## UJI DAYA HAMBAT RAMUAN HERBAL TERHADAP PERTUMBUHAN
Staphylococcus aureus DAN Salmonella thypi
Muh. Arsan Jamili 1 , Muh. Nur Hidayat 2 , Amriana Hifizah 2
1 Alumni Jurusan Ilmu Peternakan, Email: Muhammad_arsan89@yahoo.com
2) Staf Pengajar Jurusan Ilmu peternakan Fakultas Sains dan Teknologi Universitas Islam Negeri Alauddin Makassar

## ABSTRACT
This study aims to : 1 )  Determine whether the herbal ingredients (onion , betel leaf , and cinnamon ) can inhibit the growth of bacteria and the bacteria S. aureus S. thypi 2  )  Knowing  the  long  fermentation  time  best  herbs  to  suppress  or  inhibit  the  growth  of bacteria  and  bacterial S.  thypi and S.  aureus .  Design  method  used  is  RAL  5  x  4,  5 treatments  and  4  replicates  for  each  -  each  test  bacterium  used  .  The  treatment  is  carried out to test the bacteria time to see the most effective in inhibiting the growth of bacteria S . aureus and S.  thypi in  units  of  weeks.  Result  obtained  were  processed  using  SPSS.  The results  obtained  from  this  study  showed  that  the  herb  may  inhibit  bacterial  growth inhibition test and the best herbs that herbal ingredients are fermented for 21 days (P3) can suppress the growth of S. thypi bacteria’s . In other words , P3 significantly different from P0 , P1 , P2 , and P4 ( P <0.05) . As for the bacteria S. aureus , which is a good herb to inhibit the growth of S. aureus bacteria fermented herbs either 1 week (P1) , 2 weeks (P2) , 3  weeks  (  P3  )  and  4  weeks  (  P4  )  .  Or  in  other  words  ,  each  of  these  treatments  has  no significant  difference  in  inhibiting  the  bacteria S  .  aureus .  The  treatment  is  said  to  be capable of inhibiting bacterial growth due in accordance with the standards of the Ministry of Health on scale power resistor material used is 12 mm . The materials used in this study according to treatment had a greater inhibition than the prescribed limit ( P < 0.05 )
Keywords : Inhibition, Herbal Ingredients, Fermentation , S.aureus, S.thypi

