## UJI DAYA HAMBAT CACING TANAH (Lumbricus rubellus) TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI Salmonella typhi SECARA IN VITRO
Lamri 1) , Suryanata Kesuma 1) , dan Marezha Aulia Putri Sugiarsono 1)
1 Poltekkes Kemenkes Kalimantan Timur E-mail: suryanatakesuma@gmail.com

## Abstract
Salmonella typhi is the cause of typhoid fever. Antibiotics are the main choice in treating typhoid fever. Herbal ingredients are very safe for humans because they contain active compounds as effective  antiseptics.  Now,  the  active  compound  lumbricin  in  earthworms  ( Lumbricus  rubellus ) can used as a medicinal ingredient. The purpose of the study was to determine the diameter of the  inhibition  zone  and  to  determine  the  effectiveness  of  the  inhibition  of  earthworm  powder ( Lumbricus  rubellus )  with  concentrations  of  25%,  50%,  and  100%  against  the  growth  of Salmonella  typhi bacteria.  This  type  of  research  is  a  laboratory  experiment.  Earthworm ( Lumbricus rubellus ) was processed into powder by roasting technique, then made in the form of a medicinal disc. Sensitivity test by disc diffusion method, which was cultured in Muller Hinton Agar media with a clear zone formed for 24 hours with seven repetitions. The study results are concentration  of  25%  is  no  antibacterial  power  and  antibacterial  effectiveness.  However,  at concentrations  of  50%  and  100%,  the  average  diameter  of  the  inhibition  zones  was  0.21  mm and  0.92  mm,  and  the  antibacterial  efficacy  was  0.7%  and  3.4%,  respectively.  This  study concludes  is  that  at  a  minimum  concentration  of  50%,  antibacterial  power  and  effectiveness were obtained.

## Keywords: Earthworm, inhibition, Salmonella typhi

## Abstrak
Salmonella  typhi merupakan  penyebab  demam  tifoid.  Antibiotik  merupakan  pilihan  utama dalam menangani demam tifoid. Bahan herbal sangat aman bagi manusia karena mengandung senyawa  aktif  sebagai  antiseptik  yang  efektif.  Dalam  dunia  modern  seperti  sekarang  ini, senyawa  aktif  lumbricin  pada  cacing  tanah  tanah  ( Lumbricus  rubellus )  digunakan  sebagai bahan  obat.  Tujuan  penelitian  adalah  mengetahui  diameter  zona  hambat,  serta  mengetahui efektivitas  daya  hambat  bubuk  cacing  tanah  ( Lumbricus  rubellus )  dengan  konsentrasi  25%, 50%,  dan  100%  terhadap  pertumbuhan Salmonella  typhi .  Jenis  penelitian  ini  adalah eksperimen  laboratorium.  Cacing  tanah  ( Lumbricus  rubellus )  diolah  menjadi  bubuk  dengan teknik  sangrai,  lalu  dibuat  dalam  bentuk  disk  obat.  Bubuk  cacing  tanah  diuji  sensitivitasnya dengan metode difusi cakram dalam konsentrasi 25%, 50% dan 100% terhadap pertumbuhan Salmonella  typhi ,  yang  dibiakkan  dalam  media  Muller  Hinton  Agar  dengan  zona  bening  yang terbentuk  selama  24  jam.  Hasil  penelitian  dilakukan  dengan  7  kali  pengulangan,  pada konsentrasi  25%  tidak  didapatkan  daya  antibakteri  serta  efektivitas  antibakteri.  Namun,  pada konsentrasi 50% dan 100% didapatkan rata-rata diameter zona hambat 0,21 mm dan 0,92 mm serta  efektivitas  antibakteri  sebesar  0,7%  dan  3,4%.  Kesimpulan  penelitian  ini  yaitu  pada konsentrasi minimal 50% didapatkan daya antibakteri serta efektivitas antibakteri.
