## Hubungan Kekerabatan Fenetik Jamur Shiitake ( Lentinula edodes (Berk.) Pegler) berdasarkan Karakter Morfologi
Nuraeni Ekowati1,2*, Rina Sri Kasiamdari2, Nursamsi Pusposendjojo3,
dan C.J. Soegihardjo4
1 Fakultas Biologi Universitas Jenderal Soedirman, Purwokerto
2 Fakultas Biologi Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta
3 Fakultas Pertanian Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta
4 Fakultas Farmasi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta
E-mail: Nuraeniekowati@yahoo.com

## Diterima Desember 2010 disetujui untuk diterbitkan Mei 2011

## Abstract
Phenetic  relationship  of  shiitake  mushroom  ( Lentinula  edodes (Berk.)  Pegler)  cultivated  in Indonesia especially in Java is still undisclosed. In order to increase adaptability and high production most of cultivators in Indonesia make inter-isolates breeding. Consequently L. edodes isolates grown in Indonesia may have morphological and genetic diversity. Diversity among the isolates of L.edodes can be determined by morphological and molecular assessments. Isolates originating from different locations can show specific morphological characters, and requires more in-depth assessment of the macroscopic and microscopic morphological characters. Four L.edodes isolates from Malang, Cianjur, Lembang and Yogyakarta were understudy to determine their morphological characters and phenetic relationship. Degree of similarity between the isolates was carried out through numerical taxonomy approach  and  the  data  obtained  were  analyzed  using  the  Numerical  taxonomy  program  and multivariate analysis system, version 2.1. The results showed that there was diversity of morphology of the four isolates and based on the results of data analysis obtained, the degree of similarity between the isolates ranged between 83-95%. Isolates of L. edodes from Malang to Cianjur showed the closest phenetic relationship (95%) and isolates from Malang to Yogyakarta showed the most distant phenetic relationship (83%). Based on the morphological characters obtained from this research revealed the diversity and phenetic relationship among the four isolates of L. edodes . Key words: Lentinula edodes , phenetic relationship, morphology, similarity, numerical taxonomy Abstrak
Hubungan kekerabatan jamur shiitake ( Lentinula edodes (Berk.) Pegler) yang dibudidayakan di Indonesia khususnya di Pulau Jawa sampai saat ini belum diketahui. Sebagian besar pembudidaya L.edodes di Indonesia melakukan penyilangan antar isolat untuk mendapatkan produksi yang tinggi, sehingga  isolat  yang  dibudidayakan  di  Indonesia  diperkirakan  memiliki  keragaman  morfologi  dan genetik.  Untuk  menentukan  adanya  keragaman  antar  isolat L.edodes dapat  dilakukan  pengkajian secara  morfologi  maupun  molekular.    Isolat  yang  berasal  dari  lokasi  berbeda  dapat  menunjukkan karakter morfologi yang spesifik, sehingga diperlukan pengkajian lebih mendalam mengenai karakter morfologi makroskopis dan mikroskopisnya. Empat isolat L.edodes asal Malang, Cianjur, Lembang dan Yogyakarta digunakan untuk mengetahui karakter morfologi dan hubungan kekerabatan fenetik. Untuk mendapatkan  tingkat  kesamaan  antar  isolat  dilakukan  melalui  pendekatan  taksonomi  numerik  dan data yang diperoleh dianalisis menggunakan program Numerical taxonomy and multivariate analysis system, version 2.1 . Hasil penelitian menunjukkan bahwa ada keragaman morfologi dari keempat isolat dan berdasarkan hasil analisis data diperoleh tingkat kesamaan antar isolat berkisar antara 83-95%. Isolat L. edodes asal Malang dengan Cianjur menunjukkan hubungan kekerabatan paling dekat (95%) dan isolat asal Malang dengan Yogyakarta menunjukkan hubungan kekerabatan paling jauh (83%). Berdasarkan  karakter  morfologi  dapat  mengungkap  keragaman  dan  hubungan  kekerabatan  antar empat isolat L. edodes. Kata kunci: Lentinula edodes , hubungan kekerabatan, morfologi, kesamaan, taksonomi numerik
negara-negara maju dan merupakan jamur Pendahuluan
pangan  terpenting  kedua  di  dunia.  Jamur
Jamur  shiitake  ( Lentinula  edodes
shiitake  penting  untuk  dikembangkan (Berk.) Pegler) merupakan salah satu jamur
karena  memiliki  banyak  manfaat  di
anggota  filum  Basidiomycota  yang
antaranya  kaya  akan  kandungan  mineral,
berpotensi sebagai jamur pangan dan bahan
vitamin,  asam  amino  esensial,  dan  dapat
obat  ( edible  and  medicinal  mushroom ). L. menghasilkan  senyawa  bioaktif  yang edodes merupakan  salah  satu  komoditas
berpotensi untuk antikanker, antivirus serta
yang  sudah  banyak  dikembangkan  di
dapat  meningkatkan  sistem  kekebalan genetik  ini  mempengaruhi  morfologi  dari tubuh (Smith et al. , 2002; Wasser dan Weis,
keempat isolat tersebut. 2003; Regu ù a dan Siwulski, 2007). Tujuan  penelitian  adalah  untuk Di Indonesia, pengembangan shiitake mengetahui  hubungan  kekerabatan  fenetik
masih  terbatas  di  beberapa  daerah  saja
dan  karakter  morfologi  empat  isolat  jamur
karena  suhu  optimal  untuk  pembentukan
shiitake  ( L.edodes )  asal  Malang,  Cianjur, o Lembang dan Yogyakarta.
tubuh buah spesifik berkisar antara 1525 C.
L.edodes yang dibudidayakan di Indonesia khususnya  di  Pulau  Jawa  bukan  asli  isolat Materi dan Metode Indonesia  tetapi  berasal  dari  Cina,  Korea L.  edodes yang  digunakan  dalam dan Jepang. Sebagian besar pembudidaya penelitian ini terdiri atas empat isolat, yaitu L.edodes di  Indonesia  melakukan  penyi- isolat  1  asal  Malang,  isolat  2  asal  Cianjur, langan  antar  isolat  untuk  mendapatkan
isolat  3  asal  Lembang,  isolat  4  asal
produksi  yang  tinggi  dan  agar  dapat
Yogyakarta dan satu isolat P.ostreatus asal beradaptasi  terhadap  iklim  di  Indonesia, Purwokerto sebagai outgroup , semua isolat sehingga  isolat  yang  dibudidayakan  di
jamur  diperoleh  dalam  bentuk  miselium.
Indonesia diperkirakan memiliki kera-gaman
Masing-masing isolat dikultur pada medium morfologi  dan  genetik.  Untuk  me-nentukan
Potato  Dextrose  Agar (PDA),  diinkubasi
o
adanya  keragaman  beberapa  isolat L. pada  suhu  28 C selama  15  hari.  Setelah edodes dapat dilakukan pengkajian secara
diperoleh kultur murni masing-masing isolat morfologi  maupun  molekular.    Isolat  yang kemudian  dibuat  bibit  pada  medium  biji berasal  dari  lokasi  berbeda  dapat
jagung  dan  bekatul  dengan  perbandingan menunjukkan  karakter  morfologi  yang
3:1. Medium yang telah diinokulasi tersebut
spesifik,  sehingga  diperlukan  pengkajian
diinkubasikan pada suhu kamar selama 30
lebih  mendalam  mengenai  karakter hari.  Setelah  miselium  memenuhi  seluruh m o r f o l o g i   m a k r o s - k o p i s   d a n permukaan  medium  bibit,  bibit  jamur
mikroskopisnya. tersebut  digunakan  untuk  inokulum  pada Hasil  penelitian  yang  telah  dilakukan budidaya L.  edodes .  Budidaya L.  edodes
o l e h   H i b b e t t   d a n   Vi l g a l y s   ( 1 9 9 3 )
dilakukan selama enam bulan pada medium menunjukkan  bahwa  melalui  karakterisasi serbuk  gergaji  kayu  sengon  untuk m o r f o l o g i   d a p a t   d i b u a t   h u b u n g a n mendapatkan tubuh buah. Tubuh buah yang
kekerabatan  beberapa  isolat Lentinus. diperoleh  digunakan  untuk  karakterisasi Karakterisasi morfologi dan kimia juga telah morfologi makroskopis dan mikroskopis. dilaporkan  oleh  Ofodile et  al., (2010)  yang Karakterisasi  morfologi  dilakukan
menggunakan Daedalea  quercina ,  dengan
melalui  pengamatan  struktur  jamur  secara meng-gunakan  karakter  tubuh  buah.  Hasil
makroskopis  untuk  tubuh  buah  dengan penelitiannya  menunjukkan  bahwa  dari prosedur kerja menurut Largent (1973) dan beberapa  isolat  yang  digunakan  terdapat Jordan  (1999).  Karakterisasi  morfologi perbedaan karakter morfologi. Selan-jutnya mikroskopis dilakukan melalui pengamatan Penas et  al., (2004)  menyatakan  bahwa struktur  jamur  secara  mikroskopis  untuk isolat  yang  berbeda  pada Pleurotus
basidiospora,  mise-lium,  dan  tubuh  buah ostreatus dapat  menunjukkan  karakter dengan  prosedur  kerja  menurut  Largent et morfologi  tubuh  buah  yang  spesifik  yang al. (1977).  Pengamatan  hifa  tersier berbeda  antar  isolat,  di  antaranya  ukuran, dilakukan  dengan  mengamati  irisan  tubuh warna  dan  bentuk  tubuh  buah  serta buah masing-masing isolat dengan prosedur k e m a m p u a n   a d a p t a s i n y a   t e r h a d a p kerja menurut Berlyn dan Miksche (1976).
