UJI EFEK ANALGETIK NANOPARTIKEL EKSTRAK RIMPANG JAHE MERAH ( Zingiber officinale var Rubrum ) PADA TIKUS PUTIH JANTAN GALUR WISTAR ( Rattus norvegicus )
Christian Excelino Kaunang 1) , Widdhi Bodhi 1) , Hosea Jaya Edy 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
Red  Ginger  (Zingiber  officinale  var  rubrum)  has  long  been  known  that  its  properties  can  cure  various diseases.  Chemical  components  such  as  gingerol,  shogaol,  and  zigeron  that  can  provide  pharmacological and  physiological  effects  such  as  analgesic,  antioxidant,  carcinogenic,  and  non-mutagenic  effects  even  at high concentrations. This study aims to determine whether the nanoparticles of red ginger rhizome extracts can  provide  analgesic  effects  in  white  male  wistar  rats  (Rattus  norvegicus).  The  red  ginger  rhizome  was extracted  using  maceration  method  with  ethanol  as  a  solvent  and  nanoparticle  formulation  of  red  ginger extract  was  made  using  an  ionic  gelation  method.  The  test  mice  animals  were  divided  into  5  kinds  of treatments  and  each  treatment  performed  3 repetitions.  Test  of  the  analgesic  effect  was carried out by the method  of  thermic induction  using  waterbath  and  was  observed  as  many  as  5  times,  namely  before  giving test  material,  the  30 th minute,  60 th minute,  90 th minute,  and  120 th minute.  Group  I  as  negative  control  was given  1%  CMC,  group  II  as  positive  control  was  given  paracetamol,  group  III-V  was  treated  using nanoparticles red ginger extract with multilevel doses of 0.0215g, 0.043g, and 0.086g. Based on the ANOVA test, the results obtained of analgesic effects significantly different with p = 0.019 (p < 0.05).
Keywords : analgesic, nanoparticles, red ginger.

## ABSTRAK
Jahe  merah  ( Zingiber  officinale  var  rubrum )  sudah  lama  diketahui  khasiatnya  yaitu  dapat  menyembuhkan berbagai macam penyakit. Komponen kimia seperti gingerol, shogaol, dan zigeron yang dapat memberikan efek  farmakologi  maupun  efek  fisiologi  seperti  efek  analgetik  ,  antioksidan,  karsinogenik,  dan  non mutagenik  meskipun  pada  konsentrasi  yang  tinggi.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  apakah nanopartikel  ekstrak  rimpang  jahe  merah  dapat  memberikan  efek  analgetik  pada  tikus  putih  jantan  galur wistar  ( Rattus  norvegicus) .  Rimpang  jahe  merah  diekstraksi  menggunakan  metode  maserasi  dengan  etanol sebagai pelarut dan  dibuat formulasi nanopartikel ekstrak rimpang jahe merah dengan  metode gelasi ionik. Hewan  uji tikus  dibagi  menjadi  5  macam  perlakuan  setiap  perlakuan  dilakukan 3  kali  pengulangan.  Untuk pengujian  efek  analgetik  dilakukan  dengan  metode  induksi  termik  menggunakan waterbath dan  dilakukan pengamatan sebanyak 5 kali yaitu sebelum pemberian bahan uji, menit ke-30, menit ke-60, menit ke-90, dan menit  ke-120.  Kelompok  I  sebagai  kontrol  negatif  diberi  CMC  1%,  kelompok  II  sebagai  kontrol  positif diberi parasetamol, kelompok III-V diberi perlakuan menggunakan nanopartikel ekstrak rimpang jahe merah dengan dosis yang bertingkat yaitu 0,0215g, 0,043g, dan 0,086g. Berdasarkan hasil uji ANOVA didapatkan efek analgetik yang berbeda secara bermakna dengan p = 0,019 (p<0,05).
Kata Kunci : Jahe merah, analgetik, nanopartikel.

