## ISOLATION AND IDENTIFICATION OF FLAVONOID COMPOUNDS ETHANOL EXTRACT OF SUANGGI LEMON PEEL Citrus limon L.

## ISOLASI DAN IDENTIFIKASI SENYAWA FLAVONOID EKSTRAK ETANOL KULIT BUAH LEMON SUANGGI Citrus limon L.
Rizya Marchilia Mamahit 1)* , Fatimawali 1) , Meilani Jayanti 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA Universitas Sam Ratulangi *rizyammamahit@gmail.com

## ABSTRACT
Suanggi lemon peel is a plant that is often used as a traditional health therapy. The outer skin of the lemon  suanggi (Citrus Limon L.) is rich in oil glands, bright yellow in color with a distinctive and fresh  citrus  aroma. The  purpose  of  this  study  was  to  isolate  and  identify  the  class  of  Flavonoid compounds from the rind of lemon suanggi (citrus limon L.) by using the UV-Vis spectrophotometer method. The rind of the suanggi lemon was extracted by maceration method using 95% ethanol as solvent which resulted in a thick extract of suanggi lemon rind. Isolation was carried out by thin layer chromatography (TLC) method with Chloroform: n-hexane (4:2) as the eluent. The fourth spot from the result of Thin Layer Chromatography was positive for containing Flavonoid compounds. From the spectrum of the UV-Vis spectrophotometer, it can be assumed that the Flavonoid compound is a Flavonol group, which can be seen from its wavelength range, which is between 200- 500 nm from its wavelength range of 366 nm.

## Keywords: lemon suanggi, Flavonoids, thin layer chromatography, UV-Vis spectrophotometer

## ABSTRAK
Kulit  buah  lemon  suanggi  adalah  satu  tanaman  yang  sering  dimanfaatkan  sebagai  terapi kesehatan tradisional. Kulit terluar buah lemon suanggi (citrus limon L.) kaya akan kelenjar minyak, berwarna kuning terang dengan aroma jeruk yang khas dan segar. Tujuan penelitian ini  untuk  mengisolasi  dan mengidentifikasi  golongan  senyawa Flavonoid dari  kulit  buah lemon  suanggi (citrus  limon  L.) dengan menggunakan  metode  spektrofotometer  UV-Vis. Kulit buah lemon suanggi di ekstraksi dengan metode maserasi menggunakan pelarut etanol 95%  yang  menghasilkan  ekstrak  kental  kulit  lemon  suanggi.  Isolasi  dilakukan  dengan metode  kromatografi  lapis  tipis  (KLT)  dengan  eluen  Kloroform  :  n-heksana  (4:2).  Noda keempat  dari  hasil  pemisahan  Kromatografi  Lapis  Tipis  positif  mengandung  senyawa golongan Flavonoid . Dari spektrum spektrofotometer UV-Vis, dapat diduga bahwa senyawa Flavonoid tersebut merupakan golongan Flavonol , yang dapat dilihat dari rentang panjang gelombangnya yaitu antara 200-500 nm dari rentang panjang gelombangnya yaitu 366 nm.
Kata kunci : lemon suanggi, Flavonoid , kromatografi lapis tipis, spektrofotometer UV-Vis

