Agri- SosioEkonomi Unsrat, ISSN (p) 1907– 4298, ISSN (e) 2685-063X , Sinta 5, Volume 18 Nomor 3, September 2022 : 835 - 842

## Pengaruh Kinetin Pada Pertumbuhan Kecambah Brokoli Hibrida
(Brassica oleracea Var. Green Magic) Dan Kandungan Sulforafan Pada Kultur In Vitro

## The Effect of Kinetin on the Growth of Broccoli (Brassica Oleracea Var. Green Magic) Sprouts and Sulforaphan Content in In Vitro Culture
Monica Pamela Doodoh (1) , Wenny Tilaar (2) , Sesilia Wanget (2)
1) Mahasiswa Program Studi Agronomi, Fakultas Pertanian, Universitas Sam Ratulangi, Manado
2) Dosen Program Studi Agronomi, Fakultas Pertanian, Universitas Sam Ratulangi, Manado
*Penulis untuk korespondensi: monicaadoodoh@gmail.com
Naskah diterima melalui e-mail jurnal ilmiah agrisosioekonomi@unsrat.ac.id
: Senin, 05 Desember 2022
Disetujui diterbitkan : Rabu, 28 September 2022

## ABSTRACT
This study aims to observe the growth in the sprouting phase and to observe the sulforaphane content in the growth stages of broccoli sprouts treated with kinetin on MS media. The research was conducted at the Laboratory of Biotechnology, Faculty of Agriculture, Sam Ratulangi University and the Laboratory of Department of Chemical Engineering,  State  of  Malang.  The  study  used  a  Completely  Randomized  Design  (CRD)  with  4  treatments  and  9 replications, nam ely without kinetin, 0.5 ppm kinetin, 1 ppm kinetin, 1.5 ppm kinetin. The variables observed were the  time  of  sprout  formation, sprout  height,  sprout  weight, sulforaphane  content.  The  results  of  this  study  showed that the sulforaphane content was not affected by the height and weight of the sprouts but the kinetin concentration, the higher the concentration given, the higher the sulforaphane content.
Keywords : broccoli; tissue culture; sulforaphane; kinetin

## ABSTRAK
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  melihat  pertumbuhan  pada  fase  kecambah  dan  untuk  melihat  kandungan sulforafan pada tahap pertumbuhan kecambah Brokoli yang diberi kinetin pada media MS. Penelitian dilaksanakan di  Laboratorium  Bioteknologi  Fakultas  Pertanian  Universitas  Sam  Ratulangi  dan  Laboratorium  Jurusan  Teknik Kimia  Negeri  Malang.  Penelitian  Menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  dengan  4  perlakuan  dan  9 ulangan yaitu tanpa kinetin, kinetin 0,5 ppm, kinetin 1 ppm, kinetin 1,5 ppm. Variabel yang diamati adalah waktu terbentuknya  kecambah,  tinggi  kecambah,  berat  kecambah,  dan  kandungan  sulforafan.  Hasil  penelitian menunjukkan bahwa kandungan sulforafan tidak dipengaruhi oleh tinggi dan berat kecambah tetapi pada konsentrasi kinetin, semakin tinggi konsentrasi yang diberikan semakin tinggi kandungan sulforafan.
Kata kunci : brokoli; kultur jaringan; sulforafan; kinetin
Pengaruh Kinetin pada Pertumbuhan Kecambah Brokoli Hibrida ….………………...…(Monica Doodoh, Wenny Tilaar, Sesilia Wanget)

