e-ISSN 2540-9840 p-ISSN 1412-3770
Accredited by Ministry of Education, Culture,                                      DOI: https://doi.org/10.35799/jis.v23i2.48443 Research and Technology No: 105/E/KPT/2022         Available online at https://ejournal.unsrat.ac.id/v3/index.php/jis

## Aktivitas Antipiretik Ekstrak Etanol Daging Buah  Beligo (Benincasa hispida (Thunb.) Cogn.) pada Tikus Putih Wistar (Rattus norvegicus)
Nur Alim 1*) , Rusman Hasanuddin 2) , Jasmiadi 3) , Musdalifah 4) , A. Ihdinal Haqq 5) , Nur Linda 6) 1,2,3,4,5,6) Program Studi Farmasi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Islam Makassar, Indonesia
*) Corresponding author: nuralim.dty@uim-makassar.ac.id

## ABSTRAK
Masyarakat  di  Sulawesi  Selatan  menggunakan  beligo  sebagai  tumbuhan  yang  bisa menurunkan  demam.  Bagian  yang  dimanfaatkan  adalah  daging  buahnya.  Buah  beligo mengandung asam lemak, flavonoid, senyawa fenolik, dan steroid yang berpotensi sebagai agen  antipiretik.  Penelitian  bertujuan  untuk  mengidentifikasi  aktivitas  antipiretik  dari ekstrak etanol daging buah beligo pada tikus jantan Wistar yang diinduksi dengan larutan pepton.  Metode  penelitian  melibatkan  ekstraksi  dengan  maserasi  menggunakan  pelarut etanol 70% dan pengujian aktivitas antipiretik pada tikus jantan Wistar sebanyak 15 ekor yang dibagi menjadi 5 kelompok perlakuan. Kelompok I sebagai kontrol negatif menerima Na-CMC 1%, kelompok II, III, dan IV menerima ekstrak etanol daging buah beligo dengan dosis  masing-masing  250  mg/kg  BB,  500  mg/kg  BB,  dan  750  mg/kg  BB,  sedangkan kelompok V sebagai kontrol positif menerima tablet parasetamol. Pengukuran suhu awal, suhu setelah induksi, dan suhu setelah perlakuan diambil setiap 30 menit selama 180 menit. Data  dianalisis  secara  statistik  menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  dan  uji Duncan. Hasil penelitian menunjukkan persentase penurunan demam sebesar 1,57% untuk kelompok I, 4,03% untuk kelompok II, 4,28% untuk kelompok III, 4,45% untuk kelompok IV,  dan  5,25%  untuk  kelompok  V.  Analisis  data  mengindikasikan  bahwa  ekstrak  etanol daging  buah  beligo  dengan  dosis  250  mg/kg  BB,  500  mg/kg  BB,  dan  750  mg/kg  BB memiliki aktivitas antipiretik yang signifikan (p < 0,05). Ekstrak etanol daging buah beligo memiliki  aktivitas  antipiretik  pada  tikus  Wistar  yang  diinduksi,  sehingga  berpotensi digunakan sebagai obat penurun demam.
Kata kunci : Antipiretik; Benincasa hispida (Thunb.) Cogn.; demam
Antipyretic Activity of Ethanol Extract from Beligo (Benincasa hispida (Thunb.) Cogn.) Fruit Flesh in Wistar Albino Rats (Rattus norvegicus)

## ABSTRACT
The people of South Sulawesi employ beligo as a plant with fever-reducing properties. The utilized  part  is  the  flesh  of  its  fruit.  The  beligo  fruit  contains  fatty  acids,  flavonoids, phenolics, and steroids that hold promise as antipyretic agents. The study aimed to determine the  antipyretic  activity  of  ethanolic  extract  from  beligo  fruit  flesh  on  male  Wistar  rats induced  with  peptone  solution.  The  research  method  encompassed  maceration  extraction using 70% ethanol solvent and antipyretic activity testing using 15 male Wistar rats divided into five treatment groups. Group I served as the negative control and received SODIUM- CMC 1%, groups II, III, and IV received ethanolic extract of beligo fruit flesh at doses of 250 mg/kg BW, 500 mg/kg BW, and 750 mg/kg BW respectively, and group V, the positive control, received paracetamol tablets. Measurements of initial temperature, temperature after induction, and temperature after treatment were taken at 30-minute intervals for 180 minutes. Data were statistically analyzed using a Completely Randomized Design (CRD) and Duncan test. The research findings revealed a fever reduction percentage of 1,57% for group I, 4,03%
for group II, 4,28% for group III, 4,45% for group IV, and 5,25% for group V. Data analysis indicated that ethanolic extract of beligo fruit flesh at doses of 250 mg/kg BW, 500 mg/kg BW, and 750 mg/kg BW exhibited significant antipyretic activity (p < 0.05). The ethanolic extract  from  beligo  fruit  flesh  possesses  antipyretic  activity  in  induced  Wistar  rats, suggesting its potential use as a fever-reducing medication.
Keywords: Antipyretic; Benincasa hispida (Thunb.) Cogn; fever
(Article History:  Received 31-05-2023; Accepted 06-09-2023; Published 27-09-2023)

