Jurnal Pharmascience, Vol. 04 , No.01, Februari 2017, hal: 18 - 24 ISSN-Print. 2355 – 5386 ISSN-Online. 2460-9560 http://jps.unlam.ac.id/

## Research Article
Uji Aktivitas Antibakteri Salep Ekstrak Etanolik Daun Binahong ( Anredera cordifolia (Ten.) Steenis) Dengan Berbagai Variasi Basis  Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus
*Elya Zulfa 1 , Tegar Bagus Prasetyo 1 , Mimiek Murrukmihadi 2
1 Fakultas Farmasi Universitas Wahid Hasyim Semarang.
2 Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada Yogyakarta *Email : elya@unwahas.ac.id

## ABSTRAK
Salep  ekstrak  etanolik  daun  binahong  ( Anredera cordifolia (Ten.)  Steenis)  basis absorpsi  memiliki  aktivitas  antibakteri  terhadap Staphylococcus  aureus pada konsentrasi  10%.  Dalam  meningkatkan  aktivitas  zat  aktif  ekstrak  etanolik  daun binahong, maka perlu dilakukan penyesuaian berbagai basis formulasi salep. Penelitian ini  bertujuan  untuk  mengetahui  aktivitas  antibakteri  salep  ekstrak  daun  binahong dengan  variasi  basis  hidrokarbon,  absorpsi,  dan  larut  air  terhadap Staphylococcus aureus. Ekstrak  etanolik  daun  binahong  diperoleh  dengan  metode  maserasi menggunakan  etanol  70%.  Salep  dibuat  dengan  variasi  basis  pembawanya  yaitu hidrokarbon,  absorpsi,  dan  larut  air.  Salep  yang  telah  dihasilkan  selanjutnya  diuji aktivitas  antibakterinya  terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus. Data  hasil  uji aktivitas  antibakteri  dianalisis  secara  Anova  satu  jalan dan  dilanjutkan Tukey dengan taraf  kepercayaan  95%.  Hasil  uji  aktivitas  antibakteri  salep  ekstrak  etanolik  daun binahong  (hidrokarbon,  absorpsi,  dan  larut  air)  tidak  memiliki  perbedaan  yang bermakna (Sig≥0,05).
Kata Kunci : Salep, Daun binahong, Aktivitas antibakteri, Staphylococcus aureus.

## ABSTRACT
The  absorbtion-based  ointment  of  ethanolic  extract  of  binahong  leaves  (Anredera cordifolia  (Ten.)  Steenis)  on  10%  concentrate  has  antibacterial  activity  towards Staphylococcus  aureus.  In  order  to  improve  the  activity  of  this  ethanolic  extract  of binahong leaves, it is necessarily to adjust the ointment’s base of formulation. The aims of study  are  to  determine  the  ointment’s  physical  characteristics  as  well  as  the  antibacterial activity  towards  Staphylococcus  aureus  which  various  base  such  as  hydrocarbon, absorbtion  and  water  solubility.  The  ethanolic  extract  of  binahong  leaves  obtained  from maceration method using 70% of ethanol. The ointment was made based on the variation of its base which are hydrocarbon, absorbtion and water solubility. The obtained oinment then was examined on antibacterial activity toward  Staphylococcus aureus. Anti-bacterial
activity were analyzed using one-way ANOVA and Tukey with the level of confidence up to 95%.  the  antibacterial  activity  of  ethanolic  extract  ointment  of  binahong  leaves (hydrocarbon,  absorbtion,  and  watersolubility)  also  did  not  have  any  significant differences (Sig≥0,05).
Keywords: Ointment, Binahong leaves, Antibacterial activity, Staphylococcus aureus.

