## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167 (The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (1), 112-121
Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Kulit Buah Pepaya Carica papaya L. Terhadap Bakteri Penyebab Jerawat Propionibacterium acnes .
Vania V. Liling 1* , Yessie K. Lengkey 2 , Christel N. Sambou 1 , Reky R. Palandi 2
1 Program Studi Farmasi, Fakultas FMIPA, Universitas Kristen Indonesia Tomohon
2 Program Studi Biologi, Fakultas FMIPA, Universitas Kristen Indonesia Tomohon
* Penulis Korespondensi; vaniavliling@gmail.com Diterima : 12 Desember 2019; Disetujui : 20 Januari 2020

## ABSTRAK
Kulit  buah  pepaya  jarang  digunakan  masyarakat  sebagai  obat  tradisional,  padahal  kulit  buah  pepaya memiliki kandungan gizi yang hampir mirip dengan daging buahnya. Kulit buah pepaya Carica papaya L. mengandung  senyawa  antibakteri  seperti  alkaloid,  tanin,  steroid,  saponin,  flavonoid.  Bakteri Propionibacterium  acnes merupakan  bakteri  flora  normal  pada  kulit  yang  berperan  dalam  pembentukan jerawat.  Tujuan  penelitian  untuk  mengetahui  nilai  zona  hambat  dari  ekstrak  kulit  buah  pepaya Carica papaya L. terhadap bakteri penyebab jerawat P. acnes . Jenis penelitian ini adalah eksperimen laboratorium. Uji daya hambat dengan menggunakan metode difusi kertas cakram. Variabel penelitian yaitu konsentrasi ekstrak kulit buah pepaya Carica papaya L. 10µg/50µL, 20µg/50µL, 30µg/50µL, 40µg/50µL, 50µg/50µL dan zona hambat pertumbuhan bakteri P. acnes . Hasil penelitian ini didapatkan ekstrak kulit buah pepaya Carica papaya L. dapat menghambat pertumbuahan bakteri P. acnes pada konsentrasi 20% sampai 100% dengan rata-rata diameter zona hambat 9,83 mm sampai dengan 11,67 mm dengan kategori sedang hingga kuat.  Hal  ini  menunjukan  bahwa  ekstrak  kulit  buah  pepaya Carica  papaya L.  mempunyai  pengaruh terhadap pertumbuhan bakteri penyebab jerawat P. acnes .
Kata kunci: Kulit Buah Pepaya, Etanol, Propionibacterium acnes.

## ABSTRACT
The  skin  of  papaya  fruit  is  rarely  used  as  a  traditional  medicine,  whereas  the  skin  of  papaya  fruit  has nutritional value that is almost similar to the fruit flesh. The skin of papaya fruit Carica papaya L. contain of anti-bacteria compound, such as alkaloids, tannins, steroids, saponins, flavonoids. Propionibacterium acnes is a normal flora on the skin that plays a role in the formation of acne. The purpose of this observation is to find out the inhibitory zone values of the skin of papaya fruit Carica papaya L. extract against acne- causing bacteria P. acnes. The observer conducts a laboratory experiment. To conduct obstruction power test, the observer uses disc paper diffusion method. The observation variable measures the skin of papaya fruit  extract  concentration  in  10µg/50µL,  20µg/50µL,  30µg/50µL,  40µg/50µL,  50µg/50µL  and  the obstruction zone growth of P. acnes bacteria. Hence, the result shows that the skin of  papaya fruit (Carica papaya L) extract successfully obstruct the growth of P. acnes bacteria in a concentration range 20 % to 100 % with the diameter zone average 9,83 mm to 11.67 mm in a medium and strong category. Thus, it shows  that  the  skin  of  papaya  fruit  Carica  papaya L. extract  significantly  influence  the  growth  of acne- causing bacteria P. acnes.
Keywords: The Skin of Papaya Fruit, Ethanol, Propionibacterium acnes.

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167 (The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (1), 112-121

