## OPTIMASI KONSENTRASI SURFAKTAN CREMOPHOR RH 40 DALAM NANOEMULSI KOMPLEKS MOLEKULAR ASAM GLIKOLAT-KITOSAN MENGGUNAKAN METODE
MULTILEVEL CATEGORIC-ONE FACTOR
Fabryla Lutfiani Fayakun 1) , Malinda Prihantini 2*)
1 Program Studi S-1 Farmasi, Fakultas Farmasi Universitas Wahid Hasyim, Semarang
2 Bidang Farmasetika dan Teknologi Farmasi, Fakultas Farmasi Universitas Wahid Hasyim, Semarang *Email: malindap@unwahas.ac.id

## INTISARI
Asam glikolat (AG) digunakan untuk mengatasi photoaging , namun menyebabkan rasa menyengat pada kulit . Kompleks molekular asam glikolat-kitosan (AG-KS) dapat mengatasi masalah tersebut namun  berpotensi memperbesar  ukuran  partikel sehingga  dibentuk  sediaan  nanoemulsi  dengan Cremophor RH 40 sebagai surfaktan . Nanoemulsi diharapkan meningkatkan bioavailabilitas bahan aktif  dengan  meningkatkan  luas  permukaan  dan  Cremophor  RH  40  mendukung  peningkatkan permeabilitas  membran  dengan  menurunkan  tegangan  antarmuka.  Konsentrasi  Cremophor  RH  40 optimum  diperlukan  untuk  mencapai  kondisi  tersebut.  Tujuan  penelitian  ini  untuk  memperoleh formula optimum nanoemulsi  kompleks molekular  AG-KS dengan variasi  konsentrasi Cremophor RH 40 menggunakan metode desain faktorial . Kompleks AG-KS (1:1) disonikasi selama 10 menit. Nanoemulsi dibuat dengan variasi Cremophor RH 40 10%, 20%, 30%. Sediaan diuji organoleptik, homogenitas,  tipe  emulsi,  pH,  viskositas,  daya  sebar,  daya  lekat,  ukuran  partikel,  indeks polidispersitas (PI), dan potensial zeta. Data dianalisis menggunakan multilevel categoric-one factor . Sediaan berwarna putih, tekstur lembut, homogen, tidak beraroma, dengan tipe emulsi minyak dalam air. pH  rata-rata  sediaan  3,9  ±0,00  memenuhi  persyaratan  BPOM, viskositas  dan  daya  lekat meningkat  dengan  meningkatnya  variabel  bebas, sedangkan  daya  sebar  menurun. Hasil  ukuran partikel  dari  ketiga  formula  di  bawah  400  nm. Indeks  polidispersitas  menunjukkan monodisperse ( <0,6)  dengan  potensial  zeta  <30  mV. Hasil  formula  optimum  menggunakan  desain  faktorial didapatkan F2 dengan nilai desirability 0,608. Cremophor RH 40 konsentrasi 20% optimal digunakan pada nanoemulsi kompleks molekuler AG-KS.
Kata kunci : asam glikolat, Cremophor RH 40, kitosan, kompleks molekuler, nanoemulsi

## ABSTRACT
Glycolic acid (GA) is used to treat photoaging, but it causes a stinging sensation on the skin. The glycolic  acid-chitosan  (GA-CS)  molecular  complex  can  overcome  this  problem  but  potentially increase  the  particle  size  so  that  the  nanoemulsion  was  prepared  with  Cremophor  RH  40  as  a surfactant. Nanoemulsion is knowledgable can improve the bioavailability of active ingredients by increasing surface area and so Cremophor RH 40 supports it by increasing membrane permeability after reducing interfacial tension. An optimum Cremophor RH 40 concentration is useful to achieve these conditions. The aim of this research is to obtain the optimum formula using the factorial design method for GA-CS molecular complex nanoemulsion with varying concentrations of Cremophor RH 40. The GA-CS molecular complex (1:1) was sonicated for 10 minutes. Nanoemulsions were made with  variations  of  Cremophor  RH  40  10%,  20%,  30%.  The  preparations  were  tested  for organoleptics, homogeneity, emulsion type, pH, viscosity, spreadability, stickiness, particle size,
polydispersity index (PI), and zeta potential. Data were analyzed using multilevel categorical-one factor. The preparation is white in color, soft in texture, homogeneous, odorless, with an oil-in-water emulsion type. The average pH of the preparation of 3.9 ± 0.00 meets BPOM requirements, viscosity and adhesive power increase with increasing independent variables, while spreadability decreases. The  particle  size  results  of  the  three  formulas  are  below  400  nm.  The  polydispersity  index  shows monodisperse  (<0.6)  with  a  zeta  potential  <30  mV.  The  results  of  the  optimum  formula  using  a factorial design obtained F2 with a desirability value of 0.608. Cremophor RH 40 with an optimal concentration of 20% was used in the GA-CS molecular complex nanoemulsion.
Keywords : chitosan, Cremophor RH 40, glycolic acid, molecular complex, nanoemulsion
*Corresponding author:
Nama : Malinda Prihantini Institusi : Universitas Wahid Hasyim Alamat institusi  : Jl. Raya Manyaran-Gunungpati KM 15 Kota Semarang E-mail : malindap@unwahas.ac.id