## I. PENDAHULUAN
Luka merupakan rusaknya kesatuan  atau  komponen  jaringan  yang secara  spesifik  terdapat  substansi  jaringan yang  rusak  atau  hilang  (Pusponegoro, 2005). Luka yang terjadi dapat menyebabkan terjadinya infeksi. Penyebab infeksi  disebabkan  oleh  bakteri  atau mikroorganisme  yang  patogen,  mikroba masuk  ke  dalam  jaringan  tubuh  dan berkembang  biak  di  dalam  jaringan.  Di antara  bakteri  yang  dapat  menyebabkan infeksi  adalah Staphylococcus  aureus (Jawetz et  al .,  2001).  Infeksi  oleh Staphylococcus  aureus banyak  ditandai dengan  rusaknya  jaringan  pada  tubuh berupa  abses  bernanah  dan  infeksi  yang lebih berat dapat menyebabkan pneumonia, meningitis, empiema, endokarditis atau sepsis dengan supurasi di tiap organ (Ryan et al .,1994).
Salah  satu  tanaman  tradisional yang  sering  digunakan  sebagai  obat  luka adalah daun binahong ( Anredera cordifolia (Ten.)  Steenis)  yang  memiliki kandungan  senyawa  alkaloid,  flavonoid, polifenol, saponin, triterpenoid, dan minyak  atsiri  (Rohmawati,  2007).  Daun
binahong terbukti berkhasiat untuk mencegah terjadinya infeksi bakteri Staphylococcus aureus pada luka secara in vitro (Christiawan et al., 2010). Salah satu upaya yang dilakukan untuk mempermudah penggunaan daun binahong adalah  dengan  dibuat  menjadi  suatu sediaan topikal berupa salep.
Salep  merupakan  sediaan  setengah padat  yang  ditujukan  untuk  pemakaian topikal pada kulit atau selaput lendir. Salep sendiri memiliki kelebihan sebagai pelindung untuk mencegah kontak permukaan  kulit  yang  luka  dengan  udara, stabil  dalam  penggunaan,  penyimpanan, dan  mudah  dalam  penggunaan.  Formulasi salep dibutuhkan adanya suatu basis. Basis sendiri  merupakan  zat  pembawa  yang bersifat  inaktif  dari  sediaan  topikal  dapat berupa  bentuk  cair  atau  padat  yang membawa  bahan  aktif  untuk  berkontak dengan  kulit.  Basis  yang  digunakan  yaitu basis  salep  hidrokarbon,  basis  salep  serap (absorpsi),  dan  basis  salep  larut  dalam  air (Depkes RI, 1995).
Penelitian  Paju et  al (2013) menyatakan  salep  ekstrak  daun  binahong (Anredera cordifolia (Ten.) Steenis)
efektif menyembuhkan luka yang terinfeksi Staphylococcus  aureus pada kelinci  ( Oryctolagus  cuniculus )  dengan konsentrasi  10%.  Dalam  formulasi  salep tersebut  digunakanbasis  salep  berlemak berupa  campuran  bahan  adeps  lanae  dan vaselin  album.  Sifat  fisik  salep  tersebut dipengaruhi oleh komponen basis pembentuknya  sehingga  perlu  dilakukan adanya  penyesuaian  formulasi  basis  salep sebagai  pembawa  zat  aktif  dan  dapat memberikan efek yang maksimal.
Berdasarkan latar belakang penelitian  di  atas  maka  perlu  dilakukan penelitian  lebih  lanjut  dengan  membuat sediaan  farmasi  yaitu  formulasi  salep ekstrak  etanolik  daun  binahong  dengan berbagai  basis dan uji aktivitas  antibakteri terhadap bakteri Staphylococcus aureus .

## II. METODE PENELITIAN
Bahan  utama  yang  digunakan adalah  daun  binahong  yang  diperoleh  dari UD.  Jamu  Sleman  Jogja.  Bahan  lain  yang digunakan  dalam  penelitian  ini  kualitas farmasi  yaitu  alkohol  70%  (P.A),  alfa tokoferol,  cera  alba,  metil  paraben,  propil paraben,  PEG  400,  PEG  4000,  lanolin anhidrat, vaselin putih, bakteri Staphylococcus  aureus (Biakan  Murni) , media agar nutrient broth, kaldu nutrient.

