## SENSITIVITAS ANTIBIOTIK BETALAKTAM TERHADAP BAKTERI HASIL ISOLAT KULTUR URINE PADA PENDERITA INFEKSI SALURAN KEMIH
Andi Fatmawati 1)
1) Akademi Analis Kesehatan Muhammadiyah Makassar Alamat Korespondensi : fatmawati.moe@gmail.com

## Abstrak
Antibiotik betalaktam telah digunakan secara luas terhadap penyakit infeksi  saluran kemih (ISK) karena  spektrum  aktivitas  antibakterinya  yang  cukup  luas,  mencakup  bakteri  gram  positif  dan gram  negatif.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  menguji  sensitivitas  antibiotik  betalaktam,terhadap bakteri  hasil isolat kultur urine penderita ISK Di Rumah Sakit Ibnu Sina  Makassar berdasarkan standar  NCCLS.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  hasil  identifikasi  gram  dan  uji  biokimia dari hasil spesimen urine penderita ISK didapatkan hasil isolat bakteri Enterobacter agglomerans dan  Staphylococcus  saprophyticus.  Dari  ketiga  antibiotik  betalaktam  seftazidim,  sefotaksim  dan seftriakson,  bersifat  sensitif  terhadap  pertumbuhan  Enterobacter  agglomerans.  Sedangkan Seftriakson  kurang  sensitif,  Seftazidim  bersifat  sensitif,  dan  sefotaksim  bersifat  resisten  terhadap pertumbuhan Staphylococcus saprophyticus .
Kata  Kunci:  Antibiotik  Betalaktam,  Enterobacter  agglomerans,  Isolat  Kultur,  Penderita  ISK, Staphylococcus saprophyticus

## PENDAHULUAN
Di negara yang sudah maju 13-37% dari  seluruh  penderita  yang  dirawat  di rumah  sakit  mendapatkan  antibiotik  baik secara  tunggal  maupuan  kombinasi, sedangkan di negara berkembang 30-80% penderita  yang  dirawat  di  rumah  sakit mendapatkan antibiotik. Penggunaan antibiotik  yang  tidak  rasional  sangat banyak  dijumpai  baik  di  negara  maju maupun berkembang. Pada awalnya istilah yang digunakan  adalah antibiosis yang  berarti substansi yang dapat menghambat pertumbuhan  organisme  hidup  yang  lain, dan  berasal  dari  mikroorganisme.  Namun pada  perkembangannya,  antibiosis  ini disebut  sebagai antibiotik dan  istilah  ini tidak hanya terbatas untuk substansi yang berasal  dari  mikroorganisme,  melainkan semua  substansi  yang  diketahui  memiliki kemampuan untuk menghalangi pertumbuhan  organisme  lain  khususnya mikroorganisme. Untuk bakteri, pengertian antibiotik berkembang menjadi bahan  kimia  yang  dapat  membunuh bakteri-bakteri,  atau  yang  lebih  dikenal dengan sebutan bakterisidal, atau
menghambat perkembangan bakteri atau bakteriostatik (Chandra, 2008). Penggunaan antibiotik tentu
diharapkan  mempunyai  dampak  positif, akan  tetapi  penggunaan  antibiotik  yang tidak rasional akan menimbulkan dampak negatif.  Dampak  negatif  dari  penggunaan antibiotik  yang  tidak  rasional  antara  lain muncul  dan  berkembangnya  bakteri  yang resisten  terhadap  antibiotik,  munculnya penyakit akibat superinfeksi bakteri resisten,  terjadinya  toksisitas  atau  efek samping obat,sehingga perawatan
penderita  menjadi  lebih  lama,  biaya pengobatan  menjadi  lebih  mahal,  dan akhirnya  menurunnya  kualitas  pelayanan kesehatan .
Infeksi  saluran  kemih  (ISK)  adalah infeksi  bakteri  yang  terjadi  pada  saluran kemih  (mencakup  organ-organ  saluran kemih, yaitu ginjal,ureter, kandung kemih,  dan uretra).  Infeksi  saluran  kemih di  Indonesia  insiden  dan  prevalensinya masih  cukup  tinggi.  Keadaan  ini  tidak terlepas  dari  tingkat  dan  taraf  kesehatan masyarakat  Indonesia  yang  masih  jauh dari  standart  dan  tidak  meratanya  tingkat kehidupan  sosial  ekonomi,  yang  mau
tidak  mau  berdampak  langsung  pada kasus  infeksi  saluran  kemih  di  Indonesia.
