Identifikasi  Kromatografi  Lapis  Tipis  Dan  Efektivitas  Ekstrak  Etilasetat  Daun  Talok (Muntingia  Calabura  L)  Sebagai  Analgetik  (NR.  Widyaningrum,  Sri  Saptuti,  Veronika Tria Agustina, Wella Sulistiyah)

## IDENTIFIKASI KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS DAN EFEKTIVITAS EKSTRAK ETILASETAT DAUN TALOK ( Muntingia calabura L )

## SEBAGAI ANALGETIK
Thin Layer Chromatography Identification And Aethylacetate Extract Talok Leaves (Muntingia Calabura L) Effectiveness As Analgetic
NR. Widyaningrum 1 , Sri Saptuti. 2 , Veronika Tria Agustina 3 , Wella
Sulistiyah 4 1 STIKES Mamba’ul ‘Ulum Surakarta 2 Poltekkes Bhakti Mulia Sukoharjo 3 Poltekkes Bhakti Mulia Sukoharjo
4 Poltekkes Bhakti Mulia Sukoharjo
thussannofx@gmail.com

## ABSTRAK
Latar  Belakang  : Kersen  atau  talok  merupakan  salah  satu  tanaman  yang  dapat berkhasiat  sebagai  analgetik,  antiinflamasi  dan  antipiretik.  Senyawa  kimia  yang terkandung  di  dalamnya  antara  lain  flavonoid,  polifenol,  tannin,  triterpen  dan saponin.
Tujuan  : Untuk  melakukan  identifikasi  profil  kromatografi  lapis  tipis  ekstrak etilasetat  daun  talok  (EEADT)  dan  melakukan  pengujian  efektivitasnya  sebagai analgetik melalui induksi kimia yang diberikan pada mencit jantan ras Swiss.
Metode : Penyarian daun talok dilakukan dengan pelarut etilasetat menggunakan metode  maserasi.  Maserat  kemudian  diuji  fitokimia  dilanjutkan  pengujian kromatografi  lapis  tipis  (KLT).  Selanjutnya  dilakukan  pengujian  efektivitas EEADT sebagai analgetik menggunakan metode induksi kimia. Sampel hewan uji adalah  mencit  jantan,  yang  dibagi  5  kelompok  perlakuan,  yaitu  kontrol  negatif minyak  goreng,  kontrol  positif  asetosal  dosis  65  mg/kgBB,  kelompok  1  yaitu EEADT dosis  60 mg/kgBB, kelompok  II  yaitu EEADT dosis 120 mg/kgBB dan kelompok III adalah dosis 240 mg/kgBB. Induksi kimia menggunakan asam asetat 1% secara intraperitoneal kemudian diamati geliat yang timbul pada mencit. Data yang diperoleh kemudian dihitung daya analgetiknya lalu dianalisis menggunakan SPSS melalui uji ANOVA.
Hasil  : Hasil  maserasi  berupa  ekstrak  kental  etilasetat  dengan  rendemen  sebesar 8,41%. Hasil pengujian  skrining fitokimia menunjukkan bahwa ekstrak etilasetat positif  pada  uji  pendahuluan,  kemudian  uji  lanjutan  positif  terhadap  alkaloid, antrakinon,  tannin,  saponin  dan  flavonoid.  Pada  identifikasi  KLT  menunjukkan adanya  bercak  alkaloid,  antrakinon  dan  flavonoid.  Hasil  pengujian  efektivitas analgetik  pada  EEADT  adalah  berturut-turut  asetosal,  dosis  60mg/kgBB;  120 mg/kgBB dan 240 mg/kgBB yaitu 37,74%; 6,40%; 16,42% dan 32,09%. Simpulan  : EEADT  mengandung  senyawa  alkaloid,  antrakinon  dan  flavonoid. EEADT memiliki efektivitas sebagai analgetik.
Kata kunci : Ekstrak etilasetat, daun talok, analgetik, KLT
Identifikasi  Kromatografi  Lapis  Tipis  Dan  Efektivitas  Ekstrak  Etilasetat  Daun  Talok (Muntingia  Calabura  L)  Sebagai  Analgetik  (NR.  Widyaningrum,  Sri  Saptuti,  Veronika Tria Agustina, Wella Sulistiyah)

