DOI: 10.24853/mujg.4.1.1-9

## Artikel Penelitian
Efek Hipoksia Sistemik Kronik Terhadap Aktivitas Spesifik Enzim Kreatin Kinase dan Kadar Kreatinin Otot Rangka Tikus
Ninik Mudjihartini 1* , Dwi Harmelia 2 , Sri Widia AJ 1
1 Departemen Biokimia dan Biologi Molekuler, Fakultas Kedokteran, Universitas Indonesia, Indonesia
2 Program Magister Ilmu Biomedik, Fakultas Kedokteran, Universitas Indonesia, Indonesia
* Corresponding author : ninikbiokim@gmail.com

## ABSTRACT
Background:  Hypoxia  is  the  result  of  an  imbalance  between  oxygen  supply  and  oxygen demand.  Under  hypoxic  conditions,  skeletal  muscles  are  required  to  produce  sufficient amounts of ATP to maintain their function with limited O 2 . Several diseases related to aging are often accompanied by hypoxic conditions, as well as diseases caused by heart and lung disorders. Chronic hypoxia often occurs in the elderly population due to ischemic injury that induces  a  number  of  adaptive  responses  to  the  microenvironment  of  cells.  Purposes:  to  see how  the  phenomenon  of  changes  in  metabolism  as  an  energy  source  in  skeletal  muscle  in chronic  systemic  hypoxia,  by  measuring  the  specific  activity  of  CK  and  creatinine  levels  of skeletal muscle in rats. Methods: Hypoxic rats were prepared by placing them in a hypoxia chamber which was fed with a mixture of 10% oxygen and 90% nitrogen. Specific CK activity was  measured  spectrophotometrically  using  the  Creatine  kinase  N-acetyl-L-cysteine (Randox®) kit, creatinine levels were measured by the Folin method, while total muscle protein was measured by the Christian-Warburg method. Results: Specific CK muscle activity of rats in groups 1H, 3H, 5H, 7H, and 14H decreased significantly compared to group K (Kruskal- Wallis) (P<0.05). Muscle creatinine levels in the 1H and 14H groups decreased significantly compared to the K group, while the 3H, 5H, and 7H groups increased significantly compared to  the  K  group  (Kruskal-Wallis)  (P<0.05).  Conclusion:  Chronic  systemic  hypoxia  causes  a decrease in the specific CK activity of rat muscles in all groups compared to controls. ATP to form  creatine  phosphate  decreases  causing  free  creatine  to  increase.  The  results  of  the oxidation of free creatine to creatinine increased as seen in groups 3H, 5H, and 7H.

## Keywords: creatinine, hypoxia, rat skeletal muscle, specific activity of creatine kinase

## ABSTRAK
Latar  Belakang :  Hipoksia  adalah  hasil  dari  ketidakseimbangan  antara  suplai  oksigen  dan kebutuhan  oksigen.  Pada  kondisi  hipoksia,  otot  rangka  dituntut  untuk  menghasilkan  ATP dalam jumlah yang cukup untuk mempertahankan fungsi kontraksi dengan O 2 yang terbatas. Beberapa  penyakit  terkait  penuaan  sering  disertai  dengan  kondisi  hipoksia,  demikian  juga penyakit yang disebabkan oleh kelainan jantung dan paru. Hipoksia kronik sering terjadi pada populasi lanjut usia oleh karena cedera iskemik yang menginduksi sejumlah respons adaptif terhadap lingkungan mikro selnya. Tujuan : Penelitian ini untuk melihat bagaimana fenomena perubahan  metabolisme  salah  satu  sumber  energi  pada  otot  rangka  pada  kedaan  hipoksia sistemik kronik, dengan mengukur aktivitas spesifik CK dan kadar kreatinin otot rangka pada tikus. Metode :  Tikus  hipoksia  dibuat  dengan  cara  memasukkan  tikus  ke  dalam hypoxia chamber yang  dialiri  campuran  gas  oksigen  10%  dan  nitrogen  90%.  Aktivitas  spesifik  CK
DOI: 10.24853/mujg.4.1.1-9
diukur  secara  spektrofotometri  menggunakan  kit Creatine  kinase  N-acetyl-L-cysteine (Randox®),  kadar  kreatinin  dengan  metode  Folin,  sedangkan  protein  total  otot  tikus  diukur dengan metode Christian-Warburg. Hasil: Aktivitas spesifik CK otot tikus kelompok 1H, 3H, 5H,  7H,  dan  14H  menurun  secara  bermakna  dibandingkan  dengan  kelompok  K  (Kruskal- Wallis) ( P <0,05). Kadar kreatinin otot tikus kelompok 1H dan 14H menurun secara bermakna dibanding dengan kelompok K, sedangkan kelompok 3H, 5H, 7H  meningkat secara bermakna dibanding  dengan  kelompok  K  (Kruskal-Wallis)  (P<0,05). Simpulan :  Hipoksia  sistemik kronik menyebabkan penurunan aktivitas spesifik CK  otot tikus semua kelompok dibanding kontrol. ATP untuk membentuk kreatin fosfat menurun menyebabkan kreatin bebas meningkat. Hasil oksidasi kreatin bebas menjadi kreatinin meningkat terlihat pada kelompok 3H, 5H, dan 7H.
