## FORMULATION AND STABILITY TEST OF GEL
HANDSANITIZER OF LEAF ETHANOL EXTRACT ( Annona muricata L.)
Framesti Frisma Sriarumtias 1 , Mila Kamilatu Sa’adah 1 , Akmal 2
1 Fakultas MIPA-Universitas Garut, Jl.Jati No. 42B, Tarogong, Garut
2 Lembaga Farmasi Direktorat Kesehatan Angkatan Darat, Jl. Gudang Utara No. 26, Merdeka, Sumur Bandung, Kota Bandung
Korenspondensi: Framesti Frisma Sriarumtias (framesti@uniga.ac.id)

## ARTICLE HISTORY
Received: 20 Mei 2017 Revised: 6 Juni 2017                     Accepted: 10 Juni 2017

## Abstract
Soursop leaves belong to the family Annonaceae, which as antibacterial activity. There are several studies that have proven that ethanol extract of soursop leaves has an antibacterial activity. The purpose of this study to make a gel andsanitizer preparation  containing  safe,  effective  and  stable  soursop  leaf  ethanol  extract. This research was carried out by making a gel base using various concentrations of carbopol 940 which then made the best base used in the manufacture of hand antiseptic  gel  preparations.  Then  testing  for  antibacterial  activity  using  the  agar diffusion  method,  using  nutrient  agar  as  a  medium  against  staphylococcus aureus  bacteria  and  escherichia  coli  bacteria,  then  measuring  the  clear  zone using  calipers  on  each  media  that  has  been  treated.  Inhibition  zone  in  the  best gel preparations was at the concentration of ethanol extract of soursop leaves by 12% in Staphylococcus aureus bacteria with inhibitory values of 26,42 mm and in Escherichia coli bacteria at 17,56 mm.
Key words: antibacterial, soursop leaf, hand sanitizer, Staphylococcus aureus, Escherichia coli

## FORMULASI SEDIAAN DAN UJI STABILITAS GEL ANTISEPTIK TANGAN EKSTRAK ETANOL DAUN SIRSAK ( Annona muricata L.)

## Abstrak
Daun  sirsak  termasuk  kedalam  famili  annonaceae,  yang  memiliki  aktivitas sebagai  antibakteri.  Terdapat  beberapa  penelitian  yang  sudah  membuktikan bahwa  ekstrak  etanol  daun  sirsak  memiliki  aktivitas  sebagai  antibakteri.  Tujuan penelitian  ini  yaitu  untuk  membuat  sediaan  gel  antiseptik  tangan  yang mengandung ekstrak etanol daun sirsak yang aman, efektif, dan stabil. Penelitian ini  dilakukan  dengan  pembuatan  basis  gel  menggunakan  berbagai  konsentrasi carbopol  940  yang  kemudian  menjadikan  basis  terbaik  di  gunakan  dalam pembuatan  sediaan  gel  antiseptik  tangan.  Lalu  pengujian  aktivitas  antibakteri dengan  menggunakan  metode  difusi  agar,  menggunakan  nutrient  agar  sebagai media  terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus dan  bakteri Escherichia coli lalu
dilakukan  pengukuran  zona  bening  menggunakan  jangka  sorong  terhadap masing –  masing  media  yang  telah  diberikan  perlakuan.  Zona  hambat  pada sediaan  gel  terbaik  yaitu  pada  konsentrasi  ekstrak  etanol  daun  sirsak  sebesar 12%  pada  bakteri Staphylococcus  aureus dengan  nilai  daya  hambat  sebesar 26,42 mm dan pada bakteri Escherichia coli sebesar 17,56 mm.
Kata kunci: Antibakteri, daun sirsak, antiseptik tangan, Staphylococcus aureus, Escherichia coli