temperatur. Ekowati  (2009)  melaporkan
Berdasarkan  karakter  morfologi bahwa  melalui  karakterisasi  molekular makroskopis dan mikroskopis, selan-jutnya empat isolat L. edodes asal Malang, Cianjur, dibuat  hubungan  kekerabatan  antar  empat Lembang  dan  Yogyakarta  terdapat isolat L.  edodes meng-gunakan  metode keragaman  genetik  dengan  tingkat taksonomi  numerik.  Penentuan  OTU kesamaan  genetik  78-86%.  Selain ( Operational  Taxonomi  Unit )  adalah karakterisasi  molekular  perlu  dilakukan
berdasarkan asal isolat yaitu isolat L. edodes karakterisasi  morfologi  untuk  melengkapi asal  Malang,  Cianjur,  Lembang  dan data keragaman keempat isolat, dan untuk
Yogyakarta  serta  satu  isolat P.ostreatus mengetahui  pula  sejauh  mana  perbedaan untuk outgroup. Karakter  yang  digunakan
Ekowati dkk., Hubungan kekerabatan Fenetik Jamur Shiitake :  110-117

## Hubungan Kekerabatan Fenetik Jamur Shiitake ( Lentinula edodes (Berk.)

## Pegler) berdasarkan Karakter Morfologi
Nuraeni Ekowati1,2*, Rina Sri Kasiamdari2, Nursamsi Pusposendjojo3, dan C.J. Soegihardjo4
1 Fakultas Biologi Universitas Jenderal Soedirman, Purwokerto
2 Fakultas Biologi Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta 3 Fakultas Pertanian Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta 4 Fakultas Farmasi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta E-mail: Nuraeniekowati@yahoo.com

## Diterima Desember 2010 disetujui untuk diterbitkan Mei 2011

## Abstract
Phenetic  relationship  of  shiitake  mushroom  ( Lentinula  edodes (Berk.)  Pegler)  cultivated  in Indonesia especially in Java is still undisclosed. In order to increase adaptability and high production most of cultivators in Indonesia make inter-isolates breeding. Consequently L. edodes isolates grown in Indonesia may have morphological and genetic diversity. Diversity among the isolates of L.edodes can be determined by morphological and molecular assessments. Isolates originating from different locations can show specific morphological characters, and requires more in-depth assessment of the macroscopic and microscopic morphological characters. Four L.edodes isolates from Malang, Cianjur,
Lembang and Yogyakarta were understudy to determine their morphological characters and phenetic relationship. Degree of similarity between the isolates was carried out through numerical taxonomy approach  and  the  data  obtained  were  analyzed  using  the  Numerical  taxonomy  program  and multivariate analysis system, version 2.1. The results showed that there was diversity of morphology of the four isolates and based on the results of data analysis obtained, the degree of similarity between the isolates ranged between 83-95%. Isolates of L. edodes from Malang to Cianjur showed the closest phenetic relationship (95%) and isolates from Malang to Yogyakarta showed the most distant phenetic relationship (83%). Based on the morphological characters obtained from this research revealed the diversity and phenetic relationship among the four isolates of L. edodes . Key words: Lentinula edodes , phenetic relationship, morphology, similarity, numerical taxonomy Abstrak
Hubungan kekerabatan jamur shiitake ( Lentinula edodes (Berk.) Pegler) yang dibudidayakan di Indonesia khususnya di Pulau Jawa sampai saat ini belum diketahui. Sebagian besar pembudidaya L.edodes di Indonesia melakukan penyilangan antar isolat untuk mendapatkan produksi yang tinggi, sehingga  isolat  yang  dibudidayakan  di  Indonesia  diperkirakan  memiliki  keragaman  morfologi  dan genetik.  Untuk  menentukan  adanya  keragaman  antar  isolat L.edodes dapat  dilakukan  pengkajian secara  morfologi  maupun  molekular.    Isolat  yang  berasal  dari  lokasi  berbeda  dapat  menunjukkan karakter morfologi yang spesifik, sehingga diperlukan pengkajian lebih mendalam mengenai karakter morfologi makroskopis dan mikroskopisnya. Empat isolat L.edodes asal Malang, Cianjur, Lembang dan Yogyakarta digunakan untuk mengetahui karakter morfologi dan hubungan kekerabatan fenetik. Untuk mendapatkan  tingkat  kesamaan  antar  isolat  dilakukan  melalui  pendekatan  taksonomi  numerik  dan data yang diperoleh dianalisis menggunakan program Numerical taxonomy and multivariate analysis system, version 2.1 . Hasil penelitian menunjukkan bahwa ada keragaman morfologi dari keempat isolat dan berdasarkan hasil analisis data diperoleh tingkat kesamaan antar isolat berkisar antara 83-95%.
Isolat L. edodes asal Malang dengan Cianjur menunjukkan hubungan kekerabatan paling dekat (95%) dan isolat asal Malang dengan Yogyakarta menunjukkan hubungan kekerabatan paling jauh (83%).
Berdasarkan  karakter  morfologi  dapat  mengungkap  keragaman  dan  hubungan  kekerabatan  antar empat isolat L. edodes. Kata kunci: Lentinula edodes , hubungan kekerabatan, morfologi, kesamaan, taksonomi numerik
negara-negara maju dan merupakan jamur Pendahuluan
pangan  terpenting  kedua  di  dunia.  Jamur
Jamur  shiitake  ( Lentinula  edodes shiitake  penting  untuk  dikembangkan (Berk.) Pegler) merupakan salah satu jamur
karena  memiliki  banyak  manfaat  di anggota  filum  Basidiomycota  yang
antaranya  kaya  akan  kandungan  mineral, berpotensi sebagai jamur pangan dan bahan
vitamin,  asam  amino  esensial,  dan  dapat obat  ( edible  and  medicinal  mushroom ). L. menghasilkan  senyawa  bioaktif  yang edodes merupakan  salah  satu  komoditas berpotensi untuk antikanker, antivirus serta yang  sudah  banyak  dikembangkan  di
dapat  meningkatkan  sistem  kekebalan
genetik  ini  mempengaruhi  morfologi  dari tubuh (Smith et al. , 2002; Wasser dan Weis, keempat isolat tersebut.
2003; Regu ù a dan Siwulski, 2007).
Tujuan  penelitian  adalah  untuk
Di Indonesia, pengembangan shiitake
mengetahui  hubungan  kekerabatan  fenetik masih  terbatas  di  beberapa  daerah  saja
dan  karakter  morfologi  empat  isolat  jamur karena  suhu  optimal  untuk  pembentukan
shiitake  ( L.edodes )  asal  Malang,  Cianjur, o Lembang dan Yogyakarta.
tubuh buah spesifik berkisar antara 1525 C.
L.edodes yang dibudidayakan di Indonesia khususnya  di  Pulau  Jawa  bukan  asli  isolat Materi dan Metode
Indonesia  tetapi  berasal  dari  Cina,  Korea
L.  edodes yang  digunakan  dalam dan Jepang. Sebagian besar pembudidaya
penelitian ini terdiri atas empat isolat, yaitu
L.edodes di  Indonesia  melakukan  penyi- isolat  1  asal  Malang,  isolat  2  asal  Cianjur, langan  antar  isolat  untuk  mendapatkan
isolat  3  asal  Lembang,  isolat  4  asal produksi  yang  tinggi  dan  agar  dapat
Yogyakarta dan satu isolat P.ostreatus asal beradaptasi  terhadap  iklim  di  Indonesia,
Purwokerto sebagai outgroup , semua isolat sehingga  isolat  yang  dibudidayakan  di
jamur  diperoleh  dalam  bentuk  miselium. Indonesia diperkirakan memiliki kera-gaman
Masing-masing isolat dikultur pada medium morfologi  dan  genetik.  Untuk  me-nentukan
Potato  Dextrose  Agar (PDA),  diinkubasi o adanya  keragaman  beberapa  isolat L. pada  suhu  28 C selama  15  hari.  Setelah edodes dapat dilakukan pengkajian secara diperoleh kultur murni masing-masing isolat morfologi  maupun  molekular.    Isolat  yang
kemudian  dibuat  bibit  pada  medium  biji berasal  dari  lokasi  berbeda  dapat
jagung  dan  bekatul  dengan  perbandingan menunjukkan  karakter  morfologi  yang
3:1. Medium yang telah diinokulasi tersebut
spesifik,  sehingga  diperlukan  pengkajian
diinkubasikan pada suhu kamar selama 30
lebih  mendalam  mengenai  karakter
hari.  Setelah  miselium  memenuhi  seluruh m o r f o l o g i   m a k r o s - k o p i s   d a n
permukaan  medium  bibit,  bibit  jamur mikroskopisnya.
tersebut  digunakan  untuk  inokulum  pada
Hasil  penelitian  yang  telah  dilakukan budidaya L.  edodes .  Budidaya L.  edodes o l e h   H i b b e t t   d a n   Vi l g a l y s   ( 1 9 9 3 )
dilakukan selama enam bulan pada medium menunjukkan  bahwa  melalui  karakterisasi
serbuk  gergaji  kayu  sengon  untuk m o r f o l o g i   d a p a t   d i b u a t   h u b u n g a n
mendapatkan tubuh buah. Tubuh buah yang kekerabatan  beberapa  isolat Lentinus. diperoleh  digunakan  untuk  karakterisasi Karakterisasi morfologi dan kimia juga telah
morfologi makroskopis dan mikroskopis.
