UJI KOGNITIF MENCIT ( Mus musculus L.) JANTAN BERBEDA UMUR YANG DIBERI EKSTRAK LADA HITAM ( Piper nigrum L.)
Cognitive Test MaleMouse ( Mus musculus L.) Of Different Ages Were Given Black Pepper ( Piper nigrum L.)Extract
Monica Sapitri, M. Kanedi, Hendri Busman, Sutyarso
Jurusan Biologi FMIPA Universitas Lampung E-mail : monicasapitri@yahoo.co.id
Jurusan Biologi FMIPA, Universitas Lampung Jl. Prof.Dr. Soemantri Brojonegoro No. 1, Bandarlampung, Lampung, Indonesia, 35145

## Abstrak
Lada  hitam  adalah  salah  satu  jenis  rempah  yang  diketahui  mengandung  antioksidan.    Antioksidan adalah  zat  yang  dipercayadapat  menghambat  proses  penuaan.    Penuaan  ditandai  dengan menurunnya  berbagai  fungsi  organ  tubuh,  termasuk  otak  sehingga  berdampak  pada  menurunnya daya  ingat.  Penelitian  ini  bertujuan  mengetahui  pengaruh  pemberian  ekstrak  lada  hitam  terhadap daya  ingat  mencit  ( Mus  musculus L.).Empat  puluh  ekor  mencit  jantan,  masing-masing  20  ekor berumur  4  bulan  (muda)  dan  20  ekor  berumur  6  bulan  (tua),  diberi  empat  perlakuan  yaitu  :  tanpa ekstrak  sebagai  kontrol (K),  ekstrak  air  (A), ekstrak  etanol  (E),  dan ekstrak  campuran  air-etanol  (C). Data  dianalisis  menggunakan  Sidik  Ragam  2  Jalur  (Two  Ways  ANOVA).    Hasil  penelitian menunjukkan  bahwa  mencit  tua  lebih  cepat  mengingat  jalur  dalam  uji  labirin,  tetapi  cendrung  tidak berbeda  dengan  mencit  muda  dalam  mengingat  balok  pijakan  pada  uji  renang.    Melalui  uji  labirin, daya ingat mencit muda dan tua yang diberi ekstrak lada hitam terbukti lebih baik dari pada yang tidak diberi.  Sedangkan dalam uji renang, daya ingat mencit muda lebih baik pada yang diberi  ekstrak air, sedangkan pada mencit tua hanya ekstrak campuran yang bisa membuat daya ingat lebih baik.
Kata kunci: antioksidan, mencit (Mus musculus L.), lada hitam (Piper nigrum L.).

## Abstract
Black  pepper  ( Piper  nigrum L.)  is  one  of  the  herbs  that  are  known  to  contain  antioxidants. Antioxidants  are  substances  that  are  believeduseful  toinhibit  aging.    Aging  is  characterized  by decrease  in  the  various  capability  of  the  body  organs,  includingbrain  so  thatdecrease  in  memory. Research aims to know the influence of black pepper extract against memory of mice ( Mus musculus L.).  Forty male mice, divided into two groups, i.e. 20 of young male (4 months) and 20 of old-ones (6 months), are given four treatments, namely :no-extract as control (K), water extract (A), ethanol extract (E), and the water-ethanol extract mixtures (C).   Data were analyzed using Two Ways ANOVA.  The results  showed  that old  mice  are quicker in recalling line  in  the  maze  test, but  was  not  different  with the  young  mice  in  recalling  a  given  beam  footing  on  a  swimming  test.    Through  a  maze  test  it  was revealed that both young and old mice treated with black pepper extract have a better memory than that  of  untreated  ones.    Meanwhile,  trough  swimming  test  the  results  proved  that  only  young  male treated  with  water  extract  and  the-old  ones  treatred  with  water-ethanol  mixtures  showed  better memory.
Keywords : antioxidants, mouse (Mus musculus L.), black pepper (Piper nigrum L.).

