## BIOAKTIVITAS ANTIMALARIA EKSTRAK METANOL SPONS
Petrosia ficiformis ASAL TANJUNG RUM TIDORE KEPULAUAN
Sabir Sumarna 1 , Mahruf Azis 2 , Suwandi S. Sangadji 3 , Irsan Nudin Idrus 4 Universitas Nuku: Jl. Sultan Mansyur No. 1, Tidore Kepulauan
1 Program Studi Kehutanan, FAPERTAHUT Universitas Nuku
2 Program Studi Ilmu Kelautan, FIK Universitas Nuku 3 Program Studi Agribisnis, FAPERTAHUT Universitas Nuku
4 Program Studi Akuntansi, FE Universsitas Nuku Email: sabir@univ-nuku.ac.id, azismahruf@gmail.com, suwandinukusangadji@gmail.com
Manuscript recieved:15-11-2019 Revision Accepted: 30-11-2019

## Abstrak
Malaria adalah masalah kesehatan serius disebabkan parasit Plasmodium falciparum telah resisten (kebal)  terhadap  obat  antimalaria  yang  ada  seperti  chloroquin.  Obat  baru  dengan  struktur molekul dan mekanisme aksi yang unik sangat diperlukan untuk menggantikan obat-obat yang telah  reisten.  Uji  bioaktivitas  antimalaria  ekstrak  metanol  spons P.  ficiformis telah  dilakukan terhadap  parasit Plasmodium  falciparum strain  3D7.  Ekstrak  spons  diperoleh  dengan  metode maserasi menggunakan pelarut metanol dan uji aktivitas antimalarial menggunakan metode in- vitro  dengan  variasi  konsentrasi  ekstrak  0,01,  0,1,  1,  10,  dan  100  µg/mL.  Hasil  penelitian menunjukkan  bahwa  ekstrak  metanol  spons P.  ficiformis sangat  efektif  menghambat pertumbuhan parasit malaria dengan nilai IC 50 = 20,489 µg/mL.
Kata Kunci : Antimalaria, Spons, Petrosia ficiformis, Tidore Kepulauan

## PENDAHULUAN
Penyakit malaria telah membunuh satu sampai dua juta orang per tahun dan  sebanyak 300- 500  juta  kasus  klinis  baru  terkait  malaria  dilaporkan  setiap  tahunnya  (Snow  dkk,  2005). Malaria  adalah  masalah  kesehatan  serius  disebabkan  parasit Plasmodium  falciparum telah resisten  (kebal)  terhadap  obat  antimalaria  yang  ada  seperti  chloroquin.  Obat  baru  dengan struktur  molekul  dan  mekanisme  aksi  yang  unik  sangat  diperlukan  untuk  menggantikan obat-obat  yang  telah  reisten  terhadap  parasit  malaria.  Secara  historis,  senyawa-senyawa dengan  struktur  molekul  baru  berasal  dari  bahan  alam  dan  merupakan  sumber  utama penemuan  dan  pengembangan  obat-obat  baru  untuk  berbagai  penyakit.  Penemuan- penemuan obat antimalaria baru banyak bersumber dari bahan alam, baik ekstrak tumbuhan maupun senyawa-senyawa yang diisolasi dari tumbuhan, bakteri, jamur, dan organisme laut (Kaur dkk, 2009).
Fattorusso  dan  Scafati  (2009)  mengemukakan  bahwa  sekitar  60  metabolit  sekunder  yang berasal  dari  organisme  laut,  memperlihatkan  aktivitas  antimalaria  yang  signifikan. Berdasarkan  tipe  struktur  molekulnya,  metabolit  sekunder  bahan  alam  laut  yang  dapat menghambat  pertumbuhan  parasit  malaria  dibagi  menjadi  tiga  kelompok  utama  yaitu turunan  isonitril  (Cafieri  dkk,1973;Di  Blasio  dkk,  1976),  alkaloid  (Ang  dkk,  2000;Rao  dkk, 2006), dan turunan endoperoksida (Fattorusso dkk, 2002;Fattorusso dkk, 2006). Sebagian besar kelompok  metabolit  sekunder  tersebut  bersumber  dari  spons  laut.  Menurut  Mehbub  dkk (2014)  Spons  merupakan  hewan  laut  tertua  dari  filum  Porifera  adalah  satu-satunya  sumber terbaik  molekul  bioaktif  bahan  alam  laut.  Sejak  tahun  2001  hingga  2010  telah  ditemukan

