Universitas Ubudiyah Indonesia e-ISSN : 2615-109X
Aktivitas Antimikroba Isolat Bakteri Asam Laktat yang Diisolasi dari Pangan Pliek U terhadap Bakteri Staphylococcus aureus, Escherichia coli dan Khamir Candida albicans secara in Vitro
In Vitro Antimicrobial Activities of Lactic Acid Bacteria Isolates That Are Insulated from Pliek U Food Against Pathogenic Microbes Staphylococcus aureus, Escherichia coli and Candida albican
Annisa Ammalia Kiti *1 , It Jamilah 2 , Herla Rusmarilin 3
1 Program Studi Farmasi, Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Ubudiyah Indonesia, Jalan Alue Naga, Banda Aceh, Indonesia
2 Departemen Biologi Fakultas MIPA Universitas Sumatera Utara
3 Departemen Ilmu dan Teknologi Pangan Fakultas Pertanian Universitas Sumatera Utara
*Korespondensi Penulis : annisaammaliakiti@uui.ac.id

## Abstrak
Bakteri  asam  laktat  (BAL)  telah  diisolasi  dari  pangan  khas  Aceh pliek  u .  Penelitian  ini bertujuan  untuk  mengetahui  daya  hambat  dan  menguji  aktivitas  antimikroba  BAL  terpilih yang  diisolasi  dari pliek  u terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus,  Escherichia  coli dan khamir Candida  albicans .  Hasil  pengujian  menunjukkan  bahwa  isolat  BAL  terpilih  dapat menghambat pertumbuhan kedua bakteri uji, namun tidak dapat menghambat C. albicans . Hal ini ditunjukkan oleh terbentuknya zona bening di sekeliling isolat BAL terpilih. Zona hambat terbesar terhadap bakteri Staph. aureus dan E. coli berturut-turut yaitu ditunjukkan oleh isolat SP3 sebesar 7.7 mm dan SP5 sebesar 28 mm, sedangkan zona hambat terendah berturut-turut ditunjukkan oleh isolat SP4 dan SP5 sebesar 0.25 mm dan SP2 sebesar 1.5 mm.
Kata kunci : pliek u, bakteri asam laktat, bakteri patogen, aktivitas antimikroba

## Abstract
Lactic acid bacteria (LAB) have been isolated from typical Acehnese food. This study aimed to determine the inhibitory potency and to examine antimicrobial activity of the selected LAB isolated  from  pliek  u  against  bacteria  Staphylococcus  aureus,  Escherichia  coli  and  yeast Candida albicans. The results showed that the selected LAB isolates could inhibit the growth of the two test bacteria, but could not inhibit C. albicans. This is indicated by the formation of a clear zone around the selected BAL isolates. The biggest inhibition zone for Staph. aureus and E. coli bacteria consecutively were shown by isolates SP3 7.7 mm and SP5  28 mm, while the lowest inhibition zones were shown by isolates SP4 and SP5 0.25 mm and SP2 1.5 mm.
Keywords: pliek u, lactic acid bacteria, pathogen bacteria, antimicrobial activity
e-ISSN : 2615-109X

## PENDAHULUAN
Pliek  u merupakan  salah  satu  pangan  khas  yang  berasal  dari  Provinsi  Aceh,  Indonesia yang dihasilkan  secara tradisional  dari fermentasi daging buah kelapa. Selama berabad-abad pengetahuan  mengenai  teknologi  fermentasi  tradisional  umumnya  diturunkan  dari  satu generasi  ke  generasi  selanjutnya.  Produk  fermentasi pliek  u menjadi  bagian  yang  tidak terpisahkan dari menu makanan sehari-hari masyarakat Aceh, biasanya pliek u dimanfaatkan sebagai  bumbu  untuk  memasak  sayur  ( gulé  pi’u ),  sambal  dan  bumbu  rujak.  Diduga  selama proses  pengolahan  pangan  tersebut  telah  terjadi  berbagai  perubahan  terhadap  komposisinya, sehingga menghasilkan berbagai metabolit  yang mempunyai aktivitas antimikroba. Senyawa tersebut dapat terbentuk dari bahan baku ataupun juga dihasilkan oleh mikroba selama proses fermentasi,  karena  proses  fermentasi  makanan  erat  kaitannya  dengan  mikroorganisme  atau enzim.  Senyawa-senyawa  yang  dihasilkan  secara  alami  oleh  mikroba  tersebut  dapat diekstraksi dan dipurifikasi, serta dapat digunakan untuk mengawetkan makanan  dan sebagai bahan antimikroba (Nurliana, 2009).
