## Analisis  Kadar Rhodamin B Pada Blush-On Menggunakan  Metode Spektrofotometri Uv-Vis
Muhammad Taupik* 1 , Moh, Adam Mustapa 2 , Sintia  Gonibala 3
1,2,3,4Jurusan Farmasi, Fakultas Olahraga dan Kesehatan, Universitas Negeri Gorontalo, Gorontalo *E-mail: muhtaupik@ung.ac.id
Article Info: Received: 12 April 2021 in revised form: 15 Mei 2021 Accepted: 19 Mei 2021 Available Online: 19 Mei 2021

## ABSTRACT
Cosmetic are mixture of materials that are ready to be used on the  outside  of  the  body.  One  type  cosmetics  makeup  that  is often  used  is  Blush-On.  This  Blush-On  cosmetics  has  a distinictive red color, so it issu red color, so it is suspected that there  is  still  a  misuse  in  the  addition  of  Rhodamine  B  to Blush—n  cosmetics,  especially  cosmetics  that  are  not registered to BPOM (The Nationalof Drug and Food Control). Based  on  the  PERMENKES  RI  No.  445/Menkes/Per/V1998 concerning  certain  dyes  declared  dangerous  it  is  a  synthetic dye Rhodamine B which is one of the dyes that is prohibited for  use  in-cosmetics  products  because  the  fidings  of  BPOM from 2014 to 2015, Rhodamine B is still used as one of the dyes. This study aims to knowthe misuse of the addition of synthetic dye  Rhodamine  B  to  Blush-On  cosmetics  and  to  know  how much  Rhodamine  B  is  contained  in  the  Blush-On  cosmetic samples.  The  results  of  the  qualitative  test  with  the  staining method on the Blush-On cosmetics samples A,B,C,D, and E, it is  sample  E  that  produces  a  clear  reddish  color  that  has  he potential to contain Rhodamine B . Furthemore, it is continued with a quantitative test by using Uv-Vis Spectrofotometry, and it  obtains  levels  of  Rhodamine  B  in  sample  E  is 9,98mquantitative test by using Uv-Vis Spectrofotometry, and it obtains levels of Rhodamine B in sample E is 9,98mg/g.
Keywords : Rhodamine B, Blush-On , Cosmetics, Uv-Vis Spectrofotometry

## Corresponding Author:
Sintia S.H. Gonibala Jurusan Farmasi Fakultas Olahraga dan Kesehatan Universitas Negeri Gorontalo Kota Gorontalo Indonesia E-mail:
sintagonibala@gmail.com
Copyright © 2021  IJPE-UNG
This open access article is distributed under a Creative Commons Attribution (CC-BY-NC-SA) 4.0 International license.
How to cite (APA 6 th Style): Taupik,M et al. (2021). Analisis Kadar Rhodamin B Pada Blush On Dengan Metode Spektrofotometri Uv-Vis. Indonesian Journal of Pharmaceutical  (e-Journal),x (x), x-x. doi:10.22487/j24428744.xxxx.vx.ix. xxxxx
Indonesian Journal of Pharmaceutical Education (e-Journal) 2021; 1 (2): 119 – 126
ISSN : 2775-3670 (electronic) Journal Homepage: http://ejurnal.ung.ac.id/index.php/ijpe/index DOI: 10.37311/ijpe.v1i2.10666