## A. Formula  salep  ekstrak  etanolik daun binahong
Penentuan  dosis  ekstrak  etanolik daun  binahong  dalam  sediaan  salep  untuk pengobatan  luka  infeksi  pada  manusia yaitu  10%  (Paju., et  al 2013),  formula acuan  yang  didapat  dari  jurnal  Faradiba (2011).
Tabel  I. Formula  Salep  Ekstrak  Etanolik  Daun Binahong  ( Anredera  cordifolia (Ten.) Steenis) dengan Variasi Basis.
Keterangan: FA    : Basis Salep Hidrokarbon F B   : Basis Salep Absorpsi FC   : Basis Salep Larut Air Setiap formula diuji 3 x replikasi

## B. Pembuatan  Salep  Ekstrak  Etanolik Daun Binahong
Metode  pembuatan  sediaan  salep yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah metode peleburan.
Bahan (g) Konsentrasi (%) F A Hidrokarbon F B Absorpsi F C Larut Air Ekstrak Kental 12 12 12 Alfa tokoferol 0,001 0,001 0,001 Cera alba 2 3 Metil paraben 0,02 Propil paraben 0,01 0,01 PEG 400 70,38 PEG 4000 17,6 Lanolin anhidrat 3 Vaselin putih 85,989 81,989 Jumlah 100 100 100

## C. Uji Aktivita Antibakteri Salep pada
Bakteri Staphylococcus Aureus
Metode uji antibakteri menggunakan  teknik  sumuran  (Difusi Agar)  yang  telah  dimodifikasi.  Pertama- tama, alat-alat gelas dan alat-alat non gelas disterilkan  terlebih  dahulu  di  dalam autoklaf  pada  suhu  121°C  selama  2  jam. Jarum ose dibakar dengan api Bunsen.
Metode sumur (difusi agar) didasarkan  pada  kemampuan  senyawa- senyawa  antibakteri  yang  diuji  untuk menghasilkan jari-jari zona penghambatan di  sekeliling  sumur  uji  terhadap  bakteri yang digunakan sebagai penguji.
Pengujian aktivitas antibakteri daun binahong  dimulai  dengan  menyiapkan media  pertumbuhan  bakteri.  Pembuatan media diawali dengan penimbangan media bubuk  yaitu  Nutrien  Agar  (NA)  sebanyak 4,2 gram lalu dimasukan kedalan erlenmeyer  dan  penambahan  aquades  210 ml.  Kemudian  dilakukan  pengadukan sambil  dipanaskan  menggunakan  kompor listrik hingga larutan media homogen yang ditandai  oleh  warna  larutan  yang  jernih, selanjutnya  erlenmeyer  ditutup  dengan kapas  dan  disterilisasi  pada  suhu  121 o C selama 15 menit.
Setelah sterilisasi media didinginkan  dalam  keadaan  tertutup  pada LAF  ( Laminar  Air  Flow )  sampai  suhu kurang lebih mencapai 40 o C lalu suspense bakteri uji diinokulasikan kedalam
erlenmeyer tersebut kemudian dihomogenkan. Setelah homogen didistribusikan  kedalam  cawan  petri. Media yang telah diinokulasi kultur bakteri uji  tersebut  dibiarkan  hingga  membeku. Kemudian dibuat empat lubang (sumur)secara aseptis, kemudian dimasukkan  salep  ekstrak  etanolik  daun binahong uji masing-masing sebanyak 100 mg.  Inkubasi  dilakukan  secara  statis  pada suhu 37 o C selama 48 jam.

