## EVALUATION OF ANTIHYPERURICEMIC ACTIVITY OF ETHANOL
EXTRACTS SURUHAN HERB ( PEPEROMIA PELLUCIDA L.), CELERY HERB ( APIUM GRAVEOLENS L.) AND EXTRACT COMBINATIONS: SCIENTIFIC EVIDENCE-BASED IN VIVO STUDIES
Yogi Rahman Nugraha 1,2* , Dani Sujana 2 , Faizatun 1 , Yunahara Farida 1
1 Fakultas Farmasi Universitas Pancasila
Jl. Raya Lenteng Agung No.56-80, RT.1/RW.3, Srengseng Sawah, Jakarta, Kota Jakarta Selatan, Daerah Khusus Ibukota Jakarta, 12640, Indonesia
2 Program Studi Diploma III STIKes Karsa Husada Jl. Subyadinata No.7, Jayaraga, Kec. Tarogong Kidul, Kabupaten Garut, Jawa Barat, 44151, Indonesia
*Corresponding author: Yogi Rahman Nugraha ( cep.ogi28@gmail.com )

## ARTICLE HISTORY
Received: 28 July 2021                                Revised: 18 January 2022             Accepted: 21 January 2022

## Abstract
Hyperuricemia  is  a  condition  in  which  uric  acid  levels  are  elevated.  Hyperuricemia  is caused by a genetic disorder in the body's metabolic system that prevents the body from removing  uric  acid  from  the  body.  Flavonoids  and  alkaloids  are  compounds  that  are believed  to  be  able  to  reduce  uric  acid  levels  in  the  blood  by  inhibiting  the  work  of xanthine oxidase and superoxidase. Herbs suruhan and celery have long been used as traditional medicine to treat gout complaints. In this study, it was reported that the ethanol extract of suruhan and celery herbs as well as the combined extract showed significant antihyperuricemic  activity  against  negative  controls  during  observation  (p<0.05).  The dose  of  250  mg/kgBW  showed  the  best  activity  (combination  of  ethanol  extract  of suruhan  herbs  ( Peperomia  pellucida 75%)  ethanol  extract  of  celery  herbs  ( Apium graveolens 25%) with a decrease in uric acid of 58.4%.
Key words: antihyperuricemia, celery herbs, extracts combination, suruhan herbs

## EVALUASI AKTIVITAS ANTIHIPERURISEMIA EKSTRAK
ETANOL HERBA SURUHAN ( PEPEROMIA PELLUCIDA L.), HERBA SELEDRI ( APIUM GRAVEOLENS L.) DAN KOMBINASI

## EKSTRAK: STUDI IN VIVO BERBASIS BUKTI ILMIAH

## Abstrak
Hiperurisemia adalah suatu kondisi dimana kadar asam urat meningkat. Hiperurisemia disebabkan oleh kelainan genetik pada sistem metabolisme tubuh yang mencegah tubuh mengeluarkan asam urat dari tubuh. Flavonoid dan alkaloid merupakan senyawa yang dipercaya mampu menurunkan kadar asam urat dalam darah dengan cara menghambat kerja xantin oksidase dan superoksidase. Herba suruhan dan seledri telah lama dipakai sebagai  obat  tradisional  untuk  mengatasi  keluhan  asam  urat.  Pada  penelitian  ini dilaporkan  bahwa  ekstrak  etanol  seledri  dan  herba  seledri  serta  ekstrak  gabungan
menunjukkan aktivitas antihiperurisemia yang signifikan terhadap kontrol negatif selama pengamatan (p<0,05). Dosis 250 mg/kgBB menunjukkan aktivitas paling baik (kombinasi ekstrak etanol herba suruhan ( Peperomia pellucida 75%) ekstrak etanol herba seledri ( Apium graveolens 25%) dengan penurunan asam urat sebesar 58,4%.
Kata kunci: antihiperurisemia, herba seledri, herba suruhan, kombinasi ekstrak

