DOI: 10.35311/jmpi.v9i1.299
Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Metanol  dan  n-Heksana  Rimpang  Temu Ireng ( Curcuma aeruginosa Roxb.) Metode DPPH
Fadli Sukandiarsyah 1* , Indah Purwaningsih 2 , Gervacia Jenny Ratnawaty 2
1 Program Studi D-IV Teknologi Laboratorium Medis, Politeknik ‘Aisyiyah Pontianak
2 Program Studi D-IV Analis Kesehatan, Poltekkes Kemenkes Pontianak

## ABSTRAK
Temu  ireng  (Curcuma  aeruginosa  Roxb.)  merupakan  tanaman  obat  tradisional  yang kaya  akan  senyawa  bioaktif  seperti  fenol,  steroid,  triterpenoid,  flavonoid,  alkaloid, tanin, dan saponin. Penelitian ini bertujuan untuk mengevaluasi aktivitas antioksidan ekstrak  metanol  dan  ekstrak  n-heksana  rimpang  temu  ireng  menggunakan  metode DPPH. Ekstraksi dilakukan dengan cara maserasi menggunakan pelarut metanol dan n-heksana.  Ekstrak  metanol  diuji  pada  konsentrasi  100,  150,  200,  250,  dan  300  ppm, sedangkan  ekstrak n-heksana diuji  pada konsentrasi  1500, 1600,  1700, 1800,  dan 1900 ppm, masing-masing diulang tiga kali. Hasil penelitian menunjukkan nilai IC50 ekstrak metanol  sebesar  171  ppm  dan  ekstrak  n-heksana  sebesar  1.724  ppm.  Sebagai pembanding,  vitamin  C  memiliki  nilai  IC50  6,175  ppm.  Kesimpulannya,  ekstrak metanol rimpang temu ireng memiliki aktivitas antioksidan yang lebih baik daripada ekstrak n-heksana rimpang temu ireng.
Kata Kunci : Antioksidan, Curcuma aeruginosa Roxb, DPPH, Ekstrak Metanol, Ekstrak n-Heksana

## ABSTRACT
Black ginger ( Curcuma aeruginosa Roxb.) is a traditional medical herb which is abundant bioactive compounds such as phenol, steroid, triterpenoid, flavonoid, alkaloid, tannin, and  saponin  compound.  This  research  aims  to  evaluate  the  antioxidant  activity  of methanol extract and n-hexane extract of temu ireng rhizome using the DPPH method. Extraction was carried out by maceration using methanol and n-hexane solvents. The methanol extract was tested at concentrations of 100, 150, 200, 250, and 300 ppm, while the  n-hexane  extract  was  tested  at  concentrations  of  1500,  1600,  1700,  1800,  and  1900 ppm, then each was repeated three times. The results showed that the IC 50 value of the methanol extract was 171 ppm and that of the n-hexane extract was 1.724 ppm. As a comparison,  vitamin  C  has  an  IC 50 value  of  6.175  ppm.  In  conclusion,  the  methanol extract black ginger rhizome has better antioxidant activity compared to the n-hexane extract black ginger rhizome.
Keywords : Antioxidant, Curcuma aeruginosa Roxb, DPPH, Methanol Extract, n-Heksana Extract
Sitasi: Sukandiarsyah, F., Purwaningsih, I., & Ratnawaty, G. J. (2023). Aktivitas Antioksidan Ekstrak Metanol dan n-Heksana Rimpang Temu Ireng ( Curcuma aeruginosa Roxb.) Metode DPPH. Jurnal Mandala Pharmacon Indonesia, 9(1), 62- 70. https://doi.org/10.35311/jmpi. v9i1.299
Submitted: 09 April 2023 Accepted: 19 Juni 2023 Published: 30 Juni 2023
*Penulis Korespondensi: Fadli Sukandiarsyah Email: fadli.s@polita.ac.id
Jurnal Mandala Pharmacon Indonesia is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License
Sukandiarsyah, et al.

## PENDAHULUAN
Antioksidan  merupakan  senyawa  yang bisa  mengatasi  efek  negatif  senyawa  oksidan dengan  memberikan  satu  elektronnya  kepada senyawa  yang  kurang  stabil  sehingga  dapat menghambat aktivitasnya, kemudian bisa menghilangkan senyawa radikal bebas agar tidak menyebabkan suatu  penyakit (Permanasari et al., 2021). Penggunaan  antioksidan  sintetik  mulai dikurangi karena apabila digunakan dalam jangka waktu  yang  panjang  akan  memberikan  buruk yaitu  menyebabkan  terjadinya  kanker  karena bersifat  karsinogenik.  Untuk  meminimalisir  efek samping  tersebut  dapat  digunakan  alternatif antioksidan alami dari tumbuhan (Kesuma, 2015). Tumbuhan  yang  diduga  mempunyai  potensi aktifitas antioksidan adalah rimpang temu ireng.
