## EFEK ANTIMIKROBA EKSTRAK LIDAH BUAYA ( ALOE VERA ) TERHADAP ISOLAT BAKTERI PENYEBAB ACNE VULGARIS SECARA IN VITRO
Hany Yusmaini 1 ,  Meiskha Bahar 2
1 Departemen Farmakologi, Fakultas Kedokteran UPN “Veteran” Jakarta Email : hany.yusmaini@gmail.com
2 Departemen Mikrobiologi, Fakultas Kedokteran UPN “Veteran” Jakarta Email : meiskha27@gmail.com

## ABSTRAK
Acne vulgaris adalah suatu kondisi inflamasi umum pada unit polisebaseus, ditandai dengan komedo, papul,  pustul,  atau  nodul.  Penyakit  kulit  ini  bukan  merupakan  penyakit  yang  berbahaya  tetapi mempunyai dampak yang besar secara fisik maupun psikologik. Prinsip penanganan acne antara lain menurunkan  populasi Propionibacterium  acne dan  menekan    inflamasi.  Penelitian  sebelumnya menunjukkan  adanya  mikroorganisme  lainnya  dalam  lesi  yang  mungkin  berperan  selain Propionibacterium  acne yaitu Staphylococcus  aureus , S.  epidermidis dan Pityrosporum  ovale . Beberapa sumber melaporkan ada beberapa manfaat Aloe vera untuk kecantikan dan perawatan kulit. Aloe  vera juga  digunakan  secara  eksternal  untuk  mengobati  berbagai  kondisi  kulit  misalnya  luka, nyeri  dan  menekan  proses  inflamasi.  Penelitian  ini  dilakukan  untuk  mengetahui  efek  antimikroba ekstrak Aloe  vera konsentrasi  25%,50%  dan  75%  terhadap  isolat  bakteri  penyebab  Acne  vulgaris secara invitro dengan menggunakan metode difusi. Penelitian ini dimulai dengan melakukan  isolasi dan  identifikasi  bakteri  dari  lesi.  Bakteri  yang  ditemukan  dari  lesi  penderita  tergolong  bakteri golongan Gram positif yaitu Staphylococcus aureus dan Propionibacterium acne. Hasil uji One-way Anova    menunjukan  terdapat  perbedaan  bermakna  efektivitas ekstrak  lidah  buaya  terhadap S.aureus dan  P.acne. Ekstrak  Lidah  Buaya  ( Aloe  vera )    mempunyai  efek  antimikroba  terhadap  isolat  bakteri penyebab  Acne  vulgaris  yaitu Propionibacterium  acne dan Staphylococcus  aureus pada  konsentrasi 25%, 50% dan 75% secara invitro.
Kata Kunci: Acne vulgaris , Aloe vera , Propionibacterium acne , Staphylococcus aureus

## ABSTRACT
Acne vulgaris is a common inflammatory condition of the polisebaseus, characterized by comedones, papules, pustules, or nodules. This skin disease is not dangerous, but has a huge impact physically as well as psychologically. The principle of treatment of acne among other things reduce the population of Propionibacterium  acnes and  suppress  the  inflammation.  Previous  studies  found  any  other microorganisms  in  the  lesions  might  play  a  role  in  addition  to P.  acnes such  as Staphylococcus aureus, S. epidermidis, and Pityrosporum ovale. Some sources reported several benefits of Aloe vera for  beauty  and  skin  care.  Aloe  vera  is  also  used  externally  to  treat  various  skin  conditions  such  as injuries,  pain  and  suppress  the  inflammatory  process.  This study  was  conducted  to  determine  the antimicrobial  effects  of A.vera ,  extract  concentration  25%,  50%  and  75%  of  bacteria  isolates  that causes  acne  vulgaris  in  vitro  by  using  a  diffusion  method.  This  research  begins  with  isolation  and identification of  bacteria  from  the  lesions. S.  aureus and P.  acnes were  classified  as  Gram-positive bacteria . Based  on  the  analysis  of  data  from  the  One-way  ANOVA  test,  there  was  significant
differences  effectiveness  of  extract Aloe  vera against S.  aureus and P.  acne at  the  concentration group. The results showed that A.vera extract concentration of 25%, 50% and 75% have the ability to inhibit Propionibacterium acne and Staphylococcus aureus , through in vitro research.
