UJI PRA KLINIS TOLERANSI GLUKOSA EKSTRAK ETANOL  SERTA PENGUJIAN TOKSISITAS AKUT EKSTRAK ETANOL DARI PUGUN TANA ( Picria felterrae Lour.).
Imam Bagus Sumantri 1 , Sumadio Hadisahputra 1 , Dharma Lindarto 2 , Awaluddin Saragih 1 1 Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara, 2 Fakultas Kedokteran Universitas Sumatera Utara ibs2342@gmail.com

## ABSTRAK
Diabetes mellitus merupakan penyakit degeneratif yang memerlukan pengobatan yang intensif. Tanaman tradisional untuk  pengobatan diabetes  banyak dijumpai  di masyarakat dan telah  digunakan secara turun temurun. Pugun Tana ( Picria felterrae Lour.) merupakan tumbuhan khas yang digunakan oleh masyarakat Dairi untuk pengobatan diabetes. Data hasil penelitian efektifitas sebagai antidiabetes dari Pugun Tana belum banyak dilakukan. Penelitian ini dilakukan bertujuan untuk menguji keamanan dan  efektifitas  dari  Pugun  Tanan  sebagai  antidiabetes  sehingga  dapat  digunakan  sebagai  tanaman tradisional yang aman dan berkhasiat.
Penelitian ini dilakukan dengan  karakteristik simplisia daun (penentuan kadar air, penentuan kadar abu total dan tidak larut dalam asam, penentuan kadar sari larut etanol dan penentuan larutan kadar sari larut air). Ekstrak dibuat dalam crude extract dengan metode maserasi-perkolasi.
Uji  Toksisitas  secara  akut crude  extract daun  pugun  tana  tidak  menunjukkan  tanda-tanda keracunan dan kematian yang berarti sampai dosis 10.000 mg/kg bb. Crude extract pugun tana ( Picria felterrae Lour.)  dikategorikan  praktis  tidak  toksis  atau  toksisitas  ringan.  Namun,  data  indeks  organ menunjukkan  bahwa  ada  perbedaan  dari  organ  seperti  hati,  dan  perbedaan  ini  tidak  memberikan perbedaan yang  berarti dibandingkan dengan dosis lainnya.    Uji Toleransi glukosa dengan pemberian larutan  glukosa  dosis  5  g/kg  bb  menunjukkan  bahwa  pemberian  ekstrak  etanol  pugun  tana  dosis  50, 100  dan  200  mg/kg  BB  tersebut  menurunkan  kadar  gula  darah  tikus  yang  diberikan  glukosa  50%. Suspensi  ekstrak  pugun  tana  dosis  100  mg/kg  bb  memberikan  penurunan  kadar  gula  darah  hampir sama dengan  suspensi glibenklamid dosis 10 mg/kg bb dan kenaikan dosis ekstrak tidak memberikan efek penurunan kadar gula darah yang lebih baik.
Kata kunci:  tikus obesitas, toleransi glukosa, toksisitas akut, picria felterrae, pugun tana,

## PRE-CLINICAL TRIAL OF TOLERANCE GLUCOSE OF ETHANOLIC EXTRACT AND ACUTE TOXICITY
EFFECT TEST OF PUGUN TANA ( Picria felterrae Lour.) ETHANOLIC EXTRACT

## ABSTRACT
Diabetes mellitus is a degenerative disease that requires intensive treatment. Traditional plant treatments for diabetes are often found in public and has been used for generations. Pugun Tana (Picria felterrae  Lour.)  Is  a  typical  plant  used  by  the  Dairi  for  the  treatment  of  diabetes.  Research  data  as antidiabetic effectiveness of Pugun Tana has not been done. This research was conducted aiming to test the safety and effectiveness of antidiabetic Pugun empire as it can be used as a traditional plant that is safe and efficacious.
The  research  was  done  by  characteristic  simplicia  leaves  (the  determination  of  moisture content,ash content determination of total and insoluble in acids, determination of the ethanol-soluble extracts and determination of a solution of water-soluble levels). The extract is made in crude extract by maceration-percolation method.
Acute  toxicity  test  of  crude  extract  of  pugun  tana  leaves  showed  no  signs  of  poisoning  and significant deaths up to a dose of 10,000 mg / kg bb. Crude extract pugun tana (Picria felterrae Lour.) Is categorized  as  practically  non-toxic  or  mild  toxicity.  However,  organ  index  data  show  that  there  is  a difference from a liver-like organ, and this difference does not make a significant difference compared to other doses.
Glucose tolerance test with 5 g / kg bb glucose solution showed that ethanol extract of pugun tana  dose  50,  100  and  200  mg  /  kg  BW  lowered  blood  sugar  level  given  50%  glucose.  Suspension  of
panaun extract of 100 mg / kg bb gave a decrease in blood glucose level similar to the 10 mg / kg bw glibenclamide  suspension  and  the  increase  in  the  dose  of  extract  did  not  give  a  better  effect  of decreasing blood sugar levels.
