## INDUCTION OF POLYPLOID BANANA KEPOK THROUGH IN VITRO ADDITION OF FLAME LILY EXTRACT

## Eti Ernawiati*, Lili Chrisnawati
Dosen Jurusan Biologi FMIPA Universitas Lampung Jl. Prof Soemantri Brojonegoro No.1, Bandar Lampung 35145 *Email: eti.ernawiat@fmipa.unila.ac.id

## ABSTRACT
Flame  lily  ( Gloriosa  superba L . )  contains  colchicine  and  gloriosin  in almost  all  parts  of  the plant,  especially  in  tubers  and  seeds.  Colchicine  is  often  used  in  biological  and  breeding studies to induce mutations that result in polyploid plants. This study aimed to examine the effectiveness of flame lily tuber extract as a natural mutagen for the development of superior kepok banana cultivars through the in vitro assembly of polyploid kapok bananas. The study was arranged completely randomly with two factors. Factor 1 consisted of 3 levels, namely fresh  extract  of  breech  flower  tubers  (10  %),  pure  colchicine  solution  (0.1%)  as  a  positive control, and without being added (0%) as a negative control. Factor 2 consists of 3 levels, namely Kepok Abu, Kepok Batu and Kepok Kuning . All treatment combinations were repeated 5 times. The data were analyzed by Diversity Test ( Sidik Ragam ) and if there is a difference, it  will  be  continued  with  the  DMRT  test  at  a  level  of  5%.  The  results  showed  that  the administration of colchicine in culture media could induce the emergence of polyploid banana plantlets  when  viewed  from  the  addition  of  the  size  of  the number of  shoots,  shoot  length, number  of  roots,  root  length,  leaf  area,  epidermal  cells,  stomata,  and  decreased  stomata index. Meanwhile, 10% breech flower tuber extract was not able to induce the emergence of polyploid plantlets. Kepok Kuning bananas had a better response to mutagens than Kepok Abu and Kepok Batu . From these results, it can be concluded that 0.1% colchicine was able to  induce  polyploid  banana  plantlets  and  10%  breech  flower  tuber  extract  was  not  able  to induce polyploid plantlets.
Keywords: colchicine, flame lily, kapok banana.