## ABSTRACT
Background : Kersen or talok is a kind of plans which can be used for analgethic, antiinflammation and antipyretic agent. It contains some chemical substances like flavonoid, polifhenol, tannine, tritepene and saponinne.
Goal  : This  research  had  goals  for  identifying  thin  layer  chromatography  (TLC) profile  of  aethyilacetate  extract Muntingia  calabura  L  (AEMc) and  for effectiveness testing of AEMc as analgetic agent by chemical induction to Swiss rass male mice.
Methods  : Muntingia  calabura  L was  extracted  with  aethylacetat  diluents  by maceration  method.  Then  the  macerate  of  this  would  be  tested  by  phytochemist screanning then continued with TLC. Next step are effectiveness test of AEMc as alagetic  by  chemical  induction  with  male  mice  as  sample,  then  divided  into  five groups.  They  were  oil  as  negative  control,  acetosal  as  positive  control  with  65 mg/kgBB  as  its  dose  then  AEMc  with  different  of  doses  like  60  mg/kgBB;  120 mg/kgBB  and  240  mg/kgBB.  Pain  induction  used  acetate  acid  1%  v/v  then injected by intraperitoneal section on male mice then examined of pain stretching as  long  as  one  hour.  The  data  was  analyzed  with  ANOVA  test  by  SPSS Programm.
Results  : The  maceration  results  were  thick  ethylacetate  extract  with  a  yield  of 8.41%. The results of phytochemical screening tests showed that the ethylacetate extract  was  positive  in  the  preliminary  test,  then  a  positive  follow-up  tested  for alkaloids, anthrax, tannins, saponins and flavonoids. In the identification of TLC, there  were  patches  of  alkaloids,  anthrax  and  flavonoids.  The  results  of  the analgesic effectiveness test on EEADT were acetosal consecutive, a dose of 60mg / kgBB; 120 mg / kgBB and 240 mg / kgBB which were 37.74%; 6.40%; 16.42% and 32.09%.
Conclussions  : AEMc  contained  alkaloid,  antrakinon,  saponinne  and  flavonoid. AEMc had an effectiveness as analgetic
Keywords : analgetic, TLC, talok leaves, aethylacetate

## PENDAHULUAN
Talok  atau  kersen  merupakan  tanaman  yang  mudah  tumbuh  di  Indonesia tanpa  dipengaruhi  oleh  cuaca  dan  iklim.  Pada  penelitian  Widyaningrum  (a),  dkk (2016)  menyatakan  bahwa  ekstrak  etanol  daun  talok  memiliki  aktivitas  sebagai pereda  nyeri.  Hastuti  (2013)  meyatakan  bahwa  ekstrak  etanol  daun  talok memberikan  efek  diuretik  pada  tikus  putih  galur  Wistar.  Sementara  penelitian Widyaningrum (b) dkk (2016) yang lain menyatakan bahwa  pada ekstrak etanol, etilasetat  dan  kloroform  memiliki  khasiat  sebagai  antipiretik  melalui  induksi vaksin  DPT  pada  mencit  galur  Swiss.  Aktivitas  tersebut  berkaitan  dengan kandungan  senyawa  pada  daun  talok  antara  lain  flavonoid,  alkaloid,  tanin,  dan saponin (Widyaningrum (a), dkk, 2016).
Flavonoid diduga memiliki kemampuan untuk mengurangi peradangan dan penghilang  rasa  nyeri  (Verdayanti,  2009).  Nyeri  merupakan  sensasi  yang melibatkan  persepsi  seseorang  terhadap  suatu  rasa  yang  kurang  menyenangkan
Identifikasi  Kromatografi  Lapis  Tipis  Dan  Efektivitas  Ekstrak  Etilasetat  Daun  Talok (Muntingia  Calabura  L)  Sebagai  Analgetik  (NR.  Widyaningrum,  Sri  Saptuti,  Veronika Tria Agustina, Wella Sulistiyah)
akibat  adanya  kerusakan  jaringan  (Tjay  dan  Rahardja,  2007).  Hal  ini  biasanya diatasi  dengan  menggunakan  pereda  atau  penghilang  rasa  nyeri  yang  disebut analgetik.  Kandungan  flavonoid  pada  daun  talok  ini  memiliki  mekanisme menghambat  kerja  enzim  siklooksigenase  sehingga  produksi  prostaglandin  akan menurun  dan  rasa  nyeri  akan  berkurang  atau  bahkan  hilang  (Suryanto,  2012; Gunawan  dan  Mulyani,  2004).  Flavonoid  juga  berperan  dalam  penghambatan degranulasi  neutrofil  sehingga  akan  menghambat  pengeluaran  sitokin,  radikal bebas  serta  enzim  yang  berperan  dalam  proses  peradangan  (Christiana, et al, 2012).  Diduga  karena  hal  inilah  yang  menyebabkan  daun  talok  dapat  digunakan sebagai analgetik.
Penelitian  yang  dilakukan  Widyaningrum  (b),  dkk  (2016)  tentang  aktivitas antipiretik menyatakan bahwa ekstrak etilasetat memiliki potensi sebagai penurun panas rata-rata sebesar 82,79% untuk dosis 4mg/20gram BB; 80,50% untuk dosis 8mg/20gram  BB  dan  81,45%  untuk  dosis  16mg/20gram  BB.  Hal  ini  diduga karena  kandungan  flavonoidnya.  Hal  inilah  yang  mendorong  peneliti  untuk melakukan pengujian efektivitasnya sebagai analgetik, terkait dengan mekanisme dari senyawa flavonoid tersebut.
Penelitian  mengenai  aktivitas  daun  talok  sebagai  analgetik  juga  masih jarang  dilakukan  sehingga  memungkinkan  untuk  dilakukan  penelitian  dan pengembangan aktivitas ekstrak daun talok dari senyawa semipolarnya. Penelitian ini  juga  dilengkapi  dengan  pengujian  skrining  fitokimia  dan  uji  pendahuluan kualitatif  untuk  mengetahui  kandungan  senyawa  yang  terdapat  pada  ekstrak etilasetat daun talok.

