## UJI AKTIVITAS ANTHELMINTIK BATANG KAYU KUNING
( Arcangelisia flava (L.) Merr.) TERHADAP LARVA-3 Ascaridia galli

## Melizsa
Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Kharisma Persada Tangerang Selatan, 15417, Indonesia
E-mail : melizsa@masda.ac.id

## ABSTRAK
Tanaman  batang  kayu  kuning  ( Arcangelisia  flava (L.)  Merr.)  secara  tradisional  digunakan  untuk mengobati  kecacingan.  Telah  dilakukan  penelitian  tentang  uji  aktivitas  anthelmintik  ekstrak  etanol  70% batang  kayu  kuning  ( Arcangelisia  flava (L.)  Merr)  terhadap  larva-3 Ascaridia  galli pada  ayam  ras  tipe pedaging berumur 2 minggu dengan berat badan 800 – 960 gram. Penelitian menggunakan 6 kelompok hewan uji  dan  masing-masing  kelompok  terdiri  dari  5  ekor  ayam.  Kelompok  1  sebagai  kontrol  normal  (tanpa penginfeksian),  kelompok  2  –  6  diinfeksi  dengan  1000  telur  infektif Acaridia  galli ,  pada  hari  ke-10  setelah penginfeksian  diteruskan  dengan  perlakuan  yang  berbeda  pada  masing-masing  kelompok.  Kelompok  2 sebagai  kontrol  negatif,  kelompok  3  sebagai  kontrol  positif,  kelompok  4,  5,  6  sebagai  kelompok  larutan ekstrak, dengan dosis masing-masing 26 mg/400 gBB, 52 mg/400 gBB, 104 mg/400 gBB. Tiga hari kemudian seluruh  hewan  uji  dilakukan  pembedahan  pada  bagian  mukosa  ususnya  untuk  mengetahui  jumlah  larva-3 Ascaridia  galli yang  hidup.  Rata-rata  jumlah  larva-3 Ascaridia  galli yang  hidup,  yaitu  kelompok  1;  tidak mengandung  larva-3,  kelompok  2;  733  ekor,  kelompok  3;  52  ekor,  kelompok  4;  170  ekor,  kelompok  5;  91 ekor, kelompok 6; 38 ekor. Data tersebut dianalisis dengan menggunakan Anava satu arah, didapatkan nilai F hitung = 103,774 lebih besar dari F tabel = 2,87 (α=0,05) kemudian dilanjutkan uji Tukey. Berdasarkan data analisis statistik tersebut maka dapat disimpulkan bahwa larutan ekstrak etanol 70% batang kayu kuning pada dosis 26 mg/400 gBB, 52 mg/400 gBB dan 104 mg/400 gBB memiliki aktivitas sebagai anthelmintik. Makin tinggi dosis yang diberikan maka makin kuat daya anthelmintiknya.
Kata Kunci : Batang kayu kuning; Ascaridia galli ; Anthelmintik; Arcangelisia flava (L.) Merr

## ABSTRACT
Yellow  wood  stems  (Arcangelisia  flava  (L.)  Merr.)  Are  traditionally  used  to  treat  worms.  Research has been carried out on the anthelmintic activity of 70% ethanol extract of yellow wood stems (Arcangelisia flava (L.) Merr) against Ascaridia galli larvae in  broiler breeds of 2 weeks of age with a weight of 800-960 grams. The study used 6 groups of test animals and each group consisted of 5 chickens. Group 1 as a normal control (without infection), groups 2 - 6 were infected with 1000 infective eggs of Acaridia galli, on the 10th day after infection, continued with different treatments in each group. Group 2 as a negative control, group 3 as a positive control, group 4, 5, 6 as a group of extract solutions, with a dose of 26 mg / 400 gBB, 52 mg / 400  gBB,  104  mg  /  400  gBB.  Three  days  later  all  test  animals  were  surgically  removed  from  the  intestinal mucosa to determine the number of Ascaridia galli larvae that were alive. The average number of Ascaridia galli larvae-3 that live, namely group 1; does not contain larva-3, group 2; 733 tails, group 3; 52 tails, group 4; 170 tails, group 5; 91 tails, group 6; 38 tails. The data were analyzed using one-way ANOVA, obtained F value  =  103,774  greater  than  F  table  =  2,87  (α  =  0,05)  then  followed  by  the  Tukey  test.  Based  on  the statistical analysis data, it can be concluded that the solution of 70% ethanol extract of yellow wood stems at doses of 26 mg / 400 gBB, 52 mg / 400 gBB and 104 mg / 400 gBB has anthelmintic activity. The higher the dose given, the stronger the anthelmintic power.
Keywords: Yellow wood stems; Ascaridia galli; Anthelmintik; Arcangelisia flava (L.) Merr

## PENDAHULUAN
Alam  Indonesia  yang  kaya  akan keanekaragaman  hayati,  seperti  flora  dan fauna  telah  banyak  dimanfaatkan  oleh masyarakat  sejak  zaman  dahulu  sebagai obat  tradisional.  Salah  satu  bahan  alam yang  digunakan  sebagai  obat  tradisional adalah tanaman kayu kuning
( Arcangelisia flava (L.) Merr.).