Keywords: Acne vulgaris, Aloe vera, Staphylococcus aureus, Propionibacterium acne ___________________________________________________________________________

## PENDAHULUAN
Penelitian
ekstrak tumbuhan sampai  saat  ini  terus  dilakukan  salah satunya  untuk  menemukan  senyawa  baru yang  dapat  membunuh  mikroba  patogen. Kira-kira  20%  dari  tumbuhan  di  dunia telah diteliti biologi dan efek farmakologinya,  dan  sejumlah  antibiotika baru yang telah dikenal dipasaran diketahui  didapatkan  dari  sumber  alam atau  semisintetik. 1 Salah  satu  tumbuhan yang  dilaporkan  memiliki  efek  anti  jamur dan  antimikroba  adalah Aloe  vera .  Gel Aloe  vera bersifat  bakterisidal  terhadap Pseudomonas  aeruginosa ,  menghambat pertumbuhan Candida albicans,
Streptoccocus pyogenes dan Streptococcus faecalis . 1 Aloe vera , di Indonesia, sudah lama ditanam  oleh  masyarakat  sebagai  tanaman obat  keluarga  sekaligus  tanaman  hias karena  bentuknya  yang  cukup  unik. Terdapat  beberapa  jenis Aloe  vera yang umum dibudidayakan, yaitu Aloe sorocortin yang  berasal  dari  Zanzibar,
Aloe barbadensis Miler dan Aloe vulgaris . Jenis  yang  saat  ini  dibudidayakan  secara komersial  di  Indonesia  adalah Aloe barbadensis Miler  atau  yang  memiliki sinonim Aloe  vera Linn. 2 Zat  aktif  yang terdapat  dalam  lidah  buaya  meliputi monosakarida,  polisakarida,  asam  amino esensial  dan  non  esensial,  enzim,  mineral, vitamin,  antraquinon,  protein,  lignin, salisilat, saponin, sterol, tannin, magnesium  laktat  dan  prostaglandin. 3 Zat
yang bersifat antibakteri adalah antrakuinon, saponin dan tannin. 4,5,6

## Beberapa literatur menulis manfaat
Aloe vera untuk perawatan kulit, kosmetik dan asnutraceuticals .  Gel Aloe  vera digunakan untuk menyejukan dan melembabkan kulit, menghindari kulit dan kulit kepala bersisik atau kering, mempunyai efek protektif melawan kerusakan  kulit  akibat  radiasi.  Gel Aloe vera juga  memperlihatkan  aktivitas  anti penuaan  karena  mampu  menghambat proses  penipisan  kulit  dan  menahan kehilangan  serat  elastin  serta  menaikan kandungan  kolagen  dermis  yang  larut air. 5,6 Selain  untuk  perawatan  kulit  dan kecantikan, Aloe  vera juga  digunakan secara eksternal untuk mengobati berbagai kondisi kulit misalnya luka, luka bakar dan eksim. Diduga bahwa getah dari Aloe vera juga dapat mengurangi nyeri dan inflamasi. 5,7
Acne  vulgaris adalah  suatu  kondisi inflamasi  umum  pada  unit  polisebaseus, ditandai  dengan  komedo,  papul,  pustul, atau  nodul.  Penyakit  kulit  ini  bukan merupakan penyakit yang berbahaya tetapi mempunyai  dampak  yang  besar  bagi  para remaja baik secara fisik maupun psikologik  karena  dapat  menimbulkan kecemasan,  depresi  dan  mengurangi  rasa percaya  diri. 7,8 Menurut  studi  dermatologi kosmetika  Indonesia  prevalensi  penderita acne  vulgaris meningkat  dari  60%  pada tahun  2006,  80%  pada  tahun  2007  dan 90% pada tahun 2009. Prevalensi tertinggi terjadi  pada  umur  14–17  tahun  pada
wanita,  dan  umur  16–19  tahun  pada  pria.
Acne pada wanita kadang menetap sampai usia  30-an,  sedangkan  pada  pria  jarang menetap  tetapi  bila  mengenai  pria  akan lebih berat. 5,6 Empat teori sebagai
etiopatogenesis acne ,  telah  diidentifikasi.
Keempat  etiopatogenesis  tersebut  adalah hiperkeratinisasi  dari  duktus  polisebasea, produksi  sebum  yang  berlebih,  bakteri Propionibacterium  acnes ( P.  acnes ),  dan inflamasi.  Peran  mikroorganisme  penting dalam perkembangan
acne .
Mikroorganisme  yang  berperan  selain P. acnes adalah Staphylococcus  aureus , Staphylococcus epidermidis, dan Pityrosporum ovale . Patogenesis mikroorganisme adalah memecah
trigliserida,  salah  satu  komponen  sebum menjadi  asam  lemak  bebas  sehingga terjadi  kolonisasi  yang  memicu  inflamasi melalui    produksi  mediator  proinflamasi seperti IL-1, TNF-α dan lipase lainnya .5
Salah satu prinsip penanganan acne adalah  menurunkan  populasi P.  acne dan menekan inflamasi. Derajat acne berdasarkan  tipe  dan  jumlah  lesi  dapat digolongkan menjadi ringan, sedang, berat dan  sangat  berat.  Sebagian  besar acne ringan sampai sedang membutuhkan terapi topikal  sedangkan acne sedang  sampai berat  menggunakan  kombinasi  terapi topikal dan oral. 6,8
Berdasarkan  latar  belakang  di  atas yaitu  adanya  efek  antimikroba  dari Aloe vera didukung  oleh  adanya  efek antiinflamasi  dan  manfaat Aloe  vera lainnya  bagi  kulit,  kemudian  adanya penelitian  sebelumnya  yang  menemukan adanya bakteri lain yang mungkin berperan  selain P.  acne pada  lesi acne vulgaris maka  dilakukan  penelitian  untuk menganalisis  bagaimanakah  efek  ekstrak Aloe  vera terhadap  bakteri  yang  diisolasi
dari  pasien  yang  menderita acne  vulgaris secara in  vitro .  Penelitian  ini  bertujuan menganalisis  bagaimana  efek  antimikroba ekstrak  lidah  buaya  ( Aloe  vera )  terhadap isolat  bakteri  penyebab acne  vulgaris secara  invitro,  dengan  tujuan  khusus sebagai berikut:
1. Mengisolasi dan mengidentifikasi bakteri penyebab acne vulgaris
2. Menguji  efek  ekstrak  lidah  buaya konsentrasi  25%    terhadap  isolat bakteri penyebab acne vulgaris .
3. Menguji  efek  ekstrak  lidah  buaya konsentrasi  50%    terhadap  isolat bakteri penyebab acne vulgaris
4. Menguji  efek  ekstrak  lidah  buaya konsentrasi  75%    terhadap  isolat bakteri penyebab acne vulgaris .

## METODE PENELITIAN
Penelitian ini adalah penelitian true experimental .  Perlakuan  dengan  uji  anti mikroba  ekstrak  lidah  buaya  ( Aloe  vera ) terhadap  isolat  bakteri  penyebab acne vulgaris kemudian  hasil  dibandingkan dengan kelompok kontrol pembandingnya.
Pelaksanaan  penelitian  dilakukan  kurang lebih selama 20 minggu. Lokasi penelitian di  Laboratorium  Mikrobiologi  Fakultas Kedokteran Universitas Pembangunan
Nasional Jakarta.
Tanaman  Lidah  buaya  didapatkan dan diekstraksi di Balai Penelitian Tanaman  Obat  dan  Aromatik  (Balitro).
Proses  pembuatan  ekstrak Aloe  vera
dengan metode maserasi dan menggunakan  pelarut  etanol.  1000  gram lidah buaya ( Aloe vera L .) segar yang telah ditambahkan 7000 ml etanol 70% dibiarkan  selama  3–5  hari  sambil  diaduk berulang-ulang, disaring dengan menggunakan  kertas  saring.  Kemudian diuapkan menggunakan cawan porselen di atas penangas air sampai terbentuk ekstrak
kental. 9 Bakteri diperoleh dari pasien acne vulgaris derajat sedang-berat yang berobat di  klinik  X,  dan  belum  pernah  menjalani pengobatan  dengan  antibiotik  topikal maupun sistemik.
Jumlah ulangan dari tiap kelompok perlakuan  akan  dihitung  mengunakan rumus  Federer.  Kelompok  perlakuan berjumlah  lima  (25%,  50%,  75%)  satu kelompok  kontrol  positif  (Doksisiklin), satu  kelompok  kontrol  negatif  (etanol). Sampel  diperoleh  menggunakan  Rumus Federer,  yatiu  (n-1)(t-1)  ≥  15,  dengan:  t  = jumlah kelompok (yaitu 5) dan n = jumlah ulangan.  Oleh  karena  itu,  berdasarkan rumus tersebut, didapatkan: (n-1)(6-1) ≥ 15 5n x (-5) ≥ 15 5n ≥ 20
n ≥ 5 Jumlah sampel = 5n = 5 x 5 = 25
Bahan-bahan  yang  digunakan  untuk  uji daya hambat: ekstrak lidah buaya, antibiotik Doksisiklin, Bacto agar , Ekstrak beef  (Difco),  Pepton  (Merck),  Natrium klorida  (NaCl),Glukosa,  Isolat  bakteri penyebab  acne vulgaris, akuades,  metanol, aluminium foil, kapas
Cara  kerja  pada  penelitian  ini, sebagai berikut:
1. Sterilisasi  alat:  Semua  alat  yang  akan digunakan  dicuci  dengan  deterjen  lalu dibilas  dengan  air  bersih.  Khusus  alat- alat  dari  gelas  disterilkan  dalam  oven selama  2  jam  pada  suhu      180 o C,  ose disterilkan dengan cara dipijarkan pada nyala  api  spritus,  sedangkan  spuit disterilkan  dalam  otoklaf  pada  suhu 121 o C selama 15 menit.
2. Pembuatan medium peremajaan bakteri  uji:  Medium  yang    digunakan adalah  medium Nutrient  Agar (NA),
dengan komposisi bahan-bahan sebagai  berikut:  Bacto  agar  3  gram, Pepton  (Merck)  0,75  gram,  Ekstrak
beef (Difco)  0,45  gram,  Akuades  150 ml.  Masing-masing  bahan  ditimbang beratnya, kemudian bahan-bahan tersebut dimasukkan ke dalam
Erlenmeyer bersama dengan air suling. Selanjutnya bahan yang telah tercampur dipanaskan di atas penangas air sambil diaduk. Setelah bahan-bahan tersebut  larut,  pH-nya  diukur  hingga 7,0,  lalu  volume  dicukupkan  hingga 150 ml. Kemudian medium disterilkan di  dalam  otoklaf  pada  suhu  121 o C, tekanan 2 atm selama 15 menit. 11,12
3. Pembuatan  medium  Mueller  Hinton Agar (MHA): Medium yang digunakan adalah  medium Mueller  Hinton  Agar
(MHA),  dengan  bahan-bahan  sebagai berikut: beef    infusion 150  gr; casein hydrolysate 17,5  gram,  amilum  0,75 gram, agar-agar 8,5 gram, dan aquadest 500  ml.  Bahan  ditimbang sesuai  yang  dibutuhkan,  kemudian bahan-bahan  tersebut  dimasukkan  ke dalam  Erlenmeyer  bersama  dengan akuades. Selanjutnya bahan  yang telah tercampur dipanaskan di atas penangas air  sampai  semua  larut,  lalu  pH-nya diperiksa hingga 7,0. Kemudian medium  disterilkan  ke  dalam  otoklaf pada  suhu  121 o C  selama  15  menit dengan tekanan 2 atm. 11,12
4. Penyiapan bakteri uji: a. Pewarnaan gram: Membuat preparat  ulas  ( smear )  yang  telah difiksasi.  Teteskan  kristal  violet sebagai pewarna utama pada kedua preparat,  usahakan  semua  ulasan terwarnai dan tunggu selama kurang-lebih  1  menit.  Kristal  ungu akan  mewarnai  seluruh  permukaan sel bakteri gram positif dan negatif. Cuci dengan akuades mengalir lalu diteteskan  mordant  ( lugol  iodine ) lalu  tunggu  kurang-lebih  1  menit.
