## Jurnal Ilmiah Biologi Eksperimen dan Keanekaragaman
Hayati (J-BEKH)
Volume 9, Issue 1, June 2022
Article History Received: January 28 2022 Accepted: May 1 2022
The Potential of Soil Bacterial Isolates from Liwa Botanical Gardens, West Lampung as Phosphate Solubilizing Bacteria (Potensi Isolat Bakteri Tanah Kebun Raya Liwa, Lampung Barat Sebagai Bakteri Pelarut Fosfat)
Christina Nugroho Ekowati*, Rina Shintia, Suratman, Bambang Irawan
Jurusan Biologi FMIPA Universitas Lampung
*Corresponding author: Abstrak Abstract
Tanah Kebun Raya Liwa  (KRL) Lampung Barat merupakan  tanah  jenis  laterit  yang  kandungan unsur  hara  dan  kesuburan  tanahnya  rendah, sehingga  tidak  dapat  mendukung  pertumbuhan tanaman  hias  yang  ada  secara  optimal.  Salah satu unsur hara yang penting dalam menunjang kesuburan  dan  pertumbuhan  tanaman  adalah fosfat.  Jumlah  fosfat  terlarut  dalam  tanah  yang dapat  dimanfaatkan  oleh  tanaman  sangat sedikit sehingga menyebabkan defisiensi. Bakteri  pelarut  fosfat  asli  dibutuhkan  untuk memenuhi  kebutuhan  fosfat  bagi  tanaman. Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk mendapatkan  isolat  bakteri  pelarut  fosfat  yang berpotensi  melarutkan  fosfat.  Penelitian  ini dilaksanakan  pada  bulan  Maret  sampai  Juni 2021  meliputi  isolasi  bakteri  pelarut  fosfat  dan pengujian  potensi  pelarutan  fosfat  pada  media pikovskaya  padat.  Potensi  bakteri  pelarut  fosfat ditentukan  berdasarkan  nilai  Indeks  Kelarutan Fosfat  (IPF)  tertinggi.  Hasil  isolasi  tanah  dari Kebun  Raya  Liwa  diperoleh  10  isolat  yang mampu  melarutkan  fosfat  dan  menghasilkan zona  bening.  Isolat  dengan  potensi  pelarutan fosfat  terbaik  adalah  isolat  C1  dan  C3  dengan nilai indeks pelarutan fosfat 2, 6 dan 2.
Kata kunci: KRL, fosfat, IPF
Liwa  Botanical  Gardens  (KRL)  soil,  West Lampung  is  a  lateritic  soil  type  nutrient  content and  low  soil  fertility,  so  it  can’t  support  the growth  of  existing  ornamental  plants  optimally. One  of  the  important  nutrients  in  supporting fertility  and  plant  growth  is  phosphate.  The amount  of  dissolved  phosphate  in  the  soil  that can be utilized by plants is very small, causing a deficiency.  Indigenous  phosphate  solubilizing bacteria  are  needed  to  meet  the  needs  of phosphate for plants. The  purpose of  this study was  to  obtain  isolates  of  phosphate  solubilizing bacteria  that  have  the  potential  to  dissolve phosphate.  This  research  was  carried  out  from March  to  June  2021  covering  the  isolation  of phosphate  solubilizing  bacteria  and  testing  the potential  for  dissolving  phosphate  on  solid pikovskaya media. Potential phosphate solubilizing  bacteria  were  determined  based  on the  highest  Phosphate  Solubility  Index  (IPF) value.  The  results  of  soil  isolation  from  Liwa Botanical Gardens obtained 10 isolates capable of  dissolving  phosphate  and  producing  a  clear zone.  Isolates  with  the  best  phosphate solubilizing  potential  were  isolates  C1  and  C3 with  phosphate  solubilizing  index  values  of  2,  6 and 2.
Keywords: KRL, phosphate, IPF
How to Cite : Ekowati, C. N., Shintia, R., Suratman, & Irawan, B. (2022). JUDUL BAHASA INGGRIS. Jurnal Ilmiah Biologi Eksperimen Dan Keanekaragaman Hayati (J-BEKH) , 9 (2), 83-89. https://doi.org/10.23960/jbekh.v9i1.203

## PENDAHULUAN
Kebun Raya Liwa memiliki banyak koleksi tanaman      hias      yang      perlu      didukung dengan  kondisi  tanah  yang  baik  untuk pertumbuhan tanaman tersebut.
Kesuburan  tanah  dan  Ketersedian  unsur hara  sangat  berperan  penting  dalam meningkatkan pertumbuhan dan perkembangan  tanaman.  Tanah  pada Kebun  Raya  Liwa  termasuk  jenis  tanah laterit  dengan  kandungan  unsur  hara rendah  sehingga  kurang    mendukung pertumbuhan tanaman. Salah satu indikator  kesuburan  tanah  adalah  jumlah fosfat terlarut yang tersedia.
Fosfat    merupakan  unsur  hara  kedua yang    penting  bagi  tanaman  setelah nitrogen. Fosfat berperan dalam pembentukan  asam  nukleat  dan  protein, serta  mampu  mengirim  dan  menyimpan energi  bagi  tanaman.  Adapun  ion  fosfat yang  dapat  dimanfaatkan  tanaman  dalam bentuk  H 2 PO 4 - dengan  Ph  <  5  atau dengan  pH  >  7.  Fosfat  di  dalam  tanah bersifat  sangat  reaktif  sehingga  mudah berikatan dengan ion lain di tanah seperti Al,  Fe,  dan  Ca  sehingga  tidak  dapat dimanfaatkan  tanaman  (Arisna  &  Asri, 2012).
Alternatif  peningkatan  jumlah  unsur  fosfat di  tanah  secara  mikrobiologi  dapat dilakukan  dengan  memanfaatkan  bakteri pelarut  fosfat.  Bakteri  pelarut  fosfat mampu meningkatkan jumlah fosfat terlarut dengan melepaskan asam organik dan  enzim  (fosfatase  dan  fitase)  yang dapat  dihasilkan  oleh  berbagai  jenis mikroorganisme  tanah  (Zulkifli et  al ., 2020).  Terdapat  beberapa  kelompok bakteri  pelarut  fosfat  yang  bersifat  sangat potensial,  yaitu  genus Pseudomonas, Bacillus, dan Rhizobium .  Bakteri  jenis Pseudomonas yang  umum  diketahui mampu  melarutkan  fosfat  terbaik,  seperti Pseudomonas fluorescens, Pseudomonas psychrotolerance, Pseudomonas cepaceae, Pseudomonas aeruginosa, dan
Pseudomonas oryzihabitans (Asril & Lisafitri, 2020).
Bakteri  pelarut  fosfat  dapat  ditemukan pada  berbagai  jenis  tanah  dan  Rhizosfer tanaman di daerah berbeda-beda. Penelitian  Oksana et  al .  (2020)  diperoleh 4  isolat  bakteri  dari  tanah  jenis  ultisol  di Kecamatan  Rumbai,  Pekanbaru  dengan kemampuan melarutkan fosfat yang teridentifikasi  sebagai  genus Klebsiella dan Acinetobacter. Penelitian  Larasati et al . (2018) berhasil memeperoleh 18 isolat bakteri  pelarut  fosfat  dari  tanah  gambut dengan 2 isolat yang potensial. Kemudian pada tanah mineral masam juga ditemukan  15  isolat  bakteri  dengan kemampuan melarutkan fosfat yang terikat pada  senyawa  alumunium  fosfat,  besi fosfat,  dan  kalsium  fosfa  (Nugraha et al ..2019)..
