## Original Article
DOI : 10.35311/jmpi.v10i1.486
Standarisasi  dan  Uji  Aktivitas  Antikolesterol  Ekstrak  Etanol  Daun  Labu Kuning ( Cucurbita moschata Duch.)
Rifa’atul Mahmudah * , Himaniarwati , Shintia Agrifa Ali Imran
Program Studi Farmasi, Fakultas Sains dan Teknologi, Universitas Mandala Waluya

## ABSTRAK
Kolesterol merupakan salah satu golongan lemak yang terdapat dalam tubuh. Namun, ketika  kadarnya  di  atas  normal,  maka  dapat  meningkatkan  resiko  terkena  penyakit jantung  koroner,  aterosklorosis,  pankreatitis,  diabetes  melitus,  gangguan  tiroid, penyakit hepar dan penyakit ginjal, sehingga diperlukan alternatif pengobatannya, di samping obat sintetis saat ini yang memiliki efek samping yang tidak sedikit. Penelitian ini bertujuan untuk menentukan standarisasi dan mengetahui aktivitas antikolesterol ekstrak etanol daun labu kuning (EELK) pada mencit jantan ( Mus musculus Linn.) yang diinduksi high  fat  diet (HFD)  dan  propiltiouurasil.  Standarisasi  ekstrak  meliputi parameter  spesifik  dan  non-spesifik.  Sedangkan  pengujian  aktivitas  antikolesterol dilakukan dengan mengelompokkan mencit sebanyak 25 ekor ke dalam 5 kelompok, yang teridiri atas kelompok kontrol negatif (Na.CMC 0,5%), kelompok kontrol positif (Simvastatin), kelompok EEKL dosis 50 mg/kg BB, 100 mg/kg BB, dan 200 mg/kg BB. Analisis data uji aktivitas menggunakan metode One way Analysis of Variance ( ANOVA ) dan  dilanjutkan  dengan  uji LSD .  Dari  hasil  identifikasi  metabolit  sekunder,  EEKL mengandung flavonoid, tanin, saponin dan triterpenoid. EEKL juga memenuhi standar parameter  mutu  ekstrak.  Pada  pengujian  aktivitas,  EEKL  pada  semua  dosis menunjukkann  aktivitas  sebagai  antikolesterol  dengan  rata-rata  penurunan  berturut- turut yaitu sebesar 114 mg/dL, 108 mg/dL dan 103 mg/dL, berbeda bermakna (p<0,05) dengan kelompok kontrol negatif, dan hampir serupa dengan kelompok kontrol positif. Dapat disimpulkan bahwa EEKL dapat digunakan sebagai obat antikolesterol dengan standarisasi mutu ekstrak yang telah ditetapkan.
Kata Kunci: Antikolesterol, Standarisasi, Daun Labu Kuning

## ABSTRACT
Cholesterol  is  a  type  of  fat  found  in  the  body.  However,  when  the  levels  are  above normal,  it  can  increase  the  risk  of  developing  coronary  heart  disease,  atherosclerosis, pancreatitis,  DM,  thyroid  disorders,  liver  disease,  and  kidney  disease,  so  alternative treatments are needed, apart from current synthetic drugs, which have quite a few side effects.  This  study  aims  to  determine  the  standardization  and  the  anti-cholesterol activity of the ethanol extract of pumpkin leaves (EEYPL) in male mice ( Mus musculus Linn.) induced by a high-fat diet (HFD) and propylthiouracil. Extract standardization includes  specific  and  non-specific  parameters.  To  test  the  anti-cholesterol  activity,  25 mice  were  split  into  5  groups:  a  negative  control  group  (Na.CMC  0.5%),  a  positive control  group  (Simvastatin),  and  an  EEYPL  group  that  was  given  50  mg/kg  BW,  100 mg/kg BW, or 200 mg/kg BW of the drug. Activity test data analysis used the one-way analysis of variance (ANOVA) method and continued with the LSD test. According to the results of secondary metabolite identification, EEYPL contains flavonoids, tannins, saponins,  and  triterpenoids.  EEYPL  also  complies  with  extraction  quality  parameter standards.  All  three  doses  of  EEYPL  showed  activity  as  an  anticholesterol,  lowering cholesterol  levels  by  an  average  of  114  mg/dL,  108  mg/dL,  and  103  mg/dL.  This  was significantly different (p<0.05) from the negative control group and almost the same as the  positive  control  group.  It  can  be  concluded  that  EEYPL  can  be  used  as  an  anti- cholesterol drug with a standardized extract quality that has been determined.
Keywords : Anti-Cholesterol, Standardization, Pumpkin Leaves
Sitasi: Mahmudah, R., Himaniarwati, Imran, S. A. A. (2024). Standarisasi dan Uji Aktivitas Antikolesterol Ekstrak Etanol Daun Labu Kuning (Cucurbita moschata Duch.). Jurnal Mandala Pharmacon Indonesia, 10(1), 111-121. https://doi.org/10.35311/jmpi .v10i1.486
Submitted: 04 Maret 2024 Accepted: 05 Mei 2024
Published: 26 Juni 2024
*Penulis Korespondensi: Rifa’atul Mahmudah Email:
ifamahmudah11@gmail.com
Jurnal Mandala Pharmacon Indonesia is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License

## PENDAHULUAN
Indonesia  dikenal  sebagai  negara  yang sangat  kaya  akan  keanekaragaman  hayati. Salah  satu  kekayaan  keragaman  hayati  di Indonesia  adalah  keragaman  jenis  tumbuhan liar  maupun  tumbuhan  budidaya  yang  dapat dimanfaatkan  dalam  pengembangan  ilmu pengetahuan.  Menurut  Komalasari  (2017)  di Indonesia  terdapat  30.000  jenis  tumbuhan  dan 7.000  diantaranya  merupakan  tumbuhan  yang berkhasiat untuk pengobatan. Menurut Setyowati et al., (2014) Kemampuan pengobatan  tanaman  herba  telah  banyak dibuktikan melalui berbagai penelitian.
Pengobatan  herbal  lebih  efektif  memberikan solusi  penyembuhan  dibandingkan  dengan pengobatan menggunakan bahan kimia. Keunggulan  pengobatan  herbal  terletak  pada bahan  dasarnya  yang  bersifat  alami  sehingga efek  sampingnya  dapat  ditekan  seminimal mungkin. Selain itu, tanaman obat lebih murah dan mudah didapatkan (Muaja et al., 2013).
