Ekologia : Jurnal Ilmiah Ilmu Dasar dan Lingkungan Hidup Volume 23, Nomor 2, Oktober 2023, Hal.92-99
https://journal.unpak.ac.id/index.php/ekologia

## UJI AKTIVITAS EKSTRAK ETANOL DAUN TAPAK DARA (Catharanthus roseus L.) SEBAGAI ANTIBAKTERI Streptococcus mutans
Tristinurmiatiningsih 1* , Oom Komala 1 , Nadia Muna Salsabila 1
1 Program Studi Biologi FMIPA Universitas Pakuan, Bogor, Indonesia
* e-mail: triasti_nur@unpak.ac.id
diterima:28 Desember 2023; direvisi: 30 Desember 2023; disetujui: 30 Desember 2023

## ABSTRAK
Karies gigi adalah penyakit gigi terlokalisir yang merusak jaringan keras gigi yang terbentuk dari akumulasi plak pada permukaan gigi. Salah satu penyebab karies gigi yaitu bakteri Streptococcus mutans. Daun tapak dara ( Catharanthus roseus L. ) diketahui memiliki aktivitas antibakteri yang berasal  dari  metabolit  sekunder  yaitu  Triterpenoid  Indol  Alkaloid  (TIA),  flavonoid,  saponin, steroid,  dan  tannin.  Tujuan  penelitian  adalah  untuk  menganalisis  aktivitas  ekstrak  etanol  96% daun  tapak  dara  dengan  daya  hambat  tertinggi  terhadap  bakteri Streptococcus  mutans dan menentukan senyawa kimia melalui uji fitokimia. Pengujian antibakteri ekstrak etanol 96% daun tapak dara menggunakan metode difusi cakram dengan pengukuran LDH (Lebar Daya Hambat). Uji antibakteri ekstrak etanol daun tapak dara dilakukan terhadap konnsentrasi 60%, 65%, 70%, dan  75%.  Pelarut  DMSO  10%  sebagai  kontrol  negative  dan  antibiotik  amoxicillin  500  ppm sebagai kontrol positif. Hasil penelitian menunjukkan bahwa hasil uji antibakteri pada konsentrasi 75% menunjukkan aktivitas antibakteri dengan daya hambat tertinggi rata-rata 6,27 mm. Hasil uji  fitokimia  menunjukkan bahwa  ekstrak  etanol  96  % daun  tapak  dara  mengandung  alkaloid, flavonoid, tannin, saponin, dan steroid
Kata Kunci: Antibakteri, Catharanthus roseus , Streptococcus mutans.

## ABSTRACT

## ACTIVITY OF ETHANOLIC EXTRACT TAPAK DARA (Catharanthus roseus L.) LEAF AGAINST OF Streptococcus mutans
Dental caries is a localized dental disease that damages the hard tissues of the teeth formed from the accumulation of plaque on the tooth surface.  Tapak dara leaf (Catharanthus roseus L.) is known  to  have  antibacterial  activity  derived  from  secondary  metabolites,  namely  Triterpenoid Indole Alkaloid (TIA), flavonoids, saponins, steroids, and tannins. The purpose of the study was to  analyze  the  activity  of  96%  ethanol  extract  of  tapak  dara  leaves  with  the highest  inhibitory power  against  Streptococcus  mutans  bacteria  and  determine  chemical  compounds  through phytochemical tests. Antibacterial testing of 96% ethanol extract of virgin tread leaves using disc diffusion method with LDH (Width Inhibitory Power) measurement. Antibacterial tests of ethanol extract  of  tapak  dara  leaf  were  carried  out  on  concentrations  of  60%,  65%,  70%,  and  75%. DMSO solvent 10% as a negative control and amoxicillin antibiotic 500 ppm as a positive control. The results showed that antibacterial test results at a concentration of 75% showed antibacterial activity with the highest inhibitory power averaging 6.27 mm. Phytochemical test results show that 96% ethanol extract of tapak dara leaf contains alkaloids, flavonoids, tannins, saponins, and steroids
Keywords: Antibacteria, Catharanthus roseus, Streptococcus mutans

