P-ISSN : 2407-8441/℮-ISSN : 2502-0749

## Original Research Paper

## EFEKTIVITAS GEL MADU HUTAN AKASIA TERHADAP JUMLAH FIBROBLAS PENYEMBUHAN LUKA BAKAR
Riski Dwi Utami 1* , Uly Santika Wulan 2 , Bimby Irenesia 1
1 Departemen Fisiologi Fakultas Kedokteran Universitas Abdurrab, Pekanbaru-Riau
2 Prodi Pendidikan Dokter Fakultas Kedokteran Universitas Abdurrab, Pekanbaru-Riau
Email Corresponding:
riski.dwi.utami@univrab.ac.id
Page : 267-272

## ABSTRAK
Latar  belakang  :  Menurut  World  Health  Organisation  (WHO)  setiap  tahunnya terjadi  kematian  akibat  luka  bakar  sekitar  180.000  jiwa.  Indonesia  mencatat kasus  luka  bakar  akibat  api  sekitar  53,1%.  Fibroblas  berperan  pada  sintesis kolagen  fase  proliferasi  penyembuhan  luka  bakar.  Penggunaan  bahan  alam seperti  madu  merupakan  salah satu tatalaksana dalam penyembuhan  luka  bakar dan sediaan obat berupa gel bersifat dingin dan mengurangi rasa nyeri. Provinsi Riau menghasilkan berbagai jenis madu salah satunya madu hutan akasia.. Tujuan:  untuk  mengetahui  efektivitas  gel  madu  hutan  akasia  terhadap  jumlah fibroblas pada penyembuhan luka bakar pada tikus putih.
Metode: eksperimental dengan Randomized Post Only Control Group Design. Hasil:  didapatkan  rerata  jumlah  fibroblas  hari  ke-7  pada  kelompok  gel  madu 20%, 60%, dan 80%, serta kelompok kontrol negatif dan positif adalah 186,40 + 59,411;  206,80  +  48,132;  203,40  +  44,472  111,60  +  28,413;  178,20  +  74,258; dengan p < 0,05. Sedangkan rerata jumlah fibroblas hari ke-14 adalah 122.60 + 46,683;  189.80  +  78,049;  268.60  +  38,201;  143.80  +  17,196;  117.60  +  71,640 dengan nilai p < 0,05.
Kesimpulan:  gel  madu  hutan  akasia  dapat  meningkatkan  jumlah  rata-rata fibroblas secara bermakna dibandingkan dengan kontrol positif dan negatif.

## ABSTRACT
Background:  According  to  the  World  Health  Organization  (WHO),  every  year there are around 180.000 deaths from burns. Indonesia  states tha  burns due to fire  are  recorded  at  around  53.1%.  Fibroblasts  play  a  role  in  the  synthesis  of collagen in the proliferative phase in the burn wound healing process. The use of natural ingredients such as honey is one of the treatments in healing burns and medicinal  preparations  in  the  form  of  gel  are  cold  and  reduce  pain.  Riau produces various types of honey, one of which is acacia forest honey.
Objective:  To  determine  the  effectiveness  of  acacia  forest  honey  gel  on  the number of fibroblasts in white rats wound healing.
Methods:  This  study  used  experimental  with  Randomized  Post-Only  Control Group Design. Thirty  white  rats  were divided into 5 groups  were given acacia forest  honey  gel  20%,  60%,  80%,  negative  and  positive  control.  Data  analysis was carried out with the oneway ANOVA test.
Results: The mean number of fibroblasts on the 7th day in the honey gel group was 20%, 60%, and 80%, the negative and positive control groups were 186,40 +  59,411;  206,80  +  48,132;  203,40  +  44,472;  111,60  +  28,413;  178,20  + 74,258, with p < 0.05. The mean number of fibroblasts on day 14th were 122.60 +  46,683;  189.80  +  78,049;  268.60  +  38,201;  143.80  +  17,196;  117.60  +
71,640 with p-value < 0.05.
Conclusion:  Acacia  forest  honey  gel  can  increase  the  mean  number  of fibroblasts compared to negative and positive controls significantly
Kata Kunci : fibroblas, gel, hutan akasia, madu
Keywords: acacia forest, fibroblast, gel, honey

