## TINGKAT TOKSISITAS AIR LIMBAH PROSES PEMUTIHAN PULP KERTAS TERHADAP  IKAN MAS ( Cyprinus carpio L.)
Rina S. Soetopo *) ,  Sri Purwati; Yusup Setiawan, Krisna Septiningrum
*) Peneliti Balai Besar Pulp dan Kertas

## ABSTRACT
Research on toxicity level of pulp bleaching effluent to carp fish (Cyprinus carpio L.) has been  conducted  using  OECD  203-1992  standard  methods  experiment.  The  waste  water  from chlorination and extraction unit  in pulp  conventional bleaching  with  AOX  content of 33.04  mg/L and 20.06 mg/L was used as testing material. The research was conducted in two steps, i’e.: first acute toxicity (4 days) and chronic toxicity (28 days). Measured parameter are the amount of death test organism, operculum movement frequency (OMF) and the AOX content in animal tissues.
Result  of  the  experiment  showed  that  the  acute  toxicity  of  effluent  from chlorination unit is more toxic than from the extraction unit, with LC 50 -96 hours value are of 87.01 ±  0.06%  for  bleaching  chlorination  effluent and  above  100%  for  extraction  effluent.  Subchronic toxicity for chlorination unit showed the enhancement of 40% OMF for 28 days, while there is no AOX compounds accumulation found in the animal tissue.
Keywords:  bleaching  chlorination-extraction  effluent,  AOX,  Cyprinus  carpio  L.,  LC 50 ,  acute  and sub-chronic toxicity, operculum movement frequency (OMF)

## INTISARI
Penelitian  tingkat  toksisitas  air  limbah  proses  pemutihan  pulp  terhadap  ikan  mas (Cyprinus carpio L.) telah dilakukan. Metoda penelitian mengacu pada standar OECD 203-1992. Air limbah diambil dari proses pemutihan pulp konvensional pada unit tahap klorinasi dan tahap ekstraksi yang masing-masing mengandung AOX 33,04 mg/L dan 20,06 mg/L. Penelitian dilakukan dalam 2 tahap yaitu penelitian toksisitas akut (selama 4 hari) dan toksisitas subkronis (selama 28 hari).  Parameter  yang  diuji  adalah  jumlah  kematian  ikan,  frekwensi  gerakan  operkulum  dan kandungan AOX dalam jaringan tubuh ikan.
Hasil percobaan toksisitas akut menunjukkan bahwa air limbah unit klorinasi lebih toksik daripada air limbah unit ekstraksi, dengan nilai LC50-96 jam 87,01 ± 0,06% untuk air limbah unit klorinasi dan LC50-96 jam > 100% untuk air limbah unit ekstraksi.  Hasil uji toksisitas subkronis menunjukkan adanya peningkatan Frekwensi Gerakan Operkulum (FGO) ikan yang terdedah air limbah  klorinasi  40%  selama  28  hari,  yang  berdampak  terhadap  penurunan  laju  pertambahan berat ikan, namun demikian pendedahan selama 28 hari tersebut belum sampai terjadi akumulasi AOX dalam jaringan tubuh ikan.
Kata kunci : Air limbah klorinasi-ekstraksi, AOX, Cyprinus carpio, toksisitas akut dan sub kronis, Frekwensi Gerakan perculum (FGO).

## PENDAHULUAN
Indonesia  memiliki  81  industri  pulp dan kertas yang merupakan salah satu industri andalan  sebagai  sumber  penghasil  devisa (APKI,2005).  Hal  tersebut  didukung  oleh ketersediaan bahan baku dan kebutuhan kertas yang  cenderung  meningkat  sejalan  dengan pertumbuhan  pembangunan  dan  konsumsi masyarakat.  Salah  satu  jenis  produk  kertas andalan  eksport  adalah  kertas  putih  yang berbahan  baku  pulp  putih  yang  diperoleh melalui proses pemutihan.
