## ANALISIS PROKSIMAT DAN TOKSISITAS AKUT EKSTRAK DAUN SIRIH MERAH YANG BERPOTENSI SEBAGAI ANTIDIABETES
( Proximate Analysis and Acute Toxicitiy of Piper crocatum Leaves Extract as Potential Antidiabetics )
Mega Safithri 1* , Farah Fahma 2 , dan Paramitha Wirdani Ningsih Marlina 1
1 Departemen Biokimia, Fakultas Matematika dan IPA (FMIPA), Institut Pertanian Bogor, Jl. Raya Darmaga, 16680
2 Departemen Teknologi Industri Pertanian, Fakultas Teknologi Pertanian (FATETA), Institut Pertanian Bogor, Jl. Raya Darmaga, 16680

## ABSTRACT
The aim of this study was to explore the analysis proximate and toxicity of the decoctions of P. crocatum . Fresh leaves of P. crocatum were boiled in water in order to obtain decoction and were examined for its chemical compounds by using SNI 01-2891-1992  method for proximate analysis. Toxicity of decoction extract of P. crocatum was orally fed to rats ( Sprague dawley ). The results showed that P. crocatum leaves contains 9.27% water, 14.33% ash, 3.96% fat, 22.63% proteins, and 59.08% carbohydrates. Acute toxicity test showed that all rats were still alive after 7 days treatment with P. crocatum decoction for all dose groups (0, 5, 10, and 20 g/kg BB). LC 50 value of P. crocatum decoction was 544.82 ppm, meaning that the decoction was relatively harmless and bioactive.
Key words: Piper crocatum , proximate analysis, toxicity, antidiabetic

## ABSTRAK
Penelitian ini bertujuan menentukan kadar air, abu, protein, lemak, dan karbohidrat dari rebusan daun sirih merah  ( Piper  crocatum )  serta  mempelajari  toksisitasnya.  Daun  segar  sirih  merah  direbus  dalam  air  men - didih untuk mendapatkan dekokta/rebusan yang akan dianalisis kandungan senyawa kimianya menggunakan metode SNI 01-2891-1992. Uji toksisitas menggunakan tikus putih galur Sprague dawley untuk menentukan LD 50 nya dan menggunakan larva udang untuk menentukan  LC 50 nya. Hasil analisis proksimat menunjukkan bahwa daun sirih merah mengandung 9.27% air, 14.33% abu, 3.96% lemak, 22.63 % protein, dan 59.08% kar - bohidrat. Hasil uji toksisitas menunjukkan bahwa selama 24 jam sampai 7 hari setelah diberikan dekokta, tidak ada tikus yang mati pada semua kelompok dosis (0, 5, 10, maupun 20 g/kg BB). Tidak adanya kematian pada semua dosis yang diujikan dapat dikatakan bahwa dekokta sirih merah tidak toksik. Nilai LC 50 untuk air rebusan sirih merah terjadi pada konsentrasi 544.82 ppm. Hal ini menunjukkan bahwa air rebusan sirih merah memiliki potensi bioaktivitas.
