Uji Antagonisme Lentinus cladopus LC4 terhadap Ganoderma boninense Penyebab Penyakit Busuk Pangkal Batang Kelapa Sawit
Erni Angraini 1
1 FKIP Pendidikan Biologi, Universitas Muhammadiyah Palembang Email: erniangraini.81@gmail.com

## Abstract
The growth of oil palm can not be separated from disease attack. One of the diseases that attack is the Base Stem Rot disease caused by Ganoderma boninense . Efforts to control the pest and disease one of them by using Lentinus Cladopus LC4 biological controller so that the purpose of this study is to determine the potential of L.cladopus LC4 as biological  controlling  agent G.  boninense .  The  method  used  is L.  cladopus LC4  antagonism  test  against G. boninense .  The  results  showed  that L.  cladopus LC4  had  antagonistic  potency  against G.  boninense pathogen, although  the  mechanism  did  not  show  any  inhibition  zone.  Therefore, L.cladopus LC4  may  be  considered  for  the prevention and control of plant diseases in the field.
Keywords : Lentinus cladopus LC4, Ganoderma boninense , antagonism test.

## Abstrak
Pertumbuhan  kelapa  sawit  tidak  terlepas  dari  serangan  penyakit.  Salah  satu  penyakit  yang  menyerang  adalah penyakit Busuk Pangkal Batang (BPB) yang disebabkan oleh Ganoderma boninense . Upaya pengendalian terhadap hama dan penyakit tersebut salah satunya dengan menggunakan pengendali hayati Lentinus cladopus LC4 sehingga tujuan penelitian ini yaitu untuk mengetahui potensi L. cladopus LC4 sebagai agens hayati pengendali G. boninense . Metode  yang  digunakan  yaitu  dengan  uji  antagonisme L.  cladopus LC4  terhadap G.  boninense .  Hasil  penelitian membuktikan  bahwa L.  cladopus LC4 memiliki  potensi  antagonistik  terhadap  cendawan  patogen G.  boninense , walaupun mekanisme yang terjadi tidak menunjukkan adanya zona hambat. Oleh karena itu, L. cladopus LC4 dapat dipertimbangkan untuk pencegahan dan pengendalian penyakit tanaman di lapangan.
Kata kunci : Lentinus cladopus LC4, Ganoderma boninense, uji antagonisme

