## PENGARUH  PENAMBAHAN EKSTRAK  ENZIM CAIRAN RUMEN DOMBA  PADA KOMPONEN  SERAT KASAR, KANDUNGAN  ASAM FITAT TEPUNG DAUN LAMTORO GUNG  (Leucaena leucocephala)
The Effect of Addition Sheep Rumen Liquor Enzyme Extract On Fiber Component and  Fitate Acid Content Leucaena Leaf Meal
Indira Fitriliyani 1
1 Jurusan Budidaya Perairan Fakultas Perikanan Ilmu Kelautan Universitas Lambung Mangkurat Banjarmasin,
Coresspondent : Email : indiramabrur@yahoo.co.id

## ABSTRACT
The  aim  of  this experiment was  to evaluate  the nutrient  quality of   leucaena  leaf  meal (LLM) with addition of sheep rumen liquor enzyme for nile tilapia feed which incubated 24 hours (in vitro); This experiment was designed in completely randomized design with 6 treatments and 3 replications each with different level of enzyme addition (0; 20; 40; 60; 80; and 100 ml/kg LLM).  Results of the experiment showed that nutrient quality of LLM  with addition of sheep rumen liquor enzyme which incubated for 24 hours, where significantly  affected  (P<0.05)  on  decrease  of  crude  fiber  (53,640%),  NDF,  ADF component and phytic acid (68,088%).  Over all conclusion is a great potential for using sheep rumen liquor enzyme for improving nutrition quality of leucaena leaf meal
Keywords: leucaena leaf meal (LLM), sheep rumen liquor enzyme, nutrient quality .

## PENDAHULUAN
Tepung daun lamtoro gung (selanjutnya  disingkat  TDL)  merupakan sumber  daya  hayati  lokal  yang  potensial untuk  digunakan  sebagai  salah  satu sumber  protein  nabati  dalam  pakan  ikan. Hal  ini  disebabkan  tingginya  kandungan protein  yaitu  sekitar  34,38  %,  komposisi asam  amino  yang  hampir  seimbang dengan      bungkil            kedelai  serta merupakan   sumber    vitamin A dengan
-karoten  yang  relatif  tinggi serta kandungan xantofil yang merupakan sumber pigmentasi  pada  kulit dan  kuning telur  (Agbede  dan  Aletor,  2004)  ;  25  -
30%  (NAS  1984);  24,2%  (Sutardi  1981); 24%  (Scott et  al 1982).    Tanaman  ini dapat  menghasilkan  bahan  kering  dari unsur-unsur yang dapat dimakan sebesar 6-8  ton  per  hektar  per  tahun  atau  sekitar 20 - 80 ton bahan segar (NAS, 1994).   Di Indonesia tanaman leguminosa ini mudah ditanam sehingga dapat membantu penyediaan pakan secara kontinyu sepanjang tahun.
Pemanfaatan  bahan  baku  pakan ikan  nila  dari  daun  tumbuhan  khususnya daun lamtoro gung salah satunya dibatasi oleh kandungan yang tinggi dari komponen neutral  detergent  fiber (NDF)
39,5%  dan acid  detergent  fiber (ADF)
35,10%. (Gracia et al . 1996).  Sedangkan ikan mempunyai kemampuan yang terbatas dalam  memanfaatkan  serat.  Hal ini  berkaitan  dengan  ketersediaan  enzim selulotik  yang  terbatas  dalam  saluran pencernaan  ikan,  bahkan  pada  level tertentu dapat menghambat pertumbuhan ikan.  Beberapa  peneliti  telah  melaporkan bahwa ikan tidak memiliki enzim selulosa dan kemungkinan adanya populasi mikroba  selulotik  di  saluran  pencernaan ikan  juga  masih  menjadi  kontrofersi  di kalangan  peneliti  (Stickney  &  Shumway 1974;  Prejs  &  Blaszczyk  1977;  Linsday dan  Harris  1980;  Lessel  dan  Lesel  1986; Luczkovich & Stellway 1993; Saha & Ray 1998).
Jalilvand et al. (2008)  melaporkan enzim  fibrilotik  eksogen    sangat  efektif untuk  menurunkan  kadar  serat  bahan baku pakan seperti jerami padi, dan silase jagung.  Penggunaan  enzim  eksogen diharapkan  dapat  menghidrolisis  tepung daun  lamtoro  gung  sehingga  dapat ditingkatkan kualitas
nutrisi dan
kecernaannya. Penggunaan enzim eksogen  ini  terkendala  dengan  harga enzim  komersil  yang  mahal  di  pasaran, sehingga sangatlah penting dicari sumber enzim  yang  murah  dan  efektif  untuk meningkatkan  kualitas  nutrisi  dari  tepung daun lamtoro gung.
Cairan  rumen  domba  merupakan salah  satu  sumber  bahan  suplemen alternatif yang murah dan dapat dimanfaatkan  dengan  mudah  sebagai sumber enzim-enzim
hidrolase (Moharrery  dan  Das,  2001)  diantaranya enzim yang bersifat selulitik (Kung, 2006). Hal  ini  berkaitan  dengan  kemampuan domba  untuk  mencerna  hijauan  dengan kandungan  serat  yang  tinggi.    Isi  rumen domba  sebagai  sumber  ekstrak  enzim kasar akan dimanfaatkan untuk menghidrolisis  (predigestiori)  TDL  yang akan digunakan sebagai bahan campuran pakan  ikan  nila.  Produk  yang  diekstraksi dari  cairan  rumen  ini  diharapkan  dapat secara  langsung    digunakan  sehingga jauh  lebih  efisien  dibanding  bila  harus menggunakan  enzim  dengan  mendirikan sebuah  industri  enzim,  asam  amino, vitamin  dan  mineral,  serta  dapat  menjadi salah  satu  sumber  bahan  suplemen alternatif yang murah dan dapat dimanfaatkan dengan mudah untuk meningkatkan  kualitas  nutrisi  dari  tepung daun  lamtoro  gung,  sehingga  kecernaan meningkat  dan  pertumbuhan  ikan  nila dapat lebih optimal.

