Jurnal Pharmascience, Vol. 04 , No.02, Oktober 2017, hal: 246 - 254 ISSN-Print. 2355 – 5386 ISSN-Online. 2460-9560 http://jps.unlam.ac.id/

## Research Article

## Isolasi Dan Identifikasi Senyawa Antioksidan Dari Buah Kasturi ( Mangifera casturi Kosterm.)
*Sutomo 1 , Hadi Azhari 1 , Arnida 1 , Fadlilaturrahmah 1 , Rahmat Yunus 2
1 Program Studi Farmasi Fakultas MIPA Universitas Lambung Mangkurat, Banjarbaru 2 Program Studi Kimia Fakultas MIPA Universitas Lambung Mangkurat, Banjarbaru *Email: sutomo01@unlam.ac.id

## ABSTRAK
Antioksidan  berfungsi  untuk  menetralisir  radikal  bebas,  sehingga  dapat mencegah  dan  melindungi  terjadinya  kerusakan  tubuh  yang  dapat  menyebabkan timbulnya penyakit degeneratif. Salah satu tanaman endemik Kalimantan Selatan yang teridentifikasi  mengandung  antioksidan  alami  yaitu  kasturi  ( Mangifera  casturi Kosterm.).  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengisolasi  dan  mengidentifikasi  senyawa antioksidan  dari  buah  M.  casturi.  Ekstraksi  dilakukan  dengan  metode  maserasi. Pemisahan  dan  pemurnian  dilakukan  dengan  KLT  ,  KCV,  dan  kromatografi  kolom gravitasi.  Identifikasi  senyawa  dengan  spektrofotometri  UV-Vis  dan  FTIR  serta  uji kualitatif antioksidan dan aktifitas kuantitatif antioksidan isolat. Ekstraksi  2500 gram serbuk  buah  M.  casturi  dengan  metanol  diperoleh  840,69  gram  ekstrak  kental berwarna  coklat.  Fraksinasi  60  gram  ekstrak  metanol  dengan  fraksi  etil  asetat menghasilkan  8,3  gram  ekstrak  kering.  Fraksi  etil  asetat  difraksinasi  kembali menggunakan  KCV  dengan  eluen  n-heksana  :  etil  asetat  (9:1;  8:2;  7:3;  6:4;  5:5;  4:6; 3:7) v/v,  etil asetat : metanol (5:5 v/v), 100% metanol diperoleh fraksi A, B, C, D, E, F, G, dan H. Fraksi H dipilih untuk di isolasi menggunakan kromatografi kolom gravitasi dengan eluen n-heksana : etil asetat : metanol (5:3:0,5; 5:4:1; 5:4:2; 5:6:2; 5:6:2,5) v/v dan 100% metanol. Uji kualitatif KLT menunjukkan isolat H-7  mengandung senyawa antioksidan  dengan  pereaksi  DPPH.  Aktivitas  antioksidan  isolat  H-7  memiliki  nilai IC50¬  sebesar  4,61±0,57    ppm.  Analisis  isolat  H-7  dengan  UV-Vis  menghasilkan puncak pada λ 274,8 nm (pita I) dan λ 218 nm (Pita II). Analisis FTIR menunjukkan gugus  fungsi  dari  isolat  H-7  yaitu  -OH,  C-H  aromatik,  C-H  alifatik,  C=O,  C=C aromatik, dan C-O.
Kata Kunci : Antioksidan, buah M. casturi, DPPH, fraksi etil asetat, Isolasi

