## UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL 70% DAUN
BINAHONG ( Anredera cordifolia (Ten.) Steenis) TERHADAP

## BAKTERI Staphylococcus aureus
I Putu Gede Adi Purwa Hita 1 , Putu Eka Arimbawa 2 , Dhiancinantyan windydaca BP 3 1,2,3) Universitas Bali Internasional, Jl. Seroja Denpasar - Bali 80114
e-mail: 1) adipurwah.1@gmail.com
2) eka _apoteker@yahoo.co.id
3) windydacabrataputri@iikmpbali.ac.id

## ABSTRAK
Pengobatan  jerawat  dewasa  ini  didominasi  oleh  kosmetika  khususnya  kosmetika  sintetis memiliki  efek  samping  yang  tinggi,  sehingga  memerlukan  alternatife  yaitu  pengobatan obat  herbal.  yang  memiliki  efek  samping  lebih  sedikit  dari  obat  sintetis.  Binahong ( Anredera  cordifolia (Ten.)  Steenis)  merupakan  salah  satu  tanaman  obat  herbal  khas Indonesia  yang  secara  empiris  digunakan  untuk  mengobati  berbagai  macam  penyakit. Untuk mengetahui aktivitas antibakteri dari ekstrak etanol 70% daun binahong ( Anredera cordifolia (Ten.)  Steenis)  terhadap  bakteri Staphyloccocus  aureus .  Pembuatan  ekstrak dilakukan dengan metode maserasi menggunakan etanol 70% dan uji aktivitas antibakteri dilakukan dengan metode difusi cakram yang diukur diameter zona hambatnya. Sebanyak 84,04  gram  ekstrak  kental  daun  binahong  yang  memiliki  warna  hijau  kehitaman,  bau khas,  dan  rasa  pahit  didapatkan  melalui  proses  ekstraksi.  Diameter  zona  hambat  ekstrak yang  dihasilkan  sebesar  12,97  ±  0,54  mm,  kontrol  positif  (kloramfenikol)  30,18  ±  0,08 mm,  dan  kontrol  negatif  tidak  memberikan  zona  hambat.  Ekstrak  etanol  70%  daun binahong  ( Anredera  cordifolia (Ten.)  Steenis)  memiliki  aktivitas  antibakteri  yang  kuat terhadap bakteri Staphylococcus aureus .
Kata  Kunci: Anredera  cordifolia (Ten.)  Steenis,  ekstrak  etanol,  antibakteri, Staphylococcus aureus .

## ABSTRACT
Today's acne treatment is dominated by cosmetics, especially synthetic cosmetics, which have  high  side  effects,  so it  requires  an  alternative,  namely  herbal  medicinal  treatment. which have fewer side effects than synthetic drugs. Binahong (Anredera cordifolia (Ten.) Steenis) is a typical Indonesian herbal medicinal plant which is empirically used to treat various  diseases.  To  determine  the  antibacterial  activity  of  70%  ethanol  extract  of binahong  leaves  (Anredera  cordifolia  (Ten.)  Steenis)  against  Staphyloccocus  aureus bacteria.  The  extract  was  made  by  maceration  method  using  70%  ethanol  and antibacterial  activity  test  was  carried  out  by  using  the  disc  diffusion  method  which measured the inhibition zone diameter. 84.04 grams of binahong leaf thick extract which has  a  green-black  color,  distinctive  odor,  and  a  bitter  taste  was  obtained  through  the extraction process. The resulting extract inhibition zone diameter was 12.97 ± 0.54 mm, positive control (chloramphenicol) 30.18 ± 0.08 mm, and negative control did not provide an  inhibition  zone.  The  70%  ethanol  extract  of  binahong  leaves  (Anredera  cordifolia (Ten.) Steenis) has strong antibacterial activity against Staphylococcus aureus bacteria.
Keywords: Anredera  cordifolia (Ten.)  Steenis,  ethanol  extract,  antibacterial, Staphylococcus aureus .

## PENDAHULUAN
Jerawat yang sering timbul pada muka, bahu, dada, punggung, leher, dan lengan merupakan kondisi sangat umum dengan melibatkan gangguan dari unit pilosebasea yang mempengaruhi jutaan orang di seluruh dunia (Wasitaatmadja, 2011). Pengobatan jerawat dewasa  ini  didominasi  oleh  kosmetika  khususnya  kosmetika  sintetis  memiliki  efek samping  yang  tinggi  salah  satunya  ditunjukkan  dari  hasil  monitoring  efek  samping kosmetika yang tertinggi  memiliki efek samping yaitu terjadi pada sediaan krim sintesis. Senyawa-senyawa  yang  bertanggung  jawab  dalam  hal  ini  antara  lain  adalah  zat  kimia berbahaya  seperti  merkuri  (Hg),  pewarna  sintetis  (K10  dan  K3),  hidrokinon,  dan  asam retinoat  (Tringani et  al .,  2011).  Oleh  karena  itu  perlu  adanya  formulasi  dari  bahan alternatif lain untuk mengurangi efek samping yang tidak diinginkan.
Salah satu alternatif yaitu penggunaan obat herbal hal ini dikarenakan obat herbal memiliki  efek  samping  yang  lebih  sedikit  dari  obat  sintetis  (Hanutami  dan  Arif,  2017). Obat herbal merupakan tanaman yang  memiliki khasiat obat dan digunakan sebagai  obat dalam  penyembuhan  maupun  pencegahan  penyakit.  Salah  satu  contoh  obat  herbal  yaitu daun  binahong  ( Anredera  cordifolia (Ten.)  Steenis).  Daun  binahong  merupakan  salah satu  tanaman  khas  Indonesia  yang  secara  empiris  digunakan  untuk  mengobati  berbagai macam penyakit, antara lain untuk menyembuhkan luka luar akibat goresan senjata tajam, meningkatkan  stamina  tubuh,  mengobati  sakit  maag,  wasir,  menyembuhkan  memar, rematik  (Samirana,  2016).  Khasiat  secara  empiris  dari  daun  binahong  tersebut  dapat menjadi  dasar  pengobatan  alternative  untuk  jerawat  dan  harus  dibuktikan  secara  ilmiah, salah satunya dengan menguji aktivitas antibakteri dari ekstrak etanol 70% daun binahong terhadap bakteri Staphyloccocus aureus sebagai salah satu penyebab jerawat.

## METODOLOGI PENELITIAN

## Bahan
Simplisia daun binahong ( Anredera cordifolia (Ten.) Steenis), aquadestilata, etanol 70% (PT. Brataco), Nutrient Agar (Oxoid), larutan saline (NaCl) steril, bakteri Staphylococcus aureus , cakram disk, dan kloramfenikol.

## Alat
Alat  maserasi,  alat-alat  gelas  (Pyrex),  rotary  evaporator  (IKA),  corong  Buchner  (Merk), timbangan analitik (Acic AD- 2100H), pinset, dan autoklaf (GEA).

## Pembuatan Ekstrak
Simplisia daun binahong ( Anredera cordifolia (Ten.) Steenis) yang diperoleh dari daerah Bangli,  Bali.  1000  g  simplisia  kemudian  diekstraksi  menggunakan  metode  maserasi dengan  etanol  70%  sebanyak  5  L  di  dalam  sebuah  maserator  selama  3  hari  dengan perlakuan  sekali  dikocok  dan  dengan  melakukan  dua  kali  remaserasi  masing-masing dengan  etanol  70%  sebanyak  2,5  L.  Kemudian  hasil  maserasi  disaring  menggunakan corong Buchner dan filtrat dipekatkan dengan rotary evaporator pada suhu 50°C.

