PENGARUH EKSTRAK DAUN BINAHONG ( Anredera cordifolia (Ten.) Steenis ) TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI Streptococcus pyogenes

## SECARA IN VITRO
Yuliana Prasetyaningsih 1* ,Eni Kurniati 2 , Dina Setiarini 3
1,3 Prodi D3 Analis Kesehatan, STIKES Guna Bangsa Yogyakarta, Jl. Ring Road Utara Condongcatur Depok Sleman Yogyakarta telp. 0274-4477701, 4477703, 4477704 fax.0274-4477702
2 Jurusan Analis Kesehatan, POLTEKKES Kemenkes Yogyakarta Email: yulianaprasetya@gmail.com

## ABSTRACT
Background: Infectious  diseases  are  diseases  caused  by  pathogenic  bacteria  such  as Streptococcus pyogenes bacteria. This bacterium is a gram-positive, cocci-shaped chain that  infect  the  respiratory  tract.  As  a  result  of  irrational  use  of  antibiotics  is  causing bacterial resistance. Utilization of plants used in traditional medicine as an alternative by some people. Binahong ( Anredera cordifolia (Ten.) Steenis) is a plant that can be used as a traditional medicine can be found easily in Indonesia. Binahong is one of the  medicinal plants are thought to have antibacterial effects.
Objective: To  investigate  the  effect  of  leaf  extracts  binahong (Anredera  cordifolia  (Ten) Steenis) against Streptococcus pyogenes bacterial growth in vitro.
Research  Methods: The  study  was  conducted  in  July  2014  in  the  Laboratory  of Bacteriology of Ministry of Health polytechnic Yogyakarta. Types experimental research is real  by  using  desain one-short  case  study .  Binahong  leaves  were  tested  came  from Yogyakarta Sleman. Analysis of the data obtained and performed descriptive statistics and presented  in  tables  or  graphs.  The  statistical  test  used  is  one  way  analysis  of  variance ( One Way Anova ).
Result: The mean diameter of inhibition zone binahong leaf extract on the growth of the bacterium Streptococcus pyogenes at the smallest concentration that is 20% of 12.3 mm and largest concentration of 100% at 23.6 mm.
Conclusion: there  is  influence  binahong  leaf  extract  against Streptococcus  pyogenes growth in vitro.
Keywords: Antibacterial, Inhibitory zone, Binahong, Streptococcus pyogenes.

## PENDAHULUAN
Penyakit  infeksi  masih  menempati urutan  teratas  penyebab  penyakit  dan kematian di negara berkembang,
termasuk  Indonesia.  Tingginya  angka kejadian  infeksi  di  masyarakat  akan
menyebabkan  penurunan  produktifitas nasional  secara  umum,  sedangkan  di lain  pihak  menyebabkan  peningkatan pengeluaran  untuk  upaya  pengobatan (Wahyono, 2007).
Penanggulangan  penyakit  infeksi biasanya menggunakan antibiotik
(Refdanita dkk., 2004). Antibiotik
mempunyai peran penting untuk mengatasi infeksi karena bakteri. Antibiotik  diharapkan  mampu  mengeli- minasi  bakteri  penyebab  infeksi.  Tetapi jika  penyalahgunaan  antibiotik  dan kesalahan  pemilihan  antibiotik  dapat menyebabkan  resistensi  yang  dapat mempengaruhi  laju  perjalanan  infeksi (Dzen, 2003).
Menurut  hasil  survei  Kesehatan Rumah Tangga 2004, prevalensi karies gigi  di  Indonesia  adalah  90,05  %. Patogenitas Streptococcus mutans sebagai  penyebab  utama  karies  gigi dipercaya  dapat  mengganggu  biologi rongga  mulut.  WHO  pada  tahun  2003 menyatakan bahwa karies gigi merupakan proses infeksi yang memiliki keterkaitan  dengan  kesehatan  dan status  gizi serta  dapat bertindak sebagai  fokal  infeksi  yang  dapat menimbulkan  penyakit  organ  tubuh lainnya.
Penggunaan obat yang tidak rasional  dapat  menimbulkan  resistensi sejumlah bakteri, sehingga perlu dilakukan penelitian untuk mencari obat alternatif  yang  murah  dan  mudah didapat dengan memanfaatkan tanaman  (Uchida,  2003).  Penggunaan obat  yang  tidak  rasional  adalah  obat yang  tidak  sesuai  dengan  kebutuhan klinis  pasien  dalam  jumlah  dan  untuk dosis  yang  sesuai.  Dampak  buruk penggunaan  obat  yang  tidak  rasional dan penggunaan antibiotik yang berlebihan  yaitu  menyebabkan  ekologi pada  bakteri.  Pemberian  antibiotik dikatakan tepat bila efek terapi mencapai  maksimal  sementara  efek toksik  yang  berhubungan  dengan  obat menjadi minimal, serta resisten seminimal mungkin (Sadikin, 2011).