## PENDAHULUAN
Demam atau pireksia adalah peningkatan suhu inti tubuh seseorang di atas 'set-point' yang diatur oleh pusat termoregulasi tubuh di hipotalamus. Kenaikan suhu tubuh 'set-point' ini  seringkali  disebabkan  oleh  proses  fisiologis  yang  bisa  bersumber  dari  infeksi  atau penyebab  non-infeksi  seperti  peradangan,  keganasan,  atau  proses  autoimun.  Proses  ini melibatkan pelepasan mediator imunologi, yang memicu pusat termoregulasi hipotalamus, sehingga menyebabkan peningkatan suhu inti tubuh (Balli et al ., 2022).
Suhu normal tubuh manusia adalah sekitar 37°C, atau 98,6°F, dan bervariasi sekitar 0,5°C  sepanjang  hari.  Variasi  suhu  inti  tubuh  ini  berasal  dari  proses  fisiologis  normal  di seluruh  tubuh  manusia,  termasuk  perubahan  metabolisme,  siklus  tidur/bangun,  fluktuasi hormon, dan perubahan tingkat aktivitas. Namun, pada kasus demam, peningkatan suhu inti tubuh seringkali lebih besar dari 0,5°C dan terkait dengan zat pemicu demam (pirogen) (Balli et al ., 2022).
Demam didefinisikan sebagai kondisi di mana suhu tubuh mencapai 38,3 o C (101 o F ) atau lebih tinggi (Brown & Finnigan, 2022). Demam juga bisa menjadi tanda awal dari suatu infeksi tertentu. Bagian tubuh yang mengatur suhu tubuh manusia adalah hipotalamus, dan saat terjadi demam, hipotalamus diatur ulang pada tingkat suhu yang lebih tinggi (Dipiro et al ., 2017).
Demam bisa diatasi dengan menggunakan obat antipiretik buatan seperti parasetamol (Ayoub,  2021)  dan  aspirin.  Antipiretik  adalah  jenis  obat  yang  mampu  menurunkan  suhu tubuh  saat  mengalami  demam.  Cara  kerja  antipiretik  adalah  dengan  merangsang  pusat pengaturan  panas  di  hipotalamus,  sehingga  produksi  panas  berlebihan  akan  dihambat.  Ini dilakukan dengan meningkatkan sirkulasi darah ke bagian perifer tubuh dan meningkatkan produksi keringat untuk mengeluarkan panas (Tjay & Rahardja, 2007)
Contoh sediaan antipiretik termasuk parasetamol, yang merupakan pilihan pertama dalam  mengatasi  demam,  dan  aspirin  yang  efektif.  Namun,  penggunaan  jangka  panjang dapat memiliki efek samping. Parasetamol dapat menyebabkan kerusakan hati (Rotundo & Pyrsopoulos,  2020),  sementara  aspirin  dapat  menyebabkan  iritasi  lambung  (Huang et  al ., 2011),  terutama  pada  usia  lanjut  (Mahady et  al .,  2021).  Oleh  karena  itu,  penelitian  yang mengembangkan  antipiretik  dari  bahan  alami  perlu  dilakukan.  Salah  satu  tanaman  yang umum  digunakan  dan  diyakini  berkhasiat  dalam  menurunkan  demam  adalah  buah  beligo (Ozougwu  &  Eyo,  2014;  Caffarelli et  al .,  2022).  Penggunaan  bahan  alami  sebagai  obat memiliki  keuntungan,  di  mana  efek  sampingnya  cenderung  lebih  rendah  meskipun digunakan dalam jangka waktu yang lama (Katno & S.Pramono, 2002; Tjay & Rahardja, 2007).
Secara  tradisional,  masyarakat  Sulawesi  Selatan  menggunakan  beligo  sebagai tanaman  yang  diyakini  memiliki  kemampuan  menurunkan  demam.  Bagian  yang  paling dimanfaatkan  adalah  daging  buahnya.  Dalam  daging  buah  beligo  terkandung  asam-asam lemak, flavonoid, senyawa fenolik, dan steroid (Samad et al ., 2013) yang memiliki potensi sebagai agen antipiretik. (Robinson, 1991 Zaini, et al ., 2011).
Studi  oleh  Qadrie et  al .  (2009)  menyimpulkan  bahwa  ekstrak  etanol  biji  beligo memiliki efek farmakologis sebagai antipiretik dan penghilang nyeri pada dosis 250 mg/kg dan 500 mg/kg BB. Penelitian lain oleh Alim et al. (2022) menunjukkan bahwa daun beligo dengan  dosis  250  mg/kg  BB,  500  mg/kg  BB,  dan  750  mg/kg  BB  menunjukkan  aktivitas antipiretik yang signifikan (p < 0,05) dan tidak berbeda secara signifikan dengan pengendali positif dalam bentuk tablet parasetamol. Meskipun demikian, penelitian mengenai daging buah  beligo  sebagai  agen  antipiretik  belum  pernah  dilakukan.  Oleh  karena  itu,  dalam penelitian ini, dosis yang digunakan mengacu pada penelitian sebelumnya mengenai biji dan daun beligo tersebut.
Berdasarkan  uraian  di  atas,  permasalahan  yang  timbul  pada  penelitian  ini  adalah apakah  ekstrak  etanol  daging  buah  beligo  ( Benincasa  hispida (Thunb.)  Cogn.)  memiliki aktivitas antipiretik pada tikus putih (Rattus norvegicus) yang diinduksi larutan pepton. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas antipiretik ekstrak etanol daging buah beligo pada tikus Wistar jantan yang diinduksi larutan pepton

