TINGKAT KEJADIAN AEROMONASIS PADA IKAN KOI ( Cyprinus carpio carpio ) YANG TERINFEKSI Myxobolus koi PADA DERAJAT INFEKSI YANG BERBEDA
AEROMONASIS INCIDENCE RATE IN KOI ( Cyprinus carpio carpio ) THAT INFECTED Myxobolus koi AT DIFFERENT DEGREES OF INFECTION
Riris Ulfiana, Gunanti Mahasri dan Hari Suprapto
Fakultas Perikanan dan Kelautan Universitas Airlangga Kampus C Mulyorejo - Surabaya, 60115 Telp. 031-5911451

## Abstract
Myxobolus infection  in  koi  fish  allows  followed  by  opportunistic  microorganisms infection. Aeromonas hydrophila bacteria classified as opportunistic because it can cause illness in certain condition  such  as  when  environmental  conditions  change,  stress  and  the  condition  of  the  host that  has been  infected  by  the  parasite. This  study  purpose  to  determine  the  incidence  rate  Aeromonasis  in  koi ( Cyprinus carpio carpio ) infected Myxobolus koi at different degrees of infection.
The results showed that of 120 samples taken, infected with M. koi in a mild degree of infection is 68.3%. Furthermore the medium infection is  22.5%, 1.7% severe infection and uninfected fish 7.5%. Each level of infection of M. koi taken samples for examination bacteria with skin samples and water. The results  of  bacterial  examination  showed  that  17  positive  samples  of  fish  infected  with A.  hydrophila (85%) from 20 fish sample. 17 positive samples of fish infected with A. hydrophila consist of 3 sample normal  fish,  7  sample M.  koi mild  infection,  6  sample M.  koi medium  infection  and  1  sample  severe infection.  The  results  showed  that  the  fish  infected  or  not  infected  with  M.  koi,  positive  with A. hydrophila infection that needs to be done by using a bacterial colony calculation method of determining the Angka Lempeng Total (ALT) or Total Plate Count (TPC). The calculation results from the number of bacterial  colony  in  various  levels  of  infection  of M.  koi are  sample  1  (normal  koi  fish)  of  1.15  x10 8 CFU/ml,  sample  2  (koi  fish  with  a  mild  infection  of M.  koi )  as  much  as  1.3  x10 8 CFU/ml.  While  the sample 3 (koi fish with a medium infection of M. koi ) 2.02 x10 8 CFU/ml and sample 4 (with the severe infection of M. koi ) 2.60 x10 8 CFU/ml.
Keywords : Aeromonas hydrophila, Myxobolus koi, pathogen in koi fish

## Pendahuluan
Ikan  hias  merupakan  salah  satu komoditi  perikanan  yang  memiliki  peluang untuk dikembangkan. Ikan koi ( Cyprinus carpio carpio ) adalah ikan hias air tawar yang digemari masyarakat  saat  ini.  Serangan  hama  dan penyakit  merupakan  salah  satu  kendala  bagi pembudidaya  ikan  koi  di  Desa  Kemloko, Kecamatan Nglegok Kabupaten Blitar terutama parasit Myxobolus  koi . M.  koi menginfeksi insang  ikan  dan  dalam  lembar  insang M.  koi membentuk  kista  (Supriyadi,  2004).  Pecahnya kista  pada  kulit  dan  insang  menyebabkan pendarahan  intens  dan  menyebabkan  infeksi sekunder  bakteri  oportunistik  (Paperna  and Overstreet, 1981).
Salah  satu  mikroorganisme  yang digolongkan  dalam  bakteri  oportunistik  adalah bakteri Aeromonas  hydrophila karena  mampu menyebabkan  penyakit  pada  kondisi  tertentu diantaranya  perubahan  kondisi  lingkungan, stress  dan  kondisi  inang  yang  telah  terinfeksi oleh  parasit  (Swann  and  White,  1989).  Bakteri
A.  hydrophila dapat  menginfeksi  melalui permukaan  tubuh  yang  luka  atau  insang kemudian masuk ke dalam pembuluh darah dan organ dalam lainnya (Kabata, 1985).
