## Microbiological Test Feasibility Of Roadside Squeezed Orange ice In Southeast Pontianak
Author : Marizca Okta Syafani 1 , Mahyarudin 2 , Muhammad In’am Ilmiawan 3
First Author E-mail: marizcaoktasyafani25@gmail.com, Universitas Tanjungpura Pontianak,
Indonesia 1 Second Author E-mail: mahyarudin.ashari@gmail.com, Universitas Tanjungpura Pontianak, Indonesia 2 Third Author E-mail :. inamedica@gmail.com, Universitas Tanjungpura Pontianak, Indonesia 3
DOI :10.24903/kujkm.v8i2.1526
Received : July 2022
Accepted : September 2022
Published : December 2022 P-ISSN: 2477-1880  E-ISSN: 2502-
6623 Kesmas Uwigama : Jurnal Kesehatan Masyarakat

## Abstract
Background: Squash  orange  squash  is  a  natural  drink  with  the ingredients consist  of  ice  and  oranges  that  are  sold  in  many places  such  as  eatery  and vendor. Iced orange squash might  not  be safe for consumption  because bad quality  oranges,  unclean  water,  unhygienic  sellers,  and  unstandarlized environmental  sanitation  of  the  beverage  processing.  These  could  cause indigestion  with  the  symptoms  of  nausea,  stomachache,  vomitting  and diarrhea. The bacteria often used as the indicator that causes contamination in the beverage is Coliform, for example Escherichia coli.
Objectives:  To  find  out  about  the  food  safety  of  iced  orange  squash  in

## Southeast Pontianak.
Research  Metodes:  This  research  is  descriptive  with  cross-sectional approach.  This  research  uses  bacterial  quantification  method  with  Most Probable  Number  (MPN)  as  the  technique  and  purposive  sampling  as  the sampling method.
Results:  This  research  indicates  that  16  samples  of  Squeezed  Orange  ice exceed  the  maximum  microbial  limit  that  is  with  the  value  range  of  20 MPN/100 ml - >1100 MPN/ 100 ml contaminated with Coliform (100%) and Escherichia coli (100%).
Conclusion: The tested iced orange squash drinks are not safe to consume and unstandardized according to Permenkes 2010, National Standard of Indonesia and World Health Organization.
Keywords:  iced  orange  squash;  Coliform;  Escherichia  coli;  hygiene; sanitation

## Abstrak
Latar  Belakang: Es  jeruk  peras  merupakan  minuman  alami  dengan  bahan baku  es  dan  perasan  jeruk  yang  banyak  dijual  di  berbagai  tempat  makan ataupun  di  pinggir  jalan.  Es  jeruk  peras  bisa  jadi  tidak  layak  konsumsi dikarenakan beberapa hal, yaitu kualitas jeruk yang sudah tidak layak untuk di konsumsi, air yang tidak bersih, higiene penjual tidak baik, sanitasi lingkungan pengolahan  minuman  yang  tidak  sesuai  dengan  standar.  Hal  ini  bisa menimbulkan gangguan saluran pencernaan dengan gejala mual, perut mulas, muntah  dan  diare.  Bakteri  yang  sering  dijadikan  indikator  terjadinya pencemaran minuman adalah bakteri Coliform contohnya Escherichia coli. Tujuan: Mengetahui tingkat  kelayakan minuman jeruk peras yang dijual  di pinggir jalan Pontianak Tenggara.
Metode  Penelitian: Penelitian  ini  merupakan  penelitian  deskriptif  dengan pendekatan cross  sectional. Penelitian ini menggunakan metode kuantifikasi bakteri dengan teknik Most Probable Number (MPN) dan pengambilan sampel dengan metode purposive sampling.
Hasil: Hasil penelitian menunjukkan bahwa 16 sampel es jeruk peras melebihi batas maksimal  mikrob yaitu dengan rentang nilai  20 MPN/100 ml  -  >1100 MPN/100 ml terkontaminasi bakteri Coliform (100%) dan bakteri Escherichia coli (100%).

## Kesimpulan:
Es  jeruk  peras  yang  di  uji  tidak  layak  minum  dan  tidak  memenuhi  standar Permenkes 2010, Standar Nasional Indonesia dan World Health Organization Kata  kunci:  Es  jeruk  peras;  bakteri  Coliform;  Escherichia  coli;  hygiene; sanitasi.

