## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online)
DOI 10.47065/jharma.v5i2.4166

## Uji Aktivitas Antioksidan Fraksi Ekstrak Kulit Bawang Putih (Allium Sativum L.) dengan Metode FRAP (Ferri Reducing Antioxid Power)
Rizky Indah Pratiwi * , Ummu Kalsum, Abdul Wahid Suleman
Fakultas Farmasi, Universitas Megarezky, Makassar, Indonesia Email: 1,* rizkyindahp@unimerz.ac.id, 2 airahalfatih@gmail.com, 3 wahid26061991@unimerz.ac.id Email Penulis Korespondensi: rizkyindahp@unimerz.ac.id (*: coressponding author)
Abstrak- Bawang putih digunakan oleh sebagian masyarakat untuk mengobati gatal-gatal di kulit yang sering dikenal panu. Bahan- bahan tersebut dipakai dengan cara digosokkan pada daerah kulit yang gatal. Bawang putih menghasilkan limbah berupa kulit, kulit umbi bawang putih mengandung senyawa flavonoid, fenol, alkaloid, tanin, dan saponin, yang memiliki aktifitas antioksidan. Penelitian ini bertujuan Untuk mengetahui aktivitas antioksidan dari fraksi ekstrak kulit bawang putih (Allium Sativum L.) dengan menggunakan metode FRAP (Ferric Reducing Antioxidant Power) dan untuk mengetahui nilai IC50 dari fraksi ekstrak kulit bawang putih dengan menggunakan  metode  FRAP.  Jenis  penelitian  yang  digunakan  yaitu  dengan  eksperimen  dengan  sampel  kulit  bawang  putih  yang diekstraksi menggunakan metode maserasi dengan  pelarut etanol 70% kemudian dilakukan fraksi dengan pelarut polar (etanol:air) dan non  polar  (n-heksan).  Pengujian  aktivitas  antioksidan  menggunakan  spektrofotomerti  uv-vis.  Berdasarkan  hasil  analisis  secara deskriptif menunjukan bahwa sampel ekstrak dan fraksi kulit bawang putih memiliki aktivitas antioksidan. Hasil yang didapatkan yaitu Fraksi etanol:air adalah 1,52 ppm dan fraksi n-heksan 2,75. Kesimpulan penelitian ini bahwa fraksi polar (etanol:air) dan fraksi non polar(n-heksan) memiliki aktivitas antioksidan kuat.
Kata kunci: Aktivitas; Antioksidan; FRAP; Fraksi; Kulit Bawanag Putih
Abstract- Garlic is used by some people to treat itching on the skin which is often known as tinea versicolor. These materials are used by rubbing the itchy skin area. Garlic produces waste in the form of skin, garlic bulb skin contains flavonoids, phenols, alk aloids, tannins and saponins, which have antioxidant activity. This study aims to determine the antioxidant activity of the garlic sk in extract fraction (Allium Sativum L.) using the FRAP (Ferric Reducing Antioxidant Power) method and to determine the IC50 value of the garlic skin extract fraction using the FRAP method. The type of research used was experimentation with garlic skin samples extracted using the maceration method with 70% ethanol solvent, then fractions were carried out with polar (ethanol:water)  and non-polar (n- hexane) solvents. Antioxidant activity testing using uv-vis spectrophotometry. Based on the results of the descriptive analysis, it showed that the garlic extract and skin fraction samples had antioxidant activity. The results obtained were the ethanol:water fraction was 1.52 ppm and the n-hexane fraction was 2.75. conclution is the polar fraction (ethanol:water) and the non-polar fraction (n-hexane) have strong antioxidant activity.
Keywords: Activity; Antioxidant; FRAP; Fraction; Garlic Skin

## 1. PENDAHULUAN
Dewasa  saat  ini  banyak  dikembangkan  pangan  fungsional,  yaitu  makanan  yang tidak  hanya  berperan  sebagai  sumber energi,  tetapi  juga  memiliki  nilai  tambah  bagi  kesehatan  seperti  makanan  yang  mengandung  senyawa  antioksidan. Antioksidan merupakan suatu senyawa yang dapat menyerap atau menetralisir radikal bebas sehingga mampu mencegah penyakit-penyakit degeneratif seperti kardiovaskuler, karsinogenesis, dan penyakit lainnya  (Latu  and Suleman, 2023). Senyawa antioksidan merupakan substansi yang diperlukan tubuh untuk menetralisir radikal bebas karena berperan dalam melindungi sel-sel dari kerusakan yang disebabkan oleh radikal bebas. Radikal bebas adalah molekul-molekul yang tidak stabil  dan  memiliki  kelebihan  elektron  yang  dapat  merusak  sel-sel  tubuh  dengan  merenggut  elektron  dari  molekul- molekul lain, termasuk dari DNA, protein, dan lipid. Proses ini disebut oksidasi. (Suleman et al. , 2022). Tubuh manusia memiliki sistem pertahanan endogen terhadap serangan radikal bebas terutama terjadi melalui peristiwa metabolisme sel normal dan peradangan. Jumlah radikal bebas dapat mengalami peningkatan yang diakibatkan faktor stres, radiasi, asap rokok  dan  polusi  lingkungan  menyebabkan  sistem  pertahanan  tubuh  yang  ada  tidak  memadai,  sehingga  tubuh memerlukan tambahan antioksidan dari luar yang dapat melindungi dari serangan radikal bebas.
Radikal bebas adalah molekul-molekul yang memiliki satu atau lebih elektron yang tidak berpasangan pada orbital luarnya. Hal ini membuat mereka sangat reaktif karena mereka mencari elektron tambahan untuk mencapai kestabilan. Elektron yang tidak berpasangan ini membuat radikal bebas cenderung bereaksi dengan molekul-molekul di sekitarnya untuk mencuri atau memberikan elektron, sehingga sering kali memicu reaksi berantai yang dapat merusak struktur dan fungsi  molekul  tersebut  (Latu  and  Suleman,  2023).  Adanya  elektron  yang  tidak  berpasangan  menyebabkan  senyawa tersebut  sangat  reaktif  mencari  pasangan,  dengan  cara  menyerang  dan  mengikat  elektron  yang  berada  disekitarnya sehingga dapat memicu timbulnya penyakit (Suleman et al. , 2022). Meskipun tubuh manusia juga dapat memproduksi senyawa-senyawa  yang  dapat  berperan  aktif  dalam  menanggulangi  radikal  bebas,  namun  jumlahnya  seringkali  tidak mencukupi (Wahdaningsih et al. , 2021).
Indonesia terdapat beragam tanaman yang dimanfaatkan oleh masyarakat secara tradisional sebagai bahan pangan, obat-obatan herbal, bahan kosmetik, dan untuk keperluan lainnya. Namun, pengelolaan limbah dari tanaman ini masih menjadi isu yang perlu mendapatkan perhatian lebih. (Suleman et al. , 2022). Limbah tanaman dapat mencakup bagian tanaman yang tidak digunakan seperti daun yang sudah layu, akar yang tidak terpakai, atau sisa hasil olahan seperti ampas

## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online)
DOI 10.47065/jharma.v5i2.4166
setelah ekstraksi minyaknya. Pemanfaatan limbah tanaman memiliki potensi yang besar untuk dikembangkan, Salah satu contohnya adalah limbah kulit bawang putih yang banyak dihasilkan dari limbah rumah tangga. Diketahui bahwa ekstrak kulit  bawang  putih  mengandung  senyawa  kimia  yang  berpotensi  sebagai  antioksidan  yaitu  flavonoid  yang  dapat mencegah  berkembangnya  radikal  bebas  di  dalam  tubuh  sekaligus  memperbaiki  sel-sel  tubuh  yang  rusak  (Sayuti  dan Yenrina, 2021).
Namun,  informasi  mengenai  kulit  bawang  putih  ini  masih  terbatas  sehingga  penelitian  ini  dilakukan  agar pengetahuan  mengenai  antioksidan  menjadi  lebih  luas,  dapat  menambah  wawasan  dan  informasi  yang  baru  mengenai jenis senyawa flavonoid yang terkandung dalam kulit bawang putih yang berperan sebagai antioksidan, dengan harapan limbah kulit bawang merah yang tidak memiliki nilai ekonomis di masyarakat ini dapat diminimalisir dan akan menjadi salah satu limbah yang bermanfaat.
Telah dilakukan penelitian yang mempelajari tentang aktivitas antioksidan pada ekstrak bawang putih. Menurut penelitian  yang  telah  dilakukan  Istiana  pada  tahun  2002  dengan  sampel  ekstrak  bawang  putih  memiliki  aktivitas antioksidan  yang  dapat  menghambat radikal  bebas.  Dijelaskan  juga  secara  detail  komponen  bioaktif  yang terkandung dalam  umbi  bawang  putih  yang  mendukung  aktivitas  antioksidan  pada  umbi  bawang  putih,  senyawa  bioaktif  tersebut adalah flavonoid, fenolik dan tannin (Istiana, 2002).
Secara tradisional bawang putih digunakan oleh sebagian masyarakat untuk mengobati gatal-gatal di kulit yang sering dikenal panu. Bahan-bahan tersebut dipakai dengan cara digosokkan pada daerah kulit yang gatal. Bawang putih menghasilkan limbah berupa kulit, kulit umbi bawang putih mengandung senyawa flavonoid, fenol, alkaloid, tanin, dan saponin,  yang  memiliki  aktifitas  antioksidan.  Menurut  penelitian  kulit  bawang  putih  memiliki  aktivitas  sebagai antioksidan dimana fraksi larut etil asetat memiliki aktivitas antioksidan yang lebih kuat dibandingkan fraksi tak larut etil asetat dengan metode pengujian DPPH (Istiana, 2002).
Metode pengujian aktivitas antioksidan secara in vitro yang umum digunakan adalah metode ABTS (2,2’ Azino bis (3-ethylbenzthiazoline-6 sulfonic acid)), metode penangkapan radikal bebas DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl), metode  reduksi  FRAP  (ferric  reducing  antioxidant  power). Penelitian  ini  menggunakan  metode  reduksi  FRAP (ferric reducing antioxidant power) untuk pengujian antioksidan karena metode ini dikenal sebagai metode yang secara langsung mengukur  antioksidan  dalam  bahan  dan  merupakan  metode  yang  dapat  digunakan  untuk  menguji  antioksidan  dalam tumbuh-tumbuhan, metodenya yang mudah pengerjaannya, murah dan  cepat, reagen yang  digunakan cukup sederhana serta tidak menggunakan alat khusus untuk menghitung total antioksidan (Wabula et al. , 2019). Metode FRAP cenderung memberikan hasil yang lebih konsisten dan sensitif dalam mengukur aktivitas antioksidan, terutama ketika menghadapi senyawa  atau  ekstrak  dengan  aktivitas  antioksidan  yang  tinggi  selain  itu,  metode  ini  lebih  sering  digunakan  dalam penelitian biologis untuk mengukur aktivitas antioksidan dalam sistem biologis yang kompleks, seperti dalam penelitian mengenai kapasitas antioksidan serum darah, cairan tubuh, atau jaringan. Hal ini menjadikan FRAP lebih relevan untuk aplikasi dalam bidang kesehatan dan nutrisi.
Berdasarkan hal diatas maka dilakukan penelitian tentang aktivitas antioksidan partisi ekstrak kulit umbi bawang putih ( Allium Sativum L.) dengan menggunakan metode FRAP (Ferric Reducing Antioxidant Power) , untuk mengetahui bagaimana menentukan kapasitas antioksidan partisi ekstrak kulit umbi bawang putih.

## 2. METODOLOGI PENELITIAN

## 2.1 Lokasi dan Waktu Penelitian
Penelitian  ini  telah  dilakukan  di  Laboratorium  Fitokimia  dan  Laboratorium  Kimia  Farmasi  Universitas  Megarezky Makassar pada bulan Juli sampai September 2023.

## 2.2 Populasi dan Sampel
Sampel yang digunakan adalah kulit bawang putih ( Allium sativum L . ) yang diperoleh dari pengumpul di pasar Terong kota Makassar.

