EFEK EKSTRAK ETANOL BIJI PEPAYA ( Carica papaya linn) TERHADAP KADAR 17-β ESTRADIOL DAN FOLIKULOGENESIS PADA MENCIT BETINA ( Mus musculus )

## Yenny Puspitasari
Indonesia  is  a  developing  country  with  population  density  problem  occupies  the fourth  rank  of  the  world.  One  effort  made  to  suppress  the  population  growth  is  through family planning. One of the efforts to succeed family planning is the development of raw materials  from  papaya  for  antifertility  natural  ingredients.  The  purpose  of  this  research was  to  study  the  effects  of  ethanol  papaya  extract  seeds  on  antifertility  in  female  mice. The benefits of this research was to provide information about the use of ethanol papaya extract seeds as antifertility in animals and make ethanol extract of papaya seeds as an alternative  contraceptive  drug.  This  study  used  post-test  only  control  group  design. Samples  were  taken  in  random.  The  independent  variable  was  ethanol  papaya  extract seeds  in  various  doses.  The  dependent  variables  were  folliculogenetic  examination  and the  examination  of  17- β  estradiol  levels.  Data  analysis  to  determine  the  different  mean number  of  follicles  and  the  levels  of  blood  17- β  estradiol  weer  performed  with  one-way ANOVA  test.    Ethanol  extract  of  papaya  seeds  in  dose  of  30  mg/kg,  100  mg/kg,  300 mg/kg lowered the number of tertiary and de Graaf follicles, while primary and secondary follicles  did  not  decrease.  The  number  of  primary  follicles  are  significantly  different  (p  < 0,05).17- β  estradiol in the dose group was decreasing along the increase of the doses. Levels of 17- β estradiol in blood showed significant differences (p < 0.05). The correlation between  the  number  of  primary,  secondary,  tertiary,  and  de  Graaf  follicles  with  17- β estradiol  levels  were  not  statistically  significant  (p  >  0.05)  for  the  Pl,  P2,  P3,  P4,  P5. E thanol  extract  of  papaya  seeds  is  proved  to  decrease  the  number  of  tertiary  and  de Graaf  follicles  in  the  ovary  and  decrease  the  levels  of  17- β  estradiol  in  blood,  causing infertility in women.
Keywords:  ethanol  extract  of  papaya  seeds,  folliculogenesis,  levels  of  17- β estradiol

## PENDAHULUAN
Indonesia  merupakan  Negara dengan  jumlah  penduduk  terbanyak ke-empat  di  dunia  setelah  RRC,India dan  Amerika  Serikat  :  yaitu  sekitar 238  juta  jiwa  ditahun  2010  dengan laju  pertumbuhan  penduduk  1,3%, dan  jumlah  penduduk  terbanyak terdapat  di  Pulau  Jawa sebesar  58% dengan  kepadatan  penduduk  124 orang/km²  terutama  di  wilayah  DKI Jakarta dengan nilai kepadatan penduduk  hampir  14.440  orang/km². Indonesia juga merupakan salah satu Negara berkembang dengan berbagai  jenis  masalah.  Masalah utama  yang  dihadapi  di  Indonesia adalah  dibidang  kependudukan  yang terus meningkat
pertumbuhan penduduknya.  Keadaan  penduduk yang  demikian  telah  mempersulit usaha  peningkatan  dan  pemerataan kesejateraan  rakyat.  Semakin  tinggi pertumbuhan penduduk semakin besar  usaha  yang  dilakukan  oleh pemerintah  untuk  mensejaterakan rakyat.  Oleh  karena  itu  pemerintah terus  berupaya  untuk  menekan  laju pertumbuhan dengan Keluarga Berencana  (KB).  Untuk  mencapai sasaran  dan  tujuan  dari  kebijakan dalam  sektor  kependudukan  telah dirumuskan berbagai kebijakasanaan,  antara  lain  meliputi peningkatan kualitas penduduk, pengendalian pertumbuhan, dan kualitas  penduduk  dalam  rangka
menekan dan mengendalikan pertambahan  jumlah  penduduk  (BPS dan BKKBN,2011). Salah satu usaha yang dilakukan untuk menekan pertumbuhan penduduk adalah melalui program Keluarga Berencana. Program Keluarga Berencana  yang  ditawarkan  saat  ini adalah  alat  kontrasepsi  wanita,  yaitu tablet, AKDR (Alat Kontrasepsi Dalam  Rahim),  foam  tablet  ( vaginal tablet )  dan  sebagainya  (Meles  dan Sastrowardoyo,  2001).  Salah  satu jenis  alat  kontrasepsi  yang  banyak digunakan  adalah  kontrasepsi  oral yaitu  dengan  mengkonsumsi  obat atau  pil.  Namun  kandungan  kimia yang  terdapat  didalam  pil  dapat menyebabkan  efek  samping  pada pengguna obat tersebut.