## Published by:
Tadulako University, Managed by Faculty of Medicine. Email: healthytadulako@gmail.com Phone (WA): +6285242303103 Address: Jalan Soekarno Hatta Km. 9. City of Palu, Central Sulawesi, Indonesia

## PENDAHULUAN
Luka  bakar  merupakan  masalah  serius yang  sering  terjadi  di  masyarakat  yang biasanya  disebabkan  oleh  panas  atau  radiasi, radioaktif, listrik, gesekan, atau kontak dengan bahan kimia 1 . Menurut World Health Organisation  (WHO)  setiap  tahunnya  dapat terjadi  kematian  akibat  luka  bakar  yang mencapai  sekitar  180.000,  dimana  sekitar  dua per tiganya terjadi di wilayah Afrika dan Asia. Data  di  Indonesia  diambil  dari  data  Rumah Sakit  Cipto  Mangunkusumo  (RSCM),  pasien yang  dirawat akibat  luka  bakar  dalam  periode 2  tahun  sebanyak  303  pasien.  Penyebab terbanyak  luka  bakar  berdasarkan  data  pasien yang  dirawat  di  unit  luka  bakar  RSCM  tahun 2011-2016  adalah  akibat  api  sekitar  53,1% 2 . Menurut  data  di  Rumah  Sakit  Umum  Daerah Arifin  Achmad  Provinsi  Riau  periode  Januari 2011-Desember  2013  terdapat  111  pasien akibat luka bakar dengan jumlah meninggal 19 orang dan pasien sembuh 88 orang 3 .
Luka  bakar  yang  tidak  dirawat  dengan baik  dapat  menyebabkan  berbagai  komplikasi diantaranya  infeksi  pada  luka,  kontraktur,  dan syok  hipovolemik  yang  bisa  berlanjut  pada kematian 4 . Tahap proliferasi pada penyembuhan  luka  bakar  dipengaruhi  oleh pemakaian  produk  perawatan  luka.  Perawatan yang  kurang  tepat  akan  menyebabkan  proses penyembuhan juga akan lambat 5 .
Penatalaksanaan  luka  bakar  diperlukan untuk  mengurangi  nyeri,  mencegah  infeksi, dan  mempercepat  proses  penyembuhan,  yaitu dengan  pemberian  agen  terapetik  sintesis maupun bahan alam 6 . Penggunaan bahan alam saat  ini  sangat  berkembang  dengan  berbagai manfaat  yang  telah  diteliti.  Hasil  penelitian menunjukkan  bahwa  kopi  robusta  mampu mempercepat  penyembuhan  luka  pada  tikus diabetes 7 . Selain itu, dalam penyembuhan luka juga  diperlukan  zat  yang  bersifat  antibakteri, seperti bahan alam ekstrak kulit buah markisa ungu  yang  memiliki  efek  antibakteri  terhadap
Staphylococcus  aureus  dan  ekstrak  biji ketumbar  yang  memiliki  efek  antibakteri terhadap  Pseudomonas  aeruginosa 8,9 .  Selain itu,  bahan  alam  yang  bermanfaat  dalam mempercepat penyembuhan luka bakar adalah tanaman  krekot  dari  Kalimantan  dan  daun rumput ayam dari Sulawesi 7 . Madu merupakan salah  satu  bahan  alam  yang  dapat  digunakan untuk pengobatan luka bakar. Madu mengandung  saponin  dan  trapenoid  yang berperan  sebagai  antibakteri 8 .  Madu  juga memiliki kemampuan untuk memperbaiki sel- sel  kulit  mati  atau  sel  yang  rusak  pada  kulit dari  kandungan  asam  glukonat  yang  terdapat didalam  madu,  kemudian  juga  merangsang pertumbuhan  sel-sel  baru 12,13 .  Sediaan  madu pada  pengobatan  luka  bakar  yang  dapat digunakan  adalah  gel,  dimana  sediaan  gel bersifat  dingin  dan  menyejukkan  pada  luka dan  akan  memberi  kenyamanan  dengan  rasa nyeri  yang  berkurang.  Sediaan  gel  juga bersifat  lembab  dimana  kandungan  airnya dapat  tetap  melembabkan  daerah  luka  dan sekitarnya. Kelembaban kulit dapat meningkatkan  migrasi  sel  dan  reepitelisasi sehingga  mempercepat  proses  penyembuhan luka. Selain itu, aktivitas growth factor (TGF- β, EGF), pengiriman oksigen dan nutrisi yang efektif juga dipengaruhi oleh kelembaban 5 .
Provinsi  Riau  memiliki  madu  hutan  dari berbagai kabupaten diantaranya dari bioregion hilir  dan  pesisir  pantai  di  Bengkalis  dan  Selat Panjang,  hutan  tanah  mineral  di  Kampar, hutan rawa gambut di Pelalawan, aliran sungai di Rokan  Hilir, hutan tanaman akasia di Siak, serta  perkebunan  kelapa  sawit  dan  karet  di Kuantan  Singingi.  Karakteristik  madu  yang baik  juga  cukup  terpenuhi  pada  berbagai macam  madu  yang  berada  di  bioregion  yang ada  di  Riau,  mulai  dari  kadar  HMF (Hidroksimetilfurfural),  keasaman,  sukrosa, enzim  diastase,  dan  lainnya  yang  merupakan standar pengukuran kemurnian produk madu 14 .  Menurut  penelitian  oleh  Pribadi  dkk,
bioregion  di  Kabupaten  Siak  memiliki  tipe polen  yang  cukup  baik  yakni  sekitar  64,61% dibandingkan  di  bioregion  lain  seperti  pada perkebunan kelapa sawit dan karet menunjukkan  hanya  sekitar  59,88%  tipe polennya. Ukuran polen mempengaruhi kualitas  madu  yang  dihasilkan,  semakin besar hasil  persentasinya  maka  semakin  baik  madu yang dihasilkan.
Berdasarkan  data  di  atas,  penelitian  ini bertujuan  untuk  melihat  efektivitas  gel  madu hutan  akasia  terdapa  jumlah  fibroblas  pada penyembuhan luka bakar pada tikus putih.

