Studi Docking Molekuler dan Toksisitas Senyawa Bioaktif Fukoidan Rumput Laut Coklat yang Berpotensi Sebagai Antihipertensi Secara In Silico
In Silico Molecular Docking and Toxicity Studies of Bioactive Fucoidan Compound from Brown Seaweed as Potential of

## Antihypertensive
Agus Kurniawan 1,2* , Siswandono 3 , Esti Mumpuni 4 , Syamsudin Abdillah 5
1 Program Studi Farmasi, Fakultas Ilmu Kesehatan dan Farmasi, Universitas Gunadarma, Depok, Indonesia
2 Program Doktor Ilmu Farmasi, Fakultas Farmasi Universitas Pancasila, DKI Jakarta, Indonesia
3 Departemen Kimia Farmasi, Fakultas Farmasi Universitas Airlangga, Surabaya, Indonesia
4 Departemen Kimia Farmasi, Fakultas Farmasi Universitas Pancasila, DKI Jakarta, Indonesia
5 Departemen Farmakologi, Fakultas Farmasi Universitas Pancasila, DKI Jakarta, Indonesia * E-mail: akur.biofar@gmail.com
Received: 04 Oktober 2021; Accepted: 26 Mei 2022; Publised:25 Juni 2022

## Abstrak
Angiotensin  Converting  Enzyme  (ACE)  merupakan  enzim  yang  mampu  merubah  peptida  angiotensin  1 menjadi angiotensin 2 yang merupakan vasokonstriktor kuat penyebab hipertensi. Fukoidan (4,5-dihydroxy- 2,6-dimethyltetrahydro-2H-pyran-3-yl hydrogen sulfate) adalah salah satu senyawa kimia polisakarida yang banyak  terkandung  dalam  rumput  laut  dan  dilaporkan  mempunyai  kemampuan  dalam  menghambat  ACE secara  in  vitro.  Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk  prediksi  interaksi  penambatan  antara  fukoidan  dengan asam-asam amino pada ACE dan menggunakan ligan native kaptopril (MCO702) sebagai ligan standarnya. Analisis  penambatan  molekuler  senyawa  fukoidan  dan  kaptopril  terhadap  ACE  (1UZF)  menggunakan Software Molegro 6.0 dan Chemoffice Professional 17.1 serta untuk analisis toksisitas menggunakan pkCMS online  tools.  Hasil  prediksi  penambatan  menunjukan  fukoidan  memiliki  nilai  MolDock  dan  Rerank  Score masing-masing yaitu -82,311 kkal/mol dan -70,872 kkal/mol yang tidak berbeda jauh dengan kaptopril yaitu -84,816  kkal/mol  dan  -74,758  kkal/mol.  Fukoidan  dan  kaptopril  juga  mudah  diabsoprsi  dan  memiliki permeabilitas yang baik  serta tergolong  toksisitasnya rendah,  tetapi fukoidan dan kaptopril  berbahaya  jika tertelan dalam rentang 2000<LD50≤ 5000 mg/kg. Fukoidan berpotensi sebagai kandidat obat antihipertensi karena secara prediksi in silico memiliki kemampuan yang tidak berbeda jauh dengan kaptopril.
Kata Kunci : ACE, antihipertensi, in silico , toksisitas, fukoidan

## Abstract
Angiotensin Converting Enzyme (ACE) is an enzyme that can convert angiotensin 1 to angiotensin 2 peptide, which is a strong vasoconstrictor that causes hypertension. Fucoidan (4,5-dihydroxy-2,6-dimethyltetrahydro- 2H-pyran-3-yl hydrogen sulfate) is one of the polysaccharide chemical compounds found in seaweed and is reported to have the ability to inhibit ACE activuty in vitro. The aim of this study is to predict of the binding interaction between fucoidan and amino acids in ACE and to use the native captopril ligand (MCO702) as the standard ligand. Analysis of the molecular docking of fucoidan and captopril compounds against ACE (1UZF) using Molegro 6.0 and Chemoffice Professional 17.1 Software and for toxicity analysis using pkCMS online  tools.  The  results  of  the  docking  prediction  showed  that  fucoidan  had  MolDock  and  Rerank  Score values of -82.311 kcal/mol and -70.872 kcal/mol, respectively, which were not much different from captopril, namely -84.816 kcal/mol and -74.758 kcal/mol. Fucoidan and captopril are also easily absorbed and have good permeability and are classified as low toxicity, but are dangerous if ingested in the 2000 <LD50≤ 5000 mg/kg range. Fucoidan has the potential as a candidate for antihypertensive drugs because it is predicted that in silico has the same ability as captopril.
