Jurnal Farmasi, Sains, dan Kesehatan ISSN 2442-9791
Potensi  Limbah  Cangkang  Telur  dan  Daun  Tembelekan  ( Lantana camara L.) Sebagai Salep Antiseptik Alami
Sariyana 1* , Andi Nofriani 1 , Hadijah Sabarwati 1 , Sahidin 2
1 Jurusan Kimia FMIPA Universitas Halu Oleo, Kampus Hijau Bumi Tridharma Anduonohu Kendari 93232
2 Fakultas Farmasi Universitas Halu Oleo, Kampus Hijau Bumi Tridharma Anduonohu Kendari 93232

## Abstrak
Salep antiseptik alami dari limbah cangkang telur dan daun tembelekan ( Lantana camara L.) diformulasikan untuk penyembuhan luka. Salep dibuat dengan kombinasi serbuk cangkang telur dan ektrak kental daun tembelekan dengan konsentrasi 5%, 10%, 15%, dan 20%. Pengujian potensi salep sebagai antiseptik dilakukan secara in vitro dan in vivo . Uji secara in vitro dilakukan pada 2 jenis bakteri yaitu Staphylococcus aureus dan Eschericia coli . Uji secara in vivo dilakukan pada tikus putih galur Wistar sebanyak 14 ekor yang diberi luka sayat sebesar 1,5 cm selama 8 hari, dimana diameter penyembuhan luka dianalisis dengan menggunakan metode  ANOVA  ( Analysis  Of  Variant ).  Hasilnya uji in  vitro memperlihatkan  bahwa  salep  memiliki  aktifitas anti  bakteri  yang ditandai  dengan  terbentuknya  zona  bening  yang  semakin  meningkat  seiring  dengan  peningkatan  konsentrasi.  Hasil  uji in  vivo menunjukkan  bahwa  salep  efektif  dalam  menyembuhkan  luka,  dimana  semakin  tinggi  konsetrasi  semakin  cepat  pula  proses penyembuhan luka. Hasil ini menunjukkan bahwa  limbah cangkang telur dan daun tembelekan menjadi bahan yang menjanjikan untuk salep antiseptik alami terhadap penyembuhan luka.
Kata kunci: Cangkang telur, Lantana camara , salep, antiseptik

## 1. Pendahuluan
Meningkatnya  aktivitas  sehari-hari  tidak  bisa terhindarkan  dari  kecelakaan,  salah  satu  akibat  yang ditimbulkan  dari  kecelakaan  tersebut  ialah  timbulnya luka.  Luka  didefinisikan  sebagai  keadaan  robek  atau terkoyaknya  sejumlah  jaringan  tubuh,  baik  itu  jaringan kulit, jaringan oiot, jaringan saraf, pembuluh darah dan limfa oleh beberapa faktor [1].
Efek  yang  ditimbulkan  akibat  luka  sangat bervariasi,  mulai  terjadinya  proses  pendarahan,  hingga timbulnya  infeksi  akibat  kontaminasi  bakteri  pada daerah  luka.  Proses  penyembuhan  luka  atau  penutupan luka  perlu  dilakukan  secepatnya  untuk  mencegah berkembangnya  bakteri  dengan  cepat  karena  semakin basah  luka  tersebut  akan  menyebabkan  lamanya penyembuhan luka. Penyembuhan luka dapat dipercepat dengan  zat  yang  dapat  mengeringan  luka  dengan  cepat dan  zat  yang  dapat  mencegah  munculnya  tumbuhnya bakteri pada luka. Zat tersebut dapat berasal dari bahan kimia  sintesis  ataupun  berasal  dari  bahan  alami.  Salah satunya cangkang telur, di Indonesia diperkirakan setiap tahunnya  terdapat  sekitar  75.112  ton  limbah  kulit  telur
* Email: oka_sariyana@yahoo.com
ayam  peternak  dan  18.620  ton  limbah  kulit  telur  ayam kampung [2].
Cangkang  telur  dapat  berfungsi  mempercepat penyembuhan luka karena tersusun atas senyawa protein sederhana  dan  kalsium,  yaitu  kalsium  karbonat  sekitar 95%  [3].  Kandungan  kalsium  dan  senyawa  protein sangat  penting  perananya  dalam  penyembuhan  luka. Kalsium akan membantu protrombin dalam membentuk benang-benang  fibrin  ketika  luka  mengeluarkan  enzim trombokinase. Selain kalsium pada cangkang telur juga terdapat memran telur yang juga berperan penting pada proses penyembuhan luka, membran telur mengandung zat  aktif  seperti  kolagen,  glukosamin,  asam  hialuronat, kondroitin  sulfat  dan  protein-protein  sulfur,  yang berperan  penting  pada  berbagai  fungsi  sel  termasuk fibrolas untuk meningkatkan produksi kolagen sehingga mampu  mempercepat  penyembuhan  luka.  Selain  itu memran  telur  juga  dapat  meredahkan  dan  mengurangi rasa  nyeri  dengan  adanya  kandungan  glukosamin  dan kondroitin  yang  dimiliki  oleh  memran  kulit  telur  ayam [4].
Sariyana, dkk: Uji Toksisitas Akut dan Gambaran Hispatologi Hepar Mencit Jantan (Mus musculus L.) yang Diberi Ekstrak Terpurifikasi Daun Galing (Cayratia trifolia L. Domin)
Alternatif  lain  yang  dapat  digunakan  dalam penyembuhan  luka  yaitu Lantana  camara atau  daun tembelekan yang mengandung senyawa kimia alkaloid, flavonoid,  lemak,saponin,  tannin,  protein,  senyawa fenolik  dan  minyak  atsiri  [5].  Adanya  kandungan senyawa kimia tanin,  flavonoid dan saponin pada daun tembelekan dapat berfungsi sebagai senyawa antibakteri sehingga dapat digunakan untuk mempercepat penyembuhan  luka  dan  mencegah  infeksi  yang kemungkinan akan terjadi akibat bakteri.

