Versi Online: http://journal.ipb.ac.id/index.php/jtip DOI: 10.6066/jtip.2013.24.1.27
Hasil Penelitian

## ISOLASI Campylobacter DARI KARKAS AYAM MENGGUNAKAN METODE KONVENSIONAL DAN POLYMERASE CHAIN REACTIONS
[Isolation of Campylobacter from Poultry Carcasses using Conventional and Polymerase Chain Reaction Methods]
Andriani 1) *, Mirnawati Sudarwanto 2) , Surachmi Setiyaningsih 2) dan Harsi Dewantari Kusumaningrum 3)
1) Balai Besar Penelitian Veteriner-Bogor, Jl. RE Martadinata 30, Bogor
2) Fakultas Kedokteran Hewan, Institut Pertanian Bogor, Dramaga, Bogor
3) Fakultas Teknologi Pangan, Institut Pertanian Bogor, Dramaga, Bogor
Diterima 12 Maret 2012 / Disetujui 27 Maret 2013

## ABSTRACT
Campylobacter jejuni and Campylobacter coli are two spesies of Campylobacter sp. frequently found as pathogenic bacteria causing human gastrointestinal  infections.  Contaminated  chicken  carcasses  have  been  reported  as  the  source  of  human  campylobacteriosis.  In  this  study, Campylobacter were isolated from chicken carcasses sold in traditional markets and supermarkets. In traditional markets, chicken carcasses are sold without proper packaging or in an open space and stored at room temperature (25-30°C) for prolonged period allowing pathogenic bacteria to grow. While at supermarkets, chicken carcasses are openly displayed or enclosed in plastic wrappings and stored in a refrigerator (4-8°C). A total of 298 samples of chicken carcasses from traditional markets and supermarkets in the area of DKI Jakarta , West Java (Bogor and Sukabumi) and Central Java (Kudus and Demak) were collected. Isolation and identification using conventional and Polymerase Chain Reactions (PCR) methods were done to determine the prevalence of C. jejuni and C. coli contamination in poultry. The results showed that chicken carcasses sold in the sampling area, both traditional markets and supermarkets, were contaminated with C. jejuni and C. coli. The contamination rate of Campylobacter sp. in chicken carcasses sold in supermarkets, were 14.1% by conventional methods and 29.5% by PCR. This was higher than those in traditional markets, i.e. 5.7 and 12.1%, respectively. It is also confirmed that the prevalence for contamination of C. jejuni was  higher than C. coli in 298 samples, i.e. 16.1% and 3.7% by conventional method and 23.5% and 18.1% by PCR method respectively.
Keywords: Campylobacter coli, Campylobacter jejuni, poultry carcasses, supermarket, traditional market

## ABSTRAK
Campylobacter  jejuni dan Campylobacter  coli merupakan  dua  spesies  dari Campylobacter  sp. yang  banyak  ditemukan  sebagai  penyebab infeksi gastroenteritis pada manusia. Karkas ayam yang terkontaminasi merupakan sumber utama infeksi campylobakteriosis pada manusia. Pada penelitian  ini, Campylobacter diisolasi  dari  karkas  ayam  yang  dijual  di  pasar  tradisional  dan  swalayan.  Di  pasar  tradisional,  karkas  ayam  dijual tanpa kemasan, di ruang terbuka dan disimpan pada suhu kamar (25-30°C) sehingga memungkinkan bakteri patogen tumbuh dan berkembang. Di pasar swalayan, karkas ayam disajikan dalam keadaan terbuka atau dalam kemasan yang disimpan pada lemari pendingin (4-8°C). Sebanyak 298 sampel karkas ayam dari pasar tradisional dan supermarket di wilayah DKI Jakarta, Jawa Barat (Bogor dan Sukabumi) dan Jawa Tengah (Kudus dan  Demak)  dikumpulkan,  diisolasi  dan  diidentifikasi  dengan  metode  konvensional  dan Polymerase  Chain  Reactions (PCR)  untuk  menentukan prevalensi  kontaminasi C.  jejuni dan C.  coli .  Hasil  penelitian  menunjukkan  karkas  ayam  yang  dijual  di  pasar  tradisional  dan  swalayan  telah terkontaminasi C. jejuni dan C. coli . Tingkat kontaminasi Campylobacter sp. pada karkas ayam yang dijual di pasar swalayan ditemukan sebesar 14.1% dengan metode konvensional dan 29.5% dengan metode PCR. Angka ini lebih tinggi daripada di pasar tradisional yaitu 5.7% yang secara konvensional dan 12.1% secara PCR. Penelitian ini juga menunjukkan bahwa prevalensi kontaminasi dari C. jejuni lebih tinggi daripada C. coli pada 298 sampel, yaitu secara berturut-turut 16.1% dan 3.7% dengan metode konvensional dan 23.5% dan 18.1% menggunakan PCR.