## PENDAHULUAN
Suatu  Tumbuhan  dapat  dimanfaatkan sebagai obat
karena  memiliki  kandungan senyawa metabolit sekunder seperti Flavonoid ,  alkaloid, steroid,  tanin  saponin, fenolik  dan  lain-lain. Pemanfaatan  tumbuhan sebagai  obat  herbal  telah banyak  dilakukan oleh  masyarakat  indonesia  secara  turun- temurun  dari  generasi  ke  generasi berdasarkan pengalaman  dan  keterampilan  nenek moyang zaman  dahulu  (Dewoto,  2007).  Pemilihan penggunaan  obat  herbal  ini  dikarenakan  efek samping  serta  toksisitas  terhadap  tubuh  lebih kecil dan lebih muda diterima oleh tubuh, serta mudah  dibuat  karena  ketersediaan  bahan bakunya  lebih banyak  dan  harganya  lebih murah (Wasito, 2011). Flavonoid adalah  salah satu  golongan  fenol alam terbesar. Flavonoid terdapat  dalam semua  tumbuhan hijau sehingga  dapat  ditemukan  pada setiap  ekstrak tumbuhan. Flavonoid adalah  kelas senyawa yang  disajikan  secara  luas  di  alam. Flavonoid ditemukan pada tanaman, yang memproduksi  pigmen  berwarna kuning, merah, oranye, biru dan warna ungu dari buah, bunga, dan daun (Tiang-Yang. dkk, 2018).
Lemon  Suanggi (citrus  limon L .) sejenis jeruk yang dikenal juga dengan sebutan sitrun, jeruk sitrun  (dari  Bahasa  Belanda, citroen ), buahnya berbentuk bulat lonjong, ada tonjolan pada  ujungnya,  warna  kulit  buah  matang kuning  cerah,  rasanya  asam,  sepet,  sedikit manis  menurut  Marwanto  (2014).  Penelitian- penelitian  telah dilakukan  dan  menunjukkan bahwa  kulit  buah  lemon  suanggi  memiliki senyawa Flavonoid .  Menurut  penelitian  yang dilakukan  oleh  Indah  (2006)  menyimpulkan bahwa  kadar Flavonoid meniran  pada  daerah uji  yang  berbeda  juga memiliki  kadar  yang berbeda  pula.  Kadar Flavonoid meniran  pada daerah  uji  Bantar  Kambing sebesar  1,56  %, pada  daerah  uji  Darmaga  sebesar  1,4  %  dan pada daerah uji 1,4 %.
Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi dan mengidentifikasi  senyawa Flavonoid yang terdapat dalam  kulit  lemon  suanggi (citrus limon L.) . Dari proses isolasi akan didapatkan isolat-isolat  suatu  senyawa  atau  kumpulan senyawa sehingga dapat mempermudah untuk melakukan identifikasi senyawa-senyawa yang terdapat dalam simplisia. Sedangkan identifikasi diperlukan untuk mengetahui jenis senyawa Flavonoid yang  berada  dalam simplisia.  Kelebihan  dari  metode  ekstraksi
etanol  ini  adalah  senyawa  cair  yang  mudah larut  di dalam  air  dapat  terekstraksi  secara mudah  dengan  menggunakan  air  sebagai pelarut. Kemudian kelebihan metode spektrofotometer  UV-VIS  adalah  bahwa metode  ini  memberikan  cara  sederhana  untuk menetapkan  kuantitas  zat  yang  sangat  kecil. Selain  itu,  hasil  yang  diperoleh  cukup akurat, dimana  angka  yang  terbaca  langsung dicatat oleh detector dan tercetak dalam bentuk angka digital ataupun grafik yang sudah diregresikan (Yahya S,2013).

## METODOLOGI PENELITIAN Waktu dan Tempat Peneliatian
Penelitian  ini  dilaksanakan  pada  pada bulan  Juli  sampai  Desember  2021  di Laboratorium  Farmasi  Lanjut  Program  Studi Farmasi, Universitas Sam Ratulangi.

## Alat dan Bahan Alat
Alat yang digunakan dalam penelitian ini yaitu oven, gilingan (F-leco),
mikropipet,chamber  KLT,  aluminium  foil (Klinpak ®), peralatan gelas (Iwaki ST Pyrex ®),  pipet  tetes,  krus  porselen,  timbangan analitik,  kertas  saring  (Whatman  no.42), toples,  lampu  UV  366  nm,  spektrofotometer UV-Vis.

## Bahan
Bahan  yang digunakan  dalam  penelitian ini yaitu kulit buah lemon suanggi, etanol 95 %, metanol, kloroform, amoniak, asam asetat glasial,  aquades,  FeCl3,  n-Heksana,  asam sulfat  pekat,  NaOH  10%,  Serbuk  Mg,  HCl, H 2 SO 4 ,  Plat  KLT  dan  kuersetin  sebagai pembanding.

