Uji Potensi Metabolit Sekunder Ekstrak Kulit Buah Petai (Parkia s peciosa Hassk ) terhadap Kadar Kreatinin dan Ureum Tikus Secara Spektrofotometri UV-Vis
[Potential Test of Secondary Metabolites Extract of Petai Fruit Peel ( Parkia speciosa Hassk) on Creatinine and Ureum Levels of Rats by U V- Vis Spectrophotometry]
Joni Tandi 1 , Heru Khairul Muttaqin 1 , Kiki Rizki Handayani 1 , Sri Mulyani 2 , Recky Patala 1*
1 Program Studi S1 Farmasi, STIFA Pelita Mas Palu
2 Program Studi Pendidikan Kimia, Jurusan P.MIPA FKIP Universitas Tadulako, Palu
* ) Coresponding Author : Reckyfarmasi@yahoo.com
ABSTRACT . This  study  aims  to  determine  the  effectiveness  of  bitter  beans  peels  ( Parkia  speciosa Hassk) extract  on  creatinine  and  urea  levels,  and  the  effective  dose  of  the  exctract on creatinine and  urea  levels.  This research  was  a  laboratory  experiment  using  25  rats  which were  divided  into  five  treatment  groups,  each  group consisting  of  5  rats.  Group  1  (normal  control),  group  2  (negative  control)  were  given  suspension  of  Na-CMC, group  3,  4  and  5  respectively  given  petai  rind  ethanolic  extract  doses  of  300,  400  and  500  mg/kg.  The  results showed  that  petai  fruit  ( Parkia  speciosa hassk)  peels  extract  had  an  effect  on  creatinine  and  urea  levels  of diabetes  hypercholesterolemia  male  rats  by  an  effective  dose  of  300  mg/kg  which  has  an  effect  on  creatinine levels by an average of 0.38 mg/dL and ureum levels by an average of 12.9 mg/dL.
Keywords : petai fruit peels extract, secondary metabolite, creatinine, ureum, Streptozotocin
ABSTRAK. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efektifitas ekstrak etanol kulit buah petai ( Parkia speciossa Hassk)  erhadap  kadar  kreatinin  dan  ureum  serta  dosis  yang  efektif  terhadap    kadar  kreatinin  dan  ureum. Penelitian ini merupakan penelitian eksperimen laboratorium dengan menggunakan hewan uji sebanyak 25 ekor tikus  yang  dibagi  menjadi  5  kelompok  perlakuan,  tiap  kelompok  terdiri  atas  5  ekor  tikus.  Kelompok  1  (kontrol normal),  kelompok  2  (kontrol  negatif)  diberi  suspensi  Na-CMC,  kelompok  3,4  dan  5  masing-masing  diberikan ekstrak  etanol  kulit  buah  petai  ( Parkia speciosa Hassk)  dosis  300,  400  dan  500  mg/kg  BB.  Hasil  penelitian menunjukkan bahwa ekstrak etanol kulit buah petai memiliki efek terhadap penurunan kadar kreatinin dan ureum tikus terhadap kadar kreatinin dengan rata-rata 0,38 mg/dL dan kadar ureum dengan rata-rata 12,9 mg/dL.
Kata Kunci : ekstrak kulit buah petai, metabolit sekunder, kreatinin, ureum,Streptozotocin.
Riwayat artikel: Diterima 29 Juli 2020, Disetujui 29 Agustus 2020 Cara sitasi: Tandi, J., Muttaqin, H.K., Handayani, K.R., Mulyani, S., & Patala, R. (2020). Uji Potensi Metabolit Sekunder Ekstrak Kulit Buah  Petai  (Parkia  Speciosa  Hassk)  terhadap  Kadar  Kreatinin  dan  Ureum  Tikus  Secara  Spektrofotometri  UV-Vis. KOVALEN: Jurnal Riset Kimia , 6(2): 143-151. DOI: https://doi.org/10.22487/kovalen.2020.v6.i2.15225

