Menara Perkebunan 2024, 92(1), 46-54
DOI: http://dx.doi.org/10.22302/iribb.jur.mp.v92il.565
p-ISSN: 0125-9318/ e-ISSN: 1858-3768
Accreditation Number: 164/E/KPT/2021

## Ekstrak kulit pisang Cavendish (Musa acuminata) sebagai agen antioksidan dan antipenuaan pada khamir model Schizosaccharomyces

## pombe
The extract of Cavendish banana ( Musa acuminata ) peel as antioxidant and anti-aging agents in model yeast Schizosaccharomyces pombe
Theresia Yolanda AVELINA 1) , Rika Indri ASTUTI 1,2*) & Wulan Tri WAHYUNI 2,3)
1) Departemen Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, IPB University, Jl. Raya Dramaga, Bogor 16680, Indonesia
2) Pusat Studi Biofarmaka Tropika, IPB University, Jl. Taman Kencana, Bogor, 16128, Indonesia
3) Departemen Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, IPB University, Jl. Raya Dramaga, Bogor 16680, Indonesia
Diterima tgl 8 Jan 2024 / Perbaikan tgl 23 Feb 2024 / Disetujui tgl 18 Mar 2024

## Abstract
Banana  peel  is  one  of  the  wastes  that  can  be explored  for  various  applications.  Cavendish  is among  the  most  highly  consumed  bananas  in  the world, which implies a high amount of banana peel waste.  Our  study  evaluated  the  potential  of Cavendish banana peels as the source of antioxidant and  anti-aging  agents.  Antioxidant  was  extracted using  three  different  solvents,  i.e.,  water,  ethyl acetate,  and  methanol.  Each  extract  was  then assayed for antioxidant activity in vitro using a 1,1- diphenyl-2-picrylhydrazyl  (DPPH)  assay.  The antioxidant  and  anti-aging  activity  of  the  extracts were further evaluated at the cellular level using the yeast Schizosaccharomyces pombe as a model. Our data indicated that the methanol extract of banana peel showed the highest antioxidant activity with an IC 50 value  of  253.8  µg  mL -1 compared  to  ethyl acetate  and  water,  yet  it  was  considered  weak. Interestingly,  the  methanol  extract  (600  ppm) showed  antioxidant  and  anti-aging  activities  at cellular  levels  in  yeast S.  pombe. Therefore,  this research reveals the potential for developing banana peel  methanol  extract  as  a  component  of pharmaceutical  or  cosmetic  products  with antioxidant and anti-aging properties.
[Keywords: oxidative  stress,  chronological  life span, H 2 O 2, maceration, model organism]

## Abstrak
Kulit pisang merupakan salah satu limbah yang dapat dimanfaatkan untuk berbagai bidang aplikasi. Konsumsi  jenis  pisang  terbesar  di  dunia  saat  ini adalah  pisang  Cavendish,  hal  ini  menjadikan  kulit pisang Cavendish tersedia dalam jumlah yang besar. Penelitian ini bertujuan untuk  mempelajari  potensi ekstrak  kulit  pisang  Cavendish  sebagai  agen antioksidan  dan  antipenuaan.  Kulit  pisang  di ekstraksi  menggunakan  tiga  pelarut  berbeda  yakni air, etil asetat , dan metanol. Masing-masing ekstrak diuji  aktivitas  antioksidannya  secara  in  vitro menggunakan  uji 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH).  Ekstrak  kulit  pisang  kemudian  diuji aktivitas  antioksidan  dan  antipenuaannya  di  level seluler  dengan  menggunakan  mikroorganisme model  khamir Schizosaccharomyces  pombe .  Hasil penelitian  menunjukkan  ekstrak  metanol  kulit pisang memiliki aktivitas antioksidan in vitro paling tinggi  yakni  IC 50 sebesar  253,8  µg  mL -1 , dibandingkan  ekstrak  air  dan  etil  asetat,  walaupun kategori  aktivitas  antioksidannya  masih  tergolong lemah.  Ekstrak  metanol  kulit  pisang  (600  ppm) menunjukkan kemampuan sebagai agen antioksidan dan  antipenuaan  di  level  seluler  berdasarkan pengujian  pada  khamir S.  pombe. Oleh  karena  itu, penelitian  ini  mengungkap  potensi  pengembangan ekstrak  metanol  kulit  pisang  sebagai  komponen produk farmasetika atau kosmetika yang berkhasiat antioksidan dan antipenuaan.
[Kata kunci:   cekaman oksidatif, chronological life span ,  H 2 O 2, maserasi,  organisme model]
*) Korespondensi penulis: rikaindriastuti@apps.ipb.ac.id
0125-9318/ 1858-3768 ©2023 Authors
This is an open access article under the CC BY license ( https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/ )
Menara Perkebunan is DOAJ indexed Journal and accredited as Sinta 2 Journal ( https://sinta.kemdikbud.go.id/journals/profile/3125 ) How to Cite: Avelina, T. Y., Astuti, R. I., & Wahyuni, W. T. (2024). Ekstrak kulit pisang Cavendish ( Musa acuminata ) sebagai agen antioksidan dan antipenuaan seluler pada khamir model Schizosaccharomyces pombe . Menara Perkebunan , 92(1), 46-54. http://dx.doi.org/10.22302/iribb.jur.mp.v92il.565
Ekstrak kulit pisang Cavendish ( Musa acuminata ) sebagai agen antioksidan dan antipenuaan ………………....(Avelina et al.)

