INNOVATIVE: Journal Of Social Science Research Volume 3 Nomor 3 Tahun 2023 Page 10479-10487 E-ISSN 2807-4238 and P-ISSN 2807-4246
Website: https://j-innovative.org/index.php/Innovative
Perbandingan Antibakteri  Ekstrak Daun Belimbing Wuluh ( Averrhoa bilimbi L.) terhadap Daya Hambat Pertumbuhan Staphylococcus aureus dan Klebsiella pneumonia Secara In Vitro

## Yenita
Universitas , Muhammadiyah Sumatera ’ Utara
Email: yenita@umsu.ac.id
Abstract
Karena, tingginya angka, kematian akibat infeksi dan resistensi antibiotik diperlukan pengobatan alternatif yang memanfaatkan bahan tumbuhan alami yang ada di sekitar kita Daun belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi L.) mengandung metabolit sekunder seperti flavonoid, steroid/terpenoid, tanin dan  saponin  yang  bersifat antibakteri.  Untuk mengetahui  efek antibiotik  ekstrak  daun belimbing wuluh    (Averrhoa  bilimbi  L.)  terhadap  daya  hambat  pertumbuhan  bakteri.  Desain  penelitian  ini laboratorik  dengan  metode  eksperimen  perbandingan  kelompok  statis.  Bakteri  yang  digunakan pada penelitian yaitu Staphyloccocus aureus dan Klebsiella pneumonia yang diuji dengan ekstrak daun belimbing wuluh  pada konsentrasi 40%, 60%, 80% dan 100% lalu diukur zona daya hambat yang  terbentuk.  Hasil  penelitian  menunjukkan  rerata  diameter  zona  hambat  pada  bakteri Staphyloccocus  aureus  sebesar  18,71  mm  dan   Klebsiella pneumonia tidak  ditemui  zona hambat yang terbentuk. Hasil analisis penelitian dengan menggunakan uji tidak berpasangan didapatkan p < 0,05 pada bakteri Staphylococcus aureus. Ekstrak etanol daun belimbing wuluh memiliki aktifitas antibakteri  Staphylococcus  aureus  dan  tidak  dapat  sebagai  antibakteri  pada  bakteri  Klebsiella pneumonia
Kata kunci : Ekstrak daun belimbing wuluh (Averrhoa.bilimbi.L.); Staphyloccocus aureus; Klebsiella pneumonia.

## Abstract
With the high mortality rate due to infection and antibiotic resistance,  alternative therapies using natural plant ingredients around us are needed. Wuluh star fruit leaves contain secondary metabolites such as flavonoids, steroids/terpenoids, tannins, and saponins, which are antibacterial. To determine the antibiotic effect of wuluh starfruit leaves ( Averrhoa bilimbi L.) extract on bacterial growth inhibition. The research design  was  a  laboratory  with  a  static  group  comparison  experimental  method.  In  this  study, Staphylococcus  aureus  and  Klebsiella  pneumonia  were  tested  with  wuluh  starfruit  leaf  extract  at concentrations of 40%, 60%, 80%, and 100%, and the inhibition zones formed were measured. The results showed that the average diameter of the inhibition zone in Staphylococcus aureus bacteria was 18.71 mm and that no inhibition zone was formed in Klebsiella pneumonia. Data analysis was performed using the unpaired t-test and obtained a p-value <0.05 for Staphylococcus aureus. The ethanol extract of wuluh starfruit leaves has an antibacterial activity for Staphylococcus aureus.
Keywords  : Belimbing  wuluh  (Averrhoa  bilimbi  L.)    leaf  extract;  Staphyloccocus  aureus;  Klebsiella pneumonia .

