yang memiliki  struktur  yang  sama  dengan  kolesterol hewani  dan  dapat  digunakan  sebagai  prekursor hormon steroid (Dean & Boyd 2004). Yurnadi et al . (2006) menyatakan bahwa senyawa sitosterol yang  terkandung  dalam  buah  cabe  jawa  bekerja sebagai  tonik  seksual  pada  sistem  hormonal  ti- kus. Pada dosis yang rendah, diduga senyawa si-
tosterol  dapat  mengaktifkan  poros  hipotalamus- hipofisis-testis  melalui  mekanisme  umpan  balik positif.
Penelitian  terkait  penggunaan  cabe  jawa sebagai bahan afrodisiaka terbatas pada manusia, mencit,  dan  ayam.  Berdasarkan  penelitian  Moe- loek et  al .  (2010),  ekstrak  cabe  jawa  pada  dosis 100 mg  hari -1 dapat bersifat atau bertindak seba- gai  fitofarmaka  androgenik  yakni  dapat  mening- katkan  kadar  testosteron  darah  dan  libido  pada laki-laki  hipogonad.  Penelitian  ekstrak  etanol 70%  buah  cabe  jawa  yang  diteliti  efek  androge- niknya  pada  anak  ayam  jantan,  pada  dosis  3,75 mg  100  gram  bobot  badan -1 mempunyai  respon tidak berbeda nyata dengan  bahan  standar  metil- testosteron (andriol) dosis 500 mg  100 gram  bo- bot badan -1 (Wahjoedi et al . 2004). Pemberian pi- perin  dan  fraksi  tak  larut  heksan  bebas  piperin ekstrak  etanol  buah  cabe  jawa  berpengaruh  sig- nifikan  terhadap  peningkatan  kadar  testosteron darah  pada  tikus  putih  jantan  (Muslichah  2011). Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengevaluasi pemberian  ekstrak  cabe  jawa  melalui  pakan  ter- hadap  akselerasi  pematangan  gonad  ikan  patin siam jantan.

## Bahan dan metode
Penelitian dilakukan pada bulan Mei hing- ga  Juli  2014  bertempat  di Teaching  Farm ,  Budi daya Perairan, FPIK IPB.

## Materi uji
Penelitian  ini  menggunakan  rancangan acak  lengkap.  Ikan  yang  digunakan  pada  peneli- tian  ini  adalah  ikan  patin  siam  jantan  berukuran 250,0±18,6 g (umur ±8 bulan) berjumlah 10 ekor setiap ulangan yang dipelihara pada bak berukur- an 100 x 100 x 50 cm 3 . Perlakuan yang diberikan meliputi  kontrol  negatif  (A),  ekstrak  cabe  jawa (ECJ)  dengan  dosis  37,5  mg  kg  ikan -1 hari -1 (B)
dan 187,5 mg  kg ikan -1 hari -1 (C),  17-α  metiltes- tosteron 50 µg kg ikan -1 minggu -1 sebagai kontrol positif  (D).  Perlakuan  diberikan  melalui  pakan komersial dengan kadar protein 30-33% selama 8 minggu dengan persentase pemberian pakan hari- an  sebesar  2%.  Setiap  perlakuan  diulang  seba- nyak tiga kali.

## Pembuatan ekstrak cabe jawa
Pembuatan ekstrak cabe jawa dilakukan di Laboratorium Balai Penelitian Tanaman Rempah dan Obat (Balitro) Bogor. Cabe jawa  yang digu- nakan  dalam  penelitian  ini  adalah  bagian  buah cabe jawa  matang  yang bewarna  merah  yang di- dapatkan  dari  Kebun  Percobaan  Balitro  Bogor. Pembuatan ekstrak kental cabe jawa dengan me- tode  maserasi  menggunakan  etanol  95%  dengan perbandingan  1:5.  Cabe  jawa  yang  telah  dima- serasi  kemudian  disaring  dengan  kertas  saring dan  dievaporasi  menggunakan  rotavator  untuk memisahkan ekstrak dengan pelarut.

## Pencampuran ekstrak cabe jawa dalam pakan
Pencampuran  ekstrak  cabe  jawa  dengan pakan dilakukan dengan menyemprotkan ekstrak cabe  jawa  yang  telah  dilarutkan  dengan  alkohol 70%  menggunakan  botol  semprot  sesuai  dengan dosis yang ditentukan. Setiap 100 ml larutan eks- trak cabe jawa disemprotkan pada 1 kg pakan se- cara merata, lalu pakan dibiarkan kering udara.