## Pendahuluan
Pisang  merupakan  salah  satu  jenis  buah komoditas  hortikultura  yang  banyak  dijumpai  di Indonesia  dan memiliki nilai ekonomi yang sangat tinggi.  Seluruh  bagian  dari  pohon  pisang  dapat dimanfaatkan  termasuk  buah,  jantung,  daun , dan bonggolnya.  Jenis  pisang  di  Indonesia  cukup beragam,  beberapa  yang  dikenal  luas  yaitu  pisang Cavendish , pisang kepok, pisang ambon, pisang uli, pisang  raja,  dan  pisang  tanduk.  Pisang Cavendish ( Musa  acuminata triploid  A  cv. Cavendish) memiliki ukuran buah sedang dan bentuknya mirip dengan  pisang  ambon.  Permintaan  buah  pisang Cavendish sangat  tinggi,  yakni  hampir  mencapai 80% dari total permintaan buah dunia (Falcomer et al., 2019; Luh et al., 2022).
Tingginya  konsumsi  buah  pisang Cavendish , diiringi  dengan  melimpahnya  limbah  kulit  pisang. Kulit  pisang Cavendish tipis  dan  berwarna  kuning muda    saat  matang.  Kulit  pisang  dilaporkan memiliki kandungan senyawa flavonoid yang cukup tinggi  (Putu  et  al.,  2017).  Bahkan,  konsentrasi flavonoid  kulit  pisang  ambon  sebesar  818  mg 100  g -1 lebih  tinggi  dari blueberry yaitu  sebesar 30,44  mg  100  g -1 yang  dikenal  memiliki  senyawa antioksidan  yang  tinggi  (Parvez  et  al.,  2023). Antioksidan  memiliki  peranan  penting  dalam menghambat  toksisitas radikal bebas atau Reactive Oxygen  Species (ROS)  (Rahal  et  al.,  2014).  ROS dapat terakumulasi sehingga menyebabkan cekaman oksidatif  dan  memicu  penuaan  seluler  ( cellular aging )  (Guo  et  al.,  2013;  Pizzino  et  al.,  2017). Penuaan  seluler  ini  menjadi  salah  satu  pemicu munculnya penyakit degeneratif termasuk Alzheimer, Parkinson, dan kanker (Tan et al., 2018; Trostchansky et al., 2018).
Kajian penuaan seluler  dapat dilakukan dengan menggunakan organisme model yaitu khamir seperti Schizosaccharomyces  pombe (Astuti  et  al.,  2021; Lesmana et al., 2021). Khamir S. pombe melakukan proses  reproduksi  aseksual  dengan  pembelahan ( fission ) seperti pada sel somatik manusia (Roux et al.,  2010;  Smith  et  al.,  2006).  Khamir  ini  juga memiliki  lintasan  penuaan  yang  homolog  dengan organisme  tingkat  tinggi  termasuk  mamalia. Beberapa  gen  kunci  dalam  lintasan  penuaan Sir2/Sir1  bersifat conserved pada  khamir  dan  sel mamalia (Ariybah et al., 2021; Wa¸troba et al., 2016; Wierman  et  al.,  2014).  Pemanfaatan  kulit  pisang yang memiliki potensi senyawa bioaktif antioksidan dapat  menjadi  strategi  untuk  mencegah  penuaan seluler  ( anti-aging ).  Hingga  saat  ini  pemanfaatan kulit pisang Cavendish sebagai agen antioksidan dan antipenuaan  belum  dilaporkan.  Oleh  karena  itu,
penelitian ini bertujuan untuk menganalisis potensi ekstrak  kulit  pisang Cavendish sebagai  agen antioksidan  peredam  radikal  bebas  1,1-difenil-2- pikrilhidrazil  (DPPH)    dan  agen  antipenuaan  di tingkat  seluler  dengan  menggunakan  khamir S. pombe .

## Bahan dan Metode

## Ekstraksi metabolit pada kulit pisang
Ekstraksi kulit pisang dilakukan dengan metode maserasi menggunakan tiga pelarut, yaitu: akuades, etil  asetat,  dan  metanol  (Astuti  et  al.,  2021).  Kulit pisang  sebanyak  100  g  dipotong  kecil-kecil, dicampur dengan 500 mL pelarut. Kulit pisang yang sudah  dimaserasi  disaring  menggunakan  kertas saring.  Perendaman  dan  penyaringan  dilakukan sebanyak  3  kali  setiap  24  jam.  Filtrat  akuades, methanol, dan etil asetat yang didapatkan kemudian diuapkan  menggunakan rotary  evaporator pada suhu  45  °C  selama  1  jam.  Filtrat  akuades  yang didapatkan  dikeringkan  di  oven  bersuhu  50  °C selama satu minggu. Ekstrak pasta disimpan dalam botol kaca steril pada suhu 4 °C.

## Uji aktivitas antioksidan in Vitro
Aktivitas  antioksidan  diuji  dengan  metode  1,1- difenil-2-pikrilhidrazil  (DPPH)  seperti  yang  telah dilaporkan sebelumnya (Lesmana et al . 2021). Stok ekstrak  dibuat  dengan  mencampurkan  pasta  kulit pisang dengan dimethyl sulfoxide (DMSO) sebagai pelarut.  Stok  ekstrak  10.000  ppm  dibuat  dengan mencampurkan 0,1 g pasta dan 10 mL DMSO. Stok ekstrak diencerkan menjadi 25, 500, dan 1.000 ppm. Larutan  DPPH  dibuat  dengan  mencampurkan 0,0025 g DPPH dan 50 mL etanol. Larutan ekstrak sebanyak  2  mL  ditambahkan  larutan  DPPH  2  mL lalu  diinkubasi  selama  30  menit  pada  kondisi ruangan  gelap.  Kuantitasi  aktivitas  antioksidan diukur  menggunakan  spektrofotometer  (λ517  nm) sebanyak tiga ulangan. Ekstrak kasar yang kuantitasi aktivitas  antioksidannya  paling  baik,  diuji  ulang dengan  konsentrasi  200,  400,  600,  800,  dan  1.000 ppm  untuk  menentukan inhibition  concentration ( IC 50 ). Ekstrak kasar yang memiliki nilai IC 50 yang terbaik  digunakan  untuk  metode  selanjutnya. Ekstrak kasar yang mampu mengurai radikal DPPH akan  berubah  warna  dari  ungu  menjadi  kuning (Nasution et al., 2015).
Persentase inhibisi tiap sampel dihitung dengan menggunakan rumus:

