Pengaruh Level Kuning Telur Pada Pengencer Susu Skim Terhadap Motilitas dan Fertilitas Spermatozoa Ayam Pelung
(The Effect of Egg Yolk Level in Skim Milk Diluent to The Motility and Fertility of Pelung Rooster Spermatozoa)
Sri Lestari, Dadang Mulyadi Saleh, dan Sigit Mugiyono Fakultas Peternakan, Universitas Jenderal Soedirman, Purwokerto Email : sri.lestari010@mhs.unsoed.ac.id
Diterima : 30 September 2022/Disetujui : 27 November 2022

## ABSTRAK
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  pengaruh  penambahan  level  kuning  telur  pada pengencer  susu  skim  terhadap  motilitas  dan  fertilitas  spermatozoa  ayam  Pelung.  Penelitian menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan perlakuan (P 0 = susu skim + 0% kuning telur, P 1 = susu skim + 5% kuning telur, P 2 = susu skim + 10% kuning telur, P 3 = susu skim + 15%  kuning  telur)  pada  suhu  ruang  dan  masing-masing  perlakuan  diulang  lima  kali.  Hasil analisis variansi menunjukkan perlakuan berpengaruh sangat nyata (P<0,01) terhadap motilitas spermatozoa  dan  hasil  uji  ortogonal  polinomial  menunjukkan  pengaruh  yang  sangat  nyata secara linier (P<0,01). Persentase motilitas yang dihasilkan perlakuan P 0 , P 1 , P 2 , dan P 3 berada diatas 70% sehingga masih sangat layak digunakan untuk IB. Hasil terbaik ditunjukkan oleh perlakuan P 3 (susu skim + 15% kuning telur) terhadap motilitas spermatozoa yang membentuk garis linier dengan persamaan Y = 0,61x + 76,74 dan koefisien determinasi (R 2 ) sebesar 0,70. Hasil analisis variansi menunjukkan adanya pengaruh sangat nyata (P<0,01) terhadap fertilitas spermatozoa dan membentuk garis kuadrater dengan persamaan persamaan Y = 0,35x 2 – 0,64x + 6,1 dengan koefisien determinasi (R 2 ) sebesar 0,62. Fertilitas yang dihasilkan lebih baik pada perlakuan  pengencer  tanpa  pemberian  kuning  telur.  Berdasarkan  hasil  penelitian  ini  dapat disimpulkan bahwa penambahan level kuning telur pada pengencer susu skim meningkatkan motilitas, namun tidak meningkatkan fertilitas spermatozoa ayam Pelung.
Kata kunci: Ayam Pelung, Susu Skim, Kuning Telur, Motilitas, Fertilitas.

## ABSTRACT
The purpose of this research was to determine the effect of the addition of egg yolk level in skim milk diluent on the motility and fertility of Pelung rooster spermatozoa. The study used a completely randomized design with 4 treatments. The treatments were P 0 : (skim milk + 0 % egg yolk)., P 1 : ( skim milk + 5%  egg yolk)., P 2 : ( skim milk + 10% egg yolk)., P 3 : ( skim milk + 15%  egg yolk). Analysis of variance results showed that the addition of egg yolk in skim milk had a highly significant effect (P<0.01) on the motility of Pelung rooster spermatozoa. The percentage of motility produced by P 0 , P 1 , P 2 , and P 3 treatments is above 70% so it is still suitable  for  IB.  The  best  treatment  was  P 3 (skim  milk  +  15%  egg  yolk)  on  the  motility  of spermatozoa forming linear lines with the equation y = 0.61x + 76.74 and the coefficient of determination (R 2 ) of 0.70. While Analysis of variance results showed that  the level  of egg yolk in skim milk diluent had a highly significant effect (P<0.01) on the spermatozoa fertility forming  a  quadratic  line  with  the  equation  y=0.35x 2 -0.64x  +  6.10  and  the  coefficient  of determination (R 2 =0.62). Fertility will be better without adding egg yolk. From the results of this  research,  it  can  be  concluded  that  the  addition  of  egg  yolk  level  in  skim  milk  diluent increases the motility, but not the fertility of Pelung rooster spermatozoa.
Keywords: Pelung Rooster, Skim Milk, Egg Yolk, Motility, Fertility.

