## UJI FITOKIMIA DAN AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DARI EKSTRAK
DAUN BAWANG KUCAI ( Allium tuberosum Rottl. Ex Spreng)

## MENGGUNAKAN SPEKTROFOTOMETER UV-VIS
Meidi Y Mangkasa 1) , Johnly A Rorong 1) dan Audy D. Wuntu 1)
1) Jurusan Kimia Fakultas MIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
This  study  aims  to  determine  the  secondary  metabolic  compounds  contained  in  the  onion extract  of  chives  of  Allium  Toberosum  Rottl  Ex.  Spreng  and  determine  the  antioxidant  activity  of chives extract. Chives onion powder was extracted by maceration with petroleum ether, ethyl acetate and  methanol  solvent  for  3  x  24  hours  and  then  evaporated  until  getting  a  thick  extract. Determination of the water content of chives on chives obtained an average of 4.427%. Determination of the total phenolic was measured by the Folin-Ciocalteu method. Phytochemical test results indicate the  presence  of  flavonoid  and  saponin  compounds.  The  results  of  antioxidant  activity  using  Ferric Reducing  Antioxidant  Power  (FRAP)  gave  a  total  antioxidant  value  of  ethyl  acetate  extract  of 47,10345  mmol/g,  methanol  extract  of  45,2931  mmol/g  and  petroleum  ether  extract  of  9,689655 mmol/g which means ethyl extract acetate has the greatest ability to reduce Fe 3+ to Fe 2+ . The results of  antioxidant  activity  using  1-1-dhypenyl-2-pikrilhidrazin  (DPPH)  gave  IC 50 value  of  ethyl  acetate extract  of  179,5622  µg/mL,  methanol  extract  of  385,6795  µg/mL  and  petroleum  ether  extract  of 429,3103  µg/mL  which  means  that  ethyl  acetate  extract  has  the  greatest  ability  to  counteract  free radicals. Chives onion have antioxidant activity in counteracting free radicals and can reduce Fe 3+ to Fe 2+ .
Keywords: Chives, Phytochemicals, Ferric Reducing Antioxidant Power (FRAP), 1-1-dhypenil-2- pikrilhidrazin (DPPH).

## ABSTRAK
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  senyawa  metabolic  sekunder  dalam  ekstrak  daun bawang  kucai  ( Allium  Toberosum Rottl  Ex.  Spreng)  dan  menentukan  aktivitas  antioksidan  dari ekstrak  daun  bawang  kucai.  Serbuk  daun  bawang  kucai  diekstraksi  secara  maserasi  dengan  pelarut petroleum  eter,  etil  asetat  dan  methanol  selama  3  x  24  jam  dan  selanjutnya  dievaporasi  sampai mendapatkan  ekstrak  kental.  Penentuan  kadar  air  yang  diperoleh  rata-rata  4,427  %.  Penentuan kandungan  total  fenolik  dengan  metode  Folin-Ciocalteu.  Hasil  uji  fitokimia  menunjukan  adanya golongan  senyawa  flavonoid  dan  saponin.  Hasil  Aktivitas  antioksidan  menggunakan  reagen Ferric Reducing  Antioxidant  Power (FRAP)  memberikan  nilai  total  antioksidan  ekstrak  etil  asetat  sebesar 47,10345  mmol/g,  ekstrak  methanol  sebesar  45,2931  mmol/g  dan  eksrak  petroleum  eter  sebesar 9,689655  mmol/g  yang  berarti  ekstrak  etil  asetat  memiliki  kemampuan  yang  paling  besar  dalam mereduksi  Fe 3+ menjadi  Fe 2+ .  Hasil  aktivitas  antioksidan  menggunakan  reagen 1,1-diphenyl-2- picrylhydrazyl (DPPH)  memberikan  nilai  IC 50 untuk  ekstrak  etil  asetat  sebesar  179,5622  µg/mL, ekstrak  methanol  sebesar 385,6795 µg/mL  dan  eksrak  petroleum  eter  sebesar  429,3103 µg/mL  yang berarti  ekstrak  etil  asetat  memiliki  kemampuan  yang  paling  besar  dalam  menangkal  radikal  bebas. Daun  bawang  kucai  memiliki  aktivitas  antioksidan  dalam  menangkal  radikal  bebas  dan  dapat mereduksi Fe 3+ menjadi Fe 2+ .
Kata Kunci :  Bawang Kucai, Fitokimia, Ferric Reducing Antioxidant Power (FRAP), 1-1-dhypenil- 2-pikrilhidrazin (DPPH).

