## OPTIMASI SUHU, WAKTU, DAN RASIO BAHAN PADA ULTRASOUND- ASSISTED EXTRACTION BUTTER BIJI PALA (Myristica fragrans)

## (Optimization of Temperature, Time, and Redundancy Ratio on Ultrasound- Assisted Extraction of Nutmeg (Myristica fragrans))
Victoria Kristina Ananingsih a *, Veryka Budianto a , Bernadeta Soedarini a
a Program Studi Teknologi Pangan, Fakultas Teknologi Pertanian, Universitas Katholik Soegijapranata Semarang 50234, Indonesia
*Penulis korespondensi Email: kristina@unika.ac.id

## ABSTRACT
Nutmeg (Myristica fragrans) seeds are spices from Indonesia which have a distinctive aroma because they contain hydrocarbons such as myristicin. Myristicin has properties that are easily damaged when exposed to  heat.  This  causes  the  extraction  of  nutmeg  seeds  will  not  be  optimal  if  it  is  done  with  conventional extraction. So, we need a new extraction method to maintain the quality of nutmeg butter. The purpose of this study is to determine the effect of time, temperature, and redundancy ratio on the ultrasonic extraction of  nutmeg  seeds.  This  study  also  aims  to  determine  the  optimal  process  conditions  in  the  ultrasonic extraction of nutmeg butter based on extraction efficiency, saponification numbers, acid numbers, and ester numbers  on  the  results  of  nutmeg  butter  extraction.  Nutmeg  seed  extraction  was  carried  out  with comparative parameters namely temperature (40 o C, 45 o C, and 50 o C), time (30, 37.5, and 45 minutes) and ratio of samples and n-Hexane solvents (21: 100, 28: 100, 35: 100). After extraction is complete the solvent is filtered and separated with a rotary evaporator. Quality analysis includes analysis of total yield, analysis of acid numbers, analysis of saponification numbers, and esterification values. The results of the study were processed using the respond surface method and showed that there was an influence of time and the ratio of the yield of percent yield. The highest yield was obtained by the center treatment (45 o C, 37.5 minutes and ratio of samples and solvent is 28:100). Temperature difference affects the results of saponification numbers  and  ester  numbers  which  shows  the  minimum  value  at  the  treatment  center.  While  the  acid number is not affected by differences in variable.
Keywords: Nutmeg seed, Butter, RSM, Ultrasound assisted extraction

## ABSTRAK
Biji Pala (Myristica fragrans) adalah rempah-rempah asal Indonesia yang memiliki aroma yang khas karena memiliki kandungan hidrokarbon seperti myristicin. Myristicin memiliki sifat yang mudah rusak bila terpapar panas.  Hal  ini  menyebabkan  ekstraksi  biji  pala  tidak  akan  optimal  bila  dilakukan  dengan  ekstraksi konvensional.  Sehingga  diperlukan  metode  ekstraksi  baru  untuk  menjaga  kualitas  butter  biji  pala  yang dihasilkan. Tujuan dilakukan penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh waktu, suhu, dan rasio pada ekstraksi  ultrasonic  biji  pala.  Penelitian  ini  juga  untuk  mengetahui  kondisi  proses  yang  optimal  pada ekstraksi ultrasonic butter biji pala berdasarkan efisiensi ekstraksi, bilangan penyabunan, bilangan asam, dan bilangan ester terhadap hasil ekstraksi butter biji pala. Ekstraksi biji pala dilakukan dengan parameter pembanding yaitu suhu (40 o C, 45 o C, dan 50 o C), waktu (30; 37,5; dan 45 menit) dan ratio perbandingan sampel  dan  pelarut  n-Hexane  (21:100, 28:100,  35:100).  Setelah  ekstraksi  selesai  maka  akan  dilakukan penyaringan dan dilakukan pemisahan pelarut n-Hexane dengan alat rotary evaporator. Analisa kualitas meliputi analisa total rendemen, analisa bilangan asam, analisa bilangan penyabunan, dan nilai esterifikasi. Hasil dari penelitian diolah dengan metode respond surface dan menunjukan bahwa terdapat pengaruh
waktu dan rasio dari hasil persen rendemen. Hasil persen rendemen tertinggi diperoleh dengan perlakuan center yaitu suhu 45 o C, waktu 37,5 menit dan ratio perbandingan sampel dan pelarut n-Hexane sebesar 28:100. Perbedaan suhu  mempengaruhi hasil bilangan  penyabunan  dan  bilangan ester dari lemak  pala yang menunjukan nilai minimum pada perlakuan center. Sedangkan bilangan asam tidak dipengaruhi oleh perbedaan suhu, waktu, maupun rasio perbandingan.
Kata kunci: Biji Pala, Butter , RSM, Ultrasound assisted extraction

## PENDAHULUAN
Indonesia  menyumbang  rempah- rempah  sebesar  21,06%  ke  pasar  dunia pada tahun 2013 dan 31,43% dari total nilai ekspor  ke pasar  dunia  dieksport ke wilayah ASEAN  (Hermawan  2015).  Salah  satu rempah-rempah yang dihasilkan oleh Indonesia adalah biji pala (Myristica fragrans). Biji pala biasa digunakan sebagai bumbu  masak,  membuat  minuman,  dan dapat  digunakan  sebagai  obat  tradisional (Drazat,  2007).  Senyawa  fenolik  pada  biji pala  segar  bersifat  tidak  stabil  sehingga membutuhkan  proses  ekstraksi  sehingga komponen aktif dalam biji pala dapat tertarik keluar  (Yuliani  & Satuhu,  2012).  Salah  satu komponen  aktif  dalam  biji  pala  adalah myristicin sebesar 0,5-13,5% (NIIR, 2013).
Butter pala berupa cairan semi padat yang  aromatik  (bau  dan  rasa  khas  pala), berwarna  kuning-range,  yang  berbentuk padat  pada  suhu  ruang  dan  mencair  pada suhu  45-51 o C,  memiliki  berat  jenis  0,990 – 0,995.  Komponen  utama  dari  butter  pala adalah trimyristin (73,09%) dan minyak atsiri (12,5%) (Nurdjannah et al ., 2007). Beberapa metode  yang  dapat  digunakan  untuk mengekstrak  butter  biji  pala  adalah  solvent extraction, steam distillation, high hydrostatic pressure  extraction,  pulse  electric  field process, dan high pressure process. Metode ekstraksi  tersebut  memiliki  kelemahan  yaitu membutuhkan  waktu  yang  lama  dan  suhu tinggi  sehingga  hasil  yang  didapat  tidak optimal  (Sofyana, et  al., 2013).  Selain  itu, suhu  tinggi  juga  dapat  merusak  produk sehingga  diperlukan  metode  yang  dapat mengoptimalkan  hasil  produk.  Ultrasound- assisted  extraction  (UAE)  adalah  metode ekstraksi menggunakan gelombang ultrasonic yang memiliki sifat non-destructive dan  non-invasive  sehingga  dapat  menjaga
kualitas dari produk (Adhiksana 2017). UAE memiliki  prinsip  akustik  kavitasi  yang  dapat merusak  dinding  sel  tanaman  sehingga dapat  membuat  senyawa  bioaktif  lepas  ke lingkungan  (Medina-torres et  al .,  2017). Ultrasound-assisted extraction (UAE) memiliki kelebihan yaitu metode yang paling murah,  peralatan  yang  sederhana,  dapat meningkatkan  hasil  ekstraksi,  dan  memiliki durasi waktu ekstraksi yang singkat (Pineiro et  al .,  2013).  Ekstraksi  menggunakan ultrasound memiliki berbagai faktor pendukung, diantaranya adalah suhu, waktu dan  rasio.  Suhu  yang  semakin  tinggi  akan menyebabkan proses ekstraksi tidak berjalan  dengan  efisien  sedangkan  waktu yang  terlalu  lama  akan  menyebabkan degradasi  komponen  serta  rasio  yang  tidak seimbang  antara  padatan  dan  solvent  akan membuat  butter  pala  tidak  terekstraksi secara  sempurna  (Capelo-Martine,  2009). Belum  adanya  penelitian  tentang  pengaruh dari  waktu,  suhu  dan  rasio  dari  hasil ekstraksi  butter  biji  pala  menggunakan pelarut  n-heksane  membuat  penelitian  ini menjadi penting. Hal ini dikarenakan dengan mengetahui titik optimum dapat mempermudah proses ekstraksi
menggunakan  ultrasound.  Penelitian  ini dimaksudkan  untuk  mengetahui  pengaruh waktu,  suhu,  dan  rasio  pada  ekstraksi ultrasonik  biji  pala.  Penilitian  ini  juga  untuk mengetahui  kondisi  proses  yang  optimal pada  ekstraksi  ultrasonic  butter  biji  pala berdasarkan  efisiensi  ekstraksi,  bilangan penyabunan,  bilangan  asam,  dan  bilangan ester terhadap hasil ekstraksi butter biji pala.

