## Efektivitas ektrak etanol daun bandotan (Ageratum conyzoides) terhadap
salmonella enterica serovar typhimurium
secara in vitro
Masda Admi 1 , A nggun Bellia Putri 2, , Teuku Zahrial Helmi 3 , Daniel 2* , Lailia Dwi Kusuma Wardhani 2
1 Laboratorium Mikrobiologi, Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Syiah Kuala, Darussalam Banda Aceh
2 Program Studi Pendidikan Dokter Hewan, Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Syiah  Kuala, Darussalam Banda Aceh
3 Laboratorium Biokimia, Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Syiah Kuala, Banda Aceh *email : daniel@usk.ac.id
Received : 19 April 2024 Accepted : 24 May 2024 Published : 28 May 2024

## Abstract
Bandotan leaves (Ageratum conyzoides) are one of the traditional medicinal plants used by the community to treat various diseases.Several studies report the potential of bandotan leaves as an antibacterial  because  they  contain  the  chemical  compounds  such  as  trepanoids,  flavonoids, alkaloids, essential oils, and tannins. This study aims to determine the effectiveness of bandotan leaves on the growth of Salmonella enterica serovar typhimurium bacteria in vitro. This research used  the  Kirby  Bauer  disk  diffusion  method  with  the  antibiotic  chloramphenicol  as  a  positive control,  CMC  1%  as  a  negative  control,  and  an  ethanol  extract  of  bandotan  leaves  with concentrations of 25%, 50%, and 75%. Re-identification of bacteria was carried out using Gram staining, and effectiveness testing was carried out on Mueller Hinton Agar (MHA) media. The results  of  the  study  on  Gram  staining  showed  uniform  morphological  characteristics  of Salmonella enterica serovar Typhimurium bacteria and the diameter of the inhibition zone formed at  concentrations of bandotan leaf  ethanol extract  of 25% (8.02  mm  ± 0.41),  50%  (8.37mm ± 0.69) and 75% (8.78mm ± 0.78). It can be concluded that the ethanol extract of bandotan leaves at concentrations of 25%, 50%, and 75% has a weak category of inhibitory activity against the growth of Salmonella enterica serovar Typhimurium bacteria in vitro.
Keywords:  bandotan  leaves,  in  vitro,  chloramphenicol,  Salmonella  enterica  serovar Typhimurium, inhibition zone

## PENDAHULUAN
Bakteri Salmonella sp. merupakan enterobakteriaceae  yang  bersifat  anaerobik fakultatif  dengan  habitat  alami  pada  mamalia, burung  dan  reptil  (Chauhan  &  Jindal,  2020). Bakteri Salmonella sp. terdiri  dari  dua  spesies yaitu S.  bongori dan S.  enteric. Bakteri S. enterica memiliki tiga serotipe yaitu S. typhi , S. typhimurium ,  dan S.  enteritidis .  Diantara serotipe  tersebut, Salmonella  enterica  serovar typhimurium merupakan patogen penting yang ditularkan  melalui  makanan  diseluruh  dunia. Berdasarkan  data  dari  WHO  tahun  2018,
Salmonella  sp. merupakan  penyebab  tertinggi kasus  keracunan  makanan  di  seluruh  dunia terutama di  Afrika,  Asia  Tenggara,  dan  Eropa Timur  dan  infeksinya  menyababkan  masalah kesehatan yang sangat signifikan. diperkirakan terjadi  sebanyak  93,8  juta  diseluruh  dunia dengan  tingkat  kematian  diperkirakan  terjadi pada  155.000  kasus  (Dood, et  al .  2017)).  Di Indonesia insidensi penyakit akibat Salmonella sp tidak  diketahui  secara  pasti,  diperkirakan terdapat 900.000 kasus dan 20.000 kematian di seluruh  Nusantara  per  tahun  (Ilham,  dkk., 2017).
