## Formulasi Sediaan Krim Antioksidan Ekstrak Etanolik Daun Alpukat
( Persea americana Mill.)
Antioxidant Cream Formulation of Ethanolic Extract from Avocado Leaves (Persea americana Mill.)
Daun alpukat (Persea americana Mill.) diketahui mengandung flavonoid yang memiliki aktivitas  antioksidan.  Penelitian ini  bertujuan  untuk  mengetahui  pengaruh  tween  80 dan span 80 terhadap sifat fisik dan stabilitas sediaan krim ekstrak etanolik daun alpukat dan persen peredaman formula terbaik terhadap radikal DPPH. Formula sediaan krim dibuat dengan  membandingkan  konsentrasi  emulgator  tween  80  dan  span  80  yaitu  Formula  1 (75%:25%), Formula 2 (85%:15%) dan Formula 3 (95%:5%). Krim yang terbentuk diuji sifat  fisik  dan  stabilitasnya.  Formula  terbaik  yang  memenuhi  syarat  uji  sifat  fisik  dan stabilitas  selama  penyimpanan  28  hari  diuji  aktivitas  antioksidannya  dengan  metode DPPH.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  peningkatan  konsentrasi  tween  80  dan penurunan  konsentrasi  span  80  menyebabkan  viskositas  dan  daya  lekat  semakin meningkat,  sedangkan  daya  sebar  semakin  menurun.  Formula  terbaik  terdapat  pada Formula  3  dengan  nilai  viskositas  sebesar  25.220-43.960  cps,  daya  sebar  sebesar  4,90- 5,50 cm, daya lekat sebesar 1,41-4,65 detik dan persen peredaman radikal DPPH sebesar 69,33%.
Avocado  leaves  (Persea  americana  Mill.)  was  known  contain  flavonoids  that  have antioxidant activity. This study aimed to determine the effect of tween 80 and span 80 on the physical properties and stability of cream ethanolic extract from avocado leaves and to  know  the  antioxidant  activity  by  DPPH  radical  scavenging  activity.  Cream  formula preparation was done by comparing the emulsifiers concentration tween 80 and span 80 were  Formula  1  (75%:25%), Formula  2  (85%:15%)  and Formula  3  (95%:5%). Cream was  tested  the  physical  properties  and  stability.  The  best  formula  that  qualified  in physical  properties  and  stability  during  storage  for  28  days  was  examined  antioxidant activity by DPPH method. The results showed that increasing concentrations of tween 80 and  decreasing  concentration  of  span  80  would  increase  viscosity  and  adhesion  but decrease  the  dispersive  power.  The  best  formula  was  Formula  3  with  viscosity  range 25220-43960 cp,  dispersive  power  range  4.90  to  5.50 cm, adhesion  range  1.41  to 4.65 seconds and DPPH radical scavenging activity was 69.33%.

## Pendahuluan
Stress  oksidatif  merupakan  faktor  utama dalam proses penuaan (kerusakan mitokondria  oksidatif),  perkembangan inflamasi dan beberapa penyakit degeneratif.  Antioksidan  merupakan  suatu substansi  yang  pada  konsentrasi  kecil secara signifikan mampu menghambat atau mencegah oksidasi yang dapat menimbulkan  kerusakan  terhadap  lemak, struktur  sel,  dan  DNA  (Isnindar et al., 2011).  Kerusakan  ini  pada  dasarnya dapat  diatasi  oleh  antioksidan  endogen seperti  enzim  superoksida  dismutase, katalase, dan glutation peroksidase. Namun jika senyawa radikal bebas terdapat  berlebih  dalam  tubuh,  maka dibutuhkan antioksidan tambahan dari luar atau antioksidan eksogen untuk menetralkannya (Erguder et al., 2007).
Tanaman alpukat (Persea americana Mill.) merupakan  salah  satu  tanaman  yang memiliki  manfaat  mencegah  penuaan  dini karena  adanya  kandungan  antioksidan. Senyawa  bioaktif  utama  yang  berperan sebagai  antioksidan  adalah  saponin, alkaloid, flavonoid, terpenoid, safrol, dan
Acta Pharmaciae Indonesia September 2016, 4(2) 7-15; ISSN: 2337-8433 7
Dina Mailana, Nuryanti, Harwoko
Jurusan Farmasi,
Universitas Jenderal Soedirman, Purwokerto
e-mail: dinamailana@yahoo.com

## Kata kunci:

## Persea americana
Mill, krim. antioksidan
Keywords:
Persea americana Mill, cream,
antioxidant
Dina Mailana * , Nuryanti, Harwoko
Jurusan Farmasi, Universitas Jenderal Soedirman, Purwokerto Email : dinamailana@yahoo.c om
Kata kunci : Persea americana, Mill, Krim Antioksidan
Keywords: Persea americana, Mill, Cream antioxidant
tannin yang terdapat pada daun (Owalabi et al., 2010).  Penelitian  Katja et  al. (2009) menunjukkan  bahwa  aktivitas  antioksidan daun  alpukat  sebesar  94,71%.  Penelitian Tambunsaribu (2013) menunjukaan potensi antioksidan  daun  alpukat  dengan  nilai IC50sebesar 114,95 ppm. Namun, penggunaan daun alpukat sebagai pelindung  kulit  masih  jarang  digunakan oleh masyarakat, sehingga perlu dilakukan  pengembangan  menjadi  suatu bentuk  sediaan  topikal.  Sediaan  kosmetik yang beredar, umumnya berupa krim. Sifat krim  yang  disenangi  adalah  mudah dioleskan,  tidak  lengket,  kemampuan penyebarannya  yang  baik  pada  kulit, memberikan efek dingin karena lambatnya penguapan  air  pada  kulit,  mudah  dicuci dengan air, pelepasan obat yang baik, serta tidak  terjadi  penyumbatan  di  kulit  (Voigt, 1995).
Salah satu syarat yang harus dipenuhi suatu sediaan krim yang baik adalah stabil secara fisika-kimia. Berdasarkan hal di atas maka perlu dilakukan penelitian untuk membuat sediaan krim ekstrak etanolik daun alpukat yang  memenuhi  syarat  fisik  dan  stabilitas krim  serta  memiliki  aktivitas  antioksidan berdasarkan  peredaman  radikal  DPPH, dengan membandingkan konsentrasi emulgator tween 80 dan span 80.