## PENDAHULUAN
Indonesia  sebagai  negara  tropis memiliki  kekayaan  alam  berbagai  jenis tumbuhan  yang  mempunyai  kandungan bahan aktif tertentu yang bermanfaat untuk kesehatan. Sebagian besar tumbuhan sudah lama  dipergunakan  oleh  penduduk  lokal sebagai  obat  tradisional  untuk  mengobati berbagai  jenis  penyakit  degenerative. Kebanyakan penyakit degenerative tersebut  disebabkan  oleh  adanya  radikal bebas.
Radikal  bebas  merupakan  atom  atau gugus  yang  memiliki  satu  atau  lebih elektron tidak berpasangan yang berbahaya  bagi  tubuh.  Oleh  karena  itu pembentukan radikal bebas harus dihalangi atau dihambat dengan antioksidan. Antioksidan merupakan senyawa kimia yang dapat menyumbangkan  satu  atau  lebih  elektron ( electron  donor )  kepada  radikal  bebas, sehingga  reaksi  radikal  bebas  tersebut dapat terhambat. Sumber-sumber antioksidan  dapat  berupa  antioksidan alami  dan  antioksidan  sintetik  (Ridho et al ., 2013).
Salah  satu  tumbuhan  yang  diduga mengandung  antioksidan  adalah  bawang kucai.  Bawang  kucai  ( Allium  tuberosum Rottl.  Ex  Spreng)  merupakan  salah  satu tanaman    dari    famili  Liliaceae  dengan genus  allium.  Bawang  kucai  juga  sering digunakan  untuk  tujuan  terapeutik  dalam pengobatan  tradisional  untuk  mengurangi kondisi seperti sakit perut, diare, hematemesis, sengatan dan asma.
Beberapa  penelitian  terhadap  bawang kucai telah dilakukan oleh Ariesaka (2016) dan  Risky  (2014)  yang  membuktikan adanya  efek  imunomodulasi  dan  efek penurunan  low density  lipoprotein, namun
belum dilakukan pengujian aktivitas antioksidanya.
Aktivitas  antioksidan  dapat  diuji menggunakan  berbagai  metode  seperti metode  FRAP  dan  metode  DPPH. ferric reducing antioxidant power (FRAP) adalah  satu-satunya  metode  yang  secara langsung  mengukur  antioksidan  dalam bahan.    Selawa  (2013)  mengemukakan bahwa FRAP adalah metode yang digunakan  untuk  menguji  antioksidan dalam  tumbuh  –  tumbuhan.    Kelebihan metode  FRAP  ini  yaitu  metodenya  yang murah, cepat, dan reagen yang digunakkan cukup  sederhana  serta tidak  menggunakan alat  khusus  untuk  menghitung  total antioksidan.
Radikal  bebas  yang  dapat  digunakan adalah 1,1-diphenil-2-pikrilhidrazin (DPPH).  DPPH  merupakan  senyawa radikal  bebas  yang stabil sehingga apabila digunakan  sebagai  pereaksi  dalam  uji penangkapan radikal bebas cukup dilarutkan. Metode pengujian ini merupakan  metode  yang  konvensial  dan telah  lama  digunakan  untuk  penetapan aktivitas senyawa antioksidan. Mekanisme penangkapan radikal DPPH oleh antioksidan  yaitu  berupa  donasi  proton kepada  radikal  (Pokorni,  2001).  Pada metode  ini,  DPPH  berperan  sebagai radikal bebas yang direndam oleh antioksidan  dari  bahan  uji,  dimana  DPPH akan  bereaksi  dengan  antioksidan  tersebut membentuk 1,1-diphenil-2-pikrilhidrazin
(Juniarti et al., 2009).
Sehubungan  dengan  itu  peneliti menganggap  perlu  melakukan  pengujian aktivitas  antioksidan  dari  ekstrak  daun bawang  kucai  menggunakan  FRAP  ( ferric reducing  antioxidant  power) dan  metode DPPH ( 1,1-diphenil-2-pikrilhidrazin )
untuk  melihat  perbandingan  antioksidan antara kedua metode tersebut.

## METODE PENELITIAN
Alat-alat  yang  digunakan  adalah blender  (philips),  gunting,  alat-alat  gelas (pireks),  timbangan  analitik  (shimadzu), desikator, rotary evaporator , oven, ayakan 65 mesh ,  pipet  tetes,  pipet  mikro,  vortex, kertas saring, tissue, spektrofotometer UV- Vis.
Bahan-bahan  yang  digunakan  adalah daun  bawang  kucai  ( Allium  Tuberosum
Rottl.  Ex  Spreng)  dari  desa  Tolambo
Kabupaten Poso Sulawesi
Tengah, aquades,  petroleum  eter  (redestilasi), metanol  (CH 3 OH)  p.a,  asam  asetat (CH 3 COOH),  etil  asetat  (C 4 H 8 O 2 )  p.a, natrium  asetat  trihidrat  (CH 3 COONa),
2,4,6 tri-pridyal-s-triazine (TPTZ),  asam klorida  (HCl),  feri  klorida  heksahidrat (FeCl 3 .6H 2 O),  fero  sulfat  heptahidrat (FeSO 4 .7H 2 O),  magnesium  (Mg),  dan DPPH ( 1,1-diphenil-2-pikrilhidrazin ).

## Prosedur Penelitian Preparasi Sampel
Sampel  daun  bawang  kucai  ( Allium Tuberosum Rottl.  Ex  Spreng)  segar dibersihkan  terlebih  dahulu  dengan  cara dicuci menggunakan air bersih, selanjutnya  dikeringkan  secara  alami dengan  suhu  kamar  dengan  tidak  dikenai sinar  matahari  langsung  sampai  kering, kemudian  diblender  dan  diayak  dengan ayakan 65 mesh .

