## ANALISIS KADAR TOTAL METABOLIT SEKUNDER EKSTRAK ETANOL DAUN
TAMOENJU ( Hibiscus surattensis L . )
[Analyze Total Level of Secondary Metabolites from Ethanol Extracts of “ Tamoenju ” Leaves ( Hibiscus Surattensis L.) ]
Astrid Natalia Alasa 1* ,Syariful Anam 1 , Jamaluddin 1
1) Jurusan Farmasi, Fakultas MIPA, Universitas Tadulako, Palu Jl. Soekarno Hatta Km.9, Kampus Bumi Tadulako Tondo Palu, Telp. 0451- 422611
*)Coresponding author: Astrdnathalya@gmail.com (hp: +62 821-8869-5868)
Diterima  1 Mei 2017, Disetujui 8 Oktober 2017

## ABSTRACT
Tamoenju  ( Hibiscus  surattensis L.)  leaves  are  included  in the malvaceae family  which  grows  in  the plateau  and  are  known  to  have  the  antidiabetic  activity  that  the  standardization  of  the  extract  is needed to be conducted. The research aimed to discover the total level of secondary metabolites from ethanol extract. The extraction of Tamoenju leaves through maceration method with 96% ethanol was done to obtain the filtrate.  The filtrate obtained was concentrated by  using rotary  evaporator at 40°C until  the  concentrated  extract  was  obtained.  The  extract  gained  was  then  tested  in  a  qualitative  way with  Alkaloid,  Flavonoid,  Saponin,  and  Tannin  tests  by  using  the  suitable  reagent  for  the  test parameters. While in the quantitative test the method used was Gravimetric analysis on alkaloid and Saponin compounds, Permanganometry on Tannin compound, and UV-Visible Spectrophotometry on Flavonoid.  The  qualitative  test  results  reveal  that  Tamoenju  is  positive  for  containing  Alkaloid  which was  characterized  by  the  presence  of  orange  sediment,  Flavonoid  was  characterized  by  the  orange formation,  Tannin  was  characterized  by  the  dark  blue  and  Saponin  was  characterized  by  the  stable foam.  The  quantitative  test  results  are  Alkaloid  by  305.181  g/g,  Saponin  by  371.112  g/g,  Tannin  by 55.417 g/g and Flavonoid by 14.999 mg/100 g.
Keywords : Hibiscus surattensis L. , secondary metabolites, standardization

## ABSTRAK
Daun  Tamoenju  ( Hibiscus  surattensis L.)  merupakan  daun  dengan  family malvaceae yang  tumbuh didataran  tinggi  yang  diketahui  memiliki  aktivitas  sebagai  anti-diabetes    sehingga  perlu  dilakukan standardisasi  pada  ekstraknya.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  untuk  mengetahui  kadar  total  metabolit sekunder dari ekstrak etanol. Ektraksi daun Tamoenju menggunakan metode maserasi dengan pelarut etanol  96  %  untuk  mendapatkan  filtrat.  Filtrat  yang  diperoleh  dipekatkan  menggunakan rotary evaporator pada  suhu  40°C  hingga  diperoleh  ekstrak  pekat.  Ekstrak  yang  diperoleh  di  uji  kualitatif dengan uji Alkaloid,Flavonoid, Saponin dan Tanin dengan menggunakan pereaksi yang sesuai dengan parameter  uji.  Sedangkan  untuk  uji  Kuantitatif  pada  senyawa  Alkaloid  dan  Saponin  menggunakan metode  Gravimetri,  senyawa  Tanin  menggunakan  metode  Permanganometri  dan  Flavonoid menggunakan  metode  Spektrofotometri  UV-Visible.  Hasil  uji  kualitatif  menunjukkan  daun  Tamoenju positif  mengandung  senyawa  Alkaloid  ditaindai  dengan  adanya  endapan orange ,  Flavonoid  ditandai dengan  terbentuknya  warna  jingga, Tanin  ditandai  dengan  warna  biru  tua  dan  Saponin  adanya  busa yang  stabil.  Hasil  Uji  kuantitatif  Alkaloid  sebesar  305,181  g/g,  Saponin  sebesar  371,112  g/g,Tanin sebesar 55,417 g/g dan Flavonoid sebesar 14,999 mg/100 g.
Kata Kunci : Hibiscus surattensis L.,   Metabolit Sekunder, Standardisasi

