Window of Health : Jurnal Kesehatan, Vol. 6 No. 4 (Oktober, 2023) : 344 - 353 E-ISSN 2614-5375

## ARTIKEL RISET
URL artikel: http://jurnal.fkmumi.ac.id/index.php/woh/article/view/woh6401
Daun Kersen Sebagai Tanaman Alternatif Penangkal Radikal Bebas Dalam Meningkatkan Sistem Imun
K St. Maryam 1 , Muzakkir B., Masdiana
1 Kimia Farmasi, Fakultas Farmasi, Universitas Muslim Indonesia Email Penulis Korespondensi ( K ): st.maryam@umi.ac.id st.maryam@umi.ac.id 1 , muzakkir.baits@umi.ac.id 2 , masdiana.tahir@umi.ac.id 3
(083137903739)

## ABSTRAK
Daun  kersen  ( Muntingia  calabura L)  secara  empiris  digunakan  untuk  mengobati  berbagai  penyakit  karena memiliki  kandungan  senyawa  flavonoid  dan  tannin.  Berdasarkan  penelitian  sebelumnya,  dilaporkan  bahwa senyawa  fenol,  tannin,  dan  flavonoid  dapat  berpotensi  menangkal  radikal  bebas  sehingga  dapat  meningkatkan sistem imun tubuh.  Adapun tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui aktivitas antioksidan dari ekstrak metanol,  etil  asetat,  n-heksan  dari  daun  kersen  ( Muntingia  calabura L.). Metode  peredaman  radikal  bebas DPPH didasarkan  pada  reduksi  dari  larutan  metanol  radikal  bebas  DPPH  yang  berwarna  oleh  penghambatan radikal  bebas.  Proses  ekstraksi  suatu  senyawa  dilakukan  untuk  memisahkan  bahan  dari  campurannya  dengan menggunakan  pelarut  yang  sesuai.  Adanya  tingkat  polaritas  suatu  pelarut  yang  digunakan  untuk  menarik komponen  senyawa  aktif  dalam  tanaman  merupanakan  suatu  pedoman  untuk penelusuran  senyawa  baru  dalam suatu tanaman. Potensi suatu senyawa dalam menangkal radikal bebas dapat diketahi melalui perhitungan IC50. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak methanol, etil asetat, dan n-heksan daun kersen ( Muntingia calabura L.) memiliki aktivitas penghambatan terhadap radikal bebas DPPH dengan nilai IC50 berturut-turut sebesar 8,67; 9,097; dan 18,17 𝜇 g/mL. Sedangkan, asam galat memiliki aktivitas penghambatan dengan nilai IC50 sebesar 1,77 𝜇 g/mL. Ekstrak metanol dan etil asetat daun kersen mampu menghambat aktivitas DPPH dengan kategori sangat kuat yang hampir sebanding dengan asam galat sedangkan ekstrak n-heksan memiliki aktifitas antioksidan dalam kategori kuat.
Kata kunci: Daun kersen ( Muntingia calabura L.;  radikal bebas; sistem imun

## PUBLISHED BY :
Public Health Faculty Universitas Muslim Indonesia

## Address :
Jl. Urip Sumoharjo Km. 5 (Kampus II UMI) Makassar, Sulawesi Selatan.
Email : jurnal.woh@gmail.com , jurnalwoh.fkm@umi.ac.id Phone : +62 85397539583
Article history : (dilengkapi oleh admin) Received 10 Februari 2023 Received in revised form 12 April 2023 Accepted 22 September 2023 Available online 25 Oktober 2023
licensed by Creative Commons Attribution-ShareAlike 4.0 International License .