Penyakit Infeksi saluran kemih merupakan masalah kesehatan masyarakat di  Indonesia  yang  perlu  mendapatkan perhatian  yang  serius.  Diperkirakan  8  % anak  wanita  dan  2  %  anak  laki  –  laki pernah  mengalami  ISK  pada  masa  kanak – kanaknya. Insiden ISK belum diketahui dengan pasti (Subandiyah, 2004). Mikroorganisme yang sering menyebabkan ISK antara lain Escherichia coli (merupakan  mikroorganisme  yang paling  sering  diisolasi  dari  pasien  dengan infeksi  simtomatik  maupun  asimtomatik), Proteus  sp , Klebsiella  sp , Enterobacter sp , Citrobacter sp . Infeksi yang disebabkan Pseudomonas sp dan mikroorganisme lainnya seperti Staphylococcus jarang  dijumpai  kecuali pasca  kateterisasi.  Mikroorganisme  lain yang  kadang-kadang  dijumpai  sebagai penyebab  ISK  adalah Chlamydia dan Mycoplasma (Praktika, 2009).
Sasaran  terapi  pada  infeksi  saluran kemih  adalah  mikroorganisme  penyebab infeksi.  Oleh  karena  itu,  pengobatan  ISK sebagian  besar  menggunakan  antibiotik.
Pemilihan  antibiotik  untuk  pengobatan didasarkan pada tingkat keparahan, tempat  terjadinya  infeksi  dan  jenis mikroorganisme yang
menginfeksi (Endriani,2009).
Saat  ini  telah  banyak  terjadi resistensi  bakteri  penyebab  ISK  terhadap antibakteri  sehingga  angka  kesakitan semakin  tinggi.  Perubahan  pola  resistensi bakteri  penyebab  ISK  terjadi  lebih  cepat dibanding infeksi lainnya. Meskipun telah banyak  yang  melaporkan  bahwa  pola resistensi  bakteri  penyebab  ISK  telah terjadi, tetapi mengingat perbedaan tempat  dan  waktu  penelitian  yang dilakukan  kemungkinan  pola  resistensi bakteri  penyebab  ISK  terhadap  berbagai antibiotik  juga  berubah.  Oleh  karena  itu, sangat  penting  untuk  memantau  pola resistensi  bakteri  penyebab  ISK  terhadap berbagai antibakteri secara berkesinambungan disetiap institusi kesehatan.  Berdasarkan  uraian  diatas dapat  dilihat  betapa  pentingnya  untuk mengetahui pola resistensi bakteri
penyebab ISK terhadap antibakteri terutama  untuk  penanganan  ISK  yang lebih rasional (Endriani,2009). Penelitian yang dilakukan Noorhamdani et  al .,  (1996)  menentukan bahwa resistensi Escherichia coli
terhadap ampicilin dan amoxycilin di
RSUD Dr. Saiful Anwar Malang mencapai  70%.  Antibakteri  sefalosporin generasi  pertama  sudah  lama  dan  sering digunakan untuk terapi ISK sehingga bisa menyebabkan terjadinya resistensi.
Antibakteri  sefalosporin  generasi  kedua efektif  terutama  terhadap  bakteri  Gram negatif,  sedangkan  sefalosporin  generasi ketiga  (seperti cefadroxil,cefriaxone ,  dan lain-lain)  aktif  dan  mempunyai  spektrum yang  luas  terhadap Enterobacteriaceae , termasuk  strain  penghasil  penisilinase atau strain yang resisten terhadap sefalosporin  generasi  kedua.  Namun, dengan  adanya  berbagai  mekanisme bakteri  dalam  menyebabkan  resistensi, bakteri-bakteri tersebut dapat saja menjadi resisten.  Sefalosporin  generasi  ke  tiga seperti ceftazidime mempunyai  aktivitas yang  tinggi  terhadap Pseudomonas  sp penyebab ISK. (Endriani, 2009). Antibiotik jenis penicillin , cephalosporin , monobactam dan carbapenem merupakan antibiotik golongan  betalaktam,  karena  memiliki cincin  beta-laktam pada  strukturnya. Antibiotika golongan sefalosporin generasi  ke-3  telah  digunakan  secara  luas pada pengobatan berbagai penyakit infeksi.  Juga  digunakan  pada  pengobatan ISK  (Infeksi  Saluran  Kemih). Hal  ini disebabkan karena spektrum aktivitas anti bakterinya  yang  cukup  luas, mencakup bakteri  Gram  negatif  dan  Gram  positif. Sefalosporin  generasi  ketiga  memiliki aktifitas  lebih  kuat  dan  lebih  luas dari generasi  sebelumnya  terhadap  kuman
Gram-negatif.  Produksi  dari enzim  beta- laktamase adalah penyebab utama terjadinya  resistensi  terhadap antibiotik golongan beta-laktam. Enzim beta-
laktamase  memutus  cincin  amida pada cincin beta-laktam, sehingga mengakibatkan  antibiotik  menjadi  tidak aktif. (Firizky, 2013).