Proses pemutihan adalah larutnya lignin dari  pulp  untuk  meningkatkan kecerahan  pulp menjadi  berwarna  putih.  Proses  pemutihan pulp  yang  digunakan  di  Indonesia  terdiri  dari proses  pemutihan  konvensional,  substitusi klor,  dan elemental  chlorine  free (ECF). Reaksi  yang  terjadi  antara  lignin  dan  bahan kimia yang digunakan dalam proses pemutihan pulp menghasilkan  senyawa    organoklorin. Parameter  yang  menunjukkan  jumlah  total senyawa  organokhlorin  ini  adalah  AOX ( Adsorbable Organic Halides ). AOX
merupakan komponen-komponen organik yang  mengandung  satu  atau  lebih  atom terhalogenasi  (klorin,  bromin,  iodin  dan florine)  yang  terikat  pada  atom  karbonnya.
Sebanyak 75 – 90% dari senyawa organokhlorin  memiliki  berat  molekul  tinggi (>  1000),  sulit  diidentifikasi  dan  memiliki struktur  yang  sangat  bervariasi,  sedangkan sisanya 10 – 25% memiliki berat molekul yang rendah, bersifat hidrofil dan lipofil, berpotensi toksik dan bioakumulatif.
Beberapa organokhlorin yang dapat diidentifikasi adalah chlorophenol (Anonim, 2002).
Senyawa-senyawa
organoklorin tersebut akan terbuang ke lingkungan bersama- sama  dengan  air  limbah  proses  pemutihan pulp.  Sebagian  besar  senyawa  organoklorin merupakan  pencemar  yang dapat  memberikan dampak  negatif  yang  serius  (Kocurek,  1989). Badan  air  penerima  yang  tercemar  senyawa organoklorin  dapat  menyebabkan  air  tersebut tidak menenuhi syarat jika digunakan untuk air minum  dan  untuk  kelangsungan  hidup  ikan serta hewan akuatik lainnya ( EPA (1993).
Dalam mengantisipasi terjadinya masalah pencemaran lingkungan perairan oleh industri  pulp  dan  kertas,  saat  ini  pemerintah Indonesia  tengah  menerapkan  produk  kertas ramah lingkungan dengan memberikan ekolabel  pada  produk  kertas  cetak  tanpa  salut kepada  industri  yang  telah  memenuhi  syarat. Salah  satu  persyaratan  untuk  memperoleh ekolabel untuk kertas cetak tanpa salut tersebut adalah parameter AOX. Namun sampai saat ini Indonesia  belum  memiliki  baku  mutu  AOX untuk  pembuangan  air  limbah  industri  pulp dan  kertas.  Beberapa  permasalahan  yang dihadapi  dalam  menentukan  nilai  nominal baku  mutu  AOX  adalah  kurangnya  data-data tentang pengaruh senyawa organik terklorinasi dari  proses  pemutihan  pulp  terhadap  hewan akuatik.  Atas  dasar  hal  tersebut,  penelitian penentuan    toksisitas  air  limbah  proses pemutihan terhadap ikan mas dilakukan.
Tulisan ini melaporkan hasil penelitian tentang pengaruh air limbah proses  pemutihan pulp  terhadap  organisme  perairan ikan mas ( Cyprinus  carpio L.)  yang  dilakukan  dengan menggunakan  prosedur  uji  toksisitas  akut menurut  standar OECD 203-1992.

## BAHAN DAN METODA
Air limbah dan Air Pengencer
Air  limbah  diambil  dari  unit  klorinasi dan  unit  ekstraksi  proses  pemutihan  pulp metoda konvensional. Terhadap kedua jenis air limbah  tersebut  dilakukan  analisis  yang meliputi  pH,  AOX,  COD,  TSS.  Sebelum digunakan,  air  limbah  dari  proses  klorinasi dinetralkan  terlebih  dahulu  menggunakan NaOH,  sedangkan  air  limbah  dari  proses ekstraksi dinetralkan dengan HCl. Air pengencer  yang  digunakan  adalah  air  tanah yang telah diendapkan selama minimal 24 jam.

## Hewan uji
Hewan uji yang digunakan adalah Ikan mas ( Cyprinus carpio L.) galur majalaya yang berasal dari induk pemijahan. Untuk penentuan  nilai  LD50  digunakan  ikan  mas dengan  berat  rata-rata  2,09  ±  0,02  g,  panjang total  rata-rata  5,48  ±  0,04  cm.  Untuk penentuan  pengaruh  subkronis  air  limbah proses  pemutihan  pulp  digunakan  ikan  mas dengan  berat  rata-rata  3,07  ±  0,06  g  dan panjang  rata-rata  9,68  ±  0,16  cm.  Sebelum digunakan sebagai hewan uji, ikan diaklimatisasi  terlebih  dahulu  selama  7  hari dalam bak akuarium pada kondisi laboratorium dan  diberi  pakan  pelet  komersial  secara et libitum .  Selain  itu,  metilen  biru  juga ditambahkan ke dalam air dalam bak akuarium untuk  mencegah  timbulnya  penyakit  dan parasit  ikan.  Ikan  mas  dipuasakan  terlebih dahulu  selama  satu  hari  sebelum  digunakan untuk percobaan.