Kata kunci: Campylobacter coli , Campylobacter jejuni , karkas ayam, supermarket, pasar tradisional
PENDAHULUAN 1
Campylobacter sp.  adalah  salah  satu  bakteri  penyebab penyakit asal pangan hewani (foodborne zoonosis) (Schlundt et al. 2004;  Silva et  al. 2011).  Bakteri  ini  merupakan  bakteri emerjing pada dasa warsa terakhir, sejak banyak ditemukannya spesies yang resisten terhadap antibiotik (Marinou et al. 2012). Organisasi  kesehatan  dunia  memperkirakan  sekitar  1% populasi di Eropa terinfeksi Campylobacter sp. setiap tahunnya
*Korespondensi Penulis : E-mail: andribalitvet@gmail.com; Telp: 0251 8334456; 8331048
(Wheeler et  al. 1999).  Epidemiologi  infeksi Campylobacter sp. ( campylobacteriosis )  di  negara  berkembang  berbeda  dengan negara  maju,  karena  di  negara  berkembang  infeksi Campylobacter sp.  lebih  banyak  terjadi  pada  anak-anak berumur  kurang  dari  2  tahun  dengan  ciri  penyakit  bersifat asimptomatik. Campylobacteriosis di Indonesia telah dilaporkan oleh Allos (2001), Oyofo et al. (2002), dan Tjaniadi et al. (2003) yang  ditunjukkan  dengan  ditemukannya Campylobacter  jejuni pada spesimen penderita diare di beberapa kota.
Campylobacter spp. telah dikenal sebagai bakteri penyebab diare  pada  manusia  sejak  tahun  1972.  Kejadian  penyakit  asal
Versi Online: http://journal.ipb.ac.id/index.php/jtip DOI: 10.6066/jtip.2013.24.1.27
Hasil Penelitian
pangan  ( foodborne  disease) oleh Campylobacter sp.  telah banyak  dilaporkan  dapat  menyebabkan  gastroenteritis  pada manusia.  Spesies Campylobacter yang  berhubungan  dengan foodborne disease adalah Campylobacter jejuni, Campylobacter coli,  Campylobacter  lari dan Campylobacter  upsaliensis. Menurut  Hariharan et  al. (2004)  infeksi  terbanyak  yang dilaporkan disebabkan oleh spesies C. jejuni meskipun spesies C.  coli kadang-kadang  juga  dilaporkan.  Kejadian  infeksi Campylobacter sp.  terus  meningkat  dari  tahun  ke  tahun. Selama  dua  puluh  tahun  terakhir,  kejadian  campylobacteriosis pada  manusia  meningkat  secara  eksponential  di  beberapa negara  tetapi  penyebab  terjadi  peningkatan  belum  diketahui secara  jelas  (WHO,  2000).  Sumber  infeksi  pada  manusia sebagian  besar  disebabkan  karena  mengkonsumsi  karkas ayam terkontaminasi Campylobacter sp. yang dimasak dengan pemanasan tidak sempurna (Wagenaar et al. 2006). Studi lain oleh  Tam et  al.  ( 2003)  juga  menemukan  spesies C.  jejuni sebagai  agen  penyebab  infeksi  gastrointestinal  yang  utama pada manusia sedangkan bakteri C. coli juga dianggap sebagai agen foodborne  disease yang  penting  meskipun  angka kejadiannya  lebih  rendah.  Spesies C.  jejuni menyebabkan campylobacteriosis  pada  manusia  mencapai  90%  sedangkan spesies C. coli berkisar 5-10% (Gillespie et al. 2002). Hasil yang diperoleh peneliti Gurtler et al. (2005) adalah sebanyak 18.6% campylobacteriosis  pada  manusia  disebabkan  oleh  spesies C. coli .  Meskipun  angka  kejadiannya  lebih  kecil  namun  hal  ini memperlihatkan bahwa risiko campylobacteriosis pada manusia akibat infeksi C. coli perlu diperhatikan.
Penelitian  ini  dilakukan  untuk  mengetahui  prevalensi kontaminasi Campylobacter sp.  termofilik,  terutama C.  jejuni dan C.  coli pada  karkas  ayam  asal  pasar  tradisional  dan swalayan.  Kondisi  lingkungan  pasar  dan  cara  mengemas karkas ayam yang dijual di pasar tradisional dan swalayan akan mempengaruhi  kemampuan  pertumbuhan  bakteri  kontaminan Campylobacter sp.

## BAHAN DAN METODE

## Bahan
Sampel  yang  digunakan  pada  penelitian  ini  adalah  berupa karkas  ayam  diperoleh  dari  pasar  tradisional  dan  swalayan  di daerah  DKI  Jakarta,  Jawa  Barat  (Bogor  dan  Sukabumi)  dan Jawa  Tengah  (Kudus,  dan  Demak)  pada  tahun  2009  sampai 2011  (Tabel  1).  Sampel  yang  dikoleksi  dimasukkan  ke  dalam kantung  plastik  kedap  udara  dan  oksigen  dikurangi  meng- gunakan  alat  vakum,  kemudian  dimasukkan  ke  dalam  boks pendingin  dengan  kisaran  suhu  4-5°C  untuk  dibawa  ke laboratorium.
