Jurnal Pharmascience, Vol. 04 , No.02, Oktober 2017, hal: 219 - 226 ISSN-Print. 2355 – 5386 ISSN-Online. 2460-9560 http://jps.unlam.ac.id/

## Research Article

## Profil Glukosa Darah Tikus Putih Setelah Pemberian Ekstrak Minyak Ikan Patin ( Pangasius hypopthalmus ) Sebagai Alternatif Antidiabetes
*Hidayaturrahmah 1 , Heri Budi Santoso 1 , Nurlely 2
1 Program Studi Biologi, FMIPA, Universitas Lambung Mangkurat, Banjarbaru 2 Program Studi Farmasi, FMIPA, Universitas Lambung Mangkurat, Banjarbaru *Email: rahmahidayahipb09@yahoo.com

## ABSTRAK
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian ekstrak minyak ikan  patin  dan  dosis  ekstrak  minyak  ikan  patin  yang  tepat  untuk  menurunkan  kadar glukosa  darah  pada  tikus  jantan  kondisi  hiperglikemia.  Penelitian  ini  merupakan penelitian  ekperimental.  Rancangan  penelitian  yang  digunakan  adalah  Rancangan Acak  Lengkap  (RAL)  dengan  6  perlakuan  pada  4  ulangan.  Perlakuan  terdiri  dari  1. Kontrol  normal,  2.  Kontrol  positif,  3.  Kontrol  negative,  4.  Kelompok  A  (Ekstrak minyak ikan patin A), 5. Kelompok B (Ekstrak minyak ikan patin B) dan 6. Kelompok C  (Ekstrak  minyak  ikan  patin  C).  Hasil  penelitian  memperlihatkan  bahwa  ekstrak minyak  ikan  patin  (EMIP)  berpengaruh  terhadap  profil  glukosa  darah  tikus  putih. Dosis  yang    dapat    menurunkan  kadar  glukosa  darahpaling  tinggi  pada    tikus  putih adalah 72,8 mg/kg BB
Kata kunci : diabetes melitus, ikan patin, minyak.

## ABSTRACT
This  study aims  to determine the effect  of catfish oil extract and dosage of catfish oil extract proper to reduce blood glucose level in male rats hyperglycemia condition. This research  is  an  experimental  research.  The  research  design  used  was  Completely Randomized  Design  (RAL)  with  6  treatments  on  4  replications.  Treatment  consists  of  1. Normal control, 2. Positive control, 3. Negative control, 4. Group A (Catfish oil extract A), 5.  Group  B  (Catfish  oil  extract  B)  and  6.  Group  C  (Catfish  oil  extract  C).  The  results showed that catfish oil extract (EMIP) had an effect on blood glucose profile of white rat. The highest dose in reducing blood glucose levels of white rats was 72.8 mg / kg BW Keywords: diabetes melitus, catfish, oil

