## KUALITAS SEMEN KAMBING KACANG DENGAN LAMA SIMPAN YANG BERBEDA PADA SUHU RUANG MENGGUNAKAN PENGENCER TRIS AMINOMETHAN KUNING TELUR
Enike Dwi Kusumawati 1 , Kris Nur Utomo 2 , Aju Tjatur Nugroho Krisnaningsih 1 dan Syam Rahadi 3
1 Dosen Fakultas Peternakan Universitas Kanjuruhan Malang
2 Alumnus Fakultas Peternakan Universitas Kanjuruhan Malang
3 Dosen Jurusan Peternakan Fakultas Peternakan Universitas Halu Oleo, Kendari e-mail : enike@unikama.ac.id

## ABSTRAK
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  kualitas  semen  segar  kambing  Kacang  pada penyimpanan yang berbeda pada suhu ruang dengan menggunakan pengencer tris aminomethan kuning telur. Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Fakultas Peternakan Universitas Kanjuruhan Malang. Metode penelitian yang digunakan adalah metode percobaan dengan menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL). Setiap perlakuan semen diulang sebanyak 5 kali. Variabel yang diamati antara lain motilitas, viabilitas dan abnormalitas. Data dianalisis menggunakan Analisis Varian. Apabila diantara perlakuan  terdapat  perbedaan  maka  dilanjutkan  dengan  Uji  Beda  Nyata  Terkecil.  Berdasarkan  hasil penelitian menunjukkan bahwa kualitas spermatozoa kambing Kacang pada suhu ruang dengan lama simpan  yang  berbeda  dengan  menggunakan  pengencer  menunjukkan  adanya  perbedaan  yang  sangat nyata  (P<0,01).  Pada  pengamatan  motilitas  dan  viabilitas  spermatozoa  kambing  Kacang  pada  suhu ruang  menggunakan pengencer menunjukkan adanya perbedaan yang sangat nyata (P<0,01). Tetapi pada  pengamatan  abnormalitas  spermatozoa  kambing  Kacang  pada  suhu  ruang  tidak  menunjukkan adanya  pengaruh  penggunaan  pengencer  serta  tidak  terdapat  pengaruh  antara  lama  simpan  dan penggunaan pengencer terhadap abnormalitas spermatozoa kambing Kacang (P>0,01). Namun terdapat pengaruh  yang  sangat  nyata  lama  simpan  terhadap  abnormalitas  spermatozoa  kambing  Kacang. Kesimpulan  yang  diperoleh  dari  hasil  penelitian  yaitu  lama  simpan  yang  berbeda  pada  suhu  ruang menggunakan tris aminomethan kuning telur terdapat pengaruh sangat nyata terhadap kualitas semen segar kambing Kacang. Berdasarkan hasil penelitian ini maka disarankan agar penggunaan kuning telur sebagai  pengencer  tidak  lebih  dari  9  jam  karena  dapat  menurunkan  motilitas  dan  viabilitas spermatozoa..
Kata kunci : Lama Simpan, Kambing Kacang, Pengencer, Spermatozoa, Kualitas Semen

## ABSTRACT
The aim of this research intent to know sperm quality of Kacang goat on different storage time on room temperature using yolk tris aminomethan extender. This research was done at the laboratory of Animal Husbandary faculty at the Kanjuruhan University. The method that was experimental method by using completely randomized design. Each treatment consisted of 10 replications. The Kacang goat sperm quality on room temperature with different storage time using yolk tris aminomethan extender had significant (P<0,01). This research had high (P<0,01) sperm motility and viability with different storage time on room temperature using yolk tris aminomethan extender.
Key words : Sperm Quality, Kacang Goat, Storage Time, Extender, Sperm

## PENDAHULUAN
Berhasilnya suatu program kegiatan Inseminasi  Buatan  (IB)  pada  ternak  salah
satunya  tergantung  pada  kualitas  dan kuantitas  semen  segar  yang  diejakulasikan seekor pejantan. Kesanggupan untuk
mempertahankan
kualitas
dan
memperbanyak  volume  semen  tersebut untuk  beberapa  saat  lebih  lama  setelah ejakulasi  sehingga  lebih  banyak  betina akseptor yang akan diinseminasi.
Dilaporkan  oleh  Arifiantini  dan Purwantara (2010) bahwa presentase motilitas  dan  viabilitas  spermatozoa  setiap 24  jam  selama  144  jam  penyimpanan  pada suhu  ruang  menunjukkan  bahwa  terjadi penurunan motilitas sebanyak 4,3% sampai 8,6% selama setiap 24 jam pengamatan dan penurunan  viabilitas  antara  5,1%  sampai 5,8%.  Dilaporkan  pula  oleh  Yudi  (2008) bahwa  daya  tahan  simpan  semen  segar berdasarkan motilitas dan viabilitas, setelah 3 dan 9 jam penyimpanan pada suhu ruang berturut – turut adalah 48,33 ± 10, 52% dan 20,00  ±  7,98%.  Sementara  itu,  viabilitas dalam  waktu  simpan  yang  sama  adalah 71,49 ± 6,32% dan 50,40 ± 7,3%. Perbedaan motilitas dan viabilitas, yang nyata (P<0,05) antara penyimpanan pada suhu ruang dapat terlihat setelah 3 jam. Semen yang disimpan pada  suhu  suhu  ruang  memperlihatkan penurunan  motilitas  dan  viabilitas  lebih cepat  dari  pada  semen  yang  disimpan  pada suhu  ruang.  Sehingga  pada  setiap  titk pengamatan  semen  yang  di  simpan  pada suhu  ruang  menunjukan  motilitas  dan viabilitas nyata lebih tinggi.
Berdasarkan  latar  belakang  tersebut perlu  diketahui  kualitas  semen  segar kambing kacang dengan  lama simpan  yang berbeda  pada  suhu  ruang  menggunakan pengencer tris aminomethan kuning telur.