## 2. Bahan dan Metode

## 2.1 Umum
Jenis  penelitian  yang  digunakan  adalah  penelitian eksperimen,  yang  dilakukan  di  Laboratorium  Fakultas Farmasi  Universitas  Halu  Oleo.  Daun  tembelekan diperoleh dari wilayah Kota Kendari. Bakteri S. aureus dan E.  coli ,  serta  tikus  galur  Wistar  diperoleh  dari Laboratorium  Farmasi  Universitas  Halu  Oleo.  Sampel limbah  cangkang  telur  diperoleh  di  berbagai  rumah makan  sekitar  kampus  baru  UHO  kelurahan  Lalolara Kecamatan Kambu, Provinsi Sulawesi Tenggara.

## 2.2 Preparasi Sampel dan Ekstraksi
Limbah  cangkang  telur  ayam  dibersihkan  dan direndam  dengan  menggunakan  air  panas,  dan selanjutnya  dikeringkan  dalam  oven  pada  suhu  105 o C selama  30  menit.  Setelah  kering,  cangkang  telur dihaluskan dengan blender sampai menjadi serbuk yang halus. Lalu, serbuk cangkang telur diayak dengan ukuran 250 mesh.
Sampel daun tembelekan dikeringkan tanpa terkena sinar matahari langsung. Sampel yang kering kemudian dihaluskan  sampai  berbentuk  serbuk.  Sebanyak  100  g sampel dimasukkan dalam wadah dan dimaserasi selama 1  x  24  jam  dengan  pelarut  metanol.  Hasil  ekstraksi kemudian  disaring,  dan  filtrat  yang  diperoleh dikentalkan menggunakan alat rotavapor sampai ekstrak tidak mengandung pelarut.

## 2.3 Pembuatan Salep
Formula salep dibuat dengan menggunakan adeps lanae 15 g dan vaselin album 85 g [6]. Peleburan basis salep  dilakukan  dengan  penambahan  alkohol  sambil terus diaduk hingga homogen. Pembuatan salep ekstrak cangkang telur dan daun tembelekan dilakukan dengan cara  yang  sama  yaitu  basis  salep  yang  ditambahkan dengan  alkohol  dan  ditambahkan  ekstrak  sedikit  demi sedikit hingga homogen dan membentuk salep. Sediaan salep  yang  akan  dibuat  dalam  penelitian  ini  memiliki konsentrasi ekstrak cangkang telur dan daun tembelekan
yaitu  5%,  10%,  15%,  dan  20  %.  Rancangan  formula disajikan dalam tabel  berikut.
Tabel 1. Formula salep Bahan Konsentrasi 5% 10% 15% 20% Cangkang telur 2 g 4 g 6 g 8 g Ekstrak daun tembelekan 2 g 4 g 6 g 8 g Basis salep 38 g 36 g 34 g 32 g m.f.Ungt 40 g 40 g 40 g 40 g