## LATAR BELAKANG
Ginjal memiliki
fungsi
untuk mengeksresikan zat-zat sisa metabolisme. Zat sisa  metabolisme  yang  diekresikan  melalui
ginjal diantaranya adalah ureum dan kreatinin. Jika  terjadi  kerusakan  pada  tubulus  ginjal maka  ureum  dan kreatinin    akan  terakumulasi dalam  darah  (Puspitaningrum et  al .,  2018).
Melihat banyaknya efek samping yang ditimbulkan  oleh  obat-obat  kimia  modern. maka  dari  itu  sebagian  besar  masyarakat mulai melirik pengobatan alternatif lain dengan memanfaatkan bahan alam (tanaman) sebagai obat  (DiPiro et  al .,  2015).  Salah  satu tumbuhan  yang  sering  dikonsumsi  dan digunakan  sebagai  obat  tradisional  oleh masyarakat  adalah  petai  ( Parkia  speciossa Hassk).
Petai (Parkia speciosa Hassk) merupakan tanaman yang mengandung alkaloid, polifenol, flavonoid, saponin dan tanin. Memiliki manfaat mampu mencegah bahkan mengatasi beberapa  macam  penyakit  yaitu  anemia, tekanan  darah  tinggi,  diabetes,  kolesterol, sembelit,  serta  dapat  berfungsi  sebagai penangkap  anion  superoksida  dan  lipid superoksida radikal, serta mengurangi aktifitas radikal  bebas  superoksida.  Kulit  petai  memiiki kandungan  fosfor,  vitamin  C,    vitamin  A, protein,  karbohidrat,  mineral  dan  zat  besi (Verawaty & Novel, 2018).
Berdasarkan Data Riset Kesehatan Dasar (RISKESDAS)  pada  tahun  2018  diperoleh data sebanyak 300.000 sampel rumah tangga (1,2  juta  jiwa)  menunjukan  beberapa  penyakit mengalami  peningkatan  bila  dibandingkan dengan  Riskesdas  2013,  antara  lain  penyakit ginjal  kronis  dan  diabetes  melitus.  Prevalensi penyakit  gagal  ginjal  kronis  naik  dari  2% mencapai  3,8%;  dan  berdasarkan  data pemeriksaan gula darah untuk pasien diabetes melitus naik dari 6,95 menjadi 8,5%
(Kemenkes, 2018).
Salah  satu  indikator  untuk  mengetahui kerusakan  ginjal  yaitu  pemeriksaan  kadar kreatinin dan ureum. Kreatinin adalah zat hasil metabolisme  otot  yang  disekresikan  melalui serum  oleh  tubuh  setiap  hari.  Sedanglan
ureum  merupakan  produk  akhir  katabolisme protein  dan  asam  amino  yang  diproduksi  oleh hepar.  Oleh  karena  itu,  meningkatnya  kadar kreatinin  dan  ureum  dalam  serum  darah menandakan  terjadinya  kerusakan  pada  ginjal (Mahara, 2016).
Penelitian  sebelumnya  ekstrak  dari  biji petai  ( Parkia  speciossa Haskk)  dengan  dosis 400  mg/kg  BB  tikus  memiliki  dampak  yang signifikan  terhadap  penurunan  kadar  glukosa darah  tikus.  Penelitian  lain  juga  menyebutkan bahwa  jus  biji  petai  dengan  dosis  1200 mg/200 gram BB memiliki khasiat hepatoprotektif  ditinjau  dari  aktivitas  alanin aminotransfrase dan  peroksida dan lipid pada tikus  putih  jantan  yang  diinduksi  karbon tetraklorida (Juliati, 2010).
Berdasarkan  latar  belakang  tersebut diatas maka perlu dilakukan penelitian dengan menggunakan  ekstrak  etanol  kulit  buah  petai ( Parkia  specioss Hassk)  terhadap  kadar kreatinin  dan  ureum  dalam  serum  darah dengan  dosis  300  mg/kg  BB,  400  mg/kg  BB dan 500 mg/kg BB.

## METODE PENELITIAN

## Bahan dan Peralatan
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  yaitu  Air  suling,  amoniak,  asam  klorida, asam  klorida  pekat,  asam  sulfat,  besi  (III) klorida,  kulit  buah  petai,  etanol  96%,  eter, kertas saring, kloroform, Liebermann- burchard,  metanol,  natrium  klorida,  natrium carboxymethyle cellulose , pakan tinggi kolesterol (lemak babi dan kuning telur puyuh), pereaksi  dragendorff,  serbuk  magnesium  p, streptozotocin.
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini yaitu  ayakan  mesh  40,  batang  pengaduk, bejana  maserasi,  blender,  cawan  porselin,
gunting,  hot  plate,  kandang  hewan  uji,  labu ukur,  mortir  dan  stamper,  penangas  air,  pipet tetes,  pipet  mikro,  rotary  vacum  evaporator, sonde  oral  3  ml,  spoit  injeksi  3  ml, spektrofotometri Uv-Vis ( Evolution 201 ), sentrifuge,  tabung  reaksi,  tabung  darah, tabung efendrof timbangan gram dan timbangan analitik.

## Prosedur Penelitian

## Pembuatan ekstrak etanol kulit buah petai
Pembuatan  ekstrak  kulit  buah  petai dilakukan dengan metode maserasi menggunakan  pelarut  etanol  96%.  Serbuk simplisia  ditimbang  sebanyak  1000  gram  lalu dimasukkan  ke  dalam  4  bejana  maserasi masing-masing 250 gram dengan menggunakan pelarut  etanol 96% sebanyak 6 L  masing –  masing  1,5  liter,  ditutup,  lalu didiamkan  selama  3x24  jam  terlindung  dari cahaya  sambil  sesekali  diaduk.  Ekstrak disaring  menggunakan  kertas  saring  lalu diperoleh  filtrat,  dievaporasi  menggunakan Rotavapor pada suhu 60 0 C dilanjutkan dengan pengentalan yang dilakukan dengan menggunakan waterbath .

