e-ISSN: 2443-3446                                                                                                            ISSN: 2443-1095
PRODUKSI ANTOSIANIN DARI DAUN MIANA ( Plectranthus scutellarioides ) SEBAGAI PEWARNA ALAMI
[Anthocyanin Production From Miana Leaves (Plectranthus scutellarioides) as Natural Pigment]
Dhanang Puspita 1)* , Yosephine Diana Tjahyono 1) , Yunius Samalukang 2) , Binerd Anthon Im Toy 2) , Norson Willem Totoda 3)
1) Teknologi Pangan, Universitas Kristen Satya Wacana, Salatiga
2) Magister Biologi, Universitas Kristen Satya Wacana, Salatiga
3) Carotenoid Antioxidant Research Center, Universitas Kristen Satya Wacana, Salatiga *email: dhanang.puspita@staff.uksw.edu

## ABSTRACT
Miana (Coleus scutellaroides) is an ornamental plant of single leaf a purple color. The purple color found from miana leaves is an indicator of the presence of anthocyanin pigments. Anthocyanin from miana leaves can be utilized as a natural pigment for various staining purposes especially in the food industry, anthocyanin harvesting on miana leaves can be done at any time and does not depend on the season due to its abundant availability in nature.The aims of this study were to isolate, identify, and microencapsulated anthocyanin pigments of miana leaves. The result, pigment extracted from miana leaves had characteristic of purple color and having maximum absorbance at wavelength 529 nm, suspected as anthocyanin derivative (cyanidin-3-routosida).The  total  microcapsulated  anthocyanim  was  0.149542  mg  /  g.    Thermostability  of  encapsulated anthocyanin pigment from miana leaves stable with heat exposure temperature 100  C up to 60 minutes. Based on those collected information, encapsulated miana leaves pigment could be used as an additional natural coloring in food industries.
Keywords: anthocyanin, miana, microencapsulation, pigment, thermostability.

## ABSTRAK
Miana (Coleus scutellaroides) termasuk ke dalam tanaman hias yang berdaun tunggal dan berwarna ungu. Warna ungu yang terdapat pada daun miana adalah indikator keberadaan pigmen antosianin.Pemanfaatan daun miana sebagai sumber antosianin dapat dimanfaatkan sebagai pigmen alami untuk berbagai keperluan pewarna terutama dalam industri pangan, pemanenan antosianin pada daun miana dapat dilakukan setiap saat dan tidak bergantung pada musim dikarenakan ketersediannya  yang  selalu  melimpah  di  alam.Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk  mengisolasi,  mengidentifikasi,  dan mikroenkapsulasi pigmen antosianin dari daun miana.Berdasarkan hasil analisis didapati bahwa ekstrak pigmen daun miana memiliki karakteristik warna nampak ungu dan serapan maksimum absorbansinya berada pada panjang gelombang 529 nm, pigmen  diduga  sebagai  turunan  antosianin  yaitu  sianidin-3-rutinosida.Total  antosianim  yang  sudah  dimikroenkapsulasi sebesar 0.149542 mg/g. Dari hasil uji thermostabilitas pigmen terenkapsulasi maltodekstrin, stabilitas pigmen antosianin dari daun  miana  cenderung  stabil  dengan  adanya  pemaparan  panas  suhu  100  C  hingga  60  menit.Berdasarkan  hasil  dan pengujian, pigmen daun miana terenkapsulasi dapat menjadi pertimbangan produk untuk digunakan sebagai bahan tambahan pewarna dalam industri pangan.
Kata kunci: antosianin, miana, mikroenkapsulasi, pigmen, termostabilitas.

