BioEksakta: Jurnal Ilmiah Biologi Unsoed Volume 5, Nomor 1 (2023): 53-63 E-ISSN: 2714-8564

## Kualitas Spermatozoa dan Struktur Histologis Gonad Jantan Tiga Spesies Ikan Famili Cyprinidae di Sungai Banjaran
Habibulah Ahmad Al Gifari, Priyo Susatyo * , Atang, Sugiharto
Fakultas Biologi, Universitas Jenderal Soedirman, Jl. dr. Suparno 63 Purwokerto 53122 *Correspondent email : priyo.susatyo@unsoed.ac.id
Rekam Jejak Artikel:
Diterima  : 21/12/2022 Disetujui  : 06/03/2023

## Abstract
Fisheries researchers reveal that many species of native wild fish are threatened with extinction due to uncontrolled fishing, things that can threaten their existence in nature, one of which is in the Banjaran River. The aims of this study were: to determine the quality of fish spermatozoa, to determine the gonadal maturity index (IKG), to determine the Gonad Maturity Level (TKG), and  to  determine  the  histological  description  of  the  male  gonads  in  order  to  obtain  data  for conservation purposes. The research was conducted by survey method, the sample was taken by purposive random sampling technique. The results of the study during the March-May period showed that the sperm quality of Nilem Fish was best in May, which had a milt volume of 0.21 mL, a spermatozoa concentration of 2.3454 x10 9 cells/mL, Motility 3, and viability of 82.55%. In  Brek  Fish  the  highest  volume  of  milt  was  found  in  May,  namely  0.25  mL,  the  highest concentration  of  spermatozoa  was  in  April  34.465  x10 9 cells/mL,  with  viability  88.62%,  and motility 2.9. The best quality of Lunjar fish sperm was found in May which had a milt volume of 0.02 mL, spermatozoa concentration of 22.435 x10 9 cells/mL, 80% viability, and motility 3. All sperm samples were white with a pH of 7-8. Based on TKG and IKG, it can be seen that many Nilem fish are found spawning in April and May, Brek and Lunjar fish are found spawning every month. Histological structure of male gonads in Nilem, Brek and Lunjar fish had the same composition, in immature fish the spermatogenic cell composition observed was dominated by spermatocytes,  spermatids,  and  spermatogonia,  in  mature  fish  the  gonads  were  dominated  by spermatozoa  cells.  and  spermatids,  whereas  in  post-spawning  fish  spermatozoa  and spermatogonia were found in large number.
Key Words : Cyprinidae, Male gonad histological, Native fish, Spermatozoa Quality

## Abstrak
Para peneliti perikanan mengungkapkan bahwa banyak jenis ikan asli perairan liar terancam punah akibat penangkapan yang tidak terkendali, hal ini dapat mengancam keberadaan sumber daya ikan di  alam  salah  satunya  di  Sungai  Banjaran.  Tujuan  penelitian  ini  yaitu:  mengetahui  kualitas spermatozoa ikan, mengetahui Indeks kematangan gonad (IKG), mengetahui Tingkat Kematangan Gonad  (TKG),  dan  mengetahui  gambaran  histologis  gonad  jantan  agar  diperoleh  data  untuk kepentingan konservasi. Penelitian dilakukan dengan metode survei, sampel diambil dengan teknik purposive  random  sampling.  Hasil  penelitian  selama  periode  Maret-Mei  menunjukkan  kualitas spermatozoa Ikan Nilem yang terbaik adalah pada bulan Mei yakni memiliki volume milt 0,21 mL, konsentrasi spermatozoa 2,3454 x10 9 sel/mL, Motilitas 3, dan viabilitas 82,55%. Pada Ikan Brek jumLah  volume  milt  yang  tertinggi  terdapat  pada  bulan  Mei  yakni  0,25  mL,  konsentrasi spermatozoa tertinggi terdapat pada bulan April 34,465 x10 9 sel/mL, dengan viabilitas 88,62%, dan motilitas 2,9. Kualitas sperma Ikan Lunjar terbaik dijumpai pada bulan Mei yakni memiliki volume milt 0,02 mL, konsentrasi spermatozoa 22,435 x10 9 sel/mL, viabilitas 80%, dan motilitas 3. Semua sampel sperma berwarna putih dengan pH 7-8. Berdasarkan TKG dan IKG dapat diketahui bahwa Ikan Nilem banyak ditemukan memijah pada bulan April dan Mei, Ikan Brek dan Lunjar banyak ditemukan memijah setiap bulannya. Struktur histologis gonad jantan pada Ikan Nilem, Brek dan Lunjar  memiliki  komposisi  yang  sama,  pada  ikan  yang  belum  matang  gonad  komposisi spermatogenik yang teramati lebih di-dominasi oleh spermatogonium, spermatosit, dan spermatid, pada ikan yang matang gonad di-dominasi oleh spermatozoa dan spermatid, sedangkan pada ikan pasca memijah lebih banyak dijumpai spermatozoa dan spermatogonium.
Kata kunci: Cyprinidae, Histologis gonad jantan, Ikan tangkapan,  Kualitas spermatozoa