## BAHAN DAN METODE Bahan
Bahan yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  biji  pala,  n-Heksan,
Jurnal Teknologi Pangan dan Gizi Journal of Food Technology and Nutrition Vol 19 (2): 126-134, 2020.
larutan KOH, larutan HCl, indikator fenolftalein, ethanol 95% dan aquades.

## Alat
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  adalah  blender,  erlenmeyer,  ultrasonic cleaner  UC-10SD,  penyaring  vakum,  rotary evaporator,  kertas  saring  Whatman  no  1, corong,  beaker  glass,  labu  didih,  reflux, buret, hot plate, stirrer, pipet volume, pompa pilleus, dan timbangan analitik
Gambar 1. Diagram Alir Penelitian

## Metode Ekstraksi Butter Biji Pala
Biji pala dikeringkan dalam oven binder dengan suhu 50 o C selama 24 jam. Biji pala kering kemudian dihaluskan dengan blender. Setelah  itu,  sampel  dilarutkan  dengan pelarut  n-Heksana  dengan  perbandingan padatan dan pelarut sebesar 21:100, 28:100, dan 35:100 di dalam erlenmeyer. Kemudian dilakukan ekstraksi dengan cara erlenmeyer berisi  sampel  direndam  dalam  bak  air ultrasonic  cleaner  UC-10SD.  Erlenmeyer diletakkan didalam bak air ultrasonic selama 30, 37,5 , dan 45 menit dengan suhu 40 o C, 45 o C,  dan  50 o C  serta  dengan  frekuensi  45 kHz. Setelah itu, sampel diambil dan disaring dengan  kertas  saring  whatman  no  1.  Filtrat yang didapatkan kemudian dilakukan pemisahan  dari  pelarut  dengan  alat  rotary
evaporator  (modifikasi  Trendafilova et  al ., 2010).
Analisa rendemen (Sani et al., 2014)
Hasil ekstraksi butter biji pala ditimbang dan dihitung persen rendemennya dengan rumus :
% 𝑅𝑒𝑛𝑑𝑒𝑚𝑒𝑛 = 𝑏𝑒𝑟𝑎𝑡 𝑒𝑘𝑠𝑡𝑟𝑎𝑘 𝑦𝑎𝑛𝑔 𝑑𝑖ℎ𝑎𝑠𝑖𝑙𝑘𝑎𝑛 (𝑔𝑟) 𝑏𝑒𝑟𝑎𝑡 𝑎𝑤𝑎𝑙 (𝑔𝑟) 𝑥 100% Analisa Bilangan Asam (modifikasi Lempang et al., 2016) Bilangan  asam  ditentukan  dengan cara  butter  biji  pala  ditimbang  sebanyak 1,5gram  kemudian  ditambahkan  alkohol 95%  sebanyak  50  ml.  kemudian  sampel dipanaskan  diatas  penangas  air  selama  15 menit  sambal  diaduk.  Setelah  itu  sampel dititrasi  dengan  KOH  0,1N  dan  diberi  3-5 tetes  indikator  PP.  Titrasi  dilakukan  sampai larutan  berubah  warna  menjadi  merah jambu.
𝐵𝑖𝑙𝑎𝑛𝑔𝑎𝑛 𝑎𝑠𝑎𝑚 = 𝑉𝑥𝑁𝑥 56,1 𝑚𝑎𝑠𝑠𝑎 𝑏𝑎ℎ𝑎𝑛
Keterangan : V = Jumlah mL KOH untuk titrasi N = Normalitas KOH 56,1 = Bobot molekul KOH
Analisa Bilangan Penyabunan (modifikasi SNI 0l-3555-1998)
Bilangan penyabunan dilakukan dengan  cara  sampel  sebanyak  1,5  gram dilarutkan dalam 50 ml KOH alkohol 0,5 yang kemudian  direflux.  Setelah  selesai  sampel dititrasi dengan HCl 0,5 N dan ditambahkan indikator PP sebanyak 1-3 tetes.
𝐵𝑖𝑙𝑎𝑛𝑔𝑎𝑛 𝑝𝑒𝑛𝑦𝑎𝑏𝑢𝑛𝑎𝑛 = (𝑉0 − 𝑉1)𝑥𝑁𝑥 56,1 𝑔𝑟 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑙𝑒
Keterangan : Vo = Volume HCl blanko (mL) V1 = Volume HCl sample (mL) N   = Normalitas HCl
Analisa  Bilangan  Ester  (Chasani  et  al., 2014)
Nilai  bilangan  ester  didapatkan  dari selisih  dari  bilangan  penyabunan  dan bilangan asam

