Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Kombinasi Daun Kersen (Muntingia calabura L.) dan Daun Kelor (Moringa oleifera L) Dengan Metode DPPH (2,2-Diphenyl-1-Picrylhydrayl)
Antioxidant Activity Test of Ethanol Extract Combination of Kersen Leaf (Muntingia calabura L.) and Moringa Leaf (Moringa oleifera L) Using DPPH (2,2-Diphenyl-1-Picrylhydrazyl) Method
Galih Samodra 1* , Nurul Fitri Alfathani 1, Peppy Octaviani 1,2
1 Program Studi Farmasi, Fakultas Kesehatan, Universitas Harapan Bangsa, Jl. Raden Patah No.100, Purwokerto, Indonesia.
2 Program Studi Doktor Ilmu Farmasi, Fakultas Farmasi, Universitas Gadjah Mada, Jl. Sekip Utara, Yogyakarta, Indonesia.
*E-mail: galihsamodra@uhb.ac.id
Received: 27 April 2023; Accepted: 27 Juni 2023; Published: 30 Juni 2023

## Abstrak
Daun kersen dan daun kelor merupakan sumber antioksidan alami yang dapat mencegah kerusakan oksidatif tubuh  akibat radikal  bebas.  Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  aktivitas  antioksidan  dari bentuk  tunggal  dan  kombinasi  ekstrak  daun  kersen  dan  daun  kelor  dalam  melawan  radikal  bebas.  Uji aktivitas  antioksidan  pada  penelitian  ini  menggunakan  metode  DPPH  (2,2-difenil-1-pikrilhidrazil).  Hasil penelitian  menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  bentuk  tunggal  daun  kersen  dan  daun  kelor  mempunyai aktivitas antioksidan yang sangat kuat dengan nilai IC 50 8,04 ppm dan kuat 68,40 ppm. Kombinasi dengan perbandingan  2:1  memperoleh  nilai  IC 50 terendah,  yaitu  sebesar  6,35  ppm.  Dapat  disimpulkan  bahwa aktivitas antioksidan yang paling tinggi terdapat pada kombinasi ekstrak etanol daun kersen dan daun kelor perbandingan 2:1, dengan IC 50 lebih kecil dibandingkan dengan bentuk tunggalnya. Kata Kunci: Antioksidan, DPPH, kombinasi, daun kersen, daun kelor

## Abstract
Kersen leaves and Moringa leaves are natural sources of antioxidants that can prevent oxidative damage to the body due to free radicals. The purpose of this study was to determine the antioxidant activity of a single form  and a combination of cherry leaf extract  and Moringa leaf in fighting free radicals. The antioxidant activity test in this study used the DPPH method (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazil). The results showed that ethanol extracts of single forms of cherry leaves and Moringa leaves have very strong antioxidant activity with IC 50 values of 8.04 ppm and strong 68.40 ppm. The combination with a ratio of 2:1 obtained the lowest IC 50 value,  which  is  6.35  ppm.  It  can  be  concluded  that  the  highest  antioxidant  activity  is  found  in  the combination of ethanol extract of cherry leaves and Moringa leaves in a ratio of 2:1, with IC 50 smaller than the single form.
Keywords: Antioxidant, DPPH, combination,  kersen leaves, moringa leaves