Masyarakat  Indonesia  mengenal  Temu ireng ( Curcuma aeruginosa Roxb.) sebagai tanaman jamu.  Tanaman  ini  mempunyai  beberapa  nama lain  seperti  temu  erang,  temu  hitam  atau  temu ireng.  Rimpang  temu  ireng  bersifat  dingin  serta rasa  tajam  dan  pahit  (Zulfiah  et  al.,  2020).  Temu ireng  banyak  digunakan  dalam  ilmu  pengobatan oleh masyarakat karena memiliki kandungan yang baik bagi tubuh. Biasanya masyarakat menggunakan temu ireng sebagai campuran jamu. Tanaman  ini  menurut  penelitian  yang  dilakukan oleh Mustariani et al. (2017) mengandung senyawa metabolit sekunder berupa flavonoid, triterpenoid serta  saponin.  Hal  tersebut  diperkuat  dengan penelitian  lain  yang  dilakukan  Nurcholis  et  al. (2017) dilaporkan bahwa ekstrak etanol temu ireng juga mengandung senyawa saponin dan triterpenoid.
Rimpang  temu  ireng  telah  digunakan dalam  pengobatan  tradisional  untuk  mengobati penyakit  ambeien,  gonorrhoea,  kecacingan  dan mengobati  masuk  angin  (Zulfiah  et  al.,  2020). Selain  itu,  juga  digunakan  dalam  pengobatan penyakit kulit, gangguan otot, sakit gigi, gangguan pernapasan,  demam,  keputihan,  penghilang  bau badan dan mengatasi kolesterol (Mustariani et al., 2017).
Menurut Armimi et al (2020) bahwa etanol rimpang temu ireng memiliki nilai IC 50 54,74 ppm. Ekstrak  etanol  rimpang  temu  ireng  memiliki aktivitas  inhibisi  enzim  α-glukosidase  yang berfungsi  untuk  menghambat  peningkatan  gula darah  (Unarso,  2016).  Penelitian  Rahman  (2016) menunjukan bahwa ekstrak etanol rimpang temu ireng  mempunyai  aktivitas  imunostimulan  yang menghambat pertumbuhan tumor.
Penelitian  ini  menggunakan  ektraksi maserasi  dengan  pelarut  metanol  dan  n-heksana sebagai  perwakilan  pelarut  polar  dan  nonpolar. Maserasi  dipilih  untuk  mencegah  adanya kerusakan  senyawa  akibat  pemanasan. Penelitian ini  menggunakan  metode  DPPH.  Metode  ini digunakan  karena  pengerjaannya  cepat,  mudah serta hanya menggunakan sedikit reagen (Kesuma,  2015).  Metode  DPPH  (2,2-difenil-1- pikrilhidrazil)  menghasilkan  nilai  IC 50 ( Inhibitor Concentration ),  dimana nilai tersebut memberikan gambaran
mengenai
konsentrasi yang menghambat  aktivitas  radikal  bebas  sebesar  50% (Molyneux, 2004).
Penelitian  sebelumnya  yang  dilakukan oleh Mustariani et al. (2017) membahas tentang uji skrinning fitokimia pada ekstrak dengan beberapa pelarut dari rimpang temu ireng dan pengaplikasian  pada  uji  sitotoksik  sedangkan pada penelitian ini dilakukan skrinning fitokimia dan melihat bagaimana aktivitas antioksidan yang terkandung  didalam  ekstrak  tersebut.  Kemudian, penelitian  oleh  Nurcholis  et  al.  (2017)  melihat kemiripan  tanaman  dan  kandungan  senyawa metabolit  sekunder  yang  di  ekstrak  secara maserasi  dengan  pelarut  etanol  yang  terdapat dalam  beberapa  tumbuhan  temu  ireng  yang tumbuh  di  beberapa  daerah  di  Indonesia. Penelitian  oleh  Nurcholis  &  Bintang  (2017) melakukan  analisis  aktivitas  antioksidan  dengan menggunakan  pelarut  etanol.  Tujuan  dilakukan penelitian  ini  adalah  untuk  melihat  bagaimana aktivitas  antioksidan  dari  ekstrak  metanol  dan ekstrak n-Heksana rimpang temu ireng ( Curcuma aeruginosa Roxb.).
Berdasarkan  uraian  diatas  penelitian hanya  sebatas  skrinning  fitokimia  namun  belum sampai ke tahap uji aktivitas antioksidan sehingga peneliti  tertarik  melakukan  penelitian  mengenai uji  aktivitas  antioksidan  dari  ekstrak  metanol sebagai perwakilan dari pelarut polar dan ekstrak n-heksana  sebagai  perwakilan  pelarut  nonpolar rimpang  temu  ireng  ( Curcuma  aeruginosa Roxb.).
Hal ini didasarkan pada kedekatan taksonomi dan penelitian terdahulu dari tanaman rimpang temu ireng walaupun sampel diambil tidak dari daerah yang sama, sehingga kemungkinan besar rimpang temu ireng akan memiliki aktivitas antioksidan.

## METODE PENELITIAN
Alat
Sukandiarsyah, et al.