## ABSTRAK
Kosmetik adalah sediaan atau paduan bahan  yang siap untuk digunakan pada bagian luar badan. Salah-satu jenis kosmetik rias yang sering digunakan adalah perona pipi atau (Blush On) . Sediaan kosmetik perona pipi ini memiliki warna khas merah, sehingga diduga masih ada penyalahgunaan dalam penambahan Rhodamin B pada kosmetik perona pipi terutama kosmetik  yang  tidak  terdaftarkan  ke  BPOM.  Berdasarkan  PERMENKES  RI No.445/Menkes/Per/V/1998  tentang  Zat  Warna  Tertentu  yang  Dinyatakan  Berbahaya, adalah  zat  warna  sintetis  Rhodamin  B  yang  merupakan  salah  satu  pewarna  yang  dilarang digunakan dalam produk kosmetika serta temuan Balai POM tahun 2014 sampai 2015 masih terdapat  Rhodamin  B  yang  digunakan  sebagai  salah  satu  pewarna.  Tujuan  penelitian  ini dilakukan    untuk  mengetahui  adanya  penyalahgunaan  penambahan  pewarna  sintetis Rhodamin  B  pada  kosmetik  perona  pipi (Blush-On) dan  berapa  kadar  Rhodamin  B  yang terkandung  dalam  sampel  kosmetik  perona  pipi (Blush-On). Metode  yang  digunakan  pada penelitian  ini  yaitu  secara  kualitatif  dengan  menggunakan  uji  pewarnaan  sebagai  uji pendahuluan dan kuantitatif menggunakan spektrofotometri uv-vis untuk mengetahui kadar Rhodamin  B  yang  terkandung  dalam  sampel.Hasil  penelitian  uji  kualitatif  dengan  metode pewarnaan  pada  sampel  perona  pipi (Blush-On) dari  sampel  A,  B,  C,  D,  dan  E  terdapat  1 sampel yang menghasilkan warna bening kemerah mudahan yang berpotensi mengandung Rhodamin  B  yaitu  sampel  E.s  Setelah  itu  dilanjutkan  dengan  uji  kuantitaif  menggunakan spektrofotometri uv-vis dan diperoleh kadar Rhodamin B pada sampel E sebesar 9,98 mg/g. Kata Kunci: Rhodamin B, Kosmetik Perona Pipi (Blush-On), Spektrofotometri Uv-Vis

## 1. Pendahuluan
Kosmetik merupakan kebutuhan yang telah lama dipergunakan dan dikembangkan oleh manusia. Seiring dengan berkembangnya tingkat ilmu pengetahuan tentang perawatan tubuh, budaya dan tingkat sosial ekonomi, penggunaan kosmetik pun kian meningkat dan beragam. Apalagi dengan perkembangan teknologi,  khususnya yang berkaitan dengan kosmetik.
Kosmetik  pada  umumnya  merupakan  kosmetik  rias  dan  pemeliharaan.  Kosmetika  rias semata-mata  hanya  melekat  pada  bagian  tubuh  yang  dirias  dan  dimaksudkan  agar  terlihat menarik serta dapat menutupi kekurangan yang ada.[16]
Kosmetik ini hanya terdiri dari zat pewarna dan pembawa saja. Kosmetik sendiri saat ini telah menjadi sebuah lahan perdagangan yang mempunyai omset yang memuaskan, sehingga banyak  dari  para  produsen  yang  tidak  mementingkan  kesehatan  para  konsumen  dengan mengesampingkan kualitas.Artinya banyak produk yang kini beredar di pasaran mengandung beberapa zat yang tidak memenuhi syarat kelayakan pemakaian. [1]
Berdasarkan  data  Kementerian  mencatat  pada  tahun  2017,  industry  kosmetik  nasional tumbuh mencapai 6,35% dan naik menjadi 7,36% di tahun 2018 dan untuk tahun 2019  industri kosmetik dapat tumbuh hingga 9,67%. Dengan jumlah tersebut, Indonesia merupakan potential market bagi para pengusaha industri kecantikan baik dari luar maupun dalam negeri.