## Pendahuluan
Hiperurisemia  merupakan  suatu kondisi  patologis,  ditandai  dengan meningkatnya kadar asam urat darah melewati batas normal. Kadar asam urat normal pada perempuan berkisar  2,4-6  mg/dL,  sedangkan  laki-laki  antara  3,0-7,0  mg/dL. 1 Berdasarkan  data Riskesdas  tahun  2018 melaporkan  angka  kejadian  hiperurisemia  di  Indonesia  secara keseluruhan sebesar 11,9%. Secara spesifik, jika dilihat berdasarkan diagnosis sebesar 24,7%, serta dari karateristik umur angka kejadian tertinggi terjadi pada umur ≥ 75 tahun sebesar 54,8%. 2
Asam  urat  adalah  terminasi  hasil  oksidasi  dari  degradasi  purin.  Di  dalam  tubuh, xantin oksidoreduktase mengkatalisis hidroksilasi oksidatif hipoksantin menjadi xantin, selanjutnya menjadi asam urat, disertai produksi spesies oksigen reaktif (ROS). Asam urat  biasanya membentuk  ion  dan garam  yang  dikenal  sebagai  kristal  urat  dan  asam urat dalam serum. Secara klinis, kelebihan produksi atau kekurangan ekskresi asam urat mengakibatkan peningkatan kadar asam urat serum. 3 Pada manusia, sumber utamanya berasal  dari  produksi  endogen  dan  asupan  makanan. 4 Kumpulan  purin  eksogen disintesis terutama di usus, hati, serta jaringan lain diantaranya endotel vaskular, otot dan  ginjal.  Sedangkan  yang  bersumber  dari  makanan  sebagian  besar  berasal  dari protein hewani. 5 Saat ini, obat pilihan pertama untuk terapi jangka panjang hiperurisemia adalah  inhibitor  xantin  oksidase  (XO)  kompetitif  misalnya,  allopurinol,  oxypurinol  dan febuxostat yang mampu menurunkan kadar asam urat serum. 6
Banyak  senyawa  yang  berasal  dari  tanaman  memiliki  potensi  antihiperurisemia. Dalam  studi in  vitro ,  flavonoid,  alkaloid,  minyak  esensial,  senyawa  fenolik,  tanin, glukosida iridoid, dan kumarin menunjukkan potensi efek penurunan kadar asam urat dengan mekanisme penghambatan XO, serta triterpenoid dan xantofil bertindak melalui efek antiinflamasinya. 7 Pengobatan penyakit menggunakan tanaman obat mendapatkan minat baru dan penelitian tentang tanaman obat telah meningkat di seluruh dunia karena beranggapan    efek  samping  yang  lebih  sedikit. 8 Flavonoid  adalah  senyawa  yang dihasilkan  produk  bahan  alam  dengan  berbagai  efek  biokimia  dan  antioksidan  yang menguntungkan.  Senyawa  tersebut  dikenal  sebagai  inhibitor  kuat  untuk  beberapa enzim, salah satu diantaranya xantin oxidase. 9
Indonesia  merupakan  negara  terbesar  kedua  di  dunia  akan  keanekaragaman hayatinya,  dengan  28.000  spesies  tumbuhan,  dari  2.500  spesies 10,  11 termasuk  herba suruhan  ( Peperomia  pellucida )  merupakan  tanaman  yang  banyak  digunakan  sebagai obat  asam  urat.  Berbagai  pengujian  membuktikan  bahwa  ekstrak  suruhan  memiliki aktivitas  antihiperurisemia  secara in  vitro .  Telah  diketahui  bahwa  ekstrak  tersebut mampu menginhibisi  xantin oksidase dengan nilai IC 50 40,79 bpj untuk ekstrak etanol, sedangkan IC 50 43,11 bpj untuk ekstrak air. 12 Selain itu, fraksi etil asetat-etanol juga telah dievaluasi dengan nilai IC 50 5,0 ppm. 13 Hasil penelitian lain secara in vivo menunjukan bahwa  ekstrak  etanol  suruhan  pada  dosis  200  mg  dapat  menurunkan  kondisi hiperurisemia secara bermakna. 14 Tumbuhan lainnya yang memiliki efek antihiperurisemia yaitu seledri ( Apium graveolens L). Tanaman ini  telah terbukti efektif dan  berpotensi  sebagai  antihiperurisemia  pada  penderita  gout  arthtritis  dan  dapat dijadikan  sebagai  alternatif  untuk  pengobatan  asam  urat. 15 Selain  itu,  aktivitas
antihiperurisemia  secara in  vivo telah  dilaporkan  dengan  dosis  efektifnya  1,8  g/1,5 kgBB. 16
Penelitian ini bertujuan untuk mengevaluasi aktivitas antihiperurisemia ektrak etanol dari herba suruhan dan seledri serta kombinasi keduanya menggunakan model in vivo yaitu hewan uji mencit dibuat hiperurisemia dengan induksi kalium oksonat dan jus hati ayam.