Tanah  pada  Kebun  Raya  Liwa  yang ditumbuhi oleh banyak tanaman memungkinkan  dapat  diperoleh  bakteri pelarut  fosfat.  Hal  ini  dikarenakan  bakteri pelarut fosfat dapat dijumpai pada daerah perakaran tanaman, Penelitian ini bertujuan untuk memperoleh isolat bakteri tanah  yang  potensial  sebagai  bakteri pelarut fosfat dari tanah Kebun Raya Liwa, Lampung Barat.

## METODE PENELITIAN
Penelitian ini dilakukan melalui dua tahap, yaitu pengambilan sampel di Kebun Raya Liwa  pada  bulan  juli  2020    dan pengujian potensi  isolat  dilakukan  di  laboratorium Mikrobiologi,  Fakultas  MIPA,  Universitas Lampung  pada  bulan  Januari  sampai dengan Maret 2021. Sampel yang diambil yaitu tanah tapak/datar, tanah tapak/datar aracecae ,  tanah  miring aracecae ,  tanah biopori, dan tanah serasah.
Alat  yang  digunakan,  yaitu  tabung  reaksi, pipet  volumetri,  cawan  petri,  bunsen, beaker,  erlenmeyer,  jarum  ose,  pipet tetes,  penggaris,  mikroskop,  gelas  objek, hot plate dan m magnetic stirrer, incubator,
oven,  dan  timbangan  digital.  Bahan  yang digunakan, yaitu aquades, garam fisiologis,  alkohol,  spiritus,  cat  gram, media  pikovskaya  (5  g  Ca 3 PO 4 ,  10  g glukosa,  0,2  g  Na  Cl,  0,2  g  KCl,  0,1  g MgSO 4 , 0,1 g FeSO 4 , 0,1 g MnSO 4 , 0,5 g NH 4 SO 4 ,  0,5  g Yeast  Extract ,  dan  1  L Aquades),  media Nutrient  Agar, media Nutrient  Broth, plastik  sampel,  spatula, sekop, alat tulis, dan kertas label.

## Pengambilan Sampel
Sampel  diambil  sebanyak  ±250  g  pada kedalaman 0 - 25 cm. sampel dimasukkan ke  dalam plastik  sampel  serta  diberi  label nama.  Sampel  kemudian  dibawa  ke Laboratorium Mikrobiologi, Fakultas MIPA, Universitas Lampung untuk diukur pH dan dilakukan  isolasi  serta  uji  potensi  bakteri pelarut fosfat (Oktaviani et al ., 2020).

## Isolasi dan Karakterisasi Bakteri Pelarut Fosfat
Sampel  tanah  ditimbang  masing-masing sebanyak  1  g  dan  dimasukkan  dalam tabung  reaksi  berisi  9  ml  garam  fisiologis sebagai pengenceran 10 -1 . Kemudian 1 ml suspensi  10 -1 dimasukkan  dalam  tabung kedua  sebagai  pengenceran  10 -2 ,  dan dilakukan hal yang sama hingga diperoleh pengenceran 10 -4 . 1 ml suspensi 10 -2 , 10 - 3 , dan 10 -4 masing-masing sampel diinokulasi  secara  taburan  ( pour  plate ) pada  media  pikovskaya  dan  diinkubasi selama  3  hari  pada  suhu  ruang  (Friska dkk., 2015). Koloni yang membentuk zona jernih  merupakan  koloni  bakteri  pelarut fosfat  Selanjutnya  koloni  yang  positif diinokulasikan  pada  tabung  miring  berisi media Nutrient  Agar (NA).  selanjutnya diamati karakter makroskopis koloni meliputi  bentuk,  tepi,  elevasi,  dan  warna koloni  bakteri,  serta  karakter  mikroskopis sel dengan pengecatan Gram.

## Uji Potensi Pelarutan Fosfat Secara
Kualitatif Kemampuan pelarutan fosfat secara kualitatif  ditentukan  dengan  menghitung nilai  Indeks  Pelarutan  Fosfat  (IPF).  Isolat bakteri  diinokulasi  pada  media  selektif pikovskaya  padat  menggunakan  metode titik,  selanjutnya  diinkubasi  pada  suhu ruang  selama  7  hari.  Zona  jernih  yang terbentuk  kemudian  diukur  nilai  Indeks Pelarutan  fosfat  menggunakan  rumus berikut (Asril & Lisafitri, 2020).