## 𝑃𝑒𝑛𝑔ℎ𝑎𝑚𝑏𝑎𝑡𝑎𝑛 (%) = 1 −
Absorbansi sampel−Absorbansi sampel kontrol Absorbansi blanko−Absorbansi blanko kontrol 𝑥 100% . ..(1)
Menara Perkebunan 2024, 92(1), 46-54
Analisis  resistensi  khamir  terhadap  cekaman oksidatif
Kultur  khamir S.  pombe diinkubasi  selama 24  jam  di  suhu  ruang  sebagai  inokulum  pada medium Yeast Extract  and Supplement (YES) cair. Komposisi medium YES untuk 1 L terdiri atas 5 g yeast extract , 30 g glukosa, 0,128 g histidin, 0,128 g leucine, 0,128 g adenine, 0,01 g uracil, dan 0,128 g arginin. Kultur khamir lalu dikuantitasi kekeruhannya  hingga  OD 600 =  1  menggunakan spektrofometer UV-Vis. Ekstrak kulit pisang dengan konsentrasi  1x dan 2x IC 50 dicampurkan ke dalam 3  mL  kultur  khamir S.  pombe .  Kultur  khamir S. pombe dalam  media  YES  dengan  perlakuan pembatasan  kalori  (0,3%  glukosa)  dan YES  tanpa ekstrak  kulit  pisang  digunakan  sebagai  kontrol positif  dan  negatif.  Perlakuan  cekaman  oksidatif dilakukan  dengan  menumbuhkan  khamir  pada medium Yeast Extract and Supplement (YES) padat +  H 2 O 2 (1  dan  2  mM)  menggunakan  metode spot dan  diinkubasi  pada  suhu  30°C  selama  3  hari (Sarima  et  al.,  2019).  Proses  spot  dimulai  dengan mengatur nilai OD 600 masing-masing kultur menjadi sebesar  1,  kemudian  diencerkan  secara  serial  10 -1 , 10 -2 ,  10 -3 ,  dan  10 -4 pada microplate  well steril. Masing-masing  pengenceran  dan  kultur  OD 600 = 1 dispot pada media YES padat dengan volume 3 µL kemudian diinkubasi selama 3 hari pada suhu 30 °C. Pengamatan dilakukan terhadap densitas pertumbuhan  koloni  pada  masing-masing  spot pengenceran secara visual.
Analisis  penuaan  seluler  (Chronological  life  span assay)
Uji  penuaan  seluler  dilakukan  menggunakan metode
Chronological Life Span Assay menggunakan  khamir S.  pombe (Lesmana  et  al., 2021).  Kultur  khamir S.  pombe diinkubasi  selama 24  jam  di  suhu  ruang  sebagai  inokulum,  lalu dikuantitasi OD 600 = 1 menggunakan spektrofometer UV-Vis. Ekstrak kulit pisang dengan konsentrasi 1x dan  2x  IC 50 dicampurkan  ke  dalam  3  mL  kultur khamir S.  pombe .  Kultur  khamir S.  pombe dalam media  YES  dengan  perlakuan  pembatasan  kalori
(0,3% glukosa) dan YES tanpa ekstrak kulit pisang digunakan  sebagai  kontrol  positif  dan  negatif.  Sel khamir  dipanen  pada  hari  ke  5  dan  20  lalu diencerkan secara serial menggunakan akuades dan dikuantitasi  menggunakan  metode viable  count. Metode viable count dilakukan dengan mengencerkan  kultur  uji  secara  serial  10 -1 ,  10 -2 , 10 -3 , 10 -4 dan 10 -5 pada tabung reaksi. Pengenceran 10 -3 ,  10 -4 ,  dan  10 -5 dituang  ke  cawan  petri  steril kemudian  ditambahkan  media  YES  padat  ( pour plate )  dan  diinkubasi  selama  tiga  hari  pada  suhu ruang (30 °C). Jumlah koloni khamir yang tumbuh dihitung.