## MATERI DAN METODE

## Eksperimen
Penelitian   dilakukan   selama ± 6 bulan    dari      Juni  - Desember  2008,    di
Laboratorium Nutrisi Ternak Perah
Fakultas  Peternakan  IPB.      Bahan  yang digunakan  adalah    tepung  daun  lamtoro gung  yang  diperoleh  dari  daerah  Bogor, cairan rumen domba  yang diperoleh dari peternak  domba  tradisional  di  wilayah Ciampea,  Bogor (dari ternak yang sudah dipotong  yang  isi  rumennya  dikeluarkan dan kemudian diperas untuk mendapatkan cairan rumennya).

## Persiapan Enzim Cairan Rumen
Cairan  rumen  sapi  yang  diambil dari  RPH  disentrifus  dengan  kecepatan 12.000    rpm  selama 10  menit  pada  suhu 4°C. Kemudian supernatan yang
terbentuk  direaksikan  dengan  ammonium sulfat  dengan  menggunakan  magnetic stirer  dan  didiamkan  selama  semalam pada  suhu  4 o C.  Cairan  rumen  kemudian disentrifus  kembali  dengan    kecepatan 12.000    rpm  selama 15  menit  pada  suhu 4°C.  Selanjutnya  endapan    diambil sebagai  enzim  kasar  (Pantaya,  2003). Enzim kasar tersebut langsung digunakan untuk hidrolisis TDL.

## Rancangan Penelitian
Percobaan ini didesain menggunakan rancangan  acak  lengkap (RAL) dengan 6 perlakuan dan 3 ulangan
dan setiap ulangan dilakukan pengulangan  dua  kali  (duplo).  Dilakukan inkubasi  24  jam  pada  6  level  jumlah
ekstrak  enzim  kasar  yang  ditambahkan yaitu, 0 (K), 20 (A), 40 (B); 60 (C); 80 (D); 100  (E)  mL/kg  TDL.        Parameter  yang diamati adalah komponen serat kasar, NDF dan  ADF,  serta  kadar  asam  fitat  dari  TDL sebelum  dan  sesudah  dihidrolisis  dengan ekstrak  enzim  rumen. Data    perubahan kualitas  nutrien  dianalisis    menggunakan ANOVA    dengan  software  SAS  versi  6.12 (1997).    Uji  lanjut  Duncan  dilakukan  pada data  yang  menunjukkan  perbedaan  nyata. Analisa  kadar  serat  kasar  dan  kadar  asam fitat  dilakukan  dengan  metode  AOAC (1990), sedangkan analisa komponen serat kasar  NDF  dan  ADF  dilakukan  dengan metode Van Soest et al .(1991).

