## Sains Aku a kultur Tropis

## D e p a r t e m e n A k u a k u l t u r
Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan - Universitas Diponegoro Jl. Prof. Soedarto, SH, Tembalang, Semarang 50275
Telp. (024) 7474698, Fax.: (024) 7474698 Email: sainsakuakulturtropis@gmail.com , sainsakuakulturtropis@undip.ac.id
PENGARUH PEMBERIAN RECOMBINANT GROWTH HORMONE (rGH) DENGAN DOSIS BERBEDA PADA PAKAN KOMERSIAL TERHADAP EFISIENSI PEMANFAATAN PAKAN, PERTUMBUHAN DAN KELULUSHIDUPAN BENIH IKAN PATIN  ( P. pangasius )
The Effect of Recombinant Growth Hormone (rGH) Added with Different Doses in Commercial Feed on Food Utilization Efficiency, Growth and Survival Rate of Catfish Fry (P. pangasius)

## Fika Ainallaudia Fissabela, Suminto*, Ristiawan Agung Nugroho
Program Studi Budidaya Perairan, Jurusan Perikanan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Diponegoro Jl. Prof. Soedarto Tembalang-Semarang

## ABSTRAK
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengkaji  pengaruh  penambahan recombinant  Growth  Hormone (rGH)  pada pakan  komersial  dengan  dosis  berbeda  terhadap  efisiensi  pemanfaatan  pakan,  pertumbuhan  dan  kelulushidupan  dan mengetahui  perlakuan  pemberian recombinant  Growth  Hormone (rGH)  pada  pakan  komersial  yang  memberikan efisiensi pemanfaatan pakan, pertumbuhan dan kelulushidupan ikan patin ( P. pangasius ) yang terbaik. Penelitian ini dilaksanakan di  Laboratorium  Budidaya Perairan Universitas Diponegoro, Semarang, Jawa  Tengah Tengah pada 14 November – 15 Januari 2016. Ikan uji yang digunakan dalam penelitian ini adalah ikan patin ( P. Pangasius ), dengan benih  0,9  -  1,4  g.  Penelitian  ini  dilakukan  dengan  metode  eksperimental  menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap (RAL) dengan 4 perlakuan dan 3 kali ulangan. Perlakuan dalam penelitian ini yakni, perlakuan A (pakan + 0 mg/kg), B  (pakan  +  1  mg/kg),  C  (pakan  +  2  mg/kg),  dan  D  (pakan  +  3  mg/kg).  Pembuatan  larutan  rGH  untuk  1  kg  pakan adalah pencampuran rGH sesuai dosis ditambah kuning telur 20 ml + larutan Phosphate Buffered Saline (PBS) 100 ml, dicampur & disemprotkan secara merata ke pakan dan diberikan secara at satiation sehari 2 kali. Data yang diamati meliputi  TKP,  EPP,  PER,  SGR,  SR  dan  kualitas  air.  Data  dianalisa  menggunakan  ANOVA  untuk  melihat perbedaannya, kemudian jika terdapat perbedaan maka dilakukan uji wilayah Duncan untuk melihat perlakuan terbaik. Pendederan benih berlangsung selama 63 hari. Kesimpulan dari hasil penelitian menunjukkan bahwa kombinasi rGH dan pakan komersial, menunjukkan pengaruh nyata ( P <0,05) terhadap TKP, EPP, PER, SGR, panjang mutlak dan SR. Perlakun terbaik terhadap TKP, EPP, PER, SGR, dan SR adalah perlakuan C dengan nilai TKP sebesar 670,36±26,11 gram,  EPP  sebesar  58,49±0,92%,  PER  sebesar  1,13±0,02%,  SGR  sebesar  4,60±0,02%,  dan  kelulushidupan  sebesar 73,33±2,89%.  Sehingga  perlakuan  penambahan  rGH  dengan  dosis  2  mg/kg  menghasilkan  efisiensi  pemanfaatan pakan, pertumbuhan dan kelulushidupan terbaik untuk ikan patin ( P. pangasius ). Kata Kunci : P . pangasius ; rGH; Efisiensi pemanfaatan pakan; Pertumbuhan; Kelulushidupan

## ABSTRACT
This research was aimed to assess the effect of giving recombinant Growth Hormone (rGH) in commercial feed with different dosage for food utilization efficiency (FCE), growth and survival rate (SR); and determine the exact dosage of recombinant Growth Hormone (rGH) that provides the best result on food conversion efficiency, growth and survival rate of pangasius  fish  (P.  pangasius).  This  research  was  conducted  at  the  Aquaculture  Laboratory,  University  of  Diponegoro, Semarang, Central Java on November 14 to January 15, 2016. The trial fish used in this research was Fry Pangasius (P. pangasius) with average weight of seed about 0,9 to 1,4 g. The experimental design used was completely randomized design with 4 treatments and 3 replicates. Which were treatment A (feed + 0 mg / kg); B (feed + 1 mg/kg); C (feed + 2 mg/kg); and D (feed + 3 mg/kg). of rGH for 1 kg of feed is the appropriate dose of rGH mixed with 20 ml egg yolk + solution Phosphate Buffered Saline (PBS) 100 ml, mixed and sprayed evenly to feed. The methode been used was at satiation (2 times/day). The data observed were involving Food Consumption Rate, Food Utilization Efficiency, Protein Efficiency Ratio (PER), Spesific Growth Rate (SGR), absolute length, SR and water quality. Data were analyzed by  using ANOVA to see the difference, then if  there  is  a  difference  then  tested  with    Duncan  area  to  see  the  best  treatment.  Trial  fish  was  reared  for  63  days.  The conclusions shown that the combination of rGH and commercial feed  were giving affect significantly (p<0,05) for Food
Consumption Rate, Food Utilization Efficiency, PER, SGR, absolute length and SR. Best treatment that affected the value of Food Consumption Rate, Food Utilization Efficiency, PER, SGR, absolute length and SR is treatment C with value of Food Consumption Rate 670,36±26,11 grams, Food Utilization Efficiency 58,49±0,92%, PER 1,13±0,02%, SGR 4,60±0,02%, the absolute length 9,78±0,015 cm and SR 73,33±2,89%. The addition of rGH with dosage of 2 mg/kg was the best treatment for food utilization efficiency, growth and survival rate of Pangasius (P. pangasius).