## PENDAHULUAN
Persentase masyarakat yang mengidap karies  gigi  di  Indonesia  pada  tahun  2007 sebesar 43,4%, lalu pada tahun 2013 sebesar
53,2% (Kumara, dkk, 2019). Laporan Badan Riset  Kesehatan  Dasar  (RISKESDAS)  pada tahun  2018,  persentase  masyarakat  yang mengidap  karies  di  Indonesia  mencapai 88,8%  (Ariyani,  dkk,  2021).  Dari  data  ini, menunjukkan  bahwa  adanya  peningkatan pengidap karies gigi di Indonesia. Karies gigi merupakan  terbentuknya  kumpulan  plak yang  melekat  pada  permukaan  gigi  yang dapat menyebabkan kerusakan pada jaringan keras gigi (Fajrina dkk, 2017).
Karies gigi terbentuk dengan melibatkan  fermentasi  yang  dilakukan  oleh bakteri Streptococcus  mutans membentuk glukosil  transferase  (GTF)  yang  mengubah sukrosa  menjadi  glukan  dan  dilanjutkan dengan  terbentuknya  plak  gigi  (Putri  dkk, 2017). Streptococcus  mutans merupakan flora normal atau mikroba yang terdapat pada tubuh  inang  tanpa  menyebabkan  penyakit, bakteri  ini  terdapat  di  rongga  mulut  yang memiliki bentuk kokus dan tergolong bakteri gram positif (Kumara dkk, 2019).
Salah  satu  upaya  meminimalisasi terjadinnya  karies  gigi  dengan  mengurangi penumpukan  plak  di  permukaan  gigi menggunakan  obat  kumur  antiseptik.  Obat kumur  Chlorhexidine  0,2%  memiliki  efek antimikroba  spektrum  luas  dan  efektif melawan bakteri gram positif, gram negatif, dan jamur. Penggunaan obat kumur chlorhexidine 0,2% dalam jumlah berlebihan dapat  menyebabkan  perubahan  warna  gigi, dorsum  lidah,  menurunkan  kepekaan  rasa pada  lidah,  serta  meningkatkan  terjadinya pembentukan  karang  gigi  (Ariyani  dkk, 2021).
Sejauh ini orang kembali
menggunakan  bahan  alam  ( back  to  nature ), sebagai alternatif pengobatan, karena dibandingkan  dengan  obat-obatan  yang dibuat  dari  bahan  sintetis,  senyawa  alami yang  digunakan  sebagai  obat  jarang menimbulkan  efek  samping  yang  tidak diinginkan  (Fajrina,  dkk,  2017).  Salah  satu tanaman yang dapat digunakan sebagai obat tradisional  adalah  tapak  dara  ( Catharantus roseus (L.)  G.  Don.).  Bunga  dan  daunnya berpotensi  menjadi  sumber  obat  penyakit leukemia,  hipertensi  dan  penyakit  hodgkin
(Andalia  dkk,  2019).  Hasil  uji  fitokimia terdapat  tannin,  alkaloid,  polifenol  dan steroid  yang  dimiliki  oleh  ekstrak  dari tumbuhan  tapak  dara  baik  daun  maupun bunga  (Dwijatyanti  dan  Pamungkas,  2016; Putri dkk, 2017; Sayekti dkk, 2018).
Penelitian  mengenai  uji  aktivitas antibakteri  ekstrak  daun  tapak  dara  sudah dilakukan  oleh  Dwijayanti  dan  Pamungkas (2016), ekstrak daun tapak dara ( Catharantus roseus (L.)  G.  Don)  memiliki  nilai  zona hambat rata-rata masing-masing 20 mm dan 17,33  mm  terhadap  bakteri Staphylococcus aureus dan Pseudomonas  aeruginosa pada konsentrasi  75%.  Hasil  penelitian  lain  dari Shanmugaraju dan Bhakyaraj (2016), bahwa aktivitas penghambatan terkuat ekstrak daun tapak  dara  terhadap Staphylococcus  sp dengan zona hambat 25 mm pada konsentrasi 100 mg/ml, lalu diikuti oleh Pseudomonas sp yang  menunjukkan  zona  hambat  sebesar  20 mm  pada  konsentrasi  100  mg/ml.  Sayekti dkk, (2018), menyatakan bahwa dari hasil uji difusi cakram, ekstrak daun tapak dara pada konsentrasi 40% memiliki nilai zona hambat sebesar 8,884 mm terhadap bakteri Streptococcus pyogenes .
Sejauh ini studi mengenai ekstrak daun tapak  dara  sebagai  penyembuhan  luka, antibakteri,  dan  penyakit  lainnya  sudah dilakukan,  namun  belum  banyak  studi mengenai  ekstrak  daun  tapak  dara  sebagai antibakteri penyebab karies gigi. Oleh karena itu  perlu  dilakukan  pengujian  tentang aktivitas  ekstrak  etanol  daun  tapak  dara ( Catharanthus  roseus )  sebagai  antibakteri Streptococcus mutans (L.).

