Journal Syifa Sciences and Clinical Research Volume 3 Nomor 2, September 2021
Journal Homepage: http://ejurnal.ung.ac.id/index.php/jsscr , E-ISSN: 2656-9612 P-ISSN:2656-8187

## Analisis Kadar Senyawa Rhodamin B Pada Sediaan Lipstik Menggunakan Metode Spektrofotometri UV-Vis
Faramita Hiola 1* , Mahdalena Sy Pakaya 1 ,Juliyanty Akuba 1
1 Jurusan Farmasi,Fakultas Olahraga Dan Kesehatan , Universitas Negeri Gorontalo, Jl. Jenderal Sudirman No. 06 Kota Gorontalo 96128, Indonesia
* Penulis Korespondensi. Email: faramita@ung.ac.id

## ABSTRAK
Rhodamin  B  termasuk  senyawa  pewarna  sintetis  dimana  dipakai  dalam  senyawa  pewarna kertas,  tekstil  maupun  tinta  yang  mengakibatkan  iritasi  dalam  saluran  napas  serta  ketika dipakai bisa mengakibatkan kanker dengan rusaknya hati pada tubuh. Tujuan dari penelitian ini yaitu untuk mengetahui berapa kadar rhodamin b yang terkandung dalam lipstik. Dalam penelitian  ini  menggunakan  pengujian  secara  kualitatif  dan  kuantitatif.  Pengujian  secara kualitatif yaitu dengan metode Kromatografi Lapis Tipis menggunakan eluen Etil asetat : n- butanol  :  amoniak  dengan  perbandingan  terbaik  (20:55:25)  dan  secara  kuantitatif menggunakan metode Spektrofotometri UV-Vis. Hasil penelitian menunjukkan bahwa hasil uji  kuantitatif  dengan  menggunakan  metode  Kromatografi  Lapis  Tipis  (KLT),  terdapat  3 sampel lipstik yang  mengandung rhodamin B. Uji analisis kuantitatif senyawa rhodamin B dengan  menggunakan  spektrofotometri  UV-Vis  memiliki  kadar  senyawa  rhodamin  B    6,62 µg/mL dengan presentasi kadar 0,662%.

## Kata Kunci:
Rhodamin B, lipstik, spektrofotometri UV-Vis Diterima:
11-08-2021
Disetujui:
16-08-2021 Online: 25-08-2021

## ABSTRACT
Rhodamine  B  is  a  syntheticdye  use  in  paper,  textile,  and  ink  dyes.  This  compound  can  irritate  the respiratory tract and cause cancer with liver damage. The present study aimed to find out the levels of rhodamine  B  contained  in  lipstick.  It  relied  on  qualitative  and  quantitative  testing.  The  qualitative testing applied the thin-layer chromatography method with ethyl acetat eluent: n-buthanol : ammonia with  the  best  ratio  of  20:55:25.  Meanwhile  quantitative  testing  used  the  UV-Vis  Specrophotometry method. It was shown from the quantitative test using thin-layer chromatography that three samples of lipstick  contained  rhodamine  B.  Further,  the  quantitative  test  with  the  UV-Vis  spectrophotometry indicated that the levels of rhodamine B were measured at 6.62 µg/mL with 0.662%
Keywords: Rhodamine B, lipstick, spectrophotometry UV-Vis
Received: 2021-08-11 Accepted: 2021-08-16 Online: 2021-08-25

