## UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI ∆-GUAIENE MINYAK NILAM TERHADAP BAKTERI
Staphylococcus aureus DAN Staphylococcus epidermis
Antibacterial Activity Test Of ∆-Guaiene Patchouli oil Against Bacteria Staphylococcus aureus and Staphylococcus epidermis
Rifqi Kurniawan 1)* , Sarifah Nurjanah 2 , Tita Rialita 2
1 Program Studi Teknik Pertanian, Fakultas Teknologi Industri Pertanian, Universitas Padjadjaran
2 Departemen Teknik Pertanian dan Biosistem, Fakultas Teknologi Industri Pertanian, Universitas Padjadjaran
DOI: http://dx.doi.org/10.21111/agrotech.v6i3.5052
Terima  15 September 2020                Revisi 4 Oktober 2020                    Terbit  30  Desember 2020
Abstrak: Minyak  nilam  merupakan  salah  satu  komoditas  pertanian  yang memiliki  potensi  dibidang  kesehatan  sebagai  antibakteri  alami.  Minyak  nilam tersusun  dari  beberapa  komponen  kimia  salah  satunya  adalah Δ-guaiene . Δ- guaiene merupakan  senyawa  penentu  aroma  minyak  nilam  yang  diduga memiliki kemampuan seperti patchouli alcohol sebagai antibakteri dan termasuk kedalam  senyawa  seskuiterpen.  Senyawa  seskuiterpen  memiliki  sifat  merusak membran sel bakteri dengan cara berikatan dengan protein enzim sehingga dapat menghambat  pertumbuhan  sel  bakteri.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui  aktivitas  antibakteri Δ-guaiene minyak  nilam  dengan  konsentrasi tertentu  terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus dan Staphylococcus epidermidis .  Uji  aktivitas  antibakteri  menggunakan  metode  difusi  sumuran dengan  konsentrasi  larutan Δ-guaiene (20%,  40%,  60%,  80%,  100%  v/v). Kontrol  positif  yang  digunakan  adalah  amoxicillin  10%  dan  meropenem  10%, dan  kontrol  negatif  yang  digunakan  adalah  n-heksana.  Hasil  penelitian menunjukkan  adanya  zona  hambat  terbesar  dihasilkan  oleh Δ-guaiene konsentrasi  80%  yakni  11.2  mm  pada  bakteri  Staphylococcus  aureus  dan Δ- guaiene konsentrasi  60%  sebesar  5.16  mm  pada  bakteri Staphylococcus epidermidis . Diameter daya hambat yang terbentuk pada bakteri Staphylococcus
* Korespondensi email: Rifqi16002@mail.unpad.ac.id Alamat : Fakultas Teknologi Industri Pertanian, Universitas Padjadjaran Jl. Raya Bandung  Sumedang KM 21 , Bandung, Indonesia, 45363
aureus tergolong  kuat,  sedangkan  pada  bakteri Staphylococcus  epidermidis diameter yang terbentuk tergolong lemah.
Kata kunci: antibakteri, Δ-guaiene, diameter daya hambat
Abstract: Patchouli  oil  is  an  agricultural  commodity  that  has  potential  in  the health  sector  as  a  natural  antibacterial.  Patchouli  oil  is  composed  of  several chemical  components,  one  of  which  is  Δ-guaiene.  Δ-guaiene  is  a  patchouli  oil aroma compound  which is thought to have the ability  like  patchouli alcohol as an  antibacterial  and  is  a  sesquiterpene  compound.  Sesquiterpene  compounds have the property of damaging bacterial cell membranes by binding to enzyme proteins  so  that  they  can  inhibit  bacterial  cell  growth.  This  study  aims  to determine  the  antibacterial  activity  Δ-guaiene  of  patchouli  oil  with  certain concentrations  against  bacteria  Staphylococcus  aureus  and  Staphylococcus epidermidis.  Antibacterial  activity  test  used  well  diffusion  method  with  Δ- guaiene concentration (20%, 40%, 60%, 80%, 100% v / v). The positive control used was amoxicillin 10% and meropenem 10%, and the negative control used was n-hexane. The results showed that the largest inhibition zone was produced by Δ-guaiene with a concentration of 80%, namely 11.22 mm in Staphylococcus aureus  bacteria  and  Δ-guaiene  60%  concentration  of  5.16  mm  in  bacteria Staphylococcus  epidermidis.  The  diameter  of  inhibition  power  formed  in  the bacteria  was  Staphylococcus  aureus  classified  as  strong,  while  in  the  bacteria the Staphylococcus epidermidis diameter formed was classified as weak.
Key words: antibacterial, Δ-guaiene, diameter of inhibition.