Keywords : ACE, antihypertensive, docking in silico, toxicity, fucoidan

## PENDAHULUAN
Pengidap hipertensi masih tinggi prevalensinya  baik  di  dunia  maupun  di Indonesia.  Hipertensi  merupakan  salah  satu penyakit  yang  berdampak  serius  terhadap kesehatan tubuh. Hasil Riset Kesehatan Dasar (Riskesdas) tahun 2018, menunjukkan prevalensi hipertensi di Indonesia pada umur ≥18  tahun  yaitu  sebesar    34,1  %  yang mengalami  peningkatan  dari  25,8  %  tahun 2013.  Penderita  hipertensi  berdasarkan gender  menunjukan  perempuan  lebih  tinggi yaitu  36,9%  dibandingkan  dengan  laki-laki yaitu 31,3% (Kemenkes RI, 2018, 2013).
Secara patologis hipertensi terjadi melalui  beberapa  mekanisme  yaitu  melalui sistem renin-angiotensin-aldosteron (RAAS), sistem simpatoadrenal, akibat ketidakteraturan metabolik ( metabolic disorder ),  pengaruh  hormon  endotel  dan autokoid.  Sedangkan  untuk  mekanisme penatalaksanaan  farmakologisnya  meliputi mekanisme diuretik saluretik, alpha  block er, beta blocker , angiotensin  receptor  blocker (ARB),  penghambat angitensin  converting enzyme (ACE), calcium  channel  blocker (CCB),  dan  pelepasan  nitrit  oksida  (NO) (Carey, 2007).
Angiotensin  Converting  Enzyme (ACE) adalah  seng  (Zn)  metallopeptidase  yang mengubah angiotensin I (dekapeptida inaktif) menjadi angiotensin II, yaitu vasokonstriktor kuat penyebab hipertensi (Sharifi et al., 2013). Inhibitor ACE berperan untuk antihipertensi, gagal  jantung,  infraksi  miokardial,  diabetes militus,  gangguan  ginjal  kronik,  dan stroke (Fagyas et al., 2014; Miller et al., 2006; Neal et  al.,  2000).  Inhibitor  ACE  adalah  senyawa yang  biasa  digunakan  untuk  pengobatan hipertensi  baik  sebagai  monoterapi  atau dikombinasikan  dengan  obat  diuretik  atau penghambat  saluran  kalsium.  Ada  dua kelompok  utama  inhibitor  RAAS  yang memblok aksi angiotensin II dengan mekanisme yang berbeda. Pertama, inhibitor ACE  memblok  pembentukan  angiotensin  II dengan cara menghambat konversi
angiotensin  II  dari  angiotensin  I.  Kedua, Inhibitor ACE mencegah terjadinya degradasi bradikinin  yang  memiliki  fungsi  penting sebagai vasodilatasi dan memberikan pengaruh  antiproliferatif  di  pembuluh  darah (Battegay, Lip dan Bakris, 2005).
Interaksi  yang  paling  penting  dari inhibitor  ACE  dengan  situs  aktif  enzim bergantung  pada  kontak  antara  gugus  kelat yang kuat dan atom seng di situs aktif. Salah satu jenis obat kategori penghambat kompetitor  terhadap  aktivitas  enzim  adalah kaptopril dan enalapril yang digunakan untuk menghambat ACE dengan membentuk ikatan kordinat  dengan  situs  aktif  atom  seng  (Zn) dan juga membentuk interaksi yang menguntungkan  dengan  gugus  lain  dalam situs aktif enzim yang dapat mengawali ikatan dengan  afinitas  tinggi  antara  obat  dan  target enzim (Copeland, 2005).