## Metode

## Alat
Alat  yang  digunakan  pada  penelitian  diantaranya  oven  (Sharp),  mesin  penggiling (Fomac FGD-15) dan ayakan nomor 40 (Versa Jaya), beaker glass (Pyrex), corong kaca (Pyrex), batang pengaduk (Pyrex), tabung reaksi (Pyrex), timbangan analitik (Durascale dabe223), rotary  evaporator  ( IKA  RV  10 Digital  V),  strip  tes  asam  urat  ( Easy  Touch ), spuit  injeksi  (OneMed),  pencekok  oral  mencit,  kain  flannel,  kertas  saring  dan  botol maserasi.

## Bahan
Bahan utama pada penelitian ini antara lain herba suruhan dilengkapi dokumen hasil determinasi  di  Herbarium  Jatinangor,  Laboratorium  Taksonomi  Tumbuhan,  FMIPA Universitas Padjadjaran, Jatinangor, Indonesia, dengan   No.18/HB/11/2020 dan herba seledri dengan No.17/HB/11/2020. Kedua herba diperoleh dari Kabupaten Garut, masa panen bulan November 2020. Bahan lainnya yaitu tablet Allopurinol (Kimia Farma), Na- CMC (Brataco), jus hati ayam mentah 100%, kalium oksonat (Sigma Aldrich), etanol 70% teknis (Brataco).

## Preparasi Sampel
Sampel uji berupa herba seledri dan suruhan segar masing-masing sebanyak 15 kg dan 27 kg dikumpulkan dan dipisahkan dari pengotor, kemudian pencucian dilakukan dengan  air  mengalir,  kemudian  pengeringan  menggunakan  oven  pada  suhu  60 0 C sampai bobotnya konstan. Setelah kering, masing-masing simplisia kering disortasi dan kemudian dibuat serbuk dengan penggiling, selanjutnya diayak dengan mesh 40 hingga diperoleh serbuk halus.

## Ekstraksi
Metode  ekstraksi  mengikuti    Himawan 17,18 dengan  modifikasi.  Serbuk  simplisia herba suruhan 630 gram dan seledri 750 gram dimaserasi menggunakan etanol 70% (3 x  24  jam)  dengan  perbandingan 5:1.  Proses penggantian  pelarut  dilakukan  pada  jam yang  sama  setiap  harinya.  Selanjutnya,  filtrat  yang  diperoleh  dihilangkan  pelarutnya pada vakum putar dengan suhu 60 0 C hingga didapat ekstrak kental. Terhadap ekstrak kemudian  hilangkan  kembali  pelarut  yang  tersisa  menggunakan waterbath (60 0 C) sampai ekstrak pekat. Bobot ekstrak dihitung rendemen dan DER nativenya.

## Persiapan Hewan Coba
Sebanyak 44 ekor mencit putih jantan Swiss Webster dengan usia sekitar 2-3 bulan dan  bobot  rata-rata  25-30  g  didatangkan  dari  Laboratorium  Farmakologi  dan  Terapi Fakultas  Kedokteran,  Universitas  Padjadjaran.  Selanjutnya,  mencit  diaklimatisasi selama  7  hari  dalam  keranjang  plastik  dengan  alas  sekam  yang  disimpan  dalam kandang berdimensi 50x100x50 cm. Pemberian pakan regular diberikan sehari dua kali, serta diberi minum adlibitum.

## Pengujian Aktivitas Antihiperurisemia
Prosedur  pengujian  ini  telah  disetuji  oleh  Komisi  Etik  Penelitian  Kesehatan dilengkapi  dengan  dokumen  No:  002/kepk-bth/III/2021. Sebelum  dilakukan  pengujian, mencit dipuasakan selama 18 jam tetapi masih diberikan minum adlibitum. Mula-mula, seluruh  mencit  diukur  kadar  asam  urat  darah  normalnya  (N),  kemudian  mencit dikelompokan secara acak menjadi 11 kelompok perlakuan. Setiap kelompok berjumlah 4 ekor mencit ( n =4).
Tabel 1. Kelompok Perlakuan Uji Aktivitas Antihiperurisemia
Kelompok Perlakuan Negatif CMC Na 0,5% b/v Positif Allopurinol 18 mg/kgBB Kelompok I EEHSUR 100 mg/kgBB Kelompok II EEHSUR 200 mg/kgBB Kelompok III EEHSUR 400 mg/kgBB Kelompok IV EEHSEL 100 mg/kgBB Kelompok V EEHSEL 200 mg/kgBB Kelompok VI EEHSEL 400 mg/kgBB Kelompok VII EEHSUR75%-EEHSEL25% 250 mg/kgBB Kelompok VIII EEHSEL50%-EEHSUR50% 500 mg/kgBB Kelompok IX EEHSUR25%-EEHSEL75% 750 mg/kgBB
Keterangan : EEHSUR = Ekstak etanol herba suruhan EEHSEL = Ekstak etanol herba seledri
Setelah  didapat  data  kadar  asam  urat  darah  normal,  selanjutnya  semua kelompok dibuat hiperurisemia dengan diinduksi kalium oksonat 300 mg/kgBB 0,2 ml/ 20gram bobot mencit rute intraperitoneal dan jus hati ayam per oral 0,2 ml/20gram bobot  mencit.  Setelah  1  jam  induksi,  semua  mencit  diukur  kadar  asam  uratnya. Selanjutnya,  seluruh  mencit  diberi  perlakuan  sesuai  kelomponya  yaitu  suspensi ekstrak uji, CMC Na dan Allopurinol. Pengukuran kadar asam urat dilakukan pada jam ke-1,  2,  3,  dan  4  setelah  perlakuan.  Pengambilan  darah  mencit  yaitu  dengan  cara memotong bagian ekor mencit sekitar 0,5-1 cm. Pengukuran kadar menggunakan alat Easy Touch ®. Data kadar asam urat darah mencit dikumpulkan dan dianalisis secara statistik. Persentase penurunan kadar asam urat dihitung menggunakan persamaan:

## Analisis Data
Kadar  asam  urat  darah  mencit  dianalisis  dengan sofware SPSS  versi  25.0 menggunakan  uji  ANOVA  ( One  Way  Anova ).  Uji  lanjutan  dengan  LSD  ( Least Significance Differen t) tingkat kepercayaan 95% (p<0,05).
Hasil Simplisia Kering (g) Ekstrak (g) Rendemen (%) DER native Herba Suruhan 630 216,17 34,31 2,91 Herba Seledri 750 330,12 44,01 2,27 Kelompok perlakuan Rerata kadar asam urat selama pengamatan (mg/dL) N T0 Jam ke-1 Jam ke-2 Jam ke-3 Jam ke-4 CMC Na 0.5% 3.8±0.29  9.3±0.62 9.9±1.23 10.0±1.44  9.0±0.58 8.1±0.63 Allopurinol 18 mg/kgBB 3.5±0.36  9.0±1.11  5.6±1.08*  3.7±0.56*  3.7±0.43*  3.2±0.10* EEHSUR 100mg/kgBB 3.5±0.35  9.3±0.78 8.2±2.00 7.3±1.35*  4.7±1.70*  5.3±0.76* EEHSUR 200mg/kgBB 3.9±0.80  9.4±1.45  6.4±0.48*  5.7±2.35*  4.0±0.71*  3.8±0.65* EEHSUR 400mg/kgBB 4.2±0.64  9.3±0.83  6.0±1.75*  5.4±1.79*  3.6±0.34* 3.4±0.23* EEHSEL 100mg/kgBB 4.3±0.65  9.1±0.78  10.3±0.64  7.0±1.26*  5.0±0.43*  5.0±0.55* EEHSEL 200mg/kgBB 3.7±0.49  9.4±0.92  10.1±4.08  6.9±1.56*  5.1±2.02*  4.1±1.54* EEHSEL 400mg/kgBB 3.8±0.33  9.3±2.15  6.3±0.96*  6.2±0.61*  4.6±1.14*  4.9±0.92* EEHSUR (75%)EEHSEL(25%) 250 mg/kgBB 3.6±0.30  9.1±0.33  5.5±0.50*  4.9±0.43*  3.6±0.58*  3.4±0.05* EEHSUR (50%)EEHSEL(50%) 500 mg/kgBB 3.6±0.40  9.4±0.57 7.6±0.97 6.8±0.54*  6.2±0.47*  5.8±0.56* EEHSUR (25%)EEHSEL(75%) 750 mg/kgBB 3.7±0.54  9.4±0.66 8.2±0.50 7.6±0.62*  7.2±0.47*  6.0±0.94*
Keterangan : N   = Rerata kadar asam urat normal T0 = Rerata kadar asam urat setelah 1 jam induksi kalium oksonat dan jus hati ayam *) Kadar asam urat berbeda bermakna terhadap kelompok kontrol negative (p<0,05).
Gambar 1. Grafik rerata persentase penurunan kadar asam urat darah mencit setelah perlakuan selama pengamatan 4 jam
4 3 ,8 6 3 ,3 5 9 ,6 6 0 ,2 17 ,0 2 6 ,9
4 7 ,9 3 4 ,5 3 4 ,9
4 3 ,6 5 5 ,7
5 2 ,8 3 9 ,5 4 5 ,9 5 9 ,8 5 7 ,8 -4 ,3 3 0 ,4 44 ,9 3 8 ,2 -2 ,5
3 1 ,7 4 3 ,2 4 8 ,8
3 5 ,9 3 8 ,4
4 9 ,0 3 9 ,8 4 4 ,8
5 0 ,9 5 9 ,8 5 8 ,4 22 ,8 3 1 ,9 3 1 ,9
2 8 ,6 1 7 ,5 2 4 ,4
2 0 ,8 2 5 ,5 -10,0 0,0 10,0 20,0 30,0 40,0 50,0 60,0 70,0 80,0 J A M   K E - 1 J A M   K E - 2 J A M   K E - 3 J A M   K E - 4