Kata Kunci : Cacing tanah, daya hambat, Salmonella typhi

## PENDAHULUAN
Penyakit demam tifoid atau sering disebut dengan penyakit tifus adalah penyakit infeksi  akut.  Penyakit  ini  disebabkan  oleh  mikroba  patogen  yang  sering  menginfeki manusia  yaitu  bakteri Salmonella  typhi. Tifoid  biasanya  menyerang  bagian  usus  halus pada  tubuh  manusia  (Siti  dkk.,  2016).  Penularan  penyakit  ini  hampir  selalu  terjadi melalui  makanan  dan  minuman  yang  terkontaminasi  oleh  bakteri Salmonella  typhi (Nurdin  dkk.,  2018).  Gejala  klinik  penyakit  ini  yaitu  demam  tinggi  pada  minggu ke-2 dan  ke-3,  biasanya  dalam  4  minggu  gejala  tersebut  telah  hilang,  meskipun  terkadang bertambah lebih lama.
Secara global diperkirakan terjadi sekitar 21 juta kasus demam tifoid dan 220.000 menyebabkan  kematian  setiap  tahunnya.  Demam  tifoid  di  negara  maju  terjadi  sekitar 5.700 kasus setiap tahunnya, sedangkan di negara berkembang demam tifoid mencapai sekitar  21,5  juta  orang  per  tahun  (Batubuaya  dkk.,  2017).  Di  kota  Samarinda, Kalimantan  Timur,  pasien  demam  tifoid  tertinggi  berdasarkan  jenis  kelamain  adalah laki-laki (52,22%), berdasarkan usia sekitar 18-40 tahun (80%), berdasarkan pendidikan sekolah  dasar  (SD)  (42,68%),  dan  berdasarkan  pekerjaan  swasta  (46,43%)  (Bulwan dkk., 2016).
Menurut  Siti  dkk.,  (2016),  demam  tifoid  merupakan  penyakit  yang  jika  tidak segera  ditangani  akan  menyebabkan  timbulnya  komplikasi  yaitu  perforasi  atau pendarahan  usus  dan  pneumonia.  Penggunaan  antibiotik  merupakan  pilihan  utama dalam  menangani  demam  tifoid.  Antibiotik  merupakan  zat  kimiawi  yang  dapat menghambat pertumbuhan atau membunuh suatu mikroorganisme. Pemakaian antibotik sebaiknya  didasarkan  dengan asas  penggunaan  obat  yang  rasional  yaitu  tepat  indikasi, tepat pasien, tepat dosis serta waspada terhadap efek samping yang mungkin timbul dari pemberian antibiotik tersebut.
Sejak tahun 1940-an, obat antibiotik dan sejenisnya telah mengurangi gejala dari kematian  yang  disebabkan  penyakit  infeksi  (Rahmawati,  2021).  Sejak  zaman  nenek moyang  pengobatan  tradisional  telah  dikenal,  seperti  untuk  pencegahan  penyakit maupun menjaga kesehatan.  Obat tradisional merupakan suatu ramuan atau bahan yang berasal  dari  bahan  alam,  berupa  dalam  sediaan  sarian  (galenik)  atau  campuran  dari bahan  tersebut  secara  turun  temurun  telah  digunakan  untuk  pengobatan  berdasarkan pengalaman  (Sugito  dan  Slamet,  2018).  Penggunaan  antibiotik  sebagai  bahan  aditif
telah  dilarang,  karena  adanya  residu  dari  pengunaan  antibiotik  yang  membahayakan kesehatan manusia. Maka perlu diterapkan penggunaan bahan herbal sebagai alternatif lain  sangat  aman  bagi  manusia  karena  mengandung  senyawa  aktif  sebagai  antiseptik yang efektif (Sudarman dkk., 2017)
Pengobatan  tradisional  sudah  dilakukan  dibeberapa  Negara  Asia  seperti mengintegrasikan  pengobatan  tradisional di  dalam  sistem  pelayanan  kesehatan  formal. Masyarakat Indonesia pun telah memanfaatkan tumbuh-tumbuhan dan hewan berkhasiat obat  dalam  berbagai  tradisi  adat  istiadat  untuk  pencegahan  peyakit.  Menurut  Dirjen Bina Kesehatan Masyarakat Depkes, dalam jumlah pengobatan tradisional di Indonesia tercatat cukup banyak, yaitu 280.000 pengobatan tradisional dan 30 keahlian/spesialisasi.  Masyarakat  Indonesia  memanfaatkan  pengobatan  tradisional masih  tinggi  sekalipun  pelayanan  kesehatan  modern  telah  berkembang  di  Indonesia (Kamal, 2017).