## Penentuan Kadar Air (AOAC, 1995)
Wadah kosong sebagai media sampel ditimbang dan dicatat  beratnya. Kemudian sampel  yang  telah  depreparasi  ditimbang sebanyak 1 g, dan dipanaskan dalam oven dengan  suhu 105℃ selama  tiga  jam.
Setelah  tiga  jam,  sampel  dimasukkan  ke
dalam  desikator  selama  30  menit  sampai berat  konstan.  Selanjutnya,  berat  akhir sampel wadah ditimbngdan dicatat beratnya.  Rumus  perhitungan  kadar  air menggunakan rumus sebagai berikut :
Kadar air = (A + B) − C B × 100%
Keterangan :
A = berat wadah B = berat sampel sebelum dipanaskan C  =  berat  sampel  +  wadah  setelah dipanaskan

## Ekstraksi Sampel
Sebanyak  40  g  sampel  serbuk  daun bawang  kucai  kering  dimaserasi  dengan 250 mL petroleum eter, 250 mL etil asetat dan  250  mL  dan  metanol  dimasukan  ke dalam  erlenmeyer  500  mL  selama  24  jam dengan  beberapa  kali  diaduk,  setelah  itu disaring  untuk  memisahkan  ampas  dan filtratnya.  Ampasnya  dimaserasi  ulang selama  24  jam  lagi  dan  disaring  dengan kertas  saring,  ulangan  dilakukan  sampai tiga kali. Filtrat pertama, kedua, dan ketiga digabung  dan  dievaporasi  menggunakan rotary evaporator pada suhu 60℃, 65℃, dan 77℃ untuk pelarut petroleum  eter,  methanol  dan  etil  asetat, hingga diperoleh ekstrak kering.

## Skrining Fitokimia Senyawa flavonoid (Harborne, 1987)
Sampel  daun  bawang  kucai  halus sebanyak 200 mg dalam tabung ditambahkan  dengan  5  mL  etanol  dan dipanaskan  selama  lima  menit  di  dalam tabung reaksi. Selanjutnya ditambahkan 4- 5 tetes HCL pekat. Kemudian ditambahkan 0,2 g bubuk Mg. Hasil positif ditunjukkan  dengan  timbulnya  warna merah tua selama 3 menit.
Senyawa saponin (Harborne, 1987) :
Sampel  daun  bawang  kucai  halus sebanyak 2 g dimasukkan ke dalam tabung reaksi,  kemudian  ditambahkan  akuades hingga seluruh sampel terendam, dididihkan selama 2-3 menit, dan selanjutnya didinginkan, kemudian dikocok kuat-kuat. Hasil positif ditunjukkan  dengan  terbentuknya  buih yang stabil.
Senyawa tannin (Harborne, 1987) :
Sampel  daun  bawang  kucai  halus sebanyak  20  mg  ditambahkan  etanol sampai sampel terendam semuanya.
Kemudian sebanyak 1 mL larutan dipindahkan  kedalam  tabung  reaksi  dan ditambahkan  2-3  tetes  larutan  FeCl 3 1%. Hasil positif ditunjukkan dengan terbentuknya  warna  hitam  kebiruan  atau hijau.
Uji Kandungan Total Fenolik (Conde et al ., 1997)
Kandungan total fenolik ekstrak daun bawang  kucai  ( Allium  Tuberosum Rottl. Ex  Spreng)  ditentukan  dengan  metode Folin  Ciocalteu.  Sebanyak  0,1  mL  larutan ekstrak  ditambahkan  0,1  mL  reagen  Folin Ciocalteu  50%.  Selanjutnya  divortex,  lalu ditambahkan  2  mL  larutan  natrium karbonat  (Na 2 CO 3 )  2  %.  Campuran diinkubasi dalam ruangan gelap selama 30 menit.  Diukur  absorbansi  pada  panjang gelombang 750 nm menggunakan spektrofotometer UV-Vis. Kandungan total  fenolik  dinyatakan  sebagai  mg ekivalen asam galat/g ekstrak.
Uji Aktivitas Antioksidan dengan Metode  FRAP  (Benzie  and  Strain., 1996)
Larutan  sampel  sebanyak  0,1  mL ditambahkan reagen FRAP (2,5  mL  buffer asetat;  2,5  mL  larutan 2,4,6-tripiridil-s- triazina (TPTZ)  dan  2,5  mL  larutan FeCl 3 .6H 2 O) sebanyak 3 mL dalam tabung reaksi. Selanjutnya larutan dibaca absorbansinya  dengan  spektrofotometer pada panjang gelombang 596 nm. Kandungan  total  antioksidan  dinyatakan sebagai ekuivalen Fe 3+ menjadi Fe 2+ dalam mmol/L ekstrak. Kurva kalibrasi dipersiapkan pada cara yang sama menggunakan Fe 2+ sebagai standar.
Uji Aktivitas Antioksidan dengan Metode DPPH (Molyneux., 2004)
Larutan  ekstrak  dan  DPPH  dibuat terlebih dahulu. Ekstrak sampel dilarutkan dalam  methanol  dan  larutan  DPPH  dibuat dengan  konsentrasi  0,4  nM.  Larutan sampel  yang  telah  dibuat  diencerkan dengan berbagai variasi konsentrasi dengan  total  volume  0,8 mL  dan dimasukan ke dalam tabung reaksi sebagai larutan uji dan juga blanko. Selanjutnya ke dalam tabung reaksi larutan uji ditambahkan  0,2  mL  larutan  DPPH  dan diinkubasi  selama 30  menit dalam kondisi gelap.  Setelah  30  menit,  blanko  dan larutan  uji  diukur  absorbansinya  dengan menggunakan  spektrofotometer  UV-Vis pada  panjang  gelombang  517  nm.  Nilai absorbansi  dari  setiap  variasi  konsentrasi dicatat dan dihitung % scavenging -nya dan nilai  IC 50 .  Pengujian  dilakukan  sebanyak dua kali.
Perhitungan  nilai  IC 50 dinyatakan dengan  persamaan  regresi  linear  dan perhitungan  % scavenging dinyatakan dengan persamaan sebagai berikut :
% 𝑠𝑐𝑎𝑣𝑒𝑛𝑔𝑖𝑛𝑔 =   ( 𝐴 𝑘𝑜𝑛𝑡𝑟𝑜𝑙 − 𝐴 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 𝐴 𝑘𝑜𝑛𝑡𝑟𝑜𝑙 ) × 100%
Keterangan:
𝐴 𝑘𝑜𝑛𝑡𝑟𝑜𝑙 = Absorbansi DPPH 𝐴 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 = Absorbansi DPPH + sampel