Adanya lugol’s iodine menyebabkan  adanya  ikatan  CV dengan iodin yang akan meningkatkan  afinitas  pengikatan zat  warna  oleh  bakteri.  Pada  Gram positif  dapat  terbentuk  CV  iodin ribonukleat  pada  dinding  sel  lalu dicuci  dengan  akuades  mengalir. Diberi    larutan  pemucat  (ethanol 96%/  aseton)  setetes  demi  setetes hingga  etanol  yang  jatuh  berwarna jernih. Cuci dengan akuades mengalir  lalu  diberi counterstain (safranin)  dan  tunggu  selama kurang-lebih  45  detik  Safranin akan  mewarnai  sel  Gram  negatif menjadi berwarna merah, sedangkan  Gram  positif  tidak terpengaruh. Counterstain hanya berfungsi  sebagai  pengontras  saja dan dicuci kembali dengan akuades
mengalir. Preparat dikeringkan dengan kertas tissue yang
ditempelkan  di  sisi  ulasan  (jangan sampai merusak ulasan) lalu dibiarkan  mengering  di  udara  dan diamati di bawah mikroskop. 11,12
b. Peremajaan  bakteri  uji:  Bakteri  uji diambil satu ose kemudian diinokulasikan dengan cara digoreskan  pada  medium Nutrient
Agar (NA) dan diinkubasikan pada suhu 37 o C selama 24 jam.
c. Pembuatan  suspensi  bakteri  uji: mengambil  isolat  bakteri P.  acnes , yang  berumur  24  jam  sebanyak satu  ose.  Kemudian  disuspensikan ke  dalam  NaCl  fisiologis  lalu diukur  serapan  suspensi  biakan  ini dengan spektrofotometer pada
panjang gelombang 580 nm sehingga pada pengenceran tertentu didapatkan
transmitan 25%
terhadap  blanko  larutan  NaCl fisiologis.
5. Penyiapan  ekstrak  lidah  buaya  ( aloe vera ):  ekstrak  lidah  buaya  dibagi dalam  tabung,  masing-masing  A  =  2,5 ml;  B  =  5  ml;  dan  C  =  7,5  ml. Tambahkan etanol dalam tabung masing-masing  A  =  7,5  ml;  B  =  5  ml; dan  C  =  2,5  ml,  kemudian  larutan dihomogenkan  dengan  menggunakan vortex kurang-lebih selama 5 menit.
6. Pengujian  daya  hambat,  dilakukan dengan  metode  difusi  agar.  Disiapkan medium Mueller  Hinton  Agar (MHA) steril  dengan  suhu  40 o C,  dimasukkan ke  dalam  cawan  petri  secara  aseptis sebanyak 10 ml dan dibiarkan membeku  sebagai  lapisan  dasar  atau base  layer .  Setelah  itu  dimasukkan suspensi  bakteri  1  ml  dan  medium Mueller Hinton Agar (MHA) 5 ml lalu dihomogenkan hingga membentuk lapisan  yang  rata,  dibiarkan  setengah padat,  yang  merupakan seed  layer , kemudian tiga buah pencadang diletakkan dengan cara dijatuhkan pada ketinggian  kurang-lebih  12  mm  secara aseptis  dengan  pinset  steril  pada permukaan  medium  dengan  jarak pencadang  satu  dengan  yang  lain  2–3 cm  dari  pinggir  cawan  petri,  dibiarkan pada  suhu  kamar.  Pencadang  pertama diisi  dengan  larutan  ekstrak  lidah buaya dengan konsentrasi 5%, pencadang kedua diisi antibiotik eritromisin  sebagai  kontrol  positif  dan pencadang ketiga diisi dengan aquadest sebagai kontrol negatif masing-masing sebanyak 0,2 ml dengan    menggunakan      spoit  steril kemudian  diinkubasi  pada  suhu  35– 37 o C.  Setelah  24  jam  diamati  dan diukur  daerah  hambatannya.  Inkubasi
dilanjutkan  untuk  pengamatan  48  jam dan diukur daerah hambatannya. 12,14,15

## HASIL PENELITIAN
Penelitian ini merupakan uji
efektivitas  antibakteri  ekstrak  lidah  buaya ( Aloe  vera )  pada  konsentrasi  25%,  50% dan  75%  terhadap  isolat  bakteri  penyebab acne  vulgaris yang  dilakukan  secara invitro  dengan  metoda  difusi  cakram menggunakan  media  MHA.  Efektivitas antibakteri  dapat  dilihat  dengan  adanya zona  hambatan  yang  terbentuk,  yaitu berupa  zona  bening  di  daerah  sekeliling kertas  cakram  yang  kemudian  diukur diameternya dengan jangka sorong.