## PENDAHULUAN
Ayam  Pelung  merupakan  salah  satu rumpun ayam lokal Indonesia yang mempunyai  keseragaman  bentuk  fisik  dan komposisi genetik serta kemampuan adaptasi dengan  baik  pada  keterbatasan  lingkungan. Kabupaten  Cianjur,  Jawa  Barat  merupakan tempat  ditemukannya  ayam  Pelung.    Ayam Pelung  mempunyai  ciri  khas  yang  berbeda dengan rumpun ayam asli atau lokal lainnya dan  merupakan  kekayaan  sumber  daya genetik  ternak  lokal  Indonesia  yang  perlu dilindungi  dan  dilestarikan  (Fitriani  et  al., 2019).
Pemilihan bahan pengencer yang baik dapat berpengaruh bagi kehidupan spermatozoa  sehingga  dapat  menghasilkan kualitas  semen  yang  berkualitas.    Menurut Hoesni  (2016)  bahan  pengencer  yang  dapat digunakan sebagai pengencer yaitu susu skim dan kuning telur. Susu skim mengandung zat nutrisi  yang  dapat  dimanfaatkan  oleh spermatozoa sebagai sumber energi. Kuning telur sebagai bahan krioprotektan ekstraseluler berfungsi sebagai media penyedia  makanan,  sumber  energi,  dan pelindung  ekstraseluler  spermatozoa  dari cold  shock karena  mengandung  lipoprotein dan lesitin. Penambahan kuning telur dengan level berbeda yaitu 0%, 5%, 10%, dan 15% dimaksudkan  untuk  mencari  level  optimal untuk  mempertahankan  motilitas  sehingga dapat meningkatkan fertilitas.
Motilitas  dan  fertilitas  spermatozoa merupakan  satu  parameter  penting  yang dapat  dijadikan  dasar  informasi  penilaian untuk inseminasi buatan.  Menurut Getachew (2016) umumnya kualitas semen ayam lokal mempunyai  volume  motilitas  sebesar  60% sampai  80%.    Motilitas  merupakan  daya gerak  individu  sperma  yang  digunakan sebagai  ukuran  kemampuan  sperma  untuk membuahi  sel  telur.    Daya  gerak  maju  ini
sangat diperlukan pada saat berada di dalam saluran  kelamin  betina  untuk  mencapai tempat  terjadinya  fertilisasi  (Danang  et  al., 2012).
Pada  akhir  penelitian  ini  diharapkan dapat  menghasilkan  level  kuning  telur  yang terbaik  yang  dapat  memberikan  fertilitas spermatozoa tinggi sebagai acuan untuk para akademisi dan inseminator dalam melakukan IB ayam yang lebih efisien.

## METODE PENELITIAN

## Alat dan Bahan Penelitian
Alat yang digunakan dalam penelitian ini meliputi 10 buah kandang ayam individu berbahan  bambu  dengan  tempat  pakan  dan minum, erlenmeyer, timbangan digital, bilik thoma ,  termometer,  termos  es,  mikroskop, objek  Glass , cover  Glass ,  alat  hitung,  pipet eritrosit,  spuit  1  ml, microtube ,  gelas  ukur, tabung  berskala,  pengaduk,  kompor,  kertas alumunium foil , kertas saring, label, alat tulis, tissue , egg  tray, pemisah  kuning  telur , dan mesin tetas otomatis.
Bahan yang digunakan dalam penelitian  ini  meliputi  semen  segar  yang disadap  dari  10  ekor  ayam  Pelung  jantan umur 1 - 2 tahun dengan berat badan rata-rata 3  -  4  kg.    Ayam  niaga  petelur  ( Isa  Brown ) yang  digunakan  sebanyak  40  ekor  berumur 51 minggu dengan berat badan rata-rata 1, 65 kg. Pakan yang diberikan ayam betina adalah pakan  komersial  untuk  dan  fase  produksi, sebanyak 100 g/ekor/hari dengan kandungan protein  antara  16  -  17%.  Pakan  yang diberikan ayam jantan comfeed sebanyak 150 g/ekor/hari  dengan kandungan protein  kasar 19%. es batu, ringer laktat, 50 ml aquabidest ,
5  gram  susu  skim  dengan  merk  dagang tropicana  slim ,  1  butir  kuning  telur  ayam niaga petelur.

## Koleksi semen
Semen  dikoleksi  dari  ekor  ayam pejantan Pelung  dan 10 ekor pejantan ayam Pelung.  Penampungan  semen  menggunakan teknik  pengurutan  ( masase )  dimulai  dari bagian  punggung  ayam  dan  pada  1  cm  di belakang  kloaka.  Sebelum  koleksi  bagian kloaka  dibersihkan  dengan  tisu  yang  diberi NaCl fisiologi. Koleksi semen dilakukan oleh dua  orang,  satu  orang  memegang  ayam  dan melakukan masase ,  satu  orang  lainnya bertindak  sebaik  kolektor  semen. Masase dilakukan  beberapa  kali  sampai  terjadi rangsangan pada ayam yang ditandai dengan peregangan  tubuh  ayam  dan  keluarnya papillae  dari  proctodaeum  kloaka.  Ketika ereksi mencapai maksimal, dilakukan kembali  masase  hingga  terjadi  ejakulasi. Kolektor  semen  menampung  semen  hasil ejakulasi ke dalam mikrotube dan dimasukan kedalam termos es.