## PENDAHULUAN
Miana  atau  dikenal  juga  sebagai tumbuhan iler adalah daun pucuk yang memiliki nama  ilmiah Coleus  scutellaroides termasuk dalam tanaman herba atau perdu. Miana dapat dikembang  biakan  dengan  biji  atau  pun  stek, sehingga  memudahkan  dalam  perbanyakan penanaman. Pemanenan daun dapat dilakukan setiap  saat  tanpa  mengenal  musim  dan  bisa diperoleh  setiap  saat.  Tumbuhan  ini  banyak tumbuh liar ditempat yang lembab dan terbuka, seperti ditepi selokan dan di pematang sawah, dibeberapa  daerah  juga  digunakan  sebagai sayuran maupun obat (Anonim, 2004).
Daun  miana  berwarna  ungu  kecoklatan sampai  ungu  kehitaman  dan  ada  beberapa
yang  bagian  pinggirnya  bercorak  hijau  atau kuning.Warna yang nampak pada daun miana merupakan  atribut  visual  yang  timbul  akibat pemantulan cahaya. Pigmen yangbertanggung jawab  terhadap  munculnya  warna  ungu  pada daun  miana  adalah  antosianin.  Variasi  warna daun pada masing-masing varietas dipengaruhi oleh  pigmen  yang  terakumulasi  didalamnya, misalnya corak hijau yang nampak pada daun menandakan adanya akumulasi pigmen klorofil. Warna  ungu  pekat  pada  seluruh  permukaan daun  yang  nampak  pada  daun  miana disebabkan oleh tingginya kandungan antosianin (Nguyen & Cin, 2009).
Antosianin  adalah  pigmen  alami  yang larut  dalam  air  yang  diturunkan  dari  cabang biosintesis  flavanoid  (Nguyen  dan  Cin,  2009).
http://www.profood.unram.ac.id/index.php/profood
e-ISSN: 2443-3446                                                                                                            ISSN: 2443-1095
Senyawa  antosianin  bersifat  amfoter  yaitu memiliki  kemampuan  untuk  bereaksi  baik dengan  asam  maupun  dengan  basa.  Dalam kondisi asam antosianin akan berwarna merah tua,  dan  pada  media  basa  berubah  menjadi ungu dan biru. Di dalam daun miana, antosianin terekspresi  dalam  warna  ungu.  Pemanfaatan antosianin dalam daun miana dapat menjawab kebutuhan industri pangan terhadap permintaan  pewarna  yang  bersifat  non  toksik dan  aman.  Pigmen  alami  dalam  daun  miana dapat  menggantikan  penggunaan  pigmen sintetik  yangmemiliki  dampak  negatif  bagi kesehatan  manusia  dan  lingkungan.  Pigmen sintetiksusah  terurai  di  alam  dan  ketika dikonsumsi dapat menyebabkan keracunan dan berpotensi menjadi kanker (Winarti dkk, 2008).
Antosianin  pada  daun  miana  sebagai salah satu potensi penghasil pigmen alamiyang memiliki  beberapa  keuntungan  yaitu;  proses produksi  pigmen  yang  relatif  mudah,  murah dan aman. Mudah dan murah karena bahannya selalu  tersedia  di  alam  dan  melimpah,  aman karena  sifatnya  non  toksik  dan  dapat diekstraksi  menggunakan  bahan  yang  tidak berbahaya  untuk  kesehatan  manusia  maupun keseimbangan  lingkungan  alam.  Antosianin dapat  diekstrak  dengan  menggunakan  air suling.
Proses  pengkristalan  atau  enkapsulasi antosianin  bertujuan  untuk  mengurangi pengaruh  luar  lingkungan  yang  mungkin berdampak  buruk  bagi  pigmen.  Enkapsulasi adalah  salah  satu  cara  yang  efisien  untuk memasukan  suatu  senyawa  kedalam  sebuah produk, didefinisikan juga sebagai proses untuk menjebak  zat  aktif  didalam  bahan  penyalut (Tensiska  dkk,  2012).  Enkapsulasi  pigmen menjadikan produk menjadi berupa kristal atau serbuk sehingga mempermudah dalam proses penyimpanannya  Antosianin  yang  sudah dimikroenkapsulasi diharapkan bisa memberikan nilai tambah terkhusus pada teknis pemanfaatannya.
Proses pengkristalan antosianin dilakukan dengan menggunakan maltodekstrin yang  merupakan  bahan  tambahan  pangan yang  aman.  Maltodekstrin  adalah  padatan dekstrosa yang dapat digunakan sebagai bahan penyalut dengan kelarutan airnya yang tinggi, viskositas  rendah,  kadar  gula  rendah,  dan kelarutannya  tidak  berwarna.  Sifat-sifat tersebut merupakan prasyarat bahan penyalut yang  paling  umum  digunakan  dalam mikroenkapsulasi (Mahdavi dkk., 2016). Tujuan dari  penelitian  ini  adalah  untuk  mengisolasi, mengidentifikasi,  memproduksi  dan  menguji
antosianin  dari  daun  miana  sebagai  penghasil pigmen  alami.  Dari  hasil  penelitian  ini diharapkan  memberikan  informasi  tentang produksi pigmen alami dari daun miana untuk memenuhi kebutuhan pigmen alami dipasaran.