Alat-alat yang
digunakan yaitu Erlenmeyer, spektrofotometer UV-VIS , labu ukur, batang pengaduk,  pipet tetes, gelas  beker, neraca analitik,  waterbath,  tabung  reaksi,  pipet  ukur, rotary evaporator, cabinet dryer dan aluminium foil.
Bahan
Bahan-bahan  yang  digunakan  adalah metanol teknis, n-Heksana teknis, metanol p.a dan larutan  DPPH.  Sampel  rimpang  temu  ireng dikumpulkan dari petani Desa Punggur, Kalimantan Barat.

## Determinasi Tumbuhan
Determinasi dilakukan untuk mengetahui tanaman  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah  benar  rimpang  temu  ireng  ( Curcuma aeruginosa Roxb.).  Determinasi  di  Laboratorium Biologi Fakultas MIPA, Universitas Tanjung Pura Pontianak.
Ekstraksi Rimpang Temu Ireng
Rimpang temu ireng dikumpulkan sebanyak  3  kg  untuk  ekstrak  metanol  dan  3  kg untuk  ekstrak  n-heksana  sebagai  berat  basah, disortasi  basah  dan  dicuci  dengan  air  mengalir. Lalu, rimpang tersebut diiris tipis memanjang atau melintang kemudian dikeringkan dengan menggunakan  alat cabinet  dryer sampai  rimpang tersebut  kering  sempurna  dengan  suhu  35-38°C. Setelah  itu,  disortasi  kering  dan  ditimbang  berat keringnya,  kemudian  dihaluskan  dan  diayak dengan ayakan. Proses pengeringan menghasilkan serbuk  rimpang  temu  ireng  sebanyak  500gram masing-masing  pada  ekstrak  metanol  dan  n- heksana.  Ekstraksi  dilakukan  dengan  metode maserasi  yaitu  dilakukan  perendaman  simplisia selama  3x24  jam,  dimana  setiap  24  jam  sekali pelarutnya  diganti  agar  senyawa  pada  simplisia berdifusi  keluar.  Filtrat  yang  diperoleh  dari masing-masing  pelarut  diuapkan  dengan rotary evaporator pada  suhu  40ºC  untuk  memperoleh ekstrak kental.
Uji Skrinning Fitokimia 1. Pemeriksaan Alkaloid
Ekstrak kental diambil kemudian ditambahkan 5 ml HCl 2 N, lalu filtrat direaksikan dengan reagen masing-masing Mayer sebanyak 3 tetes  dan  Dragendorff  sebanyak  3  tetes. Pembentukan  endapan  berwarna  putih  sampai kuning  pada  pereaksi  Mayer  menunjukkan adanya  alkaloid  sedangkan  endapan  jingga menunjukkan adanya alkaloid pada dragendorf. 2. Pemeriksaan Fenol
Ekstrak  ditambahkan  larutan  FeCl3  10% sebanyak  1  ml,  kemudian  apabila  terbentuk
larutan  warna  biru  kehitaman  atau  hitam kehijauan menunjukkan terdapat senyawa Fenol. 3. Pemeriksaan Flavonoid
Ekstrak  ditambahkan  2  ml  HCl  2  N  dan bubuk magnesium. Pembentukan larutan berwarna  jingga  sampai  merah  menunjukan adanya senyawa Flavonoid.
4. Pemeriksaan Tanin
Ekstrak  ditambahkan  gelatin  1%  1  ml, apabila  terbentuk  endapan  putih  menandakan terdapat kandungan tanin.
5. Pemeriksaan Saponin
Ambil ekstrak lalu ditambahkan 10 ml air panas,  dinginkan  dan  dikocok  10  detik. Terbentuknya  busa  konstan  menunjukan  adanya senyawa saponin.
6. Pemeriksaan Steroid dan Triterpenoid Tambahkan  kloroform  sebanyak  0,5  ml pada ekstrak, kemudian ditambahkan CH 3 COOH
0,5  ml  dan  H 2 SO 4 2  ml  melalui  dinding  tabung. Terbentuk  warna  hijau  kebiruan  menunjukan terdapat  senyawa  sterol  dan  terbentuk  cincin kecoklatan  atau  violet  menunjukan  terdapat senyawa triterpenoid.

## Uji Aktivitas Antioksidan
Ekstrak  kental  metanol  rimpang  temu ireng  dibuat  beberapa  variasi  konsentrasi  yaitu 100, 150, 200, 250 dan 300 ppm. Ekstrak n-Heksan rimpang  temu  ireng  dibuat  variasi  konsentrasi yaitu  1500,  1600,  1700,  1800  dan  1900  ppm. Kemudian masukkan 2 ml masing-masing variasi konsentrasi  larutan.  Tambahkan  larutan  2  ml DPPH  0,1  mM  lalu  ditutup  dengan  kertas aluminium foil, dihomogenkan dan diinkubasi 30 menit  dalam  tempat  yang  tidak  terpapar  cahaya. Setelah  itu,  masing-masing  larutan  uji  diukur absorbansinya  pada  panjang  gelombang  515  nm. Dilakukan  pengulangan  pengukuran  sebanyak  3 kali (Molyneux, 2004).

