Aktivitas Antihiperurisemia Ekstrak Etanol Daun Afrika ( Vernonia amygdalina Delile.) pada Mencit Putih Galur Swiss Webster yang Diinduksi Melinjo dan Hati Ayam
Antihyperuricemic Activity of Ethanol Extract of African Leaf ( Vernonia mygdaline Delile.) on Swiss Webster White Mice Induced by Melinjo and Chicken Liver Juice
Doni Anshar Nuari 1* , Hesti Renggana 1 , Cindra Tri Yuniar 2 , Mentari Novitasari 1 , Asholeha  Lulu 1 1 Prodi Farmasi Fakultas MIPA Universitas Garut, Jl. Jati No.42B, Tarogong, Garut, Indonesia
2 Sekolah Farmasi Institut Teknologi Bandung, Jl. Ganesha No.10, Bandung, Indonesia *E-mail: doni@uniga.ac.id
Received: 14 Oktober 2020; Accepted: 14 Januari 2021; Published: 30 Juni 2021

## Abstrak
Hiperurisemia adalah suatu kondisi dimana terjadi peningkatan kadar asam urat di dalam darah melebihi batas  normal.  Daun  Afrika  ( Vernonia  amygdalina Delile.)  secara  empiris  digunakan  masyarakat  untuk pengobatan  diabetes,  hiperkolesterolemia,  demam,  hipertensi  dan  asam  urat  dengan  cara  meminum rebusan daun Afrika. Penelitian in vivo ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas antihiperurisemia ekstrak etanol  daun  Afrika  pada  mencit  jantan  dengan  metode  POCT  ( Point  Care  of  Testing ).  Penginduksi hiperurisemia yang digunakan adalah kombinasi suspensi melinjo dan jus hati ayam secara oral selama 9 hari berturut-turut dan kadar asam urat diukur pada hari ke 1, 3, 6 dan 9.  Hasil penelitian  menunjukkan bahwa  ekstrak  etanol  daun  Afrika  ( Vernonia  amygdalina Delile.)  dosis  100,  200,  dan  400  mg/KgBB memiliki aktivitas antihiperurisemia yang berbeda bermakna terhadap kontrol negatif.
Kata Kunci : Anti hiperurisemia, Vernonia amygdalina Delile, POCT

## Abstract
Hyperuricemic  is  a  condition  in  which  uric  acid  level  in  blood  exceeds  its  normal  level.  Empirically, African  leaves ( Vernonia  amygdalina Delile.) were  used  to  treat  diabetic,  hypercholesterolemic,  fever, hypertension  and  hyperuricemic  by  drinking  boiled  water  of  African  leaves. This  in  vivo  study  was performed  to  determine  antihyperuricemic  activity  of  ethanolic  extract  of  African  leaves  on  male  mice using  the  POCT  (Point  of  Care  Testing)  method.  Suspension  combination  of  melinjo  and  chicken  liver juice were used as hyperuricemic inductor. It is given orally for consecutive 9 days and the uric acid level were  tested  on  day  1,  3,  6,  and  9.  The  results  showed  that  the  ethanolic  extract  of  African  leaves (Vernonia  amygdalina Delile .)  at  dosage  100,  200,  and  400  mg/KgBW  had  a  significantly  different antihyperuricemic activity against negative control.
Keywords : Antihyperuricemic , Vernonia amygdalina Delile, POCT

## PENDAHULUAN
Pola  makan  pada  masyarakat  yang banyak  mengandung  purin  tinggi  dapat menyebabkan  terjadinya  peningkatan  kadar asam  urat  (Tarigan et  al .,  2012).  Asam  urat merupakan    hasil  metabolisme  purin.  Asam urat  dibawa  ke  ginjal  melalui  aliran  darah untuk  dikeluarkan  bersama  urin.  Jika  terjadi gangguan eliminasi asam urat melalui ginjal, maka akan menyebabkan menurunnya sekresi  asam  urat  ke  tubuli  ginjal  sehingga terjadi  peningkatan  kadar  asam  urat  dalam
darah  (Sinaga et  al .,  2014).  Peningkatan kadar  asam  urat  di  dalam  darah  yang melebihi batas normal disebut hiperurisemia. Hiperurisemia  dapat  diakibatkan  karena produksi asam urat yang berlebih, pengeluaran  asam  urat  yang  berkurang  atau gabungan  dari  keduanya  (Rakanita et  al ., 2017).  Asam  urat  diekskresikan  oleh  ginjal melalui  urin.  Apabila  kadar  asam  urat berlebih, maka ginjal tidak mampu mengatur kestabilannya  sehingga  sisa  asam  urat  tidak dibuang  melalui  urin.  Akibatnya,  terjadi
penumpukan  kristal  asam  urat  pada  jaringan sekitar  sendi  sehingga  menyebabkan  rasa nyeri  pada  daerah  tersebut  (Sumarmin  dan Yuniarti, 2017).