## PENDAHULUAN
Penyakit  kulit  yang  sering  terjadi  di kalangan  remaja  maupun  dewasa  muda  adalah acne atau  biasa  disebut  jerawat.  Jerawat  adalah penyakit  kulit  obstruktif  dan  inflamatif  kronik pada  pilosebasea.  Faktor  utama  penyebab munculnya  jerawat  adalah  adanya  peningkatan produksi sebum atau kelenjar minyak pada kulit, peluruhan  keratinosit  serta  adanya  pertumbuhan bakteri  disaluran  pilosebasea  yang  secara  alami terkandung dalam kulit normal [1, 2].
Salah satu bakteri penyebab jerawat adalah Propionibacterium  acnes . P.  acnes merupakan salah  satu  bakteri  Gram  positif  yang  merupakan bagian flora normal yang terdapat pada kulit dan dapat  menyebabkan  infeksi  oportunistik  yang menghasilkan  lipase  sebagai  kontributor  pada pembentukan jerawat [3].
Antibakteri adalah zat yang dapat
mengganggu pertumbuhan atau bahkan mematikan  bakteri  dengan  cara  mengganggu metabolisme mikroba yang merugikan.
Antibiotik  merupakan pilihan utama pengobatan jerawat namun dapat menimbulkan efek samping yaitu  iritasi  dan  resistensi  sehingga  perlu diperhatikan  penggunaannya.  Masalah  yang ditimbulkan  akibat  penggunaan  antibiotik  harus dicari alternatif lainnya, yakni dengan menggunakan  tanaman  herbal  dengan  harapan dapat  meminimalkan  efek  samping  penggunaan obat [4, 5].
Tanaman yang dipercaya dapat menghambat  pertumbuhan  bakteri  salah  satunya adalah tanaman pepaya. Tanaman pepaya adalah tanaman  yang  berasal  dari  famili Caricaceae . Bagian pohon pepaya seperti akar, batang, daun, daging buah, bahkan biji telah diteliti mempunyai aktivitas antibakteri terhadap bakteri Gram positif maupun  Gram  negatif  [6,  7].  Dari  penelitian tersebut tidak menutup kemungkinan bahwa kulit buah pepaya juga efektif sebagai antibakteri.
Secara  empiris,  masyarakat  Papua  Nugini menggunakan  kulit  buah  pepaya  sebagai  bahan
penyembuh  untuk  menanggulangi  ruam  kulit, kulit  yang  terbakar  sinar  matahari,  dan menghilangkan  noda  hitam  di  wajah  yang mengganggu penampilan. Berdasarkan penelitian yang  telah  dilakukan  kulit  buah  pepaya mengandung  senyawa  triterpenoid,  alkaloid, antrakuinon, flavonoid [8, 9].
Beberapa studi melaporkan bahwa adanya aktivitas  antibakteri  pada  berbagai  senyawa fenolik dan senyawa turunan lainnya. Berdasarkan  latar  belakang  di  atas  penulis  ingin melakukan  penelitian  tentang  uji  aktivitas antibakteri  ekstrak  kulit  buah  pepaya  terhadap bakteri penyebab jerawat ( P. acnes )

## METODE PENELITIAN

## Tempat Dan Waktu Penelitian
Penelitian  ini  dilaksanakan  di  laboratorium terpadu Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Kristen Indonesia
Tomohon dan laboratorium mikrobiolgi Universitas  Sam  Ratulangi  Manado.  Waktu pelaksanaan  penelitian  dilakukan  pada  bulan September sampai Oktober 2019.

## Bahan dan Alat
Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian  ini  antara  lain  kulit  buah  pepaya, bakteri P.  acnes ,  etanol  70%,  aquades,  Nutrient Broth (NB), aquades sebagai kontrol negatif, dan clindamycin sebagai kontrol positif.
Alat  yang  digunakan  adalah  gelas  ukur, erlenmeyer,  oven,  aluminium  foil,  timbangan analitik  (Pgl  20001),  bejana  kaca,  botol  kaca, batang  pengaduk,  kertas  saring,  gelas  beaker, rotary  evaporator  eyela(N-1001V-WWith  SB- 1000),  inkubator,  kawat  ose,  pembakar  bunsen, jangka sorong, cawan petri, autoklaf, gelas ukur, tabung  reaksi,  Laminar  Air  Flow  (LAF), spektrofotometer  (UV-VIS  T60),  kuvet,  pinset, magnetic  stirrer,  mikropipet,  spatula,  dan  kertas cakram (advantec).
e - ISSN 2685-3167 (The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (1), 112-121

## Metode Penelitian
Metode  uji  antibakteri  yang  dipakai  dalam penelitian ini dengan menggunakan teknik difusi cakram. Jenis penelitian ini merupakan penelitian eksperimental laboratorium, dengan menggunakan  5  perlakuan  dengan  3  kali pengujian.
Berikut  konsentrasi  ekstrak,  kontrol  positif dan  kontrol  negatif  yang  digunakan  dalam penelitian ini:
K1 : Ekstrak kulit buah pepaya konsentrasi 20% K2 : Ekstrak kulit buah pepaya konsentrasi 40% K3 : Ekstrak kulit buah pepaya konsentrasi 60% K4 : Ekstrak kulit buah pepaya konsentrasi 80% K5 : Ekstrak kulit buah pepaya konsentrasi 100% K (-) : Kontrol negatif aquades K (+) : Kontrol positif clindamycin 5μg/50μL

## Prosedur Skrining Fitokimia

## Uji Alkaloid
Sampel  ekstrak  sebanyak  50-100  mg ditambahkan kloroform secukupnya, selanjutnya ditambahkan  10  mL  amoniak  dan  10  mL kloroform.  Kemudian  larutan  disaring  ke  dalam tabung  reaksi  dan  filtrat  ditambahkan  10  tetes H 2 SO 4 .  Campuran  dikocok  dengan  teratur, dibiarkan  beberapa  menit  sampai  terbentuk  2 lapisan.  Lapisan  atas  dipindahkan  ke  dalam  tiga tabung  reaksi  masing-masing  sebanyak  1  mL. Kemudian masing-masing tabung tersebut ditambahkan  beberapa  tetes  pereaksi  Mayer, Wagner  dan  Dragendorff.  Apabila  terbentuk endapan  menunjukan  bahwa  sampel  tersebut mengandung  alkaloid,  dengan  pereaksi  Mayer memberikan  endapan  putih,  dengan  pereaksi Wagner  memberikan  endapan  berwarna  coklat dan  pereaksi  Dragendorff  memberikan  endapan berwarna jingga [10].