Tabel 1. Jumlah sampel karkas ayam
Tahun Pasar Tradisional Pasar Swalayan 2009 2010 2011 48 50 50 50 50 50 Jumlah 148 150

## Metode isolasi dan identifikasi (ISO, 1995)
Sampel  sebanyak  25  gram  karkas  ayam  dimasukkan  ke dalam kantong steril yang berisi media Nut Broth No 2 (Oxoid, England)  yang  telah  ditambah growth  suplement (Oxoid SR 232E, England), diinkubasikan pada suhu 42˚C selama 24 jam dalam  kondisi  mikroaerofilik  (5%  O 2 ,  10%,  CO 2 ,  85%  N 2 ). Setelah  inkubasi  kultur  tersebut  diinokulasikan  pada  media Campylobacter  Blood  Free  Selective  Agar  Base  (modified CCDA-Preston) yang  mengandung CCDA  selective  suplement (OXOID  SR  155E,  England),  kemudian  diinkubasikan  kembali pada  kondisi  mikroaerofilik  seperti di  atas  selama  24-48  jam. Isolat Campylobacter sp.  hasil  isolasi  selanjutnya  diidentifikasi menggunakan API Campy (BioMerieux, Perancis) untuk menen- tukan spesies C. jejuni atau C. coli.
Metode  identifikasi  secara Polymerase  Chain  Reaction (PCR) (Wang et al. 2002) Sampel karkas ayam dalam suspensi media Nut Broth No 2 yang  telah  diinkubasikan  (lihat  isolasi  dan  identifikasi),  diambil sebanyak 1 ml, kemudian disentrifus dengan kecepatan 10.000 rpm  pada  suhu  4°C  selama  10  menit.  Pelet  yang  diperoleh ditambah  1  ml  akuades  dan  disentrifus  kembali  dengan  ke- cepatan dan waktu yang sama seperti sebelumnya (Alexandrino et  al. 2004).  Selanjutnya  dilakukan  purifikasi  DNA  dalam akuades seperti cara di atas.
Primer  yang  digunakan  tercantum  seperti  pada  Tabel  2 adalah  untuk  mengidentifikasi  gen hippuricase ( HipO ), serine hydroxymethyl transferase ( GlyA ) dan 23S rRNA .
Tabel 2. Pasangan primer untuk mengidentifikasi C. jejuni dan C. coli
Spesies Target Sequen Basa Gen Target Ukuran Target (pb) C. jejuni ACT TCT TTA TTG CTT GCT GC GCC ACA ACA AGT AAA GAA GC Hip O 323
C. coli GTA AAA CCA AAG CTT ATC GTG TCC AGC AAT GTG TGC AAT G Gly A 126 Campylobacter termofilik TAT ACC CGT AAG GAG TGC TGG AG ATC AAT TAA CCT TCG AGC ACC G 23S rRNA 650
Amplifikasi  DNA  dilakukan  pada  mesin  PCR  dengan  35 cycle pada  suhu initial  denaturation 95°C  selama  6  menit, denaturation 95°C selama 30 detik, annealing 59°C selama 30 detik, extension 72°C selama 30 detik dan final extension 72°C selama  7  menit.  Produk  PCR  kemudian  diperiksa  dengan electrophoresis  gel  agarose .  Agarose  gel  (Invitrogen,  New Zealand) 1% dengan 1 x TBE/ Tris Boric EDTA (Invitrogen, New Zealand)  ditambah  5  l ethidium  bromide (Sigma,  Germany). Dilanjutkan  dengan electrophoresis pada  tegangan  150  volt selama 30 menit.
Versi Online: http://journal.ipb.ac.id/index.php/jtip DOI: 10.6066/jtip.2013.24.1.27
Hasil Penelitian

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Isolasi  secara  konvensional  menghasilkan  59  isolat Campylobacter sp.  Hasil  identifikasi  yang  dilakukan  meng- gunakan API Campy dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel 3.  Isolat Campylobacter sp, C.  jejuni dan C.  coli pada  karkas ayam  pada  tahun  2009-2011  menggunakan  metode konvensional (n=298)
Tahun Campylobacter sp. C. jejuni C. coli 2009 2010 2011 12 9 38 12 0 36 0 9 2
Isolasi  dan  identifikasi  bakteri  patogen Campylobacter sp. sebagai  kontaminan  pada  karkas  ayam  menggunakan  metode konvensional  diperoleh  59  sampel  (19.8%)  dimana  48  sampel (81.4%) diidentifikasi sebagai  spesies C. jejuni dan 11 sampel (18.7%) C.  coli. Hasil  penelitian  Humphrey et  al. (2007) menyatakan  bahwa  infeksi  campylobacteriosis  pada  manusia pada  umumnya  disebabkan  oleh  spesies C.  jejuni dan C.  coli yang berasal dari saluran pencernaan hewan terutama ayam.
Iso lasi dan identifikasi secara PCR (Tabel 4) menggunakan primer  23S  rRNA  menghasilkan  isolat Campylobacter sp. sebanyak  124  sampel.  Spesies C.  jejuni diidentifikasi  meng- gunakan  primer Hip O  dan  diperoleh  hasil  positif  sebanyak  70 sampel (56.5%), sedangkan C. coli diidentifikasi menggunakan primer Gly A  dan  diperoleh  hasil  positif  sebanyak  54  sampel (43.6%).