Kandungan  kimia  yang  telah  diketahui adalah  golongan  alkaloid,  flavonoid, saponin,  dan  tanin.  Batang  kayu  kuning digunakan  sebagai  obat  tradisional  oleh beberapa  masyarakat  di  Asia  Tenggara, baik  sebagai  obat  luar  ataupun  obat dalam,  sebagai  obat  luar  yaitu  untuk mencuci luka bernanah dan penyakit gatal sedangkan  yang  digunakan  sebagai  obat dalam  yaitu  cairan  yang  keluar  dari batang  kayu  kuning  yang  masih  muda untuk mengobati sakit sariawan dan panas dalam,  sedangkan  rebusan  batang  kayu kuning  digunakan  sebagai  obat  penyakit kuning,  gangguan  pencernaan  dan  obat cacing (Ariyanti, 2001; Agusta, A., Jamal, Y dan Chairul, 1996).
Obat  cacing  atau  anthelmintik adalah obat-obat yang dapat memusnahkan cacing dalam tubuh manusia  dan   hewan.   Gejala     penyakit cacing  ialah  terjadi  gangguan  lambung dan  usus  seperti  mulas,  kejang-kejang, diare serta hilangnya nafsu makan. Infeksi
cacing umumnya terjadi penularan karena adanya  luka  di  kulit  yaitu  pada  cacing tambang  dan  cacing  pita,  sedangkan penularannya  melalui  tanah  yaitu  pada cacing gelang seperti Ascaris lumbricoides (Soedarto,  1991;  Anief,  M, 1996). Ascaris lumbricoides adalah cacing  nematoda  yang  berada  pada  usus halus  manusia  yang  dapat  menyebabkan penyakit  askariasis,  maka  pada  penelitian ini digunakan nematoda yang menyebabkan askariasis yang sama dengan  manusia  yaitu Ascaridia  galli yang  hospesnya  adalah  ayam,  dan penggunaan  cacing Ascaridia  galli ini hanya sebagai model percobaan dikarenakan tidak adanya Ascaris lumbricoides yang  hospesnya  selain manusia.  Penelitian  ini  ditujukan  untuk pengobatan pada manusia dengan menggunakan hewan percobaan.
Infeksi  cacing Ascaridia  galli terjadi  melalui  mulut  yaitu  dengan tertelannya  telur  yang  infektif.  Larva-2 hidup di dalam lumen usus halus selama 8 hari  dan  pada  hari  ke  8–17  larva menempel  pada  mukosa  usus  halus,  pada hari  ke-8  sesudah  infeksi  larva  ekdisis menjadi  larva-3.  Larva  pindah  lagi  ke lumen  usus  halus  pada  hari  ke  18–22, menjadi  cacing  dewasa  sekitar  5–8 minggu sesudah infeksi. Masa prepaten
menjadi lebih lama pada ayam yang lebih
tua (Soekardono, S dan Partosoedjono, S,
1992; Levine, N.D,
1990;
Kusumamihardja, S, 1989).
Ayam  ras  memiliki  sifat  unggul sesuai  dengan  tujuan  pemeliharaan  dan telah  mengalami  perbaikan  mutu  genetis sehingga  lebih  mudah  dalam  proses pemeliharaan  ,  dan  digunakannya  tipe pedaging dengan sifat bentuk tubuh besar dan  pertumbuhan  cepat.  (Supritjana,  E., Atmomarsono,  U  dan  Kartasujana,  R, 2005).
Pirantel pamoat sebagai zat pembanding, merupakan obat anthelmintik pilihan untuk askariasis yang mulanya digunakan untuk hewan, ternyata efektif  dan  kurang  toksis  sehingga digunakan  untuk manusia.  Dibandingkan
dengan   obat   askariasis    lainnya seperti piperazin, efek samping berupa neurotoksisitas  sedangkan  mebendazol dan  albendazole  tidak  boleh  digunakan pada  wanita  hamil  karena  bersifat teratogen  yang  potensial.  Pirantel  pamoat bekerja dengan menimbulkan depolarisasi pada  otot  cacing  dan  meningkatkan frekuensi  impuls  sehingga  cacing  mati dalam  keadaan  spastis  (Anonim,  1995; Tjah, T.H dan Rahardja, K, 2002).
Penggunaan  batang  kayu  kuning ( Arcangelisia  flava (L.)  Merr.)  sebagai obat cacing sampai saat ini hanya terbatas pada  penggunaan  secara  empiris  yang diwariskan  secara  turun-temurun,  akan tetapi hal tersebut perlu ditunjang dengan adanya penelitian ilmiah untuk membuktikan khasiat.

## METODE
Bahan
Simplisia  batang  kayu  kuning ( Arcangelisia  flava (L.)  Merr.),  Ayam DOC  Strain  Hybro  PN,  Pirantel  pamoat, Dispersing agent PGA, Etanol 70%, NaCl 0,9% b/v, Akuades.
