## Formulasi Konsorsium Bakteri Endofit untuk Menekan Infeksi Nematoda Puru Akar Meloidogyne incognita pada Tomat
Ankardiansyah Pandu Pradana 1 , Abdul Munif 2 , Supramana 2
1 Program Studi Proteksi Tanaman, Fakultas Pertanian, Universitas Jember. Email: pandu@unej.ac.id 2 Departemen Proteksi Tanaman, Fakultas Pertanian, Institut Pertanian Bogor
.
Received: 15-09-2020 Accepted:16-10-2020 Available online:01-11-2020

## ABSTRACT
The  root-knot  nematodes  ( Meloidogyne  incognita )  infection  can  cause  a  significant  yield  loss  in tomato plants. One of the environmentally friendly efforts to control this nematode is through the application  of  endophytic bacteria.  The  application  of  endophytic bacteria  in  a  consortium  was reported to be more effective than the application using a single isolate. This study aims to test the effectiveness of the endophytic bacteria consortium formula in suppressing M. incognita infection in tomato plants. The research stages were  selecting the consortium of endophytic bacteria as a growth promoter for tomato plants infected with M. incognita . The best performing consortium was formulated using 100 g of grass compost + 100 g vermicompost + 10 ml molasses + 1 g peptone and 50 ml distilled water. The test of bacterial cell viability in the endophytic formula was carried out for 20 weeks. The formula made was tested for its performance as a biocontrol agent against M.  incognita  in  tomato  plants.  The  results  showed  that  three  consortia  gave  the  best  results  as growth promoters of M. incognita infected tomatoes, namely TmtN5, TmtN2, and GsgN2. The three of them survived the formula with log CFU at week 20 of 6.07 (TmtN5), 5.56 (TmtN2), and 6.11 (GsgN2). This formula can suppress the nematode population on tomato plants' roots and suppress the number of root knots in tomato plants. This study provides information that there are three consortia of endophytic bacteria (TmtN5, TmtN2, and GsgN2), which have the potential to become biological control agents for root-purulent nematodes.
Keywords : biocontrol, compost, formula, suppression, viability

## ABSTRAK
Infeksi  nematoda  puru  akar Meloidogyne  incognita menyebabkan  penurunan  hasil  panen  tomat yang  cukup  signifikan.  Upaya  pengendalian  ramah  lingkungan  yang  dapat  dilakukan  salah satunya melalui aplikasi agens biokontrol bakteri endofit. Aplikasi bakteri endofit dalam bentuk konsorsium dilaporkan lebih efektif dibandingkan dengan aplikasi menggunakan isolat tunggal. Penelitian  ini  bertujuan  untuk  menguji  efektifitas  formula  konsorsium  bakteri  endofit  dalam menekan  infeksi M.  incognita pada  tanaman  tomat.  Tahapan  penelitian  yang  dilakukan  adalah seleksi  konsorsium  bakteri  endofit  sebagai  pemacu  pertumbuhan  tanaman  tomat  terinfeksi M. incognita . Konsorsium dengan performa terbaik diformulasi menggunakan 100 g kompos rumput + 100 g kascing + 10 ml molase + 1 g pepton dan 50 ml akuades. Uji viabilitas sel bakteri di dalam formula  endofit  dilakukan  selama  20  minggu.  Formula  yang  telah  dibuat  diuji  performanya sebagai  agens  biokontrol  terhadap M.  incognita pada  tanaman  tomat.  Hasil  penelitian menunjukkan  terdapat  3  konsorsium  yang  memberikan  hasil  terbaik  sebagai  pemacu pertumbuhan tanaman tomat terinfeksi M. incognita , yaitu TmtN5, TmtN2, dan GsgN2. Ketiganya dapat  bertahan  pada  formula  dengan  log  CFU  pada  minggu  ke  20  sebesar  6,07  (TmtN5),  5,56
E-ISSN-2580-7129 Print- ISSN-1978-6107

## TECHNO: JURNAL PENELITIAN
Journal homepage : http://ejournal.unkhair.ac.id/index.php/Techno Issue 09 Number 02 October 2020 DOI: http://dx.doi.org/10.33387/tjp.v9i2
(TmtN2),  dan  6,11  (GsgN2).  Formula  tersebut  mampu  menekan  populasi  nematoda  pada perakaran  tanaman  tomat  dan  menekan  umlah  puru  akar  pada  tanaman  tomat.  Penelitian  ini memberikan informasi terdapat 3 konsorsium bakteri endofit (TmtN5, TmtN2, dan GsgN2) yang berpotensi menjadi agens pengendali hayati nematoda puru akar.
Kata Kunci: biokontrol, formula, kompos, penekanan, viabilitas

