## PENGARUH KONSENTRASI MINYAK CENGKEH TERHADAP KARAKTERISTIK EDIBLE FILM DARI PATI SINGKONG – KITOSAN
The Effect of Clove Oil Concentration on The Characteristics of Cassava Starch – Chitosan Edible film
Ulyarti (1) *, M. Rizki (1) , Mursyid (1) , Irma Rahmayani (2) , Rahayu Suseno (1) , Nazarudin (3)
(1) Program Studi Teknologi Hasil Pertanian, Universitas Jambi
(2) Program Studi Kedokteran Universitas Pendidikan Ganesha
(3) Program Studi Teknik Kimia, Universitas Jambi
* ulyarti@unja.ac.id

## ABSTRACT
Edible film is  an  edible  thin coating  material used to  cover and protect  food. Cassava  starch  edible  film  has  an  undesirable  high  water  vapor  transmission  rate (WVTR)  which  means  low  water  vapor  barrier  properties.  Efforts  to  improve  the barrier properties has been carried out by combining starch with more hydrophobic materials such as chitosan and oils. The purpose of this study was to determine the effect of clove oil concentration on the characteristics of the cassava starch-chitosan edible film. This research was carried out using a completely randomized design CRD) with 6 levels of clove oil concentration (0, 0.5, 1, 1.5, 2, and 2.5% (%/ww)). The results showed that the concentration of clove oil had improved films barrier properties and had significant effect on the thickness, transparency, solubility, and color, but had no significant effect  on the compressive strength of the films. Clove oil concentration of 2.5%  produced  the  best  film  with  a  thickness  value  of  0.21  mm,  transparency 1.05%/mm, solubility 73.66%, WVTR 21.53gram/m 2 .hour, compressive strength 7,03 gF,  L*=  61.33,  a*=  0,  b*=18.33  and  the  diameter  of  the  inhibition  zone  against Staphylococcus aureus was 17.05 mm
Keywords: edible film, cassava starch, clove oil, antimicrobial activity

## ABSTRAK
Edible film merupakan bahan tipis yang dapat dimakan berfungsi untuk melapisi makanan dan melindunginya. Salah satu kekurangan edible film pati singkong adalah memiliki laju transmisi uap air yang tinggi sehingga tidak dapat membatasi pergerakan uap air keluar dan masuk film.  Perbaikan terhadap karakteristik ini dapat dilakukan dengan melakukan kombinasi bahan penyusun edible film dengan bahan yang bersifat hidrofobik  seperti  minyak.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  pengaruh
konsentrasi minyak  cengkeh terhadap karakteristik edible film pati singkong-kitosan. Penelitian  dilaksanakan  menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap  dengan  6  taraf perlakuan  konsentrasi  minyak  cengkeh  (%/bb)  yaitu  0,  0.5,  1,  1.5,  2,  dan  2.5%. Perlakuan konsentrasi minyak cengkeh dapat memperbaiki kemampuan film sebagai penghalang serta memiliki pengaruh nyata terhadap ketebalan, transparansi, kelarutan, dan  warna,  namun  tidak  berpengaruh  nyata  terhadap  kuat  tekan film. Karakteristik edible film terbaik dihasilkan pada penggunaan minyak cengkeh 2,5% yaitu ketebalan 0,21  mm,  transparansi  1,05  %/mm,  kelarutan  73,66%,  laju  transmisi  uap  air  21,53 gram/m 2 .jam,  kuat  tekan  7,03  gF, L *=  61,33, a *=  0, b *=18,33  dan  diameter  zona hambat terhadap bakteri Staphylococcus aureus sebesar 17,05 mm.
Kata Kunci: edible film, pati singkong, minyak cengkeh, aktivitas antimikroba