## TECHNO: JURNAL PENELITIAN
Jurnal homepage : http://ejournal.unkhair.ac.id/index.php/Techno Volume 08 Nomor 02 Oktober 2019 DOI: http://dx.doi.org/10.33387/tk.v8i2.1385
molekul-molekul bioaktif baru dari spons dan organisme yang berasosiasi dengannya. Fakta penelitian  ini  menunjukkan  bahwa  prospek  pencarian  dan  penemuan  senyawa-senyawa bioaktif baru dari spons laut memiliki peluang yang menjanjikan.
Perairan Tidore, Ternate dan sekitarnya terletak di kawasan zona coral triangle yang memiliki kekayaan hayati laut dengan tingkat biodiversitas sangat tinggi dan dapat dipastikan bahwa perariran  ini  merupakan  bagian  dari  pusat  kekayaan  keanekaragaman  laut  dunia  (Giyanto, 2012). Hal ini menjadikan perairan Maluku Utara sebagai salah satu tempat pusat penelitian bahan  alam  laut.  Telah  dilakukan  penelitian  tentang  potensi  antimalaria  ekstrak  metanol spons Petrosia ficiformis yang berasal dari perairan Tanjung Rum, Tidore Utara.

## METODE PENELITIAN

## Lokasi Sampling
Sampel  spons Petrosia  ficiformis diambil  di  perairan  Tanjung  Rum  [00 0 44’40.96”N 127 0 23’4.76”E],  Tidore  Utara  dengan metode Scuba  Diving pada  kedalaman  20  m  dan  diberi Kode TR01. Sampel TR01 kemudian diidentifikasi secara mikroskopis dengan melihat bentuk spikulanya.
(a)
(b)
Gambar 1. (a) Lokasi Pengambilan Sampel (sumber: Google Earth 2019); (b) Foto underwater
spons P. ficiformis (TR01)

## Preparasi dan Ekstraksi Sampel
Sampel  spons P.  ficiformis dikeringanginkan  tanpa  sinar  matahari  langsung.  Sampel  kering kemudian  dihaluskan  dengan dry  blender ,  ditimbang,  dan  selanjutnya  dimaserasi  dengan pelarut  metanol  pada  suhu  ruang.  Serbuk  sampel P.  ficiformis diekstraksi  dengan  metode maserasi menggunakan pelarut metanol sebanyak 3 x 24 jam. Maserat metanol hasil ekstraksi disaring  dan  diuapkan  pelarutnya  menggunakan Rotary  Evaporator ,  hingga  diperoleh crude ekstrak total. Crude ekstrak total kemudian ditimbang sebanyak 10 mg untuk selanjutnya diuji aktivitas antimalaria secara in-vitro.

## Bioassay Aktivitas Antimalaria in-vitro
Bioassay aktivitas antimalaria menggunakan kultur parasit Plasmodium falciparum strain 3D7. Parasit dikondisikan cara in-vitro menggunakan teknik kultur Trager dan Jensen (1976) dalam sel  darah  merah  manusia  (Golongan  Darah  O+)  yang  ditambahkan  5%  hematocrit  dalam RPMI 1640 (GIBCO BRL, USA), 22.3 mM HEPES (Sigma), hipoxanthine, natrium bikarbonat,
dan  10%  plasma  darah  O+.  Pengujian  dilakukan  secara  triplo  dalam  24  lubang  plat  kultur yang  telah  berisi  1%  parasitemia  (1 mL  suspensi/lubang).  Sampel  ekstrak metanol  spons P. ficiformis dibuat dengan lima variasi konsentrasi yaitu 0.01, 0.1, 1, 10, dan 100 µg/mL. Kultur sampel  uji  kemudian  diinkubasi  dalam  inkubator  multigas  pada  suhu  37 0 C  selama  48  jam. Setelah inkubasi, dibuat lapisan tipis sampel darah diatas kaca preparat dan dianalisis.