## PENDAHULUAN
Sungai  Banjaran  banyak  dimanfaatkan  oleh masyarakat sekitar, diantaranya adalah untuk irigasi, sumber  air  bersih,  dan  perikanan,  hal  ini  dapat diketahui  melalui  tingginya  kegiatan  penangkapan
ikan  di  Sungai  Banjaran.  Sungai  Banjaran  telah dieksplorasi sumber daya ikannya secara luas untuk memenuhi kebutuhan perikanan masyarakat sekitar. Sungai  Banjaran  merupakan  habitat  yang  banyak dihuni oleh berbagai spesies ikan (Bhagawati et al ., 2013).
Menurut  para  peneliti  dan  praktisi  perikanan mengungkapkan  bahwa  banyak  jenis  ikan  liar endemik  terancam  punah  akibat  penangkapan  yang tidak  terkendali.  Berbagai  macam  ancaman  tersebut dapat menyebabkan banyak jenis ikan asli Indonesia terutama dari perairan liar terancam punah (Lestari et al .,  2018).  Tingginya  minat  masyarakat  terhadap konsumsi  ikan  liar  air  tawar  dapat  mengancam kelestarian  ikan-ikan  tersebut  di  alam.  Penelitian terkait  reproduksi  hewan  tersebut  harus  dikaji  lebih lanjut guna memperoleh data yang dapat dimanfaatkan  dalam  pengembangan  budidaya  ikan. Salah satu aspek reproduksi yang penting untuk dikaji dalam pengembangan budidaya ikan adalah gambaran  histologis  reproduksi  selama  masa perkembangan  gonad  (Susatyo et  al .,  2012). Pengkajian terkait perkembangan gonad ini bertujuan untuk  mengetahui  status  reproduksi  ikan  pada periode, dan musim tertentu (Ochokwu et al ., 2015). Menurut  Ningrum et  al (2019),  beberapa  ikan tangkapan  pemijahannya  bergantung  pada  musim sehingga pembudidayaannya sukar dilakukan. Dalam rangka  menunjang  keberhasilan  pembudidayaan ikan-ikan  tangkapan  secara  berkelanjutan  maka diperlukan  upaya  data-data  profil  reproduksi  ikan tangkapan sungai, yang berpedoman pada penggalian informasi  atau  data  dasar  mengenai  biologi  dan ekologinya, aspek reproduksi, fisiologi, perilaku/kebiasaan makan, pemijahan, dan karakteristik habitatnya di alam (Naylor et al. , 2000). Keberhasilan  proses  fertilisasi  sangat  bergantung pada  kualitas  spermatozoa.  Beberapa  ikan  seperti ikan  lele  dan  ikan  patin  diketahui  memiliki  tingkat fertilisasi yang relatif rendah pada kondisi normal, hal ini diduga dapat terjadi karena viabilitas spermatozoa yang tidak optimal (Ibrahim et al ., 2020).
Menurut  Rahardhianto et  al (2012),  dalam penelitiannya disebutkan bahwa pemeriksaan kualitas spermatozoa diperlukan untuk menentukan kelayakan spermatozoa yang akan disimpan sebagai stok. Spermatozoa yang layak digunakan sebagai stok adalah  spermatozoa  yang  memiliki  kualitas  yang baik.  Diketahui  bahwa  spermatozoa  yang  layak digunakan  sebagai  stok  adalah  spermatozoa  yang memiliki pH 7,14-7,85 dan viabilitas lebih dari 70%.
Indeks  kematangan  gonad  (IKG)  merupakan nilai perbandingan bobot gonad dengan berat somatik yang  dinyatakan  dalam  persen  (%).  Data  hasil pengukuran  IKG  digunakan  untuk  menentukan stadium kematangan gonad dengan melihat hubungan antara  pertumbuhan  somatik  dan  perkembangan gonadnya, selain itu IKG juga dapat digunakan untuk memperkirakan waktu pemijahan suatu spesies ikan. Hasil  perhitungan  IKG  pada  individu  jantan  dapat diperkuat dengan melakukan pengamatan perkembangan  spermatogenik  melalui  pengamatan struktur histologis testis (Nurhidayat et al ., 2017). Menurut  Nurhidayat et  al (2017),  analisis tingkat  kematangan  gonad  (TKG)  pada  individu jantan dapat dilakukan dengan mengamati
mofologinya.  Tingkat  kematangan  gonad  dapat diketahui  dengan  membandingkan  morfologi  testis dengan  tabel  tingkat  kematangan  gonad  (Effendie, 1979).
Menurut  Uribe et  al (2014),  tipe  testis  tubular banyak  dimiliki  oleh  ikan  dengan  tingkatan  taksa yang  rendah  seperti  cyprinid.  Pendapat  tersebut didukung  oleh  Nurhidayat et  al (2017)  yang menyatakan,  sebagian  besar  ikan  dari  Famili Cyprinidae  memiliki  tipe  testis  tubular  dengan anastomose .  Testis  tipe  ini  memiliki  tubula  yang tidak  langsung  berujung  keluar  namun  di  antara tubula  tersebut  saling  berhubungan  dan  membentuk percabangan,  sebelum  nantinya  bersatu  membentuk saluran yang akan menuju ke porus urogenitalis . Pengamatan  histologis  gonad  jantan  dilakukan untuk  mengevaluasi  komposisi  spermatogenik  yang dapat digunakan untuk menentukan tahapan spermatogenesis. Pada ikan uceng yang telah matang gonad  terdapat  banyak  spermatosit  sekunder, spermatid, dan spermatozoa dalam testisnya sedangkan komposisi kista spermatogoniumnya lebih sedikit.  Pada  ikan  uceng  yang  belum  matang  gonad komposisi  spermatozoanya  relatif  lebih  sedikit dibanding  kondisis  testis  dalam  keadaan  matang gonad  dan  kista  spermatogoniumnya  lebih  banyak (Gambar 1) (Nurhidayat et al ., 2017).
Tujuan  penelitian  ini  yaitu  untuk  mengetahui kualitas spermatozoa beberapa spesies ikan tangkapan  dari  Famili  Cyprinidae  baik  secara makroskopis maupun mikroskopis,  mengetahui nilai Indeks  Kematangan  Gonad  (IKG),  mengetahui Tingkat  Kematangan  Gonad  (TKG),  mengetahui gambaran histologis gonad jantan ikan tangkapan dari Famili Cyprinidae. Manfaat dari penelitian ini adalah memberikan informasi terkait biologi reproduksi Ikan dari  Famili  Cyprinidae  sebagai  dasar  penanganan kegiatan domestikasi atau budidaya.
Gambar  1. Histologis  gonad  jantan  Ikan  Uceng ( Nemacheilus  fasciatus ).  Sumber:  Nurhidayat et  al ., 2017.
Keterangan: (A)  &  (C)  Struktur  histologis  testis  Ikan  Uceng ( Nemacheilus fasciatus ) belum matang gonad; (B) & (D) Struktur histologis  testis  Ikan  Uceng  ( Nemacheilus  fasciatus )  matang gonad. (TCS, Tubulus Contortus Seminiferus; SC, Spermatogenic cell;  SG,  Spermatogonium;  STD,  spermatid;  SP,  spermatosit primer; SS, spermatosit sekunder; SZ, spermatozoa)

## MATERI DAN METODE
Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah termometer,  alat  bedah,  akuarium,  aerator,  botol sampel, timbangan analitik (ketelitian 0,01 g), objek glass, cover  glass ,  sarung  tangan  lateks,  masker, Staining  jar ,  mikroskop,  baki  preparat,  mikrotom putar, Inkubator, haemocytometer, spuit injeksi 1 mL tanpa jarum, hand counter , cavity slide , pipet, bunsen, dan pipet thoma.
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah,  Larutan  formalin  10%,  Alkohol  bertingkat (70%, 80%, 96%, dan absolut), tissue, label, parafin, xylol,  akuades,  gelatin, entellan  new ,  carazzi haematoxylin,  kertas  pH  universal,  NaCl  fisiologis, Eosin dan spirtus.
Lokasi pengambilan sampel penelitian dilakukan  di  Sungai  Banjaran  Purwokerto.  Setiap lokasi  ditentukan  titik  koordinat  dan  ketinggian wilayahnya dengan menggunakan aplikasi Altimeter Ler.  Pengambilan  sampel  dibagi  menjadi  3  stasiun yakni  hulu,  tengah,  dan  hilir.  Proses  pembedahan, pembuatan  sediaan  histologi  dan  analisis  data dilaksanakan di Laboratorium Struktur dan Perkembangan  Hewan  Fakultas  Biologi  Universitas Jenderal  Soedirman.  Waktu  pengambilan  sampel dimulai pada bulan Maret-Mei 2021
Metode  yang  digunakan  pada  penelitian  ini adalah metode Survei. Sampel diambil dengan teknik purposive  random  sampling .  Pengambilan  sampel setiap  bulan  dilakukan  sebanyak  satu  kali  dalam kurun waktu 3 bulan yakni pada bulan Maret, April, dan Mei tahun 2021 pada pekan terakhir.
Variabel yang diamati pada penelitian ini yaitu aspek biologi reproduksi tiga spesies ikan jantan dari famili  cyprinidae.  Parameter  yang  diukur  pada penelitian ini yaitu, panjang tubuh ikan, bobot tubuh ikan,  bobot  gonad  jantan,  morfologi  gonad  jantan, dan struktur histologis gonad jantan.

## Pengambilan sampel
Pengambilan sampel dilakukan di 3 titik stasiun pada ruas sungai banjaran. Ketinggian lokasi diukur dengan menggunakan aplikasi Altimeter Ler, pH air diukur  dengan  kertas  pH  meter  universal  dan temperatur air menggunakan termometer. Pengambilan  sampel  dilakukan  oleh  pemancing dengan menggunakan kail berukuran #1 pada waktu siang  (08.00-13.00  WIB)  dan  malam  hari  (19.00- 12.00).  Umpan  yang  digunakan  berupa  lumut  dan serangga  kecil.  Sampel  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  spesies  ikan  yang  memiliki kelimpahan  tertinggi  dan  merupakan  ikan  konsumsi yang  digemari.  Sampel  diambil  pada  bulan  Maret- Mei di pekan terakhir.

## Proses penampungan sampel sebelum diamati
Ikan yang telah ditangkap dari Sungai Banjaran Purwokerto,  kemudian  dimasukkan  ke  dalam akuarium yang dilengkapi dengan aerator. Tujuannya agar  ikan  yang  telah  ditangkap  dari  lokasi
pengambilan  sampel  tersebut  tetap  hidup  sebelum dilakukan pembedahan dan pengamatan.