## Uji Triterpenoid dan Saponin
Sampel  sebanyak  50-100  mg  ditambahkan asam  asetat  glasial  sampai  semua  sampel terendam, dibiarkan selama 15 menit kemudian 6 tetes larutan dipindahkan ke dalam tabung reaksi dan  ditambahkan  2-3  tetes  asam  sulfat  pekat. Adanya triterpenoid ditunjukkan dengan terjadinya  warna  merah,  jingga  atau  ungu sedangkan steroida ditujukan dengan terbentuknya warna hijau kebiruan [10].

## Uji Tanin
Sampel  sebanyak  50  mg  ditambah  etanol sampai  sampel  terendam  semuanya.  Kemudian ditambahkan  2-3  tetes  larutan  FeCl3  1%.  Hasil positif  ditunjukkan  dengan  terbentuknya  warna hitam kebiruan atau hijau [10].

## Uji Flavonoid
Sampel  halus  sebanyak  50  mg  diekstrak dengan 5 mL etanol dan dipanaskan selama lima menit  di  dalam  tabung  reaksi.  Selanjutnya ditambah  beberapa  tetes  HCl  pekat.  Kemudian ditambahkan  0,2  g  bubuk  Mg.  Hasil  positif ditunjukkan  dengan  timbulnya  warna  merah  tua selama 3 menit [10].

## Uji Saponin
Sampel  sebanyak  50mg  dimasukkan  ke dalam  tabung  reaksi,  kemudian  ditambahkan akuades  hingga  seluruh  sampel  terendam, dididihkan  selama  2-3  menit,  dan  selanjutnya didinginkan,  kemudian  dikocok  kuat-kuat.  asil positif  ditunjukkan  dengan  terbentuknya  buih yang stabil [10].

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167 (The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (1), 112-121
Prosedur  Kerja  Penyiapan  Sampel  dan Pembuatan Ekstrak

## Pengambilan Sampel Kulit Buah Pepaya
Sampel  yang  akan  digunakan  adalah  kulit buah  pepaya  yang  masih  berwarna  hijau  dan segar  sebanyak  1  kg  yang  diperoleh  dari  Kota Bitung,  Propinsi  Sulawesi  utara.  Sampel  dicuci dengan air mengalir hingga bersih.

## Pembuatan Ekstrak Kulit Buah Pepaya
Sampel  segar  kemudian  diekstraksi  dengan metode  maserasi  dalam  bejana  kaca  dengan menggunakan pelarut etanol 70% sampai sampel terendam  seluruhnya,  setelah  itu  ditutup  dengan aluminium  foil  dan  dibiarkan  selama  1  minggu. Kemudian  filtrat  disaring  menggunakan  kertas saring,  proses  filtrasi  menghasilkan  filtrat. Kemudian filtrat dipekatkan menggunakan rotary evaporator pada  suhu  40  C,  hingga  diperoleh ekstrak kental. Ekstrak kemudian ditimbang  dan disimpan  dalam  wadah  kaca  tertutup  sebelum digunakan untuk pengujian.

## Persiapan Media-Media Untuk Bakteri Uji
Pembuatan Media Nutrient Agar (NA)
Media  NA  dibuat  dengan  konsentrasi  2%. Sebanyak 2 gram media NA dilarutkan dalam 100 mL akuades. Kemudian diaduk dengan magnetic stirer  dengan  pemanasan  pada  suhu  70°C. Kemudian  28  mL  media  ini  ditempatkan  ke dalam tabung reaksi  masing-masing 7 mL untuk agar  miring.  Media  selanjutnya  di  sterilisasi menggunakan  autoklaf  pada  suhu  121°C  selama 15 menit. Media untuk agar miring diletakan pada papan miring hingga beku dan diinkubasi selama 24 jam [11].

## Pembuatan Media Nutrient broth (NB)
Media  ini  dibuat  dengan  konsentrasi  2%. Sebanyak 2 gram media NB dilarutkan dalam 100
mL  akuades  di  dalam  erlenmeyer.  Kemudian diaduk  dengan  magnetik  stirer  disertai  dengan pemanasan  pada  suhu  70°C.  Erlenmeyer kemudian  ditutup  rapat  dengan  kapas  dan aluminium foil. Media ini disterilisasi menggunakan  autoklaf  pada  suhu  121°C  selama 15 menit [11].

