## PENGARUH KEMASAN TERHADAP AKTIVITAS ANTI BAKTERI SUSPENSI ERITROMISIN SETELAH PENYINARAN DENGAN SINAR MATAHARI LANGSUNG
Submitted : 27 April 2016
Edited : 17 April 2016
Accepted : 25 April 2016
Nurul Hidayati
DIII Farmasi Stikes Muhammadiyah Klaten Email : nurulhidayati1983@gmail.com

## ABSTRACT
Erythromycin is a type of antibiotic medication. The drug is unstable when in the water because  it  can  undergo  hydrolysis  process. Fortunately,  it  can  be  prevented  by  making  dry syrup  dosage  form.  In  addition  to  hydrolysis,  erythromycin  can  also  have  photolysis.  For preventing  the  reaction,  it  can  be  done  by  packing  the  medication  in  an  opaque  and  tightly closed  container.  This  research  was  conducted  to  determine  the  effect  of  packaging  on  the stability  of  erythromycin  suspension  that  has  been  exposed  to  direct  sunlight  within  a  period. The  research  was  done  by  exposing  erythromycin  suspension,  which  was  packed  with  three kinds  of  color  packaging  namely  brown,  translucent, and  opaque,  for  30  minutes,  60  minutes, 90 minutes and 120 minutes, then continued by a microbiological test with a diffusion method to determine  the  activity  of  erythromycin  against  Staphylococcus  Aureus. The  results of  the research showed the existence of diameter of barrier areas around the spots that were given a test solution. It means that the test solution has antibiotic activity against bacteria. Preparations packaged  in  brown  color  have  higher  inhibition  when compared  with  the  opaque  and translucent.  It  shows  that  the  erythromycin  suspension  packaged  in  brown  colors  was  more efficient in stabilizing the preparation.
K eywords : Erythromycin,  Staphylococcus  Aureus  ATCC  25923,  hydrolysis,  dry  syrup, suspension, photolysis, package, expose

## PENDAHULUAN
Penentuan  stabilitas  sediaan  suatu bahan  pada  tahap  prefomulasi  mutlak dilakukan  untuk  dapat  menentukan  bentuk sediaan  yang  sesuai.  Hal  ini  disebabkan karena stabilitas fisika dan kimia bahan obat, baik secara tersendiri maupun bersama-sama dengan  bahan  tambahan  dalam  formulasi, merupakan  kriteria  yang  paling  penting untuk  berhasilnya  suatu  produk  obat. Stabilitas  obat  dapat  dipengaruhi  oleh
adanya modifikasi terhadap lingkungan obat itu  sendiri, yaitu  dengan  mengubah-ubah kondisi penyimpanan (1) .
Ketidakstabilan obat disebabkan karena  proses  kimia  atau  fisika  kimia,
sehingga mengakibatkan terjadinya penurunan  kadar  obat.  Secara  kimia  proses kerusakan  yang  paling  sering  meliputi hidrolisis,  oksidasi  dan  fotolisis.  Hidrolisis merupakan  suatu  proses  solvolisis, di  mana molekul (obat) berinteraksi dengan molekul-
molekul  air  menghasilkan  produk  pecahan dari  konstitusi  kimia  yang  berbeda (2) .  Cara yang  paling  mudah  dan  efektif  untuk menstabilkan  obat  dari  hidrolisis  adalah dengan  membatasi  keberadaan  air  di lingkungan sediaan obat yang bersangkutan. Fotolisis  terjadi  karena  adanya  proses absorbsi  cahaya  atau  energi  radiasi  oleh suatu  molekul  secara  berurutan.  Suatu proses  degradasi  fotolisis  dapat  diturunkan dengan  cara  menyimpan  sediaan  dalam kemasan yang tidak tembus cahaya (1) .