## PENDAHULUAN
Salah  satu  komoditas  rempah  penting  yang dihasilkan  di  Indonesia  yaitu  lada  hitam (Majeed  &  Prakash,  2000).Kandungan  kimia lada  hitam  terdiri  dari  beberapa  bahan  aktif seperti phenolic  amides,  phenolic  acids, dan
flavonoid yang  bersifat  antioksidan(Meghwal  & Goswami, 2012).
Antioksidan  mampu  melindungi  tubuh  dari kerusakan  yang  disebabkan  oleh  oksigen reaktif.Penggunaan  senyawa  antioksidan  juga sebagai  anti  radikal  bebas  yang  saat  ini semakin  meluas  seiring  dengan  semakin
Vol. 2 No. 2 November 2014 : hal. 86-90 ISSN : 2338-4344
besarnya  pemahaman  masyarakat  tentang peranannya dalam menghambat penyakit degeneratif
seperti penyakit jantung, arteriosclerosis ,  kanker,  serta  gejala  penuaan (Tahir  dkk,  2003).Antioksidan  digunakan  untuk memperkecil  terjadinya  prosesoksidasi  dari lemak  dan  minyak,  memperkecil  terjadinya proses  kerusakan  dalam  makanan,  memper- panjang  masa  pemakaian  dalam  industri  ma- kanan,  meningkatkan  stabilitas  lemak  yang terkandung  dalam  makanan  serta  mencegah hilangnya  kualitas  sensori  dan  nutrisi  (Hernani dan Raharjo, 2005).
Menurut  Singh et  al (2008)  dalam  uji  anti- oksidan  yang  dilakukan  terhadap  ekstrak  pe- troleum ether lada hitam secara in vitro berhasil membuktikan  bahwa  ekstrak  lada  hitam  efektif menghambat  beberapa  radikal  bebas.Melihat berbagai  kandungan  zat  yang  terdapat  dalam lada hitam yaitu salah satunya sebagai sumber antioksidan  maka  perlu  dilakukan  penelitian mengenai  pengaruh  penambahan  ekstrak  lada hitam  pada  pakan.    Hewan  uji  yang  digunakan yaitu  mencit  dengan  memberikan  penambahan ekstrak lada hitam pada pakan  mencit.  Mencit yang  digunakan  diamati  perilaku  kognitfnya yang meliputi daya ingat belajar labirin dan da- ya ingat renang setelah diberikan penambahan ekstrak  lada  hitam  pada  pakan  yang  me- rupakan  salah  satu  perubahan  fungsi  yang akan  ditunjukkan  pada  proses  penuaan  suatu organisme.
Kognitif  adalah  kemampuan  berpikir  dan  mem- berikan  rasional,  termasuk  proses  belajar,  me- ngingat,  menilai,  orientasi,  persepsi  dan  mem- perhatikan.  Gangguan  fungsi  kognitif  erat  kait- annya  dengan  fungsi  otak  karena  kemampuan untuk berpikir akan dipengaruhi oleh otak.
Ivey (1993),mengatakan bahwa perilaku kognitif didasarkan  pada  asumsi  bahwa  perilaku  ma- nusia  secara  langsung  dipengaruhi  oleh  pemi- kiran,  perasaan,  proses  fisiologis,  serta  pada perilaku.  Jadi bila ingin mengubah perilaku dari manusia, maka tidak hanya sekedar mengubah perilakunya  saja,  namun  juga  menyangkut aspek kognitifnya.
Secara  fisiologi  ingatan  merupakan  hasil  dari perubahan kemampuan penjalaran sinaptik dari suatu  neuron  ke  neuron  berikutnya.Ingatan dibagi  menjadi  tiga  yaitu  ingatan  jangka panjang,  ingatan  jangka  pendek,  dan  ingatan jangka  menengah.    Faktor  yang  menyebabkan menurunnya  ingatan  antara  lain  kurang  tidur, tekanan  darah  tinggi,  terlalu  banyak  meng- konsumsi  alkohol,  stres  kronis,  dan  kerusakan dalam hubungan sel saraf otak.  Dalam proses belajar  juga  sangat  penting  sebab,  dengan dengan  belajar  maka  semua  sel-sel  otak  akan
ikut aktif sehingga proses memori menjadi lebih mudah mengingat (Venustri, 2006).
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  pe- ngaruh  pemberian  ekstrak  lada  hitam  terhadap daya ingat mencit (Mus musculus L.) jantan.

