## Analisis Fitokimia dan Aktivitas Antioksidan Ekstrak Daun Kesambi ( Schleichera oleosa ) Metode DPPH
Kholifah Holil 1 , Tias Pramesti Griana 2 *
1 Jurusan Biologi, Fakultas Sains dan Teknologi, UIN Maulana Malik Ibrahim Malang, Indonesia
2 Program Studi Pendidikan Dokter, Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan, UIN Maulana Malik Ibrahim Malang, Indonesia
*E-mail: tiaspram_esti@yahoo.co.id

## ABSTRACT
Kesambi (Schleichera oleosa) is one of the forest plants from Indonesia that has potential as medicine. Kesambi has active compounds that act as antioxidants. The purpose of this study was to determine the potential of kesambi leaf as an antioxidant using the DPPH method. Samples of kesambi leaf were extracted in methanol, ethanol, and water solvents by the maceration method.  The  class  of  compounds  contained  in  kesambi  leaf  was  tested  by  the  colour  reaction  test  method  for  alkaloids, flavonoids,  triterpenoids,  phenols,  steroids,  saponins,  and  tannins.  Antioxidant  activity  was  tested  by  the  DPPH  method  to determine IC50 values. Based on the results of the colour reaction test showed that methanol and ethanol solvents were able to bind 6 classes of compounds (alkaloids, flavonoids, triterpenoid, phenols, saponins, and tannins) and water solvents were only able to bind 5 classes of compounds (flavonoids, triterpenoid, phenols, saponins, and tannins) contained in kesambi leaf. The  results  of  antioxidant  activity  tests  using  the  DPPH  method  showed  the  lowest  IC50  value  was  methanol  extract (16,12µg/ml) compared to  ethanol extract  (20,43µg/ml) and water (904,28µg/ml). It  was concluded that the leaf  extract  of kesambi has potential as an antioxidant and  which has the best  antioxidant  ability  was extracted in  methanol. The class of compounds which were thought to be responsible for the antioxidant activity of the kesambi leaf extract based on the color reaction test were phenols, flavonoids and tannins.
Keywords: antioxidant, kesambi, Schleichera oleosa, DPPH

## ABSTRAK
Kesambi ( Schleichera oleosa) merupakan salah satu tanaman hutan asli Indonesia yang berpotensi sebagai obat. Kesambi memiliki senyawa aktif yang berperan sebagai antioksidan. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui potensi daun kesambi sebagai antioksidan menggunakan metode DPPH. Simplisia daun kesambi di ekstraksi dalam pelarut metanol, etanol dan air dengan metode maserasi. Golongan senyawa kimia yang terkandung didalam esktrak daun kesambi di analisa dengan uji reaksi warna untuk golongan alkaloid, flavonoid, triterpenoid, fenol, steroid, saponin, dan tanin. Aktivitas antioksidan di uji  dengan  DPPH  untuk  diketahui  nilai  IC50.  Berdasarkan  hasil  uji  reaksi  warna  menunjukkan  pelarut  metanol  dan  etanol mampu mengikat 6 golongan senyawa (alkaloid, flavonoid, triterpenoid, fenol, saponin, dan tanin) dan pelarut air hanya mampu mengikat  5  golongan  senyawa  (flavonoid,  triterpenoid,  fenol,  saponin,  dan  tanin).  Hasil  uji  aktivitas  antioksidan  dengan menggunakan  metode  DPPH  menunjukkan  nilai  IC50  ekstrak  metanol  adalah  paling  rendah  (16,12μg/mL)  dibandingkan dengan  ektrak  etanol  (20,43μg/mL)  dan  air  (904,28μg/mL).  Disimpulkan  bahwa  ekstrak  daun  kesambi berpotensi  sebagai antioksidan dan yang memiliki kemampuan antioksidan paling baik adalah yang menggunakan ektrak dengan pelarut metanol. Golongan senyawa yang diduga bertanggungjawab terhadap aktivitas antioksidan ekstrak daun kesambi berdasarkan uji reaksi warna adalah fenol, flavonoid dan tanin.
Kata kunci: antioksidan, kesambi, Schleichera oleosa, DPPH