## Proses analisis kualitas spermatozoa
Proses  analisis  kualitas  spermatozoa  dilakukan secara  makroskopis  dan  mikroskopis.  Ikan  yang volume miltnya kurang dari 0,01 mL tidak dianalisis spermanya secara keseluruhan hanya cukup menganalisis  beberapa  parameter  yang  memang masih  memungkinkan  untuk  dianalisis.  Tahapan analisis  spermatozoa  secara  makroskopis  yaitu:  (1) ikan  diurut  pada  bagian  abdomennya  kearah  porus urogenitalis  kemudian  milt  yang  keluar  ditampung dengan menggunakan spuit injeksi 1 mL tanpa jarum; (2)  milt  yang  diperoleh  diukur  volumenya menggunakan skala yang tertera pada spuit; (3) milt kemudian  diteteskan  pada  objek  glass  diamati warnanya  (4)  milt  selanjutnya  diukur  nilai  pH-nya menggunakan kertas pH meter universal.
Tahapan analisis sperma secara mikrokopis: (1) Konsentrasi  spermatozoa  ditentukan  dengan  cara thoma  dan  dinyatakan  dalam  angka.  Prosedur pengukuran  diawali  dengan  milt  yang  ditampung diambil  dengan  pipet  thoma hingga  mencapai  tanda 0,5,  selanjutnya  ujung  pipet  dibersihkan  terlebih dahulu,  setelah  dibersihkan  milt  dalam  pipet diencerkan  dengan  menghisap  eosin  2%  hingga angka 101 pada pipet thoma, selang pipet kemudian ditekuk  dan  pipet  selanjutnya  dikocok  membentuk angka 8 agar homogen, selanjutnya sebanyak  5 tetes larutan dibuang dan ujung pipet dibersihkan dengan tissue, lalu konsentrasi spermatozoa dihitung dengan meneteskan  larutan  dalam  pipet  thoma  ke  dalam counting chamber yang terdapat pada haemocytometer .  Penghitungan  dilakukan  dengan menggunakan bilik terkecil pengamatan dilakukan di bawah mikroskop dengan perbesaran 400x (Zairin et al ., 2005).
Selanjutnya  sel  yang  teramati  dihitung  dengan menggunakan  rumus  menurut  Zairin et  al .  (2005) berikut:
𝐽𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑠𝑒𝑙 𝑡𝑖𝑎𝑝 𝑏𝑖𝑙𝑖𝑘 𝑥 10 𝑥 10 6 𝑠𝑒𝑙/𝑚𝐿
(2) Analisis selanjutnya yakni viabilitas yang. Mula- mula 1 tetes milt diambil, lalu diletakkan pada gelas objek, kemudian diteteskan Eosin, Selanjutnya dibuat preparat  apus  kemudian  dikering-anginkan,  lalu diamati di bawah mikroskop dengan perbesaran 400x. Spermatozoa yang mati akan menyerap zat pewarna sehingga  sperma  yang  hidup  dan  mati  dapat dibedakan  (Rahardhianto et  al .,  2012).    Hasil pengamatan kemudian dihitung menggunakan rumus menurut Condro et al . (2012):
Viabilitas = 𝐽𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑠𝑒𝑙 ℎ𝑖𝑑𝑢𝑝 𝑠𝑒𝑙 𝑡𝑒𝑟𝑎𝑚𝑎𝑡𝑖 𝑥 100%
(3) Analisis selanjutnya yakni motilitas, pengamatan motilitas  dilakukan  dengan  cara  milt  diteteskan sebanyak  1  tetes  pada cavity  slide ,  kemudian diteteskan  air  1  tetes  lalu  diamati  motilitasnya  di
bawah  mikroskop  dengan  perbesaran  100x,  untuk mempermudah  penilaian  motilitas  maka  karakter gerakan dari spermatozoa dibuat dalam bentuk notasi yang  mengacu  pada  penelitian  Kurniawan et  al (2013),  sebagai  berikut:  (+++)  :  Gelombang  yang dihasilkan  dari  pergerakan  spermatozoa  besar, banyak, gelap, tebal, dan aktif bergerak cepat; (++) : Gelombang  yang  dihasilkan  dari  pergerakan spermatozoa  kecil,  dengan  bayangan  tipis,  jarang, kurang  jelas,  dan  gerakannya  lamban;  (+)  tidak terlihat  gelombang  tapi  hanya  terlihat  gerakan spermatozoa aktif progresif; (0) sedikit bergerak atau tidak ada individu yang bergerak sama sekali.

## Penimbangan Bobot dan Panjang Total Ikan
Ikan  yang  telah  dianalisis  kualitas  spermanya kemudian  dimatikan  dengan  menusuk  otaknya kemudian  ikan  ditimbang  menggunakan  timbangan analitik (ketelitian 0,01 g). Panjang total ikan diukur dengan kertas milimeter blok.

## Tingkat Kematangan Gonad (TKG)
Ikan  selanjutnya  dibedah  dari  bagian  porus urogenitalis  ke  arah  anterior  searah  medio-ventral untuk mengamati gonadnya, gonad kemudian diamati morfologi,  ukuran,  dan  warnanya,  kemudian dibandingkan  dengan  tabel  tingkat  kematangan gonad ikan (Effendie, 1979).

## Indeks kematangan gonad (IKG)
Ikan  yang  telah  ditimbang  bobot  totalnya  dan telah  dibedah,  kemudian  diambil  dan  ditimbang gonadnya menggunakan timbangan analitik (ketelitian  0,01  g).  Indeks  kematangan  gonad diperoleh dengan membandingkan bobot total tubuh ikan dengan bobot gonad (Effendie, 1979).
IKG = 𝐵𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑔𝑜𝑛𝑎𝑑 𝐵𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑡𝑢𝑏𝑢ℎ x 100 %

## Pembuatan Sediaan Histologis Gonad Jantan
Proses  pembuatan  sediaan  histologi  dilakukan dengan  menggunakan  metode  parafin.  Tahapan tersebut  meliputi:  (1)  gonad  diisolasi  lalu  dipartisi menjadi 3 bagian yakni anterior, medial, dan posterior (2) kemudian difiksasi menggunakan formalin 10%, (3)  Selanjutnya  sampel  diproses  untuk  mengetahui gambaran histologis gonad jantan.

## Pengamatan struktur histologis gonad jantan
Preparat histologis gonad jantan diamati dengan menggunakan  perbesaran  100x,  400x  dan  1000x. Setiap  preparat  gonad  jantan  (baik  bagian  anterior, medial dan posterior) diamati pada 5 lapang pandang mikroskopis.    Teknik  penentuan  lapang  pandang dilakukan  dengan  pola  Z  selanjutnya  setiap  sampel diidentifikasi  spermatogeniknya  yang  terdiri  dari spermatogonium,  spermatosit  primer,  spermatosit sekunder, spermatid, dan spermatozoa.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Berdasarkan  hasil  pengambilan  sampel  ikan Cyprinidae  yang  dilakukan  di  sungai  banjaran didapati  3  spesies  yang  memiliki  kelimpahan
tertinggi  yakni,  Ikan  Nilem  ( Osteochilus sp.),  Ikan Brek  ( Barbonymus sp.)  dan  Ikan  Lunjar  ( Rasbora sp.).