## Pembuatan Suspensi Bakteri Uji
Bakteri  uji  pada  media agar  miring  diambil dengan  kawat  ose  steril  lalu  disuspensikan  ke dalam  erlenmeyer  yang  berisi  100  ml  NB  yang telah  disterilkan  kemudian  diaduk,  selanjutnya suspensi  bakteri  di  inkubasi  pada  suhu  37ºc selama 24 jam .

## Pembuatan Media Padat
Sebanyak  1  gram  NB  dicampurkan  dengan 1.5 g agar yang sudah ditimbang dan tambahkan aquades sebanyak 100 mL kemudian dihomogenkan  dengan  magnetic  stirrer,  larutan yang sudah homogen diterilisasi dengan autoclaf pada suhu 121 ºC selama 15 menit.

## Prosedur Uji Antibakteri
Ekstrak kental kulit buah pepaya ditimbang  sebanyak  5  g  kemudian  dilarutkan dalam 5 mL etanol 70 % sebagai larutan standar, kemudian dibuat 5 serial konsentrasi yaitu 20%, 40%,  60%,  80%,  100%.  Untuk  kontrol  positif digunakan disc antibiotik  clindamycin  dengan dosis 5μg/50μL sedangkan untuk kontrol negatif digunakan  aquades.  Kertas  cakram  yang  telah disterilkan  ditotol  dengan  masing-masing  seri konsentrasi  ekstrak  kulit  buah  pepaya,  kontrol positif  dan  kontrol  negatif  setelah  itu  kertas cakram  diletakan  diatas  aluminium  foil,  kertas cakram  dibiarkan  hingga  kering  pada  suhu ruangan. Sebanyak 3 mL larutan blanko dan 3 mL suspensi  bakteri  diambil  kemudian  dimasukan kedalam  2  buah  kuvet  selanjutnya  diukur  nilai tingkat  kepadatan  dari  bakteri  menggunakan spektrofotometer  UV-VIS.  Jumlah  sel bakteri

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167 (The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (1), 112-121
dapat diukur dengan cara mengetahui kekeruhan (turbiditas)  kultur.  Semakin  keruh  suatu  kultur, semakin  banyak  jumlah  selnya.  Cahaya  yang dipancarkan pada spektrofotometer UV-VIS akan mengenai  sel  sehingga  sebagian  cahaya  akan diserap  dan  sebagian  diteruskan.  Besarnya cahaya  dalam  spektrofotometer  UV-VIS  yang diserap  oleh  sel  dalam  kuvet  dihitung  sebagai nilai  absorbansi.  Dari  data  absorbansi  dihitung persentase  daya  hambat  (%  inhibisi)  terhadap bakteri  pada  masing-masing  sampel.  Hasil pengujian aktvitas antibakteri ekstrak etanol kulit buah  pepaya  terhadap  bakteri P.  acnes menggunakan  metode  OD  λmax  600  nm.  Pada panjang  gelombang  600  nm  dengan  absorbansi 1.0 nilai kepadatan bakteri dalam suspensi adalah 8  10 8 CFU/mL.  Setelah  kepadatan  bakteri diketahui, suspensi bakteri kemudian diencerkan hingga  menjadi  1  10 6 .  Jumlah  bakteri  ini  sudah memenuhi  standar  untuk  uji  kepekaan  bakteri yaitu 10 5 -10 8 CFU/mL [3]. Suspensi bakteri yang telah  diencerkan,  diambil  dan  dimasukan  ke dalam  erlenmeyer  yang  berisi  100  mL  media padat  steril  dan  sudah  didinginkan  hingga  suhu ±45-50  C.  Erlenmeyer  kemudian  digoyangkan hingga suspensi bakteri tercampur dengan media, selanjutnya media dituang sebanyak 20 mL untuk setiap  cawan  petri  dan  dibiarkan  hingga memadat.  Kertas  cakram  yang  telah  kering ditempelkan pada media pengujian dalam cawan petri yang telah diberi tanda dan dibiarkan selama 24 jam pada suhu 37ºC. Selanjutnya diukur zona hambat  yang  terbentuk  menggunakan  jangka sorong. Pengujian ini dilakukan sebanyak 3 kali.

## Cara Perhitungan Zona Hambat
Perhitungan  diameter  zona  hambat  dengan menggunakan rumus: 𝑑 = A+B 2
Keterangan : d = diameter zona hambat A =diameter vertikal B = diameter horisontal
Jika  dikaitkan  dengan  ketentuan  kriteria aktivitas  daya  hambat  yang  dikemukaan  oleh zona hambat yang terbentuk ≥ 20 mm  dianggap memiliki aktivitas daya  hambat sangat kuat,  10- 20  mm  dinyatakan  memiliki  aktivitas  daya hambat  kuat,  5-10  mm  dinyatakan  memiliki aktivitas  daya  hambat  sedang  dan  ≤  5  mm dinyatakan  memiliki  aktivitas  daya  hambat lemah. [12].

## Analisa Data
Data  hasil  pengujian  aktivitas  antibakteri ekstrak  etanol  kulit  buah  pepaya  terhadap P. acnes akan dihitung secara manual menggunakan rumus  perhitungan  zona  hambat,  kemudian  data yang  sudah  diolah  akan  disajikan  dalam  bentuk tabel.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Penyiapan Sampel
Sampel  kulit  buah  pepaya  yang  digunakan dalam  penelitian  ini  diperoleh  dari  Kota  Bitung, Sulawesi  Utara.  Sampel  yang  digunakan  yaitu kulit buah yang berwarna hijau, tidak berlubang, dan  tidak  berbintik-bintik.  Sampel  kemudian dicuci  bersih  dengan  air  mengalir  dan  diangin- anginkan.  Sampel  kemudian  dirajang  dan ditimbang sebanyak 1 kg.

## Pembuatan Ekstrak Kulit Buah Pepaya
Sampel  yang  telah  ditimbang,  diekstrasi dengan  metode  maserasi.  Maserasi  merupakan cara sederhana yang dapat dilakukan dengan cara merendam  serbuk  simplisia  dalam  pelarut  [13]. Pelarut akan menembus dinding sel dan masuk ke dalam rongga sel yang mengandung zat-zat aktif sehingga  zat  aktif  akan  larut.  Pelarut  yang digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  pelarut etanol  70%.Senyawa  metabolit  sekunder  yang akan  diambil  pada  kulit  buah  pepaya  bersifat polar  sehingga  proses  ekstrasi  menggunakan pelarut polar yaitu etanol 70%. Etanol 70% dapat

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167 (The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (1), 112-121
menarik  senyawa-senyawa  baik  polar  atau  non polar  seperti  alkaloid,  flavonoid,  tanin,  saponin, dan steroid [14]. Hasil ekstrak kental dapat dilihat pada tabel 1.
Tabel 1. Ekstrak Kental Kulit Buah Pepaya
pengenceran  untuk  mendapatkan  konsentrasi akhir yaitu 10µg/50µL, 20µg/50µL, 30µg/50µL,
40µg/50µL, 50µg/50µL. Kontrol positif menggunakan disc antibiotik clindamycin dengan dosis 5µg/50µL. Pemilihan antibiotik
clindamycin  sebagai  kontrol  positif  karena bakteri P.  acnes masih  sensitif  berdasarkan Clinical    Laboratory    Susceptibility    Institute (CLSI)  tahun  2016.  Sedangkan  aquades  yang Kulit Buah Pepaya 1 kg Etanol 26.71 g 70% merupakan  pelarut  ekstrak  digunakan  sebagai kontrol  negatif.  Sebelum  digunakan  untuk pengujian,  kepadatan  sel  bakteri  uji  pada  media broth yang telah diinkubasi selama 24  jam pada
Skrining Fitokimia
Tabel 2. Skrining Fitokimia Kulit Buah Pepaya Alkaloid + Terbentuk endapan putih (Pereaksi Mayer), coklat (Pereaksi Wagner) dan jingga (Pereksi Dragendorf) Tanin + Terbentuk warna hitam kehijauan Triterpenoid - Tidak terbentuk warna merah, jingga atau ungu Steroid + Terbentuk warna hijau kebiruan Saponin + Terbentuk busa yang stabil Flavonoid + Terbentuk warna merah tua suhu 37  C ditentukan terlebih dahulu menggunakan  spektrofotometer  UV-VIS  pada panjang gelombang 600 nm. Panjang gelombang 600  nm  nilai  absorbansi  cenderung  linier  yaitu meningkat 2 kali lipat seiring berjalannya waktu. Dengan begitu panjang gelombang 600 nm yang paling cocok digunakan untuk mengukur tingkat kepadatan  sel  bakteri.  Analisis  kepadatan  sel bakteri  menggunakan  spektrofotometer  UV-VIS pada  panjang  gelombang  600  nm  dengan absorbansi  1,0  nilai  kepadatan  sel  bakteri  dalam suspensi adalah 8  10 8 CFU/mL. [15]

## Uji Aktivitas Antibakteri
Pengujian
aktivitas antibakteri ini menggunakan  metode  difusi  agar  dengan menggunakan kertas cakram, kertas cakram yang telah dijenuhkan dengan senyawa uji ditempelkan pada  media  berisi  bakteri  dalam  cawan  petri. Diameter kertas cakram adalah 6 mm. Pengujian ini  dilakukan  terhadap  bakteri P.  acnes yang merupakan  bakteri  utama  penyebab  jerawat. Konsentrasi  ekstrak  yang  digunakan  dalam penelitian  dibuat  dengan  melarutkan  5  gram ekstrak dalam 5 mL aquades kemudian dilakukan
Gambar 1. Pengukuran Kepadatan Bakteri P. acnes
Setelah  dianalisis,  didapat  nilai  absorbansi untuk  bakteri P.acnes yaitu  0.842.  Setelah  itu dihitung  nilai  kepadatan  bakteri  yaitu  6.736  10 8 CFU/mL,  selanjutnya  dilakukan  pengenceran terhadap  suspensi  bakteri  uji  hingga  sel  bakteri mencapai  jumlah  1  10 6 CFU/mL,  bakteri  siap digunakan  untuk  uji  aktivitas  ekstrak.  Hasil
Skrining Fitokimia Hasil Keterangan Sampel Berat Sampel Pelarut Berat Ekstrak

