J. Kartika Kimia , Mei 2024, 7, (1), 15-18 Journal homepage : http://jkk.unjani.ac.id/index.php/jkk P-ISSN: 2655-1322     E-ISSN: 2655-0938

## Kandungan Metabolit Sekunder dan Aktivitas Antioksidan Batang Tanaman Selasih Ungu (Ocimum basilicum Linn.)

## Secondary Metabolite Content and Antioxidant Activity of Basil Stems
(Ocimum basilicum Linn.)
Erni Paulina, Anis Shofiyani, Rudiyansyah *
Jurusan Kimia, Fakultas MIPA Universitas Tanjungpura, Pontianak, Indonesia *E-mail: rudiyansyah@chemistry.untan.ac.id
DOI: https://doi.org/10.26874/jkk.v7i1.242
Received : 10 Feb 2024, Revised : 1 June 2024, Accepted : 1 June 2024, O nline : 1 June 2024

## Abstrak
Selasih  ungu  ( Ocimum  basilicum Linn.)  merupakan  salah  satu  tanaman  endemik  Kalimantan  Barat  yang berpotensi sebagai antioksidan alami. Penelitian kandungan kimia dan bioaktifitas pada tanaman selasih ungu telah  banyak  dilakukan  khususnya  pada  bagian  daun,  akan  tetapi  informasi  ilmiah  pada  bagian  batang tanaman ini masih sangat terbatas. Penelitian dilakukan untuk mengidentifikasi golongan senyawa metabolit sekunder dengan uji fitokimia dan menentukan aktivitas antioksidan menggunakan metode DPPH terhadap ekstrak dan fraksi-fraksi batang tanaman selasih ungu. Hasil penelitian menunjukkan bahwa crude ekstrak metanol  dan  semua  fraksi  mengandung  alkaloid  dan  tanin.  Selain  itu, crude ekstrak  metanol  juga mengandung flavonoid  dan  fenolik,  fraksi  diklorometana  (DCM)  mengandung  flavonoid,  dan  pada  fraksi metanol terkandung senyawa golongan fenolik. Nilai aktivitas antioksidan (IC 50 ) berturut-turut untuk crude ekstrak metanol, fraksi n -heksana, fraksi DCM, dan fraksi metanol adalah 65,52 ppm, 98,11 ppm, 2,89 ppm, dan 67,11 ppm, sedangkan asam askorbat sebagai standar positif memiliki nilai IC 50 11,75 ppm. Berdasarkan nilai-nilai  aktivitas  antioksidan  tersebut  diketahui  fraksi  DCM  batang  tanaman  selasih  ungu  memiliki aktivitas antioksidan lebih kuat dibandingkan asam askorbat.
Kata kunci: antioksidan, DPPH, Fitokimia, s, Selasih Ungu