## HASIL DAN PEMBAHASAN Kadar Air
Pengujian  kadar  air  dilakukan  untuk mengetahui  banyaknya  kadar  air  dari sampel.  Pengujian  kadar  air  pada  daun bawang kucai dilakukan sebanyak tiga kali pengulangan, dengan hasil yang ditunjukkan pada Tabel 1.
Tabel 1. Kadar Air Daun Bawang Kucai
Pengujian Ke- Kadar Air (%) Rata-Rata (%) I 4,81 4,427 II 4,691 III 3,782
Berdasarkan  data  pada  Tabel  1, menunjukkan  bahwa  kadar  air  pada  daun bawang  kucai  memiliki  rata-rata  4,427%. Hasil  yang  didapatkan  berada  pada persentase  kurang  dari  10%.  Persentase kadar  air  yang  rendah  (di  bawah  10%) dapat  mengoptimalkan  ketahanan  bahan pangan  dari  sampel  daun  bawang  kucai dalam  waktu  yang  relatif  lama  dan  tidak mudah rusak.

## Ekstraksi
Sampel daun bawang kucai dijadikan sebagai  serbuk  untuk  proses  tahapan ekstraksi.    Semakin  kecil  ukuran  sampel, semakin  besar  luas  permukaan  sehingga bisa mempengaruhi interaksi sampel dengan  pelarut  maka  proses  ekstraksi secara  maserasi  berlangsung  optimal  dan menghasilkan  ekstrak  yang  maksimal. Pada  proses  ekstraksi  digunakan  tiga pelarut yaitu petroleum eter, etil asetat dan metanol.  Hasil  proses  eksraksi  maserasi
serbuk  daun  bawang  kucai  ditunjukkan pada table 2.
Tabel 2. Rendemen Ekstrak
Pelarut Berat Ekstrak (g) Rendemen (%) Metanol 9,6827 24,2067 Etil Asetat 2,3381 5.8452 Petroleum Eter 2,1244 5.311
Berdasarkan  data  pada  tabel  2, menunjukkan  bahwa  perbedaan  jenis pelarut  mempengaruhi  jumLah  ekstrak kasar  yang  dihasilkan,  hasil  ekstraksi methanol  mempunyai  rendemen  tertinggi kemudian  diikuti  hasil  ekstraksi  etil  asetat dan  petroleum  eter.  Tingginya  rendemen menunjukkan  bahwa  pelarut  metanol mampu mengekstrak lebih banyak komponen  bioaktif  dengan  sifat  kepolaran tinggi dari sampel daun bawang kucai. Hal ini disebabkan banyaknya jumLah senyawa  metabolit  sekunder  bersifat  polar yang  terkandung  dalam  daun  bawang kucai.  Pada  proses  maserasi,  sampel mengalami  pemecahan  dinding  sel  dan membran  sel  akibat  perbedaan  tekanan antara  di  dalam  dan  di  luar  sel  sehingga metabolit  sekunder  yang  ada  dalam sitoplasma akan terlarut dalam pelarut atau terjadi  proses  difusi.  Penggunaan  pelarut petroleum  eter,  etil  asetat  dan  metanol pada  proses  maserasi,  bertujuan  untuk mengekstrak  senyawa  metabolit  sekunder yang  terkandung  dalam  daun  bawang kucai  sesuai  dengan  sifat  kepolarannya yaitu non polar, semi polar dan polar.

