 2022. Fitriani et al . Open access under CC BY–SA license, doi: 10.20473/mkh.v33i3.2022.208-213 Received:25-05-2022, Accepted:18-06-2022, Published online:08-09-2022
Available at https://e-journal.unair.ac.id/MKH/index
Fitriani et al. MKH (2022).208-213 DOI: 10.20473/mkh.v33i3.2022.208-213
Hubungan Kadar Antioksidan Superoxide Dismutase (SOD) dengan Abnormalitas Dalam Tingkat Pengencer dan Lama Simpan Berbeda Semen Mentog ( Muscovy Duck ) yang Disimpan pada  Suhu Dingin
The correlation between antioxidant levels of superoxide dimustase (SOD) with the abnormalities in different diluent levels and shelf life of Muscovy Duck semen stored at cold temperatures
Fitriani 1* , Erna Yuniati 2 , M. Irwan Zakir 1
1 Fakultas Pertanian Universitas Islam Kalimantan MAB Jl.Adyaksa No.2 Kayutangi Banjarmasin
2 Fakultas Peternakan UniversitasNegeri PGRI Kediri Jl.KH.Ahmad Dahlan No.76 Kediri
*Email: ipit.peternakan@gmail.com

## ABSTRAK
Tujuan penelitian ini adalah  mengetahui  pengaruh  penambahan kuning telur sebagai  cryoprotectant  dalam tingkat pengencer dan lama simpan pada semen mentog yang disimpan pada suhu dingin.Mentog yang digunakan dalam  penelitian ini adalah 4 ekor ternak entog  jantan berumur sekitar 1,5 –  2 tahun dengan berat badan 3 –  3,5 kg.   Penampungan semen mentog dilakukan pagi dengan frekuensi penampungan 2x/minggu, Metode penelitian yang digunakan metode eksperimental dengan Split Plot pola petak terbagi.   Faktor pertama sebagai Petak Utama adalah tingkat pengencer yaitu tanpa pengencer (A0); 5 X(A1);10X(A2) dan 15X (A3),faktor kedua sebagai Anak Petak adalah lama simpan  0(B0); 60 (B1); 120  (B2) dan 180 menit yang disimpan  pada  suhu dingin  4ºC.Tiga kelompok  kandang  mentog sebagai ulanganyang diambil semennya.   Hasil yang diperoleh melalui analisis ragam menunjukkan  terdapat  pengaruhtetapi  tidak  nyata  baik  SOD maupun abnormalitas(P<0.05).  Kesimpulan  adalahtingkat  pengenceran dan lama simpan beda berpengaruh  tetapi tidak nyata (P < 0,05).   Kuning telur dalam pengenceran semen  mentog sebagai cryoprotectant dapat mempertahankan semen mentog.
Kata Kunci: Entog, semen, antioksidan, cryoprotectant , SOD
 2022. Fitriani et al . Open access under CC BY–SA license, doi: 10.20473/mkh.v33i3.2022.208-213 Received:25-05-2022, Accepted:18-06-2022, Published online:08-09-2022
Available at https://e-journal.unair.ac.id/MKH/index
Fitriani et al. MKH (2022).208-213 DOI: 10.20473/mkh.v33i3.2022.208-213

## ABSTRACT
The purpose of this study was to determine the effect of adding egg yolk as a cryoprotectant in the diluent level and the shelf-life of Muscovy duck semen stored at cold temperatures. Muscovy duck used in this study were 4 male Muscovy duck aged 1.5 – 2 years with a body weight of 3 – 3.5 kg. Muscovy duck semen collection is carried out in the morning with a frequency of 2x/week. The research method used is an experimental method with a split plot with pattern. The first factor as the Main Plot is the level of diluent, namely no diluent (A0); 5 X(A1);10X(A2) and 15X (A3), the second factor as subplot is the shelf life 0(B0); 60 (B1); 120 (B2) and 180 minutes stored at 4ºC cold. Three groups of Muscovy duck cages were used as replicates for the semen. The results obtained through analysis of variance showed that there was an effectbut not significant effect on both SOD and abnormalities (P < 0.05). The Conclusion is that the level of dilution and storage time were different but not significant (P < 0.05). Egg yolk in  Muscovy  duck  semen dilution as a cryoprotectant can maintain Muscovy  duck semen.
Keywords: Muscovy Duck, Semen, antioxidant, cryoprotectant, SOD