## LATAR BELAKANG
Obat  dari  tumbuhan  telah  lama digunakan  dalam  kehidupan  masyarakat Indonesia  merupakan  negara  yang  kaya biodiversitas. Kecenderungan masyarakat untuk  kembali  ke  alam  menjadikan tumbuhan memiliki peran penting sebagai sumber  obat  dan  bahkan  berpotensi memiliki  nilai  ekonomi  tinggi.  Namun demikian, permaslahan yang harus menjadi  perhatian  pemerintah  saat  ini adalah  bagaimana  cara  menjamin  obat yang  berbasis  herbal  memiliki  mutu  yang terukur dan mampu mendukung kesehatan  serta  terjamin  keamanannya. Dengan demikian, prospek dan pekerjaan standardisasi bahan obat alam adalah  isu dan  tantangan  besar  hingga  20  tahun mendatang.  Mengingat  obat  herbal  dari berbagai tanaman memiliki peranan penting dalam bidang kesehatan sehingga  perlu  dilakukan  standardisasi, dalam  hal  ini  terkait  dengan  aspek parameter  spesifik  dan  berfokus  pada senyawa yang bertanggung jawab terhadap aktivitas  farmakologis atau senyawa  metabolit  sekunder    suatu tumbuhan (Saifudin dkk, 2011).
Senyawa metabolit sekunder seringkali  dihubungkan  dengan  aktivitas farmakologi tertentu. Terlebih jika senyawa  kimiawi  yang  bertanggungjawab terhadap  khasiat  belum  diketahui.  Telah banyak dipublikasikan para peneliti herbal medisin  bahwa  senyawa-senyawa  alami di  dalam  tumbuhan/ekstrak  seringkali
tidak  bekerja  sendirian  namun  banyak diantaranya bersifat bioaktif atau sinergisme dan seringkali golongan metabolit  sekunder  tertentu  mendukung aktivitas senyawa utama. Sehingga dengan  mengandalkan  analisis  pada  1 senyawa  target  tunggal  tidaklah  cukup. Untuk  itu  pendekatan  terhadap  kadar golongan  metabolit  sekunder  tertentu dilakukan (Saifudin,dkk, 2011).
Tanaman  berkhasiat    di  Indonesia banyak  digunakan  untuk  pengobatan penyakit secara tradisional dan merupakan  obat  alternatif  yang  telah dimanfaatkan  oleh  nenek  moyang  salah satu diantaranya adalah Hibiscus surattensis L atau  yang  biasa  disebut Tamoenju oleh masyarakat Desa Kapiroe,
Kecamatan Palolo, Kabupaten Sigi Biromaru, Provinsi Sulawesi Tengah.
Masyarakat  Desa  Kapiroe  saat  ini masih memanfaatkan tanaman obat sebagai  alternatif utama pengobatan  bagi beberapa  penyakit  termasuk  diabetes dengan    memanfaatkan  daun  Tamoenju ( Hibiscus  surattensis L)  yang  banyak terdapat  di  hutan.  Tanaman  yang  dikenal dengan  nama  Tamoenju  di  Desa  Kapiroe ini telah dikenal sebagai obat antidiabetes secara turun-temurun oleh masyarakat.
Revina  (2014)  menyatakan  bahwa di  dalam  ekstrak Hibiscus  surattensis L terdapat  beberapa  metabolit  sekunder yang berpotensi sebagai senyawa antidiabetes.  Telah  diuji  secara  kualitatif ekstrak Hibiscus  surattensis L  dan
didapatkan  ada  4  senyawa  metabolit sekunder yang positif terdeteksi, diantaranya  senyawa  flavonoid,  saponin, alkaloid dan tanin. Oleh sebab itu, peneliti tertarik untuk melakukan penelitian analisis  kadar  total  metabolit  sekunder ekstrak etanol Hibiscus surattensis L yang berpotensi sebagai antidiabetes.
Dengan adanya penelitian ini, diharapkan dapat menambah data pemanfaatan  tanaman  obat  yang  secara empiris  digunakan  masyarakat  secara turun-temurun,  sekaligus  sebagai  wujud pelestarian tanaman obat yang bersumber  dari local  wisdom masyarakat Sulawesi Tengah.