## Pendahuluan
Pertumbuhan  kelapa  sawit  tidak  terlepas dari serangan penyakit. Salah satu penyakit yang menyerang  adalah  penyakit  Busuk  Pangkal Batang  (BPB)  (Semangun,  2000).  Saat  ini penyakit  BPB  merupakan  penyakit  yang  penting, terutama  pada  kebun-kebun  kelapa  sawit  yang telah  mengalami  peremajaan.  Semakin  sering suatu  kebun  mengalami  peremajaan  maka semakin tinggi persentase kejadian penyakit BPB. Hal ini terjadi karena setelah cendawan menginfeksi  tanaman,  areal  pertanaman  akan terus  terkontaminasi  dan  inokulum  patogen  akan terakumulasi  sejalan  dengan  semakin  seringnya penanaman kelapa sawit (Susanto, et al., 2005).
Penyebab penyakit
BPB adalah
Ganoderma boninense yang merupakan cendawan  patogen  tular  tanah.  Patogen  ini  tidak hanya  menyerang  tanaman  tua,  tetapi  juga  yang masih  muda.  Saat  ini,  laju  infeksi  penyakit  BPB berjalan  semakin  cepat,  terutama  pada  tanah dengan  tekstur  berpasir  (Susanto,  et  al.,  2013). Penyakit  ini  juga  menyebabkan  kehilangan  hasil secara  luas  pada  perkebunan  kelapa  sawit. Penyakit  ini  telah  menyebabkan  kematian  kelapa sawit  di  beberapa  perkebunan  Indonesia  hingga
80% atau lebih dari populasi kelapa sawit dan hal tersebut  menyebabkan  penurunan  produk  kelapa sawit per satuan luas (Susanto, 2002).
Pada saat ini upaya pengendalian terhadap hama dan penyakit tanaman masih mengandalkan  penggunaan  pestisida  sebagai upaya pengendalian utama. Kenyataannya menunjukkan bahwa upaya pengendalian dengan menggunakan  senyawa  kimia  bukan  merupakan alternatif  yang  terbaik,  karena  sifat  racun  yang terdapat dalam senyawa tersebut dapat meracuni manusia,  ternak  piaraan,  serangga  penyerbuk, musuh  alami,  tanaman,  serta  lingkungan  yang dapat  menimbulkan  polusi  bahkan  pemakaian dosis  yang  tidak  tepat  bisa  membuat  hama  dan penyakit  menjadi  resisten.  Selain  itu  dengan adanya  aplikasi  pestisida  sintetik  yang  tidak bijaksana  dapat  memicu  timbulnya  patogen  yang resisten terhadap pestisida sintetik yang digunakan,  sehingga  perlu  adanya  alternatif  lain dalam pencegahan penyakit BPB yang disebabkan  oleh Ganoderma  boninense yaitu dengan pengendalian hayati.
Salah  satu  metode  pengendalian  hayati adalah  dengan  menggunakan  mikroorganisme . Lentinus merupakan  spesies  yang ternyata berpotensi menghasilkan berbagai macam
metabolit yang dapat dimanfaatkan untuk kepentingan  kesehatan  dan  industri.  Sudirman (2005)  mengemukakan  bahwa Lentinus  cladopus LC4  memiliki  potensi  lebih  dalam  menekan pertumbuhan mikroorganisme dibandingkan isolat Lentinus tropis  lainnya. L.  cladopus LC4 menghasilkan setidaknya delapan senyawa antimikroba  (ACs)  yang  aktif  melawan  patogen tanaman  ( Xanthomonas  campestris pv. glycines ). (Sudirman,  2010).  Penelitian  terdahulu  mengenai Pengendalian hayati pada G. boninense dilakukan dengan  pemanfaatan  agens  biologi  antagonis seperti cendawan Trichoderma sp. SBJ8 (Alviodinasyari,  et  al.,  2005)  dan  endomikoriza (Simanjuntak,  et  al.,  2013).  Ekstrak  miselium L. cladopus LC4  dapat  menghambat  beberapa patogen  tanaman  seperti Rhizoctonia  solani , Rigidiporus lignosus , Phytophthora capsici , Pseudomonas syringae (Mulyaningsih, 2002). Berdasarkan  permasalahan  di  atas,  maka perlu  dilakukannya  penelitian  untuk  mengetahui potensi L.  cladopus LC4  sebagai  agens  hayati pengendali G.  boninense sehingga  membuka peluang  pemanfaatan L.  cladopus LC4  sebagai agen  pengendalian  hayati  bagi  patogen G. boninense di lapangan.

## Metode
Bahan-bahan  yang  digunakan  di  dalam penelitian  ini  adalah  jamur L.  cladopus LC4  dan G.  boninense isolat  GKSA  yang merupakan  hasil isolasi  dan  koleksi  Prof.  Dr.  Lisdar  I.  Sudirman. Penelitian ini menggunakan media Potato Dextrose  Agar (PDA)  untuk  peremajaan  dan  uji antagonisme isolat jamur, pembibitan pada media jagung, dan budidaya jamur dengan menggunakan  serbuk  gergaji  kayu,  dedak  padi, 1,5% gipsum dan 1,5%  kapur (CaC0 3 ), dan air.
Peremajaan isolat L. cladopus LC4 . Isolat  L.  cladopus  LC4  diremajakan  pada media  Malt  Extract  Agar  (MEA)  di  dalam  cawan petri  (diameter  9  cm),  kemudian  diinkubasi  pada suhu 35 o C selama ± 7 hari.

