## KUALITAS SPERMATOZOA ASAL CAPUT, CORPUS, DAN CAUDA
EPIDIDIMIS PADA KERBAU RAWA (Bubalus bubalis carabenensis)
Muhammad Riyadhi 1 , Akbar Budiansa 1 , Herliani 1 , Muhammad Rizal 1
1 Jurusan Peternakan, Fakultas Pertanian,Universitas Lambung Mangkurat Jl. Jenderal Ahmad Yani Km.36 Banjarbaru 70714.Telp. 0511-5781551 *Email: muhammadriyadhi54@yahoo.com

## Abstrak
Penelitian ini  bertujuan  untuk  mengevaluasi kualitas  spermatozoa  yang  terdapat  pada caput, corpus dan cauda epididimis  kerbau rawa (Bubalus bubalis carabenensis). Metode penelitian yang digunakan adalah metode eksplorasi pada 13 buah epididimis dari 8 ekor kerbau rawa dari Rumah  Pemotongan  Hewan  (RPH)  Pemerintah  Kabupaten  Banjar  dan  Rumah  Pemotongan Hewan  (RPH)  dan  Rumah  Pemotongan  Unggas  (RPU)  Kota  Banjarmasin  dengan  melihat kualitas  spermatozoa  pada  masing-masing caput,  corpus dan cauda epididimis.  Peubah  yang akan  diamati  dalam  penelitian  ini  adalah  motilitas,  konsentrasi,  persentase  spermatozoa  yang hidup, dan persentase abnormalitas. Hasil penelitian menunjukkan bahwa kualitas spermatozoa asal caput epididimis yang diamati meliputi: persentase motilitas, persentase hidup, konsentrasi dan  abnormalitas  berturut-turut sebesar  0%,  45,43% (31,87 – 72%), 189,62  x10 6 (40 – 480  x10 6 ) dan 56,16 %(44,34 – 66,53%), pada spermatozoa asal corpus epididimis sebesar 2,77% (1 – 9%),
58,73 (45,14 – 76%), 152,31 x10 6 (45 – 345x10 6 ) dan 47,61%(23,92 – 60,15%) dan pada cauda epididimis sebesar 53,46% (20 – 70%), 74,32% (56.68 – 83%), 1.459,62 x10 6 (825 – 2.340x10 6 ) dan  34,60%(15,89 – 50,04%).  Disimpulkan  bahwa spermatozoa  asal cauda epididimis memenuhi syaratdimanfaatkan dalam program inseminasi buatan.
Kata kunci: Spermatozoa, epididimis,kerbau rawa.

## Abstract
The purpose of this research was evaluate the quality of spermatozoa concentration in the caput, corpus and cauda of the swamp buffalo epididymis (Bubalus bubalis carabanensis). Method of this  research  was  to exploration  to  13  epididymides  of  eight  swamp buffaloes  were  obtained from Banjar  and  Banjarmasin  slaughterhouses,evaluated  the  quality  of  spermatozoa in  caput, corpus  and  cauda  of  epididymis.    Quality  of  collected-spermatozoa  including spermatozoa motility,  percentage  of  live  spermatozoa,  spermatozoa  concentration  and  percentage  of abnormality.    Result  of  this  study  showed  that  mean of  each  of  caput  spermatozoa  motility, percentage of live spermatozoa, spermatozoa concentration and percentage of abnormality; 0%, 45.43% (31.87 – 72%), 189,62 x10 6 (40 – 480 x10 6 ) and 56.16 %(44.34 – 66.53%), corpus ;2.77%
(1 – 9%), 58.73%  (45.14 – 76%), 152.31  x10 6 (45 – 345x10 6 ), and 47.61  %(23.92 – 60.15%), cauda;53.46%  (20 – 70%), 74.32  %  (56.68 – 83%), 1,459.62  x10 6 (825 – 2,340x10 6 ), and 34.60%(15.89 – 50.04%). In  conclusion, spermatozoaofcaudaepididymis could  be used in artificial insemination program.