Sebelumnya  dilakukan  identifikasi  bakteri dari isolat tersebut dengan uji mikroskopik (pewarnaan  Gram)  dan  uji  makroskopik (uji  kultur)  pada  media  MHA  dilanjutkan Uji Hemolitik pada Media Blood Agar .
Identifikasi hasil pertumbuhan pada media MHA:
1. Hasil  uji  mikroskopik  (pewarnaan gram)
a. Lesi 1.
1) Didominasi bakteri bentuk coccus,  susunan  bergerombol, dan berwarna ungu/merah.
Diduga: Staphylococcus aureus
2) Didapat  pula  bakteri  bentuk bacil,  susunan  tunggal,  dan berwarna ungu. Diduga:
Propionibacterium acne.
b. Lesi 2. Ditemukan  bakteri  bentuk  bacil, susunan  tunggal,  dan  berwarna ungu.  Diduga: Propionibacterium acne .
2. Hasil Uji Makroskopik (Uji Kultur)
a. Lesi 1.
Bentuk  bulat,  cembung,  pinggiran halus dan integer, dan warna koloni kuning tersebar merata.
b. Lesi 2.
Bentuk  flat,  elevasi  datar,  halus, dan berwarna putih.
Pengamatan  identifikasi  lanjutan  (uji hemolitik pada media blood agar ):
1. Hasil uji mikroskopik
a. Lesi 1 Bentuk coccus , susunan
bergerombol,  berwarna  ungu,  dan bersifat Gram (+).
b. Lesi 2 Bentuk bacil ,  susunan  tunggal, berwarna  ungu,  dan  bersifat  Gram (+).
2. Hasil Uji Makroskopik
a. Lesi 1
Warna  koloni  kuning/  jernih,  tepi bergranul,  permukaan  cembung halus Bakteri Staphylococcus aureus , dan bersifat tidak menghemolisa darah. b. Lesi 2
Warna  putih,  keabu-abuan,  tepi integer/rata, permukaan halus.
Bakteri Propionibacterium  acnes , dan bersifat hemolisis tipe–β (menghemolisis sempurna).
Uji  efektivitas  antibakteri  ekstrak lidah  buaya  ( Aloe  vera )  pada  konsentrasi 25%,50%  dan  75%,  dilakukan  secara invitro  dengan  metoda  difusi  cakram menggunakan  media  MHA  ( Mueller Hinton  Agar ),  setelah  identifikasi  lesi  dari isolat.  Efektivitas  antibakteri  dapat  dilihat dengan  adanya  zona  hambatan  yang terbentuk,  yaitu  berupa  zona  bening  di daerah  sekeliling  kertas  cakram  yang kemudian  diukur  diameternya  dengan jangka  sorong.  Pengukuran  ini  dijelaskan sebagai berikut:
1. Efektivitas  antibakteri  ekstrak  lidah buaya ( aloe vera b .) terhadap
Staphylococcus aureus
Tabel  1.  Hasil  Pengukuran  Diameter Zona Hambat yang dihasilkan oleh Ekstrak Lidah Buaya terhadap Staphylococcus aureus Percob aan K (-) K (+) ELB 25% ELB 50% ELB 75% 1 0 17,4 7,3 7,3 10,3 2 0 17,1 7,5 7,7 9,0 3 0 17,5 7,7 6,0 9,0 4 0 17,5 6,0 7,6 9,3 5 0 18,2 6,0 8,1 8,1 Total 0 87.7 34,5 36,7 45,7 Mean 0 17.5 6,9 7,3 9.14 Tabel  1  menunjukan  bahwa  kelompok kontrol  negatif  tidak  menghasilkan zona  hambat  terhadap  pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus, sedangkan  kelompok  kontrol  positif, ELB  25%,  ELB  50%  dan  ELB  75% seluruhnya  menghasilkan  zona  hambat yang artinya keempat kelompok tersebut memiliki efektivitas antibakterial  terhadap  Staphylococcus aureus.
2. Efektivitas  antibakteri  ekstrak  lidah buaya ( aloe vera b .) terhadap Propionibacterium acne Tabel  2.  Hasil  Pengukuran  Diameter Zona Hambat yang dihasilkan oleh Ekstrak Lidah Buaya terhadap Propionibacterium acne Percobaan  K (-) K (+) ELB 25% ELB 50% ELB 75% 1 0 32,5 7,2 16,2  25,7 2 0 28,4 6,6 6,7 13 3 0 17,5 7,6 22 26 4 0 17,5 6,8 22 10 5 0 20,4 7,9 8,7 8,5 Total 0 116.3 36,1 75.6 83.2 Mean 0 23.3 7,2 15,1 15,8 Tabel 2. menunjukan bahwa kelompok kontrol  negatif  tidak  menghasilkan zona  hambat  terhadap  pertumbuhan bakteri Propionibacterium acnes , sedangkan  kelompok  kontrol  positif,
ELB  25%,  ELB  50%  dan  ELB  75% seluruhnya  menghasilkan  zona  hambat yang artinya keempat kelompok tersebut memiliki efektivitas antibakterial terhadap Propionibacterium acne .