Eritromisin  adalah  salah  satu  anti bakteri golongan makrolida yang tidak larut dalam  air  dan  tidak  stabil  jika  disimpan dalam  air (3) .  Eritomisin  juga  tidak  stabil apabila  terkena  paparan  cahaya  karena eritromisin  dapat  menyerap cahaya pada daerah ultraviolet (3) , oleh karena itu eritromisin dibuat dalam bentuk sirup kering dan  disimpan  dalam  kemasan  yang  sesuai sehingga  terlindung  dari  cahaya.  Kemasan harus  sesuai  untuk  menjaga  kestabilan preparat  farmasi  dalam  jangka  waktu  lama dan  harus  aman  serta  efektif  pada  saat digunakan  pasien (2) .  Pengujian  kemampuan kemasan mencegah fotolisis dapat dilaksanakan dengan pemaparan sinar matahari langsung, hal ini dikarenakan sinar matahari  langsung  tersusun  oleh  sederet sinar  yang  memiliki  panjang  gelombang tertentu  dengan  kemampuan  melewati  suatu objek  di  mana  objek  akan  menyerap  sinar dengan  panjang  gelombang  tertentu  dan membiarkan  sinar  yang  tidak  diserap  tetap lewat.
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui stabilitas eritromisin dilihat dari pengaruh  kemasan  terhadap  aktifitas  anti bakteri  eritromisin  sirup  kering  yang  telah direkonstitusi  dengan  air  suling  dan  telah dilakukan  pemaparan  dengan  sinar  matahari secara langsung.
Pengujian stabilitas suspensi eritromisin terhadap proses fotolisis dilakukan  dengan  cara  pemaparan  sediaan
yang  dikemas  dalam  berbagai  macam kemasan  dengan  sinar  matahari  secara langsung  dengan  jangka  waktu  tertentu  dan secara  berkala.  Kemasan  yang  digunakan adalah  kemasan  beda  warna  yaitu  bening, coklat dan opak.
Pengujian  stabilitas  suatu  sediaan dapat  dilakukan  secara  fisika,  kimia  dan mikrobiologi.  Pada  penelitian  ini  pengujian stabilitas  suspensi  eritromisin  dilakukan secara  mikrobiologi,  di  mana  pengujian secara mikrobiologi dapat dilakukan apabila pengujian  secara  fisika  maupun  kimia  tidak memungkinkan.  Pengujian  aktivitas  anti bakteria  suspensi  eritromisin  dilakukan dengan metode difusi terhadap Staphylococcus  aureus  ATCC  25923.  Hasil dari  pengujian  aktivitas  anti  bakteri  dengan metode  difusi  dinyatakan  dalam    di sekeliling  sumuran  media  MHA  yang  telah diberi larutan uji.

## METODE PENELITIAN Alat dan Bahan
Bahan yang digunakan dalam penelitian  ini  meliputi:  eritromisin  stearat, laktosa,  kalium  dihidrogen  fosfat  0,2  M, natrium  hidroksida  0,2  N,  air  suling  bebas CO 2 ,  CMC  Na,  nipagin,  essence  strawberi, zat  pewarna,  larutan  dapar  fosfat  no.  3, metanol, Staphylococcus  aureus  ATCC 25923,  media Brain  Heart  Infusion (BHI), Mueller Hinton Agar (MHA), Nutrient Agar (NA).
Alat yang digunakan dalam penelitian ini  meliputi:  timbangan  gram  elektrik  dan timbangan  analitis,  motir  dan  stampher, ayakan  no.  16  dan  no.  30,  kemasan warna coklat,  bening  dan  opak,  aluminium  foil, alat alat gelas, cawan Petri steril, jarum ose, boor  prop,  kapas  lidi  steril,  inkas,  oven pemanas,  inkubator,  mikropipet,  jangka sorong.
Prosedur Penelitian 1. Pembuatan Suspensi Eritromisin Tabel 1. Formula Suspensi Eritromisin Komposisi Berat (gram) Eritromisin stearat KH 2 PO 4
NaOH Laktosa CMC Na Nipagin 2,4 0,409 0,070 18,75 1,2 0,06 Suspensi eritromisin dibuat sebanyak 3 sampel dengan bahan bahan pada Tabel 1. NaOH dilarutkan dengan 10  ml  air  suling  yang  sudah  digunakan untuk  melarutkan  pewarna dan essence dalam mortir. Kemudian di atas larutan ini ditaburkan  CMC  Na  dan  diaduk sampai  diperoleh  suspensi.  Dalam mortir  lain,  laktosa,  nipagin  dan KH 2 PO 4 digerus  dan  dicampur  sampai homogen kemudian ditambahkan dalam suspensi  CMC  Na  di  atas.  Campuran tersebut  kemudian  diaduk  homogen sampai  diperoleh  masa  granul.  Masa granul tersebut kemudian diayak
dengan  menggunakan  ayakan  no. 16 hingga  diperoleh  masa  granul  dasar yang  siap  untuk  di oven.  Setelah  di oven,  diperoleh  granulat  (1)  lalu  diuji kandungan kadar airnya.
