## ISOLASI METABOLIT SEKUNDER
DARI DAUN KAWISTA ( Limonia Acidissima L. )
1 Dadan Ridwanuloh
2 Iin Lidia Putama Mursal
1 Jurusan Farmasi Fakultas Tekhnik dan Ilmu Komputer Universitas Buana Perjuangan Karawang ( dadan.ridwanuloh@ubpkarawang.ac.id )
UNIVERSITAS BUANA PERJUANGAN,  KARAWANG
Jl. HS Ronggowaluyo, Telukjambe Timur, Karawang

## Abstrak
Tanaman  Kawista  telah  banyak  diketahui  memiliki  manfaat  dalam  pengobatan  tradisional. Hampir semua bagian tanaman kawista seperti akar, kulit batang, daun,  getah, dan buahnya telah  digunakan  secara  tradisional  untuk  mengobati  berbagai  penyakit  .  Salah  satu  contoh pemanfaatan tanaman kawista dalam pengobatan yang menjadi kebiasaan masyarakat adalah mengkonsumsi  buah  kawista  mentah  untuk  mengobati  penyakit  diare.  Pada  penelitian sebelumnya  telah  diketahui  bahwa  kandungan    fitokimia  terdiri  dari  senyawa  alkaloid, saponin, fenol, dan flavonoid (Pandey et.al.2014). 1995). Dilakukan kembali penelitian isolasi metabolit  sekunder  dari  daun  kawista.  Dari  hasil  analisis  penapisan  fitokimia  dan kromatografi  lempeng  tipis  (KLT)  diketahui  akstrak  daun  kawista  mengandung  senyawa metabolit sekunder golongan, fenolik, flavonoid, tannin, saponin dan terpenoid.
Kata Kunci : isolasi, daun kawista kawista

## 1. PENDAHULUAN
Kawista (Limonia acidissima) merupakan tanaman yang termasuk anggota Rustacea . Spesies ini telah lama dikenal sebagai tanaman obat kuno Yunani dan Romawi dan menjadi obat  paling  penting  di  india  (Phapale  dan  Seema.2010).  Hampir  semua  bagian  tanaman kawista  seperti  akar,  kulit  batang,  daun,    getah,  dan  buahnya  telah  digunakan  secara tradisional untuk mengobati berbagai penyakit (Absar.2010). Salah satu contoh pemanfaatan tanaman  kawista  dalam  pengobatan  yang  menjadi  kebiasaan  masyarakat  adalah mengkonsumsi  buah  kawista  mentah  untuk  mengobati  penyakit  diare.  Pada  penelitian
sebelumnya  telah  diketahui  bahwa  kandungan    fitokimia  terdiri  dari  senyawa  alkaloid, saponin, fenol, dan flavonoid (Pandey et.al.2014). 1995).
Senyawa  metabolit  sekunder  dari  kawista  (limonia  acidissima)  memiliki  bioaktivitas yang beragam. Namun, kadar metabolit sekunder tumbuhan alaminya rendah. Selain itu juga, keberadaan  tanaman  kawista  saat  ini  sudah  mulai  langka  sehingga  perlu  dikembangbiakan. Oleh karena itu, agar sampel tumbuhan memiliki jumlah yang memadai dan diperoleh dengan waktu  yang  singkat  maka  salah  satu  cara  yang  tepat  yaitu  dengan  metode  kultur  jaringan. Kajian  fitokimia  kultur  tunas  Kawista  (Limonia  acidissima)  belum  pernah  dilaporkan. Sehingga,  pada  penelitian  ini  dilakukan  isolasi  senyawa  metabolit  sekunder  dari  daun tumbuhan Kawista (Limonia acidissima).
Pohon  Kawista  (Kawis)  menyukai  daerah  kering.  Batangnya  relatif  kecil  dan  bisa mencapai  tinggi  hingga  12  meter  dengan  cabang  dan  ranting  yang  ramping,  serta  memiliki kebiasaan  meluruhkan  daunnya.  Cabang  pohon  Kawista  (Limonia  acidissima)  biasanya ditumbuhi  duri.  Daunnya  majemuk  berukuran  panjang  hingga  12  centimeter,  dan  anak daunnya berhadapan, dua sampai tiga pasang.
Bunga  Kawista  biasanya  bergerombol  dengan  warna  putih  atau  hijau  dan  kemerahan. Bunga keluar dari ketiak daun atau terletak di ujung ranting. Buah Kawista berbentuk bulat, berkulit  keras  dan  bersisik,  dan  berwarna  coklat  putih.  Daging  buahnya  berbau  harum berwarna coklat kehitaman.
Buah  Kawista  yang  telah  cukup  masak  akan  jatuh  dengan  sendirinya.  Karena  kulit buahnya yang keras, meskipun jatuh buah ini tidak akan rusak.