## METODE PENELITIAN

## Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian  ini  merupakan  penelitian  eksperimen  laboratorium  yang  dilakukan  di Laboratorium  Farmakognosi-Fitokimia  dan  Laboratorium  Biofarmasi  Prodi  Farmasi Fakultas  MIPA  Universitas  Islam  Makassar  pada  bulan  Oktober-Desember  2022  setelah mendapatkan persetujuan izin etik dari Fakultas Kedokteran dan RS IBNU SINA YW-UMI dengan nomor : 387/A.1/KEK-UMI/X/2022.

## Bahan
Penelitian  ini  menggunakan  sampel  uji  buah  beligo  yang  diperoleh  dari  petani  di  Dusun Daulele, Desa Lembang Lohe, Kec. Kajang, Kab. Bulukumba, Sulawesi Selatan. Bahan kimia yang digunakan  terdiri  atas  air  suling  ( H 2 O)  (Onemed®) ,  etanol  (C 2 H 5 OH) 70% (Onemed®) , Natrium  Carboxymethyl  Cellulose  (Na-CMC)  (Wealthy ®) ,  paracetamol  tablet  (Generik berlogo produksi PT. PIM Pharmaceutical), pepton (Sigma Aldrich), dan hewan coba tikus putih ( Rattus norvegicus ) galur Wistar.
Semua bahan diperoleh dari toko resmi bahan kimia yang terdapat di Kota Makassar. Hewan coba di peroleh dari Laboratorium Biofarmasi Universitas Islam Makassar.

## Cara Kerja

## Pengolahan sampel Penelitian
Buah  beligo  dibersihkan  dengan  air mengalir.  Daging  buah  beligo  dipisahkan  dari kulit  dan  bijinya,  dipotong  menjadi  bagian  kecil  Setelah  itu,  potongan  daging  buah ditimbang dan dikeringkan dalam oven pada suhu 60°C selama 2 jam,  kemudian diangin- anginkan selama 2 hari. Setelah mengering, daging buah beligo dihaluskan menjadi serbuk
dan  diayak  menggunakan  ayakan  dengan  ukuran  mesh  40.  Sebanyak  500  mg  serbuk  ini ditimbang (Ditjen, 1979; Alim et al ., 2022).

## Ekstraksi Daging Buah Beligo
Serbuk simplisia dari daging buah beligo seberat 500 g dimasukkan ke dalam wadah maserasi  dan  dibasahi  terlebih  dahulu  dengan  1500  mL  etanol  70%,  kemudian  dibiarkan selama  15  menit  agar  semua  bagian  terbasahi.  Selanjutnya,  ditambahkan  1000  mL  etanol 70% hingga semua serbuk terendam. Proses ini dibiarkan selama 3 kali 24 jam dalam wadah tertutup  yang  dilindungi  dari  cahaya  matahari,  dengan  sesekali  pengadukan,  kemudian disaring.  Dilakukan  proses  remaserasi  dua  kali  dengan  pelarut  yang  sama  masing-masing 1250 mL, hingga akhirnya diperoleh ekstrak cair sebanyak 5000 mL. Ekstrak cair kemudian diuapkan  dengan  menggunakan  rotary  evaporator  hingga  menghasilkan  ekstrak  kental (Ditjen, 1979; Alim et al ., 2022).

## Pembuatan Na-CMC 1%
Na-CMC  ditimbang  sebanyak  1  g  kemudian  dimasukan  kedalam  lumpang  dan ditambahkan  sedikit  demi  sedikit  air  suling  (suhu  70°C)  sambil  terus  diaduk  hingga terbentuk larutan koloidal yang homogen. Dimasukkan ke dalam labu tentukur 100 mL dan dicukupkan volumenya hingga tanda batas (Alim et al ., 2022)

## Pembuatan Suspensi Ekstrak Etanol Daging Buah Beligo
Ekstrak  etanol  daging  buah  beligo  memiliki  kelarutan  yang  buruk  pada  air  suling sehingga  diperlukan  Na-CMC  1%  sebagai  pensuspensi  agar  ekstrak  terdistribusi  secara homogen. Suspensi ekstrak etanol daging buah beligo dibuat dalam 3 dosis pemberian. Dosis 250 mg/kg BB dibuat dengan cara menimbang 1,25 g ekstrak, dimasukan ke dalam lumpang dan  ditambahkan  Na-CMC  1%  secara  perlahan-lahan  dan  diaduk  hingga  homogen. Dimasukkan ke dalam labu tentukur dan dicukupkan hingga tanda batas. Dosis 500 mg/kg BB dan 750 mg/kg BB dibuat dengan cara yang sama, dengan menimbang masing-masing 2,5 gram dan 3,75 g, kemudian dicukupkan hingga 100 mL dalam labu tentukur (Alim et al., 2022).