## Hasil dan Pembahasan

## Ekstraksi kulit pisang menggunakan pelarut dengan kepolaran berbeda
Ekstrak  kasar  kulit  pisang  berhasil  diperoleh melalui teknik maserasi  dengan menggunakan tiga pelarut  yaitu  akuades,  etil  asetat,  dan  metanol. Warna  masing-masing  ekstrak  secara  berurutan cokelat,  kuning  kecoklatan, dan cokelat kehitaman (Gambar 1). Persentase rendemen ekstrak tertinggi diperoleh  dari  ekstrak  kulit  pisang  dengan  pelarut metanol yaitu 5% (Tabel 1).
Ekstrak kasar didapatkan dengan menggunakan tiga pelarut yang berbeda yaitu akuades, etil asetat, dan metanol. Pelarut akuades dan metanol memiliki karakteristik  pelarut  polar,  sedangkan  etil  asetat yang memiliki indeks polaritas sebesar 4,4 termasuk ke  dalam  pelarut  semi-polar  (Pintać  et  al.,  2018). Perbedaan  polaritas  pelarut  ini  akan  menentukan keragaman  senyawa  yang  terekstrak  (Pintać  et  al., 2018; Thavamoney et al., 2018; Truong et al., 2021). Pada penelitian sebelumnya, pelarut heksan mampu mengekstraksi  kandungan  flavonoid  dari  daun  dan bunga cengkeh, lebih tinggi daripada pelarut etanol (Lesmana  et  al.,  2021).  Namun  demikian, penggunaan pelarut etanol juga dapat mengekstraksi beberapa  senyawa  non-flavonoid  yang  memiliki aktivitas  antioksidan  tinggi  seperti  asam  galat (Lesmana  et  al.,  2021;  Utami  et  al.,  2023). Penggunaan   pelarut  akuades  dan  metanol  yang
Gambar 1. Hasil ekstraksi kulit pisang dengan pelarut (a) akuades (b) etil asetat (c) metanol Figure 1. Extract of banana peel from three different solvents (a) aquadest (b) ethyl acetate (c) methanol
a b c
Ekstrak kulit pisang Cavendish ( Musa acuminata ) sebagai agen antioksidan dan antipenuaan …………...…….(Avelina et al.)
Tabel 1. Hasil produksi ekstrak kulit pisang Cavendish menggunakan tiga macam pelarut Table 1. The production of Cavendish banana peel extract by using three different solvents
Sampel ekstrak Extract sample Bobot sampel segar (g) Fresh weight (g) Bobot ekstrak (g) Extract weight (g) Rendemen ekstrak (%) Extract yield (%) Air (akuades) 100 1,107 1,11 Etil asetat 100 0,180 0,18 Metanol 100 4,926 5,00
Keterangan: Rendemen menunjukkan % (b/b) dari masing-masing ekstrak Note: Extract yield shows the percentage (%) of each extract in weight/weight
tergolong polar juga dapat mengekstraksi beberapa senyawa yang memiliki aktivitas antioksidan seperti oxyphyllacinol dan  sugiol  yang  diekstraksi  dari tumbuhan  bunga  kelompok Asteraceae, Synedrella nodiflora L. (Astuti et al., 2021). Pelarut etil asetat yang  bersifat  semi  polar  juga  dilaporkan  dapat mengekstraksi  senyawa  flavonoid  berkhasiat antioksidan  seperti  dilaporkan  oleh  penelitian sebelumnya (Nurcholis et al., 2021; Tungmunnithum et al., 2022).
Aktivitas antioksidan ekstrak kulit pisang in v itro
Aktivitas  antioksidan  dinyatakan  dalam  nilai IC 50 (µg mL -1 ). Nilai IC 50 menunjukkan kemampuan ekstrak dalam menangkap 50% radikal bebas DPPH. Aktivitas  antioksidan  terkuat  ditunjukkan  oleh ekstrak  metanol  kulit  pisang  yakni  sebesar 253,8 µg mL -1 (Tabel 2).  Nilai IC 50 yang semakin kecil  menunjukkan  aktivitas  yang  semakin  kuat. Aktivitas  antioksidan  terbagi  ke  dalam  beberapa kategori  berdasarkan  nilai  IC 50 yaitu  sangat  kuat (IC 50 < 50 µg mL -1 ), kuat (IC 50 = 50-100 µg mL -1 ), sedang  (IC 50 =  101-250  µg  mL -1 ),  lemah  (IC 50 = 250-500  µg  mL -1 ),  dan  sangat  lemah  (IC 50 > 500  µg  mL -1 )  (Jun  et  al.,  2003).  Berdasarkan penggolongan  tersebut,  maka  aktivitas  antioksidan ekstrak  metanol  kulit  pisang  tergolong  lemah. Penelitian  sebelumnya  melaporkan  aktivitas antioksidan  dari  ekstrak  etil  asetat  kulit  pisang  uli ( Musa  paradisiaca L.AAB) sebesar 114,8 µg mL -1
(Heriani  et  al.,  2021).  Hasil  analisis  fitokimia menunjukkan bahwa ekstrak kulit pisang uli tersebut memiliki  kandungan  flavonoid  dan  tannin. Flavonoid  juga  dilaporkan  terkandung  dalam ekstrak pisang kapok ( Musa acuminata ) dan pisang ketip ( Musa paradisiaca forma Typiaca) (Putu et al.,
2017). Aktivitas antioksidan dari kelompok senyawa flavonoid  telah  banyak  dilaporkan  diantaranya berasal  dari  ekstrak  tumbuhan Guazuma  ulmifolia (Syaefudin  et  al.,  2014), Euphorbia  splendida (Kefayati et al., 2017), Clinacanthus nutans (Ismail et  al.,  2017),  lotus  (Tungmunnithum  et  al.,  2022), dan Adenostemma  lavenia (Batubara  et  al.,  2020).
Untuk mengetahui efek ekstrak metanol kulit pisang di  tingkat  seluler,  maka  dilakukan  pengujian aktivitas  antioksidan  dan  antipenuaan  dengan
menggunakan  mikroorganisme  model  khamir S. pombe .