Beberapa penelitian melaporkan aktivitas senyawa  kimia  dari Sargassum sp.  sebagai antihipertensi  di  antaranya  adalah  asam sargahidrokuinoik dan farnesilaseton sebagai vasodilatasi (Park et al., 2017, 2008), 5E- dan 5Z-  farnesilaseton  dan  sargakromenol  D sebagai  CCB  (Park  et  al.,  2017;  Shin  et  al., 2013), ekstrak Sargassum sp. dan fukosantin sebagai  penghambat  ACE  (Maneesh  et  al., 2017;  Nagappan  et  al.,  2017;  Raji  et  al., 2020).  Selain  dari  jenis Sargassum sp.  telah dilaporkan  juga  senyawa  dari  rumput  laut coklat lain yang memiliki aktivitas antihipertensi  melalui  jalur  pelepasan  NO seperti  dari  jenis Undaria  pinnatifida dan Laminaria japonica dengan senyawa fukoidan yang terkandung di dalamnya dapat sebagai  vasodilatasi  pembuluh  darah  (Cui  et al., 2014).
Fukoidan dicirikan dengan gugus polisakarida sulfat yang mengandung fukosa tertentu  yang  tidak  hanya  memiliki  tulang punggung yang dibangun dari (1→3) - linked α-l-fukopiranosil atau pergantian (1→3) - dan (1→4) - linked α-l residu fukopiranosil tetapi juga  termasuk  galaktofukan  tersulfat  dengan tulang punggung yang dibangun dari (1→6)-
β-D-galakto-  dan/atau  unit  (1→2)-β-D- mannopiranosil  dengan  fukosa  atau  fuko- oligosakarida yang bercabang dan/atau asam glukuronat, xilosa, atau substitusi glukosa (Li et al., 2008).
Molecular  docking atau  penambatan molekuler merupakan suatu prediksi terjadinya  konformasi  ikatan  berupa  posisi, jenis,  dan  afinitas  atas  dasar  ikatan  energi antara ligan (senyawa aktif) dan makromolekul  (protein  target)  secara  efisien dengan  menggunakan  teknik  komputasi (Trott  dan  Olson,  2009). Nilai  energi  ikatan ( rerank atau binding  energy )  merupakan banyaknya  energi  yang  diperlukan  untuk melakukan  ikatan  antara  reseptor  dengan ligan. Apabila energi ikatan yang diperlukan lebih  kecil  (semakin  negatif)  maka  ikatan reseptor  dengan  ligan  menjadi  lebih  stabil. Jika  ikatan  tersebut  stabil,  maka  aktivitas kemampuan obat akan semakin besar (Huang and  Zou,  2010;  Molegro,  2013).  Sedangkan untuk prediksi farmakokinetik, sifat fisikokimia,  dan  toksisitas  senyawa  dapat dilihat  dengan  menggunakan  pkCSM online tool sehingga  dapat  diprediksi  ketoksikan senyawa tersebut.
Mekanisme kerja secara molekuler yang menerangkan  aktivitas  senyawa  fukoidan sebagai antihipertensi melalui penghambatan ACE  belum  dilaporkan.  Untuk  itu,  perlu dilakukan  penulusaran  mengenai  prediksi konformasi interaksi penambatan dan
toksisitas senyawa fucoidan dari rumput laut terhadap  ACE  secara  komputasi  untuk mengetahui  potensi  aktivitasnya  sehingga dapat  dikembangkan  lebih  jauh  lagi  di  masa depan.

## METODE PENELITIAN Bahan Data
Bahan  yang  digunakan  adalah  data molekul  kristal Angiotensin  Converting Enzyme (ACE) dari RCSB Protein Data Bank (https://www.rcsb.org)  dengan  kode  protein 1UZF  yang  menggunakan  ligan native senyawa  kaptopril  (MCO702)  dan  struktur ligan  senyawa  fukoidan  yang  diperoleh  dari PubChem  Open  Chemistry  Database yang selanjutnya  dibuat  struktur  3  dimensinya menggunakan  Chem  Draw  3D Professional 17.1  (PerkinElmer)  dengan  meminimilkan energinya untuk mendapatkan bentuk stereokimia  dan  senyawa  yang  paling  stabil. Struktur  fukoidan  3D  selanjutnya  disimpan dalam bentuk file SYBYL.mol2 .