## PENDAHULUAN
Nematoda puru akar Meloidogyne incognita dikenal sebagai salah satu patogen kosmopolit yang dapat menginfeksi tanaman hortikultura, pangan, industri, maupun perkebunan. M. incognita dapat menyebabkan kehilangan hasil yang cukup tinggi, bahkan gagal panen pada beberapa komoditas (Ntalli dan Caboni, 2017). Pada tanaman tomat, M. incognita dapat menyebabkan kehilangan hasil sampai dengan 30%. Namun demikian, bila infeksi nematoda puru akar diikuti oleh infeksi cendawan atau bakteri patogen, kehilangan hasil akan semakin tinggi (Viljoen et al. , 2019). Kumar et al. (2017) melaporkan sinergisme Fusarium oxysporum dan M. incognita dapat menyebabkan  kehilangan  hasil  sampai  dengan  70%  pada  tomat.  Selanjutnya,  pada  laporan terpisah,  Furusawa et  al. (2019)  juga  melaporkan  sinergisme Ralstonia  solanacearum dan M. incognita dapat  menyebabkan  kehilangan  hasil  sampai  dengan  85%,  bahkan  menyebabkan tanaman mati.
Berbagai upaya telah dilakukan untuk menekan infeksi nematoda pada tanaman tomat. Namun demikian, sampai saat ini infeksi M. incognita masih menjadi permasalahan yang belum dapat diselesaikan  sepenuhnya.  Relung  hidup  nematoda  puru  akar  yang  unik  menyebabkan nematoda ini cukup sulit dikendalikan (Xiang et al. , 2017). Pada fase Juvenil-2, nematoda puru akar dapat  hidup  di  daerah  perakaran  tanaman,  dan  setelah menemukan  inangnya,  ia  akan menginfeksi  inangnya  dan  hidup  di  dalam  jaringan  akar  (Muhae-Ud-Din et  al. ,  2018). Berdasarkan cara hidupnya tersebut, nematoda ini dikenal sebagai nematoda parasit menetap. Posisi  nematoda  puru  akar  yang  dapat  berada  di  daerah  perakaran  tanaman  dan  di  dalam jaringan  akar  menyebabkan  upaya  pengendalian  secara  konvensional  kurang  begitu  efektif (Khanna et al. , 2019).
Solusi  efektif  dan  ramah  lingkungan  untuk  mengendalikan  nematoda  puru  akar  adalah pengendalian  secara  biologi  menggunakan  bakteri  endofit.  Bakteri  endofit  hidup  di  dalam jaringan  akar  tanaman,  menempati  relung  hidup  yang  sama  dengan  nematoda  puru  akar (Eljounaidi et al. , 2016). Aplikasi bakteri endofit dapat menekan populasi M. incognita secara langsung  maupun  tidak  langsung.  Secara  langsung  bakteri  endofit  dilaporkan  dapat memproduksi  metabolit  sekunder  seperti  enzim  kitinase,  enzim  protease,  dan  HCN  yang bersifat  nematisidal  (Anjum et  al. ,  2019).  Selanjutnya,  secara  tidak  langsung  bakteri  endofit dapat menginduksi ketahanan tanaman inang terhadap infeksi patogen seperti M. incognita (Hu et al. , 2017).
Pada penelitian sebelumnya, tim peneliti telah menemukan 80 konsorsium bakteri endofit dari akar  tanaman  bambu  ( Bambusa  bambos ),  mint  ( Coleus  amboinicus ),  bit  merah  ( Beta  vulgaris ), gingseng  ( Talinum  triangulare ),  pecah  beling  ungu  ( Strobilanthes  crispus ),  pacar  air  ( Impatiens balsamina ),  tomat  ( Lycopersicum  esculentum ),  sereh  ( Cymbopogon  nardus ),  padi  ( Oryza  sativa ), tithonia  ( Tithonia  diversifolia ),  kumis  kucing  ( Orthosiphon  aristatus ),  binahong  ( Anredera cordifolia ), jinten ( Nigella sativa ), temulawak ( Curcuma xanthorrhiza ), garut ( Maranta arundinacea ),
TECHNO: Vol. 09 (02) Oktober 2020
dan cabai rawit ( Capsicum frutescens ). Sebanyak 17 konsorsium bakteri endofit diketahui aman bagi tumbuhan dan mamalia, serta dapat memproduksi enzim kitinase, enzim protease, HCN, dan mampu melarutkan fosfat (P) serta menambat nitrogen (N) (Pradana et al. , 2016). Aplikasi agens  biokontrol  dalam  bentuk  konsorsium  dilaporkan  lebih  efektif  dibandingkan  dengan penggunaan agens biokontrol secara tunggal (Ashraf et al. , 2018). Pada penelitian sebelumnya, Munif dan Giyanto (2015) melaporkan konsorsium bakteri endofit efektif menekan kerusakan akar akibat infeksi Pratylenchus coffeae pada tanaman kopi. Penekanan kerusakan akar kopi oleh konsorsium bakteri endofit dilaporkan lebih baik dibandingkan dengan penekanan oleh isolat tunggal.  Selanjutnya,  pada  laporan  terpisah,  Varkey et  al. (2018)  melaporkan  konsorsium bakteri endofit efektif menekan tingkat infeksi M. incognita pada tanaman tomat.
Pada  umumnya,  agens  biokontrol  seperti  bakteri  endofit  akan  lebih  mudah  diterima  oleh masyarakat dalam bentuk formula. Formula konsorsium bakteri endofit dapat dibuat dalam bentuk  padat  dan  cair.  Formulasi  agens  biokontrol  bertujuan  untuk  menjaga  viabilitas  sel bakteri selama masa penyimpanan dan menghindari terjadinya perubahan sifat (Basheer et al. , 2019).  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  menguji  efektifitas  formula  konsorsium  bakteri  endofit dalam menekan infeksi M. incognita pada tanaman tomat.