## 1. Pendahuluan
Kesambi  ( Schleichera  oleosa (L.)  Oken.)  merupakan tanaman pohon hutan tropis salah satu dari famili Sapindaceae yang  tersebar  di  wilayah  Asia  Selatan  dan  Asia  Tenggara (Kamboja, India, Indonesia, Myanmar, Sri Langka, Thailand dan  Vietnam)  [1].  Tanaman  kesambi  dikenal  juga  dengan nama  daerah  :  kasambi  (Sunda);  kesambi,  kusambi,  sambi (Jawa dan Bali); kasambhi (Madura); kusambi, usapi (Timor Timur);  kasembi,  kahembi  (Sumba);  kehabe  (Sawu);  kabahi (Solor);  kalabai  (Alor);  kule,  ule  (Rote);  bado  (Makasar); ading (Bugis) [2].
Pemanfaatan kesambi  sudah dikenal sejak dulu. Dibidang pertanian  dan  peternakan,  kulit  biji  kesambi  dimanfaatkan sebagai  pupuk  tanaman  jagung  dan  daunnya  sebagai  pakan ternak [3]. Dibidang industri, minyak dari buah kesambi dapat digunakan  sebagai  sumber  biodiesel  [4],  sedangkan  pohon kesambi  berperan  sebagai  inang  kutu  lak  yang  mempunyai nilai  ekonomis  tinggi,  dimana  lak  adalah  bahan  dasar  untuk pembuatan isolasi listrik, piringan hitam, tinta cetak, ampelas, semir, kapsul obat, pelitur dan cat [3]. Di bidang pengobatan tradisional,  dikenal  sebagai Macassar  oil untuk  pelembut rambut, menyembuhkan penyakit gatal, eksim, kudis, koreng, dan jerawat. Bubuk biji kesambi digunakan sebagai obat luka pada  ternak  dan  daunnya  dapat  mengobati  penyakit  malaria [2].
Kulit  batang  kesambi  mengandung  senyawa  fenolik  [5] yang  terdiri  dari 1,2-Benzenedicarboxylic  acid,  diisooctyl ester dan squalene [6]. Buah kesambi  mengandung senyawa fenolik  yang  terdiri  dari protocatechuic  acid,  p-hydroxy benzoic acid, vanillic acid, caffeic acid, syringic acid dan p- coumaric acid [7]. Kulit buah dan biji kesambi mengandung saponin, alkaloid, terpenoid, flavonoid dan tanin [8,9]. Daun kesambi  mengandung  metabolit  sekunder  yang  berupa alkaloid, fenolik, tanin, dan flavonoid. Fenolik dan flavonoid merupakan  komponen  terbanyak  pada  daun  kesambi,  dan hasil analisa dengan metode thin layer chromatography (TLC) didapatkan quercetin sebagai salah satu komponen flavonoid dalam daun kesambi [10]. Telah diketahui berbagai tanaman yang  mengadung  senyawa  fenolik  dan  flavonoid  memiliki kemampuan  sebagai  antioksidan  dengan  metode  DPPH [11,12].
Pelarut yang digunakan untuk ekstraksi senyawa metabolit dari tanaman dipilih  berdasarkan polaritas zat terlarut. Suatu pelarut dengan polaritas  yang  mirip dengan zat terlarut akan melarutkan zat terlarut dengan baik [13]. Senyawa metabolit didalam  tanaman  ada  pada  dinding  sel,  vakuola  dan  inti  sel [14].  Pelarut  dengan  polaritas  yang  rendah  tidak  akan  dapat mengikat senyawa metabolit didalam sel pada sampel kering (simplisia) [15]. Berdasarkan indeks polaritas, metanol, etanol dan  air  memiliki  indeks  polaritas  yang  tinggi,  dimana  nilai indeks polaritas metanol 5,1, etanol 5,2 dan air 9 [16] sehingga metanol,  etanol  dan  air  lebih  banyak  dipilih  untuk  ekstraksi
tanaman  obat  yang  mengandung  senyawa  metabolit. Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  potensi  daun Schleichera  oleosa sebagai  antioksidan.  Pelarut  untuk mengekstraksi  daun  kesambi  yang  digunakan  dalam penelitian ini adalah metanol 90%, etanol 96% dan air.