Infeksi Salmonella  Typhimurium pada saluran pencernaan dapat menyebabkan
kerusakan  yang  mengganggu  integritas  epitel usus  dan  menyebabkan  enterokolitis  serta peradangan, selain itu infeksi Salmonella dapat menghambat  penyerapan  ascorbic  acid  (AA) pada  jejunum  tikus  dan  sel  Caco-2  yang terpajan IL-1β (Teafatiller et al ., 2023). Infeksi Salmonella sp .  juga  dapat  menyebabkan pneumonia  pada  anak  sapi,  enterocolitis, septikemia serta abortus pada kuda (Holschbach & Peek, 2018; Stazi et al ., 2022).
Penanganan  penyakit  yang  disebabkan oleh Salmonella sp.  selama  ini  menggunakan antibiotik broad  spektrum seperti  amoksilin, amoksisilin  asam-klavulanat,  enrofloksasin, trimetoprim sulfametoksazol, sefalotin, ampisilin,  asam  nalidiksat,  tetrasiklin  dan gentamisin  (Loisa et  al .,  2016).  Penggunaan antibiotik  harus  menjadi  perhatian  karena memiliki  ancaman  terjadinya  resistensi  yang sangat  merugikan.  Hafizhah et  al .  (2021) melaporkan  bahwa Salmonella sp.  sudah resisten  terhadap  antibiotik  asam  nalidiksat, tetrasiklin,  amoksilin  dan  eritromisin.  Salah satu upaya pencegahan resistensi adalah dengan dengan  penggunaan  tanaman  obat  sebagai alternatif.
Daun  bandotan  ( Ageratum  conyzoides) yang dipercaya oleh masyarakat secara empiris sebagai  obat  antigatal,  flu,  demam,  diare, radang  usus,  rematik  dan  kesembuhan  luka (Sugara et  al .,  2016),  juga  sudah  dilaporkan sebagai antibakteri oleh beberapa peneliti  yaitu dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri bakteri E. coli (Safrida dan Rahma, 2021), dan bakteri Pseudomonas aeruginosa ( Admi et al ., 2022).  Hal  ini  dikarenakan  tanaman  bandotan mengandung senyawa kimia trepanoid, flavonoid,  alkaloid,  minyak  atsiri,  dan  tannin (Munira et  al .,  2020).  Oleh  karena  itu  perlu dilakukan penelitian untuk mengetahui efektivitas daun bandotan
terhadap
pertumbuhan  bakteri Salmonella  enterica serovar typhimurium secara invitro.

## MATERI DAN METODE

## Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian  ini  pada  bulan    November- Desember 2022 di Laboratorium Mikrobiologi dan Laboratorium Farmakologi Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Syiah Kuala.
Bahan Penelitian
Penelitian ini menggunakan media Nutrien Agar (NA), Nutrien  Broth (NB), Mueller Hinton Agar (MHA), satu set bahan pewarnaan Gram,  etanol  96%,  CMC  1%  dan blank  disk , disk antibiotik  kloramfenikol  serta  ekstrak etanol daun bandotan, isolat bakteri Salmonella ATCC  14028  ( Salmonella  enterica  serovar Typhimurium ) yang diperoleh secara komersial.

## Metode Penelitian
Penelitian ini menggunakan metode Kirby Bauer disk diffusion untuk melihat daya hambat ekstrak  etanol  daun  bandotan  terhadap pertumbuhan  bakteri Salmonella  enterica serovar  Typhimurium secara  in  vitro,  dengan mengacu  pada  penelitian  Admi et  al .  (2021) yang dimodifikasi.

## Prosedur Penelitian Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Bandotan
(Ageratum conyzoides)
Pembuatan ekstrak dilakukan dengan cara menimbang ± 5 kg daun bandotan segar tumbuh secara  sempurna  dan  terbuka  lebar,  daun tersebut  kemudian  dibersihkan  dan  dikering anginkan  serta  dihaluskan  menggunakan blender untuk mendapatkan simplisia. Simplisia  tersebut  ditimbang  sebanyak  500  gr dan  dilarutkan  dengan  5  liter  etanol  96% sehingga  memperoleh  perbandingan  1:10. Kemudian  dimaserasi  selama  3x24  jam  di dalam  botol  kaca  yang  tertutup.  Filtrat  yang didapat diuapkan dengan menggunakan vacuum rotary evaporator untuk menghilangkan  kandungan  pelarut  etanol didalam  ekstrak  sehingga  diperoleh  ekstrak daun bandotan.

