Journal Syifa Sciences and Clinical Research (JSSCR)
Volume 5 Nomor 3, 2023
Journal Homepage: http://ejurnal.ung.ac.id/index.php/jsscr , E-ISSN: 2656-9612 P-ISSN:2656-8187 DOI : https://doi.org/10.37311/jsscr.v5i3.23896

## Perbandingan  Kadar  Flavonoid  Total  Jarak  Pagar
(Jatropha  curcas L .) dan  Jarak  Merah (Jatropha
gossypiifolia L .)
Hamsidar  Hasan 1* , Faramita  Hiola 2 , Fika  Nuzul  Ramadhani 3 , Mahdalena  Sy. Pakaya 4 , Rahmatiya Imran Tululi 5
1,2,3,4,5 Jurusan  Farmasi,  Fakultas  Olahraga  dan  Kesehatan,  Universitas  Negeri  Gorontalo,  Jl.  Jenderal Sudirman  No.  06  Kota  Gorontalo  96128,  Indonesia
* Penulis Korespondensi . Email: hamsidarhasan@ung.ac.id

## ABSTRAK
Flavonoid  merupakan  salah  satu  kelompok  senyawa  fitokimia  yang  sering  ditemukan dalam  tumbuhan. Jatropha  curcas L . dan Jatropha  gossypiifolia L . merupakan  tumbuhan yang  berasal  dari family yang  sama  yaitu Euphorbiaceae .  Dimana  kedua  tanaman  ini memiliki  banyak  potensi  terutama  dibidang  kesehatan.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui  perbandingan  kadar  flavonoid  total  pada  ekstrak  metanol  daun  Jarak  Pagar (Jatropha  Curcas L .) dan  Jarak  Merah (Jatropha  Gossypiifolia L .) menggunakan  metode spektrofotometri  UV-Vis.  Metode  penelitian  ini  menggunakan  metode  analisis  kualitatif dan  kuantitatif.  Analisis  kualitatif  pada  penelitian  ini  menggunakan  metode  skrining fitokimia  dan  analisis  Kromatografi  Lapis  Tipis  menggunakan  eluen  n-Heksan  :  etil asietat  dengan  perbandingan  (8:2).  Analisis  kuantitatif  pada  penelitian  ini  menggunakan metode  spektrofotometri  UV-Vis  pada  panjang  gelombang  435  nm  dengan  pembanding standar  kuersetin.  Hasil  penelitian  menunjukkan  rata-rata  kadar  flavonoid  total  yang terdapat  pada  100  mg  ekstrak  metanol  daun  Jarak  Pagar  yaitu  5,75%  b/v.  Sedangkan pada  ekstrak  metanol  daun  Jarak  Merah  yaitu  7,20%  b/v.  Berdasarkan  analisis  statistik Independent  Sampel  T-test, kadar  flavonoid  total  pada  ekstrak  metanol  daun  Jarak  Merah lebih  besar  dibandingkan  dengan  ekstrak  metanol  daun  Jarak  Pagar  dimana  terdapat perbedaan  rata-rata  yang  signifikan  dari  kedua  sampel (p-value<0,  05).
Kata Kunci: Flavonoid,   Jarak  Pagar (Jatropha  curcas  L.), Jarak  Merah (Jjatropha  gossypiifolia  L.), Spektrofotometri  UV-Vis
Diterima: 27-08-2023 Disetujui: 19-12-2023 Online: 31-12-2023

## ABSTRACT
Flavonoids  are  a  group  of  phytochemical  compounds  commonly  found  in  plants.  Jatropha  curcas L .  And  Jatropha  gossypiifolia L .  Are  plants  belonging  to  the  same  family,  Euphorbiaceae.  Both  of these  plants  have  significant  potential,  especially  in  health.  This  research  aims  to  determine  the comparison  of  total  flavonoid  levels  in  methanol  extracts  of  Physic  Nut  (Jatropha  curcas L .)  and Cotton-Leaf  Physic  Nut  (Jatropha  gossypiifolia L .)  leavs  using  U-Vis  spectrophotometry  method. This  research  utilizes  both  qualitative  and  quantitative  analysis  methods.  The  qualitative  analysis involves  phytocemical  screening  and  Thin-Layer  Chromatography  analysis  using  an  eluent  of  n- Hexane  ethyl  acetate  with  a  ratio  of  (8:2).  The  quantitative  analysis  in  this  research  utilized  the UV-Vis  spectrofotometry  method  at  a  wavelength  of  435  nm  with  quercetin  as  the  standard
comparator.  The  results  indicate  that  the  average  total  flavonoid  content  in  100  mg  of    methanol extract  from  Physic  Nut  (Jatropha  curcas L .)  leaves  is  5,75%  w/v.  Meanwhile,  in  the  methanol extract  from  Cotton-Leaf  Physic  Nut  (Jatropha  gossypiifolia L .)  leaves,  it  is  7,20%  w/v.  Based  on Independent  Sample  T-test  statistical  analysis,  the  total  flavonoid  content  in  the  methanol  extract from  Cotton-Leaf  Physic  Nut  leaves  is  significantly  higher  than  that  in  the  methanol  extract  from Physic  Nut  Leaves,  indieating  a  significant  difference  in  the  average  values  of  two  samples  (p- value<0,05).
Copyright © 2023 Jsscr. All rights reserved . Keywords:
Flavonoids,  Physic  Nut  (Jatropha  curcas L .);  Cotton-Leaf  Physic  Nut  (Jatropha  gossypiifolia L .), UV-Vis  Spectrophotometry
Received: 2023 -08-27 Accepted: 2023 -12-19 Online: 2023 -12-31