344

## ABSTRACT
Cherry  leaves  (Muntingia  calabura  L)  are  empirically  used  to  treat  various  diseases  because  they  contain flavonoid and tannin compounds. Based on previous research, it was reported that phenolic compounds, tannins, and flavonoids can potentially counteract free radicals so that they can improve the body's immune system. The purpose  of this  study  was  to  determine  the  antioxidant  activity  of extracts  of  methanol,  ethyl  acetate,  n-hexane from cherry leaves (Muntingia calabura L.). The DPPH free radical scavenging method is based on the reduction of  the  colored  DPPH  free  radical  methanol  solution  by  free  radical  inhibition.  The  extraction  process  of  a compound is carried out to separate the material from the mixture using a suitable solvent. The existence of a level of polarity of a solvent used to attract the components of active compounds in plants is a guide for the search for new  compounds  in  a  plant.  The  potential  of  a  compound  in  counteracting  free  radicals  can  be  determined  by calculating the IC50. The results showed that the extract of methanol, ethyl acetate, and n-hexane of cherry leaf (Muntingia calabura L.) had inhibitory activity against DPPH free radicals with IC50 values of 8.67; 9,097; and 18.17  g/mL.  Meanwhile,  gallic  acid  has  inhibitory  activity  with  IC50  value  of  1.77  g/mL.  Methanol  and  ethyl acetate extracts of cherry leaves were able to inhibit DPPH activity in a very strong category which was almost comparable to gallic acid while n-hexane extract had antioxidant activity in a strong category.
Keywords: Cherry leaves (Muntingia calabura L.; free radicals; immune system

## PENDAHULUAN
Virus  Corona  merupakan Novel  coronavirus 2019  (2019-nCoV)  yang  dapat  menyebabkan gangguan sistem pernapasan seperti infeksi paru-paru (pneumonia) yang bersifat akut, dan juga dapat mengakibatkan  gagal  ginjal.  Secara  resmi  WHO  memberikan  nama  COVID-19  ( Coronavirus disease 2019)  untuk  virus  Corona  ini.  Pada  dasarnya  didalam  tubuh  manusia  memiliki  sistem  imun untuk melawan virus dan bakteri penyebab penyakit. Namun, ada hal-hal yang dapat melemahkan sistem imun atau daya tahan tubuh seseorang, antara lain penuaan, kurang gizi, penyakit, bahkan obat-obatan tertentu. Oleh karena itu, fungsi sistem imun harus senantiasa dijaga agar daya tahan tubuh bisa menjadi kuat.
Suatu  system  imun  tubuh  yang  kuat,  sangat  berperan  penting  untuk  melawan  infeksi  virus. Ketika virus tersebut memasuki tubuh, maka akan menempel pada dinding sel-sel saluran pernapasan dan  paru-paru,  lalu  masuk  ke  dalamnya  untuk  meningkatkan  infeksi  selanjutnya  proses  tersebut  akan terdeteksi  oleh  sistem  imun.  Selanjutnya,  sistem  imun  akan  beraksi  dengan  cara  mengirim  sel  darah putih untuk membentuk antibodi yang berperan penting dalam melawan virus tersebut.
Adanya  keseimbangan  antara  antioksidan  dan  zat  oksidan  sangat  penting  karena  berkaitan dengan  berfungsinya  sistem  imunitas  tubuh.  Keadaan  ini  berperan  untuk  menjaga  integritas  dan berfungsinya  komposisi  membran  sel  tubuh  yaitu  lipid,  protein  sel,  dan  asam  nukleat,  serta  dapat mengontrol  transduksi  signal  dan  ekspresi  gen  dalam  imun.  Komponen  terbesar  yang  menyusun membran sel adalah senyawa asam lemak tidak jenuh yang diketahui sangat sensitif terhadap perubahan keseimbangan  zat  oksidan-antioksidan.  Sistem  pertahanan  antioksidan  dalam  tubuh  mengurangi  atau mengeleminasi radikal bebas seperti superoksida (O2 - ), hidroksil (OH- ), hidrogen peroksida (H2O2), dan  peroksil  (ROO-  ).  Reaktivitas  radikal  bebas  itu  dapat  dihambat  oleh  sistem  antioksidan  yang melengkapi sistem kekebalan tubuh (1).
Berbagai bahan alami dapat dijadikan sebagai sumber antioksidan yang dapat membantu tubuh mengurangi  kerusakan  oksidatif  akibat  radikal  bebas.  Salah  satunya  adalah  daun  kersen  atau  talok. Kersen merupakan tanaman yang digunakan sebagai sumber antioksidan alami (2). Kersen ( Muntingia calabura ) merupakan tanaman yang telah lama digunakan masyarakat untuk berbagai tujuan pengobatan antara  lain  sebagai  obat  batuk,  sakit  kuning,  dan  asam  urat.  Secara  ilmiah,  penelitian  manfaat  daun kersen  telah  dilakukan  oleh  (3)yang  menyatakan  bahwa  pemberian  ekstrak  etanol  daun  kersen  dapat memberikan  perlindungan  yang  signifikan  pada  tikus  yang  mengalami  luka  parah  pada  mukosa lambung.  Penelitian  air  rebusan  daun  kersen  telah  dilakukan  oleh  Zahroh  dan  Musriana  (2016)  yang menyatakan  bahwa  daun  kersen  berperan  sebagai  antioksidan  yang  menyekresi  hormon  insulin  yang bekerja untuk metabolisme gula (4).
