https://doi.org/10.56064/jps.v25i3.876 Naskah diusulkan: 02 Oktober 2023;  Naskah disetujui: 08 November 2023
p-ISSN: 1410-7058 e-ISSN: 2597-7059 © 2023 JPS MIPA UNSRI

## Jurnal Penelitian Sains
Journal Home Page: http://ejurnal.mipa.unsri.ac.id/index.php/jps/index

## Isolasi dan identifikasi mikroorganisme dari produk ekoenzim WOP FST 1310
Arina Findo Sari 1) , Lily Surayya Eka Putri 1) , Dinda Rama Haribowo 2) , Armar Riliansyah Tamala 1) , Irawan Sugoro 3) , Aldi Mujiyanto 1,4) , dan Firdaus Ramadhan 4,5*)
1) Program Studi Biologi, Fakultas Sains dan Teknologi, UIN Syarif Hidayatullah. 2) Pusat Laboratorium Terpadu (PLT), Fa- kultas Sains dan Teknologi UIN Syarif Hidayatullah. 3) Organisasi Riset dan Teknologi Nuklir, Badan Riset dan Inovasi Na- sional (BRIN), Jakarta Selatan. 4) Kelompok Studi GENOM, Prodi Biologi, Fakultas Sains dan Teknologi UIN Syarif Hidaya- tullah. 5) Laboratorium Mikrobiologi, Fakultas Farmasi Institut Sains dan Teknologi Nasional (ISTN).
Kata kunci: bakteri,
eko-enzim,
jamur,
WOP FST 1310
ABSTRAK: Produk  ekoenzim Waste  Organic  Product (WOP)  FST  1310,  merupakan  produk buatan  tim  Fakultas Sains  Dan  Teknologi,  UIN  Syarif  Hidayatullah.  Produk  ini  terbuat  dari  2 jenis sampah organik yang berbeda, yaitu sisa sayur dan kulit jeruk. Penelitian mengenai kon- sorsium  mikroba  pada  produk  ekoenzim  belum  banyak  dilaporkan.  Pentingnya  mengetahui mikroba yang hadir pada produk WOP FST 1310 merupakan langkah awal untuk menentukan pemilihan bahan substrat yang akan digunakan. Karakterisasi makroskopis diamati bentuk ko- loni, permukaan koloni , tepi koloni dan warna koloni. Karakter mikroskopis dilakukan dengan pengamatan bentuk sel dan pewarnaan gram. Identifikasi koloni dengan uji fisiologis biokimia yang diujikan, yaitu H 2 S, karbohidrat (uji katalase dan TSIA), fermentasi gula (glukosa, sukrosa, laktosa, manitol) dan MR-VP. Berdasarkan hasil diperoleh 11 isolat bakteri dan jamur dari ke- dua  bahan  dengan  lima  isolat  dari  kulit  jeruk  dan  enam  isolat  dari  sayuran.  Berdasarkan  uji makroskopis, mikroskopis, pewarnaan gram, aktivitas fisiologis dan biokimia merupakan isolat KJ NA 1, KJ NA 2, SY NA 3, SY NA 4, SY NA 5, dan SY NA 6 merupakan bakteri asam laktat (BAL). Keywords: bacteria, eco-enzymes, fungi, WOP FST 1310
ABSTRACT: Ecoenzyme product Waste Organic Product (WOP) FST 1310, is a product made by a team from the Faculty of Science and Technology, UIN Syarif Hidayatullah. This product is  made  from  2  different  types  of  organic  waste,  namely  vegetable  waste  and  orange  peels. Research on microbial consortia on ecoenzyme products has not been widely reported. The importance of knowing the microbes that are present in the WOP FST 1310 product is the first step to determine the selection of the substrate material to be used. Macroscopic characteriza- tion observed the shape of the colony, the surface of the colony, the edge of the colony and the color of the colony. Microscopy characters were carried out by observing cell shape and gram staining. Identification of colonies by physiological biochemical tests tested, namely, H2S, carbohydrates (catalase test and TSIA), sugar fermentation (glucose, sucrose, lactose, manni- tol) and MR-VP. Based on the results, 11 bacterial and fungal isolates were obtained from both materials, with five isolates from orange peels and six isolates from vegetables. Based on ma- croscopic, microscopic, gram staining, physiological and biochemical tests, the isolates KJ NA 1, KJ NA 2, SY NA 3, SY NA4, SY NA 5, and SY NA 6 were lactic acid bacteria (LAB).

## 1 PENDAHULUAN
koenzim  adalah  produk  dari  fermentasi  limbah organik. Bahan-bahan seperti ampas buah, kulit buah, dan sayuran yang diformulasikan dengan gula (gula  coklat,  gula  merah  atau  gula  tebu)  dan  air. Produk ini berwarna coklat gelap dan memiliki aro- ma fermentasi asam manis yang kuat [1], [2] Produk ini  awalnya  dibuat  untuk  mengatasi  permasalahan sampah  yang  selalu  meningkat  khususnya  sampah
rumah  tangga.  Hal  tersebut  berpotensi  mencemari lingkungan,  sumber  penyakit  dan  merusak  nilai keindahan. Pemanfaatan limbah rumah tangga den- gan menjadikannya produk ekoenzim memiliki man- faat  lain  selain  di  bidang  lingkungan  seperti  di  bi- dang pertanian dan kesehatan [2], [3].
Produk  ekoenzim Waste Organic  Product (WOP) FST  1310,  merupakan  produk  buatan  tim  Fakultas Sains dan Teknologi (FST), UIN Syarif Hidayatullah.