## BAHAN DAN METODE Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian  dilakukan  selama  3  bulan ( September-Desember 2022 ) di Laboratorium Mikrobiologi Fakultas
Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam Universitas Pakuan Bogor.

## Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  timbangan analitik,  autoklaf All  American model  no. 75X, inkubator Corona ZTP80A-7, Laminar Air Flow.
Bahan  yang  digunakan  meliputi etanol  96  %,  larutan  DMSO  (Dimetil Sulfoksida),  larutan  Mc.Farland, Mueller Hinton  Agar (MHA),  amoksisilin,  NaCl 10%, dan bakteri Streptococcus mutans .

## Ekstraksi Daun Tapak Dara
200  g  serbuk  simplisia  diekstraksi dengan  pelarut  etanol  96%  sebanyak  2  L. Ekstraksi dilakukan secara bertahap. Sebanyak  700  mL  etanol  96%  ditambahkan ke dalam maserator yang telah berisi serbuk simplisia dan dibiarkan selama 24 jam pada suhu  kamar  dengan  pengadukan  berkala setiap  6  jam,  setelah  itu  maserat  disaring. Filtrat disaring menggunakan kain batis, dan residu yang dihasilkan dicampur dengan 700 mL  pelarut  kedua.  Prosedur  dilakukan  tiga kali hingga dihasilkan tiga maserat. Pelarutnya  dipisahkan  menggunakan  rotary evaporator pada suhu 50°C, lalu dilanjutkan di  dalam  waterbath  untuk  menghasilkan ekstrak kental (Sayekti dkk, 2018)

## Uji Kadar Air dan Kadar Abu
Pengukuran  kadar  air  ditentukan dengan  memasukkan  2  gr  ekstrak  kental  ke dalam cawan porselen yang sudah ditimbang bobotnya,  kemudian  dimasukkan  ke  dalam oven  dan  dikeringkan  pada  suhu  105°C selama  24  jam,  lalu  dinginkan  dalam desikator  selama  ±  10  menit  dan  ditimbang kembali.  Pengukuran  kadar  abu  merupakan lanjutan dari analisis kadar air. Cawan yang berisi  sampel  dimasukkan  ke  dalam  tanur pada  suhu  650°C  selama  6  jam,  kemudian dinginkan  dalam  desikator  dan  ditimbang. (Winarno, 2004)

## Uji Fitokimia
Uji  fitokimia  kualitatif  dilakukan untuk  mendeteksi  senyawa  aktif.  Pengujian fitokimia  dengan  metode  Harborne,  1987 dalam  Supriyanto,dkk  (2021),  meliputi  uji
alkaloid  menggunakan  pereaksi  Mayer  dan Dragendorf,  flavonoid  ditambahkan  HCl pekat  dan  serbuk  magnesium,  tannin ditambahkan larutan FeCl3 1 %, saponin, dan terpenoid/steroid  ditambahkan  asam  sulfat pekat dan asam asetat anhidrat.
Peremajaan Bakteri Streptococcus mutans Penanaman bakteri S. mutans dilakukan  dengan  menggunakan  jarum  ose steril  lalu  ditanamkan  pada  media  agar miring
NA yang telah dibuat denganncaraamengggores satu ose secaraazig-zag,  setelah  itu  simpan  di  dalam inkubator  pada  suhu  37°C  aselama  24  jam (Fajrina dkk, 2017).

## Pembuatan Larutan Mc. Farland
Larutan Mc. Farland berfungsi sebagai standar  kekeruhan  pada  suspensi  bakteri, larutan Mc.  Farland 0,5  dibuat  dengan mencampurkan  larutan  H2SO4  0,36  N sebanyak 99,5 ml dengan larutan BaCl 2 H 2 O 1,175% sebanyak 0,5 ml dalam Erlenmeyer, kemudian  dikocok  hingga  terbentuk  larutan yang keruh (Fajrina dkk, 2017).

## Pembuatan Suspensi Bakteri
Suspensi bakteri dibuat dengan mengambil 1 ose koloni biakan bakteri yang berumur 24 jam dari agar miring, kemudian ditambahkan  NaCl  0,9%  sebanyak  10  ml dengan  1  ose  koloni  bakteri,  setelah  itu suspensi dikocok hingga homogen. Kekeruhan  suspensi  bakteri  dibandingkan larutan Mc. Farland 0,5 . (Fajrina dkk, 2017).

