## AKTIVITAS VERMISIDA EKSTRAK DAUN MIANA TERHADAP Ascaris lumbricoides DENGAN METODE  REAL TIME
Vermicidal Activity of Miana Leaf Extract Against Ascaris lumbricoides Using Real Time Method
Penulis / Author (s)
Sesilia Rante Pakadang *1 1,2,34 Poltekkes Kemenkes Makassar, St. Ratnah 2
*e-mail korespondensi: mamajassy@gmail.com Alfrida Monica Salasa 3 Djuniasti Karim 4
DOI: https://doi.org/ 10.32382/mf.v19i2.168 ARTICLE INFO ABSTRACT Keywords: Soiled Transmitted Helminth (STH) is an infectious disease caused by earthworms. The type of worm identified as the cause of STH is dominated by Ascaris lumbricoides and 3 other types. Many studies have been carried out to monitor the results of worm death. This study aimed to determine the profile of vermicides including onset of  action,  duration,  and  effectiveness  of  miana  leaf  extract compared to the drug pyrantel pamoat. The research method is to gradually  start  preparing  miana  leaf  extract  using  a  maceration process with continuous stirring, preparing the extract, and treating worms. The worms are placed in a sterile cup, then the test material is  added  and  observed  every  hour. Worm  death  profiles  such  as paralysis, death, and life were observed for each worm subject. The results  showed  the  death  profile  of  worms  after  administration  of miana  leaf  extract  concentrations  of  10,  20,  and  40  mg/ml  and pyrantel pamoat 2.5 mg/ml gave onset of action data for 4, 3, 2, and 1 hour respectively. The working duration of the test material is 5, 5, 3, and 1 hour respectively.  The effective dose is generated by a concentration of 40 mg/ml which can kill worms starting 2 hours after administration of the test material, with a duration of 1 hour
Soiled  Transmitted  Helminth  (STH)  adalah  salah  satu  penyakit infeksi  akibat  cacing  tanah.  Jenis  cacing  yang  teridentifikasi sebagai penyebab STH didominasi oleh Ascaris lumbricoides dan 3 jenis lainnya, penelitian telah banyak dilakukan dengan memantau hasil akhir kematian cacing. Tujuan penelitian ini mengetahui profil vermisida  meliputi  onset  of  action,  durasi  dan  efektivitas  ekstrak daun  miana  yang  dibandingkan  dengan  obat  pyrantel  pamoat. Metode penelitian secara bertahap mulai penyiapan ekstrak daun miana  dengan  proses  maserasi  dengan  pengadukan  kontinu, penyiapan  ekstrak  dan  perlakuan  terhadap  cacing.  Cacing dimasukkan dalam cawan steril, kemudian ditambahkan bahan uji dan  diamati  setiap  jam.  Profil  kematian  cacing  seperti  paralisis, mati  dan  hidup  diamati  setiap  subyek  cacing.  Hasil  penelitian menunjukkan  profil  kematian  cacing  setelah  pemberian  ekstrak daun miana konsentrasi 10, 20 dan 40 mg/ml dan pyrantel pamoat 2,5 mg/ml memberikan data onset of action berturut 4, 3, 2 dan 1 jam. Durasi kerja bahan uji berturut 5, 5, 3 dan 1 jam. Dosis efektif
Miana leaves Ascaris lumbricoides onset of action duration vermicida
Kata Kunci
Daun Miana
Ascaris lumbricoides Mula kerja obat Durasi Vermicida
Poltekkes Kemenkes Makassar

## Media Farmasi
https://ojs3.poltekkes-mks.ac.id/index.php/medfar/

## Open access article
dihasilkan oleh konsentrasi 40 mg/ml yang dapat mematikan cacing mulai 2 jam setelah pemberian bahan uji, durasi 1 jam.