Kata kunci: Piper crocatum , analisis proksimat, toksisitas, antidiabetes
* Korespondensi: Departemen Biokimia FMIPA IPB,  Gedung FAPET Lt. 5, Wing 5 Kampus IPB Darmaga, Bogor Tel/fax: (0251) 8423267; Email: mega_safithri@yahoo.com/safithri@ipb.ac.id
JGP , Volume 7, Nomor 1, Maret 2012                                                                                                        43

## PENDAHULUAN
Diabetes  mellitus  tidak  hanya  menjadi  ma - salah  negara  maju  saja  tetapi  juga  di  negara berkembang  seperti  Indonesia.  Proyeksi  statis - tik  jumlah  penderita  diabetes  di  Indonesia  me - nyatakanakan terjadinya peningkatan dari 5.6 juta pada tahun 2001 menjadi 8.2 juta pada tahun 2020. Saat ini Indonesia menempati urutan ke-4 tertinggi di  dunia  setelah  India,  Cina,  dan  Amerika  Serikat (King et al . 1998; Boyle et al . 2001). Diabetes melli - tus dapat diklasifikasikan menjadi empat kelompok, yaitu diabetes mellitus tipe I, tipe II, diabetes mel - litus karena kehamilan, dan diabetes mellitus tipe sekunder akibat kerusakan pankreas. Diabetes mel - litus tipe 1 dapat terjadi karena interaksi kompleks genetik dengan faktor lingkungan. Diabetes mellitus tipe  1  merupakan  penyakit  diabetes  mellitus  yang tergantung pada insulin dari luar tubuh untuk menu - runkan  kadar  glukosa  darah  karena  sel-β  pankreas penderita tidak mampu memproduksi insulin dalam jumlah  mencukupi  akibat  proses  autoimun  tubuh atau serangan virus. Diabetes mellitus tipe 2 meru - pakan penyakit diabetes yang paling banyak terjadi (90-95% kasus). Diabetes mellitus tipe 2 sangat ber - hubungan de- ngan keadaan resistensi yang biasanya disebabkan oleh obesitas (Bowman & Russel 2001). Stres oksidatif yang terjadi dapat menimbulkan ra - dikal bebas di dalam tubuh, dan akan mengganggu kerja insulin sehingga insulin tidak maksimal dalam menurunkan  kadar  glukosa  darah.  Selain  itu,  ke - adaan hiperglikemia akan dapat memproduksi ban - yak radikal bebas (Ceriello 2003), dan kondisi hiper - glikemia kronis pada diabetes dapat menyebabkan terjadinya  autooksidasi  glukosa  (Dobretsov et  al . 2007). Senyawa radikal bebas yang terbentuk dalam jumlah besar akan meningkatkan stres oksidatif dan semakin banyak merusak senyawa-senyawa makro - molekul  lainnya  seperti  lipida  dan  protein.  Keru - sakan  makromolekul  tersebut  akan  menyebabkan penurunan  fungsi  kerja  organ  sehingga  menimbul - kan  penyakit  lainnya,  seperti  kebutaan,  gagal  gin - jal, dan aterosklerosis (Maritim et al . 2003).
Biaya  pengobatan  yang  tinggi  untuk  pengo - batan  diabetes  mellitus  membuat  komisi  ahli  dia - betes  melitus  WHO  pada  tahun  1980  merekomen - dasikan penggunaan bahan alami, seperti tanaman, sebagai bahan yang dapat digunakan dalam pence - gahan dan penyembuhan penyakit diabetes melitus. Ada 46 jenis tanaman yang telah mendapat perha - tian karena aktivitas antidiabetesnya (Widowati et al .  1997)  akan  tetapi  sirih  merah  belum  termasuk di  dalamnya.  Hasil  penelitian  Safithri  dan  Fahma (2008) menunjukkan bahwa rebusan daun sirih men - gandung alkaloid, flavonoid, dan tanin. Air rebusan tersebut  dapat  menurunkan  kadar  glukosa  darah tikus sebesar 38% setelah diberikan selama 10 hari dengan  dosis  20  g/kg  BB.  Selain  itu,  air  rebusan
juga dapat menekan  penurunan  bobot badan tikus tersebut. Namun demikian, sampai sekarang belum ada penelitian mengenai analisis proksimat dan tok - sisitas akut pada hewan uji. Analisis proksimat sirih merah penting dilakukan untuk mengidentifikasi zat makanan yang belum diketahui sebelumnya, sehing - ga apabila air rebusan sirih merah ini akan dikem - bangkan  menjadi  minuman  fungsional  data  hasil analisis  proksimat  dapat  digunakan  sebagai  data awal.  Air  rebusan  sirih  merah  perlu  dilakukan  uji toksisitas, karena air rebusan potensial dikembang - kan menjadi minuman fungsional, sehingga diperlu - kan uji toksisitas akut untuk mengetahui dosis yang aman  untuk  dikonsumsi.  Penelitian  ini  bertujuan mengetahui  kandungan  senyawa  kimia  dan  toksisi - tas akut rebusan sirih merah.