## MATERI DAN METODE

## A. Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian
dilakukan
di
Laboratorium Terpadu Fakultas Peternakan Universitas  Kanjuruhan  Malang  pada tanggal 2- 30 Agustus 2012.

## B. Materi Penelitian
1. Bahan Penelitian
Bahan yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  Semen  kambing
Kacang,  tris  aminomethan  kuning  telur, pewarna  eosin  negrosin, NaCL 3%, kertas pengukur pH.

## 2. Peralatan Penelitian
Alat  yang  digunakan  antara  lain mikroskop, timbangan analitik, water bath , thermometer, erlenmeyer ,  neraca  ukur, tissue,  magnetik  stirer,  tabung  reaksi,  rak tabung  reaksi, aluminium  foil ,  mikropipet, object glass dan cover glass , kertas lakmus, gunting, ose , haemocytometer , hand counter, kamar  hitung Neubauer. dan Vagina buatan.

## C. Prosedur Penelitian
1)  Prosedur  percobaan  yang  di  amati meliputi :
a) Semen segar diamati secara makroskopis  (volume,  warna,  pH),
Semen  segar  yang  diletakkan  pada suhu ruang.
b) Semen segar diamati secara mikroskopis  (Motilitas  Individu, Viabilitas, Motilitas massa, Konsentrasi, Abnormalitas) 2)  Penampungan Semen segar dan
Pengamatan
a)  Penampungan Semen Menggunakan
Vagina Buatan:
Proses penampungan semen meliputi beberapa  tahapan,  mulai  koleksi  semen dilaksanakan  pada  pagi  hari  dengan menggunakan vagina buatan, dengan mengisi  air  hangat  yang  bertemperatur  42- 45 o C  dan pemberian tekanan udara dengan jalan dipompa dan diberi bahan pelicin yaitu vaselin  dioleskan  pada  liang  vagina  buatan dengan  menggunakan  stick  glass  sepertiga dari  panjang  vagina  buatan,  dapat  juga menggunakan  kambing  betina  yang sedang birahi    sebagai  pemancing  sampai  pada tahap pelaksanaannya di lapang.
Segera  setelah  penampungan  di lakukan  evaluasi  kuantitatif  dan  kualitatif terhadap    semen  segar.  Evaluasi  kualitatif
meliputi volume, konsistensi, warna, pH dan jumlah total spermatozoa sedangkan evaluasi kuantitatif meliputi motilitas massa, motilitas  individu,  presentase  hidup-mati, konsentrasi  dan  abnormalitas. Tujuan  dari evaluasi  semen  adalah  untuk  menentukan suatu parameter dalam memprediksi kemampuan  fertilitas  dari  spermatozoa tersebut.  Untuk  mengetahui  apakah  semen layak  untuk  diproses  lebih  lanjut.  Semen yang diencerkan harus memiliki persyaratan,  yaitu  minimal  persentase motilitas  70%,  konsentrasi  2  X  10 9
spermatozoa/ml dan persentase
abnormalitas kurang dari 15%.
b)  Motilitas Individu Spermatozoa
Pengamatan motilitas individu diamati  dengan  cara  meneteskan  satu  tetes semen  di object  glass kemudian  ditutup dengan cover  glass .  Pengamatan  di  bawah mikroskop dengan pembesaran 400 kali.
c) Persentase Hidup (Viabilitas spermatozoa) Persentase  hidup  diamati  dengan pewarnaan
eosin-negrosin. Semen diteteskan  pada object  glass dan  ditetesi dengan eosin-negrosin. Setelah dihomogenkan diusap dengan menggunakan cover  glass dengan  posisi  30 0 terhadap sumbu  horisontal. Obyek  glass diamati dibawah mikroskop dengan pembesaran 400 kali.  Spermatozoa  yang  terang  dianggap hidup  dan  yang  berwarna  merah  gelap dianggap  mati.  Jumlah  spermatozoa  yang hidup  dihitung  dari  200  pengamatan  sel spermatozoa,  hasilnya  dinyatakan  dalam persen.
d) Persentase Spermatozoa Abnormal
Preparat untuk pengamatan
abnormalitas  seperti  preparat  pengamatan hidup-mati yang diamati
bentuk morfologinya.
Jumlah spermatozoa
abnormal dihitung dari 200 sel spermatozoa, dan hasilnya dinyatakan dalam persen.
e) Motilitas Massa
Pengamatan motilitas massa diamati dengan cara meneteskan satu tetes semen di
object  glass kemudian  tempatkan object glass tersebut  pada  meja  objek  mikroskop, setelah itu dilakukan pengamatan di bawah mikroskop dengan pembesaran 400 kali.
f) Konsentrasi
Pengamatan  konsentrasi  seperma dalam  satu  contoh  semen  dapat  dihitung secara  lebih  akurat  dengan  menggunakan pipet haemacytometer dan  kamar  hitung Neubauer dengan  cara  Teteskan  satu  tetes kecil  semen  pada  permukaan object  glass bersih. Hisap semen tersebut ke dalam pipet haemacytometer sampai  mencapai  angka 0,5.  Kemudian  encerkan  dengan  larutan NaCl  3%  sampai  mencapai  angka  101. Keringkan  bagian  ujung  luar  pipet  dari cairan  dengan  kertas  tissue.  Kocok  larutan semen  tersebut  dengan  gerakan  angka delapan  (8)  supaya  sperma  dalam  pipet tercampur  secara  merata  tetapi  sel-selnya tidak  rusak  karena  pengocokan  yang dilakukan  tidak  menimbulkan  benturan antara sel dengan dinding pipet. Pengocokan dilakukan  selama  kurang  lebih  satu  menit. Buang tiga tetes cairan dalam pipet. Siapkan kamar hitung Neubauer kemudian diletakkan  di  atas  objek  mikroskop  pada posisi  mendatar.  Teteskan  semen  yang sudah dicampur dengan NaCl 3% pada cover glass dan  tutup  dengan cover  glass kemudian  letakkan cover  glass tersebut diatas  kamar  hitung Neubauer yang  sudah berada diatas mikoskop yang telah diseting, setelah itu dilakukan pengamatan di bawah mikroskop dengan pembesaran 400 kali.