dilaporkan  oleh  Ofodile et  al., (2010)  yang Karakterisasi  morfologi  dilakukan menggunakan Daedalea  quercina ,  dengan
melalui  pengamatan  struktur  jamur  secara meng-gunakan  karakter  tubuh  buah.  Hasil
makroskopis  untuk  tubuh  buah  dengan
penelitiannya  menunjukkan  bahwa  dari
prosedur kerja menurut Largent (1973) dan
beberapa  isolat  yang  digunakan  terdapat
Jordan  (1999).  Karakterisasi  morfologi perbedaan karakter morfologi. Selan-jutnya
mikroskopis dilakukan melalui pengamatan Penas et  al., (2004)  menyatakan  bahwa struktur  jamur  secara  mikroskopis  untuk
isolat  yang  berbeda  pada Pleurotus
basidiospora,  mise-lium,  dan  tubuh  buah ostreatus dapat  menunjukkan  karakter
dengan  prosedur  kerja  menurut  Largent et morfologi  tubuh  buah  yang  spesifik  yang
al. (1977).  Pengamatan  hifa  tersier berbeda  antar  isolat,  di  antaranya  ukuran,
dilakukan  dengan  mengamati  irisan  tubuh warna  dan  bentuk  tubuh  buah  serta
buah masing-masing isolat dengan prosedur k e m a m p u a n   a d a p t a s i n y a   t e r h a d a p
kerja menurut Berlyn dan Miksche (1976). temperatur. Ekowati  (2009)  melaporkan
Berdasarkan  karakter  morfologi
bahwa  melalui  karakterisasi  molekular
makroskopis dan mikroskopis, selan-jutnya empat isolat L. edodes asal Malang, Cianjur, dibuat  hubungan  kekerabatan  antar  empat
Lembang  dan  Yogyakarta  terdapat
isolat L.  edodes meng-gunakan  metode keragaman  genetik  dengan  tingkat
taksonomi  numerik.  Penentuan  OTU kesamaan  genetik  78-86%.  Selain
( Operational  Taxonomi  Unit )  adalah karakterisasi  molekular  perlu  dilakukan
berdasarkan asal isolat yaitu isolat L. edodes karakterisasi  morfologi  untuk  melengkapi
asal  Malang,  Cianjur,  Lembang  dan
data keragaman keempat isolat, dan untuk Yogyakarta  serta  satu  isolat P.ostreatus mengetahui  pula  sejauh  mana  perbedaan
untuk outgroup. Karakter  yang  digunakan
ditentukan  berdasarkan  karakter  morfologi
tudung  dapat  terbentuk  secara  sem-purna, makros-kopis  dan  mikroskopis  yang  terdiri namun warna tudung pada permukaan atas atas  39  karakter  untuk  setiap  OTU
sedikit  berbeda.    Warna  tudung  pada  fase (Felsenstein,  1983;  Hibbett  dan  Vilgalys, pinhead berbeda  dengan  warna  tudung 1993). pada  fase mature (matang).  Pada  fase Hasil  pengamatan  karakter  pada pinhead ,  keempat  isolat  menunjukkan setiap  OTU  dinyatakan  dengan  skor  1,2,3
warna coklat tua, dengan sedikit perbedaan dan  4  ( multistate  characters ),  hasil  skoring pada isolat asal Malang menunjukkan warna kemudian distandarisasi. Setelah diperoleh yang  lebih tua. Dengan bertambahnya umur nilai  standarisasi  kemudian  nilai  tersebut terjadi perubahan dari fase pinhead menjadi diubah menjadi nilai biner yaitu nilai 0 dan 1.
fase matang, warna yang semula coklat tua Untuk  menghitung  indeks  kesamaan  dan
akan  memudar  menjadi  coklat  (Tabel  1). hubungan kekerabatan antar empat isolat L. Penentuan  kode  warna  digunakan  kamus edodes data  dianalisis  menggunakan
warna menurut Maerz dan Paul (1950).
p r o g r a m N u m e r i c a l   t a x o n o m y   a n d
Karakter  pada  tudung  merupakan multivariate  analysis  system,  version  2.1 . karakter  yang  sangat  diperhatikan  dan
( NTSYSpc21 )  dan  untuk  mengkonstruksi
dianggap penting karena tudung merupakan d e n d o g r a m   m e n g g u n a k a n   m e t o d e
produk utama yang bernilai ekonomis tinggi. Unweighted  Pair  Group  Method  with Pada penelitian ini ukuran diameter tudung Arithmatic  Average  Algorithm (UPGMA) dari  keempat  isolat L.  edodes berkisar (Rohlf,  2000). antara  4-14  cm.  Ukuran  tudung  pada p e n e l i t i a n   i n i   l e b i h   b e s a r   a p a b i l a dibandingkan  dengan  penelitian  Djuariah Hasil dan Pembahasan
(2006)  memberikan  hasil  ukuran    tudung
Karakterisasi  morfologi  dilakukan
berkisar antara 2,9-7,9 cm. Namun demikian
melalui pengamatan morfologi makros-kopis
ukuran  tudung  pada  penelitian  ini  masih pada  tubuh  buah  yang  meliputi  tudung,
lebih  kecil  apabila  dibandingkan  dengan tangkai dan lamela, sedangkan pengamatan
pernyataan  Keizer  (1998)  bahwa  ukuran
mikroskopis  dilakukan  pada  miselium
tudung L. edodes berkisar antara 8-20 cm, primer, miselium sekunder, miselium tersier,
sedangkan menurut Stamets (2000) adalah
basidium,  sistidium  dan  spora.  Untuk
5-25  cm.  Ukuran  diameter  tudung  pada
menentukan  indeks  kesamaan  ( similarity
p a n e l i t i a n   i n i   l e b i h   k e c i l   a p a b i l a index ) dan hubungan kekerabatan isolat L. dibandingkan  dengan  pernyataan  Keizer edodes asal Malang, Cianjur, Lembang dan
(1998)  dan  Stamets  (2000),  hal  ini
Yogyakarta  serta  satu  isolat P.  ostreatus
disebabkan  oleh  teknik  budidaya  yang sebagai outgroup ,  digunakan  39  karakter
berbeda.  Pada  penelitian  ini  digunakan morfologi  baik  makroskopis  maupun
teknik budidaya tradisional sedangkan pada
mikroskopis.  Berdasarkan  hasil  penga-
kedua  acuan  pustaka  tersebut  digunakan
matan menunjukkan ada beberapa karakter
teknik  budidaya  modern  pada  ruangan
yang  berbeda,  di  antaranya  terdapat  pada
tertutup  dengan  pengaturan  semua  faktor karakter  warna  tudung  permukaan  atas,
lingkungan.  Selain  itu  jenis  isolat  yang ukuran tudung, kete-balan tudung, panjang
digunakan  juga  berbeda  sehingga  secara
tangkai,  diameter  tangkai,  ukuran  spora,
genetik  berbeda.  Karakter  morfologi
persentase  perkecambahan  spora  dan
makroskopis  dan  mikroskopis  keempat waktu perke-cambahan spora (Tabel 1).
isolat L.edodes dan P.ostreatus disajikan Pada  pengamatan  karakter  tudung
pada Tabel 1.
keempat  isolat L.  edodes menunjukkan karakter  bentuk  tudung  yang  sama  dan
Tabel 1. Karakter  morfologi  makroskopis  dan  mikroskopis    empat  isolat L.  edodes dan

## P.ostreatus
Table 1. Macroscopic and microscopic morphological characters of four isolates of L.edodes and P.ostreatus
No. Karakter OTU (Jenis isolat) L. edodes 'Malang' L. edodes 'Cianjur' L. edodes 'Lembang' L. edodes 'Yogya' P.ostreatus 1 Bentuk tudung (tampak samping) rata rata rata rata Rata 2 Bentuk tudung (tampak atas) bundar bundar bundar bundar Mengipas 3 Tepi tudung beringgit beringgit beringgit beringgit Mengeriting 4 Warna tudung (permukaan atas) coklat (6D3) coklat (6D3) coklat (5B9) coklat (5B9) putih (1A1) 5 Warna tudung (permukaan bawah) krem (4A1) krem (4A1) krem (4A1) krem (4A1) putih (1A1) 6 Warna pinhead coklat tua (7L12) coklat tua (8J6) coklat tua (8J6) coklat tua (8J6) putih (1A1) 7 Ukuran tudung 5-11 cm 4-9 cm 8-14 cm 8-14 cm 8,0-11,3 cm 8 Ketebalan tudung 1-1,8 cm 1-1,8 cm 1,5-2,8 cm 1,5-2,8 cm 1,5-1,8 cm 9 Tekstur tudung lunak lunak lunak lunak Lunak 10 Permukaan atas tudung lembap, berambut lembap, berambut lembap, berambut lembap, berambut lembap, halus 11 Warna lamella krem (4A1) krem (4A1) krem (4A1) krem (4A1) putih (1A1) 12 Perlekatan lamella bebas bebas bebas bebas Melanjut 13 Spasi pada lamella rapat rapat rapat rapat Rapat 14 Tepi lamella bergelom-bang bergelom-bang bergelom-bang bergelom-bang Bergelom-bang halus 15 Perlekatan tangkai pada tudung di tengah di tengah di tengah di tengah di samping 16 Perlekatan tangkai dengan substrat menyerupai akar menyerupai akar menyerupai akar menyerupai akar menyerupai akar 17 Bentuk tangkai agak menggada agak menggada agak menggada agak menggada agak menggada 18 Permukaan tangkai memata jala memata jala memata jala memata jala memata jala 19 Warna tangkai krem (4A7) krem (4A7) krem (4A7) krem (4A7) putih (1A1) 20 Kekerasan tangkai mengayu mengayu mengayu mengayu Menjangat 21 Cincin pada tangkai tidak ada tidak ada tidak ada tidak ada tidak ada 22 Volva pada tangkai tidak ada tidak ada tidak ada tidak ada tidak ada 23 Panjang tangkai 3,5-6,5 cm 3,5-7,5 cm 3,5-9,5 cm 3,5-7,5 cm 3,5-4,5 cm 24 Diameter tangkai 0,7-1,5 cm 0,7-1,5 cm 1,1-1,5 cm 1,1-2,0 cm 0,8-2,0 cm 25 Warna spora putih putih putih putih Putih 26 Bentuk spora jorong jorong jorong jorong Jorong 27 Ukuran spora 5,0-7,2x2,6-3,7 µm 4,0-5,0x2,0-3,0 µm 5,0-7,2x2,6-3,7 µm 5,0-7,2x2,6-3,7 µm 6,1-7,4 x 3,1-4,0 µm 28 Jumlah basidium 4 4 4 4 4 29 Perkecambahan spora 50-70 % 40-60 % 60-90% 60-90% 50-70 % 30 Waktu perkecambahan spora 7 hari 6 hari 6 hari 5 hari 6 hari 31 Sekat hifa ada ada ada ada Ada 32 Clamp connection pada hifa sekunder ada ada ada ada ada 33 Clamp connection pada hifa tersier ada ada ada ada ada 34 Diameter hifa primer 2,5-3,7 µm 2,5-3,7 µm 2,5-3,7 µm 2,5-3,7 µm 2,5-3,7 µm 35 Diameter hifa sekunder 3,1-5,1 µm 3,1-5,1 µm 3,1-5,1 µm 3,1-5,1 µm 2,9-4,1µm 36 Diameter hifa tersier 6,9-8,8 µm 6,9-8,8 µm 6,9-8,8 µm 6,9-8,8 µm 7,5-10 µm 37 Sistem hifa monomitik monomitik monomitik monomitik Monomitik 38 Bentuk sistidium menggada menggada menggada menggada Menggada 39 Diameter sistidium 3,0-4,5 µm 3,0-4,5 µm 3,0-4,5 µm 3,0-4,5 µm 3,0-4,5 µm Keterangan:
Istilah dalam karakter morfologi diterjemahkan sesuai dengan Glosarium Biologi (Rifai dan Ermitati, 1995)
Ekowati dkk., Hubungan kekerabatan Fenetik Jamur Shiitake :  110-117
ditentukan  berdasarkan  karakter  morfologi tudung  dapat  terbentuk  secara  sem-purna, makros-kopis  dan  mikroskopis  yang  terdiri namun warna tudung pada permukaan atas atas  39  karakter  untuk  setiap  OTU sedikit  berbeda.    Warna  tudung  pada  fase (Felsenstein,  1983;  Hibbett  dan  Vilgalys, pinhead berbeda  dengan  warna  tudung 1993). pada  fase mature (matang).  Pada  fase
Hasil  pengamatan  karakter  pada pinhead ,  keempat  isolat  menunjukkan setiap  OTU  dinyatakan  dengan  skor  1,2,3 warna coklat tua, dengan sedikit perbedaan dan  4  ( multistate  characters ),  hasil  skoring pada isolat asal Malang menunjukkan warna kemudian distandarisasi. Setelah diperoleh yang  lebih tua. Dengan bertambahnya umur nilai  standarisasi  kemudian  nilai  tersebut terjadi perubahan dari fase pinhead menjadi diubah menjadi nilai biner yaitu nilai 0 dan 1. fase matang, warna yang semula coklat tua Untuk  menghitung  indeks  kesamaan  dan akan  memudar  menjadi  coklat  (Tabel  1). hubungan kekerabatan antar empat isolat L. Penentuan  kode  warna  digunakan  kamus edodes data  dianalisis  menggunakan warna menurut Maerz dan Paul (1950).