## Pembuatan Larutan Pepton 5%
Larutan pepton 5% dibuat dengan menimbang 5 gram pepton ditambahkan aquades sedikit demi sedikit hingga larut, aduk hingga homogen, dicukupkan volumenya hingga 100 mL (Viani & Hijratul, 2016).

## Pembuatan Suspensi Tablet Paracetamol
Tablet paracetamol digunakan sebagai kontrol positif. Parasetamol merupakan obat sintetis  yang  memiliki  efek  menurunkan  demam.  Pada  penelitian  ini  tablet  paracetamol dibuat menjadi bentuk suspensi dengan dengan langkah-langkah sebagai berikut : 20 tablet parasetamol  500  mg  ditimbang  dan  digerus  hingga  menjadi  serbuk.  Serbuk  dari  tablet paracetamol  ditimbang  sebanyak  0,308  gram,  lalu  dimasukkan  ke  dalam  lumping. Selanjutnya, larutan Na-CMC 1% ditambahkan perlahan sambil digerus hingga mencapai kehomogenan. Suspensi ini kemudian dimasukkan ke dalam labu takar berukuran 100 mL, dan volume suspensi disesuaikan hingga mencapai tanda batas pada labu takar (Alim et al .,
2022; Rahmi et al ., 2021).

## Penyiapan Hewan Coba
Hewan  coba  yang  digunakan  pada  penelitian  ini  adalah  tikus  putih  ( Rattus norvegicus ) jantan galur Wistar, berumur 2 sampai 3 bulan yang sebanyak 15 ekor dengan bobot badan (BB)  200-300 gram yang telah dewasa, sehat, dan bersih. Sebanyak 15 ekor yang terbagi atas 5 kelompok dimana masing-masing kelompok terdiri dari 3 ekor hewan coba tikus, kemudian diadaptasikan selama kurang lebih 7 hari sebelum perlakuan dengan pemberian makanan dan minum yang rutin (Alim et al ., 2022).
Hewan  coba  diperoleh  dari  laboratorium  Biofarmasi  Fakultas  Farmasi  Universitas Hasanuddin dan telah memenuhi syarat sebagai hewan coba.

## Pengujian Aktivitas Antipiretik
Hewan coba tidak diberi makanan terlebih dahulu selama 8 jam namun tetap di beri minum. Dilakukan pengukuran suhu awal pada tiap hewan coba secara rektal sebagai suhu normal. Kemudian diinduksi demam dengan larutan pepton 5% (2 mL) secara subkutan, 1 jam  setelah  diinduksi  dilakukan  kembali  pengukuran  suhu  rektal  pada  hewan  coba  tikus putih. Jika setelah pemberian larutan induksi dan terjadi peningkatan suhu tubuh tikus lebih dari  atau  sama  dengan  0.6°C  (Ditjen,  1979)  dari  suhu  awal  maka  tikus  dapat  dikatakan demam, kemudian diberikan perlakuan secara oral sesuai masing-masing kelompok yaitu:
Kelompok I : Kontrol negatif diberi Na-CMC 1%
Kelompok II : Diberikan ekstrak daging buah beligo 250 mg/kg BB Kelompok III       : Diberikan ekstrak daging buah beligo 500 mg/kg BB Kelompok IV : Diberi ekstrak daging buah beligo 750 mg/kg BB Kelompok V : Kontrol positif diberi Paracetamol
Setelah  diberi  perlakuan  suhu  rektal  hewan  coba  tikus  diukur  menggunakan termemoter  digital  (Termometer  AlphaOne ® ),  tiap  30  menit  hingga  menit  ke-180  setelah perlakuan (Alim et al ., 2022; Rahmi et al ., 2021).

## Pengumpulan dan Analis Data
Data  yang  diperoleh  dari  pengukuran  suhu,  dikumpulkan  dan  dianalisis  secara statistik menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dan uji Duncan (Alim et al ., 2022; Rahmi et al ., 2021).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Ekstraksi
Penelitian  dimulai  dengan  melakukan  proses  ekstraksi  dari  daging  buah  beligo ( Benincasa hispida (Thunb.) Cogn .) menggunakan etanol 70% dengan metode maserasi. Penggunaan  pelarut  etanol  dipilih  karena  pelarut  ini  dapat  melarutkan  berbagai  jenis metabolit  sekunder,  baik  yang  bersifat  polar  maupun  non-polar  (universal),  dan  inilah sebabnya  mengapa  etanol  sering  digunakan  dalam  ekstraksi  senyawa  metabolit  sekunder dari  bahan  alam  (Harbone,  1987;  Nyoman,  2015) . Temuan  dari  penelitian  sebelumnya mengindikasikan  bahwa  buah  beligo  mengandung  berbagai  jenis  asam  lemak,  flavonoid, fenolik dan steroid (Samad et al., 2013) yang potensial sebagai antipiretik (Robinson, 1991; Zaini et al ., 2011).
Pemilihan  metode  ekstraksi  secara  maserasi  didasarkan  pada  sifatnya  yang  mudah dilakukan, biaya relatif rendah, dan tidak melibatkan pemanasan, sehingga metode ini aman digunakan untuk senyawa-senyawa yang sensitif terhadap suhu tinggi (Ditjen POM, 2000). Hasil ekstraksi daging buah beligo yang diperoeh dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1 . Data hasil ekstraksi daging buah beligo ( Benincasa hispida (Thunb.) Cogn.)
Berat sampel (g) Jumlah pelarut (mL) Berat ekstrak (g) Rendemen (%) b / b 500 5000 27,39 5,47