## Penapisan fitokimia

## 1.  Uji flavonoid
Ekstrak kulit buah petai ditimbang sebanyak  0,5  gram  lalu  ditambahkan  10  ml aquadest dan dipanaskan diatas penangas air kemudian  disaring,  lalu  dilarutkan  dalam  1  ml etanol  (95%)  dengan  penambahan  serbuk magnesium  P,  setelah  itu  dilarutkan  dalam  10 ml  asam  klorida  pekat  P,  jika  terjadi perubahan  warna  merah  ungu  menunjukan adanya  flavonoid  dan  jika  terjadi  perubahan warna  kuning  menunjukan  adanya  senyawa flavon, kalkon dan auron.

## 2.  Uji saponin
Ekstrak kulit buah petai ditimbang sebanyak  0,5  gram  dimasukkan  ke  dalam tabung  reaksi,  lalu  ditambahkan  10  ml  air panas,  dinginkan  kemudian  dikocok  dengan kuat selama 10 detik. Jika terbentuk buih yang menetap  selama  tidak  kurang  dari  1  menit setinggi 10 cm atau pada penambahan 1 tetes asam  klorida  2N  buih  tidak  hilang  maka menunjukkan adanya saponin.
3.  Uji tanin
Ekstrak kulit buah petai ditimbang sebanyak  0,5  gram  dimasukkan  kedalam cawan  lalu  ditambahkan  dengan  20  ml  air panas  dan  larutan  NaCl  10%  3  tetes. Kemudian  ditambahkan  larutan  FeCl 3 ,  bila terbentuk  warna  biru  hitam  menunjukkan adanya tanin.
4.  Uji alkaloid
Ekstrak kulit buah petai ditimbang sebanyak  0,5  gram  lalu  ditambahkan  5  ml asam  klorida  2  N  dan  dipanaskan  diatas penangas air selama 2 menit lalu ditambahkan 3  tetes  pereaksi  Dragendrof  LP.  Jika  hasil memberikan  endapan  kuning orange sampai merah  bata  maka  sampel  mengandung alkaloid.

## Pembuatan larutan koloidal Na-CMC 0,5%
Natrium  karboksimetil  selulosa  (Na  CMC) ditimbang  sebanyak  0,5  gram  dimasukkan sedikit  demi  sedikit  kedalam  lumpang  yang berisi  10  ml  aquades  panas  sambil  digerus hingga  homogen,  lalu  diencerkan  dengan sedikit  aquades,  selanjutnya  dimasukkan kedalam labu ukur 100 ml. volume dicukupkan hingga 100 ml dengan aquadest.

## Pembuatan bahan uji
Ekstrak  etanol  kulit  buah  petai  ditimbang untuk  membuat  suspensi  uji  dengan  masing- masing  2,4  gram  (dosis  300  mg/kgBB),  3,2
gram  (dosis  400  mg/kgBB),  dan  4  gram  (500 mg/kgBB).  Selanjutnya  pada  masing-masing ekstrak  ditambahkan  Na  CMC  0,5  %  sedikit demi  sedikit  dan  dicukupkan  volumenya hingga  100  ml  kemudian  dikocok  hingga homogen.

## Pembuatan larutan Streptozotocin (STZ)
Streptozotocin  (STZ)  ditimbang  sebanyak 0,24 gram dan larutkan ke dalam citrate buffer pH  4,5  hingga  100  ml,  lalu  diinduksikan  pada tikus  putih  melaului  intraperitonial  (ip).  Dosis streptozotocin  yang  diberikan  sebanyak  30 mg/kg BB (Yuniasih, 2016).

## Pengambilan sampel darah
Pengambilan  darah  dilakukan  pada  hari ke-0,  ke-21,  ke-28,  dan  ke-35  melalui  ekor tikus dengan menggunakan tabung yang telah diberi EDTA sebanyak 2 ml untuk disentrifuge menjadi serum.

## Analisis kreatinin
Adapun  cara  kerja  pengukuran  kreatinin diawali  dengan  memisahkan  sampel  darah dan  serum  dengan  cara  disentrifugasi  selama 15  menit.Jumlah  serum  yang  dibutuhkan adalah 100 μL, kemudian ditambahkan reagen asam  pikrat  (reagen  1)  100  μL  dan  reagen sodium  hidroksida  (reagen  2)  100  μL  dengan perbandingan  (1:1),  dicampur  hingga  merata. Didiamkan  selama  30  detik,  diukur  dengan menggunakan spektofotometri UV-VIS ( Evolution  201 )  pada  panjang  gelombang  492 nm,  dengan  dua  kali  pengukuran  dimana pengukuran  pertama  selama  30  detik  dan pengukuran  kedua  selama  2  menit  kemudian dicatat  pengukuran    adsorban  kreatinin  (Amir et al ., 2015).