Keywords: Spermatozoa, epididymis, swamp buffalo.

## PENDAHULUAN
Kerbau  rawa  merupakan  salah  satu plasma  nutfah  daerah  Kalimantan  Selatan dan sebagai salah satu penyuplai daging di Kalimantan Selatan. Populasi kerbau rawa pada  tahun 2012 tercatat  21.686 ekor, namun sejak lima tahun terakhir populasinya menurun (Biro Pusat Statistik,  2013). Penurunan  populasi diduga berkaitan dengan sistem
pemeliharaan yang masih  dilakukan secara tradisional, tingginya tingkat pemotongan, terbatasnya pakan dan padang penggembalaan alami, serta penampilan produksi dan reproduksi yang belum  maksimal. Untuk  meningkatkan populasi,  produktivitas,  dan  reproduksi kerbau  rawa  perlu  dilakukan  perbaikan kualitas  genetik  ternak  salah  satunya dengan  inseminasi  buatan (Suryana, 2007). Salah satu faktor penentu keberhasilan  dalam  inseminasi  buatan bergantung  dari spermatozoa  yang digunakan. Selama ini koleksi spermatozoa (semen) yang  digunakan dalam IBdilakukan  melalui  penampungan menggunakan vagina  buatan,  akantetapi ada  alternatif sumber  spermatozoa lain, yaitu  spermatozoa  asal  epididimis.Secara anatomis  epididimis  memang  berfungsi sebagai tempat pematangan dan penyimpanan spermatozoa
sebelum
diejakulasikan. Spermatozoa  epididimis ini  diketahui  telah  dapat  digunakan  untuk melakukan proses fertilisasi seperti halnya spermatozoa  hasil  ejakulasi  (Hafez dan Hafez, 2000).
Menurut  Toelihere  (1985)  epididimis adalah  suatu  struktur  memanjang  yang bertaut rapat dengan testes.Didalam epididimis
mengandung ductus epididimis yang  sangat  berliku-liku,  dan mencapai  panjang  lebih  60  meter  pada babi  dan  80  meter  pada  kuda.Epididimis dapat  dibagi  atas: caput (kepala), corpus (badan) dan cauda(ekor). Cauda
epididimis
merupakan tempat penyimpanan spermatozoa sebelum diejakulasikan (Toelihere, 1985). Spermatozoa  yang  terdapat  pada cauda epididimis merupakan  spermatozoa yang sudah  matang  karena  telah  mengalami proses pematangan pada bagian caput dan corpus (Hafez danHafez, 2000).
Hasil  penelitian  Herdis et  al.(2008), menyatakan bahwa  rataan  konsentrasi spermatozoa  yang  terdapat  pada cauda epididimis kerbau belang sebesar
1.044,50x10 6 spermatozoa/ml.Sementara itu, konsentrasi spermatozoa yang terdapat pada ejakulat  kerbau  berkisar  antara500 – 1,500x10 6 spermatozoa/ml  (Hafez dan Hafez, 2000). Konsentrasi  spermatozoa dalam cauda epididimis  sangat  padat karena  belum  mendapat  penambahan plasma  semen  yang  dihasilkan  oleh kelenjar  asesoris  di  sepanjang  jalur pengeluaran spermatozoa
sebelum ejakulasi.Untuk konsentrasi  epididimis pada  bagian  lain  seperti caput dancorpus belum  banyak  yang  meneliti,  sehingga perlu  penelitian  lebih  lanjut  untuk mengetahui bagaimana konsentrasi spermatozoa  pada  bagian caput dan corpus epididimis kerbau rawa.

## BAHAN DAN METODE

## Tempat dan Waktu
Penelitian dilaksanakan di Laboratorium  Reproduksi  dan  Pemuliaan Ternak,  Jurusan  Peternakan,  Fakultas Pertanian, Universitas Lambung Mangkurat, Banjarbaru selama dua bulan.