## D. Rancangan Penelitian
Penelitian  ini  dilakukan  dengan menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap (RAL)  dengan  lama  simpan  yang  berbeda pada  suhu  ruang  menggunakan  pengencer tris  aminomethan  kuning  telur,  pada  lama simpan 0, 3, 6, 9, 12, 15, 18, 21, 24, 27, 30 jam, masing-masing diulang 5x.

## E. Peubah Penelitian
Peubah  yang  diamati  dalam  penelitian ini adalah motilitas, viabilitas dan abnormalitas.

## F. Analisis Data
Data  yang  diperoleh  dianalisis menggunakan  Analisis  Varian.  Apabila diantara perlakuan terdapat perbedaan maka dilanjutkan dengan Uji Beda Nyata Terkecil.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## A. Kualitas Semen Segar Hasil Evaluasi
Semen  yang  digunakan  adalah  semen segar  kambing  Kacang  hasil  penampungan dari seekor kambing Kacang yang didapatkan dari peternakan Bapak Nuryanto,
Kec,  Kanigoro,  Kab.  Blitar,  Jawa  Timur. Pemeriksaan  semen  yang  dilakukan  dalam penelitian  ini  adalah  evaluasi  semen  secara makroskopis menunjukkan volume sebanyak  1  ml,  warna  semen  krem,  pH  7 dengan  konsistensi  sedang.  Sedangkan evaluasi secara mikroskopis yang diperoleh  berturut-turut yakni gerakan atau motilitas  massa  sangat  bagus  (+++), motilitas (75,2%), viabilitas (95,8%),
konsentrasi (3540,2x10 6 ) dengan abnormalitas  spermatozoa  (1,6%).  Untuk lebih jelasnya bisa dilihat pada Tabel 1.

## Tabel 1. Hasil evaluasi semen segar kambing Kacang pada penelitian
Pengamatan Parameter Rataan Makroskopis Volume (ml) 1 Bau Khas Warna Krem Konsistensi Sedang pH 7 Mikroskopis Motilitas (%) 75.2 Motilitas massa Sangat bagus (+++) Viabilitas (%) 95.8 Abnormalitas (%) 1,6 Konsentrasi (10 6 /ml) 3540,2
Berdasarkan  hasil  evaluasi  di  atas menunjukkan  bahwa  kualitas  semen  segar kambing  Kacang  yang  diteliti  cukup  baik untuk  digunakan  dan  layak  untuk  diproses lebih  lanjut  untuk  keperluan  program inseminasi buatan (IB).