Kolesterol adalah suatu zat lemak yang beredar di dalam darah, berwarna kekuningan dan  berupa  seperti  lilin,  diproduksi  oleh  hati dan  sangat  diperlukan  oleh  tubuh.  Kolesterol yang diproduksi oleh tubuh terdiri dari 2 jenis, yaitu kolesterol HDL ( High Density Lipoprotein ) yang biasa disebut dengan kolesterol baik dan kolesterol LDL ( Low Density Lipoprotein ) disebut dengan  kolesterol  jahat.  Kolesterol  LDL  akan menumpuk  pada  dinding  pembuluh  darah arteri koroner yang menyebabkan penyumbatan,  karena  itu  LDL  disebut  sebagai kolesterol jahat (Kowalski, 2010).
World  Health  Organization (WHO) menyatakan  bahwa  persentase  penggunaan obat  tradisional  di  negara  maju  sekitar  60%, sedangkan persentase penggunaan obat tradisional  di  negara  berkembang  sekitar  80% penduduk  (Sutrisna,  2016).  Menurut  hasil Riskesdas  bidang  biomedis  tahun  2018, proporsi kadar kolesterol total pada masyarakat di Indonesia adalah sebanyak 21,2% (Kementerian  Kesehatan  Republik  Indonesia, 2018)  terdapat  35,9%  penduduk  Indonesia memiliki  gangguan  kolesterol  total,  15,9% kadar  LDL  tinggi,  11,9%  kadar  trigliserida
tinggi,  dan  22,9%  kadar  HDL  rendah  (<40 mg/dl).
Obat golongan statin seperti atorvastatin, fluvastatin, lovastatin, pravastatin, kalsium  rosuvastatin  dan  simvastatin  banyak digunakan  sebagai  obat  penurun  kadar kolesterol. Obat golongan ini bekerja menghambat  pembentukan  kolesterol  dalam sirkulasi  darah  dan  sangat  efektif  serta bertoleransi  baik  pada  banyak  pasien  sebagai pengobatan untuk menurunkan kadar kolesterol,  tetapi  mempunyai  beberapa  efek samping  diantaranya  mual,  konstipasi,  kram abdomen, sakit kepala, nyeri otot dan gangguan hati (Purbaningrum & Orbayinah, 2016).
Dalam sebuah penelitian yang dilakukan  oleh  Hippisley-Cox  et  al.  (2008) penggunaan  statin  dalam  kondisi  tertentu dapat menyebabkan efek samping berupa gagal ginjal,  miopati,  katarak,  dan  disfungsi  hati. Dengan di temukannya beberapa efek samping tersebut  maka  sudah  saatnya  melakukan penelitian terbaru dan beralih kepada tanaman herbal  untuk  mendapatkan  obat  yang  dapat berkhasiat  baik  dalam  menurunkan  kadar kolesterol  dan  memiliki  efek  samping  yang sangat minimal kedepannya.
Labu kuning ( Cucurbita moschata Duch.) merupakan  salah  satu  tanaman  yang  dapat digunakan untuk pengobatan. Melihat kandungan  gizinya,  olahan  dari  labu  kuning sangat  baik  dikonsumsi  oleh  remaja  maupun orang  tua.  Berdasarkan  sejumlah  penelitian pula,  labu  kuning  memiliki  peranan  penting dalam  mencegah  penyakit  degeneratif  seperti diabetes melitus, aterosklerosis, jantung koroner,  tekanan  darah  tinggi,  bahkan  bisa mencegah  kanker  (Marjoni,  2016).  Daun  labu kuning memiliki kandungan senyawa flavonoid, tanin, saponin, glikosida, steroid/triterpenoid  (Boris,  2020).  salah  satu kandungan dari ekstrak daun labu kuning yang berpotensi sebagai pengobatan kolesterol yaitu kandungan  flavonoid  (Ahmad  et  al.,  2015). Menurut  Hasanah  et  al.  (2020),  kandungan  B- karoten  dan  flavonoid  yang  terdapat  dalam labu  kuning  dapat  melawan  bahaya  radikal bebas.
Pada penelitian ini menggunakan daun labu kuning tua menurut penelitian Setiawati et al. (2016) kadar klorofil akan meningkat seiring bertambahnya umur sampai daun berkembang penuh  dan  kemudian  kadar  klorofil  menurun ketika daun semakin tua. Pada saat daun sudah tua diindikasikan bahwa ada senyawa lain yang berperan  sebagai barrier utama  untuk  reaksi oksidasi yaitu flavonoid. Hal ini sesuai dengan penelitian Devy et al., (2010) yang menyatakan bahwa pada daun muda, kandungan flavonoid masih  rendah,  kemudian  semakin  meningkat dengan  semakin  tuanya  daun,  dimana fotosintesis  terjadi  secara  optimal.  Penelitian yang  dilakukan  oleh  Artha  et  al.  (2017) mendukung  penelitian  yang  telah  dilakukan sebelumnya bahwa penurunan kadar kolesterol LDL oleh ekstrak daun singkawan disebabkan oleh  aktivitas  flavanoid,  alkaloid  dan  tanin. Selain itu, tanin dapat mengendapkan mukosa protein  dipermukaan  usus  halus  sehingga mengurangi  efektivitas  penyerapan  kolesterol dan lemak (Artha et al., 2017).
Sebelumnya  telah  dilakukan  penelitian mengenai  uji  efek  perasan  buah  labu  kuning ( Cucurbita  moschata Duch. ) terhadap  kadar kolesterol  total  darah  tikus  putih  yang diinduksi dengan propiltiourasil (Ahmad et al., 2015).  Tetapi  belum  ditemukan  penelitian mengenai uji aktivitas ekstrak etanol daun labu kuning  ( Cucurbita  moschata Duch . )  sebagai antikolesterol pada mencit ( Mus musculus ) yang diinduksikan  dengan High  fat  diet dan propilthiourasil.  Dengan  hal  ini  maka  penulis ingin  melakukan  penelitian  awal  terhadap  uji aktivitas ekstrak etanol daun labu kuning, yang diinduksikan high  fat  diet (HFD)  dan  PTU. Berdasarkan  acuan  dari  peneliti  sebelumnya dengan  menggunakan  sampel  buah  labu kuning  ( Cucurbita  moschata Duch.),  maka peneliti  tertarik  menguji  aktivitas  dari  ekstrak daun  labu  kuning  ( Cucurbita  moschata Duch . ) terhadap  kadar  kolesterol  total,  maka  perlu dilakukan penelitian laboratoris yang bertujuan untuk  mengetahui  apakah  daun  labu  kuning ( Cucurbita  moschata Duch.)  dapat  menurunkan kadar kolesterol total. Sehingga hasil penelitian ini  menjadi  referensi  baru  dalam  penemuan obat herbal untuk mengatasi kolesterol.