## Klasifikasi ilmiah
Kerajaan: Plantae Divisi: Magnoliophyta Kelas: Magnoliopsida Ordo: Sapindales Famili: Rutaceae Genus: Limonia Spesies: L. acidissima

## METODE PENELITIAN

## Alat dan Bahana
Alat-alat  yang  digunakan  ialah laminar  airflow,  autoclave ,  oven  digital,  pembakar bunsen,  shaker,  pH-meter, magnetic  stirrer  hot  plate ,  labu  erlenmeyer,  gelas  ukur,  pipet volum,  gelas  ukur,  gelas  kimia  ukuran  1L,  spatula,  lampu  duduk,  cawan  petri,  tabung  gelas ukuran 100 dan 250 mL, pinset, dan pisau.
Peralatan  yang  digunakan  dalam  tahap  isolasi  adalah  alat-alat  gelas,  seperti  labu erlenmeyer,  botol  vial,  serta  alat  pendukung  lainnya  diantaranya  seperangkat  alat kromatografi cair vakum, kromatografi radial, kromatografi lapis tipis (KLT), alat maserator, labu  isap,  oven,  alat  penghalus(blender),  batang  pengaduk,  pinset,  evaporator,  corong Buchner,  neraca  analitik,  kamera,  pipa  kapiler, hair-dryer ,  pompa  vakum,  gelas  ukur,  pipet tetes, dan lampu UV

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Karakterisasi  simplisia  yang  dilakukan  meliputi  uji  makroskopik,  uji  mikroskopik, penentuan  kadar  air,dan  penapisan  fitokimia.  Pada  penentuan  kadar  air  daun    kawista memiliki kadar air 6% dan  memenuhi persyaratan yang sesuai buku pedoman materia medika indonesia dan farmakope herbal yaitu kurang dari 10% .
Kemudian  dilakukan  penapisan  fitokimia.  Penapisan  fitokimia  ini  dilakukan  untuk mengetahui  kandungan  senyawa  metabolit  sekunder  seperti  golongan  alkaloid,  fenol, flavonoid,  saponin,  tanin,  terpenoid,  dan  kuinon.  Dari  hasil  penapisan  fitokimia  dapat dididentifikasi  bahawa  sampel  dari  daun  kawista  mengandung  metabolit  sekunder  golongan fenol,  flavonoid,  saponin,  terpenoid,  sedangkan  golongan  alkaloid  dan  tanin  tidak terdeteksi pada simplisia.
Dari hasil peritungan randemen ekstrak diperoleh sebesar 40,9 %. Randemen ini masih cukup  baik  karena mendekati  setengah  dari  berat  simplisianya.  Hal  ini  menunjukan  ektraksi dengan menggunakan metode sokletasi cukup efektif.
Hasil elusidasi menggunakan fasa gerak n-heksan dan etil asetat diperoleh bahawa pada ektrak  daun  kawista  memiliki  beragam  senyawa  metabolit  sekunder  dan  potensila  untuk dilakukan isolasi.  Adanya spot yang berfluoresensi terang berwarna biru di bawah lampu UV
 366  nm  meng  indikasikan  bahwa  senyawa  senyawa  yang  berpendar    merupakan  senyawa golongan flavonoid, golongan terpenoid, dan golongan fenol