E
Produk ini terbuat dari 2 jenis sampah organik yang berbeda, yaitu sisa sayur dan kulit jeruk. Komponen sisa  sayur,  yaitu  kol,  sawi,  dan  mentimun.  Produk WOP FST 1310 ini diharapkan mampu menjadi so- lusi  untuk  menangani  sampah  organik  yang  berada di sekitar kampus UIN dan sebagai agen bioremedia- tor  untuk  lingkungan  perairan  sekitar.  Hal  ini  juga mendukung  langkah  peningkatan  menuju Evidence Universitas  Indonesia GreenMetric (UIGM) Question- naire kampus UIN Syarif Hidayatullah.
Beberapa  penelitian  sebelumnya  melaporkan ekoenzim berpotensi antibakteri secara in vitro pada Shigella spp., Bacillus spp., Salmonella  thyphi , Pseu- domonas  aeruginosa , Escherichia  coli [4] ,  Enterococ- cus  faecalis [5].  Lebih  lanjut  Hasanah  (2020)  mela- porkan  ekoenzim  berfungsi  menjadi  pupuk  organik cair  dan  desinfektan.  Dalam  pengembangannya  di bidang  lingkungan,  ekoenzim  mampu  untuk  me- murnikan air sehingga berpotensi menurunkan ting- kat  pencemaran  di  perairan  [6]–[9].  Fungsi  ekoen- zim  yang  beragam  merupakan  hasil  dari  reaksi  en- zimatis  yang  berasal  dari  mikroba  baik,  kelompok bakteri  ataupun  jamur  [10].  Enzim-enzim  seperti amilase,  lipase  dan  protease  dibutuhkan  untuk  me- rombak  senyawa  kompleks  yang  terdapat  di  dalam sampah organik [11], [12]. Penelitian mengenai kon- sorsium  mikroba  pada  produk  ekoenzim  belum  ba- nyak  dilaporkan.  Pentingnya  mengetahui  mikroba yang hadir pada produk WOP FST 1310 merupakan langkah  awal  untuk  menentukan  pemilihan  bahan substrat  yang  akan  digunakan.  Hal  tersebut  akan mendukung  pengembangan  penelitian  mengenai produk WOP FST 1310 yang berkelanjutan.

## 2 BAHAN DAN METODE
Penelitian  dilakukan  di  Laboratorium  Mikrobiologi, PLT  UIN  Syarif  Hidayatullah.  Bahan  utama  dalam penelitian ini adalah produk ekoenzim Waste Organ- ic Product (WOP) FST 1310. Produk ini terbuat dari 2  jenis  sampah  organik  yang  berbeda,  yaitu  sisa sayur  dan  kulit  buah  jeruk.  Komponen  sisa  sayur, yaitu kol, sawi, dan mentimun. Alat dan bahan yang digunakan  dalam  pembuatan  media  diantaranya adalah,  media  NA  dan  PDA,  cawan  gores,  botol pengencer, cawan petri, laminar air flow , alumunium foil ,  kapas,  botol specimen ,  jarum  oce,  kaca  objek, alkohol, bunsen, isolat bakteri, akuades, zat pewarna primer untuk bakteri ( crystal violet dan safranin) dan jamur  ( lactophenol  cotton  blue ),  aseton,  mikroskop, pereaksi  indol,  pereaksi methyl  red ,  larutan alpha naftol ,  larutan  KOH  40%, tabung  reaksi,  media  NA, media  MIO, tetesreagen  kovaes ,  media  MR-VP,  me- dia  SCA,  inkubator,  larutan  H2O2,  reagen tetrame- thyl – paraphenyldiamine , ose.
Prosedur kerja penelitian ini terdiri dari pembua- tan media, isolasi, karakterisasi makroskopis dan mi- kroskopis  mikroba  hasil  isolasi  dan  uji  fisiologis  bio- kimia. Karakterisasi makroskopis diamati bentuk ko- loni, permukaan koloni , tepi koloni dan warna kolo- ni [13]. Karakter mikroskopis dilakukan dengan pen- gamatan  bentuk  sel  dan  pewarnaan  gram.  Identifi- kasi isolat terduga dengan uji aktivitas fisiologis dan biokimia  bertujuan  untuk  menentukan kemampuan bakteri  dalam  memproduksi  gas  H 2 S  dan  karbohi- drat  (uji  katalase  dan  TSIA),  memfermentasi  gula (glukosa,  sukrosa,  laktosa,  manitol)  dan    produksi asam campuran (uji MR-VP) yang mengacu Bergey’s Manual  of  Determinative  Bacteriology [14].  Pada  se- tiap  uji  koloni  ditanam  pada  media  spesifik  dan  di- amati perubahan pada media setelah masa inkubasi 24 jam pada suhu 37 o C. Prosedur kerja penelitian ini terdiri  dari  pembuatan  media,  isolasi,  karakterisasi makroskopis  dan  mikroskopis  mikroba  hasil  isolasi dan uji fisiologis biokimia. Karakterisasi makroskopis diamati bentuk koloni, permukaan koloni , tepi kolo- ni dan warna koloni [13]. Karakter mikroskopis dila- kukan  dengan  pengamatan  bentuk  sel  dan  pewar- naan gram. Identifikasi isolat terduga dengan uji ak- tivitas  fisiologis  dan  biokimia  bertujuan  untuk  me- nentukan  kemampuan  bakteri  dalam  memproduksi gas  H 2 S  dan  karbohidrat  (uji  katalase  dan  TSIA), memfermentasi  gula  (glukosa,  sukrosa,  laktosa,  ma- nitol)  dan    produksi  asam  campuran  (uji  MR-VP) yang  mengacu Bergey’s  Manual  of  Determinative Bacteriology [14]. Pada setiap uji koloni ditanam pa- da media spesifik dan diamati perubahan pada me- dia setelah masa inkubasi 24 jam pada suhu 37 o C.