## HASIL DAN PEMBAHASAN Rendemen
Biji  pala  memiliki  nilai  komersial  yang tinggi  jika  diubah  menjadi  butter  biji  pala (Nurdjannah et  al .,  2007).  Minyak  esensial pala  memiliki  warna  kuning  pucat  biasa disebut myristica dengan kandungan sebesar  6,5%-16%.  Komposisi  dari  minyak esensial tersebut adalah sabinene (15-50%), α-pinene  (10-22%)  dan  ß-pinene  (7-18%), myrcene  (0,7-3%),  1,8-cineole  (1,5-3,5%), myristicin (0,5-13,5%), limonene (2,7-4,1%), safrole  (0,1-3,2%),  dan  terpinen  (0-11%). Hasil dari penelitian menunjukan bahwa pala yang  diekstrak  menggunkan  pelarut  n- heksane  memiliki  karakteristik  berwarna kuning pucat, berbentuk padat dan memiliki aroma  khas  pala.    Hal  ini  sesui  teori Krishnamoorthy  &  Rema  (2001)  bahwa  biji pala yang diekstrak dengan pelarut hidrokarbon akan menghasilkan kandungan fatty oil yang lebih tinggi sehingga berbentuk semi padat atau padat.
Hasil ekstraksi pala dengan pelarut n- heksana  memiliki  bentuk  padat  dan  disebut dengan  butter  biji  pala  (nutmeg  butter).  Hal ini karena sifatnya yang seperti butter. Butter biji  palamemiliki  karakteristik  yang  semi solid, berwarna kekuningan sampai kecoklatan  tergantung  dari  bahan  awal, memiliki  aroma dan  rasa  seperti  pala,  serta memiliki  titik  didih  rendah  sekitar  45-51  oC, serta  specific  gravity  sebesar  0,990.  Butter biji  pala  tetap  memiliki  senyawa  volatil karena memiliki kandungan minyak esential sebesar  10-12%.  Hal  ini  dikarenakan terdapatnya  kandungan  trimyristin  yang merupakan  trigliserida  yang  terdapat  di butter  biji  pala.  Butter  biji  pala  biasanya digunakan  untuk  membuat  lilin,  campuran pada  sabun,  dental  product  dan  terkadang untuk substitusi pada cocoa butter
(Krishnamoorthy  &  Rema,  2001;  Leela, 2008; Jose et al., 2016).
Penelitian  kali  ini  dilakukan  dengan ekstraksi menggunakan ultrasound waterbath yang memiliki keuntungan penggunaan  yang  mudah  dan  ekonomis. Ultrasound  waterbath  memiliki  cara  kerja dengan  mengubah  energi  listrik  menjadi getaran mekanis oleh transduser piezoelektrik.  Kemudian  sistem  tuning  akan mengirimkan  gelombang  ultrasonik  yang dihasilkan  oleh  getaran  mekanis  ke  media. Ultrasound waterbath juga memiliki sounder ultrasonik  yang  akan  memberikan  sinyal excitation  yang  sesuai  dengan  frekuensi yang  dipilih  (Wen et  al .,  2018).    Menurut Capelo-Martine  (2009),  terdapat  beberapa hal  yang  mempengaruhi  hasil  ekstraksi, diantaranya  adalah  jumlah  sampel,  ukuran partikel  sampel,  pelarut,  sonic  power, frekuensi,  waktu  ekstraksi,  dan  suhu ekstraksi.  Suhu  yang  dipilih  adalah  40,  45 dan 50 o C dengan pertimbangan titik didih n- heksan yang rendah, dengan waktu 30, 37.5 dan 40 menit serta rasio 21, 28 dan 35 gram sesuai dengan critical value hasil pendahuluan. Penelitian dilakukan menggunakan  pelarut  n-heksan.  Pelarut  n- heksana merupakan pelarut non polar, serta mudah  menguap  sehingga  memudahkan pemisahan dengan hasil ekstrak (Azis et al ., 2014).
Rancangan  percobaan  dan  analisa data menggunakan metode RSM. Anderson &  Whitcomb  (2016)  mengatakan  bahwa RSM  akan  mengkasilkan  grafik  yang didasarkan pada model matematika. Response  Surface  Methodology  (RSM) dapat  pula  digunakan  untuk  mengevaluasi signifikansi  dari  beberapa  faktor  yang memiliki  interaksi  kompleks.  RSM  dapat mengecilkan  jumlah  percobaan  sehingga merupakan metode yang kuat dalam menguji variabel  proses  ganda  (Bai et  al. ,  2014). Metode  response  surface  yang  paling terkenal  adalah  Composite  Central  Design (CCD).  CCD  dapat  memungkinan  untuk membuat  model  statistik  dan  representasi dalam bentuk grafis serta respond surface .
Jurnal Teknologi Pangan dan Gizi Journal of Food Technology and Nutrition Vol 19 (2): 126-134, 2020.