Dalam  dunia  modern  seperti  sekarang  ini,  senyawa  aktif  lumbricin  pada  cacing tanah tanah (Lumbricus rubellus) digunakan sebagai bahan obat. Beberapa negara maju dan  berkembang  seperti  Prancis  dan  Italia,  cacing  tanah  digunakan  dalam  pembuatan kosmetik  yang  menggunakan  bahan  aktif  tersebut  sebagai  substrat  pelembut  kulit, pelembab wajah, dan antiinfeksi. Di negara Jepang dan beberapa negara Eropa, cacing tanah dimanfaatkan sebagai bahan tambahan dalam pembuatan makanan dan minuman, sedangkan di Negara Tiongkok cacing tanah digunakan dalam ramuan tradisional untuk menyembuhkan  berbagai  penyakit,  terutama  untuk  mengobati  demam,  infeksi  saluran pencernaan seperti diare, maag, serta gangguan perut lainnya (Sugito dan Slamet, 2018).
Cacing  tanah (Lumbricus  rubellus) merupakan  hewan  yang  cukup  banyak  di Indonesia.  Habitat  cacing  tanah  merupakan  tempat  yang  memiliki  kondisi  tanah  yang lembab  dan  memiliki  kadar air  tanah  yang  tinggi.  Menurut  Do  Tat  Loi  dan  Ba  Hoang dari Vietnam, praktisi pengobatan konvensional dan pengobatan tradisional Cina, telah membuktikan efektivitas cacing tanah untuk mengobati pasiennya yang mengidap strok, hipertensi, penyumbatan pembuluh darah (aterosklerosis ), epilepsi (ayan), dan berbagai penyakit  infeksi  lainnya.  Cacing  tanah  memiliki  mekanisme  imunitas  terhadap organisme  patogen  dengan  cara  menghasilkan hyalin, granular  amoebocytes dan chloragocytes.  Hyaline dan granular  amoebocytes mempunyai  kemampuan  dalam
proses  fagositosis,  chloragocytes  menghasilkan  produk  ekstraseluler  yang  bersifat sitotoksik dan antibakteri (Suryani, 2010).
Berdasarkan penelitian Sugito dan Slamet (2018), daya hambat air rebusan cacing tanah (Lumbricus  rubellus) dengan  menggunakan  metode  difusi,  menunjukkan  bahwa air  rebusan  cacing  tanah (Lumbricus  rubellus) konsentrasi  10%  belum  menunjukkan zona  hambat,  tetapi  pada  konsentrasi  20%  efektif  dalam  menghambat  pertumbuhan Salmonella  typhi. Sedangkan  pada  penelitian  Agustin  (2018),  daya  hambat  serbuk cacing tanah (Lumbricus rubellus) terhadap Salmonella typhi konsentrasi 10% memiliki kemampuan menghambat pertumbuhan Salmonella typhi.