## Pemeriksaan  Kualitas  Makroskopis  dan
Mikroskopis Semen Segar
Volume  semen .  Diukur  melalui  skala  yang ada  pada  tempat  penyadapan  semen  atau microtube.
Konsistensi  atau  kekentalan .  Diamati secara kualitatif dengan memiringkan tabung penampung  kemudian  ditegakkan  kembali, bila semen turunnya lambat berarti konsentrasinya tinggi dan jika turunnya cepat berarti  konsentrasinya  rendah  (Garner  and Hafez, 2008).
Warna .  Diamati  secara  kualitatif  setelah penyadapan, semen yang baik adalah warna krem.
pH .  Diukur  dengan  cara  mengambil  sedikit semen  segar  diletakkan  pada  kertas  Ph selanjutnya  dilihat  pH  semen  dengan menggunakan  pH  paper,  pH  normal  semen 6,4 - 7,8 (Garner and Hafez, 2008).
Bau .  Diamati  secara  kualitatif  dengan  cara memegang tempat penyadapan atau
microtube ,  tangan  di  kibas-kibaskan,  dan dihirup  baunya,  biasanya  berupa  bau  anyir atau bau amis yang biasa disebut sebagai bau khas sperma.
Motilitas  Massa  atau  gerakan  massa . Gerakan  massa  dilakukan  menggunakan object glass yang ditetesi semen kurang lebih 10-15  µl,  diperiksa  di  bawah  mikroskop menggunakan pembesaran 100 kali (10 x 10), kemudian diamati pergerakannya dan dilakukan penilaian dari jumlah keseluruhan. Hasil  berupa  cepat  (+++),  sedang  (++), lambat (+) dan tidak bergerak (-).
Gerak  individu  atau  motilitas  individu . Diamati dengan meneteskan satu tetes emen di atas object glass dan ditambahkan larutan ringer  laktat  di  atasnya  menggunakan mikroskop dengan pembesaran 400x. Selapis tipis  semen  dibuat  di  atas  gelas  objek  yang ditutupi  dengan  gelas  penutup.  Kriteria motilitas  spermatozoa  menurut  Susilawati (2012)  adalah  0%  :  spermatozoa  immotil tidak bergerak; 50% : spermatozoa bergerak melingkar,  kurang  dari  50%  bergerak progresif dan tidak bergelombang; 50-80% : spermatozoa bergerak progresif dan menghasilkan gerakan massa; 90% : gerakan progresif  yang  gesit  dan  membentuk gelombang; 100% : gerakan sangat progresif dan gelombang sangat cepat.
Konsentrasi
Spermatozoa . Evaluasi
terhadap  konsentrasi  dilakukan  dengan mencampurkan  semen  dan  NaCl  fisiologis 3% sebagai pengencer dengan perbandingan 1:200  (5µl  semen  :  995  µl  NaCl  fisiologis 3%)  di  dalam microtube kemudian  di homogenkan diputar dengan angka 8 selama 2-3 menit. Setelah itu semen diteteskan pada kamar hitung Neubauer yang ditutup dengan gelas  penutup,  kemudian  diamati  dengan mikroskop cahaya pembesaran 400x. Menghitung  spermatozoa  yang  terdapat di  dalam  lima  kotak  dengan  arah diagonal .  Hasil  perhitungan  konsentrasi spermatozoa  dalam  jumlah  kamar  yang
Jurnal Ilmu dan Teknologi Peternakan Indonesia Volume 8 (2) 94 - 103; Desember 2022 p-ISSN: 2460-6669 e- ISSN: 2656-4645
dihitung lima kotak dengan 80 ruangan kecil di dalamnya dikalikan 107 per mililiter

## Pengenceran Semen
Susu  skim  dibuat  dengan  cara diencerkan dengan aquabidest pada perbandingan  1:10  yaitu  1  gram  susu  skim dicampur dengan 10 ml aquabidest kemudian  dipanaskan  pada  suhu  92-95°C selama  10  menit.  Setelah  susu  kim  dingin kemudian  disaring  menggunakan  kertas saring  whatman  no  451.  Kuning  telur disiapkan  dengan  melakukan  pemisahan antara  putih  dan  kuning  telur  menggunakan alat  pemisah  kuning  telur.  Kuning  telur diambil menggunakan sepuit sesuai perlakuan.
Semen yang telah dikoleksi diencerkan  dengan  susu  skim  dan  kuning telur  dengan  perbandingan  1:2.  Kemudian semen  yang  sudah  diencerkan  diamati motilitas individu di bawah mikroskop pada pembesaran  400x.  Pengenceran  semen menggunakan  susu  skim  dan  penambahan kuning telur (P) sebagai berikut : P 0 : 0,5 ml Semen  +  1  ml  pengencer  (1  ml  ssk  +  0  ml kuning  telur),  P 1 :  0,5  ml  Semen  +  1  ml pengencer  (0,95  ml  ssk  +  0,05  ml  kuning telur),  P 2 :  0,5  ml Semen  +  1  ml  pengencer (0,90 ml ssk + 0,1 ml kuning telur), P 3 : 0,5 ml Semen + 1 ml pengencer (0,85 ml ssk + 0,15 ml kuning telur).

## Inseminasi Buatan
Inseminasi  Buatan  dilakukan  oleh dua  orang,  dengan  tugas  satu  orang memegang ayam betina dan memegang paha ayam dengan rapat,  ibu  jari kanan menekan daerah kloaka (sebelah kiri) dan tangan kiri, letakkan jari telunjuk dan jari tengah seperti menggunting  ekor  dan  tekan  ke  atas  sedikit sedangkan  ibu  jari  kiri  menekan  ke  bawah sehingga alat reproduksi ayam betina keluar. Semen  yang  sudah  ditambahkan  pengencer dengan  masing-masing  perlakuan  di  Ib  kan
pada  ayam  betina.  Metode  yang  digunakan yaitu  intra  vagina.  Pendisposisian  semen sebanyak  100  juta  spermatozoa  motil progresif per 0,1 ml yang sudah ditambahkan pengencer dengan masing-masing perlakuan disuntikan ke dalam daerah perbatasan antara vagina  dengan  kedalaman  3  –  4  cm. Inseminasi  buatan  dilakukan  pada  pukul 16.00 WIB, untuk menghindari adanya telur dalam uterus.

