## PERKEMBANGAN TULANG BELAKANG DAN AKTIVITAS ENZIM
PROTEASE LARVA IKAN BANDENG, Chanos chanos Forsskal YANG

## DIPELIHARA PADA MEDIA BERBEDA

## VERTEBRAL DEVELOPMENT AND PROTEASE ACTIVITY OF LARVAL MILKFISH, Chanos chanos Forsskal IN DIFFERENT REARING MEDIA
Titiek Aslianti 1* , Afifah Nasukha 1 , dan Irwan Setyadi 1
1 Institute of Mariculture Reasearch and Development, Gondol - Bali
* E-mail: tiaspriyono@yahoo.com

## ABSTRACT
The  milkfish  (Chanos  chanos  Forsskal)  seed  quality  is  an  important  factor  for  supporting  the fisheries  industrialization  program  .  The  egg  fertility  and  larval  rearing  management  are two main  factors  to  improve  the  quality  of  the  seed.  The  aim  of  this  research  was  to  obtain  the information  about  those  two  indicators  on  milkfish  larvae,  reared  in  different  media.  About 100,000 eggs were located in 6 units of the outdoor concrete tank with volume of 6 m 3 . Larvae were reared due to the rearing standard procedure while the feeding management was adapted during  larvae  development.  Two  different  treatments  in  larval  rearing  medium  were  with  and without the addition of molasses, subsequently in triple trials. This study started from hatching day (0 DAH) until the end of larval rearing period (16-18 DAH). The growth parameters such as  vertebrae  analyses  and  survival  were  taken  in  the  end  of  research  periods,  while  protease assessment  was  analyzed  every  day  using  tyrosine  and  casein  standard  methods.  The  results showed    that    the  molasses  addition  produced  a  higher  growth  (TL  12.95±0.87  mm)  and survival  rate  (87.66±1.52%),  better  vertebral  performance  (44-45  segments),  and  higher protease  activity  (0.1392-0.3863  U/ml/min)  than  without  molasses  addition.  The  results indicated that molasses addition in larvae rearing medium improved the larvae quality.
Keywords: Protease enzime activity,milkfish seeds, molasses, vertebrae

## ABSTRAK
Kualitas  benih  bandeng  ( Chanos  chanos Forsskal)  masih  harus  ditingkatkan  guna  mendukung tercapainya program industrialisasi perikanan. Dua hal yang menentukan kualitas benih adalah fertilitas  telur  dan  manajemen  pemeliharaan  larva.  Penelitian  bertujuan  untuk  memperoleh informasi  tentang  kondisi  tulang  belakang  dan  aktivitas  enzim  protease  larva  yang  dipelihara pada  kondisi  lingkungan  berbeda  sehingga  dapat  diketahui  kualitasnya.  Wadah  penelitian berupa  6  unit  bak  beton  kapasitas  6  m 3 dan  berada  di  luar  ruangan (outdoor) .  Setiap  bak  diisi telur  ikan  bandeng  fertilitas  sekitar  ±  80%  kepadatan  100.000  butir  per  bak.  Manajemen pemeliharaan  larva  mengacu  pada  cara  pemeliharaan  ikan  yang  baik  dan  pemberian  pakan disesuaikan  dengan  perkembangan  larva.  Perlakuan  penelitian  adalah  perbedaan  media pemeliharaan dengan menggunakan molase (2ppm) dan tanpa molase, masing-masing diulang 3 kali.    Pemeliharaan  dilakukan  hingga  larva  siap  panen  (umur  16-18  hari).  Parameter pertumbuhan,  kelangsungan  hidup,  dan  kondisi  tulang  belakang  diamati  secara  diskriptif  pada akhir penelitian, sedangkan aktivitas  enzim protease diamati setiap hari  menggunakan substrat kasein  dan  tirosin  sebagai  metode  standar.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  larva  yang dipelihara pada media dengan penambahan molase menghasilkan pertumbuhan  (TL 12,95±0,87 mm)  lebih  baik  dan  kelangsungan  hidup    (87,66  1,52%)  lebih  tinggi,  performansi  tulang belakang normal - proporsional dengan jumlah ruas 44-45 segmen, dan kisaran aktivitas enzim protease  lebih  baik  (0,1392-0,3863  U/mL/menit).  Hal  ini  mengindikasikan  bahwa  penggunaan molase dalam media pemeliharaan larva ikan bandeng dapat meningkatkan kualitasnya.
Kata kunci: Aktivitas enzim protease, benih ikan bandeng, molase, tulang belakang