Peneliti  telah  melakukan  survei  pada  2  desa  yaitu  Desa  Anggana,  Kecamatan Anggana,  Kabupaten  Kutai  Kartanegara,  Kalimantan  Timur  dan  Desa  Balik  Buaya, Bukuan,  Kecamatan  Palaran,  Kota  Samarinda,  Kalimantan  Timur.  Pada  kedua  desa tersebut  didapatkan  9  orang  didiagnosa  sakit  tifus  dan  3  orang  tanpa  didiagnosa  sakit tifus tetapi mengalami gejala demam, mengigil, mual, nyeri perut,  hilang nafsu makan, hingga  berat  badan  berkurang,  mengalami  kesembuhan  setelah  mengonsumsi  bubuk cacing tanah (Lumbricus rubellus).
Berbagai penelitian untuk menemukan antimikroba dari sumber alam telah banyak dilakukan,  hingga  identifikasi  terhadap  kandungan  yang  dapat  bekerja  seperti antimikroba  sintetik.  Secara  umum,  cacing  tanah (Lumbricus  rubellus )  sebagai  obat tradisional  belum  dimanfaatkan  seluruhnya  oleh  masyarakat  dalam  usaha  pengobatan sendiri (self-medicaton). Umumnya,  masih  kurang  atau  belum  menjadi  pertimbangan penggunaan  cacing  tanah  sebagai  obat  di  dalam  profesi  kesehatan  (medis),  dengan alasan  belum  secara  emperis  teruji  dan  terstandar  dalam  uji  bahan-bahan  antibiotik, sehingga  perlu  diuji,  dikembangkan,  dan  diteliti  agar  dapat  digunakan  lebih  luas  oleh masyarakat.
Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  daya  hambat  bubuk  cacing  tanah (Lumbricus  rubellus) terhadap  bakteri Salmonella  typhi ;  mengetahui  diameter  daya hambat  bubuk  cacing  tanah (Lumbricus  rubellus) dengan  konsentrasi  25%,  50%,  dan 100%  terhadap  pertumbuhan  bakteri Salmonella  typhi secara in  vitro ;  mengetahui efektivitas  daya  hambat  bubuk  cacing  tanah (Lumbricus  rubellus) dengan  konsentrasi 25%, 50%, dan 100% terhadap pertumbuhan bakteri Salmonella typhi secara in vitro .

## METODE PENELITIAN

## Preparasi Sampel
Cacing tanah (Lumbricus rubellus) 3 kg dicuci bersih, isi perut pada cacing tanah dikeluarkan.  Kemudian  cacing tanah  disangrai  dengan  api  sedang  hingga  cacing  tanah rapuh  menyerupai  bubuk.  Lalu  cacing  tanah  ditumbuk  hingga  menjadi  bubuk  cacing tanah.

## Pengujian Bakteri Uji
Bakteri Salmonella typhi dalam bentuk ose dicelupkan dan dihomogenkan pada media  BHI  secara  aseptis,  diinkubasi  pada  suhu  37°C  selama  24  jam  hingga  BHI menjadi keruh . Isolat murni bakteri dikultur pada media Mac Conkey (MC) selama 24 jam pada suhu 37°C. Koloni bakteri dari media MC distandardisasikan dengan standar Mc Farland 0,5. Sebelum digunakan untuk uji antibakteri, kertas cakram steril direndam dengan  masing-masing  konsentrasi  bubuk  cacing  tanah,  dikeringkan,  kemudian diletakkan  pada  permukaan  media Muller  Hinton  Agar (MHA)  plate  yang  telah diinokulasi  S.  typhi.  Hal  tersebut  dilakukan  dalam  7  kali  pengulangan.  Selanjutnya cawan petri tersebut diinkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam.  Diameter zona hambat diukur  menggunakan  penggaris  dari  ujung  ke  ujung  melalui  tengah disk obat  dan dinyatakan dalam satuan (mm).