Keywords:  Obese rast, tolerance glucose,acute  toxicity, picria felterrae, pugun tana,

## Pendahuluan
Diabetes  adalah  penyakit  kronik  yang terjadi dikarenakan pankreas tidak memproduksi cukup  insulin,  atau  tubuh  tidak  dapat  bekerja secara  efektif  menghasilkan  insulin.  Insufisiensi fungsi  insulin  dapat  disebabkan  oleh  gangguan atau  defisiensi  produksi  insulin  oleh  sel-sel  beta Langerhans  kelenjar  pankreas,  atau  disebabkan oleh  kurang  responsifnya  sel-sel  tubuh  terhadap insulin.  (Departemen  Kesehatan  RI,  2005; World Health Organization (WHO) , 2008). Hasil survei  WHO, Indonesia menempati urutan  ke-4  dengan  jumlah  penderita  diabetes terbesar di dunia setelah India, Cina dan Amerika Serikat.  Pravelensi  penderita  diabetes  setiap tahun  sebesar  8,6%  dari  total  penduduk, sehingga  tahun  2025  penderita  diabetes  di Indonesia diperkirakan meningkat 12,4 juta jiwa (Departemen  Kesehatan  RI,  2005).  Amerika sebagai  negara  maju  sendiri  ada  23,6  juta  atau 7,8%  penderita  diabetes  dari  populasi  warga amerika  dari  anak-anak  dan  orang  dewasa (Anonim a ,  2009;  National  Diabetes  Fact  Sheet, 2007).  Tahun  2008  di  dunia  diperkirakan  180 juta  orang  menderita  diabetes.  Jumlah  tersebut akan  dua  kali  lipatnya  pada  tahun  2030  sekitar 360  juta  diseluruh  dunia  ( World  Health Organization  (WHO) ,  2008).  Pada  tahun  2005, lebih  dari  1,1  juta  penderita  diabetes  meninggal dunia  (dari  data  lain  menyebutkan  bahwa kematian akibat diabetes mendekati 2,9 juta jiwa per tahun). Kematian ini 80% berasal dari negara berkembang  dan  miskin  dengan  umur  di  bawah 70  tahun  serta  55%  dari  kematian  diabetes  ini adalah  wanita.  ( World  Health  Organization (WHO), , 2008). Indonesia  merupakan  mega-senter  keragaman hayati  dunia,  dan  menduduki  urutan  terkaya kedua  di  dunia  setelah  Brazilia.  Jika  biota  laut ikut diperhitungkan, maka Indonesia menduduki urutan terkaya pertama di  dunia.  Sekitar 40.000 spesies tumbuhan, di mana 30.000 spesies hidup di  kepulauan  Indonesia.  Sekurang-kurangnya 9.600  spesies  tumbuhan  dari  30.000  spesies berkhasiat  sebagai  obat  dan  kurang  lebih  300 spesies  telah  digunakan  sebagai  bahan  obat tradisional  oleh  industri  obat  tradisional (Departemen  Kesehatan  RI,  2007).  Penggunaan sediaan  herbal  untuk  penyakit  degeneratif  terus
berkembang  dengan  pesat.  Salah  satu  penyakit degeneratif  yang  banyak  diteliti  yaitu  penyakit diabetes.  Penelitian  bahan  alam  yang  potensi sebagai antidiabetes seharusnya perlu dikembangkan dari hulu  ke  hilir.  Penelitian  obat herbal  yang  sudah  lama  dikenal  dan  digunakan secara turun temurun secara kearifan lokal (local wisdom)  perlu  ditingkatkan  dari  segi  keamanan dan  khasiat  sehingga  penggunaanya  lebih terjamin di masyarakat.