## PENDAHULUAN
SOD ( Superoxide Dismutase)
merupakan enzim sebagai perlindungan dalam sel tubuh terhadap serangan radikal bebas berfungsi mengkatalisis perubahan anion superoksida (metabolik toksik dari reaksi biologi normal yang mengurangi oksigen) menjadi oksigen dan hidrogen peroksida.  Radikal bebas merupakan hasil metabolisme oksigen yang normal di dalam sel sebagian besar oksigen (95%) dimetabolisme sempurna di dalam sel secara aerob,  sedangkan sisanya tidak mengalami metabolisme sempurna dan menghasilkan semireduced oksigen spiciesreactive oxygent species atau radikal bebas. Kemampuan
organisme aerob bertahan terhadap radikal bebas ditentukan oleh adanya pertahanan organisme tersebut terhadap radikal bebas (Dandaker, Nadkani and  Punckar,2002).
Pada proses penyimpanan semen masalah yang sering timbul adalah rusaknya membran plasma semen akibat terbentuknya perioksidasiPeroksidasi lipida. Keadaan ini terjadi karena membran semen banyak mengandung asam lemak tak jenuh yang sangat rentan terhadap kerusakan perioksidasiperoksidasi  (Maxwell dan Waston,   1996).  Menurut Alvarez dan Storey 1982 dalam Feradis, (2001) perioksidasiperoksidasi  lipida terjadi pada semen yang disimpan lama dan
 2022. Fitriani et al . Open access under CC BY–SA license, doi: 10.20473/mkh.v33i3.2022.208-213 Received:25-05-2022, Accepted:18-06-2022, Published online:08-09-2022
Available at https://e-journal.unair.ac.id/MKH/index
Fitriani et al. MKH (2022).208-213 DOI: 10.20473/mkh.v33i3.2022.208-213
dapat menurunkan daya tahan sehingga mempengaruhi pengawetan semen untuk inseminasi.    Kerusakan semen karena cold shock dapat dikurangi apabila semen dicampur dengan suatu bahan pelindung atau pengencer sebelum  didinginkan 5°C (Toelihere,1993).   Penggunaan kuning telur dalam pengenceran  sebagai tambahan dalam semen segar mentog sebagai cryoprotectant dalam pengenceran semennya. Dengan adanya penambahan kuning telur dalam semen dapat mengikat lemak yang tidak jenuh menjadi normal sebelum diinseminasikan selama penyimpanan
Khasiat kuning telur terletak pada lipoprotein dan lecithin yang bekerja mempertahankan dan melindungi integritas selubung lipoprotein dari sel spermatozoa (Blackshaw and Salisbury dalam Toelihere, 1993).  Penggunaan tingkat pengenceran pengenceran 5X memberikan angka fertilitas dan daya tetas tertinggi,  bisa  dikombinasikan dengan dosis 0.2 atau 0.3 ml, dimana 5X dengan dosis 0.2 ml memberikan angka fertilitas  81.5%,  sedangkan 5X dengan dosis 0.3 ml memberikan  daya tetas 90.48% (Fitriani, 2011).

## METODE PENELITIAN
Penelitian dilaksanakan Laboratorium lapang di Simpang Candipanggung,  di Laboratorium FAAL UB Malang untuk mengetahui kualitas semen mentog.   Mentog yang
digunakan dalam  penelitian ini adalah 4 ekor ternak entog  jantan berumur sekitar 1,5 –  2 tahun dengan berat badan 3 – 3,5 kg. Penampungan semen entog dilakukan pagi haridengan frekuensi penampungan 2x  dalam seminggu.
Aktivitas SOD diukur dengan metode spektrofotometer,Deteksi anion superoksida melalui sitokrom c menghasilkan suatu metode yang didasarkan pada perubahan warna menjadi ungu.    Metode NBT didasarkan pada perubahan warna biru formazan dengan panjang gelombang maksimum 560 nm.
Pengamatan abnormalitas perwarnaan eosin negrosin dibawah mikroskop  dengan pembesaran 400 Kandang individu yang terbuat dari kawat  dengan  ukuran  60X60X80  cm. Mentog diadaptasikan dengan lingkungan selama empat sampai enam minggu,  pakan yang diberikan yaitu campuran  dengan  dedak dan kosentrat  tepung itik petelur (144) Pokphand  yang terdiri dari:  kadar air max 12.0%,  protein max 37.0 –  39.0%, lemak min 2.0%,  serat max 6.0%,  abu max 35.0%,  calsium kalsium min 12.0% dan phosphorfosfor min 1.20%,  dengan perbandingan (4:1) dan pemberiannya dicampur sedikit air diaduk sampai rata dan diberikan  pagi dan siang hari. Metode penelitian yang digunakan adalah  metode eksperimental dengan Split Plot pola petak terbagi. Faktor pertama sebagai Petak Utama adalah tingkat pengencer yaitu tanpa pengencer  (A0);  5 X(A1);10X(A2)
 2022. Fitriani et al . Open access under CC BY–SA license, doi: 10.20473/mkh.v33i3.2022.208-213 Received:25-05-2022, Accepted:18-06-2022, Published online:08-09-2022
Available at https://e-journal.unair.ac.id/MKH/index
Fitriani et al. MKH (2022).208-213 DOI: 10.20473/mkh.v33i3.2022.208-213
dan15X  (A3),  faktor kedua sebagai Anak Petak adalah lama simpan yaitu 0(B0);  60  (B1);  120(B2) dan 180 menit yang disimpan  pada  suhu 4º C.  Tiga kandang mentog sebagai ulangan yang diambil semennya.
Apabila hasil yang diperoleh melalui analisis ragam menunjukkan adanya pengaruh perbedaan yang nyata antar perlakuan (0,05<P<0,01),  maka diuji
lebih lanjut uji BNJbertujuan untuk menentukan perlakuan -  perlakuan mana yang berbeda dengan yang lain (Stell dan Torrie,  1990).