Keywords: P. pangasius; rGH; Food utilization efficiency; Growth; Survival rate

## PENDAHULUAN
Ikan Patin  ( P. pangasius ) adalah salah satu ikan air tawar  yang paling banyak dibudidayakan,  karena merupakan  salah  satu  ikan  unggul  yang  memiliki  daging  enak,  lezat,  dan  gurih.  Di  samping  itu,  patin mengandung  protein  yang  tinggi  dan  kolesterol  yang  rendah  (Minggawati,  2011).  Ikan  patin  rendah  sodium, mudah  dicerna  oleh  usus  serta  mengandung  kalsium,  zat  besi,  dan  mineral  yang  sangat  baik  untuk  kesehatan. Kandungan gizi dari ikan patin adalah 68,6% protein, 5,8% lemak, 3,5% abu dan 51,3% air (Khomariyah, 2009). Terdapat 25 jenis ikan patin di dunia dan 14 jenis diantaranya terdapat di Indonesia (Gustiano et al ., 2000). Ikan patin ( P. pangasius ) adalah ikan  yang banyak ditemukan  di perairan umum di Indonesia seperti sungai,  waduk dan rawa (Martha, 2006).
Saat  ini  permasalahan  Ikan  Patin  yakni  memiliki  pertumbuhan  yang  lambat.  Hal  ini  dapat  dilihat  dari perbandingan  pertumbuhan  ikan  patin  dari  larva  sampai  ukuran  konsumsi  lebih  lama  dibandingkan  ikan konsumsi  lainnya.  Ikan  patin  waktu  pemeliharaannya  yakni  6  bulan,  ikan  mas  3  bulan,  ikan  nila  4  bulan,  dan ikan  gurame  4  bulan  (Kementerian  Kelautan  Perikanan,  2015).  Banyak  faktor  yang  menyebabkan  belum optimalnya  pertumbuhan  ikan  patin,  diantaranya  permasalahan  ditingkat  petani  adalah  kurangnya  teknologi budidaya,  ketersediaan  pakan  yang  bekualitas,  dan  kualitas  air  yang  kurang  optimal  pada  lokasi  pemeliharaan. Mengingat  pertumbuhan  ikan  patin  lambat  maka  perlu  diupayakan  suatu  strategi  yang  efektif  dalam pertumbuhan dan pengembangan benih ikan patin (Imawan, 2014).
Peningkatan  pertumbuhan  ikan  dapat  dilakukan  dengan  penambahan recombinant  Growth  Hormone (rGH) pada pakan buatan ikan patin. Metode ini adalah metode alternatif yang dapat digunakan dalam memacu pertumbuhan  ikan. recombinant  Growth  Hormone (rGH)  di  produksi  menggunakan  biorektor  seperti  bakteri (Pomdonkoy et  al .,  2004)  dan  ragi  (Acosta et  al .,  2007).  Penggunaan  (rGH)  diyakini  aman  untuk  dikonsumsi kultivan, karena (rGH) tidak dapat bertahan lama dalam usus pada ikan (Habibi et al ., 2003). Ikan yang diberikan (rGH)  tidak  termasuk  dalam  kategori  mahluk  hidup  GMO  (genetically  modified  organism)  karena  (rGH)  tidak diwariskan pada keturunan selanjutnya ( Acosta et al ., 2007). Penggunaan rGH dapat meningkatkan penyimpanan dan  penyerapan  protein  di  otot  ikan,  meningkatkan  penggunaan  lipid  sebagai  sumber  energi  (Pérez-Sánchez, 1999),  sebagai  modulator  sistem  immune  pada  ikan  (Yada et  al .,  2002),  mengatur  proses  aklimatisasi  salinitas dan  osmoregulasi  pada  tubuh  ikan  (McCormick,  2001),  mengatur  sekresi  nitrogen  (Kobayashi et  al. ,  2007) namun  ada  kerugian  juga  yang  diakibatkan  pemberia  rGH  yakni,  bahwa  IGF-1    juga  terdeteksi  di  otak  ikan terutama  di optic  tectum dan hypothalamus (Smith et  al .,  2005).  Penggunaan  rGH  dapat  mempengaruhi  otak, sebagai  organ  yang  menghasilkan  berbagai  macam  signal  perintah  seperti  GHRH  yang  berfungsi  merangsang pituitary  untuk  memproduksi  berbagai  macam endogeneous  hormone tidak  pada  jumlah  umumnya  seperti  LH, FSH dan lainnnya (Wong et al ., 2006). Penambahan recombinant  Growth  Hormone (rGH)  pada  pakan  komersial  dengan  dosis  berbeda diharapkan  mampu  mengatasi  masalah  efisiensi  pemanfaatan  pakan,  pertumbuhan  dan  tingkat  kelulushidupan benih  ikan  patin  pada  fase  pendederan  yang  belum  optimum.  Pada  penelitian  ini  penambahan  pemberian  rGH pada pakan dengan dosis berbeda diduga mampu meningkatkan efisiensi pemanfaatan pakan,  pertumbuhan dan tingkat kelulushidupan pada fase pendederan benih ikan patin ( P. pangasius ).

## MATERI DAN METODE

## 1. Pencampuran pakan dengan rGH
Pakan uji yang digunakan adalah pakan komersil berbentuk pelet dengan ukuran PF 1000 sesuai dengan bukaan mulut benih ikan uji. Pakan yang akan diberikan dicampur dengan recombinant Growth Hormone (rGH). Penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan 4 perlakuan dan setiap perlakuan diulang sebanyak 3 kali, berikut dosis rGH yang diberikan pada setiap perlakuan:
Berikut dosis rGH yang digunakan setiap perlakuan: Perlakuan A: Penambahan (rGH) 0 mg/kg pada pakan komersial. Perlakuan B :Penambahan (rGH) 1 mg/kg pada pakan komersial. Perlakuan C :Penambahan (rGH) 2 mg/kg pada pakan komersial. Perlakuan D :Penambahan (rGH) 3 mg/kg pada pakan komersial.
Cara mencampurkannya yakni campur rGH sesuai dosis setiap perlakuan dengan PBS 100 ml dan kuning telur  ayam  20  ml.  Larutan  yang  sudah  tercampur  dimasukan  ke  sprayer  lalu  disemprotkan  ke  1  kg  pakan  tiap perlakuan. Pengeringan pakan dilakukan sebelum pakan diberikan ke ikan uji.
