June – November, 2021
Aceh Nutrition Journal Original Article Pages:  139 - 146 p-issn 2527-3310; e-issn 2548-5741
DOI: http://dx.doi.org/10.30867/action.v6i2.537
Efek tepung ulat sagu ( Rhynchophorus ferrugineus ) terhadap penurunan kadar malondialdehyde (MDA) pada tikus Wistar dengan diet rendah protein
The effect of sago worm (Rhynchophorus ferrugineus) flour on Malondialdehyde level of Wistar rats with low diet protein
Lara Ayu Lestari 1* , M. Sulchan 2 , Anang M Legowo 3 , Kusmiyati Tjahjono 4 , Achmad Zulfa Juniarto 5
1 Departemen Ilmu Gizi, Fakultas Kedokteran, Universitas Diponegoro, Semarang, Jawa Tengah, Indonesia. Email: laraayu014@gmail.com 2 Departemen Ilmu Gizi, Fakultas Kedokteran, Universitas Diponegoro, Semarang, Jawa Tengah, Indonesia. Email: msulchan49@gmail.com 3 Program Studi Teknologi Pangan, Fakultas Peternakan dan Pertanian, Universitas Diponegoro, Semarang, Jawa Tengah, Indonesia.
Email: anang_ml@yahoo.com 4 Fakultas Kedokteran, Universitas Diponegoro, Semarang, Jawa Tengah, Indonesia.
Email: kusmiceria@gmail.com 5 Fakultas Kedokteran, Universitas Diponegoro, Semarang, Jawa Tengah, Indonesia.
Email: zulfa_juniarto@fk.undip.ac.id
*Korespondensi: Departemen Ilmu  Gizi, Fakultas  Kedokteran, Universitas Diponegoro, Jl. Prof.  Sudarto SH, Tembalang, Semarang, Jawa Tengah, Indonesia. Email: laraayu014@gmail.com
Riwayat Artikel: Diterima  tanggal  10  Februari  2021; Direvisi  tanggal  14  April  2021;  Disetujui tanggal  06  Juni  2021;  Dipublikasi  tanggal 30 Nopember 2021.
Penerbit:
© The Author(s). 2021 Open Access Artikel ini telah
dilakukan  distribusi berdasarkan atas ketentuan Lisensi  Internasional  Creative
Commons Attribution 4.0

## Abstract
Kwashiorkor  is  protein-energy  malnutrition  (PEM)  caused  by  protein deficiency.  Sago  worm  flour  ( Rhynchophorus  ferrugineus )  can  reduce malondialdehyde  (MDA)  caused  by  the  high  content  of  the  amino  acids glycine, lysine, and phenylalanine. The study aimed to prove the effect of sago worm flour on MDA levels in Wistar rats with a low protein diet. A true experimental-pre-post control group. The intervention was given for 28 days to 28 Wistar rats, divided into four groups with each group of seven rats. The dose of sago starch was 0,36 g/100 g rat body weight/day (P1), and a dose of 1,36 g/100 g rat body weight/day (P2) for rats fed a low diet protein. The treatment group was compared with a group of mice given a low diet protein (K +) and a group of healthy mice (K-). Serum MDA levels were measured by the TBARs method. Statistical analysis used paired t-test or Wilcoxon test and one way ANOVA/Kruskal Wallis test. The results of decreasing MDA levels were in the P1 and P2 groups (p= 0,000). There was a difference in MDA levels in the P1 and P2 groups compared to the K + group  (P=  0,000).  There  was  a  difference  that  decreased  MDA  levels between P1 and P2 (p= 0,000). In conclusion, sago worm flour at a dose of 0,36  g/100  g  of  rats/day  and  a  dose  of  1,36  g/100  g  of  body  weight  of rats/day can reduce MDA levels.
Keywords: Diet low protein, malondialdehyde (MDA), sago worm flour

## Abstrak
Kwashiorkor  adalah  tipe  kekurangan  energi  protein  (KEP)  yang disebabkan  oleh  kekurangan  protein.  Tepung  ulat  sagu  ( Rhynchophorus ferrugineus ) dapat menurunkan kadar malondialdehyde (MDA) disebabkan oleh kandungan asam amino glisin, lisin, dan fenilalanin yang tinggi. Tujuan penelitian untuk membuktikan pengaruh tepung ulat sagu terhadap kadar MDA  tikus  Wistar  dengan  diet  rendah  protein.  Penelitian  menggunakan desai true  eksperimental-pre  post  control  group .  Intervensi  diberikan selama  28  hari  pada  28  tikus  Wistar,  dibagi  menjadi  empat  kelompok dengan  masing-masing  kelompok  berjumlah  tujuh  ekor  tikus.  Dosis tepung ulat sagu 0,36 g/100 g berat badan tikus/hari (P1), dan dosis 1,36 g/100 g berat badan tikus/hari (P2) terhadap tikus yang diberi diet rendah protein. Kelompok perlakuan dibandingkan dengan kelompok tikus yang diberi diet rendah protein (K+) dan kelompok tikus sehat (K-). Kadar MDA serum diukur dengan metode TBARs. Analisis statistik menggunakan uji paired t-test/Wilcoxon dan one way ANOVA/Kruskal Wallis . Hasil penelitian menunjukkan  terdapat  penurunan  kadar  MDA  yang  bermakna  pada kelompok  P1,  dan  P2  (p=  0,000).  Terdapat  perbedaan  yang  bermakna kadar  MDA  pada  kelompok  P1  dan  P2  dibandingkan  kelompok  K+  (P=
140 Efek tepung ulat sagu terhadap penurunan kadar malondialdehyde (MDA) …
Lestari et al.