## Pendahuluan
Kesehatan adalah aspek penting yang mempengaruhi kualitas hidup ( quality of life ) setiap  orang.  Untuk meminimalisir  kontak  dengan  mikroorganisme kita perlu  menjaga kesehatan  tubuh  dengan  menjaga  kebersihan,  salah  satunya  adalah  kebersihan tangan. Tangan merupakan bagian dari tubuh yang sering kontak dengan lingkungan luar  serta  menjadi  jalan  masuknya  mikroorganisme  kedalam  tubuh  yaitu  saluran cerna. 1 Sehingga kebersihan tangan perlu mendapatkan perhatian penting. Salah satu cara  untuk  menjaga  kebersihan  tangan  yaitu  dengan  penggunakan  antiseptik. Antiseptik  adalah  suatu  zat  yang  dipakai  dalam  menghambat  pertumbuan  atau membunuh mikroorganisme. 2 Telah dikembangkan banyak produk pembersih tangan, dari  mulai  sabun  pembersih  tangan  sampai  sediaan  yang  tidak  membutuhkan  air dalam  proses  pembersihannya.  Serta  telah  berkembang  banyak  bentuk sediaan  baru yang mengandung antiseptik. 1
Seiring  perkembangan  zaman  kebiasan  mencuci  tangan  telah  teralihkan  dengan cara  yang  lebih  praktis  salah  satunya  dengan  penggunaan hand  sanitizer . 3 Hand sanitizer merupakan  salah  satu  bahan  antiseptik  bisa  berbentuk  cair  dengan  cara disemprotkan  dan  bentuk  semipadat  yaitu  gel  yang  sering  digunakan  masyarakat sebagai  pengganti  sabun  cuci  tangan. 4 tetapi  sayangnya,  biasanya hand  sanitizer dipasaran mengandung antiseptik yaitu alkohol dengan kadar 70-96% dimana apabila lapisan  kulit  terlalu  sering  kontak  dengan  alcohol  bisa  menimbulkan  iritasi.  Sehingga perlu  dicara  sediaan  dari  alam  yang  bisa  mengganti  peran  alkohol  sebagai  antiseptik pada  sediaan hand  sanitizer, dalam  kasus  ini  peneliti  tertarik  untuk  memanfaatkan ekstrak daun sirsak kedalam bentuk hand sanitizer.
Daun sirsak merupakan jenis bahan alam yang memiliki kandungan tanin, alkaloid, saponin,  dan  flavonoid  yang  berfungsi  sebagai  antibakteri.  Hasil  penelitian menunjukkan  adanya  daya  hambat  dari  ekstrak  daun  sirsak  terhadap  pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus setelah proses inkubasi pada suhu 37ºC pada inkubator selama  24  jam.  Oleh  karena  itu  peneliti  tertarik  untuk  melakukan  penelitian menggunakan  ekstrak  etanol  daun  sirsak  sebagai  antiseptik  untuk  mengurangi  efek yang terjadi pada pemakaian berulang pada bakteri staphylococcus aureus dan bakteri escericia coli. 1

## Metode
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  cawan  petri,  gelas  kimia/beaker glass,  mortir,  stamper,  pipet  tetes,  pH  digital,  gelas  ukur,  autoclap,  ose,  batang pengaduk,  oven,  timbangan  digital,  viscometer  Brookfield, rotary  evaporator, waterbath,  magnetic  stierer ,  LAF,  tabung  reaksi,  erlenmeyer,  cawan  uap,  kompor listrik, tanur, desikator, orbital shaker dan inkubator.
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  ekstrak  daun  sirsak  ( Annona muricata Linn ), etanol, karbopol, metil paraben (Nipagin), trietanolamin (TEA), gliserin,
aquadest,  nutrient  agar,  toluen,  ammoniak  25%,  kloroform,  pereaksi  Dragendorff, larutan  HCl  10  %,  pereaksi  Mayer,  larutan  alkohol-HCl  (1:1),  FeCl 3 1%,  pereaksi Steasny,  Larutan  NaOH  1  N,  benzen,  larutan  eter-kloroform  (2:1),  Na 2 SO 4 anhidrat, NaOH 30%, eter, H 2 SO 4 (P), CH 3 COOH anhidrat, dan DMSO. Penelitian  ini  diawali  dengan  pengumpulan  tanaman  daun  sirsak  di  daerah Sucinaraja  Kabupaten  Garut  dan  di  determinasi  di  Herbarium  Bandungense  Sekolah Ilmu dan Teknologi Hayati Institut Teknologi Bandung.
Setelah  pengumpulan  daun  sirsak,  kemudian  dilakukan  karakteristik  simplisia, penafisan  fitokimia,  dan  pembuatan  ekstrak  daun  sirsak  ( Annona  Muricata  Linn ) dengan  menggunakan  pelarut  etanol  96%  selama  3  hari,  sehingga  diperoleh  ekstrak daun  sirsak  ( Annona  Muricata  Linn ).  Kemudian  dilakukan  pemilihan  dan  pembuatan basis  gel,  uji  stabilitas  basis  untuk  memdapatkan  basis  yang  stabil    untuk  dipakai dalam  formulasinya.  Setelah  diperoleh  formula  dasar  yang  stabil,  kemudian  formula dasar  ditambahkan  ekstrak  etanol  daun  sirsak  ( Annona  Muricata  Linn ).  Kemudian dilakukan  uji  stabilitas  fisik,  meliputi  pengamatan  organoleptik,  homogenitas,  pH, viskositas,  dan  daya  sebar.  Setelah  terbentuk  sediaan  gel  antiseptik  tangan,  lalu dilakukan  uji  aktivitas  antibakteri  ekstrak  etanol  daun  sirsak  terhadap Staphylococcus aureus dengan  metode  difusi  agar.  Kemudian  dilakukan  uji  keamanan  dan  uji kesukaan.