## PENDAHULUAN
Soiled  Transmitted  Helminth (STH) adalah salah satu penyakit infeksi akibat cacing tanah.  WHO  masih  mencatat  1,45  miliar penderita  STH  di  dunia  dan  70%  diantaranya berada  di  Asia  terutama  Asia  Tenggara. Indonesia  mencatatkan  penderita askariasis, trichuriasis ,  dan  cacing  tambang  terbanyak  di wilayah  Asia Pasifik. Ter data lebih dari 90 juta kasus untuk askariasis dan trichuriasis , serta 60 juta kasus cacing tambang ( Lee J, Ryu JS, 2019 ).
Pemerintah telah mencanangkan program  Pemberian  Obat  Pencegahan  Secara Massal  Cacingan  yaitu  pemberian  obat  yang dilakukan  untuk  mematikan  cacing  secara serentak  kepada  semua  penduduk  sasaran  di wilayah  berisiko  cacingan  sebagai  bagian  dari upaya  pencegahan  penularan  cacingan.  Jenis cacing  yang  teridentifikasi  sebagai  penyebab STH  didominasi  oleh Ascaris  lumbricoides, Trichuris  trichiura,  Ancylostoma  duodenale , dan Necator  americanus ( Permenkes  no  15, 2017 ). Salah satu upaya penyediaan bahan baku obat  termasuk  obat  cacing  adalah  optimalisasi penggunaan herbal secara ilmiah.
Herbal  seperti  daun  miana  secara empiris telah digunakan sebagai obat cacing dan didukung  oleh    penelitian  miana  terhadap Hymenolepis microstoma ( Ridwan et al., 2020 ). Beberapa  penelitian  aktivitas  tanaman  terhadap Ascaris  lumbricoides  juga  telah  dilakukan terhadap  buah  delima  ( Apriliani  et  al,  2022 ; Amelia, 2017 ); daun sirih ( Sumual et al., 2021 ); daun pinang ( Roring et al, 2019 ); bawang merah dan  bawang  putih  ( Dibfiora  et  al.,  2021 );  labu kuning  ( Ganestya  et  al.,  2017 );  daun  anting- anting ( Astuti, 2020; Mutiarawati, 2020 ). Namun penelitian  tersebut  menguji  aktivitas  pasca inkubasi  saja  atau  waktu  kematian  cacing  saja, sehingga  belum  menunjukkan  profil  efektivitas ekstrak tanaman sebagai vermisida.
Penelitian ini memberikan inovasi baru dalam  pengujian  herbal  sebagai anthementika khususnya  terhadap Ascaris  lumbriciodes . Tujuan  penelitian  ini  mengetahui  profil vermisida  meliputi onset  of  action ,  durasi  dan efektivitas ekstrak daun miana yang dibandingkan dengan obat pyrantel pamoat.

## METODE
Penelitian  dilakukan  di  Poltekkes Kemenkes  Makassar.  Penelitian  bertahap  dari penyiapan  simplisia,  proses  ekstraksi,  dan pengujian vermisida.
Penyiapan  simplisia  dilakukan  dengan mengambil    daun  miana  dari    Kabupaten  Tana Toraja, Provinsi Sulawesi Selatan. Bahan daun miana  disortasi  basah,  dicuci  dan  dikeringkan dalam oven suhu 50-55 0 C  selanjutnya disortasi kering.
Proses  ekstraksi  menggunakan  pelarut etanol 96%, metode maserasi yang dimodifikasi dengan  pengadukan  kontinu  menggunakan orbital  shaker  kecepatan  100  rpm.  Selanjutnya ekstrak  cair  hasil  maserasi  dipekatkan  dengan rotary  evaporator.  Ekstrak  kental  4  gram disuspensikan  dengan  Na  CMC  1%  20  ml  dan diencerkan  dengan  NaCL  0,9%    ad  100  ml. Ekstrak  dihomogenkan  hingga  menjadi  bahan uji ekstrak daun miana 40 mg/ml. Dengan cara yang sama ditimbang 2 gram dan 1gram ekstrak untuk menyiapkan ekstrak daun miana 20 mg/ml dan  10  mg/ml.    Kontrol  positif  menggunakan pyrantel  pamoat  Bahan  uji  kontrol  positif disiapkan  dengan  mengencerkan  sediaan menjadi 250 mg/100 ml (2,5mg/ml) dan kontrol negatif campuran Na CMC dan NaCl.