## Peremajaan isolat G.boninense
Cendawan G.boninense GKSA ditumbuhkan  selama  7  hari  dalam  suhu  kamar pada  media  PDA.  Peremajaan  dilakukan  sampai 10 hari sebelum digunakan untuk uji antagonisme.
Pengujian  antagonisme  L.  cladopus LC4 terhadap G. boninense
Uji  antagonisme  antara  isolat L.  cladopus LC4 dengan G. boninense GKSA dengan metode kultur  ganda  yang  telah  dimodifikasi  (Mbarga,  et al.,  2012).  Pengujian  antagonisme  dengan menggunakan  biakan  ganda  ( dual  culture ) yaitu dilakukan dengan menumbuhkan L. cladopus LC4 dan G.  boninense GKSA  pada  cawan  Petri  yang berisi  media  PDA  secara  berhadapan  dengan
jarak  2  cm  dari  garis  tengah  cawan  Petri  dengan masing  masing  isolat  berdiameter  0,6  cm.  Pada kultur  tunggal,  masing-masing  kontrol  diinokulasi pada  hari  yang  sama,  sedangkan  pada  kultur ganda  isolat  LC4  terlebih  dahulu  diinokulasi kemudian  setelah  7  hari  isolat G.boninense diinokulasikan.  Peubah  yang  diamati  adalah presentase  penghambatan  cendawan  patogen oleh  cendawan  antagonis  dan  lebar  zona hambatan, seperti rumus dibawah ini :
% H LC4 = Kontrol LC4 − Perlakuan LC4
Kontrol LC4
% H GKSA = Kontrol GKSA − Perlakuan GKSA Kontrol GKSA
% H Interaksi LC4 − GKSA = Perlakuan LC4 − Perlakuan GKSA Perlakuan  LC4
Adapun  cara  meletakkan  Inokulum L. cladopus LC4  dan G.  Boninense GKSA  (Gambar 1) adalah sebagai berikut :
Gambar 1. Kontrol dan Uji Antagonis L. cladopus LC4 dan G. Boninense GKSA Pengamatan mikroskopik
interaksi L. cladopus LC4 dengan G.boninense
Pertemuan  kedua  isolat  di  dalam  cawan dipotong  dengan  menggunakan  jarum  ose, kemudian dengan bantuan selotip ditempelkan ke gelas objek.

## Pembuatan preparat awetan
Gliserol  85%  (42,5  mL)  ditambahkan aquades  50  mL  kemudian  direndam  di  dalam cawan  petri  15-30  menit.  Setelah  itu,  sampel diangkat dan dikeringkan.

## Pembuatan Bibit Jamur
Bibit  jamur  masing-masing  isolat  dibuat dengan  menggunakan  pipilan  jagung.  Pipilan jagung kemudian dimasukkan ke dalam botol dan disterilisasi  menggunakan  autoklaf  (suhu  121 o C, tekanan  1  atm)  selama  20  menit.  Pipilan  jagung yang  telah  steril  diinokulasikan  dengan  isolat masing-masing  jamur  dan  diinkubasi  pada  suhu ruang  hingga  seluruh  media  dipenuhi  miselium jamur.

## Budidaya Jamur
Isolat L.  cladopus CL4  dan G. boninense dibudidayakan  pada  substrat  yang  terdiri  dari serbuk gergajian kayu. Pada substrat
ditambahkan  15%  dedak  padi,  1,5%  gipsum  dan 1,5%    kapur  (CaC0 3 ),  kemudian  diberi  air  hingga kadar  airnya  mencapai  70-75%.  Selanjutnya, substrat  dimasukkan  ke  dalam  kantong  plastik berukuran  1  kg  dan  disterilisasi  menggunakan autoklaf  (suhu  121 o C,  tekanan  1  atm).  Masing- masing isolat ditanam pada kantong plastik tahan panas.  Kantong  plastik  berisi  substrat  yang  telah steril  didinginkan  pada  suhu  ruang  dan  masing- masing diinokulasi dengan bibit jamur L. cladopus LC4  dan G.  boninense sebanyak  2  sendok  teh perkantong  secara  aseptik.  Kantong  plastik  berisi bibit  jamur  diinkubasi  di  rumah  jamur  selama  30 hari pada suhu 28-30 o C dan diamati pertumbuhan L. cladopus LC4 dan G. Boninense .