## PENDAHULUAN
Nanopartikel merupakan partikel koloid  padat  dengan  diameter  1-1000  nm (Tiyaboonchai, 2003). Nanopartikel bertujuan untuk  mengatasi  kelarutan  zat  aktif  yang sukar larut, memperbaiki bioavailabilitas yang buruk,  memodifikasi  sistem  penghantaran obat  sehingga  obat  dapat  langsung  menuju daerah  yang  spesifik,  meningkatkan  stabilitas zat aktif dari degradasi lingkungan (penguraian  enzimatis,  oksidasi,  hidrolisis), memperbaiki absorbsi suatu senyawa makromolekul,  dan  mengurangi  efek  iritasi zat  aktif  pada  saluran  cerna  (Mohanraj  dan Chen, 2006).
Jahe  merah  ( Zingiber  officinale  var rubrum )  sudah  lama  diketahui  khasiatnya yaitu  dapat  menyembuhkan  berbagai  macam penyakit, dibandingkan dengan jahe gajah dan jahe emprit. Meskipun demikian, kebanyakan orang  umumnya  lebih  mengenal  jahe  gajah yang  berguna  sebagai  bumbu  dapur,  rempah- rempah,  dan  bahan  obat-obatan.  Berdasarkan penelitian para ahli dalam negeri maupun para ahli  dari  luar  negeri,  jahe  memiliki  efek farmakologis  yang  berkhasiat  sebagai  obat dan  mampu  memperkuat  khasiat  obat  yang dicampurkannya (Tim Lentera, 2002).
Jahe  memiliki  beberapa  komponen kimia  seperti  gingerol,  shogaol,  dan  zigeron yang  dapat  memberikan  efek  farmakologi maupun efek fisiologi  seperti  efek analgetik  , antioksidan, karsinogenik, dan non mutagenik
meskipun  pada  konsentrasi  yang  tinggi (Hernani  dan  Winarti,  2011).  Menurut penelitian  Dugasani et  al (2010),  kandungan gingerol  yang  ada  pada  jahe  merah  lebih tinggi  dibanding  jahe  lainnya.  Senyawa  aktif pada  jahe  merah  adalah  [6]-gingerol  dan 3R,5S-[6] gingerdiol.

## METODOLOGI PENELITIAN Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian  ini  akan  dilaksanakan  pada bulan Mei – September 2019 di Laboratorium Advance  Program  Studi  Farmasi  Fakultas Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam Universitas Sam Ratulangi.

## Alat
Alat  yang  akan  digunakan  dalam penelitian  ini  antaralain  :  alat-alat  gelas (pyrex),  blender,  oven,  pisau,  timbangan analitik,  tisu,  wadah,  kandang  pemeliharaan hewan,  sarung  tangan,  tempat  air  minum  dan makanan hewan, sudip, kertas saring, lumpang  dan  alu, stopwatch , disposable syringe 3mL,  dan  NGT  ( Nasograstric  Tube ) No. 3,5, aluminium foil, dan Waterbath.

## Bahan
Bahan  yang  digunakan  adalah  :  jahe merah,  tablet  parasetamol  500  mg,  makanan hewan  uji,  CMC  1%,  etanol  96%,  Natpp, kitosan, polisorbat 80, poldan akuades.
Hewan Uji
Objek yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  tikus  putih  jantan  yang berumur  5  minggu  dan  berat  100-200  gram dengan jumlah 15 ekor. Setelah itu diadaptasi selama 10 hari.

## Rancangan Penelitian
Penelitian ini menggunakan rancangan penelitian eksperimental laboratorium dengan menggunakan  tikus  putih  jantan  sebagai hewan  percobaan.  Perlakuan  dibagi  dalam  5 kelompok,  dalam  kelompok  masing-masing terdiri  dari  3  ekor  tikus  putih  jantan  yang sudah  diadaptasikan  terlebih  dahulu  terhadap lingkungan selama 10 hari.
Pembagian  kelompok  perlakuan  sebagai berikut :
K (-) :  diberikan  suspensi  CMC  1% sebanyak 1mL
K (+) :  diberikan  suspensi  parasetamol dosis 0,132 g KP1 :  diberikan  suspensi  nanopartikel ekstrak jahe merah   0,0215 g KP2 :  diberikan  suspensi  nanopartikel ekstrak jahe merah 0,043 g
KP3 :  diberikan  suspensi  nanopartikel ekstrak jahe merah 0,086 g

