## UJI PERBANDINGAN KANDUNGAN ANTIOKSIDAN PRODUK JINTEN HITAM YANG BEREDAR DI KOTA PALEMBANG DENGAN METODE DPPH
Mona Rahmi Rulianti, Vera Astuti Jurusan Farmasi Poltekkes Kemenkes Palembang Korespondensi: monarahmirulianti@yahoo.com
Diterima:1 Juni 2017 Direvisi: 18 Juli 2017 Disetujui: 13 Okt  2017

## ABSTRAK
Jinten  Hitam (Nigella  sativa )  sudah  lama  dikenal  berkhasiat  dalam  menyembuhkan penyakit. Banyak penelitian yang membuktikan Jinten Hitam atau lebih dikenal di masyarakat dengan  nama  Habbatussauda  dapat  berkhasiat  sebagai  imunomodulator,  anti  bakteri,  anti inflamasi dan sebagai antioksidan. Jinten Hitam atau yang lebih dikenal dengan nama dagang Habbatusauda sudah banyak beredar di pasaran, baik dalam bentuk kering maupun minyak di toko obat  dan  apotek  sehingga  mudah  didapatkan.  Beberapa  produk  Habbatusauda  ini  dapat ditemukan dalam bentuk tunggal maupun di kombinasi dengan minyak lain seperti campuran minyak Habbatusauda dengan  ekstrak daun Sirsak, dan ada dalam  bentuk campuran  minyak Habbatusauda dengan minyak Zaitun. Penelitian ini bertujuan untuk membandingkan jumlah antioksidan yang terdapat pada produk Jinten Hitam yang beredar di kota Palembang dengan menggunakan  metode  DPPH (1,1-difenil-2-pikrilhidrazil)  dengan  mengukur  absorban menggunakan Spektrofotometer UV-VIS pada panjang gelombang 529 nm dengan Vitamin C sebagai  pembanding. Dari  pendekatan  analisis  deskriptif  ditemukan  adanya  perbedaan kandungan produk Jinten Hitam yang beredar di pasaran khususnya kota Palembang. Produk jinten  hitam  dengan  komposisi  tunggal  memiliki  daya  antioksidan  lebih  tinggi  disbanding produk jinten  hitam  yang  berbentuk campuran  yaitu Habbasyi  Oil  sebesar 97,2% (IC 50 437,8 ppm),  Habbasyi  Pondok  Herbal  Habbatussauda  Oil  sebesar  87,4%  (IC 50 569,3  ppm) mempunyai  daya  antioksidan  yang  setara  dengan  Vitamin  C,  minyak  Habbasyifa  sebesar 43,4%  (IC 50 1316,9ppm),  minyak  Habbatussauda  Kamil  sebesar  40,1%  (IC 50 2220,5  ppm), Minyak  Habbatussauda  Sari  Murni  sebesar  37%  (IC 50 1586,4  ppm),  Minyak  Habbatussauda Plus  Minyak  Zaitun  sebesar  26,4%  (IC 50 3632,7  ppm),  minyak  Habbat  Plus  Sirsak  sebesar 17,4% (IC 50 5631,4 ppm),serbuk Habbatussauda cap Kurma Ajwa sebesar 16,1% (IC 50 5042,2 ppm),  minyak  Habbatussauda  Kamil  sebesar  15,8%  (IC 50 3397,3  ppm)  dan  serbuk Habbatussauda Sari Murni sebesar 10,8% (IC 50 5665,6ppm).
Kata Kunci : Jinten Hitam, Antioksidan, DPPH, IC 50