## Tabel 1. Hasil Ekstraksi dan Analisa
No Suhu Waktu Rasio Rendemen (gram) % rendemen Angka Penyabunan Bilangan Asam Bilangan Ester 1 40,0 30,0 21,0 4,215±0,01 20,075±0,04 144,925±6,61 16,269±2,38 128,656±8,99 2 40,0 30,0 35,0 7,21±1,00 20,6±2,87 143,99±15,9 14,96±1,59 129,03±14,28 3 40,0 45,0 21,0 4,335±0,02 20,64±0,1 151,47±2,64 16,082±1,59 135,388±4,23 4 40,0 45,0 35,0 7,95±0,66 22,715±1,9 162,69±2,64 16,082±1,59 146,608±1,06 5 50,0 30,0 21,0 4,215±0,02 20,07±0,1 163,625±14,5 17,952±2,64 145,673±11,09 6 50,0 30,0 35,0 8,025±0,16 22,93±0,47 141,185±25,1 16,456±0,00 124,729±25,12 7 50,0 45,0 21,0 4,225±0,04 20,12±0,17 152,405±17,2 16,269±0,79 136,136±16,40 8 50,0 45,0 35,0 8,125±0,28 23,215±0,78 162,69±10,6 16,456±0,53 146,234±11,11 9 36,6 37,5 28,0 6,235±0,3 22,27±1,09 180,455±17,2 17,391±0,79 163,064±16,40 10 53,4 37,5 28,0 6,84±0,76 24,43±2,73 173,91±13,2 16,082±1,59 157,828±11,64 11 45,0 24,9 28,0 6,18±0,45 22,07±1,61 167,365±3,97 16,269±0,79 151,096±4,76 12 45,0 50,1 28,0 6,21±0,38 22,175±1,36 154,275±1,32 17,765±0,26 136,51±1,59 13 45,0 37,5 16,2 3,225±0,02 19,875±0,13 147,73±2,64 16,643±0,79 131,087±1,85 14 45,0 37,5 39,8 7,74±0,92 19,46±2,31 159,885±1,32 17,391±1,32 142,494±2,64 15 (C) 45,0 37,5 28,0 6,68±0,28 23,855±1,01 143,055±9,26 18,326±0,53 124,729±8,73 16 (C) 45,0 37,5 28,0 6,66±0,27 23,785±0,95 127,16±13,2 17,578±3,17 109,582±16,40 17 (C) 45,0 37,5 28,0 6,64±0,07 23,715±0,25 141,185±6,61 17,952±1,59 123,233±8,20 Keterangan : C : titik center
Tabel 2. Tingkat signifikan ANOVA model kuadratik polinomial
Faktor Nilai p Rendemen Angka Penyabunan Bilangan Asam Bilangan Ester Suhu (L) 0,110762 0,871552 0,691268 0,903570 Suhu (Q) 0,454746 0,000598* 0,086804 0,000304* Waktu (L) 0,381220 0,707775 0,648309 0,739986 Waktu (Q) 0,033451* 0,064816 0,156134 0,043546* Rasio (L) 0,038399* 0,606959 0,725450 0,574204 Rasio (Q) 0,000021* 0,294419 0,156134 0,222756 Suhu*Waktu 0,399919 0,588346 0,380370 0,649044 Suhu*Rasio 0,233827 0,418664 1,000000 0,410333 Waktu*Rasio 0,522611 0,112838 0,317277 0,130873 R 2 0,62659 0,46023 0,22822 0,48391 *signifikan Tabel 3. Nilai Koefisien Regresi model kuadratik polinomial Faktor Nilai Koefisien Regresi Rendemen Angka Penyabunan Bilangan Asam Bilangan Ester Mean -35,7046 1157,698* -53,6556 1211,353* Suhu (L) 0,8364 -36,633* 2,3327 -38,966* Suhu (Q) -0,0088 0,454* -0,0220 0,476* Waktu (L) 1,1348 -8,026 0,8127 -8,838 Waktu (Q) -0,0116* 0,099 -0,0080 0,107* Rasio (L) 1,1228 -3,724 0,2348 -3,959 Rasio (Q) -0,0310* 0,063 -0,0092 0,072 Suhu*Waktu -0,0078 -0,050 -0,0087 -0,041 Suhu*Rasio 0,0120 -0,080 0,0000 -0,080 Waktu*Rasio 0,0042 0,107 0,0071 0,100 R 2 0,62659 0,46023 0,22822 0,48391 *signifikan
Jurnal Teknologi Pangan dan Gizi Journal of Food Technology and Nutrition Vol 19 (2): 131-144, 2020.
(a) (b) (c) Gambar 2. Grafik Fitted Surface Rendemen (a) Pengaruh Suhu dan Waktu Terhadap Persen Rendemen (b) Pengaruh  Suhu  dan  Rasio Terhadap  Persen  Rendemen (c) Pengaruh Waktu dan Rasio Terhadap Persen Rendemen
(a)
(b)
(c) Gambar 3. Grafik Fitted Surface Bilangan Penyabunan
(a) Pengaruh Suhu dan Waktu Terhadap Bilangan Penyabunan (b) Pengaruh Suhu dan Rasio Terhadap Bilangan Penyabunan (c) Pengaruh Waktu dan Rasio Terhadap Bilangan Penyabunan
(a) (b) (c)
Gambar 4. Grafik Fitted Surface Bilangan Asam (a) Pengaruh Suhu dan Waktu Terhadap Bilangan Asam (b) Pengaruh Suhu dan Rasio
Terhadap Bilangan Asam (c) Pengaruh Waktu dan Rasio Terhadap Bilangan Asam
(a)
(b)
(b) Gambar 5. Grafik Fitted Surface Bilangan Ester (a) Pengaruh  Suhu  dan  Waktu  Terhadap Bilangan  Ester (b) Pengaruh  Suhu  dan  Rasio Terhadap  Bilangan  Ester (c) Pengaruh  Waktu dan Rasio Terhadap Bilangan Ester
Metode ini berguna untuk memprediksi nilai optimal  dari  respon  serta  memberikan informasi interaksi antar variabel independen
Jurnal Teknologi Pangan dan Gizi Journal of Food Technology and Nutrition Vol 19 (2): 131-144, 2020.
dan  kaitannya  dengan  variabel  dependen (Yousefi et al., 2016). Rancangan percobaan dan  hasil  penelitian  sebelum  diolah  dengan software RSM dapat dilihat pada Tabel 1.
Analisa varietas (anova) akan menunjukan  persamaan  dan  hubungan sebenarnya  antara  respon  dan  variabel signifikan  yang  akan  diwakili  oleh  sebuah persamaan. Signifikansi dari koefisien ditentukan oleh nilai F dan p. Nilai F semakin besar  dan  semakin  kecil  nilai  p  maka  akan semakin signifikan. Jika nilai p lebih rendah dari  0,05  maka  dapat  dikatakan  model signifikan  secara  statistik  (Bai et  al., 2014). Berdasarkan  Tabel  2.,  hasil  anova  persen rendemen  menunjukan  bahwa  waktu  (Q), rasio (L), dan rasio (Q) memiliki nilai p value lebih  rendah  dari  0,05  sehingga  dinyatakan signifikan. Hal ini menunjukan bahwa waktu dan  rasio  sangat  berpengaruh  untuk mendapatkan  %  rendemen  yang  optimal pada  biji  pala  menggunakan  pelarut  n- heksana.  Hal  ini  telah  sesuai  teori,  karena waktu  mempengaruhi  hasil  rendemen, dikarenakan  semakin  lama  waktu  ekstraksi maka  rendemen  yang  dihasilkan  akan semakin  banyak.  Efektivitasnya  akan  naik sampai titik equilibrium, tetapi semakin lama waktu  ekstraksi  dapat  terjadi  degradasi komponen,  selain  itu  komponen  yang  tidak diinginkan juga dapat ikut terekstrak (Wen et al., 2018;
Capelo-Martine,
2009).
Perbandinga  rasio  antara  padatan  dan pelarut  juga  dapat  mempengaruhi  hasil rendemen.  Semakin  sedikit  rasio  padatan menandakan  semakin  banyaknya  pelarut. Hal  ini  akan  membuat  hasil  ekstraksi  akan semakin banyak karena terdapatnya kenaikan laju difusi senyawa dari padatan ke pelarut  (Esclapez et  al .,  2011;  Predescu et al ., 2016).
Berdasarkan  Gambar  2.,  grafik  fiited surface  dari  pengaruh  waktu  dan  rasio terhadap  persen  rendemen  memilik  bentuk grafik  maksimum,  dimana  menandakan bahwa  titik  maksimum  berada  di  wilayah penelitian.  Hal  ini  juga  menandakan  bahwa waktu  dan  rasio  mempengaruhi  hasil  dari persen  rendemen.  Grafik  fitted  surface
persen  rendmen  pengaruh  suhu  dan  waktu terhadap persen rendemen serta grafik fitted surface persen rendmen pengaruh suhu dan rasio terhadap persen rendemen menunjukan  bentuk  plateu  yang  bearti perlakuan  suhu  tidak  memiliki  pengaruh terhadap  hasil  rendemen  (Bezerra et  al ., 2008).  Hal  ini  tidak  sesuai  teori,  menurut Capelo-Martine (2009) suhu ekstraksi mempengaruhi  hasil  ekstraksi,  hal  ini dikarenakan  semakin  naiknya  suhu,  maka akan menaikan efisiensi dari ektraksi karena akan  menaikan  jumlah  gelembung  kavitasi tetapi  bila  suhu  mendekati  titik  didih  maka akan menurunkan hasil ekstraksi. Penelitian kali ini tidak menggunakan temperature yang lebih  tinggi  lagi  karena  pelarut  yang digunakan adalah pelarut n-heksana. Menurut Azis et al . (2014) pelarut n-heksana memiliki titik didih rendah yaitu antara 65-70 o C  sehingga  suhu  yang  digunakan  tidak dapat terlalu tinggi karena n-heksan mudah menguap dan akan menghilangkan senyawa volatile yang terkandung dalam pala.
Regresi digunakan untuk memprediksi respon  untuk  kombinasidari  parameter proses  pada  level  terbaik  mereka  (Antony, 2003). Regresi juga akan member penjelasan tentang hubungan antara variabel idependent dan respon (Bai, 2014). Persamaan untuk regresi 3 tingkat adalah:
Y= β 0 + β 1 A+ β 2 B+ β 3 C+ β 12 AB+ β 13 AC+ β 23 AC+ β 11 A 2 + β 22 B 2 + β 33 C 2
Y akan memprediksi respon, β 0 merupakan model konstan, β 1 sampai β 3 merupakan koefisien  linear, β 11 sampai β 33 merupakan koefisien kuadratic, β 12 sampai β 23 merupakan koefisien cross product . Sementara huruf A, B, dan C melambangkan variabel independen (suhu, waktu, dan rasio) yang dapat diganti dengan huruf X (Said, & Amin,  2015).  Sehingga  berdasarkan  Tabel 3., prediksi persamaan dari persen rendemen adalah
Y= -35,7046 + 0,8364X 1 + 1,1348X 2 + 1,1228X 3 - 0,0078X 1 X 2 +  0,0120  X 1 X 3 +  0,0042  X 2 X 3 -
0,0088X 1 2 - 0,0116X 2 2 - 0,0310X 3 2
Jurnal Teknologi Pangan dan Gizi Journal of Food Technology and Nutrition Vol 19 (2): 126-134, 2020.