## Konsentrasi Hambat Minimum
Penentuan  KHM  dilakukan  dengan metode dilusi agar, ekstrak kental yang telah diencerkan pada masing-masing konsentrasi dipipet  sebanyak  1  ml  dan  pipet  0,2  ml suspensi  bakteri,  kemudian  ditambahkan 15 ml media MHA ( Mueller Hinton Agar ) cair ke  dalam  cawan  petri  steril.  Campuran dihomogenkan  dan  biarkan  dingin  hingga padat,  dan  diinkubasikan  pada  suhu  37°C selama  24  jam.  Pengamatan  KHM  dilihat pada  cawan  konsentrasi  ekstrak  terendah
yang tidak terdapat bakteri. Konsentrasi yang diuji adalah 55%, 60%, 65%, 70%

## Uji Lebar Daya Hambat
Pengujian  LDH  dilakukan  dengan metode difusi cakram. Sebanyak 15 ml MHA cair dimasukkan ke dalam cawan petri steril dan  ditambahkan  0,2  ml  suspensi  bakteri, kemudian  dihomogenkan  hingga  media memadat.  Kertas  cakram  yang  sudah direndam  berbagai  konsentrasi  dan  kontrol positif ditempelkan di permukaan agar secara teratur, setelah itu diinkubasi pada suhu 37°C selama  24  jam.  Perlakuan  ini  diulang sebanyak 4 kali (Baura dkk, 2021)

## Analisis Statistik
Pengukuran  lebar  daya  hambat (LDH)  yang  diperoleh  dianalisis  dengan analisis ragam IBM SPSS Statistik 25 untuk 5  jenis  perlakuan  konsentrasi  ekstrak  etanol daun  tapak  dara  yang  berbeda,  dan  kontrol positif. Analisis data menggunakan satu arah (One Way ANOVA) dengan α = 5% apabila distribusi  data  normal  dan  ada  perbedaan selanjutnya  dilakukan  uji  lanjut  Duncan. (Saefudin dkk, 2010)