## I. PENDAHULUAN
Penyakit diabetes mellitus merupakan  penyakit  yang  membutuhkan
perhatian khusus karena jumlah penderitanya terus mengalami peningkatan dari  tahun  ke  tahun.  Berdasarkan  data
World Health Organization (WHO) (2015), kenaikan jumlah penderita diabetes mellitus  di  Indonesia  dari  8,4  juta  pada tahun  2000  diperkirakan  akan  menjadi 21,3  juta  pada  tahun  2030.  Faktor-faktor yang  berhubungan  dengan  peningkatan jumlah penderita diabetes mellitus disebabkan  oleh  perubahan  pola  makan masyarakat,  gaya  hidup  (Akrom et  al. , 2014).
Pengobatan  yang  biasa  dilakukan oleh  penderita  diabetes  mellitus  yaitu dengan  cara  suntikan  atau  pemberian  obat kimia  antidiabetes.  Pengobatan  dengan cara  tersebut  memiliki  efek  samping  dan membutuhkan  biaya  yang  mahal  karena penggunaannya  dalam  jangka  waktu  yang lama, sehingga penderita diabetes mellitus menggunakan cara tradisional untuk mengobati  dan  mengendalikan  kadar glukosa  darah.  Umumnya  bahan  yang digunakan  adalah  bahan  alam  berupa tanaman herbal (Prameswari & Widjanarko, 2014). Sedangkan pengobatan dengan  mengggunakan  bahan  alam  dari hewan  masih  sangat  sedikit  sekali.  Maka dari  itu,  produk  hewani  harus  lebih memeriahkan  tren  makanan  fungsional  di pasar-pasar  negeri  ini,  karena  kandungan nutrisinya  jauh  lebih  fungsional  daripada tumbuhan.
Berdasarkan hal  tersebut maka perlu dicari obat antidiabetes yang memiliki efek samping relatif rendah, harga yang murah,
mudah  didapat,  dan  yang  berasal  dari ekstrak  hewan  dan    salah  satunya  berasal dari ekstrak ikan patin. Kandungan minyak pada ikan patin lebih banyak dibandingkan dengan  jenis  ikan  tawar  lainnya  sehingga memiliki  potensi  untuk  diekstrak  sebagai sumber  asam  lemak  yang  bermanfaat (Isnani, 2013).
Ikan patin mempunyai potensi dalam pemanfaatan  minyaknya  sebagai  sumber asam  lemak  tak  jenuh  Omega-3  dan Omega-6  dalam  peningkatan  pemenuhan kebutuhan  pangan  dan  gizi  masyarakat. Menurut  Isnani  (2013)  dalam  Kromhout dkk . (1985)  menyatakan  bahwa  asam lemak  ini  diketahui  dapat  mencegah  dan mengobati  berbagai  macam  penyakit degeneratif  salah  satunya  adalah  diabetes melitus.
Berdasarkan  hal  tersebut,  suatu tantangan  bagi  peneliti  untuk  menjadikan ekstrak minyak ikan patin sebagai kandidat suplemen  yang  kedepannya  nanti  dapat berkompeten sebagai alternatif antidiabetes  mellitus. Indikator yang dapat dilakukan  untuk  penilaian  antidiabetes adalah  analisa  profil  darah  pada  tikus sebagai hewan model sebelum diujikan ke manusia

## II. METODE PENELITIAN

## A. Bahan dan Alat
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini yaitu ikan patin segar yang di
dapat dari BBAT (Balai Budidaya Ikan Air Tawar) Mandiangin, NaCl 2,5 %,
akuades,bentonit  1  %,    tikus  putih  yang berasal dari Yogjakarta, sekam padi, pakan standar, aloksan, Na-CMC 0,5%, glibenklamid,  strip  glukosa,  alcohol  70%, dan kapas.
Alat yang digunakan dalam penelitian  ini  yaitu  pisau,  timbangan, kompor,  panci stainless  steel , hotplate stirer  magnetic ,  spatula,  corong  pisah, sentrifuge,  gelas  beaker,  tabung  reaksi, tube , kandang, botol minum tikus , timbangan hewan, spuit injeksi, sonde oral, erlenmayer, neraca analitik dan Glukometer.

## B. Jalannya Penelitian

## 1. Pengambilan Sampel Ikan Patin
Pengambilan  sampel  ikan  patin dilakukan  di  BBAT  (Balai  Budidaya  Ikan Air Tawar) Mandiangin. Sampel ikan patin diambil  kemudian  dicuci  bersih  dan tiriskan,  setelah  itu  ditimbang  sekitar @700-750gram  dengan  total  2kg  untuk persiapan ekstraksi.

## 2. Ekstraksi Minyak Ikan Patin
Metode  ekstraksi  yang  digunakan adalah metode wet rendering yang telah di modifikasi oleh Hidayaturrahmah (2015).