## Copyright Notice
This work is licensed under Creative Commons Attribution 4.0 International License.

## Pendahuluan
Buah  jeruk  merupakan  buah  yang paling  digemari  karena  merupakan  salah  satu buah  yang  kaya  akan  vitamin  C  dan  dapat berfungsi  sebagai  antioksidan  yang  berkhasiat bagi  Kesehatan  (Pracaya,  2003).  Salah  satu olahan dari buah jeruk adalah es jeruk. Es jeruk merupakan  salah  satu  bentuk  minuman  alami dengan  bahan baku  es  dan perasan  jeruk  yang banyak  dijual  di  berbagai  tempat  makan ataupun di pinggir jalan (Ardiarini & Gunanti, 2005). Es jeruk yang dijual di pinggir jalan bisa jadi  tidak  layak  konsumsi  dikarenakan beberapa  hal,  yaitu  kualitas  jeruk  yang  sudah tidak  layak  untuk  di  konsumsi,  air  yang  tidak bersih,  higiene  penjual  tidak  baik,  sanitasi lingkungan  pengolahan  minuman  yang  tidak sesuai dengan standar (Bahar, 2005) .
Pengelolaan  makanan  dan  minuman yang  tidak  higienis  dan  sanitasi  yang  buruk dapat  mengakibatkan  adanya  bahan-bahan  di dalam makanan/minuman yang dapat menimbulkan gangguan kesehatan pada konsumen.  Gangguan  kesehatan  yang  terjadi berupa  gangguan  pada  saluran  pencernaan dengan  gejala  mual,  perut  mulas,  muntah  dan diare (Gainey & Lord, 1950; Naria, 2015). Air dan makanan adalah sumber sarana penyebaran infeksi  serta  tempat  tumbuhnya  bekteri. Banyaknya kontaminan dalam air memerlukan standar tertentu untuk menjamin kebersihannya.  Air  yang  terkontaminasi  oleh bakteri patogen saluran cerna sangat berbahaya untuk diminum. Di Indonesia, bakteri indikator air  terkontaminasi  adalah  Coliform  (Bahar, 2005; Jawelz et al., 2015).
Bakteri  Coliform  adalah  golongan bakteri intestinal, yaitu hidup di dalam saluran pencernaan  manusia  yang  menjadi  indikator keberadaan  bakteri  patogenik  lain  (Nugroho, 2006).  Sesuai  dengan  standar  Kementrian
Kesehatan  Indonesia  setiap  100  ml  sampel  air minum diperiksa, kadar maksimal bakteri total Coliform  dan  Escherichia  coli  dalam  sampel harus  nol.  Bakteri  yang  diutamakan  dalam setiap  penilaian  Kementrian  Kesehatan  adalah bakteri  Escherichia  coli  dan  Coliform,  karena bakteri  ini  mampu  menginvasi  usus  manusia dan menyebabkan diare dan disentri (Kepmenkes RI, 2010).
Berdasarkan  permasalahan  di  atas belum  adanya  penelitian  di  Kota  Pontianak terkhusus  di  wilayah  Kecamatan  Pontianak Tenggara  karena  kawasan  ini  merupakan kawasan yang ramai penduduk dan berdasarkan hasil  survei  yang  menjual  es  jeruk  peras  di kawasan  ini  lebih  banyak  dibandingkan wilayah lainnya sehingga sangat penting untuk diketahui kualitas dan kelayakan es jeruk peras yang  dijual  di  pinggir  jalan  Pontianak Tenggara.

## Metode Penelitian
Desain  penelitian  yang  digunakan merupakan studi deskriptif dengan pendekatan cross  sectional.  Penelitian  ini  menggunakan metode kuantifikasi bakteri dengan teknik Most Probable  Number  (MPN)  dengan  metode pengambilan sampel yaitu purposive sampling. Penelitian  dilaksanakan  di  pinggir  jalan Kecamatan Pontianak Tenggara, Laboratorium Mikroskopik  dan  non  Mikroskopik  Fakultas Kedokteran  Universitas  Tanjungpura  pada periode Desember 2017 - Mei 2019.
Bahan  yang digunakan pada  peneltian ini  adalah  minuman  es  jeruk  yang  termasuk dalam  kriteria  inklusi.  Kriteria  inklusi  pada penelitian  ini  adalah  pedagang  kaki  lima  es jeruk peras Kecamatan Pontianak Tenggara dan kriteria eksklusi adalah warung-warung pinggir jalan  Kecamatan  Pontianak  Tenggara.  Jumlah sampel  dalam  penelitian  yang  memenuhi kriteria inklusi dan eksklusi adalah 16 sampel.
December 2022, Vol. 8 No. 2
Data  hasil  penelitian  yang  diperoleh  akan disajikan  dalam  bentuk  tabel,  gambar,  dan narasi.