Pengujian vermisida terhadap bahan uji diawali  dengan  memasukkan  cacing Ascaris lumbricoides ke dalam cawan steril sebanyak 5 cacing  setiap  cawan.  Selanjutnya  ekstrak  daun miana  10  mg/ml  sebanyak  10  ml  dimasukkan dalam cawan yang berisi cacing,  Hal yang sama dilakukan  untuk  ekstrak  daun  miana  20  mg/ml dan  40  mg/ml,    kontrol  positif  dan  kontrol negatif.  Semua  perlakuan  dibuat  dengan  6  x replikasi. Pengamatan dilakukan setiap 60 menit hingga  semua  cacing  telah  mati.  Parameter pengujian vermisida berdasarkan kondisi cacing ketika  waktu  pengamatan  yaitu  hidup,  paralisis dan  mati  cacing  setiap  jam.  Parameter pengamatan  cacing  mati  adalah  cacing  sudah kaku  atau  tidak  bergerak  lagi.  Paralisis  diamati dengan memindahkan cacing yang tak bergerak ke  dalam  NaCl  0,9%b/v  dan  digoyangkan beberapa  kali,  jika  cacing  kembali  bergerak sendiri  berarti  status  cacing  paralisis.  Cacing hidup  berarti  cacing  tetap  bergerak  aktif  atau
lambat.  Cacing  dinyatakan  mati  jika  tidak bergerak  lagi  meskipun  telah  diamati  secara metode paralisis.
Penetapan  parameter onset  of  action (dalam penelitian ini) adalah mula kerja obat atau waktu  yang  dibutuhkan  oleh  bahan  obat  cacing (ekstrak  dan  pyrantel  pamoat)  untuk  bekerja
(dalam hal ini mematikan cacing). Durasi (dalam penelitian ini) adalah lama kerja obat adalah lama waktu yang dibutuhkan untuk mematikan cacing pertama  hingga  semua  cacing.  Pengamatan dihentikan setelah semua cacing yang diberikan perlakuan telah mati.

## HASIL
Tabel 3. Hasil Pengamatan  Kematian Cacing  dalam Rendaman Bahan Uji
Kelom pok kondisi cacing jam pengamatan 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 mg/ml Mati 0 0 0 0.3 ±0,5 0.7 ±0,8 2.2 ±1,2 2.7 ±0,8 4 ±1,5 5 ±0 Paralisis 0 0 0.2 ±0,4 0.7 ±1 0.7 ±1 1.2 ±1 1.2 ±1 0.8 ±1,6 0 Hidup 5 ±0 5 ±0 4.8 ±0,4 4 ±1,3 3.7 ±1,2 1.7 ±1,5 1.2 ±1,6 0.2 ±0,4 0 20 mg/ml Mati 0 0 0.7 ±0,8 1.3 ±1,2 3.2 ±1 4.7 ±0,5 4.7 ±0,5 5 ±0 Paralisis 0 0 0.5 ±0,5 1.8 ±1,5 0.7 ±0,8 0 0.3 ±0,5 0 Hidup 5 ±0 5 ±0 3.7 ±1,2 1.8 ±1,9 1.2 ±1,5 0.3 ±0,5 0 0 40 mg/ml Mati 0 0.7 ±1,2 2 ±1,3 4.3 ±1 5 ±0 Paralisis 1 ±2 0.7 ±0,8 1 ±0,9 0.3 ±0,8 0 Hidup 4 ±2 3.6 ±1 2 ±1,9 0.3 ±0,8 0 kontrol Positif Mati 5 ±0 Paralisis 0 Hidup 0 kontrol Negatif Mati 0 0 0 0 0 0 0 0 0 Paralisis 0 0 0 0 0 0 0 0 0 Hidup 5 ±0 5 ±0 5 ±0 5 ±0 5 ±0 5 ±0 5 ±0 5 ±0 5 ±0
Tabel 2. Hasil analisis onset of action dan durasi kerja obat sebagai vermisida