## PENDAHULUAN
Asam  glikolat  dikenal  sebagai  bahan  kosmetik  yang  paling  efektif  untuk remodelling epidermis, mendorong deskuamasi, dan memberikan efek penghambatan pada sintesis melanin  (Yeo dan Kim, 2018). Asam glikolat sebagai alpha hydroxyl acid (AHA) dengan ukuran molekul terkecil memiliki  potensi  besar  sebagai  kosmetika  antipenuaan  karena  ukuran  molekul  yang  kecil memudahkan bahan aktif berpenetrasi menembus kulit, sehingga efektivitasnya tinggi. Karakteristik bahan tersebut sangat asam menimbulkan sensasi menyengat ( stinging effect ). Beberapa pendekatan yang  digunakan  dalam  sediaan  komersial  adalah  dengan  meningkatkan  pH  sediaan  hingga  batas keasaman yang dapat diterima oleh kulit, namun hal tersebut dapat menurunkan potensi asam glikolat (Yu dan Van Scott, 2004).
Berdasarkan  persamaan  Handerson-Hasselbach,  jumlah  asam  bebas  dari  asam  glikolat semakin menurun seiring dengan meningkatnya pH. Jumlah asam bebas berkurang hingga 50% pada pH  4.  Badan  Pengawas  Obat  dan  Makanan  Republik  Indonesia  memberikan  syarat  sediaan  yang mengandung  asam  glikolat  hingga  10%  memiliki  pH  sediaan  >3,5  dengan  pertimzetabangan efektivitas dan toksisitasnya. Nilai pH tersebut berada di bawah rentang pH yang dapat ditolerir oleh kulit (4,5-6,5) dan masih berpotensi mengiritasi kulit, sehingga diperlukan pendekatan pemecahan masalah  yang  lain.  Yu  dan  Scott  dalam  patennya  membuktikan  kompleks  molekular  mampu mengatasi  sensasi  menyengat  dan  mempertahankan  efektivitasnya  melalui  mekanisme  pelepasan bertahap (Karwal dan Mukovozov, 2023). Agen pengkompleks yang dapat digunakan salah satunya adalah golongan aminosakarida, yaitu kitosan.
Kitosan  merupakan  hasil  pengolahan  dari  limbah  cangkang Crustacea yang  melimpah  di Indonesia dan telah banyak dimanfaatkan di bidang farmasi dan terbukti kompatibel dengan berbagai bahan,  serta  mampu  menghasilkan  sediaan  yang  baik  (Sismaraini,  2015)  (Aranaz  dkk . ,  2021). Kitosan  merupakan  polimer  dengan  ukuran  molekul  besar  yang  berpotensi  meningkatkan  ukuran molekul  kompleks  molekular,  sehingga  diperlukan  penghantaran  nanoemulsi  yang  mampu meningkatkan bioavailabilitas bioaktif karena ukuran droplet yang kecil mampu meningkatkan luas permukaan kontak. Karakteristik dan stabilitas fisik nanoemulsi dipengaruhi oleh formula dan proses pembuatannya. Surfaktan adalah bahan yang pengaruhnya paling besar dalam formula nanoemulsi karena menentukan terbentuk atau tidaknya suatu nanoemulsi. Konsentrasi surfaktan Cremophor RH 40 yang tinggi dapat meningkatkan viskositas sediaan secara signifikan, tetapi tidak mempengaruhi ukuran globul yang dihasilkan (Utami dkk., 2021). Sediaan yang optimum dapat diperoleh melalui optimasi konsentrasi Cremophor RH 40 dalam formula menggunakan metode Multilevel Categoric- One Factor pada software Design Expert versi trial 22.0.6.0.

## METODE PENELITIAN Alat dan bahan
Timbangan analitik, sonikator, ultra turrax , nano particle analyzer (Horiba Scientific Analyzer SZ-100) , alat-alat  gelas,  pH  meter  (HANNA  Instruments,  Inc),  viskometer,  mikroskop  binokuler (Novel®) ,  alat  uji  daya  sebar,  alat  uji  daya  lekat,  alat  uji  homogenitas,  kompor  listrik,  dan termometer.  Bahan  ( pharmaceutical  grade ) yaitu asam  glikolat,  kitosan, Polyethylene  Glycol  400 (PEG 400), Cremophor RH 40, Isopropyl Myristate (IPM), natrium benzoat, dan aquades.