Berdasarkan  latar  belakang  maka rumusan  masalah  penelitian  ini  adalah Bagaimanakah derajat  infeksi M. koi pada  ikan koi ( Cyprinus carpio carpio ) di Desa Kemloko, Kecamatan  Nglegok  Kabupaten  Blitar  serta Berapakah  tingkat  kejadian  Aeromonasis  pada ikan  koi  yang  terinfeksi M.  koi pada  derajat infeksi yang berbeda. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk  mengetahui derajat  infeksi M. koi pada ikan koi ( Cyprinus carpio carpio ) di Desa Kemloko,  Kecamatan  Nglegok  Kabupaten Blitar  dan  untuk  mengetahui  tingkat  kejadian Aeromonasis  pada  ikan  koi  yang  terinfeksi M. koi pada derajat  infeksi  yang  berbeda.  Manfaat dari penelitian ini diantaranya adalah memberikan  informasi  ilmiah  dan  pengetahuan tentang  derajat  infeksi M.  koi pada ikan  koi ( Cyprinus  carpio  carpio ) di  Desa  Kemloko, Kecamatan  Nglegok  Kabupaten  Blitar  serta
kejadian  infeksi A.  hydrophila pada  ikan  koi yang terinfeksi M. koi pada derajat infeksi yang berbeda  sehingga  dapat  dijadikan  acuan  oleh pembudidaya ikan untuk melakukan pencegahan penyakit agar tidak terjadi kerugian dalam budidaya ikan koi.

## Metodologi
Sampel Ikan yang Digunakan Ikan  koi  berumur  1-2  bulan  diperoleh dari  kolam  budidaya  di  Desa  Kemloko, Kecamatan  Nglegok,  Kabupaten  Blitar  dengan ukuran 3-5 cm. Sesuai dengan ketetapan Badan Standar  Nasional  Indonesia  (2000),  bahwa pengambilan  sampel  yang  dilakukan  untuk pemeriksaan  kesehatan  ikan  adalah  1%  dari populasi. Total populasi tiap petak adalah 3000 ekor sehingga diambil 30 ekor ikan koi sebagai sampel  di  tiap  petak.    Dari  4  petak  didapatkan 120  ekor  ikan  yang  kemudian  dikelompokkan berdasarkan  derajat  infeksi M.  koi .  Dari  setiap derajat infeksi M. koi kemudian diambil sampel kembali untuk dilakukan pemeriksaan bakteri di Balai Karantina Ikan Kelas I Juanda.
Pemeriksaan  Dan  Penentuan  Derajat  Infeksi Myxobolus koi
Pemeriksaan M.  koi dilakukan  secara mikroskopis dengan cara mengambil nodul dari insang  ikan  kemudian  digerus  sehingga diperoleh  cairan  yang  berisi  spora.  Spora diamati di bawah mikroskop dengan perbesaran 1000x  dan  diidentifikasi  dengan  melihat morfologi sporanya. Setelah dilakukan pemeriksaan  secara  mikroskopis  ikan  yang terinfeksi M.  koi dikelompokkan  berdasarkan derajat infeksinya kemudian disampling kembali untuk dilakukan  isolasi  bakteri dengan menggunakan  nodul dan  luka pada  insang  ikan sebagai sumber isolasi.
Isolasi,  Identifikasi  dan  Penentuan  Prevalensi bakteri A.  hydrophila
Isolasi dan identifikasi bakteri
dilakukan dengan  mengambil  isolat dari  insang ikan.  Adapun  isolasi  dan  identifikasi  bakteri adalah sebagai berikut :
1. Isolasi Bakteri Isolasi  bakteri  menggunakan  media Triptic  Soy  Agar (TSA)  yang  bertujuan  untuk mendapatkan  bakteri  yang  menyerang  sampel yang  diduga  terinfeksi  bakteri.  Sumber  isolasi pada  ikan  adalah  nodul  dan  luka  pada insangnya.
2. Pemurnian Bakteri Pemurnian  ini  merupakan  kelanjutan dari  isolasi  bakteri  yang  bertujuan  untuk mengidentifikasi  mikroorganisme  penyebab
penyakit  dengan  menggunakan  media  TSA. Karena  yang  dicari  dalam  penelitian  ini  adalah penyakit  yang  disebabkan  oleh  bakteri A. hydrophila maka  pemurnian  bakteri  dilakukan dengan  cara  mengambil  koloni  bakteri  yang memiliki ciri morfologi koloni A. hydrophila 3. Identifikasi bakteri Identifikasi bakteri meliputi pemeriksa- an morfologi, pewarnaan gram, dan uji biokimia antara  lain  :  uji  O/F,  uji  oksidase,  uji  katalase, uji motilitas, produksi indol, uji TSIA, LIA dan uji  Cimmon’s  citrate.  Karakteristik  biokimia bakteri A. hydrophila dapat dilihat pada tabel 1. sebagai berikut :
Tabel 1.  Karakteristik Biokimia Bakteri Acromonas  hydrophila (Austin  and Austin, 2007). No Parameter Austin and Austin (2007) 1 2
3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 Gram bentuk bakteri
Oksidase Katalase O/F Motil arginine dihydrolase Indole lysine decarboxylase H 2 S ornitine decarboxylase Voges Proskauer Methyl red Gelatin Urea Glukosa Lactose Arabinose Mannitol Sukrosa Inositol
Negatif Batang + + Fermentatif Motil + + v - - v - + - + + v + + -
4. Penentuan Prevalensi Bakteri A. hydrophila Setelah  diketahui  derajat  infeksinya maka  dilakukan  pemeriksaan  bakteri  dengan nodul  dan  luka  pada  insang  sebagai  sumber isolasi  di  Laboratorium  Bakteriologi  Balai Karantina Ikan Juanda. Kejadian atau prevalensi
Aeromonasis  pada  ikan  koi  dinyatakan  dalam bentuk persen. Prevalensi Aeromonasis = Jumlah ikan yang terinfeksi A.hydrophila x 100% Jumlah total sampel
Penghitungan  Angka  Lempeng  Total  (ALT) atau Total Plate Count (TPC) Penentuan  Angka  Lempeng  Total  (ALT) atau Total  Plate  Count (TPC)  ini  bertujuan untuk  mengetahui  jumlah  koloni  bakteri  pada sampel  Ikan  koi  yang  telah  diidentifikasi. Perhitungan  ALT/TPC  dilakukan  terhadap sampel  ikan  dari  tiap  tingkatan    infeksi M.  koi sehingga  tiap  tingkatan  infeksi M.  koi diambil satu  sampel  biakan  bakteri  untuk  ditumbuhkan pada  media Plate  Count  Agar (PCA).  Bakteri yang telah diisolasi, diencerkan terlebih dahulu sebelum ditumbuhkan pada media PCA. Proses penghitungan  ALT/TPC  dilakukan  berdasarkan BSN  (2006)  yaitu  dengan  menggunakan  rumus sebagai berikut:
N =
Keterangan:
N     :  Jumlah koloni produk, dinyatakan dalam koloni per ml
:  Jumlah  koloni  pada  semua  cawan  yang dihitung
n1    :  Jumlah cawan pada pengenceran pertama yang dihitung
n2    :  Jumlah  cawan  pada  pengenceran  kedua yang dihitung
d      :  adalah  pengenceran  pertama  yang dihitung

## Hasil dan Pembahasan
Benih  ikan  koi  diambil  dari  kolam petani  di Desa Kemloko, Kecamatan Nglegok, Kabupaten Blitar, Jawa Timur. Benih ikan yang diambil  berumur  1-2  bulan  dengan  ukuran  3-5 cm  sebanyak  120  ekor  dari  4  kolam  budidaya. Identifikasi M. koi dilakukan secara mikroskopis dengan cara mengambil nodul dari insang  ikan  kemudian  digerus  sehingga diperoleh  cairan  yang  berisi  spora.  Spora diamati di bawah mikroskop dengan perbesaran 1000x  dan  diidentifikasi  dengan  melihat morfologi  sporanya.  Hasil  pengamatan  secara makroskopis  menunjukkan  bahwa  morfologi spora  yang  diamati  sesuai  dengan  karakteristik spora M. koi.
Setelah  mengidentifikasi  spora M.  koi selanjutnya  dilakukan  pengelompokkan  derajat infeksi M.  koi yang  dibagi  menjadi  4  kategori
yaitu  ikan  yang  sehat  apabila  tidak  terdapat nodul, infeksi ringan apabila terdapat 1-4 nodul, infeksi  sedang  bila  terdapat  5-8  nodul  dan derajat  infeksi  berat  bila  terdapat  lebih  dari  8 nodul  pada  insang  ikan  (Titis  dkk,  2009).  Dari pengamatan yang dilakukan didapatkan komposisi  ikan  sebagaimana  dapat  dilihat  pada Tabel 2.
Tabel 2.  Tingkat  Infeksi Myxobolus  koi Pada Benih Ikan Koi. no Derajat infeksi Jumlah ikan koi 1 2 3 4 Normal (0 nodul) Ringan (1-4 nodul) Sedang (4-8 nodul) Berat (>8 nodul) 9 (7.5%) 82 (68,3%) 27 (22,5%) 2 (1,7%)
Berdasarkan  tabel  di  atas  sebagian kecil  benih  ikan  koi  termasuk  dalam  derajat infeksi  berat, diikuti derajat  infeksi  sedang dan tertinggi  adalah  derajat  infeksi  ringan. Keragaman  derajat  infeksi  dikarenakan  pada saat  pengambilan  sampel  benih  ikan  koi  yang berumur  1-2  bulan,  proses  pembelahan  dan perkembangan  spora M.  koi pada  setiap  inang berbeda  akan  tetapi  sebagian  besar  benih  ikan koi  terinfeksi  dalam  derajat  infeksi  ringan  dan sedang.    Menurut  Komarudin  (1991) dalam Helmiati dkk (2001) semakin kecil ukuran ikan maka  semakin  rentan  terhadap  infeksi M.  koi karena  pada  ukuran  benih  semua  organ  tubuh belum  berfungsi  secara  sempurna  sehingga dapat  dikatakan  bahwa  benih  merupakan  fase kritis dan mudah terserang penyakit.
Pada  tahapan  isolasi  dan  identifikasi bakteri,  dilakukan  sampling  kembali  dari  total sampel ikan di setiap tingkatan infeksi M. koi . Benih  ikan  koi  sehat  sebanyak  3  ekor,  tingkat infeksi ringan 10 ekor, tingkat infeksi sedang 6 ekor dan tingkat infeksi  berat sebanyak 1 ekor. Dari  semua  tingkatan  infeksi  didapat  20  ekor sampel  ikan  untuk  isolasi  dan  identifikasi bakteri A.  hydrophila .  Bagian  tubuh  ikan  yang digunakan  sebagai  bahan  isolasi  adalah  insang yang terdapat nodul maupun luka akibat infeksi M.  koi .  Karakteristik biokimia bakteri Aeromonas berdasarkan  hasil  isolasi  dan identifikasi dapat dilihat pada Tabel 3.
Berdasarkan  hasil  uji  biokimia  di  atas maka bakteri yang diamati memiliki karakteristik biokimia sesuai dengan
karakteristik  biokimia  bakteri A.  hydrophila pada  tabel  1.  Hasil  pemeriksaan  bakteri A. hydrophila pada  benih  ikan  koi  dari  berbagai tingkatan infeksi M. koi dapat dilihat pada Tabel
4.
Berdasarkan  pengamatan  terhadap  20 sampel  ikan didapatkan  hasil  bahwa 17  sampel positif  terinfeksi  bakteri A.  hydrophila (85%). Menurut  Rukyani  (1990),  infeksi Myxobolus dapat  menyebabkan  perubahan  histopatologi pada  daerah  sekitar  nodul  dalam  insang  seperti odema,  hyperthropy,  inflamasi,  kongesti dan hyperplasia .  Dapat  dikatakan  bahwa  ikan  yang terinfeksi M.  koi lebih  mudah terinfeksi  bakteri A.  hydrophila dibandingkan  ikan  sehat , sebab luka akibat pecahnya nodul dapat menjadi jalan masuk  bagi  bakteri A.  hydrophila ke  dalam
tubuh  ikan.  Selain  itu,  infeksi M.  koi juga mempengaruhi  daya  tahan  tubuh  ikan  sehingga ikan  yang  sakit  lebih  mudah  terinfeksi A.
