## ANALISIS NATRIUM DODESILBENZENA SULFONAT DALAM IKAN LELE  SECARA MASERASI DAN SPEKTROFOTOMETRI UV-VIS MENGGUNAKAN METILEN BIRU
Kahar Muzakar 1* , Adhitasari Suratman 2 dan Roto 2
1 PDD Politeknik Negeri Pontianak Di Kabupaten Kapuas Hulu, Jl. Danau Sentarum no. 03 Putussibau, Kalimantan Barat, Indonesia
2 Departemen Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas
Gadjah Mada
* email:  kahar_muzakar61@yahoo.co.id
ARTICLE INFO

## ABSTRACT
Article history: Received 2 December 2019 Accepted 31 December 2020 Available online 31 December 2020 Keywords: Method validation, SDBS, maceration,
MBAS, catfish.
Method  validation  of  sodium  dodecylbenzene  sulfonate  (SDBS) analysis in catfish by maceration and UV-Vis spectrophotometry using methylene blue active substances (MBAS) method was performed. The first  stage  of  this  research  was  method  validation  comprising correlation coefficient, sensitivity, Limit of Detection (LOD), Limit of Quantitation (LOQ), precision, and accuracy. The  extraction  of SDBS by  maceration  with  methanol  for  16  h  and  analysis  by  UV-Vis spectrophotometry  using  MBAS  were  performed.  Then,  this  method was  applied  to  analyze  SDBS  in  catfish.  The  results  of  validation  of SDBS analysis in cultivated catfish give correlation coefficient 0.9944, sensitivity  10.57  ×  104  L  mol -1 cm -1 ,  LOD  0.01776  mg/L,  LOQ 0.05922  mg/L,  precision  0.1351-1.300  %,  and  accuracy  87.64-90.01 %,  respectively.  The  SDBS  concentrations  in  fish  increase  with  the increase  in  the  SDBS  concentration  in  cultivating water. Bioconcentration  Factor (BCF)  values  were  inversely  proportional  to the concentration of SDBS in the cultivating water. The concentrations of SDBS on catfish, tilapia, and carp in traditional markets were 5.719- 8.162;  5.180-6.548;  and  2.973-5.874  mg/kg,  respectively.  In  general, analysis  method  of  SDBS  in  catfish  by  maceration  and  UV-Vis spectrophotometry with MBAS show a good result and can be used as a routine analysis in fish.
© 2020 IJoPAC. All rights reserved

## 1. Pendahuluan
Salah  satu  sumber  pencemaran  di  perairan  adalah  kontaminasi  surfaktan  anionik  dari  produk detergen  yang  memberikan  dampak  cukup  besar terhadap  sistem  lingkungan.  Detergen  yang  banyak mengandung surfaktan anion yaitu seperti laundry agent , sabun, pewangi, laundry perfume , pemutih, penghilang noda, pelembut, dan shampoo . Konsentrasi surfaktan anionik yang melebihi ambang batas di  perairan  dapat  menyebabkan  kematian  ikan  dan  biota  akuatik.  Konsentrasi  maksimum  surfaktan anionik yang diizinkan di perairan adalah 2,000 mg/L [1] . Salah satu jenis surfaktan anion yang sering digunakan  dalam  detergen  yaitu Sodium  Dodecylbenzene  Sulponate (SDBS).  Penggunaan  air