Bakteri  asam  laktat  (BAL)  merupakan  salah  satu  kelompok  mikroba  yang  berperan penting dalam proses fermentasi berbagai jenis makanan tradisional. BAL telah lama dikenal dan  digunakan  oleh  manusia  dalam  proses  pengolahan  pangan  yang  menghasilkan  produk dengan  kualitas  yang  jauh  lebih  baik  dan  lebih  disukai  daripada  bahan  bakunya.  Bakteri  ini memberikan  kontribusi  terhadap  karakteristik  yang  khas  terhadap  produk  pangan  seperti aroma,  rasa , tekstur  dan  masa  simpan  produk  yang  lebih  tahan  lama.  Bila  ditinjau  dari  nilai gizinya,  produk  fermentasi  BAL  menghasilkan  komponen-komponen  nutrisi  yang  lebih mudah dicerna serta diproduksinya senyawa-senyawa yang bermanfaat oleh mikroorganisme yang terlibat di dalamnya (Wirawati, 2002; Jay et al. , 2005; Hutkins, 2006).
Keberadaan  BAL  dalam  bahan  pangan  hasil  fermentasi  menghasilkan  berbagai  jenis senyawa  metabolit  yang  dapat  berperan  sebagai  antimikroba,  sehingga  dapat  menghambat atau  mengontrol  pertumbuhan  mikroorganisme  lain  yang  tidak  diinginkan  kehadirannya, seperti  mikroba  patogen  dan  perusak  bahan  pangan.  BAL  menghasilkan  komponen antimikroba  seperti  asam  organik  (asam  laktat,  asam  asetat,  asam  propionat),  hidrogen peroksida dan bakteriosin (Ray dan Bhunia, 2008; Amezquita dan Brashears, 2002; dan Vuyst dan Leroy, 2007).
BAL  yang  diisolasi  dari  berbagai  pangan  tradisional  telah  dilaporkan  dapat menghambat  pertumbuhan  berbagai  jenis  mikroba  patogen.    Bettache et  al. (2012)
e-ISSN : 2615-109X
menyatakan  bahwa  hasil  isolasi  BAL  dari dhan, mentega  susu  fermentasi  tradisional  yang berasal  dari  Negara  Algeria  Barat  ditemukan  genus Leuconostoc sebanyak  8  isolat , Lactococcus 13 isolat dan 35 isolat Lactobacillus. Ketiga genus tersebut mampu menghambat pertumbuhan Escherichia coli, Staphylococcus aureus dan Listeria innocua. Selanjutnya BAL yang diisolasi dari berbagai makanan tradisional di Indonesia seperti gatot, growol, tempoyak, peda,  bekasam,  tape,  tempe,  wadi  dan  terasi  umumnya  didominasi  oleh L.  plantarum, Streptococcus  thermophillus, dan Pediococcus  acidilactici .  Dari  hasil  skrining,  diketahui bahwa L.  plantarum TGR-2  yang  diisolasi  dari  growol  dapat  menghasilkan  senyawa antimikroba yang dapat menghambat berbagai jenis bakteri patogen yang diujikan (Rahayu et al., 1996,  2000;  Wirawati,  2002;  Rahayu,  2003;  Wikandari et  al., 2012;  dan  Putri et  al., 2012). Lactobacillus  plantarum ATCC  25927  yang  diisolasi  dari ogi ,  makanan  tradisional yang difermentasi dari jagung dapat menghambat Candida albicans dengan zona hambat 22 mm (Oluwafemi dan Adetunji, 2011).