## B. Evaluasi Makroskopis
a)  Volume
Volume  semen  hasil  pada  penelitian ini 1 ml hal ini  masih sesuai dengan Sekosi dkk.  (2016)  yang  menyatakan  bahwa volume semen kambing setiap kali ejakulasi berkisar  antara  0,5-1,5  ml.  Sedangkan menurut  Hafez  and  Hafez  (2008),  volume semen Kambing berkisar antara 0,5-1,2 ml/ ejakulat.  Volume  semen  berbeda  menurut bangsa,  umur,  ukuran  badan,  frekuensi penampungan, lingkungan, kondisi dari
ternak itu sendiri, waktu penampungan dan pakan.
b) Bau
Bau  semen  yang  dihasilkan  pada penelitian ini adalah bau khas sperma yaitu berbau  amis  khas  sperma.  Hal  ini  sesuai dengan  Kusumawati  dkk.  (2016 b )  yang mengemukakan bahwa semen  yang normal umumnya  memiliki  bau  amis  khas  disertai bau dari hewan itu sendiri. Bau busuk bisa terjadi  apabila  semen  mengandung  nanah yang disebabkan oleh adanya infeksi organ atau saluran reproduksi hewan jantan.
c) Warna
Warna  semen  yang  diperoleh  pada penelitian  ini  adalah  krem,  hal  ini  sesuai dengan  Sekosi et  al. (2016) yang mengemukakan  bahwa  warna  semen  segar
kambing  yang  normal  adalah  putih  hingga krem.  Semen  pada  penelitian  ini  dapat dikatakan  normal  dikarenakan  tidak  ada campuran  warna  kemerahan  dan  warna coklat yang menandakan semen terkontaminasi darah, ataupun warna kehijauan  yang  merupakan  tanda  adanya bakteri  pembusuk  dalam  semen.  Ini  sesuai dengan  Ax et  al. (2008)  yang  menyatakan bahwa  bila  semen  berwarna  kemerahan adalah  tanda  bahwa  semen  terkontaminasi oleh  darah  segar,  sedang  apabila  warnanya mendekati  coklat  dapat  merupakan  tanda bahwa darah yang mengkontaminasi semen sudah  mengalami  dekomposisi.  Warna kehijauan  merupakan  tanda  adanya  bakteri pembusuk dalam semen.
d) Konsistensi (Kekentalan)
Pada  penelitian  ini  konsistensi  semen yang  diamati  adalah  sedang.  Hal  ini menunjukkan  bahwa  semen  yang  diteliti pada  penelitian  ini  masih  dalam  taraf kekentalan  yang  normal  ini  dikarenakan kekentalan semen yang diteliti sedikit lebih kental  dari  susu.  Hal  ini  sesuai  dengan pendapat  Zenichiro,  dkk.  (2002)  bahwa semen  yang  baik  derajat  kekentalannya hampir  sama  atau  sedikit  lebih  kental  dari susu,  sedangkan  yang  jelek  baik  warna maupun  kekentalannya  sama  dengan  air kelapa.
e) Derajat Keasaman (pH)
Derajat keasaman memegang peranan sangat penting karena dapat mempengaruhi viabilitas spermatozoa. Apabila pH tinggi/rendah akan menyebabkan spermatozoa  mati.  Derajat  keasaman  hasil penelitian adalah 7, hal ini masih lebih tinggi menurut Sekosi dkk. (2016) yang menyebutkan derajat keasaman (pH) semen umumnya pada kisaran 6,4-6,8%. Tetapi pH 7  pada  semen  yang  diteliti  termasuk  pada kisaran  pH  netral  dan  begitu  juga  dengan derajat  keasaman  semen  pada  umumnya pada kisaran pH netral.

