Tersedia  online  di:  http://ejournal-balitbang.kkp.go.id/index.php/jra
# Korespondensi:  Balai  Riset  Budidaya  Ikan  Hias. Jl.  Perikanan  No.  13,  Pancoran  Mas,  Depok,  Indonesia Tel.  +  62  21  7520482 E-mail:  yaminpaada@gmail.com

## TOKSISITAS NONILFENOL PADA BENIH IKAN NILA (Oreochromis niloticus) DAN PHYTOREMEDIASI DENGAN ECENG GONDOK (Eichhornia crassipes) YANG DIBERI PUPUK BERBEDA
Muhamad  Yamin *)# ,  Eddy  Supriyono **) , dan Mulyasari ***)
*) Balai Riset Budidaya Ikan Hias Jl. Perikanan No. 13, Pancoran Mas, Depok
**) Program Studi Budidaya Perairan, Fakutas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Insitut Pertanian Bogor Kampus IPB  Darmaga, Jalan Agatis, Babakan, Kec. Dramaga, Kota Bogor, Jawa  Barat 16128
***) Balai Riset Perikanan Budidaya Air Tawar dan Penyuluhan Perikanan Jl. Sempur  No.1, Bogor,  Jawa  Barat 16129
(Naskah diterima: 17 Oktober 2019; Revisi final: 19 Maret 2020; Disetujui publikasi: 20 Maret 2020)

## ABSTRAK
Beberapa  tanaman  air  telah  dilaporkan  mampu  meremediasi  air  yang  tercemar  senyawa  berbahaya. Nonilfenol sebagai jenis surfaktan non ionik yang berbahaya perlu ditelaah potensi toksisitasnya bagi biota perairan  dan  mitigasi  remediasinya  menggunakan  tanaman  air.  Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk menentukan level toksisitas mematikan nonilfenol pada benih ikan nila (Oreochromis niloticus) dan upaya meremediasi  menggunakan  tanaman  eceng  gondok  (Eichhornia  crassipes)  yang  diberi  pupuk  berbeda. Perlakuan konsentrasi toksisitas  nonilfenol adalah: kontrol, 0,4  mg/L,  0,5 mg/L, 0,63 mg/L, 0,80 mg/L dan 1,0 mg/L. Padat tebar ikan uji sebanyak dua puluh ekor benih pada tiap akuarium kaca yang berisi 40 L air. Pergantian air dilakukan setiap hari sebanyak 200%.  Pengamatan kematian ikan dilakukan pada jam ke 2, 4,  6,  8,  10,  12,  24,  48,  72,  dan  96.    Tahapan  berikutnya  adalah  remediasi  nonilfenol  dari  media  air menggunakan  sistem  resirkulasi  dengan  perlakuan:  1)  kontrol  air  +  nonilfenol  2,5  mg/L,  2)  zeolite  + nonilfenol 2,5 mg/L, 3) zeolit + tanaman air + nonilfenol  2,5 mg/L, 4) zeolite + tanaman air + pupuk kandang + nonilfenol 2,5 mg/L, dan 5) zeolite + tanaman air + pupuk hidroponik + nonilfenol 2,5 mg/L. Konsentrasi  nonilfenol  di  air  dianalisis  menggunakan  HPLC.  Hasil  uji  menunjukkan  bahwa  nonilfenol menyebabkan kematian 100 % benih ikan nila dalam waktu kurang dari 48 jam pada konsentrasi 0,8 mg/L dengan  nilai  LC 50 -96  jam  sebesar  0,58  mg/L.  Remediasi  media  air  yang  mengandung  nonilfenol  dengan konsentrasi 2,5 mg/L menggunakan tanaman eceng gondok membutuhkan waktu 1 hari sedangkan tanpa tanaman membutuhkan waktu 2 hari atau lebih. Dengan nilai LC 50 -96 jam nonifenol di bawah 1.00 mg/L maka berdasarkan Kriteria Toksisitas Bahan dari Komisi Pestisida, Departemen Pertanian, Indonesia, maka nonilfenol  tergolong  dalam  bahan  berbahaya  dengan  daya  racun  yang  sangat  tinggi.    Pengurangan konsentrasi nonilfenol sampai dengan 2.5 mg/L dapat dilakukan dengan menambahkan tanaman air eceng gondok (Eichhornia crassipes) pada sistem resirkulasi
KATA KUNCI: nonilfenol; remediasi; eceng gondok (Eichhornia crassipes); ikan nila (Oreochromis niloticus)
ABSTRACT: Nonylphenol, toxicity on nile tilapia (Oreochromis niloticus) seeds and its remediation using water hyacinth (Eichhornia crassipes). By: Muhamad Yamin, Eddy Supriyono, and Mulyasari
Certain species of aquatic plants are reported able to remediate water contaminated with harmful compounds. The toxicity of nonylphenol as one of the harmful non-ionic surfactants to farmed fish species has yet to be determined, including its remediation using aquatic plants. This study aimed to determine the lethal toxicity level of nonylphenol for Nile tilapia (Oreochromis niloticus) seeds and its remediation using water hyacinth plants (Eichhornia crassipes).  The nonylphenol treatments were arranged by separately mixing water with 0.0 mg/L (control), 0.4 mg/L, 0.5 mg/L, 0.63 mg/L, 0.80 mg/L and 1.0 mg/L of nonylphenol. Twenty tilapia seeds were placed into each glass aquarium containing 40 L of freshwater that had already been mixed with the different concentrations of nonylphenol. Water exchange was
done every day as much as 200% using water pre-mixed with the nonylphenol concentrations. Observation of fish mortality was carried out at 2, 4, 6, 8, 10, 12, 24, 48, 72, and 96 hours after the fish seeds were placed in the aquarium.  The next stage experiment was the phytoremediation  of the water contaminated  with different additions of  nonylphenol  in  a  recirculation  system:  nonylphenol  2.5  mg/L;  nonylphenol  2.5  mg/L  +  zeolite;  nonylphenol 2.5 mg/L + zeolite + water hyacinth; nonylphenol 2.5 mg/L + water hyacinth + zeolite + manure; and nonylphenol 2.5 mg/L + water hyacinth + zeolite + hydroponic fertilizer (AB mix).  Nonylphenol concentrations in water were determined using the HPLC method.  The results of the first stage experiment showed that nonylphenol caused 100% mortality rate of tilapia seeds in less than 48 hours at a concentration of 0.8 mg/L. The LC 50 -96 hour of nonylphenol on the Nile tilapia seeds was 0.58 mg/L. The complete remediation of 2.5 mg/L or less of nonylphenol using water hyacinth plants took one day while without plants took two days or more. Based on the Acute Aquatic Toxicity Criteria published by the Pesticide Commission of the Indonesian Agricultural Department, nonylphenol is categorized as a very high toxicity compound due to its LC 50 -96 h value of concentration less than 1.00 mg L -1 . The results of this study provide evidence that water hyacinth (Eichhornia crassipes) system could remediate water with a concentration of nonylphenol up to 2.5 mg/L.
