Jurnal AGRIFOR Volume XIX Nomor 2, Oktober 2020                                                                ISSN P : 1412-6885 ISSN O : 2503-4960

## RESPON MORFOGENESIS EKSPLAN PUCUK ANGGREK TEBU
( Grammatophylum speciosum Blume) SECARA IN VITRO TERHADAP BEBERAPA KONSENTRASI KINETIN
Ellok Dwi Sulichantini 1 , Susylowati 1 , Ariya Ramadhan 1
1 Jurusan Agroekoteknologi Fakultas Pertanian Universitas Mulawarman Jl. Pasir Balengkong Kampus Gunung Kelua Samarinda, 75123
Kalimantan Timur, Indonesia E-Mail: ellokds@gmail.com

## ABSTRAK
Respon  Morfogenesis  Eksplan  Pucuk  Anggrek  Tebu  ( Grammatophylum  speciosum Blume)  Secara In Vitro Terhadap  Beberapa  Konsentrasi  Kinetin. Anggrek  tebu  ( Grammatophyllum  speciosum Blume) dikenal  sebagai  jenis  anggrek  raksasa,  anggrek  dewasa  dapat  memiliki  berat  1  ton,  malai  dapat  tumbuh hingga  2,5-3  meter  dengan  diameter  sekitar  1,5-2  cm.  Setiap  malai  memiliki  belasan,  bahkan  mencapai seratus  kuncup  bunga,  masing-masing  berdiameter  sekitar  satu  10  cm.  Anggrek  tebu  merupakan  salah  satu jenis  tanaman  yang  dilindungi  karena  keberadaannya  yang  semakin  langka  sehingga  membutuhkan  teknik perbanyakan secara in vitro untuk menunjang kelangsungan hidupnya.
Untuk  meningkatkan  pertumbuhan  Grammatophyllum  speciosum  Blume  pada  pucuk  tunas  ditanam  pada media MS dengan variasi konsentrasi kinetin (0, 1, 2, 3, dan 4 mg L-1) dengan 5 kali ulangan. Ujung pucuk dari kultur in vitro dengan panjang sekitar 1 cm digunakan sebagai eksplan. Pengamatan dilakukan selama 8 minggu setelah inokulasi.
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  ujung  pucuk  eksplan  tumbuh  dengan  baik  pada  media  dasar  MS. Penambahan kinetin ke dalam media meningkatkan laju pertumbuhan kultur. Peningkatan konsentrasi kinetin cenderung meningkatkan pertumbuhan. Konsentrasi terbaik untuk induksi pertumbuhan pada tinggi tanaman, diameter  batang,  panjang  daun  dan  panjang  akar  adalah  2  mg.L-1  kinetin,  sedangkan  3  mg.L-1  kinetin memberikan respon terbaik pada jumlah daun dan 4 mg. Konsentrasi L-1 kinetin terbaik pada lebar daun dan jumlah akar.
Kata kunci : Anggrek, Grammatophyllum speciosum , In Vitro, Kinetin.

## ABSTRACT
Morphogenesis  Response  of  Cane  Orchid  Shoots  (Grammatophylum  speciosum  Blume)  by  In  Vitro  to Several  Kinetin  Concentrations. Sugarcane  orchid  (Grammatophyllum  speciosum  Blume)  are  known  as  a type of giant orchid, adult orchids can weigh 1 ton, panicle can grow up to 2.5 – 3 meters with a diameter of about 1.5-2 cm. Each panicle has dozens, even reaching one hundred flower buds, each with a diameter of about one 10 cm. Sugarcane orchids are a type of plant that is protected because its existence is increasingly scarce so that it needs in vitro propagation techniques to support its survival.
To improve the growth of Grammatophyllum speciosum Blume in vitro shoot tip was growing on MS medium with  varying  concentration  of  kinetin  (0,  1,  2,  3,  and  4  mg  L -1 )  with  5  replications.  Shoot  tip  from  in  vitro culture around 1 cm lengt was used as explants. Observations carried out for 8 weeks after inoculation. The results showed that shoot explants tip  growth well in MS basic medium. The addition of kinetin to the medium,  increases  growth  rate  of  culture.  Increasing  the  concentration  of  kinetin  tends  to  increase  the growth.  The  best  concentration  for  growth  induction  on  plant  height,  stem  diameter,    leaves  length  and length  of  roots  was  2  mg.L -1 kinetin,  On  the  other  hand  3  mg.L -1 kinetin  gave  best  response  on  number  of leaves and 4  mg.L -1 kinetin was the best concentration on leaves width and number of roots .
Key words : Grammatophyllum speciosum, In Vitro, Kineti, Orchid .