## HASIL DAN PEMBAHASAN Hasil
Serat Kasar
Kandungan  serat  kasar  dalam TDL setelah dihidrolisis oleh  enzim kasar cairan  rumen  domba  yang  mengandung enzim  selulase.    Hasil  pengukuran  kadar serat  TDL  yang  dihasilkan  pada  akhir periode  inkubasi  24  jam  disajikan  pada Gambar 1.
Kandungan  serat  kasar  nyata dipengaruhi  oleh  penambahan  enzim rumen,  dimana  kandungan  serat  kasar mengalami penurunan dengan peningkatan penambahan jumlah enzim(P <  0,05).    Nilai  kadar  serat  kasar  tertinggi yaitu  16,769%  terdapat  pada  perlakuan
tanpa  penambahan  enzim  yang  berbeda nyata   dengan semua perlakuan dengan penambahan  enzim.    Nilai  kadar  serat kasar yang terendah yaitu 7,774% dicapai oleh perlakuan pemberian enzim 100ml/kg.  Nilai 7,774% ini berbeda nyata dengan perlakuan lainnya yaitu pemberian enzim 20, 40, 60, dan 80 ml/kg TDL  yang  menghasilkan  nilai  kadar  serat kasar  berturut-turut  adalah  12,942%; 12,057%;  10,546%  dan    9,854%  .
Perlakuan  dengan  penambahan  enzim 20;  40;  60  dan  80  ml/kg  TDL  mengalami penurunan  kadar  serat kasar berturut- turut sebanyak,  22,818 ; 28,098; 37,112 ; 41,238  %  apabila      dibandingkan perlakuan kontrol (Gambar 2). Penurunan  kadar  serat  tertinggi  sebesar 53,640% terdapat pada perlakuan penambahan  ekstrak enzim  sebanyak 100ml/kg TDL. Gambar  1.    Kandungan  serat  kasar  setiap perlakuan dengan masa inkubasi 24 jam Gambar 2. Persentase penurunan serat kasar perlakuan  dibandingkan  kontrol pada inkubasi 24 jam Ket  :  huruf  yang  sama  pada  diagram  batang
Menunjukkan  nilai  tidak  berbeda  nyata
(P >0,05)

## NDF dan ADF
Hasil  pengukuran  kadar  NDF  dan
ADF  tepung  daun  lamtoro  gung  yang telah  mendapat  penambahan  eksrak enzim  kasar  cairan  rumen disajikan  pada Gambar 3 dan 4.
Hasil  pengukuran  kadar  NDF  dan ADF  tepung  daun  lamtoro  gung  yang telah  mendapat  penambahan  eksrak enzim  kasar  cairan  rumen  disajikan
Gambar  15  dan  16.  Data  selengkapnya setiap  pelakuan  dapat  dilihat  pada Lampiran 31 dan 32.
Nilai  NDF  tepung  daun  lamtoro gung    nyata  (P  <  0,05)  dipengaruhi  oleh penambahan ekstrak enzim rumen domba.    Terdapat  perbedaan  yang nyata antara nilai NDF perlakuan tanpa penambahan  enzim  dengan  nilai  NDF perlakuan  yang  mendapat  penambahan enzim  40ml/kg  TDL.    Nilai  NDF  tertinggi
d
yaitu  46,32%  dicapai  pada  perlakuan tanpa  penambahan  enzim  yang  tidak berbeda nyata dengan nilai NDF perlakuan  yang  mendapat  penambahan enzim 20 dan 40ml/kg TDL.   Sedangkan nilai NDF terendah yaitu 42,54 % dicapai pada perlakuan 100 ml/kg TDL yang tidak berbeda  nyata  dengan  nilai  NDF  dengan penambahan enzim  80 ml/kg TDL (44,31%)  dan  60  ml/kg  TDL  (44,42%).
Semakin banyak enzim
yang ditambahkan, nilai NDF mengalami
penurunan. Perlakuan dengan penambahan enzim sebanyak 20; 40; 60; 80  dan  100  ml/kg  dibandingkan  dengan kontrol,  menghasilkan  penurunan  nilai NDF  berturut-turut  sebanyak    3,66;  6,29; 10,14; 10,36 dan 13,92%.
Penambahan ekstrak enzim rumen domba nyata (P < 0,05) mempengaruhi  nilai  ADF  tepung  daun lamtoro.    Nilai  ADF  perlakuan  tanpa penambahan  enzim  lebih  tinggi  dari  nilai ADF  seluruh  perlakuan  yang  mendapat penambahan enzim. Perlakuan penambahan  enzim  pada  taraf  taraf  20, 40,  60,  80  dan  100  ml/kg  tidak menghasilkan  nilai  ADF  yang  berbeda tetapi  lebih  rendah  dan  nyata  berbeda dengan  perlakuan  tanpa  penambahan enzim.    Peningkatan  jumlah  enzim  yang ditambahkan cenderung akan menurunkan  nilai  ADF.    Secara  berturut- turut  penambahan  enzim  sebanyak  20; 40;  60;  80  dan  100  ml/kg  akan menurunkan nilai  ADF  sebanyak  18,70  ; 14,63; 15,83 ; 13,43 dan 13,46%.
Gambar  3.  Kadar  NDF  setiap  perlakuan
dengan masa inkubasi 24 jam Gambar  4.  Kadar  ADF  setiap  perlakuan dengan masa inkubasi 24  jam Ket  :  huruf  yang  sama  pada  diagram  batang menunjukkan  nilai  tidak  berbeda  nyata
(P >0,05)