Persiapan kultur ikan patin ( P . pangasius )
Tempat atau wadah yang digunakan dalam penelitian ini adalah ember dengan volume 30L sebanyak 12 buah  untuk  4  perlakuan  dengan  masing-masing  perlakuan    dilakukan  3  kali  pengulangan.    Wadah  dilengkapi dengan sistem aerasi agar kebutuhan oksigen ikan patin ( P . pangasius ) selama pemeliharaan terpenuhi. Wadah yang  digunakan  dicuci  dan  diberikan chlorine untuk  membunuh  bakteri.  Penempatan  ember  yakni  4  baris  3 kolom,  peletakan  ember  tiap  perlakuan  di  acak.  Pemasangan  aerasi  yang  sudah  dilengkapi  dengan  selang  dan batu aerasi dipasang pada setiap ember perlakuan. Masing - masing aerasi memiliki dua selang udara agar supply oksigen yang masuk kedalam wadah benar benar tercukupi untuk ikan uji. Wadah yang siap digunakan diisi air yang bersumer dari Laboratorium Budidaya Perairan, Universitas Diponegoro. Air tersebut di treatment dengan aerasi  diendapkan  selama  7  hari  agar  air  di  dalam  wadah  tersebut  mengandung  banyak  oksigen  dan  siap  di masukkan  ikan  uji.  Ikan  uji  yang  digunakan  yakni  benih  ikan  patin  yang  berasal  dari  petani  ikan  di  daerah Sukamandi, Subang, Jawa Barat. Benih yang digunakan memiliki bobot 0,9 – 1,4 gram sebanyak 20 ekor/wadah dengan  total  240  ekor.  Pemberian  pakan  pada  ikan  uji  yakni  2  kali  sehari,  pada  pukul  08.00  dan  pada  pukul 16.00. metode pemberian pakannya yakni at satiation .

## 2. Metode penelitian
Penelitian  ini  dilakukan  di  Laboratorium  Budidaya  Perairan  FPIK  Universitas  Diponegoro  Semarang. Penelitian ini berlangsung dari tanggal 14 November 2016 – 15 Januari 2016.

## 3. Pengambilan dan analisa sample
a. Tingkat konsumsi pakan (TKP)
Tingkat  konsumsi  pakan  yakni  variabel  yang  digunakan  untuk  mengetahui  berapa  banyak  pakan  yang dikonsumsi oleh ikan uji. Data tersebut dihitung setiap hari. Cara pengambilan sample dengan cara pakan yang tidak  dimakan  diambil  dan  keringkan  lalu  ditimbang  menggunakan  timbangan  analitik.  Lalu  dihitung  dengan rumus (Weatherly, 1972) sebagai berikut
S C F  
Keterangan:
F : Konsumsi pakan (g)
C : Pakan yang diberikan (g) S : Pakan sisa (g) b. Efisiensi pemanfaatan pakan (EPP)
Efisiensi  pemanfaatan  pakan  yakni  variabel  yang  digunakan  untuk  mengetahui  pakan  yang  dapat dimanfaatkan untuk pertumbuhan. Data tersebut dihitung saat akhir penelitian. Cara pengambilan sample yakni hitung  bobot  biomassa  ikan  uji  tiap  wadah  pemeliharaan  pada  awal  dan  akhir  penelitian  dengan  timbangan analitik  dan  hitung  pakan  yang  dikonsumsi  tiap  wadah  pemeliharaan  dari  awal  sampai  akhir  penelitian  dengan timbangan analitik. Setelah itu hitung EPP dengan rumus (Zonneveld et al ., 1991) sebagai berikut:
EPP = % 100 x
F Wo - Wt Keterangan:
EPP       :Efisiensi pemanfaatan pakan (%)
Wt
:Bobot biomassa ikan uji pada akhir penelitian (g) W0 :Bobot biomassa ikan uji pada awal penelitian (g) F :Jumlah pakan ikan yang dikonsumsi selama penelitian (g)
c. Protein efisiensi rasio (PER)
Protein  efisiensi  rasio  adalah  variabel  yang  digunakan  untuk  mengetahui  kadar  protein  yang  digunakan untuk pertumbuhan. Data diambil pada akhir penelitian. Cara pengambilan sample yakni hitung bobot biomassa ikan  uji  tiap  wadah  pemeliharaan  pada  awal  dan  akhir  penelitian  dengan  timbangan  analitik.  Dan  lakukan  uji proximate untuk mengetahui protein yang terkandung pada pakan komersial baik yang sudah dicampur rGH dan yang tidak dicampur rGH. Setelah itu hitung PER dengan rumus (Tacon, 1987) sebagai berikut:
Keterangan: W t : Bobot ikan pada akhir pnelitian (g); W o : Bobot ikan pada awal penelitian (g); Pi : Jumlah protein yang dikonsumsi (g) d. Laju pertumbuhan spesifik (SGR)
Laju  pertumbuhan  spesifik  adalah  variabel  yang  digunakan  untuk  untuk  mengetahui  pertumbuhan spesifik pada ikan uji. Data ddiambil pada akhir penelitian. Cara pengambilan sampel yakni hitung biomasa ikan setiap  wadah  pemeliharaan  pada  awal  dan  akhir  penelitian  dengan  timbangan  analitik,  serta  hitung  lamanya penelitian. Setelah itu hitung SGR dengan rumus (Tacon, 1993) sebagai berikut:
SGR= % 100 x t LnWo - LnWt Keterangan:
SGR  : Specific Growth Rate (%) Wo :berat ikan pada awal pemeliharaan(g); Wt :berat ikan pada akhir pemeliharaan (g); t :lama pemeliharaan (hari)
e. Kelulushidupan (SR)
Kelulushidupan yakni variabel yang digunakan untuk mengetahui tingkat ikan uji yang hidup dari awal sampai akhir penelitian. Data SR diambil saat di akhir penelitian.  Cara pengambilan sampel yakni hitung ikan uji yang ada pada tiap wadah pemelihaan. Setelah itu hitung SR dengan rumus (Effendi, 2002), sebagai berikut:
% 100 x No Nt  SR Keterangan:
SR
: Survival Rate (%) No
: jumlah ikan pada awal pemeliharaan (ekor) Nt : jumlah ikan pada akhir pemeliharaan (ekor) f. Kualitas air
Parameter kualitas air yang diukur meliputi suhu, pH, DO. Suhu dan ammonia. DO, pH, dan suhu diukur 2 kali sehari pada pukul 08.00 dan 16.00 dan ammonia diukur pada awal, tengah, dan akhir penelitian. Selama masa pemeliharaan berlangsung, pengukuran kualitas air dilakukan dengan alat bantu water quality checker dan alat pengukur ammonia.

## 4. Metode analisis data
Hasil  analisa  sampel  seperti  TKP,  EPP,  PER,  SGR,  ,dan  SR  di  analisa  dengan  uji  –  uji  statistik.    Data dianalisis  dengan  menggunakan  analisis  sidik  ragam  untuk  mengetahui  pengaruh  perlakuan  yang  diujicobakan terhadap  TKP,  EPP,  PER,  SGR,  dan  SR  benih  ikan  patin.  Sebelum  data  dianalisis  ragam  terlebih  dahulu  diuji normalitas,  uji  homogenitas  dan  uji  addictivitas.    Analisis  sidik  ragam  dapat  dilakukan,  jika  hasil  ketiga  uji tersebut menunjukan bahwa data menyebar normal, homogen dan additiv. Apabila diketahui terdapat perbedaan yang nyata maka dilakukan uji wilayah ganda Duncan untuk mengetahui perbedaan nilai tengah dari perlakuan, sehingga dapat diperoleh hasil perlakuan yang terbaik (Srigandono, 1981).
