## ANALYSIS OF THE LEVELS OF EUGENOL IN CLOVE LEAF OIL
( Syzigium aromaticum ) AFTER WATER WAS DISTILLED USING GAS CHROMATOGRAPHY-MASS SPECTROMETRY METHOD
Lilis Tuslinah, Ade Yeni Aprillia*, Lusi Nurdianti, Indra, Devita Septiani
Program Studi Farmasi, Fakultas Farmasi, Universitas BTH Tasikmalaya Jl. Cilolohan No. 36, Kec. Tawang, Kota Tasikmalaya, Jawa Barat 46115 Indonesia
*Corresponding author: Ade Yeni Aprillia ( adeyeni@universitas-bth.ac.id )

## ARTICLE HISTORY
Received: 22 May 2023
Revised: 24 July 2023                                         Accepted: 28 July 2023

## Abstract
Because  clove  leaves  contain  eugenol,  a  substance  that  has  a  medicinal  impact  on health, their use has not been optimal. This study uses the GC-MS technique to compare the essential oil components of young and old clove (Syzigium aromaticum) leaves. The extraction of essential oil from young and old clove leaves was carried out using steam distillation. The essential oil yield in young leaves yielded 0.575%, and old leaves lost 0.625%.  The  levels  of  eugenol  compounds  in  young  leaves  were  79.98%,  while  they were 84.86% in old leaves, and the levels of caryophyllene compounds in young leaves were  14.18%,  while  they  were  13.18%  in  old  leaves.  Examine  young  and  old  leaves, which  are  yellow  and  have  a  characteristic  clove  odor,  to  determine  the  purity  of  the essential oils. Young and old leaves have the same refractive index value, 1.534, and essential  oils  are  70%  and  1:2  solubilized  in  ethanol,  respectively.  Oil  had  a  specific gravity of 1.037 g/mL in young leaves and 1.035 g/mL in mature leaves. The standards of SNI 06-2387-2006 are met by the quality test of the essential oil quality in young and old clove leaves (Syzigium aromaticum).
Keywords: clove leaves, essential oil, eugenol, GC-MS
ANALISIS KADAR EUGENOL DAUN CENGKEH ( Syzigium aromaticum ) HASIL DESTILASI UAP AIR MENGGUNAKAN METODE KROMATOGRAFI GAS-SPEKTROMETRI MASSA

## Abstrak
Pemanfaatan  daun  cengkeh  belum  digunakan  secara  optimal  karena  pada    daun cengkeh  mengandung  Eugenol,  senyawa  ini  yang  memiliki  efek  farmakologis  bagi kesehatan.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  perbedaan  kandungan  eugenol dari daun muda dan daun tua cengkeh ( Syzigium aromaticum ) dengan menggunakan metode GC-MS. Pengambilan minyak atsiri daun muda dan daun tua cengkeh dilakukan dengan  menggunakan  destilasi  uap  air.  Rendemen  minyak  atsiri  pada  daun  muda menghasilkan  0,575%  dan  daun  tua  menghasilkan  0,625%.  Kadar  senyawa eugenol pada  daun  muda  79,98%  sedangkan  pada  daun  tua  84,86%  dan  kadar  senyawa caryophyllene pada daun muda 14,18% dan pada daun tua 13,18% . Uji mutu minyak atsiri pada pemeriksaan organoleptik daun muda dan daun tua berwarna kuning dan bau khas cengkeh, kelarutan minyak atsiri dalam etanol 70% dengan perbandingan 1:2, nilai indeks bias daun muda dan daun tua memiliki nilai yang sama yaitu 1,534. Bobot jenis
minyak pada daun muda 1,037 g/mL sedangkan daun tua 1,035 g/mL. Uji Kualitas mutu minyak  atsiri  pada  daun  muda  dan  daun  tua  cengkeh  ( Syzigium  aromaticum )  telah memenuhi syarat SNI 06-2387-2006.
Kata kunci: daun cengkeh, eugenol, GC-MS, minyak atsiri