Kata kunci: aktivitas spesifik kreatin kinase, hipoksia, kreatinin, otot rangka tikus

## PENDAHULUAN
Otot rangka merupakan otot yang menempel  pada  tulang,  berfungsi  sebagai alat  gerak  aktif  untuk  membantu  proses pergerakan  tulang  (1).  Proses  pergerakan tulang  ini  membutuhkan  energi  berupa adenosin trifosfat (ATP). Dengan demikian ATP harus selalu disediakan agar kontraksi otot  dapat  terus  berlanjut.  ATP  yang dibutuhkan untuk melakukan kontraksi otot didapatkan  dari  tiga  jalur  metabolisme, yaitu: 1) pemindahan fosfat berenergi tinggi dari  kreatin  fosfat  ke  adenosine  difosfat (ADP)  (sumber  segera);  2)  fosforilasi oksidatif  (sumber  utama  apabila  tersedia oksigen),  jalur  ini  memerlukan  glukosa yang  berasal  dari  simpanan  glikogen  otot atau glukosa dan asam lemak yang tersedia di darah; dan 3) glikolisis anaerob (sumber utama apabila tidak tersedia oksigen).
Jumlah  ATP  yang  tersedia  di  otot rangka  hanya  dapat  menghasilkan  energi untuk  kontraksi  selama  lima  belas  detik, sehingga  ATP  harus  terus  menerus disediakan  melalui  salah  satu  atau  lebih sumber  di  atas,  bergantung  pada  kondisi metabolik  (2).  Ketika  otot  pertama  kali berkontraksi,  energi yang  digunakan berasal dari simpanan kreatin fosfat. Lebih dari 90% total kreatin yang ada dalam tubuh terdapat  di  otot,  40%  diantaranya  dalam
bentuk  kreatin  bebas  dan  60%  dalam bentuk  kreatin  fosfat  (2).  Kreatin  bebas  di otot  akan  segera  teroksidasi  dalam  bentuk kreatinin.  Kreatin  fosfat  berperan  dalam proses  metabolisme  energi  secara  anaerob untuk menghasilkan ATP (3). Apabila otot berkontraksi,  maka  kreatin  fosfat  akan dihidrolisis  dan  mengalami  defosforilasi menjadi kreatin dan fosfat berenergi tinggi yang  akan  berikatan  dengan  adenosin difosfat  (ADP)  sehingga  menghasilkan ATP (4). Sebagian kreatin akan mengalami fosforilasi  kembali  menjadi  kreatin  fosfat dan sebagian lagi akan mengalami oksidasi menjadi kreatinin. Proses defosforilasi dan fosforilasi  kreatin  fosfat  dikatalisis  oleh enzim kreatin kinase.
Kreatinin  adalah  produk  akhir  dari metabolisme kreatin yang dibentuk dengan cara non enzimatik di otot dan tidak dapat terfosforilasi  lagi,  sehingga  dikeluarkan melalui  urin.  Jumlah  kreatinin  yang dihasilkan  setara  dengan  massa  otot  yang dimilikinya (4–6). Penelitian Hultman dkk, memperlihatkan bahwa peningkatan ekskresi  kreatinin  urin  sesuai  dengan hilangnya  kreatin  di  otot  (6).  Pemeriksaan yang lebih akurat tentang jumlah kreatinin di  dapatkan  dengan  cara  biopsi  otot  (7). Otot  merupakan  salah  satu  jaringan  yang sering  dihadapkan  pada  kondisi  hipoksia,
DOI: 10.24853/mujg.4.1.1-9
contohnya  pada  saat  atlit  yang  melakukan lari  cepat  ( sprint )  (8,9).  Ketersediaan oksigen  yang  berkurang  disebut  hipoksia, dilaporkan  dapat  menginduksi  adaptasi metabolik dan hilangnya massa otot rangka (10).