## PENDAHULUAN
Hasil olahan dari jintan hitam telah banyak  dipasarkan  di  Indonesia,  berupa minyak, biji, ekstrak dan lain
sebagainya.Produk  jintan  hitam  yang beredar dengan
merek dagang Habbatussauda  telah  lama  dikenal  oleh sebagian masyarakat, mudah diperoleh di pasaran  dengan  harga  yang  terjangkau. Selain  dalam  bentuk  tunggal,  produk Habbatussauda ini ada yang di kombinasi dengan  daun  sirsak  dan  minyak  zaitun. Biji  atau  bubuk  jinten  hitam  yang diperdagangkan  sekarang  biasanya
dikemas  dalam  bentuk  kapsul  ataupun minyak jinten hitam dalam botol (Wahyuni, 2009).
Aktivitas  biologis  dari  biji  jinten hitam  telah  banyak  dilaporkan  seperti anthelmintik, antibakteri, anti iflamasi, anti tumor, antioksidan, imuno-mudulator, diuretik,
antihipertensi, antidiabetes, antiasma, obat  penyakit  paru,  dan  anti  artritis (Haq  et  al  1995  ;  Zaoui  at  al,2002;l- Beshbishy, Mohammadin &Abdel Naim,  2009;  Tubesha,  Igbal  &  Ismail,
2011).  Penelitian  lain  yaitu  Ismail  et  al
(2010),  Khattak  et  al  (2008)  dan Thippeswamy  dan  Naidu  (2005)  telah melaporkan bahwa Nigella sativa memiliki  aktivitas  antioksidan  yang menjanjikan melalui
penurunan kekuatan  dan  inhibisi  dari  peroksidasi (Tubesha, Iqbal & Ismail 2011).
Antioksidan  dapat  didefinisikan sebagai senyawa yang dapat menghambat oksidasi  dan  mampu  menetralkan  efek berbahaya  dari  oksidasi  pada  jaringan tubuh.  Antioksidan  akan  mencegah kerusakan  sel  yang  disebabkan  oleh radikal  bebas.  Cara  kerja  senyawa antioksidan  adalah  bereaksi  dengan radikal  bebas  reaktif  membentuk  radikal bebas tak reaktif yan g  r e l a t i f   s t a b il. A n t i o k s i d a n   menstabilkan  radikal bebas  dengan  melengkapi  kekurangan elektron yang dimiliki radikal bebas,  dan menghambat  terjadinya  reaksi  berantai dari pembentukan radikal bebas. Antiradikal bebas (antioksidan) merupakan  aktivitas  suatu  senyawa  yang dalam  kadar  rendah  dapat  mencegah terjadinya  oksidasi  dari  substrat  yang mudah  teroksidasi  (Sarma,  Mallick,  & Gosh, 2010).
Uji  aktivitas  antioksidan  dilakukan untuk  mengetahui  kemampuan  suatu senyawa  ekstrak  dalam  menghambat terjadinya  reaksi  oksidasi.  Metode  yang paling  sering  digunakan  untuk  menguji aktivitas antioksidan tanaman obat adalah metode  uji  dengan  menggunakan  radikal bebas  DPPH.  Tujuan  metode  ini  adalah mengetahui  parameter  konsentrasi  yang ekuivalen memberikan 50% efek aktivitas  antioksidan  ( IC 50 ).  Hal  ini  dapat dicapai dengan cara menginterpretasikan data  eksperimental  dari  metode  tersebut. DPPH  merupakan  radikal  bebas  yang dapat  bereaksi  dengan  senyawa  yang
dapat  mendonorkan  atom  hidrogen, dapat berguna untuk pengujian aktivitas  antioksidan komponen tertentu dalam suatu ekstrak. Keberadaan senyawa  antioksidan  dapat  mengubah warna larutan DPPH dari ungu m e nja d i ku ni n g (D eh po ur,
Ebrahimzadeh,  Fazel,  dan  Mohammad, 2009).
Berdasarkan uraian diatas, peneliti ingin mengetahui apakah ada perbedaan kandungan  antioksidan  dari  produk Jinten  Hitam  yang  beredar  di  kota Palembang dalam bentuk tunggal dengan bentuk campuran.
Adapun  tujuan  penelitian  ini adalah  Untuk  mengetahui  perbedaan kandungan  antioksidan  produk  Jinten Hitam  yang  beredar  di  kota  Palembang dalam  bentuk  tunggal  maupun  yang campuran dengan metode DPPH.

## METODE PENELITIAN
Waktu dan Tempat Penelitian Penelitian dilaksanakan di Laboratorium  Kimia  Jurusan  Farmasi Poltekkes  Palembang  dan  Balai  Besar La b o r at ori um   Kese hatan  ( BBLK)
Palembang pada bulan Oktober- Desember 2016.