Pembuatan Ekstrak Etanol 70%
Serbuk  simplisia  batang  kayu kuning  sebanyak  460  g  di  maserasi dengan  etanol  70%  sampai  seluruh sampel  terendam  dan  cairan  penyari dilebihkan  setinggi  lebih  kurang  2  cm
diatas permukaan simplisia selama 3 hari. Maserat yang diperoleh dipekatkan dalam rotary  evaporator pada  suhu  45 o C sehingga  diperoleh  ektrak  kental  dan dioven  pada  suhu  40 o C  sampai  diperoleh ekstrak kering.

## Penyiapan Suspensi Pirantel pamoat
Zat  pembanding  Pirantel  pamoat sebagai  kontrol  positif  yang  tidak  larut dalam  air  dan  metanol  sehingga  dibuat suspensi  dengan  Pulvis  Gummi  Arabici (PGA).  Berdasarkan  dosis  untuk  manusia
yang  dianjurkan  10  mg/  kgBB  dan dikonversikan  ke  marmut  dikarenakan tidak ada data konversi ke ayam.
Penyiapan  Larutan  Ekstrak  Etanol 70% Batang Kayu kuning
Dosis  yang  digunakan  secara empiris  20  g  batang  kayu  kuning  segar
(Depkes, 1999). Penelitian ini menggunakan ekstrak kering maka dilakukan perbandingan dosis dari 1000 g batang  kayu  kuning  segar  menjadi  42  g ekstrak  kering  (23,8:1),  karena  penelitian juga  menggunakan  hasil  data  uji in  vitro sebagai  perbandingan  dalam  penentuan dosis  maka  dilihat  apakah  uji  aktivitas anthelmintik secara in vitro dapat digunakan  untuk  menentukan  dosis  uji in vivo , dengan melihat berapa persen larva- 3  dan  cacing  dewasa Ascaridia  galli sehingga  menyebabkan  paralisis  selama waktu pengamatan.
Penyiapan Stok Telur Infektif Ascaridia galli Cacing  yang  diperoleh  dari  usus ayam  dicuci  bersih  dengan  larutan  NaCl fisiologis,  kemudian  ditorehkan  bagian uterusnya  untuk  mendapatkan  telurnya. Telur Ascaridia  galli dapat  dikumpulkan dalam waktu 24 jam, kemudian diinkubasi dengan  larutan  NaCl  fisiologis  pada  suhu kamar  selama  10  hari  dalam  cawan  petri untuk mendapatkan telur infektif.
Penggantian  NaCl  fisiologis  dilakukan setiap hari untuk menghindari kontaminasi inkubasi media telur cacing.
Uji  Aktivitas  Anthelmintik  Secara In

## Vitro
Percobaan pada larva-3 dan cacing dewasa Ascaridia  galli sebagai  orientasi, dibagi  berdasarkan  konsentrasi  larutan ekstrak  etanol  70%  batang  kayu  kuning yang akan diberikan, yaitu:
Kelompok 1:
Larutan ekstrak konsentrasi 1% b/v Konsentrasi 2:
Larutan ekstrak konsentrasi 2% b/v Konsentrasi 3:
Larutan ekstrak konsentrasi 3% b/v Masing-masing kelompok dilakukan  3  kali  pengulangan,  10  ekor larva-3 dan cacing dewasa Ascaridia galli masing-masing  diletakkan  pada  cawan petri  berdiameter  10  cm  yang  telah  berisi 40  ml  larutan  ekstrak  etanol  70%  batang kayu kuning.
Pengamatan  jumlah  larva-3  dan cacing  dewasa Ascaridia  galli yang paralisis  dilakukan  setiap  jam,  untuk larva-3  selama  6  jam  sedangkan  cacing dewasa  selama  12  jam,  karena  larva-3 lebih  rentan  terhadap  lingkungan  luar hospesnya  yaitu  ayam.  Paralisis  yang terjadi  pada  larva-3  dan  cacing  dewasa
Ascaridia  galli dapat  dikatakan  jika  tidak bergerak  oleh  rangsangan  sentuhan  dan bergerak  sebentar  kemudian  langsung mati dengan temperatur air hangat.
Uji  Aktivitas  Anthelmintik  Secara In Vivo Jumlah ayam yang dibutuhkan tiap kelompok,  dihitung  berdasarkan  rumus Federer yaitu (Hanafiah, 2000):
(T-1) (n-1) ≥ 15
(6-1) (n-1) ≥ 15 n   ≥  4 Dimana:
T: Jumlah kelompok percobaan
n:  Jumlah ulangan (jumlah hewan uji tiap kelompok)
Penelitian  ini  menggunakan  30 ekor  ayam  ras  tipe  pedaging  berumur  2 minggu  yang  dibagi  menjadi  6  kelompok dan  tiap  kelompok  terdiri  dari  5  ekor ayam. Ayam dibagi secara acak, dipelihara  dengan  sistem  1  kandang  dan disekat untuk masing-masing ayam.
Ekstrak  etanol  70%  batang  kayu kuning  yang  didapat  dilakukan  pengujian aktivitas  anthelmintik  terhadap  larva-3 Ascaridia  galli yang  terdapat  di  usus ayam  dan  dilakukan  secara in  vivo .