Tabel 4.  Isolat Campylobacter sp,  spesies C.  jejuni dan C.  coli pada karkas ayam tahun 2009-2011 menggunakan metode PCR
Tahun Campylobacter sp. C. jejuni C. coli 2009 2010 2011 30 31 63 6 5 59 24 26 4
Pada  penelitian  ini  secara  PCR  digunakan  susunan  basa primer  23S  rRNA  yang  merupakan  kontrol  gen  yang  bersifat highly polymorphic terletak di helix antara 43 dan 69 (Eyers et al. 1993; Fermer dan Engvall, 1999; Rashid et al. 2000; Wang
et  al. 2002)  untuk  mendeteksi  keberadaan Campylobacter termofilik  dengan  metode  PCR.  Gen  rRNA  memiliki  struktur mosaik  yang conserve .  Sekuen  asam  nukleat  gen  23S  rRNA dapat  mengidentifikasi  beberapa  strain  bakteri  termofilik Campylobacter spesies  yaitu C.  jejuni,  C.  coli,  C.  lari, dan C. upsaliensis (Eyers et al. 1993). Kemampuan spesies C. jejuni menghidrolisis hippurate ( N- benzoylglycine) menjadi benzoic acid dan glycine dapat diguna- kan  untuk  membedakan C.  jejuni dari  spesies Campylobacter yang  lain.  Aktivitas  enzim hippurate  hydrolase pada C.  jejuni ditentukan oleh gen Hip O ( Hippuricase ) (Hani dan Chan, 1995). Gen Hip O merupakan novel primer yang hanya terdapat pada C.  jejuni. Spesies C.  jejuni memberikan  reaksi  positif  pada  uji hidrolisis hippurate (Wang et  al. 2002;  Persson  dan  Olsen, 2005)  dan  menurut  Nakari et  al. (2008) C.  jejuni memberikan reaksi  positif  pada  uji  hidrolisis hippurate sedangkan C.  coli memberikan  reaksi  negatif.  Target  gen C.  jejuni  HipO yang memiliki lokasi gen 1662-1965 bp memberikan hasil positif pada 323 bp yang dapat dilihat pada Gambar 1. Lokasi gen terletak pada  337-444  bp  dengan  ukuran  126  bp.  Gen GlyA dari pasangan  basa  yang  digunakan  pada  penelitian  ini  mengkode serine  hydroxymethyltransferase bersifat  sangat  stabil  seperti yang terdapat pada Campylobacter termofilik seperti C. coli, C. lari,  C.  upsaliensis .  Lokasi  gen  terletak  pada  337-444  bp dengan  ukuran  126  bp  untuk  spesies C.  coli, ukuran  251  bp untuk spesies C. lari dan 204 bp untuk spesies C. upsaliensis (Wang et al. 2002).
Gambar  1  memperlihatkan  bahwa  sampel  pada  sumur  1 sampai  17  yang  diuji  secara  PCR  menggunakan  primer HipO menunjukkan hasil positif untuk spesies C. jejuni pada sumur 5, 6, 12, dan 14, sedangkan primer GlyA menunjukkan hasil positif untuk C. coli pada sumur 2-4, 9, dan 15-17. Kontaminasi bakteri Campylobacter termofilik  pada  karkas  ayam  pada  pasar tradisional  dan  swalayan  di  lokasi  pengambilan  sampel  tidak hanya spesies C. jejuni saja tetapi juga C. coli. Hasil penelitian ini  memperlihatkan  bahwa  kontaminasi C.  coli pada  karkas ayam  adalah  18.7%  dengan  metode  konvensional  dan  43.5% dengan PCR.
Gambar 1.  Produk  PCR  menggunakan  primer HipO dan GlyA yang  diseparasi  dalam  agarose  1%  dari  dari  sampel  (sumur  1-17)  yang  diuji. Sebagai kontrol positif digunakan isolat ATCC C. jejuni (323 bp) pada sumur 19 dan ATCC C. coli (126 bp) pada sumur 18. M adalah marker DNA
1 323 bp 126 bp 2 3 4 5 6 7 8 9 10  11  12  13  14  15  16  17  18  19  M
Versi Online: http://journal.ipb.ac.id/index.php/jtip DOI: 10.6066/jtip.2013.24.1.27
Hasil Penelitian
Terakreditasi Dikti: 80/DIKTI/Kep/2012
15 33 19 51 2 9 17 37 0 10 20 30 40 50 60 Ps. Tradisional Ps. Swalayan Ps. Tradisional Ps. Swalayan Ju m la h Is ola t C. jejuni C. coli Metode Konvensional Metode PCR
Meskipun  prevalensi  kontaminasi C.  coli rendah  jika dibandingkan  dengan C.  jejuni dan  menyebabkan  campylo- bacteriosis  minor  pada  manusia  namun  ternyata  dapat  meng- akibatkan  gangguan  kesehatan  yang  cukup  serius  pada manusia  karena  hasil  yang  diperoleh  oleh  Tam et  al. (2003) memperlihatkan bahwa di Inggris, dari 25.000 kasus foodborne disease yang  disebabkan  oleh  spesies C.  coli, terdapat  lebih dari  12.000  orang  ditangani  di  klinik,  1.000  pasien  di  rumah sakit,  4.000  orang  dirawat  di  rumah  sakit  dan  11  orang meninggal.  Peternakan  ayam  dan  sapi  perah  serta  produknya merupakan  sumber  utama  infeksi C.  jejuni sedangkan  per- ternakan babi serta produknya berperan terhadap infeksi C. coli (Gillespie et al. 2002; Alter et al. 2005). Hasil penelitian Gurtler et al. (2005) menyatakan bahwa spesies C. coli berperan pada infeksi Campylobacter pada manusia namun terdapat perbeda- an  sumber  infeksi.  Pada  penelitian  ini,  pada  sampel  karkas ayam  menunjukkan  bahwa  karkas  telah  terinfeksi  oleh  kedua spesies tersebut yaitu C. jejuni dan C. coli. Prevalensi isolat C. jejuni dan C. coli dari karkas ayam yang diperoleh dari pasar tradisional maupun swalayan dapat dilihat pada Gambar 2.