## Bahan dan Metode
Bahan-bahan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  daun  alpukat  yang diperoleh dari Dusun Kemojin Kecamatan Kemangkon Kabupaten Purbalingga, etanol  70%,  asam  stearat,  tween  80, span 80, setil alkohol, gliserin, trietanolamin,  metil  paraben,  propil paraben,
oleum rosae, aquades, magnesium, HCl pekat, dan DPPH.

## Determinasi Tanaman Alpukat
Determinasi  dilakukan  di  Laboratorium Taksonomi  Fakultas  Biologi  Universitas Jenderal  Soedirman  Purwokerto  untuk mengetahui  kebenaran  bahan  yang  akan digunakan dalam penelitian.

## Pembuatan Ekstrak Daun Alpukat
Daun alpukat dibersihkan dari kotoran yang menempel,  kemudian  dicuci  dengan  air mengalir  sampai  bersih  dan  ditiriskan.
Daun  alpukat  dikeringkan  dengan  oven pada suhu 40 o C. Daun
yang  telah  kering  kemudian  dipulverisasi. Simplisia diekstraksi dengan cara maserasi selama  3x24  jam.  Sebanyak  500,3  gram serbuk  simplisia  dimasukkan  ke  dalam maserator lalu direndam dengan 5 L etanol 70%.  Perbandingan  banyaknya  alkohol dengan  daun  alpukat  sebanyak  10:1. Kemudian  direndam  dan  diaduk  selama 3x24  jam  dan  ditampung.  Maserat dipisahkan  dan  proses  diulangi  dua  kali dengan jenis dan jumlah pelarut yang  sama.  Pencampuran  dan  penguapan filtrate etanol dengan menggunakan rotary evaporator. Selanjutnya, dipekatkan di atas penangas air dengan suhu 40 - 50 o C sampai diperoleh ekstrak kental.

## Identifikasi Flavonoid
Sebanyak  0,52  gram  ekstrak  dilarutkan dalam  1  mL  etanol  70%  kemudian ditambahkan 0,15 gram serbuk magnesium dan  5  tetes  HCl  pekat.  Perubahan  warna menjadi jingga sampai merah menunjukkan adanya flavonoid (Harborne,
1996).

## Formulasi Krim
Fase  minyak  dibuat  dengan  cara meleburkan  asam  stearat,  setil  alkohol, span 80 dan propil paraben secara berturut- turut  dalam  cawan  porselen  di  atas penangas  air  hingga  suhu  70 o C  sambil diaduk  hingga  homogen.  Fase  air  dibuat dengan cara memanaskan air hingga 70 o C, ditambahkan metil paraben sambil diaduk hingga  melarut  sempurna.  Setelah  itu ditambahkan  gliserin,  tween  80,  dan TEA  kemudian  diaduk  hingga  homogen. Selanjutnya fase minyak dituang ke dalam fase air dalam mortir panas, digerus sampai suhu  25°C  dan  terbentuk  massa  krim. Tambahkan  ekstrak  daun  alpukat  dalam krim  dan  teteskan oleum  rosae, digerus sampai  homogen,  lalu  masukkan  krim  ke dalam pot plastik.
8 Dina Mailana dan kawan-kawan
Tabel 1 Formula Sediaan Krim Komposisi Formula (gram) Krim  ______________________________ F1 F2 F3
Diadaptasi  dari:  Rowe et  al. (2009)  dan  Sharon et al. (2013).  Ket:  perbandingan  Tween  80  dan  Span 80  pada  formula  1  (75%:25%),  formula  2 (85%:15%) dan formula 3 (95%:5%).

## Evaluasi Sediaan Krim
Uji Sifat Fisik Sediaan Krim Evaluasi Organoleptik Evaluasi organoleptis meliputi pengamatan secara visual perubahan-perubahan bentuk, bau dan warna pada sediaan krim pada suhu kamar (25°C).

## Evaluasi Homogenitas
Krim diambil dari masing-masing formula secukupnya  dan  dioleskan  pada  plat  kaca, diraba  dan  saat  digosokkan  massa  krim harus menunjukkan susunan homogen yaitu tidak terasa adanya bahan padat pada kaca (Voigt, 1995).

## Pengukuran pH
Pengukuran pH sediaan dilakukan menggunakan indikator universal, indikator universal dicelupkan ke  dalam  sediaan  krim.  Setelah  tercelup dengan  sempurna,  amati  perubahan  warna pada  indicator universal tersebut  dan sesuaikan  dengan  spectrum  warna  pada alat.