## PENDAHULUAN
Daun  kersen  (DKS)  dan  daun  kelor (DKL)  merupakan  sumber  antioksidan  alami yang  dapat  mencegah  kerusakan  oksidatif tubuh  akibat  radikal  bebas  yang  diperlukan untuk  pertahanan  tubuh.  Tubuh  manusia memiliki  sedikit  sekali  antioksidan  yang tersedia  secara  alami,  sehingga  jika  jumlah
radikal  bebas  meningkat,  tubuh  memerlukan tambahan  antioksidan  eksogen  (Sayuti  & Yenrina, 2015).
Sumber  antioksidan  alami  yang  dapat menurunkan  kerusakan  oksidatif  diantaranya DKS  dan  DKL  (Khan  et  al.,  2015).  Hasil penelitian uji fitokimia pada DKS mempunyai kandungan  senyawa  diantaranya  yaitu, tanin,
saponin,  triterpenoid,  steroid  dan  flavonoid berupa  auron,  flavon  dan  flavonol  hal  ini menunjukkan  adanya  aktivitas  antioksidan (Arum  et  al.,  2013).  Sedangkan  hasil penelitian  dari  DKL  menyatakan  bahwa terdapat  kandungan  senyawa  flavonoid, tannin,  steroid,  saponin  dan  alkaloid  hal  ini menunjukkan bahwa adanya daya antioksidan (Tutik et al., 2018).
Ekstrak  DKS  mempunyai  nilai  IC 50 sebesar  6,82  ppm  (Sami  et  al.,  2017),    dan DKL  dengan  nilai  IC 50 sebesar  50,59  ppm (Riskianto et al., 2021), keduanya dinyatakan mempunyai  kemampuan  antioksidan  yang kuat.
Karena sifat
sinergisnya, menggabungkan dua atau lebih jenis tanaman yang mengandung antioksidan akan menghasilkan  potensi  yang  lebih  besar. (Septiawan et al., 2020).
Berdasarkan  temuan  ini,  peneliti  ingin menguji  aktivitas  antioksidan  dari  campuran ekstrak etanol DKS dan DKL, yang diprediksi dapat meningkatkan aktivitas antioksidan dan memberikan  nilai  IC 50 yang  lebih  rendah daripada ekstrak bentuk tunggalnya.

## METODE PENELITIAN Alat
Alat gelas (Pyrex),  spektrofotometer UV Visibel  (Biobase  BK-D590),  timbangan analitik  (Kenko  KK-Lab), rotary  evaporator (Biobase  RE100-Pro),  m oisture  balance (Ohaus), oven (Mammert), waterbath (Memert  WNB  22  Ring)  dan  blender (Cosmos).

## Bahan
Bahan  yang  diperlukan  meliputi  daun kersen dan daun kelor, etanol 96% (Brataco), aquades (Brataco), serbuk Mg (Merck), HCl 1 N, FeCl 3 5%, pereaksi dragendorf, vitamin C (Merck),  serbuk  DPPH  (2,2-  Diphenyl-1 Picrylhydrayl) (Sigma-Aldrich)..
Sampel
Sampel DKS yang dipilih yaitu daun yang tua didapatkan dari wilayah Desa Karangsari, Kabupaten Purbalingga, Jawa Tengah. Sedangkan DKL dipilih daun yang muda yang
didapatkan  dari  wilayah Desa  Blater, Kabupaten Purbalingga, Jawa Tengah.

## Jalannya Penelitian Determinasi
Determinasi  tanaman  dilaksanakan  di Fakultas  Biologi,  UNSOED.  Determinasi menegaskan bahwa tanaman yang digunakan adalah  benar  tanaman  kersen  ( Muntingia calabura L)  dan  kelor  ( Moringa  oleifera Lam).  Ekstraksi  dan  skrining  fitokimia dilaksanakan di Laboratorium Biologi Farmasi  serta  uji  aktivitas  antioksidan dilakukan  di  Laboratorium  Kimia  Farmasi Universitas Harapan Bangsa.

## Penyiapan Simplisia
Daun  kersen  diambil  bagian  daun  yang tua, sementara daun kelor diambil daun yang masih muda. Simplisia dibersihkan dengan air mengalir  dan  diangin-anginkan.  Daun  yang dikeringkan menggunakan oven pada suhu 40 o C dikecilkan ukurannya dan disimpan dalam wadah tertutup rapat.

## Pembuatan Ekstrak
Masing-masing  250  gram  bubuk  DKS dan  bubuk  DKL  direndam  selama  5  hari dengan  2,5 L etanol 96% (1:10), diaduk dan terlindungi  dari  paparan  cahaya.  Maserat selanjutnya diuapkan melalui rotary evaporator sampai  diperoleh  ekstrak  kental daun  kersen  dan daun  kelor.  Hasil perolehan rendemen dihitung dengan persamaan :
% Rendemen = Bobot ekstrak (g)
Bobot serbuk simplisia (g) x 100% ….(1)

## Penetapan Kadar Air
Kadar  air  ditetapkan  menggunakan  alat moisture yang diatur pada suhu 100 o C selama 15  menit.  Sebanyak  2  gram  ekstrak  yang ditempatkan secara merata di atas aluminium foil, dan kadar air ditetapkan dalam satuan % (Keswara et al., 2015).
Skrining Fitokimia a. Alkaloid
Sampel dalam tabung reaksi dan ditambahkan pereaksi Dragendroff sebanyak  5  tetes, sehingga  terjadi  endapan  berwarna  merah hingga jingga (Wimpy & Harningsih, 2017).

