Vol.18, No.1, Bulan Juni 2021, Hal. 40-46 ISSN: 1693 7899, e-ISSN:2716 3814

## PENGARUH METODE EKSTRAKSI TERHADAP KADAR TOTAL FENOLIK, KADAR TOTAL FLAVONOID DAN AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK DAUN MENGKUDU
( Morinda citrifolia L.)
Septiana Laksmi Ramayani 1) *, Eka Amalia Permatasari 2 , Indah Novitasari 2 , Maryana 2
1 Dosen Prodi DIII Farmasi, Politeknik Katolik Mangunwijaya
2 Mahasiswa Prodi DIII Farmasi, Politeknik Katolik Mangunwijaya Email corresponding author: septianaLR@gmail.com

## INTISARI
Reactive Oxygen Species (ROS) yang berlebihan dapat menyebabkan hipertensi. Pencegahan risiko  hipertensi  adalah  dengan  mengkonsumsi  antioksidan.  Mengkudu  ( Morinda  citrifolia L). merupakan  tanaman  yang  terbukti  secara  empiris  dapat  menurunkan  tekanan  darah  dan  memiliki aktivitas  antioksidan.  Aktivitas  antihipertensi  daun  mengkudu  dipengaruhi  oleh  senyawa  fenolik dan  flavonoid.  Metode  ekstraksi  mempengaruhi  kadar  senyawa  dalam  ekstrak.  Penelitian  ini bertujuan  untuk  mengetahui  pengaruh  metode  ekstraksi  terhadap  kadar  total  fenol,  kadar  total flavonoid  dan  aktivitas  antioksidan  ekstrak  daun  mengkudu.  Metode  ekstraksi  yang  digunakan adalah  maserasi, Microwave  Assisted  Extraction dan  soklet.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa metode ekstraksi yang berbeda mempengaruhi kadar total fenol, kadar total flavonoid dan aktivitas antioksidan  ekstrak  daun  mengkudu.  Metode  Soklet  memberikan  kadar  total  fenolik,  kadar flavonoid total, dan aktivitas antioksidan tertinggi dibandingkan metode ekstraksi lainnya
Kata  kunci:  ekstrak  daun  mengkudu,  metode  ekstraksi,  kadar  total  fenolik,  kadar  total flavonoid, aktivitas antioksidan

## ABSTRACT
Excessive Reactive Oxygen Species (ROS) can cause hypertension. Prevention of the risk of hypertension  is  consume  an  antioxidant.  Noni  (Morinda  citrifolia  L).  is  a  plant  that  empirically proven  to  lower  blood  pressure  and  has  antioxidant  activity.  Antihypertensive  activity  of  noni leaves is influenced by phenolic  and flavonoid compounds. The extraction method affects the levels of compound in extracts. The aims of study is determine the effect of the extraction method on the total  phenolic  level,  total  flavonoid  level  and  antioxidant  activity  of  noni  leaf  extract.  The extraction  methods  are  maceration,  Microwave  Assisted  Extraction  and  Soxhlet.  The  results showed  that  the  different  extraction  methods  affected  the  total  phenol  level,  total  flavonoid  level and  antioxidant  activity  of  the  noni  leaf  extract.  The  Soxlet  method  provides  the  highest  total phenolic level, total flavonoid level and antioxidant activity than other extraction methods.
.