## 3 HASIL
Cairan  WOP  FST  1310  berbahan  kulit  jeruk  dan sayuran diisolasikan pada media NA hingga tumbuh. Setelah  berhasil  ditumbuhkan,  isolat  bakteri  dimur- nikan  dengan  media  yang  sama.  Hal  ini  bertujuan untuk  mengetahui  karakteristik  koloni  bakteri.  Ber- dasarkan hasil diperoleh 11 isolat dari kedua bahan WOP FST 1310, yaitu lima isolat pada kulit jeruk (KJ NA 1; KJ NA 2; KJ NA 3; KJ NA 4; dan KJ NA 5) dan enam isolat pada sayuran (SY NA 1; SY NA 2; SY NA 3; SY NA 4; SY NA 5; dan SY NA 6). Karakte- ristik makroskopis koloni bakteri hasil isolasi dari ke- dua  bahan  memiliki  karakter  yang  beragam  (Tabel 1).
Hasil  uji  pewarnaan  gram  pada  penelitian  ini menunjukkan  seluruh  isolat  adalah  gram  positif  ke- cuali  KJ  NA  4.  Bentuk  sel  yang  teramati  diperoleh enam  isolat  berbentuk coccus dan  lima  isolat  ber- bentuk bacil (Tabel 2).
Uji  biokimia  yang  dilakukan  pada  penelitian  kali ini  diantaranya  uji  katalase,  kandungan  sulfur,  fer- mentasi karbohidrat, indol, MR, VP dan Sitrat (Tabel 3). Hasil uji katalase menunjukkan bahwa isolat bak- teri  KJ  NA  3,  KJ  NA  4,  KJ  NA  5,  SY  NA  1,  dan  2 menghasilkan  hasil  positif  dengan  adanya  gelem- bung pada uji katalase. Bakteri KJ NA3, dan 4 me- nunjukkan  hasil  positif  pada  uji  H 2 S  yang  ditunjuk- kan dengan adanya warna kehitaman pada hasil uji. Pada  hasil  pengamatan  uji  karbohidrat,  SY  NA  1 memiliki  kemampuan  untuk  memfermentasikan  se- luruh gula. KJ NA 1, dan 5 hanya mampu memfer- mentasi  glukosa  dan  laktosa.  SY  NA  2,  3,  dan  5 hanya mampu memfermentasi glukosa dan sukrosa. Isolat KJ NA 4 hanya mampu memfermentasi lakto- sa dan SY NA 5 hanya mampu memfermentasi glu- kosa.  Hampir  seluruh  isolat  bakteri  menunjukkan hasil positif pada uji indol yang ditandai dengan ter- bentuknya cincin berwarna merah, kecuali KJ NA 3, KJ NA 4, dan KJ NA 5. Seluruh bakteri menunjuk- kan  hasil  negatif  untuk  uji  MR.  Pada  uji  VP  hampir seluruh bakteri menunjukkan hasil positif kecuali KJ NA 1 dan KJ NA 5. Hasil pengamatan pada uji sitrat, hanya KJ NA 4, KJ NA 5, dan SY NA 5 yang menun- jukkan hasil positif.

## Karakteristik Makroskopis Isolat Jamur
Terdapat 11 isolat yang diperoleh dari kedua bahan, yaitu lima dari kulit jeruk (KJ) dan enam dari sayu- ran (SY). Karakter makroskopis isolat jamur dipero- leh memiliki ciri yang beragam (Tabel 4). Morfologi koloni jamur yang didapatkan cukup bervariasi. Dari segi  warna,  terdapat  beberapa  warna  koloni  yang ditemukan  seperti  jingga,  abu-abu,  hitam,  putih ke- kuningan,  putih,  dan    merah  muda.  Bentuk  koloni terdiri dari irregular dan circular .  Bentuk  tepian ko- loni  yang  didapatkan,  yaitu undulate dan entire  lo- bate .  Ukuran  koloni  jamur  bervariasi  mulai  dari small , moderate , dan large . Konsistensi koloni jamur yang  diisolasikan  paling  banyak  adalah opaque ,  na- mun juga terdapat transparant . Elevasi koloni jamur cukup beragam, seperti raised , flat , dan conveks . Ko- loni  jamur  yang  ditumbuhkan  memiliki  beberapa struktur  permukaan,  seperti  mengkilap,  berkerut, kusam, halus, dan licin.

## 4 PEMBAHASAN
Kulit  jeruk  dan  sisa  sayuran  merupakan  bahan- bahan yang dapat dijadikan sebagai sumber karbon mikroorganisme, sehingga mikroba dapat ditemukan pada  ekoenzim.  Contoh  sumber  karbon  bagi  mi- kroorganisme  adalah  karbohidrat.  Karbohidrat  se- perti pati atau amilum merupakan senyawa organik pada  ekoenzim  [15].  Hal  ini  karena  terdapat  kan-
dungan karbohidrat yang banyak pada sayuran dan buah-buahan  (Slavin  &  Carlson,  2014).  Kemudian karbohidrat  tersebut  digunakan  bakteri.  Kulit  jeruk memiliki sumber pektin yang sekitar 18,3%  oleh ka- renannya  memungkinkan  banyak  mikroba  seperti kelompok  bakteri  dan  jamur dapat  hidup  [17].  Sisa sayuran sendiri umumnya banyak mengandung selu- losa dan garam mineral yang cukup tinggi [18]. Bak- teri  menggunakan  nutrisi  yang  terdapat  pada  ling- kungan hidupnya melalui berbagai aktivitas biokimia [19].