Metode penelitian yang digunakan adalah metode eksperimen yang dilakukan di laboratorium. Penelitian eksperimen  dapat  diartikan  sebagai  metode  penelitian    yang  digunakan  untuk  mencari  pengaruh  perlakuan tertentu terhadap yang lain dalam kondisi yang terkendalikan. Rancangan acak lengkap adalah suatu rancangan dimana  perlakuan  dilibatkan  atau  dikenakan  sepenuhnya  secara  acak  kepada  unit  –  unit  eksperimen  (Steel and Torrie, 1995). Hipotesa yang digunakan pada penelitian ini yaitu: H 0 :  diduga  pemberian  rGH  pada  pakan  dengan  dosis  berbeda  memberikan  pengaruh  tidak  nyata  terhadap efisiensi pemanfaatan pakan, pertumbuhan dan tingkat kelulushidupan benih ikan patin.
H 1 :  diduga  pemberian  rGH  pada  pakan  dengan  dosis  berbeda  memberikan  pengaruh  nyata  terhadap  efisiensi pemanfaatan pakan, pertumbuhan dan tingkat kelulushidupan benih ikan patin.
% 100 x Pi Wo - Wt  PER

## HASIL DAN PEMBAHASAN Hasil
Hasil dari data TKP, EPP, PER, SGR dan SR terdapat pada  Tabel 1 dibawah ini. Tabel 1. Nilai Rata – rata TKP, EPP, PER, SGR, dan SR.
Data yang Diamati Perlakuan A B C D TKP (gram) 384,41±27,75 d 587,62±44,87 b 670,36±26,11 a 499,18±37,95 c EPP (%) 25,0,96±0,96 d 35,21±1,92 b 58,49±0,92 a 30,77±2,97 c PER (%) 0,71±0,08 c 0,81±0,04 b 1,13±0,02 a 0,51±0,05 c SGR (%/hari) 2,71±0,08 d 3,74±0,08 b 4,60±0,02 a 3,36±0,10 c SR (%) 51,67±2,89 c 68,33±2,89 b 73,33±2,89 a 63,33±2,89 c
Keterangan:  Nilai dengan Superscript yang berbeda pada kolom menunjukkanadanya perbedaan yang nyata
Hasil  pengukuran  kualitas  air  dalam  media  pemeliharaan  ikan  patin  ( P.  pangasius )  serta  nilai kelayakannya berdasarkan pustaka tersaji pada Tabel 2. Tabel 2. Hasil Parameter Kualitas Air pada wadah pemeliharaan Ikan Patin ( P. pangasius )
Perlakuan Kisaran Nilai Parameter Kualitas Air Suhu ( 0 C) Ph DO (mg/l) NH 3 (mg/l) A 26 – 29 7,1 – 7,6 4,55 – 4,84 0,00 – 0,645 B 25 – 30 7,1 – 7,5 4,51 – 4,93 0,00 - 0,258 C 25 – 30 7,1 – 7,5 4,59 – 5,00 0,00 – 0,258 D 25 – 30 7,1 – 7,6 4,52 – 4,87 0,00 - 0,258 Nilai Kelayakan 25 – 32* 6,5 – 9,0 * 3 – 5 mg/l ** <0,1 mg/l *** Keterangan:*    Boyd (1990)
**  Zonneveld (1991) ***Robinette (1976)
a. Tingkat konsumsi pakan (TKP)
Berdasarkan  uji  analisa  sidik  ragam  anova  pada  penelitian  ini  menunjukkan  kombinasi  rGH  dengan dosis  berbeda  dan  pakan  menunjukkan  pengaruh  nyata  ( P <0,05)  terhadap  nilai  TKP  benih  ikan  patin. Berdasarkan uji  wilayah  ganda duncan  menunjukkan perbedaan nyata ( P <0,05) selisih  nilai  tengah TKP antar perlakuan A perlakuan B perlakuan C dan perlakuan D. Nilai TKP tertinggi didapatkan pada perlakuan C. b. Efisiensi pemanfaatan pakan (EPP)
Berdasarkan  uji  analisa  sidik  ragam  anova  pada  penelitian  ini  menunjukkan  kombinasi  rGH  dengan dosis  berbeda  dan  pakan  menunjukkan  pengaruh  nyata  (P  <0,05)  terhadap  nilai  EPP  benih  ikan  patin. Berdasarkan  uji  wilayah  ganda  duncan  menunjukkan  perbedaan  nyata  (P  <0,05)  selisih  nilai  tengah  EPP  antar perlakuan A perlakuan B perlakuan C dan perlakuan D. Nilai EPP tertinggi didapatkan pada perlakuan C. c. Protein efisiensi rasio (PER)
Hasil  analisis  ragam  data  protein  efisiensi  rasio  pada  patin  menunjukkan  perbedaan  kandungan  (rGH) dalam pakan komersial  memberikan pengaruh yang nyata (P<0,05) terhadap protein efisiensi rasio pada patin. Berdasarkan  uji  wilayah  ganda  duncan  menunjukkan  perbedaan  nyata  (P  <0,05)  selisih  nilai  tengah  PER  antar perlakuan  A    perlakuan  B  perlakuan  C  dan  perlakuan  D.  Dari  hasil  tersebut  maka  didapat  nilai  PER  tertinggi terdapat  pada perlakuan  C.
d. Laju pertumbuhan speesifik (SGR)
Hasil  analisis  ragam  data  laju  pertumbuhan  spesifik  pada  patin  menunjukkan  perbedaan  kandungan (rGH)  dalam  pakan  komersial    memberikan  pengaruh  yang  nyata  (P<0,05)  terhadap  laju  pertumbuhan  spesifik pada patin. Berdasarkan uji wilayah ganda duncan menunjukkan perbedaan nyata (P <0,05) selisih nilai tengah SGR antar perlakuan A perlakuan B perlakuan C dan perlakuan D. Dari hasil tersebut maka didapat nilai SGR tertinggi terdapat  pada perlakuan  C.
e. Kelulushidupan (SR)
Hasil analisis ragam data  kelulushidupan pada patin  menunjukkan perbedaan kandungan (rGH) dalam pakan  komersial    memberikan  pengaruh  yang  nyata  (P<0,05)  terhadap  nilai  kelulushidupan  pada  patin. Berdasarkan  uji  wilayah  ganda  duncan  menunjukkan  perbedaan  nyata  (P  <0,05)  selisih  nilai  tengah  SR  antar perlakuan  A  perlakuan  B  perlakuan  C  dan  perlakuan  D.  Dari  hasil  tersebut  maka  didapat  nilai  SR  tertinggi terdapat  pada perlakuan  C f. Kualitas air Berdasarkan hasil pengamatan selama 63 hari menggunakan water quality checker diperoleh nilai suhu berkisar antara 25-30 o C. Kisaran DO selama pengamatan adalah 4,51-5,00 mg/L. Kisaran pH pada penelitian ini berkisar antara 7,1-7,6. Kisaran NH 3 pada penelitian  ini berkisar antara 0  - 0,645.  Hasil  pengukuran  parameter
kualitas air menunjukkan bahwa nilai  parameter kualitas air selama pemeliharaan layak, hal ini didasarkan dari pustaka tentang kondisi kualitas air yang optimum untuk ikan patin ( P. pangasius) .