Gambar 2.  Prevalensi C.  jejuni dan C.  coli pada  pasar  tradisional (n=148) dan swalayan (n=150)
Laporan  hasil  survei  Meldrum et  al. (2005)  di  Wales terhadap  karkas  ayam  yang  dijual  di  pasar  tradisional  dan swalayan  dinyatakan  positif  terkontaminasi Campylobacter sp. secara  berurutan  73%  (n=565)  dan  71%  (n=171).  Pada penelitian ini, persentase kontaminasi bakteri patogen C. jejuni dan C. coli pada karkas ayam yang diambil di pasar tradisional lebih  rendah  jika  dibandingkan  dengan  swalayan.  Poeloengan dan  Noor  (2003)  melaporkan  adanya  kontaminasi  bakteri Campylobacter  sp. pada  karkas  ayam  yang  dijual  di  pasar tradisional dan swalayan di daerah Bogor. Isolasi menggunakan metode  konvensional  menghasilkan  persentase  kontaminasi pada pasar tradisonal lebih rendah dari pada swalayan. Hal ini disebabkan  karena  bakteri Campylobacter sp.  meskipun  ter- masuk  kelompok  bakteri  termofilik  namun  bersifat fastidious, fragile dan tidak mampu berkompetisi dengan bakteri lain dalam pertumbuhannya.  Penelitian  Gill  dan  Haris  (1982)  menyatakan bahwa  pertumbuhan Campylobacter sp.  pada  karkas  me- ngalami  penurunan  pada  saat  pertumbuhan  mikroflora  normal dan  bakteri  patogen  lain  jumlahnya  meningkat  maksimum mencapai  10 9 /cm 2 .  Hasil  penelitian  karkas  ayam  yang  diambil dari  pasar  tradisional  dijual  tanpa  penutup  memungkinkan
banyak bakteri kontaminan baik patogen maupun non patogen yang  tumbuh  (Meldrum et  al. 2005) sehingga  mengurangi kesempatan Campylobacter sp.  untuk  tumbuh  dan  memper- banyak  diri  (Gill  dan  Haris,  1982).  Di  pasar  swalayan  karkas dijual  dengan  dibungkus  plastik  memberikan  kondisi  atmosfer yang  lebih  optimal  bagi  pertumbuhan Campylobacter sp.  yang bersifat  mikroaerofilik,  dimana  adanya  oksigen  di  udara  dapat mengganggu  pertumbuhan Campylobacter sp . Hal  ini  sesuai dengan hasil penelitian Balamurugan et al. (2011) dan Hilbert et al. (2010)  yang  menyatakan  bahwa  kemasan  vakum  pada karkas dan tidak adanya mikroflora normal yang tumbuh pada kemasan vakum dapat meningkatkan kemampuan tumbuh dan berkembangnya C. jejuni. Perbedaan suhu penyimpanan karkas ayam mempengaruhi kemampuan pertumbuhan Campylobacter sp.  Menurut  Upton  (1995)  karkas  ayam  yang  disimpan  pada suhu  4°C  dengan  kondisi  vakum  mampu  hidup  dan  ber- proliferasi meskipun pada penyimpanan hari ke-28 hanya dapat dideteksi  500  sel  per  gram  karkas.  Hasil  dari  penelitian  ini menunjukkan  bahwa  kontaminasi  bakteri C.  jejuni dan C.  coli pada karkas ayam yang dijual di swalayan lebih tinggi dari pada karkas  yang  dijual  di  pasar  tradisional,  karena  di  swalayan karkas  disimpan  pada  suhu  refrigerator  sehingga  memungkin- kan Campylobacter sp. masih mampu tumbuh dan berkembang. Didukung  oleh  hasil  penelitian  Huezo et  al. (2007)  bahwa proses chilling tidak  mempengaruhi  prevalensi Campylobacter pada karkas.
Prevalensi  kontaminasi Campylobacter sp.  pada  karkas ayam  yang  dijual  di  pasar  tradisional  lebih  rendah  dari  pada swalayan tidak memberikan arti bahwa karkas ayam yang dijual di  pasar  tradisional  lebih  baik.  Menurut  Meldrum et  al. (2005) terdapat perbedaan yang nyata adanya kontaminasi Salmonella pada  karkas  ayam  yang  dijual  di  pasar  tradisional  lebih  tinggi dari  pada  di  toko  ayam  yang  dilengkapi  dengan  pendingin. Meskipun  prevalensi Campylobacter sp.  pada  karkas  ayam yang  dijual  di  pasar  tradisional  lebih  rendah  dari  swalayan namun  dosis  infeksi  bakteri  patogen Campylobacter  jejuni sangat rendah yaitu 900  sel hidup (Stern dan Pretanik, 2006), sehingga,  apabila  manusia  mengonsumsi  karkas  ayam  yang telah  terkontaminasi Campylobacter sp.  dapat  menyebabkan infeksi.