## Hasil dan Pembahasan
Hasil penelitian  menunjukkan  bahwa  pada kontrol,  kedua  isolat  telah  tumbuh  pada  hari pertama  setelah  diinkubasi.  Pertumbuhan  isolat L.cladopus LC4  lebih  cepat  dibanding  isolat G.boninense (Gambar  2  dan  Gambar  3).  Pada hari  ke-11  inkubasi,  jari-jari  isolat G.  boninense mencapai 3,8 cm, sedangkan jari-jari LC4 sebesar 6,5  cm  (Gambar  2).  Isolat G.  boninense diinokulasikan pada hari ke-9 pada uji antagonisme.
Gambar  2.  (a)  isolat  LC4  hari  ke-11  (b)  isolat GKSA hari ke-11
Gambar  3.  Rata-rata  pertumbuhan  kontrol  LC4 dan GKSA
Uji  antagonisme  menunjukkan  potensi L. cladopus LC4  sebagai  agen  pengendalian  hayati bagi G.boninense . Hal tersebut karena keberadaan  isolat  LC4  mampu  menghambat pertumbuhan  isolat G.  boninense (Gambar  4). Pertumbuhan L.  cladopus LC4  dan G.  boninense
terlihat adanya perkembangan, setelah pengamatan  hari  ke-9,  namun  yang  lebih  cepat menunjukan  perkembangan  adalah  LC4,  dimana jari-jari L.  cladopus LC4  setelah  hari  ke-10 berukuran  4,75  cm  dibandingkan G.  boninense berukuran  0,43  cm  (Gambar  6).  Banyak  agen pengendalian  hayati  yang  dapat  menghambat pertumbuhan G.  boninensis antara  lain:  isolat Trichoderma sp.  SBJ8  dapat  menghambat pertumbuhan G.  boninense pada  hari  ke-4 sebesar  65,25%  (Alviodinasyari,  et  al.,  2005). Simanjuntak  et  al.  (2013),  menyatakan  bahwa aplikasi mikoriza mampu mengendalikan penyakit busuk  pangkal  batang  kelapa  sawit  yang disebabkan  oleh G.  boninense pada  pembibitan kelapa  sawit  MN  sampai  tujuh  bulan  setelah aplikasi Ganoderma . Antagonisme L.  cladopus LC4 dengan G. boninense GKSA tidak mengakibatkan terbentuknya zona bening yang terdapat di antara koloni kedua isolat (Gambar 4), tetapi Berdasarkan  pengamatan  mikroskopik,  terlihat bahwa ada  hifa yang terpilin pada saat terjadinya interaksi  (Gambar  5).  Hal ini  bisa  menjadi  alasan pemanfaatan  LC4  sebagai  antagonis  dari G. boninensis GKSA.  Antagonisme L.  cladopus LC4 dengan GKSA tidak mengakibatkan  terbentuknya zona  penghambatan.  Hal  ini  bukan  berarti  LC4 tidak menghasilkan
metabolit spesifik
ekstraseluler,  karena  pada  beberapa  penelitian dilaporkan  bahwa  ekspresi  antibiosis  pada antagonisme in vitro dipengaruhi oleh media yang digunakan.  Achmad  et  al. (2011),  mempelajari antagonisme  pada  media  padat  yang  melibatkan T. harzianum, zona penghambatan terbentuk baik pada  PDA  maupun  MEA,  akan  tetapi  zona penghambatan pada antagonisme yang melibatkan T.  pseudokoningii terbentuk  hanya pada  MEA,  sedangkan  pada  PDA  tidak.  Seperti yang  kita  ketahui  bahwa  LC4  tumbuh  baik  pada media  MEA  sedangkan  pada  penelitian  ini menggunakan media PDA.