## Pembuatan Simplisia dan Proses Ekstraksi
Sampel  rimpang  jahe  merah  sebanyak 6500  g  dicuci  dengan  air  mengalir,  dikupas, diiris  tipis,  dikeringkan  dengan  cara  diangin
anginkan sampai menghasilkan sampel kering,  lalu  ditimbang  menghasilkan  berat kering  1250  g    kemudian  diblender  hingga halus  dan  diayak  menggunakan  pengayak. Serbuk  rimpang  jahe  merah  ditimbang sebanyak 400 g, dimasukkan ke dalam wadah, kemudian  ditambahkan  pelarut  etanol  96% sebanyak  2000  mL,  ditutup  dan  dibiarkan selama 5 hari terlindung dari cahaya matahari. Setelah  5  hari,  rendaman  tersebut  disaring dengan  menggunakan  kertas  saring  (filtrat  1) dan  sisanya  diekstrak  kembali  dengan  etanol sebanyak 1200mL selama 2 hari. Filtrat 1 dan filtrat 2 digabung kemudian diuapkan dengan menggunakan  evaporator  pada  suhu  40˚C yang bertujuan untuk menguapkan pelarutnya higga  berupa  endapan  tidak  terlalu  kental. Proses  dilanjutkan  dengan  pemekatan  ekstrak sampai  menjadi  ekstrak  kental  dengan menggunakan  oven  pada  suhu  40˚C.  Hasil ekstrak kental didapat sebanyak 24,2 g.

## Pembuatan Larutan CMC 1%
Sebanyak  1  gram  CMC  ditaburkan dalam  beaker  glass  yang  berisis  10  mL aquades  yang  telah  dipanaskan,  aduk  sampai mengembang  kemudian  dihaluskan  sampai homogen.  Selanjutnya  dimasukkan  ke  dalam labu  ukur  dan  tambahkan  aquades  sampai volume 100 mL.

## Preparasi Nanopartikel Ekstrak Rimpang Jahe Merah

## Pembuatan Laruan Kitosan
Kitosan  ditimbang  sebanyak  0,5  gram kemudian  dimasukkan  ke  dalam  gelas  kimia dan  ditambahkan  akuades  sebanyak  100  mL. Kemudian  dilarutkan  dengan  polisorbat  80 sebanyak 1 mL dan diaduk dengan menggunakan magnetic  stirrer pada hotplate higga larut.

## Penyiapan Nanopartikel Ekstrak Rimpang Jahe Merah
Sebanyak 0,0215 g, 0,043 g, dan 0,086 g  ekstrak  rimpang  jahe  merah  ditimbang  dan dilarutkan dalam etanol 96% sebanyak 5 mL . Lalu dilakukan sonikasi selama 5 menit.

## Pembuatan Nanopartikel Ekstrak Rimpang Jahe Merah
Larutan  kitosan  sebanyak  100  mL ditambahkan  polisorbat  80  sebanyak  1  mL dan  diaduk  dengan  menggunakan magnetic stirrer pada hotplate selama 10 menit. Setelah itu pada larutan kitosan dimasukkan 0,0215 g, 0,043  g,  dan  0,086  g  ekstrak  rimpang  jahe merah  dan  diaduk  menggunakan magnetic stirrer pada hotplate selama 30 menit. Setelah itu  ditambahkan  larutan  TPP  0,1  gram sebanyak  20  mL  lalu  diaduk  menggunakan magnetic  stirrer pada hotplate selama  90 menit.

## Pemberian Suspensi Nanopartikel dan Larutan Pembanding

## Nanopartikel Rimpang Jahe Merah
Takaran  dosis  untuk  manusia  dengan berat  badan  70  kg  pada  tikus  dengan  berat badan 200 gram adalah 0,018. Rata-rata orang Indonesia  beratnya  50  kg.  Dosis  pemakaian jahe merah pada manusia dewasa (50kg) yang biasa digunakan masyarakat adalah 15 g (Tim Lentera, 2002).
= (70kg / 50kg x 15 g) x 0,018 = 0,238 x 0,0018
= 0,0043 gram /200 gramBB tikus
Dalam percobaan digunakan dosis nanopartikel jahe merah yang bertingkat : Kelompok  Perlakuan  1  =  0,5  x  0,0043  g  = 0,00215 g
Kelompok  Perlakuan  2  =  1  x  0,0043  g  = 0,0043 g
Kelompok  Perlakuan  3  =  2  x  0,0043  g  = 0,0086 g

## Kontrol Positif
Tiap  tablet  parasetamol  mengandung 500  mg.  Takaran  konversi  dosis  parasetamol untuk manusia dengan berat badan 70 kg pada tikus dengan berat badan 200 g adalah 0,018. Rata-rata  orang  Indonesia  beratnya  50  kg, maka dosis untuk tikus adalah : = (70/50 x 500 mg) x 0,018 = 12,6 mg / 200 g tikus