IPF = diameter  zona jernih − diameter koloni diameter koloni

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  pengukuran  pH  sampel  tanah menunjukkan  bahwa  sampel  tanah  dapat dikategorikan netral dengan kisaran pH 6- 7  (netral),  kondisi  pH  tanah  tersebut sangat  mempengaruhi  aktivitas  pelarutan fosfat  (Nasution  &  Idami,  2020).  Hasil isolasi  diperoleh  10    koloni  dengan karakteristik  makroskopis  berbeda  yang ditunjukkan  pada  Tabel  1,  dan  memiliki bentuk  morfologi  yang  dapat  dilihat  pada Gambar  1.    Jika  diamati  pada  isolat  TBP B3 terdapat lapisan lendir disekitar koloni. Lapisan lendir pada koloni bakteri merupakan material kapsul yang
disekresikan oleh bakteri untuk melindungi dari  lingkungan  yang  tidak  sesuai  atau berbahaya seperti kekeringan, menangkap nutrisi dan air, bertahan pada proses  sterilisasi  kimia  seperti  pemberian iodin  dan  klorin,  serta  untuk  menempel pada permukaan licin (Dewanti., 2016).
Bentuk  sel  bakteri  isolat  yang  diperoleh berbeda-beda  seperti  yang  ditunjukkan pada  Tabel  2.  Isolat  yang  diperoleh merupakan jenis yang berbeda.
Tabel 1. Karakter mofologi koloni bakteri pelarut fosfat
Kode Isolat Karakter Morfologi Koloni Bentuk Warna Tepi Elevasi TBP B3 Circuler Putih Entire Convex TBP2 B2 Ireguler Putih Transparan Undulate Flat
Kode Isolat Karakter Morfologi Koloni Bentuk Warna Tepi Elevasi TSR M Circuler Putih Tulang Undulate Raised TB2 S Circuler Putih Tulang Entire Raised TMA B1 Ireguler Putih Undulate Convex C1 Ireguler kuning Undulate Convex C2 Rhizoid Putih tulang Lobate Raised C3 Circuler Kuning Entire Convex M2 Circuler Putih Tulang Entire Convex M3 Ireguler Putih Susu Undulate Convex (a) (b) (c)                            (d)
(e)
(f) (g) (h) (i) (j)
Gambar 1. Karakter morfologi koloni bakteri; (a) TBP B3; (b) TBP2 B2; (c) TSR M; (d) TB2 S; (e) TMA B1; (f) C1; (g) C2; (h) C3; (i) M2; (j) M3.
Tabel 2. Karakter mikroskopis sel bakteri pelarut fosfat
Kode Isolat Karakter Mikroskopis Sel Sifar Gram Bentuk Sel TBP B3 Negatif Coccobacil TBP2 B2 Negatif Bacil TSR M Positif Coccobacil TB2 S Positif Coccobacil TMA B1 Positif Diplococcus
Kode Isolat Karakter Mikroskopis Sel Sifar Gram Bentuk Sel MS C1 Negatif Diplococcus MS C2 Positif Diplobacil MS C3 Negatif Bacil MS M2 Negatif Bacil MS M3 Negatif Diplococcus
Isolat  yang  berpotensi  sebagai  pelarut fosfat secara kualitatif ditunjukkan dengan terbentuknya  zona  jernih  yang  terbentuk disekitar  koloni  yang  ditumbuhkan  pada media  selektif  pikovskaya  seperti  yang ditunjukkan  pada  Gambar  2.  Isolat  yang sangat  potensial    sebagai  bakteri  pelarut fosfat  adalah  isolat  yang  memiliki  nilai Indeks  Pelarutan  Fosfat  (IPF)  tinggi dibandingkan dengan isolat lainnya. Pada penelitian ini sumber fosfat yang digunakan adalah trikalsium fosfat (Ca3(PO 4 ) 2 ).  Zona  jernih  yang  terbentuk menjadi  indikasi  pelarutan  fosfat  oleh bakteri pelarut fosfat.