## PENDAHULUAN
Sehubungan  dengan  perkembangan  teknologi,    semakin  banyak  tanaman  obat tradisional  yang  telah  bisa  dibuktikan  khasiatnya  secara  laboratorium  dan  dijamin  aman untuk  dikonsumsi  dan  bisa  menyembuhkan  penyakit  tanpa  menimbulkan  efek samping.Banyak  bagian  tumbuhan  yang  bisa  digunakan  sebagai  obat,  diantaranya  adalah bagian buah, batang, daun, dana karatau umbi.  Oleh karena pentingnya tanaman-tanaman obat  tersebut,  maka  perlu  kita  mempelajarinya  dengan  baik  sehingga  dapat  berdayaguna bagi  kita  sendiri  maupun  digunakan  untuk  ternak.  Karena  banyak  bahan  bahan  alami
Indonesia  yang  bisa  dimanfaatkan  sebagai  alternatif  pengganti  antibiotik  diantaranya bawang merah, dan kayu manis, daun sirih.
Penyakit  yang paling sering menyerang dan menggangu system metabolism tubuh terutama  di  saluran  pencernaan  yaitu  infeksi  oleh  mikroorganisme.  Infeksi  adalah  proses invasive  oleh  mikroorganisme  dan  berfoliferansi  di  dalam  tubuh  sehingga  terjadi  sebuah penyakit.  Beberapa  mikroorganisme  secara  umum  menyebabkan  penyakit  pada  saluran pencernaan  ternak baik  yang bersifat  Gram  negative  maupun Gram  positif. Bakteri  Gram negatif salah satunya adalah bakteri S. thypi, sedangkan bakteri yang bersifat Gram positif salah satunya yaitu bakteri S. aureus.
Salmonellosis  adalah  penyakit  yang  diakibatkan  oleh  infeksi  bakteri S.thypi pada hewan S.  thypi adalah  bakteri  yang  banyak  tersebar  di  saluran  pencernaan  unggas,  reptil dan  mamalia.  Sedangkan S.  aureus dapat  menyebabkan  infeksi  supuratif  pada  hewan maupun manusia dan sering menimbulkan mastitis pada sapi dan kambing, pioderma pada anjing  maupun  kucing  serta  menimbulkan  abses  pada  semua  spesies  hewan  termasuk unggas.
Penyakit infeksi tersebut dapat diobati dengan menggunakan antibiotik. Antibiotik adalah zat-zat kimia yang dihasilkan oleh fungi,  dan bakteri tanah, yang memiliki khasiat mematikan atau menghambat pertumbuhan kuman, sedangkan toksisitasnya  bagi manusia relative  kecil.  Penggunaan  antibiotic  secara  besar-besaran  untuk  pengobatan  inilah  yang merupakan factor utama terjadinya resistensi (Ajizah, 2004).
Akhir-akhir  ini  penggunaan senyawa antibiotik mengalami penurunan dan  bahkan di  beberapa  negara  telah  dilarang  sebagai  bahan  aditif  dalam  pakan  ternak.  Hal  ini disebabkan karena dua factor utama. Pertama, kemungkinan hadirnya residu dari antibiotik yang  akan  menjadi  racun  bagi  konsumen,  disamping  itu  antibiotic  dapat  menciptakan mikroorganisme  yang  resisten  dalam  tubuh  manusia  atau  ternak  (terutama  bakteri-bakteri pathogen  seperti Escherichia  coli dan Clostidium  perfrinens ).  Dilaporkan  penggunaan antibiotik  pada  pakan  ternak  unggas  di  North  Carolina  (Amerika  Serikat)  mengakibatkan resistensi  bakteri  terhadap  Enrofloxacin,  yang  merupakan  salah  satu  antibiotik  yang direkomendasikan untuk membasmi bakteri E. coli (Anonim, 2012) .
Oleh karena itu, perlunya sebuah alternative pengganti antibiotik yang berasal dari tumbuhan yang memiliki toksisitas bagi mikroorganisme penyebab penyakit infeksi, yang mana  dalam  hal  ini  ramuan  herbal  yang  memiliki  beberapa  senyawa  yang  dapat menghambat pertumbuhan mikroorganisme yang merugikan.
Berdasarkan uraian di atas, sudah diketahui bersama sebelumnya terdapat beberapa jenis tanaman yang dapat menghambat pertumbuhan mikroorganisme patogen yang berada dalam  saluran  pencernaan  unggas  baik  yang  bersifat  Gram  negatif  maupun  Gram  positif . Maka  dari  itu,  penulis  merancang  sebuah  penelitian  dengan  menggabungkan  beberapa jenis tanaman obat sebagai ramuan herbal untuk diuji kemampuannya dalam menghambat bakteri S.  thypi dan  bakteri S.  aureus ,  sehingga  nantinya  dapat  digunakan  sebagai antibiotik herbal bagi ternak khususnya unggas.

## METODE PENELITIAN

## A. Waktu dan Tempat
Penelitian  ini  dilaksanakan  pada  bulan  Juni  –  Juli  2013.  Lokasi  penelitian bertempat diLaboratorium  Animal Nutrition, Jurusan  Ilmu Peternakan  Fakultas Sains  dan Teknologi  UIN  Alauddin  Samata  Gowa,  dan  Laboratorium  Mikrobiologi  Sekolah  Tinggi Penyuluh Pertanian (STPP) Gowa.

## B. Materi Penelitian

## 1. Bahan
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  bawang  merah,  daun  sirih,  dan kayu  manis  sebagai  bahan  utama  ramuan  herbal,  molasses,  EM4  dan  aquadest  sebagai bahan  yang  digunakan  untuk  fermentasi,  NA  (Nutrien  Agar)  pelarutetanol,  alkohol,  dan biakan bakteri salmonella thypi mureum dan bakteri Staphylococcus aureus .

## 2. Alat
Peralatan  yang  digunakanadalah  incubator,  cawan  petri,  osebulat,  neracaanalitik, oven,  pipet  tetes,  blender,  pisau,  tempatpenampung,  paper  disk,  dansebagainya  yang dianggapperlu.

## C. Metode Kerja

## 1. Rancangan Percobaan
Percobaan dilaksanakan  berdasarkan RancanganAcakLengkap (RAL) 5X4. Susunan perlakuan sebagai berikut:
P0 : Ramuan herbal yang difermentasi selama 0 hari tanpa EM4 P1 : Ramuan herbal yang difermentasi selama 0 hari dengan EM4 P2 : Ramuan herbal yang difermentasi selama 7 hari dengan EM4

## P3 : Ramuan herbal yang difermentasi selama 14 hari dengan EM4 P4 : Ramuan herbal yang difermentasi selama 21 hari dengan EM4
Mikroba yang diuji diberikan kode S untuk bakteri Salmonella dan X untuk bakteri Staphylococcus aureus .