## Kadar Asam Fitat
Hasil pengukuran kadar asam fitat tepung  daun  lamtoro  gung  yang  telah
mendapat  penambahan  eksrak  enzim kasar  cairan  rumen  disajikan  pada Gambar 5.
Kandungan asam fitat nyata (P<0,05)  dipengaruhi  oleh  penambahan ekstrak  enzim  rumen  domba.    Kadar asam  fitat  pada  perlakuan  penambahan ekstrak enzim rumen sebanyak 20, 40, 60 dan  80  ml/kg  berbeda  nyata  dengan perlakuan  kontrol  dan  perlakuan  dengan penambahan eksrak enzim rumen sebanyak 100ml/kg TDL.  Nilai asam fitat tertinggi yaitu  7,84% dicapai pada perlakuan  tanpa  penambahan  enzim  dan perlakuan  terendah  yaitu  2,50%  dicapai pada pelakuan yang menggunakan enzim terbanyak (100ml/kg TDL).
Gambar  5.    Nilai  rata-rata  kadar  asam    fitat setiap perlakuan uji in vitro
Gambar  6.  Persentase  penurunan  kadar asam  fitat  setiap  perlakuan dibandingkan kontrol Persentase penurunan kadar asam  fitat  (Gambar  6)  pada  semua perlakuan  yang  mendapat  penambahan enzim  20;  40;  60;  80  ml/kg  TDL    secara berurutan adalah 15,15; 19,53; 19,62 dan 19,77 %.  Penurunan kadar asam fitat terbesar dibandingkan kontrol yaitu sebesar    68,09%  terdapat    pada perlakuan  penambahan  enzim  sebesar 100ml/kg TDL.

## Uji Respon Parameter Kualitas Nutrien
Respon  kadar  serat  dan  kadar asam fitat   pada  periode inkubasi  24 jam membentuk  pola  persamaan  garis  linier. Pola  respon kadar serat (Gambar 7) dan asam  fitat  (Gambar  8)  membentuk  pola respon linier negatif yang menggambarkan semakin banyak ekstrak enzim  rumen  yang  ditambahkan  maka kadar  serat  dan  kadar  asam  fitat  akan menurun.
Gambar  7.  Kurva respon kadar serat perlakuan uji in vitro
Gambar    8.  Kurva  respon  kadar  asam fitat perlakuan uji in vitro
Respon  kadar  NDF  dan  kadar ADF  pada  periode  inkubasi  24  jam membentuk  pola  persamaan  garis  linier negatif  yang  mengambarkan  semakin banyak  ekstrak  enzim  rumen  yang ditambahkan  maka  kadar  serat  akan menurun.
Gambar  9.  Kurva  respon  kadar  NDF perlakuan uji in vitro
Gambar  10.  Kurva  respon  kadar  ADF perlakuan uji in vitro