Setiap  isolat  menunjukkkan  kemampuan yang  berbeda-beda  dalam  melarutkan fosfat  seperti  yang  ditunjukkan  dengan nilai  Indeks  Pelarutan  Fosfat  (IPF)  yang dapat dilihat pada Tabel 3.
Berdasarkan  Tabel  3.  Dapat  diketahui bahwa  isolat  MS  C1  dan  MS  C3  memiliki nilai  indeks  pelarutan  fosfat  tertinggi dengan  nilai  2.6  dan  2,  sedangkan  nilai indeks  pelarutan  fosfat  terendah  yaitu isolat  TB1 B1 dengan nilai 0.2. Besarnya nilai  indeks  pelarutan  fosfat  tersebut mengindikasikan bahwa isolat MS C1 dan MS  C3  memiliki  aktivitas  enzim  fosfatase dan  mampu  menghasilkan  asam  organik dalam  jumlah  yang  besar  (Larasati et  al .,
2018).  Nilai  indeks  pelarutan  fosfat  tidak dapat  menentukan  jumlah  konsentrasi fosfat  terlarut,  hanya  menunjukkan  nilai tinggi rendahnya kemampuan suatu isolat bakteri  dalam  melarutkan  fosfat(Arisna& Asri, 2012). Selain itu, nilai aktivitas enzim suatu  bakteri  yang  semakin  meningkat akan  menghasilkan  zona  jernih  yang semakin besar juga (Larasati et al ., 2018).
Tabel 3. Nilai Indeks Pelarutan Fosfat (IPF) isolat bakteri terpilih
Kode Isolat Diameter Zona Jernih (mm) Diameter Koloni (mm) Nilai IPF TBP B3 11 8 0.375 TBP2 B2 6.3 5 0.26 TSR M 7 5,6 0.25 TB2 S 6,3 4,3 0.465 TMA B1 7 5,6 0.25 MS C1 11 3 2.6 MS C2 9.3 9 0.5 MS C3 9 3 2 MS M2 8 4.6 0.74 MS M3 7 4.8 0.458 Setiap isolat memiliki kemampuan melarutkan  fosfat  berbeda-beda  sehingga nilai  Indeks  pelarutan  fosfat  nya  juga berbeda-beda  yang  dipengaruhi  oleh kemampuan  masing-masing  isolat  dalam menghasilkan  asam  organik  (Oksanai et al .,  2020).  Zona  jernih  disekitar  koloni
terbentuk mengindikasikan adanya kemampuan  pelarutan  fosfat  oleh  bakteri. Kemampuan tersebut berkaitan erat dengan  produksi  asam  organik  oleh bakteri  seperti  format,  asetat,  propionat, laktat,  glikolat,  fumarat,  serta  asam suksinat  (Nasution  &  Idami,  2020).  Selain
itu,  zona  jernih  menunjukkan  adanya perubahan  fosfat  dari  tidak  terlarut menjadi  terlarut  akibat  aktivitas  enzim fosfatase  oleh  bakteri.  Enzim  fosfatase adalah  kelompok  enzim  katalis  reaksi mineralisasi  hidrolitik  secara  enzimatik dengan  melepaskan  fosfat  tidak  terlarut menjadi terlarut. Terbentuknya zona jernih disekitar koloni juga dipengaruhi penurunan  pH  media  (Larasati et  al ., 2018).  Selain  itu,  juga  dihasilkan  enzim phytase  yang  dapat  memineralisasi  P organik  pada  tanah  melalui  degradasi phytate sehingga  P  dilepaskan,  juga enzim phosphonatase dan C-P lyase yang menghidrolisis ikatan
C-P
dari organophosponat  sehingga  P  terlepas (Alam & Zulaika, 2020).