## Hasil
Uji pendahuluan aktivitas ekstrak daun sirsak ( annona muricata L.) terhadap bakteri Stapylococcus aureus dan Eschericia coli dengan konsentrasi 3%, 6%, 9%, dan 12%, dan pada bakteri escherichia coli dengan konsentrasi yang sama. Hasil menunjukkan bahwa  ekstrak  daun  sirsak  ( annona  muricata L.)  memiliki  aktivitas  antibakteri  pada bakteri Stapylococcus  aureus dengan  diameter  zona  hambat  11,32  mm  pada konsentrasi  3%,  15,2  mm  pada  konsentrasi  6%,  18,3  mm  pada  konsentrasi  9%,  dan 23,7  mm  pada konsentrasi  12%.  Sedangkan  hasil  dari  uji  aktivitas  ekstrak  antibakteri pada bakteri Escherihcia coli dengan diameter daya hambat 19,7 mm pada konsentrasi 9%,  dan  22,68  mm  pada  konsentrasi  12%,  sedangkan  pada  konsentrasi  3%  dan  6% tidak dapat menghambat bakteri.
Tabel 1. Hasil Uji Pendahuluan Ekstrak daun Sirsak terhadap Aktivitas Antibakteri
Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Sirsak ( Annona muricata L.) terhadap Bakteri Escherichia coli Konsentrasi Ekstrak (%) Zona Hambat (mm) 3 - 6 - 9 19,7 12 22,68
Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Sirsak ( Annona muricata L.) terhadap Bakteri Staphylococcus aureus Konsentrasi Ekstrak (%) Zona Hambat (mm) 3 11,32 6 15,2 9 19,3 12 22,68
Tabel 2. Formula Dasar Gel Dengan Berbagai Konsentrasi Carbopol 940 pada Ekstrak
Daun Sirsak ( Annona muricata L.)
Komposisi Formula (%) B1 B2 B3 Carbopol 940 0,5 1 1,5 TEA 2,5 2,5 2,5 Metil Paraben 0,2 0,2 0,2 Gliserin 10,25 10,25 10,25 Aquadest add 100 mL add 100 mL add 100 mL
.
Diambil  Carbopol  dengan  konsentrasi  0,5  karena  dari  setiap  pengujiannya merupakan konsentrasi yang paling stabil.
Gambar  1. Basis  sediaan  gel  antiseptik  tangan  ekstrak  etanol  daun  sirsak  ( annona muricata L.) B1 B2 B3 3
Tabel 3. Formulasi Sediaan Gel Antiseptik Tangan Ekstrak Etanol Daun Sirsak
( Annona muricata L.)
Komposisi Formula (%) F1 F2 Ekstrak daun sirsak 9 12 Carbopol 940 0,5 0,5 TEA 2,5 2,5 Metil Paraben 0,2 0,2 Gliserin 10,25 10,25 Aquadest add 100 mL add 100 mL
Gambar 2. Formulasi sediaan gel antiseptik tangan ekstrak etanol daun sirsak ( annona muricata L.)
Tabel 4. Hasil Uji Aktivitas Sediaan Gel Ekstrak Etanol Daun Sirsak terhadap Bakteri