## METODE PENELITIAN Alat
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian ini adalah rotary evaporator , timbangan analitik (ACIS), toples maserasi, tabung reaksi, hot plate , corong  ( Pirex ® ),  batang  pengaduk,  mortir  dan stamper,  timbangan  hewan,  kandang  mencit, gelas  ukur,  pipet  tetes,  kanula,  spoit  injeksi ( Onemed ® ), kertas saring, label, spidol, gunting, alat  digital  ( Nesco ® ),  sendok  tanduk,  kertas perkamen, botol minum mencit, wadah tempat makan, dan striptest kolesterol ( Nesco ® ).

## Bahan
Bahan-bahan  yang  digunakan  dalam penelitian ini adalah daun labu kuning, etanol 96%,  mencit  jantan,  simvastatin  10  mg, tissue , alkohol swabs , pakan mencit, hati ayam, tepung jagung,  tepung  kacang  hijau,  lemak  sapi, tepung ikan, kuning telur, aquadest, Na.CMC, asam klorida p.a, asam borat P, asam oksalat P, eter  P,  asam  asetat  anhidrat  p.a,  kloroform, pereaksi Dragendroff ,  pereaksi Mayer ,  larutan besi (III) klorida 10%.

## Determinasi Sampel
Determinasi  sampel  dilakukan  di laboratorium  Universitas  Mandala  Waluya dengan nomor 129/09.03.01/VII/2023.

## Pengolahan Sampel
Daun  labu  kuning  berupa  daun  labu kuning diambil sebanyak 1000 gram dan dicuci bersih  dengan  air  mengalir,  setelah  itu ditiriskan lalu dilakukan sortasi basah kemudian dilakukan perajangan untuk mempermudah  proses  pengeringan  kemudian dikeringkan  dengan  cara  diangin-anginkan tanpa sinar matahari langsung, selama 2-3 hari, setelah  kering  sampel  diserbukkan  kemudian diekstraksi (Lestari et al., 2012).

## Ekstraksi Sampel
Ekstraksi  daun  labu  kuning  ( Cucurbita moschata Duch.) dilakukan dengan menggunakan  metode  ekstraksi  cara  dingin dengan  cara  maserasi.  Maserasi  dilakukan dengan  memasukkan  750  gram  sampel  daun labu  kuning  dimasukkan  ke  dalam  wadah maserasi.  Ditambahkan  pelarut  etanol  96% sebanyak  8  liter  hingga  simplisia  terendam.
Wadah maserasi ditutup dan dibiarkan selama 3 x 24 jam sambil sesekali di aduk. Selanjutnya hasil maserasi disaring, lalu dipekatkan dengan Vacum  Rotary  Evaporator dengan  suhu  70˚C hingga  diperoleh  ekstrak  etanol  daun  labu kuning yang kental dan ditimbang (Boris, 2020).

## Skrining Fitokimia
Uji  fitokimia  pada  ekstrak  daun  labu kuning meliputi pemeriksaan alkaloid, flavonoid,  saponin,  tanin,  terpenoid,  steroid dan triterpenoid dilakukan mengikuti prosedur sebagai berikut:
1. Pemeriksaan Alkaloid
Larutan  ekstrak  uji  sebanyak  2  ml dimasukkan kedalam tabung reaksi, kemudian ditetesi  dengan  HCl  2N,  lalu  dibagi  dalam beberapa tabung reaksi. Tiap tabung ditambahkan  dengan  masing  -    masing pereaksi.  Pada  penambahan  pereaksi  mayer positif  mengandung  alkaloid  jika  membentuk endapan putih atau kuning. Pada penambahan pereaksi  Dragendrof  positif  mengandung alkaloid  jika  terbentuk  endapan  jingga ( Farmakope Indonesia Edisi IV , 1995).
2. Pemeriksaan Flavonoid
Sejumlah ekstrak dimasukkan ke dalam tabung  reaksi  kemudian  di  tambahkan  10  mL air  panas  dan  didihkan  5  menit  kemudian disaring.  Filtrat  yang  diperoleh  diambil  5  mL ditambahkan serbuk magnesium dan 1 mL HCl pekat  serta  ditambahkan  amyl  alkohol kemudian kocok kuat hingga memisah. Apabila terbentuk  warna  orange,  merah  atau  kuning, berarti positif mengandung flavonoid ( Farmakope Indonesia Edisi IV , 1995).
3. Pemeriksaan Saponin
Sejumlah  ekstrak  dimasukkan  kedalam tabung  reaksi,  ditambahkan  10  ml  air  panas, dinginkan dan kemudian kocok sekuat-kuatnya selama  10  detik.  Terbentuk  buih  yang  mantap selama tidak kurang dari 10 menit setinggi 1-10 cm.  Pada  penambahan  HCl  2N,  buih  tidak hilang ( Farmakope Indonesia Edisi IV , 1995).
4. Pemeriksaan Tanin
Sebanyak 500 mg ekstrak ditambahkan 5 ml aquadest kemudian didihkan selama 5 menit kemudian  disaring  filtratnya  ditambahkan dengan  3  tetes  FeCl  1  %  (b/v).  Hasil  positif
mengandung  tanin  jika  terbentuk  warna  biru tua  atau  hijau  kehitaman  ( Farmakope  Indonesia Edisi IV , 1995).
5. Pemeriksaan Steroid dan Triterpenoid
Ekstrak  di  larutkan  dalam  0,5  ml kloroform,  lalu  ditambahkan  dengan  0,5  ml asam asetat anhidrat. Selanjutnya, campuran ini ditetesi dengan 2 ml asam sulfat pekat melalui dinding tabung tersebut. Bila terbentuk warna hijau  kebiruan  menunjukkan  adanya  steroid. Jika  hasil  yang  diperoleh  berupa  cincin kecoklatan  atau  violet  pada  perbatasan  dua pelarut,  menunjukkan  adanya  triterpenoid ( Farmakope Indonesia Edisi IV , 1995).