## METODOLOGI

## Ekstraksi Daun Miana
Sebanyak  200  gr  daun  miama ditumbuk  dalam  mortar  hingga  halus  lalu dimaserasi  dengan  akuades  yang  telah ditambahkan  asam  asetat  glasial  0,1% sebanyak  500  ml  secara  bertahap  hingga terekstraksi  secara  maksimal.  Ekstraksi  daun miana kemudian disentrifugasi selama 10 menit dengan kecepatan 4.000 RPM hingga diperoleh pelet  dan  supernatan.  Supernatan  kemudian disimpan untuk proses analisis dan pengkristalan pigmen.

## Kristalisasi Pigmen
Sebanyak  200  ml  supernatan  pigmen daun  miana  dicampur  dengan  maltodekstrin sebanyak  20  gr  (10%).  Campuran  keduanya kemudian  dimasukan  dalam  tabung  kolf  dan selanjutnya  dilakukan  penguapan  dengan vacuum  rotary  evaporator.  Suhu  yang digunakan  dalam  penguapan  ini  adalah  60°C. Setelah 90 menit akan terbentuk kristal-kristal dan kemudian dilakukan penggerusan dengan mortar  dan  dilakukan  pengayakan.  Kristal pigmen yang sudah dihaluskan disimpan dalam botol dan ditutup rapat dalam lemari pendingin.

## Analisis Pigmen
Analisis pertama dengan menggunakan spektrofotometer  UV-vis  untuk  pemindaian pigmen.  Sebanyak    4  ml  sampel  yang  terdiri dari ekstrak murni, kristal pigmen yang sudah dilarutkan dan dipanaskan selama 0, 10, 20, 30, 40,  50,  dan  60  menit  dipindai  pada  panjang gelombang  200  –  800  nm.  Hasil  pemindaian kemudian  diolah  dengan  menggunakan perangkat  lunak  Origin  ver.9.  Analisis  kedua menggunakan  KLT  (kromatografi  lapis  tipis), yakni  dengan  menotolkan  supernatan  yang telah dipekatkan. Dalam KLT digunakan 3 eluen yakni    akuades,  aseton,  dan  heksan  yang dilakukan  secara  terpisah  dan  masing-masing selama  15  menit.  Hasil  dari  KLT  dihitung  RF berdasarkan fraksi-fraksi warna yang terbentuk.
Uji Termostabilitas Kristal pigmen sebanyak 10% dilarutkan  dalam  akuades.  Kristal  yang  sudah dilarutkan kemudian dipanaskan sampai di titik
http://www.profood.unram.ac.id/index.php/profood
e-ISSN: 2443-3446                                                                                                            ISSN: 2443-1095
didih  air  (100°C).  Setiap  kelipatan  10  menit yakni mulai dari 0, 10, 20, 30, 40, 50, dan 60 menit  dilakukan  sampling  untuk  selanjutnya dilakukan analisis.
Penghitungan total antosianin (TA) dilakukan dengan rumus sebagai berikut:
𝑇𝐴 = (𝐴𝑏𝑠530 − 0,25. 𝐴𝑏𝑠657) 𝑥 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙 𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒 𝑒𝑥𝑡𝑟𝑎𝑐𝑡 (𝑚𝑙) 𝑚𝑎𝑠𝑠𝑎 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 (𝑔𝑟)