Bahan  uji Onset of action Durasi EDM 10 mg/ml 4 jam 5 jam EDM 20 mg/ml 3 jam 5 jam EDM 40 mg/ml 2 jam 3 jam kontrol positif 1 jam <1 jam kontrol negatif tidak teridentifikasi tidak teridentifikasi Keterangan Waktu kerja obat Onset obat
Profil vermisida setelah pemberian bahan uji ekstrak daun miana dan kontrol diperlihatkan pada gambar histogram berikut:

## Gambar 1 Profil vermisida ekstrak daun miana

## PEMBAHASAN
Fokus  utama  penelitian  ini  adalah pengamatan  proses  kematian  cacing  Ascaris lumbricoides. Secara umum penelitian yang ada selama ini mengamati jumlah cacing yang mati setelah kontak bahan uji (ekstrak, kontrol positif dan  kontrol  negatif)  selama  beberapa  waktu inkubasi  seperti  penelitian  sebelumnya  dengan waktu  inkubasi  24  jam.  Profil  kematian  cacing tidak teramati karena pengamatan hanya 1 kali. Penelitian  ini  menjawab  profil  kematian  cacing dengan  pengamatan real  time .  Proses  kematian cacing  yang  melewati  fase  paralisis  kemudian mati dan waktu kontak yang dibutuhkan hingga bahan uji mulai aktif (membunuh atau membuat cacing paralisis) dapat teramati dan terdata pada tabel 1 dan gambar 1.
Pentingnya menganalisis profil kematian  cacing  untuk  menentukan  mula  kerja obat (bahan uji) untuk setiap konsentrasi bahan uji  yang  diberikan. Onset  of  action yang  cepat dibutuhkan dalam pengobatan untuk
memberikan  efek  yang  singkat  dan  akan memberikan perbedaan efektivitas antar perlakuan  dalam  hal  ini  perbedaan  konsentrasi ekstrak  daun  miana.  Hasil  menunjukkan  bahwa semakin  besar  konsentrasi  ekstrak  memberikan mula kerja obat yang lebih baik.
Durasi  kerja  obat  (bahan  uji)  yang terlihat pada tabel 2 juga merupakan hal penting dalam pengobatan karena menentukan efektivitas
dosis  pemberian  obat.  Secara  farmakologi efektivitas durasi kerja obat (singkat atau lama) akan  berbeda  setiap  indikasi.  Khusus  dalam pengobatan kecacingan efektivitas obat ditentukan  oleh  durasi  yang  singkat.  Kontrol positif  (pyrantel  pamoat)  dalam  penelitian  ini menunjukkan  efektivitas  yang  sangat  baik dengan mematikan cacing dalam waktu < 1 jam. Meskipun demikian efektivitas optimal (durasi 3 jam)  ekstrak  daun  miana  konsentrasi  40  mg/ml dibanding  konsentrasi  lainnya  (durasi  5  jam). Secara  parasitologi  durasi  vermisida    dalam waktu 3 – 5 jam, cukup efektif mengingat dosis pemberian  yang  hanya  sekali.  Berdasarkan anjuran  Kemenkes  RI,  obat  cacing  diberikan dalam  dosis  tunggal  sebanyak  2  kali  setahun. Identifikasi mula kerja obat dan durasi kerja obat merupakan  novelty  dalam  penelitian  ini  yang dapat dikembangkan untuk menjadi bahan baku obat dengan penelitian lanjutan.