## Pengukuran Viskositas
Viskositas sediaan krim diukur menggunakan viskometer Brookfield. Sediaan krim sebanyak ±200 gr dimasukkan  ke  dalam  cup.  Kemudian dipasang  spindle  ukuran  64  dan  rotor
dijalankan dengan kecepatan 10 rpm. Hasil viskositas  dicatat  setelah  Viskometer menunjukan angka yang stabil.

## Uji Daya Sebar
Sebanyak 0,53 g krim diletakkan di tengah kaca  bulat,  di  atas  krim  diletakkan  kaca bulat lain dan dibiarkan selama 1 menit lalu diukur  diameter  krim  yang  menyebar. Beban  seberat  150  g  diletakkan  di atas  kaca  bulat  dan  didiamkan  selama  1 menit lalu diukur lagi diameter krim yang menyebar dari berbagai sisi (Voigt, 1995).

## Uji Daya Lekat
Krim  diambil  sebanyak  0,21  g  kemudian dioleskan  pada  sebuah  plat  kaca.  Kedua plat ditempelkan sampai plat menyatu dan ditekan dengan beban seberat 1 kg selama 5 menit,  setelah  itu  beban  diambil.  Waktu sampai kedua plat saling lepas dicatat,  kemudian  dilakukan  pengulangan sebanyak  3  kali  untuk  masing-masing formula (Voigt, 1995).

## Uji Stabilitas Sifat Fisik Sediaan Krim
Uji  stabilitas  sifat  fisik  sediaan  krim dilakukan  dengan  mengamati  perubahan sifat fisik krim yang meliputi organoleptik (bentuk, warna dan bau), homogenitas, pH, viskositas, daya sebar dan daya lekat  selama  penyimpanan  28  hari.
Pengamatan  uji  stabilitas  dilakukan  setiap hari  pada  minggu  pertama,  selanjutnya pada  hari  ke-14,  21,  dan  28  selama penyimpanan (Gozali et al., 2009).

## Uji Aktivitas Antioksidan (Molyneux, 2004)

## Pembuatan Larutan Uji
Larutan uji sediaan krim dan eksipien tanpa ekstrak  (kontrol  negatif)  dibuat  dengan mengekstraksi  masing-masing  1,025  gram krim dan 1,275 gram eksipien tanpa ekstrak dengan  10  mL  etanol  70%  dalam  corong pisah,  kemudian  dikocok  dengan  cepat selama  5  menit.  Hasil  ekstraksi  disaring menggunakan  kertas  saring  dan  kemudian ditampung  filtratnya.  Larutan  uji  ekstrak etanolik  daun  alpukat  200  ppm  (kontrol positif)  dibuat  dengan  melarutkan  0,002 gram ekstrak dengan 10 mL etanol 70%.
Ekstrak daun 0,02 0,02 0,02 alpukat Asam stearat 12 12 12 Tween 80 4,03 4,57 5,11 Span 80 1,26 0,76 0,25 Setil alkohol 4 4 4 Gliserin 18,74 18,74 18,74 TEA 0,09 0,09 0,09 Metil paraben 0,20 0,20 0,20 Propil 0,02 0,02 0,02 paraben Oleum rosae q.s q.s q.s (gtt) Akuades ad 100 100 100

## Acta Pharmaciae Indonesia
September 2016, 4(2) 7-15; ISSN: 2337-8433

## 10  Dina Mailana dan kawan-kawan

## Pembuatan Larutan Baku DPPH
Sebanyak 0,006 g serbuk DPPH dimasukkan  ke  dalam  labu  ukur  50  mL, ditambah etanol 70% hingga volume 50 mL sehingga  diperoleh  larutan  DPPH  dengan konsentrasi 304 ^M, kemudian dikocok hingga larut sempurna. Larutan ini kemudian  diencerkan  hingga  diperoleh larutan DPPH dengan konsentrasi 60,8 ^M dan didiamkan di tempat gelap.

## Penentuan Panjang Gelombang Maksimum DPPH
Dipipet sebanyak 3 mL larutan DPPH 60,8 ^M dan ditambahkan dengan 1 mL etanol 70%. Setelah dibiarkan selama 30 menit di tempat  gelap,  serapan  larutan  diukur dengan  spektrofotometer  visible  dengan panjang  gelombang  sebesar  400-800  nm dengan blangko etanol 70%.

## Penentuan Lama Inkubasi
Dipipet  sebanyak  3  mL  larutan  DPPH 60,8^M  dan  ditambahkan  dengan  1  mL ekstrak  etanol  daun  alpukat,  kemudian diinkubasi di tempat gelap dengan rentang waktu yang berbeda yaitu 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, dan 60 menit. Sampel yang  telah  diinkubasi  kemudian  diukur absorbansinya  pada  panjang  gelombang 520  nmdengan  blangko  etanol  70%. Selanjutnya dibuat kurva hubungan absorbansi sebagai fungsi waktu.

## Penetapan Absorbansi DPPH
Tiga  mL  larutan  DPPH  60,8  gM ditambahkan 1 mL etanol 70%, dihomogenkan, dan diamati absorbansinya pada  panjang  gelombang  520  nm dengan menggunakan blangko etanol 70%.