## Penetapan Mutu Ekstrak
Parameter  mutu  ekstrak  dilakukan secara  spesifik  dan  non  spesifik.  Penetapan parameter  spesifik  meliputi  uji  organoleptik ekstrak  labu  kuning  meliputi  bentuk,  warna, rasa, dan bau, sedangkan penetapan parameter non-spesifik meliputi penetapan susut pengeringan  dan  bobot  jenis.  Prosedur pengerjaan parameter ini ialah sebagai berikut: 1. Parameter Spesifik
a. Kadar Sari Larut Etanol
Serbuk  simplisia  kering  ditimbang saksama sebanyak 5 g dimasukkan ke dalam lerlenmeyer  bersumbat  dan  ditambahkan 100  ml  etanol.  Erlenmeyer  yang  berisi simplisia  kemudian  disimpan  selama  6  jam dan  dikocok  setelah  6  jam,  kemudian didiamkan selama 18 jam dan disaring, filtrat sebanyak  20  ml  diuapkan  hingga  kering dalam cawan porselen yang telah dipanaskan 105˚C dan ditara, panaskan sisa pada suhu 105˚C hingga bobot tetap. Hitung kadar sari larut etanol dihitung dalam % b/b (Depkes RI, 2000).
b. Kadar Sari Larut Air
Sebanyak  1  g  ekstrak  ditimbang dalam  cawan  yang  telah  ditara.  Lalu dikeringkan pada suhu 105˚C selama ± 3 jam di  dalam  oven.  Kemudian  dimasukkan cawan  dalam  desikator  hingga  suhu  kamar dan  dicatat  bobot  tetap  yang  diperoleh (Depkes RI, 2000).
2. Parameter Non Spesifik
a. Penetapan Susut Pengeringan
Ekstrak  ditimbang  sebanyak  2  gram dan  dimasukkan  ke  dalam  kurs  porselin tertutup yang sebelumnya telah dipanaskan pada suhu 105˚C selama 30 menit dan telah ditera. Sebelum ditimbang, ekstrak diratakan  ke  dalam  kurs  porselin,  dengan menggoyangkan  kurs  hingga  membentuk lapisan setebal 5-10 mm. Masukkan ke dalam oven,  buka  tutupnya.  Dinginkan  dalam desikator. Lakukan replikasi sebanyak 3 kali kemudian hitung presentasenya (Depkes RI, 2000).
b. Bobot Jenis Piknometer ditimbang dengan volume  tertentu  dalam  keadaan  kosong. Selanjutnya piknometer diisi penuh dengan air  dan  ditimbang,  sehingga  kerapatan  air dapat  ditetapkan.  Dengan  cara  yang  sama, piknometer  dikosongkan  dan  diisi  penuh dengan ekstrak, ditimbang sehingga kerapatan  ekstrak  dapat  ditetapkan.  Bobot jenis  dilakukan  pada  suhu  kamar.  Bobot jenis ekstrak cair adalah hasil yang diperoleh dengan  membagi  bobot  ekstrak  dengan bobot  air,  dalam  piknometer  pada  suhu kamar (Depkes RI, 2000).

## Pengujian Aktivitas Antikolesterol
Prosedur  pengujian  ini  telah  mendapat persetujuan etik dengan nomor 031/KEP/UMW/VII/2023 yang dikeluarkan oleh Komite  Etik  Penelitian  Universitas  Mandala Waluya.  Mencit  jantan  sebanyak  25  ekor dengan  bobot  rata-rata  20-30  gram  dibagi  ke dalam 5 kelompok. Kelompok I sebagai kontrol negatif  diberikan  Na.CMC  0,5%,  Kelompok  II sebagai kontrol positif diberikan simvastatin 10 mg/kg BB, Kelompok III, IV, dan V merupakan kelompok  yang  diberikan  ekstrak  etanol  daun labu  kuning  dengan  dosis  berturut-turut  (50 mg/kg  BB,  100  mg/kg  BB,  dan  200  mg/kg  BB. Mencit  diadaptasikan  selama  7  hari  dan dipuasakan selama 8 jam sebelum pengukuran awal kadar kolesterol. Selama 6 hari berikutnya, mencit diberi pakan tinggi kolesterol (HFD) dan propilthiourasil (PTU) secara per oral, dan pada hari ke-7, kadar kolesterol diukur. Pada hari ke- 8  hingga  ke-15,  mencit  diberi  pakan  standar dengan perlakuan yang sesuai. Pada hari ke-24,
pengukuran  kadar  kolesterol  darah  dilakukan setelah  mencit  dipuasakan  selama  ±12  jam. Darah diambil dari pembuluh darah vena pada ekor  mencit  jantan  yang  sebelumnya  telah diusap dengan alkohol 70%. Hasil pengukuran kadar  kolesterol  darah  ditampilkan  pada monitor pada alat tes strip Nesco ® .

## Analisis Data
Data yang diperoleh kemudian dianalisis  dengan  menggunakan  perhitungan sistem  statistik  Analisis One-Way  of  Variance (ANOVA) (Program SPSS 20.0) dengan uji LSD Data dianggap signifikan jika nilai P (Sig) ˂ 0,05.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Kolesterol  adalah  senyawa  kimia  yang mengandung  lipid  atau  lemak  yang  terdapat dalam makanan dan tubuh manusia. Kolesterol HDL  dan  kolesterol  LDL  adalah  dua  jenis kolesterol  yang  ditemukan  dalam  tubuh;  yang pertama membentuk endapan dan menyumbat arteri.  Kolesterol  eksogen  yang  berasal  dari makanan  yang  kita  konsumsi,  dan  kolesterol endogen  yang  diproduksi  di  sel-sel  tubuh, khususnya  hati,  merupakan  dua  sumber kolesterol. Kolesterol membentuk ester dengan asam  lemak  dan  sedikit  larut  dalam  air  tetapi sangat  larut  dalam  lemak.  Kolesterol,  yang dihasilkan  oleh  metabolisme  hewan,  terdapat dalam  banyak  makanan  hewani,  termasuk kuning  telur,  daging,  hati,  dan  otak  (Murray, 2003).
Penelitian  ini  menggunakan  sampel daun  labu  kuning  yang  diperoleh  dari Kelurahan Abuki, Kecamatan Abuki, Kabupaten Konawe Provinsi
Sulawesi Tenggara.  Determinasi  tanaman  dilakukan untuk  memastikan  bahwa  tumbuhan  yang digunakan  pada  penelitian  ini  adalah  benar Cucurbita moschata Duch.