## Pembahasan
Secara  umum  GH  merupakan  salah  satu pituitary  hormone yang  sangat  penting  untuk  mengatur pertumbuhan tubuh dan metabolisme tubuh (Wong et al ., 2006). Ditambahkan pula bahwa GH merupakan salah satu  hormon  yang  diekresikan  oleh pituitary pada  ikan  yang  diatur  oleh  hypothalamus  dalam  organ  otak  ikan (Moriyama et  al .,  2000).  GH  diproduksi  dalam  jumlah  kecil  kemudian  dikirimkan  ke  organ  target  melalui peredaran darah untuk menjalankan fungsinya di organ target pada tubuh ikan (Dong et al ., 2010). Mekanisme ini dimulai dari otak ikan, dalam hal ini hypothalamus akan mengeluarkan Growth Hormone Releasing Hormone (GHRH)  yang  kemudian  diserap  oleh  pituitary.  Selain  GHRH,  hypothalamus  juga  mengeluarkan  somatostatin yang  berfungsi  untuk  mengatur  pelepasan  GH  pada  pituitary.  GHRH  akan  menstimulus  pituitary  untuk melepaskan  GH.  Kemudian  GH  akan  ditangkap  dan  diantarkan  oleh Growth  Hormone  Binding  Proteins (GHBPs) dalam aliran darah untuk diantarkan ke organ  – organ target dalam tubuh ikan ( gonad, bone, muscle, heart,  liver dll)  untuk  kemudian  diterima  melalui Growth  Hormone  receptor (GHr)  dalam  organ  target  dalam tubuh ikan secara langsung dan GH dapat menjalankan berbagai macam fungsinya dalam pertumbuhan pada ikan tanpa perantara IGF-1 ( Moriyama et al ., 2000).
Tingkat  konsumsi  pakan  dihitung  untuk  mengetahui  berapa  banyak  pakan  yang  konsumsi  ikan  patin selama pemeliharaan. Pemberian rGH dengan metode oral dapat memberikan nilai TKP pada perlakuan C (pakan +  2  mg/kg  rGH)  tertinggi  dengan  nilai  670,36±26,11  dibanding  perlakuan  lain.  Hal  ini  diduga  bahwa penggunaan  rGH  dapat  memperbaiki  tingkat  konsumsi  pakan  (TKP) pada  ikan,  dan  memperbaiki  metabolisme dari tubuh ikan.  Metabolisme yang berjalan baik sudah tentu akan berpengaruh terhadap nilai tingkat konsumsi pakan  ikan.  Hasil  nilai  TKP  tersebut  lebih  baik  dibanding  hasil  penelitian  Munisa  (2015),  yang  menghasilkan nilai  TKP  sebesar  25,23±0,06  gram  pada  ikan  patin  ( P.  pangasius ).  Ini  menunjukkan  bahwa  rGH  dapat meningkatkan nilai TKP.
Setelah mengetahui pakan yang dikonsumsi lanjut pada variable PER. Perhitungan nilai PER dilakukan untuk mengetahui pengaruh pemberian rGH pada nilai protein yang berasal dari pakan dan dikonsumsi, dimana protein  tersebut  dapat  diserap  dan  dimanfaatkan  oleh  ikan  patin  untuk  pertumbuhan.  Nilai  PER  tertinggi  juga didapatkan oleh perlakuan C  (pakan + 2mg/kg rGH) dengan nilai 1,13±0,02 % . Hal ini disebabkan  protein  yang ada pada rGH yang diserap adalah protein yang paling optimal. Semakin optimal protein yang diserap, semakin banyak  protein  dapat  terbentuk.  Menurut  Alfia  (2013),  menyatakan  bahwa  protein  merupakan  nutrien  yang sangat  dibutuhkan  ikan  untuk  pertumbuhan.  Jadi  dengan  adanya  pemanfaatan  protein  pakan  akan  diharapkan protein  tubuh  bertambah  dan  terjadi  pertumbuhan.  Hal  ini  akan  menyebabkan  semakin  besar  nilai  perubahan bobot ikan dengan nilai pertumbuhan. Pengaruh kombinasi rGH dengan kadar protein tinggi yang mempengaruhi proses  metabolisme  tubuh  dalam  mencerna  dan  menyerap  pakan  protein  tinggi  secara  maksimal  (Wong et  al ., 2006).  Hasil  nilai  PER  tersebut  tidak  lebih  baik  dibanding  hasil  penelitian  Munisa  (2015),  yang  menghasilkan nilai PER sebesar 1,14±0,02% pada ikan patin ( P. pangasius ).
Selanjutnya yakni mengukur efisiensi pemanfaatan pakan, dimana melalui data EPP dapat mengetahui pakan  dan  protein  yang  dapat  dihasilkan  menjadi  daging  dengan  penambahan  rGH  pada  pakan.  Nilai  EPP tertinggi yakni pada perlakuan C (pakan + 2mg/kg rGH) yakni dengan nilai 58,49±0,92%. Nilai efisiensi pakan menunjukkan  persentase  pakan  yang  dimanfaatkan  oleh  ikan  untuk  pertumbuhan  (diwakili  oleh  penambahan bobot tubuh) berbanding dengan jumlah pakan yang dikonsumsi (Wahyuni, 2013).  Hal tersebut didukung oleh Matty  (1985)  mengatakan  bahwa  GH  dapat  meningkatkan  nafsu  makan,  konsumsi  pakan,  sintesis  protein, menurunkan  ekskresi  nitrogen,  merangsang  metabolisme  dan  oksidasi  lemak,  serta  memacu  sintesis  dan pelepasan  insulin.  Menurut  Setiawati  (2007),  hasil  pada  penelitian  ini  diduga  kenaikan  nilai  efisiensi pemanfaatan  pakan  pada  pakan  yang  diberikan  rGH  menunjukkan  bahwa  pakan  yang  dikonsumsi  memiliki kualitas  yang  baik,  sehingga  dapat  dimanfaatkan  secara  efisien.  Hasil  nilai  EPP  tersebut  lebih  baik  dibanding hasil  penelitian  Munisa  (2015),  yang  menghasilkan  nilai  EPP  sebesar  33,29±0,72%  pada  ikan  patin  ( P. pangasius ). Ini menunjukkan bahwa rGH dapat meningkatkan nilai EPP pada ikan patin ( P. pangasius ).
