## EduMatSains
Jurnal Pendidikan, Matematika dan Sains http://ejournal.uki.ac.id/index.php/edumatsains

## JARAK GENETIK DAN KEKERABATAN TIGA JENIS BADAK DI DUNIA BERDASARKAN ANALISIS MtDNA
Handayani 1* , Dedi Duryadi 2 , Hadi Alikodra 3
1 Universitas Islam As-Syafi’iyah
2,3 Institut Pertanian Bogor, Bogor, Indonesia
Diterima: 31 Oktober 2020     Direvisi: 08 Januari 2021     Diterbitkan : 10 Januari 2021

## ABSTRACT
The  family  Rhinocerotidae  is  distinct  and  well  defined,  but  systematic  relationships  among  the  four  genera evaluated on the basis of geographical distribution of the different genera.  The purpose of the research is to find out  the  genetic  distance  of  rhinos  in  the  world.  Samples  of  Sumatran  rhinoceros  (Indonesia)  are  from  SRS (Sumatran Rhino Sanctuary) Way Kambas National Park, while for Indian rhinoceros and white African rhinos. Amplification of cytochrome oxidase 1 (CO1) genes in mitochondrial DNA ( mtDNA) uses a specific primer for COI.  The  two  primary  pairs  are  Primer  to  amplify  the  partial  CO1  sequence  (RHCO1F  &  RHCO1R).  CO1 amplification  process    PCR  conditions  used  are:  predenaturation  at  94 0 C,  followed  by  the  main  cycle denaturation  stage  at  94 0 C  for  45  seconds,  primary  annealing  stage  (annealing)  at  58 0 C.  analyzed  provides genetic distance ranging from (0.016) to (0.147) for each species.  Analysis of 711 bp of rhino DNA sequences can  be  shown  in  the  form  of  a  matrix  of  genetic  differences.  The  genetic  distance  of  the  white  African rhinoceros  (Ceratorium  simum)  with  the  Sumatran  torgamba  rhinoceros  is  (0.142),  while  with  the  Indian rhinoceros  (0.147)  and  the  genetic  distance  between  the  Sumatran  rhinos  themselves  there  is  a  difference  that the Sumatran rhino Bina differs by (0.136-0.147) with the other three individuals, while Torgamba has a genetic distance  with  Rosa  of  (0.014)  but  with  a  very  close  genetic  distance  (0.007),  and  Andalas  (0.017),  while  the genetic distance is close to Bina (0.014) with Rosa (0.014).
Keywords: Rhinocerotidae, Genetic Distance, Cytochrome Oxidase 1 (CO1)

## PENDAHULUAN
Badak  Sumatera  ( Dicerorhinus  sumatrensis ) pernah menyebar luas di Asia Tenggara, saat ini diperkirakan tinggal sekitar 30 individu di Sumatera  dan  Kalimantan  (Brandt  et  al. 2018).    Dari  tiga  jenis  badak  yang  hidup  di Asia,  dua  jenis  diantaranya  hidup  di Indonesia,  namun  kedua  jenis  badak  ini statusnya  terancam  punah  ( endangered ).
Badak  Sumatera  tersebar  di  Pulau  Sumatera dan Kalimantan (Borneo).
Informasi  terakhir  di  Kalimantan dijumpai di Kutai Barat (Propinsi Kalimantan Timur) oleh tim WWF Indonesia.  Hal  ini  memberi  harapan  baru upaya konservasi badak Sumatera yang dapat dilakukan  di  masa  depan  (Atmoko  et  al. 2016) . Pada  28  November  2018  berhasil diselamatkan  satu  ekor  Badak  Sumatera berjenis  kelamin  betina  pada  tempat  yang sama  di  Kabupaten  Kutai  Barat,  Provinsi Kalimantan  Timur  (Press  rilist  Menteri Lingkungan  Hidup  dan  Kehutanan  RI
Nomor: SP. 663/HUMAS/PP/HMS.3/11/2018). Seperti diketahui  Badak  Sumatera  masuk  dalam katagori Critically  Endangered  species ( IUCN  Red  List,  2008 )  di  Sumatera  dan Kalimantan.