## 1. Pendahuluan
Sumber  daya  alam  di  Indonesia  telah  dieksplorasi  secara  terus  menerus oleh  manusia  untuk  kebutuhan  sehari-hari.  Salah  satu  sumber  daya  alam  yang selalu  dieksplorasi  adalah  tanaman  obat.  Menurut  Yasir  dan  Asnah lebih  dari 9.609  spesies  tanaman  Indonesia  memiliki  khasiat  sebagai  obat [1].  Tanaman  obat merupakan  tumbuhan  yang  telah  diidentifikasi  dan  diketahui  memiliki  senyawa yang  dapat  bermanfaat  untuk  mencegah  dan  mengobati  penyakit,  melakukan fungsi    biologis    tertentu,    hingga    mencegah    serangan    serangga    dan    jamur. Berdasarkan    beberapa    penelitian    bahwa    pengobatan    dengan    memanfaatkan tanaman  obat  ini  juga  dapat  meminimalisir  efek  samping  bagi  tubuh  manusia.
Jatropha  curcas L. dan 0 Jatropha  gossypiifolia L. merupakan  tanaman 0 yang berasal    dari 0 family yang    sama 0 yaitu Euphorbiaceae . Jatropha 0 curcas L. atau yang 0 dikenal  dengan 0 tanaman  jarak 0 pagar  ini  memiliki  banyak  potensi  sebagai sumber  bioenergi,  pengendalian  gulma,  dan  pengobatan  tradisional.  Berdasarkan hasil  penelitian  Sadik  dan  Disi menyatakan  bahwa  adanya  keberadaan 0 alkaloid, 0 flavonoid, 0 saponin, 0 triterpenoid, 0 steroid,  dan 0 tanin  dalam  daun 0 tanaman  ini. Jatropha  gossypiifolia L.  atau  yang  dikenal  dengan  jarak  merah  juga  termasuk dalam family Euphorbiaceae [2].    Seperti Jatropha    curcas L.,    tanaman    ini    juga mengandung  berbagai  senyawa  fitokimia,  termasuk  flavonoid,  yang  telah  diteliti untuk  aktivitas  farmakologisnya.
Pengujian  skrining  fitokimia  ini  hanya  sebatas  uji  kualitatif  untuk  melihat ada  tidaknya  suatu  senyawa  dalam  daun  Jarak  Pagar  ( Jatropha  curcas L. ) dan Jarak  Merah  ( Jatropha  gossypiifolia L. ) sehingga  dalam  pengukuran  kadar  flavonoid total  dalam  ekstrak  metanol  daun  Jarak  Pagar  dan  daun  Jarak  Merah  perlu dilakukan  pengujian  kuantitatif  dengan  menggunakan  metode  spektrofotometri UV-Vis.    Spektrofotometri    UV-Vis    merupakan    teknis    analisis    yang    umum digunakan  dalam  mengukur  absorpsi  cahaya  pada  berbagai  senyawa  kimia.  Pada penelitian  ini  metode  spektrofotometri  UV-Vis  akan  digunakan  untuk  mengukur absorpsi  cahaya  dari  senyawa  flavonoid  dalam  ekstrak  metanol  daun  Jarak  Pagar ( Jatropha  curcas L. ) dan  ekstrak  metanol  daun  Jarak  Merah  ( Jatropha  gossypiifolia L. ) .  Data  absorbansi  yang  diperoleh  nantinya  akan  digunakan  untuk  menghitung kadar  flavonoid  total  dalam  ekstrak  metanol  daun  Jarak  Pagar  ( Jatropha  curcas L. ) dan  Jarak  Merah  ( Jatropha  gossypiifolia L. ) . Berdasarkan  uraian  diatas  maka akan   dilakukan   kajian   lebih    lanjut   mengenai   senyawa   aktif   flavonoid   dalam ekstrak  metanol  daun  Jarak  Pagar  ( Jatropha  curcas L. ) dan  ekstrak  metanol  daun
Jarak    Merah    ( Jatropha    gossypiifolia L. ) baik    secara    kualitatif    serta    penentuan kandungan  flavonoid  total  pada  ekstrak  metanol  daunJarak  Pagar  ( Jatropha  curcas L. ) dan  ekstrak  metanol  daun  Jarak  Merah  ( Jatropha  gossypiifolia L. ).

## 2. Metode
Alat  dan  Bahan
Alat  yang  digunakan  pada  penelitian  yaitu  wadah    maserasi,    batang pengaduk , chamber KLT, gelas  kimia , gelas ukur, kain saring, lampu UV 254  nm dan 366  nm (Camag ® ) , neraca analitik , pipet tetes, spatula logam, spektrofotometri UV-Vis (Orion  Aquamate  8000 ® ) , sudip, rak tabung reaksi, tabung reaksi, dan vial. Bahan yang digunakan  pada  penelitian  yaitu,  AlCl 3 aquades,  aluminium  foil,    etanol  70%,  etil asetat,  HCl,  kertas  saring,  kuersetin,  lempeng  KLT,    metanol,    natrium    asetat,    n- Heksan,  sampel  daun  jarak  pagar  ( Jatropha  curcas L.)  dan  jarak  merah  ( Jatropha gossypiifolia L.)  dan  serbuk  magnesium  (Mg). Pengambilan  Sampel Sampel  daun  Jarak  Pagar  ( Jatropha  curcas L.)  dan  Jarak  Merah  ( Jatropha gossypiifolia L.)  dikumpulkan  dari  rimbunan  Jarak  Pagar  dan  Jarak  Merah  yang ada   di    Kelurahan    Pohe,    Kecamatan   Hulonthalangi,    Kota    Gorontalo,    Provinsi Gorontalo.  Sampel  diambil  pada  jam  10.00  pagi  dengan  cara  memilih  daun  Jarak Pagar  dan  daun  Jarak  Merah  yang  tidak  terlalu  tua  atau  tidak  terlalu  muda, segar  dan  tidak  terserang  hama.