## Metode Induksi Nyeri Cara Termik
Uji  efek  analgetik  menggunakan metode  induksi  nyeri  dengan  cara  termik yaitu  dengan  cara  memasukkan  tikus  ke dalam beaker  glass yang  telah  dipanaskan dalam waterbath pada  suhu  55˚C  sebagai stimulus  nyeri  dan  tikus  akan  memberikan respon  dalam  bentuk  menjilat  kaki  dan melompat.  Sebagai  patokan,  bahwa  tikus mulai  merasakan  nyeri  pada  waktu  menjilat kaki belakang dan melompat, karena menjilat kaki  depan  adalah  hal  normal  bagi  tikus (Turner ,1965).

## Pengujian Efektivitas Analgetik
Langkah-langkah pengujian efek analgetik pada hewan uji ialah sebagai berikut : a. Beaker  glass dimasukkan  ke  dalam waterbath yang berisi air, kemudian waterbath  dipanaskan  hingga  suhu  55˚C.
Setelah suhu mencapai 55˚C, tikus dimasukkan ke dalam beaker glass tersebut.
b.  Setelah  tikus  ada  di  dalam beaker  glass maka  responnya  diamati,  yaitu  berupa gerakan menjilat kaki dan melompat. Pengamatan dilakukan selama 1 menit. c.  Kelompok  kontrol  negatif  diberikan  CMC 1%,  kelompok  kontrol  positif  diberikan parasetamol dan kelompok perlakuan diberikan nanopartikel jahe merah. Tikus lalu diistirahatkan  untuk  diamati  kembali  pada menit ke-30.
d.  Pengamatan  dilakukan  hingga  menit  ke- 120,  dengan  interval  waktu  30  menit  untuk setiap pengamatan.
e.  Pengamatan  dilakukan  sebanyak  5  kali, yaitu :
1. Sebelum pemberian bahan uji
2. Menit ke-30 3. Menit ke-60 4. Menit ke-90 5. Menit ke-120

