## PERBANDINGAN BEBERAPA METODE PEMBUATAN METIL ESTER DALAM ANALISA ASAM LEMAK DARI VIRGIN COCONUT OIL (VCO)
Julius Pontoh 1) dan Lita Makasoe 1)
1) Program Studi Kimia FMIPA Universitas Sam Ratulangi, Manado 95115 e-mail: pontohjulius@yahoo.com

## ABSTRAK
Transesterifikasi merupakan metode awal dalam analisa asam asam lemak dalan minyak dengan teknik  kromatografi  gas.    Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk  mempelajari  efisiensi  diantara berbagai  metode  transesterifikasi  dalam  analisa  asam  asam  lemak  dalam  minyak  kelapa  murni. Metode  yang  dipelajari  meliputi  transesterifikasi  asam  dan  basa  menurut  Christie  (1993), transesterifikasi  asam  dan  basa  menurut  Laureles,  at  al.  (2002)  dan  trasesterifikasi  menurut IUPAC  (1997).    Hasil  penelitian  menunjukan  bahwa  diantara  metode  yang  dipelajari  hanya memberikan  sedikit  perbedaan  waktu  retensi  dari  asam  asam  lemak  dengan  berbagai  erlakuan metode transesterifikasi.  Metode IUPAC (1997) memberikan luas puncak yang lebih besar dari anatara  metode  yang  dipelajari.    Transesterifikasi  basa  dengan  metode  Christie  (1992) memberikan persentasi luas area tertinggi untuk asam laurat, diikuti dengan transesterifikasi asam dengan metode Laureles, et al., 2002), tetapi untuk persentasi luas puncak dari asam kaprilat dan kaprat  metode  IUPAC  (1997)  menghasilkan  persentasi  luas  luncak  yang  lebih  besar.    Dengan demikian,  untuk  analisa  asam  asam  lemak  dalam  VCO,  metode  IUPAC  (1997)  adalah  yang terbaik.
Kata kunci: metil ester, VCO

## COMPARISON OF SOME METHODS IN MAKING METHYL ESTER OF FATTY ACID ANALYSIS FROM VIRGIN COCONUT OIL (VCO)

## ABSTRACT
Transeterification  is  always  the  first  step  in  analysis  of  fatty  acid  using  gas  chromatographic method.  The goal of this research is to study the efisiency of the derivative methods for fatty acid analysis.  The methods to be studied including acid and base transesterification (Christie, 1993), acid  and  base  transesterification  (Laureles,  et  al.,  2002)  and  esterification  (IUPAC,  1997).    The results  show  that  among  the  methods  there  are  only  slightly  different  in  retention  time.    The IUPAC  (1997)  method  showed  higher  peak  area  among  the  methods  tested.    The  base transeterification by Christie (1993) produce the highest  percentage peak area for the lauric acid followed by acid tranesterification by Laureles, et al. (2002). But for caprylic and capric acids, the esterification  by  IUPAC  (1997)  produce  higher  percentage  of  peak  areas.    Therefore,  for  the purpose of VCO’s fatty acid analysis, the IUPAC method should be the choice.
Keywords: methyl ester, VCO

## PENDAHULUAN
Kelapa  sebagai  salah  satu  kekayaan hayati Indonesia telah berabad-abad yang lalu dimanfaatkan  untuk  memenuhi  berbagai kebutuhan,  baik  sebagai  sumber  makanan, obat-obatan maupun industri. Pada masyarakat  Indonesia,  buah  kelapa  banyak digunakan  dalam  kehidupan  sehari-hari,  baik
di  pedesaan  maupun  di  perkotaan.  Terutama daging  buahnya  dapat  dipakai  sebagai  bahan baku  untuk  menghasilkan  kopra,  minyak kelapa, santan dan kelapa parut. Virgin Coconut Oil (VCO)
merupakan  hasil  olahan  dari  daging  buah kelapa segar (non kopra), dalam pengolahannya  tidak  melalui  proses  kimiawi dan  tidak  menggunakan  pemanasan  tinggi
hingga  minyak  yang  dihasilkan  berwarna bening  (jernih)  dan  beraroma  khas  kelapa. Menurut standar internasional yang dikeluarkan  oleh Asian  Pacific  Coconut
Community (APCC, 2004) bahwa kandungan asam lauratnya mencapai 43-53 %, kandungan  asam  lemak  bebas  sangat  rendah yaitu  ≤  0,5  %  serta  kadar  airnya  mencapai 0,1-0,5  %.  Komposisi  asam  lemak  tertinggi dalam  minyak  kelapa  murni  adalah  asam laurat  yang  berfungsi  dapat  memberi  gizi serta melindungi tubuh dari penyakit menular dan penyakit degeneratif (Sutarmi, 2005).
Komposisi asam lemak berbeda-beda sesuai dengan sumber minyak itu. Komposisi asam lemak dalam daging buah kelapa terdiri dari  asam  lemak  jenuh  yaitu  asam  kaproat (0,5  %),  asam  kaprilat  (8,0  %),  asam  kaprat (6,4  %),  asam  laurat  (48,5  %),  asam  miristat (17,6 %), asam palmitat (8,4 %), asam stearat (2,5  %)  dan  asam  lemak  tidak  jenuh  yaitu asam oleat    (6,5  %), asam linoleat (1,5 %) (Zapsalis dan Beck, 1985).
Proses  esterifikasi  bertujuan  untuk mengubah  asam-asam  lemak  dari  trigliserida dalam  bentuk  metil  ester  atau  etil  ester kemudian  diikuti  dengan  fraksinasi  yang dilakukan dengan kromatografi gas. Menurut Christie  (1993),  pembuatan  metil  ester  asam lemak dari minyak   dapat dilakukan melalui proses esterifikasi atau transesterifikasi dengan katalis asam misalnya H 2 SO 4 maupun katalis  basa  misalnya  kalium  metoksida. Metode  yang  digunakan  harus  sesuai  dengan karakteristik asam-asam lemak. Untuk analisa asam  lemak  rantai  pendek  harus  mendapat perlakuan  yang  khusus,  karena  asam  lemak tersebut  mudah  menguap  selama  proses esterifikasi  dan  mudah  larut  dalam  air. Misalnya  dalam  susu  terdapat  asam  lemak rantai pendek sehingga dianjurkan menggunakan  metode  esterifikasi  dengan katalis asam misalnya HCl ( Christie, 1993).
Sampai  sekarang  metode  pembuatan ester  telah  banyak  dikembangkan  oleh Christie (1993), Laureles (2002) dan International  Union  of  Pure  and  Applied Chemistry (IUPAC,  yang  diterapkan  oleh Institut  Pertanian  Bogor,  IPB).  Namun demikian, metode-metode tersebut diterapkan kembali ke VCO untuk melihat metode mana yang  paling  baik  dalam  menganalisa  metil ester  khususnya  ester  dari  kaproat  dan kaprilat,  metil  ester  kaproat  dan  kaprilat digunakan  sebagai  indikator  untuk  melihat
metode  yang  terbaik,  karena  asam  kaproat dan  kaprilat  dalam  minyak  kelapa  sangat rendah,  masing-masing  0,5  %  dan  8,0  % (Zapsalis dan Beck, 1985).
Berdasarkan  uraian  di  atas  bahwa minyak  kelapa  mengandung  asam  lemak rantai  pendek  yaitu  0,5  %  asam  kaproat  dan 8,0  %  asam  kaprilat  yang  bersifat  mudah menguap  dan  mudah  larut  dalam  air, sehingga analisa dari minyak kelapa khususnya  VCO  perlu  diperlakukan  secara khusus.

## Tujuan Penelitian
Adapun  tujuan  yang  ingin  dicapai yaitu  untuk  mengetahui  metode  pembuatan metil  ester  yang  terbaik  untuk  analisa  asam lemak  pada  VCO  khususnya  asam  kaproat dan asam kaprilat.

## METODOLOGI PENELITIAN

## Bahan Dan Alat
Bahan-bahan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  VCO  komersil  (Nyiur Melambai),  NaOH,  H 2 SO 4 p.a,    metanol  p.a, n-heksana, NaCl, Na 2 SO 4 anhidrous, petroleum  eter,  kertas  saring,  aquades, aluminium  foil.  Alat-alat  yang  digunakan antara  lain  alat-alat  gelas  laboratorium, neraca  analitik,  karet  penghisap,  magnet  bar, termometer, satu set alat refluks, satu set alat destilasi, hot plate , pipet mohr, corong pisah.

## Pembuatan Sampel

## Transesterifikasi asam (Christie, 1993)
Ke  dalam  labu  leher  tiga  kapasitas 250  mL  dimasukkan  25  g  VCO  sambil diaduk  dengan  batang  pengaduk  magnetik. Sebanyak 5 mL H 2 SO 4 dilarutkan dalam 100 mL  metanol  kemudian  campuran  larutan  ini melalui  corong  penetes  ditambahkan  tetes demi  tetes  ke  dalam  VCO.  Selanjutnya larutan  direfluks  selama  10  jam  dengan pemanasan  pada  suhu  65 0 C.  Larutan  hasil refluks    kemudian  diekstraksi  dengan petroleum  eter  dan  aquades.  Fase  organik yang diperoleh ditambahkan Na 2 SO 4 anhidrous  kemudian  disaring.  Filtrat  yang diperoleh selanjutnya diuapkan untuk menghilangkan pelarut. Residunya
merupakan  hasil  metil  ester  asam  lemak
kemudian  dianalisis  dengan  menggunakan kromatografi gas.

## Transesterifikasi basa (Christie, 1993)
Ke  dalam  labu  leher  tiga  kapasitas 250  mL  dimasukkan  25  g  VCO  sambil diaduk  dengan  batang  pengaduk  magnetik. Sebanyak  5  g  NaOH  dilarutkan  dalam  100 mL  metanol  kemudian  campuran  larutan  ini melalui  corong  penetes  ditambahkan  tetes demi  tetes  ke  dalam  VCO.  Selanjutnya larutan  direfluks  selama  10  jam  dengan pemanasan  pada  suhu  65 0 C.  Larutan  hasil refluks    kemudian  diekstraksi  dengan petroleum  eter  dan  aquades.  Fase  organik yang diperoleh ditambahkan Na 2 SO 4 anhidrous  kemudian  disaring.  Filtrat  yang diperoleh selanjutnya diuapkan untuk menghilangkan pelarut. Residunya
merupakan  hasil  metil  ester  asam  lemak kemudian  dianalisis  dengan  menggunakan kromatografi gas.

## Transesterifikasi asam (Laureles, 2002)
Sebanyak 2 mL n-heksana
ditambahkan dalam 0,1 g VCO kocok hingga bercampur.  Ditambahkan  metanolik  H 2 SO 4 sebanyak  0,4  mL  ke  dalam  VCO  kemudian dikocok selama 10 detik. Kemudian
campuran  larutan  ditempatkan  dalam water bath yang  telah  diukur  suhunya  yaitu  50 0 C selama 1 menit dan dikocok selama 10 detik. Selanjutnya  ditambahkan  metanolik  NaOH 0,4  mL  dan  dikocok  beberapa  detik  hingga bercampur. Campuran larutan akan terbentuk dua  lapisan,  lapisan  metil  ester  asam  lemak dipisahkan kemudian dianalisis dengan menggunakan kromatografi gas.

## Transesterifikasi basa (Laureles, 2002)
Sebanyak 2 mL n-heksana ditambahkan dalam 0,1 g VCO kocok hingga bercampur.  Tambahkan  metanolik  NaOH sebanyak  0,4  mL  ke  dalam  VCO  kemudian dikocok selama 10 detik. Kemudian campuran  larutan  ditempatkan  dalam water bath yang  telah  diukur  suhunya  yaitu  50 0 C selama  1  menit  dan  kocok  selama  10  detik. Selanjutnya  ditambahkan  metanolik  H 2 SO 4 0,4  mL  dan  dikocok  selama  beberapa  detik hingga  bercampur.  Campuran  larutan  akan terbentuk  dua  lapisan,  lapisan  metil  ester
asam  lemak  dipisahkan  kemudian  dianalisis dengan menggunakan kromatografi gas.

## Esterifikasi (IUPAC, 1987 dikerjakan oleh Lab. Kimia Organik IPB)
Kedalam 0,1 g  VCO ditambahkan n- heksana  1  mL  kemudian  divortex  dan ditambahkan  NaOH  1,5  mL.  Setelah  itu dipanaskan  pada  suhu  80 0 C  selama  5  menit kemudian didinginkan. Selanjutnya ditambahkan  BF 3 dalam  metanol  sebanyak  2 mL serta dipanaskan pada suhu 80 0 C selama 25  menit.  Kemudian  didinginkan  dan ditambahkan berturut-turut n-heksana 1,5 mL dan  3  mL  larutan  NaCl  jenuh.  Diambil lapisan atas, ditambahkan Na 2 SO 4 anhidrous, disaring  dan  siap  disuntikkan  pada  alat kromatografi gas.

## Analisa Sampel dengan Kromatografi Gas
Sampel dianalisa dengan kromatografi gas dengan kondisi sebagaimana dibawah ini. Gas pembawa Kolom Panjang kolom Suhu awal Suhu akhir Jenis detektor : He : Kapiler DB 23 (90  %  bis  sianopropil  dan 10  %  fenilsiano  propil
Polisiloxane
: 50 m
: 120 o C : 230 o C : FID

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Kromatogram Metil Ester Asam Lemak VCO
Dari  gambar  kromatogram  (Gambar 1)  terlihat  bahwa  asam-asam  lemak  telah ditentukan  dengan  menggunakan  larutan standar.
Terdapat  beberapa  puncak  yang berhubungan  dengan  masing-masing  asam lemak,  asam  stearat  dan  oleat  sedikit berhimpit namun demikian masih
mempunyai resolusi yang baik.
Gambar 1.   Contoh  kromatogram  dengan  menggunakan  asam  lemak  standar  untuk  penentuan puncak  berdasarkan  pada  waktu  retensi  pada  metode  transesterifikasi  asam (Laureles, 2002) dari minyak kelapa murni (VCO).
Tabel 1. Waktu retensi metil ester asam lemak VCO dari berbagai metode.
Asam lemak Waktu retensi Transesterifikasi (Christie, 1993) Transesterifikasi (Laureles, 2002) Esterifikasi (IUPAC, 1987) Asam Basa Asam Basa Kaprilat(C8) Kaprat(C10) Laurat(C12) Miristat(C14) Palmitat(C16) Stearat(C18) Oleat(C18:1) Linoleat(C18:2) 3,1 4,3 7,3 11,8 17,3 22,6 23,1 24,3 3,1 4,3 7,3 11,8 17,3 22,6 23,2 24,3 3,1 4,3 7,2 11,8 17,1 22,5 23,0 24,2 3,1 4,3 7,2 11,8 17,2 22,6 23,2 24,3 3,1 4,3 7,5 12,0 17,4 22,8 23,3 24,4

## Waktu Retensi
Bardasarkan pada asam lemak standar  maka  waktu  retensi  untuk  masing- masing  asam  lemak  dapat  dilihat  pada  Tabel 1.
Berdasarkan waktu retensi metil ester asam  lemak  VCO  yang  disajikan  pada  tabel
1, dapat diketahui bahwa waktu retensi untuk masing-masing  asam  lemak  hampir  tidak bervariasi  dengan  pelakuan  berbagai  metode metilasi VCO tetapi untuk asam kapraot tidak terdeteksi  oleh  kromatografi  gas.  Kelima metode di atas menggunakan perlakuan yang berbeda  tetapi  tidak  menunjukkan  adanya asam kaproat.

## Luas Puncak
Luas  puncak  adalah  luas  area dibawah puncak. Luas puncak untuk masing- masing  asam  lemak  dalam  berbagai  metode metilasi dapat dilihat dalam tabel 2. Berdasarkan  luas  puncak  metil  ester asam  lemak  VCO  yang  disajikan  pada  tabel
2,  dapat  diketahui  bahwa  asam  linoleat mempunyai  luas  puncak  yang  terendah diikuti  asam  stearat  dan  asam    kaprat.  Luas puncak  yang  tertinggi  dihasilkan  oleh  asam laurat diikuti oleh asam miristat.
Tabel 2. Luas puncak metil ester asam lemak VCO dari berbagai metode
Asam lemak Luas Puncak Transesterifikasi (Christie, 1993) Transesterifikasi (Laureles, 2002) Esterifikasi (IUPAC, 1987) Asam Basa Asam Basa Kaprilat(C8) Kaprat(C10) Laurat(C12) Miristat(C14) Palmitat(C16) Stearat(C18) Oleat(C18:1) Linoleat(C18:2) 6650 8989 80617 35230 19477 5829 13672 1918 2953 9765 88956 35190 16917 4914 11382 2676 7610 8500 69197 27662 13927 4162 9793 2087 12085 12952 105582 42898 21839 6425 15594 3370 30682 26845 204168 80408 40470 12889 27618 6479 172382 172753 142938 220745 458655
Tabel 3. Persen puncak area metil ester asam lemak VCO dari berbagai metode
Asam Lemak Persen (%) Puncak Area Transesterifikasi (Christie, 1993) Transesterifikasi (Laureles, 2002) Esterifikasi (IUPAC, 1987) mg/g Esterifikasi IUPAC * (%) Asam Basa Asam Basa Kaprilat(C8) Kaprat(C10) Laurat(C12) Miristat(C14) Palmitat(C16) Stearat(C18) Oleat(C18:1) Linoleat(C18:2) 3,9 5,2 46,8 20,8 11,3 3,4 7,9 1,1 1,7 5,7 51,5 20,4 9,8 2,8 6,6 1,5 5,3 5,9 48,4 19,4 9,7 2,9 6,9 1,5 5,5 5,9 47,8 19,4 9,9 2,9 7,1 1,5 7,1 6,2 47,5 18,7 9,4 3,0 6,4 1,5 247,68 53,99 404,45 152,62 77,28 23,34 53,51 17,63 24 5 39 15 7 2 5 2 100 100 100 100 100 1030,5 100
Ket : * : Dihitung berdasarkan pada standar internal dari standar asam-asam lemak.
Persen Luas Puncak Persen luas
puncak adalah perbandingan  antara  masing-masing  puncak area  terhadap  total  luas  puncak.  Persen puncak  area  untuk  masing-masing  asam lemak dapat dilihat dalam tabel 3.
Persen  luas  puncak  yang  tertinggi dihasilkan  oleh  asam  laurat  yaitu  bervariasi dari  46,8  %  -51,5  %  dan  persen  luas  puncak yang  terendah  dihasilkan  oleh  asam  linoleat yaitu bervariasi yaitu dari 1,1 % - 1,5 %.
Asam  kaprilat  merupakan  asam lemak  rantai  pendek  yang  mudah  menguap dan  mudah  larut  dalam  air,  rendahnya
komposisi  asam  kaprilat  yang  diperoleh dengan metode Christie, menunjukkan bahwa metode  ini  relatif  kurang  baik.  Pada  metode esterifikasi IUPAC diperoleh komposisi asam kaprilat yang lebih tinggi (7,1 %).
Dari  tabel  di  atas  terlihat  bahwa variasi  tertinggi  persen  puncak  area  yang dihasilkan oleh asam kaprilat yaitu dari 1,7 % -  7,1  %  tetapi  untuk  asam  kaproat  tidak terdeteksi  oleh  kromatografi  gas,  dari  kelima metode yang digunakan.
Persen  luas  puncak  asam  kaprilat yang tertinggi diperoleh pada metode metilasi esterifikasi IUPAC yaitu 7,1 %. Pada metode metilasi  Christie  menggunakan  katalis  asam diperoleh  puncak  area  asam  kaprilat  yang lebih  rendah  (3,9  %)  dibandingkan  dengan metode  metilasi  Laureles  menggunakan katalis  asam  (5,3        %)  dan  metode esterifikasi IUPAC (7,1 %).
Persen  luas  puncak  asam  kaprilat yang diperoleh pada metode metilasi Christie menggunakan  katalis  basa  lebih  rendah  (1,7 %)  dibandingkan  metode  metilasi  Laureles menggunakan katalis basa (5,5 %).
Pada  metode  transesterifikasi  dengan katalis  asam  (H 2 SO 4 )  untuk  waktu  reaksi yang lama perlu ditambahkan jumlah alkohol (Christie, 1993). Metode ini dapat berlangsung pada suhu di atas 100 0 C dengan 3  sampai  48  jam  reaksi  kecuali  jika  reaksi dilakukan  pada  suhu  dan  tekanan  tinggi, disamping  itu  juga  metode  ini  dapat digunakan  untuk  minyak  yang  bermutu rendah atau memiliki kandungan asam lemak bebas tinggi (Mardiah et al .,  2004 ).
Menurut  Christie  (1993)  bahwa metode  esterifikasi  yang  baik  untuk  asam- asam lemak rantai pendek adalah pemanasan dengan  bahan  reaksi  dan  keterlibatan  air dalam  ekstraksi  harus  dihindarkan  karena asam  lemak  tersebut  mudah  menguap  dan mudah larut dalam air.
Metode transesterifikasi dengan katalis basa (sodium metoksida) mempercepat  reaksi.  Dalam  metode  ini menggunakan  alkohol  dalam  jumlah  yang banyak  dan  pada  saat  reaksi  berlangsung tidak  boleh  ada  air.  Reaksinya  dapat berlangsung 1 hingga 2 jam pada suhu ruang dan  akan  efisien  jika  digunakan  untuk minyak  yang  bermutu  tinggi  atau  kandungan asam  lemak  bebasnya  sangat  rendah,  karena dengan  adanya  sedikit  kandungan  asam lemak  bebas  dan  air  dalam  reaktan  akan
menyebabkan  terbentuknya  sabun  sehingga menurunkan  hasil  ester  dan  mempersulit pemisahan  ester  dengan  gliserol  (Mardiah et al ., 2004 ).
Persen  luas  puncak  asam  kaprilat yang  diperoleh  pada  metode  esterifikasi IUPAC  cukup  tinggi  dengan  jumlah  7,1  %. Hal  ini  disebabkan  karena  BF 3 -metanol merupakan asam lewis dalam wujud koordinasi kompleks dengan metanol menjadikannya  sebagai  katalis  asam  yang kuat  (Christie,  1993).  Dalam  reaksinya pemanasan  yang  digunakan  tidak  lama  yaitu pada pemanasan pertama selama 5 menit dan pemanasan  kedua  selama  25  menit  sehingga dapat  memperkecil  menguapnya  asam  lemak rantai  pendek  dan  tidak  menggunakan  air untuk  mengekstraksi  sehingga  asam  kaprilat yang diperoleh cukup tinggi.
Persen  luas  puncak  asam  kaprilat yang diperoleh pada metode metilasi Laureles menggunakan  katalis  asam  dan  basa  adalah 5,3  %  dan  5,5  %.  Pada  metode  ini  tidak menggunakan  pemanasan  yang  terlalu  lama, yaitu  pemanasan  yang  digunakan  hanya  1 menit  sehingga  hilangnya  asam  lemak  rantai kaprilat  masih  bisa  dihindari  dan  pada  tahap reaksi  ini  tidak  menggunakan  air  untuk mengekstraksi.  Menurut  Christie  (1993) bahwa  pada  tahap akhir  dari  reaksi transesterifikasi  basa  ditambahkan  asam (H 2 SO 4 ) hal ini bertujuan untuk memperkecil terjadinya reaksi hidrolisis.
Persen  luas  puncak  asam  kaprilat yang diperoleh pada metode metilasi Christie menggunakan  katalis  asam  dan  basa  adalah sangat  rendah  yaitu  3,9  %  dan  1,7  %.  Asam kaprilat merupakan asam lemak rantai pendek yang mudah menguap selama proses transesterifikasi  dimana  dalam  hal  ini digunakan  waktu  refluks  yang  lama  yaitu  10 jam  dan  pada  saat  diekstraksi  dengan  air asam  lemak  ini  mudah  larut  dalam  air.    Hal ini menyebabkan asam kaprilat yang diperoleh sangat rendah.
Kelima metode yang digunakan yaitu transesterifikasi  asam  dan  basa  (Christie, 1993),  transesterifikasi  asam  dan  basa (Laureles,  2002)  dan  esterifikasi  (IUPAC, 1987)  menggunakan  perlakuan  yang  berbeda tetapi  tidak  menunjukkan  adanya  asam kaproat.  Hal  ini  disebabkan  karena  asam kaproat merupakan asam lemak rantai pendek yang  mudah  menguap  dan  cenderung  mudah larut  dalam  air,  sehingga  pada  setiap
perlakuan  yang  digunakan  yaitu  pada  waktu pemanasan  dan  pada  waktu  diekstraksi dengan  air  dapat  menghilangkan  komposisi asam  kaproat  yang  juga  relatif sangat  sedikit dalam minyak kalapa.