## 1. PENDAHULUAN
Anggrek  merupakan  jenis  tanaman dengan  bunga  yang  sangat  indah,  selain berperan  sebagai  tanaman  hias  beberapa jenis  anggrek  juga  bermanfaat  sebagai obat,  dan    minyak  wangi.  Famili orchidaceae  memiliki  jumlah  genus  dan spesies  yang  sangat  besar,  sehingga variasi  bunganya  juga  sangat  besar. Variasi  bunga  dapat  dilihat  dari  warna bunga,  ukuran  bunga,  bentuk  bunga, ketebalan  bunga,  aroma  bunga,  jumlah kuntum bunga pertangkai, panjang tangkai  bunga,  dan  letak  bunga  dalam tangkai.
Anggrek  tebu  ( Grammatophyllum speciosum )  sampai  saat  ini  dikenal sebagai anggrek yang terbesar.
Grammatophyllum  merupakan  marga anggrek  tropis  dan  memiliki  12  jenis yang  tersebar  di  dunia.  G.  speciosum disebut  juga  sebagai  anggrek  tebu,  ratu anggrek  atau  tiger  orchid.    Anggrek  tebu tersebar  luas  di  seluruh  Asia  Tenggara seperti Myanmar, Thailand, Laos, Vietnam,  Malaysia,  Indonesia,  Papua Nuginea  dan  Kepulauan  Solomon.  Di Indonesia  anggrek  tebu  tersebar  di Sumatera,  Kalimantan,  Jawa,  Sulawesi, Maluku dan Papua. Anggrek tebu tumbuh secara  epifit  pada  pohon-pohon  besar  di daerah  dataran  rendah  yang  beriklim tropis.    Anggrek  tebu  memerlukan  sinar matahari langsung (Anonim, 2015; O’Byrne  1994;  Salifah,  et  al.  2011; Yukawa, et al. 2013).
Satu rumpun anggrek dewasa dapat mencapai  berat  1  ton,  dengan  panjang mencapai  3  meter.    Bunga  anggrek  tebu berwarna  kuning  dengan  bintik-bintik coklat,  merah,  dan  merah  kehitaman. Tangkai bunga keluar diantara dua ketiak daun.  Berdasarkan  tipe  pertumbuhannya, anggrek  tebu  termasuk  dalam  tipe monopodial yaitu mempunyai pertumbuhan  tidak  terbatas,terus  tumbuh ke  atas.    Anggrek  tebu  tidak  mempunyai umbi,  bentuk  batangnya  ramping.    Malai
dapat mencapai tinggi 2,5-3 meter dengan diameter  1,5-2  meter.  Setiap  malai  dapat memiliki ratusan kuntum bunga, masing- masing  bunga  mempunyai  diameter sekitar 10 cm. Bunga  anggrek tebu yang dipotong dari batangnya mampu bertahan selama 2 bulan (Herawati, 2013).
Anggrek tebu termasuk jenis anggrek yang banyak diminati masyarakat  sehingga  keberadaannya  di alam menjadi terancam akibat pengambilan yang berlebihan. Langkanya  keberadaan    anggrek  tebu  di habitat aslinya dipengaruhi oleh berbagai faktor antara lain adalah adanya perubahan  atau  rusaknya  habitat  tumbuh akibat  penebangan  hutan  dan  alih  guna lahan.  Eksploitasi  anggrek  tebu  di  alam yang  dilakukan  secara  terus  menerus akan mengakibatkan kepunahan, sehingga perlu dilakukan kegiatan konservasi.
Menurut  Irawati  (2001),  salah  satu genus  anggrek  yang  hampir  punah  yaitu Grammatophyllum . Grammatophyllum speciosum Blume masuk dalam Apendiks II  CITES  sejak  tahun  2005  bersama dengan  seluruh  jenis  anggrek,  kecuali dari marga Pahiophedilum (CITES 2005). Menurut  Anonim  (1999),  peraturan Pemerintah  Republik  Indonesia  Nomor  7 Tahun  1999  tentang  Pengawetan  Jenis Tumbuhan dan Satwa menetapkan bahwa Grammatophyllum  merupakan  salah  satu jenis  anggrek  yang  dilindungi.    Menurut Sabran  dan  Firmansyah  (2015)  tidak sedikit  jenis  anggrek  Indonesia  mulai terancam keberadaannya di habitat alaminya,  termasuk  jenis  anggrek  tebu.
Selain  itu  banyak  jenis  anggrek  yang penyebarannya terbatas diperkirakan sudah  punah  di  tempat  aslinya,  oleh karena  itu  sebagai  upaya  pelestarian plasma  nutfah  tanaman  anggrek  perlu dilakukannya eksplorasi maupun karakterisasi. Aprilianti, (2018) menyatakan  bahwa  Pusat  Konservasi Tumbuhan Kebun Raya-LIPI telah
Jurnal AGRIFOR Volume XIX Nomor 2, Oktober 2020                                                                ISSN P : 1412-6885 ISSN O : 2503-4960
melaksanakan
kegiatan konservasi
anggrek Grammatophyllum  speciosum melalui  kegiatan  eksplorasi  di  hutan- hutan  Indonesia  dan  juga  pengembangan secara in vitro maupun ex vitro, termasuk pengembangan benih sintetik.
Perbanyakan anggrek