## Software yang Digunakan
Alat  dan  software  berupa  perangkat komputer  merek  Lenovo,  sistem  operasi Windows 8  Pro,  32  bit, prosesor AMD  E1- 2100  APU with  Radeon ™  HD Graphics , RAM  2,00  GB.  Program  yang  digunakan meliputi Chem  Draw  Professional 17.1 (PerkinElmer), Chem  3D  Professional 17.1 (PerkinElmer), Molegro  Virtual  Docker 6.0
(A)                                                                    (B)
Gambar 1. Struktur senyawa fukoidan atau 4,5-dihydroxy-2,6-dimethyltetrahydro-2H- pyran-3-yl hydrogen sulfate (A) dan struktur senyawa kaptopril  atau ((S)-3-mercapto-2- methylpropanoyl)-L-proline (B)
(Molegro  ApS)  yang  berlisensi, SMILES Translator , dan pkCSM online tools . Persiapan Target Protein Molekul  reseptor  target  berupa Human ACE yang  diunduh  dari  situs protein  data bank dengan kode 1UZF yang terdapat ligan kaptopril native dengan kode MCO702 ( 1-(3- Mercapto-2-Methyl-Propionyl)  Pyrrolidine- 2-Carboxylic Acid ) . Struktur senyawa ( Gambar  1 )  Kaptopril  mengandung  gugus aktif  sulfhidril  (-SH)  dan  gugus  asam karboksilat  (-COOH)  yang  memliki  fungsi sebagai  farmakofor  dalam  proses  hubungan interaksi reseptor-ligan (Cushman and Ondetti, 1991). Senyawa fukoidan mengandung  gugus  sulfat  (HSO 4 - )  yang diharapkan  juga  dapat  berfungsi  sebagai farmakofor (Li et al., 2008).

## Analisis Data Docking
Senyawa  yang  akan  didocking  terlebih dahulu  dibuat  struktur  molekul  2D  dengan program  aplikasi Chem  Draw  Professional 17.1,  dan  dikopikan  pada  program  aplikasi Chem 3D Professional 17.1 untuk merancang struktur  3D.  Energi  minimalnya  yang  telah diukur melalui MMFF94, selanjutnya
disimpan dalam bentuk mol2 {SYBYL2(*.mol2)}. Docking terhadap ACE dengan kode pdb.1UZF menggunakan program  aplikasi  komputer MVD versi  6.0. Hasil docking berupa  visualisasi  ikatan struktur ligan dengan enzim ACE dan Rerank Score (RS) merupakan energi yang dibutuhkan  untuk  interaksi  reseptor-ligan, sehingga dari nilai tersebut dapat memprediksi aktivitas antihipertensi senyawa fukoidan.

## Analisis Toksisitas Senyawa
Prediksi  sifat  fisikokimia  menggunakan pkCSM online  tool digunakan  untuk memprediksi  sifat  fisikokimia  yang  meliputi logaritma  koefisien  partisi  oktanol/air  (Log P),  berat  molekul  senyawa,  jumlah  ikatan antar atom yang dapat berotasi, donor ikatan hidrogen ,  akseptor  ikatan  hydrogen , dan aktivitas  permukaan  polar  ( Polar  Surface Activity) .  Sebelum  dilakukan  penambatan, senyawa fukoidan dan pembanding kaptopril perlu  dipersiapkan  struktur  gambar  2D dengan Chem  Draw  Professional 17.1, kemudian  dirancang  struktur  3D  pada program  aplikasi  yang  sama.  Struktur
Tabel 1. Prediksi penambatan senyawa fukoidan dan kaptopril No Nama Senyawa MolDock Score (kkal/mo) Rerank Score (kkal/mol) RMSD (Å) Ikatan Hidrogen Interaksi Elektrostatik Interaksi Sterik 1. Kaptopril ( native ) - - - Glu384, Gln281, Lys511, Tyr520, Tyr523, His387 His513, His353, Lys511 His513, His353 2. Kaptopril ( Redocking ) -84,816 -74,758 1,352 Ala354, Gln281, Lys511, Tyr520 His353 Lys511, His513 Tyr520, Phe457, His353, Tyr523, 3. Fukoidan -82,311 -70,872 3,726 Glu384, Tyr523, Ala354 His383, Arg522, Glu411, His387, Glu384, His513, His353, Zn-701 Tyr523, Glu384, Ala354, His513, Val380
senyawa  3D  yang  sudah  dibuat,  disimpan dalam  bentuk  file  *.sdf  atau  *.pdb. Selanjutnya,  struktur  senyawa  fukoidan  dan senyawa pembanding kaptopril dikonversi ke dalam format SMILES dengan menggunakan Online SMILES
Translator
(https://cactus.nci.nih.gov/translate/).