## Sterilisasi alat dan bahan
Alat  dan  bahan  yang  sudah  disediakan  dibungkus  dengan  aluminium  foil  agar  tahan panas.  Isi  Autoclave dengan  air  secukupnya.  Kemudian  masukan  alat  dan  bahan  yang sudah dibungkus dengan aluminium foil kedalam autoclave yang berada di Laboratorium Universitas Bali Internasional dengan suhu 120 o C selama 15 menit.
Penyiapan Media Nutrient Agar (NA)
7,25  gram Nutrient  Agar (NA)  dimasukkan  ke  dalam  labu  erlenmeyer  lalu  ditambahkan dengan 250 mL aquades dan dipanaskan dengan menggunakan hotplate selama ±10 menit hingga Nutrient  Agar (NA)  larut.  Media  yang  telah  homogen  disterilisasi  di  dalam autoklaf  selama  15  menit  pada  suhu  121°C.  Setelah  itu  media  ditunggu  hingga  agak dingin  sekitar  suhu  40-45°C  dan  tuangkan  ke  cawan  petri  sebanyak  20  mL.  Media Nutrient Agar (NA) yang telah dituang ke dalam cawan petri dibiarkan hingga memadat.
Pembuatan Media Bakteri Staphylococcus aureus
Kultur  murni  bakteri Staphylococcus  aureus dibuat  suspensi,  dengan  1  ose  kultur  murni bakteri  disuspensikan  dalam  larutan  saline  (NaCl)  steril  sebanyak  10  mL,  larutan  saline steril  digunakan  untuk  pembuatan  suspensi  dengan  tujuan  agar  bakteri  uji  tidak mengalami  lisis,  dihomogenkan  lalu  kekeruhan  suspensi  dibandingkan  dengan  standard larutan  Mc.  Farland  0,5  untuk  mendapatkan  suspensi  sesuai  standard,  dengan  jumlah pertumbuhan 10 8 CFU. Kemudian dilanjutkan dengan tahap inokulasi bakteri dengan cara bakteri uji diambil dengan jarum ose steril sebanyak satu ose, kemudian ditanam di media Nutrient Agar (NA) secara aseptik menggunakan metode spread plate atau metode sebar.

## Penyiapan sampel
Pembuatan  Cakram/ Disc dilakukan  dengan  menggunakan  kertas  cakram  steril  yang kemudian  dijenuhkan  dengan  ekstrak  untuk  sampel  uji,  larutan  kontrol  positif  yaitu
kloramfenikol,  dan  aquadest  sebagai  kontrol  negatif.  Sampel  uji  dibuat  dengan  cara melarutkan  4  gram  ekstrak  daun  binahong  ( Anredera  cordifolia (Ten.)  Steenis)  dalam  5 mL etanol.

## Uji Aktivitas Antibakteri
Pengujian  aktivitas  antibakteri  ekstrak  daun  binahong  menggunakan  metode  difusi  agar dengan  Metode  cakram  difusi  agar  ( Agar  Disk  Diffusion  Test) .  Cakram  yang  telah mengandung  sampel  uji,  kontrol  positif,  dan  control  negatif  diletakkan  di  permukaan pelat  agar  yang  mengandung  organisme  yang  diuji.  Kemudian  diinkubasi  selama  2  x  24 jam pada suhu 37°C. Aktivitas antibakteri dapat terlihat dengan adanya zona hambat dan dilakukan replikasi sebanyak empat kali. Zona hambatan tampak sebagai area jernih atau bersih yang mengelilingi cakram tempat zat dengan aktivitas antimikroba terdifusi.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Tabel 1. Hasil Diameter Zona Hambat
Replikasi 1 (mm) Replikasi 2 (mm) Replikasi 3 (mm) Replikasi 4 (mm) Rata-Rata (mm) Standar Deviasi Kontrol Positif 30,18 30,1 30,13 30,3 30,18 0,08 Kontrol Negatif 0 0 0 0 0 0 Sampel Uji (Ekstrak Daun Binahong) 13,78 12,25 12,95 12,88 12,97 0,54