## Pengukuran  Persen  Peredaman  Radikal DPPH
Larutan  uji  sediaan  krim,  ekstrak  etanolik daun  alpukat  dan  eksipien  tanpa  ekstrak, masing-masing  diambil  sebanyak  1  mL kemudian  ditambahkan  dengan  larutan DPPH  60,8  gM  sebanyak  3  mL, dihomogenkan, didiamkan selama 40 menit
pada  tempat  gelap,  kemudian  diukur absorbansinya  pada  panjang  gelombang 520 nm dengan blangko etanol 70%.
% Peredaman Radikal DPPH
Absorbansi DPPH — Absorbansi Sampel x100%

## Absorbansi DPPH

## Analisis Data
Hasil  evaluasi  organoleptik,  homogenitas dan pengukuran pH dilakukan analisis data secara deskriptif, sedangkan hasil pengukuran  viskositas,  daya  sebar,  daya lekat  dan  persen  peredaman  dianalisis menggunakan  ANOVA  satu  arah  dengan taraf kepercayaan 95%. Apabila data hasil pengukuran  viskositas,  daya  sebar,  daya lekat dan persen peredaman yang diperoleh berbeda secara signifikan, maka dilanjutkan  dengan Least  Significance Difference Test (LSD Test). Analisis untuk menentukan formula terbaik menggunakan regresi  linear  terhadap  viskositas  dimana formula  dengan  nilai slope mendekati  nol dianggap sebagai formula terbaik.

## Hasil dan Pembahasan
Hasil  determinasi  tanaman  menunjukkan bahwa  tanaman  yang  digunakan  dalam penelitian ini adalah benar tanaman alpukat ( Persea Americana Mill.) famili Lauraceae. Metode maserasi dipilih karena metode ini mudah dilakukan, peralatannya sederhana, tidak melibatkan panas, sehingga tidak ada faktor temperatur yang mempercepat reaksi atau  mempengaruhi  senyawa  aktif  pada ekstrak (Hamzah et al., 2014). Pelarut yang digunakan  untuk  mengekstraksi  adalah etanol 70% yang dapat melarutkan senyawa fitokimia  lebih  maksimal  karena  etanol 70%  masih  mengandung  air  yang  cukup banyak  (30%)  yang  membantu  proses ekstraksi  sehingga  sebagian  senyawa tersebut  ada  yang  dapat  tertarik  dalam etanol dan ada pula yang tertarik dalam air. Asam amino, gula, alkaloid, flavonoid, dan glikosida  flavonoid  serta  klorofil  terlarut dalam pelarut polar sehingga senyawa yang terekstrak  dengan  pelarut  etanol  70%  ini cukup banyak (Melodita, 2011).
Hasil rendemen ekstrak etanolik daun alpukat diperoleh  sebanyak  16,9%  ekstrak  kental berwarna coklat kehitaman. Menurut Farmakope Herbal Indonesia (2008) rendemen ekstrak daun alpukat tidak kurang dari 28,02%. Perbedaan  hasil  rendemen  ini  disebabkan karena  perbandingan  jumtah  sampel  terhadap jumtah  pelarut  yang  digunakan  masih  kurang yaitu 1:10 selama 3x24 jam. Semakin banyak jumlah pelarut yang digunakan, maka semakin banyak  pula  hasil  yang  didapatkan,  karena distribusi  partikel  dalam  pelarut  semakin menyebar,  sehingga  memperluas  permukaan kontak  (Bustan et  al., 2008).  Hasil identifikasi  golongan  senyawa  menunjukkan bahwa  ekstrak  etanolik  daun  alpukat mengandung  flavonoid  yang  ditunjukkan dengan  perubahan  warna  yang  semula  coklat kehitaman menjadi merah.
Tabel  2. Hasil  Uji  Identifikasi  Senyawa  Flavonoid Ekstrak  Etanolik  Daun  Alpukat  dengan Pereaksi Warna
HCl  pekat  akan  menghidrolisis  flavonoid menjadi  aglikon  flavonoid  dengan  cara menghidrolisis  O-glikosil.  Glikosil  yang terhidrolisis ini akan tergantikan oleh H + dari asam  yang  memiliki  keelektronegatifan yang kuat. Selanjutnya Mg akan mereduksi senyawa  flavonoid  tersebut  sehingga menghasilkan  senyawa  kompleks  yang berwarna  merah  atau  jingga  (Harborne, 1996).

## Evaluasi Organoleptik
Krim ekstrak daun alpukat yang dihasilkan berupa krim yang kental, tidak lengket dan tidak creaming. Krim  yang  telah  dibuat berwarna  putih  susu.  Hasil  pengamatan organoleptis  bau,  sediaan  krim  beraroma mawar. Corrigens  odoris mawar  yang ditambahkan  ke  dalam  sediaan  krim bertujuan  untuk  menutupi  bau  asli  sediaan krim yang kurang sedap akibat bau khas dari emulgator tween 80 dan span 80 yang lebih dominan.  Hasil  keseluruhan  pengamatan yang  dilakukan  terhadap  sediaan  krim, menunjukkan bahwa ketiga formula krim  yang  dibuat  tidak  mengalami perubahan  warna,  bau  dan  tidak  terjadi
creaming selama penyimpanan 28 hari.

## Evaluasi Homogenitas
Hasil pengamatan homogenitas menunjukkan bahwa  semua  formula  sediaan  krim  ekstrak etanolik daun alpukat memiliki susunan yang homogen,  tidak  terasa  adanya  butir-butir kasar pada plat kaca saat diujikan. Formula 1, Formula  2  dan  Formula  3  tidak  mengalami perubahan  homogenitas  selama  28  hari penyimpanan  sehingga  dapat  dikatakan sediaan krim stabil dalam hal homogenitasnya.

## Pengukuran pH
Hasil  pengukuran  pH  sediaan  krim menunjukkan bahwa semua formula sediaan krim memiliki tingkat keasaman 6. Nilai pH kulit normal berkisar antara 4,5-6,0 (Akhtar et al, 2011), sedangkan menurut SNI 16-4399- 1996  nilai  pH  sediaan  pelembab  kulit  yang baik berkisar antara 4,5-8. Nilai pH krim yang mengandung  ekstrak  daun  alpukat  masih berada dalam kisaran pH yang memenuhi standar SNI. Hasil pengukuran pH selama  28  hari  menunjukkan  bahwa  ketiga fomula  krim  yang  dibuat  tidak  mengalami perubahan  pH.  Dengan  demikian  perbedaan konsentrasi  emulgator  tidak  berpengaruh terhadap pH krim.

## Pengukuran Viskositas
Viskositas  merupakan  suatu  pernyataan tahanan  dari  suatu  cairan  untuk  mengalir. Semakin  tinggi  volume  dari  sediaan  krim maka semakin semakin  tinggi viskositasnya, sehingga    sediaan    tersebut    akan  semakin stabil  karena  pergerakan  partikel cenderung sulit    dengan    semakin    kentalnya    suatu sediaan.  Namun,  kecepatan  sediaan  untuk mengalir  lambat    (Schmitt,    1996).    Nilai viskositas  sediaan krim ekstrak etanolik daun alpukat selama 28 hari yang  dihasilkan  pada Formula  1  adalah  sebesar 13.180-26.060  cp ( Gambar  1 ),  Formula  2  sebesar  21.580- 33.880 cp  ( Gambar  2 ), Formula 3 sebesar 25.220-43.960  cp    ( Gambar  3 ).  Menurut Gozali  et al.  (2009),  nilai  viskositas  krim yang  ideal  lebih dari  5000  cps  dan  menurut SNI    16-4399-1996  tentang    standar    mutu sediaan  krim  tabir  surya, viskositas sediaan yang baik berkisar antara  2000-50.000  cps. Berdasarkan    data    pengukuran  viskositas, maka dapat disimpulkan semua formula krim yang dibuat memenuhi syarat sifat fisik.
Golongan  Senyawa Pereaksi Pengamatan Hasil Flavonoid Serbuk Merah (+) Mg+HCl pekat Keterangan: (+): terdeteksi

## Acta Pharmaciae Indonesia
September 2016, 4(2) 7-15; ISSN: 2337-8433
Hasil  pengukuran  menunjukkan  perbedaan viskositas  antar  formula  yang  disebabkan adanya  perbedaan  konsentrasi  emulgator. Semakin  tinggi  konsentrasi  tween  80  dan semakin  rendah  konsentrasi  span  80,  maka viskositas  krim  semakin  tinggi.  Hal  ini disebabkan oleh komposisi krim yang  lebih  banyak  mengandung  bagian  air maka komposisi emulgator yang lebih banyak mengandung Tween 80 akan lebih menstabilkan krim karena Tween 80 bersifat hidrofil yang akan mengikat bagian air dalam komposisi krim sehingga semakin kental (Sugihartini, 2010). Hasil  pengukuran  viskositas  krim  setelah penyimpanan krim selama 28 hari menunjukkan  adanya  penurunan  seiring dengan lamanya waktu penyimpanan sediaan krim.  Perubahan  yang  terjadi  selama penyimpanan  disebabkan  oleh  perubahan pada suhu ruang dan tipe emulsi. Suhu ruang yang  meningkat  dapat  mengganggu  daya tahan  krim  yang  menyebabkan  penurunan viskositas  dari  fase  kontinu  (air)  serta meningkatkan  gerak  globul  fase  terdispersi (minyak).  Emulsi  yang  termasuk  dalam tipe  minyak  dalam  air  cenderung  akan mengalami  penurunan  viskositas  sebagai akibat penyerapan air dari lingkungan sekitar oleh  bahan  yang  bersifat  higroskopis  dalam formula seperti gliserin (Gozali et al., 2009; Rowe et al., 2009). Hasil analisis ANOVA menunjukkan bahwa nilai signifikansi  0,000<0,05  yang  berarti  bahwa variasi  konsentrasi  emulgator  memberikan perbedaan    viskositas  sediaan    krim    yang signifikan.    Hasil    uji    LSD  didapatkan signifikansi    antarformula    ditemukan  pada semua  formula.  Hal  ini  berarti  peningkatan
konsentrasi    tween    80    dan    penurunan konsentrasi span  80  pada  semua  formula berpengaruh  signifikan  dalam  peningkatan viskositas.