## Metoda Percobaan
Penentuan  tingkat  toksisitas  akut  air limbah  proses  pemutihan pulp  kertas  terhadap ikan  mas (Cyprinus  carpio L.)  dilakukan dengan  sistem  semi  statis  menurut  standar OECD  203-2002 Fish,  Acute  Toxicity  Test . Pada  percobaan  ini  digunakan  akuarium kapasitas 20 L. Perlakuan percobaan dilakukan dengan 7  variasi  pengenceran air limbah,  satu kontrol  dengan  masing-masing  4  replikasi (Tabel 1). Pada setiap replikasi, diberi 10 ekor hewan  uji. Percobaan dilakukan  selama 4  hari dengan  parameter  pengamatan  adalah  jumlah kematian  pada  setiap  waktu  pemaparan  3,  6, 24, 48, 72 dan 96 jam.
Variasi  perlakuan  pengenceran  air limbah pada uji toksisitas subkronis ditentukan dengan  berdasarkan  nilai  LC50-96  jam  yang diperoleh  dari  hasil  uji toksisitas  akut  (Forbes
& Forbes, 1994). Dengan menggunakan faktor 10,  diperoleh  variasi  perlakuan  pengenceran air limbah sebagai berikut : 0,4 %, 4 %, 40 % dan kontrol, dengan masing-masing 3 replikasi (OECD,  2002).  Percobaan  toksisitas  akut dilakukan  selama  28  hari  dengan  pergantian air  limbah  pada  masing-masing  perlakuan setiap  2  hari  sekali.  Parameter  pengamatan meliputi  :  pH,  oksigen  terlarut,  DHL,  suhu, jumlah kematian, kecepatan respirasi dilakukan  setiap  2  hari  sekali,  penghitungan frekwensi  gerakan  operkulum  (FGO)  dan pengukuran berat badan segar dilakukan setiap empat  hari,  dan  analisis  kadar  AOX  dalam daging ikan dilakukan pada akhir percobaan

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Karakteristik Air Limbah Proses Pemutihan Pulp
Pada  dasarnya  air  limbah  yang dihasilkan dari proses pemutihan konvensional merupakan  campuran  dari  air  limbah  tahap klorinasi dan ekstraksi alkali. Proses pemutihan  tahap  klorinasi  dilakukan  untuk mengoksidasi  senyawa  lignin  dalam  pulp menjadi  senyawa  organoklorin  dan asam  HCl yang larut sebagai air limbah dengan pH asam. Setelah  itu,  pulp  hasil  klorinasi  diputihkan lebih  lanjut  untuk  melarutkan  senyawa  lignin yang  tersisa  dalam  pulp  melalui  proses ekstraksi alkali (NaOH) sehingga larut sebagai air limbah yang bersifat basa. Karakteristik air limbah  yang  dihasilkan  dari  masing-masing tahapan  klorinasi  dan  ekstraksi  dapat  dilihat pada Tabel 2.
Tabel 1. Variasi perlakuan pada uji toksisitas akut
Air limbah Variasi perlakuan,% I II III IV V VI VII VIII Klorinasi 100 87 75 56 42 28 10 0 Air pengencer 0 13 25 44 58 72 90 -
Tabel 2. Karakteristik air limbah proses klorinasi
Parameter unit Air Limbah proses Pemutihan Kep.MenKLH No 51/MLH/10/1995 Klorinasi Ekstraksi pH - 3,5 9,3 6-9 AOX, mg/L 33,04 20.06 - COD, mg/L 349.4 610 300 Rasio AOX / COD % 9,4 3,3 - TSS, mg/L 24 52 100
Air  Lim bah Klor inas i 0 20 40 60 80 100 Kons e ntras i lim bah k lorinas i  (%) Ke m at ian ika n (%) JAM KE O 0 0 0 0 0 0 0 20 JAM KE 24 0 0 0 0 20 30 20 70 JAM KE 48 0 0 0 20 20 30 20 70 JAM KE 72 0 0 0 20 20 30 20 80 JAM KE 96 0 0 0 20 20 30 30 80 0 10 28 42 56 75 87 100 Air  Lim bah dari Unit Ek strak si 0 20 40 60 80 100 Kons entrasi lim bah e k straks i (%) Kematian (% ) Jam ke 0 0 0 0 0 0 0 0 0 Jam ke 24 0 0 0 0 0 0 0 0 Jam ke 48 0 0 0 0 0 10 0 0 Jam ke 72 0 0 0 0 0 10 0 10 Jam ke 96 0 0 0 0 0 10 10 10 0 10 28 42 56 75 87 100
Gambar 1. Pengaruh air limbah klorinasi dan ekstraksi terhadap ikan.