## 2. Tahap Persiapan
a. Pembuatan Ramuan Herbal
Masing  –  masing  bahan  (bawang  merah,  dauh  sirih,  dan  kayu  manis)  ditimbang menggunakan  neraca  analitik  seberat  62,5  gram  dicuci  dan  dihaluskan  menggunakan blender,  kecuali  kayu  manis  ditumbuk  sampai  halus  dan  dicampur  menjadi  satu.  Secara terpisah  dicampur  juga  molasses  dan  EM4  dengan  takaran  masing  –  masing  250  ml. Selanjutnya  semua  dicampur  dan  ditambahkan  air  (sumur),  kemudian  diaduk  hingga homogen.  Adapun  masing  –  masing  bahan  yang  digunakan  dapat  dilihat  pada  Tabel  2 berikut:
Tabel 2. Komposisi bahan yang digunakan
Bahan yang digunakan Berat bahan
1. Bawang putih
2. Daun sirih
3. Kayu manis
4. EM4
5. Molases 6. Air sumur 62, 5 gr 62, 5 gr 62, 5 gr 250 ml 250 ml 2,5 liter

## b. Sterilisasi alat bahan

## 1) Sterilisasi menggunakan oven
Alat  –  alat  yang  tahan  panas  tinggi  misalnya  labu  erlenmeyer,  cawan  petri,  dan tabung  reaksi,  di  sterilkan  dengan  menggunakan  oven  biasanya  pada  suhu  180 o C,  tetapi terlebih  dahulu  dicuci  bersih  dan  disterilkan  dengan  menggunakan  alkohol  kemudian dibungkus dengan kertas.

## 2) Sterilisasi menggunakan autoklaf
Media  dan  bahan  disterilkan  dengan  tekanan  tinggi  menggunakan  autoklaf  pada tekanan  2  ATM  dengan  suhu  121 o C  selama  15  –  30  menit.  Biasanya  bergantung  pada jenis dan banyaknya bahan. Medium yang disterilkan adalah medium NA (Nutrien Agar) dan  Aquadest.  Selain  itu,  alat  –  alat  yang  yang  dianggap  perlu,  disterilisasi  juga  dengan menggunakan autoklaf.
3 ) Sterilisasi menggunakan bunsen
Alat  yang  terbuatt  dari  kawat  platina  seperti  kawat  ose,  disterilkan  menggunakan bunsen  dengan  cara  membakar  alat  tersebut  di  atas  api  sampai  pijar.  Disamping  itu,  juga digunakan dalam pengerjaan secara aseptis untuk meghindari terjadinya kontaminasi.

## 4) Sterilisasi menggunakan aquadest
Aquadest  dimasukkan  kedalam  labu  erlenmeyar  kemudian  ditutup  dengan menggunakan  kapas  dan  alumunium  foil  kemudian  disterilkan  ke  dalam  autoklaf  pada tekanan 2 ATM dengan suhu121 o C selama 15 menit.
3. Tahap Pelaksanaan
a. Pembuatan suspensi dan peremajaan mikroba uji

## 1) Staphylococcus aureus
Bakteri S.aureus dibiakkan terlebih dahulu pada media NA dan diinkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam. Empat sampai lima koloni S.aureus hasil biakan diambil dengan ose steril  dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi  yang  telah  berisi  lima  mili  liter  media  PBS. Inkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam, maka terbentuklah kekeruhan yang setara dengan standart  Mc  Farland  1  dengan  konsentrasi  bakteri  3  x  10 8 /  ml.  Jumlah  bakteri  telah memenuhi syarat untuk uji kepekaan yaitu : 10 5 – 10 8 / ml (Carter dan Cole, 1990).
2 ) Salmonella thypimerium
Bakteri Salmonella  thypimerium dibiakkan  terlebih  dahulu  pada  media  NA  dan diinkubasi  pada  suhu  37°C  selama  24  jam.  Empat  sampai  lima  koloni Salmonella thypimerium hasil  biakan  diambil  dengan  ose  steril  kemudian  dimasukkan  dalam  tabung reaksi yang telah berisi lima mililiter PBS. Inkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam, maka terbentuklah  kekeruhan  yang  setara  dengan  standart  Mc  Farland  1  dengan  konsentrasi bakteri 3 x 10 8 / ml. Jumlah bakteri telah memenuhi syarat untuk uji kepekaan yaitu : 10 5 –
10 8 / ml.