## Bilangan Penyabunan
Bilangan  penyabunan  menyatakan banyaknya mg KOH yang dibutuhkan untuk menyabunkan  1  gram  lemak  atau  minyak. Jumlah  KOH  yang  dibutuhkan  tergantung dari panjang rantai karbon asam lemak yang terkandung di trigliserida dan bobot trigliserida.  Berdasarkan  Tabel  1.  hasil ekstraksi  dan  analisa  menyatakan  angka terendah  dari  bilangan  penyabunan  adalah 132,517  mg  KOH/  gr  minyak  sedangkan yang  paling  tinggi  bernilai  192,61  mg  KOH/ gr  minyak.  Hasil  ini  sesuai  dengan  teori Weiss  (2002)  bahwa  bilangan  saponifikasi untuk butter biji pala berada adalah 172 mg KOH/  gr  lemak  sampai  179  mg  KOH/  gr lemak  serta  terdapat  penelitian  yang menyatakan angka saponifikasi bernilai 196 mg  KOH/  gr  lemak.  Hal  ini  membuktikan butter  biji  pala  yang  dihasilkan  pada penelitian ini masih memasuki standar yang ada.
Berdasarkan  Tabel  2.,  Hasil  ANOVA Bilangan Penyabunan, hanya suhu (Q) yang memiliki  nilai  p  lebih  rendah  dari  0,05 sehingga  hanya  suhu  (Q)  yang  dinyatakan signifikan  secara  statistika.  Suhu  (Q) merupakan  bentuk  persamaan  kuadrat sehingga  kurva  yang  terbentuk  akan berbentuk  melengkung.  Hal  ini  sesuai  teroi dari  Capelo-Martine  (2009)  bila  suhu mendekati titik didih maka akan menurunkan hasil ekstraksi karena akan terjadi degradasi thermal.
Berdasarkan  Gambar  3.,  ketiga  grafik memiliki  bentuk  seperti  kawah  atau  bernilai minimum,  hal  ini  dikarenakan  semakin bersarnya nilai bilangan penyabunan menunjukan bahwa bobot molekul dari asam lemak  dan  gliserida  semakin  kecil  (Chasani et  al .,  2014).  Diagram  minimum    juga menandakan bayaknya kandungan trimyristin  dalam  lemak  pala  yang  memiliki berat molekul sebesar 723,2 g/mol. Sedangkan  berat  molekul  dari  penyusun lemak  pala  yang  lain  seperti    asam  oleat (C 18 H 34 O 2 )    sebesar  283,5  g/mol,  berat molekul  asam  linolenat  (C 18 H 30 O 2 )  adalah
278,4  g/mol,  serta  myristisin  (C 11 H 12 O 3 ) memiliki  bobot  molekul  192,21  g/mol (PubChem,  2005;  2007;2004  ).  Sehingga dapat  dipastikan  teori  dari  benar  bahwa kandungan  fixed  oil  pada  butter  biji  pala sebesar  25-40%  dan  terdiri  dari  trimyristin (84%), konstituen yang tidak dapat tersaponifikasi  (9,8%),  oleic  acid  (3,5%), material  seperti  resin  (2,3%),  linolenic  acid (0,6%),  formic  acetate  dan  cerotic  acid  in trace (Krishnamoorthy & Rema, 2001).
Regresi digunakan untuk memprediksi respon  untuk  kombinasidari  parameter proses  pada  level  terbaik  mereka  (Antony, 2003). Regresi juga akan member penjelasan tentang hubungan antara variable idependent dan respon (Bai, 2014). Berdasarkan  Tabel  3.,  persamaan  dari bilangan penyabunan adalah
Y=1157,698  -  36,633X 1 -  8,026X 2 -  3,724X 3 - 0,050X 1 X 2 - 0,080X 1 X 3 + 0,107X 2 X 3 + 0,454X 1 2 + 0,099X 2 2 + 0,063X 3 2