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Ekstraksi  simplisia  serbuk  daun  tapak dara  menghasilkan  ekstrak  kental  berwarna hijau kehitaman, aroma khas yang kuat, dan rasa  yang  pahit  pada  ekstrak  etanol  96%. Maserasi  menggunakan  pelarut  etanol  96% menghasilkan  bobot  ekstrak  kental,  sebesar 46  g.  Kelebihan  metode  maserasi  yaitu mampu  mengisolasi  senyawa  yang  tidak tahan  panas.  Pelarut  yang  digunakan  pada proses maserasi yaitu etanol 96%, pelarut ini memiliki  sifat  semipolar  sehingga  mampu menyaring suatu zat dalam rentang polaritas yang lebar mulai dari senyawa polar hingga nonpolar  (Handoyo,  2020).  Ekstrak  kental tapak  dara  yang  diperoleh  selanjutnya dilakukan  karakterisasi  untuk  mengetahui kualitasnya. Hasil karakterisasi terdapat pada Tabel 1.
Tabel 1 . Ekstrak Kental Daun Tapak Dara
Warna Ekstrak Bobot Ekstrak Rende men Kadar Air Kadar Abu Hijau pekat 46 g 11,78% 8,43% 3,94%
Beberapa faktor  dapat mempengaruhi jumlah  nilai  rendemen, antara  lain  polaritas pelarut, ukuran partikel simplisia, konsentrasi  pelarut  yang  digunakan,  dan lama waktu perendaman simplisia (Handoyo, 2020).
Berdasarkan  hasil  uji  kadar  air  dan kadar  abu  pada  Tabel  2,  nilai  kadar  air esktrak sebesar 8,43% dan kadar abu ekstrak kental  sebesar  3,94g,  kedua  jenis  ekstrak dikatakan  memiliki  kualitas  cukup  baik, yaitu tidak melebihi 10% pada nilai kadar air dan  15%  pada  nilai  kadar  abu  berdasarkan standar yang ditetapkan oleh Depkes (2013). Uji  kadar  air  diperlukan  karena  kadar  air yang  berlebihan  dapat  menjadi  tempat berkembangbiaknya bakteri dan jamur yang dapat  merusak  bahan  kimia  yang  terdapat pada ekstrak. Nilai kadar air yang baik pada ekstrak  yaitu  kurang  dari  10%,  apabila simplisia memiliki kadar air yang tinggi akan menyebabkan  terjadinya  proses  enzimatik dan  kerusakan  oleh  mikroba  (Ulfah  dkk, 2022).  Rendahnya  kadar  abu  total  yang dihasilkan  ekstrak menunjukkan tidak banyak  mengandung  mineral.  Sebaliknya semakin  tinggi  kadar  abu  total  pada  suatu sampel maka semakin buruk kualitas sampel (Andini dan Putri, 2021).
Setelah dilakukan karakterisasi dilanjutkan  dengan  uji  fitokimia  secara kualitatif  dengan  tujuan  untuk  mengetahui senyawa  yang  terkandung  dalam  ekstrak daun  tapak  dara.  Hasil  uji  fitokimia  secara kualitatif terdapat pada Tabel 2.
Tabel 2. Hasil Uji Fitokimia Daun Tapak Dara
Senyawa Hasil Keterangan alkaloid (Dragendorf) (Meyer) warna merah/jingga endapan putih + + flavonoid Warna kuning + Tanin Warna hijau kehitaman + Steroid Warna hijau +
Saponin Terbentuk busa +
Berdasarkan hasil uji fitokimia secara kualitatif  ekstrak  kental  daun  tapak  dara mengandung  alkaloid,  flavonoid,  tannin, steroid,  dan  saponin.  Faktor-faktor  yang mempengaruhi kandungan senyawa metabolit  sekunder  yaitu  umur  tanaman, letak  geografis,  dan  proses  ekstraksi (Kusumaningtyas,  et  al.  2008;  Sayekti  dkk, 2018).
Alkaloid berfungsi sebagai antibakteri dengan cara merusak dinding sel. Mekanisme kerja alkaloid sebagai antibakteri dengan  menghambat  pembentukan  dinding sel  yang  akan  menyebabkan  dinding  sel bakteri menjadi lisis, sehingga pertumbuhan bakteri  terhambat  bahkan  menyebabkan kematian  (Komala,  dkk,  2021).  Flavonoid pada  daun  tapak  dara  merusak  struktur protein  dengan  cara  inaktivasi  protein  pada membran sel yang membuat dinding sel dan membran  sitoplasma  bakteri  menjadi  tidak stabil.  Hal  ini  mengakibatkan  hilangnya makromolekul  dan  ion  dari  sel  sehingga sel menjadi kehilangan bentuk dan lisis (Rahmi, 2015; Dwijayanti dan Guruh, 2016). Tannin mampu merusak  dinding  sel  bakteri  dengan cara  megurangi  kelarutan  protein  sehingga terjadi  inaktivasi  enzim  yang  diproduksi bakteri  dan  protein  transport  dinding  sel bakteri  (Aisyah,  2015;  Komala  dkk,  2021). Senyawa saponin dapat  menyebabkan denaturasi  protein  dan  merusak  dinding  sel yang  mengakibatkan  sel  bakteri  menjadi lisis.  Mekanisme  kerja  steroid  sebagai antibakteri  adalah  dengan  cara  merusak membran sel bakteri (Amalia dkk, 2016).
Setelah dilakukan uji fitokimia, dilanjutkan  dengan  uji  konsentrasi  hambat minimum  untuk  mengetahui  konsentrasi terendah yang dapat menghambat pertumbuhan bakteri yang dapat dilihat pada Gambar 1.
konsentrasi 55% konsentrasi 60%
konsentrasi 65% konsentrasi 70%
Gambar 1 . Hasil Uji Konsentrasi Hambat