## I.  PENDAHULUAN
Ikan  bandeng  ( Chanos  chanos Forsskal)  termasuk  komoditas  endemik (Nosho,  1981)  dan  merupakan  satu diantara  komoditas  unggulan  ekspor Indonesia dari sektor perikanan (Cholik et al .,  2006;  Kordi,  2009),  bahkan  saat  ini (tahun 2013) dicanangkan  dalam program nasional sebagai komoditas industrialisasi. Budidaya  ikan  bandeng  dalam  beberapa tahun terakhir mengalami berbagai masalah  mulai  dari  penurunan  produksi, serangan  penyakit  (Johnny et  al .,  1998), biaya produksi  yang semakin tinggi,  serta benih  yang  tumbuh  lambat/kerdil  ketika dipelihara di tambak, hingga isue lingkungan  yang  dirasa  kurang  mendu- kung (Trobos, 2011). Menurunnya produksi  budidaya  sangat  terkait  dengan kualitas benih yang ditebar. Hasil evaluasi terhadap  kualitas  benih  produk  hatchery yang  disinyalir  sebagai  sumber  utama pasok  benih  (Trobos,  2009)  menunjukkan bahwa  benih  belum  memenuhi  standar yakni  ukuran  tidak  seragam  berkisar  9-11 mm,  kondisi  fisik  sangat  lemah  dengan struktur  tulang  belakang  masih  berbentuk tulang  rawan  ( cartilage )  sehingga  riskan tumbuh  kerdil  bahkan  banyak  mengalami kematian saat dilakukan panen (Aslianti et al ., 2011a).
Hal mendasar yang menjadi penyebab  pertumbuhan  yang  lambat adalah  kondisi  internal  (faktor  genetik) dan  eksternal  (pakan)  (Priyono,  2000). Kondisi internal berkaitan dengan kualitas telur. Telur yang baik adalah telur dengan tingkat  pembuahan  ( fertilitas )  minimal 80%  (Afifah et  al., 2011;  Aslianti et  al.,
2012)  sehingga  proses  perkembangan embrio berlangsung normal. Pakan sebagai  faktor  eksternal  merupakan  unsur utama  yang  menjadikan  protein  sebagai sumber  energi  bagi  pertumbuhan  dan kelangsungan  hidup  larva,  karena  fungsi pakan  pada  ikan  sangat  terkait  dengan aktivitas  enzim  pencernaan  yang  kebera-
daannya sangat bervariasi dan dipengaruhi oleh  ukuran  (fisiologis),  umur  ikan  dan organ  spesifik  selama  fase  pertumbuhan, serta  musim  (Hepher,  1988).  Aktivitas enzim  pencernaan  (khususnya  protease) merupakan  indikator  biologis  terhadap kemampuan  larva  untuk  mencerna  pakan yang  dikonsumsinya.  Aktivitas  enzimatik pada  sistem  pencernaan  larva  ikan  stadia awal  umumnya  masih  sangat  sederhana (Suryanti,  2002).  Peningkatan  aktivitas enzim  pencernaan  akan  sejalan  dengan pertumbuhan  larva,  yakni  semakin  tinggi aktivitas  enzimatik  pada  masa  pertum- buhan  maka  perkembangan  larva  akan semakin baik (Aslianti et al ., 2011b).
Faktor  lingkungan  juga  berperan penting  dalam  proses  produksi  benih karena  media  pemeliharaan  (air)  juga merupakan tempat  berkembangnya berba- gai  jenis  mikroorganisme  patogen  dan nonpatogen.  Peran  kualitas  air  sebagai lingkungan  hidup  larva  sangat  menentu- kan  kelangsungan  hidup  benih  mengingat ikan  bandeng  termasuk  jenis  ikan  yang ” compensatory  growth ”    yaitu  dapat tumbuh  dengan  cepat  jika  mendapat suasana lingkungan yang baik, cocok, dan banyak  tersedia  makanan  (Cholik et  al ., 2005).
Molase  dari  tetes  tebu  adalah limbah  dari  industri  pembuatan  gula  tebu ( Saccharum  officinarum )  yang  berwarna coklat  kehitaman  dan  berupa  cairan kental.  Molase  merupakan  hasil  samping dari  proses  pemisahan  kristal  gula  yang diketahui  banyak  mengandung  unsur karbon  (37%),  sukrosa  (31%),  beberapa jenis  asam  amino  dan  mineral  (32%), yang  kesemuanya  dapat  berperan  dalam menjaga  kesuburan  dan  menstabilkan kualitas air (Suastuti, 1998). Bahan-bahan tersebut  diduga dapat  dimanfaatkan untuk memperbaiki  lingkungan  pemeliharaan larva  bandeng  (Nasukha  dan  Aslianti, 2012). Penggunaan molase dalam penelitian  ini,  dalam  upaya  mencari inovasi memperbaiki kualitas benih
bandeng  produk  HSRT  yang  disinyalir sebagai  pasok  benih  yang  pertumbu- hannya  lambat  setelah  dibudidayakan  di tambak.
Dikatakan Anvimelech (1999)
bahwa  molase  merupakan  satu  diantara sumber karbohidrat yang dapat dimanfaatkan  untuk  meningkatkan  C/N rasio dalam upaya
mempercepat
tumbuhnya microorganisme terutama bakteri  heterotrof  (bioflok)  di  perairan budidaya. Bakteri heterotrof akan berkembang  pesat  jika  cukup  tersedia sumber  C-karbohidrat  seperti  sukrosa, molase  atau  tepung  tapioka.  Selanjutnya dikatakan  bahwa  bakteri  akan  menyerap polutan  terutama  amonia  dan  didesintesis menjadi  protein  yang  dapat  dimanfaatkan oleh  hewan-hewan  aquatic  (Anvimelech, 2007).  Teknologi  bioflok  telah  digunakan dalam  budidaya  ikan  nila  ( Oreochromis niloticus ) dan dilaporkan mampu mening- katkan produktivitas hingga 30 kali (Azim dan Little, 2008). Lebih lanjut
dikemukakan  bahwa  kandungan  protein pada  flok  berkisar  30-50%.  Bioflok  juga terdiri  dari  70-80%  bahan  organik sehingga kualitas air menjadi lebih stabil.
Dalam menentukan kualitas benih, pengamatan  secara  laboratoris  tentang perkembangan  tulang  belakang  merupa- kan  salah  satu  indikator  yang  dapat diamati  selain  tampilan morfologi,  karena pertumbuhan  larva  terkait  erat  dengan pertumbuhan tulang belakangnya (Aslianti et  al .,  2011a).  Tulang  belakang  yang abnormal akan berdampak terhadap keragaan  benih  sehingga  benih  tumbuh lambat/kerdil (Aslianti et al ., 2003).
Penelitian  ini  perlu  dilakukan dengan  tujuan  mendapatkan  informasi sejauh  mana  dampak  molase  dari  tetes tebu  yang  digunakan  dalam  media pemeliharaan larva ikan bandeng, terhadap  kualitas  benih  yang  dihasilkan melalui pengamatan perkembangan tulang belakang  dan  aktivitas  enzim  protease selama pemeli-haraan larva.

## II. METODE PENELITIAN
Penelitian  dilakukan  dengan  cara menerapkan  pola  cara  pembenihan  ikan yang  baik  (CPIB)  dalam  pemeliharaan larva  bandeng.  Prosedur  pelaksanaan penelitian  terdiri  dari  beberapa  tahapan sebagai berikut:

## 2.1. Persiapan Wadah
Wadah  yang  digunakan  dalam penelitian berupa bak beton berkapasitas 6 m 3 (ukuran  3x2x1  m 3 )  sebanyak  6  unit dan  berada  di  luar  ruangan  ( outdoor ). Bagian  dalam  bak  dicat  warna  kuning (Ahmad et  al., 1994)  dan  bagian  luar berupa semen biasa. Setelah bak dibersihkan  dengan  cara  mencuci  dan dikeringkan,  selanjutnya  diisi  air  laut (salinitas  33-34  ppt)  sebanyak  80%.  Bak dilengkapi  dengan  pipa  PVC  untuk mengalirkan  air  masuk  dan  saluran pembuangan  di  dasar  wadah,  slang  serta batu  aerasi  yang  diatur  sedemikian  rupa sehingga  diharapkan  udara  dari  aerasi dapat  mengalir  secara  merata  ke  seluruh bagian bak.