## 3. Pemeliharaan dan Perlakuan Hewan Uji
Hewan  uji  yang  digunakan  dalam penelitian ini adalah tikus ( Rattus norvegicus ) jantan yang berumur sekitar 2- 3  bulan.  Hewan  uji  ini  diperoleh  dari Yogjakarta  sehingga  didapatkan  subjek yang  homogen.  Sebelum  diperlakukan sesuai  rancangan  penelitian,  tikus  terlebih dahulu  diaklimitasi  selama  1  minggu. Tikus  diberi  makan,  minum,  dan  kandang yang  sama  dengan  tujuan  agar  tidak mempengaruhi  hasil  dan  tikus  mampu beradaptasi  dengan  kondisi  tempat  uji (laboratorium).  Hewan  uji  dibagi  secara acak  menjadi  6  kelompok  masing-masing terdiri dari 4 ekor tikus putih jantan.
4. Pembuatan Larutan Penginduksi
Hewan uji diinduksi aloksan monohidrat  dengan  dosis  150  mg/kg  BB (Sujono  &  Munawaroh,  2009)  yang dilarutkan  dengan Aquabidestilasi  steril forinjection diinjeksikan secara intraperitonial.  Aloksan  monohidrat  yang telah  dilarutkan  harus  segera  diinjeksikan sebelum  terjadi  perubahan  warna  dari merah  muda  menjadi  bening.  Dosis aloksan  yang  diberikan  pada  tikus  standar (200  g)  yaitu  200  g/1000  g  x  150  mg/kg BB  =  30  mg/200  g  BB  tikus.  Volume pemberian  maksimal  pada  tikus  standar yang  diinjeksikan  secara  intraperitonial yaitu 0,5 mL (Dewi, 2013).
Hari  pertama  kadar  glukosa  darah tikus  diukur  sebagai  kadar  glukosa  awal (normal).  Tikus  diinjeksi  aloksan  secara intraperitoneal,  lalu  tiga  hari  setelah diinjeksi  aloksan,  kadar  glukosa  darah tikus  diukur  lagi  untuk  dibandingkan dengan  kadar  glukosa  darah  pada  hari pertama,  yaitu  sebelum  diinjeksi  aloksan. Apabila  terjadi  kenaikan  kadar  glukosa darah  tikus  yaitu  menjadi  ±200  mg/dL, maka tikus dianggap sudah diabetes (Che- ma, 2015).

## 5. Pembuatan Dosis Glibenklamid
Dosis  Glibenklamid  pada  manusia = 5 – 15 mg/hari (Siwaka, 2013). Konversi dosis manusia (70kgBB) ke tikus 200 gr = 0,018. Jadi  dosis  yang diberikan pada tiap tikus yaitu : 200 gr = 5 mg X 0,018 = 0,09 mg/200  gr  tikus  (Dewi,  2013).  Pada penelitian  ini,  konsentrasi  glibenklamid yang  diberikan  pada  tikus  standara  dalah 0,45 mg/kg BB.

## 6. Rancangan Penelitian
Penelitian ini merupakan penelitian ekperimental.  Rancangan  penelitian  yang digunakan adalah Rancangan Acak Lengkap  (RAL)  dengan  6  perlakuan  pada 4 ulangan. Pola pengelompokan perlakuan yaitu:
1. Kontrol normal :  Perlakuan yang tidak diberi aloksan dan diberi Na-CMC 0,5%
2. Kontrol :  Perlakuan yang
positif diberi aloksan dan glibenklamid dengan dosis 0,45 mg/kg BB 3. Kontrol negatif :  Perlakuan yang diberi aloksan dan Na-CMC 0,5% 4. Kelompok A  :  Perlakuan yang
diberi aloksan dan ekstrak minyak ikan patin (EMIP) dengan dosis 18,2 mg/kg BB 5. Kelompok B :  Perlakuan yang diberi aloksan dan ekstrak minyak ikan patin (EMIP)
dengan dosis 36,4
mg/kg BB 6. Kelompok C : Perlakuan yang diberi aloksan dan ekstrak minyak ikan
patin (EMIP)
dengan dosis 72,8 mg/kg BB