130 140 150 160 4 8 12 16 20 24 28 La ma  pende da ha n, hari FG O/menit Kontrol 40 4
0,4
Hasil analisis pada Tabel 2
menunjukkan  bahwa  pH  dari  kedua  jenis  air limbah proses pemutihan sangat berbeda yaitu air  limbah  klorinasi  bersifat  asam  dengan  pH rata-rata  3,5  dan  air  limbah  ekstraksi  bersifat basa  dengan  pH  rata-rata  9,3.  Perbedaan  sifat pH  ini  akan  memberikan  pula  perbedaan senyawa  organik  yang  terkandung  dalam masing-masing air limbah tersebut.
Ditinjau dari parameter AOX menunjukkan  bahwa  konsentrasi  AOX  dalam air  limbah  klorinasi  adalah  33,04  mg/L  yang menunjukkan nilai lebih tinggi dari konsentrasi AOX dalam air limbah ekstraksi (20,06 mg/L). Parameter  AOX  mencerminkan  jumlah  total dari kandungan senyawa organokhlorin teradsorbsi  yang  terbagi  atas  fraksi  berat molekul tinggi (BM >1000) sebanyak 80% dan fraksi  berat  molekul  rendah  (BM  <1000) sebanyak 20%. Air limbah dari tahap ekstraksi lebih dominan mengandung komponen senyawa  AOX  dengan  berat  molekul  tinggi, sebaliknya  untuk  air  limbah  klorinasi  lebih didominasi  dengan  komponen  senyawa  AOX dengan  berat  molekul  rendah  (Allan,  1993). Perbedaan  karakteristik  dua  jenis  air  limbah tersebut,  akan  memberikan  tingkat  toksisitas yang  berbeda  pula,  tergantung  pada  sifat komponen  yang  terkandung  dalam  masing- masing air limbah tersebut.
Parameter COD air limbah mencerminkan jumlah total kandungan organik  yang  terdiri  dari  organik  sederhana dan organik kompleks. Hasil analisis menunjukkan bahwa kandungan  organik total di dalam air limbah ekstraksi  lebih tinggi (610 mg/L)  daripada  yang  terkandung  dalam  air limbah  klorinasi  (349,4  mg/L).  Berdasarkan perhitungan  ratio  AOX/COD  pada  masing- masing  air  limbah,  menunjukkan  bahwa  nilai rasio  AOX/COD  air  limbah  klorinasi    lebih besar  (9,4%)  daripada  air  limbah  ekstraksi (3,3%). Berdasarkan kondisi tersebut, mencerminkan  bahwa  kandungan  senyawa organoklorin  dalam  air  limbah  dari  tahap klorinasi lebih tinggi daripada tahap ekstraksi. Selain itu, rasio AOX/COD juga menunjukkan tingkat  toksisitas,  dengan  makin  tinggi  ratio AOX/COD  air  limbah,  makin    toksik.(Folke, 1995).  Parameter  TSS  dari  kedua  air  limbah yang  digunakan  relatif  rendah  dan  sudah memenuhi  syarat baku mutu efluen air limbah
industri  pulp  menurut  Kep  Men  LH  No 51/1995.