## METODE PENELITIAN
Daun  talok  yang  digunakan  untuk  penelitian,  dipilih  yang  sudah  tua  dan masih  segar,  kemudian  dipotong-potong  dan  dikeringkan,  kemudian  dilakukan penyarian dengan menggunakan  pelarut etilasetat. Pelarut ini  bersifat semipolar, dengan tujuan agar senyawa-senyawa yang terkandung pada daun talok baik yang bersifat  polar  dan  nonpolar  dapat  tersari  semua,  sehingga  diharapkan  rendemen yang  diperoleh  lebih  banyak.  Setelah  perendaman  selama  lima  hari,  kemudian disaring dan diperas kemudian diuapkan sampai menjadi ekstrak kental etilasetat.
Langkah berikutnya adalah pengujian skrining fitokimia untuk mengidentifikasi  senyawa  yang  terkandung  dalam  ekstrak  etilasetat  tersebut. Terlebih  dahulu  dilakukan  uji  pendahuluan,  jika  positif  maka  dilanjutkan  uji alkaloid,  uji  antrakinon,  uji  polifenol,  uji  tannin,  uji  saponin  dan  uji  flavonoid secara  kimia.  Selanjutnya  dilakukan  identifikasi  kromatografi  lapis  tipis  (KLT) menggunakan fase diam silica gel GF 254 dan fase gerak campuran etilasetat dan benzene dengan perbandingan 9 : 11. Baku standart KLT tidak disertakan karena hasil  pelacakan  bercak  totolan  akan  disemprot  kemudian  dicocokkan  dengan literature. Larutan penyemprot yang digunakan antara lain  Lieberman Burcardat, Vanilin  Aam  Sulfat,  FeCl 3 ,  KOH  etanolis  dan  Uap  Amonia  kemudian penampakannya  diamati  pada  detektor  UV  254  nm  dan  366  nm.  Jarak  elusinya diukur (Rf) kemudian dicocokkan dengan literature yang diacu untuk menentukan jenis senyawa yang dikandungnya.
Identifikasi  Kromatografi  Lapis  Tipis  Dan  Efektivitas  Ekstrak  Etilasetat  Daun  Talok (Muntingia  Calabura  L)  Sebagai  Analgetik  (NR.  Widyaningrum,  Sri  Saptuti,  Veronika Tria Agustina, Wella Sulistiyah)
Setelah  pengujian  fitokimia,  dilanjutkan  pengujian  efektivitas  ektrak etilasetat  daun  talok  (EEADT)  menggunakan  mencit  jantan  Ras  Swiss.  Sampel yang digunakan adalah  mencit jantan sejumlah 25  – 30 ekor dengan berat  badan berkisar  antara  20  –  30  gram,  usia  2.5  –  4  minggu.  Induksi  nyeri  dengan menggunakan  asam  asetat  1%  v/v  secara  intraperitoneal  disesuaikan  waktu pemberiannya  sesuai  dengan  orientasi  yang  dilakukan  oleh  Widyaningrum  (a), dkk (2016). Timbulnya nyeri pada mencit ditandai dengan munculnya geliat yang cirinya  adalah  kaki  ditarik  ke  belakang,  dengan  perut  mengencang  (Pudjiastuti, 2000).
Pengujian  efektivitas  EEADT  dilakukan  dengan  menggunakan  rancangan uji  acak  lengkap  pola  searah,  Sampel  mencit  dibagi  menjadi  lima  kelompok perlakuan, kelompok I adalah kontrol negatih yaitu dengan menggunakan minyak goreng  diberikan  secara  oral  sebanyak  0,5ml,  kelompok  II  adalah  kontrol  positif menggunakan aspirin dengan dosis sebesar 65 mg/kgBB diberikan secara peroral, kemudian kelompok III adalah kelompok perlakuan EEADT dengan dosis sebesar 60  mg/kgBB,  kelompok  IV  adalah  EEADT  dengan  dosis  sebesar  120  mg/kgBB dan  terakhir  adalah  kelompok  V  yaitu  EEADT  dengan  dosis  sebesar  240 mg/kgBB. Setelah beberapa perlakuan di atas, kemudian mencit diinduksi dengan asam  asetat  1%  v/v  secara  intraperitoneal,  kemudian  diamati  jumlag  geliat  yang timbul selama 60 menit. Pengamatan dilakukan tiap 5 menit selama 1 jam.
Jumlah  geliat  yang  muncul  akan  digunakan  untuk  menghitung  persentase daya analgetik dengan rumus :
Persen Daya Analgetik =
Data tersebut diatas kemudian dianalisis menggunakan uji ANOVA dengan SPSS pada  tingkat  kepercayaan  95%.  Hal  ini  dilakukan  untuk  mengetahui  perbedaan efektivitas  antar  kelompok  perlakuan,  juga  untuk  mengetahui  besar  efektivitas analgetik dari masing-masing ekstrak dengan pembanding aspirin.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Penyarian  menggunakan  metode  maserasi  diperoleh  rendemen  ekstrak kental  etilasetat  daun  talon  sebesar  8,41%  b/b,  dengan  berat  simplisia  awal sebesar 100 gram. Hasil organoleptis dari sediaan ekstrak kental etilasetat adalah berupa ekstrak kental yang sedikit lengket, dengan warna hijau kehitaman, dengan bau khas daun talok serta memiliki rasa yang pahit. Hasil skrining fitokimia yang terlebih dahulu dilakukan uji pendahuluan, diperoleh hasil positif dimana hal inji menandakan  bahwa  EEADT  mengandung  senyawa  yang  memiliki  gugus kromofor.  Kemudian  dilakukan  pengujian  lanjutan  untuk  mengetahui  dan mengidentifikasi  masing-masing  senyawa  yang  terkandung  didalamnya menggunakan  reaksi  kimia,  diantaranya  adalah  uji  alkaloid  baik  mayer  dan dragendroff, kemudian uji antrakinon, uji polifenol, tannin, saponin dan flavonoid.
Skrining  fitokima  dan  KLT  digunakan  untuk  mengidentifikasi  secara kualitatif  kandungan  senyawa  yang  terdapat  pada  EEADT.  Hasil  pengujian tersebut  menghasilkan  positif  pada  uji  alkaloid  menggunakan  dragendroff, antrakinon,  negatif  pada  senyawa  polifenol,  positif  pada  tannin,  saponin  dan
flavonoid.  Kemudian  dilanjutkan  pengujian  bercak  totolan  menggunakan  KLT lalu diamati jarak elusidasinya. Hasilnya adalah sebagai berikut :