## Minimum
Dari  hasil  uji  konsentrasi  hambat minimum  (KHM),  didapatkan  hasil  yaitu konsentrasi 60% pertumbuhan koloni berkurang.  Hal  tersebut  ditandai  dengan sedikitnya  koloni  bakteri  pada  cawan ekstrak,  berbeda  dengan  cawan  ekstrak dengan  konsentrasi  55%  yang  terdapat banyak  bercak  putih  pada  permukaan agarnya  Pada  konsentrasi  60%  dan  65% koloni bakteri pada cawan ekstrak berkurang drastis, pada konsentrasi 70% tidak terdapat koloni  bakteri  pada  cawan.  Hal  ini  terjadi karena terdapat perbedaan besaran kandungan  senyawa  pada  tiap  konsentrasi. Dari  hasil  penelitian  yang  didapat  semakin tinggi  konsentrasi  ekstrak,  maka  semakin banyak kandungan zat antibakteri yang dapat menghambat  pertumbuhan  bakteri  atau membunuh bakteri (Rohmah dkk, 2021).
Setelah  dilakukan  uji  konsentrasi hambat  minimum  dilanjutkan  dengan  uji Lebar daya hambat dengan 4 kali pengulangan  yang  dirangkum  pada  Tabel  3 berikut:
Tabel 3. Klasifikasi Respon Hambatan Tiap Konsentrasi Ekstrak Daun Tapak Dara Terhadap Pertumbuhan Bakteri
Streptococcus mutans Konsentr asi Rata-rata Lebar Daya Hambat (mm) Kekuatan Antibakter i Kategori Daya Hambat K- 0 ± 0,00 a Tidak ada - 60% 1,88± 0,15 b Lemah < 5 (mm) 65% 4,21± 0,49 c Lemah < 5 (mm) 70% 5,52± 0,30 d Sedang 5-10 (mm) 75% 6,27± 0,13 e Sedang 5-10 (mm)
K+ 7,93± 0,39 f Sedang 5-10 (mm)
Keterangan: *kategori lebar daya hambat Menurut Davis & Stout (1971) dalam Fajrina dkk (2017). *Angka  yang  diikuti  dengan  notasi  huruf yang sama menunjukkan nilai tidak berbeda nyata  (P>0,05)  berdasarkan  uji  duncan, setelah  dilakukan  analisis  sidik  ragam (Anova)
Pengujian lebar daya hambat dilakukan dengan  metode  difusi  cakram.  Aktivitas antibakteri  dilihat  dengan  mengukur  lebar daya hambat ekstrak etanol daun tapak dara pada konsentrasi 60%, 65%, 70%, dan 75%, kontrol positif menggunakan amoxicillin 500 ppm  dan  kontrol  negative  menggunakan pelarut DMSO 10%.
Dari hasil pengujian lebar daya hambat (LDH),  nilai  rata-rata  paling  baik  terdapat pada  konsentrasi  75%  sebesar  6,27  mm dengan kategori sedang, sedangkan rata-rata nilai  lebar  daya  hambat  terendah  terdapat pada  konsentrasi  60%  sebesar  1,88  mm dengan kategori lemah, hal ini dsebabkan zat antimikroba  masih  terlalu  rendah  untuk merusak  bagian-bagian  penyusun  dari  sel bakteri  (Rohmah  dkk,  2021).  Nilai  rata-rata lebar  daya  hambat  ekstrak  tersebut  tidak menunjukkan  aktivitas  yang  sama  dengan lebar daya hambat kontrol positif amoxicillin 500 ppm dengan nilai rata-rata sebesar 7,93 mm dan masuk ke dalam kategori sedang.
Dari  hasil  uji  lebar  daya  hambat (LDH),  rata  nilai  lebar  daya  hambat  paling baik  terdapat  pada  konsentrasi  75%  sebesar 6,27 mm dengan kategori sedang, sedangkan rata-rata  nilai  lebar  daya  hambat  terendah terdapat  pada  konsentrasi  60%  sebesar  1,88 mm  dengan  kategori  lemah,  hal  ini dsebabkan  zat  antimikroba  masih  terlalu rendah untuk merusak bagian-bagian penyusun  dari  sel  bakteri  (Rohmah  dkk., 2021)  Nilai  rata-rata  lebar  daya  hambat ekstrak tersebut tidak menunjukkan aktivitas yang sama dengan lebar daya hambat kontrol positif  amoxicillin  500  ppm  dengan  nilai
rata-rata  sebesar  7,93  mm  dan  masuk  ke dalam kategori sedang.
Setiap  perlakuan  menghasilkan  lebar daya  hambat  yang  berbeda,  hal  ini disebabkan setiap konsentrasi ekstrak memiliki  kekuatan  kandungan  senyawa antibakteri  yang  berbeda.  Semakin  tinggi konsentrasi  ekstrak  maka  semakin  banyak kandungan  zat  antibakteri  yang  dapat menghambat  pertumbuhan  bakteri  dengan ditunjukkan lebar daya hambat yang semakin besar  (Rohmah  dkk,  2021).  Adanya  zat antibakteri  pada  ekstrak  etanol  daun  tapak dara  didukung  oleh  penelitian  Sayekti  dkk, (2018)  dan    Dwijayanti  dan  Guruh,  (2016) yang  menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol daun  tapak  dara  mengandung  senyawa alkaloid,  flavonoid,  saponin,  steroid,  dan terpenoid,  serta  tannin.  Senyawa  kimia tersebut  dapat  membatasi  pertumbuhan bakteri dengan cara menonaktifkan adhesion sel  mikroba  yang  terletak  pada  permukaan sel, dimana polipeptida dinding sel menyebabkan kerusakan dinding sel, mendenaturasi  bakteri,  dan  mengganggu metabolisme bakteri sehingga menyebabkan kerusakan sel (Pattipeilohy dkk, 2022).
Uji  One  Way  Anova  menghasilkan nilai signifikan sebesar 0.000. Nilai ini lebih kecil dari 0.05 sehingga dapat menunjukkan bahwa terdapat perbedaan daya hambat antar kelompok  perlakuan  atau  terdapat  daya hambat  ekstrak  etanol  daun  tapak  dara terhadap pertumbuhan Streptococcus mutans .  Dari  hasil  uji  post-hoc  Duncan, secara statistik kontrol positif dan konsentrasi  75%  memberikan  aktivitas antibakteri paling besar dari setiap perlakuan. Hasil  perhitungan  statistik  menunjukan bahwa  ekstrak  yang  mempunyai  aktivitas antibakteri  paling  besar  adalah  konsentrasi 75% dengan nilai rata-rata sebesar 6,27 mm, meskipun  masih  lebih  rendah  dibandingkan kontrol  positif  amoxicillin  500  ppm  yang memiliki  nilai  rata-rata  lebar  daya  hambat sebesar 7,93 mm.