## Analisis Data
Nilai  %  inhibisi  di  hitung  dengan menggunakan Rumus 1.
% inhibisi = Absorbansi blanko-absorbansi sampel absorbansi blanko ×100% (1)
Nilai % inhibisi dan konsentrasi diperlukan untuk mendapatkan  persamaan.  Nilai  IC 50 ( Inhibition Concentration 50%) dihitung dengan memplot nilai pada  sumbu  x  dan  y  yang  diperoleh  dari persamaan  kurva  baku  nilai  inhibisi  serta konsentrasi  ekstrak  yang  diperoleh  dari  rumus regresi  linear  sederhana  menggunakan  aplikasi Microsoft excel 2023.
Sukandiarsyah, et al.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian ini menggunakan sampel temu ireng  yang  di  ekstrak  dengan  cara  maserasi menggunakan  pelarut  metanol  dan  n-heksana. Sampel  sebelum  dilakukan  maserasi  dikeringkan terlebih  dahulu.  Pengeringan  berfungsi  untuk mendapatkan  simplisia  yang  tidak  mudah  rusak oleh  adanya  pertumbuhan  jamur.  Pengeringan juga  mengurangi  kadar  air  dan  menghentikan reaksi  enzimatik  untuk  mencegah  penurunan mutu  atau  perusakan  simplisia  (Rosawanti  et  al. 2018).
Maserasi dilakukan untuk menarik keluar senyawa  aktif  dari  simplisia.  Hasil  ekstraksi diperoleh ekstrak kental metanol sebanyak 65,44 g dan  ekstrak  kental  n-heksana  sebanyak  25,06  g, lalu  ekstrak  tersebut  diuji  susut  pengeringan, diperoleh hasil untuk ekstrak metanol dan ekstrak n-heksana  rata-rata  0,92%  dan  0,47%.  Ekstrak kental kemudian dilakukan uji skrining fitokimia untuk  melihat  kandungan  senyawa  metabolit sekunder.  Hasil  skrinning  fitokimia  ekstrak rimpang temu ireng ditunjukan pada tabel berikut.
Tabel 1. Skrinning Fitokimia Ekstrak Metanol dan n-Heksan Rimpang Temu Ireng  ( Curcuma aeruginosa Roxb.)
Hasil  skrinning  fitokimia  pada  ekstrak metanol  diperoleh  hasil  positif  untuk  semua parameter yaitu alkaloid, flavonoid, fenol, tannin, saponin dan steroid serta triterpenoid, sedangkan hasil  skrinning  fitokimia  ekstrak  n-Heksana diperoleh  hasil  positif  hanya  pada  alkaloid  dan triterpenoid.  Hal  tersebut  membuktikan  bahwa senyawa yang terdapat pada rimpang temu ireng bersifat polar dan juga pelarut metanol merupakan pelarut  universal  yang  membuat  semua  senyawa ikut larut didalamnya.
Penelitian ini sejalan dengan Mustariani et al.  (2017)  bahwa  ekstrak  metanol  dan  n-heksan mengandung flavonoid, saponin dan triterpenoid, kemudian  penelitian  oleh  Nurcholis  et  al.  (2017) ekstrak etanol mengandung saponin dan triterpenoid.  Hasil  tersebut  juga  diperkuat  oleh penelitian  Oktavia  et  al.  (2021)  yang  melaporkan ekstrak  etanol  mengandung  flavonoid,  alkaloid, saponin  dan  tanin.  Pada  penelitian  ini  analisis senyawa  metabolit  sekunder  hanya  secara kualitatif  tidak  dilakukan  pengecekan  kosentrasi dan jenis senyawa-senyawa yang terkandung dan juga  ekstrak  yang  digunakan  tidak  di  fraksinasi sehingga  masih  banyak  senyawa  yang  ikut terdeteksi.
Uji  aktivitas  antioksidan  ekstrak  metanol dan n-heksan rimpang temu ireng dengan metode
DPPH untuk mengetahui absorbansinya. Senyawa yang  mempunyai  aktivitas  antioksidan  akan menurunkan  absorbansi  DPPH  yang  diukur terhadap  blanko.  DPPH  yang  memiliki  elektron tidak  berpasangan  memberikan  warna  ungu. Warnanya  akan  berubah  menjadi  pudar  ketika elektron  dipasangkan  (Saragih,  2014).  Nilai absorbansi  DPPH  digunakan  untuk  melihat persentase  penghambatan  radikal  DPPH  (% inhibisi)  kemudian  dapat  ditentukan  nilai  IC 50 . Perubahan  warna  terjadi  karena  adanya  reaksi reduksi  DPPH  dari  senyawa  antioksidan.  Reaksi dapat dilihat pada Gambar 1.