## METODE
Bahan dan Alat Bahan  yang  digunakan  untuk  diteliti  adalah daun sirih merah segar diperoleh dari kebun tana - man obat IPB. Daun yang digunakan adalah daun tua tanpa  tangkai.  Bahan  kimia  yang  digunakan  untuk analisis proksimat terdiri atas kjeltab (tablet berisi K 2 SO 4 dan selenium), H 2 SO 4 , dan petroleum benze - na.  Bahan-bahan  tersebut  diperoleh  dari laborato - rium pengujian nutrisi Pusat Penelitian Biologi, LIPI. Bahan yang digunakan untuk analisis toksisitas akut adalah tikus putih galur Spraque dawley dengan je - nis  kelamin  jantan,  sehat,  dan  mempunyai  aktivi - tas normal, berusia 3-4 bulan dengan  berat badan 200-350 gram yang diperoleh dari BPOM RI dan larva udang serta air laut dari laboratorium Biokimia FMI - PA IPB.  Alat yang digunakan untuk analisis proksi - mat, yaitu kjeltec dan perangkat destruksi.
Pembuatan Rebusan Daun Sirih Merah Pembuatan rebusan daun sirih merah dilaku - kan berdasarkan metode Safithri dan Fahma  (2008). Daun  sirih  merah  segar  ditimbang  sebanyak  50  g, ditambahkan akuades sebanyak 250 mL, lalu direbus dengan air mendidih sampai volumenya menjadi 25 mL.  Setelah  itu  rebusan  disaring  untuk  mendapat - kan ekstrak air daun sirih merah.
Analisis Proksimat Analisis  proksimat  dilakukan  berdasarkan metode SNI 01-2891-1992 yang dimodifikasi dan di - lakukan 3 kali ulangan.
Kadar air Cawan porselin dikeringkan dalam oven 105 o C selama  3  jam,  kemudian  ditempatkan  dalam  desi - kator selama 1 jam. Setelah itu ditimbang dengan neraca sartorius (a). Lalu ke dalam cawan ditambah - kan  sebanyak  2.0-2.5  g  sampel  (b).  Cawan  yang berisi sampel ditempatkan dalam oven 105 o C selama
3 jam. Setelah itu ditempatkan dalam desikator se - lama 1 jam. Bobot cawan dan sampel ditimbang (c). Pengeringan dilakukan beberapa kali sampai bobot sampel yang diperoleh konstan. Analisis dilakukan 3 kali ulangan untuk masing-masing sampel.
%Bobot kering  (BK) = (c – a) x  100% b
%Kadar air = 100 - %BK
Analisis kadar abu Cawan porselin dikeringkan dalam oven 105oC selama  3  jam,  kemudian  ditempatkan  dalam  desi - kator  selama  1  jam.  Setelah  itu  cawan  ditimbang dengan  neraca  sartorius  (a).  Lalu  ke  dalam  cawan ditambahkan  sebanyak  2.0-2.5  g  sampel  hasil  pre - parasi (b). Cawan dan sampel tersebut dikeringkan dalam tanur listrik 550 o C selama 18-24 jam. Sampel yang  telah  jadi  abu  kemudian  ditempatkan  dalam desikator  selama  1  jam.  Bobot  cawan  dan  abu  di- timbang (c). Analisis kadar abu dilakukan sebanyak 3 kali ulangan.
%Kadar abu = (c – a) x 100%
b

## Analisis kadar protein
Sampel  sebanyak  0.5-1  g  ditimbang  dengan menggunakan  kertas,  lalu  dimasukan  ke  tabung destruksi dan ditambahkan katalis kjeltab dan 12.5 ml H 2 SO 4 . Kemudian tabung destruksi diletakan pada digestor  dan  dilakukan  proses  destruksi  pada  suhu 415 o C  selama  1  jam.  Setelah  proses  destruksi  ber - langsung  tabung  diangkat  dan  didinginkan  selama 1  jam.  Kemudian  dilakukan  proses  analisis  meng - gunakan alat kjeltec. Sebelumnya dilakukan anali - sis  terhadap  blanko  dengan  menempatkan  tabung destruksi  kosong  yang  akan  terisi  air  suling  secara otomatis oleh alat. Setelah itu dilakukan pengeset- an  tempat  tabung  destruksi,  nomor  tabung,  bobot sampel, data konversi, dan konsentrasi HCl terstan - darisasi. Data blanko digunakan untuk analisis sam - pel  dan  disimpan  di  dalam  alat.  Dari  hasil  analisis pada alat kjeltec akan menunjukan %N dari sampel yang dianalisis. Analisis kadar protein dilakukan se - banyak 2 kali ulangan.