KEYWORDS: nonylphenol; remediation; water hyacinth (Eichhornia crassipes); nile tilapia (Oreochromis niloticus)

## PENDAHULUAN
Kualitas  lingkungan yang  menurun akibat  bahan pencemar yang berasal dari limbah pertanian, industri, dan rumah tangga menjadi salah satu masalah dalam kegiatan  budidaya  perikanan.  Beberapa  laporan menunjukkan  bahwa  perairan  Indonesia  telah tercemar  mulai  dari  tingkatan  sedang  sampai  berat seperti di Waduk Saguling, Waduk Cirata dan Waduk Juanda, Waduk Gajah Mungkur, Waduk Duriangkang, Sungai Citarum, DAS Keduang, DAS Bengawan Solo, DAS Alang Unggahan dan DAS Temon (Garno, 2001; Pujiastuti et al., 2013; Hariyadi, 2006). Salah satu bahan kimia  berbahaya  yang  mencemari  perairan  adalah nonilfenol. Nonilfenol merupakan surfaktan non-ionik yang merupakan produk turunan utama dari kelompok senyawa alkylphenolpolyethoxylates (APEs) (Junk et al., 1974). Senyawa ini banyak dimanfaatkan untuk emul- sifier dan surfaktan dalam produk industri dan rumah tangga seperti cat, plastik, kosmetik, bahan bangunan, karet  vulkanisir,  garmen,  kertas,  dan  pelumas kendaraan (USEPA, 2005; Brigden et al., 2012).
Di  sisi  lain,  keberadaan  nonilfenol  memberikan dampak  buruk  bagi  biota  perairan  (air  laut  dan  air tawar)  termasuk  invertebrata,  tanaman,  dan  ikan. USEPA (2005) melaporkan bahwa nonilfenol berpotensi menyebabkan toksik akut dan kronis serta berpotensi menyebabkan dampak negatif pada ekologi di semua trofik level dari spesies akuatik yang terpapar. Salah satu  dampak  nonilfenol  adalah  dapat  mengganggu endokrin  atau  endocrine  disrupting  chemicals  (EDC) (Christiansen et al., 1998; Cardinali, 2004; Li & Wang, 2005).  Nonilfenol  juga  dilaporkan  menyebabkan gangguan pada perkembangan larva pada ikan Rhinella arenarum (Mariel et al., 2014), gangguan pada organ reproduksi  dan  pertumbuhan  ikan,  amfibi,  dan mamalia (Nagao  et  al.,  2001; Lukáèová  et  al.,  2013; Lee et al., 2015), kematian sel (apoptosis) pada sper- matocytes,  sertoli  dan  leydig-homologue  di  ikan
mal pada ikan Rhinella arenarum (Mariel et al., 2014).
Medaka  Oryzias  latipes  (Weber  et  al.,  2002), terhambatnya perkembangan jaringan testicular dan oogenesis  pada  ikan  Riulus  marmoratus  (Tanaka  & Grizzle,  2002),  meningkatkan  kerusakan  struktur testikular ikan Xiphophorus maculatus (Kinnberg et al., 2000), dan meningkatkan persentase larva tidak nor- mal pada ikan Rhinella arenarum (Mariel et al., 2014).
Terkait dengan dampak negatif yang ditimbulkan oleh nonilfenol pada berbagai organisme akuatik dan ikan budidaya, beberapa negara di Eropa dan Amerika menggolongkannya  sebagai  bahan  berbahaya  yang keberadaannya mendapat pengawasan ketat (USEPA, 2010; Eropa Commission, 2008). Europe  Commission dalam Water Framework Directive (WFD) memasukkan nonilfenol sebagai bahan berbahaya yang mendapat prioritas  (priority  hazardous  substance)  (http:// ec.europa.eu/environment/water/water-framework/ priority substances.htm). Sayangnya belum ada regulasi di Indonesia yang mengatur tentang pengawasan dan pengendalian nonilfenol agar tidak mencemari perairan khususnya di lingkungan perikanan budidaya.
Di Indonesia, cemaran nonilfenol telah terdeteksi di  Sungai  Cikamasan  Kabupaten  Bogor  dengan konsentrasi mencapai 0,239 ± 0,026 µg L -1 (Duong et al., 2010). Selain itu Greenpeace (2013) melaporkan bahwa cemaran nonilfenol juga terdeteksi di Sungai Citarum, Jawa Barat yang disebabkan di antaranya oleh pembuangan limbah yang mengandung nonilfenol oleh industri garmen ke perairan Sungai Citarum. Adanya cemaran nonilfenol di perairan, diduga menjadi salah satu  penyebab  terganggunya  kegiatan  budidaya perikanan yang memanfaatkan sumber air dari perairan umum. Satu di antara komoditas ikan budidaya yang banyak  dipelihara  di  Indonesia  adalah  ikan  nila  (O. niloticus).
Upaya untuk mempelajari pengurangan nonilfenol dari  air dan  media  telah  dilaporkan dalam  berbagai kajian  pustaka  di  antaranya  dengan  menggunakan
karbon aktif (Yu et al., 2008), tanaman hias (Belmont & Metcalfe, 2003), biosolid (McNamara et al., 2012), dan microalga (Gao et al., 2011). Dalam penelitian ini, remediasi nonilfenol dari air menggunakan tanaman air  eceng gondok  (Eichhornia  crassipes).  Tanaman  ini dipilih karena eceng gondok telah dilaporkan memiliki kemampuan untuk remedasi air yang terkontaminasi bahan pencemar seperti zat pewarna (dye), chromium and copper (Shah et al., 2010; Gao et al., 2015; Sarkara et al., 2017). Lebih lanjut Lagos et al. (2009) melaporkan bahwa  eceng  gondok  mengurangi  bahan  organik sebesar 46–75% dan kandungan fenolik sebesar 11– 17% yang terdapat pada limbah dari kraft mill. Namun demikian,  kami  belum  menemukan  laporan penggunaan  eceng  gondok  untuk  meremediasi nonilfenol. Sehubungan dengan hal tersebut di atas, maka dirasa perlu melakuan kajian mengenai tingkat toksisitas nonilfenol serta peluang tanaman air eceng gondok dalam meremediasinya nonilfenol. Penelitian ini bertujuan untuk menentukan tingkat toksisitas akut nonilfenol  pada  ikan  nila  (Oreochromis  niloticus)  dan upaya remediasinya menggunakan tanaman air eceng gondok (Eichhornia  crassipes).