## Skrining Fitokimia
Tabel  3 .  Analisis  Kualitatif  Senyawa Metabolit Sekunder Senyawa  Hasil Ket Flavonoid + Berubah warna dari Coklat kehijauan menjadi merah tua Saponin + Dari tidak berbuih menjadi berbuih Tanin - Tidak berubah warna Ket : (+) terkandung dalam sampel; (-) tidak terkandung dalam sampel Pada penelitian ini, skrining fitokimia dilakukan secara kualitatif berdasarkan  pada  sifat  kelarutan  senyawa. Pengujian  fitokimia  pada  penelitian  ini dilakukan  menggunakan  teknik  pengujian menurut  Harborne  (1987).  Hasil  uji  ini menunjukan  bahwa  daun  bawang  kucai memiliki  komponen  aktif  di  dalamnya kecuali tannin.

## Kandungan Total Fenolik
Penentuan  kandungan  total  fenolik dilakukan untuk mengetahui total kandungan  senyawa  fenolik  yang  terdapat dalam  ekstrak  metanol,  etil  asetat  dan petroleum  eter.  Penentuan  kandungan fenolik  dinyatakan  sebagai  mg  ekuivalen asam galat/g ekstrak. Hasil total kandungan  fenolik  ekstrak  metanol,  etil asetat dan petroleum eter dengan konsentrasi 1000 µg/mL ditunjukkan  pada Gambar 1.
Gambar  1. Kandungan  total  fenolik  dari ekstrak  methanol,  etil  asetat dan  petroleum  eter  (MeOH  = Metanol; EA = Etil Asetat; dan PE = Petroleum Eter)
Gambar  1  menunjukkan  bahwa  perbedaan jenis  pelarut  memberikan  pengaruh  yang berbeda  terhadap  kandungan  total  fenol yang dihasilkan. Ekstrak kasar dari pelarut
etil  asetat  memiliki  kandungan  total  fenol yang  paling  tinggi  yaitu  sebesar  57,5714 mg/g  sampel,  diikuti  oleh  ekstrak  kasar dari metanol sebesar 32,7302 mg/g sampel dan  total  fenol  dari  ekstrak  kasar petroleum  eter  sebesar  19.2381  mg/g sampel.  Senyawa  fenol  cenderung  lebih larut  pada  pelarut  polar  (Harborne  1987), akan tetapi pada hasil pengujian total fenol dari  daun  bawang  kucai  menunjukkan bahwa  ekstrak  kasar  yang  diperoleh menggunakan pelarut etil asetat memperoleh nilai total  fenol paling tinggi. Hal ini diduga banyaknya kadar fenol yang terekstrak pada pelarut etil asetat (semipolar). Menurut Harborne (1987), etil asetat  merupakan  pelarut  semipolar  yang dapat  melarutkan  senyawa  semipolar  pada dinding  sel  seperti  aglikon  flavonoid. Dalam tumbuhan, aglikon flavonoid adalah  polifenol  yang  mempunyai  sifat kimia  seperti  senyawa  fenol.  Dapat disimpulkan  bahwa  dalam  daun  bawang kucai  lebih  banyak  terkandung  senyawa aglikon flavonoid semipolar (kurang polar) dengan  pengujian  total  fenolik  yang  lebih tinggi dalam ekstrak etil asetat.
Aktivitas Antioksidan Reagen DPPH
32.7302 57.5714 19.2381 0 10 20 30 40 50 60 70 MeOH EA PE K and un gan T ot al F en ol ik (m g/g)
Gambar 2. IC 50 dari ekstrak methanol, etil asetat,  dan  petroleum  eter  (MeOH  = methanol; EA = Etil Asetat; dan PE = Petroleum Eter).
Berdasarkan
Gambar
2,
menunjukkan  bahwa  hasil  ekstraksi  etil asetat (EA) memiliki nilai IC 50 yang paling rendah  yaitu  284,563   µg/mL, diikuti oleh hasil  ekstraksi  metanol  (MeOH)  339,778 µg/mL,  dan  hasil  ekstraksi  petroleum  eter (PE)  421,740  µg/mL.  Semakin  rendah nilai  IC 50 ,  maka  semakin  besar  aktivitas antioksidan dari sampel. Berdasarkan hasil yang didapat, aktivitas antioksidan tertinggi terdapat dalam hasil ekstraksi etil asetat. Hal ini membuktikan bahwa pelarut etil  asetat  paling  efektif  dalam  mengikat senyawa  aktif  yang  berfungsi  sebagai antioksidan  yang  terdapat  pada  ekstrak daun  bawang  kucai.  Hasil  ini  juga menunjukkan  bahwa  tingginya  aktivitas antioksidan  berbanding  lurus  dengan kandungan fenolik dari sampel.
Menurut  Blois  (1985),  antioksidan dapat dibagi menjadi kategori kuat, sedang dan  lemah.  Suatu  antioksidan  dikatakan kuat  apabila  memiliki  nilai  IC 50 berkisar antara 150-300 μg/mL, antioksidan sedang memiliki nilai IC 50 berkisar antara 300-400 μg/mL,  dan  antioksidan  lemah  memiliki nilai  IC 50 berkisar  antara  400-500  μg/mL.
Sehingga  ekstrak  etil  asetat  daun  bawang kucai  dapat  dikatakan  memiliki  aktivitas antioksidan  yang  kuat  kemudian  diikuti ekstrak methanol daun bawang kucai yang
memiliki aktivitas antioksidan yang sedang  dan  ekstrak  petroleum  eter  daun bawang kucai yang aktivitas antioksidannya lemah.
Hasil reaksi antara penangkap radikal bebas  DPPH  dengan  senyawa  antioksidan dapat  diketahui  melalui  perubahan  warna dari  ungu  pekat  menjadi  kuning  akibat terjadi resonansi struktur penangkap radikal  bebas  DPPH. Perubahan  warna  ini menjadi  tolak  ukur  pengukuran  pada spektrofotometer UV-Vis.