## 2.4 Uji Aktivitas Antibakteri Secara In Vitro
Uji aktivitas antibakteri secara in vitro menggunakan  metode  difusi  agar  (difusi  Kirby  dan Bauer  yang  dimodifikasi).  Larutan  uji  salep  kombinasi cangkang  telur  ayam,  membran  telur  ayam  dan  daun tembelekan dengan berbagai konsentrasi (10%, 20% dan 30%),  akuades  sebagai  kontrol  negatif;  larutan ciprofloxacin  50  μg/50  μl  sebagai  kontrol  positif; masing-masing  diteteskan  pada  sumur  yang  berbeda sebanyak  50  μl.  Kemudian  cawan  petri  berisi  media, bakteri,  dan  sampel  uji  diinkubasi  suhu  37 o C  selama 1x24  jam.  Zona  bening  yang  terbentuk  diukur  sebagai zona hambat pertumbuhan bakteri.

## 2.5 Uji Aktivitas Antibakteri Secara In Vivo
Hewan  uji  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini ialah tikus putih jantan galur Wistar sebanyak 14  ekor dengan  berat  badan  260-280  g.  Sebelum  pembuatan luka, tikus diaklimatisasi selama 6 hari. Sehari sebelum pembuatan  luka,  hewan  uji  dicukur  bulunya  didaerah punggung  sampai  licin  kemudian  dibersihkan  dengan alkohol  70%.  Selanjutnya  dibuat  luka  sayatan  dengan ukuran panjang 1,5 cm. Perlakuan dan pengamatan atau pengumpulan data pada penelitian ialah sebagai berikut: a. Tikus  putih  jantan  dibuat  luka,  kemudian  diukur luas luka awal sebelum dilakukan perlakuan.
b. Masing-masing  tikus  putih  jantan  diberi  perlakuan sebagai berikut :
 Perlakuan A: Luka tanpa perlakuan
 Perlakuan B: Luka diberi dasar salep
 Perlakuan C: Luka diberi Betadine salep
 Perlakuan  D:  Luka  diberi  salep  ekstrak cangkang  telur,  membran    telur    dan    daun tembelekan  5%
 Perlakuan  E:  Luka  diberi  salep  ekstrak cangkang  telur,  membran    telur  dan  daun tembelekan  10%
 Perlakuan  F:  Luka  diberi  salep  ekstrak cangkang  telur,  membran    telur  dan  daun tembelekan  15%
Sariyana, dkk: Uji Toksisitas Akut dan Gambaran Hispatologi Hepar Mencit Jantan (Mus musculus L.) yang Diberi Ekstrak Terpurifikasi Daun Galing (Cayratia trifolia L. Domin)
 Perlakuan  G:  Luka  diberi  salep  ekstrak cangkang  telur,  membran    telur  dan  daun tembelekan  20%
 Dilakukan  pengamatan  selama  8  hari  untuk melihat diameter penutup luka.

## 2.6 Analisis Data
Pengukuran  rata-rata  diameter  luka  terbuka dilakukan dengan dx (1,2,3) yaitu diameter luka terbuka setiap ulangan perlakuan. Dihitung dengan rumus:
dx = ( ) ( ) ( ) ………………………..(1)
untuk  rata-rata  diameter  luka  terbuka  (cm).  Secara statistik  data  dianalisis  dengan  metode  ANOVA (Analysis  Of  Variant)  dengan  α  0,05  atau  5%,  dengan rumus:
P% = = 100% …………………… (2)
dimana P % untuk persentase penyembuhan luka