Organisme  eukariotik  mempunyai mekanisme adaptif untuk menjaga homeostasis dalam upaya mengatasi hipoksia baik pada tingkat sistemik maupun seluler  (9).  Otot  termasuk  salah  satu jaringan  yang  mampu  beradaptasi  karena mempunyai  mekanisme  sendiri  untuk melindungi  diri.  Meskipun  demikian, apabila  keadaan  hipoksia  berkelanjutan maka  kondisi  tersebut  kemungkinan  dapat mempengaruhi  jaringan  otot  itu  sendiri (11,12). Hasil penelitian pada otot hipoksia terjadi  adaptasi  yang  dapat  dilihat  dengan menurunnya  kapasitas  oksidatif  diikuti penurunan  kapasitas  kerja  aerobiknya  (9). Otot  rangka  yang  terpapar  hipoksia  terus menerus  akan  memberi  efek  merugikan pada strukturnya. Hipoksia dapat menyebabkan  penurunan  diameter  serat dan  meningkatkan  stres  oksidatif  yang mempengaruhi  kinerja  otot  (11–13).  Pada kondisi  hipoksia  pemenuhan  energi  untuk otot  rangka  berasal  dari  dua  jalur,  yaitu glikolisis  anaerob  dan  kreatin  fosfat. Glikolisis anaerob merupakan jalur metabolisme  untuk  menghasilkan  ATP menggunakan  simpanan  glukosa  yang sebagian  besar  dapat  diperoleh  dari glikogen  otot,  glukosa  yang  terdapat  di dalam  aliran  darah,  dan  glukoneogenesis. Glukoneogenesis adalah proses pembentukan  glukosa  atau  glikogen  dari substrat  selain  karbohidrat  seperti  asam amino,  laktat,  gliserol  dan  propionat. Jumlah  ATP  yang  dihasilkan  oleh  proses glikolisis  anaerob  sebanyak  2  ATP,  jauh lebih sedikit dibandingkan dengan
glikolisis aerob yang menghasilkan 38 ATP (11,12,14).
Kreatin fosfat dibentuk melalui reaksi yang reversibel, dan dikatalisis oleh enzim kreatin  kinase  (CK)  yang  mempunyai peranan penting dalam proses metabolisme energi  secara  anaerobik  di  otot  untuk menghasilkan ATP. Kreatin kinase ditemukan  dalam  sel  yang  memiliki kebutuhan energi tinggi antara lain di otot. Pada kondisi hipoksia, otot rangka dituntut untuk  menghasilkan  ATP  dalam  jumlah yang cukup untuk mempertahankan fungsi kontraksi dengan O 2 yang terbatas. Apabila otot  rangka  tersebut  mengalami  kondisi hipoksia sistemik yang berlangsung kronik maka  aktivitas  spesifik  kreatin  kinase  dan kadar kreatinin kemungkinan akan terpengaruh pada kondisi tersebut. Beberapa  penyakit  terkait  penuaan  sering disertai dengan kondisi hipoksia, demikian juga  pada  penyakit  yang  disebabkan  oleh kelainan  jantung  dan  paru  (15,16). Berangkat dari kenyataan tersebut penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui bagaimana  pengaruh  hipoksia  sistemik kronik  terhadap  aktivitas  spesifik  kreatin kinase dan kadar kreatinin pada otot rangka tikus.

## METODE
Penelitian ini merupakan studi eksperimental in vivo model hipoksia pada hewan  percobaan.  Hewan  percobaan  yang digunakan  adalah  tikus  jantan  ( Sprague dawley ) dengan berat 200 – 250 gram, dan umur  10  –  12  minggu.  Hewan  percobaan yang  digunakan  sebanyak  24  ekor.  Bahan percobaan yang diambil adalah otot rangka ekstremitas bawah kanan.