Menurut  Kramer et  al. (2000)  dan  Gurtler  (2005)  terdapat beberapa jenis spesies Campylobacter yang dapat diisolasi dari karkas ayam. Adanya perbedaan prevalensi C. jejuni dan C. coli sebagai  kontaminan  pada  bahan  pangan  menyebabkan  per- bedaan  faktor  risiko  sehingga  strategi  kontrol  yang  perlu dilakukan juga berbeda. Menurut Mateo et al. (2005) spesies C. jejuni dan C.  coli merupakan  mikroba  yang  umumnya  meng- kontaminasi karkas ayam, namun Tam et al. (2003) melaporkan bahwa  terdapat  perbedaan  morbiditas  dan  mortalitas  yang ditimbulkan oleh masing-masing spesies tersebut. Menurut Allos (2001) penanganan yang tidak baik selama proses pada karkas ayam  di  rumah  potong  serta  meningkatnya  konsumsi  karkas ayam  dapat  merupakan  sumber  utama  infeksi  Campylobacter pada manusia. Adanya kontaminasi spesies C. jejuni dan C. coli pada karkas ayam pada penelitian ini dengan prevalensi yang berbeda  memberikan  laporan  pentingnya  peranan  kesehatan masyarakat dalam penyediaan bahan pangan yang berkualitas. Sesuai  dengan  laporan  Tam et  al. (2003)  bahwa  meskipun
Versi Online: http://journal.ipb.ac.id/index.php/jtip DOI: 10.6066/jtip.2013.24.1.27
Hasil Penelitian
kejadian  infeksi C.  coli lebih  rendah  daripada C.  jejuni dalam menyebabkan  campylobacteriosis  pada  manusia  tetapi  tetap berpengaruh pada kesehatan manusia.
Usaha  untuk  mengurangi  jumlah  kontaminasi Campylo- bacter sp.  dapat  dilakukan  dengan  melakukan  dekontaminasi. Menurut  Li et  al. (2002)  dekontaminasi  karkas  ayam  meng- gunakan klorin seperti yang biasa dilakukan pada karkas ayam yang  dijual  di  pasar  tradisional  dan  swalayan  dengan konsentrasi  50  ppm  dapat  menurunkan  jumlah Campylobacter sp.  sebanyak  1  log  CFU/karkas.  Peningkatkan  sanitasi, termasuk klorinasi air, dan hygiene pada saat produksi karkas ayam,  mengurangi  kejadian  kontaminasi  silang.  Memisahkan bahan  mentah  sebagai  sumber  kontaminan  dengan  bahan pangan  siap  saji,  memegang  peranan  cukup  penting  untuk mengurangi terjadinya infeksi Campylobacter sp. pada manusia.

## KESIMPULAN
Karkas  ayam  yang  dijual  pada  pasar  tradisional  dan swalayan  di  daerah  DKI  Jakarta,  Jawa  Barat  (Bogor  dan Sukabumi)  dan  Jawa  Tengah  (Kudus  dan  Demak)  positif  ter- kontaminasi bakteri enteropatogen C. jejuni dan C. coli. Spesies C. jejuni adalah kontaminan utama karkas ayam yang dijual di pasar tradisional dan swalayan dengan angka prevalensi yang lebih  lebih  tinggi  dari C.  coli. Identifikasi  pada  298  sampel menggunakan  metode  konvensional  menghasilkan  prevalensi kontaminasi C. jejuni 16.1 dan C. coli 3.7%, sedangkan metode PCR menghasilkan prevalensi kontaminasi C. jejuni 23.5 dan C. coli 18.1%.
Kontaminasi Campylobacter sp. pada karkas ayam di pasar swalayan  ditemukan  pada  42  sampel  atau  14.1%,  lebih  tinggi jika dibandingkan dengan  di pasar tradisional, 17 sampel atau 5.7%,  yang  diidentifikasi  dengan  metode  konvensional.  Tren yang sama juga ditemukan pada isolasi menggunakan metode PCR, yaitu kontaminasi di swalayan lebih tinggi (88 sampel atau 29.5%)  dari  kontaminasi  di  pasar  tradisional  (36  sampel  atau 12.1%).  Keberadaan  kontaminasi C.  jejuni dan C.  coli pada karkas  ayam  perlu  mendapat  perhatian  dalam  bidang kesehatan  masyarakat  karena  dapat  menjadi  agen foodborne enteropatogenik dan menyebabkan infeksi pada manusia.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Pada  kesempatan  ini  kami  menyampaikan  ucapan  terima kasih kepada Kepala Badan Litbang Kementrian Pertanian yang telah  memberikan  dana  penelitian  melalui  DIPA  Anggaran Tahun  2009  dan  2010  pada  program  Kerjasama  Kemitraan Penelitian  Pertanian  dengan  Perguruan  Tinggi  (KKP3T)  dan Kepala  Lembaga  Penelitian  dan  Pengabdian  Kepada Masyarakat  (LPPM)  Institut  Pertanian  Bogor  yang  telah  mem- bantu  menyelenggarakan  program  kerjasama  penelitian  ini sehingga  kegiatan  penelitian  ini  dapat  berlangsung  dengan baik.