## PENDAHULUAN
Kemasan  merupakan  salah  satu faktor  penting  pada  produk  pangan. Kemasan  dapat  memperpanjang  umur simpan  serta  menambah  nilai  jual  dari bahan  pangan  tersebut  [1].  Kemasan plastik  yang  banyak  digunakan  saat  ini bersifat non  biodegradable (tidak  dapat terurai  oleh  proses  biologi),  sehingga menghasilkan limbah yang dapat menyebabkan  pencemaran  lingkungan. Edible  film dilain  sisi  merupakan kemasan  yang  dapat  terdegradasi  secara alami  sehingga  dapat  menjadi  upaya dalam menghadapi permasalahan limbah plastik konvensional. Edible film merupakan lapisan tipis yang digunakan untuk  melapisi  lapisan  makanan  atau diantara  komponen  yang berfungsi untuk  melindungi  komponen  tersebut [2]. Edible  film dapat  dibuat  dari polisakarida,  protein  atau  hidrokoloid alami.  Pati  singkong  merupakan  salah satu polisakarida yang sering digunakan dalam  pembuatan edible  film ,  terutama karena ketersediannya yang melimpah di Indonesia.
Edible  film berbasis  pati  diketahui memiliki  laju  transmisi  uap  air  ( water vapour  transmission  rate =  WVTR)
tinggi  sehingga  migrasi  uap  air  masuk dan keluar kemasan tidak dapat dicegah. Edible film pati tapioka memiliki WVTR yang tinggi yaitu 24,41 g/m 2 .jam hingga 32,03 g/m 2 .24 jam [3]. Bergantung pada derajat asetilasinya, kitosan dapat bersifat  hidrofobik  dan  telah  dicoba diformulasi dengan pati untuk menghasilkan edible film dengan karakteristik  yang  lebih  baik.  Pada  pati uwi, penambahan kitosan 1% menurunkan WVTR hingga 45,00 g/m 2 .24  jam  [4]  namun  masih  belum cukup  rendah  untuk  diaplikasikan  pada produk  pangan.    Untuk  menurunkan WVTR lebih rendah lagi, formulasi pati- kitosan  memerlukan  tambahan  bahan hidrofobik seperti lipid dan minyak atsiri [4, 5].  Penambahan minyak sawit  0,7% pada edible film pati singkong menghasilkan  nilai  WVTR  yang  lebih rendah  sebesar  6,47  g/m 2 .24  jam  [6].
Menurut  Ulyarti  et  al.  [4],  penambahan minyak  cengkeh  1,5%  pada  edible  film pati uwi menghasilkan nilai WVTR yang lebih rendah sebesar 21,319 g/m 2 .24 jam.
Submit: 14 Agustus 2022 * Revisi: 6 Desember 2022 * Accepted:9 Desember 2022 * Publish: 11 Desember 2022
Selain  dapat  menurunkan  WVTR  film, minyak cengkeh juga dilaporkan memiliki aktivitas antimikroba [7].
Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui  memperbaiki  karakteristik transmisi  uap  air edible  film pati singkong-kitosan serta untuk mengetahui pengaruh  konsentrasi  minyak  cengkeh terhadap  karakteristik edible  film pati singkong-kitosan.

## METODOLOGI PENELITIAN

## Rancangan Penelitian
Rancangan penelitian berupa rancangan  acak  lengkap  (RAL)  disusun dengan  dengan  6  taraf  perlakuan konsentrasi  minyak  cengkeh  (%/bb). Selain itu dilakukan pengulangan sebanyak 3 kali.  Analisis data dilakukan menggunakan sidik ragam pada taraf 5% dan  1%,  dan  uji  lanjut Duncan’s  New
Multiple Range (DNMRT). Taraf perlakuan  dalam  penelitian  ini  adalah sebagai berikut:
P0 = [minyak cengkeh] 0 %
P1 = [minyak cengkeh] 0,5% P2 = [minyak cengkeh] 1% P3 = [minyak cengkeh] 1,5% P4 = [minyak cengkeh] 2% P5 = [minyak cengkeh] 2,5%

## Pembuatan Larutan Kitosan
Larutan  kitosan  1%  dibuat  dengan cara  melarutkan  1  gram  kitosan  dalam larutan  asam  asetat  (CH 3 COOH)  1% hingga volume larutan 100 ml. Penambahan  asam  asetat  dilakukan perlahan  sedikit  demi  sedikit kemudian diaduk hingga kitosan terlarut sempurna.