Resistensi terhadap
antibiotik adalah  perubahan  kemampuan  bakteri hingga
menjadi kebal terhadap antibiotik.  Bakteri  ini  resisten  terhadap penisilin,  oksasilin,  dan  antibakteri lactam  lainnya  (Fontana,  dkk.,  1990). Bakteri Streptococcus
pyogenes
( Streptococcus grup  A)  merupakan salah  satu  penyebab  infeksi  saluran
nafas. Kerongkongan merupakan tempat  pertama  yang  diserang  hingga menyebabkan nyeri menelan. Bakteri ini sering  terkumpul  pada  tonsil  atau  juga dapat  menyerang  faring  (Gupte,  2004). Streptococcus  pyogenes merupakan bakteri pathogen yang banyak menginfeksi manusia. Pemanfaatan tumbuh-tumbuhan sebagai  obat  tradisional  berkembang pesat  dan  banyak  dijadikan  obat alternatif  oleh  sebagian  masyarakat. Obat tradisional merupakan bahan atau ramuan berupa bahan tumbuhan, bahan  hewan,  bahan  mineral,  sediaan sarian  atau    bahan  campuran  dari bahan  tersebut  yang  secara  turun temurun telah digunakan untuk pengobatan  berdasarkan  pengalaman yang sudah dilakukan (Tjai dan
Rahardja, 2007). Daun binahong (Anredera cordifolia (Ten.) Steenis ) dalam kultur in vitro mengandung  beberapa  senyawa metabolit sekunder antara lain flavonoid, alkaloid, terpenoid, dan saponin.  Aktivitas farmakologi flavonoid adalah  sebagai  anti-inflamasi,  dan antioksidan, alkaloid
sebagai hipoglikemik.
Terpenoid dapat
membantu tubuh  dalam  proses  sintesis organik  dan  pemulihan  sel-sel  tubuh, sedangkan  saponin  berperan  untuk menurunkan kolesterol dan anti karsinogenik  (Manoi,  2009).  Gambar  1 menunjukkan gambar daun binahong.
Gambar 1.Daun binahong ( Anredera cordifolia (Ten.) Steenis ) Sumber : Ervizal, 2012

## METODE PENELITIAN
Penanaman  bakteri  pada  media Blood Agar Plate (BAP) Kapas lidi steril ke  dalam  suspense  bakteri  kemudian ditekan-tekan  pada  dinding  tabung sehingga  tidak  terlalu  basah,  kemudian dioleskan  pada  permukaan  media  BAP hingga rata, kemudian pada setiap petri dibuat  5  sumuran  menggunakan  perfo- rator  yang  terlebih  dahulu  dipanaskan, masing-masing  sumuran  berdiameter  5 mm  dan  ketebalan  media  4  mm. Mengisi ekstrak daun binahong ( Anredera  cordifolia  (Ten.) Steenis )
Pada setiap sumuran diberi 50µl ekstrak daun binahong sehingga tiap-tiap
lubang  berisi  larutan  percobaan  yang berlainan  konsentrasinya.  Diinkubasi pada  suhu  37°  C  selama  24  jam. Pembacaan  hasil  dilakukan  dengan beralaskan  kertas  berwarna  gelap  atau dengan  latar  belakang  sedikit  gelap, mengukur  diameter  zona  irradikal  dan zona  radikal  yaitu  daerah  jernih  sekitar sumuran (tidak ada pertumbuhan bakteri) diukur dari ujung ke ujung yang lain
melaui
tengah
sumuran (Soemarmo, 2000).
Metode  yang  digunakan  dalam penelitian  yaitu  metode  difusi  dengan sumuran  agar,  dalam  penelitian  ini ekstrak daun binahong ( Anredera cordifolia (Ten.) Steenis ) mampu menghambat bakteri Streptococcus pyogenes karena terdapat zona hambat di  sekitar  sumuran.  Hasil  pengukuran diameter zona hambat disekitar sumuran  agar  pada  ekstrak  daun binahong  dengan  konsentrasi  (20%, 40%,  60%,  80%,  100%)  terhadap pertumbuhan bakteri Streptococcus pyogenes , polyethylene  glycol (PEG) 0,5% sebagai kontrol negatif dan kontrol positif menggunakan antibotik tetrasiklin 30 µg.