Kebutuhan  manusia  akan  kosmetika  tentunya  sangat  beralasan,  mengingat  keberadaan manusia  itu  sendiri  sebagai  makhluk  sosial,  yang  dalam  berinteraksi  dengan  sesamanya memerlukan  bekal  kepercayaan  diri  agar  dapat  diterima  dengan  baik.  Untuk  itu  manusia memerlukan  perawatan  diri  yang  dengan  itu  diharapkan  dapat  tampil  mempesona,  menarik, dan penuh rasa percaya diri
Salah-satu jenis kosmetik rias yang sering digunakan adalah perona pipi atau (Blush On) . Produk  kosmetik    Perona  pipi  digunakan  dengan  tujuan  mengoreksi  wajah  sehingga  wajah tampak lebih cantik, segar dan berdimensi. Perona pipi tersedia dalam berbagai pilihan warna, yaitu merah, merah muda, jingga, dan kecoklatan.[11]
Dahulu  bahan  yang  dipakai  untuk  memproduksi  kosmetik  berasal  dari  bahan-bahan alam. Namun saat ini para produsen lebih memilih untuk menggunakan zat warna sintetik untuk bahan  tambahan  yang  digunakan  karena  relatif  lebih  murah  dan  dapat  menghasilkan  warna yang  terang  dan  stabil  dalam  pemakaian.  Zat  warna  sintetik  saat  ini  telah  digunakan  pada beberapa jenis makanan, obat dan kosmetik.[2]
Rhodamin B adalah zat pewarna sintetis yang sering disalahgunakan pemanfaatannya dalam produk kosmetika.  Secara umum zat warna tersebut berupa kristal  yang tidak berbau, berwarna hijau atau ungu kemerahan, dan dalam bentuk larutan berwarna merah terang dan berfluoresensi. [4]
Pada  penelitian  ini  digunakan  uji  pewarnaan  untuk  uji  pendahuluan,  selanjutnya dikonfirmasi  dengan  menggunakan  metode  spektrofotometri  Uv-Vis.  Keuntungan  utama metode  spektrofotometri  adalah  bahwa  metode  ini  memberikan  cara  sederhana  untuk menetapkan kualitas zat yang sangat kecil. Selain itu, hasil yang diperoleh cukup akurat, dimana angka  yang  terbaca  langsung  dicatat  oleh  detektor  dan  tercetak  dalam  bentuk  angka  digital ataupun grafik yang sudah diregresikan. [10]
Berdasarkan  uraian  diatas  peneliti  tertarik  untuk  melakukan  penelitian  mengenai “Analisis  Kadar  Rhodamin  B  pada  Perona  Pipi (Blush-On) di  Kota  Gorontalo  dengan menggunanakan uji analisis Kromatografi Lapis Spektrofotometri Uv-Vis.”
2.  Metode
Desain  penelitian  yang  dilakukan  adalah  penelitian  experimental,  karena  penelitian bersifat laboratories, serta peneliti memberikan perlakuan terhadap sampel yang akan dianalisis kadarnya dengan menggunakan spektrofotometri uv-vis.
Penelitian  ini  dilakukan  di  Laboratorium  Kimia  Analisis  ,  Jurusan  Farmasi,  Fakultas Olahraga  dan  Kesehatan,  Universitas  Negeri  Gorontalo,  dan  Laboratorium  Ilmu  Teknologi Pangan, Fakultas Pertanian, Universitas Negeri Gorontalo.

## Alat dan Bahan
Alat-alat yang digunakan pada penelitian ini yaitu : Batang pengaduk, chamber, corong pisah, Erlenmeyer, kertas saring, labu tentukur, neraca analitik, pipet tetes, pipet volume, rak tabung, spektrofotometri UV-Vis, spatula, tabung reaksi.
Bahan yang digunakan pada penelitian ini yaitu : Amonia, asam klorida pekat, eter, HCL, aquadest, etil asetat, NaOh, N-butanol, plat silika gel, rhodamin B, sampel perona pipi, methanol.

## Pengambilan Sampel
Sampel yang digunakan diambil dari populasi berdasarkan tiga parameter  yaitu Perona Pipi  yang  tidak  dicantumkan  bahan-bahan  yang  digunakan,  tulisan  dalam  kemasannya menggunakan bahasa selain bahasa Indonesia, dalam kemasannya tidak terdapat nomor ijin edar dari BPOM atau Depkes.
