Indonesia, 7 (2).
E-ISSN:
2548-1398 Published by: Ridwan Institute
Syntax  Literate:  Jurnal  Ilmiah  Indonesia  p–ISSN:  2541-0849 e-ISSN: 2548-1398 Vol. 7, No. 2, Februari 2022
UJI  EFEK  ANTIHIPERTENSI  EKSTRAK  ETANOL  96%  AKAR  PULE PANDAK  (RAUVOLFIA  SERPENTINA  (L.)  BENTH.  EX  KURZ.)  PADA MENCIT (MUS MUSCULUS)
Maruli Davidson Sitompul, Kadek Dian Widyapurwanti, Ni Luh Putu Putri Dewi, Ni Kadek Warditiani
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Udayana Bali, Indonesia Email: marulidavidson@gmail.com, dianwidya305@gmail.com, niluhputuputridewi@gmail.com, kadektia@unud.ac.id

## Abstrak
Pule  pandak  ( Rauvolfia  serpentina (L.)  Benth.  ex  Kurz.)  merupakan  salah  satu tanaman  lokal  yang  secara  empiris  digunakan  untuk  mengobati  hipertensi  dengan kandungan kimia utama adalah alkaloid yang sebagian besar terdapat pada bagian akar. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek antihipertensi dan dosis efektif ekstrak  etanol  96%  akar R . serpentina secara in  vivo pada  mencit  jantan  Swiss Webster.  Metode  yang  digunakan,  yaitu pretest-posttest  control  group  design . Delapan  belas  ekor  mencit  dibagi  menjadi  enam  kelompok  perlakuan.  Kelompok perlakuan 1, 2 dan 3 (P1, P2 dan P3) secara berturut-turut adalah kelompok kontrol normal,  kontrol  negatif  dan  kontrol  positif  yang  diberi  makan  dan  minum  ad libitium,  suspensi  CMC-Na,  dan  suspensi  atenolol  6,5  mg/kgBB.  Kelompok perlakuan  4,  5  dan  6  (P4,  P5  dan  P6)  adalah  kelompok  yang  diberikan  suspensi ekstrak etanol 96% akar R . serpentina pada dosis 70, 140 dan 280 mg/kgBB. Data dianalisis dengan menggunakan uji One Way ANOVA dan uji Post Hoc, yaitu uji LSD. Hasil penelitian menunjukkan, bahwa persentase penurunan mean±SEM TD sistolik  dan  diastolik  tertinggi  dihasilkan  oleh  P6,  yaitu  sebesar  29,243±0,7651% dan  37,880±3,692%.  Hasil  uji  One  Way  ANOVA  dan  LSD  menunjukkan,  bahwa ada perbedaan signifikan (p<0,05) terhadap %penurunan tekanan darah sistolik dan diastolik  mencit.  Berdasarkan  hasil  penelitian,  dapat  disimpulkan  bahwa  ekstrak etanol  96%  akar R . serpentina memiliki  efek  antihipertensi  dengan  dosis  efektif sebesar 280 mg/kgBB
Kata Kunci : alkaloid; antihipertensi; mencit; rauvolfia serpentine ; tekanan darah

## Abstract
Abstracts  Pule  pandak  (Rauvolfia  serpentina  (L.)  Benth.  ex  Kurz.)  is  one  of  the local  plants  that  is  empirically  used  to treat  hypertension  with  the  main  chemical content  is  alkaloids,  mostly  found  in  the  roots.  This  study  aimed  to  determine  the antihypertensive  effect  and  effective  dose  of  96%  ethanol  extract  of  R.  serpentina root  in  vivo  in  Swiss  Webster  male  mice.  The  method  used  is  pretest-posttest control  group  design.  Eighteen  mice  were  divided  into  six  treatment  groups. Treatment groups 1, 2 and 3 (P1, P2 and P3) were normal control group, negative control  and  positive  control  which  were  fed  and  drank  ad  libitium,  CMC-Na
suspension,  and  atenolol  suspension  6.5  mg/kgBW.  Treatment  groups  4,  5  and  6 (P4, P5 and P6) were groups that were given a suspension of 96% ethanol extract of  R.  serpentina  root  at  doses  of  70,  140  and  280  mg/kgBW.  Data  were  analyzed using  One  Way  ANOVA  test  and  Post  Hoc  test,  namely  LSD  test.  The  results showed  that  the  highest  percentage  decrease  in  mean  ±  SEM  of  systolic  and diastolic  BP  was  produced  by  P6,  which  was  29.243±0.7651%  and 37.880±3.692%,  respectively.  The  results  of  the  One  Way  ANOVA  and  LSD  test showed  that  there  was  a  significant  difference  (p<0.05)  to  the  %  decrease  in systolic  and  diastolic  blood  pressure  in mice.  Based  on  the  results  of  the  study, it can  be  concluded  that  the  96%  ethanol  extract  of  R.  serpentina  root  has  an antihypertensive effect with an effective dose of 280 mg/kgBW.
Keywords: alkaloid; antihypertensive; blood pressure; mice; rauvolfia serpentina
Received: 2022-01-20; Accepted: 2022-02-05; Published: 2022-02-20