Keywords : Noni leaf extract, extraction method , total phenolic level, total flavonoid level and antioxidant activity
Corresponding author: Septiana Laksmi Ramayani Prodi DIII Farmasi Politeknik Katolik Mangunwijaya Jl. Gajahmada No 91. Semarang Email: septianaLR@gmail.com

## PENDAHULUAN
Hipertensi  merupakan  penyakit  yang  sering  disebut  sebagai sillent  killer .  Menurut  data Riskesdas  (2018),  prevalensi  hipertensi  di  Indonesia  mencapai  34,1%  pada  usia  18  tahun  ke  atas. Hipertensi  dapat  disebabkan  oleh  tingginya  kadar  ROS  ( Reactive  Oxygen  Species )  yang menghambat  aliran  oksigen  ke  jantung  dan  otak. Salah  satu  alternatif  pencegahan  risiko  penyakit hipertensi  dapat  dilakukan  dengan  mengkonsumsi  antioksidan. Senyawa  antioksidan  merupakan senyawa yang dapat menghambat reaksi oksidasi dengan mengikat radikal bebas dan molekul yang sangat  reaktif  sehingga  tubuh  terlindungi  dari  penyakit  degeneratif  seperti  hipertensi.    Salah  satu tanaman  obat  yang  secara  empiris  telah  banyak  digunakan  untuk  pengobatan  hipertensi  dan memiliki aktivitas antioksidan adalah mengkudu ( Morinda citrifolia L).
Menurut  Jamaludin  (2015),  jus  buah  mengkudu  yang  dikonsumsi  sebanyak  dua  kali  sehari selama  3  hari  pada  saat  20-30  menit  sebelum  sarapan  dan  makan  malam  mampu  menurunkan tekanan  darah  sebesar  10-20  mmHg.  Penelitian  Wigati  (2015),  menyebutkan  bahwa  selain  buah mengkudu,  daun  mengkudu  juga  memiliki  aktivitas  farmakologi  sebagai  antihipertensi.  Aktivitas hipertensi  daun  mengkudu  dipengaruhi  oleh  adanya  kandungan  senyawa  fenolik  dan  flavonoid. Kadar  fenolik  dan  flavonoid  ekstrak  daun  mengkudu  yang  diekstraksi  secara  maserasi  sebesar 3,02%  b/b  GAE  dan  0,46%  b/b  KE  (Rohman,  2006).  Ekstrak  daun  mengkudu  yang  diekstraksi secara maserasi juga diketahui memiliki aktivitas antioksidan yang rendah dengan nilai IC 50 244,98 ppm (Rohman, 2007).
Aktivitas  farmakologis  suatu  ekstrak  dipengaruhi  oleh  kadar  total  senyawa  aktif  yang terkandung  dalam  ekstrak.  Besarnya  kandungan  senyawa  aktif  dalam  ekstrak,  salah  satunya dipengaruhi oleh  metode  ekstraksi yang  digunakan.  Metode  ekstraksi maserasi merupakan metode ekstraksi dingin yang dilakukan dengan cara merendam sampel menggunakan pelarut yang sesuai. Pada  maserasi  proses  ekstraksi  berjalan  hingga  tercapainya  kesetimbangan  konsentrasi  di  dalam dan  di luar sel sehingga terjadi kejenuhan pada pelarut dan senyawa yang  diperoleh tidak  optimal (BPOM, 2012). Salah satu cara untuk meningkatkan kandungan senyawa dan aktivitas ekstrak daun mengkudu dapat dilakukan  modifikasi  metode  ekstraksi yang digunakan, yaitu dengan Microwave Assisted Extraction (MAE) dan metode soklet.
MAE  merupakan  modifikasi  maserasi  yang  memanfaatkan  radiasi  gelombang  mikro  untuk memanaskan  pelarut  secara  cepat  dan  efisien  (Jain,  2011).  Soklet  merupakan  penyarian  yang dilakukan  berulang-ulang  dan  menghindarkan  terjadinya  kejenuhan  dengan  jumlah  pelarut  yang relatif  tetap  (BPOM,  2013). Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  pengaruh  metode ekstraksi terhadap kadar total fenolik, kadar total flavonoid  dan aktivitas antioksidan  ekstrak daun mengkudu.

## METODE PENELITIAN
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini serbuk daun mengkudu, Metanol (Merck), asam galat (Merck), FeCl 3 , Folin-Ciocalteau (Merck), Na 2 CO 3 , serbuk Mg, HCl, kuersetin Alat (Sigma), AlCl 3 (Merck),  CH 3 COOH,  DPPH  (Aldrich).  Alat  yang  digunakan  adalah  alat  gelas  (Pyrex), Neraca Analitik (Mettler Toledo), microwave (Metrowealth), alat  soklet, shaker, moisture analyzer (Ohaus), dan spektrofotometer UV-Vis (Mini Shimadzu 1240).
a. Ekstraksi
Masing-masing metode ekstraksi menggunakan 40 gram serbuk daun mengkudu dan 400 mL pelarut metanol teknis masing-masing dilakukan tiga kali replikasi.
i. Maserasi
Ekstraksi dilakukan selama 4x24 jam dengan penggantian pelarut sebanyak 400 mL setiap 24 jam.
ii. Microwave Assisted Extraction
Ekstraksi  dilakukan  pada  suhu  50°C  selama  2  menit,  secara  berkala  radiasi  dihentikan dengan interval waktu tiap 15 detik.
iii. Soklet Ekstraksi dilakukan pada suhu 60-65°C hingga cairan dalam tube extractor menjadi jernih.
Masing-masing  filtrat  hasil  ekstraksi  diuapkan  diatas  waterbath  pada  suhu  <50°C  sampai terbentuk  ekstrak  kental.  Masing-masing  ekstrak  dilakukan  kontrol  kualitas  meliputi  organoleptis, susut pengeringan dan perhitungan rendemen.
(1)
b.  Uji kualitatif
i. Senyawa fenol
Sebanyak  0,1  gram  ekstrak  daun  mengkudu  dilarutkan  dalam  5,0  mL  etanol  96%  dan ditambahkan dengan 2 tetes larutan FeCl 3 1%. Terbentuknya warna hijau, merah, ungu, biru atau hitam menunjukkan adanya senyawa fenolik (Harbone, 1987).
ii. Senyawa flavonoid
Sebanyak  0,1  gram  ekstrak  daun  mengkudu  dilarutkan  dalam  5,0  mL  etanol  96%  dan ditambahkan  dengan  0,1  gram  serbuk  Mg  dan  1  mL  HCl  pekat,  dan  dikocok  perlahan. Terbentuknya  warna  merah,  kuning  atau  jingga  menunjukkan  adanya  senyawa  flavonoid (Hanani, 2015).
iii. Aktivitas antioksidan
Sebanyak  0,1  gram  ekstrak  daun  mengkudu  dilarutkan  dalam  5,0  mL  etanol  96%  dan ditambahkan  dengan  4  mL  larutan  DPPH  (0,075mM).  Terbentuknya  warna  kuning menunjukkan adanya aktivitas antioksidan (Molyenux, 2004).
c. Uji kuantitatif
i. Senyawa fenol
Sebanyak  1  mL  dari  masing-masing  deret  baku  larutan  asam  galat  dan  larutan  ekstrak dimasukkan  dalam  masing-masing  tabung,  ditambahkan  5  mL  reagen  Folin-Ciocalteau (1:10) dan 4 mL Na 2 CO 3 1 M. Larutan diinkubasi selama 25 menit dan diukur absorbansinya pada  panjang  gelombang  748,20  nm.  Kadar  total  fenolik  dinyatakan  dalam  GAE  sebagai miligram ekivalensi asam galat per gram ekstrak.  Kadar total fenolik dapat dihitung dengan persamaan (2).
(2)
Keterangan : C   = konsentrasi V   = volume ekstrak fp  = faktor pengenceran g   = berat sampel yang digunakan (g)
ii. Senyawa flavonoid
Sebanyak  1  mL  dari  masing-masing  deret  baku  larutan  kuersetin  dan  larutan  ekstrak dimasukkan  dalam  masing-masing  tabung,  ditambahkan  1  mL  AlCl 3 10%  dan  8  mL CH 3 COOH 5%. Larutan diinkubasi selama 14 menit dan diukur absorbansinya pada panjang gelombang  413,90  nm.  Kadar  total  flavonoid  dinyatakan  dalam  KE  sebagai  miligram ekivalensi  kuersetin  per  gram  ekstrak.  Kadar  total  flavonoid  dapat  dihitung  dengan persamaan (2).
iii. Aktivitas antioksidan
Sebanyak  0,1  mL  dari  masing-masing  deret  baku  larutan  asam  galat    dan  larutan  ekstrak dimasukkan  dalam  masing-masing  tabung,  ditambahkan  4  mL  larutan  DPPH  0,075mM. Absorbansi  larutan  diukur  pada  panjang  gelombang  515,9  nm.  Aktivitas  antioksidan dinyatakan dalam persentase aktivitas antioksidan dan dihitung dengan persamaan (3).
(3)
d. Analisis data
Data yang  diperoleh  dianalisa secara statistik  dengan  uji One  way Analysis of Variance dan dilanjutkan dengan uji Post-Hoc Bonferroni dengan taraf kepercayaan 95%.

## Hasil dan Pembahasan
Ekstrak  daun  mengkudu  tiap  metode  ekstraksi  dilakukan  kontrol  kualitas  untuk  menjaga mutu dan kualitas dari ekstrak yang dihasilkan. Hasil kontrol kualitas ekstrak daun mengkudu dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Kontrol Kualitas Ekstrak Daun Mengkudu pada Berbagai Metode Ekstraksi
Parameter Metode ekstraksi Maserasi (Ekstrak A) MAE (Ekstrak B) Soklet (Ekstrak C) Organoleptis a. Bentuk b. Warna
c. Bau d. Rasa Ekstrak kental Hijau kehitaman Khas Pahit Ekstrak kental Hijau kehitaman Khas Pahit Ekstrak kental Hijau kehitaman Khas Pahit Susut pengeringan 1,99 a 2,62 a 5,08 b Rendemen 19,08 a 20,23 a 25,21 b
Subscript yang berbeda menunjukkan adanya perbedaan bermakna (p<0,05)
Perbedaan  metode  ekstraksi  menunjukkan  organoleptis  yang  sama.  Warna  ekstrak  yang dihasilkan menunjukkan adanya perubahan warna dari warna serbuk simplisia yaitu berwarna hijau menjadi  hijau  kehitaman.  Perubahan  warna  disebabkan  karena  adanya  reaksi  oksidasi  akibat pemanasan  saat  penguapan  filtrat  menjadi  ekstrak.  Rasa  pahit  ekstrak  daun  mengkudu  karena adanya  senyawa  alkaloid  (Halimah  dkk,  2018).  Senyawa  alkaloid  merupakan  golongan  senyawa yang bersifat basa dan mengandung unsur nitrogen (N) dan berasa pahit.
Perbedaan  metode  ekstraksi  menunjukkan  adanya  perbedaan  yang  signifikan  ( p<0,05 )  pada pengujian susut pengeringan dan rendemen. Rendemen tertinggi ditunjukkan pada metode ekstraksi soklet.  Metode  soklet  merupakan  metode  ekstraksi  yang  menggunakan  pelarut  yang  selalu  baru dengan bantuan alat khusus dan berjalan secara kontinyu, sehingga dapat meminimalisir terjadinya kejenuhan  dan  menyebabkan  senyawa  yang  tersari  semakin  banyak.  Hasil  analisa  statistik  susut pengeringan  dan  rendemen  pada  metode  maserasi  dan  MAE  menunjukkan  perbedaan  yang  tidak
signifikan  ( p>0,05 )  karena  kedua  metode  tersebut  memiliki  prinsip  yang  sama  yaitu  perendaman sehingga  ketika  konsentrasi  di  dalam  sel  dan  diluar  sel  setimbang  (jenuh)  tidak  akan  terjadi perpindahan massa lagi dari dalam sel simplisia ke pelarut.