Menurut
Kurniawanto (2007) kekhawatiran  ini  muncul  berkaitan  dengan adanya  beberapa  faktor  yang  mengancam kelestarian  satwa  ini.  Faktor-faktor  tersebut antara  lain  seperti  adanya  perburuan  liar, perusakan  habitat,  penyempitan  maupun fragmentasi  landscape  dalam  habitat  satwa ini. Selain faktor-faktor itu, kekhawatiran ini juga  diperkuat  oleh  karakter  dari  karakter perkembangbiakan badak sumatera ( Dicerorhinus  sumatrensis )  itu  sendiri. Spesies ini terkenal sebagai “slow breeders” atau  perkembangbiakannya  lambat,  padahal di  sisi  lain  badak  sumatera  termasuk  satwa besar yang membutuhkan daerah jelajah dan pergerakan  yang  luas.  Kebutuhan  aktivitas untuk menjelajah  areal  yang  luas  ini  sering beresiko bagi keguguran janin yang dikandung  satwa betina  yang  sedang hamil.Penelitian  keragaman  genetik  dari populasi Badak Sumatera merupakan langkah penting yang harus dilakukan, maka langkah konservasinya lebih terarah.
Menurut  Alikodra  (2002)  populasi satwa  liar  dapat  berkembang  stabil  ataupun menurun  sesuai  dengan  kondisi  perubahan komponen  lingkungannya.  Selain  faktor diatas    terancamnya  populasi  badak  juga
akibat  hidupnya  yang  soliter  dan  sensitif terhadap  aktivitas  manusia  dan  pengganggu lainnya, serta proses perkembangbiakan yang lambat dengan keturunan yang dihasilkannya pun  sangat  terbatas.  Badak  Jawa  dan  badak Sumatera  sudah  sangat  terancam  punah. Tumpuan terakhir bagi keduanya untuk dapat bertahan  hidup  di  habitat  alaminya  hanya  di Indonesia.  Pada  2007,  populasi  badak  Jawa di  Vietnam  yang  tersisa  hanya  sekitar  3-7 individu,  namun  pada  tahun  2012  sudah dinyatakan  punah  ( Ministry  of  Forestry  the Republic of Indonesia , 2007).
Hasil  kajian  berbagai  pihak  telah menetapkan utilitas urutan DNA mitokondria dalam membedakan spesies hewan. Beberapa dekade terakhir genetika molekuler memiliki peran penting membantu, memperjelas,  dan  menentukan  identifikasi spesies terutama yang mempunyai hubungan kekerabatan dekat ( criptic species ). Pendekatan  DNA  molekuler  dalam  bidang taksonomi  telah  digunakan  sejak  20  tahun yang  lalu  dan  saat  ini  telah  tersedia  akses protokol lebih cepat dan besar (Borisenko et al. 2008).
Teknik  DNA  molekuler  ini  diketahui dapat digunakan sebagai alat bantu identifikasi  jenis  melalui  urutan  sekuen barkode  DNA  dari  gen  CO1  ( Cytochrome  c oxidase subunit -1) DNA mitokondria (Hebert  et  al.  2003).  Gen  CO1  diketahui memiliki variasi dalam spesies (intraspesies) rendah, tetapi mempunyai variasi antar taksa
(interspesies)  tinggi  (Ward  et  al.  2005; Hajibabaei  et  al.  2006).  Gen  CO1  diketahui memiliki variasi dalam spesies (intraspesies) rendah, tetapi mempunyai variasi antar taksa (interspesies)  tinggi  (Ward et  al .  2005; Hajibabaei et  al .  2006).Amplifikasi  fragmen gen  CO1  menggunakan  primer  standard DNA barcode yang  dikembangkan  Ivanova et  al.  (2006)  yang  sudah  banyak  digunakan untuk identifikasi spesies mamalia.

## METODE PENELITIAN
Sample penelitian badak sumatera (Indonesia)  berasal  dari  SRS  (Suaka  Rhino Sumatera)  Taman  Nasional    Way  Kambas, sample  berupa  darah  diambil  pada  bulan desember  2008,  sampel  darah  terdiri  atas  4 ekor  badak  sumatera  yang  berasal    dari daerah  yang    berbeda  yaitu  (Rosa  berasal dari  TN.  Bukit  Barisan  Selatan/TNBBS  & Bina  berasal  dari  Bengkulu)  dan  2  ekor badak jantan asli  indonesia tetapi telah lama ditangkarkan di kebun binatang Inggris (Los Angeles  Zoo)  dan  Amerika  (Cincinati  Zoo) yaitu  (Torgamba  berasal  dari  Riau  & Andalas  kedua  induknya  berasal  dari Bengkulu) Darah diambil dengan menggunakan  disposible  syringe  10  ml  dari masing-masing  individu  badak,  kemudian darah  dimasukkan  kedalam  tabung  reaksi yang telah diisi alkohol absolut sebanyak 10 ml, dan di beri label menurut masing-masing sampel  individu.  Tabung  yang  telah  berisi darah ini  dan kemudian  disimpan rapi  untuk
selanjutnya  dibawa  ke  laboratorium,  untuk badak  India  dan  badak  Afrika  putih  sampel berupa  Sequence  data  runutan  badak  India ( Rhinoceros  unicornis)  dengan kode  akses (NC001779), Ceratotherium  simum (badak putih Afrika) akses kode akses (NC001808). Ekstraksi  DNA  Untuk  sampel  darah, ekstraksi menggunakan Qiagen Kit (QIAamp DNA Stool Mini Kit (Qiagen, 2013).
Amplifikasi  gen cytochrome oxidase 1 (CO1)  pada  mitokondrial  DNA  (mtDNA) menggunakan  primer  spesifik  khusus  CO1 yang  dirancang  berdasarkan  sekuen  badak India  ( Rhinoceros  unicornis)  dengan kode akses  (NC001779).  Primer  tersebut  didesain menggunakan software primer3 ( http://www- genome.wi.mit.edu/cgi- bin/primer/primer3_www.cgi ).
Kedua  pasang  primer  tersebut  yaitu Primer  untuk  mengamplifikasi  sekuen  CO1 partial  (RHCOIF  &  RHCOIR).  Proses amplifikasi CO1 Kondisi PCR yang digunakan  adalah  :  predenaturasi  pada  suhu 94 0 C, dilanjutkan dengan siklus utama, yaitu tahap  denaturasi  pada  suhu  94 0 C  selama  45 detik,  tahap  penempelan  primer  ( annealing ) pada  suhu  58 0 C,  dan  tahap  polimerasi ( extension )  pada  suhu  72 0 C  diulang sebanyak  35  siklus.  Reaksi  PCR  diakhiri dengan  polimerasi  ( final  exstension )  pada suhu  72 0 C.  Dan  proses  amplifikasi  CO1 tahap  penempelan  primer  ( annealing )  pada suhu  58 0 C.    Reaksi  PCR  untuk  tiap campuran baik pada daerah D-loop dan CO1
adalah  50  μl  dengan  komposisi  air  34,25μl, 5  μl  buffer  PCR,  MgCl  2,5  μl,  1  μl  dNTP mix,primer  RHLDF  atau  RHCOIF,  primer RHLDR  atau  RHCOIR,  5  μl  DNA  templete dan 0,25 μl Taq DNA polymerase (Promega).
Analisis data-data polimorphisme panjang fragmen dianalisis dengan menggunakan  program  MEGA  versi  6.0 Beta Release (Moleculer Evolutionary Genetic  Analysis)  (Tamura  et  al.  2007). Sampel    badak  putih  Afrika  ( Ceratorium simum) sequence  dengan  kode  akses (NC001808),  badak  hitam  Afrika  ( Diceros bicornis )  kode  akses  (NC388287),  badak India  ( Rhinoceros  unicornis) kode  akses (NC001779). Analisis filogeni menggunakan perangkat  lunak  MEGA  versi  6.0  dengan metode  bootstrapped  Neighbor-Joining  (NJ) memakai  1000  kali  pengulangan.  Hasil analisis  program  MEGA  tersebut  akan diperoleh  matriks  jarak  genetik  berdasarkan persamaan basa nukleotida.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Jarak  genetik  digunakan  untuk  melihat kedekatan  hubungan  genetik  antar  individu badak  Sumatera  dan  spesies  badak  lain menggunakan Pairwise  Distance dengan model Kimura  Two  Parameter dianalisa memberikan  jarak  genetik  berkisar  antara (0,016)  sampai  (0,147)    untuk  masing- masing  spesies.    Hasil  analisis  sekuen  DNA badak  sepanjang  711  bp  dapat  ditunjukkan
berupa  matriks  perbedaan  genetik  antara badak Sumatera dan badak India serta  badak putih  Afrika    yang  datanya  diambil  dari GenBank.
Jarak  genetik  badak  Afrika  putih (Ceratorium  simum)  dengan  badak  sumatera torgamba  adalah  (0,142),  sedangkan  dengan badak  india  (0,147)  dan  jarak  genetik diantara  badak  sumatera  sendiri  terjadi perbedaan  yaitu    badak  Sumatera  Bina berbeda sebesar (0.136-0.147) dengan ketiga individu  lainnya,    sedangkan  Torgamba memiliki jarak genetik dengan Rosa  sebesar (0.014)    namun  dengan  bina  jarak  genetik yang  sangat  dekat  (0.007),  dan  Andalas (0.017),  sedangkan  jarak  genetik  andalas dengan Bina (0.014) dengan Rosa (0.014).
Hasil  perhitungan  berdasarkan  daerah CO1  menunjukkan  bahwa  perbedaan  jumlah cula tidak mempengaruhi hubungan kekerabatan antara badak sumatera (Indonesia)  dengan  badak  India  hubungan kekerabatan  ini    lebih  didasarkan  pada sebaran geografinya. Sebaran geografi badak Sumatera dilaporkan sampai ke daerah India yang merupakan habitat Rhinoceros unicornis. Menurut  WWF  (2002),  badak Sumatera  mempunyai  daerah  penyebaran yang  luas  yaitu  meliputi  daerah  Bengal (India), Burma, Pegunungan Thailand, Kamboja, Vietnam, Laos dan Malaysia.
Variasi  genetik  telah  terbukti  terkait langsung  dengan  daya  hidup  suatu  populasi hidupan liar. Beberapa bukti yang
berhubungan  dengan  penurunan  keragaman genetik berakibat pada penurunan kemampuan  bertahan  hidup  dan  performa individu seperti keberhasilan reproduksi atau
daya  tahan  terhadap  penyakit.  Namun demikian pola ini tetap ditemukan pengecualian  pada  hidupan  liar  di  alam (Frankham et al. 2010).
Tabel 1. Jarak genetiik pada badak India dan badak putih Afrika GenBank dan empat individu  badak Sumatera
R. unicornis       C. simum Torgamba     Andalas     Rosa    Bina

## R. unicornis -
C. simum 0.147                         -
Torgamba           0.142                     0.143               - Andalas              0.142                     0.143            0.017               - Rosa                   0.136                     0.133            0.014              0.014      - Bina                    0.142                     0.144            0.007             0.014     0.016

## Hubungan Kekerabatan Badak Sumatera Berdasarkan Sekuen CO1
Torgamba/RH1/M/Riau
Bina/RH4/F/Bengkulu Andalas/RH2/M/Bengkulu Rosa/RH3/F/TNBBS/Lampung Rhinoceros unicornis/India Ceratotherium simum/Afrika 92 100 80 0.01
Gambar  1. Dendogram Neighbor-Joining dengan badak Sumatera, badak India dan badak putih Afrika
Oleh  sebab  itu  pengetahuan  secara komprehensif  tentang  keragaman  genetik spesies dalam atau antar populasi merupakan langkah  penting  untuk  merancang  rencana yang  bertujuan  menjaga  keragaman  genetik pada generasi selanjutnya (Li et al. 2008).
Berdasarkan dendogram  terlihat badak Asia  terpisah  dengan  jelas  dengan  badak Afrika.  Akan  tetapi  antara  badak  Sumatera dan  badak  India  walaupun  berbeda  dalam jumlah  culanya  tetap  masuk  dalam  satu kelompok (Gambar 1).
Dari  gambar  1  terlihat  bahwa  badak putih  Afrika  berbeda  kelompok  dengan badak  Asia.  Di  dalam  kelompok  badak  Asia terlihat  bahwa  badak  India  sama  satu kelompok dengan badak Sumatera (Indonesia)  walaupun  memiliki  perbedaan jumlah  cula.  Dan  di  dalam  badak  Sumatera (Indonesia) sendiri terjadi keragaman. Torgamba  terlihat  satu  kluster  dengan  Bina, namun  Andalas  dan  Rosa  terlihat  jauh kekerabatannya  baik  dengan  Torgamba maupun Bina.
Torgamba  menunjukkan  satu  kluster 92%    dengan  Bina,  hal  ini  perlu  mendapat perhatian  di  dalam  proses  reproduksinya bahwa  Torgamba  tidak  boleh  kawin  dengan Bina karena memiliki hubungan kekerabatan yang sangat dekat yaitu sebesar 92%  jika hal ini  terjadi  maka  akan  terjadi inbreeding . Sedangkan  Andalas  terlihat  jauh  hubungan kekerabatannya  baik  dengan  Rosa  ataupun Bina, hal ini adalah kesempatan yang sangat
baik  di  dalam  proses  reproduksinya  bahwa Andalas  boleh  kawin  dengan  kedua  badak betina tersebut. Dendogram ini tidak berubah ketika  ditambahkan  dengan  2  spesies  badak Afrika  ( Ceratotherium  simum dan Diceros bicornis )  yaitu  badak  Asia  terpisah  dengan badak  Afrika.  Akan  tetapi  antara  badak Sumatera dan badak India walaupun berbeda dalam  jumlah  culanya  tetapi  masuk  dalam satu kelompok/kluster.
Dari  data  CO1,  badak  bercula  satu Asia  dan  badak  bercula  dua  Asia  masuk dalam  satu  kelompok  (Cluster).  Walaupun sama-sama  bercula  dua,  badak  Sumatera terpisah  dari  badak  bercula  dua  Afrika. Dengan demikian pengelompokan dan penamaan  genus  berdasarkan  jumlah  cula tidak  tepat  lagi  secara  genetik.  Pada  badak Afrika  penamaan  genusnya  tidak  didasarkan atas jumlah cula namun untuk membedakannya dilakukan berdasarkan warna kulit.

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil sequence CO1 menunjukkan  bahwa  jarak  genetik  berkisar antara (0,016) sampai (0,147)  untuk masing- masing  spesies.    Hasil  analisis  sekuen  DNA badak  sepanjang  711  bp  dapat  ditunjukkan berupa  matriks  perbedaan  genetik  antara badak Sumatera dan badak India serta  badak putih  Afrika    yang  datanya  diambil  dari GenBank.    Jarak  genetik  badak  Afrika  putih (Ceratorium  simum)  dengan  badak  sumatera
torgamba  adalah  (0,142),  sedangkan  dengan badak  india  (0,147)  dan  jarak  genetik diantara  badak  sumatera  sendiri  terjadi perbedaan  yaitu    badak  Sumatera  Bina berbeda sebesar (0.136-0.147) dengan ketiga individu  lainnya,    sedangkan  Torgamba memiliki jarak genetik dengan Rosa  sebesar (0.014)    namun  dengan  bina  jarak  genetik yang  sangat  dekat  (0.007),  dan  Andalas (0.017),  sedangkan  jarak  genetik  andalas dengan Bina (0.014) dengan Rosa (0.014).
Dari  data  CO1,  badak  bercula  satu Asia  dan  badak  bercula  dua  Asia  masuk dalam  satu  kelompok  (Cluster).  Walaupun sama-sama  bercula  dua,  badak  Sumatera terpisah  dari  badak  bercula  dua  Afrika. Dengan demikian pengelompokan dan penamaan  genus  berdasarkan  jumlah  cula tidak  tepat  lagi  secara  genetik  bahwa perbedaan  tersebut  terjadi  karena  adanya pemisahan geografi perbedaan tersebut tidak berhubungan dengan jumlah culanya.

## DAFTAR PUSTAKA
Alikodra  HS.  2002. Pengelolaan  satwaliar jilid  1 .  Departemen  Pendidikan  dan kebudayaan Direktorat Pendidikan Tinggi  Pusat  Antar  Universitas  IPB. Bogor.
Atmoko,  T.,  BS.  Sitepu,  Mukhlisi,  SJ. Kustini  &  R.  Setiawan.  2016. Jenis Tumbuhan  Pakan  Badak  Sumatera (Dicerorhinus  sumatrensis  harrissoni) di  Kalimantan .  Balai  Penelitian  dan
Pengembangan  Teknologi  Konservasi Sumber  Daya  Alam.  Balikpapan, Kalimantan Timur.
Avise,  JC.  2004. Molecular  Markers, Natural History and Evolution . Sinauer Associates, Sunderland, MA.
Brandt,  JR.,  PJ.  van  Coeverden  de  Groot, KE.  Witt,  PK.  Engelbrektsson,  KM. Helgen,  RS.  Malhi,  OA.  Ryder  &  AL. Roca.  2018.  Genetic  structure  and diversity  among  historic  and  modern population of the Sumatran Rhinoceros ( Dicerorhinus  sumatrensis ). Journal Heredity 109(5): 553-565.
Borisenko, AV., BK. Lim, NV. Ivanova, RH. Hanner  &  PDN.  Hebert.  2008.  DNA barcoding in surveys of small mammal communities: afield study in Suriname. Molecular  Ecology  Resources 8:471- 479.
Cunningham, Meghen MC. 2001 .Biological identification systems: genetic markers. Rev.  sci.  tech.  Off.  int. Epiz. 20 (2): 491-499.
Duryadi  D.  2005. Prinsip-prinsip  dalam teknologi  molekuler .  Pelatihan  singkat Teknik  Biologi  Molekuler  ”kerjasama Pusat  Studi  Ilmu  Hayati,  Lembaga penelitian dan Pemberdayaan Masyarakat  Institut  Pertanian  Bogor dan  Direktorat  Jenderal  Pendidikan Tinggi Depdiknas. Bogor.  .
Frankham,  R.,  JD.  Ballou,  DA.  Briscoe. 2010. Introduction  to  Conservation
Genetics .  Cambridge  University  Press, Cambridge.
Foose,  TJ.  &  Strien  van.  N.  (Editors).  1997.
Asian  Rhinos  Status  Survey  and Conservation  Action  Plan.  IUCN, Gland,  Switzerland,  and  Cambridge, UK. 112+v pp.
Hebert,  PDN., A. Cywinska, SL. Ball & JR. deWaard. 2003. Biological identifications  through  DNA  barcodes. Proceedings  of  the  Royal  Society  of London. Biological Sciences, Series B. 270: 313–322.
Hajibabaei  M.,  DH.  Janzen,  JM.  Burns,  W.
Hallwachs  &  PDN.  Hebert.  2006. DNA  barcodes  distinguish  species  of tropical Lepidoptera. Proceedings National  Academy  of  Sciences .  USA. 103(4) 968-971.
Ivanova,  NV.,  JR.  deWaard,  PDN.  Herbert. 2006.  An  inexpensive,  automation- friendly  protocol  for  recovering  high quality  DNA. Molecular  ecology
Notes . doi:10.1111/j.1471- 8286.2006.0147x. Hebert PDN,
Cywinska  A,  Ball  SL,  deWaard  JR. 2003. Barcoding animal life: cytochrome  c  oxidase  subunit  1 divergences  among  closely  related species. J  Proc.  R.  Soc.  Lond. B (Suppl.). 270:313–321.
Isnan  W,  Subrata  DD,  Van  strein  NJ.  2005.
Indonesian rhino Conservation Programme  (IRCP)  2004  Annual
report  and  summary  of  relevant  data. Pusat  Konservasi  Badak  Indonesia. Bogor.
Li,  JY., H. Chen, XY. Lan, XJ. Kong &  LJ.
Min.  2008.  Genetic  diversity  of  five Chines  goat  breeds  assessed  by microsatellite  marker. Czech  Journal Animal Sciences 53(8):315-319).
Scott C., T. Foose, JC. Morales, P. Fernando, DJ.  Melnick,  PT.  Boag,  JA.  Davila  & PJ.  Van  Coeverder  De  Groot.  2004. Optimization  of  novel  polymorphic microsatellites  in  the  endangered sumatran rhinoceros (Dicerorhinus sumatrensis). Molecular Ecology Notes
4:194-196.
Steiner,  CC.,  ML.  Houch  &  OA  Ryder.
2018.  Genetic  variation  of  complete mitochondrial  genome  sequences  of the Sumatran rhinoceros ( Dicerorhinus sumatrensis).  Conservation  Genetic 19:397-408.
Tamura,  K.,  G.  Stecher,  D.  Peterson,  A.
Filipski  &  S.  Kumar.  2013.  MEGA  6: Molecular Evolutionary
Genetics Analysis version 6.0. Molecular Biology and Evolution 30: 2725-2729. Tougard C, Delefosse T, Catherine,
Montgelard  C.  2001.  Phylogenetic Relationships  of  the  Five  Extant Rhinoceros  Species  (Rhinocerotidae, Perissodactyla) Based on Mitochondrial  Cytochrome b and  12S
rRNA Genes. J Molecular
Phylogenetics  and  Evolution .  19:34–
44.
Van  Strien  NJ.  1985. The  Sumatran
Rhinocerus  Dicerorhinus  sumatrensis (Fiscer,  1814)  in  The  Gunung  Leuser National  Park,  Sumatera,  Indonesia,
Its
Distribution, Ekology and
Conservation . Privately Publisher.
Ward, RD., TS. Zemlak, BH. Innes, PR. Last
& PDN. Hebert. 2005. DNA barcoding
Australia’s  fish  species. Philosophical
Sciences . 360:1847-1857.
WWF  (World  Wide  Fund).  2002. Asian Rhinos- Spesies Status Report . WWF.
Zein,  MSA.  &  YS.  Fitriana.  2012.  Teknik
Molekuler  untuk  Identifikasi  Spesies Ordo  Cetartiodactyla  Menggunakan
Barcoding DNA. Zoo Indonesia
21(2):1-8.