3. Perbandingan  efektivitas  antibakteri ekstrak  lidah  buaya  ( Aloe  vera b .) terhadap Staphylococcus  aureus dan

## Propionibacterium acne
Tabel  3.  Daya  Antibakterial  Ekstrak Lidah  Buaya  Berdasarkan
Rata-rata Diameter Zona Hambat Staphylococcus aureus dan Propionibacterium
acne
Perlakuan  Rata-rata Diameter Zona Hambat (mm) Daya  Antibakteri (Kriteria Davis & Stout, 2009) S. aureus P. acne S. aureus P. acne Kontrol (-) 0 0 Tidak ada Tidak ada Kontrol (+) 17,5 23,3 Sangat kuat Sanga t kuat ELB 25% 6,9 7,2 Sedang  Sedan g ELB 50% 7,3 15,1 Sedang Kuat ELB 75% 9,1 15,8 Sedang Kuat

## PEMBAHASAN
Tabel  4.  Uji  Normalitas Shapiro-Wilk Zona Hambat  Ekstrak  Lidah  Buaya ( Aloe  vera )  terhadap S.  aureus dan P.acne
Konsentrasi Uji Saphiro Wilk (Sig) 25% 0,082 S.aureus 50% 0,250 75% 0,702 25% 0,785 P.acne 50%                       0,231 75% 0,099
Uji statistik yang digunakan adalah One-way  ANOVA.  Alasan  pemilihan  uji tersebut karena variabel pada penelitian ini adalah  variabel  numerik  dan  lebih  dari  2 kelompok.  Syarat  yang  harus  dipenuhi
yaitu  distribusi  data  harus  normal  dan varians  data  harus  sama.  Oleh  karena  itu sebelum  dilakukan  uji  One-way  ANOVA terlebih  dahulu  dilakukan  uji  terhadap distribusi  data  dengan  Uji  Normalitas Shapiro-Wilk dan Uji Varians Data. Untuk mengetahui  perbedaan  setiap  kelompok dilakukan analisis Post-hoc dengan Tamhane’s. 15 Tabel  4  menunjukan  bahwa hasil  uji  normalitas Saphiro  Wilk setiap kelompok  memiliki  signifikansi  p>0,05, maka  kesimpulannya  distribusi  setiap kelompok  normal.  Selanjutnya  dilakukan uji varians data.
Tabel  5.  Uji  Varians  Data  Zona  Hambat Ekstrak  Lidah  Buaya  ( Aloe  vera ) terhadap S. aureus dan P. acne Uji Varians Sig. Zona Hambat Ekstrak Lidah Buaya 0,000
Tabel 5 menunjukan bahwa hasil uji varian zona hambat ekstrak lidah buaya memiliki nilai  signifikansi  lebih  besar  dari  0,05, maka  kesimpulannya  kedua  perlakuan identik.  Hal  ini  dibuktikan  juga  dengan Hasil uji One-way Anova pada Tabel 6.
Tabel 6. Uji  One-Way Anova Zona Hambat Ekstrak  Lidah  Buaya  ( Aloe  vera ) terhadap S. aureus dan P. acne Bakteri Sig. S.aureus 0.000 P.acne 0.000 Berdasarkan  hasil  analisis  data  dari  uji One-Way
Anova didapatkan hasil signifikansi lebih kecil daripada 0.05 yang berarti  terdapat  perbedaan  bermakna  daya hambat  ekstrak  lidah  buaya  terhadap pertumbuhan isolat bakteri Staphylococcus aureus dan  terhadap Propionibacterium
acne pada berbagai konsentrasi dibandingkan dengan kontrol (+) dan (-).
Tabel  7.  Uji  Post  Hoc Tamhane’s Zona Hambat  Ekstrak  Lidah  Buaya ( Aloe  vera )  terhadap S.aureus dan P.acne
Konsentrasi Konsentrasi Sig. ( P. acnes ) Sig. ( S. aureus ) ELB 25% ELB 50% .517 .996 ELB 75% .514 .024 Kontrol Positif .060 .000 Kontrol Negatif .000 .001 ELB 50% ELB 25% .517 .996 ELB 75% 1.000 .070 Kontrol Positif .667 .000 Kontrol Negatif .090 .000 ELB 75% ELB 25% .514 .024 ELB 50% 1.000 .070 Kontrol Positif .911 .000 Kontrol Negatif .116 .000 Kontrol Positif ELB 25% .060 .000 ELB 50% .667 .000 ELB 75% .911 .000 Kontrol Negatif .016 .000 Kontrol Negatif ELB 25% .000 .001 ELB 50% .090 .000 ELB 75% .116 .000 Kontrol Positif .016 .000
Berdasarkan uji Post Hoc antara kontrol (-) dan (+) dengan ELB 25%, ELB 50%, ELB 75%  terhadap S.aureus didapatkan  nilai signifikansi  lebih  kecil  dari  0,05  artinya terdapat perbedaan bermakna daya hambat ketiga  ekstrak  lidah  buaya  tersebut terhadap S.aureus dibandingkan kontrol (-) dan  (+).  Berdasarkan  uji  Post  Hoc  antara ELB  25%  dengan  50%  dan  didapatkan nilai  signifikansi  lebih  besar  dari  0,05 artinya tidak terdapat perbedaan bermakna daya hambat antara ELB 25% dengan ELB 50%  terhadap S.  aureus. Demikian  pula dengan  ELB  50%  dan  75%  tidak  berbeda bermakna.  Tetapi  antara  ELB  25%  dan ELB  75%  terdapat  perbedaan  bermakna daya hambatnya terhadap S. aureus .