Masing-masing kelompok yang digunakan dalam percobaan ini yaitu: Kelompok 1:
Kontrol  normal  untuk  melihat  adanya kontaminasi  cacing  atau  tidak,  ayam hanya diberi makan dan minum.
Kelompok 2:
Kontrol  negatif,  ayam  diinfeksi  dengan 1000  telur  infektif,  kemudian  dibiarkan tanpa perlakuan pengobatan.
Kelompok 3:
Kontrol  positif,  ayam  diinfeksi  dengan 1000  telur  infektif,  kemudian  dilanjutkan pemberian suspensi pirantel pamoat dosis 21,7 mg/400 gBB
Kelompok 4:
Ayam  diinfeksi  dengan  1000  telur infektif,  kemudian  dilanjutkan  pemberian larutan ekstrak dosis I (26 mg/400 gBB) Kelompok 5:
Ayam  diinfeksi  dengan  1000  telur infektif,  kemudian  dilanjutkan  pemberian larutan ekstrak dosis II (52 mg/400 gBB). Kelompok 6:
Ayam  diinfeksi  dengan  1000  telur infektif,  kemudian  dilanjutkan  pemberian larutan  ekstrak  dosis  III  (104  mg/400 gBB).
Uji aktivitas anthelmintik secara in vivo menggunakan  ayam  ras  DOC  ( Day Old Chicken ) tipe pedaging yang diaklimitasi  selama  2  minggu  dengan pemberian  Vitacik  (vitamin+antibiotik). Dipergunakan  anak  ayam  karena  masa
prepaten lebih pendek dibandingkan ayam dewasa,  kemudian  kelompok  2  –  6 dilakukan  penginfeksian  dengan  1000 telur infektif cacing Ascarida galli secara oral.  Hari  ke-8  penginfeksian maka  telur- telur  infektif  tersebut  akan  terbentuk larva-3 Ascaridia galli , kemudian
dilakukan pengujian aktivitas
anthelmintik  ekstrak  etanol  70%  batang
kayu  kuning  secara in  vivo pada  masing- masing  kelompok  larutan  ekstrak  pada hari  ke-10  sesudah  infeksi.  Tiga  hari kemudian  seluruh  ayam  uji  dilakukan pembedahan pada bagian mukosa ususnya untuk mengetahui jumlah larva-3 Ascaridia galli yang hidup pada kelompok percobaan.

## HASIL
Uji Aktivitas Anthelmintik Batang Kayu Kuning Secara In Vitro
Tabel 1.   Hasil Uji Terhadap 10 Ekor Larva-3 Ascaridia galli yang Paralisis Selama 6 Jam Ulangan Perlakuan KO1 KO2 KO3 1 0 5 5 2 1 4 4 3 1 4 5 Rata-rata ulangan 0,67 4,33 4,67 Persentase 6,70% 43,30% 46,70%
Tabel 2. Hasil Uji Terhadap 10 Ekor Cacing Dewasa Ascaridia galli yang Paralisis selama 12 Jam Ulangan Perlakuan KO1 KO2 KO3 1 1 5 6 2 3 5 5 3 2 5 5 Rata-rata ulangan 2 5 5,33 Persentase 20% 50% 53,30%
Keterangan:
KO1:   Kelompok orientasi larutan ektrak, konsentrasi  1% b/v
KO2:   Kelompok orientasi larutan ekstrak, konsentrasi 2% b/v KO3:   Kelompok orientasi larutan ekstrak, konsentrasi 3% b/v
Hasil  uji  aktivitas  anthelmintik secara in  vitro di  atas  menunjukkan bahwa  persentase  paling  besar  yang menyebabkan  paralisis  pada  larva-3  dan cacing  dewasa Acaridia  galli yaitu  pada KO2 dan KO3. KO2 pada larva-3 sebesar 43,30%  dan  pada  cacing  dewasa  sebesar 50%.  KO3  pada  larva-3  sebesar  46,70% dan  pada  cacing  dewasa  sebesar  53,30%, sedangkan  KO1  pada  larva-3  dan  cacing dewasa hanya 6,70% dan 20%. Berdasarkan hasil tersebut dapat disimpulkan  bahwa  ekstrak  etanol  70% batang  kayu  kuning  mempunyai  aktivitas sebagai anthelmintik, maka dapat dilanjutkan pada uji aktivitas anthelmintik secara in vivo .
Hasil  data  jumlah  larva-3  dan cacing  dewasa Ascaridia  galli yang paralisis  secara in  vitro dilakukan
kenormalan menurut Kolmogorov- Smirnov data terdistribusi  normal dan uji homogenitas     Levene     diketahui   data terdistribusi  homogen.  Selanjutnya  data diuji  menggunakan  Anava  satu  arah  taraf uji  0,05  (α=0,05)    diketahui      data berbeda        secara     bermakna     antar kelompok perlakuan. Selanjutnya dilakukan  uji  Tukey  pada  data  jumlah larva-3 dan cacing dewasa Ascaridia galli yang  paralisis  terdapat  perbedaan  antara KO1  dengan  KO2  dan  KO3,  sedangkan antara  KO2  dan  KO3  tidak    terdapat perbedaan.    Hal  ini  berarti  uji  aktivitas anthelmintik  ekstrak  etanol  70%  batang kayu    kuning  secara in  vitro dengan konsentrasi 2% b/v dan 3% b/v mempunyai
kekuatan aktivitas anthelmintik yang sama.