## Koleksi Telur
Koleksi telur tetas dilakukan dua hari setelah pelaksanaan inseminasi buatan. Telur dikumpulkan pada hari ke-2 sampai hari ke- 7.  Telur  hari  ke  satu  (satu  hari  setelah  IB) dianggap infertil sedangkan telur hari ke dua sampai hari ketujuh yang sudah dibersihkan dari  kotoran  dengan  antiseptik  diberi  kode tanggal  bertelur  dan  nomor  ayam  dan ulangan perlakuan, kemudian dimasukkan ke dalam mesin tetas yang sebelumnya sudah di fumigasi dengan suhu 38°C.

## Evaluasi Hasil Inseminasi Buatan
Fertilitas telur yang telah dimasukkan ke dalam mesin tetas otomatis diamati pada hari ke- 7  melalui candling .  Fertilitas  diukur  dengan menghitung  persentase  jumlah  total  telur  yang dibuahi dibandingkan dengan jumlah telur yang dihasilkan selama 7 hari setelah IB.

## Analisis Data
Data  motilitas  dan  fertilitas  yang diperoleh dalam penelitian ditabulasi kemudian dianalisis  menggunakan  analisis  variansi,  Jika perlakuan  berpengaruh  nyata  (P  >  0,  05) terhadap  variabel  maka  dilanjutkan  dengan Ortogonal Polinomial.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Evaluasi Semen Segar Ayam Pelung
Pemeriksaan  dan  evaluasi  semen  segar ayam  Pelung  meliputi  pengamatan  secara makroskopis  dan  mikroskopis.  Pengamatan
mikroskopis  merupakan  pengamatan  yang dilakukan  secara  visual  tanpa  bantuan  alat mikroskop.  Pengamatan  makroskopis  yang dilihat  adalah  antara  lain  volume,  pH,
konsistensi, bau, dan warna. Hasil pemeriksaan  semen  segar  dari  10  ekor  ayam Pelung disajikan pada Tabel 1.
Tabel 1.  Rataan Kualitas Semen Segar Ayam Pelung yang digunakan dalam Penelitian No. Kualitas Semen Rata-rata 1. Volume 0,30 2. Ph 7 3. Konsistensi Kental 4. Warna Putih susu krem 5. Bau Spermin/Bunga akasia 6. Motilitas Individu (%) 81,3 ± 3,97 7. Gerak Massa +++ 8. Konsentrasi (x10 6 spm/ml) 3.710
Keterangan: (-): buruk; (+): sedang; (++): baik; (+++): sangat baik
Berdasarkan  tabel  1  menunjukkan volume  yang  dihasilkan  dari  1  ekor  ayam Pelung adalah 0,30 ml.  Volume yang didapat dari  penelitian  ini  lebih  rendah  bila dibandingkan  dengan  penelitian  Saleh  dan Mugiyono  (2017)  yang  menyatakan  bahwa volume semen ayam Sentul sebesar 0,33 ml. Menurut Adhyatma et al (2013) menyatakan bahwa  faktor  yang  mempengaruhi  volume semen  adalah  bobot  badan  ayam,  pH  yang didapat  7  (netral),  warna  yang  diamati  putih susu  krem,  konsistensi  kental  dan  bau  yang dihasilkan mengeluarkan aroma seperti bunga akasia.
Pemeriksaan mikroskopis yang diamati  antara  lain  pH,  motilitas,  dan konsentrasi.  pH  dalam  Tabel  1  menunjukan pH  yang  dihasilkan  netral.  Hal  tersebut berbeda  dengan  penelitian  Permatasari  et  al (2013)  yang  mana  derajat  keasaman  yang diperoleh untuk semen sapi Jabres adalah 6,7. Motilitas spermatozoa ayam Pelung menghasilkan  85%.    Hal  tersebut  sesuai dengan pendapat Hafez (2000) yang menjelaskan  bahwa  semen  yang  dihasilkan dari  ternak  yang  sehat  dan  normal  memiliki motilitas  individu  sebesar  60  –  80%. Toelihere  (1993)  juga  menambahkan  bahwa semen yang layak untuk untuk IB yaitu tidak
kurang  dari  40%,  dan  semen  mempunyai kualitas  baik  apabila  persentase  hidupnya sebesar 50% berdasarkan pengamatan mikroskopis  dilihat  dari  perbedaan  afinitas menghisap  zat  warna  eosin  -negrosin. Konsentrasi spermatozoa merupakan banyaknya spermatozoa yang terdapat dalam satu ejakulat setiap kali penampungan semen dilakukan menggunakan bantuan mikroskop. Konsentrasi penelitian ini menunjukkan nilai sebesar 3.710 x 10 6 .  Hasil penelitian ini lebih baik dari laporan Tethool et al (2019) dengan konsentrasi  1.600  x  10 6 .    Perbedaan  ini dikarenakan  konsentrasi  spermatozoa  dalam satu  kali  ejakulat  sangat  dipengaruhi  oleh genotipe  seperti  bangsa  ayam,  strain,  umur ayam, dan faktor lingkungan turut mempengaruhi konsentrasi spermatozoa yang dihasilkan
Kualitas spermatozoa merupakan parameter  yang  penting  untuk  pelaksanaan inseminasi buatan. Penelitian ini menggunakan  bahan  pengencer  susu  skim dengan  kontrol  level  kuning  yang  berbeda- beda.    Pengencer  merupakan  salah  satu parameter yang dibutuhkan mempertahankan kualitas  spermatozoa  pada  jangka  waktu tertentu dalam pelaksanaan inseminasi buatan