%Protein = %N  x 6.25
Analisis kadar lemak Sebelum  dilakukan  analisis  kadar  lemak, cangkir  ekstraksi  ( extraction  cup )  dipanaskan  se - lama 1 jam. Kemudian extraction cup ditempatkan dalam desikator selama 1 jam. Lalu ditimbang bo - botnya  (a).  Sebanyak  kira-kira  1  gram  sampel  di - bungkus dengan kertas saring (b)  dan ditempatkan dalam timbel. Timbel kemudian ditempatkan pada alat  soxtec  system  HT.  Sebanyak  40  ml petroleum benzena dimasukan  dalam extraction  cup .  Setelah suhu mencapai 110 o C extraction cup diletakan pada alat dengan  posisi di bawah timbel, sehingga sam -
pel terendam. Selama 20 menit sampel dididihkan dengan cara memutar tombol ke arah posisi boiling , lalu dilakukan pembilasan selama 30 menit dengan cara  memutar  tombol  pada  posisi rinsing .  Pembi- lasan diulang lagi sambil menutup katup selama 40 menit  dan  diuapkan  selama  10  menit. Extraction cup dilepaskan dari alat dan ditempatkan pada oven selama  ½  jam.  Lalu extraction  cup ditempatkan dalam desikator selama 1 jam. Bobot extraction cup dan lemak yang terbentuk ditimbang (c). Analisis ini dilakukan sebanyak 3 kali ulangan. Kadar lemak di - cari dengan persamaan:
%Kadar lemak = (c- a) x 100% b

## Analisis kadar karbohidrat
Analisis  kadar  karbohidrat  dilakukan  dengan menggunakan rumus sebagai berikut:
% Kadar Karbohidrat = {100 % - (kadar abu +  kadar protein + kadar lemak)}

## Uji Toksisitas Akut
Uji  toksisitas  dilakukan  untuk  menentukan LD 50 dan LC 50 . Penentuan LD 50 dilakukan berdasarkan metode  Lu  (1995).  Penentuan  LC 50 dilakukan  ber - dasarkan metode Meyer et al . (1982).
Penentuan LD 50 Sebanyak 24 ekor tikus galur Spraque dawley dibagi menjadi 4 kelompok dosis, yaitu 0, 5, 10, dan 20 g/kg BB dan setiap kelompok terdiri atas 4 ekor. Rebusan  sirih merah diberikan secara oral ke tikus sesuai dosisnya, kemudian diukur mortalitas (tingkat kematian) dan bobot selama 1 minggu.
Penentuan LC 50 Larva    (udang)  A.salina  dimasukkan  dalam air  laut  yang  telah  diaerasi.  Setelah  48  jam  telur akan  menetas  dan  siap  digunakan  untuk  uji  LC 50 . Larva udang dikelompokkan dalam enam sumur dan masing-masing diberi ekstrak air rebusan daun sirih merah  dengan  konsentrasi  0,  200,  400,  600,  800, dan 1000 ppm. Ke dalam setiap sumur dimasukkan 10 larva udang. Tingkat kematian diamati setelah 24 jam. Setelah itu dilakukan perhitungan LC 50 . Perhi - tungan LC 50 dilakukan dengan cara membuat kurva hubungan antara konsentrasi air rebusan sirih merah (x)  terhadap  %  kematian  (y),  sehingga  diperoleh persamaan garis y = 0.085 x + 13,  r = 98.63, dari persamaan  tersebut  konsentrasi  air  rebusan  sirih merah pada kematian 50%.