## Abstract
Basil (Ocimum basilicum Linn.) is one of the endemic plants in West Kalimantan known for its antioxidant activity.  While  some  studies  have  focused  on  the  chemical  constituents  and  bioactivities  of  basil  plants, particularly the leaves, scientific information on the stems of this plant remains underexplored. This study aimed to identify secondary metabolites through phytochemical assays and determine antioxidant activity using the DPPH method on crude methanol extract and fractions of basil stems. The results showed that the crude methanol extract and all fractions contained alkaloids and tannins. Additionally, the crude methanol extract also contained flavonoids and phenolics, while the dichloromethane (DCM) and methanol fractions contained flavonoids and phenolic compounds, respectively. The antioxidant activity (IC 50 ) values of crude methanol extract, and fractions of n-hexane, DCM, and methanol were 65.52 ppm, 98.11 ppm, 2.89 ppm, and 67.11 ppm, respectively, while ascorbic acid showed an IC 50 value of 11.75 ppm. Based on these results, it is concluded that the DCM fraction exhibits stronger antioxidant activity than ascorbic acid.
Keywords: antioxidant, basil, DPPH, Ocimum basilicum Linn., phytochemical test
1 Pendahuluan
Salah  satu  tanaman  yang  tumbuh  subur  dan cukup  mudah  ditemukan  di  Indonesia  serta memiliki  Banyak  manfaat  bagi  kesehatan  adalah
selasih.  Selasih  merupakan  salah  satu  tanaman pada  famili  Lamiaceae  dengan  nama  spesies Ocimum basilicum .
Selasih tumbuh tersebar di seluruh kepulauan Indonesia, Asia, Eropa, dan Amerika Selatan [1]. Tanaman  Genus Ocimun memiliki  beragam bioaktivitas  farmakologi  seperti  antimikroba, antiinflamasi,  antioksidan,  antitusif,  antidiabetes, antiartritis, antifertilitas, dan antihipertensi [2].
Secara  umum  tanaman  selasih  dikenal menghasilkan  minyak  atsiri  dari  daun  dimana kadarnya  dipengaruhi  oleh  beberapa  faktor, seperti  varietas,  tempat  tumbuh,  keadaan  tanah, iklim, dan intensitas matahari [3,4]. Selain minyak atsiri, telah dilaporkan adanya kandungan  alkaloid,  flavonoid,  dan  steroid, saponin, dan polifenol pada daun dan biji selasih [5,6].  Golongan  senyawa  metabolit  sekunder tersebut  memiliki  beragam  bioaktivitas  termasuk antioksidan.
Antioksidan  adalah  senyawa  kimia  yang mempunyai kemampuan mereduksi efek merusak dari  senyawa-senyawa  radikal  [7].  Senyawa antioksidan berfungsi menstabilkan radikal bebas dengan melengkapi kekurangan elektron sehingga mencegah  terjadinya  reaksi  berantai.  Radikal bebas  dapat  terbentuk  dengan  dua  cara,  pertama secara  endogen  sebagai  respon  normal  dari peristiwa biokimia dalam tubuh dan kedua secara eksogen dari polusi di luar tubuh yang bereaksi di dalam tubuh [8].
Berdasarkan  literatur,  informasi  kandungan kimia dan sifat antioksidan bagian batang selasih khususnya  selasih  ungu  ( O.  basilicum )  masih sangat  terbatas.  Oleh  sebab  itu  telah  dilakukan analisis  kandungan  metabolit  sekunder  dengan metode  uji  fitokimia  beserta  uji  aktivitas antioksidan  dengan  metode  DPPH    [9]  terhadap batang tanaman O. basilicum .
2 Metode Penelitian/ Method
2.1 Preparasi dan Ekstraksi
Batang  tanaman  selasih  ungu  dibersihkan, dipotong kecil-kecil, dan dikering anginkan pada suhu  kamar  hingga  kering.  Batang  selasih  ungu kering dihaluskan dengan blender. Sebanyak 500 g  serbuk  batang  selasih  ungu  dimaserasi  dalam 1500  mL  metanol  (3x24  jam)  dan  setiap  24  jam ekstrak  disaring,  filtrat  dievaporasi  pada    40 o C hingga  menghasilkan crude ekstrak  metanol, selanjutnya  ditimbang. Crude ekstrak  metanol dilarutkan kembali dalam metanol untuk dipartisi pada  corong  pisah  (ekstraksi  cair-cair)  dengan pelarut n -heksana  dan  diklorometana  (DCM) secara  berurutan  sehingga  diperoleh  fraksi n - heksana, fraksi DCM, dan fraksi metanol. Semua
fraksi  yang  diperoleh  dievaporasi  pada  40 o C sampai kering lalu ditimbang.