## Staphylococcus aureus
Konsentrasi Zona Hambat (mm) 9% 15,04 12% 26,42 Pembanding 22,07 FO (-) -
Tabel 5. Hasil Uji Aktivitas Sediaan Gel Ekstrak Etanol Daun Sirsak terhadap Bakteri Escherichia coli
Konsentrasi Zona Hambat (mm) 9% 14,12 12% 17,46 pembanding 20,41 FO (-) -

## Pembahasan
Hasil  menunjukkan  bahwa  ekstrak  daun  sirsak  ( annona  muricata L.)  memiliki aktivitas antibakteri pada bakteri Stapylococcus aureus dengan diameter zona hambat 11,32  mm  pada  konsentrasi  3%,  15,2  mm  pada  konsentrasi  6%,  18,3  mm  pada konsentrasi 9%, dan 23,7 mm pada konsentrasi 12%. Sedangkan hasil dari uji aktivitas ekstrak  antibakteri  pada  bakteri Escherihcia  coli dengan  diameter  daya  hambat  19,7 mm  pada  konsentrasi  9%,  dan  22,68  mm  pada  konsentrasi  12%,  sedangkan  pada konsentrasi  3%  dan  6%  tidak  dapat  menghambat  bakteri.  Salah  satu  faktor  yang mempengaruhi  zona  hambat  yaitu  konsentrasi.  Semakin  tinggi  konsentrasi  maka semakin  banyak  mikroorganisme  yang  dapat  dihambat,  sehingga  diameter  daya hambat semakin besar. 33
Dari  data  di  atas  menunjukkan  hambatan  yang  dihasilkan  sediaan  bakteri Escherichia coli terlihat lebih kecil apaila dibandingkan dengan bakteri Staphylococcus aureus ,  hal  ini  disebabkan  karena Escherichia  coli merupakan  bakteri  gram  negatif, mempunyai dinding - dinding sel yang tipis dan lebih kompleks dengan kandungan lipid yang  tinggi  sehingga  sulit  ditembus.  Sedangkan Staphylococcus  aureus merupakan bakteri  gram  positif  yang  memiliki  dinding  sel  sederhana  dan  tebal,  berlapis  tunggal kandungan  lipid  rendah,  sehingga  bakteri  gram  positif  lebih  mudah  ditembus.  Kriteria kekuatan  daya  antibakteri  sebagai  berikut  :  5  sampai  10  mm  dikategorikan  sedang, zona  hambat  10  sampai  20  mm  dikategorikan  kuat  dan  zona    hambat  lebih  dari  20 dikategorikan  sangat  kuat.  Berdasarkan  kriteria  tersebut,  maka  daya  hambat antibakteri  ekstrak  daun  sirsak  ( Annona  muricata L.)  pada  bakteri Staphylococcus aureus dengan  konsentrasi  ekstrak  3%  (11,32  mm),  ekstrak  6%  (15,2  mm),  dan ekstrak  9%  (18,3  mm)  termasuk  daya  hambat  kuat.  Sedangkan  pada  ekstrak  12% (23,7  mm)  termasuk  ke  dalam  daya  hambat  sangat  kuat.  Sedangkan  daya  hambat ekstrak  pada  bakteri Escherichia  coli dengan  konsentrasi  ekstrak  9%  (19,7  mm) termasuk kuat dan pada ekstrak 12% (22,68 mm) termasuk sangat kuat. 33,34
Selanjutnya dilakukan pembuatan basis gel dengan perbedaan konsentrasi yaitu 0,5 gram,  1  gram,  dan  1,5  gram.setalah  dilakukan  pemerikaan  meliputi  organoleptik,  pH, daya  sebar,  dan  homogenitas  yang  dilakukan  selama  28  hari  maka  didapat  sediaan basis  gel  yang  palin  stabil  yaitu  pada  konsentrasi  0,5  gram.  Setelah  didapatkan  hasil basis yan stabil kemudian dibuatla sediaan gel dengan konsentrasi ekstrak daun sirsak 9%  dan  12%.  Kemudian  dilakukan  pengujian  selama  28  hari  meliputi  pengujian oranoleptik,  homogenitas,  pH,  viskositas,  dan  daya  sebar.  Kemudian  hasil  yan  paling stabil  yaitu  pada  ekstrak  daun  sirsak  9%  karena  lebi  encer  dan  warnanya  lebih transparan  juga  tidak  mengakibatkan  iritasi,  hal  itu  karena  penambahan  daun  sirsak yang tidak terlalu banyak.
Hasil dari pengujian aktivitas antibakteri gel dengan konsentrasi ekstrak etanol daun sirsak  9%  menunjukkan  adanya  aktivitas  antibakteri  dengan  adanya  zona  jernih
disekitar sumuran. Gel dengan konsentrasi ekstrak 9% memberikan diameter hambat pada  bakteri Staphylococcus  aureus sebesar  15,04  mm  sedangkan  pada  bakteri Escherichia  coli sebesar  14,12  mm.  Sedangkan  pada  pembanding  yaitu  detol hand sanitizer memberikan zona hambat 22,07 mm pada bakteri Staphylococcus aureus dan 20,41 mm pada bakteri Escherichia coli . Hasil yang didapat dikategorikan daya hambat yang  kuat  karena  memiliki  hasil  zona  hambat  lebih  dari  10  mm.  Lemah  ≤  5  mm, sedangkan sedang 5 - 10 mm, dan kuat 10 - 20 mm, sangat kuat ≥ 20 mm.