## Populasi dan Sampel
Populasi pada penelitian ini adalah produk  Jinten  Hitam  yang  dibeli  dari Apotek  di  kota  Palembang.  Sedangkan sampel  pada  penelitian ini  adalah jinten hitam  dalam  bentuk  tunggal  dan campuran dengan sirsak maupun dengan minyak  zaitun  yang  memenuhi  kriteria inklusi sebagai berikut: Sediaan berbentuk  minyak  atau  serbuk,  tidak kadaluarsa, beredar di kota Palembang.

## Besar Sampel Penelitian
Sampel  yang  akan  diambil  adalah produk  Jinten  Hitam  yang  dijual  di  kota Palembang  baik  yang  berbentuk  tunggal maupun yang berbentuk campuran dengan  Sirsak  dan  Minyak  Zaitun, diambil  sampel  produk   kura n g  lebih 10 prod uk Habbatusauda (Jinten Hitam)  yangberedar  di  kota  Palembang dari berbagai merk produsen. Eksperimen ini akan dilakukan dengan tiga pengulangan pengujian.

## Alat dan Bahan
Alat-alat  yang  digunakan  pada penelitian  ini  adalah  neraca  analitik, spektro fotometer  UV-  Vis, vortex ,mikropipet  dengan  berbagai  macam ukuran, stopwatch dan  alat-alat  gelas laboratorium
Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah Produk Jinten Hitam  (Minyak/Serbuk  minyak  jinten hitam  dan  minyak  zaitun  (Minyak Habbatussauda plus Minyak Zaitun), dan campuran minyak jinten hitam dan sirsak (Minyak  Habbat  plus  Sirsak),  Reagen DPPH  ( 2,2-Diphenyl-  1-picrylhydrazyl ), kloroform, aquadest, VitaminC.

## Prosedur Penelitian Pembuatan Larutan DPPH
Larutan  DPPH  20  ppm  dibuat dengan cara menimbang DPPH sebanyak 20  mg  dilarutkan  dengan  100  ml kloroform  dalam  labu  ukur  (Brand Williams,1995).

## Pembuatan Larutan Sampel
Pembuatan larutan uji sampel dengan konsentrasi  1000  ppm  dengan  cara menimbang sampel 500 mg dan dilarutkan dengan  kloroform  sebanyak  500  ml. Selanjutnya  diencerkan  dengan  berbagai
konsentrasi 800, 600, 400, 200 ppm.

## Pembuatan Larutan Pembanding
Vitamin  C  sebagai  pembanding ditimbang  sebanyak  250  mg  kemudian dilarutkan  dengan  500  ml  kloroform sehingga  didapatkan  larutan  induk dengan  konsentrasi  500  ppm  dan diencerkan dengan berbagai konsentrasi.
Pengukuran Aktifitas Antioksidan dengan Metoda DPPH Pengujian dilakukan dengan memipet  1,5  ml  larutan  sampel  dan pembanding  dari  berbagai  konsentrasi kemudian  ditambahkan  3,0  ml  DPPH. Lalu  divortex  dan  diinkubasi  pada  suhu 37º  C  pada  ruangan  gelap.Absorbansi kemudian diukur dengan Spektro- fotometer UV-Vis pada panjang gelombang  529  nm  (Brand  Williams, 1995).  Sebagai  kontrol  negatif  digunakan larutan  DPPH  20  ppm  sebanyak  3,0  mL ditambah 1,5 mL kloroform.
Dari data absorbansi yang diperoleh, dapat dihitung daya antioksidan dengan menghitung % peredaman dengan menggunakan rumus :
%  peredaman  =  [1-(absorbansi larutan uji/absorbansi kontrol)] x 100%

## Analisis Data
Analisis  data  dilakukan  dengan menggunakan tabel dan grafik berdasarkan  daya  aktivitas  antioksidan dalam meredam radikal(%peredaman).