Hasil  penelitian  ini  menunjukkan ekstrak daun miana dalam 3 dosis kecil (10, 20 dan 40 mg/ml atau 1, 2 dan 4%b/v) telah efektif sebagai  vermisida  karena  dapat  mematikan semua cacing dalam waktu 5 - 9 jam, sehingga potensial untuk diberikan sebagai pengganti obat cacing  bahan  kimia.  Meskipun  pembandingnya pyrantel  pamoat  2,5  mg/ml  hanya  1  jam. Beberapa  penelitian  yang  sejalan  dengan penelitian ini menggunakan replikasi 3 – 5 cacing per  kelompok  perlakuan  menunjukkan  variasi
0 1 2 3 4 5 6 M P H M P H M P H M P H M P H EDM 10 mg/ml EDM 20 mg/ml
EDM 40 mg/ml pirantel pamoat NaCl Ju m la h ca ci ng Perlakuan bahan uji Profil kematian cacing jam ke 1 jam ke 2 jam ke 3 jam ke 4 jam ke 5 jam ke 6 jam ke 7 jam ke 8 jam ke 9
waktu  total  mematikan  cacing  yang  ditentukan oleh konsentrasi ekstrak yang digunakan. Ekstrak daun  anting-anting  dan  daun  belimbing konsentrasi 40 - 100% mematikan cacing dalam waktu  1,1  –  8,2  jam.  Ekstrak  biji  labu  kuning konsentrasi 54 dan 70% mematikan cacing dalam waktu 7,1 – 11,8 jam. Ekstrak daun anting-anting 60 – 100% mematikan cacing dalam waktu 1,5 – 3,8 jam. Data ini mendukung efektivitas ekstrak daun  miana  sebagai  vermisida  dengan pembanding  ekstrak  tanaman  lainnya  dengan dosis kecil (1, 2 dan 4%b/v ) memberikan potensi yang setara dengan ekstrak lainnya dengan dosis besar.  Efektivitas  dosis  pemberian  berpengaruh dalam  mula  kerja  obat  dan  durasi  kerja  obat karena  mekanisme  kerja  yang  dihasilkan  oleh senyawa  aktif  dalam  tanaman.  Besarnya penghambatan  proses  pada mitokondria cacing dapat  dipengaruhi  oleh  besarnya  jumlah  obat yang  diberikan.  Beberapa  produk  alami tampaknya menggunakan aktivitas anthelmintiknya melalui
penghambatan
mitokondria , tanpa menimbulkan toksisitas yang berlebihan  bagi  inangnya  ( Adak  dan  Kumar, 2020 ). Mekanisme ekstrak daun miana sebagai vermisida  ditentukan  oleh  zat  aktif  (metabolit sekunder)  yang  terkandung  dalam  ekstrak. Ekstrak  daun  miana  mengandung  senyawa alkaloid,  tannin,  saponin,  flavonoid  (flavon), fenol,  steroid,  terpenoid,  phlobotanin  dan antrakuinon.
Penelusuran literatur telah menunjukkan  bahwa  senyawa  kimia  yang terkandung dalam ekstrak tanaman memberikan aktivitas antelmentika seperti   terpen, glikosida, saponin, flavonoid, tanin dan alkaloid memiliki aktivitas anthelmintik.
Penelusuran  pustaka  menunjukkan bahwa  senyawa  tanin  yang  terkandung  dalam ekstrak  daun  miana  mampu  menghambat  kerja enzim pencernaan sehingga mengganggu proses metabolisme  pencernaan  pada  cacing  dan merusak  membran  sel  cacing  yang  dapat menyebabkan kematian ( Hanafiah et al., 2022 ). Kandungan senyawa alkaloid berpotensi sebagai vermisida  dengan  mekanisme  menekan  fungsi sistem saraf pusat. sehingga  terjadi kelumpuhan otot atau paralisis pada cacing ( Mahatriny et al., 2014; Hanafiah  et  al.,  2022 ).  Flavonoid  dan saponin yang terkandung dalam ekstrak tanaman termasuk  dalam  ekstrak  daun  miana  berpotensi menghambat  enzim  asetilkolinesterase  yang akan  berpengaruh  terhadap  otot-otot  cacing ( Pratama,  2021 ).    Demikian  pula  kandungan Fenol  akan  bekerja  dengan  cara  menyebabkan terjadinya  gangguan  pada  glikoprotein  di permukaan sel cacing ( Liu et al., 2020 ).