## Pengambilan sampel
Parameter uji yang diukur meliputi indeks kematangan  gonad  (IKG),  kadar  testosteron  da- rah, histologi gonad, kualitas sperma, dan tingkat kelangsungan  hidup  (TKH).  Pada  awal  peneliti- an, dilakukan pengukuran parameter uji pada 10 ekor  ikan  stok.  Selama  pemeliharaan  dilakukan kembali  pengukuran  parameter  uji  setiap  dua minggu sekali meliputi minggu ke-2, ke-4, ke-6,
dan  ke-8.  Pengamatan  tersebut  dilakukan  pada tiga  ekor  ikan  uji  yang  dipilih  secara  acak  pada setiap perlakuan.
Indek kematangan gonad merupakan per- sentase bobot gonad dibandingkan dengan bobot tubuh ikan uji.
Pengukuran  konsentrasi  testosteron  dalam darah  menggunakan  metode Enzyme-linked  Im- munosorbent  Assay (ELISA)  dengan  kit  ber- merek Biomatik. Pengambilan  darah  dilakukan pada bagian pangkal sirip ekor.
Histologi gonad dilakukan dengan metode pewarnaan  Hematoksilin-Eosin  (HE).  Penyajian hasil  pembacaan  histologi  gonad  menggunakan metode penilaian berdasarkan persentase sebaran spermatozoa  (Tabel  1).  Sebaran  spermatozoa  di- hitung  menggunakan  perangkat  lunak  ImageJ versi 1.48.
Pengamatan  kualitas  sperma  meliputi pengukuran  kadar  spermatokrit,  volume,  kepa- datan, pH, dan motilitas sperma.
Penghitungan  kadar  spermatokrit  dilaku- kan  dengan  cara  sampel  cairan  semen  dimasuk- kan  dalam  tabung  mikrohematokrit  sampai  4/5 bagian.  Ujung  tabung  disumbat  dengan  crysto- ceal.  Tabung  hematokrit  disentrifus  selama  5 menit  dengan  kecepatan  8000  rpm.  Kadar  sper- matokrit dihitung dengan rumus sebagai berikut:
Kadar spermatokrit  = x y x 100%
Keterangan:  x  =  padatan  cairan  semen  (cm),  y  =  total cairan semen (cm)
Sperma ikan dikumpulkan dengan metode pengalinan  ikan.  Sperma  yang  terkumpul  dima- sukkan  ke  dalam microtube berskala  untuk mengetahui volume sperma yang dihasilkan. Ke- padatan sperma diamati di bawah mikroskop de- ngan  perbesaran  40  x  10  dengan  menggunakan hemasitometer. Pengamatan dilakukan pada lima lapangan pandang. Kepadatan sperma total dapat dihitung dengan rumus sebagai berikut:
Tabel 1.  Penilaian sebaran spermatozoa pada preparat histologi gonad ikan uji
Nilai Sebaran spermatozoa Keterangan 0 Spermatozoa 0% Belum terbentuk spermatozoa 1 Spermatozoa 0,1-24,9% Spermatozoa sangat sedikit dan jarang 2 Spermatozoa 25,0-49,9% Spermatozoa mulai banyak 3 Spermatozoa 50,0-74,5% Spermatozoa banyak 4 Spermatozoa 75,0-100% Spermatozoa banyak dan rapat
Kepadatan sperma = x .fp . 2,5.10 5
Keterangan:  x  =  rata-rata  jumlah  sperma,  fp  =  faktor pengenceran
pH  sperma  diukur  dengan  pH  indikator dengan  skala  0  hingga  14.  Pengamatan  motilitas sperma  dilakukan  di  bawah  mikroskop  dengan perbesaran 20 x 10. Sperma ikan diletakkan pada gelas obyek dan ditetesi air kemudian diamati la- ma  pergerakan  (motilitas)  sperma  hingga  sper- ma tidak bergerak.
Tingkat  kelangsungan  hidup  merupakan persentase jumlah ikan yang hidup pada akhir pe- nelitian  dibandingkan  dengan  jumlah  ikan  awal penelitian.

## Analisis data
Hasil  pengamatan  IKG,  kadar  tetosteron darah, kualitas sperma, dan TKH dianalisis sidik
ragam pada selang kepercayaan 95% dengan  pe- rangkat lunak SPSS versi 16, sedangkan  penilai- an  histologis  gonad  dianalisis  secara  deskriptif. Jika  hasil  analisis  sidik  ragam  yang  diperoleh terdapat  perbedaan  antarperlakuan  yang  dibe- rikan,  maka  dilanjutkan  dengan  uji  Duncan  de- ngan selang kepercayaan 95%.