## b. Flavonoid
Sejumlah sampel ditambahkan air yang telah dipanaskan sebelumnya selama 5 menit,  dan disaring.  Sejumlah  0,05  mg  Bubuk  Mg ditambahkan  HCl  pekat  1  mL,  dikocok sampai  homogen.  Apabila  terjadi  warna jingga,  kuning  atau  merah,  maka  hasil  uji dinyatakan positif (Sami et al., 2017).

## c. Tanin
Sampel  ditambahkan  FeCl3  5%  sehingga terbentuk  warna  hitam  kehijauan  atau  hitam kebiruan  yang  menandakan  positif  tanin (Wimpy & Harningsih, 2017).
d. Saponin
Terbentuknya busa yang stabil selama 7 menit ketika ditambahkan 2 tetes HCl 1N (Sami et al., 2017).
Pembuatan Larutan Induk DPPH 100 ppm dan DPPH 40 ppm
DPPH  ditimbang  10  mg  ditambahkan etanol  96%  pada  labu  dicukupkan  hingga tanda  batas  100  mL,  dihomogenkan  dan diperoleh konsentrasi 100 ppm. DPPH 40 ppm disiapkan  dengan  mengambil  40  mL  larutan DPPH 100 ppm yang ditambahkan etanol 96% sampai 100 mL.
Penentuan
Panjang
Gelombang

## Maksimum
Larutan DPPH 40 ppm yang telah dibuat, diambil  sebanyak  2  mL  dan  ditambahkan  2 mL  larutan  blanko  etanol  96%,  dikocok hingga tercampur. Larutan diukur serapannya dengan spektrofotometer UV-Vis pada panjang  gelombang  400-800  nm  (Rosaini  et al., 2019).
Pembuatan  Dan  Pengukuran  Larutan Blanko
Larutan  kerja  DPPH  40  ppm  diambil  3 mL,  etanol  96%  1,5  mL  dihomogenkan  dan diukur absorbansinya (Wimpy & Harningsih, 2017).

## Penentuan operating time
Sebanyak  1,5  mL  larutan  kontrol ditambahkan  larutan  3  mL  DPPH  40  ppm dihomogenkan dan dibaca absorbansi menggunakan panjang gelombang yang telah ditentukan  sebelumnya,  selama  120  menit hingga  didapatkan  absorbansi  yang  stabil
(Puspitasari & Ningsih, 2016). Dari pengujian operating  time menggunakan  DPPH  selama 120 menit menunjukkan bahwa serapan stabil pada  menit  ke  18  secara  maksimal  pada panjang  gelombang  517  nm,  pada  waktu tersebut  diperoleh  nilai  serapan  yang  relatif stabil.

## Uji Antioksidan Ekstrak Etanol Daun Kersen
Ekstrak  DKS  konsentrasi  200  ppm disiapkan  dengan  menambahkan  0,02  g ekstrak dengan etanol 96 %. Seri konsentrasi yang diujikan berturut-turut 2; 4; 6; 8; dan 10 ppm.  Setiap  konsentrasi  diambil  1,5  mL  dan dicampurkan  dengan  larutan  DPPH  40  ppm sebanyak 3 mL, diinkubasi di suhu ruang dan diukur absorbansinya pada 517 nm.

## Ekstrak Daun Kelor
Ekstrak DKL ditimbang sebanyak 0,02 g ditambahkan etanol 96% ke dalam labu ukur berukuran  100  mL  sampai  tanda  batas  dan dihomogenkan sampai menghasilkan konsentrasi 200 ppm, dan dibuat pengenceran dengan konsentrasi (10, 20, 40, dan 60 ppm) Sampel  disiapkan  sejumlah  1,5  mL  dan ditambahkan  3  mL  larutan  DPPH  40  ppm, campuran dihomogenkan dan diinkubasi pada suhu  ruang.  Larutan  sampel  dimasukkan  ke dalam kuvet dan diukur absorbansinya.