Berdasarkan  uraian  di  atas,  maka penelitian ini bertujuan untuk menentukan sensitivitas antibiotik betalaktam terhadap bakteri  hasil  isolat  kultur  urine  pada penderita  ISK  di  Rumah  Sakit  Ibnu  Sina Makassar  berdasarkan  standar  NCCLS (National Commite For Clinical Laboratory Standard) . PROSEDUR PENELITIAN
Alat dan Bahan
Alat-Alat  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  autoklaf,  botol  steril (penampung urin), cawan petri, inkubator, lampu  spritus,  lamina  air  flow  (LAF), mistar  geser,  ose  bulat,  pingset,  rak tabung,  sendok  tanduk,  spoit,  pipet  steril, tabung reaksi, timbangan analitik.
Bahan-bahan yang digunakan
adalah  aquadest  steril,  alkohol  96%, aluminum  foil,  bakteri  hasil  isolat  kultur urine,  disk  antibiotik,  kapas  lidi  steril  / cutton  bad,  NaCl  steril,  Medium  Mac Conkey,  Medium  Muller  Hinton  Agar, Medium Nutrien agar, NaCl fisiologis 0,9 %, Sampel urine (pagi /segar). Prosedur Penelitian Pengambilan spesimen urin
Spesimen  urin  diperoleh  dari  pasien  ISK
(Infeksi  Saluran  Kemih)  di  perawatan rawat  inap  Rumah  Sakit  Ibnu  Sina Makassar, diambil melalui kantong
kateter (penampungan urin) pasien, diambil menggunakan spoit steril  dengan tindakan  antisepsis  pada  daerah  kateter yang  akan  ditusuk,  tempat  penusukan kateter  sedekat  mungkin  dengan  ujung kateter  yang  berada  di  dalam  kandung kemih (ujung distal), kemudian dimasukkan pada pot atau botol steril. Pembuatan Medium Medium  Muller  Hinton  Agar  untuk 250 mL
Bahan-bahan  yang akan digunakan ditimbang  8,5  g,  kemudian  dilarutkan dalam  air  sebanyak  250  ml  dengan bantuan  pemanasan  hingga  semua  bahan terlarut  sempurna,  lalu  di  cek  pH  7,4 dan disterilkan  dengan  otoklaf  pada  suhu 121 0 C selama 15 menit.
Medium  Nutrien  Agar  (NA)  untuk 250 mL Ditimbang  5,75  gram  dan  dimasukkan kedalam Erlemeyer lalu dilarutkan dengan
air  suling  sedikit  demi  sedikit  dibantu dengan  sedikit  pemanasan  semua  bahan larut  diatur  pada  pH  6,8  dan  dicukupkan volumenya  dengan  air  suling  250  ml disterilkan  dalam  otoklaf  pada  suhu 121 0 C selama 15 menit dengan tekanan 2 atmosfir.

## Medium  Mac  Conkey  Agar  untuk  250 ml
Ditimbang  20,6  gram  mac  conkey  agar, lalu dimasukkan kedalam 2 erlemeyer 250 ml  masing-masing  sebanyak  200  ml, kemudian  ditambahkan  aquadest  masing- masing sebanyak 200 ml, lalu dipanaskan diatas  pemanas  sampai  larut  sempurna, setelah  itu  ditutup  dengan  penutup ikat(bundle),  lalu  disterilkan  dengan autoklaf  pada  suhu  121 0 C  selama  15 menit,  kemudian  dituangkan  kedalam cawan  plate,  lalu  dibungkus  dengan kertas, setelah itu media siap digunakan. Persiapan  Isolasi  Bakteri  dari  Sampel Urin
Pertama-tama  sampel  spesimen  urin  yang ada  didalam  botol,diambil  sebanyak  0,5 ml  dan  diteteskan  dalam  media  Nutrien Agar  dan  Mac  Conkey,  lalu  diratakan, kemudian  dimasukkan  dalam  inkubator selama  24  jam  dengan  suhu  37 0 C,  pada saat  bakteri  tumbuh  pada  media  Nutrien Agar  atau  pada  medium  Mac  Conkey dilanjutkan pengujian  secara  mikroskopik dengan cara diambil satu koloni yang ada, lalu  dilakukan  test  pewarnaan  gram  dan uji  biokimia  untuk  mengetahui  adanya gram positif dan gram negatif.