## Analisis Data
Data  hasil  pengamatan  dikumpulkan dan  disajikan  dalam  bentuk  tabel,  grafik  dan analisis  statistik  menggunakan  uji  One-Way ANOVA  ( Analysis  Of  Variance )  untuk mengetahui  pengaruh  eksktrak  nanopartikel rimpang  jahe  merah  ( Zingiber  officinale Roxb)  terhadap  tikus  putih  galur  wistar ( Rattus  norvegicus )  dan  menggunakan Least Significant  Difference (LSD)  untuk  menguji signifikasi  dari  perbedaan  rata-rata  antar kelompok perlakuan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Hasil Penurunan Respon Tikus
Hasil rata-rata penurunan respon tikus (jilatan dan  lompatan)  terhadap  kontrol  negatif, kontrol  positif  dan  ekstrak  nanopartikel rimpang  jahe  merah  dapat  dilihat  sebagai berikut :
Tabel  1 .  Hasil  rata-rata  penurunan  respon
tikus sebelum dan sesudah
pemberian bahan uji :
Keterangan Tabel 1 : K(-)   : Kelompok kontrol negatif (CMC 1%) sebanyak 1 mL
K(+)  :  Kelompok  kontrol  positif  (suspensi parasetamol) dosis 0,132 g KP1 : Kelompok perlakuan ekstrak nanopartikel rimpang jahe merah dosis
0,0215 g
KP2 : Kelompok perlakuan ekstrak
nanopartikel rimpang jahe merah dosis
0,043 g
KP3 : Kelompok perlakuan ekstrak nanoparikel  rimpang jahe merah dosis 0,086 g
Hasil Uji Dengan One-Way ANOVA Tabel 2. Hasil Uji ANOVA
Uji  ANOVA  dilakukan  pada  kelima kelompok perlakuan. Hasil analisis menunjukkan nilai p = 0,019 (p<0,05).
Tikus  putih  jantan  galur  wistar  yang berumur  2-3  bulan  dengan  berat  badan  100- 200  gram  digunakan  sebagai  hewan  uji dikarenakan  menurut  Hakim  (2002)  tikus putih  jantan  galur  wistar  memiliki  kemiripan dengan manusia dalam hal fisiologi,  anatomi, patologi  dan  metabolisme.  Berbeda  dengan tikus  betina,  tikus  jantan  digunakan  karena memiliki  kecepatan  metabolisme  yang  tidak terpengaruh oleh perubahan hormonal dibandingkan  dengan  tikus  betina,  karena tikus  betina  mengalami  siklus  uterus  masa kehamilan dan menyusui. Sebelum perlakuan, tikus  dipuasakan  terlebih  dahulu  selama  6 jam,  hal  ini  dilakukan  untuk  mengosongkan lambung tikus agar tidak terjadi reaksi  antara makanan  tikus  dan  zat  uji  yang  akan diberikan.
Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui  ada  tidaknya  efek  analgetik  dari nanopartikel  ekstrak  rimpang  jahe  merah dengan  menggunakan  metode  induksi  termik yang  diuji  pada  tikus  putih  galur  wistar. Stimulus nyeri yang diberikan pada hewan uji yaitu  berupa  rangsangan  panas  dengan  suhu 55˚C  .  Menurut  Guyton  1994,  seseorang mulai  merasakan  sakit  pada  suhu  45˚C  dan reseptor  panas  mempunyai  respon  terhadap suhu  30-45˚C,  suhu  diatas  45˚C  mulai  terjadi kerusakan  jaringan  yang  diakibatkan  oleh
panas  dan  sensasinya  berubah  menjadi  nyeri. Jadi,  rasa  nyeri  yang  disebabkan  oleh  panas sangat  erat  hubungannya  dengan  kemampuan panas  untuk  merusakan  jaringan.  Gerakan menjilat  kaki  atau  melompat  dinilai  sebagai respon  tikus  sebagai  patokan  bahwa  tikus mulai  merasakan  nyeri  pada  waktu  menjilat kaki belakang atau melompat.
Pembuatan nanopartikel ekstrak rimpang  jahe  merah  dibuat  dengan  metode gelasi  ionik.  Metode  gelasi  ionik  ini didasarkan pada interaksi elektrostastik antara grup  amina  kitosan  dan  grup  muatan  negatif polianion,  polianion  yang  digunakan  adalah natrium  tripolifosfat  (Na-TPP).  Nanopartikel dengan  reaksi  gelasi  ionik  mempunyai keuntungan yaitu tidak memerlukan pemanasan  sehingga  kemungkinan  rusak senyawa  aktif  bisa  dihindarkan.  Penambahan polisorbat  80  pada  larutan  kitosan  0,5% berfungsi  untuk  menstabilkan  emulsi  partikel dalam larutan dengan cara mencegah timbulnya  penggumpalan,  serta  memperkecil ukuran partikel. Peningkatan kecepatan pengadukan dari 1000 rpm ke 1500 rpm pada saat  proses  pembuatan  nanopartikel  ekstrak rimpang jahe merah bertujuan untuk memperkecil ukuran partikel, karena semakin cepat proses pengadukan  maka semakin kecil ukuran partikel yang akan diperoleh.
Pada  penelitian  ini  digunakan  kitosan 0,5%  dan  Na-TPP  0,1%,  dengan  rasio  5  :  1 antara  berat  kitosan  dan  natrium  tripolifosfat
sehingga  dapat  menghasilkan  nanopartikel dengan  ukuran  yang  lebih  kecil,  serta menghasilkan  efisiensi  penyerapan  paling baik  dengan  struktur  nanopartikel  (Zhang, 2004).  Mekanisme  terbentuknya  nanopartikel ekstrak  rimpang  jahe  merah  ini  didasarkan pada  interaksi  elektrostatik  antara  gugus amina  dari  kitosan  0,5%  dan  muatan  negatif dari  polianion  natrium  tripolifosfat  0,1% sehingga  membentuk  nanopartikel  secara spontan ketika saat pengadukan menggunakan magnetic stirrer (Sailaja et al , 2010).