Setelah  mengetahui  nilai  EPP  lanjut  pada  variabel  SGR  dimana  variabel  tersebut  digunakan  untuk mengetahui  pertumbuhan  dari  ikan  patin  ( P.  pangasius )  dari  awal  sampai  akhir  penelitian  yang  dilakukan penambahan rGH pada pakan. Hasil nilai laju pertumbuhan spesifik pada perlakuan C dengan kandungan rGH 2 mg/kg  memiliki  nilai  yang  lebih  tinggi  dibandingkan  perlakuan  yang  lainnya,  yakni  4,60±0,02.  Hal  ini  diduga rGH  yang  ditambahkan  ke  dalam  pakan,  menyebabkan  semakin  besar  sumber  energi  yang  dihasilkan  sehingga dapat digunakan untuk beraktifitas ikan, sedangkan sumber energi yang berasal dari protein dimanfaatkan untuk mengoptimalkan  pertumbuhan.  Pemanfaatan  rGH  untuk  menstimulsi  pertumbuhan  ikan  juga  telah  banyak dilakukan  baik  melalui  penyuntikan,  perendaman,  maupun  pemberian  melalui  pakan,  dan  terbukti  dapat meningkatkan laju pertumbuhan ikan jika dibandingkan dengan ikan kontrol tanpa pemberian rGH (Ben-Atia et al ., 1999; Silverstein et al ., 2000; Kajimura et al ., 2003; Acosta et al ., 2007; Acosta et al., 2009; Alimuddin et al .,  2010;  Lesmana,  2010;  Utomo,  2010  dan  Handoyo,  2012).    Hasil  penelitian  ini  menunjukkan  bahwa
pemberian  rGH  yang  paling  sering  dilakukan  mampu  meningkatkan  konsumsi  pakan.    Peningkatan  konsumsi pakan  ini  berkaitan  dengan  semakin  meningkatnya  energi  yang  diperlukan  untuk  menunjang  peningkatan  laju pertumbuhan  yang distimulasi oleh pemberian rGH.  Pengaruh  kombinasi rGH dan pakan dengan kadar protein tinggi yang mempengaruhi proses metabolisme tubuh dalam mencerna dan menyerap pakan protein tinggi secara maksimal untuk dapat digunakan dalam proses pertumbuhan sehingga dapat meningkatkan pertumbuhan, dalam hal ini khususnya dapat meningkatkan pertumbuhan terutama nilai SGR (Wong et al ., 2006; Abdel-Tawwab et al ., 2010 dan Qiang et al. , 2012).  Menurut Huet (2007), efisiensi pakan  yang tinggi  menunjukkan penggunaan pakan  yang  efisien,  sehingga  hanya  sedikit  protein  yang  dirombak  untuk  memenuhi  kebutuhan  energi  dan selebihnya  digunakan  untuk  pertumbuhan.  Hasil  nilai  SGR  tersebut  lebih  baik  dibanding  hasil  penelitian Setyawan (2014), yang menghasilkan SGR sebesar 3,32 ± 0.017% pada ikan nila dengan penambahan rGH. Ini menunjukkan bahwa rGH  yang diberikan pada ikan patin  dapat  meningkatkan  nilai SGR di banding pada ikan nila.
Nilai  kelulushidupan  tertinggi  yakni  pada  perlakuan  C  (Pakan  +  2mg/kg  rGH)  yakni  73,33±2,89%. Menurut  McCormick  (2001),  pemberian    rGH    dapat    meningkatkan    kelangsungan    hidup    ikan    melalui peningkatan    sistem    kekebalan    terhadap  penyakit.  Hasil  tersebut  diduga  rGH  yang  diberikan  memberikan pengaruh  peningkatan  daya  tahan  tubuh  terhadap  penyakit.  Hal  ini  diperkuat  oleh  Acosta et  al .  (2009), menyatakan bahwa pemberian rGH pada benih ikan dapat meningkatkan kelulushidupan dan meningkatkan daya tahan  tubuh  terhadap  penyakit.  Selain  itu  faktor  yang  mempengaruhi  kelulushidupan  yakni  kualitas  air.  Hasil nilai  SR  tersebut  tidak  lebih  baik  dibanding  hasil  penelitian  Munisa  (2014),  yang  menghasilkan  SR  sebesar 91,67±14,43% pada ikan patin dengan penambahan rGH. Ini menunjukkan bahwa rGH yang diberikan pada ikan patin tidak dapat meningkatkan nilai SR Ikan patin ( P. pangasius ). Berdasarkan hasil pengamatan selama 63 hari menggunakan water quality checker diperoleh nilai suhu berkisar antara 25-30 o C, kondisi tersebut masih layak untuk  kegiatan  budidaya  benih  ikan  patin,  hal  ini  sesuai  dengan  pendapat  Boyd  (1990)  yang  mengatakan  Ikan patin akan tumbuh baik pada lingkungan dengan suhu air sekitar 25 0 C -32 0 C.  Kisaran DO selama pengamatan adalah  4,51-5,00  mg/L,  kondisi  ini  masih  layak  untuk  kehidupan  ikan  patin,  ini  sesuai  dengan  pendapat Zonneveld et  al .  (1991),  kadar  oksigen  terlarut  dalam  air  sangat  penting  bagi  kelangsungan  hidup  semua organisme. Oksigen tergantung dari jenis ikan, umur dan aktifitasnya. Air kolam budidaya ikan patin minimum harus  mengandung  oksigen  terlarut  4-6  mg/liter.    Kisaran  pH  pada  penelitian  ini  berkisar  antara  7,1-7,6  dan masih  layak  untuk  ikan  patin,  dan  hal  ini  sesuai  pendapat  Boyd  (1990),  yang  menyatakan  bahwa  pH  yang optimal  untuk  ikan  adalah  pH  kisaran  6,5  –  9.  Kisaran  NH 3 pada  penelitian  ini  berkisar  antara  0  -  0,645  dan termasuk  diatas  kelayak  untuk  ikan  patin,  dan  hal  ini  diperkuat  oleh  pendapat  Robbinette  (1976),  yang menyatakan  bahwa  NH 3 optimal  untuk  ikan  adalah  ammonia    <0,  1mg/l.  Adanya  kematian  diduga  karena ammonia yang diatas batas kelayakan (Tort et al. , 2003).