## BAHAN DAN METODE

## Uji Akut
Dua puluh ekor benih ikan nila digunakan sebagai ikan uji untuk masing-masing akuarium berukuran p:40 cm  x  l:50  cm  x  t:50  cm  yang  berisi  40  liter  air  dan dilengkapi  aerasi.  Sebelum  diberi  perlakuan,  benih ikan  diadaptasi  selama  seminggu  dan  diberi  pakan komersil. Persiapan larutan nonilfenol technical grade, mixture of ring and chain isomers (Sigma: CAS No. 84852- 15-3) dilakukan mengikuti metoda Yamin et al., (2017). Penyiapan larutan untuk uji toksisitas diawali dengan pembuatan larutan stok 1 yaitu melarutkan nonilfenol kedalam ethanol absolut (Merck: Em. 1.00983.2500) sampai  konsentrasi  64  g/L  (stok  1).  Kemudian menyiapkan larutan stok 2 dengan cara mencampurkan ethanol teknis dengan larutan stok 1 sampai mencapai konsentrasi 3,2 g/L. Stok 2 siap diaplikasikan untuk uji sesuai dengan konsentrasi  yang ditentukan. Bila belum digunakan, larutan stok 1 dan stok 2 disimpan dalam ruang pendingin 4 o C. Penelitian didesain dalam Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan enam perlakuan dan  tiga  ulangan.  Penentuan  konsentrasi  yang digunakan  dalam  penelitian  ini  berdasarkan  uji pendahuluan pengunaan nonilfenol kurang dari 0,1 mg/ L menyebabkan ikan hidup 100% dan konsentrasi 1,0 mg/L atau lebih tinggi menyebabkan 100% ikan mati dalam waktu uji 96 jam. Penelitian ini menggunakan konsentrasi nonilfenol 0,00 mg/L (kontrol); 0,4 mg/L; 0,5  mg/L;  0,63  mg/L;  0,80  mg/L;  dan  1,0  mg/L. Pergantian air pada akuarium uji dilakukan dengan cara
mangalirkan air dari bak penampungan (tandon) yang mengandung  nonilfenol  sesuai  dengan  konsentrasi yang ditentukan. Pergantian air dilakukan setiap hari sebanyak minimal 80 liter (200%) dari volume air di akuarium.  Selama  pemeliharaan  ikan  diberi  pakan komersil. Pengamatan kematian ikan dilakukan pada jam ke-2, 4, 6, 8, 10, 12, 24, 48, 72, dan 96. Analisis nilai LC 50 nonilfenol pada ikan menggunakan uji regresi probit.

## Pengurangan  Nonilfenol  Dalam  Media  Air
Prosedur  ujicoba  remediasi  nonilfenol  dari  air adalah sebagai berikut: Penelitian dilakukan di dalam 15 akuarium persegi panjang yang diberi media dasar (zeolit),  pupuk  dan  tanaman  sesuai  perlakuan.  Uji remediasi nonilfenol dari air dilakukan dalam wadah akuarium kaca dengan sistem resirkulasi. Penelitian didesain dalam rancangan acak lengkap (RAL) dengan lima perlakuan konsentrasi nonilfenol dan tiga ulangan, yaitu: A. konsentrasi nonilfenol 2,5 mg/L; B. nonilfenol 2,5 mg/L + zeolite; C. nonilfenol 2,5 mg/L + zeolit + eceng  gondok;  D.  nonilfenol  2,5  mg/L,  +  eceng gondok + zeolite + pupuk kandang; dan E. nonilfenol 2,5  mg/L  +  eceng  gondok  +  zeolite  +  pupuk hidroponik  (AB  mix).  Sebelum  diberi  perlakuan, tanaman diadaptasi dalam wadah uji selama seminggu. Perlakuan dilakukan dengan cara mengganti seluruh air dengan air yang mengandung nonilfenol (2,5 mg/ L).    Selanjutnya  dilakukan  pengamatan  konsentrasi nonilfenol dan fisik-kimia air pada hari ke 1, 2, 4, 8, dan 16.

## Analisis  Konsentrasi  Nonilfenol  Dalam  Air
Analisis  konsentrasi  nonilfenol  di  air  dilakukan melalui tahapan ekstrasi nonilfenol menggunakan Solid Phase Extractions (SPE) dilanjutkan dengan pengamatan menggunakan High Performance Liquid Chromatography (HPLC). Ekstraksi nonilfenol diawali dengan menambah 1  M  HCl  ke  dalam  air  sampel  sehingga  pH  turun menjadi  3,5.  Sementara  SPE  column  dikondisikan dengan cara mengalirkan 3  mL acetonitrile (CH 3 CN) (CAS No. 75-05-8), lalu dibilas dengan 3 mL ddH 2 O. Sebanyak 250 mL air sampel dilewatkan ke dalam SPE column tersebut lalu dibersihkan dengan 3 mL metha- nol (CH 3 OH) (CAS No. 67-56-1). Selanjutnya SPE col- umn  dielusi  dengan  3  mL  asetonitrile.  Hasil  elusi dievaporasi sampai kering kemudian dilusi dengan 1 mL  acetonitrile.  Pengukuran  kadar  nonilfenol menggunakan HPLC (Column: C18). Eluent A: acetoni- trile  dan  eluent  B:  methanol  dengan  perbandingan 50%:50%. Volume injeksi sampel 10 µL, flow rate 1 mL/ min, suhu 40 o C. Deteksi menggunakan UV 225nm.
Perubahan fisik-kimia air untuk amoniak dianalisis mengikuti SNI no 06-6989-30-2005, analisis nitrit (NO 2 )
mengikuti SNI No. 06-6989-9-2004 dan analisis nitrat mengikuti metode Brusin Sulfat (SNI 06-2480-1991). Data  kualitas  air  dianalisis  menggunakan  regresi dengan  program  excell  dan  disajikan  dalam  bentuk grafik.
Analisis  pengaruh  nonilfenol  pada  sintasan  ikan menggunakan  uji  Anova.  Hasil  yang  menunjukkan pengaruh nyata selanjutnya dianalisis dengan uji Tukey.