## PENDAHULUAN
Kembang sungsang ( Gloriosa superba L.) mengandung  kolkisin  dan    gloriosin  di hampir seluruh bagian tanaman, khususnya  pada  umbi  dan  biji.  Beberapa peneltian  melaporkan  kandungan  kolkisin pada  berbagai  bagian  tanaman,  yaitu dalam umbi dan bagian lain dari  kembang sungsang  berkisar  antara  0.1 –  0.9  %
(Addink, 2002; Dounias, 2008).
Rahmawati, et  al (2018)  melaporkan bahwa  kadar  kolkisin  pada  ekstrak  air  biji G. superba sebanyak 12,84 µg/µl (± 2,88), lebih  tinggi  dibandingkan  kadar  kolkisin pada contoh baku. Madhumita, et al (2008) menmbahkan bahwa kolkisin yang diekstraksi dari kembang sungsang memiliki  efikasi  yang  lebih  baik  daripada kolkisin standar dari Sigma.
Kolkisin merupakan senyawa yang memiliki  afinitas  kuat  terhadap  tubulin sehingga  kerap  digunakan  dalam  studi biologi  dan  pemuliaan  untuk  menginduksi mutasi yang menghasilkan tanaman poliploid. Senyawa ini mampu mempengaruhi proses mitosis dengan cara mengganggu organisasi mikrotubule sehingga menghasilkan metafase abnormal  dan  kemudian  membentuk  sel dengan  jumlah  kromosom  berlipat.  Pada umumnya  tanaman  poliploid  memiliki beberapa  kelebihan,  yaitu  selnya  lebih besar,  tanaman  lebih  tinggi,  daun  lebih lebar,  buah  lebih  besar,  produksi  lebih tinggi, dan lebih tahan terhadap serangan penyakit (Dounias, 2008). Penelitian Ernawiati (2007) dan Ernawiati et al (2008)
memdapatkan  bahwa kolkisin  dalam
ekstrak umbi kembang sungsang cenderung  menurunkan  indeks  mitosis akar kecambah cabai merah meningkatkan tinggi tanaman, luas daun.
Pisang  Indonesia  memiliki  keragaman aksesi tinggi, salah satunya adalah pisang kapok. Retnoningsih et al. (2010) mencatat dari  koleksi  Dinas  Pertanian  Yogjakarta terdapat 15 aksesi pisang kepok, sedangkan  Ernawiati et  al. (2018)  di  kota Bandar  Lampung,  propinsi  Lampung diperoleh 6 aksesi pisang kepok. Selain itu, pisang kepok memiliki nilai ekonomi tinggi, antara  lain    sebagai  bahan  baku  industi makanan,  seperti  tepung  pisang  atau makanan  bayi  (Astutik,  2009).  Bahkan Musita  (2009)  menambahkan  bahwa pisang  kepok  mengandung  serat  seperti pati  resisten  dan  inulin  yang  berpengaruh positif terhadap kadar glukosa darah.
Meskipun  tanaman  pisang  dikenal  dan dibudidayakan sejak lama tetapi pengetahuan genetik genom pisang masih terbatas  (Mancho-Sanchez et  al .,  2015). Dampak  dari  keterbatasan  pengetahuan genetik  genom  pisang  adalah  banyak aspek  pemuliaan  dan  seleksi  kurang berkembang.  Sifat  partenokarpi,  sterilitas dan  ploidi  adalah beberapa  kendala pada pemuliaan  dan  seleksi  pisang  (Mancho- Sanchez et a.l,  2015).  Dengan  demikian perlu strategi bioteknologi seperti pemuliaan mutasi untuk mengatasi kendala  pengembangan  kultivar  pisang kepok  yang  unggul  pada  suatu  sifat tertentu.  Salah  satu  strategi  yang  dapat dilakukan yakni pemanfaatan ekstrak umbi kembang  sungsang  sebagai  mutagen alami untuk pengembangan kultivar pisang kepok  unggul  melalui  perakitan  pisang kapok  poliploid  secara in  vitro .  Menurut Hutami et al. (2006) metode perbanyakan somaklonal  melalui  kultur  jaringan  dapat dgunakan sebagai strategi pengembangan kultivar  pisang  kepok,  mengingat  metode ini dianggap lebih efektif dan efisien karena perubahan  dapat  diarahkan  pada  sifat yang  diharapkan.    Dikatakan  pula  bahwa perubahan sifat genetik dapat ditingkatkan dengan menambahkan komponen organik tertentu ke dalam media untuk memunculkan  variasi  genetik.  Dengan
demikian,  penambahan  ekstrak  umbi kembang sungsang ke dalam media kultur jaringan  dalam  penelitian  ini  berperan untuk  menginduksi    munculnya  sifat genetik  unggul  pada  pisang  kepok. Penggunaan beberapa variasi tipe genom pisang kepok bertujuan untuk memperoleh sumber  variasi  genetik  yang  lebih  luas sehingga  peluang  memperoleh  kultivar pisang  kepok  yang  unggul  dapat  tercapai dengan optimal.

## METODE PENELITIAN
Penelitian dilaksanakan mulai bulan Januari  sampai  dengan  Oktober  2020 di Laboratorium  MTC,  PT  Great  Giant Pineapple PG 4  Labuhan  Ratu  Lampung di  Lampung  Timur  dan  pengamatan parameter  planlet    di  Laboratorium  Botani Jurusan Biologi FMIPA Universitas Lampung. Penelitian dilakukan
menggunakan Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  dengan 2    faktor.  Faktor  1  adalah  pemberian ekstrak  yang  terdiri  dari  3  level,  yaitu ekstrak  segar  umbi  kembang  sungsang (konsentrasi  10  %)  sebagai  perlakuan utama,  larutan  kolkisin  murni  (0,1  %) sebagai  kontrol  positif  dan  tanpa  diberi penambahan (0%) sebagai kontrol negatif. Faktor 2 adalah kultivar pisang kepok yang terdiri  dari  3  macam,  yaitu  Kepok  Abu, Kepok Batu  dan  Kepok  Kuning.  Semua kombinasi  perlakuan  diulang  4   kali.