## Prosedur Penelitian Penyiapan dan pembuatan simplisia
Buah  lemon  suanggi  dicuci  dengan  air mengalir,  kemudian  kulit  lemon  suanggi dikupas  sebanyak  6  kg.  Selanjutnya  kulit lemon  suanggi  dikeringkan  dengan  cara dimasukan  dalam  oven  pada  suhu  40°C. Setelah  kulit  lemon  suanggi  benar-benar kering  lalu  di  timbang  dan  dihancurkan menggunakan gilingan hingga menjadi serbuk kemudian diayak dan di simpan di wadah yang tertutup.

## PHARMACON– PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI

## Pembuatan Ekstrak
Sampel  serbuk  simplisia  kulit  lemon suanggi  ditimbang  sebanyak  300  gram kemudian dimaserasi  dengan  1500  ml  pelarut etanol  95% hingga  semua  sampel  terendam sambil  diaduk-  aduk  dan  dibiarkan  selama  3 hari  dengan  2  kali  pengulangan.  Sampel kemudian di saring untuk mendapatkan filtrat. Filtrat kemudian diuapkan dengan menggunakan  oven  dengan  suhu  40°C yang akan menghasilkan ekstrak kental dari sampel kulit  buah  lemon  suanggi.  Persentase rendemen  dihitung  menggunakan  bobot ekstrak yang diperoleh menggunakan rumus :
𝑅𝑒𝑛𝑑𝑒𝑚𝑒𝑛 = 𝐵𝑒𝑟𝑎𝑡 ℎ𝑎𝑠𝑖𝑙 𝑒𝑘𝑠𝑡𝑟𝑎𝑘 𝑥 100% 𝐵𝑒𝑟𝑎𝑡 𝑒𝑘𝑠𝑡𝑟𝑎𝑘 𝑎𝑤𝑎𝑙 Uji  Kandungan  Kimia Ekstrak  Prosedur Uji Fitokimia

## a. Uji Alkaloid
Ambil  sebanyak  2g  sampel  ditambahkan kloroform  secukupnya,  selanjutnya  ditambah 10  ml amoniak dan 10  ml kloroform. Larutan disaring ke  dalam  tabung  reaksi  dan  filtrat ditambahkan  10  tetes  H2SO4.  Campuran dikocok  dengan  teratur,  dibiarkan  beberapa menit  sampai  terbentuk  dua lapisan.  Lapisan atas  dipindahkan  ke  dalam  tiga  tabungreaksi masing-masing tersebut ditambahkan beberapa tetes pereaksi Mayer, Wagner dan Dragendorff. Apabila terjadi endapan menunjukan bahwa sampel tersebut mengandung  alkaloid, dengan  pereaksi  Mayer membentuk  endapan  putih, dengan  pereaksi Wagner membentuk endapan warna coklat dan pereaksi  Dragendorff  membentuk  endapan warna jingga (Harbonen, 1997).

## b. Uji Triterpenoid dan Steroid
Timbang  sebanyak  20-50  mg  sampel ditambahkan asam asetat glasial sampai semua sampel  terendam,  kemudian  6  tetes  larutan dipindahkan  ke  dalam  tabung  reaksi  dan ditambahkan  2-3  tetes  asam  sulfat  pekat. Adanya triterpenoid ditunjukan dengan terjadinya  warna  merah,  jingga  atau  unggu, sedangkan steroide ditunjukan dengan terbentuknya warna biru (Harbonen, 1997).
c. Uji Tanin
Ambil  lebih  kurang  1  mL  ekstrak  etanol
diencerkan dengan 2 mL aquades. Tambahkan 3  tetes larutan FeCl3. Hasil positif ditunjukan dengan terbentuknya  warna  hitam  kebiruan atau kehijauan (Harbonen, 1997).