Masyarakat Tiga Lingga Kabupaten Dairi Propinsi  Sumatera  Utara  menggunakan  Pugun Tana  ( Pierce  fel-terrae )  yang  merupakan  salah satu  tumbuhan  berkhasiat  sebagai  antidiabetes. Secara  tradisional,  Masyarakat  mengunyah beberapa  lembar  daun  segar  Pugun  Tana  untuk menurunkan  kadar  gula  darah  (antidiabetes). Tumbuhan pugun tana ini merupakan salah satu tumbuhan kearifan lokal dimana penggunaannya sebagai  antidiabetes  masih  digunakan  di  daerah tersebut.  Dari  hasil  identifikasi  LIPI,  nama  latin dari  pugun  tana  adalah Picria  fel-terae Lour famili  Scrophulariaceae.  Nama  lain  dari  spesies ini  adalah Curanga  fel-terrae Merr.(Anonim b , 2009) dan Curanga amara Vahl (Anonim g , 2009). Di negara lain tumbuhan ini dikenal dengan nama hempedu tanah, gelumak susu, rumput kerak nasi (Malaysia),  sagai-uak  (Philippines),  kong  saden (Laos)  dan  thanh  (Vietnam)  (Anonim d ,  2009). Kandungan kimia dari Pugun Tana atau Picria fel- terrae Merr. adalah Glukosida pahit dan curangin (Anonim c ,  2009).  Secara  tradisional,  di  Maluku dan  Filipina,  cairan  dekoksi  dari  tanaman  ini dinggap  sebagai  obat  cacing  untuk  anak-anak, dan untuk mengobati kolik (mulas mendadak dan hebat)  dan  malaria.  Di  Indonesia,  tapel  daun dapat  menyembuhkan  gatal-gatal  dan  penyakit kulit  lainnya.  Infusa  dari  daun  bersama  dengan daun  kaki  kuda  digunakan  untuk  mengatasi batuk  danm  rasa  sesak  di  dada.  Maserasi  daun dengan  alkohol  dianggap  sebagai  tonik  (untuk menguatkan  badan  dan  meningkatkan  nafsu makan) (Anonim d , 2009). Berdasarkan dari penggunaan tradisional  tersebut  maka perlu  untuk dilakukan penelitian pembuktian khasiat daun Pugun  Tana terstandar  sebagai  penurun  kadar  gula  darah secara  praklinis  (toleransi  glukosa)  dengan pembanding Glibenklamid dosis 10 mg/kg bb dan menguji  keamanan  dengan  melakukan  Uji
Toksisitas akut.
Bahan dan Metode Penelitian  yang  dilakukan  meliputi pengumpulan  dan  pengolahan  simplisia  daun pugun  tana;  penentuan  standarisasi  simplisia yaitu  penentuan  kadar  air  (PKA),  penentuan kadar  abu  total  dan  kadar  abu  yang  tidak  larut dalam air, penentuan kadar sari larut etanol dan penentuan kadar sari larut air; pembuatan crude extract dengan  cara  perkolasi,  Uji  Toleransi Glukosa  (Kadar  gula  darah  (mg/dL))  dan;  Uji toksisitas  akut crude extract  (Kondisi  fisiologis dan  kematian  hewan);  Analisis  data  dilakukan dengan menggunakan Analisis Varian (Anava).
Alat-alat yang digunakan alat – alat gelas, laboratorium  (seperti  beaker  glass,  labu  takar, Erlenmeyer dan sebagainya), Blender (Panasonic),  neraca  Analitik  listrik  (Vibra), neraca  hewan  (Presica  Geniwigher,  GW-1500), Alat  PK-Air  (Azeotropi),  rotary  evaporator (Heidolph  vv-2000  dan  Boeco), Muffle  Furnace (Noberthem)  mortar  dan  stamper,  oral  sonde, spuit  (ukuran  1  ml  dan  3  ml),  kertas  saring, penangas air, Easy Touch GSU Test, animal rodent restrainer ,  Kandang  mencit  dan  tikus,  dan  kotak pengamatan transparan.
Bahan yang digunakan Daun Pugun Tana, Etanol  96%,  Metformin  (Sigma),  Glibenklamid (Sigma),  CMC-Na,  Aquadest,  Larutan  fisiologis NaCl  0,9%  (Otsuka),  toluen,  formalin  10%,  Strip test Easy Touch, D-Glukosa, dan bahan kimia lain.
Hewan yang digunakan dalam percobaan ini  adalah  mencit  putih  galur  swiss  dan  Tikus putih  galur  wistar    yang  diperoleh  dari  Pusat Penelitian dan Pengembangan Kesehatan (Puslitbangkes)  Bidang  Medis  dan  Farmasi Jakarta.  Uji  antidiabetes  dengan  metode  uji toleransi  glukosa  terhadap  hewan  obesitas.  Uji toksisitas  LD 50 dilakukan  dengan  menggunakan hewan  uji  mencit  jantan  dan  betina  berat  badan 25-30g  (Angelina  dkk,  2008;  Gad  C.  Shayne, 2002).  Hewan  dikondisikan  selama  lebih  kurang satu minggu di laboratorium farmakologi farmasi USU  dengan  diberi  makanan  pelet  T79-4  dan minuman  air  mineral  yang  sesuai.  Penelitian  ini menggunakan  Uji  pra  klinik  (dengan  hewan  uji) sehingga  pelaksanaannya  terlebih  dahulu  telah meminta  persetujuan  Komite  Etik  Penelitian Kesehatan dari Fakultas Kedokteran, Universitas Sumatera Utara
Penyediaan  Simplisia . Daun  Pugun Tana diperoleh dari Desa Tiga Lingga Kabupaten Dairi.  Daun  dikeringkan  di  dalam  lemari pengering  dengan  suhu  tidak  lebih  dari  40 0 C. Daun  dikeringkan  sampai  didapat  masa  yang
kering  dan  mudah  dihancurkan.  Simplisia dikarakterisasi  sesuai  dengan  Materia  Medika Indonesia edisi VI tahun 1995 dengan mengukur kadar air (PKA), kadar abu total dan larut dalam asam, serta kadar sari larut dalam air dan etanol (Depkes RI, 1995).
Pembuatan  Crude  Extract  Etanol . Ekstrak  etanol  dibuat  dengan  melakukan ekstraksi metode perkolasi dengan Pelarut Etanol 96%.    Serbuk  simplisia  dimasukkan  ke  dalam bejana  bertutup  dan  dibasahi  dengan  sejumlah cairan  penyari  etanol,  dimaserasi  selama  3  jam. Massa dipindahkan sedikit demi sedikit ke dalam perkolator,  kemudian  cairan  penyari  dituangkan secukupnya dan di atas simplisia masih terdapat selapis  cairan  penyari,  perkolator  ditutup  dan dibiarkan  selama  24  jam.  Cairan  dibiarkan menetes  dengan  kecepatan  1  ml  tiap  menit, cairan  penyari  ditambahkan  berulang-ulang sehingga selalu terdapat selapis cairan penyari di atas  simplisia.  Perkolat  diuapkan  menggunakan alat  penguap  vakum  putar  hingga  diperoleh ekstrak  kental  (Sakulpanich,  2008; United  State Pharmacopia (USP) , 2009). Suspensi CMC-Na 1% . Sebanyak 500 mg karboksil  metil  selulosa  natrium  (CMC-Na) dikembangkan  dengan  10  ml  air  panas  di  dalam lumpang,  lalu  digerus  sampai  homogen.  Dituang ke  dalam  labu  tentukur  50  ml,  ditambah  air suling sampai 50 ml.
Suspensi  Crude  Extract  Pugun  Tana . Suspensi Crude  Extract Daun  Pugun  Tana  dibuat dalam  larutan  suspensi  karboksil  metil  selulosa natrium  (CMC-Na)  konsentrasi  1%.  Pengujian antidiabetes uji toleransi glukosa dibuat dalam 3 konsentrasi  yaitu  0,5%;1%  dan  2%.  Ditimbang 125 mg (0,5%); 250 mg (1%) dan 500 mg (2%) crude  extract dilarutkan  dalam  suspensi konsentrasi CMC-Na 1%  secara perlahan sampai 25  ml.  Pengujian  antidiabetes  uji  induksi diabetogen  aloksan  dibuat crude  extract konsentrasi  1%.  Pengujian  keamanan  (toksisitas akut)  dibuat  konsentrasi crude  extract dalam konsentrasi  berbeda  untuk  dosis  100;  316,2; 1.000; 3162; 10.000 mg/kg bb (Dosis pemberian 1mL/100g berat badan (bb) hewan uji tikus, dan maksimum  5%  berat  badan  hewan  uji  mencit putih) (Gad, 2002; Derelanko, 2000).
Suspensi Obat Pembanding
Glibenklamid . Serbuk  glibenklamid  dari  Sigma dibuat  dalam  larutan  suspensi  karboksil  metil selulosa  ntrium  (CMC-Na)  konsentrasi  1%. Konsentrasi glibenklamid dibuat dalam konsentrasi 0,05% dengan menimbang 0,050 mg glibenklamid  dilarutkan  dalam  suspensi  CMC-Na
1%  secara  perlahan-lahan  didalam  lumpang  dan dimasukkan ke dalam labu  tentukur sampai 100 ml  (Dosis  pemberian  10  mg/kg  bb  hewan  uji) (Goverdhan, 2008).
Larutan  Glukosa  50%. Larutan  D- Glukosa  50  gram  dibuat  dalam  larutan  aquadest 100 ml. Pemberian dosis dilakukan dengan dosis 5 g/kg bb hewan uji.
Pengujian  Antidiabetes  (Toleransi Glukosa) . Hewan  uji  tikus  putih  galur  wistar dikondisikan  dalam  kandang  selama  1  minggu. Makanan  hewan  diberikan  dengan  lemak  tinggi dan  gula  tinggi.  Selama  pemeliharaan  hewan diberikan makanan pelet T79-4. Makanan khusus dibuat dengan komposisi modifikasi yaitu: Lemak hewani kalengan Orchid Butter 20%, kuning telur 20%, Glukosa 10%, dan Pelet T94-1 hingga 100% (Shafrir Eleazar, 2007).
Tikus  obersitas  yang  telah  diberikan makanan  selama  1-2  minggu  dipuasakan  selama 18  jam.  Kemudian  berat  badan  ditimbang  dan diukur kadar gula darah puasa. Diberikan larutan glukosa  dosis 5  g/kg BB secara peroral. Setelah 30  menit  ditentukan  kadar  gula  darah  dengan alat Easy touch .
Kemudian masing – masing tikus diberi: Kelompok 1 :    Suspensi  CMC  1  %  dosis  1 % bb (peroral) Kelompok 2 : Suspensi glibenklamid dosis 10 mg/kg bb (peroral). Kelompok 3 : Suspensi Crude Extract Daun Pugun  Tana  dosis  50;  100 dan 200 mg/kg bb (peroral). Kelompok 4 : Suspensi Crude Extract Daun Pugun  Tana  dosis  50;  100 dan 200 mg/kg bb (peroral). Kelompok 5 : Suspensi Crude Extract Daun Pugun  Tana  dosis  50;  100 dan 200 mg/kg bb
(peroral).
Pengukuran  kadar  gula  darah  dilakukan pada  selang  waktu  30,  60,  90,  dan  120  menit. Pengukuran  kadar  gula  darah  dilakukan  dengan menggunakan  alat easy  touch GCU  (Adnyana  I. Ketut, 2004; Etuk, 2010).
Uji  Toksisitas  Akut  (LD-50) . Hewan  uji jantan  dan  betina  (masing-masing  5  ekor) dikondisikan  selama  1  minggu  dan  dipuasakan sepanjang  malam.  Pada  hari  percobaan,  hewan ditimbang dan ditandai. Dihitung dosis hewan uji dengan  dosis  terendah  sampai  dosis  tinggi  (4 rasio dosis tertentu) dan diberikan dosis tunggal secara oral (Zaini, 2005). Diamati hewan uji pada 4  jam  pertama,  24  jam  kemudian.  Pengamatan
dilanjutkan  pada  hari-hari  berikutnya  selama  7 hari  pada  waktu  yang  sama.  Pengamatan  yang dilakukan  meliputi  berat  badan,  keadaan fisiologis, reaksi lain seperti : kejang, dan jumlah kematian  (Gad,  2007;  Zaini,  2005;  Angelina, 2008). Dosis  yang  diberikan  dalam  penelitian dalam  5  dosis  dengan  kelompok  I  dosis percobaan  100  mg/kg  bb  (log  2)  dan pengelompokan hewan uji dilakukan secara acak (random)  dengan  ditambah  4  kelompok  untuk empat  peringkat  dosis  316,2;1.000;3.162  dan 10.000 mg/kg bb (log 2,5; log 3; log 3,5; dan log 4)(Gad, 2007). Jika terjadi kematian, maka jumlah kematian  hewan  dan  dicari  dosis  LD-50  dengan rumus :
Untuk LD-50:
m = Log LD-50 a = Logaritma dosis terendah yang masih menyebabkan jumlah kematian 100% tiap kelompok b = Beda logaritma dosis berurutan pi = Jumlah hewan yang mati menerima dosis i dibagi dengan jumlah seluruh yang menerima dosis i. (Depkes RI, 1969) Pada  hari  terakhir  hewan  uji  dibedah  dan ditimbang organ-organ pentingnya yaitu jantung, hati, dan ginjal (Angelina dkk, 2008).
Analisa  Data. Rancangan  penelitian yang  digunakan  pada  penelitian  ini  adalah rancangan  acak  lengkap  dengan  pengujian menggunakan software SPSS versi 15. Data hasil penelitian yaitu % kadar gula darah (% KGD) dari Uji  tolerasi  glukosa,  dan  data  %  indeks  organ hewan pada uji toksisitas akut.

## Hasil Dan Pembahasan
Hasil  identifikasi  yang  dilakukan  oleh Pusat  Penelitian  Biologi,  Lembaga  Ilmu Pengetahuan  Indonesia  (LIPI)  Bogor,  sampel tumbuhan  adalah Picria  fel-terrae Lour.  famili Scrophulariaceae.  Hasil  Standarisasi  tanaman yang dilakukan pada simplisia daun Pugun  Tana ( Picria  felterrae Lour.)  diperoleh    data  sebagai berikut:
a. Persentase Berat Kering Simplisia Berat  basah  dari  Daun  Segar  Pugun  Tana ( Picria felterrae Lour.) sebanyak 5850 gram, setelah  pengeringan  diperoleh  daun  kering (simplisia  kering)  sebanyak  1700  gram. Persentase  berat  kering  simplisia  adalah 29,06%  dari  berat  basah. Crude  ekstrak
m = a-b (∑ pi-0,5)
etanol yang didapat sebanyak 34,13%.
b. Penentuan Kadar Air (PKA) Kadar  air  dengan  metode  Azeotropi (Destilasi  Toluena)  dari  serbuk  simplisia daun  yaitu  9,65%.  Kadar  air  dari  simplisia masih  memenuhi  persyaratan  Materia Medika  Indonesia  bahwa  kadar  air  dari suatu  simplisia  tidak  boleh  lebih  dari  10% (Ditjen POM RI, 1995; WHO, 1998; 2011).
c. Penentuan Kadar abu total Kadar  abu  total  dengan  melakukan peleburan pada suhu tinggi (600 0 C) didapat hasil yaitu 7,34% dan kadar abu tidak larut dalam asam sebesar 0,98%.
d. Penentuan Kadar Sari kadar sari larut dalam air dan kadar sari larut dalam etanol. Kadar Sari kadar sari larut dalam air didapat hasil  21,02%  dan  kadar  sari  larut  dalam etanol 17,14%.
Gambar 1. Simplisia tumbuhan pugun tana Uji Toksisitas Akut (LD-50) Pengamatan Fisiologi
Dari  hasil  pengamatan  secara  fisiologis, kondisi  mencit dari  dosis log 2  (100 mg/kg  BB), log 2,5  (316  mg/kg  BB) dan  log  3  (1.000  mg/kg BB)  tidak  menunjukkan  perubahan  fisiologis yang  berarti  secara  visual  (hewan  masih bergerak normal dan lincah tanpa ada perubahan dari  nafas,  tertidur,  reaktif  atau  terjadinya kejang). Namun, pada dosis log 3,5 (3162 mg/kg BB)  dan  dosis  log  4  (10.000  mg/kg  BB)  terjadi
ada  perubahan  fisiologis  yaitu  gerak  lambat  dan kurangnya  reaktif  (hanya  pada  1-4  jam pengamatan),  namun  kondisi  hewan  tidak menunjukkan  perubahan  yang  cukup  berarti (tanda-tanda  toksik  lain  seperti  tertidur,  reaktif, gerak lambat sampai kejang).

## Pengamatan Indeks Organ Hewan
Pemberian  dosis  tunggal  oral  ekstrak pada  dosis  100,  316,2  ,  1000  ,  3162  dan  10.000 mg/kg  bb  pada  tabel  analisis  varian  (anava) memiliki perbedaan pada organ hati dan jantung dengan  nilai  signifikansi  0,005  pada  organ jantung  jantan;  0,000  pada  organ  hati  jantan; 0,000 pada organ jantung betina dan  0,001 pada organ hati betina.
Pada  organ  ginjal  tidak  ada  perbedaan yang  bermakna  dari  kelima  perlakuan  dosis sehingga  ekstrak  tidak  mempengaruhi  proses ekskresi ginjal hewan uji yang betina dan jantan. Uji lanjutan ( post hoc ) duncan dapat dilihat dosis perbedaan  pada  masing  organ  dimana  pada organ hati jantan ada perbedaan pada dosis 3.162 mg/kg  bb  (5,017)  berbeda  dengan  dosis  1000 (5,537);  316,2  (5,613);  10.000  (5,967);  dan  100 (6,2226)  mg/kg  bb.  Organ  hati  betina  terlihat adanya  perbedaan  pada  dosis  1.000  dan  10.000 mg/kg  bb  tidak  berbeda  nyata  dengan  dosis 316,2;  3.162  dan  100  mg/kg  bb.  Perbedaan  ini terlihat  tidak  menunjukkan  pada  kenaikan  dosis memberikan kenaikan pada indeks organ hewan sehingga  efek  ekstrak  terhadap  hati  tidak  bisa ditentukan.
Uji Toleransi Glukosa Uji Toleransi Glukosa Crude Extract
Dari  Gambar    2    dapat  dilihat  bahwa pemberian  ekstrak  etanol  pugun  tana  dosis  50, 100  dan  200  mg/kg  BB  tersebut  menurunkan kadar  gula  darah  tikus  yang  diberikan  glukosa 50%.  Suspensi  ekstrak  pugun  tana  dosis  100 mg/kg  bb  memberikan  penurunan  kadar  gula darah  hampir  sama  dengan    suspensi glibenklamid  dosis  10  mg/kg  bb.  Dari  gambar grafik  pada  gambar  4.1.  bahwa  dosis  dinaikkan pada  pemberian  ekstrak  tidak  memberikan  efek penurunan kadar gula darah yang lebih baik.
