Pengaruh modifikasi inokulum Feses Sebagai Pengganti Cairan Rumen Pada Teknik In Vitro : Estimasi Kecernaan NDF, ADF dan Protein Kasar Rumput lapangan

## M. Afdal dan Yurleni
Fakultas Peternakan Universitas Jambi Kampus Mandalo Darat KM 15 Jambi 36361 email: m.afdal@unja.ac.id
Intisari
Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui potensi inokulum feses yang ditambahkan gula dan urea sebagai inokulan dalam teknik in vitro dalam menentukan kecernaan Neutral Detergent Fibre (NDF), Acid Deteegent Fibre (ADF) dan protein kasar (PK) rumput lapangan. Penelitian ini menggunakan  seperangkat  alat in  vitro dua  langkah  dan  seperangkat  peralatan  untuk  analisis NDF, ADF dan PK. Inokulum rumen dan feses diambil dari sapi yang sama sebelum sapi diberi makan  pada  jam  07.00.  Feses  diperas  untuk mendapatkan  inokulum  dan  ditambahkan  dengan gula  dan  atau  urea  sesuai  dengan  perlakuan.  Perlakuan  terdiri  dari    A.  Inokulum  rumen (kontrol), B. Inokulum feses, C. Inokulum feses dan 2,5 % gula, D. Inokulum feses, 2,5 % gula dan 2,5 % urea dan E. Inokulum feses dan 2,5  % urea. Penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Lengkap (5x4) dengan lima perlakuan dan setiap perlakuan dikenakan 4 kali ulangan. Kecernaan NDF, ADF dan PK perlakuan A yang memakai inokulum rumen juga menunjukkan kecernaan yang lebih tinggi dari pada perlakuan lain, B, C, D dan E yang memakai inokulum feses dengan berbagai modifikasi penambahan gula maupun urea.
Kata kunci : rumput lapangan, in vitro, modifikasi, inokulum feses, kecernaan

## Abstract
The aim of this study was to investigate the potency of faecal inculum added with sugar and  urea  as  inoculants  in  the in  vitro technique  in  determining  the  degradability  of Neutral Detergent Fibre (NDF), Acid Deteegent Fibre (ADF) and Crude Protein (CP) of natural grass. This study used a set of tool of two-steps in vitro technique and a set of tool for the analysis of NDF, ADF and CP. The inoculums of rumen and faeces was collected from  a fistulated cow before fed at 07.00. Faecal inoculums was squeezed and added with sugar or urea according to the  treatment.  Treatments  were  Rumen  inoculums,  Faecal inoculums,  Faecal  inoculums  +  2.5% sugar,  Faecal  inoculums  +  2.5%  sugar  and  2.5%  urea  and  Faecal  inoculums  +  2.5%  urea  for treatment  A,  B,  C,  D  and  E  respectively.  The  design  of  this  experiment  was  Completely Randomized Design (5x4) with five treatments and four replications. The degradability of  NDF, ADF and CP using rumen inoculums was the highest among all treatments.
Key word : natural grass, in vitro, modification, faecal inoculum, degradability