p r o g r a m N u m e r i c a l   t a x o n o m y   a n d
Karakter  pada  tudung  merupakan multivariate  analysis  system,  version  2.1 . karakter  yang  sangat  diperhatikan  dan ( NTSYSpc21 )  dan  untuk  mengkonstruksi dianggap penting karena tudung merupakan d e n d o g r a m   m e n g g u n a k a n   m e t o d e
produk utama yang bernilai ekonomis tinggi.
Unweighted  Pair  Group  Method  with
Pada penelitian ini ukuran diameter tudung
Arithmatic  Average  Algorithm (UPGMA) dari  keempat  isolat L.  edodes berkisar (Rohlf,  2000). antara  4-14  cm.  Ukuran  tudung  pada p e n e l i t i a n   i n i   l e b i h   b e s a r   a p a b i l a dibandingkan  dengan  penelitian  Djuariah Hasil dan Pembahasan
(2006)  memberikan  hasil  ukuran    tudung
Karakterisasi  morfologi  dilakukan
berkisar antara 2,9-7,9 cm. Namun demikian melalui pengamatan morfologi makros-kopis
ukuran  tudung  pada  penelitian  ini  masih pada  tubuh  buah  yang  meliputi  tudung,
lebih  kecil  apabila  dibandingkan  dengan tangkai dan lamela, sedangkan pengamatan
pernyataan  Keizer  (1998)  bahwa  ukuran mikroskopis  dilakukan  pada  miselium
tudung L. edodes berkisar antara 8-20 cm, primer, miselium sekunder, miselium tersier,
sedangkan menurut Stamets (2000) adalah basidium,  sistidium  dan  spora.  Untuk
5-25  cm.  Ukuran  diameter  tudung  pada menentukan  indeks  kesamaan  ( similarity p a n e l i t i a n   i n i   l e b i h   k e c i l   a p a b i l a index ) dan hubungan kekerabatan isolat L. dibandingkan  dengan  pernyataan  Keizer edodes asal Malang, Cianjur, Lembang dan
(1998)  dan  Stamets  (2000),  hal  ini
Yogyakarta  serta  satu  isolat P.  ostreatus disebabkan  oleh  teknik  budidaya  yang sebagai outgroup ,  digunakan  39  karakter berbeda.  Pada  penelitian  ini  digunakan morfologi  baik  makroskopis  maupun
teknik budidaya tradisional sedangkan pada mikroskopis.  Berdasarkan  hasil  penga-
kedua  acuan  pustaka  tersebut  digunakan matan menunjukkan ada beberapa karakter
teknik  budidaya  modern  pada  ruangan yang  berbeda,  di  antaranya  terdapat  pada
tertutup  dengan  pengaturan  semua  faktor karakter  warna  tudung  permukaan  atas,
lingkungan.  Selain  itu  jenis  isolat  yang ukuran tudung, kete-balan tudung, panjang
digunakan  juga  berbeda  sehingga  secara tangkai,  diameter  tangkai,  ukuran  spora,
genetik  berbeda.  Karakter  morfologi persentase  perkecambahan  spora  dan
makroskopis  dan  mikroskopis  keempat waktu perke-cambahan spora (Tabel 1).
isolat L.edodes dan P.ostreatus disajikan Pada  pengamatan  karakter  tudung
pada Tabel 1. keempat  isolat L.  edodes menunjukkan karakter  bentuk  tudung  yang  sama  dan
Tabel 1. Karakter  morfologi  makroskopis  dan  mikroskopis    empat  isolat L.  edodes dan

## P.ostreatus
Table 1. Macroscopic and microscopic morphological characters of four isolates of L.edodes and P.ostreatus
112
No. Karakter OTU (Jenis isolat) L. edodes 'Malang' L. edodes 'Cianjur' L. edodes 'Lembang' L. edodes 'Yogya' P.ostreatus 1 Bentuk tudung (tampak samping) rata rata rata rata Rata 2 Bentuk tudung (tampak atas) bundar bundar bundar bundar Mengipas 3 Tepi tudung beringgit beringgit beringgit beringgit Mengeriting 4 Warna tudung (permukaan atas) coklat (6D3) coklat (6D3) coklat (5B9) coklat (5B9) putih (1A1) 5 Warna tudung (permukaan bawah) krem (4A1) krem (4A1) krem (4A1) krem (4A1) putih (1A1) 6 Warna pinhead coklat tua (7L12) coklat tua (8J6) coklat tua (8J6) coklat tua (8J6) putih (1A1) 7 Ukuran tudung 5-11 cm 4-9 cm 8-14 cm 8-14 cm 8,0-11,3 cm 8 Ketebalan tudung 1-1,8 cm 1-1,8 cm 1,5-2,8 cm 1,5-2,8 cm 1,5-1,8 cm 9 Tekstur tudung lunak lunak lunak lunak Lunak 10 Permukaan atas tudung lembap, berambut lembap, berambut lembap, berambut lembap, berambut lembap, halus 11 Warna lamella krem (4A1) krem (4A1) krem (4A1) krem (4A1) putih (1A1) 12 Perlekatan lamella bebas bebas bebas bebas Melanjut 13 Spasi pada lamella rapat rapat rapat rapat Rapat 14 Tepi lamella bergelom-bang bergelom-bang bergelom-bang bergelom-bang Bergelom-bang halus 15 Perlekatan tangkai pada tudung di tengah di tengah di tengah di tengah di samping 16 Perlekatan tangkai dengan substrat menyerupai akar menyerupai akar menyerupai akar menyerupai akar menyerupai akar 17 Bentuk tangkai agak menggada agak menggada agak menggada agak menggada agak menggada 18 Permukaan tangkai memata jala memata jala memata jala memata jala memata jala 19 Warna tangkai krem (4A7) krem (4A7) krem (4A7) krem (4A7) putih (1A1) 20 Kekerasan tangkai mengayu mengayu mengayu mengayu Menjangat 21 Cincin pada tangkai tidak ada tidak ada tidak ada tidak ada tidak ada 22 Volva pada tangkai tidak ada tidak ada tidak ada tidak ada tidak ada 23 Panjang tangkai 3,5-6,5 cm 3,5-7,5 cm 3,5-9,5 cm 3,5-7,5 cm 3,5-4,5 cm 24 Diameter tangkai 0,7-1,5 cm 0,7-1,5 cm 1,1-1,5 cm 1,1-2,0 cm 0,8-2,0 cm 25 Warna spora putih putih putih putih Putih 26 Bentuk spora jorong jorong jorong jorong Jorong 27 Ukuran spora 5,0-7,2x2,6-3,7 µm 4,0-5,0x2,0-3,0 µm 5,0-7,2x2,6-3,7 µm 5,0-7,2x2,6-3,7 µm 6,1-7,4 x 3,1-4,0 µm 28 Jumlah basidium 4 4 4 4 4 29 Perkecambahan spora 50-70 % 40-60 % 60-90% 60-90% 50-70 % 30 Waktu perkecambahan spora 7 hari 6 hari 6 hari 5 hari 6 hari 31 Sekat hifa ada ada ada ada Ada 32 Clamp connection pada hifa sekunder ada ada ada ada ada 33 Clamp connection pada hifa tersier ada ada ada ada ada 34 Diameter hifa primer 2,5-3,7 µm 2,5-3,7 µm 2,5-3,7 µm 2,5-3,7 µm 2,5-3,7 µm 35 Diameter hifa sekunder 3,1-5,1 µm 3,1-5,1 µm 3,1-5,1 µm 3,1-5,1 µm 2,9-4,1µm 36 Diameter hifa tersier 6,9-8,8 µm 6,9-8,8 µm 6,9-8,8 µm 6,9-8,8 µm 7,5-10 µm 37 Sistem hifa monomitik monomitik monomitik monomitik Monomitik 38 Bentuk sistidium menggada menggada menggada menggada Menggada 39 Diameter sistidium 3,0-4,5 µm 3,0-4,5 µm 3,0-4,5 µm 3,0-4,5 µm 3,0-4,5 µm Keterangan:
Istilah dalam karakter morfologi diterjemahkan sesuai dengan Glosarium Biologi (Rifai dan Ermitati, 1995)
Tabel 1 menunjukkan bahwa karakter masing  7,17  cm  dan  5,1  cm.  Penggunaan ukuran  dan  ketebalan  tudung  di  antara
ketiga  bahan  tersebut  dengan  modifikasi keempat  isolat L.edodes ada  perbedaan. pada  beberapa  bahan  pendukung  untuk Isolat L.  edodes asal  Lembang  dan
budidaya  jamur  tiram  putih  mampu Yogyakarta  menunjukkan  ukuran  tudung