Daun  labu  kuning  tersebut  dicuci terlebih  dahulu  menggunakan  air  mengalir untuk memisahkan kotoran yang terdapat pada daun  labu  kuning  tersebut  hingga  bersih, kemudian  dirajang  dan  diperkecil  ukurannya guna mempercepat proses pengeringan. Serbuk daun  labu  kuning  dimaserasi  menggunakan etanol  96%  selama  3×24  jam  sambil  sesekali
diaduk.  Maserasi  merupakan  salah  satu  jenis metode ekstraksi dengan sistem tanpa pemanasan  atau  dikenal  dengan  istilah ekstraksi  dingin.  Metode  ini  digunakan  untuk senyawa yang tidak tahan panas ataupun tahan
panas.  Hasil  maserasi  kemudian  disaring setelah  itu  diuapkan  menggunakan rotary evaporator untuk  memperoleh  ekstrak  kental. Kemudian dihitung persen rendamen ekstrak.
Tabel 1. Rendemen Ekstrak Daun Labu Kuning
Pelarut Berat Simplisia Berat Ekstrak Hasil Rendemen etanol 96 % 750 g 70,6 g 9,41 %
Pada  Tabel  1  memperlihatkan  ekstrak kental  daun  labu  kuning  sebanyak  70,6  g dengan  persen  rendemen  yang  diperoleh banyak  9,41%.  Menurut  Senduk  et  al.  (2020) semakin  tinggi  rendemen  ekstrak  maka semakin  tinggi  pula  kandungan  zat  yang diinginkan  pada  bahan  bakunya.  Rendemen merupakan  perbandingan  antara  ekstrak  yang diperoleh dengan simplisa awal. Nilai
rendemen yang baik yaitu 10%, maka rendemen yang  dihasilkan  di  bawah  standar.  Besar kecilnya  hasil  rendemen  yang  diperoleh dipengaruhi  oleh  keefektifan  dalam  proses ekstraksi, Adapun faktor-faktor yang mempengaruhi  hasil  ekstraksi  adalah  waktu, penyimpanan,  suhu,  pengadukan  dan  pelarut (Usman et al., 2019).
Tabel 2. Hasil Uji Identifikasi Metabolit Sekunder Ekstrak Daun Labu Kuning ( Cucurbita moschata Duch.)
No. Pemeriksaan Senyawa Perekasi Hasil Pengamatan Hasil (+/-) 1 Alkaloid Dragendorff Tidak terbentuk endapan berwarna merah jingga atau coklat muda sampai kuning - 2 Mayer Tidak terbentuk endapan warna kuning - 3 Tannin FeCl 3 Terbentuk warna hijau kehitaman + 4 Flavonoid Mg, HCl P Terbentuk warna kuning jingga + 5 Saponin Aquadest, HCl 2N Terbentuk buih yang stabil + 6 Steroid Kloroform, asam asetat anhidrat Tidak terbentuk warna hijau kebiruan - 7 Triterpenoid Terbentuk cincin coklat ataupun violet +
Pada  Tabel  2  memperlihatkan  bahwa metobolit sekunder yang terdapat pada ekstrak daun  labu  kuning  ialah  flavanoid,  saponin, tannin dan triterpenoid. Hal ini sejalan dengan penelitian  yang  telah  dilakukan  oleh  Boris (2020)  Flavonoid  diketahui  memiliki  aktivitas antioksidan.  Flavonoid  dapat  beraksi  dengan radikal  bebas  melalui  penangkapan  langsung terhadap radikal bebas oksigen dan menginhibisi  enzim  penyebab  terbentuknya radikal  bebas  seperti  siklooksigenase  dan lipoksigenase  (Romadhoni  et  al.,  2014).  Dalam
menurunkan kadar kolesterol, senyawa antioksidan  tersebut  diduga  bekerja  dengan cara menghambat enzim HMG-CoA reduktase yang  berfungsi  sebagai  pengkatalis  dalam pembentukan  kolesterol  dan  meningkatkan aktivitas Lecithin  Cholesterol  Acyl  Transferase (LCAT) (Romadhoni et al., 2014).
Selanjutnya,  dilakukan  pemeriksaan mutu ekstrak yang meliputi parameter spesifik dan  non  spesifik.  Parameter  spesifik  meliputi identitas ekstrak (tabel 3).
Tabel 3. Hasil Parameter Spesifik Ekstrak No. Parameter EDLK 1 Nama Ekstrak Ekstrak Daun Labu Kuning 2 Nama Latin ( Cucurbita moschata ) 3 Bagian Tanaman Daun 4 Warna Cokelat kehitaman 5 Bau Berbau khas 6 Rasa Hambar 7 Bentuk Kental 8 Senyawa Larut Dalam Air 77,33% ± 3,05 9 Senyawa Larut Dalam Etanol 82,66% ± 8,08 Pemeriksaan  organoleptis  bertujuan sebagai  pengenalan  ekstrak  yang  diamati langsung dengan panca indera untuk memastikan bentuk, warna, bau dan rasa yang dihasilkan  secara  sederhana  dan  obyektif. Selanjutnya ditentukan senyawa kadar terlarut dalam  air  dan  dalam  etanol.  Penetapan  kadar senyawa  larut  dalam  air  bertujuan  untuk menunjukkan  jumlah  kandungan  senyawa yang  bersifat  polar  (memiliki  sifat  kepolaran
sama dengan air). Sedangkan penetapan kadar senyawa larut etanol dilakukan untuk menunjukkan  kandungan  senyawa-senyawa yang  bersifat  semi  polar  (memiliki  sifat kepolaran  sama  dengan  etanol)  (Darmono, 2011). Pada tabel 3 menunjukkan bahwa kadar senyawa  larut  air  ekstrak  daun  labu  kuning ( Cucurbita  moschata Duch.)  yaitu  77,33%  dan kadar senyawa larut etanol yaitu 82,66%.