## Pembuatan Larutan Kompleks Molekular AG-KS
Larutan  kompleks  molekular  dihasilkan  dengan  cara  melarutkan  asam  glikolat  dan  kitosan dengan perbandingan 1:1 dalam aquades. Sebanyak 5% asam glikolat dilarutkan ke dalam aquades, kemudian  ditambahkan  kitosan  dengan  konsentrasi  5%  sedikit  demi  sedikit  hingga  tercampur  dan membentuk larutan jernih. Larutan kompleks molekular yang dihasilkan kemudian diberi perlakuan sonikasi  selama  10  menit  dan  disimpan  dengan  wadah  yang  terlindung  dari  cahaya  di  lemari pendingin (Prihantini dkk., 2019)

## Pembuatan Nanoemulsi Kompleks Molekular AG-KS
Formula sediaan nanoemulsi kompleks molekular AG-KS disajikan pada Tabel I. Pembuatan nanoemulsi dilakukan dengan memanaskan fase air yaitu natrium benzoat, Cremophor RH 40, PEG 400, dan aquades pada suhu 60-70°C dan ditutup agar air tidak menguap, kemudian dihomogenkan menggunakan ultra turrax dengan kecepatan 10.000 rpm selama 1 menit. IPM sebagai fase minyak dipanaskan dengan suhu 60-70°C, kemudian diteteskan sedikit demi sedikit ke fase air yang sedang dihomogenkan menggunakan ultra turrax dengan kecepatan 10.000 rpm selama 9 menit , setelah itu larutan AG-KS dimasukkan ke dalam ultra turrax selama 20 menit dengan kecepatan 12.000 rpm. Proses pembuatan diperoleh melalui tahap orientasi.
Tabel I. Formula Nanoemulsi Kompleks Molekular AG-KS
Nama Bahan Konsentrasi (%) Fungsi F1 F2 F3 Asam Glikolat 5 5 5 Zat aktif Kitosan 5 5 5 Agen pengompleks PEG 400 10 10 10 Kosurfaktan Cremophor RH 40 10 20 30 Surfaktan IPM 20 20 20 Fase minyak Natrium Benzoat 0,3 0,3 0,3 Pengawet Aquades add to 100 add to 100 add to 100 Fase air

## Pengujian Karakteristik Fisik Sediaan Nanoemulsi Organoleptik dan Homogenitas
Uji  organoleptik  dilakukan  dengan  melihat  bentuk  dan  warna  sediaan  secara  visual  serta aroma dari nanoemulsi. Uji homogenitas dilakukan dengan mengoleskan 0,5 gram nanoemulsi pada kaca  objek  di  bawah  lampu  dengan  latar  belakang  berwarna  hitam,  kemudian  diamati.  Sediaan homogen tidak menunjukkan adanya butiran kasar.

## Penentuan Tipe Emulsi
Tipe  emulsi  ditentukan  dengan  metode  pewarnaan  menggunakan  metilen  biru  yang  dapat larut air. Nanoemulsi yang telah ditambahkan metilen biru diaduk, lalu diletakkan pada kaca objek, kemudian diamati menggunakan mikroskop binokuler dengan perbesaran 16 x 4.
pH
pH sediaan nanoemulsi diukur menggunakan pH meter digital. Kalibrasi pH meter dengan larutan  dapar  pH  4  dan  7  dilakukan  sebelum  pengujian  pH  sediaan  untuk  memastikan  alat  dapat berfungsi  dengan  baik.  Setelah  proses  kalibrasi  selesai,  elektroda  dibersihkan  lalu  dimasukkan  ke dalam beaker glass yang berisi nanoemulsi.  Nilai pH sediaan nanoemulsi akan muncul pada layar alat pH meter, pembacaan ditunggu hingga stabil, atau bila angka tidak berubah selama setidaknya 5 detik sebelum mencatat pengkuran. Elektroda dibilas dengan air bersih sampai semua residu hilang (HANNA Instruments) (Kementerian Kesehatan, 2020).

## Viskositas
Viskositas  sediaan  diukur  menggunakan  viskometer  Rion.  Sediaan  sebanyak  50  gram dimasukkan ke dalam wadah yang sesuai. Alat viskometer disiapkan dengan memasang rotor no.2. Rotor kemudian dicelupkan ke dalam wadah berisi sediaan dengan memastikan bahwa keseluruhan piringan rotor tercelup dengan sempurna. Alat kemudian dinyalakan dan pembacaan dilakukan ketika skala  yang  ada  pada  viskometer  tersebut  stabil.  Pengukuran  dilakukan  3  kali  (RION  Viscometer, 2023).

## Daya Sebar
Uji daya sebar dilakukan dengan cara 0,5 gram nanoemulsi diletakkan pada bagian tengah kaca alat uji daya sebar, kemudian ditutup dengan kaca kedua. Beban seberat 50gram ditambahkan dan ditunggu selama 1 menit, kemudian dicatat penyebaran nanoemulsi pada 4 sisi kaca. Pengukuran daya sebar nanoemulsi diulang dengan penambahan beban 50gram tiap 1 menit sampai beban yang diberikan sebesar 300 gram. Pengujian dilakukan 3 kali (Imanto dkk., 2019).