## Determinasi  Tanaman
Determinasi  daun  Jarak  Pagar  ( Jatropha  curcas L.)  dan  Jarak  Merah  ( Jatropha gossypiifolia L.)  dilakukan  di  Laboratorium  Bahan  Alam,  Jurusan  Farmasi,  Fakultas Olahraga  dan  Kesehatan,  Universitas  Negeri  Gorontalo  untuk  memastikan  bahwa simplisia  yang  akan  digunakan  benar-benar  Jarak  Pagar  ( Jatropha  curcas L.)  dan Jarak  Merah  ( Jatropha  gossypiifolia L.)

## Pengolahan  Sampel
Sampel  daun  Jarak  Pagar  ( Jatropha  curcas L.)  dan  Jarak  Merah  ( Jatropha gossypiifolia L.)  yang  telah  diperoleh,  dibersihkan  dari  kotoran  yang  menempel lalu  dilakukan  sortasi  basah.  Kemudian  sampel  dicuci  menggunakan  air  yang mengalir  hingga  bersih  selanjutnya  dipotong-potong  kecil  dan  dikeringkan  dengan cara  diangin-anginkan.  Proses  pengeringan  dilakukan  selama  kurang  lebih  3  hari. Selanjutnya  dilakukan  sortasi  kering,  kemudian  sampel  daun  Jarak  Pagar  dan Jarak  Merah  dihaluskan  hingga  menjadi  serbuk dan dimasukkan  kedalam  wadah yang  kering  dan  tertutup,  kemudian  disimpan  pada  suhu  ruang.

## Pembuatan  Ekstrak
Daun  Jarak  Pagar  ( Jatropha  curcas L.)  dan  daun  Jarak  Merah (Jatropha gossyiipifolia L. ) yang  telah  dihaluskan  kemudian  diekstraksi  dengan  cara  maserasi menggunakan  pelarut  metanol.  Proses  maserasi  dilakukan  dengan  menimbang simplisia  daun  Jarak  pagar  dan  daun  Jarak  Merah  masing-masing  sebanyak  270 g  dan  dimasukan  kedalam  wadah  maserasi  kemudian  ditambahkan  2000  mL pelarut  metanol  pada  wadah  maserasi    yang  berisi  sampel  daun  Jarak  Pagar  dan 2000  mL  pelarut  metanol  pada  wadah  maserasi    yang  berisi  sampel  daun  Jarak Merah  hingga  sampel  terendam  sempurna.  Maserasi  dilakukan  selama  3  x  24 jam    hingga    tercapai  kesetimbangan  antara  konsentrasi  senyawa  dalam    pelarut dengan  konsentrasi  dalam  sel  tanaman.  Setelah  tiga  hari,  hasil  ekstraksi maserasi dipisahkan filtrat dan residunya. Filtrat yang didapatkan kemudian diuapkan hingga diperoleh ekstrak kental [4].

## Analisis  Kualitatif
Ekstrak  metanol  daun  Jarak  Pagar  ( Jatropha  curcas L.)  dan  Jarak  Merah ( Jatropha  gossypiifolia L.)  sebanyak  2  gram  dimasukan  kedalam  tabung  reaksi  yang telah  diberi  label.  Kedua  tabung  reaksi  yang  berisi  ekstrak  ditambahkan  0,5  mg magnesium  dan  HCl  0,5  M.  Warna  merah  muda  atau  ungu  menunjukkan  adanya flavonoid [5].

## Analisis  Menggunakan  Kromatografi  Lapis  Tipis  (KLT)
Fase 0 diam  yang  digunakan 0 yaitu  silika  gel 0 GF254  dan  fase  gerak  yang digunakan    adalah 0 n-Heksan    dan    etil 0 asetat.    KLT    dilakukan    dengan 0 cara mengambil  sedikit  ekstrak  daun  jarak 0 pagar  dan  jarak 0 merah  kemudian dilarutkan dengan 0 pelarut  metanol,  setelah  itu 0 sampel    ditotolkan 0 pada    plat    KLT dan 0 diletakkan  di  dalam 0 bejana  yang  telah 0 dijenuhkan.  Plat  KLT 0 dibiarkan  di dalam 0 bejana tesebut  hingga 0 eluen  sampai  pada 0 tanda  batas.  Plat KLT 0 kemudian dikeluarkan 0 dari  bejana    lalu    disinari    di 0 bawah    lampu 0 ultraviolet    pada panjang 0 gelombang 254 nm dan 366 nm. Setelah 0 didapatkan noda  yang 0 diinginkan dilanjutkan 0 dengan  menghitung 0 nilai  Rf.