Daun kersen  kaya akan kandungan senyawa flavonoid diantaranya flavon, flavonon, flavan, dan biflavan yang mempunyai aktivitas antidiabetes dan sitotoksik Senyawa fenolik, tannin dan flavon merupakan senyawa utama yang berperan sebagai antioksidan yang menangkal radikal bebas (5).
Radikal  bebas  yang  biasa  digunakan  sebagai  model  dalam  mengukur  daya  penangkapan radikal bebas adalah 1,1- difenil-2-pikrihidazil (DPPH). DPPH merupakan senyawa radikal bebas yang stabil  sehingga  apabila  digunakan  sebagai  pereaksi  dalam  uji  penangkapan  radikal  bebas  cukup dilarutkan dan bila disimpan dalam keadaan kering dengan  kondisi penyimpanan yang baik dan stabil selama bertahun-tahun. Nilai absorbansi DPPH berkisar antara 515-520 nm. Metode peredaman radikal bebas DPPH didasarkan pada reduksi  dari larutan methanol radikal bebas DPPH yang berwarna oleh penghambatan  radikal  bebas.  Ketika  larutan  DPPH  yang  berwarna  ungu  bertemu  dengan  bahan pendonor elektron maka DPPH akan tereduksi, menyebabkan warna ungu akan memudar dan digantikan warna kuning yang berasal dari gugus pikril. (6).
Salah  satu  faktor  yang  mempengaruhi  proses  ekstraksi  metabolit  sekunder  atau  komponen kimia  aktif  dalam  tumbuhan  adalah  pemilihan  pelarut.  N-heksana  merupakan  jenis  pelarut  nonpolar sehingga n-heksana dapat melarutkan senyawa-senyawa bersifat nonpolar. Etil asetat merupakan pelarut semi polar dan dapat melarutkan senyawa semi polar pada dinding sel dan metanol merupakan pelarut polar yang dapat melarutkan senyawa-senyawa yang bersifat polar seperti golongan fenol (7).
Proses ekstraksi suatu senyawa dilakukan untuk memisahkan bahan dari campurannya dengan menggunakan  pelarut  yang  sesuai.  Proses  ekstraksi  dihentikan  ketika  tercapai  kesetimbangan  antara konsentrasi  senyawa  dalam  pelarut  dengan  konsentrasi  dalam  sel  tanaman.  Adanya  tingkat  polaritas suatu pelarut yang digunakan untuk menarik komponen senyawa aktif dalam tanaman merupakan suatu pedoman  untuk  penelusuran  senyawa  baru  dalam  suatu  tanaman  (mukhriani).  Oleh  karena  itu, penelitian  ini  mencakup  ekstraksi  senyawa  daun  kersen  ( Muntingia  calabura )  menggunakan  pelarut metanol, etil asetat dan n-heksana dengan metode ekstraksi tunggal secara maserasi. Selanjutnya ekstrak dianalisis uji fitokimia dan aktivitas antioksidan dengan menggunakan metode peredaman DPPH. (8)
Penelitian  akan  dilaksanakan  di  Laboratorium  Kimia  dan  Laboratorium  Instrumen  Fakultas Farmasi Universitas Muslim Indonesia pada bulan Juli – Desember 2020. Alat-alat yang digunakan yaitu batang  pengaduk,  blender,  gelas  erlenmeyer  (Pyrex®),  gelas  kimia  (Pyrex®),  kuvet  kuarsa,  labu  ukur (Pyrex®),  lemari  pendingin  (freezer),  mesin vacum ,  mikropipet  (Eppendorf),  oven  (Memmert®), penangas air, pH meter, pipet tetes, pipet ukur, pipet volume, sendok tanduk, sentrifuge , seperangkat alat rotavapor, spektrofotometer UV-Visible, termometer, timbangan analitik (Ohaus®), toples, dan vortex mixer . Adapun bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah daun kersen ( Muntingia calabura L.), aquadest, DPPH, metanol p.a , etil asetat, n-heksan, dan asam galat.