## HASIL DAN PEMBAHASAN HASIL
Sampel  berasal  dari  10  macam produk  Habbatussauda  (Jinten  Hitam) yang beredar di apotek dan toko obat di kota Palembang.
Sampel yang dikumpulkan  tersebut  terdiri  dari  2
bentuk  yaitu  :  bentuk  tunggal  dan bentuk  campuran.  Sedangkan  bentuk sediaannya  juga  terdiri  dari  2macam yaitu  bentuk  sediaan  serbuk  dan  bentuk
sediaan minyak.
Sampel yang digunakan  dapat  dilihat  pada  tabel berikut:
Tabel 1. Daftar Sampel
Tabel 2. Data Absorban dan % Peredaman pada berbagai Konsentrasi
Dari  pengukuran  absorban  dan  % peredaman  dari  berbagai  konsentrasi padasampel  dapat  dicari    nilai  IC 50 yaitu nilai  konsentrasi  dari  sampel  yang dapat  memberikan  efek  sebanyak  50%. Nilai  IC 50 dari  sampel  yang  diuji  dapat dilihat pada tabel2.
Tabel 3 Persamaan Garis dan IC 50
Banyak penelitian yang telah dilaporkan  mengatakan  bahwa  Nigella sativa  (Jinten  Hitam)  memiliki  banyak aktivitas  biologis  salah  satunya  adalah antioksidan.  Produk  Jinten  Hitam  atau yang sering dikenal dengan Habbatussauda  sudah  banyak  diolah dan dijual di pasaran sebagai pengobatan herbal dan alternatif. Selain dijual  dalam  bentuk  tunggal  produk Jinten  Hitam  juga  terdapat  dalam bentuk  kombinasi  dengan  bahan  lain seperti ekstrak daun sirsak dan minyak zaitun.
Penelitian inidiawali dengan mencari  panjang  gelombang  maksimal DPPH  20  ppm  yang  didapatkan  pada panjang gelombang 529
nm.
Selanjutnya sampel yang telah
dilarutkan  dengan  kloroform  dibuat konsentrasi  1000  ppm  lalu  dipipet
sebanyak  1,5  ml  dan  ditambahkan  3 ml  larutan  DPPH  20  ppm.Larutan tersebut  diinkubasi  diruangan  gelap  30 menit dan diperiksa absorbannya dengan  panjang  gelombang  529  nm dengan  alat  Spektrofotometri  UV-VIS. Pengujian  dilakukan  dengan  tiga  kali pengulangan  dan  diambil  rata-ratanya.
Hasil absorban pemeriksaan sampel  dapat  dilihat  pada  tabel  2.Dari tabeltersebut  dapat  dilihat  terdapat perbedaaan  absorban  dari  masing masing  sampel.  Dari  hasil  absorban tersebut  dapat  dicari  %  peredaman dengan  menggunaan  persamanyang sudah ditulis. Dari hasil % peredeman sampeldapat  dilihat  sampel  nomor  4 memiliki  %  peredaman  yang  paling tinggi  yaitu  sebanyak  97,2  %  dan diikuti sampel nomor 2sebanyak 87,4%.  Peredaman paling  rendah dihasilkan  pada  sampel  nomor8  yaitu sebanyak 10,8%. Dari  data  tersebut  dapat  dilihat bahwa  sampel  nomor  4  adalah  sampel produk  Jinten  Hitam  dengan  nama Habbasyi Oil yang mengandung Nigella  sativa  Oil  500  mg  (tunggal), diproduksi oleh PT. Habbatussauda Int. Produk  ini  berbentuk  minyak.  Sampel nomor  2  yang  juga  memiliki  % peredaman tinggi adalah produk dengan nama Habbasyi Pondok  Herbal Habbatussauda  Oil  yang  mengandung oleum  Nigella  sativa  semen500  mg (tunggal), diproduksi oleh CV. FOTOSINTESIS  Jawa  Timur.  Produk ini  juga  berbentuk  minyak.  Sedangkan % peredaman yang terendah dihasilkan pada  sampel  nomor  8  dengan  nama produk Ha b b a t u s s a u d a
Sari
Murni  yang  mengandung  serbuk Nigella  sativa/Black  Cumin  Seeds 100%  (tunggal),  diproduksi  oleh  CV. Herbal  Himalaya  Food.  Produk  ini berbentuk serbuk.
.