Analisis Statistik Analisis  data  menggunakan  analisis  ragam (ANOVA) rancangan acak lengkap (RAL) pada tingkat kepercayaan 95% dan taraf α = 0.05 dan kemudian dilanjutkan dengan uji duncan. Semua data dianali - sis dengan menggunakan program SPSS 11.5.
JGP , Volume 7, Nomor 1, Maret 2012                                                                                                        45

## Safithri, Fahma, & Marlina

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Proksimat Daun Sirih Merah Analisis proksimat terhadap daun sirih merah kering  dilakukan  untuk  mengetahui  secara  garis besar  jumlah  zat  nutrisi  seperti  air,  abu,  protein, karbohidrat, dan lemak yang terkandung pada daun tersebut. Hasil analisis kadar air (Tabel 1) menunjuk - kan bahwa proses pengeringan dengan oven mampu kadar  air  sampai  dibawah  10%.  Dengan  demikian, daun sirih merah dapat aman disimpan sebelum di - gunakan untuk ekstraksi karena kadar air di bawah 10%  dapat  mencegah  terjadinya  proses  enzimatik dan  kerusakan  oleh  mikroba  seperti  bakteri,  ka - pang, dan khamir (Manoi 2006).
Tabel  1.  Hasil Analisis  Proksimat  Daun  Sirih  Merah (Piper crocatum) Kadar Proksimat Daun Sirih Merah (%) Air 9.27 Abu 14.33 Lemak 3.96 Protein 22.63 Karbohidrat 59.08
Kadar  abu  merupakan  parameter  untuk menunjukkan nilai kandungan mineral (bahan anor - ganik) yang ada di dalam suatu bahan atau produk. Kandungan bahan anorganik yang terdapat di dalam suatu  bahan  diantaranya  kalsium,  kalium,  fosfor, besi, magnesium, dan lainnya. Kadar abu daun sirih merah (14.33%) lebih tinggi jika dibandingkan den - gan daun kumis kucing (7.89%) yang biasa digunakan sebagai bahan baku untuk obat herbal (Kusumaning- rum  2005).  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  daun  sirih memiliki  mineral  yang  lebih  tinggi  daripada  daun kumis kucing.
Berdasarkan  hasil  analisis  proksimat  terlihat bahwa pada daun sirih merah komponen yang ter - besar  adalah  karbohidrat  (Tabel  1).  Sebagaimana daun-daunan  pada  umumnya,  jenis  karbohidrat utama  yang  terdapat  pada  daun  sirih  kemungki - nan  merupakan  serat  kasar,  seperti  lignin  dan  pe - ktin.  Komponen  terbesar  kedua  adalah  protein. Kadar protein pada daun sirih merah (22.63%) lebih tinggi jika dibandingkan dengan daun salam (7.61%) yang juga digunakan sebagai obat diabetes melitus (Sayekti et al . 1994). Komponen terendah dari daun sirih merah adalah lemak. Kadar lemak pada daun sirih merah (3.96%) lebih rendah jika dibandingkan dengan daun salam (8.36%) yang juga digunakan se - bagai obat diabetes melitus (Sayekti et al . 1994).
Toksisitas Akut Air Rebusan Daun Sirih Merah Bukti  empiris  menunjukkan  bahwa  konsumsi air rebusan sirih merah ( P. crocatum ) dapat mengo-
bati  penderita  diabetes  mellitus  (Duryatmo  2005). Penelitian pra klinis menunjukkan bahwa pemberian air rebusan sirih merah pada tikus diabetes (induksi aloksan  sebagai  bahan  pemicu  rusaknya  pankreas sehingga tikus diabetes) dengan berbagai dosis se - lama 10 hari mampu menurunkan kadar gula darah sebesar  10-38%  dan  mencegah  penurunan  berat badan  sebesar  5-52%.  Analisis  senyawa  fitokimia menunjukkan  bahwa  air  rebusan  sirih  merah  men - gandung  alkaloid,  flavonoid,  dan  tanin  (Safithri  & Fahma 2008). Senyawa-senyawa tersebut merupak - an  senyawa  bioaktif  antidiabetes  dan  antioksidan (Rohdiana  2001;  Silva et  al .  2002;  Su et  al .  2007; Satyanarayana 2006; Battu et al . 2007; Tapas et al. 2008).  Upaya  menjaga  tidak  terjadinya  komplikasi penyakit  pada  penderita  diabetes  mellitus  dapat dilakukan dengan menggunakan obat yang bersifat hipoglikemik,  atau  dengan  mengonsumsi  minuman fungsional  yang  berbahan  baku  tanaman  obat  dan rempah yang memiliki aktivitas antioksidasi dan an - tidiabetes (Rates 2001; Rao et al . 2010).