Penyakit akibat
hiperurisemia  dikenal  sebagai gout atau penyakit pirai (Tarigan et al ., 2012).
Menurut  Riset  Kesehatan  Dasar tahun  2018,  prevalensi  penyakit  sendi berdasarkan diagnosis dokter pada penduduk usia  ≥  15  tahun  berdasarkan  provinsi  di Indonesia. Provinsi Aceh merupakan provinsi  dengan  tingkat  penyakit  sendi tertinggi dengan persentase 13,3%, sedangkan Sulawesi Barat merupakan provinsi  dengan  tingkat  penyakit  sendi terendah  yaitu  dengan  persentase  3,2%. Berdasarkan  jenis  kelamin,  perempuan dengan  persentase  8,5%  dan  laki-laki  6,1% (Kemenkes, 2018). Pengobatan untuk hiperurisemia biasanya menggunakan alopurinol  untuk  mengurangi  kadar  asam urat dalam darah. Alopurinol bekerja dengan menghambat  aktivitas  ksantin  oksidase  yang mengubah  hipoksantin  menjadi  ksantin  dan kemudian  akan  menjadi  asam  urat  (Djohari dan  Rovi,  2015).  Namun  di  samping  obat sintetik  yang  disebutkan,  banyak  tersedia obat  tradisional  yang secara empiris terbukti berkhasiat  dapat  menurunkan  kadar  asam urat darah (Kritiani et al ., 2013).
Pemanfaatan  obat  tradisional  atau jamu di Indonesia pada hakikatnya merupakan  bagian  dari  kebudayaan  bangsa Indonesia.  Meskipun  secara  empiris  obat tradisional terbukti berkhasiat untuk mengatasi  berbagai  macam  penyakit,  tetapi khasiat  dan  kemampuannya  belum  banyak dibuktikan  secara  ilmiah  maupun  klinis (Muhtadi et  al .,  2014).  Salah  satu  upaya penggunaan obat secara herbal atau tradisional  yang  dapat  digunakan  adalah daun  Afrika  ( Vernonia  amygdalina Delile). Berdasarkan  hal  tersebut,  maka  perlu dilakukan  penelitian  untuk  melihat  aktivitas penghambatan enzim ksantin oksidase ekstrak  daun  Afrika  secara in  vivo .  Tujuan penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui apakah  ekstrak  etanol  daun  Afrika  memiliki
aktivitas  anti  hiperurisemia  secara in  vivo pada  mencit  jantan  yang  diinduksi  melinjo dan jus hati ayam.