memberikan pengaruh   yang berbeda pada d a n   k e t e b a l a n   y a n g   l e b i h   b e s a r morfologi P. ostreatus. Penelitian mengenai dibandingkan dengan isolat asal Malang dan
karakterisasi  morfologi  dan  biokimia Cianjur.  Adanya  perbedaan  ukuran  tudung Pleurotus spp.  juga  telah  dilaporkan  oleh dari  keempat  isolat L.  edodes dapat Shukla  dan  Jaitly  (2011)  bahwa  karakter disebabkan  oleh  faktor  genetik  dan  faktor
morfologi  yang  dapat  menunjukkan  variasi lingkungan  tempat  tumbuh.  Berdasarkan
antar  isolat  adalah  panjang  dan  lebar hasil karakterisasi genetik secara molekular
tudung,  panjang  tangkai,  tepi  tudung  dan i s o l a t   a s a l   L e m b a n g   m e n u n j u k k a n warna tudung. hubungan  kekerabatan  genetik  yang  lebih
Selain  ukuran  tudung,  karakter  yang dekat dengan isolat asal Yogyakarta dengan
menunjukkan  perbedaan  adalah  panjang tingkat kesamaan genetik 86%. Sedangkan tangkai.  Pada  penelitian  ini  diperoleh isolat  asal  Lembang  dengan  isolat  asal
panjang tangkai yang bervariasi antara 3,5- Malang dan Cianjur menunjukkan hubungan 9,5  cm.  Ukuran  ini  lebih  panjang kekerabatan yang lebih jauh dengan tingkat dibandingkan  dengan    pernyataan  Keizer kesamaan genetik 78% (Ekowati, 2009). Hal
(1998)  bahwa  panjang  tangkai L.  edodes ini dapat menyebabkan adanya perbedaan
adalah 5,0 cm, sedangkan menurut Stamets pada  ukuran  dan  ketebalan  tubuh  buah.
(2000) adalah 3-5 cm, dan Djuariah (2006)
Lokasi  budidaya L.  edodes adalah  di  desa
adalah 4,0-6,5 cm.
Serang,  Kabupaten  Purbalingga,  Jawa
Karakter  morfologi  mikroskopik  yang
Tengah,  dengan  ketinggian  tempat  900  m
menunjukkan ada perbedaan adalah ukuran
0
spora.  Ukuran  spora  isolat  asal  Cianjur dpl,  suhu  berkisar  antara  18-25 C  dan
adalah    4,0-5,0  x  2,0-3,0  µm,  sedangkan
kelembaban  antara  80-95%.  Menurut  Paul
isolat  asal  Malang,  Lembang  dan dan Donoghue (1990) suhu optimum untuk 0 Yogyakarta  adalah  5,0-7,2  x  2,6-3,7  µm pertumbuhan  tubuh  buah  antara  10-25 C,
(Tabel  1).  Menurut  Stamets  (2000)  ukuran dan kelembaban antara 85-95%. Suhu dan
spora L. edodes adalah 5,0-6,5 x 3,0-3,5 µm. kelembaban  di  desa  Serang  memenuhi
Karakter  mikros-kopik  lainnya  yaitu  warna
syarat  untuk  pertumbuhan L.edodes spora  adalah  putih  berbentuk  oval  sampai sehingga  tubuh  buah  dapat  terbentuk
jorong, basidium menyangga  empat spora,
sempurna.
sistem  hifa  monomitik,  dan  ada clamp Pertumbuhan tubuh buah dan karakter
connection pada  hifa  sekunder  dan  tersier morfologi  selain  dipengaruhi  oleh  faktor
adalah sesuai dengan pernyataan Stamets lingkungan  dan  teknik  budidaya,  juga
(2000).
dipengaruhi  oleh  medium  yang  digunakan.
Berdasarkan  karakter  morfologi
Dalam  penelitian  ini  digunakan  medium
makroskopis  dan  mikroskopis  yang  telah
serbuk  gergaji  kayu  sengon  yang
diperoleh kemudian dilakukan skoring data
merupakan  medium  terbaik  berdasarkan
morfologi,  dilanjutkan  dengan  standarisasi
penelitian pendahuluan. Dikemukakan pula
sifat pada karakter morfo-logi. Nilai karakter
oleh Kasiamdari dan Sugara (2009) bahwa
tersebut kemudian dianalisis menggunakan
ukuran  tubuh  buah  jamur  tiram  putih  ( P. program  NTSYSpc21  untuk  menentukan ostreatus )  sangat  dipengaruhi  oleh  jenis
indeks kesamaan fenetik dari empat isolat L. substrat  (medium)  yang  digunakan,  dalam
edodes dan  satu  isolat P.  ostreatus. Dari penelitiannya  diperoleh  hasil  ukuran  tubuh
indeks kesamaan kemudian disusun matriks
buah  terbaik  adalah  pada  medium  serbuk
kesamaan  fenetik  dari  kelima  isolat  yang
gergaji  kayu  sengon  dengan  diameter
digunakan dan dapat dilihat pada Tabel 2.
tudung  8,89  cm,  kemudian  diikuti  oleh medium  karton  dan  daun  pisang  masing-
Tabel  2. Matriks kesamaaan fenetik empat isolat L. edodes dan P. ostreatus ( outgroup ) Table 2.   Phenetic similarity matrix of four isolates of L. edodes and P. ostreatus (outgroup) Isolat No 1 2 3 4 5 L. edodes 'Malang' 1 1,0000 L. edodes 'Cianjur' 2 0,9474 1,0000 L. edodes 'Lembang' 3 0,8421 0,8421 1,0000 L. edodes 'Yogya' 4 0,8158 0,8158 0,9211 1,0000 P. ostreatus 5 0,5789 0,5263 0,5789 0,5263 1,0000 Hasil analisis indeks kesamaan fenetik
persamaan  karakter  morfologi  antara
antara  keempat  isolat L.  edodes adalah
keempat  isolat L.edodes dengan P.
antara  0,82  –  0,95.  Hal  ini  menunjukkan ostreatus dikarenakan  kedua  spesies bahwa  antara  keempat  isolat  tersebut termasuk dalam satu suku. Penelitian untuk memiliki  tingkat  kesamaan  morfologi  yang mengetahui hubungan kekera-batan pada L. tinggi  dan  hubungan  kekerabatan  yang edodes juga telah dilakukan oleh Xiao et al.
dekat, karena keempat isolat berada dalam
(2010)  dengan  menggunakan  teknik TRAP satu  spesies.  Dinyatakan  pula  oleh ( t h e   Ta r g e t   R e g i o n   A m p l i f i c a t i o n Chaveerach et  al., (2008)  bahwa  pada Polymorphism ), dan hasilnya menunjukkan analisis  hubungan  kekerabatan  yang
terdapat variasi genetik pada L.edodes isolat menunjukkan indeks kesamaan antara 0,85- liar di Cina dengan indeks kesamaan antara 1 dapat dikelompokkan dalam satu spesies 0,50–0,95. yang sama, antara 0,65-0,84 dikelompokkan Untuk  mengetahui  hubungan  keke- dalam satu marga dan lebih kecil dari 0,65 rabatan antara empat isolat L. edodes dan adalah  marga  yang  berbeda.  Namun P. o s t r e a t u s ,   k e m u d i a n   d i a n a l i s i s d e m i k i a n   i n t e r p r e t a s i   d e n d r o g r a m
berdasarkan  metode  klastering  UPGMA
tergantung  pada  pengeta-huan  taksonom
untuk  mengkonstruksi  dendrogram. Dendrogram  yang  menunjukkan  tingkat dan operational  taxo - nomic  units yang kesamaan  fenetik  antara  empat  isolat digunakan.  Antara  empat  isolat L.  edodes
L.edodes dan outgroup dapat  dilihat  pada d e n g a n P. o s t r e a t u s ( o u t g r o u p ) Gambar 1. menunjukkan  indeks  kesamaan  fenetik antara 0,53 – 0,58. Masih adanya beberapa
L.edodes ‘Malang’
Koefisien kesamaan fenetik
L.edodes ‘Cianjur’
L.edodes ‘Lembang’
L.edodes ‘Yogya’
P. ostreatus
Gambar 1. Dendrogram yang menunjukkan hubungan kekerabatan fenetik antara empat isolat L. edodes dan P. ostreatus . Figure 1. Dendrogram  of  phenetic  relationship    among  four  isolates  of L.  edodes and P.
ostreatus .