## ABSTRACT
The  core  function  of  antioxidants  is  to  neutralize  free  radicals,  by  administering these  antioxidants  ones  can  prevent  damage  and  protect  their  body  from  degenerative diseases.  One  of  the  endemic  plants  in  South  Kalimantan  which  is  identified  to  contain natural  antioxidants  is  Kasturi  (Mangifera  casturi  Kosterm.).  This  research  aims  at isolating  and  identifying  antioxidant  compounds  in  M.  casturi  fruit.  Extraction  is conducted by using maceration method. Separation and purification is conducted by using
TLC, VLC, and gravity chromatography column. The identification of compound uses UV- Vis  and  FTIR  spectrophotometry.  So  do  the  qualitative  assay  of  antioxidant  and quantitative activity of isolates antioxidant. The extraction of 2.500 grams M. casturi fruit powder  with  methanol  extracts  produces  840.69  grams  of  brown  viscous  extracts.  The fractionation of 60 grams methanol extracts with ethyl acetate fraction produces 8.3 grams of dry extracts. Ethyl acetate fraction by using VLC with the n-hexane: ethyl acetate eluent (9:1; 8:2; 7:3; 6:4; 5:5; 4:6; 3:7) v/v, ethyl acetate : methanol (5: 5 v / v), 100% methanol produces fractions A, B, C, D, E, F, G, and H. Fraction H then is chosen to be isolated by using gravity chromatography column with the n-hexane: ethyl acetate : methanol eluent (5:3:0.5; 5:4:1; 5:4:2; 5:6:2; 5:6:2.5) v/v and 100% methanol. TLC qualitative test shows that  H-7  isolates  contains  antioxidant  compounds  with  DPPH  reagent.  The  antioxidant activity of H-7 isolates have IC50 value of 4.61±0.57 ppm. H-7 Isolates analysis  by using UV-Vis  reach  the  peak  at  λ  274.8  nm  (Band  I)  and  λ  218  nm  (Band  II).  FTIR  analysis shows  that  the  functional  groups  of  H-7  isolates  are  -OH,  aromatic  C-H,  aliphatic  C-H, C=O, C=C aromatic, and C-O.
Key words: Antioxidants, DPPH, ethyl acetate fraction, M. casturi fruit, Isolation

## I. PENDAHULUAN
Radikal  bebas  merupakan  molekul yang  kehilangan  satu  buah  elektron  yang diproduksi pada proses metabolisme dalam keadaan  normal,  dapat  juga  berasal  dari polusi,  debu,  makanan,  dan  sebagainya (Hariyatmi,  2004).  Aktivitas radikal bebas yang  berlebihan  dapat  merusak  protein, lipid,  karbohidrat,  dan  asam  nukleat sehingga  dapat    menyebabkan  berbagai penyakit  degeneratif  (Suirta et  al., 2007).
Risiko  penyebab  terjadinya  penyakit tersebut dapat dikurangi dengan penggunaan  senyawa  antioksidan  yang mampu  menangkap  radikal  bebas  (Amrun et  al., 2007).  Antioksidan  berfungsi menetralisir radikal bebas sehingga diharapkan  dengan  pemberian  antioksidan tersebut  dapat  mencegah  dan  melindungi terjadinya kerusakan tubuh terhadap penyakit  degeneratif  (Kosasih et  al.,
2006).    Salah  satu  tanaman  endemik Kalimantan  Selatan  yang  diidentifikasi mengandung  antioksidan  alami  yaitu kasturi ( Mangifera casturi Kosterm.)
Ekstrak  metanol  buah M.  casturi mengandung  terpenoid  dan  kelompok polifenol,  serta  menunjukkan  aktivitas antioksidan (Sutomo et al. , 2014).
Aktivitas antioksidan dari buah M. casturi dibuktikan  dengan  menggunakan  metode penangkap  radikal  bebas 2,2-diphenyl-1- picrylhydrazyl (DPPH).  Ekstrak  metanol buah M.  casturi memiliki  aktivitas antioksidan  dengan  nilai  IC 50 sebesar 112,4 μg/mL, sedangkan fraksi n -heksana,
etil asetat, dan metanol memiliki nilai IC 50 sebesar  193,0  μg/mL,  6,0  μg/mL,  dan 538,9  μg/mL  (Sutomo et  al. ,  2014). Berdasarkan  nilai  IC 50 pada  penelitian sebelumnya maka ekstrak buah M. casturi berpotensi  sebagai  antioksidan  secara
alami.  Kandungan  tersebut  diperkuat dengan  hasil  isolasi  yang  dilakukan  pada buah M.  casturi yaitu  lupeol, β -sitosterol, dan metil galat (Sutomo, 2014). Penelitian Suhartono et  al (2012)  buah M.  casturi mengandung  total  flavonoid  dengan  nilai 30,0 ± 1,2 ( equivalen quersetin μg/mL ) .
Berdasarkan  informasi  tersebut, sangat  perlu  untuk  melakukan  isolasi  dan identifikasi  senyawa  dengan  tujuan  untuk mengeksplorasi berbagai kandungan senyawa  antioksidan  dalam  buah M. casturi. Rumusan  masalah  penelitian  ini yaitu  senyawa  apakah  yang  terkandung  di dalam  buah M.  casturi yang  berpotensi sebagai antioksidan.

## II. METODE PENELITIAN

## A. Bahan dan Alat
Alat yang digunakan pada penelitian ini yaitu alat-alat gelas (Pyrex® Iwaki  Glass),  cawan  porselin,  corong pisah,  erlenmeyer, Infrared  spectrometry (FTIR,  Perkin  Elmer  100),  kertas  saring, kromatografi  cair  vakum  (KCV),  lampu ultraviolet  254  nm  dan  366  nm,  mesin blender,  neraca  analitik  (Ohaus®),  oven, pipa  kapiler, rotary  vacuum  evaporator,
seperangkat  alat  KLT,  seperangkat  alat kromatografi  kolom,  seperangkat  alat maserasi, UV-Vis (spectronic® 20 genesysTM), waterbath (SMIC®).
Bahan  yang  digunakan  pada  penelitian  ini yaitu  akuades,  buah M.  casturi, etil  asetat
(p.a),  kalium  bromida,  kloroform  (p.a), metanol  (p.a),  metanol  (teknis), n -heksana (p.a),  plat  kromatografi  lapis  tipis  (KLT) dengan  silika  gel  60  F 254 for  thin  layer chromatography (Merck), silika gel 60 for column  chromatography (Merck), 2,2- diphenyl-1-picrylhidrazyl (DPPH).

## B. Jalannya Penelitian
1. Ekstraksi Buah M. casturi
Sampel  buah M.  casturi diambil dari Kabupaten Banjar, Kalimantan Selatan. Buah M. casturi yang dipilih pada penelitian  ini  adalah  buah  yang  sudah masak  (tekstur  daging  buah  tidak  lembek, warna  kulit  buah  ungu  agak  kehitaman, daging buah berwarna jingga, dan memiliki  bau  khas).  Serbuk  simplisia daging  bersama  kulit  buah M.  casturi ditimbang seberat 2,5 kg untuk diekstraksi dengan  metode  maserasi  menggunakan pelarut metanol (teknis) dengan perbandingan  1:2,5.  Ekstraksi  dilakukan selama  3  x  24  jam  sambil  diaduk,  Hasil ekstrak  dipekatkan  dengan rotary  vacuum evaporator pada suhu 50 o hingga didapatkan ekstrak kental (Sutomo, 2014).
2. Fraksinasi
Ekstrak dilakukan fraksinasi dengan  metode  cair-cair.  Ekstrak  kental metanol  difraksinasi  menggunakan  etil asetat. Ekstrak metanol 15 g disuspensikan dengan aquades terlebih  dahulu  dengan perbandingan ekstrak dan akuades
sebanyak  1:2  dan  dimasukkan  ke  dalam corong pisah. Fraksinasi dilakukan dengan menambahkan  50  mL  etil  asetat  diulang sebanyak  3  kali,  Seluruh  fraksi  etil  asetat disimpan untuk diisolasi senyawa aktifnya. Ekstrak dan fraksi yang diperoleh dianalisis  dengan  kromatografi  lapis  tipis dan  disemprot  dengan  DPPH  untuk mengetahui aktivitas antioksidannya.