## KESIMPULAN
Hasil identifikasi ekstrak daun kawista  menggunakan uji kulaitatif penapisan fitokimia memiliki  kandungan  kimia  golongan  fenol,  terpenoid,  flavonoid,  tanin  dan  saponin. Sedangkan  pola  kromatografi  lapis  tipis  dengan  melihat  banyaknya  spot  yang  dominan  dan warna fluoresensi yang terang dibawah lampu uv λ366 berpotensi untuk disolasi lebih lanjut.

## DAFTAR PUSTAKA
Culter, S.J. dan Culter,  H.G. (2000). Biologically active natural product pharmaceuticals.
CRC Press: Raton. New York.
Davidenko, TI, OV. Oseyhchuk et al. (2004). Peroxidase Oxidation of Phenols . J.
Biochemistry and Microbiology. 40(6): 542-546.
Dehpour, A.A., Ebrahimzadeh, M.A., Fazel, N.S., dan Mohammad, N.S., 2009, Antioxidant Activity of Methanol Extract of Ferula Assafoetida and Its Essential Oil Composition , Grasas Aceites , 60(4), 405-412.
Diah Pratimasari. (2009). Uji Aktivitas Penangkap Radikal Buah Carica Papaya L. Dengan Metode Dpph Dan Penetapan Kadar Fenolik Serta FlavonoidTotalnya. Universitas Muhammadiyah Surakarta.
Harborne, J.  B., 1987, Metode  Fitokimia  : Penuntun Cara Modern Menganalisis Tumbuhan, Bandung : Penerbit ITB.
Hariana, H.arief., Drs., 2000, Tumbuhan Obat dan Khasiatnya , Seri 3, Penebar     Swadaya, Jakarta, 91.
Heyne, K. 1988, Tumbuhan Berguna Indonesia , Jilid 4, Yayasan Sarana Wana Jaya, Jakarta, 1456-1459, dan 2273.
Hovenkanp, P.H. Pirrosia Mirbel In: de Winter. W. P. &  Arnoroso.  V.B.  (eds.).,  2003,  Plant  Resources  of  South  —  East  Asia No. 15 (2). Cryptogarns : Ferns aiid fern allies. Backhuys Publishers, Leiden, the Neitherlands, Pj):170-174.
Kusuma, Fauzi R., Zaky, B.Muhamad., 2005, Tumbuhan Liar Berkhasiat Obat, Agromedia Pustaka, Jakarta, 283.
Lestari,  Widya.  2008, Beberapa  Parameter  Standar  Dan  Telaah  Fitokimia  Rhizoma Binahong (Anredera Cordifolia (Tenore steen)) , Unjani, Bandung, 5-7.
Markham.  K.R.,  1988, Cara  Mengindentifikasi  Flavonoid ,  terjemahan  K.  Radmawinata,
Penerbit ITB, Bandung, 1-117.
Stahl,  E.,  1985, Analisis  Obat  Secara  Kromatografi  dan  Mikroskopi ,  terjemahan  K. Radmawinata dan I. Soediso, penerbit ITB, Bandung, 1985, 3-18.
Tjokronegoro, Roekmi., Dr., 2000, Teknik Pemisahan Kimia , Jurusan Kimia Fakultas MIPA Unpad, Bandung, 206-207, 230-231, 227.
Thomas,  A.,  Pomammal,  N.R.,  2005,  PG  and  Research  Department  of  Botany,  Kongunadu Arts and Science College,Vol XXV (2), 57-61.
Vijayvargia, P., Vijayvargia., R., 2014,  Biological and Phytochemical Screening of Plants, J. Pharm. Sci., 28(1), 191-195.