hydrophila yang merupakan bakteri
oportunistik.  Sedangkan  ikan  sehat  memiliki daya tahan tubuh yang baik lebih sulit terinfeksi meskipun  bakteri A.  hydrophila terdapat  di peraiaran.    Hasil  tersebut  didapat  dengan menghitung  menggunakan  rumus  prevalensi sebagai berikut :
Tabel 3.  Hasil Uji Biokimia Bakteri Yang Diisolasi Dari Benih Ikan Koi Yang Terinfeksi Myxobolus koi . no Parameter Austin and Austin (2007) Hasil Pengamatan 1 2
3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18
19
20 21
Gram bentuk bakteri
Oksidase Katalase O/F Motil arginine dihydrolase Indole
lysine decarboxylase
H 2 S ornitine decarboxylase Voges Proskauer Methyl red Gelatin Urea Glukosa Lactose Arabinose Mannitol Sukrosa Inositol
Negatif Batang + + Fermentatif Motil + + v - - v - + - + + v + + - Negatif Batang + + Fermentatif Motil + + + - v + v + - + - - + + -
Tabel 4.  Hasil  Pemeriksaan  Bakteri Aeromonas  hydrophila Pada  Benih  Ikan  Koi  Dari  Berbagai Tingkatan Infeksi Myxobolus koi . No Derajat infeksi Jumlah sampel Hasil pemeriksaan Jumlah bakteri 1 2 3 4 Tidak ada nodul Ringan Sedang Berat 3 10 6 1 +3 +7
+6 +1
1,15x10 8 1,3x10 8 2,02x10 8 2,60x10 8
Prevalensi Aeromonasis =
Jumlah ikan yang terinfeksi A. hydrophila X 100% Jumlah total sampel = 17  x 100%  = 85 % 20
Akan  tetapi  dari  hasil  isolasi  dan identifikasi bakteri didapatkan hasil bahwa ikan yang  sehat  atau  tidak  terinfeksi M.  koi juga positif  terinfeksi A.  hydrophila, hal  tersebut dikarenakan  pada  air  di  kolam  budidaya  telah teridentifikasi positif
A. hydrophila . Berdasarkan  hasil  pengamatan  tersebut  maka perlu  dilakukan  perhitungan  koloni  bakteri dengan menggunakan metode penentuan Angka Lempeng  Total  (ALT)  atau Total  Plate  Count (TPC). Perhitungan ALT atau TPC ini bertujuan untuk mengetahui apakah tingkat infeksi M. koi berpengaruh  terhadap  jumlah  bakteri  pada insang ikan koi.
Bakteri yang telah diisolasi, diencerkan terlebih  dahulu  sebelum  ditumbuhkan  pada media Plate  Count  Agar (PCA).  Pengenceran dilakukan  dengan  cara  mengambil  sampel bakteri  yang  akan  diperiksa  dengan  ose kemudian  dimasukkan  ke  dalam  10  ml  laruran Butterfield’s Phosphate Buffered (BFP) kemudian  homogenkan  menggunakan  vortex.
Homogenat  ini  merupakan  larutan  dengan tingkat  pengenceran  10 -1 .  Larutan  pengenceran 10 -1 diambil  1  ml  menggunakan  pipet volumetrik  steril  kemudian  dimasukkan  ke dalam  9  ml  larutan  BFP  dan  dihomogenkan
untuk  mendapatkan  pengenceran  10 -2 .  Proses diulangi  dengan  mengambil  1  ml  larutan pengenceran  10 -2 dan  dimasukkan  ke  dalam  9 ml larutan BFP untuk mendapatkan pengenceran  10 -3 .  Proses  terus  diulangi  sampai mendapat  larutan  hingga  pengenceran  10 -7 . Jumlah  total  mikroba  terbanyak  terdapat  pada sampel dengan pengenceran pertama yakni  10 -1 dan  semakin  menurun  pada  pengenceran berikutnya.  Tingkat  pengenceran  yang  ditanam pada media PCA adalah pengenceran 10 - 4, 10 -5 ,
10 -6 dan 10 -7 akan  tetapi  perhitungan  ALT/TPC menggunakan  pengenceran  10 -5 dan 10 -6 .  Hal tersebut dikarenakan pada pengenceran 10 -5 dan pengenceran  10 -6 koloni  yang  tumbuh  berkisar antara  25-250  yang  merupakan  syarat  dalam perhitungan ALT/TPC.
Hasil  perhitungan  jumlah  koloni bakteri  diberbagai  tingkat  infeksi M.  koi berdasarkan  rumus  di  atas  adalah  sebagai berikut,  sampel  1  (ikan  koi  normal)  sebanyak 1,15x10 8 CFU/ml,  sampel  2  (ikan  koi  dengan infeksi M.  koi ringan)  sebanyak  1,3x10 8 CFU/ml. Sedangkan sampel 3 (ikan koi dengan infeksi M.  koi sedang)  2,02x10 8 CFU/ml  dan sampel 4 (ikan koi dengan infeksi M. koi berat) 2,60x10 8 CFU/ml.  Berdasarkan  perhitungan jumlah  koloni  bakteri  diberbagai  tingkatan infeksi M.  koi, maka  hubungan  infeksi M.  koi terhadap  tingkat  kejadian  infeksi  bakteri A. hydrophila dapat  digambarkan  dalam  grafik korelasi seperti pada Gambar 1.
Dari  pengambilan  data  kualitas  air  di
Gambar 1.   Grafik  Korelasi  Tingkat  Infeksi Myxobolus  koi Terhadap  Jumlah  Bakteri Aeromonas hydrophila Pada Ikan Koi
Tabel 5. Data  Kualitas  Air  Di  Kolam  Budidaya  Ikan  Koi  Desa  Kemloko,  Kecamatan  Nglegok,
Kabupaten Blitar. Parameter Hasil Suhu pH Oksigen terlarut Amonia
28 o C 6 9 mg/l 0 mg/l
kolam  budidaya  ikan  koi  Desa  Kemloko, Kecamatan  Nglegok,  Kabupaten  Blitar,  Jawa Timur didapatkan hasil pada Tabel 5.
Ditinjau  berdasarkan  data  kualitas  air di  kolam  budidaya  ikan  koi  Desa  Kemloko, Kecamatan  Nglegok,  Kabupaten  Blitar,  Jawa Timur,  menunjukkan  bahwa  kondisi  air  kolam dalam keadaan normal namun beberapa kondisi kualitas  air  pada  kolam  ikan  koi  tersebut  tidak sesuai  atau  tidak  berada  dalam  kisaran  normal bagi  kelangsungan  hidup  ikan  koi.  Kondisi kualitas  air  yang  normal  pada  kolam  ikan  koi yang  diamati  adalah  suhu,  ammonia  dan oksigen  terlarut.  Sedangkan  pH  perairan  yang rendah  berada  diluar  batas  toleransi  kondisi optimum untuk benih  ikan koi. Nilai suhu pada kolam  budidaya  adalah  28 o C,  nilai  tersebut masih  dalam  kondisi  optimum  bagi  kehidupan ikan.  Menurut  Laili  (2007),  kondisi  suhu optimum  dalam  budidaya  ikan  koi  berkisar antara 25-30 o C. nilai oksigen terlarut di perairan kolam  budidaya  adalah  9  mg/l  sedangkan  nilai amonia diperairan adalah 0  mg/l.  Nilai oksigen terlarut  tersebut  dapat  dikatakan  jenuh  karena nilai  oksigen  terlarut  minimum  yang  bisa ditoleransi  oleh  ikan  adalah  5,0  mg/l  (Afrianto dan  Liviawaty,  1992). Sedangkan  pH  di  kolam budidaya  ikan  koi  adalah  6  yang  menunjukkan bahwa  air  pada  kolam  budidaya  bersifat  agak asam dan nilai tersebut tidak memenuhi kriteria optimum  pH  perairan  untuk  budidaya  ikan. Menurut  Laili  (2007)  kisaran  optimum  pH perairan untuk budidaya ikan berkisar antara 7- 8.  Helmiati  dkk.  (2001)  menyatakan  bahwa parameter  kualitas  air  yang  berpengaruh terhadap prevalensi M. koi adalah pH.

## Kesimpulan
Adanya  kondisi  yang  tidak  optimal untuk  benih  ikan  koi  menyebabkan  kondisi benih  ikan  koi  tidak  optimal  sehingga  mudah terinfestasi M. koi ataupun terinfeksi  bakteri A. hydrophila.

## Daftar Pustaka
Afrianto  E.  dan  E.  Liviawati.  1992. Pengendalian  Hama  dan  Penyakit. Kanisius. Yogyakarta. Austin,  B.  and  D.A.  Austin.  1999.  Bacterial Fish  Pathogens:  Disease  Of  Farmed And  Wild  Fish,  Third  Edition.  Praxis Publishing Ltd. Chicester, UK. Austin,  B.  and  D.A.  Austin.  2007.  Bacterial Fish  Pathogens:  Disease  Of  Farmed And  Wild  Fish,  Fourth  Edition.  Praxis Publishing Ltd. Chicester, UK. Badan Standar Nasional Indonesia. 2000. Induk Ikan  Gurami  (Osphronemus  gouramy,
Lac)  Kelas  Induk  Pokok  (Parent Stock ). Badan Standar Nasional. Badan  Standar  Nasional.  2006.  Cara  Uji Mikrobiologi-  Bagian  3:  Penentuan Angka  Lempeng  Total  (ALT)  pada Produk  Perikanan.  Badan  Standar
Nasional. Jakarta. Helmiati, S., Triyanto., dan H.N. Kamiso. 2001. Prevalensi dan derajat Infeksi Myxobolus sp.  Pada  Insang  Benih Karper (Cyprinus  carpio  L.) Di Kabupaten  Sleman  Jawa  Tengah. Jurnal  Perikanan.  Jurusan  Perikanan Fakultas Pertnian UGM. Yogyakarta.
Kabata,  Z.  1985.  Parasites  and  Disease  of  Fish Cultured  in  The  Tropics.  Philadelphia: International  Development  Research Council.
Laili,  S.  2007.  Pengaruh  Pemberian  Ekstrak
Temulawak (Curcuma  xanthorrhiza Roxb) Terhadap Prevalensi dan Kelulushidupan  Ikan  Mas (Cyprinus carpio) yang Diinfeksi Bakteri
Aeromonas hydrophyla. Fakultas Sains dan  Teknologi,  Jurusan  Biologi, Universitas Negeri Malang. Malang. Paperna, I. & Overstreet, R.M., 1981. Parasites and  diseases  of  Mullets  (Mugilidae). In:  Oren,  O.H.  (ed.)  Aquaculture  of Grey  Mullets.  IBP  26,  Cambridge University Press, U.K.
Rukyani, A. 1990. Histopathological Changes in
The  Gill  Of  Common  Carp  (Cyprinus carpio L.) Infected with the Myxosporean  Parasite  Myxobolus  Koi Kudo,1920.  Research  Institute  for Freshwater Fisheries. Bogor, Indonesia. Supriyadi, H. 2004. Membuat Ikan Hias Tampil Sehat Dan Prima. Agro Media Pustaka. Jakarta. Swann,  L,  and  M.  R.  White.,  1989.  Diagnosis and Treatment of “ Aeromonas hydrophila ”    Infection  of  Fish.  http:// www.extension.purdue.edu/extmedia/A S/AS-461.pdf/8/4/2011.2hal.
Titis  C.  D.,  W.  S.  D.  Nugroho,  D.  Daenuri, Sumayani dan H. Nurul. 2009. Laporan Uji  coba  Identifikasi  dan  Penentuan Derajat  Kerusakan  Akibat  Infeksi Myxobolus  sp .  Pada  Ikan  Mas (Cyprinus carpio). Balai Karantina Ikan Kelas II Tanjung Emas Semarang.