## Pembuatan Edible Film
Proses  pembuatan edible  film diawali dengan menimbang pati singkong  sebanyak  7  g  kemudian dilarutkan  dengan  aquades  yang  sudah ditetapkan  diaduk  hingga  larut  tanpa pemanasan.  Setelah  itu,  suspensi  pati singkong  dipanaskan  diatas  hot  plate selama  40  menit  pada  suhu  70-80 o C. Pada  menit  ke-10  ditambahkan  gliserol sebanyak  5  g  dan  larutan  kitosan  1% sebanyak  50g.    Larutan  dihomogenkan menggunakan magnetic  stirrer hingga suhu 80 o C. Pada menit ke-30 ditambahkan  minyak  cengkeh  sesuai dengan konsentrasi perlakuan dan diaduk  hingga  homogen.  Larutan edible film yang  telah  homogen  kemudian dituang ke plat cetakan berukuran 20 cm x  20  cm  sebanyak  140,8  g  dan dikeringkan  pada  suhu  50 o C  selama  24 jam  menggunakan  oven  pengering. Sebelum dianalisis, film disetimbangkan didalam  desikator  RH  52%  minimal  48 jam.
Pengaturan
RH dilakukan menggunakan larutan Mg(NO3)2 jenuh.

## Pembuatan Media NA
Pertama dilarutkan bubuk nutrient agar (NA)  sebanyak  10  gram  dan ditambahkan  dengan  aquades  sebanyak 500  ml  menggunakan  beaker  glass. Kemudian  dipanaskan  di  atas hot  plate pada suhu 60 o C dan diaduk menggunakan magnetic  stirrer hingga homogen.  Suspensi  media  yang  dibuat kemudian dimasukan ke dalam erlenmeyer  setelah  itu  ditutup  rapat dengan  kapas  bagian  mulut  erlenmeyer agar tidak terjadi kontaminasi. Erlenmeyer  ditutup  dengan  kertas  kopi dan  dimasukan  ke  dalam autoclave dengan  suhu  121 o C  selama  15  menit. Media disimpan pada refrigerator sebelum digunakan.

## Pembuatan Media NB
Media nutrient broth (NB)
sebanyak  1  gram  dimasukkan  ke  dalam gelas  beaker  dan ditambahkan  aquades hingga  150  ml  dan  dipanaskan  dengan hotplate  hingga  mendidih.  Kemudian media  yang  telah  dibuat  disterilkan dengan autoklaf pada suhu 121ᵒC selama 15 menit.

## Persiapan Kultur Bakteri Staphylococcus
aureus   dan Escherichia coli
Bakteri  yang  akan  digunakan sebelumnya  diaktifkan  terlebih  dahulu, dengan  cara  menggoreskan  bakteri S. aureus atau E.  Coli dengan  jarum  ose pada  media  yang  berisi  NA  dilanjutkan dengan  inkubasi  selama  1x24  jam  pada suhu 37ᵒC. Sel bakteri S. aureus atau E. coli kemudian
diambil dengan
menggunakan jarum ose dan dimasukkan kedalam tabung reaksi yang berisi 12 ml NB lalu diinkubasi selama 1x24 jam pada suhu 37ᵒC dan inokulum siap digunakan.

## Ketebalan [8]
Ketebalan  pada edible  film diukur menggunakan mikrometer  sekrup pada lima titik yang berbeda, kemudian dirata- ratakan  dan  dinyatakan  dalam  satuan mm.
Transparansi [8]
Transparansi  film  diukur  dengan menempatkan film ke dalam sel uji pada spektrofotometer pada panjang gelombang 550 nm. Perhitungan transparansi berdasarkan rumus
Transparansi = log %T/d dimana %T = % transmittan d = ketebalan film

## Kelarutan [9]
Kelarutan  menunjukan  persentase berat  kering  terlarut  setelah  direndam dalam  air  selama  24  jam.  Pertama sampel  dipotong  dengan  ukuran  2cm  x 2cm kemudian ditimbang beratnya (W3). Sampel  dimasukkan  ke  dalam  50  ml aquades  dan  direndam  selama  24  jam sambil diaduk kemudian larutan tersebut disaring  dan  kertas  saring  dikeringkan dengan  suhu  105 o C  selama  24  jam  dan diketahui beratnya (W2). Film yang tidak terlarut  (beserta  kertas  saringnya)  tadi kemudian  ditimbang  (W1),  persentase kelarutan  dapat  dinyatakan  dengan rumus:
% Kelarutan = 100% - ( (𝑊1−𝑊2) 𝑊3 x 100%) Water Vapor Transmission Rate/WVTR [10] Sebuah  tabung  reaksi  diisi  dengan garam  yang  sangat  higroskopis,  dalam penelitian ini digunakan  kalsium klorida (CaCl2).  Tabung kemudian ditutup rapat menggunakan  film  yang  akan  diuji. Tabung  reaksi  ini  kemudian  ditimbang dan  ditempatkan  didalam  desikator RH75%  yang  disaturasi  menggunakan larutan  NaCl  jenuh.    Perubahan  berat tabung reaksi kemudian dicatat dan diplot sebagai  fungsi  dari  waktu.  Perhitungan WVTR dilakukan menggunakan rumus:
WVTR (g/m 2 .24jam) = 𝑆𝑙𝑜𝑝𝑒 𝐴 Slope = Pertambahan berat persatuan waktu (g/jam) A = Luas area film (m 2 )