Masing-masing  ekstrak  dilakukan  uji  kualitatif  sebagai  uji  pendahuluan  pada  uji  kuantitatif. Hasil  uji  kualitatif  ekstrak  daun  mengkudu  menunjukkan  hasil  positif  senyawa  fenolik  yaitu terbentuknya  warna  coklat  kehitaman.  Perubahan  warna  terjadi  karena  senyawa  fenol  bereaksi dengan  FeCl 3 membentuk  senyawa  kompleks.  Senyawa  kompleks  dapat  berwarna  karena  adanya transisi  elektron  dan  ion  pusat  akibat  adanya  ligan  (Sahoo  dkk,  2012).  Baku  pembanding  yang digunakan  adalah  asam  galat,  hasil  pengujian  menunjukkan  terbentuknya  warna  biru  setelah penambahan dengan FeCl 3 .
Hasil  uji  kualitatif  ekstrak  daun  mengkudu  menunjukkan  hasil  positif  senyawa  flavonoid yang ditunjukkan dengan adanya perubahan warna ekstrak yang semula berwarna hijau kehitaman menjadi  kuning  jingga.  Perubahan  warna  terjadi  karena  logam  Mg  dan  HCl  pekat  mereduksi  inti benzopiron  pada  flavonoid  dan  membentuk  garam  flavilium (Hanani,  2015).  Hasil  pengujian menunjukkan  warna  yang  hampir  sama  pada  pengujian  baku  pembanding  kuersetin  yaitu terbentuknya  warna  kuning  jingga.  Hasil  uji  kualitatif  aktivitas  antioksidan  menunjukkan  hasil positif  dengan  adanya  perubahan  warna  larutan  DPPH  dari  ungu  menjadi  kuning  setelah penambahan  ekstrak  karena  adanya  kemampuan  mengikat  elektron  yang  tidak  berpasangan  dari senyawa radikal (Molyneux, 2004). Hasil uji kualitatif ekstrak pada berbagai metode  dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2. Hasil Uji Kualitatif Ekstrak Daun Mengkudu pada Berbagai Metode Ekstraksi
Pengujian Warna blanko larutan ekstrak Pereaksi Warna larutan ekstrak + pereaksi Maserasi MAE Sokletasi Fenolik Coklat FeCl 3
coklat kehitaman   coklat kehitaman coklat kehitaman
Flavonoid Coklat Mg + HCl kuning jingga kuning jingga kuning jingga Antioksidan Coklat DPPH kuning kuning kuning
Penentuan kadar total fenolik ekstrak daun mengkudu menggunakan asam galat sebagai baku pembanding.  Persamaan  regresi  linier  asam  galat  yang  diperoleh  adalah  y  =  0,098x  +  0,0493 dengan  koefisien  relasi  r  =  0,999.  Nilai  koefisien  relasi  yang  mendekati  1  menunjukkan  bahwa kurva baku yang diperoleh semakin mendekati linier (Gandjar dan Rohman, 2007).
Penentuan  kadar  total  flavonoid  ekstrak  daun  mengkudu  menggunakan  kuersetin    sebagai baku  pembanding.  Kuersetin  merupakan  flavonoid  golongan  flavonol  (Chang  dkk,  2002). Persamaan  regresi  linier  yang  diperoleh  pada  kurva  baku  kuersetin  adalah  y  =  0,005x  +  0,143 dengan koefisien relasi r = 0,999.
Aktivitas antioksidan ekstrak daun mengkudu dilakukan dengan metode DPPH. Prinsip kerja metode  DPPH  adalah  adanya  atom  hidrogen  dari  senyawa  antioksidan  yang  berikatan  dengan elektron  bebas  pada  senyawa  radikal  sehingga  menyebabkan  perubahan  dari  radikal  bebas ( diphenylpicrylhydrazyl) menjadi senyawa non-radikal ( diphenylpicrylhydrazine) . Adanya senyawa antioksidan  menyebabkan  perubahan  warna  larutan  DPPH  dari  warna  ungu  gelap  menjadi  warna kuning. Makin kuat senyawa antioksidan untuk menangkal radikal DPPH, makin pudar warna yang teramati (Setiawan dkk, 2018).