## Pendahuluan
Inokulum  feses  adalah  cairan dari  hasil  pemerasan  feses  yang  masih segar.  Feses  yang  masih  segar berpotensi digunakan sebagai pengganti cairan  rumen  dalam  teknik in  vitro .
Mikroba yang terdapat pada feses segar
ataupun  dalam  rektum  masih  dapat dimanfaatkan sebagaimana yang
dilakukan  dalam  penggunaan  cairan rumen  dalam  teknik in vitro.    Di beberapa  negara  Eropa  dan  Amerika telah  dilakukan  usaha  pemanfaatan inokulum feses sebagai pengganti cairan
rumen  dalam  percobaan in  vitro dalam mengevaluasi  kecernaan  pakan  ternak (Afdal  dan  Toha,  2007;  Afdal,  2003; Sudirman dkk, 2007; Alwi, 2009; Utomo dkk, 2011).
Kelemahan  dari  cairan  feses adalah  rendahnya  jumlah  populasi mikroba  dibandingkan  dengan  jumlah populasi  mikroba  yang  terdapat  pada cairan rumen. Todar (1998) melaporkan bahwa jumlah populasi bakteri di kolon mencapai  sepersepuluh  jumlah  bakteri di  dalam  cairan  rumen.  Usaha  untuk meningkatkan jumlah populasi mikroba yang  terdapat  dalam  feses  telah dilakukan  oleh  Harris  (1998).  Garcia dkk (1992) melaporkan bahwa penambahan  tepung  beras  bebas  lemak dalam ransum dapat meningkat jumlah populasi  mikroba  pada  teknik  simulasi rumen.
Neutral detergent fibre (NDF), acid detergent  fibre (ADF)  dan  protein  kasar merupakan  fraksi  zat  gizi  yang signifikan  dalam  proses  pencernaan ternak ruminansia. Kecernaan dari NDF dan  ADF  merupakan  indikasi  dari kegiatan pencernaan pakan oleh mikroba  di  dalam  saluran  pencernaan ruminansia.  Sedangkan  kecernaan  dari protein  kasar  (PK)  menunjukkan indikator proses yang berkaitan dengan sintesa  protein  mikroba  pada  proses pencernaan ruminansia Berdasarkan  pemikiran  diatas penulis  tertarik  untuk  melakukan percobaan  tentang  pemakaian  cairan feses  sebagai  pengganti  cairan  rumen pada  teknik in  vitro untuk  pengujian kecernaan  NDF,  ADF  dan  PK  beberapa jenis rumput.
Tujuan  penelitian  ini  adalah untuk  mengetahui  potensi  cairan  feses yang  ditambahkan  gula  dan  urea sebagai  inokulan  dalam  teknik in  vitro bila  dibandingkan  dengan  inokulan yang  berasal  dari  cairan  rumen  dalam
menentukan  kecernaan  NDF,  ADF  dan PK rumput lapangan.
Materi dan Metoda
Materi Penelitian Sampel  rumput  lapangan  yang beragam  tanpa  memilah-milah  dan biasa diberikan kepada ternak, urea dan gula  pasir.  Bahan-bahan  kimia  untuk keperluan  pembuatan  larutan  media percobaan  seperti  larutan  McDougall dan  larutan  pepsin  HCl.  Larutan Na 2 CO 3 dan MgCl 2 .
Percobaan  ini  menggunakan satu  ekor  sapi  berpistula  rumen  untuk pengambilan  feses  dan  cairan  rumen. Untuk  percobaan in  vitro digunakan seperangkat  alat in  vitro sesuai  dengan petunjuk  Tilley  and  Terry  (1963). Seperangkat  peralatan  analisis  NDF, ADF dan PK.

## Pelaksanaan Penelitian
Sebelum penelitian dilaksa- nakan,  terlebih  dahulu  ternak  sapi berfistula  rumen  diberikan  ransum standar  terdiri  dari  80  %  rumput lapangan  dan  20  %  konsentrat  untuk adaptasi  selama  dua  minggu.  Setelah habis masa adaptasi dilakukan pengambilan  cairan  rumen  ataupun feses  untuk  pembuatan  inokulum. Pengambilan  feses  dan  cairan  rumen dilakukan  satu jam  sebelum  sapi  diberi makan pada jam 07.00

## Inokulum Cairan Rumen
Cairan  rumen  segar  didapat dengan  memeras  isi  rumen.  Cairan ditempatkan kedalam termos yang telah dipanaskan  terlebih  dahulu  dengan suhu  39 0 C.  Cairan  rumen  disaring dengan  kain  kasa  dan  ditampung kedalam wadah yang telah ditempatkan didalam water  bath pada  suhu  39 0 C. Cairan rumen dialirkan gas CO 2 sampai dilakukan inokulasi.

## Inokulum Feses
Feses  juga  diambil  dari  sapi yang sama setelah pengambilan cairan rumen  sesuai  petunjuk  Afdal  (2003). Feses  diambil  dari  rektum  dengan tangan  dan  dimasukkan  kedalam termos  yang  telah  dipanaskan  terlebih dahulu  dengan  suhu  39 0 C.  Inokulum dipersiapkan  dengan  mencampurkan feses  dan  larutan  McDougall  dengan perbandingan  500  :  500  ml.  Campuran feses dan  larutan McDougall diblender selama  20  detik.  Hasil  campuran  ini disaring dengan kain kasa dan disimpan ke dalam water bath sebagaimana cairan rumen.

## Analisis Sampel
Kandungan  NDF  dan  ADF sampel  rumput  dan  residu  dianalisis menurut  prosedur  analisis  Van  Soest. Kandungan  PK  sampel  rumput  dan residu  dianalisis  menurut  prosedur analisis proksimat.