secara konvensional  secara  vegetatif  dapat dilakukan dengan stek batang, pemisahan rumpun,  pemisahan  pseudobuld,  dan keiki  (Gunawan,  2004).  Perbanyakan secara  generatif  dengan  menggunakan biji  mengalami  kesulitan  karena  biji-biji anggrek  hasil  penyerbukan  alami  tidak mempunyai cadangan makanan, sehingga tidak  dapat  berkecambah.  Di  alam perkecambahan  bisa  terjadi  apabila  ada asosiasi dengan mikoriza. Menurut Kumaria  dan  Tandon  (2010),  persentase keberhasilan perkecambahan biji  di alam sangat rendah yaitu sekitar 1 %. Teknik  perbanyakan  secara  kultur jaringan  termasuk  salah  satu  cara  untuk melestarikan  keberadaan  anggrek  tebu sehingga terhindar dari kepunahan.
Teknik perbanyakan secara kultur jaringan  dapat  dilakukan  tanpa  perlu adanya  asosiasi  dengan  mikoriza,  seperti yang  telah  ditunjukkan  oleh  Knudson pada  tahun  1922  (Knudson,  1922). Teknik  kultur  jaringan  merupakan  solusi perbanyakan  biji  yang  tidak  mempunyai cadangan  makanan  seperti  anggrek, karena  teknik  ini  menggunakan  media buatan yang kaya nutrisi. Pradhan et al. (2016),
menggunakan  teknik  kultur  jaringan untuk  melestarikan  anggrek  Cymbidium. Menurut Gunawan, (1992), Teknik kultur jaringan  mempunyai  kelebihan    dapat menghasilkan bibit dalam jumlah banyak, dalam  waktu  cepat,  dan    bibit  seragam, pengadaan  bibit  tidak  tergantung  musim, dan memerlukan ruang yang relatif kecil. Menurut, Zulkarnain (2009) bahwa manfaat  utama  dari  aplikasi  teknik  in vitro  adalah  perbanyakan  klon  atau perbanyakan  massal  dari  tanaman  yang
sifat genetiknya identik dengan induknya. Selain  itu  metode  in  vitro  bermanfaat dalam beberapa hal khusus yaitu perbanyakan klon secara cepat, keseragaman  genetik,  kondisi  aseptik, seleksi  tanaman,  lingkungan  terkendali dan pelestarian plasma nutfah.
Media  dalam  kultur  in  vitro merupakan  salah  satu  faktor  penting penentu keberhasilan perbanyakan tanaman  secara  in  vitro.  Media  tanam harus  berisi  semua  zat  yang  diperlukan untuk  menjamin  kebutuhan  eksplan. Komponen penyusun media tanam terdiri  dari  campuran  garam  mineral, unsur  makro  dan  unsur  mikro,  sumber karbon,  protein,  vitamin,buffer,  sukrosa sebagai sumber energy, asam amino  dan hormon  tumbuhan.    Media  tumbuh  yang biasa  digunakan  untuk  anggrek  adalah media  Vacin  and  Went  (VW)  dan Murashige  dan  Skoog  (MS).  Menurut Wetherell  (1982),  konsentrasi  optimum dari unsur-unsur nutrisi untuk pertumbuhan  berbeda-beda  tergantung pada  jenis  tanaman  dan  tujuan  kultur yang diinginkan.
Keberhasilan  kultur  in  vitro  juga ditentukan  oleh  zat  pengatur  tumbuh (ZPT)  yang  diberikan.  Zat  pengatur tumbuh  yang  banyak  digunakan  adalah golongan sitokinin dan auksin
(Wattimena  et  al.,  1992).  Pemanfaatan sitokinin  dan  auksin  pada  teknik  kultur jaringan  dibutuhkan  untuk  memacu terbentuknya organ-organ. Sitokinin digunakan  untuk  memacu  pembelahan sel,  dimana  ketika  berinteraksi  dengan auksin  dalam  konsentrasi  yang  tepat, maka akan tumbuh sel-sel meristem yang terus membelah dan berkembang membentuk  organ.  Sitokinin  berfungsi untuk meregulasi pembelahan sel, memacu  organogenesis,  perkembangan kloroplas,  menginduksi  embriogenesis dan  organogenesis  (Salisburry  dan  Ross, 1995).  Interaksi  antara  zat  pengatur tumbuh  yang  ditambahkan  atau  eksogen
dengan  hormon yang diproduksi oleh sel secara  endogen  akan    menentukan  arah perkembangan suatu kultur. Perbandingan auksin yang tinggi sedangkan  sitokinin  yang  rendah  akan mendorong morfogenesis akar sebaliknya sitokinin  dengan  konsentrasi    tinggi sedangkan
auksin rendah akan mendorong  pembentukan  tunas  (George dan Sherrington 1984). Menurut Zulkarnain  (2009),  tanpa  menggunakan zat  pengatur  tumbuh  maka  akan  sulit mencapai keberhasilan perbanyakan secara in  vitro .  Menurut  Santoso  dan Nursandi  (2004), pemberian zat  pengatur tumbuh  yang  melebihi  konsentrasi  yang diperlukan tanaman dapat menjadi penghambat pertumbuhan.
Menurut George  dan  Sherrington  (1984),  rasio antara  hormon  sitokinin  dan  auksin  yang diperlukan  untuk  meregenerasi  suatu eksplan tidak mutlak sama pada tiap jenis tanaman.  Penelitian  dilaksanakan  untuk mengetahui  pengaruh  konsentrasi  kinetin terhadap  morfogenesis  eksplan  anggrek tebu.