## Bilangan Asam
Bilangan  asam  menunjukan  jumlah KOH  yang  diperlukan  untuk  menetralkan asam  lemak  bebas.  Semakin  besar  nilai bilangan asam bearti semakin banyak asam lemak  bebas  yang  terdapat  di  lemak, sehingga  kualitas  lemak  semakin  buruk (Chasani et  al .,  2014).  Bilangan  asam  juga menunjukan  bahwa  pada  minyak/  lemak terdapat  kandungan  asam  organik.  Hal  ini dikarenakan pelarut heksan yang digunakan selama proses ekstraksi akan ikut mengekstraksi asam lemak bebas khususnya  asam  lemak  oleat  dan  linoleat (Saranaung et al., 2018). Berdasarkan Tabel 1.,  hasil  ekstraksi  dan  analisa  dapat diketahui  bahwa  nilai  dari  bilangan  asam paling  rendah  bernilai  13,83  mg  KOH/  gr lemak serta yang paling tinggi bernilai 19,822 mg KOH/ gr lemak. Hasil ini sesuai teori dari Weiss  (2002)  bahwa  nilai  asam  butter  biji pala  berada  di  antara  17-23  mg  KOH/  gr lemak,  sehingga  butter  biji  pala  yang dihasilkan  berada  dalam  kondisi  baik  dan sesuai standar.
Jurnal Teknologi Pangan dan Gizi Journal of Food Technology and Nutrition Vol 19 (2): 131-144, 2020.
Berdasarkan  Tabel  2.,  hasil  ANOVA bilangan  asam  tidak  terdapat  variable  yang signifikan.  Hal  ini  karena  pada  pada  tabel ANOVA  diketahui  nilai  p  tidak  ada  yang memiliki  nilai  dibawah  0,05.  Hal  ini membuktikan  bahwa  tidak  ada  variable selama ekstrasi yang mempengaruhi bilangan  asam.  Menurut  Asyik  &  Astuti (2010) bilangan asam yang tinggi menunjukan  proses  penyimpaan  yang dilakukan  pada  suhu  ruang  sehingga membuat  komponen  dalam  lemak  pala terurai. Umur simpan juga dapat mempengaruhi  bilangan  asam.  Semakin lama umur simpan semakin banyak komponen  lemak  yang  terurai.  Menurut Idrus, et al. (2014) meningkatnya nilai asam dapat  dikarenakan  pecahnya  komponen trimiristin  menjadi  asam  miristat.  Trimyristin (C 45 H 86 O 6 ) adalah trigliserida yang diperoleh dengan asilasi formal dari tiga gugus hidroksi gliserol  oleh  asam  miristat  (tetradekanoik) (PubChem, 2005).
Berdasarkan  Gambar  4.,  dapat  dilihat ketiganya  merupakan  grafik  fiited  surface maksimum.  Grafik  ini  menandakan  bahwa nilai maksimun berada di wilayah penelitian (Bezerra et  al .,  2008).  Akan  tetapi,  variable suhu, waktu, dan rasio tidak dapat dikatakan mempengaruhi  dari  bilangan  asam.  Hal  ini dikarenakan  tidak  terdapat  variable  yang signifikan.  Maksimum  surface  plot  dapat terjadi karena rentang hasil terlalu dekat.
Regresi digunakan untuk memprediksi respon  untuk  kombinasidari  parameter proses  pada  level  terbaik  mereka  (Antony, 2003). Regresi juga akan member penjelasan tentang hubungan antara variable idependent dan respon (Bai, 2014). Berdasarkan  Tabel  3.,  Hasil  Regresi Bilangan  Asam,  persamaan  dari  bilangan asam adalah
Y= -53,6556 + 2,3327X 1 + 0,8127X 2 + 0,2348X 3 - 0,0087X 1 X 2 +  0,0000X 1 X 3 +  0,0071X 2 X 3 - 0,0220X 1 2 - 0,0080X 2 2 - 0,0092X 3 2

## Bilangan Ester
Bilangan  ester  akan  berapa  milligram KOH yang dibutuhkan untuk menyabunkan 1
mg  ester.  Semakin  kecil  bilangan  ester menunjukan  semakin  kecil  pula  ester  yang terkandung  dalam  minyak/lemak.  Hal  ini menunjukan bahwa penyusun dari butter biji pala  sebagian  besar  bukan  metil  ester (Handayani, et al ., 2015).
Berdasarkan  Tabel  2  Hasil  ANOVA Bilangan Ester, dapat diketaui bahwa nilai p dari suhu (Q) serta waktu (Q) memiliki nilai di bawah  0,05  atau  0,000304  untuk  suhu  (Q) dan  0,043546  untuh  waktu  (Q).  Hal  ini menunjukan bahwa suhu (Q) dan waktu (Q) signifikan secara statistik. Kuadran dari suhu dan waktu memiliki nilai signifikan menunjukan grafik akan berbentuk melengkung  dan  tidak  datar  (Haans  et  al., 2016).  Suhu  (Q)  dan  waktu  (Q)  dapat berpengaruh  dalam  bilangan  ester.  Hal  ini dikarenakan semakin lama proses ekstraksi bahan-bahan yang tidak diinginkan dimungkinkan dapat terbawa selama proses, serta  terjadi  dekomposisi  senyawa  karena lamanya proses ekstraksi (Wen et al., 2019). Sedangkan  semakin  tingginya  suhu  dapat berpengaruh  dengan  degradasi  thermal komponen volatile yang memang tidak tahan terhadap panas (Esclapez et al ., 2011).
Berdasarkan  Gambar  5.,  ketiga  grafik fiited  surface  membentuk  grafik  minimum. Hal  ini  dapat  diartikan  bahwa  hasil  yang didapat  memiliki  nilai  rendah  pada  suhu, waktu  dan  rasio  perbandingan  pada  titik tengah.  Hal  ini  menunjukan  bahawa  lemak pala  yang  dihasilkan  memiliki  kandungan yang  kurang  baik.  Menurut  Asyik  &  Astuti (2010)  nilai  ester  yang  rendah  menunjukan proses  penyimpaan  yang  dilakukandi  suhu ruang  serta  dilakukan  dalam  waktu  yang lama  dapat  membuat  komponen  dalam lemak pala terurai. Lemak pala dengan nilai ester  yang  rendah  dinyatakn  kurang  baik karena  ester  memberikan  kontribusi  dalam memberikan  flavor  pada  lemak  pala.
Komponen  utama  lemak  pala  adalah trimyristin  (84%).  Kandungan  trimyristin  ini yang  mengakibatkan  butter  biji  pala  dapat memiliki  aroma  dan  rasa  seperti  biji  pala (Krishnamoorthy & Rema,2001; Leela, 2008; Jose et al ., 2016).
Jurnal Teknologi Pangan dan Gizi Journal of Food Technology and Nutrition Vol 19 (2): 126-134, 2020.
Tabel 4. Critical Value
Faktor Critical Values Rendemen Bilangan Penyabunan Bilangan Asam Bilangan Ester Suhu ( o C) 51,98264 44,74809 45,38643  44,79936 Waktu (menit) 36,96741 37,85521 38,13063  37,72494 Rasio (gram) 30,63414 25,99078 27,47197  26,28540
Regresi digunakan untuk memprediksi respon  untuk  kombinasidari  parameter proses  pada  level  terbaik  mereka  (Antony, 2003). Regresi juga akan member penjelasan tentang hubungan antara variable idependent dan respon (Bai, 2014). Berdasarkan Tabel 3. Hasil Regresi Bilangan Ester, persamaan dari bilangan ester adalah
Y=  1211,353  -  38,966X 1 -  8,838X 2 -  3,959X 3 - 0,041X 1 X 2 - 0,080X 1 X 3 + 0,100X 2 X 3 + 0,476X 1 2 + 0,107X 2 2 + 0,072X 3 2