Jika kandungan  kadar  air  dalam  granul sudah  memenuhi  syarat,  maka  granulat (1)  diayak  dengan  ayakan  no.  30, kemudian diperoleh granulat (2).
Granulat  (2)  ditambahkan  dengan eritromisin  stearat  sehingga  menjadi granulat  (3)  yang  kemudian  siap  untuk diisikan  dalam kemasan. Setelah  itu masing-masing  sediaan  direkonstitusi dengan air suling ad 60 ml.

## 2. Pengujian Aktivitas Anti Bakteri
a. Pembuatan Suspensi Bakteri

## Staphylococcus aureus ATCC 25923

## Koloni Staphylococcus  aureus
ATCC  25923 diambil  dari  biakan murni sebanyak  1 ose kemudian disuspensikan  ke  dalam  media  BHI cair dan di inkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam.  Biakan  tersebut diambil  200  µl dan  dimasukkan  ke dalam BHI DS, kemudian diinkubasi selama 3-5 jam, selanjutnya diencerkan  dengan air  suling steril sampai  didapat  kekeruhan  yang sama dengan standart Brown II.
b. Penyiapan Larutan Uji
Suspensi eritromisin yang belum mengalami proses penyinaran dilakukan  proses  penyiapan terlebih dahulu. Masing-masing sediaan dilakukan  penyinaran  selama  30 menit, 60  menit,  90  menit  dan  120 menit.  Tiap  30  menit,  sediaan larutan  uji  dilakukan  penyiapan larutan  uji  dengan  cara sejumlah volume  zat  uji diukur  seksama, dikocok  dan  bebas  gelembung udara, dilumatkan  selama  4  ±  1 menit dalam blender kaca kecepatan tinggi dengan metanol P secukupnya hingga  diperoleh  larutan  persediaan yang  mengandung  setara  kurang lebih  1  mg  Eritromisin  per  ml. Larutan  persediaan  ini diencerkan secara  kuantitatif  dengan  larutan dapar fosfat no.  3 hingga  diperoleh larutan  uji  yang  mempunyai  kadar diperkirakan  setara  dengan  aras dosis tengah larutan baku. Selanjutnya larutan uji dilakukan uji aktivitas anti bakteri. c. Pengujian Aktivitas Anti Bakteri Pengujian aktivitas anti  bakteri dilakukan dengan menggunakan metode  difusi. Disiapkan  1  media MHA  yang  sudah  ditanam  dengan
bakteri  uji,  dengan 1 sumuran  diisi larutan  baku dan 3  sumuran  diisi dengan  larutan  uji,  yaitu  larutan dalam  3  macam  kemasan  (coklat, bening  dan  opak).  Semua  sumuran diisi dengan  larutan  tersebut  dengan konsentrasi  100  ppm  sebanyak  20 µl.  Pengujian  dilakukan  sebanyak  4 kali dengan 3 replikasi tiap
pengujiannya.  Pertama,  larutan  uji tersebut  diisikan  setelah  sediaan dipapari  dengan  sinar  matahari selama  30  menit,  kedua  setelah  60 menit,  ketiga  setelah  90  menit  dan keempat  setelah  120  menit.  Semua larutan  uji  setelah  diuji  harus disimpan dalam ruangan yang terlindung  dari  cahaya  dan  ditutup dengan  aluminium  foil  sampai digunakan untuk uji yang selanjutnya. Selain itu disiapkan lagi 1  media  MHA  yang  sudah  ditanam dengan  bakteri  uji  kemudian  dibuat 3  sumuran.  Satu  sumuran  berisi larutan  baku,  1  sumuran  berisi larutan  blangko  (sediaan  tanpa eritromisin)  dan  1  sumuran  berisi larutan uji tanpa mendapatkan
perlakuan  penyinaran. Kemudian
cawan-cawan  tersebut  diinkubasi pada suhu 37 ˚C selama 24 jam.