## 1. Pendahuluan
Pewarnaan bibir termasuk sediaan kosmetika yang dipakai dalam memberi warna pada bibir dalam sentuhan artistika sampai bisa menambahkan estetika pada riasan wajah. Sediaan pewarnaan bibir ada dalam beberapa macam bentuk, misalnya larutan, krayone, dengan krim. Pewarnaan bibir modern yang disukai ialah jenis sediaan pewarnaan bibir yang bila terlekatkan dalam bibir bisa menghasilkan selaput  mengering. Pewarnaan bibir krayone sangat diketahui dalam penyebutannya lipstik [1].
Salah  satu  jenis  kosmetik  yang  pada  pembuatannya  cukup  sering  ditemukan penggunaan  pewarna  tekstil  berupa  senyawa  Rhodamin  B  adalah  lipstik.  Penyalahgunaan Rhodamin B pada lipstik digunakan untuk memberikan warna mencolak pada lipstik dan untuk meminimalisir  biaya  produksi  pada  lipstik.Jenis  lipstik  yang  sering  dijumpai  menggunakan senyawa  Rhodamin  B  yaitu,  yang  diproduksi  dan  di  jual  di  pasaran  serta  yang  belum  lulus pengujian klinis melalui Badan Pengawasan Obat dengan Makanan [1].
Rhodamin B termasuk senyawa pewarna sintetis yang dipakai sebagai senyawa pewarna kertas,  tekstile  maupun  tinta  yang  mengakibatkan  iritasi  dalam  saluran  napas  serta  ketika dipakai bisa mengakibatkan kanker dengan rusaknya hati pada tubuh. Pemakaian Rhodamin B dalam waktu terlama, bisa adanya bahaya akut  bila  ditelan serta  menyebabkan muntah  yang memunculkan iritasi dalam saluran cerna serta memunculkan keluhan keracunan [15].
Pada penelitian sebelumnya tentang Pengidentifikasian Senyawa Warna Rhodamine B dalam Lipstik yang tersebar pada Pasaran Kota Palu oleh [10] dengan sampel yang didapatkan seperti produk lipstik yang beredar pada pasaran dengan hasil kesemua sampel yang ada tidak terdapat senyawa rhodamin B.
Sesuai  dengan  penguraian  tersebut  sehingga  pengamat  melaksanakan  pengamatan mengenai analisa kadar zat Rhodamine B dalam sediaan lipstik yang ada pada pasaran Bongo 2 Kecamatan Wonosari menggunakan metode Spektrofotometri UV-Vis.

## 2.  Metode
Penelitian  ini  menggunakan  desain  eksperimental  yang  dilakukan  di  Laboratorium Kimia    Analisis,  Jurusan  Farmasi,  Fakultas  Olahraga  dan  Kesehatan,  Universitas Negeri  Gorontalo serta di lanjutkan di Laboratorium Badan Pengawasan Obat dan  Makanan (BPOM).

## Alat Dan Bahan
Alat-alat yang digunakan pada penelitian ini batang pengaduk, cawan porseline, corong, gelas kimia, gelas pengukur, lampu UV 254 nm, Kromatografi Lapis Tipis (KLT), pipet tetes, penangas listrik, sendok tanduk, sudip, Spektrofotometri UV-Vis dengan penimbang analitika .
Bahan-bahan  yang  digunakan  pada  penelitian  ini  adalah  alkohol,  aquadest,  4  sampel  lipstik, Asam Klorida Pekat, Amoniak, Etil Asetat, Kertas Saring, Metanol, N-butanol, Plat KLT kiesel G 60 F 254, Rhodamine B (C.I. 45170)

## Pembuatan Larutan Uji (Analisis Kualitatif Rhodamin B)
Ditimbang  kurang  lebih  500  mg  dimasukkan  ke  dalam  cawan    porselin,  dan  penambahan  4 tetesan Asam klorida 4 M, penambahan 5 mL  Metanole, kemudian pelelehan dalam pengangas air.  Selanjutnya  penambahan    kembali  10  mL  Metanol,  pengadukan  sampai  bercampur  rata dengan penyaringan  menggunakan kertas saringan.

## Pembuatan Larutan Baku
Sebanyak dibawah 10 mg pewarna Rhodamine B (baku pembanding)  larutkanlah dalam 20 mL metanol.

## Pembuatan Larutan Campuran
Dicampur  cairan  penguji  dengan  cairan  bakuan  pada  jumlah  volume  yang  sesuai  kemudian dihomogenkan