Tikus jantan sejumlah 24 ekor dibagi secara acak menjadi 6 kelompok perlakuan. Kelompok  K  adalah  kelompok  kontrol tanpa  perlakuan  hipoksia,  sedangkan
DOI: 10.24853/mujg.4.1.1-9
kelompok  1H,  3H,  5H,  7H  dan  14H ditempatkan dalam bilik hipoksia (Gambar 1.) yang dialiri campuran gas (O 2 : 10% dan N 2 :  90%)  dengan  durasi  waktu  berturut turut  1,  3,  5,  7,  dan  14  hari.  Air  dan makanan  standar  ( ad libitum )  disiapkan  di dalam  bilik  hipoksia.  Metode  hipoksia  ini mengikuti  cara  yang  telah  digunakan  oleh peneliti sebelumnya, dan sudah dinyatakan bahwa  perlakuan  tersebut  sesuai  dengan kondisi hipoksia sistemik kronik (17).
Gambar 1. Bilik hipoksia.
Kelompok  1H,  3H,  5H,  7H  dan  14H ditempatkan  dalam  bilik  hipoksia (Gambar 1.) yang dialiri campuran gas (O 2 :  10%  dan  N 2 :  90%)  dengan  durasi waktu  berturut  turut  1,  3,  5,  7,  dan  14 hari secara bergantian .
Aktivitas total CK diukur secara spektrofotometri menggunakan
kit
Creatine kinase N-acetyl L-cysteine
(Randox®), kadar kreatinin diukur dengan metode Folin, sedangkan protein otot tikus total  diukur  dengan  metode  Christian- Warburg  (18).  Aktivitas  CK  spesifik jaringan  otot  tikus  (U/mg  protein)  didapat dengan  cara  membagi  aktivitas  CK  total (U/L)  dengan  kadar  protein  otot  (mg/L protein).  Data  yang  didapat  dianalisis menggunakan software SPSS  22.0.  Uji normalitas  data  menggunakan  Shapiro- Wilk. Hasil sebaran tidak normal dan tidak homogen  sehingga  analisis  statistik  yang digunakan  adalah  uji  Kruskal-Wallis,  dan
dilanjutkan  dengan  uji  Post  Hoc  Mann- Whitney untuk mengetahui perbedaan antar perlakuan.  Perbedaan  antara  variabel dinyatakan bermakna bila P <0,05. Penelitian telah mendapatkan lolos kaji etik dengan nomor: 480/PT02.FK/ETIK/2010.

## HASIL
1. Hasil  pengukuran  aktivitas  spesifik kreatin kinase otot tikus masing-masing kelompok berturut-turut adalah sebagai berikut:    Kelompok  K  (5.392-6.313)
U/mg  protein,  1H  (0.555-0.608)  U/mg protein, 3H (1.028-2.567) U/mg protein, 5H (1.045-1.116) U/mg protein, 7H 0.415-2.082 U/mg protein, dan  14H  (1.327-6.163)  U/mg  protein. Analisis statistik menunjukkan perbedaan  yang  bermakna  (Kruskal- Wallis)  ( P <0,05)  antara  kelompok  K dengan kelompok 1H, 3H, 5H, 7H, dan 14H (Gambar 2.).
* berbeda bermakna
Gambar  2. Aktivitas  spesifik  kreatin  kinase  otot tikus  kelompok  K  (normoksia)  dan kelompok  hipoksia  (1H,  3H,  5H,  7H dan 14H)
2. Hasil  pengukuran  kadar  kreatinin  otot tikus masing-masing kelompok berturut-turut adalah sebagai berikut: K (0,216-0,395)  µg/mg  otot,  1H  (0,191- 0,265)  µg/mg  otot,  3H  (0,275-0,587) µg/mg  otot,  5H  (0,378-0,537)  µg/mg protein,  7H  (0,328-0,460)  µg/mg protein,  dan  14H  (0,111-0,239)  µg/mg
DOI: 10.24853/mujg.4.1.1-9
protein. Analisis statistik menunjukkan perbedaan  yang  bermakna  (Kruskal- Wallis)  (P<0,05)  antara  kelompok  K dengan  1H,  3H,  5H,  7H  dan  14H (Gambar 3.).