## 3. Metode Analisis Data
Hasil  pengujian  adanya aktivitas anti  bakteri dari  suspensi  eritromisin dapat diamati setelah cawan di inkubasi selama  24  jam. Data  yang  diperoleh adalah Diameter Daerah Hambat (DDH) dari bakteri uji yang ditunjukkan  dengan  daerah  jernih  di sekeliling sumuran yang tidak ditumbuhi  oleh  bakteri,  merupakan tanda  bahwa  larutan  yang  disuntikkan mempunyai aktivitas anti bakteri. Daerah  hambatan  pertumbuhan  dari masing-masing suspensi yang disimpan
dalam  kemasan warna coklat,  bening dan  opak  baik  yang  belum  maupun yang  telah  dipapari  oleh  sinar  matahari selama  30  menit,  60  menit, 90  menit dan  120  menit diukur  diameternya dengan  menggunakan  jangka  sorong. Hasil pengukuran dengan jangka sorong dibuat  dalam  satuan  mm  kemudian dianalisa  secara  statistik  varian  2  arah dengan  taraf  kepercayaan  atau  batas kepercayaan 95%.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil uji dari percobaan ini ditunjukkan  dengan  adanya  diameter  daerah hambatan  pertumbuhan  bakteri.  Diameter daerah  hambatan  pertumbuhan  bakteri terlihat dengan adanya daerah jernih sebagai tanda  tidak  tumbuhnya  bakteri  di  sekeliling sumuran  media  MHA  sebagai  akibat  dari disuntikkannya  larutan  uji.  Besar  kecilnya hambatan pertumbuhan bakteri dapat ditunjukkan  dengan  besar  kecilnya daerah jernih  di  sekeliling  sumuran,  semakin  besar aktivitas anti bakterinya maka semakin besar nya dan semakin  kecil aktivitasnya semakin kecil  pula    pertumbuhan  bakteri  tersebut. Hasil  uji  aktivitas anti  bakteri suspensi eritromisin  terhadap Staphylococcus  aureus ATCC  25923 dapat  dilihat  pada  Tabel 2, Tabel 3 dan Tabel 4.
Pengujian  stabilitas  sediaan  suspensi eritromisin  pada  penelitian  ini  dilakukan secara mikrobiologi dengan uji aktivitas anti bakteria  dengan  menggunakan  metode difusi. Volume larutan uji yang dimasukkan ke dalam sumuran masing-masing adalah 50 µl  dengan  konsentrasi  100  ppm  dan  masa inkubasi selama 24 jam pada suhu 37 ºC.
Sesaat setelah suspensi kering
eritromisin  dicampur  dengan air  suling sebagai cairan pembawa kemudian dimasukkan  ke sumuran  media  MHA  untuk digunakan  sebagai  pembanding  larutan  uji yang  telah  dipapari  oleh  sinar  matahari dengan  jangka  waktu  tertentu  dan  secara
berkala  yaitu  30  menit,  60  menit,  90  menit dan 120 menit. Sediaan suspensi eritromisin dibuat  dengan  menggunakan  larutan  dapar fosfat  pH  7,  oleh  karena  itu  untuk mengetahui  apakah  larutan  dapar  fosfat tersebut  memberikan  hambatan  terhadap pertumbuhan  bakteri  maka  larutan  dapar tersebut  juga  diuji  dengan  perlakuan  yang sama  yaitu  dimasukkan  ke  sumuran  media MHA. Selain larutan uji sebelum mengalami penyinaran dan larutan dapar, juga digunakan  larutan  blangko  yaitu  larutan  uji tanpa  mengandung  zat  aktif  eritromisin sebagai  kontrol  negatif  dan  juga  digunakan larutan  baku  sebagai  kontrol  positif  yang juga  digunakan  untuk  mengetahui  bahwa konsentrasi  yang  dibuat  yaitu  100  ppm adalah  tepat  sehingga  dalam  1  cawan  dapat digunakan  untuk  4  sumuran  sehingga  tidak menimbulkan saling tumpang tindih maupun saling  bersentuhan  antara    satu  larutan  uji dengan    yang  lain  sehingga  memudahkan dalam  pengukuran  diameter.  Beberapa larutan tersebut digunakan sebagai pembanding  dalam  uji  aktivitas anti  bakteri untuk  mengetahui  apakah  ada  perbedaan ukuran
dengan  larutan uji setelah
mengalami penyinaran dengan sinar
matahari langsung.