Pada  kelompok  kontrol  negatif  yang diberikan  CMC  1%  menunjukkan  rata-rata jumlah  respon  tikus  antara  sebelum  dan sesudah 30 menit pemberian CMC 1%, terjadi penurunan,  Walaupun  pada  menit  ke-60, menit  ke-90,  dan  menit  ke-120  terjadi  naik turun  respon  nyeri  pada  tikus.  Hal  ini disebabkan  karena  pada  kontrol  negatif  yaitu CMC  1%  tidak  terkandung  zat  aktif  yang dapat  mengurangi  nyeri  sehingga  rasa  nyeri pada tikus tidak menurun.
Pada penelitian ini digunakan parasetamol  sebagai  kontrol  positif  karena paresetamol  sudah  terbukti  memiliki  efek analgetik    dan  menjadi  pilihan  utama  oleh masyarakat Indonesia. Pada kelompok kontrol positif yaitu parasetamol, menunjukkan terjadi  respon  rata-rata  hewan  uji  terhadap rangsangan  nyeri  yang  diberikan.  Efek analgetik  dari  kelompok  kontrol  positif
terlihat efektif mulai dari menit ke-30 sampai akhir pengujian yaitu pada menit ke-120.
Dapat  dilihat dari data  yang diperoleh pada kelompok perlakuan ekstrak nanopartikel  rimpang  jahe  merah  bahwa  efek yang  ditimbulkan  oleh  Kp 1 (dosis  0,0215 g/kgBB)  tidak  lebih  baik  dari  parasetamol 0,132 gram dalam mengurangi rasa nyeri pada tikus yang diinduksi secara termik menggunakan waterbath ,  tetapi  pada  Kp 2 (dosis  0,043  g/kgBB)  dan  Kp 3 (dosis  0,086 g/kgBB)  mempunyai  efek  analgetik  yang lebih  baik  dari  parasetamol  terutama  Kp 3 yang  merupakan  dosis  maksimum  pada penelitian  ini.  Hal  ini  disebabkan  karena ekstrak  yang  digunakan  adalah  ekstrak nanopartikel  dimana  nanopartikel  sendiri memiliki kelebihan kemampuan untuk menembus  dinding  sel  yang  lebih  tinggi (Kawashima,  2000),  yang  berarti  efektivitas yang dihasilkan oleh ekstrak lebih baik.
Kp 1 (dosis  0,0215  g/kgBB)  terlihat efek  analgetiknya  mulai  dari  menit  ke-30 setelah  perlakuan  dan  tetap  memperlihatkan efek  analgetiknya  sampai  dengan  menit  ke- 120.  Kp 2 (dosis  0,043  g/kgBB)  terlihat  efek analgetiknya  mulai  dari  menit  ke-30  setelah perlakuan  dan  tetap  memperlihatkan  efek analgetiknya  sampai  dengan  menit  ke-120. Kp 3 (dosis  0,086  g/kgBB)  terlihat  efek analgetiknya  mulai  dari  menit  ke-30  setelah perlakuan  dan  tetap  memperlihatkan  efek analgetiknya sampai dengan menit ke-120.
Tanpa melihat perbedaan dosis nanopartikel ekstrak rimpang jahe merah yang diberikan,  penelitian  ini  membuktikan  bahwa secara  farmakologis  tanaman  ini  memiliki efek analgetik yang karena memiliki kandungan  alkaloid  dan  flavonoid  (Hernani dan Winarti, 2011). Alkaloid yang terkandung dalam  tanaman  ini  mampu  menghambat sintesis  dan  pelepasan  leukotrin  sehingga mengurangi  rasa  nyeri  sedangkan  flavonoid mampu  menghambat  enzim  siklooksigenase (Suryanto,  2012).  Dengan  demikian  akan mengurangi produksi prostaglandin oleh asam arakidonat  sehingga  mengurangi  rasa  nyeri (Gunawan, 2008).
Hasil  analisis  statistik  uji  ANOVA (tabel  2)  rata-rata  respon  tikus  kelompok kontrol negatif, kontrol positif, dan kelompok perlakuan  menunjukkan  hasil  yang  bermakna dengan nilai p = 0,019 (p<0,05).
Berdasarkan  pengamatan  yang  telah dilakukan  pada  tikus  yang  diinduksi  secara termik menggunakan waterbath , dapat  dilihat bahwa tidak semua tikus menunjukkan reaksi yang  sama.  Ketidaksamaan  tersebut  berupa lompatan  atau  hanya  berupa  jilatan  atau keduanya  dan  jumlah  respon  tikus  yang berbeda-beda  sebelum  perlakuan  disebabkan oleh  faktor  yang  mempengaruhi  metabolisme obat  atau  ekstrak  yang  diberikan  pada  tikus, antara  lain  yaitu  genetik  atau  keturunan, perbedaan  umur,  makanan  dan  penyakit (Coleman, 2010).
Melihat  banyaknya  faktor  yang  dapat mempengaruhi,  dapat  disimpulkan  bahwa adanya  spesifitas  individual  terhadap  induksi nyeri  yang  diberikan  dan  respon  tikus terhadap pemberian obat dan ekstrak nanopartikel pun berbeda-beda, sehingga data pengamatan berbeda-beda setiap tikus walaupun  dalam  kelompok  perlakuan  yang sama, namun pada keseluruhan rata-rata hasil pengamatan  ini  menunjukkan  respon  sesuai dengan  yang  diharapkan  dari  masing-masing kelompok perlakuan.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  dapat disimpulkan  bahwa  nanopartikel  ekstrak rimpang  jahe  merah  dengan  dosis  0,0215, 0,0043, dan 0,0086 memberikan efek analgetik  pada  tikus  putih  jantan  galur  wistar ( Rattus norvegicus ) dapat dilihat dari menurunnya respon tikus (jilatan dan lompatan)  setelah  diberikan  nanopartikel eksrak rimpang jahe merah.