## C. Evaluasi Mikroskopis

## Motilitas  Spermatozoa  Kambing  Kacang Pada Suhu Ruang
a) Motilitas Massa
Semakin  tinggi  skala  gerakan  atau motilitas  massa,  maka  kualitas  sperma semakin  baik.  Motilitas  massa  hasil penelitian  adalah  sangat  bagus  (+++). Gelombang  yang  terlihat  berbentuk  besar- besar dan bergerak sangat cepat dan padat. Tidak tampak sperma secara individual. Hal ini sesuai dengan penilaian Ax et al. (2008) yang  menyatakan  bahwa  penilaian  Sangat bagus mempunyai skor 5 dengan keterangan terlihat  sangat  padat,  gelombang  yang terbentuk  besar-besar  dan  bergerak  sangat cepat.  Tidak  tampak  sperma  secara individual,  semen  tersebut  mengandung 90% atau lebih sperma aktif.
b) Motilitas Individu
Pada  penelitian  ini  rataan  motilitas individu yang didapat adalah 75.2%, nilai ini lebih  rendah  dibandingkan  penelitian  Kaka (2010)  yaitu  rataan  persentase  motilitas semen  segar  kambing  PE  adalah  76,67%. Adapun faktor - faktor yang mempengaruhi motilitas  sperma  menurut  Ax et  al. (2008) adalah metode penampungan semen, lingkungan,  penanganan  dan  perawatan semen  sesudah  penampungan,  interval antara  penampungan  dan  evaluasi  semen, variasi pejantan serta variasi musim. Faktor- faktor  tersebut  yang  menyebabkan  adanya perbedaan hasil motilitas sperma dari setiap pejantan  kambing  Kacang  dan  ternak ternak-ternak pejantan lain.
Berdasarkan  hasil  evaluasi  semen segar kambing Kacang seperti terlihat pada Tabel  1.  dapat  diketahui  bahwa  semen dalam  penelitian  ini  mempunyai  kualitas yang  baik.  Hal  ini  ditunjukkan  dengan presentase  motilitas  spermatozoa  sebesar 75,2%,  sehingga  semen  ini  bisa  diproses lebih  lanjut  untuk  keperluan  IB.  Hal  ini sesuai  dengan  pendapat  Zenichiro  dkk. (2002) dan Kusumawati and Leondro (2015) menyatakan  bahwa  semen  segar  harus memiliki  motilitas  ≥  70%  agar  dapat
diproses  lebih  lanjut  menjadi  semen  beku untuk keperluan IB.
Hasil  penelitian  semen  segar  pada suhu ruang dengan menggunakan pengencer menunjukkan  rataan  persentase  motilitas spermatozoa tertinggi pada lama simpan ke
0 jam yaitu sebesar 75,2±0,84%, dan untuk motilitas terendah terjadi pada lama simpan ke  30  jam  yaitu  dengan  rataan  persentase 0±0,00 %. Untuk lebih jelasnya dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2. Rataan Persentase Motilitas Spermatozoa pada Lama
Simpan yang Berbeda Lama simpan Motilitas (%) 0 jam 75,2±0,84 a 3 jam 73,6±1,52 a 6 jam 71,8±1,92 a 9 jam 67±1,58 b 12 jam 58,2±2,95 c 15 jam 54±4,53 d 18 jam 22,2±4,49 d 21 jam 5,4±2,88 e 24 jam 3±1,58 f 27 jam 0,8±0,8 f 30 jam 0±0 f
Keterangan: Notasi yang berbeda menunjukkan adanya perbedaan yang  sangat nyata (P<0,01)
Berdasarkan  analisis  data  menunjukkan bahwa  motilitas  spermatozoa  kambing  Kacang pada  suhu  ruang  dengan  lama  simpan  yang berbeda  dengan  menggunakan  pengencer menunjukkan  adanya  perbedaan  yang  sangat nyata (P<0,01). Pada lama simpan 0, 3, 6, 9, 12 dan  15  jam  dengan  menggunakan  pengencer rataan  motilitas  spermatozoa  masih  berada dalam kisaran standar minimum untuk program IB yaitu berkisar antara 54-95%. Hal ini sesuai dengan pendapat Kusumawati dkk. (2016 a ) yang menyatakan bahwa salah satu standar minimum bagi  kualitas  semen  yang  dapat  dipakai  untuk inseminasi buatan adalah minimal mengandung 50%  persentase  sperma  hidup  (viabilitas)  dan yang motil. Ini berarti  pada lama simpan 18, 21, 24,  27  dan  30  jam  yang  rataan  motilitas spermatozoa berkisar antara 0-50% tidak dapat dilakukan  proses  lebih  lanjut  karena  di  bawah standar minimum untuk program IB. Walaupun pada perlakuan dengan menggunakan pengencer motilitas  spermatozoa  masih  terlihat  sampai lama  simpan  ke  27  jam  tetapi  antara  lama simpan ke 18-27 jam tersebut rataan persentase motilitas  spermatozoa  berada  dalam  kisaran  di bawah  50%  yang  berarti  tidak  dapat  dilakukan proses  lebih  lanjut  karena  di  bawah  standar minimum untuk program IB (Saili dkk., 2017).
Hal  ini  diduga  kerena  pengencer  yang mengandung kuning telur sudah mulai membusuk, ini terbukti pada lama simpan ke 15 jam  timbul  aroma  yang  menyengat.  Hal  inilah yang menyebabkan motilitas spermatozoa mulai menurun drastis hingga mencapai 0%. Semakin lama  waktu  penyimpanan  berarti  energi  yang dibutuhkan spermatozoa semakin tinggi sedangkan  nutrisi  yang  tersedia  dalam  semen semakin berkurang. Susilawati (2014) menambahkan  faktor  penyesuaian  suhu  dari suhu  tubuh  ternak  ke  suhu  ruang  dapat  juga mempengaruhi  pergerakan  spermatozoa  karena spermatozoa  harus  mampu  menyesuaikan kondisi  fisik  dengan  lingkungan.  Dengan demikian  terdapat  pengaruh  lama  simpan  yang berbeda  dengan  menggunakan  pengencer terhadap motilitas spermatozoa kambing Kacang pada suhu ruang.