## Aktivitas Antioksidan Reagen FRAP
Menurut  Benzie  dan  Strain  (1996), metode  FRAP  merupakan  metode  untuk mengukur  aktivitas  antioksidan  yang didasarkan pada kempuan dalam mereduksi  ion  ferri  (Fe 3+ )  menjadi  ion ferro (Fe 2+ ) pada pH rendah. Dimana akan membentuk  kompleks  warna  biru  yang menandakan  adanya  aktivitas  antioksidan pada sampel.
Gambar 3. Total Antioksidan dari ekstrak methanol,  etil  asetat,  dan petroleum  eter  (MeOH  = methanol;  EA  =  Etil  Asetat; dan PE = Petroleum Eter).
Berdasarkan  gambar  3,  menunjukan bahwa total antioksidan dari hasil ekstraksi etil asetat memiliki nilai paling tinggi yaitu 47,10345  mmol/g,  diikuti  oleh  hasil
284.563 339.778 421.74 0 100 200 300 400 500 EA MeOH PE IC 50 (µ g/m L ) 45.2931 47.10345 9.689655 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 MeOH EA PE T ot al Ant iok sid an (m m ol /g)
ekstraksi  methanol  yaitu  45,2931  mmol/g dan  hasil  ekstraksi  petroleum  eter  yaitu 9,689655  mmol/g.  Hal  ini  menunjukkan bahwa  daun  bawang  kucai  memiliki kemampuan untuk mereduksi Fe 3+ -(TPTZ) menjadi
Fe 2+ -(TPTZ).
Hasil ini membuktikan  bahwa  daun  bawang  kucai memiliki  kemampuan  untuk  mendonorkan elektronnya.  Tinggi  rendahnya  kandungan total antioksidan dalam daun bawang kucai tersebut  berhubungan  langsung  dengan aktivitasnya sebagai penyumbang elektron.
Hasil ini juga  sejalan  dengan kandungan fenolik dan aktivitas penangkal radikal bebas DPPH. Samosir et al (2010), menyatakan  semakin  banyak  senyawa fenolik  yang  terkandung  maka  semakin besar  pula  total  aktivitas  antioksidannya. Senyawa  fenolik  memiliki  kemampuan untuk  mereduksi  beberapa  ion  logam teroksidasi.  Senyawa fenolik banyak terdapat  gugus  hidroksi  yang  dapat dijadikan  donor  elektron.  Kemampuan mereduksi senyawa bioaktif dapat diasosiasikan dengan aktivitas antioksidan. Pengujian  kemampuan  mereduksi  sampel yang  mengandung  antioksidan  merupakan reduktan.  Sampel  akan  mereduksi  ion komplek  Fe 3+ untuk  membentuk  ion  Fe 2+
(Siddhuraju et al. , 2001).