## Pengujian Aktivitas Antipiretik
Dalam  penelitian  ini,  hewan  percobaan  yang  digunakan  adalah  tikus  putih  jantan ( Rattus norvegicus ). Pemilihan jenis kelamin jantan didasarkan pada pertimbangan faktor hormonal. Tikus jantan memiliki kadar hormon estrogen yang sangat rendah, bahkan jika ada, serta kondisi hormonal pada tikus jantan cenderung lebih stabil dibandingkan dengan tikus betina. Selain itu, tingkat stres pada tikus betina cenderung lebih tinggi dibandingkan dengan tikus jantan . (Krinke, 2000; Sharp & Villano, 2012).
Pengukuran  suhu  tubuh  pada  tikus  dilakukan  menggunakan  termometer  digital (AlphaOne®)  yang  dimasukkan  melalui  anus  (pengukuran  rektal),  karena  metode  ini dianggap paling akurat untuk mewakili suhu inti tubuh. Pengukuran suhu melalui rektum dianggap  paling  akurat  karena  mencerminkan  suhu  inti  tubuh  tikus.  Pengukuran  suhu melalui  ketiak  hanya  mencerminkan  suhu  tubuh  perifer  dan  bisa  dipengaruhi  oleh  suhu lingkungan  sekitarnya,  sehingga  kurang  akurat.  Sementara  itu,  pengukuran  suhu  melalui mulut dapat dipengaruhi oleh makanan atau minuman yang dikonsumsi tikus dan juga oleh udara yang masuk melalui saluran pernapasan . (Nusi et al ., 2013).
Tablet  parasetamol  dijadikan  sebagai  kelompok  kontrol  positif  karena  parasetamol merupakan jenis obat sintetis yang bekerja dengan menurunkan suhu tubuh melalui pengaruh di pusat pengaturan suhu tubuh di hipotalamus. Cara kerjanya adalah dengan menghambat enzim siklooksigenase yang berperan dalam sintesis, sehingga keseimbangan suhu tubuh di hipotalamus  tetap  terjaga  dan  diiringi  dengan  peningkatan  produksi  keringat  (Tjay  & Rahardja, 2007).
Penginduksi yang digunakan dalam penelitian ini adalah pepton 5%, yang digunakan untuk  meningkatkan  suhu  tubuh  pada  tikus.  Pepton  merupakan  protein  yang  telah dihidrolisis dan digunakan sebagai agen penginduksi demam pada tikus. Pemberian protein dalam jumlah berlebihan secara subkutan pada tikus dapat memiliki sifat toksik dan berperan sebagai  pirogen,  yang  berarti  dapat  mempengaruhi  keseimbangan  suhu  tubuh.  Protein, termasuk pepton, dianggap sebagai pirogen yang dapat dikenali oleh sistem kekebalan tubuh sebagai  benda  asing,  yang  pada  akhirnya  dapat  memicu  respons  stimulasi  pada  pusat pengaturan  suhu  tubuh.  Mekanisme  kerja  pepton  adalah  dengan  merangsang  hipotalamus untuk  meningkatkan  produksi  prostaglandin,  yang  selanjutnya  dapat  mengakibatkan peningkatan suhu tubuh (Budiman, 2010; Widyasari et al ., 2018).
Pengukuran suhu tubuh pada tikus setelah pemberian ekstrak dilakukan pada menit ke-30 setelah induksi. Waktu ini dipilih berdasarkan awal mula kerja paracetamol secara oral
yang biasanya terjadi dalam rentang waktu 15-30 menit. Pengukuran suhu tubuh dilakukan selama 180 menit (3 jam), hal ini disesuaikan dengan waktu paruh (t 1/2 ) paracetamol yang berkisar antara 1-3 jam. Durasi kerja (lama kerja) paracetamol sendiri mencapai sekitar 4-6 jam.(Twycross et al ., 2013).
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  telah  dilakukan,  suhu  awal  tikus  putih  dalam penelitian ini berada dalam kisaran 36,0-36,8°C. Setelah satu jam dari induksi menggunakan larutan  pepton  5%,  terjadi  kenaikan  suhu  pada  setiap  tikus  dalam  kisaran  37,9-38,2°C. Peningkatan  suhu  tubuh  tikus  sebesar  0,6°C  atau  lebih  dari  suhu  awal  dianggap  sebagai indikasi adanya demam. Rentang suhu normal untuk tikus putih adalah antara 35,9°C hingga 37,5°C (Ditjen, 1979; Sugita et al ., 2016 ). Data peningkatan dan penurunan suhu tubuh tikus dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2 . Data peningkatan suhu tubuh tikus awal, setelah induksi dan setelah pemberian ekstrak