## 2.2 Uji Fitokimia
Uji fitokimia mengadopsi prosedur Harborne [10]. Enam golongan senyawa metabolit sekunder diuji  melalui  uji  fitokimia  yaitu  flavonoid, alkaloid, tanin, steroid, triterpenoid, dan fenolik.
Uji Flavonoid: Beberapa tetes asam klorida (HCl)  pekat  dan  serbuk  magnesium  (Mg) ditambahkan ke dalam larutan sampel uji untuk uji flavonoid.  Hasil  uji  dinyatakan  positif  jika dihasilkan  perubahan  warna  larutan  sampel  uji menjadi jingga, merah, kuning, atau ungu.
Uji  Alkaloid: Uji  golongan  alkaloid dilakukan  dengan  menambahkan  masing-masing pereaksi Meyer dan Wagner pada larutan sampel uji.  Hasil  positif  ditandai  dengan  terbentuknya endapan  putih  pada  larutan  sampel  uji  dengan penambahan  pereaksi  Meyer  dan  endapan  coklat jika diberikan pereaksi Wagner.
Uji  Tanin: Larutan  10  %  besi(III)  klorida (FeCl 3 )  ditambahkan  pada  sampel  untuk  uji golongan  tanin.  Larutan  sampel  yang  berubah warna  menjadi  hijau  atau  biru  kehitaman menandakan hasil uji positif.
Uji  Steroid  dan  Triterpenoid: Pereaksi Liebermann - Burchard ditambahkan pada sampel untuk uji golongan steroid atau triterpenoid. Hasil uji  positif  untuk  steroid  ditunjukkan  dengan perubahan warna larutan sampel uji menjadi biru kehijauan,  sedangkan  hasil  uji  positif  untuk triterpenoid ditunjukkan dengan perubahan warna larutan sampel uji menjadi merah.
Uji Fenolik: Uji golongan fenolik dilakukan dengan  menambahkan  larutan  5  %  besi(III) klorida (FeCl 3 ) terhadap larutan sampel uji. Hasil uji  positif  mengandung  fenolik  apabila  larutan sampel  uji  berubah  warna  menjadi  hijau,  merah, ungu, atau biru kehitaman.

## 2.3 Uji Aktivitas Antioksidan
Uji  aktivitas  antioksidan  DPPH  menggunakan prosedur  Blois  dengan  beberapa  modifikasi  [9]. Crude ekstrak  metanol  dan  fraksi-fraksi  dilarutkan masing-masing  dalam  pelarutnya  menjadi  larutan induk  1000  ppm.  Masing-masing  larutan  induk kemudian  diencerkan  menjadi  berbagai  variasi konsentrasi.  Masing-masing  larutan  induk crude ekstrak  metanol  dan  fraksi-fraksi  diencerkan menjadi 10, 20, 40, 80, dan 160 ppm. Sebanyak 4 mL masing-masing larutan uji dimasukkan dalam tabung
reaksi,  ditambahkan  2  mL  larutan  DPPH  50  ppm, divortex  hingga  homogen,  diinkubasi  selama  30 menit  dalam  ruangan  gelap,  kemudian  diukur serapannya  dengan  spektrofotometer  UV-Vis  pada panjang gelombang 516 nm. Dengan prosedur yang sama dilakukan juga uji pada larutan blanko (DPPH) yang tidak mengandung sampel uji. Sebagai kontrol positif, digunakan asam askorbat konsentrasi 5, 10, 15, 20, dan 25 ppm.

## 3 Hasil dan Diskusi
3.1 Rendemen Ekstraksi dan Fitokimia
Proses maserasi menghasilkan crude ekstrak metanol  sebanyak  6,75  g  (1,35  %)  yang selanjutnya dipartisi secara bertingkat menghasilkan  massa  dan  rendemen  fraksi-fraksi diperlihatkan dalam Tabel 1.
Tabel 1. Massa dan Rendemen Fraksi Fraksi Massa (g) Rendemen (%) n -heksana DCM Metanol 2,18 1,44 1,38 32,3 21,3 20,4 Residu 1,75 25,9
Tabel  1  menunjukkan  bahwa  senyawa  non- polar  merupakan  kandungan  utama  pada crude ekstrak  metanol  batang  tumbuhan  selasih  ungu. Semua  sampel  tersebut  diuji  fitokimia  dan antioksidan.  Uji  fitokimia  dilakukan  untuk mengetahui golongan senyawa metabolit sekunder yang  terdapat  dalam  sampel  uji.  Prinsip  dari  uji fitokimia  ini  adalah  melihat  ada  tidaknya perubahan  warna  atau  endapan  yang  terbentuk pada larutan sampel uji setelah ditambah pereaksi spesifik.
Tabel 2. Hasil Uji Fitokimia Crude Ekstrak Metanol dan Fraksi Sampel uji Uji Fitokimia Alkaloid Tanin Flavonoid Steroid Triterpenoid Fenolik Crude ekstrak + + + - - + Fraksi n -heksana + + - - - - Fraksi DCM + + + - - - Fraksi metanol + + - - - +
keterangan: (+) terdeteksi, (-) tidak terdeteksi
Tabel  2  memperlihatkan  data  hasil  uji fitokimia  dimana  terlihat crude ekstrak  metanol dan semua fraksi mengandung golongan senyawa metabolit  sekunder  alkaloid  dan  tanin, crude ekstrak  metanol  juga  mengandung flavonoid  dan fenolik,  pada  fraksi  DCM  dan  fraksi  metanol masing-masing terdapat senyawa golongan flavonoid  dan  fenolik.  Akan  tetapi  golongan senyawa  triterpenoid  dan  steroid  tidak  terdeteksi pada semua larutan sampel uji.