## METODE PENELITIAN

## Sumber Konsorsium Bakteri Endofit
Sebanyak  17  konsorsium  bakteri  endofit  berasal  dari  penelitian  sebelumnya  (Pradana et  al. , 2016). Konsorsium bakteri endofit yang digunakan adalah PcrN5, PcrT2, MntT5, BitT2, GsgN5, GsgN2, PbuT2, JtnT2, GsgT2, CbiKB, PbuN5, BitN5, TmtN2, TmtN5, PdiT2, PtmN2, dan PdiN2.
Sumber Inokulum Meloidogyne incognita
Inokulum M. incognita diperoleh dari Laboratorium Nematologi Tumbuhan – Institut Pertanian Bogor.  Perbanyakan M.  incognita dilakukan  dengan  menginokulasi  tanaman  tomat  yang ditanam  pada  tanah  steril.  Setelah  enam  puluh  hari,  paket  telur  yang  terbentuk  kemudian dipanen dan diinokulasikan ulang ke tanaman tomat pada tanah steril lainnya. Kegiatan ini dilakukan secara terus menerus untuk memperoleh telur M. incognita dalam jumlah besar dan murni (Chawla et al. , 2006).
Seleksi  Konsorsium  Bakteri  Endofit  Sebagai  Pemacu  Pertumbuhan  Tanaman  Tomat Terinfeksi M. incognita
Tanaman tomat varietas Tantyna F1 disemai pada tanah yang telah disterilkan. Empat puluh hari  setelah  semai,  dilakukan  pemindahan  tanam.  Tomat  ditumbuhkan  pada  media  tanah  : kompos  :  pasir  (1:1:1,  w/w)  yang  telah  disterilisasi  menggunakan  autoklaf.  Penanaman dilakukan di rumah kaca menggunakan plot pastik dengan diameter 15 cm dan tinggi 20 cm. Percobaan  dilakukan  mengikuti  pola  rancangan  acak  kelompok  dengan  5  ulangan,  18 perlakuan, dan setiap perlakuan terdiri atas 3 tanaman uji yang ditanam pada pot yang berbeda.
Tiga puluh hari setelah pindah tanam, tanaman tomat diinokulasi dengan 300 Juvenil-2 (J2) M. incognita per tanaman. Aplikasi konsorsium bakteri endofit dilakukan pada 7 hari, 14 hari, 21 hari, dan 35 hari setelah inokulasi M. incognita ke tanaman tomat. Konsorsium bakteri diperoleh dengan mengkulturkan setiap konsorsium pada media cair Tryptic Soy Broth (TSB) (HiMedia,
Pradana , A. P. , A. Munif, Supramana . 2020. biocontrol; compost; formula; suppression; viability
India) 100% selama 48 jam. Jumlah konsorsium bakteri endofit yang diaplikasikan adalah 100 ml dengan kerapatan 10 8 cfu ml -1 per tanaman. Sebagai kontrol, tanaman tomat ditanam tanpa perlakuan menggunakan konsorsium bakteri endofit.
Pengamatan dilakukan 40 hari setelah inokulasi M. incognita , yang merupakan tahap preliminary infection .  Tahap preliminary  infection dapat  menggambarkan  dengan  baik  tingkat  efektifitas agens biokontrol terhadap infeksi nematoda. Peubah pengamatan yang diamati meliputi berat segar tanaman (g), berat kering tanaman (g), tinggi tanaman (cm), jumlah daun, dan panjang akar (cm) (Munif et al. , 2013).

## Formulasi Konsorsium Bakteri Endofit Pada Kompos
Konsorsium bakteri endofit diformulasi menggunakan bahan pembawa utama kompos rumput dan kompos kascing. Kompos rumput diperoleh dari Balai Penelitian Tanaman Rempah dan Obat (Balittro) Bogor, dan kompos kascing diperoleh dari kebun Pusat Penelitian Biofarmaka Institut  Pertanian  Bogor.  Konsorsium  yang  diformulasi  adalah  3  konsorsium  yang menunjukkan  formula  terbaik  pada  pengujian  sebelumnya.  Kombinasi  formula  yang digunakan pada penelitian ini adalah sebagai berikut:
1. Konsorsium terbaik 1 + 100 g kompos rumput + 100 g kascing + 10 ml molase + 1 g pepton + 50 ml akuades;
2. Konsorsium terbaik 1 + 100 g kompos rumput + 100 g kascing + 10 ml molase + 1 g pepton + 50 ml akuades;
3. Konsorsium terbaik 1 + 100 g kompos rumput + 100 g kascing + 10 ml molase + 1 g pepton + 50 ml akuades.
Formulasi dilakukan dengan mencampur seluruh bahan pembawa pada plastik tahan panas, kemudian campuran tersebut disterilisasi menggunakan autoklaf. Bahan pembawa yang telah steril  dan  telah  didinginkan  selama  48  jam  kemudian  dicampur  dengan  10  ml  suspensi konsorsium bakteri endofit dengan kerapatan 10 8 cfu ml -1 (Munif dan Mutaqin, 2016).

## Pengujian Viabilitas Konsorsium Bakteri Endofit Dalam Formula
Sebanyak  1  g  formula  bakteri  diambil  dan  dilakukan  pengenceran  berseri  sampai  dengan tingkat  pengenceran  10 -4 .  Suspensi  hasil  pengenceran  berseri  diambil  sebanyak  0,1  ml  dan diratakan pada media Tryptic Soy Agar (TSA) (HiMedia, India) selama 48 jam. Jumlah koloni yang tumbuh dihitung dan dikonversi menjadi log cfu ml -1 (Munif dan Mutaqin, 2016).
Uji Efektifitas Formula Konsorsium Bakteri Endofit Sebagai Agens Biokontrol M. incognita

## Pada Tomat di Rumah Kaca
Tanaman tomat varietas Tantyna F1 disemai pada media tanah steril. Empat puluh hari setelah semai  tomat  dipindah  tanam  pada  pot  dengan  diameter  15  cm  dan  tinggi  20  cm,  berisi campuran  tanah  steril  dan  formula  konsorsium  bakteri  endofit  dengan  perbandingan  1  :  1 (w/w). Selanjutnya, tiga puluh hari setelah pindah tanam, tanaman tomat diinokulasi dengan 300 J2 M. incognita . Percobaan dilakukan mengikuti pola rancangan acak kelompok, dengan 4 perlakuan, 5 ulangan, dan setiap ulangan terdiri atas 3 tanaman uji. Peubah pengamatan yang diamati  meliputi  peubah  patologis  dan  agronomis.  Peubah  patologis  yang  diamati  adalah jumlah nematoda di tanah, jumlah nematoda di dalam akar, dan jumlah puru akar. Selanjutnya, peubah agronomis yang diamati meliputi jumlah daun, tinggi tanaman (cm), panjang akar (cm), dan bobot segar tanaman (Cetintas et al. , 2018).