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167 (The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (1), 112-121
pengujian  aktivitas   antibakteri   pada   bakteri P.acnes dapat dilihat pada tabel 3.
Gambar  2.  Grafik  Pengujian  Aktivitas Antibakteri Pada Bakteri P. acnes
Tabel 3. Hasil Pengujian Aktivitas Antibakteri
Pada Bakteri P. acnes 20% (10µg/50µL) 9.83 mm 40% (20µg/50µL) 10.67 mm 60% (30µg/50µL) 11.58 mm 80% (40µg/50µL) 11.83 mm 100% (50µg/50µL) 11.67 mm Kontrol Positif Clindamycin 22 mm Kontrol Negatif Aquades 0 mm
Dari  Tabel  3  dan  Gambar  2  di  atas  dapat dilihat  bahwa  masing-masing  konsentrasi  dapat membentuk  zona  hambat  pada  media  padat, konsentrasi terkecil yaitu 20% dapat membentuk zona  hambat  dengan  rata-rata  ukuran  zona hambat  yang  terbentuk  sebesar  9.83  mm. Konsentrasi 40% dapat membentuk zona hambat dengan  rata-rata  sebesar  10.67  mm.  Konsentrasi 60% dapat membentuk zona hambat dengan rata- rata  sebesar  11.58  mm.  Konsentrasi  80%  dapat membentuk zona hambat dengan rata-rata sebesar 11.83  mm,  sedangkan  pada  konsentrasi  terbesar yaitu  100%  dapat  membentuk  zona  hambat
dengan rata-rata sebesar 11,67 mm. Pada kontrol positif didapatkan zona hambat dengan rata-rata 22  mm  sedangkan  pada  kontrol  negatif  tidak membentuk  zona  hambat  pada  media  yang ditumbuhi bakteri P. acnes . Hal ini membuktikan bahwa  kandungan  ekstrak  kulit  buah  pepaya dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri P. acnes .  Setelah  dilakukan  skrining  fitokimia diketahui kulit buah pepaya memiliki kandungan alkaloid,  tanin,  steroid,  saponin  dan  flavonoid dimana senyawa-senyawa ini merupakan senyawa  antibakteri.  Biji  pepaya  yang  memiliki kandungan  saponin,  tanin,  alkaloid,  flavonoid, dan  steroid  memiliki  potensi  antibakteri  [16]. Mekanisme  kerja  saponin  sebagai  antibakteri adalah menurunkan
tegangan
permukaansehingga mengakibatkan naiknya permeabilitas atau kebocoran sel dan mengakibatkan senyawa intraseluler akan keluar. Tanin  memiliki  aktifitas  antibakteri  yang berhubungan  dengan  kemampuannya  untuk menginaktifkan adhesin selmikroba juga menginaktifkan enzim, dan mengganggu transport  protein  pada  lapisan  dalam  sel  [17]. Mekanisme  kerja  alkaloid  sebagai  antibakteri diprediksi melalui penghambatan sintesis dinding sel  yang  akan  menyebabkan  lisis  pada  sel sehingga sel akan mati [18]. Flavonoid diketahui memiliki  sifat  antibakteri  dimana  mekanisme kerjanya  adalah  membentuk  senyawa  kompleks dengan protein ekstraseluler dan terlarut sehingga dapat  merusak  membran  sel  bakteri  dan  diikuti dengan  keluarnya  senyawa  intraseluler  [19] Mekanisme  kerja  steroid  dalam  menghambat bakteri adalah dengan merusak membran plasma sel  bakteri,  sehingga  menyebabkan  bocornya sitoplasma keluar sel yang selanjutnya menyebabkan  kematian  sel  [20].  Pada  tabel  3 menunjukkan  diameter  zona  hambat P.  acnes untuk  kontrol  negatif,  terlihat  adanya  perbedaan yang  bermakna  terhadap  kontrol  positif  dan berbagai  konsentrasi  ekstrak  etanol  kulit  buah pepaya,  yaitu  20%,  40%,  60%,  80%  dan  100%. Kontrol  negatif  yang  digunakan  adalah  aquades
Rata-Rata Diameter (mm) Konsentrasi Nilai Zona Hambat Bakteri P. acnes