## 2. METODA PENELITIAN
2.1. Tempat dan Waktu Penelitian dilaksanakan di Laboratorium Kultur Jaringan, Fakultas Pertanian, Universitas Mulawarman,  pada  bulan  Desember 2018 sampai April 2019.

## 2.2. Bahan dan Alat
Alat-alat  yang  digunakan  dalam penelitian ini adalah autoklaf, laminar  air  flow  cabinet  (LAFC), timbangan  analitik,  botol  kultur,  pH indikator,  pisau,  cawan  petri,  pipet, gelas  ukur,  erlenmeyer  berbagai ukuran, tabung reaksi, bunsen, spayer, refrigerator dan rak inkubasi. Bahan-bahan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah pucuk  steril anggrek  tebu  ( Grammatophyllum
speciosum  blume) ukuran  sekitar  1 cm,  dan  zat  pengatur  tumbuh  yang digunakan  adalah  kinetin.  Bahan- bahan  lainnya  yaitu  HCl  (1N)  dan NaOH  (1N)  untuk  mengatur  pH, alkohol 70 % dan 90 %, serta plastik bening,  karet,  spirtus,  akuades,  gula, agar, masker, dan sarung tangan.

## 2.3. Rancangan Penelitian
Penelitian ini menggunakan Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL) faktor tunggal dengan ulangan sebanyak  5  kali.  Faktor  perlakuan yaitu  konsentrasi  Kinetin  terdiri  atas lima taraf, yaitu k 0 = 0 mg L -1 , k 1 = 1 mg L -1 , k 2 = 2 mg L -1 , k 3 = 3 mg L -1 , dan  k 4 =  4  mg  L -1 .  Media  dasar  yang digunakan  adalah  media  Murashige dan Skoog (MS)

## 2.4. Pengamatan
Pengamatan dilakukan setiap minggu sampai  umur  8  minggu  setelah inokulasi  (MSI).  Variabel  yang diamati  dalam  penelitian  ini  adalah pertambahan  tinggi  tanaman  (mm), pertambahan  jumlah  daun  (buah), pertambahan lebar daun (mm), pertambahan  panjang  daun  (mm), waktu  muncul  akar  (his),    jumlah akar (buah) dan panjang akar (mm)