## Hasil Penelitian
1 1. Hasil Uji Keberadaan Bakteri
Coliform  Sampel  dengan  Metode  Most

## Probable Number (MPN)
Pada  penelitian  ini,  sampel  diambil dengan cara membeli ke pedagang kaki lima es jeruk  peras  yang  berada  di  pinggir  jalan  di Kecamatan  Pontianak  Tenggara.  Sampel  yang sudah  dikemas oleh penjual kemudian dimasukan  ke  dalam  termos  yang  telah disterilkan  dengan  alkohol  70%.  Setelah  itu, langsung dibawa ke laboratorium mikroskopik dan  non  mikroskopik  Fakultas  Kedokteran Universitas  Tanjungpura  Pontianak  untuk dilakukan  uji  mikrobiologi.  Berdasarkan  hasil pemeriksaan  uji  bakteri  Coliform  pada  16 sampel  es  jeruk  peras  yang  berasal  dari pedagang kaki lima jalan Pontianak Tenggara, didapatkan  seluruh  sampel  terkontaminasi bakteri Coliform. Hasil presumptive test dapat dilihat pada tabel sebagai berikut:
Tabel  1.  Hasil  Presumptive  Test  Keberadaan Bakteri Coliform terhadap Es Jeruk Peras
S T 10ml T 1ml T 0,1 ml A B C D E F G H I J K L M N O 2 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 1 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 1 3 3 2 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3
P 3 1 3
Keterangan : S = Sampel; T = Tabung
Berdasarkan  tabel  1  menunjukkan bahwa  dari  16  sampel  yang  diuji  pada  tabung yang berisi 10 ml, tabung 1 ml, dan tabung 0,1 ml  media  LB  didapatkan  seluruh  sampel terdapat gelembung gas. Dari hasil presumptive test,  lalu  dilanjutkan  dengan  confirmed  test untuk memastikan keberadaan bakteri Coliform.  Hasil  dari  confirmed  test  dapat dilihat pada tabel 2 berikut:
Tabel  2.  Hasil  Confirmed  Test  Keberadaan Bakteri  Coliform  terhadap  Sampel  Es  Jeruk
Peras S T 10ml T 1ml T 0,1 ml X Y (9) A B C D E F G H I J K L M N O P 2 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 1 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 1 1 3 3 2 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 20 >1.100 >1.100 >1.100 >1.100 >1.100 >1.100 >1.100 >1.100 >1.100 >1.100 >1.100 >1.100 >1.100 >1.100 43 I VH VH VH VH VH VH
VH
VH VH
VH VH
VH VH

## VH

## I
Keterangan : S = Sampel; T = Tabung; X = Nilai MPN/ml; Y = Penilaian Higiene; I = Intermediate Risk; VH = Very High Risk; Syarat mikrobiologi air  bersih  memiliki  nilai  MPN  0/100  ml; klasifikasi  WHO  High  risk  (100-1000/100  ml),
Intermediate risk (10-100cfu/100 ml), low risk (1- 10/100 ml)
Berdasarkan  tabel  2  menunjukan bahwa  confirmed  test  dari  16  sampel  es  jeruk didapatkan  seluruh  sampel  diuji  positif mengandung  Coliform  dengan  terbentuknya gelembung gas di dalam tabung durham media BGLB.  Untuk  penilaian  higiene  terdapat  14 sampel  dengan  kategori  very  high  risk  dan  2 sampel  kategori  intermediate  risk  (Michigan, 2007).
Berdasarkan kedua tabel tersebut dapat disimpulkan  bahwa  16  sampel  es  jeruk  yang dijual oleh pedagang kaki lima Kota Pontianak Tenggara  terkontaminasi  bakteri  Coliform. Hasil  confirmed  test  dilanjutkan  ke  tahap completed  test  untuk  mengetahui  karakteristik dari bakteri Coliform yang mengontaminasi es jeruk tersebut. Hasil dapat dilihat pada tabel  3 berikut ini:
Tabel  3.  Hasil  Completed  Test  pada  Sampel  Es Jeruk.
S Koloni Ket. Bakteri A B C D E F G H I J K L M N O P U U U U U U U U U U U U U U U U PC PC PC PC PC PC PC PC PC PC PC PC PC PC PC PC EC EC EC EC EC EC EC EC EC EC EC EC EC EC EC EC
Keterangan : S = Sampel; U= Ungu-hitam, warna hijau  metalik;  PC  =  Probable  Coliform;  EC  = Escherichia coli
Berdasarkan  tabel  3  hasil  completed test ditemukan bahwa 16 sampel es jeruk positif mengandung bakteri Escherichia coli. Hasil uji didapatkan  16  sampel  menghasilkan  berbagai bentuk dan warna koloni, dari gelap ungu-hitam dengan  atau  tanpa  hijau  metalik.  Pada  tabel  3 ditunjukkan  mengenai  dugaan  bakteri  yang tumbuh  berdasarkan  ciri-ciri  koloni  yang tampak (Bahar, 2005).

## 2 2. Hasil Uji Pewarnaan
Hasil completed  test  dilanjutkan dengan  pewarnaan  gram.  Dari  tiap  sampel diambil 1 koloni dan di fiksasi di gelas objek. Adapun hasil pewarnaan gram dan karakteristik dapat dilihat pada tabel 4 berikut ini:
Tabel 4. Hasil Pewarnaan Gram
S Koloni Bakteri A B C D E F G H I J K L M N O P N, B N, B N, B N, B N, B N, B N, B N, B N, B N, B N, B N, B N, B N, B N, B N, B EC EC EC
EC
EC EC EC EC EC EC EC EC EC EC
EC
EC
Keterangan  :  S  =  Sampel;  N,  B  =  Gram negatif, basil; EC = Escherichia coli
December 2022, Vol. 8 No. 2

## Pembahasan
Sebanyak  16  minuman  es  jeruk  peras yang  dijual  di  pinggir  jalan  Kecamatan Pontianak  Tenggara  diambil  untuk  diuji kualitasnya.  Pemilihan  lokasi  Kecamatan Pontianak  Tenggara  dikarenakan  kawasan  ini merupakan  kawasan  yang  ramai  penduduk, terutama mahasiswa. Berdasarkan hasil survei, es  jeruk  peras  lebih  banyak  dijual  di  kawasan ini  dibandingkan  wilayah  Pontianak  lainnya. Penentuan  kualitas  higiene  es  jeruk  secara mikrobiologi  dapat  dilakukan  berdasarkan analisis adanya bakteri Coliform dan Escherichia coli (Cruess, 1958).
Escherichia  coli  adalah  bakteri  yang tergolong Coliform dan hidup secara normal di dalam kotoran manusia maupun hewan. Bakteri Escherichia  coli  yang  diduga  meliputi  semua bakteri  gram  negatif  tidak  membentuk  spora, selnya  berbentuk  sel  pendek,  bersifat  anaerob. Escherichia coli juga bisa menjadi bakteri yang mungkin  banyak  ditemukan  di  dalam  usus besar  manusia  sebagai  flora  normal.  Sifatnya unik karena dapat menyebabkan infeksi primer pada  usus  misalnya  diare  pada  anak  dan  pada orang-orang yang sedang pergi berlibur, seperti juga  kemampuannya  menimbulkan  infeksi pada  jaringan  tubuh  lain  di  luar  usus  (Kyle  et al.,  1956).  Hasil  observasi  di  lokasi  penelitian yaitu di sepanjang wilayah Pontianak Tenggara dinilai dari kondisi lingkungan personal higiene penjual,  pemeliharaan  alat,  dan  pengolahan bahan.  Faktor-faktor  ini  yang  menyebabkan tingginya  nilai  MPN  Coliform  pada  es  jeruk. Higiene  adalah  upaya  kesehatan  dengan  cara memelihara dan melindungi kebersihan individu dan kesehatan pribadi. Sanitasi adalah pencegahan  penyakit  dengan  cara  mengatur faktor  lingkungan  yang  berkaitan  dengan transmisi  penyakit  (Naria,  2015;  Widyati, 2002).
Hasil  observasi  menunjukkan  bahwa sebagian  besar  penjual  tidak  menggunakan APD  (Alat  Pelindung  Diri)  seperti  celemek, tutup  kepala,  masker,  sarung  tangan.  Penjual juga  tidak  mencuci  tangan  dengan  sabun,
memegang  uang  langsung  dari  pembeli,  dan tidak  mencuci  tangan  setelah  memegang  uang karena  penjual  merasa  pakaian  dan  tangan mereka  sudah  bersih,  serta  penggunaan  APD membuat  penjual  merasa  tidak  nyaman  dan terganggu.
Para  penjual  es  jeruk  peras  masih kurang  memperhatikan  kebersihan  bahan minuman,  tempat,  dan  peralatannya.  Hal  ini sangat bertentangan dengan tatalaksana higiene sanitasi untuk penjamah dalam UU No.23 tahun 1992 tentang kesehatan, Kepmenkes No.715/Menkes/SK/V/2003 tentang persyaratan  higiene  sanitasi  jasa  boga, Kepmenkes No.913/Menkes/SK/VII/2002
tentang angka kecukupan gizi yang dianjurkan bagi  bangsa  Indonesia,  dan  Menaker:  Ins 03/M/BW/1999  tentang  pengawasan  terhadap pengelolaan makanan di tempat kerja (Agustina, 2005; Batt, 2014; Depkes RI, 2003;
New York State Department of Health, 2011).
Permukaan  kulit  merupakan  tempat hidup  banyak  mikroba  yang  apabila  tidak dijaga  kebersihannya  dapat  terjadi  penularan penyakit secara bebas. Mencuci tangan dengan benar  menjadi  sesuatu  yang  harus  dilakukan oleh  penjual.  Tangan  yang  kotor  atau terkontaminasi  dapat  memindahkan  bakteri atau virus patogen dari tubuh, feses atau sumber lain  ke  minuman.  Oleh  karena  itu  pencucian tangan  merupakan  hal  pokok  yang  harus dilakukan  oleh  penjual  dalam  pengolahan  es jeruk  (Karsinah  et  al.,  2014).  Apabila  hal  ini dilakukan  maka  risiko  pencemaran  bakteri Coliform  dalam  es  jeruk  yang  dijual  dapat dikurangi. Hal ini harus dilakukan karena dapat memperkecil kemungkinan terjadinya kontaminasi  silang  antara  penjual  dengan  es jeruk. Hal ini sesuai dengan penelitian Isnawati yaitu terdapat hubungan antara personal higiene penjamah dengan keberadaan bakteri Coliform (Isnawati, 2012).
Personal  higiene  penjual  merupakan faktor risiko yang dapat menimbulkan pencemaran  bakteri  Coliform  dalam  es  jeruk.
Hal ini juga sesuai dengan hasil penelitian Fitri Hermastuti  yang  menyatakan  bahwa  ada hubungan  antara  personal  higiene  penjual dengan keberadaan Escherichia coli (Hermastuti,  2006).  Hal  yang  harus  diperkuat dalam  upaya  higiene  sanitasi  es  jeruk  adalah adanya  petunjuk-petunjuk  positif,  pembinaan- pembinaan atau dorongan serta dukungan untuk penjual agar menjaga kebersihan saat mengelola es jeruk. Air merupakan faktor yang sangat menentukan kualitas dari es jeruk karena air  digunakan  sebagai  bahan  baku,  mencuci bahan-bahan, mencuci peralatan dan sebagainya.  Apabila  air  yang  tersedia  tidak memenuhi  persyaratan  yang  diperlukan  maka dimungkinkan  es  jeruk  yang  diolah  menjadi terkontaminasi  oleh  bakteri-bakteri  yang patogen.  Persyaratan  kualitas  air  bersih  untuk parameter  fisik  adalah  tidak  berwarna,  tidak berbau  dan  tidak  berasa.  Kualitas  air merupakan  kriteria  standar  yang  digunakan untuk mencegah terjadinya penularan penyakit pada  masyarakat  yang  ditularkan  melalui  air. Standar  yang  digunakan  yaitu  Peraturan
Menteri Kesehatan RI No.
416/PerMenKes/PER/IX/1990  tentang  syarat- syarat dan pengawasan kualitas air bersih yang meliputi parameter fisika, kimia, mikrobiologi dan radioaktivitas (Fatonah, 2005).
Faktor  lain  yang  dapat  memengaruhi kontaminasi  adalah  proses  pembuatan  es  batu yang terdiri dari air  sebagai bahan baku untuk pembuatan  es  batu,  alat  yang  digunakan, kebersihan tangan ketika melakukan pengemasan,  dan  lingkungan  tempat  produksi es batu. Hasil penelitian yang diperoleh bahwa ada  penjual  yang  menggunakan  es  batu  yang dipesan  dari  pihak  lain,  memasak  air  sendiri, dan  menggunakan  air  isi  ulang  untuk  bahan baku dalam pembuatan es batu. Penggunaan air isi  ulang  ini  juga  dikhawatirkan  mengandung bakteri  Escherichia  coli  karena  dari  hasil penelitian yang dilakukan oleh Dinas Pelayanan  Kesehatan  Jakarta  Barat  (Subdin YanKesJakbar) menyebutkan dari 640 depo air minum isi ulang yang tersebar di 8 kecamatan, 384  depo  di  antaranya  tidak  layak  konsumsi