## Pendahuluan
Hipertensi  adalah  kondisi  meningkatnya  tekanan  darah  (TD)  diatas  TD  normal manusia,  dimana  TD  sistolik  ≥  140  mmHg  atau  TD  diastolik  ≥  90  mmHg  (Lee  et  al., 2022). Hipertensi sering disebut tekanan darah tinggi atau ‘silent killer’, karena memicu risiko serangan jantung, stroke, dan masalah kesahatan lainnya tanpa adanya gejala atau tanda peringatan dini (Khoury & Ratchford, 2021). Salah satu masalah kesehatan yang sangat  berbahaya  di  seluruh  dunia  adalah  hipertensi,  karena  menyebabkan  tingginya tingkat  morbiditas  (angka  kesakitan)  dan  mortalitas  (angka  kematian)  untuk  penyakit kardiovaskular  (Yuqing  Zhang  et  al.,  2022).  Angka  kesakitan  dan  kematian  akibat hipertensi  menurut  Word  Health  Organization  (WHO)  tergolong  tinggi,  diperkirakan sebanyak  1,28  miliar  orang  dewasa  berusia  30-79  tahun  menderita  hipertensi  dengan prevalensi hipertensi pada laki-laki lebih tinggi, yaitu sebesar 34% dibandingkan wanita 32%  dengan  angka  kematian  7,5  juta  per  tahun  di  seluruh  dunia  (Luo  et  al.,  2022); (Nguyen & Chow, 2021); (Oh & Cho, 2020).
Prevalensi hipertensi dalam 10 tahun terakhir meningkat sebesar 5,2% di seluruh dunia (Bloch, 2016). Prevalensi hipertensi telah meningkat dari 25,8% pada tahun 2013 menjadi 34,1% pada tahun 2018 di Indonesia (Kurnianto, A., Sunjaya, D. K., Rinawan, F.  R.,  &  Hilmanto,  2020).  Pada  tahun  2025,  tingkat  prevalensi  hipertensi  diperkirakan mengalami  peningkatan  sebesar  30%  (Sharma,  J.  R.,  Mabhida,  S.  E.,  Myers,  B., Apalata,  T.,  Nicol,  E.,  Benjeddou,  M.,  Muller,  C.,  &  Johnson,  2021).  Menurut  WHO, pada  tahun  2025 akan ada  1,5  miliar  orang  yang  berpotensi mengalami  hipertensi  dan setiap  tahun  akan  ada  9,4  juta  orang  meninggal  karena  hipertensi  dan  komplikasi (Sutiningsih, Inova, & Adi, 2021).
Pengobatan  herbal  yang  berasal  dari  tanaman  merupakan  salah  satu  alternatif untuk  mengobati  hipertensi  (Hidayah  &  Sulistiyaningsih,  2019).  Salah  satu  tanaman lokal  yang memiliki efek antihipertensi adalah  Pule  Pandak  ( Rauvolfia  serpentina (L.) Benth.  ex  Kurz.).  Nilai  manfaat R . serpentina sebagai  tanaman  obat  terletak  pada kandungan  alkaloidnya.  Bagian  tanaman R . serpentina yang  banyak  mengandung
alkaloid adalah akarnya (Sulandjari & Yuniastuti, 2010). Akar R . serpentina dilaporkan mengandung  0,7-3,0%  dari  total  alkaloid  dan  0,1%  reserpin,  dimana  reserpin merupakan  alkaloid  indol  yang  bermanfaat  dalam  mengobati  hipertensi  (Kumari,  I., Madhusudan,  S.,  Walia,  B.,  &  Chaudhary,  2021);  (Sulaiman,  Jyothi,  Unnithan, Prabhukumar, & Balachandran, 2020).  Efek antihipertensi ekstrak n-heksan, kloroform, metanol,  dan  air  akar R .  serpentina  pada  tikus  ( Rattus  norvegicus )  telah  diteliti  secara ilmiah  oleh  (Sulaiman  et  al.,  2020)  dan  (Shah,  S.  M.  A.,  Naqvi,  S.  A.  R.,  Munir,  N., Zafar,  S.,  Akram,  M.,  &  Nisar,  2020).  Namun,  efek  antihipertensi  ekstrak  etanol 96% akar R . serpentina pada  mencit  ( Mus  musculus )  belum  pernah  diteliti.  Berdasarkan beberapa  penelitian  sebelumnya,  maka  dalam  penelitian  ini  akan  dilakukan  pengujian efek  antihipertensi  dan  penentuan  dosis  efektif  ekstrak  etanol  96%  akar R . serpentina pada mencit ( Mus musculus ).

## Metode Penelitian
A. Lokasi dan Waktu Penelitian
Penelitian  dilaksanakan  di  Laboratorium  Forensik,  Sains  dan  Kriminologi Universitas  Udayana,  Laboratorium  Farmakognosi  &  Fitokimia  dan  Laboratorium Farmasi  Bahan  Alam  Program  Studi  Farmasi,  FMIPA,  Universitas  udayana. Penelitian  berlangsung  selama  4  bulan  dari  Juni  sampai  September  2021  dengan mematuhi protokol kesehatan di masa Pandemi COVID-19.
B. Rancangan Penelitian
Penelitian  ini  bersifat  eksperimental  dengan  menggunakan pretest-posttest control group design .
C. Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  untuk  penelitian  adalah  timbangan  digital  (Ohaus®,
Adam®,  dan  SF-400®),  desikator  (Duran®), drying  oven (Binder®), hot  plate (Corning  PC-420D®), rotary  vacuum  evaporator (Eyela®),  tanur  (WiseTherm®), water  bath  (Memmert®), disposable  syringe 1  mL  ukuran  26Gx1/2”  dan  3  mL ukuran  3Gx11⁄4”  (OneMed®),  sonde  oral,  alat  ukur  tekanan  darah  non  invasif (CONTEC08A-VET®), dan restrainer .
Bahan  yang  digunakan  untuk  penelitian  adalah  simplisia  akar R . serpentina yang  diperoleh  dari  Kota  Batu,  Jawa  Timur,  mencit  jantan  galur  Swiss  Webster, umur  2-3  bulan  dengan  rata-rata  berat  badan  (BB)  25-30  g,  tablet  atenolol (Betablok®)  50  mg,  etanol  96%  10L  (PT.  Brataco  Chemika),  etanol  pro  analisis (Merck),  aquadest  5L  dan  10L  (PT.  Karunia  Sejahtera  Abadi), water  for  injection , pereaksi  Dragendroff  (Nitra  Kimia),  pereaksi  Mayer  (Nitra  Kimia),  asam  klorida (HCl)  37%  (PT.  Karunia  Sejahtera  Abadi),  dan  serbuk  CMC-Na  500  gr  (Cakra Kimia Retailindo).