Sebagai upaya untuk mensukseskan  program  KB  berbagai cara  kontrasepsi  telah  diterapkan, salah  satunya  dengan  memperbaiki bahan  baku  obat  antifertilitas  yang mempunyai  efek  samping  seminimal mungkin dan memberi khasiat maksimum, diantaranya obat antifertilitas yang berasal dari
tanaman,  mengingat  Indonesia  kaya akan berbagai macam tanaman yang dapat  dimanfaatkan  sebagai  bahan obat  antifertilitas.  Selama  ini  bahan baku  masih  diimpor  dari  luar  negeri,
dengan demikian swasembada dalam  penyediaan  bahan  baku  obat antifertilitas  mempunyai  arti  yang sangat penting. Pemanfaatan tanaman sebagai bahan baku obat di Indonesia telah dilakukan sejak dahulu,  terutama  sebagai  bahan baku  obat  tradisional  menunjukkan kecenderungan untuk meningkat pemanfaatannya  (Padmawinata  dkk) yang dikutip Uddin (2004). Tanaman  merupakan  sumber utama yang digunakan sebagai obat- obat baru, termasuk obat kontrasepsi. Berbagai jenis tumbuhan liar  ada  di  Indonesia  dapat  dijadikan bahan  alami  untuk  membuat  obat kontrasepsi. Obat-obat alami tersebut
diharapkan  aman  jika  dikonsumsi oleh  masyarakat  tanpa  menimbulkan bahaya efek samping yang merugikan  (Astirin  dan  Muthmainah, 2002). Diantara berbagai jenis tumbuhan  liar  yang  dapat  digunakan sebagai obat tradisional yang penting untuk  diteliti  adalah  tanaman  pepaya ( Carica  papaya  l ).  Kandungan  kimia yang  terdapat  pada  pepaya  adalah mengandung spektrum yang luas dari phytochemical
termasuk, polisakarida,  vitamin,  mineral,  enzim, protein, alkaloid, glikosida, lemak dan minyak,  lektin,  saponin,  flavonoid, sterol,  dll  (Krisna et  al .,  2008). Menurut  Udoh  (1998)  biji  pepaya ( Carica  papaya )  sebagai  antifertilitas sudah  diketahui  sejak  tahun  1970, menyebabkan  kuantitas  dan  kualitas sperma menurun. Potensi antifertilitas ini diperkuat oleh adanya penelitian  yang  menunjukkan  bahwa didalam biji pepaya terkandung senyawa  antifertilitas  yaitu  saponin. Bahan  aktif  pepaya  yaitu  triterpenoid saponin  yang  merupakan  salah  satu turunan  steroid,  bahan  aktif  steroid dan  triterpenoid  diduga  sebagai bahan  aktif  yang  bekerja  sebagai faktor antifertilitas. Kedua bahan aktif tersebut diduga mampu mengakibatkan  gangguan  pada  jalur hipotalamus hipofise yang selanjutnya mengakibatkan gangguan sekresi GnRH yang kemudian akan berpengaruh terhadap pembentukan, perkembangan dan pematangan folikel  (Limbong,  2007;  Garor et  al., 2009;  Borrow et  al .,  2001).  Bahan antifertilitas  yang  bekerja  pada  poros hipothalamus-hipofise-ovarium mempunyai  aktifitas  gonadotropin, dengan  mekanisme  umpan  balik negatif dari hipothalamus yang menyebabkan  penurunan  produksi GnRH.  Hal  ini  akan  berpengaruh pada  sekresi  FSH  dan  LH  dari hipofisa  anterior,  sehingga  sekresi FSH  dan  LH  rendah,  dimana  kedua hormon ini sangat berpengaruh
dalam  pembentukan,  perkembangan dan pematangan folikel ovarium serta proses  ovulasi  (Gomes,  2001  dalam Wurlina dkk, 2005). Menurut Robinson  (1995),  triterpenoid  adalah turunan lipid yang dianggap berperan sebagai senyawa antara dalam biosintesis steroid, senyawa ini harus dibuat  sekurang-kurangnya  dalam jumlah  kecil  oleh  semua  makhluk yang  mensintesis  steroid.  Dalam jumlah  besar  zat  aktif  triterpenoid yang merupakan turunan lipid diduga mampu menyebabkan penghambatan  pelepasan  LH  dan FSH.  Menurut  Francis et  al .,  (2002)
saponin mempunyai pengaruh negatif terhadap  reproduski  ternak  seperti aborsi  atau  kematian,  menyebabkan steril dan penghentian proses kebuntingan. Saponin berperan besar dalam pengeluaran hormon luteinizing .  Saponin  steroid  secara langsung  menghambat  kerja  gen yang bertanggungjawab dalam proses steroidogenesis dan menekan perkembangan  sel  granula  yang diatur oleh hormon perangsang folikel dalam ovarium.