## 2. Bahan dan Metode

## 2.1 Bahan tanaman dan bahan kimia
Simplisia daun kesambi didapat dari UPT Materia Medica, kota Batu dengan kunci determinasi : 1b-2b-3b-4b-6b-7b-9b- 10b-11b-12b-13b-14a-15b-197b-208b-219b-220a-221b- 222a-1b-5b-6.
Bahan kimia dalam penelitian ini terdiri dari: Metanol 90% ( grade Pro Analysis, Merck, German), etanol 96% ( grade Pro Analysis , Merck, German), ammonia (CHCl3) 0,05N (Ricca, USA),  asam  sulfat  (H2SO4)  2N  (Ricca,  USA),    ferriklorida (FeCl3)  0,1%  (Ricca,  USA),  regen  Meyer  (Sigma  Aldrich, German), regen Bouchardat (Ricca, USA), regen Dragendorff (Merck,  German),  regen  DPPH  (Sigma  Aldrich,  German), asam askorbat (Merck, German).

## 2.2 Metode ekstraksi
Serbuk  simplisia  dimaserasi  dengan  merendam  di  pelarut aquades, etanol 96% dan metanol 90% dengan perbandingan simplisia : pelarut = 1:5 selama 24 jam. Dimasukkan larutan simplisia  ke  dalam incubator  shaker dengan  kecepatan 125rpm  suhu  37ºC  selama  3  jam.  Disaring  dengan  kertas saring dan ampas yang diperoleh dimaserasi kembali dengan pelarut  yang  sama  dan  diulang  3  kali.  Filtrat  di  evaporasi dengan rotary  evaporator dengan  suhu  60º  dan  tekanan 0,045mPA selama 30 menit.
2.3 Uji reaksi warna (flavonoid, alkaloid, tanin,

## terpenoid, fenol, dan saponin)
Dimasukkan  2g  ekstrak  ke  dalam beaker  glass dan ditambahkan  20mL  aquades,  kemudian  dididihkan  lalu disaring.  Dimasukkan  0,5mL  filtrat  kedalam  tabung  reaksi, kemudian  ditambahkan  5mL  ammonia  encer  dan  5mL  asam sulfat  pekat.  Diamati  perubahan  warnanya.  Sampel mengandung  flavonoid  jika  didapatkan  perubahan  warna menjadi merah atau jingka kekuningan.
Dimasukkan 3g ekstrak kedalam tabung reaksi, ditambahkan 10mL CHCl3 0,05N, ditutup aluminium foil dan dikocok perlahan. Didiamkan  hingga terbentuk  lapisan  yang terpisah.  Lapisan  CHCl3  diambil  dipindahkah  ke  tabung reaksi  lain.  Selanjutnya  ditambahkan  0,5mL  H2SO4  2N, ditutup  aluminium  foil  dan  dikocok  perlahan.  Kembali didiamkan hingga terbentuk lapisan terpisah. Lapisan H2SO4 dipipet  dan  dipindahkan  ke  tabung  lain.  Pada  larutan  yang merupakan  lapisan  dibawahnya  ditambahkan  satu  tetes pereaksi  Mayer,  Bouchardat  dan  Dragendorff.  Hasil  positif
terdapat  alkaloid  apabila  terbentuk  endapan  putih  untuk pereaksi  Mayer,  endapan  coklat  untuk  pereaksi  Bouchardat dan jingga untuk pereaksi Dragendorff.
Dimasukkan  0,5g  ekstrak  ke  dalam  tabung  reaksi  dan ditambahkan  ferri  klorida  (FeCl3)  0,1%  dan  diamati terjadinya  perubahan  warna.  Sampel  mengandung  tanin  jika terbentuk warna biru tua atau biru kehitaman.
Dimasukkan  2g  ekstrak  kedalam  tabung  reaksi  dan ditambahkan  2mL  asam  sulfat,  kemudian  dididihkan  dan disaring.  Filtrat  yang  didapat  ditambahkan  2mL  asam  asetat anhidrat,  lalu  diamati  perubahan  warnanya.  Jika  warna berubah  menjadi  biru  atau  hijau  maka  steroid  positif,  jika warna berubah menjadi merah sampai ungu maka triterpenoid positif.
Dimasukkan  0,5g  ekstrak  ke  dalam  tabung  reaksi,  filtrat ditambahkan  beberapa  tetes  ferriklorida  0,1%  dan  diamati terjadinya  perubahan  warna.  Positif  mengandung  senyawa fenolik jika terjadi perubahan warna hitam kebiruan.
Dimasukkan  0,1g  ekstrak  ke  dalam  tabung  reaski, ditambahkan  10mL  aquades  yang  dididihkan,  kemudian ditutup dengan aluminium foil, dikocok kuat selama 30 detik hingga terbentuk busa. Diamati kestabilan pembentukan busa. Jika  busa  bertahan  selama  30  menit  dengan  ketinggian  3cm dari cairan maka disebut kandungan saponin positif.