Ekowati dkk., Hubungan kekerabatan Fenetik Jamur Shiitake :  110-117
Tabel 1 menunjukkan bahwa karakter masing  7,17  cm  dan  5,1  cm.  Penggunaan ukuran  dan  ketebalan  tudung  di  antara ketiga  bahan  tersebut  dengan  modifikasi
keempat  isolat L.edodes ada  perbedaan. pada  beberapa  bahan  pendukung  untuk
Isolat L.  edodes asal  Lembang  dan budidaya  jamur  tiram  putih  mampu
Yogyakarta  menunjukkan  ukuran  tudung memberikan pengaruh   yang berbeda pada
d a n   k e t e b a l a n   y a n g   l e b i h   b e s a r
morfologi P. ostreatus. Penelitian mengenai dibandingkan dengan isolat asal Malang dan
karakterisasi  morfologi  dan  biokimia Cianjur.  Adanya  perbedaan  ukuran  tudung
Pleurotus spp.  juga  telah  dilaporkan  oleh dari  keempat  isolat L.  edodes dapat Shukla  dan  Jaitly  (2011)  bahwa  karakter disebabkan  oleh  faktor  genetik  dan  faktor
morfologi  yang  dapat  menunjukkan  variasi lingkungan  tempat  tumbuh.  Berdasarkan antar  isolat  adalah  panjang  dan  lebar hasil karakterisasi genetik secara molekular tudung,  panjang  tangkai,  tepi  tudung  dan i s o l a t   a s a l   L e m b a n g   m e n u n j u k k a n
warna tudung.
hubungan  kekerabatan  genetik  yang  lebih
Selain  ukuran  tudung,  karakter  yang dekat dengan isolat asal Yogyakarta dengan menunjukkan  perbedaan  adalah  panjang tingkat kesamaan genetik 86%. Sedangkan tangkai.  Pada  penelitian  ini  diperoleh isolat  asal  Lembang  dengan  isolat  asal panjang tangkai yang bervariasi antara 3,5- Malang dan Cianjur menunjukkan hubungan 9,5  cm.  Ukuran  ini  lebih  panjang kekerabatan yang lebih jauh dengan tingkat dibandingkan  dengan    pernyataan  Keizer kesamaan genetik 78% (Ekowati, 2009). Hal
(1998)  bahwa  panjang  tangkai L.  edodes
ini dapat menyebabkan adanya perbedaan
adalah 5,0 cm, sedangkan menurut Stamets pada  ukuran  dan  ketebalan  tubuh  buah. (2000) adalah 3-5 cm, dan Djuariah (2006) Lokasi  budidaya L.  edodes adalah  di  desa adalah 4,0-6,5 cm.
Serang,  Kabupaten  Purbalingga,  Jawa
Karakter  morfologi  mikroskopik  yang
Tengah,  dengan  ketinggian  tempat  900  m menunjukkan ada perbedaan adalah ukuran 0 spora.  Ukuran  spora  isolat  asal  Cianjur dpl,  suhu  berkisar  antara  18-25 C  dan
adalah    4,0-5,0  x  2,0-3,0  µm,  sedangkan kelembaban  antara  80-95%.  Menurut  Paul
isolat  asal  Malang,  Lembang  dan dan Donoghue (1990) suhu optimum untuk 0 Yogyakarta  adalah  5,0-7,2  x  2,6-3,7  µm pertumbuhan  tubuh  buah  antara  10-25 C,
(Tabel  1).  Menurut  Stamets  (2000)  ukuran dan kelembaban antara 85-95%. Suhu dan
spora L. edodes adalah 5,0-6,5 x 3,0-3,5 µm. kelembaban  di  desa  Serang  memenuhi
Karakter  mikros-kopik  lainnya  yaitu  warna syarat  untuk  pertumbuhan L.edodes spora  adalah  putih  berbentuk  oval  sampai sehingga  tubuh  buah  dapat  terbentuk
jorong, basidium menyangga empat spora,
sempurna.
sistem  hifa  monomitik,  dan  ada clamp Pertumbuhan tubuh buah dan karakter
connection pada  hifa  sekunder  dan  tersier morfologi  selain  dipengaruhi  oleh  faktor
adalah sesuai dengan pernyataan Stamets lingkungan  dan  teknik  budidaya,  juga
(2000). dipengaruhi  oleh  medium  yang  digunakan.
Berdasarkan  karakter  morfologi
Dalam  penelitian  ini  digunakan  medium
makroskopis  dan  mikroskopis  yang  telah serbuk  gergaji  kayu  sengon  yang
diperoleh kemudian dilakukan skoring data merupakan  medium  terbaik  berdasarkan
morfologi,  dilanjutkan  dengan  standarisasi penelitian pendahuluan. Dikemukakan pula
sifat pada karakter morfo-logi. Nilai karakter oleh Kasiamdari dan Sugara (2009) bahwa
tersebut kemudian dianalisis menggunakan ukuran  tubuh  buah  jamur  tiram  putih  ( P. program  NTSYSpc21  untuk  menentukan ostreatus )  sangat  dipengaruhi  oleh  jenis
indeks kesamaan fenetik dari empat isolat L. substrat  (medium)  yang  digunakan,  dalam
edodes dan  satu  isolat P.  ostreatus. Dari penelitiannya  diperoleh  hasil  ukuran  tubuh
indeks kesamaan kemudian disusun matriks buah  terbaik  adalah  pada  medium  serbuk
kesamaan  fenetik  dari  kelima  isolat  yang gergaji  kayu  sengon  dengan  diameter
digunakan dan dapat dilihat pada Tabel 2.
tudung  8,89  cm,  kemudian  diikuti  oleh medium  karton  dan  daun  pisang  masing-
114
Tabel  2. Matriks kesamaaan fenetik empat isolat L. edodes dan P. ostreatus ( outgroup ) Table 2.   Phenetic similarity matrix of four isolates of L. edodes and P. ostreatus (outgroup) Isolat No 1 2 3 4 5 L. edodes 'Malang' 1 1,0000 L. edodes 'Cianjur' 2 0,9474 1,0000 L. edodes 'Lembang' 3 0,8421 0,8421 1,0000 L. edodes 'Yogya' 4 0,8158 0,8158 0,9211 1,0000 P. ostreatus 5 0,5789 0,5263 0,5789 0,5263 1,0000 Hasil analisis indeks kesamaan fenetik
persamaan  karakter  morfologi  antara antara  keempat  isolat L.  edodes adalah keempat  isolat L.edodes dengan P. antara  0,82  –  0,95.  Hal  ini  menunjukkan ostreatus dikarenakan  kedua  spesies bahwa  antara  keempat  isolat  tersebut
termasuk dalam satu suku. Penelitian untuk memiliki  tingkat  kesamaan  morfologi  yang
mengetahui hubungan kekera-batan pada L. tinggi  dan  hubungan  kekerabatan  yang edodes juga telah dilakukan oleh Xiao et al. dekat, karena keempat isolat berada dalam
(2010)  dengan  menggunakan  teknik TRAP satu  spesies.  Dinyatakan  pula  oleh ( t h e   Ta r g e t   R e g i o n   A m p l i f i c a t i o n Chaveerach et  al., (2008)  bahwa  pada Polymorphism ), dan hasilnya menunjukkan analisis  hubungan  kekerabatan  yang
terdapat variasi genetik pada L.edodes isolat menunjukkan indeks kesamaan antara 0,85-
liar di Cina dengan indeks kesamaan antara 1 dapat dikelompokkan dalam satu spesies
0,50–0,95. yang sama, antara 0,65-0,84 dikelompokkan
Untuk  mengetahui  hubungan  keke-
dalam satu marga dan lebih kecil dari 0,65
rabatan antara empat isolat L. edodes dan adalah  marga  yang  berbeda.  Namun
P. o s t r e a t u s ,   k e m u d i a n   d i a n a l i s i s d e m i k i a n   i n t e r p r e t a s i   d e n d r o g r a m
berdasarkan  metode  klastering  UPGMA tergantung  pada  pengeta-huan  taksonom
untuk  mengkonstruksi  dendrogram. Dendrogram  yang  menunjukkan  tingkat dan operational  taxo - nomic  units yang kesamaan  fenetik  antara  empat  isolat digunakan.  Antara  empat  isolat L.  edodes L.edodes dan outgroup dapat  dilihat  pada d e n g a n P. o s t r e a t u s ( o u t g r o u p ) Gambar 1. menunjukkan  indeks  kesamaan  fenetik antara 0,53 – 0,58. Masih adanya beberapa
L.edodes ‘Malang’ Koefisien kesamaan fenetik L.edodes ‘Cianjur’ L.edodes ‘Lembang’
L.edodes ‘Yogya’ P. ostreatus
Gambar 1. Dendrogram yang menunjukkan hubungan kekerabatan fenetik antara empat isolat L. edodes dan P. ostreatus .
Figure 1. Dendrogram  of  phenetic  relationship    among  four  isolates  of L.  edodes and P. ostreatus .