## METODE PENELITIAN
Metode  penelitian  yang  dilakukan  adalah penelitian eksperimental dengan menggunakan  rancangan  penelitian  acak lengkap  yang  dilakukan  di  laboratorium. Penelitian  ini  terdiri  dari  beberapa  tahapan yaitu  penyiapan  dan  determinasi  bahan, pengolahan bahan menjadi simplisia, pemeriksaan  karakteristik  dan  penapisan fitokimia  simplisia,  pembuatan  ekstrak etanol,  penapisan  fitokimia  ekstrak,  dan pengujian aktivitas antihiperurisemia ekstrak etanol  daun  Afrika  pada  mencit  secara in vivo. Uji aktivitas antihiperurisemia secara in vivo merupakan  pengujian  yang  dilakukan untuk  mengetahui  pengaruh  suatu  senyawa terhadap penurunan kadar asam urat terhadap hewan  uji.  Pengujian  ini  terdiri  dari  5 kelompok  hewan  percobaan  yaitu  kelompok kontrol  negatif  diberikan  suspensi  tragakan 2%,  kelompok  kontrol  positif  menggunakan alopurinol  dosis  14  mg/kgBB  dan  3 kelompok uji dengan variasi  dosis  yaitu 100 mg/KgBB, 200 mg/KgBB dan 400 mg/KgBB.  Parameter  yang  diamati  adalah kadar asam urat mencit. Hewan uji diinduksi hiperurisemia  dengan  pemberian  suspensi biji  melinjo  dan  jus  hati  ayam  konstrasi 100% b/v secara oral selama 9 hari berturut- turut  kemudian  diukur  kadar  asam  uratnya (Sukrama, 2015). Setelah hewan uji mengalami  hiperurisemia,  maka  diberikan sediaan  pembanding,  kontrol  positif,  dan sediaan uji ekstrak etanol daun Afrika selama 9  hari  berturut-turut.  Kemudian  dilakukan pemeriksaan kadar asam urat darah pada hari ke  1,  3,  6,  dan  9.  Kadar  asam  urat  diukur dengan menggunakan alat POCT. Kemudian dianalisis  secara  statistik  menggunakan anova  dan  uji  lanjut  LSD  ( Least  Significant Difference ).  Dari  data  hasil  pengukuran kadar  asam  urat  yang  didapat  kemudian dihitung  persentase  penurunan  kadar  asam
urat  dengan  rumus  (%P)  kadar  asam  urat (Salsabila et al ., 2015).
𝑃𝑒𝑟𝑠𝑒𝑛𝑡𝑎𝑠𝑒 𝑝𝑒𝑛𝑢𝑟𝑢𝑛𝑎𝑛 𝑘𝑎𝑑𝑎𝑟 𝑎𝑠𝑎𝑚 𝑢𝑟𝑎𝑡 =
𝐾𝑎𝑑𝑎𝑟 𝑎𝑠𝑎𝑚 𝑢𝑟𝑎𝑡 (−) − 𝑘𝑎𝑑𝑎𝑟 𝑎𝑠𝑎𝑚 𝑢𝑟𝑎𝑡 (𝑢𝑗𝑖)
𝑘𝑎𝑑𝑎𝑟 𝑎𝑠𝑎𝑚 𝑢𝑟𝑎𝑡 (−) 𝑥 100%
Keterangan:
Kadar  asam  urat  (uji)  =  Kadar  asam  urat  kelompok yang diberi perlakukan Kadar  asam  urat  (-)  =  Kadar  asam  urat  kelompok kontrol negatif.
Parameter  keberhasilan  dilihat  dari  adanya penurunan  kadar  asam  urat  dalam  darah mencit  yang  signifikan  setelah  pemberian sediaan  uji  terhadap  kelompok  kontrol negatif.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian ini diawali dengan pengumpulan sampel tanaman yang digunakan  yaitu  daun  Afrika  yang  diperoleh dari daerah Pamengpeuk, Garut, Jawa Barat. Setelah sampel tanaman terkumpul, selanjutnya tanaman dideterminasi di Herbarium  Bandungense,  Sekolah  Ilmu  dan Teknologi  Hayati  (SITH)  Institut  Teknologi Bandung.  Determinasi  ini  bertujuan  untuk memastikan  identitas  tanaman  uji  dan memastikan  bahwa  tanaman  tersebut  benar yang  dimaksud  dalam  penelitian.  Hasil determinasi  menunjukkan  bahwa  tanaman tersebut  adalah  daun  Afrika  ( Vernonia amygdalina Delile.).
Pemeriksaan karakterisasi simplisia dilakukan  untuk  mengetahui  mutu  simplisia sebagai  jaminan  stabilitas  dan  kualitas  dari simplisia  yang  digunakan  harus  memenuhi persyaratan yang telah ditetapkan. Pemeriksaan  ini  meliputi  kadar  air,  susut pengeringan, kadar abu total, kadar abu tidak larut  asam,  kadar  abu  larut  air,  kadar  sari larut  etanol, dan kadar sari larut  air. Standar karakteristik  simplisia  yang  digunakan  yaitu mengacu  pada  standar  umum  karena  tidak didapatkan standar yang menyatakan persyaratan  khusus  untuk  daun  Afrika.  Hal ini terjadi mungkin  dikarenakan tanaman ini merupakan  tanaman  yang  potensi  untuk
ditelitinya masih sedikit, sehingga belum ada pustaka yang menyatakan standar persyaratan karakteristik daun Afrika.