Fraksi  Etil  asetat  7  gram  difraksinasi kembali  menggunakan  kromatografi  cair vakum.  Sampel  dielusi  dengan  campuran gradien  fase  gerak n- heksana  -  etil  asetat (9:1;  8:2;  7:3;  6:4;  5:5;  4:6;  3:7;  dan  2:8) v/v,  etil  asetat  :  metanol  (5:5  v/v),  dan 100%    metanol.  Masing-masing  eluen ditampung  dalam  wadah  berdasarkan profil kromatogramnya. Fraksi yang menunjukkan  profil  kromatogram  yang baik  dipisahkan lebih lanjut menggunakan kromatografi  kolom  gravitasi  dengan gradien fase gerak hasil orientasi campuran n -heksana - etil asetat - metanol
(5:3:0,5;  5:4:1;  5:4:2;  5:6:2;  5:6:2,5)  v/v dan  100%  metanol.  Tiap  eluen  diperiksa profil  kromatogramnya  dan  isolat  dengan karakteristik  yang  sama  dikumpulkan sebagai fraksi-fraksi. Proses isolasi dihentikan setelah senyawa target terisolasi.
3. Pemeriksaaan  Kemurnian  dengan KLT 2 Dimensi
Ekstrak metanol hasil kromatografi kolom diuji kemurniannya dengan
kromatografi  lapis  tipis  dua  dimensi dengan  menggunakan  beberapa  eluen dengan kepolaran yang berbeda. Jika isolat tetap  menunjukkan  pola  bercak  tunggal, maka  dapat  dikatakan  bahwa  isolat  telah murni.
4. Uji Aktivitas
Kuantitatif Antioksidan  Fraksi  Etil  Asetat Buah M. Casturi
Isolat murni buah M. casturi dibuat dengan menimbang 1,0 mg isolat kemudian dilarutkan dalam metanol hingga volume 10 mL. Dibuat  konsentrasi 0,5,  1,  2,  4,  dan  8  ppm.  Satu  milliliter larutan  DPPH  0,4  mM  ditambahkan dengan tiap-tiap larutan sampel sebanyak 4 mL,  larutan  didiamkan  ditempat  gelap selama operating  time yaitu  20  menit. Absorbansinya dibaca pada panjang gelombang  maksimum  516  nm  (Nihlati et al , 2008).
Nilai  IC 50 merupakan  konsentrasi  sampel yang  dapat  menghambat  radikal  bebas sebesar  50%  diperoleh  dengan  memakai persamaan  regresi  linear  y=  bx+a  dan SPSS regresi probit analisis.
5. Spektrofotometri UV-Vis
Sampel yang akan diukur dilarutkan  dengan  5  mL  metanol  p.a selanjutnya  dimasukkan  ke  dalam  kuvet. Blanko  dan  sampel  dimasukkan  ke  dalam kuvet pada sisi yang tepat dan diukur pada
panjang gelombang 200-800 nm (Sastrohamidjojo, 2001; Sutomo, 2014).