## D. Tahapan Penelitian
Penelitian  ini  diawali  dengan  melakukan  karakterisasi  simplisia  akar R . serpentina berdasarkan  prosedur  yang  tertera  pada  Farmakope  Indonesia  edisi  V yang  meliputi  uji  susut  pengeringan  dan  kadar  abu  tak  larut  asam.  Kemudian,
dilanjutkan  dengan  ektraksi  akar R . serpentina menggunakan  pelarut  etanol  96% dengan  metode maserasi  hingga terbentuk  ekstrak  kental.  Ekstrak etanol  96%  akar R . serpentina dengan konsistensi kental dilakukan skrining fitokimia menggunakan perekasi  Mayer  dan  Dragendorff  untuk  mengetahui  kandungan  metabolit  sekunder berupa  senyawa  alkaloid.  Setelah  skrining  fitokimia  selesai  dilakukan,  dilanjutkan dengan  pembuatan  suspensi  CMC-Na  1%  yang  digunakan  sebagai  kontrol  negatif dengan cara ditimbang CMC-Na sebanyak 1 g, dimasukkan sedikit demi sedikit ke dalam  50  mL  aquadest  yang  telah  dipanaskan  dengan  menggunakan hot  plate . Dikalibrasi  botol  coklat  100  mL,  kemudian  dimasukkan  50  mL  larutan  suspensi CMC-Na ke dalam botol coklat. Ditambahkan aquadest hingga tanda batas kalibrasi dan dikocok homogen. Selain sebagai kontrol negatif, CMC-Na digunakan sebagai suspending  agent dalam  pembuatan  suspensi  atenolol  dosis  6,5  mg/kgBb  dan suspensi  ekstrak  dosis  70,  140  dan  280  mg/kgBB.  Dosis  efektif  atenolol  untuk mencit  diperoleh  dari  perhitungan  konversi  dosis  atenolol  (50  mg)  dari  orang dewasa  dengan  BB  70  kg  ke  mencit  dengan  BB    25  g,  sehingga  diperoleh  dosis atenolol untuk mencit sebesar 0,1625 mg/25 grBB dengan dosis efektif sebesar 6,5 mg/kgBB. Sedangkan, dosis ekstrak yang digunakan mengacu pada penelitian Shah et al . (2020), dimana dosis ekstrak air akar R . serpentina pada tikus untuk pengujian antihipertensi menggunakan tiga variasi dosis ekstrak, yaitu dosis 50, 100,  dan 200 mg/kgBB.  Kemudian,  dilakukan  konversi  dosis  dari  BB  tikus  ke  mencit  dan diperoleh dosis efektif ekstrak sebesar 70, 140 dan 280 mg/kgBB.
Setelah  pembuatan  suspensi  atenolol  dan  suspensi  ekstrak  selesai  dilakukan, tahap  selanjutnya  adalah  pengujian  efek  antihipertensi  ekstrak  etanol  96%  akar  R. serpentina,  yang  meliputi  pengelompokan,  penginduksian,  perlakuan  dan pengukuran  tekanan  darah  hewan  uji  (mencit).  Hewan  uji  dibagi  menjadi  6 kelompok perlakuan. Tiap kelompok terdiri dari 3 ekor mencit. Kelompok perlakuan 1  (P1)  adalah  kelompok  normal  yang  hanya  diberi  makan  dan  minum  ad  libitium; kelompok  perlakuan  2  (P2)  adalah  kelompok  kontrol  negatif  yang  diberikan suspensi CMC-Na 1%; Kelompok perlakuan 3 (P3) adalah kelompok kontrol positif yang diberikan suspensi atenolol 6,5 mg/kgBB sekali sehari selama 1 minggu secara peroral.  Kelompok  perlakuan  4,  5,  dan  6  (P4),  (P5),  dan  (P6)  secara  berturut-turut adalah  kelompok  yang  diberikan  suspensi  ekstrak  dengan  dosis  70,  140  dan  280 mg/kgBB secara peroral. Hewan uji sebelum diinduksi dan diberi perlakuan, terlebih dahulu  diadaptasi  selama  1  minggu  dengan  diberi  makan  dan  minum  ad  libitum. Kemudian,  diukur  tekanan  darah  awal  mencit  pada  hari  ke-0  setelah  dipuasakan selama  16  jam  dan  diinduksi  mencit  pada  semua  kelompok  perlakuan,  kecuali  P1 (kontrol normal) dengan larutan adrenalin (epinefrin) secara intraperitoneal dengan dosis  0,02  mg/kgBB  (0,5  mL)  selama  2  minggu  dan  diukur  tekanan  darah  mencit pada hari ke-14.
Dosis efektif epinefrin untuk mencit mengacu pada US Departement of Health, Education  and  Walfare  (1960),  yaitu  sebesar  0,02-2,5  mg/kg  secara  i.p  dan dikonversi ke mencit dengan BB ±25 g. Sehingga, diperoleh volume epinefrin yang
efektif  untuk  mencit,  yaitu  sebesar  0,0005  mL.  Dilakukan  pengenceran menggunakan water  for  injection (WFI)  dengan  perbandingan  antara  volume epinefrin  dan  WFI  sebesar  1:1.000,  maka  volume  epinefrin  yang  diinjeksikan  ke mencit adalah 0,5 mL secara i.p. Selanjutnya, mencit diberi perlakuan dengan cara disonde  secara  oral  sekali  sehari  selama  2  minggu  dengan  suspensi  CMC-Na  1% pada  kontrol  negatif  dan  supensi  atenolol  6,5  mg/kgBb  pada  kontrol  positif. Sedangkan  ekstrak  dosis  70,  140,  dan  280  mg/kgBB  diberikan  tiga  kali  sehari selama  2  minggu.    Diukur  tekanan  darah  sistolik  dan  diastolik  mencit  setelah  2 minggu diberi perlakuan.
Data  persentase  (%)  penurunan  tekanan  darah  sistolik  dan  diastolik  yang diperoleh  dari  pengukuran  tekanan  darah  mencit,  dianalisis  secara  statistik  dengan menggunakan aplikasi IBM SPSS Statistics Versi 24. Analisis data diawali dengan uji  normalitas  menggunakan  uji  Shapiro-Wilk  untuk  mengetahui  data  terdistribusi normal atau tidak. Kemudian, dilanjutkan dengan uji homogenitas menggunakan uji Levene untuk melihat data homogen atau tidak. Jika data sudah terdistribusti normal dan  homogen  (p>0,05),  maka  dilakukan  uji  One  Way  ANOVA  untuk  melihat hubungan antara kelompok perlakuan. Jika terdapat perbedaan signifikan (p<0,05), maka  dilakukan  uji  post  hoc  menggunakan  uji  LSD  untuk  mengetahui  kelompok perlakuan  mana  yang  berbeda  signifikan.  Hasil  analisis  data  ditampilkan  sebagai mean±SEM.