## Gambar 5. Interaksi isolat GKSA dengan LC4 (perbesaran 100x)
Gambar 6.  Uji Antagonisme Pertumbuhan LC4 dan Ganoderma boninense dari hari ke hari
Tabel  1.  Persentase  nilai  hambat  interaksi  LC4-
GKSA Cawan petri Nilai hambat interaksi LC4- GKSA 1 75,67% 2 68,75% 3 81,25% 4 75,90%
Berdasarkan  Tabel  1.  dapat  diketahui bahwa  LC4  mampu  menghambat  pertumbuhan Ganoderma sebesar  75,67%,  68,75%,  81,25%, dan  75,90%.  Hal  ini,  tidak  sejalan  dengan pengamatan  interaksi  yang  diinokulasikan  pada baglog.  Pada  baglog  terlihat  miselium  LC4 menghitam  dan  tidak  mampu  memenuhi  baglog, sedangkan  GKSA  juga  tidak  mampu  untuk memenuhi  baglog  padahal  pada  kontrolnya miselia  memenuhi  baglog  (Gambar  7).  Interaksi yang terjadi pada baglog tidak dapat
menunjukkan potensi isolat LC4 sebagai antagonis  GKSA,  karena  hampir  keseluruhan baglog  terkontaminasi  oleh Trichoderma dan cendawan  lain.  Hasil  yang  sama  juga  dilaporkan oleh  Aprilisma  (2017),  menyatakan  bahwa pertumbuhan  isolat  GKSA  juga  dihambat  oleh cendawan  kontaminan Trichoderma sp.  yang diisolasi dari media tanam yang hanya mengandung  formulasi  Bio-LC4  tidak  steril sedangkan pada semua perlakuan yang mengandung media tanam tidak steril, pertumbuhan isolat GKSA dihambat oleh beberapa  cendawan  kontaminan,  antara  lain: genus X ,  dan  genus Y . Trichoderma spp. mempunyai kecepatan pertumbuhan koloni paling cepat,  hanya  membutuhkan  waktu  7-9  hari dibandingkan  pertumbuhan G.  boninense yang membutuhkan  waktu  15-40  hari  pada  medium PDA.  (Aeny,  2010).  Pertumbuhan G.  boninense penyebab  penyakit  busuk  pangkal  batang  kelapa sawit  juga  dapat  dihambat  oleh Trichoderma harzianum (Izzati & Abdullah, 2008).
Pada  baglog  terlihat  bahwa  LC4  memiliki hifa  yang  lama  kelamaan  menghitam.  Hal  ini mungkin  merupakan  sebuah  cara survive yang dilakukan  LC4  dari  senyawa  metabolit  yang dihasilkan  oleh  GKSA.  Pertumbuhan  GKSA  pun tidak ada yang memenuhi baglog, karena adanya penghambatan  oleh  LC4.  Isolat Trichoderma viride , T. harzianum , T. koningii dapat menghambat  pertumbuhan  jamur Ganoderma boninense secara  in  vitro,  tetapi  pengaruh  antar isolat Trichoderma tidak  berbeda  satu  sama  lain (Aeny,  2010).  Hasil  pengujian  pada  perlakuan media  tanam  yang  mengandung  formulasi  Bio-
LC4  steril  atau  yang  mengandung  media  tanam steril  baik  tanpa  suplemen  maupun  dengan suplemen  isolat  GKSA  mampu  tumbuh  dengan kisaran  82-83%,  sedangkan  formulasi  Bio-LC4 sebagai  media  tanam G.  boninense isolat  GKSA di  cawan  petri  menunjukkan  bahwa  isolat  GKSA tumbuh  dengan  kisaran  2.6-18.4%  pada  semua perlakuan  media  tanam  yang  mengandung formulasi  Bio-LC4  tidak  steril  ataupun  yang mengandung  media  tanam  tidak  steril  baik  tanpa suplemen  maupun  dengan  suplemen.  Aktivitas formulasi  Bio-LC4  hilang  setelah  disterilisasi (Aprilisma, 2017).
Gambar 7. Interaksi pada baglog (a) kontrol GKSA (b) Antagonisme LC4-GKSA

## Simpulan
Penelitian ini membuktikan bahwa Lentinus cladopus LC4 memiliki  potensi  antagonistik terhadap cendawan patogen Ganoderma boninense ,  walaupun  mekanisme  yang  terjadi tidak  menunjukkan  adanya  zona  hambat.  Oleh karena  itu, Lentinus  cladopus LC4 dapat
dipertimbangkan  untuk  pencegahan  dan  pe- ngendalian penyakit tanaman di lapangan.