## Identifikasi Sampel
Cairan  penguji,  cairan  bakuan  dengan  larutan  pencampuran  ditotol  dalam  pelat  KLT menggunakan cara terpisah memakai pemipetan dalam rentang 10 µL melalui bahagian dasar plat dengan rentang penotolannya 10 cm dibiarkan beberapa saat sampai mengering. Kemudian pelat KLT masukanlah pada gelas kimia yang sudah terisi eluen yang sudah terjenuhkan dengan bergerak  naik  keatas.  Larutan  eluen  dibuat  dari  Eluen  A  =  Etil  asetat  :  n-butanol  :  amoniak (20:55:25[9]. Kemudian lempeng dikeluarkan dan dikeringkan. Diamati noda pada dasar cahaya UV  254  nm  bila  noda  berflourosensikan  kuning  dalam  lampu  UV  254  nm  memperlihatkan terdapat  Rhodamine  B,  bila  dengan  cara  visuale  warnanya  merah  muda  memperlihatkan terdapat Rhodamine B. kemudian terhitung harga Rfnya, data ditentukan positif bila berwarna bercakan pada sampel dengan bakuan sesuai maupun tetap mendekatkan dalam selisihan biaya ≤ 0,2 [5]

## Pembuatan Larutan Uji Rhodamin B (Analisis Kuantitatif)
Ditimbang lebih kurang 1,25 gram sampel dimasukkan kedalam beaker glass, lalu ditambahkan 7,5 mL cairan Natriume hidroksida 2 %, teraduk dengan pemanasan pada pengangas air sampai tercairkan. Larutan ditambahkan kedalam corong pemisah 100 mL, kemudian penambahan 30 mL  eter,  di  kocok  hingga  3  menitan  yang  dibiarkan  sampai  terpisahkan.  Selanjutnya  fase  air buanglah, fase eter cucilah dua kali dalam 20 mL cairan Natriume hidroksida 0,5 %. Kemudian pencucian dibuangkan, fase eter dimasukkan 10 mL Asam klorida 0,1 N dengan pengocokkan, fase asam tertampung (A).

## Pembuatan Larutan Baku Pembanding Rhodamin B
Ditimbang sekitaran 10 mg bakuan pembandingan Rhodamine B pelarutannya pada 50 mL Metanole. Kemudian sebanyak 1 mL cairan tersebut dimasukkan dalam 25 mL Asam klorida 0,1 N (B)

## Campuran Larutan Uji dan Larutan Baku Pembanding Rhodamin B
Di buat pencampuran pada cairan (A) dengan (B) dalam banyaknya volume yang sesuai dalam memperoleh cairan (C)

## Penentuan Kurva Baku
Dilakukan  skrining  untuk  panjang  gelombang  maksimum  baku  pada  500-600  nm. Penyerapan maksimum cairan A, B, dengan C setiap pengukurannya dalam panjang gelombang sekitaran  558  nm  memakai  asam  klorida  0,1  N  untuk  blanko.  Cairan  bakuan  rhodamine  B dibentuk dalam konsentrasi 200 ppm. Melalui cairan bakuan tersebut dibentuk cairan bakuan dalam 2, 4, 6, 8 ppm. Cairan yang dipakai cairan HCL 0,1 N.

## Penentuan Linearitas Kurva Kalibrasi Baku Pembanding Rhodamin B
Kurva  bakuan  dibentuk  dalam  mengaitkan  kekuatan  cairan  standar  dalam  hasil penyerapan yang didapatkan melalui penghitungan dalam memakai spektro UV-Vis. Penetapan kurva kalibrasi bakuan perbandingan memakai rumusan : y = bx + a.

## Penetapan Kadar Senyawa Rhodamin B dalam sampel Lipstik
Kekuatan melalui zat Rhodamine B dalam sampel yang dipakai bisa ditetapkan sesudah dilaksanakan  penghitungan  harga  penyerapan  sesuai  dengan  kesamaan  regresi  pada  kurva bakuan  kalibrasi  standarnya.  Kadar  zat  Rhodamine  B  pada  sampel  Lipstik  bisa  dijumlahkan dalam rumusan: Kadar Senyawa Rhodamin B = X (mg/mL) x volume (mL) / Berat sampel (g)