0,000). Terdapat perbedaan yang bermakna penurunan kadar MDA antara P1 dibandingkan P2 (p= 0,000). Kesimpulan, tepung ulat sagu dosis 0,36 g/100  g  berat  badan  tikus/hari  dan  dosis  1,36  g/100  g  berat  badan tikus/hari dapat menurunkan kadar MDA.
Kata Kunci: Diet rendah protein, malondialdehyde (MDA), tepung ulat sagu

## Pendahuluan
Kekurangan  energi  protein  (KEP)  merupakan kondisi gizi kurang dimana asupan makanan tidak mencukupi  kebutuhan  energi  dan  protein  yang adekuat  untuk  pertumbuhan  dan  pemeliharaan tubuh (Munthali et al., 2015). Prevalensi KEP pada anak  usia  di  bawah  lima  tahun  (balita)  di  dunia menurut World  Health  Organization (WHO)  2018 yaitu 49 juta balita (WHO, 2019). Prevalensi KEP di Indonesia sebesar 17,8% lebih dari 15% termasuk masalah gizi kategori sedang berdasarkan standar WHO (Balitbangkes, 2018). Studi Diet Total (SDT) 2014 menunjukkan bahwa sebanyak 36,1% balita masih mendapatkan  asupan protein  kurang dari 80%  angka  kecukupan  protein  (AKP)  (Kemenkes RI, 2014).
Kwashiorkor  merupakan  KEP  berat  yang disebabkan  oleh  penyapihan  dini  dengan makanan  pendamping  rendah  protein  tinggi karbohidrat  (Heikens  &  Manary,  2009).  Asupan protein  yang  rendah  dapat  menurunkan  asam amino esensial di tubuh, maka lemak digunakan untuk proses produksi energi. Hal tersebut dapat menyebabkan gangguan katabolisme lemak dan karbohidrat  yang  dapat  meningkatkan Reactive Oxygen  Species (ROS)  secara  berlebihan  (Jahoor et al., 2008; Wang et al., 2019).
Kelebihan ROS dapat merusak struktur sel seluler  (protein,  lipid  dan  DNA).  Kerusakan peroksidasi lipid, dan oksidatif lipid menghasilkan  produk  aldehid  reaktif  seperti MDA (Valko et al., 2007) , (Dewi et al., 2020). MDA memiliki kemampuan reaksi yang reaktif secara kovalen dengan makromolekul terutama protein (Akinola et al., 2010; Gourine et al., 2018). Stres oksidatif dapat menurunkan kadar IGF-1 melalui persinyalan  pascareseptor  yang  meningkatkan Sirtuin (sirt1)  untuk  menghambat  fosforilasi tirosin dari STAT5 (Savage, 2013; Fazeli, 2015). Penurunan  kadar  IGF-1  digunakan  sebagai indikator  anak  bertubuh  pendek  (Hawkes  & Grimberg, 2015). Hal tersebut karena homeostasis  tulang  pada  anak  untuk  mencapai pertumbuhan  linier  dan  masa  tulang  yang maksimal pada usia dini dipengaruhi oleh IGF-1 (Tessema et al., 2018; Giustina et al., 2008).
Pangan  lokal  dapat  menjadi  sumber pangan  alternatif  penanganan  kwashiorkor (Bustaman,  2008;  Haryanto  et  al.,  2015). Indonesia  bagian  timur  merupakan  penghasil pohon sagu terbesar di Asia (FOLU, 2019). Sagu merupakan  salah  satu  pangan  lokal  sumber karbohidrat dan limbah panen sagu menghasilkan ulat sagu sebagai sumber protein (Nirmala  et  al.,  2017).  Penelitian  tentang komposisi  gizi  ulat  sagu  dari  Papua  memiliki label  protein  tinggi  yaitu  10,39/100  g,  nilai cerna 92%,  tinggi kandungan magnesium dan zink,  dan  tingkat  logam  berat  yang  aman (Köhler et al., 2020). Penelitian ulat sagu pada subjek  balita  sehat  di  Sulawesi  menunjukkan adanya  peningkatan  berat  badan  dan  tinggi badan setelah intervensi ulat sagu sebanyak 20 g yang diversifikasi pada makanan pendamping air susu ibu (ASI) (Nirmala et al., 2017).
Strategi  diversifikasi  dengan  metode penepungan dapat digunakan untuk intervensi ulat  sagu  sebagai  makanan  pendamping. Tujuan penepungan ulat sagu untuk pendistribusian masal jangka panjang, peningkatan  penerimaan  secara  organoleptik oleh  konsumen dan peningkatan  zat  gizi  (Kim et  al.,  2019;  Tao  &  Li,  2018;  Food  and Argriculture  Organization  of  the  United Nations, 2013).
Analisis  zat  gizi  tepung  ulat  sagu dilakukan  oleh  Ariani  (2018),  protein  tepung ulat  sebesar  33,68  g/100g  angka  ini  dua  kali lebih tinggi daripada protein telur sebesar 12,5 g/100g,  tinggi  kandungan  asam  amino  glisin, fenilalanin,  dan  lisin  (Ariani  et  al.,  2018; Réhault-Godbert et al., 2019). Asam amino lisin pada studi in vitro menunjukkan perlindungan terhadap  stres  oksidatif    jaringan  dalam  sel epitel  usus  manusia  dengan  meningkatkan aktivitas enzim glutathione (GSH) (Katayama & Mine, 2007).