## Ucapan Terima Kasih
Peneliti mengucapkan  terimakasih  kepada tim  laboratorium  Mikrobiologi  da n  Mikrotropisian IPB 2015.

## Daftar Referensi
Achmad & Yulisman, D., 2011. Potensi dua isolat lokal Pleurotus sp.  sebagai  antagonis terhadap Ganoderma sp. Jurnal  Penelitian Tanaman Industri, 17(4), pp. 174-178.
Aeny,  T.  N.,  2010. Pengaruh  beberapa  iolat Trichoderma spp. pada  pertumbuhan  in vitro  Ganoderma  boninense,  penyebab busuk  pangkal  batang  kelapa  sawit  (Elaeis Guineensis). Lampung,
Universitas Lampung.
Alviodinasyari, R., Martina, A. & Lestari, W., 2005. Pengendalian Ganoderma  boninense oleh Trichoderma sp. SBJ8 pada kecambah dan bibit kelapa sawit ( Elaeis guineensis Jacq.). JOM FMIPA, 2(1), pp. 99-107. Aprilisma, G., 2017. Pengaruh Formulasi BIO-LC4 Terhadap Pertumbuhan Ganoderma Boninense, Bogor: Institut Pertanian Bogor.
Izzati,  M.  Z.  N.  A.  &  Abdullah,  F.,  2008.  Disease Suppression  in Ganoderma -infected  oil palm  seedlings  treated  with Trichoderma harzianum . Plant  Protect.  Sci, 44(3),  pp. 101-107.
Mbarga,  J.  B.,  Hoopen,  G.  M.  T.,  Kuaté,  J., Adiobo, A., Ngonkeu, M. E. L., Ambang, z., Akoa,  A.,  Tondje,  P.  R.  &  Begoude,  B.  A. D.,  2012. Trichoderma  asperellum :  A potential  biocontrol  agent  for  Pythium myriotylum,  causal  agent  of  cocoyam ( Xanthosoma  sagittifolium )  root  rot  disease in  Cameroon. Crop  Protection, Volume  36, pp. 18-22.
Mulyaningsih, C., 2002. Aktivitas ekstrak miselium Lentinus  cladopus  isolat  LC  terhadap
beberapa  mikrob  patogen  tanaman  dan cendawan  penghasil  alfatoksin, Bogor:
Institut Pertanian Bogor.
Semangun, H., 2000. Penyakit-Penyakit Tanaman Perkebunan  di  Indonesia. Yogyakarta: Gajah Mada University Press.
Simanjuntak,  D.,  F.  &  Susanto,  A.,  2013.  Efikasi Mikoriza dan Trichoderma sebagai pengendali  penyakit  busuk  pangkal  batang ( Ganoderma ) dan sebagai pemacu pertumbuhan  di  pembibitan  kelapa  sawit. Widyariset, 16(2), p. 233 –242.
Sudirman, L. I., 2005. Deteksi senyawa antimikrob yang diisolasi dari beberapa Lentinus tropis dengan  metode  bioautografi. Hayati, 12(2), pp. 67-72.
Sudirman,  L.  I.,  2010.  Partial  purification  of antimicrobial  compounds  isolated  from
mycelia  of  tropical Lentinus  cladopus LC4. HAYATI  Journal  of  Biosciences, 17(2),  pp. 63-67.
Susanto,  A.,  2002. Kajian  pengendalian  hayati Ganoderma  boninense Pat. penyebab penyakit  busuk  pangkal  batang  kelapa sawit, Bogor: Institut Pertanian Bogor.
Susanto, A., Sudharto, P. S. & Purba, R. Y., 2005. Enhancing  biological  control  of  basal  stem rot  disease  ( Ganoderma  boninense )  in  oil palm  plantations. Mycopathologia, Volume 159, p. 153 –157.
Susanto,  A.,  Prasetyo,  A.  E.,  Priwiratama,  H., Wening,  S.  &  Surianto.,  2013. Ganoderma boninense penyebab penyakit busuk batang  atas  kelapa  sawit. J  Fitopatol Indones, 9(4), p. 123 –126.