Tabel 2. Kadar Total Fenolik, Kadar Total Flavonoid dan Aktivitas Antioksidan Ekstrak
Daun Mengkudu pada Berbagai Metode Ekstraksi Parameter Metode ekstraksi Maserasi (Ekstrak A) MAE (Ekstrak B) Soklet (Ekstrak C) Kadar Total Fenolik (mgGAE/g ekstrak) 6,03±0,01 a 8,80±0,01 b 11,50±0,28 c Kadar Total Flavonoid (mgKE/g ekstrak) 2,07±0,04 a 6,45±0,02 b 10,51±0,04 c Aktivitas Antioksidan (%) 6,64±0,12 a 15,55±0,08 b 27,78±0,04 c
Subscript yang berbeda menunjukkan adanya perbedaan signifikan ( p<0,05 )
Tabel  2  menunjukkan  bahwa  perbedaan  metode  ekstraksi  memberikan  perbedaan  yang signifikan  terhadap  kadar  total  fenolik,  kadar  total  flavonoid  dan  aktivitas  antioksidan.  Persentase aktivitas  antioksidan  menunjukkan  besarnya  aktivitas  hambatan  radikal  bebas  yang  dapat dihasilkan  oleh  senyawa  dalam  ekstrak.  Semakin  banyak  senyawa  radikal  bebas  (DPPH)  yang dihambat maka semakin besar persentase aktivitas antioksidan yang dihasilkan. Kadar total fenolik, kadar total flavonoid dan aktivitas antioksidan tertinggi ditunjukkan pada metode  ekstraksi  soklet, diikuti  MAE  dan  maserasi.  Hasil  ini  berbanding  lurus  dengan  rendemen  ekstrak  yang  dihasilkan yaitu  pada  metode  ekstraksi  soklet,  MAE  dan  paling  kecil  pada  maserasi.    Rendemen  tertinggi menghasilkan  kadar  senyawa  dan  aktivitas  yang  paling  tinggi  pula.  Semakin  banyak  rendemen yang  dihasilkan  maka  semakin  banyak  pula  kadar  senyawa  yang  terkandung  dan  semakin  besar aktivitasnya.  Aktivitas  antioksidan  ekstrak  daun  mengkudu  diduga  kuat  karena  adanya  senyawa fenolik  dan  flavonoid  dalam  ekstrak  tersebut  (Rao  dan  Subramanian,  2009).  Senyawa  fenol  akan bereaksi  dengan  radikal  bebas  dengan  mendonorkan  atom  hidrogen  (H)  kepada  radikal  DPPH sehingga  tereduksi  menjadi  bentuk  yang  lebih  stabil.  Aktivitas  antioksidan  senyawa  fenolik  juga berkaitan  dengan  kemampuannya  untuk  mengkhelat  logam  ion  yang  terdapat  dalam  produksi radikal bebas (Pereira dkk, 2009).  Senyawa flavonoid  mengandung gugus cathecol (O-dihidroksi) pada  cincin  B  yang  memberikan  kemampuan  penangkapan  radikal  bebas  yang  tinggi  (Middleton dkk, 2000).

## KESIMPULAN
Perbedaan  metode  ekstraksi  berpengaruh  signifikan  terhadap  kadar  total  fenolik,  kadar total  flavonoid  dan  aktivitas  antioksidan  ekstrak  daun  mengkudu.  Hasil  tertinggi  diperoleh  pada metode ekstraksi soklet, diikuti MAE dan maserasi.

## DAFTAR PUSTAKA
BPOM,  R.I.,  2012, Pedoman  Teknologi  Formulasi  Sediaan  Berbasi  Ekstrak ,  Vol.  2.,  Badan Pengawas Obat dan Makanan Republik Indonesia:Jakarta
Chang,  C.C.,  Yang.,  M.H.,  Wem,  H.M.  &  Chern,  J.C.,  2002,  Estimation  of  Total Flavonoid Content in Propolis by Two Complementary Colorimetric Methods, Journal of Food and Drug Analysis , Vol. 10 (3):178-182.