## DAFTAR PUSTAKA
Alexandrino M, Grohmann E, Szewzyk U. 2004. Optimization of PCR-based  for  rapid  detection  of Campylobacter  jejuni, Campylobacter coli, and Yersinia enterocolitica serovar 0:3 in waste samples. Water Res 38: 1340-1346. Allos  BM.  2001. Campylobacter  jejuni infections:  update  on emerging issues and trends. Clin Infect Dis 32: 1201-1206. DOI: 10.1086/319760.
Alter  T,  Gaull  F,  Kasimir  S,  Gurtler  M,  Fehlhaber  K.  2005. Distribution  and  genetic  characterization  of  porcine Campylobacter  coli isolates.  Berl  Munch  Tierarztl Wochenschr 118: 214-219.
Balamurugan  S,  Nattress  FM,  Baker  LP,  Dilts  BD.  2011. Survival  of Campylobacter  jejuni on  beef  and  pork  under vacuum  packaged  and  retail  storage  conditions: examination  of  the  role  of  natural  meat  microflora  on C. jejuni survival.  Food  Microbiol  28:  1003-1010. DOI: 10.1016/j.fm.2011.01.012.
Eyers M, Chapelle S,  Van Camp G, Goossens H, De Wachter R. 1993. Discrimination among thermophilic Campylobacter species  by  polymerase  chain  reaction  amplification  of  23S rRNA gene fragments. J Clin Microbiol 31: 3340-3343.
Fermer  C,  Engvall  EO.  1999.  Specific  PCR  Identification  and differentiation  of  the  thermophilic  Campylobacters, Campylobacter jejuni, C. coli, C. lari, and C. upsaliensis. J Clin Microbiol 10: 3370-3373.
Gillespie IA, O’Brien SJ, Frost JA, Horby P, Swan AV, Painter MJ,  Neal  KR.  2002.  A  case-case  comparison  of Campylobacter  coli and Campylobacter  jejuni infection:  a tool for generating hypotheses. Emerg Infect Dis 8: 937-942. Gill CO, Haris LM. 1982. Survival and growth of Campylobacter fetus subs. jejuni on meat and cooked foods. Appl Environ Microb 44: 259-263.
Gurtler  M,  Alter  T,  Kasimir  S,  Fehlhaber  K.  2005.  The importance  of Campylobacter  coli in  human  campylo- bacteriosis:  prevalence  and  genetic  characterization. Epidemiol  Infect  133:  1081-1087. DOI:  10.1017/S095026 8805004164.
Hariharan H, Murphy GA, Kempf I. 2004. Campylobacter jejuni : public  health  hazards  and  potential  control  methods  in poultry: a review. Vet Med-Czech 49: 441-446.
Hani  EK,  Chan  VL.  1995.  Expression  and  characterization  of
Campylobacter  jejuni benzoylglycine  amidohydrolase (Hippuricase)  gene  in Escherichia  coli. J  Bacteriol  117: 2396-2402.
Hilbert F, Scherwitzel M, Paulsen P, Szostak M. 2010. Survival of Campylobacter  jejuni under  condition  of  atmospheric oxygen tension with the support of Pseudomonas spp. Appl Environ  Microbiol  76:  5911-5917. DOI:  10.1128/AEM. 01532-10.
Humphrey T, O’Brien  S, Madsen M. 2007. Campylobacters as zoonotic  pathogens:  A  food  production  perspective.  Int  J Food  Microbiol  117:  237-257. DOI:  10.1016/j.ijfoodmicro. 2007.01.006.
Versi Online: http://journal.ipb.ac.id/index.php/jtip DOI: 10.6066/jtip.2013.24.1.27
Hasil Penelitian
Terakreditasi Dikti: 80/DIKTI/Kep/2012
Huezo  R,  Northcutt  JK,  Smith  DP,  Fletcher  DL,  Ingram  KD. 2007. Effect of dray air or immersion chilling on recovery of bacteria  from  broiler  carcasses.  J  Food  Protect  70:  1829- 1834.
[ISO]  International  Organization  for  Standardization.  1995. Microbiology of Food and Animal Feeding Stuffs–Horizontal Method  for  Detection  of  Thermotolerant  Campylobacter. Geneva: International Organization for Standardization; [ISO 10272: 1995. E].
Kramer  JM,  Frost  JA,  Bolton  FJ,  Wareing  DR.  2000. Campylobacter contamination  of  raw  meat  and  poultry  at retail  sale:  Identification  of  multiple  types  and  comparison with isolates from human infection. J Food Protect 63: 1654- 1659.
Li  Y,  Yang  H,  Swem  BL.  2002.  Effect  of  high-temperature inside-outside  spray  on  survival  of Campylobacter  jejuni attached to prechill chicken carcasses. Poultry Sci 81: 1371- 1377.
Marinou  I,  Bersimis  S,  Ioannidis  A,  Nicolaou  C,  Mitroussia- Ziouva  AM,  Legakis  NJ,  Chatzipanagiotou  S.  2012. Identification and antimicrobial resistance of Campylobacter species isolated from animal sources. Front Microbiol 3: 1-6. DOI: 10.3389/fmicb.2012.00058.