## METODE PENELITIAN Bahan dan Peralatan
Alat-alat  yang  digunakan  dalam penelitian    ini  adalah,  gelas  kimia (PYREX®),  gelas  ukur  (PYREX®),  labu
ukur (PYREX®), neraca Ohaus (PioneerTM), hotplate ,  batang  pengaduk, rotavapor  (Eyela  OSB  2100),  corong kaca (PYREX®),  wadah  maserasi,  gunting, buret, statif dan klem, buret,
Spektrofotometer
UV-VIS,
Toples, magnetic stirrer.
Bahan yang digunakan yaitu Ekstrak etanol Hibiscus  surattensis L,  kertas saring,  Sitroborat,  kuersetin ,  metanol, akuabides  ,  natrium  nitrat  (NaNO 2 ), aluminium klorida (AlCl 3 ) , Natrium hidroksida (NaOH) 4%, mono kalium fosfat (KH 2 PO 4 )  0,2  M  ,  natrium  hidroksida (NaOH)  0,2  N,  Reagen  Mayer,  Reagen
Dragendorff,  Natrium  sitrat  (C 6 H 5 Na 3 O 7 ), Petroleum  eter,  Dietil  eter,  Etil  asetat, asam asetat 10% (CH 3 COOH), ammonium hidroksida  (NH 4 OH),  kalium  permanganat (KMnO 4 ).

## Prosedur Penelitian

## Pengambilan Bahan Uji
Bahan  uji  daun Hibiscus  surattensis diambil  di  Desa  Kapiroe,  Kecamatan Palolo, Kabupaten Sigi Biromaru.

## Pengolahan Bahan Uji
Bahan  uji  daun  yang  digunakan adalah daun muda, yaitu daun yang kelima dari  pucuk  hingga  ke  bawah  yang  masih hijau dan tidak terlalu tua. Setelah disortasi dalam  keadaan  segar,  daun  dicuci  bersih kemudian diangin-anginkan sampai kering. Daun  selanjutnya  dihaluskan  dengan menggunakan  blender  kemudian  diayak dengan  menggunakan  ayakan  mesh  40 agar diperoleh serbuk halus.
Proses Ekstraksi
Daun Hibiscus surattensis yang telah dikeringkan selanjutnya diekstraksi dengan  menggunakan  metode  maserasi. Pelarut  yang  digunakan  pada  proses ekstraksi  ini  adalah  etanol  96%.  Serbuk simplisia  daun  sebanyak  165  gram dimasukkan  ke  dalam  wadah  maserasi yang steril selanjutnya dimasukkan penyari etanol  96%  1,5  liter  sampai  serbuk simplisia  terendam  aduk  agar  sampel menyatu dengan penyari kemudian ditutup wadah  sampel  dan  bungkus  permukaan wadah  sampel  dengan  menggunakan aluminium  foil.  Selanjutnya  disimpan  pada
tempat yang tidak terkena cahaya langsung pada temperatur kamar yaitu 20- 25ºC. Setiap 24 jam sekali,sampel diaduk- aduk  sehingga  bagian  bawah  dan  bagian atas  tetap  homogen.  Ekstrak  kental  cair yang diperoleh dipekatkan dengan menggunakan  rotavapor  hingga  menjadi ekstrak  kental.  Kemudian  ekstrak  kental ditimbang dan dihitung rendamennya.
Rendamen = ( ) ( )
Uji Fitokimia
a.  Flavonoid
Ditimbang 0,1 g ekstrak ditambahkan  0,2  g  serbuk  Mg,  lalu ditambahkan  5  mL  asam  klorida  pekat. Apabila  terbentuk  warna  jingga,  merah atau kuning menunjukkan adanya flavonoid (Harbone, 1987).
b.  Saponin
Saponin  dapat  dideteksi  dengan  uji busa  dalam  air  panas.  Busa  yang  stabil akan  terus  terlihat  selama  5  menit  dan tidak hilang pada penambahan 1 tetes HCl 2 N menunjukkan adanya saponin (Harbone, 1987).
c.  Alkaloid
Larutkan  50  mg  ekstrak  dengan beberapa  mL  HCl  dan  saring.  Kemudian filtrat  diuji  dengan  menambahkan  satu atau  dua  tetes  pereaksi  Mayer,  Wagner dan Dragendorff dalam tabung reaksi yang berbeda.  Reaksi  positif  ditandai  dengan adanya  endapan  putih  atau  kekuningan pada  pereaksi  Mayer,  munculnya  warna merah-kehitaman  pada  pereaksi  Wagner, dan adanya endapan orange pada
pereaksi Dragendorff (Raaman, 2006).

## d.  Tanin
Ditimbang 0,1 g ekstrak ditambahkan 10  mL  akuades,  disaring  dan  filtratnya ditambahkan  reagen  besi  (III)  klorida (FeCl 3 ) 1%  sebanyak  5  mL.  Warna  biru tua  atau  hitam  menunjukkan  adanya  tanin (Harbone, 1987).