## Hasil

## Indeks kematangan gonad (IKG)
Persentase  IKG  meningkat  pada  minggu ke-2  hingga  minggu  ke-8  (Gambar  1).  Hasil  uji statistik  menunjukkan  bahwa  perlakuan  yang  di- berikan  memberikan  pengaruh  yang  nyata  terha- dap  IKG  ikan  uji  sejak  minggu  ke-2  (p<0,05). Nilai IKG tertinggi ditunjukkan pada minggu ke- 8 yaitu 5,4% pada perlakuan C (ECJ 187,5 mg kg ikan -1 hari -1 ).
Gambar 1.  Nilai IKG ikan patin siam yang diberi perlakuan ekstrak cabe jawa pada minggu ke-0 hingga ke-8 (A: kontrol negatif; B: ECJ 37,5 mg kg ikan -1 hari -1 ; C: ECJ 187,5 mg kg ikan -1 hari -1 ; D: kontrol positif (17α-metiltestosteron 50 µg kg ikan -1 minggu -1 )).
a a a a
a
a b b b a
a b b b b a b b b b 0 1 2 3 4 5 6 7 0 2 4 6 8 IKG (%) Minggu ke- E F G
H

## Konsentrasi testosteron darah
Konsentrasi  testosteron  semakin  mening- kat  sejak  minggu  ke-2  hingga  minggu  ke-8 (Gambar  2).  Konsentrasi  testosteron  darah perlakuan C (ECJ 187,5 mg kg ikan -1 hari -1 ) lebih tinggi  daripada  kontrol  negatif  pada  minggu  ke- 2,  4,  6,  dan  8  (p<0,05).  Konsentrasi  testosteron tertinggi  ditunjukkan  pada  pengambilan  sampel minggu ke-8 yaitu 9,55 ng ml -1 pada perlakuan C (ECJ 187,5 mg kg ikan -1 hari -1 ).

## Histologi gonad
Spermatozoa  ikan  uji  pada  semua perlakuan  mulai  terbentuk  pada  minggu  ke-2 perlakuan  (Tabel  2).  Sebaran  spermatozoa tertinggi  ditunjukkan  oleh  perlakuan  17α-metil- testosteron  yang  mencapai  nilai  4  (75-100%) pada  minggu  ke-8,  sedangkan  pada  ikan  yang diberi  perlakuan  ekstrak  cabe  jawa  dosis  rendah maupun tinggi mencapai nilai 3 (50-74,5%), dan pada  kontrol  negatif  mencapai  nilai  2  (25- 49,5%).
Gambar  2.    Konsentrasi  testosteron  darah  ikan  patin  siam  yang  diberi  perlakuan  ekstrak  cabe  jawa  pada minggu ke-0 hingga ke-8 (A: kontrol negatif; B: ECJ 37,5 mg kg ikan -1 hari -1 ; C: ECJ 187,5 mg kg ikan -1 hari -1 ; D: kontrol positif (17α-metiltestosteron 50 µg kg ikan -1 minggu -1 )).
Tabel 2.  Penilaian sebaran spermatozoa ikan patin siam jantan
Perlakuan Nilai minggu ke- 0 2 4 6 8 A 0 1 1 2 2 B 0 1 2 3 3 C 0 2 2 3 3 D 0 2 3 3 4
A= kontrol negatif; B= ECJ 37,5 mg kg ikan -1 hari -1 ; C= ECJ 187,5 mg kg ikan -1 hari -1 ; D= kontrol positif (17α-Metiltestosteron 50 µg kg ikan -1 minggu -1 ).
a a a ab a a a a b a a b b b b a a a a a 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00 0 2 4 6 8 T esto st er o n (ng m l -1 ) Minggu ke- E F G
H

## Kualitas sperma
Kepadatan  sperma  menunjukkan  pening- katan pada setiap perlakuan (Tabel 3). Perlakuan 17α-metiltestosteron  menunjukkan  peningkatan yang tertinggi hingga minggu ke-8 perlakuan, se- baliknya kontrol negatif menunjukkan kepadatan sperma terendah. Kepadatan, volume, dan motili- tas sperma ikan yang diberi perlakuan ekstrak ca- be  jawa  serta  kontrol  positif  (D)  lebih  tinggi  di- bandingkan    kontrol  negatif  (p<0,05).  Kadar spermatokrit  perlakuan  ekstrak  cabe  jawa  baik dosis rendah (B) maupun tinggi (C) memberikan
hasil  yang  sama  dengan  perlakuan  17α-metiltes- tosteron  (D)  (p>0,05)  pada  minggu  ke-2  hingga ke-6.