## KESIMPULAN
1. Kelima metode esterifikasi yang digunakan  untuk  analisa  komposisi  asam lemak dari VCO menunjukkan hasil yang berbeda-beda.
2. Kaproat  tidak  dapat  terdektesi  dengan kromatografi  gas  dari  kelima  metode esterifikasi yang digunakan.
3. Metode esterifikasi (IUPAC, 1987), lebih baik  dari  metode  Christie  dan  Laureles dalam  menganalisa  asam  lemak  rantai pendek seperti asam kaprilat.

## DAFTAR PUSTAKA
Anonim.  2004.  APCC  Standards  for  Virgin Coconut Oil . www.apccsec.org/ document [17 Maret 2006]
Christie,  W.W.  1993. Preparation  of  Ester Derivates of Fatty Acids for
Chromatography Analysis . Advance in Lipid  Methodology.  Ed.  W.  W.
Christie. Oily Press. Dundee, Scotland.
Gaman,  P.M.  And  K.B.  Sherrington.  1994.
Pengantar  Ilmu  Pangan  Nutrisi  dan Mikrobiologi. Gadjah Mada University
Press, Yogyakarta.
Hendayana,  S.,  A.  Kadarohman,  AA. Sumarna,  A.  Supriana.  1994.  Kimia
Analitik  Instrumen.  IKIP  Semarang Press, Semarang.
IUPAC.  1987. Standard  Methods  for  the Analysis  of  oils,  fats  and  Derivates  7 th
Edition. International  Union  of  Pure and  Aplied  Chemistry,  Consorsium  on oils,  Fats  and  Derivates . Backwell Scientificts Publication Oxford, England. Ketaren,  S.  1986.  Pengantar  Teknologi Minyak  dan  Lemak  Pangan.  UI  Press, Jakarta.
Khopkar,  S.  M.  1990.  Konsep  Dasar  Kimia Analitik. UI Press, Jakarta.
Laureles , L.  R.,  F.  M.  Rodriguez.,  C.  E. Reano., G. A. Santos., A. C. Laurena., E. M. T. Mendoza. 2002. Variability in Fatty ACID and Triacilglycerol
Composition  of  the  Oil  of  Coconut ( Coconus  nucifera L.) Hybrids  and Their  Parentals. J.  Agric.  Food  Chem . 50 : 1581-1586
Mardiah.,  A.  Widodo.,  E.  Trisningwati.,  A. Purijatmiko.  2004.  Pengaruh  Asam Lemak  Dan  Konsentrasi  Katalis  Asam Terhadap  Karakteristik  Dan  Konversi
Biodiesel Pada Transesterifikasi Minyak Mentah Dedak Padi. ITS. http://www.kemahasiswaan.its.ac.ad/files/PK MI [17 Maret 2006]
Sastrohamidjojo,  H.  2005.  Kimia  Organik.
Gadjah Mada University Press, Yogyakarta. Sutarmi.,  H.  Rozaline.  2005.  Taklukkan Penyakit Dengan VCO. Penebar
Swadaya, Jakarta.
Winarno, F.G. 2002. Kimia Pangan dan Gizi.
PT. Gramedia Pustaka Utama, Jakarta. Zapsalis, C., R. Beck. 1986. Food Chemistry and Nutritional Biochemistry. Macmillan  Publishing  Company,  New York.