## 3. HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN
Zat  pengatur  tumbuh  tanaman berperan  penting  dalam  mengontrol proses  biologi  dalam  jaringan  tanaman, mengatur  kecepatan  pertumbuhan  dari masing-masing  jaringan  Aktivitas  zat pengatur  tumbuh  di  dalam  pertumbuhan tergantung  dari  jenis,  struktur  kimia, konsentrasi,  genotipe  tanaman  serta  fase fisiologi  tanaman  (Satyavathi  et  al., 2004). Proses pertumbuhan dapat dipengaruhi  oleh  zat  pengatur  tumbuh, salah  satunya  adalah  sitokinin,  yang
Jurnal AGRIFOR Volume XIX Nomor 2, Oktober 2020                                                                ISSN P : 1412-6885 ISSN O : 2503-4960
dalam  hal  ini  adalah  kinetin.  George  dan Sherrington,  1984  menyatakan  bahwa induksi tunas hanya memerlukan sitokinin  dalam  konsentrasi  tinggi  tanpa auksin  atau  dengan  auksin  dalam konsentrasi yang rendah.
Mondal  et  al.  (1990),    menyatakan bahwa  rasio  konsentrasi  sitokinin  dan auksin yang tinggi akan memacu pembentukan  tunas.  Apabila  sitokinin dalam  media  berada  pada  jumlah  sangat terbatas  maka  pembelahan  sel  akan
terhambat  dan  apabila  sitokinin  dalam media  berada  dalam  jumlah  yang  cukup, maka pembelahan sel akan lebih cepat.

## 3.1. Pertambahan tinggi
Hasil penelitian respon pertambahan  tinggi  pucuk  anggrek  tebu secara  in  vitro  pada  umur  1  sampai  8 minggu setelah inokulasi terhadap berbagai  konsentrasi  kinetin  disajikan pada Gambar 1.
Gambar 1. Pengaruh Konsentrasi Kinetin terhadap Pertambahan Tinggi
Perlakuan  konsentrasi  kinetin  pada awal  pertumbuhan  belum  begitu  terlihat, semakin  bertambahnya  umur  kultur semakin nampak bahwa pemberian kinetin  pada  media  memberikan  respon lebih  baik  daripada  kontrol  (MS  tanpa kinetin).  Pada  kultur  umur  8  minggu setelah  inokulasi  (MSI)  terlihat  bahwa konsentrasi kinetin 2 mg.L -1
menunjukkan  respon  pertumbuhan  yang terbaik (35,6  mm)  diikuti  dengan perlakuan  kinetin  3  mg.L -1 (26,6  mm). Penambahan konsentrasi sebesar 4 mg.L -1
menghasilkan  pertambahan  tinggi  yang lebih  rendah  (21,6  mm)  dari  pada konsentrasi  1,  2,  dan  4  mg.L -1 ,  tetapi masih  lebih  baik  dibandingkan  kontrol
(15,8  mm)  (Gambar  1).  Sitokinin diperlukan  untuk  pembelahan  sel  atau stimulasi pertumbuhan dan perkembangan  tanaman  (Bhojwani  dan Radzan, 1983). Hasil penelitian menunjukkan bahwa peningkatan konsentrasi  kinetin  tidak  linier  dengan pertambahan tinggi, hal tersebut kemungkinan disebabkan kandungan sitokinin  alami  yang  terdapat  di  dalam eksplan  sudah  cukup  tersedia,  sehingga konsentrasi sitokinin eksogen yang diperlukan tidak terlalu besar.
3.2. Pertambahan diameter batang Hasil
penelitian respon pertambahan  diameter  batang  pucuk
anggrek tebu secara in vitro pada umur 1 sampai  8  minggu  setelah  inokulasi
terhadap  berbagai  konsentrasi  kinetin disajikan pada Gambar 2.
Gambar 2. Pengaruh Konsentrasi Kinetin terhadap Pertambahan Diameter Batang
Pertambahan diameter
batang sebesar  0,2-0,4  mm  terlihat  pada  kultur umur  satu minggu setelah inokulasi yaitu pada  kultur yang diberi perlakuan kinetin (1-4 mg.L -1 ), sedangkan  pada kontrol  ( 0 mg.L -1 kinetin) belum terdapat pertambahan
diameter batang. Pertambahan diameter batang baru sebesar 0,2 mm pada kontrol baru terlihat pada  kultur  umur  2  minggu  setelah inokulasi.    Diameter  batang  pada  kontrol tidak terdapat penambahan sampai kultur berumur  8  minggu  setelah  inokulasi. Penambahan  kinetin  dengan  konsentrasi 1-4 mg.L -1 mampu meningkatkan pertambahan
diameter batang.
Pertambahan terbesar terlihat pada perlakuan 2 mg.L -1 yaitu sebesar 1,4 mm (umur 4 MSI) dan 1,6 mm (umur 8 MSI). Peningkatan konsentrasi kinetin sebesar 4 mg.L -1 hanya  memberikan  pertambahan diameter  batang  sebesar  1,4  mm  pada kultur umur 8 MSI (Gambar 2).