Berdasarkan  hasil  uji  pra  klinis  air  rebusan daun sirih merah pada tikus diabetes yang diinduksi aloksan tersebut, air rebusan daun sirih merah ber - potensi untuk dikembangkan sebagai minuman fung - sional  atau  obat  yang  dapat  dikonsumsi  oleh  pen - derita  diabetes.  Oleh  karena  itu  diperlukan  suatu kajian  keamanan  terhadap  air  rebusan  daun  sirih merah, yaitu yang diukur dengan uji toksisitas akut, sehingga dapat diketahui tingkat keaman an pangan fungsional tersebut untuk dikonsumsi oleh penderi - ta diabetes.
Pengujian  toksisitas  akut  air  rebusan  daun sirih merah menunjukkan bahwa selama 24 jam per - tama sampai 7 hari masa percobaan tidak ada he - wan yang mati baik untuk kelompok dosis 0, 5, 10, maupun 20 g/kg BB. Dengan tidak adanya kematian tikus  putih  pada  semua  dosis  yang  diujikan,  maka dapat  dikatakan  bahwa  rebusan  sirih  merah  tidak bersifat  toksik.  Dengan  demikian  dianggap  semua toksisitas akut dapat diabaikan dan nilai LD 50 tidak perlu ditentukan karena sampai tertinggi pada skala Hodge, yaitu dosis 20 g/kg BB tidak ada tikus yang mati. Hal ini sesuai dengan klasifikasi toksisitas akut menurut skala Hodge dan Sterner (2005) yang me - nyatakan  bahwa  zat  kimia  dengan  nilai  LD 50 15  g/ kg BB atau lebih bersifat praktis tidak toksik (toksis tinggi, LD 50 = 1 - 50 mg/kg; toksis sedang, LD 50 = 50 -  500  mg/kg;  toksis  ringan,  LD 50 =  500  -  5000  mg/ kg). Pengamatan berat badan baik sebelum maupun sesudah perlakuan menunjukkan peningkatan berat badan (Tabel 2). Peningkatan berat badan ini tida - klah berbeda nyata untuk semua dosis (p>0.05). Ini berarti perlakuan yang diberikan, yaitu pemberian rebusan sirih merah, tidak mempengaruhi pertum - buhan tikus. Pemberian rebusan daun sirih merah, dengan  berbagai  dosis  (0,  5,  10,  maupun  20  g/kg BB), yang tidak mempengaruhi pertumbuhan berat
badan disebabkan dosis yang diberikan tidak mem - buat mati tikus atau dikatakan tidak toksik sampai dosis 20 g/kg BB sehingga tidak mengganggu meta- bolisme dalam tubuh tikus.
Penimbangan  berat  badan  dilakukan  untuk mengetahui perubahan berat badan sebagai indika - tor  efek  samping  obat  dan  bahan  kimia  (Mounnis - samy et  al .  2010).  Hasil  pengukuran  berat  badan toksisitas akut air rebusan sirih merah (selaras den - gan hasil pengujian toksisitas akut ekstrak air panas Trichosanthes  cucumerina  Linn .yang  telah  dilapor - kan memiliki aktivitas antidiabetes (Arawwawala et al . 2011).