## HASIL DAN BAHASAN

## Toksisitas  Akut  Nonilfenol
Pengaruh beberapa konsentrasi nonilfenol terhadap sintasan  ikan  nila  pada  jam  ke-2  sampai  jam  ke-96 ditampilkan  pada  Gambar  1.  Pada  gambar  tersebut terlihat bahwa ikan yang terpapar nonilfenol 0,80 mg/ L mengalami kematian massal setelah lebih dari 2 jam dan semua ikan mengalami kematian pada jam ke-48. Sementara  pada  konsentrasi  0,63  mg/L  atau  lebih rendah terlihat kematian baru terjadi setelah lebih dari 8 jam. Bahkan pada konsentrasi nonilfenol 0,5 mg/L atau kurang, ikan yang mengalami kematian kurang dari 20% pada jam ke-96.
Hasil uji lanjut sintasan ikan nila pada jam ke-96 menunjukkan bahwa terdapat perbedaan yang nyata antara kontrol  dengan semua  perlakuan nonilfenol. Lebih lanjut diketahui bahwa antara ikan yang dipapar dengan  konsentrasi  0,80  mg/L  dengan  1,0  mg/L nonilfenol  tidak  berbeda  nyata  namun  berbeda terhadap perlakuan 0,63 mg/L; 0,5 mg/L; dan 0,3 mg/L (Gambar 2).
Hasil analisis LC 50 pada jam ke-4 sampai jam ke-96 ditampilkan  pada  Gambar  3.  Dari  gambar  tersebut terlihat pada jam  ke-96 (LC 50 -96  jam) terhadap  ikan nila berada pada 0,58 mg/L. Lebih lanjut terlihat bahwa
LC 50 dari  jam  ke-6  sampai  96  mengikuti  pola  linear sesuai  dengan  persamaan  y=  -0,002x  +  0,7539, dengan nilai R²= 0,9827.
Nonilfenol terlihat memiliki tingkat toksisitas yang cukup  tinggi  pada  benih  ikan  nila.  Konsentrasi terendah nonilfenol yang dapat menyebabkan kematian 100% (LC 100 ) pada ikan nila adalah 0,8 mg/L. Hasil ini lebih tinggi dibanding konsentrasi toksik dari Linier Alkylbenzene  Sulfonate  (L AS)  yang  memiliki konsentrasi ambang atas sebesar 100 mg/L (Suparjo, 2010). Kematian ikan ini umumnya terjadi setelah jam ke-2  sampai  6  setelah  ikan  terpapar  nonilfenol. Kematian mendadak ini diduga terjadi akibat ikan tidak dapat bernafas dan mati lemas atau dikenal sebagai sufokasi (suffocation). Sufokasi terjadi karena insang ikan memproduksi mukus secara berlebihan sehingga mengganggu  proses  pergantian  gas  di  insang  dan menyebabkan  ikan  kesulitan  bernafas  atau  disebut asfiksia (asphyxia) (Supriyono et al., 1998).
Dari hasil pengamatan menunjukkan bahwa ikan yang dipapar pada konsentrasi 1,0 mg/L, mati dengan kondisi mulut dan operculum terbuka lebar. Selain itu ditemukan  juga  ikan  yang  mati  terdapat  produksi lendir (mukus) yang berlebihan pada pada bagian luar insang dan seluruh permukaan tubuh. Terbukanya mulut dan operkulum ini terjadi akibat dari meningkatnya volume  mukus di  insang ikan.  Mukus adalah  cairan licin yang mengandung banyak  glikoprotein dan air yang  dihasilkan  oleh  kelenjar  mukus  (mucus  glands) (Esteban, 2012). Menurut Kurniasih & Tabbu (1994), bahwa  meningkatnya  produksi lendir  di  insang  dan kulit ikan sebagai reaksi tubuh untuk menghindari dari dampak buruk bahan pencemar yang masuk ke dalam tubuh.  Namun  demikian  produksi  lendir  yang berlebihan dapat mengancam kehidupan ikan karena
Gambar 1. Pola  sintasan  ikan  nila  setelah  terpapar  beberapa konsentrasi nonilfenol pada jam ke-2 sampai 96.
Figure 1.
Survival rate patterns of nile tilapia after exposed to vari- ous concentrations of nonylphenol between 2 and 96 hours.
. 0% 10% 20% 30% 40% 50% 60% 70% 80% 90% 100% - 2 4 6 8 10  12  24  48  72  96 Si n ta sa n ( Su rv iv al r at e) (% ) Jam (Hours) 0.00 0.40 0.50 0.63 0.80
1.00
dapat menghambat proses pertukaran oksigen dan CO 2 di  insang  (Suparjo,  2010).  Menurut  Suparjo  (2010), bahwa ikan yang terpapar deterjen dalam konsentrasi tertentu,  akan  mengalami  peningkatan  frekuensi pernafasan ikan dan konsumsi oksigen 2-3 kali lebih tinggi.  Peningkatan  ini  terjadi  akibat  berkurangnya aliran air yang melewati insang akibat adanya gangguan dari polutan atau akibat adanya penyumbatan insang oleh  gabungan  antara  mukus  dengan  zat  polutan. Adanya penumpukan kompleks deterjen dan mukus (coagulan)  yang  bersifat  tidak  larut  (insolubel)  dapat menghalangi  pertukaran  gas  di  insang.  Selain  itu adanya  senyawa  surfaktan  yang  tinggi  di  air  dapat menyebabkan  kerusakan  epitelium  insang  sehingga insang tidak dapat bekerja optimal untuk menyerap oksigen di air. Bila ini berlangsung terus maka akan diikuti  dengan  penurunan  ritme  pernafasan,  ikan mengalami  kehilangan  keseimbangan,  dan  akhirnya mati lemas. Selain itu kematian ikan nila mungkin juga terjadi karena nonilfenol yang terserap masuk ke dalam tubuh ikan menyebabkan pecahnya sel dan berinteraksi dengan  protein  dan  membran  semi  permeabel. Rusaknya sel-sel di insang menyebabkan berkurangnya fungsi insang dalam pertukaran gas (Supriyono et al., 1998).
Hasil  analisis  probit  menunjukkan  nilai  LC 50 nonilfenol pada ikan nila mengalami penurunan dengan semakin  lamanya  waktu  paparan.  Hasil  ini  sejalan dengan hasil penelitian Supriyono et al. (2008) yang menyatakan bahwa semakin lama waktu pemaparan akan menyebabkan toksisitas surfaktan AS semakin tinggi pada post larva udang windu. Selain itu hasil penelitian ini mendukung pendapat Rai et al. (2011)
yang  menyatakan  bahwa  efek  polutan  terhadap organisme  tergantung  dari  konsentrasi  dan  lama pemaparan polutan.