Dari  hasil  pengamatan,  hasil  uji aktivitas anti  bakteri suspensi  eritromisin terhadap Staphylococcus  aureus  ATCC
25923 untuk masing-masing kemasan memberikan
hasil  yang  berbeda  dari masing-masing sediaan yang dikemas dalam beberapa warna kemasan kemudian dibandingkan dengan  dari larutan baku dan larutan  blangko  yang  diukur  menggunakan jangka sorong.
Hasil analisa statistika dua arah untuk suspensi  eritromisin  terhadap Staphylocous aureus adalah terlihat adanya pengaruh yang bermakna  antara  sediaan  yang  dikemas dalam  kemasan warna coklat,  bening dan opak  setelah  dipapari dengan  sinar  matahari selama  30  menit,  60  menit,  90  menit  dan
120  menit,  ini  ditunjukkan  dengan  hasil  F hitung > F tabel.
Penentuan  laju  penurunan  aktivitas dilakukan  dengan  membuat  kurva lama penyinaran  vs    rata-rata  untuk  masing- masing  kemasan  seperti  pada  Gambar 2. Hasil  perhitungan  regresi  linear  didapatkan harga slope yang menyatakan laju penurunan  aktivitas    dari  masing-masing sediaan  yang  disimpan  dalam  kemasan warna coklat, bening dan opak, dapat dilihat pada Tabel 4.
Hasil  pengamatan  pada  tabel 4 tidak adanya  daerah  jernih  di  sekeliling  sumuran larutan  dapar  menunjukkan  bahwa  larutan dapar fosfat yang digunakan dalam suspensi eritromisin  tidak  memberikan  hambatan terhadap  pertumbuhan  bakteri,  begitu  pula dengan  larutan  blangko  sebagai  kontrol negatif  yang  tidak  menunjukkan  adanya hambatan pertumbuhan bakteri.
Diameter  daerah  hambat  larutan  baku dan  larutan  uji  suspensi  eritromisin  tanpa penyinaran  (lama  penyinaran  0  menit) kemudian dilakukan  uji  analisis  statistika  1 arah  dengan  taraf  kepercayaan  95  % diperoleh hasil bahwa F hitung (2,1586) < F tabel  (9,55)  ini  berarti  tidak  ada  beda  yang bermakna  antara  larutan  baku  eritromisin stearat  dengan  sediaan  suspensi  eritromisin stearat tanpa mendapatkan perlakuan penyinaran.
Larutan  uji  yang  disimpan  dalam kemasan warna coklat  menunjukkan  ukuran yang  lebih  besar  jika  dibandingkan  dengan yang  disimpan  dalam kemasan opak dan bening.  Hal  ini  dimungkinkan  karena  sinar matahari  memancarkan sinar  pada  panjang gelombang  400  nm  sampai 750  nm sedangkan  kemasan bening  hanya  mampu menghambat cahaya pada panjang
gelombang  < 325  nm,  sedangkan  kemasan coklat  mampu  menghambat  cahaya  lebih banyak pada panjang gelombang < 450 nm.
Penurunan
setelah sediaan mendapatkan  perlakuan  penyinaran  dengan
sinar  matahari  tiap  30  menit menunjukkan hasil yang tidak terlalu tinggi, ini dimungkinkan  karena  sinar  matahari  yang menyinari  sediaan  tidak  selalu  konstan  dari waktu ke waktu.
Opak yang diperkirakan akan memberikan  hasil  yang  lebih  baik  daripada kemasan warna coklat  ternyata hasilnya lebih  kecil,  ini  dimungkinkan  karena kemasan  opak  yang  digunakan  berupa plastik  yang  tidak  terlalu  tebal  jadi  sinar matahari  yang  diserap  jauh  lebih  banyak dibandingkan dengan kemasan coklat. Ketebalan yang berbeda dari masing-masing kemasan  yang  digunakan  juga  berpengaruh dalam  proses  penghambatan  sinar  matahari, kemasan  bening  mempunyai  ketebalan  2,75 mm,  kemasan  coklat  3,25  mm  sedangkan kemasan  opak  0,75  mm.  Hal  ini  yang  juga memungkinkan  kemasan  opak  mempunyai di  bawah  kemasan  coklat.  Selain  itu, dimungkinkan  pula  terjadinya  penyerapan
produk  obat  eritromisin  oleh  kemasan plastik  sehingga  berpengaruh  terhadap potensi  eritromisin  yang  berkurang  dalam menghambat  pertumbuhan Staphylococcus aureus ATCC 25923.