BAL indigenous yang  diisolasi  dari  pangan pliek  u diharapkan  dapat  menghambat pertumbuhan  berbagai  mikroba  patogen,  sehingga  penelitian  ini  bertujuan  untuk  menguji aktivitas  antimikroba  isolat  BAL  yang  diisolasi  dari pliek  u yaitu  bahan  pangan  khas  yang berasal  dari  Provinsi  Aceh  yang  diolah  secara  tradisional  dari  daging  buah  kelapa  dengan fermentasi  spontan  dan  menguji  kemampuannya  dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus aureus, Escherichia coli, dan khamir Candida albicans .

## METODE PENELITIAN
Jenis  penelitian  ini  ialah  penelitian  eksperimental  laboratorium,  data  yang  digunakan ialah  data  primer,  yaitu  semua  data  yang  diperoleh  secara  langsung  dari  penelitian  yang dilakukan  oleh  peneliti.  Selanjutnya  data  yang  diperoleh  dari  penelitian  ini  dianalisis  secara deskriptif dan disajikan dalam bentuk gambar dan tabel.
Penelitian  ini  dilakukan  di  Laboratorium  Mikrobiologi  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu Pengetahuan  Alam  (FMIPA)  Biologi  Universitas  Sumatera  Utara  (USU)  dan  Laboratorium Biologi  Balai  Teknis  Kesehatan  Lingkungan  dan  Pemberantasan  Penyakit  Menular  (BTKL dan PPM) Medan.
Sampel  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  ialah pliek  u yang  diperoleh  dari  Desa Geundering Kecamatan Darul Imarah, Aceh Besar, Indonesia. Pliek u tersebut dibuat melalui 3  tahapan  (Nurliana,  2009).  Medium  yang  digunakan  untuk  pengujian  aktivitas  antimikroba
e-ISSN : 2615-109X
isolat BAL ialah mueller hinton agar (MHA).  Kultur bakteri uji yang digunakan ialah isolat klinis Staphylococcus aureus, Escherichia coli dan khamir Candida albicans , yang diperoleh dari Laboratorium Mikrobiologi Fakultas Kedokteran USU.
Isolat-isolat  BAL  yang  telah  diisolasi  diuji  daya  hambatnya  terhadap  bakteri Staph. aureus, E.  coli dan  khamir C.  albicans secara in  vitro .  Pada  uji  ini  lempengan  agar  MHA disemai  dengan  suspensi  bakteri  uji  dengan  konsentrasi  10 8 sel/ml  (yang  terlebih  dahulu disetarakan dengan larutan Mc.  Farland) menggunakan cotton swab steril. Isolat  yang sudah ditandai  diinokulasi  dengan  cara  ditotolkan  menggunakan  tusuk  gigi  steril  pada  medium MHA. Selanjutnya diinkubasi pada suhu 37 °C selama 48 jam. Pengamatan dilakukan dengan melihat  terbentuknya  zona  bening,  selanjutnya  diukur  zona  bening  tersebut  menggunakan jangka sorong (Lay, 1994; dan Santoso, 2008 dengan modifikasi).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pengujian antimikroba isolat BAL yang diisolasi dari pangan pliek u dilakukan secara in vitro terhadap  isolat  klinis  bakteri  Gram  positif Staph.  aureus ,  bakteri  Gram  negatif E.  coli dan  khamir C.  albicans. Hasil  pengujian  menunjukkan  adanya  zona  penghambatan  yang ditandai  dengan  munculnya  zona  bening  di  sekitar  koloni  isolat  BAL  terpilih  setelah diinkubasi  selama  24-48  jam,  baik  pada  kultur Staph.  aureus (Gambar  1) maupun E.  coli (Gambar  2).  Penghambatan  tersebut  diduga  disebabkan  karena  aktivitas  antimikroba  yang dihasilkan  oleh  isolat  BAL  tersebut.  Namun,  zona  hambat  tidak  ditemukan  pada  pengujian terhadap khamir C. albicans (Gambar 3) .