## KESIMPULAN
Kesimpulan  yang  dapat  diambil  dari  penelitian  “Pengaruh  Pemberian recombinant  Growth  Hormone (rGH)  dengan  Dosis  Berbeda  pada  Pakan  Komersial  terhadap  Efisiensi  Pemanfaatan  Pakan,  Pertumbuhan  dan Kelulushidupan Benih Ikan Patin ( P. pangaius )” adalah sebagai berikut :
1. Penambahan recombinant  Growth  Hormone (rGH)  dalam  pakan  komersil  berpengaruh  nyata  (P<0,05) terhadap,  efisiensi  pemanfaatan  pakan  (58,49±0,92)%,  pertumbuhan  (4,60±0,02)%,  dan  kelulushidupan ikan patin (73,33±2,89)%.
2. Perlakuan terbaik dengan penambahan recombinant Growth Hormone (rGH) yang dicampur dengan pakan komersial  yakni  perlakuan  C  dengan  dosis  2  mg/kg.  Perlakuan  C  dengan  dosis  rGH  2  mg/kg  mampu menghasilkan  nilai  efisisiensi  pakan  tertinggi  (58,49±0,92)%,  laju  pertumbuhan  spesifik  tertinggi (4,60±0,02)%, dan nilai kelulushidupan tertinggi (73,33±2,89)%.

## DAFTAR PUSTAKA
Abdel-Tawwab,  M.,  Mohammad,  H.A.,  Yassir,  A.E.K.,  Adel,  M.E.S.  2010. Effect  of  Dietary  Protein  Level, Initial  Body  Weight,  and  Their  Interaction  on  the  Growth,  Feed  Utilization,  and  Physiological Alterations of Nile Tilapia Oreochromis niloticus (L). Aquaculture. (298): 267-274.
Acosta  J.,  Morales  R,  Morales  M,  Alonso  M,  Estrado  M.  P.  2007. Pichia  Pastoris  Expressing  Recombinant Ttilapia Growth Hormone Accelerates The Growth Of Tilapia . Biotechnol. Lett. (29): 1671-1676. Acosta, J., M.P. Estrada., Y. Carpio., O. Ruiz., R. Morales., E. Martinez., J. Valdes., C. Borroto., V. Besada, A. Sanches.,  F.  Herrera.  2009. Tilapia  Somatotropin  Polypeptides:  Potent  Enhanchers  of  Fish  Growth and Innate Immunity . Biotec Aplicada. (26): 267-272.
Alfia  A,  R.,  Endang  A.,  Tita    E.  2013.  Pengaruh  Kepadatan  yang  Berbeda  terhadap  Kelulushidupan  dan Pertumbuhan Ikan Nila ( Orechromis niloticus ) pada Sistem Resirkulasi dengan Filter Bioball. Journal of Aquaculture Management and Technology. 2 ( 3): 86-93.
Alimuddin., I. Lesmana., A.  Sudrajat,. O., Carman, O., Faizal, I. 2010. Production and Bioactivity Potential of Three Recombinant Growth Hormones of Farmed Fish . Indonesian Aquacult Jour. (5): 11-17. Ben-Atia, I., Fine, M., Tandler, A., Funkenstein, B., Maurice, S., Cavari, B. and Gertler, A. 1999. Preparation of Recombinant  Gilthead  Seabream  (Sparus  aurata)  Growth  Hormone  and  its  Use  for  Stimulation  of Larvae Growth by Oral Administration . Gen Comp Endocr . (113): 155-164.
Boyd, C.E.  1990. Water Quality Management for Pond Fish Culture .  Elsevier Scientific Publishing Company, Amsterdam-Oxford, New York, 585 Pp.
Dong, H., Lingxian, Z., Da, D., Haifa, Z., Yunxin, W., Wensheng, L., Haoran, L., 2010. Growth Hormone and Two  Forms  of  Insulin-Like  Growth  Factors  I  in  the  Giant  Grouper  (Epinephelus  lanceolatus): Molecular  Cloning  and  Characterization  of  Tissue  Distribution .  Fish  Physiology  and  Biochemistry. (36): 201-212.
Effendie, M. I. 2002. Biologi Perikanan. Yayasan Pustaka Nusatama. Yogyakarta. 163 Pp.
Gustiano  R  .,  Legendre  M.,  L.  Pouyaud.,  J.  Slembrouck.,  A.  H.  Kristanto.,  J.  Subagja,  O.  Komarudin  dan Maskur,  2000. Pangasius  djambal  :  a  New  Candidate  Species  for  Fish  Culture  in  Indonesia .  IARD Journal. (22):1-14.
Habibi H., Erwing  R., Bajwa., Walker R. 2003. Gastric Uptake of Recombinant Growth Hormone in Rainbow Trout. Fish Physiology And Biochemistry . (28): 463-467. Handoyo  B.,  Alimuddin.,  Nur,  B.P.U.  2012. Growth,  Feed  Conversion  and  Retention,  and  Proximate  of  Ell Juvenile Treated  by Immersion of Recombinant Giant Grouper Growth Hormone . Jurnal Akuakultur Indonesia. (11):  132-140.
Huet,  M.  2007. Textbook  of  Fish  Culture Breeding  and  Cultivation  of  Fish . Fishing  News  (Book  Ltd). London. 436 pp.
http://kkpnews.kkp.go.id/index.php/potensi-usaha-budidaya-ikan-air-tawar/ (diakses tanggal 6 Maret 2016). Imawan  T.  2014.  Strategi  Pengembangan  Pembenihan  Ikan  Patin  ( Pangasius  hypopthalmus )  di  Kecamatan Ciampea Kabupaten Bogor. Food Science and Technology. 1 (7): 20-26.
Kajimura S., Hirano T., Visitacion N., Moriyama S., Aida K., Grau E. G. 2003. Dual Mode of Cortisol Action on GH/IGF-I/IGF  Binding  Proteins  in  the  Tilapia,  Oreochromis  mossambicus. Journal  Endocrinology. (178): 91-99.
Khomariyah S. A. 2009. Pengaruh Penambahan Berbagai Dosis Minyak Ikan yang Berbeda pada Pakan Buatan pada Pertumbuhan Benih ikan Patin ( Pangasius pangasius ). PENA Akuatika. 1 (1): 20-29.
Kobayashi,  S.I.,  Alimuddin.,  Tetsuro,  M.,  Misako,  M.,  Jun,  L.,  Masato,  E.,  Toshiro,  T.,  Goro,  Y.,  2007. Transgenic  Nile  Tilapia  (Oreochromis  niloticus)  Over-Expressing  Growth  Hormone  Show  Reduced Ammonia Excretion . Aquaculture. (270): 427–435.
