Journal Syifa Sciences and Clinical Research (JSSCR)
Volume 5  Nomor 2, 2023
Journal Homepage: http://ejurnal.ung.ac.id/index.php/jsscr , E-ISSN: 2656-9612 P-ISSN:2656-8187 DOI : https://doi.org/10.37311/jsscr.v5i2.15311
Isolasi Dan Identifikasi Terpenoid Fraksi  Heksan Daun Premna serratifolia L . Menggunakan GC-MS
Ricky Midi Candra 1 , Isnindar 2* , Sri Luliana 3
1,2,3 Jurusan Farmasi, Fakultas Kedokteran, Universitas Tanjungpura, Jl. Prof. Dr. H. Hadari Nawawi, Kota Pontianak 78124, Indonesia
* Penulis Korespondensi. Email: isnindar@pharm.untan.ac.id

## ABSTRAK
Buas-buas  ( Premna  serratifolia L . )  merupakan  tanaman  yang  termasuk  famili verbenaceae . Senyawa  terpenoid  yang  ada  pada  tanaman  buas-buas  memiliki  bioaktivitas  sebagai  obat. Seyawa terpenoid merupakan senyawa larut dalam n-heksan. Tujuan dari penelitian ini adalah mengisolasi  dan  mengidentifikasi  senyawa  terpenoid  yang  terdapat  pada  fraksi  n-heksan daun  buas-buas  megguakan  metode GC-MS .  Daun  buas-buas  dimaserasi  dengan  pelarut etanol  96%  kemudian  difraksinasi  menggunakan  corong  pisah  dengan  pelarut  n-heksan. Fraksi  n-heksan  daun  buas-buas  diisolasi  menggunakan  kromatografi  kolom  denagan  fase gerak bergradien kombinasi n-heksan dan etil asetat, selanjutnya diidentifikasi menggunakan instrumen GC-MS .  Senyawa  terpenoid  yang terdapat  pada  fraksi  n-heksan  daun  buas-buas diperkirakan  adalah neophytadiene ; 3,7,11,15-tetramethyl-2-hexadecen-1-ol ;  dan 2  hydroxy-4a,5- dimethyl-3-(prop-1-en-2-yl) octahydronaphthalen-1-(2H)-one .
Kata Kunci: Daun Buas-buas; Terpenoid; Ekstrak; GC-MS Diterima: 11-02-2023 Disetujui: 21-07-2023 Online: 15-08-2023

## ABSTRACT
Buas-buas  (Premna  serratifolia  L.)  is  a  plant  that  belongs  to  the  Verbenaceae  family.  Terpenoid compounds that exist in buas-buas plants have bioactivity as medicine. Terpenoid compounds are soluble compounds in n-hexane. The purpose of this study was to isolate and identify the terpenoid compounds contained in the n-hexane fraction of buas-buas leaves using the GC-MS method. The buas-buas leaves were macerated with 96% ethanol solvent and then fractionated using a separating funnel with n-hexane as solvent. The n-hexane fraction of buas-buas leaves was isolated using column chromatography with a gradient  mobile  phase  combination  of  n-hexane  and  ethyl  acetate,  then  identified  using  the  GC-MS instrument. The terpenoid compounds found in the n-hexane fraction of buas-buas leaves are estimated to be neophytadiene; 3,7,11,15-tetramethyl-2-hexadecen-1-ol; and 2 hydroxy-4a,5-dimethyl-3-(prop-1- en-2-yl) octahydronaphthalen-1-(2H)-one.
Copyright © 2023 Jsscr. All rights reserved.
Keywords:
Buas-buas leaves, Terpenoid; Extract; GC-MS
Received: 2023-02-11 Accepted: 2023-07-21 Online: 2023-08-15