## P ENUR UNAN K AD AR S AM UR AT (% ) Allopurinol  18 mg/kgbb

## EEHSUR 100mg/kgBB

## EEHSUR 200mg/kgBB
EEHSUR 400mg/kgBB EEHSEL 100mg/kgBB EEHSEL 200mg/kgBB EEHSEL 400mg/kgBB
EEHSUR (75%)EEHSEL(25%)
EEHSUR (50%)EEHSEL(50%)
Tabel 2. Hasil Rendemen dan DER Native Ekstrak Etanol Herba Suruhan dan Herba Seledri
Tabel 3. Rerata  Perubahan  Kadar  Asam  Urat  Darah  Mencit  Sebelum  dan  Sesudah  Perlakuan Induksi  Kalium  Oksonat,  Jus  Hati  Ayam  dan  Pemberian  Ekstrak  Uji  dengan  Berbagai Dosis. Data yang di dapat di nyatakan dalam Rerata ± SD

## Pembahasan
Sumber obat dari bahan alami telah lama memainkan peran penting dalam bidang farmasi.  Organisasi  Kesehatan  memperkirakan  bahwa  80%  masyarakat  masih bergantung pada obat tradisional .19 Secara empiris, masyarakat memanfaatkan herba suruhan  dan  seledri  untuk  mengobati  penyakit  asam  urat.  Secara  umum,  tanaman menghasilkan  metabolit  sekunder  dengan  substituen  polar  dan  non-polar  sehingga kehadiran struktur kimia yang beragam akan menghasilkan aktivitas biologis yang luas. 20 Dalam penelitian ini, pelarut yang dipilih yaitu etanol 70%. Pemilihan pelarut merupakan titik  kritis  sebelum  melakukan  proses  ekstraksi.  Selektivitas  serta  kelarutan  harus dipertimbangkan  dalam  pemilihan  pelarut.  Etanol  adalah  pelarut  universal  sehingga dapat meningkatkan hasil ekstraksi dikarenakan dapat mengekstrak senyawa non-polar dan polar. Semakin besar rasio pelarut semakin tinggi hasil ekstrak yang didapatkan. 21 Metode  maserasi  menggunakan  pelarut  etanol  berair  akan  melunakan  dan menghancurkan  dinding  sel  tanaman  dan  akan  melarutkan  senyawa  fitokimia didalamnya.  Banyak  bukti  penelitian  melaporkan  bahwa  fraksi  flavonoid  berhasil diekstraksi  dengan  maksimal  dengan  cara  maserasi. 22 Penggunaan  kalium  oksonat sangat cocok untuk penelitian model in vivo . Kalium oksonat merupakan inhibitor uricase kompetitif  selektif  dengan  cara  memblokir  efek  uricase  hati  sehingga  sangat  efektif dalam  meningkatkan  asam  urat  terhadap  hewan  coba. 23 Selain  itu,    telah  dilaporkan bahwa  model  hiperurisemia  yang  diinduksi  oleh  kalium  oksonat  menyebabkan peningkatan ROS sehingga terjadi cedera ginjal yang mengakibatkan peningkatan asam urat. 24
Herba suruhan diketahui mengandung flavonoid dalam jumlah besar yang berfungsi sebagai antioksidan potensial, 25 sama halnya dengan hebra seledri. 26 Antioksidan telah terbukti  efektif  dalam  menangkal  ROS,  serta  bertanggungjawab  dalam  berbagai aktivitas  biologis  yang  bermanfaat. 26,27 Keberadaan  gugus  hidroksil  sangat mempengaruhi efek penghambatan atau mempengaruhi interaksi flavonoid dengan jalur katalitik  xantin  oxidase.  Selain  itu,  mekanisme  polifenol  dalam  menghambat  xantin oxidase    dengan  cara  mengikat  sisi  aktif  dan  memblok    masuknya  xanthine  dan pelepasan  asam  urat  dan  serta  difusi  radikal  bebas. 28 Serangkaian  penelitian  terus dilakukan untuk mengeksplorasi khasiat dari senyawa metabolit sekunder, khususnya berfokus pada senyawa flavonoid.