## Indonesian Journal of Pure and Applied Chemistry
journal homepage: http://jurnal.untan.ac.id/index.php/IJoPAC
Indo. J . Pure App. Chem. 3 (3), pp. 10-16, 2020
budidaya  yang  mengandung  surfaktan  SDBS  menyebabkan  terjadinya  akumulasi  ke  dalam  tubuh ikan.
Akumulasi  surfaktan  anionik  ke  dalam  ikan  dapat  melalui  insang  dan  kulit [13] .  Hal  ini menunjukkan  bahwa  ikan  yang  tidak  bersisik  seperti  lele  akan  mudah  terjadi  akumulasi  surfaktan anionik  karena  dapat  melalui  kulit . Tingkat  akumulasi  dapat  ditentukan  melalui  nilai  faktor biokonsentrasi.  Nilai  faktor  biokonsentrasi  merupakan  perbandingan  antara  konsentrasi  surfaktan anionik  di  dalam  ikan  dan  perairan . Nilai  faktor  biokonsentrasi  surfaktan  anionik  pada  setiap  ikan berbeda-beda.  Nilai  BCF  surfaktan  anionik  di  dalam  ikan  berbanding  terbalik  dengan  paparannya. Konsentrasi  surfaktan  anionik  di  dalam  ikan  lele  pada  paparan  0,126-0,927  mg/L  selama  32  hari adalah 0,0378-0,1110 mmol/kg [15] .
Penentuan konsentrasi analit pada organisme mahluk hidup melalui 2 tahap yaitu proses ekstraksi dan  analisis.  Proses  ekstraksi  SDBS  dari  organisme  yang  sudah  pernah  dilakukan  yaitu  metode Sokhlet,  fase  padat,  dan  filtrasi  dengan  membran  berpori.  Metode  ekstraksi  fase  padat  dan  filtrasi dengan  membran  berpori  memerlukan  biaya  yang  mahal.  Metode  ekstraksi  Sokhlet  dapat menyebabkan  terjadinya  reaksi  penguraian  analit  akibat  pemanasan.  Ekstraksi  senyawa  analit  dalam sampel organisme juga dapat dilakukan secara metode maserasi.
Metode  maserasi  merupakan  ekstraksi  zat  aktif  dengan  cara  perendaman  sampel  dalam  pelarut yang sesuai sehingga terjadi difusi kesetimbangan. Metode maserasi memiliki kelebihan yaitu mudah dikerjakan  dan  biayanya  relatif  murah [18] .  Metode  maserasi  dapat  digunakan  untuk  mengekstrak senyawa  organik  dalam  daging.  Proses  maserasi  senyawa  organik  dalam  daging  ikan  dapat menggunakan  beberapa  campuran  pelarut  organik.  Ekstraksi  residu  pestisida  dalam  ikan  (Lagoon tilapia)  dengan  metode  maserasi  menggunakan  pelarut  etil  asetat/diklorometana  (1:1) [3] .  Metode maserasi  memerlukan  pelarut  analit  yang  sesuai  agar  menghasilkan  rendemen  optimum.  Ekstraksi SDBS dalam ikan secara Sokhlet menggunakan metanol menghasilkan % recovery 86 [6] . Hal ini dapat menjadi acuan penggunaan pelarut metanol pada proses maserasi SDBS dalam ikan.
Proses  maserasi  juga  dipengaruhi  oleh  waktu,  sehingga  diperlukan  waktu  yang  efektif  dan efisien.  Ekstraksi  secara  maserasi  senyawa  amina  biogenik  dalam  ikan  laut  dan  produk  ikan  kaleng menggunakan  metanol  memerlukan  waktu  optimum  selama  15  jam [7] .  Hal  ini,  menunjukkan  bahwa waktu  yang digunakan untuk  mengekstraksi senyawa organik  dalam ikan  memerlukan  waktu selama 15 jam. Namun, perbedaan senyawa yang diekstrak memerlukan pelarut yang berbeda mengakibatkan waktu  ekstraksi  yang  berbeda  juga.  Penggunaan  pelarut  metanol  untuk  mengekstraksi  SDBS  dalam ikan  secara  Sokhlet  menggunakan  metanol  dalam  ikan  selama  15  jam  menghasilkan  % recovery 80- 104 [9] .
Penentuan  kandungan  SDBS  dapat  dilakukan  dengan  beberapa  metode  seperti  spektrofotometri UV-Vis, titrimetric [8] , High Performance Liquid Chromatography (HPLC) dan elektroforesis kapiler. Kelebihan analisis surfaktan menggunakan metode HPLC dan elektroforesis kapiler memiliki akurasi dan kepekaan yang tinggi tetapi memerlukan biaya yang mahal [14] . Metode titrimetri memiliki akurasi dan  kepekaan  yang  rendah [16] .  Analisis  menggunakan  spektrofotometeri  UV-Vis  memiliki  beberapa kelebihan  yaitu  mudah  dikerjakan,  cepat,  jumlah  larutan  yang  sedikit,  akurasi  dan  kepekaan  yang tinggi.  Selanjutnya,  analisis  SDBS  secara  spektrofotometri  UV-Vis  dapat  menggunakan  beberapa pewarna  seperti  metilen  biru,  malasit  hijau,  metil  violet,  rhodamine  B,  dan  akridin  oranye.  Analisis SDBS secara spektrofotometri UV-Vis menggunakan metilen biru dikenal dengan metode Methylene Blue Active Substances (MBAS) yang merupakan metode Standar Nasional Indonesia (SNI). Metode MBAS  memiliki  keunggulan  yaitu  waktu  kestabilan  yang  lama  (3  jam) [17] .  Suatu  metode  analisis harus  divalidasi  terlebih  dahulu  agar  hasil  dapat  dipertanggungjawabkan.  Parameter  validasi  metode analisis meliputi akurasi, presisi, linearitas, batas deteksi dan batas kuantisasi, serta sensitifitas [11] .
Pada tulisan ini disajik mengenai metode validasi untuk menentukan konsentrasi SDBS dalam air budidaya  dan  ikan  lele  yang  terpapar  surfaktan  sehingga  diperoleh  nilai  faktor  biokonsentrasi.
Ekstraksi  SDBS  dalam  ikan  dilakukan  secara  maserasi  menggunakan  metanol  selama  16  jam sedangkan  analisisnya  dengan  spektrofotometri  UV-Vis.  Metode  analisis  SDBS  dalam  ikan  secara maserasi  dan  spektrofotometri  UV-Vis  menggunakan  metilen  biru  menghasilkan  % recovery 80-104 maka dapat digunakan sebagai analisis rutin.

## 2. Material dan Metode

## 1.2. Material
Penelitian  ini  menggunakan  bahan  kimia  seperti  surfaktan  SDBS  ( sodium  dodesilbenzene sulfonate )  dari  Aldrich,  Ikan  lele,  nila,  dan  gurame  dari  pasar  tradisional  D.I.  Yogyakarta.  Bahan kimia yang digunakan dari E Merck dengan kualitas pro analisis adalah metanol, indikator fenoftalein, metilen  biru,  kloroform,  hidrogen  peroksida  (H 2 O 2 )  30%,  isopropil  alkohol  ( i -C 3 H 7 OH),  NaOH  1  N, H 2 SO 4 1 N, H 2 SO 4 6 N, dan NaH 2 PO 4 .H 2 O. Untuk analisis digunakan  evaporator (Buchi R-114) dan spektrofotometer UV-Vis (Cintra-2020).

## 1.3. Analisis SDBS dalam air budidaya
Larutan sampel sebanyak 25,00 mL dimasukkan ke dalam corong pemisah 250 mL, ditambahkan 6,25  mL  metilen  biru  dan  2,50  mL  kloroform,  kemudian  dikocok  selama  30  detik.  Selanjutnya, dibiarkan hingga terbentuk dua fasa, digoyang pelan-pelan. Jika terbentuk emulsi ditambahkan sedikit isopropil  alkohol  sampai  menghilang.  Larutan  bagian  bawah  (fasa  kloroform)  kemudian  dipisahkan dan ditampung ke dalam wadah yang lain.
Fasa air dilakukan ekstraksi dengan cara yang sama menggunakan kloroform sebanyak dua  kali. Fasa kloroform tersebut dimasukkan ke dalam corong pemisah, ditambahkan 12,5 mL larutan pencuci (Larutan  H 2 SO 4 6  N  diambil  sebanyak  20,5  mL  dan  dimasukkan  ke  dalam  labu  ukur  500  mL  yang berisi  250  mL  akuades.  Selanjutnya,  ditambahkan  natrium  dihidrogen  fosfat  monohidrat (NaH 2 PO 4 .H 2 O)  sebanyak  25  g,  dikocok  hingga  larut  sempurna  kemudian  dimasukkan  akuades sampai  tepat  tanda  batas,  dan  dihomogenkan) [19] dan  dilakukan  ekstraksi.  Larutan  bagian  bawah dipisahkan.  Selanjutnya,  fasa  larutan  pencuci  dilakukan  ekstraksi  menggunakan  kloroform  sebanyak dua kali. Fasa kloroform hasil ekstraksi diukur dengan spektrofotometer UV-Vis.

## 1.4. Analisis SDBS dalam ikan lele
Sampel  ikan ditimbang terlebih  dahulu, kemudian  daging, insang, serta bagian perut dipisahkan dari tulang dan kulit. Selanjutnya, bagian tersebut dihaluskan menggunakan mesin penggiling daging dan  ditimbang  kembali.  Bagian  yang  sudah  digiling,  di freezer selama  24  jam  kemudian  di freeze dryer ,  dihaluskan,  dan  ditimbang  kembali  (massa  kering).  Sampel  kering  dimaserasi  menggunakan metanol  selama  16  jam,  diuapkan  dengan  evaporator,  kemudian  ditambahkan  akuades.  Diekstraksi dengan keloroform dan metilena biru, selanjutnya dianalisis menggunakan spektrofotometri UV-Vis.

## 3. Hasil dan Diskusi

## 3.1. Validasi metode analisis SDBS
Panjang  gelombang  maksimum  yang  dihasilkan  dari  analisis  SDBS  dalam  ikan  menggunakan metode  MBAS  adalah  652  nm.  Parameter  validasi  metode  analisis  SDBS  dalam  air  dan  ikan  lele budidaya tertera pada Tabel 1.
Tabel 1. Parameter validasi metode analisis SDBS Parameter validasi Analisis air budidaya Analisis ikan lele R 2 0,9940 0,9944 Persamaan garis regresi y = 0,2819x + 0,0016 y = 0,2886x + 0,1235
Sensitifitas (L mol -1 cm -1 ) 9,824 × 10 4 10,57 × 10 4
Limit of detection (LOD) 0,03108 mg/L 0,01776 mg/L Limit of quantitatif (LOQ) 0,1037 mg/L 0,05922 mg/L Presisi (%RSD) 0,1105-1,116 0,1351-1,300 Akurasi ( %recovery ) 98,32-99,65 87,64-90,01
Tabel  1  merepresentasikan  bahwa  nilai  koefisien  korelasi  (R 2 )  >  0,98.  Hasil  ini  menunjukkan bahwa  kurva  standar  yang  dihasilkan  baik.  Larutan  standar  banyak  yang  mengandung  matriks  maka nilai R 2 ≥ 0,98 [5] . Sensitivitas yang dihasilkan yaitu 9,824 × 10 4 L mol -1 cm -1 dan 10,57 × 10 4 L mol -1 cm -1 termasuk sensitivitas tinggi. Kriteria sensitifitas tinggi jika nilai absorptivitas molar (ɛ) > 6 × 10 4 L mol -1 cm -1 [10] . Nilai LOD analisis SDBS dalam air dan ikan lele budidaya tidak berbeda signifikan yaitu 0,03108 dan 0,01776 mg/L, sedangkan nilai LOQ menunjukkan perbedaan yang signifikan yaitu 0,1037 dan 0,05922 mg/L. Hasil batas deteksi dan kuantisasi tidak berbeda signifikan dengan analisis SDBS  dalam  limbah  rumah  tangga  dan  industri  menggunakan  metode Methylene  Blue  Active Substances (MBAS) masing-masing yaitu 5,900 × 10 -2 dan 9,900 × 10 -2 mg/L [2] . Dengan demikian, nilai LOD dan LOQ kedua metode tersebut  memiliki batas deteksi  yang rendah. Nilai %RSD presisi pada kedua metode tersebut lebih rendah dari 2. Nilai presisi ketelitian tinggi dengan kriteria %RSD ≤ 2 [12] .  Nilai  % recovery analisis  SDBS  dalam  air  budidaya  ikan  lele  adalah  98,32-99,65.  Hasil  ini mengindikasikan bahwa dalam air budidaya ikan lele tidak banyak terdapat matriks sehingga hampir semua  senyawa  SDBS  diperoleh  kembali.  Nilai  % recovery analisis  SDBS  dalam  ikan  lele  adalah 87,64-90,01. Nilai persen analit maksimum yang hilang dari sampel biologis adalah 15% [4] . Hasil ini termasuk  akurasi  yang  tinggi  karena  berdasarkan  kriteria  nilai  % recoovery senyawa  SDBS  dalam sampel ikan menghasilkan % recovery 80-104 [9] .

## 3.2. Penentuan Konsentrasi dan Faktor Biokonsentrasi SDBS dalam Ikan Lele Budidaya
Penambahan SDBS dengan konsentrasi tertentu pada air budidaya akan menyebabkan akumulasi ke  dalam  tubuh  ikan  budidaya.  Akumulasi  SDBS  berada  di  organ  ikan  terjadi  dalam  hati  dan  ginjal [15] .  Penambahan  SDBS  dengan  konsentrasi  2,492±0,1870;  5,372±0,1151;  10,27±0,3107;  dan 15,47±0,2465  mg/L  ke  dalam  air  budidaya.  Hasil  analisis  senyawa  SBDS  dalam  ikan  budidaya  dan nilai Bioconcentration Factor , (BCF) terdapat pada Tabel 2.
Tabel 2. Nilai konsentrasi dan faktor biokonsentrasi SDBS dalam ikan lele
Konsentrasi SDBS BCF (L/kg) dalam air (mg/L) dalam ikan (mg/kg) 2,492±0,0234 2,909±0,5964 1,167 5,372±0,1870 3,836±0,4147 0,7141 10,27±0,1151 4,411±0,2519 0,4297 15,48±0,3107 5,203±0,2523 0,3363
Tabel  2.  merepresentasikan  bahwa  semakin  tinggi  paparan  SDBS  dalam  air  budidaya  maka terjadi  penurunan  nilai  faktor  biokonsentrasi.  Fakta  ini  menunjukkan  bahwa  paparan  SDBS  tinggi menyebabkan proses penyerapannya cenderung menjadi semakin jenuh. Hal ini terjadi karena jumlah situs-situs  yang  mengikat  senyawa  tersebut  terbatas.  Hasil  faktor  biokonsentrasi  surfaktan  anionik dalam ikan lele yaitu pada konsentrasi tertentu akan terjadi stagnansi [15] .
Berdasarkan  hasil  yang  diperoleh  serta  analisis  data  menunjukkan  bahwa  tingkat  akumulasi surfaktan  anionik  dipengaruhi  oleh  konsentrasi  paparan  SDBS.  Hasil  ini  sesuai  dengan  penelitian sebelumnya  bahwa  semakin  tinggi  paparan  SBDS,  maka  senyawa  tersebut  meningkat  dalam  ikan, sedangkan nilai BCF terjadi penurunan [15] .