Gambar 1. Uji in vitro isolat BAL terpilih terhadap Staph. aureus
Universitas Ubudiyah Indonesia e-ISSN : 2615-109X
Gambar 2. Uji in vitro isolat BAL terpilih terhadap E. coli
Gambar 3. Uji in vitro isolat BAL terpilih terhadap khamir C. albicans
Diameter  zona  hambat  yang  dibentuk  oleh  isolat  BAL  terpilih  terhadap Staph.  aureus dan E.  coli bervariasi,  hasil  pengukuran  diameter  zona  bening  dapat  dilihat  pada  Tabel  1. Besar zona hambat untuk bakteri Staph. aureus berturut-tururt yaitu 0.25, 4.6, 7 dan 7,7 mm, sedangkan  besar  zona  hambat  untuk  bakteri E.  coli berturut-turut  yaitu  1.5,  2.5  dan  28  mm. Penghambatan tertinggi terhadap Staph. aureus ditunjukkan oleh isolat SP3 yaitu sebesar 7.7 mm,  sedangkan  penghambatan  terendah  yang  terukur  ditunjukkan  oleh  isolat  SP4  dan  SP5 yaitu  1,5  mm.  Penghambatan  tertinggi  terhadap E.coli ditunjukkan  oleh  isolat  SP5  yaitu sebesar 28 mm, sedangkan penghambatan terendah ditunjukkan oleh isolat  SP2 yaitu sebesar 1.5 mm.
e-ISSN : 2615-109X
Adanya aktivitas antimikroba dapat diketahui dengan timbulnya zona bening di sekitar koloni  isolat-isolat  BAL  setelah  diinkubasi  selama  24-48  jam  pada  uji  antagonis. Terbentuknya zona bening menyebabkan bakteri Staph. aureus dan E. coli tidak dapat tumbuh di  sekeliling  isolat  BAL.  Hal  tersebut  mengindikasikan  bahwa  senyawa  asam  ataupun komponen  metabolit  dari  isolat  BAL  terpilih  mampu  menghambat  pertumbuhan  bakteri  uji tersebut.  Penghambatan  yang  ditunjukkan  oleh  isolat  BAL  tersebut  diduga  disebabkan  telah terjadi  perubahan  pH  karena  dihasilkannya  asam-asam  organik  selama  fermentasi.  Menurut Salminen et  al. (2007),  fermentasi  oleh  BAL  mengurangi  jumlah  karbohidrat  yang  tersedia dan  menghasilkan  komponen  organik  dengan  bobot  molekul  rendah  yang  menunjukkan aktivitas antimikroba.
Tabel 1. Zona Hambat Uji Antimikroba Isolat Bal Terpilih terhadap Mikroba Patogen
Kode Isolat Diameter Zona Hambat (mm) E. coli Staph. aureus C. albicans Lama Inkubasi (jam) 24 48 24 48 24 48 SP1 2,5 2,5 Sedikit sekali zona Sedikit sekali zona - - SP2 1,5 1,5 7 7 - - SP3 - - 4,6 7,7 - - SP4 - - Sedikit sekali zona 0,25 - - SP5 28 28 Sedikit sekali zona 0,25 - -
De  Vuyst  dan  Vandamme  (1994)  menyatakan  asam  laktat  merupakan  salah  satu senyawa inhibitor yang dihasilkan BAL dan merupakan produk akhir utama dari katabolisme karbohidrat, karena dari proses konversi sumber karbon ini dihasilkan setidaknya  50% asam laktat,  sehingga  kelompok  bakteri  ini  dinamakan  bakteri  asam laktat.  Asam  yang  dihasilkan selama  proses  metabolisme  oleh  BAL  akan  menyebabkan  penurunan  pH  dan  menyebabkan mikroba  patogen  maupun  perusak  bahan  pangan  yang  umumnya  tidak  tahan  suasana  asam akan terhambat. Akumulasi produk akhir berupa asam mengakibatkan turunnya pH dan akan menghambat  pertumbuhan  bakteri  Gram  positif  maupun  Gram  negatif.  Aktivitas  asam-asam lipofilik seperti asam laktat dalam bentuk tidak terdisosiasi dapat menembus sel mikroba, dan pada  pH  intraseluler  yang  lebih  tinggi,  berdisosiasi  menghasilkan  ion-ion  hidrogen  dan
e-ISSN : 2615-109X
mengganggu fungsi metabolit esensial, translokasi substrat dan fosforilasi oksidatif sehingga mereduksi pH intraseluler.
Selain  itu  Delgado et  al. (2001)  menyebutkan  bahwa  aktivitas  penghambatan  tersebut dapat  terjadi  karena  adanya  akumulasi  metabolit  primer  berupa  asam  laktat,  etanol  dan karbondioksida  ataupun  karena  adanya  metabolit  sekunder  berupa  senyawa  hidrogen peroksida dan bakteriosin. Alokami et al. (2000) menambahkan bahwa, zona bening di sekitar isolat BAL dapat  terbentuk karena aktivitas senyawa antimikrobia yang bersifat bakterisidal yaitu  berupa  asam  organik.  Asam  organik  tersebut  mampu  mempengaruhi  sitoplasma  sel mikroba  patogen  menjadi  asam  dan  menghambat  potensial  transmembran  dan  transport substratnya.
Proses  fermentasi  yang  umumnya  melibatkan  BAL  memiliki  ciri  khusus  yaitu  berupa terakumulasinya asam organik yang disertai dengan adanya perubahan nilai pH menjadi lebih rendah (asam) (Purwandani dan Rahayu, 2003). Pada kasus senyawa antimikroba dari BAL, zona  bening  dengan  batas  tepi  lingkaran  yang  jelas  dan  tegas  disebabkan  oleh  adanya aktivitas  senyawa  bakteriosin,  karena  bakteriosin  ini  memiliki  sifat single  hit  inactivation yang  berarti  satu  molekul  bakteriosin  dapat  membunuh  satu  sel  bakteri  indikator  (Ray  dan Bhunia,  2005).  Bakteriosin  tersebut  juga  dapat  mencegah  sintesis  peptidoglikan  yang  utuh, sehingga  dinding  sel  bakteri  gram  positif  akan  melemah  dan  akibatnya  sel  bakteri  akan mengalami lisis (Napitupulu et al . , 2000), sedangkan pada zona hambat yang terbentuk pada uji  antimikroba  terhadap  bakteri Staph.  aureus terlihat  dengan  tepi  lingkaran  yang  keruh disebabkan  oleh  adanya  aktivitas  asam.  Keruhnya  zona  hambat  tersebut  diduga  dapat disebabkan  karena  rendahnya  konsentrasi  asam  laktat  yang  dihasilkan  oleh  isolat  BAL tersebut,    sehingga  mengakibatkan  turunnya  aktivitas  penghambatan  terhadap  bakteri  uji (Ray, 2005).