## PENDAHULUAN

## Latar Belakang
Brokoli  ( Brassica  oleracea  L .)  ialah satu  dari  jenis  tanaman  sayur  suku  kubis- kubisan ( Brassicaceae ). Di Indonesia, Brokoli hanya bisa ditanam pada dataran tinggi antara 1000  hingga  2000  meter  di  atas  permukaan laut  yang  bersuhu  relatif  rendah  dengan kelembaban tinggi. Sejumlah kultivar Brokoli yang  ditanam  di  Indonesia  meliputi Brassica oleracea var. italica cv. Royal  Green, Brassica  oleracea var. italica cv. Delicate Green,  Brassica  oleracea var. italica cv. Green King, Brassica oleracea var. italica cv. Radia nt Green, Brassica oleracea var. italica cv. Tender  Green dan Brassica  oleracea var. italica cv. Green  Jewel .  Kultivar  Brokoli introduksi dan pembibitan untuk
pengembangan kultivar tidak banyak dilakukan  sehingga  hasil  produksi  Brokoli  di Indonesia  memiliki  kualitas  dan  kuantitas yang rendah (Susila, 2006).
Sayuran jenis kubis-kubisan ini disebutkan  paling  kaya  zat  antioksidan,  baik dalam hal  jumlah maupun jenisnya. Senyawa antioksidan  paling  ampuh  yang  tersimpan dalam brokoli adalah sulforafan yang dihasilkan dari hidrolisis glukosinolat, merupakan
glukoraphanin penghasil
sulforafan dengan bantuan myrosinase. Brokoli kaya akan myrosinase dan glucoraphanin adalah pada bagian biji  (Tilaar et  al., 2012).  Sulforafan  merupakan  senyawa antioksidan  paling  ampuh  yang  tersimpan, selain  betakaroten,  indola,  kuersetin,  dan glutation.  Brokoli  juga  sangat  kaya  akan mikromineral  kromium  yang  membantu meredam melonjaknya kadar gula darah pada penderita  kencing  manis  (diabetes  mellitus), sehingga  sayuran  Brokoli  sangat  disarankan untuk  penderita  kencing  manis.  Brokoli memiliki  khasiat  mempercepat  penyembuhan penyakit  serta  mencegah  dan  menghambat perkembangan  sel-sel  kanker  dalam  tubuh, terutama  penyakit  kanker  yang  berkaitan dengan hormon, seperti kanker payudara pada
perempuan dan kanker prostat yang mengancam pria (Dharlimantha, 2007).
Kultur  jaringan  tanaman  merupakan pengetahuan dan teknologi mengenai pertumbuhan  sel,  jaringan  atau  organ  yang diisolasi dari tanaman induk dan ditumbuhkan pada  media  buatan  yang  aseptik.  Teknologi kultur  jaringan  sudah  banyak  digunakan dalam  perbanyakan  bibit  tanaman  yang  sulit dikembangkan secara vegetatif (Mandang dan Doodoh, 2021). Perbanyakan tanaman melalui  kultur  jaringan  memiliki  fungsi alternatif  dan  peluang  besar  untuk  mengatasi kebutuhan bibit dalam jumlah besar, serentak, dan  bebas  penyakit  sehingga  bibit  yang dihasilkan  lebih  sehat  serta  seragam  dalam waktu relatif singkat sehingga lebih ekonomis dan  teknik  perbanyakan  tanaman  ini  dapat dilakukan  sepanjang  waktu  tanpa  tergantung pada musim.
Media  tanam  memberi  pengaruh  besar terhadap  keberhasilan  kultur  jaringan,  sebab terdapat  penambahan  zat  pengatur  tumbuh. Tanaman  membutuhkan  zat  pengatur  tumbuh alami ( fitohormon ) dalam proses pertumbuhan,  yaitu  zat  pengatur  tumbuh auksin  dan  sitokonin  yang  tergolong  dalam kinetin  dan  berfungsi  untuk  pengaturan pembelahan sel dan morfogenesis.
Penelitian  ini  menduga  bahwa  terjadi peningkatan sulforafan dalam tahap pertumbuhan  kecambah  Brokoli  dengan penambahan kinetin pada media MS.

## Rumusan Masalah
Berdasarkan  latar  belakang  yang  telah diuraikan,  rumusan  masalah  dalam  penelitian ini  adalah  bagaimana  peningkatan  sulforafan pada  tahap  pertumbuhan  kecambah  Brokoli dengan penambahan kinetin pada media MS?

## Tujuan Penelitian
Tujuan  penelitian  ialah  untuk  melihat fase  pertumbuhan  kecambah  dan  untuk melihat  kandungan  sulforafan  pada  tahap pertumbuhan  kecambah  Brokoli  yang  diberi kinetin pada media MS.
Agri- SosioEkonomi Unsrat, ISSN (p) 1907– 4298, ISSN (e) 2685-063X , Sinta 5, Volume 18 Nomor 3, September 2022 : 835 - 842

## Manfaat Penelitian
Manfaat  dari  penelitian  ini  untuk mengetahui penggunaan  zat  pengatur tumbuh kinetin pada pertumbuhan dan dalam mendeteksi kandungan sulforafan pada kecambah Brokoli pada media MS.