## Reidentifikasi Bakteri
Stok  isolat  bakteri Salmonella ATCC 14028  yang  tersimpan  dalam Nutrien  Agar (NA)  miring  diremajakan  dengan  menanam kembali bakteri tersebut kedalam Nutrien Broth (NB) dan diinkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam.  Selanjutnya  bakteri  dari  NB  dilakukan reidentifikasi  sederhana  dengan  pewarnaan Gram.  Reidentifikasi  pada  studi  ini  hanya melalui reidentifikasi sederhana.

## Uji  Daya  Hambat  Bakteri  Menggunakan Metode Difusi Cakram
Isolat  bakteri Salmonella ATCC  14028 dari  media  NB  yang  kekeruhannya  telah
disesuaikan  dengan  standar McFarland 0,5 (1,5x10 8 CFU/mL)  diswab  pada  permukaan media Mueller  Hinton  Agar (MHA)  secara merata  dan  didiamkan  selama  15  menit.  Disk yang telah direndam selama 15 menit kedalam ekstrak etanol daun bandotan dengan konsentrasi 25% (P1), 50% (P2) dan 75% (P3) sebagai  sampel  perlakuan , kontrol  positif digunakan  disk  antibiotik  kloramfenikol  (K+) dan  kontrol  negatif  digunakan  CMC  1%  (K-) ditempelkan  pada  media  tersebut.  Perlakuan yang  sama  diulang  masing-masing  3  kali, Inkubasi  dilakukan  selama  24  jam  dalam inkubator dengan suhu 37 0 C.
Pengamatan  daya  hambat  di  sekitar  disk dilakukan dengan mengukur zona bening yang terbentuk menggunakan jangka sorong dengan satuan milimeter.

## Analisis Data
Data  hasil  penelitian  disajikan  dalam bentuk gambar dan tabel dengan mengacu pada standar  zona  hambat  Clinical  Laboratory Standard  Institute  (CLSI).  Analisis  data menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap (RAL).

## HASIL
Hasil  reidentifikasi  bakteri  ATCC  14028
( Salmonella  enterica  serovar  Typhimurium ) dilakukan sebagai upaya memastikan
kemurnian isolat bakteri sampel sepert terlihat pada Gambar 1.
Gambar  1 .  Hasil  reidentifikasi  bakteri Salmonella enterica serovar Typhimurium .
Diameter zona hambat ekstrak etanol daun bandotan konsentrasi terhadap bakteri
Salmonella enterica serovar Typhimurium pada gambar 2.
Gambar  2 .  Diameter  zona  hambat pertumbuhan  bakteri Salmonella enterica serovar  Typhimurium yang  terbentuk:  P1) 25%,  P2)  50%,  P3)  75%  dan  K(+)
Kloramfenikol dan K(-) KCMC 1%,
Hasil  pengukuran  daya  hambat  ekstrak etanol  daun  bandotan  terhadap  pertumbuhan bakteri Salmonella enterica serovar Typhimurium terlihat pada tabel 1.
Tabel 1. Hasil pengukuran daya hambat ekstrak etanol  daun  bandotan  terhadap  pertumbuhan bakteri Salmonella enterica serovar Typhimurium Kelompok Perlakuan Diameter (Mean ± SD) Interpretasi K- 0 ± 0 a - K+ 29.28 ± 0.79 b Kuat ((≥ 18 mm) P1 8.02 ± 0.41 ac Lemah (≤ 12 mm) P2 8.37 ± 0.69 ac Lemah (≤ 12 mm) P3 8.78 ± 0.78 ac Lemah (≤ 12 mm) Perbedaan superskrip a,b pada kolom yang sama menunjukkan perbedaan yang signifikan (p<0.05).
Hasil  pengukuran  daya  hambat  esktrak  etanol daun  bandotan  terhadap  pertumbuhan  bakteri Salmonella enterica serovar Typhimurium pada perlakuan  berbeda  nyata  dengan  kelompok kontrol  positif.  Namun  pada  masing  – masing kelompok perlakuan memiliki hasil yang tidak berebda nyata.
K+ K - P1 P2 P3

## PEMBAHASAN
Hasil penelitian dan analisis data menunjukkan bahwa zona hambat pertumbuhan bakteri Salmonella enterica serovar Typhimurium secara in  vitro pada  berbagai perlakuan  menunjukkan  hasil  yang  berbeda- beda.  Hasil  pengukuran  dari  (K+)/pemberian kloramfenicol  berbeda  nyata  dibandingkan dengan  kelompok  perlakuan  dan  kontrol negative  (K-).  Zona  hambat  yang  terbentuk pada  (K+)  yaitu  yaitu  29.28  ±  0,79  mm tergolong  katagori  kuat  berdasarkan  standar CLSI  (2020)  (zona  hambat  diatas  18  mm). Antibiotik kloramfenikol merupakan antibiotik golongan aminoglikosida yang bekerja dengan cara menghambat terbentuknya sintesis protein sehingga mampu menghambat bakteri berkembang biak, selain itu Kloramfenikol juga mampu  menghambat  replikasi  bakteri,  namun pada dosis tinggi dapat membunuh bakteri atau bersifat  bakterisid  (Indang et  al .,  2013). Golongan aminoglikosida bekerja baik apabila digunakan sebagai obat untuk penyakit infeksi yang  disebabkan  oleh Salmonella  enterica serovar Typhimurium.
Hasil  pengukuran  zona  hambat  ekstrak etanol  daun  bandotan  dalam  penelitian  ini menunjukkan  rata-rata  diameter  8,02  ±  0,41 konsentrasi  25%  (P1),  dan  8,37 ±  0,69 konsentrasi  50%  (P2),  serta  8,78  ±  0,78  pada konsentrasi  75%  (P3).  Perbedaan  ukuran diameter zona hambat yang terbentuk pada disk perlakuan  konsentrasi  25%;  50%  dan  75%, diduga  pengaruh  dari  kandungan  senyawa kimia  yang  terkandung  didalam  konsentrasi ekstrak,  semakin  tinggi  konsentrasi  semakin banyak  zat  fitokimia  yang  terserap  ke  dalam disk. Sesuai dengan pernyataan Mengkido et al . (2019) bahwa semakin besar bahan aktif yang terkandung  didalam  ekstrak  yang  digunakan, maka semakin besar pula diameter zona hambat yang  terbentuk  di  sekitar  disk  tersebut (Sampurna  dkk.,  2023).  Hasil  skrining fitokimia  oleh  Almira et  al .  (2021),  daun bandotan    mengandung  senyawa  metabolit sekunder  yang  memiliki  aktivitas  antibakteri seperti  alkaloid,  flavonoid,  tanin,  saponin, fenolik,  steroid,  triterpenoid  dan  glikosida. Selain itu, Safani et al. (2019) juga melaporkan bahwa  senyawa  utama  yang  terkandung  pada daun  bandotan  yaitu  alkaloid  dan  flavonoid mampu  menghambat  pertumbuhan  bakteri.
Mekanisme penghambatan pertumbuhan
bakteri  oleh  senyawa  yang  terkandung  dalam tanaman  obat  melalui  perusakan  dinding  sel bakteri  pada  saat  pembentukan  atau  setelah pembentukan dinding sel, mengubah permeabilitas  membran  sitoplasma  sehingga menyebabkan keluarnya komponen sel. Selain itu,  penghambatan  juga  dapat  terjadi  melalui proses  perubahan  molekul  protein  dan  asam nukleat  serta  menghambat  kerja  enzim  dan sintesis  asam  nukleat  dan protein.  Mesy et  al .