## 3.3  Penentuan SDBS dalam Ikan yang Dijual Di Pasar Tradisional
Kualitas  ikan  di  pasar  tradisional  terutama  kandungan  SDBS  secara  umum  belum  diketahui sehingga sangat perlu dilakukan analisis senyawa tersebut dalam ikan. Metode yang sudah tervalidasi, akan  dilakukan  pendekatan  pada  jenis  spesies  sampel  yang  berbeda,  namum  hidup  di  perairan  yang
sama  seperti  air  tawar.  Hal  ini,  untuk  meninjau  apakah  metode  yang  sudah  tervalidasi  dapat digunakan  pada  sampel  tersebut.  Pemilihan  sampel  ikan  komersial  seperti  lele,  nila,  dan  gurame karena  ikan  tersebut  termasuk  jenis  ikan  air  tawar  yang  mudah  dibudidaya  dan  dapat  hidup  pada kondisi perairan yang tercemar  SDBS. Hasil analisis SDBS dalam  masing-masing  ikan  dari tiap-tiap pasar tradisional ditunjukkan pada Tabel 3.
Tabel 3. Hasil analisis SDBS dalam ikan yang dijual di pasar PSRB
Kode sampel Konsentrasi (mg/kg) LB1 6,826±0,0403 LB2 8,162±0,0472 LB3 5,832±0,0492 NB1 6,553±0,0578 NB2 5,442±0,0643 NB3 5,866±0,0541 GB1 3,990±0,0821 GB2 3,568±0,0748 GB3 2,973±0,0624
Keterangan: L = ikan lele; N = ikan nila dan G = ikan gurame
Tabel 3 sampai dengan 4 menunjukkan bahwa dalam ikan lele yang diambil dari pasar tradisional mengandung SDBS dengan konsentrasi 5,719±0,0376-8,162±0,0472 mg/kg. Kandungan SDBS dalam ikan  nila  dan  gurame  masing-masing  adalah  5,180±0,0446-6,548±0,0297  dan  2,973±0,0624- 5,874±0,0291  mg/kg.  Secara  umum,  ikan  yang  dijual  di  pasar  mengandung  SDBS.  Hasil  tersebut menunjukkan  bahwa  akumulasi  tertinggi  terjadi  pada  ikan  lele  karena  ikan  tersebut  tidak  memiliki sisik  dan  lebih  suka  hidup  di  dasar  perairan.  Konsentrasi  SDBS  yang  tinggi  pada  ikan  dapat diakibatkan adanya akumulasi SDBS selama budidaya ikan, dimana senyawa tersebut dapat masuk ke dalam daging melalui insang dan kulit [13] .
Tabel 4. Hasil analisis SDBS dalam ikan yang dijual di pasar PSRC
Kode sampel Konsentrasi (mg/kg) LC1 6,841±0,0427 LC2 6,729±0,0318 LC3 6,959±0,0304 NC1 6,548±0,0297 NC2 5,279±0,0409 NC3 5,180±0,0303 GC1 5,109±0,0247 GC2 5,874±0,0291 GC3 5,649±0,0764 Keterangan: L = ikan lele; N = ikan nila dan G = ikan gurame Tabel 5. Hasil analisis SDBS dalam ikan yang dijual di pasar PSRD Kode sampel Konsentrasi (mg/kg) LD1 5,719±0,0376 LD2 6,258±0,0476 LD3 6,660±0,0563 ND1 5,936±0,0611 ND2 5,625±0,0476 ND3 5,180±0,0446 GD1 3,189±0,0240 GD2 4,173±0,0362 GD3 4,259±0,0652
Keterangan: L = ikan lele; N = ikan nila dan G = ikan gurame
Proses  masuknya  SDBS  melalui  insang  terjadi  karena senyawa  tersebut  bersamaan  dengan  air menuju  ventilasi  ingsang  dan  bagian  surfaktan  yang  berifat  lipofilik  berinteraksi  dengan  membran kemudian  masuk  ke  dalam  sel  darah.  Senyawa  SDBS  masuk  melalui  kulit  terjadi  karena  surfaktan membentuk  missel dengan bagian lipofilik menepel dengan kulit sehingga masuk ke dalam sel darah melewati pori membran pada kulit [15] .
Ikan  lele  dan  nila  termasuk  ikan  yang  tahan  terhadap  tumpukan  senyawa  organik  dalam  air, sehingga ikan tersebut tidak mengalami  gangguan dan dapat mengakumulasi senyawa organik SDBS dalam jumlah  yang banyak. Konsentrasi SDBS dalam ikan gurame lebih rendah dari nila karena 100 %  isi  lambung  ikan  gurame  mengandung  sisa  pakan  sedangkan  ikan  nila  hanya  mengandung  50  %. Sisa  pakan  yang  terakumulasi  dalam  ikan  gurame  dapat  menyebabkan  ikan  tersebut  untuk mengakumulasi senyawa-senyawa organik yang terdapat dalam air menurun.

## 4. Simpulan
Validasi  metode analisis SDBS dalam ikan lele adalah baik yang ditunjukkan dengan parameter R 2 = 0,9944; sensitifitas 10,57 × 10 4 L mol -1 cm -1 ; LOD 0,01776 mg/L; LOQ 0,05922 mg/L; presisi (%RSD  <  2);  dan  akurasi  (% recovery =  87,64-90,01).  Semakin  tinggi  paparan  SDBS  dalam  air budidaya  maka  konsentrasi  senyawa  tersebut  dalam  ikan  lele  meningkat.  Kandungan  SDBS  dalam ikan  lele,  nila,  dan  gurame  komersial  di  pasar  masing-masing  adalah  5,719±0,0376-8,162±0,0472; 5,180±0,0446-6,548±0,0297; dan 2,973±0,0624-5,874±0,0291 mg/kg.