## METODE PENELITIAN

## Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian  dilaksanakan  pada  bulan  Juli sampai Agustus 2022 di Laboratorium Kultur Jaringan  Bioteknologi  Fakultas  Pertanian Universitas  Sam  Ratulangi  Manado  dan Laboratorium
Jurusan
Teknik
Kimia Politeknik Negeri Malang.

## Alat dan bahan
Alat-alat  yang  digunakan  ialah:  pipet, botol  kultur,  gelas  ukur,  pinset,  pH  meter, timbangan  analitik,  autoclave,  laminar  air flow, cawan petri, gelas kimia dan erlenmeyer,  spatula,  scalpel,  lampu  bunsen, panci,  kompor,  dan  rak  kultur,  sonicleaner, hot plat, sentrifuga, mortal dan alat-alat gelas lainnya.  Perangkat  Liquid  Chromatography Mass  spectroscopy,  kolom  shim-Pack  XR- ODSIL (50 mm x 2.0 mm I.D.), fase gerak A: 5 mmol/l ammonium format-air, fase gerak B: asetonitril,  laju  pengaliran  0.3  ml/menit, volume injeksi 5 ul, temperature kolom 40 ° C, pengaliran gas 1.5 l/menit, tekanan gas kering 10 l/menit.
Bahan-bahan  yang  digunakan  adalah benih  Brokoli,  Agar,  Gula,  Bayclin,  Media MS,  Larutan  stok  hara,  Metionin,  Spritus, Tissue,  NaOH,  HCL,  Aquades,  Alkohol  75% dan  95%,  Alluminium  foil,  serta  senyawa kimia  untuk  ekstraksi.  Bahan-bahan  tersebut antara lain methanol p.a, acetonitril, ammonium  format  dan  akuades,  dan  standart sulforafan.

## Variabel Pengamatan
Variabel  yang  diamati  pada  penelitian ini ialah:
1. Waktu  terbentuknya  kecambah  yang diamati setiap hari setelah tanam.
2. Tinggi kecambah yang diamati selama 14 hari setelah tanam.
3. Berat  kecambah  yang  diiamati  selama  14 hari setelah tanam.
4. Analisis Sulforafan yakni analisis kandungan pada minggu ketiga (21 HST).

