## PENGGUNAAN Trichoderma sp. SEBAGAI AGENSIA  PENGENDALIAN TERHADAP Pyricularia oryzae Cav. PENYEBAB BLAS PADA PADI
Yulida Sarif Hidayat, Muhammad Nurdin & Suskandini R.D
Jurusan Agroteknologi, Fakultas Pertanian Universitas Lampung Jl. Prof. Dr. Soemantri Brodjonegoro no. 1 Bandar Lampung 35145 Email: hidayatsarief@gmail.com

## ABSTRAK
Salah satu kendala dalam budidaya tanaman padi adalah penyakit blas padi yang disebabkan oleh jamur Pyricularia oryzae Cav. Salah satu cara pengendalian yang dapat dilakukan adalah penggunaan agensia hayati ramah lingkungan. Penelitian ini bertujuan mengetahui keefektifan Trichoderma sp. untuk menghambat pertumbuhan Pyricularia oryzae Cav. in vitro. dan mengetahui keefektifan Trichoderma sp. untuk mengurangi keparahan penyakit blas pada tanaman padi di lapangan. Penelitian ini terdiri dari dua sub percobaan, pertama yaitu sub percobaan secara in vitro untuk menguji antagonisme Trichoderma sp. terhadap Pyricularia oryzae serta sub percobaan yang kedua yaitu menguji kefektifan Trichoderma sp. mengurangi keparahan penyakit blas pada tanaman padi di lapangan. Pada sub percobaan kedua disusun dalam rancangan acak lengkap dengan dua perlakuan dan 10 ulangan. Perlakuan terdiri atas perlakuan benih disertai dengan penyemprotan suspensi konidia Trichoderma sp.  terhadap padi kultivar Ciherang (T1) dan kontrol tanpa pemberian Trichoderma sp. (T0). Data keparahan penyakit yang diperoleh dianalisis dengan sidik ragam ( Anova ), dan dilanjutkan dengan uji BNT (Beda Nyata Terkecil) pada taraf nyata 5% atau 1%. Hasil penelitian menunjukkan bahwa Trichoderma sp. mampu menghambat pertumbuhan Pyricularia oryzae secara in vitro dan perlakuan perendaman benih serta penyemprotan menggunakan suspensi konidia Trichoderma sp. mengurangi keparahan penyakit blas pada tanaman padi.
Kata Kunci : Padi, Pyricularia oryzae Cav, Trichoderma sp.

## PENDAHULUAN
Padi ( Oryza sativa L.) sebagai tanaman pangan terpenting  di  Indonesia  memiliki  beberapa  faktor pembatas  dalam  pertumbuhannya.  Salah  satu  faktor pembatas dalam produksi padi adalah penyakit blas yang disebabkan  oleh  jamur Pyricularia  oryzae . P.oryzae selain menyerang daun, juga menyerang malai (bulir), dan leher ( neck ). Penyakit blas telah menurunkan hasil panen padi di  Asia  tenggara  dan  Amerika selatan sekitar 30-50%, dan mengakibat kan kerugian jutaan dolar Amerika. Di Indonesia serangan penyakit blas  dapat  mencapai  luas  1.285  juta  ha  atau  sekitar 12% dari total luas areal pertanaman padi di Indonesia (Shimamoto et al ., 2001 dalam Sijabat, 2007).
Penyakit blas dapat menular secara langsung dari tanaman sakit ke tanaman sehat di pertanaman. Selain itu,  penyakit  blas  juga  dapat  tertular  melalui  benih, sehingga diperlukan perhatian terhadap kualitas benih padi  yang  akan  ditanam.  Sampai  saat  ini  pengujian kesehatan benih  padi  belum pernah  dilakukan secara benar  sehingga  benih  sehat  hanya  dicerminkan  oleh
keseragaman benih dengan tingkat kemurnian varietas yang  tinggi,  dan    daya  tumbuh  minimal  80% (Anonim, 2007 a ). Sampai saat ini pengendalian jamur P.oryzae masih menggunakan fungisida sintetik, sehingga jika penggunaan fungisida dilakukan terus menerus dapat mencemari lingkungan. Oleh karena itu perlu diteliti cara- cara atau metode pengendalian yang ramah lingkungan dengan menggunakan mikroorganisme.