## Kombinasi Ekstrak DKS dan DKL
Kombinasi dibuat dalam larutan konsentrasi dengan perbandingan  (1:1), (1:2) dan (2:1), sehingga  didapatkan  konsentrasi  akhir  100 ppm ( Tabel 1). Masing-masing pengenceran dibuat  sebanyak  1,5  mL  dengan  variasi konsentrasi  (2,  4,  6,  8,  10,  dan  12  ppm). Larutan tersebut dicampurkan dengan 3 mL larutan  DPPH  konsentrasi  40  ppm,  dengan cara  yang  sama  larutan  dimasukkan  ke dalam  kuvet  dan  diukur  serapannya.  Hasil absorbansi  kemudian  dihitung  nilai  persen inhibisi dari masing-masing larutan (Septiawan et al., 2020).
% Inhibisi = A Blanko−A Sampel
A Blanko x100% …(2) Keterangan : A Blanko : Absorbansi tidak mengandung sampel A sampel : Absorbansi mengandung sampel

## Pengukuran Antioksidan Vitamin C
Sepuluh  (10)  mg  Vitamin  C  ditimbang dilarutkan  dengan  etanol  96%  sampai mendapatkan  100  ppm.  Larutan  dibuat pengenceran  100  ppm  sampai  didapatkan konsentrasi 2, 3, 4, 5 dan 6 ppm. Pengukuran serapan dipreparasi dengan etanol 96% seperti sampel.
Analisis Data Nilai  IC 50 ditentukan  dari  persamaan regresi linier dimana y=bx+a yang menggambarkan hubungan antara konsentrasi dengan  %  inhibisi.  Nilai  IC 50 dianalisis dengan ANOVA  (Analysis  of  Variance) dan terlebih  dahulu  dilakukan  uji  normalitas  dan homogenitas    dengan  menggunakan  uji Shapiro-Wilk dengan  kepercayaan  95%. Analisis  data  penelitian  digunakan  program SPSS versi 26.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pembuatan kedua ekstrak dengan metode maserasi yang mengandalkan proses penarikan senyawa aktif dengan pelarut yang sesuai.  Dengan  metode  maserasi  senyawa yang  aktif  diambil  tanpa  memerlukan pemanasan yang tinggi dan atau tanpa proses pemanasan  sama  sekali  (Chairunnisa  et  al., 2019).  Maserasi  memiliki  keunggulan  dalam memastikan keutuhan zat aktif yang diekstraksi  tanpa  terjadi  kerusakan,  serta dalam  proses  perendaman  ini  terdapat pemecahan pada dinding sel bersama dengan membran  sel  karena  terjadi  perbandingan
tekanan diantara bagian luar dan dalam sel, hal ini  disebabkan  karena  senyawa  yang  ada  di dalam sitoplasma tersebut memecah lalu larut di  dalam  penyari  organik  yang  dipakai (Chairunnisa et al., 2019).
Yang  menjadi  pertimbangan  adalah waktu  yang  digunakan  untuk  mengestrak cukup  lama,  tidak  dapat  dimanfaatkan  untuk bahan  yang  mengandung  bahan  padat contohnya  benzoin,  lilin  serta  tiraks,  cairan penyari yang dipakai lebih banyak (Hasrianti et al., 2016).
Rendemen  ekstrak  DKS  yang  diperoleh sebesar  13,15%,  dan  hasil  ini  tidak  berbeda dengan  penelitian  lain  yang  mendapatkan sebanyak  20,1%  (Vonna  et  al.,  2021). Sedangkan  rendemen  ekstrak  etanol  DKL yang  diperoleh  sebesar  12,09%,  dan  tidak berbeda signifikan dengan penelitian Tutik et al  (2018)  yang  mendapatkan  ekstrak  etanol DKL  sebesar  12,69%  (Tutik  et  al.,  2018). Menurut Farmakope Herbal Indonesia rendemen  dari  DKS  dan  DKL  memenuhi persyaratan  yaitu  tidak  kurang  dari  9,2% (Kemenkes RI, 2017).