Analisis Kualitatif
1. Persiapan sampel
Sampel blush-on sebanyak 2 gram dimasukkan ke dalam beaker glass 100 mL, kemudian sampel  di  larutkan  dengan  30  mL  aquadest  dan  di  aduk  hingga  larut  dalam  air.  Selanjutnya dipisahkan  antara  larutan  zat  warna  dengan  destilat  sampel  dengan  cara  campuran  sampel dengan aquadest yang ada di dalam beaker glass yang telah diaduk diambil sisa sampelnya lalu kemudian  ampasnya  dibuang  dan  di  dapatkan  larutan  zat  warna  yang  akan  digunakan pengujian
2. Pemeriksaan Kualitatif dengan Metode Uji Pewarnaan [13]
Reaksi khusus untuk Rhodamin B Larutan uji 2-5 mL diberikan NaOH 10% tetes demi tetes  sampai  menjadi  basa,  kemudian  dimasukkan  ke  dalam  corong  pisah  dan  diber  Eter. Selanjutnya larutan digojog dan dipisahkan untuk diambil fase Eternya, kemudian ditambahkan HCl 10% secukupnya untuk melihat perubahannya. Jika larutan uji mengandung Rhodamin B, maka terlihat pada lapisan bawah atau lapisan asam berwarna merah. Pembuatan Larutan Baku Pembanding  Kontrol  Positif:  50  mg  Rhodamin  B  dilarutkan  dengan  10  mL  Metanol.  Kontrol Negatif : 5 mL Metanol murni.
Analisis Kuantitatif
1. Pembuatan Larutan Rhodamin B 1000 ppm
Ditimbang  50  mg  pewarna  Rhodamin  B  BPFI  dimasukkan  kedalam  tentukur  50  ml didalam  labu  tentukur  ditambahkan  metanol  secukupnya  dan  dikocok  hingga  homogen. Kemudian larutan dicukupkan dengan metanol hingga garis tanda kemudian dihomogenkan.
2. Pembuatan Larutan Rhodamin B 50 ppm
Dipipet  2,5  ml  larutan  Rhodamin  B  1000  ppm  dengan  menggunakan  pipet  volum kemudian  dimasukkan  kedalam  labu  tentukur  50  ml  lalu  ditambahkan  metanol  sampai  garis tanda.
3. Penentuan Panjang Maksimum Larutan Rhodamin B
Dipipet  2 ml larutan Rhodamin B dengan menggunakan pipet volum dan dimasukkan kedalam labu tentukur 50 ml (konsentrasi 2 ppm), lalu ditambahkan metanol sampai garis tanda dan dihomogenkan. Diukur serapan maksimum pada panjang gelombang 400-800 nm dengan menggunakan blangko. Blangko yang digunakan adalah metanol.
4. Penentuan Linieritas Kurva Kalibrasi
Dipipet larutan Rhodamin B 50 ppm dengan menggunakan pipet volum kedalam labu tentukur 50 ml berturut-turut 2 ml; 4 ml; 6 ml; 8 ml; 10 ml (2; 4; 6; 8; dan 10 ppm) kedalam masing- masing  labu  tentukur  tersebut  ditambahkan  metanol  sampai  garis  tanda.  Dikocok  homogen, kemudian diukur serapannya pada panjang gelombang 545 nm.
5. Uji Kuantitatif Sampel
Sejumlah lebih kurang 5 gram cuplikan perona pipi  dimasukkan kedalam labu tentukur, kemudian  ditambahkan  16  tetes  Asam  klorida  4  N,  ditambahkan  30  ml  metanol,  kemudian dihomogenkan. Disaring, dengan membuang 2-5 ml filtrat pertama, dilakukan berulang-ulang sampai  larutan  sampel  jernih.  Filtrantya  ditampung  dalam  labu  tentukur  50  ml.  Dicukupkan dengan  metanol  sampai  garis  tanda  dan  dihomogenkan.  Dipipet  2  ml  filtrat  kemudian dimasukkan kedalam labu tentukur 25 ml, dicukupkan dengan metanol sampai garis tanda dan dihomogenkan, diukur serapannya pada panjang gelombang 545 nm.