## 3.3. Pertambahan jumlah daun
Hasil penelitian respon pertambahan jumlah daun pucuk anggrek tebu secara in vitro pada umur 1 sampai 8 minggu setelah inokulasi terhadap berbagai  konsentrasi  kinetin  disajikan pada Gambar 3.
Jurnal AGRIFOR Volume XIX Nomor 2, Oktober 2020                                                                ISSN P : 1412-6885 ISSN O : 2503-4960
Gambar 3. Pengaruh Konsentrasi Kinetin terhadap Pertambahan Jumlah Daun
Penambahan  kinetin  pada  media tumbuh  menunjukkan  pertumbuhan  daun yang  lebih  cepat  dibandingkan  pada kontrol (Gambar 3.). Pertambahan jumlah daun  pada  media  kontrol  (MS 0 )  baru dimulai  pada  umur  3  minggu  setelah inokulasi. Pada umur 4 MST pertambahan  jumlah  daun  pada  media kontrol sebesar 0,4 helai, sedangkan pada media  perlakuan  pertambahan  jumlah daun sudah mencapai 1,8 helai (kinetin  2 mgL -1 ),  1,4  helai  (kinetin    3  mgL -1 ),  1,2 helai  (kinetin    4  mgL -1 ),  0,8  helai (kinetin  1 mgL -1 )  sedangkan pada umur
8 MSI pertambahan jumlah daun terbanyak  sebesar  2,4  helai  diperoleh pada  media  perlakuan  kinetin    3  mgL -1 , selanjutnya  berturut-turut  sebesar  2,2 helai    (kinetin    2  mgL -1 ),  1,6  helai (kinetin    4  mgL -1 ),  1,2  helai  (kinetin    2 mgL -1 ) dan  1,0 helai pada media kontrol
(kinetin    0  mgL -1 ).    Peningkatan konsentrasi  kinetin  tidak  linier  dengan pertambahan  jumlah  daun.  Pertambahan jumlah  daun  tertinggi    pada  umur  8  MSI diperoleh  pada  media  MS  yg  ditambah dengan  kinetin    3    mgL -1 ).  Menurut Wattimena (1988), variasi respon terhadap  pemberian  zat  pengatur  tumbuh dipengaruhi oleh perbedaan fase pertumbuhan, kondisi fisiologis, kemampuan  tanaman  mengabsorbsi  zpt, serta fluktuasi kandungan hormone endogen.

## 3.4. Pertambahan lebar daun
Hasil penelitian respon pertambahan  lebar  daun  pucuk  anggrek tebu secara in vitro pada umur 1 sampai 8 minggu setelah inokulasi terhadap berbagai  konsentrasi  kinetin  disajikan pada Gambar 4.
Gambar 4. Pengaruh Konsentrasi Kinetin terhadap Pertambahan Lebar Daun
Peningkatan  konsentrasi  kinetin yang  ditambahkan  pada  media  MS menunjukkan kecenderungan adanya peningkatan  lebar  daun.    Pada  umur kultur  4  MSI,  pertambahan  lebar  sebesar 0,2 mm pada kontrol  (kinetin  0 mg.L -1 ), 0,8  mm    (kinetin    1  mg.L -1 ),  1,0  mm (kinetin    2  mg.L -1 )  ,  1,2  mm  (kinetin    3 mgL -1 ),  dan  1,2  mm(kinetin    4  mgL -1 ).
Bertambahnya  umur  kultur  secara  umum akan  meningkatkan  pertambahan  lebar daun.  Pada  kultur  umur  8  MSI, pertambahan  lebar  sebesar  0,8  mm  pada kontrol  (kinetin    0  mg.L -1 ),  0,8  mm (kinetin    1  mg.L -1 ),  1,4  mm  (kinetin    2 mg.L -1 ) , 1,6 mm (kinetin  3 mgL -1 ), dan 1,8 mm (kinetin  4 mgL -1 ).  Pertambahan lebar daun terbesar didapat pada perlakuan kinetin  4 mgL -1 (Gambar 4).