Penetapan kadar air dilakukan dengan tujuan  untuk  memberikan  batasan  minimal atau rentang tentang besarnya kandungan air di dalam bahan. Hal ini dihubungkan dengan kestabilan  simplisia  selama  penyimpanan (Depkes  RI,  2000).    Penetapan  kadar  abu dilakukan  dengan  tujuan  untuk  memberikan gambaran  kandungan  mineral  internal  dan eksternal  yang  berasal  dari  proses  awal sampai terbentuknya ekstrak. Pada prinsipnya, bahan dipanaskan pada temperatur  dimana  senyawa  organik  dan turunannya terdestruksi dan menguap sehingga tinggal unsur mineral dan anorganik  (Depkes  RI,  2000).  Sementara larut  air  dan  etanol  dihubungkan  dengan kandungan  kimia  dalam  tumbuhan  yang terlarut  dalam  air  dan  etanol.  Penetapan kadar  sari  dilakukan  dengan  tujuan  untuk memberikan gambaran awal jumlah senyawa kandungan (Depkes RI, 2000).
Tabel 1. Hasil pemeriksaan karakteristik simplisia daun Afrika ( Vernonia amygdalina Delile.). Pemeriksaan Hasil (%) Kadar air 9,95 Susut pengeringan 9,97 Kadar abu total 9,50 Kadar abu tidak larut asam 2,33 Kadar abu larut air 2,50 Kadar sari larut etanol 16,90 Kadar sari larut air 18,22
Penapisan  fitokimia  dilakukan  pada serbuk simplisia dan ekstrak kental. Penapisan  fitokimia  ini  merupakan  uji kualitatif  yang  bertujuan  untuk  mengetahui kandungan  senyawa  kimia  atau  metabolit sekunder  yang terdapat dalam tanaman  yang diteliti.  Hasil  ini  akan  menjadi  dasar  untuk melakukan pengujian selanjutnya. Penapisan fitokimia  pada  penelitian  ini  dilakukan terhadap senyawa golongan flavonoid, saponin, tanin, kuinon, alkaloid, dan steroid/triterpenoid.
Tabel 2. Hasil penapisan fitokimia simplisia dan ekstrak daun Afrika  ( Vernonia amygdalina Delile.)
Ket: (+) = Terdeteksi (-)  = Tidak terdeteksi
Hasil dari penapisan fitokimia menunjukkan  bahwa  simplisia  dan  ekstrak daun Afrika mengandung senyawa flavonoid,  saponin,  tanin,  kuinon,  dan steroid/triterpenoid (Tabel 2). Tujuan dilakukannya  penapisan  fitokimia  terhadap ekstrak  yaitu  untuk  memastikan  bahwa proses  ekstraksi  serta  pemekatan  ekstrak tidak  merusak  senyawa  yang  terkandung dalam  simplisia,  dan  untuk  memastikan bahwa  senyawa  yang  dimaksud  dalam pengujian  dapat  terdeteksi.  Flavonoid  ini merupakan  metabolit  sekunder  yang  diduga dapat  berperan  sebagai  senyawa  antioksidan yang  terbukti  dapat  menghambat  aktivitas ksantin oksidase (Kristiani et al ., 2013).
Metode  ekstraksi  yang  digunakan pada  penelitian  ini  yaitu  maserasi.  Pelarut yang  digunakan  yaitu  etanol  96%.  Etanol merupakan penyari universal sehingga diharapkan semua senyawa kimia baik polar, semipolar  maupun  non  polar  dapat  tertarik (Sun et al ., 2015). Proses maserasi dilakukan 3x24 jam, dengan pengadukan sebanyak 2-3 kali sehari dengan tujuan untuk meningkatkan  kontak  serbuk  pada  larutan penyari  sehingga  diperoleh  hasil  ekstrak kental  dengan  rendemen  ekstrak  sebesar 13,93%.