* berbeda bermakna
Gambar 3. Kadar kreatinin otot tikus kelompok K
(normoksia)  dan  kelompok  hipoksia (1H, 3H, 5H, 7H dan 14H)

## PEMBAHASAN
Hasil  penelitian  ini  menunjukkan  bahwa aktivitas spesifik CK otot rangka tikus yang terpapar  hipoksia  1,3,5,7,  dan  14  hari menurun  secara  bermakna  dibandingkan dengan kontrol. Aktivitas enzim dipengaruhi  oleh  beberapa  faktor,  yaitu suhu,  konsentrasi  substrat,  konsentrasi enzim, dan pH. Enzim CK bekerja optimal pada pH 6-8, pada kondisi hipoksia terjadi penurunan  pH  (19).  Selain  itu  penelitian Rahmawati  S,  pada  otot  rangka  yang hipoksia  terjadi  peningkatan  konsumsi glukosa, yang terlihat pada hipoksia 14 hari dan  hipoksia  21  hari  (20).  Hal  ini menunjukkan  terjadinya  pergeseran  jalur metabolisme  dari  glikolisis  aerob  ke glikolisis  anaerob  dan  mengakibatkan penurunan produksi ATP. Penurunan ATP berarti  ketersediaan  substrat  menurun, sehingga aktivitas CK ke arah kiri (kreatin fosfat  +  ADP  kreatin  +  ATP) membentuk  kreatin  fosfat  juga  menurun.
Pada  glikolisis  anaerob  selain  terjadi penurunan  produksi  ATP  juga  akan menyebabkan  penurunan  pH  darah  karena piruvat  sebagai  produk  akhir  akan  diubah menjadi laktat (20). Pada kondisi hipoksia upaya perolehan energi dicapai juga dengan cara memecah triasilgliserol dan
mengoksidasi  asam  lemak,  sehingga  akan menghasilkan  benda  keton.  Penumpukan badan keton juga menyebabkan penurunan pH  darah  yang  berakibat  menurunnya aktivitas spesifik enzim CK.
Kadar  kreatinin  pada  kelompok hipoksia  1  dan  14  hari  mengalami penurunan  dibanding  dengan  kontrol.  Hal ini  disebabkan  karena  kreatin  hasil penguraian  kreatin  fosfat  kembali  diikat dengan  fosfat  menjadi  kreatin  fosfat sebagai  cadangan  energi  dalam  bentuk kreatin  fosfat  di  otot.  Oleh  karena  kreatin bebas  menurun  kreatinin  hasil  oksidasi kreatin  di  otot  juga  menurun,  sehingga kadar  kreatininnya  lebih  kecil  dibanding dengan kontrol. Pembentukan kreatin fosfat ini  merupakan  respons  adaptasi  dalam upaya  untuk  memenuhi  kebutuhan  ATP dalam  bentuk  cadangan  energi  berupa kreatin fosfat.
Pada hipoksia 3 hari terjadi peningkatan aktivitas spesifik CK, walaupun tetap lebih rendah dibandingkan dengan kontrol. Hal ini disebabkan karena adanya  proses  adaptasi  pada  otot  rangka tikus dalam upaya pemenuhan energi. Pada kondisi  hipoksia  sistemik  yang  berulang akan terjadi pengaktifan mekanisme adaptasi.  Mekanisme  adaptasi  dalam kondisi  hipoksia  diatur  oleh  gen  utama yang  mengalami  upregulasi  yaitu Hypoxia Inducible  Factor-1α (HIF-1α)  (21,22). Melalui aktivitas HIF-1α, ekspresi sejumlah gen akan mengalami peningkatan guna  mengurangi  ketergantungan  sel terhadap  oksigen  sekaligus  meningkatkan
DOI: 10.24853/mujg.4.1.1-9
pasokan oksigen ke jaringan. Pada kondisi hipoksia  terjadi  akumulasi  HIF-1α  dalam sitoplasma  dengan  cepat  (19).  Ekspresi beberapa  gen  terkait  hipoksia  termasuk HIF-1α  juga  meningkat  pada  kondisi hipoksia  di  jaringan  adiposa  dari  hewan model  obes  (23).  Peningkatan  aktivitas spesifik  CK  pada  hipoksia  3  hari  dapat dikatakan  sebagai  respons  adaptasi  untuk meningkatkan  perolehan  ATP  yang  akan digunakan untuk membentuk kreatin fosfat.