## Tabel 5  Data % Peredaman Sampel  dan IC 50
No. Sampel % Peredaman IC 50 Tunggal/Campuran Minyak/Serbuk 4 97,2 437,8 Tunggal Minyak 2 87,4 569,3 Tunggal Minyak 3 43,4 1316,9 Tunggal Minyak 9 40,1 2220,5 Tunggal Minyak 7 37 1586,4 Tunggal Minyak 5 26,4 3632,7 Campuran (zaitun) Minyak 6 17,4 5631,4 Campuran (sirsak) Minyak 1 16,1 5042,2 Tunggal Serbuk 10 15,8 3397,3 Campuran (zaitun) Minyak 8 10,8 5665,6 Tunggal Serbuk Tabel 5. Data % Peredaman dan IC 50 vs Bentuk Sediaan
Berdasarkan  tabel  5  di  atas  terlihat bahwa produk jinten hitam yang berbentuk  minyak  memiliki  aktifitas antioksidan  yang  jauh  lebih  tinggi dibandingkan  produk  jinten  hitam  yang berbentuk  serbuk.  Hal  ini  dikarenakan dalam  bentuk  minyak,  semua  zat  aktif telah  terekstrak  (tersari)  secara  sempurna termasuk  zat  yang  memiliki  aktifitas sebagai  antioksidan.  Sedangkan  jika dalam  bentuk  serbuk,  zat  aktif  tersebut memerlukan waktu lebih lama untukuntuk  ditarik  (diekstrak)  secara sempurna  sehingga  akan  lebih  kecil aktifitas yang dihasilkan.
Produk  jinten  hitam  dalam  bentuk campuran  juga  tidak  memiliki  aktifitas antioksidan yang lebih baik dibandingkan dengan  bentuk  tunggalnya.  Hal  ini  bisa dijelaskan  dengan  meneliti  lebih  lanjut apakah  mekanisme  kerja  dari  zat a n t i o k s i d a n   pada  ta na m a n   yan g dicampurkan tersebut saling sinergis atau malah  saling  meniadakan  efek  masing- masing. Sehingga akhirnya dapat menjadi pertimbangan  dalam  produksi  apakah harus memproduksi dalam bentuk campuran  atau  dalam  bentuk  tunggal
untuk  menghasilkan  produk  dengan  efek yang terbaik.
Pada  pengukuran  daya  antioksidan ini  juga  diukur  %  peredaman  Vitamin  C dengan  konstrasi  500  ppm  sebangai pembanding positif. Dari hasil pengukuran didapatkan  %  peredaman  pada  sampel vitamin  C  dengan  konsentrasi  10  ppm adalah  5%  ;  250  ppm  adalah  35,2%  dan 500  ppm  adalah  56,1%.  Dari  hasil  ini dapat  diketahui  bahwa  produk  jinten hitam  dengan  aktifitas  antioksidan  yang tertinggi  yaitu  sampel  4  (97,2%)  dan sampel  2  (87,4%)  memiliki  aktifitas antioksidan  yang  setara  dengan  vitamin  C konsentrasi  500  ppm  yaitu  dengan  IC 50 berturut-turut  437,8  ppm  dan  569,3  ppm . Dengan kata lain dapat disimpulkan bahwa sampel  4  dan  sampel  2  memiliki  aktifitas antioksidan  yang  hampir  setara  dengan vitamin C pada konsentrasi yang sama.

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian perbandingan  kandungan  antioksidan produk  Jinten  Hitam  (Habbatussauda) yang beredar di kota Palembang dengan metoda DPPH dapat diambil kesimpulan:  Produk  jinten  hitam  yang beredar  di  kota  Palembang  memiliki aktifitas antioksidan yang berbeda-beda, yaitu  Habbasyi  Oil  sebesar  97,2%  (IC 50
Mona Rahmi Rulianti, Vera Astuti, Uji Perbandingan Kandungan Antioksidan Produk Jinten Hitam Yang Beredar Di Kota Palembang Dengan Metode Dpph
437,8  ppm) ,  Habbasyi  Pondok  Herbal
Habbatussauda Oil sebesar 87,4% (IC 50 569,3  ppm) ,  minyak  Habbasyifa sebesar  43,4%  (IC 50 1316,9  ppm), minyak  Habbatussauda  Kamil  sebesar 40,1%  (IC 50 2220,5  ppm),  Minyak Habbatussauda  Sari  Murni  sebesar  37%
(IC 50 1586,4
ppm), Minyak
Habbatussauda  Plus  Minyak  Zaitun sebesar  26,4%  (IC 50 3632,7  ppm), minyak  Habbat  Plus  Sirsak  sebesar 17,4%  (IC 50 5631,4  ppm),  serbuk Habbatussauda cap Kurma Ajwa sebesar 16,1% (IC 50 5042,2 ppm), minyak Habbatussauda  Kamil  sebesar  15,8%
(IC 50 3397,3 ppm) dan serbuk
Habbatussauda  Sari  Murni  sebesar 10,8% (IC 50 5665,6ppm).