## Analisis ureum
Alat  yang  digunakan  untuk  mengukur kadar ureum dalam serum darah yang bekerja
secara  otomatis  adalah  spektrofotometri  UV- VIS  ( Elovution  201) .  Komposisi  reagen  ureum pertama  terdiri  dari  reagen  1  (terdiri  dari larutan penyangga (Phospate Buffer, pH < 13) 120 mmol/L dan natrium hipoklorit 10 mmol/L), R2 (urease >500 KU/I.).
Cara  pengukuran  ureum  diawali  dengan memisahkan sampel darah dan serum dengan cara  di  sentrifugasi  selama  15  menit.  Jumlah sampel  yang  dibutuhkan  adalah 10  μL.  Lalu ditambahkan  reagen  1 1000  μL.  Lalu diinkubasi  selama  5  menit  pada  suhu  25 0 C.
Setelah  itu,  ditambahkan  reagen  2  sebanyak 1000 μL. Diamkan selama 10 menit pada suhu
25 0 C lalu diukur
menggunakan spektrofotometri  UV-VIS  ( Elovution  201) pada panjang gelombang 578 nm, kemudian dicatat hasil pengukuran adsorban ureum (Amir et al ., 2015).

## Analisis data
Data  kadar  kreatinin  dan  ureum  yang diperoleh  dianalisis  menggunakan  uji One Way  Anova pada  dengan  taraf  kepercayaan 95% (p = 0,05). Jika  terdapat perbedaan yang signifikan  maka  dilanjutkan  dengan  uji  LSD ( Least  Signifivantly  Diffrenc e)  untuk  melihat adanya  perbedaan  yang  signifikan  antar perlakuan menggunakan SPSS 23.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Hasil Penapisan Fitokimia
Penapisan fitokimia dilakukan untuk mengetahui  jenis  kandungan  senyawa  kimia yang  terdapat dalam  ekstrak  etanol  kulit  buah petai  ( Parkia speciosa Hassk.).  Berdasarkan hasil  uji  fitokimia  diperoleh  bahwa  ekstrak etanol  kulit  buah  petai  ( Parkia  speciossa Hassk) mengandung senyawa-seyawa metabolit  sekunder  yaitu  alkaloid,  flavonoid, saponin dan tannin (Tabel 1).
Tabel 1. Hasil  uji  penapisan  fitokimia  ekstrak etanol kulit buah petai No. Senyawa Metabolit Sekunder Pereaksi Hasil 1. Flavonoid Magnesium dan HCl + 2. Alkaloid Pereaksi Dragendorf + 3. Tanin Penambahan FeCl 3 + 4. Saponin Aquadest +
Keterangan:  (+)  positif  =  terdeteksi  adanya golongan senyawa yang diuji