## 2.4 Uji DPPH
Dibuat pengencaran standart dan ekstrak yang digunakan. Ektrak  tanaman  diencerkan  dengan  konsentrasi  50µg/mL, 100µg/mL,  200µg/mL,  400µg/mL,  800µg/mL.  Sedangkan standart  digunakan  asam  askorbat  dengan  konsentrasi 8µg/mL,  16µg/mL,  24µg/mL,  32µg/mL,  dan  64µg/mL. Diambil masing-masing 1mL larutan ekstrak, larutan standart dan  larutan  blanko  (larutan  DPPH  terdiri  dari  2mL  DPPH 0,1mM  dan  1mL  metanol)  ke  dalam  tabung  reaksi  yang berbeda. Ditambahkan kedalam masing-masing tabung reaksi, 2mL  DPPH  0,1mM.  Divorteks  dan  diinkubasi  pada  suhu kamar  selama  30  menit  ditempat  gelap.  Absorbansi  larutan ekstrak  dan  blanko  diukur  pada  λmaks  516  nm,  sedangkan asam askorbat pada λmaks 515 nm. Pengukuran absorbansi di ulang  3  kali.  Data  hasil  pengukuran  absorbansi  dianalisa persentase aktivitas antioksidannya menggunakan persamaan berikut:
%𝑖𝑛ℎ𝑖𝑏𝑖𝑠𝑖 = 𝐴𝑏𝑠 𝑏𝑙𝑎𝑛𝑘𝑜 − 𝐴𝑏𝑠 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 𝐴𝑏𝑠 𝑏𝑙𝑎𝑛𝑘𝑜 × 100

## 3. Hasil dan Pembahasan
Penelitian  ini  bertujuan untuk mengetahui potensi ekstrak daun kesambi sebagai antioksidan. Sebelum diuji antioksidan dengan  metode  DPPH,  dilakukan  pembuktian  kandungan ekstrak daun kesambi dengan uji reaksi warna. Hasil uji reaksi warna ekstrak daun kesambi dengan pelarut air, metanol dan etanol 96% dapat dilihat pada Tabel 1-3.