## Uji Kadar Total Metabolit Sekunder
a.  Kadar Flavonoid Total
Ditimbang  200  mg  ekstrak  sampel, yang  dilarutkan  dalam  1  mL  etanol, kemudian  di buat pengenceran dengan  3 replikasi.  Total  flavonoid  dari  ekstrak etanol dihitung berdasarkan metode kolorimetri  yang  dikerjakan  oleh  Chang et al. (2002).  Setiap  0,2  mL  larutan  sampel ditambahkan  3,7  mL  etanol  95  %,  0,1  mL AlCl 3 10 %, 0,1 mL kalium asetat 1 M dan di  tambahkan  akuades  sampai  5  mL,  lalu dicampur  hingga  homogen  dan  didiamkan selama  30  menit.  Kemudian  diukur absorbansinya  pada  panjang  gelombang 437  nm.  Kuersetin  digunakan  sebagai kurva  kalibrasi  dengan  konsentrasi  100 – 400 μg/mL. Total flavonoid sampel dihitung ekuivalen dengan jumlah (g) kuersetin/100 g  sampel.  Data  dibuat  tiga  replikasi (Chang, 2002).
y=ax+b
Keterangan : y = Nilai Absorbansi x = Kadar Flavonoid a,b = Konstanta
b.  Kadar Alkaloid Total
Sampel  yang  berupa  ekstrak  kental ditimbang secara seksama sebanyak 2,5 g dan dilarutkan dengan 50 mL larutan asam asetat  10%  (dalam  etanol).    Larutan dikocok  dengan magnetic  stirrer selama  4 jam,  kemudian  disaring.  Filtrat  kemudian dievaporasi.  Kemudian  ditetesi  dengan ammonium hidroksida hingga terjadi endapan  alkaloid.  Timbang  dahulu  kertas saring yang akan digunakan untuk menyaring  endapan.  Kemudian  endapan disaring  dan  dicuci  dengan  menggunakan larutan  ammonium  hidroksida  1%.  Kertas saring yang mengandung endapan dikeringkan  dalam  oven  pada  suhu  60 0 C selama 30 menit. Setelah dingin, endapan ditimbang  hingga  didapatkan  bobot  yang konstan.  Rendemen  alkaloid  ditetapkan dari  presentasi  bobot  endapan  alkaloid yang diperoleh terhadap bobot penimbangan  awal  sampel.  Pengujian diulang sebanyak 3 kali (Saifudin, 2011).
Analisa  data  dilakukan  secara univariat  dimana  kadar  alkaloid  yang dihitung menggunakan rumus :
% kadar =
Keterangan : X1 = bobot kertas saring (g) X2= bobot kertas saring + endapan saponin (g) A = bobot ekstrak etanol Hibiscus surattensis L

## c.  Penetapan Kadar Saponin Total
Ditimbang  1,25  g  ekstrak  kemudian di  refluks  dengan  50  ml  Petroleum  Eter pada  suhu  60º-80ºC  selama  30  menit Setelah  dingin  larutan  petroleum  eter dibuang dan  residu yang tertinggal dilarutkan dalam 50 ml etil asetat. Larutan
dipindahkan  ke  corong  pisah  kemudian dipisahkan larutan etil asetat. Residu yang tertinggal  dilarutkan  dengan  n-butanol sebanyak 3 kali masing-masing dengan 50 ml. seluruh larutan butanolik dicampur dan diuapkan dengan rotavapor. Sisa penguapan dilarutkan dengan methanol 10 ml  kemudian  larutan  ini  diteteskan  ke dalam  50  ml  dietil  eter  sambil  diaduk. Endapan  yang  terbentuk  dalam  campuran dituang  pada  kertas  saring  yang  telah diketahui  bobotnya.  Endapan  di  atas kertas  saring  kemudian  ditimbang  sampai bobot  tetap.  Selisih  bobot  kertas  sa  ring sebelum dan sesudah penyaringan ditetapkan sebagai bobot saponin (Dumanauw, Wullur & Poli Anindita, 2015)
Analisa  data  dilakukan  secara univariat  dimana  kadar  saponin  yang dihitung menggunakan rumus :
% kadar =
Keterangan : X1 = bobot kertas saring (g)
X2= bobot kertas saring + endapan saponin (g) A = bobot ekstrak etanol Hibiscus surattensis L