Mateo E, Carcamo J, Urquijo M, Perales I, Fernandez-Astorga A.  2005.  Evaluation  of  a  PCR  assay  for  the  detection  and identication of Campylobacter jejuni and Campylobacter coli in retail poultry products. Res Microbiol 156: 568-574. DOI: 10.1016/j.resmic.2005.01.009.
Meldrum RJ, Tucker D, Smith RMM, Edwards C. 2005. Survey of Salmonella and Campylobacter contamination  of  whole, raw poultry on retail sale in Wales in 2003. J Food Protect 68: 1447-1449.
Nakari UM, Puhakka A, Siitonen A. 2008. Correct identification and discrimination between Campylobacter jejuni and C. coli by  a  standardized  hippurate  test  and  spesies-specific polymerase chain reaction. Eur J Clin Microbiol 27: 513-518. DOI: 10.1007/s10096-008-0467-9.
Oyofo BA, Lesmana M, Subekti D, Tjaniadi P, Larasati W, Putri M,  Simanjuntak  CH,  Punjabi  NH,  Santoso  W,  Muzahar, Sukarma, Sriwati, Sarumpaet S, Abdi M, Tjindi R, Ma'ani H, Sumardiati  A,  Handayani  H,  Campbell  JR,  Alexander  WK, Corwin  AL. 2002.  Surveillance  of  bacterial  pathogens  of diarrhea disease in Indonesia. Diag Microbiol and Infect Dis 44: 227-234. DOI: 10.1016/S0732-8893(02)00454-6.
Persson S, Olsen KEP. 2005. Multiplex PCR for identification of Campylobacter  coli and Campylobacter  jejuni from  pure cultures and directly on stool samples. J Med Microbiol 54: 1043-1047. DOI: 10.1099/jmm.0.46203-0.
Poeloengan  M,  Noor  SM.  2003.  Isolasi Campylobacter  jejuni pada Daging Ayam dari Pasar Tradisional dan Supermarket. Proceeding  Seminar  Nasional  Teknologi  Peternakan  dan Veteriner. Puslitbang Peternakan, Bogor.
Rashid Al ST, Dakuna I, Louie H, Ng D, Vandamme P, Johnson W, Chan VL. 2000. Identification of Campylobacter jejuni, C. coli,  C.  lari,  C.  upsaliensis,  Arcobacter  butzleri, dan A. butzleri -like  species  based  on  the glyA gene.  J  Clin Microbiol 38: 1488-1494.
Schlundt J, Toyofuku H, Jansen J, Herbst SA. 2004. Emerging food-borne zoonoses. Rev Sci Tech OIE 23: 513-533.
Silva J, Leite D, Fernandes M, Mena C, Gibbs PA, Teixeira P.
2011. Campylobacter spp.  as  a  foodborne  pathogen:  a review.  Front  Microbiol 2:  200-208. DOI:  10.3389/fmicb. 2011.00200.
Stern  NJ,  Pretanik  S.  2006.  Counts  of Campylobacter spp.  on U.S. broiler carcasses. J Food Protect 69: 1034-1039. Tam  CC,  O’Brien  SJ,  Adak  GK,  Meakins  SM,  Frost  JA.  2003.
Campylobacter  coli –an  important  foodborne  pathogen.  J Infection 47: 28-32. DOI: 10.1016/S0163-4453(03)00042-2. Tjaniadi P, Lesmana M,  Subekti D, Machpud  N,  Komalarini  S, Santoso  W,  Simanjuntak  CH,  Punjabi  N,  Campbell  JR, Alexander  WK,  Beecham  HJ  3rd,  Corwin  AL,  Oyofo  BA. 2003.  Antimicrobial  resistance  of  bacterial  pathogens associated  with  diarrheal  patients  in  Indonesia.  Am  J  Med Hyg 68: 666-670.
Upton M. 1995. Relationship between pathogen growth and the general microbiota an raw and processed meat and poultry. J  Food  Safety  15:  133-144. DOI: 10.1111/j.1745- 4565.1995.tb00129.x.
Wagenaar JA, Mevius  DJ, Havelaar AH. 2006. Campylobacter in  primary  animal  production  and  control  strategies  to reduce  the  burden  of  human  campylobacteriosis.  Rev  Sci Tech OIE 25: 581-594.
Wang G, Clark CG, Taylor TM, Pucknell C, Barton C, Price L,
Woodward  DL,  Rodgers  FG.  2002.  Colony  multiplex  PCR assay for identification and differentiation of Campylobacter jejuni,  C.  coli,  C.  lari,  C.  upsaliensis, and C.  fetus subsp. fetus .  J  Clin  Microbiol  40:  4744-4747. DOI:  10.1128/ JCM.40.12.4744-4747.2002.
Wheeler  JG,  Sethi  D,  Cowden  JM,  Wall  PG,  Rodrigues  LC, Tomkins  DS,  Hudson  MJ,  Roderick  PJ.  1999.  Study  of infectious intestinal disease in England: rates in community, presenting  to  general  practice  and  reported  to  national surveillance. Brit Med J 318: 1046-1050.
[WHO]  World  Health  Organization.  2000.  The  Increasing Incidence of  Human Campylobacteriosis: Report and Proc. of  a  WHO  Consultation  of  Experts,  Copenhagen,  21-25 November. WHO/CDC/CSR/APH/2001.7. WHO, Geneva.