## Tabel 1. Hasil KLT EEADT
Pereaksi Warna hRf Sebelum Setelah 254 366 254 366 Liebermann burchard - Jingga, hijau - Jingga, hijau 72,5; 91,25 Vanillin : H 2 SO 4 - jingga Jingga Jingga 81,25; 93,75 FeCl 3 Jingga Jingga Jingga Jingga 72,5; 96,25 KOH etanolis Kuning   Jingga Kuning Jingga, coklat 91,25 Uap amonia - Jingga - Kuning 91,25
Deteksi  bercak  totolan  dilengkapi  dengan  dilakukan  penyemprotan  dengan reaksi-reaksi  yang  spesifik  untuk  beberapa  senyawa  pada  tanaman.  Pereaksi semprot  Lieberman  Buchardad  akan  positif  jika  terdapat  senyawa  saponin  yang ditandai  dengan  muncul  warna  kuning,  jingga  dan  hijau  pada  pengamatan  UV. Positif  alkaloid  akan  dapat  dilihat  menggunakan  pereaksi  semprot  vanillin  asam sulfat dengan menunjukkan warna hijau, biru atau jingga pada UV 254nm dan UV 366nm. Jika terdapat senyawa fenolik, maka akan menunjukkan warna jingga atau berbagai  warna  (Wagner,  1987)  mulai  dari  hijau,  merah,  ungu,  biru  atau  hitam yang berlatarbelakang kuning.

## Tabel 2. Warna standar penampakan bercak berdasarkan literatur
Pereaksi Warna Jenis senyawa Libermann burchard Hijau, kuning, merah, biru Saponin Vanillin : asam sulfat Berbagai warna Alkaloid FeCl 3 Berbagai warna, biru-hitam Fenol, tannin KOH etanolis Merah Antrakinon UV 220 nm-290 nm Kuning Antrakinon Uap amonia Kuning, hijau Flavonoid
Sumber : Metode fitokimia (Harborne, J.B., 1987). Petunjuk praktikum fitokimia (Maryati dan Sri wahyuni, 2007). (Markham, 1988). (Parmadi, 2000).
Penampakan  bercak  totolan  pada  pengamatan  UV  254nm  dan  UV  366nm adalah  sebagai  berikut  :  Ekstrak  etil  asetat  daun  kersen  (EEADT)  dapat  seperti pada  gambar  4.3  positif  saponin  dengan  menunjukkan  warna  hijau  dengan  hRf 72,5 dan 91,25. Pereaksi semprot yang digunakan adalah Lieberman Buchardad.
254nm 366nm Visibel
Identifikasi  Kromatografi  Lapis  Tipis  Dan  Efektivitas  Ekstrak  Etilasetat  Daun  Talok (Muntingia  Calabura  L)  Sebagai  Analgetik  (NR.  Widyaningrum,  Sri  Saptuti,  Veronika Tria Agustina, Wella Sulistiyah)
Gambar 1. EEADT pada sinar UV 254nm, 366nm dan setelah disemprot pereaksi

## Lieberman Buchardad
Pada  pereaksi  semprot  vanillin  asam  sulfat  pekat  positif  menunjukkan alkaloid  dengan  timbul  warna  hijau,  biru  dan  jingga.  Ekstrak  etil  asetat menampakkan warna jingga dengan hRf 81,25 dan 93,75. Bercak tersebut diduga sebagai  bercak  alkaloid  setelah  direaksikan  dengan  pereaksi  vanillin  asam  sulfat pk.
254nm 366nm Visibel
Gambar 2. EEADT pada sinar UV 254nm, 366nm dan setelah disemprot vanillin asam sulfat pekat
Pereaksi  FeCl 3 akan  positif  jika  terdapat  senyawa  fenolik  dengan  timbul warna  jingga  atau  berbagai  warna.  Untuk  memperkuat  dan  melengkapi pemeriksaan jenis senyawa fenolik  yang terkandung di  dalam EEADT dilakukan juga  penyemprotan  menggunakan  KOH  etanolis  dan  uap  ammonia.  Hal  ini dilakukan karena adanya uap ammonia akan memperkuat warna fluorosensi pada pengamatan  UV  tersebut  (Harborne,  1987).  Berdasarkan  gambar  3,  EEADT menimbulkan bercak warna jingga dengan hRf 72,5 dan 96,25.
254nm  366nm  Visibel
Identifikasi  Kromatografi  Lapis  Tipis  Dan  Efektivitas  Ekstrak  Etilasetat  Daun  Talok (Muntingia  Calabura  L)  Sebagai  Analgetik  (NR.  Widyaningrum,  Sri  Saptuti,  Veronika Tria Agustina, Wella Sulistiyah)
Gambar 3. EEADT pada sinar UV 254nm, 366nm dan setelah disemprot FeCl 3 Pengujian  antrakinon  akan  positif  pada  deteksi  peraksi  semprot  KOH etanolis  dengan  warna  kuning  pada  sinar  UV  antara  220  –  290  nm  (Harborne, 1987). Pada ekstrak etil asetat menampakkan bercak berwarna kuning dilihat pada sinar UV 254 nm dengan hRf 91,25. Bercak yang ditimbulkan bersifat non polar karena cenderung terikat dengan fase gerak.