Uji  kadar  air  dengan  menggunakan moisture  balance untuk  menetapkan  banyak air  yang  terkandung  dalam  ekstrak,  hal  ini bertujuan  untuk  menjaga  mutu  dan  kualitas dari  ekstrak  itu  sendiri.  Hasil  ekstrak  DKS diperoleh  kadar  air  kedua  ekstrak  sebesar 0,35%.  yang  artinya  ekstrak  tersebut  sudah memenuhi  persyaratan  mutu  yang  ≤10% (Kemenkes  RI,  2017).  Jika  kadar  air  terlalu tinggi  maka  akan  terjadinya  pertumbuhan jamur, kapang dan mikroba serta akan memicu reaksi  enzimatis  atau  pembusukan  pada ekstrak.
Skrinning  fitokimia  dilakukan  untuk memastikan  kandungan  zat  aktif  yang  ada dalam  bahan  yang  dianalisis  ( Tabel 2).  Uji skrining fitokimia telah dilakukan dari kedua jenis  ekstrak  daun  tersebut  dengan  berbagai perubahan warna sebagai uji positifnya. Pada pengujian golongan alkaloid, tanin, flavonoid, dan  saponin,  perubahan  warna  menunjukkan adanya reaksi menguntungkan yang diinginkan (Purwanto et al., 2017).
Tabel 1. Perbandingan volume kombinasi ekstrak etanol daun kersen dan daun kelor
Perbandingan Kombinasi daun kersen dan daun kelor Daun kersen (mL) Daun kelor (mL) Volume (mL) Konsentrasi (ppm) 1:1 12,5 12,5 50 100 1:2 8,3 16,7 50 100 2:1 16,7 8,3 50 100
Menurut  penelitian  Vonna  et  al.,  (2021) DKS  mengandung  zat  seperti  flavonoid, saponin,  steroid,  dan  tanin  dalam  ekstrak etanolnya.  Simplisia  dan  ekstrak  dari  DKL disebutkan  mengandung  senyawa  alkaloid, flavonoid,  tanin,  saponin,  steroid,  dan triterpenoid  (Husni  et  al.,  2019).  Perbedaan hasil  skrining  fitokimia  yang  diperoleh
disebabkan  karena  terdapat  perbedaan  antara pelarut  yang  dipakai  untuk  melarutkan  suatu sampel. Variasi dalam prosedur pengujian dan lingkungan tempat tumbuhnya (Purwati et al., 2017).
Tabel 3  hasil  penelitian  menunjukkan bahwa  ekstrak  etanol  daun  kersen  dalam bentuk tunggal memiliki kemampuan antioksidan  yang  sangat  tinggi,  dengan  nilai IC 50 sebesar  8,04  ppm,  pada  penelitian sebelumnya  ekstrak  etanol  DKS  mendapat
nilai  IC 50 sebesar  6,82  ppm  artinya mendapatkan aktivitas antioksidan sangat kuat (Sami et al., 2017). Sedangkan ekstrak etanol daun  kersen  dalam  bentuk  tunggal  memiliki aktivitas  antioksidan  yang  sangat  tinggi, dengan nilai IC 50 sebesar 8,04 ppm, sedangkan pada  penelitian  sebelumnya  ekstrak  etanol DKL  memperoleh  nilai  IC 50 sebesar  50,59 ppm artinya menunjukkan aktivitas antioksidan kuat (Riskianto et al., 2021).
Hasil pengujian ekstrak ketiga kombinasi menunjukkan  aktivitas  antioksidan  sangat kuat dengan nilai IC50 15,78 ppm (1:1); 17,46 ppm  (1:2);  dan    6,35  ppm  (2:1).  Aktivitas antioksidan dipengaruhi oleh struktur senyawa  pada  sampel,  sehingga  terjadinya penghambatan  konsentrasi  dapat  dipengaruhi oleh struktur senyawa pada sampel. Relokasi elektron  senyawa metabolik  sekunder  seperti alkaloid  dan  fenol  terjadi  melalui  resonansi pada  struktur  radikal  antioksidan,  sehingga mencegah  pembentukan  radikal  baru  dan menghambat  reaksi  berantai  radikal  bebas (Isrianto & Tania, 2019).
Kombinasi  dengan  perbandingan  2:1 menunjukkan  potensi  antioksidan  paling tinggi  dibandingkan  dengan  kelompok  lain, didukung  unsur  polifenol  seperti  senyawa flavonoid memainkan fungsi paling signifikan dengan  aktivitas  antioksidan  guna  mencegah oksidasi lipid, kombinasi ekstrak ini menghasilkan  potensi  antioksidan  tertinggi