Sebagai upaya pendayagunaan sumber  daya  alam  nabati  sebagai bahan  obat,  serta  guna  menunjang program  nasional  dalam  bidang keluarga  berencana  maka  perlu dilakukan penelitian
tentang pengaruh  ekstrak  etanol  biji  pepaya ( Carica papaya ) terhadap kadar 17- β estradiol  dan  folikulogenesis  pada mencit betina ( Mus musculus ). Selanjutnya  penelitian  ini  diharapkan dapat memberikan
sumbangan pikiran sebagai obat kontrasepsi bagi wanita.

## METODE PENELITIAN
Penelitian ini menggunakan metode  eksperimental  laboratorium, menggunakan  rancangan post  test only  control  group  design .  Sampel diambil secara acak. Variabel independen pemberian ekstrak
etanol  biji  pepaya  berbagai  dosis. Variabel dependen pemeriksaan folikulogenesis,  pemeriksaan  kadar 17- β  estradiol.  Analisis  data  untuk mengetahui  beda  rata-rata  jumlah folikel dan kadar 17- β estradiol darah dengan Uji Anova satu arah. Analisis data untuk korelasi antara kadar 17- β estradiol  darah  dengan  jumlah  folikel pada proses folikulogenesis dilakukan dengan uji korelasi bivariat.

## HASIL
Penelitian  efek  ekstrak  etanol biji  pepaya  ( Carica  papaya  linn ) terhadap  kadar  17- β  estradiol  dan folikulogenesis  ini  dilakukan  pada mencit  ( Mus  musculus )  galur  Balb/c yang  berjumlah  5  ekor  /  kelompok, terbagi  menjadi  5  kelompok  yaitu kontrol  negatif,  kontrol  positif  dan  3 kelompok perlakuan. Perlakuan
terdiri  dari  P1  (diberikan  CMCNa 0,5%),  P2  (ekstrak  etanol  biji pepaya
30 mg/kg  BB),  P3  (ekstrak  etanol  biji pepaya  100  mg/kg  BB),  P4  (ekstrak etanol biji pepaya 300 mg/kg BB), P5 (0,03  mg Ethinylestradiol dan  0,15 mg Levonogestrel 0,2  mg/kg  BB). Variabel  yang  diukur  adalah  jumlah folikel  ovarium  dan  kadar  17- β estradiol  darah  mencit.  Data  jumlah folikel  primer,  sekunder,  tertier  dan folikel  de  Graff  disajikan  pada Gambar 1.
Gambar 1. Grafik jumlah folikel ovarium mencit pada semua kelompok perlakuan
Gambar 1 menunjukkan
semakin  tinggi  dosis  ekstrak  etanol biji pepaya maka jumlah folikel primer akan  semakin  banyak,  sedangkan untuk jumlah folikel sekunder 0 50 100 150 P 1 P 2 P 3 P 4 P 5 JML F. PRIMER JML F. SEKUNDE R
semakin  tinggi  dosis  ekstrak  etanol biji  pepaya  jumlah  folikel  sekunder tidak  tetap  karena  pada  tahap pertumbuhan folikel primer dan
sekunder  tidak  bergantung  pada hormon  gonadotropin,  untuk  jumlah folikel  tersier  dan  folikel  de  Graaf semakin  tinggi  dosis  ekstrak  etanol biji  pepaya  jumlahnya  akan  semakin menurun karena
pada tahap
pembentukkan  folikel  tersier  dan folikel  de  Graaf  tergantung  hormon gonadotropin.