## 254nm  366nm  Visibel
Gambar 4. EEADT pada sinar UV 254nm, 366nm dan setelah disemprot KOH etanolis
Pengujian flavonoid menggunakan deteksi uap ammonia yang menampakkan  warna  kuning  kehijauan.  Bercak  warna  kuning  yang  dihasilkan karena  flavonoid  mempunyai  gugus  kromofor  dan  auksokrom.  Gugus  kromofor yaitu  gugus  yang  mempunyai  ikatan  rangkap  terkonjugasi.  Ikatan  rangkap terkonjugasi  ialah  ikatan  rangkapnya  selang-seling  sehingga  dapat  memadamkan fluoresensi silica gel dan gugus auksokrom ialah gugus fungsi. Ekstrak etil asetat menimbulkan  1  bercak  setelah  diuapi  dengan  amonia.  Hasil  positif  ditunjukkan dengan adanya bercak berwarna kuning (Markham, 1988). Berdasarkan gambar 5 dapat  diketahui  nilai  hRf  bercak  sampel  ekstrak  etil  asetat  daun  kersen  sebesar 91,25 bercak yang ditimbulkan bersifat non polar karena cenderung terikat dengan fase gerak.
254nm  366nm    Visibel
Identifikasi  Kromatografi  Lapis  Tipis  Dan  Efektivitas  Ekstrak  Etilasetat  Daun  Talok (Muntingia  Calabura  L)  Sebagai  Analgetik  (NR.  Widyaningrum,  Sri  Saptuti,  Veronika Tria Agustina, Wella Sulistiyah)
Gambar4.14 ekstrak etil asetat  pada sinar UV 254nm, 366nm dan setelah diuapi amonia
Pengujian efektivitas analgetik dimulai dengan melakukan orientasi terlebih dahulu.  Uji  aktivitas  analgetik  EEADT  dengan  cara  diujikan  pada  hewan  uji mencit  dengan  induksi  nyeri  menggunakan  asam  asetat  1%  v/v  secara intraperitonial  setelah  sebelumnya  hewan  uji    diberi  perlakuan.  Percobaan analgetik  meliputi  kontrol  negatif  menggunakan  minyak,  kontrol  positif menggunakan  asetosal,  dan  ekstrak  etil  asetat  daun  kersen  dengan  dosis  60 mg/kbBB, 120 mg/kgBB, dan 240 mg/kgBB. Pengamatan dilakukan selama 1 jam dengan  interval  pengamatan  setiap  5  menit  sekali.  Pengamatan  berdasarkan jumlah geliat,  karena  geliat merupakan reaksi  nyeri  yang dialami oleh hewan uji mencit.
Mencit putih jantan digunakan pada penelitian ini, mencit jantan digunakan dengan  alasan  kondisi  biologis  yang  lebih  stabil  dibanding  mencit  betina  yang kondisi  bologisnya  dipengaruhi  oleh  masa  siklus  esterus.  Selain  keseragaman jenis  kelamin,  juga  digunakan  keseragaman  berat  badan  (20-30  g)  dan  umur  (35 hari). Hal  ini bertujuan  untuk  memperkecil variabilitas biologis  antara hewan uji yang  digunakan,  sehingga  dapat  memberikan  respon  yang  relatif  lebih  seragam terhadap  rangsangan  kimia  yang  digunakan  pada  penelitian  ini.  Pengelompokan hewan uji dilakukan secara acak, maksudnya adalah setiap anggota dari  masing- masing kelompok memiliki kesempatan yang sama untuk dijadikan sampel.
Proses  untuk  mengetahui  daya  analgetik  ekstrak  etil  asetat  daun  kersen terhadap hewan uji mencit dilakukan dengan membagi hewan uji menjadi masing- masing  untuk  uji  daya  analgetik  adalah  lima  kelompok,  yang  masing-masing kelompok  terdiri  dari  empat  ekor  mencit.  Variasi  dosis  yang  digunakan  adalah dosis 60 mg/kgBB, 120 mg/kgBB, dan 240 mg/kgBB. Persen daya analgetik dari variasi  dosis  tersebut  akan  dibandingkan  dengan  persen  daya  analgetik  kontrol positif  yaitu asetosal  dengan dosis  65 mg/kgBB mencit dan kontrol pelarut  yaitu minyak. Pengamatan dilakukan berdasarkan jumlah geliat yang merupakan reaksi nyeri yang diperlihatkan oleh hewan uji.
Identifikasi  Kromatografi  Lapis  Tipis  Dan  Efektivitas  Ekstrak  Etilasetat  Daun  Talok (Muntingia  Calabura  L)  Sebagai  Analgetik  (NR.  Widyaningrum,  Sri  Saptuti,  Veronika Tria Agustina, Wella Sulistiyah)
Gambar 6. Grafik Hubungan antara Waktu Percobaan dengan Geliat pada  Hewan Uji Mencit pada analgetik
Dari  grafik  diatas  dapat  dilihat  geliat  paling  banyak  terjadi  pada  kontrol negatif (minyak) dan geliat paling sedikit pada kontrol positif (asetosal) dan yang paling mendekati adalah pada ekstrak etil asetat daun kersen dosis 240 mg/kgBB. Hal  ini  dikarenakan  minyak  tidak  memiliki  efek  analgetik  sedangkan  asetosal merupakan  obat  kimia  yang  memiliki  efek    analgetik  yang  kuat.  Minyak  yang digunakan  dalam  percobaan  ini  adalah  minyak  goreng  yang  bersifat  netral sehingga  tidak  menimbulkan  efek  samping  dan  tidak  merusak  zat  aktif  yang terkandung  dalam  daun  kersen.  Daun  kersen  dipilih  karena  sebagai  obat tradisional diyakini memiliki daya analgetik.
Gambar 7. Diagram Hubungan antara jenis perlakuan dengan rata-rata jumlah Geliat pada