## 2.2. Penanganan Telur
Telur  ikan  bandeng  yang  baru dipanen dari egg colector , dipindahkan ke bak inkubasi (bak fiber transparan volume 100 liter) dan dipilih telur-telur yang fertil dengan tingkat pembuahan ±80%. Setelah dilakukan desinfeksi dengan cara merendam  telur  dengan  menggunakan iodine 50 ppm selama 20 menit (Afifah et al .,  2011),  selanjutnya  telur-telur  tersebut ditebar  kedalam  bak  pemeliharaan  larva dengan kepadatan optimal 100.000
butir/bak  dengan  asumsi  daya  tetas  telur mencapai  80-90%.  Setelah  24  jam  telur menetas kemudian dihitung daya tetasnya. Cangkang  telur  yang  mengendap  di  dasar bak  segera  dibersihkan  dengan  cara menyipon dan pada hari ke-2 setelah telur menetas,  kedalam  bak  pemeliharaan
ditambahkan Nannochloropsis oculata (Chlorela) sebagai green water (peneduh).

## 2.3. Manajemen Pemeliharaan Larva
Rotifer type S  yang  berukuran 80- 100  µm  merupakan  pakan  alami  utama dalam  pemeliharaan  larva  ikan  bandeng. Jumlah rotifer  yang  diberikan  disesuaikan dengan perkembangan larva (10-20
ind./mL) dan diupayakan tercukupi. Pakan buatan  yang  berukuran  200-400  µm dengan kadar protein 40% mulai diberikan secara ad  libitum (sebanyak  2-6  g/m 3 ) pada  hari  ke-10  hingga  menjelang  panen (D18).  Pakan  buatan  berfungsi  sebagai asupan  untuk  melengkapi  kebutuhan karbohydrat guna mendukung pertumbuh- an  larva. Nannochloropsis diberikan selama pemeliharaan larva, karena
keberadaannya  selain  sebagai  pakan rotifer  juga  berperan  sebagai  peneduh. Adapun molase (tetes tebu) yang ditambahkan  dalam  media  pemeliharaan berfungsi sebagai stimulan dan merupakan perlakuan  yang  membedakan  kualitas larva  antara  yang  dipelihara  dalam lingkungan  dengan  penambahan  molase dan  yang  tidak  menggunakan  molase. Dosis  tetes  tebu  adalah  2  ml/1.000L (Nasukha  dan  Aslianti,  2012)  diberikan mulai  hari  ke-2  (D2)  sampai  menjelang panen.  Pergantian  air  merupakan  salah satu cara untuk mengantisipasi
kemungkinan  kualitas  air  yang  ekstrim selama pemeliharaan larva, yang dilakukan  bertahap  mulai  hari  ke-10 sebanyak  20%  dan  mencapai  100%  saat menjelang  panen.  Secara  keseluruhan manajemen  pemeliharaan  larva  bandeng tertera  pada  Tabel  1.    Panen  dilakukan setelah  larva  berumur  16-18  hari  dengan terlebih  dulu  melihat  kondisi  larva  (gerak renang aktif dan responsif), dan diperkirakan  kondisi  tulang  belakang sudah cukup kuat.

## 2.4. Parameter yang Diamati

## 2.4.1. Pertumbuhan, Kelangsungan
Hidup dan Perkembangan Tulang Belakang
Parameter  yang  dapat  dijadikan tolok  ukur  kualitas  benih  antara  lain pertumbuhan, kelangsungan hidup (sintasan),  dan  perkembangan  tulang belakang  yang  semuanya  dievaluasi  pada saat panen. Panjang total dan bobot tubuh, masing-masing diketahui
melalui pengukuran  dengan  menggunakan  alat mistar  berketelitian  1  mm  dan  timbangan analitik  tipe  Denver  Instrument  AA  160 berketelitian 0,0001 g terhadap 30-50 ekor sampel  yang  diambil  secara  acak  dari setiap perlakuan. Selanjutnya hasil pengamatan  didokumentasi  menggunakan camera  digital  merk  Sony  type  526/7.2 mega pixels. Persentase sintasan dihitung
Tabel  1.  Pola  pemberian  pakan  alami  dan  pakan  buatan  serta  sistim  pergantian  air selama pemeliharaan larva bandeng hingga panen.
Manajemen pemeliharaan larva Hari setelah menetas 1   2   3   4   5                10                15                20 Pemeliharaan: Nannochloropsis Molase (perlakuan) Rotifer Pakan komersial Pergantian air: 20%-100% ****************************** ****************************** ****************************
*************
*************
menurut Effendi et al. (2006), berdasarkan jumlah  benih  yang  hidup  pada  saat  panen dibandingkan  dengan  jumlah  telur  yang menetas dikalikan seratus persen.  Adapun perkembangan  tulang  belakang  dianalisa dengan  menggunakan  metode  pewarnaan ganda  ( double  staining  method )  Alizarin menurut  Potthoff  (1984),  dan  diamati menggunakan  mikroskop  merk  Nikon Eclipse E400 pembesaran 10x – 20x serta didokumentasi  menggunakan  program ACT-1.  Dari  hasil  analisa  tersebut  akan diketahui  bahwa  struktur  tulang  belakang yang berwarna biru
transparan menunjukkan kondisi tulang masih berbentuk  tulang  rawan/tulang  muda (cartilage),  sedangkan  struktur  tulang yang  berwarna  biru  tua  atau  merah  sudah menunjukkan tulang keras (bone). Berdasarkan  morfologinya  tulang  yang berwarna  biru  tua  atau  merah  berpenam- pilan  kokoh  yang  berdampak  terhadap performansi  benih  yang  cenderung  lebih gesit  dan  agresif.  Kondisi  ini  berdasarkan hasil-hasil penelitian yang pernah dilakukan  menunjukkan  bahwa  tulang belakang  yang  kokoh  (warna  biru  tua) biasanya  dicapai  setelah  larva  berumur 16-18  hari,  kondisi  tulang  yang  lebih kokoh  (warna  merah)  dicapai  pada  umur 19-25 hari.

## 2.4.2. Aktivitas Enzim Protease
Pengamatan terhadap aktivitas enzimatik  pada  sistem  pencernaan  larva (khususnya  enzim  protease)  dilakukan dengan  cara  mengambil  sampel  larva setiap  hari  (D1-D18)  sebanyak  500-1000 ekor  larva  (±  1  g)  dan  dilakukan  pada kondisi suhu 0-4 o C. Selanjutnya sampel di ekstraksi  dengan  cara  menghaluskan (digerus)  untuk  mendapatkan  substratnya dan  dianalisis  menggunakan  metode hidrolisis  menurut  Bergmeyer et  al.
(1983). Aktivitas enzim protease ditentukan  dengan  mengukur  kemampuan enzim dalam menghidrolisis protein sehingga dihasilkan tirosin yang
dibebaskan. Pengukuran dilakukan dengan menggunakan  substrat  kasein  dan  tirosin sebagai  standar,  serta  menggunakan  alat UV-1201 UV-VIS spectrophotometer buatan Jepang dengan panjang gelombang 340-560  nm.  Aktivitas  enzim  protease, dinyatakan dalam unit aktivitas enzim/mL sampel/menit (Affandi et al ., 1994).