## Viabilitas  Spermatozoa  Kambing  Kacang Pada Suhu Ruang
Persentase  viabilitas  sperma  pada penelitian  ini  adalah  95.8%,  nilai  ini  lebih besar dibandingkan penelitian Kaka (2010) yaitu  sebesar  81,45%  pada  kambing Peranakan  Ettawa  (PE).  Berdasarkan  hasil
evaluasi  semen  segar  kambing  Kacang seperti terlihat pada Tabel 1. dapat diketahui bahwa semen dalam penelitian ini mempunyai  kualitas  yang  baik.  Hal  ini ditunjukkan  dengan  presentase  viabilitas spermatozoa  sebesar  95,8%,  sehingga semen  ini  bisa  diproses  lebih  lanjut  untuk keperluan  IB.  Hal  ini  sesuai  dengan pendapat  Kusumawati  dkk.  (2016 a )  yang menyatakan  bahwa  salah  satu  standar minimum  bagi  kualitas  semen  yang  dapat dipakai  untuk  inseminasi  buatan  adalah minimal  mengandung  50%  persentase sperma hidup (viabilitas) dan yang motil.
Hasil penelitian semen segar pada suhu ruang  dengan  menggunakan  pengencer menunjukkan  rataan  persentase  viabilitas spermatozoa tertinggi pada lama simpan ke 0  jam  yaitu  sebesar  95,8±0,8%,  dan  untuk viabilitas terendah terjadi pada lama simpan ke  30  jam  yaitu  dengan  rataan  persentase 0±0%.  Untuk  lebih  jelasnya  dapat  dilihat pada Tabel 3.
Berdasarkan analisis data menunjukkan bahwa viabilitas spermatozoa kambing  Kacang  pada  suhu  ruang  dengan lama simpan yang berbeda dengan menggunakan pengencer menunjukkan adanya  pengaruh  yang  sangat  nyata (P<0,01).  Pada  lama  simpan  0,  3,  6,  9,  12 dan 15 jam dengan menggunakan pengencer rataan  viabilitas  spermatozoa  masih  berada dalam  kisaran  standar  minimum  untuk program  IB  yaitu  berkisar  antara  54-95%. Hal ini sesuai dengan pendapat Kusumawati et al. (2015) yang menyatakan bahwa salah satu  standar  minimum  bagi  kualitas  semen yang dapat dipakai untuk inseminasi buatan adalah minimal mengandung 50% persentase  sperma  hidup  (viabilitas)  dan yang motil. Ini berarti  pada lama simpan 18, 21, 24,27 dan 30 jam yang rataan viabilitas spermatozoa  berkisar  antara  0-50%  tidak dapat dilakukan proses lebih lanjut karena di bawah standar minimum untuk program IB.
Tabel 3. Rataan Persentase Viabilitas Spermatozoa ada Lama Simpan yang Berbeda
Lama simpan Rataan Viabilitas (%) 0 jam 95,8±0,8 a 3 jam 95,2±0,8 a 6 jam 92,6±1,1 a 9 jam 90,8±0,8 b 12 jam 82,2±2,4 c 15 jam 59±3,88 d 18 jam 24,8±4,3 e 21 jam 7,4±1,5 f 24 jam 2,8±1,3 f 27 jam 0,8±0,8 g 30 jam 0±0 g
Keterangan: Notasi yang berbeda menunjukkan adanya pengaruh yang sangat nyata (P<0,01).
Perlakuan  dengan  menggunakan pengencer  viabilitas  spermatozoa  masih terlihat sampai lama simpan ke 27 jam akan tetapi  antara  lama  simpan  ke  18-27  jam tersebut rataan persentase viabilitas spermatozoa berada dalam kisaran di bawah 50%  yang  berarti  tidak  dapat  dilakukan proses lebih lanjut karena di bawah standar minimum untuk program IB sesuai menurut Kusumawati et  al .  (2017).  Hal  ini  diduga kerena pengencer yang mengandung kuning telur sudah mulai membusuk, ini terbukti pada lama simpan ke 15 jam timbul aroma yang menyengat. Hal inilah yang menyebabkan  viabilitas  spermatozoa  mulai menurun drastis hingga mencapai 0%.
Penurunan persentase viabilitas spermatozoa    ini  dikarenakan  persediaan nutrisi spermatozoa yang hanya berasal dari seminal plasma saja tanpa adanya tambahan nutrisi  dari  medium  lain.  Semakin  lama waktu  penyimpanan,  nutrisi  dalam  seminal plasma  semakin  berkurang  hal  ini  yang menyebabkan persentase viabilitas spermatozoa  kambing  Kacang  pada  suhu ruang semakin lama semakin menurun.
Semakin  lama  waktu  penyimpanan berarti energi yang dibutuhkan spermatozoa semakin  tinggi  sedangkan  nutrisi  yang tersedia  dalam  semen  semakin  berkurang. Susilawati  (2014)  menambahkan  faktor penyesuaian suhu dari suhu tubuh ternak ke suhu  ruang  dapat  juga  mempengaruhi pergerakan spermatozoa karena spermatozoa  harus  mampu  menyesuaikan kondisi  fisik  dengan  lingkungan.  Dengan demikian  terdapat  pengaruh  lama  simpan yang  berbeda  menggunakan  pengencer terhadap  viabilitas  semen  segar  kambing Kacang pada suhu ruang.
Abnormalitas Spermatozoa Kambing Kacang Pada Suhu Ruang