Hasil  uji  akut  nonilfenol  pada  ikan  nila menunjukkan bahwa LC 50 -96 jam nonilfenol yaitu 0,58 mg/L  (Gambar  3).  Berdasarkan  hasil  yang  diperoleh maka terlihat bahwa ikan nila terlihat tahan terhadap nonilfenol  dibandingkan  dengan  embrio  dari  ikan Rhinella arenarum, yang memiliki nilai LC 50 -96 jam 0.37 mg/L  (Mariel  et  al.,  2014).  Namun  demikian  LC 50 -96 jam ikan nila ini berada dalam kisaran LC 50 pada ikan- ikan lain yaitu antara 0,13-1,4 mg/L (Naylor, 1995).

## Pengurangan  Nonilfenol  Dalam  Media  Air
Pengaruh berbagai perlakuan terhadap pengurangan konsentrasi  nonilfenol  di  media  air  pada  hari  ke-1 sampai hari ke-16 ditampilkan pada Gambar 4.  Dari Gambar tersebut terlihat bahwa perlakuan tanaman eceng  gondok  (perlakuan  C,  D,  dan  E)  dapat menurunkan nonilfenol lebih cepat dibanding tanpa tanaman.  Namun  demikian  antara  perlakuan  eceng gondok yang diberi pupuk berbeda terlihat tidak ada perbedaan waktu yang signifikan. Pada hari pertama setelah  pemberian  nonilfenol  terlihat  konsentrasi nonilfenol sudah sangat jauh berkurang (98% atau lebih) dihampir semua perlakuan yang diberi tanaman eceng gondok.  Sebaliknya  tanpa  adanya  tanaman  maka konsentrasi nonilfenol di air masih cukup tinggi yaitu berkisar 80 persen. Penurunan konsentrasi nonilfenol yang  cukup  besar  pada  media  yang  tidak  terdapat tanaman eceng gondok baru terjadi pada hari ke-2, di mana kandungan nonilfenol pada perlakuan B sudah tidak terdeteksi dan pada kontrol tersisa sebesar 10%.
Gambar 2. Sintasan ikan nila yang terpapar nonilfenol selama 96 jam pada berbagai konsentrasi.
Figure 2. Survival  rate  of  nile  tilapia  after  96  hours  exposure  to  various concentrations of nonylphenol.
Huruf yang sama menunjukkan antara perlakuan tidak berbeda nyata (p>0,05)
The  same  letters  indicated  that  the  treatments  were  not  significantly  different  (p>  0.05) a a b c d d 0% 10% 20% 30% 40% 50% 60% 70% 80% 90% 100% 0.00 0.40 0.50 0.63 0.80 1.00 Si n ta ss an ( Su rv iv al r at e) (% )
Konsentrasi nonilfenol (NP concentration) (mg/L)
Secara  umum  terlihat  bahwa  semua  perlakuan termasuk  kontrol  terlihat  memiliki  kemampuan mengurangi konsentrasi nonilfenol di air. Walaupun demikian perlakuan yang menggunakan tanaman air terlihat  mampu  mengurangi  nonilfenol  lebih  cepat dibanding perlakuan yang tanpa menggunakan tanaman air.  Waktu  yang  diperlukan  untuk  mengurangi konsentasi  nonilfenol  di  air  dari  2,5  mg/L  menjadi mendekati  0,0  mg/L  adalah  satu  hari  sedangkan perlakuan yang tanpa tanaman membutuhkan waktu dua hari. Berkurangnya konsentrasi nonilfenol di air pada  perlakuan  kontrol  (tanpa  tanaman  dan  zeolit) diduga terjadi karena penyerapan nonilfenol oleh akar tanaman  eceng  gondok  dan  juga  adanya  peran mikroorganisme pendegradasi nonilfenol (biodegrad- able),  mikroalga,  cahaya  matahari  (photolisis),  dan resirkulasi (mekanis). Dari uji ini juga terlihat bahwa penambahan zeolit (perlakuan B) dan pemberian pupuk yang  berbeda  (perlakuan  D  dan  E)  pada  media  air terlihat  tidak  signifikan  dalam  mempercepat  waktu pengurangan  konsentrasi  nonilfenol  di  air  (Gambar 4).  Tidak  signifikannya  pengaruh  zeolit  dan penambahan  pupuk  dalam  penyerapan  nonilfenol diduga  karena  bahan-bahan  tersebut  tidak berkontribusi  langsung  dalam  menyerap  nonilfenol khususnya pada dua hari pertama proses remediasi.
Toksisitas  nonilfenol  di  air  terhadap  benih  ikan nila  juga  diamati dengan  dengan  cara  memasukkan dua  ekor  benih  ikan  nila  ke  masing-masing  bak perlakuan.  Hasil  pengamatan  menunjukkan  bahwa semua benih ikan nila segera mati pada saat pertama kali dimasukkan larutan nonilfenol 2,5 mg/L. Namun saat benih ikan nila dimasukkan pada keesokan harinya ternyata hanya ikan pada perlakuan C, D, dan E yang dapat  bertahan  hidup  sampai  hari  berikutnya.
Selanjutnya pada hari ke-2 saat diganti dengan ikan yang  baru,  ternyata  semua  ikan  diperlakuan  dapat bertahan hidup sampai selesai kegiatan penelitian (data tidak  ditampilkan).  Kematian  ikan  ini  diduga  ada hubungannya dengan penurunan konsentrasi nonilfenol di  hari  pertama  dan  kedua  pada  masing-masing perlakuan  (Gambar  4).  Sebaliknya  kematian  ikan tersebut  diyakini  bukan  akibat  amoniak  dan  nitrit karena konsentrasi kedua zat tersebut masih sangat rendah  pada  hari  ke-0  dan  ke-1.  Sementara  ketika konsentrasi  amonia  dan  nitrat  cukup  tinggi  seperti pada hari ke-16 (Gambar 5 dan 6), ternyata tidak ada ikan uji yang mengalami kematian.
Pengaruh  eceng  gondok  dalam  menurunkan konsentrasi  nonilfenol  di  air  diduga  melalui penyerapan langsung atau akibat berasosiasi dengan organisme air lainnya. Adanya kemampuan beberapa tanaman dalam menyerap nonilfenol sudah dilaporkan pada  penelitian  sebelumnya.  Bokem  et  al.  (1998) melaporkan  bahwa  akar  tanaman  Lycopersicon Esculentum,  Triticum  aestivum  Atriplex  hortensis  dapat menyerap  nonilfenol  (4-n-NP)  secara  langsung  dan mengirimnya  ke  tunas  dalam  dengan  metabolisme polar.  Namun  peningkatan  konsentrasi  nonilfenol dalam  media  dapat  membatasi  kemampuan  akar tanaman dalam menyerap nonilfenol (Sjöström et al., 2008). Sementara Doucette et al. (2005) melaporkan bahwa  residu  nonilfenol  yang  diremediasi  dengan tanaman grass ditemukan di akar (98%), dan sisanya di daun dan bagian tanaman lainnya. Di samping diserap secara  langung,  penyerapan  nonilfenol  juga  terjadi secara tidak langsung di mana nonilfenol mengalami proses  mineralisasi  terlebih  dahulu  oleh mikroorganisme  lalu  diserap  oleh  tanaman.  Hal  ini disebabkan  karena  tanaman  tidak  dapat  melakuan
Gambar 3. Konsetrasi letal (LC 50 ) selama 6-96  jam paparan dari nonilfenol pada ikan nila.