Uji Aktivitas Anthelmintik Batang Kayu Kuning Secara In Vivo
Tabel 3.  Hasil Uji Terhadap Larva-3 Ascaridia galli yang Hidup Perlakuan Ulangan Rata- rata 1 2 3 4 5 K 1 0 0 0 0 0 0 K 2 671 654 890 576 873 733 K 3 63 44 51 26 76 52 K 4 175 176 165 154 181 170 K 5 81 132 76 63 101 91 K 6 30 49 35 45 31 38
Tabel 4.  Hasil Transformasi (log X) Uji Terhadap Larva-3
Ascaridia galli yang Hidup Perlakuan Ulangan Rata- rata 1 2 3 4 5 K 2 2,83 2,82 2,95 2,76 2,94 2,86 K 3 1,8 1,64 1,71 1,41 1,88 1,69 K 4 2,24 2,25 2,22 2,19 2,26 2,23 K 5 1,91 2,12 1,88 1,8 2 1,94 K 6 1,48 1,69 1,54 1,65 1,49 1,57
Keterangan:
Kelompok 1 (K1) :  Kelompok kontrol normal (tanpa penginfeksian) Kelompok 2 (K2) :  Kelompok kontrol negatif (tanpa pengobatan) Kelompok 3 (K3) :  Kelompok kontrol positif (suspensi pirantel pamoat)
Kelompok 4 (K4) :  Kelompok larutan ekstrak, dosis I (26 mg/400 gBB)
Kelompok 5 (K5) :  Kelompok larutan ekstrak, dosis II (52 mg/400 gBB)
Kelompok 6 (K6) :  Kelompok larutan ekstrak, dosis III (104 mg/400 gBB)
Pengamatan  uji in  vivo di  atas menunjukkan  rata-rata  jumlah  larva-3 Ascaridia  galli yang  hidup,  yaitu:  K1 tidak terdapat larva-3 ataupun bentuk lain dari  cacing Ascaridia  galli dan  jenis cacing lainnya, karena pada kelompok ini tidak dilakukan penginfeksian telur infektif Ascaridia galli . Berdasarkan hasil tersebut  terlihat  bahwa  pemberian  larutan ekstrak  pada  dosis  104  mg/400  gBB mempunyai  aktivitas  anthelmintik  yang lebih mendekati kontrol normal.
Berdasarkan
uji
kenormalan
Kolmogorov- smirnov data tidak terdistribusi  normal  dan  pada  uji  Levene data tidak  terdistribusi     homogen pada kelompok  percobaan,  maka  tidak  dapat langsung  dilakukan  uji  Anava  tetapi ditransformasi terlebih dahulu dengan log
x,  setelah  ditransformasi  baru  dapat dilakukan  uji  Anava  satu  arah  untuk melihat ada atau tidaknya perbedaan antar perlakuan.  Penelitian  ini  juga  diamati berat  badan  ayam  sebelum  dan  sesudah dilakukan  pengobatan  untuk  melihat apakah infeksi larva-3 Ascaridia galli dan sesudah  dilakukan  pengobatan  dengan menggunakan  larutan  ekstrak  etanol  70% batang kayu kuning berpengaruh terhadap berat badan ayam.
Hasil pengamatan dapat dilihat pada tabel berikut:
Tabel 5.  Berat Badan Ayam (gram) Sebelum Pengobatan, Berumur 24 Hari
Perlakuan Ulangan Rata-rata Berat Badan 1 2 3 4 5 K1 1140 1040 1140 1000 1000 1064 K2 900 960 920 860 840 896 K3 800 900 880 930 890 880 K4 900 880 960 940 870 910 K5 890 870 950 920 840 894 K6 880 930 920 890 870 898
Tabel 6.  Berat Badan Ayam (gram) Sesudah Pengobatan, Berumur 27 Hari
Perlakuan Ulangan Rata-rata Berat Badan 1 2 3 4 5 K1 1160 1060 1200 1060 1120 1120 K2 760 860 820 740 740 784 K3 1020 1060 1020 1160 1040 1060 K4 880 840 920 900 900 888 K5 960 920 1020 1020 1000 984 K6 1020 1100 1180 1160 1040 1100
Hasil pengamatan di atas menunjukkan bahwa rata-rata berat badan ayam  sebelum  pengobatan  kelompok kontrol  normal  (tanpa  penginfeksian) yaitu  1064  g,  sedangkan  kelompok perlakuan penginfeksian adalah kontrol negatif (K2), kontrol positif (K3), dosis I
(K4), dan dosis II (K5), dan dosis III (K6) rata-rata  berat badan  ayam berturut-turut yaitu  896  g,  880  g,  910  g,  894  g,  898  g. Angka  ini  menunjukkan  bahwa  ayam yang  tidak  diinfeksi  rata-rata  berat badannya  lebih  besar  dari  ayam  yang diinfeksi.