## Tingkat Toksisitas Akut Air Limbah Proses Pemutihan Pulp
Percobaan toksisitas akut telah dilakukan  terhadap  air  limbah  dari  masing- masing tahap proses pemutihan pulp yaitu dari unit  klorinasi  dan  unit  ekstraksi.  Jumlah kematian  hewan  uji  pada  masing-masing  air limbah  proses  pemutihan  dapat  dilihat  pada Gambar  1.  Hasil  perhitungan  analisis  probit menunjukkan  bahwa  nilai  LC50-96  jam  air limbah  klorinasi  adalah  87,01  ±  0,06%, sedangkan  air  limbah  unit  ekstraksi  tidak menyebabkan  kematian  akut  (LC50-96  jam >100%).  Nilai-nilai  tersebut  mencerminkan tingkat  toksisitas,  nilai  LC50  lebih  kecil menunjukkan  lebih  toksik.  Atas  dasar  hal tersebut, dapat diketahui bahwa sumber toksik air  limbah  proses  pemutihan  ada  pada  air limbah  tahap  klorinasi.  Hal tersebut  didukung oleh data AOX dari masing-masing air limbah, yang menunjukkan nilai AOX air limbah tahap klorinasi lebih tinggi daripada air limbah tahap ekstraksi (Tabel 2).
Nilai  LC50  air  limbah  tahap  ekstraksi lebih  besar  dari  100%,  hal  ini  menunjukkan bahwa  tidak  semua  organokhlorin  yang terdeteksi  sebagai  AOX  merupakan  senyawa yang  bersifat  toksik.  Telah  dilaporkan  bahwa lebih  dari  300  komponen  organokhlorin terdapat  dalam  air  limbah  industri,  dan  hanya 10 – 25% memiliki berat molekul yang rendah, yang  sebagian  bersifat  hidrofil  dan  sebagian lagi  bersifat  lipofil  dan  berpotensi  bersifat toksik  dan  bioakumulatif  (Anonim,  2002). Senyawa-senyawa  yang  bersifat  lipofilik  ini akan  terakumulasi  dalam  jaringan  hidup, sehingga berpotensi sebagai senyawa karsinogenik. Beberapa senyawa-senyawa lipofilik  tersebut  antara  lain  Chlorofenol; dichlorofenol;  trichlorofenol;  tetrachlorofenol; pentachlorofenol;
dichloroquaiacol;
2-
0.00 10.00 20.00 30.00 lama pendedahan (Hari) Laju per ta mb ahan ber at (%) K L 0.4 L 4 L 40 K 3.54 7.08 8.85 12.98 15.93 17.99 24.19 L 0.4 5.90 8.39 9.94 12.11 15.22 17.39 23.91 L 4 4.17 9.29 10.58 10.90 14.42 17.63 23.08 L 40 1.18 4.72 8.26 9.73 14.75 16.52 23.89 4 8 12 16 20 24 28
tetrachlodibenzo-furan (Commoner, et al .,
1996).

## Pengaruh Subkronis Air Limbah Klorinasi Terhadap Ikan
Percobaan
penentuan pengaruh subkronis  air  limbah  klorinasi  terhadap  ikan, dilakukan  pada  suhu  ruang  (26-29 o C)  dengan suhu  rata-rata  air  24,5˚C,  kadar  oksigen terlarut rata-rata  6,5 – 6,7 dan pH rata-rata 7,8 – 8,0. Kondisi tersebut termasuk dalam kondisi ideal  untuk  kehidupan  ikan  mas  (Darmadi, 2003).
Data  hasil  pengamatan  frekwensi gerakan  operkulum  (FGO)  ikan  pada  masing- masing  perlakuan  konsentrasi  air  limbah klorinasi dapat  dilihat  pada  Gambar  2.  Secara keseluruhan,  FGO  ikan  yang  didedahkan dalam  air  limbah  klorinasi  selama  28  hari menunjukkan  peningkatan  jika  dibandingkan dengan kontrol. Hasil percobaan menunjukkan ikan  yang  didedahkan  pada  perlakuan  yang mengandung  air  limbah  klorinasi  40% menunjukkan  peningkatan  FGO  yang  sangat signifikan  terhadap  konsentrasi  air  limbah lainnya.    FGO  ikan  per  menit  pada  perlakuan kontrol  adalah  140  –  143,  sedangkan  pada perlakuan  yang  mengandung  air  limbah klorinasi  40%,  4%  dan  0,4%  berturut-turut adalah 140 – 153, 140 -146; dan 139 – 142 per menit.