Pada tahapan penelitian, pertama-tama dilakukan pengolahan sampel yaitu sampel  daun  kersen dibersihkan  dari  kotoran  yang  melekat  pada  permukaanya,  lalu  dikeringkan  dengan  cara  diangin- anginkan.  Setelah  kering,  sampel  diserbukkan  menggunakan blender .  Selanjutnya  pembuatan  ekstrak daun kersen yaitu menggunakan metode maserasi dimana pelarut yang digunakan dalam penelitian ini yaitu  pelarut  polar  (metanol),  semi  polar  (etil  asetat)  dan  non  polar  (n-heksana).  Sampel  yang  telah diserbukkan ditimbang sebanyak 350 g dan dimaserasi dengan ketiga pelarut sebanyak 300 mL selama 24 jam.(9) Filtrat yang dikumpulkan dari ekstrasi pertama sampai terakhir dikumpulkan dan dipekatkan dengan menggunakan alat Rotary Vakum Evaporator. Kemudian dilakukan penyiapan bahan uji, yaitu pembuatan  larutan  DPPH  dilakukan  dengan  penimbangan  serbuk  DPPH  sebanyak  5  mg  kemudian dilarutkan dengan 5,0 mL metanol p.a dengan konsentrasi 1000 ppm dalam labu ukur (10). Selanjutnya pembuatan  larutan  pembanding  asam  galat,  yaitu  asam  galat  ditimbang  sebanyak  5  mg,  kemudian dilarutkan dengan metanol p.a sambil diaduk dan dihomogenkan lalu dicukupkan volumenya hingga 5,0 mL.  Selanjutnya,  larutan  tersebut  dibuat  variasi  konsentrasi  2;  2,5;  3;  3,5;  dan  4  ppm  (10).  Untuk pembuatan  larutan  sampel,  daun  kersen  ( Muntingia  calabura L.)  ditimbang  sebanyak  5  mg  dan dilarutkan  dengan  masing-masing  metanol  p.a,  etil  asetat  dan  n-heksan  sambil  diaduk  dan dihomogenkan lalu dicukupkan volumenya hingga 5,0 mL. Selanjutnya, larutan tersebut dibuat variasi konsentrasi 4, 6, 8, 10 dan 12 ppm (11). Sebelum  dilakukan pengujian, dilakukan penentuan panjang gelombang  maksimum  DPPH  pada  spektrofotometer  UV-Vis  dengan  range  panjang  gelombang  400- 600 nm (11). Pengujian aktivitas antioksidan dilakukan pada pembanding asam galat dan sampel ekstrak daun kersen dengab cara yaitu sebanyak 1,0 mL larutan pembanding dan sampel dari ekstrak methanol, etil  asetat,  dan  n-heksan  dengan  berbagai  konsentrasi  masing-masing  ditambahkan  2,0  mL  DPPH. Larutan tersebut diinkubasi selama 30 menit pada ruang gelap selanjutnya diukur absorbansinya pada panjang gelombang maksimum. (12)
Untuk  Analisis  Data  aktivitas  antioksidan  pada  sampel  ditentukan  oleh  besarnya  hambatan serapan radikal DPPH melalui perhitungan persentase (%) inhibisi serapan DPPH dengan menggunakan rumus (13):
% 𝐼𝑛ℎ𝑖𝑏𝑖𝑠𝑖  = (𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛  𝑏𝑙𝑎𝑛𝑘𝑜 − 𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙)
𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛 𝑏𝑙𝑎𝑛𝑘𝑜 𝑥 100 %
Absorban blanko : Serapan radikal DPPH 50 µM pada panjang gelombang maksimal (514 nm).
Absorban sampel: Serapan sampel dalam radikal DPPH50 µM pada panjang gelombang maksimal (514 nm).