## Penyiapan Kultur Murni Mikroba Uji Isolasi Bakteri
Bakteri uji yang digunakan adalah bakteri hasil isolat murni kultur urin,diambil satu ose, lalu diinokulasi dengan cara digoreskan    pada  Medium  Nutrien  Agar (NA) diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37 0 C.

## Pewarnaan Gram
Kaca  objek  dibersihkan  dengan  alkohol sehingga  bebas  dari  lemak,  difiksasi  di atas  lampu  spiritus  sampai  kering,beri satu  tetes  NaCl  fisiologis.  Bakteri  dari media NA diambil dengan jarum ose,diletakkan pada tetesan NaCl
fisiologis,campur  hingga  merata.  Biarkan mengering  diudara  sebentar  dan  fiksasi
diatas  api.  Tetesi  2-3  tetes  larutan  kristal violet,  biarkan  selama  1  menit,  bilas dengan  air  mengalir.  Tetesi  larutan  lugol satu  tetes  dan  dibiarkan  selama  1  menit, dibilas  dengan  air  mengalir,  preparat dibilas  dengan  alkohol  96%  selama  30 detik,cuci  dengan  air  mengalir.  Terakhir ditetesi  dengan  safranin  dan  dibiarkan selama  1  menit  lalu  dibilas  dengan  air mengalir  dan  dikeringkan.    Amati  di bawah  mikroskop  pembesaran  100x dengan  oil  emersi.  Warna  ungu  untuk bakteri  gram  positif  dan  warna  merah untuk bakteri gram negatif.

## Uji Biokimia
Identifikasi  bakteri  dengan  uji  biokimia didasarkan  pada  Uji  TSIA,  Uji  Sitrat,  Uji MR-VP,  Uji  SIM.  Pengidentifikasian bakteri  didasarkan  pula  dari  jenis  bakteri (bakteri  gram  positif  atau  bakteri  gram negatif). Pengujian Kepekaan Antibiotik Terhadap Bakteri Uji Pengujian  kepekaan  antibiotik  dilakukan dengan  metode  difusi  Kirby  Bauer  yang direkombinasikan oleh National Committee  For  Clinical  Laboratory Standard (NCCLS):
Media Muller Hinton Agar dituang secara aseptis  kedalam  cawan  petri  steril sebanyak 20  ml dibiarkan sampai memadat.  Setelah  memadat,dengan  kapas lidi  steril  di  ambil  suspensi  inokulum yang  berumur  24  Jam  diusapkan  secara merata  pada  permukaan  medium  Muller
Hinton  Agar  didiamkan  selama  15  menit pada  suhu  kamar.  Di  letakkan  paper  disk antibiotik seftazidim,
seftriakson,
sefotaksim dengan pinset steril dan sedikit di  tekan.  Diatur  jarak  antara  pusat  ke pusat paper disk, jarak dari pinggir cawan petri minimal 15 mm. Diamkan selama 15 menit kemudian diinkubasi dalam inkubator pada suhu 37 o C selama 24 jam. Di ukur diameter zona hambatan antibiotika seftazidim, seftriakson, sefotaksim. Perlakuan dilakukan sebanyak 3 kali. Pengamatan dan Pengukuran Diameter Hambatan Pengamatan  dan  pengukuran  diameter hambatan dilakukan setelah masa inkubasi  1  x  24  jam  pada  suhu  37 0 C dengan menggunakan mistar geser. Pengumpulan Dan Analisa Data Untuk  menentukan  resisten,  intermediate dan  sensitif,  hasil  zona  hambatan  yang diperoleh masing-masing antibiotika dibandingkan  dengan  nilai  kritis  resisten , intermediate  dan  sensitifdari  rekombinasi Nasional Committe For Clinical Laboratory Standard (NCCLS).