Mekanisme  meningkatnya  FGO  ikan yang  didedahkan  pada  perlakuan  yang mengandung air limbah klorinasi 40%, diawali dengan  terhalangnya  proses  difusi  oksigen  ke dalam  insang  mengakibatkan ikan kekurangan oksigen. Sebagai respon, ikan akan meningkatkan FGO untuk memenuhi kekurangan  oksigen  tersebut.  Hal  ini  sesuai dengan  penelitian  yang  telah  dilakukan  oleh Aktaviyani  (2006)  dan  Bella  (2006)  yang mendedahkan  ikan  mas  ( Cyprinus  carpio L.) dalam  senyawa  natrium  hipoklorit  (NaOCl) dan  senyawa  monokhlorofenol.  Peningkatan FGO  pada  ikan  dalam  waktu  lama  dapat menyebabkan kerusakan insang yang
berdampak  pada  kematian  (Heath,  1995)  dan melemahkan otot yang menggerakkan operkulum (Anonim,1999). Senyawa penyebab terjadinya
peningkatan  FGO  ini  belum  dapat  diketahui secara  pasti  karena  komponen  air  limbah klorinasi  yang  heterogen.  Namun  senyawa tersebut diduga berupa senyawa organokhlorin
yang  bersifat  lipofilik  dan  mudah  terserap  ke dalam tubuh ikan. Senyawa organoklorin yang bersifat  lipofilik  tersebut  dapat  mengganggu proses  fosforilasi  oksidatif  pada  respirasi  sel yang menyebabkan terhambatnya pembentukan  ATP    (Ramamoorthy,  1997). Tubuh  ikan  merespon  kekurangan  ATP tersebut  sebagai  kekurangan  oksigen  sehingga menimbulkan  reaksi  fisiologis  yaitu  dengan meningkatkan FGO untuk menambah pasokan oksigen ke dalam tubuh. Hal ini sesuai dengan penelitian  yang  telah  dilakukan  oleh  Bella (2006) yang mendedahkan ikan mas ( Cyprinus carpio L.)  dalam  senyawa  monokhlorofenol. Peningkatan FGO pada ikan dalam waktu lama dapat  menyebabkan  kerusakan  insang  dan hipoksia  yang  berdampak  pada  kematian (Bailey,  2004)  dan  melemahkan  otot  yang menggerakkan  operkulum  (Anonim,1999). Hipoksia  adalah  keadaan  kekurangan  oksigen yang  telah  mencapai  jaringan  tubuh  ikan  dan seringkali  menyebabkan  kematian  (Bailey, 2004).  Satchell  (1991),  menyatakan  ada beberapa respon yang dilakukan ikan terhadap hipoksia yaitu peningkatan ventilasi, peningkatan  tekanan  darah  dan  penyesuaian denyut  jantung.  Selain  itu,  Egna  &  Boyd (1997)  menyatakan  bahwa  hipoksia  yang berkelanjutan  dapat  menimbulkan  penurunan laju  pertumbuhan  karena  sel-sel  tubuh  yang kekurangan  oksigen  tersebut  akan  rusak sehingga tidak dapat beraktifitas.
Gambar  3. Laju pertambahan berat ikan selama pendedahan 28 hari
Peningkatan FGO pada ikan
berdampak terhadap menurunan laju pertambahan  berat  rata-rata  ikan.  Hal  tersebut
tampak  setelah  16  hari  didedah  air  limbah klorinasi,  laju  pertambahan  berat  ikan  lebih rendah  dibanding  perlakuan  kontrol  (Gambar 3), walaupun secara statistik tidak menunjukkan  beda  nyata.    Peningkatan  FGO pada ikan, menyebabkan terganggunya  proses pembentukan  ATP  dalam  tubuh  yang  akan berdampak terhadap metabolisme sel, sehingga mempengaruhi  laju  pertambahan  berat  tubuh (Campbell, 2000).
Tabel 3. Data analisis kadar  AOX  pada daging ikan Konsentrasi air limbah klorinasi (%) Konsentrasi AOX (µg/g) Kontrol tt 0,4 tt 4 tt 40 tt
tt : tidak terdeteksi.