## DISKUSI
Pada  uji  aktivitas  anthelmintik secara in vitro , larutan ekstrak etanol 70% batang kayu kuning di dalam cawan petri menggunakan  NaCl  fisiologis  sebagai pelarut  dan  seluruh  permukaan  tubuh tertutup  oleh  larutan  ekstrak    karena dikondisikan  larva-3  dan  cacing  dewasa Ascaridia  galli berada  pada  cairan  tubuh hospes  sehingga  tekanan  osmose  pada larutan ekstrak sama dengan cairan tubuh pada  hospesnya,  karena  jika  tidak dikondisikan  sama  dengan  cairan  tubuh maka larva-3 dan cacing dewasa Ascaridia galli dapat mengalami paralisis dan akhirnya mati karena mungkin terjadi nekrosis,  rangsangan  pada  selaput  otak dan hemolisa sehingga nantinya pengamatan  tidak  dapat  diambil  sebagai hasil  uji  aktivitas  anthelmintik  secara in vitro dengan  melihat  berapa  persen  yang menyebabkan paralisis.
Penelitian ini simplisia menggunakan  penyari  etanol  70%  untuk mendapatkan  sediaan  yang  tahan  lebih lama  karena  bakteri  dan  kapang  tidak dapat  tumbuh  di  dalamnya  dan  penyari etanol  70%  dapat  melarutkan  zat  aktif yang lebih baik dan zat pengganggu yang larut  hanya  terbatas  sehingga  dapat menghasilkan  sediaan  yang  lebih  baik
dibandingkan  dengan  penyari  air  karena ekstrak  dapat  ditumbuhi  kapang  dan bakteri,  dan  penyari  air  tidak  hanya melarutkan zat aktif tetapi juga melarutkan  zat  pengganggu  dan  enzim yang  dapat  menurunkan  kualitas  sediaan ekstrak. Pada penelitian ini yang digunakan  adalah  ekstrak  kering  maka dikonversi dari simplisia segar ke ekstrak kering (23,8 : 1), jadi 20 g x 1/23,8 = 0,84 g (840 mg).
Penelitian  ini  menggunakan  ayam sebagai  hewan  uji  maka  dosis  yang digunakan  untuk  manusia  dikonversi  ke ayam, akan tetapi tidak ada data konversi ke  unggas  maka  dosis  dikonversikan dengan berat badan ayam yang mendekati ke  data  konversi  yang  ada  yaitu  marmut 0,031/400 gBB, sehingga 0,84 g x 0,031 = 0,026  g  (26  mg)  dan  untuk  interval  dosis selanjutnya  2  x  n,  sehingga  dosis  yang digunakan  untuk  uji in  vivo adalah  26 mg/400  gBB,  52  mg/400  gBB,  104 mg/400 gBB.
Uji  anthelmintik  secara in  vivo digunakan  30  ekor  ayam  ras  karena bersifat  unggul  sesuai  dengan  tujuan pemeliharaan  karena  telah  mengalami perbaikan  mutu  genetis  sehingga  lebih mudah  dalam  proses  pemeliharaan,  dan
digunakannya  tipe  pedaging  dengan  sifat bentuk  tubuh  besar  dan  pertumbuhan cepat,  karena  pada  penelitian  ini  yang diamati  tidak  hanya  pada  jumlah  larva-3 Ascaridia  galli yang  hidup  setelah pengobatan tetapi juga diamati pengaruhnya  terhadap  berat  badan  ayam. Ayam DOC yang diperoleh dari PT.Peternakan  Ayam  Manggis,  Jakarta diaklimitasi  selama  2  minggu  dengan pemberian Vitacik untuk kekebalan tubuh ayam,  sehingga  mencegah  infeksi  lain yang  tidak  diinginkan  karena  setelah diinfeksikan  diharapkan  hanya  terjadi infeksi  tunggal  untuk  memperoleh  hasil yang  lebih  akurat  pada  jenis  cacing Ascaridia galli dan tidak dipengaruhi oleh jenis  cacing  lain  yang  bukan  sasaran penelitian.  Dari  30  ekor  ayam  tersebut dibagi  menjadi  6  kelompok  dan  masing- masing kelompok terdiri dari 5 ekor ayam sebagai ulangan perlakuan. K1 merupakan  kontrol  normal  untuk  melihat adanya  kontaminasi  cacing  atau  tidak pada  hewan  uji  dan  kelompok  2  –  6 dilakukan  penginfeksian  dengan  1000 telur infektif cacing Ascaridia galli secara oral  dan  diteruskan  dengan  perlakuan yang berbeda pada masing-masing kelompok.