Kadar  asam  urat  darah  mencit  normal  sebelum  induksi  memiliki  kadar  yang bervariasi  yaitu  antara  3,5-4,3  mg/dL  (Tabel  2).  Setelah  diinduksi,  1  jam  kemudian seluruh  mencit  mengalami  peningkatan  kadar  asam  urat  (T0).  Berdasarkan  hasil pengukuran dengan strip tes, rata-rata puncak peningkatan kadar asam urat terjadi pada jam pertama yaitu berkisar 9,0-9,4 mg/dL, namun kelompok perlakuan EEHSEL 100 dan 200 mg/kgBB puncak peningkatan asam urat terjadi di jam kedua setelah induksi dan diberikan  perlakuan  dengan  rerata  kadar  asam  urat  berkisar  10,1-10,3  mg/dL. Sedangkan  kelompok  negatif,  puncak  pengingkatan  terjadi  pada  jam  ketiga  dengan rerata kadar asam urat sebesar 10,0 mg/dL.
Dalam  penelitian  ini,  aktivitas  antihiperurisemia  ditunjukkan  dengan  adanya penurunan kadar asam urat darah mencit setelah diberikan perlakuan, baik obat standar yaitu  allopurinol  maupun  ekstrak  uji.  Berdasarkan  hasil  analisis  statistik  (tabel  2) menunjukan bahwa Allopurinol sebagai kontrol positif berpengaruh signifikan terhadap penurunan kadar asam urat di seluruh periode pengamatan selama 4 jam dibandingkan dengan kelompok negatif (p<0,05). Persentase penurunan asam urat paling baik terjadi pada  jam  ke-2  sebesar  63,34%.  Allopurinol  merupakan  antihiperurisemia  yang umumnya sering digunakkan pada kondisi hiperurisemia. 29 Obat ini bekerja dengan cara dua cara diantaranya menginhibisi produksi hipoksantin dari xantin dan pembentukan asam urat dari hipoksantin sehingga kadar asam urat darah dapat dikendalikan. 30 Selain
itu, aktivitas yang sama juga terjadi pada semua kelompok ekstrak, dimana penurunan kadar asam urat darah di mulai dari jam ke-1, akan tetapi EEHSEL 100 dan 200 mg/kgBB pada  jam  ke-1  masih  mengalami  peningkatan  dan mulai  mengalami  penurunan  pada jam ke-2. Kelompok EEHSUR 200, 400mg/kgBB, EEHSEL 400mg/kgBB dan EEHSUR (75%)EEHSEL(25%)  250  mg/kgBB  mengalami  penurunan  kadar  asam  urat  secara bermakana  di  semua  periode  pengamatan  dibandingkan  dengan  kontrol  negatif (p<0,05).  Selanjutnya,  pada  jam  ke-2  seluruh  ekstrak  mengalami  penurunan  secara bermakna hingga akhir pengamatan di jam ke-4. Dari semua kelompok ekstrak, aktivitas antihiperurisemia  paling  baik  ditunjukkan  EEHSUR  (75%)EEHSEL(25%)  dosis  250 mg/kgBB  dengan  persentase  penurunan  yang  paling  besar  pada  jam  ke-1  dan  ke-3 dengan  masing-masing persentase penurunan sebesar 44,8 dan 59,8%. Ini lebih besar persentase penurunan kadar asam uratnya dari pada Allopurinol sebagai kontrol positif. Disisi  lain,  EEHSUR  400  mg/kgBB  lebih  besar  penurunannya  dibandingkan  dengan Allopurinol  pada  jam  ke-3  sebesar  59,8%  dan  sebanding  dengan  EEHSUR (75%)EEHSEL(25%)  dosis  250  mg/kgBB.  Dalam  penelitian  ini,  secara  keseluran membuktikan bahwa ekstrak etanol tunggal maupun kombinasi dengan berbagai dosis berpengaruh terhadap penurunan kadar asam urat darah mencit yang diinduksi kalium oksonat dan jus hati ayam.  Efek antihiperurisemia berbanding lurus dengan dosis, akan tetapi  ekstrak  kombinasi  dosis  kecil  yaitu  EEHSUR(75%)-EEHSEL(25%)  dosis  250 mg/kgBB  menunjukkan  persentase  penurunannya  lebih  besar  dari  pada  ekstrak kombinasi  yang  lainnya.  Kombinasi  ekstrak  tersebut  dengan  perbandingan  EEHSUR paling  besar  kandungannya  dibandingkan  dengan  EEHSEL.  Ini  menunjukkan  bahwa EEHSUR yang paling dominan akan kemampuannya dalam menurunkan kadar asam urat.  Hal  tersebut  diperkuat  dengan  nilai  persentase  masing-masing  ekstrak  tunggal EEHSUR  lebih  tinggi  persentase  penurunan  kadar  asam  uratnya  dari  pada  EEHSEL diseluruh periode pengamatan.