## Analisis Data
Data dianalisis menggunakan analisis ragam, jika terdapat keragaman data maka dilanjutkan dengan uji lanjut Duncan Multiple Range Test (DMRT) dengan taraf kepercayaan 95%. Program yang digunakan untuk analisis adalah DSAASTAT versi 1.021.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Konsorsium Bakteri Endofit Sebagai Pemacu Pertumbuhan Tanaman Tomat Terinfeksi M. incognita
Secara  umum  pertumbuhan  tomat  yang  diberi  diberi  perlakuan  konsorsium  bakteri  endofit menunjukkan  pertumbuhan  yang  lebih  baik  dibandingkan  dengan  tanaman  kontrol.  Pada peubah berat segar tanaman diketahui seluruh konsorsium bakteri endofit memberikan hasil yang berbeda nyata dengan tanaman kontrol. Namun demikian, konsorsium bakteri endofit TmtN5 memberikan pengaruh positif yang paling baik dengan rata-rata berat segar tanaman 72,05 g, diikuti oleh TmtN2 (69,96 g), PcrT2 (68,56 g), MntT5 (68,51 g), GsgT2 (68,01 g), dan konsorsium  lainnya.  Selanjutnya,  pada  peubah  pengamatan  berat  kering  tanaman,  hanya konsorsium  TmtN5  yang  memberikan  hasil  berbeda  nyata  dengan  tanaman  kontrol. Konsorsium  TmtN5  memberikan  berat  kering  tanaman  berat  kering  tanaman  8,85  g,  jika dibandingkan dengan kontrol TmtN5 memiliki berat kering tanaman 15,94% lebih tinggi.
Pada peubah pengamatan tinggi tanaman, dari seluruh konsorsium bakteri yang diuji, terdapat 5  konsorsium  yang  memberikan  tinggi  tanaman  berbeda  nyata  jika  dibandingkan  dengan kontrol. Secara berurutan, kelima konsorsium yang memberikan tinggi tanaman berbeda nyata dengan tanaman kontrol adalah TmtN5 (82.90 cm), TmtN2 (79 cm), GsgN2 (75,70 c,), MntT5 (75,70 cm), dan PbuN5 (74 cm). Konsorsium lainnya memberikan tinggi tanaman yang lebih tinggi dibandingkan dengan  tinggi  tanaman  kontrol  (65,10  cm),  namun  tidak  berbeda  nyata pada  uji  selang  berganda  duncan  pada  taraf  kepercayaan  95%.  Selanjutnya,  pada  peubah pengamatan  rata-rata  jumlah  daun,  terdapat  6  konsorsium  yang  memberikan  hasil  berbeda nyata dibandingkan dengan tanaman kontrol. Secara berurutan, konsorsium yang memberikan rata-rata  jumlah  daun  berbeda  nyata  dengan  tanaman  kontrol  adalah  TmtN5  (8,60),  TmtN2 (7,60), GsgN2 (7,30), MntT5 (7,20), PcrT2 (7,00), dan PdiN2 (7,00). Pada peubah pengamatan panjang akar, dari 17 konsorsium yang diuji, 16 diantaranya memberikan panjang akar yang berbeda  nyata  dengan  panjang  akar  tanaman  kontrol  (15,70  cm).  Namun  demikian,  tiga konsorsium  paling  baik  pada  peubah  pengamatan  panjang  akar  adalah  TmtN5  (17,57  cm), TmtN2 (17,26 cm), dan BitT2 (16,65 cm). Lebih lanjut, data pertumbuhan tomat disajikan pada Tabel 1.
Pradana , A. P. , A. Munif, Supramana . 2020. biocontrol; compost; formula; suppression; viability
Tabel 1. Pertumbuhan tanaman tomat terinfeksi nematoda puru akar setelah aplikasi konsorsium bakteri endofit
Kode Konsorsium Berat Segar Tanaman (g) Berat Kering Tanaman (g) Tinggi Tanaman (cm) Jumlah Daun Panjang Akar (cm) PcrN5 66.81 de 7.36 bc 69.75 cd 6.60 cdef 16.10 de PcrT2 68.56 c 7.30 bc 71.50 cd 7.00 bcde 16.39 cd MntT5 68.51 c 7.15 c 75.70 bc 7.20 bcd 16.27 cd BitT2 67.00 de 7.30 bc 69.90 cd 6.60 cdef 16.65 cd GsgN5 67.47 cde 6.96 c 68.60 cd 6.40 def 16.53 cd GsgN2 67.75 cde 7.57 bc 75.70 bc 7.30 bc 16.44 cd PbuT2 67.26 cde 7.39 bc 72.30 cd 6.70 cdef 16.51 cd JtnT2 66.95 de 7.30 bc 70.40 cd 6.60 cdef 16.63 cd GsgT2 68.01 cd 7.20 c 69.90 cd 6.60 cdef 16.34 cd CbiKB 67.27 cde 7.56 bc 72.30 bcd 6.80 bcdef 16.74 c PbuN5 67.19 de 7.51 bc 74.00 bc 7.00 bcde 16.52 cd BitN5 66.56 e 7.36 bc 69.40 cd 6.30 ef 16.82 bc TmtN2 69.96 b 7.95 b 79.00 ab 7.60 b 17.26 ab TmtN5 72.05 a 8.58 a 82.90 a 8.60 a 17.57 a PdiT2 67.63 cde 7.65 bc 70.90 cd 6.60 cdef 16.39 cd CbiN2 67.72 cde 7.31 bc 71.40 cd 6.80 bcdef 16.29 cd PdiN2 66.94 de 7.47 bc 71.70 cd 7.00 bcde 16.63 cd Kontrol 63.78 f 7.40 bc 65.10 d 6.10 f 15.70 e
Angka-angka pada kolom yang diikuti oleh huruf yang sama tidak berbeda nyata pada p-value 0.05 (uji selang berganda Duncan).