## d. Uji Saponin
Ambil sebanyak 2 g sampel dimasukan ke dalam tabung reaksi, kemudian ditambahkan 5 ml  aquadest  hingga  seluruh  sampel  terendam dan  dikocok  kuat-kuat  sampai  timbul  busa. Hasil  posotif  ditunjukan  dengan  terbentuknya buih atau busa yang stabil (Harbonen, 1997).

## e. Uji Flavonoid
Ambil  lebih  kurang  3  mL  ekstrak  eter diuapkan  dan  dilarutkan  dalam  1-2  mL metanol. Ke dalam larutan tersebut ditambahkan logam Mg dan  4  tetes  HCl.  Hasil positif  ditunjukan  dengan  timbulnya  warna merah tua selama tiga menit (Harbonen, 1997).

## Isolasi Senyawa Flavonoid Menggunakan Kromatografi Lapis Tipis
Isolasi Flavonoid dari  ekstrak  kulit lemon  suanggi  di  lakukan  dengan  metode KLT.  KLT  yang  digunakan  terbuat  dari  fase diam  silika  gel  GF254.  Plat  KLT  silika  gel diaktifasi terlebih dahulu dengan cara dioven pada  suhu  40ºC  selama  30  menit  untuk menghilangkan  air  yang  terdapat  pada  plat KLT. Ekstrak kental hasil ekstraksi dilarutkan dengan  etanol  95%  kemudian  ditotolkan sepanjang  plat  dengan  menggunakan  mikro pipet dengan dielusi menggunakan fase gerak campuran dari  kloroform  :  n-heksana  (4:2). Pengamatan  dilakukan  dibawah  lampu  UV pada panjang gelombang 366 nm. Kemudian hasil  KLT  dikerok  dan  dilarutkan  kedalam pelarut metanol 4 ml.
Identifikasi Senyawa Flavonoid Menggunakan Spektrofotometer UV-Vis Metode yang digunakan untuk identifikasi Flavonoid ialah spektrofotometer UV-Vis. Isolat hasil KLT yang telah dikerok dan  disentrifuge  kemudian  dibaca  pada  alat spektorofotometer  UV-  Vis  menggunakan pelarut baku metanol. Isolat yang telah larut di rekam  pada  alat  spektrofotometer  UV-Vis pada panjang gelombang 366.
Untuk  pembanding  yang  dipakai  dalam mengisolasi ialah kuersetin, yang merupakan pembanding  yang  biasanya  di  pakai  untuk mengisolasi senyawa Flavonoid .

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Ekstraksi  Kulit  Lemon  Suanggi  Citrus limon L.
Proses  ekstraksi  simplisia  kulit  lemon suanggi  dilakukan  dengan  menggunakan metode  maserasi dan  pelarut  yang  digunakan untuk  sampel  tersebut adalah  etanol  95%. Menurut  Trifani  (2012)  etanol  digunakan sebagai  pelarut karena bersifat  polar, universal,  dan  mudah  didapat.  Pemilihan pelarut ini karena senyawa Flavonoid yang ada dalam  kulit  lemon suanggi merupakan senyawa  yang  bersifat polar  sehingga  harus dilarutkan  dengan  pelarut yang bersifat  polar. Proses  maserasi  ini  dilakukan dengan  cara merendam sampel selama 3 hari agar senyawa kimia  didalam  sampel  dapat  terekstrak menyeluruh.  Filtrat  1  dan  2  yang  didapat dicampur  menjadi  satu,  hasil  filtrat  yang diperoleh  kemudian disaring,  dikumpulkan dan  dimasukkan  kedalam oven dan dihasilkan ekstrak  kental  yang  berwarna hijau  pekat hingga  diperoleh  ekstrak  kental  28,20  g  dan rendemen  yang diperoleh 9,4%.  Warna  hijau pekat  pada  filtrat  terbentuk  karena  pelarut yang  digunakan  tidak  hanya  mengekstraksi senyawa Flavonoid melainkan juga mengekstraksi  klorofil  yang  ada  dalam tumbuhan.