## BAHAN DAN CARA
Penelitian  ini  adalah  studi  eksperimental dengan rancangan penelitian Randomized Post Only  Control  Group  Design .  Pembuatan  gel madu hutan akasia menggunakan formulasi di bawah ini.

## Tabel 1. Formula Gel Madu
Bahan Kegunaan Komposisi Madu Zat aktif 20%, 60%, 80% Karbopol 940 Basic gel 2% Metil paraben Pengawet 0,2% Gliserin Humektan 10% Triethanolamin Surfaktan 2% Aquades Pelarut Ditambah hingga 100%
Sampel  penelitian  ini  menggunakan  30 ekor  tikus  putih  ( Rattus  novergicus )  strain wistar  berumur  2-3  bulan  dengan  berat  150- 250  gram.  Tikus  diaklimatisasi  selama  7  hari dan  dibagi  menjadi  5  kelompok,  yaitu kelompok  yang  diberi  gel  madu  hutan  akasia 20%,  60%,  dan  80%,  kelompok  kontrol negatif  yang  diberi  gel  tanpa  madu,  serta kontrol  positif  yang  diberi  bioplacenton. Sampel  tikus  dicukur  bulunya  di  bagian punggung  dan  diberi  anestesi  inhalasi  dengan eter.  Selanjutnya  dilakukan  pembuatan  luka bakar  derajat  II  pada  punggung  tikus.  Logam berdiameter 2 cm dibalut kasa direndam dalam air  dengan  suhu  98℃  selama  3  menit,
kemudian  logam  tersebut  ditempel  selama  10 detik di punggung tikus hingga terbentuk luka bakar  derajat  II.  Rerata  jumlah  fibroblas dihitung  melalui  sampel  yang  diambil  dengan teknik  biopsi  jaringan  pada  hari  ke-7  dan  ke- 14  dan  dilakukan  pengecatan  haematoxylin eosin  (HE).  Selanjutnya,  preparate  sampel diamati  menggunakan  mikroskop  cahaya binokuler  dengan  perbesaran  400x  dan  rerata fibroblas dihitung dari 5 lapang pandang.
Uji statistik yang digunakan pada penelitian ini adalah uji One Way Anova untuk melihat  adanya  perbedaan  jumlah  fibroblas pada  kelima  kelompok  perlakuan.  Besarnya perbedaan  pada  masing  –  masing  kelompok dilakukan  analisis  lebih  lanjut  menggunakan Post Hoc  Test  LSD .  Nilai  signifikansi  pada penelitian  ini  adalah  apabila  variabel  yang dianalisis  memiliki  nilai  p  <0,05.  Semua analisis statistik yang dilakukan menggunakan program komputer SPSS 25.00.