## 7. Penentuan Kadar Glukosa Darah
Kadar glukosa darah diukur dengan menggunakan  glukometer.  Sampel  darah diteteskan  pada  test  strip  glukosa.  Kadar glukosa  darah  yang  diamati  berada  dalam satuan  mg/dL  (Mokuna et  al. ,  2014).
Setelah  masa  adaptasi  semua  tikus dipuasakan  selama  12  jam.  Keesokan harinya,  dilakukan  pengukuran  glukosa darah  puasa  (GDP)  masing-masing  tikus sebagai  data  awal.  Setelah  itu  tikus  dibagi menjadi  6  kelompok  sesuai  dengan perlakuan  kelompok.  Enam  hari  pasca
injeksi  aloksan,  glukosa  darah  puasa diukur  kembali.  Setelah  terjadi  kondisi hiperglikemia pada semua kelompok maka penelitian  dilanjutkan  dengan  perlakuan oral pemberian Na-CMC 0,5%, glibenklamid, dan EMIP sesuai perlakuan. Setelah  14  hari  dilakukan  pemeriksaan kadar glukosa puasa pada semua kelompok.  Data  penurunan  kadar  glukosa darah puasa didapatkan dari KGD sebelum injeksi  aloksan  (hari  ke-0),  KGD  7  hari pasca injeksi aloksan (hari ke-7), dan KGD 14  hari  pasca  perlakuan  (hari  ke-14) (Wicaksono et al. , 2014).

## C. Analisis Data
Data  yang  didapat  dari  uji  kadar glukosa darah dan histologi pankreas pada tikus  dilakukan  uji  normalitas  distribusi data dan homogenitas varians data dengan menggunakan  uji Kolmogorov-Smirnov dan  uji Levene .  Jika  diperoleh  data  yang terdistribusi  normal  dan  homogen,  maka dilakukan  uji  parametrik  Analisis  Variasi (ANOVA) dan dilanjutkan dengan analisis HSD  (uji Tuckey ).  Jika  data  percobaan tidak  terdistribusi  normal  dan  homogen, maka dilakukan uji non-parametrik menggunakan  uji Kruskal-Wallis dan dilanjutkan dengan uji Mann-Whitney .

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN
Ekstraksi minyak ikan patin menggunakan  tiga  ekor  ikan  patin  seberat
2  kg  dengan  berat  masing-masing  ikan 700-750  gram  berumur  sekitar  6-7  bulan dan  diperoleh  ekstrak  minyak  ikan  patin sebanyak 38-41 gram. Hasil lebih lengkapnya bisa dilihat pada tabel berikut : Tabel I. Hasil ekstraksi minyak ikan patin
Tahap Ekstraksi Minyak Ikan Patin Hasil Ekstraksi Minyak Ikan Patin Berat total ikan patin @700-750 gram= total 2kg Aquadest 6 Liter Ampas Ikan 1,2 Kg Minyak + Aquadest 5,8 Liter Minyak Kasar 70-90 mL Bentonit yang diperlukan 0,7-0,9 gram Minyak Murni ikan patin 38-41 gram