## Rancangan Percobaan
Penelitian  ini  menggunakan Rancangan Acak Lengkap (5x4) dengan lima  perlakuan  dan  setiap  perlakuan dikenakan  4  kali  ulangan,  dimana masing-masing perlakuan sebagai
berikut:
A. Cairan rumen (kontrol)
B. Cairan feses
C. Cairan feses dan 2,5 % gula
D. Cairan  feses,  2,5  %  gula  dan  2,5  % urea
E. Cairan feses dan 2,5  % urea Data  yang  diperoleh  dari  setiap peubah  yang  diamati  dianalisis  dengan analisis ragam sesuai dengan rancangan yang  dipakai.  Bila  terdapat  perbedaan yang nyata dalam analisis ragam, maka nilai  rata-rata  dalm  perlakuan  diuji
dengan  uji  jarak  Duncan  (Steel  dan Torry, 1991)
Hasil Dan Pembahasan Kecernaan Neutral Detergent Fibre Kecernaan  NDF  rumput  lapang dapat  dilihat  pada  Tabel  1.    Hasil percobaan  menunjukkan  bahwa  rata- rata kecernaan in vitro NDF dari rumput lapangan menunjukkan perbedaan nyata  (P<0,05).  Perlakuan  A  (inokulum cairan  rumen)  menunjukkan  kecernaan NDF  yang  lebih  tinggi  dibandingkan dengan  perlakuan  lainnya,  yaitu perlakuan  inokulum  feses  dengan berbagai  modifikasi  penambahan  gula dan  urea  sebagai  sumber  energi  dan atau protein. Penambahan gula ataupun urea  kedalam  inokulum  cairan  feses juga  memberikan  efek  yang  berebeda- beda  terhadak  kecernaan  NDF  dari sampel rumput lapangan.
Perlakuan A yang menggunakan cairan  rumen  menunjukkan  kecernaan NDF  yang  lebih  tinggi  dibandingkan dengan  perlakuan  lain.  Hal  ini  diduga karena  jumlah  populasi  dari  mikroba didalam cairan rumen lebih banyak dari pada  cairan  feses  (Todar,  1998).
Sehingga
akan mempengaruhi degradasi  dari  sampel  pakan  selama inkubasi.  Gejala  ini  diduga  bahwa penambahan  gula  dan  urea  sebagai sumber  energi  dan  protein  kedalam inokulum feses berkemungkinan dimanfaatkan  oleh  mikroba  sehingga memacu  jumlah  populasi  mikroba. Peningkatan  populasi  mikroba  akan meningkatkan  kecernaan  zat  gizi  dari sampel  pakan  termasuk  NDF  selama inkubasi.  Chamberlain  dan  Choung
(1995) menyatakan bahwa keseimbangan  antara  pasokan  energi dan  nitrogen  didalam  rumen  dapat meningkatkan  efisiensi  sintesa  protein mikroba.
Kecernaan Acid Detergent Fibre
Kecernaan  ADF  dari  sampel rumput  lapangan  dapat  dilihat  pada Tabel  1.  Hasil  penelitian  menunjukkan bahwa  kecernaan  ADF  dari  masing- masing  sampel  rumput  percobaan menunjukkan gejala yang  hampir  sama dengan  kecernaan  NDF.  Perlakuan  A yang  menggunakan  inokulum  cairan rumen  memberikan  kecernaan  ADF yang  lebih  tinggi  dari  pada  perlakuan
lain  yang  menggunakan  inokulum cairan feses dengan berbagai modifikasi penambahan  gula  dan  atau  urea. Penambahan gula maupun urea kedalam  inokulum  cairan  rumen  juga memberikan efek yang berbeda terhadap  kecernaan  ADF  dari  masing- masing sampel rumput percobaan. Tingginya kecernaan ADF dari rumput- rumput percobaan dengan
Tabel 1. Kecernaan NDF, ADF dan PK dari sampel rumput lapangan*
Perlakuan NDF ADF PK ……………………  %  …………………… A 65.85 a 41.77 a 39.23a B 55.23 b 40.76 a 31.69 b C 47.08 e 29.31 b 23.62 c D 48.51 d 26.90 c 15.05 e E 53.15 c 28.60 b 17.58 d
Seperskrip dengan huruf berbeda pada kolom yang sama menunjukkan berbeda nyata (P<0,05) * angka setelah ditransformasi
menggunakan  cairan  rumen  sebagai sumber inokulum dari pada menggunakan cairan feses erat kaitannya  dengan  jumlah  populasi mikroba yang terdapat didalam inokulum.  Todar  (1998)  melaporkan bahwa  jumlah  populasi  mikroba didalam  cairan  rumen  sepuluh  kali lebih banyak dari pada jumlah populasi mikroba  yang  terdapat  didalam  feses. Ini  akan  mempengaruhi  kegiatan fermentasi  dan  degradasi  substrat didalam  tabung  fermentor,  yang  tidak lansung akan mempengaruhi kecernaan ADF  substrat  secara  keseluruhan. Disamping  itu  ada  kemungkinan perbedaan  komposisi  spesies  mikroba yang  terdapat  didalam  masing-masing inokulum  akan  memberikan    pengaruh yang  berbeda  terhadap  kecernaan substrat. Sesuai dengan laporan Wallace (2001)  yang  menyatakan  bahwa  ada perbedaan  spesies  mikroba  yang terdapat  didalam  cairan  rumen  dan cairan  sekum  dan  feses.  Walaupun
Mann dan Ørkov (1973) dan Sharpe dkk (1975)  menyatakan  adanya  persamaan spesies  mikroba  yang  terdapat  didalam rumen  dan  feses  seperti Bacteroides ruminicola,  Fusobacterium  sp,  Micrococcus sp,  Streptococci  sp dan Rumincoccus  sp . Belum  ada  informasi  yang  menyatakan jumlah terperinci dari populasi masing- masing  mikroba  tersebut  baik  yang terdapat didalam cairan rumen maupun didalam cairan sekum dan feses.