## KESIMPULAN
Daun  bawang  kucai  mengandung senyawa  flavonoid  dan  saponin.  Tetapi tidak mengandung senyawa tannin.
Kandungan  total  fenolik  tertinggi  terdapat dalam  hasil  ekstraksi  etil  asetat  diikuti methanol  dan  petroleum  eter.  Hasil ekstraksi  etil  asetat  memiliki  aktivitas antioksidan  lebih  tinggi  dibandingkan methanol dan petroleum eter untuk reagen DPPH dan FRAP.
DAFTAR PUSTAKA
Aji, R. M. 2014. Uji Aktivitas Antioksidan pada  Ekstrak  Daging  Daun  Lidah Buaya  ( Aloe  Vera )  menggunakan Metode  DPPH  ( 2-2-diphenil-2- pikrilhidrazin )  [skripsi].  Fakultas Kedokteran  dan  Ilmu  Kesehatan UIN Syarif Hidayatullah, Jakarta. AOAC. 1995. Offical Methods of Analysis 16 th Ed.  Association  of  Offical
Analytical  Chemist.  Washington DC, USA. Ariesaka, K. M. 2016. Efek
Imunomodulasi  Ekstrak  Metanolik Bawang Kucai ( Allium Tuberosum ) terhadap  Kadar  CD 4+ dan  CD 8+
Tikus Wistar yang Diinduksi Doxorubicin  [skripsi].  Fakultas Kedokteran  Universitas  Jember,
Jember.
Benzie,  I.  F.  F.,  and  J.  J.  Strain.    1996.
The  Ferricreducing  Ability  of Plasma  (FRAP)  as  Ameasurement of  Antioxidant  Power:  the  FRAP assay. Analytical Biochemistry
239 :70-76. Blouis, M. S. 1958. Antioxidant
Determinations  by  the  Use  of  a Stable  Free  Radical. Nature .  1199- 1200.
Chanda,  S.,  and  R.  Dave.  2009.  In  Vitro
Models  for  Antioxidant  Activity Evaluation  and  Some  Medicinal
Plants Possessing Antioxidant
Properties  an  Overvie. African Journal  of Microbiology Research. 3(13) : 981-996.
Conde,  E.,  E.  Cadahia.,  M.C.  Garcia- Vallejo., B.F.D. Simon., and J.R.G. Adrados.  1997.  Low  Molecular Weight  Polyphenol  in  Cork  of Qoercus. J  Agric  Food  Chem . 45 : 2695-2700.
Deore,  S.  L.,  and  S.  S.  Khadabadi.  2009.
Screening  of  Antistress  Properties
of Chlorophytum  Borivilianum
Tuber. Pharmacologyonline. 1 : 320-328.
Fessenden,  R.  J.,  dan  Fessenden,  J.  S. 1986. Kimia  Organik .  Jakarta: Penerbit Erlangga.
Gholib,  G.,  Rohman,  A.  2007. Kima Farmasi: Analisis . Pustaka Pelajar. Yogyakarta.
Halvorsen,  B.  L.,  K.  Holte.,  M.  C.  W. Myhrstad., I. Barikmo., E. Hvattum.,  S.  F.  Reberg.,  A.  B. Wold.,  K.  Haffner.,  H.  Baugerod., L.  F.  Andersen.,  O.  Moskaug.,  D. R.  Jacobs.,    and  J.  R.  Blomhoff.
2002.  A  Systematic  Screening  of Total Antioxidant in Dietary
Plants. J. Nutrition . 132 : 461471.
Harborne,  J.B.  1987. Metode  Fitokimia, Penuntun Cara Modern Menganalisis Tumbuhan.
Terjemahan  K.  Padmawinata  dan
I. Soediro . ITB, Bandung.
Julkunen.,  dan  R.  Titto.  1985.  Phenolics Constituents  in  the  Leaves  of Northem Willows: Methods for the Analysis  of  Certain  Phenolics. J. Agric. Food Chem. 91 : 571-577.
Juniarti.,  O.  Devi  dan  Yuhernita.  2009. Kandungan  Senyawa  Kimia,  Uji Toksisitas  ( Brine  Shrimp  Lethality
Test ) dan Antioksidan ( 2-2- diphenil-2-pikrilhidrazin ) dari Ekstrak Daun Saga ( Abrus Precatorius  L ). Jurnal  Sains . 13(1) : 50-54.
Khopkar,  S.  M.  2010. Konsep  Dasar Kimia Analitik . Jakarta: UI-Press.
Mardawati,  E.,  C.  S.  Achyar.,  dan  H. Marta.  2008.  Kajian  Aktivitas Antioksidan Ekstrak Kulit Manggis ( Garcinia  Mangostana  L )  dalam Rangka Pemanfaatan Limbah Kulit Manggis di Kecamatan Puspahiang
Kabupaten  Tasikmalaya  [skripsi]. Fakultas Teknologi Industri
Pertanian  Universitas  Padjadjaran, Bandung.
Marinova,  G.,  dan  Batcharov,  V.  2011.
Evaluation  of  the  Methods  for Determination of The Free Radical Scavenging  Activity  by  DPPH. Journal  of  Agricultural  Science . 17(1) : 11-24
Mongkolsilp,  S.,  Pongbupakit,  I.,  Sae-lee,
N.  dan  Sitthithaworn,  W.  2004. Radical  Scavenging  Activity  and Total  Phenolic  Content  of  Medical Plants  Used  in  Primary  Health Care. Jurnal  of  Pharmacy  and Science . 9(1) : 32-35 Molyneux,  P.  2004.  The  use of  the  Stable Free Radical 2-2-diphenil-2- pikrilhidrazin (DPPH) for
Esstimating  Antioxidant  Activity. Songklanarin  J.  Sci.  Technol.
26(2) : 211-219.
Muaja,  M.  G.  D.,  M.  R.  J.  Runtuwene., dan  D.  S.  Wewengkang.  2016.  Uji Fitokimia  dan  Aktivitas  Ekstrak Etanol  Daun  Tiga  ( Allophylus cobbe L.). Jurnal  Ilmiah  Farmasi . 5(1) : 266-274.
Munekata,  P.  E.  S.,  Franco,  D.,  Trindade, M.  A.  dan  Lorenzo,  J.  M.  2016.
Characterization of Phenolic Composition  in  Chestnut  Leaves and  Beer  Residue  by  LC-DAD- ESI-MS. Journal  of  Food  Science and Technology . 68 : 52-58.
Nely,  F.  2007.  Aktivitas  Antioksidan Rempah  Pasar  dan  Bubuk  Rempah Pabrik  dengan  Metode  Polifenol dan  Uji  Aom  ( Active  Oxygen Method ) [Skripsi]. Fakultas
Teknologi Pertanian IPB, Bogor.
Pokorni,  H.  2001. Antioxidant  in  Food;
Practical  Applications .  CRS  Press,
New York.
Putra,  A.  A.  B.,  Bogoriani,  N.  W.,
Diantariani,  N.  P.,  dan  Sumadewi, N. L. U. 2014. Ekstraksi Zat Warna Alam  dari  Bonggol  Tanaman Pisang  (Musa  paradiasciaca  L.) dengan  Metode  Maserasi,  Refluks, dan  Sokletasi. Jurnal  Kimia . 8(1) : 113-119.
Ridho, E. A., R. Sari., dan S. Wahdaningsih.  2013.  Uji  Aktivitas Antioksidan Ekstrak Metanol Buah Lakum  ( Cayratia  Trifolia )  dengan Metode  DPPH  ( 2-2-diphenil-2-
pikrilhidrazin )  [skripsi].  Fakultas
Kedokteran Universitas Tanjungpura, Pontianak. Risky, I. S. 2014. Uji Efek Ekstrak Etanol 70%  Daun  Bawang  Kucai  ( Allium Tuberosum Rottl.  Ex  Spreng) Terhadap Penurunan Low – Density  Lipoprotein  (LDL)  Serum Tikus Putih Jantan ( Rattus Norvegicus ) Galur Wistar [skripsi].
Fakultas  Kedokteran  Universitas Tanjungpura, Pontianak.
Rubiatik,  S.,  Sartini.,  dan  L.  Risliana.
2015.  Skrining  Fitokimia  Dan  Uji Antimikroba Ekstrak Kasar
Bawang  Batak  ( Allium  Cinense ) Terhadap  Bakteri Staphylococcus Aureus dan Escherichia  Coli.
BioLink. 2(1) : 4-6.
Salamah  E.,  Ayuningrat  E.,  Purwaningsih
S., 2008. Penapisan Awal
Komponen  Bioaktif  dari  Kijing
Taiwan  ( Anadonta  woodiana  Lea .) sebagai Senyawa Antioksidan.
Buletin Teknologi Hasil Perikanan.
11(2) :119-132.
Selawa,  W.,  M.  R.  J.  Runtuwene.,  dan  G. Citraningtyas.  2013.  Kandungan Flavonoid Dan Kapasitas Antioksidan  Total  Ekstrak  Etanol Daun Binahong ( Anredera Cordifolia (Ten.)  Steenis). Jurnal Ilmiah Farmasi. 2(1) : 18-22.
Siddhuaraju,  P.,  K.  Vijayakumari.,  and  K Janardhanan. 1996. Chemical
Composition  and  Protein  Quality of  the  Little  Known  Legume, Velvet  Bean  ( Mucuna  pruriens ) (L) DC. Journal of Agriculture and Food Chemistry . 44 : 2636-2641.
Silalahi,  J.  2006. Makanan  Fungsional .

