## UJI TOKSISITAS EKSTRAK EMPAT JENIS TERIPANG SUKU
HOLOTHURIIDAE DARI PULAU PENJALIRAN TIMUR,

## KEPULAUAN SERIBU, JAKARTA MENGGUNAKAN BRINE SHRIMP LETHALITY TEST (BSLT)
TOXICITY TEST OF  EXTRACTS OF THE FOUR SEA CUCUMBER (FAMILY HOLOTHURIIDAE) FROM EAST PENJALIRAN ISLAND, SERIBU ISLANDS, JAKARTA  BASED ON THE BRINE SHRIMP LETHALITY TEST (BSLT)
Arum Albuntana, Yasman, dan Wisnu Wardhana Departemen Biologi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam (FMIPA) Universitas Indonesia, Depok; Email: arum.albuntana@yahoo.com,  albuntana@gmail.com

## ABSTRACT
Sea cucumber is one of the marine bioactive compounds resources .  The properties of the  bioactive  compound  are  biologically  shown  by  their  functions  as  anticancer, antifungi,  hemolytic,  and  immunomodulatoryt.    The  purpose  of  this  research  is    to predict (determine) the toxicity level of the extracts of Actinopyga miliaris, Holothuria leucospilota, Bohadschia argus, and Bohadschia marmorata  collected from Penjaliran Timur Island, Seribu Island National Park Jakarta.  The method used in this research is Brine Shrimp Lethality Test (BSLT).  The result of this research showed that all of the extract  from  those  species  are  active  in  BSLT,  indicated  by  LC 50 values    of  less  than 1000  µg/ml.    Bohadcshia    argus  is  highest  active  species    indicated  by  LC 50 value 69,254  µg/ml.    Water  fraction  of  H.  leucospilota’s  crude  extract  is  the  most  active fraction indicated by LC 50 50,968 µg/ml.
Keywords: Brine  Shrimp  Lethality  Test,  Crude  Extract,  Fractionation,  Family Holothuriidae, Sea Cucumber

## ABSTRAK
Teripang  merupakan  salah  satu  biota  yang  dapat  dijadikan  sebagai  sumber  senyawa bioaktif dari laut.   Senyawa tersebut  memiliki efek biologi  seperti anti kanker, jamur, hemolisis  dan  aktivitas  kekebalan  tubuh.    Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk  menduga tingkat  toksisitas  ekstrak  empat  jenis  teripang  yaitu Actinopyga  miliaris,  Holothuria leucospilota,  Bohadschia  argus ,  dan Bohadschia  marmorata dari  Pulau  Penjaliran Timur  Taman  Nasional  Kepulauan  Seribu  (TNKpS)  Jakarta.    Metode  yang  digunakan pada penelitian ini adalah Brine Shrimp Lethalty Test (BSLT).  BSLT merupakan salah satu metode awal untuk menduga tingkat toksisitas suatu substansi bahan alam dengan menggunakan  larva  udang Artemia  salina. Hasil  penelitian  ini    menunjukkan  bahwa keempat  jenis  teripang  tersebut  bersifat  aktif  terhadap  uji  BSLT  yang  ditandai  dengan nilai LC 50 kurang dari 1000 µg/ml. Keaktifan tertinggi diperoleh jenis B. argus dengan nilai  LC 50 sebesar  69,254  µg/ml.  Uji  BSLT  fraksi crude  extract jenis H.  leucospilota menunjukkan  bahwa  fraksi  air  memiliki  keaktifan  tertinggi  dengan  nilai  LC 50 sebesar 50,968 µg/ml.
Kata kunci: BSLT, Ekstrak Kasar, Fraksinasi, Suku Holothuriidae, Teripang

## I. PENDAHULUAN
Perairan  laut  Indonesia  memiliki keanekaragaman  biota  laut  sangat  tinggi yang dapat dimanfaatkan untuk kehidupan.    Pemanfaatan  biota  laut  saat ini, bukan hanya sekadar untuk konsumtif  saja,  tetapi  mengarah  kepada penelitian  yang  lebih  maju,  seperti penemuan  obat-obatan  berbahan  dasar biota  laut  (Rasyid,  2008).    Pencarian obat-obatan  berbahan  dasar  biota  laut terkait dengan meningkatnya sifat resistensi  berbagai  penyakit  terhadap jenis  obat-obatan  yang  sudah  ada  (Yan, 2004).    Salah  satu  biota  laut  yang berpotensi menghasilkan senyawa bioaktif  yang  dapat  digunakan  sebagai bahan  baku  obat-obatan  adalah  teripang. Menurut Matranga (2005) teripang sudah ratusan  tahun  digunakan  sebagai  obat- obatan  di  Cina  yang  diyakini  mampu menyembuhkan  berbagai  jenis  penyakit. Efek  penyembuhan  tersebut  mungkin disebabkan    senyawa  bioaktif  yang terdapat  pada  tubuh  teripang  seperti saponin (triterpen glikosida) (Dyck et al ., 2010).
Saponin  dihasilkan  sebagai  salah satu  bentuk    mekanisme  pertahanan  diri secara  kimiawi  bagi  teripang  di  alam. Senyawa tersebut selain diduga digunakan  sebagai  pertahanan  diri  dari predator,  juga  diyakini  memiliki,  efek biologis,  termasuk  diantaranya  sebagai anti jamur, sitotoksik melawan sel tumor, hemolisis, aktivitas kekebalan tubuh, dan anti  kanker  (Zhang et  al .,  2006). Penelitian ilmiah mengenai khasiat teripang di Indonesia, khususnya teripang dari  Taman  Nasional  Kepulauan  Seribu (TNKpS) Jakarta belum banyak dilakukan.    Kekayaan  jenis  teripang  di TNKpS Jakarta cukup banyak yaitu tidak kurang  dari  25 jenis  teripang  yang  telah diidentifikasi.  Penelitian khasiat teripang sebagai  obat  alternatif  di  Indonesia  baru dalam  wacana  untuk  dikembangkan
(Darsono,  komunikasi  pribadi,  2  Maret 2010).    Oleh  sebab  itu,  studi  awal  uji toksisitas  ekstrak  teripang  di  TNKpS diharapkan  dapat  memberikan  informasi secara  ilmiah  mengenai  khasiat  teripang sebagai bahan baku obat di Indonesia.
Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk menduga/memprediksi  keaktifan crude extract empat  jenis  teripang  Suku Holothuriidae  yaitu Actinopyga  miliaris ,
Holothuria leucospilota , Bohadschia argus , Bohadschia marmorata dari Pulau Penjaliran Timur Taman Nasional Kepulauan  Seribu  (TNKpS)  Jakarta  dan fraksi crude extract dengan menggunakan  uji Brine  Shrimp  Lethality
Test (BSLT).

## II.  BAHAN DAN METODE

## 2.1.  Pengambilan Sampel
Pengambilan sampel teripang dilakukan secara bebas di rataan terumbu Pulau  Penjaliran  Timur  Taman  Nasional
Kepulauan  Seribu  (TNKpS)  Jakarta. Sampel  yang  didapat    lalu  diambil gambarnya  dan  dibuat  catatan  morfologi untuk  proses  identifikasi  tingkat  jenis. Setelah  itu  sampel  dipotong  menjadi beberapa  bagian  dan  khusus  organ pencernaan seperti usus besar yang berisi kotoran dan pasir dibuang untuk menghindari
pembusukan sampel.
Selanjutnya,  sampel  tubuh  teripang  dan organ  dalam  lainnya  dimasukkan  ke dalam  botol  kaca,    lalu  diisi  metanol hingga terendam.

## 2.2. Ekstraksi
Sample  basah  empat  jenis  teripang ditimbang  antara  lain A.  miliaris (193,5 gram), H.  leucospilota (542  gram), B. argus (383,8  gram),  dan B.  marmorata
(153,7  gram)  dan  tiap  jenis  diekstraksi dengan  cara  maserasi  biasa.    Sampel basah teripang dipotong-potong kecil dan ditambahkan  100--200  ml  metanol  sisa perendaman  sampel  untuk  diblender.
Setelah  halus,  sampel  dimasukkan  ke dalam  gelas Beaker  ukuran  1000  ml  lalu dimaserasi  dengan  metanol  selama  24 jam.    Filtrat  yang  didapat    kemudian disaring  dengan  menggunakan  kertas saring  Whatman  no.1.    Filtrat  yang didapat  dimasukkan  ke  dalam  labu penguap, lalu diuapkan dengan menggunakan vacuum  rotary  evaporator pada  suhu  40 o C  dan  kecepatan  90  rpm hingga mengental menjadi crude extract. Setelah  itu, crude  extract ditimbang  dan disimpan ke dalam botol berwarna gelap.