Salah satu mikroorganisme yang dapat digunakan untuk  menekan  penyakit  tanaman  adalah  jamur Trichoderma sp.  Jamur Trichoderma sp.  diketahui efektif  dalam  menekan  beberapa  patogen    tanaman seperti Armillaria mellea , Pythium sp., Phytophthora sp., Rhizoctonia  solani , Sclerotium  rolfsii ,  dan Heterobasidium  annosum (Parker et  al .,  1985  dalam Murniasih, 2009). Oleh karena itu pada penelitian ini akan  dicoba  pengaruh Trichoderma sp.  terhadap Pyricularia  oryzae pada  padi  yang  bertujuan mengetahui  keefektifan Trichoderma sp.  untuk menghambat pertumbuhan Pyricularia oryzae Cav. in vitro dan  keefektifan Trichoderma sp.  untuk mengurangi keparahan penyakit blas pada tanaman padi.

## BAHAN  DAN  METODE
Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Penyakit Tumbuhan Jurusan Agroteknologi Fakultas Pertanian Universitas Lampung, dari bulan Mei sampai dengan Desember  2013. Alat yang digunakan ialah cawan petri, gelas piala, gelas ukur, otoklaf, meja laminar air flow , timbangan elektrik, nampan plastik, jarum ose, bor gabus, polibag, bunsen, aluminium foil, plastik tahan  panas. Bahan  yang  digunakan  ialah  alkohol  70%,  aquades, media  PSA,  benih  padi  varietas  Ciherang.  Untuk perlakuan benih dan penyemprotan digunakan agensia hayati berupa Trichoderma sp. koleksi Klinik Proteksi Tanaman, Fakultas Pertanian Universitas Lampung.
Penelitian  ini  dilaksanakan  dengan  metode rancangan acak lengkap (RAL).  Percobaan terdiri atas dua  perlakuan  yaitu  perlakuan  benih  disertai  dengan penyemprotan  menggunakan  suspensi  konidia Trichoderma sp. terhadap padi  kultivar Ciherang dan kontrol  tanpa  pemberian Trichoderma sp.  Masing- masing perlakuan diulang  10 kali.
Perlakuan yang diaplikasikan pada padi adalah : (1). Perendaman biji padi Ciherang  dalam air biasa dan tidak ada penyemprotan apapun  sebagai kontrol (T0) dan (2). Perendaman biji  padi Ciherang dalam suspensi konidia Trichoderma sp.  yang  dilanjutkan  dengan penyemprotan suspensi konidia Trichoderma sp. pada tanaman padi umur 40 hari setelah tanam (T1). Peubah yang diamati adalah keparahan penyakit. Setelah data keparahan penyakit didapatkan, data dianalisis secara statistik dengan menggunakan sidik ragam ( Anova ), dan dilanjutkan dengan uji BNT (Beda Nyata Terkecil) pada taraf nyata 5% atau 1 %.
Penyiapan  biakan Pyricularia  oryzae Cav. Pyricularia oryzae diisolasi dari daun  padi  Ciherang yang  menunjukkan  gejala  terserang  blas  daun  dari pertanaman padi di Kecamatan Gadingrejo Kabupaten Pringsewu. Gejala daun padi yang terserang blas yaitu adanya  bercak  belah  ketupat  berwarna  abu-abu kecoklatan.
Daun padi yang menunjukkan gejala bercak belah ketupat dicuci dengan air bersih, direndam dalam larutan NaOCl 0,5% selama 30 detik, kemudian dibilas dengan air steril. Benih tersebut diisolasi menggunakan media PSA  ( Potato  Succrose  Agar )  yang  ditambah  dengan asam  laktat.  Pertumbuhan  jamur  hasil  isolasi  yang diharapkan berupa Pyricularia oryzae diamati selama 7  hingga  10  hari  inkubasi  pada  suhu  30 0 C.  Isolat dimurnikan dan diperbanyak dengan media PSA Penyiapan  biakan Trichoderma sp.  Jamur antagonis yang digunakan pada penelitian ini merupakan isolat  jamur Trichoderma sp. koleksi  Klinik Proteksi
Tanaman  Fakultas  Pertanian  Universitas  Lampung. Isolat  murni Trichoderma sp.  diidentifikasi  dan diperbanyak pada media PSA. Pada setiap cawan petri diletakkan 1 potongan induk Trichoderma sp. berukuran bor gabus yang berdiameter 1 cm, dan diinkubasikan selama 7 hingga 10 hari
Uji  penghambatan Trichoderma sp. terhadap Pyricularia  oryzae secara  in    vitro.  Uji  antagonis dilakukan dengan cara menumbuhkan dua jamur yaitu Trichoderma sp.  dan Pyricularia  oryzae dalam  satu cawan petri secara berlawanan. Cawan petri yang telah berisi  media  PSA  padat  dibalik  dan  pada  bagian belakangnya dibuat garis yang saling berpotongan pada tengah  cawan  petri  menggunakan  spidol  permanen. Kemudian pada garis tersebut ditentukan dua titik yang berjarak 3 cm dari tepi cawan secara berlawanan. Titik- titik tersebut digunakan sebagai tempat infestasi jamur Trichoderma sp. dan Pyricularia oryzae yang masing- masing  berumur  3  hari  dan  5  hari  inkubasi.  Masing- masing diinfestasikan pada titik yang telah ditentukan, kemudian diinkubasikan  di ruang dengan suhu 30 0 C (gambar 1).