## 3.2 Aktivitas Antioksidan
Prinsip dari metode DPPH adalah mengetahui  interaksi  antara  DPPH  dengan senyawa antioksidan baik secara transfer elektron atau radikal hidrogen. Apabila semua elektron tak berpasangan (radikal bebas) pada DPPH menjadi berpasangan maka warna larutannya berubah dari ungu  tua  menjadi  kuning  terang.  Nilai  aktivitas peredaman radikal bebas (antioksidan) dinyatakan sebagai IC 50 . Nilai IC 50 terendah dihasilkan fraksi DCM sebesar  2,89  ppm,  diikuti  dengan crude ekstrak metanol  65,52  ppm,  fraksi  metanol  67,11  ppm, dan  fraksi n -heksana  sebesar  98,11  ppm,
sedangkan  nilai  IC 50 asam  askorbat  (kontrol positif) adalah 11,75 ppm (Tabel 3). Berdasarkan literatur,  ekstrak  atau  fraksi  akan  memiliki aktivitas antioksidan sangat kuat jika menunjukkan  nilai  IC 50 <  50  ppm,  kuat  dengan rentang  IC 50 =  50-100  ppm,  sedang  jika  IC 50 = 101-150 ppm, dan lemah jika IC 50 > 150 ppm [11].
Tabel  3 .    Tingkat  Aktivitas  Antioksidan Crude
Ekstrak dan Fraksi Berdasarkan Nilai IC 50 Ekstrak/ Fraksi IC 50 (ppm) Sifat Antioksidan Crude ekstrak 65,52 Kuat Fraksi n -heksana 98,11 Kuat Fraksi DCM 2,89 Sangat kuat Fraksi Metanol 67,51 Kuat Asam Askorbat 11,75 Sangat kuat
Berdasarkan  Tabel  3  terlihat  bahwa  fraksi DCM  dan  asam  askorbat  memiliki  aktivitas antioksidan  sangat  kuat, crude ekstrak  metanol, fraksi  metanol,  dan  fraksi n -heksana  tergolong antioksidan  kuat.  Aktivitas  antioksidan  yang sangat  kuat  fraksi  DCM  diduga  berkorelasi
dengan  golongan  senyawa  metabolit  sekunder flavonoid yang sudah dikenal sebagai antioksidan. Flavonoid  termasuk  golongan  senyawa  fenolik yang  mampu  menyumbangkan  radikal  hidrogen sehingga  dapat  menetralisir  radikal  bebas  atau menghentikan reaksi berantai yang sedang terjadi terjadi  [12].  Gugus hidroksi  (-OH)  yang  terdapat pada struktur senyawa flavonoid sangat mempengaruhi kemampuannya dalam menangkap radikal bebas DPPH [13]. Semakin banyak gugus hidroksil yang tersubstitusi pada struktur molekul maka kemampuan penangkapan radikal bebasnya semakin  kuat  karena  semakin  banyak  radikal hidrogen yang didonorkan [14].