## Hasil Analisis Kadar Kreatinin dan Ureum
Hasil  uji  statistik  diperoleh  pengukuran jumlah  kadar  kreatinin  dan  ureum  dalam serum  darah  pada  kelompok  hewan  uji  pada hari  ke-0,  21,  28  dan  35  diolah  dengan menggunakan  analisis  Anova  satu  arah  ( One Way  Anova ).  Hasil  uji  statistik  one  way ANOVA  kadar  kreatinin  darah  hari  ke-0 diperoleh  rata –rata  hasil  pengukuran  kadar kreatinin  yaitu  0,41  mg/dL –0,68  mg/dL  yang menandakan bahwa kadar kreatinin awal pada tikus  putih  jantan  berada  pada  nilai  normal
(Tabel  2).  Sebab  nilai  normal  kadar  kreatinin tikus  yaitu  0,2-0,8  Mg/kg  BB  (Amir et  al ., 2015).  Diperoleh  nilai  p=0,250  (p>0,05)  yang menunjukan  adanya  perbedaan  yang  tidak signifikan antar antar kelompok perlakuan. Hal ini  menunjukan  bahwa  kadar  serum  kreatinin uji  yang  digunakan  dalam  keadaan  homogen. Kadar  ureum  yaitu  31,06  mg/dL –43,83  mg/dL (Tabel  3).  Menandakan  bahwa  kadar  ureum berada  diatas  nilai  normal.  Hal  ini  disebabkan oleh  pemberian  pakan  mengadung  protein tinggi  yang  mempengaruhi  kadar  ureum plasma  (Fuadi,  2009).  Menurut  Amir et  al .
(2015)  kadar  ureum  normal  pada  tikus  putih jantan  berada  pada  nilai  15-21  mg/dl. Berdasarkan hasil uji statistik One Way Anova pada hari ke-0 untuk pengukuran kadar ureum awal    bahwa  semua  kelompok  berbeda  tidak signifikan  yang  ditandai  dengan  nilai  p>0,05 (0,378).  Hal  ini  menunjukan  bahwa  kadar ureum  awal  semua  hewan  uji  masih  dalam keadaan homogen.
Tabel 2. Rerata kadar kreatinin Hari ke- Rerata±SD Kadar Kreatinin Serum (mg/dl) Kontrol Normal Kontrol Negatif Dosis 300 mg/kg BB Dosis 400 mg/kg BB Dosis 500 mg/kg BB 0 0,61±0,12 a 0,63±0,12 a 0,49±0,18 a 0,52±0,11 a 0,66±0,16 a 21 0,68±0,33 a 0,65±0,50 a 0,28± 0,23 a 0,36±0,29 a 0,39±0,36 a 28 0,44±0,34 a 1,43±0,59 b 0,70±0,24 c 0,90±0,25 c 1,31±0,77 b 35 0,41±0,28 a 1,02± 0,53 b 0,36±0,24 a 0,55±0,32 a 0,49±0,25 a
Ket : Huruf Kecil yang berbeda menunjukan perbedaan yang signifikan antar perlakuan
Tabel 3. Rerata kadar ureum Hari ke- Rerata±SD Kadar Ureum (mg/dl) Kontrol Normal Kontrol Negatif Dosis 300 mg/kg BB Dosis 400 mg/kg BB Dosis 500 mg/kg BB 0 39,36±6,49 a 41,92±4,10 a 39,77±3,26 a 41,43±2,79 a 42,58±2,44 a 21 19,03±3,74 b 60,41±5,35 a 35,46±8,49 c 35,76±2,19 c 39,38±11,76 c 28 37,44±23,44 a 62,79 ±3,65 a 48,45±12,41 a 38,15±20,58 a 40,65±14,73 a 35 17,6±8,2 a 54,4±2,9 b 12,97±4,0 a 23,55±23,18 a 29,88±22,79 a
Ket : Huruf Kecil yang berbeda menunjukan perbedaan yang signifikan antar perlakuan
Data  rata  -  rata  hasil  pengukuran  kadar kreatinin  pada  hari  ke-21  untuk  kelompok
kontrol  normal,  kelompok  kontrol  negatif, kelompok  dosis  300  mg/kg  BB,  kelompok
dosis  400  mg/kg  BB  dan  kelompok  dosis  500 mg/kg  BB  berturut –  turut  adalah  0,68  mg/dl, 0,65  mg/dl,  0,28  mg/dl,  0,36  mg/dl  dan  0,39 mg/dl  (Tabel  2).  Kadar  rerata  kreatinin  tidak terjadi  peningkatan  setelah  pemberian  induksi streptozotocin pada semua kelompok perlakuan  (Gambar  1).  Data  hasil  uji  statistik One  Way  Anova  dengan  nilai    p=  0,326 (p>0,05).  Hal  ini  menunjukan  bahwa  semua hewan  uji  pada  kelompok  yang  diinduksi streptozotocin  tidak  terjadi  peningkatan  kadar kreatinin.  Menurut  penelitian  Yuniasih  (2016) waktu yang dibutuhkan STZ untuk menimbulkan keadaan nefropati diabetik pada tikus  adalah  3  minggu.  Kadar  ureum  berturut- turut  adalah  19,03  mg/dl,  60,41  mg/dl,  35,46 mg/dl,  35,76  mg/dl,  39,38  mg/dl  (Tabel  3, Gambar 2). Berdasarkan hasil uji statistik One
Way Anova menunjukan bahwa tejadi perbedaan  yang  signifikan  antar  kelompok yang  ditandai  dengan  nilai  p<  0,05  (0,000) sehingga dilanjutkan dengan uji lanjut post hoc LSD.  Hasil  uji  lanjut  LSD  menunjukan  bahwa kontrol  normal  berbeda  signifikan  dengan kontrol  perlakuan  dosis  300,  400  dan  500 Mg/kg  BB  dan  kontrol  negatif.  Hal  ini disebabkan  pada  hari  ke-21  kontrol  normal tidak  diberikan  streptozotocin  sedangkan kontrol  negatif  dan  kelompok  perlakuan  dosis 300, 400  dan  500  Mg/kg  BB  diberikan  induksi streptozocin dan  dalam keadaan sakit.