## Viabilitas Konsorsium Bakteri Endofit Dalam Formula
Berdasarkan hasil pengujian sebelumnya, terdapat tiga konsrosium dengan performa terbaik, yaitu  konsorsium  TmtN5,  TmtM2,  dan GsgN2.  Ketiga  konsorsium  tersebut  diformulasi  dan diukur  viabilitasnya  di  dalam  formula.  Berdasarkan  hasil  pengamatan  diketahui  viabilitas ketiga konsorsium tersebut dalam 20 minggu pengamatan cenderung menurun. Pada minggu pertama  pengamatan  secara  berurutan  Log  CFU  dari  konsorsium  adalah  9,7  (TmtN5),  9,55 (TmtN2),  dan 9,23  (GsgN2).  Pada minggu  ke-10  pengamatan  semua  konsorsium mengalami penurunan jumlah sel dalam Log CFU menjadi 8,87 (TmtN5), 8,11 (TmtN2), dan 7,32 (GsgN2). Selanjutnya, pada akhir pengamatan di minggu ke-20, jumlah sel dalam Log CFU menjadi 6,07 (TmtN5), 5,56 (TmtN2), dan 6,11 (GsgN2). Jika dibandingkan jumlah sel bakteri antara minggu ke-20 dan minggu pertama pengamatan, maka terdapat penurunan sebesar 37,42% (TmtN5), 41,78%  (TmtN2),  dan  33,80%  (GsgN2).  Data  viabilitas  sel  konsorsium  bakteri  pada  formula disajikan pada Gambar 1.
TECHNO: Vol. 09 (02) Oktober 2020
Gambar 1. Viabilitas konsorsium bakteri endofit di dalam formula selama 20 minggu
Efektifitas  Formula  Konsorsium  Bakteri  Endofit  Sebagai  Agens  Biokontrol M.  incognita

## Pada Tomat
Hasil penelitian menunjukkan formula konsorsium bakteri memberikan respon yang beragam pada peubah pengamatan yang diukur. Pada jumlah daun, seluruh formula konsorsium tidak memberikan  hasil  yang  berbeda  nyata  dengan  tanaman  kontrol  meskipun  rata-rata  jumlah daunnya  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan  rata-rata  jumlah  daun  tanaman  kontrol  (7,66). Selanjutnya, pada peubah pengamatan bobot segar tanaman, hanya TmtN2 yang memberikan hasil  berbeda  nyata  dengan  bobot  segar  tanaman  kontrol.  Jika  dibandingkan  dengan  bobot segar  tanaman  kontrol  (59,33  g),  maka  bobot  segar  tanaman  dengan  perlakuan  formula konsorsium  TmtN2  (84,95  g)  lebih  tinggi  43,18%.  Selanjutnya,  pada  peubah  pengamatan panjang akar, aplikasi formula konsorsium bakteri endofit tidak memberikan pengaruh nyata terhadap panjang akar tanaman jika dibandingkan dengan panjang akar tanaman kontrol (36,25 cm).
Hasil  penelitian  terhadap  jumlah M.  incognita di  tanah  memberikan  hasil  yang  beragam. Formula  konsorsium  bakteri  endofit  TmtN5  dan  TmtN2  memberikan  hasil  populasi M. incognita yang  berbeda  dengan  tanaman  kontrol.  Formula  konsorsium  TmtN2  memberikan hasil terbaik dengan jumlah populasi M. incognita di tanah sebanyak 55,33; diikuti oleh formula konsorsium TmtN5 dengan populasi M. incognita sebanyak 73,50. Jika dibandingkan dengan populasi  nematoda  di  tanah  pada  tanaman kontrol  (137), maka  formula  konsrosium  TmtN2 memberikan penekanan populasi sebesar 58,61%, dan formula konsorsium TmtN5 memberikan penekanan populasi sebesar 46,35%. Selanjutnya, pada peubah pengamatan populasi nematoda di dalam akar, seluruh perlakuan tidak memberikan pengaruh nyata. Meskipun secara jumlah lebih kecil dibandingkan dengan nematoda pada akar tanaman kontrol, namun pada uji selang berganda duncan dengan taraf kepercayaan 95% tidak terdapat perbedaan nyata. Pada peubah pengamatan jumlah puru pada akar, hanya formula konsorsium TmtN5 yang memberikan hasil berbeda nyata dengan tanaman kontrol. Jumlah puru akar pada tanaman dengan perlakuan formula  TmtN5  adalah  125,83.  Jika  dibandingkan  dengan  jumlah  puru  akar  pada  tanaman kontrol  (256,17),  maka  formula  TmtN5  memberikan  penekanan  jumlah  puru  akar  sebesar 50,88%. Data pertumbuhan tanaman tomat terinfeksi M. incognita dengan perlakuan formula konsorsium bakteri endofit disajikan pada Tabel 2.
Pradana , A. P. , A. Munif, Supramana . 2020. biocontrol; compost; formula; suppression; viability
Tabel  2.  Pengaruh  formula  konsorsium  bakteri  terhadap  pertumbuhan  tanaman  tomat  terinfeksi M. incognita
Kode Formula Jumlah Daun Bobot Segar Tanaman (g) Panjang Akar (cm) Populasi  NPA di Tanah Populasi NPA di Akar Jumlah Puru Akar TmtN5 9,66 a 75,78 ab 39,66 a 73,50 b 28,66 a 125,83 b TmtN2 8,66 a 84,95 a 48,83 a 55,33 b 32,83 a 148,17 ab GsgN2 9,44 a 67,31 b 36,92 a 92,00 ab 36,12 a 162,33 ab Kontrol 7,66 a 59,33 b 36,25 a 137,00 a 37,50 a 256,17 a
Angka-angka pada kolom yang diikuti oleh huruf yang sama tidak berbeda nyata pada p-value 0.05 (uji selang berganda Duncan).