## PENDAHULUAN
Penyakit  infeksi  salah  satu  penyakit  terbanyak  di  Indonesia.  Penyakit  ini  berpotensi menular,  dan  juga  dapat  ditularkan  dari  satu  orang  ke  orang  lain  atau  dari  hewan  ke manusia.(MABEY, 1997) Mikroorganisme seperti bakteri, virus, jamur, dan parasit biasanya menyebabkan infeksi.(Muhtadi et al., 2012)
Bakteri  dapat  ditemukan  pada  tumbuhan,  debu,  limbah,  dan  udara.(Aliviameita  & Puspitasari, 2020) Bakteri  juga dapat ditemukan di usus manusia dan mamalia lain sebagai flora  normal.(MABEY,  1997) Bakteri Staphylococcus  aureus  dan  Klebsiella  pneumonia merupakan salah satu mikroba penyebab infeksi.(Aliviameita & Puspitasari, 2020; Kusuma, 2009)  Berdasarkan  klasifikasi  mikroorganisme,  bakteri Staphylococcus  aureus  tergolong bakteri  gram  positif,  sedangkan Klebsiella  pneumonia  gram  negatif.(Aliviameita  & Puspitasari, 2020)
Infeksi Staphylococcus aureus dapat timbul gejala demam, mual mentah, diare dan ruam di kulit.(Kusuma, 2009) Sebaliknya, Klebsiella pneumonia dapat menyebabkan  abses hati piogenik yang bersifat oportunistik. Infeksi bakteri Klebsiella, lazim terjadi pada pasien rawat inap, terutama di unit perawatan intensif Di beberapa negara, bakteri ini penyebab utama pneumonia.(Aliviameita & Puspitasari, 2020; DiPiro, 2013; Tarina & Kusuma, 2017) Lebih  dari  13  juta  orang  per  tahun  meninggal  karena  penyakit  menular,  yang  juga
merupakan  salah  satu  penyebab  utama  kematian  pada  orang  dewasa  dan  anak-anak. Menurut  Organisasi  Kesehatan  Dunia  (WHO),  penyakit  menular  menyumbang  25%  dari kematian,  setelah  penyakit  kardiovaskular.  Prevalensi  penyakit  menular  di  Timur  Tengah adalah 11,8%, tetapi sangat bervariasi di Asia Tenggara dimana Thailand 33,5%, Singapura 13%, dan Indonesia 23,5%.(Moshinsky, 1959)
Penggunaan yang tidak tepat dari 40 hingga 62% antibiotik yang digunakan dalam terapi bakteri menghasilkan pengembangan Multi Drug Resistance Organisms (MDROs), membuat antibiotik tidak efektif melawan bakteri.(MOHAMMAD ZULFIKAR RASHIF, 2017; Moshinsky,  1959)  Ditambah  semakin  banyak  laporan  efek  samping  obat(DiPiro,  2013), sehingga  membuat trend  kembali  ke  alam(DiPiro,  2013),  sehingga  pengguna  obat tradisional meningkat digunakan masyarakat.(Menteri Kesehatan RI, 2016; Sutrisna, 2016)
Pada umumnya tanaman herbal selain bermanfaat sebagai bumbu masak dapat juga sebagai  proteksi  tubuh  dan  dapat  bermanfaat  sebagai  obat(Yenita,  2010),  karena kandungan metabolit sekunder tanaman yang mermanfaat sebagai antioksidan, misalnya dari  hasil  penelitian,  jahe  emprit  ( Zingiber  Officinale  Rosc.)  juga  dapat  menjadi  proteksi kerusakan ginjal, terhadap logam berat Pbasetat.(Sutrisna, 2016; Yenita, 2010) Sedangkan pada  tanaman  belimbing  wuluh  ( Averrhoa  bilimbi  L.)(Rasab,  2016;  Riwayati,  2012) mengandung  meta-bolit  sekunder  flavonoid,  tanin,  saponin,  dan  triterpenoid,  yang merupakan senyawa aktif dengan berbagai mekanisme kerja yang memiliki efek antioksidan dan antibakteri.(Difo, 2019; Rasab, 2016) Kemampuan flavonoid untuk perkembangan dan perlindungan  terhadap  dampak  infeksi  dan  kerusakan.(Yenita,  2010)  Flavonoid  bekerja dengan menggabungkan dengan protein ekstraseluler dan intraseluler  untuk membentuk senyawa kompleks.(Yenita, 2010)
Menurut  hasil  penelitian,  fraksi  etanol  70%  daun  belimbing  ( Averrhoa  bilimbi L.)(Riwayati, 2012) memberikan daya hambat yang baik terhadap beberapa pertumbuahan bakteri.(Maryam et al., 2015) Untuk itu peneliti ingin membandingkan bagaimana pengaruh pemberian ekstrak daun belimbing wuluh ( Averrhoa bilimbi L.)(Rasab, 2016; Riwayati, 2012) terhadap pertumbuhan bakteri Klebsiella pneumoniae dan Staphylococcus aureus.

## INTRODUCTION
Infectious  diseases  are  one  of  the  most  common  diseases  in  Indonesia.  (1)  These diseases have the potential to be contagious, and can also be transmitted from one person to another or from animals to humans.(1) Microorganisms such as bacteria, viruses, Fungi, and parasites usually cause the infection.(2) Bacteria can be found in plants, dust, waste, and air. (3) Bacteria can also be found in the intestines of humans and other mammals as normal flora. (1) Staphylococcus aureus and Klebsiella pneumonia bacteria are one of the microbes  that  cause  infection.  (3,4)  Based  on  the  classification  of  microorganisms, Staphylococcus aureus bacteria are classified as gram-positive bacteria (3), while Klebsiella pneumonia  is  gram-negative.  (3)  Staphylococcus  aureus  infection  can  cause  fever,  raw nausea,  diarrhea  and  skin  rash.  (4)  On  the  other  hand,  Klebsiella  pneumonia  can  cause opportunistic pyogenic liver abscess. (5) Klebsiella bacterial infection, commonly occurs in hospitalized patients, especially in intensive care units. (5) In several countries, this bacterium is the main cause  of pneumonia.  (3,5,6) More than 13  million  people  per year die  from communicable  diseases,  which  are  also  one  of  the  main  causes  of  death  in  adults  and children. (7) According to the World Health Organization (WHO), communicable diseases contribute 25% of deaths, after cardiovascular disease.(7) The prevalence of communicable diseases in the Middle East is 11.8%(7), but varies greatly in Southeast Asia where is Thailand 33.5%,Singapore 13%, and Indonesia 23.5%.(7) Improper use of 40 to 62% of antibiotics used in bacterial therapy results in the development of Multi Drug Resistance Organisms (MDROs), making antibiotics ineffective against bacteria.(7,8) Plus there are more and more reports of drug side effects(6), thus making the trend is back to nature (6), so that the use of  traditional  medicines  is  increasing  for  the  community.(9,10)  In  general,  herbal  plants besides  being  useful  as  cooking  spices  can  also  protect  the  body  and  can  be  useful  as medicine  (11),  because  they  contain  secondary  plant  metabolites  that  are  useful  as antioxidants, for example from research results, emprit ginger (Zingiber Officinale Rosc.) can also  be  a  protection  kidney  damage,  to  the  heavy  metal  Pb  acetate.(10,11)  Whereas  the starfruit  plant  (Averrhoa  bilimbi  L.)(12,13)  contains  secondary  metabolites  of  flavonoids, tannins, saponins, and triterpenoids, which are active compounds with various mechanism of action that has antioxidant and antibacterial effects.(13,14) The ability of flavonoids to develop and protect against the effects of infection and damage.(11) Flavonoids work by combining  with  extracellular  and  intracellular  proteins  to  form  complex  compounds.(11) According to the results of the study, the 70% ethanol fraction of starfruit leaves (Averrhoa bilimbi  L.)(12)  provided  good  inhibition  of  some  bacterial  growth.(15)  For  this  reason,
researchers  wanted  to  compare  how  the  effect  of  giving  starfruit  leaf  extract  (Averrhoa bilimbi  L.)  (12,13)  on  the  growth  of  Klebsiella  pneumoniae  and  Staphylococcus  aureus bacteria.

## METODE PENELITIAN
Desain  penelitian  adalah  analitik  laboratorik  dengan  metode  eksperimen perbandingan kelompok statis. Ekstrak daun belimbing wuluh ( Averrhoa bilimbi L.) yang digunakan pada konsentrasi 40%, 60%, 80%, dan 100%.  Dalam penelitian ini untuk menguji zona hambat dengan mengukur pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dan Klebsiella pneumoniae,  dimana  kelompok  kontrol  dalam  penelitian  ini  diberi  amoksisilin  sebagai kontrol positif dan aquades sebagai kontrol negatif. Pada kelompok perlakuan dilakukan pengukuran  kemudian  hasil  pengukuran  tersebut  dibandingkan  dengan  hasil  kelompok kontrol.
Penelitian dilakukan di Laboratorium Mikrobiologi dan, Laboratorium Farmakologi Fakultas  Kedokteran  Universitas  Muhammadiyah  Sumatera  Utara  dan  FMIPA  Universitas Sumatera Utara.
Hasil  pengukuran  diameter  zona  hambat  pertumbuhan Staphylococcus aureus(Kusuma,  2009)  dan  Klebsiella  pneumonia(Tarina  &  Kusuma,  2017)  menggunakan jangka sorong sebagai dasar metode pengumpulan data, dan penelitian ini mengumpulkan data primer.
Tabel 1. Kategori . kekuatan , zat . antibakteri , berdasarkan . diameter , zona . hambat.
(Riwayati, 2012)
Diameter . Kekuatan Daya Hambat . •  > 20 mm ,. • Sensitif ., • 6 -19 mm ,. • Intermediate ,.
• < 5 mm
• Resistensi ,.

## Table 1. Antibacterial substances strength category based on diameter zone inhibition.(12)
Diameter . Inhibition Strength
•  > 20 mm ,.
• Sensitive .,
• 6 -19 mm ,.
• Intermediate ,. • < 5 mm • Resist ance ,.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Tabel 2. Hasil , skrining . fitokimia . bahan . alam
SAMPEL . : . DAUN , BELIMBING . WULUH .
Flavonoid ,.
Positif ,. Alkaloid ,.
Negatif ,. Steroida/Terpenoida ,.
Positif ,. Tanin ,.
Positif ,.
Saponin ,. Positif ,.
Dari hasil uji fitokimia di atas, didapati ekstrak daun blimbing wuluh yang digunakan dalam  penelitian  ini  mengandung  antioksidan  flavonoid,  steroid/terpenoid,  tani    dan saponin.

## Uji daya hambat
Berdasarkan hasil uji daya hambat rata-rata zona hambat ekstrak daun belimbing wuluh ( Averrhoa bilimbi L.) pada konsentrasi 40%, 60%, 80%, dan 100% untuk kelompok Staphylococcus aureus(Kusuma, 2009) menunjukkan rata-rata zona bening sebesar 23,62 mm, dan konsentrasi 100% ekstrak belimbing wuluh ( Averrhoa bilimbi L) ini mendekati zona bening rata-rata 34,04 mm dari antibiotik. Sebaliknya, uji inhibisi ekstrak daun belimbing wuluh  ( Averrhoa  bilimbi  L.)  terhadap  bakteri  Klebsiella  pneumoniae  secara  in  vitro menunjukkan tidak ada aktivitas  antibakteri pada konsentrasi masing-masing 40%, 60%, 80%, dan 100%.

## DISCUSSION
Table 2. Results of phytochemical screening of natural products
SAMPLE . : . BELIMBING . WULUH LEAF
Flavonoid ,. Positive ,. Alkaloid ,.
Negative ,. Steroida/Terpenoida ,.
Positive ,. Tanin ,. Positive ,. Saponin ,. Positive ,.
From the results of the phytochemical tests above, it was found that the starfruit leaf extract used in this study contained flavonoid antioxidants, steroids/terpenoids, tani and saponins.

## Resistance test
Based on the results of the inhibition test, the average inhibition zone of starfruit leaf extract  (Averrhoa  bilimbi  L.)  at  concentrations  of  40%,  60%,  80%,  and  100%  for  the Staphylococcus  aureus(4)  group  showed  an  average  clear  zone  of  23,  62  mm,  and  the concentration of 100% extract of belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi L) is close to the clear zone with an average of 34.04 mm of antibiotics. In contrast, inhibition test of starfruit leaf extract  (Averrhoa  bilimbi  L.)  against  Klebsiella  pneumoniae  bacteria  in  vitro  showed  no antibacterial activity at concentrations of 40%, 60%, 80% and 100%, respectively.

## SIMPULAN
Ekstrak daun belimbing wuluh ( Averrhoa bilimbi L.) tidak dapat digunakan sebagai antibiotik terhadap bakteri penyebab pneumonia,  karena Klebsiella pneumoniae mampu menghasilkan enzim  -laktamase(Tsakris et al., 2009) yang memungkinkan menghidrolisis cincin  -laktam yang menyebabkan resistensi antibiotik. Selain itu, bakteri ini dilindungi dari fagositosis dan aksi  bakterisidal  serum  yang  dianggap  sebagai  faktor  virulensi Klebsiella  pneumonia  oleh kapsul polisakarida yang mengelilinginya.
DAFTAR PUSTAKA
Aliviameita, A., & Puspitasari. (2020). Buku Ajar Mata Kuliah.
Difo,  I.  (2019). Uji Efektivitas Ekstrak Daun Belimbing  Wuluh (Averrhoa bilimbi L.) terhadap Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus aureus ATCC 25923 secara In Vitro.
DiPiro,  J.  T.  (2013).  Pharmacotherapy  6Th  Edition.  In Journal  of  Chemical  Information  and Modeling.
Kusuma, S. A. F. (2009). MAKALAH Staphylococcus aureus. Universitas Padjadjaran Fakultas Farmasi, 12.
MABEY,  D.  (1997).    Lecture  Notes  on  Infectious  Diseases,  5th  edition  .  Ed.  B.  K.  Mandal. Blackwell Scientific Inc. 1996. £14.95. ISBN 0 632 03351 7. . Epidemiology and Infection, 118(3). https://doi.org/10.1017/s0950268897217504
Maryam, S., Juniasti, S., & Kosman, R. (2015). UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL BUAH BELIMBING WULUH (Averrhoa bilimbi L.) ASAL KOTA WATAMPONE. Jurnal Ilmiah As-Syifaa, 7(1). https://doi.org/10.33096/jifa.v7i1.21
Menteri  Kesehatan  RI.  (2016).  Permenkes  No.72  Tahun  2016.  2016:4.  In Permenkes  No.72 Tahun 2016. 2016:4. Menteri Kesehatan RI.
MOHAMMAD  ZULFIKAR  RASHIF.  (2017). Isolasi  Dan  Identifikasi  Bakteri  Penyebab  Infeksi Nosokomial Pada Lingkungan Rumah Sakit Margono Soekarjo Purwokerto. 9 – 12.
Moshinsky, M. (1959). Removing obstacles to healthy development. Nucl. Phys., 13(1), 104 – 116. Muhtadi, D., Ambarwati, R., & Yuliani, R. (2012). AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL DAN  FRAKSI  KULIT  BATANG  BELIMBING  WULUH  (Averrhoa  bilimbi  Linn.)  TERHADAP BAKTERI  Klebsiella  pneumoniae  DAN  Staphylococcus  epidermidis  BESERTA BIOAUTOGRAFINYA. Biomedika, 4(2), 1 – 9. https://doi.org/10.23917/biomedika.v4i2.252 Rasab,  S.  (2016). UJI  AKTIVITAS  ANTIMIKROBA  FRAKSI  DAUN  BELIMBING  WULUH (Averrhoabilimbi L.) TERHADAP BEBERAPA MIKROBA UJI (Vol. 152, Issue 3).
Riwayati, D.  (2012).  AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL DAUN BELIMBING WULUH (Averrhoa  bilimbi  L.)  TERHADAP  Escherichia  coli  DAN  Bacillus  sp. Universitas Muhammadiyah Surakarta.
Sutrisna. (2016). Herbal Medicine : Suatu Tinjauan Farmakologis. Muhammadiyah University Press.
Tarina, N. T. I., & Kusuma, S. A. F. (2017). Deteksi Bakteri Klebsiella pneumonia. Jurnal Farmaka, 15Tarina,(2), 119 – 126.
Tsakris, A., Poulou, A., Themeli-Digalaki, K., Voulgari, E., Pittaras, T., Sofianou, D., Pournaras,
S., & Petropoulou, D. (2009). Use of boronic acid disk tests to detect extended-spectrum
β -lactamases in clinical isolates of KPC carbapenemase-possessing Enterobacteriaceae. Journal of Clinical Microbiology, 47(11). https://doi.org/10.1128/JCM.01314-09 Yenita, Y. (2010). Pengaruh pemberian ekstrak jahe (Zingiber officinale Rosc.) terhadap kadar malondialdehiad  (MDA)  ginjal  dan  gambaran  histopatologi  tubulus  proksimal  ginjal mencit yang diberi Pb asetat.