## Prosedur Kerja
1. Sterilisasi Alat Sterilisasi merupakan tahap awal melakukan  kultur  jaringan  dan  mempunyai peranan  peting  dalam  keberhasilan  teknik kultur  jaringan  agar  tidak  terjadi  kotaminasi yang  akan  menyebakan  eksplan  tidak  dapat berkembang.  Sterilisasi  adalah  proses  untuk membunuh jasad renik yang ada.
Alat  yang  digunakan  seperti  botol kultur,  gelas  ukur,  scalpel,  cawan  petri  harus terlebih  dahulu  disterilkan  menggunakan autoklaf  dengan  suhu  121°C  selama  20-30 menit sebelum digunakan.
2. Pembuatan  Media  MS (Murashige  and Skoog)
a. Pertama sediakan alat dan bahan yang akan  digunakan.  Timbang  MS  jadi 4,45 gram, gula 30 gram, agar 8 gram, setelah  itu  masukan  bahan  kedalam gelas.
b. Masukan  gula  30  gram,  MS  jadi  4,45 gram,  larutan  aquades  500  ml  lalu masukan  kedalam  gelas  ukur  aduk hingga tercampur setelah itu dilarutkan  menggunakan  hotplate  dan magnetic stirrer.
c. Mengukur  pH  hingga  mencapai  5,8 dan  jika  belum  mencapai  tambahkan NaOH dan jika sudah lebih tambahkan HCL.
d. Setelah  media  dilarutkan  masukan kedalam  gelas  ukur  volume  1000  ml, tambahkan  aquades  hingga  mencapai 1000 ml. Lalu tambahkan metionin 50 mg/l.
e. Bagi  media  menjadi  4  bagian  sesuai perlakuan.
Pengaruh Kinetin pada Pertumbuhan Kecambah Brokoli Hibrida ….………………...…(Monica Doodoh, Wenny Tilaar, Sesilia Wanget)
f. Bagi agar 8 gram menjadi 4 bagian (2 gram),  lalu  panaskan  masing-masing media bersama dengan agar yang telah dibagi juga sampai mendidih.
g. Kemudian tuang media kedalam botol kultur steril.
h. Strerilkan  media  kedalam  autoclave dengan suhu 121°C selama 45 menit.
i. Media yang sudah disterilkan
dimasukan  kedalam  ruang  kultur  dan ditempatkan pada rak kultur.
j. Terakhir  diamkan  media  selama  1 minggu untuk melihat adanya kontaminasi.
3. Sterilisasi Benih
Sterilisasi  benih  Brokoli  dilakukan secara  bertingkat  yang  pertama,  memasukan benih  kedalam  larutan  aquades  100ml+15% bayclin  lalu  dikocok  selama  5  menit kemudian  dibilas  dengan  aquades.  Lalu, memasukan  benih  kedalam  larutan  aquades 100ml+10%  bayclin  dan  dikocok  selama  10 menit  kemudian  dibilas  dengan  aquades. Kemudian, memasukan benih kedalam larutan  aquades  100ml+5%  bayclin  dan dikocok  selama  15  menit  kemudian  dibilas dan ditanam pada media MS.
4. Penanaman Eksplan
Eksplan  yang  steril  dipindahkan  ke media  perlakuan  di  dalam  LAFC (Laminar Air  Flow  Cabinet) ,  sebelumnya  LAFC  sudah disterilisasi dengan sinar UV. Setelah eksplan dipindahkan  ke  dalam  botol  kultur  sesuai dengan perlakuan, botol kultur ditutup dengan alluminium  foil dan  dipindahkan  ke  rak kultur.

## Ekstraksi dan Isolasi Sulforafan
Sampel  yang  telah  dilarutkan  dalam acetonitrile  dilakukan  sentrifugasi  dengan kecepatan  4.000  rpm  selama  10  menit.  1ml supernatant  ditambahkan  1  ml  acetonitrile dimasukan  dalam  ependorf  yang  berisi adsorben. Sampel dikocok hingga sampel dan adsorbent  tercampur  kemudian  dilakukan sentrifugasi  pada  kecepatan  10.000  rpm selama 10 menit. Supernatan disaring dengan
membrane  filter  dengan  ukuran  0.2  mikron dan  siap  dilakukan  uji  dengan  LC-MSMS. Kolom  yang  digunakan  dengan  spesifikasi phenomenex  (50  mm  x  2,1  mm  x  1,7  µm). UHPLC  merek  ACCELLA  type  1250  buatan Thermo  Scientific  yang  terdiri  dari  degasser vakum, pompa quartener, autosampler termostatik  dikendalikan  Personal  computer melalui  program  x-calibur  2.1.  Fase  gerak  A terdiri  dari  0,1%  asam  format  dalam aquabidest,  fase  B  terdiri  dari  0,1%  asam format  dalam  acetonitril.  Sebuah  gradien linier  dengan  kecepatan  300  µl/menit  dengan pengaturan fase gerak sebagai berikut: Kolom dikontrol  pada  suhu  30°C,  dan  kompartemen autosampler ditetapkan untuk 16°C. Penggunaan  MS/MS  Triple  Q  (quadrupole) spektrometer massa TSQ QUANTUM ACCESS MAX dari Thermo Finnigan dengan sumber ionisasi ESI (Electrospray Ionization) dikendalikan  oleh  software  TSQ  Tune  yang dioperasikan  dengan  ionisasi  mode  negatif. Kondisi  ionisasi  ESI  adalah  sebagai  berikut: tegangan spray 3 kV; suhu penguapan 300°C; suhu  kapiler,  300°C;  nitrogen  sebagai  sheath gas pressure 40 psi, dan Aux gas pressure 10 psi dengan gas argon. Ionisasi dilakukan pada muatan  positive  dengan  pengaturan  ion precursor  178  m/z,  sebagai  ion  produk  diatur pada  114  m/z  (quantitative)  dan  72  m/z sebagai (qualitative).

## Metode Analisis Data
Penelitian  menggunakan  Rancangan Acak  Lengkap  (RAL)  dengan  4  perlakuan yaitu  pemberian  kinetin  pada  media  MS. Dengan  jumlah  9  ulangan  pada  setiap perlakuan, maka jumlah total 36 botol kultur.
1. Perlakuan  pertama  K0  (tanpa  kinetin/ kontrol)
2. Perlakuan kedua K1 (kinetin 0,5 ppm)
3. Perlakuan ketiga K2 (kinetin 1 ppm)
4. Perlakuan keempat K3 (kinetin 1,5 ppm)
Data diamati dan dimasukan dalam tabel kemudian dilakukan analisis. Apabila berbeda nyata maka dilanjutkan dengan uji beda nyata terkecil BNT 5%.
Agri- SosioEkonomi Unsrat, ISSN (p) 1907– 4298, ISSN (e) 2685-063X , Sinta 5, Volume 18 Nomor 3, September 2022 : 835 - 842

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Waktu Terbentuknya Kecambah
Berdasarkan
pengamatan yang dilakukan  tanaman  mulai  berkecambah  pada 1 hari sesudah tanam.
Tabel 1. Waktu Terbentuknya Kecambah Perlakuan Hari 1 Kinetin 0 9 Kinetin 0.5 9 Kinetin 1 9 Kinetin 1.5 9
Tabel  1  menunjukkan  bahwa  1  hari setelah  tanam  tanpa  kinetin  dan  pemberian kinetin tidak berpengaruh nyata terhadap daya kecambah  benih  karena  media  MS  sudah mengandung  vitamin,  dan  unsur  hara  makro, mikro  sehingga  cukup  untuk  memacu pertumbuhan  eksplan  dan  kinetin  memiliki kemampuan untuk terjadinya pembelahan sel.
Pertumbuhan  tanaman  secara  in-vitro dikendalikan oleh keseimbangan dan interaksi dari  ZPT  yang  ada  dalam  eksplan  baik endogen  maupun  eksogen  yang  diserap  dari media  dan  menghasilkan  persentase  hidup eksplan  yang  tinggi.  Kandungan  ZPT  dalam media  merupakan  salah  satu  hal  yang  dapat mempengaruhi  lingkungan  hidup  eksplan. Pertumbuhan  dan  arganogenesis  secara  in vitro  dikendalikan  oleh  keseimbangan  dan interaksi  dari  ZPT  yang  berada  dalam eksplan.
Menurut Sutopo (1985), proses perkecambahan benih merupakan suatu rangkaian  yang  komplek  dari  perubahan morfologi,  fisiologi,  dan  biokimia.  Tahap pertama  suatu  perkecambahan  benih  dimulai dengan  proses  penyerapan  air  oleh  benih, melunaknya  kulit  biji  dan  hidrasi  dari protoplasma. Kemudian dimulai dari kegiatan-kegiatan  sel  dan  enzim-enzim  serta naiknya  tingkat  respirasi  benih.  Selanjutnya merupakan  tahap  terjadi  penguraian  bahan- bahan  karbohidrat,  lemak,  dan  protein menjadi  bentuk-bentuk  yang  melarut  dan ditranslokasikan  ke  titik  tumbuh.  Setelah  itu adalah  asimilasi  dari  bahan  yang  telah diuraikan  nerismatik  untuk  menghasilkan
energi bagi  kegiatan pembentukan komponen dan  pertumbuhan  sel-sel  baru.  Terakhir adalah pertumbuhan kecambah melalui proses pembelahan, pembesaran, dan pembagian sel- sel pada titik-titik tumbuh.
Proses  perkecambahan  benih  tidak tergantung  kepada  ketersediaan  nutrisi  dalam tanah  karena  adanya  endosperma.  Proses perkecambahan dimulai dengan memanjangnya  batang,  akar,  dan  daun  yang keluar  dari  biji.  Perkecambahan  epigael terjadi  ketika  hipokotil  memanjang  yang mengakibatkan  plumula  (calon  daun)  dan kotiledon  muncul  ke  permukaan.  Ketika kotiledon  muncul  ke  permukaan  tanah, memungkinkan kotiledon untuk berfotosintesis  sebagai  pengganti  daun  yang belum terbentuk.

## Tinggi Kecambah
Hasil  pengukuran  terhadap  tinggi  rata- rata kecambah brokoli umur 2 minggu dengan kecambah  tertinggi  pada  perlakuan  Kinetin 0.5  ppm  yaitu  8.5  cm  dan  terendah  pada perlakuan kinetin 1.5 yaitu 7.36 cm. Hasil uji BNT  5%  menunjukkan  pemberian  kinetin berpengaruh nyata terhadap tinggi kecambah, pada  perlakuan  tanpa  kinetin  (kontrol)  tidak berbeda  jauh  dengan  tinggi  kecambah  pada perlakuan kinetin 0.5 karena dalam konsentrasi  0.5  belum  mampu  menekan pembelahan  sel.  Perlakuan  kinetin  1  ppm sudah  terdapat  percepatan  pembelahan  sel sehingga tinggi kecambah sudah mulai turun, dan perlakuan 1.5 ppm tinggi kecambah lebih menurun  dikarenakan  fungsi  dari  sitokin menekan  pertumbuhan  maka,  semakin  besar konsentrasi kinetin  yang  diberikan  semakin menekan  pertumbuhan  tinggi  dari  kecambah brokoli.
Lestari  (2011),  mengatakan  bahwa penambahan  sitokinin  dan  auksin  kedalam media kultur dapat  meningkatkan konsentrasi zat  pengatur  tumbuh  endogen  yang  terdapat dalam  sel,  sehingga  menjadi  faktor  pemicu perkembangan  jaringan  dan  proses  tumbuh tanaman.    Berdasarkan  penelitian  Tabuni et al. (2018)  menunjukkan  bahwa  tinggi
Pengaruh Kinetin pada Pertumbuhan Kecambah Brokoli Hibrida ….………………...…(Monica Doodoh, Wenny Tilaar, Sesilia Wanget)
tanaman  tertinggi  pada  perlakuan  0  ppm kinetin tinggi tanaman 5.31 cm tidak berbeda nyata  dengan  perlakuan  K1  (1  ppm  kinetin) tinggi  tanaman  4.70  cm,  dan  berbeda  nyata dengan  K2  (2  ppm  kinetin)  tinggi  tanaman 4.02  cm  dan  K3  (3  ppm  kinetin)  tinggi tanaman 3.40 cm. Semakin tinggi konsentrasi kinetin  semakin  pendek  tanaman.  Hal  ini diduga  kinetin  merupakan  golongan  sitokinin yang  lebih  berpengaruh  pada  pertunasan. Berdasarkan  hasil  penelitian  Tilaar et  al. (2022), pada hasil uji BNT 5% menunjukkan pada  perlakuan  tanpa  NAA,  BAP  dan Metionin  adalah  tertinggi  dari  kecambah brokoli  hybrid,  sedangkan  terendah  pada perlakuan kombinasi N0.5B0M50 dan N0.5B2M50  yaitu  0.80  cm.  Semakin  tinggi konsenterasi  NAA,  BAP  dan  Metionin  maka dapat  menekan  pertambahan  tinggi  tunas kecambah brokoli hybrid.
Tabel  2.  Rerata  Tinggi  Kecambah  Brokoli  pada  Umur  2
Minggu Setelah Tanam Perlakuan Kinetin 0 Kinetin 0.5ppm Kinetin 1ppm Kinetin 1.5ppm Ulangan (cm)
1 8 8.4 7 8.7
BNT 5% = 0.22 2 7 8.6 7.6 7.5 3 7.6 8.6 7.7 7
4 8.1 8.6 8 6.5
5 8.1 7.5 7.8 7
6 8.4 8 8.6 6.5 7 8.5 8.5 7.6 7
8 8.6 8.1 8.5 6.6
9 9 8.5 7.5 7.5 Total (cm) 72.3 74.8 70.3 64.3 Rata-rata (cm) 8,03 b 8,31 c 7,81 b 7,14 a
Keterangan : Angka yang diikuti dengan huruf yang sama, tidak berbeda nyata berdasarkan uji BNT 5%.

## Berat Kecambah
Berdasarkan Tabel 3 dari hasil pengukuran  berat  rata-rata  kecambah  brokoli umur  2  minggu  pada  perlakuan  Kontrol (tanpa  kinetin)  menunjukkan  berat  kecambah tertinggi  yaitu  0.32  (g).  Kemudian  pada perlakuan  kinetin  0.5  ppm  dengan  berat  0.27 (g)  dan  kinetin  1  ppm  0.28  (g)  selanjutnya kinetin  0.27  (g)  sedangkan  berdasarkan  hasil uji  BNT  5%  menunjukkan  bahwa  pemberian kinetin  tidak  berpengaruh  nyata  terhadap berat kecambah.
Hasil  penelitian  Tilaar et  al. (2022), menunjukkan bahwa berat kecambah tertinggi
pada  perlakuan  tanpa  BAP  dan  Metionin sedangkan terendah pada perlakuan kombinasi  BAP  1  ppm  dan  Metionin  25g (B1M25).
Tabel 3. Rerata Berat Kecambah Brokoli Umur 2 Minggu
Perlakuan Kinetin 0 Kinetin 0.5ppm Kinetin 1ppm Kinetin 1.5ppm Ulangan (g) 1 0.36 0.29 0.17 0.34
BTN 5% = 0.02 2 0.37 0.29 0.28 0.31 3 0.36 0.30 0.36 0.20 4 0.40 0.27 0.35 0.30 5 0.28 0.32 0.32 0.19 6 0.26 0.33 0.29 0.28 7 0.32 0.25 0.25 0.23 8 0.33 0.19 0.32 0.31 9 0.26 0.22 0.25 0.33 Total (g) 2.94 2.46 2.59 2.49 Rata-rata (g) 0,32 b 0,27 a 0,28 a 0,27 a

## Analisis Sulforafan
Berdasarkan  hasil  analisis  pada  Tabel  4 menunjukkan  kandungan  sulforafan  yang terangsang  dengan  diberikannya  kinetin  0.5 ppm  adalah  yang  terendah  1.10,  pemberian kinetin  1  ppm  yaitu  1.74,  sedangkan  yang tertinggi pada perlakuan kinetin 1.5 ppm yaitu 3.20.
Tabel 4. Kandungan Sulforafan Pada Kecambah Brokoli
Perlakuan Kinentin 0 Kinentin 0.5ppm Kinentin 1ppm Kinetin 1.5ppm Kandungan Sulforafam (µg/g) 1 2.78 1.02 1.74 3.17
BNT 5% = 0.01 2 2.80 1.07 1.74 3.16 3 2.78 1.06 1.74 3.20 4 2.80 1.10 1.74 3.18 5 2.79 1.10 1.75 3.19 Total 13.95 5.35 8.71 15.9 Rata-rata 2.79 c 1.07 a 1.74 b 3.18 d
Keterangan : Angka yang diikuti dengan huruf yang sama, tidak berbeda nyata berdasarkan uji BNT 5%.
Hasil kandungan sulforafan pada perlakuan  kontrol  atau  tanpa  pemberian kinetin  lebih  tinggi  kandungannya  dari perlakuan  kinetin  0.5  ppm  dan  perlakuan kinetin  1  ppm  karena  tiap  tanaman  variasi genetik  dan  berbeda  dalam  merespon.  Tetapi pada  hasil  akhir  perlakuan  kinetin  1.5  ppm lebih  tinggi  kandungan  sulforafan  yang terangsang dari semua perlakuan.
Berdasarkan hasil uji BNT 5% menunjukkan bahwa semua perlakuan berbeda  nyata  dalam  merangsang  kandungan sulforafan.  Pemberian  zat  pengatur  tumbuh kinetin  terdapat  interaksi  dalam  merangsang
Agri- SosioEkonomi Unsrat, ISSN (p) 1907– 4298, ISSN (e) 2685-063X , Sinta 5, Volume 18 Nomor 3, September 2022 : 835 - 842
dan berpengaruh terhadap peningkatan kandungan sulforafan, semakin tinggi konsentrasi  pemberian kinetin semakin tinggi kandungan  sulforafan.  Pada  dasarnya  media yang  hanya  diberikan  metionin  (kontrol) mampu dalam merangsang kandungan solforafan,    namun  apabila  ditambahkan  zat pengatur  tumbuh  dengan  semakin  tinggi konsentrasi  yang  diberikan  akan  lebih merangsang kandugan sulforafan.
Hasil  penelitian  Tilaar et  al. (2022) menunjukkan  bahwa  terdapat  interaksi  antara NAA, BAP dan metionin terhadap biosintesis sulforafan.  Kombinasi  NoB1M25  memiliki kandungan  sulforafan  tertinggi  dibandingkan dari  perlakuan  lainnya  sekaligus  berbeda nyata dengan perlakuan lainnya.
Berdasarkan  hasil  penelitian  Tilaar (2017)  juga  menyebutkan  bahwa  hasil sulforafan kombinasi  0  ppm  BAP  dan 0 ppm NAA  yang  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan perlakuan  kombinasi  0  ppm  BAP  dan  1  ppm NAA  serta  perlakuan  kombinasi  2.5  ppm BAP  dan  0  ppm  NAA  yang  lebih  tinggi kandungan sulforafannya dibandingkan dengan  kombinasi  2.5  ppm  BAP  dan  1  ppm NAA  dimana  berbeda  dengan  pola  pada perlakuan  kombinasi  5  ppm  BAP  dengan  0 ppm  NAA  yaitu  lebih  rendah  dari  pada kombinasi 5 ppm BAP dan 1 ppm NAA. Hal ini  disebabkan  karena  keseimbangan  yang paling tepat untuk merangsang hasil sulforafan adalah pada kombinasi 5 ppm BAP dan 1 ppm NAA.