Hari ke-10 telur infektif yang telah diinfeksikan  tersebut  telah  terbentuk menjadi larva-3 Ascaridia galli , digunakan  larva-3  pada  uji in  vivo ini karena untuk mengetahui aktivitas ekstrak etanol  70%  batang  kayu  kuning  terhadap bentuk  imatur  dari  cacing Ascaridia  galli dengan  siklus  hidup  yang  lebih  cepat waktunya  dibandingkan  dengan  bentuk matur  cacing Ascaridia  galli yang  masa prepatennya jauh lebih lama. K2 merupakan kontrol negatif tanpa dilakukan  pengobatan.  K3  merupakan kontrol  positif  dengan  menggunakan suspensi pirantel pamoat sebagai pembanding,  menurut  literatur  dosis tunggal  pirantel  pamoat  10  mg/  kgBB untuk manusia, karena pada penelitian ini menggunakan  ayam  sebagai  hewan  uji maka dikonversikan menjadi 21,7 mg/400 gBB.  K4,  K5  dan  K6  merupakan kelompok  larutan  ekstrak  etanol  70% batang  kayu  kuning  dengan  masing- masing dosis 26 mg/400 gBB, 52 mg/400 gBB,  104  mg/400  gBB.  Tiga  hari  setelah pengobatan  seluruh  kelompok  hewan  uji dilakukan  pembedahan  pada  bagian mukosa  ususnya,  larva-3 Ascaridia  galli diambil  dari  usus  halus  dengan  cara memijit  perlahan-lahan  organ  tersebut dengan  pinset,  dan  disaring  ke  dalam
gelas piala yang berisi larutan NaCl 0,9 % b/v,  maka  akan  akan  terlihat  adanya endapan  pada  larutan  yang  menunjukkan adanya  larva-3 Ascaridia  galli .  Endapan tersebut dipipet dan dipindahkan ke dalam cawan petri untuk dilihat dengan menggunakan  mikroskop,  agar  dapat dihitung  jumlah  larva-3 Ascaridia  galli yang  hidup.  Seluruh  pengamatan  larva-3 Ascaridia  galli pada  larutan  NaCl  0,9  % b/v dalam keadaan hidup semua tidak ada yang  paralisis/mati,  itu  menunjukkan bahwa  larva-3  yang  paralisis/mati  ketika berada  di  dalam  tubuh  hospes  akan langsung  dieksresikan,  karena  tubuh larva-3  terjadi  depolarisasi  otot  sehingga terjadi  spastis  yang  menyebabkan  larva-3 tidak  dapat  bertahan  untuk  menempel mukosa usus.
Berdasarkan  hasil  perhitungan  uji Anava  satu  arah  pada  hasil  transformasi (log  x)  uji  aktivitas  anthelmnintik  batang kayu  kuning  secara  in  vivo  taraf  uji  0,05 (α  =  0,05)  diketahui  data  berbeda  secara bermakna  antar  kelompok  perlakuan, selanjutnya  data  tersebut  dilakukan  uji Tukey.  Berdasarkan  hasil  uji  Tukey  pada data  terdapat  perbedaan  antara  kontrol negatif  dengan  kontrol  positif  (K3), larutan  ekstrak  etanol  70%  batang  kayu kuning  dosis  26  mg/400  gBB  (K4),  52
mg/400  gBB  (K5),  dan  104  mg/400  gBB (K6).  Perbedaan  juga  terlihat  antara  K4 dengan  kelompok  lainnya  dan  antara  K5 dengan  kelompok  lainnya.  Tidak  terdapat perbedaan  antara  kontrol  positif  dengan larutan  ekstrak  etanol  70%  batang  kayu kuning  dosis  104  mg/400  gBB.  Hal  ini berarti, kontrol positif mempunyai aktivitas  anthelmintik  yang  sama  dengan K6.  Berdasarkan  kelima  data  analisis statistik  (K2  –  K6)  maka  bahwa  larutan ekstrak  etanol  70%  batang  kayu  kuning pada  dosis  26  mg/400  gBB,  52  mg/400 gBB,  dan  dosis  104  mg/400  gBB mempunyai aktivitas sebagai anthelmintik.
Hasil  pengamatan  rata-rata  berat badan ayam sesudah pengobatan pada K1 yaitu  1120  g,  K2  yaitu  784  g,  K3  yaitu 1060  g,  kelompok  larutan  ekstrak  etanol 70% batang kayu kuning dosis 26 mg/400 gBB (K4), 52 mg/400 gBB (K5), dan 104 mg/400  gBB  (K6)  rata-rata  berat  badan ayam  berturut-turut  yaitu  888  g,  984  g, 1100  g.  Angka  ini  menunjukkan  bahwa dengan  dilakukan  pengobatan  terhadap ayam uji akan mempengaruhi peningkatan berat badan ayam tersebut.