## Kuat Tekan [8]
Pengukuran kuat tekan menggunakan  alat texture  analyser
dengan  probe  jenis  TA  7  60  mm.    Alat disetting  menjadi  dengan  jarak  0,2  mm dan  speed:  2  mm/s. Probe kemudian menekan  sampel edible  film berukuran 5x2  cm  yang  ditempatkan  di  bagian bawah.  Besar  gaya  yang  muncul  pada layar dicatat sebagai nilai kuat tekan.

## Warna [11]
Pengukuran  warna edible  film dilakukan  pada  gambar  hasil  tangkapan kamera  pada color  box . Sampel diletakan  ditempat  sampel  pada color box kemudian  diambil  gambar  sampel
untuk  mendapatkan  nilai L *, a *  dan b * pada  adobe photoshop.  Deskripsi  warna untuk  nilai L*,  a*,  b* yang  diperoleh didapatkan pada www.colorhexa.com
Antimikroba [4]
Pengujian  antimikroba  dilakukan menggunakan metode sumur dengan dua kali  ulangan. Sebanyak  1 ml dari kultur bakteri escheria coli dan staphylococcus aureus diambil  dan  dituang  ke  cawan petri steril. Masukkan 14 ml nutrient agar ke cawan petri yang berisi kultur bakteri, lalu diratakan secara mendatar membentuk angka delapan dan dibiarkan hingga  padat.  Kemudian dibuat  sumur (lubang) dengan diameter 10 mm. Edible film (konsentrasi  minyak  cengkeh  0%, 0,5%, 1%, 1,5%, 2 %, 2,5 %) dimasukan kedalam lubang. Cawan petri diinkubasi pada suhu 37 o C selama 24 jam. Setelah melalui masa inkubasi, dilakukan pengamatan dan pengukuran zona penghambatan pertumbuhan bakteri yang  ditandai  dengan  adanya  areal bening  yang  menunjukkan  tidak  adanya pertumbuhan  bakteri.  Hasil  pengujian
dinyatakan
dalam diameter penghambatan (mm) yang diukur dengan menggunakan jangka sorong.

## Analisis Data
Data  hasil  pengukuran  dianalisis menggunakan  ANOVA  pada  taraf  1% dan  5%  untuk  mengetahui  pengaruh perlakuan.    Apabila  terdapat  pengaruh perlakuan,  maka  dilanjutkan  dengan DNMRT ( Duncan’s New Multiple Range Test) untuk  mengetahui  perbedaan  antar perlakuan.  Khusus  uji  antibakteri  tidak dilakukan ANOVA.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Ketebalan
Ketebalan  merupakan  parameter yang berpengaruh terhadap karakteristik utama edible  film seperti  transparansi,
WVTR  dan  kuat  tekan.  Rata-rata  nilai ketebalan edible  film dari pati  singkong- kitosan  dengan  penambahan  minyak cengkeh dapat dilihat pada Tabel 1.  Nilai ketebalan edible  film meningkat  secara signifikan  (p<0,01)  seiring  dengan meningkatnya konsentrasi minyak cengkeh yang digunakan.  Meningkatnya nilai ketebalan dikarenakan bertambahnya  total  padatan  pada edible film pati  singkong  -  kitosan.    Hal  yang sama dilaporkan sebelumnya [12] bahwa semakin  tinggi  konsentrasi  padatan terlarut  maka  semakin  tinggi pula ketebalan film yang dihasilkan.
Ketebalan  yang  dihasilkan  pada penelitian ini menghasilkan nilai rata-rata 0,15-0,20 mm, lebih tinggi dari penelitian sebelumnya dengan penambahan minyak cengkeh pada edible film pati  uwi  yang  menghasilkan ketebalan  0,14-0,17  mm  [4].    Namun, keduanya telah memenuhi standar
ketebalan  film  berdasarkan Japanesse Industrial  Standard (JIS),  dengan  nilai maksimal 0,25 mm.