## IV. KESIMPULAN
Gambar 1. Ekstrak minyak ikan patin

## 1. Penurunan Kadar Glukosa Darah
Berdasarkan analisis statistik menggunakan  uji Kruskal – Wallis dan dilanjutkan  dengan  uji Mann – Whitney didapatkan  hasil  pengukuran  KGD  pasca perlakuan (Tabel1). Hasil yang didapatkan pada perlakuan C memiliki pengaruh yang signifikan, sedangkan untuk hasil pengukuran  dengan  perlakuan  negatif, positif, perlakuan A dan perlakuan B tidak berpengaruh signifikan.
Tabel  I. Nilai  rata-rata  ±  standar  deviasi  kadar  glukosa  darah  (mg/dl)  pada masing-masing hari.
Perlakuan Hari ke- 0 7 14 N 83 ± 5,01 105,75 ± 7,64* 96,5 ± 6,86* - 403 ± 71,11 305,75 ± 132,01 263 ± 185,60 + 347,75 ± 109,49 184 ± 14,85 103,5 ± 6,85 A 333,75 ± 116,13 202 ± 116,07 163,75 ± 52,35 B 343,75 ± 133,66 209,5 ± 78,97 111 ± 26,05 C 345,75 ± 154,08 98 ± 6,06* 87,25 ± 12,31*
* Berbeda secara bermakna pada taraf uji p < 0,05, dibandingkan dengan kelompok kontrol negatif Keterangan : Klp = Kelompok perlakuan
N = Perlakuan kontrol normal tanpa induksi aloksan dan diberi Na-CMC 0,5%
- = Perlakuan kontrol negatif dengan induksi aloksan dan diberi Na-CMC 0,5%
+ = Perlakuan kontrol positif dengan induksi aloksan dan diberi glibenklamid 0,45 mg/kg BB A = EMIP dengan induksi aloksan dan diberi ekstrak minyak ikan patin dosis 18,2 mg/kg BB B = EMIP dengan induksi aloksan dan diberi ekstrak minyak ikan patin dosis 36,4 mg/kg BB
C = EMIP dengan induksi aloksan dan diberi ekstrak minyak ikan patin dosis 72,8 mg/kg BB
H = Hari H0  = Kadar glukosa darah sebelum di injeksi aloksan H7  = Kadar glukosa darah setelah di injeksi aloksan H14  = Kadar glukosa darah setelah diberi perlakuan .
Gambar 2. Diagram garis penurunan kadar glukosa darah
Keterangan  :  0  =  kadar  glukosa  darah  awal  (sebelum  injeksi  aloksan),  7  =  kadar  glukosa  darah pasca  injeksi  aloksan,  dan  14  =  kadar  glukosa  darah  pasca  perlakuan  oral 85 105,75 96,5 403 305,75 263 103,5 184 347,75 333,75 202 163,75 343,75 209,5 111 345,75 98 87,25 0 50 100 150 200 250 300 350 400 450 0 7 14 Normal Negatif Positif EMIP A EMIP B EMIP C Hari Ke- Mg/d L
Kondisi hiperglikemia disebabkan karena  aloksan  secara  selektif  toksik  pada sel  beta  pankreas  yang  secara  khusus berakumulasi  pada  sel  beta  melalui ambilan  via  GLUT  2.  Aloksan  dapat menyebabkan terjadinya gangguan homeostatis  kalsium  intraseluler  dengan cara meningkatkan konsentrasi ion kalsium  bebas  sitosolik  pada  sel  β  pulau Langerhans  pankreas.  Influks  kalsium akibat  aloksan  tersebut  mengakibatkan depolarisasi  sel  β  pulau  Langerhans pankreas  yang lebih lanjut  akan membuka kanal  kalsium  tergantung  voltase  dan semakin menambah masuknya ion kalsium ke dalam sel, konsentrasi insulin meningkat  sangat  cepat,  dan  secara signifikan  mengakibatkan  gangguan  pada sensitivitas  insulin  (resistensi  insulin) perifer dalam waktu singkat (Wicaksono et al. , 2014).
Ekstrak minyak ikan patin berpengaruh  dalam  penurunan  kadar glukosa  darah  tikus  putih.  Hasil  yang didapat  dari  pengukuran  kadar  glukosa darah  pada  tikus  diabetes  mellitus  pada kurva  memperlihatkan  penurunan  yang beragam.    Dosis  pemberian  ekstrak minyak ikan patin yang memiliki pengaruh terbaik  pada  kurva  yaitu  pada  permberian dengan  perlakuan  EMIP  C  (aloksan  dan ekstrak  minyak  ikan  patin  dengan  dosis 72,8 mg/kg BB).
Minyak  ikan  bekerja  menurunkan kadar glukosa darah karena adanya dua zat yaitu, omega 3 dan albumin (Kidd, 2007). Omega  3  akan  menstimulasi  zink  ke membran  sel  dan  meningkatkan  proses sintesis  insulin  Zink  diperlukan  untuk membentuk  proinsulin  yang  akan  diubah menjadi  insulin.  Asam  lemak  omega-3 dapat  mengurangi  resiko  diabetes  mellitus pada  tikus,  pemberian  minyak  ikan  pada tikus memiliki efek penghambatan peningkatan  glukosa  darah.  Konsumsi minyak  ikan  yang  lebih  tinggi  akan meningkatkan kadar insulin didalam tubuh,  yang  mana  sel  beta  penghasil insulin mendapat rangsangan dari omega-3 yang  kemudian  memicu  akan  sekresi insulin (Soltan, 2012).