Tabel 4. Hasil Pengamatan Susut Pengeringan
No. Parameter Hasil ± SD 1 Susut pengeringan 2,10% ± 1,55 2 Bobot jenis 1,00 g/mL ± 0,00
Pada  tabel  4  hasil  susut  pengeringan pada  ekstrak  daun  labu  kuning  menunjukkan nilai  sebesar  2,10%.  Sehingga  dapat  dikatakan bahwa  ekstrak  daun  labu  kuning  ( Cucurbita moschata Duch.) sudah memenuhi standar mutu yang  mengatakan  bahwa  nilai  standar  susut pengeringan yaitu < 10% (Kementrian Kesehatan  Republik  Indonesia,  2017).  Pada pengujian bobot jenis ekstrak, sampel diencerkan  terlebih  dahulu  menjadi  0,5  gram dengan aquadest sebagai pelarutnya (Darmono,  2011).  Penetapan  bobot  jenis bertujuan untuk memberikan gambaran mengenai  kandungan  kimia  yang  terlarut dalam  ekstrak.  Hasil  penelitian  menunjukkan bahwa  bobot  jenis  ekstrak  daun  labu  kuning ( Cucurbita  moschata Duch.)  adalah  1,00g/mL. Pada Penentuan parameter non-spesifik ekstrak yang  dilakukan  meliputi  susut  pengeringan bertujuan  untuk  memperlihatkan  berapa banyak senyawa yang terkandung pada ekstrak
dan hilang  atau  mudah menguap  pada proses pengeringan.  Susut  pengeringan  menjadi parameter  suatu  ekstrak  untuk  menjaga kualitas  agar  terhindar  dari  pertumbuhan jamur.
Pada  pengujian  aktivitas  antikolesterol digunakan 25 ekor mencit yang dibagi menjadi 5 kelompok perlakuan yang terdiri dari masing- masing  5  ekor  mencit.  Kelompok  yang  diberi Na.CMC  0,5%  sebagai  (kontrol  negatif), simvastatin  10  mg/kg  BB  sebagai  (kontrol positif),  kelompok  ekstrak  dosis  1  (50  mg/kg BB), ekstrak dosis 2 (100 mg/kg BB) dan ekstrak dosis  3  (200  mg/kg  BB).  Pemilihan  dosis didasarkan pada hasil orientasi uji pendahuluan  sebelumnya.  Menurut  Sihotang (2014) digunakan tiga dosis pada penelitian ini untuk  melihat  perbandingan  antara  dosis  dan juga  untuk  menghemat  biaya  pengeluaran bahan selain itu dapat juga digunakan dengan dua atau empat dosis (Febrianti, 2017).
Sebelum dilakukan perlakuan hewan uji mencit  ( Mus  musculus )  terlebih  dahulu  di adaptasikan  selama  7  hari.  Adapun  tujuan adaptasi  yaitu  agar  mencit  dapat  beradabtasi terhadap  lingkungan  baru  untuk  menghindari terjadinya  stress  pada  hewan  uji  yang  akan mempengaruhi  penelitian  (A.  Hasanah,  2017). Selanjutnya, hewan uji diukur kadar kolesterol mencit  dengan  alat  pengukur  kolesterol ( Nesco ®)  untuk  mengatahui  kadar  kolesterol awalnya. Hasil ini menunjukkan bahwa seluruh mencit  memiliki  kadar  kolesterol  darah  total yang  normal  107,20  mg/dL – 109,80  mg/dL sehingga dapat
dilakukan pengujian
selanjutnya.  Hewan  uji  kemudian  diinduksi pakan High Fat Diet (HFD) dan Propilthiouurasil (PTU). HFD memiliki berdampak pada konversi kolesterol usus oleh mikrobiota dan meningkatkan kadar kolesterol serum  darah  (Bubeck  et  al.,  2023).  Begitupun dengan PTU merupakan metode yang dianggap  efektif  dalam  membuat  model hiperkolesterolemia melalui pengaruhnya terhadap enzim metabolisme lipid (Weijia et al., 2018). Kombinasi kedua metode ini dihadapkan mampu menimbulkan efek peningkatan kadar kolesterol yang segera dapat diamati.
Tabel 5. Hasil Kadar Kolesterol Darah Rata-Rata Pada Mencit No. Kelompok Perlakuan Kadar Kolesterol Darah (mg/dL) ± SD Sebelum Perlakuan (Hari 0) Setelah Induksi (7 Hari) Sesudah Pemberian Sediaan (7 Hari) 1 Kelompok I 107,20 ± 2,38 175,20 ± 46,43 170,40 ± 44,92 2 Kelompok II 109,60 ± 5,41 182,20 ± 59,79 103,20 ± 1,43* 3 Kelompok III 106,60 ± 270 178,80 ± 44,69 114,20 ± 4,32* 4 Kelompok IV 109,60 ± 2,88 176,60 ± 32,25 108,00 ± 1,58* 5 Kelompok V 109,80 ± 3,19 177,00 ± 27,14 103,80 ± 1,92*
Keterangan: Kelompok I (Kontrol negatif yang diberikan Na.CMC 0,5%), Kelompok II (Kontrol positif yang diberikan Simvastatin 10 mg/kg BB), Kelompok III (Ekstrak etanol daun labu kuning 50 mg/kg BB), Kelompok IV (Ekstrak etanol daun labu kuning 100 mg/kg BB), Kelompok V (Ekstrak etanol daun labu kuning 200 mg/kg BB), *berbeda bermakna (p<0,05) terhadap kelompok kontrol negatif.
Dari  hasil  analisis  statistik  pada  tabel  5 menunjukkan  bahwa  profil  kadar  kolesterol sebelum  induksi  dan  kadar  kolesterol  darah setelah  induksi  mengalami  peningkatan  dan berbeda  secara  bermakna  (p<0,05).  Metode penginduksian  ini  dapat  meningkatkan  level kolesterol, triacyl glyserol , LDL serta menurunkan HDL. Peningkatan kadar kolesterol  darah  mencit  dalam  hal  ini  ialah berkisar  175,20  -  182,20  mg/dL  yang  dapat dikategorikan keadaan hiperkolesterol. Hal ini sejalan dengan penelitian yang dilakukan oleh Erni  et  al.  (2014)  yang  mengatakan  bahwa mencit  dikatakan  menderita  kolesterol  apabila kadar kolesterol darah >130 mg/dL. Salah satu penyebab  kenaikan  kadar  kolesterol  dalam darah  adalah  dengan  mengonsumsi  makanan yang mengandung kolesterol dan lemak jenuh diantaranya yang bersumber dari daging, telur, produk  biji-bijian,  dan  produk  susu  berlemak penuh (Carson et al., 2020).