Pengujian  aktivitas  antihiperurisemia dilakukan  terhadap  ekstrak  etanol  daun Afrika  dengan  menggunakan  mencit  putih jantan  galur Swiss  Webster .  Dosis  yang
digunakan dalam penelitian ini menggunakan  dosis  100  mg/KgBB,  200 mg/KgBB,  dan  400  mg/KgBB.  Pemilihan jenis  kelamin  jantan  didasarkan  pada pertimbangan  bahwa  mencit  jantan  tidak mempunyai hormon estrogen, jika ada hanya dalam  jumlah  yang  sedikit  serta  mempunyai kondisi hormonal yang stabil jika dibandingkan  dengan  mencit  betina  yang mengalami  perubahan  hormonal  pada  masa- masa tertentu seperti pada masa siklus estrus, masa  kehamilan,  dan  menyusui  dimana kondisi  tersebut  dapat  memengaruhi  kondisi psikologis hewan uji (Muhtadi et al ., 2014). Pengukuran kadar asam urat menggunakan  metode  POCT  dengan  alat Easy  Touch ®  dimana  prinsip  analisisnya menggunakan  katalis  yang  digabungkan dengan  teknologi  biosensor  yang  spesifik terhadap pengukuran asam urat. Ketika darah diteteskan  pada  zona strip  test maka katalisator  asam  urat  akan  mengoksidasi asam  urat  dalam  darah.  Intensitas  dari elektron  yang  terbentuk  dalam  alat  setara dengan  konsentrasi  asam  urat  dalam  darah (Pawestri,  2018).  Kadar  asam  urat  awal diukur, selanjutnya mencit dibuat hiperurisemia dengan penginduksian senyawa  yang  mengandung  kadar  purin tinggi. Induktor hiperurisemia yang digunakan yaitu suspensi biji melinjo dan jus hati  ayam.  Pemberian  biji  melinjo  dengan dosis  4g/KgBB  dan  jus  hati  ayam  50 mL/KgBB  selama  9  hari  berturut-turut mampu  meningkatkan  kadar  asam  urat mencit.  Hati  ayam  dan  biji  melinjo  dipilih karena merupakan jenis makanan yang dapat memicu  peningkatan  kadar  asam  urat  dalam darah karena mengandung purin dalam kadar yang  relatif  tinggi.  Hati  ayam  memiliki kandungan  purin  tinggi  yaitu  100-1000  mg purin/  100  g  bahan  makanan  sedangkan  biji melinjo  memiliki  kandungan  purin  sedang yaitu 9-100 mg purin/ 100 g bahan makanan (Kusumayanti dan Komang, 2014). Metabolit sekunder Hasil pengamatan Simplisia Ekstrak Alkaloid - - Flavonoid + + Saponin + + Tanin + + Kuinon + + Steroid/triterpenoid + +
Tabel 3 Rata-Rata Kadar Asam Urat Darah Sebelum Induksi, Saat Terinduksi dan Saat Pemberian
sediaan uji Kelompok Uji Kadar Asam Urat (mg/dL) t0 Tinduksi t1 t3 t6 t9 Kontrol (-) 3,0±0 7,80±1,25 a 7,95 ± 1,16 7,85 ± 1,2 7,65±0,89 7,85±0,80 Kontrol (+) 3,0±0 8,28±2,31 a 5,98±1,93 4,8±2,09* 3,0±0,0* 3,0 ±0,0* Ekstrak Etanol Daun Afrika 100 mg/KgBB 3,0±0 9,0±2,31 a 9,05 ± 0,42 7,95 ± 0,45 6,63 ± 0,33 5,25 ± 1,15* Ekstrak Etanol Daun Afrika 200 mg/KgBB 3,0±0 9,53±2,62 a 9,37 ± 2,94 7,7 ± 2,43 * 5,57±1,97* 4,1 ± 1.61* Ekstrak Etanol Daun Afrika 400 mg/KgBB 3,0±0 10,4±2.33 a 9,88 ± 2,46 7,7 ± 2,17 4,55±1,94* 3,45 ± 0,90*