(2023)  menyatakan  bahwa  alkaloid  memiliki mekanisme  kerja  yaitu  merusak  penyusun dinding  peptidoglikan  sehingga  menyebabkan dinding bakteri menjadi lisis, selain itu alkaloid juga mengandung      komponen      kimia  berupa Antrakuinon  glikosida  dan  resin  yang mampu menembus    dinding    sel    dan    bersifat menghambat  replikasi   DNA pada   inti   sel, sehingga    merusak    sel    bakteri.  Senyawa fenolik  bekerja  dengan  mengganggu  transport aktif  sel  dengan  cara  merusak  dinding  dan membran, mengganggu metabolisme sel dengan mendenaturasi protein bakteri (Mengkido et  al .,  2019).  Saponin  dapat melisiskan dinding sel bakteri (Munfaati et al .,
2015).  Tanin  bekerja  dengan  cara  mengikat radikal  bebas  dan  melarutkan  lemak  pada  sel dan  jaringan  serta  menyebabkan  denaturasi protein  dan  DNA    pada    inti    sel    bakteri sehingga  sel  bakteri menjadi lisis (Venila M., et al., 2020 ). Senyawa flavonoid mengganggu metabolisme  bakteri  dengan  menghambat penggunaan  oksigen  oleh    bakteri  serta menghalangi  pembentukan  DNA  dan  RNA (Nomer et  al .,  2019).  Triterpenoid  bekerja dengan  mengurangi  permeabilitas  dinding  sel bakteri (Wulansari et al , 2020).
Aktivitas senyawa fitokimia yang terkandung di dalam ekstrak daun bandotan ini menyebabkan  terbentuknya  zona  hambat.  Hal ini  dibuktikan  dengan  penggunaan  pengencer CMC  1%  dalam  perlakuan  yang  tidak menunjukkan  pembentukan  zona  hambat disekitar  disk.  Pemilihan  CMC  1%  sebagai kontrol  negatif  yang  sekaligus  sebagai  pelarut untuk  mengencerkan  ekstrak  etanol  daun bandotan  diperkuat  oleh  Utomo et  al .  (2018) bahwa kontrol negatif yang digunakan berasal dari  zat  pengencer  untuk  senyawa  yang  akan diuji sehingga dapat dilihat zat yang digunakan sebagai pengencer tidak berpengaruh terhadap aktivitas  antibakteri  senyawa    yang  akan diujikan.
Diameter  zona  hambat  yang  terbentuk pada  ekstrak  etanol  daun  bandotan  dengan konsentrasi  25%,  50%  dan  75%  digolongkan dalam kategori lemah berdasarkan kriteria daya hambat  dalam  CLSI  (2020),  diantaranya penentuan kriteria aktivitas zona hambat berupa ≤12 mm aktivitas daya hambat lemah terhadap Salmonella  enterica  serovar  Typhimurium . Bakteri Salmonella enterica serovar Typhimurium merupakan bakteri Gram negatif yang memiliki penyusun dinding sel kompleks. Menurut  Hamidah et  al .  (2019)  dinding  sel bakteri  Gram  negatif  tersusun  oleh  lapisan lipopolisakarida. Bakteri Gram negatif mempunyai  lapisan  peptidoglikan  yang  tipis, namun  pada  bagian  luarnya  disusun  oleh  tiga lapisan yaitu lipoprotein, fosfolipid dan polimer yang  khas  untuk  dinding  sel  bakteri  Gram negatif, sehingga lebih susah ditembus oleh zat antibakteri.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  dapat disimpulkan  bahwa  ekstrak  etanol  daun bandotan  ( Ageratum  conyzoides )  berpotensi sebagai  anti bakteri  alami  karena  mempunyai kemampuan  dalam      hambatan  pertumbuhan bakteri.  Konsentrasi  25%,  50%,  dan  75% memiliki aktivitas daya hambat dengan katgori lemah terhadap pertumbuhan bakteri Salmonella  enterica  serovar  Typhimurium secara in vitro

## REFERENSI
Admi  M,  Sitorus,  A.  A,  Rinidar,  R.,  Sutriana,
A., Rosmaidar, R., Sugito, S. 2021. The Sensitivity  Level  Of  Gentamicine, Chloramphenicol and Penicillin Inhibiting The Growth Of Pseudomonas  Aeruginosa  Bacteria Isolated From Aceh Bull Prepuce. Jurnal  Medika  Veterinaria 15(1), 1-6. Admi,  M,  Sari,  Y,  Isa  M,  Rasmaidar,
Amiruddin,  Helmi  T.Z,  Akmal,  Y., 2022.  Sensitivity  test  of  bandotan  leaf extract  ( Ageratum  conyzoides )  against
Pseudomonas aeruginosa bacteria. Int. J. Trop. Vet. Biomed. Res, 7(1), 29-35. Chauhan,  A,  Jindal,  T.  2020.  Microbiological
Methods  for  Environment,  Food  and Pharmaceutical  Analysis.  Springer,
Switzerland.