## BAHAN dan METODE

## Pembuatan  ekstrak  lada  hitam  dan  peracik- an pakan
Lada  yang  digunakan  merupakan  lada  hitam yang diperoleh dari petani buah lada di provinsi Lampung.Lada dipilih yang bernas lalu dikeringkan.Kemudian  lada  hitam  diekstraksi dengan  metode  maserasi  menggunakan  dua macam pelarut, yaitu etanol dan air.
Masing-masing  ekstrak  kemudian  ditambahkan pada  pakan  mencit  dengan  komposisi  0,3  g dalam  setiap  1  kg  pakan  lalu  dicetak  kembali. Pakan  dicetak  membentuk  batangan  dengan panjang  4-5  cm  dan  diameter  0,5-1  cm, kemudian  dikeringkan.  Pakan  inilah  yang  akan diberikan  pada  mencit  hewan  uji  selama  3 bulan.  Setelah  3  bulan  perlakuan  mencit  yang berumur  4  bulan  dan  6  bulan,  mencit  tersebut akan berumur 7 bulan dan 9 bulan.

## Pemeliharaan dan perlakuan ekstrak
Mencit  dipelihara  dalam  kandang  berupa  bak plastik  yang  diberi  tutup  kawat  dengan  ukuran 20x40  cm.    Dasar  kandang  diberi  serbuk  kayu dan  dalam  satu  kandang  dipelihara  5  ekor mencit.    Selama  pemeliharaan,  mencit  diberi pakan  berupa  pelet  pakan  ayam  dicampur tepung  jagung  dan  tepung  terigu  yang  dicetak ulang  berbentuk  batang  dengan  diameter sekitar  1cm  sebagai  langkah  habituasi  1  bulan dengan  pemberian  pakan  sebelum  perlakuan menggunakan  ekstrak  lada  hitam  selama  3 bulan  dan  diberi  minum  dalam  botol  minum khusus mencit.
Mencit  yang  digunakan  20  ekor  mencit  muda dan 20 ekor mencit tua.  Masing-masing mencit diberi  4  perlakuan  ekstrak.  Pola  pengelompok- kan  perlakuan  yang  dipakai  adalah  sebagai berikut:
1.  K0  adalah  kelompok  mencit  yang  tidak  di- beri  ekstrakdengan  pakan  pelet  yang  di- cetak  ulang  dalam  bentuk  batang  berdia- meter 0,5-1,0 cm dan memiliki berat 4-5 g.
2.  K1 adalah kelompok mencit yang diberi eks- trak  air  dengan  pakan  pelet  yang dicetak u- lang  dalam  bentuk  batang  berdiameter  0,5- 1,0 cm dan memiliki berat 4-5 g.
3.  K2 adalah kelompok mencit yang diberi eks- trak etanol dengan pakan pelet yang dicetak ulang dalam bentuk batang berdiameter 0,5- 1,0 cm yang memiliki berat 4-5 g.
4.  K3 adalah kelompok mencit yang diberi eks- trak  campuran  (air  dan  etanol)  dengan pakan  pelet  dalam  bentuk  batang  berdia- meter 0,5-1,0 cm yang memiliki berat 4-5 g.