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167 (The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (1), 112-121
yang  menunjukkan  tidak  adanya  zona  hambat. Pelarut  aquades  merupakan  pelarut  organik  dan tidak  bersifat  bakterisidal.  Kontrol  positif menunjukkan  perbedaan  yang  bermakna  dengan kontrol  negatif  dan  berbagai  konsentrasi  ekstrak etanol  kulit  buah  pepaya  karena  menghasilkan aktivitas  antibakteri  dengan  rata-rata  diameter zona  hambat  paling  besar  terhadap  bakteri  uji. Antibiotik yang digunakan sebagai kontrol positif adalah clindamycin yang memiliki spektrum luas. Rata-rata  diameter  zona  hambat  dari  perlakuan clindamycin pada penelitian ini adalah sebesar 22 mm  yang  menunjukan  bahwa  clindamycin  yang diuji  adalah  sensitif  berdasarkan  standar  CLSI. Mekanisme kerta clindamycin sebagai antibakterial  yaitu  bekerja  dengan  menghambat pertumbuhan atau reproduksi dari bakteri dengan menghambat  sintesa  protein.  Mekanisme  kerja clindamycin  meliputi  memotong  elongasi  rantai peptida, memblok site A pada ribosom, kesalahan membaca  pada  kode  genetik  atau  mencegah penempelan rantai oligosakarida pada glikoprotein  [21].  Hasil  pengukuran  diameter zona hambat menunjukkan bahwa ekstrak etanol kulit  buah  pepaya  memiliki  daya  hambat  yang sedang  sampai  kuat  terhadap  bakteri P.  acnes . Konsentrasi 20% memiliki daya hambat sedang, sedangkan  konsentrasi  40%,  60%,  80%  dan 100%  memiliki  daya  hambat  yang  kuat.  Pada tabel 3 terlihat bahwa diameter zona hambat yang terbesar  dan  yang  paling  mendekati  diameter zona  hambat  yang  dibentuk  kontrol  positif dimiliki oleh konsentrasi 80% sebesar 11.83 mm dan  terkecil  yaitu  konsentrasi  20%  sebesar  9.83 mm.  Hal  tersebut  membuktikan  bahwa  semakin tinggi  konsentrasi  ekstrak  kulit  buah  pepaya, tidak membuat nilai zona hambat bakteri P. acnes semakin  besar.  Daya  hambat  tertinggi  berada pada konsentrasi 80% lalu kembali menurun daya hambatnya  pada  konsentrasi  100%.  Fenomena yang sama juga terjadi pada hasil uji zona hambat yang  dilakukan  oleh  Elifah  (2010),  bahwa diameter zona hambat tidak selalu naik sebanding dengan  naiknya  konsentrasi  antibakteri.  Hal  ini
dapat  terjadi  karena  perbedaan  kecepatan  difusi senyawa  antibakteri  pada  media  agar  [22]. Menurut penelitian yang dilakukan Rastina et al., (2015),  konsentrasi  efektif  adalah  konsentrasi yang  daya  antibakterinya  dikategorikan  kuat untuk  membentuk  zona  hambat  terbesar.  Maka dapat disimpulkan bahwa konsentrasi 40%, 60%, 80% dan 100% ekstrak etanol kulit buah pepaya merupakan konsentrasi efektif dalam menghambat pertumbuhan P. acnes , terlihat dari besarnya  diameter  zona  hambat  yang  terbentuk [23].

## KESIMPULAN
Dari  hasil  penelitian  yang  telah  dilakukan dapat  disimpulkan  bahwa  ekstrak  etanol  70% kulit  buah  pepaya  memliki  aktivitas  antibakteri terhadap bakteri P. acnes dengan kategori sedang hingga kuat. Pada konsentrasi terkecil 20% rata- rata  diameter  zona  hambat  sebesar  9.83  mm, konsentrasi  40% rata-rata  diameter  zona  hambat adalah  10.  67  mm,  konsentrasi  60%  rata-rata diameter  zona  hambat  adalah  11.58  mm, konsentrasi  80% rata-rata  diameter  zona  hambat adalah  11.83  mm,  sedangkan  pada  konsentrasi terbesar  yaitu  100%  rata-rata  diameter  zona hambat adalah 11.67 mm.

## DAFTAR PUSTAKA
[1] Movita, T. 2013. Acne Vulgaris . CDK-203. 40(3): 269-272.
[2] Athikomkulchai,S.,Watthanachaiyingcharoen R.,  Tunvichien,  S.,  Vayumhasuwan,  P., Karnsomkiet, P., & Sae-Jong, P., 2008, The Development  of  Anti-Acne  Products  from Eucalyptus  globulus and Psidium  guajava Oil, J. Health Res, 22 (3),109-113
[3] Levinson, W., 2004, Medical Microbiology &  Imunology, Examination  &  Board review,  8th  edition,  McGraw-Hill,  New York.
[4] Muhammad, M dan Rosen. T., 2013, A