## 1.  Pendahuluan
Buas-buas  ( Premna  serratifolia L.)  merupakan  tanaman  yang  termasuk  dalam famili verbenaceae .  Tanaman  ini  dapat  ditemukan  di  pekarangan  rumah  dan  sering dijadikan  sebagai  sayur  atau  lalapan  [1]. Tanaman  buas-buas  digunakan  dalam pengobatan  tradisional  [2].  Penggunaan  sebagai  obat  tradisional  tanaman  buas-buas oleh  masyarakat  digunakan  untuk  masuk  angin,  bau  nafas,  infeksi  cacing,  dan memperbanyak ASI wanita menyusui. Skrining fitokimia menunjukkan daun buas-buas memiliki metabolit sekunder seperti flavonoid, saponin, tanin, steroid/terpenoid [3].
Senyawa  terpenoid  yang  ada  pada  tanaman  buas-buas  memiliki  bioaktivitas sebagai  obat.  Bioaktivitas  yang  dimiliki  antara  lain  sebagai  antioksidan,  analgesik, antibakteri,  antiinflamasi,  fungisida,  Hipokolesterolemik, antiacne ,  diuretik,  dan imunostimulant [4].  Terpenoid  merupakan  senyawa  yang  bersifat  volatil  atau  mudah menguap [5]. Salah satu metode yang baik digunakan untuk menganalisa senyawa yang mudah menguap adalah GC-MS [6].
Kromatografi gas-spekstroskopi massa atau sering disebut GC-MS merupakan gabungan dari 2 teknik analisis. Metode GC-MS mempunyai sensitivitas dan spesivitas yang  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan  metode  lainnya.  Sensitivitasnya  yang  tinggi dapat memisahkan berbagai senyawa yang saling bercampur dan mampu menganalisis berbagai senyawa meskipun dalam kadar atau konsentrasi rendah [7].
Penelitian tentang isolasi dan identifikasi senyawa terpenoid daun buas-buas di Indonesia masih belum banyak dilakukan. Penelitian sebelumnya dilakukan oleh Rency [4]  mendapatkan  hasil 7  senyawa  terpenoid  yaitu Bicyclo [3.1.1] hept- 2 -ene- 2 -methanol, 6,6 -dimethyl- , Cyclohexanol, 5 -methyl- 2 -( 1 -methylethenyl)-,  [1R-  (1à,2á,5à)]- , Caryophyllene , Longifolene-(V4) ,  3,7,11,15 -Tetramethyl- 2 -  hexadecen- 1 -ol , Phytol ,  dan Squalene dimana penelitian ini dilakukan di India yang memiliki kandungan unsur hara yang berbeda dari Indonesia.

## 2.  Metode

## Pembuatan Simplisia
Daun  buas-buas  yang  telah  dibeli  dari  pasar  disortasi  basah  untuk menghilangkan  bahan-bahan  asing  dari  tumbuhan  sebelum  pencucian  dengan  cara membuang  bagian-bagian  yang  tidak  perlu.  Dicuci  menggunakan  air  bersih  yang mengalir  untuk  menghilangkan  tanah  atau  kotoran  yang  melekat.  Daun  buas-buas selanjutnya  dirajang  untuk  mempermudah  proses  pengeringan.  Proses  perajangan dilakukan secara manual hingga diperoleh irisan tipis atau ukuran yang dikehendaki. Selanjutnya  daun  dikeringkan  menggunakan  metode  penjemuran  di  bawah  sinar matahari  dengan  dilapisi  kain  hitam.  Penjemuran  dilakukan  hingga  diperoleh  daun yang  kering  dan  rapuh.  Daun  yang  telah  kering  dilakukan  sortasi  kering  untuk menghilangkan pengotor-pengotor yang masih ada. Daun kering kemudian dihaluskan menggunakan blender hingga  didapatkan  ukuran  yang  halus  dan  seragam.  Simplisia disimpan dalam wadah yang tidak beracun dan bereaksi dengan isinya seperti wadah kaca. Wadah dilapisi dengan aluminium foil untuk melindungi dari cahaya dan disimpan pada suhu kamar[8].
Pembuatan Ekstrak
Metode ekstraksi yang digunakan dalam penelitian ini adalah metode maserasi dengan  menggunakan  pelarut  etanol  96%.  Sampel  simplisia  kering  daun  buas-buas sebanyak 900 g dimasukkan ke dalam wadah maserasi kemudian dimasukkan pelarut etanol 96% sebanyak 5 liter hingga sampel terendam. Proses maserasi dilakukan selama
5 hari sambil dilakukan pengadukan sesekali dan dilakukan pergantian pelarut setiap 1x24 jam. Pelarut hasil maserasi kemudian diuapkan menggunakan rotary evaporator dan disimpan dalam wadah tertutup [9]. Isolasi dan Identifikasi
Ekstrak etanol daun buas-buas diambil sebanyak 150 gram dilarutkan dalam air hangat  sebanyak  170  ml  dan dimasukkan  ke dalam  corong  pisah,  diamkan  beberapa saat.  Ditambahkan  150  ml  n-heksan  kocok  kuat  dan  diamkan  selama  beberapa  saat hingga terbentuk 2 lapisan. Dibuka keran corong pisah untuk mengeluarkan tekanan gas. Lapisan n-heksan akan berada di atas dan lapisan air berada di bawah. Pisahkan kedua fase pada wadah yang berbeda, kemudian fase air kembali dimasukkan kedalam corong pisah. Dilakukan lima kali pengulangan dengan perlakuan yang sama hingga tidak terjadi perubahan warna yang signifikan. Total pelarut n-heksan yang digunakan 900 mL. Diuapkan fraksi n-heksan dengan menggunakan rotary evaporator [10]. Dihitung rendemen dengan rumus sebagai berikut :
% bobot fraksi n − heksan = 𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑓𝑟𝑎𝑘𝑠𝑖 𝑛−ℎ𝑒𝑘𝑠𝑎𝑛 𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑒𝑘𝑠𝑡𝑟𝑎𝑘 𝑒𝑛𝑐𝑒𝑟 𝑥 100%                           [1]