## Aktivitas  antioksidan  ekstrak  kulit  pisang  di  level seluler
Pengujian  aktivitas  antioksidan  ekstrak  kulit pisang  dilakukan  untuk  mengetahui  prospeksi ekstrak  dalam  mempertahankan  viabilitas  khamir dalam  menghadapi  cekaman  oksidatif.  Pemberian ekstrak  metanol  kulit  pisang  (300  dan  600  ppm) mampu  mempertahankan  viabilitas  khamir  dalam menghadapi  cekaman  oksidatif  yang  berasal  dari perlakuan H 2 O 2 1 dan 2 mM (Gambar 2). Viabilitas khamir ditunjukkan berdasarkan densitas koloni dari setiap  titik  (spot)  pengenceran  yang  diteteskan kultur S.  pombe .  Metode  ini  merupakan  metode semi-kuantitatif  yang  dapat  menjadi  acuan  dalam menentukan respons sel dalam hal ini mikroorganisme  model S.  pombe terhadap perlakuan  cekaman  oksidatif.  Evaluasi  penentuan viabilitas  khamir  ditentukan  dengan  melihat kerapatan  koloni  pada  tiap  pengenceran.  Adanya pertumbuhan  koloni  yang  rapat  dan  tebal  pada pengenceran  yang  semakin  tinggi  menunjukkan konsentrasi  sel  khamir  yang  viabel  yang  semakin baik.    Metode  ini  juga  digunakan  pada  penelitian sebelumnya  yang  mengevaluasi  kemampuan antioksidan  berbagai  ekstrak  tanaman  di  level seluler  diantaranya  ekstrak  bunga  rosela  ( Hibiscus sabdariffa )  (Sarima  et  al.,  2019),  buah  mangrove nyiri  ( Xylocarpus  granatum )  (Yusuf  et  al.,  2021), bunga cengkeh (Astuti et al., 2019), hoya (Pudjas et al.,  2022), Adenostemma  lavenia (Batubara  et  al., 2020). Melalui  pengujian  ini,  ekstrak  kulit  pisang mampu mempertahankan viabilitas khamir terhadap cekaman oksidatif dibandingkan khamir yang tidak diberikan  perlakuan  ekstrak.  Pemberian  ekstrak metanol 600 ppm mampu meningkatkan kemampuan  khamir  dalam  menghadapi  cekaman oksidatif  H 2 O 2 2  mM  (Gambar  2).  Namun, perlakuan  ekstrak  kulit  pisang  tidak  dapat mempertahankan  viabilitas  khamir  setara  dengan kontrol  positif  yakni  perlakuan  pembatasan  kalori (0,3% glukosa). Pertumbuhan khamir  tanpa ekstrak
Menara Perkebunan 2024, 92(1), 46-54
Tabel 2.    Aktivitas antioksidan ekstrak kulit pisang Cavendish secara in vitro, yang dianalisis menggunakan uji ,1-difenil-2- pikrilhidrazil (DPPH)
Table 2.   Antioxidant activity of the Cavendish banana peel extract based on the 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) assay
Sampel Ekstrak
Extract sample
IC 50 (µg mL -1 ) Asam Askorbat 26 ± 3,2 Akuades >1000 Etil Asetat 552,4 ± 8,3 Metanol 253,8 ± 7,6 Keterangan: Asam askorbat digunakan sebagai kontrol.
Note: Ascorbic acid was used as control.
Gambar 2.   Pengaruh  pemberian  ekstrak  metanol  kulit  pisang Cavendish (300  dan  600  ppm)  terhadap  viabilitas  khamir Schizosaccharomyces pombe yang dipapar cekaman oksidatif H 2 O 2 1 dan 2 mM. Khamir yang ditumbuhkan pada medium YES  cair  dengan konsentrasi glukosa normal (3%  b/v)  tanpa penambahan  ekstrak digunakan  sebagai kontrol negatif. Khamir yang ditumbuhkan pada medium YES dengan konsentrasi glukosa rendah (0,3% b/v) atau perlakuan pembatasan kalori, tanpa penambahan ekstrak digunakan sebagai kontrol positif
Figure 2.  The  effect  of  methanol  derived-cavendish  extract  peels  (300  and  600  ppm)  on  the  viability  of  yeast Schizosachharomyces pombe toward 1 and 2 mM of H 2 O 2 induced oxidative stress treatment.  Yeast grown in YES medium with normal glucose concentration (3% w/v) without extract supplementation is designated as negative control. Yeast grown in YES medium with low glucose concentration (0.3% w/v) or calorie restriction treatment without extract supplementation is assigned as positive control
atau  perlakuan  kontrol  negatif  merupakan pertumbuhan minimum khamir pada medium. Pada uji  ini  diharapkan  adanya  penambahan  ekstrak pisang  dapat  mempertahankan  atau  bahkan meningkatkan  viabilitas  khamir  dibandingkan dengan  perlakuan  tanpa  ekstrak.  Sehingga,  adanya khamir yang tumbuh pada perlakuan kontrol negatif menjadi  representatif  sel  yang  sehat.  Pemberian ekstrak metanol juga diharapkan mampu mempertahankan  atau  meningkatkan  viabilitas khamir  ketika  diberi  perlakuan  cekaman  oksidatif (H 2 O 2 ).  Disisi  lain,  perlakuan  pembatasan  kalori merupakan  perlakuan  kontrol  positif  pada  uji  ini. Perlakuan  pembatasan  kalori  telah  dilaporkan mampu meningkatkan kemampuan sel khamir untuk menghadapi  cekaman  oksidatif.  Hal  ini  karena pembatasan  kalori  dapat  menginduksi  mekanisme respons  adaptif  terhadap  cekaman  oksidatif  yang diperantarai  mitokondria  ( adaptive mitochondrial ROS signaling ) (Pan et al., 2011).
Aktivitas  antipenuaan  ekstrak  kulit  pisang  di  level seluler
Kemampuan  ekstrak  kulit  pisang  dalam menunda  penuaan  sel  diuji  melalui  metode Chronological  Life  Span (CLS).  Ekstrak  metanol kulit  pisang  mampu  mempertahankan  viabilitas khamir  hingga  hari  ke-20.  Pemberian  ekstrak metanol kulit pisang (300 ppm) mampu menurunkan kematian sel khamir hingga hari ke-20 lebih tinggi dibandingkan perlakuan pembatasan kalori (kontrol positif)  dan  tanpa  ekstrak  (kontrol  negatif)  yang ditunjukkan dengan konsentrasi  khamir yang lebih tinggi. Disisi lain, pemberian ekstrak metanol kulit pisang (600 ppm) hanya menunjukkan kemampuan yang lebih baik dalam menunda kematian sel khamir dibandingkan perlakuan kontrol negatif namun tidak terhadap kontrol positif (Gambar 3).
Hasil  pengujian  ini  mengindikasikan  bahwa ekstrak  metanol  kulit  pisang  walaupun  memiliki kemampuan   antioksidan in   vitro IC 50 yang
Ekstrak kulit pisang Cavendish ( Musa acuminata ) sebagai agen antioksidan dan antipenuaan ……………...….(Avelina et al.)
Gambar 3.  Pengaruh  pemberian  ekstrak  kulit  pisang Cavendish (300  dan  600  ppm)  terhadap  viabilitas  khamir Schizosaccharomyces pombe pada hari ke-5 dan ke-20. Khamir yang ditumbuhkan pada medium YES cair dengan konsentrasi glukosa normal (3% b/v) tanpa penambahan ekstrak digunakan sebagai kontrol negatif. Khamir yang ditumbuhkan pada medium YES dengan konsentrasi glukosa rendah (0,3% b/v) atau perlakuan pembatasan kalori, tanpa penambahan ekstrak digunakan sebagai kontrol positif
Figure 3.  The  effect  of  methanol  derived-cavendish  peels  extract  (300  and  600  ppm)  on  the  viability  of  yeast Schizosachharomyces pombe at day-5 and 20 of incubation.  Yeast grown in YES medium with normal glucose concentration (3% w/v) without extract supplementation is designated as negative control. Yeast grown in YES medium  with  low  glucose  concentration  (0.3%  w/v)  or  calorie  restriction  treatment  without  extract supplementation is assigned as positive control
tergolong  lemah  (Tabel  2)  namun  memiliki kemampuan  antioksidan  dan  anti  penuaan  di  level seluler.  Hasil  serupa  juga  ditunjukkan  pada penelitian  sebelumnya  dimana  rendahnya  aktivitas antioksidan  ekstrak  melalui  pengujian in  vitro berbasis  DPPH  tidak  berkorelasi  dengan  aktivitas antioksidan di level seluler (Astuti et al., 2021). Hal ini  berkaitan  dengan  keberadaan  senyawa  bioaktif yang memiliki berbagai mekanisme antioksidan dan anti penuaan. Pengujian antioksidan berbasis radikal bebas  DPPH  mengkonfirmasi  adanya  kemampuan senyawa  bioaktif  dalam  mendonorkan  atom hidrogennya  untuk  menstabilkan  radikal  bebas DPPH  (Shalaby  et  al.,  2013).  Namun,  aktivitas antioksidan  dari  senyawa  bioaktif  tidak  hanya terkait dengan aktivitas donor hidrogen namun juga dapat  berupa  aktivitas  pencegahan  terbentuknya molekul  terglikasi,  penangkapan  ion  hidroksil  dan superoksida,  dan  tiolasi  (Astuti  et  al.,  2018).  Oleh karena  itu,  dapat  dimungkinkan  adanya  aktivitas senyawa bioaktif dari  ekstrak metanol kulit  pisang yang  memiliki  mekanisme  antioksidan  yang beragam dan bersinergi kuat untuk mempertahankan viabilitas  sel  khamir  dalam  menghadapi  cekaman oksidatif  yang  kemudian  menunda  penuaan  dan kematian sel. Hasil penelitian ini menjadi informasi pertama  khasiat  ekstrak  kulit  pisang  sebagai  agen antioksidan dan antipenuaan di level seluler. Kajian ini  menjadi  landasan  pengembangan  ekstrak
metanol  kulit  pisang  ini  dalam  formulasi  produk farmasetika atau kosmetika.

## Kesimpulan
Kulit pisang Cavendish memiliki potensi sebagai agen antioksidan dan antipenuaan. Ekstrak metanol kulit  pisang  terkonfirmasi  memiliki  aktivitas antioksidan  kategori  lemah  melalui  uji in  vitro berbasis DPPH. Namun demikian, ekstrak metanol kulit  pisang Cavendish (600  ppm)  memiliki kemampuan  antioksidan  dan  antipenuaan  di  level seluler  yang  ditunjukkan  dengan  kemampuannya mempertahankan  viabilitas  khamir S.  pombe , sebagai mikroorganisme model, dalam menghadapi cekaman  oksidatif  (H 2 O 2 )  dan  mencegah  penuaan dan  kematian  sel  hingga  waktu  inkubasi  20  hari dibandingkan tanpa pemberian ekstrak metanol kulit pisang.    Penelitian  lebih  lanjut  terkait  kandungan senyawa  kimia  dari  ekstrak  kulit  pisang  perlu dilakukan  untuk  mengetahui  senyawa-senyawa bioaktif  yang  berpotensi  memiliki  aktivitas antioksidan.

## Ucapan Terimakasih
Penulis mengucapkan terimakasih untuk fasilitas pengujian  antioksidan  di  Pusat  Studi  Biofarmaka Tropika.
0 1 2 3 4 5 6 Kontrol - /Control - Kontrol + / Control + Ekstrak m etanol 300 ppm /methanol extract 300 ppm Ekstrak m etanol 600 ppm / methanol ext ract  600 ppm R at a- ra ta k o n se n tr as i k o lo n i X 1 0 7 (C F U m L -1 ) / A ve ra ge o f c ol on y co nc en tr at io n x 10 7 (C F U m L -1 ) Hari ke-5 (Day-5) Hari ke-20 (Day 20) Kontrol - / Control - Kontrol + / Control + Ekstrak metanol 300 ppm/ Methanol extract 300 ppm Ekstrak metanol 600 ppm/
Methanol extract 600 ppm
Hari ke-5 ( Day-5 ) Hari ke- 20 ( Day-20 )
Menara Perkebunan 2024, 92(1), 46-54

## Daftar Pustaka
Ariybah,  Z.  Q.,  Astuti,  R.  I.,  &  Listiyowati,  S. (2021). Cell longevity of yeast Saccharomyces  cerevisiae by  clove  bud extract  treatment  may  occur  in  sirtuin- independent  pathway. OnLine  Journal  of Biological Sciences Original Research Paper , 21 (3).  https://doi.org/10.3844/ojbsci.2021.32 0.327
Astuti,  R.I.,  Listyowati,  S.,  &  Wahyuni,  W.  T. (2019).  Life  span  extension  of  model  yeast Saccharomyces  cerevisiae upon  ethanol derived-clover  bud  extract  treatment. IOP Conference Series: Earth and Environmental Science , 299 (1). https://doi.org/10.1088/1755- 1315/299/1/012059
Astuti, R.I., Nasuno, R., & Takagi, H. (2018). Nitric oxide  signalling  in  yeast. Advances  in Microbial  Physiology , 72 (45),  1–38.  https:// doi.org/10.1016/bs.ampbs.2018.01.003
Astuti,  Rika  Indri,  Prastya,  M.  E.,  Batubara,  I., Budiarti,  E.,  &  Ilmiyawati,  A.  (2021). Antiaging  and  antioxidant  bioactivities  of asteraceae  plant  fractions  on  the  cellular functions  of  the  yeast Schizosaccharomyces pombe . Advances  in  Pharmacological  and Pharmaceutical  Sciences , 2021 ,  2119634. https://doi.org/10.1155/2021/2119634
Batubara, I., Astuti, R. I., Prastya, M. E., Ilmiawati, A., Maeda, M., Suzuki, M., Hamamoto, A., & Takemori, H. (2020). The  antiaging effect  of active  fractions  and  Ent-11α-Hydroxy-15- Oxo-Kaur-16-En-19-Oic  acid  isolated  from Adenostemma  lavenia (L.)  O.  Kuntze  at  the Cellular  Level. Antioxidants , 9 (8),  719. https://doi.org/10.3390/antiox9080719
Falcomer, A. L., Riquette, R. F. R., De Lima, B. R., Ginani,  V.  C.,  &  Zandonadi,  R.  P.  (2019). Health benefits of green banana consumption: a  systematic  review. Nutrients , 11 (6). https://doi.org/10.3390/NU11061222
Guo,  C. Y.,  Sun,  L.,  Chen,  X.  P.,  &  Zhang,  D.  S. (2013).  Oxidative  stress,  mitochondrial damage  and  neurodegenerative  diseases. Neural Regeneration Research , 8 (21), 2003– 2014.  https://doi.org/10.3969/j.issn.1673-537 4.2013.21.009
Heriani,  F. A.,  Sari,  S.  P.,  &  Oktasari, A.  (2021). Antioxidant activity of uli banana peel extract ( Musa  x  Paradisiaca L.  AAB). Stannum : Jurnal Sains Dan Terapan Kimia , 3 (2), 64–68. https://doi.org/10.33019/JSTK.V3I2.2386
Ismail, N. Z., Arsad, H., Samian, M. R., & Hamdan, M. R. (2017). Determination of phenolic and flavonoid contents, antioxidant activities and GC-MS  analysis  of Clinacanthus  nutans (Acanthaceae) in different locations. Agrivita , 39 (3),  335–344.  https://doi.org/10.17503/ agrivita.v39i3.1076
Jun, M., Fu, H. Y., Hong, J., Wan, X., Yang, C. S., & Ho, C. T. (2003). Comparison of  antioxidant activities  of  isoflavones  from  kudzu  root ( Pueraria  lobata Ohwi). Journal  of  Food Science , 68 (6),  2117–2122.  https://doi.org/ 10.1111/J.1365-2621.2003.TB 07029.X
Kefayati,  Z.,  Motamed,  S.  M.,  Shojaii, A.,  Noori, M., & Ghods, R. (2017). Antioxidant activity and  phenolic  and  flavonoid  contents  of  the extract  and  subfractions  of Euphorbia splendida Mobayen. Pharmacognosy Research , 9 (4),  362.  https://doi.org/10.4103 /PR.PR_12 _17
Lesmana, D., Andrianto, D., & Astuti, R. I. (2021). Antiaging  properties  of  the  ethanol  fractions of  clove  ( Syzygium  aromaticum L.)  bud  and leaf  at  the  cellular  levels:  Study  in  yeast schizosaccharomyces pombe . Scientia Pharmaceutica , 89 (4). https://doi.org/10.3390 /scipharm89040045
Luh,  N.,  Wahyuni,  P.  O.,  Noer,  I.,  Teguh,  D.,  & Trisnanto, B. (2022). Sikap konsumen dalam pembelian  buah  pisang  cavendish  di  pasar modern  kota  Bandar  Lampung. Journal  of Food  System  and  Agribusiness , 6 (2),  201– 207.  https://doi.org/10.25181/JOFSA.V6I2.2 455
Nurcholis, W., Sya’bani Putri, D. N., Husnawati, H., Aisyah,  S. I.,  &  Priosoeryanto,  B.  P.  (2021). Total  flavonoid  content  and  antioxidant activity  of  ethanol  and  ethyl  acetate  extracts from  accessions  of Amomum  compactum fruits. Annals of Agricultural Sciences , 66 (1), 58–62. https://doi.org/10.1016/J.AOAS.2021. 04.001
Pan, Y., Schroeder, E. A., Ocampo, A., Barrientos, A.,  &  Shadel,  G.  S.  (2011).  Regulation  of yeast  chronological  life  span  by TORC1  via adaptive  mitochondrial  ROS  signaling. Cell Metabolism , 13 (6),  668–678.  https://doi.org/ 10.1016/j.cmet.2011.03.018
Parvez, G. M., Tonu, J. F., Ara, R., Joarder, Md. Y. A., Milon, M. M. M., Sarker, R. K., Naznin, Most. A., Hossain, Md. S., Sultana, R., Parvin, S.,  &  Kader,  Md. A.  (2023).  Phytochemical and  antioxidant  comparison  of  different varieties of banana. Journal of
Pharmacognosy and Phytochemistry , 12 (1),
Ekstrak kulit pisang Cavendish ( Musa acuminata ) sebagai agen antioksidan dan antipenuaan ……………...….(Avelina et al.)
194–199.  https://doi.org/10.22271/phyto.202 3.v12.i1c.14574
Pintać, D., Majkić, T., Torović, L., Orčić, D., Beara, I.,  Simin,  N.,  Mimica–Dukić,  N.,  &  Lesjak, M.  (2018).  Solvent  selection  for  efficient extraction of bioactive compounds from grape pomace. Industrial Crops and Products , 111 , 379–390. https://doi.org/10.1016/J.INDCROP .2017.10.038
Pizzino,  G.,  Irrera,  N.,  Cucinotta,  M.,  Pallio,  G., Mannino,  F.,  Arcoraci,  V.,  Squadrito,  F., Altavilla,  D.,  &  Bitto, A.  (2017).  Oxidative stress:  harms  and  benefits  for  human  health. Oxidative  Medicine  and  Cellular  Longevity , 2017 , 1–13.  https://doi.org/10.1155/2017/841 6763
Pudjas,  N.  T.  G.,  Mubarik,  N.  R., Astuti,  R.  I.,  & Sudirman, L. I. (2022). Antioxidant activity of endophytic  bacteria  derived  from hoya multiflora blume  plant  and  their  cellular activities  on Schizosaccharomyces  pombe . HAYATI  Journal  of  Biosciences , 29 (2),  214– 221. https://doi.org/10.4308/HJB.29.2.214-22 1
Putu,  N.,  Astiti,  A.,  &  Yulihastuti,  D.  A.  (2017). Determination  of  flavonoid,  tannin  and vitamin  c  content  from  methanol  extract wrapping  stone banana  ( Musa brachycarpa ), ketip  banana  ( Musa  Paradisiaca Forma Typiaca) and kepok banana ( Musa acuminata ). Journal of Advances in  Tropical Biodiversity  and  Environmental  Sciences , 1 (2), 33.
Rahal, A., Kumar, A., Singh, V., Yadav, B., Tiwari, R.,  Chakraborty,  S.,  &  Dhama,  K.  (2014). Oxidative stress, prooxidants, and antioxidants: The interplay. BioMed Research International , 2014 .  https://doi.org/10.1155/ 2014/761264
Roux, A. E., Chartrand, P., Ferbeyre, G., & Rokeach, L. A. (2010). Fission yeast and other yeasts as emergent models to unravel cellular aging in eukaryotes. Journals of Gerontology  - Series A Biological Sciences and Medical Sciences , 65 (1), 1–8. https://doi.org/10.1093/gerona/glp 152
Sarima,  Astuti,  R.  I.,  &  Meryandini,  A.  (2019). Modulation of aging in yeast Saccharomyces cerevisiae by  roselle  petal  extract  ( Hibiscus sabdariffa L.). American  Journal  of Biochemistry  and  Biotechnology , 15 (1),  23– 32. https://doi.org/10.3844/ajbbsp.2019.23.32
Shalaby,  E.  A.,  &  Shanab,  S.  M.  M.  (2013). Comparison  of  DPPH  and ABTS  assays  for
determining antioxidant potential of water and methanol  extracts  of Spirulina  platensis .  In Indian Journal of Geo-Marine Sciences (Vol. 42, Issue 5).
Smith, M. G., & Snyder, M. (2006). Yeast as a model for  human  disease. Current  Protocols  in Human  Genetics , 48 (1),  1–8.  https://doi.org/
10.1002/0471142905
Syaefudin,  Wahyuni,  W.  T.,  Artika,  I.  M.,  & Sulistiyani.  (2014).  Antioxidant  activity  of flavonoid  from Guazuma  ulmifolia la  ink. leaves and apoptosis induction in yeast cells. Journal https://doi.org/:10.3923/JBS.2014. 305.310
Tan,  B.  L.,  Norhaizan,  M.  E.,  Liew,  W.  P.  P.,  & Rahman,  H.  S.  (2018).  Antioxidant  and oxidative  stress:  A  mutual  interplay  in  age- related  diseases. Frontiers  in  Pharmacology ,
9 (1162),  1–28.  https://doi.org/10.3389/fphar. 2018.01162
Thavamoney, N., Sivanadian, L., Tee, L. H., Khoo, H. E., Prasad, K. N., & Kong, K. W. (2018). Extraction  and  recovery  of  phytochemical components  and  antioxidative  properties  in fruit parts of Dacryodes rostrata influenced by different  solvents. Journal  of  Food  Science and  Technology , 55 (7),  2523.  https://doi.org/ 10.1007/S13197-018-3170-6
Trostchansky, A., Xu, S., Demicheli, V., Rahman, H. S., Tan, B. L., Norhaizan, M. E., & Liew, W.- P.-P. (2018). Antioxidant and oxidative stress: a  mutual  interplay  in  age-related  diseases. Frontiers  in  Pharmacology , 9 (1162),  1–28. https://doi.org/10.3389/fphar.2018.01162
Truong, D. H., Ta, N. T. A., Pham, T. V., Huynh, T. D., Do, Q. T. G., Dinh, N. C. G., Dang, C. D., Nguyen, T. K. C., & Bui, A. V. (2021). Effects of solvent—solvent fractionation on the total terpenoid  content  and  in  vitro  anti‐ inflammatory  activity  of Serevenia  buxifolia bark extract. Food Science & Nutrition , 9 (3), 1720. https://doi.org/10.1002/FSN3.2149
Tungmunnithum, D., Drouet, S., & Hano, C. (2022). Flavonoids  from  sacred  lotus  stamen  extract slows chronological aging in yeast model by reducing  oxidative  stress  and  maintaining cellular metabolism. Cells , 11 (4), 599. https:// doi.org/10.3390/cells11040599
Utami,  L. A.,  Wahyuni, W.  T.,  Mubarik,  N.  R.,  & Astuti,  R.  I.  (2023).  Endophytic  bacteria  of clove  ( Syzygium  aromaticum L.)  leaves produce metabolites with antioxidant and anti- aging properties. Journal of Applied Pharma-
Menara Perkebunan 2024, 92(1), 46-54
ceutical  Science , 13 (7), 241–250.  https://doi. org/10.7324/JAPS.2023.93258
Wa¸troba, M., & Szukiewicz, D. (2016). The role of sirtuins  in  aging  and  age-related  diseases. Advances in Medical Sciences , 61 (1), 52–62. https://doi.org/.1016/j.advms.2015.09.003
Wierman,  M.  B.,  &  Smith,  J.  S.  (2014).  Yeast sirtuins  and  the  regulation  of  aging. FEMS
Yeast Research , 14 (1), 73–88. https://doi.org/ 10.1111/1567-1364.12115
Yusuf, S. M., Astuti, R. I., Batubara, I., & Chavasiri, W. (2021). Anti-aging activity  of Xylocarpus granatum phytoextracts  and  Xyloccensins  K compound. Indonesian Journal of Pharmacy ,
32 (3),  365–375.  https://doi.org/10.22146/IJP. 1430