karena  tercemar  bakteri  Escherichia  coli  yang berbahaya  terhadap  kesehatan.  Hal  ini  sangat memungkinkan  terjadinya  kontaminasi  silang antara sari jeruk, air, dan es batu yang dipesan tersebut (Widyati, 2002).
Kondisi  alat  yang  tidak  memenuhi syarat  merupakan  faktor  penunjang  terjadinya pencemaran  bakteri  Coliform  pada  es  jeruk. Faktor penunjang yang menyebabkan terjadinya pencemaran minuman yaitu peralatan  untuk  menyiapkan,  mengolah,  dan menyajikan  yang  masih  kotor  sehingga minuman  menjadi  tercemar.  Penanganan minuman  yang  tidak  baik  dapat  menimbulkan penyakit dan bahkan kematian (Neygren et al., 2012).  Dalam  hal  menciptakan  kondisi  yang baik  pada  pengolahan  minuman,  perlu dilakukan pencucian peralatan yang digunakan (Riyadi,  2006).  Hal  ini  harus  dilakukan  untuk menghilangkan sisa-sisa bahan dan kemungkinan  adanya  mikroba  yang  melekat pada peralatan. Hasil observasi yang dilakukan diketahui  bahwa  tidak  adanya  pencucian  pada peralatan yang digunakan. Hal ini tidak sesuai dengan salah satu syarat pencucian yang diatur dalam Peraturan Menteri Kesehatan RI No. 236 tahun  1997  tentang  persyaratan  kesehatan makanan jajanan, sebaiknya air pencuci selalu bersih  untuk  menjaga  efektifitas  pencucian. Berdasarkan  hasil  penelitian,  hal  yang  perlu diperhatikan  adalah  penyediaan  air  mengalir untuk  cuci  tangan,  peralatan,  dan  bahan  agar efektivitas pencucian terjaga (WHO, 2006).
Selain  personal  higiene  penjual  yang harus  memenuhi  syarat,  tempat  yang  bersih juga  diperlukan.  Hal  ini  dapat  mengurangi risiko  masuknya  mikroba  ke  dalam  es  jeruk. Sanitasi  lingkungan  yang  buruk  dan  tidak memenuhi syarat kesehatan akan menyebabkan bakteri mudah masuk dan menyebabkan infeksi (Fatonah,  2005).  Lingkungan  yang  baik  harus memberikan  rasa  nyaman  kepada  orang  yang berada  di  sekitarnya,  dengan  kriteria  antara lain: (1) tersedianya air bersih yang mencukupi, baik  dari  segi  kuantitas  maupun  kualitas,  (2) pembuangan  air  limbah  yang  tertata  dengan
December 2022, Vol. 8 No. 2
baik agar tidak menjadi sumber pencemar, (3) tempat  pembuangan  sampah  yang  terbuat  dari bahan  kedap  air,  mudah  dibersihkan,  dan mempunyai tutup (Naria, 2015).
Hasil observasi yang dilakukan menunjukkan  kondisi  lingkungan  penjual  es jeruk  belum  memenuhi  kriteria  di  atas  karena pembuangan limbah es jeruk dilakukan di tepi jalan  dan  menggunakan  karung  yang  tidak kedap air serta tidak mempunyai tutup sebagai tempat pembuangan sampah, sehingga menjadi salah satu faktor tingginya kontaminasi bakteri Coliform pada es jeruk peras.
Pemeriksaan terhadap es jeruk dilakukan  menggunakan  uji  mikrobiologi dengan metode most probable number (MPN). Metode  MPN  terdiri  dari  tiga  tahap  yaitu presumptive test, confirmed test, dan completed test  (Cappucino  &  Sherman,  2014).  Tahap presumptive  test  bertujuan  untuk  menduga adanya  bakteri  Coliform.  Hasil  ini  diketahui dengan  terbentuknya  gelembung  gas  pada media lactose broth (LB) dalam waktu 24 jam dari  laktosa  pada  temperatur  37 ̊  Celsius. Terbentuknya  gas  yang  disebabkan  karena bakteri  Coliform  mampu  memfermentasikan laktosa.  Pada  penelitian  ini,  seluruh  sampel menghasilkan  gas  pada  media  LB.  Hasil presumptive  test  ini  menunjukkan  bahwa keberadaan  Coliform  masih  dalam  tingkat probabilitas rendah, sehingga masih diperlukan uji  berikutnya  untuk  memastikannya  (Cruess, 1958).