## Daya Lekat
Uji  daya  lekat  dilakukan  dengan  cara  meletakkan  0,25  gram  nanoemulsi  diletakkan  pada kaca objek, kemudian ditempelkan dengan kaca objek lain, lalu ditimpa dengan beban 1 kg selama 5 menit.  Kaca  objek  dipasang  pada  alat  tes  dan  beban  seberat  80  gram  dilepaskan.  Waktu  yang dibutuhkan untuk kedua kaca objek terlepas dicatat. Pengujian dilakukan 3 kali (Imanto dkk., 2019).

## Ukuran Partikel, Indeks Polidispersitas, dan Potensial Zeta
Ukuran  globul,  potensial  zeta,  dan  indeks  polidispersitas  diukur  dengan  menggunakan particle size analyzer dengan tipe dynamic light scattering . Sebanyak 1 mL sampel diambil kemudian diencerkan  menggunakan  aquades  sebanyak  5  mL,  lalu  dimasukkan  ke  dalam  kuvet.  Kuvet  harus dibersihkan  terlebih  dahulu  sehingga  tidak  mempengaruhi  hasil  analisis.  Kuvet  yang  telah  diisi dengan sampel kemudian dimasukkan ke dalam sampel holder dan dilakukan analisis oleh instrumen (Shoviantari dkk., 2019).

## Optimasi Formula
Desain formula sediaan nanoemulsi  kompleks molekular  AG-KS dilakukan menggunakan software Design Expert versi trial 22.0.6.0 dengan metode desain faktorial multi level categoric-one factor . Cremophor RH 40 sebagai faktor dengan level konsentrasi rendah (10%), sedang (20%), dan tinggi (30%). Parameter ukuran partikel, indeks polidispersitas, potensial zeta, dan viskositas sebagai respon  untuk  menghasilkan  formula  yang  optimum,  hal  ini  dikarenakan  parameter  tersebut  yang menentukan karakteristik nanoemulsi.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Organoleptik dan Homogenitas
Hasil uji organoleptis nanoemulsi kompleks molekular AG-KS memiliki aroma dan tekstur yang  sama,  tetapi  memiliki  perbedaan  warna  pada  setiap  formulanya. Hasil  uji  organoleptis ditunjukkan pada Gambar 1.
Gambar 1. Hasil Uji Organoleptis nanoemulsi Kompleks Molekular Asam Glikolat Kitosan pada (a) F1, (b) F2, (c) F3.
Hasil uji homogenitas nanoemulsi kompleks molekular AG-KS pada F1 (Cremophor RH 40 10%), F2 (Cremophor RH 40 20%), dan F3 (Cremophor RH 40 30%) menunjukkan campuran yang homogen  serta  tidak  terdapat  partikel  kasar.  Peningkatan  konsentrasi  Cremophor  RH  40  tidak mempengaruhi organoleptik dan homogenitas secara visual. Hal tersebut sejalan dengan penelitian yang  dilakukan  oleh  Pengon  dkk.  (2013)  dengan  peningkatan  konsentrasi  Cremophor  RH 40 dari 2,5%  hingga  10%  menunjukkan  tidak  adanya  perubahan  fisik  secara  visual  bahkan  setelah mengalami  kondisi  suhu  ekstrim  pada cycling  test (Pengon  dkk . ,  2013) .  Hasil  uji  homogenitas ditunjukkan pada Gambar 2.
Gambar 2.  Hasil Uji Homogenitas nanoemulsi Kompleks Molekular Asam Glikolat- Kitosan (a) F1, (b) F2, (c) F3.

## Penentuan Tipe Emulsi
Hasil  uji  penentuan  tipe  emulsi  sediaan  nanoemulsi  kompleks  molekular  AG-KS  pada  F1 (Cremophor  RH  40  10%),  F2  (Cremophor  RH  40  20%),  dan  F3  (Cremophor  RH  40  30%) menunjukkan bahwa methylene blue dapat terdispersi  secara merata dalam fase air ketiga  formula tersebut  sebelum  dilakukan  pengamatan  di  bawah  mikroskop.  Hal  ini  membuktikan  bahwa  ketiga formula  memiliki  jenis  tipe  emulsi  minyak  dalam  air  (M/A).  Hasil  uji  penentuan  tipe  emulsi ditunjukkan pada Gambar 3. Hasil pengamatan yang dilakukan menggunakan mikroskop binokuler dengan  perbesaran  16  x 4  tidak  tampak  jelas  pada  gambar  tersebut  karena  lampu  yang  digunakan berwarna  kuning.  Cremophor  RH  40  dengan  nilai  HLB  14-16  termasuk  surfaktan  nonionik  yang bersifat  hidrofilik,  sehingga  memiliki  kecenderungan  membentuk  emulsi  minyak  dalam  air (SpecialChem, 2023) (Miller, 2016) .
Gambar 3. Hasil Uji Tipe Emulsi nanoemulsi Kompleks Molekular AG-KS (a) F1, (b) F2, (c) F3, dan (d) pengamatan visual setelah pewarnaan dengan methylene blue