## Parameter yang diamati
Parameter  yang  diamati  dalam  penelitian  ini adalah  kecepatan  daya  ingat  mencit  setelah diberi  ekstrak  lada  hitam  pada  masing-masing perlakuan.  Parameter  pertama  yang  diamati yaitu dengan menggunakan labirin dengan luas 100x100 cm, labirin merupakan jalur/jalan yang rumit,  berliku-liku  serta  memiliki  jalan  yang buntu,  dimana  mencit  di  masukkan  ke  dalam labirin  sebagai  proses  belajar,  kemudian menghitung  waktu  yang  dibutuhkan  mencit untuk  keluar  dari  labirin.  Setelah  selesai  labirin di  semprot  dengan  alkohol  untuk  menghapus jejak  mencit  dan  dibiarkan  beberapa  saat sampai  kering,  dan  parameter  kedua  meng- gunakan  daya  ingat  (renang)  yaitu  dengan menggunakan  bak  besar  berdiameter  50  cm, dan  berisi  air  dimana  di  dalam  bak  yang  berisi air  di  letakkan  balok  dengan  ukuran  15x15  cm di  ujung  sebagai  pijakan  mencit  yang  telah diberi tanda garis berwarna putih sebagai akhir dari  uji  pengamatan  yang  diamati  dengan panjang  35  cm  dari  awal  mencit  dilepaskan  ke dalam  bak  sampai  mencit  berhenti  di  balok pijakan,  dan  mencatat  waktu  (detik)  tempuh mencit  tersebut  dengan  menggunakan  stop- watch dan kamera pada setiap perlakuan yang akan  diuji  dengan  pengulangan  sebanyak  5 kali.

## Analisis data
Data yang diperoleh dari hasil perlakuan mencit uji  kognitif  labirin  dan  renang  akan  dianalisis secara  deskriptif  dan  dengan  menggunakan Analisis  Ragam  (ANARA)  2  jalur.  Jika  ada perbedaan yang nyata maka akan dilakukan uji lanjut  dengan  menggunakan  Uji  Beda  Nyata Terkecil (BNT) pada taraf 5% untuk mengetahui perbandingan dari masing-masing kelompok.