## HASIL
Seluruh sampel mempunyai rata-rata berat badan  hampir  sama  antara  kelompok  sampai hari  ke-14,  dimana  tidak  ada  sampel  yang berat  badannya  melebihi  250  gr.  Selama penelitian berlangsung terdapat 2 sampel yang drop  out yakni  pada  kelompok  perlakuan dengan  obat bioplacenton sebanyak  1  ekor tikus di hari ke-4 dan pada kelompok gel madu hutan  akasia  60%  sebanyak  1  ekor  tikus pada hari  ke-7.  Berikut  ini  adalah  tabel  rerata juumlah fibroblas pada hari ke-7.
Gambar 1. Gambaran Fibroblas dengan pewarnaan HE hari ke-7 pada kelompok perlakuan (C1) bioplacenton , (C2) gel tanpa madu, (P1) gel madu hutan akasia 20%, (P2) gel madu hutan akasia 60%, dan (P3) gel madu hutan akasia 80%
Tabel 2. Rerata jumlah fibroblas pada hari ke-7 Kelompok Rerata + SD Nilai p Bioplacenton 111,60 + 28,413 p < 0,005 Gel tanpa madu 178,20 + 74,258 Gel madu hutan akasia 20% 186,40 + 59,411 Gel madu hutan akasia 60% 206,80 + 48,132
Gel madu hutan akasia 80% 203,40 + 44,472
Berdasarkan uji one way  ANNOVA pada jumlah fibroblas hari ke-7 didapatkan nilai p < 0,05,  artinya  terdapat  perbedaan  bermakna jumlah  rerata  fibroblas  di  antara  kelompok kontrol dan kelompok perlakuan. Analisis data dilanjutkan  dengan Post  Hoc  Test  LSD dan diperoleh  nilai p  value  <0, 05  terdapat  antara kelompok  yang  diberi  bioplacenton  dengan kelompok  yang  diberi  gel  madu  20%,  60%, dan  80%.  Berikut  ini  merupakan  gambar fibroblas hari ke-7 .
Gambar 2. Gambaran Fibroblas dengan pewarnaan HE hari ke-14 pada kelompok perlakuan (C1) bioplacenton , (C2) gel tanpa madu, (P1) gel madu hutan akasia 20%, (P2) gel madu hutan akasia 60%, dan (P3) gel madu hutan akasia 80%.
Tabel 3. Rerata jumlah fibroblas pada hari ke-14
Kelompok Rerata + SD Nilai p Bioplacenton 143.80 + 17,196 p < 0,005 Gel tanpa madu 117.60 + 71,640 Gel madu hutan akasia 20% 122.60 + 46,683 Gel madu hutan akasia 60% 189.80 + 78,049 Gel madu hutan akasia 80% 268.60 + 38,201
Table  3  menunjukkan  rerata  jumlah fibroblas  pada  hari  ke-14.  Tampak  jumlah rerata  fibroblas  tertinggi  pada  kelompok perlakuan  yang  diberi  gel  madu  hutan  akasia
80%  yaitu  sebanyak  268.60+38,201  dan jumlah  terendah  dimiliki  oleh  kelompok yang diberi gel tanpa zat aktif. Berdasarkan uji one way ANNOVA pada jumlah fibroblas hari ke- 14  didapatkan  nilai  p  <  0,05,  artinya  terdapat perbedaan bermakna jumlah rerata fibroblas di antara  kelompok  kontrol  dan  kelompok perlakuan.  Analisis  data  dilanjutkan  dengan Post Hoc Test LSD dan diperoleh nilai p value <0, 05  yang  menunjukkan  terdapat  perbedaan bermakna  antara  kelompok  yang  diberi  gel madu  hutan  akasia  80%  dengan  kelompok kontrol  positif  yang  diberi  bioplacenton, kelompok  yang  diberi  gel  tanpa  bahan  aktif, kelompok  gel  madu  hutan  akasia  20%,  serta kelompok gel madu hutan akasia 60%. Berikut ini  merupakan  gambar  fibroblas  pada  hari  ke- 14.