## Kesimpulan
Dari  hasil  penelitian  yang  telah  dilakukan,  dapat  disimpulkan  bahwa  ekstrak  daun sirsak  ( annona  muricata L.)  dapat  diformulasikan  ke  dalam  sediaan  gel  antiseptik tangan, dengan daya hambat pada bakteri Staphylococcus aureus dengan konsentrasi 9%  yaitu  15,04  mm  dan  konsentrasi  12%  yaitu  26,42  mm.  Sedangkan  pada  bakteri Escherichia coli memiliki daya hambat  pada konsentrasi 9% yaitu 14,12 mm dan pada 12%  yaitu 24,46 mm.  Sehingga dapat dikategorikan pada sediaan 9% memiliki daya hambat kuat sedangkan pada sediaan 12% dengan kategori sangat kuat.

## Daftar Pustaka
1.  Lili  Widyawati,  Baiq  A.P,  Purmafitriah  E.n.,  2017.  Formulasi  Sediaan  Gel  Hand Sanitizer  Ekstrak etanol Daun Sirsak (Annona Muricata Linn) Sebagai Antibakteri terhadap Staphylococcus aureus. Jurnal Farmasetis, Vol 6, No. 2. Hlm 47-56
2.  Lengkoan,  F.,  Yamlean  V.Y.,  2017.  Fomulasi  dan  Uji  Efektivitas  Sediaan  el Ekstrak  Bunga  Pacar  Air  ( Impatiens  balsamina L.)  Sebagai  Antiseptik  Tangan. Jurnal Ilmiah Farmasi, Vol 6, No. 4. Hlm 219
3.  Manus Nuriko, Paulina V.Y, dkk., 2016. Formulasi Sediaan Gel Minyak Atsiri Daun Sereh  ( Cymbopogon  Ciratus )  Sebagai  Antiseptik  Tangan.  Jurnal  Ilmiah  Farmasi. Vol. 5, No. 3. Hlm 86
4.  Asngad  Aminah,  R  Bagas  Aprilia,  Nopitasari.  2018.  Kualitas  Gel  Pembersih Tangan  ( Hand  sanitizer )  Dari  Ekstrak  Batang  Pisang  Dengan  Penambahan Alkohol  Triloksan  Dan  Gliserin  yang  Berbeda  Dosisnya.    Bioeksperimen,  Vol.  4, No. 2. Hlm 62
5.  Dirjen  POM.,  1989,  Materia  Medika  Indonesia,  Jilid  V,  Depkes  RI,  Jakarta.  Hlm 41,45
6.  Artini  Rahayu  P.N, Wahjuni  Sri,  Sulihingtyas  D.W.,  Ekstrak  Daun  Sirsak  Sebagai Antioksidan Pada Penurunan Kadar Asam Urat Tikus Wistar. Jurnal Kimia Vol. 6, No 2. Hlm 127-137
7.  Warsino  dan  Kres  Dahaha.  2012.  Daun  Sirsak  Langkah  Alternatif  Menggempur Penyakit. Jakarta : Gramedia Pustaka Umum. Hlm vii
8.  Ansel H.C. 2008. Bentuk Sediaan Farmasetis & Sistem Penghantaran Obat, Edisi 9 . Penerbit : Buku Kedokteran EGC. Hlm 298
9.  Anonim,  1978,  Formularium  Nasional,  Edisi  kedua,  Departemen  Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta. Hlm 315
10. Handayani  Putri,  2014.  Formulasi  dan  Uji  Stabilitas  Fisik  Gel  Antiseptik  Tangan Ekstrak  Etanol  daun  Jambu  Biji  ( Psidium  Guajava) ,  Tugas  Akhir  S1,  Jurusan Farmasi, FMIPA, Universitas Garut. Hm 9-12