## Analisis Sperma Makroskopik
Hasil penelitian mengenai analisis sperma Ikan Nilem  secara  makroskopik  dalam  kurun  waktu selama 3 bulan tersaji dalam tabel berikut:
Tabel 1. Data analisis makroskopik sperma rata-rata
Ikan Nilem dalam 3 bulan Bulan JumLah Sampel (Ikan) Volume (mL) Warna pH Maret 5 0,03 Putih 7-8 April 11 0,04 Putih 7-8 Mei 15 0,21 Putih 7-8
Berdasarkan  tabel  1.  dapat  diketahui  bahwa rata-rata  volume  milt  yang  dapat  dihitung  dengan menggunakan  spuit  1  mL  secara  berurutan  dari rendah ke tinggi yakni, bulan Maret dengan volume 0,03  mL,  bulan  April  dengan  volume  0,04  mL,  dan bulan Mei dengan volume 0,21mL. Menurut Hastuti &  Riviani  (2020),  Ikan  Nilem  matang  gonad  yang sehat memiliki milt rata-rata volume sebesar 2,8 mL, sehingga dapat diketahui bahwa volume rata-rata milt Ikan  Nilem  bulan  Maret  dan  April  memiliki perbedaan yang cukup jauh, sedangkan rata-rata milt Ikan  Nilem  pada  bulan  Mei  sudah  mendekati  dan sesuai dengan literatur.
Menurut  Yulianto et  al (2020)  perbedaan  atau variasi  volume  milt  pada  spesies  yang  sama  dapat disebabkan  oleh  beberapa  faktor,  yaitu  perbedaan berat  tubuh  ikan,  usia,  dan  perbedaan  siklus reproduksi  antar  organisme.  Pendapat  ini  diperkuat oleh hasil penelitian Shabila (2013), yang menyatakan  bahwa  volume  milt  pada  ikan  jantan dapat  dipengaruhi  oleh  ukuran  tubuh,  umur,  dan kondisi  lingkungan.  Ikan  Nilem  berukuran  <  18  cm memiliki  rata-rata  milt  sebesar  0,17  ±  0,10  mL. Berdasarkan tabel 1. juga dapat diketahui bahwa rata- rata milt ikan nilem berwarna putih dengan nilai pH berkisar  antara  7-8.  Nilai  pH  tersebut  telah  sesuai dengan  hasil  penelitian  Hastuti  &  Riviani  (2020), yakni  ikan  nilem  memiliki  milt  berwarna  putih  dan pH berkisar antara 7,5-8.
Tabel 2. Data analisis makroskopik sperma rata- rata Ikan Brek dalam 3 bulan
Bulan JumLah Sampel (Ikan) Volume (mL) Warna pH Maret 10 0,19 Putih 7-8 April 10 0,12 Putih 7-8 Mei 12 0,25 Putih 7-8
Berdasarkan  tabel  2.  dapat  diketahui  bahwa rata-rata  volume  milt  yang  dapat  dihitung  dengan
menggunakan  spuit  1  mL  secara  berurutan  dari rendah  ke  tinggi  yakni,  bulan  April  dengan  volume 0,12  mL,  bulan  Maret  dengan  volume 0,19  mL  dan bulan Mei dengan volume 0,25 mL. Hasil penelitian yang  diperoleh  sedikit  berbeda  dengan  literature menurut  Yulianto et  al (2020),  pada  penelitiannya disebutkan  bahwa  Ikan  Brek memiliki  rata-rata  milt sebanyak 0,3 mL. Perbedaan ini dimungkinkan dapat terjadi  karena perbedaan  berat  tubuh  ikan,  usia, dan perbedaan siklus reproduksi antar organisme.
Tabel 3. Data analisis makroskopik sperma rata-rata Ikan Lunjar dalam 3 bulan
Bulan JumLah Sampel (Ikan) Volume (mL) Warna pH Maret 3 0,01 Putih 7-8 April 3 0,02 Putih 7-8 Mei 2 0,02 Putih 7-8
Berdasarkan tabel 3. juga dapat diketahui bahwa ikan brek memiliki milt berwarna putih dengan pH 7- 8, hasil analisis makroskopis sperma pada ikan Brek ini telah sesuai dengan literatur. Menurut Yulianto et al (2020) Ikan Brek hasil tangkapan di sungai Serayu Banjarnegara  memiliki  milt  berwarna  putih  susu dengan nilai pH sebesar 7,73.
Berdasarkan  tabel  3.  dapat  diketahui  bahwa rata-rata  volume  milt  yang  dapat  dihitung  dengan menggunakan  spuit  1  mL  secara  berurutan  dari rendah ke tinggi yakni, bulan Maret dengan volume sebesar  0,01  mL,  lalu  diikuti  dengan  volume  milt pada  bulan  April  dan  Mei  yakni  sebesar  0,02  mL. Menurut Putri et al (2020) dalam penelitiannya pada ikan Rasbora argyrotaenia diketahui bahwa volume miltnya  adalah  sebesar  9,11 µl  ±  0,95  µl,  sehingga nilai  milt  yang  diperoleh  dari  hasil  penelitian  ini sudah  sesuai  dengan  literatur.  Berdasarkan  tabel tersebut  juga  dapat  diketahui  bahwa  Ikan  Lunjar memiliki  milt  berwarna  putih  dan  nilai  pH  berkisar
antara  7-8.  Hasil  penelitian  tersebut  telah  sesuai dengan  pendapat  Arifiantini  (2012)  bahwa  kualitas milt  yang  baik  secara  umum  berwarna  putih  dan memiliki pH berkisar antara 7.5-8,5.

## Analisis Sperma Mikroskopik
Berdasarkan  tabel  4.  tersebut  dapat  diketahui bahwa konsentrasi spermatozoa Ikan Nilem dari yang terendah hingga tertinggi secara berturut-turut adalah bulan  Maret  dengan  nilai  konsentrasi  sebesar 1,9968x10 9 sel/mL,  bulan  April  dengan  nilai konsentrasi  sebesar  2,2744x10 9 sel/mL,  dan  bulan Mei dengan konsentrasi terbesar yakni 2,3454 x10 9 . Hasil  tersebut  telah  sesuai  dengan  hasil  penelitian menurut Shabila (2013), yakni diketahui bahwa nilai konsentrasi rata-rata Ikan Nilem adalah senilai 1.6428 ±  0.4245x10 9 sel/mL.  Berdasarkan  tabel  4.  tersebut juga dapat diketahui bahwa viabilitas terendah adalah 81,116%  pada  bulan  Maret,  dan  nilai  viabilitas tertinggi  adaalah  85,56%  pada  bulan  April.  Nilai motilitas pada Ikan Nilem yang diuji juga tergolong sehat dengan nilai 3 (+++) pada bulan Maret dan Mei, nilai  motilitas  yang  terkecil  yakni  pada  bulan  April yakni  senilai  2,857  (++)  yang  sebenarnya  masih tergolong sehat dan normal.
Menurut Rahardhianto et al (2012), spermatozoa ikan dikatakan sehat apabila memiliki nilai viabilitas lebih dari  70%.  Ikan  dengan  nilai  viabilitas  diatas  70% sudah  bisa  digunakan  sebagai  stok  dan  disimpan untuk  masa  mendatang  menggunakan  teknik kriopreservasi.  Menurut  Kurniawan et  al (2013), motilitas ikan dengan nilai +++ tergolong sangat baik yang  ditandai  dengan  spermatozoa  membentuk gelombang  besar,  banyak,  gelap,  tebal,  dan  aktif bergerak cepat ketika diberi stimulus. Motilitas ikan dengan nilai ++ tergolong baik yang ditandai dengan spermatozoa  membentuk  gelombang-gelombang kecil, dengan bayangan tipis, jarang, kurang jelas, dan bergerak lamban.
Tabel 4. Data analisis mikroskopik spermatozoa rata-rata Ikan Nilem dalam 3 bulan
Bulan Konsentrasi Spermatozoa (sel/mL) Viabilitas Motilitas (1-3) Maret 1,9968x10 9 (n=5) 81,116% (n=6) 3 (n=6) April 2,2744x10 9 (n=11) 85,56% (n=11) 2,857 (n=14) Mei 2,3454x10 9 (n=5) 82,55% (n=10) 3(n=10) Tabel 5. Data analisis mikroskopik spermatozoa rata-rata Ikan Brek dalam 3 bulan
Bulan Konsentrasi Spermatozoa (sel/mL) Viabilitas Motilitas (1-3) Maret 29,078x10 9 (n=10) 84,86% (n=10) 3 (n=11) April 34,465x10 9 (n=10) 88,62% (n=10) 2,9 (n=10) Mei 28,101x10 9 (n=12) 83,05 (n=12) 3(n=12)
Tabel 6. Data analisis mikroskopik spermatozoa rata-rata Ikan Lunjar dalam 3 bulan
Bulan Konsentrasi Spermatozoa (sel/mL) Viabilitas Motilitas (1-3) Maret 20,06x10 9 (n=3) 73,81% (n=9) 2,54 (n=11) April 17,75x10 9 (n=3) 80,19% (n=11) 2,92 (n=14) Mei 22,435x10 9 (n=2) 80 (n=8) 3 (n=10)
Berdasarkan  tabel  5.  tersebut  dapat  diketahui bahwa konsentrasi spermatozoa Ikan Brek dari yang terendah hingga tertinggi secara berturut-turut adalah bulan  Mei  dengan  nilai  konsentrasi  sebesar 28,101x10 9 sel/mL,  bulan  Maret  dengan  nilai konsentrasi  sebesar  29,078x10 9 sel/mL,  dan  bulan April  dengan konsentrasi  terbesar  yakni  34,465x10 9 sel/mL. Hasil penghitungan konsentrasi spermatozoa pada  penelitian  ini  sedikit  lebih  kecil  apabila dibandingkan  dengan  hasil  penelitian  menurut Yulianto et  al (2020)  pada  Ikan  Brek  di  Sungai Serayu  yakni  memiliki  konsentrasi  spermatozoa senilai  58,17  x10 9 sel/mL.  Perbedaan  konsentrasi dapat disebabkan oleh perbedaan ukuran tubuh, bobot tubuh, dan perbedaan nutrisi (Condro et al ., 2012).
Berdasarkan  tabel  5.  tersebut  juga  dapat diketahui  bahwa  nilai  viabilitas  Ikan  Brek  dalam  3 bulan  senilai  lebih  dari  80%  yang  mengindikasikan bahwa  sperma  Ikan  tersebut  sehat  dan  normal (Rahardhianto et  al .,  2012).  Nilai  Motilitasnya  juga tergolong normal, dan sangat baik karena pada bulan Maret  dan  Mei  didapati  nilai  motilitasnya  adalah  3 (+++), hanya pada bulan April yang nilai motilitasnya senilai 2,9 (++) yang masih tergolong dalam kategori baik (Kurniawan et al ., 2013).
Berdasarkan  tabel  6.  tersebut  dapat  diketahui bahwa  konsentrasi  spermatozoa  Ikan  Lunjar  dari yang  terendah  hingga  tertinggi  secara  berturut-turut adalah  bulan  April  dengan  nilai  konsentrasi  sebesar 17,75x10 9 sel/mL,  bulan  Maret  dengan  nilai konsentrasi sebesar 20,06x10 9 sel/mL, dan bulan Mei dengan  konsentrasi  tertinggi  yakni  22,435x10 9 sel/mL.  Menurut  Putra  (2010) Rasbora  lateristriata yang sudah diinduksi dengan NaCl 0,65% sebanyak 1 mL memiliki rataan nilai konsentrasi sebesar 30,36 x  10 9 ,  hasil  ini  sedikit  lebih  tinggi  apabila dibandingkan  dengan  hasil  penelitian  pada  bulan Maret,  April  dan  Mei.  Perbedaan  yang  terjadi dimungkinkan  karena  perbedaan  spesies  ataupun frekuensi pengambilan sperma. Menurut Condro et al (2012),  konsentrasi  spermatozoa  ikan  dipengaruhi oleh seberapa sering pengambilan sperma pada ikan tersebut  dilakukan,  hal  ini  karena  gonad  memiliki kisaran  waktu  tertentu  untuk  melangsungkan  proses spermatogenesis  hingga  konsentrasi  spermatozoa benar-benar kembali ke kondisi prima.
Berdasarkan  tabel  6  tersebut  juga  dapat diketahui  bahwa  nilai  viabilitas  Ikan  Brek  dalam  3 bulan  senilai  lebih  dari  70%  yang  mengindikasikan bahwa  sperma  Ikan  tersebut  sehat  dan  normal (Rahardhianto et  al .,  2012).  Nilai  Motilitas  yang
terendah terdapat pada bulan maret dengan nilai 2,54 (++)  kemudian  disusul  dengan  motilitas  pada  bulan April  yakni  senilai  2,95  (++).  Motilitas  tertinggi terdapat  pada  bulan  mei  yakni  (+++).  Berdasarkan pengujian  motilitas  spermatozoa  pada  tiap  bulannya dapat  diketahui  bahwa  nilai  motilitasnya  masih tergolong  normal, hal  ini  karena  motilitasnya  masih dikategorikan  sebagai  baik  (++)  hingga  sangat  baik (+++) (Kurniawan et al ., 2013).

## Tingkat Kematangan Gonad (TKG)
Gambar 1 . Tingkat kematangan gonad Ikan Nilem
Berdasarkan gambar  1. berikut dapat diketahui bahwa pada bulan Maret didominasi oleh kelompok ikan  pada  tahapan  TKG  III  (46,6%)  dan  IV  (40%), sedangkan  Tahapan  TKG  V  hanya  sebesar  13%. Tahapan tingkat kematangan gonad pada bulan April didominasi  oleh  kelompok  ikan  pada  tahapan  TKG IV  (86,6%)  lalu  diikuti  oleh  kelompok  ikan  pada TKG III (6,6%) dan TKG V (6,6%). Tahapan tingkat kematangan gonad  pada  bulan  Mei  didominasi  oleh kelompok ikan pada tahapan TKG IV (58,3%) dan III (33,3%), sedangkan Tahapan TKG V hanya sebesar 8,3%.  Berdasarkan  data  tersebut  maka  diketahui bahwa  puncak  pemijahan  Ikan  Nilem  di  Sungai banjaran  selama  perionde  Maret-Mei  terjadi  pada bulan  April.  Menurut  BMKG  bulan  April  dan  Mei 2021  merupakan  masa  peralihan  dari  musim penghujan  ke  musim  kemarau,  sehingga  pada  bulan ini  hujan  masih  sangat  sering  terjadi  (Media Indonesia, 2021). Hasil Penelitian ini selaras dengan pernyataan  Fujaya  (2004)  yang  menyatakan  bahwa Ikan  Nilem  tidak  dapat  memijah  setiap  saat,  musim pemijahan  baru  akan  berlangsung  ketika  musim penghujan.
46,6 40 13 6,6 86,6 6,6 33,3 58,3 8,3 0 20 40 60 80 100 III IV V FR EK U NS I % TAHAPAN TINGKAT KEMATANAN GONAD Maret April Mei
Gambar 2 . Tingkat kematangan gonad Ikan Brek
Berdasarkan gambar 2 tersebut dapat diketahui bahwa  bulan  Maret,  bulan  April,  dan  bulan  Mei didominasi oleh kelompok ikan pada tahapan TKG IV. Berdasarkan data tersebut maka dapat diketahui bahwa  Ikan  Brek  memijah  tidak  bergantung  pada musim.  Menurut  Haryono  dan  Gema  (2020)  Ikan Brek memijah pada malam hari menjelang pagi pada malam  pertama  setelah  matang  gonad.  Pendapat tersebut  diperkuat  oleh  hasil  penelitian  menurut Suryaningsih et  al (2012),  bahwa  Ikan  Brek  baik Brek jantan maupun betina memiliki tipe pemijahan asynchronus spawner . Dalam penelitiannya mengenai  Ikan  Brek  selama  12  bulan  disebutkan bahwa  ikan  yang  telah  matang  gonad  (TKG  IV) selalu  dijumpai  dalam  setiap  bulannya  dalam frekuensi  yang  beragam,  maka  dapat  disimpulkan bahwa masa pemijahan Ikan brek berlangsung lama, namun  puncak  pemijahan  terjadi  pada  bulan September-Oktober.
Gambar 3. Tingkat kematangan gonad Ikan Lunjar
Berdasarkan gambar 3. dapat diketahui bahwa bulan  Maret  didominasi  oleh  kelompok  ikan  pada TKG III (41,67%) dan TKG IV (41,67%), sedangkan ikan  pada  kelompok  ikan  pada  TKG  V  hanya dijumpai sebanyak 16,67%. Bulan April didominasi oleh  kelompok  ikan  pada  TKG  IV  (66,67%), kemudian diikuti oleh kelompok ikan pada TKG III
(26,67%), dan yang terendah adalah kelompok ikan pada TKG V yakni 6,67%. Bulan Mei tidak didapati ikan  pada  TKG I,  TKG  II  ataupun  TKG  III.  Bulan Mei  didominasi  oleh  kelompok  ikan  pada  TKG  IV (70%) dan diikuti oleh kelompok ikan pada TKG V (30%).  Berdasarkan  data  tersebut  dapat  diketahui bahwa  Ikan  Lunjar  yang  matang  gonad  (TKG  IV) selalu  dijumpai  pada  setiap  bulannya  dengan frekuensi  yang  relatif  tidak  berbeda  jauh.  Menurut Ahmad  &  Nofrizal  (2011)  pada  penelitiannya mengenai Ikan Lunjar ( Rasbora argyrotaenia ) Ikan Lunjar  melakukan  pemijahan  berulangkali  ( partial spawner ) namun puncak pemijahannya terjadi pada musim  penghujan  yakni  sekitar  bulan  September- November.