## HASIL DAN PEMBAHASAN Hasil Penelitian
Hasil  penelitian  mengenai  uji  sensitivitas antibiotik  betalaktam  terhadap  bakteri hasil  isolat  kultur  urine  pada  penderita ISK  di  Rumah  Sakit  Ibnu  Sina  Makassar selengkapnya  dapat  dilihat  pada  tabel berikut:
Tabel 1. Hasil Identifikasi Bakteri Hasil Isolat Kultur urine pada penderita ISK di
Rumah Sakit Ibnu Sina Makassar Spesimen Pewarnaan Gram Bentuk Morfologi Uji Biokimia Identifikasi TSIA MR- VP SIM Citrat A Gram negatif Basil Slant (+) Butt (+) Gas(-) H 2 S(-) - Indol (-) Motility(+) H 2 S (-) + Enterobacter agglomerans B Gram positif Coccus Butt (+) Gas(-), H 2 S(-) - Indol (-) Motility(+) H 2 S (-) - Staphylococus saprophyticus
Tabel  2.  Hasil  pengukuran  diameter  hambatan  (mm)  antibiotik  betalaktam terhadap  bakteri  Enterobacter  agglomerans  hasil  isolat  kultur  urine
penderita ISK Di Rumah Sakit Ibnu Sina Makassar dengan inkubasi 1 x 24 jam pada suhu 37°C
Perlakuan Bakteri Hasil Isolat Jenis Antibiotik Potensi Disk (µg) Zona Hambatan (mm) Interpretasi 1 Enterobacter agglomerans Seftazidim 30 27 Sensitive Sefotaksim 30 30 Sensitive Seftriakson 30 24 Sensitive 2 Enterobacter agglomerans Seftazidim 30 26 Sensitive Sefotaksim 30 29 Sensitive Seftriakson 30 23 Sensitive 3 Enterobacter agglomerans Seftazidim 30 26 Sensitive Sefotaksim 30 30 Sensitive Seftriakson 30 24 Sensitive
Tabel  3.  Hasil  pengukuran  diameter  hambatan  (mm)  antibiotik  betalaktam terhadap  bakteri  Staphylococcus  saprophyticus  hasil  isolat  kultur  urine penderita ISK Di Rumah Sakit Ibnu Sina Makassar dengan inkubasi 1 x 24 jam pada suhu 37°C Perlakuan Bakteri Hasil Isolat Jenis Antibiotik Potensi Disk (µg) Zona Hambatan (mm) Interpretasi 1 Staphylococcus saprophyticus Seftazidim 30 23 Sensitive Sefotaksim 30 12 Resisten Seftriakson 30 20 Intermediat 2 Staphylococcus saprophyticus Seftazidim 30 23 Sensitive Sefotaksim 30 13 Resisten Seftriakson 30 20 Intermediat 3 Staphylococcus saprophyticus Seftazidim 30 23 Sensitive Sefotaksim 30 13 Resisten Seftriakson 30 21 Intermediat Pembahasan Antibiotik ialah zat yang dihasilkan oleh suatu mikroba, terutama fungi,  yang dapat  menghambat  atau  dapat  membasmi mikroba  jenis  lain.  Sensitivitas  adalah suatu  keadaan  dimana  mikroba  sangat peka  terhadap  antibiotik  atau  sensitivitas adalah  kepekaan  suatu  antibiotik  yang masih  baik  untuk  memberikan  daya hambat  terhadap  pertumbuhan  mikroba. Resistensi  adalah  suatu  keadan  dimana mikroba  sudah  tidak  peka  terhadap antibiotik.  Intermediate  adalah  suatu keadaan dimana mikroorganisme mengalami  pergeseran  sifat  dari  sensitive menjadi  resisten  tapi  belum  sepenuhnya resisten .
Pada  penelitian  ini  dilakukan  uji sensitivitas antibiotik betalaktam terhadap bakteri  hasil  isolat  kultur  urine  pada penderita  ISK  (Infeksi  saluran  kemih) dengan tujuan untuk menentukan
sensitivitas antibiotik betalaktam golongan  sefalosporin  generasi  ketiga yaitu seftazidim, sefotaksim, dan seftriakson  terhadap  bakteri  hasil  isolat kultur urine penderita ISK di Rumah Sakit Ibnu  Sina  Makassar  berdasarkan  standar NCCLS (National  Commite  For  Clinical Laboratory Standard).
Pada  uji  mikrobiologi  dalam  uji sensitivitas  dari  antibiotik  betalaktam dilakukan  dengan  metode  difusi,  dimana pada  metode  ini  kemampuan  antimikroba ditentukan  berdasarkan  hambatan  yang terjadi terhadap pertumbuhan suatu bakteri.  Dalam  hal  ini  antibiotik  yang digunakan  adalah  seftazidim,  sefotaksim, dan  seftriaksonl,  dimana  ketiga  antibiotik ini  adalah  antibiotik  betalaktam  golongan sefalosporin  generasi  ke-3  yang    telah digunakan  secara  luas  pada  pengobatan berbagai penyakit infeksi, juga digunakan pada  pengobatan  ISK  (infeksi  saluran
kemih) karena spektrum aktivitas antibakterinya yang cukup luas, mencakup bakteri Gram negatif dan Gram positif.  Antibiotik  betalaktam  golongan
sefalosporin  generasi  ketiga  ini  memiliki mekanisme  kerja  dengan  menghambat sintesis  dinding  sel  bakteri  dengan berikatan  satu  atau  lebih  ikatan  protein yang selanjutnya akan menghambat tahap transpeptidase sintesis peptidoglikan dinding  sel  bakteri  sehingga  menghambat biosintesis dinding sel.