## d.  Penetapan Kadar Tanin Total
Lebih  kurang  2  g  ekstrak  yang ditimbang  saksama  panaskan  dengan  50 mL air mendidih di atas tangas air selama 30  menit  sambil  diaduk.  Diamkan  selama beberapa  menit  lalu  tuangkan  melalui segumpal  kapas  ke  dalam  labu  takar  250 mL.  Sari  sisa  dengan  air  mendidih,  saring larutan  ke  dalam  labu  takar  yang  sama. Ulangi  penyarian  beberapa  kali  hingga larutan  bila  direaksikan  dengan  besi  (III) ammonium sulfat tidak menunjukkan
adanya  tanin.    Dinginkan  cairan  dan tambahkan  air  secukupnya  hingga  250 mL.  Pipet  25  mL  larutan  ke  dalam  labu 1000  mL,  ditambah  750  ml  akuades  , titrasi dengan kalium  permanganat 0,1125 N  hingga  larutan  berwarna  pink  violet.  1 mL  kalium  permanganat  0,1125  N  setara dengan  0,004157  g  tanin.  Lakukan percobaan blanko (Anonim, 2000).
% kadar (     )
Keterangan : V2 = volume titran (mL) V1 = volume blanko (mL) BE = Berat Ekivalen (0,004157 g)

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Identifikasi  tanaman  Tamoenju  di UPT.  Sumber  Daya  Hayati  Sulawesi, Universitas  Tadulako  menyatakan  bahwa tanaman yang digunakan dalam penelitian ini adalah spesies Hibiscus surattensis L.
Tabel 1 Hasil Penapisan Fitokimia
Keterangan : (+) = Ekstrak  mengandung  golongan  senyawa yang diuji.
(-) = Ekstrak  tidak  mengandung  golongan senyawa yang duji.
Tabel 2 Kadar Alkaloid Total
Tabel  3  Hasil  Penetapan  Normalitas KMnO 4
Tabel 4 Kadar Tanin Total
Tabel 5 Kadar Total Saponin N o Perlakuan Sampel Hasil pengamata
n Ket
1 Alkaloid + HCl + pereaksi
Dragendorf f Alkaloid Terbentuk endapan cokelat + + +
2 Flavonoid + Mg + HCl Flavonoi d Larutan berwarna Merah Bata atau kuning kecoklatan + + + 3 Saponin + HCl Saponin Terbentuk Busa yang stabil + + + 4 Tanin +FeCl 3 Tanin Biru Tua Kehitaman + + +
Perlakuan Bobot Ekstrak (g) Bobot Alkaloid (g) Kadar Alkaloid (%) I 2,5211 0,3874 15,350 0 II 2,5113 0,3883 15,460 0 III 2,5008 0,3796 15,170 0 Rata-rata 15,320 0 Volume Asam Oksalat (mL) Normalitas Asam Oksalat (N) Volume KMnO 4 (mL) Normalitas KMnO 4 (N) 10,0000 0,1100 9,7000
0,1125
9,6000 10,0000 Rata-rata Volume KMnO 4 9,7700 Bobot serbuk (g) Volume Titran (mL) Volume Blanko (mL) Kadar Tanin (%) 2,0027 8,7000 2,6000 0,1424 2,0032 8,9000 2,6000 0,1471 2,0025 8,6000 2,6000 0,1401 Kadar Tanin Rata-rata (%) 0,1432 Perlakuan Bobot Ekstrak (g) Bobot Saponin (g) Kadar Saponin (%) I 1,2516 0,0812 6,4800 II 1,2588 0,0834 6,6200 III 1,2563 0,0864 6,8700 Rata-rata 6,6500