## Metode Penelitian
Metode  penelitian  yang  digunakan dalam  penelitian  ini  adalah  metode eksplorasi terhadap 13  buah  epididimis dengan  mengamatikualitas  spermatozoa pada caput,corpus, dan cauda epididimis.
Peubah kualitas  spermatozoa yang diamati  dalam  penelitian ini  adalah:
motilitas, konsentrasi, persentase spermatozoa yang hidup, dan abnormalitas pada  bagian caput,  corpus, dan cauda epididimis.

## Analisis Data
Data yang diperoleh dianalisis menggunakan nilai rata-rata dan simpangan baku antara kualitas spermatozoa pada  bagian caput,  corpus, dan cauda epididimis kerbau rawa.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Motilitas Spermatozoa
Hasil  pengamatan  rata-rata  motilitas spermatozoa  segar yang  diperoleh adalah 0,  2,77,  dan  53,46%  masing-masing untukcaput, corpus, dan cauda epididimis (Tabel 1).
Tabel 1. Persentase Motilitas Spermatozoa Epididimis Kerbau Rawa
Bagian epididimis Rataan ± SD (%) Kisaran (%) Caput 0,00 ± 0,00 0 Corpus 2,77 ± 2,13 1 – 9 Cauda 53,46 ± 19,73 20 – 70
Hasil  motilitas  pada  bagian caput epididimis menunjukan 0%, hal ini sesuai dengan  pernyataan  Senger  (1999),  bahwa motilitas spermatozoa pada caput epididimis  hewan  mamalia  bersifat  tidak motil.Kemudian  Senger  (1999),  lebih lanjut  menyatakan  bahwa  motilitas pada bagian corpus yaitu  hanya  ditemukan beberapa  yang  motil.    Hal  ini  juga  sesuai dengan  pernyataan  Hafez dan Hafez (2000), yang melaporkan bahwa
peningkatan motilitas terjadi saat spermatozoa memasuki corpus epididimis sehingga  sesuai  dengan  hasil  penelitian yakni  terjadi  peningkatan  motilitas  dari caput (0%)  menjadi  2,77%  pada corpus. Sedangkan  motilitas  spermatozoa  dapat ditemukan  secara  lebih  besar  lagi  pada bagian cauda epididimis.
Motilitas  pada  bagian cauda rata-rata
53,45%  (berkisar  antara 20 dan70%). Nilai ini  merupakan  motilitas  layak digunakan  untuk  inseminasi  buatan (IB) berdasarkan  standar  yang  ditetapkan Direktorat  Jenderal  Peternakan  (2007), yakni motilitas spermatozoa semen segarkerbau  minimum 50%.    Motilitas spermatozoa  dari cauda epididimis  ini juga  sesuai  dengan  pernyataan  Senger (1999), bahwa motilitas spermatozoa pada bagian cauda epididimis memiliki kemampuan motilitas dan fertilitas normal setara dengan spermatozoa hasil ejakulasi. Persentase motilitas spermatozoa cauda epididimis yang  diperoleh  sebesar rata-rata 53,46 %, lebih rendah dibandingkan dengan hasil yang dilaporkan  Herdis et  al. (2008)  dan Surachman et  al. (2009)  bahwa  motilitas progresif spermatozoa asal
cauda epididimis kerbau belang sebesar rata-rata 65,00%. Perbedaan ini diduga disebabkan beberapa  faktor  diantaranya adalah umur ternak  sesuai  pernyataan  Mathevon et  al. (1998),  jumlah  spermatozoa  motil  per ejakulat  cenderung  meningkat  seiring dengan  bertambahnya  umur  pejantan mencapai  5  tahun,  kesehatan  ternak,  asal ternak penelitian, serta lama waktu antara pemotongan dengan evaluasi spermatozoa. Spermatozoa  yang  dikoleksi  dari bagian cauda epididimis memenuhi syarat untuk  dimanfaatkan  dalam  program  IB, sedangkan  spermatozoa  yang  dikoleksi dari  bagian caput dan corpus tidak memenuhi syarat.Hal ini karena spermatozoa dari cauda epididymis memiliki persentase  motilitas  lebih  dari 30%,  sedangkan  spermatozoa  dari caput dan corpus motilitasnya kurang dari 30%. Berdasarkan  standar  nasional  Indonesia (SNI4869.2:2008) dinyatakan bahwa semen  kerbau  yang  memenuhi  syarat digunakan  dalam  program  IB  harus memiliki persentase motilitas spermatozoa minimum 30%.