## Tabel 1
Hasil uji reaksi warna ekstrak daun kesambi dengan pelarut air Identifikasi senyawa Hasil Flavonoid + Alkaloid Meyer - Dragendrof - Bouchartdat - Tanin + Terpenoid Steroid - Triterpenoid + Fenol + Saponin +

## Tabel 2
Hasil uji reaksi warna ekstrak daun kesambi dengan pelarut metanol Identifikasi senyawa Hasil Flavonoid + Alkaloid Meyer + Dragendrof - Bouchartdat + Tanin + Terpenoid Steroid - Triterpenoid + Fenol + Saponin +

## Tabel 3
Hasil uji reaksi warna ekstrak daun kesambi dengan pelarut etanol 96% Identifikasi senyawa Hasil Flavonoid + Alkaloid Meyer - Dragendrof - Bouchartdat + Tanin + Terpenoid Steroid - Triterpenoid + Fenol + Saponin +
Hasil uji reaksi warna menunjukkan ekstrak daun kesambi dengan  pelarut  air  hanya  mampu  mengikat  5  senyawa  aktif (flavonoid,  tanin,  triterpenoid,  fenol  dan  saponin),  pelarut metanol  dan  etanol  96%  mampu  mengikat  7  senyawa  aktif (flavonoid,  alkaloid,  tanin,  triterpenoid,  fenol  dan  saponin). Perbedaan  antara  ekstrak  daun  kesambi  dengan  pelarut metanol dan etanol 96% adalah uji alkaloid, dimana metanol positif  dengan  uji  regen  Meyer  dan  Bouchartdat,  sedangkan etanol 96% positif hanya pada uji regen Bouchartdat. Secara keseluruhan  uji  reaksi  warna  menunjukkan  daun  kesambi mengandung  senyawa  metabolit  sekunder  yang  berupa
flavonoid,  alkaloid,  tanin,  triterpenoid,  fenol  dan  saponin. Hasil penelitian ini tidak jauh berbeda dengan penelitian yang dilakukan  oleh  Situmeang et.  al. yang  juga  melakukan  uji reaksi  warna  pada  ekstrak  metanol  daun  kesambi  yang menghasilkan  positif  pada  uji  flavonoid,  alkaloid,  steroid, fenolik dan tanin [17]. Namun hal ini berbeda dengan analisa uji  reaksi  warna  yang  dilakukan  oleh  Soundararajan  dan Sivakkumar, dimana ekstrak daun kesambi dengan pelarut air dan etanol memiliki kemampuan yang sama dalam mengikat senyawa  metabolit  sekunder  yang  berupa  alkaloid,  saponin, senyawa  fenolik  dan  tanin,  flavonoid  dan  fitosterol.  Analisa fitokimia  kuantitatif  didapatkan  senyawa  fenol  (71.92± 0.92mgGAE/gm) dan flavonoid (9.69±1.38mgQE/gm) merupakan  senyawa  metabolit  yang  terbanyak  jumlahnya didalam ekstrak daun kesambi [10].
Perbedaan  pelarut  ekstrak  daun  kesambi  mempengaruhi jenis  senyawa  aktif  yang  terikat.  Senyawa  bioaktif  lebih efektif  diikat  oleh  pelarut  dengan  polaritas  tinggi  [18]. Senyawa  polifenol  akan  optimal  jika  di  ektraksi  dengan pelarut  polar  daripada  nonpolar  [19].  Wang  dan  Helliwell melaporkan  bahwa  pelarut  etanol  lebih  baik  untuk  mengikat polifenol  daripada  metanol  dan  aseton  [20].  Tetapi  peneliti lain menyarankan bahwa aseton adalah pelarut yang lebih baik untuk  ekstraksi  polifenol  daripada  air  dan  kloroform  [21]. Didalam  penelitiannya,  Qasim,  et.  al.  menyimpulkan  bahwa ekstrak  metanol  80%  adalah  pelarut  yang  lebih  baik  untuk ekstraksi polifenol dari tanaman halofit dibandingkan pelarut lainnya  (air,  etanol  80%,  aseton  dan  kloroform)  [22].  Hasil penelitian  Chanda et.  al. ,  yang  mengekstraksi  12  macam tanaman herbal India dengan pelarut eter, aseton dan metanol, disimpulkan  bahwa  total  kandungan  flavonoid  lebih  tinggi didapatkan  pada  pelarut  metanol,  dan  sedangkan  kandungan fenolik  sangat  sedikit  jumlahnya  [23].  Temuan  di  atas menunjukkan bahwa hasil polifenol dan flavonoid tergantung pada  jenis  dan  polaritas  pelarut  ekstraksi,  di  samping karakteristik fisik sampel tanaman [24].
IC 50 hasil  dari  uji  aktivitas  antioksidan  dengan  metode DPPH  dapat  dilihat  pada  Tabel  4.  Nilai  IC 50 ekstrak  daun
kesambi  dengan  pelarut  metanol  merupakan  terendah (16,12μg/mL)  dibandingkan  dengan  pelarut  etanol  96% (20,43μg/mL), dan air (904,28μg/mL). Sedangkan  nilai IC 50 asam askorbat sebagai standart adalah 7,16 μg/mL. Semakin besar  nilai  IC 50 ,  maka  aktivitas  antioksidan  akan  semakin lemah,  sedangkan  semakin  kecil  nilai  IC 50 ,  maka  aktivitas antioksidan  akan  semakin  besar.  Nilai  IC 50 pada  tabel menunjukkan  bahwa  aktivitas  antioksidan  yang  terbaik  di antara  3  pelarut  ini  adalah  ekstrak  kesambi  dengan  pelarut metanol.  Bahkan  nilai  IC 50 ekstrak  daun  kesambi  dengan pelarut  metanol  hanya  dua  kali  lipat  dari  nilai  IC 50 standart (asam  askorbat).  Sehingga  menggunakan  pelarut  metanol hasil  aktivitas  antioksidan  ekstrak  daun  kesambi  akan mendekati  nilai  aktivitas  antioksidan  asam  askorbat.  Pada penelitian  yang  dilakukan  oleh  Truong et.  al .,  didapatkan ektrak  tanaman Severinia  buxifolia dengan  pelarut  metanol memiliki  efek  antioksidan  yang  paling  tinggi  (IC50 16.99μg/mL)  dibandingkan  dengan  pelarut  air,  etanol, kloroform, diklorometan dan aseton [18].
Nilai  IC 50 ekstrak  daun  kesambi  dengan  pelarut  air  jauh sangat  tinggi.  Hal  ini  disebabkan  pelarut  air  hanya  mampu mengikat  sedikit  senyawa  metabolit  sekunder  pada  daun kesambi seperti yang ditunjukkan pada hasil uji reaksi warna. Tingginya nilai IC50 ekstrak daun kesambi dengan pelarut air juga dilaporkan oleh penelitian Situmeang et. al. dimana nilai IC50  yang  diperoleh  sebesar  272,28ppm  [17].  Perubahan polaritas  pelarut  dapat  mempengaruhi  ekstraksi  gugus senyawa  antioksidan  yang  dipilih  dan  aktivitas  antioksidan selanjutnya  [25].  Boulekbache-Makhlouf et.  al .  melaporkan bahwa  senyawa  golongan  fenol  dan  turunannya  (flavonoid dan tanin) merupakan agen pereduksi dan penghambat radikal bebas  yang  kuat  [26].  Berdasarkan  hasil  penelitian  ini, golongan senyawa  yang diketahui terkandung dalam ekstrak daun  kesambi  melalui  uji  reaksi  warna  (diantaranya,  fenol, flavonoid  dan  tanin)  diduga  bertanggung  jawab  terhadap aktivitas antioksidan ekstrak daun kesambi.