Setelah  terjadi  keadaan  hiperkolesterol hewan  uji  kemudian  diberi  perlakuan  berupa
pemberian sediaan sesuai dengan kelompoknya  masing-masing  yang  ditandai dengan  kadar  kolesterol  meningkat  hinga  di atas  normal  (≥  200  mg/dL). Dari  hasil pengamatan yang diperoleh (tabel 5), pada hari ke-7  setelah  pemberian  sediaan  uji  tersebut, berdasarkan hasil analisis statistik pada tabel 5, menunjukkan  bahwa  terjadi  perbedaan  yang bermakna (p< 0,05) antara kelompok hewan uji yang  diberikan  Na.CMC  0,5%  sebagai  kontrol negatif  dengan  kelompok  kontrol  positif  dan ekstrak pada setiap dosis uji (50 mg/kg BB; 100 mg/kg  BB;  200  mg/kg  BB).  Penurunan  kadar kolesterol yang terbaik terlihat pada pemberian ekstrak  dengan  dosis  200  mg/kg  bb,  hampir serupa dengan efek yang diberikan oleh kontrol positif  (Simvastatin).  Simvastatin  bekerja dengan mengurangi pembentukan kolesterol di hati  dengan  menghambat  secara  kompetitif kerja dari enzim HMG-CoA ( Hydroxy Methylglutaryl -CoA)  reduktase  (Perkeni,  2021). Sedangkan  daun  labu  kuning  ( Cucurbita moschata Duch.) mengandung senyawa
flavonoid,  tanin  dan  saponin  yang  diduga dapat  menurunkan  kadar  kolesterol  dalam darah  melalui  berbagai  mekanisme  kerja (Khyade  &  Vaikos,  2009;  Romadhoni  et  al., 2014). Melihat potensi tersebut, perlu dilakukan uji  tambahan  lain  berupa  uji  toksisitas  dan  uji klinik  terhadap  penggunaan  EELK  sebagai antikolesterol sehingga dapat dipertanggungjawabkan penggunaannya secara luas oleh masyarakat.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  setelah dianalisis  secara  statistik  dan  pembahasan maka  dapat  disimpulkan  bahwa  ekstrak  daun labu  kuning  memiliki  aktivitas  sebagai antikolesterol pada mencit ( Mus musculus ) yang diinduksi high fat diet (HFD) dan Propilthiouurasil.  Dosis  ekstrak  daun  labu kuning  yang  paling  baik  dalam  menurunkan kadar  kolesterol  dalam  darah  adalah  dosis  3 (200 mg/kgBB).

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis  mengucapkan  terima  kasih kepada  Program  Studi  S1-Farmasi,  Fakultas Sains  dan  Teknologi,  Universitas  Mandala Waluya  yang  telah  menyediakan  fasilitas hingga penelitian ini selesai.

## DAFTAR PUSTAKA
Ahmad,  A.  R.,  Juwita,  &  Ratulangi,  S.  A.  D.
(2015).  Penetapan  Kadar  Fenolik  dan Flavonoid Total Ekstrak Metanol Buah dan Daun  Patikala  (Etlingera  elatior  (Jack) R.M.SM). Pharmaceutical  Sciences  and Research , 2 (1), 1 – 10.
https://doi.org/10.7454/psr.v2i1.3481
Artha, C., Mustika, A., & Sulistyawati, S. (2017).
Pengaruh  Ekstrak  Daun  Singawalang Terhadap  Kadar  LDL  Tikus  Putih  Jantan Hiperkolesterolemia. EJournal  Kedokteran Indonesia , 5 . https://doi.org/10.23886/ejki.5.7151.
Boris,  Y.  (2020). Uji  Efektivitas  Gastroprotektif Ekstrak  Daun  Labu  Kuning  (Cucurbita moschata) pada Tikus Putih (Rattus norvegicus) yang Diinduksi Aspirin .
Universitas Mandala Waluya.
Bubeck, A. M., Urbain, P., Horn, C., Jung, A. S., Ferrari,  L.,  Ruple,  H.  K.,  Podlesny,  D., Zorn,  S.,  Laupsa-Borge,  J.,  Jensen,  C., Lindseth,  I.,  Lied,  G.  A.,  Dierkes,  J., Mellgren,  G.,  Bertz,  H.,  Matysik,  S., Krautbauer, S., Liebisch, G., Schoett, H.-F.,
… Fricke, W. F. (2023). High -fat diet impact on intestinal cholesterol conversion by the microbiota  and    serum  cholesterol  levels.
IScience , 26 (9), 107697. https://doi.org/10.1016/j.isci.2023.107697
Carson, J. A. S., Lichtenstein, A. H., Anderson, C. A. M., Appel, L. J., Kris-Etherton, P. M., Meyer, K. A., Petersen, K., Polonsky, T., & Van  Horn,  L.  (2020).  Dietary  Cholesterol and  Cardiovascular  Risk:  A  Science Advisory  From  the  American    Heart Association. Circulation , 141 (3),  e39 – e53. https://doi.org/10.1161/CIR.0000000000000 743
Darmono,  S.  (2011). Buku  Ajar:  Farmakologi Eksperimental . Universitas Indonesia Press.
Depkes  RI.  (2000). Parameter  Standar  Umum Ekstrak Tumbuhan Obat . Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan.
Devy,  N.  F.,  Yulianti,  Y.,  & Andrini, A. (2010).
Kandungan  Flavonoid  Dan  Limonoid
Pada Berbagai Fase Pertumbuhan Tanaman  Jeruk  Kalamondin  (Citrus  Mitis Blanco)  Dan  Purut  (Citrus  Hystrix  Dc.). Jurnal Hortikultura , 20 (1).
https://doi.org/10.21082/jhort.v20n1.2010.p
%p
Erni,  Mu’nisa,  A., &  Arsal,  A.  (2014). Pengaruh Pemberian Minyak Mandar yang Ditambahkan Bubuk Daun Sukun (Arthocarpus altilis) terhadap Kadar Kolesterol pada Mencit (Mus musculus) .
https://api.semanticscholar.org/CorpusID:
192004410
Farmakope Indonesia Edisi IV . (1995). Depkes RI.
Febrianti,  A.  R.  (2017). Isolasi  Senyawa Steroid/Triterpenoid  dari  Daun  Labu  Kuning (Cucurbita moschata Duch.) .
https://repositori.usu.ac.id/handle/123456
789/12802
Hasanah,  A.  (2017).  Efek  Jus  Bawang  Bombay (Allium  Cepa  Linn.)  Terhadap  Motilitas Spermatozoa  Mencit  Yang  Diinduksi Streptozotocin (Stz). Saintika Medika , 11 (2), 92. https://doi.org/10.22219/sm.v11i2.4203
Hasanah, N., Novian, D. R., Program, S., Diii, F., Stikes, K., Persada, Anatomi, D., Biokimia, D.,  &  Hewan,  K.  (2020). Analisis  Ekstrak Etanol  Buah  Labu  Kuning  (Cucurbita Moschata D.) . 2020 – 2054.