Selanjutnya  dilakukan  confirmed  test yang bertujuan untuk menegaskan hasil positif dari  presumptive  test.  Media  yang  digunakan adalah  media  Brilliant  Green  Lactose  Bile Broth (BGLB). Pembacaan dilakukan dalam 24 jam dengan melihat tabung-tabung yang positif. Pada penelitian ini, seluruh sampel menghasilkan gas pada media BGLB.
Terbentuknya  gas  dalam  BGLB  tidak  selalu menunjukkan  bakteri  Escherichia  coli  karena mikroba lainnya mungkin juga ada yang dapat memfermentasikan laktosa dengan membentuk
gas, misalnya bakteri asam laktat. Oleh karena itu,  perlu  dilakukan  completed  test  pada  agar eosin  methylen  blue  agar  (EMBA)  (Cruess, 1958).
Pengujian selanjutnya dilanjutkan dengan  completed  test  untuk  menentukan bakteri  Escherichia  coli.  Jenis  bakteri  yang tumbuh pada media (EMBA) dapat ditentukan berdasarkan  karakter  koloni  yang  tumbuh. Bakteri Coliform khususnya bakteri
Escherichia  coli  memproduksi  koloni  ungu kehitaman  dengan  atau  tanpa  hijau  metalik akibat  menyerap  methylene  blue  pada  media EMBA. Beberapa bakteri Coliform memfermentasikan  laktosa  secara  lambat sehingga  menghasilkan  koloni  berwarna  pink. Bakteri  non-Coliform  tidak  dapat  menyerap eosin  Y  dan  methylene  blue  sehingga  akan menghasilkan  koloni  dengan  karakteristik transparan (Cruess, 1958).
Berdasarkan  pemeriksaan  lanjutan, yaitu  pada  tahap  completed  test  didapatkan hasil  seluruh  sampel  terkontaminasi  bakteri Escherichia  coli.  Pewarnaan  Gram  yang dilakukan  pada  16  sampel  di  media  EMBA menunjukkan  ditemukan  seluruh  sampel  telah terkontaminasi bakteri Escherichia coli (100%). Hasil penelitian yang disajikan di atas sesuai  dengan  penelitian  yang  dilakukan  oleh Kurniawan  di  warung  sekitar  kampus  UNDIP Pleburan  yang  menunjukkan  terdapat  93,3% bakteri  Coliform  yang  terdiri  dari  Escherichia coli (53,3%) dan Salmonella sp (Kurniawan & Isbandrio,  2006).  Hasil  penelitian  ini  juga sesuai  dengan  penelitian  yang  dilakukan  oleh Isnawati  di  Kelurahan  Tembalang  Semarang terdapat  75%  sampel  es  jeruk  terkontaminasi bakteri  Coliform.23  Berdasarkan  Keputusan Menteri Kesehatan RI No.492/MENKES/2010 menyatakan batas maksimum bakteri Coliform dan  Escherichia  coli  pada  air  minum  adalah dengan  nilai  0  MPN/100  ml  (Kepmenkes  RI, 2010).
Berdasarkan Standar Nasional
Indonesia  (SNI),  batas  maksimum  cemaran
mikroba  pada  air  minum  untuk  bakteri Coliform adalah 1100 MPN/ 100 ml (sampel B, C,  D,  E,  F,  G,  H,  I,  J,  K,  L,  M,  N,  O),  dan sebesar  43  MPN/100  ml  (sampel  P). Berdasarkan  3  standar  tersebut,  maka  es  jeruk peras  yang  di  pinggir  jalan  Kecamatan Pontianak  Tenggara  tidak  memenuhi  standar yang  telah  ditetapkan.  Hasil  ini  menunjukkan kualitas  es  jeruk  yang  dijual  terkontaminasi bakteri Coliform (Sumartono, 1985).
Penelitian  ini  menunjukkan  kualitas mikrobiologi es jeruk di pinggir jalan Pontianak Tenggara  belum  memenuhi  syarat  sesuai dengan  batasan  maksimum  mikrob  pada  air minum,  yaitu  dari  16  sampel  yang  diuji, seluruhnya terkontaminasi bakteri Coliform.

## Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian mengenai kontaminasi  bakteri  Coliform  pada  16  sampel es  jeruk  di  pinggir  jalan  Pontianak  Tenggara dapat  disimpulkan  bahwa  terdeteksi  adanya kontaminasi bakteri Coliform (100%), masing- masing  sampel  dengan  rentang  nilai  20 MPN/100  ml  -  >1100  MPN/  100  ml.  Uji Completed Test sampel es jeruk terkontaminasi oleh  bakteria  Escherichia  coli  (100%).  Hal  ini mengindikasikan  es  jeruk  yang  di  uji  tidak layak  minum  berdasarkan  standar  MENKES No. 492/2010, SNI, dan WHO.

## Referensi
Agustina,  T.  (2005). Pentingnya  higiene penjamah  makanan  tradisional.  In: Proceeding Seminar Nasional Memebangun Citra Pangan Tradisonal .
Ardiarini, O., & Gunanti, R. (2005). Preferensi minuman jajanan dan tingkat pengetahuan tentang  pola  jajan  pada  siswa  sekolah dasar (studi pada SDN Dukuh Menanggal II/425  Gayungan  Surabaya). Surabaya: The Indonesian Journal of Public Health , 2(1) , 10–16.
Bahar,  E.  (2005).  Uji  Bakteriologis  Terhadap Minuman  Segar  Air  Tebu  yang  Beredar Di Pasar Raya Padang. Majalah Kedokteran Andalas , 29 (2). Batt,  C.  (2014). Encyclopedia  of  food microbiology (2nd ed.). Elsevier.
https://www.elsevier.com/books/encyclo pedia-of-foodmicrobiogy/batt/9780-  12- 384730-0 Cappucino,  J.,  &  Sherman,  N.  (2014). Microbiology:  a  laboratory  manual. USA Pearson . Cruess,  W.  V.  (1958). Commercial  fruit  and vegetable  products .  McGraw-Hill  Book Company, Incorporated. Depkes  RI.  (2003). Keputusan  Menteri Kesehatan RI Nomor 942/Menkes /sk/VII/2003 tentang pedoman persyaratan  higiene  sanitasi  makanan
jajanan . Depkes RI.
Fatonah,  S.  (2005).  Higiene  dan  sanitasi makanan. Semarang : UNNES . Gainey,  P.  L.,  &  Lord,  T.  H.  (1950).
Microbiology  of  water  and  sewage .
Englewood Cliffs: Prentice-HaliIne. Hermastuti, F. (2006). Faktor Risiko Kontaminasi Escherichia Coli Di Rumah Makan  Kecamatan  Semarang  Tengah Kota Semarang . Diponegoro University. Isnawati, I. (2012). Hubungan Higiene Sanitasi Keberadaan  Bakteri  Coliform  Dalam  Es Jeruk  Di  Warung  Makan  Kelurahan Tembalang  Semarang. Jurnal  Kesehatan Masyarakat  Universitas  Diponegoro ,
1 (2), 18849.
Jawelz,  Melnick,  R.,  &  Adelberg.  (2015). Mikrobiologi kedokteran. EGC.
Karsinah,  L.,  HM,  S.,  &  Mardiastuti,  H.  W.
(2014). Buku Ajar Mikrobiologi
Kedokteran revisi FKUI . Binarupa
Aksara Publisher. Kepmenkes  RI.  (2010). Surat  keputusan menteri kesehatan nomor 492/menkes/PER/IV/2010 tentang
persyaratan kuaalitas air minum . Kepmenkes.
Kurniawan,  M.,  &  Isbandrio,  B.  (2006).
Deteksi Bakteri Coliform Dalam Es Jeruk yang  Dijual  Di  Warung  Sekitar  Kampus Undip  Pleburan. Tim  Karya  Tulis  Ilmiah
Mahasiswa Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro Semarang . Kyle, Gressam, J., & Collum, C. (1956). Small canning  facilities  technical  aids  branch office of industrial resources. Washington :  International  Cooperation Administration .
Michigan. (2007). Water Science Center Fecal indicator  bacteria  and  sanitary  water Quality . http://mi.water.usgs.gov/h2oqual/BactH
December 2022, Vol. 8 No. 2
OWeb.html Naria, E. (2015). Higiene Sanitasi Makanan dan Minuman  Jajanan  di  Kompleks  USU, Medan. Higiene  Sanitasi  Makanan  Dan Minuman Jajanan . New York State Department of Health. (2011).
Coliform  bacteria  in  drinking  water supplies . https://www.health.ny.gov/environmental /water/drinking/docs/coliform_bacteria.p df Neygren,  B.,  Schilling,  K.,  Blanton,  E.,  &
Mintz, E. (2012). Foodborne outbreaks of shigellosis. USA :  Epidemiology  and Infection , 1–9.
Nugroho,  A.  (2006). Bioindikator  kualitas  air. Universitas Trisakti. Jakarta .
Pracaya.  (2003). Jeruk  manis:  varietas budidaya  dan  pasca  panen .  Penabar Swadaya. Riyadi,  S.  (2006). HUBUNGAN  KONDISI
HIGIENE  DAN  SANITASI  DENGAN KEBERADAAN E.  coli  PADA  ES BUAH YANG DIJUAL DI JL. PROF.
SOEDHARTO,  SH  KOTA  SEMARANG
TAHUN 2006 . Diponegoro University. Sumartono. (1985). Jeruk . Penerbit Restu. WHO.  (2006). Penyakit  bawaan  makanan: fokus pendidikan kesehatan . EGC.
Widyati, R. (2002). Higiene dan sanitasi umum dan perhotelan . PT Gramedia Widiarsana Indonesia.