## IV. KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang telah dilakukan, dapat diambil kesimpulan bahwa  pemberian  ekstrak  minyak  ikan patin  berpengaruh  terhadap  profil  glukosa darah.  Dosis  yang  paling  berpengaruh besar  dalam  penurunan  profil  glukosa darah adalah dosis 72,8 mg/kg BB

## DAFTAR PUSTAKA
Akrom,  P.D.  Harjanti,  T.  Armansyah.
2014.  Efek  Hipoglikemik  Ekstrak Etanol Umbi Ketela Rambat( Ipomoea batatas P)
(EEUKR) pada Mencit Swiss  yang
DiinduksiAloksan . Pharmaciana. 4
(1) : 65 – 76.
Dewi, I. L. 2013. Uji Aktivitas
Antidiabetes  Ekstrak  Etanol  Daun Salam (Eugenia polyantha) Terhadap Tikus Galur Wistar yang Diinduksi Aloksan. Naskah Publikasi. Fakultas Farmasi, Universitas Muhammadiyah Surakarta, Surakarta. Che-ma,  Mr.  S.  2015. Pengaruh  Ekstrak Etil  Asetat  Bawang  Merah  (Alium sscalonicum) Terhadap Kadar Glukosa  Darah Tikus Putih Jantan Wistar  yang  Diinduksi  Aloksan. Naskah Publikasi. Fakultas Farmasi, Universitas Muhammadiyah Surakarta, Surakarta. Hidayaturrahmah. 2015. Efektivitas Ekstrak Minyak Ikan Patin (Pangasius hypopthalmus) Terhadap  Intelegensi  dan  Memori Otak  serta  Protein  Plasma  Darah
pada  Mencit .  Laporan  DIPA, Universitas  Lambung  Mangkurat, Banjarbaru. Isnani,  A.  N.  2013. Ekstraksi  Dan Karakterisasi  Minyak  Ikan  Patin yang Diberi Pakan Pellet Dicampur Probiotik. Skripsi. Jurusan Kimia, Fakultas Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan Alam, Universitas Jember. Julaikha, Anita. 2014. Karakteristik
Minyak Ikan Dari Belly Flap Patin Siam  (Pangasius  hypopthalmus) Pada  Berbagai  Tahap  Proses Pemurnian. Skripsi. Fakultas Perikanan  Dan  Ilmu  Kelautan,
Institut Pertanian Bogor, Bogor.
Mokuna, N., R. Pitopang, & Yuliet. 2014.
Uji Efek Antidiabetes Ekstrak Akar Garcinia  rostrata Hassk.ex  Hook.f pada Mencit Jantan ( Mus musculus ) dengan Metode Toleransi  Glukosa  dan  Induksi
Aloksan. Jurnal Biocelebes. 8 (2) :
37 – 47.
Prameswari,  O.  M.  &  S.  B.  Widjanarko. 2014.  Uji  Efek  Ekstrak  Air  Daun
Pandan Wangi Terhadap
Penurunan  Kadar  Glukosa  Darah dan  Histopatologi  Tikus  Diabetes
Mellitus. Jurnal Pangan dan Agroindustri. 2 (2) : 16 – 27.
Soltan,  S.  S.  A.  M.  2012.  The  Effects  of Varieties  Sources  of  Omega-3 Fatty  Acids  on  Diabetes  in  Rats.
Food  and  Nutrition  Sciences.  3 :
1404 – 1412.
Wicaksono, B., Sugiyanta, & A.
Purwandhono.  2014. Efek  Ekstrak Buah  Pare  (Momordica  charantia) dan  Metformin  terhadap  Kadar Glukosa  Darah  Tikus  Wistar  yang Diinduksi  Aloksan:  Perbandingan Terapi Kombinasi dan Terapi
Tunggal. Artikel Ilmiah Hasil
Penelitian Mahasiswa. Fakultas Kedokteran, Universitas Jember.