## Yogyakarta: Penerbit Kanisius
Singleton,  V.  L.,  and  J.  A.  Rossi.  1965. Colorunetry  of  Total  Phenolics  with Phosphomolybdic Phosphotungstic
Acid Reagents. Amer. J. Enol. Viticult .
16 : 144-58. Suryanto,  E.  2012. Fitokimia  Antioksidan . Surabaya: Putra Media Nusantara.
Takashi,  M.,  dan  Takayuki,  S.  1997.
Antioxidative  Activities  of  Natural Compounds  Found  in  Plants. Journal of  Agricultural  and  Food  Chemistry. 45(5) : 1819-1822.
Tamat, S. R., T.  Wikanta.,  dan  L. S.  Maulina. 2007.  Aktivitas  Antioksidan  dan Toksisitas  Senyawa  Bioaktif  dari Ekstrak  Rumput  Laut  Hijau Ulva
Reticulata Forsskal. Jurnal Ilmu Kefarmasian Indonesia . 5(1) : 31-36.
Ukhty, N. 2011. Kandungan Senyawa
Fitokimia,  Total  Fenol  dan  Aktivitas
Antioksidan Lamun Syringodium isoetifolium [skripsi]. Institut Pertanian Bogor, Bogor.
Veronita,  V.  2014.  Uji  Efek  Ekstrak  Etanol
70%    Daun  Bawang  Kucai    ( Allium Tuberosum Rottl. Ex Spreng)
Terhadap    Kadar  Kolesterol  Total Pada  Tikus Putih ( Rattus Norvegicus ) Jantan    Galur  Wistar  [skripsi]. Universitas Tanjungpura, Pontianak. Winarsi,  Dr.  H.  2007. Antioksidan  Alami  dan Radikal  Bebas .  Yogyakarta:  Penerbit Kanisius Yuswantina, R. 2009. Uji Aktivitas Penangkap Radikal  Dari  Ekstrak  Petroleum  Eter,
Etil  Asetat  Dan  Etanol  Rhizoma Binahong ( Anredera Cordifolia (Tenore) Steen) Dengan Metode Dpph ( 1-1-diphenil-2-pikrilhidrazin )
[skripsi]. Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta, Surakarta.