## (Toelihere, 1993) dan memperbanyak volume
(Hafez, 2000).

## Motilitas Spermatozoa
Hasil penelitian motilitas yang diberi penambahan  pengencer  susu  skim  dengan level kuning telur yang berbeda menunjukkan
jumlah  rataan  keseluruhan  sebesar  81,30  ± 3,96% dengan kisaran antara 0,00% - 2,97% dengan  rataan  terendah  sebesar  76,20±2,17 dan  tertinggi  sebesar  85,40±2,97.  Rataan untuk  masing-masing  perlakuan  disajikan pada Tabel 2.
Tabel 2.  Rataan Persentase Motilitas Spermatozoa Ayam Pelung pada berbagai Level Kuning
Telur No. Perlakuan Motilitas ss 1. P 0 76,20±2,17 2. P 1 80,40±1,67 3. P 2 83,20±2,77 4. P 3 85,40±2,97
Keterangan : ss = sangat significant/ada signifikansi. P 0 = Pengencer Susu Skim, P 1 = Penambahan Kuning Telur 5%, P 2 = Penambahan Kuning Telur 10%, P 3 = Penambahan Kuning Telur 15%
Hasil  rataan  motilitas  spermatozoa berdasarkan tabel 2 menunjukan perlakuan P 0 =  76,20±2,17%  ,;  P 1 =  80,40±1,67%  ,;  P 2 = 83,20±2,77% ,; P 3 = 85,40±2,97% maka dari itu motilitas ayam Pelung terbaik memperlihatkan  pada  perlakuan  P 3 dengan jumlah  konsentrasi  3  miliar  spermatozoa dengan  rataan    85,40±2,97.  Pengaruh perlakuan  terhadap  motilitas  spermatozoa dapat  dilihat  pada  Tabel  2.    Tabel  2 menunjukkan bahwa perlakuan P 3 menunjukkan
persentase motilitas spermatozoa  yang  lebih  baik  dibanding dengan perlakuan P 0 , P 1 , dan P 2 . Berdasarkan hasil  pengamatan  rataan  keseluruhan  yang diperoleh  sebesar  81,30%,  maka  dapat dikatakan motilitas sudah baik.  Hal tersebut sesuai  dengan  hasil  penelitian  Nugroho  dan Saleh (2016) spermatozoa yang motilitasnya 80 - 100% mempunyai nilai yang sangat baik. Hal  tersebut  didukung  oleh  pernyataan Widjaya (2011) bahwa kuning telur dan susu skim  mengandung  lipoprotein  dan  lesitin yang bekerja mempertahankan dan melindungi  integritas  selubung  lipoprotein dari  sel  spermatozoa.    Kuning  telur mengandung  asam-asam  amino,  glukosa, karbohidrat, vitamin yang larut dalam air dan
lemak,  juga  mineral,  serta  mempunyai senyawa  anti  kejut  dingin  sehingga  dapat menutrisi spermatozoa dan berperan melindungi spermatozoa dari kejut dingin.
Hasil  analisis  variansi  (ANOVA) menunjukkan  hasil  bahwa  penambahan kuning  telur  0%,  5%,  10%,  dan  15%  dalam pengencer  susu  skim  berpengaruh  nyata terhadap motilitas spermatozoa yang ditandai dengan nilai  statistik (P<0,01).  Hal  tersebut diduga  karena  pengencer  susu  skim  dengan kuning telur mampu mempertahankan motilitas  spermatozoa,  sehingga  semakin tinggi level kuning telur yang diberikan maka motilitas  spermatozoa  akan  meningkat.    Hal tersebut didukung oleh pernyataan Widiastuti et  al  (2018)  bahwa  kuning  telur  berfungsi sebagai  media  penyedia  makanan,  sumber energi, krioproktektan, dan memberikan efek sebagai  penyangga.  Hasil  analisis  variansi kemudian  dilakukan  uji  lanjut orthogonal polynomial mendapatkan  hasil  linier  yang menunjukkan bahwa semakin banyak penambahan  kuning  telur  dalam  pengencer susu skim berpengaruh sangat nyata terhadap motilitas yang dihasilkan, kemudian dilanjutkan  dengan  analisis  variansi  linier diperoleh persamaan regresi linier y = 0.61x
Jurnal Ilmu dan Teknologi Peternakan Indonesia Volume 8 (2) 94 - 103; Desember 2022 p-ISSN: 2460-6669 e- ISSN: 2656-4645
+  76.74  koefisien  determinasi  (R 2 )  sebesar 70%  yang  artinya  setiap  penambahan  1%
kuning  telur  akan  meningkatkan  motilitas sebesar 0,6%.
Gambar 2.  Grafik pengaruh penambahan kuning telur terhadap motilitas
Berdasarkan  gambar  2  perlakuan  P 0
(susu skim + 0% kuning telur) menunjukkan hasil terendah dalam kemampuannya mempertahankan motilitas spermatozoa ayam Pelung.    Hal  ini  diduga  karena  spermatozoa tanpa adanya kuning telur tidak akan bertahan lama  dikarenakan  nutrisi  yang  dibutuhkan spermatozoa  tidak  tercukupi.    Hal  tersebut sejalan dengan pendapat Santoso et al (2020) dikarenakan  susu  skim  tanpa  adanya penambahan kuning telur saja belum mampu memberikan  nutrisi  yang  cukup  untuk kelangsungan  hidup  spermatozoa,  sehingga tanpa  adanya  kuning  telur  maka  kandungan lemak  dan  protein  dalam  pengencer  kurang mampu mengatasi perubahan pH, perubahan tekanan osmosis dan perubahan keseimbangan elektrolit.
Perlakuan  P 3 (susu  skim  +  15%  kuning telur)  menunjukan  hasil  yang  paling  baik dalam kemampuannya mempertahankan motilitas  spermatozoa  ayam  Pelung  yaitu menunjukan  rataan  sebesar  85,40±2,97. Penambahan  level  kuning  telur  15%  pada pengencer susu skim dapat mempertahankan motilitas spermatozoa paling baik karena zat yang  terkandung  dalam  kuning  telur  segar dapat  memberikan  nutrisi  yang  baik  bagi spermatozoa dalam pengencer sehingga dapat mempertahankan  motilitas.  Hal  tersebut
sesuai  dengan  pendapat  Widiastuti  et  al (2018)  menyatakan  bahwa  kuning  telur berfungsi  sebagai  media  penyedia  makanan, sumber energi, agen protektif serta memberikan efek sebagai penyangga terhadap  spermatozoa.  Hasil  penelitian tersebut  sesuai  dengan  pendapat  Getachew (2016)  umumnya  kualitas semen ayam  lokal mempunyai  volume  motilitas  sebesar  60% sampai  80%.    Daya  gerak  maju  ini  sangat diperlukan pada saat berada di dalam saluran kelamin  betina  untuk  mencapai  tempat terjadinya fertilisasi dan motilitas merupakan parameter  yang  harus  diperhatikan  dalam pelaksanaan perkawinan ternak karena sebagai penentu keberhasilan suatu pembuahan.