## Ekstraksi Umbi Kembang Sungsang
Umbi  kembang  sungsang  dipilih  yang berukuran  sama  dan  dibersihkan  dari kotoran yang menempel. Umbi yang telah bersih  diiris  tipis  dan  dikeringanginkan pada suhu kamar sekitar 10 hari (Lakshmi Priyat  and  Swathi,  2015)  sampai  kadar airnya  menyusut.  Umbi  yang  telah  kering angin  kemudian  digiling  menggunakan Hammer  Mill sampai  diperoleh  serbuk halus  yang  siap  diekstraksi.  Pembuatan ekstrak  air  umbi  kembang  sungsang menggunakan metode maserasi mengikuti metode  Harborne  (1987).  Serbuk  halus umbi  sebanyak  100  g  dimaserasi  dalam
akudes  selama  2  x  24  jam  kemudian disaring  menggunakan Whitman  filter paper no.  1.  Konsentrat  yang  diperoleh selanjutnya  di vacum pada  suhu  40 o C menggunakan rotary  evaporator dan hasilnya disimpan dalam lemari pendingin pada suhu 4 o C sebagai larutan stok.

## Pembuatan Larutan Untuk Perlakuan
Konsentrasi ekstrak umbi kembang sungsang 10  %  diperoleh  melalui  metode pengenceran  yaitu  mencampur  larutan stok  sebanyak  10  ml  dengan  akuades sampai  volumenya  mencapai  100  ml. Konsentrasi kolkisin  0,1  %  dibuat  dengan cara  melarutkan  1  mg  kolkisin  murni berbentuk  kristal dari Sigma  Chemical  Co dalam 99 ml akuades kemudian dihomogenkan  dengan  sentrifus  pada kecepatan 14.000 rpm selama 5 menit.

## Prosedur Kerja
Semua  peralatan  yang  digunakan  dalam penelitian  disterilkan  dalam  autoclave pada  suhu  121 o C  dan  tekanan  17.5  psi selama  1  jam.  Media  yang  digunakan untuk menginduksi tunas dan akar adalah media  dasar  MS  +  ZPT  dan  bahan tambahan sesuai perlakuan. Media dipanaskan  di  atas  kompor  listrik  sampai terlihat jernih. Setelah itu, media dituangkan ke dalam botol kultur sebanyak 40  ml  terdiri  dari  media  dasar  MS  tanpa bahan tambahan, media MS sebanyak 36 ml + 4 ml ekstrak kembang sungsang, dan media  MS  36  ml  +  4  ml  kolkisin  murni. Media disterilisasi menggunakan autoclave  selama  30  menit  kemudian diinkubasi pada suhu ruangan.
Tunas  muda  yang  tumbuh  pada  bonggol pisang  kepok  abu,  kepok  batu  dan  kepok kuning  dibersihkan  dengan  akuades  steril sebelum dipotong-potong. Bonggol dipotong  sesuai  ukuran  botol  kultur  dan direndam dalam alkoho 96 %. Selanjutnya, bonggol  dipindahkan  dalam  botol  yang berisi  asam  sitrat  dan  dikocok  selama  10 menit. Bonggol kembali dipotong seukuran 2 cm dan direndam kembali dengan asam sitrat. Kemudian, bonggol dipotong kembali menjadi 4 – 8 eksplan.
Induksi  multiplikasi  akar  dan  tunas  terdiri dari  5  tahap,  yaitu:  tahap  E2  merupakan tahap  induksi  kalus,  tahap  P0,  P1,P2 merupakan  subkultur  untuk  menginduksi tunas, dan tahap rooting untuk menginduksi  akar  dan  daun.  Masing- masing  subkultur  dilakukan  selama  4 minggu.
Keberhasilna pertumbuhan planlet ditentukan  secara  kualitas  dan  kuantitas. Pengamatan  dilakukan  setiap  4  minggu pada tiap tahapan. Keberhasilan pertumbuhan  planlet  secara  kualitatif dilihat dari diferensiasi morfologi eksplan/planlet  dengan  system  skoring, yaitu 0  = eksplan  mati, 1  = eksplan  tetap segar  tetapi  tidak  berkembang,  2  = eksplan tetap segar dan berkembang, dan 3  =  eksplan  segar  dan  terbentuk  kalus. Keberhasilan multiplikasi  secara  kuantitas ditentukan  dengan  parameter: persentase kultur yang kontaminan, persentase eksplan  hidup,  jumlah  tunas,  panjang tunas (cm),  dan  jumlah daun (Avivi et  al. , 2013). Data  kuantitatif  hasil  pengukuran dianalisis  Sidik  Ragam  dan  jika  ada perbedaan  akan  dilanjutkan  dengan  uji DMRT  pada  taraf  5 %,   sedangkan   data kualitatif    akan    ditelaah    menggunakan analisis    perbandingan  antara  data  hasil tanaman yang diperlakukan dengan tanaman kontrol.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Diferensiasi Morfologi Eksplan/Planlet Diferensiasi morfologi eksplan/planlet akibat penambahan ekstrak umbi kembang sungsang  (A2)  dalam  media in  vitro tidak menunjukkan hasil yang baik untuk pisang kapok abu  yaitu semua eksplan mati pada subkultur ke 2 (P0) dan kapok batu semua eksplan  mati  pada  subkultur  ke  3  (P1). Sedangkan eksplan kapok kuning berhasil berdiferensiasi morfologi dengan nilai skor 3 yaitu eksplan tetap segar dan terbentuk kalus untuk semua perlakuan (A1, A2, dan A3). Hasil selengkapnya dapat dilihat pada Tabel 1.