Tabel 2. Hasil skrining uji fitokimia ekstrak etanol daun kersen dan daun kelor Identifikasi Indikator positif Hasil daun kersen daun kelor Alkaloid Terbentuknya endapan warna merah sampai jingga + +
Flavonoid menunjukkan warna merah, warna kuning atau jingga + + Tanin Terbentuknya warna hitam ke hijauan atau warna hitam kebiruan + + Saponin Terbentuknya busa, dan tetap stabil selama 7 menit + + Tabel 3.  Hasil replikasi (3x) pengujian aktivitas antioksidan bentuk tunggal dan kombinasi Sampel IC 50 (ppm) SD Keterangan Daun kersen 8,06 0,03 Sangat kuat Daun kelor 68,40 3,54 Kuat Kombinasi 1:1 15,78 0,46 Sangat kuat Kombinasi 1:2 17,46 0,14 Sangat kuat Kombinasi 2:1 6,35 0,18 Sangat kuat
jika dibandingkan dengan pembanding lainnya (Sannigrahi et al., 2010). Hal ini juga dapat disebabkan karena semakin meningkatnya  konsentrasi  suatu  ekstrak menyebabkan  absorbansi  sampel  menjadi turun  serta  tingkat  inhibisi  menjadi  naik. Perubahan  ini  terjadi  sebagai  akibat  dari kemampuan  sampel  untuk  mengubah  larutan ungu menjadi kuning pucat ketika mengandung elektron (Wimpy & Harningsih, 2017). Konsentrasi ekstrak yang terlalu tinggi menyebabkan antioksidan akan merubah pro- oksidan atau menjadi toksik, serta kemungkinan  senyawa  metabolit  sekunder
akan saling berinteraksi. Dapat menimbulkan efek  potensiasi  pada  konsentrasi  kecil  dan sebaliknya yaitu saling melemahkan (Septiawan et al., 2020).
Tabel 4  menunjukkan  bahwa  vitamin  C dimanfaatkan  untuk  senyawa  pembanding dalam  uji  aktivitas  antioksidan  dikarenakan memiliki  berbagai  sifat  diantaranya  yaitu antioksidan sekunder dapat menyerap radikal bebas,  serta  terdapat  aktivitas  antioksidan
yang  sangat  tinggi,  mudah  didapatkan,  serta dapat mencegah terjadinya reaksi berantai dan bersifat  lebih  polar  dibandingkan  dengan vitamin  lainnya.  Vitamin  C  terdapat  gugus hidroksil  bebas  yang  berfungsi  sebagai penangkapan  radikal  bebas  sehingga  mampu menaikkan aktivitas antioksidan. (Damanis et al., 2020).
Hasil penelitian ini menunjukkan vitamin C mempunyai nilai IC 50 sebesar 5,30 ppm. Hal ini mengindikasikan adanya aktivitas antioksidan  sangat  kuat.  Dari  hasil  tersebut sejalan  dengan  penelitian  sebelumnya  yang mana menunjukkan bahwa mendapatkan nilai IC 50 vitamin C sebesar 5,63 ppm yang artinya terdapat aktivitas antioksidan  yang  tergolong sangat kuat (Prasetyo et al., 2021).
Hasil  Identifikasi  metabolit  sekunder ekstrak  DKS  dan  ekstrak  DKL,  ditemukan bahwa kedua sampel terdapat potensi sebagai antioksidan karena terdapat senyawa flavonoid.  Hal  ini  terbukti  dari  hasil  positif pada pengujian dengan menggunakan pereaksi  FeCl 3 dimana  terjadi  perubahan warna  sampel  menjadi  kuning  setelah ditambahkan  pereaksi  tersebut  (Nasir  et  al., 2016).  Adanya  gugus  hidroksil  polifenol dalam  flavonoid  inilah  yang  berkhasiat sebagai antioksidan  (Dewi  et  al.,  2014)  yang ditentukan pula oleh posisi dan jumlah gugus hidroksilnya (Rohman & Riyanto, 2005).