## KESIMPULAN
Penelitian  ini  menyimpulkan  bahwa Ekstrak  etanol  96%  daun  tapak  dara  pada
konsentrasi  75%  memiliki  aktivitas  paling tinggi  dalam  menghambat  pertumbuhan bakteri Streptococcus  mutans dengan  lebar daya  hambat  sebesar  6,27  mm  dengan kategori sedang. Hasil uji fitokimia menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  96% daun  tapak  dara  mengandung  alkaloid, flavonoid, Tanin, saponin, dan steroid.

## DAFTAR PUSTAKA
Ariyani, B., Armalina, D., dan
Purbaningrum, D. A. (2021). Pengaruh  Konsentrasi  Ekstrak  Kulit Buah Naga Merah terhadap Pertumbuhan Streptococcus  mutans pada  Sediaan  Obat  Kumur  (Uji Invitro). e-GiGi . 9 (2): 289-297. Andalia,  N.,  Juliana,  Ridhwan,  M.,  Armi. (2019).  Pola  Sebaran  Tapak  Dara ( Cataranthus Roseus ) di Lamno Aceh Jaya. Serambi Konstruktivis . 1 (1): 82- 87.
Andini., dan Putri, C. F. (2021). Standardisasi  Simplisia  Kulit  Buah Mangga ( Mangifera Indica L.) Varietas Gadung. PHARMADEMICA :
Jurnal Kefarmasian dan Gizi. 1(1): 1-
8
Amalia, A., Sari, I., dan Nursanty, R. (2017). Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Etil Asetat  Daun  Sembung  ( Blumea balsamifera (L.)  DC.)  Terhadap
Pertumbuhan Bakteri Methicillin Resistant Staphylococcus aureus (MRSA). Prosiding Seminar Nasional Biotik 2017 : 387-391.
Baura,V.  A.,  D.  N.  Pareta,  S.  Selvana. Tulandi,  S.  D.  Untu.  (2021).  Uji
Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Etanol Daun Kangkung Air Ipomoea aquatica  Forsk Terhadap  Bakteri Staphylococcus aureus . Jurnal Biofarmasetikal Tropis . 4(1): 10-20. Dwijayanti,  S.  I.  P.,  dan  Pamungkas,  G.  S. (2016).  Uji  Aktivitas  Antibakteri
Ekstrak Daun Tapak Dara ( Catharantus  roseus (L.)  G.  Don.)
Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus dan Pseudomonas aeruginosa . Jurnal BIOMEDIKA . 9(2): 11-20
Departemen
Kesehatan RI. (2013).
Suplemen  III  Farmakope  Herbal Indonesia, Edisi I. Jakarta: Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan.
Fajrina,  A.,  Jubahar,  J.,  dan  Hardiana,  N.
(2017).  Uji  Aktivitas  Fraksi  Dari Ekstrak  Akar  Kangkung  ( Ipomoea aquatica  Forsk .)  Terhadap  Bakteri Streptococcus mutans . Jurnal Farmasi Higea. 9 (2): 140-148. Handoyo, D. L. Y. (2020). Pengaruh Lama Waktu Maserasi (Perendaman)
Terhadap  Kekentalan  Ekstrak  Daun Sirih  ( Piper  Betle ). Jurnal  Farmasi Tinctura . 2(1): 34-41.