## Karakteristik Makroskopis Isolat Bakteri dan Pewarnaan Bakteri
Isolat dengan warna putih hingga putih pucat meru- pakan  isolat  yang  dominan diperoleh  sama dengan penelitian  sebelumnya.  Penelitian  [15],  [20] mela- porkan seluruh isolat yang diperoleh hasil isolasi dari eko-enzim  beberapa  buah  memiliki  warna  keputih- putihan  hingga  putih  pucat.  Lebih  lanjut  Arun  & Sivashanmugam  (2015)  menginfokan  bahwa  warna bakteri pada ekoenzim didominasi oleh warna putih.
Isolat  bakteri  dari  penelitian  ini  didominasi  oleh bakteri gram positif yang diduga merupakan bakteri asam  laktat  (BAL).  Menurut  Viza  (2022)  ekoenzim mengandung  asam  laktat  dan  asam  asetat.  Lebih lanjut  Hanifah  et  al.  (2022)  menerangkan  bahwa produksi  asam tersebut  berhubungan dengan  sinte- sis  asam  laktat  dan  asam  asetat  hasil  dari  metabo- lisme  mikroba  dalam  ekoenzim.  Hasil  yang  serupa dengan penelitian Naeem et al . (2012) semua isolat gram  positif  dan  isolat terduga  kelompok  BAL.  Me- nurut  Mozzi  (2016)  BAL  merupakan  bakteri  gram positif  dan  memiliki  bentuk  bulat  atau  batang.  Ber- beda dengan penelitian Widowati et al. (2020) yang diperoleh semua isolat gram negatif.

## Aktivitas Fisiologis dan Biokimia
Gelembung  pada  hasil  uji  aktivitas  katalase  terben- tuk karena isolat bakteri KJ NA 3, KJ NA 4, KJ NA 5, SY NA 1, dan SY NA 2  memiliki enzim katalase. En- zim  katalase  akan  mengurai  hidrogen  peroksida membentuk  H 2 O  dan  gas  O 2 [25].  Berdasarkan  uji katalase, maka bakteri yang menunjukkan hasil posi- tif tergolong bakteri aerob. Hal ini dikarenakan me- nurut  enzim  katalase  dapat  mendetoksifikasi  hidro- gen peroksida (H2O2) dan biasanya ditemukan pada bakteri  yang  mampu  tumbuh  dengan  adanya  oksi- gen [26].
Hasil  positif  pada  uji  H 2 S  yang  ditunjukkan  oleh isolat  bakteri  KJ  NA3,  dan  KJ  NA  4  menandakan bahwa  bakteri  tersebut  mampu  memfermentasi asam  amino.  Sedangkan  jika  hasil  negatif  berarti
bakteri  tidak  mampu  melakukan  fermentasi  asam amino [25].
Uji fermentasi karbohidrat bertujuan untuk men- getahui  kemampuan  isolat  bakteri  dalam  menghi- drolisis  karbohidrat  [25].  Hasil  pada  uji  fermentasi karbohidrat  yang  telah  dilakukan  akan  mengung- kapkan pola fermentasi, kemudian pola tersebut da- pat digunakan untuk membedakan antara kelompok bakteri atau spesies. Dalam penelitian ini juga keba- nyakan isolat (kecuali KJ NA 3)  mampu melakukan fermentasi  karbohidrat  menghasilkan  asam  organik yang dapat menurunkan pH. Seperti produk ekoen- zim  lainnya,  WOP  FST  1310  juga  memiliki  pH  ren- dah.  Rendahnya  pH  mengindikasikan  tingginya asam-asam  organik.  Menurut  Viza  (2022)  ekoenzim mengandung  asam  laktat  dan  asam  asetat.  Produk ekoenzim  hasil  kulit  buah  jeruk  dan  sayur  memiliki pH sekitar 4 - 5 akibat degradasi karbohidrat meng- hasilkan  asam  organik  dan  asam  volatil  [18],  [27]. Hanifah et al. (2022) menerangkan bahwa produksi asam  tersebut  berhubungan  dengan  sintesis  asam laktat dan asam asetat hasil dari metabolisme mikro- ba dalam ekoenzim.
Uji  indol  dilakukan  untuk  mengetahui  kemam- puan  mikroorganisme  dalam  mendegradasi  asam amino triptofan dan membentuk indole [25]. Sampir seluruh mikroorganisme pada penelitian ini menun- jukkan hasil positif, karenannya mikroorganisme ter- sebut  mengandung  enzim  tripfanase  yang  merupa- kan  katalis  pengurai  indol  yang  terkandung  dalam asam amino triptofan [28].
Hasil negatif pada Uji Methyl Red (MR), mengin- dikasikan  bahwa seluruh  isolat  negatif  dalam  mem- produksi  dan  mempertahankan  produk  akhir  asam stabil  dari  fermentasi  glukosa.  Hasil  positif  pada  uji Voges  Proskauer  (VP)  menunjukkan  bahwa  semua isolat positif terhadap pembentukan acetonin dalam kultur cair bakteri [29].