Senyawa  yang  sudah  dibuat  dalam  format SMILES ,  selanjutnya  dapat  diproses  untuk memprediksi toksisitas senyawanya fukoidan dan  kaptopril  dengan  pkCSM online  tool (http://biosig.unimelb.edu.au/pkcsm/predicti on).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  dari  analisis  dari  penambatan ( docking )  molekul  senyawa  molekul  ACE dengan  ligan  senyawa  isolat  fukoidan  untuk
menghambat kerja ACE untuk tidak menghasilkan  angiotensin  yang  merupakan peptida penyebab terjadinya hipertensi. Hasil interaksi  docking  kaptopril  dan  fukoidan dapat  dilihat dalam Tabel 1 .  Senyawa isolat fukoidan  mempunyai MolDock  score dan rerank  score lebih  rendah  yaitu  masing- masing  nilainya  -82,311  kkal/mol  dan  - 70,872  kkal/mol  dibandingkan  senyawa kaptopril  sebagai  ligan native -nya  yang mempunyai MolDock score dan rerank score yaitu masing-masing  -84,816  kkal/mol  dan  - 74,758 kkal/mol. Hal ini menunjukan bahwa senyawa  kaptopril  masih  kuat  sebagai  obat antihipertensi  karena  daya  energi  ikatannya dengan  reseptor  untuk  menghambat  ACE masih  tinggi  dibandingkan  dengan  senyawa fukoidan. Tetapi, MolDock score dan rerank
A B
C
D E F
Gambar 2. Visualisasi 3D struktur kristal ACE (1UZF) dan ikatan antara asam-asam amino dengan ligan kaptopril (A-C) dan  fukoidan (D-F)
score antara kaptopril dan fukoidan memiliki nilai yang tidak jauh berbeda nilainya , dengan demikian  senyawa  fukoidan  masih  memiliki potensi sebagai penghambat kerja ACE. Nilai RMSD merupakan jarak ligan dengan ikatan reseptor,  kaptopril  memiliki  nilai  yang  lebih baik yaitu 1,352 Å, sedangkan untuk fukoidan memiliki  nilai  3,726  Å.  Nilai  RMSD  dapat diperoleh  dengan  cara  melihat  perbandingan antara posisi atom ligan secara eksperimental dengan  posisi  prediksi  algoritmanya.  Posisi kompleks  yang  tepat  dapat  terbentuk  dari fleksibelitas ligan (Sousa et al., 2006).
Hasil  penambatan  akan  memiliki  nilai yang baik jika nilai RMSD lebih rendah dari 2 Å (Molegro, 2013). Asam-asam amino yang terkikat melalui ikatan hidrogen oleh senyawa kaptopril  pada  target  ACE  mempunyai  4 ikatan  hidrogen  dengan  asam  amino  dan terdapat  3  asam  amino  yang  terikat  sama dengan  ligan  native  kaptopril  yaitu  asam amino Gln281 , Lys511 , dan Tyr520 . Sedangkan  senyawa  fukoidan  memiliki  3 ikatan  hidrogen  dan  terdapat  2  asam  amino yang  terikat  sama  dengan  ligan  native kaptopril yaitu Glu384 dan Tyr523 ( Gambar 3 ). Interaksi elektrostatik dan sterik senyawa fukoidan  memiliki  jumlah  interaksi  yang
lebih banyak dengan asam amino dibandingkan dengan kaptopril dan fukoidan memiliki  interaksi  dengan  unsur  seng  (Zn) yang merupakan kofaktor dan salah satu situs aktif  dari  ACE  sedangkan  pada  kaptopril tidak  terlihat  ( Gambar  2 ).  Hal  tersebut menunjukan  bahwa  senyawa  fukoidan  juga diprediksi memiliki potensi untuk menghambat  ACE,  namum  kemampuan penghambatannya  terhadap  ACE  masih  di bawah kaptopril.