## Pengujian Aktivitas Antibakteri
Uji  aktivitas  antibakteri  dilakukan  menggunakan  metode  difusi  kertas  cakram. Bubuk cacing tanah dibuat dalam tiga konsentrasi berbeda yaitu 25%, 50%, dan 100% (b/v) (Agustin, 2018). Dimana %b/v merupakan jumlah gram zat dalam 100 ml larutan (aquades). Isolat  bakteri Salmonella  typhi (ATCC  14028)  diperoleh  dari  Laboratorium Mikrobiologi  Poltekkes  Kemenkes  Kaltim.  Kontrol  positif  adalah  kloramfenikol  30 μg/mL, dan kontrol negatif adalah aquadest steril.
Data  Hasil  perhitungan  aktivitas  penghambatan  efektifitas  antibakteri  bubuk cacing  dibandingkan  diameter  zona  hambatnya  dengan  diameter  zona  hambat  yang dihasilkan  oleh  antibiotik  kontrol  positif  yaitu kloramfenikol 30  μg/mL.  Efektifitas antibakteri bubuk cacing dihitung menggunakan persamaan (Dini Harlita dkk., 2019) :
E = x 100%
Keterangan, E = efektivitas antibakteri (%), D = rata-rata diameter zona hambat bubuk cacing tanah (mm), dan Da = diameter zona hambat antibiotik kontrol positif (mm).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Identifikasi sampel
Cacing  tanah  dengan  tubuh  berwarna  merah  muda  hingga  ungu  kemerahan, perut  berwarna  krem,  ekor  berwarna  kekuningan,  berlendir,  memiliki  klitelium  yang terletak pada segmen, berukuran ± 4-9 cm, dengan tubuh bagian atas bulat dan bagian bawah pipih. Hasil identifikasi menyatakan benar bahwa cacing tanah yang digunakan adalah Lumbricus rubellus .
(a)                         (b)                           (c)
Gambar 1. Cacing tanah ( Lumbricus rubellus ) (a) karakteristik cacing tanah; (b) cacing tanah yang telah dicuci bersih; (b) bubuk cacing tanah (Data primer, 2022)

## Uji Konfirmasi Bakteri Salmonella typhi (ATCC 14028)
Dengan  melakukan  uji  konfirmasi  pada  media  BHI,  melihat  adanya  kekeruhan sesuai  dengan  standar Mc  farland 0,5;  uji  konfirmasi  pada  media Mac  Conkey menunjukan  adanya  koloni  berwarna  abu-abu,  berbentuk  bulat  kecil,  s mooth ,  dan bersifat  tidak  memfermentasi  laktosa;  hasil  pewarnaan  Gram  yang  menunjukkan mikroba  berbentuk  batang  berwarna  merah  dan  susuan  bakteri  menyebar;  hasil  zona hambat efektivitas bubuk cacing tanah terhadap Salmonella typhi.
(a) (b)
(c)                               (d)
Gambar 2 . Uji konfirmasi Bakteri S. typhi (ATCC 14028) (a) media BHI sesudah ditanam S. typhi; (b) media Mac Conkey setelah ditanam S. typhi; (c) bakteri S. typhi Gram Negatif berbentuk batang; (d) Zona hambat pada konsentrasi 25%, 50% dan 100% (Data primer, 2022)

## Diameter Zona Hambat dan Efektivitasi Antibakteri Bubuk Cacing Tanah
Hasil  penelitian  menunjukkan  diameter  zona  hambat  dan  efektifitas  bubuk cacing tanah yang dilakukan 7 kali pengulangan didapatkan, pada konsentrasi 25% tidak memililiki daya hambat dengan rata-rata diameter zona hambat yaitu 0 mm, sedangkan pada  konsentrasi  50%  dan  100%  memiliki  kategori  lemah  dengan  rata-rata  diameter zona  hambat  0,21  mm  dan  0,92  mm.  Tetapi  terhadap  antibiotik Kloramfenikol 30 µ g memiliki  kategori  sangat  kuat  dengan  diameter  zona  hambat  27  mm  (Gambar  3). Kemudian  efektivitas  daya  hambat  bubuk  cacing  tanah  yang  terbesar  yaitu  pada konsentrasi  100%  dan  50%  dengan  efektifitas  antibakteri  sebesar  0,7%  dan  3,4% (Gambar 4).