## HASIL
Data  hasil  diameter  zona  hambat ekstrak daun binahong ( Anredera cordifolia  (Ten.) Steenis ) terhadap pertumbuhan bakteri Streptococcus
pyogenes yang  dilakukan  sebanyak  3 kali dalam satuan millimeter (mm) dapat dilihat pada tabel 1.
Tabel 1. Hasil pengukuran diameter zona hambat pertumbuhan
bakteri Streptococcus pyogenes Pengulangan Diameter zona hambat pertumbuhan bakteri Streptococcus pyogenes Kontrol positif (mm) Kontrol negatif (mm) Konsentrasi  100%  80% 60% 40% 20% 28
0 Plate 1 24 23 20 17 13 Plate 2 24 22 20 18 12 Plate 3 23 22 21 17 12 Jumlah 71 67 61 52 37 Rata-rata 23,6 22,3 20,3 17,3 12,3 28 0 Berdasarkan  Tabel  1  hasil  rata – rata  diameter  zona  hambat  terbesar ekstrak daun binahong ( Anredera cordifolia  (Ten.) Steenis ) terhadap pertumbuhan bakteri Streptococcus pyogenes terdapat  pada  konsentrasi
100% yaitu sebesar 23,6 mm sedangkan  rata-rata  terkecil  diameter zona hambat terdapat pada konsentrasi 20%  yaitu  sebesar  12,3  mm.  pada konsentrasi 40%  rata-rata zona hambat
ekstrak daun binahong ( Anredera cordifolia  (Ten.) Steenis ) sebesar  17,3 mm,  konsentrasi  60%  sebesar  20,3 mm, dan pada konsentrasi 80% sebesar  22,3  mm.  Hasil  Tabel  1 menunjukkan  bahwa  semakin  besar konsentrasi  ekstrak  daun  binahong ( Anredera  cordifolia  (Ten.) Steenis ) maka  semakin  besar  pula  diameter zona  hambat  yang  terbentuk  terhadap pertumbuhan bakteri Streptococcus
pyogenes.
Hasil uji statistik deskriptif melalui program  SPSS  17 for  windows dari hasil data pada tabel  2 menggambar- kan  terdapat  15  data  pengukuran zona  hambat  ekstrak  daun  binahong terhadap bakteri Streptococcus
pyogenes dengan  diameter  minimum 12.0  mm,  diameter  maksimum  24.0 mm,  nilai  rata-rata  19.20  mm  dan standar deviasi 4.21.
Gambar 2. Zona hambat yang terbentuk pada media BAP
Tabel 2. Hasil uji statistik deskriptif Konsentrasi Jumlah Rata- rata Tingkat Kepercayaan 95% Minimum Maksimum Batas Atas Batas Bawah 20% 3 12,33 10,89 13,76 12,00 13,00 40% 3 17,33 15,89 18,76 17,00 18,00 60% 3 20,33 18,89 21,76 20,00 21,00 80% 3 22,33 20,89 23,76 22,00 23,00 100% 3 23,66 22,23 25,10 23,00 24,00 Total 15 19,20 16,86 21,53 12,00 24,00 Grafik  peningkatan  besar  diameter zona  hambat  yang  terbentuk  dari ekstrak daun binahong ( Anredera cordifolia (Ten) steenis) terhadap
bakteri Streptococcus  pyogenes pada konsentrasi  terkecil  sampai  konsentrasi terbesar dapat dilihat pada Gambar 3.
Uji  statistik  yang  digunakan  untuk mengetahui  adanya  pengaruh  ekstrak daun  binahong  ( Anredera  cordifolia (Ten.) Steenis ) terhadap  pertumbuhan bakteri Streptococcus  pyogenes secara invitro yaitu uji analisis varian satu jalan ( One Way Anova ) dengan taraf signifikan  sebesar  5%  (0,05)    menggu- nakan    program    SPSS    17,0 for windows .    Untuk  mengetahui  homogen atau  tidaknya  data  hasil  dimeter  zona hambat ekstrak daun binahong ( Anredera  cordifolia  (Ten.) Steenis ) terhadap pertumbuhan bakteri
Streptococcus  pyogenes maka  dilaku- kan uji homogenitas. Pada uji homogenitas  varian  diperoleh  hasil  p- value (sig) 0,000. Selanjutnya dilakukan uji One Way Anova dan  hasilnya dapat dilihat pada tabel 3.