## Analisis Data
Aktivitas  antimalaria  diperoleh  berdasarkan  nilai  persen  parasitemia  dan  persen  inhibisi, ekstrak metanol spons P. ficiformis terhadap pertumbuhan parasit Plasmodium falciparum 3D7. Nilai IC 50 ditentukan dengan metode analisis probit.
Rumus perhitungan persen parasitemia:
Rumus perhitungan persen inhibisi:

## [ ]
Xp = % pertumbuhan pada larutan uji Xk = % pertumbuhan pada kontrol negatif

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Potensi  bioaktif  produk  bahan  alam  laut  menjadi  fokus  kajian  para  ilmuan.  Fakta  hasil penelitian  mengungkapkan  bahwa  senyawa-senyawa  yang  diisolasi  dari  bahan  alam  laut, memiliki  aktivitas  biologis  terhadap  berbagai  penyakit  kronis.  Molekul-molekul  produk bahan  alam  laut  dapat  dimanfaatkan  dibidang  pengobatan  sebagaai  agen  antikanker, antitumor,  anti-HIV,  anti-tubercolosis,  antidengue,  antimalaria,  antivirus,  antijamur  dan sabagainya. Oleh karena itu, eksplorasi potensi bahan alam laut menjadi objek kajian dalam upaya  memanfaatkan  kekayaan  molekul-molekul  organik  bahan  alam  secara  komprehensif dan  bijaksana.  Berbagai  penelitian  telah  mengungkapkan  bahwa  spons  adalah  salah  satu organisme  laut  dengan  persentase  bioaktif  terbanyak  jika  dibandingkan  dengan  biota  laut lainnya,  termasuk  aktivitas  antimalaria  (Garson,  1994;  Sipkema  dkk,  2005;  Fattorusso  dan Scafati, 2009; Kaur dkk, 2009; Fattorusso dkk, 2010).
Uji  bioaktivitas  antimalaria  ekstrak  metanol  spons P.  ficiformis secara  in-vitro  terhadap Plasmodium falciparum menunjukkan prospek yang menjanjikan. Hal ini didasarkan pada data nilai  IC 50 sebesar  20,489  µg/mL  (Tabel  1).  Kohler  (2002)  menyatakan  bahwa  suatu  ekstrak dengan nilai IC 50 kurang dari 50 µg/mL, sangat efektif dan potensial sebagai sumber bahan baku  obat  antimalaria.  Daya    hambat  ekstrak  terhadap  pertumbuhan  parasit P.  falciparum meningkat seiring peningkatan konsentrasi. Berdasarkan data Tabel 1, ekstrak metanol spons P. ficiformis baru memberikan efek inhibisi pada konsentrasi 1 µg/mL sebesar 3,81% dan efek inhibisinya  meningkat  menjadi  12,8%  hingga  97,92%  pada  konsentrasi  10  µg/mL  dan  100 µg/mL.  Efektivitas  ekstrak  spons P.  ficiformis secara  in  vitro  perlu  diperkuat  dengan  data pengujian  secara  in-vivo  untuk  mempertegas  potensi  aktivitas  antimalaria.  Kemampuan ekstrak  dalam  menghambat  pertumbuhan  parasit P.  falciparum 3D7,  disebabkan  oleh senyawa-senyawa aktif yang terkandung pada spons P. ficiformis .
Sabir Sumarna, Mahruf Azis, Suwandi S. Sangadji, Insan N. Idrus. Antimalaria, Spons, Petrosia ficiformis, Tidore Kepulauan
Tabel  1.  Persen  Inhibisi  rata-rata  dan  Nilai  IC 50 Ekstrak  Metanol  Spons P.  Ficiformis terhadap Plasmodium falciparum 3D7. Konsentrasi (µg/mL) Persen Inhibisi (%) IC 50 (µg/mL) 100
97,92 20,489
10 12,8 1 3,81 0,1 0 0,01 0 K (-) -
Senyawa-senyawa antimalaria yang diisolasi dari bahan alam laut adalah golongan alkaloid (Tasdemir  dkk,  2007;  Xu  dkk,  2011),  golongan  peptida  (McPhail  dkk;  Linington  dkk;  2007), golongan poliketida (Kasettrathat dkk; Na dkk; Clark dkk; Pontius dkk; 2008),  dan golongan terpenoid (Fattorusso dan Scafati, 2009) dengan struktur molekul dan gugus fungsi yang unik. Penelitian ini tidak dapat ditentukan golongan senyawa yang berperan dalam penghambatan pertumbuhan  parasit P.  falciparum ,  sebab  sampel  uji adalah  ekstrak  total  dimana  komponen kimianya  belum  dipisahkan.  Hasil  penelitian  ini  penting  sebagai  informasi  awal  untuk dilakukan  penelitian  secara  komprehensif,  dalam  upaya  mengisolasi  dan  mengelusidasi struktur  molekul  senyawa-senyawa  yang  memiliki  aktivitas  antimalaria  pada  spons P. ficiformis asal perairan Tidore Kepulauan.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  nilai  IC 50 aktivitas  antimalaria  ekstrak  metanol  spons P.  ficiformis terhadap Plasmodium falciparum 3D7 maka dapat disimpulkan bahwa ekstrak metanol spons P. ficiformis sebagai sumber senyawa antimalaria.

## SARAN
Perlu  penelitian  lebih  lanjut  untuk  mengisolasi  komponen  senyawa  metabolit  sekunder hingga  elusidasi  struktur  molekul  yang  memberikan  aktivitas  inhibisi  pertumbuhan  parasit malaria.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terima  kasih  kepada  DRPM  RISTEKDIKTI  atas  dana  hibah  Penelitian  Dosen  Pemula  Riset Kompetitif Nasional tahun 2019. Kepada Kanda Abdul Hakim (Chimbo), Ryko, Muhammad Sesar  yang  telah  membantu  melakukan  pengambilan  sampel.  Kepada  Unit  Laboratorium Pengujian Fakultas Farmasi Universitas Airlangga atas kerjasama yang baik dalam melakukan uji bioassay antimalaria.

## DAFTAR PUSTAKA
Ang, K.K.H., Holmes, M.J., Higa, T., Hamann, M.T., Kara, U.A.K., 2000, In vivo antimalarial activity of the .beta.-carboline alkaloid manzamine A. Antimicrob. Agent. Chemother ., 44 , 1645-1649.
TECHNO: Vol. 08 ( 02) Oktober 2019
Cafieri, F., Fattorusso, E., Magno, S., Santacroce, C., Sica, D., 1973, Isolation and structure of axisonitrile 1 and axisothiocyanate 1, two unusual sesquiterpenoids from the marine sponge   Axinella cannabina. Tetrahedron , 29 , 4259-4262.
Clark, B.R., Engene, N., Teasdale, M.E., Rowley, D.C., Matainaho, T., Valeriote, F.A., Gerwick, W.H., 2008.  Natural  products  chemistry  and  taxonomy  of  the  marine  cyanobacterium    Blennothrix cantharidosmum. J. Nat. Prod., 71 , 1530–1537.
Di Blasio, B., Fattorusso, E., Magno, S., Mayol, L., Pedone, C., Santacroce, C., Sica, D., 1976, Axisonitrile- 3, axisothiocyanate-3 and axamide-3. Sesquiterpenes with a novel  spiro[4,5]decane skeleton from the sponge Axinella cannabina. Tetrahedron , 32 , 473-478.
Fattorusso,  C.,  Campiani,  G.,  Catalanotti,  B.,  Persico,  M.,  Basilico,  N.,  Parapini,  S.,  Taramelli.  D., Campagnuolo,  C.,  Fattorusso,  E.,  Romano,  A.,  Taglialatela-Scafati,  O.,  2006,  Endoperoxide Derivatives from Marine Organisms: 1,2-Dioxanes of the Plakortin Family as Novel Antimalarial Agents. J. Med. Chem ., 49 , 7088-7094.
Fattorusso, C., Persico, M., Calcinai, B., Cerrano, C., Parapini, S., Taramelli, D., Novellino, E., Romano, A., Scala, F., Fattorusso, E., Taglialatela-Scafati, O., 2010, Manadoperoxides A-D   from The Indonesian Sponge Plakortis cfr. Simplex. Further Insights on Structure -Activity   Relationships of Simple 1,2-Dioxane Antimalarials, Journal of Natural Product , 73 , 1138-  1145.
Fattorusso, E. and Scafati, O. T., 2009, Marine Antimalarials, Marine Drugs , 7 , 130-152.
Fattorusso, E., Parapini, S., Campagnuolo, C., Basilico, N., Taglialatela-Scafati, O., Taramelli, D..   2002, Activity against Plasmodium falciparum of cycloperoxide compounds obtained from the sponge Plakortis simplex. J. Antimicrob. Chemother ., 50 , 883-888.
Garson, M. J., 1994, The Biosynthesis of Secondary Metabolits: Why is Important. In: Sponss in Time and Space, pp: 428-429, edited by R.W.M. van Soest, Th. M.G. Van Kempen and J.C Braekman (eds.). Proceeding 4th International Porifera Conggress, Amsterdam/Netherland.
