Jurnal Pharmascience, Vol. 10, No.2, Oktober 2023, hal: 288-295 ISSN-Print. 2355 – 5386 ISSN-Online. 2460-9560 https://ppjp.ulm.ac.id/journal/index.php/pharmascience Research Article

## Uji Aktivitas Antioksidan pada Hidrosol Sereh Wangi (Cymbopogon nardus)
Ester Dwi Antari*, Umi Nafisah , Wanda Eka Rosita Dewi, Khoiril Muna
Program Studi D3 Farmasi, Politeknik Indonusa Surakarta, Jawa Tengah, Indonesia, Email: esterdwiantari@poltekindonusa.ac.id

## ABSTRAK
Antioksidan adalah senyawa yang melindungi sel-sel dalam tubuh dari kerusakan akibat  radikal  bebas.  Antioksidan  biasanya  merupakan  bagian  dari  flavonoid  pada tumbuhan. Tanaman sereh wangi, menurut penelitian sebelumnya dinyatakan memiliki aktivitas  antioksidan.  Metode  penyulingan  uap  biasanya  digunakan  untuk  membuat minyak atsiri dan produk sampingan, seperti hidrosol, yang akan dihasilkan dari hasil destilasi  uap.  Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  aktivitas  antioksidan hidrosol sereh wangi terhadap radikal  bebas DPPH. Hidrosol di peroleh dari destilasi uap batang sereh wangi. Pengukuran aktivitas antioksidan menggunakan metode DPPH dengan  menggunakan  panjang  gelombang  maksimum  513,3  nm.  Berdasarkan  hasil perhitungan  nilai  aktivitas  antioksidan,  diperoleh  aktivitas  antioksidan  menggunakan metode  DPPH  dari  hidrosol  sereh  wangi  menunjukkan  hasil  rata-rata  nilai  IC 50 yaitu 9,322  ±  1,63.  Nilai  ini  menunjukkan  hidrosol  sereh  wangi  tergolong  antioksidan  yang sangat kuat (IC 50 <50 ppm).
Kata Kunci: Antioksidan, Sereh Wangi, Hidrosol, DPPH, IC 50

## ABSTRACT
Antioxidants are compounds that protect cells in the body from damage caused by free  radicals.  Antioxidants  are  usually  part  of  the  flavonoids  in  plants.  Citronella  plants, according to previous research, have antioxidant activity. The steam distillation method is usually  used  to  prepare  essential  oils  and  by-products,  such  as  hydrosols,  which  are produced  by  steam  distillation.  This  study  aimed  to  determine  the  antioxidant  activity  of citronella  hydrosol  against  DPPH  free  radicals.  Hydrosol  is  obtained  from  the  steam distillation of citronella stems. Measurement of antioxidant activity using the DPPH method using a maximum wavelength of 513.3 nm. Based on the results of calculating the value of antioxidant activity, the antioxidant activity of DPPH citronella hydrosol obtained showed an  average  IC 50 value  of  9.322  ±  1.63.  This  value  indicates  that  citronella  hydrosol  is classified as a very strong antioxidant (IC 50 <50 ppm).
Keywords: Antioxidant, Lemongrass, Hydrosol, DPPH, IC 50