## 3. Hasil dan Pembahasan
Pada  penelitian  ini,  terdapat  5  sampel  kosmetik  yang  akan  dianalisis,  1  sampel  tidak terdapat  nomor  ijin  edar  dari  BPOM  dan  Depkes,  2  sampel  pada  kemasannya  tidak menggunakan bahasa indonesia, dan juga tidak dicantumkan komposisi bahan yang digunakan, 2 sampel lainnya terdapat nomor ijin edar dari BPOM dan Depkes.

## Hasil Uji Kualitatif Dengan Metode Uji Pewarnaan
Sebelum dilakukan analisis kuantitatif rhodamin B pada sampel, perlu terlebih dahulu dilakukan identifikasi untuk mengetahui ada tidak rhodamin B pada sampel yang diteliti dengan menggunakan metode uji pewarnaan. Hasil uji tersebut terdapat pada Tabel I. sebagai berikut:
Tabel 4.1 Hasil Identifikasi Kualitatif Sampel

## Analisis Spektrofotometri Uv-Vis Identifikasi Panjang Gelombang Maksimum
Dari hasil pengukuran panjang gelombang maksimal Rhodamin B pada rentang panjang gelombang 500– 550 nm diperoleh serapan maksimal pada panjang gelombang 545 nm dengan nilai  serapan  sebesar  0,617.  Hasil  pengukuran  panjang  gelombang  maksimal  larutan  baku Rhodamin B yang diperoleh masuk  dalam range panjang  gelombang literature yang ada yaitu 400-800 nm.[3]
No.  Kode Sampel Warna Secara Visual Positif/Negatif 1. A Bening Negatif Rhodamin B 2. B Bening Negatif Rhodamin B 3. C Bening Negatif Rhodamin B 4. D Bening Negatif Rhodamin B 5. E Bening Kemerah mudahan Diduga positif Rhodamin B
Tabel 4.2 Panjang Gelombang Maksimum Rhodamin B Konsentrasi (ppm) Absorbansi (nm) Panjang Gelombang (nm) 10 mL 0,617 nm 545 nm

## Validasi Metode Analisis
Validasi metode analisis adalah suatu tindakan penelitian terhadap parameter tertentu, berdasarkan  percobaan  dari  laboratorium,  untuk  membuktikan  bahwa  parameter  tersebut memenuhi  persyaratan  untuk  penggunanya.[7]  Validasi  metode  analisis  bertujuan  untuk mengkonfirmasi bahwa metode analisis tersebut dapat sesuai untuk peruntukannya.[6]  Validasi metode  dilakukan  untuk  menjamin  bahwa  metode  analisis  akurat,  spesifik,  reprodusibel  dan tahan pada kisaran analit yang akan dianalisis.[6]

## Penentuan Linearitas Kurva Rhodamin B
Linieritas  menunjukkan  kemampuan  suatu  metode  analisis  untuk  memperoleh  hasil pengujian  yang  sesuai  dengan  konsentrasi  analit  yang  terdapat  pada  sampel  pada  kisaran konsentrasi  tertentu.  Rentang  dapat  dilakukan  dengan  cara  membuat  kurva  kalibrasi  dari beberapa set larutan standart yang telah diketahui konsentrasinya.[5]
Linieritas  dapat  dilihat  melalui  kurva  kalibrasi  yang  menunjukkan  hubungan  antara respon  dengan  konsentrasi  analit  pada  beberapa  seri  larutan  baku.  Dari  kurva  kalibrasi  ini kemudian akan ditemukan regresi linearnya yang berupa persamaan y=bx+a, dimana x adalah konsentrasi,  y  adalah  respon,  a  adalah  intersep  y  yang  sebenarnya  dan  b  adalah  slope  yang sebenarnya. Tujuan dari dibuatnya regresi ini adalah untuk menentukan estimasi terbaik untuk slope  dan  intersep  y  sehingga  akan  mengurangi  residual  error,  yaitu  perbedaan  nilai  hasil percobaan  dengan  nilai  yang  diprediksi  melalui  persamaan  regresi  linear.[8]    Dari  hasil pengukuran serapan larutan standar rhodamin B pada konsentrasi 2; 4; 6; 8; dan 10 ppm.