## D. Parameter yang Diukur
Parameter  yang  diukur  pada  penelitian  ini  yaitu  terbentuknya  daerah  hambatan pertumbuhan  bakteri  yang  ada  di  sekeliling  kertas  disk  berupa  ukuran  diameter  daerah jernih.  Pengukuran  dilakukan  dengan  menggunakan  mistar  palstik.  Interpretasi  daerah hambatan  pertumbuhan  bakteri  mengacu  pada  standart  umum  obat  asal  tanaman  yakni diameter daya hambat berukuran 12 – 24 mm (Depkes, 1988).
Metode  difusi  digunakan  dilakukan  untuk  mendeteksi  adanya  efek  anti  bakteri  dari ekstrak  yang  diuji,  dan  dilanjutkan  dengan  cara  pengenceran  tuang  (pouring  dilution method)  (Thompson,  1969)  untuk  menentukan  konsentrasi  hambat  minimal  (KHM). Bakteri  yang diuji dibiakkan secara strik pada permukaan agar di cawan petri, lalu dibuat lubang  sumuran  dengan  mnggunakan  ring,  dan  ekstrak  dimasukkan  ke  dalam  lubang sampai  merata  ke  permukaan  media.  Inkubasi  dilakukan  pada  suhu  37 o C  dan  hasilnya dapat dilihat setelah 24 jam.
Pengamatan  dan  pengolahan  data  dilakukan  setelah  masa  inkubasi  yang  dilakukan selama  24  jam  pada  suhu  37 o C  yaitu  dengan  melihat  dan  mengukur  diameter  zona hambatan yang terbentuk di sekeliling lubang sumuran yang dibuat tadi pada cawan petri.

## E. AnalisisData
Data  yang  diperoleh  dari  hasil  pengukuran  dianalisis  dengan  analisis  varians berdasarkan  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  5x4  yaitu  5  perlakuan  dan  4 ulangan.Apabila  dalam  pengujian  perlakuan  berpengaruh  nyata,  dilanjutkan  dengan  uji Beda Nyata Terkecil (BNT) (Gaspersz, 1991 ) .