Tabel 1. Hasil pengukuran kadar gula darah (KGD)
Perlakuan KGD Normal Kadar Gula Darah (KGD) mg/dL 30 menit 60 menit 90 menit 120 menit Kontrol (CMC 1 %) 120,33± 7,37 240,17± 38,23 249,17± 42,74 202± 46,37 152,5± 24 Glibenklamid Dosis 10 mg/kg BB 100,25± 12,89 226,5± 28,58 182± 30,26 146,5± 33,79 87,92± 17,77 Ekstrak Etanol Pugun Tana Dosis 50 mg/kg BB 131,75± 18,09 236,83± 28,36 171,33± 32,57 137,92± 12,04 119,17± 3,49 Ekstrak Etanol Pugun Tana Dosis 100 mg/kg BB 150,67± 27,28 201,67± 6,31 139,75± 12,57 129,17± 5,84 104,08± 9,09 Ekstrak Etanol Pugun Tana Dosis 200 mg/kg BB 137,08 ± 22,86 219± 45,55 168,33± 16,07 210,58± 15,13 119,67± 23,75
Gambar 2. Grafik Penurunan Kadar Gula Darah Ekstrak Etanol
Hasil  pengujian  statistik  terhadap ekstrak etanol pugun tana dosis 50, 100, dan 200 mg/kg BB menunjukkan adanya perbedaan (Nilai Sig.  0.000)  pada  menit  60,  90  dan  120  (P<0,2). Hasil  analisa  statistik  uji  beda  rata-rata  duncan menunjukkan bahwa kadar gula darah tikus pada menit  ke-60  dengan  pemberian  suspensi glibenklamid  tidak  berbeda  secara  signifikan dengan  suspensi  ekstrak  uji  dosis  50  dan  200 mg/kg  BB.  Penurunan  ekstrak  etanol  dosis  100 mg/kg  BB  memberikan  perbedaan  dengan suspensi  glibenklamid.  Hasil  analisa  statistik  uji beda rata-rata Duncan pada menit ke-90 dengan pemberian  suspensi  glibenklamid  tidak  berbeda
secara  signifikan  dengan  suspensi  ekstrak  uji dosis  50  dan  100  mg/kg  BB.  Penurunan  ekstrak etanol  dosis  50  dan  100  mg/kg  BB  memberikan perbedaan  dengan  suspensi  ekstrak  etanol  dosis 200  mg/kg  BB.  Hasil  analisa  statistik  uji  beda rata-rata  Duncan  pada  menit  ke-120  Suspensi ekstrak  dosis  100  mg/kg  BB  dibandingkan dengan  pemberian  suspensi  glibenklamid  tidak berbeda  secara  signifikan.  Penurunan  ekstrak etanol  dosis  50  dan  100  mg/kg  BB  memberikan hasil  yang  lebih  baik  dari  penurunan  suspensi ekstrak etanol dosis 200 mg/kg BB.
Hasil  pemeriksaan  skrining  fitokimia menunjukkan  bahwa  keduanya  mengandung
50.00 100.00 150.00 200.00 250.00 300.00 0 menit 30 menit 60 menit
90 menit 120 menit Kontrol (CMC 1 %) Glibenklamid Dosis 10 mg/kg BB Crude ekstrak  Pugun Tano Dosis 50 mg/kg BB Crude ekstrak  Pugun Tano Dosis 100 mg/kg BB
Crude ekstrak   Pugun Tano Dosis 200 mg/kg BB
senyawa  kimia  golongan  alkaloida,  flavonoida, tanin  dan  steroid/triterpenoid  (Juwita  N,  2009). Senyawa-senyawa  golongan  terpenoid  dan flavanoid  dapat  memberikan  efek  antidiabetes. Senyawa  flavonoida  yang  dapat  bersifat  sebagai antidiabetes  karena  flavonoid  mampu  berperan sebagai senyawa yang dapat menetralkan radikal bebas,  sehingga  dapat  mencegah  kerusakan  sel beta pankreas yang memproduksi insulin (Singab et.al, 2005).

## Kesimpulan
Hasil
pemeriksaan karakterisasi simplisia  daun  pugun  tana  diperoleh    kadar  air 9,65%,  kadar  abu  total  7,34%,  kadar  abu  tidak larut  dalam  asam  0,81%,  kadar  sari  larut  dalam air  21,02%  dan  kadar  sari  larut  dalam  etanol 17,14%.
Uji  Toksisitas  secara  akut  (LD-50) Ekstrak  etanol  daun  pugun  tana  tidak menunjukkan  tanda-tanda  keracunan  dan kematian  yang  berarti  sampai  dosis  tertinggi  uji 10.000  mg/kg  BB.  Ekstrak  etanol  pugun  tana ( Picria  felterrae Lour.)  dikategorikan  praktis tidak  toksis  atau  toksisitas  ringan.  Namun,  dari data  indeks  organ  menunjukkan  bahwa  ada perbedaan dari organ seperti hati, dan perbedaan ini  tidak  signifikan  dibandingkan  dengan  dosis lainnya.
Uji  Toleransi  glukosa  menunjukkan bahwa  dosis  100  mg/kg  BB  pada  crude  ekstrak memberikan efek penurunan yang berarti secara statistik  dibandingkan  dengan  obat  pembanding glibenklamid dosis 10 mg/kg BB.

## Ucapan Terimakasih
Terima  kasih  sebesar-besarnya  kepada Drs.  Awaluddin  Saragih,  M.Si.,  Apt.  yang  telah membantu  peneliti dalam kegiatan penelitian ini yang  dikerjasamakan  dalam  penelitian  SP3T Provinsi Sumatera Utara.

## Daftar putaka
Adhyana  I  Ketut,  Yulinah  Elin,  Andreanus  A.S., Endang  K,  Maria  Immaculata,  Joseph  I.
Sigit,  Suwendar.  2004. Uji  Aktivitas Antiduabetes Ekstrak Etanol Buah Mengkudu ( Morinda  citrifolia L.).  Acta Pharmaceutical  Indonesia.  Vol.  XXIX. No.2.2004-43.