Hasil  analisis  menunjukkan  bahwa ukuran  spora,  waktu  dan  persentase pada  koefisien  kesamaan  fenetik  0,83 perkecambahan spora. Isolat L. edodes asal dendrogram membentuk tiga klaster, klaster Malang  dengan  Cianjur  menunjukkan pertama terdiri atas dua isolat yaitu L.edodes
hubungan kekerabatan paling dekat dengan 'Malang'  dan L.  edodes 'Cianjur' dengan tingkat  kesamaan  fenetik  95%  dan  isolat tingkat kesamaan fenetik 95% (Gambar 1).
a s a l   M a l a n g   d e n g a n   Yo g y a k a r t a Dua  isolat L.edodes 'Malang'  dan  'Cianjur' menunjukkan hubungan kekerabatan paling terga-bung  dalam  satu  klaster  dan
jauh dengan tingkat kesamaan fenetik 83%. mempunyai  kesamaan  fenetik  yang  tinggi karena  kedua  isolat  tersebut  memiliki

## Ucapan Terima Kasih
kesamaan  pada  karakter  warna  tudung,
Terima kasih kepada Dekan Fakultas ukuran tudung, ketebalan tudung, diameter
Biologi  UGM  yang  telah  memberikan  ijin tangkai  dan  persentase  perkecambahan
pengajuan  usulan  penelitian  Hibah  Doktor spora.   Klaster kedua terdiri atas dua isolat
dan  LPPM-UGM  yang  telah  memberikan yaitu L.  edodes 'Lembang'  dan L.  edodes dana  penelitian  melalui  Hibah  Penelitian 'Yogya'  dengan  tingkat  kesa-maan  fenetik
Mahasiswa  Program  Doktor  Tahun  2009.
92%.   Klaster ketiga terdiri atas satu isolat
Ucapan terimakasih juga penulis sampaikan
yaitu P. ostreatus dengan tingkat kesamaan
kepada Dekan Fakultas Biologi Unsoed dan fenetik  56%  dan  membentuk  klaster
Direktur  I-MHERE  Unsoed  yang  telah tersendiri yang terpisah dari keempat isolat. memberikan beasiswa program S3. Kepada Keempat  isolat L.  edodes membentuk Drs. Aris Mumpuni, MPhil, Dr. Nuniek Ina R, klaster  besar  tersendiri  yang  terpisah
MS.,  dan  Rhevi  Raditya  G,  Amd.,  penulis dengan P.  ostreatus karena P.ostreatus m e n y a m p a i k a n   t e r i m a k a s i h   a t a s merupakan outgroup yang  berbeda  marga
k e r j a s a m a n y a   d a l a m   m e m b a n t u sehingga  menunjukkan  tingkat  kesamaan pelaksanaan penelitian ini. yang rendah. Isolat L. edodes asal Malang dengan  Cianjur  menunjukkan  hubungan Daftar Pustaka
kekerabatan  paling  dekat  dan  isolat  asal Malang  dengan  Yogyakarta  menunjukkan Berlyn,  G.P.  and  J.P.  Miksche.  1976. hubungan  kekerabatan  paling  jauh.
B o t a n i c a l   M i c r o t e c h n i q u e   a n d Berdasarkan  hasil  analisis  hubungan
Cytochemistry . The  Iowa  State kekerabatan  fenetik  tersebut  diketahui
University Press, Ames, Iowa. b a h w a   k a r a k t e r   m o r f o l o g i   d a p a t
Chaveerach, A.,  R.  Sudmoon,  T.  Tanee,  P. mengungkap  keragaman  dan  hubungan
Mokkamul,  N.  Sattayasai  ,  J.
kekerabatan  antar  empat  isolat L.  edodes.
Sattayasai. 2008. Two new species of
Penelitian  Khan et  al. ,  (2011)  melaporkan
Curcuma (Zingiberaceae)  used  as bahwa  karakterisasi  morfo-logi  dan
cobra-bite antidotes. J. Syst. Evol.,  46 molekular dapat digunakan untuk identifikasi
(1): 80–88
dan membuat hubu-ngan kekerabatan pada
Djuariah,  D.  2006.  Uji  Daya  Hasil  dan
Pleurotus spp.  Namun  demikian  karakter
Kualitas  Hasil  Tiga  Belas  Species morfologi  dan  molekular  memberikan  pola
Jamur  Shiitake  ( Lentinus  edodes dendrogram  yang  sedikit  berbeda.
(Berk)  Sing)  Di  Dataran  Tinggi  Jawa
Hubungan  kekera-batan  berdasarkan
Barat.  Balai  Penelitian  Tanaman karakter  morfologi  memberikan  tingkat
Sayuran Lembang, Bandung.
kesamaan 75-90%, sedangkan berdasarkan
Ekowati,  N.  2009.  Karakterisasi  strain karakter  mole-kular  memberikan  tingkat
Lentinula  edodes secara  morfologi kesamaan 72-86%. dan  molekular  serta  potensinya Kesimpulan
sebagai  antimikroba  dan  antitumor.
Dengan  karakter  morfologi  makros-
Laporan  penelitian  Hibah  Doktor,
kopis  dan  mikroskopis  dapat  diungkap
Fakultas  Biologi,  Universitas  Gadjah
keragaman  dan  hubungan  kekerabatan
Mada, Yogyakarta.
antar  empat  isolat L.  edodes asal  Malang. Felsenstein, J. 1983. Numerical Taxonomy. Cianjur, Lembang dan Yogya-karta. Karakter
Department  of  Genetics  University  of
morfologi  yang  menun-jukkan  adanya
Washington, USA
keragaman  adalah  warna  tudung,  ukuran
Hibbett,  D.S.  and  R.  Vilgalys.  1993. tudung, ketebalan tudung, panjang tangkai,
Phylogenetic relationships of Lentinus
( B a s i d i o m y c o t a )   i n f e r r e d   f r o m Penas, M.M., J. Arangurea, L. Ramirez and m o l e c u l a r   a n d   m o r p h o l o g i c a l A.G.  Pisabarro.  2004.  Structure  of characters. Syst. Bot., 18(3): 409-433. gene coding for the fruit body-specific Jordan,  P.  1999.    Illustrated  Encyclopedia hydrophobin  Fbh  1  of  the  edible M u s h r o o m   I d e n t i f i e r.   A n n e s s basidiomycete Pleurotus  ostreatus . Publishing Limited. Hong Kong. Mycologia, 96(1): 75-82. Kasiamdari,  R.S.,    and  A.  Sugara.  2009. Regu ù a,  J.  and  M.  Siwulski.  2007.  Dried Morphology of  white oyster mushroom shiitake ( Lentinula edodes ) and oyster ( Pleurotus  ostreatus Jacq.  ex.  Fr. ( Pleurotus ostreatus ) mushrooms as a Kummer)  on  modification  media  of good source of nutrient.  Acta Sci. Pol., mushroom  cultivation. Proceedings Technol. Aliment. , 6(4):  135-142. International Conference on Biological Rifai,  M.A.  dan  Ermitati.  1995.  Glosarium Science, Faculty of Biology Universitas Biologi. Balai Pustaka, Jakarta. Gadjah  Mada,  Yogyakarta,  16-17 Rohlf,  F.J.  2000.  NTSYS-pc:  Numerical Oktober 2009. taxonomy  and  multivariate  analysis K e i z e r,   G . J .   1 9 9 8 .   T h e   C o m p l e t e s y s t e m ,   v e r s i o n   2 . 1 .   A p p l i e d Encyclopedia  of  Mushrooms.  Rebo Biostatistics, New York. Publishers the Netherlands. Shukla,  S  and  A.  K.  Jaitly.  2011. Khan, S.M., A. Nawaz, W . Malik, N . Javed, Morphological  and  Biochemical T . Yasmin, M . Rehman, A . Qayyum, Q. Characterization  of  Different  Oyster Iqbal, T. Ahmad and A . Ali Khan. 2011. Mushroom ( Pleurotus spp. ). J. Phytol. , M o r p h o l o g i c a l   a n d   m o l e c u l a r 3(8): 18-20 characterization  of  Oyster  mushroom Smith,  J.E.,  N.J.  Rowan  and  R.  Sullivan, ( Pleurotus spp.).  Afr.  J.  Biotechnol ., 2002.    Medicinal  Mushrooms  :  Their 10(14): 2638-2643 . therapeutic  properties  and  current Largent,  D.L.  1973.    How  to  Identify medical  usage  with  special  emphasis Mushrooms  to  Genus  I:  Macroscopic on  cancer  treatments.  Cancer Features.    Mad  River  Press,  Inc. R e s e a r c h   U K ,   U n i v e r s i t y   o f California. Strathclyde. Largent,  D.L.,  D.  Johnson  and  R.  Watling. Stamets,  P.,  2000.    Growing  Gourmet  and 1977.  How  to  Identify  Mushrooms  to Medicinal  Mushrooms. Third  Ed., Ten Genus III: Microscopic Features.  Mad Speed Press, Berkeley, Toronto. River Press, Inc. California. Wasser, S.P. and A.L. Weis. 2003. Medicinal Maers, A. and M.R. Paul. 1950. A Dictionary Properties of Substances Occurring in ed Higher  Basidiomycetes  Mushrooms:
of  Color.  2 .  Mc.  Grow-Hill  Book
Current  Perspective  (Review).  Int.  J.
Company Inc., New York.
Med.  Mushrooms, 1: 31-33.
Ofodile, L.N., N.U. Uma, L.E. Attah, M.S.J.
Xiao,  Y.,  Liu,  W.,  Lu,  Y.Y.,  Gong,  W.B.  dan Simmond,  and  O.E.  Popoola.  2010.
Bian,  Y.B.  2010.  Applying  target
Chemomorphological  study  and
region  amplification  polymorphism
antimicrobial  activity  of Daedalea
markers  for  analyzing  genetic
quercina. Acta Satech., 3(2): 102-107.
diversity  of Lentinula  edodes in
Paul,  P  and  J.  Donoghue.  1990.  Shiitake
China.  J.  Basic  Microb.,  50  (5):
Growers  Handbook,  The  Art  and
475–483.
Science  of  Mushroom  Cultivation.
Kendall/Hunt  Publishing  Company.
Dubuque, Iowa.