## Indeks Kematangan Gonad (IKG)
Gambar 4. Indeks kematangan gonad Ikan Nilem
Berdasarkan gambar 4. tersebut dapat diketahui bahwa  indeks  kematangan  gonad  Ikan  Nilem  yang tertinggi  yakni,  19,11%.  Nilai  IKG  tertinggi  ini ditemui  pada  bulan  April  namun  hanya  dijumpai sejumLah  1  individu.  Nilai  IKG  yang  tinggi mengindikasikan  bahwa  ikan  sudah  matang  gonad dan  siap  memijah.  Menurut  Fatimah et  al (2019),
Nilai  IKG  suatu  individu  akan  semakin  tinggi nilainya hingga sesaat sebelum memijah, dan mulai menurun kembali setelah selesai memijah.
8,33 75 16,67 0 100 0 0 83,33 16,67 0 20 40 60 80 100 120 III IV V FR EK U NS I % TAHAPAN TINGKAT KEMATANAN GONAD Maret April Mei
41,67 41,67 16,67 26,67 66,67 6,67 0 70 30 0 20 40 60 80 III IV V FR EK U NS I % TAHAPAN TINGKAT KEMATANAN GONAD Maret April Mei 8 4 2 1 0 1 3 6 4 1 3 5 2 2 0 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 JUML AH ( N) INDEKS KEMATANGAN GONAD % Maret April Mei 3 6 3 2 7 2 3 6 3 0 1 2 3 4 5 6 7 8 3-5,5 5,6-8,1 8,2-10 JUML AH ( N) INDEKS KEMATANGAN GONAD % Maret April Mei
Berdasarkan gambar 5. tersebut dapat diketahui bahwa  indeks  kematangan  gonad  Ikan  Brek  yang tertinggi  berkisar  antara  8,2-10%.  Nilai  IKG tertinggi ini selalu ditemui pada bulan Maret, April, dan  Mei.  Ikan  Brek  yang  ditemui  mencapai  nilai IKG  8,2-10%  pada  bulan  Maret  dan  Mei  dijumpai sebanyak  3  individu,  sedangkan  pada  bulan  April dijumpai  sebanyak  2  individu.  Berdasarkan  nilai IKG  yang  tersaji  pada  gambar  5.  tersebut  dapat diketahui  bahwa  pada  tiap  bulannya  (Maret-Mei) selalu  dijumpai  individu  yang  telah  siap  memijah, hal ini mengindikasikan bahwa Ikan Brek memiliki rentang  pemijahan  yang  luas  (Suryaningsih et  al ., 2012).
Gambar 6. Indeks kematangan gonad Ikan Lunjar
Berdasarkan gambar 6. tersebut dapat diketahui bahwa nilai IKG Ikan Lunjar yang tertinggi adalah senilai 8,6%. Nilai IKG tertinggi ini hanya dijumpai pada  bulan  Mei,  namun  hanya  ditemui  sebanyak  1 individu. Seperti yang telah dijelaskan sebelumnya, Nilai IKG yang tinggi mengindikasikan bahwa ikan tersebut sudah siap memijah. Menurut Fatimah et al (2019),  Nilai  IKG  diperoleh  dengan  cara  membagi bobot  gonad  dengan  bobot  tubuh  lalu  dikalikan dengan 100%. Ikan yang gonadnya semakin matang akan  cenderung  bertambah  bobotnya,  namun  pada ikan  jantan  pertambahan  bobotnya  tidak  sebesar pada  ikan  betina.  Ikan  yang  sudah  siap  memijah bobot  gonadnya  akan  semakin  tinggi  namun  bobot tubuhnya akan menurun, hal ini dapat terjadi karena pasokan energi akan dialihkan untuk perkembangan gonad. Pertambahan bobot gonad ini kemudian akan mempengaruhi nilai IKG suatu individu.