Clinical  Laboratory  Standard  Institute.  2020. Performance Standard for
Antimicrobial  Susceptibility  Testing. 30 th ed  CLSI  SupPlement  M100. Wayne,  PA:  Clinical  and  Laboratory Standards Institute. 39-49, 201.
Dodd,  C.,  Aldsworth,T.,  Stein,  R.  et  al.  2017. Foodborne  Disease.  Third  Edition. Academic Press. London. 3, 14-17. Hafizhah,  R,  Muthmainah,    N,  Biworo,  A. 2021.  Literatur  review:  pola  kepekaan Salmonella  typhi terhadap  antibiotik pada pasien dewasa. Jurnal Homeostasis 4(3), 773-784.
Hamidah,  M.  N,  Rianingsih,  L,  Romadhon. 2019.  Aktivitas  antibakteri  isolate bakteri  asam  laktat  dari  peda  dengan jenis ikan berbeda terhadap E. coli dan
S. aureus . Jurnal Ilmu dan Teknologi Peternakan 1(2), 11-21. Holschbach, C.L., Peek, S.F. 2018. Salmonella in dairy cattle. Veterinary
Clinics :  Food  Animal  Practice  34(1),
133-154.
Ilham  ,  Nugraha,  J.,  Purwanta,  M.,  2017. Deteksi IgM Anti Salmonella Enterica Serovar  Typhi  Dengan  Pemeriksaan Tubex  Tf  D  an  Typhidot-M.  Jurnal Biosains Pascasarjana Vol. 19 (2), 127 -145.
Indang,  N.,  Guli,  M.N.,  Alwi,  M.  2013.  Uji resistensi  dan  sensitivitas  bakteri Salmonella  thypi pada  orang  yang sudah  pernah  menderita  demam  tifoid terhadap antibiotik. Jurnal Biocelebes 7(1), 27-34.
Loisa, Lukman, D.W., Latif H. 2016. Resistensi Salmonella  spp .  terhadap  beberapa antibiotik pada daging itik di Kabupaten Bogor yang dapat mempengaruhi  kesehatan  konsumen. Jurnal  Kedokteran  Hewan  10(2),  115- 120.
Mengkido, M, Lambui O., Harso W., 2019. Uji daya  hambat  ekstrak  daun  bandotan ( Ageratum  conyzoides L.)  terhadap pertumbuhan  bakteri Staphylococcus aureus . Biocelebes 13(2), 121-130.
Mesy M., Linda, A., Violita, Moralita C. 2023. Karakteristik  dan  Fungsi  Senyawa Alkaloid sebagai antifungi pada tumbuhan. Serambi Biologi.ppj.unp.ac.id. 8 (2), 231-236
Munfaati,  P.N.,  Ratnasari  E.,  Trimulyono  G,.
2015.  Aktivitas  senyawa  antibakteri ekstrak  herba  meniran  ( Phyllanthus niruri ) terhadap pertumbuhan bakteri Shigella dysenteriae
secara
in vitro . Lentera bio 4(1), 64-67.