## Hasil dan Pembahasan

## A. Karakterisasi Simplisia
Hasil  yang  diperoleh  telah memenuhi  persyaratan  Farmakope  Indonesia  edisi V, dimana susut pengeringan dan kadar abu tidak larut asam adalah <12% b/b dan <2%  b/b  (Kemenkes  RI,  2014).  Hasil  susut  pengeringan  dan  kadar  abu  tak  larut asam simplisia akar R . serpentina dapat dilihat pada tabel 1.
Tabel 1
Hasil Susut Pengeringan dan Kadar Abu Tidak Larut Asam Simplisia Akar R.
serpentina Uji Kadar (% b/b) Susut pengeringan 7,67 Kadar abu tak larut asam 0,383

## B. Ekstraksi
Hasil  ekstraksi  akar R . serpentina dengan  menggunakan  pelarut  etanol  96% dan metode maserasi dapat dilihat pada tabel 2. Rendemen ekstrak etanol 96% akar R . serpentina yang  dihasilkan  lebih  tinggi  dibandingkan  penelitian  yang  dilakukan oleh (Azmi & Qureshi, 2012) yang menghasilkan rendemen ekstrak metanol akar R . serpentina sebesar 5% b/b.
Hasil Ekstraksi akar R. serpentina Warna Ekstrak Konsistensi Ekstrak Bobot (gram) Rendemen (% b/b) Coklat kehitaman Kental 22,119 5,529
Maserasi metode ekstraksi yang dipilih untuk mengektraksi akar R . serpentina . Kelebihan  metode  maserasi,  yaitu  metode  yang  dikerjakan  sederhana  karena menggunakan  peralatan  dan  perlengkapan  yang  tidak  rumit,  tidak  membutuhkan keterampilan  khusus  dalam  pengerjaannya,  dan  hemat  energi  (Rasul,  2018).  Selain pemilihan  metode  ekstraksi,  pemilihan  pelarut  sangat  penting  dalam  ekstraksi. Dalam  pemilihan  pelarut  faktor  selektivitas,  kelarutan,  biaya  dan  keamanan  (Qing Wen  Zhang,  Lin,  &  Ye,  2018).  Etanol  merupakan  pelarut  yang  lebih  selektif daripada  air  (Ginting,  2020).  Selain  itu,  etanol  lebih  mudah  melarutkan  golongan senyawa  alkaloid  dibandingkan  air  (Aniszewski,  2015).  Alkaloid  merupakan senyawa  non  polar  yang  tidak  dapat  diekstraksi  dengan  pelarut  air  (Roopashree  & Naik,  2019).  Etanol  96%  dipilih  untuk  mengekstraksi  senyawa  alkaloid  yang terkandung  dalam  akar R . serpentina ,  karena  etanol  96%  dapat  meminimalkan kontaminasi  pertumbuhan  mikroorganisme  lain  dalam  ekstrak  yang  hanya mengandung 4% air (Sogandi & Nilasari, 2019).

## C. Skrining Fitokimia
Hasil  skrining  fitokimia  ekstrak  etanol  96%  akar R . serpentina dapat  dilihat pada  Tabel  3.  Berdasarkan  hasil  yang  tertera  pada  Tabel  3,  menunjukkan  bahwa ekstrak  etanol  96%  akar R . serpentina positif  mengandung  senyawa  alkaloid. Endapan  putih  dan  merah  jingga  yang  terbentuk  dengan  penambahan  perekasi Mayer  dan  Dragendroff  pada  uji  alkaloid  merupakan    kompleks  kalium-alkaloid yang mengendap (Wardhani & Supartono, 2015).