Gambar 3. Grafik rata-rata diameter zona hambat bubuk cacing tanah (Data primer, 2022)
Gambar 4. Grafik efektifitas antibakteri bubuk cacing tanah (Data primer, 2022)

## Aktivitas Antibakteri Bubuk Cacing Tanah
Hasil  penelitian  yang  dilakukan  dalam  pengulangan  sebanyak  7  kali  dari masing-masing  konsentrasi,  diperoleh  hasil  positif  lemah  yaitu  pada  konsentrasi  50% dan 100%. Reaksi positif lemah menunjukkan bahwa bubuk cacing tanah belum mampu untuk  menghambat  pertumbuhan  bakteri Salmonella  typhi .  Peneliti  menggunakan perlakuan  yaitu  menggunakan  metode  difusi  cakram.  Uji  daya  hambat  antibakteri bertujuan  untuk  mengetahui  daya  kerja/efektivitas  dari  suatu  bahan  dalam  membunuh atau menghambat suatu bakteri.
Penelitian  ini,  menggunakan  cacing  tanah  sebanyak  3  kg,  kemudian  diolah menjadi  bubuk  cacing  tanah  dengan  teknik  sangrai  dan  ditimbang  masing-masing sebanyak  25  g,  50  g  dan  100  g.  Proses  pembuatan  larutan  cacing  tanah  dilakukan dengan  menggunakan  pelarut  aquades  steril  karena  pelarut  tersebut  dapat  berinteraksi dengan larutan dari bubuk cacing tanah sehingga tidak menyebabkan kontaminasi pada larutan  dan  dapat  menyebabkan  konsentrasi  larutan  bisa  berubah  sesuai  dengan  yang diinginkan yaitu 25%, 50% dan 100%.
Pada percobaan ini, peneliti menggunakan strain murni bakteri Salmonella typhi (ATCC 14028) yang telah dibuat menjadi suspensi sesuai dengan standar Mc Farland , kemudian diusapkan di permukaan media Muller Hinton Agar dan ditanam dengan disc paper yang  sebelumnya  telah  direndam  dalam  masing-masing  konsentrasi  larutan cacing tanah. Setelah diinkubasi, diamati zona hambat di sekitar kertas saring dan disk obat.  Luas  zona  hambat  yang  terbentuk  diukur  menggunakan  penggaris  dengan  latar belakang hitam.
Penelitian  ini,  menggunakan  metode  difusi  kertas  saring  yang  dicelupkan  ke dalam larutan cacing tanah. Pada metode kertas saring ini memungkinkan diameter zona hambat yang terbentuk lebih kecil, karena senyawa cacing tanah yang meresap ke dalam kertas saring hanya sedikit, sehingga kurang maksimal dalam membentuk zona hambat. Selain  itu,  metode  difusi  kertas  saring  memiliki  kelemahan  yaitu  zona  bening  yang terbentuk tergantung dengan kondisi inkubasi, inokulum, predifusi dan preinkubasi serta ketebalan medium. Apabila kelima faktor tersebut tidak sesuai maka hasil dari metode kertas saring biasanya sulit untuk diinteprestasikan (Vernanda dkk., 2020).
Pada  konsentrasi  25%  tidak  memiliki  daya  hambat  (Gambar  3).  Hal  ini  dapat disebabkan  oleh  perbandingan  antara  kandungan  cacing  tanah  dengan  aquades  yang berbeda  dan  penggunaan  suhu  pemanasan  yang  belum  optimal.  Hal  tersebut  sesuai dengan teori Vernanda dkk., (2020) menyatakan bahwa semakin tinggi konsentrasi yang diberikan  maka  semakin  besar  daya  (zona)  hambat  terhadap  bakteri  tersebut  atau semakin tinggi konsentrasi pengaruhnya akan lebih baik atau mudah berdifusi.
