http://jurnal.farmasi.umi.ac.id/index.php/fitofarmakaindo/index
Copyright © 2020 Jurnal Fitofarmaka Indonesia. This is an open-access article distributed under the terms of the Creative Commons Attribution-ShareAlike 4.0 International License

## Efek Hepatoprotektor
Andrographolide Terhadap Aktivitas Alanin Aminotransferase Dalam Serum Rattus norvegicus Jantan Galur Wistar Yang Diinduksi Karbon Tetraklorida
Dewinta Putri Utami 1 , Andriani 2* , Mardhia 3 , Virhan Novianry 2 , Mistika Zakiah 4
1 Medical School, Faculty of Medicine, Tanjungpura University
2 Department of Biochemistry, Tanjungpura University
3 Department of Microbiology, Tanjungpura University
4 Department of Histology, Tanjungpura University
Article info Abstract History
Submission : 17-10-2019
Review : 20-10-2020 Accepted : 19-01-2021
* Email: drvirhannovianry@gmail.com
DOI: 10.33096/jffi.v8i1.582
Keywords: Andrographolide, CCl 4 ,
hepatoprotector, alanine aminotransferase dsdfsdf
Andrographolide is a diterpenoid bioethanol that effectively prevent liver injury by  reducing  liver  oxidative  stress  response.  The  research  was randomized  experimental  design  with  pretest-posttest  design.  Thirty  male wistar rats was randomly divided into 6 groups, normal control, negative control (0,2 ml CCl 4 ), and positive control (500 mg/kgBW curcumin), dose I (50 mg/kgBW), dose II (100 mg/kgBW), dose III (200 mg/kgBW) given for 8 days and induced by 0,2 ml CCl 4 on the first day. Data was analyzed by One-Way  Anova  test,  LSD  Post-Hoc  test  and  paired  T  test.  All  groups induced by CCl4 shows elevated of ALT activity. The posttest results shows significant  differences  of  ALT  activity  between  groups  (p<0,05). Andrographolide shows hepatoprotector effect by decrease  the activity of ALT  in  male  wistar  rats  induced  by  CCl 4 .  The  effective  dose  of andrographolide is 200 mg/kgBW.

## I. Pendahuluan
Hepar merupakan organ metabolik terbesar yang  memiliki  peran  terpenting  dalam  proses biokimia  tubuh  (Torotra  and  Derrickson,  2014). Salah satu fungsi hepar adalah mendetoksifikasi atau mendegradasi zat-zat sisa dalam tubuh dan hormon, serta  obat-obatan  dan  senyawa  asing  lainnya (Sherwood,  2014).  Maka  dari  itu,  hepar  sangat rentan  terhadap  paparan  berbagai  zat  metabolik, racun,  mikroba,  dan  peredaran  darah  yang  dalam beberapa kasus dapat menyebabkan kerusakan hepar (Kumar, Abbas and Aster, 2013).  Kerusakan pada hepar menyebabkan sel hepatosit melepaskan alanin aminotransferase (ALT) ke dalam ruang ekstraseluler  dan  selanjutnya  ke  dalam  darah, sehingga kadar ALT dalam serum meningkat. Salah satu  senyawa  yang  diketahui  dapat  menginduksi kerusakan hepar dan digunakan sebagai model untuk mempelajari kerusakan hepar pada penelitian adalah karbon  tetraklorida  (Departemen  Kesehatan  RI, 2007; Sonderup, 2011).
Untuk  meningkatkan  pertahanan  terhadap efek  radikal  bebas  pada  hepar,  diperlukan antioksidan dari luar tubuh atau eksogen.  Senyawa yang  saat  ini  telah  terbukti  memiliki  efek  sebagai antioksidan  eksogen  ialah  kurkumin.  Kurkumin merupakan senyawa polifenol alami yang diekstraksi dari kunyit ( Curcuma longa Linn. ) yang menunjukkan  aktivitas  antioksidan,  antiinflamasi,
antiviral, antimikroba, dan antikanker (Ratner et al. , 2008).
Selain kurkumin, penelitian terbaru menunjukkan  bahwa  terdapat  salah  satu  senyawa yang  diduga  memiliki  efek  sebagai  antioksidan eksogen,  yakni andrographolide . Andrographolide adalah senyawa bioetanol diterpenoid yang berasal dari ekstrak tanaman obat Sambiloto ( Andrographis paniculata Ness ), yang secara tradisional digunakan di Asia untuk mengobati demam, batuk, tuberkulosis, gigitan ular, infeksi saluran pernapasan, dan infeksi saluran kemih. Studi in vivo dan in  vitro menunjukkan  bahwa A.paniculata dan andrographolide memiliki  aktivitas  antioksidan, anti  inflamasi,  anti  aterosklerosis,  anti  kanker,  dan tindakan hipoglikemik (Fujii et al. , 2010).
Berdasarkan latar belakang tersebut, peneliti bermaksud melakukan penelitian mengenai efek  hepatoprotektor andrographolide terhadap aktivitas ALT dalam serum Rattus norvegicus jantan galur  Wistar  yang  diinduksi  CCl 4 dengan membandingkannya pada senyawa kurkumin.
II. Metode Penelitian II.1 Alat dan Bahan
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini  adalah  kandang  tikus,  spuit  injeksi  dan  oral, sonde  lambung,  spektrofotometer  (Genesys  10S UV-Vis  Spectophotometry),  sentrifuge,  timbangan obat, timbangan hewan, mikropipet, kuvet
disposable, microtube 2 ml, tip biru, tip kuning, tip putih.
Bahan-bahan yang  digunakan  dalam penelitian ini adalah tikus Rattus norvegicus jantan galur Wistar, berumur 2-3 bulan dengan berat badan 120-200  gram, andrographolide ®  (PT.  Sigma- Aldrich, Jerman), kurkumin, CCl 4 (Merck, German), carboxymethyl  cellulose (CMC), olive  oil ,  aquades 100 ml, makanan standar, dan reagen AnalyticonFluitest ® (DiaSys, Jerman).

## II.2 Metode
Tikus  yang  digunakan  adalah  tikus  putih ( Rattus norvegicus ) jantan galur Wistar, berumur 2- 3  bulan  dengan  berat  badan  tikus  120-200  gram sebanyak  30  ekor  tikus  yang  dibagi  kedalam  6 kelompok perlakuan.
Kelompok I merupakan kelompok perlakuan  normal,  diberikan  makanan  standar selama  8  hari.  Kelompok  II  merupakan  kontrol negatif,  diberikan  CCl 4 dan  makanan  standar. Kelompok III merupakan kontrol positif, diberikan CCl 4 dan  kurkumin.  Kelompok  IV-VI  merupakan kelompok uji dosis, diberikan CCl 4 dan andrographolide .
CCl 4 diberikan secara intraperitoneal  dalam  satu  kali  pemberian  (0,2 ml/200 gBB dicampurkan dalam olive oil 1:1) pada hari  pertama.  Kurkumin  diberikan  selama  8  hari secara  intragastrical  dengan  dosis  500  mg/kgBB disuspensikan  ke  dalam  0,5% methyl  cellulose . Andrographolide  diberikan  selama  8  hari  secara intragastrical  dengan  dosis  50  mg/kgBB,  100 mg/kgBB,  dan  200  mg/kgBB  disuspensikan  ke dalam 0,5% methyl cellulose .
Aktivitas ALT diukur pada hari ke-2 untuk mengamati  kerusakan  hepar  yang  disebabkan  oleh CCl4  dan  setelah  uji  dosis  hari  ke-8  untuk mengamati  efek  andrographolide.  Darah  diambil
melalui  vena  ekor.  Sampel  darah  dibiarkan membeku selama 30-60 menit. Kemudian disentrifuge  dengan  kecepatan  4000  rpm  dan  suhu 15 o C selama 15 menit untuk memisahkan serum dari darah.  Serum  darah  ditambahkan  dengan  reagen AnalyticonFluitest®  dan  dibaca  menggunakan spektofotometri dengan panjang gelombang 340 nm.
Data  yang  diperoleh  dianalisis  secara statistik  dengan  uji  T  berpasangan  dan One  Way Anova . Jika terdapat perbedaan bermakna, dilanjutkan  dengan Post  hoc  Least  Significant Differences (LSD) dengan tingkat kepercayaan 95%
(α)  0,05.  Penelitian  ini  telah  lolos  kaji  etik  dari Komite  Etik  Fakultas  Kedokteran  Universitas Tanjungpura dengan nomor 2747/UN22.9/DL/2018.

## III. Hasil dan Pembahasan III.1 Hasil
Pemberian  karbon  tetraklorida  (CCl 4 ) secara intraperitoneal pada hewan coba menyebabkan  terjadinya  kerusakan  sel  hepar  yang ditandai  dengan  peningkatan  aktivitas  spesifik enzim ALT (Gambar 1). Bila dibandingkan dengan kelompok  normal,  pada  kelompok  II-VI  terjadi peningkatan  aktivitas  spesifik  enzim  ALT  akibat pemberian  CCl 4 .  Pemberian  andrographolide  (50, 100, 200 mg/kgBB) menunjukkan adanya perbaikan dari  sel  hepar  yang  rusak,  ditandai  dengan  adanya penurunan aktivitas spesifik enzim ALT. Pemberian 200  mg/kgBB  andrographolide  menunjukkan adanya  penurunan  aktivitas  spesifik  enzim  ALT yang  signifikan  (Gambar  2).  Pemberian  kurkumin juga  menunjukkan  adanya  penurunan  aktivitas spesifik  enzim  ALT.  Perbedaan  aktivitas  spesifik enzim ALT antara pretest dan posttest ditunjukkan pada Tabel 1.

## Tabel 1. Aktivitas spesifik enzim ALT (Mean±SD)
Kelompok ALT Enzyme Activity (Mean±SD) Pre-Test Post-Test Kelompok I 28,426±0,44679 29,540±0,57480 Kelompok II + 53,474±0,64104 ˟ 42,826±0,78223 * Kelompok III + 54,752±1,04619 ˟ 25,664±1,55548 */** Kelompok IV + 55,040±1,37027 ˟ 42,208±1,15584 */*** Kelompok V + 54,752±1,14266 ˟ 39,446±0,88996 */**/*** Kelompok VI + 53,886±0,60805 ˟ 23,970±1,10878 */**/***
Keterangan: ANOVA, p = 0,000, LSD, ˟ p <0,05 vs Kelompok normal (pre-test). ANOVA, p=0,000; LSD, *p< 0,05 vs Kelompok normal, **p< 0,05 vs Kelompok negatif, ***p< 0,05 vs Kelompok positif (post-test). Uji T berpasangan, + p < 0,05.
Gambar 1. Rerata aktivitas enzim alanin aminotransferase (ALT) serum sebelum perlakuan ( Pretest ) (ANOVA, p=0,000, LSD, *p<0,05 vs KN). (Ket; KN: Kontrol normal, K(-) : Kontrol negatif, K(+) : Kontrol positif, DI : Uji dosis I (50 mg/kgBB), DII : Uji dosis II (100 mg/kgBB), DIII : Uji dosis III (200 mg/kgBB))
Pengukuran  aktivitas  enzim  ALT  sebelum perlakuan  ( pretest )  dilakukan  1  hari  setelah pemberian  induksi  CCl 4 .  Gambar  1  menunjukkan hasil  rerata  aktivitas  enzim  ALT  pretest  pada kelompok  normal  (28,426±0,44679)  yang  masih dalam  rentang  normal.  Hasil  rerata  aktivitas  enzim ALT pretest pada kelompok negatif (53,474±0,64104), kelompok positif (54,752±1,04619), kelompok uji dosis I (55,040±1,37027), kelompok uji dosis II
(54,752±1,14266), dan uji dosis III
(53,886±0,60805)  mengalami  peningkatan  apabila dibandingkan  dengan  kelompok  normal.    Hal  ini menunjukkan  bahwa  pemberian  induksi  CCl 4 pada kelompok  negatif,  kelompok  positif,  kelompok  uji dosis  I,  kelompok  uji  dosis  II,  dan  kelompok  uji dosis  III  menyebabkan  terjadinya  peningkatkan aktivitas  enzim  ALT  dibandingkan  aktivitas  ALT pada  kelompok  normal  yang  tidak  diberikan  CCl 4 dan hanya diberikan pangan standar.
Gambar 2. Rerata aktivitas enzim alanin aminotransferase (ALT) setelah perlakuan ( Posttest ) (ANOVA, p=0,000; LSD, *p< 0,05 vs KN, **p< 0,05 vs K(-), ***p< 0,05 vs K(+)). (Ket; KN: Kontrol normal, K(-) : Kontrol negatif, K(+) : Kontrol positif, DI : Uji dosis I (50 mg/kgBB), DII : Uji dosis II (100 mg/kgBB), DIII : Uji dosis III (200 mg/kgBB))
Pengukuran aktivitas enzim ALT setelah perlakuan ( posttest )  dilakukan  setelah  8  hari  pemberian kurkumin pada kelompok positif dan andrographolide pada  kelompok  uji  dosis  I, kelompok uji dosis II, kelompok uji dosis III, serta pemberian makanan standar pada kelompok negatif dan kelompok normal. Pada Tabel 1 dan Gambar 2 menunjukkan penurunan rerata aktivitas enzim ALT posttest pada  kelompok  positif  yang  diberikan
kurkumin, kelompok uji dosis I, kelompok uji dosis II,  dan  kelompok  uji  dosis  III  yang  diberikan andrographolide ,  maupun  kelompok  negatif  yang hanya  diberikan  makanan  standar.  Hal  ini menunjukkan  bahwa  pemberian andrographolide menurunkan aktivitas enzim ALT dan kelompok uji dosis  III  merupakan  kelompok  yang  memiliki kemampuan  menurunkan  aktivitas  enzim  ALT paling baik dibandingkan kelompok lainnya.
KN K(-) K(+) DI DII DIII Rerata Aktivitas ALT (U/L) 28,426 53,474 54,752 55,040 54,752 53,886 * * * * * 0 10 20 30 40 50 60 KN K(-) K(+) DI DII DIII Rerata Aktivitas ALT (U/L) 29,540 42,826 25,664 42,208 39,446 23,970
* */** */*** */**/*** */**/*** 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45

## III.2 Pembahasan
Semua  kelompok  yang  diberikan  CCl 4 menunjukkan  peningkatan  aktivitas  spesifik  enzim ALT  (Tabel  1).  Kerusakan  yang  terjadi  akibat paparan  CCl 4 disebabkan  konversi  molekul  CCl 4 menjadi  radikal  bebas  CCl 3 • oleh  sitokrom  P450. Sitokrom  P450  memediasi transfer elektron  ke ikatan C-Cl membentuk radikal bebas triklorometil (CCl 3 • ).  CCl 3 • sangat  mudah  berekasi  dengan oksigen  membentuk  radikal  triklorometil  peroksi (CCl 3 O 2 • ) yang lebih reaktif. Radikal bebas CCl 3 O 2 • ini dapat menyerang lipid pada membran retikulum endoplasma menyebabkan peroksidasi lipid sehingga  terjadi  peningkatan  OH  dan  Ca 2+ sitoplasma  interseluler  menyebabkan  autolisi  asam lemak  yang  terdapat  pada  fosfolipid  membran  sel sehingga terjadi peningkatan permeabilitas membran(Gold et  al. ,  2003;  Daniel et  al. ,  2004; Panjaitan et al. , 2007; González-Reyes et al. , 2013; Dai et  al. ,  2014).  Hal  ini  akan  menyebabkan kerusakan  bahkan  kematian  sel  hepar.  Rusaknya membran sel hepar menyebabkan bocornya protein- protein  dan  molekul-molekul  lain  keluar  yang kemudian  masuk  dalam  darah,  termasuk  protein spesifik  yang  terdapat  pada  jaringan  hepar  seperti enzim  transaminase,  yaitu  enzim  ALT,  sehingga terjadi peningkatan aktivitas spesifik ALT (Marinda, 2014).  Hasil  pada  penelitian  ini  sejalan  dengan penelitian  yang  dilakukan  oleh  Ruqiah  dkk  (2007) yang menunjukkan bahwa pemberian CCl 4 sebanyak 0,1 ; 1,0 ; dan 10 ml/kgBB yang diberikan secara intraperitoneal mengakibatkan adanya peningkatan aktivitas enzim ALT serum  (Panjaitan et  al. ,  2007). Penelitian  yang  dilakukan  oleh Adewale et al (2014) juga menunjukkan bahwa pada pemberian 3 ml/kgBB CCl 4 menyebabkan kerusakan  hepar  yang  ditandai  dengan  terjadinya peningkatan  kadar  enzim  hepar  dalam  serum ( Aspartat aminotransferase (AST), Alanin aminotransferase (ALT), dan Alkaline phosphatase (ALP))(Adewale O.B, Adekeye A.O, Akintayo C.O, Onikanni A, 2014).
Tabel  1  menunjukkan  penurunan  aktivitas spesifik enzim ALT antara pretest dan posttest pada kelompok  III-VI.  Pemberian  kurkumin  (Kelompok III)  menunjukkan  adanya  penurunan  aktivitas spesifik  enzim  ALT  ke  rentang  normal.  Hasil penelitian  ini  sejalan  dengan  penelitian  yang dilakukan  Naglaa  dan  Eman  (2014)  yang menunjukkan  bahwa  pemberian  300  mg/kgBB kurkumin efektif dalam memperbaiki fibrosis hepar yang ditunjukkan oleh penurunan kadar ALT, AST, dan  bilirubin  total  ke  rentang  normal  (Khedr  and Khedr, 2014).
Radikal bebas yang terbentuk dalam tubuh dapat  dinetralisir  oleh  mekanisme  pertahanan antioksidan endogen, apabila terdapat dalam jumlah yang tidak berlebihan. Antioksidan merupakan suatu senyawa  yang  pada  konsentrasi  rendah  secara
signifikan  dapat  menghambat  atau  mencegah oksidasi  substrat  dalam  reaksi  rantai.  Antioksidan akan  mendonorkan  elektronnya  kepada  molekul radikal bebas, sehingga radikal bebas menjadi stabil (Werdhasari A, 2014). Antioksidan dibagi  menjadi antioksidan endogen, seperti superoksida dismutase (SOD),  katalase  (Cat),  gluthathione  peroxidase (Gpx), serta antioksidan eksogen, yaitu yang didapat dari luar tubuh, seperti kurkumin dan andrographolide  yang  digunakan  dalam  penelitian ini.
Kelompok  IV-  VI  menunjukkan  bahwa pemberian  andrographolide  dapat  menurunkan aktivitas  spesifik  enzim  ALT  ke  rentang  normal (p<0,05). Penelitian terdahulu  yang dilakukan oleh Visen dkk tahun 1993, menunjukkan andrographolide pada  dosis  0,75-12  mg/  kg  yang diberikan  secara  per  oral  selama  7  hari  memiliki aktivitas  signifikan  terhadap  toksisitas  hepar  tikus yang  diinduksi  parasetamol  (Visen et  al. ,  1993). Penelitian yang dilakukan oleh Guojun, et al (2012) menunjukkan bahwa dengan pemberian 30 dan 100 mg/kg andrographolide secara intraperitoneal 2 jam sebelum pemberian Concanavalin-A dapat mengurangi aktivitas serum ALT secara signifikan. Pemberian andrographolide juga dapat menurunkan produksi  ROS  ( Reactive  Oxygen  Spesies )  dan mengurangi  stress  oksidatif  di  hepar  yang ditunjukkan  dengan  penurunan  aktivitas  serum lactate dehydrogenase (LDH) dan myeloperoxidase (MPO) (Zhang et al. , 2012).
Penelitian  lain  yang  dilakukan  oleh  Ju-
Feng, et  al (2011)  menunjukkan  p retreatmen 100 mg/kg andrographolide dapat  secara  efektif mencegah  kerusakan  hepar  yang  diinduksi  CCl 4 dengan  menginhibisi  stress  oksidatif  dan  respon inflamasi  yang  ditunjukkan  melalui  penurunan aktivitas  spesifik  serum  AST  dan  ALT  serta malondialdehid (MDA) hepar. Pemberian andrographolide juga secara signifikan menghambat deplesi dari glutathion (GSH) di hepar. Hal  ini  mengindikasikan  bahwa andrographolide merupakan  penangkal  radikal  dan  memiliki  efek perlindungan terhadap hepatotoksisitas yang diinduksi CCl 4 (Hu et al. , 2011). Andrographolide tergolong kedalam antioksidan  pemutus  rantai  peroksidasi  lipid.  Pada struktur andrographolide terdapat  hidrogen  alilik pada  atom  karbon  C-11  yang  memegang  peranan penting  dalam  memutuskan  peroksidasi  lipid. Andrographolide mendonasikan  hidrogen  aliliknya untuk berpasangan dengan elektron tak berpasangan dari  radikal  bebas  (Chao  and  Lin,  2010). Dalam menangkal  radikal  bebas  yang  terbentuk  akibat paparan CCl 4 , andrographolide dapat mengeleminasi  pengaruh  kereaktifan  CCl 4 dengan menurunkan  energi  ikatan  antara  radikal  bebas dengan  reseptor  yang  ada  dalam  hepar  (Hu et  al. , 2011).
Hasil  pada  kelompok  VI  menunjukkan penurunan  aktivitas  enzim  ALT  paling  tinggi, dibandingkan kelompok IV dan kelompok V dengan p<0,05  (Tabel  1).  Sehingga  dapat  disimpulkan bahwa dosis efektif andrographolide ialah dosis 200 mg/kgBB.  Efek  yang  ditunjukkan  pada  pemberian 200  mg/kgBB  andrographolide  sama  dengan pemberian 500 mg/kgBB kurkumin (Kelompok III).

## IV. Kesimpulan
Induksi  CCl 4 dosis  toksis  menyebabkan kerusakan hepar yang ditandai dengan peningkatan aktivitas  ALT  serum.  Pemberian andrographolide menunjukkan  adanya  efek  hepatoprotektor  yang dibuktikan  dengan  penurunan  aktivitas  alanain aminotransferase  (ALT)  pada  tikus  putih  jantan galur  wistar  yang  diinduksi  CCl 4 dengan  dosis efektif 200 mg/kgBB yang setara dengan kurkumin dosis 500 mg/kgBB.

## Daftar Pustaka
Adewale  O.B,  Adekeye  A.O,  Akintayo  C.O, Onikanni  A,  S.  S.  (2014)  ‘Carbon tetrachloride  (CCl  4  )-induced  hepatic damage  in  experimental  Sprague  Dawley rats:  Antioxidant  potential  of  Xylopia aethiopica’, The Journal
of
Phytopharmacology , 3(2), pp. 118–123.
Chao,  W.-W.  and  Lin,  B.-F.  (2010)  ‘Isolation  and identification  of  bioactive  compounds  in Andrographis  paniculata  (Chuanxinlian)’, Chinese  Medicine ,  5(1),  p.  17.  doi: 10.1186/1749-8546-5-17.
Dai,  N. et  al. (2014)  ‘Antioxidant  Properties  of Proanthocyanidins Attenuate Carbon
Tetrachloride  (CCl 4 )–Induced  Steatosis and  Liver  Injury  in  Rats  via  CYP2E1 Regulation’, Journal  of  Medicinal  Food , 17(6), pp.
663–669.
doi:
10.1089/jmf.2013.2834.
Daniel,  S. et  al. (2004)  ‘Through  metal  binding  , curcumin  protects  against  lead-  and cadmium-induced lipid peroxidation in rat brain  homogenates  and  against  lead- induced tissue damage in rat brain’, 98, pp. 266–275.
doi:
10.1016/j.jinorgbio.2003.10.014.
Departemen  Kesehatan  RI  (2007) Pharmaceutical Care  untuk  Penyakit  Hati .  Jakarta: Departemen Kesehatan RI.
Fujii,  T. et  al. (2010)  ‘Mouse  model  of  carbon tetrachloride induced liver fibrosis: Histopathological  changes  and  expression of  CD133  and  epidermal  growth  factor’, BMC  Gastroenterology ,  10(1),  p.  79.  doi: 10.1186/1471-230X-10-79. Gold,  E.  J. et  al. (2003)  ‘Changes  in  activin  and activin  receptor  subunit  expression  in  rat liver  during  the  development  of  CCl4- induced cirrhosis’, Molecular and Cellular Endocrinology ,  201(1–2),  pp.  143–153.
doi: 10.1016/S0303-7207(02)00417-3. González-Reyes,  S. et  al. (2013)  ‘Curcumin pretreatment induces Nrf2 and an antioxidant  response  and  prevents  hemin- induced  toxicity  in  primary  cultures  of cerebellar  granule  neurons  of  rats’,
Oxidative Medicine and Cellular Longevity , 2013. doi: 10.1155/2013/801418. Hu,  H.  Z. et  al. (2011)  ‘Protective  Mechanism  of
Andrographolide
against Carbon Tetrachloride-’, 34(11), pp. 1666–1670. Khedr, N. F. and Khedr, E. G. (2014)  ‘Antioxidant and Anti-inflammatory Effects of Curcumin  on  CCl4  â?"  induced  Liver Fibrosis  in  Rats’, American  Journal  of Biomedical  Sciences ,  6(3),  pp.  191–200. doi: 10.5099/aj140300191.
Kumar,  V.,  Abbas,  A.  K.  and  Aster,  J.  C.  (2013)
Buku  Ajar  Patologi  Robbins .  9th  edn.
Edited by I. Nassar and S. Cornain. Jakarta: Elsavier.
Marinda,  F.  D.  (2014)  ‘Hepatoprotective  effect  of curcumin in chronic hepatitis’, J Majority , 3(VII), pp. 52–56. Panjaitan,  R.  G.  P. et  al. (2007)  ‘Pengaruh Pemberian  Karbon  Tetraklorida  Terhadap Fungsi  Hati  Dan  Ginjal  Tikus’, Makara, kesehatan , 11(1), pp. 11–16. Ratner,  M.  H. et  al. (2008)  ‘The  Current  State  of Serum  Biomarkers  of  Hepatotoxicity  The current  state  of  serum  biomarkers  of hepatotoxicity’, (April). doi:
10.1016/j.tox.2007.11.021.
Sherwood, L. (2014) Fisiologi Manusia Dari Sel Ke Sistem . 8th edn. Edited by H. O. Ong, A. A. Mahode, and D. Ramadhani. Jakarta: EGC. Sonderup,  M.  W.  (2011)  ‘[Drug  induced  liver injuries].’, Canadian  Medical  Education Journal , 29(6), pp. 244–246. Available at: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/228 41776%5Cnhttp://www.ncbi.nlm.nih.gov/ pubmed/8231072.
Torotra, G. J. and Derrickson, B. (2014) Principles of  Anatomy  and  Physiology .  14th  edn. Hoboke: WILEY.
Werdhasari  A.  Peran  Antioksidan  Bagi  Kesehatan. Jurnal  Biotek  Medisiana  Indonesia.  2014; 3(2): 59-68.
Visen,  P.  K.  S. et  al. (1993)  ‘Andrographolide protects rat hepatocytes against paracetamol-induced  damage’, Journal  of Ethnopharmacology ,  40(2),  pp.  131–136. doi: 10.1016/0378-8741(93)90058-D. Zhang,  Z. et  al. (2012)  ‘Protective  effect  of andrographolide  against  concanavalin  A- induced liver injury’,
Naunyn- Schmiedeberg’s Archives of Pharmacology ,  385(1),  pp.  69–79.  doi:
10.1007/s00210-011-0685-z.