## Tabel 3

## Hasil Skrining Fitokimia Ekstrak Etanol 96% Akar R. Serpentina
Uji Pereaksi Endapan Hasil Alkaloid Mayer Dragendorff Putih Merah Jingga (+) (+)
Keterangan: (+) (Ekstrak positif mengandung senyawa alkaloid)

## D. Pengujian Efek Antihipertensi
Hasil  pengukuran  TD  sistolik  dan  diastolik  mencit  yang tertera  pada  Tabel  4 menunjukkan,  bahwa  terjadi  peningkatan  mean SEM  TD  sistolik  dan  diastolik mencit  yang  signifikan  setelah  diinduksi  epinefrin  selama  2  minggu  pada  P2 (kontrol  negatif),  P3  (kontrol  positif),  P4  (ekstrak  70  mg/kgBB),  P5  (ekstrak  140 mg/kgBB)  dan  P6  (ekstrak  280  mg/kgBB)  jika  dibandingkan  P1,  dimana  P2 menghasilkan  mean SEM  TD  sistolik  dan  diastolik  yang  paling  tinggi,  yaitu sebesar 158,000 1,155 mmHg dan 106,670 mmHg. Epinefrin memiliki mekanisme kerja  dalam  meningkatkan  tekanan  darah,  karena  merupakan  vasokonstriktor  tipe katokolamin yang bersifat non-selektif adrenergik yang menyebabkan pengurangan
diameter  pembuluh  darah  perifer  (α1  agonis)  dan  menstimulasi  β1  reseptor, sehingga  meningkatkan  denyut  jantung  dan  tekanan  darah  (Seminario-Amez, González-Navarro, Ayuso-Montero, Jané-Salas, & López-López, 2021).
Tabel 4 juga menunjukkan hasil pengukuran TD sistolik dan diastolik mencit setelah  perlakuan  selama  2  minggu,  dimana  P3,  P4,  P5  dan  P6  menghasilkan penurunan  mean SEM  TD  sistolik  yang  signifikan  jika  dibandingkan  dengan  P1 dan  P2.  Nilai  mean SEM  TD  sistolik  terendah  dihasilkan  oleh    P6,  yaitu  sebesar 109,670 1,764  mmHg.  Sedangkan,  penurunan  mean SD  TD  diastolik  yang signifikan  terjadi  pada  P1,  P3,  P5  dan  P6  jika  dibandingkan  dengan  P2  dan  P4, dimana  P1  menghasilkan  nilai  mean SEM  TD  diastolik  terendah,  yaitu  sebesar 63,670 3,283 mmHg.
Tabel 4 Hasil Pengukuran Tekanan Darah (TD) Sistolik (S) dan Diastolik (D) Mencit (Mean   SEM) Kelompok Perlakuan TD Awal (mmHg) TD Setelah Induksi Selama 2 Minggu (mmHg) TD Setelah Perlakuan Selama 2 Minggu (mmHg) S D S D S D Kontrol normal (P1) 109,000 1,155 74,670 6,119 109,670 0,882 81,670 5,333 107,670 0,882 63,670 3,283 Kontrol negatif (P2) 111,000 1,000 77,000 13,000 158,000 1,155 106,670 6,360 155,000 1,528 88,670 12,68 Kontrol positif (P3) 111,330 1,202 85,000 6,557 149,670 2,028 104,330 0,333 120,670 0,667 86.670 1,453 Ekstrak 70 mg/kgBB (P4) 111,330 0,333 87,000 1,000 152,670 2,404 104,670 3,930 117,330 0,333 89,330 2,603 Ekstrak 140 mg/kgBB (P5) 114,670 0,333 85,670 6,888 151,670 1,453 106,330 4,667 114,670 0,333 80,000 6,245 Ekstrak 280 mg/kgBB (P6) 114,67 0,33 79,330 6,173 155,000 0,577 109,670 1,764 109,670 0,882 68,000 2,887
Kelompok  kontrol  negatif  (P2)  dalam  penelitian  ini  adalah  kelompok  mencit yang  diberikan  supensi  CMC-Na  1%  yang  bertujuan  untuk  melihat  pengaruh pemberian  CMC-Na  terhadap  TD  sistolik  dan  diastolik  mencit  setelah  diberi perlakuan selama 2 minggu. Berdasarkan hasil yang tertera pada Tabel 4, setelah 2 minggu perlakuan tidak terjadi penurunan TD sistolik dan diastolik yang signifikan. Hal  ini  menunjukkan,  bahwa  pemberian  suspensi  CMC-Na  pada  P2  tidak mempengaruhi TD sistolik dan diastolik mencit, karena CMC-Na tidak mengandung
zat aktif yang berkhasiat obat untuk menurunkan tekanan darah (Safitri, Kholifah, & Rangkuti, 2021).
CMC-Na  dalam  penelitian  ini  tidak  hanya  digunakan  dalam  P2,  namun  juga digunakan sebagai agen pensuspensi atenolol 6,5 mg/kgBB dan ekstrak etanol 96% akar R . serpentina dengan dosis 70, 140 dan 280 mg. Sediaan suspensi dibuat untuk untuk  mengurangi  penguraian  zat  aktif  yang  tidak  stabil/larut  dalam  air  (Fitriani dkk.,  2015).  Atenolol  merupakan  obat  antihipertensi  golongan  β-blocker  yang bersifat sebagai nonvasodilatasi yang memiliki mekanisme aksi dalam menurunkan tekanan  darah  dengan  cara  mengurangi  curah  jantung  (Poirier  &  Tobe,  2014). Atenolol  memiliki  kelarutan  yang  rendah  dalam  air  (Parfati,  Rani,  Charles,  & Geovanny,  2018).  Selain  atenolol,  reserpin  yang  merupakan  zat  aktif  yang terkandung dalam akar R . serpentina memiliki kelarutan yang praktis tidak larut di dalam  air  (Shakeel,  Haq,  Siddiqui,  Alanazi,  &  Alsarra,  2015).  Oleh  karena  itu, dalam penelitian ini atenolol dan ekstrak etanol 96% akar R . serpentina lebih efektif jika dibuat sediaan dalam bentuk suspensi.
Efek antihipertensi ekstrak etanol 96% akar R . serpentina berasal dari senyawa golongan  alkaloid,  yaitu  reserpin  yang  dapat  mengobati  hipertensi  ringan  hingga sedang  (Kumar,  Kumar,  Bajpai,  &  Madhusudanan,  2020).  Sifat  antihipertensi  dari reserpin  adalah  karena  aksi  depresannya  pada  sistem  saraf  pusat  dan  sistem  saraf tepi.  Reserpin  mencegah  penyimpanan  serotonin  dan  katekolamin.  Selain  itu, reserpin  juga  mengganggu  fungsi  sistem  saraf  otonom  dengan  menipiskan katekolamin  dari  neuron  adrenergik  dan  mengaktifkan  sistem  parasimpatis.  Salah satu  efek  yang  ditimbulkan  adalah  penurunan  tekanan  darah  (antihipertensi) (Agrawal,  2019).  Berdasarkan  hasil  persentase  (%)  penurunan  TD  sistolik  dan diastolik  mencit  pada  Gambar  1  menunjukkan,  bahwa  P4,  P5  dan  P6  yang merupakan  kelompok  ekstrak  dengan  dosis  70,  140  dan  280  mg/kgBB  mampu menurunkan  TD  sistolik  dan  diastolik  mencit  dengan  persentase  penurunan mean SEM  TD  sistolik  dan  diastolik  tertinggi  dihasilkan  oleh  P6,  yaitu  sebesar 29,243 0,7651%  dan  37,880 3,692%.  Hasil  ini  menunjukkan,  bahwa  dosis  280 mg/kgBB  merupakan  dosis  ekstrak  etanol  96%  akar R . serpentina yang  paling efektif dalam menurunkan tekanan darah mencit.
Gambar 1 Persentase Penurunan TD Sistolik dan Diastolik Mencit. Data ditampikan sebagai
mean SEM.
E. Analisis Data
Hasil  uji  normalitas  dan  homogenitas  dengan  menggunakan  uji  Saphiro-Wilk dan uji Levene menunjukkan, bahwa data %penurunan mean±SEM TD sistolik dan diastolik  mencit  terdistribusi  normal  dan  homogen,  yang  ditandai  dengan  niai signifikansi (p>0,05). Hasil uji normalitas dan homogenitas %penurunan TD sistolik dan diastolik mencit dapat dilihat pada Tabel 5 dan Tabel 6.