## KESIMPULAN
Perbandingan  2:1  ekstrak  etanol  daun kersen dan daun kelor tersebut menghasilkan nilai IC 50 sebesar 6,35 ppm, yang menunjukkan bahwa kombinasi ekstrak etanol daun kersen dan daun kelor memiliki aktivitas antioksidan  yang  lebih  kuat  daripada  kedua daun yang digunakan secara tunggal.

## Daftar Pustaka
Arum, Y., Suparto and Sudarmin, S., 2013. Isolasi dan Uji Daya Antimikroba Ekstrak Daun Kersen ( Muntingia calabura ). Jurnal MIPA Unnes, 35(2), pp.165-174.
Chairunnisa, S., Wartini, N. M. and Suhendra, L., 2019. Pengaruh Suhu Dan Waktu Maserasi
Tabel 4. Hasil uji aktivitas antioksidan
vitamin C
Konsen trasi (ppm) Vitamin C Absorbansi Rata-rata (replikasi 3x) Inhibisi (%) IC 50 (ppm) SD 2 0,395 33,05 0.41 3 0,370 37,28 0.55 4 0,337 42,88 5,30 0.49 5 0,306 48,13 0.71 6 0,270 54,23 0.34 Blanko DPPH 0,590 - - -
terhadap  Karakteristik  Ekstrak  Daun  Bidara  ( Ziziphus  mauritiana L.)  sebagai  Sumber Saponin. Jurnal Rekayasa Dan Manajemen Agroindustri, 7(4), pp.551-560.
Damanis, F. V. M., Wewengkang, D. S. and Antasionasti, I., 2020. Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak  Etanol  Ascidian Herdmania  momus dengan  Metode  DPPH  (1,1-difenil-2- pikrilhidrazil). Pharmacon, 9(3), pp.464-469.
Dewi, N. W. O. A. C., Puspawati, N. M., Swantara, I. M. D., Astiti, I. A. R. and Rita, W. S., 2014.  Aktivitas  Antioksidan  Senyawa  Flavonoid  Ekstrak  Etanol  Biji  Terong  Belanda ( Solanum  betaceum ,  syn)  dalam  Menghambat  Reaksi  Peroksidasi  Lemak  Pada  Plasma Darah Tikus Wistar. Cakra Kimia, 2(1), pp.7-16.
Hasrianti, Nururrahmah and Nurasia., 2016. Pemanfaatan Ekstrak Bawang Merah dan Asam Asetat Sebagai Pengawet Alami Bakso. Jurnal Dinamika, 7(1), pp.9–30.
Husni, P., Pratiwi, A. N. and Baitariza, A., 2019. Formulasi Krim Ekstrak Etanol Daun Kelor ( Moringa oleifera Lamk). Jurnal Ilmiah Farmasi Farmasyifa, 2(2), pp.101–110.
Isrianto, P. L. & Tania, P. O. A., 2019. Antioxydant Activity in Combination Extract of Acorus calamus L.  (Dlingu)  And Allium  sativum (GARLIC).  International  Journal  of  Applied Biology, 3(1), pp.1-7.
Rohman, A. & Riyanto, S., 2005. Daya Antioksidan Ekstrak Etanol Daun Kemuning ( Murraya paniculata (  L  )  Jack  )  secara  in  vitro  Antioxidant  Potency  of  Ethanolic  Extract  of Kemuning. Majalah Farmasi Indonesia, 16(3), pp.136–140.
Kemenkes RI, 2017. Farmakope Herbal Indonesia (Edisi II). Jakarta : Kementrian Kesehatan RI.
Keswara, Y. D., Sunarti and Ekowati, D., 2015. Kapsul Kombinasi Ekstrak Daun Jati Belanda ( Guazuma ulmifolia , L) dan Kelopak Rosella ( Hibiscus sabdarifa , L) sebagai alternatif penurun trigliserida. Biomedika, 8(2), pp.19-24.
Khan,  M.A.,  Ramadas,  D.,  Mundasada,  S.  C.,  N,  Santosh  K.,  and  D,  Chikkanna.,  2015. Antioxidant  and  Free  Radical  Scavenging  Activities  of  Root  Extracts  of Muntingia Calabura . Scholars Journal of Applied Medical Sciences, 3(6), pp.2309–2312.
Nasir,  M.,  Febrina,  L.  and  Masruhim,  M.  A.,  2016.  Identifikasi  Metabolit  Sekunder  dan Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Patah  Tulang  ( Euphorbia  tirucalli ).  Prosiding  Seminar Nasional Kefarmasian Ke-4, pp.222–226.