## 2.4.3. Kualitas Air
Pengamatan  kualitas  air  sebagai data  dukung  meliputi  parameter  fisikawi (suhu,  salinitas,  pH),  dan  kimiawi  (total amonium,  nitrit,  nitrat  dan  fosfat).
Pengamatan  secara  fisikawi  dilakukan dengan menggunakan alat Hanna
Instruments,  code  no:  HI  8314,  Serial  no: 31085,  ISO  9002.  Sedangkan  secara kimiawi  dilakukan  dengan  menggunakan alat  UV-1201  UV-VIS  spectrophotometer dengan panjang gelombang 640 nm untuk amonium,  543  nm  untuk  nitrit  dan  nitrat, serta  880  nm  untuk  fosfat.  Sampel  air diambil  dari  setiap  perlakuan  yang dilaksanakan setiap 3 hari selama pemeliharaan larva (Boyd, 1982).

## 2.5. Analisa data
Semua data yang diperoleh melalui pengamatan  langsung  ataupun  proses analisa  dihimpun  dan  ditabulasi  dalam software program Microsoft Excel , selanjutnya dianalisis menggunakan
software  Statistical  Product  and  Service Solution (SPSS) version 12.0 for windows.

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN

## 3.1.  Pertumbuhan, Kelangsungan Hidup, dan Perkembangan Tulang Belakang
Pertumbuhan larva bandeng sangat terkait  dengan  kondisi  lingkungan/media pemeliharaan  serta  tingkat  kelimpahan pakan  alami  yang  tersedia.  Kecukupan ketersediaan  pakan  serta  lingkungan  yang mendukung akan berdampak positif terhadap pertumbuhan larva. Hasil
pengamatan terhadap pertumbuhan,
kelangsungan  hidup,  dan  kondisi  tulang belakang  benih  bandeng  pada  akhir penelitian  disajikan  pada  Tabel  2  dan Gambar 1.
Dari  Tabel  2  diketahui  bahwa penggunaan molase pada media
pemeliharaan  larva  bandeng  berdampak positif  terhadap  pertumbuhan  dan  secara nyata  lebih  baik  dari  pada  tanpa  molase. Hal  ini  ditunjukkan  dari  kisaran  nilai panjang  total  masing-masing  perlakuan (Gambar  1)  berturut-turut  untuk  molase 11,67-14,67 mm dengan rerata 12,95±0,87 mm  dan  tanpa  molase  10-11,83  mm dengan  rerata  10,63±0,67  mm.  Pertum- buhan  yang  baik  akan  sangat  terkait dengan  kelangsungan  hidup  larva  dan terbukti  bahwa  kelangsungan  hidup  pada perlakuan  dengan  molase  menunjukkan lebih  tinggi  (87,66  1,52%)  jika  diban- dingkan  dengan  tanpa  molase.  Hal  yang nyata  terlihat  adalah  pertumbuhan  bobot tubuh  pada  perlakuan  tanpa  molase  yang menghasilkan  nilai  jauh  lebih  rendah (4,90±0,72  mg)  dengan  performansi individu  yang  tampak  kurus  dan  sangat riskan  banyak  mengalami  kematian  saat dilakukan panen, sehingga mengakibatkan kelangsungan  hidupnyapun  jauh  lebih rendah (62,30±1,11%) (Tabel 2).
Kelangsungan  hidup  yang  rendah tidak berarti tingkat pertumbuhannya juga rendah.  Hal  ini  dapat  dilihat  bahwa berdasarkan  korelasi  regresi  hubungan antara  panjang  total  dan  bobot  tubuh  dari masing-masing perlakuan, keduanya menunjukkan korelasi yang positif (Gambar  2) yang  berarti antara  pertum- buhan  panjang  total  dan  bobot  tubuh masing-masing  perlakuan  berada  dalam kondisi  yang  seimbang.  Tetapi  persentase korelasi pada perlakuan molase jauh lebih tinggi  (99,19%)  yang  ditunjukkan  oleh persamaan korelasi regresi  Y = -0,0207X 2 +  0,7874X  +  6,7428  dengan  R 2 =  0,9919 dari pada perlakuan tanpa molase (83,45%) yang ditunjukkan oleh persama-
an  korelasi  regresi    Y=0,9558X 2 – 4,5842X  +  15,637  dengan  R 2 =  0,8345. Hal tersebut menunjukkan bahwa penggu- naan  molase  dalam  lingkungan  pemeliha- raan  larva  bandeng  berdampak  positif terhadap  pertumbuhan  dan  kelangsungan hidup larva. Kondisi ini terjadi mengingat unsur  mineral  yang  terkandung  dalam molase  cukup  tinggi,  diduga  dapat mendukung  pertumbuhan  larva  sehingga kelangsungan  hidup  benih  menjadi  lebih baik.  Dikatakan  Saputra  (2008)  bahwa tetes  tebu  mengandung  48-56%  gula (molase)  dan  unsur-unsur  mikro  ( trace element )  seperti  cobalt,  boron,  iodium, tembaga,  mangan,  seng  dan  juga  vitamin serta  pigmen  yang  sangat  penting  bagi kehidupan  organisme  perairan.  Selanjut- nya  dikatakan  Suastuti  (1998)  bahwa kandungan utama molase tetes tebu terdiri dari  karbon  (37%),  sukrosa  (31%)  dan beberapa  jenis  asam  amino  serta  mineral (32%).  Karbon  merupakan  salah  satu unsur  hara  mikro  penyusun  senyawa- senyawa  organik  yang  berperan  sebagai bahan utama dalam proses fotosistesa oleh fitoplankton  perairan  (Round  1970 dalam Hendrajat et  al. 2007)  yang  dapat dikonversi  menjadi  protein  bioflok  dan selanjutnya  dapat  digunakan  sebagai substitusi  pakan  bagi  organisme  perairan. Oleh karenanya unsur karbon mempunyai peran yang sangat penting dalam menjaga kesuburan  dan  menstabilkan  kualitas  air pada  media  pemeliharaan  larva.  Secara visual,  media  pemeliharaan  yang  diberi penambahan  molase  tetes  tebu  terlihat berwarna  lebih  hijau-kecokelatan.  Hal  ini diduga bahwa media pemeliharaan tersebut  mempunyai  kandungan  bahan organik  maupun  an-organik  lebih  tinggi daripada  media  pemeliharaan  yang  tidak menggunakan  molase  tetes  tebu  yang terlihat  berwarna  lebih  bening.  Sesuai dengan  pendapat  Permana et  al .  (2010) yang menyatakan bahwa indikator keberhasilan
pembentukan bioflok (klekap) dalam media pemeliharaan larva
10.37 12.23 12.40 11.67 13.85 14.93 15.23 14.67 12.95 9 11 13 15 17 Siklus-1 Siklus-2 Siklus-3 Rerata Pemeliharaan larva dengan molase K is a ra n p a n ja n g t o ta l (m m ) TL min TL max TL Rerata 10.0 11.0 10.0 9.0 11.5 11.5 12.5 11.8 10.63 7 9 11 13 15 Siklus-1 Siklus-2 Siklus-3 Rerata Pemeliharaan larva tanpa molase K is a ra n p a n ja n g t o ta l (m m ) TL min TL max TL Rerata
Molase : y = -0,0207x 2 + 0,7874x + 6,7428 R 2 = 0,9919 10 11 12 13 14 15 6 9 12 15 18 Bobot Tubuh (mg) P a n ja n g T o ta l (m m ) TL Poly. (TL) Tanpa molase : y = 0,9558x 2 - 4,5842x + 15,637 R 2 = 0,8345 6 9 12 15 3 4 5 6 7 Bobot Tubuh (mg) P a n ja n g T o ta l (m m ) TL Poly. (TL)
Tabel 2. Hasil pengamatan terhadap pertumbuhan (panjang total, berat tubuh), kelangsungan hidup dan kondisi tulang belakang benih bandeng pada akhir penelititan yang dipanen pada umur 18 hari.
Parameter Perlakuan media pemeliharaan Dengan Molase Tanpa Molase Panjang Total (mm) 12,95±0,87 a 10,63±0,67 b Berat Tubuh (mg) 11,37  2,54 a 4,90±0,72 b Kelangsungan hidup (%) 87,66  1,52 a 62,30±1,11 b Jenis tulang belakang Transisi cartilage-bone Cartilage Kondisi tulang belakang Kokoh Lemah Jumlah segmen (ruas) 44-45 44-45
Keterangan: angka-angka yang diikuti huruf superscript berbeda (a,b) pada baris yang sama menunjukkan beda nyata (p<0,05).
Gambar 1. Kisaran pertumbuhan panjang total benih pada akhir penelitian yang dipanen pada umur 18 hari.
Gambar 2. Korelasi regresi hubungan panjang total dan bobot tubuh pada perlakuan dengan molase dan tanpa molase
(A) (B)
bandeng  yang  diberi  penambahan  molase adalah  perubahan  warna  air  menjadi kecoklatan. Dengan demikian dapat dikatakan bahwa penggunaan molase tetes tebu  pada  media  pemeliharaan  larva bandeng  cukup  berperan  aktif  dalam menyediakan  unsur  hara  yang  dibutuhkan larva bandeng guna mendukung pertumbuhan dan kelangsungan hidupnya. Berdasarkan  pengamatan  terhadap perkembangan  tulang  belakang  individu dari
masing-masing
perlakuan
menunjukkan hasil  yang berbanding lurus dengan  pertumbuhan  (Gambar  3).  Pada perlakuan  dengan  molase  terlihat  kondisi tulang  belakang  benih  lebih  kokoh  dan berada  pada  fase  peralihan  dari  tulang rawan/muda  ( cartilage )  yang  berwarna biru transparan ke fase tulang keras ( bone ) yang  berwarna  biru  tua.  Sementara  pada perlakuan  tanpa  molase  menunjukkan perkembangan tulang belakang
sepenuhnya masih berada pada fase tulang rawan.  Benih  dalam  kondisi  tersebut selain  beresiko  tinggi  terhadap  kematian terutama saat dilakukan panen, juga sering menimbulkan masalah setelah dibudidayakan  di  tambak  seperti  tumbuh lambat/kerdil (Trobos, 2011). Oleh karenanya performansi individu merupakan  salah  satu  indikator  kualitas benih  yang  dapat  dijadikan  dasar  dalam
menentukan  waktu  panen  secara  tepat. Walaupun  umur  sudah  waktunya  panen tetapi  jika  performansinya  lemah  akan lebih baik jika pelaksanaan panen ditunda 1-2  hari.  Pertumbuhan  tulang  belakang larva  terkait  erat  dengan  efektifitas  pakan yang  dikonsumsinya.  Kelengkapan  nutrisi pakan akan sangat mendukung pertumbuhan  tulang  belakangnya  yang akan terekspresi pada tampilan morfologinya. Larva yang dipelihara pada media  dengan  penambahan  molase  secara morfologi menunjukkan performansi lebih agresif  dan  responsif  dibanding  dengan larva  yang  dipelihara  pada  media  tanpa penambahan molase yang terlihat cenderung lebih lemah.