## Keberhasilan Eksplan Hidup
Persentase  eksplan  hidup  (persentase kultur  yang  kontaminan)  selama  5  kali subkultur (E2, P0, P1, P2, R ) menunjukkan hasil bahwa semua (100%) eksplan pisang kapok kuning hidup pada semua
perlakuan,  sedangkan  eksplan  pisang kapok  abu  dan  batu  pada  perlakuan penambahan  ekstrak  umbi  kembang sungsang  persentase  hidup  0  %  (semua mati). Hasil selengkapnya dapat dilihat dari Tabel 2.
Tabel 1. Nilai skorsing diferensiasi morfologi eksplan dari minggu ke 1-25 SMT
Perlakuan A1 A2 A3 E2 P0 P1 P2 R E2 P0 P1 P2 R E2 P0  P1 P2  R KA 3 3 3 3
3 3 3 3 3 3 3 0 0 0 0 KB 3 3 3 3
3 3 3 3 3 3 3 2 0 0 0 KK 3 3 3 3
3 3 3 3 3 3 2 3 3 3 3
Keterangan :  KA = Kapok Abu; KB = Kepok Batu; KK = Kapok Kuning;
A1 = tanpa bahan tambahan (kontrol negatif); A2 = penambahan kolkisin 0,1 % (kontrol positif); A3 = penambahan ekstrak umbi kembang sungsang 10 %.
Tebel 2. Persentase eksplan hidup mulai minggu ke 1-25 SMT
Perlakuan A1 A2 A3 KA 100 % 100 % 0 % KB 100 % 100 % 0 % KK 100 % 100 % 100 %
Keterangan :  KA = Kapok Abu ; KB = Kepok Batu ; KK = Kapok Kuning
A1 = tanpa bahan tambahan (kontrol negatif); A2 = penambahan kolkisin 0,1 % (kontrol positif); A3 = penambahan ekstrak umbi kembang sungsang 10 %.
Gambar 1. Contoh media yang terkontaminasi bakteri dan jamur
Kualitas  keberhasilan  kultur in  vitro beberapa  varietas  pisang  kepok  dengan pemberihan variasi mutagen menunjukkan respon  yang  beragam.  Eksplan  pisang kepok  abu  dan  batu  100  %  tidak  berhasil tumbuh  (mati)  pada  media  mengandung ekstrak umbi kembang sungsang disebabkan  terjadi  kontaminasi  media. Hasil pengamatan mengindikasikan kontaminasi diduga disebabkan oleh jamur dan  bakteri  (Gambar  1).  Kontaminasi
bakteri  golongan  gram positif dapat  dilihat dari  lapisan  bagian  atas  media    terbentuk lendir berwarna putih kecoklatan (Setiyoko, 1995).  Kontaminasi  ini  diduga  disebabkan sterilisasi  yang  kurang  optimal.  Sumber eksplan juga dapat menjadi faktor munculnya  kontaminasi.  Dalam  penelitian ini eksplan berasal dari kebun warga yang kemungkinan  mengandung  bakteri  yang cukup  banyak  sehingga  sterilisasi  standar yang  ada  di  laboratorium  MTC  PT  GGPC
kurang optimal menghilangkan bakteri yang ada  di  eksplan.  Kontaminasi  media  juga ada  yang  disebabkan  oleh  jamur.  Hal  ini ditandai  adanya  kumpulan  hifa  yang berwarna putih keabu-abuan pada permukaan media dan eksplan. Kontaminasi jamur diduga akibat lingkungan  kerja  yang  kurang  steril. Peningkatan kelembapan dapat menyebabkan  ruang  kerja  yang  steril menjadi tidak steril dan akan mempercepat perkembangan  mikroorganisme.  Menurut Nursalmi (2018) perkembangan
mikroorganisme  ini  akan  menyebabkan persaingan
dengan planlet dan mengganggu pertumbuhan planlet.
Bahkan  dalam  hal  ini  menyebabkan kematian eksplan. Setiyoko (1995)
menyebutkan  bahwa  jamur  yang  umum mengkontaminasi  media  di  labortorium adalah Monilla  sp , Penisillium  sp .,  dan Aspergillus sp.