Hasil positif isolat KJ NA 4, KJ NA 5, dan SY NA 5  pada  uji  sitrat  menunjukkan  bahwa  mikroorga- nisme pada isolat tersebut menggunakan sitrat seba- gai satu-satunya sumber karbon dan energi. Bila mi- kroba mampu menggunakan sitrat, maka asam akan dihilangkan  dari  medium  biakan,  sehingga  menye- babkan peningkatan pH dan mengubah warna me- dium dari hijau menjadi biru [28].
Hasil uji makroskopis, mikroskopis, dan biokimia mengindikasikan bahwa isolat KJ NA 1, KJ NA 2, SY NA 3, SY NA 4, SY NA 5 dan SY NA 6 diduga  ma- suk  ke  dalam  kelompok  bakteri  asam  laktat  (BAL), sedangkan  sisa  isolat  yang  didapatkan  merupakan kelompok non-BAL. Isolat KJ NA 1, KJ NA 2, SY NA 5,  dan  SY  NA  6  diduga  merupakan Streptococcus
dan enterococcus ,  sedangkan  SY  NA  3  &  SY  NA  4 diduga  merupakan Lactobacillus .  Mozzi  (2016)  me- nerangkan  bahwa  bakteri  asam  laktat  (BAL)  meru- pakan kelompok bakteri yang secara filogenetik ter- kait  erat  menghasilkan  asam  laktat  sebagai  produk utama atau satu-satunya dari fermentasi karbohidrat. Bakteri  asam  laktat  (BAL)  ini  memiliki  karakteristik gram  positif,  tidak  menghasilkan  spora,  katalase- negatif,  toleran  asam,  aerotoleran,  dan  biasanya berbentuk kokus atau batang nonmotil.
Hasil uji makroskopis, mikroskopis, dan biokimia Isolat  KJ  NA  4  diduga  merupakan Pseudomonas . Pseudomonas dalam  ekoenzim  pernah  ditemukan oleh  peneltian  sebelumnya  [30]. Pseudomonas mempunyai kemampuan untuk mensekresikan asam organik [31]. Asam organik seperti asam sitrat meru- pakan  asam  organik  yang  dapat  disekresikan  oleh genus Pseudomonas [32].  Hasil  uji  fermentasi  me- nunjukkan  bahwa  KJ  NA  4  yang  diduga  sebagai Pseudomonas hanya  mampu  melakukan  fermentasi laktosa.  Hal  ini  tidak  sejalan  dengan  [33]  yang  me- nyatakan  bahwa  berbagai  macam  bakteri  termasuk pseudomonas mampu  mengoksidasi d-glukosa  men- jadi  asam  glukonat  dan  kemampuan  tersebut  digu- nakan  dalam  fermentasi  untuk  biosintesis.  Isolat  KJ NA  3  &  5  diduga  merupakan micrococcus dan sta- phylococcus berturut-turut. Kedua isolat tidak masuk kedalam  kelompok  BAL.  Lebih  lanjut  hasil  uji  ma- kroskopis,  mikroskopis,  dan  biokimia  menunjukkan bahwa isolat SY NA 3, dan SY NA 4 juga tidak ter- masuk  ke  dalam  kelompokk  BAL,  meskipun  demi- kian isolat-isolat yang tidak masuk ke dalam kelom- pok  BAL  tersebut  mampu  melakukan  fermentasi karbohidrat, kecuali isolat KJ NA 3 yang diduga mi- crococcus .  Hal  ini  karena micrococcus tidak  dapat melakukan fermentasi karbohidrat [34]. Uji moleku- ler  perlu  dilakukan  untuk  identifikasi  lebih  lanjut. Karena identifikasi secara makroskopis, mikroskopis, dan biokimia masih belum cukup untuk mengidenti- fikasi bakteri dengan tepat.
Berdasarkan  hasil  karakteristik  makroskopis  ter- dapat beberapa isolat jamur yang diduga kelompok genus Penicillium , Aspergillus , Fusarium dan Tricho- derma . Hasil penelitian sebelumnya melaporkan ter- dapat 10 isolat kulit jeruk dengan karakter morfologi, enzim  pektinolitik  yang teridentifikasi  sebagai  genus Penicillium , Aspergillus , Fusarium dan Trichoderma (Amilia et  al .,  2017).  Lebih  lanjut,  Setiawan dkk . (2016)  melaporkan isolat yang ditemui pada peneli- tian  di  kulit  jeruk  memiliki  koloni  putih,  pertumbu- han koloni rata dan tebal. Isolat yang kedua memiliki warna  hijau tua kemudian  hitam     dengan  pertum- buhan koloni menyebar dan tebal.

## 5 KESIMPULAN
Hasil  isolasi  mikroorganisme  pada  ekoenzim Waste Organic Product (WOP) FST 1310 terdapat 11 isolat bakteri  dari  kedua  bahan dan Isolat  jamur  yang di- peroleh  terdapat  11  isolat  dari  kedua  bahan.  Isolat KJ NA 1, KJ NA 2, SY NA 3, SY NA 4, SY NA 5, dan SY NA 6 diduga  masuk ke dalam kelompok kelom- pok bakteri asam laktat (BAL).

## Ucapan Terima Kasih
Penulis mengucapkan terima kasih kepada Lembaga Penelitian dan Pengabdian Masyarakat (LP2M) den- gan  Surat  Keputusan  Nomor:  UN.01/KPA/760/2021 UIN Syarif Hidayatullah yang telah mendanai peneli- tian ini.