## 3.2. Aktivitas enzim protease
Ditinjau dari aktivitas enzim pencernaan (protease) dari masing-masing perlakuan  (Gambar  4)  menunjukkan bahwa  larva  yang  dipelihara  pada  media tanpa  molase  aktivitas  enzim  mulai terlihat  meningkat  bersamaan  dengan mulai  terbukanya  mulut  larva  pada  D2 dimana  larva  mulai  mengkonsumsi  pakan dari  luar  tubuhnya  ( eksogenus )  yaitu berupa  pakan  alami  rotifer  kemudian menurun  pada  D3  dan  terlihat  stabil hingga  D9.  Selanjutnya  aktivitas  enzim meningkat lagi mulai D10 sebagai akibat
Gambar 3.  Performansi tulang belakang benih yang dipelihara pada perlakuan dengan molase (A) terlihat lebih kokoh daripada tanpa molase (B).
0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 D0 D2 D4 D6 D8 D10 D14 D18 Umur larva (hari) A k ti v it a s e n zi m p ro te a s e ( U /m l/ m e n it ) Molase Tanpa Molase
Gambar 4. Aktivitas enzim protease larva yang dipelihara pada masing-masing perlakuan dan diamati setiap hari mulai D0-D18
dari  berubahnya  menu  pakan  dari  pakan alami  ke  pakan  buatan  yang  diberikan pada  larva  ketika  berumur  10  hari. Kondisi  aktivitas  enzim  pada  perlakuan tanpa  molase  ini  tetap  stabil  hingga  saat panen  (D18)  dengan  kisaran  sebesar 0,1827 – 0,2843 u/ml/menit.
Aktivitas  enzim  protease  pada perlakuan  dengan  molase  menunjukkan lebih  baik  dari  pada  tanpa  molase. Aktivitas  enzim  pencernaan  pada  D2-D3 terlihat  menurun  mengingat  saat  mulut larva  mulai  terbuka  dan  mendapatkan pakan  eksogenus  tidak  hanya  berupa pakan alami rotifer tetapi juga unsur-unsur hara mikro yang terkandung pada molase. Masa  ini  merupakan  masa  adaptasi  larva untuk  menyesuaikan  organ  cernanya terhadap  pakan  yang  diterimanya.  Hal  ini jelas  mempengaruhi  aktivitas  enzim- enzim  pencernaan.  Van et  al. (2005) mengatakan  bahwa  penggunaan green water /molase  dalam  media  pemeliharaan larva  berperan  sangat  penting  dalam proses  pencernaan  larva  stadia  awal. Namun demikian pada D4 aktivitas enzim terlihat  terus  meningkat  dan  stabil  hingga D10.  Pada  masa  ini  menunjukkan  bahwa asupan  pakan  yang  diterimanya  sangat mendukung  pertumbuhan  larva.  Aktivitas enzim  menurun  pada  D11  seiring  dengan perubahan  menu  pakan  dari  pakan  alami
ke  pakan  buatan  selanjutnya  aktivitas enzim  stabil  hingga  saat  panen  (D18) dengan  kisaran  nilai  aktivitas  lebih  besar dari  pada  perlakuan  tanpa  molase  yaitu sebesar 0,2138-0,3863 u/ml/menit. Berda- sarkan  aktivitas  enzim  protease  tersebut menunjukkan  bahwa  media  pemeliharaan larva  dengan  penambahan  molase  sangat mendukung  kehidupan  larva  dimana dengan  semakin  meningkatnya  aktivitas enzim pencernaan maka pertumbuhan dan kelangsungan  hidup  larva  semakin  baik. Hal  ini  membuktikan  bahwa  aktivitas enzim  pencernaan  larva  merupakan  salah satu  tolok  ukur  yang  menunjukkan kemam-puan larva dalam mencerna pakan yang  diterimanya.  Ju et  al. (2008)  mela- porkan  bahwa  penggunaan  molase  dalam media  pemeliharaan  larva  dapat  mening- katkan  jumlah  bakteri,  alga  dan  plankton yang  membentuk  flok  yang  kaya  protein sehingga dapat memacu tumbuhnya pakan alami  dalam  media  pemeliharaan  yang dapat dimanfaatkan oleh larva. Disamping itu  kelengkapan  asam  amino  pada  pakan alami  yang  terkandung  pada  molase sangat  berperan  dalam  pembentukan enzim-enzim  tertentu  dalam  tubuh  larva. Enzim-enzim  yang  terkandung  dalam pakan alami sangat berperan dalam proses penguraian  ( autolysis )  sehingga  larva dapat  mencerna  dan  mengabsorbsi  pakan
Molase : y = -0,0034x 2 + 0,0711x - 0,0229 R 2 = 0,8103 Tanpa molase : y = -0,0013x 2 + 0,0238x + 0,1211 R 2 = 0,1644 0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 D0 D2 D4 D6 D8 D10 D14 D18 Umur larva (hari) A k ti v ita s e n z im p ro te a s e (U /m l/ m e n it) Molase Tanpa Molase Poly. (Molase) Poly. (Tanpa Molase)
alami secara lebih efisien yang berdampak positif terhadap laju tumbuh dan kelangsungan hidup larva.
Kondisi ini juga diperjelas melalui korelasi  regresi  hubungan  antara  umur larva  (D0-D18)  dengan  aktivitas  enzim protease  pada  masing-masing  perlakuan yang  menunjukkan  bahwa  pada  media dengan penambahan molase menghasilkan korelasi  yang  positif  sebesar  81,03%  dan menghasilkan  persamaan  Y=-0,0034X 2 +
0,0711X–0,0229 dengan R 2 =0,81. Sedangkan  pada  media  tanpa  molase walaupun  korelasinya  positif  namun  jauh lebih  rendah  yaitu  sebesar  16,44%  dan menghasilkan  persamaan  Y  =  -0,0013  X 2 +0,0238X+0,1211 dengan R 2 =0,16
(Gambar  5).  Oleh  karenanya  penggunaan tetes tebu (molase) dalam media pemeliharaan larva bandeng dinilai sangat efektif  selain  dapat  memperbaiki  pertum- buhan  yang  berdampak  terhadap  tingkat keseragaman  ukuran  benih  cukup  tinggi (>80%),  gerak  renang  aktif  dan  responsif sehingga termasuk kategori  benih  berkua- litas baik dan menghasilkan kelangsungan hidup sangat tinggi 87,66  1,52 %. Peningkatan aktivitas enzim pencernaan terlihat sejalan dengan
pertumbuhan larva seiring dengan bertambahnya umur larva. Semakin tinggi aktivitas  enzimatik  pada  masa  pertum- buhan  maka  perkembangan  larva  cende- rung  lebih  cepat  dan  dihasilkan  benih yang berkualitas baik.