## Pembahasan
Hasil  percobaan  secara in  vitro menunjukkan  bahwa  eksrak  enzim cairan rumen domba efektif
menghidrolisis  tepung  daun  lamtoro gung  untuk  bahan  formulasi  pakan  ikan nila dan sangat dipengaruhi oleh jumlah enzim yang ditambahkan
Pada penelitian ini, penambahan ekstrak  enzim  cairan  rumen  akan menurunkan kadar serat TDL. Penambahan  100  ml  enzim/kg  TDL dapat menurunkan kadar serat mencapai  53,40%.    Penurunan  kadar serat  ini  merupakan  hasil  dari  kerja enzim  amilase  dan  selulase  yang disekresikan oleh mikroba yang
terkandung pada cairan rumen.  Dimana enzim  amilase  akan  menghidrolisis -1,4  menjadi  pati  cair  dan maltose  sedangkan  enzim  selulase akan menghidrolisis selulosa yang memiliki  rantai  yang  lebih  pendek. Enzim  amilase  akan  menghidrolisis
ikatan  -1,4 menjadi D-glukosa, maltosa dan  sejumlah  kecil  destrin.    Proses penghidrolisisan  ini  merupakan  kerja kelompok endo amilase dan eksoamilase.  Endo amilase yaitu enzim amilase yang bekerja
dengan memecah  ikatan  pada  bagian  tengah substrat  dengan  pH  optimum  5-7  dan suhu optimum 60 – 70 o C.  Endo amilase banyak  ditemukan  pada  tanaman  dan mikroorganisme, terutama Bacillus stearothermophilus, B-subtilus, Apergilus niger dan A.oryzae.
Sedangkan  kelompok  ekso  amilase adalah  menghidrolasis unit-unit  dari ujung  non  reduksi  substrat  menjadi maltose  dan  maltotriosa  dengan  pH  4,5 – 5,5 dan suhu 40- 60 o C.  Ekso amilase banyak  ditemukan  pada  tanaman  dan mikroorganisme, terutama Bacillus stearothermophilus, B-subtilus, Apergilus  niger  dan  A.oryzae .      Jenis mikroorganisme ini sangat banyak didapatkan  di  rumen,  sehingga  ketika cairan rumen dieksraksi untuk mendapatkan  enzim  kasar,  jenis  enzim amilase selulase akan terdeteksi aktifitasnya. Enzim selulase merupakan kompleks enzim  (multi  komponen)  yang terdiri dari beberapa enzim yang bekerja bertahap atau bersama-sama menguraikan selulosa menjadi D- glukosa (Kim et al. 1994).     Ada empat kelompok  enzim  utama  yang  menyusun selulosa  berdasarkan  substrat  masing- masing  enzim,  yaitu:    Pertama;  Endo
- -4 D- glukanohidrolase,  EC  3.2.1.4),  Cx- selulase,  menghidrolisis  ikatan  glikolisik -4)  secara  acak.    Enzim  ini  tidak menyerang selobiosa tapi menghidrolisis  selodekstrin.    Enzim  ini juga  aktif  menyerang  selulosa  yang telah disubstitusi misalnya -4)  D- glukan  selobiohidrolase  (EC  3.2.1.91), Cl yang menyerang ujung rantai selulosa non pereduksi dan menghasilkan  selobiosa.    Enzim  ini dapat menyerang  selodekstrin tapi tidak menyerang selulosa yang telah disubstitusi serta tidak dapat -4)
D-glukan  glukohidrolase  (EC  3.2.1.74), menyerang  ujung  rantai  selulosa  non pereduksi  dan  menghasilkan  glukosa. Enzim  ini  menyerang  selooligosakarida dan  CMC.    Sedangkan  yang ke  empat
- -4) D-glukosida glukohidrolase (EC 3.2.1.21),  menghidrolisis  selobiosa  dan rantai  pendek  selooligosakarida  dan glukosa. Cone (1990) melakukan observasi  dengan  scanning  elektron mikroskop  yang  memperlihatkan  hasil bahwa  telah  terjadi  degradasi  granula bahan  pati dengan  penambahan  cairan rumen  yang  telah bebas  dari  sel-sel mikroba rumen.
Analisa  kualitas  nutrien  TDL dengan periode inkubasi 24 jam memperlihatkan penurunan nilai kandungan  serat  kasar  dan  serta
perubahan  komponen  serat  yaitu  ADF dan  NDF.      Nilai Acid  Detergent  Fiber (ADF)  dan Neutral  Detergent  Fiber (NDF) adalah nilai yang dihasilkan untuk mengambarkan  komponen  dari  serat kasar  dimana    kedua  metode  ini  hanya dapat  menentukan  kadar  total  serat yang  tak  larut  dalam  larutan  deterjen. ADF  hanya  dapat  untuk  menentukan kadar total selulosa dan lignin, sedangkan dengan NDF dapat menententukan kadar total dari selulosa, hemiselulosa dan lignin. Selisih  jumlah  serat  dari  analisis  NDF dan  ADF  dianggap  jumlah  kandungan hemiselulosa, meski sebenarnya terdapat juga komponen-komponen lainnya  selain  selulosa,  hemiselulosa dan  lignin.        Pada  penelitian  ini  nilai NDF  dan  ADF  perlakuan  kontrol  tanpa penambahan  enzim    memperlihatkan nilai  kandungan  NDF  yang  lebih  tinggi dibandingkan  dengan  perlakuan  20,  40, 60 dan 100 ml enzim/kg TDL, penurunan nilai NDF dan ADF  ini dapat menggambarkan  meningkatnya  bagian bahan pakan yang dapat dicerna. Menurunnya kadar  serat  serta komponen NDF, ADF dengan bertambahnya  jumlah  ekstrak  enzim cairan  rumen  yang  ditambahkan,  terjadi karena  peluang  substrat  untuk  bertemu dengan katalisator biologis dalam proses  hidrolisis  protein,  karbohidrat dan  lemak  semakin  besar.    Abu et  al (2005)  melaporkan  bahwa  peningkatan konsentrasi  enzim  secara  umum  akan
memberikan  pengaruh  yang lebih besar pada  waktu  hidrolisis  dibandingkan dengan  peningkatan  temperatur.    Lama proses hidrolisis berlangsung menyebabkan substrat yang terdegradasi semakin banyak dan
produk  yang  dihasilkan  akan  semakin meningkat.    Vijaya et  al. (2002) melaporkan adanya indikasi peningkatan  derajat  hidrolisis  dengan peningkatan waktu inkubasi.
Dilaporkan  oleh  Pantaya  (2005) bahwa  perlakuan  tanpa  enzim  rumen mengandung  polisakarida  lebih  tinggi dibandingkan perlakuan
dengan penambahan  enzim  rumen,  dimana perlakuan  dengan  penambahan  enzim rumen    620  dan 1240  U/kg  pada wheat pollard menurunkan  kadar    polisakarida sebesar  4  dan  3,9%.      Hidrolisis  enzim
1240 U/kg terhadap komponen polisakarida wheat  pollard juga  akan meningkatkan  kandungan  oligosakarida dan monosakarida sebesar 5,5%
dibandingkan  pada  perlakuan  tanpa penambahan  enzim  (Pantaya,  2005). Kemampuan bakteri rumen untuk
meningkatkan  kualitas  bahan  baku pakan  telah dibuktikan  pula  oleh Purnomohadi (2006), dimana fermentasi    jerami  padi  selama  7  hari dengan bakteri selulitik rumen menghasilkan  penurunan  bahan  kering 10,6%, kadar serat 15,98% . Penambahan enzim cairan rumen  ini  akan  merombak  komponen bahan yang sulit dicerna menjadi mudah
dicerna, dimana selulosa dipecah menjadi  komponen  glukosa  yang  dapat dimanfaatkan  sebagai  sumber  energi bagi  hewan  (Twoney et  al. 2003). Didukung  pula  oleh    Alemawor  (2009) yang mendapatkan peningkatan kualitas nutrien yang lebih baik pada penggunaan  multi  enzim  pada  bahan baku  pakan  dengan  nilai  total  gula meningkat,  serat  kasar,  NDF,  ADF, selulase dan lignin yang menurun.
Pada  penelitian  ini  TDL  tanpa perlakuan penambahan enzim mengandung asam fitat sebanyak 7,839%.   Sedangkan  terjadi penurunan
kadar  fitat  sebanyak  68,088  %  TDL setelah diinkubasi dengan ekstrak cairan  rumen  domba  sebanyak  100 ml/kg  TDL.    Satu  mili  ekstrak  ekstrak
cairan  rumen  domba  mengandung enzim fitase 2,7388 Unit/menit.ml