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167
(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (1), 112-121
Controversial Proposal: No More Antibiotics for Acne , Skin Therapy Letter,
Indexed  by  the  US  National  Library  of Medicine and PubMed , 18, hal. 1-4.
[5] Utami, E.R. 2012. Antibiotika, Resistensi, dan Rasionalitas Terapi. Sainstis. 1 (1).
[6] Warisno. 2003. Budidaya Pepaya. Kanisius: Yogyakarta.
[7] Ishiwu,  C.N,  C.P.  Umenwanne,  J.E. Obiegbuna,  N.N.  Uchegbu.  2014.  Invitro Assesment  of  Anti  Bacterial  Effect  of
Extracts  of  Ocinum  gratissimum  and
Carica papaya Leaves. International Journal of Applied Science and Technology 4 (1).
[8] Santos,  C.M.D,  A.C.M.  Patto,  F.J. Mesquita, Q.E.D. Rezende, M.M. Mendes. 2014.  Chemical  characterization  of  the flour  of  peel  and  seed  from  two  papaya cultivars. Food Sci. Technol, Campinas. 34 (2), 7-353.
[9] Debie. 2008. Toksisitas Kulit Buah Pepaya (Carica  papaya  L.)  dengan  Metode  "Brine Shrimp  Lethality  Test"  dan  Skrining Kandungan  Kimia.  Skripsi.  Fakultas Farmasi UBAYA. Surabaya.
[10] Sangi,  M.,  Runtuwene,  M.R.J.,  Simbala., H.E.I.  Making,  V.M.A.  2008.  Analisis Fitokimia  Tumbuhan  Obat  di  Kabupaten Minahasa Utara. Chem. Prog . 1(1):47-53.
[11] Kusumaningjati. 2009, Potensi Antibakteri kitosan  Sebagai  Pengawet  Alami  pada
Tahu.  Skripsi  Program  Studi  Biokimia Fakultas Matematikan dan Ilmu Pengetahuan  Alam  Institut  pertanian Bogor.
[12] Rita,  W.  S.  2010.  Isolasiidentifikasi  dan ujiaktivitas antibakterisenyawa
golongantriterpenoid  pada  rimpangtemu putih  (Curcumazedoaria  (Berg)  Roscoe).
Jurnal Kimia , Vol 4 Hal 20-26.
[13] Harmita.,  Radji,  M.  2008.  Buku  Ajar Hayati Edisi 3, Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta.
[14] Irwan,  F.  2011.  Aktivitas antidiabetes  dan analisis  fitokimia  ekstrak  air  dan  etanol daun wungu . Skripsi. Bogor.
[15] Manoharan,  C.,  Jothibas,  M.,  Johnson Jeyakumar,  S.,  Dhanapandian,  S.,  2015. Struktural  optical  and  electrical  properties of Zr-doped In2O3 thin films.
Spectrochim.  Acta  Part  A  Mol.  Biomol. Spectra, 145, 47-53.
[16] Asep  R,  Maesaroh,  Marliani  L.  2018. Aktivitas  antibakteri  biji,  kulit  dan  daun pepaya  (Carica  papaya  L.)  terhadap  bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus.
Jurnal Ilmiah Farmasi . 6(1), 29-33.
[17] Ngajow  M,  Abidjulu  J,  Kamu  VS.  2013. Pengaruh  Antibakteri  Ekstrak  Kulit  Batang Matoa  (Pometia  pinnata)  terhadap  Bakteri Staphylococcus aureus secara  In vitro.
Jurnal MIPA UNSRAT, 2(2),182-132
[18] Nikham, Basjir T.E. 2012, Uji Bahan Baku Antibakteri  dari  Buah  Mahkota  Dewa (Phaleria  Macrocarpa(Scheff)  Boerl.)  Hasil Iradiasi  Gamma  danAntibiotik  terhadap Bakteri Patogen. Serpong: Prosiding
Pertemuan  Ilmiah  Ilmu  Pengetahuan  dan Teknologi Bahan.
[19] Darmawati,  A.A.S.K.,  Bawa,  I.G.A.G., Suirta,  I.W.  2015,  Isolasidan  Identifikasi
Senyawa  GolonganFlavonoid  pada  Daun Nangka (Artocarpusheterophyllus Lmk) dan Aktivitas
Antibakteriterhadap Bakteri
Staphylococcus  aureus. Jurnal  Kimia . 9(2):203-210.
[20] Wiyanto,  D.B.  2010,  Uji  Aktivitas Antibakteri EkstrakRumput Laut Kappaphycus alvarezii danEucheuma denticullatum  terhadap  BakteriAeromonas hydrophila  dan  Vibrio  harveyii. Jurnal Kelautan , 3(1):1-17.
e - ISSN 2685-3167
(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (1), 112-121
[21] Mazidah  Z.  2014.  Perbedaan  keberhasilan terapi  klindamisin  oral  dan  metronidazole oral  terhadap  bacterial  vaginosis  pada kehamilan  [Skripsi].  Semarang;  Fakultas
Kedokteran Universitas Diponegoro.
[22] Elifah, E. 2010 Uji Antibakteri Fraksi Aktif Ekstrak Metanol Daun Senggani (Melastoma  candidum  D.  Don)  Terhadap Escherichia  coli  dan  Bacillussubtilis  serta Profil Kromatografi Lapis Tipisnya.
(Skripsi). FMIPA Universitas Negeri Surakarta, Surakarta. Hal 52.
[23] Rastina, Sudarwanto M, Wientarsih I. 2015, Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Kari (Murrayakoenigii) terhadap
Staphylococcus  aureus,  Escherichia  coli, dan  Pseudomonas  sp. Jurnal  Kedokteran Hewan. 9(2):185-188