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Data  rataan  diameter  daya  hambat  antibakteri  ramuan  herbal  (kombinasi  bawang putih,  daun  sirih  dan  kayu  manis)  terhadap  bakteri S.  thypi dan  bakteri S.  aureus yang dianalisis secara statistic disajikanpada Tabel 3.
Berdasarkan sidik ragam pada Tabel 3, setiap perlakuan ramuan herbal berpengruh nyata pada taraf (P<0,05) terhadap pertumbuhan mikroba uji,  yaitu S. thypi dan S. aureus. Selanjutnya hasil uji beda nyata terkecil (BNT), menunjukkan terdapat perbedaan diantara perlakuan.
Hasil pengujian pada S. thypi menunjukkan, bahwa perlakuan P0 (0 hari fermentasi tanpa  EM4)  tidak  berbeda  nyata  dengan  dan  P1(0  hari  fermentasi  menggunakan  EM4) dengan  P4 (fermentasi selama 21 hari). Demikian juga perlakuan P1 tidak berbeda nyata dengan  P2  (fermentasi  7  hari)  dan    P4  (fermentasi  21  hari).  Sedangkan  perlakuan  yang berbeda  nyata,  yaitu  P0  dengan  P2  dan  P3.  Satu-satunya  perlakuan  yang  memiliki perbedaan  nyata  dengan  perlakuan  lainnya,  yaitu  P3  (fermentasi  14  hari).  Perlakuan  ini memiliki  zona  daya  hambat  yang  lebih  luas.    Hasil  pengujian  pada S.aureus menununjukkan,  perlakuan  P0  tidak  berbeda  dengan  perlakuan  P1.  Demikian  juga perlakuan  P1  tidak  berbeda  nyata  dengan  P2,  P3  dan  P4.  Sedangkan  perlakuan  yang berbeda nyata, yaitu P0 dengan P2, P3, dan P4.
Tabel 3. Rata- rata hasil pengukuran luas daya hambat ramuan herbal (bawang putih, dun sirih, dan kayu manis terhadap pertumbuhan bakteri
Jenis Mikroba Luas Daya Hambat (mm) P0 P1 P2 P3 P4 S. thypi 17.30 a ± 0.01 19.32 ab ± 0.12 23.07 b ± 0.06 27.92 c ± 0.01 20.2 ab ± 0.22 S. thypi 20.46 a ± 0.02  24.18 ab ± 0.05 25.03 b ± 0.05 25.90 b ± 0.03 25.68 b ± 0.16
Keterangan: Spuerkrip yang berbeda pada baris yang sama menunjukkanberbeda nyata (P<0,05)
Hasil  analisis  statistik  menunjukkan  bahwa  pemberian  ramuan  herbal terhadap  masing-masing  ulangan  berpengaruh  nyata  dalam  menghambat  pertumbuhan bakteri S.  thypi dan  bakteri S.  aureus .  Rata-rata  zona  daya  hambat  dari  tiap  perlakuan mengalami  peningkatan  dari perlakuan P0 sebagai  kontrol  (0 hari fermentasi tanpa EM4) sampai  dengan  perlakuan  P3  (fermentasi  14  hari).  Kemudian  selanjutnya,  mengalami penurunan zona daya hambat pada perlakuan P4 (fermentasi selama 21 hari). Hal tersebut disajikan grafik pada Gambar 1.
Ada beberapa faktor yang mempengaruhi kerja zat anti mikroba, diantaranya yaitu: kandungan  zat  antibakteri,  suhu,  konsentrasi  zat  anti  mikroba,  umur  bakteri,  dan sebagainya.  Pada  umumnya  kemampuan  suatu  bahan  dalam  menghambatpertumbuhan bakteri  sangat  erat  hubungannya  dengan  konsentrasi  zat  antibakteri  yang  diberikan.Hal tersebut menandakan bahwa semakin tinggi konsentrasi bahan yang digunakan, maka daya tahan  mikroba  semakin  rendah  (Ristiati,  2000).  Konsentarasi  ramuan  herbal  yang digunakan  untuk  menguji  daya  hambat  masing  –  masing  bakteri  setiap  perlakuan  dalam penelitian ini yaitu sebanyak 0.5 mL.
Berdasarkan  Tabel  3  dan  4,  rata  –  rata  zona  daya  hambat  ramuan  herbal  terhadap masing – masing perlakuan yaitu lebih tinggi dari standar standar nasional Dinas kesehatan tentang  kategori  bahan  yang  berasal  dari  tanaman  dapat  dikatakan  memiliki  atau  mampu menghambat  bakteri  apabila  zona  daya  hambat  bahan  tersebut  ≥  12-24  mm  (Depkes, 2011).  Hal  tersebut  menunjukkan  bahwa  bahan  uji  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini sudah  bisa  dikatakan  mampu  menghambat  mikroba  atau  memiliki  daya  hambat  terhadap bakteri S. thypi dan bakteri S. aureus.