Data  Indeks  Obat  Dunia  ( World  Drugs Index )  merupakan  database  komputerisasi yang sangat besar yang telah mengalisis sifat fisikokimia  2.245  senyawa  obat  dari  50.000 senyawa database. Permeabilitas dan absorpsi sebuah  senyawa  sangat  ditentukan  oleh  sifat fisikokimia  seperti  berat  molekul,  nilai  log koefisien  partisi  oktanol/air  (log  P),  donor ikatan  hidorgen  ( Hydrogen  Bond  Acceptors ) dengan ditunjukan oleh banyaknya gugus O- H  dan  N-H,  akseptori  ikatan  hydrogen ( Hydrogen Bond Acceptors ) dengan ditunjukan  oleh  dengan  ditunjukan  oleh banyaknya  atom  O  dan  N.  Prediksi  sifat fisikokimia dapat dilakukan dengan menggunakan pkCSM online tool (Lipinski et al., 2001).
A B
Gambar 3. Visualisasi 2D ikatan hidrogen (biru), interaksi elektrosatik (hijau), dan interaksi sterik (merah) antara senyawa kaptopril (A) dan fukoidan (B) dengan asam-asam amino ACE (1UZF)
Senyawa fukoidan dan kaptopril menunjukan prediksi bahwa senyawa tersebut mudah  untuk  diabsorbsi  dan  memiliki permeabilitas  yang  baik  karena  memenuhi hukum lima Lipinski yaitu berat molekulnya di  bawah  500  Dalton,  Log  P  kurang  dari  5, HBD  di  bawah    5,  dan  HBA  di  bawah  10 ( Tabel  2 ). Sedangkan  untuk  mengetahui kategori  klasifikasi  toksisitas  senyawa  dapat diketahui  berdasarkan  nilai  LD 50 , skin sensitization , Ames toxicity
dan
Hepatotoxycity (Nations United, 2013). Nilai  LD 50 ( Tabel  3 )  pada  hewan  coba ( rodent ) yang dimiliki fukoidan sebesar 1,570 mol/kg  (3802  mg/kg)  dan  kaptopril  sebesar 1,578  mol/kg  (3429  mg/kg),  sehingga keduanya dapat dikategorikan dalam kelas V. Selain  itu,  fukoidan  dan  kaptopril  tidak bersifat toksik terhadap bakteri (uji mutagenik  AMES),  hati,  dan  sensitivitas kulit.  Fukoidan  dan  kaptopril  termasuk  jenis senyawa kimia yang memiliki efek toksisitas rendah,  tetapi  berbahaya  jika  tertelan  dalam rentang  2000<LD 50 ≤  5000  mg/kg,  hal  ini
sesuai  dengan  nilai  kisaran  toksisitas  akut yang  diperoleh  secara  eksperimental  (atau kategori bahaya toksisitas akut) ke perkiraan titik  toksisitas  akut  untuk  digunakan  dalam formula klasifikasi campuran dalam pedoman Globally Harmonized System of Classification  and  Labelling  of  Chemicals (GHS)  (Nations  United,  2013),  semakin tinggi  nilai  LD 50 ,  maka  semakin  rendah toksisitasnya.

## KESIMPULAN
Prediksi senyawa fukoidan ( 4,5- dihydroxy-2,6-dimethyltetrahydro-2H-pyran- 3-yl  hydrogen  sulfate )  secara in  silico menunjukan  kemampuan  fukoidan  dalam menghambat ACE sebagai target enzim yang mempunyai kemampuan merubah angiotensin  1  menjadi  angiotensin  2  yang merupakan senyawa peptide vasokonstriktor. Fukoidan memiliki nilai MolDock dan Rerank Score masing-masing yaitu -82,311 kkal/mol dan  -70,872  kkal/mol.  Hasil  penambatan fukoidan  tersebut  terhadap  ACE  tidak
Tabel 2. Prediksi nilai parameter-parameter sifat fisikokimia senyawa fukoidan dan kaptopril dengan menggunakan pkCSM online tool.