117
Ekowati dkk., Hubungan kekerabatan Fenetik Jamur Shiitake :  110-117
Hasil  analisis  menunjukkan  bahwa ukuran  spora,  waktu  dan  persentase pada  koefisien  kesamaan  fenetik  0,83 perkecambahan spora. Isolat L. edodes asal dendrogram membentuk tiga klaster, klaster Malang  dengan  Cianjur  menunjukkan pertama terdiri atas dua isolat yaitu L.edodes hubungan kekerabatan paling dekat dengan 'Malang'  dan L.  edodes 'Cianjur' dengan tingkat  kesamaan  fenetik  95%  dan  isolat tingkat kesamaan fenetik 95% (Gambar 1).
a s a l   M a l a n g   d e n g a n   Yo g y a k a r t a Dua  isolat L.edodes 'Malang'  dan  'Cianjur' menunjukkan hubungan kekerabatan paling terga-bung  dalam  satu  klaster  dan jauh dengan tingkat kesamaan fenetik 83%. mempunyai  kesamaan  fenetik  yang  tinggi karena  kedua  isolat  tersebut  memiliki
Ucapan Terima Kasih kesamaan  pada  karakter  warna  tudung,
Terima kasih kepada Dekan Fakultas ukuran tudung, ketebalan tudung, diameter
Biologi  UGM  yang  telah  memberikan  ijin tangkai  dan  persentase  perkecambahan pengajuan  usulan  penelitian  Hibah  Doktor spora.   Klaster kedua terdiri atas dua isolat dan  LPPM-UGM  yang  telah  memberikan yaitu L.  edodes 'Lembang'  dan L.  edodes dana  penelitian  melalui  Hibah  Penelitian 'Yogya'  dengan  tingkat  kesa-maan  fenetik
Mahasiswa  Program  Doktor  Tahun  2009.
92%.   Klaster ketiga terdiri atas satu isolat
Ucapan terimakasih juga penulis sampaikan yaitu P. ostreatus dengan tingkat kesamaan kepada Dekan Fakultas Biologi Unsoed dan fenetik  56%  dan  membentuk  klaster
Direktur  I-MHERE  Unsoed  yang  telah tersendiri yang terpisah dari keempat isolat. memberikan beasiswa program S3. Kepada Keempat  isolat L.  edodes membentuk Drs. Aris Mumpuni, MPhil, Dr. Nuniek Ina R, klaster  besar  tersendiri  yang  terpisah
MS.,  dan  Rhevi  Raditya  G,  Amd.,  penulis dengan P.  ostreatus karena P.ostreatus m e n y a m p a i k a n   t e r i m a k a s i h   a t a s merupakan outgroup yang  berbeda  marga k e r j a s a m a n y a   d a l a m   m e m b a n t u sehingga  menunjukkan  tingkat  kesamaan pelaksanaan penelitian ini.
yang rendah. Isolat L. edodes asal Malang dengan  Cianjur  menunjukkan  hubungan Daftar Pustaka
kekerabatan  paling  dekat  dan  isolat  asal
Malang  dengan  Yogyakarta  menunjukkan
Berlyn,  G.P.  and  J.P.  Miksche.  1976.
hubungan  kekerabatan  paling  jauh.
B o t a n i c a l   M i c r o t e c h n i q u e   a n d Berdasarkan  hasil  analisis  hubungan Cytochemistry . The  Iowa  State kekerabatan  fenetik  tersebut  diketahui
University Press, Ames, Iowa.
b a h w a   k a r a k t e r   m o r f o l o g i   d a p a t
Chaveerach, A.,  R.  Sudmoon,  T.  Tanee,  P.
mengungkap  keragaman  dan  hubungan
Mokkamul,  N.  Sattayasai  ,  J.
kekerabatan  antar  empat  isolat L.  edodes.
Sattayasai. 2008. Two new species of
Penelitian  Khan et  al. ,  (2011)  melaporkan Curcuma (Zingiberaceae)  used  as bahwa  karakterisasi  morfo-logi  dan
cobra-bite antidotes. J. Syst. Evol.,  46 molekular dapat digunakan untuk identifikasi
(1): 80–88
dan membuat hubu-ngan kekerabatan pada Djuariah,  D.  2006.  Uji  Daya  Hasil  dan Pleurotus spp.  Namun  demikian  karakter
Kualitas  Hasil  Tiga  Belas  Species morfologi  dan  molekular  memberikan  pola
Jamur  Shiitake  ( Lentinus  edodes dendrogram  yang  sedikit  berbeda.
(Berk)  Sing)  Di  Dataran  Tinggi  Jawa Hubungan  kekera-batan  berdasarkan
Barat.  Balai  Penelitian  Tanaman karakter  morfologi  memberikan  tingkat
Sayuran Lembang, Bandung.
kesamaan 75-90%, sedangkan berdasarkan
Ekowati,  N.  2009.  Karakterisasi  strain karakter  mole-kular  memberikan  tingkat
Lentinula  edodes secara  morfologi kesamaan 72-86%.
dan  molekular  serta  potensinya
Kesimpulan sebagai  antimikroba  dan  antitumor.
Dengan  karakter  morfologi  makros-
Laporan  penelitian  Hibah  Doktor,
kopis  dan  mikroskopis  dapat  diungkap
Fakultas  Biologi,  Universitas  Gadjah keragaman  dan  hubungan  kekerabatan
Mada, Yogyakarta.
antar  empat  isolat L.  edodes asal  Malang. Felsenstein, J. 1983. Numerical Taxonomy. Cianjur, Lembang dan Yogya-karta. Karakter
Department  of  Genetics  University  of morfologi  yang  menun-jukkan  adanya
Washington, USA keragaman  adalah  warna  tudung,  ukuran
Hibbett,  D.S.  and  R.  Vilgalys.  1993. tudung, ketebalan tudung, panjang tangkai,
Phylogenetic relationships of Lentinus
116
( B a s i d i o m y c o t a )   i n f e r r e d   f r o m
Penas, M.M., J. Arangurea, L. Ramirez and
m o l e c u l a r   a n d   m o r p h o l o g i c a l
A.G.  Pisabarro.  2004.  Structure  of
characters. Syst. Bot., 18(3): 409-433.
gene coding for the fruit body-specific
Jordan,  P.  1999.    Illustrated  Encyclopedia
hydrophobin  Fbh  1  of  the  edible
M u s h r o o m   I d e n t i f i e r.   A n n e s s
basidiomycete Pleurotus  ostreatus .
Publishing Limited. Hong Kong.
Mycologia, 96(1): 75-82.
Kasiamdari,  R.S.,    and  A.  Sugara.  2009.
Regu ù a,  J.  and  M.  Siwulski.  2007.  Dried
Morphology of  white oyster mushroom
shiitake ( Lentinula edodes ) and oyster ( Pleurotus  ostreatus Jacq.  ex.  Fr.
( Pleurotus ostreatus ) mushrooms as a Kummer)  on  modification  media  of good source of nutrient.  Acta Sci. Pol., mushroom  cultivation. Proceedings Technol. Aliment. , 6(4):  135-142. International Conference on Biological
Rifai,  M.A.  dan  Ermitati.  1995.  Glosarium
Science, Faculty of Biology Universitas Biologi. Balai Pustaka, Jakarta.
Gadjah  Mada,  Yogyakarta,  16-17
Rohlf,  F.J.  2000.  NTSYS-pc:  Numerical
Oktober 2009. taxonomy  and  multivariate  analysis K e i z e r,   G . J .   1 9 9 8 .   T h e   C o m p l e t e
s y s t e m ,   v e r s i o n   2 . 1 .   A p p l i e d
Encyclopedia  of  Mushrooms.  Rebo Biostatistics, New York. Publishers the Netherlands. Shukla,  S  and  A.  K.  Jaitly.  2011. Khan, S.M., A. Nawaz, W . Malik, N . Javed, Morphological  and  Biochemical T . Yasmin, M . Rehman, A . Qayyum, Q. Characterization  of  Different  Oyster
Iqbal, T. Ahmad and A . Ali Khan. 2011.
Mushroom ( Pleurotus spp. ). J. Phytol. ,
M o r p h o l o g i c a l   a n d   m o l e c u l a r 3(8): 18-20 characterization  of  Oyster  mushroom
Smith,  J.E.,  N.J.  Rowan  and  R.  Sullivan,
( Pleurotus spp.).  Afr.  J.  Biotechnol ., 2002.    Medicinal  Mushrooms  :  Their 10(14): 2638-2643 . therapeutic  properties  and  current Largent,  D.L.  1973.    How  to  Identify medical  usage  with  special  emphasis Mushrooms  to  Genus  I:  Macroscopic on  cancer  treatments.  Cancer
Features.    Mad  River  Press,  Inc.
R e s e a r c h   U K ,   U n i v e r s i t y   o f
California. Strathclyde. Largent,  D.L.,  D.  Johnson  and  R.  Watling.
Stamets,  P.,  2000.    Growing  Gourmet  and 1977.  How  to  Identify  Mushrooms  to
Medicinal  Mushrooms. Third  Ed., Ten Genus III: Microscopic Features.  Mad Speed Press, Berkeley, Toronto. River Press, Inc. California.
Wasser, S.P. and A.L. Weis. 2003. Medicinal
Maers, A. and M.R. Paul. 1950. A Dictionary
Properties of Substances Occurring in
ed
Higher  Basidiomycetes  Mushrooms: of  Color.  2 .  Mc.  Grow-Hill  Book
Current  Perspective  (Review).  Int.  J.
Company Inc., New York.
Med.  Mushrooms, 1: 31-33.
Ofodile, L.N., N.U. Uma, L.E. Attah, M.S.J.
Xiao,  Y.,  Liu,  W.,  Lu,  Y.Y.,  Gong,  W.B.  dan
Simmond,  and  O.E.  Popoola.  2010.
Bian,  Y.B.  2010.  Applying  target
Chemomorphological  study  and
region  amplification  polymorphism
antimicrobial  activity  of Daedalea
markers  for  analyzing  genetic
quercina. Acta Satech., 3(2): 102-107.
diversity  of Lentinula  edodes in Paul,  P  and  J.  Donoghue.  1990.  Shiitake
China.  J.  Basic  Microb.,  50  (5):
Growers  Handbook,  The  Art  and 475–483.
Science  of  Mushroom  Cultivation. Kendall/Hunt  Publishing  Company. Dubuque, Iowa.