## Critical Value
Tabel prediksi critical value didapatkan dari gabungan kondisi optimal yang dipengaruhi  oleh  interaksi  antar  variable (Ratnawati et al ., 2018). Bezerra et al. (2008) mengatakan bahwa prediksi titik kritis hanya didapatkan jika grafik fiited surface berbentuk  maksimum,  minimum,  ataupun saddle.
Grafik fiited  surface dari  persen rendemen merupakan grafik maksimum dan grafik  plateu,  karena  grafik fitted  surface pengaruh  waktu  dan  rasio  (C)  masih berbentuk  grafik  maksimum  tabel critical value dapat  muncul.  Berdasarkan  Tabel  4., Critical  Value Persen  Rendemen,  persen rendemen  akan  memiliki  angka  tertinggi pada suhu 51,98 o C, waktu 36,97 menit dan rasio  30,63  gram  dalam  100  ml  pelarut heksan.  Namun,  angka  critical  point  pada suhu  tidak  boleh  terlalu  tinggi,  karena  jika terlalu  tinggi  pelarut  n-heksane  akan menguap.
Grafik  fiited  surface  dari  bilangan penyabunan  merupakan  grafik  minimum, sehingga  tabel  critical  value  dapat  muncul. Berdasarkan  Tabel  4.,  Critical  Value Bilangan Penyabunan, bilangan
penyabunan  akan  memiliki  angka  tertinggi pada suhu 44,74 o C, waktu 37,85 menit dan rasio  25,99  gram  dalam  100  ml  pelarut heksan.  Namun,  angka  critical  point  ini belum tentu benar karena bilangan penyabunan  didasarkan  dari  berat  molekul dan  diharapkan  grafik  fiited  surface  yang muncul berbentuk grafik minimum.
Grafik fiited surface dari bilangan asam merupakan grafik maksimum, sehingga tabel critical  value  dapat  muncul.  Berdasarkan Tabel  4. Critical  Value Bilangan  Asam, bilangan asam akan memiliki angka tertinggi pada suhu 45,38 o C, waktu 38,13 menit dan rasio  27,47  gram  dalam  100  ml  pelarut heksan.  Angka  dari  tabel critical  point bilangan asam sebaiknya tidak diikuti karena akan  menghasilkan  grafik fiited  surface maksimum, sedangkan bilangan asam lebih baik  jika  bernilai  rendah  atau  grafik  fiited surface berbentuk grafik minimum.
Grafik fiited surface dari bilangan ester merupakan  grafik  minimum,  sehingga  tabel critical  value dapat  muncul.  Berdasarkan Tabel  4. Critical  Value Bilangan  Ester, bilangan ester akan memiliki angka tertinggi pada suhu 44,79 o C, waktu 37,72 menit dan rasio  26,28  gram  dalam  100  ml  pelarut heksan.  Angka  pada  tabel  critical  value bilangan  asam  diperlukan  verifikasi  untuk melihat apakah benar akan dihasilkan grafik fiited surface maksimum.

## KESIMPULAN
Perbedaan waktu dan rasio
mempengaruhi  hasil  persen  rendemen  dari ekstraksi  biji  pala  menggunakan  pelarut  n- heksan. Sedangkan perbedaan suhu mempengaruhi  hasil  bilangan  penyabunan dan  bilangan  ester  dari  lemak  pala.  Critical value  untuk  persen  rendemen,  bilangan
Jurnal Teknologi Pangan dan Gizi Journal of Food Technology and Nutrition Vol 19 (2): 131-144, 2020.
penyabunan,  bilangan  asam  dan  bilangan ester  akan  berbeda. Critical  value persen rendemen  ada  pada  suhu  51,98 o C,  waktu 36,97 menit dan rasio 30,63 gram dalam 100 ml  pelarut  heksan.  Bilangan  penyabunan memiliki  critical  value  pada  suhu  44,74 o C, waktu  37,85  menit  dan  rasio  25,99  gram dalam 100  ml pelarut  heksan.  Critical  value untuk  bilangan  asam  akan  ada  pada  suhu 45,38 o C, waktu 38,13 menit dan rasio 27,47 gram  dalam  100  ml  pelarut  heksan. Sedangkan  critical  value  untuk  bilangan ester  akan  ada  pada  suhu  44,79 o C,  waktu 37,72 menit dan rasio 26,28 gram dalam 100 ml pelarut heksan.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis  mengucapkan  terima  kasih kepada semua pihak yang telah berkontribusi membantu dalam penelitian ini, terutama atas pendanaan oleh DIKTI dengan SK  No.  010/L6/AK/SP2H.1/PENELITIAN/ 2020.