## HASIL
Tabel 1 menunjukkan data persen rendamen yang diperoleh dari proses ekstraksi daun kersen menggunakan tiga variasi pelarut yaitu metanol, etil asetat, dan n-heksan
Tabel 1 . Data persen (%) rendamen ekstrak etanol Daun kersen ( Muntingia calabura L) Nama Sampel Jenis Pelarut Berat Sampel Segar (g) Berat Ekstrak (g) Pelarut (mL) Rendamen (%) Ekstrak Daun kersen ( Muntingia calabura L) Metanol Etil Asetat n- Heksan 30 30 30 6 3 2 900 900 900 20 10 6,67
Pada tabel dua menunjukkan hasil pengukuran panjang gelombang maksimum DPPH yang digunakan sebagai blanko pada pengujian antioksidan
Tabel 2 . Hasil running (λ Maks ) DPPH 60 ppm Sampel (Maks) Absorban DPPH 60 ppm 511,6 0,985 Tabel 3. Perhitungan IC 50 asam galat (Pembanding)
Pada tabel empat menunjukkan IC 50 dari ekstrak metanol daun kersen Tabel 4. Perhitungan IC 50 ekstrak Metanol Daun kersen ( Muntingia calabura L) Konsentrasi (ppm) Absorbansi % Inhibisi Persamaan IC 50 (µg/mL) 4 6 8 10 12 DPPH 0.596 0.549 0.498 0.426 0.381 0,943 36,79 41,78 47,18 54,82 57,59 a  = 24,576 b  = 2,932 R 2 = 0,9942 8,67 Konsentrasi (ppm) Absorbansi % Inhibisi Persamaan IC 50 (µg/mL) 2 2,5 3 3,5 4 DPPH 0.633 0.515 0.411 0.318 0.209 0,944 32,94 45,44 56,46 66,31 77,86 a  = 10,624 b  = 22,142 R 2 = 0,9986 1,77
Pada tabel lima menunjukkan IC 50 dari ekstrak etil asetat daun kersen Tabel 5. Perhitungan IC 50 ekstrak Etil asetat daun kersen ( Muntingia calabura L) Konsentrasi (ppm) Absorbansi % Inhibisi Persamaan IC 50 (µg/mL) 4 6 8 10 12 DPPH 0.742 0.642 0.545 0.445 0.350 0,982 36,79 41,78 47,18 54,82 57,59 a  = 4,5668 b  = 4,9939 R 2 = 0,9942 9,097
Pada tabel enam menunjukkan IC 50 dari ekstrak n-heksan daun kersen
Tabel 6. Perhitungan % inhibisi ekstrak n heksan Daun kersen ( Muntingia calabura L) Konsentrasi (ppm) Absorbansi % Inhibisi Persamaan IC 50 (µg/mL) 4 6 8 10 12 DPPH 0.700 0.663 0.627 0.600 0.570 0,954 26,62 33,64 34,27 37,10 40,25 a  = 22,088 b  = 1,536
R 2 = 0,915 18,17

## PEMBAHASAN
Antioksidan merupakan suatu senyawa yang mampu mengurangi kerusakan oksidatif akibat dari radikal  bebas  yang  berada  di  dalam  tubuh  sehingga  dapat  mengurangi  terjadinya  berbagai  macam penyakit.  Penelitian  ini  menggunakan  daun  kersen  ( Muntingia  calabura L)  yang  diekstraksi menggunakan  metode  maserasi  yang  merupakan  salah  satu  metode  ekstraksi  dingin.  Pada  ekstraksi maserasi  ini  pelarut  yang  digunakan  adalah  etanol.  Keuntungan  dari  metode  maserasi  ini  adalah pengerjaannya yang sederhana serta alat yang digunakan mudah untuk diperoleh.
Proses maserasi sampel daun kersen  ( Muntingia calabura L) dilakukan masing-masing sebanyak 3  kali  dengan  menggunakan  beberapa  pelarut,  yaitu  metanol  ,  etil  asetat,  dan  n-heksan.  Metanol merupakan  pelarut  polar,  sehingga  dapat  menarik  senyawa  yang  bersifat  polar,  selain  itu  juga penggunaanya  mudah,  efisien,  selektivitas  dan  penerapannya  yang  luas  (14).  Etil  asetat  merupakan pelarut yang bersifat semi polar sehingga dapat menarik senyawa yang bersifat polar maupun nonpolar, memiliki toksisitas rendah, dan mudah diuapkan sehingga dapat digunakan untuk ekstraksi. Pemilihan pelarut n heksan merupakan pelarut yang bersifat non polar dan dapat menarik senyawa-senyawa yang bersifat  non  polar.  Jadi  semakin  tinggi  konsentrasi  pelarut  yang  digunakan  maka  kemampuan  untuk menarik senyawa semakin besar, begitupun sebaliknya (15).  Remaserasi dilakukan sebanyak 3 kali agar proses  penarikan  komponen  senyawa  kimia  yang  terdapat  dalam  sampel  daun  kersen  ( Muntingia calabura L) lebih sempurna dan menghasilkan lebih banyak ekstrak cair.