## HASIL dan PEMBAHASAN

## 1.  Uji Labirin Mencit.
Hasil  uji  perbandingan    rata-rata  waktu  (detik) tempuhuji  mencit,  antara  mencit  umur  7  bulan dan  mencit  umur  9  bulan  disajikan  dalam (Tabel 1).
Pada  perbandingan  antara  kelompok  umur  7 bulan  dan  9  bulan  terdapat    perbedaan  yang nyata  antara  rata-rata  waktu  (detik)  labirin mencit  umur  7  bulan  dan  umur  9  bulan  pada kelompok kontrol dan kelompok perlakuan pada penambahan  ekstrak  air  ,  etanol  dan  ekstrak campuran  (air  dan  etanol)  lada  hitam.    Fungsi belajar  dinilai  dari  waktu  yang  digunakan
pertama  kali  mengenali  lingkungan  disekitar labirin  maupun  renang,  waktu  retensi  yang menggambarkan  fungsi  kognitif  penyimpanan memori dinilai dengan respon sewaktu dilakukan  uji  ulangan  dengan  kondisi  yang sama  dan  secara  pasif  membiarkan  subjek menentukan  dan  memutuskan  sendiri  sesuai dengan fungsi kognitifnya. Lama retensi adalah waktu  retensi  pada  perlakuan  pengulangan mencit.Rata-rata  lama  retensi  waktu  (detik) kontrol  mencit  umur  7  bulan  mencapai 288detik, dan  pada mencit umur 9 bulan lama retensi  menurun  dengan  lama  rata-rata  retensi 151 detik.
Tabel 1 . Perbandingan  rata-rata  waktu  (detik) tempuh uji labirin mencit jantan antara kelompok umur 7 dan 9 bulan.
No Perlakuan Waktu (detik) ± SD 7 bulan 9 bulan 1 K 288 ± 88,24 a 151 ± 100,36 c 2 C 133 ± 62,90 ab 83  ± 68,42 cd 3 E 53  ± 24,39 b 71 ± 17,66 d 4 A 36 ± 23,07 b 38 ± 19,40 d
Keterangan :  Nilai yang diikuti pada huruf yang sama tidak berbeda  nyata  pada  uji  BNT  dengan  taraf signifikans  5%;  (K)  Kontrol,  (C)  Ekstrak Campuran  (Air  dan  Etanol),  (E)  Ekstrak Etanol, dan (A) Ekstrak Air.
Pada  penambahan  ekstrak  air,  etanol  dan campuran  lada  hitam  tidak  terlihat  beda  nyata. Karena,  pada  kelompok  mencit  umur  7  bulan dengan perlakuan penambahan ekstrak air dan etanol  rata-rata  lama  retensi  menurun  36detik dan  53detik  mampu  meningkatkan  memori daya  ingat  dibandingkan  kontrol.    Sedangkan pada  mencit  umur  9  bulan  meningkat  dengan rata-rata  lama  retensi  38detik  sampai  71detik tidak  meningkatkan  fungsi  memori  secara bermakna.  Jika  lama  retensi  mencit  menun- jukkan waktu lama pada saat terjadinya proses belajar  dan  mengingat  mencit  yang  berlang- sung pada neurotransmisi kolinergik maka pada penambahan ekstrak campuran (air dan etanol) lada  hitam  pada  mencit  umur  7  bulan  juga dapat  terlihat  bahwa  terjadinya  peningkatan lama retensi yang baik dengan adanya penam- bahan dosis pada ekstrak lada hitam dibanding kontrol  dimana  rata-rata  lama  retensi  133detik, dan  terjadi  penurunan  pada  mencit  umur  9 bulan dengan lama retensi 83 detik yang mam- pu  meningkatkan  fungsi  kognitif  dibandingkan dengan kontrol.
Perbandingan  rata-rata  waktu  (detik)  uji  labirin mencit  umur  7  bulan  dan  umur  9  bulan  antara kelompok perlakuan menunjukkan adanya beda nyata  antara  rata-rata  waktu  (detik)  kelompok kontrol  dengan  kelompok  pemberian  ekstrak lada hitam.
Hasil  penelitian  membuktikan  bahwa  pengaruh ekstrak  lada  hitam  dengan  perlakuan  ekstrak air,  ekstrak  etanol  dan  ekstrak  campuran  (air dan  etanol)  dapatmemberikan  hasil  yang  baik pada fungsi kognitif mencit.  Hal ini dikarenakan efek  oksidan  dari  ekstrak  lada  hitam  yang terkandung didalamnya lebih banyak dan dapat disebabkan  karena  meningkatnya  kapasitas oksigen  dalam  kerja  sel  saraf  mampu  mening- katkan dan mampu menghasilkan respon gerak yang  lebih  baik.Dengan  pemberian  antioksidan dari ekstrak lada hitam diharapkan dapat mem- berikan  pengaruh  positif  pada  fungsi  kognitif mencit.  Kandungan  lada  hitam  selain  sebagai antioksidan  juga  memiliki  kandungan  senyawa fenol.  Rachmi melaporkan bahwa ekstrak daun M.oleifera mengandung  gugus  fenol  yang mempunyai efek protektif dari oksidatif. Shidharaju  dan  Beker  juga  melaporkan  bahwa senyawa bioaktif yang utama pada gugus fenol masih merupakan golongan flavonoid.
Menurut  Gupta  (2003), Centella  asiatica (L.) Urban  dapatmeningkatkan  fungsi  kognitif  dan oksidatif  stressyang  diinduksi  dengan  strepto- zotocin  secara  intracerebroventricular  pada tikus dengan penyakit Alzheimer. Centella asia- tica (L.) Urban juga dapat  meningkatkan fungsi kognitif  dan  oksidatif  stress  pada  tikus  normal. Ekstrak  cair Centella  asiatica (L.)  Urban  yang meningkatkan  fungsi  kognitif  pada  dosis  200 mg/kg BB dan 300 mg/kg BB.