Adapun  mekanisme  kerja  dari  streptozotocin dapat  meningkatkan  produksi  radikal  bebas serta  menyebabkan  stres  oksidatif  sehingga tikus mengalami hiperglikemia yang mengganggu laju filtrasi glomerulus.
Gambar 1. Grafik hasil pengukuran kadar kreatinin serum
Gambar 2. Grafik hasil pengukuran kadar ureum
a a a a a a b b a a c a a a c a a a b a 0 0.5 1 1.5 2 2.5 Hari ke 0 Hari ke 21 Hari ke 28 Hari ke 35 Kad a r Kr e a tin in (M g/ dL ) Waktu Pengukuran (Hari) kontrol normal kontrol negatif ekstrak dosis 300 mg ekstrak dosis 400 mg ekstrak dosis 500 mg a a a a a a a b a c a a a c a a b c a a 0 10 20 30 40 50 60 70 Hari ke 0 Hari ke 21 Hari ke 28
Hari ke 35
Kad a r Ur e um (M g/ dL ) Waktu Pengukuran (Hari) kontrol normal kontrol negatif ekstrak dosis 300 mg ekstrak dosis 400 mg ekstrak dosis 500 mg
Data  rata –  rata  hasil  pengukuran  kadar kreatinin  pada  hari  ke-28  untuk  kelompok kontrol  normal,  kelompok  kontrol  negatif, kelompok  dosis  300  mg/kg  BB,  kelompok dosis  400  mg/kg  BB  dan  kelompok  dosis  500 mg/kg  BB  berturut –  turut  adalah    0,44 mg/dl, 1,43  mg/dl,  0,70  mg/dl,  0,90  mg/dl  dan  1,31 mg/dl  (Tabel  2,  Gambar  1).  Data  hasil  uji statistik One Way Anova dengan nilai p=0,033 (p<0,05)    menunjukan  terdapat  perbedaan yang  signifikan  pada  semua  kelompok  dan dilanjutkan  dengan  uji  lanjut  LSD.  Hasil  uji lanjut  LSD  menunjukan  bahwa  dosis  300 mg/kg  BB  berbeda  tidak  signifikan  dengan kontrol  normal.  Hal  ini  dikarenakan  efek pemberian  dari  tanaman  ekstrak  kulit  buah petai.  Berbeda  signifikan  dengan  kontrol negatif  yang  menandakan  bahwa  dosis  300 mg/kg  BB  memiliki  efek  terhadap  kadar kreatinin  serum.  Tetapi  apabila  melihat  dari pengukuran  sebelumnya  pada  hari  ke-21 bahwa  terlihat  peningkatan  pada  dosis  300 mg/kg BB. Dosis 400 mg/kg BB berbeda tidak signifikan  dengan  kontrol  normal.  Hal  ini dikarenakan  efek  pemberian  ekstrak  etanol kulit buah petai. Dosis 400 mg/kg BB berbeda signifikan dengan kontrol negatif yang menandakan  bahwa  dosis  400  mg/kg  BB memiliki  efek  terhadap  kadar  kreatinin  serum. Tetapi  apabila  melihat  dari  pengukuran sebelumnya  pada  hari  ke-21  bahwa  terlihat peningkatan  pada  dosis  400  mg/kg  BB.  Dosis 500  mg/kg  BB  berbeda  signifikan  dengan kontrol  normal.  Hal  ini  dikarenakan  dosis  500 mg/kg  BB  menghasilkan  ekstrak  yang  lebih kental,  dimana  kekentalan  dari  suatu  sediaan dapat  mempengaruhi  absorbsi  dari  ekstrak tersebut  untuk  mencapai  target.  Dosis  500 mg/kg  BB  berbeda  tidak  signifikan  dengan kontrol  negatif.  Hal  ini  disebabkan  karena
bahan  tanaman  yang  digunakan  yaitu  kulit buah  petai  dengan  dosis  500  mg/kg  BB memiliki  efek  yang  kurang  maksimal  dalam penurunan  kadar  kreatinin  serum.  Tetapi apabila  melihat  dari  pengukuran  sebelumnya pada  hari  ke-21  bahwa  terlihat  peningkatan pada  dosis  500  mg/kg  BB.  Hal  ini  sesuai dengan  literatur  diatas  yang  menyatakan bahwa pengukuran untuk mengetahui gangguan  nefropati  diabetik  yaitu  3  minggu .
Kadar  ureum  berturut-turut  adalah  37,44 mg/dl,  62,79  mg/dl,  48,45  mg/dl,  38,15  mg/dl dan 40,65 mg/dl (Tabel 3, Gambar 2). Hasil uji statistik  dari  data  yang  diperoleh  kadar  ureum berbeda  tidak  signifikan  antar  kelompok perlakuan  yang  ditandai  dengan  nilai  p>0,05 (0,262).  Hal  ini  dikarenakan  sampel  darah pada  saat  pengambilan  mengalami  lisis sehingga mengganggu pengukuran. Akibatnya data yang diperoleh sulit untuk diinterpretasikan.  Akan  tetapi  dilihat  dari  data pengukuran  hari  ke-28  (setelah  pemberian ekstrak)  kelompok  perlakuan  dosis  ekstrak kulit  buah  petai  300,  400  dan  500  Mg/kg  BB mengalami peningkatan. Waktu yang dibutuhkan  STZ  untuk  menimbulkan  keadaan nefropati  diabetik  pada  tikus  adalah  3  minggu (Tesch & Allen, 2007).