## Pendahuluan
Indonesia,  sebagai  pusat  biodiversitas,  telah  memposisikan  dirinya  sebagai pemimpin  global  dalam  perdagangan  minyak  esensial. 1 Permintaan  global  untuk komoditas  minyak  esensial  ini  tumbuh  sekitar  8-10%  per  tahun,  digunakan  terutama dalam  industri  kosmetik  dan  farmasi.  Berbagai  jenis  tanaman  asli  Indonesia,  seperti cengkeh, sereh wangi, jahe, pala, dan akar wangi, telah mencapai pasar global. Melihat perkembangan  pasar  internasional  ini,  pengusaha  dan  industri  minyak  esensial  di Indonesia  memiliki  peluang  untuk  meningkatkan  ekspor  dan  menghasilkan  produk dengan nilai ekonomi tinggi. 2
Minyak esensial, juga dikenal sebagai minyak eteris atau volatile , mudah menguap pada suhu kamar. Bagian tanaman yang dapat menjadi sumber minyak esensial meliputi bunga,  biji,  daun,  kulit,  akar  dan  rhizome. 3 Salah  satu  tanaman  yang  menghasilkan minyak esensial dan memiliki potensi untuk dikembangkan adalah cengkeh ( Syzigium aromaticum ). 4 Bagian  tanaman  cengkeh  yang  paling  bernilai  adalah  bunganya,  yang digunakan  dalam  industri  rokok  dan  makanan.  Meskipun  di  Indonesia,  penggunaan tanaman  cengkeh  biasanya  terbatas  pada  bunganya,  daun  cengkeh  juga  memiliki kandungan minyak esensial yang dapat dimanfaatkan, menambah nilai guna tanaman ini .5 Komponen  utama  minyak  esensial  daun  cengkeh  ( Syzigium  aromaticum )  adalah eugenol  dan  kariofilen. 6 Eugenol  adalah  senyawa  yang  ditemukan  dalam  cengkeh. Eugenol,  yang  memiliki  aroma  yang  khas,  mempunyai  gugus  fungsional  yang  sama dengan anggota keluarga fenol lainnya, seperti chavicol, estragol, dan osmorhyzol . 7
Penelitian  sebelumnya  telah  menggunakan  teknik  destilasi  air,  destilasi  uap-air, dan  destilasi  uap  langsung  untuk  mengekstraksi  minyak  esensial.  Destilasi  uap  air adalah  teknik  yang  umum  digunakan  karena  berhubungan  dengan  titik  didih.  Dalam proses  ini,  uap  yang  dihasilkan  oleh  air  tidak  berhubungan  langsung  dengan  sampel yang menghasilkan minyak esensial. Uap yang dihasilkan menuju sampel dan kemudian dikondensasi menjadi dua cairan yaitu air dan minyak cengkeh. 8
Komponen  senyawa  dalam  minyak  esensial  dapat  diidentifikasi  menggunakan metode Gas Chromatography-Mass Spectrometry (GC-MS), metode yang sangat akurat untuk  identifikasi  komponen  minyak  esensial,  karena  memberikan  informasi  jumlah senyawa  yang  terdeteksi.  Hasil  dari  kromatografi  gas  menghasilkan  kromatogram sedangkan hasil spektrometri massa menghasilkan spektrum. 9 Untuk memaksimalkan manfaat  pohon  cengkeh  sebagai  sumber  eugenol,  penelitian  tentang potensi  eugenol dari daun muda dan daun tua pohon cengkeh ( Syzigium aromaticum ) dengan metode GC-MS sangat diperlukan. 5

## Metode

## Alat
Alat destilasi uap air, piknometer,  Refraktometer (Kruss DR 6000), Kromatografi Gas-Spektrometri  Massa  (QP2010  Shimadzu,  Jepang)  kolom  kapiler  RTx-5  sebagai fase diam dan gas helium sebagai fase gerak.

## Bahan
Daun  muda  dan  daun  tua  cengkeh  ( Syzigium  aromaticum ),  Etanol  (Quadrant), Vanillin, H 2 SO 4 (Quadrant) dan Natrium sulfat (Na 2 SO 4 ) Anhidrat.