Panjang  gelombang  maksimum  (λmaks) yang diperoleh dengan pengukuran menggunakan Spektrofotometer UV-Vis diperoleh 515  nm.  Tujuan  dilakukan  pemeriksaan  panjang gelombang  maksimum adalah untuk  mengetahui panjang gelombang yang terjadi eksitasi elektronik akan memberikan absorbansi maksimum terhadap pengukuran dan mengetahui daerah serapan yang dapat  dihasilkan  dalam  bentuk  nilai  absorbansi. Nilai  absorbansi  yang  diperoleh  dihitung    % inhibisi  dengan  menggunakan  rumus  dan  dicari persamaannya.    Gambar  2  menunjukkan  kurva hubungan  antara  konsentrasi  ekstrak  dengan persen  inhibisi  DPPH  dari  ekstrak  metanol  dan ekstrak n-heksana rimpang temu.
No. Metabolit Skunder Hasil Pemeriksaan Ekstrak Metanol Ekstrak n-Heksana 1 Flavonoid Positif (+) Negatif (-) 2 Alkaloid Positif (+) Positif (+) 3 Tanin Positif (+) Negatif (-) 4 Fenol Positif (+) Negatif (-) 5 Saponin Positif (+) Negatif (-) 6 Triterpenoid Positif (+) Positif (+)
Sukandiarsyah, et al.
Gambar 1. Reaksi Senyawa Antioksidan dengan DPPH (Nurfadillah et al., 2016)
Gambar 2.  Kurva  Hubungan  Konsentrasi  dengan  %  Inhibisi  Ekstrak  Metanol  Rimpang  Temu  Ireng ( Curcuma aeruginosa Roxb.) (Dokumentasi Pribadi)
Gambar 3.  Kurva  Hubungan  Konsentrasi  dengan  %  Inhibisi  Ekstrak  Metanol  Rimpang  Temu  Ireng ( Curcuma aeruginosa Roxb.) (Dokumentasi Pribadi)
Kurva  diatas  (Gambar  3)  diperoleh menggunakan regresi linier dari % inhibisi dengan konsentrasi  larutan.  Dari  tabel  diatas  diperoleh persamaan  untuk  ekstrak  metanol  adalah  y  = 0,1261x  +  28,397  dengan  nilai  R 2 sebesar  0,9797. Sedangkan,  untuk  ekstrak  n-heksan  adalah  y  = 0,0892x  -  103,85  dengan  nilai  R 2 0,9981.  Nilai  R2 merupakan koefisien determinasi, nilainya berarti baik jika 0,5-1. Koefsien y pada persamaan tersebut memiliki  nilai  50,  sedangkan  koefisien  x  pada persamaan tersebut merupakan konsentrasi
ekstrak  yang  akan  dihitung  untuk  mengetahui nilainya.  Nilai  IC 50 yang  didapatkan  dari persamaan diatas dapat dilihat pada Tabel 3.
Nilai IC 50 pada tabel diatas menunjukkan bahwa konsentrasi ekstrak yang dapat menghambat radikal DPPH sebesar 50%. Semakin kecil  nilai  IC 50 maka  semakin  baik  aktivitas antioksidannya.  Nilai  IC 50 perlu  diketahui  untuk menggolongkan sifat antioksidan ekstrak. Kategori  aktivitas  antioksidan  sangat  kuat memiliki nilai IC 50 < 50 ppm, antioksidan kuat 50-
y = 0,1261x + 28,397 R² = 0,9797 0 20 40 60 80 0 100 200 300 400 % In h ib isi Konsentrasi (ppm) Hubungan Konsentrasi dengan % inhibisi Ekstrak Metanol Rimpang Temu Ireng y = 0,0892x - 103,85 R² = 0,9981 0 20 40 60 80 0 500 1000 1500 2000 % In h ib isi Konsentrasi (ppm)
Hubungan Konsentrasi dengan % Inhibisi Ekstrak n-Heksana Rimpang Temu Ireng
Sukandiarsyah, et al.
100 ppm, kategori sedang nilai IC 50 100-150 ppm, lemah memiliki nilai IC 50 antara 150-200 ppm dan
nilai IC 50 > 200 ppm sangat lemah (Fithriani et al., 2015).