## Kromatografi Kolom
Fase  diam  kolom  kromatografi  dibuat  menggunakan  metode  basah. Dimasukkan  kapas  ke  dalam  ujung  kolom  untuk  menahan  fase  diam.  Silika  gel sebanyak  70  gram  dibasahi  dengan  100  mL  n-heksan.  Dimasukkan  silika  yang  telah basah  kedalam  kolom  secara  perlahan  dan  pastikan  tidak  ada  celah  udara.  Kolom diketuk-ketuk secara perlahan untuk mengeluarkan udara yang terjebak dalam kolom dan  diamkan  kolom  selama  24  jam.  Pastikan  pelarut  berada  diatas  fase  diam  [11]. Ekstrak  sebanyak  5,2  gram  digerus  bersama  silika  sebanyak  10,1  gram  hingga membentuk serbuk. Ekstrak diletakkan di atas fase diam dan dielusi menggunakan fase gerak n-heksan : etil asetat dengan metode gradien dari 100% n-heksan hingga 50:50 n- heksan : etil asetat. Masing-masing pelarut yang digunakan berjumlah 100 mL. Hasil pemisahan dari kromatografi kolom gravitasi (KKG) ditampung dalam vial-vial 20 mL. Masing-masing vial ditandai mulai dari F1.  Elusi dihentikan jika sudah tidak ada lagi pita yang dapat dibawa keluar lagi oleh fase gerak [12].

## Identifikasi KLT
Ekstrak kental diambil dengan sendok stainless dan diencerkan dengan etanol kemudian sampel ditotolkan pada plat silika gel F 254 . Dielusi menggunakan fase gerak n-heksan : etil asetat (2:1), ditunggu hingga fase gerak menyentuh batas atas KLT. Plat hasil  kemudian  disemprot  dengan  penampak  bercak  terpenoid  yaitu  vanilin-asam sulfat.  Hasil  positif  ditandai  dengan  adanya  bercak  bewarna  ungu  setelah  dilakukan pemanasan [13].