11. Voight,  R,  1984,  Buku  Pelajaran  Teknologi  Farmasi,    Diterjemahkan  oleh Soewandi, S.N, Edisi V. Gadjah Mada University : Yogyakarta. Hlm 336
12. Sari  Retno  dan  Isadiartuti  Dewi.,  2006.  Studi  Efektivitas  Sediaan  Gel  Antiseptik Tangan Ekstrak Daun Sirih ( Piper betle Linn.). Majalah Farmasi Indonesia, Vol 17, No. 4. Hlm 165
13. Robin  Graham,  Brown.  2005.  “Dermatologi”,  Edisi  delapan.  Jakarta  :  Penerbit Erlangga. Hlm 5
14. Price,  Silvya A, 2006. Patofisiologi Konsep Klinis Proses-Proses Penyakit, Vol. 2, Edisi 4. Jakarta : Penerbit Buku Kedokteran EGC. Hlm 1260
15. Pearce,  Evelin C. 2016. Anatomi & Fisiologi Untuk Paramedis. Jakarta : Penerbit PT Gramedia Pustaka Utama. Hlm 294
16. Agoes, goeswan. 2008. Sediaan Kosmetik (SFI-9) : Penerbit ITB. Hlm 23-24
17. Kalangi sonny J. R. 2006.  Histofisiologi Kulit, Baagian Anatomi-Histologi Fakultas Kedokteran : Universitas Sam Ratulangi Manado. Hlm 814
18. Hamijaya  Legawa,  Prihatiningsih,  Widiastuti  M.G.,  Perbedaan  Daya  Anti  Bakteri Tetrachlorodecaoxide, Povidon Iodine, dan Hidrogen Peroksida (H2O2) Terhadap Bakteri Pseudomonas Aeruginosa Secara Invitro. Jurnal Kedokteran, Vol. 5, No. 4. 329-335
19. Radji,  Maksum.  2010.  Buku  Ajar  Mikrobiologi  Panduan  Mahaiswa  Farmasi  dan Kedokteran. Jakarta : EGC. Hlm 179-180
20. Mismadiarly,  Djajaningrat,  Hujain.  2014.  Mikrobiologi  Untuk  Klinik  dan Labolaturium. Penerbit : Rineka Cipta. Hlm 55-56
21. Todar, K. 2010. Todar’s Online Text book of Bacteria Stapylococcus . University of Wisconsin-Madison Departemen of Bacteorology. Hlm 1
22. Aryulina  Diah,  Muslim  Choirul,  dkk.  2006.  “Biologi  SMA  dan  MA  untuk  Kelas  X”. Penerbit Erlangga. Hlm 61
23. Murwani Sri, Qosima Dahliatul, Amri Indah Amalia. 2017. Penyakit Bakterial Pada Ternak Hewan Besar dan Unggas. Penerbit : UB Press. Hlm 101
24. Ekawati,  Elyratnasari.  2018.  Bakteriologi  :  Mikroorganisme  Penyebab  Infeksi. Yogyakarta : Penerbit Deepublish. Hlm 38-39
25. Departemen  Keseatan  Republik  Indonesia.,  2008,  Farmakope  Herbal  Indonesia, Edisi 1. Hlm 202-204
26. Dirjen  POM.,  1989,  Materia  Medika  Indonesia,  Jilid  V,  Depkes  RI,  Jakarta.  Hlm 150-168
27. Dasopang  Eva  Sartika  &  Simutuah  Akmal.,  2016.  Formulasi  Sediaan  Gel Antiseptik Tangan dan Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Pandan Wangi ( Pandanus  amaryllifolius Roxb.).  Jurnal  Biologi  Lingkungan,  Industri,  Keseatan.
Vol, 3. No. 1. Hlm 85-86