## Persentase Hidup Spermatozoa
Hasil pengamatan rata-rata persentase hidup  spermatozoa  segar  asal caput, corpus dan cauda epididimis kerbau rawa dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2. Persentase Hidup Spermatozoa Epididimis Kerbau Rawa Bagian epididimis Rataan ± SD (%) Kisaran (%) Caput 45,43 ±12,70 31,87 – 72 Corpus 58,73 ± 9,58 45,14 – 76 Cauda 74,32 ± 7,66 56,68 – 83
Berdasarkan hasil  penelitian  yang dilakukan,  ditemukan  rata-rata  persentase hidup spermatozoa pada caput rata-rata 45,43%  (31,87 – 72%), rata-rata 58,3% (45,14 – 76%) pada corpus,  dan  rata-
rata74,32%  (56,68 – 83%)pada cauda epididimis.
Berdasarkan  hasil  tersebut,  rata-rata persentase  hidup  spermatozoa  pada caput 45,43%  dan corpus 58,73  %,  tergolong rendah.  Hal  ini  disebabkan  karena spermatozoa yang ada di bagian caput dan corpus epididimis masih  dalam  proses pematangan  baik  dalam  hal  morfologi maupun fisiologi (Hunter, 1995). Sementara spermatozoa yang di dalamcauda
epididimis, memiliki persentase  hidup  lebih  tinggi,  yakni  rata- rata 74,32%.  Hal  ini karena  spermatozoa yang  ada  di  dalam cauda epididimis merupakan spermatozoa yang  sudah matang dan  disimpan  sementara sebelum diejakulasikan, dan telah memiliki motilitas dan kemampuan membuahi oosit yang  sama  baiknya  dengan  spermatozoa hasil  ejakulasi  (Axneret  al.,  1998;  Hafez dan Hafez (2000).
Persentase  hidup  pada  penelitian  ini menunjukkan hasil lebih tinggi dibandingkan dengan persentase motilitas. Hal ini disebabkan karena pada perhitungan  motilitas  spermatozoa  yang dihitung hanya spermatozoa yang bergerak kedepan sedangkan yang bergerak memutar, maju-mundur,dan
bergerak  di  tempat tidak  dihitung.
Spermatozoa  yang  bergerak  memutar, maju-mundur,  dan  bergerak  di  tempat masih hidup, tetapi tidak motil. Persentase hidup spermatozoa epididimis  kerbau  rawa  setiap  individu dapat berbeda. Perbedaan ini
kemungkinaan  dipengaruhi  oleh  beberapa faktor,  seperti:  umur  ternak,  kondisi kesehatan, lama antara waktu pemotongan dengan proses evaluasi spermatozoa.

## Konsentrasi Spermatozoa
Hasil pengamatan konsentrasi spermatozoa  segar  asal caput,  corpus,dan cauda epididimis  kerbau rawa  dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel 3. Konsentrasi Spermatozoa Epididimis Kerbau Rawa Bagian epididimis Rataan ± SD(10 6 ) Kisaran (10 6 ) Caput 189,62 ±141,49 40 – 480 Corpus 152,31 ± 88,36 45 – 345 Cauda 1.459,62 ± 417,97 825 – 2.340 Keterangan: Konsentrasi spermatozoa setelah ditambahkan  NaCl  fisiologis  hingga  mencapai volume 4 ml.