Otot  yang  mengalami  hipoksia beradaptasi  terhadap  keadaan  hipoksia yaitu  terjadi  penurunan  kapasitas  oksidatif (glikolisis  aerob),  sehingga  berakibat meningkatnya  kebutuhan  glukosa  untuk glikolisis  anaerob  (9).  Hasil  ini  sejalan dengan  penelitian  Vogel  dkk.  bahwa paparan hipoksia selama 14 hari menyebabkan uptake glukosa basal meningkat  pada  sel  multipoten  dari  sel punca jaringan adiposa (24). Glukosa yang digunakan
merupakan hasil glukoneogenesis, substrat utamanya adalah asam amino glukogenik, laktat dan gliserol (1,20,21,25,26). Ketersedian ATP dari hasil glikolisis  anaerob  menyebabkan  kreatin fosfat  dapat  kembali  dibentuk  pada  saat istirahat (27). Cadangan kreatin fosfat yang terbentuk  tersimpan  di  otot  dan  siap digunakan  kembali  untuk  menghasilkan ATP, maka akibatnya aktivitas CK kearah kanan  (kreatin  fosfat  +  ADP  kreatin  + ATP)  kembali  meningkat.  Meskipun demikian  ATP  yang  tersedia  tidak  cukup untuk  mengikat  semua  kreatin  bebas  yang ada menjadi kreatin fosfat, sehingga kreatin bebas kadarnya meningkat dan didegradasi secara  spontan  menjadi  kreatinin.  Hal  ini dapat terlihat pada kadar kreatinin hipoksia 3  hari  yang  mengalami  peningkatan melebihi kontrol.
Pada  hipoksia  5  hari,  aktivitas spesifik  CK  kembali  menurun  dan  terus
menurun pada hipoksia 7 hari dan terendah pada  hipoksia  14  hari.  Kondisi  ini disebabkan  karena  kadar  oksigen  yang semakin sedikit sehingga jalur metabolisme pada  hipoksia  sistemik  kronik  beralih  dari fosforilasi  oksidatif  menjadi  glikolisis anaerobik.  Setiap  molekul  glukosa  akan menghasilkan  2  ATP  bila  dikatabolisme melalui  jalur  glikolisis  anaerob,  sehingga sel  menurunkan  proses  metabolismenya dan  menggunakan  energi  yang  ada  untuk proses  bertahan  (11,23,25,28,29).  Dalam hal  ini  ATP  yang  dihasilkan  lebih diutamakan  untuk  kerja  organ  vital  antara lain  jantung,  juga  otak.  Ketersediaan oksigen yang terbatas menyebabkan jantung  berupaya  memompa  darah  lebih kuat agar oksigen sampai ke jaringan yang membutuhkan (19).
Kadar kreatinin pada hipoksia hari ke
5  paling  tinggi  dibanding  kelompok  lain.
Pada hipoksia 5 hari, aktivitas CK semakin menurun karena ATP yang ada sudah tidak cukup  lagi  digunakan  untuk  membentuk kreatin  fosfat  sehingga  kreatin  bebas meningkat. Kreatin bebas akan mengalami oksidasi secara spontan membentuk kreatinin  sehingga  pada  hipoksia  5  hari kadar  kreatinin  meningkat  dan  mencapai kadar  tertinggi  dibandingkan  dengan kelompok  hipoksia  yang  lain.  Pada hipoksia  7  hari  dan  14  hari,  ketersediaan asam  amino  untuk  pembentukan  kreatin baru  semakin  sedikit  karena  asam  amino hasil  degradasi  protein  otot  diutamakan untuk  pembentukan  glukosa  melalui  jalur glukoneogenesis.  Sintesis  kreatin  makin menurun oleh karena keterbatasan ketersediaan  asam  amino  dan  ATP. Penurunan  sintesis  kreatin  ini  dapat diartikan bahwa subtrat untuk reaksi ke kiri (yaitu: reaksi enzim CK semakin menurun, dan  sebaliknya  reaksi  ke  kanan  enzim  CK juga  menurun  oleh  karena  produk  kreatin
DOI: 10.24853/mujg.4.1.1-9
fosfat  tidak  terbentuk.    Keadaan  ini mendukung  bahwa  pada  hipoksia  14  hari hasil  pengukuran  aktivitas  spesifik  CK yang  semakin  rendah  dan  kadar  kreatinin yang semakin sedikit dibandingkan dengan kreatinin kontrol.