## Tabel 5
Hasil Uji Normalitas %Penurunan TD Sistolik dan Diastolik Mencit menggunakan Uji Saphiro-Wilk Kelompok Perlakuan Nilai Signifikansi (p>0,05) Interpretasi Hasil %Penurunan TD Sistolik %Penurunan TD Diastolik P1 0,945 0,409 Normal P1 0,940 0,427 Normal P3 0,420 0,521 Normal P4 0,780 0,145 Normal P5 0,225 0,424 Normal P6 0,130 0,928 Normal Tabel 6 . Hasil Uji Homogenitas %Penurunan TD Sistolik dan Diastolik Mencit menggunakan Uji Levene Variabel Nilai Signifikansi (p>0,05) Interpretasi Hasil %Penurunan TD sistolik 0,321 Homogen
%Penurunan TD diastolik 0,108 Homogen
Data  %  penurunan  TD  sistolik  dan  diastolik  mencit  yang  telah  terdistribusi normal  dan  homogen,  selanjutnya  dianalsis  dengan  menggunakan  uji  One  Way Anova. Berdasarkan hasil uji One Way Anova, dipeorleh nilai F(hitung) (197,264) > nilai  F  (tabel)  (3,11)  dan  nilai  signifikasi  pada  masing-masing  variabel  (% penurunan TD sistolik dan diastolik mencit) sebesar 0,000 dan 0,018 (p<0,05). Hal ini menunjukkan, bahwa minimal terdapat dua kelompok yang memiliki perbedaan signifikan  pada  %penurunan  TD  sistolik  dan  diastolik  mencit.  Hasil  uji  One  Way Anova %penurunan TD sistolik dan diastolik mencit dapat dilihat pada Tabel 7.
Tabel 7
Hasil Uji One Way Anova %Penurunan TD Sistolik dan Diastolik Mencit
Variabel n k Nilai F (Hitung) Nilai F (Tabel) Nilai Signifikansi (p<0,05) Interpretasi Hasil %Penurunan TD sistolik 18 6 197,264 3,11 0,000 Ada perbedaan signifikan %Penurunan TD diastolik 18 6 4,400 3,11 0,018 Ada perbedaan signifikan
Keterangan: n = banyak data 1 variabel; k = banyak variabel.
Untuk  menentukan  perbedaan  signifikasi  pada  setiap  kelompok,  maka selanjutnya  dilakukan  uji  post  hoc  menggunakan  uji  LSD.  Hasil  uji  post  hoc %penurunan  TD  sistolik  dan  diastolik  mencit  menggunakan  uji  LSD  (Tabel  8) menunjukkan,  bahwa  pada  variabel  %penurunan  TD  sistolik  mencit  tidak  ada perbedaan signifikan (p>0,05) antara P1 dengan P2 dan P4 dengan P5. Namun, ada perbedaan signifikan (p<0,05) antara P1 dengan P3, P4, P5 dan P6; P2 dengan P3, P4,  P5  dan  P6;  P3  dengan  P4,  P5  dan  P6;  dan  P5  dengan  P6.  Sedangkan,  pada variabel %penurunan TD sistolik mencit dipeorleh hasil, bahwa tidak ada perbedaan signifikan (p>0,05) antara P1 dengan P2, P3, P4 dan P5; P2 dengan P3, P4 dan P5; P3 dengan P4 dan P5; dan P4 dengan P5. Namun, ada perbedaan signifikan (p<0,05) antara P1 dengan P6; P2 dengan P6; P3 dengan P6; P4 dengan P6; dan P5 dengan P6.
Tabel 8 Hasil Uji Post Hoc %Penurunan TD Sistolik Mencit menggunakan Uji LSD Variabel Kelompok Perbandingan Nilai Signifikansi (p>0,05) Interpretasi Hasil %Penurunan TD sistolik P1 P2 P3 P4 P5 P6 0,946 0,000 0,000 0,000 0,000 Tidak berbeda signifikan Berbeda signifikan Berbeda signifikan Berbeda signifikan Berbeda signifikan P2 P3 P4 0,000 0,000 Berbeda signifikan Berbeda signifikan
%Penurunan TD diastolik P5 P6 0,000 0,000 Berbeda signifikan Berbeda signifikan P3 P4 P5 P6 0,008 0,001 0,000 Berbeda signifikan Berbeda signifikan Berbeda signifikan P4 P5 P6 0,309 0,000 Tidak berbeda signifikan Berbeda signifikan P5 P6 0,002 Berbeda signifikan P1 P2 P3 P4 P5 P6 0,440 0,430 0,226 0,637 0,017 Tidak berbeda signifikan Tidak berbeda signifikan Tidak berbeda signifikan Tidak berbeda signifikan Berbeda signifikan P2 P3 P4 P5 P6 0,986 0,642 0,223 0,004 Tidak berbeda signifikan Tidak berbeda signifikan Tidak berbeda signifikan Tidak berbeda signifikan P3 P4 P5 P6 0,654 0,218 0,004 Tidak berbeda signifikan Tidak berbeda signifikan Tidak berbeda signifikan P4 P5 P6 0,104 0,002 Tidak berbeda signifikan Berbeda signifikan P5 P6 0,046 Berbeda signifikan

## Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian dapat disimpulkan, bahwa ekstrak etanol 96% akar R . serpentina memiliki efek antihipertensi, karena dapat menurunkan tekanan darah mencit yang  dibuat  hipertensi.  Dosis  ekstrak  yang  paling  efektif  dalam  menurunkan  tekanan darah  mencit  adalah  280  mg/kgBB.  Penelitian  ini  dapat  dijadikan  referensi atau  acuan oleh peneliti selanjutnya untuk menguji toksisitas ekstrak etanol 96% akar R . serpentina pada hewan uji.

## BIBLIOGRAFI
Agrawal, S. (2019). Rauvolfia serpentina: a medicinal plant of exceptional qualities. Alt Med Chiropr OA J , 2 (2), 180016.
Aniszewski, Tadeusz. (2015). Alkaloids: chemistry, biology, ecology, and applications . Elsevier.
Azmi,  Muhammad  Bilal,  &  Qureshi,  Shamim  A.  (2012).  Methanolic  root  extract  of Rauwolfia  serpentina  benth  improves  the  glycemic,  antiatherogenic,  and cardioprotective  indices  in  alloxan-induced  diabetic  mice. Advances  in Pharmacological Sciences , 2012 .
Bloch,  M.  J.  (2016).  Worldwide  Prevalance  of  Hypertension  Exceeds  1.3  Billion.
Journal of the American Society of Hypertension , 10 (10), 1–2.
Ginting, Suventi Syafrina. (2020). Perbandingan Efek Penyembuhan Luka Bakar Antara Gel Ekstrak Etanol Daun Afrika (Gymnanthemum amygdalinum Del.) Dengan Gel Ekstrak  Etanol  Daun  Kelapa  Sawit  (Elaeis  guineensis  Jacq.)  Serta  Kombinasinya Pada Kelinci Tahun 2019. Jurnal Penelitian Farmasi & Herbal , 3 (1), 82–90.
Hidayah,  Riska  Nurul,  &  Sulistiyaningsih,  Rr  Sulistiyaningsih  Rr.  (2019).  Review Artikel: Tanaman Dengan Aktivitas Anti Hipertensi. Farmaka , 17 (2), 161–166.
Khoury,  Shireen  R.,  &  Ratchford,  Elizabeth  V.  (2021).  Vascular  Disease  Patient Information Page: Subclavian artery stenosis. Vascular Medicine , 26 (4), 464–468.
Kumar,  Brijesh,  Kumar,  Sunil,  Bajpai,  Vikas,  &  Madhusudanan,  K.  P.  (2020). Phytochemistry of Plants of Genus Rauvolfia . CRC Press.
Kumari, I., Madhusudan, S., Walia, B., & Chaudhary, G. (2021). Rauwolfia serpentine (Sarpagandha):  A  Review  Based  Upon  Its  Phytochemistry  and  Ayurvedic  Uses. International Journal of Current Research , 13 (3), 16727–16734.
Kurnianto,  A.,  Sunjaya,  D.  K.,  Rinawan,  F.  R.,  &  Hilmanto,  D.  (2020).  Prevalance  of Hypertension  and  Its  Associated  Factors  among  Indonesian  Adolescents. International Journal of Hypertension , 2020 (4262034), 1–7.
Lee,  Jinkook,  Wilkens,  Jenny,  Meijer,  Erik,  Sekher,  T.  V,  Bloom,  David  E.,  &  Hu, Peifeng.  (2022).  Hypertension  awareness,  treatment,  and  control  and  their association with healthcare access in the middle-aged and older Indian population: A nationwide cohort study. PLoS Medicine , 19 (1), e1003855.
Luo, Xiaoqin, Yang, Hexiang, He, Zhangya, Wang, Shanshan, Chen, Tao, & Li, Chao. (2022).  Numbers  and  Mortality  Risk  of  Hypertensive  Patients  with  or  without Elevated  Body  Mass  Index  in  China. International  Journal  of  Environmental Research and Public Health , 19 (1), 116.
Nguyen,  Tu  N.,  &  Chow,  Clara  K.  (2021).  Global  and  national  high  blood  pressure burden and control. Lancet (London, England) , 398 (10304), 932–933.
Oh,  Gyu  Chul,  &  Cho,  Hyun  Jai.  (2020).  Blood  pressure  and  heart  failure. Clinical Hypertension , 26 (1), 1–8.
Parfati,  Nani,  Rani,  Karina  Citra,  Charles,  Nathanael,  &  Geovanny,  Valencia.  (2018). Preparation  and  evaluation  of  atenolol-β-cyclodextrin  orally  disintegrating  tablets using  co-process  crospovidone-sodium  starch  glycolate. International  Journal  of Applied Pharmaceutics , 10 (5), 190–194.
Poirier,  Luc,  &  Tobe,  Sheldon  W.  (2014).  Contemporary  use  of  β-blockers:  clinical relevance of subclassification. Canadian Journal of Cardiology , 30 (5), S9–S15.