## 12  Dina Mailana dan kawan-kawan
■ Formula 2 Replikasi 1 — F o r m u l a   2   R e p l i k a s i 2 Formula 2 Replikasi 3 y = -834,8x +33175 y = -982,9 lx+34367 y = -1000,5x+ 34767 Gambar  2 Hubungan  Lama  Penyimpanan  dengan Viskositas  Sediaan  Krim  Ekstrak Etanolik Daun Alpukat Formula 2
Gambar  1 Hubungan  Lama  Penyimpanan  dengan Viskositas Sediaan Krim Ekstrak Etanolik Daun Alpukat Formula 1
Data viskositas terhadap lama penyimpanan dianalisis  menggunakan  regresi  linier  dan didapatkan nilai slope untuk masing-masing formula.  Nilai slope menunjukkan  laju perubahan  terhadap  lama  penyimpanan sehingga  digunakan  untuk  menentukan stabilitas  formula.  Semakin  mendekati  nol nilai    slope    maka  laju  perubahannya semakin    kecil.    Hasil    analisis    ANOVA data    nilai  slope    didapatkan    nilai signifikansi    0,766>0,05  yang    berarti bahwa  variasi  konsentrasi  emulgator tidak memberikan    perbedaan    laju    perubahan viskositas  yang  signifikan  antar  formula selama penyimpanan  (ketiga  formula  krim yang  dibuat tidak  berbeda  stabilitasnya). Hasil  analisis  regresi linier  menunjukkan bahwa  Formula  3  merupakan krim yang paling stabil karena memiliki nilai  slope (- 394)    yang    lebih    mendekati    nol dibandingkan Formula 1 dan Formula 2.
-Formula 3 Replikasi 1 — ■ — Formula 3 Replikasi 2 ■ *- Formula 3 Replikasi 3 y = -1153,5x+ 45541 y = -394x + 36386 y = -733,4x 1 35671
Gambar  3 Hubungan  Lama  Penyimpanan  dengan
Viskositas Sediaan Krim Ekstrak Etanolik Daun Alpukat Formula 3

## Uji Daya Sebar
Pengujian  daya  sebar  ini  dimaksudkan untuk  mengetahui  seberapa  besar  krim dapat  menyebar  pada  kulit.  Semakin  besar daya  sebar  krim  maka  zat  aktif  yang dihantarkan  ke  dalam  lapisan  kulit akan  semakin  besar  (Voigt,  1995).  Hasil pengukuran  daya  sebar  krim  ekstrak etanolik  daun  alpukat  menunjukkan  hasil yang  cukup  stabilselama  penyimpanan  28 hari. Formula 1 memiliki daya sebar sebesar 5,80-6,40 cm; Formula 2 sebesar 5,00-6,30 cm  dan  Formula  3  sebesar  4,90-5,50  cm ((Gambar  4). Daya  sebar  yang  baik  yaitu 5-7  cm  (Garg et  al., 2002).  Hasil  analisis ANOVA menunjukkan bahwa nilai signifikansi 0,001<0,05 yang berarti variasi
emulgator  memberikan  perbedaan  daya sebar sediaan krim yang signifikan. Hasil uji LSD didapatkan signifikansi antar formula ditemukan  pada  semua  formula.  Hal  ini berarti  peningkatan  konsentrasi  tween  80 dan  penurunan  konsentrasi  span  80  pada semua  formula  berpengaruh  signifikan dalam penurunan daya sebar.
a Penyimpanan ( -Formula 1 M Formula 2 A Formula 3 Gambar  4 Hubungan  Lama  Penyimpanan  dengan Daya  Sebar  Sediaan  Krim  Ekstrak Etanolik Daun Alpukat
Hasil uji daya sebar pada hari ke-0 sampai hari  ke-28  menunjukkan  peningkatan diameter  daya  sebar  selama  penyimpanan seiring dengan penurunan viskositas. Hal ini menunjukkan hubungan terbalik antara daya sebar  dengan  viskositas,  semakin  besar viskositas sediaan maka semakin kecil daya sebarnya (Sugihartini, 2010).

## Uji Daya Lekat
Pengujian  daya  lekat  pada  suatu  sediaan bertujuan  untuk  mengevaluasi  kemampuan sediaan  krim  untuk  dapat  menempel  pada kulit.  Semakin  lama  suatu  sediaan semipadat dapat menempel pada kulit maka daya  absorbsi  zat  aktif  pada  kulit  akan semakin  baik  (Ansel,  2008).  Daya  lekat sediaan  semipadat  yang  baik  adalah  lebih dari 1 detik (Ansel, 2008). Hasil pengukuran daya  lekat  krim  ekstrak  etanolik  daun alpukat menunjukkan hasil yang cukup baik selama penyimpanan 28 hari. Formula 1 memiliki daya lekat sebesar 0,44- 2,56  detik;  Formula  2  sebesar  1,03-3,46 detik dan Formula 3 sebesar 1,41-4,65 detik (Gambar 5).
Hasil  analisis  ANOVA  menunjukkan bahwa  nilai  signifikansi  0,001<0,05  yang berarti bahwa variasi konsentrasi emulgator memberikan  perbedaan  daya  lekat  sediaan krim  yang  signifikan.  Hasil  uji  LSD didapatkan bahwa signifikansi antar
September 2016, 4(2) 7-15; ISSN: 2337-8433
formula  ditemukan  pada  semua  formula. Hal  ini  berarti  peningkatan  konsentrasi tween  80  dan  penurunan  konsentrasi  span 80  pada  semua  formula  berpengaruh signifikan dalam peningkatan daya
lekat.  Hasil  uji  daya  lekat  sediaan  krim ekstrak  etanolik  daun  alpukat  selama penyimpanan 28 hari menunjukkan adanya kecenderungan  daya  lekat  krim  semakin menurun.  Hal  tersebut  dapat  disebabkan karena  viskositas  dari  sediaan  krim selama
penyimpanan menunjukkan kecenderungan  mengalami  penurunan, sehingga  daya  lekatnya  juga  menurun (Sugihartini, 2010).
Formula 1 - B-Formula2 Formula 3 Gambar 5 Hubungan Lama Penyimpanan dengan Daya Lekat Sediaan Krim Ekstrak Etanolik Daun Alpukat