Hippisley-Cox,  J.,  Coupland,  C.,  Vinogradova,
Y.,  Robson,  J.,  Minhas,  R.,  Sheikh,  A.,  &
Brindle, P. (2008). Predicting
cardiovascular risk in England and Wales: prospective  derivation  and    validation  of QRISK2. BMJ  (Clinical  Research  Ed.) , 336 (7659), 1475 – 1482. https://doi.org/10.1136/bmj.39609.449676.2
5
Kementerian  Kesehatan  Republik  Indonesia.
(2018). Hasil Utama RISKESDAS 2018 .
Kementrian  Kesehatan  Republik  Indonesia.
(2017). Farmakope Herbal Indonesia . Kemenkes RI. Khyade, M., & Vaikos, N. (2009). Pharmacognostical and preliminary phytochemical  studies  on  the  leaf  of Alstonia macrophylla. Journal of
Occupational  Medicine  and  Toxicology , 3 , 127 – 132.
Komalasari, W. O. J. O. (2017). Eksplorasi Jenis Dan  Pemanfaatan  Tumbuhan  Obat  Pada Masyarakat  Suku  Muna  Di  Permukiman Kota  Wuna. Majalah  Obat  Tradisional , Vol 22 , No 1 (2017) , 45 – 56.
https://jurnal.ugm.ac.id/TradMedJ/article/ view/24314/15835
Kowalski, R. E. (2010). Terapi Hipertensi Program 8  Minggu :  Menurunkan  Tekanan  Darah
Tinggi Mengurangi Risiko Serangan Jantung Dan  Stroke  Secara  Alami .  Bandung  Mizan Pustaka.
Lestari,  L.  N.,  Susilowati,  M.,  &  Martono,  Y.
(2012). Pemanfaatan  Tepung  Labu  Kuning (Cucurbita  Moschatadurch  )  Sebagai  Bahan Fortifikasi  Pada  Pembuatan  Mie . 3 (1). https://repository.uksw.edu//handle/1234 56789/3070
Marjoni, R. (2016). Dasar-dasar fitokimia untuk diploma  III  farmasi. Jakarta:  Trans  Info Media .
Muaja, A. D., Koleangan, H. S. J., & Runtuwene, M.  R.  J.  (2013).  Uji  Toksisitas  dengan Metode  BSLT  dan  Analisis  Kandungan Fitokimia Ekstrak Daun Soyogik (Saurauia bracteosa  DC)  dengan  Metode  Soxhletasi.
Jurnal MIPA , 2 (2), 115 – 118.
https://doi.org/10.35799/JM.2.2.2013.3000
Murray,  R.  K.  (2003). Biokimia  Klinik.  Edisi  4 . EGC.
Perkeni.  (2021).  Pengelolaan  Dislipidemia  Di Indonesia 2021. PB Perkeni , 1 – 2.
Purbaningrum,  L.,  &  Orbayinah,  S.  (2016).
Pengaruh  Kapsul  Pleuratus  ostreatus terhadap  Kadar  Kolesterol  pada  Lanjut Usia Hiperkolesterolemia. Mutiara Medika: Jurnal Kedokteran Dan Kesehatan; Vol 12, No 2 (2012)DO  - 10.18196/Mmjkk.V12i2.1021 . https://journal.umy.ac.id/index.php/mm/a rticle/view/1021
Romadhoni, D. A., Murwani, S., & Oktavianie, D.  A.  (2014).  Efek  Pemberian  Ekstrak  Air Daun  Kelor  (Moringa  oleifera  Lam.) Terhadap  Kadar  LDL  dan  HDL  Serum Tikus  Putih  (Rattus  norvegicus)  Strain Wistar  yang  Diberi  Diet  Aterogenik. Universitas Brawijaya.
Senduk,  T.  W.,  Montolalu,  L.  A.  D.  Y.,  & Dotulong,  V.  (2020).  The  rendement  of boiled  water  extract  of  mature  leaves  of mangrove Sonneratia alba. Jurnal Perikanan Dan
Kelautan Tropis , 11 (1), 9. https://doi.org/10.35800/jpkt.11.1.2020.286
59
Setiawati,  T.,  Saragih,  I.  A.,  Nurzaman,  M.,  & Mutaqin,  A.  Z.  (2016).  Analisis  Kadar Klorofil dan Luas Daun Lampeni (Ardisia humilis Thunberg ) pada Tingkat
Perkembangan  yang  Berbeda  di  Cagar Alam  Pangandaran. Prosiding  Seminar Nasional MIPA , 122 – 126.
Setyowati, W. A. E., Ariani, S. R. D., Ashadi, M. B.,  &  Rahmawati,  C.  P.  (2014).  Skrining fitokimia  dan  identifikasi  komponen utama ekstrak metanol kulit durian (Durio zibethinus Murr.) varietas petruk. Seminar Nasional Kimia Dan Pendidikan Kimia VI , 21 , 271 – 280.
Sihotang, H. (2014). Sistem Pakar Mendiagnosa Penyakit  Kolesterol  Pada  Remaja  Dengan Metode  Certainty  Factor  (CF)  Berbasis Web. Jurnal  Mantik  Vol  15  No  1  Juni  2014 ISSN 2088-3943 , 15 , 8.
Sutrisna, E. (2016). Herbal Medicine: Suatu Tujuan Farmakologis .  Muhammadiyah  University
Press.
https://books.google.co.id/books?id=ycpq DwAAQBAJ
Usman,  S.,  Wisdawati,  &  Hasnaeni.  (2019).
Pengaruh  Metode  Ekstraksi  Terhadap Rendemen  Dan  Kadar  Fenolik  Ekstrak Tanaman Kayu Beta-Beta ( Lunasia amara Blanco ) ( The Effect of Extraction Method on  Yield  Value  and  Phenolic  Content  of Beta-Beta. Galenika  Journal  of  Pharmacy ,
5 (2), 175 – 182.
https://doi.org/10.22487/j24428744.2019.v5. i2.13149
Weijia, H., Qiushi, Y., Jingyi, L., Yi, M., Li, L., Jie, X., Yuhang, L., Pingxiang, X., Yi, C., Ming, X.,  &  Xiaorong,  L.  (2018).  Effects  of propylthiouracil  addition  in  high  fat  diet on blood lipid, body weight and body fat of rats. Journal of Capital Medical University , 39 (3),
385. https://doi.org/10.3969/J.ISSN.1006- 7795.2018.03.014