## Transparansi
Transparansi menunjukan
kemampuan  cahaya  untuk  menembus film.  Uji  transparansi  dapat  dapat ditentukan  dari  besar  cahaya  yang diteruskan  oleh edible  film .  Nilai  rata- rata  transparansi edible  film dari  pati singkong-kitosan dapat dilihat dari Tabel 1.
Nilai  transparansi  edible  film  pati singkong–kitosan mengalami penurunan dengan meningkatnya
konsentrasi minyak  cengkeh  yang  ditambahkan (Tabel  1).    Minyak  cengkeh  yang ditambahkan  menghasilkan  larutan  film yang keruh sehingga dapat menghalangi tembusnya  cahaya  melewati  edible  film [13].  Menurunnya nilai transparansi juga dipengaruhi  oleh  ketebalan edible  film yang semakin tebal dengan meningkatnya  konsentrasi  minyak cengkeh  [ 4 ] .
Hasil  penelitian  uji  transparansi edible  film dari  pati  singkong-kitosan dengan  penambahan minyak  cengkeh menghasilkan  nilai  rata-rata   transparansi antara  1,05  %/mm  –  3,37  %/mm.  Hasil ini lebih rendah dari penelitian sebelumnya pada edible film dari pati uwi dengan  penambahan  minyak  cengkeh yakni  dengan  rata-rata  transparansi berkisar  antara  5,95%/mm  –  12,28 %/mm.

## Kelarutan
Kelarutan edible  film dinyatakan dalam  persentase bagian edible film yang terlarut dalam air setelah perendaman 24
jam.  Kelarutan edible  film diperlukan untuk  mengetahui  kemampuan  film diaplikasikan  dalam  industry  pangan. Nilai  rata-rata  persentase  kelarutan edible  film dari  pati  singkong-  kitosan dengan  berbagai  konsentrasi  minyak cengkeh dapat dilihat pada Tabel 1. Konsentrasi minyak cengkeh berpengaruh  secara  signifikan  pada kelarutan film. Semakin tinggi konsentrasi  minyak  cengkeh,  maka semakin rendah kelarutannya.     Hal ini disebabkan  karena  adanya  minyak cengkeh yang bersifat hidrofobik sehingga  memperlambat  larutnya edible film terhadap  air.      Nilai  rata-rata kelarutan edible film dari pati singkong- kitosan berkisar antara 73,66% - 90,80%. Hasil  ini  lebih  tinggi  dibandingkan dengan    penelitian  sebelumnya  pada edible film pati uwi dengan penambahan minyak  cengkeh  saja  [4].  Hal  ini disebabkan  karena  adanya  kitosan  yang digunakan dalam penelitian ini.
Diketahui  bahwa  kitosan  bersifat  lebih larut  air  daripada  minyak  cengkeh sehingga  penggunaan  kitosan  dapat meningkatkan kelarutan film dalam air.