Figure 3.
Lethal  Concentration  (LC 50) on  6-96  hours  exposure  of nonylphenol for nile tilapia. y = -0.002x + 0.7539 R² = 0.9827 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 LC 5 0 (LC 50 )( m g/ L)
Waktu (jam) / Time (hours)
mineralisasi nonilfenol (Bokem et al., 1998). Namun demikian  tidak  semua  tanaman  dapat  menyerap nonilfenol  dimana  Belmont  &  Metcalfe  (2003) melaporkan bahwa ada atau tidaknya tanaman calla lily (Zantedeschia  aethiopica)  pada  sistem  subsurface  flow wetland  (SSFW)  tidak  menunjukkan  pengaruh  yang signifikan untuk pengurangan nonilfenol dari media budidaya.  Selain  oleh  tanaman  eceng  gondok, penurunan nonilfenol mungkin pula disebabkan adanya organisme lain (mikroorganisme, phytoplankton, atau zooplankton) yang terikut bersama eceng gondok saat pemindahan  tanaman  tersebut.  Kemampuan mikroorganisme dan mikroalga dalam mendegradasi nonilfenol sudah dilaporkan (Yu et al., 2012; Gao et al., 2011).

## Ammonia,  Nitrit,  dan  Nitrat
Amonia (NH 3 ), nitrit (NO 2 ), dan nitrat (NO 3 ) adalah senyawa  anorganik  yang  terbentuk  dari  mineraliasi bahan  organik  khususnya  protein  dan  asam  amino terutama berasal dari metabolisme ikan dan sisa pakan yang  tidak  termakan  (Djokosetiyanto  et  al.,  2006; USEPA,  2002).  Keberadaan  senyawa  ini  di  air  pada konsentrasi  tertentu  dapat  meracuni  dan membahayakan kehidupan ikan. Konsentrasi amonia di media air pada masing-masing perlakuan dari hari ke pertama sampai hari ke-16 menunjukkan adanya peningkatan di masing-masing perlakuan (Gambar 5). Adanya  peningkatan  amonia  pada  masing-masing perlakuan terjadi karena penelitian ini menggunakan
0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 0 1 2 4 8 16 K o n se n tr as i N P NP c on ce nt ra ti on ( m g/ L) Hari (Days) A B C D E Gambar 4. Pengurangan konsentrasi nonilfenol  di media air pada hari ke-1 sampai hari ke–16 dengan perlakuan remediator yang berbeda. Figure 4. Reduction of nonylphenol concentration in water from the 1 st to
16 th day in different remediator treatments
Gambar 5. Konsentrasi  amonia  air  uji  dengan  perbedaan  perlakuan remediasi selama penelitian.
Figure 5.
Concentrations  of  ammonia  in  water  treated  with  different remediators during the experiment.
-0.02 0 0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 0.12 0.14 0.16 0.18 0 5 10 15 20 Ko n se n tr as i A m o n ia A m m on ia c on ce nt ra ti on ( p p m ) Hari (Days) A B C D E Poly. (A) Poly. (D)
sistem resirkulasi yang menyebabkan terakumulasinya bahan  organik  dan  anorganik  dalam  sistem (Djokosetiyanto et al., 2006). Pada hari ke-16 terlihat bahwa  konsentrasi  amonia  pada  media  yang  diberi perlakuan tanaman terlihat lebih tinggi dibanding pada perlakuan tanpa tanaman. Lebih tingginya kadar amonia pada  perlakuan  C,  D,  dan  E  diduga  berasal  dari pembusukan tanaman seperti daun dan akar yang rusak akibat terpapar  nonilfenol pada saat  awal kegiatan. Konsentrasi amoniak (NH 3- N) pada akhir pengamatan cukup tinggi dibanding ambang batas baku mutu yang dipersyaratkan dalam Peraturan Pemerintah (PP) No. 82 tahun 2001 untuk budidaya ikan (  0,02 mg/L).
Secara  umum  konsentrasi  nitrit  (NO 2 )  dan  nitrat (NO 3 )  di  masing-masing  perlakuan  masih  berada  di bawah ambang baku mutu yang dipersyaratkan dalam Peraturan Pemerintah Republik Indonesia No. 82 tahun 2001 yaitu berturut-turut 0,06 dan 10 mg/L (Gambar 6 dan 7). Namun demikian konsentrasi nitrit dan nitrat di  air  selama  penelitian  menunjukkan  adanya peningkatan  di  semua  perlakuan.  Hasil  ini menunjukkan  bahwa  pada  media  tersebut  terjadi proses  nitrifikasi  yaitu  proses  perombakan  amonia menjadi nitrit dan nitrat yang tidak berbahaya. Proses nitrifikasi  ini  umumnya  melibatkan  bakteri-bakteri yang berperan dalam proses oksidasi amonia menjadi
Gambar 7. Konsentrasi  nitrat  air  uji  dengan  perbedaan  perlakuan remidiasi selama penelitian.
Figure 7. Concentrations of nitrite in water treated with different remediators during the experiment. Gambar 6. Konsentrasi  nitrit  air  uji  dengan  perbedaan  perlakuan remidiasi selama penelitian. Figure 6. Concentrations of nitrite in water treated with different remediators during the experiment.
0 0.01 0.02 0.03 0.04 0.05 0.06 0.07 0.08 0.09 0 5 10 15 20 Ko n se n tr as i Ni tr it ni tr it e co nc en tr at io n (p pm ) Hari (Days) A B C D E Poly. (A) Poly. (B) 0 0.005 0.01 0.015 0.02 0.025 0.03 0.035 0.04 0.045 0 5 10 15 20 K o n se n tr as i N it ra t N it ra te c on ce nt ra ti on ( p p m ) Hari (Days) A B C D E Poly. (A) Log. (D)
nitrit  dan  nitrat  seperti  Nitrosomonas,  Nitrosococcus, Nitrospira, Nitrosolobus, dan Nitrosovibrio (Hastuti et al., 2011).