## Jumlah Tunas
Hasil  analisis  ragam  jumlah  tunas  planlet pada  minggu  ke  25  menunjukkan    bahwa faktor A, faktor B dan interaksi Faktor A dan B  berpengaruh  nyata  terhadap  jumlah tunas. Sehingga, uji lanjut yang digunakan yaitu faktor interaksi faktor A dan B. Hasil uji DMRT menunjukkan perlakuan pemberian  bahan  tambahan pada media kultur jaringan  menghasilkan jumlah tunas planlet  yang  sama  pada  kapok  abu  dan batu.  Pada  kapok  kuning  pemberian bahan  tambahan  mampu  meningkatkan jumlah tunas yang terbentuk dibandingkan  planlet    dari  perlakuan kontrol,  dan  penambahan  kolkisin  0,1  % menghasilkan jumlah tunas tertinggi dengan  nilai  rata-rata  1,60  tunas.  Hasil selengkapnya dapat dilihat pada Tabel 3.

## Tabel 3. Pengaruh perlakuan dan jenis pisang terhadap jumlah tunas
Perlakuan Jenis Pisang Kepok abu Kepok batu Kepok kuning 0% 1.40 ± 0.55 Ab 1.00 ± 0.00 Ab 1.20 ± 0.45 Aa 0.1% 1.00 ±  0.00 Aa 1.20 ±  0.45 Aa 1.60 ±  0.55 Ba 10% 0.00 ± 0.00 Ab 0.00 ± 0.00 Ab 1.40 ± 0.55 Ba
Keterangan : *Pada baris yang sama, angka yang diikuti oleh huruf majuscule yang berbeda menunjukkan simple effect dari perlakuan yang berbeda nyata pada taraf signifikan 0.05; dan  pada  kolom  yang  sama,  angka  yang  diikuti  huruf miniscule yang  berbeda menunjukkan simple effect jenis pisang yang berbeda nyata pada taraf 0.05% dengan Duncan Multiple Range Test.

## Tinggi Tunas
Hasil  ANARA  tinggi  tunas  menunjukkan bahwa nilai signifikansi pada faktor A yaitu 0.001 berbeda nyata dan interaksi faktor A dan  B  yaitu  0.006<  0.05,  berpengaruh nyata  terhadap  jumlah  tunas.  Sedangkan faktor B bernilai 0.08 > 0.05 tidak berbeda nyata, sehingga, uji lanjut yang digunakan yaitu faktor interaksi faktor A dan B. Hasil uji lanjut diperoleh bahwa perlakuan kontrol negatif  memberikan pengaruh tinggi tunas planlet  yang  sama  untuk  semua  varietas pisang.    Pada  perlakuan  kontrol  positif      , kapok batu dan kapok kuning menghasilkan  tinggi  tunas  planlet  yang sama dan lebih baik apabila dibandingkan dengan kapok abu. Sedangkan perlakuan utama  yaitu  pemberian  ekstrak  umbi
kembang  sungsang  hanya  menunjukkan pengaruh  tinggi  tunas  yang  signifikan pada kapok kuning sedangkan  kapok abu dan batu tidak diperoleh data dikarenakan eksplan mati (Tabel 4).

## Jumlah Akar
Menurut hasil ANARA jumlah akar menunjukkan bahwa nilai signifikansi pada faktor  A  berbeda  nyata,  begitu  pula  pada interaksi faktor A dan B yaitu 0.034< 0.05, berpengaruh  nyata  terhadap  jumlah  akar, sedangkan  pada  faktor  B  tidak  berbeda nyata,  sehingga  uji  lanjut  yang  digunakan adalah  interaksi  antara  faktor  A  dan  B. Hasil  Uji  lanjut  interaksi  antara  faktor    A dan  faktor  B  menunjukkan  bahwa  pada perlakuan  kontrol  negatif    memberikan
hasil  jumlh  akar  planlet  yang  sama  untuk semua  jenis  pisang.    Pada  perlakuan kontrol  positif,  kapok  batu  dan  kapok kuning  menghasilkan  jumlah  akar  planlet yang  sama  dengan  jumlah  akar dan  lebih banyak  apabila  dibandingkan  dengan kapok  abu.  Sedangkan  perlakuan  utama
yaitu  pemberian  ekstrak  umbi  kembang sungsang  tidak  menunjukkan  pengaruh terhadap  jumlah  akar  pada  kapok  kuning dibandingkan kapok abu dan batu meskipun  keduanya  tidak  diperoleh  data dikarenakan eksplan mati (Tabel 5).