## 2.  Uji Renang Mencit.
Hasil perhitungan perbandingan rata-rata waktu (detik)  tempuh  mencit,  antara  mencit  umur muda  (7  bulan)  dan  mencit  umur  tua  (9  bulan) disajikan dalam (Tabel 2).
Tabel 2.  Perbandingan rata-rata (detik) tempuh renang  mencit  jantan  antara  kelom- pok umur 7 dan 9 bulan.
No Perlakuan Waktu (detik) ± SD 7 bulan 9 bulan 1 K 12,12 ± 9,10 a 6,76 ± 4,61 a 2 C 14,16 ± 19,06 a 5,48 ± 2,95 a 3 E 4,96  ± 2,52 a 3,8 ± 0,80 a 4 A 8,2 ± 6,21 a 2,7 ± 1,65 a Keterangan :  Nilai yang diikuti pada huruf yang sama tidak berbeda nyata pada uji BNT dengan taraf signifikans 5%; (K) Kontrol, (C) Ekstrak
Campuran (Air dan Etanol), (E) Ekstrak Etanol, dan (A) Ekstrak Air.
Perlakuan  ekstrak  air  lada  hitam  pada  mencit umur  7  bulan  rata-rata  lama  retensi  8,2detik tidak mampu meningkatkan kemampuan kognitif mencit, pada mencit umur 9 bulan rata- rata  lama  retensi  menurun  2,7  detik  mampu meningkatkan fungsi kognitif.  Sedangkan pada perlakuan  ekstrak  etanol  lada  hitam  mencit umur  7  bulan  lama  rata-rata  retensi  4,9  detik, pada mencit umur 9 bulan lam rata-rata retensi
3,8  detik.  Pada  mencit  perlakuan  ekstrak  cam- puran (air dan etanol) lada hitam umur 7 bulan lama rata-rata retensi nya 4, 16 detik dan pada mencit  umur  9  bulan  lama  rata-rata  retensi mencapai 5, 48 detik.
Hasil uji statistik ANARA, menunjukkan  adanya beda nyata pada lama rata-rata retensi mencit. perbandingan  rata-rata  (waktu)  renang  mencit umur 7 bulan terdapat adanya beda nyata pada perlakuan  ekstrak  campuran.  Sedangkan  pada perbandingan mencit umur 9 bulan hanya pada ekstrak  air  yang  terlihat  adanya  beda  nyata. Hal ini  disebabkan  karena  meningkatnya  kapa- sitas oksigen dalam kerja sel saraf mampu me- ningkatkan  dan  mampu  menghasilkan  respon gerak  yang  lebih  baik.  Respon  berupa  gerak karena  telah  mengingat  dan  menemukan  kem- bali jalan keluar labirin atau balok pijakan dalam air  uji  renang  juga  akan  meningkat  sehingga waktu  untuk  menyelesaikan  uji  labirin  dan  uji renang menjadi lebih cepat.
Menurut soewolo (2005)  dengan meningkatnya daya  ingat  mencit  juga  dapat  disebabkan semakin baiknya metabolisme tubuh sehubung- an  dengan  meningkatnya  kada  hemoglobin darah  yang  banyak  mengandung  O 2 .  Mening- katnya kapasitas oksigen  maka kerja sel saraf meningkat  dan  dapat  menghasilkan  respon gerak  yang  lebih  baik.  Buzan  (2003)  menyata- kan  bahwa  oksigen  adalah  sumber  energi utama  otak.  Kemampuan  kognitif  pada  mencit tua  yang  semakin  menurun  fungsi  kognitifnya, akibat  umur  yang  semakin  tua  sehingga  daya ingat  nya  dapat  berkurang.  Secara  fisiologi ingatan  merupakan  hasil  dari  perubahan  ke- mampuan penjalaran sinaptik dari suatu neuron ke  neuron  berikutnya.  Ingatan  dibagi  menjadi tiga  yaitu  ingatan  jangka  panjang,  ingatan jangka  pendek,  dan ingatan  jangka  menengah. Faktor yang menyebabkan menurunnya ingatan antara  lain  kurang  tidur,  tekanan  darah  tinggi, terlalu  banyak  mengkonsumsi  alkohol,  stres kronis,  dan  kerusakan  dalam  hubungan  sel saraf  otak.    Proses  dalam  belajar  juga  sangat penting  sebab,  dengan  belajar  semua  sel-sel otak  akan  ikut  aktif  sehingga  proses  memori menjadi  lebih  mudah  mengingat  (Venustri, 2006).