## Kecernaan Protein Kasar
Kecernaan  PK  dari  rumput lapangan  dapat  dilihat  pada  Tabel  1. Seperti  pada  kecernaan  NDF  dan  ADF perlakuan  A  yang  memakai  inokulum cairan  rumen  juga  menunjukkan kecernaan  PK  yang  lebih  tinggi  dari pada perlakuan lain, B, C, D dan E yang memakai inokulum cairan feses dengan berbagai  modifikasi  penambahan  gula maupun  urea.  Penambahan  gula maupun  urea  sebagai  sumber  energi dan  nitrogen  kedalam  inokulum  cairan
feses  juga  memberikan  efek  yang berbeda  terhadap  kecernaan  PK. Terlihat  bahwa  kecernaan  PK  dari sampel rumput lapang lebih tinggi dari pada rumput raja dari setiap perlakuan yang  sama  kecuali  untuk  perlakuan  D dan E.
Penurunan  kecernaan  PK  ini berkemungkinan  belum  seimbangnya level  penambahan  energi  dan  protein didalam  inokulum  untuk  kehidupan mikroba,  sehingga  tidak  memfasilitasi perkembangbiakan  mikroba.  Van  Soest (1994) melaporkan bahwa perkembangbiakan  mikroba  didalam rumen sangat dipengaruhi oleh tersedianya  energi  dan  protein  dalam batas-batas  keseimbangan,  didalam  hal ini  ketersediaan Adenosin  Triphosphate (ATP)  dan  amonia  untuk  kehidupan mikroba.
Modifikasi  cairan  feses  belum memperlihat  hasil  yang  diharapkan hingga  bisa  menyamai  kecernaan dengan  menggunakan  cairan  rumen. Walaupun  uji  beda  statistik  dari  rata- rata  sampel  rumput  memperlihatkan berbeda  tidak  nyata  (P>0,05)  antara perlakuan A yang menggunakan cairan rumen dan perlakuan B yang menggunakan cairan feses. Rata-ratanya masih menunjukkan
tingginya kecernaan  pada  perlakuan  A  (39,23  %)
dibandingkan  dengan  perlakuan  B (31,69  %).  Pengaruh  modifikasi  cairan feses  dengan  penambahan  gula  dan urea,  seperti  perlakuan  C,  D  dan  E,
menunjukkan
lebih rendahnya kecernaan  BK  dengan  angka  secara berurutan 18,78 %, 18,57 % dan 18,21 %.

## Kesimpulan Dan Saran Kesimpulan
Dapat  disimpulkan  dari  hasil penelitian ini bahwa :
1. Kecernaan  NDF,  ADF  dan  PK  dari semua  jenis  rumput  percobaan
lebih tinggi dengan memakai cairan rumen sebagai inokulum dari pada cairan feses.
2. Belum  optimumnya  penambahan gula  dan  urea  kedalam  inokulum feses  sehingga  ada  kemungkinan kurang  berkembangnya  mikroba didalam  inokulum  cairan  feses sehingga  menurunnya  kecernaan NDF, ADF dan PK substrat.
3. Ada  indikasi  bahwa  kecernaan NDF,  ADF  dan  PK  dipengaruhi oleh substrat yang diinkubasi.