## 6. Spektrofotometri FTIR
Senyawa  hasil  isolasi  (isolat)  yang akan  diukur  digerus  dengan  KBr  (0,2-0,5 mg  isolat  +  100  mg  KBr).  Campuran dikempa  (dibuat  pelet)  dan  pelet  yang telah  dibuat  ditempatkan  pada  kisi  NaCl. Selanjutnya  diukur  dengan  alat  FTIR  di daerah  bilangan  gelombang  tengah  infra merah  (4000-400  cm -1 )  pada  resolusi  16 cm -1 payar  32  (Sastrohamidjojo,  2001; Sutomo, 2014).

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Preparasi Sampel Buah M. casturi
Buah M.  casturi yang  dipilih  pada penelitian  ini  adalah  buah masak  dengan tekstur  daging  buah  tidak  lembek,  warna kulit  buah  ungu  dengan  bintik-bintik kehitaman  pada  kulitnya,  daging  buahnya berwarna  jingga,  serta  memiliki  bau  khas.
Buah M.  casturi yang  telah  dipotong dikeringkan  dengan  oven,  dan  didapatkan serbuk  simplisia  kering  sebanyak  4,9  kg (8,92%)  dengan  susut  pengeringannya yaitu 91,07%.

## B. Ekstraksi
Ekstrak  dibuat  dari  2,5  kg  serbuk buah M.  casturi dimaserasi  menggunakan pelarut  metanol  selama  3  kali  24  jam dengan  pergantian  pelarut  setiap  24  jam (remaserasi),  disertai  dengan  pengadukan. Ekstrak  selanjutnya  diuapkan  di  atas
waterbath hingga  bobotnya  tetap,  dengan hasil yang diperoleh berupa ekstrak kental sebanyak  840,69  gram  berwarna  coklat). Rendemen yang diperoleh sebesar
33,62 %.
C. Fraksinasi
Fraksinasi ekstrak metanol sebanyak  60  g  dengan  pelarut  etil  asetat menghasilkan  dua  lapisan  yaitu  lapisan bawah  (metanol  sisa)  yang  berwarna coklat  dan  lapisan  atas  (etil  asetat) berwarna  kuning  pucat.  Semua  filtrat  etil asetat  diuapkan  dengan waterbath hingga diperoleh  ekstrak  sebesar  8,3  gram. Rendemen  fraksi  etil  asetat    buah M. casturi yang  diperoleh  sebesar  14  %.  Uji pendahuluan  dengan  KLT  memberikan informasi bahwa beberapa senyawa dalam ekstrak dan fraksinya bersifat antioksidan. Fraksi yang didapatkan dipisahkan kembali  menggunakan  kromatografi  cair vakum.

## D. Kromatografi Cair Vakum
Fraksi  etil  asetat  sebanyak  7  gram difraksinasi menggunakan KCV menghasilkan  7  fraksi.  Setiap  fraksi  yang terkumpul  dilakukan  uji  menggunakan KLT.  Hasil  KLT  dikelompokkan  menjadi beberapa  fraksi  yaitu n- heksana  –  etil asetat (9:1 v/v) sebagai fraksi A, (8:2 v/v) sebagai    fraksi  B,  (7:3  v/v)  sebagai  fraksi C,  (6:4  v/v)  sebagai  fraksi  D,  (5:5  v/v) sebagai  fraksi  E,  (4:6  v/v)    sebagai  fraksi F,  (3:7  v/v)  sebagai  fraksi  G,  etil  asetat-
metanol  (5:5  v/v)  dan  100%  metanol sebagai  fraksi  H.  Identifikasi  hasil  KLT dipilih  senyawa  target  berada  pada  fraksi H  tetapi belum  terindikasi sebagai senyawa  tunggal  (Gambar  1).  Fraksi  H dipilih untuk dilanjutkan isolasi menggunakan kromatografi kolom gravitasi,  karena  hasil  kromatogram  KLT nya  menunjukkan  pemisahan  bercak  yang baik  namun  belum tunggal  serta fraksinya lebih  banyak  di  bandingkan  dengan  fraksi yang  lain,  sehingga  memungkinkan  untuk dilanjutkan  ke  tahap  isolasi  menggunakan KK gravitasi.
Gambar  1. Profil  kromatogram  Fraksi  H  hasil KCV buah M. casturi eluen n- heksana - etil asetat - metanol  (5:3:2  v/v)  penampak  bercak  DPPH dengan nilai H Rf 38

## E. Kromatografi Kolom Gravitasi
Sampel  hasil  KCV  fraksi  H  yang digunakan  sebanyak  2  g.  Eluen  yang keluar  ditampung  dalam  vial  kapasitas  25 mL  dan  disebut  sebagai  isolat.  Semua isolat  dilihat  profil  KLT  nya.  Eluen  yang digunakan    sebagai  pengelusi  pada  hasil
isolat  KK  gravitasi  ini  yaitu  eluen n- heksana  - etil  asetat  - metanol (5:3:2) v/v. Isolat  yang  didapatkan  yaitu  H-1  ;  H-2  ; H-3 ; H-4 ; H-5 ; H-6 ; H-7 ; H-8 dan  H-9. Profil kromatogram KLT hasil isolasi pada isolat  H-7  menunjukkan  isolat  tunggal dengan  pemisahan  yang  baik  (Gambar  2). Isolat  H-7  berupa  kristal  kuning  pucat didapatkan sebanyak 6 mg.
Gambar  2. Profil  kromatogram  isolat  murni  dari fraksi etil asetat buah M. casturi eluen n- heksana - etil  asetat  (5:5  v/v)  Penampak  bercak  DPPH dengan H R f  40.