Gambar 1. Rancangan aplikasi tempat infestasi jamur Trichoderma sp. dan Pyricularia  oryzae pada cawan petri. P  = Biakan Pyricularia oryzae, T    =  Biakan Trichoderma sp.  r1 = Jari-jari koloni Pyricularia oryzae yang menjauhi Trichoderma sp., r2   = Jari-jari koloni Pyricularia oryzae yang mendekati Trichoderma sp.
Pengamatan  dilakukan  setiap  hari  dengan mengukur  jari-jari  koloni Pyricularia  oryzae yang berlawanan  arah  dan  menuju  ke  arah  jamur Trichoderma sp. Kemudian persentase penghambatan diukur  dengan  menggunakan  rumus  (Mahadtanapuk dkk.,  2007  dalam  Kurniawati,  2012):  Suspensi
% 100 1 2 1    r r r PR
Keterangan: PR = Persentase penghambatan pertumbuhan jamur r1   = Jari-jari koloni Pyricularia oryzae yang menjauhi Trichoderma sp. r2   = Jari-jari koloni Pyricularia oryzae yang mendekati Trichoderma sp.
Trichoderma sp. dibuat  dengan cara  mensuspensikan konidia dan konidiofor Trichoderma sp. yang tumbuh pada  media PSA  ( Potato Succrose Agar ) berumur  3 hari  inkubasi,  ke  dalam  air  steril  sebanyak  10  ml kemudian dikocok sampai homogen. Kerapatan konidia
dihitung dengan  menggunakan alat haemocytometer sehingga mendapatkan kerapatan 38,5 x 10 2 butir konidia/ ml.  Suspensi P . oryzae dibuat    dengan  cara mensusp.ensikan konidia dan konidiofor P . oryzae dari media  PSA  ( Potato  Succrose  Agar ) berumur  5  hari inkubasi ke dalam air steril sebanyak 10 ml kemudian dikocok sampai homogen. Kerapatan konidia dihitung dengan menggunakan alat haemocytometer sehingga mendapatkan  kerapatan 38,5 x 10 2 butir konidia /ml. Tahapan  Pengujian  pada  perlakuan  dengan Trichoderma sp. disajikan pada gambar 2, sedangkan perlakuan tanpa Trichoderma sp. (kontrol) disajikan pada gambar 3.
Pengamatan.  Peubah  yang  diamati  dalam penelitian  ini  ialah  keparahan  penyakit.  Pengamatan keparahan penyakit blas dilakukan terhadap tanaman padi dari saat benih mulai tumbuh hingga menunjukkan gejala bercak daun berbentuk belah ketupat.
Gambar 2. Perlakuan dengan Trichoderma sp.
Gambar 3. Perlakuan tanpa Trichoderma sp. (kontrol).
Keparahan  penyakit      dihitung    dengan menggunakan  rumus sebagai berikut ( Dirjen Pertanian Tanaman Pangan, 2003) :
Keterangan : I   = Intensitas Serangan ni  =  Jumlah  Tanaman  atau  Bagian  Tanaman  Contoh dengan Skala Kerusakan vi
vi  = Nilai Skala Kerusakan Contoh ke-i N  =  Jumlah  Tanaman  atau  Bagian  Tanaman  Contoh yang Diamati
V = Nilai Skala Kerusakan Tertinggi
Nilai skala kerusakan yang digunakan adalah sebagai berikut  :
0 = Daun sehat 1 = 1-20 % permukaan daun terinfeksi 2 = 21-40 % permukaan daun terinfeksi
3 = 41-60 % permukaan daun terinfeksi
4 = 61-80% permukaan daun terinfeksi
5 = 81-100% permukaan daun terinfeksi

## HASIL  DAN  PEMBAHASAN
Hasil  isolasi  jamur Pyricularia  oryzae .  Isolat Pyricularia oryzae yang digunakan diperoleh dari hasil isolasi daun padi yang menunjukkan gejala terserang
% 100 ) (      V N vi ni I
blas dengan gejala bercak berbentuk belah ketupat. Dari pengamatan secara mikroskopis diperoleh konidia yang bersekat-sekat,  jarang  bercabang,  tunggal,  berbentuk bulattelur dengan ujung  runcing, jika masak bersekat 2, dengan ukuran 0-22 x 10-12 µm  (Gambar 4). Hal ini sesuai dengan identifikasi menurut Barnett (1960).
Persentase  Rerata  Penghambatan Trichoderma sp. Terhadap  Pertumbuhan Pyricularia oryzae .  Hasil penelitian  menunjukkan  bahwa Trichoderma sp. mempengaruhi pertumbuhan Pyricularia oryzae pada media tumbuh PSA. Pengaruh Trichoderma sp. berupa penghambatan Pyricularia  oryzae tampak  pada  hari ke-2  inkubasi.  Pada  hari  ke-2  inkubasi,    persentase penghambatan 11,2%, dan meluas pada hari ke-3 menjadi 14,26%, berlanjut pada hari ke-4 sebesar 17,83%, dan pada hari ke-5 inkubasi Trichoderma sp. telah tumbuh hingga  ke  pinggir  cawan  petri.  Rerata  persentase pengaruh  penghambatan Trichoderma sp.  terhadap pertumbuhan Pyricularia  oryzae dapat  dilihat  pada Gambar 5.
Penghambatan pertumbuhan Pyricularia oryzae oleh Trichoderma sp. diduga karena terjadi persaingan atau  kompetisi.  Dalam  hal  ini  kebutuhan  akan  zat makanan  yang  sama  dapat  menyebabkan  terjadinya persaingan  antara  kedua  jamur  tersebut.  Jamur  yang dapat  menyesuaikan  diri  paling  cepat  maka  akan mengalami pertumbuhan  lebih  subur.  Jika  dua  jamur ditumbuhkan di dalam suatu media yang sama, maka jamur yang unggul dapat bertahan, sedangkan jamur yang lemah dapat punah (Dwidjoseputro, 1985).
Gambar 4. Konidia Pyricularia oryzae (perbesaran 10x40)
Keparahan  Penyakit  Blas  Pada  Tanaman  Padi. Hasil  analisis  sidik  ragam  pengamatan  keparahan penyakit blas menunjukkan bahwa perendaman benih dan penyemprotan tanaman padi menggunakan agensia hayati Trichoderma sp. mampu mengurangi keparahan penyakit  blas.  Hasil  pengamatan  terhadap  keparahan penyakit  pada  7, 8,  9, dan  10 minggu setelah  pindah tanam (MSPT) disajikan dalam Gambar 6.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa perlakuan perendaman  benih  dan  penyemprotan  menggunakan jamur Trichoderma sp. menyebabkan  perbedaan keparahan penyakit blas pada padi dibandingkan dengan tanpa  aplikasi Trichoderma sp. Perendaman biji padi dan  penyemprotan  dengan Trichoderma sp. mampu mengurangi keparahan penyakit blas pada 8, 9 dan 10
MSPT.  Suspensi  konidia Trichoderma sp.  yang digunakan  untuk  melindungi  benih  ternyata menyebabkan penghambatan keparahan penyakit blas dari 8 MSPT sampai 10 MSPT. Hal ini sesuai dengan Tandiabang  dan  Pakki  (2007),  bahwa Pyricularia oryzae menginfeksi berat pada padi berumur dua bulan atau delapan minggu setelah tanam. Pada umur tersebut padi  mulai  berbunga  sehingga  fisiologinya  menjadi rentan.