Variabel  terakhir  yang  diukur adalah  kadar  17- β  estradiol  darah mencit.  Kadar  17- β  estradiol  yang terdeteksi  pada  P1,  P2,  P3,  P4,  P5. Pada kelompok P2 dengan perlakuan 30  mg/kgBB  kadar  17- β  estradiol lebih tinggi, sedangkan pada kelompok  P3  dan  P4  semakin  tinggi dosis  ekstrak  etanol  biji  pepaya semakin menurun kadar 17- β estradiol.  Data  kadar  17- β  estradiol darah mencit  disajikan  pada  Gambar 2.
Gambar 2. Grafik kadar 17- β estradiol darah mencit (pg/ml) pada berbagai kelompok perlakuan Kadar  17- β  estradiol  darah pada kelompok P1 sampel dikorbankan pada fase estrus sehingga  didapatkan  kadar  17- β estradiol  tinggi,  sedangkan  pada kelompok P2, P3, P4 dan P5 sampel dikorbankan pada fase anestrus, dari Gambar  2  semakin  tinggi  dosis ekstrak etanol biji pepaya kadar 17- β estradiol semakin menurun.
Uji  normalitas  yang  digunakan adalah One  -  Sample  Kolmogorov- Smirnov  Test .  Hasil  uji  tersebut adalah  untuk  jumlah  folikel  sekunder
dan  folikel  de  graaf  ovarium  seperti pada  Tabel  1  dan  kadar  17- β estradiol  darah  mencit  berada  dalam distribusi data tidak normal (p < 0,05) seperti  pada  Tabel  1.  Sedangkan hasil  uji  normalitas  untuk  folikel primer  dan  folikel  tersier  berada dalam  distribusi  data  normal  (p  > 0,05) seperti pada Tabel 1.
Tabel 1. Hasil uji normalitas jumlah folikel ovarium dan kadar 17- β estradiol Hasil uji normalitas Nilai signifikansi (p) Folikel Primer 0,200 Folikel Sekunder 0,000 Folikel Tersier 0,200 Folikel de Graaf 0,020 Kadar 17- β estradiol 0,000
Hasil  uji  homogenitas  dari semua  data  menunjukkan  bahwa hanya  data  jumlah  folikel  primer  dan folikel  tersier  yang  memiliki  varians yang  homogen  (p  >  0,05)  seperti pada  Tabel  2,  sehingga  data  pada penelitian ini dapat dilanjutkan dengan uji Anava satu arah.
Tabel  2.  Nilai  signifikansi  (p)  hasil  uji homogenitas jumlah folikel ovarium mencit Variabel Jenis Folikel Primer Tersier Jumlah folikel 0,270 0,449
Hasil  Uji  Anova  satu  arah  terdapat pada  Tabel  3.  Jumlah  folikel  primer saja  yang  berbeda  bermakna  (p  < 0,05),  sehingga  dapat  dilanjutkan dengan  uji  BNT.  Variabel  yang  tidak bermakna  dengan  uji  Anova  satu arah tidak diuji BNT.
Tabel 3. Nilai signifikansi (p) hasil uji beda antar kelompok
Variabel Jenis Folikel Primer Tersier Jumlah Folikel 0,011* 0,318 Keterangan : *) Terdapat perbedaan bermakna (p < 0,05)
0 2000 P 1P 2P 3P 4P 5 KADAR 17 β - ESTRADIOL pg/ml KADAR 17 β -
ESTRADIO
L pg/ml
Kelompok  data  yang  bermakna dengan uji Anava satu arah dilanjutkan  dengan  uji  BNT,  yaitu data jumlah folikel primer. Perbedaan diantara  semua  kelompok  seperti pada  Tabel  4.  Hasil  dikatakan berbeda bermakna jika p < 0,05.