## SARAN
Berdasarkan  penelitian  yang  telah dilakukan,  penulis  menyarankan  bahwa  perlu dilakukan  penelitian  lebih  lanjut  tentang karakterisasi  ukuran  partikel  ekstrak  etanol rimpang  jahe  merah  dan  penggunaan  metode lain dalam pembuatan nanopartikel.

## DAFTAR PUSTAKA
Dugasani,  S,  Pichika,  M.R,  Nadarajah,  V.D,
Balijepalli M.K, Tandra S, dan Korlakunta  J.N.  2010. Comparative antioxidant and anti-inflammatory effects  of  [6]-gingerol,  [8]-  gingerol, [10]-gingerol and [6]-shogaol . J.Ethnopharmacol. Elsavier Ireland.
Gunawan,  S.G.,  Setiabudy,  R.,  Nafrialdi,  dan Elsyabeth.  2008. Farmakologi  dan Terapi . Edisi Kelima. FKUI, Jakarta. Guyton,  A.C.  1994.  Buku  Ajar  Fisiologi Kedokteran.  Terjemahan  K.A.  Tengadi. EGC, Jakarta.
Hakim,  L.  2002. Uji  Farmakologi  dan Toksikologi  Obat  Alam  Pada  Hewan Coba . Universitas Muhamadiyah, Purwokerto.
Hernani  dan  Winarti,  C.  2011. Kandungan Bahan  Aktif  Jahe  dan  Pemanfaatannya dalam  Bidang  Kesehatan .  Balai  Besar Penelitian dan Pengembangan Pascapanen Pertanian, Bogor.
Kawashima, Y., Yamamoto, H., Takeuchi, H.,
dan Kuno, Y. 2000. Mucoadhesive DL- lactide/glycolide Copolymer
Nanospheres  Coated  with  Chitosan  to Improve  Oral  Delivery  of  Elcatonin.
Pharmaceutical Development and
Technology. 5: (1) ,77-85.
Mohanraj,  V.J.,  dan  Y.  Chen.  2006.
Nanoparticles:  A  Review. Tropical Journal  of  Pharmaceutical  Research.
5: (1) , 561-573.
Sailaja, K.A., Amareshwar, P., dan Chakravarty, P. 2010. Chitosan Nanoparticles  as  a  Drug  Delivery System. Research Journal of Pharmaceutical, Biological
and
Chemical .
Suryanto,  E.  2012. Fitokimia  Antioksidan .
Putra Media Nusantara, Surabaya.
Tim  Lentera.  2002. Khasiat  dan  Manfaat
Jahe  Merah  :  Si  Rimpang  Ajaib .
Agromedia Pustaka, Jakarta.
Tiyaboonchai, W. 2003. Chitosan
Nanoparticles:  Apromising  System  For
Drug  Delivery. Naresuan  University
Journal . 11: (3) ,51-6.
Turner,  R.  A.  1965. Screening  Methods  in
Pharmacology .  Academic  Press,  New
York.
Zhang,  Y.Q.,  Tao,  M.L.,  Shen,  W.D.,  Zhou,
Y.Z.,  Ma,  .Y.,  dan  Zhou,  W.L.  2004. Immobillization  of  L-asparaginase  on the  Microparticles  of  the  Natural  Silk Sericin  Protein  and  its  Characters.
Biomaterials. 25: (4) ,3751-3759.