## 3.3. Kualitas Air
Kondisi  kualitas  air  media  tanpa penambahan  molase  cenderung  mengha- silkan  kisaran  nilai  yang  lebih  tinggi (Tabel  3).  Kondisi  ini  diduga  karena proses  perombakan  bakteri/mikroorganis- me  dalam  media  pemeliharaan  tidak berlangsung  optimal  sehingga  dihasilkan amonia  yang  tinggi.  Berbeda  dengan media  yang  diberi  molase  bahwa  dengan adanya sinar matahari dapat dimanfaatkan untuk  berlangsungnya  proses  fotosintesis sehingga  mikroorganisme  yang  tersedia dapat  berkembang  dan  menghasilkan bahan organik yang bermanfaat bagi kehi- dupan larva  yang mendukung pertumbuh- an  dan  kelangsungan  hidupnya.  Namun demikian  kisaran  nilai  tersebut  masih dalam  batas  toleransi  larva  dan  masih  di bawah  ambang  batas  nilai  pustaka sehingga  larva  masih  mampu  bertahan hidup  hingga  umur  panen  (18  hari).
Gambar 5. Korelasi regresi hubungan antara umur larva (D0-D18) dengan aktivitas enzim protease pada masing-masing perlakuan
Tabel 3. Hasil pengamatan kualitas air (fisika dan kimia) yang dilakukan setiap 3 hari selama pemelihaaan larva.
Parameter Perlakuan Kisaran  nilai (hasil Pustaka) Molase Tanpa Molase Suhu ( o C) 27,0 - 27,3 27,2 - 28,5 28 - 31 (Tebbutt, 1992) DO (mg/L) 5,003 - 5,57 4,83 - 5,44 >5 ppm (Anonim, 2012) pH 7,79 - 8,07 8,05 - 8,39 7 - 8,5 (Setiawati et al , 2005) Salinitas (ppt) 33 - 34 33 - 34 28 - 35 (Anonim, 2012) NH 4 -N (mg/L) 0,0011 - 0,1454 0,0011 - 0,4272  1 (Boyd, 1982) NO 3 -N (mg/L) 0,0305 - 0,2612 0,0405 - 0,2718  0,2 (Boyd, 1982) NO 2 -N (mg/L) 0,0002 - 0,0004 0,0002 - 0,2296  0,2 (Boyd, 1982) PO 4 (mg/L) 0,0048 - 0,0306 0,0245 – 0,470  0,2 (Boyd, 1982)