Mekanisme  penghambatan Pyricularia  oryzae oleh Trichoderma sp. di duga disebabkan oleh kompetisi antara  kedua  jamur  yang  telah  ditunjukkan  pada  uji kompetisi  pertumbuhan  jamur  secara in  vitro . Trichoderma sp. yang diaplikasikan terlebih dahulu akan lebih  cepat  berkembang  di  permukaan  tanaman  padi
Gambar  5.  Grafik  rerata  persentase  pengaruh penghambatan Trichoderma sp. Terhadap pertumbuhan Pyricularia  oryzae (%).
Gambar 6. Grafik rerata persentase keparahan penyakit blas ( P.oryzae ) pada tanaman padi (%). = tanpa Trichoderma sp. (T0),   = dengan Trichoderma sp.  (T1).
karena  ada  penambahan  air  gula  pada  suspensi Trichoderma sp. sebagai sumber nutrisi.  Selanjutnya diduga Trichoderma sp. menggunakan kemampuannya yang lain untuk menghambat keparahan penyakit blas daun  dengan  cara Trichoderma sp.  mengekskresikan enzim b-(1,3)- glukanase dan kitinase yang diduga dapat menghancurkan  dinding  sel  jamur.  Kemampuan Trichoderma sp.  mengekskresikan  enzim  b-(1,3)- glukanase dan kitinase yang  menghancurkan dinding sel jamur dinyatakan oleh Chet (1987). Selain itu menurut Papavizas (1985) Trichoderma sp. dapat menghasilkan antibiotik yaitu trichodermin dan viridin.

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa Trichoderma sp.  menghambat  pertumbuhan Pyricularia  oryzae secara in  vitro .  Perlakuan perendaman  benih  dan  penyemprotan  menggunakan suspensi  konidia Trichoderma sp. mengurangi keparahan penyakit blas pada padi.

## DAFTAR  PUSTAKA
Anonim.2007 a. Interaksi Poligenik Ketahanan Padi Terhadap  Blas .  http://biogen.litbang.deptan. go.id.  Diakses pada tanggal : 12 januari 2014.
Barnett,  H.L,  1960. Imperfect  Fungi .  Burgess Publishing Company. Virginia. 225 hlm.
Chet,  I.  1987. Innovative  Approaches  to  Plant Diseases Control . Jhon Wiley and Sons, A Wiley- Interscience Publication, USA. pp. 11-210.
Direktorat Jenderal Pertanian Tanaman Pangan. 2003.
Pedoman  Pengujian  Pestisida  Berbahan  Aktif
Majemuk. Direktorat  Jenderal  Bina  Sarana Pertanian. Jakarta.76 p.
Dwidjoseputro,  D.  1985. Dasar-Dasar  Mikrobiologi . Djambatan. Malang. 207 hlm.
Kurniawati, Y.  2012.  Pengaruh Trichoderma  viridae dan Pseudomonas  fluorescens Terhadap Pertumbuhan Phytophthora  palmivora Butl. Pada  Berbagai  Media  Tumbuh. Skripsi . Universitas Lampung. Bandar Lampung. 60 hlm Murniasih, Y. 2009. Pengaruh Aplikasi Tepung Kencur dan  Kunyit  Terhadap  Kemampuan  Antagonis Trichoderma  viridae Pers.  Pada Phytophthora palmivora L.  Penyebab  Busuk  Buah  Kakao Secara In Vitro. Skripsi. Universitas Lampung. Bandar Lampung. 35 hlm
Papavizas, G. C. 1985. Trichoderma & Gliocladium : Biology, Ecology, and Potential For Biocontrol .
Annual Reviews of Phytopathol . Maryland. 23: 23-54 pp.
Semangun,  H.  1991. Penyakit-Penyakit  Tanaman Pangan di Indonesia . Gadjah Mada  University Press.  Yogyakarta.  449 hlm.
Sijabat,  O.N.S.BR.  2007.  Epidemi  Penyakit  Blas ( Pyricularia  oryzae Cav.)  Pada    Beberapa Varietas  Padi  Sawah  ( Oryza  sativa L)  Dengan Jarak  Tanam  Berbeda  Dilapangan. Skripsi . Universitas Sumatera Utara. Medan. 103 Hlm.
Tandiabang,  J.  dan  S.  Pakki.  2007 . Penyakit  Blas (Pyricularia grisea) dan Strategi Pengendalian nya  pada  Tanaman  Padi. Prosiding  Seminar Ilmiah  dan  Pertemuan  Tahunan  PEI  dan  PFI XVIII. Komda Sul-Sel. Hal : 241-245.