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  uji  aktivitas  antibakteri  salep menunjukkan  bahwa  semua  formula  basis salep  ekstrak  etanolik  daun  binahong menunjukan  adanya  daya  hambat  atau aktivitas  antibakteri  terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus .  Hasil  uji  aktivitas antibakteri dapat dilihat pada Tabel II.
Tabel II. Hasil Aktivitas Antibakteri Salep
F Daya Hambat (mm) Rata- rata±SD R I R II R III K (+) 39,61 42,71 37,70 40,01±2,53 F A 11,41 12,24 20,79 14,81±5,19 F B 30,64 13,74 20,10 21,49±8,53 F C 24,12 20,46 22,86 22,48±1,85
Umumnya  suatu  pelepasan  obat (absorpsi  obat)  pada  sediaan  salep  tidak hanya  tergantung  pada  sifat  fisika  kimia dari bahan obat saja tetapi juga tergantung pada sifat basis salep pembawanya (Ansel, 1989) salep hidrokarbon cenderung memiliki  daya  hambat  yang  lebih  kecil dibandingkan  dengan  basis  lain  karena
basis hidrokarbon merupakan basis berlemak  dimana  mempunyai  sifat  lemak atau  bebas  air,  dan  media  pengujinyapun menggunakan nutrient agar yang cenderung mengandung banyak air sehingga salep yang mengandung zat aktif sukar  untuk  berdifusi  atau  melepaskan suatu  zat  aktif  sehingga  pelepasan  zat aktifnyapun  kurang  maksimal.  Basis  salep hidrokarbon  bertahan  pada  kulit  untuk waktu yang lama sehingga memungkinkan larinya  lembab  ke  udara  dan  sukar  dicuci (Ansel, 1989).
Basis  absorpsi  merupakan  basis berlemak  yang  memilki  sifat  menyerupai basis hidrokarbon. Basis absorpsi memiliki daya  hambat  yang  cukup  besar  karena basis  ini  merupakan  basis  yang  dapat bercampur  dengan  air  dengan  jumlah tertentu,  dimana  basis  ini  mengandung lanolin anhidrat yang mana dapat bercampur  dengan  air  dengan  membentuk emulsi  air  dalam  minyak  sehingga  basis absorpsi  dapat  melepaskan  atau  dapat berdifusi  dengan  cukup  baik  (Ansel, 1989).
Basis  larut  air  memiliki  daya hambat  yang  paling  besar  karena  basis initidak  mengandung  bahan  lemak  dan mudah  larut  dalam  air,  karena  basis  salep ini  mengandung  PEG  400  dan  PEG  4000 yang  merupakan  basis  salep  yang  tidak berlemak sehingga dapat bercampur dengan  media  uji  nutrien  agar  yang
bersifat  polar  dan  dapat  berdifusi  dengan baik.
Hasil uji normalitas untuk aktivitas antibakteri  salep  terdistribusi  normal  dan homogen  ditunjukkan  nilai  signifikansi (P>0,05),  sehingga  dilanjutkan  dengan analisis  parametrik  berupa  Anova  satu jalan dengan taraf kepercayaan 95%. Hasil statistik uji Anova satu jalan pada aktivitas antibakteri menunjukan nilai signifikansinya  0,002  (P<0.05).  Hal  ini menunjukan  bahwa  antara  K(+)  dengan masisng-masing formula basis salep memiliki  aktivitas  antibakteri  atau  daya hambat yang berbeda, selanjutnya dilakukan uji Tuke y.
Dari  hasil  uji Tukey menunjukan hasil yang signifikan antara kontrol positif dengan  FI  0,002,  kontrol  positif  dengan FII  0,011,  dan  kontrol  positif  dengan  FIII 0,012  (P<0,05)  berbeda  bermakna  yang artinya bahwa setiap masing-masing formula  basis  salep  ekstrak  etanolik  daun binahong  memiliki  aktivitas  antibakteri yang berbeda dengan kontrol positif.
Pada  basis  hidrokarbon  memiliki perbedaan bermakna dengan kontrol positif yaitu 0,002 (P<0,05), dimungkinkan  karena  pada  basis  tersebut mengandung bahan pembawa utama berupa  vaselin  putih  dan  cera  alba  yang keduanya merupakan basis berlemak bebas dari air, basis lemak sukar untuk berdifusi atau  melepaskan  zat  aktif  karena  media
yang  digunakan  berupa  media agar  plate yang bersifat polar sehingga zat aktif tidak bisa  lepas  dengan  sempurna.  Oleh  karna itu aktivitas antibakteri yang dihasilkanpun kecil atau kurang optimal.
Basis absorpsi juga memiliki perbedaan bermakna dengan kontrol positif  yaitu  0,011  (P<0,05)  dikarenakan pada  basis  tersebut  mengandung  bahan pembawa  utama  berupa  vaselin  putif  dan cera  alba  yang  juga  merupakan  basis berlemak,  dimana  basis  ini  terdapat  basis lanolin  anhidrat  tetapi  basis  tersebut memiliki  daya  serap  air  yang  kecil  karena komponen  utamanya  berupa  basis  lemak sehingga  untuk  pelepasan  zat  aktif  atau untuk  berdifusi  dengan  media agar  plat yang cenderung bersifat polar kurang yang memberikan  aktivitas  antibakteri  secara optimal
Pada  basis  larut  air  memiliki aktivitas  antibakteri  yang  lebih  besar dibandingkan  dengan  basis  lain  dan  juga memiliki  nilai  yang  signifikan  dengan kontrol positif yaitu 0,012 (P<0,05) artinya berbeda  bermakna.  Basis  ini  mengandung basis  pembawa  utama  berupa  PEG  400 dan  PEG  4000  dimana  basis  tersebut mudah  larut  dalam  air  dan  media  uji agar plat yang  bersifat  polar,  sehingga  basis salep dapat berdifusi atau dapat melepaskan zat aktif dengan baik.
Pada  hasil  uji Tukey dari  masing- masing  formula  basis  ekstrak  etanolik
daun  binahong  tidak  menunjukan  hasil yang signifikan antara FI dengan FII yaitu 0,863 (P>0,05), FI dengan FIII yaitu 0,614 (P>0,05),  dan  FII  dengan  FIII  yaitu  0,962 (P>0,05)  artinya  bahwa  masing-masing formula basis aktivitas antibakterinya tidak berbeda bermakna antara basis satu dengan basis yang lainnya.