Giyanto, 2012, Ekosistem Pesisir Ternate, Tidore dan Sekitarnya, Propinsi Maluku Utara 2012, CRITC-Pusat Penelitian Oseanografi LIPI, Jakarta.
Kasettrathat, C., Ngamrojanavanich, N., Wiyakrutta, S., Mahidol, C., Ruchirawat, S., Kittakoop, P., 2008. Cytotoxic  and  antiplasmodial  substances  from  marine-derived  fungi,  Nodulisporium  sp.  and CRI247-01. Phytochemistry , 69 , 2621–2626.
Kaur, K., Jain, M., Kaur, T., Jain, R., 2009, Antimalarials from Nature, Bioorganic & Medicinal Chemistry ,
Elsevier.
McPhail, K.L., Correa, J., Linington, R.G., Gonzalez, J., Ortega-Barria, E., Capson, T.L., Gerwick,   W.H., 2007.  Antimalarial  linear  lipopeptides  from  a  Panamanian  strain  of  the  marine  cyanobacterium Lyngbya majuscula. J. Nat. Prod., 70 , 984–988.
Mehbub, M.F., Lei, J., Franco, C., Zhang, W., 2014, Marine Sponge Derived Natural Products between 2001 and 2010: Trends and Opportunities for Discovery of Bioakctives, Marine Drugs, 12,
4539-4577.
Na,  M.,  Meujo,  D.A.F.,  Kevin,  D.,  Hamann,  M.T.,  Anderson,  M.,  Hill,  R.T.,  2008.  A  new  antimalarial polyether from a marine Streptomyces sp. H668. Tetrahedron Lett. 49 , 6282–6285.
Sabir Sumarna, Mahruf Azis, Suwandi S. Sangadji, Insan N. Idrus. Antimalaria, Spons, Petrosia ficiformis, Tidore Kepulauan
Pontius, A., Krick, A., Kehraus, S., Brun, R., Konig, G.M., 2008a. Antiprotozoal activities of heterocyclic- substituted  xanthones  from  the  marine-derived  fungus  Chaetomium  sp. J.  Nat.  Prod.,  71 , 1579– 1584.
Rao, K.V., Donia, M.S., Peng, J., Garcia-Palomero, E., Alonso, D., Martinez, A., Medina, M., Franzblau, S.G., Tekwani, B.L., Khan, S.I., Wayhuono, S., Willett, K.L., Hamann, M.T.,  2006,  Manzamine  B and E and Ircinal A Related Alkaloids from an Indonesian  Acanthostrongylophora  Sponge  and Their Activity against Infectious, Tropical Parasitic, and   Alzheimer's Diseases. J. Nat. Prod. , 69 , 1034-1040.
Sipkema,  D.,  Franssen,  M.C.R.,  Osinga,  R.,  Tramper,  J.,  Wijffels,  R.H.,  2005,  Marine  Sponges  as pharmacy, Marine Biotechnology , 7 , 142-162.
Snow, R.W., Guerra, C.A., Noor, A.M., Myint, H.Y., and Hay, S.I., 2005, The Global Distribution   of Clinical Episodes of Plasmodium falciparum Malaria, Letters to Nature , Vol. 434, 214-  2017.
Tasdemir, D., Topaloglu, B., Perozzo, R., Brun, R., O'Neill, R., Carballeira, N.M., Zhang, X., Tonge, P.J., Linden, A., Ruedi, P., 2007. Marine natural products from the Turkish sponge Agelas oroides that inhibit  the  enoyl  reductases  from  Plasmodium  falciparum,  Mycobacterium  tuberculosis  and Escherichia coli. Bioorg. Med. Chem . 15 , 6834–6845.
Xu,  M.,  Andrews,  K.T.,  Birrell,  G.W.,  Tran,  T.L.,  Camp,  D.,  Davis,  R.A.,  Quinn,    R.J.,  2011, PsammapLysin H, a New antimalarial bromotyrosine alkaloid from a marine sponge of the genus Pseudoceratina, Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters , Elsevier.