Pada  konsentrasi  50%  dan  100%  didapatkan  rata-rata  diameter  zona  hambat yaitu 0,21 mm dan 0,92 mm yang memiliki daya hambat lemah (Gambar 3), kemudian didapatkan  efektivitas  antibakteri  sebesar  0,7%  dan  3,4%  pada  konsentrasi  50%  dan 100%  (Gambar  4).  Hal  ini  kemungkinan  disebabkan  oleh  beberapa  faktor,  antara  lain yaitu  cara  preparasi  bahan  untuk  dijadikan  sebagai  antibakteri  belum  optimal.  Proses pengolahan  cacing  tanah  dengan  cara  disangrai  dianggap  belum  optimal  dalam  proses pemisahan  bahan-bahan  antibakteri  dalam  tubuh  cacing  tanah.  Hal  tersebut  sesuai dengan  teori  Oktavi  dkk.,  (2019)  mengatakan  bahwa  antibakteri  seperti  lisozim  dan alkaloid  yang  terdapat  dalam  tubuh  cacing  tanah  masih  diikat  oleh  lemak.  Sehingga akan  berpengaruh  ketika  suhu  yang  digunakan  belum  cukup  untuk  meluruhkan  lemak pada cacing tanah.
Dapat  diketahui  bahwa  dalam  proses  pengolahan  cacing  tanah  sebaiknya  suhu yang  digunakan  stabil,  tidak  kurang  dan  juga  tidak  terlalu  tinggi  (72°C).  Jika  suhu kurang  maka  proses  pemisahan  kandungan  antibakteri  yang  ada  pada  cacing  tanah belum optimal, dikarenakan antibakteri seperti lisozim dan alkaloid yang terdapat dalam tubuh  cacing tanah  masih  diikat  oleh  lemak.  Dan  jika  suhu terlalu  tinggi  (72°C)  dapat menyebabkan rusaknya zat aktif yang terkandung di dalam cacing tanah. Diameter zona hambat  bakteri  yang  terbentuk  dalam  perlakuan  selalu  mengalami  peningkatan
sebanding dengan meningkatnya konsentrasi air cacing tanah (Lumbricus rubellus) yang digunakan.  Dapat  diketahui  dari  hasil  penelitian  yang  diperoleh  bahwa  semakin  tinggi konsentrasi  yang  diberikan  maka  semakin  besar  daya  (zona)  hambat  terhadap  bakteri tersebut  atau  semakin  tinggi  konsentrasi  pengaruhnya  akan  lebih  baik  atau  mudah berdifusi.
Dari penelitian yang telah dilakukan, sebaiknya dapat mengkondisikan suhu agar tetap stabil dan juga aspek-aspek lainnya untuk mencegah hal-hal yang tidak diinginkan. Selain  itu,  sebaiknya  dapat  meneliti  efek  antibakteri  bubuk  cacing  tanah (Lumbricus rubellus) terhadap  jenis  bakteri  lain  dan  mengidentifikasi  senyawa  aktif  yang  paling berperan  sebagai  antibakteri  pada  bubuk  cacing  tanah (Lumbricus  rubellus) menggunakan metode yang berbeda serta teknik yang berbeda.

## SIMPULAN
Berdasarkan  penelitian  yang  telah  dilakukan  mengenai  daya  hambat  cacing tanah (Lumbricus rubellus) terhadap pertumbuhan bakteri Salmonella typhi, maka dapat ditarik  kesimpulan  yaitu  pada  konsentrasi  minimal  50%  didapatkan  daya  antibakteri serta efektivitas antibakteri.

## DAFTAR PUSTAKA
Agustin,  D.  (2018).  Uji  Daya  Hambat  Serbuk  Cacing  Tanah  ( Lumbricus  rubellus ) Terhadap Bakteri Salmonella typhi .