Keterangan : t0 = kadar asam uarat sebelum induksi; t1 = Kadar asam urat hari pertama; t3 = Kadar asam urat hari  ke-3;  t6  =  Kadar  asam  urat  hari  ke-6;  t9  =  Kadar  asam  urat  hari  ke-9; a =  Berbeda  bermakna  (α  ≤  0,05) dengan t0; *= Berbeda bermakna (α ≤ 0,05) dengan kelompok kontrol negatif
Pada tabel 3 dapat dilihat bahwa rata- rata kadar asam urat sebelum induksi rendah yaitu  3,0  mg/dL  dikarenakan  belum  terjadi hiperurisemia,  sedangkan  rata-rata  kadar asam  urat  mencit  dari  semua  kelompok setelah diinduksi mengalami perbedaan yang bermakna  secara  statistik  dibandingkan dengan  nilai  awal  sebelum  induksi.  Hal tersebut  dapat  dinyatakan  semua  hewan  uji mengalami  hiperurisemia,  ini  menunjukkan bahwa pemberian kombinasi biji melinjo dan hati ayam efektif dalam meningkatkan kadar asam  urat  darah.  Pada  kelompok  kontrol positif  terjadi  penurunan  mulai  hari  ke-3 hingga  hari  ke-9  pengujian.  Hal  ini menunjukkan  bahwa  metode  induksi  dan metode  pengujian  telah  valid,  sementara ekstrak etanol daun Afrika mampu menurunkan  kadar  asam  urat  mencit  yang berbeda bermakna secara statistik mulai pada hari ke-6 untuk dosis 200 mg/kgBB dan 400 mg/KgBB  yang  terus  belangsung  hingga pengujian pada hari ke-9 dan pada kelompok dosis  100  mg/kgBB  baru  menunjukkan penurunan pada hari ke-9. Hal ini menunjukkan  bahwa  efek  antihiperurisemia berkaitan dengan dosis ekstrak yang diberikan  (Rahmi et  al .,  2020).  Selain  itu,
dosis  100  mg/KgBB  dalam  menurunkan kadar  asam  urat  membutuhkan  waktu  lebih lama juga terjadi karena kandungan senyawa aktif  atau  metabolit  sekunder  yang  terdapat dalam  ekstrak  etanol  daun  Afrika  dosis  100 mg/KgBB lebih sedikit dibandingkan dengan dosis  200  dan  400  mg/KgBB  (Alara et  al ., 2020).
Gambar 1. Grafik rata-rata kadar asam urat pada mencit yang diberi perlakuan ekstrak etanol daun
Afrika pada berbagai dosis 0 2 4 6 8 10 12 Ka da r A sa m Ura t Da ra h mg/dL Waktu (hari) Kontrol - Kontrol + dosis 100
dosis 200 dosis 400

## Gambar 2. Grafik persentase penurunan asam urat setelah diberikan perlakukan ekstrak etanol daun Afrika
Pada  Gambar  1  dapat  dilihat  bahwa terjadi  peningkatan  kadar  asam  urat  darah dari t0 ke t induksi yang menandakan bahwa hewan  uji  berhasil  terinduksi.  Kemudian terjadi  penurunan  pada  hari  ke-9  pada kelompok kontrol positif, kelompok perlakukan  ekstrak  etanol  daun  Afrika  dosis 100, 200, 400mg/KgBB yang sejalan dengan hasil statistik yang menunjukkan kebermaknaan  jika  dibandingkan  terhadap kontrol negatif dimana dapat dikatakan bawa semua  dosis  uji  memiliki  efek  sebagai antihiperurisemia.  Selain  itu,  kelompok kontrol  negatif  menunjukkan  masih  dalam kondisi  terinduksi  hingga  akhir  pengujian yang  menunjukkan  permodelan  hewan  uji berhasil dilakukan.
Aktivitas antihiperurisemia yang ditunjukkan  oleh  alopurinol  maupun  ekstrak etanol  daun  Afrika  dengan  dosis  100,  200, dan  400  mg/KgBB  dinyatakan  juga  dalam persen  penurunan  kadar  asam  urat.  Hasilnya dapat  dilihat  pada  gambar  2  dimana  persen penurunan  tertinggi  sebesar  62%  pada  hari ke-9 ditunjukkan oleh alopurinol dibandingkan  dengan  semua  dosis  ekstrak. Hal  ini  berkaitan  dengan  alopurinol  yang telah dinyatakan sebagai standar terapi untuk hiperurisemia dan gout (Becker et al ., 2015). Alopurinol  merupakan  salah  satu  urikostatik
yang  saat  ini  digunakan  secara  terapeutik dimana bekerja dengan mengurangi pembentukan asam urat dengan menghambat ksantin  oksidase  dan  asam  urat  dimana dalam dosis rendah mekanisme penghambatan berlangsung secara kompetitif dan  dalam  dosis  tinggi  bekerja  secara  tidak kompetitif,  melalui  penghambatan  ksantin oksidase  maka  hipoksantin  dan  ksantin diekskresi lebih banyak dalam urin sehingga kadar  asam  urat  dalam  darah  dan  urin menurun (Chen et al ., 2014). Sementara pada ekstrak  persen    penurunan  tertinggi  sebesar 56%  ditunjukkan  oleh  dosis  400  mg/kgBB pada  hari  ke-9  juga.  Mekanisme  kerja ekstrak  etanol  daun  Afrika  belum  diketahui secara pasti. Namun flavonoid yang terkandung  di  ekstrak  etanol  daun  Afrika diduga  berperan  dalam  menurunkan  kadar asam  urat  karena  bersifat  antioksidan  dan dapat  menghambat  aktivitas  enzim  ksantin oksidase  (Lin et  al .,  2015).  Selain  itu, saponin juga diduga berperan dalam menurunkan kadar asam urat dengan bekerja mengurangi aktivitas enzim ksantin oksidase dalam  serum.  Sedangkan  senyawa  tanin diduga  dapat  mengikat  radikal  bebas  selama perubahan purin menjadi asam urat (Rakanita et al ., 2017).

## KESIMPULAN
Dari hasil penelitian dapat disimpulkan  bahwa  ekstrak  etanol  daun Afrika  ( Vernonia  amygdalina Delile.)  dosis 100,  200,  dan  400  mg/KgBB  memiliki aktivitas  antihiperurisemia  yang  diinduksi oleh  melinjo  dan  jus  hati  ayam  dengan persentase  penurunan  kadar  asam  urat terbesar ditunjukkan oleh ekstrak etanol daun Afrika  dosis  400  mg/KgBB  sebesar  56% namun  masih  lebih  rendah  dibandingkan dengan kemampuan alopurinol.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan
terimakasih kepada Kementerian  Riset  dan  Teknologi  serta Fakultas MIPA Universitas Garut yang telah mendanai penelitian ini.
-30% -20% -10% 0% 10% 20% 30% 40% 50% 60% 70% Kontrol + dosis 100 Dosis 200 dosis 400
Pe rs en Pe nurun an Ka da r A sa m Ura t Kelompok Perlakuan t1 t3 t6 t9

## Daftar Pustaka
Alara, O.R., Abdurahman, N.H. and Olalere, O.A., 2020. Ethanolic extraction of flavonoids, phenolics  and  antioxidant  from Vernonia  amygdalina leaf  using  two-level  factorial design. Journal of King Saud University–Science, 32(1), pp.7–16.
Becker, M.A., Patrick, F.D., Choi, H.K., Dalbeth, N., Storgard, C., Cravets, M. and Scott, B., 2015. An Open-label, 6-month study of allopurinol safety in gout: The LASSO study. Seminars in Arthritis and Rheumatism, 45(2), pp.174-183.
Chen, Y.C.,  Huang, C.C., Tsai, K.C., Huang, W.J., Huang, W.C., Hsu, Y.C. and Hsu, F.L., 2014.  Evaluation  of  the  antihyperuricemic  activity  of  phytochemicals  from Davalia farmosana by  enzyme  Assay  and  hyperurecemic  mice  model.  Hindawi  Publishing Corporation  Evidence-Based  Complementary  and  Alternative  Medicine,  vol  2014, http://dx.doi.org/10.1155/2014/873607
Departemen  Kesehatan  Republik  Indonesia,  2000.  Parameter  standar  umum  ekstrak tumbuhan obat cetakan pertama (pp.13-32). Jakarta.