## 3.  Hasil dan Pembahasan
Nilai Rf yang baik menunjukkan pemisahan yang cukup baik pada 0,2-0,8 dan untuk nilai Rf pada larutan standar rhodamin B yaitu 0,71 [14].
Tabel 1. Hasil Analisis Senyawa Rhodamin B dalam Baku Rhodamin B dan Sediaan Lipstik Menggunakan Kromatografi Lapis Tipis
Fase Gerak Etil asetat : n-butanol : Amoniak Sampel Lipstik Rf Baku Rhodamin B Noda bercakkan pada KLT 20:55:25
1 2
3 4 5 0,73
0,72 0,72 - 0,72
Tabel  1  menunjukkan  bahwa  perbandingan  eluen  yang  baik  untuk  mengidentifikasi senyawa  rhodamin  b  pada  sediaan  lipstik  yaitu  dengan  perbandingan  eluen  Etil  asetat  :  n- butanol : amoniak (20:55:25) dengan nilai Rf yang di dapatkan yaitu 0,73; 0,72; 0,72; 0; dan 0,72.
Tabel 2 Hasil Pembacaan Nilai Absorbansi Larutan Baku Rhodamin B Menggunakan
Spektrofotometri UV-Vis No Konsentrasi (ppm) Absorbansi 1 2 3 4 2 4
6 8 0,613 0,736 0,748 0,740
Tabel 2 menunjukkan bahwa hasil pembacaan nilai absorbansi larutan standar rhodamin B menggunakan spektrofotometri UV-Vis dan berdasarkan data hasil dari perhitungan regresi linear pembanding rhodamin B diatas diperoleh persamaan regresi linear yaitu y = 0,0197x + 0,611 dengan koefisien korelasi (R 2 ) = 0.6214

## Tabel 3 Hasil Kadar Kandungan Senyawa Rhodamin B pada Sediaan Lipstik
Berat Sampel Sampel Lipstik Nilai Absorbansi Lipstik 200 ppm Kadar Senyawa Rhodamin B Presentase Kadar Senyawa Rhodamin B 10 mg 1 2 3 0,736 0,748 0,740 6,35 µg/mL 6,95 µg/mL 6,55 µg/mL 0,635% 0,695% 0,655% ∑ 6,62 µg/mL 0,662%
Tabel 3 menunjukkan bahwa kadar senyawa rhodamin B dalam 10 gram sampel lipstik pada  konsentrasi  200  ppm  dengan  nilai  absorbansi  yang  didapat  memiliki  kadar  senyawa rhodamin B  6,62 µg/mL dengan presentasi kadar 0,662%.

## Identifikasi dengan menggunakan Kromatografi Lapis Tipis
Pada penelitian ini yang digunakan sebagai sampel yaitu lipstik berbentuk krayon yang berasal dari daerah Gorontalo, khususnya wilayah Kabupaten Boalemo,  Kecamatan Wonosari, Desa Sejahtera Bongo 2, dan pada penelitian ini lipstik yang digunakan terdiri atas 4 sampel yang berbeda nama dan brand yang terdapat di pasar bongo 2 tersebut. Lipstik yang telah di pilih untuk dijadikan sampel pada penelitian ini akan diuji identifikasinya untuk memastikan adanya kandungan rhodamin b yang terdapat dalam lipstik tersebut.
Sebelum  dilakukannya  identifikasi,  terlebih  dahulu  dilakukan  pembuatan  larutan  uji, larutan baku dan larutan campuran untuk analisis kualitatif dan analisis kuantitatif rhodamin b atau untuk identifikasi senyawa rhodamin b pada sampel lipstik yang akan diteliti.
Identifikasi dengan Kromatografi lapis tipis dilakukan dengan tujuan untuk melihat pola kromatogram  komponen  senyawa  aktif  yang  terkandung  dalam  lipstik.  Pada  metode kromatografi lapis tipis ini dilakukan dengan prinsip trial and error dimana prinsip ini digunakan untuk mencari eluen dengan perbandingan tertentu yang dapat memberikan pemisahan yang baik. Identifikasi kromatografi lapis tipis dilakukan menggunakan fase diam plat KLT kiesel G 60  F  254,  alasan  digunakan  silika  gel  F  254  adalah  karena  analit  tidak  berwarna  dan  mampu berfluorosensi dengan baik pada sinar UV dengan panjang gelombang 254 nm [6] dengan fase gerak menggunakan beberapa perbandingan eluen. Menurut [13], eluen yang baik adalah eluen yang bisa memisahkan senyawa dalam jumlah yang banyak ditandai dengan munculnya noda. Noda yang terbentuk tidak berekor dan jarak antara noda satu dengan yang lainnya cukup jelas.