## Tabel 2. Kriteria Kekuatan Aktivitas Antibakteri (Hapsari, 2015)
Diameter Zona Hambat Kekuatan Daya Hambat > 20 mm Sangat Kuat 10-20 mm Kuat 5-10 mm Sedang 0-5 mm Lemah
Sebanyak 84,04 gram ekstrak kental daun binahong ( Anredera cordifolia (Ten.) Steenis) didapatkan  melalui  proses  ekstraksi  menggunakan  metode  maserasi  dengan  karakteristik bentuk  kental,  warna  hijau  kehitaman,  bau  khas,  dan  rasa  yang  pahit. Tabel  1. menunjukkan  ekstrak  etanol  70%  daun  binahong  memiliki  aktivitas  antibakteri  terhadap pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  aureus dengan  diameter  zona  hambat  yang dihasilkan  sebesar  12,97  ±  0,54  mm  berbanding  terbalik  dengan  control  negatif  yang tidak  menghasilkan  diameter  zona  hambat.  Apabila  dinilai  dari Tabel  2. ekstrak  etanol 70%  daun  binahong  memiliki  aktivitas  antibakteri  yang  kuat  dan  kontrol  positif
(kloramfenikol)  memiliki  aktivitas antibakteri  yang  sangat  kuat.  Aktivitas antibakteri  ini disebabkan oleh kandungan metabolit sekunder yang terkandung dalam ekstrak.
Metabolit sekunder tumbuhan  merupakan senyawa metabolit  yang dihasilkan  oleh tumbuhan  dalam  proses  adaptasinya  dengan  lingkungan.  Terdapat  beberapa  senyawa metabolit  sekunder  yang  berperan  dalam  menghambat  pertumbuhan  mikroorganisme patogen.  Beberapa  contohnya  adalah  fenol,  flavonoid,  alkaloid,  tannin,  saponin,  dan terpenoid  (Hanphakphoom et  al. ,  2016).  Mekanisme  kerja  flavonoid  sebagai  antibakteri Terdapat  beberapa  mekanisme  kerja  flavonoid  sebagai  antibakteri  yaitu  :  menghambat sintesis  asam  nukleat,  menghambat  fungsi  membran  sel  bakteri,  menghambat metabolisme energi dalam sel bakteri, dan menghambat penggunaan oksigen oleh bakteri (Liantari,  2014;  Riwayati,  2012).  Tanin  merupakan  senyawa  metabolit  sekunder  yang dapat  menghambat  enzim  reverse  transkriptase  dan  DNA  topoisomerase  sehingga  sel bakteri  tidak  dapat  terbentuk  (Mukhlisoh,  2010;  Savitri,  2014).  Alkaloid,  saponin  dan terpenoid  memiliki  aktivitas  sebagai  antibakteri  dengan  mekanisme  menyebabkan kebocoran  protein,  menghambat  produksi  komponen  dinding  sel  bakteri  seperti peptidoglikan,  dan  enzim  dari  dalam  sel  dan  merusak  porin  sehingga  membrane  sel bakteri tidak berfungsi (Safangat et al. , 2014; Amirah et al. , 2019; Tim et al., 2014).

## SIMPULAN
Ekstrak  etanol  70%  daun  binahong  ( Anredera  cordifolia (Ten.)  Steenis)  memiliki aktivitas  antibakteri  yang  kuat  terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus dengan  nilai diameter  zona  hambat  12,97  ±  0,54  mm.  Data  awal  aktivitas  antibakteri  ekstrak  etanol 70% daun binahong dapat menjadi acuan untuk penelitian lebih lanjut seperti standarisasi ekstrak,  skrining  fitokimia,  dan  pengujian  aktivitas  antibakteri  dengan  golongan  bakteri yang  berbeda-beda  sehingga  nantinya  dapat  dihasilkan  produk  komersil  berbahan  dasar herbal.