## Tingkat kelangsungan hidup
Tingkat  kelangsungan  hidup  perlakuan ekstrak cabe jawa dan 17α-Metiltestosteron men- capai  100±0,0%,  pada  kontrol  negatif  sebesar 93,33±11,55%  (Gambar  3).  Berdasarkan  uji  sta- tistik,  semua  perlakuan  menunjukkan  hasil  yang sama  terhadap  tingkat  kelangsungan  hidup  ikan patin siam jantan (p>0,05).
Tabel 3. Hasil pengamatan kualitas sperma  ikan patin siam minggu ke-2 hingga ke-8 pada perlakuan eks- trak cabe jawa  melalui pakan (A: kontrol negatif; B: ECJ 37,5 mg kg ikan -1 hari -1 ; C: ECJ 187,5 mg kg ikan -1 hari -1 ; D: kontrol positif (17α-metiltestosteron 50 µg kg ikan -1 minggu -1 ). Perlakuan Minggu ke Kualitas Sperma Kepadatan (x10 9 ml -1 ) pH Volume (ml) Spermatokrit (%) Motilitas (detik) A 2 40,83±3,82 a 8-9 0,41±0,29 a 60,50±9,98 a 146,00±39,69 a B 36,67±1,44 a 8-9 0,98±0,13 b 66,81±2,13 a 135,33±17,93 a C 39,17±3,82 a 8-9 0,65±0,10 a 59,27±4,96 a 101,00±14,00 a D 48,33±3,82 b 8 0,48±0,03 a 57,41±4,79 a 139,67±35,73 a A 4 40,00±2,50 a 8 0,72±0,24 a 65,67±2,51 a 272,33±33,84 b B 50,83±5,20 b 8 1,29±0,09 b 73,81±4,76 ab 192,67±27,39 a C 50,83±1,44 b 8-9 1,63±0,28 c 73,69±5,78 ab 263,75±36,25 b D 68,33±6,29 c 8-9 1,18±0,21 b 75,52±5,28 b 304,83±40,83 b A 6 57,08±1,91 a 8 1,10±0,10 a 74,91±6,96 a 262,67±23,67 a B 69,44±2,41 b 8-9 1,30±0,10 a 76,14±5,92 a 270,75±18,25 a C 56,67±3,82 a 8-9 1,82±0,18 b 71,79±3,74 a 277,17±31,08 a D 70,00±4,33 b 8-9 1,88±0,20 b 78,36±2,80 a 382,75±30,75 b A 8 60,00±3,31 a 8-9 1,15±0,15 a 75,25±5,01 a 146,00±13,00 a B 69,17±1,61 b 8-9 1,74±0,21 b 74,32±2,35 a 330,00±37,51 b C 71,39±2,10 b 8-9 2,84±0,23 b 71,44±3,27 a 302,67±14,51 b D 76,25±2,17 c 8 2,95±0,20 c 88,47±9,71 b 385,00±32,00 c
Keterangan:
A= kontrol negatif; B= ECJ 37,5 mg kg ikan -1 hari -1 ; C= ECJ 187,5 mg kg ikan -1 hari -1 ; D= kontrol positif (17α-metiltestosteron  50  µg  kg  ikan -1 minggu -1 ).  Huruf  tika  atas  yang  berbeda  pada  kolom  yang  sama menunjukkan pengaruh perlakuan yang berbeda nyata (p<0,05). Nilai yang tertera merupakan nilai rata-rata dan simpangan baku.
Gambar 3. Tingkat kelangsungan hidup ikan patin siam pada akhir masa pemeliharaan. A= kontrol negatif;
B=  ECJ  37,5  mg  kg  ikan -1 hari -1 ;  C=  ECJ  187,5  mg  kg  ikan -1 hari -1 ;  D=  kontrol  positif  (17α- metiltestosteron 50 µg kg ikan -1 minggu -1 ).

## Pembahasan
Menurut  Zeyl et  al .  (2013),  indeks  kema- tangan gonad (IKG) telah menjadi protokol baku dalam memilih ikan dalam proses reproduksi ser- ta dapat dijadikan estimasi untuk kematangan go- nad  dan  pemijahan  pada  banyak  spesies.  Berda- sarkan  hasil  uji  statistik,  perlakuan  yang  diberi- kan  menunjukkan  pengaruh  yang  nyata  terhadap nilai  IKG.  Nilai  IKG  tertinggi  ditunjukkan  oleh perlakuan C (ECJ 187,5 mg kg ikan -1 hari -1 ) yai- tu  sebesar  5,40±1,04%  (Gambar  1).  Menurut Tang & Affandi (2001), selama proses reproduk- si  pertambahan  bobot  gonad  pada  ikan  jantan mencapai  5-10%  dari  bobot  tubuh  ikan.  Nilai IKG  pada  ikan  patin  siam yang  diberi  perlakuan hormon  GnRH  dan  domperidone  (DOM)  pada saat matang gonad sebesar 6,3%, sedangkan pada saat  belum  matang  gonad  sebesar  0,32%  (Me- ngamphan et al . 2008). Pada ikan  baung ( Hemi- bargus  nemurus ),  IKG  berkisar  antara  1,14± 0,02% hingga 7,06±1,40% (Adebiyi et al . 2012).
Konsentrasi  testosteron  darah  ikan  memi- liki nilai yang selaras dengan IKG. Semakin me- ningkat  IKG  ikan  maka  konsentrasi  testosteron juga  meningkat.  Hal  ini  disebabkan  testosteron merupakan  hormon  utama  dalam  perkembangan
gonad jantan (spermatogenesis). Konsentrasi tes- tosteron darah ikan yang diberi perlakuan ekstrak cabe  jawa  lebih  tinggi  jika  dibandingkan  pada kontrol  negatif  (Gambar  2).  Berdasarkan  peneli- tian Moeloek et al . (2010), ekstrak cabe jawa pa- da dosis 100 mg hari -1 dapat meningkatkan kadar testosteron  darah  78%  pasien  hipogonad  hingga dua kali lipat pada hari pertama perlakuan. Selain itu, pemberian piperin dan fraksi tak larut heksan bebas piperin ekstrak etanol buah cabe jawa me- ningkatkan kadar testosteron darah pada tikus pu- tih jantan (Muslichah 2011).
Peningkatan  testosteron  tersebut  diduga karena  ekstrak  cabe  mengandung  senyawa  alka- loid  yang  memiliki  efek  androgenik  yaitu  pipe- rin. Senyawa alkaloid berpengaruh dalam spema- togenesis  dan    menstimulasi  sekresi  hormon  tes- tosteron  pada  individu  jantan  (Lin et  al. 1999,
Yakubu  2012).  Selain  piperin,  cabe  jawa  me- ngandung  senyawa  sitosterol  (termasuk  senyawa sterol)  yang  merupakan  kolesterol  khas  dari tumbuhan  (fitosterol)  yang  dapat  dikonversikan untuk  pembentukan  hormon  steroid  (androgen). Tremblay  &  Kraak  (1998)  menyatakan  bahwa reseptor  androgen  dan  estrogen  pada  hewan  da- pat  mengikat  fitosterol,  sehingga  dapat  meme-
a
a a a 0.00 20.00 40.00 60.00 80.00 100.00 A B C D T KH (%) Perlakuan
ngaruhi  nisbah  kelamin,  gonad,  dan  hormonal. Yurnadi et  al .  (2006)  menyatakan  bahwa  senya- wa  sitosterol  yang  terkandung  dalam  buah  cabe jawa  bekerja  sebagai  tonik  seksual  pada  sistem hormonal  tikus.  Pada  dosis  yang  rendah,  diduga senyawa  sitosterol  dapat  mengaktifkan  poros  hi- potalamus-hipofisis-testis  melalui  mekanisme umpan  balik  positif.  Kondisi  tersebut  akan  men- stabilkan  proses  spermatogenesis  dan  berakibat terjadinya peningkatan konsentrasi spermatozoa.
Histologi  gonad  merupakan  metode  yang dapat memberikan gambaran langsung tahap per- kembangan gamet pada gonad (Lowerre-Barbieri et  al .  2010).  Perkembangan  gonad  (spermatoge- nesis)  sangat  berkaitan  dengan  konsentrasi  tes- tosteron darah ikan uji. Hormon utama yang ber- peran  dalam  sistem  reproduksi  jantan  adalah hormon  testosteron.  Secara  umum  hormon  ini berfungsi  untuk  merangsang  pertumbuhan  sper- matogonium,  perkembangan  spermatosit  primer dan sekunder serta diferensiasi spermatosit  men- jadi  sperma  (Billard et  al. 1982,  Weltzien et  al.
2002).  Perlakuan  ECJ  melalui  pakan  dapat  me- ningkatkan sebaran spermatozoa hingga 75% pa- da minggu ke-8 sedangkan kontrol negatif memi- liki  sebaran  spermatozoa  dibawah  50%.  Hal  ini menunjukkan  bahwa  cabe  jawa  yang  mengan- dung  alkaloid  diduga  dapat  meningkatkan  tes- tosteron darah yang dapat memacu pembentukan spermatozoa  dan  memiliki  efek  yang  sama  de- ngan  17α-metiltestosteron  dalam  perkembangan spermatozoa ikan uji.
Evaluasi  kualitas  sperma  ikan  diperlukan untuk meningkatkan efisiensi dalam fertilisasi te- lur terutama pada pemijahan buatan. Volume, ke- padatan,  motilitas,  dan  kadar  spermatokrit  sper- ma tertinggi ditunjukkan pada pengamatan ming- gu  ke-8  yaitu  pada  perlakuan  17α-Metiltestoste- ron  (D).  Perlakuan  ECJ  maupun  17α-Metiltes- tosteron  menghasilkan  kepadatan,  volume  sper-
ma  yang  lebih  tinggi  serta  durasi  motilitas  sper- ma yang lebih lama dibandingkan kontrol negatif (p<0,05). Kadar spermatokrit perlakuan ECJ me- nunjukkan  hasil  yang  sama  dengan  perlakuan 17α-Metiltestosteron  pada  minggu  ke-2  hingga ke-6 (p<0,05).  Kadar spermatokrit dapat diguna- kan sebagai indikator kekentalan sperma. Jika ni- lai  spermatokrit  tinggi  maka  dapat  disimpulkan bahwa  cairan  sperma  tersebut  bersifat  kental  se- hingga memiliki padatan spermatozoa yang lebih banyak dibandingkan dengan cairan seminalnya.
Motilitas sperma merupakan indikator ku- alitas  sperma  sebagai  prasyarat  pembuahan  dan berkorelasi  erat  dengan  keberhasilan  pembuahan (Rurangwa et  al .  2004).  Pada  kebanyakan  ikan air  tawar,  durasi  motilitas  sperma  umumnya  ha- nya  mencapai  2  menit  dan  sperma  sangat  aktif bergerak  30  hingga  35  detik  (Kime et  al .  2001).
Menurut  Lahnsteiner et  al .  (1998),  respon  rang- sangan  aktivitas  spermatozoa  tergantung  pada pH,  tekanan  osmotik,  dan  kandungan  ion  (sodi- um dan kalium) pada medium yang mengelilingi- nya.  Panjang  pendeknya  ukuran  ekor  sperma  ju- ga  dapat  menentukan  keaktifan  sperma  dalam bergerak.  Semakin  panjang  ekor  sperma  maka semakin  aktif  sperma  tersebut  bergerak  (Affandi &  Tang  2002).  Hasil  penelitian  menunjukkan bahwa  durasi  motilitas  sperma  ikan  yang  diberi perlakuan  ECJ  mampu  motil  lebih  dari  5  menit sedangkan  durasi  motilitas  sperma  ikan  kontrol negatif  hanya  mencapai  2,4  menit  (p<0,05).  Hal ini menunjukkan bahwa sperma ikan yang diberi perlakuan cabe jawa memiliki performa yang le- bih baik daripada kontrol negatif.
Volume  sperma  yang  dihasilkan  mening- kat  seiring dengan peningkatan bobot testis. Vo- lume sperma ikan  yang diberi perlakuan  ECJ le- bih  tinggi  daripada  kontrol  negatif  pada  minggu ke-4,  6,  dan  8  (p<0,05).  Hal  ini  membuktikan bahwa  ECJ  yang  dapat  meningkatkan  kadar  tes-
tosteron  mengakibatkan  peningkatan  volume sperma  yang  dihasilkan.  Nagahama  (1994)  me- nyatakan  bahwa  testosteron  dan  11-ketotestos- teron  menyebabkan  spermatogenesis  dan  sper- miogenesis pada ikan.
pH sperma juga memiliki pengaruh terha- dap kualitas sperma serta kualitas pembuahan te- lur. Billard & Cossom (1992) menyatakan bahwa pH  dibawah  7,8  dapat  menghambat  motilitas sperma.  pH  optimal  untuk  sperma  ikan  berkisar antara  8,0  hingga  8,2  (Lahnsteiner et  al .  1998). pH  sperma  yang  diberi  perlakuan  ECJ  memiliki kisaran  antara    8,0-8,7  namun  jika  dibandingkan dengan  kontrol  negatif    menunjukkan  kisaran yang sama. Hal ini menunjukkan bahwa pH sper- ma yang diberi perlakuan ekstrak cabe jawa ma- suk dalam kisaran normal meskipun bukan dalam kisaran optimum.
Penggunaan  ECJ  pada  penelitian  tidak memengaruhi  tingkat  kelangsungan  hidup  ikan uji  (p>0,05)  (Gambar  3).  Hal  ini  menunjukkan bahwa  perlakuan  ekstrak  cabe  jawa  yang  diberi- kan  tidak  berpengaruh  terhadap  metabolisme ikan  uji.  Wahyoedi et  al .  (2004)  menyatakan bahwa hasil uji toksisitas akut (LD-50) tidak me- nemukan  kelainan  yang  spesifik  dan  gejala  lain pada  hati,  jantung,  ginjal,  usus,  lambung,  testes maupun  ovarium  hewan  uji  sebagai  akibat  pem- berian  ekstrak  etanol  cabe  jawa.  Penelitian  yang dilakukan  oleh  Isnawati  e t  al .  (2002)  menunjuk- kan bahwa ekstrak buah cabe jawa 50% yang di- uji  dengan  metoda  Ames  tidak  memperlihatkan adanya efek mutagenik pada bakteri uji sehingga aman untuk dikonsumsi.