## Pengamatan Struktur Histologis Gonad Jantan
Berdasarkan  hasil  pengamatan  yang  telah dilakukan dapat diketahui bahwa terdapat perbedaan struktur  histologis  gonad  jantan  antara  yang  belum matang  gonad  dengan  yang  sudah  matang  gonad. Perbedaan ini dapat diidentifikasi melalui komposisi tahapan perkembangan spermatogenik yang terdapat di dalam testis, yakni dari keberadaan spermatogonium,  spermatosit  primer,  spermatosit sekunder, spermatid, dan spermatozoa.
Spermatogonium  umumnya  dijumpai  di  dekat membrana basalis.
Gambar 7. Histologi testis Ikan Nilem ( Osteochilus sp.) belum matang gonad .
Keterangan: (A)  Struktur  histologis  testis  Ikan  Nilem  lensa objektif  10x;  (B)  Struktur  histologis  testis  Ikan  Nilem  lensa objektif  40x;  (C)  Struktur  Histologis  Testis  Ikan  Nilem  lensa objektif  100x.  (SG,  Spermatogonium;  SP,  Spermatosit  Primer; Std, Spermatid)
Spermatogonium  merupakan  sel  induk  yang memiliki ukuran paling besar apabila dibandingkan dengan  spermatogenik  lainnya  (Gambar 7).
Spermatogonium  memiliki  ciri  berwarna  pucat  dan memiliki  nukleus  yang  besar.  Spermatogonium  ini kemudian  akan  membelah  secara  mitosis  menjadi spermatosit.  Spermatosit  memiliki  sitoplasma  yang lebih  padat  karena  terlingkupi  oleh  benang-benang kromatin yang merupakan persiapan untuk memulai pembelahan  secara  meiosis.  Spermatosit  primer memiliki  bentuk  sedikit  oval  dan  berukuran  lebih kecil apabila dibandingkan dengan spermatogonium. Spermatosit primer kemudian mengalami pembelahan  meiosis  menjadi  spermatosit  sekunder yang  memiliki  bentuk  lebih  bulat  dan  lebih  kecil ukurannya apabila dibandingkan dengan spermatosit primer.  Pembelahan  secara  meiosis  menyebabkan spermatosit  sekunder  bersifat  haploid.  Spermatosit sekunder  ini  kemudian  mengalami  pembelahan meiosis kembali menjadi spermatid, yang ukurannya lebih  kecil  lagi  dan  memiliki  bentuk  yang  lebih bulat,  selanjutnya  spermatid  akan  berdiferensiasi membentuk  struktur  kepala  dan  ekor  yang  disebut spermatozoa  (Nurhidayat et  al .,  2017;  Koc et  al ., 2015).
Berdasarkan gambar 8. tersebut dapat diketahui bahwa  testis  didominasi  spermatosit  primer, spermatid, dan spermatogonium, hal ini mengindikasikan  bahwa  testis  belum  matang  dan belum  siap  memijah.  Spermatogenik  yang  terdapat di dalam testis di-dominasi oleh spermatosit primer dan sekunder yang sudah mulai bermigrasi ke arah lumen,  lalu  dijumpai  pula  spermatogonium  yang jumLahnya  kurang  dari  spermatosit,  hal  ini mengindikasikan  bahwa  testis  ikan  sedang  berada dalam  tahap mid-spermatogenesis. Tahap mid- spermatogenesis ini  banyak   dijumpai   pada  ikan
6 6 0 0 5 5 5 0 0 3 6 1 0 1 2 3 4 5 6 7 0-2,5 2,6-5,1 5,2-7,7 7,8-8,6 JU ML A H ( N) INDEKS KEMATANGAN GONAD % Maret April Mei B A C St d Sp z SP SS B
Gambar 8. Histologi testis Ikan Nilem ( Osteochilus sp.) sudah matang gonad. Keterangan: (A)  Struktur  histologis  testis  Ikan  Nilem  lensa objektif  10x;  (B)  Struktur  histologis  testis  Ikan  Nilem  lensa objektif  40x;  (C)  Struktur  Histologis  Testis  Ikan  Nilem  lensa objektif  100x.  (SP,  Spermatosit  Primer;  SS,  Spermatosit Sekunder; Std, Spermatid; Spz, Spermatozoa).
dengan TKG III. Mnurut Suryaningsih et al . (2012) ikan  yang  berada  pada  TKG  III  memiliki  strutur histologis yang didalamnya mulai tampak spermatosit yang berkembang menjadi spermatid.
Berdasarkan gambar 8. tersebut dapat diketahui bahwa  komposisi    spermatogenik  yang  terdapat  di dalam testis didominasi oleh spermatid yang sudah bermigrasi  kearah  lumen  dan  spermatozoa,  hal  ini mengindikasikan  bahwa  testis  sudah  matang  dan siap  untuk  memijah.  Lumen  semakin  membesar kemudian  komposisi  spermatogenik  yang  terdapat didalam testis didominasi oleh keberadaan spermatozoa  maka  hal  ini  mengindikasikan  bahwa testis  sedang  berada  pada  tahapan Spawning yang berarti  sudah  siap  untuk  melakukan  pemijahan. Tahapan Spawning banyak  dijumpai  pada  ikan dengan TKG IV .
Gambar 9. Histologi testis Ikan Brek ( Barbonymus sp.) sudah matang gonad. Keterangan: (A)  Struktur  histologis  testis  Ikan  Nilem  lensa objektif  10x;  (B)  Struktur  histologis  testis  Ikan  Nilem  lensa objektif  40x;  (C)  Struktur  Histologis  Testis  Ikan  Nilem  lensa objektif  100x.  (SP,  Spermatosit  Primer;  Std,  Spermatid;  Spz, Spermatozoa).
Berdasarkan gambar 9. tersebut dapat diktahui bahwa  komposisi  spermatogenik  yang  terdapat  di dalam testis didominasi oleh spermatid yang sudah bermigrasi  kearah  lumen  selain  itu  juga  banyak dijumpai  spermatozoa.  Struktur  ini  mirip  dengan Ikan  Nilem  pada  gambar  8,  yang  mengindikasikan bahwa ikan sudah siap memijah karena testis sudah berada  pada  tahap spawning .  Tahap spawning ini banyak dijumpai pada ikan dengan TKG IV.
Berdasarkan gambar 9. tersebut dapat diktahui bahwa  komposisi    spermatogenik  yang  terdapat  di dalam testis adalah spermatozoa dan spermatogonium  dalam  jumLah  sedikit.  Struktur lobusnya sudah mulai mengkrut dan lumen menjadi lebih lega. Ikan yang telah memijah akan masuk ke tahap spent.
Gambar 10. Histologi testis Brek ( Barbonymus sp.) pasca memijah.
Keterangan: (A)  Struktur  histologis  testis  Ikan  Nilem  lensa objektif  10x;  (B)  Struktur  histologis  testis  Ikan  Nilem  lensa objektif  40x;  (C)  Struktur  Histologis  Testis  Ikan  Nilem  lensa objektif 100x. (SG, Spermatogonium; Spz, Spermatozoa).
Pada  Tahap  ini  lobus  akan  mulai  mengkerut karena  sperma  sudah  dikeluarkan,  biasanya  juga akan  dijumpai  dengan  jelas  keberadaan  pembuluh darah.  Pada  tahap  ini  spermatogonia  seharusnya merupakan  sel  yang  paling  banyak  dijumpai. Menurut  Suryaningsih et  al .  (2012)  ikan  pasca memijah dijumpai pada ikan TKG V. Spermatogenik yang terdapat pada ikan dengan TKG V didominasi oleh spermatozoa dan spermatogonium.
Berdasarkan  gambar  11  tersebut  dapat diketahui  bahwa  komposisi  spermatogenik  yang terdapat  di  dalam  testis  didominasi  oleh  spermatid yang sudah bermigrasi kearah lumen selain itu juga banyak  dijumpai  spermatozoa.  Tahap  ini  banyak dijumpai pada ikan dengan TKG IV.
A C SP Std SP SG A B C Std Spz SP
A B C SG Spz
Gambar  11. Histologi  testis  Ikan  Lunjar  ( Rasbora sp.) sudah matang gonad. Keterangan: (A)  Struktur  histologis  testis  Ikan  Nilem  lensa objektif  10x;  (B)  Struktur  histologis  testis  Ikan  Nilem  lensa objektif  40x;  (C)  Struktur  Histologis  Testis  Ikan  Nilem  lensa objektif  100x.  (SP,  Spermatosit  Primer;  Std,  Spermatid;  Spz, Spermatozoa).

## SIMPULAN
Kualitas spermatozoa Ikan Nilem yang terbaik adalah pada bulan Mei yakni memiliki volume milt 0,21  mL,  konsentrasi  spermatozoa  2,3454  x10 9 sel/mL, Motilitas 3, dan viabilitas 82,55%. Pada Ikan Brek  jumLah  volume  milt  yang  tertinggi  terdapat pada  bulan  Mei  yakni  0,25  mL,  konsentrasi spermatozoa  tertinggi  terdapat  pada  bulan  April 34,465 x109 sel/mL, dengan viabilitas 88,62%, dan motilitas  2,9.  Kualitas  sperma  Ikan  Lunjar  terbaik dijumpai  pada  bulan  Mei  yakni  memiliki  volume milt 0,02 mL, konsentrasi spermatozoa 22,435 x10 9 sel/mL,  viabilitas  80%,  dan  motilitas  3.  Semua sampel  sperma  berwarna  putih  dengan  pH  7-8. Berdasarkan  TKG  dan  IKG  dapat  diketahui  bahwa Ikan Nilem banyak ditemukan memijah pada bulan April  dan  Mei,  Ikan  Brek  dan  Lunjar  banyak ditemukan  memijah  pada  bulan  Maret-Mei. Spermatogenik  yang  teramati  pada  ikan  belum matang  gonad  lebih  di-dominasi  oleh  spermatosit, spermatid,  dan  spermatogonium,  pada  ikan matang gonad  lebih  banyak  dijumpai  spermatozoa  dan spermatid, sedangkan pada ikan pasca memijah lebih banyak dijumpai spermatozoa dan spermatogonium dengan  kondisi  lobus  yang  sedikit  mengkrut  dan lumen yang semakin lega.