## Gambar 1. Hasil uji KLT sediaan lipstik dan baku rhodamin B pada lampu UV 254 nm dan 366 nm
Fase  gerak  (eluen)  yang  digunakan  adalah  perbandingan  antara  pelarut  Etil  asetat  :  n- butanol dan amonia. Dengan perbandingan yaitu 20:55:25 v/v, . Sebelum dilakukan pengelusian pelarut, terlebih dahulu eluen yang terdapat didalam chamber dijenuhkan dengan tujuan agar mempercepat  proses  pemisahan  antara  komponen  senyawa  aktif  sesuai  tingkat  kepolarannya serta  agar  campuran  eluen  tersebut  dapat  mengelusi  larutan  campuran  dengan  baik.  Larutan campuran ditotolkan pada Plat KLT kresel G 60 F 254 dengan ukuran plat yaitu panjang 10 cm dan  lebar  5  cm  yang  telah  diberi  batas atas dan  batas bawah  masing-masing  1  cm  kemudian dimasukkan  ke  dalam  chamber  yang  berisi  eluen  yang  telah  dijenuhkan.  Plat  KLT  diangkat ketika  pelarut  telah  naik  sampai  di  tanda  batas  atas  yang  telah  dibuat  sebelumnya  yang menandakan  bahwa  proses  pengelusian  telah  selesai.  Plat  KLT  kemudian  dikeringkan  dan penampakan noda dilihat dibawah sinar UV 366 nm dan 254 nm. Hasil penampakan bercak noda dapat dilihat pada lampiran.
Bercak noda yang muncul terjadi pada hasil perbandingan pelarut Etil asetat : n-butanol dan  ammonia  (20:55:25).  Dimana  dapat  dilihat  bahwa  pada  perbandingan  tersebut  terjadi pemisahan yang baik, dimana senyawa naik sesuai dengan tingkat kepolarannya.
Dari pengujian yang telah dilakukan, didapatkan 3 noda pada lempeng KLT. Hasil yang didapatkan  menunjukkan  bahwa  sampel  lipstik  mengandung  senyawa  rhodamin  b  hal  ini
diketahui  setelah  dihitung  nilai  Rf  dari  masing-masing  sampel  lipstik  sebesar  0,72;  0,72;  0,72. Nilai Rf dapat dijadikan bukti dalam mengidentifikasi suatu senyawa. Senyawa-senyawa dengan nilai  Rf  yang  sama  atau  hampir  sama  dapat  menunjukkan  bahwa  senyawa  tersebut  memiliki karakteristik yang sama atau mirip[12]

## Penetapan Kadar Senyawa Rhodamin B Pada Sediaan Lipstik
Analisis  kuantitatif  kandungan  senyawa  rhodamin  b  pada  sediaan  lipstik  ditentukan dengan  metode  spektrofotometri  UV-Vis  yaitu  dengan  menetapkan  konsentrasi  sampel menggunakan  kurva  kalibrasi  larutan  standar  ataupun  larutan  baku  [7]  Pembuatan  kurva kalibrasi  larutan  standar  bertujuan  untuk  mengetahui  hubungan  antara  konsentrasi  larutan dengan  nilai  absorbansinya  sehingga  konsentrasi  sampel  dapat  diketahui  dengan menggunakan metode grafik [4]. Analisis kadar rhodamin b dilakukan dengan menggunakan Spektrofotometri UV-Vis karena metode ini memiliki keuntungan metode yang sederhana, dan memiliki ketelitian yang baik. [3]
Dilakukan optimasi panjang gelombang terlebih dahulu terhadap larutan baku rhodamin B  yang  nantinya  panjang  gelombang  maksimum  tersebut  akan  digunakan  untuk  mengukur serapan  dari  sampel  lipstik,  hasil  optimasi  panjang  gelombang  maksimum  larutan  baku rhodamin b yaitu dengan rentang panjang gelombang 500-600 nm.
Untuk pembuatan  kurva larutan standar diperlukan  deret standar larutan rhodamin B dengan  variasi  konsentrasi  yaitu  2,  4,  6,  8  ppm  yang  kemudian  masing-masing  konsentrasi diukur  pada  panjang  gelombang  lebih  kurang  558  nm.  Deret  standar  larutan  rhodamin  B tersebut dibuat dari larutan dengan konsentrasi 200 ppm yang kemudian diencerkan kembali menjadi deret standar, tujuan dilakukannya pengenceran agar konsentrasi dari larutan semakin kecil  sehingga  pembacaan  nilai  absorbansi  lebih  tepat,  pengenceran  dilakukan  untuk meminimalisir  kesalahan  dan  untuk  mendapatkan  nilai  yang  akurat.  Hasil  yang  didapatkan dari hasil pengukuran absorbansi larutan baku rhodamin persamaan regresi linear yaitu y = 0,0197x + 0,611 dengan koefisien korelasi (R 2 ) = 0.6214.[3]
Hasil pembacaan nilai absorbansi dari ke 3 noda sampel lipstik yang telah dinyatakan positif pada uji analisis kualitatif secara berturut-turut adalah 0,736; 0,748; 0,740 yang kemudian dikalibrasikan dengan persamaan regresi linear dari larutan standar rhodamin b tersebut. Hasil total  rata-rata  yang  didapatkan  pada  uji  analisis  kuantitatif  senyawa  rhodamin  pada  lipstik secara kadar senyawa rhodamin B  6,62 µg/mL dengan presentasi kadar 0,662%.