## analgetik
Dari diagram di  atas terlihat bahwa percobaan pada mencit dengan kontrol negatif  (minyak)  memiliki  rata-rata  jumlah  geliat  yang  paling  besar  dibanding dengan  percobaan  pada  mencit  dengan  esktrak  etil  asetat  daun  kersen  dosis  60 mg/kgBB, 120 mg/kgBB, 240 mg/kgBB, dan juga kontrol positif (asetosal). Pada percobaan ekstrak etil asetat daun kersen dosis 60 mg/kgBB, 120 mg/kgBB, 240 mg/kgBB, rata-rata jumlah geliat secara berturut-turut adalah 95,5 : 85,25 : 69,25. Hasil  tersebut  maka  dapat  dilihat  bahwa  pola  rata-rata  jumlah  geliat  menurun seiring  dengan  peningkatan  dosis.  Hal  ini  disebabkan  semakin  tinggi  dosis  yang diberikan,  maka  jumlah  geliat  sebagai  tanda  nyeri  juga  semakin  menurun.  Pada grafik  di  atas  terlihat  bahwa  kontrol  negatif  (minyak)  memiliki  daya  geliat  yang paling tinggi. Hal ini sangat relevan karena minyak tidak memiliki efek analgetik, dan ketika hewan uji merasakan nyeri maka geliat akan semakin bertambah tinggi.

## Jenis Perlakuan
Identifikasi  Kromatografi  Lapis  Tipis  Dan  Efektivitas  Ekstrak  Etilasetat  Daun  Talok (Muntingia  Calabura  L)  Sebagai  Analgetik  (NR.  Widyaningrum,  Sri  Saptuti,  Veronika Tria Agustina, Wella Sulistiyah)
Gambar 8. Diagram Hubungan antara jenis perlakuan dengan rata-rata persen daya analgetik
Dari  diagram  diatas  dapat  dilihat  bahwa  rata  rata  jumlah  persen  daya analgetik untuk kontrol positif (asetosal) diperoleh hasil sebesar 37,74 % dimana hasil tersebut lebih besar dibandingkan dosis ekstrak etil asetat daun kersen pada dosis  60  mg/kgBB  sebesar  6,40  %,  dosis  120  mg/kgBB  sebesar  16,42  %,  dan dosis 240 mg/kgBB sebesar 32,42%. Dari hasil tersebut dapat dilihat bahwa pola rata-rata persen daya analgetik meningkat seiring dengan peningkatan dosis.

## SIMPULAN DAN SARAN

## Simpulan
Pada  identifikasi  kromatografi  lapis  tipis  (KLT)  yang  dilengkapi  dengan disemprot  menggunakan  pereaksi  semprot  diperoleh  hasil  bahwa  EEADT menunjukkan positif untuk senyawa  alkaloid,  antrakinon, saponin  dan flavonoid. Namun pada skrining fitokimia uji polifenol menunjukkan hasil negatif.
Berdasarkan  hasil  pengujian  efektivitas  analgetik  EEADT  diperoleh  hasil sebagai  berikut  berturut  pada  dosis  60  mg/kgBB;  120  mg/kgBB  dan  240 mg/kgBB  adalah  6,40%;  16,42%  dan  32,09%  dengan  persentase  efektivitas analgetik kontrol positif dalam hal ini asetosal sebesar 37,74%.