## Tabel 6 Kadar total Flavonoid
Sampel Replikasi Absorbansi Berat sampel (g) Konsentrasi (µg/mL) Persentase(µg/gram) I F1 0,3124 0,2 298,4000 7460,0000 F2 0,3066 292,6000 7315,0000 F3 0,3221 308,1000 7702,5000 II F1 0,3105 296,5000 7412,5000 F2 0,3137 299,7000 7492,5000 F3 0,3070 293,0000 7325,0000 II F1 0,3091 295,1000 7377,5000 F2 0,3217 307,7000 7692,5000 F3 0,3226 308,6000 7715,0000 Pengambilan sampel daun Tamoenju ( Hibiscus surattensis
L)
dilakukan di Kecamatan Palolo Kabupaten Sigi Biromaru, tepatnya pada desa Kapiroe.  Sampel  yang  didapatkan  hanya terdapat  pada  tempat  tertentu  saja , salah satunya  berada  di  desa  Kapiroe.  Sampel yang  diambil  kemudian  di  sortasi  basah yang bertujuan untuk memisahkan simplisia  dari  kotoran  dan  bahan-bahan asing  lainnya  sperti  tanah,  kerikil,  dan rumput. Simplisa dicuci untuk menghilangkan tanah dan pengotor lainnya  yang  melekat  pada  simplisia. Proses  selanjutnya  dilakukan    perajangan pada  simplisia  untuk  memudahkan  proses pengeringan  dan  penggilingan  simplisia. Proses  selanjutnya  simplisia  dikeringkan untuk  mendapatkan  simplisia  yang  tidak mudah  rusak  sehingga  dapat  disimpan untuk waktu yang lama. Proses selanjutnya simplisia disortasi kering untuk memisahkan  dari  kotoran  dan  benda- benda  asing  yang  masih  tertinggal  pada simplisia  kering  dan  kemudian  simplisia
diserbukkan.  Proses  selanjutnya  simplisia di ekstraksi dengan menggunakan metode maserasi  dimana  menggunakan  pelarut etanol  96  %.  Pelarut  organik  selain  etanol memiliki  potensi  toksisitas  yang  lebih tinggi, kecuali dinyatakan lain pelarut yang diperbolehkan  adalah  etanol  (Anonim, 1995). Di dapatkan ekstrak cair, kemudian ekstrak cair diuapkan menggunakan rotary vacuum untuk mendapatkan ekstrak kental.
Terlebih dahulu dilakukan uji pendahuluan  yaitu  penetapan  secara kualitatif  metabolit  sekunder  pada  ekstrak kental.  Pengujian  ini  bertujuan  untuk mengetahui ada tidaknya metabolit sekunder yang terkandung didalam ekstrak  tanaman Hibiscus  surattensis L tersebut.    Didapatkan  ada  4  senyawa metabolit  sekunder  yang  positif  terdeteksi, diantaranya  senyawa  flavonoid,  saponin, alkaloid dan tanin.
Penentuan  kadar  total  flavonoid dilakukan  dengan  menggunakan  metode spektrofotometri.  Metode  spektrofotometri
UV-Vis  digunakan  untuk  menetapkan kadar  senyawa  obat  dalam  jumlah  yang cukup  banyak  (Gandjar  dan  Rohman, 2008).  Spektroskopi  serapan  ultraviolet dan serapan sinar tampak merupakan cara tunggal yang paling berguna untuk menganalisis  flavonoid  (Markham,  1988). Kuersetin digunakan sebagai baku standar dengan  konsentrasi  100 –400  ppm,  pada panjang gelombang 437 nm.
Sebelum dilakukan pemeriksaan kadar  flavonoid  total  dalam  sampel, terlebih  dahulu  dibuat  kurva  baku  larutan standar  kuersetin  terhadap  absorbansi. Diperoleh  persamaan  regresi  Y=  0,001x  + 0,014 dan harga koefisien korelasi (r) yaitu 0,997.  Berdasarkan  persamaan  regresi tersebut,  dilakukan  penghitungan  kadar flavonoid total pada setiap sampel dengan tiga  kali  replikasi  ,  diperoleh  persentase kadar  untuk  ekstrak  etanol  daun Hibiscus surattensis L  adalah  14,999  mg/100  g. Menurut Krishnaveni (2014) kadar Flavonoid  pada  tanaman  Pungpulutan ( Urena  lobata )  adalah  1,15  % ⁄ sedangkan menurut Pranowo (2015) kadar flavonoid total pada tanaman Gedi ( Abelmoschus  manihot L.)  adalah  37,29 mg/g,  sehingga  dapat  disimpulkan  kadar flavoinoid pada tanaman tamoenju ( Hibiscus  surattensis L)  lebih  tiggi  dari pada tanaman pungpulutan ( Urena lobata ) dan  lebih  rendah  daripada  tanaman  Gedi ( Abelmoschus manihot L.).