## Fertilitas Spermatozoa
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa produksi  telur  yang  dihasilkan  64,96% dengan  total  telur  228  butir,  dan  fertilitas sebesar 14,03%. Rataan keseluruhan persentase fertilitas 13, 97 ± 12,28% dengan kisaran antara 0,00% sampai dengan 20,22%. Rataan  terendah  sebesar  4,32±6,03  dan rataan tertinggi sebesar 31,83±20,22 Adapun Rataan  persentase  fertilitas  untuk  masing- masing perlakuan pada suhu ruang disajikan pada Tabel 3.
y = 0.61 x + 76.74 R² = 0.70 74 76 78 80 82 84 86 88 90 92 0 5 10 15 M ot ili tas (% )
Level Kuning Telur (%)

## Tabel 3. Rataan Fertilitas Spermatozoa Ayam Pelung
No. Perlakuan Fertilitas s 1. P 0 31,83±20,22 2. P 1 4,32±6,03 3. P 2 8,06±7,38 4. P 3 11,67±17,86
Keterangan : s = significant/ada signifikansi; P 0 = Pengencer Susu Skim, P 1 = Penambahan Kuning Telur 5%, P 2 = Penambahan Kuning Telur 10%, P 3 = Penambahan Kuning Telur 15%
Hasil  rataan  fertilitas  spermatozoa berdasarkan tabel 3 menunjukkan perlakuan P 0 = 31,83±20,22%,; P 1 = 4,32±6,03%,; P 2 = 8,06±7,38%,; P 3 = 11,67±17,86% maka dari itu  fertilitas  spermatozoa  ayam  Pelung terbaik  memperlihatkan  pada  perlakuan  P 0 dengan jumlah konsentrasi 3 miliar spermatozoa  dengan  rataan    31,83±20,22%. Pengaruh perlakuan terhadap fertilitas spermatozoa  dapat  dilihat  pada  Tabel  3. Hasil  penelitian  ini  menunjukkan  bahwa penambahan kuning telur pada perlakuan P 1 (5%  kuning  telur)  menghasilkan  rataan 4,32±6,03, P 2 (10% kuning telur) menghasilkan  rataan  8,06±7,38,  P 3 (15% kuning  telur)  menghasilkan  rataan  sebesar 11,67±17,86. Hasil penelitian ini menunjukkan  bahwa semakin tinggi  kontrol level  kuning  telur  yang  ditambahkan  ke dalam  pengencer  susu  skim  mulai  dari  P 1 (5%)  sampai pada perlakuan P 3 (15%) dalam hal  tersebut  maka  P 3 (15%)  menunjukkan hasil  yang  lebih  baik  dibanding  dengan kontrol  P 1 (5%)  dan  P 2 (10%),  namun  tidak lebih  baik  dari  P 0 (0%  kuning  telur)  tanpa penambahan  kuning  telur,  jadi  semakin tinggi  level  kuning  telur  yang  ditambahkan ke  dalam  pengencer  susu  skim  akan meningkatkan  fertilitas,  namun  lebih  baik jika tidak ditambahkan kuning telur ke dalam pengencer  susu  skim.    Hal  tersebut  diduga karena spermatozoa pada perlakuan P 1 (5%) akan mengalami kekurangan nutrisi dibandingkan P 3 (15%) dikarenakan spermatozoa  akan  mengalami  kekurangan
energi  akibat  pergerakan  spermatozoa  yang lebih  aktif  untuk  melewati  butiran-butiran lemak yang terdapat pada kuning telur.  Hal tersebut  sesuai  dengan  penelitian  Mariani dan  Kartika  (2018)  yang  melakukan  IB menggunakan  semen  segar  tanpa  kuning telur  lebih  tinggi  dibanding  semen  yang menggunakan pengencer yaitu P 0 menghasilkan  rataan  fertilitas  sebesar  76% dan  mengalami  penurunan  pada  P 1 sebesar 34%  dan  mengalami  peningkatan  pada  P 2 sebesar  42%.  Hal  tersebut  didukung  oleh pernyataan  Permatasari  et  al  (2013)  bahwa kuning  telur  mengandung  lemak  sehingga menghalangi  pergerakan  spermatozoa  dan membuat  spermatozoa  lebih  aktif  untuk melewati butiran-butiran lemak kuning telur sehingga  cepat  mengalami  peningkatan konsumsi energi akibat berkurangnya sumber makanan bagi spermatozoa.