Data  rata  -  rata  hasil  pengukuran  kadar kreatinin  pada  hari  ke-35  untuk  kelompok kontrol  normal,  kelompok  kontrol  negatif, kelompok  dosis  300  mg/kg  BB,  kelompok dosis  400  mg/kg  BB  dan  kelompok  dosis  500 mg/kg  BB  berturut –  turut  adalah  0,41  mg/dl, 1,02  mg/dl,  0,36  mg/dl,  0,55  mg/dl,  dan  0,49 mg/dl (Tabel 2, Gambar 1). Berdasarkan hasil uji  statistik  One  Way  Anova  menunjukan bahwa  adanya  perbedaan  yang  signifikan antar  kelompok  yang  ditandai  dengan  nilai p=0,035  (p<0,05).  Hal  ini  menunjukan  bahwa
pada  hari  ke-35,  setelah  pemberian  ekstrak etanol  kulit  buah  petai  pada  minggu  kedua menunjukan  adanya  perbedaan  yang  tidak signifikan  antara  kontrol  normal  dan  kontrol dosis  300,  400  dan  500  mg/kg  BB  tetapi berbeda signifikan dengan  kontrol negatif. Hal ini  menunjukan  bahwa  pada  hari  ke-35  terjadi penurunan  pada  kadar  kreatinin.  Berdasarkan hasil  pengukuran  35  (setelah  pemberian ekstrak)  rerata  kadar  kreatinin  pada  masing- masing  kelompok  perlakuan  dosis  (300,  400 dan 500 mg/kg BB) memberikan efek terhadap kadar  kreatinin  sehingga  dosis  yang  paling efektif  adalah  dosis  300  mg/kg  BB  yang merupakan  dosis  terendah  dan  yang  paling mendekati nilai kontrol normal dalam memberikan  efek  terhadap  kadar  kreatinin. Kadar  ureum  berturut-turut  adalah  17,71 mg/dl,  54,60  mg/dl,  12,97  mg/dl,  23,55  mg/dl dan  29,88  mg/dl  (Tabel  3,  Gambar  2). Berdasarkan hasil uji statistik One Way Anova menunjukan adanya perbedaan yang signifikan antar kelompok ditandai dengan nilai p<0,05  (0,003).  Hal  ini  menunjukan  bahwa pada  hari  ke-35,  setelah  pemberian  ekstrak etanol  kulit  buah  petai  pada  minggu  kedua menunjukan  adanya  perbedaan  yang  tidak signifikan  antara  kontrol  normal  dan  kontrol dosis  300,  400  dan  500  mg/kg  BB  dan berbeda signifikan dengan  kontrol negatif. Hal ini  menunjukan  bahwa  pada  hari  ke-35  terjadi penurunan pada kadar ureum pada tikus putih jantan. Berdasarkan hasil pengukuran hari ke- 35  (setelah  pemberian  ekstrak)  rerata  kadar ureum pada masing-masing kelompok perlakuan dosis (300, 400 dan 500 mg/kg BB) memberikan  efek  terhadap  kadar  ureum sehingga  dosis  yang  paling  efektif  adalah dosis  300  Mg/kg  BB  yang  merupakan  dosis terendah  dan  memiliki  efek  yang  paling
mendekati  dengan  nilai  kontrol  normal  dalam menurunkan kadar ureum.
Adanya  efek terhadap kadar kreatinin dan ureum  diduga  karena  efek  biologis  dari kandungan  senyawa  metabolit  sekunder  yang ada  dalam  kulit  buah  petai.  Mekanisme  kerja dari  metabolit  sekunder  terhadap  kadar kreatinin  dan  ureum  diduga  berdasarkan aktivitas  antioksidan.  Sesuai  dengan  hasil  uji fitokimia  ekstrak  etanol  kulit  buah  petai mengandung  senyawa  metabolit  sekunder yaitu  alkaloid,  flavonoid,  saponin,  dan  tannin. Flavonoid  merupakan  senyawa  pereduksi yang  baik,  mekanisme  antioksidan  dari flavonoid  adalah  mampu  menangkal  radikal bebas  ( ROS/Reactive  Oxygen  Species atau RNS/Reactive Nitrogen Species ) melalui transfer  elektron  serta  menghambat  reaksi peroksidasi,  mencegah  regenerasi  reactive oxygen  species,  dan  secara  tidak  langsung dapat  meningkatkan  aktivitas  antioksidan enzim.  Pencegahan  terbentuknya  reactive oxygen  species  oleh  flavonoid  dilakukan dengan  beberapa  cara  yaitu  menghambat kerja enzim xantin oksidase dan Nycotinamide Adenine  Dinucleotide  Phosphate (NAPDH) sehingga dapat mencegah reaksi redoks yang dapat  menghasilkan  radikal  bebas.  Flavonoid juga diketahui mampu bekerja secara langsung  terha dap  sel  β  pankreas,  dengan memicu  pengaktifan  kaskade  signal  Camp dalam  memperkuat  sekresi  insulin  yang disensitisasi oleh glukosa. Antioksidan diketahui  dapat  mencegah  kerusakan  sel  β pankreas  karena  memiliki  aktivitas  dengan cara  menangkap  atau  menetralkan  radikal bebas  terkait  dengan  gugus  OH  fenolik sehingga dapat memperbaiki keadaan jaringan  yang  rusak  dan  dapat  meningkatkan laju  filtrasi  glomerulus  pada  ginjal  untuk
mengeksresikan  kadar  kreatinin  dan  ureum (Khaira, 2010).