Batubuaya, D., dkk. (2017). Hubungan Higiene Perorangan dan Aspek Sosial Ekonomi Dengan  Kejadian  Demam  Tifoid  di  Rumah  Sakit  Tk.III  R.W.  Mongisidi Manado. Jurnal Media Kesehatan (Vol. 9, Issue 3).
Bulawan,  A.,  dkk.  (2016).  Karakteristik  dan  Penggunaan  Antibiotik  pada  Pasien Demam  Tifoid  di  Beberapa  Rumah  Sakit  Di  Samarinda  Periode  2015. In Proceeding of Mulawarman Pharmaceuticals Conferences (Vol. 3, pp. 145-150).
Harlita, T. D., dkk. (2019). Aktivitas dan Efektivitas Antibakteri Ekstrak Daun Ciplukan (Physalis angulata L.) terhadap Pertumbuhan Bacillus cereus. In Husada Mahakam : Jurnal Kesehatan (Issue 1).
Kamal,  U.  (2017).  Konstruksi  Perlindungan  Konsumen  Jasa  Pengobatan  Alternatif (Studi  Kasus  di  Kota  Semarang).  In  Journal  Of  Private  and  Commercial  Law Volome (Vol. 1, Issue 1). www.depkes.go.id/seberapa-besar-manfaat-
Nurdin,  E.  (2018).  Hubungan  Cemaran  Bakteri Salmonella  typhi pada  Feses  Anak Terhadap Personal Higiene di Kelurahan Kampung Makassar Timur Kota Ternate. In Jurnal Kesehatan Poltekkes Ternate (Vol. 11, Issue 1).
Rahmawati,  D.  (2021).  Mikrobiologi  Farmasi  Dasar-dasar  Mikrobiologi  untuk Mahasiswa Farmasi. Yogyakarta : Penerbit Pustaka Baru Press
Oktavi,  dkk  (2019).  Uji  Potensi  Air  Rebusan  Cacing  tanah  Jenis  Perionyx  excavates Dalam  Menghambat  Pertumbuhan  Bakteri Salmonella  typhi Secara  Invitro.  Jurnal Analis Medika Biosains (JAMBS), 5(1), 45. https://doi.org/ 10.32807/jambs.v5i1.103
Siti  Khodijah,  dkk.  (2016).  Studi  Deskriptif  Penggunaan  Antibiotik  untuk  Pengobatan Demam Tifoid  pada  Pasien  Anak.  Jurnal  Keperawatan  dan  Kesehatan  Masyarakat Cendekia Utama (Vol. 5, Issue 1). www.jurnal. stikescendekiautamakudus.ac.id
Sudarman, A., dkk. (2017). Pemberian tepung daun sirih (Piper BetleI L) dalam waktu lama  untuk  mengobati  mastitis  subklinis  pada  sapi  perah  laktasi  pasca  puncak produksi.
Buletin
Peternakan, 41(1),
8. https://doi.org/10.21059/
buletinpeternak.v41i1.12706
Sugito  dan  Slamet.  (2018).  Daya  Hambat  Konsentrasi  Air  Rebusan  Cacing  Tanah ( Lumbricus  rubellus )  Terhadap  Pertumbuhan  Bakteri Salmonella  typhi dengan Metode Difusi. Jurnal Laboratorium Khatulistiwa, 1(2), 145-151
Suryani,  L.  (2010).  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Cacing  Tanah  (Lumbricus  sp) terhadap  Berbagai  Bakteri  Patogen  secara  Invitro.  Mutiara  Medika:  Jurnal Kedokteran dan Kesehatan, (Vol. 10, Issue 1).
Vernanda,  A.  A.,  dkk.  (2020).  Uji  Efektivitas  Ekstrak  Cacing  Tanah  ( Lumbricus rubellus ) Terhadap Bakteri Salmonella typhi Secara In Vitro.