## Analisis  Kuantitatif Pembuatan  Larutan  Seri  Baku  Kuersetin
Ditimbang    sebanyak    10    mg    baku    standar    kuersetin,    dilarutkan    dalam metanol  sebanyak  10  ml  yang  akan  digunakan  pada  1000  ppm.  Larutan  standar kuasetin  1000  ppm,  di  pipet  sebanyak  1  mL  yang  dilarutkan  kedalam  metanol sebanyak  10  mL  yang  digunakan  untuk  100  ppm,  dibuat  beberapa  konsentrasi yang  berbeda  yaitu  10  ppm,  20  ppm,  30  ppm,    40  ppm,  50  ppm  dengan mempipet  1  mL,  2  mL,  3  mL,  4  mL,  5  mL  berturut-turut  dan  dilarutkan  dengan metanol  hingga  10  mL.  Masing-masing  konsentrasi  yang  digunakan  pada  larutan standar  kuarsetin  ditambahkan  metanol  sebanyak  3  mL,  0,2  mL  natrium  asetat  1 M,  0,2  mL  AlCl 3 10%  yang  selanjutnya  dicukupkan  dengan  aquadest  sampai  10 mL.  Kemudian  dilakukan  inkubasi  dengan  suhu  kamar  selama  30  menit  lalu dilakukan  pengukuran  terhadap  nilai  absorbansi  pada  alat  spektrofotometri  UV- Vis.

## Penentuan  Panjang  Gelombang  Maksimum
Dipipet   larutan   induk   kuarsetin    sejumlah    volume   tertentu    pada   kuvet untuk  mengetahui  panjang  gelombang  maksimum  yang  akan  digunakan  pada pengukuran  kadar  flavonoid  sampel  ekstrak  metanol  daun  daun  Jarak  Pagar ( Jatropha  curcas L.)  dan  Jarak  Merah  ( Jatropha  gossypiifolia L.).  Pembacaan  serapan dilakukan  pada  rentang 400-450  nm  menggunakan  spektrofotometri  UV-Vis Pembuatan  Kurva  Kalibrasi  Baku  Kuersetin Larutan  standar  kuarsetin  yang  telah  dibuat  pada    konsentrasi  10,  20,  30, 40   dan   50   ppm   dilakukan   pengukuran    untuk   mendapatkan   nilai   absorbansi menggunakan  instrumen  spektrofotometri  UV-Vis  pada  gelombang  maksimum yang    diperoleh    sebelumnya.    Penentuan    kurva    kalibrasi    baku    pembanding menggunakan  rumus [6] :
Y=  ax  +  b
Keterangan  : Y  =   absorbansi a    =  konstanta x    =  konsentrasi  PPM b    =  kemiringan  /  slope
Preparasi  Sampel  Ekstrak  Jarak  Pagar  dan  Jarak  Merah
Preparasi  sampel  dilakukan  dengan  cara  menimbang  sebanyak  100  mg sampel  ekstrak  metanol  daun  jarak  pagar  ( Jatropha  curcas L.)  dan  jarak  merah ( Jatropha  gossypiifolia L.)  dilarutkan  dalam  100  mL  metanol  sebagai  konsentrasi 1000  ppm.  Dipipet  0,5  mL  dan  dimasukan  kedalam  labu  ukur  ditambahkan  1,5 mL  metanol  lalu  ditambahkan  0,1  mL  AlCl 3 10%,  0,1  mL  natrium  asetat  1  M  dan aquadest  2,8  mL.  Larutan  diinkubasi  selama  30  menit  dan  diukur  absorbansinya menggunakan  spektrofotometri  UV-Vis  pada  panjang  gelombang  maksimum  yang didapat  dengan  dilakukan  tiga  kali  replikasi.

## Penetapan  Kadar  Flavonoid  Total
Konsentrasi  dari  senyawa  flavonoid  pada  sampel  yang  digunakan  dapat ditentukan  setelah  dilakukan  pengukuran  nilai  serapan  berdasarkan  persamaan regresi  terhadap  kurva  baku  kalibrasi  standar.  Kadar  senyawa  flavonoid    dalam sampel  ekstrak  metanol  daun  Jarak  Pagar  ( Jatropha  curcas L.)  dan  Jarak  Merah ( Jatropha  gossypiifolia L.)  dapat  dihitung  dengan  rumus [7] :
Flavonoid  = X  (mg/ml)    x    Volume ( mL ) Berat  sampel

## 3. Hasil  dan  Pembahasan
Berdasarkan  hasil  determinasi  yang  dilakukan  menggunakan  referensi mengenai  Sistematika  Tumbuhan  Tinggi  serta  mengenai  Flora  Untuk  Sekolah Indonesia  Cetakan  Ketiga,  dan  didapatkan  kebenaran  bahwa  tanaman  yang digunakan  pada  penelitian  ini  benar  tanaman  Jarak  Pagar  ( Jatropha  curcas L.) dan  tanaman  Jarak  merah (Jatropha  gossypiifolia L. ) . Sampel  daun  jarak  pagar  ( Jatropha  curcas L.)  dan  jarak  merah  ( Jatropha gossypiifolia L.)  di  ekstraksi  menggunakan  metode  maserasi.  Maserasi  merupakan suatu  metode  ekstraksi  yang  dilakukan  secara  dingin  dimana  proses  ekstraksi  ini dilakukan  dalam  suhu  ruang  tanpa  adanya  penambahan  suhu  atau  dilakukan dengan  pemanasan  sehingga  Teknik  ekstraksi  maserasi  ini  masih  membutuhkan bantuan  ekstraksi  dengan  cara  melakukan  pengocokan  atau  pengadukan  yang berulang    sehingga    dapat    mempercepat    waktu    pelarutan    penyari    dalam mengekstraksi  suatu  sampel  yang  akan  diekstrasksi.  Banyaknya  senyawa  yang dapat    terekstraksi    bila    disertai    lamanya    waktu    perendaman    simplisia  [8] .Keuntungan  cara  maserasi  ini  yaitu  mudah  dan  tidak  perlu  pemanasan  sehingga kecil  kemungkinan  bahan  alam  menjadi  rusak  atau  terurai [9].
Tabel  1. Hasil  Ekstraksi  Daun  Jarak  Pagar  dan  Jarak  Merah Sampel Volume Pelarut (mL) Berat Sampel (g) Berat Ekstrak (g) Rendamen (%) Daun  Jarak  Pagar ( Jatropha  curcas L.) 2000 270 30 11,11% Daun  Jarak  Merah ( Jatropha  gossypiifolia L.) 2000 270 44 16%
Tabel  1  menunjukan  bahwa  ekstrak  metanol  daun  Jarak  Pagar  ( Jatropha curcas L.)  dengan  berat  sampel  270  gram  menghasilkan  ekstrak  sebanyak  30  gram dengan  persen  rendamen  11,11%.  Sedangkan  pada  daun  Jarak  Merah  ( Jatropha
gossypiifolia L.)  dengan  berat  sampel  270  gram  menghasilkan  berat  ekstrak  44 gram  dan  persen  rendemen  sebesar  16%.  Sehingga  dapat  dikatakan  bahwa  hasil persen  rendemen  ekstrak  metanol  daun  Jarak  Merah   ( Jatropha  gossypiifolia L.) mempunyai  persen  rendemen  yang  lebih  besar  dibandingkan  ekstrak  metanol daun  Jarak  Pagar  ( Jatropha  curcas L.).
Skrining  fitokimia  merupakan  salah  satu  cara    untuk  melakukan  identifikasi kandungan  senyawa  metabolit  sekunder  yang  terdapat  pada  suatu  bahan  alam. Skrining  fitokimia  juga  merupakan  tahap  awal  yang  dapat  memberikan  gambaran mengenai  kandungan  senyawa  tertentu  dalam  bahan  alam  yang  akan  diteliti. Skrining  fitokimia  dapat  dilakukan  secara  kualitatif,  semi  kuantitatif,  maupun kuantitatif  sesuai  dengan  tujuan  yang  diinginkan
Tabel  2. Hasil  Skrining  Fitokimia  Daun  Jarak  Pagar  dan  Jarak  Merah
Tabel  2  menunjukan  bahwa  hasil  uji  kandungan  Flavonoid  daun  Jarak Pagar    ( Jatropha    curcas L.)    dengan    pereaksi    Magnesium    +    HCl.    Hasil    yang didapatkan  pada  ekstrak  metanol  daun  Jarak  Pagar   ( Jatropha  curcas L.)  yaitu terbentuknya    larutan    berwarna    coklat    kehijauan  [10].  Pada    metode    Wilstater cyanidin    warna  merah   sampai   jingga   diberikan   oleh   senyawa   flavon,   warna merah    tua    diberikan    oleh    flavonol    atau    flavonon,    warna    hijau    sampai    biru diberikan  oleh  aglikon  atau  glikosida.  Kemudian  pada  ekstrak  metanol  daun Jarak  Merah  yaitu  terbentuknya  larutan  berwarna  coklat  jingga.  Pada  uji  Wilstater cyanidin  sampel  dikatakan  positif  jika  larutan  membentuk  warna  merah-orange. Hal  ini  menandakan  bahwa  pada  ekstrak  metanol  daun  Jarak  Pagar  dan  ekstrak metanol  daun  jarak  merah  positif  mengandung  flavonoid [11].
Penegasan    hasil    uji    kualitatif    skrining    fitokimia    flavonoid    pada    ekstrak metanol  daun  Jarak  Pagar  ( Jatropha  curcas L.)  dan  ekstrak  metanol  daun  jarak merah (Jatropha  gossypiifolia L. ) dilakukan  dengan  menggunakan  Kromatografi Lapis  Tipis  (KLT) [12]. Kromatografi  Lapis  Tipis  merupakan  teknik  pemisahan yang    digunakan    dalam    analisis    bahan    alam,    pangan,    penentuan    alkaloid, antosianidin,  antrakuinon,  antibiotik,  amina,  amida,  asam  amino,  karbohidrat, flavonoid,  lemak,  fenol,  pigmen  dan  pewarna,  racun,  vitamin  dan  jenis  aneka senyawa  lainnya.  Identifikasi  dengan  KLT  dilakukan  dengan  tujuan  untuk  melihat pola  kromatogram  senyawa  flavonoid  pada  ekstrak  metanol  daun  Jarak  Pagar dan  ekstrak  metanol  daun  Jarak  Merah
Metode  Kromatografi  Lapis  Tipis  dilakukan  dengan  prinsip trial  and  error. Tujuan  dari  prinsip  ini  yaitu  mencari  eluen  dengan  perbandingan  yang  dapat memberikan  pemisahan  senyawa  yang  baik.  Pada  metode  KLT  ini  dilakukan dengan  menggunakan  fase  diam  berupa  plat  KLT  GF254  dengan  fase  gerak  eluen n-Heksan  :  etil  asetat.  Ekstrak  metanol  daun  Jarak  Pagar  dan  ekstrak  metanol daun  Jarak  Merah  ditotolkan  pada  plat  KLT  dan  dielusi  menggunakan  eluen  n- Heksan  :  etil  asetat.  Setelah  dilakukan  proses  elusi  kemudian  dilihat  bercak  noda
Jenis Pengujian Ekstrak Pereaksi Hasil Keterangan Flavonoid Daun  Jarak  Pagar ( Jatropha  curcas L.) Magnesium +  HCl Coklat- hijau Positif Flavonoid Daun  Jarak  Merah ( Jatropha  gossypiifolia L.) Magnesium +  HCl Coklat- jingga Positif
pada  lampu  UV  366  dan  254  nm.  Berdasarkan  hasil  yang  didapatkan  bercak noda  dengan  pemisahan  yang  baik  yaitu  pada  perbandingan  eluen  n-Heksan  : etil  asetat  8:2.
Keterangan  : JM  =  Jarak  Merah JP    =  Jarak  Pagar Gambar  1. Profil  Kromatografi  Lapis  Tipis  (KLT)  Jarak  Pagar  dan  Jarak  Merah Noda    pada    plat    KLT    dianalisis    nilai Retardation    Factor    ( RF) dengan menggunakan  rumus  jarak  yang  ditempuh  oleh  komponen  dibagi  dengan  jarak yang  ditempuh  oleh  eluen.  Berdasarkan  analisis  perhitungan  nilai  RF  tersebut, bercak  noda  yang  teridentifikasi  pada  ekstrak  metanol  daun  Jarak  Pagar  sebanyak 4  noda  dengan  nilai  RF 1 0,46,  RF 2 0,66,  RF 3 0,86  dan  RF 4 0,92.  Sedangkan  pada ekstrak  metanol  daun  Jarak  Merah  terdapat  6  noda  dengan  nilai  RF 1 0,22,  RF 2 0,34,  RF 3 0,48,  RF 4 0,66,  RF 5 0,84  dan  RF 6 0,9.  Hasil  nilai  RF  tersebut  dibandingkan dengan  nilai  RF  kuersetin  sebagai  pembanding.  Menurut  Hasan  et al. nilai  RF kuersetin  yaitu  pada  rentang  nilai  0,64-0,69 [13].  Dapat  dilihat  pada  gambar  1 bahwa  salah  satu  noda  yang  teridentifikasi  pada  ekstrak  metanol  daun  Jarak Pagar  dan  ekstrak  metanol  daun  Jarak  Merah  memiliki  nilai  RF  yang  masuk dalam  rentang  nilai  RF  kuersetin  yaitu  0,66.  Hal  ini  menandakan  bahwa  ekstrak metanol  daun  Jarak  Pagar  dan  ekstrak  metanol  daun  Jarak  Merah  mengandung senyawa  flavonoid.
Sebelum  dilakukan  pengukuran  nilai  absorbansi  larutan  standar  kuesetin, terlebih    dahulu    dilakukan    optimasi    panjang    gelombang    maksimum    terhadap larutan  standar  kuersetin  untuk  memperoleh  absorbansi  maksimal.  Penentuan panjang  gelombang  maksimum  untuk  memperoleh  kepekaan  dan  serapan  yang maksimal.  Pengukuran  pada  panjang  gelombang  maksimum  akan  memberikan perubahan  absorbansi  paling  besar  untuk  setiap  satuan  kadar,  sehingga  jika  akan dilakukan    pengukuran    ulang    dan    replikasi    akan    meminimalkan    terjadinya kesalahan  dalam  pengukuran.
Dalam  proses  penentuan  panjang  gelombang  maksimum,  larutan  baku kuersetin  yang  akan  diukur  dalam  spektrofotometri  UV-Vis  ditambahkan  dengan AlCl 3 dan  natrium  asetat  [14].  Penambahan  AlCl 3 untuk  membentuk  kompleks sehingga terjadi pergeseran panjang gelombang ke arah visible (tampak) yang ditandai dengan  larutan  menghasilkan  warna  kuning  sedangkan  natrium  asestat  untuk
mempertahankan  panjang  gelombang  tersebut  pada  daerah  visible.  Penentuan panjang gelombang maksimum diukur pada rentang panjang gelombang 400-450 nm untuk  melihat  gelombang  maksimum  dengan  absorbansi  tertinggi.  Hasil  optimasi gelombang maksimum larutan kuarsetin diperoleh 435 nm dengan absorbansi 0,498. Panjang gelombang maksimum yang diperoleh akan digunakan dalam pengukuran selanjutnya.
Tabel  3. Hasil  Pembacaan  Nilai  Absorbansi  Larutan  Baku  Kuersetin
Penentuan  panjang  gelombang  maksimum  diukur  pada  rentang  panjang gelombang  400-450  nm  untuk  melihat  gelombang  maksimum  dengan  absorbansi tertinggi.  Hasil  optimasi  gelombang  maksimum  larutan  kuersetin  diperoleh  435 nm  dengan  absorbansi  0,498.

## Gambar  2. Kurva  Kalibrasi  Larutan  Baku  Kuarsetin
Berdasarkan  data  hasil  kurva  baku  pembacaan  nilai  absorbansi  larutan standar  kuersetin  pada  konsentrasi  10  ppm,  20  ppm,  30  ppm,  40  ppm  dan  50 ppm  pada  gambar  2  diperoleh  persamaan  regresi  linier  pembanding  kuersetin yaitu  y  =  0,021  x – 0,0872  dengan  nilai  koefisien  korelasi  (R 2 )  =  0,9992.
Tabel  4. Kadar  Flavonoid  Daun  Jarak    Pagar  dan  daun  Jarak  Merah
y = 0,021x - 0,0872 R² = 0,9992 0 0,5 1 1,5 0 10 20 30 40 50 60 Ab so rb an si Konsentrasi (ppm) Kurva Baku Kuarsetin No Konsentrasi
(ppm) Absorbansi 1. 10 0,125 2. 20 0,322 3. 30 0,556 4. 40 0,746 5. 50 0,962 Ekstrak Berat Ekstrak (mg) Replikasi Nilai absorbansi Kadar (mg/ L) Persentase Kadar (%) Daun  Jarak Pagar 100 1 0,313 19,05 5,7171 2 0,315 19,15 5,7456 3 0,318 19,29 5,7885 Daun  Jarak Merah 100 1 0,418 24,05 7,2171 2 0,416 23,96 7,1883 3 0,417 24,00 7,2027
Berdasarkan  Tabel  3.  Kadar  senyawa  flavonoid  dalam  100  mg  ekstrak metanol  daun  Jarak  Pagar  ( Jatropha  curcas L.)  dengan  tiga  kali  replikasi  memiliki persentase  kadar  berturut-turut  5,7171%,  5,7456%  dan  5,7885%  b/v  dan  Daun Jarak  Merah  ( Jatropha  gossypiifolia L.)  memiliki  persentase  kadar  berturut-turut 7,2171%,  7,1883%  dan  7,2027%  b/v.
Berdasarkan    hasil    persentase    kadar    yang    didapatkan,    dimana    kadar flavonoid    total    pada    ekstrak    metanol    daun    Jarak    Merah    lebih    banyak dibandingkan  dengan  ekstrak  metanol  daun  Jarak  Pagar.  Hasil  yang  diperoleh dari  penetapan  kadar  flavonoid  total  pada  sampel  ekstrak  metanol  daun  Jarak Pagar  dan  ekstrak  metanol  daun  Jarak  dianalisis  dengan  menggunakan  analisis Statistik Independent  Sampel  T-test [15] . Independent  Sample  T-test merupakan  uji statistik  untuk  mengetahui  perbandingan  antara  rata-rata  dua  grup  data  yang tidak  berpasangan  atau  saling  bebas.  Prinsip  pengujian Independent  Sample  T-test yaitu  untuk  melihat  perbedaan  variasi  kedua  kelompok  data  sehingga  terlebih dahulu  dilihat  variansinya  sama  ataupun  berbeda.
Tabel  5. Hasil  Uji  Statistik  Independent  Sample  T-test Kelompok N Mean Std  Deviasi p-value Daun  Jarak  Pagar 3 5,75 0,036 0,000 Daun  Jarak  Merah 3 7,20 0,017
Hasil  statistik  menunjukkan  bahwa  flavonoid  total  pada  daun  Jarak  Pagar (Jatropha  curcas L. ) memiliki  nilai  rata-rata  sebesar  5,75%  b/v  dan  standar  deviasi sebesar  0,036.  Sedangkan  untuk  ekstrak  metanol  daun  Jarak  Merah  memiliki  nilai rata-rata  sebesar  7,20%  b/v  dan  standar  deviasi  sebesar  0,017.  Dari  hasil  tersebut juga  diperoleh  nilai  uji  statistik Independent  Sample  T-test sebesar  0,000.  Berdasarkan hasil  analisis  tersebut  dapat  disimpulkan  bahwa  terdapat  perbedaan  rata-rata  yang signifikan  antara  rata-rata  kadar  flavonoid  total  dari  daun  Jarak  Pagar  dengan daun  Jarak  Merah (p-value<0,  05).

## 4. Kesimpulan
Ekstrak  metanol  daun  Jarak  Pagar  ( Jatropha  curcas L.)  dan  ekstrak  metanol daun    Jarak    Merah (Jatropha    gossypiifolia L. ) mengandung    metabolit    sekunder flavonoid  berdasarkan  hasil  uji  Skrining  Fitokimia  dan  hasil  Kromatografi  Lapis Tipis  (KLT).  Kadar  rata-rata  flavonoid  total  yang  terdapat  pada  100  mg  ekstrak metanol  daun  Jarak  Pagar  ( Jatropha  curcas L.)  yaitu 5,75%  b/v dan  pada  ekstrak metanol  daun  Jarak  Merah (Jatropha  gossypiifolia L. ) yaitu 7,20%  b/v .  Hasil  ini berdasarkan  analisis  statistik  terdapat  perbedaan  yang  signifikan  terhadap  kadar rata-rata  flavonoid  total  pada  ekstrak  metanol  daun  Jarak  Pagar  ( Jatropha  curcas L.)  dan  ekstrak  metanol  daun  Jarak  Merah (Jatropha  gossypiifolia L. ). Didapatkan rata-rata  flavonoid  total  ekstrak  metanol  daun  Jarak  Merah (Jatropha  gossypiifolia L. ) lebih  banyak  dibandingkan  dengan  ekstrak  metanol  daun  Jarak  Pagar  ( Jatropha curcas L.) (p-value  <  0,  05).

## Referensi
[1] M. Yassir and Asnah, “Pemanfaatan Jenis Tumbuhan Obat Tradisional Di Desa Batu Hamparan Kabupaten Aceh Tenggara,” J. Biot. , vol. 6, no. 1, pp. 17 – 34, 2018.
[2] F. Sadik and M. Z. A. Disi, “Standarisasi Parameter Spesifik Ekstrak Etanol Daun Jarak Pagar ( Jatropha Curcas L ) sebagai Vasorelaxan,” J. Syifa Sci. Clin. Res. , vol. 5, no. 1, pp. 54 – 62, 2023.
[3] I. S. Ningsih, M. Chatri, and L. Advinda, “Flavonoid Active Compounds Found In Plants Senyawa Aktif Flavonoid yang Terdapat Pada Tumbuhan,” Serambi Biol. ,
vol. 8, no. 2, pp. 126 – 132, 2023.
[4] A. D. M. Nasution, U. Amna, and Halimatussakdiah, “Skrining Fitokimia Daun Jarak Pagar ( Jatropha curcas L .) dari Kota Langsa,” Quim. J. Kim. Sains dan Terap. , vol. 1, no. 1, pp. 11 – 15, 2019.
[5] D.  Lady  and  Y.  Handoyo,  “Pengaruh  Lama  Waktu  Maserasi  (  Perendaman  ) Terhadap Kekentalan Ekstrak Daun Sirih ( Piper Betle ),” J. Farm. Tinctura , vol. 2, no. 1, pp. 34 – 41, 2020.
[6] Susanty and F. Bachmid, “Perbandingan Metode Ekstraksi Maserasi dan Refluks terhadap Kadar Fenolik dari Ekstrak Tongkol Jagung (Zea mays L.),” KONVERSI , vol. 5, no. 2, pp. 87 – 93, 2016.
[7] F. I. Fajrin and I. Susila, “Uji Fitokimia Ekstrak Kulit Petai Menggunakan Metode Maserasi,” Pros.  Semin.  Nas.  Teknol.  dan  Sains ,  vol.  1,  no.  1,  pp.  455 – 462,  2019, [Online]. Available: https://journal.unusida.ac.id/index.php/snts/article/view/116
[8] A. Ni’ma and N. Y. Lindawati, “Analisis Kadar Total Flavonoid Ekstrak Etanol Daun Adas (Foeniculum Vulgare) Secara Spektrofotometri Visibel,” J. Farm. Sains dan  Prakt. ,  vol.  8,  no.  1,  pp.  1 – 11,  2022,  [Online].  Available: http://journal.unimma.ac.id/index.php/pharmacy
[9] S.  N.  Kautsari,  E.  D.  Purwakusumah,  and  W.  Nurcholis,  “Profil  Kromatografi Lapis Tipis Ekstrak Kunyit (Curcuma Longa Linn) Segar Dan Simplisia Dengan Variasi Metode Ekstraksi,” Media Farm. , vol. XVI, no. 1, pp. 65 – 70, 2020.
[10] H.  Hasan, A.  M.  A.  Suryadi,  S.  Bahri, and  N.  L.  Widiastuti,  “Penentuan  Kadar Flavonoid  Daun  Rumput  Knop  (  Hyptis  capitata  Jacq  .)  Menggunakan Spektrofotometri UV- Vis,” J. Syifa Sci. Clin. Res. , vol. 5, no. 2, pp. 200 – 211, 2023.
[11] Paisal,  N.  Satyahadewi,  and  H.  Perdana,  “Pengembangan  Aplikasi  Statistika Berbasis WEB Interaktif Untuk Analisis Uji- T,” Bul. Ilm. Math. Stat. dan Ter. , vol. 10, no. 3, pp. 331 – 340, 2021.
[12] R.  C.  Purnama,  A.  Primadiamanti,  and  F.  Yanti1,  “Uji  Adsorben  Limbah  Kulit Singkong  Terhadap  Ion  Logam  Pb  (Timbal)  Dengan  Metode  Spektrofotometri Serapan Atom,” J. Anal. Farm. , vol. 5, no. 2, pp. 127 – 134, 2020.
[13] E. N. Qomaliyah, N. Indriani, A. Rohma, and R. Islamiyati, “Skrining Fitokimia , Kadar Total Flavonoid dan Antioksidan Daun Cocor Bebek,” Curr. Biochem. , vol. 10, no. 1, pp. 1 – 10, 2023, [Online]. Available: http://journal.ipb.ac.id/index.php/cbj
[14] A. A. Styawan and G. Rohmanti, “Penetapan Kadar Flavonoid Metode AlCl3 Pada Ekstrak Metanol Bunga Telang (Clitoria ternatea L.),” J. Farm. Sains dan Prakt. , vol.
6, no. 2, pp. 134 – 141, 2020, [Online]. Available: http://journal.ummgl.ac.id/index.php/pharmacy%0A
[15] R.  L.  Vifta  and  Y.  D.  Advistasari,  “Skrining  Fitokimia  ,  Karakterisasi  ,  dan Penentuan  Kadar  Flavonoid  Total  Ekstrak  dan  Fraksi-Fraksi  Buah  Parijoto  ( Medinilla speciosa B .),” Pros. Semin. Nas. Unimus , vol. 1, pp. 8 – 14, 2018.