## 3. Hasil dan Pembahasan
Preparasi  bertujuan  untuk  memperoleh  serbuk cangkang  telur  agar  dapat  dikombinasikan  dengan ekstrak  daun  tembelekan  ( Lantana  camara L.)  pada proses pembuatan salep. Perendaman  menggunakan air panas  pada  proses  ini  bertujuan  untuk  melunakkan cangkang telur sedangkan tujuan dilakukan pengovenan agar  diperoleh  cangkang  telur  yang  kering  sehingga mempermudah dalam proses penghalusan dan penyaringan.  Tujuan  preparasi  sampel  adalah  untuk menghindari  komponen  lain  dan  mengurangi  kadar  air yang  dapat  menyebabkan  rusaknya  sampel  akibat susunan  senyawa  dalam  yang  berubah  karena  reaksi enzimatis.  Sebanyak  100  g  serbuk  daun L.  camara dimaserasi  dengan  merendam  serbuk  sampel  daun tersebut ke dalam pelarut metanol.
Sediaan  salep  dibuat  dalam  konsentrasi  ekstrak kental daun tembelekan dan serbuk cangkang telur yang berbeda-beda, yaitu 5%, 10%, 15% dan 20% sebanyak 40 g untuk 2 kali pemakaian dalam sehari selama 8 hari pengamatan.  Formulasi  bahan  salep  dengan  variasi konsentrasi  yang  berbeda  bertujuan  untuk  melihat pengaruh  tingkat  konsentrasi  bahan  terhadap  proses penyembuhan luka. Pada prosesnya terlebih dulu ekstrak kental  daun  tembelekan  dilarutkan  menggunakan metanol  kemudian  ditambahkan  sedikit  vaselin  album hingga  homogen,  hal  ini  bertujuan  ekstrak  kental  dan serbuk  tidak  bereaksi.  Setelah  homogen  ditambahkan serbuk  cangkang  telur  yang  dilanjutkan  dengan
penambahan  vaselin  album  sampai  tercampur  rata hinggga diperoleh produk yakni salep antiseptik alami.
Pengujian  aktivitas  antibakteri  secara in  vitro dilakukan  pada  dua  jenis  bakteri  yakni Staphylococcus aureus dan Escherichia  coli dengan Ciprofloxacin sebagai kontrol positif dan vaselin album sebagai kontrol negatif.  Pengujian  pada  kedua  jenis  bakteri  tersebut digunakan  media  padat  berupa  nutrien  agar  sintesis dengan  komposisi  20  mg/1000  mL.  Suspensi  bakteri dibuat  menggunakan  NaCl  fisiologi  dimana  berfungsi untuk  makhluk  hidup.  Hasil  pengujian  tersebut  dapat dilihat pada gambar berikut.
Gambar  1. Pengujian  aktivitas  salep  terhadap  bakteri, S. aureus (a); dan E. coli (b)
Tabel 1. Hasil Uji Antibakteri secara in vitro
Konsen trasi (%) S . aureus (mm) E. coli (mm) I II III I II III Kontrol (+) 25 24 27 28 27 26,25 Kontrol (-) - - - - - - 5 11,25 11,5 11,25 10 10,5 11 10 12,25 13,5 11,27 13,75 13,5 11,75 15 13,5 13,75 14,76 15 14,25 14 20 13,75 16 15,75 15 14,4 15
Pengujian  pada  kedua  jenis  bakteri  tersebut menunjukkan bahwa baik pada cawan petri I, II maupun III,  semakin  besar  konsentrasi  kombinasi  salep  maka semakin  luas  diameter  media  hambat  bakteri  atau semakin banyak bakteri yang dihambat.
Hasil  pengukuran  rata-rata  panjang  luka  untuk semua  kelompok  perlakuan  pada  hari  ke-1  sampai  hari ke-8 memperlihatkan perubahan panjang luka berkurang paling signifikan dengan konsentrasi 20% dibandingkan kelompok perlakuan lainnya. Salep tersebut mengandung zat aktif yang mampu meningkatkan aliran darah  ke  daerah  luka  dan  juga  dapat  menstimulasi fibroblast  sebagai  respon  untuk  penyembuhan  luka. Sebaliknya daya penyembuhan luka terbuka pada tikus putih  jantan  paling  rendah  terdapat  pada  luka  tanpa perlakuan dan dasar salep. Selain itu, kemampuan salep
Sariyana, dkk: Uji Toksisitas Akut dan Gambaran Hispatologi Hepar Mencit Jantan (Mus musculus L.) yang Diberi Ekstrak Terpurifikasi Daun Galing (Cayratia trifolia L. Domin)
untuk  mencegah  infeksi  membantu  penyembuhan  luka dengan efektif.
Gambar  2. Pengujian  aktivitas  penyembuhan  luka  sediaan salep  terhadap  tikus  jantan;  a)  Tanpa  perlakuan,  b)  Betadin salep, c) Vaselin album, d) salep 5% , e) salep 10%, f) Salep 15%, g) Salep 20%