## 1. Pendahuluan
Minyak  nilam  ( Patchouli  oil )  merupakan  salah  satu komoditas  minyak  atsiri  paling  unggul  dan  banyak  diproduksi  di Indonesia.  Minyak  nilam  memiliki  banyak  manfaat  diantaranya sebagai  bahan  sediaan  untuk  kosmetik,  sabun,  parfum,  antibiotik, dan  topikal  farmasi  lainnya  (Nuryani,  2006).  Hal  ini  dikarenakan komponen  kimia  utama  penyusun  minyak  nilam  yaitu patchouli alcohol memiliki  sifat  antibakteri.  Menurut  Aisyah  dkk  (2008), minyak  nilam  tersusun  dari  15  komponen  kimia  dan  komponen
utama  penyusun  minyak  nilam  yang  dapat  teridentifikasi diantaranya  adalah patchouli  alcohol (32,60%), Δ-  guaiene (23,07%), α-guaiene (15,91%), seychellene (6,95%),  dan α- patchoulene (5,47%).  Senyawa patchouli  alcohol , Δ-guaiene , α- guaiene , dan seychellene termasuk kedalam senyawa seskuiterpen.
Senyawa  seskuiterpen  dalam  minyak  atsiri  bersifat  merusak membran  sel  bakteri  dengan  cara  berikatan  dengan  protein  enzim sehingga mampu menghambat pertumbuhan sel bakteri (Dzakwan, 2012)  Senyawa Δ-guaiene merupakan  senyawa  seskuiterpen  yang mempengaruhi  aroma  pada  minyak  nilam. Δ-guaiene minyak nilam  diduga  memiliki  kemampuan  yang  sama  seperti patchouli alcohol yaitu  memiliki  aktivitas  antibakteri  karena  termasuk senyawa seskuiterpen.
Sampai saat ini, infeksi merupakan salah satu jenis penyakit  yang sering  dialami  oleh  manusia.  Bakteri Staphylococcus  aureus ( S.
aureus )  dan Staphylococcus  epidermidis ( S.  epidermidis )  adalah contoh  bakteri  bersifat  patogen  yang  sering  menyebabkan  infeksi pada  manusia.  Bakteri S.aureus dan S.epidermidis umumnya menyebabkan  infeksi  pada  kulit,  saluran  pernapasan  dan  saluran pencernaan  manusia.  Widowati  dkk  (2019)  menyatakan  bahwa minyak  nilam  bersifat  antibakteri  terhadap  bakteri S.aureus dan
S.epidermidis .  Salah  satu  solusi  untuk  mengatasi  infeksi  akibat

## Uji Aktivitas Antibakteri ∆-Guaiene Minyak Nilam terhadap Bakteri
bakteri  adalah  dengan  menggunakan  antibiotik.  Namun,  jika pemberian antibiotik dilakukan secara berlebihan akan menyebabkan  bakteri  yang  semula  sensitif  menjadi  resisten (Utami,  2012).  Upaya  yang  dapat  dilakukan  untuk  menangani resistensi  tersebut  dengan  menggunakan  bahan  alami  yang  tidak memberikan  dampak  negatif  pada  manusia,  yaitu  dengan memanfaatkan  zat  aktif  penghambat  pertumbuhan  bakteri  yang terkandung dalam tanaman nilam ( Pogostemon cablin Benth) yaitu
senyawa Δ-guaiene .