Tepung  ulat  sagu    dapat  digunakan sebagai  alternatif  sumber  protein  untuk perbaikan kerusakan jaringan disebabkan oleh stres  oksidatif.  Intervensi  tepung  ulat  sagu pada  penelitian  ini  menggunakan  dosis 0,36g/100  g  berat  badan/hari  berdasarkan
Aceh. Nutri. J. Vol: 6, No: 2, 2021
kebutuhan  lisin  pada  masa  pertumbuhan (Nirmala  et  al.,  2017),  dan  dosis  1,36  g/100  g berat  badan/hari  berdasarkan  penelitian intervensi  ulat  sagu  sebagai  makanan pendamping  ASI  untuk  peningkatan  tinggi badan  anak  sehat  (Zhao  et  al.,  2004).  Tikus Wistar  berusia  4  minggu  digunakan  pada penelitian  karena  sama  dengan  usia  anak  2-3 tahun  pada  manusia  (Andersen  &  Winter, 2019).
Penelitian  tentang  tepung  ulat  sagu terhadap kadar malondialdehyde (MDA) belum pernah  diuji  secara in  vitro pada  hewan  coba dan  manusia.  Sehingga,  peneliti  ingin membuktikan pengaruh pemberian tepung ulat sagu  ( Rhynchophorus  ferrugineus ) terhadap penurunan kadar MDA pada tikus Wistar.

## Metode
Penelitian
menggunakan desain true experimental dengan pre  and  post  test  control group  design .  Pembuatan  tepung  ulat  sagu, pemeliharaan  hewan  coba,  dan  pemeriksaan biokimia sampel dilakukan di Laboratorium Gizi Pusat  Studi  Pangan  dan Gizi  Universitas  Gadjah Mada, Yogyakarta.
Penelitian  ini  dilakukan  selama  49  hari pada  bulan  November – Desember  tahun  2020. Seluruh  pelaksanaan  penelitian  ini  telah memperoleh  persetujuan  dari  Komite  Etik Penelitian  Kesehatan  Fakultas  Kedokteran Universitas    Diponegoro-RSUP  Dr.  Kariadi Semarang  dengan  sertifikat  No.  111/EC/H/FK- UNDIP/XI/2020.
Sampel  penelitian  adalah  tikus  jantan Wistar  dari  laboratorium  penelitian  dan pengujian  terpadu  (LPPT)  Universitas  Gadjah Mada  yang  memenuhi  kriteria  inklusi  dan eksklusi.  Kriteria  inklusi  penelitian,  yaitu  tikus jantan Wistar, umur 4 minggu, berat badan 100 g- 110  g  dan  kondisi  sehat.  Sampel  dieksklusi  jika kadar  albumin  <3  g/dl  dan  kadar  Hb  <10  g/dl. Drop-out jika  selama  penelitian  berlangsung sampel  tidak  mau  makan,  luka  atau  cacat,  sakit dan  mati.  Besar  sampel  minimal  untuk  tiap kelompok  ditentukan  berdasarkan  WHO  terkait penggunaan  sampel  hewan  coba  untuk pemberian herbal medicin e, yaitu 5 ekor/kelompok  (WHO,  2000).  Antisipasi drop- out ditambah  20%  tikus  sehingga  total keseluruhan  28  ekor  tikus.  Tiap  kelompok terdapat 7 ekor tikus.
Tabel 1. Komposisi pakan AIN-93G Komposisi Standar AIN93-G (g/kg) Low Protein AIN93-G (g/kg) Casein (%) 39,749 - Cornstarch (%) 20,00 20,00 Dextrinized Cornstarch (%) 13,20 13,20 Sucrose (%) 10 10 Soybean Oil (%) 7 7 Alphacel, Non-Nutritive Bulk 5 5 Mineral Mix (AIN-93M-MX) (%) 3,5 3,5 Vitamin Mix (AIN-93-VX) (%) 1,0 1,0 L-Cystine (%) 0,3 0,3 Choline Bitartrate (%) 0,25 0,25 Tert-Butylhydroquinone (%) 0,0014 0,0014 Bahan penelitian yaitu ulat sagu diperoleh dari  kampung  Taroy  Kabupaten  Teluk  Bintuni Papua,  pakan  AIN-93G  (Tabel  1),  reagen pemeriksaan  MDA.  Alat  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  berupa cabinet  drayer ,  grinder, homogenizer  mixer,  kandangan  hewan,  wadah pakan  standar  dan  minum,  sonde  lambung, timbangan digital, mikropipet, mikrohematokrit dan eppendorf . Pembuatan  tepung  ulat  sagu  dengan  cara ulat  sagu  dicuci  bersih,  kemudian  dikeringkan menggunakan cabinet drayer dengan suhu 40 0 C, selama  6  jam.  Ulat  sagu  kering  dihancurkan menggunakan  grinder  hingga  menjadi  tepung. Tepung ulat sagu dibuat satu kali untuk selama penelitian,  kemudian  di  simpan  di  lemari pendingin suhu 8 0 C. Masa aklimatisasi 28 ekor tikus selama 7 hari, menggunakan kandang kelompok, kemudian  diberi  pakan  standar  AIN-93G sebanyak  10  g/hari  dan  air  minum    secara  ad libitum. Setelah masa aklimatasi 28 tikus dibagi menjadi  4  kelompok  untuk  dikondisikan  KEP selama 14 hari yaitu kelompok tikus K+, P1 dan P2  diberi  pakan  AIN-93G  modifikasi  rendah protein,  sedangkan  kelompok  tikus  K-  diberi pakan standar AIN-93G. Hari ke-15 diambil darah tikus sebanyak 2 ml melalui plexus retroorbitalis untuk dianalisis kadar MDA serum menggunakan metode TBARs sebagai data awal.