## Skrining Fitokimia
Skrining fitokimia bertujuan untuk mengetahui  kandungan  senyawa  fitokimia pada  ekstrak etanol kulit lemon suanggi secara kualitatif. Senyawa fitokimia yang diidentifikasi  meliputi,  senyawa  alkaloid, senyawa Flavonoid ,  senyawa  tanin,  senyawa triterpenoid,  senyawa  steroid  dan  senyawa saponin. Pengujian senyawa alkaloid dilakukan  dengan  mereaksikan  ekstrak  yang telah diencerkan dengan reagen Mayer, reagen Dragendorff,  dan  reagen  Wagner.  Pada pengujian  ini  menghasilkan  reaksi  posotif. Pembentukan endapan terjadi karena terbentuknya  senyawa kompleks  dari  reaksi senyawa  alkaloid  dengan  ion logam  K+  pada masing-masing  pereaksi  yang  digunakan (Setyowati. dkk, 2014). Identifikasi senyawa Flavonoid yang diuji terjadi perubahan warna larutan menjadi warna merah  tua  dikarenakan  senyawa Flavonoid mengalami  reaksi  reduksi  yang  disebabkan
oleh asam klorida dan magnesium (Simaremare,  2014).   Uji  fitokimia  senyawa tannin  dengan  menambahkan  ekstrak  etanol kulit  lemon  suanggi dengan  larutan  FeCl3 menunjukkan  hasil  positif.  Senyawa  tanin berperan  sebagai  astrigen,  anti bakteri  dan antioksidan,  tannin  merupakan komponen  zat organik  yang  sukar  dipisahkan  dan  sukar mengkristal, mengedapkan protein dari larutannya  dan  senyawa  dengan  protein tersebut (Desmiaty. dkk, 2008).
Senyawa  saponin  yang  diuji  ditandai dengan  terbentuknya  busa  setelah  dilakukan pengocokan. Dimana pada prinsipnya menurut Wardana  dan Tukiran  (2016)  adalah  reaksi hidrolisis. Reaksi hidrolisis ini ditandai dengan terbentuknya buih atau busa. Senyawa saponin akan mengalami hidrolisis menjadi aglikon dan glikon .
Isolasi  Senyawa  Flavonoid  Menggunakan Kromatografi Lapis Tipis
Hasil
Pengujian isolasi senyawa Flavonoid dengan  KLT  ekstrak  etanol  kulit buah lemon suanggi dapat dilihat pada gambar 1.
Gambar 1. Foto plat hasil KLT ekstrak kulit lemon suanggi dengan eluen kloroform : n- Heksana (4:2) dengan sinar UV 366 nm.
Tabel 1 . Nilai Rf dan warna noda hasil KLT
Noda Nilai Rf Warna noda   setelah disinari dengan lampu UV 366 1 0,22 Biru 2 0,5 Biru muda 3 0,59 Ungu 4 5 Kuersetin 0,68 0,71 0,67 Hijau Merah muda Kuning Pemisahan  senyawa Flavonoid kulit lemon  suanggi  dilakukan  dengan  metode kromatografi lapis tinggi. Pemisahan senyawa Flavonoid kulit  lemon  suanggi  dilakukan dengan  metode  kromatografi  lapis  tipis (KLT).  KLT  merupakan  suatu  metode pemisahan suatu senyawa berdasarkan perbedaan  distribusi  dua  fase  yaitu fase  diam dan  fase  gerak.  Fase  diam  yang digunakan ialah  plat  silika  gel  yang  bersifat  polar, sedangkan eluen yang digunakan sebagai fase gerak  yang  bersifat  non  polar.  Uji  isolasi senyawa Flavonoid kulit  lemon  suanggi dilakukan  dengan  metode  kromatografi  lapis tipis (KLT). KLT yang digunakan terbuat dari silika  gel  dengan  ukuran  10 cm.  Plat  KLT silika  gel  diaktifasi  dengan  cara dioven  pada suhu 40ºC selama 30 menit untuk menghilangkan  air  yang  terdapat  pada  plat KLT.  Selanjutnya  ekstrak  kental  hasil ekstraksi  dilarutkan  dengan  etanol  95%. Sampel dan pembanding ditotolkan sepanjang plat  dengan  menggunakan  mikro  pipet  pada jarak  1  cm  dari  garis  bawah  dan  1  cm  dari garis atas. Pemisahan KLT  akan  optimal  jika ukuran  bercak  penotolan  dibuat  sekecil mungkin.  Penotolan  sampel  yang  tidak  tepat akan  menyebabkan  noda  yang menyebar  dan puncak  ganda  (Gandjar,  2007).  Sampel selanjunya  dielusi  dengan  menggunakan eluen Kloroform: N-heksan dengan perbandingan (4:2).
Pengamatan  noda  dilakukan  dibawah sinar  UV  pada  panjang  gelombang  366  nm untuk  menampakkan  warna  hasil  pemisahan pada  KLT.  Jika  tampak  noda  maka  ditandai menggunakan  pensil  untuk  mengetahui  noda yang diperoleh positif mengandung Flavonoid .
Hasil  KLT  seperti  pada  gambar  1  yang  telah diangin-anginkan dan diperiksa di bawah sinar UV pada panjang gelombang 366 nm. Sampel noda yang terbentuk yaitu sebanyak 5 noda dan pada  pembanding  kuersetin  terbentuk  noda berwarna kuning. Noda- noda tersebut dihitung nilai Rfnya. Pemisahan dengan KLT menghasilkan  harga  Rf  dari  noda  pertama sebesar  0,22.  Noda  kedua  memiliki  nilai  Rf sebesar  0,5.  Noda  ketiga  memiliki  nilai  Rf sebesar 0,59. Noda keempat memiliki nilai Rf sebesar  0,68.  Noda  kelima  memiliki  nilai  Rf sebesar  0,71  dan  pembanding  kuersetin memiliki  nilai  Rf  sebesar  0,67.  Nilai  Rf  dan warna noda dapat dilihat pada tabel 1. Setelah disinari dengan lampu UV panjang gelombang 366,  noda  pertama  menghasilkan  warna  biru. Noda  kedua  menghasilkan  warna  biru  muda. Noda ketiga  menghasilkan  warna  ungu.  Noda keempat  berwarna  hujau  dan  noda  kelima menghasilkan warna merah muda. Kelima noda yang  tampak,  noda  keempat  warna  hijau dengan  nilai  Rf  0,68  diduga  mengandung Flavonoid karena  pada pembanding  kuersetin menghasilkan  nilai  Rf  0,67. Menurut  Dewi (2018) bahwa terbentuk warna hijau menunjukkan bahwa senyawa Flavonoid . Identifikasi Senyawa Flavonoid