Kumara, N. C., Pradnyani, I.  G. A. S., dan Sidiarta,  I.  G.  A.  F.  N.  (2019).  Uji Efektivitas  Ekstrak  Kunyit  ( Curcuma longa ) terhadap daya hambat pertumbuhan  bakteri Streptococcus mutans . Intisari  Sains  Medis .  10  (3): 462-467.
Komala,  O.,  Durrotun,  N.  Abd..Nf.,  dan Novi  F.  U.  (2021).  Uji  Aktivitas Ekstrak  Etanol  Kombinasi  Daun Pandan  Wangi  Dan  Daun  Jambu  Biji
Terhadap Shigella
dysenteriae.
Ekologia:  Jurnal  Ilmiah  Ilmu  Dasar dan Lingkungan Hidup . 21 (2): 64-71 Putri, A.V. A. A., Hafida, N., dan Megawati,
M. (2017). Pengaruh Daya Antibakteri
Ekstrak Daun Stevia (Stevia rebaudiana Bertoni ) Pada Konsentrasi 5%,  10%,  20%,  40%  dan  80% terhadap Streptococcus  mutans (In Vitro). Jurnal Ilmu Kedokteran Gigi. 1 (1): 9-14.
Pattipeilohy,  A.  J.,  Umar,  C.  B.  P.,  dan Pattilouw, M. T. (2022). Uji Aktivitas Antibakteri  Ekstrak  Etanol  Daun Tapak  Dara  ( Catharantus  roseus )  Di Desa Lisabata Terhadap Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus aureus
Dengan Menggunakan Metode Difusi
Agar. Jurnal JRIK. 2 (1): 80-90 Rohmah,  S.,  Euis  E.,  Jeti  R.  (2021).  Uji Ekstrak  Daun  Mengkudu  ( Morinda citrifolia L.)  Terhadap  Zona  Hambat Pertumbuhan Bakteri Escherichia Coli
Secara In-Vitro. Bioed: Jurnal
Pendidikan Biologi . 9 (1): 34-39.
Shanmugaraju,  V.,  and  Bhakyaraj,  R.
(2016). Antimicrobial Potential Activity of Leaf Extracts of Catharanthus  roseus  against Human Pathogens under Laboratory Conditions. International  Journal  Of Current  Research  In  Biology  And Medicine . 1(1): 35–51
Sayekti, N. A., Maulana, M. A., Nurhasanah,P., Triastinurmiatiningsih. (2018). Aktivitas Ekstrak Etanol dan Metanol Daun  Tapak  Dara  ( Catharanthus roseus (L.) G. Don.) Sebagai Antibakteri Streptococcus  pyogenes . Prosiding  Seminar  Nasional  FMIPA- UT 2018 . Saefudin, A., Virgantari, F., dan Effendi, E.
M. (2010). Aplikasi Statitiskan dalam
Biologi. Bogor: Departemen Statistika Fakultas  FMIPA  Intitut  Pertanian Bogor dan Fakultas FMIPA Universitas Pakuan.
Supriyanto,  Pujiastut,  E.,  Nur,  M.  (2021).
Skrining  Fitokimia  Ekstrak  Etanol 70%  Daun  Ganyong  Merah  ( CANNA EDULIS  KERR .). Joseph  (Journal  of Science and Pharmacy) . 1(1): 37-43.
Ulfah,  M.,  Priyanto,  W.,  Prabowo,  H. (2022).  Kajian  Kadar  Air  Terhadap Umur  Simpan  Simplisia  Nabati
Minuman Fungsional Wedang
Rempah. Jurnal  Pendidikan  Dasar Dan  Sosial  Humaniora .  1(5):  1103-
1112.
Winarno.  (2004).  Kimia  Pangan  dan  Gizi. Jakarta: Gramedia Pustaka Utama