## 3.5. Pertambahan panjang daun
Hasil penelitian respon pertambahan panjang daun pucuk anggrek tebu secara in vitro pada umur 1 sampai  8  minggu  setelah  inokulasi terhadap  berbagai  konsentrasi  kinetin disajikan pada Gambar 5.
Peningkatan  konsentrasi  kinetin yang  ditambahkan  pada  media  MS  tidak selalu menunjukkan  adanya peningkatan panjang  daun.  Peningkatan    konsentrasi kinetin  sampai    2  mg.L -1 menunjukkan adanya peningkatan panjang daun, selanjutnya peningkatan konsentrasi kinetin  akan  menurunkan  panjang  daun pada  kultur  umur  8  MSI.  Pada  kultur umur  4  MSI,  pertambahan  panjang sebesar  8,6  mm  pada  kontrol  (kinetin    0 mg.L -1 ), 7,0 mm  (kinetin  1 mg.L -1 ), 10,2 mm  (kinetin    2  mg.L -1 )  ,  10,6  mm (kinetin  3 mgL -1 ), dan 5,4 mm (kinetin  4 mgL -1 ).    Bertambahnya  umur  kultur secara umum akan meningkatkan pertambahan  panjang  daun.  Pada  kultur umur  8  MSI,  pertambahan  panjang sebesar 12,2  mm pada kontrol (kinetin  0 mg.L -1 ),  13,8  mm    (kinetin    1  mg.L -1 ), 32,6  mm  (kinetin    2  mg.L -1 )  ,  23,2  mm (kinetin  3 mgL -1 ), dan 14,2 mm (kinetin 4  mgL -1 ).    Pertambahan  panjang    daun terbesar didapat pada perlakuan kinetin  2 mgL -1 yaitu sebesar 32,6 mm (Gambar 5).
Jurnal AGRIFOR Volume XIX Nomor 2, Oktober 2020                                                                ISSN P : 1412-6885 ISSN O : 2503-4960
Gambar 5. Pengaruh Konsentrasi Kinetin terhadap Pertambahan Panjang Daun

## 3.6. Pertumbuhan akar
Hasil penelitian respon pertumbuhan  akar  pucuk  anggrek  tebu secara  in  vitro  pada  umur  8  minggu setelah inokulasi terhadap berbagai konsentrasi kinetin disajikan pada Gambar 6.
Gambar 6. Pengaruh Konsentrasi Kinetin terhadap Waktu Muncul Akar, Jumlah Akar dan Panjang Akar
Akar  mulai  terbentuk  pada  kultur  umur 12,2  hari  setelah  inokulasi  (HSI)  pada perlakuan kinetin  1 mg.L -1 dan 3 mg.L -1 . Akar  juga  tumbuh  pada  media  kontrol (kinetin    0  mg.L -1 )  saat  kultur  berumur 13,4  HIS.    Peningkatan  konsentrasi kinetin tidak terlalu mempengaruhi waktu munculnya  akar.  Akar  tumbuh  pada rentang  waktu  antara  12-16  HIS,  hal tersebut  menunjukkan  bahwa  eksplan pucuk anggrek tebu dapat dengan  mudah berakar  pada media dasar MS atau media MS  ditambah  kinetin  dengan  konsentrasi 1-4    mg.L -1 .  Penambahan  kinetin    pada
media perlakuan tidak terlalu berpengaruh terhadap waktu terbentuknya  akar  tetapi  memberikan pengaruh  terhadap  jumlah  akar  yang terbentuk. Peningkatan
konsentrasi kinetin  cenderung  akan  meningkatkan jumlah  akar.    Jumlah  akar  terbanyak diperoleh pada perlakuan kinetin 4 mg.L -1 sebanyak  4  buah.    Panjang  akar terpanjang  diperoleh  pada  perlakuan kontrol dan kinetin 2 mg.L -1 (72,2 mm), panjang  akar  terpendek  diperoleh  pada perlakuan  kinetin  4  mg.L -1 (Gambar  6).
Peningkatan konsentrasi kinetin cenderung  menurunkan  panjang  akar. Menurut  Salisbury  dan  Ross  (1995), konsentrasi  zat  pengatur  tumbuh  yang terlalu  tinggi  akan  mendorong  sintesis etilen yang selanjutnya akan menghambat pemanjangan akar.

## 4. KESIMPULAN
Penambahan  kinetin  pada  media MS  mampu  meningkatkan  morfogenesis eksplan  anggrek  tebu  yaitu  tinggi tanaman,  jumlah  daun,  panjang  daun, lebar daun, diameter batang, panjang akar dan  jumlah  akar.  Konsentrasi  Kinetin sebesar 2 mg L -1 merupakan  konsentrasi terbaik untuk meningkatkan pertumbuhan tinggi, daun dan akar kultur anggrek tebu.