## IV.  KESIMPULAN
Penggunaan molase  (tetes  tebu) dalam  media  pemeliharaan  larva  bandeng memberikan  pengaruh  positif  terhadap kesuburan  perairan  yang  berdampak terhadap  peningkatan  aktivitas  enzim protease  larva    sehingga  mendukung pertumbuhan  dan  kelangsungan  hidup benih.  Pertumbuhan  yang  baik  sangat terkait  dengan  perkembangan  tulang belakang  yang  normal  sehingga  benih mempunyai kualitas yang baik pula.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Terima  kasih  yang  tak  terhingga disampaikan kepada teknisi litkayasa yang telah membantu dalam pemeliharaan larva (Dedy  Rochaniawan,  Agus  Supriyatna) dan analisa laboratorium (Darsudi) sehingga  penelitian  ini  terlaksana  dengan baik dan tepat waktu.

## DAFTAR PUSTAKA
Affandi,  R.,  I.  Mokoginta,  dan  A. Suprayudi.  1994.  Perkembangan enzim  pencernaan  benih  ikan gurame, Osphronemus  goramy , Lacapede. J.  Ilmu-ilmu  Perairan dan  Perikanan  Indonesia,  2 (2):63- 71.
Afifah,  T.  Aslianti,  dan  S.Z.  Musthofa.
2011.  Penggunaan  Iodine  sebagai Desinfektan  pada  Telur  Bandeng ( Chanos chanos Forsskal). Prosiding Seminar Nasional Tahunan  VIII.  Hasil  Penelitian Perikanan  dan  Kelautan  Tahun
2011 .  Jurusan  Perikanan  Fakultas Pertanian UGM. Hlm.:1-4.
Ahmad,  T.,  T.  Aslianti,  dan  D.  Rohani- awan. 1994. Laju pertumbuhan dan kelangsungan hidup nener, Chanos chanos dalam  berbagai  nuansa warna wadah. J. Penelitian Budidaya Pantai , 10(1):123-134 Anonim, 2012. Standar nasional Indonesia.  Produksi  benih  ikan Bandeng  ( Chanos  chanos Forskal) kelas benih sebar. Pedoman pembenihan  skala  kecil  ikan  air payau dan laut. Direktorat Perbenihan.  Direktorat  Jenderal Perikanan  Budidaya.  Kementerian Kelautan dan Perikanan . 222hlm.
Anvimelech,  Y.  1999.  Carbon  nitrogen ratio  as  a  control  element  in aquaculture  system. Aquaculture, 176:227-235.
Anvimelech,  Y.  2007.    Feeding  with microbial  flocs  by  tilapia  in minimal discharge bio-flocs
technology  ponds. Aquaculture , 264:140-147.
Aslianti,  T.,  R.  Melianawati,  and  A.
Priyono.  2003.  Observation  on growth  of  several  exported  marine fish  larval  backbone  by  double staining method. Proceeding International  Seminar  on  Marine and  Fisheries,  Jakarta  Convention Center,  15-16  December  2003. Hlm.:87-91.
Aslianti,  T.,  Afifah,  dan  A.A.K  Alit.
2011a.  Pengamatan  performansi tulang belakang benih ikan bandeng  produksi  hatcheri  skala rumah  tangga  (HSRT)  sebagai indikator  kualitas  benih.  Prosiding Seminar  Nasional  Kelautan  VII, Universitas  Hang  Tuah.  Surabaya, 20 April 2011. Hlm.:105-111. Aslianti,  T.,  Afifah,  dan  S.Z.  Musthofa. 2011b.  Korelasi  aktivitas  enzim pencernaan  dengan  pertumbuhan benih ikan bandeng, Chanos chanos Forsskal  produksi  hatcheri skala  rumah  tangga  (HSRT).
Prosiding  Konferensi  Akuakultur
Indonesia 2011 . Industri  akuakul- tur  untuk  rekreasi,  bisnis  dan ketahanan  pangan.  Semarang,  2-3
Desember 2011. Hlm.:191-199. Aslianti, T., A. Nasukha,  dan  A. Priyono. 2012.  Peningkatan  kualitas  dan produksi  benih  ikan  bandeng, Chanos  chanos Forsskal  melalui perbaikan  manajemen  pemelihara- an  larva.  Prosiding  Indoaqua- Forum Inovasi Teknologi Akuakultur  2012 . Makassar,  8-11
Juni  2012.  Pusat  Penelitian  dan Pengembangan  Perikanan  Budida- ya.  Badan  Penelitian  dan  Pengem- bangan  Kelautan  dan  Perikanan. Hlm.:117-125.
Aslianti,  T.  dan  Afifah.  2012.  Studi aktivitas  enzim  pencernaan  larva ikan kuwe, Gnathanodon speciosus yang  dipelihara  dengan jenis  pakan  awal  berbeda. J.  Riset
Akuakultur, 7(1):49-59.
Azim,  M.E.  and  D.C.  Little.  2008.  The biofloc  technology  (BFT)  indoor tanks: Water quality, biofloc composition,  and  growth  and walfare  of  Nile  tilapia  ( Oreochro- mis  niloticus ). Aquaculture, 283 (1-4):29-35.
Bergmeyer,  H.U.,  M.  Grapl,  and  H.E.
Walter. 1983. Enzymes. In Bergmeyer,  H.U.  and  M.  Grapl. (eds.).  Methods  of  Enzymatic Analysis.  Vol  11.  Verlag  Chemie, Weinheim. Boyd, E.C. 1982. Water quality management  for pond fish culture. Elsevier scientific publishing company. Auburn University Alabama. 482p. Cholik, F., A.G. Jagatraya, R.P.
Poernomo,  dan  A.  Jauzi.  2005. Akuakultur tumpuan harapan masa depan  bangsa.  Kerjasama  antara Masyarakat  Perikanan  Nusantara (MPN)  dengan  Taman  Akuarium Air  Tawar  (TAAT)  Taman  Mini Indonesia  Indah.  Penerbit  PT. Victoria  Kreasi  Mandiri.  Hlm.:
184-189.
Cholik, F., S. Moeslim, E.S. Heruwati, T.
Ahmad,  dan  A.  Jauzi.  2006. Sebelas lompatan perikanan
budidaya  Indonesia.  60  Tahun Perikanan  Indonesia.  Masyarakat
Perikanan  Nusantara.  Hlm.:201- 212.
Effendi,  I.,  H.J.  Bugri,  dan  Widanarmi. 2006.  Pengaruh  padat  penebaran terhadap  kelangsungan  hidup  dan pertumbuhan  benih  ikan  gurami Osphronemus gouramy Lac.
Ukuran  2  cm. J.  Akuakultur
Indonesia , 5(2):127-135
Hendrajat, E. A dan M. Mangampa. 2007. Pengaruh  dosis  pupuk  pelengkap terhadap  pertumbuhan  rumput  laut Gracillaria  verucosa dalam  bak terkontrol.  Kumpulan  penelitian pengembangan  teknologi  budidaya
perikanan,  Badan  Riset  Kelautan dan Perikanan Departemen Kelautan  dan  Perikanan.  Hlm.: 485-488. Hepher, B. 1988. Nutrition of pond fishes. Cambridge University Press, Cambridge, New York, 388p. Johnny,  F.,  D.  Roza,  dan  Zafran.  1998. Karakteristik Vibrio spp  yang diisolasi  dari  telur  dan  larva bandeng  ( Chanos  chanos Forskal) pada  panti  benih  di  Bali  dan  Jawa Timur.  Prosiding  Seminar  dan
Teknologi  Perikanan  Pantai.  Bali, 6-7  Agustus  1998.  Puslitbang Perikanan Jakarta bekerjasama dengan JICA ATA-379. Hlm.:222- 226.
Ju,  Z.Y.,  I.E.  Foster,  L.C.  Conquest,  and W.  Dominy.  2008.  Enhanced growth  effects  of  shrimp  ( L. Vannamei )  from  the  inclusion  of whole  shrimp  floc  and  floc fractions to formulated diet. Aquaculture Nutrition, 14:533-543 Kordi,  G.  M.  2009.  Sukses  memproduksi bandeng  super  untuk  umpan, ekspor dan indukan. Penerbit Andi.
Jakarta. 145hlm.
Nasukha,  A.  dan  T.  Aslianti.  2012. Alternatif  penggunaan  tetes  tebu (molase) dalam media pemeliharaan larva bandeng,
Chanos chanos Forsskal. Prosiding
Seminar  Nasional  Tahunan  IX. Hasil  Penelitian  Perikanan  dan Kelautan  Tahun  2012.  Jilid  I. Budidaya Perikanan . Jurusan Perikanan Fakultas Pertanian UGM. Hlm.:1-7.
Nosho,  G.I.  1981.  Mate  selection  and parental  care  of  endemic  species.
Theory Population Biology . 21:11-
23.
Permana,  G.N.,  Haryanti,  K.  Mahardika, Fahrudin, dan I.K. Wardana. 2010. Aplikasi  BFT-Heterotropik  system dalam  produksi  benih  bandeng
( Chanos chanos Forskal). Progress report  hasil  penelitian T.A.  2010.
14hlm.
Potthoff, T. 1984. Clearing and staining techniques. In: H.G. Moser et al.
(eds.). Ontogeny and systematics of fishes. Special publication 1. American Sosiety of Ichtyolgists and Herpertologists. 35-37pp.
Priyono,  A.  2000.  Analisis  isozim  variasi genetik  ikan  bandeng  ( Chanos- chanos Forskal)  turunan-1  dan turunan-2  di  kawasan  perbenihan pantai  utara  Bali.  Tesis  Program Studi Biologi Rreproduksi Kekhususan  Biologi  Molekuler Reproduksi. Program Pasca Sarjana Universitas Brawijaya Malang, 57hlm. Saputra, W.H. 2008. Pengaruh penambahan molase terhadap kelangsungan  hidup  dan  pertum- buhan  udang  windu, Penaeus monodon Fab.  yang  diberi  bakteri probiotik  Vibrio  SKT-b.  Skripsi.
Departemen  Budidaya  Perairan. Fakultas Perikanan  dan Ilmu
Kelautan, Institut Pertanian Bogor.
24hlm.
Setiawati,  K.M.,  R.  Melianawati.  A.I. Supii, dan F.J. Rafael.  2005. Studi pendahuluan  pemeliharaan  benih kakap merah ( Lutjanus argentima- culatus )  pada  salinitas  berbeda. Buku  Perikanan  Berkelanjutan. Pusat  Riset  Perikanan  Budidaya.
Badan Riset Kelautan dan Perikanan.  Hal.:142-149. Suastuti,  N.G.A.M.A.  1998.  Pemanfaatan hasil  samping  industri  pertanian molase  dan  limbah  cair  tahu sebagai sumber karbon dan nitrogen untuk produksi biosurfektan  oleh Bacillus  sp.
Galur  komersial  lokal.  Tesis.
Program Pasca Sarjana IPB .
Bogor. 36hlm.
Suryanti, Y. 2002. Perkembangan aktivitas  enzim  pencernaan  pada larva/benih ikan baung ( Mystusne- murus C.V.). J. Penelitian
Perikanan Indonesia , 8(3):15-18.
Tebbutt, T.H.Y. 1992. Principles of water
quality  control.  Fourth  edition .
Pergamon Press , Oxford. 251p. Trobos.  2009.  Benih  bandeng  masih bergantung  Bali. Trobos. Edisi September 2009.
Trobos.  2011.  Ketika  Kualitas  Benih Bandeng  Merosot. Trobos .  Edisi
145 Tahun XIII Oktober 2011.
Van.,  M.V.,  A.B.  Abol-Munafi.,  A.W.M. Effendy,  and  M.  Awang  Soh. 2005.  The  effect  of  different  diets on  proteolytic  enzyme  activity  of early  marble  goby  ( Oxyeleotris marmoratus )  larvae. J.  of  Animal
Veterinary  Advances, 4(10):835- 838. Diterima : 25 Februari 2014 Direview : 11 April 2014 Disetujui : 20 April 2014