No Ligan BM (Da) LogP Torsion HBD HBA PSA (A 2 ) Persyaratan 5 Hukum Lipinski 1 Kaptopril 217,290 0,6279 3 2 3 88,685 Ya 2 Fukoidan 242,249 -1,2966 2 3 6 87,576 Ya
Tabel 3. Prediksi toksisitas senyawa fukoidan menggunakan pkCSM online tool
Nama Model Nilai Prediksi Unit Kaptopril Fukoidan AMES toxicity Tidak Tidak Kategori (Ya/Tidak) Dosis toleransi Maks. (Manusia) 1,357 1,537 Numeric (log mg/kg/hari) hERG I inhibitor Tidak Tidak Kategori (Ya/Tidak) hERG II inhibitor Tidak Tidak Kategori (Ya/Tidak) Rat Acute Toxicity (LD 50 ) 1,578 1,570 Numerik (mol/kg) Oral Rat Chronic Toxicity (LOAEL) 1,327 3,425 Numerik (log mg/kg_bw/hari) Hepatotoksitas Tidak Tidak Kategori (Ya/Tidak) Sensitivitas kulit Tidak Tidak Kategori (Ya/Tidak) Toksisitas T. Pyriformis 0,285 0,285 Numerik (log ug/L) Minnow toxicity 2,645 3,197 Numerik (log mM) Kelas Toksisitas V V Kategori (I, II, III, IV, V, VI)
berbeda  jauh  dengan  kaptopril  sebagai standar  obat  atau  ligan  yang  memiliki  nilai MolDock dan Rerank  Score masing-masing yaitu  -84,816 kkal/mol dan -74,758 kkal/mol. Fukoidan  dan  kaptopril  memenuhi  hukum  5 Lipinski  sehingga  dapat  mudah  diabsorbsi dan  memiliki  permeabilitas  yang  baik  serta
termasuk  kategori  kelas  V  yang  mempunyai efek  toksisitas  rendah,  tetapi  berbahaya  jika tertelan  dalam  rentang  2000LD 50 ≤  5000 mg/kg . Fukoidan berpotensi sebagai kandidat obat  antihipertensi  karena  secara  prediksi in silico memiliki  kemampuan  yang  tidak berbeda jauh dengan kaptopril.

## Daftar Pustaka
Battegay, E.J., Lip, G.Y.H., Bakris, G.L., 2005. Hypertension Principles and Practice. Taylor Francis Group, New York, USA.
Carey,  R.M.,  2007.  Hypertension  and  Hormone  Mechanisms.  Humana  Press,  New  Jersey, USA.
Copeland,  R.A.,  2005.  Evaluation  of  Enzyme  Inhibitors  in  Drug  Discovery :  A  Guide  for Medicinal Chemists and Pharmacologists. John Wiley  Sons, Inc., New Jersey, USA.
Cui, W., Zheng, Y., Zhang, Q., Wang, J., Wang, L., Yang, W., Guo, C., Gao, W., Wang, X., Luo,  D.,  2014.  Low-molecular-weight  fucoidan  protects  endothelial  function  and ameliorates basal hypertension in diabetic Goto-Kakizaki rats. Lab. Investig. 94, 382–393.
Cushman, D.W., Ondetti, M.A., 1991. History of the design of captopril and related inhibitors of angiotensin converting enzyme. Hypertension 17, 589–592.
Fagyas, M., Uri, K., Siket, I.M., Darago, A., Boczan, J., Banyai, E., Edes, I., Papp, Z., Toth, A.,  2014.  New  perspectives  in  the  renin-angiotensin-aldosterone  system  (RAAS)  III: Endogenous  inhibition  of  angiotensin  converting  enzyme  (ACE)  provides  protection against cardiovascular diseases. PLoS One 9, 1–13.
http://biosig.unimelb.edu.au/pkcsm/prediction.
https://cactus.nci.nih.gov/translate/.
https://www.rcsb.org/.
Huang, S.Y., Zou, X., 2010. Advances and challenges in Protein-ligand docking. Int. J. Mol. Sci. 11, 3016–3034.
Kemenkes RI, 2018. Riset Kesehatan Dasar 2018. Jakarta.