Setelah  diperoleh  ekstrak  cair  dari  proses  maserasi,  dilakukan  penguapan  yang  akan menghasilkan  ekstrak  kental  daun  kersen.  Untuk pelarut  metanol,  etil  asetat  dan  n  heksan  diperoleh masing-masing ekstrak cair sebanyak 2, 3 dan 6 gram dengan persen rendamen masing-masing yaitu 20; 10; dan  6,67.  (tabel 1)  Persen rendamen ditentukan untuk mengetahui kadar metabolit sekunder yang terbawa  oleh  pelarut  namun  tidak  dapat  menentukan  jenis  senyawa  yang  terbawa.  Kemudian  ekstrak yang  diperoleh  dilakukan  pengujian  aktivitas  antiradikal  bebas.  Dimana  Metode  DPPH  digunakan karena  sampel  yang digunakan  memiliki  anti  karsinogenik,  dimana  karsinogenik  adalah  zat-zat  yang menyebabkan  timbulnya  kanker  dan  kelebihan  dari  metode  ini  adalah  sederhana,  mudah,  cepat  dan peka  serta  hanya  memerlukan  sedikit  sampel.  Pemilihan  pelarut  yang  digunakan  untuk  melarutkan DPPH  dan  sampel  adalah  pelarut  metanol  karena  metanol  tidak  mempengaruhi  dalam  reaksi  antara sampel uji sebagai antioksidan dengan DPPH sebagai radikal bebas (13).
Tujuan  penentuan  panjang  gelombang  maksimum  agar  mengetahui  daerah  serapan  yang  dapat dihasilkan  berupa  nilai  absorbansi  dari  larutan  baku  DPPH  yang  dilarutkan  dengan  pelarut  metanol kemudian  diukur  serapannya  mengguanakan  alat  spektrofotometer  UV-Vis  pada  rentang  panjang gelombang 400-800 nm. Sehingga didapatkan hasil absorbansi 0,860 dengan panjang gelombang 516,90 nm.  Panjang  gelombang  maksimum  ini  memberikan  serapan  paling  maksimal  dari  larutan  uji  dan memberikan kepekaan paling besar.
Pada  penelitian  ini  dilakukan  pengukuran  absorbansi  sampel  pada  spektro  UV-Vis  dengan panjang  gelombang  511,6  nm  dengan  volume  sampel  2  mL  dan  DPPH  sebanyak  2  mL.  Dimana konsentrasi yang digunakan adalah 4, 6, 8, 10 dan 12 ppm. Sedangkan konsentrasi pembanding 2; 2,5; 3;  3,5;  dan  4  ppm.  Dalam  pengerjaan  ini  dilakukan  inkubasi  selama  30  menit  untuk  memberikan kesempatan  antara  sampel  dan  DPPH  agar  dapat  bereaksi  secara  sempurna  sehingga  dapat terjadimekanisme  pemutusan  rantai  autooksidasi  dengan  pengubahan  radikal  lipida  kebentuk  lebih stabil.  Adapun  pembanding  yang  digunakan  sebagai  kontrol  positif  adalah  asam  galat.  Asam  galat dipilih  karena  memiliki  aktivitas  antioksidan  yang  kuat  karena  memiliki  tiga  ciri  pada  strukturnya yaitu 3’,4’- dihidroksi pada cincin B; 2,3 ikatan rangkap pada cincin C dan sebuah gugus 5-hidroksi pada cincin A (16).