## Menggunakan Spektrofotometer UV-Vis
Pada  uji  identifikasi  senyawa Flavonoid digunakan  metode  spektrofotometer  UV-Vis. Noda-noda  hasil  KLT  kemudian  dikerok  dan dilarutkan  dalam  pelarut  metanol  sebanyak  4 ml, kemudian diidentifikasi  menggunakan spektrofotometer UV-Vis. Dari keempat isolat tersebut,  isolat  keempat  yang  memiliki  hasil spektrum senyawa Flavonoid seperti yang bisa dilihat pada Gambar 2.
Gambar 2. Spektrum UV-Vis pada panjang gelombang 200-500 nm.

## PHARMACON– PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI
Hasil  spektrum  pita  isolat  hijau  yang tampak,  pita  mempunyai  panjang  gelombang 366  nm  pada  absorbansi  0,291.  Hasil  ini menandakan  bahwa isolat  yang  dibaca  positif mengandung Flavonol dan  didukung  dengan hasil  rentangan  serapan  spektrum  UV-Vis Flavonol ( Flavonoid terkondensasi)  bahwa
spektrum Flavonol mempunyai  panjang gelombang  350-385  menurut  Hepni  (2019). Selaras dengan penelitian lain yang memberikan  panjang  gelombang  365  nm diduga senyawa Flavonoid golongan Flavonol (Bona, dkk. 2015).    Jenis senyawa Flavonoid yang ditemukan ialah Flavonol.
Gambar  3. Spektrum  UV-Vis  pembanding rutin kuersetin pada panjang gelombang 300- 500 nm.
Pembanding Flavonoid yaitu  kuesertin seperti pada  gambar  3,  hasil  yang  didapat mempunyai    rentang  separan  yaitu  pada panjang  gelombang  370 nm  pada  absorbansi 1,371.  Hasil  ini  menandakan  bahwa  isolat yang didapat berwarna hijau positif mengandung Flavonol ,  hal  ini  dikarenakan Flavonol itu  terdiri  atas  kuersetin. Flavonol merupakan  salah  satu  jenis Flavonoid yang paling  banyak  ditemukan  dalam  bunga maupun  daun  tumbuhan,  hanya  sedikit  sekali yang  ditemukan  pada  bagian  tanaman  yang berada  di  bawah  permukaan  tanah. Flavonol terdiri atas kuersetin, kaemferol, dan  irisetin. Kuersetin  umumnya  merupakan  komponen terbanyak  dalam  suatu tanaman  dan  senyawa yang paling  luas  penyebarannya.  Bandingkan dengan penelitian  yang  dilakukan  oleh (Koirewoa,  dkk.  2012),  bahwa  hasil  yang didapat mempunyai rentang serapan pada pita terdapat di antara panjang gelombang 350-385 nm  yaitu  377  nm,  hal  ini  memperkuat  hasil yang  di  dapat  bahwa  isolat  ketiga  positif mengandung Flavonol .

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  telah dilakukan dapat disimpulkan bahwa Flavonoid dapat  diisolasi  dan  diidentifikasi dari  kulit  lemon  suanggi  dengan  metode kromatografi lapis tipis dan spektrofotometer

## SARAN
Perlu  adanya  penelitian  lebih  lanjut tentang  identifikasi  jenis  senyawa Flavonoid yang ada pada  kulit lemon suanggi menggunakan metode spektrofotometer seperti NMR  dan  IR  dan  perbandingan  kandungan Flavonoid pada  kulit  lemon  suanggi  yang ditanam di berbagai lokasi.

## DAFTAR PUSTAKA
Desmiaty, Y., Raith H., Dewi M.A., & Agustin R. 2008. Penentuan Jumlah Tanin Total Pada  Daun  Jati  Belanda  ( Guazuma ulmifolia  lamk )  Dan  Daun  Sambang Darah  ( Excoecaria  bicolor  Hassk .) Secara  Kolorimetri  Dengan  Pereaksi Biru Prusia. Ortocarpus . 08 : 106-109. Abdullah,  S.S.,  Djide,  N.,  Natsir,  S.  (2021).
KLT Bioautografi Hasil Partisi Ekstrak Etanol Herba Bandotan ( Ageratum  conyzoides  L. )  Terhadap Shigella  dysentriae . Chem.  Prog. 14(1) .15-17
Dewi., Shinta R., Naily Ulya., & Bambang D
Argo. 2018. Mengidentifikasi Flavonoid , Diterjemahkan Padmawinata. Penerbit             ITB, Bandung. Dewoto,  H.R.  2007.  Pengembangan  Obat Tradisional Indonesia  Menjadi Fitofarmaka, Majalah Kedokteran
Indonesia, 07 : 205-211.
Gandjar.,  I.  G  &  Rohman,  A.  2007. Kimia Farmasi  Analisis .  Pustaka  Pelajar, Yogyakarta.Harborne., J.B. 1987. Metode  Fitokimia  Penuntun  Cara
Modern Menganalisis Tumbuhan.
Terbitan kedua. ITB, Bandung.
Hepni.  2019.  Isolasi  Dan  Identifikasi
Senyawa Flavonoid Daun  Kumak (Lactuca  Indica  L.).  Jurnal  Dunia Farmasi, 17-22.
Koirewoa.,  Fatimawali.,  &  Wiyono.  2012. Isolasi  Dan  Identifikasi  Senyawa Flavonoid Dalam  Daun  Beluntas (Pluchea  indica  L.) . Jurnal  Ilmiah.