## HASIL DAN PEMBAHASAAN
Hasil perlakuan percobaan semen mentog  setelah penampungan tertera pada rataan tabel 1.
Tabel 1 . Rataan hasil SODdan SD semen mentog  pada tingkat pengencer dan lama simpan beda disimpan di suhu dingin Tingkat Pengencer (X) Rataan ±SD Lama simpan (menit) Rataan ±SD 0 65.22  ±  1.24 0 63.23 ±  2.38 5 58.89 ±  2.74 60 56.98 ±  10.04 10 58.38  ±  3.16 120 57.24  ± 4.71 15 54.57 ±  8.79 180 59.61 ± 3.37 Analisis ragam ( P < 0,05)
berpengaruh tetapi tidak nyata,  di tingkat pengencer 58,89 –  54,57%  dan lama simpan 56,98 –  59,61%.
Penambahan kuning telur dalam pengenceran yang disimpan pada suhu dinginmasihdapat mempertahankan aktivitas SOD adanya endapan  warna unggu muda Superoxide Dismutase
(SOD) sebagai enzim antioksidan terpenting yang sudah terdapat dalam sel sebagai pertahanan dimana bertanggung jawab terhadap terjadinya
kerusakan akibat radikal bebas seperti radikal reactive superoxide.  Reactive Superoxide merupakan radikal superoxide atau anion yang diproduksi ketika oksigen kehilangan  satu elektronnya Superoxide  Dismutase/ SOD bertanggung jawab untuk mengkatalisir perubahan dari superoxide menjadi elemen oksigen dan hydrogen peroxide .
Transformasi ini disebut dismutase dan bergantung dari nama enzimnya (Kieler,  2006).
 2022. Fitriani et al . Open access under CC BY–SA license, doi: 10.20473/mkh.v33i3.2022.208-213 Received:25-05-2022, Accepted:18-06-2022, Published online:08-09-2022
Available at https://e-journal.unair.ac.id/MKH/index
Fitriani et al. MKH (2022).208-213 DOI: 10.20473/mkh.v33i3.2022.208-213
Tabel 2. Hasil rataan abnormalitas semen mentog yang disimpan pada suhu dingin
Tingkat Pengencer (X) Rataan ±SD Lama simpan (menit) Rataan ±SD 0 6.67  ±  1.71 0 7.22  ±  1.89 5 6.81  ±  1.77 60 6.81  ±  1.31 10 8.47  ±  1.71 120 6.81  ±  1.71 15 6.39  ±  1.31 180 7.50  ±  1.60 Analisis ragam berpengaruh tetapi tidak nyata (P < 0,05),  dimana terlihat di tingkat pengencer 6,39 – 8,47 % dan lama simpannya berkisar 6,81 – 7,50 % kemungkinan banyaknya tambahan pengenceran sebagai medianya dan lamanya penyimpanan (metabolism terurai) akibat kemampuan mempertahankan kualitas dari kerusakan semen tidak dapat dihindarkan.
Ini sesuai dengan pendapat Susilawati (2000) bahwa fungsi membran adalah sebagai pelindung sel.Kerusakan membran semen mengakibatkan terganggunya proses metabolisme intraseluler, sehingga semen akan lemah dan bahkan dapat mengakibatkan kematian semen, adanya kuning telur dalam pengenceran dapat meningkatkan persentase hidup dan dapat dipertahankan karena angka persentase abnormalitas masih dibawah 10%.   Ini sesuai pendapat Toelihere (1993), persentase abnormalitas spermatozoa berkisar antara 5 sampai 20%.
Diduga antioksidan endogen dalam spermatozoa tidak mencukupi sebagai
makanannya mengakibatkan spermatozoa untuk melawan radikal bebas tidak dapat bergerak pada suhu dingin lebih cepat adanya oksigen yang reaktif (tanpa adanya hambatan).Hal ini terlihatIniterdapat  semen  mati  yang ditandai penyerapan warna eosin negrosin.
Sedangkan pada suhu terhambatnya gerakan disebabkan banyaknya pasokan media pengenceran tinggi yang menyebabkan keseimbangan semen dalam media terhambat gerakannya sendiri mengakibatkan semen lebih cepat mati, sesuai pernyataan Toelihere (1993) abnormalitas pada semen ayam dan kalkun adalah spermatozoa d spermatozoa dengan ekor yang melingkar,  patah antara ekor dan kepala dan persentase ejakulat abnormalitas berkisar 5 sampai 20 persen.
Abnormalitas  merupakan  salah satu  indikator  dalam menentukan kualitas spermatozoa, karena struktur sel yang abnormal  dapat menyebabkan  gangguan  dan hambatan pada  saat  fertilisasi,  lebih
 2022. Fitriani et al . Open access under CC BY–SA license, doi: 10.20473/mkh.v33i3.2022.208-213 Received:25-05-2022, Accepted:18-06-2022, Published online:08-09-2022
Available at https://e-journal.unair.ac.id/MKH/index
Fitriani et al. MKH (2022).208-213 DOI: 10.20473/mkh.v33i3.2022.208-213
jauh  menyebabkan  rendahnya angka implantasi  maupun  kebuntingan. Selain pengelompokan abnormalitas primer dan sekunder, saat ini pengelompokan  abnormalitas  dilihat berdasarkan  akibat yang ditimbulkannya  yaitu  abnormalitas mayor  dan abnormalitas  minor (Ihsan,
2008).

## KESIMPULAN
Tingkat pengenceran dan lama simpan  yang berbeda berpengaruh tetapi tidak nyata (P < 0,05). Kuning telur dalam pengenceransemen  mentog sebagai cryoprotectant dapat mempertahankan semen mentog.

## DAFTAR PUSTAKA
Bebas, W.  2002. Pengaruh Lama Penyimpanan Semen Ayam Hutan Hijau (Gallus varius) pada Suhu 4 0 C Terhadap Daya Hidup Spermatozoa dan Fertlitas Telur Ayam Kampung (Gallus domesticus) .
Dorota, S.  dan M,  Kurpisz.  2004. Reactive Oxygen Species and Sperm Cells. Jounal Reproduction Biology and Endocrinology,  March 2: 1-7 Fitriani, 2011. Tingkat Pengenceran dan dosis  Semen Entog terhadap Fertilitas Telur Hasil Persilangan Entog dengan Itik Melalui Teknologi IB . Veterinaria medika.vol 4,no 3.Unair.Surabaya. Fitriani, 2009. Kajian Penambahan Alfa Tokoferol dengan Lama Penyimpanan
dan Suhu Berbeda terhadap Kualitas Semen Entog . Disertasi  UB.Malang. Ihsan,  M.   2008. Upaya Peningkatan Konsentrasi Spermatozoa Hasil Pemisahan dengan Sentrifugasi Gradien Densitas Percol pada Sapi Frisien Holstein (FH) .  Disertasi Program Pascasarjana Fakultas Pertanian. Universitas Brawijaya Malang. Kelso, K.A.A.,  Redpath,R.C.,  Nobie., dan Speake.  1997. Lipid and Antioxidant Changes in Spermatozon and Seminal Plasma Throughout the Reproductive Period of Bul l.  Jurnal or Reproduction and Fertility Susilawati, T.  2003.  Fisiologi Spermatozoa: Kapasitasi,  Reaksi Akrosom dan Fertilisasi .  Fakultas Peternakan Universitas Brawijaya.
Malang.
Susilawati, T.  2005. Fisiologi Spermatozoa dalam buku 2: Tehnologi Reproduksi.  Program Pascasarjana Universitas Brawijaya Steel, R.G.D.  dan J.H.Torrie.   1990. Prinsip dan Prosedur Statistika.  Suatu Pendekatan Biometrik .  Gramedia Pustaka Utama.  Jakarta.
Tai Liu, j.J and Tai, C,  1991 .    Mule Duck Production in Taiwan .  Artificial Insemination of Duck Food & Fertilizer Technology Center. Extension Bulletin no. 328: Pp 1 –6 Toelihere, M.R,  1993. Inseminasi Buatan pada Ternak .  Penerbit Angkasa Bandung.