Jumlah  dosis  spermatozoa  ayam Pelung  yang  diberikan  pada  saat  inseminasi buatan pada betina ayam niaga petelur yaitu sebanyak  100  x  10 6 per  0,1  ml.    Perlakuan level  kuning  telur  yang  berbeda  yaitu  0%, 5%,  10%,  dan  15%  di  inseminasikan  pada waktu  sore  hari  mampu  menghasilkan  hasil terbaik  untuk  meningkatkan  nilai  fertilitas tertinggi  yaitu  sebesar  31,83±20,22  (P 0 ). Hasil  penelitian  ini  tidak  cukup  baik.    Hal tersebut berbeda dengan penelitian Saleh et al (2019)  yang  mana  hasil  rataan  fertilitas tertinggi  sebesar  90,01±4.34  menggunakan spermatozoa  ayam  sentul  dengan  dosis spermatozoa 100 x 10 6 .
Jurnal Ilmu dan Teknologi Peternakan Indonesia Volume 8 (2) 94 - 103; Desember 2022 p-ISSN: 2460-6669 e- ISSN: 2656-4645
Analisis variansi (ANOVA)
menunjukkan  hasil  bahwa  penambahan kuning  telur  telur  0%,  5%,  10%,  dan  15% dalam pengencer susu skim dalam berpengaruh  sangat  nyata  terhadap  fertilitas spermatozoa  yang  ditandai  dengan  nilai statistik (P<0,01). Hal tersebut diduga karena penambahan level kuning telur 0-15% dalam pengencer susu skim mempunyai kandungan lipoprotein,  lesitin,  dan  sumber  energi  yang berbeda  sehingga  menghasilkan  fertilitas yang  berbeda.  Hasil  analisis  variansi kemudian  dilakukan  uji  lanjut orthogonal polynomial mendapatkan  hasil  kuadrater
yang  menunjukkan  bahwa  semakin  sedikit penambahan  kuning  telur  dalam  pengencer susu  skim  berpengaruh  nyata  terhadap fertilitas yang dihasilkan, kemudian dilanjutkan  dengan  analisis  variansi  linier diperoleh  persamaan  regresi  linier  y  = 0,03x 2 -  0,64x  +6.10  koefisien  determinasi (R 2 )  sebesar  0,62%  yang  artinya  setiap penambahan 1% kuning telur akan menurunkan  fertilitas  dan  mencapai  titik terendah P 1 (5%) sebesar 0,92% dan tertinggi P 0 (0%)  sebesar  5,83%.    Perubahan  pada fertilitas ditentukan oleh perubahan penambahan kuning telur seperti Gambar 3. Gambar 3.  Grafik pengaruh penambahan kuning telur terhadap fertilitas
Berdasarkan  hipotesis  motilitas  dan
fertilitas merupakan parameter yang
berbanding lurus.
Penelitian
ini menunjukkan  bahwa  tidak  semua  motilitas yang tinggi akan menghasilkan nilai fertilitas yang  tinggi  juga.    Hal  tersebut  dikarenakan kuning  telur  mengandung  banyak  jenis protein  yang  merupakan  media  yang  baik bagi  pertumbuhan  mikroorganisme  yang akan  menghambat  kelangsungan  hidup  sel spermatozoa  yang  nantinya  akan  digunakan untuk membuahi sel telur.  Hal tersebut dapat dijadikan  arahan  bagi  peternak  bila  ingin melakukan inseminasi buatan dengan menggunakan  pengencer,  maka  pengencer susu skim dengan kuning telur kurang efektif diterapkan  karena  pengencer  susu  skim dengan kuning telur akan menghasilkan nilai
fertilitas  yang  rendah  dibanding  dengan pengencer  susu  skim  tanpa  penambahan kuning telur.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  data  hasil  penelitian pengaruh level  kuning  telur pada pengencer susu  skim  terhadap  motilitas  dan  fertilitas spermatozoa ayam Pelung diperoleh kesimpulan bahwa penambahan kuning telur dalam pengencer susu skim dapat mempertahankan  motilitas  dan  penambahan kuning  telur  dalam  pengencer  susu  skim dapat menurunkan fertilitas.