Tabel 3. Nilai IC 50 Sampel No. Sampel Nilai IC 50 (ppm) Kategori Antioksidan 1 Ekstrak Metanol 171 Sedang 2 Ekstrak n-Heksana 1.724 Sangat Lemah
Hasil  penelitian  ini  memperlihatkan bahwa  ekstrak  metanol  rimpang  temu  ireng mempunyai  aktivitas  antioksidan  yang  bersifat lemah karena diperoleh nilai IC 50 171 ppm. Ekstrak n-heksana rimpang temu ireng tidak  mempunyai aktivitas  antioksidan karena  nilai  IC 50 >1000 ppm yaitu  1.724  ppm.  Penelitian  ini  tidak  sejalan dengan  Nurcholis  &  Bintang  (2017)  yang mengukur  IC 50 ekstrak  etanol  temu  ireng  yang diperoleh  hasil  406,52  ppm  yang  berarti  sangat lemah.  Hal  tersebut  dikarenakan  perbedaan kandungan  senyawa  metabolit  sekunder  dari ekstrak  yang  dilakukan  pemeriksaan.  Pada penelitian ini tidak dilakukan pengukuran dengan standar antioksidan sehingga mengambil rujukan dari standar vitamin C sebagai antioksidan alami yang  sering  digunakan  masyarakat.  Menurut Purwaningsih  et  al.  (2018)  vitamin  C  sebagai antioksidan alami memiliki nilai IC 50 sebesar 6,175 ppm  sehingga  tergolong  sangat  kuat  demikian juga  diperkuat  penelitian  oleh  Fauzi  et  al.  (2021)
yang  menyatakan  bahwa  nilai  IC 50 vitamin  C sebesar  28,907  ppm  yang  tergolong  sangat  kuat. Dari hasil tersebut ekstrak metanol rimpang temu ireng  memiliki  aktivitas  antioksidan  yang  lebih baik  dari  ekstrak  n-heksana  rimpang  temu  ireng karena  memiliki  IC 50 yang  lebih  kecil,  namun tergolong lemah. Hal tersebut  karena kandungan metabolit sekunder yang terkandung didalamnya berdasarkan hasil skrinning fitokimia.
Antioksidan memiliki mekanisme aktivitas yang berbeda seperti penangkap radikal bebas,  inaktivasi  peroksida  dan  spesies  oksigen reaktif  lainnya,  khelasi  logam,  dan  pendinginan produk  oksidasi  lipid  sekunder  (Bustanul  & Sanusi,  2018).  Senyawa  saponin  (Gambar  4) bekerja  dengan  membentuk  hidroperoksida  yang dapat  menghambat  terbentuknya  lipid  peroksida (Kurniati, 2013).
Gambar 4. Struktur senyawa Saponin (Noer et al., 2018)
Senyawa  alkaloid  (Gambar  5)  pada ekstrak  diduga  berupa  garam  alkaloid.  Memiliki perbedaan  sifatnya  dengan  alkaloid  bebas  dalam bentuk basa. Alkaloid dalam bentuk basa biasanya tidak  larut  dalam  air  tetapi  mudah  larut  dalam pelarut organik (seperti benzena, eter, kloroform) sementara  dalam  bentuk  garamnya,  alkaloid mudah  larut  dalam  pelarut  polar.  Hal  ini menunjukkan bahwa kandungan senyawa
alkaloid  didalam  ekstrak  temu  ireng  merupakan senyawa alkaloid dalam bentuk garamnya karena reaksi  positif  ditunjukkan  pada  pelarut  yang bersifat  polar  (Prayoga  et  al.,  2019).  Senyawa alkaloid,  terutama  indol,  memiliki  kemampuan untuk  menghentikan  reaksi  rantai  radikal  bebas secara  efisien.  Senyawa  radikal  turunan  dari senyawa amina ini memiliki tahap terminasi yang sangat lama (Yuhernita & Juniarti, 2011).
Sukandiarsyah, et al.
Gambar 5. Peredaman Radikal Bebas oleh Alkaloid (Yuhernita & Juniarti, 2011)
Tanin  memiliki  peranan  biologis  yang besar karena fungsinya sebagai pengendap protein dan  penghelat  logam.  Oleh  karena  itu,  tanin diprediksi  dapat  berperan  sebagai  antioksidan
biologis (Noer et al., 2018) (Kurniawati & Sutoyo, 2021). Struktur senyawa Tanin secara umum dapat dilihat pada Gambar 6 berikut.
Gambar 6. Struktur Senyawa Tanin (Noer et al., 2018).
Flavonoid  (Gambar  7)  bersifat  sebagai  senyawa antioksidan,  hal    ini    disebabkan    oleh  adanya gugus  hidroksil  fenolik  pada  struktur  molekul flavonoid  yang  juga  bersifat  sebagai  pengkhelat logam  (Romadanu  et  al.,  2014).  Bekerja  secara langsung  dengan  memutus  reaksi  oksidasi  dari radikal bebas untuk mempertahankan keseimbangan  radikal  bebas  dengan  antioksidan. Secara tidak langsung meningkatkan ekspresi gen
antioksidan endogen melalui nuclear factor eryhtrid related  factor  2 (Nrf 2 )  yaitu  sintesis  enzim  SOD ( superoxide  dismutase )  (Sumardika  &  Jawi,  2012). Flavonoid  dioksidasi  oleh  radikal,  menghasilkan radikal yang lebih stabil dan tidak reaktif. Dengan kata lain, flavonoid menstabilkan spesies oksigen reaktif  melalui  reaksi  dengan  senyawa  reaktif radikal (Gambar 8) (Bustanul & Sanusi, 2018).
Gambar 7. Struktur dasar senyawa flavonoid (Noer et al., 2018)
Gambar 8. Penangkap radikal bebas oleh flavonoid (Bustanul & Sanusi, 2018)
Sukandiarsyah, et al.