## 2. Bahan dan Metode
Penelitian ini menggunakan metode eksperimental laboratorium  yang  berlangsung  di  Laboratorium  Mikrobiologi Pangan dan Laboratorium Pascapanen Fakultas Teknologi Industri Pertanian.  Tujuan  utama  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui aktivitas antibakteri Δ-guaiene minyak nilam terhadap pertumbuhan  bakteri S.aureus dan S.epidermidis .  Bahan  yang digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah Δ-guaiene minyak  nilam 72,62%,  akuades  steril,  n-heksana,  amoxicillin,  meropenem, larutan NaCl 0,85%, nutrient agar (NA), bakteri S. aureus ATCC 25923 dan S. epidermidis ATCC 12228. Peralatan yang digunakan
dalam  penelitian  adalah  cawan  petri, cotton  buds ,  tabung  reaksi, spektrofotometer,  mikropipet,  autoklaf,  inkubator,  dan  oven.  Uji antibakteri  menggunakan  variasi  konsentrasi  larutan Δ-guaiene sebesar  20%,  40%,  60%,  80%,  dan  100%  v/v.  Pembuatan  larutan uji dilakukan dengan melarutkan Δ-guaiene minyak nilam dengan n-heksana. Kontrol positif yang digunakan adalah amoxicillin 10% dan  meropenem  10%.  Kontrol  negatif  yang  digunakan  adalah  n- heksana.
Uji  antibakteri Δ-guaiene minyak  nilam  menggunakan metode  difusi  sumuran  untuk  melihat  diameter  daya  hambat  yang terbentuk.  Menurut  Ludfi  (2014),  metode  difusi  sumuran  dapat membuat  antibakteri  yang diujikan berdifusi  secara maksimal.  Hal ini  disebabkan  karena  adanya  pertemuan  langsung  antara  zat antibakteri  dan  media  pertumbuhan.  Uji  ini  menggunakan perlakuan  duplo  dan  pengulangan  sebanyak  3  kali.  Langkah- langkah  penelitian  dimulai  dari  identifikasi  bakteri,  sterilisasi  alat, pembuatan media dan larutan ∆-guaiene minyak nilam, dan kontrol positif, peremajaan bakteri, pembuatan suspensi bakteri standar 0,5 McFarland,  dan  melakukan  uji  aktivitas  antibakteri.  Setelah  media ( Nutrient  Agar )  dalam  cawan  petri  memadat,  suspensi  bakteri diinokulasi  sebanyak  100  µL  dan  disebarkan  pada  permukaan media  kemudian  diratakan  menggunakan cotton  buds .  Membuat lubang sumuran pada cawan petri dengan diameter 6 mm. Masing- masing  larutan  uji  dengan  konsentrasi  20%,  40%,  60%,  80%,

## Uji Aktivitas Antibakteri ∆-Guaiene Minyak Nilam terhadap Bakteri
100%,  larutan  kontrol  positif  dan  kontrol  negatif  dimasukkan sebanyak  60  µL  kedalam  sumuran.  Cawan  petri  kemudian diinkubasi  pada  suhu  37˚C  selama  18  –  20  jam.  Setelah  proses inkubasi,  hasil  penelitian  dianalisis  secara  kuantitatif  dengan mengukur diameter daya hambat yang terbentuk disekitar sumuran dalam satuan millimeter (mm).

## 3. Hasil dan Pembahasan
Setelah  dilakukan  uji  antibakteri ∆-guaiene minyak  nilam terhadap bakteri S. aureus ATCC 25923 dan S. epidermidis ATCC 12228, maka dilakukan pengamatan dan mengukur diameter daya hambat  yang  terbentuk.  Adapun  hasil  pengukuran  diameter  daya hambat disajikan pada Tabel 1 dan Tabel 2.
Tabel 1. Rata-Rata Diameter Daya Hambat ∆-Guaiene Minyak Nilam Terhadap Bakteri S.aureus Dan S.epidermidis
Gambar 1. Grafik Diameter Daya Hambat pada bakteri S. aureus
dan S. epidermidis
Tabel  2.  Rata-Rata  Diameter  Daya  Hambat  Kontrol  Positif  Dan Negatif Terhadap Bakteri S.aureus Dan S.epidermidis
Berdasarkan  Tabel  1,  senyawa ∆-guaiene minyak  nilam memiliki  kemampuan  sebagai  antibakteri,  hal  ini  ditunjukkan