Angelina  Marrissa,  Sriu  Hartati,  Indah  D. Dewijanti, Sofina D.S., Lin Meilawati. 2008. Penentuan LD 50 Daun Cinco (Cyclea barbata Miers.) Pada Mencit. Makara Sains. Vol. 12.
No. 1. April 2008; 23-26.
Anonim  A.  2009. All  About  Diabetes .  Available from: http://www.diabetes.org/about- diabetes.jsp. Pada 26 Maret 2009.
Anonim  B.  2009. Curangga  fel-terrae .  From: http://www.zipcodezoo.com/plant/c/ curangga_fel-terrae. Diunduh pada tanggal: 5 Mei 2009.
Anonim C. 2009. Curanga fel-terrae (Lour.)  Merr. SAGAI-USAK . From:htttp://www.bpi.da.gov.ph.publicati ons/mp/pdf/s/sagai-usak.pdf. Diunduh pada tanggal 5 Mei 2009. Anonim  D.  2009.
Picria  fel-terrae .  Dari:  http:// www.proseanet.org/prohati- 4/printer.php?photoid=459.
Anonim  E.  2009. Gestational  Diabetes .  From: http://www.diabetes.org/Gestational- diabetes.jsp.  Diunduh  pada tanggal 26 Mei
2009. Anonim F. 2009. Pre-Diabetes . From: www.diabetes.org/pre-diabetes.jsp. Diunduh pada tanggal 26 Mei 2009.
Anonim  G.  2009. Tumbuhan  Obat .  Dari: http://www.kehati.or.id/Florakita browser.php?pcategory=8&page.  Diunduh pada tanggal 5 Mei 2009.
Canadian  Centre  for  Occupational  Health  and Safety. 2005. LD50 and LC50 . Diunduh dari http://www.ccohs.ca/oshanswers/chemic als/ld50.html#tphp.  Pada  tanggal  05 Januari 2010.
Depkes  RI.  1979. Farmakope  Indonesia. Edisi  III. Depkes RI. Jakarta. Depkes  RI.  2005. Jumlah  Penderita  Diabetes Indonesia  Ranking  ke-4  Di  Dunia .  Pusat Data dan Informasi Departemen Kesehatan RI.  Tanggal:  05  September  2005.  Dari; htttp://www.depkes.go.id/
index.php?option=news&task= viewarticle.
Depkes  RI.  2000. Parameter  Standar  Umum Ekstrak Tumbuhan Obat . Cetakan Pertama. Jakarta : Departemen
Kesehatan RI. Hal. 10-11.
Ditjen POM. 1995. Materia Medika Indonesia . Jilid VI.  Jakarta  :  Departemen  Kesehatan  RI. Hal. 536-540.
Dorelanko J. Michael. (2000). Toxicologists Pocket Handbook. CRC Press. Florida. Page. 14. Etuk, E.U.  (2010).  Animals Models For Studying Diabetes Mellitus. Agriculture And Biology Journal Of North  America.  Agric. Biol. J. N. Am., 2010, 1(2): 130-134
Gad  C.  Shayne.  (2002). Drug  Safety  Evaluation . John Wiley and Sons Inc. New York. Page 130-132.
Goverdhan  P.,  Rani  MS.,  Thirupathi  K.,  Rani  S., Sathesh  S.,  Kumar  Ravi  B.,  Mohan  KG. (2008). Hypoglicemic and Antihyperglicemic  Effect  of  Aristolochia Indica  Normal  and  Alloxan  Induceed
Diabetic  rats. Pharmacologyonline  1:  20- 29. Shafrir Eleazar. 2007. Animal Models of Diabetes:
Frontiers  in  Research .  Second  Edition.  CRC Press. New York.
Singab  AN. et  al. 2005.  Hypoglycemic  effect  of Egyptian  Morus  alba  root  bark  extract: Effect  on  diabetes  and    lipid  peroxidation of  streptozotocin-induced  diabetic  rats. Journal  of  Ethnopharmacology 100:  333– 338.
US  Pharmacopeia.  2009. Poin  565  Botanical
Extract . diunduh dari
http://www.pharmacopeia.cn/v29240/us p29nf24s0_c565.html  tanggal  05  Februari 2012. WHO. 2008. Diabetes . World Health Organization (WHO)  Media  Center,  November  2008. From: http:// www. WHO.int/mediacentre/factsheets/fs312. Diunduh pada tanggal 11 Maret 2009.
WHO. 2011. Quality control methods for medicinal plant  materials. Update  dari  1998.  Printed WHO, England. Zaini  Mohd  Bin  Asmawi.  2005. Toxicological Report  on  Acute  Oral  and  Acute  Dermal Toxicity  of  Diquat  in  Rats. School  of Pharmaceutical  Sciences.  Universiti  Sains Malaysia. Penang.