## KESIMPULAN
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan  dapat  disimpulkan  bahwa  ekstrak metanol rimpang temu ireng termasuk antioksidan  lemah  karena  memiliki  IC 50 150-200 ppm  yaitu  171  ppm.  Ekstrak  n-heksana  rimpang temu ireng tidak mempunyai aktivitas antioksidan karena diperoleh nilai IC 50 > 1000 ppm yaitu 1.724 ppm. Aktivitas antioksidan ekstrak metanol lebih baik  dari  pada  ekstrak  n-heksana  dikarenakan nilai  IC 50 ekstrak  metanol  lebih  kecil  dari  pada ekstrak  n-heksana.  Namun,  walau  lebih  kecil aktivitas antioksidan ekstrak metanol digolongkan dalam aktivitas yang lemah dikarenakan memiliki IC 50 di antara rentang 150-200 ppm yaitu 171 ppm.
Diharapkan  untuk  peneliti  selanjutnya dapat  menggunakan  pelarut  lainnya  dengan  tipe kelpolaran  yang  berbeda,  kemudian  dapat difraksinasi  dengan  tingkat  kepolaran  pelarut yang digunakan. Kemudian, dilakukan uji analisis lebih  lanjut  secara  kuantitatif  untuk  melihat jumlah  konsentrasi  senyawa  metabolit  sekunder serta  jenis  golongan  senyawa  yang  terkandung dalam temu ireng.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Peneliti  mengucapkan  terima  kasih  atas bantuan,  saran  dan  masukan  dalam  penyusunan penelitian  ini  kepada  seluruh  anggota  peneliti. Kami  juga  mengucapkan  terimakasih  kepada Politeknik  Negeri  Pontianak  sudah  mengizinkan kami  melakukan  penelitian  di  Laboratorium Teknologi Pangan.

## DAFTAR PUSTAKA
Armimi, A., Artika, I. M., & Nurcholis, W. (2020).
Aktivitas  Antioksidan  dan  Sitotoksisitas Terkait  Sink  Senyawa  Fenolik  Tanaman Temu  Hitam  (Curcuma  aeruginosa  Roxb.).
Scientific Repository .
Bustanul,  A.,  &  Sanusi,  I.  (2018). Struktur  , Bioaktivitas Dan Antioksidan Flavonoid Structure  ,  Bioactivity  and  Antioxidan  of Flavonoid . 6 (1), 21–29.
Fithriani, D., Amini, S., Melanie, S., & Susilowati, R.  (2015).  Uji  Fitokimia,  Kandungan  Total Fenol  dan  Aktivitas  Antioksidan  Mikroalga Spirulina sp., Chlorella sp., dan Nannochloropsis  sp. Jurnal  Pascapanen  Dan Bioteknologi  Kelautan  Dan  Perikanan , 10 (2),
101.
Kesuma, Y. (2015). Antioksidan Alami dan Sintetik .
Kurniati,  ruth indah. (2013). Kurniati, ruth indah. 2013. Uji Aktivitas Antioksidan Fraksi Etanol Daun  Buas-Buas  (Premna  cordifolia  Linn.) dengan Metode DPPH (2,2-difenil-1- pikrilhidrazil). Jurnal  Mahasiswa  Farmasi
Fakultas Kedokteran UNTAN , 3 (1), 1–13.
Kurniawati,  I.  F.,  &  Sutoyo,  S.  (2021).  Review Artikel:  Potensi  Bunga  Tanaman  Sukun (Artocarpus Altilis [Park. I] Fosberg) Sebagai Bahan  Antioksidan  Alami. Unesa  Journal  of Chemistry , 10 (1), 1–11.
Molyneux,  P.  (2004).  The  Use  of  the  Stable  Free
Radical Diphenylpicryl-hydrazyl (DPPH) for Estimating Antioxidant Activity. Songklanakarin Journal of Science and
Technology , 26 (December 2003), 211–219.
Muhammad Nur Fauzi, Joko Santoso, & Aldi Budi Riyanta.  (2021).  Uji  Kualitatif  dan  Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanolik Buah Maja  (Aegle  Marmelos  (L.)Correa)  dengan Metode DPPH. Jurnal Riset Farmasi , 1 (1), 1–8.
Mustariani, B. A. A., Izuddin, A., Hasyim, D. M., & Batubara,  I.  (2017).  Uji  Toksisitas  Dan Aktivitas Antimakan Ekstrak Rimpang Temu Hitam  (Curcuma  Aeruginosa  Roxb). Jurnal Farmasetis , 6 (1), 1–8.
Noer,  S.,  Pratiwi,  R.  D.,  &  Gresinta,  E.  (2018). Penetapan Kadar Senyawa Fitokimia (Tanin, Saponin  dan  Flavonoid)  sebagai  Kuersetin Pada Ekstrak Daun Inggu (Ruta angustifolia L.). Jurnal Eksakta , 18 (1), 19–29.
Nurcholis, W., & Bintang, M. (2017). Comparison between  antioxidant  activity  and  phenolics content  of  Curcuma  zanthorrhiza  and Curcuma  aeruginosa  Roxb. Indonesian  Herb Journal , 2 (1), 25–29.