Masa  intervensi  selama  28  hari,  kelompok perlakuan P1 dan P2 masing-masing diberi tepung ulat  sagu  dosis  0,36  g/BB/hari  dan  dosis  1,36 g/BB/hari  melalui  sonde,  pakan  standar  AIN-93G sebanyak  10  g  dan  air  minum  secara ad  libitum . Kelompok K- dan K+ hanya diberikan pakan standar AIN-93G sebanyak 10 g dan air minum ad libitum . Hari ke-29 diambil darah tikus sebanyak 2 ml melalui plexus retroorbitalis untuk dianalisis  kadar MDA setelah intervensi. Data penunjang yaitu berat
142 Efek tepung ulat sagu terhadap penurunan kadar malondialdehyde (MDA) … Lestari et al.
badan  tikus  masa  pengkondisian    dan  intervensi pada semua kelompok. Deskripsi data yang disajikan meliputi  nilai  rerata  dan  standar  deviasi  (SD). Sampel pada penelitian ini ≤ 50 sehingga normalitas data  berat  badan  dan  MDA  menggunakan  uji Saphiro-Wilk .  Selanjutnya,  data  berat  badan    dan MDA berdistribusi normal diuji dengan uji statistik Paired  t-test dan  data  berat  badan    berdistribusi tidak normal diuji dengan uji statistik Wilcoxon. Data delta  berat  badan  diuji  non  parametrik Kruskal Wallis karena tidak berdistribusi normal. Data delta MDA diuji  parametrik one way ANOVA dilanjut Pos Hoc Bonferroni karena berdistribusi normal.

## Hasil dan Pembahasan
Karakteristik tikus pada masa aklimitasi memiliki rata-rata  kadar  albumin  2,06  g/dl  dan  kadar  Hb
10,155  g/dl.  Pemberian  diet  AIN-93G  modifikasi rendah  protein  menurunkan  kadar  albumin  dan kadar Hb  kelompok K+, P1 dan P2 dibawah kadar normal,  masing-masing  yaitu  1,18  g/dl  dan  8,76 g/dl. Kadar normal albumin dan Hb tikus masing- masing  yaitu  3,0-5,1  g/dl  dan  13,6-16,4  g/dl (Lewicki et al., 2018; Anggraeny et al., 2016).
Berat  badan  dapat  menggambarkan keseimbangan  antara  asupan  makanan  dengan pemanfaatan    zat  gizi  yaitu  untuk  mencukupi kebutuhan  basal  metabolism  tubuh,  aktivitas fisik, adanya stres/sepsis dan masa pertumbuhan (Soenen et al., 2013). Berdasarkan teori  tersebut  penimbangan  berat  badan  tikus pada  penelitian  ini  dilakukan  setiap  minggu selama  penelitian.  Nilai  berat  badan  tikus  (g) sebelum dan sesudah pemberian  diet AIN-93G terdapat pada tabel 2.
Tabel 2. Nilai berat badan tikus (g) sebelum dan sesudah pemberian AIN-93G Kelompok n Sebelum Sesudah ∆ % ∆ Nilai p K- 7 107,00±1,14 122,29±1,49 15,28±0,75 a 14,28 0,000 b K+ 7 106,29±1,11 112,0 (110,0-113,0) 5,0 (5,0-7,0) a 5,24 0,000 c P1 7 106,29±1,11 112,14±1,67 5,85±0,69 a 5,50 0,000 b P2 7 107,00±1,52 112,43±1,90 5,0 (5,0-6,0) a 5,07 0,016 b a Uji Kruskal-Wallis, b Uji Paired t-test, c Uji Wilcoxon
Tabel  2  menunjukkan  peningkatan  yang bermakna  berat  badan    sebelum  dan  setelah diberikan diet standar AIN-93G K- dan diet AIN- 93G  modifikasi  rendah  protein  K+,  P1,  P2.  Uji Kruskal  Wallis (tabel  2),  terdapat  perbedaan bermakna  antara  delta  tiap  kelompok.  Hasil analisis berat badan sebelum dan setelah diberi diet  AIN-93G  modifikasi  rendah  protein menunjukkan peningkatan berat badan pada K+, P1, dan P2 tiga kali lebih lambat dibandingkan K- . Lambatnya peningkatan berat badan K+, P1, dan P2  setelah  diberi  diet  rendah  protein  karena adanya  peningkatan katabolik.
Peningkatan  katabolik  disebabkan  oleh asupan rendah protein mengikis asam amino dan asam  lemak  dari  otot  dan  jaringan  adiposa cadangan  dalam  tubuh  (Scrimshaw  &  Viteri,
2010;  Pezeshki  et  al.,  2016).  Rata-rata peningkatan  berat  badan  pada  kelompok diberi diet rendah protein sebesar ±5%. Hasil penelitian ini  sejalan  dengan  penelitian  sebelumnya  yang menyatakan  pemberian  diet  rendah  protein meningkatkan    berat  badan  kurang  dari  10% (Anggraeny et al., 2016; Pezeshki et al., 2016).
Berat  badan  dapat  ditingkatkan  oleh asupan  makronutrient  melalui  mekanisme metabolisme energi dan pembentukan lean body mass . Hasil penelitian (tabel 3) secara deskriptif terlihat  adanya  peningkatan  rata-rata  berat badan antara sebelum dengan setelah dilakukan intervensi.  Hasil  uji Kruskal  Wallis (tabel  3) menunjukkan  terdapat  perbedaan  perubahan berat badan yang bermakna sebelum dan setelah intervensi.