Penentuan  kadar  alkaloid  total  dan kadar  saponin  total  digunakan  metode gravimetri  yaitu  suatu  metode  analisis
yang  didasarkan  pada  pengukuran  berat, yang melibatkan: pembentukan, pengukuran  berat  ataupun  isolasi  dari suatu endapan. Metode ini sangat sederhana  dan  mudah  dilakukan,  juga hasil yang didapatkan spesifik dan akurat.
Didapatkan  15,32  %  atau  305,181 g/gram  pada  penentuan  kadar  total alkaloid daun Tamoenju. Menurut Murrukmihadi  (2013)  kadar  alkaloid  pada tanaman Kembang Sepatu ( Hibiscus rosa- sinensis L.)  adalah  2,35  ±  0,67  % ,sehingga  dapat  disimpulkan  lebih  rending dibandingkan dengan kadar alkaloid tanaman  Tamoenju  ( Hibiscus  surattensis L).  Hasil  penentuan  kadar  total  saponin daun  Tamoenju  ( Hibiscus  surattensis L) adalah  6,65  %  atau  371,112  g/gram. Menurut  Putra  (2011)  kandungan  kadar total  saponin  tanaman  Waru  ( Hibiscus tiliaceus L.)  adalah  8,93  mg/g,  sehingga dapat disimpulkan bahwa tanaman tamoenju  lebih  tinggi  kadar  saponinnya. Saponin merupakan senyawa .
Penentuan  tanin  total  digunakan metode  secara  permanganometri.  Metode ini  berdasarkan  proses  oksidasi-reduksi atau redoks. Pada penelitian ini digunakan KMnO 4 sebagai standar zat pengoksidasi , karena  termasuk  oksidator  kuat  dan sebagai  larutan  baku  primer  adalah  asam oksalat  (Gholib,2010).  Langkah  pertama yang  dilakukan  adalah  pembuatan  larutan baku asam oksalat. Didapatkan penimbangan  baku  primer  asam  oksalat sebanyak  0,6939  g,  sehingga  didapatkan normalitas asam oksalat 0,1100 N.
Perhitungan  normalitas  asam  oksalat dapat  dilihat  pada  lampiran  7.  Setelah  itu dilakukan  pembakuan  KMnO 4 dengan asam  oksalat  sebagai  larutan  baku. Didapatkan normalitas KMnO 4 yaitu 0,1125 N.  Proses  selanjutnya  yaitu  penetapan kadar  tanin  dari  daun  tamoenju  ( Hibiscus surattensis L.)  menggunakan  KMnO 4 . Pada metode titrasi secara permanganometri tidak perlu menggunakan  indikator  karena  KMnO 4 tersebut sudah bertindak sebagai
indikator.  Volume  titrasi  blanko  dijadikan faktor  pengurangan  pada  volume  titrasi sampel. Dari hasil titrasi tersebut didapatkan  kadar  tanin  0,1432  %  atau 55,417 g/gram. Menurut Krishnaveni (2014) kadar tanin pada tanaman Pungpulutan ( Urena lobata) adalah 0,45 %
,lebih tinggi dibandingakan tanaman Tamoenju ( Hibiscus surattensis L. ).
Flavonoid  adalah  senyawa  yang tersebar  luas  pada  tanaman  dan  memiliki banyak fungsi. Menurut Lackerman (1986) &  Huesken  (1995)  flavonoid  memiliki aktivitas  kardiotonik.  Menurut  Izzo  AA (1991)  &  Murakami  (1992)  flavonoid memiliki aktivitas antiulcer. Menurut Felicia (1996)  &  Hirano  T  (1989)  flavonoid memiliki  efek  antineoplastik.  Menurut Weidenboemer M (1993) flavonoid memiliki aktivitas antibakteri.
Tamoenju juga memiliki kadar alkaloid  305,181  g/gram,  dimana  menurut Isaac  (2006)  alkaloid  dapat  digunakan sebagai  antidiabetes,  selain  itu  menurut Zanatta  (2009)  alkaloid  juga  memiliki
aktivitas  gastroprotektif.  Menurut  Rao  AV &  Sung  MK  (1995)  Saponin  menunjukkan efek penghambatan pertumbuhan pada sel karsinoma  manusia.  Selain  itu  menurut Khan  NA  (2009)  saponin  menunjukkan inhibisi  terhadap  jamur.  Menurut  Scalbert (1991)  Tanin  diketahui  memiliki  aktivitas antibakteri.  Menurut    Ann  E.H  (1998) keberadaan  tanin  dalam  suatu  tanaman juga  dapat  berperan  sebagai  senyawa antioksidan.