Nurcholis,  W.,  Khumaida,  N.,  Syukur,  M.,  & Bintang, D. M. (2017). Analisis Kemiripan 20 Aksesi  Temu  Ireng  (Curcuma  aeruginosa Roxb.)  Berdasarkan  Warna  Rimpang,  Hasil Ekstrak,  dan  Kandungan  Fitokimia. Jurnal Agronomi  Indonesia  (Indonesian  Journal  of Agronomy) , 44 (3), 315.
Nurfadillah, N., Chadijah, S., & Rustiah, W. (2016).
Analisis Antioksidan Ekstrak Etil Asetat Dari
Kulit Buah Rambutan (Nephelium
Lappaceum)  dengan  Menggunakan  Metode dpph (1,1 difenil-2-pikrilhidrakzil). Al-Kimia ,
4 (1), 78–86.
Sukandiarsyah, et al.
Oktavia, T., Suci, P. R., Ikhda, C., & Hamidah, N.
(2021). FORMULASI DAN UJI MUTU FISIK EKSTRAK  RIMPANG  TEMU  IRENG  ( Curcuma  aeruginosa  Roxb  .)  SEBAGAI MASKER  GEL  PEEL  OFF  PENCERAH WAJAH. Jurnal  Seminar  Nasional  Pendidikan Biologi Dan Saintek , VI , 337–344.
Permanasari,  D.,  Sari,  A.  E.,  &  Aslam,  M.  (2021). Pengaruh konsentrasi gula terhadap aktivitas antioksidan  pada  minuman  bir  pletok.
AcTion: Aceh Nutrition Journal , 6 (1), 9.
Prayoga, D. G. E., Nocianitri, K. A., & Puspawati,
N. N. (2019). Identifikasi Senyawa Fitokimia
Dan  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Kasar
Daun Pepe. Jurnal Ilmu Dan Teknologi Pangan (ITEPA) , 8 (2), 111. https://doi.org/10.24843/itepa.2019.v08.i02.p0 1
Purwaningsih,  I.,  Sapriani,  R.,  &  Indrawati,  R.
(2018).  Aktivitas  antioksida  ekstrak  metanol daun  kesum  (Polygonum  minus  Huds.) metode DPPH. Jurnal Laboratorium Khatulistiwa , 2 (2), 161–165.
Rahman  M.  (2016).  Aktivitas  Kemopreventif Ekstrak  Ethanol  Temu  ireng  (Curcuma Aeruginosa  Roxb)    Terhadap  Sel  Makrofag,
Ifn-Γ Dan Tnf-Α Tikus Putih Yang Diinduksi
7,12-imetilbenz. Antrasena Sekolah Pascasarjana Institut Pertanian Bogor.  Bogor .
Romadanu,  Rachmawati,  Si.  H.,  &  Lestari,  S.  D.
(2014). Pengujian Aktivitas Antioksidan Ekstrak Daun Lotus . III (November), 1–7.
Rosawanti, P., Mulia, D. S., & Ardhany, S. D.
(2018).  Kandungan  Antioksidan  Daun Mahang  Damar  (Macaranga  triloba  (Bl.) Muell  Arg.). Jurnal  Surya  Medika , 3 (2),  122–
131.
Saragih,  R.  (2014).  UJI  KESUKAAN  PANELIS PADA  TEH  DAUN  TORBANGUN  (Coleus amboinicus). E-Journal WIDYA Kesehatan Dan Lingkungan , 1 (1), 46–52.
Sumardika, I. W., & Jawi, I. M. (2012). Ekstrak Air Daun  Ubijalar  Ungu  Memperbaiki  Profil Lipid  dan  Meningkatkan  Kadar  Sod  Darah Tikus yang Diberi Makanan Tinggi Kolesterol. Jurnal Ilmiah Kedokteran , 43 (2), 67– 70.
Unarso, C. jessica. (2016). OPTIMASI EKSTRAKSI RIMPANG TEMU IRENG (Curcuma aeruginosa Roxb.) BERDASARKAN AKTIVITAS  INHIBISI  α-  GLUKOSIDASE
DAN SITOTOKSISITAS .
Yuhernita,  &  Juniarti.  (2011).  Analisis  Senyawa Metabolit  Sekunder  dari  Ekstrak  Metanol Daun  Surian  yang  Berpotensi  sebagai Antioksdan. Fakultas  Kedokteran  Universitas
Yarsi Jakarta , 15 (1), 48–52.
Zulfiah, Z., Megawati, M., Herman, H., H. Ambo Lau,  S.,  Hasyim,  M.  F.,  Murniati,  M., Roosevelt,  A.,  Kadang,  Y.  K.,  AR,  N.  I.,  & Patandung,  G.  (2020).  Uji Toksisitas  Ekstrak Rimpang Temu Hitam (Curcuma aeruginosa Roxb.)  Terhadap  Larva  Udang  (Artemia salina  Leach)  dengan  Metode  Brine  Shrimp Lethality  Test  (BSLT). Jurnal  Farmasi  Sandi Karsa , 6 (1), 44–49.