## PEMBAHASAN
Berdasarkan  identifikasi  bakteri isolat  dengan  uji  mikroskopik  (pewarnaan Gram)  dan  uji  makroskopik  (uji  kultur) pada media MHA, dilanjutkan Uji Hemolitik pada Media Blood Agar ditemukan  bakteri Staphylococcus
aureus dan bakteri lainnya adalah Propionibacterium  acne. Hal  ini  sesuai dengan hasil penelitian Hassanzadeh P dan Mehrabani D (2008), bahwa mikroba yang sering  ditemukan  pada  lesi acne  vulgaris adalah Staphylococcus aureus dan Propionibacterium acne. Selanjutnya dari hasil uji antibakteri ekstrak lidah buaya, kemampuan ekstrak lidah buaya menghambat  pertumbuhan  isolat  bakteri
Propionibacterium acne
dan Staphylococcus  aureus ditunjukkan  dari zona  bening  yang  terbentuk  di  sekitar paper disc . Hasil pengukuran daya hambat terkecil  dihasilkan  oleh    ekstrak  lidah buaya konsentrasi 25% (7.2 mm) terhadap isolat P.  acnes dan  pada  konsentrasi  25%
(6.9 mm) terhadap isolat S.aureus.
Ukuran  zona  hambat  pada  masing- masing konsentrasi menunjukkan peningkatan  diameter  daya  hambat  seiring dengan  peningkatan  konsentrasi  ekstrak lidah  buaya  yang  disebabkan  peningkatan senyawa  aktif  yang  dimiliki  oleh  ekstrak lidah buaya dalam menghambat pertumbuhan isolat P. acnes dan S.aureus. Hal  ini  sejalan  dengan  penelitian  Natsir (2013) . 16
Daya  hambat  ekstrak  lidah  buaya terhadap P.  acne lebih  kuat  dibandingkan terhadap S.aureus . 17 Rata-rata  diameter hambat  ekstrak  konsentrasi  50%  terhadap S.  aureus adalah  7,3  mm,  lebih  besar dibandingkan  dengan  hasil  penelitian Pratiwi  SN,  2012 dimana  rata-rata diameter  hambat  ekstrak  pada  konsentrasi yang  sama  (50%)  adalah  2,5  mm.  Hal  ini mungkin disebabkan oleh karena penelitian ini menggunakan ekstrak keseluruhan  daun  lidah  buaya,  baik  kulit maupun gel nya., sedangkan pada penelitian Pratiwi SN, 2012 menggunakan gelnya saja. 18 Bagian kulit luar dan tengah
banyak  mengandung  antraquinon  yang bersifat  antibakterial  sedangkan  bagian dalam  kulit  yg  berbentuk  gel  banyak mengandung  saponin  yg  juga  berefek antibacterial, sehingga penggunaan keseluruhan daun lidah buaya
menghasilkan efek antibakterial yang lebih tinggi. 1
Daun  lidah  buaya  mengandung kompleks antrakurnonealoin ,  antara  lain aloemodin, kurnonealoin, aloin, barbaloin , yang berfungsi sebagai antimikroba. Selain itu  terdapat  kandungan  zat  saponin  yang bersifat  antiseptik.  Senyawa kurnonealoin dapat menyebabkan protein bakteri menjadi  inaktif  dan  kehilangan  fungsinya, sedangkan  saponin  dapat  melarutkan  lipid pada  membran  sel  bakteri  akibatnya  dapat menurunkan  tegangan  lipid,  permeabilitas sel  berubah,  fungsi  sel  menjadi  tidak normal  dan  sel  bakteri  akhirnya  akan  lisis dan menyebabkan kematian . 18
P.  acnes dan S.  aureus merupakan bakteri  dari  golongan  gram  positif  dengan susunan  dinding  selnya  tebal  karena mengandung  peptidoglikan    yang  cukup banyak  dan  cukup  tebal  (20–80  nm)  dan juga  mengandung  asam  teikoat  dan  asam lipoteikoat. 12 Susunan  dinding  sel  bakteri ini hanya mengandung satu lapis membran plasma,  ini  yang  menyebabkan  tekanan osmotiknya menurun drastis ketika diberikan  kompleks antrakurnonealoin yang  terkandung  dalam  ekstrak  lidah buaya.  Sehingga  sel  bakteri  akan  sult mengontrol  proses  respirasi  dan  transport ion dari luar sel. 10
Berdasarkan hasil analisis data dari uji One-way  Anova didapatkan  hasil signifikansi lebih kecil daripada 0.05 yang berarti  terdapat  perbedaan  bermakna  daya hambat  berbagai  konsentrasi  ekstrak  lidah buaya terhadap pertumbuhan isolat bakteri Staphylococcus  aureus dan  terhadap P.
acne dibandingkan  dengan  kontrol  (-)  dan (+),  artinya  ketiga  konsentrasi  ekstrak lidah  buaya  tersebut  mempunyai  efek antibakterial  terhadap S.  aureus  dan  P. acne tetapi tidak sekuat kontrol positifnya.