## I. PENDAHULUAN
Senyawa antioksidan semakin berkembang  pemanfaatannya  di  bidang Kesehatan.    Secara  tradisional  sereh  telah diakui untuk mengobati sakit perut, radang usus  besar,  maag,  diare,  obat  kumur,  dan sakit  tenggorokan.  Sereh  wangi  adalah salah satu contoh tanaman yang mengandung antioksidan (Febrianto
Ramadhan et al., 2022).
Peran  antioksidan  adalah  untuk menetralkan  radikal  bebas  dalam  sel biologis, serta radikal bebas yang merugikan organisme hidup. Peran khusus dalam  menetralkan  efek  stres  oksidatif terkait  dengan  keberadaan  radikal  bebas dimainkan  oleh  enzim  yang  disebut superoksida  dismutase (SOD).  Ini  adalah
metalloenzyme dengan organisasi struktural subunit,  menjadi  pengatur  utama  proses oksidasi  dalam  sel  biologis.  Enzim  ini mengkatalisis  reaksi  rekombinasi  radikal oksigen (Munteanu & Apetrei, 2021).
Berdasarkan penelitian sebelumnya meneliti  minyak  atisiri  sereh  wangi  yang diuji  aktivitas  antioksidan  dengan  metode DPPH  memberikan  hasil  IC 50 sebesar  3,8 ppm  dengan  intensitas  antioksidan  sangat kuat.  Penelitian  serupa  yang  dilakukan sebelumnya  meneliti  minyak  atsiri  sereh wangi  mengandung  geraniol  dan  elemol yang  merupakan  kelompok  alkohol  yang telah dilaporkan potensinya sebagai antioksidan (Rastuti et al. , 2020).
Senyawa atau molekul yang memiliki  satu  atau  lebih  elektron  tidak berpasangan  di  orbit  terluarnya  dikenal sebagai  radikal  bebas.  Senyawa  tersebut sangat  reaktif  dalam  menyerang  dan mengikat  elektron  pada  molekul  di sekelilingnya,  karena  senyawa  radikal bebas  memiliki  elektron  yang  tidak berpasangan. Kerusakan pada struktur sel, struktur  molekul  yang berubah  yang  tidak mampu  dikenali  oleh  sistem  kekebalan tubuh  merupakan  efek  dari  radikal  bebas. Berbagai  penyakit,  termasuk  kanker  dan penyakit  degeneratif  dapat  dipicu  oleh radikal  bebas.  Oleh  karena  itu,  tubuh  kita membutuhkan zat penting, seperti antioksidan, bahwa senyawa tersebut dapat melindungi  tubuh  dari  radikal  bebas  dan mengurangi  efek  bahayanya.  Senyawa yang  dikenal  sebagai  antioksidan  dapat mengikat  radikal  bebas  dan  molekul  yang snagat  reaktif  yang  sangat  reaktif  untuk mencegah rekasi oksidasi, hal ini juga dapat menghentikan  kerusakan  sel  (Amin et  al.,
2015).
Proses  pembuatan  minyak  atsiri dapat dilakukan dengan proses
penyulingan/destilasi yang biasanya
dilakukan dengan proses penyulingan uap.
Dua  produk  yang  dihasilkan  melalui penyulingan  uap,  yaitu  produk  utamanya adalah minyak atsiri dan produk sampingannya  adalah  hidrosol.  Hidrosol adalah  jenis  emulsi  berair  yang  berisi
gabungan  minyak  essensial  dalam  larutan lengkap (homogen) (Siregar, 2020).
Hidrolat  yang  diproduksi  oleh produsen  minyak  atsiri  biasanya  tidak digunakan. Namun, intensitas hidrolat yang dihasilkan  dapat  melebihi  fraksi  minyak (produk utama). Selain itu, nilai kebutuhan oksigen  kimiawi  justru  meningkat  akibat terbuangnya hidrosol, yang justru menimbulkan masalah baru dalam lingkungan (Siregar, 2020).
Penelitian ini memiliki tujuan untuk menentukan  aktivitas  antioksidan  hidrosol sereh wangi terhadap radikal bebas DPPH berdasarkan nilai IC 50 .

## II. METODE

## A. Preparasi Sampel
Hidrosol sereh wangi diperoleh dari hasil  samping  proses  pembuatan  minyak atsiri  sereh  wangi.  Batang  sereh  wangi dipotong-potong  dengan  ukuran  ±  1,5  cm kemudian  ditimbang  sebanyak  200  gram. Potongan  sereh  wangi  dimasukkan  ke dalam labu alas bulat yang berukuran 1000 ml,  dalam  labu  alas  bulat  potongan  sereh wangi  ditambahkan  750  ml  atau  sampai semua simplisia terendam. Destilasi
dilakukan  pada  suhu  90°C  selama  120 menit terhitung sejak tetesan pertama. Pada akhir proses destilasi dilakukan pemisahan destilat dengan cara hasil destilasi dimasukkan  ke  dalam  almari  pendingin, minyak atisiri akan memadat dan hidrosol
tetap cair, kemudian hasil destilat disaring untuk  memisahkan  minyak  atisiri  dan hidrosol.