## 4 Kesimpulan
Golongan  senyawa  metabolit  sekunder  pada batang  tanaman  selasih  ungu  adalah  alkaloid, tanin,  flavonoid,  dan  fenolik.  Fraksi  DCM memiliki tingkat aktivitas antioksidan sangat kuat dengan  nilai  IC 50 2,89  ppm,  lebih  baik dibandingkan  asam  askorbat  dengan  nilai  IC 50 11,75  ppm.  Dengan  demikian,  batang  tanaman selasih  ungu  berpotensi  untuk  dijadikan  sebagai salah satu sumber senyawa antioksidan alami.

## Daftar Pustaka
[1] Backer,  CA.,  Van  Den  Brink,  RCB.  1965. Flora of Java (Spermatophytes Only), Vol II., N.V.D. Noordhoff-Groningen-The Netherlands.
[2] Pattanayak,  P.,  Behera,  P.,  Das,  D.,  Panda, SK. 2010. Ocimum sanctum Linn. A reservoir plant for therapeutic applications, Pharmacognosy  Reviews ,  4,  (7),  95-105. 10.4103/0973-7847.65323
[3] Dharmawan,  RQ.,  Setiari,  N.,  Haryanti,  S. 2022.  Pertumbuhan  dan  rendemen  minyak atsiri tanaman selasih ( Ocimum basilicum L.) pada  naungan  yang  berbeda,  Metamorfosa: Journal  of  Biological  Sciences ,  9,  (1),  112- 121. 10.24843/metamorfosa.2021.v09.i01.p11
[4] Pitojo, S. 1996. Kemangi dan Selasih, Trubus Agriwidya , Unggara.
[5] Yulia,  M.,  Hidayana.  V.,  2017,  Uji  aktivitas sitotoksik  ekstrak  etanol  daun  selasih ( Ocimum basilicum L.) terhadap larva udang ( Artemia salina L.). Scientia: Jurnal Farmasi dan Kesehatan , 7, (2), 173-178. 10.36434/scientia.v7i2.134
[6] Sukandar,  D.,  Hermanto,  S.,  Amelia,  ER., Noviani, CP. 2015.  Karakterisasi  fraksi aktif antioksidan  dari  ekstrak  etanol  biji  kemangi ( Ocimum  basilicum L.), Jurnal  Kimia
Valensi , 1, (1), 39-49. 10.15408/jkv.v0i0.3598
[7] Langseth,  L.,  2000.  Oxidants,  Antioxidants, and  Disease  Prevention,  International  Life Sciences Institute, Europe Press.
[8] Setyaningsih, D., Nurmillah, OY., Windarwati,  S.  2010.  Kajian  aktivitas antioksidan dan antimikroba ekstrak biji, kulit buah,  batang,  dan  daun  tanaman  jarak  pagar ( Jatropa  curcas L.), Jurnal  Teknologi Pangan , 4, (2), 1-7.
[9] Blois  MS.  1958.  Antioxidant  Determination by the Use of a Stable Free Radical, Nature , 181, 1199–1200. 10.1038/1811199a0
[10] Harborne, JB. 2012, Phytochemical methods: A  guide  to  modern  techniques  of  plant analysis,  Springer  Sciences  &  Business Media.
[11] Molyneux, P. 2004. The use of the stable free radical  diphenylpicrylhydrazyl  (DPPH),  for estimating
antioxidant activity,
Songklanakarin  Journal  of  Science  and Technology , 2, (26), 211–219.
[12] Yuhernita,  Juniarti,  2011.  Analisis  senyawa metabolit sekunder dari ekstrak metanol daun surian  yang  berpotensi  sebagai  antioksidan, Makara, Sains , 15, (1), 48-52.
[13] Nakiboglu, M., Urek, RO., Kayali,
HA.,Tarhan,  L.  2007.  Antioxidant capacities of  endemic Sideritis  sipylea and Origanum sipyleum from Turkey, Food Chemistry , 104, (2), 630–635. 10.1016/j.foodchem.2006.12.012
[14] Lin,  HY.,  Kuo,  YH.,  Lin,  YL.,  Chiang,  W. 2009.  Antioxidative  effect  and  active components  from  leaves  of  Lotus  ( Nelumbo nucifera ), Journal  of  Agricultural  and  Food
Chemistry , 12, (57), 6623-6629. 10.1021/jf900950z