## Gambar 2.  Hasil Optimasi Panjang Gelombang dan Absorbansi Rhodamin B dan Sampel Lipstik
Untuk  membuktikan  bahwa  parameter  yang  digunakan  dapat  memenuhi  persyaratan maka  dilakukan  uji  validasi.  Parameter  yang  digunakan  dalam  uji  ini  yaitu  uji  liniearitas. Penentuan  parameter  validasi  dilanjutkan  dengan  uji  liniearitas.  liniearitas  merupakan kemampuan  suatu  metode  untuk  memperoleh  hasil-hasil  uji  secara  langsung  proporsional dengan konsentrasi analit yang diberikan. [7] [13] Liniearitas suatu metode merupakan ukuran seberapa baik kurva kalibrasi yang menghubungkan antara respon (y) dengan konsentrasi (x). Berdasarkan hasil pembuatan kurva kalibrasi dengan menggunakan metode Spektrofotometri
UV-Vis yang menghubungkan konsentrasi dengan absorbansi, diperoleh persamaan linear y = 0,0197x + 0,611 dengan koefisien korelasi (R 2 ) = 0.6214. Hasil koefisien korelasi diatas dinyatakan tidak  memenuhi  kriteria  korelasi  yang  linear.  Harga  koefisien  korelasi  (r)  yang  mendekati  1 menyatakan hubungan yang linier antar konsentrasi dengan serapan yang dihasilkan, dengan kata  lain  peningkatan  nilai  absorbansi  analit  berbanding  lurus  dengan  peningkatan konsentrasinya yang sesuai dengan kriteria penerimaan koefisien korelasi (r) yang baik adalah r 2 ≥ 0,9970 [14]. Sehingga dapat dinyatakan uji liniearitas untuk rhodamin menghasilkan korelasi yang liniear.
Hasil  uji  validasi  metode  analisis  yang  dilakukan  dapat  memenuhi  syarat  yang  telah ditetapkan.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  metode  analisis  kadar  senyawa  rhodamin  b  pada sediaan lipstik dengan metode spektrofotometri UV-Vis ini valid dan dapat digunakan untuk penetapan kadarnya.
Adapun kekurangan atau keterbatasan selama proses pengujian yaitu kekurangan pada bahan dan alat yang akan digunakan saat pengujian maupun hasil yang didapatkan belum sesuai dengan literature. Hal ini menyebabkan proses pada pengujian membutuhkan waktu yang lama untuk selesai.

## 4.  Kesimpulan
Berdasarkan  hasil  analisis  rhodamin  b  yang  dilakukan  pengujian  pada  4  sampel  lipstik menggunakan metode Spektrofotometri UV-Vis, maka dapat disimpulkan bahwa Lipstik yang terdapat pada pasar Bongo 2 Kecamatan Wonosari terdapat 3 sampel lipstik yang mengandung rhodamin B dengan menggunakan metode Kromatografi Lapis Tipis (KLT). Kadar rhodamine b yang  terdapat  dalam  3  sampel  lipstik  yang  telah  dilakukan  uji  analisis  kuantitatif  senyawa rhodamin b memiliki kadar senyawa rhodamin b  6,62 µg/mL dengan presentasi kadar 0,662%.