Pada  penelitian  ini  bakteri  yang digunakan  adalah  hasil  isolat  yang didapatkan  dari  spesimen  urine  yang diperoleh dari pasien ISK (infeksi saluran kemih)  di  Rumah  Sakit  Ibnu  Sina Makassar  dengan  kriteria  inklusi  adalah pasien  yang  terdiagnosa  ISK  oleh  bagian Spesialis  Urologi  Rumah  Sakit  Ibnu  Sina Makassar  yang  terdapat  di  perawatan rawat inap. Dari hasil isolasi bakteri yang ditumbuhkan  pada  media  Nutrien  Agar dan  dilanjutkan  pada  Mac  Conkey  Agar untuk  menghambat  pertumbuhan  bakteri gram  positif  disebabkan  oleh  adanya garam empedu dan kristal violet sehingga yang  tumbuh  hanya  bakteri  gram  negatif. Pada  media  ini  memperlihatkan  koloni yang berwarna merah bata dan dikelilingi oleh endapan garam empedu. Endapan ini di  sebabkan  oleh  penguraian  laktosa menjadi  asam  yang  bereaksi  dengan garam  empedu,  lalu  dilanjutkan  dengan uji biokimia. Uji biokimia yang dilakukan yaitu  uji  MR-VP,  uji  TSIA,  uji  SIM,  dan uji Citrat.
Uji  MR-VP  ini  dilakukan  untuk menentukan organisme yang memproduksi  dan  mengelola  asam  dan produk-produknya  dari  hasil  fermentasi glukosa,  memperlihatkan  kemampuan sistem  buffer  dan  menentukan  organisme yang  menghasilkan  produk  netral  (asetil metal  karbinol  atau  aseton)  dari  hasil fermentasi glukosa, dengan adanya indikator  methyl  red  yang  berwarna merah  pada  suasana  asam  akan  tetap menjadi  warna  merah  pada  pH  4,4  dan berubah  kuning  pada  pH  6,2.  Pada spesimen A dan B tidak terjadi perubahan warna  merah.  Uji  TSIA  adalah  untuk mengetahui organisme yang dapat memfermentasi glukosa, sukrosa dan/atau laktosa  dengan  atau  tanpa  menghasilkan
gas,  juga  untuk  mengetahui  kemampuan organisme  dalam  menghasilkan  hydrogen sulfida  dari  thiosulfate  dalam  kondisi asam  hasilnya  memperlihatkan  warna kuning pada bagian slant atau butt sebagai reaksi  asam  yang  dihasilkan  dengan phenol red. Pada spesimen A
menunjukkan  warna  kuning  pada  pada bagian  dasar  (butt)  dan  miring  (slant), tidak  menghasilkan  gas  dan  hydrogen sulfida.  Pada  spesimen  B  menunjukkan warna  kuning  pada  bagian  dasar  (butt), tidak  menghasilkan  gas  dan  hydrogen sulfida.  Uji  SIM  digunakan  untuk mengetahui  produksi  indol,  produksi hydrogen sulfida, dan pergerakan/motilitas dengan adanya
reagen kovac’s, indol menunjukkan warna merah, hydrogen sulfida warna hitam, dan untuk  motilitas  adanya  penyebaran  yang berwarna putih dari titik awal penanaman. Pada  spesimen  A  dan  B,  indol  dan hydrogen sulfida menunjukkan hasil yang negatif, dan untuk motilitas menunjukkan hasil  positif.  Uji  Citrat  dilakukan  untuk untuk mengetahui apakah suatu organisme  dapat  menggunakan  sitrat sebagai  satu-satunya  sumber  karbon. Hasilnya  jika  pH  indikator  bromthymol biru  berubah  hijau  menjadi  biru  tua  jika terjadi  peningkatan  pH  menjadi  basa. Hanya  mikroba    yang  mempunyai  enzim citrat  permiase  yang  dapat  mentransport citrat  ke  dalam  selnya  untuk  dikatalis. Pada spesimen A terjadi perubahan warna hijau  menjadi  biru  tua,  sedangkan  pada spesimen B tidak terjadi perubahan warna dari  hijau  menjadi  biru  tua.  Dari  hasil  uji biokima  untuk  spesimen  A  diidentifikasi Enterobacter  agglomerans ,  dan  untuk spesimen B Staphlococcus saprophyticus .