## IV. KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian,  dapat disimpulkan  bahwa  Aktivitas  antibakteri dari  salep  ekstrak  etanolik  daun  binahong dengan  berbagai  macam  basis  pada (hidrokarbon, absorpsi, dan larut air) tidak memiliki perbedaan yang bermakna (Sig≥0,05).

## UCAPAN TERIMAKASIH
Terimakasih kepada Tegar Bagus Prasetyo dan  Ibu  Mimik  Murukmihadi  yang  sudah membantu dalam penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Ansel,  H.  C.,  1989, Pengantar  Baentuk Sediaan Farmasi , diterjemahkan oleh Farida Ibrahim, edisi IV, Universitas Indonesia Press, Jakarta, 502-509.
Christiawan,  A.  and  Perdanakusuma,  D.,
2010,  Aktivitas  Antimikroba  Daun Binahong  terhadap Pseudomonas aerugin osa dan Staphylococcus aureus Yang Sering Menjadi
Penyulit  Pada  Penyembuhan  Luka
Bakar, Departemen/SMF
Ilmu Bedah  PlastikFakultas  Kedokteran
Universitas  Airlangga,  RSUD  Dr. Soetomo, Surabaya, 3 Depkes  RI.,  1995, Farmakope  Indonesia, Edisi  IV,  Departemen  Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta, 77, 186, 551, 713.
Faradiba,  2011,  Formulasi  Salep  Ekstrak Dietil  Eter  Daging  Buah  Pare ( Momordika  charantia L.)  Dengan
Berbagai  Variasi  Basis, Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas Muslim Indonsia, Makassar. Jawetz,  E.,  Melnick,  J.L.,  Adelberg,  E.A., 2001, Mikrobiologi Kedokteran , EdisiXXII, diterjemahkan oleh Bagian Mikrobiologi Fakultas KedokteranUniversitas Airlangga,
Penerbit  Salemba  Medika,  Jakarta,
205-209.
Paju, N., Yamlean, P.V.Y. and Kajong, N., 2013,  Uji  Efektivitas  Salep  Ekstrak
Daun Binahong ( Anredera cordifolia
(Ten.) Steenis) pada Kelinci
( Oryctolagus curiculus ) yang Terinfeksi  Bakteri Staphylococcus
aureus , Jurnal, Program Studi
Farmasi,FMIPA UNSRAT, Manado, 51-52.
Pusponegoro,  A.D.,  2005,  Luka  Dalam; Sjamsuhidajat,  R.  and  De  J.W., penyunting, Buku Ajar Ilmiah Bedah ,
Edisi ke II, EGC, Jakarta, 66-88.
Rohmawati,
A., 2007, Pengaruh
pemberian  topikal  daun  binahong ( Anredera  cordifolia (Ten.)  Steenis) tumbuk  terhadap  penyembuhan  luka bakar pada mencit, Skripsi , FK UNS,
Solo.
Ryan, J.K., 2004, Sherris Medical Microbiology
An Introduction
Diseases, forth edition , 160-161.