## Water  Vapor  Transmission  Rate (WVTR)
Water  vapor  transmition  rate atau laju  transmisi  uap  air  merupakan parameter  penting edible  film ,  karena sangat berpengaruh terhadap produk yang dikemas.  Nilai  WVTR  yang  baik  adalah nilai  nilai  yang  rendah  sebab  dapat menghambat  masuknya  uap  air  dengan baik.  Nilai  rata-rata  WVTR edible  film dari pati singkong-kitosan dengan penambahan beberapa konsentrasi minyak cengkeh dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Hasil Rata-Rata Nilai Ketebalan, Transparansi, Kelarutan, WVTR, dan Kuat Tekan Edible Film dari Pati Singkong-Kitosan pada Berbagai Konsentrasi
Minyak Cengkeh Parameter Perlakuan 0 % 0,5% 1% 1,5% 2% 2,5% Ketebalan (mm) 0,15 a 0,16 a 0,17 ab 0,18 ab 0,19 b 0,20 b Transparansi (%/mm) 3,37 a 2,10 a 2,07 a 1,93 a 1,42 a 1,05 b Kelarutan (%) 90,80 d 89,27 d 85,57 c 83,45 bc 79,88 b 73,66 a WVTR (Gram/m 2 .jam)  41,59 d 27,67 c 27,66 c 25,37 b 22,12 a 21,53 a Kuat Tekan (gF) 7,93 9,47 9,2 9 8 7,03 Keterangan: Angka-angka yang diikuti huruf superscript yang sama pada baris yang sama tidak berbeda menurut uji DnMRT pada taraf 5%
Hasil penelitian menunjukkan bahwa  peningkatan  konsentrasi  minyak cengkeh  menurunkan  nilai  WVTR.    Hal ini  disebabkan  karena  minyak  cengkeh yang  bersifat  hidrofobik  menghasilkan sifat  film  yang  juga  lebih  hidrofobik. Edible film yang bersifat hidrofobik sulit untuk ditembus uap air. Hasil ini sejalan dengan [14] yang melakukan pengembangan edible  film dari  pati jagung dengan penambahan minyak sawit mengalami  penurunan  nilai  WVTR seiring dengan peningkatan minyak sawit yaitu  antara  15,8  gram/m 2 .hari  -  9,59 gram/m 2 .hari.
Hasil  ini  hampir  mirip  dengan penelitian  sebelumnya  pada  pati  uwi yang menghasilkan film  dengan  WVTR antara  36,56  –  21,31  gram/m 2 .jam  [4].
Semakin rendah nilai WVTR e dible film, maka edible  film semakin  baik. Penambahan  minyak cengkeh  2%  dan 2,5%  adalah  yang  terbaik  berdasarkan nilai  WVTR.  Perpindahan  uap  air  pada edible  film  terjadi  melewati  bagian hidrofilik  film.    Semakin  berkurang proporsi hidrofilik film maka perpindahan  semakin  sukar  terjadi sehingga  WVTR  mengalami  penurunan dengan penambahan minyak [15]. Beberapa  faktor  yang  mempengaruhi WVTR  diantaranya  seperti  integritas dari edible  film ,  perbandingan  antara
hidrofilik  dan  hidrofobik,  rasio  antara kristalin dan daerah amorf dan mobilitas rantai polimer.

## Kuat Tekan
Kuat  tekan edible  film merupakan parameter yang menunjukan kemampuan edible  film untuk  melindungi  produk. Semakin  tinggi  nilai  kuat  tekan  maka edible  film semakin  disukai.  Nilai  rata- rata  kuat  tekan edible  film dari  pati singkong-kitosan dengan berbagai konsentrasi minyak cengkeh dapat dilihat pada Tabel 1.
Nilai  kuat  tekan  tertinggi  terdapat pada edible  film dari  pati  singkong- kitosan  dengan  penambahan  minyak cengkeh  0,5%.  Bila  konsentrasi  minyak cengkeh  terus  ditingkatkan  maka  kuat tekan  menurun.  Hasil  ini  mirip  dengan yang  dilaporkan  sebelumnya  bahwa minyak cengkeh pada konsentrasi tertentu  dapat  menurunkan  kuat  tekan film  [4].  Minyak  cengkeh  diduga menghasilkan struktur film yang heterogen  sehingga  film  bersifat  rapuh [5].  Dalam  jumlah  kecil  (minyak cengkeh  0,5%),  minyak  cengkeh  dapat menyatu dengan baik sehingga menghasilkan struktur film yang homogen.

## Karakteristik Warna
Warna edible film dapat mempengaruhi penampilan produk  yang dikemas.  Nilai  rata-rata  kecerahan  (L*), a* dan b* edible film dari pati singkong- kitosan  dengan  berbagai  konsentrasi minyak cengkeh dapat dilihat pada Tabel 2. Semakin  tinggi  konsentrasi  minyak cengkeh  yang  digunakan  maka  nilai lightness semakin kecil.  Hal ini disebabkan  karena  minyak  cengkeh mengakibatkan  larutan  film  menjadi keruh.  Minyak  cengkeh  sebagai  bahan tunggal memiliki warna kecoklatan yang disebabkan  oleh  adanya  flavonoid, sejenis pigmen tanaman untuk memproduksi  warna  bunga  merah  atau biru  pigmentasi  kuning  pada  kelopak yang  digunakan  untuk  menarik  hewan penyerbuk  [16].  Penambahan  minyak cengkeh  kedalam  formulasi edible  film dapat  mempengaruhi  warna  akhir  dari produk, dimana pada edible film merubah nilai a* dan b* semakin positif (Tabel 2).