## Simpulan
Ekstrak cabe jawa  (ECJ)  memberikan pe- ngaruh yang signifikan terhadap pematangan go- nad ikan patin  siam jantan. Dosis ECJ  187,5 mg kg  ikan -1 hari -1 menunjukkan  nilai  IKG,  kadar
testosteron, dan kualitas sperma ikan uji yang le- bih  tinggi  daripada  perlakuan  lainnya.  Perlakuan ECJ 187,5 mg kg ikan -1 hari -1 yang diberikan me- lalui  pakan  selama  8  minggu  menghasilkan  IKG sebesar  5,40±1,04%,  sebaran  spermatozoa  men- capai  75%,  serta  kadar  testosteron  sebesar  9,54 ng ml -1 .

## Daftar Pustaka
Adebiyi FA, Siraj SS, Harmin SA, Christianus A. 2012. Plasma sex steroid hormonal profile and gonad histology during the annual re- productive  cycle  of  river  catfish Hemiba- grus  nemurus in  captivity. Fish  Physiolo- gy and Biochemistry , 39(3): 547-557.
Affandi  R,  Tang  UM.  2002. Fisiologi  Hewan Air . Unri Press. Riau. 213 hlm.
Billard  R,  Fostier  A,  Weil  C,  Breton  B.  1982. Endocrine  control  of  spermatogenesis  in teleost  fish. Canadian    Journal  of  Fishe- ries and Aquatic Sciences , 39(1): 65-79
Billard R, Cosson MP. 1992. Some  problems re- lated  to  the  assessment  of  sperm  motility in  freshwater  fish. Journal  of  Experimen- tal Zool ogy, 261 (2): 122-131.
Contreras-Sanchez WM, Fitzpatrick MS, Schreck CB.  2001.  Fate  of  methyltestosterone  in the  pond  environment:  Impact  of  mt-con- taminated  soil  on  tilapia  sex  differentia- tion.  PD/A  CRSP Eighteenth  Annual Technical  Report.  Effluents  and  Pollution Research. pp 83-86.
Dean  LO, Boyd  LC. 2004. Biological effect and safety  aspects  of  phytosterol  oxide. In : Dutta PC (ed.). Phytosterols as Functional Food  Components  and  Nutraceuticals . Marcel  Dekker  Inc.  New  York.  pp.  419- 430.
Fostier A, Jalabert B, Billard R, Breton B, Zohar Y.  1983.  The  gonadal  steroid. In :  Hoar WS,  Randall  DJ,  Donaldson  EM  (ed.). Fish  Physiology  Volume  IX  Reproduction Part  A  Endocrine  Tissues  and  Hormones . Academic Press. London. pp. 277-372.
Hoar  WS.  1969.  Reproduction. In :  Hoar  WS, Randall DJ (ed.). Fish Physiology Volume III . Reproduction  and  Growth,  Biolumi- nescence,  Pigments,  and  Poisons. Acade- mic Press. New York. pp. 1-72.
Isnawati A, Endreswari S, Pudjiastuti, Murhandi- ni.  2002.  Efek  mutagen  ekstrak  etanol
buah cabe jawa Piper retrofractum . Jurnal Bahan Alam Indonesia, 1(2): 63-67.
Kime  DE,  Van  Look  KJW,  McAllister  BG,
Huyskens  G,  Rurangwa  E,  Ollevier  F. 2001.  Computer-assisted  Sperm  Analysis (CASA)  as  a  tool  for  monitoring  sperm quality in  fish. Comparative Biochemistry and Physiology , 130(4): 425-433.
Lahnsteiner F,  Berger B, Weismann T,  Patzner
RA. 1998. Determination of semen quality of  the  rainbow  trout Oncorhynchus mykiss , by sperm motility, seminal plasma parameters, and spermatozoal metabolism. Aquaculture , 163(1-2): 163-81.
Liley  NR.  1969.  Hormone  and  reproductive  be- havior in fishes. In : Hoar WS, Randall DJ (ed.). Fish  Physiology  Volume  III . Repro- duction  and  Growth,  Bioluminescence, Pigments,  and  Poisons. Academic  Press. New York. pp. 73-116.
Lin H, Tsai SC, Chen JJ, Chiao YC,  Wang SW,