## B. Pembuatan Larutan Induk Hidrosol Sereh Wangi
Dalam labu ukur 10 mL dimasukkan  1  mL  hidrosol  sereh  wangi yang  dilarutkan  dalam  etanol  p.a  9  mL untuk  membuat  larutan  induk  100  ppm. Setelah  itu,  labu  ukur  5  mL  yang  berisi berbagai konsentrasi 15, 20, 25, 30, 35, dan 40  ppm  diencerkan  dengan  pelarut  etanol p.a hingga tanda batas untuk menghasilkan larutan induk 100 ppm.

## C. Pembuatan Larutan DPPH
Dibuat  larutan  DPPH  100  ppm dengan menimbang DPPH 0,01 g dimasukkan ke dalam labu ukur 100 ml dan berikutnya  dilarutkan  dengan  etanol  p.a sampai  tanda  batas.  Selanjutnya  diukur serapan panjang gelombang DPPH.
Jangkauan  panjang  gelombang  untuk pengukuran  dengan  metode  DPPH  yaitu 400 nm - 700 nm.

## D. Penentuan Operating Time
Tujuan dari Operating Time adalah untuk memastikan berapa lama waktu yang diperlukan  agar  radikal  bebas  DPPH larutan  uji  tereduksi  sempurna  setelah reaksi.  Saat  mengukur  radikal  DPPH dengan senyawa uji, tujuan pengukuran OT
adalah untuk mengurangi kesalahan pengukuran. Waktu dimana nilai absorbansi  mulai  stabil  atau  selisih  nilai absorbansi  mulai  berkurang  pada  setiap selang waktu digunakan untuk menghitung OT.  Nilai  absorbansi  yang  ditetapkan menunjukkan  bahwa  OT  untuk  larutan  uji adalah 105 menit.

## E. Uji Aktivitas Antioksidan
Hidrosol  yang  dilarutkan  dalam etanol  p.a  dan  dibuat  dalam  berbagai konsentrasi yaitu 15, 20, 25, 30, 35, dan 40 ppm  sebanyak  masing-masing  2  ml.  Ke dalam masing-masing larutan ditambahkan 4  ml  DPPH  10  ppm  dan  diinkubasi  pada ruangan  gelap  selama  105  menit  dan divortex  selama  3  menit.    Selanjutnya diukur  serapan  dengan  spektrofotometer UV-VIS  ( Genesys ® 10S)  pada  panjang gelombang  maksimum  DPPH  513,3  nm. Sebagai  blanko  digunakan  etanol  p.a.
Perhitungan  aktivitas  antioksidan  DPPH digunakan rumus sebagai berikut :
Aktivitas antioksidan (%) =
(𝐴 𝑏𝑙𝑎𝑛𝑘𝑜 − 𝐴 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙)
𝐴 𝑏𝑙𝑎𝑛𝑘𝑜
𝑥 100%
Keterangan :
A  blanko  =  absorbansi  radikal  DPPH  10 ppm
A  sampel  =  absorbansi  radikal  DPPH  10 ppm setelah diberi perlakuan sampel.
Nilai IC 50 ( Inhibition Concentration 50%). IC 50 digunakan  untuk  mengukur aktivitas  antioksidan.  Konsentrasi  suatu ekstrak yang mampu menghambat aktivitas radikal bebas sebesar 50% dikenal dengan nilai  IC 50. Menggunakan  serangkaian pengukuran berulang dan rumus persamaan regresi  linier,  nilai  IC 50 untuk  setiap konsentrasi sampel ditentukan.