Adanya  zona  bening  yang  terbentuk  (Zona  daya  hambat)  di  sekitar  sumuran  yang sebelumnya telah diisi dengan  ramuan herbal  yang terdapat pada cawan petri disebabkan oleh  karena  adanya  senyawa  atau  zat  antimikroba  yang  terkandung  dalam  setiap  bahan  – bahan  yang digunakan untuk membuat ramuan herbal tersebut.  Bawang putih, daun sirih, dan kayu manis  yang digunakan untuk membuat suatu ramuan herbal semuanya memiliki sifat  sebagai  anti  mikroba.  Bawang  putih  mengandung  minyak  atsiri  yang  sangat  mudah menguap  di  udara  bebas.  Minyak  atsiri  dari  senyawa  ini  diduga  mempunyai  kemampuan sebagai  antibakteri  dan  anti  septik.  Sementara  itu  zat  yang  diduga  memberikan  aroma bawang  putih  yang  khas  adalah  alisin.  Di  dalam  tubuh  alisin  merusak  protein  kuman penyakit  sehingga  kuman  penyakit  tersebut  mati.  Alisin  merupakan  zat  aktif  yang mempunyai daya antibiotik  yang cukup ampuh. Selain itu juga mengandung minyak atsiri, dialil  sulfida,  alisin,  enzim  alinase,  saponin,  flavonoid,  polifenol,  vitamin  A,  B  dan  C (Siagian, 2002 ).
Daun sirih ( Piper betle L .) juga mempunyai daya antibakteri. Kemampuan tersebut karena  adanya  berbagai  zat  yang  terkandung  didalamnya.  Daun  sirih  mengandung  4,2  % minyak  atsiri  yang  sebagian  besar  terdiri  dari Chavicol  paraallyphenolturunan  dari Chavica  betel.  Isomer  Euganol  allypyrocatechine,  Cineol  methil  euganoldan Caryophyllen,  kavikol,  kavibekol,  estragol,  terpinen (Sastroamidjojo,  1997) . Selain  itu
didalam daun sirih juga terdapat flavanoid, saponin, dan tannin. Flavanoid selain berfungsi sebagai  bakteriostatik  juga  berfungsi  sebagai  anti  inflamasi  (Mursito,  2002).  Selain  itu, daun  sirih  juga  mengandung  kavikol  dan  kavibetol  yang  merupakan  turunan  dari  fenol yang  mempunyai  daya  antibakteri  lima  kali  lipat  dari  fenol  biasa  terhadap  fenol  biasa terhadap S.  aureus (Kartasapoetra,  1992).  Cara  kerja  fenol  dalam  membunuh mikroorganisme  yaitu  dengan  cara  mendenaturasi  protein  sel  (Pelczar  dan  Chan,  1988). Dengan terdenaturasinya protein sel, maka semua aktivitas metabolisme sel dikatalisis oleh enzim yang merupakan suatu protein (Lawrence and Block, 1968).
Kulit batang dan daun Cinnamomumburmanni mengandung minyak atsiri, saponin dan  flavonoida.Di  samping  itu  kulit  batangnya  juga  mengandung  tanin,  daunnya  juga mengandung  alkaloids  dan  polifenol,  sedangkan  substansi  yang  terdapat  paling  banyak dalam daun Cinnamomumburmanni adalah saponin,  flavonoid,  dan minyak atsiri. Kelima bahan aktif yang dimiliki daun kayu manis tersebut memiliki mekanisme tersendiri sebagai antimikroba (Towaha dan Indriati, 2008 ) .
Diantara  sekian  banyak  kandungan  zat  antibakteri  ketiga  bahan  yang  digunakan untuk  membuat  ramuan  herbal,  diduga  ada  beberapa  zat  senyawa  yang  masih  memiliki daya  hambat  yang  kuat  terhadap  bakteri  setelah  semua  bahan  tercampur.  Zat  –  zat  atau senyawa  tersebut  diantaranya  tannin,  minyak  atsiri,  alisin,  flavonoids  dan  sebagainya. Senyawa  atau  zat  antimikroba  tersebut  masing  –  masing  memiliki  cara  tersendiri  dalam menghambat  pertumbuhan  bakteri.  Ada  yang  merusak  lapisan  sel  bagian  luar,  serta  ada juga yang bereaksi langsung menembus lapisan dalam dari sel tersebut. Selain itu, ada juga yang bekerja mempengaruhi lingkungan dari bakteri uji sehingga bakteri tidak bisa tumbuh dengan baik.
Secara garis besar semua kandungan dari bahan yang digunakan yang memiliki sifat antibakteri  bekerja  sesuai  dengan  mekanisme  masing-masing  misalnya,  flavonoids, alkaloid tannin, dan minyak atsiri yaitu bekerja membentuk senyawa yang lebih kompleks kemudian mengganggu bahkan merusak membran sel bakteri uji. Akibat dari terganggunya membran  sel  tersebut,  bakteri  tidak  dapat  melakukan  aktifitas  hidup  sehingga pertumbuhannya terhambat atau mati.
Sementara itu, tanin  memiliki  aktivitas anti bakteri,  secara  garis  besar mekanisme kerja  tidak  berbeda  jauh  dengan  yang  dijelaskan  sebelumnya  yang  cenderung  bekerja merusak membran sel bakteri uji. mekanisme yang  diperkirakan  adalah sebagai  berikut: toksisitas  tanin  dapat merusak  membran  sel  bakteri,  senyawa astringent  tanin  dapat