Djohar, M. and Paramitha, R., 2015. Efektivitas rebusan daun salam ( Syzygium polyanthum ) terhadap penurunan kadar asam urat dalam darah mencit putih jantan. Pharmacy, 12(2), pp.176–185.
Kementerian Kesehatan Republik Indonesia. 2018. Hasil Utama Riskesdas 2018. Kristiani,  R.  D.,  Rahayu,  D.  and  Subarnas,  A.,  2013.  Aktivitas  antihiperurisemia  ekstrak etanol daun pakis tangkur ( Polypodium feei ) pada mencit jantan. New Bionatura, 15(3), pp.174–177.
Kusumayanti,  G.A.D.,  Wiardani,  N.K.  and  Sugiani,  P.P.S.,  2014.  Diet  mencegah  dan mengatasi gangguan asam urat. Jurnal Ilmu Gizi, 5(1), pp.69-78.
Muhtadi,  Suhendi,  A.,  Wahyuningtyas,  N.,  and  Sutrisna,  E.M.,  2014.  Uji  praklinik antihiperurisemia secara in vivo pada mencit putih jantan galur balb-c dari ekstrak daun salam  ( Syzigium  polyanthum walp)  dan  daun  belimbing  wuluh  ( Averrhoa  bilimbi l.). Biomedika vol 6(1);  17–23.
Pawestri, U., 2018. Aktivitas antihiperurisemia ekstrak etanol daun kesum ( Polygonum minus Huds.)  pada  mencit  jantan  galur  swiss  webster.  Skripsi  S1  Prodi  Farmasi  Universitas Garut.
Rahmi, E.P., Kumolosasi, E., Jalil J., Husain, K., Buang, F., Razak, A.F.A. and Jamal, J.A., 2020.  Anti-hyperuricemic  and  anti-inflammatory  effects  of Marantodes  pumilum as potential treatment for gout. Front. Pharmacol, 11. doi: 10.3389/fphar.2020.00289
Rakanita,  Y.,  Hastuti,  L.,  Tandi,  J.  and  Mulayani,  S.,  2017.  Efektivitas  antihiperurisemia ekstrak  etanol  daun  seledri  (eeds)  pada  tikus  induksi  kalium  oksonat.  Journal  of Tropical Pharmacy and Chemistry, 4(1), pp.1-6.
Sinaga, A. F., Bodhi, W. and Lolo, W.A., 2014. Uji efek ekstrak etanol daun salam ( Syzygium polyanthum (Wight.) Walp) terhadap penurunan  kadar  asam  urat  tikus putih diinduksi potasium oksonat. Pharmacon Jurnal Ilmiah Farmasi, 3(2), pp.141–145.
Sukrama,  I.D.M.,  2015.  Xanthine  oxydase  inhibition  of  kombucha  tea  in  hyperuricemia induced  wistar  rat:  decrease  of  uric  acid,  malondialdehyde,  and  8-hydroxy-2’- deoxyguanosine. Bali Medical Journal, 4(1), pp.32–36.
Sumarmin,  R.,  Yuniarti,  E.,  and  Zulino,  G.,  2017.  Uji  in  vivo  ekstrak  buah  mahkota  dewa ( Phaleria  macrocarpa (Scheff.)  Boerl.)  terhadap  kadar  asam  urat  pada  mencit  jantan ( Mus musculus L.). Journal Biosains, 1(2), pp.57–61.
Sun, C., Wu, Z., Wang, Z. and Zhang, H., 2015. Effect of ethanol/water solvent on phenolic profiles  and  antioxidant  properties  of  beijing  propolis  extracts.  Hindawi  Publishing Corporation  Evidence-Based  Complementary  and  Alternative  Medicine,  Vol  2015 http://dx.doi.org/10.1155/2015/595393
Tarigan,  I.  M.,  Bahri,  S.  and  Saragih,  A.,  2012.  Aktivitas  antihiperurisemia  ekstrak  etanol herba  suruhan  ( Peperomia  pellucida (L.)  Kunth)  pada  mencit  jantan.  Journal  of Pharmaceutics and Pharmacology, 1(1), pp.37–43.