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian dan pembahasan  maka  dapat  disimpulkan  bahwa ekstrak  etanol  kulit  buah  petai  ( Parkia speciosa Hassk.) memiliki kandungan senyawa  metabolit  sekunder  yaitu  alkaloid, flavonoid,  saponin  dan  tannin.  Ekstrak  etanol kulit buah petai ( Parkia speciosa Hassk.) dosis 300  mg/kg  BB  merupakan  dosis  yang  efektif untuk menurunkan kadar kreatinin dan ureum.

## DAFTAR PUSTAKA
Amir,  N.,  Suprayitno,  E.,  Hardoko,  H.,  & Nursyam, H. (2015). Pengaruh Sipermetrin Pada Jambal Rotiterhadap Kadaru Reum dan Kreatinin Tikus Wistar (Rattus norvegicus). Jurnal IPTEKS Pemanfaatan  Sumberdaya  Perikanan ,
2 (3). https://doi.org/10.20956/jipsp.v2i3.81
DiPiro,  J.,  Wells,  B.,  Schwinghammer,  T.,  & DiPiro,  C.  (2015). Pharmacotherapy Handbook,  Ninth  Edition .  McGraw-Hill Education Companies, Inggris.
Fuadi,  A.  (2009). Pengaruh  Ekstrak  Etanol Daun Alpukat (Persea americana Mill.)
Terhadap  Kadar  Ureum  dan  Kreatin
Pada Tikus Putih Jantan yang Diinduksi Etilen Glikol. [Skripsi].
Institut Pertanian Bogor, Bogor.
Juliati, D. (2010). Efek Hepatoprotektif Jus Biji
Petai  Ditinjau  dari  Aktivitas  Alanin
Aminotranferase Plasma dan Peroksida  Lipid  pada  Tikus  Putih Jantan yang
Diinduksi
Karbon.Tetraklorida.
[Skripsi].
Universitas Indonesia, Jakarta.
Kemenkes.  (2018). Hasil  Riskesdas  2018 . Balitbangkes ,  Jakarta .  (diunduh  di http://www.depkes.go.id/resources/do wnload/infoterkini/materi_rakorpop_20 18/Hasil%20Riskesdas%202018.pdf pada tanggal 20 Agustus 2019).
Khaira,  K.  (2010).  Menangkal  Radikal  Bebas dengan  Anti-Oksidan. J.  Saintek , II : 183 –187.
Mahara, N. (2016). Hubungan Kadar Kreatinin Serum  dengan  Kadar  Gula  Darah Puasa  pada  Pasien  Diabetes  Melitus Tipe  2  Di  RSUD  dr.  Sayidman Kabupaten  Magetan [Skripsi].  UMS, Surakarta.
Puspitaningrum, L. S., Tjahjono, K., & Candra,
A. (2018). Pengaruh Pemberian
Ekstrak  Daun  Kelor  ( Moringa  oleifera ) Terhadap  Kadar  Ureum  dan  Kreatinin Serum  Tikus  Wistar  yang  Diinduksi Formalin. Diponegoro  Medical  Journal (Jurnal  Kedokteran  Diponegoro) , 7 (2):
777 –786.
Tesch,  G.  H.,  &  Allen,  T.  J.  (2007).  Rodent Models of Streptozotocin-Induced Diabetic Nephropathy. Nephrology (Carlton, Vic.) , 12 (3): 261 –266.
https://doi.org/10.1111/j.1440- 1797.2007.00796.x
Verawaty,  V.,  &  Novel,  D.  C.  (2018).  Efek Ekstrak  Etanol  Kulit  Petai  ( Parkia speciosa Hassk) Terhadap Penurunan Kadar  Glukosa  Darah  Mencit  Jantan.
Jurnal Katalisator , 3 (1): 1 –6. https://doi.org/10.22216/jk.v3i1.2178
Yuniasih,  N.  (2016). Efektivitas  Ekstrak Metanol Alga Cokelat Terhadap Kadar Malondialdehid  dan  Kreatin  Serum Sebagai Preverensi Gangguan Fungsi Ginjal .  [Skripsi].  Universitas  Jember, Jember.