Perlakuan Suhu Tubuh Tikus Putih Suhu awal Suhu setelah induksi Setelah pemberian ekstrak pada menit ke- Rata-rata Penurunan (%) 30 60 90 120 150 180 Kelompok I Na-CMC 1% 36,30 38,06 37,93 37,76 37,63 37,56 37,46 37,46 1,57 Kelompok  II EDBB 250 mg/kg BB 36,30 37,93 37,80 37,66 37,46 37,30 37,10 36,40 4,03 Kelompok  III EDBB 500 mg/kg BB 36,36 38,10 37,93 37,70 37,30 36,86 36,56 36,46 4,30 Kelompok  IV EDBB 750 mg/kg BB 36,30 38,10 37,96 37,73 37,30 36,80 36,40 36,40 4,45 Kelompok V Paracetamol 36,00 38,00 37,90 37,56 37,10 36,60 36,16 36,00 5,25
Keterangan:
EEDBB = Ekstrak Etanol Daging Buah Beligo
Berdasarkan data penurunan suhu demam pada tikus, ditemukan rata-rata persentase penurunan  suhu  sebagai  berikut:  kelompok  I  (kontrol  negatif)  yang  diberi  Na-CMC  1% memiliki penurunan suhu rata-rata sebesar 1,57%, kelompok II diberi ekstrak etanol daging buah  beligo  dosis  250  mg/kg  BB  memiliki  penurunan  suhu  rata-rata  sebesar  4,03%, kelompok  III  diberi  ekstrak  etanol  daging  buah  beligo  dosis  500  mg/kg  BB  memiliki penurunan  suhu  rata-rata  sebesar  4,28%,  kelompok  IV  diberi  ekstrak  etanol  daging  buah beligo dosis 750 mg/kg BB memiliki penurunan suhu rata-rata sebesar 4,45%, dan kelompok V  (kontrol  positif)  diberi  parasetamol  memiliki  penurunan  suhu  rata-rata  sebesar  5,25%. Hasil  ini  menunjukkan  bahwa  semakin  tinggi  dosis  ekstrak,  semakin  besar  aktivitas antipiretiknya dalam menurunkan suhu tubuh pada tikus yang mengalami demam. Hal ini kemungkinan  bahwa  semakin  tinggi  dosis  ekstrak  yang  diberikan  semakin  banyak kandungan metabolit sekundernya.
Data  hasil  penurunan  suhu  selanjutnya  dianalisis  secara  statistik  menggunakan Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  diperoleh  F  Hitung  lebih  besar  F  tabel  pada  taraf kepercayaan  5%  dan  1%  yang  menunjukkan  bahwa  ada  perbedaan  sangat  nyata  antar
kelompok  perlakuan  pada  aktivitas  antipiretik  terhadap  penurunan  demam  tikus  putih. Sehingga  dilakukan  uji  lanjut  dengan  uji  Duncan  untuk  mengetahui  perbedaan  aktivitas antipiretik antar kelompok.
Hasil  uji  Duncan,  diperoleh  bahwa  selisih  antara  taraf  nyata  5%  dan  1%,  pada Kelompok kontrol negatif  Na-CMC 1% dengan ekstrak etanol daging buah beligo dosis 250 mg/kg, 500 mg/kg BB dan 750 mg/kg BB menunjukkan perbedaan yang sangat signifikan. Hal ini menunjukkan bahwa ekstrak etanol daging buah beligo dosis 250 mg/kg BB, 500 mg/kg BB dan 750 mg/kg BB memiliki aktivitas antipiretik ( P<0,05 ) dan berpotensi sebagai obat  demam,  meskipun  persentase  rata-rata  dalam  menurunkan  suhu  demam  tikus  putih lebih  kecil  daripada  kelompok  paracetamol.    Persentase  rata-rata  penurunan  suhu demam pada tikus dapat dilihat pada Gambar 1.
Gambar 1 . Persentase rata-rata penurunan suhu demam pada tikus ( Rattus norvegicus ) setelah pemberian ekstrak daging buah beligo Hasil penelitian ini sama pada penelitian sebelumnya yang dilakukan oleh Qadrie, et al . (2009) dalam penelitiannya menyatakan bahwa dosis 250 mg/kg dan 500 mg/kg ekstrak etanol biji buah beligo memiliki efek sebagai antipiretik serta penelitian  oleh Alim et al ., (2022) menyatakan bahwa ekstrak etanol daun beligo dosis 250 mg/kg BB, 500 mg/kg BB dan  750  mg/kg  BB  memiliki  aktivitas  antipiretik  secara  signifikan  ( p<0,05 ).  Aktivitas antipiretik  buah  beligo  ditentukan  oleh  kandungan  metabolit  sekundernya.  Buah  beligo mengandung  asam-asam  lemak,  flavonoid,  fenolik  dan  steroid  (Samad  et  al.,  2013)  yang berpotensi  sebagai  antipiretik  (Robinson,  1991  Zaini  et  al.,  2011).  Efek  antipiretik  suatu senyawa  bekerja  dengan  cara  menghambat  biosintesis  prostaglandin  melalui  mekanisme penghambatan  enzim  siklooksigenase  (COX)  sehingga  dapat  menurunkan  suhu  demam (Howart et al ., 2009; Mradu et al ., 2013).