Hasil penelitian yang telah dilakukan  didapatkan  hasil  yakni  untuk hasil pengukuran diameter zona hambatan (mm) ketiga antibiotik terhadap pertumbuhan Enterobacter  agglomerans dengan inkubasi pada suhu 37˚C selama 1 x 24 jam yaitu untuk antibiotik seftazidim dengan  rata  –  rata  zona  hambat  ketiga perlakuan sebesar 26,33 mm, menunjukkan interpretasi sensitive. Untuk
antibiotik  sefotaksim  dengan  rata  –  rata zona  hambat  ketiga  perlakuan  sebesar
29,66  mm  menunjukkan  interpretasi sensitive. Untuk  antibiotik  seftriakson
dengan  rata  –  rata  zona  hambat  ketiga perlakuan sebesar 23,66 mm menunjukkan interpretasi sensitive. Dengan  demikian,  menunjukkan  bahwa ketiga  antibiotik  betalaktam  golongan sefalosporin  generasi  ketiga  tersebut bersifat sensitive terhadap  pertumbuhan Enterobacter agglomerans dengan inkubasi  pada  suhu  37˚C selama  1  x  24 jam.  Hal  ini  dikarenakan  kemampuan antibiotik betalaktam seftazidim, sefotaksim, dan seftriakson dalam membunuh bakteri Enterobacter agglomerans dengan  cara  menginhibisi sintesa  dinding  sel.  Proses  pembentukan dinding  sel  terjadi  reaksi  transpeptidase yang dikatalisis oleh enzim transpeptidase dan menghasilkan ikatan silang antara dua rantai peptida-glikan. Enzim transpeptidase yang terletak pada membran  sitoplasma  bakteri  tersebut dapat  mengikat  antibiotik  betalaktam sehingga menyebabkan enzim tidak mampu mengkatalisis reaksi transpeptidase walaupun dinding sel tetap terbentuk.  Dinding  sel  yang  terbentuk tidak memiliki ikatan silang dan peptidoglikan yang terbentuk tidak sempurna  sehingga  lebih  lemah  dan mudah  terdegradasi,  dengan  demikian bakteri  yang  kehilangan  dinding  selnya akan lisis dan mati.
Untuk  hasil  pengukuran  diameter zona  hambatan  (mm)  ketiga  antibiotik terhadap pertumbuhan Staphylococus
sapropiticus dengan  inkubasi  pada  suhu 37˚C selama  1  x  24  jam  yaitu  untuk antibiotik  seftazidim  dengan  rata  –  rata zona  hambat  ketiga  perlakuan  sebesar  23 mm,  menunjukkan  interpretasi sensitive. Untuk antibiotik sefotaksim dengan rata – rata zona hambat ketiga perlakuan sebesar 12,66  mm,  menunjukkan  interpretasi resisten. Untuk  antibiotik  seftriakson dengan  rata  –  rata  zona  hambat  ketiga perlakuan sebesar 20,33 mm, menunjukkan  interpretasi intermediat. Hasil  tersebut  menunjukkan  bahwa  dari ketiga  antibiotik  tersebut  hanya  antibiotik seftazidim yang sensitive terhadap pertumbuhan Staphylococcus
saprophyticus dengan  inkubasi  pada  suhu
37˚C selama  1  x  24  jam,  sedangkan antibiotik  sefotaksim  bersifat  resisten terhadap  pertumbuhan Staphylococcus saprophyticus dan  antibiotik  seftriakson bersifat intermediate terhadap pertumbuhan Staphylococcus saprophyticus dengan  inkubasi  pada  suhu
37˚C selama 1 x 24 jam. Beberapa bakteri diketahui  memiliki  resistensi  terhadap antibiotik betalaktam, hal ini terbukti dari hasil  penelitian  yang  memperjelas  bahwa antibiotik sefotaksim telah bersifat resisten dan antibiotik seftriakson bersifat intermediat terhadap pertumbuhan Staphylococcus saprophyticus. Kemungkinan  tumbuhnya  bakteri  yang resisten  terhadap  antibiotik  ini  karena adanya  kemampuan  dekstruksi  antibiotik dengan adanya enzim betalaktamase yang dihasilkan oleh Staphylococcus saprophyticus yang  mampu  memecah cincin  betalaktam  sehingga  antibiotik tersebut tidak aktif. Hasil analisis statistika menggunakan  metode  rancangan  acak lengkap (ANOVA) memperlihatkan bahwa  pada  zona  hambat  antibiotik Seftazidim,  Sefotaksim,  dan  Seftriakson menunjukan ada perbedaan efek (signifikan)  dari  tiap  perlakuan  terhadap Enterobacter agglomerans dan
Staphylococcus  saprophyticus sehingga dilanjutkan  pada  uji rentang  Newmann- Keuls.  Untuk  zona  hambat  antibiotik  A (Seftriakson)  terhadap  B  (Seftazidim),  A terhadap  C  (Sefotaksim),  dan  B  terhadap C,  menunjukkan  hasil  yang  signifikan terhadap Enterobacter agglomerans. Begitu  pula  untuk  zona  hambat  antibiotik A  (Sefotaksim)  terhadap  B  (Seftriakson), A  terhadap  C  (Seftazidim),  dan  B terhadap  C  menunjukkan  hasil  yang signifikan terhadap Staphylococus saprophyticus.