## Pengolahan Daun Cengkeh
Daun muda dan daun tua cengkeh ( Syzigium aromaticum ) segar yang diperoleh dari  Percobaan  Perkebunan  Manoko  Lembang  Bandung,  Jawa  Barat.  Tanaman diidentifikasi  di  laboratorium  Taksonomi  Tumbuhan  Jurusan  Biologi  FMIPA  UNPAD No.15/HB/01/2022,  dari  hasil  determinasi  diperoleh  bahwa  tanaman  tersebut  yaitu Cengkeh  ( Syzigium  aromaticum ).  Bahan  yang  telah  dikumpulkan  langsung  dilakukan sortasi basah untuk dapat menghilangkan kotoran dan bahan lain  yang melekat pada sampel.  Lalu  dilakukan pencucian  untuk menghilangkan  pengotor  yang melekat  pada daun. Daun segar cengkeh ini yang akan digunakan untuk proses isolasi minyak atsiri menggunakan metode destilasi uap. 10

## Isolasi Minyak Atsiri
Daun  muda  dan  daun  tua  cengkeh  ( Syzigium  aromaticum )  diisolasi  dengan metode  destilasi  uap  air.  Proses  isolasi  dilakukan  dengan  durasi  4-8  jam  untuk  1x penyulingan  dengan  cara memasukan  4 Kg  daun muda  dan  4 Kg  daun  tua  Cengkeh ( Syzigium aromaticum ) secara bergantian. Destilat  yang diambil yaitu fase minyaknya yang  sudah  dibebaskan  airnya  menggunakan  Na 2 SO 4 anhidrat.  Kemudian  simpan  ke dalam vial berwarna coklat untuk dianalisis menggunakan GC-MS. 4
Rumus Rendemen Minyak Atsiri 11 :
𝑅𝑒𝑛𝑑𝑒𝑚𝑒𝑛  = 𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒 𝑚𝑖𝑛𝑦𝑎𝑘 𝑎𝑡𝑠𝑖𝑟𝑖 (𝑚𝐿) 𝑏𝑒𝑟𝑎𝑡 𝑠𝑖𝑚𝑝𝑙𝑖𝑠𝑖𝑎 𝑥 100%

## Analisis dengan GC-MS
Minyak atsiri hasil isolasi selanjutnya  dilakukan analisis senyawa komponen daun muda  dan  daun  tua  cengkeh  ( Syzigium  aromaticum )  dengan  menggunakan  GC-MS. Minyak atsiri disuntikan sebanyak 2 µL ke alat GC-MS, injektor akan otomatis mengambil sampel dan menginjeksi langsung pada alat GC-MS yang menggunakan kolom kapiler RTx-5. Kolom memisahkan komponen minyak atsiri dengan oven 80ºC ditahan selama 5 menit sebagai suhu awal, setelah ditahan suhu akan mengalami kenaikan 5ºC/menit hingga suhu 270ºC dan akan ditahan selama 2 menit. Gas helium digunakan sebagai fase  gerak.  Kemudian  hasil  komponen  tersebut  akan  langsung  dideteksi  oleh spektroskopi massa, sehingga menghasilkan data berupa spektrum. 12,13

## Penapisan Skrining Fitokimia Monoterpen dan Seskuiterpen
a.  1g sampel uji ditambahkan eter, lalu digerus dan disaring. Filtrat tersebut diuapkan dan  ditambahkan  pereaksi  vanillin-asam  sulfat  pekat.  Terbentuknya  warna-warna menunjukkan adanya kandungan senyawa monoterpen dan seskuiterpen. 14
b.  2 g serbuk simplisia dimasukan kedalam tabung reaksi kemudian 10 mL petroleum eter ditambahkan dan 20 menit dipanaskan dengan penangas air dan dinginkan. Lalu saring  kemudian  filtrat  disimpan  di  cawan  penguap  untuk  diuapkan  kemudian melarutkan residu dengan 5 mL pelarut alkohol lalu saring. Jika filtrat menguap dan residu berbau aromatik hal ini menunjukan adanya senyawa golongan minyak atsiri. 14

## Uji kualitas Mutu Minyak Atsiri
1.  Pemeriksaan Organoleptik pengujian  organoleptik  yang  dilakukan  berupa  warna,  bau  dan  kejernihan minyak atsiri pada daun muda dan daun tua cengkeh ( Syzigium aromaticum ). 15

## 2.  Kelarutan Pada Pelarut Etanol
Dengan teliti, ukur 1 mL minyak atsiri dalam gelas ukur berukuran 10 mL, lalu tambahkan etanol secara perlahan, satu tetes pada satu waktu. Setiap penambahan dilakukan pengocokan sampai larutan menjadi jernih atau bening. Hasil akan dilihat dari perbandingan volume etanol yang digunakan untuk melarutkan minyak atsiri. 15

## 3.  Analisis Indeks Bias
Pengukuran indeks bias dilakukan dengan mengukur langsung sudut sinar yang dibiaskan,  dalam  hal  ini  adalah  minyak  atsiri  dari  daun  muda  dan  tua  cengkeh ( Syzigium aromaticum ), menggunakan refraktometer. Awalnya, penutup refraktometer dibuka dan permukaan prisma dibersihkan dengan tisu yang dibasahi alkohol.  Minyak  atsiri  diteteskan  pada  permukaan  prisma  dan  penutup  ditutup kembali. Pengujian dilakukan pada suhu 25ºC, sesuai Standar Nasional Indonesia. 15

## 4.  Bobot Jenis
Piknometer digunakan untuk pengujian bobot jenis sampel. Pertama piknometer dibersihkan dan dibilas dengan etanol kemudian keringkan bagian dalam dan tutup lalu  timbang  (m).  Piknometer  diisi  dengan  aquadest  dan  menghindari  adanya gelembung udara lalu tutup dengan penutupnya dan keringkan, kemudian timbang (m 2 ). Piknometer dikosongkan kembali dan cuci dengan etanol kemudian keringkan. Isi piknometer dengan sampel dan pastikan gelembung udara tidak ada lalu sisipkan penutup dan ditimbang (m 3 ). 15
Rumus 15 :
𝑅𝑢𝑚𝑢𝑠 𝑃𝑒𝑟ℎ𝑖𝑡𝑢𝑛𝑔𝑎𝑛 = (𝑚 3 − 𝑚)
(𝑚 2 − 𝑚)
Keterangan : m = piknometer kosong m 2 = piknometer + air m 3 = piknometer + sampel

## Hasil
Uji skrining fitokimia merupakan tahapan yang digunakan untuk mengidentifikasi adanya metabolit sekunder pada daun cengkeh ( Syzigium aromaticum ). 12 Berikut hasil dari skrining fitokimia daun cengkeh ( Syzigium aromaticum ).

## Tabel 1. Data Hasil Skrining Fitokimia
No Golongan Senyawa Monoterpen dan Seskuiterpen Hasil 1 Daun muda + 2 Daun tua + Keterangan : (+) Terdeteksi
Berikut merupakan hasil kromatogram dari minyak atsiri daun muda dan daun tua cengkeh  ( Syzigium  aromaticum )  menggunakan  metode  Kromatografi  Gas – Spektrometri Massa:
(a)

## (b)
Gambar 1. Spektrum kromatogram GC-MS minyak atsiri (a) daun muda dan (b) daun tua cengkeh
Tabel 2. Hasil Analisis Kromatogram Minyak Atsiri Daun Muda dan Daun Tua Cengkeh menggunakan GC-MS
Sampel Peak Waktu Retensi (menit) Luas Area (%) Nama Senyawa 1 18,058 79,98 Eugenol 2 19,427 14,18 Trans-caryophyllene Daun Muda 3 20,297 1,32 Alpha-humulene 4 21,489 0,16 Farnesene 5 22,227 4,06 Acetyleugenol 6 23,736 0,30 Caryophyllene oxide
Tabel 2. (Lanjutan) Sampel Peak Waktu Retensi (menit) Luas Area (%) Nama Senyawa 1 11,129 0,13 Citronella 2 18,069 84,86 Eugenol Daun Tua 3 19,430 13,18 Trans-caryophyllene 4 20,298 1,22 Alpha-humulene 5 23,733 0,51 Caryophyllene oxide 6 25,600 0,10 Beta-tumerone
Data hasil spektrofotometri massa senyawa eugenol pada daun  muda dan daun tua cengkeh ( Syzigium aromaticum ) dapat dilihat pada gambar dibawah ini:
(a)
(b)
Gambar 2. Spektrum massa eugenol (a) daun muda, (b) daun tua
Gambar 3. Pola fragmentasi spektroskopi massa eugenol 16
Pada  pemeriksaan  organoletik  minyak  atsiri  daun  muda  dan  daun  tua  cengkeh ( Syzigium aromaticum ) terlampir di bawah ini.
Tabel 3. Data Hasil Pengamatan Organoleptik Minyak Cengkeh
No Sampel Jenis Uji Hasil 1 Daun muda Warna Kuning Bau Khas minyak cengkeh 2 Daun tua Warna Kuning Bau Khas minyak cengkeh
Berat  jenis  merupakan  kriteria  penting  terhadap  kualitas  dan  tingkat  kemurnian minyak atsiri. 17
Tabel 4. Hasil Bobot Jenis Minyak Atsiri Daun Cengkeh ( Syzigium aromaticum ) No Sampel BJ (g/mL) 1 Daun muda 1,037 2 Daun tua 1,035

## Pembahasan
Hasil pengujian skrining fitokimia pada Tabel 1 dengan penambahan vanilin asam sulfat  pekat  memberikan  hasil  positif  dengan  terbentuknya  warna  ungu  dan  filtrat menguap berbau aromatik khas cengkeh ( Syzigium aromaticum ) hal ini karena titik uap minyak  atsiri  sangat  rendah  dan  menandakan  bahwa  adanya  senyawa  golongan monoterpen  dan  seskuiterpen  yang  merupakan  indikator  terdapatnya  kandungan minyak  atsiri. 18 Komponen  senyawa  seperti  minyak  atsiri,  triterpenoid,  polifenol,  dan
flavonoid menampilkan variasi aktivitas biologis. Minyak atsiri merupakan gabungan dari banyak  senyawa  kimia.  Biasanya,  minyak  atsiri  meliputi  komponen  terpenoid  seperti monoterpen dan seskuiterpen. 19
Rendemen minyak  atsiri  daun muda  cengkeh  adalah    0,575%  sedangkan  pada daun  tua  cengkeh  ( Syzigium  aromaticum )  rendemen  0,625%.  minyak  atsiri  dilakukan isolasi melalui destilasi uap air. Cara destilasi uap air menghasilkan penguapannya lebih cepat sehingga pada saat proses penyulingan akan memiliki waktu yang lebih singkat. Hasil  destilat  dipisahkan  menggunakan  corong  pisah  dan  menambahkan  Na ₂ SO ₄ Anhidrat  supaya  dapat  mengikat  sisa  air  yang  masih  ada  dalam  minyak  atsiri. Kandungan minyak atsiri dalam daun cengkeh itu sekitar 1-4%. 1 Minyak yang dihasilkan dengan  metode  destilasi  uap  cenderung  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan  metode destilasi air. Hal ini disebabkan oleh uap dari ketel yang memiliki tekanan dan suhu lebih tinggi, yang mampu mempercepat proses difusi dan osmosis minyak atsiri. 20
Nilai  rendemen  minyak  atsiri  pada  penelitian  ini  menurun  disebabkan  adanya beberapa faktor yaitu umur tanaman, tempat tumbuh, metode pemisahan,  kondisi iklim, kondisi alat dan perbedaan metode penyulingan. 12,21
Analisis  senyawa  minyak  atsiri  dapat  diidentifikasi  menggunakan  alat  GC-MS karena  dapat  menganalisis  senyawa  komponen  pada  sampel  yang  sifatnya  volatile seperti  minyak  atsiri  dan  dapat  mengetahui  komponen  senyawa  minyak  atsiri  serta persentase kandungan senyawa minyak atsiri. Hasil kromatogram pada gambar. 1 yang menunjukan  bahwa  minyak  atsiri  daun  muda  dan  daun  tua  cengkeh  ( Syzigium aromaticum ) masing-masing memiliki 6 puncak yang artinya terdapat 6 senyawa dengan persentase  yang  berbeda-beda.  Tinggi  atau  rendahnya  waktu  retensi  pada  senyawa yang keluar dari detektor dapat dipengaruhi oleh adanya perbedaan titik didih, tekanan, suhu dan kecepatan alir eluen. 22
Peningkatan  konsentrasi  pada  daun  tua  dapat  dilihat  pada  Tabel  2.  Hal  ini disebabkan  karena  daun  merupakan  tempat  berlangsungnya  fotosintesis  yang menghasilkan fotosintat yang lebih banyak. Fotosintat tersebut sebagai substrat dalam pembentukan  minyak  atsiri.  Pada  proses  fotosintesis  menghasilkan  fotosintat  berupa karbohidrat  yang  akan  berperan  sebagai  substrat  biosintesis  minyak  atsiri.  Selama periode  pertumbuhan,  tanaman mensintesis  metabolit  sekunder  dan senyawa bioaktif dengan jumlah yang berbeda yang dipengaruhi oleh morfologi dan bertambahnya usia daun. 23
Kandungan  senyawa  minyak  atsiri  cengkeh  pada  daun  muda  dan  daun  tua memenuhi  standar  yang  telah  ditetapkan  oleh  SNI  06-2387-2006  tentang  minyak cengkeh  ( Syzigium  aromaticum )  yaitu  eugenol  78-95%  dan  caryophyllene  maksimum 17%. 15
Hasil spektrum massa pada daun muda dengan waktu retensi 18,058 dan daun tua  cengkeh  dengan  waktu  retensi  18,069  dengan  nilai  similarity  indeks  95%  yang merupakan  senyawa  eugenol  dan  memiliki  rumus  molekul  C ₁₀ H ₁₂ O ₂ .  Hasil  ini membuktikan  adanya  pola  fragmentasi  eugenol  pada  gambar  2  yang  menunjukkan bahwa puncak ion molekul pada m/e = 164 yang merupakan berat molekul dari senyawa eugenol dan terlihat jelas sebagai puncak dasar. Senyawa dengan berat molekul 164 dan  terfragmen  menjadi  m/e  149  dengan  melepaskan –CH 3 kemudian  terfragmen menjadi m/e 121 dengan  melepaskan adalah -CH=CH 2 . Kemudian m/e 121 terfragmen menjadi  m/e  103  dengan  melepaskan –O  dan  terfragmen  menjadi  m/e  91  dengan melepaskan -O dan menjadi m/e 77 dengan melepaskan –CH 2. 16
Untuk  menjamin  kualitas  minyak  atsiri  yang  dihasilkan  dari  daun  tua  dan  daun muda cengkeh  ( Syzigium  aromaticum ) maka dilakukan  uji  mutu minyak  atsiri  meliputi pemeriksaan organoleptik, kelarutan dalam etanol, indek bias dan bobot jenis. 15 Hasil  pada  Tabel  3  penentuan  keadaan  warna  dan  bau  cengkeh  ( Syzigium aromaticum ) pada minyak atsiri daun muda adalah berwarna kuning, bau khas cengkeh dan  untuk  daun  tua  berwarna  kuning,  bau  khas  cengkeh  menunjukan  bahwa
pemeriksaan  organoleptik  pada  minyak  atsiri  cengkeh  ( Syzigium  aromaticum )  telah memenuhi persyaratan SNI 06-2387-2006 minyak cengkeh. 15,24
Kelarutan minyak atsiri dalam etanol pada daun muda dan daun tua adalah larut dalam etanol  70%  dengan  perbandingan  1:  2  jernih  artinya  sampel  minyak  telah  memenuhi persyaratan  SNI  06-2387-2006  tentang  minyak  cengkeh.  Evaluasi  ini  dapat mengidentifikasi  adanya  pemalsuan  pada  minyak  atsiri,  jika  bahan  tambahan  yang digunakan  tidak  larut  dalam  etanol.  Minyak  atsiri  yang  disimpan  dalam  jangka  waktu lama dapat menyebabkan polimerisasi sehingga dapat menurunkan kelarutannya dalam etanol 24,25
Hasil  dari  pengujian  indeks  bias  minyak  atsiri  cengkeh  ( Syzigium  aromaticum ) pada daun muda dan daun tua memiliki hasil yang sama yaitu 1,534. Hal ini menunjukan bahwa  minyak  daun  cengkeh  daun  muda  dan  daun  tua  memiliki  kualitas  yang  baik karena  memenuhi  syarat  SNI  06-2387-2006  tentang  minyak  cengkeh  ( Syzigium aromaticum )  yaitu  dengan  nilai  pada  rentang  1,528 –  1,535.  Dalam  komponen- komponen minyak atsiri yang tersusun dan dihasilkan akan berhubungan dengan indeks bias.  Semakin  banyak  komponen  berantai  panjang,  maka  kerapatan  medium  pada minyak  atsiri  akan  bertambah  dan  mengakibatkan  makin  sukar  membiaskan  cahaya, sehingga indeks bias menjadi lebih besar. Apabila nilai indeks bias pada minyak atsiri besar, maka akan memiliki kualitas yang baik daripada minyak atsiri yang mempunyai nilai indeks bias yang kecil. 1,17
Hasil penentuan bobot jenis minyak cengkeh pada Tabel 4 pada daun muda yaitu 1,037  dan  pada  daun  tua  yaitu  1,035.  Hal  ini  menunjukan  bobot  jenis  minyak  daun cengkeh  telah  memenuhi  persyaratan  SNI  06-2387-2006  tentang  minyak  cengkeh ( Syzigium aromaticum ) yaitu berada pada rentang 1,025 – 1,049.
Komponen-komponen  penyusun  minyak  atsiri  akan  mempengaruhi  bobot  jenis karena  apabila  semakin  banyak  komponen  penyusun  minyak  atsiri,  maka  senyawa polimer dalam minyak akan meningkatkan bobot jenis minyak. 17

## Kesimpulan
Hasil  isolasi  minyak  atsiri  daun  cengkeh muda dan  tua menggunakan destilasi uap air pada daun muda menghasilkan rendemen daun tua lebih besar dari daun muda. Hasil  GC-MS  terdapat  adanya  perbedaan  kadar  eugenol  pada  minyak  atsiri.  Kadar eugenol daun tua lebih besar dari daun muda. Berdasarkan hasil uji mutu minyak atsiri daun muda dan daun tua cengkeh meliputi warna, bau, kelarutan dalam etanol, bobot jenis dan indeks bias, memenuhi syarat SNI 06-2387-2006 tentang minyak cengkeh.

## Daftar Pustaka
1.   Sastrohamidjojo H. Kimia minyak atsiri. Yogyakarta: Gadjah Mada University Press; 2017.
2.   Julianto TS. Minyak atsiri bunga Indonesia. Yogyakarta: Deepublish; 2016.
3.   Anto.  Rempah-rempah  dan  minyak  atsiri.  Andriyanto,  editor.  Klaten:  Penerbit Lakeisha; 2020.
4.   Nirwana CH, Zamrudy W. Studi literatur karakteristik minyak cengkeh (clove oil) dari beberapa metode distilasi. DISTILAT J Teknol Separasi. 2023;7(2):561 –9.
5.   Aryawati F meyla, Nyuwito. Pengaruh perlakuan bahan dan massa daun cengkeh terhadap rendemen dan kualitas minyak dengan metode air dan uap. In: Prosiding Seminar  Nasional  Seri  7 :  menuju  masyarakat  madani  dan  lestari  -  diseminasi penelitian. Yogyakarta: Universitas Islam Indonesia; 2017. p. 142 –55.
6.   Setia  Budi  JJ,  Yuli  Damayanti  NL,  Dhani  YR,  Antari  Dewi  NP.  Ekstraksi  dan karakterisasi  minyak  atsiri  bunga  kenanga  (Cananga  odorata)  dan  aplikasinya sebagai penolak nyamuk pada lotion dan parfum. J Kim. 2018;12(1):19 –24.
7.   Hamri  S,  Rhazri  K,  Hafid  A,  Ouchetto  H,  Hajbi  Y,  Khouili  M.  Clove  (Eugenia
Caryophyllata) extraction and synthesis of new pyrazole derivatives from eugenol. Glob J Sci Front Res Chem. 2013;13(7).
8.   Jayanudin J. Komposisi kimia minyak atsiri daun cengkeh dari proses penyulingan uap. J Tek Kim Indones. 2018;10(1):37 –42.
9.   Nurhaen N, Winarsii D, Ridhay A. Isolasi dan identifikasi komponen kimia minyak atsiri dari daun, batang dan bunga tumbuhan salembangu (Melissa sp.). Nat Sci J Sci Technol. 2016;5(2).
10.  Santoso J, Mardhi Hutama F, Anesya Lystyoarti F, Linda Nilatari L. Ekstraksi minyak atsiri dari daun dan batang cengkeh dengan metode hydro-distillation dan steam- hydro  distillation  untuk  meningkatkan  nilai  tanaman  cengkeh  dan  menentukan proses ekstraksi terbaik. Pekan Ilm Mhs Nas Progr Kreat Mhs Penelit. 2014;
11.  Aisyah  Y,  Haryani  S,  Maulidya  R.  Pengaruh  jenis  bunga  dan  waktu  pemetikan terhadap  sifat  fisikokimia  dan  aktivitas  antibakteri  minyak  atsiri  bunga  kenanga (Cananga odorata). J Teknol dan Ind Pertan Indones. 2016;8(2).
12.  Kurniasari  F.  Penetapan  kadar  eugenol  dan  profil  GC-MS  daun  cengkeh.  In: Prosiding  “Simposium  Nasional  Peluang  dan  Tantangan  Obat  Tradisional  dalam Pelayanan Kesehatan Formal.” 2013. p. 188–91.
13.  Kurniawan A, sri rahayu W, Wahyuningrum R. Perbandingan kadar eugenol minyak atsiri daun cengkeh (syzygium aromaticum (l) merr & perry) yang tumbuh di dataran tinggi dan dataran rendah. J Farm. 2019;06(03).
14.  Endang Hanani. Analisis fitokimia. Jakarta: EGC; 2015.
15.  Badan  Standardisasi  Nasional.  Minyak  daun  cengkeh:  SNI  No.06-2387-1998. Jakarta: Badan Standardisasi Nasional; 2006.
16.  Ekasari  SR.  Pengaruh  metode  pengambilan  minyak  atsiri  dari  daun  jeruk  purut (Citrus  hystrix)  terhadap  kandungan  geraniol  dan  sitronelal.  J  Inov  Tek  Kim. 2020;5(1).
17.  Putri  IA,  Fatimura  M,  Bakrie  M.  Pembuatan  minyak  atsiri  kemangi  (  Ocimum Basilicum  L  .)  dengan metode  distilasi  uap  langsung.  J  Progr  Stud  Tek  Kim  Univ PGRI Palembang. 2021;6(2).
18.  Ruwindya  Y.  Optimasi  metode  analisis  minyak  atsiri  sereh  wangi  secara kromatografi gas. IJCA (Indonesian J Chem Anal. 2019;2(2).
19.  Abdulaziz R, Suedy SWA, Izzati  M. Pertambahan biomassa dan produksi minyak atsiri tanaman selasih (Ocimum basilicum L.) pada usia panen yang berbeda. Bul Anat dan Fisiol. 2021;6(2).
20.  Lerrick  RI,  Pake  KI.  Pengaruh metode  pengambilan  minyak  atsiri  dari  daun jeruk purut  (Citrus  hystrix)  terhadap  kandungan  geraniol  dan  sitronelal.  Chem  Notes. 2020;1(2):70 –93.
21.  Loppies JE, Wahyudi R, Sri Rejeki E, Winaldi A. Kualitas minyak atsiri daun cengkih yang dihasilkan dari berbagai waktu penyulingan. J Ind Has Perkeb. 2021;16(2).
22.  Irvan, Manday PB, Sasmitra J. Ekstraksi 1,8-cineole dari minyak daun eucalyptus urophylla dengan metode soxhletasi. J Tek Kim USU. 2015;4(3).
23.  Omarta  O,  Jayuska  A,  Silalahi  IH.  Karakterisasi  komponen  destilat  minyak  sereh wangi  (Cymbopogon  nardus  l.  Rendle)  dari  Kecamatan  Kuala  Behe  Kabupaten Landak. Indones J Pure Appl Chem. 2021;3(3).
24.  Muyassaroh.  Microwave  assisted  extraction  (mae)  process  of  red  ginger  rhizome with  variation  of  material  treatment  and  operating  power.  Atmosphere  (Basel). 2021;2(2):33 –8.
25. Ma’sum Z, Proborini WD. Optimasi proses destilasi uap essential oil. J Reka Buana. 2016;1(2):105 –9.