Media Ilmu Kesehatan Vol. 9, No. 3, Desember 2020
UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK DAUN KEMANGI ( Ocimum sanctum L. )
TERHADAP BAKTERI Staphylococcus epidermidis ATCC 12228
ANTIBACTERIAL ACTIVITY TEST OF KEMANGI LEAF EXTRACT ( Ocimum sanctum L.) ON BACTERIA Staphylococcus epidermidis ATCC 12228
Nur’Aini Purnamaningsih 1 *, Francisca Romana Sri Supadmi 2
* 1 Universitas  Jenderal  Achmad  Yani  Yogyakarta,  Jalan  Brawijaya,  Ring  Road  Barat,  Ambarketawang, Gamping, Sleman, Yogyakarta, email: nurainipurnamaningsih21@gmail.com
2 Universitas  Jenderal  Achmad  Yani  Yogyakarta,  Jalan  Brawijaya,  Ring  Road  Barat,  Ambarketawang, Gamping, Sleman, Yogyakarta, email: siskatbd.ayani@gmail.com

## ABSTRACT
Background: Indonesia is a tropical country that is rich in various types of plants that have the potential to be  used  in  the  health  sector.  Basil  leaves  ( Ocimum  sanctum L.)  is  a  plant  that  has  antibacterial  potential. Antibacterial compounds are compounds that can inhibit bacterial growth.
Objective: The objective of this study was to determine the antibacterial activity of basil leaf extract ( Ocimum sanctum L. ) with varying concentrations of 20%, 40%, 60%, 80% and 100%, and to determine the effective concentration  of  basil  extract  which  has  antibacterial  activity  against Staphylococcus  epidermidis ATCC 12228.
Methods: This research was conducted with laboratory experimental research method. Basil leaves ethanol extract  was  prepared  by  using  maseration  extraction  method.  The  method  used  in  the  inhibitory  test  using diffusion  of  the  disc  with  5  samples  in  each  treatment  group.  The  sample  consisted  of  treatment  groups, ethanol extract of basil leaves with concentration of 20%, 40%, 60%, 80% and 100%.
Results: Antibacterial test results showed that basil leaf extracts with various concentrations of 20%,  40%, 60%, 80% and 100% had antibacterial activity against Staphylococcus epidermidis ATCC 12228. The result of  this  study  showed  that  ethanol  extract  of  basil  leaves  with  20%  concentration  had  inhibitory  power  of 10,23 mm, 40% of 10,32 mm, 60% by 10,58 mm, 80% by 13,37 mm, and 100% by 15,83 mm.
Conclusion: Basil  leaf  extract  concentrations  100%  effective  as  an  antibacterial  against Staphylococcus epidermidis ATCC 12228 at 15,83 mm.
Keywords: Antibacterial, basil leaf extract, staphylococcus epidermidis ATCC 12228