## Tabel 4. Pengaruh perlakuan penambahan biomutagen dan jenis pisang terhadap tinggi tunas
Perlakuan Jenis Pisang Kepok abu Kepok batu Kepok kuning 0% 2.32 ± 0.97 Ab 2.06 ± 1.48 Ab 1.80 ± 1.04 Ab 0.1% 0.74 ± 0.38 Aa 2.90 ± 1.24 Ba 1.92 ± 1.76 Bb 10% 0.00 ± 0.00 Bb 0.00 ± 0.00 Bb 1.78 ± 0.30 Ab
Keterangan : *Pada baris yang sama, angka yang diikuti oleh huruf majuscule yang berbeda menunjukkan simple effect dari perlakuan yang berbeda nyata pada taraf signifikan 0.05; dan  pada  kolom  yang  sama,  angka  yang  diikuti  huruf miniscule yang  berbeda menunjukkan simple effect jenis pisang yang berbeda nyata pada taraf 0.05% dengan Duncan Multiple Range Test.
Tabel 5. Pengaruh interaksi antara perlakuan pemberian bahan tambahan dan jenis pisang kapok terhadap jumlah akar planlet
Perlakuan Jenis pisang Kepok abu Kepok batu Kepok kuning 0% 1.40 ± 0.55 Ba 1.20 ± 1.79 Bb 0.20 ± 0.45Bb 0.1% 0.80 ± 0.84 Ab 2.40 ±  1.67 Ba 2.20 ±  0.84 Ba 10% 0.00 ± 0.00 Bb 0.00 ± 0.00 Bb 0.60 ± 0.89 Bb
Keterangan: *Pada baris yang sama, angka yang diikuti oleh huruf majuscule yang berbeda menunjukkan simple effect dari perlakuan yang berbeda nyata pada taraf signifikan 0.05; dan  pada  kolom  yang  sama,  angka  yang  diikuti  huruf miniscule yang  berbeda menunjukkan simple  effect jenis  pisang  yang  berbeda  nyata  pada  taraf  0.05%  dengan Duncan Multiple Range Test.

## Panjang Akar
Hasil  ANARA  parameter  panjang  akar planlet menampilkan bahwa nilai signifikansi  pada  interaksi  Faktor  A  yaitu 0.004< 0.05,  berpengaruh nyata  terhadap jumlah  tunas.  Sedangkan  untuk  faktor  B dan interaksi faktor A dan B, tidak bernilai signifikan,  sehingga  uji  lanjut  hanya dilakukan  pada  faktor  A.  Uji  lanjut menampilkan bahwa panjang akar perlakuan kontrol negatif dan kontrol positif menunjukkan  panjang  akar  yang  sama dibandingakan  perlakuan  penambahan biomutagen ekstrak umbi kembang sungsang. Panjang akar tertinggi diperoleh pada  penambahan  kolkisin  0,1  %  dan terendah pada penambahan ekstrak umbi kembang sungsang (Tabel  6).