## F. Uji Kemurnian
Uji kemurnian senyawa isolat hasil isolasi  dilakukan  dengan  menggunakan metode  KLT  dua  dimensi.  Campuran eluennya adalah (1) n- heksana - etil asetat -   metanol  (5:3:2) dan (2) n- heksana  - etil asetat  -  metanol  (5:4:2).  Berdasarkan analisis  menggunakan  KLT  di  bawah lampu  UV  λ  254  nm  diketahui  isolat mengandung  satu  senyawa  ditunjukkan dengan adanya satu bercak pada plat KLT 2 dimensi (Gambar 3).
Gambar  3 .  Profil  kromatogram  KLT  2 dimensi  isolat  H-7  buah M.  casturi pada sinar UV 254 nm

## G. Aktivitas  Kuantitatif  Antioksidan

## Isolat
Penentuan  aktivitas  antioksidan isolat  murni  buah M.  casturi dilakukan menggunakan UV-Vis pada panjang gelombang  maksimum  516  nm  dengan waktu inkubasi selama 20 menit. Nilai IC 50

## dapat  ditentukan  dengan  menggunakan
Statistical  Product  and  Service  Solutions (SPSS) for windows versi  21 regresi linear analisis.  Berdasarkan  hasil  perhitungan aktivitas  inhibisi  radikal  bebas  DPPH sebanyak  50%  terjadi  pada  konsentrasi 4,61 ± 0,57 ppm (sangat kuat).

## H. Analisis Spektrum UV-Vis
Pengukuran  absorbansi  isolat  H-7 dalam  pelarut  metanol  menunjukkan  2 puncak  pada  panjang  gelombang  218  nm dan  274,8  nm  dengan  absorbansi  masing- masing  sebesar  1,136  dan  0,452  (Gambar 4).  Pita  1  dari  spektrum  isolat  H-7  pada
panjang gelombang 274,8 nm, menunjukkan  adanya  sistem  kromofor dengan  ikatan  π  –  π * seperti  C=C terkonjugasi  serta  ikatan  n  –  π * berupa kromofor  tunggal  seperti  ikatan  C=O.
Spektrum UV-Vis pada panjang gelombang  218  nm    diperkirakan  adanya sistem ausokrom (gugus -OH) dengan satu ikatan  rangkap  tidak  terkonjugasi  dalam senyawa  menunjukkan  adanya  ikatan  n  – σ * (Pavia et al, 2001).
Gambar  4. Hasil spektrum  UV-Vis  Isolat H-7 dengan pelarut methanol

## I. Analisis  Spektrum  FT-IR  ( Fourier Transform – Infra Red)
Berdasarkan  spektrum  FT-IR isolat  H-7,  terdapat  pita-pita  serapan  pada bilangan gelombang yang bisa dilihat pada gambar  5.  Pita-pita  serapan  khususnya yang spesifik tersebut kemudian dibandingkan dengan pustaka.
Gambar  6. Spektrum  FT-IR  Isolat  H-7 dengan pelet KBr.
Pita  serapan  lebar  antara  3600- 3300 cm -1 yaitu 3363,86 dan 3518,16 cm -1
merupakan  vibrasi  regangan  hidroksil  (- OH).  Pita  serapan dengan  panjang gelombang 2962,66 cm -1 dapat diperkirakan  adanya  C-H  alifatik.  Pita serapan  sedang  pada  bilangan  gelombang 1620,21 cm -1 menunjukkan regangan C=C
(aromatik) dan                            1689,64 menunjukkan adanya karbonil (C=O) pada keton.  Pita  1265,3  dan  1211,3  cm -1 yang berarti  bahwa  isolat  H-7  memiliki  gugus C-O-C eter.

## IV. KESIMPULAN
Isolat dari fraksi etil asetat memiliki aktivitas antioksidan dengan nilai IC 50 sebesar 4,61±0,57  ppm (sangat  kuat).
Hasil identifikasi spektrofotometri UV-Vis menghasilkan puncak pada pita 1 dengan λ 274,8  nm  diperkirakan  adanya  sistem kromofor  menunjukkan  (C=C  ;  C=O)  dan Pita  2  dengan  λ  218  nm  diperkirakan adanya  sistem  ausokrom  menunjukkan  (-
OH)  serta  hasil  identifikasi  dengan spektrofotometri FTIR menunjukkan gugus fungsi dari isolat yaitu –OH (3518,2 cm -1 ),  CH  aromatik  (2715,8  cm -1 ),  CH alifatik  pada  (2962,77  cm -1 ),  C  =  O (1689,6 cm -1 ),  C=C aromatik (1620,2 cm -
1 ) dan C-O (1265; 1211,3) cm -1