Tabel 3. Nilai berat badan tikus (g) sebelum dan sesudah intervensi Kelompok n Sebelum Sesudah ∆ % ∆ Nilai p K- 7 122,28±1,49 155,00±2,30 32,85±1,21 26,86 a 0,007 b K+ 7 112,0 (110,0-113,0)  120,71±2,05 8,85±1,06 7,91 a 0,016 b P1 7 112,14±1,67 130,57±1,98 16,36 (15,79-16,96)  16,43 a 0,000 b P2 7 112,42±1,90 138,00±2,58 25,57±1,51 22,74 a 0,026 b a Uji Kruskal-Wallis, b Uji Paired t-test, c Wilcoxon
Aceh. Nutri. J. Vol: 6, No: 2, 2021
Hasil  analisis  berat  badan  sebelum  dan setelah  intervensi  menunjukkan  peningkatan berat  badan  lebih  dari  15%  pada  kelompok intervensi,  sejalan  dengan  penelitian  Nirmala 2017 (Nirmala et al., 2017). Hal tersebut karena nilai  cerna  protein  92%  dan  asam  amino fenilalanin  pada  tepung  ulat  sagu.  Asam  amino fenilalanin,  dan  tirosin  dapat  meningkatkan sintesis protein dan meningkatkan keseimbangan  leusin  pada  anak-anak  KEP  (Hsu et al., 2014). Asam amino leusin merupakan asam amino yang berperan penting dalam pembentukan  dan  pemeliharaan  jaringan  otot. Keseimbangan  asam  amino  leusin  pada  anak kekurangan  protein  efektif  meningkatkan sintesis  protein  otot  dan  mengurangi  hilangnya massa  tanpa  lemak  dalam  kondisi  katabolik (Wamiti et al., 2017).
Peningkatan katabolik
dapat menyebabkan  peningkatan  produksi  ROS  di sirkulasi dan  sel adiposa. Peningkatan ROS dapat
menyebabkan stres oksidatif karena keseimbangan reaksi reduksi oksidasi terganggu sehingga menurunkan enzim antioksidan seperti SOD  ( superoxide  Dismutase )  dan  CAT  ( Catalase ) (Akinola  et  al.,  2010;  Gourine  et  al.,  2018). Kondisi tersebut dapat menyebabkan kerusakan peroksidasi  lipid  yang  menghasilkan  produk aldehid  reaktif  seperti  MDA.  Stres  oksidatif ditandai apabila kadar MDA > 3 mmol/L (Arrigo et al., 2015).
Tabel  4  menunjukkan  kadar  MDA kelompok  K+,  P1  dan  P2    >  3  mmol/L  setelah diberikan  diet  AIN-93G  modifikasi  rendah protein.  Penelitian  diet low  protein perhadap peningkatkan  stres  oksidatif  telah  diteliti sebelumnya  oleh    Ling  (2009),  menunjukkan peningkatan sitokin inflamasi  IL-1 dan IL-6 pada tikus Sprague Dawley yang diberi diet 2% protein AIN-76G selama 14 hari (Ling & Bistrian, 2009). Rerata  kadar  MDA  sebelum  dan  setelah intervensi dapat dilihat pada tabel 4.
Tabel 4. Perubahan rerata MDA sebelum dan sesudah intervensi Kelompok n Sebelum Sesudah ∆ % ∆ Nilai p Rerata± SD Rerata± SD Rerata± SD K- 7 1,27±0,16 1,60±0,15 0,33±0,10 a 26,84 0,000 b K+ 7 9,12±0,37 9,73±0,34 0,60±0,10 a 6,65 0,000 b P1 7 8,7±0,20 3,90±0,23 -4,8±0,30 a -55,22 0,000 b P2 7 9,02±0,24 3,11±0,24 -5,91±0,26 a -65,47 0,000 b a Uji One Way Anova, b Uji Paired t-test
Tabel 4 menunjukkan terdapat perbedaan bermakna antara kadar MDA serum sebelum dan setelah intervensi.  Secara deskripsi, penurunan kadar  MDA  pada  kelompok  intervensi  tepung ulat  sagu  1,36  g/100g  berat  badan/hari  (P2) lebih tinggi dibandingkan pemberian tepung ulat sagu    0,36  g/100g  berat  badan/hari  (P1).  Hal tersebut terjadi karena dosis tertinggi  diberikan pada  P2.  Dengan  demikian,  pengaruh  terbesar dari tepung ulat sagu terhadap kadar MDA dapat dilihat pada P2.
Tepung ulat sagu dapat menurunkan kadar MDA  karena tinggi  kandungan asam  amino lisin, dan antioksidan (Ariani et al., 2018). Asam amino lisin  dapat  meningkatkan  enzim  antioksidan katalase (CAT), dan glutathione peroksidase (GPx) sebagai perlindungan makromolekul seluler dari efek negatif ROS (Arrigo et al., 2015; Katayama & Mine,  2007).  Produksi  ROS  dalam  kondisi fisiologis  memiliki  peran  positif  dalam  produksi energi, fagositosis, pertumbuhan sel, dan regulasi persinyalan antar sel (Valko et al., 2007)
Berdasarkan uji One Way Anova (Tabel 4), terdapat  perbedaan  kadar  MDA  setelah intervensi diantara empat kelompok (p= 0,000). Selanjutnya  dilakukan  analisis  lebih  lanjut menggunakan analisis post hoc Bonferroni untuk mengetahui perbedaan antar kelompok perlakuan. Uji post hoc Bonferroni menunjukkan perbedaan yang bermakna kelompok intervensi P1 dan P2 dibandingkan kelompok K+ (p= 0,000). Tidak ada perbedaan bermakna antara kelompok K- dibandingkan K+ (p= 0,165). Dalam penelitian ini,  perbedaan rerata  kadar  MDA  terbesar  pada K-  dan  P2  (-6,24  mmol/L),  namun  kadar  MDA pada  P2  lebih  tinggi  dibandingkan  K-.  Hal tersebut  dapat  terjadi  karena  kandungan  asam amino arginin pada tepung ulat sagu rendah yaitu 0,01  mg/100g  tepung  ulat  sagu  (Ariani  et  al., 2018).  Asam  amino  arginin  menurunkan  MDA dengan  menghambat  ekspresi inducible-nitric oxide synthase (iNOS) (Gourine et al., 2018). Dosis tepung ulat sagu pada P2 adalah 1,36 g/100 g berat badan tikus/hari berarti terdapat
144 Efek tepung ulat sagu terhadap penurunan kadar malondialdehyde (MDA) … Lestari et al. 0,000136  mg  asam  amino  arginin  dalam  dosis tersebut. Berdasarkan literatur review suplementasi  arginin  2%  dapat  mencegah retardasi  pertumbuhan  melalui  mekanisme peningkatan  sintesis NO  (Wu et al., 2009). Dosis optimal suplementasi arginin terhadap penurunan kadar MDA hingga mencapai normal adalah  100  mg/kgberat  badan  (Gupta  et  al., 2005).  Perbedaan  rerata  kadar    MDA  terendah pada  K-  dan  K+  (0,272  mmol/L)  disebabkan karena  K-  dan  K+  pada  kondisi  stres  oksidatif yang diberi diet AIN-93G. Penelitian sebelumnya menyatakan bahwa pemberian diet standar AIN- 93G  dalam  kondisi  stres  oksidatif  ditambahkan suplementasi  asam  amino  arginin  1%  atau metionin 0,3% (Gourine et al.,  2018; Xiao  et al., 2016).
Penelitian  ini  mempunyai  keterbatasan penelitian, yaitu tidak dilakukan analisis zat gizi terutama uji asam amino pada tepung ulat sagu secara spesifik.

## Kesimpulan
Pemberian  tepung  ulat  sagu  ( Rhynchophorus ferrugineus )  dosis  0,36  g/100  g  berat  badan tikus/hari  dan  1,36  g/100  g  berat  badan tikus/hari  menurunkan  kadar  MDA  pada  tikus Wistar  dengan    diet  rendah  protein  secara bermakna.
Saran,  perlu  dilakukan  analisis  zat  gizi asam amino spesifik dan nilai cerna tepung ulat sagu secara in vitro . Perlu penelitian lebih lanjut terkait  pengaruh  tepung  ulat  sagu  terhadap biomarker stres oksidatif lainnya dan Insulin-like Growth  Factor  Binding  Protein 3  (IGFBP-3) dengan  dosis  bertingkat  untuk  mengetahui potensi pemberian perlakuan secara kuratif pada anak kekurangan protein.

## Daftar Rujukan
Akinola,  F.,  Oguntibeju,  O.,  &  Alabi,  O.  (2010). Effects of severe malnutrition on oxidative stress in Wistar rats. Scientific Research and Essays , 5 (10), 1145 – 1149.
Andersen, M. L., & Winter, L. M. F. (2019). Animal models  in  biological  and  biomedical research  -  experimental  and  ethical concerns. An Acad Bras Cienc , 91 (1), 1 – 14. https://doi.org/10.1590/0001-
3765201720170238 Anggraeny, O., Dianovita, C., Putri, E. N., Sastrina, M.,  &  Dewi,  R.  S.  (2016).  Korelasi Pemberian Diet Rendah Protein Terhadap Status Protein, Imunitas, Hemoglobin, dan Nafsu  Makan  Tikus  Wistar  Jantan.
Indonesian  Journal  of  Human  Nutrition , 3 (2), 105 – 122. https://doi.org/10.21776/ub.ijhn.2016.00 3.Suplemen.5 Ariani, A., Anjani, G., Sofro, M. A. U., & Djamiatun, K. (2018). Tepung ulat sagu (Rhyinchophorus ferrugineus) imunomodulator  Nitric  Oxide  (NO) sirkulasi mencit terapi antimalaria standar.
Jurnal  Gizi  Indonesia , 6 (2),  131 – 138.
https://doi.org/10.14710/jgi.6.2.131-138
Arrigo,  T.,  Leonardi,  S.,  Cuppari,  C.,  Manti,  S.,
Lanzafame,  A.,  D’A ngelo,  G.,  Gitto,  E., Marseglia, L., & Salpietro, C. (2015). Role of the diet as a link between oxidative stress and  liver  diseases. World  Journal  of Gastroenterology , 21 (2), 384 – 395. https://doi.org/10.3748/wjg.v21.i2.384
Balitbangkes. (2018). Hasil Utama Riset Kesehata Dasar  (RISKESDAS).  In Badan  Penelitian dan Pengembangan Kesehatan .
Bustaman,  S.  (2008).  Potensi  ulat  sagu  dan prospek  pemanfaatannya. Jurnal  Litbang Pertanian , 27 (10), 50 – 54.
Dewi, L., Lestari, L. A., Astiningrum, A. N., Fadhila, V.,  Amala,  N.,  Bakrie,  M.  A.,  &  Hidayah,  N.
(2020).  Tempeh  and  red  ginger  flour  for hypercholesterolemic  rats. Nutrition  & Food Science , 51 (1), 41 – 49. https://doi.org/10.1108/NFS-01-2020- 0005 FOLU.  (2019).  Tumbuh  Lebih  Baik:  Sepuluh Transisi Penting untuk Melakukan Transformasi Pangandan Tata Guna Lahan. In Food  and  Land  Use  Coalition .
www.foodandlandusecoalition.org Food and Argriculture Organization of the United Nations.  (2013).  Edible  insects.  Future prospects  for  food  and  feed  security.  In Food  and  Agriculture  Organization  of  the United Nations (Vol. 171).
Giustina,  A.,  Mazziotti,  G.,  &  Canalis,  E.  (2008). Growth  hormone,  insulin-like  growth factors,  and  the  skeleton. Endocrine Reviews , 29 (5), 535 – 559. https://doi.org/10.1210/er.2007-0036
Gourine, H., Grar, H., Dib, W., Mehedi, N., Boualga,
Aceh. Nutri. J. Vol: 6, No: 2, 2021
A., Saidi, D., & Kheroua, O. (2018). Effect of a  normal  protein  diet  on  oxidative  stress and  organ  damage  in  malnourished  rats. Frontiers  in  Biology , 13 (5),  366 – 375.
https://doi.org/10.1007/s11515-018-
1511-5
Gupta,  V.,  Gupta,  A.,  Saggu,  S.,  Divekar,  H.  M.,  &
Grover,  S.  K.  (2005).  Anti-stress  and Adaptogenic  Activity  of  L  -Arginine Supplementation. Evidence-Based Ccomplementary  and  Alternative  Medicine , 2 (December 2004), 93 – 97. https://doi.org/10.1093/ecam/neh054 Haryanto,  B.,  Mubekti,  &  Putranto,  A.  T.  (2015). Potensi dan Pemanfaatan Pati Sagu dalam Mendukung Ketahanan Pangan di Kabupaten  Sorong  Selatan  Papua  Barat. Pangan , 24 (2), 97 – 106.
Hawkes, C. P., & Grimberg, A. (2015). Insulin-like growth  factor-I  is  a  marker  for  the nutritional  state. Pediatric  Endocrinology Reviews , 13 (2), 499 – 511.
Heikens, G. T., & Manary, M. (2009). 75 years of Kwashiorkor  if  Africa. Malawi  Medical Journal , 21 (3), 96 – 100. Hsu, J. W., Badaloo, A., Wilson, L., Taylor-bryan, C., Chambers,  B.,  Reid,  M.,  Forrester,  T.,  & Jahoor, F. (2014). Dietary Supplementation with  Aromatic  Amino  Acids  Increases Protein  Synthesis  in  Children  with  Severe Acute  Malnutrition  1 – 4. The  Journal  of Nutrition , 144 (5), 660 – 666. https://doi.org/10.3945/jn.113.184523.T
ABLE
Jahoor,  F.,  Badaloo,  A.,  Reid,  M.,  &  Forrester,  T.
(2008).  Protein  metabolism  in  severe childhood malnutrition. Annals of Tropical Paediatrics , 28 (2), 87 – 101. https://doi.org/10.1179/146532808X302 107
Katayama,  S.,  &  Mine,  Y.  (2007).  Antioxidative activity of amino acids on tissue oxidative stress  in  human  intestinal  epithelial  cell model. Journal  of  Agricultural  and  Food
Chemistry , 55 (21), 8458 – 8464. https://doi.org/10.1021/jf070866p Kemenkes  RI.  (2014). Buku  Studi  Diet  Total :
Survei Konsumsi Makanan Individu Indonesia  2014 .  Kementerian  Kesehatan Republik Indonesia. Kim, T. K., Yong, H. I., Kim, Y. B., Kim, H. W., & Choi,
Y.  S.  (2019).  Edible  insects  as  a  protein source:  A  review  of  public  perception,
processing  technology,  and  research trends. Food  Science  of  Animal  Resources , 39 (4), 521 – 540. https://doi.org/10.5851/kosfa.2019.e53
Köhler,  R.,  Irias-Mata,  A.,  Ramandey,  E., Purwestri,  R.,  &  Biesalski,  H.  K.  (2020). Nutrient  composition  of  the  Indonesian sago  grub  (Rhynchophorus  bilineatus).
International  Journal  of  Tropical  Insect Science , 40 (3), 677 – 686. https://doi.org/10.1007/s42690-020-
00120-z
Lewicki,  S.,  Leśniak,  M.,  Bertrandt,  J.,  Kalicki,  B., Jacek,  Z.,  &  Lewicka,  A.  (2018).  The  long- term  effect  of  a  protein-deficient-diet enriched  with  vitamin  B6  on  the  blood parameters  in  unexercised  and  exercised rats. Food  and  Agricultural  Immunology ,
29 (1),
722 – 734. https://doi.org/10.1080/09540105.2018. 1439900
Ling, P. R., & Bistrian, B. R. (2009). Comparison of the  effects  of  food  versus  protein restriction  on  selected  nutritional  and inflammatory markers in rats. Metabolism: Clinical and Experimental , 58 (6), 835 – 842. https://doi.org/10.1016/j.metabol.2009.0 3.002
Munthali,  T.,  Jacobs,  C.,  Sitali,  L.,  Dambe,  R.,  & Michelo, C. (2015). Mortality and morbidity patterns in under-five children with severe acute malnutrition (SAM) in Zambia: A five- year  retrospective  review  of  hospital- based  records  (2009-2013). Archives  of Public Health , 73 (1), 1 – 9. https://doi.org/10.1186/s13690-015-
0072-1
Nirmala,  I.  R.,  Trees,  Suwarni,  &  Pramono,  M.  S. (2017).  Sago  worms  as  a  nutritious traditional  and  alternative  food  for  rural children in Southeast Sulawesi, Indonesia. Asia  Pacific  Journal  of  Clinical  Nutrition , 26 (May), S40 – S49. https://doi.org/10.6133/apjcn.062017.s4
P.  Fazeli,  A.  K.  (2015).  Determinants  of  Growth Hormone  Resistance  in  Malnutrition. Journal  of  Endocrinology , 220 (3),  1 – 14. https://doi.org/10.1530/JOE-13- 0477.Determinants
Pezeshki, A., Zapata, R. C.,  Singh,  A.,  Yee, N. J., & Chelikani,  P.  K.  (2016).  Low  protein  diets produce  divergent  effects  on  energy balance. Scientific  Reports , 6 (1),  1 – 13.