Fenomena yang terjadi pada penelitian  ini dapat menggambarkan keadaan  otot  rangka  yang  mengalami hipoksia  pada  beberapa  penyakit  terkait dengan penuaan, penyakit jantung dan paru.

## SIMPULAN
Hipoksia  sistemik  kronik  menyebabkan penurunan aktivitas spesifik CK otot tikus. Penurunan  kadar  kreatinin  otot  tikus  pada kelompok  1H  menunjukkan  penurunan oksidasi  kreatin  bebas  oleh  karena  ATP masih  tersedia  untuk  membentuk  kreatin fosfat  sebagai  cadangan  energi  di  otot. Peningkatan kadar kreatinin kelompok 3H, 5H  dan  7H  menunjukkan  peningkatan oksidasi  kreatin  bebas  oleh  karena  ATP untuk  membentuk  kreatin  fosfat  semakin menurun,  sedangkan  penurunan  kreatinin pada 14H sebagai akibat penurunan kreatin bebas  oleh  karena  produk  kreatin  fosfat yang semakin menurun.

## KONFLIK KEPENTINGAN
Penulis tidak memiliki konflik kepentingan dan tidak ada afiliasi dengan organisasi apa pun,  yang  dapat  menimbulkan  pertanyaan bias dalam naskah.

## REFERENSI
1. Lieberman M, Peet A. Essentials of Medical  Biochemistry  -  A  Clinical Approach. Wolters Kluwer; 2009.
2. Sherwood  L.  Human  Physiology: From  Cells  to  Systems.  Cengage Learning; 2015.
3. Guimarães-Ferreira  L.  Role  of  the phosphocreatine system on energetic
homeostasis in skeletal and  cardiac muscles.  Einstein  (Sao  Paulo). 2014;12(1):126–31.
4. Engl E, Garvert MM. A Prophylactic Role  for  Creatine  in  Hypoxia?  J Neurosci  Off J Soc  Neurosci. 2015 Jun;35(25):9249–51.
5. Lutz PL, Prentice HM. Sensing and responding  to  hypoxia,  molecular and physiological mechanisms.
Integr Comp Biol. 2002 Jul;42(3):463–8.
6. Hultman  E,  Söderlund  K,  Timmons JA,  Cederblad  G,  Greenhaff  PL. Muscle  creatine  loading  in  men.  J Appl Physiol. 1996 Jul;81(1):232–7.
7. Burke  DG,  Smith-Palmer  T,  Holt LE,  Head  B,  Chilibeck  PD.  The effect  of  7  days  of  creatine supplementation on 24-hour urinary creatine   excretion. J  strength  Cond Res. 2001 Feb;15(1):59–62.
8. Wanandi  SI,  Dewi  S,  Paramita  R. Ekspresi  Relatif  mRNA  HIF-1α Pada Jantung, Otak dan Darah Tikus Selama  Induksi  Hipoksia  Sistemik. Makara J Sci. 2009;13(2):185–8.
9. Hoppeler H, Vogt M. Muscle tissue adaptations  to  hypoxia.  J  Exp  Biol. 2001 Sep;204(Pt 18):3133–9.
10. Chaillou  T.  Skeletal  Muscle  Fiber Type  in  Hypoxia:  Adaptation  to High-Altitude Exposure and  Under Conditions of Pathological Hypoxia.
Front Physiol. 2018;9:1450.
11. Berton  E,  Antonucci  R,  Palange  P. Skeletal  muscle  dysfunction  in chronic obstructive pulmonary disease.  Monaldi  Arch  chest  Dis  = Arch Monaldi per le Mal del torace. 2001 Oct;56(5):418–22.
12. Singer  D.  Metabolic  adaptation  to hypoxia:  cost  and  benefit  of  being small.  Respir  Physiol  Neurobiol.
DOI: 10.24853/mujg.4.1.1-9
Vol. 4 No. 1 Tahun 2023 jurnal.umj.ac.id/index.php/MuJG mujgfkk@umj.ac.id
e-issn: 2721 –6837
2004 Aug;141(3):215–28.
13. Koolman J, Roehm KH. Color Atlas of Biochemistry. 2005.
14. Jagoe  RT,  Engelen  MPKJ.  Muscle wasting  and  changes  in  muscle protein  metabolism  in  chronic obstructive  pulmonary disease. Eur Respir  J  Suppl.  2003  Nov;46:52s-
63s.