## SIMPULAN
Dari hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa :
1.  Mencit  umur  9  bulan  cendrung  mengingat jalur  dalam  uji  labirin  dengan  lama  retensi 151  detik,  tetapi  cendrung  tidak  berbeda dengan  mencit  umur  7  bulan  dalam mengingat  balok  pijakan  pada  uji  renang dengan lama retensi 12,12 detik.
2.  Melalui  uji  labirin  daya  ingat  mencit  umur  7 bulan  dan  mencit  umur  9  bulan  yang  diberi ekstrak  lada  hitam  terbukti  lebih  baik  dari pada yang tidak diberi ekstrak.
3.  Dalam  uji  renang  daya ingat  mencit  umur  7 bulan  lebihbaik  pada  yang  diberi  ekstrak campuran  dengan  lama  retensi  14,16  detik, dan  pada  mencit  umur  9  bulan  hanya ekstrak  air  yang  bisa  membuat  daya  ingat lebih baik dengan lama retensi 2,7 detik.

## DAFTAR PUSTAKA
Buzan.    2003. Head  Strong. Jakarta.    PT Gramedia.
Gupta.    2003 . Pengaruh  Triterpen  Total
Pegagan (Centella asiatica(L)Urban) Terhadap  Fungsi  Kognitif  Belajar  dan Mengingat  pada  Mencit  Jantan  Albino(Mus musculus ). Jurnal Penelitian Sains . Universitas Sriwijaya.
Hernani,  M  dan  Raharjo.    2005. Tanaman berkhasiat  Antioksidan .    Penebar  Swadya. Jakarta.
Ivey,    A  E.    1993. Conseling  and  Psychothe- rapy    A  Multicultural  Perspective .    Boston: Allyn  and  Bacon  a  Division  of  Simon  and Schuster,  Inc.
Majeed  dan  Prakash,  L.    2000. The Medicinal Uses  of  Pepper. International  Pepper
News. Vol. XXV, No.  1 Jan-Mar 2000:  23- 31.
Meghwal    M  and  Goswami  TK.    2012. Nutri- tional  Constituent  of  Black  Pepper  as Medicinal  Molecules: A  Review.  1:  129. doi:10.4172/scientificreports.12. Rachmi  E. Pengaruh  Antioksidan  dari  Ekstrak Daun  M.  oleifera  Terhadap  Hepatotok- sisitas  CCL4 .  (Tesis).  Universitas  Bra- wijaya, Malang. 2004.
Shidharaju  and  Beker. Oxidative  Stress  In  The
Progression Of Alzheimer Disease In The Frontal Cortex. Neurologi. 2010; 69(2):155-167.
Singh R, Singh N, Saini BS, & Rao HS. 2008. In vitro antioxidant activity of pet ether extract of  black pepper. Indian  J  Pharmacol .  Aug. 2008. Vol.40. Issue 4:147-151.
Soewolo  .    2005. Fisiologi  Manusia. Malang  . Penerbit  Universitas  Negri  Malang  (UM PRESS).
Tahir,  I.,  Wijaya,  K.,  Widianingsih,  D.,    (2003). Seminar on Chemometrics Chemistry Dept Gadjah Mada University, . Terapan Analisis
Hansch Untuk Aktivitas Antioksidan senyawa  Turunan  Flavon/Flavonol .  25
Januari.
Venustri,  L.  2006. Cara  Memori  Bekerja. http://www.pikiran-rakyat.com/cetak/2006. 2 Agustus 2009.

## 90 /  Biologi Eksperimen dan Keanekaragaman Hayati                                                                                       Monica Safitri