## KESIMPULAN DAN SARAN

## Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian dapat ditarik  kesimpulan  bahwa  ZPT  kinetin mempunyai pengaruh nyata terhadap pertumbuhan  tinggi  kecambah  sehingga, semakin  tinggi  konsentrasi  kinetin  yang diberikan maka akan semakin menekan tinggi kecambah,  tetapi  kinetin  tidak  berpengaruh nyata pada berat kecambah. Kandungan dalam
sulforafan  tidak  dipengaruhi  oleh  tinggi  dan berat  kecambah,  tetapi  pada  konsentrasi kinetin,  semakin  tinggi  konsentrasi  yang diberikan, maka akan semakin tinggi kandungan sulforafan.

## Saran
Berdasarkan kesimpulan dari hasil yang diperoleh dalam penelitian ini maka disarankan pada penelitian serupa untuk dapat meningkatkan  kandungan  sulforafan  pada kecambah  brokoli  menggunakan  konsentrasi kinetin 1,5 ppm.

## DAFTAR PUSTAKA
Dharlimantha, 2007.
Atlas Tumbuhan Obatindonesia Jilid 2 . Lestari,  E.G.  2011.  Peranan  Zat  Pengatur
Tumbuh  dalam  Perbanyakan  Tanaman melalui Kultur Jaringan. Jurnal AgroBiogen.
Mandang,  J.,  dan  B.  Doodoh.  2021.  Kultur Jaringan. Unsrat Press.
Susila,  A.D.  2006.  Panduan  Budidaya Tanaman Sayuran.
Sutopo,  L.  1985.  Teknologi  Benih.  Fakultas Pertanian Universitas Brawijaya Malang. Rajawali. Jakarta. Tilaar,  W.  2017. Mikropropagasi  Brokoli (Brassica  Oleracea  L.  Var.  Italica Plenck) & Biosintesis Sulforafan. Pascasarjana Unsrat.
Tilaar, W., S. Ashari., B. Yanuwiadi., J. Polii-
Mandang.,  dan  F.H.  Tomasowa.  2012.
Shoot Induction from Broccoli Excplant Hypocotyls and Biosynthesis of Sulforaphane. International  Journal  of Basic & Applied Sciences IJBAS-IJENS , 12(06), 44-48.
Pengaruh Kinetin pada Pertumbuhan Kecambah Brokoli Hibrida ….………………...…(Monica Doodoh, Wenny Tilaar, Sesilia Wanget)
Tilaar, W., J. Mandang., dan A. Pinaria. 2018. Analisis  Kandungan  Sulforafan  Pada
Beberapa Fase Pertumbuhan Dari
Beberapa  Jenis  Brassica  Sp  Secara  In
Vivo. Laporan Riset Terapan Unggulan Universitas Sam Ratulangi .