## pH
Berdasarkan hasil uji pH nanoemulsi kompleks mulekular AG-KS F1, F2, dan F3 memiliki rata-rata 3,9. Nilai tersebut masih berada pada rentang yang diperbolehkan oleh BPOM, yaitu sediaan kosmetik  dengan  kandungan  asam  glikolat  yang  diaplikasikan  sendiri  harus  memiliki  pH  >  3,5 (BPOM, 2020) .  Hasil  uji  pH  nanoemulsi  kompleks  molekular  AG-KS  ditunjukkan  pada  Tabel  II. Peningkatan  konsentrasi  Cremophor  RH 40  tidak  memberikan  perubahan  nilai  pH  sediaan  karena Cremophor  RH  40  memiliki  nilai  pH  cenderung  netral  pada  konsentrasi  lebih  dari  3%  dalam  air (Ataman-Chemicals, 2020)
Tabel II. Hasil Uji pH Nanoemulsi Kompleks Molekular AG-KS
Formula pH F1 3,91 ± 0,004 F2 3,93 ± 0,004 F3 3,92 ± 0,009

## Viskositas
Berdasarkan  hasil  uji  viskositas  nanoemulsi  kompleks  molekular  AG-KS  pada  Tabel  III menunjukkan  bahwa  viskositas  F3  lebih  besar  dibandingkan  dengan  F1  dan  F2.  Hal  tersebut dikarenakan  peningkatan  konsentrasi  dari  surfaktan  Cremophor  RH  40.  Hal  ini  sesuai  dengan penelitian  yang  dilakukan  oleh Utami  dkk.,  2021) menunjukkan  bahwa  viskositas  sediaan mikroemulsi minyak dedak padi meningkat seiring bertambahnya konsentrasi surfaktan Cremophor
(d)
RH 40-gliserin.  Peningkatan  viskositas  yang  disebabkan  oleh  meningkatnya  konsentrasi  surfaktan kemungkinan disebabkan oleh interaksi antara gugus hidrofilik pada Cremophor RH 40 dengan air sebagai fase kontinyu melalui ikatan hidrogen, sehingga membentuk struktur sambung-silang yang kuat (Ngawhirunpat dkk . , 2013) . Tingginya viskositas pada fase luar dapat meningkatkan stabilitas emulsi  karena  menurunkan  potensi creaming dan coalescenc e  yang  dalam  jangka  panjang  dapat memicu terjadinya inversi fase (Banker dan Rhodes, 2002) .
Tabel III. Hasil Uji Viskositas Nanoemulsi Kompleks Molekular AG-KS
Formula Viskositas (cps) F1 400±0 F2 600±0 F3 8333±124

## Daya Sebar
Nanoemulsi kompleks molekular AG-KS yang dihasilkan menyerupai gel, maka dilakukan uji daya sebar dan daya lekat. Hasil menunjukkan bahwa semakin besar konsentrasi Cremophor RH 40, maka  semakin  rendah  daya  sebar.  Parameter  ini  berbanding  terbalik  dengan  viskositas.  Semakin tinggi viskositas maka semakin rendah daya sebar. Hal tersebut sejalan dengan hasil penelitian pada Tabel IV. Penelitian sebelumnya membuktikan bahwa peningkatan konsentrasi Cremophor RH 40 dari 0,5%-2% mengakibatkan peningkatan viskositas dan penurunan daya sebar (Kartiningsih dkk, 2023).
Tabel IV. Hasil Uji Daya Sebar Nanoemulsi Kompleks Molekular AG-KS Formula Daya sebar (cm) F1 5,70±0,47 F2 3,90±0,12 F3 2,90±0,36

## Daya Lekat
Hasil uji daya lekat nanoemulsi kompleks molekular AG-KS ditunjukkan pada Tabel V. Hasil uji  daya  lekat  nanoemulsi  kompleks  molekular  AG-KS  menunjukkan  bahwa  semakin  besar konsentrasi Cremophor RH 40, maka semakin lama daya lekat. Daya lekat menunjukkan kemampuan sediaan  melekat  pada  kulit  saat  diaplikasikan.  Hal  ini  berhubungan  dengan  sudut  kontak  antara sediaan  dengan  lapisan  stratum  korneum  pada  kulit.  Semakin  rendah  sudut  kontak  antara  sediaan dengan lapisan stratum korneum, maka kemampuan melekat semakin baik, dan sebaliknya (Aulton dan Taylor, 2018).

## Tabel V. Hasil Uji Daya Lekat Nanoemulsi Kompleks Molekular AG-KS
Formula Daya lekat (detik) F1 11,81±9,34 F2 25,56±8,06 F3 142,65±7,93

## Ukuran Partikel, Indeks Polidispersitas, dan Potensial Zeta
Nanoemulsi  adalah  partikel  koloid  padat  dengan  diameter  antara  1  dan  1000  nanometer (Siqhny  dkk.,  2020).  Hasil  dari  F1,  F2,  dan  F3  sediaan  nanoemulsi  kompleks  molekular  AG-KS menunjukkan bahwa ukuran partikel ketiga formula tersebut sesuai sistem penghantaran nanoemulsi. Semakin tinggi konsentrasi Cremophor RH 40, maka semakin kecil ukuran partikel yang dihasilkan. Hasil uji ukuran partikel sediaan nanoemulsi kompleks molekular asam gliklat-kitosan ditunjukkan pada  Tabel  VI.  Cremophor  RH  40  terbukti  mampu  memberikan  ukuran  globul  nanoemulsi  yang paling  rendah  dibandingkan  surfaktan  nonionik  lainnya  dari  golongan  polisorbat.  Hal  tersebut berhubungan dengan interaksi hidrofilik antara Cremophor RH 40 dengan air yang mengakibatkan
polimer hidrofilik dari  komponen penyusun  Cremophor RH 40 (PEG 40 hydrogenated castor oil ) mengembang, sehingga mampu menjerap fase minyak secara optimal (Bandivadekar dkk . , 2013).
Tabel VI. Hasil Uji Ukuran Partikel Nanoemulsi Kompleks Molekular AG-KS
Formula Ukuran Partikel (nm) F1 389,60 ± 8,27 F2 288,90 ± 40,59 F3 196,70 ± 26,77
Nilai indeks polidispersitas menunjukkan distribusi  ukuran partikel.  Indeks polidispersitas ini  memberikan  informasi  mengenai  kestabilan  fisik  suatu  sistem  dispersi.  Nilai  indeks  tersebut berada pada rentang nilai antara 0 (distribusi ukuran seragam) sampai 0,5 (distribusi ukuran lebar). Nilai indeks polidispersitas yang lebih kecil menunjukkan bahwa formula sediaan yang dibuat lebih stabil, karena semakin besar nilai indeks polidispersitas suatu sediaan menunjukkan bahwa formula akan  terflokulasi  lebih  cepat  (Rahmadani  dkk.,  2020).  Nilai  indeks  polidispersitas  yang  rendah menunjukkan bahwa sistem dispersi yang terbentuk bersifat lebih stabil untuk jangka panjang (Gao dkk., 2008). Distribusi ukuran partikel berhubungan dengan resultan energi yang digunakan selama proses pembuatan sediaan seperti pengadukan dan pemanasan, selain itu viskositas juga berpengaruh (Aulton dan Taylor, 2018).
Hasil uji indeks polidispersitas F1, F2, dan F3 nanoemulsi kompleks molekular asam glikolat kitosan  menunjukkan  bahwa  ketiga  formula  tersebut  dalam  rentang  nilai  indeks  polidispersitas kurang dari 0,5 yang berarti distribusi partikel cenderung seragam, meskipun belum optimal . Hasil uji potensial indeks polidisperistas kompleks molekular AG-KS ditunjukkan pada Tabel VII.
Tabel VII. Hasil Uji Indeks Polidispersitas Nanoemulsi Kompleks Molekular AG-KS
Formula Indeks Polidispersitas F1 0,535 ± 0,04 F2 0,470 ± 0,10 F3 0,465 ± 0,07
Potensial zeta menggambarkan kekuatan tolak-menolak antardroplet. Berdasarkan penelitian Murdock  dkk.  (2008),  nilai  potensial  zeta  dari  sediaan  yang  stabil  adalah  lebih  dari  +30 mV  atau kurang dari -30 mV ± 20 mV atau lebih rendah dapat memberikan stabilitas yang cukup, dan nilai ± 5 mV menunjukkan agregasi yang cepat (Honary dan Zahir, 2013). Hasil uji zeta potensial F1, F2, dan F3 nanoemulsi kompleks molekular AG-KS yang terdapat pada Tabel VIII menunjukkan bahwa ketiga formula tersebut cukup stabil. Muatan negatif pada hasil pengujian kemungkinan berasal dari muatan negatif pada asam glikolat bebas yang tidak membentuk kompleks molekular dan dari asam lemak  yang  berasal  dari castor  oil pada  kompenen  penyusun  Cremophor  RH  40  (Prihantini  dkk, 2019; Smail dkk . , 2021).

## Tabel VIII. Hasil Uji Potensial Zeta Nanoemulsi Kompleks Molekular AG-KS
Formula Potensial Zeta (-) F1 13,13 ± 2,42 F2 15,03 ± 0,94 F3 17,66 ± 1,32

## Optimasi Formula
Hasil formula optimum dari F1 (Cremophor RH 40 10%), F2 (Cremophor RH 40 20%), dan F3 (Cremophor RH 40 30%), berdasarkan parameter ukuran partikel, indeks polidispersitas, potensial zeta,  dan  viskositas  dapat  dilihat  pada  Gambar  4.  Hasil  tersebut  menunjukkan  bahwa  formula optimum yang didapatkan ada pada formula 2 konsentrasi Cremophor RH 40 sebesar 20% dengan ukuran partikel 288,967 nm; nilai indeks polidispersitas 0.470; nilai potensial zeta (-) 15,033; dan viskositas  600  cPs.  Formula  tersebut  memiliki  nilai desirability terbesar  yaitu  0,608  yang  mana termasuk kategori rendah.