## 2.3. Pembuatan Konsentrasi Larutan Tahap I
Sebanyak  0,5  g  masing-masing crude  extract dari  4  jenis  teripang  yaitu Actinopyga  miliaris , Bohadschia  argus , Bohadschia  marmorata ,  dan Holothuria leucospilota
diencerkan dengan
menggunakan  metanol  hingga  50  ml. Larutan  yang  diperoleh  dari  masing- masing  jenis  disebut  larutan  induk dengan  nilai  konsentrasi  10.000  µg/ml, kemudian  masing-masing  larutan  induk diencerkan menjadi beberapa konsentrasi akhir dalam botol vial  yaitu 1000 µg/ml, 750  µg/ml,  500  µg/ml,  250  µg/ml,  100 µg/ml,  75  µg/ml,  50  µg/ml,  25  µg/ml, dan 10 µg/ml.  Selanjutnya sebanyak 0,5 ml dari masing-masing konsentrasi dimasukkan  ke  dalam  botol  vial  dan sebagai  kontrol,  disediakan  botol  vial yang  telah  berisi  pelarut  metanol  dengan volume  yang  sama  yaitu  0,5  ml.    Satu seri  konsentrasi  dilakukan  tiga  kali pengulangan  (triplo).    Semua  larutan crude  extract dan  kontrol  dalam  botol vial  didiamkan  mengering  pada  suhu ruang selama kurang lebih 24 jam.
2.4.  Penetasan Telur Artemia salina
Wadah  akuarium  yang  berisi  air laut dibagi menjadi dua ruang yaitu ruang gelap  dan  terang  Telur Artemia  salina (0,2 gr/1000 ml air laut) diletakkan dalam ruang  gelap.  Selama  penetasan  air  laut
diberi  aerator  sebagai  sirkulasi  udara dalam  akuarium.  Telur  mulai  menetas setelah  24  jam  dan  bergerak  menuju ruang terang. Telur menetas dan bergerak aktif    pada  usia  36--48  jam.    Umur Artemia 48  jam  tersebut  dikenal  sebagai nauplii Artemia  salina yang  digunakan pada uji BSLT.

## 2.5.  Uji Brine Shrimp Lethality Test

## Tahap I
Sebanyak 10 nauplii Artemia salina dipipet  ke  dalam  masing-masing  botol vial  yang  telah  berisi crude  extract dengan berbagai konsentrasi dan kontrol, lalu  ditambahkan  air  laut  hingga  volume akhir  adalah  5  ml.    Konsentrasi  akhir dalam  botol  vial  setelah  penambahan  air laut  adalah  1000  µg/ml,  750  µg/ml,  500 µg/ml,  250  µg/ml,  100  µg/ml,  75  µg/ml, 50  µg/ml,  25  µg/ml,  dan  10  µg/ml. Selanjutnya  botol  vial  ditutup  dengan tutup karet dan dibiarkan selama 24 jam. Kematian  pada  setiap  konsentrasi  dicatat dan  dibandingkan  dengan  kontrol,  lalu dihitung dengan menggunakan rumus:
% Kematian=((Jumlah kematian – Jumlah Kematian kontrol)/Jumlah larva awal) x 100%
Perhitungan LC 50 dilakukan dengan menggunakan bantuan program SPSS 15. Suatu  ekstrak  dikatakan  bersifat  aktif apabila nilai LC 50 yang diperoleh  ≤ 1000 µg/ml.

## 2.6.  Kromatografi Cair-cair
Jenis  teripang  yang  dilanjutkan  ke tahap  fraksinasi  adalah  dari  jenis  yang bersifat  aktif  (LC 50 ≤    1000  µg/ml)  dan memiliki  jumlah crude  extract kering terbanyak.  Kromatografi bertujuan untuk mengetahui  sifat  kepolaran  dari  suatu ekstrak,  baik  bersifat  polar,  semi  polar maupun nonpolar.
Pelarut yang digunakan  untuk  mewakili  ketiga  sifar kepolaran  tersebut  adalah  air  (polar),  etil
asetat (semipolar), dan n-heksan (nonpolar).

## 2.7.  Pembuatan Konsentrasi Larutan Tahap II
Sebanyak  0,05  g  fraksi  c rude extract dari  masing-masing  fraksi  yaitu n-heksan,  etil  asetat,  dan  air  diencerkan dengan menggunakan pelarut yang sesuai dengan  fraksinya  sebanyak  50  ml. Artinya fraksi n -heksan dengan menggunakan  pelarut n -heksan,  fraksi etil  asetat  dengan  pelarut  etil  asetat,  dan pengecualian  untuk  fraksi  air  yang digunakan sebagai pelarut adalah metanol.    Konsentrasi  yang  dibuat berdasarkan  konsentrasi  nilai  LC 50 pada uji  BSLT  tahap  I  yaitu  100  µg/ml,  75 µg/ml,  50  µg/ml,  25  µg/ml,  dan  10 µg/ml.    Satu  seri  konsentrasi  dilakukan tiga kali pengulangan (triplo).

## 2.8.  Uji Brine Shrimp Lethality Test Tahap II
Botol  vial  yang  telah  kering  dari masing-masing  konsentrasi  fraksi cude extract diberi  3  tetes  Dimetil  Sulfosit (DMSO),  lalu  ditambahkan  air  laut sebanyak  1  ml.  Penambahan  DMSO dilakukan sebagai buffer kelarutan senyawaan  dalam  air  laut,  khususnya untuk  botol-botol  vial  yang  berisi  fraksi n -heksan  dan  etil  asetat.    Sebanyak  10 nauplii Artemia  salina yang  berumur  48 jam  diambil  menggunakan  pipet  dan dimasukkan    ke  dalam  botol  vial percobaan,  lalu  ditambahkan  air  laut hingga  volumenya  menjadi  5  ml.  Hasil yang didapat dibandingkan dengan kontrol.    Selanjutnya  adalah  perhitungan LC 50 dengan  menggunakan  bantuan program SPSS 15.
2.9.  Kromatografi Lapis Tipis (KLT)
Seluruh crude extract yang
diperoleh  diuji  dengan  KLT,  yaitu crude extract empat  jenis  teripang,  fraksi n - heksan,  etil  asetat,  dan  air.    Masing-
masing crude  extract dibuat  ke  dalam konsentrasi  1000  µg/ml.    Sebanyak  satu pipa  kapiler  (20  µL)  dari  masing-masing crude extract ditotolkan secara
bergantian  dan  berulang  sebanyak  3  kali pada  pelat  alumunium  silika  gel  60F254 (Merck).  Setelah itu, pelat KLT dikering anginkan  dan  dimasukkan  ke  dalam bejana  kromatografi  yang  berisi  eluen antara  lain  CHCl 3 -MeOH-H 2 O  (3:7:1); CHCl 3 :MeOH (1:2 dan 1:1), dan CHCl 3 :BuOH  (3:2).    Bercak  pemisahan senyawa  pada  sampel  kemudian  diamati di  bawah  lampu  UV  dengan  panjang gelombang 254--365 nm.

## 3.  HASIL DAN PEMBAHASAN
3.1.  Nilai  Keaktifan Crude  Extract

## Keempat Jenis Teripang
Hasil  analisis  uji  BSLT  tahap  1 dengan  bantuan  program  SPSS  15 menunjukkan  nilai  LC 50 crude  extract dari  keempat  jenis  teripang  yang  diteliti hampir  sama  yaitu A.miliaris (70,536 µg/ml), H.  leucospilota (73,556  µg/ml) ,
B.  argus (69,254  µg/ml) , dan B. marmorata (77,063 µg/ml).  Hal tersebut berarti  bahwa crude  extract keempat jenis  teripang  bersifat  aktif  terhadap BSLT karena nilai  LC 50 yang dihasilkan kurang dari  1000 µg/ml (Fajarningsih et al., 2006).  Nilai  keaktifan crude  extract keempat  jenis  teripang  tersebut  dapat dikatakan  sangat  aktif  karena  mendekati nilai  standar  keaktifan  dari National Cancer  Institute (NCI)  Amerika  yang menyatakan standar efektifitas komponen bioaktif untuk melawan sel kanker adalah ≤ 30 µg/ml.

## 3.2.  Potensi Pengembangan Teripang Sebagai Bahan Baku Obat
Persentasi crude  extract tertinggi adalah H.  leucospilota (4,8%),  lalu diikuti B.  argus (3,2%)    dan B. marmorata (3,2%),  dan  terendah  adalah
A.  miliaris (3,1%).    Data  tersebut
menunjukkan bahwa Holothuria leucospilota merupakan jenis yang paling berpotensi  untuk  dikembang  lebih  lanjut karena  menghasilkan  persentasi  jumlah crude extract tertinggi  yaitu 4,8% (Tabel 1).
3.3.  Fraksinasi crude  extract dengan menggunakan n-heksan, etil asetat, dan air
Pada  penelitian  ini  c rude  extract yang akan dilanjutkan ke tahap fraksinasi memiliki  dua  syarat  yaitu  bersifat  aktif terhadap  BSLT  yang  ditandai  dengan nilai  LC 50 ≤  1000  µg/ml    dan  memiliki jumlah crude  extract terbanyak .    Crude extract yang  digunakan  ke  dalam  tahap fraksinasi  adalah  berasal  dari  jenis H. leucospilota .
Hasil  fraksinasi crude  extract jenis H. leucospilota menghasilkan berat fraksi n -heksan,  etil-asetat,  dan  air  berturut- turut  adalah  0,6  gram  (2,4%);  0,5  gram (2%);  23,9  gram  (95,6  %).  Berdasarkan penelitian  dari  25  gram crude  extract  H. leucospilota ,  dihasilkan  sebanyak  0,5 gram  fraksi n -heksan  dan  0,6  gram  etil-
asetat,  sisanya  23,9    gram  adalah  fraksi air,    sehingga  dapat  dikatakan,  dari  25 gram crude  extract  H.  leucospilota sangat  sedikit  sekali  yang  terikat  ke dalam  fraksi n -heksan  yaitu  2%  saja,
begitu juga fraksi etil-asetat yaitu sebesar 2,4%.    Sisanya  sebesar  95,6% crude extract tertarik  ke  dalam    pelarut  air.
Menurut  Zhang et  al. (2006)  senyawaan metabolit yang  dominan  dihasilkan
teripang berupa saponin. Saponin merupakan  senyawa  glikosida  kompleks yang  kerangka  dasarnya  berhubungan dengan  struktur  gugus  glukosa  dan triterpenoid.    Apabila  senyawa  tersebut dihidrolisis  akan  menghasilkan  suatu senyawa triterpenoid dan glikosida (gula). Glikosida (gula) sangat banyak mengandung gugus OH - , sehingga sangat baik  larut  dalam  air  (Fessenden  & Fessenden,  1982).    Senyawa  saponin larut  dalam  air,  sehingga  senyawa  aktif tersebut  terkonsentrasi pada pelarut  yang bersifat  polar  (Wu et  al., 2007).
Kemungkinan  lainnya  adalah,  karena
Tabel  1.  Perbandingan berat basah teripang, berat, persentasi dan warna crude extract No. Jenis Berat Basah (g) Crude extract (g) Crude extract (%) Warna 1. Actinopyga miliaris 193,5 g 6 g 3,1% Yuma 44-B 2. Holothuria leucospilota 542 g 26,5 g 4,8% Pum pernicle173-A 3. Bohadschia argus 383,8 g 12,1 g 3,2% Gold beach 40-D 4. Bohadschia marmorata 153,7 g 5 g 3,2% Pawnee 46-A
Tabel 2.  Perbandingan  berat,  persentasi,  warna  fraksi crude  extract n-heksan,  etil asetat, dan air
No Fraksi Berat crude extract (g) Persentasi crude extract (%) Warna 1. n-heksan 0,6 g 2,4% Autumn sunset 88-A 2. etil asetat 0,5 g 2% Adobe clay 86-A 3. Air 23,9 g 95,6% Frank’s fire 87-A
sampel  yang  digunakan  adalah  sampel biota  yang  berasal  dari  laut  yang mengandung  banyak  partikel  garam. Oleh  sebab  itu,  persentasi  fraksi  air  jauh lebih  tinggi  karena  garam  hanya  larut  ke dalam  fraksi  air  bila  dibandingkan dengan fraksi etil-asetat dan n -heksan.
3.4.  Aktivitas senyawaan crude extract hasil fraksinasi
Hasil  uji  BSLT  tahap  2  dengan menggunakan bantuan program  SPSS 15 menunjukkan nilai LC 50 tiga fraksi crude extract yaitu n -heksan, etil-asetat, dan air berturut-turut  adalah    51,184  µg/ml; 69,684; µg/ml 50,968 µg/ml.  Nilai LC 50 terendah  diperoleh  oleh  fraksi  air.    Hal tersebut  menunjukkan  fraksi  air  bersifat paling aktif terhadap uji BSLT.
Hasil  analisis  regresi  probit  BSLT tahap  II  terhadap  fraksi crude  extract jenis H.  leucospilota menunjukkan  nilai keaktifan  tertinggi    berdasarkan  analisis probit  ditempati  oleh  fraksi  air  yaitu sebesar  50,968  µg/ml.    Selanjutnya diikuti  fraksi n -heksan  sebesar  51,184 µg/ml  dan  nilai  keaktifan  terendah ditempati    fraksi  etil-asetat  yaitu  sebesar 69,584  µg/ml.  Hasil  analisis  probit tersebut    menunjukkan  bahwa  senyawa aktif  pada tubuh teripang H. leucospilota bersifat  polar.    Hal  tersebut  mungkin disebabkan  terkonsentrasinya  senyawa aktif  teripang  pada  fraksi  air  yang bersifat  polar.  Sebagai  contoh  penelitian yang dilakukan Zou et al. (2003) dan Wu et al. (2007) fraksi ektrak teripang terikat dalam  pelarut  yang  bersifat  lebih  polar seperti  H 2 O  dan  BuOH.    Oleh  sebab  itu, nilai  keaktifan  fraksi crude  extract jenis H. leucospilota tertinggi dalam penelitian ini  juga  masuk  ke  dalam  pelarut  yang bersifat polar yaitu fraksi air.

## 3.5.  Kromatografi Lapis Tipis
Pemisahan
senyawa
yang
terkandung  dalam crude  extract empat
jenis  teripang  dan  fraksi crude  extract menggunakan  metode  kromatografi  lapis tipis  (KLT)  dengan  larutan  pengembang ( eluent ) yaitu CHCL 3 :MeOH:H 2 O (3:7:1).    Hasil  elusi  pelat  KLT  yang berisi crude  extract empat  jenis  teripang dan fraksi crude extract memperlihatkan pola  persebaran  dari  senyawa  yang terkandung  dalam crude  extract dan fraksi crude extract jenis H. leucospilota . Pengamatan  dilakukan  dibawah sinar UV dengan panjang gelombang 254 nm  dan  356  nm.    Hasil  pelat    KLT menunjukkan pola persebaran  yang tidak terlalu  berbeda  dari  keempat  jenis teripang.
Hal tersebut mungkin disebabkan  kandungan  senyawa  aktif dominan  yang  sama  dari  empat  jenis teripang.    Menurut  Zhang et  al. (2006) senyawa  aktif  dominan  dari  teripang adalah  triterpen  glikosida.    Selain  itu mungkin  disebabkan  nilai  LC 50 dari keempat  jenis  teripang  tersebut  tidak terlalu berbeda jauh  yaitu berkisar antara 50--75 µg/ml.
Pendaran  pelat  KLT    fraksi crude extract menunjukkan  noktah  fraksi  air dan n -heksan  terlihat  lebih  jelas  pada panjang  gelombang  356  nm.    Hal  itu memperlihatkan senyawaan yang bersifat aktif  terkonsentrasi  di  kedua  fraksi tersebut.  Berdasarkan uji BSLT fraksi air memperoleh  LC 50 terendah,  lalu  diikuti fraksi n -heksan  dan  fraksi  tertinggi  yaitu etil  asetat.    Semakin  kecil  nilai  LC 50 menunjukkan  suatu  ekstrak  bersifat paling aktif.
Berikut  ini  adalah  gambar  hasil pemisahan senyawaan pada pelat KLT:
Gambar 1.  Hasil Pola Pemisahan Senyawaan  Pada  Pelat  KLT dengan  Panjang  Gelombang:
(I) 254 nm dan (II) 356 nm

## IV.  KESIMPULAN
Ekstrak empat jenis teripang  antara lain A. miliaris , H. leucospilota , B. argus , dan B. marmorata bersifat aktif  terhadap uji Brine  Shrimp  Lethality  Test (BSLT). Nilai keaktifan tertinggi dari fraksi crude extract  H.  leucospilota adalah  fraksi  air berdasarkan  nilai  LC50  sebesar  50,  968 µg/ml.

## V.   SARAN
Jenis H.  leucospilota potensial untuk dikembangkan sebagai bahan baku obat,  karena  bersifat  aktif  dan  memiliki persentasi crude extract tertinggi (4,8%). Selain  itu, H . leucospilota banyak  dan mudah  ditemukan  di  tempat  lokasi sampling. Jenis yang populasinya banyak dan  mudah  ditemukan  serta  memiliki
persentase crude  extract yang  banyak serta  memiliki  bioaktifitas  yang  tinggi merupakan  jenis  yang  berpotensi  untuk diteliti  lebih  lanjut  untuk  bahan  baku obat.

## Ucapan Terimakasih
Ucapan terimakasih penulis sampaikan  kepada  Direktorat  Riset  dan Pengabdian Masyarakat Universitas Indonesia yang telah mendanai penelitian ini  melalui  dana  Hibah  Riset  Berbasis Laboratorium Tahun 2009. Serta Pembimbing penelitian ini yaitu Dr.rer.nat  Yasman,  M.Sc.  (pembimbing I)  dan  Drs.  Wisnu  Wardhana  M.Si.
(pembimbing  II),  Dr.rer.nat  Mufti  Petala Patria,  M.Sc.  (Penguji  I),  Riani  Widiarti, M.Si.  (Penguji  II),    Dr.  Dadang Kusmana,  M.S.(Penguji  III)  yang  telah mencurahkan banyak waktu, tenaga, serta pikiran untuk memperkaya skripsi ini dan teman-teman satu penelitian
di Laboratorium Taksonomi Hewan Biologi dan  Laboratorium  Fitokimia  Farmasi FMIPA UI.

## DAFTAR PUSTAKA
Dyck,  S.,  Van,  P.  Gerbaux,  and  P. Flammang.  2010.  Qualitative  and quantitative  saponin  contents  in  five sea  cucumbers  from  the  Indian ocean. Mar. Drugs, 8:173-189.
Fajarningsih,  N.D.,  H.I.  Januar,  M. Nursid,  and  T.  Wikanta.  2006.
Potensi  antitumor  ekstrak  spons
Crella papilata asal Taman Nasional Laut  Kepulauan  Seribu. Pascapanen dan  Bioteknologi  Kelautan  dan Perikanan, 1(1):35-41.
Fessenden,  R.J.  and  J.S.  Fessenden. 1982.   Kimia organik. Ed ke-3. Terj. dari Organic  chemistry .  3 rd ed.  Oleh Pudjaatmaka,A.H. Erlangga, Jakarta: xv + 590 hlm.
II I a  b d c e  f  g a  b d c e  f  g
Keterangan: - Crude extract - Fraksi crude extract a: A. miliaris e: fraksi n-heksan
b: H.leucospilota f: fraksi etil asetat
c: B. argus g: fraksi air
d: B. marmorata I
Krebs,  J.R.  and  N.B.  Davies.  1993.  An introduction  to  behavioural  ecology.
3 rd
ed. The Alden Press, Massachusetts, USA: xii+410 hlm. Matranga,  V.  2005.  Echinodermata; Progress in molecular and subcellular biology. Springer ,
Jerman: xxiii+263 hlm.
Rasyid,  A.  2008.  Biota  laut  sebagai sumber obat-obatan.
Oseana ,
33(1):11-18.
Wu,  J.,  Y,H.  Yi,  H.F.  Tang,  H.M.  Wu, and  Z.R.  Zhou.  2007.  Hillasides  A and  B,  two  new  cytotoxic  triterpene glycosides  from  the  sea  cucumber
Holothuria  hilla Lesson. Asian Natural Products Research, 9(7):609-615. Yan,  H.Y.  2004.  Harvesting  drugs  from the  seas  and  how  Taiwan  could contribute to this effort. Chonghua J. Med., 9(1):1-6. Zhang,  Y.S.,  H.Y.  Yi,  and  H.F.  Tang. 2006.  Cytotoxic  sulfated  triterpene glycosides  from  the  sea  cucumber Pseudocolochirus violaceus .
Chemistry  &  Biodiversity, 3:807- 817. Zou, Z.R., Y.H. Yi, J.H. Wu, C.C. Liaw, and  K.H.  Lee.  2003.  Intercedensides A-C,  three  new  cytotoxic  triterpene glycosides  from  the  seacucumber
Mensamaria intercedens Lampert. J. Nat. Prod., 66:1055-1060.