Halimah, H., Suci, D.M., Wijayanti, I., 2018, Studi Potensi Penggunaan Daun Mengkudu ( Morinda citrifolia L.)  Sebagai  Bahan  antibakteri Escherichia  coli dan Salmonella  typhimurium , Jurnal Ilmu Pertanian Indonesia , Vol 24 (1): 56-64
Hanani, E., 2014, Analisis Fitokimia , Buku Kedokteran EGC:Jakarta
Harbone, J.B., 1987, Metode Fitokimia : Penuntun Cara Modern Menganalisa Tumbuhan , Penerbit

## ITB:Bandung
Jamaludin,  2015,  Pemberian  Mengkudu  Dalam  Menunrunkan  Tekanan  Darah  pada  Pasien Hipertensi  di  Dukuh  Susukan  Desa  Samirejo  Kecamatan  Dawe  Kabupaten  Kudus, Jurnal Profesi dan Keperawatan.
Middleton  Jr.  E.,  Kandaswami,  C.,  and  Theoharis,  C.T.,  2000, The  Effects  of  Plant  Flavonoid  on Mammalian Cells: Implication for Inflamation, Heart Disease and Cancer, Pharmacol Rev ., 52 (4), 673-751
Molyneux,  P.,  2004,  The  Use  of  The  Stable  Free  Radical  Diphenylpicrylhydrazyl  (DPPH)  for Estimating Antioxidant Activy, Journal of Science and Technology , 26(2), 211-219
Pereira, D., M., Valentao, P., Pereira, J., A., dan Andrade, B., 2009, Phenolics : From Chemistry to Biology, Molecules, 14, 2202-2211.
Rao,  U.S.M.,  dan  Subramanian,  S.  2009,  Biochemical  Evaluation  of  Antihyperglycemic  and Antioxidative Effects of Morinda citrifolia Fruit Extract Studied in Streptozotocin-Induced Diabetic Rats, Medicinal Chemistry Research , 18:433-446.
Riskesdas,  2018. Badan  Penelitian  dan  Pengembangan  Kesehatan .  Kemenkes  RI  : Jakarta.
Rohman,  A.,  Riyanto,  S.  dan  Utari,  D.,  2006.  Antioxidant  Activities  Total  Phenolic and  Flavonoid  Contents  Of  Ethyl  Acetate  Extract  Of  Mengkudu  (Morinda citrifolia  L.)  Fruit  and  Its  Fractions. Majalah  Farmasi  Indonesia .  17  :  136- 142
Rohman,  Abdul.,  Sugeng.  R.,  Nurul  K.H.,  2007.  Aktivitas  Antioksidan  Kandungan Fenolik  Total  dan  Flavonoid  Total  Daun  Mengkudu  (Morinda  citrifolia  L.), Agritech (27)
Sahoo,  B.,  Nayak,  N.  C.,  Samantaray,  A.,  and  Pujapanda,  P.  K.,  2012. Inorganic Chemistry . PHI Learning Pvt : Dehli
Setiawan  F.,  Yunita  O.,  Kurniawan  A.,  2018,  Uji  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Etanol  Kayu Secang  ( Caesalpinia  sappan )  Menggunakan  Metode  DPPH,  ABTS  dan  FRAP, Media Pharmaceutuca Indonesiana , Vol 2 (2), 82-89.
Wigati.  D.,  2015.  Efek  Ekstrak  Etanolik  Daun  dan  Buah  Morinda  citrifolia  L. Terhadap  Tekanan  Darah  dan  Gambaran  Hispatologi  Ginjal  Tikus  Hipertensi Terinduksi
Deksametason. Tesis . Universitas Gajah Mada : Yogyakarta.