Hasil  uji  Post  Hoc  terhadap S.  aureus menjelaskan    bahwa  terdapat  perbedaan bermakna  ELB  25%,  50%  dan  75% dengan  kontrol  (+)  dan  kontrol  (-)  ,  tidak terdapat  perbedaan  bermakna  antara  ELB 25%  dengan  50%  dan  50%  dengan  75%. Sedangkan antara 25–75% berbeda bermakna,  sedangkan  uji  Post  Hoc terhadap P. acne disimpulkan bahwa tidak terdapat  perbedaan  bermakna  antara  ELB 25%, 50% dan 75% dengan kontrol positif.

## KESIMPULAN
Dua  bakteri  diidentifikasi  dari  lesi acne  vulgaris  yaitu Propionibacterium acne dan Staphylococcus  aureus .  Ekstrak lidah  buaya  ( aloe  vera )  mempunyai  efek antimikroba terhadap isolat bakteri penyebab Acne vulgaris yaitu Propionibacterium acne dan
Staphylococcus  aureus pada  konsentrasi 25%, 50%, dan 75% secara in vitro .

## DAFTAR PUSTAKA
(1) Sahu,  P.K.,  Giri,  D.D.,  Singh,  R., Pandey,  P.,  Gupta,  S.,  Shrivastava, A.K., et. al. Therapeutic and
Medicinal  Uses  of  Aloe  vera:  A Review. Pharmacology and Pharmacy,  2013:  Nov:  4:  599-610. (Online) http://www.scirp.org/ journal/pp [diakses  20  Februari 2016].
(2) Kementerian  Kesehatan  (Republik Indonesia).  100  Top  Tanaman  Obat Indonesia.  Badan  Penelitian  dan Pengembangan Kesehatan Balai
Besar  Penelitian  dan  Pengembangan
Tanaman Obat dan Obat Tradisional. 2011.
(3) Kathuria  N.,  Gupta  N.,  Prasad.  R.,
Manisha,  Prasad  R.,  and  Nikita. Biologic  Effects  of  Aloe  Vera  Gel. The Internet Journal of Microbiology; 2010; 9(2):     1-6.
(4) Natsir,  N.A.  Pengaruh  Ekstrak  Daun Lidah  Buaya  (Aloe  vera)  sebagai
Penghambat  Pertumbuhan  Bakteri
Staphylococcus  aureus.  Prosiding FMIPA Universitas Pattimura.  2013:
110-112 (Online) http://www. ejournal.unpad.ac.id [Diakses
tanggal 4 Desember 2016].
(5) Hassanzadeh,  P.,  Bahmani  M.,  & Mehrabani,  D.  Bacterial  Resistance to  Antibiotics  in  Acne  Vulgaris:  An In  Vitro  Study.  Indian  Journal  of Dermatology. 2008; 53(3): 122-124.
(6) Afriyanti,  R.N.  Akne  Vulgaris  pada Remaja, J Majority, 2015; 4(6): 102- 109.
(7) Rajeswari, R ., Umadevi, M., Rahale S.,  Pushpa,  R.,  Selvavenkadesh,  S., Kumar, K.P.S., et. al. Aloe vera: The Miracle  Plant  its  Medicinal  and Traditional  Uses  in  India.  Journal  of Pharmacognosy  and  Phytochemistry. 2012; 1(4): 119-126.
(8) Movita,  T.  Acne  Vulgaris.  Cermin Dunia Kedokteran - 203. 2013; 4(8): 267-272.
(9) Djuanda  Adhi,  Hamzah  M,  Aisah  S. Ilmu  Penyakit  Kulit  dan  Kelamin. Edisi  Keenam.  Jakarta:  Fakultas Kedokteran  Universitas  Indonesia; 2010.
(10) Departemen  Kesehatan  (Republik Indonesia). Parameter
Standar
Umum  Ekstrak  Tumbuhan  Obat. Dierktorat Jenderal Pengawasan Obat dan  Makanan.  Direktorat  Pengawan Obat Tradisional. 2000.
(11) Cornelissen,  C.N.,  Fisher,  B.D.  & Harvey,  R.A.  Lippincot’s  Illustrated
Reviews-Ilustrasi Berwarna Mikrobiologi.  Edisi  Ketiga.  Jilid  I. Jakarta: Binarupa Aksara; 2015.
(12) Lay B, Sugyo H. 2000. Mikrobiologi. Jakarta: Rajawali pers.
(13) Cowan,
M.K. & Bunn, J. Microbiology Fundamentals A Clinical Approach. New York: McGraw-Hill Companies Inc; 2013. (14) Jawetz et al. Mikrobiologi Kedokteran .  Edisi  25.  Jakarta:  EGC; 2012.
(15) Tortora, Funke and Case. Microbiology.  7 th Edition.  USA: Addition  Wesley  Longman  inc; 2001.
(16) Dahlan, M.S. Statistik untuk Kedokteran dan Kesehatan Deskriptif,  Bivariat  dan  Multivariat, dilengkapi  Aplikasi  Menggunakan
SPSS. Edisi  6.  Jakarta:  Salemba
Empat; 2014.
(17) Davis  W.W.  &  Stout,  T.R.,  Disc Plate Method of Microbiology Antibiotic Assay. Microbiology.
1997; 22(4): 659-665.
(18) Pratiwi, S.N. 2012