Berdasarkan Tabel 3 dapat  dilihat nilai  rata-rata  konsentrasi  spermatozoa dari  epididimis  kerbau  rawa  dari caput, corpus dan cauda secara  berturut-turut sebagai  berikut:  rata-rata 189.62  x10 6
spermatozoa/ml (40 – 480 x10 6 spermatozoa/ml), 152,31 x10 6 spermatozoa/ml (45 – 345 x10 6 sel/ml), dan 1.459,62 x10 6 spermatozoa/ml (825 – 2.340 x10 6 sel/ml). Pada  penelitian  sebelumnya  yang dilakukan oleh Senger (1999),
perhitungan konsentrasi spermatozoa didasarkan  pada  perhitungan  konsentrasi yang sebenarnya dimana hasil pada caput, corpus, dan cauda berturut-turut 8 – 25 x 10 9 spermatozoa/ml,  8 – 25  x  10 9
spermatozoa/ml  dan  10 – 50  x  10 9 spermatozoa/ml.    Perhitungan  konsentrasi
yang  dilakukan  pada  penelitian  ini dilakukan setelah pembilasan
menggunakan  NaCl  fisiologis  sebanyak  4 ml  serta  pengenceran  sebesar  200  kali sehingga  perbedaan  nilai  konsentrasi penelitian  ini  dengan  hasil  penelitian Senger (1999) sangat jauh berbeda karena menggunakan metode yang berbeda.
Hasil penelitian terdahulu pada ternak kerbau belang dilaporkan bahwa konsentrasi spermatozoa semen  kerbau lumpur berkisar antara 200 dan
2.500x10 6 spermatozoa/ml (Batosamma, 1985), dan rata-rata  sebesar 1.709,8  x10 6 spermatozoa/ml  (600 – 3.105  x  10 6 spermatozoa/ml) (Tappa, 2007).
Variasi hasil yang  diperoleh  dapat dimungkinkan  karena  faktor  metode  yang digunakan  saat  menghitung  konsentrasi spermatozoa. Faktor umur, kondisi kesehatan, dan pakan yang dikonsumsioleh  ternak  juga  berpengaruh terhadap konsentrasi
spermatozoa (Susilawatiet al.,1993).
Pada ternak dewasa, kekurangan makanan dapat mengakibatkan gangguan fungsi fisiologis testis dan kelenjar-kelenjar asesoris sehingga berpengaruh  negative  terhadap libido dan produksi spermatozoa.

## Abnormalitas Spermatozoa
Hasil pengamatan abnormalitas spermatozoa  segar  asal caput,  corpus,dan cauda epididimis  kerbau  dapat  dilihat pada Tabel 4.
Tabel 4. Persentase Abnormalitas Spermatozoa Epididimis Kerbau
Rawa Bagian epididimis Rataan+SD (%) Kisaran(%) Caput 56,16 ± 5,31 44,34 – 66,53 Corpus 47,61 ± 9,18 23,92 – 60,15 Cauda 34,60 ±10,13 15,89 – 50,04 Hasil  pengamatan diperoleh rata-rata abnormalitas spermatozoa epididimis kerbau  rawa  memiliki berbeda  antara ketiga  bagian  epididimis,  yakni rata-rata
56,16% (44,34 – 66,53%) pada caput, rata- rata 47,61% (23,92 – 60,15%) pada corpus, dan rata-rata 34,60% (15,89 –
50,04%) pada cauda epididimis.