Tabel  4.  Hasil  uji  lanjut  menggunakan  uji BNT  pada  jumlah  folikel  primer  ovarium mencit Kelompok Nilai Signifikan si (p) Ket. P1 – P2 P3 P4 P5 0,421 0,164 0,029 1,000 Tidak ada beda Tidak ada beda Beda Tidak ada beda P2 – P3 P4 P5 0,972 0,579 0,385 Tidak ada beda Tidak ada beda Tidak ada beda P3 – P4 P5 0,900 0,145 Tidak ada beda Tidak ada beda P4 – P5 0,025 Beda Data yang diuji dengan menggunakan uji Kruskal-Wallis adalah  data  yang  berada  dalam distribusi  tidak  normal  (p  <  0,05), berdasarkan  dari  hasil  uji  normalitas maka  data  jumlah  folikel  sekunder dan  folikel  de  Graaf  ovarium  dan kadar  17- β  estradiol  darah  mencit dilakukan  uji  Kruskal-Wallis.  Hasil  uji beda  tersebut  dapat  dilihat  pada Tabel 5  dan Tabel 6.
Tabel 5. Nilai signifikansi (p) hasil uji beda jumlah folikel ovarium mencit Variabel Jenis Folikel Sekunder de Graaf Jumlah folikel 0,269 0,196
Tabel 6. Nilai signifikansi (p) hasil uji beda kadar 17- β estradiol darah mencit Variabel Nilai signifikansi (p) Kadar 17β-estradiol 0,035* Keterangan : *) Terdapat perbedaan
bermakna (p < 0,05)
Data yang dikorelasikan adalah antara  jumlah  folikel  dengan  kadar 17- β  estradiol  darah  mencit  pada semua  kelompok.  Hasil  uji  korelasi tersebut dapat dilihat pada Tabel 7.
Tabel  7.  Korelasi  antara  jumlah  folikel ovarium dengan kadar 17- β estradiol darah mencit
Sig Korel asi Pears on Kl p F.Pri mer F.Se kund er F.Te rsier F.de Graaf Kada r 17- β estra diol P1 P2 P3 P4 P5 0,784 0,769 0,333 0,458 0,556 0,058 0,765 0,234 0,852 0,857 0,626 0,952 0,188 0,480 0,777 0,150 0,105 0,949 0,495 0,375
Korelasi  antara  jumlah  folikel primer,  sekunder,  tersier,  de  Graff dengan  kadar  17- β  estradiol  pada kelompok  P1,  P2,  P3,  P4,  P5 menunjukkan  tidak ada korelasi yang bermakna secara statistik (p > 0,05).
Efek  Ekstrak  Etanol  Biji  Pepaya terhadap  Jumlah  Folikel  Ovarium Mencit (Mus musculus)
Penelitian ini menunjukkan bahwa  pemberian  ekstrak  etanol  biji pepaya menyebabkan perbedaan yang  bermakna  terhadap  jumlah folikel  primer.  Jumlah  folikel  primer semakin  meningkat  seiring  dengan meningkatnya  dosis  ekstrak  etanol biji  pepaya.  Hal  ini  disebabkan karena  pertumbuhan  folikel  primer tidak tergantung hormon gonadotropin. Jumlah folikel sekunder  dan  folikel  de  Graaf  tidak ada  perbedaan  yang  bermakna  dari pemberian  ekstrak  biji  pepaya  dosis
30 mg/kg BB, 100 mg/kg BB maupun
300  mg/kg  BB  dibandingkan  dengan kelompok  kontrol  negatif  maupun kelompok  kontrol  positif.  Jumlah folikel sekunder jumlahnya tidak tetap seiring  dengan  meningkatnya  dosis ekstrak etanol biji pepaya, sedangkan jumlah  folikel  de  Graaf  semakin menurun seiring dengan meningkatnya  dosis  esktrak  etanol biji  pepaya.  Hal  ini  disebabkan pertumbuhan  folikel  sekunder  tidak tergantung hormon gonadotropin. Untuk jumlah folikel tersier dan folikel de graaf mengalami penurunan seiring  dengan  meningkatnya  dosis ekstrak  etanol  biji  pepaya.  Hal  ini disebabkan karena pertumbuhan folikel  tersier  dan  folikel  de  graaf tergantung hormon gonadotropin
setelah  adanya  pertumbuhan  folikel dominan di ovarium.