## Identifikasi GC-MS
Identifikasi  dilakukan  di  laboratorium  analisis  kimia  Universitas  Padjajaran. Isolat  yang  didapat  dari  kromatografi  kolom  dipreparasi  untuk  dilakukan  analisis menggunakan GC-MS . Suhu awal GC-MS diatur pada 50 ℃ dan diatur suhu terprogram dengan kenaikan 10 ℃ /menit. Kolom yang digunakan yaitu Agilent 122-5532 dengan dimensi  30m  x  250  µm  x  0,25  µm.  Pelarut  yang  digunakan  untuk  sampel  adalah kloroform. Pemisahan antar komponen bergantung pada lamanya waktu relatif yang dibutuhkan sampel didalam fase diam. Sampel selanjutkan akan mengalami perubahan menjadi  bentuk  ion  yang  kemudian  medan  magnet  atau  medan  listrik  akan
membelokkan  ion  tersebut  agar  dapat  menentukan  bobot  molekul  fragmen  yang dihasilkan [6]. Data hasil dari analisis GC-MS yang berupa kromatogram dan spektrum massa kemudian dibandingkan dengan data yang ada di bank data masshunter.

## 3.  Hasil dan Pembahasan

## Pembuatan Simplisia
Sampel  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  daun  buas-buas  ( Premna serratifolia L.)  yang  diperoleh  dari  kelurahan  bangka  belitung  darat,  Kecamatan Pontianak Tenggara, Kota Pontianak. Pengolahan simplisia daun buas-buas dilakukan secara bertahap dimulai dari sortasi basah, pencucian, perajangan, pengeringan, sortasi kering, penghalusan, dan pengayakan [8]. Didapatkan simplisia kering daun buas-buas sebanyak 900 gram.