Tingginya  abnormalitas spermatozoa yang  terdapat  pada caput dan corpus apabila  dibandingkan  dengan cauda disebabkan karena caput dan corpus adalah merupakan  tempat  pematangan spermatozoa, sedangkan spermatozoa yang di dalam cauda epididimis merupakan  spermatozoa  yang  sudah matang. Salah  satu  proses  pematangan spermatozoa  yang  terjadi  di  dalam caput dan
corpu sepididimis adalah penghilangan butiran sitoplasma yang ada pada  bagian  proksimal  ekor  spermatozoa (Axner et  al., 1998;  Hafez  dan  Hafez, 2000). Spermatozoa yang memiliki butiran  sitoplasma  di  bagian  proksimal ekor  digolongkan sebagai  spermatozoa yang  abnormal.Umumnya  spermatozoa yang ada di dalam cauda epididimis tidak lagi  memiliki  butiran  sitoplasma,  dan sebagian  kecil  masih  memiliki  butiran sitoplasma  di  daerah  distal  ekor,  dan tergolong  spermatozoa  normal  (Senger, 1999).
Abnormalitas spermatozoa pada bagian cauda hasil  penelitian  ini relatif sama dengan  persentase  abnormalitas hasil  ejakulasi kerbau  rawa sebesar  rata- rata  31,86% (Arifiantini dan Ferdian, 2006). Beberapa hasil penelitian dilaporkan bahwa persentase abnormalitas spermatozoa kerbau  belang rata-rata
15,06%  (Batosamma, 1985), rata-rata
11,31% (Tappa,2007), rata-rata 15,00%
(Herdis et al., 2008), dan rata-rata 15,33% (Surachman et al.,2009).
Abnormalitas  merupakan  salah  satu faktor  penting  dalam  evaluasi  kualitas spermatozoa,  karena  hal  ini  berhubungan erat  dengan  tingkat  fertilitas  seekor pejantan.Menurut Toelihere (1993) persentase abnormalitas  primer pada spermatozoa sebesar 18 – 20% akan
berpengaruh  negatif  terhadap  tingkat fertilitas.
Pada  pengamatan  yang  dilakukan memiliki hasil yang lebih tinggi dari hasil penelitian  sebelumnya,  hal  ini  dapat dimungkinkan  karena  pada  penelitian  ini ternak  yang  digunakan  bukan  dari hasil seleksi. Begitu  juga  dengan  manajemen pemeliharaan ternak dari tempat asal yang kebanyakan  masih  menggunakan  sistem pemeliharaan semi ekstensif dan ekstensif, sehingga nutrisi pakan tidak tercukupi dan berdampak  secara  umum  pada  kualitas spermatozoa.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  dan pembahasan  dapat  disimpulkan  bahwa terdapat  perbedaan  kualitas  spermatozoa asal caput,  corpus dan cauda epididimis kerbau  rawa.Spermatozoa  asal cauda epididimis memiliki kuantitas dan kualitas yang lebih  baik  dibandingkan  dengan yang  asal caput dan corpus,  dan memenuhi  syarat  dimanfaatkan  dalam program IB.

## DAFTAR PUSTAKA
Arifiantini, R.I. 2012. Teknik Koleksi dan Evaluasi  Semen  pada  Hewan.IPB Press. Bogor.
Arifiantini,  R.I. dan F.  Ferdian.  2006.
Tinjauan aspek morgologi dan morfometri spermatozoa kerbau rawa
(Bubalus  bubalis)  yang  dikoleksi dengan teknik masase. Jurnal Veteriner 7: 83-91.
Axner,  E.,  B.  Sormholst,dan C.  Linde-
Forsberg.  1998. Morphology  of
spermatozoa  in  the  cauda  epididymis before  and  after  electroejaculation and  comparison  with  ejaculated spermatozoa  in  the  domestic  cat.
Theriogenology 50: 973-979.
Batosamma, J.T. 1985. Penerapan Teknologi  Inseminasi  Buatan  untuk Pelestaraian  Sumber  Daya  Ternak Kerbau  Belang.Disertasi.  Fakultas
Pascasarjana Institut Pertanian Bogor, Bogor.