## KESIMPULAN
Pada  ekstrak  etanol  daun Hibiscus surattensis L.  terdeteksi  ada  4  senyawa metabolit  sekunder  yang  berperan  yaitu Flavonoid,  alkaloid,  tanin  dan  saponin. Ekstrak etanol daun Hibiscus surattensis L memiliki kadar senyawa Flavonoid sebesar 14,999  mg/100  g,  senyawa  Alkaloid 305,181 g/gram, senyawa Saponin 371,112  g/gram  dan  senyawa  Tanin 55,417 g/gram.

## DAFTAR PUSTAKA
Anonim. 2000. Parameter Standar Umum  Ekstrak  Tumbuhan  Obat.
Jakarta: Dirjen POM Depkes RI. Ann  EH.  1998.  High  Molecular  Weight Plant  Polyphenolics  (Tannins)  As Biological Antioxidants . J Agriculture Food Chem . 46(5):1887-1892. Chang  CC,  Yang  MH,  Wen  HM.,  Chern
JC.  2002.  Estimation  of  Total Flavonoid  Content  in  Propolis  by Two  Complementary  Colorimetric Methods . Journal of Food and Drug
Analysis . 10:178-182. Putra DTB. 2011. Pengaruh Suplementasi Daun Waru ( Hibiscus  tilaceus L.)  Terhadap
Karakteristik Fermentasi Dan Populasi  Protozoa  Rumen  Secara In Vitro . ( Skripsi). Surakarta: Jurusan  Biologi  Fakultas  MIPA. Universitas Sebelas Maret.
Dumanauw,  Carolin  WA,    Anindita  P. 2015.  Penetapan  Kadar  Saponin Pada  Ekstrak  Daun  Lidah  Mertua (Sansievera trifasciata Prain varietas S. Laurentii) Secara Gravimetri . Jurnal Ilmu dan
Teknologi Kesehatan . 2(2):65-69. Felicia  VS,  Naila  G,  Ann  PC,  Madeleine M,  Keeneth  KC.  1996.  Inhibition  Of Human Breast Cance Cell Proliferation And Delay Of Mammary Tumorigenisis By
Flavonoides. Nutr Cancer . 64:69-78.
Gholib.  2011. Kimia  Analisis  Farmasi. Yogyakarta: Pustaka Pelajar.
Harborne  JB.  2006.  Metode  Fitokimia (Penuntun Cara Modern Menganalisis Tumbuhan). Bandung: Penerbit ITB. Hirano T, Oka K,
Akiba M. Antiproliferative Effects Of Synthetic  And  Naturally  Occuring Flavonoids On Turner Cells Of The Human  Breast  Carcinoma  Cell
Line . Res  Commun  Chem  Pahol Pharmacal . 26;167-81.
Izzo  AA,  Dicarlo  G,  Mascolo  N,  and
Capasso F. 1991. Anti-ulcer
Effects  Of  Flavonoid  Derivative  Of Sophorandin. Role Of Endogenous
PAF. Phytotherapy Res . 8;179-81.
Khan  NA.  2009. Two  Antifungal  Active
Triterpenoid  Saponins  From  The Seeds  Of  Lathyrus  Plants.  India: Departemen  Of  Postgraduate  And
Research  Of  Chemistry.  University
Of Jabalpur.
Lackerman  GM,  Claeys  M,  Rwangbo PC, Herman, Vlietink. 1986. Chronotropic  Effect  Of  Quercetin
On  Guinea  Pig  Right  Atrium. J Planta Med . 52: 433-9. Markham KR. 1988. Cara Mengidentifikasi Flavonoid. Bandung: Penerbit ITB. Murakami  S,  Muramatsu  M,  Otomo  S. 1992. Gastric H*/K* ATPase Inhibition  By  Catechins. J  Pharm Pharmacol Res , 54;333-9. Murrukmihadi M, Wahyuono S,
Marchaban,  and  Martono  S.  2013.
Penetapan  Kadar  Alkaloid  Dari Ekstrak  Etanolik  Bunga  Kembang Sepatu (Hibiscus rosa-sinensis  L.) . Traditional Medicine Journal .
8(2):118-120.
Pranowo  D,  Noor  E,  Haditjaroko  L, Maddu  A.  2015.  Karakterisasi Simplisia  dan  Ekstrak  Daun  Gedi (Abelmoschus manihot L.) Sebagai Bahan  Sediaan  Obat, Prosiding Seminar Agroindustri dan Lokakarya Nasional FKPT-TPI. Raaman N. 2006. Phytochemical Techniques.  New  Delhi: New  India Publishing.
Rao  AV.,  Sung  MK.  1995.  Saponin  As Anticarcinogens. American Institute Of Nutrition . 0022-3166.
Revina  T.  2014.  Uji  Efek  Antidiabetes Ekstrak  Daun  Hibiscus  surattensis L  Pada  Mencit  Jantan  (Mus musculus)  Dengan  Menggunakan Metode  Toleransi  Glukosa  Dan Induksi  Aloksan .  (Skripsi). Palu: Universitas Tadulako.
Saifudin A, Rahayu V, Teruna HY. 2011. Standardisasi  Bahan  Obat  Alam .
Yogyakarta: Graha Ilmu. Scalbert AC. 1991. Antimicrobial properties  in  tannins. Phytochem.
30:3875-3883.
Weidenboemer  M.  1993.  Inhibition  Of Fungal  Infection  by  Baicalin-A
Flavonoid Compound Purified
From  Chinese  Herbal  Medicine. J Nat Prod . 55:1732-9.
Zanatta F, Gandolfi RB, Lemos M, Ticona JC,  Gimenez  A,  Clasen  BK,  Filho
VC.,
Andrade SF. 2009. Gastroprotective  activity  of  alkaloid extract  2-phenylquinoline  obtained from the bark of Galipea longiflora Krause (Rutaceae). Chem Biol Interact. 180 :312 –317.