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN
Hidrosol diperoleh dari hasil samping  proses  pembuatan  minyak  atsiri sereh  wangi  dengan  cara  destilasi  uap. Hasil destilasi dimasukkan ke dalam almari pendingin kemudian dilakukan penyaringan  selagi  dingin  karena  minyak atisiri  akan  memadat  pada  suhu  dingin, sehingga  hidrosol  akan  lolos  pada  saat penyaringan dan minyak atiri akan tertahan pada  penyaring.  Hidrosol  yang  diperoleh dilakukan pengukuran aktivitas antioksidan.
Aktivitas antioksidan dapat ditentukan  dengan  menggunakan  metode DPPH, kemampuan DPPH untuk menyerap atom  hidrogen  yang  disumbangkan  oleh antioksidan  merupakan  dasar  dari  operasi proses  DPPH.  Warna  DPPH  berubah  dari ungu  menjadi  kuning  sehubungan  dengan perluasan  penguatan  sel,  yaitu  ketika elektron  dalam  DPPH  bertemu  dengan hidrogen  antioksidan  (Haryoto et  al. ,
2019).
Sebelum mengukur aktivitas peredaman  radikal  bebas  DPPH,  dibuat
kurva  standar  untuk  menguji  linearitas sampel. Pengukuran aktivitas penghambatan  radikal  bebas  dilakukan menggunakan  spektrofotometer  UV-VIS pada panjang gelombang maksimum 513,3 nm untuk mendapatkan nilai serapan pada masing-masing konsentrasi.
Larutan DPPH berubah warna dari ungu  tua  menjadi  kuning  pucat  karena
adanya  aktivitas  antioksidan  pada  sampel (Molyneux, 2004). Larutan DPPH berubah menjadi  kuning  pucat  dalam  waktu  105 menit, dimana waktu ini ditetapkan sebagai operating time . Uji aktivitas penghambatan radikal  bebas  atau  uji  antioksidan  dengan menggunakan  metode  DPPH  yang  diukur pada panjang gelombang maksimum 513,3 nm  menunjukkan  bahwa  hidrosol  sereh wangi memiliki aktivitas antioksidan dapat dilihat pada Tabel I.

## Tabel I. Aktivitas Antioksidan Hidrosol Sereh Wangi
Konsentrasi Sampel (ppm) Absorbansi A1 % Inhibisi A2 % Inhibisi A3 % Inhibisi 15 0,357 56,67 0,382 54,30 0386 52,40 20 0,320 61,16 0,362 56,70 0,334 58,81 25 0,280 66,02 0,290 65,31 0,290 64,24 30 0,230 72,09 0,266 68,18 0,253 68,80 35 0,197 76,09 0,228 65,55 0,231 71,52 40 0,173 79 0,195 76,67 0,190 76,57
Keterangan :
A1 = Absorbansi replikasi pertama konsentrasi A2 = Absorbansi replikasi kedua konsentrasi
A3 = Absorbansi replikasi ketiga konsentrasi
Data persen inhibisi yang diperoleh untuk setiap perulangan diolah menggunakan  rumus  linier  y  =  bx  +  a, dimana  x  adalah  konsentrasi  dan y  adalah persen  inhibisi.  Rumus  regresi  linier  ini digunakan  untuk  menentukan  IC 50 .  Salah satu parameter yang menunjukkan
kemampuan suatu zat sebagai antiokasidan adalah  nilai  IC 50. Aktivitas  antioksidan menurun  Ketika  nilai  IC 50 lebih  tinggi,
sedangkan sebaliknya ketika nilai IC 50 lebih rendah.
Untuk mengklasifikasikan intensitas  dari  aktivitas  antioksidan  yaitu
apabila nilai IC50 kurang dari 50 ppm maka tergolong  memiliki  aktivitas  antioksidan sangat  kuat  (Molyneux,  2004).  Analisa regresi  dari  ketiga  replikasi  sampel menunjukkan nilai IC50 dapat dilihat pada
Tabel II.
Berdasarkan  hasil  perhitungan, diperoleh  aktivitas  antioksidan  DPPH hidrosol  sereh  wangi  menunjukkan  hasil rata-rata nilai IC50 yaitu 9,322 ± 1,63. Nilai ini  menunjukkan  hidrosol  sereh  wangi tergolong kedalam antioksidan yang sangat kuat dengan nilai IC 50 <50 ppm (Yuniarti et al. , 2020).
Tabel II. Nilai IC 50 Hidrosol Sereh Wangi
Sampel Nilai IC 50 Replikasi 1 7,572 Replikasi 2 9,597 Replikasi 3 10,797 Rata - rata 9,322 ± 1,63

## IV. KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian, maka dapat  disimpulkan  bahwa  hidrosol  sereh wangi  memiliki  nilai  aktivitas  antioksidan yang ditunjukkan dengan nilai IC 50 sebesar
9,322  ppm,  sehingga  digolongkan  sebagai antioksidan sangat kuat.