## PENDAHULUAN
Indonesia  merupakan  negara  tropis yang  kaya  akan  berbagai  jenis  tumbuhan yang dapat menghasilkan metabolit sekunder berupa bahan antibakteri. 1
Senyawa  antibakteri  merupakan  senyawa yang  dapat  menghambat  pertumbuhan bakteri. Salah satu bahan alam yang dapat dimanfaatkan  sebagai  antibakteri  adalah daun  kemangi  ( Ocimum  sanctum  L. )  yang dahulu  hanya  dikonsumsi  sebagai  lalapan mentah  atau  sebagai  sayuran.  Kemangi
adalah  tanaman  yang  mudah  didapatkan yang tersebar hampir di seluruh Indonesia karena dapat tumbuh liar maupun dibudidayakan. 6 Daun  kemangi  ( Ocimum sanctum L. ) merupakan salah satu tanaman  yang  memiliki  potensi  sebagai antibakteri.  Daun  kemangi  mengandung senyawa  metabolit  antara  lain  flavonoid, tanin, steroid, dan saponin. 2
Antimikroba  dapat  menghancurkan mikroorganisme dengan cara menghambat pembentukannya  atau  kerja  patogeniknya.
Secara  lebih  spesifik,  senyawa  antibakteri bersifat  destruktif  untuk  atau  menghambat kerja bakteri. 13 Antimikroba dapat diklasifikasikan sebagai bakteriosidal
(bakterisidal) atau bakteriostatik.
Bakteriosidal  apabila  dapat  membunuh mikroba, menyebabkan lisis sel.
Sedangkan
bakteriostatik apabila menghambat pertumbuhan
mikroorganisme,  tetapi  bergantung  pada sistem  imun  seluler  dan  humoral  pejamu untuk membunuh mikroorganisme.
Senyawa antimikroba yang memiliki spektrum  kerja  yang  terbatas  disebut antibiotik spektrum sempit. Antibiotik spektrum  luas  memiliki  kerja  terhadap bakteri Gram positif dan Gram negatif. 13
Hasil uji kepekaan Kirby-Bauer dilaporkan  sebagai  sensitif,  intermediet,  atau resistan.  Apabila  hasil  sensitif  (rentan) menunjukkan  bahwa  antibakteri  tersebut efektif  terhadap  bakteri  karena  pertumbuhan dihambat in vitro . Hasil resistan menunjukkan bahwa  antibakteri  tidak  efektif  terhadap bakteri yang diperiksa. Clinical and Labolatory  Standards  Institute (CLSI)  adalah satu  organisasi  yang  menetapkan  standar untuk  metode  uji  generik,  termasuk  uji kepekaan Kirby-Bauer. 13
Kandungan daun kemangi yang bersifat antibakteri adalah minyak atsiri. Minyak atsiri daun  kemangi  memiliki  konsentrasi  bunuh minimal  (KBM)  0,5%  terhadap  bakteri S. aureus ,  0,25%  terhadap  bakteri E.coli ,  2% terhadap bakteri S. epidermidis. 7
Penelitian
Nurmashita (2015)
melaporkan  bahawa  pasta  gigi  ekstrak  daun kemangi  yang  mengandung  abrasif  di berbagai  konsentrasi  (37,42  dan  47  %) menghasilkan zona hambat terhadap pertumbuhan  bakteri S.  mutans dengan diameter penghambatan 1,241- 4,028 mm. 14
Penelitian  Ali  dan  Savita  melaporkan bahwa  kandungan  flavonoid  daunkemangi dapat  memberikan  efek  antibakteri  terhadap E.  coli , S.  aureu s  dan K.  pneumonia . Penelitian tersebut juga menunjukkan bahwa kombinasi  dari  kedua  senyawa  flavonoid daun  kemangi  yaitu  orientin  dan  visenin memberikan  efek  antibakteri  yang  sinergis dibandingkan dengan penggunaan salah satu dari kedua senyawa flavonoid tersebut. 15
Komponen  yang  terkandung  dalam ekstrak  daun  kemangi  potensial  untuk dikembangkan  sebagai  sumber  bahan  aktif antibakteri. Oleh karena  itu,  dalam  penelitian ini dipelajari aktivitas antibakteri ekstrak daun kemangi  ( Ocimum  sanctum L.)  dalam berbagai  variasi  konsentrasi  serta  untuk mengetahui  konsentrasi  efektif  ekstrak  daun kemangi  yang  memiliki  aktivitas  antibakteri terhadap Staphylococcus  epidermidis ATCC 12228.

## BAHAN DAN CARA PENELITIAN

## Bahan dan Alat
Bahan  yang  digunakan  antara  lain ekstrak daun kemangi ( Ocimum sanctum L. ), bakteri Staphylococcus  epidermidis ATCC 12228,  media  Nutrient  Agar  (Oxoid),  Muller Hinton  Agar  (Oxoid),  tip  pipet,  kloramfenikol
Media Ilmu Kesehatan Vol. 9, No. 3, Desember 2020
paperdisk, alkohol 70%, swab steril, aquadest, dan spiritus.
Sedangkan  alat  yang  digunakan antara  lain  mikropipet,  petridish,  erlenmeyer, autoclave,  vortex  stirrer,  inkubator,  Laminar Air  Flow,  hot  plate,  magnetic  stirrer,  pinset, jangka  sorong,  botol  vial,  palu  sumuran,  dan Mc. Farland Standart.
Prosedur Kerja
Pembuatan  Media  Nutrient  Agar  (NA)  dan Muller Hinton Agar (MHA)
Media yang digunakan untuk peremajaan  bakteri  uji  adalah  Nutrient  Agar (NA),  sedangkan  media  yang  digunakan untuk  uji  aktivitas  antibakteri  adalah  Muller Hinton Agar (MHA).
Media  NA  (Oxoid)  sebanyak  28  gram dilarutkan  ke  dalam  1  liter  aquadest, kemudian dipanaskan dan diaduk dengan hot plate  dan  magnetic  stirrer.  Setelah  itu disterilkan  menggunakan  autoclave  dengan suhu 121 0 C, 1 atm, selama 15 menit.
Media  Muller  Hinton  Agar  (Oxoid) sebanyak 38 gram dilarutkan ke dalam 1 liter aquadest,  kemudian  dipanaskan  dan  diaduk dengan  hot  plate  dan  magnetic  stirrer. Setelah itu disterilkan menggunakan autoclave dengan suhu 121 0 C, 1 atm, selama 15 menit.