## KESIMPULAN
Ekstrak  etanol  daging  buah  beligo  memiliki  aktivitas  antipiretik  pada  tikus  putih wistar yang diinduksi pepton sehingga potensial digunakan sebagai obat demam.
1.57 4.03 4.30 4.45 5.25 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5 5 5.5 Na-CMC 1% EEDBB 250 mg/kg BB EEDBB 500 mg/kg BB EEDBB 750 mg/kg BB Paracetamol R at a- ra ta P en u ru n an S u h u (%) Kelompok   Perlakuan

## DAFTAR PUSTAKA
Alim,  N.,  Sulastri,  D.,  &  Pratama,  A.S.  (2022).  Aktivitas  antipiretik  ekstrak  etanol  daun beligo  ( Benincasa  hispida (  Thunb  .)  Cogn  .)  pada  tikus. Jurnal  Novem  Medika Farmasi , 1(2), 40–49.
Ayoub,  S.S.  (2021).  Paracetamol  (acetaminophen):  A  familiar  drug  with  an  unexplained mechanism  of  action. Temperature , 8 (4),  351–371. https://doi.org/10.1080/ 23328940.2021.1886392.
Balli, S., Shumway, K.R., & Sharan, S. Physiology, Fever . (2022). In: StatPearls [Internet]. Treasure  Island  (FL):  StatPearls  Publishing;  2023  Jan-.  Available  from: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK562334/
Brown,  I.,  &  Finnigan,  N.A.  (2022).  Fever  of  Unknown  Origin.  In StatPearls .  StatPearls Publishing. PMID: 30335298 . Bookshelf ID: NBK532265
Budiman, T.M. (2010). Penentuan aktivitas antipiretika dan antiinflamasi dari senyawa asam o-(4-metilbenzoil) salisilat terhadap tikus putih galur  wistar [Doctoral Dissertation]. Widya Mandala Catholic University Surabaya). http://repository. ukwms.ac.id/id/eprint/1341/.
Caffarelli, C., Liotti, L., Bianchi, A., Bottau, P., Caimmi, S., Crisafulli, G., Franceschini, F., Paglialunga, C., Saretta, F., & Mori, F. (2022). Hypersensitivity reactions to vaccines in  children:  from  measles  to  SARS-CoV-2. Pediatric  Allergy  and  Immunology . 3(S27), 58-60. https://doi.org/10.1111/pai.13631.
Dipiro,  J.T.,  Talbert,  G.C.,  Yee,  G.R.,  Matzke,  B.G.,  &  Wells,  L.M.P.  (2017). Pharmacotherapy:  A  Pathophysiology  Approach,  10th  Edition. Mc-Graw  Hill Medical .
Ditjen, POM. (1979). Farmakope Indonesia Edisi III. In Depkes RI .
Ditjen  POM,  D.R.  (2000).  Parameter  standar  umum  ekstrak  tumbuhan  obat,  Jakarta:
Departement Kesehatan Republik Indonesia. Edisi IV .
Harborne, J.B.  (1987).  Metode Fitokimia: Penuntun Cara Modern Menganalisis Tumbuhan, diterjemahkan  oleh  Kosasih  Padmawinata  dan  Iwang  Soediro. Penerbit  ITB, Bandung.
Howard,  H.S.,  &  Royal,  M.A.(  2009).  Chapter  58  - Acetaminophen .  Current  Therapy  in Pain.  ISBN  9781416048367.  429-436.  https://doi.org/10.1016/B978-1-4160-4836- 7.00058-4.
(https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/B9781416048367000584)
Huang,  E.S.,  Strate,  L.L.,  Ho,  W.W.,  Lee,  S.S.,  &  Chan,  A.T.  (2011).  Long-term  use  of aspirin and the risk of gastrointestinal bleeding. Am J Med . 124(5), 426-433. Doi: 10.1016/j.amjmed.2010.12.022.
Katno,  &  S.Pramono.  (2002).  Tingkat  Manfaat  dan  Keamanan  Tanaman  Obat  dan  Obat Tradisional. In Trends in Cognitive Sciences .
Krinke, G.J. (2000). T he Laboratory Rat (Handbook of Experimental Animals)-Academic Press.pdf.
Mahady, S.E., Margolis, K.L., Chan, A.,  Polekhina, G., Woods, R.L., Wolfe, R., Nelson, M.R.,  Lockery,  J.E., Wood,  E.M.,  Reid, C.,  Ernst,  M.E.,  Murray,  A,, Thao, L.,  & McNeil, J.J.  (2021). Major GI bleeding in older persons using aspirin: incidence and risk factors in the ASPREE randomised controlled trial. Gut . 70(4):717-724. DOI: 10.1136/gutjnl-2020-321585.