menginduksi  pembentukan    kompleks    senyawa  ikatan  terhadap    enzim  atau    subtrat mikroba  dan pembentukan  suatu   kompleks  ikatan tanin  terhadap  ion  logam      yang dapat menambah   daya   toksisitas   tanin  itusendiri. Pendapat  lain juga  yang mengatakan bahwa  tanin  diduga    dapat  mengkerutkan  dinding    sel    atau    membran    sel    sehingga mengganggu  permeabilitas  sel  itusendiri.  Akibat  terganggunya permeabilitas,  sel  tidak dapat  melakukan aktivitas  hidup  sehingga pertumbuhannya  terhambat  atau  bahkan mati (Ajizah,    2004).  Ditambahkan  juga  bahwa  tanin    juga    mempunyai    daya    anti  bakteri dengan  cara  mempresipitasi  protein, karena  diduga  tanin  mempunyai  efekyang  sama dengan    senyawa    fenolik.    Efek  anti  bakteri    tanin    antara    lain    melalui:reaksi    dengan membran    sel,    inaktivasienzim,    dan    destruksi    atau    inaktivasifungsi  materi  genetik (Masduki, 1996).
Zat yang terkandung dalam bahan selain yang dijelaskan sebelumnya yang diduga juga memiliki peranan terbesar dalam menghambat pertumbuhan bakteri uji yaitu minyak atsiri.  Minyak  atsiri  ini  diduga  berperan    sebagai  antibakteri    dengan    cara    mengganggu proses  terbentuknya  membran  atau dinding  sel  sehingga  tidak terbentuk atau terbentuk tidak sempurna. ditambahkan juga bahwa,minyak atsiriyang aktif  sebagai antibakteri pada umumnya  mengandung  gugus  fungsi  hidroksil  (-OH)  dan    karbonil.  Turunan  fenol berinteraksi    dengan    sel    bakteri  melalui    proses    adsorpsi    yang    melibatkan  ikatan hidrogen.  Pada  kadar  rendah  terbentuk   kompleks  protein  fenol   dengan ikatan   yang lemah    dan    segera  mengalami    peruraian,    diikuti    penetrasifenol    ke    dalam    sel    dan menyebabkan presipitasi serta denaturasi protein. Pada kadar  tinggi  fenol  menyebabkan koagulasi  protein  dan  sel  membran mengalami lisis. Membrane sel yang mengalami lisis tentunya  tidak  normal  lagi,  sehingga  mengganggu  metabolisme  dari  sel  tersebut.  Akibat terganggunya  metabolisme  sel  itu,  pertumbuhan  jadi  terhambat  sehingga  kemungkinan besar sel atau bakteri uji akan mati (Parwata  dan Dewi, 2008).
Data  hasil  pengamatan  menunjukkan  rata–rata  bahwa  bakteri S.  aureus menghasilkan  diameter  zona  daya  hambat  lebih  besar  dibandingkan  dengan  bakteri S. thypi . Hal  tersebut  disebabkan karena adanya perbedaan struktur dinding  sel  pada bakteri Gram  Positif  ( S.  aureus )  dengan  bakteri  Gram  negatif  ( S.  thypi ).  Struktur  dinding  sel bakteri  Gram  negatif  lebih  kompleks  dibanding  struktur  diding  sel  bakteri  Gram  positif. Bakteri  Gram  negatif  memiliki  dinding  sel  yang  terdiri  dari  3  lapisan  yaitu  lapisan  luar, lapisan tengah dan lapisan dalam.Sedangkan bakteri  Gram  positif hanya  memiliki sebuah lapisan tunggal pada dinding selnya (Parwata  dan Dewi, 2008).
Struktur  dinding  sel  bakteri  Gram  negatif  yang  relatif  kompleks  tersebut menyebabkan  antibiotik  lebih  sulit  masuk  ke  dalam  sel  dan  menemukan  sasaran  untuk bekerja.  Untuk  menunjukkan  kerja  antibiotik  pada  bakteri  Gram  negatif,  antibiotik pertama-tama  harus  menembus  membran  terluar  selubung  bakteri  secara  difusi  pasif melalui  saluran  yang  terbentuk  oleh  pori  protein.  Setelah  menembus    membran  terluar, kinerja  antibiotik  tersebut  masuk  melalui  dinding  sel  melewati  ruang  periplasma  dan mencapai  sasaran,  yaitu  enzim  serin  protease  yang  terdapat  pada  membran  terdalam (sitoplasma).  Enzim  inilah  yang  bertanggung  jawab  terhadap  biosintesis  dinding  sel. Sehingga  didapatkan  hasil  bahwa  bakteri  Gram  positif  ( S.  aureus )  memiliki  zona  daya hambat  yang lebih besar dari bakteri  Gram  negatif ( S.  thypi )  (Siswandono dan Bambang, 1995).
Berdasarkan  hasil  pengamatan  menujukkan  terjadi  penurunan  efektifitas  ramuan herbal  sebagai  anti  mikroba  seiring  dengan  meningkatnya  lama  waktu  fermentasi.  Hal tersebut  lerlihat  dari  luas  zona  daya  hambat  pada  perlakuan  P4  mulai  berkurang.  Sifat antimikroba dari ramuan herbal yang digunakan bersifat  bakteristatik, yaitu hanya mampu menghambat  pertumbuhan  dari  bakteri S.  aureus dan S.  thypi. Ini  didasari  oleh    zona hambatan  yang  terbentuk  secara  perlahan-  lahan  kembali  menurun  atau  dengan  kata  lain, efektifitas  ramuan herbal  juga menurun.  Waktu  fermentasi  yang baik dalam  menghambat pertumbuhan S . thypi dan S . aureus pada perlakuan P3.

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil yang diperoleh, maka dapat disimpulkan bahwa:
1. Bawang  putih  ( Aliumcepa  L ),  daun  sirih  ( Piper  betel  linn) dan  kayu  manis (Cinnamo mumverum) yang diolah menjadi ramuan herbal dengan  difermentasi dapat digunakan sebagai  salah  alternatif  imbuhan  pakan  pada  ternak  karena  memiliki  kemampuan menghambat pertumbuhan S. thypi dan S. Aureus yang merupakan bakteri patogen
2. Waktu  fermentasi  terbaik  baik  dalam  menghambat  pertumbuhan    S .  thypi dan S. aureus pada perlakuan P3 (fermentasi 14 hari).

## DAFTAR PUSTAKA
Ajizah,    A.    2004.    Sensitivitas  Salmonella    Typhimurium    Terhadap  Ekstrak    Daun Psidium  Guajava L. Bioscientiae , Vol. 1, No. 1  :  31-8.
Anonim. 2012. Daya hambat antibakteri kombinasi kunyit, bawang putih dan zink terhadap S.  aureus  dan  escherichia  coli  dengan  metode  difusi  disk.  (Online), ( http://meewait.blogspot.com/2012/12/daya-hambat-antibakteri-kombinasi_31.htm , diakses 17 Mei 2013).
Carter,  G.R.  and  Cole,  J.R.  1990. Diagnostic  Procedures  in  Veterinary  Bacteriology  and Micology . 5 th Ed (P.108-123).  San Diego California: Academic Press. Inc.
Departemen  Kesehatan.  2011. Inventaris  Obat  Indonesia  Jilid  I.  Badan  Penelitian  dan Pengembangan Kesehatan . Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia.
Gaspersz, V. 1991. Metode Perancangan Percobaan. Bandung: CV. Armico.
Kartasapoetra,G. 1992. Budidaya Tanaman Berkhasiat Obat . Rineka Cipta, Jakarta. 25-26
Lawrence,  C.A.  and  Block,  S.S.  1968. Desinfection,  Sterilization  and  Preservation .  Lea.
Philadelphia: Lea and Febiger.
Masduki  I,  1996. Efek  Antibakteri Ekstrak  Biji  Pinang  (Areca  catechu)  terhadap  S. aureus  dan  E.  coli .  Cermin Dunia Kedokteran  109 :  21-4.
Mursito,  B.  2002. Ramuan  Tradisional  Untuk  Penyakit  Malaria .  Jakarta:  PT.  Penebar Swadaya.
Parwata,    I.M.O.A.    dan      Dewi,  P.F.S    2008.        Isolasi    Dan    Uji    Aktivitas  Antibakteri Minyak  atsiri  Dari Rimpang   Lengkuas  ( Alpinia   Galanga L.). Jurnal Kimia 2 (2):  100-4.
Pelczar,  M.  J.  dan  Chan,  E.  S.  1988. Dasar-dasar  Microbiologi .  Edisi  ke-2.  Jakarta: Penerbit Universitas Indonesia.
Quinn,  P.J.  2002. Veterinary  Microbiology  and  Microbial  Disease .  USA:  Blackwell Publishing Company.
Ristiati.  N.  P.  2000. Pengantar  Mikrobiologi  Umum .  Proyek  Pengembangan  sekolah menengah IBRD Loan Direktorat jenderal Pendidikan Tinggi. Jakarta: Departemen Pendidikan Nasional.
Sastroamidjojo, S. 1997. Obat Asli Indonesia . Jakarta: Dian Rakyat
Siagian  A  .2002  . Mikroba  Patogen  Pada  Makanan  Dan  Sumber  Pencemarannya .  USU Digital Library .
Siswandono dan Bambang S. 1995. Kimia Medisinal . Surabaya: Erlangga.
Towaha,  J.  dan  Indriati,  G.  2008.  Multifungsi  Tanaman  Kayu  Manis  ( Cinnamomum ).
(Online),  (http://minyakatsiriindonesia.wordpress.com/  budidaya-  kayu-manis/ juniaty- towaha-dan-gusti-indriati/, diakses 1 November 2013).
Zulhelmi.  2010.  . Kearifan  Lokal  Masyarakat  Etnis  Gayo  Terhadap  Pemanfaatan Tumbuhan Obat Di Desa  Wihnongkal Kecamatan Kute Panang Kabupaten Aceh Tengah . UNIMED: Medan.