## Kesimpulan
Penelitian ini melaporkan bahwa ekstrak etanol herba suruhan dan herba seledri tunggal  serta  kombinasi  memiliki  aktivitas  antihiperurisemia  pada  mencit  yang terinduksi  kalium  oksonat  dan  jus  hati  ayam.  Aktivitas  paling  baik  ditunjukkan  oleh kombinasi  EEHSUR  (75%)EEHSEL(25%)  dosis  250  mg/kgBB  dengan  persentase penurunan kadar asam urat sebesar 58,4%.

## Ucapan Terima Kasih
Ucapan terima kasih ditujukan kepada Dr. apt. Yunahara Farida, M.Si. dan Dr. apt. Faizatun M.Si. yang telah berkontribusi, serta memberikan arahan dan saran sehingga terselesaikannya karya ilmiah ini.

## Daftar Pustaka
1. Amir M, Irem J, Purukan A. The effectiveness of ethanol extract of white dragon fruit  ( hylocereus  undatus )  on  the  reduction  of  blood  uric.  J  Ilmu  Kefarmasian Indones. 2018;16(2):166 –71.
2. Febriyanti T. Hubungan kemampuan diet rendah purin dengan kadar asam urat. J Ners Lentera. 2020;8(1):72 –9.
3. Chen  C,  Lü  J-M,  Yao  Q.  Hyperuricemia-related  diseases  and  xanthine oxidoreductase (XOR) inhibitors: an overview. Med Sci Monit. 2016;22:2501 –12. Available from: doi:10.12659/msm.899852.
4. El Ridi R, Tallima H. Physiological functions and pathogenic potential of uric acid: a review. J Adv Res. 2017;8(5):487 –93. Available from: doi:10.1016/j.jare.2017.03.003
5. Wang H, Zhang H, Sun L, Guo W. Roles of hyperuricemia in metabolic syndrome and  cardiac-kidney-vascular  system  diseases.  Am  J  Transl  Res.  2018 Sep;10(9):2749 –63.
6. Bove  M,  Cicero  A,  Veronesi  M,  Borghi  C.  An  evidence-based  review  on  urate- lowering treatments: implications for optimal treatment of chronic hyperuricemia.
Vasc Heal Risk Manag. 2017;13:23 –8. Available from: doi:10.2147/VHRM.S115080 7. Ling  X,  Bochu  W.  A  review  of  phytotherapy  of  gout:  perspective  of  new pharmacological treatments. Pharmazie. 2014;69(4):243 –56.
8. Abu Bakar F, Abu Bakar M, Rahmat A, Abdullah N, Sabran S, Endrini S. Anti-gout potential of Malaysian medicinal plants. Front Pharmacol. 2018;9(261). Available from: doi:10.3389/fphar.2018.00261
9. Panche A, Diwan A, Chandra S. Flavonoids: an overview. J Nutr Sci. 2016;5:47 – 47. Available from: doi:10.1017/jns.2016.41
10. Alkandahri MY, Sujana D, Hasyim DM, Shafirany MZ, Alkandahri MY, Muhammad D & Zahra M. Antidiabetic activity of extract and fractions of Castanopsis costata leaves on alloxan-induced diabetic mice. Pharmacogn J. 2021;13(6):1589 –93.
11. Farhamzah F, Kusumawati AH, Alkandahri  M  Y, Hidayah H, Sujana D, Gunarti NS, Yuniarsih N, Apriana SD & Agustina LS. Sun Protection factor activity of black glutinous rice emulgel extract ( Oryza sativa var glutinosa). Indian J Pharm Educ Res. 2022;56(1):302 –10. Available from: doi:10.5530/ijper.56.1.36
12. Farida Y, Firmansyah R. Aktivitas penghambatan xanthine oxidase ekstrak etanol dan air dari herba suruhan ( Peperomia pellucida l). Pros Semin Nas Tumbuh Obat Indones. 2016;50:482 –7.
13. Prihastuti A, Wijaya S, Hartanti L. Uji aktivitas inhibitor xanthin oksidase dari fraksi ekstrak etanol herba Peperomia pellucida . J Pharmacey Sci Pract. 2017;4(1):18 – 24.
14. Agista    c  imbar,  Queljoe  D,  Rotinsulu  H.  Uji  aktivitas  antihiperurisemia  ekstrak etanol  tumbuhan  suruhan  ( Peperomia  pellucida l.kunth)  terhadap  tikus  putih jantan (gallur wistar) yang di induksi kafein. Pharmacon. 2019;8:671 –8.