Persentase  sperma  abnormal  pada penelitian  ini  adalah  2,9%,  nilai  ini  sesuai dengan standar  Inseminasi Buatan menurut Sekosi dkk. (2016) yang menyatakan bahwa semen  untuk  keperluan  inseminasi  buatan sebaiknya tidak mengandung sperma abnormal  lebih  dari  20  %.  Sedangkan
menurut  Saili  dkk.  (2016)  bahwa  standar persentase abnormalitas spermatozoa kambing  yang  layak  digunakan  untuk  IB tidak  lebih  dari  15%.  Dengan  persentase abnormal  2,9%  semen  ini  dianggap mempunyai  kualitas  baik  karena  hal  ini sesuai  dengan  pendapat  Arifiantini  dan Purwantara (2010) yang menyatakan bahwa Pada  umumnya  bila  terlihat  sel  dengan bentuk  abnormal  yang  primer  berjumlah 20%  atau  lebih  maka  kualitas  semen  itu dianggap  jelek.  Susilawati  (2014),  standar minimum  bagi  kualitas  semen  yang  dapat dipakai  untuk  inseminasi  buatan  adalah minimal mengandung 500 juta sel/ml/ejakulat  dengan  gerakan  massa sangat  bagus/bagus  (++/+++),  serta  50% persentase sperma yang hidup dan motil.
Berdasarkan  karakteristik  semen  segar tersebut diatas, maka dapat dikatakan bahwa semen  kambing  Kacang  yang  digunakan dalam  penelitian  ini  memiliki  kualitas semen  yang  baik  dan  memenuhi  syarat untuk  diproses  lebih  lanjut  sehingga  dapat digunakan dalam program IB.
Berdasarkan  hasil  evaluasi  semen segar kambing Kacang seperti terlihat pada Tabel  1.  dapat  diketahui  bahwa  semen dalam  penelitian  ini  mempunyai  kualitas yang  baik.  Hal  ini  ditunjukkan  dengan presentase abnormalitas spermatozoa sebesar  1,6%,  sehingga  semen  ini  bisa diproses  lebih  lanjut  untuk  keperluan  IB. Karena hal ini sesuai dengan pendapat Ax at al. (2008)  bahwa  standar  persentase abnormalitas  spermatozoa  kambing  yang layak  digunakan  untuk  IB  tidak  lebih  dari 15%  .  Sedangkan  menurut  Karatasudjana (2001)  semen  untuk  keperluan  inseminasi buatan sebaiknya tidak mengandung sperma abnormal lebih dari 20 %.
Hasil penelitian semen segar pada suhu ruang  dengan  menggunakan  pengencer menunjukkan rataan persentase abnormalitas  spermatozoa  tertinggi  pada lama  simpan  ke  30  jam  yaitu  sebesar 11,8±1,3%, dan untuk abnormalitas terendah terjadi pada lama simpan ke 0 jam yaitu  dengan  rataan  persentase  1,6±0,89%.
Untuk  lebih  jelasnya  dapat  dilihat  pada Tabel 4.
Tabel  4.  Rataan  Persentase  Abnormalitas
Spermatozoa pada  Lama Simpan yang Berbeda Lama simpan Abnormalitas (%) 0 jam 1,6±0.89 a 3 jam 2±1 a 6 jam 2,2±0,8 a 9 jam 3,4±1,14 a 12 jam 5,2±1,3 b 15 jam 5,8±0,8 b 18 jam 6,8±1,3 b 21 jam 9±1,2 c 24 jam 9,4±1,14 c 27 jam 10,8±1,3 c 30 jam 11,8±1,3 c Keterangan : Notasi yang berbeda menunjukkan adanya pengaruh yang   sangat nyata (P<0,01) Berdasarkan analisis data
menunjukkan bahwa abnormalitas spermatozoa  kambing  Kacang  pada  suhu ruang  dengan  lama  simpan  yang  berbeda menunjukkan  adanya  perbedaan  yang sangat nyata (P<0,01). Pada lama simpan ke 0-30  jam  dengan  menggunakan  pengencer menunjukkan  bahwa  rataan  abnormalitas spermatozoa  kambing  Kacang  pada  suhu ruang  masih  berada  dalam  kisaran  standar minimum untuk program IB tidak lebih dari 15-20%  yaitu  berkisar  antara  1-11%. Walaupun  mengalami  peningkatan  tetapi rataan  persentase  abnormalitasnya  tidak lebih  dari  15%.  Hal  ini  sesuai  dengan pendapat  Ax et  al. (2008)  bahwa  standar persentase abnormalitas spermatozoa kambing  yang  layak  digunakan  untuk  IB tidak  lebih  dari  15%  .  Sedangkan  menurut Sekosi  dkk.  (2016)  semen  untuk  keperluan inseminasi buatan sebaiknya tidak mengandung  sperma  abnormal  lebih  dari 20%.  Meningkatnya  abnormalitas  sperma- tozoa ini dikarenakan semakin menurunnya motilitas  spermatozoa  karena  semakin berkurangnya  nutrisi  yang  dibutuhkan  oleh spermatozoa.
Tidak  terdapat  pengaruh  pengencer terhadap abnormalitas spermatozoa kambing  Kacang  pada  suhu  ruang.  Dan
tidak terdapat pengaruh antara lama simpan dan  pengencer  terhadap    abnormalitas spermatozoa  kambing  Kacang  pada  suhu ruang, tetapi terdapat pengaruh yang sangat nyata  lama  simpan  terhadap    abnormalitas spermatozoa  kambing  Kacang  pada  suhu ruang.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  dapat disimpulkan  bahwa  lama  simpan  yang berbeda pada suhu ruang menggunakan tris aminomethan  kuning  telur  memberikan pengaruh  sangat  nyata  terhadap  kualitas semen segar kambing kacang.