Penurunan  jumlah  folikel  tersier dan  folikel  de  graaf  ovarium  seiring dengan  peningkatan  dosis  ekstrak etanol  biji  pepaya  pada  masing- masing tahapan folikulogenesis disebabkan  oleh  kandungan  saponin didalam  ekstrak  etanol  biji  pepaya. Saponin berperan besar dalam pengeluaran hormon luteinizing. Saponin  steroid  secara  langsung menghambat kerja gen yang bertanggungjawab dalam proses steroidogenesis dan menekan perkembangan  sel  granula  yang diatur oleh hormon perangsang folikel dalam ovarium. Aktifitas bahan antigonadotropin  dengan  mekanisme umpan  balik  negatif  mengakibatkan penurunan sekresi GnRH ( Gonadotropin  Releasing  Hormone ) pada  poros  hipotalamus –  hipofise anterior sehingga mengakibatkan penurunan sekresi hormon gonadotropin  (FSH  dan  LH)  dari kelenjar  hipofise  anterior  sehingga mempengaruhi pembentukan, perkembangan dan pematangan folikel ovarium serta gangguan proses  ovulasi  (Meles  dkk,  1992). Dalam penelitian ini didapatkan pertumbuhan  folikel  primer  yang semakin  tinggi  pada  kelompok  P2,
P3, P4 dan folikel sekunder jumlahnya tidak tetap pada P3 paling banyak,  hal  ini  disebabkan  adanya gangguan sekresi Luteinizing Hormone sehingga dapat mempengaruhi ovarium dalam produksi androgen meningkat sehingga bisa menyebabkan gangguan folikulogenesis.
Efek  Ekstrak  Etanol  Biji  Pepaya terhadap  Kadar  17 β  –  Estradiol Darah Mencit ( Mus musculus)
Pada pemeriksaan darah mencit  untuk  pengukuran  kadar  17- β estradiol didapatkan adanya penurunan kadar 17- β  estradiol seiring kenaikkan dosis ekstrak etanol  biji  pepaya  yang  diberikan. Pada  kelompok  kontrol  negatif  kadar 17- β estradiol tinggi, sedangkan pada kelompok  kontrol  negatif  kadar  17- β estradiolnya rendah setelah diberikan pil  kontrasepsi  kombinasi.  Pada  saat pengorbanan kelompok kontrol negatif  mencit  pada  fase  estrus, sehingga  estrogen  yang  dihasilkan pada  keadaan  maksimal,  sedangkan untuk  mencit  kelompok  P2,  P3,  P4, P5  dikorbankan  saat  fase  anestrus dimana kondisinya mengalami anovulasi  sehingga  estrogen  yang dihasilkan  pada  keadaan  minimal (Salisbury  dan  VanDenmark,  1984; Kusumawati, 2004).
Pengukuran kadar 17- β estradiol  pada  fase  diestrus  tidak menggambarkan kadar estrogen yang  optimal  karena  tidak  terdapat folikel  dominan  yang  menghasilkan estrogen  yang  optimal.  Estrogen akan  di  produksi  optimal  pada  fase proliferasi  dan  menjelang  ovulasi, yaitu  pada  fase  proestrus  akhir  atau fase estrus (Salisbury dan VanDenmark, 1984; Kusumawati, 2004). Mencit  yang  digunakan  untuk penelitian  ini  awalnya  seragam  pada fase  estrus  saat  sebelum  diberikan perlakuan tiap kelompoknya, kemudian diberikan perlakuan selama  9  hari  dan  pada  hari  ke  10
dilakukan  pemeriksaan  swab  vagina untuk mengetahui fase estrus mencit. Hasilnya  mencit  kelompok  P2,  P3, P4,  P5  berada  pada  fase  anestrus.
Keberadaan mencit pada fase anestrus sesuai dengan yang diharapkan  supaya  mencit  anovulasi sebagai  dampak  dari  pemberian ekstrak  etanol  biji  pepaya  dan pemberian  pil  kontrasepsi  oral  untuk kelompok  kontrol  positif.  Pemberian ekstrak  etanol  biji  pepaya  dapat mengganggu  proses  folikulogenesis dan steroidogenesis,
sehingga
perkembangan  folikel  dan  sintesis hormon  steroid  terhambat  (Meles dkk., 1992).