(Fitriliyani, unpublisded ).    Satu  unit fitase  didefenisikan  sebagai  kuantitas enzim itu membebaskan 1 mikromol dari fosfor  per  menit  dari  0,0015mol/L sodium  phytate  pada  pH  5,5  dan  37 o C (Simon et  al .  1990).    Dalam  enzim rumen  didapatkan  aktifitas  enzim  fitase. Fitase dapat  menghidrolisis  asam  fitat secara bertahap menjadi senyawa turunannya,  yang  dapat  larut  dan terserap  dalam  sistem  pencernaan.
Fitase (mio-inositol heksakisfosfat fosfohidrolase,  E.C.  3.1.3.8)  merupakan suatu  fosfomonoesterase  yang  mampu menghidrolisis asam fitat menjadi ortofosfat  anorganik  dan  ester-ester
fosfat  dari  mio-inositol  yang  lebih rendah.    Cole  (2001)  mengemukakan bahwa  terdapat  2  jenis  enzim  fitase yaitu;  3-fitase  yang  diperoleh  dari  fungi dan 6-fitase yang diperoleh dari tumbuhan.   Perbedaan  khas dari  kedua jenis ini adalah tempat hidrolisis pertama  molekul  fitat,  3-fitase pertama memotong  asam fitat pada posisi 3 dan 6-fitase  pertama  memotong  asam  fitat pada posisi 6.
Kadar asam fitat memperlihatkan
pola  respon  linier  yang  kadarnya semakin menurun dengan meningkatnya  jumlah  ekstrak  enzim cairan rumen yang ditambahkan.
Penurunan  kadar  asam  fitat  merupakan hasil  kerja  dari  enzim  fitase  yang terkandung  dalam  ekstrak  enzim  cairan rumen  domba.    Asam  fitat  merupakan zat  anti  nutrisi  yang  secara  alamiah terdapat pada tanaman leguminosa dan kacang-kacangan.
Mio-inositol heksakisfosfat (C 6 H 18 O 24 P 6 ) adalah rumus  kimia  dari  asam  fitat  dengan struktur  cincin  yang  mirip  dengan glukosa,  yang  berikatan  dengan  fosfor unruk  membentuk  struktur  asam  fitat. Selain  fosfor  unsur-unsur  lain  juga ditemukan  terikat  dalam  asam  fitat (Ravindra, 2000) seperti mineral bervalensi  dua  (Ca,  Zn,  Fe  dan  Mg) yang  akan  membentuk  fitat  mineral yang tidak larut (Cole, 2001).  Asam fitat tidak  larut  dalam  pH  netral  dan menurunkan  aktifitas  enzim  protease dengan  protein  yang  mengikat  asam
fitat,  sehingga  akan  menurunkan  pula bioavailability  dari  protein  di  dalam pakan (Ravindra, 2000).
Kandungan  enzim  fitase  yang menghidrolisis asam fitat akan
melepaskan  bahan-bahan  mineral  dari gugusnya seperti P, Ca, Zn, Mg dan Fe .        Hal  ini  sejalan  pula  dengan  analisa asam  fitat  yang  terkandung  pada perlakuan inkubasi TDL dengan 80ml/kg TDL yang mengalami penurunan 19,776 dibandingkan perlakuan kontrol. Armani  dan  Refilda  (2005)  melaporkan bahwa      penambahan      enzim  fitase pada  gandum,  bekatul  dan      kedelai dapat      meningkatkan      ketersediaan mineral Ca, Mg, Fe dan Zn. Mineral Ca, Mg, Fe dan Zn   yang   dibebaskan  dari gandum,  berturut-tuurut  70  %,  7,1  %, 17,5  %  dan  89,6  %;  pada  bekatul berturut-turut  mencapai  60  %,  17,5  %, 7,7  %  dan  86,8  %  dan  pada    Kedelai berturut-turut  mencapai  77  %,  7,7  %, 12,1 % dan 88,9 %.
Ikan  mempunyai  keterbatasan dalam  menyerap  fosfor  dari  air  karena konsentrasi  fosfor  dalam  air  sangat kecil,  sehingga  kebutuhan  fosfor  ikan sebagian  besar  dipenuhi  dari  pakan (NRC,  1993).    Mineral  fosfor  penting sebagai komponen dari fosfolipid, asam- asam nukleat,  senyawa  berenergi tinggi (ATP).    Fosfor  berperanan  penting dalam  metabolism  karbohidrat,  lemak dan asam amino, sedangkan dalam otot dan  jaringan  syaraf  berperan  dalam menjaga  tekanan  osmotic  cairan  tubuh
(Lall.  2002).    Keseimbangan  fosfor dalam  tubuh  dijaga  dengan  jalan pertukaran antara senyawa fosfor dalam tulang  dan  fosfor  yang  ada  dalam makanan  (Djodjosubagio  dan  Piliang, 1990).