## KONFLIK KEPENTINGAN
Seluruh penulis menyatakan bahwa tidak  ada  konflik  kepentingan  dalam penelitian ini.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penelitian  ini  dapat  terselenggara atas bantuan dana penelitian dosen pemula tahun 2022 Dirjen Vokasi.

## DAFTAR PUSTAKA
Amin, A., Wunas, J., Merina Anin Sekolah
Tinggi Ilmu Farmasi Makassar Jalan
Perintis  Kemerdekaan  Km,  Y.,  &  - Makassar, D. (2015). UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL KLIKA FALOAK (Sterculia quadrifida R.Br) DENGAN  METODE  DPPH  (2,2-
diphenyl-1-picrylhydrazyl). In Jurnal Fitofarmaka Indonesia (Vol. 2, Issue
2).
https://doi.org/https://doi.org/10.330 96/jffi.v2i2.180 Analda  Souhoka,  F.,  Hattu,  N.,  & Huliselan, M. (2019). UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK METANOL BIJI KESUMBA KELING (Bixa orellana L)  Antioxidant  Activity  Test  Of
Methanol  Extract  Of  Kesumba Keling (Bixa orellana L) Seeds. In J. Chem.  Res (Vol.  7,  Issue  1). https://doi.org/https://doi.org/10.305 98//ijcr.2019.7-fas
Andarina,  R.,  &  Djauhari,  T.  (2017). Antioksidan dalam dermatologi.
JKK , 4 (1), 39–48. Andini, D., Mulangsri, K., Budiarti, A., & Saputri, N. (2017). Aktivitas Antioksidan  Fraksi  Dietileter  Buah Mangga Arumanis (Mangifera indica L.)  dengan  Metode  DPPH. Jurnal Pharmascience , 04 (01), 85–93. http://jps.unlam.ac.id/
Bota, W., Martosupono, M., &
Rondonuwu,  F.  S.  (2015).  Potensi Senyawa  Minyak  Sereh  Wangi (Citronella  Oil)  Dari  Tumbuhan (Cymbopogon  Nardus  L.)  Sebagai Agen  Antibakteri.  Jurnal  FTUMJ, 1(1), 1–8.
Erminawati,  Naufalin,  R.,  Sidik,  W.,  & Rahman,  F.  A.  (2021).  The  role  of pre-treatment in enhancing yield and antioxidant  activity  of  lemongrass
(Cymbopogun  citratus)  essential  oil. IOP  Conference  Series:  Earth  and Environmental Science, 653(1). https://doi.org/10.1088/1755-
1315/653/1/012131
Febrianto Ramadhan, E.,  Fachriyah, E., & Dewi  Kusrini,  dan.  (2022).  Original
Article  Potensi  Antioksidan  Ekstrak Etanol Residu Destilasi Sereh Wangi (Cymbopogon nardus). In Greensphere: J. Environ. Chem (Vol.
2, Issue 1).
Haryoto,  H.,  Frista,  A.,  Achmad  Yani
Tromol  Pos,  J.,  Kartasura,  P.,
Tengah, J., & Sains dan Kesehatan, J. (2019). Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol, Fraksi Polar, Semipolar  dan  Non  Polar  dari  Daun
Mangrove  Kacangan  (Rhizophora apiculata) dengan Metode DPPH dan FRAP. J. Sains Kes. 2019 , 2 (2), 131– 138.
https://doi.org/10.25026/jsk.v2i2.129
Khasanah, L. U., Utami, R., Kawiji, K., &
Manuhara, G. J. (2021).
Characterization  Of  Cinnamon  Bark (Cinnamomum burmannii) Hydrosol
In Variations Opening Valve Of Pilot Plan-Scale Steam Distillation. Jurnal Teknologi Hasil Pertanian, 14(1), 20. https://doi.org/10.20961/jthp.v14i1.3
8064