## Ucapan Terima Kasih
Ucapan  terimakasih  kami  ucapkan  kepada  pihak  jurusan  farmasi  dan  bagian  laboratorium kimia  farmasi  universitas  negeri  Gorontalo  atas  bantuan  dan  arahan  yang  telah  diberikan selama penelitian dilakukan.

## Referensi
[1]  Adliani,N, Nazliniwaty, Djendakita, P. 2012. Formulasi Lipstik Menggunakan Zat Warna dari Ekstrak  Bunga  Kecombrang  (Etlingera  elatior  (Jack)  R.M.Sm.  Journal  of  Pharmaceutics  and Pharmacology, Volume 1(2): 87-94.
[2]     [BPOM] Badan Pengawas Obat dan Makanan. 2016. Laporan Tahunan 2016 Badan Pengawas Obat dan Makanan RI . Jakarta: Badan POM RI.
[3] [BPOM] Badan Pengawas Obat dan Makanan. 2011. Rencana Aksi Nasional : Gerakan Menuju Pangan Jajanan Anak Sekolah yang Aman, Bermutu dan Bergizi . Jakarta: Badan POM RI.
[4] Day, R A, dan Underwood, A L., (2002), Analsis Kimia Kuantitatif Edisi Keenam , Erlangga, Jakarta
[5] Departemen  Kesehatan  R.I.  1988. Peraturan  Menteri  Kesehatan  R.I.  No. 722/Menkes/Per/IX/1988, tentang Bahan Tambahan Makanan. Jakarta.
[6] Felandita, N. (2016). Identifikasi dan penetapan kadar hidrokuinon dalam krim malam pada empat klink kecantikan di Bandar Lampung dengan menggunakan metode Kromatografi Lapis Tipis dan Spektrofotomeri UV Vis . Jurnal Analis Farmasi, 1(3).
[7] Gandjar, Ibnu Gholib. 2007. Kimia Farmasi Analisis. Yogyakarta : Pustaka
[8] Hurip Budi Riyanti, Sutyasningsih, Anggun Wisnu Sarsongko. 2018. Identifikasi Rhodamin B  dalam  Lipstik  dengan  Metode  KLT  dan  Spektrofotometri  UV-Vis .  Jakarta  10510.  Volume  2 Nomor 1
[9] Khumaidi  Akhmad, Anam Syariful. 2016. Identifikasi senyawa flavonoid pada fraksi etil asetat benalu batu (begonia sp.) asal kabupaten morowali utara. Palu : Universitas Tadulako
[10]  Ni Ketut Purniati, Ratman, dan Minarni Rama Jura. 2015. Identifikasi Zat Warna Rhodamin B Pada Lipstik Yang Beredar Di Pasar Kota Palu . Palu - 94118. Volume 4 Nomor 3.
[11]  Nina Jusnita, Lioba Sripadma Septifani Nandu. 2017. Identifikasi Rhodamin B pada Sediaan Lipstik  yang  Beredar  di  Pasar  Jakarta  Utara  dengan  Metode  Kromatografi  Lapis  Tipis .  Jakarta 10510. Volume 1 Nomor 2.
[12]  Peter V.M , Campbell, N.A., Jane B.R., Lisa A.U., Michael B.C., Steven .W.,., dan Robert B.J., 2010, Biologi jilid 1 Edisi 8, Penerbit Erlangga, Jakarta.
[13]  Rohman, A. 2007. Kimia Farmasi Analisis. Yogyakarta: Pustaka Pelajar.
[14]  Rohman, A. 2009. Kromatografi Untuk Analisis. Cetakan I. Graha Ilmu .
[15]  Shargel L., Wu-Pong S., Yu Andrew B.C. 2012. Biofarmasetika dan Farmakokinetika Terapan Edisi  Kelima .  Diterjemahkan  oleh  :  Budi  Suprapti.  Surabaya  :  Penerbit  Universitas Airlangga; 2012.
[16]  Yuliarti,  Nurheti.  2007. Awas  Bahaya  diBalik  Lezatnya  Makanan .  Yogyakarta:  ANDI Yogyakarta..