## Pembahasan
Bakteri endofit hidup di dalam jaringan tanaman dan memiliki interaksi erat dengan inangnya. Interaksi  yang  terjadi  bersifat  saling  menguntungkan  dimana  bakteri  endofit  memperoleh nutrisi  dan  ruang  untuk  hidupnya,  dan  tanaman  memperoleh  keuntungan  dari  aktifitas fisiologi  bakteri  endofit  (Brader et  al. ,  2014;  Chebotar et  al. ,  2015).  Beberapa  hasil  aktifitas fisiologi  bakteri  endofit  disekresikan  dalam  bentuk  metabolit  sekunder  yang  dapat dimanfaatkan  untuk  menekan  patogen  tanaman  secara  langsung  maupun  tidak  langsung (Ludwig-Müller, 2015). Aplikasi beberapa isolat bakteri endofit secara bersamaan dalam bentuk konsorsium  dilaporkan  lebih  efektif  dibandingkan  dengan  aplikasi  bakteri  endofit  secara tunggal. Hal ini disebabkan aktifitas fisiologi bakteri endofit dalam bentuk konsorsium lebih tinggi, dan metabolit sekunder yang dihasilkannya lebih beragam (Mukherjee et al. , 2018).
Efektifitas konsorium bakteri endofit dalam menekan populasi nematoda parasit tanaman telah dilaporkan  sebelumnya.  Munif  dan  Giyanto  (2015)  melaporkan  konsorsium  bakteri  endofit efektif menekan populasi Pratylenchus coffeae pada tanaman kopi di rumah kaca. Selanjutnya, pada laporan terpisah, Munif et al. (2019) juga melaporkan konsorsium bakteri endofit efektif dalam menekan populasi nematoda Meloidogyne spp. Kemampuan konsorsium bakteri endofit dalam menekan  populasi  nematoda dan  keparahan  kerusakan  akar akibat  infeksi  nematoda didukung oleh kemampuannya dalam menghasilkan beberapa enzim ekstraseluler (Singh et al. , 2017).
Enzim ektraseluler yang dihasilkan oleh bakteri endofit yang berkaitan dengan kemampuannya sebagai anti-nematoda adalah enzim protease, dan enzim kitinase. Enzim protease berperan dalam mendegradasi struktur protein yang merupakan salah satu penyusun penting dinding sel nematoda (Siddiqui et al. , 2005; Qiuhong et al. , 2006). Sejalan dengan enzim protease, enzim kitinase  juga  bersifat  nematisidal  karena  sifatnya  yang  dapat  mendegradasi  kitin  yang  juga merupakan salah satu komponen utama dinding sel nematoda (Mercer et al. , 1992). Menurut Miller dan Sands (1977) enzim protease dan kitinase dapat menekan persentase penetasan telur M.  incognita .  Selanjutnya,  Safni et  al. (2018)  melaporkan  bahwa  bakteri  endofit  mampu menghancurkan  struktur  stilet  nematoda Meloidogyne spp.  Hancurnya  stilet  pada  nematoda diduga berkaitan dengan aktifitas bakteri endofit yang mampu memproduksi enzim protease dan  kitinase.  Selain  mampu  menghasilkan  enzim  ektraseluler,  kemampuan  bakteri  endofit dalam  mengendalikan  nematoda  parasit  tanaman  juga  berkaitan  dengan  kemampuannya dalam menghasilkan senyawa volatil HCN. HCN dikenal bersifat toksik bagi nematoda, namun pada konsentrasi rendah tidak berbahaya bagi tanaman (Yousif et al. , 2017).
Secara  tidak  langsung,  bakteri  endofit  dapat  meningkatkan  ketahanan  tanaman  terhadap nematoda  melalui  mekanisme  induksi  resistensi.  Tanaman  yang  diberi  perlakuan  bakteri endofit  memproduksi metabolit  PR-Protein  dan  senyawa  pertahanan  seperti  senyawa  tanin, fenol, dan glikosida yang lebih tinggi (Bora et al. , 2019). Selain itu, kemampuan konsorsium bakteri endofit dalam memfiksasi N dari lingkungan dan melarutkan P yang terikat di tanah juga  secara  tidak  langsung  dapat  meningkatkan  ketahanan  tanaman  (Dias et  al. ,  2009). Keseimbangan nutrisi yang diserap oleh tanaman dilaporkan menjadi salah satu faktor kunci pertahanan tanaman dari serangan dan infeksi OPT.
Kemampuan  formula  konsorsium  bakteri  endofit  dalam  mengendalikan  nematoda  sangat dipengaruhi  oleh  jenis  bahan  pembawa  yang  digunakan.  Bahan  pembawa  menentukan viabilitas,  dan  jumlah  sel  yang  bertahan  selama  proses  penyimpanan.  Semakin  melimpah jumlah  sel  agens  hayati  yang  diaplikasikan  pada  suatu  tanaman,  maka  kemungkinan keberhasilan pengendalian hayati akan semakin tinggi (Ojiambo dan Scherm, 2006; Raymaekers et  al. ,  2020).  Kelengkapan  nutrisi  menjadi  kunci  keberhasilan  sebuah  formula  dalam mengendalikan patogen tanaman. Pada penelitian terpisah, Munif dan Mutaqin (2016) berhasil menekan keparahan penyakit akibat infeksi nematoda puru akar menggunakan formula bakteri endofit  dalam  bentuk  tepung.  Selanjutnya,  Brand et  al. (2004)  juga  melaporkan  berhasil membuat formula bakteri endofit dalam bentuk padat yang efektif menekan kejadian penyakit akibat infeksi Meloidogyne spp.

## KESIMPULAN
Penelitian ini memberikan informasi terdapat 3 konsorsium bakteri endofit (TmtN 5 , TmtN 2 , dan GsgN 2 ) yang berpotensi menjadi agens pengendali hayati nematoda puru akar, dan ketiganya memiliki  jumlah  sel  yang  relatif  stabil  pada  formula  padat,  serta  efektif  menekan  infeksi Meloidogyne incognita dan memacu pertumbuhan tomat terinfeksi nematoda puru akar.

## REFERENCES
Anjum, R., Afzal, M., Baber, R., Khan, M.A.J., Kanwal, W., Sajid, W., dan Raheel, A. 2019. Endophytes: as potential biocontrol agent — review and future prospects. Journal of Agricutural Science. 11 : 113-125. doi: 10.5539/jas.v11n4p113.
Ashraf,  S.,  Afzal,  M.,  Naveed,  M.,  Shahid,  M.,  dan  Ahmad,  Z.  2018.  Endophytic  bacteria  enhance remediation of tannery effluent in constructed wetlands vegetated with Leptochloa fusca . International Journal of Phytoremediation. 20(2) : 121-128. doi: 10.1080/15226514.2017.1337072.
Basheer,  J.,  Ravi,  A.,  Mathew,  J.,  dan  Krishnankutty,  R.E.  2019.  Assessment  of  plant-probiotic performance of novel endophytic Bacillus sp. in talc-based formulation. Probiotics and Antimicrobial Proteins. 11(1) : 256-263. doi: 10.1007/s12602-018-9386-y.
Bora,  P.,  Saikia,  K.,  Hazarkia, H.,  dan  Ragesh,  G.  2019. Exploring  potential  of  bacterial  endophytes  in disease  management  of  horticultural  crops. Current  Horticulture. 7(2) : 32-37.  doi:  10.5958/2455- 7560.2019.00016.5.
Brader, G., Compant, S., Mitter, B., Trognitz, F., dan Sessitsch, A. 2014. Metabolic potential of endophytic bacteria. Current Opinion in Biotechnology. 27 : 30-37. doi: 10.1016/j.copbio.2013.09.012. Brand,  D.,  Roussos,  S.,  Pandey,  A.,  Zilioli,  P.C.,  Pohl,  J.,  dan  Soccol,  C.R.  2004.  Development  of  a bionematicide  with Paecilomyces  lilacinus to  control Meloidogyne  incognita . Applied  Biochemistry  and Biotechnology. 118(1-3) : 81-88. doi: 10.1385/ABAB:118:1-3:081.
Pradana , A. P. , A. Munif, Supramana . 2020. biocontrol; compost; formula; suppression; viability
Cetintas, R., Kusek, M., dan Fateh, S.A. 2018. Effect of some plant growth-promoting rhizobacteria strains on root-knot nematode, Meloidogyne incognita , on tomatoes. Egyptian Journal of Biological Pest Control. 28(1) : 1-5. doi: 10.1186/s41938-017-0008-x.
Chawla,  G.,  Singh,  K.P.,  dan  Srivastava,  A.  2006.  Study  on  propagation  of  root  knot  nematode,
Meloidogyne incognita (Kof oid & White) Chitwood, through tuberose ( Polianthes tuberosa Linn.) bulbs.
Journal of Ornamental Horticulture. 9(1) : 73-74.
Chebotar,  V.,  Malfanova,  N.,  Shcherbakov,  A.,  Ahtemova,  G.,  Borisov,  A.Y.,  Lugtenberg,  B.,  dan Tikhonovich,  I.  2015.  Endophytic  bacteria  in  microbial  preparations  that  improve  plant development. Applied Biochemistry and Microbiology. 51(3) : 271-277. doi: 10.1134/S0003683815030059. Dias,  A.C.,  Costa,  F.E.,  Andreote,  F.D.,  Lacava,  P.T.,  Teixeira,  M.A.,  Assumpçao,  L.C.,  Araújo,  W.L., Azevedo, J.L., dan Melo, I.S. 2009. Isolation of micropropagated strawberry endophytic bacteria and assessment  of  their  potential  for  plant  growth  promotion. World  Journal  of  Microbiology  and Biotechnology. 25(2) : 189-195. doi: 10.1007/s11274-008-9878-0.
Eljounaidi, K., Lee, S.K., dan Bae, H. 2016. Bacterial endophytes as potential biocontrol agents of vascular wilt  diseases – review  and  future  prospects. Biological  Control. 103 : 62-68.  doi: 10.1016/j.biocontrol.2016.07.013.
Furusawa,  A.,  Uehara,  T.,  Ikeda,  K.,  Sakai,  H.,  Tateishi,  Y.,  Sakai,  M.,  dan  Nakaho,  K.  2019. Ralstonia solanacearum colonization of tomato roots infected by Meloidogyne incognita . Journal of Phytopathology.
167(6) : 338-343. doi: 10.1111/jph.12804.
Hu, H.J., Chen, Y.L, Wang, Y.F., Tang, Y.Y., Chen, S.L., dan Yan, S.Z. 2017. Endophytic Bacillus cereus effectively  controls Meloidogyne  incognita on  tomato  plants  through  rapid  rhizosphere  occupation and repellent action. Plant Disease. 101(3) : 448-455. doi: 10.1094/PDIS-06-16-0871-RE. Khanna, K., Jamwal, V.L., Kohli, S.K., Gandhi, S.G., Ohri, P., Bhardwaj, R., Wijaya, L., Alyemeni, M.N., dan  Ahmad,  P.  2019.  Role  of  plant  growth  promoting  Bacteria  (PGPRs)  as  biocontrol  agents  of Meloidogyne  incognita through  improved  plant  defense  of Lycopersicon  esculentum . Plant  and  Soil.
436(1-2) : 325-345. doi: 10.1007/s11104-019-03932-2.
Kumar,  N.,  Bhatt,  J.,  dan  Sharma,  R.L.  2017.  Interaction  between Meloidogyne  incognita with Fusarium oxysporum f. sp. lycpersici on Tomato. International Journal of Current Microbiology and Applied Sciences. 6 : 1770-1776. doi: 10.20546/ijcmas.2017.608.209. Ludwig-Müller,  J.  2015.  Plants  and  endophytes:  equal  partners  in  secondary  metabolite  production? Biotechnology Letters. 37(7) : 1325-1334. doi: 10.1007/s10529-015-1814-4.
Mercer, C., Greenwood, D., dan Grant, J. 1992. Effect of plant and microbial chitinases on the eggs and juveniles of Meloidogyne hapla Chitwood (Nematoda: Tylenchida). Nematologica. 38(1-4) : 227-236. doi: 10.1163/187529292X00199.
Miller,  P.,  dan  Sands,  D.  1977. Effects  of  hydroclytic  enzymes  on  plant-parasitic  nematodes. Journal  of Nematology. 9(3) : 192-197.
Muhae-ud-Din, G., Moosa, A., Ghummen, U.F., Jabran, M., Abbas, A., Naveed, M., Jabbar, A., dan Ali, M.A. 2018. Host status of commonly planted ornamentals to Meloidogyne incognita and management through  endophytic  bacteria. Pakistan  Journal  of  Zoology. 50(4):  1393-1402.  doi: 10.17582/journal.pjz/2018.50.4.1393.1402.
Mukherjee, G., Saha, C., Naskar, N., Mukherjee, A., Mukherjee, A., Lahiri, S., Majumder, A.L., dan Seal, A.  2018.  An  endophytic  bacterial  consortium  modulates  multiple  strategies  to  improve  arsenic phytoremediation efficacy in Solanum nigrum . Scientific Reports. 8(1) : 1-16. doi: 10.1038/s41598-018- 25306-x.
Munif,  A.,  dan  Giyanto,  G.  2015.  Effectiveness  of  endophytic  bacterial  consortium  of  coffee  plant  on mortality of Pratylenchus coffeae in vitro. Pelita Perkebunan. 31(3) : 175-185.
Munif,  A.,  Hallmann,  J.,  dan  Sikora,  R.A.  2013.  The  influence  of  endophytic  bacteria  on Meloidogyne incognita infection and tomato plant growth. ISSAAS. 19(2) : 68-74.
Munif,  A.,  Herliyana, E.N., dan  Pradana, A.P.  2019.  Endophytic  bacterial  consortium  originated from forestry  plant  roots  and  their  nematicidal  activity  against Meloidogyne  incognita infestation  in greenhouse. Acta Universitatis Agriculturae et Silviculturae Mendelianae Brunensis. 67(5) : 1171-1182. doi: 10.11118/actaun201967051171.
Munif, A., Mutaqin, K.H. 2016. Lama penyimpanan, karakterisasi fisiologi, dan viabilitas bakteri endofit Bacillus sp. dalam formula tepung. Jurnal Fitopatologi Indonesia. 12(1) : 19-26. doi: 10.14692/jfi.12.1.19. Ntalli,  N.,  dan  Caboni,  P.  2017.  A  review  of  isothiocyanates  biofumigation  activity  on  plant  parasitic nematodes. Phytochemistry Reviews. 16(5) : 827-834. doi: 10.1007/s11101-017-9491-7.
Ojiambo, P., dan Scherm, H. 2006. Biological and application-oriented factors influencing plant disease suppression by biological control: a meta-analytical review. Phytopathology. 96(11) : 1168-1174. doi: 10.1094/PHYTO-96-1168.
Pradana, A, P., Munif, A., dan Supramana, S. 2016. Bakteri endofit asal berbagai akar tanaman sebagai agens pengendali nematoda puru akar Meloidogyne incognita pada tomat. Jurnal Fitopatologi Indonesia. 12(3) : 75-75. doi: 10.14692/jfi.12.3.75.
Qiuhong, N., Xiaowei, H., Baoyu, T., Jinkui, Y., Jiang, L., Lin, Z., dan Keqin, Z. 2006. Bacillus sp. B16 kills nematodes  with  a  serine  protease  identified  as  a  pathogenic  factor. Applied  Microbiology  and Biotechnology. 69(6) : 722-730. doi: 10.1007/s00253-005-0019-5.
Raymaekers, K., Ponet, L., Holtappels, D., Berckmans, B., dan Cammue, B.P. 2020. Screening for novel biocontrol agents applicable in plant disease management – a review. Biological Control. 144: 1-18. doi: 10.1016/j.biocontrol.2020.104240.
Safni, I., Lubis, K., Tantawi, A.R., dan Murthi, S. 2018. Isolation and characterization of rhizobacteria for biological control of root-knot nematodes in indonesia. Journal of the International Society for Southeast Asian Agricultural Sciences. 24(1): 67-81.
Siddiqui,  I.A., Haas, D.,  dan Heeb,  S.  2005. Extracellular  protease  of Pseudomonas  fluorescens CHA0,  a biocontrol  factor  with  activity  against  the  root-knot  nematode Meloidogyne  incognita . Applied  and Environmental Microbiology. 71(9) : 5646-5649. doi: 10.1128/AEM.71.9.5646-5649.2005. Singh, M., Kumar, A., Singh, R., dan Pandey, K.D. 2017. Endophytic bacteria: a new source of bioactive compounds. 3 Biotech. 7(5) : 315-321. doi: 10.1007/s13205-017-0942-z.
Varkey,  S.,  Anith,  K.,  Narayana,  R.,  dan  Aswini,  S.  2018.  A  consortium  of  rhizobacteria  and  fungal endophyte  suppress  the  root-knot  nematode  parasite  in  tomato. Rhizosphere. 5 : 38-42.  doi: 10.1016/j.rhisph.2017.11.005. .
Viljoen,  J.J.,  Labuschagne,  N.,  Fourie,  H.,  dan  Sikora,  R.A.  2019.  Biological  control  of  the  root-knot nematode Meloidogyne incognita on tomatoes and carrots by plant growth-promoting rhizobacteria. Tropical Plant Pathology. 44(3) : 284-291. doi: 10.1007/s40858-019-00283-2.
Xiang,  N.,  Lawrence,  K.S.,  Kloepper,  J.W.,  Donald,  P.A.,  McInroy,  J.A.,  dan  Lawrence,  G.W.  2017.
Biological control of Meloidogyne incognita by spore-forming plant growth-promoting rhizobacteria on cotton. Plant Disease. 101(5) : 774-784. doi: 10.1094/PDIS-09-16-1369-RE.
Yousif,  A.I.,  Munif,  A.,  dan  Mutaqin,  K.H.  2017.  Evaluating  the  toxicity  of  secondary  me  tabolites  of endophytic bacteria from Jatropha curcas L. to suppress Meloidogyne spp. in vitro. International Journal of Science and Research. 6 : 2195-2199. doi: 10.21275/ART20172700.
Pradana , A. P. , A. Munif, Supramana . 2020. biocontrol; compost; formula; suppression; viability