## KESIMPULAN DAN SARAN

## Kesimpulan
Peningkatan penambahan ekstrak
enzim  cairan  rumen  domba  untuk menghidrolisis TDL  efektif   menurunkan kandungan  serat  dan  kandungan  asam fitat.

## Saran
Perlunya  kajian  peluang  pemanfaatan eksrak  enzim  rumen  dan  isi  rumen untuk feed additive pakan ikan.

## DAFTAR PUSTAKA
Abu EA, Ado SA and  James DB.  2005. Raw  starch  degrading  amylase production  by  mixed  culture  of
Aspergillus niger and Saccharomyces  cerevisae grown on Sorghum  pomace , Afr.  J. Biotechnol . 4(8):785-790.
Agbede  JO  and  Aletor  VA.  2004. Chemical characterization and protein  quality    evaluation  of  leaf protein concentrates from Gliricidia  sepium and Leucaena leucocephala . International Journal  of  Food    Science  and Technology , 39: 253-261. Alemawor F, Victoria, Dzogbefia, Emmanuel OK, Oddoye and
James  HO.      2009.    Enzyme cocktail  for  enhancing  poultry utilisation  of  cocoa  pod  husk. Scientific  Research  and  Essays , 4(6):555-559.
AOAC.  1990.    Official  Methods  of
Analysis.    Association  of  Official
Analitycal  Chemist.      AOAC.
Washington DC. USA.
Armaini  dan    Refilda.    2005.    Pengaruh fitase terhadap peningkatan ketersediaan mineral dalam bahan pangan  yang  berasal  dari  biji- bijian.    Working  Paper.  Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam. (Unpublished) URL:
http://repository.unand.ac.id/id/epri nt/1618
Cole  SJ.  2001.  Phytase.    www.phytase .net. 6 Maret 2010.
Djojosoebagio  S  dan  Piliang    GW. 1996.  Fisiologi  nutrisi.  Jakarta  UI Press.
Gracia  GW,  Ferguson  TU,  Neckles  FA, and  Archibald  KAE.  1996.  The nutritive value and forage productivity of Leucaena leucocephala. Anim Feed Sci Technol . 60:29-41. Jalilvand G,  Odongo  NE,  López  S,
Naserian A, Valizadeh R, Eftekhar Shahrodi,  F,  Kebreab  E  and France  J.  2008.    Effects  of different  levels  of  an  enzyme mixture  on  in  vitro  gas  production parameters of contrasting forages. Anim.  Feed  Sci.  Tech .  146:289- 301.
Kung  LJr,  Treacher  RJ,  Nauman  GA, Smagala  AM,  Endres  KM  and Cohen  MA,  2000.    The  effect  of treating  forages  with  fibrolytic enzymes on its nutritive value and lactation  performance  of  dairy cows. J. Dairy Sci . 83:115-122.
Lall SP.  2002.  Mineral nutrition, p 260- 308.  In  JE  Halver  and  RW  Hardy (eds),  Fish  nutrition,  3 rd ed, Academic Press, San Diego, USA.
Lessel  R,  Frogeot  C,  Lesel  M.  1986. Cellulose  digestibility  in  grass carp Ctenopharyngodon    idella and    goldfish Carassius    auratus.
Aquaculture, 54;11-17.
Lindsay  GJH  and  Harris  JE.  1980.
Carboxymethylcellulase  activity  in the digestive tracts of fish. Journal of Fish Biology. l6:219-233.
Luczkovich  JJ  and  Stellwag  EJ.    1993. Isolation  of  cellulolytic  microbes from the intestinal tract of Lagodon rhomboides :  size-related  changes in diet  and  microbial  abundance.
Marine Biology .  16:381 -388. Moharrery  A  and  Das  Tirta  K.    2002. Correlation between microbial enzyme activities in the rumen fluid of sheep under different treatments.
Reprod. Nutr. Dev ,41:513-529.
NAS.  1994.  Leucaena:  Promising  forage and tree  crop for the tropics. Second Edition. National Academy of Sciences. Washington. Pantaya  Dadik,  Nahrowi,  Lily  Amalia
Sofyan.  2005.    Penambahan enzim  cairan  rumen  pada  pakan berbasis wheat  pollard dengan proses pengolahan steam pelleting pada performans
Prejs  A  and  Blaszczyk  M.    2006. Relationships  between  food  and cellulase  activity  in  freshwater fishes. Journal  of  Fish  Biology .
Vol 11;5; 447–452.
Purnomohadi M.  2006. Peranan bakteri selulotik cairan rumen pada fermentasi  jerami  padi  terhadap mutu  pakan. Jurnal  Protein , Vol 13, No 2.
Ravindran  V,  Cabahung  S,  Ravindran G, Sell PH and Bryden WL.  2000.
Respose  of  broiler  chickens  to microbial phytase supplementation as  influenced  by  dietary  phytic acid and non-phytate phosphorous  level.  II.  Effects  on apparent  metaboliazable  energy,
nutrient  digestibility  and  nutrient retention. Br.  Poult.  Sci ,  41:  193- 200.
Saha  A  and  Ray  AK.    1998.    Cellulase activity in rohu fingerlings. Aquaculture Internationale , 6(4):281-291.
Scott  JR,    Newton  SH    and    Katayama
RW.  1982.   Evaluation of sunflower meal as a soybean meal replacement in rainbow trout diets. Proceeding  of  Thirty-Sixth  Annual Conference. South-Eastern Association  of  Fish  and  Wildlife Agencies, Jacksonville. Florida. Stickney  RR  and  Shumway  SE.  (1974)
Occurrence  of  cellulase  activity  in the stomachs of  fish. Journal of Fish Biology, 6:779-790. Sutardi  T.  1981.  Sapi  perah  dan pemberian makanannya. Dep. Ilmu Makanan Ternak. Fak. Petcrnakan. Inst. Pcrtanian Bogor. Bogor Twoney LN, Muske JR, Kowe JB, Choct
M,  Brown  W,  Mc  Connell  MF  and Pethick  DW.  2003.    The  effect  of increasing  level  of  soluble  non starch polysaccharide on inclusion of  feed  enzyme  in  dog  diet  on fecal  quality  and  digestibility.
Animal Feed Science and Technology ,108: 71-82.
Van Soest PJ, Robertson JB, Lewis BA. 1991.    Methods  for  dietary  fiber, neutral  detergent  fiber,  and  non- starch        polysaccharides      in relation    to  animal  nutrition. J. Dairy Sci . 74: 3583-3597.
B. Vijaya GV, Gireesh T and Gajanan SB.  2002.    Effect    of  enzymatic hydrolysis  of  proteins  on  growth and  milk  production. Journal  of the Science of Food and Agriculture 82: 493-496.