## Tabel 2. Nilai Rata-Rata Analisis Warna Edible Film dari Pati Singkong-
Kitosan pada Berbagai Konsentrasi Minyak Cengkeh Minyak Cengkeh (%) Nilai Warna Deskripsi warna L* a* b* 0 74,33 -1 2,67 a Grayish yellow 0,5 69,33 -2 6,33 b Dark grayish yellow 1 70,67 -3 6,67 b Dark grayish yellow 1,5 69 -2,3 11,33 c Dark grayish yellow 2 67 -2 18 d Dark grayish yellow 2,5 61,33 0 18,33 d Mostly desaturated  dark orange
Keterangan:  Angka-angka  yang  diikuti  huruf superscript yang  sama, pada kolom yang sama  tidak  berbeda  nyata   pada  taraf  5%  menurut  uji  DNMRT

## Daya Hambat Mikroba
Analisis  daya  hambat  mikroba dilakukan  untuk  mengetahui  seberapa besar  aktivitas  antibakteri  yang  ditandai dengan  adanya  areal  bening  yang menunjukan  tidak  adanya  pertumbuhan bakteri di  sekitar  lubang.  Hasil diameter zona hambat bakteri S. Aureus dan E.coli dapat dilihat pada Tabel 3.
Konsentrasi minyak cengkeh dapat menghambat  bakteri S.  aureus namun belum dapat menghambat bakteri E. coli, hal ini disebabkan karena sifat antibakteri pada minyak cengkeh dapat menghambat bakteri  gram  positif  yang  mempunyai perbedaan  struktur  dinding  sel  dengan bakteri  gram  negatif.  Menurut  Jawetz  & Adelbergs  [17],  bakteri  gram  positif hanya  terdiri  dari  lapisan  peptidoglikan
dan  asam  teikoat  serta  mempunyai kandungan  lipid  yang  rendah  (1-4%) sehingga memudahkan senyawa antibakteri masuk kedalam sel sedangkan bakteri  gram  negatif  mempunyai  3 lapisan  (lipoprotein,  lapisan  tengah,  dan lipopolisakarida) dan mempunyai peptidoglikan  dengan  kandungan  lipid yang tinggi (11-12%). Hasil ini
menunjukan  respon  hambatan bakteri S.
aureus termasuk  kuat  dan  respon hambatan  bakteri E.coli kuat  pada konsentrasi  minyak  cengkeh  0,5%  dan 1%. Terdapat 4  kategori respon hambatan pertumbuhan bakteri berdasarkan  diameter  zona  hambatnya. Apabila diameter zona hambat ≥ 21 mm maka  menunjukkan  daya  hambat yang sangat kuat,  diameter 11-20  mm menunjukkan  daya  hambat  yang  kuat,
sedangkan diameter 6-10 mm menunjukkan daya hambat yang sedang,
serta  diameter  zona  hambat  <  5  mm menunjukkan daya hambat lemah.
Tabel 3. Nilai Rata-Rata Diameter Zona  Hambat Bakteri Edible Film dari Pati Singkong-Kitosan pada
Berbagai Konsentrasi Minyak Cengkeh. Minyak cengkeh (%) Jenis bakteri S. aureus (mm) E. coli (mm) 0 14,75 - 0,5 15,10 - 1 15,40 - 1,5 16,45 - 2 16,70 - 2,5 17,05 -

## KESIMPULAN
Minyak cengkeh dapat memperbaiki  sifat barrier  edible  film terhadap  uap  air.  Konsentrasi  minyak cengkeh  berpengaruh  nyata  terhadap WVTR, ketebalan, transparansi, kelarutan,  dan  warna,  namun  tidak berpengaruh  nyata  terhadap  kuat  tekan edible film. Karakteristik edible  film terbaik  dihasilkan  pada  penggunaan minyak  cengkeh  2,5%  dengan  laju transmisi uap air 21,53 gram/m 2 .jam dan diameter  zona  hambat  terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus sebesar  17,05 mm.