## Tabel 4
Nilai IC 50 ekstrak daun kesambi pada berbagai pelarut
Pelarut IC 50 (μg/mL) Rerata IC 50 Ulangan 1 Ulangan 2 Ulangan 3 Metanol 15,38 17,70 15,27 16,12 Etanol 96% 20,34 20,51 20,43 20,43 Air 903,89 905,29 903,67 904,28 Asam Askorbat 7,17 7,15 7,16 7,16

## 4. Kesimpulan
Berdasarkan  hasil  uji  reaksi  warna  dan  uji  aktivitas antioksidan dengan menggunakan metode DPPH disimpulkan bahwa  ekstrak  daun  kesambi memiliki  potensi sebagai antioksidan  dan  besarnya  kemampuan  antioksidan  daun kesambi ditentukan oleh pelarut yang digunakan dalam hal ini pelarut  metanol  yang  paling  baik  aktivitas  antioksidannya. Golongan  senyawa  yang  diduga  bertanggungjawab  terhadap aktivitas  antioksidan  ekstrak  daun  kesambi  berdasarkan  uji reaksi warna adalah fenol, flavonoid dan tanin.

## Ucapan Terimakasih
Penelitian  ini  didanai  dari  Dana  Bantuan  Penelitian BOPTN 2019 dari Universitas Negeri Maulana Malik Ibrahim Malang.