146 Efek tepung ulat sagu terhadap penurunan kadar malondialdehyde (MDA) … Lestari et al.
https://doi.org/10.1038/srep25145
Réhault-Godbert, S., Guyot, N., &  Nys, Y. (2019). The  golden  egg:  Nutritional  value, bioactivities,  and  emerging  benefits  for human  health. Nutrients , 11 (3),  1 – 26. https://doi.org/10.3390/nu11030684 Savage, M. O. (2013). Insulin-like growth factors, nutrition  and  growth. World  Review  of Nutrition  and  Dietetics , 106 ,  52 – 59. https://doi.org/10.1159/000342577 Scrimshaw,  N.  S.,  &  Viteri,  F.  E.  (2010).  INCAP studies  of  kwashiorkor  and  marasmus. Food  and  Nutrition  Bulletin , 31 (1),  34 – 41.
https://doi.org/10.1177/1564826510031
00105
Soenen,  S.,  Martens,  E.  A.  P.,  Hochstenbach- waelen, A., Lemmens, S. G. T., & Westerterp- plantenga,  M.  S.  (2013).  Normal  protein intake is required for body weight loss and weight maintenance, and elevated protein intake  for  additional  preservation  of resting  energy  expenditure  and  fat  free mass. Journal  of  Nutrition , 143 (5),  591 – 596.
https://doi.org/10.3945/jn.112.167593
Tao, J., & Li, Y. O. (2018). Edible insects as a means to  address  global  malnutrition  and  food insecurity  issues. Food  Quality  and  Safety ,
2 (1),
17 – 26. https://doi.org/10.1093/fqsafe/fyy001
Tessema,  M.,  Gunaratna,  N.  S.,  Brouwer,  I.  D., Donato,  K.,  Cohen,  J.  L.,  McConnell,  M., Belachew, T., Belayneh, D., & Groote, H. De. (2018).  Associations  among  high-quality protein  and  energy  intake,  serum transthyretin,  serum  amino  acids  and linear  growth  of  children  in  Ethiopia.
Nutrients , 10 (11), 1 – 17. https://doi.org/10.3390/nu10111776
Valko, M., Leibfritz, D., Moncol, J., Cronin, M. T. D., Mazur, M., & Telser, J. (2007). Free radicals and  antioxidants  in  normal  physiological functions and human disease. International
Journal  of  Biochemistry  and  Cell  Biology , 39 (1), 44 – 84. https://doi.org/10.1016/j.biocel.2006.07. 001
Wamiti,  J.,  Kogi-Makau,  W.,  Onyango,  F.  E.,  & Ngala, S. (2017). Leucine supplementation in  the  management  of  protein  energy malnutrition:  A  review. East  African Medical Journal , 94 (1), 20 – 24.
Wang, J., Xue, X., Liu, Q., Zhang, S., Peng, M., Zhou, J.,  Chen,  L.,  &  Fang,  F.  (2019).  Effects  of duration  of  thermal  stress  on  growth performance,  serum  oxidative  stress indices, the expression and localization of ABCG2  and  mitochondria  ROS  production of  skeletal  muscle,  small  intestine  and immune  organs  in  broilers. Journal  of Thermal  Biology , 85 (August),  102420. https://doi.org/10.1016/j.jtherbio.2019.1 02420 WHO. (2000). General Guidelines for Methodologies on Research and Evaluation of  Traditional  Medicine  World  Health Organization . WHO.  (2019).  Child  Mortality  2019. Levels  & Trends in Child Mortality , 1 – 52.
Wu, A., Bazer, F. W., Davis, T. A., Kim, S. W., Li, P., Rhoads, J. M., Satterfield, M. C., Smith, S. B., Spencer,  T.  E.,  &  Yin,  Y.  (2009).  Arginine metabolism and nutrition in growth, health and  disease. Amino  Acids , 37 (1),  1 – 7. https://doi.org/10.1007/s00726-008- 0210-y.Arginine
Xiao, L., Cao, W., Liu, G., Fang, T., & Wu, X. (2016). Arginine  ,  N  -carbamylglutamate  ,  and glutamine  exert  protective  effects  against oxidative  stress  in  rat  intestine. Animal Nutrition , 2 (3), 242 – 248. https://doi.org/10.1016/j.aninu.2016.04. 005
Zhao, W., Zhai, F., Zhang, D., An, Y., Liu, Y., He, Y., Ge,  K.,  &  Scrimshaw,  N.  S.  (2004).  Lysine- fortified  wheat  flour  improves  the nutritional  and  immunological  status  of wheat-eating  families  in  northern  China. Food  and  Nutrition  Bulletin , 25 (2),  123 –
129. https://doi.org/10.1177/1564826504025
00203