Data  analisis  kadar  AOX  dalam daging  ikan  yang  telah  didedah  air  limbah klorinasi  selama  28  hari  tidak  menunjukkan adanya  adsorbsi  senyawa  organoklorin  masuk dalam  jaringan  tubuh  ikan  (Tabel  3). Berdasarkan  data  tersebut,  dapat  disimpulkan bahwa  ikan  yang  didedah  air  limbah  klorinasi 40%  selama  28  hari  belum  menyebabkan terjadinya akumulasi senyawa-senyawa organoklorin  dalam  jaringan  tubuh  ikan.
Terdapat
dua kemungkinan yang menyebabkan hal ini terjadi, pertama senyawa organoklorin  yang  terkandung  dalam  air limbah  klorinasi  tidak  termasuk  dalam kelompok  yang  memiliki  berat  molekul rendah, sehingga  tidak bersifat lipofil. Kemungkinan kedua adalah senyawa organoklorin  yang  terkandung  dalam  air limbah  klorinasi  termasuk  dalam  kelompok yang  memiliki  berat  molekul  rendah  dan bersifat  lipofil,  namun  pada  pendedadahan ikan  selama  28  hari  belum  menyebabkan akumulasi sampai kadar yang dapat terdeteksi.

## KESIMPULAN
Air  limbah  unit  klorinasi  dari  proses pemutihan  bersifat  lebih  toksik  daripada  air limbah dari unit ekstraksi. Air limbah klorinasi 40%  yang  didedahkan  pada  ikan  selama  28 hari,  belum  menyebabkan  adanya  akumulasi AOX  dalam  jaringan  tubuh  ikan,  tetapi  sudah menyebabkan  peningkatan  frekwensi  gerakan
operkulum yang berdampak pada laju pertambahan berat badan.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Aktaviyani  (2006).  Pengaruh  Natrium hipoklorit  (NaOCl)  terhadap  Perubahan frekwensi  Gerakan  operculum  dan  nilai Hematokrit Ikan mas  (Cyprinus carpio L.) setelah  96  jam  Pendedahan.  SITH-ITB, Bandung
2. Anonim, 1999. Hazardous Substance Fact
Sheet: 4-Chlorophenol . New Jersey Department of Health and Senior Services, New Jersey, USA 3. Anonim,  2002.treatment  of  Industrial waste  waters  containing  Chlorinated Organic Compounds, Proceedings Combined  regional  workshops  2002, ARRPET  SIDA,  De  la  Salle  university, Manila, Philippines.
4. Bailey,  2004,  tropical  Fishlopaedia  ;  a Complete  guide  to  Fish  care.  Ringpress Books, internet Publishing, Surrey.
5. Bella  (2006).  Pengaruh  4-Klorofenol terhadap  Perubahan  Frekwensi  Gerakan Operkulum  dan  laju  Pertumbuhan  Berat Badan  Ikan mas  Cyprinus  carpio L.  strain
Majalaya. SITH-ITB, Bandung
6. Darmadi,  G.,  2003,  Pengaruh  suhu Terhadap Laju Metabolisme, laju Pertumbuhan  dan  Efisiensi  Pakan  Ikan mas, cyprinus carpio. Departemen Biologi ITB, Bandung
7. Egna,H.S  &  C.  E.  Boyd.  1997.  Dynamic of  Pond  Aquaculture.  CRC  Press  LLC. Florida.
8. Franson, M A H. 1998. Standard methods for  the  examination  of  water  and wastewater , 20 th edition. APHA; AWWA; WEF, p8-122, 8-123 & p10-92, 10-93.
9. Forbes,  V.E.  ,  Forbes,  T.L.  1994. Ecotoxicology  in  Theory  and  Practice . Chapman and Hall, London.
10. Heath,  1995.  water  Pollution  and  Fish physiology.  CRC  Press,  Inc.  Boca  raton. Florida.
11. OECD 203; 1992, Guideline for testing of chemicals; Fish, acute toxicity test, ,
12. Ramamoorthy,  1997.  chlorinated  Organic compounds in the environment CRC Press Inc, Florida.
13. Susanti,  H.,  1998.  Effect  of  Phipronil against  carp  fish  ( Cyprinus  carpio L.)
14. respiration  activities  by  using  of  OMF record methods, Graduate Thesis, Dept. of Biology ITB, Bandung,
15. Website http://elibs.cs.berkeley.edu/kopec/tr9/html/ sp-common-carp.html 16. Website http://www.caspianenvironment.org/biodb/ eng/fishes/Cyprinus%20carpio/main.htm
17. Website http://www.floridafisheries.com