## Uji Aktivitas Antibakteri ∆-Guaiene Minyak Nilam terhadap Bakteri
dengan  adanya  zona  bening  yang  terbentuk  disekitar  sumuran. Tabel  1  menunjukkan  hasil  rata-rata  diameter  daya  hambat  pada kosentrasi larutan uji 20%, 40%, 60%, 80%, dan 100%. Nilai rata- rata  diameter  yang  terbentuk  pada  bakteri S.  aureus secara berturut-turut  yaitu 0.27 mm, 2.05 mm, 8.11 mm, 11.22 mm, dan 8.94  mm,  sedangkan  diameter  yang  terbentuk  pada  bakteri S. epidermidis yaitu 0.22 mm, 1.72 mm, 5.16 mm, 4.39 mm, dan 2.56 mm.  Nilai  rata-rata  diameter  daya  hambat  pada  bakteri  S.aureus lebih  besar  dibandingkan  dengan  bakteri S.epidermidis .  Hal  ini dikarenakan  bakteri S.epidermidis lebih  resisten  terhadap  obat antimikroba  dibandingkan  dengan  bakteri S.aureus (Jawetz  dkk, 2008). Menurut penelitian Widowati dkk (2019) menunjukkan jika aktivitas  minyak  nilam  dalam  menghambat  bakteri S.aureus menghasilkan  diameter  hambat  yang  lebih  besar.  Hal  ini dikarenakan  adanya  perbedaan  senyawa  dan  zat  penyusun  sel bakteri,  jumlah  peptidoglikan,  struktur  dinding,  aktivitas  enzim, dan jumlah lipid.
Berdasarkan  Gambar  1.  dapat  dilihat  diameter  hambat terbesar  dihasilkan  oleh  larutan Δ-guaiene konsentrasi  80%  yakni 11.22  mm  pada  bakteri S.aureus dan Δ-guaiene konsentrasi  60% sebesar  5.16mm  pada  bakteri S.epidermidis. Diameter  daya hambat  yang  terbentuk  pada  bakteri S.aureus tergolong  kuat, sedangkan  pada  bakteri S.epidermidis diameter  yang  terbentuk tergolong  lemah.  Hal  ini  mengacu  pada  penelitian  Susanto  dkk
(2012), dimana klasifikasi diameter daya hambat ≤5 mm tergolong lemah, 6-10 mm tergolong sedang, 11-20 mm tergolong kuat, dan ≥20  mm  tergolong  sangat  kuat.    Berdasarkan  Gambar  1.  dapat dilihat jika nilai diameter hambat pada bakteri S.aureus megalami penurunan  pada  konsentrasi  100%,  sedangkan    bakteri S. epidermidis mengalami  penurunan  pada  konsentrasi  80%  dan 100%.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  semakin  tinggi  tingkat kosentrasi  zat  antibakteri  tidak  selalu  menghasilkan  zona  bening yang terbesar. Selain faktor komponen  yang terkandung dalam Δ- guaiene , kemampuan berdifusi larutan Δ-guaiene juga mempengaruhi  zona  bening  yang  terbentuk  (Jawetz  dkk,  2008). Berdasarkan  penelitian,  kondisi  larutan Δ-guaiene ,  dengan konsentrasi  semakin  tinggi  maka  semakin  jenuh  sehingga kemampuan  larutan Δ-guaiene untuk  berdifusi  tidak  lagi maksimal.  Faktor  lainnya  yang  mempengaruhi  hasil  difusi  adalah jenis bakteri yang dihambat, daya difusi ekstrak, ketebalan media, dan diameter sumuran (Jawetz dkk, 2008).
Berdasarkan  Tabel  2,  meropenem  10%  dan  amoxicillin 10%  sebagai  konrol  positif  menghasilkan  rerata  diameter  daya hambat  pertumbuhan  bakteri S.aureus sebesar  62,33  mm  dan  4 mm,  sedangkan  pada  bakteri S.epidemidis sebesar  37,67  mm  dan 2,67 mm. Meropenem  dan amoxicillin  menghasilkan zona bening karena merupakan antibiotik β-lactam yang berspektrum luas yang bekerja  dengan  menghambat  pembentukan  peptidoglikan  pada