## Penyiapan Bakteri Uji
Bakteri  uji  bakteri Staphylococcus
aureus ATCC 25923 dan bakteri Staphylococcus  epidermidis ATCC  12228 diremajakan  kembali  dan  diinokulasikan secara aseptik ke dalam media Nutrient Agar
pada  suhu  37 0 C  selama  24  jam.  Sebelum digunakan  untuk  uji  aktivitas  antibakteri, bakteri  uji  dilakukan  pengenceran  terlebih dahulu  dengan  larutan  NaCl  fisiologis, kemudian  dihomogenkan  dengan  vortex stirrer.  Inokulum  disesuaikan  ke  konsentrasi standart  0,5  Mc  Farland,  setara  dengan 1,5x10 8 CFU/ml.

## Uji Aktivitas Antibakteri
Uji aktivitas antibakteri dengan menggunakan  metode  difusi  sumuran.  Difusi sumuran  adalah  pembuatan  lubang  pada media  padat  yang  telah  diinokulasi  bakteri. Lubang  tersebut  diinjeksikan  dengan  ekstrak yang  diujikan.  Parameter  dari  metode  ini adalah dengan mengukur zona hambat yang terbentuk di sekeliling sumuran.
Suspensi  bakteri  uji  diinokulasikan  ke atas  media  Muller  Hinton  Agar  plate, kemudian  dibuat  lubang  sumuran.  Pada masing-masing petridish dibuat lubang sumuran  dengan  diameter  6  mm,  kemudian 50 µm masing-masing konsentrasi diinjeksikan ke lubang sumuran tersebut.
Ekstrak  daun  kemangi  ( Ocimum sanctum L.)  dibuat  variasi  konsentrasi  20%, 40%,  60%,  80%,  dan  100%.  Kontrol  negatif yang  digunakan  adalah  aquadest.  Kontrol positif  yang  digunakan  adalah  kloramfenikol C-30  30  µg.  Kloramfenikol  mempunyai aktivitas  terhadap  bakteri  Gram  positif  dan bakteri  Gram  negatif.  Kloramfenikol  dapat mengganggu sintesis protein dengan
pengikatan ke subunit ribosom 50S, mencegah pelekatan asam-asam amino. 13 Selanjutnya
semua petridish diinkubasi  pada  suhu  37 0 C  selama  24  jam.
Selanjutnya  diameter  zona  hambat  yang terbentuk  diamati  dan  diukur  menggunakan jangka sorong.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Daun  kemangi  merupakan  salah  satu tanaman  yang  memiliki  potensi  sebagai antibakteri. Hasil identifikasi spesies tumbuhan  kemangi  yang  digunakan  dalam
penelitian ini: Kingdom  : Plantae Divisio : Tracheophyta Class : Magnoliopsida Ordo : Lamiales Familia  : Lamiaceae Genus : Ocimum Spesies  : Ocimum sanctum L.
Sinonim  : - Nama lokal: Kemangi
Untuk  menguji  aktivitas  antibakteri dari ekstrak daun kemangi ( Ocimum sanctum L.),  maka  dilakukan  serangkaian  uji  daya hambat  ekstrak  daun  kemangi  ( Ocimum sanctum L.) dengan variasi konsentrasi 20%, 40%,  60%,  80%,  dan  100%  menggunakan metode  difusi  sumuran  terhadap  bakteri patogen,  yaitu Staphylococcus  epidermidis ATCC 12228.
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa ekstrak  daun  kemangi  ( Ocimum  sanctum L.)
dapat  menghambat  pertumbuhan  kedua bakteri  yang  diujikan.  Zona  hambat  bakteri yang terbentuk oleh Staphylococcus epidermidis ATCC  12228  ditunjukkan  pada Gambar 1.
Gambar  1.  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Kemangi 20%, 40%, 60%, 80% dan 100% terhadap Bakteri Staphylococcus epidermidis ATCC 12228