## KESIMPULAN
Tingkat  toksisitas  nonilfenol  menyebabkan kematian  100%  benih  ikan  nila  (O.  niloticus)  pada konsentrasi 0,80 mg/L atau lebih dengan waktu kurang dari 48 jam. Nilai LC 50 -96 jam nonilfenol terhadap benih ikan  nila  adalah  sebesar  0,58  mg/L.  Pengurangan konsentrasi nonilfenol dari konsentrasi 2,5 mg/L dapat dilakukan dengan menambahkan tanaman air eceng gondok  (Eichhornia  crassipes)  yang  diletakkan  pada sistem  resirkulasi.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan  terima  kasih kami  sampaikan  pada  Bayu dan Nian atas bantuan dalam analisis kualitas air dan perawatan ikan selama pelaksanaan penelitian.

## DAFTAR PUSTAKA
Belmont, M.A. & Metcalfe, C.D. (2003). Feasibility of using ornamental plants (Zantedeschia aethiopica) in subsurface flow treatment wetlands to remove nitrogen,  chemical  oxygen  demand  and nonylphenol ethoxylate surfactants-a laboratory- scale study. Ecological Engineering, 21(2003), 233- 247.
Brigden,  K.,  Santillo,  D.,  &  Johnston,  P.  (2012). Nonylphenol  ethoxylates  (NPEs)  in  textile  pro- ducts,  and  their  release  through  laundering. Greenpeace  Research Laboratories  Technical  Re- port. 01/2012, 14 hlm.
Bokem,  M.,  Raid,  P.,  &  Harms,  H.  (1998).  Toxicity, Uptake  and  Metabolism  of  4-n-Nonylphenol  in Root Culturesand Intact Plants under Septic and Aseptic  Conditions.  Environmental  Science  & Pollutant.Research, 5(1), 21-27.
Christiansen, T., Korsgaard, B., & Jespersen, A. (1998).
Effects  of  nonylphenol  and  17â-oestradiol  on vitellogenin synthesis, testicular structure and cy- tology in male Eelpout Zoarces viviparus. The jour- nal of experimental biology, 201, 179-192.
Cardinali, M., Maradonna, F., Olivotto, I., Bortoluzzi, G.,  Mosconi,  G.,  Polzonetti,  Magni,  A.M.,  & Carnevali, O. (2004). Temporary impairment of re- production  in  freshwater  teleost  exposed  to nonilfenol. Reproductive toxicology, 18, 597-604.
Djokosetiyanto, D., Sunarma, A., & Widanarni. (2006). Perubahan  Amonia  (NH 3 -N),  Nitrit  (NO 2 -N),  dan Nitrat (NO 3 -N) Pada Media Pemeliharaan Ikan Nila Merah  (Oreochromis  sp.)  di  Dalam  Sistem
Resirkulasi.  Jurnal  Akuakultur  Indonesia,  5(1), 13-20.
Doucette,  W.J.,  Wheeler,  B.R.,  Chard,  J.,  Bugbee,  B., Naylor,  C.G.,  Carbone,  J.P.,  &  Sims,  R.C.  (2005). Uptake  of  nonylphenol  and  nonylphenol ethoxylates by crested wheatgrass. Environmental Toxicology and Chemistry, 24(11), 2965-72.
Duong,  C.N.,  Ra,  J.S.,  Cho,  J.,  Kim,  S.D.,  Choi,  H.K., Park, J.H., Kim, K.W., Inam, E. & Kim, S.D. (2010). Estrogenic  chemicals  and  estrogenicity  in  river waters of South Korea and seven Asian countries. Chemosphere, 78, 286-293.
Eropa  Commission.  (2008).  Priority  Substances  and Certain Other Pollutants according to Annex II of Directive 2008/105/EC. https://ec.europa.eu/envi- ronment/water/water-framework/priority_ substances.htm.
Esteban, M.Á. (2012). An  Overview of the Immuno- logical  Defenses  in  Fish  Skin.  International Scholarly Research Network (ISRN) Immunology, 2012, Article ID 853470, 29 pp.
Gao,  Q.T.,  Wong,  Y.S.,  &  Tam,  N.F.  (2011).  Removal and  biodegradation  of nonylphenol  by  different Chlorella  species.  Marine  Pollution  Bulletin, 63 (5-12), 445-51.
Gao,  J.,  Dang,  H.,  Liu,  L.,  &  Jiang,  L.  (2015). Remediation  effect  of  contaminated  water  by water hyacinth (Eichhornia crassipes (Mart.) Solms). Journal  Desalination  and  Water  Treatment,  55(2), 1-8.
Garno,  Y.S.  (2001). Status  Dan  Karakteristik Pencemaran  di  Waduk  Kaskade  Citarum.  Jurnal Teknologi Lingkungan, 2(2), 207-213.
Greenpeace.  (2013).  Toxic  Threads:  Meracuni  Surga. Jakarta (ID). Greenpeace International.
Hariyadi,  R.  (2006).  Pengaruh  pencemaran  limbah industri dan domestik terhadap kualitas air Waduk Duriangkang.  Jurnal  Teknologi  Lingkungan,  7(3), 271-276.
Hastuti  Y.P.  (2011).  Nitrifikasi  dan  denitrifikasi  di tambak. Jurnal Akuakultur Indonesia, 10(1), 89-98.
Junk, G.A., Svec, H.J., Vick, R.D., & Avery, M.J. (1974). Contamination  of  water  by  synthetic  polymer tubes.  Environmental  Science  and  Technology,  8, 1100-1106.
Kinnberg,  K.,  Korsgaard,  B.,  Bjerregaard,  P.,  & Jespersen, Å. (2000). Effects of Nonylphenol and 17  -Estradiol  on  Vitellogenin  Synthesis  and Testis Morphology in Male Platyfish Xiphophorus maculatus. The Journal of Experimental Biology, 203, 171-181.
Komisi  Pestisida.  (1983).  Pedoman  Umum  Pengujian Laboratorium  Toksisitas  Letal  Pestisida  pada  Ikan Untuk Keperluan Pendaftaran. Jakarta (ID): Komisi Pestisida,  Departemen  Pertanian.
Kurniasih  &  Tabbu,  C.R.  (1994).  Patologi  Umum Gangguan Pertumbuhan dan Gangguan Metabolisme Sel. Lab. (51 hlm.). Yogyakarta (ID): Patologi Fakultas Kedokteran Hewan. Universitas Gadjah Mada.
Lagos, C.,  Urrutia, R., Decap, J., Martínez, M., & Vidal G.  (2009). Eichhornia crassipes used  as  tertiary color  removal  treatment  for  Kraft  mill  effluent. Desalination, 246(1-3), 45-54.