15. Wei Y, Giunta S, Xia S. Hypoxia in
Aging  and  Aging-Related  Diseases: Mechanism and Therapeutic Strategies.  Int  J  Mol  Sci.  2022 Jul;23(15).
16. Su  Z,  Liu  Y,  Zhang  H.  Adaptive Cardiac  Metabolism  Under  Chronic Hypoxia:  Mechanism  and  Clinical
Implications.  Front  cell  Dev  Biol.
2021;9:625524.
17. Mudjihartini,  N.;  Jusman,  S.W.A.; Suyatna,  F.D;  Sadikin  M.  Stres oksdatif  otak  tikus  pada  induksi hipoksia  sistemik  kronik.  Neurona.
2017;132–6.
18. Warburg O, Christian W. Isolierung und Kristallisation des Gärungsferments Enolase. Naturwissenschaften [Internet]. 1941  Sep;29(39):589–90.  Available from: http://link.springer.com/10.1007/BF
01482279
19. Flora R,  Freisleben H-J,  Ferdinal  F, Wanandi SI, Sadikin M. Correlation of  hypoxia  inducible  factor-1α  and vascular  endothelium  growth  factor in  rat  myocardium  during  aerobic and  anaerobic  exercise.  Med  J Indones. 2012 Aug 1;21(3):133–40.
20. Achyat  S.  Perbandingan  Konsumsi Glukosa, Aktivitas Dan Pola Elektroforesis Enzim Laktat Dehidrogenase  (LDH)  Pada  Otot
Tikus  Normoksia,  Hipoksia  Dan
Otot Penyu Hijau (Chelonia mydas). Universitas Indonesia; 2010.
21. Luo  W,  Wang  Y.  Epigenetic regulators:  multifunctional  proteins modulating
hypoxia-inducible factor-α protein  stability  and
activity.  Cell  Mol  Life  Sci.  2018 Mar;75(6):1043–56.
22. Sousa Fialho M da L, Abd Jamil AH,
Stannard GA, Heather LC. Hypoxia- inducible factor 1 signalling, metabolism  and  its  therapeutic potential    in  cardiovascular  disease. Biochim Biophys acta Mol basis Dis.
2019 Apr;1865(4):831–43.
23. Lempesis  IG,  van  Meijel  RLJ, Manolopoulos  KN,  Goossens  GH. Oxygenation  of  adipose  tissue:  A human  perspective.  Acta  Physiol (Oxf). 2020 Jan;228(1):e13298.
24. Vogel  MAA,  Jocken  JWE,  Sell  H, Hoebers  N,  Essers  Y,  Rouschop KMA,  et  al.  Differences  in  Upper and  Lower  Body  Adipose  Tissue Oxygen  Tension  Contribute  to    the Adipose Tissue Phenotype in Humans.  J  Clin  Endocrinol  Metab. 2018 Oct;103(10):3688–97.
25. Baird  MF,  Graham  SM,  Baker  JS, Bickerstaff GF. Creatine-kinase- and exercise-related muscle damage implications for muscle
performance  and  recovery.  J  Nutr Metab. 2012;2012:960363.
26. Murray  R,  Granner  D,  Mayes  P, Rodwell  V.  Harper’s  Illustrated
Biochemistry (31st Edition).
Biochemical Education; 2018.
27. McCorry  LK.  Essentials  of  Human Physiology for Pharmacy.
Routledge; 2008.
28. De  Groote  E,  Deldicque  L.  Is Physical  Exercise  in  Hypoxia  an Interesting  Strategy  to  Prevent  the
DOI: 10.24853/mujg.4.1.1-9
Development of Type 2 Diabetes? A Narrative  Review.  Diabetes  Metab
Syndr Obes. 2021;14:3603–16.
29. Fitch  CD,  Sinton  DW.  A  Study  of
Creatine  Metabolism  In  Diseases Causing  Muscle  Wasting.  J  Clin Invest. 1964 Mar;43(3):444–52.