## REFERENSI ______________________________
[1] D. Yanti and R. Awalina, “Sosialisasi dan Pelatihan Pengolahan Sampah Organik Menjadi Eco-Enzyme,” Jurnal Warta Pengabdian Andalas , vol. 28, no. 2, pp. 84–90, Jun. 2021, doi: 10.25077/jwa.28.2.84-90.2021.
[2] K. Jain, “MAR Microbiology Curbing Chemical Chaos against COVID-19 by Simple Solitary Solution-A Mini Review on Bio-Enzymes,” 2021.
[3] Y. Hasanah, “Eco enzyme and its benefits for organic rice production and disinfectant,” Journal of Saintech Transfer , vol. 3, no. 2, pp. 119–128, Jan. 2020, doi: 10.32734/JST.V3I2.4519.
[4] K. Neupane and R. Khadka, “Production of Garbage Enzyme from Different Fruit and Vegetable Wastes and Evaluation of its Enzymatic and Antimicrobial Effi- cacy,” Tribhuvan University Journal of Microbiology , vol. 6, pp. 113–118, Dec. 2019, doi:
10.3126/tujm.v6i0.26594.
[5] H. A. K. Mavani et al. , “Antimicrobial efficacy of fruit peels eco-enzyme against Enterococcus faecalis: An in vitro study,” Int J Environ Res Public Health , vol. 17, no. 14, pp. 1–12, Jul. 2020, doi: 10.3390/ijerph17145107.
[6] M. Hemalatha and P. Visantini, “Potential use of eco- enzyme for the treatment of metal based effluent,” in IOP Conference Series: Materials Science and Engineer- ing , Institute of Physics Publishing, Feb. 2020. doi: 10.1088/1757-899X/716/1/012016.
[7] M. Janarthanan, K. Mani, and S. R. S. Raja, “Purifica- tion of Contaminated Water Using Eco Enzyme,” in IOP Conference Series: Materials Science and Engineer- ing , IOP Publishing Ltd, Nov. 2020. doi: 10.1088/1757- 899X/955/1/012098.
[8] B. S. Patel, B. R. Solanki, and A. U. Mankad, “Effect of eco-enzymes prepared from selected organic waste on domestic waste water treatment,” World Journal of Ad- vanced Research and Reviews , vol. 10, no. 1, pp. 323– 333, Apr. 2021, doi: 10.30574/wjarr.2021.10.1.0159.
[9] E. Pratamadina and T. Wikaningrum, “Potensi Peng- gunaan Eco Enzyme pada Degradasi Deterjen dalam Air Limbah Domestik,” Jurnal Serambi Engineering , vol. 7, no. 1, Feb. 2022, Accessed: Nov. 27, 2022. [On- line]. Available:
https://ojs.serambimekkah.ac.id/jse/article/view/2722- 2728
[10] D. Larasati, A. Puji Astuti, and E. Triwahyuni Maharani, UJI ORGANOLEPTIK PRODUK ECO-ENZYME DARI LIMBAH KULIT BUAH (STUDI KASUS DI KOTA SE- MARANG). 2020.
[11] C. Arun and P. Sivashanmugam, “Investigation of bio- catalytic potential of garbage enzyme and its influence on stabilization of industrial waste activated sludge,” Process Safety and Environmental Protection , vol. 94, no. C, pp. 471–478, Mar. 2015, doi:
10.1016/j.psep.2014.10.008.
[12] N. Rasit, L. Hwe Fern, and W. Azlina Wan Ab Karim Ghani, “Production and Characterization of Eco En- zyme Produced From Tomato And Orange Wastes And Its Infulence On The Aquaculture Sludge,” Inter- national Journal of Civil Engineering and Technology , vol. 10, no. 3, pp. 967–980, 2019.
[13] Dwidjoseputro, Dasar - Dasar Mikrobiologi , 16th ed. Jakarta: Djambatan, 2005. Accessed: Nov. 27, 2022. [Online]. Available: https://opac.perpusnas.go.id/DetailOpac.aspx?id=3661 66#
[14] J. G. Holt, N. R. Krieg, P. H. A. Sneath, J. T. Staley, and S. T. Williams, Bergey’s Manual Determinative Bac- teriology , 9th ed. Boltimore: Lippincott Williams & Wil- kins, 2000. Accessed: Nov. 27, 2022. [Online]. Availa- ble:
https://books.google.co.id/books?id=jtMLzaa5ONcC& printsec=frontcover&hl=id#v=onepage&q&f=false
[15] R. H. Wibowo et al. , “Bakteri Penghasil Amilase yang Diisolasi dari Ekoenzim Limbah Buah-Buahan,” Jurnal Biosilampari : Jurnal Biologi , vol. 4, no. 2, pp. 107–117, Jun. 2022, doi: 10.31540/BIOSILAMPARI.V4I2.1531.
[16] J. Slavin and J. Carlson, “Carbohydrates,” Advances in Nutrition , vol. 5, no. 6, pp. 760–761, Nov. 2014, doi: 10.3945/an.114.006163.
[17] A. Jabeen, Q.-U.-A. Hanif, M. Hussain, A. Munawar, N. Farooq, and S. Bano, “Screening, isolation and identi- fication of pectinase producing bacterial strains from rotting fruits and determination of their pectinolytic ac- tivity,” SCIENCE LETTERS , vol. 3, no. 2, pp. 42–45, Feb. 2015, Accessed: Nov. 27, 2022. [Online]. Availa- ble:
http://thesciencepublishers.com/science_letters/files/v3i 2-1-2014046-SL.pdf
[18] S.-S. Teo, L. C. Wen, and R. L. Z. Ling, “Effective Mi- croorganisms in Producing Eco-Enzyme from Food Waste for Wastewater Treatment,” Applied Microbiolo- gy: Theory ＆ Technology , pp. 28–36, May 2021, doi: 10.37256/AMTT.212021726.