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Miana, Sumber Pigmen Antosianin
Penampakan  visual  memengaruhi kesan serta persepsi. Warna merupakan salah satu  atribut  visual  yang  timbul  dari  adanya pemantulan  cahaya.  Zat  warna  atau  pigmen tersedia  di  alam,  dapat  ditemukan  pada tumbuhan maupun hewan. Pigmen dapat pula dihasilkan  dengan  mereaksikan  zat-zat  kimia, namun  penggunaan  pigmen  yang  bersumber dari  reaksi kimia  buatan memiliki  efek negatif bagi kesehatan dan lingkungan. Pigmen sintetik dapat menyebabkan keracunan dan berpotensi menyebabkan kanker, berbeda dengan pigmen alami  yang  diklaim  bersifat  non  toksik,  non karsinogenik  dan  mudah  teruraidi  alam. Mengetahui  berbagai  dampak  negatif  dari penggunaan pigmen sintetik menjadikan dasar berpikir untuk
mengeksplorasi
dan mengembangkan  produk  pewarna  yang bersumber dari alam.
Gambar 1. Daun Miana Daun miana (Gambar 1) keberadaannya melimpah  dan  selalu  tersedia  di  alam  tanpa mengenal  musim.  Warna  ungu  yang  nampak menandakan  keberadaan  pigmen  antosianin. Antosianin  adalah  turunan  struktur  aromatik tunggal,  yaitu  sianidin,  dengan  penambahan
atau pengurangan dari gugus hidroksil, metilasi dan glikosilasi (Harborne, 2005).
Pigmen  antosianin  dapat  diekstrak menggunakan  berbagi  jenis    pelarut  yang bersifat  polar.  Pigmen  antosianin  dalam  daun miana  diekstrak  menggunakan  akuades, pemilihan  pelarut  berdasarkan  pertimbangan nilai ekonomis dan toksisitas. Akuades memiliki harga  yang  murah  dan  bersifat  non  toksik sehingga baik digunakan sebagai pelarut dalam produksi pigmenuntuk suplai pewarna industri pangan.  Ekstrak  pigmen  daun  miana  seperti yang  ditunjukkan  pada  Gambar  2  nampak berwarna  ungu.  Senyawa  antosianin  bersifat amfoter,  pada  pH  rendah  (1  –  2)  bentuk dominan antosianin adalah kation flaviliumdan nampak berwarna merah tua, menuju pH netral menjadi  berbentuk  karbinol  dan  sebagian menjadi kuinonoidal sehingga nampak berwarna  biru-ungu  dan  akan  berwarna  biru jika dalam kondisi basa (Gross, 1987).
Gambar 2. Ekstrak Pigmen Analisis Antosianin
Pembacaan pola spektra pada spektrofotometer  UV-vis  dilakukan  untuk melihat absorbansi maksimal sampel, selain itu juga  dapat  digunakan  untuk  mengetahui konsentrasi  total  pigmen  dalam  sampel.  Pola spektra  ekstrak  daun  miana  tergambarkan dalam  Gambar  3.  Pada  pola  spektra  tesebut terlihat  bahwa  puncak  serapan  maksimal berada  pada  529  nm,  diduga  bahwa  pigmen adalah sianidin-3-rutinosida. Berdasarkan literature,  ada  sekitar  17  antosianidin  yang ditemukan di alam, tapi hanya enam (sianidin, delphinidin,  petunidin,  peonidin,  pelargonidin, dan  malvidin)  yang  paling  sering  ditemukan (Miguel, 2011). Antosianin memiliki titik puncak serapan  520  nm  (perlargonidin),  535  nm (cyanidin),  dan  546  nm  (delphinidin)  (Gross, 1987).
e-ISSN: 2443-3446                                                                                                            ISSN: 2443-1095

## Gambar 3. Pola Spektra Pigmen
Dari hasil KLT pada Tabel 1 terlihat dua fraksi  pigmen.  Fraksi  pigmen  terpisah berdasarkan  berat  molekulnya.Pigmen  yang nilai  Rf-nya  tinggi,  artinya  memilik  berat molekul  yang  lebih  berat,  begitu  pula sebaliknya.  Perbedaan  berat  molekul  antar pigmen dalam ekstrak daun miana menyebabkan  terbentuk  dua  fraksi  pigmen hijau  dan  ungu.  Fraksi  pigmen  hijau  diduga klorofil  dan  fraksi  pigmen  ungu  adalah antosianin.
Tabel 1. Hasil uji KLT KLT Eluen Warna Rf 1. Heksan 2. Etanol 3. Aquades Hijau 5 cm
Ungu 6 cm
Produk Pigmen (Mikroenkapsulasi dan Uji Thermostabilitas)
Enkapsulasi merupakan sebuah teknik yang dilakukan untuk mengubah bentuk bahan dan  melindunginya  terhadap  pengaruh  faktor lingkungan.  Mikroenkapsulasi  adalah  suatu teknik memerangkap senyawa padat, cair atau gas aktif ke dalam sebuah matriks atau sistem dinding polimer berukuran mikro. Penyalut atau polimer yang
digunakan dalam mikroenkapsulasi  disebut  agen  enkapsulasi (AE) (Robert & Fredes, 2015). Beberapa jenis agen enkapsulasi antara lain; gum arabic, gom akasia,  protein  ( whey ),  polisakarida  seperti
maltodekstrin  dari  padatan  dekstrosa,  inulin, pati jagung dan, dan polisakarida termodifikasi. Adapun metode yang dapat digunakan antara lain:  spray  drying,  penguapan  pelarut,  freeze drying, koekstruksi, polimerisasi, fluidized bed, cairan  superkritikal,  dan  koaservasi  (Ozkan  & Bilek, 2014).
Pemilihan  agen  enkapsulasi  dan metode  yang  tepat  sangat  penting  untuk efisiensi enkapsulasi yang tepat.Secara umum, agen  enkapsulasi  yang  banyak  digunakan untuk menyalut pigmen adalah maltodekstrin. Maltodekstrin  memiliki  kemampuan  untuk berikatan  menyelubungi  pigmen  sehingga dapat  mencegah  kontak  langsung  antara pigmen  dengan  lingkungan  dan  juga meminimalisir  dampak  lingkungan  terhadap degradasi pigmen. Teknik enkapsulasi menggunakan  maltodekstrin  yang  dipilih adalah  pembuatan  emulsi  dan  pengeringan oven pada suhu 60  C. Teknik ini dipilih karena peralatan  yang  dibutuhkan  sederhana  dan pengerjaannya yang mudah.Hasil dari mikroenkapsulasi  berbentuk  serbuk  seperti yang terlihat pada Gambar 4.
Gambar 4. Produk Pigmen Hasil Enkapsulasi
Gambar 5.  Kenampakan
Visual
Uji
Thermostabilitas
A. Pola spektra uji termostabilitas.