## Pembuatan Ekstrak
Pembuatan  ekstrak  etanol  daun  buas-buas  menggunakan  metode  maserasi. Sebanyak  900  gram  simplisia  kering  daun  buas-buas  dimaserasi  selama  5  hari menggunakan  pelarut  etanol  96%  sebanyak  5  liter.  Maserat  selanjutnya  disaring menggunakan  pompa  vakum  dan  corong buchner untuk  selanjutnya  dipekatkan menggunakan rotary evaporator . Hasil ekstraksi dan uji organoleptis dapat dilihat di tabel 1.
Tabel 1. Hasil ekstraksi Berat Sampel Berat Rendemen Presentasi Rendemen Organoleptis 900 g 230 g 25,56% Warna hitam kehijauan, aromatik khas daun buas-buas
Sampel berupa ekstrak sebanyak 150 gram dilarutkan kedalam 170 mL air hangat. Sampel diekstraksi cair-cair dengan pelarut n-heksan sebanyak 150 ml dan dilakukan pengulangan sebanyak 5 kali. Hasil fraksinasi cair-cair dapat dilihat pada tabel 2.
Tabel 2. Hasil fraksi n-heksan daun buas-buas Jumlah (g) Volume Pelarut Rendemen 150 g 900 mL 12,4% (18,6 g)
Ditimbang sampel seberat 5.2 gram kemudian digerus bersama dengan silika gel sebanyak  10,1  gram  hingga  menjadi  kering.  Sampel  kemudian  dimasukkan  kedalam kolom  kromatografi  dan  dilapis  dengan  kertas  saring.  Proses  elusi  menggunakan pelarut campuran n-heksan : etil asetat secara bergradien dimulai dari n-heksan 100%; 95:5; 90:10; 85:15; 80:20; 75:25; 70:30; 65;35; 60:40; 55:45; dan 50:50. Isolat yang diperoleh ditampung kedalam vial kaca. Didapatkan sejumlah 50 subfraksi dari F1 100% n-heksan hingga F50. Isolat kemudian diidentifikasi menggunakan KLT. Hasil elusi (Gambar 1) menunjukkan  masih  banyak  senyawa  yang  terdapat  pada  subfraksi  kromatografi kolom.
Gambar 1. Profil KLT pelarut n-heksan:etil asetat (2:1)
Untuk meningkatkan kemurnian isolat maka dilakukan kolom kembali dengan penurunan  gradien  yang  lebih  kecil.  Tiga  sub-fraksi  yang  menunjukkan  hasil  positif dengan profil kromatogram yang mirip yaitu F15, F16, F17 digabungkan menjadi 1 vial. Berat sampel setelah ditimbang 500 mg. Sampel dimasukkan ke dalam fase diam silika gel  kemudian  dielusi  menggunakan  campuran  pelarut  n-heksan:etil  asetat  98:2;  96:4; 94:6; 92:8; dan 90:10. Masing-masing pelarut yang digunakan sebanyak 100 mL. Isolat ditampung kedalam vial-vial kaca ukuran 20 mL. Isolat yang diperoleh kemudian diuji kemurniannya kembali mengguakan KLT (Gambar 2) dengan menggunakan kombinasi pelarut  n-heksan  :  etil  asetat  95:5  dikarenakan  pada  KLT  menggunakan  pelarut  2:1 terlalu non-polar sehingga noda menjadi tumpang tindih. F1, F2, dan F3 diambil untuk selanjutnya di Identifikasi menggunakan GC-MS.
Gambar 2. Profil KLT pelarut n-heksan:etil asetat (95:5)
Identifikasi  GC-MS  dilakukan  di  Laboratorium  Analisis  Kimia  Universitas Padjajaran.  Didapatkan  100  senyawa  yang  51  diantaranya  merupakan  senyawa pengotor. Spektrum massa fraksi n-heksan daun buas-buas dapat dilihat pada gambar 3.
Gambar 3. Spektrum massa fraksi n-heksan daun buas-buas