## Gambar 4. Hasil Optimasi Sediaan Nanoemulsi Kompleks Molekular AG-KS
Hasil  tersebut  dimungkinkan  terjadi  akibat  jumlah  replikasi  hanya  dilakukan  3  kali pengambilan data. Penelitian selanjutnya dapat dibuat formula dengan replikasi yang lebih banyak, berkisar  5-9  replikasi  agar  hasil  analisis  optimasi  yang  didapatkan  lebih  baik.  Nilai desirability menggambarkan nilai fungsi untuk tujuan optimasi yang menunjukkan seberapa baik program dapat memenuhi  keinginan berdasarkan  kriteria  yang ditetapkan pada produk  akhir.  Semakin mendekati nilai 1,0, semakin baik program dapat membuat produk yang diinginkan (Raissi dan Farzani, 2009).

## KESIMPULAN
Sediaan  berwarna  putih,  tekstur  lembut,  homogen  cenderung  semipadat,  tidak  beraroma, dengan tipe emulsi minyak dalam air (M/A). pH rata-rata sediaan 3,9 memenuhi persyaratan BPOM. Viskositas  dan  daya  lekat  meningkat  dengan  meningkatnya  variabel  bebas,  sedangkan  daya  sebar menurun.  Semakin  besar  konsentrasi  Cremophor  RH  40,  semakin  kecil  ukuran  partikel  yang dihasilkan. Indeks polidispersitas menunjukkan monodisperse dengan potensial zeta <30 mV. Hasil optimasi formula menggunakan metode desain faktorial multilevel categoric-one factor , didapatkan formula optimum yaitu formula 2 dengan konsentrasi Cremophor RH 40 sebesar 20%.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Peneliti  mengucapkan  terimakasih  kepada  Yayasan  Wahid  Hasyim  melalui  Lembaga Penelitian dan Pengabdian Universitas Wahid Hasyim atas dukungan dana penelitian melalui Hibah Penelitian  Interdisipliner  DIPA  Unwahas  2023  yang  tertuang  dalam  kontrak  penelitian  nomor 11/LPPM-UWH/RISET/INTERDISIPLINER/DIPA-UWH/2023.