## Jumlah Daun
Hasil  analisis  ragam  jumlah  daun  planlet pada  minggu  ke  25  menunjukkan    nilai signifikansi  pada  faktor  A  yaitu  0.000 bernilai  signifikan  dan  pada    interaksi Faktor A dan Faktor B yaitu 0.005 < 0.05, berpengaruh nyata terhadap jumlah daun. Sedangkan  untuk  faktor  B  0.236  >  0.005 tidak bernilai signifikan, sehingga pada uji lanjut  yang  digunakan  adalah  interaksi antara  faktor  A  dan  B.  Uji  lanjut  interaksi antara faktor  A dan faktor B menunjukkan bahwa      perlakuan  kontrol  negatif  pada kapok  abu  menghasilkan  jumlah  daun tertinggi,    perlakuan  penambahan  ekstrak umbi  kembang  sungsang  menghasilkan jumlah daun terendah, dan pada perlakuan
kontrol positif  (kolkisin 0,1 %) kapok batu memiliki  jumlah  daun    terbanyak  jika dibandingkan kapok lainnya (Tabel 7).
Tabel 6. Pengaruh perlakuan terhadap panjang akar
Perlakuan Nili rata-rata 0% 3.0213 a 0.1% 3.4733 a 10% 0.1833 b
Keterangan : Angka yang diikuti huruf berbeda pada kolom yang sama menunjukkan main effect jenis pisang yang berbeda nyata pada taraf 0.05% dengan Duncan Multiple Range Test.
Tabel 7.  Uji lanjut pengaruh perlakuan dan jenis pisang terhadap jumlah daun planlet
Perlakuan Jenis pisang Kepok abu Kepok batu Kepok kuning 0% 4.40 ± 1.14 Aa 1.80 ± 1.64 Bb 1.80 ± 1.48 Bb 0.1% 2.40 ± 1.82 Bb 2.80 ± 1.30 Bb 1.80 ± 1.10 Bb 10% 0.00 ± 0.00 Bc 0.00 ± 0.00 Bc 1.40 ± 1.14 Bb
Keterangan: *Pada baris yang sama, angka yang diikuti oleh huruf majuscule yang  berbeda menunjukkan simple effect dari perlakuan yang berbeda nyata pada taraf signifikan 0.05; dan  pada  kolom  yang  sama,  angka  yang  diikuti  huruf miniscule yang  berbeda menunjukkan simple  effect jenis  pisang  yang  berbeda  nyata  pada  taraf  0.05%  dengan Duncan Multiple Range Test.
Pemberian  kolkisin  pada  media  diduga mampu  menginduksi  terbentuknya  planlet poliploid  pisang  kapok  abu,  batu  dan kuning.  Hal  ini  diindikasikan  dengan peningkatan parameter pertumbuhan pada jumlahtunas,  tinggi  tunas,    jumlah  akar, panjang akar, dan luas daun serta ukuran sel epidermis dan stomata. Hasil ini sesuai pendapat Dounias (2008) bahwa  tanaman poliploid  secara  umum  memiliki  beberapa kelebihan,  yaitu  selnya  lebih  besar, tanaman  lebih  tinggi,  daun  lebih  lebar, buah  lebih  besar,  produksi  lebih  tinggi, dan  lebih  tahan  terhadap  serangan penyakit. Hasil serupa diperoleh Nursalmin (2018)   yaitu perendaman planlet anggrek Krisan  Varietas  Pasopati  dalam  kolkisin secara In  Vitro mampu  meningkatkan ukuran  dan  jumlah  daun,  jumlah  buku, panjang  akar,  jumlah  akar  serta  tinggi planlet. Sedangkan mutagen alami ekstrak umbi  kembang  sungsang  belum  mampu menginduksi  munculnya  planlet  pisang kapok. Ketidakmampuan ini diduga konsentrasi  yang  digunakan  belum  tepat sehingga sel poliploid belum terbentuk. Hal
ini  sesuai  yang  dikatakan  oleh  Suryo (1997)  bahwa  respon  setiap  tanaman berbeda  terhadap  perlakuan  kolkhisin, bergantung konsentrasi dan lama perendaman.  Lebih  lanjut  Sofia  (2007) mengemukakan  bahwa  jika  konsentrasi kolkhisin  kurang  tepat  maka  poliploid belum  dapat  diperoleh  sebaliknya  jika konsentrasinya terlalu tinggi maka kolkhisin  akan  berpengaruh  negatif  yaitu penampilan tanaman menjadi jelek, sel-sel banyak yang rusak dan bahkan menyebabkan matinya tanaman.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  pengamatan  maka dapat disimpulkan :
1.  Ekstrak umbi kembang sungang dengan konsentrasi  10  %  belum  mampu menginduksi  munculnya  planlet  pisang kapok poliploid.
2.  Sifat  jumlah  tunas,  tinggi  tunas,  jumlah akar, dan panjang akar yang meningkat
merupakan indikator terbentuknya planlet pisang kapok poliploid.
3.  Pisang  kapok  kuning  memberikan respon  positif  terhadap  pemberian mutagen  dibandingkan  kapok  abu  dan batu.

## DAFTAR PUSTAKA
Acharya, D., Shrivastava, S., & Wed, G. S. (2005). Gloriosa superba : Naturally a Handsome Herb. http://www.disabled- world.com/artman/publish/glori.sht ml. 21/03/2005. Addink,
W. (2002). Colchicin e.
http://actahort.org/books/502/502-
27. htm. 18/06/ 2004.
Astutik.  (2008).  Penggunaan  Air  Kelapa
dalam Media Kultur Jaringan Pisang. Buana Sains , 8(1): 67-72.
Avivi, Sholeh., Soedaramo, S. H., Prasetyo,  P. A. (2013). Multiplikasi Tunas dan Aklimatisasi Tiga
Varietas  Pisang:  Raja  Nangka, Kepok  dan  Mas. Jurnal  Hort.
Indonesia , 4(2) : 83-89. Dounias,  E.  (2008). Gloriosa  superba L. Protologue Sp . pl. 1(305): 1753. Ernawiati,  E.  (2007).  Efek  Antimitosis Ekstrak  Umbi  Kembang  Sungsang ( Gloriosa  superba L.)  terhadap
Pembelahan  sel  Akar  Tanaman Cabai  Merah. Jurnal  Sains  dan Teknologi edisi khusus, 13(1).
(2008). Pengaruh Ekstrak
Umbi Kembang
Sungsang
( Gloriosa  superba L.)  Terhadap Pembelahan sel Akar Umbi
Bawang  Bombay ( Allium cepa L.). Penelitian  Dosen  Muda  DIKTI.
Jurnal Sains MIPA , 14(2): 129-132.
, Agustrina, R., Irawan, B., Nurhasanah,  E.,  &  Kanedi,  M. (2018).  Germplasm  Diversity  Of Banana  ( Musa Spp)  in  The  City of Bandar  Lampung,  Indonesia  by Type  of  Genome  and  Number  of Chromosome.  Sch.  J.  Agric.  Vet. Sci, 5(4): 251-254.
Hutami,  S.,  Mariska,  I.,  &  Supriati,  Y. (2006).  Peningkatan  Keragaman Genetik Tanaman
melalui
Keragaman  Somaklonal. Jurnal Agro Biogen, 2(2): 81-88.
Lakshmi  Priyat,  T.,  &  Swathi,  S.  (2015). Estimation  of  Colchicine  in  Tuber, Seed  and  Leave  Samples  of Gloriosa superba Using HPLC and
Their  Antibacterial  Studies  on Pathogenic  Strains.  International Journal of Natural Products Research, 5(3): 34-41. Manzo-Sanchez,  G,  Buenorosto-Nava,  M. T.,  Guzman-Gonzales, S., Orozco- Santos, M., Youssef, M., & Escobedo-Gracia  M.  R.  M.  (2015). Genetic  Diversity  in  Banana  and Plantains ( Musa spp.), in
Agriculture and Biological Sciences: Molekular  Approach  to  Genetic Diversity.  Mahmut  Caliskan,  Guul Cevahir  Oz,  I.  Halil  Kavakli  and Birguul Ozcan (Ed). ISBN 978-953- 51-2042-1, DOI: 10.5772 / 59421. Nursalmin, A.,  Ai Komariah & Hidayat, O.
(2018). Pengaruh Lama Perendaman Kolkisin terhadap Pertumbuhan Planlet ( Chrysanthemum morifolim R)
Krisan  Varietas  Pasopati  Cara  In Vitro. PASPALUM,  6(2): 124-133.
Retnoningsih, A., Megia, R., & Hartana, A.
(2010).  Molecular  Verification  an Diversity  Analysis  of  Indonesian BB,  AAB,  and  ABB  Banana Cultivars. Tree and Forestry Sciences and Biotechnology , 4(Specieal Issue 1): 69 –76. Setiyoko, A. (1995). Pedoman Pelaksanaan Teknik Kultur Jaringan Tanaman. Penebar Swadaya. Jakarta.
Soedjono,  S.  ( 2005).  Aplikasi  Mutasi Induksi  Dan  Variasi  Somaklonal Dalam Pemuliaan Tanaman. Jurnal Litbang Pertanian , 22(2). Sofia, D. (2007). Respon Pertumbuhan dan Produksi Mentimun ( Cucumis sativus L) dengan Mutagen
Kolkisin.  Karya  Tulis.  Fakultas Pertanian  Universitas  Sumatara Utara. Medan.
Suryo,  H.  (1995). Sitogenetika .  Gadjah Mada University Press. Yogyakarta. hal. 217- 224.