Lee, C.C., Jiang, L.Y., Kuo, Y.L., Chen, C.Y., Hsieh, C.Y.,
Hung, C.F., & Tien, C.J. (2015).  Characteristics of nonylphenol and bisphenol A accumulation by fish and implications for ecological and human health. Science of the Total Environment, 502, 417-425.
Li, M.H. & Wang, Z.R. (2005). Effect of nonylphenol on  plasma  vitellogenin  of  male  adult  guppies (Poecilia reticulata). Environmental Toxicology, 20(1), 53-9.
Lukáèová, J., Kòažická, Z., Tvrdá, E., Massányi, P., & Lukáè, N. (2013). The toxic effect of 4-nonylphenol on  male  reproductive.  Journal  of  Microbiology, Biotechnology and Food Sciences, 1, 1455-1468.
Mariel, A.C.,  Alejandrab, B.P., & Silvia,  P.C.C. (2014). Developmental  toxicity  and  risk  assessment  of nonylphenol to the South American toad, Rhinella arenarum.    Environmental  toxicology  and  pharma- cology, 38, 634-642.
McNamara, P.J., Wilson, C., Wogen, M.W., Murthy, S.,
Novak,  J.T.,  &  Novak,  P.J.  (2012).  The  Effect  of Thermal Hydrolysis Pretreatment on the Anaero- bic Degradation of Nonylphenol and Short-Chain Nonylphenol  Ethoxylates  in  Digested  Biosolids. Water Research, 46(9), 2937-2946.
Nagao,  T.,  Wada,  K.,  Marumo,  H.,  Yoshimura,  S.,  & Ono, H. (2001). Reproductive effects of nonilfenol in rats after gavage administration a two-genera- tion study. In Reproductive toxicology, 5, 293-315.
Naylor, C.G.  1995. Environmental fate and  safety of nonylphenol  ethoxylates.  Textile  Chemists  and Colorists, 27,
29-33. https://
p d f s . s e m a n t i c s c h o l a r . o r g / 6 5 9 3 / 54f6c71a2f7c8776baf68b24567f03075fa6. pdf?.
Pujiastuti,  P.,  Ismail,  B.,  &  Pranoto.  (2013).  Kualitas dan  Beban  Pencemaran  Perairan  Waduk  Gajah Mungkur. Jurnal EKOSAINS, V(1), 59-75.
Rai, R., Rajput, M., Agrawal, M., & Agrawal, S.B. (2011). Gaseous Air Pollutants: A Review on Current and Future Trends of Emissions and Impact On Agri- culture. Journal of Scientific Research, 55, 77-102.
Sarkara,  M.,  Rahmana,  A.K.M.L.,  &  Bhoumik,  N.C.
(2017). Remediation of chromium and copper on water hyacinth (E. crassipes) shoot powder. Water Resources and Industry, 17, 1-6.
Sjöström, Å.E., Collins, C.D., Smith, S.R., & Shaw G. (2008).  Degradation  and  plant  uptake  of nonylphenol (NP) and nonylphenol-12-ethoxylate (NP12EO)  in  four  contrasting  agricultural  soils. Environmental Pollution, 156, 1284-1289.
Shah, R.A., Kumawat, D.M., Singh, N., & Wani, K. A. (2010). Water Hyacinth (Eichhornia crassipes) as A Remediation  Tool  for  Dye-Effluent  Pollution. International  Journal  of  Science  and  Nature,  1(2), 172-178.
Suparjo, M.N. (2010). Kerusakan Jaringan Insang Ikan Nila Oreochromis Niloticus L Akibat Deterjen. Jurnal Saintek Perikanan, 5(2), 1-7.
Supriyono,  E.,  Takashima,  F.,  &  Stussmann,  C.A. (1998). Toxicity of linear alkylbenzene sulphonate (L AS)  to  juvenile  kuruma  shrimp,  Penaeus japonicus: a histopathological study on acute and sub-chronic  levels.  Journal  of  Tokyo  University  of Fisheries, 85(1), 1-10.
Supriyono,  E.,  Berlianti,  &  Nirmala,  K.  (2008).  Studi Mengenai  Toksisitas  Surfaktan  Deterjen,  Alkyl Sulfate  (As),  Terhadap  Post  Larva  Udang  Windu Penaeus monodon Fabr. Jurnal Ilmu-ilmu Perairan dan Perikanan Indonesia, 15(2), 141-148.
Tanaka,  J.N.  &  Grizzle,  J.M.  (2002).  Effects  of nonylphenol on the gonadal differentiation of the hermaphroditic  fish,  Riulus  marmoratus.  Aquatic Toxicology, 57, 117-125.
USEPA. (2002). Nitrification. Office of Ground Water and  Drinking  Water.  Pennsylvania  Ave.,  NW Washington D.C.
USEPA. (2005). Aquatic Life Ambient Water Quality Crite- ria-Nonylphenol.  Final.  Office  of  Water,  Office  of Science and Technology, Washington, DC. EPA-822- F-05-003.
USEPA.  (2010).  Nonylphenol  (NP)  and  Nonylphenol Ethoxylates  (NPEs),  Action  Plan.  [RIN2070-ZA09]. https://www.epa.gov/sites/production/files/ 2015- 0 9 / d o c u m e n t s / r i n 2 0 7 0 - z a 0 9 _ n p - npes_action_plan_final_2010-08-09.pdf
Weber, L.P., Yiannis, K., Hwang, G.S., Niimi, A.J., Janz, D.M., & Metcalfe, C.D. (2002). Increased cellular apoptosis  after  chronic  aqueous  exposure  to nonilfenol and quercetin in adult medaka (Oryzias latipes). Comparative Biochemistry and Physiology Part C Pharmacology, Toxicology and Endocrinology, 131, 51-59.
Yamin,  M.,  Supriyono,  E.,  Nirmala,  K.,  Zairin,  Jr.M., Haris,  E., &  Rahmawati,  R.  (2017). The  effect  of nonylphenol  on  spermiogram,  hematological properties and reproductive ability of comet gold- fish  (Carassius  auratus).  AACL  Bioflux,  10(4), 787-796.
Yu,  D.U.,  Kim  D.M.,  Chung,  Y.H.,  Lee,  Y.B.,  &  Kim, Y.M.  (2012).  Isolation  and  Characterization  of
Nonylphenol-degrading  Bacteria.  Fisheries  and Aquatic Science, 15(2), 91-97.
Yu, Z., Peldszus, S., & Huck, P.M. (2008). Adsorption characteristics of selected pharmaceuticals and an endocrine  disrupting  compound  Naproxen, carbamazepine and nonilfenol on activated carbon. Water Research, 42(12), 2873-2882.