Wang  GJ,  Chen  CF,  Wang  PS.  1999.  Ef- fects  of  evodiamine  on  the  secretion  of testosterone  in  rat  testicular  interstitial cells. Metabolism, 48(12): 1532-1535.
Lowerre-Barbieri  SK,  Brown-Peterson  NJ,  Mu- rua  H,  Tomkiewicz  J,  Wyanski  DM,  Sa- borido-Rey  F.  2011.  Emerging  issues  and methodological  advances  in  fisheries  re- productive  biology. Marine  and  Coastal Fisheries , 3(1): 32–51.
Mengamphan  K,  Phromya  C,  Manosroi  C,  Ma- nosroi  A.  2008.  Maturation  induction  of Pangasius  hypophthalmus using  different dosage of hormone in soybean oil suspen- sion  (May-Jun  2004). Food  and  Agricul- ture  Organi zation  of  the  United  Nation. Abstract.
Moeloek  N,  Lestari  SW,  Yurnadi,  Wahjoedi  B. 2010.  Uji  klinik  ekstrak  cabe  jawa Piper retrofractum sebagai  fitofarmaka  andro- genik  pada  laki-laki  hipogonad. Majalah Kedokteran Indonesia , 60(6): 255-262.
Muslichah  S.  2011.  Pengaruh  pemberian  piperin dan  fraksi  tak  larut  heksan  bebas  piperin ekstrak etanolik buah cabe jawa Piper re- trofractum terhadap perilaku  seksual  dan kadar  testosteron  tikus  jantan. Tesis .  Pro- gram  Pascasarjana  UGM.  Yogyakarta. Abstrak.
Nagahama  Y.  1994.  Endocrine  regulation  of gametogenesis  in  fish. The International Journal Developmental Biology ,  38:  217-
229.
Rurangwa  E,  Kime  DE,  Ollevier  F,  Nash  JP. 2004. Review: The measurement of sperm motility and factors affecting sperm quali- ty  in  cultured  fish. Aquaculture 234(1-4): 1-28.
Schwassmann HO. 1971. Biological rhythms. In : Hoar  WS,  Randall  DJ  (ed.). Fish  Physio- logy  Volume  VI . Environmental  Relation and  Behaviour .  Academic  Press.  New York. pp. 371-428.
Tang  UM,  Affandi  R.  2001. Biologi  Reproduksi Ikan . Unri Press. Riau. 208 hlm.
Tremblay  L,  Kraak  GVD.  1998.  Use  of  a  series of homologous in vitro and in vivo assays to  evaluate  the  endocrine  modulating actions  of  β  sitosterol  in  rainbow  trout.
Aquatic Toxicology, 43(2-3): 149-162.
Wahjoedi B, Pudjiastuti, Adjirni, Nuratmi B, As- tuti Y. 2004. Efek androgenik ekstrak eta- nol  cabe  jawa Piper  retrofractum pada anak ayam. Jurnal Bahan Alam Indonesia , 3(2): 201-204.
Weltzien F, Taranger GL, Karlsen Ø, Norberg B. 2002. Spermatogenesis and related plas- ma  androgen  levels  in  Atlantic  halibut ( Hippoglossus  hippoglossus L.). Com- parative  Biochemistry  and  Physiology , 132(3): 567-575.
Yakubu  MT.  2012.  Effect  of  a  60-day  oral  ga- vage  of  a  crude  alkaloid  extract  from Chromolaena  odorata leaves  on  hor- monal  and  spermatogenic  indices  of male  rats. Journal  of  Andrology ,  33(6):
199-207.
Yurnadi, Sari P, Suryandari DA. 2006. Pengaruh kombinasi Muira puama , Damiana, dan Siberian Ginseng (MDS)  terhadap berat badan,  testis,  tubulus  seminiferus,  dan sel  ledyik  tikus  strain  Sprague-Dawley. Majalah  Kedokteran  Indonesia ,  56: 357-63.
Zeyl JN, Love OP, Higgs DM. 2013. Evaluating gonadosomatic index as an estimator of reproductive  condition  in  the  invasive round  goby Neogobius  melanostomus . Journal of Great Lakes Research , 40(1): 164-171.