Setelah  dilakukan  pengerjaan  dan  pengukuran,  didapatkan  hasil  pengukuran  absorbansi  larutan standar asam galat dan larutan sampel dibuat kurva kalibrasi hubungan antara konsentrasi (C) dengan absorbansi  (A)  dan  diperoleh  persamaan  garis  linier.  Adapun  syarat  kelayakan  untuk  metode  analisis yang  diterima  untuk  koefisien  korelasi  (r)  dari  range  0.996-1  yang  nantinya  digunakan  untuk  uji antioksidan  Daun  kersen  (Muntingia  calabura  L).  Berdasarkan  hal  tersebut  diperoleh  persamaan regresi linier yaitu y = 22.142x-10.624, R² = 0.9986 yang memenuhi syarat kelayanan metode analisis. Langkah selanjutnya adalah perhitungan persen inhibisi dan nilai IC 50 antiradikal bebas dari pembanding asam  galatdan  ekstrak  etanol  Daun  kersen  ( Muntingia  calabura L),  dimana  persen  inhibisi  adalah kemampuan  suatu  bahan  untuk  menghambat  aktivitas  radikal  bebas  yang  berhubungan  dengan konsentrasi  suatu  sampel.  Sedangakan  IC 50 merupakan  salah  satu  parameter  yang  digunakan  untuk
menginterpretasikan  hasil  dari  pengujian  DPPH,  semakin  rendah  nilai  IC 50 dari  suatu  sampel  maka kemampuan  sebagai  antioksidan  semakin  besar.  Suatu  senyawa  dikatakan  sebagai  antiradikal  bebas sangat kuat apabila nilai IC 50 < 10 μg/mL, kuat apabila nilai IC 50 antara 10-50 μg/mL, sedang apabila nilai  IC 50 berkisar  antara  50-100  μg/mL,  lemah  apabila  nilaiIC 50 berkisar  antara  100-250  μg/mL  dan tidak aktif apabila IC 50 diatas 250 μg/mL. (16)
Pada penelitian ini, nilai IC 50 asam galat yang diperoleh sebesar 1,77 μg/mL (dapat dillihat pada tabel 3), ini menunjukkan bahwa antioksidan asam galat merupakan antioksidan yang memiliki aktivitas yang sangat kuat (< 10 μg/mL). untuk ekstrak metanol daun kersen ( Muntingia calabura L) memiliki aktivitas antioksidan dalam  kategori yang sangat kuat (< 10 μg/mL) dengan nilai IC 50 8,67 μg/mL (dapat dilihat  pada  tabel  4).  Begitupula  dengan  ekstrak  etil  asetat  daun  kersen  ( Muntingia  calabura L)  juga memiliki aktivitas antioksidan  dalam kategori yang sangat kuat (< 10 μg/mL) dengan nilai IC 50 9,097 μg/mL  (dapat  dilihat  pada  tabel  5).Ekstrak  n-heksan  daun  kersen  ( Muntingia  calabura L)  memiliki aktivitas antioksidan dalam kategori yang kuat (antara 10-50 μg/mL) dengan nilai IC 50 18,17 μg/mL

## KESIMPULAN DAN SARAN
Berdasarkan hasil penelitian yang  dilakukan  dapat disimpulkan bahwa ekstrak metanol dan  etil asetat  daun  kersen  ( Muntingia  calabura L)  berpotensi  sebagai  zat  antioksidan  dalam  kategori  sangat kuat  yang  setara  dengan  asam  galat  (pembanding)  sedangkan  ekstrak  n-heksan  dalam  kategori antioksidan yang kuat. Adapun nilai IC 50 asam galat sebesar 1,781 µg/mL, sedangkan ekstrak methanol, etil asetat dan n-heksan daun kersen ( Muntingia calabura L) memiliki nilai IC 50 berturut-turut sebesar sebesar  8,67,  9,097  dan  18,17  µg/mL.  Pada  penelitian  selanjutnya  disarankan  untuk  mengisolasi senyawa antioksidan dari daun  kersen ( Muntingia calabura L) terutama pada senyawa yang ada pada fraksi metanol dan etil asetat yang memiliki aktivitas antioksidan yang sangat kuat untuk mendapatkan kandidat senyawa obat baru dalam menangani penyakit akibat virus ataupun penyakit degeneratif.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terimakasih kami ucapkan kepada Lembaga Penelitian dan Pengembangan Sumberdaya (KP2S) Universitas  Muslim  Indonesia  yang  telah  memberikan  pembiayaan  penelitian  sampai  penelitian  ini dapat  dipublikasi.  Ucapan  terimakasih  juga  kami  sampaikan  kepada  Fakultas  Farmasi  khususnya laboratorium Penelitian dan Pengujian yang telah memfasilitasi pengerjaan penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Damiani  ACSG.  Antioxidants:  How  They  Work.  Oxidants  In  Biology.  Giuseppe  Valamli. Springer. Droge W, Editor. 2008. 47–95 P.