## UCAPAN TERIMAKASIH
Terimakasih kepada Direktur Jenderal  Ristek  Dikti  melalui  pendanaan riset  (PTUPT),  Universitas  Lambung Mangkurat  dan  Universitas  Gajah  Mada dalam  menfasilitasi  kegiatan  riset,  dan semua  yang  terlibat  dalam  penyelesaian riset ini

## DAFTAR PUSTAKA
Amrun., M.H., Umiyah, & U.U. Evi. 2007. Uji  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak Air  dan  Ekstrak  Metanol  beberapa Varian  Buah  Kenitu  ( Chrysophyllum cainito L.) dari Daerah Jember, Berk.
Penel. Hayati , 13 : 45. Creswel,  C.,  O.  Ruquist  &  M.  Campbell. 2005. Analisis  Spektrum  Senyawa Organik. Bandung, ITB.
Field,  L.D.,  S.  Sternhell  &  J.R.  Kalman.
2008. Organic  Structures  From Spectra  Fourth  Edition. John  Wiley & Sons, England.
Fitrya,  L.  Anwar,  &  F.  Sari.  2009. Identifikasi  Flavonoid  dari  Buah
Tumbuhan Mempelas. Jurnal
Penelitian Sains, 12 : 1-5.
Hariyatmi . 2004.  Kemampuan  Vitamin  E sebagai Antioksidan terhadap Radikal  Bebas  pada  Lanjut  Usia,
MIPA, 14 : 1.
Jun,  M.  H.  Y.,  J.Y.  Yu,  C.X.  Fong,  S. Wan,  &  C.  T.  Yang.  2003.
Comparison of Antioxidant

## Activities of Isoflavones from Kudzu
Root ( Pueraria labata Ohwl.).
Journal of Food Sciences, 68 : 2117-
2122.
Kosasih,  E.N.,  S.  Tony  &  H.  Hendro. 2006. Peran Antioksidan pada Lanjut  Usia .  Pusat  Kajian Nasional Masalah Lanjut Usia, Jakarta.
Nihlati,  A.P.,  A.  Rohman,  &  T.  Hertiani. 2008.  Daya  Antioksidan  Ekstrak
Etanol Rimpang Temu Kunci
( Boesenbergia  pandurata (Roxb. Schletch) dengan Metode Penangkapam Radikal DPPH, J. Nat.
Med . 62 : 207-21.
Pavia, D.L., G.M. Lampman, G.S. Kriz &
J.R.  Vyvyan.  2001. Introduction to Spectroscopy .  Sauders  College,
Philadelphia.
Sastrohamidjojo,  H.  2001. Dasar-dasar
Spektroskopi . Universitas Gajah Mada, Yogyakarta.
Suhartono, E., E. Viani, M.A. Rahmadhan,
I.S.  Gultom,  M.F.  Rakhman  &  D. Indrawardhana. 2012. Total flavonoid  and  Antioxidant  Activity of Some Selected Medicinal Plants in
South  Kalimantan  of  Indonesian.
APCBEE Procedia , 4 : 235–239.
Suirta,  I.W.,  N.M.  Puspawati,  &  N.K.
Gumiati.
2007. Isolasi dan
Identifikasi Senyawa Aktif Larvasida dari  Biji  Mimba (Azadirachta  indika A.  Juss) Terhadap  Larva  Nyamuk Demam  Berdarah (  Aedes  Aegypti). Jurnal Kimia, 1 : 47-54.
Sutomo.  2014. Isolasi  dan  Identifikasi
Senyawa  Penangkap  Radikal  DPPH
dan  Imunomodulator  dari  Buah Kasturi (Mangifera casturi Kosterm.) Suku Anacardiaceae. Desertasi Program Pascasarjana Fakultas Farmasi, Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta.
Sutomo, S. Wahyuono, E.P., Setyowati, S.
Rianto  &  A.  Yuswanto . 2014. Antioxidant activity assay of extracts and  active  fractions  of  kasturi  fruit ( Mangifera  casturi Kosterm.)  using
1, 1-diphenyl-2- picrylhydrazyl
method . Journal of Natural
Products, 7 : 124-130.