## DAFTAR PUSTAKA
Anonim.  (1999).  Jenis-jenis  Tumbuhan
dan Satwa yang Dilindungi. Lampiran  Peraturan  Pemerintah Republik Indonesia Nomor 7 Tahun 1999 Tanggal 27 Januari 1999. Anonim. (2015). Pelestarian Grammatophyllum speciosum. Htttp://repisitori umy Bojwani,S.S., and  Radzan. (1983). Plant Tissue Culture: Theory and
Practice.    New  York:  Elsivier,
Science Publishing Company. CITES  [Convention  on  International Trade  in  Endangered  Species]. (2005). Checklist of CITES species. https: //cites.org/ eng/resources/pub/ checklist08/ Checklist.pdf George,  E.F.,  dan  Sherrington.  (1984). Plant Propagation by Tissue Culture .  Handbook  and  Directory of Directory of Commercial laboratories. Eastern Press. England. Gunawan,  L.W.  (1992).  Teknik  Kultur Jaringan  Tumbuhan.  Laboratorium Kultur  Jaringan  Tumbuhan  Pusat Antar Universitas (PAU) Bioteknologi IPB, Bogor. Hartmann, H.T., D.E. Kester, J.R. Davis, dan R.L.  Geneve.  (1997). Plant Propagation. Prentice-Hall International Inc. New Jersey. Herawati, W. (2013). Konservasi Anggrek .  Purwokerto:  Universitas Jenderal Soedirman. http://bio.unsoed.ac.id/sites/default/
files/Konservasi%20Anggrek- .pdf . DiaksesTanggal  19  Februari 2019.
Jurnal AGRIFOR Volume XIX Nomor 2, Oktober 2020                                                                ISSN P : 1412-6885 ISSN O : 2503-4960
Irawati. (2001). Tumbuhan langka Indonesia.  Pusat  Penelitian  dan Pengembangan Biologi. LIPI. Balai Penelitian Botani Herbarium Bogoriense. Bogor. Knudson, L. (1922) Nonsymbiotic Germination  of  Orchid  Seeds. Botanical Gazette, 73, 1- 25. https://doi.org/10.1086/332956 [Citation Time(s):12. Kumaria,  S.  and  Tandon,  P.  (2010) Biotechnological  Approaches  to Conservation of Orchids, the
Wondrous  and  Mystic  Plants  of North-East India. Man and Society: A  journal  of  North  East  Studies,  4, 61-68.   [Citation Time(s):1]
Mondal,  M.,  Gupta,  S.,  Mukherjee,  B.B.
(1990).  In  Vitropropagation  Of Shoot  Buds  of  Carica  papaya  L. var.  HoneyDew.  Plant  Cell  Rep.
8:609-612. O’Byrne, P. (1994).  Lowland Orchids  of Papua New Guinea. SNP Publishers, Singapore. Pradhan, S., Tiruwa, B.L., Subedee, B.R. and  Pant,  B.  (2016)  Efficient  Plant Regeneration of Cymbidium aloifolium  (L.)  Sw.,  a  Threatened Orchid  of  Nepal  through  Artificial Seed Technology. American Journal  of  Plant  Sciences,  7,  1964- 1974. https://doi.org/10.4236/ajps.2 016.714179 Sabran,  M  dan  Firmansyah.  (2015). Eksplorasi dan Karakterisasi
Tanaman  Anggrek  di  Kalimantan Tengah.  Buletin  Plasma  Nutfah: Vol 19 No 1.
Salifah.  H.A.B.,  Muskhazli,  M.,  Rusea, G., Nithiyaa, P. (2011). Variation in mycorrhizal  specificity  for  in  vitro symbiotic  seed  germination  of Grammatophyllum speciosum
Blume.  Sains  Malaysiana  40  (5):
451- 455
Salisbury,  F.  dan  Ross,  C.W.  (1995).
Fisiologi Tumbuhan. Bandung.
Penerbit ITB Bandung. Santoso,  U.,  dan  F.  Nursandi.  (2004). Kultur Jaringan Tanaman.Universitas Muhammadiyah  Malang:  Malang Press.
Satyavathi, V.V., P.P. Jauhar, E.M. Elias, and  M.B.  Rao.    (2004).  Genomics, molecular genetic and biotechnology  efects  of  growth regulators on in vitro plant regeneration.  Crop  Sci.  (44):  1839- 1846.
Wattimena,  G.A.  (1988).  Zat  Pengatur Tumbuh  Tanaman.    Laboratorium Kultur Jaringan, PAU Bioteknologi, Bogor.
Wiendi,  N.M.A.,  G.A.  Wattimena  dan L.W. Gunawan. (1992). Perbanyakan  Tanaman.  12-104. Dalam A.S. Abidin (ed.). Bioteknologi  Tanaman.  PAU,  IPB. Bogor. Wetherell, DF. (1982). Introduction to  In Vitro  Propagation  Wayne.  A  very Publishing Group. New Jersey Yukawa  T,  Kinoshita  A,  Tanaka  N. (2013).  Molecular  identification resolves  taxonomic  confusion  in Grammatophyllum speciosum complex  (Orchidaceae).  Bull  Natl Museum Nat Sci 39 (3): 137-145. Zulkarnain.  (2009).  Kultur  Jaringan Tanaman: Solusi Perbanyakan
Tanaman  Budidaya.  Jakarta:  Bumi
Aksara.