## PEMBAHASAN
Berdasarkan tabel 2 tampak jumlah rerata fibroblas tertinggi pada hari ke-7 terdapat pada kelompok  perlakuan  yang  diberi  gel  madu hutan  akasia  60%  dan  jumlah  terendah dimiliki oleh kelompok yang diberi bioplacenton.  Hasil  penelitian  ini  sesuai dengan  penelitian  oleh  Mulia  tahun  2019 yakni  hasil  penyembuhan  luka  bakar  yang optimal adalah pada kelompok yang diberikan madu  60%  dengan  persentase  penyembuhan luka sebesar 56,60% 6 .
Tabel  3  juga  menunjukkan  bahwa perbedaan  bermakna  jumlah  fibroblas  tampak jelas antara kelompok kontrol dengan kelompok  yang  diberi  gel  madu  hutan  akasia dengan  konsentrasi  yang  paling  tinggi,  yaitu konsentrasi  80%.  Hal  ini  juga  sesuai  dengan penelitian  terdahulu  Novitasari  dimana  peran fibroblas  yang  sangat  penting  masih  fokus pada  fase  proliferasi  menyatakan  bahwa penyembuhan  luka  menggunkan  bahan  madu pada  hari  ke  14  cukup  baik  dengan berlangsungnya  fase  proliferasi  lebih  awal karena  luka  cepat  bersih  melalui  absorbsi  pus
pada luka tersebut setelah menggunakan bahan madu 10 .
Peningkatan  jumlah  fibroblas  pada kelompok  yang  diberi  gel  madu  hutan  akasia ini  sangat  berperan  penting  pada  proses proliferasi  penyembuhan  luka  bakar  dimana fibroblas  memproduksi  matrik  ekstraseluler berupa kolagen dan mempersiapkan permukaan  luka  untuk  migrasi  keratinosit. Produksi  fibroblas  diinduksi  oleh growth factor yang diproduksi oleh makrofag sehingga  perlu  diketahui  lebih  lanjut  apakah pemberian  gel  madu  hutan  akasia  ini  juga mempengaruhi  peningkatan  produksi growth factor 15 .