## DAFTAR PUSTAKA
Arifiantini,  R.I.,  dan  B.  Purwantara.  2010. Motility  and  Viability  of  Friesian Holstein Spermatozoa In Three Different  Extender  Stored  At  5 o C. Jurnal  of  the  Indonesian  Tropical Animal  Agriculture.  Vol.  35  No.  4 Desember 2010.
Ax, R. L., M. R. Dally, B. A.Didion, R. W. Lenz,  C.C.  Love,  D.  D.  Varner,  B. Hafez and M. E Bellin. 2008 Artifical Ainsemination.  In:  Hafez  E.S.E  and Hafez  B.,  editors.  Reproduction  In Farm  Animals 7 ed.  Australia Blackwell Publishing. pp: 365-375.
Hafez, E. S. E., and B. Hafez. 2008. X and Y  Chromosome-Bearing  Sperma- tozoa.  In:  Hafez  E.S.E  and  Hafez  B., editors. Reproduction In Farm Animals 7 ed. Australia:  Blackwell Publishing. pp: 390-394.
Kaka,  A.  2010.  Evaluasi  Semen  Kambing Peranakan  Etawah.  Universitas  Nusa Cendana. Kupang.
Kusumawati,  E.  D.  and  H.  Leondro.  2015. The Quality of Fresh Semen of Bulls at  5 0 C  and  24 0 C  With  or  Without Diluent.  In  Proceeding  International
Seminar  Improving  Tropical  Animal Production For Food Security.
1(1):122-126.
Kusumawati,  E.  D.,  H.  Leondro,  T. Susilawati,  dan  N.  Isnaini.  2015.
Spermatozoa  Viability  of  Filial Ettawa  Goat  After  Sexing  Process. In Proceeding International Seminar Improving Tropical Animal Production  For  Food  Security. 1(1):127-130.
Kusumawati, E. D., A. T. N. Krisnaningsih, and R.R. Romadlon. 2016 a . Kualitas Spermatozoa  Semen  Beku  Sapi Simental  dengan  Suhu  dan  Lama Thawing yang Berbeda. Jurnal Ilmu- Ilmu Peternakan, 26(3): 38-41.
Kusumawati,  E.  D.,  H.  Leondro,  A.  T.  N. Krisnaningsih,  T.  Susilawati,  N. Isnaini,  and  R.  Widhad.  2016 b . Pengaruh  Suhu  dan  Lama  Simpan Semen  Segar  terhadap  Motilitas  dan Abnormalitas  Spermatozoa  Kambing Peranakan  Etawa  (PE).  In  Seminar
Nasional  Hasil  Penelitian.  4(1):199- 208.
Kusumawati,  E.  D.,  N.  Isnaini,  A.  P.  Y. Yekti,  M.  Luthfi,  L.  Affandhy,  D. Pamungkas, Kuswati, A. Ridhowi,  H.
Sudarwati,  T.  Susilawati,  and  S. Rahayu. 2017. The Quality Of Sexed Semen  on  Filial  Ongole  Bull  Using Percoll Density Gradient Centrifugation Method. Asian Journal of  Microbiology,  Biotechnology  & Environmental Sciences
Paper,
19(1):199-203.
Saili, T., L. O. Baa, L. O. A. Sani, S. Rahadi,
I.  W.  Sura,  and    F.  Lopulalan.  2016.
Sinkronisasi  Estrus  dan  Inseminasi Buatan  Menggunakan  Semen  Cair Hasil  Sexing  pada  Sapi  Bali  Induk
Yang Dipelihara dengan Sistem yang
Berbeda ( Oestrus Syncronization and Artificial  Insemination  using  Sexing Semen  from  Bali’s  Cattle  with
Different Management System ). Jurnal Ilmu Ternak. 16(2):49-55.
Sekosi,  P.  P.  P.,  Kusumawati,  E.  D.,  dan Krisnaningsih, A. T. N. 2016 Motilitas dan Viabilitas Semen Segar Kambing Peranakan Etawa (PE) dengan Menggunakan Pengencer Cauda Epididymal  Plasma  (CEP-2)  pada Lama  dan  Suhu  Simpan  yang Berbeda.  Jurnal  Sains  Peternakan. 4(1): 34-49.
Susilawati,  T.  2014.  Sexing  Spermatozoa (Hasil  Penelitian  Laboratorium  dan Aplikasi  pada  Sapi  dan  Kambing). Universitas Brawijaya Press. Malang.
Yudi,  I.  Arifiantini,  B.  Purwantara,  dan  I. Yusuf.  2008.  Daya  Tahan  Semen Segar dan Kualitas Semen Cair Kuda dengan Konsentrasi Spermatozoa yang  Berbeda  dalam  Pengencer Dimitropoulus  yang  Dimodifikasi. JITV 13 (1): 35-42.
Zenichiro,  K.,  Herliantien  dan  Sarastina. 2002.  Teknologi  Prosesing  Semen
Beku Pada Sapi. Balai Besar Inseminasi Buatan Singosari. Malang.