## DAFTAR PUSTAKA
Amirah,  N.  M.,  Shun-Kai  Y.,  Chew-Li  M.,  Adelene  A.  S., Chou-Min  C.,  Chun-Wie  C., Aisha  A.,  Swee-Hua  E.  L.,  dan  Kok-Song  L.  2019.  Terpene  Derivatives  as  a Potential  Agent  against  Antimicrobial  Resistance  (AMR)  Pathogens. Molecules , 24,2631 : 1-21.
Hanphakphoom,  S.,  Thophon,  S.,  Waranusantigul,  P.,  Kangwanrangsan,  N.,  dan Krajangsan,  S.  2016.  Antimicrobial  Activity  of  Chromolaena  odorataExtracts Agains Bacterial Human Skin Infections. Modern Applied Science , Vol. 10 No. 2
: 159-171.
Hanutami, B. N. P. dan Arif B. 2017. Review Artikel : Penggunaan Teknologi Nano Pada Formulasi Obat Herbal. Farmaka , Suplemen Volume 15 No. 2 : 29-31.
Liantari,  Diah  Septia.  2014.  Effect  of  Wuluh  Starfruit  Leaf  Extract  for  Streptococcus Mutans Growth. J Majority . Vol 3(2) : 27-33.
Mukhlisoh, W.. 2010. Pengaruh Ekstrak Tunggal dan Gabungan Daun Belimbing Wuluh ( Averrhoa bilimbi Linn) Terhadap Aktivitas Anti Bakteri Secara In Vitro. Skripsi. Universitas Islam Negri Maulana Malik Ibrahim.
Riwayati,  Dina.  2012.  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Etanol  Daun  Belimbing  Wuluh ( Averrhoa  bilimbi  L. )  Terhadap Escherichia  Coli Dan Bacillus  Sp..  Skripsi. Surakarta : Universitas Muhammadiyah Surakarta.
Safangat,  A.,  Sarwiyono,  dan  P.  Surjowardojo.  2014.  Pengaruh  penggunaan  jus  daun kelor ( Moringa oleifera ) untuk teat dipping terhadap kejadian  mastitis sub klinis sapi  perah  FH  laktasi. Skripsi. Malang  :  Fakultas  Peternakan  Universitas Brawijaya.
Samirana,  P.  O.,  Swastini  D.  A.,  Subratha,  I  D.  G.  P.  Y.,  dan  Ariadi,  K.  A.  2016.  Uji Aktivitas  Penyembuhan  Luka  Ekstrak  Etanol  Daun  Binahong  ( Anredera scandens (L.)  Moq.)  pada Tikus  Jantan  Galur  Wistar. Jurnal  Farmasi  Udayana , Vol. 5 No. 2 : 19-23.
Savitri,  Ni  Putu  Iga.  2014.  Efektivitas  Antibakteri  Ekstrak  Daun  Belimbing  Wuluh ( Averrhoa  bilimbi L.)  terhadap  Bakteri  MIX  Saluran  Akar  Gigi. Skripsi . Denpasar: Universitas Mahasaraswati.
Tim,  T.  P.  C.,  Benjamart  C.,  Andrew  J.L.  2014.   Alkaloids:  An  Overview  Of  Their Antibacterial,  Antibiotic-enhancing,  And  Antivirulence  Activities. International Journal of Antimicrobial Agents : 1-14.
Tringani, D., Kristiana E., dan Retna S. W. 2011. Persepsi Remaja Putri di Kota Ambon Tentang  Risiko  Terpapar  Kosmetik  Berbahaya  dan  Perilakunya  dalam  Memilih dan Menggunakan Kosmetik. Berita Kedokteran Masyarakat , Vol. 27, No. 1 : 1-
9.
Wasitaatmadja,  S.  M.  2011.  Ilmu  penyakit  kulit  dan  kelamin.  Edisi  6.  Jakarta: Balai Penerbit FKUI.