## Saran
Perlu  penelitian  lebih  lanjut mengenai  jumlah  populasi  mikroba, jenis  spesies  mikroba  yang  terdapat didalam cairan rumen, sekum dan feses. Dari  informasi  ini  akan  dilanjutkan mempelajari  bagaimana  memodifikasi cairan  feses  sehingga  jumah  maupun spesies  dari  mikroba  dari  cairan  feses bisa menyamai cairan rumen.

## Daftra Pustaka
Afdal,  M.  2003.  Factors  affecting  the hydrolytic and fermemtative activity in ruminant faeces. Master of Phillosophy Thesis. The Faculty of Life Sciences, The University of Reading, Reading
Afdal,  M dan Toha,      Md.   2007.   The utilization  of  faecal  inoculum  of cow  to  investigate  The  in  vitro digestibility  of  Kumpeh  Grass ( Hymenachne amplexicaulis ) . Journal of the Indonesian Tropical Animal Agriculture, 32 (3). p. 201-206.
Alwi, Yun. 2009. Pemanfaatan Inokulum
Feses Sapi Dalam Uji Kecernaan In Vitro  ADF  dan  NDF  Rumput Gajah  (Pennisetum  purpureum) Jurnal Ilmiah Ilmu-ilmu Peternakan Volume XII No 2 p 72- 77
Chamberlain, D.G. dan J.J.Choung. 1995. The  important  of  the  rate  of
ruminal  fermentation  of  energy sources in diets for dairy cows. In:
Garnsworthy,  P  C  and  D.J.A  Cole (eds),  Recent  advances  in  animal nutrition -1995. Nottingham University Press, Nottingham, UK pp 3-27 Garcia,  D.C.,  Newbold,  C.J.,  Galbraith,
H. dan Topps, J.H. 1992. The effect of  including  Colombian  rice polishings  in  the  diet  on  rumen fermentation in  vitro .  Animal Production,  British  Society  of Animal Production 54: 275-280 Harris,  D.M.  1998.  The  effect  of  pre- exposing the microbial population on  gas  production  using  the pressure tranducer technique. PhD Thesis. The University of reading.
Mann,  S.O.  dan    dan  Ørkov,  E.R.  1973. The  effect  of  rumen  and  post rumen  feeding  of  carbohydrates on  the  caecal  mciroflora  of  sheep. Journal  of  Applied  Bacteriology 36: 475 – 484 Sharpe,  M.E.,  Latham,  M.J.  dan  Reiter, B.  1975.  The  immune  response  of the  host  animal  to  bacteria  in  the rumen and caecum. Digestion and Metabolism  in  the  Ruminant  (Ed) McDonald I.W. dan Warner, A.C.I. 1st  ed.  The  University  of  New
England, Sydney p 149 Sudirman, Utomo, R Bachruddin, Z  Widyobroto, B P and Suhubdy. 2007. Examination of  the  Ratios  of  Inoculums  of Buffalo Faeces and Buffer Solution on  the In  Vitro Fibrous  Feed Digestibility . Journal of the Indonesian Tropical Animal Agriculture, 32 (1). p. 6-10. Tilley,  J.M.A.  dan  Terry,  R.A.  1963.  A two stage technique for the in vitro digestion  of  forage  crops.  Journal of    the  British  Grassland  Society
18:104-111
Todar,  K.  1998.  The  normal  bacterial flora  of  animals.  Department  of Bacteriology. University of Wisconsin. Steel,  R.G.D  dan  Torry,  J.H.  1991.
Prinsip  dan  prosedur  Statistik. Suatu  Pendekatan  Biometrik.  PT Gramedia Utama Jakarta
R Utomo, M Soedjono, B P Widyobroto, .  Sudirman.    2011.  Determination of in Vitro Digestibility of Tropical Feeds  Using  Cattle  Faeces  as Rumen  Fluid  Alternative  Media Peternakan Vol 34, No 3 p 207-211 Van Soest, P.J. 1994. Nutritional Ecology
of the Ruminant. In: 2nd edn. Cornell  University  Press, Ithaca, NY p 476 Wallace, R.J. 2001. Personal communication.  Rowett  Research Institute.  Bucksburn,  Aberdeen, UK