2. Haerani  A,  Chaerunisa  AY,  Subarnas  A.  Antioxidant  Activities  Of  Muntingia  Calabura, Syzygium  Cumini,  Ocimum  Basilicum,  And  Eleutherine  Bulbosa  Using  DPPH  Method. Indones J Pharm. 2019;1(2).
3. Siara FO,  Ibrahim  A,  Arifian  H,  Rusli  R.  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Kulit  Batang  Kersen (Muntingia Calabura L.). In 2017.
4. Zahara  M,  Suryadi.  Kajian  Morfologi  Dan  Review  Fitokimia  Tumbuhan  Kersen  ( Muntingia Calabura L ). 2018;5(2):69–74.
5. Aruna  Sindhe  M,  Bodke  YD,  Chandrashekar  A.  Antioxidant  And  In  Vivo  Anti- Hyperglycemic Activity Of Muntingia Calabura Leaves Extracts. Der Pharm Lett. 2013;
6. Prayoga,  Wardani  W,  Krisna  A.  Polymerase  Chain  Reaction  Untuk  Deteksi  Salmonella Sp. : Kajian Pustaka. J Pangan Dan Agroindustri. 2014;
7. Maulida  D,  Zulkarnaen  N.  Ekstraksi  Antioksidan  (  Likopen  )  Dari  Buah  Tomat  Dengan Menggunakan  Solven  Campuran,  N  –  Heksana,  Aseton,  Dan  Etanol.  Jur  Tek  Kim  Fak  Tek. 2010;
8. Maryam  S,  Baits  M,  Nadia  A.  Pengukuran  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Etanol  Daun  Kelor (Moringa  Oleifera  Lam.)  Menggunakan  Metode  Frap (Ferric  Reducing  Antioxidant  Power).  J Fitofarmaka Indones. 2016;
9. Maryam  S,  Pratama  R,  Effendi  N,  Naid  T.  Analisis  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Etanolik Daun  Yodium  (Jatropha  Multifida  L.)  Dengan  Metode  Cupric  Ion  Reducing  Antioxidant Capacity (Cuprac). J Fitofarmaka Indones. 2016;
10. Andriani D, Murtisiwi L. Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol 70% Bunga Telang (Clitoria Ternatea L) Dari Daerah Sleman Dengan Metode Dpph. Pharmacon J Farm Indones. 2020;
11. Puspitasari  Ad,  Wulandari  Rl.  Aktivitas  Antioksidan  Dan  Penetapan  Kadar  Flavonoid  Total Ekstrak Etil Asetat Daun Kersen (Muntingia Calabura). J Pharmascience. 2017;
12. Aminah A, Maryam S, Baits M, Kalsum U. Perbandingan Aktivitas Antioksidan Ekstrak  Etanol Daun  Sirsak  (Annona  Muricata  L.)  Berdasarkan  Tempat
Tumbuh Dengan Metode Peredaman Dpph. J Fitofarmaka Indones. 2016;
13. Molyneux P. The Use Of The Stable Free Radical Diphenylpicryl-Hydrazyl (Dpph) For Estimating Antioxidant Activity. Songklanakarin J Sci Technol. 2004;
14. Dai  J,  Mumper  Rj.  Plant  Phenolics:  Extraction,  Analysis  And  Their  Antioxidant  And Anticancer Properties. Molecules. 2010.
15. Chew Kk, Khoo Mz, Ng Sy, Thoo Yy, Aida Wmw, Ho Cw. Effect Of Ethanol Concentration, Extraction Time And Extraction Temperature On The Recovery Of Phenolic Compounds And
Antioxidant Capacity Of Orthosiphon Stamineus Extracts. Int Food Res J. 2011;18(4).
16. Syarif  S,  Nurnaningsih  N,  Pratama  M.  Uji  Aktivitas  Ekstrak  Etanol  Daun  Kersen (Muntingia Calabura  L.)  Sebagai  Inhibitor  Enzim  Α-Glukosidase  Dengan  Menggunakan  Elisa  Reader.  J Fitofarmaka Indones. 2020;