## Saran
Dilakukan penelitian lanjutan untuk ekstrak nonpolar dari ekstrak daun talok untuk  aktivitas  yang  sama  yaitu  pengujian  analgetik.  Perlu  dilakukan  penelitian lebih lanjutan mengenai dosis letal dan dosis toksik utuk analgetik
Pemisahan  bercak  pada  saat  identifikasi  KLT  tidak  sempurna,  masih terdapat  tumpang  tindih,  maka  bisa  dilakukan  penelitian  menggunakan  metode yang lebih teliti seperti HPLC atau dilakukan fraksinasi senyawa semipolar untuk senyawa yang lebih spesifik.
Identifikasi  Kromatografi  Lapis  Tipis  Dan  Efektivitas  Ekstrak  Etilasetat  Daun  Talok (Muntingia  Calabura  L)  Sebagai  Analgetik  (NR.  Widyaningrum,  Sri  Saptuti,  Veronika Tria Agustina, Wella Sulistiyah)

## DAFTAR PUSTAKA
Christiana, I., Evacuasiany, E., Hidayat, M., 2012, The Analgetic Effect of Kayu Rapat Bark Infusion ( Parameria laevigata (Juss) Moldenke) On Male Mice Treated With Thermal Induction, Journal of Medical Planta , Vol. 2 No. 1 Gunawan  ,  D.,  dan  Mulyani,  S.,  2004, Ilmu  Obat  Alam  (Farmakognoi) ,  Penebar Swadaya; Jakarta
Harborne, J.B.1987. Metode Fitokimia II. Bandung: ITB.
Hastuti,  A.,  Susilo,  J.,  dan  Sunnah,  I.,  2013,  Uji  Efek  Diuretik  Ekstrak  Etanol Daun Kersen ( Muntingia calabura L) terhadap Kadar Natrium dan Kalium pada Urin Tikus Putih Jantan galur Wistar, Skripsi , Program Studi Farmasi; Stikes Ngudi Waluyo; Ungaran
Maryati  dan  Wahyuni,  Sri.  2007. Petunjuk  Praktikum  Fitoki mia.  Surakarta: Laboratorium Fitokimia Fakultas Farmasi UMS.
Parmadi, A. 2000. Skrining Fitokimia Terhadap Tanaman Yang Mempunyai Daya Sitotoksik Terbesar  Terhadap  Artemia  Salina  (leech)  Dari  Beberapa Tanaman  Suku  Compositae .  Skripsi.  Fakultas  Farmasi  Universitas Surabaya.
Pudjiastuti,  B.,  Dzulkarnain,  dan  B.  Nuratmi.  2000.  Uji  analgetik  infus  rimpang lempuyang  pahit  ( Zingiber  amaricans  BL .)  pada  mencit  putih.  Cermin Dunia Kedokteran 129: 39-41.
Tjay,  TH., dan Rahardja, K., 2007, Obat-obat  Penting Edisi VI , PT. Elex Media Komputindo Kelompok Gramedia; Jakarta
Verdayanti,  TE.,  2009,  Uji  Efektivitas  Jus  Buah  Kersen  ( Muntingia  calabura  L ) terhadap  Penurunan  Kadar  Glukosa  darah  pada  Tikus  Putih  ( Rattus norvegicus ), Skripsi, Fakultas  Keguruan  dan  Ilmu  Pendidikan  UMM; Malang
Wagner,  H,  Bladt,  S.,  Zgainski  EM.  1984. Plant  Drug  Analysis .  Berlin- heidelberg-New  York:  Springer  Verlag  Page  8,  9,  54,  55,  94,  153,  196, 226, 227.
Widyaningrum,  N.  R.  (a),  Parmadi,  A.,  &  Wicaksono,  W.  (2016).  Profil Kromatografi  Lapis  Tipis  Ekstrak  Etanol  Daun  Talok  (Muntingia  calabura L)  Beserta  Petensinya  Sebagai  Pereda  Nyeri. Indonesian  Journal  On Medical Science , 3 (1), 105-114. Widyaningrum,  NR.  (b),  Parmadi,  A.,  Candra,  Agus,  F.,  Budiyanto,  E. 2016. Aktivitas Ekstrak Etanol, Etilasetat dan Kloroform Talok ( Muntingia calabura L) sebagai Agen Penurun Panas melalui Induksi Vaksin DPT pada Mencit Ras Swiss. Prosiding . Molecules, Vol 20