## DAFTAR PUSTAKA
Ahmad,  M.  &  Nofrizal,  N.  2011.  Pemijahan  dan
Penjinakan Ikan Pantau ( Rasbora Latestriata ). Jurnal Perikanan dan Kelautan , 16(1), pp.71-78.
Arifiantini R. I. 2012. Teknik Koleksi Dan Evaluasi Semen Pada Hewan . Bogor: IPB Press
Bhagawati,  D.,  Abulias,  M.  N.  &  Amurwanto,  A.
2013.  Fauna  ikan  siluriformes  dari  Sungai
Serayu,  Banjaran,  dan  Tajum  di  Kabupaten Banyumas. Jurnal Mipa , 36(2), pp.112-122.
Condro,  H.  S.,  Mubarak,  A.  S.  &  Sulmartiwi,  L.,
2012.  Pengaruh  Penambahan  Madu  pada Media  Pengencer  NaCl  Fisiologis  dalam Proses  Penyimpanan  Sperma  Terhadap Kualitas  Sperma  Ikan  Komet  ( Carassius auratus  auratus ). Journal  of  Marine  and
Coastal Science , 1(1), pp.1-12.
Fatimah,  A.  N.,  Sugiharto,  S.  &  Setyaningrum,  N.
2019.  Aspek  Reproduksi  Ikan  Betutu ( Oxyeleotris marmorata
Blkr.) yang
Tertangkap  di  Waduk  Penjalin  Brebes. BioEksakta , 1(2), pp.71-77.
Fujaya, Y. 2004. Fisiologi Ikan Dasar Pengembangan Teknik Perikanan Edisi ke-1.
Jakarta: Rineka Cipta.
Hamzaouglu, E., Mufit O., Yasemin T. & Melike E.
2015. Macroscopic and Microscopic Examination  of  Seasonal  Gonad  Change  in Alburnus  istanbulensis (Battalgil,  1941) (Teleostei:  Cyprinidae). Turkish  Journal  of Fisheries and Aquatic Sciences , pp.639-646.
Haryono  &  Gema,  W.  2020.  Pemijahan  Ikan  Brek ( Barbonymus balleroides ) dan Pemeliharaan Anakan  dalam  Wadah  Budidaya. In. Sulistiono & Haryono, eds. Domestikasi Ikan Brek  untuk  Konservasi  dan  Diversivikasi Ikan Budidaya. Bogor: IPB Press. pp.71-81.
Hastuti,  D.  W.  B.  &  Riviani.  2020.  Efektifitas Penggunaan Jenis Ekstender dan Dosis Madu Berbeda  Terhadap  Motilitas  dan  Viabilitas Sperma  Ikan  Nilem  ( Osteochilus  vittatus ) Setelah  Penyimpanan. Jurnal  Airaha ,  9(2), pp.122-129.
Ibrahim,  Y.,  Fadhillah,  R.  &  Karim,  A.  2020. Suplementasi  Seng  (Zn)  Anorganik  ZnSO4. 7H 2 O  Dalam  Pakan  Terhadap  Motilitas  dan Viabilitas Sperma Ikan Serukan ( Osteochilus sp.). Jurnal  Akuakultura  Universitas  Teuku Umar , 3(1), pp.29-34.
Koc, N. D., Neslihan T., Mesut U. & Cansu A. 2015. Histological  Structure  of  Zebrafish  ( Danio rerio ,  Hamilton,  1822)  Testicles. Elixir Aquaculture , 46, pp.8117-8120.
Kurniawan,  I.  Y.,  Basuki,  F.,  Susilowati,  T.  2013. Penambahan  Air  Kelapa  Dan  Gliserol  Pada Penyimpanan  Sperma  Terhadap  Motilitas Dan  Fertilitas  Spermatozoa  Ikan  Mas ( Cyprinus Carpio L.). Journal of Aquaculture Management  and  Technology .  2(1),  pp.51- 65.
A B C SP Spz Std
Lestari,  W.,  Zayyana,  D.  A.,  Setyaningrum,  N.  & Amelia, T. 2018. The Guild Composition for Modelling  Fish  Community  in  Banjaran River, Purwokerto. Biosaintifika: Journal of Biology & Biology Education , 10(3), pp.698- 705.
Media  Indonesia.  2021.  BMKG  Prediksi  Musim
Kemarau  Mulai  April.  Diakses  pada  27
Oktober 2021 dari
https://mediaindonesia.com/humaniora/3933 31/bmkg-prediksi-musim-kemarau-mulai- april.
Naylor,  R.  L.,  Goldburg,  R.  J.,  Primavera,  J.  H.,
Kautsky,  N.,  Beveridge,  M. C.  M.,  Clay,  J., Folke,  C.,  Lubchenco,  J.,  Mooney,  H.  & Troell,  M.  2000.    Effect  of  Aquaculture  on World Fish Supplies, Journal of Nature . 4(5), pp.1017-1024.
Ningrum,  D.  R.  K.,  Budi,  D.  S.  &  Sulmartiwi,  L.
2019.  Induksi  Pemijahan  Ikan  Wader  Pari ( Rasbora argyrotaenia ) Menggunakan Ovaprim TM Dengan Dosis Berbeda. DEPIK Jurnal  Ilmu-Ilmu  Perairan,  Pesisir  dan Perikanan , 8(2), pp.117-124.
Nurhidayat, L., Arfiani, F. N. & Retnoaji, B. 2017.
Indeks Gonadosomatik dan Struktur
Histologis  Gonad  Ikan  Uceng  ( Nemacheilus fasciatus ,  Valenciennes  in  Cuvier  and Valenciennes, 1846). Majalah Ilmiah Biologi BIOSFERA:  A  Scientific  Journal ,  34(2), pp.67-74.
Ochokwu, I. J., Apollos, T. G. & Oshoke, J. O. 2015. Effect  of  Egg  and  Sperm  Quality  In Successful  Fish  Breeding .  IOSR  Journal  of Agriculture  and  Veterinary  Science ,  8(8), pp.48-57.
Putra, R. M., 2010. Pengaruh Kombinasi
Penyuntikan  hCG  dan  Ekstrak  Kelenjar
Hipofisa Ikan Mas Terhadap Volume Semen dan  Kualitas  Sperma  Ikan  Pantau  ( Rasbora lateristriata Blkr).  Jurnal  Perikanan  dan
Kelautan, 15(2), pp.161-172.
Putri, M. W. D., Prayogo & Budi, D. S. 2020. Effect of Spirulina  platensis Supplementation  in The  Diet  to  Sperm  Performance  of  Silver Rasbora  ( Rasbora  argyrotaenia ).  In  IOP Conference Series: Earth and Environmental Science 441(1).
Rahardhianto,  A.,  Abdulgani,  N.  &  Trisyani,  N., 2012.  Pengaruh  Konsentrasi  Larutan  Madu dalam  NaCl  Fisiologis  terhadap  Viabilitas dan  Motilitas  Spermatozoa  Ikan  Patin ( pangasius pangasius ) selama Masa Penyimpanan. Jurnal  Sains  dan  Seni  ITS , 1(1), pp.58-63.
Shabila,  D.  2013.  Perbedaan  Karakteristik  Semen Ikan  Nilem  ( Osteochilus  vittatus )  pada Ukuran  Tubuh  yang  Berbeda. Skripsi .  pp.1- 15.
Suryaningsih,  S.,  Sagi,  M.,  Nitimulyo,  K.  H.  & Hadisusanto,  S.  2012.  Beberapa  Aspek Pemijahan  Ikan  Brek Puntius  orphoides (Valenciennes,  1842)  di  Sungai  Klawing
Purbalingga. Jawa Jurnal Iktiologi
Indonesia , 12(1), pp.35-48. Susatyo,  P.,  Sugiharto,  S.  &  Winarni,  E.  T.  2012. Induksi Pematangan Gonad dengan Ovaprim-C:  untuk  Penyediaan  Benih  Belut Sawah  ( Monopterus albus )  Berkelanjutan. Majalah  Ilmiah  Biologi  BIOSFERA:  A Scientific Journal , 29(3), pp.116-126.
Uribe,  M.  C.,  Grier,  H.  J.    &  Roa,  V.  M.    2014.
Comparative Testicular Structure and Spermatogenesis in Bony Fishes. Review. J. Spermatogenesis . 4(3), pp.1-13.
Yulianto., Wirdateti & Gema. W., 2020. Karakteristik Spermatozoa Ikan Brek ( Barbonymus  balleroides ). In. Sulistiono  & Haryono,  eds.  Domestikasi  Ikan  Brek  untuk Konservasi dan Diversivikasi Ikan Budidaya. Bogor: IPB Press . pp.57-67.
Zairin,  M.  J.,  Handayani,  S.  &  Supriatna,  I.  2005. Kualitas Sperma Ikan Batak ( Tor soro ) Hasil
Kriopreservasi Semen
Menggunakan Dimetilsulfoksida  (DMSO)  dan  Gliserol  5, 10,  dan  15%. Jurnal  Akuakultur  Indoesia . 4(2), pp.145-151.