Gambar 3. Grafik Rata-Rata Diameter Zona Hambat Ekstrak Daun Binahong ( Anredera Cordifolia (Ten.) Steenis ) .
40 % 80 % 60 % 20 % 100 % Kontrol + Kontrol -
Tabel 3. Hasil uji One Way Anova Sum of Squares Df Mean Square F Sig. Between Groups Within Groups Total 245,06 3,33 248,40 4 10 14 61,2 6 0,33 183,80 0 0,00 Hasil uji One Way Anova didapatkan  nilai  F  hitung  sebesar 183,800  dan  nilai  p- value (sig)  sebesar 0,000  atau  p<0,001.  Hipotesis  pada  uji One  Way  Anova adalah  ada  pengaruh ekstrak daun binahong ( Anredera cordifolia  (Ten.) Steenis ) terhadap pertumbuhan bakteri Streptococcus pyogenes secara  in  vitro.  Uji  statistik One  Way  Anova menunjukan  bahwa berbagai  konsentrasi  ekstrak  daun binahong  ( Anredera  cordifolia  (Ten.)
Steenis ) dapat menghambat pertumbuhan bakteri Streptococcus pyogenes secara  signifikan.  Apabila  p- value  (sig)  dari  data  penelitian  ledih besar  dari  nilai p - value (sig)  sebesar 0,000  atau  p<0,001, maka akan menggunakan hipotesis alterntif α=0,05.
Hasil uji kemudian dilanjutkan pada uji Post  Hoc  (Tukey). Pada  hasil  uji  ini dapat
dilihat perbedaan
yang “bermakna”. Hasil yang bermakna yaitu dengan  hasil p-value (sig)  <  0,05  atau lebih  kecil  dari  α.hasil  penelitian  ini menunjukan p-value (sig)  pada  setiap konsentrasi  lebih  kecil  dari  α,  dapat disimpulkan  bahwa  terdapat  pengaruh signifikan  dan  bermakana  terhadap berbagai  konsentrasi  ekstrak  daun binahong  ( Anredera  cordifolia  (Ten.) Steenis ) terhadap  pertumbuhan  bakteri Streptococcus pyogenes secara in vitro.

## PEMBAHASAN
Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui pengaruh berbagai konsentrasi  ekstrak  daun  binahong
( Anredera  cordifolia  (Ten.) Steenis ) terhadap
pertumbuhan bakteri
Streptococcus pyogenes secara in vitro. Metode  penelitian  ini  menggunakan metode  difusi  sumuran  agar.  Metode sumuran  menggunakan  metode spread plate pada  metode  ini  suspensi  bakteri
yang disamakan  kekeruhannya dengan standar  Mc  farland  (10 8 FCU/ml)  lalu diteteskan  pada  media  dan  diratakan dengan kapas lidi steril metode ini lebih murah  dan  sederhana  dibandingkan dengan  metode  difusi  yang  lain  seperti metode pour  plate yang  membutuhkan banyak  reagen  dan  menggunakan pengenceran  bertingkat  pada  suspensi bakteri.
Pembacaan  hasil  metode  difusi sumuran agar, menggunakan pengukur- an  zona  hambat  irradikal  dengan mengukur adanya zona hambat disekitar  sumuran.  Pengukuran  zona hambat terdapat zona radikal dan zona irradikal.  Zona  radikal  merupakan  zona disekitar sumuran dimana tidak ditemukan pertumbuhan bakteri sedangkan  zona  irradikal  merupakan zona  disekitar  sumurun    pertumbuhan bakteri  hanya  dihambat  dan  tidak dimatikan.  Terbentuknya  zona  radikal karena  bakteri  sensitif  terhadap  suatu zat  antibakteri  dan  zona  irradikal disebabkan karena bakteri tidak sensitif terhadap  suatu  zat  antibakteri  (Brooks dkk.,2004).
Pada  penanaman  suspensi  bakteri pada  media  BAP  tidak  teratur  karena menggunakan  kapas  lidi  steril  apabila terlalu tebal akan menyebabkan diameter  zona hambat  kecil  sedangkan apabila terlalu kecil akan menyebabkan zona  hambat  yang  terbentuk  terlalu besar tetapi pada penggunaan lidi steril akan  memudahkan  dalan  maratakan suspensi pada media dan tidak merusak media BAP.