Berdasarkan  hasil  fragmentasi  yang  telah  dianalisis  didapatkan  senyawa  yang serupa dengan Neophytadiene (1,01%), 3,7,11,15-Tetramethyl-2-hexadecen-1-ol (0,41%) dan 2  hydroxy-4a,5-dimethyl-3-(prop-1-en-2-yl)  octahydro  naphthalen-1-(2H)-one (3,25%).  Hasil yang  diperoleh  serupa  dengan  penelitian  sebelumnya  oleh  Hadiarti  [14]  yang mengidentifikasi senyawa Neophytadiene dan 3,7,11,15-Tetramethyl-2-hexadecen-1-ol pada ekstrak daun buas-buas.
Tabel 3. Data hasil GC-MS No Waktu Retensi Area % Area Tinggi Nama Senyawa 1 18,73 52643,36 1,01% 22202,05 Neophytadiene 2 19,39 21272,31 0,41% 8043,36 3,7,11,15-Tetramethyl-2- hexadecen-1-ol 3 27,37 169465,2 3,25% 74323,45 2 hydroxy-4a,5-dimethyl-3- (prop-1-en-2-yl) octahydro naphthalen-1-(2H)-one 4 - - 95,33% - Senyawa-senyawa lain
Penelitian  oleh  Osorio  pada  tahun  2013  mendapatkan  spektrum  massa  diduga neophytadiene dengan base  peak pada  puncak  m/z  68.  Spektrum  massa  menunjukkan puncak 221, 166, 152, 137, 109, 95, 82, 68, 43, 41, dan 27 [15]. Spektrum serupa ditemukan pada senyawa neophytadiene dari ekstrak Centella asiatica dengan base peak pada puncak 68 dan menampilkan puncak pada 278, 235, 208, 179, 137, 123, 82, 68, dan 57 [16].
Gambar 4. Spektrum massa neophitadiene
Berdasarkan hasil analisis GC-MS dari fraksi n-heksan ekstrak etanol 96% daun buas-buas  (Gambar  4)  didapatkan  spektrum  massa  yang  diduga  sebagai  senyawa neophytadiene dengan base peak pada puncak m/z 68 dan menampilkan puncak-puncak m/z  206,8;  151,9;  136,9;  122,9;  108,9;  95;  68;  dan  43.  Senyawa  neophytadiene  sudah pernah ditemukan dalam tanaman buas-buas pada penelitian oleh Hadiarti [14].
Gambar 5. Spektrum massa 3,7,11,15, tetramethyl-2-hexadecen-1-ol
Penelitian oleh Saravanan pada tahun 2016 mendapatkan pola spektrum massa senyawa 3,7,1,15, tetramethyl-2-hexadecen-1-ol dengan puncak tertinggi m/z 81. Terdapat beberapa  puncak  dengan  kelimpahan  yang  tinggi  yaitu  m/z  123,  95,  dan  43  [17]. Berdasarkan  hasil analisa GC-MS didapatkan  spektrum  massa  yang  diduga  senyawa 3,7,11,15-tetramethyl-2-hexadecen-1-ol (Gambar 5) dengan base peak 80,9 dan menampilkan puncak-puncak m/z 278; 206,8; 192,8; 136,9; 122,9; 108,9; 94,9; 80.9; 67,9; 56,9; dan 42,9. Senyawa 3,7,11,15-tetramethyl-2-hexadecen-1-ol diketahui sudah pernah ditemukan pada tanaman buas-buas oleh penelitian Hadiarti [14] dan Rency [4].
Gambar 6. Spektrum massa 2 hydroxy-4a,5-dimethyl-3-(prop-1-en-2-yl) octahydronaphthalen-1-(2H)-one
Berdasarkan  data  yang  dimiliki  pubchem senyawa  2  hydroxy-4a,  5-dimethyl-3- (prop-1-en-2-yl) memiliki base peak pada puncak m/z 207. Puncak tertinggi kedua dan ketiga yaitu pada puncak m/z 69 dan 109 (18). Spektrum massa yang diperoleh dari
analisis sampel menunjukkan senyawa yang diduga adalah 2 hydroxy-4a,5-dimethyl-3- (prop-1-en-2-yl)octahydronaphthalen-1-(2H)-one dengan  sinonim  santalcamphor  dengan base peak m/z 207. Spektrum massa yang diperoleh menampilkan 11 puncak yaitu 279,1; 263; 207; 190,8; 176,8; 146,8; 132,8; 95; 69; dan 41.