## DAFTAR PUSTAKA
Adhiksana,  A.  2017.  Perbandingan  Metode Konvensional Ekstraksi Pektin dari Kulit Buah Pisang dengan Metode Ultrasonik .
Journal  of  Research  and  Technology , 3(2):80-87.
Anderson,  M.J  dan  Patrick  J.  Whitcomb 2016. RSM  simplified  :  optimizing processes  using  response  surface methods  for  design  of  experiments . Taylor & Francis Group CRC Press; US. Antony, J., 2003. Design of Experiments for Engineers  and  Scientists .  Elsevier Science & Technology Books.
Asyik,  N  dan  I.  Astuti.2010.  Karakter
Industriisasi Mutu Minyak Pala (Nutmeg Oil)  Indonesia  Sebagai  Bahan  Baku Flavour. ARGIPLUS 20(2):146-154.
Azis,  Tamzil,  SendryFebrizky,  and  Aris  D
Mario. 2014. PengaruhJenisPelarutTerhadapPersen
Yield  Alkaloid  dari  Daun  Salam  India ( Murraya koenigii ). Teknik Kimia 20 (2): 1 –6.
Bai, Y., G Saren, dan W. Huo.2014.Response Surface Methodology (RSM) in Evaluation of the
Vitamin  C  Concentration  in  Microwave Treated Milk. Juornal Food SciTechmol 52(7):4647-4651.
Bezerra, M.A.,  R. E. Santelli, E. P. Oliveira,
L.  S.  Villar,  L.  A.  Escaleira.  2008. Response  Surface  Methodology  (RSM) as  a  Tool  for  Optimization  in  Analytical Chemistry. Talanta 76(5):965-977. Capelo-Martine,  JL  .2009. Ultrasound  In Chemistry Analitical Application . WILEY-VCH Verlag GmbH & Co. KGaA;
Portugal.
Chasani ,M., Nursalim , V.H., Widyaningsih,
S., Budiasih, I.N., Kurniawan W.A. 2014. Sintesis,  Pemurnian  dan  Karakterisasi Metil  Ester  Sulfonat  (MES)  Sebagai Bahan  Inti  Deterjen  dari  Minyak  Biji Nyamplung (Calophyllum inophyllum L). Molekul . 9(1):63-72. Drazat.  2007. Meraup  Laba  dari  Pala .  PT. Argomedia Pustaka; Jakarta Selatan.
Esclapez, M.D., J.V. Garcia-Perez, A. Mulet, dan  J.A.  Carcel.  2011.  Ultrasound- Assisted Extraction on Natural Products. Food Eng Rev . 3(2):108-120
Haans,  R.F.J.,  C.  Pieters,  dan  Zi-Lin He.2016.  Thinking  About  U:  Theorizing an  Testing  U-  and  Inverted  U-shaped Relationships  in  Strategy  Research.
Strategic Management Journal .
37:1177-1195
Handayani,  R.,  S  Rukminita  A.,  dan  I. Gumilar.2015. Karakteristik Fisiko-Kimia Minyak Biji Bintaro (Cerberamanghas L) dan  Potensinya  sebagai  Bahan  Baku Pembuatan  Biodiesel .  Jurnal  Akuatika VI(2):177-186.
Hermawan,  I.  2015. Daya Saing  Rempah Indonesia  di  Pasar  ASEAN  Periode Pradan  Pasca  Krisis  Ekonomi  Global. Buletin Litbang Perdagangan , 9(2):153 –
178.
Idrus,  S.,  M  Kaimudin,  R.F.  Torry,  dan  R.
Biantoro.  2014.  Isolaasi  Trimiristisin Minyak Pala Banda Serta
Jurnal Teknologi Pangan dan Gizi Journal of Food Technology and Nutrition Vol 19 (2): 126-134, 2020.
Pemanfaatannya  Sebagai  Bahan  Aktif Sabun. Jurnal Riset Industri . 8(1):23-31. Jose,  H.,  Arya  KR,  Sindhu  TJ,  Syamjith  P,
Vinod  KR,    Sandhya  S.2016.  A
Descriptive Review on Myristica fragrans Houtt. Hygeia.J.D.Med. 8(1):35-43. Krishnamoorthy,  B.  dan  J.  Rema  2001.
Handbook of Herb and Spices: Nutmeg and Mace . Woodhead Publishing
Limited; England.
Leela,  N.K.2008. Chemistry  of  spices; Nutmeg  and  Mice .  CAB  International; London, UK.
Lempang,  I.  R.,  Fatimawali,  danPelealu,
N.C.2016.  Uji  Kualitas  Minyak  Goreng Curah Dan Minyak Goreng Kemasan Di
Manado .  PHARMACON  Jurnal  Ilmiah Farmasi-UNSRAT 5(4):155-161.
Medina-torres, N., Ayora-talavera, T., Espinosa-andrews, H., Sánchez-
Contreras,  A.,  &  Pacheco,  N.  2017. Ultrasound  Assisted  Extraction  for  the Recovery of Phenolic Compounds from Vegetable Sources . Agronomy , 7(47). NIIR Board of Consultants &Engineers.(2013). The Complate Book On Spices & Condiments (with Cultivation,  Processing,  &  Used)  2 nd Revised  Edition. Asia  Pacific  Business Press Inc.; India
Nurdjannah,  N.,  Mulyono,  E.,  &  Risfaheri. (2007). Teknologi  Pengolahan  Pala
. Badan  Penelitian  dan  Pengembangan
Pertanian Balai Penelitian dan
Pengembangan Pascapanen Pertanian.
Pineiro,  Z.,  Guerrero,  R.  F.,  Fernandez-
Martin, M. I., Cantos-Villar, E., & Palma, M. 2013. Ultrasound-Assisted Extraction of  Stilbenoids  from  Grape  Stems . Journal  of  Agricultural  and  Food Chemistry 59(21): 11683-11689.
Prasetyo,  A.  P.,  &Mulyono,  E.  1987. Penggunaan  Oleoresin  Sebagai  Bahan Penyedap  Makanan  dan  Minuman.
Buletin Littro , 1(2), 94 –101.
Predescu,  N.C.,  C.  Papuc,  V.  Nicorescu,  I.
Gajaila,  G.V.  Goran.  C.D.  Petcu,  G. Stefan.  2016.  The  Influence  of  Solid  to
Solvent Ratio and Extraction Method on Total  Phenolic  Content,  Flavonoid content  and  Antioxidant  Properties  of Some Ethanolic Plant Extracts . Rev.Chimvol 67(10): 1922-1927
PubChem.  2004. Linolenic  Acid .  [internet] https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/comp ound/5280934 diakses pada 24 Agustus
2019 PubChem. 2005. Myristicin. [internet] https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/comp ound/4276 diakses  pada  24  Agustus 2019
PubChem. 2005. Trimyristin . [internet] https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/comp ound/TRIMYRISTIN diakses  pada  24 Agustus 2019 PubChem.  2007. Oleic  Acid. [internet] https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/comp ound/13011406 diakses pada 24 Agustus 2019
Rahman  N.A.A,  Fazilah  A.,  Effarizah
M.E.2015. Toxicity of nutmeg (Myristicin) ;  A  Review .  International Journal on Advance Science Engineering  Information  Technology . 5(3):212-215.
Ratnawati,  S.E.,  N  Ekantari,  R.W.  Pradipta,
dan B.L. Pramita.2018. Aplikasi Response  Surface  Methodology  (RSM) pada  Optimalisasi  Ekstraksi  Kalsium Tulang Lele. Jurnal Perikanan Universitas Gajah Mada 20(1):41-48. Said, K.A.M dan M.A.M Amin.2015. Overview  on  The  response  Surface Methodology (RSM) in Extractiion Process. Journal  of  Applied  Science  & Process Engineering 2(1):8-17.
Sani,  R.  N.,  Nisa,  F.  C.,  Andriani,  R.  D.,
&Maligan, J. M. 2014 . Analisis Rendemen  dan  Skrining  Fitokimia Ekstrak Etanol Mikroalga Laut Tetraselmis  chuii . Jurnal  Pangan  Dan Agroindustri , 2(2), 121 –126.
Saranaung,  A.,  M.  S.  Sangi*,  D.  G.  Katja.
2018. Pengaruh Ukuran Bahan terhadap Rendemen dan Kualitas Minyak  Biji  Pala  (Myristica  Fragrans Houtt)  dengan  Metode  Soxhletasi.

## JURNAL  MIPA  UNSRAT  ONLINE
7(1):39-43. SNI 0l-3555-1998 Sofyana,  Supardan,  M.  D.,  Zuhra,  Maulida, C.  A.,  &Haura,  U.  2013.  Ultrasound Assisted  Extraction  of  Oleoresin  from Nutmeg (Myristia  Fragrans  Houtt) . International
Journal on Advance Science Engineering Information Technology 3(4):18-21. Trendafilova, A., Chanev, C., & Todorova, M. 2010.  Ultrasound-assisted  extraction  of alantolactone and isoalantolactone from Inulahelenium  roots, Pharmacognosy Magazine 6(23):234-237. Weiss,  E.A.  2002. Spice  Crops .  CAB International  Publishing,  Wallingford, UK. Wen,  C.,  J  Zhang,  H  Zhang,  C.S.  Dzah,  M Zandile,  Y  Duan,  H  Ma,  X  Luo.  2018.
Advance in Ultrasound Assisted
Extraction of Bioactive Compounds from Cash  Crops-  A  Review. Ultrasonics- Sonochemistry 48:538-549.