Hasil  data  berat  badan  ayam sebelum dan sesudah pengobatan dilakukan uji kenormalan menurut
Kolmogorov-Smirnov  data  terdistribusi normal  dan  uji  homogenitas  Levene diketahui  data  terdistribusi  homogen. Selanjutnya  data  diuji  menggunakan Anava  satu  arah  pada  taraf  uji  0,05  (α  = 0,05)  diketahui  data  berbeda  secara bermakna  antar  kelompok  perlakuan, selanjutnya  data  tersebut  dilakukan  uji Tukey.  Berdasarkan  hasil  uji  Tukey  pada berat  badan  ayam  sebelum  pengobatan tidak  terdapat  perbedaan  antara  kontrol normal (K1) dengan kontrol negatif (K2), kontrol positif (K3), K4, K5, dan K6. Hal ini  berarti  bahwa  dengan  dilakukan penginfeksian  cacing Ascaridia  galli terhadap  ayam  uji  berpengaruh  terhadap penurunan  berat  badan  ayam  tersebut, karena  ayam  yang  diinfeksi  sari-sari makanan  yang  terdapat  di  dalam  tubuh diambil  oleh Ascaridia  galli ,  sehingga asupan  nutrisi  untuk  pertumbuhan  ayam berkurang.
Hasil uji Tukey pada berat badan ayam   sesudah     pengobatan    terdapat perbedaan  antara  kontrol  negatif    dengan kontrol  normal,  kontrol  positif,  larutan ekstrak  etanol  70%  batang  kayu  kuning dosis  II  (52  mg/400  gBB)  dan  dosis  III (104 mg/400 gBB), tetapi pada dosis I (26 mg/400  gBB)  tidak  terlihat  adanya
perbedaan.  Hal  ini  berarti  besarnya jumlah  larva-3 Ascaridia  galli yang terdapat  dalam  tubuh  ayam  pada  K4 (dosis  I)  mempengaruhi  penurunan  berat badan  ayam  yang  sama  dengan  besarnya jumlah  larva-3 Ascaridia  galli yang terdapat  pada  kontrol  negatif.  Perbedaan juga terlihat antara kontrol normal dengan kontrol negatif, dosis I dan dosis II, tetapi pada  kontrol  positif  dan  dosis  III  tidak terlihat  adanya  perbedaan.  Hal  ini  berarti besarnya  jumlah  larva-3 Ascaridia  galli yang  terdapat  dalam  tubuh  ayam  pada larutan  ekstrak  etanol  70%  batang  kayu kuning  dosis  III  (104  mg/400  gBB)  dan kelompok        kontrol      positif  tidak mempengaruhi  berat  badan  ayam  karena tidak adanya perbedaan berat badan ayam dengan kelompok kontrol normal.

## SIMPULAN
Pemberian  ekstrak  etanol  70% batang  kayu  kuning  dengan  dosis  26 mg/400 gBB, 52 mg/400 gBB,     104 mg /400  gBB    pada    ayam  ras  tipe  pedaging mempunyai aktivitas sebagai obat cacing/ anthelmintik.  Semakin  tinggi  dosis  yang diberikan  maka  semakin  kuat  daya anthelmintiknya.

## DAFTAR PUSTAKA
Ariyanti,  E.E.  2001.  Mengenal  Sirawan ( Arcangelisia  flava (L.)  Merr.) Tumbuhan Langka yang Berkhasiat  Obat.  Dalam:  Warta Kebun Raya Majalah Semipopuler/Populer.  Vol  3(1). Pusat   Konservasi     Tumbuhan Kebun Raya Bogor. Bogor: Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia. Anief,  M.  1996.  Penggolongan  Obat Berdasarkan Khasiat
dan
Penggunaan.  Yogyakarta:  Gajah Mada University Press. Agusta, A., Jamal, Y. Dan Chairul. 1996.
Komponen  Kimia  Fraksi  Non Polar Arcangelisia flava
(Menispermaceae).
Jakarta: Majalah Farmasi Indonesia.
Anonim.  1995.  Farmakologi  dan  Terapi
(Edisi IV). Jakarta: Bagian Farmakologi
Kedokteran
Universitas Indonesia.
Departemen  Kesehatan  Badan  Penelitian dan  Pengembangan  Kesehatan. 1999.  Inventaris  Tanaman  Obat Indonesia (V). Jakarta: Depkes.
Hanafiah,  Kemas,  A.  2000.  Rancangan Percobaan  Teori  dan  Aplikasi (Edisi  Revisi).  Jakarta:  PT  Raja Grafindo Persada.
Kusumamihardja,  S.  1989.  Parasit  dan Parasitosis  Pada  Hewan  Ternak dan  Hewan  Piaraan  di  Indonesia. Bogor:  Pusat  Antar  Universitas Bioteknologi IPB.
Levine,  N.D.  1990.  Buku  Pelajaran
Parasitologi Veteriner. Yogyakarta: Gadjah Mada University Press. Soedarto. 1991. Helmintologi Kedokteran. Jakarta: Buku Kedokteran EGC.
Soekardono,  S  dan  Partosoedjono,  S.
1992. Parasit-parasit Ayam. Jakarta: Gramedia.
Supritjana,  E.,  Atmomarsono,  U.,  dan
Kartasujana,  R.  2005.  Ilmu  Dasar Ternak  Unggas.  Jakarta:  Penebar Swadaya.
Tjay,  T.H  dan  Rahardja,  K.  2002.  Obat- obat Penting Khasiat, Penggunaan, dan  Efek-efek  Sampingnya  (Edisi V). Jakarta: PT Gramedia.