Rasul,  Mohammed  Golam.  (2018).  Conventional  extraction  methods  use  in  medicinal plants, their advantages and disadvantages. Int. J. Basic Sci. Appl. Comput , 2 , 10– 14.
Roopashree,  K.  M.,  &  Naik,  Dhananjay.  (2019).  Advanced  method  of  secondary metabolite  extraction  and  quality  analysis. Journal  of  Pharmacognosy  and Phytochemistry , 8 (3), 1829–1842.
Safitri,  Meta,  Kholifah,  Febriyani,  &  Rangkuti,  Saru  Noliqo.  (2021).  Efek  Laksatif Infusa  Daun  Ketepeng  Cina  (Cassia  Alata  Linn)  Pada  Tikus  Jantan  (Rattus Norvegicus) Galur Sprague Dawley Yang Diinduksi Gambir. Jurnal Farmagazine ,
8 (1), 32–38.
Seminario-Amez, Maria, González-Navarro, Beatriz, Ayuso-Montero, Raul, Jané-Salas, Enric,  &  López-López,  José.  (2021).  Use  of  local  anesthetics  with  a vasoconstrictor  agent  during  dental  treatment  in  Hypertensive  and  Coronary disease patients. A systematic review. Journal of Evidence Based Dental Practice , 21 (2), 101569.
Shah, S. M. A., Naqvi, S.  A. R.,  Munir,  N., Zafar, S., Akram, M., &  Nisar, J. (2020). Antihypertensive and Antihyperlipidemic Activity of Aqueous Methanolic Extract of Rauwolfia serpentina in Albino Rats. Dose-Response: An International Journal , 18 (3), 1–7.
Shakeel, Faiyaz, Haq, Nazrul, Siddiqui, Nasir A., Alanazi, Fars K., & Alsarra, Ibrahim A. (2015). Correlation of solubility of bioactive compound reserpine in eight green solvents at (298.15 to 338.15) K. Journal of Chemical & Engineering Data , 60 (3), 775–780.
Sharma, J. R., Mabhida, S. E., Myers, B., Apalata, T., Nicol, E., Benjeddou, M., Muller, C.,  &  Johnson,  R.  (2021).  Prevalance  of  Hypertension  and  Its  Assocciated  Risk Factor in a Rural Black Population of Mthatha Town, South Africa. International Journal of Environmental Research and Public Health , 18 (1215), 1–17.
Sogandi,  Sogandi,  &  Nilasari,  Putu.  (2019).  Identifikasi  senyawa  aktif  ekstrak  buah mengkudu  (Morinda  citrifolia  L.)  dan  potensinya  sebagai  inhibitor  karies  gigi. Jurnal Kefarmasian Indonesia , 73–81.
Sulaiman,  C.  T.,  Jyothi,  C.  K.,  Unnithan,  Jinu  Krishnan,  Prabhukumar,  K.  M.,  & Balachandran, Indira. (2020). Identification of suitable substitute for Sarpagandha (Rauvolfia serpentina (L.) Benth. ex Kurz) by phytochemical and pharmacological evaluation. Beni-Suef  University  Journal  of  Basic  and  Applied  Sciences , 9 (1),  1– 11.
Sulandjari  &  Yuniastuti,  E.  (2010).  The  Leaf  Numbers  and  Root  Diameter  of  Pule Pandak  (Rauvolfia  serpentina  Benth.)  Influence  The  Root-Dry  Weight  and Reserpine Content. Journal of Biotechnology and Biodiversity , 1 (2), 31–36.
Sutiningsih, Dwi, Inova, Inova, & Adi, Mateus Sakundarno. (2021). Tempoyak Sebagai Faktor  Risiko  Kejadian  Hipertensi  (Studi  pada  Masyarakat  Suku  Dayak  di Wilayah Puskesmas Tumbang Samba, Kabupaten Katingan, Kalimantan Tengah) .
Wardhani,  Rengganis  Ayu  Pramudya,  &  Supartono,  Supartono.  (2015).  Uji  Aktivitas Antibakteri  Ekstrak  Kulit  Buah  Rambutan  (Nephelium  lappaceum  L.,)  Pada Bakteri. Indonesian Journal of Chemical Science , 4 (1).
Zhang, Qing Wen, Lin, Li Gen, & Ye, Wen Cai. (2018). Techniques for extraction and isolation  of  natural  products:  A  comprehensive  review. Chinese  Medicine , 13 (1), 1–26.
Zhang,  Yuqing,  Miao,  Huanhuan,  Chia, Yook‐Chin,  Buranakitjaroen,  Peera,  Siddique, Saulat,  Shin,  Jinho,  Turana,  Yuda,  Park,  Sungha,  Tsoi,  Kelvin,  &  Chen, Chen‐Huan. (2022). Cardiovascular risk assessment tools in Asia. The  Journal  of Clinical Hypertension .

## Copyright holder:
Maruli Davidson Sitompul, Kadek Dian Widyapurwanti, Ni Luh Putu Putri Dewi, Ni Kadek Warditiani (2022)

## First publication right:
Syntax Literate: Jurnal Ilmiah Indonesia
This article is licensed under: