## PENDAHULUAN
Pengendalian hayati merupakan salah satu alternatif bijak dalam melestarikan lingkungan (Gerhardson, 2002). Salah satu komponen pengendalian hayati adalah penggunaan mikroba antagonis sebagai agen pengendali hayati penyakit tanaman. Penggunaan mikroba antagonis  umumnya tidak berdampak negatif terhadap lingkungan dibandingkan dengan penggunaan fungisida sintetik.
Beberapa mikroba antagonis telah banyak ditemukan dan beberapa diantaranya mempunyai sifat antagonis terhadap berbagai patogen tumbuhan. Bakteri Burkholderi cepacia adalah salah satu bakteri endofit  yang  bersifat  antagonis  terhadap  berbagai patogen tanaman. Bakteri ini dilaporkan terbukti mampu mengendalikan beberapa jenis patogen tanaman seperti Fusarium moniliforme penyebab layu jagung (Bevivino et al ., 2000; Mendes et al ., 2007), F. moniliforme f.sp. cubense penyebab layu pisang (Salim dkk. 2003), Rhizoctonia solani (Zaki et al ., 1998), dan beberapa patogen lainnya. Akhir-akhir ini banyak penelitian yang bertujuan untuk memperkaya koleksi mikroba bermanfaat, namun belum banyak tindak lanjut pemanfaatannya.  Pembuatan formulasi merupakan salah satu hal penting dalam pemanfaatan koleksi mikroba unggul dan mempermudah dalam aplikasinya. Berbagai bentuk formulasi dapat disesuaikan dengan
sifat dan karakter mikroba yang akan digunakan sehingga dapat memudahkan aplikasinya di lapang. Bentuk formulasi yang umum dibuat adalah cair, emulsi, butiran, dan tepung. Namun apapun bentuk formulasi perlu diuji keefektifannya baik di laboratorium, rumah kaca, maupun lapang.
Penelitian ini bertujuan menguji keefektifan formulasi Burkholderia cepacia isolat E76 dalam bentuk emulsi terhadap cendawan Rhizoctonia solani Kühn isolat padi serta pengaruhnya pada terhadap pertumbuhan tanaman padi di laboratorium.

## BAHAN DAN METODE
Penelitian dilakukan di Laboratorium Penyakit, Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Bioteknologi dan Sumberdaya Genetik Pertanian, pada bulan Januari sampai dengan Juli 2012. Formulasi yang digunakan berbentuk emulsi yang merupakan campuran antara bakteri Burkholderia cepacia isolat E76 dan bahan pembawa (kaolin). Rancangan penelitian menggunakan rancangan acak lengkap terdiri dari 6 taraf masing-masing dengan 4 ulangan (Tabel 1). Isolat Rhizoctonia solani yang digunakan adalah isolat yang berasal dari pertanaman padi asal lapangan terinfeksi hawar pelepah daun.

## KEEFEKTIFAN FORMULASI BAKTERI
Burkholderia cepacia isolat E76 TERHADAP Rhizoctonia solani Kühn PADA PERTUMBUHAN TANAMAN PADI DI LABORATORIUM
Wartono 1 , Yadi Suryadi 1 , Dwi Ningsih Susilowati 1 1 Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Bioteknologi dan Sumberdaya Genetik Pertanian, Jl. Tentara Pelajar No. 3A, Bogor 16111 Telp. (0251) 8337975; Faks. (0251) 8338820; E-mail: war.tono@yahoo.com

## ABSTRACT
THE EFFECTIVENESS OF FORMULATION CONTAINING Burkholderia cepacia IN SUPPRESSING Rhizoctonia solani AND AFFECTING PLANT GROWTH . In vitro study was carried out to test the effectiveness of the formulation containing Burkholderia cepacia isolates E76 in suppressing  growth of Rhizoctonia solani and its effect on plant growth. The study was conducted at Plant Disease Laboratory, Indonesian Center for Agricultural Biotechnology and Genetic Resources Research and Development Bogor, in January to July 2012. The in vitro method was done by growing the bacteria B. cepacia isolates E76 together with R. solani in one dish of potato dextrose agar (PDA) medium. Seed of “Ciherang” rice was treated with formulation of B. cepacia isolates E76. Observation were done to relative inhibitory rate, rice germination, shoot length, and root length. Results showed that B. cepacia isolates E76 formulation was effective in suppressing the growth of R. solani with relative inhibitory rate at 24 and 48 hour after incubation, respectively 31,3 – 60,2% and 28,9 – 47,8%. Rice germination and growth on treated rice seeds were better than control treatment. Concentration at 3% concentration was suggested to be used as recommended concentration for further testing.
Key words : Formulation, Burkholderia cepacia isolat E76, Rhizoctonia solani
Perlakuan Konsentrasi aplikasi Formulasi B. cepacia 1% Formulasi B. cepacia 3% Formulasi B. cepacia 5% Formulasi B. cepacia 7% Formulasi B. cepacia 9% Kontrol (tanpa perlakuan) - Metode pengujian dilakukan dengan cara menumbuhkan larutan formulasi B. cepacia isolat E76 dan R. solani pada media PDA ( potato dextrose agar ) dalam satu petri. Siapan media PDA dibuat secara aseptik. Standar sterilisasi media dengan menggunakan autoclave pada suhu 121 º C selama 15 menit. Media kemudian dituang pada cawan petri berdiameter 9 cm. Setelah dingin media PDA langsung digunakan sebagai media pertumbuhan uji antagonis antara B. cepacia isolat E76 dengan R. solani.
Formulasi B. cepacia isolat E76 diencerkan dengan air steril sesuai dengan konsentrasi yang akan diuji. Sebanyak 100 µl larutan formulasi B. cepacia isolat E76 diletakkan pada media PDA dalam cawan petri dan diratakan menggunakan batang gelas bengkok. Setelah larutan formulasi kering, biakan inokulum R. solani yang telah berumur 5 hari ditanam di tengah-tengah media PDA. Selanjutnya biakan diinkubasi pada suhu ruang dan diamati pertumbuhan koloni R. solani sampai diperoleh ukuran optimal pada perlakuan kontrol. Diameter pertumbuhan R. solani diukur pada dua arah yang berbeda lalu hasilnya dirata-rata. Selanjutnya hasil rata-rata pengukuran diameter tersebut dikonversi kedalam persamaan THR seperti berikut (Hadiwiyono, 1999):
dk - dp THR = ———— x 100% dk
THR = tingkat hambat relatif dk = diemeter koloni R. solani pada kontrol dp = diemeter koloni R. solani pada perlakuan Daya tumbuh benih dihitung pada saat tunas padi berumur 1 minggu. Benih yang tumbuh kemudian diukur panjang tunas dan panjang akarnya, yaitu pada saat tunas berumur 18 hari setelah sebar.
Analisis statistika dilakukan dengan mencari sidik ragam dan perbandingan nilai tengah DMRT pada taraf nyata 5% dengan bantuan program pengolah data SAS Ver. 6.12.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pengaruh Formulasi terhadap Pertumbuhan R. solani Berdasarkan hasil pengujian menunjukkan bahwa formulasi B. cepacia isolat E76 secara umum mampu menekan perkembangan pertumbuhan cendawan R. solani (Gambar 1). B. cepacia adalah bakteri yang bersifat antagonis terhadap patogen. Bakteri ini mampu menghasilkan senyawa-senyawa antagonis, salah satunya adalah antibiotik alkaloid yang mampu menahan pertumbuhan patogen (Hernandez et al., 1999). Sementara B. cepacia isolat E76 yang digunakan dalam pengujian ini belum dikarakterisasi lebih lanjut sehingga belum diketahui senyawa apa yang dihasilkannya.
Gambar 1 . Pertumbuhan  koloni R. solani pada 48 jam setelah inkubasi pada perlakuan berbagai konsentrasi formulasi B. cepacia isolat E76
Dalam Tabel 2 terlihat bahwa hingga 48 jam setelah inkubasi (jsi) tingkat hambat relatif pada perlakuan formulasi B. cepacia isolat E76 pada seluruh konsentrasi aplikasi secara nyata mampu menekan perkembangan pertumbuhan cendawan R. solani . Hal ini terlihat dari nilai THR perlakuan
Tabel 1 . Perlakuan konsentrasi aplikasi formulasi B. cepacia isolat E76
formulasi B. cepacia isolat E76 yang nyata lebih besar dibanding kontrol.
Taraf konsentrasi aplikasi formulasi mempengaruhi pertumbuhan koloni cendawan R. solani . Terlihat bahwa, semakin tinggi konsentrasi, THR pada perlakuan formulasi B. cepacia isolat E76 terhadap R. solani juga semakin tinggi.
Penghambatan pertumbuhan R. solani tertinggi terjadi pada konsentrasi 9%. Hal ini diduga karena tingginya konsentrasi memungkinkan populasi bakteri B. cepacia isolat E76 yang berperan dalam menekan pertumbuhan R. solani juga semakin tinggi. Hal ini sesuai dengan karakteristik bakteri, yaitu populasi yang tinggi mendorong terjadinya kompetisi dan memungkinkan bakteri terpacu untuk melepaskan senyawa metabolit sekunder sebagai bentuk pertahanan bakteri.
Perlakuan Konsentrasi aplikasi THR (%) 24 jsi 48 jsi Formulasi B. cepacia 1% 31,3d 28,9c Formulasi B. cepacia 3% 38,5c 37,8b Formulasi B. cepacia 5% 42,7c 35,0b Formulasi B. cepacia 7% 52,3b 38,3b Formulasi B. cepacia 9% 60,2a 47,8a Kontrol (tanpa perlakuan) - 0,0e 0,0d
Pada 48 jsi nampak bahwa konsentrasi 3% keefektifannya tidak nyata dibandingkan dengan konsentrasi 5% dan 7% (Tabel 1). Selain itu, konsentrasi 3%  lebih  efisien  dalam  menekan  pertumbuhan R. solani dibandingkan dengan konsentrasi 5% dan 7%. Namun demikian perlu dilakukan studi lebih lanjut untuk mengetahui keefektifan konsentrasi 3% baik dalam skala rumah kaca maupun lapang untuk meyakinkan bahwa kosentrasi tersebut memang dapat direkomendasikan sebagai konsentrasi anjuran. Efisiensi  formulasi  merupakan  salah  satu  hal  yang perlu diperhatikan dalam aplikasi bahan aktif sehingga dapat menekan biaya, tanpa mengurangi keefektifannya dalam mengendalikan penyakit tanaman di lapang.

## Pengaruh Formulasi terhadap PertumbuhanTanaman Padi
Formulasi B. cepacia isolat E76 berperan dalam meningkatkan daya tumbuh benih dan mempengaruhi pertumbuhan tanaman padi (Gambar 2).  Benih yang diberi perlakuan formulasi B. cepacia isolat E76  secara nyata daya tumbuhnya lebih tinggi dibandingkan dengan kontrol (tanpa perlakuan). Selain itu, berdasarkan hasil pengamatan ternyata perlakuan benih padi dengan formulasi B. cepacia isolat E76 berpengaruh terhadap panjang tunas dan panjang akar tanaman padi. Dalam Tabel 3 terlihat bahwa panjang tunas yang diberi perlakuan formulasi B. cepacia isolat E76 lebih tinggi dibandingkan dengan kontrol. Demikian juga dengan panjang akar, tanaman yang diberi perlakuan formulasi B. cepacia isolat E76 Tabel 2 .   Tingkat hambat relatif (THR) formulasi B. cepacia isolat E76 terhadap pertumbuhan Rhizoctonia
secara nyata akarnya lebih panjang dibandingkan dengan kontrol. Hal ini mengindikasikan bahwa B. cepacia isolat E76 mempunyai pengaruh dalam memacu pertumbuhan tanaman. Kemampuan B. cepacia isolat E76 dalam memacu pertumbuhan dan vigor tanaman merupakan pelengkap selain fungsinya sebagai penghambat perkembangan cendawan R. solani . B. cepacia adalah salah satu bakteri rizosfer yang menghasilkan metabolit sekunder seperti siderofor yang berfungsi sebagai pemicu pertumbuhan tanaman (Meyer et al., 1995). Hasil penelitian lain menunjukkan bahwa beberapa isolat B. cepacia mempengaruhi pertumbuhan tanaman, seperti B. cepacia MCI 7 yang mampu meningkatkan bobot kecambah tanaman jagung (Bevivino et al ., 2000). Tran Van et al . (2000) juga melaporkan bahwa strain B. cepacia mampu  memfiksasi  Nitrogen  sehingga mampu memacu pertumbuhan tanaman padi .
Angka dalam satu  kolom yang sama yang diikuti huruf yang sama tidak berbeda berdasarkan uji DMRT pada taraf nyata 5% jsi = jam setelah inkubasi
Gambar 2 . Perbedaan tinggi semaian umur 18 hari setelah perlakuan formulasi B. cepacia isolat E76
Tabel 3. Daya tumbuh, panjang tunas, panjang akar dan vigor indeks tanaman padi dengan perlakuan formualsi B. cepacia isolat E76
Perlakuan Konsentrasi aplikasi Daya Tumbuh (%) Panjang tunas (cm) Panjang akar (cm) Formulasi B. cepacia 1% 95,0a 15,3b 7,2c Formulasi B. cepacia 3% 99,0a 14,9b 10,0ab Formulasi B. cepacia 5% 97,0a 18,2a 8,8bc Formulasi B. cepacia 7% 100,0a 19,0a 9,3abc Formulasi B. cepacia 9% 97,0a 19,6a 11,1a Kontrol (tanpa perlakuan) - 91,0b 10,4c 4,3d
Angka dalam satu  kolom yang sama yang diikuti huruf yang sama tidak berbeda berdasarkan uji DMRT pada taraf nyata 5%

## KESIMPULAN
Formulasi B. cepacia mampu menekan pertumbuhan cendawan R. solani secara in vitro . Konsentrasi formulasi 3% adalah konsentrasi yang efektif  lebih efisien sehingga perlu dilakukan studi lanjut pada skala rumah kaca dan lapang untuk meyakinkan bahwa konsentrasi tersebut dapat direkomendasikan sebagai konsentrasi anjuran. Aplikasi Formulasi B. cepacia isolat E76 melalui perlakuan benih mampu meningkatkan daya tumbuh, panjang tunas, dan panjang akar tanaman padi.

## DAFTAR PUSTAKA
Bevivino, A., C. Dalmastri, S. Tabacchioni, and L. Chiarini.  2000.  Efficacy  of Burkholderia cepacia MCI 7 in disease suppression and growth promotion of maize. Biology and Fertility of Soils Journal. 31(3-4):225-231. Gerhardson, B. 2002. Biological substitutes for pesticides. Trends Biotechnol. 20:338–343.
Hadiwiyono. 1999. Jamur akar gada ( Plasmodiphora brassicae Wor.) pada cruciferae: uji toleransi inang dan pengendaliannya secara hayati dengan Trichoderma . Prosiding Kongres Nasional XV dan Seminar Ilmiah Perhimpunan Fitopatologi Indonesia; Purwokerto, 16-18 September 1999. Purwokerto: Universitas Jenderal Soedirman. p. 365-371.
Hernandez, A., I. Fernandez, P. Ana, J. Miranda, F.C. Sandra, N.H. Ana, and J.L. Santander. 1999. Production,  purification  and  diagnosis  of siderophores from Pseudomonas fluorescens strain J-1443. Tropical Crops. 20 (1): 21-25. Mendes, R., A.A. Pizzirani-Kleiner, W.L. Araujo, and J.M. Raaijmakers. 2007. Diversity of cultivated endophytic bacteria from sugarcane: genetic and biochemicl characterization of Burkholderia cepacia complex isolates. Appl. Environ. Microbiol . 73: 7259-7267.
Meyer, J.M., V. Tran, A. Stinzi, O. Berge, and G. Winkelman. 1995. Ornibactin production and transport properties in strains of Burkholderia cepacia and Burkholderia vetnamienses (formely Pseudomonas cepacia ). Biometal. 8:309-307. Salim, W., S. Christanti, dan B. Hadisutrisno. 2003. Pengimbasan ketahanan pisang  terhadap penyakit layu fusarium dengan Burkholderia cepacia . Agrosains. 5(2):72-79. Tran Van V., O. Berge, S.K. Ngo, J. Balandreau, and  T.  Heulin.  2000.  Repeated  beneficial effects of rice inoculation with a strain of Burkholderia vietnamiensis on early and late yield components in low fertility sulphate acid soils of Vietnam. Plant Soil.  218: 273- 284.
Zaki, K., I.J. Misaghi, A. Heydary, and M.N. Shatla. 1998. Control of Cotton Seedling Damping-off in the Field by Burkholderia (Pseudomonas) cepacia AMMD of Four Pea Cultivars . Plant Disease. 82: 291-193.
o