Lesmana  I.  2010. Production  and  Bioactivity  of  Recombinant  Protein  for  Growth  Hormone  of  Three  Cultured Fish Species . Food Science and Technology. 1 (1): 5.
Lestari,  S.    2001.    Pengaruh  Kadar  Ampas  Tahu  yang  Difermentasikan  Terhadap  Efisiensi  Pakan  dan Pertumbuhan Ikan Mas ( Cyprinus carpio ). Food Science and Technology. 1 (2): 72. Martha,  R.  2006.  Analisa  Kelayakan  Industri    Fillet  Ikan  Patin  Beku  ( Pangasius  hypopthalamus )  Kabupaten Bogor. Food Science and Technology. (1): 2. Matty, A. J. 1985. Fish endocrinology . Croom Helm London and Sydney Timber Press. Portland, Oregon. 267 Pp.
McCormick S. D. 2001. Endocrine Control of Osmoregulation in Teleost Fish . Am. Zool. (41): 781–794. Minggawati, I. 2011. Analisa Usaha Pembesaran Ikan Patin Djambal ( Pangasius djambal ) dalam Kolam di Desa Sidomulyo Kabupaten Kuala Kapuas. Media Sains. 3 (1) : 24-29.
Moriyama, S., Felix, G.A., Hiroshi, K., 2000. Review GroRegulation by Insulin-Like Growth Factor-1 in Fish. Biosci . Biotechnol. Biochem. (64): 1553–1562.
Munisa, Q. 2015. Kandungan Lemak dan Energi yang Berbeda dalam Pakan Berpengaruh terhadap Pemanfaatan Pakan dan Pertumbuhan Patin ( P. pangasius ). Journal of Aquaculture Management and Technology. 3 (2): 1-10.
Pérez-Sánchez,  J.,  Le  Bail,  P.Y.,  1999. Growth  Hormone  Axis  as  Marker  of  Nutritional  Status  and  Growth Performance in Fish . Aquaculture. (177): 117-128. Pomdonkoy  B.,  Warit  S.,  Payim  S.  2004. Production  of  A  Biologically  Active  Growth  Hormone  From  Giant Catfish (Pangasiamonodon Gigas) in Escheria Coli . Biotechnol. Lett. (26): 649-653. Qiang J. H., Yang., H. Wang., M. D Kpundeh., P, X. 2012. Growth and Igf-1 Response of Juvenile Nile Tilapia (Oreochramis  niloticus)  to  Changes  in  Water  Temperatue  and  Dietary  Protein  Level. Journal  of Thermal Biology. (37):  686-695.
Robinette  H.  R.    1976. Effect  of  Sublethal  Level  of  Ammonia  on  the  Growth  of  Channel  Catfish  (Ictalarus punctatus R.) Frog. Fish Culture. 38(1): 26-29. Setiawati  M.  2007. Penggunaan  Lemak  Patin  dalam  Pakan  Ikan  Nila Oreochromis  niloticus .  Jurnal  Akuatultur Indonesia. 6 (1): 89-95.
Setyawan.  2014.  Pengaruh  Pemberian  Recombinant  Growth  Hormone  (rGH)  Melalui  Metode  Perendaman Dengan  Dosis  yang  Berbeda  Terhadap  Kelulushidupan  dan  Pertumbuhan  Larva  Ikan  Nila  Larasati ( Oreochromis niloticus ). Journal of Aquaculture Management and Technology. 3 (2): 69-76.
Silverstein    J.T.,  Wolters  W.R.,  Shimizu  M.  and  Dickhoff  W.W.  2000. Bovine  Growth  Hormone  Treatment  of Channel Catfish: Strain and Temperature Effects on Growth, Plasma IGF-I Levels, Feed Intake and Efficiency, and Body Composition . Aquaculture. (190): 77-88. Smith,  A.,  Chan,  S.J.,  Gutierrez,  J.  2005. Autoradiographic  and  Immunohistochemical  Localization  of  Insulin- Like Growth Factor-1 Receptor Binding Sites in Brain of  the Brown Trout, Salmo trutta . Gen.  Comp. Endocrinol. (141): 203–213.
Srigandono B. 1981. Rancangan Percobaan. Universitas Diponegoro. Semarang. 140 hlm.
Steel,  R.,  and  Torrie,  J.  1995.  Prinsip  dan  Prosedur  Statistika  Suatu  Pendekatan  Biometrik  Edisi  Kedua.  PT Gramedia Pustaka Utama. Jakarta.
Tacon A. G. J. 1993. Feed Ingredients for Wrom Water Fish: Fish Meal and Other Processed Feedstuffs. FAO Fisheries Circulator No. 856, Rome. 64 Pp.
, A.G.J.  1987. The Nutrition and Feeding of Farmed Fish and Shrimp, a Training Manual II.  Nutrient Source and Composition .  FAO of the United Nation Brazilia. 208 Pp. Tort  E.,  Devlin  R.H.  and  Iwama  G.K.  2003. Disease  Resistance,  Stress  Response,  and  Effects  of  Triploidy  in Growth Hormone Transgenic Coho Salmon . J. Fish Biol. (63): 806-823. Utomo D.S.C., 2010. Production and Bioactivity of Recombinant Growth Hormone Protein . Food Science and Technology. (1): 11-15.
Wahyuni  F.  2013.  Kinerja  Pertumbuhan  Benih  Ikan  Gurame  yang  Diberi  Perendaman  Hormon  Pertumbuhan Rekombinan dengan Masa Pemeliharaan di Akuarium. Jurnal Akuakultur Indonesia. (10): 123-130.
Weatherly, A. H. 1972. Growth and Ecology of Fish Populations. Academic Press. New York. 175 Pp. Wong,  A.O.L.,  Hong.  Z.,  Yonghua  J.,  Wendy  K.W.Ko.  2006. Feedback  Regulation  of  Growth  Hormone Synthesis  and  Secretion  in  Fish  and  the  Emerging  Concept  of  Inpituitary  Feedback  Loop . Comparative Biochemistry and Physiology Part A. (144): 284–305.
Yada,  T.,  Uchida,  K.,  Kajimura,  S.,    Azuma,  T.,  Hirano,  T.,  Grau  E.G.  2002. Immunomodulatory  Effects  of Prolactin and Growth Hormone in the Tilapia, Oreochromis mossambicus . J. Endocrinol. (173): 483– 492.
Zonneveld  N.,  E.A.  Huisman,  and  J.H.  Boon.    1991.    Prinsip-Prinsip  Budidaya  Ikan.    PT.  Gramedia  Pustaka Utama. Jakarta. 318 hlm.