Badan Pusat Statistik.  2013. Jumlah  Sapi dan  Kerbau  menurut  Kabupaten/Kota dan  Jenis  Kelamin  Pada  Tanggal  1
Mei2001.http://st2013.bps.go.id/dev/s t2013/index.phpsite/table?tid=26&wi d=6300000000. Diakses pada 16 Nov 2014.
Direktorat  Jendral  Peternakan.  2007. Juknis  Produksi  &  Distribusi  Semen Beku,  Peraturan  Direktur  Jenderal Peternakan Nomor : 12207/Hk.060/F/12/2007.
Graham,  J.K.  1994.  Effect of  seminal plasma  on the motility  of epididymal and ejaculated spermatozoa  of the ram  and bull during cryopreservation process.  Theriogenology 46:1151- 1162.
Hafez,  E.S.E. dan  B. Hafez.  2000. Reproduction  in  Farm  Animals7 th
Edition. Lippincott Williams & Wilkins, Baltimore.
Herdis,  M. Surachman,  Yulnawati,  M.
Rizal,dan H.  Maheshwari.    2008.
Viabilitas  dan  keutuhan membran plasma spermatozoa epididimis kerbau belang  pada penambahan maltosa dalam pengencer  Andromed. Jurnal Pengembangan Peternakan Tropis 33:101-106. Hansen,  M.B.  2003.  The enteric  nervous system III: A
target for pharmacologicaltreatment. Pharmacol ogy & Toxicology.In press.
Mathevon,  M.,  M.  Buhr, dan J.C.M. Dekkers. 1998. Environmental, management  and  genetic factors affecting semen production in holsteinbulls. Journal of Dairy Science 81:3321-3330.
Salisbury,  G.W.,  dan N.L.  Van  Denmark.
1985. Fisiologi dan Inseminasi
Buatan  pada  Sapi. Diterjemahkan oleh  Djanuar,  R.  Gajah  Mada University Press, Yogyakarta.
Sartika,  T.  1994.  Inseminasi  buatan  pada kelinci  ditinjau  dari beberapa tingkat kelahiran (parity).Di dalam: Prosiding Seminar Hasil Penelitian dan Pengembangan Bioteknologi II. Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia.  Cibinong, 6-7  September 1994. Senger,  P.L.  1999.  The organization  and function  of the male  reproduction system.  In:  Pathways  To  Pregnancy and  Parturition.  Current  Conceptions,
Inc., Pullman.
Standar  Nasional  Indonesia.4869.2:2008 tentang Semen Beku Kerbau.http://sisni.bsn.go.id/index.ph p?/sni_main/sni/detail_sni/5312 . (Diak ses pada 01 Desember 2014).
Surachman,  M.,  Herdis,  Yulnawati,  M. Rizal,  dan H.  Maheshwari.  2009.
Kualitas semen cair asal  epididimis kerbau belang dalam bahan pengencer Andromed yang mendapat penambahan sukrosa. Media Peternakan 32:88-94. Suryana.2007. Usaha Pengembangan kerbau rawa di Kalimantan Selatan.Laporan Hasil Penelitian. Balai Pengkajian Teknologi Pertanian Kalimantan Selatan, Banjarbaru. Susilawati,  T.,  P.  Srianto,  Hermanto,  dan E.  Yuliani.  1993.  Inseminasi  Buatan Dengan  Spermatozoa  Beku  Hasil Sexing pada Sapi Untuk Mendapatkan  Anak  dengan  Jenis Kelamin  Sesuai  Harapan. Laporan Hasil Penelitian.  FakultasPeternakan Universitas Brawijaya, Malang. Tappa,  B. 2007.  Bioteknologi Reproduksi Untuk Pengembangan Kerbau Belang (“Tedong  Bonga”).  Pusat  Penelitian Bioteknologi Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia, Cibinong. Toelihere, M.R.  1985.  Inseminasi  Buatan pada Ternak. Angkasa, Bandung.