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa sediaan  suspensi  eritromisin  yang  dikemas dalam  kemasan  coklat  lebih  efektif  dalam menstabilkan  suspensi  eritromisin,  selain dilihat  dari  besar  kecilnya    juga  dilihat  dari hasil  perhitungan  laju  penurunan  aktivitas dari  masing-masing  sediaan yang  dikemas dalam  kemasan warna coklat,  bening  dan opak. Sediaan yang dikemas dalam kemasan warna coklat  menunjukkan  laju  penurunan aktivitas  yang  lebih  kecil  bila  dibandingkan dengan  sediaan  yang  dikemas dalam kemasan bening dan opak, ini berarti bahwa sediaan  yang  dikemas  dalam warna coklat paling  stabil  dibandingkan  dengan  kemasan bening dan opak.

## Tabel 2.
Diameter  Daerah  Hambatan  Suspensi  Eritromisin  stearat  (100  ppm)  terhadap Staphylococcus aureus ATCC 25923 Lama penyinaran (menit) Diameter Larutan Uji (Warna kemasan)
Bening (mm)
Coklat (mm) Opak (mm) I II III X
I II
III X I
II III x 0 24,40 24,80 24,55 24,58 24,40 24,80 24,55 24,58 24,40 24,80 24,55 24,58 30 23,10 22,55 22,50 22,72 24,25 24,05 24,10 24,13 24,00 23,85 23,70 23,85 60 22,10 22,00 22,15 22,08 23,70 23,45 23,20 23,45 23,65 23,10 23,40 23,38 90 21,90 21,80 21,60 21,77 23,00 22,90 22,50 22,80 22,60 22,35 22,15 22,37 120 21,50 21,05 21,10 21,22 22,10 21,80 21,75 21,88 21,85 21,60 21,55 21,67
Gambar 2. Kurva hubungan antara lama penyinaran vs  rata-rata masing-masing kemasan
Tabel 3. Diameter Daerah Hambatan Larutan  Baku,  Blangko  serta Dapar  terhadap Staphylococcus aureus ATCC 25923 Larutan baku (mm) Larutan blangko (mm) Dapar (mm) 24,80 0 0 24,95 0 0 24,90 0 0 Tabel 4. Hasil  perhitungan  regresi  linear dari masing-masing kemasan Warna Kemasan Persamaan (y = a + b x) R Coklat y = 24,7264 - 0,0228 x - 0,991781795 Bening y = 24,0098 - 0,0256 x - 0,935736969 Opak y = 24,6330 - 0,0244 x - 0,994694519

## SIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  dapat disimpulkan  bahwa  kemasan  mempunyai pengaruh terhadap stabilitas suspensi
eritromisin.  Dari  hasil  yang  diperoleh, kemasan warna coklat  lebih  efektif  dalam menstabilkan  suspensi  eritromisin  terhadap reaksi fotolisis dibandingkan dengan kemasan bening dan opak.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Connors,  K.A.,  Amidon,  G.L.,  Stella, V.J.,  1992, Stabilitas  Kimiawi  Sediaan Farmasi,  Edisi  II,  diterjemahkan  oleh Didik  Gunawan,  Jilid  1,  halaman  73, 79, 101-107, 308-313.
2. Ansel,  Howard.  C.,  1989, Pengantar Bentuk  Sediaan  Farmasi,  Edisi  IV,  UI Press,  Jakarta;  59,  155-156,  160-162, 353-374.
3. Rahman,  I.R.,  Kusumowati,  I.T.D., Indrayudha  P,  Sukmawati  A,  2011,  Uji
Stabilitas  Fisik  dan  Daya  Antibakteri suspensi Eritromisin dengan Suspending  Agent  Pulvis  Gummi Arabici,  Pharmacon,  Pharmaceutical Journal  of  Indonesia,  Vol.12,  No.2;  44
– 49. 0 30 0 30 60 90 120 D ia m et er h a m b a t ra ta -r a ta ( m m ) Lama penyinaran (menit) Bening Coklat Opak