## B. Grafik hubungan total antosianin
(abs)terhadap lama pemanasan (menit)
Gambar 6. Pola spektra antosianin yang dipanaskan dan grafik total antosianin selama pemanasan
Tabel 2. Total antosianin dari berbagai uji petik. Sampel λ 530 (nm) λ 657 (nm) Antosianin (mg/g) Tanpa Pemanasan 0.151620 0.008312 0.149542 Pemanasan 10 menit 0.190219 0.021113 0.184941 Pemanasan 20 menit 0.184281 0.016305 0.180205 Pemanasan 30 menit 0.243512 0.042572 0.232869 Pemanasan 40 menit 0.247348 0.034892 0.238625 Pemanasan 50 menit 0.299431 0.068732 0.282248 Pemanasan 60 menit 0.533187 0.129816 0.500733 Pigmen  alami  cenderung  memiliki stabilitas  rendah  terhadap  panas.  Sebagai produk pewarna untuk tambahan dalam bahan pangan, informasi tentang ketahanan terhadap paparan panas (thermostabilitas)adalah penting  sebab  banyak  produk  pangan  yang diolah  dengan  pemanasan.  Dengan  adanya informasi  tentang  termostabilitas,  dapat diketahui  ketahanan  pewarna  terhadap  suhu tinggi  dan  akan  menjadi  pertimbangan  dalam proses  sehingga  pigmen  tetap  terjaga  atau meminimalkan tingkat kerusakannya. Perlakuan uji yang digunakan terhadap pigmen daun  miana  tersalut  maltodekstrin  adalah menggunakan  titik  didih  akuades  yaitu  100  C terhadap berbagai durasi waktu.
Hasil uji pemaparan panas selama 0 – 60 menit dapat dilihat padagambar 6A. Terjadi peningkatan    terus  menerus  terhadap absorbansi  sampel.  Kenampakan  visual perubahan warna terhadap dampak pemanasan  dapat  dilihat  pada  Gambar  5. Jumlah kuantitatif konsentrasi antosianini yang diuji  dengan  pemaparan  panas  dalam  sampel dituliskan  dalam  Tabel  2  dan  grafiknya  pada Gambar  6B.  Pola  peningkatan  ini  adalah pembacaan dari  pola spektra yang  ditunjukan pada Gambar 6A. Peningkatan bisa disebabkan oleh  beberapa  faktor,  faktor  yang  pertama adalah  pemanasan  menyebabkan  penguapan
pelarut  sehingga  konsentrasi  pigmen  dalam sampel meningkat. Faktor memungkinkan yang kedua  adalah  adanya  perngaruh  dari maltodekstrin sebagai bahan penyalut pigmen. Maltodekstrin  sebagai  penyalut,  membentuk selimut  yang  melindungi  pigmen  daripaparan panas.  Panas  akan  terlebih  dahulu  mengenai maltodekstrin.  Paparan  panas  berpengaruh terhadap daya salut maltodekstrin, pemanasan yang terus-menerus akan melemahkan ikatan- ikatan  penyalut  dan  melepaskan  antosianin menyebabkan  terekspresinya  pigmen  dan meningkatnya  absorbansinya.  Pemaparan panas  yang  terus  menerus  menyebabkan pelarut pigmen teruapkan sehingga maltodekstrin semakin mengikat kuat pigmen, pemanasan  berlanjut  yang  menyebabkan habisnya  pelarut  pigmen  akan  menjadikan pigmen kembali terenkapsulasi mejadi kristal.