Berdasarkan  perhitungan  air  rebusan  sirih merah memiliki nilai  LC 50 di bawah 1000 ppm, yaitu sebesar 544.82 ppm (Tabel 3). Hal ini menunjukkan bahwa rebusan daun sirih merah termasuk ke dalam kategori toksik sedang atau toksik menengah menu - rut skala toksisitas Hodge dan Sterner. Akan tetapi, nilai  tersebut  juga  menunjukkan  bahwa  rebusan daun  sirih  merah  memiliki  bioaktivitas  (aktivitas biologis  seperti  antibakteri,  antikanker,  antidiabe - tes, dan lainnya (Meyer et al . 1982). Salah satu hasil penelitian yang menunjukkan bahwa rebusan daun sirih merah memiliki bioaktivitas adalah penelitian Safithri dan Fahma (2008) yang melaporkan bahwa air rebusan sirih merah dosis 20 g/kg BB yang diberi - kan secara oral pada tikus diabetes, selama 10 hari dapat menurunkan kadar glukosa darahnya sebesar 38%.

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil analisis proksimat daun sirih merah mengandung 9.27% air, 14.33% abu, 3.96% le -
mak,  22.63%  protein,  dan  59.08%  karbohidrat.  Uji toksisitas  menunjukkan  bahwa  dekokta/rebusan daun  sirih  merah  tidak  memiliki  toksisitas  hingga dosis  20 g/kg BB. Nilai LC 50 untuk air rebusan terjadi pada konsentrasi 544.82 ppm. Hal ini menunjukkan bahwa dekokta sirih merah relatif aman dan memi - liki potensi bioaktivitas.

## DAFTAR PUSTAKA
Arawwawala M, Thabrew I, & Arambewela L. 2011. Evaluation of the toxic potential of standard - ized extracts (hot water extract and cold eth - anolic  extract)  of  Trichosanthes  cucumerina Linn. aerial parts. BLACPMA, 10, 11-22 Battu  GR,  Mamidipalli  SN,  Parimi  R,  Viriyala  RK, Patchula RP & Mood LR. 2007. Hypoglycemic and  anti-hyperglycemic  effect  of  alcoholic extract of Benincasa hispida in normal and in alloxan induced diabetic rats. Phacog Mag,  3, 101-105.
Bowman BA & Russel RM. 2001. Present Knowledge in Nutrition. ED ke-8. ILSI, Washingthon. DC. Boyle JP, Honeycutt AA, Narayan KM, Hoergoer TJ,
Geiss LS, Chen H, & Thompson TJ. 2001. Pro - jection  of  diabetes  burden  through  2050: Impact of changing demography and disease prevalence  in  the  U.S.  Diabetes  Care,  24, 1936-1940.
Ceriello  A.  2003.  New  insights  on  oxidative  stress and  diabetic  complications  may  lead  to  a “causal” antioxidant therapy. Diabetes Care, 26, 1589–1596.
Dobretsov  M,  Romanovsky  D,  &  Stimers  JR.  2007. Early diabetic neuropathy: triggers and mech -
Tabel 2. Pengaruh Pemberian Air Rebusan Daun Sirih Merah terhadap Berat Badan Tikus
Hari Rerata berat badan (g) Kontrol Kelompok dosis formula minuman terpilih 0 g/kg bb 5 g/kg bb 10 g/kg bb 20 g/kg bb -7 147.0±17.6 a 148.5±3.0 a 146.3±17.7 a 143.0±14.7 a 0 161.0±16.9 a 160.8±14.6 a 158.8±19.5 a 157.2±15.1 a 7 182.8±15.3 a 182.8±11.9 a 181.8±22.6 a 177.5±15.3 a Keterangan: Huruf yang sama pada baris yang sama menunjukkan tidak berbeda nyata pada P<0.05 ; n=6; Perlakuan diberikan selama 7 hari dengan intervalpengamatan 7 hari; -7: masa adaptasi; 0 : awal penimbangan berat badan ;7: akhir penimbangan berat badan
Tabel 3. Tingkat Kematian Larva Udang pada Masa Percobaaan selama 24 Jam
Konsentrasi (ppm) % kematian LC 50 (ppm) 0 0 544.82 200 30 400 35 600 50 800 70 1000 85
anism. World J Gastroenterol, 13, 175-191. Duryatmo  S.  2005.  Dulu  hiasan  kini  obat.  Trubus,
427, 37.