Aktivitas penghambatan terhadap bakteri  diukur  berdasarkan  diameter  zona hambat  yang  terbentuk.  Hasil  penelitian menunjukkan  bahwa  ekstrak  daun  kemangi ( Ocimum sanctum L.) dengan variasi konsentrasi 20%, 40%, 60%, 80% dan 100% mempunyai  aktivitas  antibakteri  terhadap Staphylococcus  epidermidis ATCC  12228. Konsentrasi  ekstrak  daun  kemangi  100% efektif  sebagai  antibakteri  terhadap  bakteri Staphylococcus  epidermidis ATCC  12228 sebesar  15,83  mm.  Hasil  pengukuran diameter  zona  hambat  terhadap  bakteri Staphylococcus  epidermidis ATCC  12228 ditunjukkan pada Tabel 1.
Media Ilmu Kesehatan Vol. 9, No. 3, Desember 2020
Tabel  1.  Diameter  Zona  Hambat  Antiseptik  Ekstrak  Daun  Kemangi  ( Ocimum  sanctum L.)    pada Berbagai Variasi Konsentrasi terhadap Bakteri Staphylococcus epidermidis ATCC 12228 No. Sampel Konsentrasi Diameter Zona Hambat (mm) 1 2 3 Rata-rata 1. Ekstrak daun kemangi 20% 10,10 9,70 10,90 10,23 40% 10,10 10,90 9,97 10,32 60% 10,90 9,95 10,90 10,58 80% 14,15 11,50 14,80 13,37 100% 16,65 15,60 15,25 15,83 2. Kontrol + (kloramfenikol) 30 30 32 30,67 3. Kontrol - (aquadest) 0 0 0 0 Sumber: Data Primer 2020.
Dari  Tabel  1  terlihat  bahwa  ekstrak daun kemangi mempunyai aktivitas antibakteri  terhadap  bakteri Staphylococcus epidermidis ATCC  12228,  dimana  semakin besar konsentrasi ekstrak, zona hambat yang terbentuk  semakin  besar  dan  kelihatan jelas. Hasil  pengujian  antibakteri  menunjukkan bahwa zona hambat terbesar untuk bakteri uji Staphylococcus  epidermidis ATCC  12228 adalah  ekstrak  daun  kemangi  dengan konsentrasi 100% yaitu sebesar 15,83 mm.
Tabel  1  menunjukkan  bahwa  ekstrak daun kemangi dapat menghambat
pertumbuhan bakteri
Staphylococcus
epidermidis ATCC  12228.  Semakin  tinggi konsentrasi ekstrak, maka cenderung semakin  besar  diameter  zona  hambatnya. Menurut  Pelczar  dan  Chan,  semakin  tinggi konsentrasi  suatu  bahan  antibakteri,  maka aktivitas antibakterinya akan semakin kuat. 9
Ekstrak  daun  kemangi  menunjukkan aktivitas antibakteri terhadap Staphylococcus epidermidis ATCC  12228.  Aktivitas  ini diperoleh dari senyawa aktif yang terkandung dalam ekstrak daun kemangi. Kandungan
daun  kemangi  yang  bersifat  antibakteri adalah  minyak  atsiri.  Minyak  atsiri  daun kemangi  memiliki  konsentrasi  bunuh  minimal (KBM)  0,5%  terhadap  bakteri S.  aureus ,
0,25%  terhadap  bakteri E.coli ,  2%  terhadap bakteri S. epidermidis. 7
Penelitian Nurmashita melaporkan bahwa pasta gigi ekstrak daun kemangi yang mengandung  abrasif  di  berbagai  konsentrasi (37,42 dan 47 %) menghasilkan zona hambat terhadap  pertumbuhan  bakteri S.  mutans dengan  diameter  penghambatan  1,241- 4,028 mm. 14
Penelitian  Ali  dan  Savita  melaporkan bahwa  kandungan  flavonoid  daun  kemangi dapat  memberikan  efek  antibakteri  terhadap E.  coli , S.  aureu s  dan K.  pneumonia . Penelitian tersebut juga menunjukkan bahwa kombinasi  dari  kedua  senyawa  flavonoid daun  kemangi  yaitu  orientin  dan  visenin memberikan  efek  antibakteri  yang  sinergis dibandingkan dengan penggunaan salah satu dari kedua senyawa flavonoid tersebut. 15

## KESIMPULAN
Ekstrak daun kemangi dengan variasi  konsentrasi  20%,  40%,  60%,  80% dan  100%  mempunyai  aktivitas  antibakteri
Media Ilmu Kesehatan Vol. 9, No. 3, Desember 2020
terhadap Staphylococcus epidermidis ATCC 12228.  Konsentrasi  ekstrak  daun  kemangi 100%  efektif  sebagai  antibakteri  terhadap bakteri Staphylococcus  epidermidis ATCC 12228 sebesar 15,83 mm.