## KESIMPULAN
Daun  miana  dapat  dijadikan  sumber pigmen alami yaitu antosianin. Antosianin daun miana terekspresi dalam warna ungu. Pigmen antosianin dari daun miana dapat dienkapsulasi untuk menjaga stabilitasnya dan menghasilkan produk pigmen berupa serbuk yang berwarna. Total antosianim yang
sudah dimikroenkapsulasi  sebesar  0.149542  mg/g.
http://www.profood.unram.ac.id/index.php/profood
e-ISSN: 2443-3446                                                                                                            ISSN: 2443-1095
Pada uji termostabilitas, terjadi pola peningkatan  kandungan  antosianin  dalam sampel.  Berdasarkan  hasil  dan  pengujian, pigmen  daun  miana  terenkapsulasi  dapat menjadi pertimbangan produk untuk digunakan sebagai  bahan  tambahan  pewarna  dalam industri pangan.

## DAFTAR PUSTAKA
Anonim.  2004.  Iler (Coleus  scutellarioides  [L] Benth ).http;//www.pdpersi.co.id/?sho w=detailnews&kode=998&tbl=alterna tive, [28 Januari 2018].
Gross  J.  1987.  Pigment  inf  Fruits.  Academic Press. London.
Harborne JB.1987. Metode Fitokimia Penuntun Cara  Modern  Menganalisis  Tumbuhan. Bandung: ITB.
Hendry  GAF  &  Houghton  JD.  1996.  Natural Food  Colorants.  Blackie  Academic  & Profesional, London.
Lestario  LN,  Rahayuni  E,  Timotius  KH.  2011.
Kandungan  Antosianin  dan  Identifikasi
Antosianidin  dari  Kulit  Buah  Jenitri ( Elaeocarpus angustifolius Blume ) . AGRITECH, 31(2).
Lestario  LN,  Soetjipto  H,  Eviningyun  A.  2009.
Identifikasi  Antosianin  dan  Antosianidin dari Daun Iler ( Coleus scuterllariodes L. Benth)  Var.  Crispa  dan  Var.  Parfivolius. Prosiding  Seminar  Nasional  Sains  dan Pendidikan Sains IV, No. 3:665-676.
Mahdavi SA, Jafari SM, Assadpoor E, Dehnnad D.
2016. Microencapsulation optimization  of  natural  anthocyanins withmaltodekstrin,  gum  Arabic  and gelatin  Sahar.  International  Journal  of Biological  Macromolecules,  (85):  379– 385.
Miguel  MG.  2011.  Anthocyanins:  Antioxidant and/or  anti-inflammatory  activities.  J  of Applied Pharmaceutical Science, 01(06): 07-15.
Nguyen P, Cin  VD.  2009.  The role of light  on foliage  colour  development  in  coleus ( Solenostemonscutellarioides (L.) Codd). Plant  Physiology  and  Biochemistry, 47(2009) 934–945.
Ozkan G, Bilek SE. 2014. Microencapsulation of natural  food  colourants.  International Journal  of  Nutrition  and  Food  Sciences, 3(3): 145-156.
Robert P, Fredes C. 2015.  The Encapsulation of Anthocyanins from Berry-Type Fruits. Trends  in  Foods  Molecules,  20:  5875- 5888.
Suzery  M,  Lestari  S,  Cahyono  B.  2010. Penentuan Total Antosianin dari Kelopak Bunga  Rosela  ( Hibiscus  sabdariffa L.) dengan Metode Maserasi dan Sokshletasi. Jurnal Sains & Matematika, 18 (1): 1-6. Tensiska,  Nurhadi  B,  Isfron  AF.  2012. Kestabilan Warna Kurkumin Terenkapsulasi  dari  Kunyit  ( Curcuma domestica Val. ) dalam Minuman Ringan dan  Jelly  pada  berbagai  Kondisi Penyimpanan. Bionatura, 14(3):198-206.
Winarti  S,  Sarofa  U,  Anggrahini  D.  2008. Ekstraksi dan Stabilitas Warna Ubi Jalar Ungu  ( Ipomoes  batatas L.)  sebagai Pewarna  Alami.  Jurnal  Teknik  Kimia, 3(1):207-14.
Zeb  A  &  Murkovic  C.  2010.  Thin-Layer Chromatographic Analysis of Carotenoids in Plant and Animal Samples. Journal of Planar Chromatography 23 2, 94–103.