## DAFTAR PUSTAKA
Aranaz, I. dkk . (2021) ‘Chitosan: An Overview of Its Properties and Applications’, Polymers , 13(19), p. 3256.
Ataman-Chemicals (2020) ‘PEG 40
Hydrogenated Castor Oil’. Available at: https://www.atamanchemicals.com/peg-40-hydrogenated-castor-oil_u24066/ . Aulton, M.E. and Taylor, K.M.G. (2018) Aulton’s Pharmaceutics: The Design and Manufacture of Medicines .
Bandivadekar, M. et al. (2013) ‘Single non-ionic surfactant based self-nanoemulsifying drug delivery systems:  formulation,  characterization,  cytotoxicity  and  permeability  enhancement  study’, Drug Development and Industrial Pharmacy , 39(5), pp. 696–703. Banker, G.S. and Rhodes, C.T. (eds) (2002) Modern pharmaceutics . 4. ed., rev. expanded. New York, NY: Marcel Dekker (Drugs and the pharmaceutical sciences, 121).
BPOM, 2020, Badan Pengawas Obat dan Makanan Republik Indonesia: KEMENKES RI.
Gao,  L.,  Zhang,  D.,  &  Chen,  M.  (2008).  Drug  nanocrystals  for  the  formulation  of  poorly  soluble drugs and its application as a potential drug delivery system. Journal of Nanoparticle Research, 10(5), 845– 862.
Honary,  S.  dan  Zahir,  F.  (2013)  ‘Effect  of  zeta  potential  on  the  properties  of  nano-drug  delivery systems - A review (Part 1)’, Tropical Journal of Pharmaceutical Research , Vol. 12, no. 2, pp 255–264
Imanto, T., Prasetiawan, R., dan Wikantyasning, E. R. 2019 ‘Formulasi dan Karakterisasi Sediaan Nanoemulgel  Serbuk  Lidah  Buaya  ( Aloe  vera L.)’, Pharmacon:  Jurnal  Farmasi  Indonesia , Vol. 16, no. 1, pp 28–37
Irianto, I. D. K., Purwanto, P., dan Mardan, M. T. (2020) ‘Aktivitas Antibakteri dan Uji Sifat Fisik Sediaan Gel Dekokta Sirih Hijau ( Piper betle L.) sebagai Alternatif Pengobatan Mastitis Sapi’,
Majalah Farmaseutik , Vol. 16.
Kartiningsih, K., Damayanti, R. and Budiati, A. (2023) ‘Formulasi Gel Ekstrak Daun Sosor Bebek (Kalanchoe pinnata (Lam.) Per.) dengan Kombinasi Carbophol 980 dan Cremophor RH 40’, Jurnal Pharmascience , 10(1), p. 14.
Karwal, K. and Mukovozov, I. (2023) ‘Topical AHA in Dermatology: Formulations, Mechanisms of Action, Efficacy, and Future Perspectives’, Cosmetics , 10(5), p. 131.
Kementerian  Kesehatan,  R.I.  (2020)  ‘ Farmakope  Indonesia  Edisi  VI’ .  Jakarta:  Departemen Kesehatan RI.
Moy, R. L., Luftman, Debra., dan Kakita, L. S., (2002) ‘ Glycolic acid peels’ , Marcel Dekker.
Murdock,  R.  C.,  Braydich-Stolle,  L.,  Schrand,  A.  M.,  Schlager,  J.  J.,  dan  Hussain,  S.  M.  (2008) ‘Characterization  of  nanomaterial  dispersion  in  solution  prior  to  in  vitro  exposure  using dynamic light scattering technique’, Toxicological Sciences , Vol. 101.
Ngawhirunpat,  T. et  al. (2013)  ‘Cremophor  RH40-PEG  400  microemulsions  as  transdermal  drug delivery carrier for ketoprofen’, Pharmaceutical Development and Technology , 18(4), pp. 798– 803.
Nurul Utami, R., Fatmawaty, A., Sugianka, A., Melly Pakanan, M., dan Jariah, N. (2021) ‘Pengaruh Jenis  dan  Konsentrasi  Surfaktan  Terhadap  Karakteristik  Fisik  Mikroemulsi  Minyak  Dedak Padi’, Original Article MFF , Vol. 25.
Pengon,  S. et  al. (2013)  ‘Factors  Affecting  Formation  of  Emulsions  Containing  Soybean  Oil’, Advanced Materials Research , 747, pp. 725–728.
Pratasik,  M.  C.,  Yamlean,  P.  V.,  dan  Wiyono,  W.  I.  (2019)  ‘Formulasi  Dan  Uji  Stabilitas  Fisik Sediaan  Krim  Ekstrak  Etanol  Daun  Sesewanua  ( Clerodendron  squamatum Vahl.)’. Pharmacon , Vol. 8, No. 2, 261-267.
Prihantini,  M.,  Fidrianny,  I.,  dan  Suciati,  T.,  2019,  Optimasi  Nanoemulsi  A/M/A  Ekstrak  Etanol Daun Binahong dan Konjugat AG-Kitosan Menggunakan Desain Box-Behnken (Optimization of  W/O/W  Multiple  Nanoemulsion  of  Madeira  Vein  Leaves  Extract  and  Glycolic  Acid- Chitosan Conjugate Using Box-Behnken Design), Jurnal Ilmu Kefarmasian Indonesia , Vol. 17. Rahmadani,  D.,  Side,  S.,  dan  Eka  Putri,  S.  (2020)  ‘Pengaruh  Penambahan  PVA  terhadap  Ukuran Nanopartikel  Perak  Hasil  Sintesis  Menggunakan  Bioreduktor  Ekstrak  Daun  Sirsak  ( Annona muricata L.), Sainsmat , Vol. 9, No. 1, 1-13. Raissi,  S.  dan  Farzani,  R.  E.  (2009)  ‘Statistical-Process-Optimization-Through-Multi-Response- Surface-Methodology’, Engineering and Technology , Vol. 3, no. 3. RION Viscometer (2023). Available at: https://rion-sv.com/vt06/ (Accessed: 25 December 2023). Rosen,  M.  R.  (2005)  ‘ Delivery  system  handbook  for  personal  care  and  cosmetic  products : technology, applications, and formulations’ , William Andrew Pub. Sismaraini,  D.  (2015)  ‘ Strategi  Pengembangan  Industri  Kitin  Dan  Kitosan  Di  Indonesia’ .  Thesis.
Bogor Agricultral University (IPB). Available at:
http://repository.ipb.ac.id/handle/123456789/78255 (Accessed: 23 October 2023).
Shoviantari, F., Liziarmezilia, Z., Bahing,  A., Agustina  Fakultas Farmasi, L., dan  Ilmu Kesehatan Bhakti Wiyata, I. (2019) ‘Uji Aktivitas Tonik Rambut Nanoemulsi Minyak Kemiri ( Aleurites moluccana L.)’, Jurnal Farmasi Dan Ilmu Kefarmasian Indonesia , Vol. 6. Smail,  S.S. et  al. (2021)  ‘Studies  on  Surfactants,  Cosurfactants,  and  Oils  for  Prospective  Use  in Formulation of Ketorolac Tromethamine Ophthalmic Nanoemulsions’, Pharmaceutics , 13(4), p. 467.
SpecialChem  (2023)  ‘CREMOPHOR®  RH  40  Technical  DataSheet’.  Available  at: https://cosmetics.specialchem.com/product/i-basf-cremophor-rh-40
Yeo,  H.  and  Kim,  J.  (2018)  ‘Stability  Determination  of  the  Various  Cosmetic  Formulations containing Glycolic Acid’, Journal of Fashion business , 22(3), pp. 30–38.
Yu, R.J. and Van Scott, E.J. (2004) ‘Alpha‐hydroxyacids and carboxylic acids’, Journal of Cosmetic Dermatology , 3(2), pp. 76–87.