Asam laktat yang dihasilkan oleh isolat BAL  berdifusi masuk ke dalam media tumbuh bakteri  uji,  sehingga  dapat  mengganggu  keutuhan  membran  sel  bakteri  patogen  tersebut. Kerusakan  membran  sel  mengakibatkan  nutrisi  yang  dibutuhkan  bakteri  uji  untuk  tumbuh tidak dapat diabsorbsi sehingga proses metabolisme tidak berjalan sebagaimana mestinya dan mengakibatkan  pertumbuhannya  akan  terhambat.  Perbedaan  aktivitas  antimikroba    BAL terhadap  beberapa  mikroba  uji  didasarkan  pada  perbedaan  struktur  penyusun  dinding  sel mikroba  uji,  konsentrasi  senyawa  antimikroba  yang  berbeda  juga  dapat  menghasilkan  zona hambat yang berbeda pula (Kasi et al ., 2017)
e-ISSN : 2615-109X

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  pengujian  yang  telah  dilakukan,  maka  dapat  disimpulkan  bahwa BAL yang diisolasi dari pangan pliek u dapat menghambat pertumbuhan bakteri Gram positif Staph.  aureus dan  bakteri  Gram  negatif E.  coli ,  namun  tidak  dapat  menghambat  khamir C. albicans. Penghambatan paling besar terhadap E.coli ditunjukkan oleh isolat BAL  SP5  yaitu sebesar  28  mm,  sedangkan  penghambatan  yang  paling  rendah  ditunjukkan  oleh  isolat  BAL SP2  yaitu  sebesar  1.5  mm.  Penghambatan  terbesar  terhadap Staph.  aureus ditunjukkan  oleh isolat  SP3  yaitu  sebesar  7.7  mm,  sedangkan  penghambatan terendah  ditunjukkan oleh  isolat BAL  SP4  dan  SP5  yaitu  sebesar  0.25  mm.  Perbedaan  aktivitas  penghambatan  ini  salah satunya disebabkan oleh adanya perbedaan struktur pada kedua dinding sel bakteri tersebut.

## SARAN
Saran  yang  diajukan  pada  penelitian  ini  ialah  diperlukan  pengujian  aktivitas antimikroba isolat BAL terpilih terhadap spesies mikroba patogen lainnya.

## DAFTAR PUSTAKA
Alokami,  H.L.,  Skytta  E.,  Saarela  M.,  Matilla-Sandhlom  T.,  Latva-Kala  K.,  Helander  I.M. 2000.  Lactic  acid  permeabilitzes  gram  negative  bacteria  by  disrupting  the  outer membrane. Appl. Environ. Microbiol . 66(5) : 2001-2005.
Amezquita, A. dan M.M. Brashears. 2002. Competitive inhibition of Listeria monocytogenes in ready-to-eat meat products by lactic acid bacteria. J. Food Protect. 65 (2): 316-325. Bettache,  G.,  A.  Fatma,  H.  Miloud  dan  K.  Mebrouk.  2012.  Isolation  and  identification  of lactic acid  bacteria  from  dhan,  a traditional  butter  and  their  major  technological  traits. World App. Scie. J. 17 (4): 480-488.
Delgado, A., Brito D., Fevereiro P., Peres C., Marques J.F. 2001. Antimicrobial activity of L. plantarum,  isolated  from  a  traditional  lactic  acid  fermentation  of  table  olives.  INRA, EDP Sci. 81(1): 2013-215.
De  Vuyst,  L.  dan  E.J.  Vandamme.  Antimicrobial  potential  of  lactic  acid  bacteria.    1994. Bacteriocins  of  Lactic  Acid  Bacteria:  Microbiology,  Genetics  and  Applications. London, Blackie Academic & Professional, Chapman & Hall.
Hutkins, R. W.  2006. Microbiology and technology of fermented food. Australia, Blackwell Publishing Asia.
Jay,  J.M.,  Martin,  J.L.  dan  David,  A.G.  2005.  Modern  food  microbiology.  Seventh  Edition. New York, Springer.
Kasi,  P.D.,  Ariandi,  dan    Heni,  M.  2017.  Uji  antibakteri  isolat  bakteri  asam  laktat  yang diisolasi dari limbah cair sagu terhadap bakteri patogen. J. Biotropikal . 5 (3): 97-101. Lay, B.W. 1994. Analisis mikroba di laboratorium. Jakarta, PT RajaGrafindo Persada.