Maharani, A. I., Riskierdi, F., Febriani, I., Kurnia, K. A., Rahman, N. A., Ilahi, N. F., &  Farma, S. A. (2021). Peran Antioksidan  Alami  Berbahan  Dasar Pangan Lokal dalam Mencegah Efek Radikal  Bebas.  Prosiding  Seminar Nasional Bio, 1(2), 390–399.
Munteanu,  I.  G.,  &  Apetrei,  C.  (2021). Analytical Methods Used in Determining Antioxidant Activity: A
Review. International  Journal  of Molecular  Sciences , 22 (7),  3380. https://doi.org/10.3390/ijms2207338 0 Molyneux, P. (2004). The use of the stable free  radical  diphenylpicryl-hydrazyl (DPPH)  for  estimating  antioxidant activity .
Prasetyo, E., Kiromah, N. Z. W., & Rahayu,
T. P. (2021). Uji Aktivitas Antioksidan  Menggunakan  Metode DPPH  (2,2-difenil-1-pikrilhidrazil) Terhadap Ekstrak Etanol Kulit Buah Durian  (Durio  zibethinnus  L.)  dari Desa Alasmalang Kabupaten Banyumas.  Jurnal  Pharmascience, 8(1), 75. https://doi.org/10.20527/jps.v8i1.920 0
Rachmatillah, A., Hasni, D., & Aisyah, Y. (2021).  Uji  Aktivitas  Antioksidan Minyak  Sereh  Wangi  (Cymbopogon nardus  (L.)  Rendle),  Minyak  Nilam (Pogostemon  cablin  Benth.)  dan Minyak  Pala  (Myristica  fragrans Houtt.) (Antioxidant Activity Test of Citronella  Oil  (Cymbopogon  nardus
(L.) Rendle), Patchouli Oil (Pogostemon  cablin  Benth.)  and Nutmeg  Oil  (Myristica  fragrans Houtt.)). JFP Jurnal Ilmiah Mahasiswa Pertanian , 6 (4). www.jim.unsyiah.ac.id/JFP
Rastuti,  U.,  Diastuti,  H.,  Chasani,  M., Purwati,  &  Hidayatullah,  R.  (2020). Chemical composition and antioxidant  activities  of  citronella essential oil Cymbopogon nardus (L.) rendle  fractions. AIP  Conference
Proceedings , 2237 .
https://doi.org/10.1063/5.0005685 Setiawan, T. (2018). Rancang bangun alat destilasi uap bioetanol dengan bahan baku batang pisang. 04(02), 119–128.
Siddeeg,  A.,  AlKehayez,  N.  M.,  Abu- Hiamed,  H.  A.,  Al-Sanea,  E.  A.,  & AL-Farga,  A.  M.  (2021).  Mode  of
action and determination of
antioxidant  activity  in  the  dietary sources: An overview. Saudi Journal of Biological Sciences, 28(3), 1633– 1644.
https://doi.org/10.1016/j.sjbs.2020.1 1.064 Siregar, I. P. (2020). STUDI PEMANFAATAN WATER AROMATIC/HIDROSOL SEREH WANGI DALAM

## PEMBUATAN
KOSMETIK FACE TONER .
Souhoka, F. A., Hattu, N., & Huliselan, M. (2019).  Uji  Aktivitas  Antioksidan Ekstrak  Metanol  Biji  Kesumba
Keling  (Bixa  orellana  L).  Indo.  J. Chem. Res., 7(1), 25–31. https://doi.org/10.30598//ijcr.2019.7- fas Yuniarti,  R.,  Nadia,  S.,  Alamanda,  A.,
Zubir,  M.,  Syahputra,  R.  A.,  & Nizam,  M.  (2020).  Characterization,
Phytochemical Screenings and Antioxidant Activity Test of Kratom Leaf  Ethanol  Extract  (Mitragyna speciosa Korth) Using DPPH Method. Journal of Physics: Conference Series , 1462 (1). https://doi.org/10.1088/1742- 6596/1462/1/012026.