Tabel 4.3 Hasil Pengukuran Absorban Larutan Baku Rhodamin B pada Panjang Gelombang 545 nm
Berdasarkan perhitungan persamaan regresi kurva baku diperoleh persamaan garis y = 0,048x+ 0,133y dengan koefisien korelasi (r) sebesar 0.999 yang ditunjukkan pada pada Gambar 1
Gambar 1. Kurva Baku Rhodamin B
Konsentrasi(x) absorbansi (y) 2 0.226 4 0.332 6 0.429 8 0.521 10 0.617

## Penentuan Kadar Sampel
Dihitung  kadar  dexametason  dari  serapan  konsentrasi  sampel  padaSpektrofotometer Uv-Vis. Hasil penentuan kadar sampel dapat dilihat pada tabel 4.5
Tabel 4.5 Hasil Perhitungan Kuantitatif
Identifikasi pewarna Rhodamin B pada sampel lipsik dan perona pipi dilakukan dengan menggunakan metode kualitatif terlebih dahulu, hal ini untuk melihat apakah sampel yang akan diteliti mengandung Rhodamin B atau tidak.
Uji kualitatif dilakukan dengan metode Pewarnaan. Sampel perona pipi yang dianalisis merupakan  perona  pipi  yang  beredar  di  pasar  Tradisional  Sentral  kota    Gorontalo  dan  toko kosmetik  di  sekitarnya.  Sampel  yang  diteliti  terdiri  dari  5  buah  perona  pipi  yang  diambil berdasarkan tiga parameter yaitu perona pipi yang tidak memiliki nomor registrasi dari BPOM, perona  pipi  yang  belum  dialih  bahasakan,  dan  perona  pipi  yang  tidak  dicantumkan komposisinya.
Metode  Uji  Pewarnaan  pada  sampel,  dilakukan  dengan  melarutkan  sampel  kedalam aquades  panas  kemudian  diaduk  sampai  larut,  lalu  dibiarkan  hingga  dingin.  Penambahan aquades panas berfungsi untuk memisahkan zat warna yang ada di dalam Lipstik, karena jika dengan  menggunakan  aquades  dengan  suhu  normal  maka  kelarutan  zat  warna  yang  ada  di dalam  lipstik  akan  berkurang.  Zat  warna  yang  terlarut  diambil  untuk  dimasukkan  ke  dalam tabung reaksi, selanjutnya ditambahkan NaOH secukupnya sampai basa, jika larutan sudah basa. Kemudian diberi Dietil Eter dan dikocok. Hal ini bertujuan agar zat warna Rhodamin B yang terlarut dalam lingkungan basa NaOH  dapat mudah ditarik oleh Dietil Eter, karena Rhodamin B  merupakan  golongan  pewarna  yang  bersifat  basa,  oleh karena  itu  ketika  di  dalam  keadaan tidak terionisasi atau pada pH tinggi senyawa basa cenderung larut baik dalam pelarut organik non polar. Kemudian diambil lapisan atas berupa fase eter lalu dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang lain. Selanjutnya fase eter yang telah dipisahkan diberi HCl secukupnya dan dilihat pada  lapisan  bagian  bawah,  jika  berwarna  merah  maka  dapat  dinyatakan  sampel  positif mengandung Rhodamin B. Diberikan HCl bertujuan untuk zat warna Rhodamin B dapat ditarik dari  fase  eter  menuju  ke  dalam  lingkungan  asam  agar  mendapatkan  hasil  identifikasi  warna positifnya.
Berdasarkan hasil identifikasi dari 5 sampel kosmetik perona pipi 1 sampel dengan kode E  dinyatakan  positif  mengandung  Rhodamin  B  karena  terlihat  adanya  perubahan  warna  dari bening  menjadi  bening  kemerah  mudaan  pada  saat  pengujian  dibandingkan  dengan  sampel yang lainnya. Hasil yang  diperoleh sudah sesuai dengan literature dimana menurut Nagekeo KSA (2011), hasil identifikasi uji kualitatif menggunakan metode uji warna dinyatakan positif jika  lapisan  asam  yang  berada  dibawah  akan  berubah  warna  menjadi  merah.  Pada  sampel  A sampai E mendapatkan hasil identifikasi yang negatif, hal ini  karena kemungkinan sampel A sampai E tidak terekstraksi dengan baik pada saat di lingkungan basa ke dalam eter, maka secara otomatis pada lingkungan asam tidak mendapatkan hasil ekstraksi sampel yang diinginkan. [13] Sampel yang dinyatakan positif pada uji kualitatif akan dilanjutkan pada uji kuantitatif dimana  sampel  yang  akan  diujikan  adalah  sampel  dengan  kode  E.  Untuk  mengetahui  kadar rhodamin  B  yang  terkandung  dalam  sampel  maka  digunakan  metode  analisis  menggunakan spektrofotometri Uv-Vis.
Sebelum  melakukan  uji  kuantitatif  maka  akan  ditentukan  terlebih  dahulu  panjang gelombang  yang  akan  digunakan.  Panjang  gelombang  maksimun    larutan  Rhodamin  B  yang dilakukan  pada  konsentrasi  6  ppm  dengan  rentang  panjang  gelombang  400-800  nm.  Hal  ini dilakukan karena Larutan rhodamin B merupakan larutan berwarna.sinar tampak mempunyai panjang gelombang 400 – 750 nm. [15]
Sampel Berat Sampel (g) Absorbansi (nm) Konsentrasi (mg/L) Kadar Sampel (mg) E 0,0500 0,399 5,5416 9,98 mg
Selain itu pengukuran dilakukan pada rentang tersebut karena pada panjang gelombang maksimum, maka kepekaanya juga maksimum, dan  disekitar panjang gelombang maksimum akan terbentuk kurva absorbansi yang datar dan pada kondisi tersebut hukum Lambert – beer akan terpenuhi.[6,2]Hasil penentuan panjang gelombang maksimum larutan baku rhodamin B pada konsentrasi 6 ppm dengan tiga kali pengukuran diperoleh panjang gelombang maksimum sebesar 545 nm. (Kurva Serapan Maksimum Larutan rhodamin B pada Konsentrasi 2 ppm  dapat dilihat pada Tabel 2.).
Dibuat konsentrasi Larutan rhodamin B, dengan berbagai konsentrasi pengukuran yaitu 2 ppm, 4 ppm, 6 ppm, 8 ppm, dan 10 ppm, kemudian diukur serapannya pada panjang gelombang 545  nm,  dengan  menggunakan  blangko.  Larutan  blangko  digunakan  untuk  mengoreksi pembacaan atau spektrum sampel. Dalam penelitian ini yang digunakan sebagai blangko adalah metanol.  Kemudian  dibuat  kurva  yang  merupakan  hubungan  antara  absorbansi  (y)  dengan Konsentrasi (X). Linieritas Kurva Kalibrasi Larutan rhodamin B dapat dilihat pada Gambar 4.1 Penetapan  kadar  rhodamin  B  pada  sampel  dilakukan  dengan  menggunakan spektrofotometri sinar tampak. Metode ini digunakan karena memiliki keuntungan metode yang sederhana, dan memiliki ketelitian yang baik.[3]
Dari  hasil  penetapan  kadar  Rhodamin  B  pada  sampel  E  diperoleh  kadar  Rhodamin  B sebesar  9,98  mg/g.  Hal  ini  sangat  membahayakan  bagi  produsen  karena  semakin  besar kemungkinan  rhodamin  B  masuk  kedalam  tubuh  dan  memberikan  efek  toksis  LD50  dari Rhodamin B ini sebesar 88,66 mg/kg.[12]

## 4. Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian diketahui bahwa i sampel perona pipi dengan kode sampel A, B, C, D, dan E yang telah dilakukan uji kualitatif, 1 sampel dengan kode E dinyatakan positif mengandung  Rhodamin  B  dan  4  sampel  lainnya  negative  Rhodamin  B.  Berdasarkan    hasil identifikasi  menggunakan  spektrofotometri  Uv-Vis,  diperoleh bahwa  Sampel  E    mengandung kadar Rhodamin B sebesar 9,98 mg/g.

## Referensi
[1] Azhara, Nurul Khasanah (2011), Waspada Bahaya Kosmetik, Jakarta,Flash Books.
[2]   Ditjen POM RI 2001. Metode Analisis PPOMN . Jakarta.
[3]   Erwantika, W. 2013. Analisa Pewarna Rhodamin B Pada Lipstik Beredar Di Pasar Pamenang Pare Kabupaten Kediri . Skripsi. Kediri: Institut Ilmu Kesehatan Bhakti Wiyata Kediri.
[4] Elfasyari,  T.Y,  Mutia  Amelia  Putri,  Regina  Andayani.  2020. Analysis  of  Rhodamin  B  in Imported Lipstick at Batam City by Thin Layer Chromatography and UV-Vis Spectrophotometry. Pharmaceutical Journal of Indonesia. Vol 17 No. 1.
[5]   Ermer, J., J. H. McB. Miller. 2005. Method Validation in Pharmaceutical Analysis :A Guide to Best Practice (Eds). WILEY-VCH Verlag GmbH & Co. KGaA, Weinheim
[6]   Gandjar, I.G., dan Rohman, A., 2012. Analisis
[7] Harmita. 2004. ‘Petunjuk Pelaksanaan Validasi Metode dan Cara Perhitungannya’ , Majalah Ilmu Kefarmasian, Vol. I, No. 3, Desember
[8]   Harvey, David. 2000. Modern Analytical Chemistry . New York: McGraw-Hill Comp
[9]   Jaelani. 2009. “Aroma Terapi”. Jakarta: Pustaka Populer Obor.
[10]   Kusnanto Mukti W. 2012 Analisis Spektroskopi Uv-Vis Penentuananat .Sebelas Maret
[11]   Kusantati  H  dkk.  2008.  50 Tata  Kecantikan  Kulit  untuk  SMK  Jilid  3 .  Jakarta:Direktorat Pembinaan Sekolah Menengah Kejuruan
[12]   Lyon.  1978. Monographs  On  The  Evaluation  Of  The  Carcinogenic  Risk  Of  Chemical  To  Man . Volume 16. International Agency For Research On Cancer. Pages 221-231
[13]   Nagekeo, KSA. 2011.[Online. 3 Maret, 2021]
[14]   Shargel,  L  &  Andrew.  2012. Applied  Biopharmaceutics  &  Pharmacokinetics. New  York: McGraw-Hill Companies
[15]   Sudjadi, 2007, Kimia Farmasi Analisis , Yogyakarta, Pustaka Pelajar
[16]  Wasitaatmadja, S.M. 1997. Penuntun Ilmu Kosmetik Medik . UI-Press :Jakarta.