## PHARMACON– PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI

## PHARMACON.  Farmasi  UNSRAT,
1 (1) Kurnia, Indah. 2006. Metode Cepat Penentuan Flavonoid Total  Meniran (Phyllantus  niruri  L.) Berbasis Teknik  Spektrofotometri  Inframerah Dan  Kemometrik, IPB Bogor Agricultural University. Karamoy,  NYF., Yamlean,  P.  V.  Y. , Abdullah ,  S.  S. (2022), Formulation And  Test  Of  Antioxidant  Activity Lotion  Ethyl  Acetate  Fraction  Of Corn Silk ( Zea Mays L.), Pharmacon, 11(4) , 1058–1065.
Legi, A.P., Edy, H.J., Abdullah , S. S., (2021), Formulasi Dan Uji Aktivitas Antibakteri  Sediaan  Sabun  Cair Ekstrak  Etanol  Daun  Sirsak  ( Annona
Muricata Linn)  Terhadap  Bakteri Staphylococcus ,    Pharmacon, 10(3) ,
1058–1065.
Mopangga,  E.,  Yamlean,  P.  V.  Y.,  & Abdullah,  S.  S.  (2021).  Formulasi
Sediaan  Sabun  Mandi  Padat  Ekstrak Etanol  Daun  Gedi  ( Abelmoschus manihot L.) Terhadap Bakteri Staphylococcus epidermidis .
Pharmacon, 10(3) , 1017–1024. Mandias,  I.I., Yamlean,  P.  V.  Y. ,  Abdullah , S.  S. (2022), Formulation  and Antibacterial  Activity  Test  of  Peel- Off Gel Mask Ethyl Acetate Fraction of Cocoa Pods ( Theobroma cacao L.) Against Staphylococcus  aureus as Anti-Acne, Pharmacon, 11(4) , 1258– 1265. Marwanto. 2014. Rekayasa Alat Pemeras Air Jeruk Siam  Dengan  Sistem  Ulir.  S ambas, POLTESA. Setyowati,  W. A. E.,  Ariani,S.R.D.,  Ashadi, Mulyani,  B.,  &  Rahmawati,C.P. (2014).  Skrining  Fitokimia  Dan
Identifikasi Komponen Utama Ekstrak Metanol Kulit Durian (Durio zibethinus  Murr) Varietas  Petruk.
Jurnal Seminar Nasional Kimia Dan
Pendidikan Kimia VI . ISBN
(979363175-0) : 271-280. Sahuleka, A.S.G., Edy, H.J., Abdullah, S. S.,
(2021),  Formulasi  Sediaan  Krim Antibakteri  Ekstrak  Etanol  Daun Eceng Gondok ( Eichhornia crassipes ) Terhadap Bakteri
Staphylococcus  aureus ,  Pharmacon,
10(4) , 1162–1168.
Sinrang,  V.N.S.,  Edy,  H.J.,  Abdullah,  S.S.,,
(2022),  Formulasi  Sediaan  Obat Kumur  Ekstrak  Etanol  Biji  Pinang ( Areca  catechu  L. ),  Pharmacon, 11(1) , 1342–1349.
Simaremare, E. S. (2014). Skrining Fitokimia
Ekstrak Etanol Daun Gatal (Laportea decumana (Roxb.) Wedd) Eva. PHARMACY, 01: 98–107. Tian-yang.,  Wang.,  Qing  Li.,  Kai-shun  Bi. 2018.  Bioactive Flavonoid s In Medicinal  Plants: Structure,  Activity
And Biological Fateasian. Journal Of Pharmaceutical Sciences, 13 : 12–23.
Trifani.  2012.  Ekstraksi  Pelarut  Cair-Cair. Depok, Universitas Indonesia.
Wasito, H. 2011. Obat Tradisional Kekayaan Indonesia. Graha Ilmu, Yogyakarta.
Yahya, S. (2013). Spektrofotometri UV-VIS. Erlangga, Jakarta.