## Tabel 2. Hasil pengukuran panjang luka tikus jantan
Hari ke- Panjang Luka (cm) LTP KN KP SAL CT DT 5% SAL CT DT 10% SAL CT DT 15% SAL CT DT 20% 1 1,5 1,5 1,5 1,5 1,5 1,5 1,5 2 1.5 1,5 1,3 1,5 1,5 1,4 1,3 3 1,4 1,4 1,2 1,5 1,3 1,2 1,2 4 1,1 1 0,8 1 0,9 0,9 0,8 5 1 0,9 0,7 0,7 0,6 0,6 0,6 6 0,8 0,6 0,4 0,6 0,4 0,3 0,4 7 0,6 0,5 0,3 0,3 0,2 0,1 0 8 0,5 0,4 0,3 0,2 0 0 0 Ket:  LTP  : Luka Tanpa Perlakuan KN  : Kontrol Negatif
KP  : Kontrol Positif
Hasil pengujian ANOVA dengan menggunakan uji F menunjukan nilai F hitung sebesar 2,98 dan signifikansi 9,35.  Nilai  F hitung lebih  besar  dari  F tabel (2,98  >2,45), sehingga  dapat  disimpulkan  rata-rata  perlakuan  untuk panjang  luka  terbuka  hari  ke-1  sampai  ke-8  (cm)  ada perbedaan  nyata  dan  terbukti  secara  sistematik.  Waktu
yang diperlukan untuk proses penyembuhan luka dengan sediaan  relatif  sama  dengan  kelompok  kontrol  positif, tetapi  berbeda  untuk  kontrol  negatif  dan  luka  tanpa perlakuan.  Hal  ini  dipengaruhi  oleh  bahan  aktif  yang terkandung  dalam  daun  tembelekan  yang  dapat menghambat pertumbuhan dinding sel bakteri [7]. Selain itu,  kandungan  kalsium  karbonat  (CaCO 3 )  dan glukosamin  pada  cangkang  telur  merupakan  berfungsi meningkatkan  produksi  asam  hialuronat  pada  fase proliferasi penyembuhan luka. Glukosamin juga terlibat dalam  proses  stimulasi  sintesis  glikosaminoglikan  dan kolagen  pada  penyembuhan  luka  [8].  Basis  salep berlemak  vaselin  album  yang  dapat  menarik  lebih banyak air sehingga luka cepat kering, tidak membusuk dan  menutupi  luka  [9].  Hasil  dari  data  diatas  dapat disimpulkan  bahwa  salep  antiseptik  limbah  cangkang telur  dan  daun  tembelekan  mempunyai  efek  sebagai penyembuhan luka terbuka pada kulit tikus putih jantan.

## 4. Kesimpulan
Salep  antiseptik  alami  dari  limbah  cangkang  telur dan daun tembelekan dapat digunakan sebagai salah satu inovasi  dalam  penanggulangan  luka  untuk  mencegah proses pendarahan dan infeksi.

## Daftar Pustaka
1. Abdurrahmat  AS.  Luka,  Peradangan  dan  Pemulihan. Jumal Entropi , 2014, Vol. 9(1) .
2. Stadelman WJ, Cotteril OJ. Egg Science and technology . The AVI Publising Company: Connecticut, 1972.
3. Warsy,  Chadijah  S,  Rustiah  W.  Optimalisasi  Kalsium Karbonat  dari  Cangkang  Telur  untuk  Produksi  Pasta Komposit. Jurnal Al-Kimia, 2013 Vol. 4(2) .
4. Ruff KJ, Endres JR, Clewell AE, Szabo JR, Schauss AG. Safety  Evaluation  of  A  Natural  Eggshell  Membrane- derived  Product. Food  Chem.  Toxicol .,  2012, 50(3-4) ; 604-11.
5. Tolanamy ES, Patadjai RS, Nur I. Potensi Ekstrak Daun Tembelekan  Lantana  camara  sebagai  Penghambat Tumbuh  Bakteri  pada  Rumput  Laut. Jurnal  Sains dan Inovasi Perikanan . 2017, Vol. 1(1) ; 1-8.
6. Ningsih DR, Zusfahair, Kartika D. Identifikasi Senyawa Metabolit  Sekunder  Serta  Uji  Aktivitas  Ekstrak  Daun Sirsak  Sebagai  Antibakteri. Molekul ,  2016, Vol.  11(1) ; 101-11.
7. Djide  NM,  Sartini. Dasar-dasar  Mikrobiologi  Farmasi . Makassar: Lembaga Penerbitan Unhas, 2008.
8. Novitasari  AIM,  Indraswary  R,  Pratiwi,  R.  Pengaruh Aplikasi  Gel  Ekstrak  Membran  Kulit  Telur  Bebek  10% Terhadap  Kepadatan  Serabut  Kolagen  pada  Proses Penyembuhan Luka Gingiva. ODONTO: Dental Journal ,
2017, Vol 4(1) .
9. Anief M. Farmasetika , Cetakan IV, Yogyakarta: Gadjah Mada University Press, 2007.