## 2.3 Alat dan Bahan
2.3.1 Alat
Alat–alat  yang  digunakan  antara  lain:  alat-alat  gelas  ( Pyrex ),  pH  meter, rotary  evaporator ,  spektrofotometer  UV-Vis, timbangan analitik, alat maserasi, cawan porselin dan vial.
2.3.2 Bahan
Bahan-bahan  yang digunakan  antara  lain:  Kulit bawang putih ( Allium Sativum L.), asam  klorida  ( Merck ),  natrium  asetat trihidrat  (CH 3 COONa.3H2O),  etanol  70%  ( Onemed ),  etanol  96%  ( Onemed ),  Iron(III)  Chloride  hexahydrate (FeCl 3 .6H2O),  Besi  (II)  Sulfat  Heptahidrat  (FeSO 4 .7H 2 O),  HCl,  besi  (III)  klorida  ( Merck ),  TPTZ  (2,4,6,-Tripyridyl- striazine) ( TCI Japan ), asam asetat ( Brataco ), n-Heksan ( Merck ), , kuersetin ( Sigma ),aquadest.

## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online)
DOI 10.47065/jharma.v5i2.4166
2.4 Prosedur Kerja

## 2.4.1 Pengolahan Sampel
Sampel  kulit  bawang  putih  ( Allium  Sativum L.)  diperoleh  dari  pengumpul  dipasar  terong  Kota  Makassar,  sampel kemudian  disortasi  basah,  simplisia  kemudian  dipotong  kecil-kecil  lalu  dikeringkan  dengan  cara  diangin-anginkan  di ruangan terbebas dari cahaya matahari hingga kering.

## 2.4.2 Pembuatan Ekstrak
Sampel yang telah diolah kemudian diekstraksi secara maserasi dengan pelarut etanol 70% menggunakan  perbandingan 1 :  7,5,  dibiarkan  selama  3×24  jam  disimpan  di  tempat  yang   terlindung  cahaya  sambil  sesekali  di  aduk.  Setelah  proses ekstraksi pertama selesai, ampasnya diremaserasi dengan cairan penyari yang baru sampai jernih kemudian di saring. Filtrat dikumpulkan lalu diuapkan dengan menggunakan alat Rotary Vacum Evaporator hingga diperoleh ekstrak kental. Ekstrak kental ditimbang dan dilakukan perhitungan % rendemen (Agus et al. , 2019) (Wijayanti dan Rosyid, 2019).

## 2.4.3 Fraksi Cair-cair
Sejumlah 10 gram ekstrak kental yang diperoleh dilarutkan dalam air dan etanol 70% (2:3) sebanyak 100ml dan diaduk. Campuran  dimasukkan  ke  dalam  corong  pisah  dan  diekstraksi  cair-cair  dengan  pelarut  n-Heksan  sebanyak  100  mL, kemudian  dikocok dan didiamkan hingga terpisah sempurna. Fraksi n-Heksan akan berada pada bagian atas, sedangkan lapisan  air:etanol  akan  berada  pada  bagian  bawah.  Selanjutnya  dipisahkan  fraksi  n-Heksan  dan  etanol.Fraksi  etanol diekstraksi kembali dengan n-Heksan hingga larutan yang diperoleh jernih (tidak berwarna) (Hodzic et al. , 2019).

## 2.4.4 Skrining fitokimia
a. Uji Alkaloid
Sebanyak 1 g ekstrak ditambahkan 10 ml air panas, di didihkan selama 5 menit, kedalam 5 ml filtrate ditambahkan 0,1  g  serbuk  magnesium  dan  1  ml  asam  klorida  pekat  dan  2  ml  amil  alkohol,  dikocok  dan  dibiarkan  memisah. Flavonoida positif jika terjadi warna merah atau kuning atau jingga.
b. Uji Flavonoid
Ekstrak ditimbang sebanyak 0,5 g kemudian ditambahkan 1 ml asam klorida 2 N dan 9 ml air suling, dipanaskan diatas penangas air selama 2 menit. Filtrat yang diperoleh dipakai untuk uji alkaloida, diambil 3 tabung reaksi, lalu kedalamnya  dimasukkan  0,5  ml  filtrat.  Masing-masing  tabung  reaksi  ditambahkan  pereaksi  yang  berbeda,  yaitu pereaksi mayer, bouchardat, dan dragendroff.
c. Uji Tanin
Ekstrak ditimbang sebanyak 1 g, di didihkan selama 3 menit dalam 10ml air suling lalu didinginkan dan disaring. larutan diambil 2 ml ditambahkan 1-2 tetes pereaksi besi (III) klorida 1%. Hasil positif jika terbentuk warna biru kehitaman atau hijau kehitaman.
d. Uji Saponin
Ekstrak  ditimbang  sebanyak  0,5  g  dan  dimasukkan  kedalam  tabung  reaksi,  lalu  ditambahkan  10  ml  air  panas, dinginkan kemudian dikocok kuat-kuat selama 10 detik. Hasil positif jika menunjukkan adanya busa setinggi 1-10 cm.

## 2.4.5 Pembuatan Sediaan Uji
a. Pembuatan Larutan Stok dan Sediaan Uji
Fraksi ekstrak etanol kulit bawang putih masing-masing ditimbang sebanyak 10 mg dan dimasukkan kedalam labu ukur 10  mL  kemudian  ekstrak  etanol dilarutkan  dengan  etanol  70%  sedangkan  fraksi  air:etanol  dilarutkan  dengan etanol p.a dan ditepatkan volumenya sehingga diperoleh konsentrasi 1000ppm.
b. Pembuatan Larutan Baku (Kuersetin)
Pembuatan larutan stok disiapkan dengan cara menimbang 10 mg kuersetin dan dilarutkan dengan etanol p.a, volume akhir dicukupkan hingga 10 mL labu tentukur, kemudian dibuat pengenceran konsentrasi 25 ppm, 50 ppm, 75 ppm, 100 ppm, 125 ppm.
c. Pembuatan larutan reagen FRAP
Penyiapan larutan pereaksi Reagen  FRAP  dengan  mencampur  buffer  Asetat 0,3  M (pH  3,6),  0,01  M  TPTZ  dalam  0,04  M  HCl  dan  0,02  M FeCl 3 .6H2O pada perbandingan masing-masing 10:1:1.

## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online)
DOI 10.47065/jharma.v5i2.4166
d. Buffer Asetat 3,6
Dibuat  dari  0,775  gram  natrium  asetat  trihidrat  (CH 3 COONa.3H 2 O)  ditambahkan  dengan  4  ml  asam  asetat  P, dilarutkan dengan aquadest hingga tepat 250 mL dalam labu tentu ukur.
e. TPTZ 0,01 M
Dibuat  dengan  melarutkan  0,8  mL  HCL  pekat  dalam  250  mL  aquadest.  Ditimbang  31,2  mg  TPTZ  kemudian dilarutkan dengan KCL 0,04 mM dalam labu 50 mL dan dicukupkan sampai tanda batas.
f. FeCl 3 .6H 2 O 0,02 M
Ditimbang 270 mg FeCl 3 .6H 2 O dilarutkan dalam labu 50 mL dan dicukupkan dengan aquadest sampai tanda batas.

## 2.4.6 Pengukuran Aktivitas Antioksidan dengan Metode FRAP
a. Pembuatan Kurva Baku Kuersetin
Masing-masing konsentrasi kuersetin dipipet ke dalam vial, ditam bahkan 2 mL reagen FRAP, dicukupkan volumenya sampai  5  mL  dengan  aquadest,  serapan  diukur  dengan  spektrofotometri  UV-Vis  dengan  panjang  gelombang  500- 800nm (Antolovich et al. , 2002).
b. Pengukuran Serapan Sampel
Masing-masing ekstrak etanol 70%, partisi n-Heksan, partisi etanol dipipet dan dimasukkan ke dalam vial sebanyak 25 ppm, 50 ppm, 75 ppm, 100 ppm dan 125 ppm. Kemudian ditambahkan 2 mL reagen FRAP (perbandingan 10 : 1
: 1 antara buffer asetat : TPTZ : FeCl 3 ) dandicukupkan volume hinggga 5 mL dengan aquadest, kecuali untuk sampel fraksi n-Heksan dicukupkan dengan etanol p.a . Campuran dihomogenkan dan diinkubasi selama 30 menit, serapan diukurdengan spektrofotometer UV-Vis pada panjang gelombang maksimum 595 nm. Aktivitas antioksidan sampel ditentukan oleh kekuatan daya reduksi sampel yang dinyatakan dalam IC 50 .

## 2.5 Pengumpulan dan Analisis Data

## 2.5.1 Prosedur pengumpulan data
Teknik  pengumpulan  data  yang  dilakukan  dalam  penelitian  ini  adalah  observasi.  Observasi  merupakan  teknik pengumpulan data dengan melakukan pengamatan terhadap proses yang sedang berlangsung.

## 2.5.2 Analisis Data
Nilai % inhibisi dihitung dengan rumus sebagai berikut:
Keterangan:
ƛ kontrol = Absorbansi yang tidak mengandung sampel
ƛ sampel = Absorbansi yang mengandung sampel Adapun rumus persamaan linier sebagai berikut: y = ax + b
Keterangan:
y = Absorbansi sampel x=Konsentrasi sampel

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN
Sampel  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  kulit  bawang  putih  ( Allium  sativum L . )yang  diperoleh  dari  pasar terong Kota Makassar, Sulawesi Selatan. Sebanyak 2,77 kg kulit bawang putih disortasi basah, dicuci lalu dikeringkan dengan cara diangin-anginkan pada suhu ruang (Wijayanti dan Rosyid, 2019). Pengeringan simplisia atau bahan tanaman mentah adalah proses penting dalam pengolahan herbal yang bertujuan untuk menjaga kualitas dan memperpanjang masa simpan tanaman tersebut. Beberapa tanaman mengandung senyawa aktif yang sensitif terhadap kelembaban atau panas. Dengan mengeringkan tanaman dengan benar, senyawa-senyawa ini dapat dipertahankan dalam konsentrasi yang tinggi, menjaga potensi efek terapeutik atau nilai nutrisinya. Pengeringan dengan cara ini relatif aman sehingga dapat mencegah terjadinya kerusakan pada senyawa metabolit sekunder yang bertindak sebagai antioksidan(Rabeta dan  Faraniza, 2019).
% inhibisi = ƛ kontrol – ƛ sampel ƛ kontrol x 100%

## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online)
DOI 10.47065/jharma.v5i2.4166
Kemudian didapatkan simplisia kering sebanyak 1,46 kg. Sebanyak 1 kg kulit bawang putih ( Allium sativum L . ) diserbukkan,  dengan tujuan  untuk  memperkecil  ukuran  simplisia  agar  luas  permukaannya  lebih  besar  sehingga  cairan penyari dengan mudah melarutkan senyawa aktif dari simplisia. Selanjutnya sampel diekstraksi secara maserasi dengan menggunakan larutan penyari etanol 70% dengan perbandingan 1:7,5 selama 3x24 jam. Cairan penyari akan menembus dinding  sel  dan  masuk  kedalam  rongga  sel  yang mengandung  zat  aktif.  Kemudian  zat  aktif  tersebut  akan  larut  dalam cairan penyari karena adanya perbedaan konsentrasi antara larutan didalam dan diluar sel, sehingga larutan yang terpekat didesak keluar. Peristiwa ini terjadi berulang–ulang sehingga terjadi keseimbangan konsentrasi  antara larutan didalam dan diluar sel. Untuk mengoptimalkan proses ini maka dilakukan sebanyak 2 kali (remaserasi) dimana residu dari ekstrak pertama dimaserasi kembali. Pemilihan metode ekstraksi secara maserasi dalam penelitian ini didasarkan atas sensitivitas senyawa antioksidan terhadap suhu yang tinggi, dimana metode ekstraksi ini dilakukan tanpa pemanasan serta dilakukan dalam  suhu  ruang.Metode  ekstraksi  ini  dapat  menghindari  rusaknya  senyawa-senyawa  yang  bersifat  termolabil (Antolovich et al. , 2002).
Pemilihan larutan penyari etanol 70% karena etanol 70% mempunyai sifat selektif, dapat bercampur dengan air dengan  segala  perbandingan,  ekonomis,  mampu  mengekstrak  sebagian  besar  senyawa  kimia  yang  terkandung  dalam simplisia.Etanol  70%  digunakan  sebagai  penyari  maserasi  didasarkan  atas  penyarian  yang  optimal  sehingga  dapat menarik banyak senyawa aktif yang ada dalam simplisia (Pratiwi et al , 2006). Ekstrak etanol kulit bawang putih kemudian dipekatkan  menggunakan  rotavapor,  dari  proses  ekstraksi  diperoleh  ekstrak  etanol  kental  sebanyak  79,162  g  dengan persentase rendemennya sebesar 7,9162 % yang dihitung  terhadap bobot kulit bawang putih ( Allium sativum L . ) yang telah dikeringkan.
Tabel 1. Hasil Rendemen Ekstraksi kulit bawang putih ( Allium sativum L . ) Bahan Uji Bobot Simplisia (g) Bobot Ekstrak (g) Rendemen (%) Ekstrak Etanol 1000 79,16 7,91 Fraksi Polar 30 25,35 84,50 Fraksi Non Polar 30 1,67 5,56
Ekstrak kental yang didapatkan selanjutnya di fraksinasi dengan menggunakan metode ekstraksi cair-cair. Metode ini sering disebut juga sebagai partisi cair-cair atau juga disebut metode corong pisah. Prinsip dari metode ekstraksi ini yaitu  berdasarkan  kelarutan  senyawa  dalam  dua  pelarut  yang  tidak  saling  bercampur  dan  dapat  dipisahkan  keduanya dalam  corong  pisah  sesuai  massa  jenis  masing-masing  pelarut.  Ekstraksi  dengan  cara  ini  dilakukan  agar  didapatkan senyawa  yang  lebih  murni  berdasarkan  selektifitas  masing-masing  pelarut  dalam  memisahkan  kelompok  kandungan kimia yang terdapat dalam ekstrak.
Sebanyak 10 gram ekstrak di ekstraksi cair-cair. Pada tabel 1 dapat dilihat hasil fraksinasi ekstrak kulit bawang putih ( Allium sativum L . ) yang paling banyak adalah fraksi etanol:air dengan persen rendemen 84,5% b/b kemudian dan fraksi n-Heksan dengan persen rendemennya sebesar 5,566% b/b. Hasil tersebut menunjukkan bahwa komponen senyawa kulit bawang putih tertarik dalam pelarut polar dan non polar.
Setelah  didapatkan  fraksi  n-Heksan  dan  fraksi  etanol  kulit  bawang  putih,  dilakukan  skrining  fitokimia  secara kualitatif  untuk  mengidentifikasi  komponen  senyawa  kimia  yang  terkandung  didalamnya  yaitu  alkaloid,  flavonoid, saponin,  steroid,  dan  tanin.Pada  pengujian  senyawa  Flavonoid  diuji  keberadaannya  menggunakan Mg  dan  HCl  pekat, Penambahan Mg dan HCl, dilakukan pada masing-masing fraksi kulit bawang putih, dan terbentuk warna merah, hal ini menunjukkan  bahwa  sampel  tersebut  mengandung  flavonoid.  Senyawa flavonoid  akan  tereduksi  dengan  Mg  dan  HCl sehingga menghasilkan warna merah, kuning atau jingga. Hasil skring fitokimia dapat dilihat pada tabel 2.
Tabel 2. Hasil Skrining Fitokimia kulit bawang putih ( Allium sativum L.) Golongan Senyawa Sampel Fraksi Etanol Fraksi n-Heksan Flavonoid + + Alkaloid + + Saponin + + Tanin + +
Pada tabel  2 hasil skrining fitokimia fraksi  etanol dan n heksan mengandung  positif  senyawa kimia  yang sama yaitu flavonoid, alkaloid, saponin dan tannin.
Pada senyawa flavonoid di uji dengan menggunakan Mg dan HCl pekat dilakukan pada masing masing fraksi dan di dapatkan pada fraksi metanol terbentuk warna kuning pekat dan pada fraksi n-heksan tidak terjadi perubahan warna jadi  fraksi  metanol  menunjukan  positif  adanya  senyawa  flavonoid.  Senyawa  flavonoid  teridentifikasi  dengan menambahkan HCl dan di tambahkan serbuk mg sehingga menghasilkan warna jingga, merah dan kuning maka fraksi tersebut positif mengandung flavonoid (Yulia et al ., 2023). Flavonoid adalah kelompok senyawa fenolik yang umumnya ditemukan  dalam  tumbuhan  dan  memiliki  sifat  antioksidan  yang  kuat.  Identifikasi  flavonoid  adalah  langkah  penting

## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online)
DOI 10.47065/jharma.v5i2.4166
dalam  penelitian  kimia  organik  dan  farmasi  untuk  mengevaluasi  potensi  senyawa  tersebut  dalam  aplikasi  medis  dan nutrisi.
Alkaloid merupakan senyawa yang mengandung atom nitrogen dan bersifat basa sehingga untuk mengekstraknya dibutuhkan penambahan asam klorida.Penambahan asam klorida bertujuan untuk mengekstrak alkaloid yang bersifat basa dengan  menggunakan  larutan.  Hasil  yang  didapat  fraksi  etanol  dan  fraksi  n-heksan  positif  pada  uji  senyawa  alkaloid ditandai dengan terbentuknya endapan merah. Alkaloid adalah kelompok senyawa kimia yang ditemukan secara alami dalam tumbuhan, sering kali memiliki aktivitas farmakologis yang kuat pada manusia dan hewan. Karakteristik utama dari alkaloid adalah keberadaan nitrogen heterosiklik dalam strukturnya, yang memberikan sifat-sifat kimia dan biologis tertentu.
Senyawa  saponin  merupakan  senyawa  aktif  permukaan  yang  mudah  terdeteksi  melalui  kemampuannya  dalam membentuk  busa.  Komponen  ikatan  glikosida  yang  terdapat  didalam  saponin  menyebabkan  senyawa  ini  cenderung bersifat polar.Keberadaan saponin positif karena sampel yang diuji membentuk busa.Berdasarkan hasil skrining fitokimia menunjukkan semua fraksi kulit bawang putih mengandung saponin. Busa yang dihasilkan pada pengujian ini bersifat stabil,busa  yang  timbul  disebabkan  karena  senyawa  saponin  mengandung  senyawa  yang  sebagian  larut  dalam  air (hidrofilik)  dan  senyawa  yang  larut  dalam  pelarut  nonpolar  (hidrofobik)  sebagai  surfaktan  yang  dapat  menurunkan tegangan permukaan. Saat digojok, gugus hidrofil akan berikatan dengan air sedangkan gugus hidrofob akan berikatan dengan udara sehingga membentuk buih yang memliki aktivitas antioksidan. Saponin memiliki struktur dasar steroid atau triterpenoid, yang umumnya terdiri dari gugus hidrofobik (non-polar) yang besar (rings A, B, C, D, dan E pada steroid atau kelompok terpenoid pada triterpenoid) dan gugus hidrofilik (polar) yang lebih kecil seperti gula (glukosa, galaktosa, atau pentosa). Struktur ini memungkinkan saponin untuk memiliki sifat amfipatik, yang artinya mereka dapat berinteraksi dengan baik baik dengan zat yang larut dalam air dan dengan lemak.
Senyawa  tanin  dalam  mengidentifikasikan  menggunakan  FeCl 3 dan  akan  menghasilkan  warna  hijau  kehitaman (Yulia et al ., 2023) masing-masing fraksi didapatkan pada fraksi metanol terjadi perubahan warna hijau kehitaman dan pada  fraksi  n-heksan  tidak  terjadi  perubahan  warna  jadi  fraksi  metanol  positif  mengandung  senyawa  tanin.  Tanin tergolong dalam senyawa polifenolik, yang berarti mereka memiliki beberapa unit fenol dalam struktur mereka. Tanin dapat diklasifikasikan menjadi dua kelompok utama: tanin hidrolisis dan tanin kondensasi. Tanin hidrolisis terdiri dari unit-unit gula yang terikat dengan cincin fenol, sementara tanin kondensasi terdiri dari cincin fenol yang terhubung satu sama lain tanpa unit gula.
Aktivitas antioksidan merupakan kemampuan suatu senyawa atau ekstrak untuk melawan atau menghambat reaksi oksidasi yang terjadi dalam tubuh atau dalam sistem tertentu. Reaksi oksidasi ini dapat menyebabkan terbentuknya radikal bebas  yang  dapat  merusak  sel  dan  jaringan  tubuh.  Pengukuran  aktivitas  antioksidan  sering  kali  dilakukan  dengan mengukur kemampuan suatu  senyawa atau ekstrak untuk menghambat reaksi  oksidasi, dan hasilnya sering  dinyatakan dalam bentuk  persen penghambatan.  Dalam uji aktivitas antioksidan, sering  digunakan metode seperti uji DPPH (1,1- diphenyl-2-picrylhydrazyl)  atau  uji  ABTS  (2,2'-azinobis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic  acid))  untuk  mengukur seberapa  efektif  senyawa  atau  ekstrak  tersebut  dalam  menangkap  radikal  bebas.  Hasil  dari  pengujian  ini  kemudian diinterpretasikan  sebagai  persentase  penghambatan  reaksi  oksidasi  yang  terjadi,  dimana  semakin  tinggi  persentase penghambatan  menunjukkan  semakin  baiknya  aktivitas  antioksidan  dari  senyawa  atau  ekstrak  tersebut.  Tapi,  pada penelitian  ini,  aktivitas  antioksidannya  menggunakan  metode  FRAP (Ferric  Reducing  Antioxidant  Power) terhadap ekstrak  dan  fraksi  kulit  bawang  putih  ( Allium  sativum L . ).  Prinsip  pengujian  dari  metode  ini  yaitu  untuk  mengetahui kapasitas  antioksidan  dari  suatu  sampel  berdasarkan  metode reduksi  ion  besi.Senyawa  yang  mempunyai  daya reduksi kemungkinan dapat berperan sebagai antioksidan karena dapat menstabilkan radikal dengan mendonorkan elektron atau atom hidrogen sehingga senyawa radikal berubah menjadi stabil. Semakin tinggi nilai FRAP suatu sampel maka semakin besar aktivitas antioksidannya karena nilai FRAP didasarkan pada reduksi ion ferri (Fe3+) menjadi ion ferro (Fe2+) yang mana senyawa antioksidan merupakan bahan pereduksi. Kemampuan larutan sampel dalam fungsinya sebagai antioksidan dapat dilihat melalui mekanisme reaksi pengubahan kompleks TPTZ-Fe3+ menjadi TPTZ-Fe2+ pada suasana asam atau pH rendah (Antolovich et al. , 2002).
Metode  FRAP  memiliki  kelebihan  diantara  uji  aktivitas  antioksidan  DPPH.  Diantaranya  FRAP  mengukur kemampuan  senyawa  untuk  mengurangi  Fe 3+ (besi  dalam  keadaan  oksidasi  tinggi)  menjadi  Fe 2+ (besi  dalam  keadaan oksidasi rendah), sementara DPPH mengukur kemampuan senyawa untuk menangkap radikal bebas DPPH yang berwarna ungu menjadi DPPH yang berwarna kuning terang. Selain itu, FRAP cenderung memberikan hasil yang lebih konsisten dan sensitif dalam mengukur aktivitas antioksidan, terutama ketika menghadapi senyawa atau ekstrak dengan aktivitas antioksidan  yang  tinggi.  Ini  karena  FRAP  langsung  mengukur  kemampuan  senyawa  untuk  mereduksi  ion  besi,  yang merupakan aspek penting dari mekanisme antioksidan dalam tubuh. Hasil dari FRAP dapat langsung dikaitkan dengan kapasitas antioksidan yang sebenarnya dari senyawa atau ekstrak dalam konteks biologis, karena metode ini berhubungan langsung  dengan  proses  reduksi  yang  terjadi  dalam  tubuh.  Sementara  itu,  uji  DPPH  memberikan  informasi  mengenai kemampuan senyawa untuk menangkap radikal bebas tertentu, yang dapat memberikan gambaran awal tentang aktivitas antioksidan tetapi tidak selalu merefleksikan aktivitas antioksidan secara keseluruhan.
Pada penelitian ini dilakukan pengujian FRAP berdasarkan pada metode Benzie dan Strain (1996) dengan sedikit modifikasi  dimana  digunakan  larutan  FeCl 3 dalam  larutan  asam  asetat  0,3M  sebagai  penghasil  ion  Fe 3+ yang  terikat kompleks dengan ligan penstabil yaitu 2,4,6-tripyridyl-striazine (TPTZ) membentuk (Fe(II) (TPTZ)2) 3+ pada pH asam

## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online)
DOI 10.47065/jharma.v5i2.4166
yaitu, 3,6. Dalam metode ini kompleks (Fe(II) (TPTZ)2) 3+ akan direduksi  menjadi  kompleks (Fe(II)  (TPTZ)2) 2+ yang berwarna Pers’s Prussion Blue . Perubahan warna ini menandakan terjadinya reduksi ion Fe 3+ menjadi Fe 2+ yang dapat dimonitor secara visual  dan diukur serapannya pada spektrofotometer UV  –  Vis. Pembentukan warna Pers’s Prussion Blue akan menaikkan absorbansi sampel yang menunjukkan kenaikan daya reduksi. Besarnya daya reduksi suatu sampel menunjukkan  kemampuannya  sebagai  donor  elektron  dan  dapat  bereaksi  dengan  radikal  untuk  mengubahnya  menjadi stabil serta mengakhiri rantai radikal.
Hasil penelitian diperoleh panjang gelombang maksimum sebesar 595 nm dengan persamaan regresi linear kurva baku kuersetin yaitu y = -15,734 + 106,07 dengan nilai koefisien korelasi (r= 0,9776). Berdasarkan nilai tersebut dapat ditentukan daya reduksi sampel yang dapat dilihat pada tabel 3.
Tabel 3. Hasil Aktivitas Antioksidan ekstrak kulit bawang putih ( Allium sativum L . ) dengan Metode FRAP Sampel Konsentrasi (ppm) Absorbansi (ppm) %Inhibisi (%) IC50 (ppm) Kuarsetin 25 0,96 87,22
3,56 50 0,90 80,56 75 0,63 57,57 100 0,48 40,29 125 0,42 28,69 Fraksi Polar
25
0,17 28,73
1,52 50 0,05 69,38 75 0,05 79,85 100 0,03 89,41 125 0,01 94,56 Fraksi Non Polar 25 0,11 4,09 50 0,11 36,19 75 0,11 59,12 2,75 100 0,03 87,51 125 0,02 90,07
Uji  aktivitas  antioksidan  metode  FRAP  fraksi  berdasarkan  yang  dimodifikasi.  Pembacaan  serapan  FRAP dilakukan dengan membuat 5 seri konsentrasi membuat 5 seri konsentrasi 25, 50, 75, 100, 125 ppm pada fraksi etanol 25, 50, 75, 100, 125 ppm pada fraksi polar dan non polar serta kuarsetin (sebagai control positif) 25, 50, 75, 100, 125 ppm yang ditambahkan dengan 2 mL larutan pereaksi FRAP dan akuades sampai 5 mL. Dilakukan inkubasi selama 30 menit dan  dibaca  pada  panjang  gelombang  596,2  nm.  Larutan  FRAP  yang  terdiri  dari  10  mmol/mL  TPTZ  (2,4,5  tripyridil- striazine), 300 mmol/mL buffer asetat pH 3,6 dan 20 mmol/mL FeCl 3 .6H 2 O, FeSO 4 .7H2O sebagai larutan standar. Hasil aktivitas  antioksidan  fraksi  etanol  dan  fraksi  n-heksan  kulit  bawang  putih  ( Allium  sativum L . )  dibandingkan  dengan aktivitas  antioksidan  kuarsetin.  Dari  pengukuran  dengan  spektrofotometer  UV-Vis  diperoleh  data  abs  kontrol  (nilai absorbansi yang berisi larutan FeSO 4 .7H 2 O berbagai konsentrasi, 2 mL larutan FRAP dan akuades) dan abs sampel ((nilai absorbansi sampel berbagai konsentrasi dikurangi abs blanko (FRAP dan akuades).
Dapat  dilihat  dari  table  3  hasil  IC 50 menggunakan  metode  FRAP,berdasarkan  hasil  analisis  secara  deskriptif menunjukan bahwa sampel ekstrak dan fraksi kulit bawang putih memiliki aktivitas antioksidan. Hasil yang didapatkan yaitu  Fraksi  polar  (etanol:air)  adalah  1,5238  ppm  dan  fraksi  non  polar  (n-heksan)  adalah  2,7580.  Sehingga  dapat disimpulka  bahwa  fraksi  polar  (etanol:air)  dan  fraksi  non  polar  (n-heksan)  memiliki  aktivitas  antioksidan  kuat.  yang didapat fraksi polar ektrak kulit bawang putih memiliki aktivitas antioksidan kuat yang dilihat dari nilai IC50 < 50 ppm dan fraksi non polar juga memiliki antivitas aktivitas antioksidan kuat yang dilihat dari nilai IC 50 < 50 ppm. Nilai IC 50 kurang dari 50 ppm mempunyai aktivitas antioksidan tergolong kuat, 50-100 ppm sedang, 150- 200 ppm lemah dan lebih dari 200 ppm sangat lemah.
Hasil yang diperoleh menunjukkan bahwa semua ekstrak memiliki aktivitas antioksidan baik  dari pelarut  polar maupun  non  polar.  Perbedaan  aktivitas  yang  diperoleh  pada  setiap  ekstrak  tersebut  kemungkinan  disebabkan  adanya perbedaan  kandungan  dan  jumlah  senyawa  aktif  yang  terdapat  dalam  ekstrak,  sehingga  aktivitas  antioksidan  yang diperoleh juga berbeda. Ekstrak etanol mempunyai aktivitas antioksidan yang lebih tinggi dibandingkan dengan ekstrak n-heksan  dan  etanol:air,  hal  ini  diduga  karena  adanya  kandungan  senyawa  aktif  dari  beberapa  golongan  senyawa antioksidan  yang  bersifat  non  polar  lebih  banyak dibandingkan  yang  bersifat  polar  yang  terdapat  dalam  kulit  bawang putih.

## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online)
DOI 10.47065/jharma.v5i2.4166

## 4. KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  dilakukan,  dapat  disimpulkan  bahwa  fraksi  polar  dan  fraksi  non  polar  kulit bawang putih ( Allium Sativum L.)  memiliki aktivitas antioksidan sangat  kuat  yaitu  nilai IC50 fraksi  polar adalah 1,52 ppm dan fraksi non polar 2,75.

## REFERENCES
Agus, S. et al. (2019) Ekstraksi dan Penentuan Aktivitas Antioksidan Ekstrak Ubi Jalar Ungu (Ipomoea batatas L.) , al Kimiya: Jurnal Ilmu Kimia dan Terapan . Available at: https://journal.uinsgd.ac.id/index.php/ak/article/view/6039/4079 (Accessed: 6 November 2023).
Antolovich,  M. et  al. (2002)  ‘Methods  for  testing  antioxidant  activity’, Analyst ,  127(1),  pp.  183–198.  Available  at: https://doi.org/10.1039/B009171P.
Asdin Rheytno Wabula, Seniwati, Harti Widiastuti. (2019). Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Buah Merah (Pandanus conoideus Lam.) dengan Metode Ferric Reducing Antioxidant Power (FRAP) . Universitas Muslim Indonesia
Boora, F., Chirisa, E., dan Mukanganyama, S. (2004). Evaluation of Nitrite Radical Scavenging Properties of Selected Zimbabwean Plant Extracts and Their Phytoconstituents, Hindawi Publishing Corporation, Zimbabwe, pp. 1-7.
Ditjen POM. (2000), Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat, Cetakan Pertama . Departemen Kesehatan RI. Jakarta Gandjar, I.G., dan Rohman, A. (2007), Kimia Farmasi Analisis , Pustaka Pelajar. Yogyakarta Hodzic, Z. et al. (2019) ‘The influence of total phenols content on antioxidant capacity in the whole grain extracts’, European Journal of Scientific Research , 28(3), pp. 471–477.
Istiana  (2002)  ‘AKTIVITAS  ANTIOKSIDAN  FRAKSI  LARUT  ETIL  ASETAT  DAN  FRAKSI  TAK  LARUT  ETIL  ASETAT EKSTRAK ETANOLIK KULIT UMBI BAWANG PUTIH (Allium sativum L.)’, Unissula Instutional Repository [Preprint]. Available at: http://repository.unissula.ac.id/10012/.
Kasminah. (2019). Pengaruh Pelarut Non Organik Pada Ekstraksi Biji-Bijian . Universitas Airlangga,
Latu, S. and Suleman, A.W. (2023) ‘Penentuan Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Daun Klebet (Ficus superba Miq) dengan Metode DPPH (1,1-difenil-2-pikrihidrazil)’, Jurnal Ilmiah Jophus : Journal of Pharmacy UMUS , 4(02), pp. 23–30. Najib, A. (2018), Ekstraksi Senyawa Bahan Alam . Deepublish, Yogyakarta. Pardede  Christina.  (2018). Ekstraksi  Tanin  Dari  Kulit  Bawang  Putih  Dengan  Bantuan  Microwave  Menggunakan  Pelarut  Etanol. Medan: Universitas Sumatera Utara
Permatasari, D. A.  (2020). Aktivitas Antibakteri Ekstrak Dan Fraksi Daun Jambu Mete (Anacardium occidentale Linn.) Terhadap Propionibakterium acnes Menggunakan Metode Difui Sumuran . Universitas Islam Negeri Maulana MalikIbrahim: Malang . Pradnya Eleonora Nirmala Citta. (2019). Eksplorasi Senyawa Antioksidan Pada Molusk . Universitas Katholik Soegijapranata Prasonto Djuned, Eriska Riyanti, Meirina Gartika. (2019). Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Bawang Putih (Allium Sativum). Rabeta, M.S. and Nur Faraniza, R. (2003) ‘Total phenolic content and ferric reducing antioxidant power of the leaves and fruits of garcinia atrovirdis and cynometra cauliflora’, International Food Research Journal , 20(4), pp. 1691–1696.
Sayuti, K. and Yenrina, R. (2021) Antioksidan alami dan sintetik . Suleman,  A.W. et al. (2022)  ‘FORMULASI  DAN EVALUASI  STABILITAS  SEDIAAN  LIP  BALM  EKSTRAK  KULIT  BUAH NAGA  MERAH  (Hylocereus  polyrhizus)  DENGAN  PENAMBAHAN  MINYAK  ZAITUN  SEBAGAI  EMOLIEN  SERTA PENENTUAN NILAI SPF (Sun Protection Factor)’, Medical Sains : Jurnal Ilmiah Kefarmasian , 7(4), pp. 899–906. Wabula, R.A., Dali, S. and Widiastuti, H. (2019) ‘Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Buah Merah (Pandanus conoideus Lam.) dengan  Metode  FRAP’, Window  of  Health :  Jurnal  Kesehatan , 2(4), pp. 329–337. Available at: https://doi.org/10.33368/woh.v0i0.203.
Wahdaningsih, S. et al. (2021) ‘AKTIVITAS PENANGKAP RADIKAL BEBAS DARI BATANG PAKIS (Alsophila glauca J. Sm) FREE RADICAL SCAVENGING ACTIVITY OF (Alsophila glauca J. Sm)’, Majalah Obat Tradisional , 16(3), p. 2011. Wijayanti,  R.  and  Rosyid,  A.  (2019)  ‘EFEK  EKSTRAK  KULIT  UMBI  BAWANG  PUTIH  (Allium  sativum  L.)  TERHADAP PENURUNAN  KADAR  GLUKOSA  DARAH  PADA  TIKUS  PUTIH  JANTAN  GALUR  WISTAR  YANG  DIINDUKSI ALOKSAN’, Jurnal Ilmu Farmasi dan Farmasi Klinik , 12(1), pp. 47–52. Available at:
https://publikasiilmiah.unwahas.ac.id/index.php/Farmasi/article/view/1402 (Accessed: 6 November 2023).