Korelasi antara Jumlah Folikel Ovarium dengan Kadar 17- β estradiol Darah Mencit (Mus musculus)
Data  yang  dapat  dilakukan  uji korelasi adalah jumlah folikel ovarium terhadap  kadar  17- β  estradiol  pada semua  kelompok  perlakuan.  Hasil statistik menunjukkan tidak ada korelasi yang bermakna antara jumlah folikel primer, sekunder, tersier,  de  Graaf  dengan  kadar  17- β estradiol  pada  kelompok  P1,  P2,  P3, P4,  P5  tidak  menunjukkan  korelasi yang  bermakna  secara  statistik  (p> 0,05).
Kadar  17- β  estradiol  yang rendah  pada  hasil  penelitian  ini dipengaruhi  oleh  jumlah  folikel  de
Graaf  yang  sedikit  akibat  pemberian ekstral  etanol  biji  pepaya,  karena secara teori jumah folikel mempengaruhi sintesis estrogen. Hasil  penelitian  ini  belum  dapat membuktikan secara bermakna
kekuatan  korelasi  diantara  keduanya karena  koefisien  korelasinya  masih belum kuat. Hal ini dapat disebabkan oleh  besar  dan  selisih  dosis  ekstrak etanol  biji  pepaya  yang  masih  belum dapat  memberikan  efek  bermakna terhadap folikulogenesis secara keseluruhan. Sebab lain adalah pengorbanan  di  fase  anestrus  yang menyebabkan tidak semua kadar 17-
β  estradiol  darah  terdeteksi.  Data tersebut  menjadi  kurang  optimal untuk dikorelasikan lebih baik.

## KESIMPULAN DAN SARAN

## Kesimpulan
1.  Ekstrak  etanol  biji  pepaya  dosis 30 mg/kg BB, 100 mg/kg BB, 300 mg/kg  BB  menurunkan  jumlah folikel  tersier dan folikel  de  graaf tapi  tidak  menurunkan  folikel primer dan folikel sekunder pada proses folikulogenesis
2.  Kadar 17- β  estradiol  pada kelompok  dosis  30  mg/kg  BB, 100  mg/kg  BB,  300  mg/kg  BB semakin menurun seiring dengan kenaikan dosis ekstrak etanol biji pepaya yang diberikan 3.  Jumlah folikel pada proses folikulogenesis  akibat  pemberian ekstrak  etanol  biji  pepaya  dosis 30,  100,  300  mg/kg  BB  tidak berkorelasi  dengan  kadar  17- β estradiol darah mencit.

## Saran
Berdasarkan  hasil  penelitian  ini ekstrak  etanol  biji  pepaya  dengan dosis  30  mg/kg  BB,  100  mg/kg  BB, 300 mg/kg BB minimal selama 9 hari dapat  menurunkan  jumlah  folikel tersier dan folikel de graaf di ovarium mencit,  sehingga  konsumsi  ekstrak biji  pepaya  akan  memberi  efek antifertilitas,
dalam hal ini menggunakan  mencit  betina  sebagai model.  Dosis  mencit  tersebut  perlu dilakukan penelitian untuk mendapatkan  dosis  terkecil  dibawah 30 mg/kg BB yang dapat mempengaruhi  fertilitas  wanita  jika ekstrak biji pepaya dikonsumsi manusia.

## DAFTAR PUSTAKA
Astirin,  O.P  dan  Muthmainah.  2002. Struktur  Histologis  Ovarium  Tikus (Rattus  novergicus)  Gravid  Setelah
Pemberian Ekstrak Momordica Charantia  L .  Jurnal  Pharmacon. Jakarta. 26-30 Biro  Pusat  Statistik,  Badan  Koordinasi Keluarga Berencana Nasional, Depkes,  Macro  International      Inc, Survey  Demografi  dan  Kesehatan
Indonesia ,2011 : XXIV+228
Budiarto  E,  2003. Metodologi  Penelitian Kedokteran , Sebuah Pengantar. Jakarta : Penerbit Buku Kedokteran.
EGC, 15. Burrow,  M.E.,  S.M.  Bone,  B.M.  Coelin,
L.I.  Meinik,  B.N.  Duana,  S.W.
Canter,  T.E.  Wiese,  T.E.  Cleveland and J.A. Mc. Lachlan. 2001.
Phytochemical  Gliceolins  Isolated from  Soy  Medicine  Antihormonal Effect  Through  Esterogen  Receptor
Alpha  and  Beta .  J.  Clin.  Endocrinol.