Munira,  Rodisa  F,  Nasir,  M.  2020.  Uji antibakteri  kombinasi  ekstrak  daun biduri ( Calotropis gigantea l.) dan daun bandotan  ( Ageratum  conyzoides L. ).
Jurnal Gizi dan Kesehatan , 1(2), 165- 171.
Nomer  N.M.G.R.,  Duniaji,  A.S.,  Nocianitri, K.A.,  2019.  Kandungan  senyawa flavonoid
dan antosianin ekstrak
kayu  secang  ( Caesalpinia  sappan L.) serta  aktivitas  antibakteri  terhadap Vibrio  cholerae . Jurnal  Ilmu  dan Teknologi Pangan 8(2): 16-22. Safani,  E.E.,  Kunharjito,  W.A.C.,  Lestari,  A, Purnama  E.R.,  2019.  Potensi  ekstrak daun  bandotan  ( Ageratum  conyzoides L.) sebagai spray untuk pemulihan luka mencit diabetik yang terinfeksi Staphylococcus aureus . Biotropic: The
Journal  Of  Tropical  Biology 3 (1),  68- 78.
Safrida,  Y.  D.,  Rahmah,  R.  2021.  Uji  daya hambat  ekstrak  etanol  daun  bandotan ( Ageratum  conyzoides L.)  terhadap pertumbuhan  bakteri Escherichia  coli. Jurnal Sains dan Kesehatan Darussalam, 1(1), 17-23. Sampurna,  A.B.,  Widhowati,  Hidayah,  N. 2023. Daun Binahong Sebagai bakteriostatik.  Jurnal  Vitek  Bidang Kedokteran  Hewan  Vol.13  No.2  PP  : 109 -113
Stazi, M, Pellegrini, M, Rampacci, E, Sforna M, Passamonti, F, Dipaolo, A., Severi, G. 2022. A new montanid seppic
IMS1313-adjuvanted autogenous vaccine  as a useful emergency tool to resolve  a Salmonella  enterica subsp.,
enterica  serovar  abortus  equi  abortion outbreak  in  mares. Open  Veterinary Journal 12(2): 303-307.
Sugara,  T.H.,  Irawadi,  T.T.,  Suprapto,  I.H., Hanafi,  M.,  2016.  Uji  aktivitas antibakteri  fraksi  etil  asetat  daun tanaman bandotan ( Ageratum conyzoides L). Jurnal Ilmiah Ibnu Sina 1(1): 88-96.
Teafatiller, T., Subramanya, S. B., Lambrecht, N, and Veedamali S. 2023. Salmonella Typhimurium  Infection  Reduces  the Ascorbic Acid Uptake in the Intestine. Hindawi  Mediators  of  Inflammation. PP : 1-9
Utomo,  S.B.,  Fujiyanti,  M,  Lestari,  W.  P,
Mulyani,  S.,  2018.  Uji  aktivitas antibakteri senyawa c-4 metoksifenilkaliks[4]resorsinarena termodifikasi hexadecyltrimethylammonium- bromide terhadap bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia  coli .  Jurnal  Kimia  dan Pendidikan Kimia 3(3), 201-209. Venila,   M.,   Fatimawali,   Gerald ,  R.,   2020.
Analisis      Senyawa      Tanin      dan Aktifitas Antibakteri Fraksi  BuahSirih ( Piper betle L.) terhadap Streptococcus    mutans.    Jurnal MIPA. Vol 9 (2) 75- 80.https://ejournal.unsrat.ac.id/index.p hp/jmuo/index WHO, 2018. Salmonella. http://www.who.int/foodsafety/areas_ work/  foodborne-diseases.  Diunduh tanggal 12-01-2018 4.
Wulansari, E. D., Lestari, D, Khoirunnisa M. A. 2020.  Kandungan  terpenoid  dalam daun ara ( Ficus carica L.) sebagai agen antibakteri
terhadap bakteri Methicillin-Resistant  Staphylococcus aureus . PHARMACON 9(2): 219-225.