## Uji Aktivitas Antioksidan
Uji  aktivitas  antioksidan  dilakukan  setelah semua  formula  dibuat  dan  didapatkan formula  terbaik.  Formula  terbaik  terdapat pada Formula 3 karena memenuhi syarat uji sifat  fisik  dan  memiliki  nilai slope yang mendekati  nol.  Metode  yang  digunakan untuk  menentukan  aktivitas  antioksidan sediaan tersebut adalah metode peredaman radikal bebas DPPH (1,1-diphenyl-2-picryl hidrazyl). Metode  ini  dipilih  karena merupakan metode yang sederhana, murah, cepat,  dan  cukup  sensitif  sehingga  hanya membutuhkan sedikit sampel (Hanani et al., 2005).  Panjang  gelombang  maksimum larutan  DPPH  60,8  pM  yang  diperoleh adalah  520  nm  nilai  dengan  absorbansi 0,351.  Nilai  tersebut  sesuai  dengan literatur  yang  menyatakan  bahwa  panjang gelombang  maksimum  DPPH  berada  pada rentang  515-520  nm  (Molyneux,  2004). Ekstrak  etanolik  daun  alpukat  memiliki nilai absorbansi yang paling stabil  pada  waktu  40-45  menit.  Data  hasil uji  aktivitas  antioksidan  sediaan  krim ekstrak etanolik daun alpukat disajikan pada Tabel 3.
Tabel 3 Hasil Uji Aktivitas Antioksidan Krim Ekstrak Etanolik Daun Alpukat
Hasil  pengukuran  menunjukkan  bahwa persen peredaman sediaan krim lebih besar daripada  ekstrak,  hal  tesebut  disebabkan karena  kontrol  negatif  juga  memberikan persen peredaman. Hal tersebut disebabkan oleh  basis  krim  yang  mengandung komponen yang mempunyai gugus hidoksi  seperti  tween  80,  span  80,  metil paraben,  propil  paraben,  gliserin  dan trietanolamin. Gugus hidroksi aromatik dan alifatik  akan  mengalami  reaksi  redoks dengan  elektron  yang  tidak  stabil dari  DPPH.  Dengan  terjadinya  reaksi tersebut  maka  radikal  bebas  DPPH  akan menjadi  DPPH  yang  stabil  (Cadenas  dan Packer,  2002).  Hasil  analisis  ANOVA menunjukkan  bahwa  nilai  signifikansi 0,000<0,05 yang berarti bahwa penambahan emulgator tween 80 dan span 80  memberikan  perbedaan  nilai  persen peredaman yang signifikan. Hasil uji LSD didapatkan  signifikansi  antar  larutan  uji hanya  ditemukan  pada  eksipien  tanpa ekstrak  Namun  nilai  persen  peredaman sediaan  krim  ekstrak  etanolik  daun alpukat  tidak  berbeda  signifikan  dengan ekstrak  etanolik  daun  alpukat.  Hal  ini berarti bahan-bahan yang digunakan dalam formulasi  sediaan  krim  tidak  berpengaruh signifikan  terhadap  aktivitas  antioksidan ekstrak etanolik daun alpukat.

## Simpulan
Semakin  tinggi  konsentrasi  tween  80  dan semakin rendah konsentrasi span 80 maka semakin  tinggi  nilai  viskositas  dan  daya lekat,  sedangkan  nilai  daya  sebar  semakin rendah.  Formula  3  dengan  perbandingan konsentrasi  emulgator  tween  80  dan  span 80  sebesar  95%:5%  merupakan  formula sediaan  krim  antioksidan  ekstrak  etanolik daun alpukat terbaik dengan nilai viskositas antara 25.220-43.960 cps, daya sebar antara 4,9-5,5  cm,  daya  lekat  antara  1,41-4,65 detik  dan  persen  peredaman  terhadap DPPH sebesar 69,33%.

## 14  Dina Mailana dan kawan-kawan
8 7 2 6 0 ^ ----------------------------- 1----------------------1 ----------------------1 --------------------- 1 ----------------------1 --------------------- 1 --------------------- 1---------------------- 1 --------------------- 1---------------------- 1------- 0 1 2 3 4 5 6 7 14 21 28 Lam a Pen yi mp an an (h ari)
Larutan Uji Persen Peredaman DPPH x ± S D ( ) Krim Formula 3 69,33±2,00 Eksipien tanpa ekstrak (kontrol 7,31±2,65 negatif) Ekstrak daun alpukat 64,95±2,89 (kontrol positif)