King H, Aubert RE, & Herman WH. 1998. Global bur - den  of  diabetes  1995-2025:  Prevalence,  nu - merical  estimates  and  projections.  Diabetes Care, 21, 1414-1431.
Kusumaningrum  I.  2005.  Mempelajari  toksisitas minuman  seduhan  bubuk  daun  kumis  kucing (orthosiphon  stamineus  benth.)  terhadap  ti - kus  percobaan  secara  in  vivo  [skripsi].  Pro - gram Sarjana, IPB, Bogor.
Lu  FC.  1995. Toksikologi  Dasar: Asas,  Organ,  Sasa - ran, dan Penilaian Resiko (Nugroho E, pener - jemah). UI Pr, Jakarta.
Manoi F. 2006. Pengaruh cara pengeringan terhadap mutu simplisia sambiloto. Bul Littro, 17(1),1
– 5.
Maritim AC,  Sanders  RA,  &  Watkins  JB.  2003.  Dia - betes,  oxidative  stress,  and  antioxidant:  a review.  J  Biochem  Molecular  Toxicology,  17, 24-38 Meyer  BN et  al .  1982.  Brine  shrimp: A  convenient general bioasay for active plant constituents. Planta medica, 45, 31–34.
Mounnissamy VM, Kavimani S, Sankari G, Quine SD, & Subramani K. 2010. Toxicological Studies on Ayurvedic Formulation Mersina in Albino Rats. Arch Pharm Sci & Res, 1, 130-137. Rao MU, Sreenivasulu M, Chengaiah B, Reddy KJ, & Chetty CM. 2010. Herbal medicines for diabe - tes mellitus: A review. IJPRIF, 2, 1883-1892. Rates SM. 2001. Plants as a source of drugs. Toxicon,
39, 603-61.
Rohdiana  D.  2001.  Aktivitas  daya  tangkap  radikal polifenol dalam daun teh. Maj Farmasi Indo - nesia, 12, 53-58.
Safithri M & Fahma F. 2008. Potency of P. crocatum decoction as an antihyperglycemic. Hayati J Biosci, 15, 45-48.
Satyanarayana T, Katyayani BM, Hema Latha E, An - jana AM,  &  Chinna  EM.  2006.  Hypoglycemic and  anti-hyperglycemic  effect  of  alcoholic extract  of  Euphorbia  leucophylla  in  normal and in alloxan induced diabetic rats. Phacog Mag, 2, 244-255.
Sayekti S, Muhtadi A, & Supriyatna. 1994. Aktivitas hipoglikemik  daun  salam  dan  herba  bulu  lu - tung. Cermin Dunia Kedokteran, 95, 50-54.
Silva et al. 2002. Structure antioxidant activity re - lationship of flavonoid: a reexamination. Free Radical Research, 36, 1219-1227.
[SNI] Standar Nasional Indonesia. 1992. SNI 01-2891- 1992, Cara Uji Makanan dan Minuman. Dewan Standardisasi Nasional, Jakarta.
Su X, Duan J, Jiang Y, Duan X,  & Chen F. 2007. Poly - phenolic profile and antioxidant activities of Oolong  tea  infusion  under  various  steeping conditions. Int J Mol Sci, 8, 1196-1205.
Tapas AR,  Sakarkar  DM,  &  Kakde  RB.  2008.  Flavo - noids  as  nutraceuticals:  A  review.  TJPR,  7, 1089-1099.
Widowati L, Dzulkarnain, & Sa’roni. 1997. Tanaman Obat  Untuk  Diabetes  Melitus.  Cermin  Dunia Kedokteran, 116, 53-60.
[WHO]  World  Health  Organization.  1980.  Diabetes Mellitus:  Report  of  a  study  group.  Technical Series Report No. 727. WHO, Geneva.