Mradu, G., Dalia, B., & Arup, M. (2013).  Studies of Anti Inflammatory, Antipyretic and Analgesic  Effects  of  Aqueous  Extract  of  Traditional  Herbal  Drug  on  Rodents. International research journal of pharmacy . 4 (3), 113–120. https://doi.org/10.7897/2230-8407.04321.
Nusi,  D.T.,  Danes,  V.R.,  Moningka,  M.E.W.    (2013).    Pengukuran  Menggunakan Termometer Air Raksa Dan Termometer Digital Pada Penderita Demam, [Skripsi]. Fakultas Kedokteran Universitas Sam Ratulangi, Manado.
Ozougwu, J.C., & Eyo, J.E. (2014).  Hepatoprotective effects of Allium cepa (onion) extracts against paracetamol-induced liver damage in rats. African Journal of Biotechnology . 13(26), 2679-2688.  https://doi.org/10.5897/ajb2014.13815.
Qadrie,  Z.L.,  Hawisa,  N.T.,  Khan,  M.W.A.,  Samuel,  M.,  &  Anandan,  R.  (2009). Antinociceptive  and  anti-pyretic  activity  of  Benincasa  hispida  (Thunb.)  Cogn.  in Wistar albino rats. Pakistan Journal of Pharmaceutical Sciences , 22 (3), 287–290.
Rahmi, A.,  Afriani, T., Sari, L.P., & Filmawati. (2021). Uji Aktivitas Antipiretik Ekstrak Etanol Daun Sembung ( Blumea balsamifera ) Secara In Vivo Terhadap Mencit Putih Jantan  ( Mus  musculus ). Majalah  Farmasi  dan  Farmakologi , 25 (1),  7–10. https://doi.org/10.20956/mff.v25i1.11961.
Robinson, T., 1991. Kandungan Organik Tumbuhan Tinggi Edisi 6. Penerbit ITB. Bandung Rotundo, L., & Pyrsopoulos, N. (2020). Liver injury induced by paracetamol and challenges associated with intentional and unintentional use. World J. Hepatol ., 12(4),125-136. DOI: 10.4254/wjh.v12.i4.125.
Samad, N.B., Debnath, T., Jin, H.L., Lee, B.R., Park, P.J., Lee, S.Y., & Lim, B.O. (2013). Antioxidant  activity  of  Benincasa  hispida  seeds. Journal  of  Food  Biochemistry , 37 (4), 388–395. https://doi.org/10.1111/j.1745-4514.2011.00643.x.
Sharp, P., & Villano, J. (2012). The laboratory rat, second edition. In The Laboratory Rat, Second Edition . https://doi.org/10.1201/b13862.
Sugita, R., Kuwabara, H., Sugimoto, K., Kubota, K., Imamura, Y., Kiho, T., Tengeiji, A., Kawakami,  K.,  &  Shimada,  K.  (2016).  A  Novel  Selective  Prostaglandin  E  2 Synthesis  Inhibitor  Relieves  Pyrexia  and  Chronic  Inflammation  in  Rats. Inflammation 39, 907–915. https://doi.org/10.1007/s10753-016-0323-5.
Tjay,  T.,  &  Rahardja,  K.  (2007).  Obat-Obat  Penting  Khasiat,  Penggunaan  dan  Efek-Efek Sampingya,. PT. Elex Media Komputindo . Jakarta.
Twycross,  R.,  Pace,  V.,  Mihalyo,  M.,  &  Wilcock,  A.  (2013).  Therapeutic  Reviews Acetaminophen (Paracetamol). Journal of Pain and Symptom Management, 46(5), 747-55.  DOI: 10.1016/j.jpainsymman.2013.08.001.
Viani,  V.,  &  Hijratul,  H.    (2016).    Uji  Efek  Antipiretik  Ekstrak  Daun  Sirsak  ( Annona muricata  L. )  Secara  Oral  Terhadap  Mencit  ( Mus  musculus ). Proceeding  of Mulawarman Pharmaceuticals Conferences , 3, 447-452.
Widyasari,  R.,  Yuspitasari,  D.,  Masykuroh,  A.,  &  Tahuhiddah,  W.  (2018).  Uji  Aktivitas Antipiretik  Ekstrak  Daun  Sisik    Naga  ( Pyrrosia  piloselloides (L.)  M.G.  Price) Terhadap    Tikus  Putih (Rattus  norvegicus) Jantan  Galur  Wistar  Yang  Diinduksi Pepton  5%. Jurnal  Ilmu  Farmasi  &  Farmasi  Klinik ,  15(1),  22–28.    DOI: http://dx.doi.org/10.31942/jiffk.v15i01.2169.
Zaini,  N.A.M.,  Anwar,  F.,  Hamid,  A.A.,  &  Saari,  N.  (2011).  Kundur  ( Benincasa  hispida (Thunb.)  Cogn. ):  A  potential  source  for  valuable  nutrients  and  functional  foods. Food Research International, 14(7), 2368-2376 . https://doi.org/10.1016/ j.foodres.2010.10.024.