Metab. Apr. 86 (4). P; 1750-1758.
Dahlan S, 2008. Statistik untuk Kedokteran  dan  Kesehatan .  Jakarta
: Penerbit Salemba Medika.4
Dharma  SJ,  Modi  DN  and  Nandedkar TD, 2009. Gene expression profiling during  early  foliculogenesis  in  the mouse  ovary .  Fertility  and  Sterility 91 (5): 2025-2036.
Francis,  G.,  Z.  Kerem,  H.P.S.  Makkar and K. Becker. 2002. The Biological action of saponins in animal system : review.  BRITISH  JOURNAL  OF NUTRITION 88:587-605.
Ganong,  W.F.  2003. Review  of  Medical Physiology . International Edition. Mc Graw Hill Book. San Fransisco.
Garor  R,  Abir  R,  Erman  A,  Felz  C,  Nitke and  Fish  B,  2009. Effect  of  Basic Fibroblast  Grotwh Factor on  In  Vitro Development  of  Human  Ovarian Primordial  Follicles .  Fertility  and Sterility 91(5): 1967-1975.
Gomes et  al .,  (2001)  Gomez,  Y,  P.N.
Velazques, I.D. Pelalta, M.C.
Mendez,  F.  Vilchia,  M.A.O.  Juarez and  E.  Pedenernera.  2001 .  Follicle Stimulating Hormone Regulates
Steroigenic  Enzymes  in  Culture
Cells  of  The  Chick  Embryo  Ovary . Gen Comp Endocrinol. Vol 121 (3). King SR and Lavoie HA, 2009. Regulation  of  the  early  steps  in gonadal steroidogenesis . In : Reproductive endocrinology, a molecular  approach.  New  York  : Springer, 175.
Krishna,  K.L.,  Paridhavi,  M.,  Patel,  J.A.
2008. Review on Nutritional, medicinal and Pharmacological Properties of Papaya (Carica papaya Linn) . Institute of Pharmacy. Nirma  University  of  Science  & Technology. Gujarat. India Kusumawati D, 2004. Bersahabat dengan  Hewan  Coba. Yogyakarta  : Gajah  Mada  University  Press,  5-6, 49-50,67-68. Limbong,  Theresia.  2007.  Pengaruh Ekstrak Ethanol Kulit Batang Pakettu ( Ficus superba Miq) Terhadap  Folikulogenesis  Ovarium Mencit  ( Mus  musculus ). Dalam
Abstrak Jurnal Penelitian . Surabaya:
Universitas Airlangga
Meles, D.K dan W. Sastrowardoyo. 2001. Efek Infusa Impatiens Balsamia Linn pada  Stadium  Pembelahan  Sel (Cleavage)  dalam  Upaya  Pencarian Obat  Antifertilitas .  PPOT.  Lemlit.
Universitas Airlangga. Surabaya.
Ridwan,  2009. Dasar-Dasar  Statistika.
Bandung :  Penerbit  Alfabeta,  217- 222; 238-243.
Sugiyono, 2008. Metode Penelitian Kuantitatif Kualitatif dan R&D. Bandung: Penerbit Alfabeta, 72-80.
Tjokroprawiro  A,  Pudjirahardjo  WJ,  dan Putra ST, 1996. Pedoman Penelitian Kedokteran .  Surabaya:  Airlangga University Press, 54-55.
Uddin,  M.  2004. Pengaruh  Pemberian Ekstrak  daun  Jarong  (Achyranthes aspera  Linn)  Per  Oral  terhadap Jumlah  embrio  Mencit.  Skripsi . Fakultas Kedokteran Hewan. Universitas Airlangga. Surabaya.
Udoh,  P.  1998. Studies  on  Anfertility Effect  of  Pawpaw  Seeds  (Carica papaya)  on  the  Gonads  of  Male Albino Rats . Pub. Med. Departement of  Biological  Sciences.  University  of Calabar. Nigeria.
Wurlina,  MS  dkk.  2005.  Pengaruh
Antifertilisasi  Achyranthes  Aspera
Linn Terhadap Perkembangan Siklus  Folikel  Ovarium  Dan  Siklus Folikel  Ovarium  Dan  Siklus  Vagina Pada Mencit ( Mus musculus ). Skripsi Tidak Diterbitkan. Sura baya: Universitas Airlangga.