Prasetyo,  E.,  Kharomah,  N.  Z.  W.  and  Rahayu,  T.  P.,  2021.  Uji  Aktivitas  Antioksidan Menggunakan Metode DPPH (2,2-difenil-1-pikrilhidrazil) terhadap Ekstrak Etanol Kulit Buah Durian ( Durio zibethinnus L.) dari Desa Alasmalang Kabupaten Banyumas. Jurnal Pharmascience, 8(1), pp.75–82.
Purwanto,  D.,  Bahri,  S.  and  Ridhay,  A.,  2017.  Uji  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Buah Purnasjiwa ( Kopsia arborea Blum). Kovalen, 3(1), pp.24–32.
Purwati,  S.,  Lumora,  S.  V.  T.  and  Samsurianto.,  2017.  Skrining  Fitokimia  Daun  Saliara ( Lantana camara L) sebagai Pestisida Nabati Penekan Hama dan Insidensi Penyakit Pada Tanaman  Holtikultura  di  Kalimantan  Timur.  Prosiding  Seminar  Nasional  Kimia  2017, pp.153–158.
Puspitasari,  E.  &  Ningsih,  I.  Y.,  2016.  Kapasitas  Antioksidan  Ekstrak  Buah  Salak  ( Salacca zalacca (Gaertn.) Voss) Varian Gula Pasir Menggunakan Metode Penangkapan Radikal
DPPH. Pharmacy, 13(01), pp.116–126.
Riskianto, Kamal, S. E. and Aris, M., 2021. Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol 70% Daun Kelor ( Moringa oleifera Lam.) terhadap DPPH. Jurnal Pro-Life, 8(2), pp.168–177.
Rosaini,  H.,  Makmur,  I.,  Putri,  R.  D.  and  Sidoretno,  W.  M.,  2019.  Formulasi,  pengujian Aktivitas Antioksidan dan Antibakteri Sediaan Masker Gel Peel Off Ekstrak Etanol Herba Seledri ( Apium graveolens L .). Jurnal Farmasi Higea, 11(2), pp.133–144.
Sami, F. J., Nur, S., Ramli, N. and Sutrisno, B., 2017. Uji Aktivitas Antioksidan Daun Kersen ( Muntingia calabura L.) dengan Metode DPPH (1,1-difenil-2-pikrilhidrazil) dan FRAP (ferric reducing antioxidan power). Jurnal Ilmiah As-Syifaa, 9(2), pp.106–111.
Sannigrahi, S., Mazuder, U. K., Pal, D. K., Parida, S. and Jain, S., 2010. Antioxidant Potential of Crude Extract and Different Fractions of Enhydra fluctuans Lour. Iranian Journal of Pharmaceutical Research, 9(1), pp.75–82.
Sayuti, K. & Yenrina, R., 2015. Antioksidan Alami dan Sintetik. Padang: Andalas University Press.
Septiawan, A. N., Emelda, E. and Husein, S., 2020. Aktivitas Antioksidan Kombinasi Ekstrak Etanol  Lidah  Buaya  ( Aloe  vera L.)  dan  Ganggang  Hijau  ( Ulva  lactuca L.). INPHARNMED  Journal  (Indonesian  Pharmacy  and  Natural  Medicine  Journal),  4(1), pp.11–24.
Tutik,  Dwipayana,  I.  N.  A.,  and  Elsyana,  V.,  2018.  Identifikasi  dan  Perbandingan Aktivitas Antioksidan  Ekstrak  Daun  Kelor  pada  Variasi  Pelarut  dengan  Metode  DPPH.  Jurnal Farmasi Malahayati, 1(2), pp.80–87.
Vonna,  A.,  Desiyana,  L.  S.,  Hafsyari,  R.,  and  Illian,  D.  N.,  2021.  Analisis  Fitokimia  Dan Karakterisasi dari Ekstrak Etanol Daun Kersen ( Muntingia calabura L.). Bioleuser, 5(1), pp.8–12.
Wimpy, & Harningsih, T., 2017. Uji Aktivitas Antioksidan Kombinasi Ekstrak Sarangsemut ( Myrmecodia  pendans )  dan  Ekstrak  Keladi  Tikus  ( Typhonium  flagelliforme Lodd.) dengan (1,1-dipheyl-2-picrilhidrazil) Metode DPPH. Jurnal Kesehatan Kusuma Husada, 8(1), pp.35–41.