## KESIMPULAN DAN SARAN
Pemberian  gel  madu  hutan  akasia dapat  meningkatkan  jumlah  rerata  fibroblas secara bermakna dibandingkan kelompok yang diberi  gel  tanpa  madu,  serta  kelompok  yang diberi obat bioplacenton . Pemberian gel madu hutan akasia konsentrasi 60% dapat meningkatkan  jumlah  fibroblas  paling  tinggi pada hari ke-7 dan pemberian gel madu hutan akasia konsentrasi madu 80% dapat meningkatkan  jumlah  fibroblas  paling  tinggi pada hari ke-14.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terima  kepada  Universitas  Abdurrab yang  telah  memberikan  dana  hibah  untuk penelitian  ini  dan  semua  pihak  yang  telah membantu penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Anggowarsito.
Luka Bakar Sudut
Pandang  Dermatologi.  Widya  Medika. 2014;(2):115-120. 2. Kemenkes RI. Pedoman Nasional Pelayanan  Kedokteran.  Keputusan  Mentri Kesehatan Republik Indonesia HK.01.07/Menkes/555/2019. 2019. 3. Giovani  L,  Pamungkas  K.A,  Inayah.
Profil  Pasien  Luka  Bakar  Berat  Yang Meninggal  Di  RSUD  Arifin  Achmad Provinsi  Riau  Periode  Januari  2011- Desember 2013. Jurnal Online Mahasiswa Kedokteran. 2015; 2(2).
4. Haikal  S.M.S,  Susilo,  A.P.  Kontinuitas Perawatan  dan  Pencegahan  Komplikasi pada  Luka  Bakar.  Jurnal  Kedokteran Mulawarman. 2021;(8;32-36.
5. Fuadi  M.I,  Elfiah  U,Misnawi.  Jumlah Fibroblas  pada  Luka  Bakar  Derajat  II pada  Tikus  dengan  Pemberian  Gel Ekstrak  Etanol  Biji  Kakao  dan  Silver Sulfadiazine ( The Total Fibroblast on the Second  Degree  Burns  of  Rats  after Treatment  using  Ethanolic  Extract  of Cocoa Beans ). Pustaka Kesehatan. 2015;3;244-248.
6. Mulia.  Efektivitas  gel  madu  lokal  Aceh terhadap  penyembuhan  luka  bakar  pada tikus  putih  ( Rattus  norvegicus ).  Jurnal Bioseluler. 2019;3.
7. Amalia  F.F.  Aktivitas  antibakteri  kopi robusta dalam mempercepat kejadian pada penyembuhan luka pada ulkus
diabetikum. Healthy  Tadulako  Journal (Jurnal Kesehatan Tadulako). 2020; 6(1).
8. Anabel,  Wijaya  C.D,  Lokanata  S.  Uji Efektivitas  ekstrak  kulit  buah  markisa ungu  ( Passiflora  Edulis  Sims )  terhadap Staphylococcus Aureus . Healthy Tadulako Journal (Jurnal  Kesehatan  Tadulako). 2020; 6(3).
9. Sitanggang  A.K,  Zai  Z.J.P,  Pratama  I.H, Amansyah A. Daya hambat ekstrak etanol biji  ketumbar  ( Coriandrum  sativum  l. ) terhadap
pertumbuhan bakteri Pseudomonas aeruginosa . Healthy
Tadulako  Journal (Jurnal  Kesehatan Tadulako).2021; 7(3)
10. Oktaviani  D.J,  Widiyastuti  S.,  Maharani D.A,  et  al.  Review:  Bahan  Alami
Penyembuh  Luka.  Majalah  Farmasetika. 2019; 4 (3). 11. Fadhmi, Mudatsir,
Syaukani E. Perbandingan Daya Hambat Madu Seulewah dengan Madu Trumon Terhadap Staphylococcus  aureus Secara
In  Vitro.  Jurnal  Ilmiah  Teknologi  dan Pendidikan. 2017;3(9).
12. Yuliarti.  Khasiat  Madu  untuk  kesehatan dan kecantikan. Kemenkes. 2019.
13. Hendy  ,  Lister  I.N.E.  Tingkat  Efektivitas Penyembuhan  Luka  Bakar  Derajat  IIA dengan  Pemberian  Madu  dan  Pemberian Salep Nebacetin pada Tikus Putih ( Rattus Norvegicus ).  Jurnal  Kedokteran  dan kesehatan. 2019; 15(2).
14. Pribadi  W.  Karakteristik  Madu  Lebah Hutan ( Apis dorsata Fabr .) Dari Berbagai Bioregion  Di  Riau  ( Apis  dorsata  Forest Honey Characteristics from Bioregions in Riau ).  Jurnal  penelitian  hasil  hutan. 2019;37.
15. Putri  R.  R.,  Hakim  R.  F,  Rezeki  S. Pengaruh  ekstrak  daun  tapak  dara ( catharanthus  roseus )  terhadap  jumlah fibroblas  pada  proses  penyembuhan  luka di mukosa oral. Journal caninus dentistry . 2019;2(1);20–30.