15. Lestari  E,  Kurniawaty  E,  Wahyudo  R.  Seledri  ( Apium  graveolens l)  sebagai antihiperurisemia pada penderita gout arthritis. J Medula. 2018;8(1):12 –9.
16. Kristiyani A. Efek pemberian seduhan serbuk herba seledri ( Apium graviolens l) terhadap kadar asam urat serum darah ayam leghorn jantan hiperurikemia. Media Farm Indones. 2019;16(1):1652 –7.
17. Sujana  D,  Suwandi  D,  Rusdiana  T,  Subarnas  A.  Acute  toxicity  test  of  ethanol extract of pakis tangkur ( Polypodium feei MEET) root from talaga bodas mountain on  swiss  webster  mice.  J  Ilm  Farm  Bahari.  2020;1(2):167 –79.  Available  from: doi:http://dx.doi.org/10.52434/jfb.v11i2.856
18. Nurul, Sujana D, Nugraha YR, Farhan Z, Hasyim D. Studi in vivo: efek analgesik ekstrak  dan  fraksi  air  akar  pakis  tangkur  ( Polypodium  feei METT).  J Pharmacopolium. 2022;4(3).
19. Sujana  D,  Lesmana  R,  Subarnas  A.  Review:  pharmacological  activity,  natural active compound and mechanism action of jarak kepyar ( Ricinus communis l.). Farmaka. 2018;16:213 –21.
20. Wink M. Modes of action of herbal medicines and plant secondary metabolites. Med. 2015;2(3):251 –86. Available from: doi:10.3390/medicines2030251
21. Tzanova  M,  Atanasov  V,  Yaneva  Z,  Ivanova  D,  Dinev  T.  Selectivity  of  current extraction  techniques  for  flavonoids  from  plant  materials.  Process.  2020;8(10). Available from: doi:10.3390/pr8101222
22. Tang  D-H,  Ye  Y-S,  Wang  C-Y,  Li  Z-L,  Zheng  H,  Ma  K-L.  Potassium  oxonate induces acute hyperuricemia in the tree shrew (tupaia belangeri chinensis). Exp Anim. 2017/03/16. 2017 Aug;66(3):209 –16.
23. Chen Y, Li C, Duan S, Yuan X, Liang J, Hou S. Curcumin attenuates potassium oxonate-induced  hyperuricemia  and  kidney  inflammation  in  mice.  Biomed Pharmacother. 2019;118:109 –95.
24. Yunarto N, Ar Rossyid, HM Lienggonegoro L. Effect of ethanolic leaves extract of
Peperomia pellucida (L) kunth as antimalarial and antioxidant. Media Penelit dan Pengemb Kesehat. 2018;28(2):123 –30. Available from: doi:10.22435/mpk.v28i2.132 25. Kusumadewi,  AP  Widiyastuti  Y.  Uji  potensi  antioksidan  herba  seledri  ( Apium graveolens l.) secara in vitro. J Tumbuh Obat Indones. 2010;3(1):59 –64.
26. Sujana D, Wardani D, Nurul N. Review artikel : potensi likopen dari buah tomat ( Solanum  lycopersicum l)  sebagai  antiaging  topikal.  J  Insa  Farm  Indones. 2020;3(1):56 –65. Available from: doi:10.36387/jifi.v3i1.479
27. Sujana D, Saptarini N, Sumiwi S, Levita J. Nephroprotective activity of medicinal plants: A review on in silico-,  in vitro-, and in vivo-based studies. J Appl Pharm Sci. 2021;11(10):113 –27. Available from: doi:10.7324/japs.2021.1101016
28. Liu L, Zhang L, Ren L, Xie Y. Advances in structures required of polyphenols for xanthine  oxidase  inhibition.  Food  Front.  2020;1(2):152 –67.  Available  from: doi:10.1002/fft2.27
29. Suwandi D, Perdana F. Antihyperuricemia activitiy of ethanol extract and fraction of  rose  guava  ( Syzygium  jambos l)  in  Swiss.  J  Ilm  Farm  Bahari.  2018;2087 – 0337:35 –44.
30. Rheumatology  A.  Registrar  clinical  pharmacology  Rheumatologist.  P pharmacologist clinical. The management of gout. Aust Prescr. 2016;39(4):119 – 122. Available from: doi:10.18773/austprescr.2016.047