Pada  hasil  penelitian  konsentrasi ekstrak  daun  binahong  terkecil  yaitu 20%  sebesar  12,3mm  karena  belum mencapai  konsentrasi  terkecil  yang diinginkan maka perlu dilakukan penelitian lagi menggunakan konsentrasi  dibawah  20%.  Konsentrasi
tertinggi  yaitu  100%  sebesar  23,6  mm apabila  dibandingkan  dengan  kontrol positif  yang  sebesar 28mm,  maka  lebih besar dibandingkan konsentrasi terbesar  ekstrak  daun  binahong,  akan tetapi  ekstrak  daun  binahong  dapat digunakan  sebagai  alternatif  antibakteri dari bahan alami.
Pada  penelitian  yag  dilakukan peralatan  harus  diseterilkan  dengan oven  agar  tidak    terjadi  kontaminasi bakteri  yang mengakibatkan kesalahan dalam    penelitian,  dan    asptis  dalam penanaman  pada  media  karena  media BAP  mudah  sangat  subur.  Diinkubasi pada suhu 37° C selama 24 jam sesuai dengan umur bakteri dan suhu pertumbuhan bakteri. Ada beberapa hal yang dapat menghambat dalam penelitian  seperti  penanaman  bakteri yang kurang aseptis, kontaminasi, suhu inkubsi yang tidak tepat, keseterilan alat dan kualitas daun binahong.

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil yang diperoleh dengan  judul  “pengaruh  berbagai konsentrasi  ekstrak  daun  binahong ( Anredera  cordifolia  (Ten)  Steenis)
terhadap bakteri Streptococcus pyogenes secara  in  vitro”  maka  dapat ditarik kesimpulan sebagai berikut: Terdapat
pengaruh berbagai
konsentrasi  ekstrak  daun  binahong ( Anredera  cordifolia  (Ten)  steenis) terhadap
pertumbuhan bakteri Streptococcus  pyogenes secara  in vitro.Rata-rata  diameter  zona  hambat ekstrak daun binahong ( Anredera cordifolia (Ten) steenis) terhadap pertumbuhan bakteri Streptococcus pyogenes pada konsentrasi 20%
sebasar 12,3mm, padakonsentrasi 40% sebesar  17,3  mm,  pada  konsentrasi 60% sebesar 20,3 mm, pada konsentrasi  80%  sebesar  22,3mm  dan pada  konsentrasi  100%  sebesar  26,6 mm.

## DAFTAR PUSTAKA
Brooks,  G.,  F.,  Butel, S.,  J., dan  Morse
S., A., 2004, Mikrobiologi Kedokteran , Edisi 1 , EGC, Jakarta. Cunningham,  M.W.2000. Phatogenesis Of Group A Streptococcal Infection , Clin Microbiol Rev.470-511 Ervizal,  dkk  .2012 Khasiat  15  Tanaman Obat  Unggulan  Kampong  Gunung Leutik. Institute Pertanian Bogor
Dzen,  M.  R.  2003. Bakteriologi  Medic Edisi Pertama. Banyumedia. Malang. Fontana.,  P.,  Canepari,  M.,  Lieo,  Dan
G.,  Satta,1990,  Mechanissms  Of Resistance Of Enterococci To Beta- Lactam  Antibiatics ,  European Journal  Of  Clinical  Microbiology And Infection Diseases . Gupte,  S.  2004. Pedoman  Perawatan Anak . Pustaka Popular Obor. Jakarta. Manoi,  F.  dan  Balittro.  2009. Binahong (Anredera Cordifolia) Sebagai Obat . Bogor  :  Pusat  Penelitian  dan Pengembangan Perkebunan. Sadikin dan Zunilda Dj., 2011, Penggunaan Obat Rasional, Departemen  Farmakologi  Fakultas Kedokteran  Universitas  Indonesia, Jakarta, Jurnal Kesehatan Andalas. Soemarmo, 2000. Isolasi dan Identifikasi Bakteri Klinik . Yogyakarta: Akademi Analis Kesehatan. Tjay, T.H.,dan Raharja,K.,2007. Obat-Obat Penting,  Edisi  ke  6. PT.  Elex Komputindo, Jakarta. Uchida, S. 2003. Production digital map of  the  hazardous  condition  of  soil erosion  for  the    sloping  lans  west java. Indonesia system (GIS) JIRCAS Indonesia. Wahyono,  H.  2007. Peran  mikrobiologi pada  penanganan  penyakit  infeksi . Makalah  Pidato  Pengukuhan  Guru Besar  Dalam  Ilmu  Mikrobiologi Fakultas  Kedokteran  Universitas Diponegoro.