## Daftar Pustaka
[1] Anonim, 2001, Peraturan Pemerintah Republik Indonesia No. 82 tentang Pengelolaan Kualitas Air dan Pengendalian Pencemaran Air.
[2] Draghici,  C.,  Coman,  D.,  Sica,  M.,  and  Dima,  C.,  2013,  Method  Validation  and  Uncertainty Estimation  for  Anionic  Surfactants  Determination  from  Municipal  Wastewaters, Rev.  Roum. Chim. , 5(8), 711-716.
[3] Essumang,  D.K.,  Togoh,  G.K.  and  Chokky,  L.,  Pesticide  Residues  in  the  Water  and  Fish (Langoon Tilapia) Samples from Lagoon in Grana, Chem. Soc. Ethiop ., 23(1), 19-27.
[4] Feinberg,  M.,  2007,  Validation  of  Analytical  Methods  Based  on  Accuracy  Profiles, J. Chromatogr. A. , 5(8), 174-183.
[5] Harris, D.C., 2010, Quantitative Chemical Analysis , 8 th Ed., W.H. Freeman and Company, New York.
[6] Kikuchi,  M.,  Tokai,  A.,  and  Yoshida,  T.,  1986,  Determination  of  Trace  Levels  of  Linear Alkylbenzene  Sulfonates  in  the  Marine  Environment  by  High-Performance  Liquid Chromatography, Wat. Res. , 5(20), 643-650.
[7] Kostadinovic, L.M. and Pavkov, S.T., 1999, HPLC Determination of Biogenic  Amines  in Sea Fish and Their Canned Products, Sci. V. I ., 97(6), 11-17.
[8] Maharani,  E.T.  dan  Hersoelistyorini,  W.H.,  2009,  Analisis  Kadar  Detergen  Anionik  pada Sedian Pasta Gigi Anak-anak, J. Kesehatan, 2(2), 1-5.
[9] Saez,  M.,  Leon,  V.M.,  Gomez-Parra,  A.,  and  Gonzalez-Mazo,  E.,  2000,  Extraction  and Isolation  of  Linear  Alkylbenzene  Sulfonates  and  Their  Intermediate  Metabolites  frm  Various Marine Organisms, J. Chromatogr. A ., 31(6), 99-104.
[10]  Savin, S.B., 1979, Fundamental of Analytical Chemistry , CRC Crit, Rev. Chem, 8,
[11]   Skoog,  D.A.,  West,  D.M.,  Holler,  F.J.,  and  Crouch,  S.R.,  2014, Fundamentals  of  Analytical Chemistry , 9 th Ed., PreMediaGlobal, Canada.
[12]  Sumardi,  2005, Tinjauan  Umum  Validasi  Metode  Analisis ,  Pusat  Penelitian  Kimia  LIPI, Bandung.
[13]  Tolls,  J.,  Haller,  M.,  Seinen,  W.,  and  Sijm,  D.T.H.M.,  2000,  LAS  Bioconcentration:  Tissue Distribution  and  Effect  of  Hardness-Implications  for  Processes, Enviro.  Sci.  Technol. ,  2(34), 304-310.
[14]  Trojanowicz,  N.,  Wójeik,  L.,  Musijowski,  J.,  Koc,  M.,  Poboźy,  E.,  and  Król,  E.,  2011,  New Analytical  Methods  Developed  for  Determination  of  Perfluorinated  Surfactants  in  Waters  and Wastes, Croat. Chem. Acta., 84(3), 439-446.
[15]  Versteeg,  D.J.  and  Rawlings,  J.M.,  2003,  Bioconcentration  and  Toxicity  of  Dodecylbenzene Sulfonate  (C 12 LAS)  to  Aquatic  Organisms  Exposed  in  Experimental  Streams, Arch.  Environ. Contam. Toxicol. , 44(2), 237-246.
[16]  Watoni,  A.H.  dan  Buchari.,  2000,  Studi  Aplikasi  Metode  Potensiometri  pada  Penentuan Kandungan Karbon Organik Total Tanah, J. M. B. , 1(5), 23-40.
[17]  Wyrwas,  B.  and  Zgola-Grześkowiak,  A.,  2014,  Continuous  Flow  Methylene  Blue  Active Substances  Method  for  the  Determination  of  Anionic  Surfactants  in  River  Water  and Biodegradation Test Samples, J. Surfact. Deterg. , 17(11) 191-198.
[18]  Nurhasnawati,  H.,  Sukarmi,  S.  dan  Handayani,  F.,  2017,  perbandingan  metode  ekstraksi maserasi  dan  sokletasi  terhadap  anti  oksidan  ekstrak  etanol  daun  jambu  bol  (Syzygium malaccense, L), J . Ilmiah Manuntung, 3(1) 91-95.
[19]  Anonim a, 2005 , Standar Nasional Indonesia No. 06-6989.51-2005 tentang Cara Uji Surfaktan Anionik dengan Spektrofotometer secara Biru Metilen .