[19] C. N. Mutiarahmi, T. Hartady, and R. Lesmana, “Use Of Mice As Experimental Animals In Laboratories That
Refer To The Principles Of Animal Welfare: A Litera- ture Review,” Indonesia Medicus Veterinus , vol. 10, no.
1, pp. 134–145, Jan. 2021, doi:
10.19087/IMV.2020.10.1.134.
[20] M. Naeem, M. Ilyas, S. Haider, S. Baig, and M. Saleem, “Isolation Characterization And Identification Of Lactic Acid Bacteria From Fruit Juices And Their Efficacy Against Antibiotics,” Pak J Bot , vol. 44, pp. 323–328, Mar. 2012, Accessed: Nov. 27, 2022. [Online]. Availa- ble: http://www.pakbs.org/pjbot/PDFs/44(SI1)/48.pdf#
[21] R. Y. Viza, “Uji Organoleptik Eco-Enzyme dari Limbah Kulit Buah,” BIOEDUSAINS:Jurnal Pendidikan Biologi dan Sains , vol. 5, no. 1, pp. 24–30, Mar. 2022, doi: 10.31539/bioedusains.v5i1.3387.
[22] A. Hanifah et al. , “The Effect of Variations in Sugar Types and Fermentation Time on Enzyme Activity and Total Titrated Acid on Eco-Enzyme Results of Fermen- tation,” Proceedings of the 7th International Conference on Biological Science (ICBS 2021) , vol. 22, pp. 585–589, May 2022, doi: 10.2991/ABSR.K.220406.084.
[23] F. Mozzi, “Lactic Acid Bacteria,” Encyclopedia of Food and Health , pp. 501–508, Jan. 2016, doi: 10.1016/B978- 0-12-384947-2.00414-1.
[24] E. Widowati, R. Utami, E. Nurhartadi, and F. Fenny, “Karakterisasi bakteri pektinolitik dari limbah kulit jeruk dan karakterisasi pektinase yang dihasilkan serta studi aplikasinya untuk penjernihan sari buah Jeruk Pontia- nak,” Journal of Tropical AgriFood , vol. 2, no. 1, p. 34, Aug. 2020, doi: 10.35941/jtaf.2.1.2020.3937.34-44.
[25] A. G. Liempepas, W. Astuty Lolo, and P. Yamlean, “Isolasi Dan Uji Antibakteri Dari Isolat Bakteri Yang Berasosiasi Dengan Spons Callyspongia Aerizusa Serta Identifikasi Secara Biokimia,” PHARMACON , vol. 8, no. 2, pp. 380–387, May 2019, doi:
10.35799/PHA.8.2019.29304.
[26] M. T. Madigan, J. M. Martinko, K. S. Bender, D. H. Buckley, and D. A. Stahl, Brock Biology of Microorgan- isms , 14th ed. Pearson Education, Inc., 2015.
[27] N. Rasit and O. Chee Kuan, “Investigation on the Influ- ence of Bio-catalytic Enzyme Produced from Fruit and Vegetable Waste on Palm Oil Mill Effluent,” IOP Conf
Ser Earth Environ Sci , vol. 140, no. 1, p. 012015, 2018, doi: 10.1088/1755-1315/140/1/012015.
[28] S. M. Pattuju, Fatimawali, and A. Manampiring, “Iden- tifikasi Bakteri Resisten Merkuri pada Urine,  Feses dan Kalkulus Gigi Pada Individu di Kecamatan Malalayang, Manado, Sulawesi Utara,” eBiomedik , vol. 2, no. 2,
2014, doi: 10.35790/EBM.V2I2.5108.
[29] S. A. Rahayu and M. H. Gumilar, “Uji Cemaran Air Minum Masyarakat Sekitar Margahayu Raya Bandung Dengan Identifikasi Bakteri Escherichia coli,” Indone- sian Journal of Pharmaceutical Science and Technology , vol. 4, no. 2, pp. 50–56, Oct. 2017, doi: 10.15416/IJPST.V4I2.13112.
[30] S. Sarabhai, A. Arya, and C. Arti Arya, “Garbage en- zyme: A study on compositional analysis of kitchen waste ferments,” The Pharma Innovation Journal , vol. 8, no. 4, pp. 1193–1197, 2019, Accessed: Nov. 27, 2022. [Online]. Available: www.thepharmajournal.com
[31] D. Susilaningsih et al. , “ISOLASI GEN SITRAT SIN- TASE BAKTERI Pseudomonas aerugenosa PS2 DARI RIZOSFER POHON KRUING (Dipterocarpus sp.) UN- TUK MODEL KONSTRUKSI METABOLISME SEL MI- KROALGA BERKARBOHIDRAT RENDAH,” Berita Bi- ologi Jurnal Ilmu-ilmu Hayati , vol. 18, no. 2, pp. 247– 253, Aug. 2019, doi:
10.14203/BERITABIOLOGI.V18I2.2967.
[32] R. J. Mailloux, J. Lemire, S. Kalyuzhnyi, and V. Ap- panna, “A novel metabolic network leads to enhanced citrate biogenesis in Pseudomonas fluorescens exposed to aluminum toxicity,” Extremophiles , vol. 12, no. 3, pp. 451–459, May 2008, doi: 10.1007/S00792-008-0150-1.