## 4.  Kesimpulan
Isolasi senyawa dari daun buas-buas ( Premna serratifolia L.) menggunakan GC- MS  mendapatkan  beberapa  senyawa  terpenoid.  Isolat  belum  merupakan  senyawa tunggal dan  masih  berupa  campuran dari  banyak  senyawa.  Adapun  isolat  senyawa- senyawa terpenoid teridentifikasi sebagai neophytadiene (1,01%); 3,7,11,15-tetramethyl-2- hexadecen-1-ol (0,41%) ; dan 2 hydroxy-4a,5-dimethyl-3-(prop-1-en-2-yl) octahydronaphthalen- 1(2H)-one (3,25%).  Dibandingkan  dengan  penelitian  sebelumnya,  metode  yang digunakan mendapatkan hasil senyawa baru berupa 2 hydroxy-4a,5-dimethyl-3-(prop-1- en-2-yl) octahydronaphthalen-1(2H)-one.

## Referensi
[1] R. Supriningrum dan F. Handayani, “Karakterisasi dan Skrining Fitokimia Daun Singkil (Premna corymbosa Rottl & Willd),” Jurnal Ilmiah Ibnu Sina , vol. 2, no. 2, hlm. 232 – 244, 2017.
[2] D. Hadiarti, “Uji Aktivitas Ekstrak Buas -buas (Premna serratifolia Linn) Sebagai Anti Kolesterol Secara In Vitro,” AR-RAZI Jurnal Ilmiah , vol. 5, no. 1, hlm. 22 – 29,
2017.
[3] W. Puspita, D. Y. Sari, dan I. R. Rahman, “Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Daun  Buas-buas  (Premna  serratifolia  L.)  Asal  Kabupaten  Melawi  Provinsi Kalimantan Barat dengan Metode DPPH,” JIFI , vol. 3, no. 2, hlm. 405 – 412, Des 2020.
[4] R. Rc, K. Vasantha, dan A. Maruthasalam, “Identification of bioactive compounds from  ethanolic  leaf  extracts  of  premna  serratifolia  L.  using  GC- MS,” Bioscience Discovery , vol. 6, no. 2, hlm. 96 – 101, 2015.
[5] R.  Wahyuni,  “Aktivitas  Enzim  Hydroxymethylglutaryl  Coenzyme  A  Reductase pada  Induksi  Gaharu  Aquilaria  malaccensis  Menggunakan  Pupuk  Urea  dan Fusarium solani,” j.lit.hut.faloak , vol. 1, no. 1, hlm. 1 – 8, Apr 2017.
[6] K. A. G. Darmapatni, A. Basori, dan N. M. Suaniti, “Pengembangan Metode GC - MS  untuk  Penetapan  Kadar  Acetaminophen  pada  Spesimen  Rambut  Manusia,” JBP , vol. 18, no. 3, hlm. 255, 2016.
[7] D. A. N. Made, I. M. O. A. Parwata, dan I. A. M. Parthasutema, “Analisis Kadar Metamfetamina  pada  Sampel  Darah  dengan  Metode  GC- MS,” Jurnal  Chemistry Laboratory , vol. 2, no. 1, hlm. 18 – 29, 2015.
[8] R. Wahyuni, Guswandi, dan H. Rivai, “Pengaruh Cara Pengeringan dengan Oven, Kering Angin dan Cahaya Matahari Langsung Terhhadap Mutu Simplisia Herba Sambiloto,” Jurnal Farmasi Higea , vol. 6, no. 2, 2014.
[9] Y. A. Koirewoa, Fatimawali, dan W. I. wiyono, “Isolasi dan Identifikasi Senyawa Flavonoid dalam Daun Beluntas (Pluchea indica L.),” Pharmacon , vol. 1, no. 1, hlm. 47 – 52, 2012.
[10] H. Rivai, meliyana, dan D. handayani, “Karakterisasi Ekstrak Spon Laut Axinella carteri Dendy Secara Fisika, Kimia dan Fisikokimia,” Jurnal Farmasi Higea , vol. 2, no. 1, hlm. 1 – 12, 2010.
[11] N.  F.  N.  Wati,  “Peningkatan  Kualitas  Minyak  Nilam  Melalui  Proses  Adsorpsi Menggunakan Adsorben Γ - Alumina Dengan Sistem Flow,” Chemical , vol. 2, no. 1, hlm. 84 – 95, 2016, doi: 10.20885/chemical.vol2.iss1.art10.
[12] A. Supriadin, R. Kudus, dan V. Amalia, “Efek Larvasida Hasil Fraksinasi Metanol Daun Aglaia glabrata terhadap Larva Aedes aegypti,” Jurnal Istek , vol. 10, no. 1, 2017.
[13] I. Christiana dan L. Soegianto, “Skrining Senyawa Antibakteri dari Minyak Atsiri Rimpang Temu Kunci (Boesenbergia pandurata) terhadap Staphylococcus aureus dengan Metode Bioautografi Kontak,” Journal of Pharmacy Science Practice , vol. 7, no. 1, hlm. 15 – 19.
[14] D.  Hadiarti,  “Identifikasi  Ekstrak  n -heksana  Senyawa  Buas-buas  (Premna serratifolia Linn) Menggunakan GC- MS,” br , vol. 12, no. 1, hlm. 22 – 28, Jul 2016.
[15]  J. Restrepo Osorio, A. J. Colmenares Dulcey, L. E. Mora, dan R. A. Sánchez Andica, “Extraction, Chemical Composition and Antimicrobial Activity of the Essential Oils of Pipilongo (Piper Tuberculatum)Using Supercritical Carbon Dioxide,” Revista de Ciencias , vol. 17, no. 3, hlm. 45 – 56, Okt 2014.
[16]  Y.  H.  Siddique dkk. ,  “Effect  of  Centella  asiatica  Leaf  Extract  on  the  Dietary Supplementation  in  Transgenic  Drosophila  Model  of  Parkinson’s  Disease,” Parkinson’s Disease , vol. 2014, hlm. 1 – 11, 2014.
[17] R. Saravanan, B. Pemiah, M. Narayanan, dan S. Ramalingam, “In Vitro Cytotoxic and Gas Chromatography Mass-Spectrometry Studies on Orthosiphon stamineus Benth. (leaf) againts MCF –7 Cell Lines,” Asian J Pharm Clin Res , vol. 10, no. 3, hlm.
129, Mar 2017. [18]  National  center  for  Biotechnology  Information.  (20  Oktober  2021). (2R,3R,4Ar,5S,8aS)- 2-Hydroxy-4a, 5-dimethyl-3-(prop-1-en-2-yl) octahydronaphthalen-1 (2H)-one. PubChem Compound Database. https://pubchem.ncbi.nlm.nih. gov/compound/ 75953512