## TERIMA KASIH
Direktorat Riset dan Pengabdian Masyarakat Direktorat Jenderal Riset dan Pengembangan Kementerian Riset, Teknologi, dan Pendidikan Tinggi.

## KEPUSTAKAAN
1. Adila,  R.,  Nurmiati,  dan  Agustien,  A.
2013.  Uji  Antimikroba Curcuma  spp.
terhadap
Pertumbuhan Candida albicans , Staphylococcus  aureus dan Escherichia coli . Jurnal Biologi Universitas Andalas (J Bio UA). 2(1): 1-
7.
2. Afifah,  E.  2003. Tanaman  Obat  untuk Mengatasi  Hepatitis .  Jakarta:  Argo Media Pustaka
3. Carson  C.F.,  Brian  J.M.,  Riley  T.V .
2002.  Mechanism  of  action  of  tea  tree oil on Staphylococcus aureus determined  by  time-kill,  lyses,  leakage, and  salt  tolerance  assays  and  electron microscopy. Antimicrobial  Agent  and Chemotherapy 6:1914-1920.
4. Davis, W.W. dan Stout, T.R. 1971. Disk
Plate Method of Microbiological Antibiotic  Assay. American  Society  for
Microbiology , 4(22).
5. Deasywaty. 2011. Aktivitas Antimikroba dan Identifikasi Komponen Aktif Rimpang Temulawak ( Curcuma
xanthorrhiza Roxb.). Tesis .  Fakultas MIPA Universitas Indonesia.
6. Dwijoseputro. 1990.
Dasar-dasar Mikrobiologi . Ed ke-11. Jakarta: Djambtan.
7. Hariana, A. 2006. Tumbuhan Obat dan Khasiatnya . Jakarta: Penebar Swadaya
8. Jawetz,  Melnick,  dan  Adelberg.  2008. Medical Microbiology . Jakarta: Salemba Medika
9. Pelczar,  M.J.,  Chan  E.S.C.  1988. Dasar-Dasar  Mikrobiologi. Ed  ke-2.
Ratna SH dkk, penerjemah. Jakarta: UI.
Terjemahan dari: Principle of Microbiology. 10.  Radji  M.  2011. Mikrobiologi .  Jakarta (ID): Buku Kedokteran ECG.
11.  Rahayu, R.D. 2011. Uji Daya Antibakteri Ekstrak Temulawak ( Curcuma  xanthorrhiza )  dalam  Pasta Gigi terhadap Pertumbuhan Streptococcus mutans . Skripsi . Jember: Fakultas  Kedokteran  Gigi,  Universitas Jember.
12.  Salem,  M.,  Nazir,  M.,  Ali,  M.S., Hussain,  H.,  Lee,  Y.S.,  Riaz,  N., Jabbar,  A.  2010.  Antimicrobial  Natural Products: An Update on Future Antibiotic  Drug  Candidates, Natural
Products Report , 27, 238-254. 13.  Delost, M.D. 2018. Mikrobiologi Diagnostik untuk Teknologi Laboratorium  Medik  ( Introduction  to Diagnostic
Microbiology for the
Laboratory Sciences ). Jakarta: EGC 14.  Nurmashita, D., Rijai, L., dan
Sulistiarini, R. 2015. Pengaruh Penambahan  Ekstrak  Daun  Kemangi (Ocimum basilicum L.) terhadap
AKtivitas  Antibakteri  Basis  Pasta  Gigi. Jurnal  Sains  dan  Kesehatan.  Vol  1 (4): 159-167
15.  Ali,  H.  dan  Savita,  D.  2012.  In  Vitro Antimicrobial  Activity  of  Flavonoids  of Ocimum  sanctum  with  Synergistic Effect  of  tHeir  Combined  Form. Asian Pacific Journal of Topical Disease .