## SARAN
Sebaiknya lebih memperhatikan prosedur  pembuatan  pengencer  dan  jarak
y = 0.03 x 2 - 0.64 x + 6.1 R² = 0.62 0 1 2 3 4 5 6 7 8 0 5 10 15 Fer til itas (% )
Level Kuning Telur (%)
waktu  penampungan  sampai  inseminasi buatan tidak terlalu lama

## DAFTAR PUSTAKA
Adhyatma,  M.,  N.  Isnaini.,  dan  Nuryadi. 2013.  Pengaruh Bobot Badan Terhadap Kualitas  dan  Kuantitas  Semen  Sapi Simental. Jurnal  Ternak  Tropika .
14(2):53-62.
Danang I. N.  2012.  Pengaruh Lama Simpan
Spermatozoa Terhadap Kualitas
Spermatozoa  Ayam  Pelung  dalam Pengencer  Ringer’s  Pada  Suhu  4  ºC.
Jurnal Ternak Tropika. 13: 47-57.
Fitriani, A., S.  Alim., dan L. Herlina.  2019.
Strategi Pengembangan Usaha Pemeliharaan Ayam Pelung Di
Kabupaten Cianjur.  JPI. 21(1): 34-50.
Garner,  D.  L.,  and  E.S.E.  Hafez.  2008.
Spermatozoa  and  Seminal  Plasma. Reproduction  in  Farm  Animal.  7th  eds 7:96-109.
Getachew,  T.    2016.    A  Review  Article  Of Artificial  Insemination  In  Poultry. Veterinary  Journal  World  Vet  Journal. 26-35.
Hafez, E.  S.  E. 2000. Semen Evaluation in Reproduction In Farm Animals 7 th Ed. Lippincott
Williams Wilkins.Philadelphia.
Hoesni,  F.      2016.    Efek  Penggunaan  Susu Skim  Dengan  Pengencer  Tris  Kuning Telur  Terhadap  Daya  Tahan  Hidup Spermatozoa  Sapi. Jurnal  Ilmiah Universitas  Batanghari  Jambi. 16(3): 46-56.
Mariani,  Y  dan  Ni  Made  Andri  Kartika. 2018.  Pengaruh  Jenis  Pengencer  dan Konsentrasi Spermatozoa Ayam Pelung Terhadap  Periode  Fertil  Telur  Ayam Arab. Journal Unmas Mataram. 12(1): 81-85.
Nugroho,  A.  P.,  dan  D.  M.  Saleh.    2016.
Motilitas dan Abnormalitas Spermatozoa  Ayam  Kampung  dengan Pengencer  Ringer  Laktat-Putih  Telur dan Lama Simpan pada Suhu 5 0 C selama
48  Jam. Acta  Veterinaria  Indonesiana . 4(1): 35-41.
Permatasari  W.D.,Samsudewa.,    dan  E.  T.
Setiatin.    2013.    Studi  Tentang Pengencer Kuning Telur dan Pengaruhnya  Terhadap  Kualitas  Semen
Beku  Sapi  Jawa  Brebes. Animal Agriculture Journal. 2(1): 143 – 151.
Saleh,  M.D  dan  S.  Mugiyono.    2017. Kualitas  Spermatozoa  Ayam  Sentul. Prosiding  Seminar  Teknologi  dan Agribisnis  Peternakan .  20  Mei  2018,
Purwokerto.  Hal. 109-114.
Santoso, I. B., D. M Saleh., dan S. Mugiyono.
2020.    Pengaruh  Level  Kuning  Telur Pada  Pengencer  Susu  Skim  dan  Lama Waktu Penyimpanan Terhadap Motilitas dan  Abnormalitas  Spermatozoa  Ayam Pelung. Angon. 2(1): 9. Susilawati T. 2012. Spermatology. Universitas Brawijaya Press, Malang.
Tethool, A. N., M. Isnaeni., dan Faidiban O. R.    2019.    Konsentrasi  dan  Motilitas Spermatozoa  Ayam  Kampung  ( Gallus domesticus )  dalam  Pengencer  Ringer Laktat  yang  Diberi  Tambahan  Minyak Buah  Merah  ( Pandanus  conoideus Lam). Jurnal  Ilmu  Peternakan  dan Veteriner Tropis . 9(2):44-49.
Tolihere, M. R. 1993 .  Fisiologi Reproduksi pada Ternak .Angkasa.  Bandung.
Widiastuti W.  A, W Bebas, dan I. G. N. B.
Trilaksana.  2018.  Penggunaan Berbagai Kuning Telur Sebagai Bahan Pengencer Terhadap  Motilitas  dan  Daya  Hidup Spermatozoa  Ayam  Pelung. Indonesia Medicus Veterinus. 7(3): 252-261.
Widjaya,  N.  2011.    Pengaruh  Pemberian Susu  Skim  dengan  Pengencer  Tris Kuning  Telur  terhadap  Daya  Tahan Hidup  Spermatozoa  Sapi  pada  Suhu Penyimpanan  5ºC. Sains  Peternakan. 9(2): 72.