## KESIMPULAN
Diperoleh  11  isolat  bakteri  pelarut  fosfat dari  tanah  Kebun  Raya  Liwa,  Lampung Barat  dengan  kemampuan  melarutkan fosfat berbeda-beda. Isolat yang berpotensi  sebagai  pelarut  fosfat  yang paling  potensial  dengan  nilai  Indeks Pelarutan  Fosfat  (IPF)  tertinggi,  yaitu isolat MS C1 dan MS C3 dengan nilai IPF yaitu  2.6  dan  2  yang  memiliki  bentuk  sel diplococcus  dan  bacil  bersifat  gram negatif.

## DAFTAR PUSTAKA
Arisna,  W.,  dan    Asri,  M.  T.  (2012).
Potensi  Isolat  Bakteri  Endofit  Akar Tanaman  Bawang  Merah  ( Allium ascalonium )  sebagai  Bakteri  Pelarut Fosfat . Lentera Bio . 8:3 260-267.
Asril,  M.,  dan  Lisafitri,  Y.  (2020).  Isolasi
Bakteri Pelarut Fosfat Genus Pseudomonas  dari  Tanah  Masam Bekas  Areal  Perkebunan  Karet  di Kawasan Institut Teknologi
Sumatera. Jurnal Teknologi Lingkungan , 21:1 40 –48.
Nugraha,  G.  B.  A.,  Wandri,  R.,  dan Asmono,  D.  (2019).  Solubilisasi Fosfat  Anorganik  Oleh Burkholderia spp.  Pada  Rizodfer  Kelapa  Sawit ( Elaeis  guineensis Jacq.)  di  Tanah
Mineral Masam. Jurnal Lahan Suboptimal . 8:1 86-93.
Friska,  W.,  Khotimah,  S.,  dan  Linda,  R.
(2015).  Karakteristik  Bakteri  Pelarut Fosfat  Pada  Tingkat  Kematangan Gambut  di  Kawasan  Hutan  Lindung
Gunung Ambawang Kabupaten Kubu  Raya. Jurnal  Protobiont . 4:1 197-202.
Nasution,  R.  A.,  dan  Idami,  Z.  (2020). Identifikasi  Bakteri  Pelarut  Posfat Pada  Pada  Rizosfer  Ubi  Jalar Varietas  Rancing  Selama  Fase
Pertumbuhan. KLOROFIL:  Jurnal Ilmu Biologi dan Terapan . 4:1 11-16. Dewanti, A. W., Pratiwi, E., dan Nuraini, Y. (2016). Viabilitas dan Aktivitas
Enzim  Fosfatase    Serta  Produksi Asam Organik Bakteri Pelarut Fosfat
Pada Beberapa Suhu simpan.
Jurnal  Tanah  dan  Sumberdaya
Lahan . 3:1 311-318.
Larasati,  E.  D.,  Rukmini,  M.  G.  I., Kusdiyanti, E., dan Ginting, R. C. B. (2018). Isolasi dan Identifikasi Bakteri  Pelarut  Fosfat  dari  Tanah Gambut. 20:1 1-8.
Oksana,  Irfan,  M.,  Fianiray,  A.  R.,  dan Zam,  S.  I.  (2020).  Isolasi  dan Identifikasi  Bakteri  Pelarut  Fosfat pada  Tanah  Ultisol  di  Kecamatan Rumbai,  Pekanbaru. Agrotechnologi Research Journal . 4:1 22-25.
Alam,  H.  E.  Y.,  dan  Zulaika,  E.  (2020).
Studi Literatur Potensi BAkteri Endogenik  Lahan  Gambut  Sebagai Biofertilizer untuk Memperbaiki
Nutrisi Lahan. Jurnal Sains dan Seni ITS . 9:2 2337-3520.