Kemenkes RI, 2013. Riset Kesehatan Dasar 2013. Jakarta.
Li,  B.,  Lu,  F.,  Wei,  X.,  Zhao,  R.,  2008.  Fucoidan:  Structure  and  bioactivity.  Molecules  13, 1671–1695.
Lipinski,  C.A.,  Lombardo,  F.,  Dominy,  B.W.,  Feeney,  P.J.,  2001.  Experimental  and computational approaches to estimate solubility and permeability in drug discovery and development settings. Adv. Drug Deliv. Rev. 46, 3–26.
Maneesh, A., Chakraborty, K., Makkar, F., 2017. Pharmacological activities of brown seaweed Sargassum  wightii  (Family  Sargassaceae)  using  different  in  vitro  models.  Int.  J.  Food Prop. 20, 931–945.
Miller,  E.M.,  Cziraky,  M.,  Sarah,  A.,  2006.  ACE  inhibitors  versus  ARBs:  comparison  of
practice guidelines and treatment selection considerations. Formulary 41, 274–284. Molegro, 2013. Molegro virtual docker: User manual. CLC bio, Denmark.
Nagappan, H., Pee, P.P., Kee, S.H.Y., Ow, J.T., Yan, S.W., Chew, L.Y., Kong, K.W., 2017. Malaysian  brown  seaweeds  Sargassum  siliquosum  and  Sargassum  polycystum:  Low density lipoprotein (LDL) oxidation, angiotensin converting enzyme (ACE), α-amylase, and α-glucosidase inhibition activities. Food Res. Int. 99, 950–958.
Nations  United,  2013.  Globally  Harmonized  System  of  Classification  and  Labelling  of Chemicals (GHS ） , 5th ed. New York and Geneva.
Neal, B., MacMahon, S., Chapman, N., 2000. Effects of ACE Inhibitors,Calcium Antagonists, and Other Blood Pressure Lowering Drugs : Results Of Perspectively Designed Overview Of Randomised Trials. Lancet 356, 1955–1964.
Park, B.G., Kwon, S.C., Park, G.M., Ham, J., Shin, W.S., Lee, S., 2008. Vasodilatation effect of  farnesylacetones,  active  constituents  of  Sargassum  siliquastrum,  on  the  basilar  and carotid arteries of rabbits. Bioorganic Med. Chem. Lett. 18, 6324–6326.
Park, B.G., Shin, W.S., Oh, S., Park, G.M., Kim, N.I., Lee, S., 2017. A novel antihypertension agent, sargachromenol D from marine brown algae, Sargassum siliquastrum, exerts dual action  as  an  L-type  Ca2+  channel  blocker  and  endothelin  A/B2  receptor  antagonist. Bioorganic Med. Chem. 25, 4649–4655.
Raji, V., Loganathan, C., Sadhasivam, G., Kandasamy, S., Poomani, K., Thayumanavan, P., 2020. Purification of fucoxanthin from Sargassum wightii Greville and understanding the inhibition  of angiotensin  1-converting enzyme:  An in  vitro  and in  silico studies.  Int.  J. Biol. Macromol. 148, 696–703.
Sharifi, N., Souri, E., Ziai, S.A., Amin, G., Amanlou, M., 2013. Discovery of new angiotensin converting enzyme ( ACE ) inhibitors from medicinal plants to treat hypertension using an in vitro assay. DARU J. Pharm. Sci. 21, 1–8.
Shin, W.S., Oh, S., An, S.W., Park, G.M., Kwon, D., Ham, J., Lee, S., Park, B.G., 2013. 5E- and 5Z-farnesylacetones from Sargassum siliquastrum as novel selective L-type calcium channel blockers. Vascul. Pharmacol. 58, 299–306.
Sousa, S.F., Fernandes, P.A., Ramos, M.J., 2006. Review: Protein–Ligand Docking: Current Status and Future Challenges. PROTEINS Struct. Funct. Bioinforma. 6515–26 65, 15–26.
Trott, O., Olson, A.J., 2009. AutoDock Vina: improving the speed and accuracy of docking with  a  new  scoring  function,  efficient  optimization  and  multithreading.  Journal  of Computational Chemistry. J. Comput. Chem. 31, 455–461.