## Daftar Pustaka
Akhtar,  N.,  Khan,  B.A.,  Khan,  M.S.,  Mahmood, T.,  Khan, H.M.S.,  Iqbal, M.,  dan  Bashir,  S.,
2011,Formulation Development
and Moisturising Effectof a Topical Cream of Aloe vera Extract, World  Academy  of  Science, Engineering and Technology, 172-180. Ansel, H.C., 2008, Pengantar Bentuk Sediaan Farmasi, Edisi Keempat, diterjemahkan oleh Farida Ibrahim, UI Press, Jakarta. Bustan, M.D., Febriyani, R. dan Pakpahan, H.,
2008, Pengaruh Waktu Ekstraksi dan Ukuran Partikel Terhadap Berat Oleoresin Jahe yang Diperoleh dalam Berbagai Jumlah Pelarut Organik (Methanol), Jurnal Teknik Kimia, 15 (4): 16-26 Cadenas, E., dan Packer, L., 2002, Handbook of Antioxidants, Second Edition, Revised and Expanded, Marcel Dekker Inc, USA. Depkes  RI,  2008, Farmakope  Herbal  Indonesia, Departemen  Kesehatan  Republik  Indonesia, Jakarta.
Erguder,  B.,  Avci,  A.,  Devrim,  E.,  dan  Durak,  I.,
2007,  Effects  of  Cooking  Techniques  on Antioxidant  Enzyme  Activities  of  Some Fruits  and  Vegetables, Turk  J  Med  Sci,
37 (3): 151 156. Garg,  A.,  Aggarwal,  D.,  Garg,  S.,  dan  Sigla,  A. K., 2002,  Spreading  of  Semisolid  Formulation: An  Update, Pharmaceutical  Technology, 84-102.
Gozali,  D.,  Abdassah,  M.,  Subghan,  A.,  dan Lathiefah,  S.A.,  2009,  Formulasi  Krim Pelembab  Wajah  yang  Mengandung  Tabir Surya  Nanopartikel  Zink  Oksida  Salut Silikon, Journal Farmaka, 7 (1). Hamzah,  N.,  Ismail,  I.,  dan  Saudi,  A.D.A.,  2014,
Pengaruh  Emulgator  Terhadap  Aktivitas Antioksidan  Krim  Ekstrak  Etanol  Kelopak Bunga  Rosella (Hibiscus  sabdariffa Linn), Jurnal Kesehatan, 7 (2), 376-385.
Hanani,  E.,  Mun'im,  A.,  dan  Sekarini,  R.,  2005, Identifikasi Senyawa Antioksidan
dalam Spons Callyspongia Sp dari Kepulauan Seribu, Majalah Ilmu
Kefarmasian, 2 (3), 127-133.
Harborne,  J.B.,  1996, Metode  Fitokimia  Penuntun Cara  Modern  Menganalisis  Tumbuhan, diterjemahkan  oleh  K.  Padmawinata  dan  I. Soediro, ITB, Bandung.
Isnindar,  Wahyuono,  S.,  dan  Setyowati,  E.P.,  2011,
Isolasi dan Identifikasi Senyawa Antioksidan  Daun  Kesemek (Diospyros kaki Thunb.)  dengan  Metode  DPPH (2,2- difenil-1-pikrilhidrazil), Majalah Obat Tradisional, 16 (3): 157-164. Katja,  D.G.,  Suryanto,  E.,  dan  Wehantouw,  F., 2009,  Potensi  Daun  Alpukat (Persea americana Mill) Sebagai Sumber
Antioksidan  Alami, Chem  Prog., Vol  2, No.
1: 58-64.
Melodita,  R.,  2011,  Identifikasi  Pendahuluan Senyawa  Fitokimia  dan  Uji  Aktivitas Antioksidan  Ekstrak  Daun  Cincau  Hitam Dengan  Perlakuan  Jenis  Pelarut, Skripsi, Fakultas  Teknologi  Pertanian,  Universitas Brawijaya, Malang.
Molyneux,  P.,  2004,  The  Use  of  The  Stable  Free
Radical  Diphenylpicrylhydrazyl  (DPPH)  for Estimating Antioxidant Activity,
Songklanakarin  J  Sci  Technol, 26 (2):  211- 19.
Owalabi,  M.A.,  Coker,  dan  Jaja,  S.  I.,  2010, Bioactivity  of  the  phytoconstituents  of  the leaves  of  Persea  americana, Journal  of Medicinal  Plants  Research, 3 (12):  1130- 1135.
Rowe,  R.C.,  Sheskey,  P.J.,  dan  Owen,  S.C.,  2009, Handbook  of  Pharmaceutical  Excipients, 6th  ed,  Pharmaceutical  Press  dan  The American Pharmacists Association, USA.
Schmitt,  W.H.,  1996,  Skin  Care  Product,  Di  dalam: DF  Williams  and  WH  Schmitt  (Ed),  1996, Chemistry  and  Technology  of  Cosmetics and  Toiletries  Industry. Ed  ke-2,  Blackie Academy and Professional, London.
Sharon,  N.,  Anam,  S.,  dan  Yuliet,  2013,  Formulasi Krim  Antioksidan  Ekstrak  Etanol  Bawang Hutan (Eleutherine  palmifolia L.  Merr), Online  Jurnal  of  Natural  Science, 2 (3): 111-122.
Standar  Nasional  Indonesia,  1996, Sediaan  Tabir Surya, Badan Standarisasi Nasional, Jakarta. SNI 16-4399-1996 Sugihartini, N., 2010, Optimasi Komposisi Emulgator Krim Ekstrak Teh Hijau
(Camellia  sinensis, L)  Sebagai  Sediaan Kemopreventif Kanker Kulit Dengan Metode Factorial  Design,  Laporan  Akhir Kegiatan Penelitian Hibah Disertasi Doktor, Lembaga Penelitian dan Pengabdian Kepada Masyarakat, Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta.
Tambunsaribu,  R.R.T.,  2013,  Uji  Efektifitas Ekstrak  Daun  Alpukat (Persea  Americana Mill)  Sebagai  Antioksidan  Alami  Terhadap Minyak  Goreng, Skripsi, Jurusan  Kimia, Fakultas Matematika Dan Ilmu Pengetahuan  Alam,  Universitas  Negeri Medan, Medan.
Voigt,  R.,  1995, Buku  Pelajaran  Teknologi Farmasi, Edisi  V,  diterjemahkan  oleh Soendadi  Noerono  Soewdanhi,  Edisi  ke-5, Gadjah Mada University Press, Yogyakarta.

## Acta Pharmaciae Indonesia
September 2016, 4(2) 7-15; ISSN: 2337-8433