## KESIMPULAN DAN SARAN
Dari  hasil  penelitian  dan  pembahasan maka dapat disimpulkan bahwa antibiotik betalaktam:  seftazidim,  sefotaksim,  dan seftriakson  bersifat  sensitif  terhadap pertumbuhan Enterobacter  agglomerans , sedangkan terhadap pertumbuhan Staphylococcus  saprophyticus , seftazidim bersifat  sensitif,  sefotaksim  resisten  dan seftriakson intermediet.
Disarankan  peneliti  selanjutnya  untuk meneliti  lebih  lanjut  tentang  sensitivitas antibiotik  lain  terhadap Enterobacter agglomerans dan Staphylococcus saprophyticus . DAFTAR PUSTAKA Anggara, A. 2013. Uji Biokimia Mikroba , Jurnal Academia. Universitas UBAYA. Arif, M. 2000. Kapita Selekta Kedokteran
Edisi  Ketiga .  Jakarta:  Penerbit
Buku Kedokteran. Aslam.  M.  2003. Farmasi  Klinis  Menuju Pengobatan Rasional dan Penghargaan Pilihan Pasien . Jakarta:  Penerbit  PT  Elex  Media Komputindo, Kelompok Gramedia.
Djide,  N.  2003. Mikrobiologi  Farmasi . Makassar: Universitas Hasanuddin. Endriani,  et.al.    2009. Pola  Resistensi Bakteri  Penyebab  Infeksi  Saluran Kemih  (ISK)  Terhadap  Antibakteri
Di  Pekanbaru .  Pekanbaru:  Bagian Mikrobiologi,  Fakultas  Kedokteran Universitas Riau. Firizky, F. 2013. Pola Kepekaan Escherichia  coli  dan  Klebsiella  sp. Terhadap  Antibiotik  Sefalosporin Periode  Tahun  2008-2012  Di Bandar Lampung. Bandar Lampung:  Fakultas  Kedokteran Universitas Lampung.
Ganiswarna,  S.  1995 Farmakologi  dan Terapi,  Edisi  4 .  Jakarta:  Bagian
Farmakologi  Fakultas  Kedokteran Universitas Indonesia. Maksum,  M.R. 2009. Betalaktam .  Bogor: Institut Pertanian Bogor. Maulina,  M.  2012. Pengertian  Urine. Aceh: Laboratorium Analisis Kesehatan Aceh. Mirawati,  T.,  et.  al.  2004. Hasil  uji resistensi bakteri terhadapberbagai antibiotik di laboratorium mikrobiologi klinik . Jakarta. Novi, P.W. 2009. Rasionalitas Penggunaan Antibiotik Pada Pasien Infeksi Saluran Kemih Pada Bangsal  Penyakit  Dalam  di  RSUP
Dr. Kariadi Semarang Tahun 20 08. Semarang:  Fakultas  Kedokteran
Universitas Diponegoro. Pelczar,  M.J.,  Chan,  E.C.S.  1986. Dasar- Dasar Mikrobiologi . Jakarta: Universitas Indonesia Press. Sudoyo,  A.W.,  et.al. 2006.  Buku  Ajar Ilmu Penyakit Dalam Jilid II, Edisi IV. Jakarta: Pusat Penerbitan Departemen  Ilmu  Penyakit  Dalam Fakultas Kedokteran UniversitasIndonesia.