## Uji Aktivitas Antibakteri ∆-Guaiene Minyak Nilam terhadap Bakteri
dinding  sel  bakteri.  Amoxicillin  menghasilkan  diameter  daya hambat  yang  lebih  rendah  dibandingkan  dengan  meropenem,  hal ini  dikarenakan  amoxicillin  sudah  mulai  resisten  terhadap  bakteri S.aureus dan S.epidermidis .  Resistensi  ini  disebabkan  karena amoxicillin  tidak  mampu  menembus  membran  luar  bakteri  dan penggunaan amoxicillin yang tidak sesuai dengan petunjuk dokter dapat  menyebabkan  terjadinya  resistensi  (Laxminarayan  dan Wattal,  2013).  N-heksana  sebagai  kontrol  negatif  tidak menghasilkan  zona  bening  Hal  ini  dikarenakan  n-heksana merupakan  senyawa  yang  bersifat  netral  dan  tidak  memiliki  sifat antibakteri.

## 4. Kesimpulan
Berdasarkan  penelitian  yang  dilakukan  dapat  disimpulkan bahwa  senyawa Δ-guaiene minyak  nilam  memiliki  aktivitas antibakteri  terhadap  bakteri S.aureus dan S.epidermidis .  Hal  ini disesabkan  larutan Δ-guaiene minyak  nilam  membentuk  zona bening  disekitar  sumuran.  Rata-rata  diameter  daya  hambat  yang terbentuk  pada  bakteri S.aureus (0,27  –  11,2  mm)  lebih  besar dibandingkan  dengan  bakteri S.epidermidis (0,22  –  5,16  mm).
Diameter  daya  hambat  yang  terbentuk  disebabkan  oleh  beberapa faktor  diantaranya  konsentrasi  larutan Δ-guaiene minyak  nilam,
ketebalan media, diameter sumuran, dan jenis bakteri uji.

## 5. Referensi
Aisyah, Y., P. Hastuti., H. Satrohamidjojo., dan C. Hidayat. 2008.
Komposisi  Kimia  dan  Sifat  Antibakteri  Minyak  Nilam (Pogostemon  Cablin). Majalah  Farmasi  Indonesia,  Banda Aceh. 19(3), 151-156
Dzakwan,  M.  2012. Uji  aktivitas  atibakteri  minyak  atsiri  daun nilam  (Pogostemon  cablin,  Benth)  terhadap  Staphylococcus aureus  dan  Eschericia  coli. Jurnal  Farmasi  Indonesia,
Universitas Setia Budi. Surakarta.
Jawetz,  E.,  J.  Melnick,  dan  E.  Adelber.  2008. Mikrobiologi Kedokteran. EGC.
Laxminarayan,  R.D.  dan  Wattal,  S.  2013. Antibiotic  Ressistance- the  need  for  global  solution .  Lancet  Infect  Dis.  SS1473-
309913:70318-9.
Ludfi,  A.  2014. Uji  Antibakteri  Ekstrak  Etanol  Kayu  Tanaman Secang  (Caesalpinia sappan  Linn)  Terhadap  Bakteri Escherichia  Coli  dan Staphylococcus.  Skripsi.  Surakarta:
Universitas Muhammadyah Surakarta.
Nuryani,  Y. 2006. Budidaya Tanaman Nilam (Pogostemon cablin Benth). Balai  Penelitian  Tanaman  Rempah  dan  Aromatik.
Badan Penelitian dan Pengembangan Pertanian.
Susanto, D., Sudrajat, dan Ruga, R. 2012. Studi kandungan bahan aktif  tumbuhan meranti  merah  (Shorea  leprosula  Miq)

## Uji Aktivitas Antibakteri ∆-Guaiene Minyak Nilam terhadap Bakteri
sebagai sumber senyawa antibakteri . Mulawarman Scientifie.
11(2): 181-190.
Utami, ER. 2012. Antibiotika, Resistensi, dan Rasionalitas Terapi .
Saintis: 1 (1): 124-38