## SARAN
Penelitian  yang  dilakukan  untuk membandingkan  kandungan  antioksidan produk  Jinten  Hitam  (Habbatussauda) yang  beredar  di  kota  Palembang  dengan metoda DPPH ini masih perlu
dilanjutkan.  Penelitian  lanjutan  yang  lain antara  lain:  Penelitian  lanjut  pemurnian senyawa  murni/aktif  yang  terkandung  di dalam produk jinten hitam yang mempunyai aktifitas antioksidan, Penelitian  lanjut  pengukuran  aktifitas antioksi dan produk jinten hitam secara in vivo terhadap  hewan  percobaan  dan Penelitian  kombinasi  dengan  senyawa aktif antioksidan lain untuk menghasilkan kombinasi  senyawa  antioksidan  yang memiliki kerja sinergis.

## DAFTAR PUSTAKA
Dehpour,  A.A.,  Ebrahimzadeh,  M.A.,
Fazel,  N.S.,  dan  Mohammad,  N.S., 2009,
Antioxidant
ActivityofMethanol Extract of Ferula Assafoetida and Its Essential
Oil  Composition, Grasas  Aceites , 60(4), 405-412.
Djauzi
S. Perkembangan obat imunomodulator. Med J Ked 2003;
4(2) : 13-5.
El-Beshbishy,H.A., Mohamadin,A.M.,& Abdel-Naim, A. B. (2009).In Vitro Evaluationofthe Antioxidant Activities  of  Grape  Seed  (Vitis vinifera) Extract, Blackseed
(Nigella  sativa)  Extract,  and Curcumin. Journal  of  Taibah University  Medical  Science  4  (1) , 23-35.
Haq,A.,Abdullatif,M.,Lobo,P.I.,Khabar,K .S.,Sheth,K.V.,&Al-Sedairy,S.T. (1995).  Nigella  sativa:  Effect  on Human Lymphocytes and Polymorphonuclear  Leukocyte Phagocytic Activity. Immunopharmacology 30 ,147-155. Molyneux.P, 2004. The use of The Stable Free Radical Diphenylpicrylhidrazyl (DPPH) for Estimating Antioxidant Activity .  Song  lklanakarin  J.  Sci Thnol, 26 (2), 211-219.
Rachmani,E.P.N.,Suhesti,T.S.,Widiastuti
,  R.,  &  Aditiyono.  2012,  The breast  of  anti  cancer  from  leaf extract of Annona muricata againts cell line in T47D,
International  Journal  of  Applied Science and Technology . 2(1):157- 164.
Sarma,  A.  D.,  Mallick,  A.  R.,  &  Ghosh, A.K.  (2010).  Free  Radicals  and Their  Rolein  Different  Clinical Conditions:An Overview.
International  Journal  of  Pharma Sciences  and  Research  Vol.1(3) , 185-192.
Tubesha,Z.,Iqbal,S.,&Ismail,M.(2011).
Effects of Hydrolysis Conditions on Recoveryof Antioxidantsfrom Methanolic  Extracts  of  Nigella Sativa  Seeds .  Journal  of  Medicinal Plants ResearchVol.5(22),5393-
5399.
Wahyuni, S. (2009).Peluang Budidayadan
Manfaat  Jintan  Hitam  (Nigella sativa) .Warta  Penelitian  dan
Pengembangan  Tanaman  Industri Volume 15 No1 ,23-25.
Zaoui,  A.,  Cherrah,  Y.,  Mahassini,  N., Alaoui,  K.,  Amarouch,  H.,  & Hassar,M.  (2002a).  Acute  and Chronic  Toxicity  of  Nigella  sativa Fixed Oil. Phytomedicine 9 , 69-74. Zaoui,  A.,  Cherrah,  Y.,  Mahassini,  N.,
Alaoui,  K.,  Amarouch,  H.,  & Hassar,M.  (2002b).  Effects  of Nigella  sativa  Fixed  Oil  on  Blood Homeostasis  in  Rat. Journal  of Ethnopharmacology 79 , 23-26