[33] R. J. Gomes, M. de F. Borges, M. de F. Rosa, R. J. H. Castro-Gómez, and W. A. Spinosa, “Acetic Acid Bacte- ria in the Food Industry: Systematics, Characteristics and Applications,” Food Technol Biotechnol , vol. 56, no. 2, p. 139, Apr. 2018, doi: 10.17113/FTB.56.02.18.5593.
[34] G. H. G. Davis and B. Hoyling, “Observations on anae- robic glucose utilization tests in Staphylococcus Micro- coccus identification,” Int J Syst Bacteriol , vol. 24, no.
1, pp. 1–5, Jan. 1974, doi: 10.1099/00207713-24-1- 1/CITE/REFWORKS. ______________________________
_____________________________________________________

## LAMPIRAN
Tabel 1. Karakteristik makroskopis koloni bakteri dari WOP FST 1310 Koloni Warna Bentuk koloni  Bentuk tepi  Ukuran Konsistensi  Elevasi Permukaan Kulit Jeruk (KJ) KJ NA 1 Kuning kecoklatan Irregular Undulate Moderate Transparant Flat Halus, kusam KJ NA 2 Putih Irregular Undulate Moderate Transparant Flat Halus KJ NA 3 Putih kekuningan Circular Entire lobate Small Opaque Flat Halus KJ NA 4 Putih kekuningan Circular Entire lobate Small Opaque Flat Halus KJ NA 5 Putih kekuningan Irregular  Entire lobate Moderate Opaque Flat Halus, kusam

## Sayur (SY)
SY NA 1 Putih kekuningan Irregular Undulate Moderate Opaque Flat Halus, kusam SY NA 2 Putih pucat Irregular Undulate Small Opaque Flat Halus SY NA 3 Putih pucat Circular Entire lobate Moderate Opaque Flat Halus SY NA 4 Putih Circular Entire lobate Small Opaque Flat Halus SY NA 5 Kuning kecoklatan Irregular  Entire lobate Moderate Translucent Conveks Halus, mengkilap SY NA 6 Kuning kecoklatan Irregular Undulate Moderate Translucent Flat Halus, kusam
Keterangan : KJNA = Kulit Jeruk; SY NA = Sayur-sayuran
Tabel 2. Karakteristik dan uji pewarnaan gram bakteri isolat WOP FST 1310
Keterangan : KJNA = Kulit Jeruk; SY = Sayur-sayuran
Koloni Warna Bentuk
Kulit Jeruk
KJ NA 1 KJ NA 2 KJ NA 3 KJ NA 4 KJ NA 5 ungu ungu ungu merah muda ungu bulat bulat bulat batang batang Koloni  Warna  Bentuk Sayur SY NA 1 SY NA 2 SY NA 3 SY NA 4 SY NA 5 SY NA 6 ungu ungu ungu ungu ungu ungu batang batang batang batang bulat bulat Tabel 3. Hasil uji aktivitas fisiologi dan biokimia Koloni Uji Katalase Uji Kandungan Sulfur Fermentasi Karbohidrat Uji Indol Uji MR Uji VP Uji Si- trat Kulit Je- ruk (KJ) Glukosa Sukrosa Laktosa KJ NA 1 - - Kuning - Kuning + - - - KJ NA 2 - - Kuning Kuning - + - + - KJ NA 3 + + - - - - - + - KJ NA 4 +++ + - - Kuning - - + + KJ NA 5 + - Kuning - Kuning - - - + Sayur (SY) SY NA 1 +++ - Kuning Kuning Oranye + - + - SY NA 2 ++ - Kuning Kuning - + - + - SY NA 3 - - Kuning Kuning - + - + - SY NA 4 - - Oranye - - + - + - SY NA 5 - - Kuning Oranye - + - + + SY NA 6 - - Kuning Kuning - + - + -
Keterangan : KJNA = Kulit Jeruk; SY NA = Sayur-sayuran
Tabel 4. Karakter makroskopis isolat jamur Koloni Warna Bentuk koloni Tekstur Bentuk tepi Garis radial Zona lingkaran Kulit Jeruk (KJ) Atas Bawah KJ PDA 1 Jingga Jingga Irregular Mengkilap Undulate Tidak ada  Ada KJ PDA 2 Abu-abu Putih Irregular Berkerut Curved Tidak ada  Ada KJ PDA 3 Hitam Putih Irregular Berkerut, kusam Entire lobate Ada Ada KJ PDA 4 Putih kekuningan Putih kekuningan  Circular Halus, licin Entire lobate Tidak ada  Ada KJ PDA 5 Hitam Hitam Circular Berkerut Entire lobate Tidak ada  Tidak ada Sayur (SY) SY PDA 1 Merah muda Merah muda Circular Halus, licin Entire lobate Tidak ada  Tidak ada SY PDA 2 Merah muda Merah muda Circular Halus, licin Entire lobate Tidak ada  Tidak ada SY PDA 3 Putih kekuningan Putih kekuningan  Irregular Kasar, mengkilap  Undulate Tidak ada  Ada SY PDA 4 Putih Putih Circular Halus, kusam Entire lobate Tidak ada  Ada SY PDA 5 Hitam Hitam Circular Berkerut Entire lobate Tidak ada  Ada SY PDA 6 Putih Putih Irregular Halus, licin Undulate Tidak ada  Tidak ada
KJ PDA = Kulit Jeruk; SY PDA = Sayur-sayuran