## DAFTAR PUSTAKA
[1].  Muin,  R.,  D.  Anggraini,  and  F. Malau, Karakteristik  Fisik  dan Antimikroba  Edible  Film  dari Tepung Tapioka dengan Penambahan  Gliserol  dan  Kunyit
Putih. Jurnal  Teknik  Kimia,  2017.
3 (23): p. 191-198.
[2].  Handayani,  R.  and  H.  Nurzanah, Karakteristik  edible  film  pati  talas dengan  penambahan  antimikroba dari minyak atsiri lengkuas. Jurnal Kompetensi Teknik, 2018. 10 (11).
[3].  Supeni,  G.,  A.A.  Cahyaningtyas, and  A.  Fitrina, Karakterisasi  Sifat Fisik  Dan  Mekanik  Penambahan
Kitasan Pada Edible Film Keragenan Dan Tapioka Termodifikasi. Jurnal Kimia Kemasan, 2015. 37 (2): p. 103-110.
[4].  Ulyarti, et al., Development of Yam- Starch-Based  Bioplastics  with  the Addition of Chitosan and Clove Oil. Makara  Journal  of  Science,  2021. 25 (2).
[5].  da  Silva  Scudeler,  C.G.,  et  al., Development  and  characterization of Nile tilapia (Oreochromis niloticus)  protein  isolate-based biopolymer films incorporated with essential  oils  and  nanoclay. Food Packaging and Shelf Life, 2020. 25 .
[6].  Harianto,  M.,  J.  Djafar,  and  H. Adinegoro, Pengaruh Penambahan Minyak Sawit Terhadap Karakteristik  Edible  Film  Dan Daya  Simpan  Bumbu  Mie  Instan.
Jurnal Standarisasi, 2017. 19 (1): p.
39-46.
[7].  Suhendar,  U.  and  S.  Sogandi, Identifikasi  Senyawa  Aktif  Ekstrak
Daun Cengkeh (Syzygium aromaticum)  Sebagai  Inhibitor Streptococcus mutans. Al- Kauniyah:  Jurnal  Biologi,  2019.
12 (2): p. 229-239.
[8].  Ulyarti, U., et al., The
Characteristics of Yam (Dioscorea Alata)  Starch  Edible  Film. Jurnal Penelitian  Pendidikan  IPA,  2018.
5 (1).
[9].  Gontard,  N.,  S.  Guilbert,  and  C. J.L., Water  and  Glyserol  as
Plasticizer  Affect  Mechanical  and
Water  Barrier  Properties  at  an
Edible Wheat Gluten Film. . J. Food Science, 1993. 58 (1): p. 206-211.
[10].  Piñeros-Hernandez,  D.,  et  al.,
Edible cassava starch films carrying rosemary antioxidant extracts  for  potential use as  active food packaging. Food Hydrocolloids,  2017. 63 :  p.  488-
495.
[11].  Fatma, M. R, and T. M, Karakteristik Edible Film Berbahan  Whey  Dangke  dan  Agar dengan  Menggunakan  Gliserol dengan Persentase Berbeda. . JITP, 2015. 4 (2): p. 63-69.
[12].  Kurniawan,  C.,  T.B.  Waluyo,  and P.  Sebayang, Analisis  Ukuran Partikel Menggunakan Free Software  Image-J ,  in Seminar
Nasional Fisika . 2011: Serpong.
[13].  Warsiki, E., T.C. Sunarti, and R.D. Martua. Pengembangan  kemasan antimicrobial (AM) untuk memperpanjang umur simpan produk pangan. . in Seminar Hasil-
Hasil  Penelitian  Institut  Pertanian Bogor . 2009. Bogor.
[14].  Santoso,  B.,  et  al., Pengembangan Edible  Film  Komposit  Berbasis Pati  Jagung  dengan  Penambahan
Minyak  Sawit  dan  Tween  20. Agritech, 2018. 38 (2).
[15].  Qotimah,  K.,  E.N.  Dewi,  and  L. Purnamayati, Karakteristik  mutu edible  film  karagenan  dengan penambahan minyak atsiri bawang putih (Allim sativum) pada produk pasta  ikan.  . Jurnal  Pengolahan
Hasil  Perikanan  Indonesia,  2020. 23 (1): p. 1-9. [16].  Mustapa, M., Penelusuran Senyawa Tumbuhan Cengkeh. Banten:  Media  Madani. 2020,
Media Madani: Banten.
[17].  Jawetz, M.  and  Adelberg’s., Medical  Microbiology Twenty-
Seventh  Edition.  ed.  2013,  US: McGraw- Hill Companies.