Napitupulu,  N.,  Yulinery  T.,  Hardiningsih  R.  2000. Pengaruh  lama  penyimpanan,  suhu  dan media  terhadap  kemampuan  antibakteri  yang  dihasilkan  Lactobacillus  dalam
e-ISSN : 2615-109X
menghambat  beberapa  bakteri  patogen .  Proyek  Penelitian  Pengembangan  dan Pendayagunaan Biota Darat, Pusat Penelitian Biologi LIPI. Bogor
Nurliana.  2009.  Prospek  makanan  tradisional  aceh  sebagai  makanan  kesehatan:  eksplorasi senyawa antimikrob dari minyak pliek u dan pliek u . Disertasi . Prodi Sains Veteriner, Sekolah Pascasarjana, Bogor, IPB.
Oluwafemi, F. dan Adetunji AF. 2011. Antimicrobial activities of lactic acid bacteria isolated from traditionally-fermented maize (ogi) against Candida albicans . J. AppL. Biosci. 41: 2820-2835 .
Purwandani,  S.N.,  Rahayu  E.  2003.  Isolasi  dan  seleksi  Lactobacillus  yang  berpotensi  sebagai  agen probiotik. J. Agritech. 23(2) : 67-74.
Putri,  W.D.R.,  Haryadi,  D.W.  Marseno,  dan  M.N.  Cahyanto.  2012.  Isolasi  dan  karakterisasi bakteri asam laktat amilolitik selama fermentasi growol, makanan tradisional Indonesia. J. Tek. Pertanian . 13 (1): 52-60.
Rahayu, E.S., T.F. Djaafar, D. Wobowo, dan S. Sudarmadji.  1996. Lactic acid bacteria from indigenous fermented foods and their antimicrobial activity. Abstract . Indonesian Food and Nutrition Progress.  3: 21-28.
,  E.S.,  S.  Okada,  T.  Uchimura,  dan  K.  Komagata.  2000.  Lactic  acid  bacteria  in fermented  foods  of  Indonesian  Origin. Abstract .  Ninth  International  Congress  for Culture Collections, Brisbane, 23-28 Juli.
,  E.S.  2003.  Lactic  acid  bacteria  and  their  potential  benefits:  reserach  activities.
Abstract. Second Asian Conference on Lactic Acid Bacteria. Taiwan, 14-15 November. Ray, B. 2005. Fundamental Food Microbiology . 3rd Edition. Taylor & Francis
, dan A. Bhunia. 2008. Fundamental Food Microbiology . Fourth Edition. New York, CRC Press.
Salminen, S., A. V. Wright, dan A. Ouwehand. 2007. Lactic Acid Bacteria:  Microbiological and Functional Aspects. 3rd ed. New York, Dekker.
Santoso,  E.  2008.  Bakteri  asam  laktat  (BAL)  pada  cumi-cumi  kering  asin  dan  aktivitas penghambatannya tehadap bakteri patogen dan bakteri pembusuk. Agroteksos . 18(1-3): 46-53.
Vuyst,  L.D  dan  F.  Leroy.  2007.  Bacteriocins  from  lactic  acid  bacteria:  production, purification, and food applications. J. Mol. Microbiol. Biotechnol. 13 (4):194-199. Wikandari,  P.R.,  Suparmo,  Y.  Marsono,  dan  E.S.  Rahayu.  2012.  Karakterisasi  bakteri  asam laktat proteolitik pada bekasam. J. Natur Indonesia . 14 (2): 120-125.
Wirawati,  C.U.  2002.  Potensi  bakteri  asam  laktat  yang  diisolasi  dari  tempoyak  sebagai probiotik. Tesis . Bogor, IPB.
Yavuzdurmaz,  H.  2007.  Isolation,  characterization,  determination  of  probiotic  properties  of lactic  acid  bacteria  from  human  milk. Master  Thesis .  Izmir,  Turkey,  Izmir  Institute  of Technology.