## Daftar Pustaka
[1] CABI.  2020. Schleichera  oleosa  (Macassar  oil  tree).
[ONLINE]. Available from :
https://www.cabi.org/isc/datasheet/49004#toidentity  [cited  21 may 2020].
[2] Hanum, I. Faridah. 1997. Plant Resources of South-East Asia. [ed.]  L.J.G.  van  der  Maesen.  Vol.  11.  Leiden :  Backhuys Publishers.
[3] Suita,  Eliya.  2012. Kesambi  (Schleichera  oleosa  MERR. Bogor :  Balai  Penelitian  Teknologi  Perbenihan  Tanaman Hutan
[4] Silitonga, A., Masjuki, H., Mahlia, T., Onga, H. C., Kusumo, F.,  Aditiya,  H.,  &  Ghazalia,  N. Schleichera  oleosa  L oil  as feedstock for biodiesel production. Fuel. 2015;156:63-70.
[5] Thind, T. S., Singh, R., Kaur, R., Rampal, G., & Arora, S.  In vitro  antiradical  properties  and  total  phenolic  contents  in methanol  extract/fractions  from  bark  of Schleichera  oleosa (Lour.)  Oken . Medicinal  Chemistry  Research.  2011;20:254– 260.
[6] Srinivas,  K.,  &  Baboo,  R.  C.  GC-MS  Study  of Schleichera oleosa (Lour.) Oken. IJCPR, 2011;2(2):106-109.
[7] Goswami, S., Singh, R. P., & Gilhotra, R. The effect of isolated quercetin of the leaf extract of Schleichera oleosa (lour) oken on Ascardia  galli. International  Journal  of  Pharmaceutical Research. 2020;12(2):544-554.
[8] Thatavong,  X.  2015.  Chemical  Constituents  And  Biologycal Activities From Crude Hexane Extract Of Schleichera oleosa Fruits . [MD thesis]. Burapha : Burapha University.
[9] Tiwari,  N.,  &  Pandey,  V.  Qualitative  and  Quantitave Phytochemical Screening of Secondary Metabolites in Seeds of Schleichera Oleosa (Lour.). IJSRSET. 2017;3(6):357-359.
[10] Soundararajan,  M.,  &  Sivakkumar,  T.  Pharmacognostical investigation,  phytochemical  studies  of Schleichera  oleosa (lour) oken leaves. Int. J. Res. Pharm. Sci. 2017;8(2):109-119.
[11] Wojdyło,  A.,  Oszmiański,  J.,  &  Czemerys,  R.  Antioxidant activity  of  phenolic  compounds  in  32  selected  herbs. Food Chemistry. 2001;105(3):940-949.
[12] Panche,  A.,  Diwan,  A.,  &  Chandra,  S.  Flavonoids:  an overview. J Nutr Sci. 2016;5(e47):1-15.
[13] Altemimi,  A., Lakhssassi, N., Baharlouei,  A., Watson,  D., & Lightfoot,  D.  Phytochemicals  :  Exctraction,  Isolation,  and Identification  of  Bioactive  Compounds  from  Plant  Extracts. Plants. 2017;6(42):56-72.
[14] Hutzler, P., Fischbach, R., Heller, W., Jungblut, T., Reuber, S., Schmitz, R., . . . Schnitzler, J.-P. Tissue localization of phenolic compounds  in  plants  by  confocal  laser  scanning  microscopy. Journal of Experimental Botany. 1998;49(323):953–965.
[15] Ghisalberti,  E.  2008.  Detection  and  Isolation  of  Bioactive Natural  Products.  In  S.  Colegate,  &  R.  Molyneux. Bioactive Natural  Products  :  detection,  Isolation  and  Structural Determination . Boca Raton: CRC Press.
[16] Harris, D. 2010. Quantitative Chemical Analysis . New  York: W. H. Freeman and Company.
[17] Situmeang,  B.,  Nuraeni,  W.,  Ibrahim,  A.  M.,  &  Silaban,  S. Analysis  of  secondary  metabolite  compounds  from  leaves extract kesambi (Schleichera oleosa) and antioxidant activity test. Jurnal Pendidikan Kimia. 2016;8(3):164-168.
[18] Truong, D.-H., Nguyen, D. H., Ta, N. T., Bui, A. V., Do, T. H., & Nguyen, H. C. Evaluation of the Use of Different Solvents for  Phytochemical  Constituents,  Antioxidants,  and  In  Vitro Anti-Inflammatory Activities of Severinia buxifolia . Journal of Food Quality . 2019;ID 8178294:1-9.
[19] Liu,  X.,  Dong,  M.,  Chen,  X.,  Jiang,  M.,  Lv,  X.,  &  Yan,  G. Antioxidant activity and phenolics of an endophytic Xylaria sp. from Ginkgo biloba. Food Chemistry. 2007;105(2):548-554.
[20] Wang, H., & Helliwell, K. Determination of flavonols in green and  black  tea  leaves  and  green  tea  infusion  by  high- performance liquid chromatography. Food Research International. 2001;34(2-3):223-227.
[21] Hayouni,  E.,  Abderrabba,  M.,  Bouix,  M.,  &  Hamdi,  M.  The effect  of  solvents  and  extraction  method  on  the  phenolic contents and biological activities in vitro of Tunisian Quercus coccifera  L.  and  Juniperus  phoenicea  L.  fruit  extracts.  Food Chemistry . 2007;105(3):1126-1134.
[22] Qasim, M., Aziz, I., Rasheed, M., Gul, B., & Khan, M. Effect of extraction solvents on polyphenols and antioxidant activity of medicinal halophytes. Pak. J. Bot. 2016;48(2):621-627.
[23] Chanda,  S.,  Bhayani  ,  D.,  &  Desai,  D.  Polyphenols  and Flavonoids  of  Tweleve  Indian  Medicinal.  The  Bioscan. 2013;8(2):595-601.
[24] Buhmann, A., & Papenbrock, J. An economic point of view of secondary compounds in halophytes. Functional Plant Biology. 2013;40:952–967.
[25] Razali,  N., Mat-Junit, S.,  Abdul-Muthalib,  A., Subramaniam, S.,  &  Abdul-Aziz,  A.  Effects  of  various  solvents  on  the extraction  of  antioxidant  phenolics  from  the  leaves,  seeds, veins  and  skins  of  Tamarindus  indica  L.  Food  Chemistry. 2012;131(2):441-448.
[26] Boulekbache-Makhlouf,  L.,  Medouni,  L.,  Medouni,  S., Arkoub,  L.,  &  Madani,  K.  Effect  of  solvents  extraction  on phenolic  content and antioxidant activity  of the byproduct of eggplant. Industrial Crops and Products. 2013;49:668-674.