Pentingnya  profil  kematian  cacing diamati untuk mengetahui potensi senyawa aktif herbal dan pengembangannya untuk memperoleh hasil  yang  lebih  memuaskan  dalam  menunjang kemandirian bahan baku obat di Indonesia. Liu et al  (2022) menyatakan  hanya  sedikit  penelitian yang  menentukan  mekanisme  kerja  senyawa antelmintiknya,    mengingat  besar  dan  sulitnya upaya  yang  dilakukan  untuk  membuktikan  hal tersebut.  Meskipun  demikian,  gambaran  profil yang  terjadi  pada  subyek  cacing  dapat  dengan cepat mengidentifikasi senyawa tersebut dengan mekanisme aksi baru yang diduga.

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian disimpulkan bahwa: Profil kematian cacing setelah pemberian ekstrak daun miana konsentrasi 10, 20 dan 40 mg/ml dan pyrantel  pamoat  2,5  mg/ml  memberikan  data onset of action berturut 4, 3, 2 dan 1 jam. Durasi kerja bahan uji berturut 5, 5, 3 dan 1 jam. Dosis efektif  dihasilkan  oleh  konsentrasi  40  mg/ml yang  dapat  mematikan  cacing  mulai  2  jam setelah pemberian bahan uji.

## SARAN
Disarankan  untuk  melanjutkan  penelitian  ini pada  3  jenis  cacing  lainnya  yang  menjadi penyebab infeksi kecacingan di Indonesia.

## DAFTAR PUSTAKA
Adak M, Kumar P.,  2022. Herbal anthelmintic agents:  a  narrative  review .  J  Tradit  Chin
Med. 2022 Aug;42(4):641-651. doi:
10.19852/j.cnki.jtcm.2022.04.007. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/3584898
2/
Apriliani  D,  Suwendar,  Fitrianingsih  SP,  2022. Uji  Aktivitas  Antelmintik  Ekstrak  Etanol Kulit  Buah  Delima  (Punica  granatum  L.) terhadap  Cacing  Gelang  Babi  Dewasa (Ascaris  suum  Goeze.)  dan  Telurnya Secara  In  Vitro . Bandung  Conf.  Ser.
Pharm . 2. https://doi.org/10.29313/bcsp.v2i2.3966
Amelia, M., Jasaputra, D.K., Tjokropranoto, R., 2017. Effects of Pomegranate Peel (Punica granatum L.) Extract as an Anthelmintic . J. Med. Heal. 1. https://doi.org/10.28932/jmh.v1i5.537 Astuti,  S.S.E.,  2020.  Identification  of  the Anthelmintic Power of Anting-anting Leaf and  Starfruit  Leaf .  Heal.  Notions  4. https://doi.org/10.33846/hn40502
Dibfiora,  R.,  Situmorang,  E.U.M.,  Firmansyah, R.D.,  2021. Efficacy  of  Shallot  (Allium cepa  L.  Var.  aggregatum)  and  Garlic
(Allium  sativum)  as  Herbal  Anthelmintic against  Ascaris  suum .  J.  Med.  Heal.  3. https://doi.org/10.28932/jmh.v3i1.3267 Ganestya,  S.,  Djumarga,  S.,  Utari,  C.S.,  2017.
Anthelmintic effects of pumpkin
(Cucurbita  moschata)  seed  extract  on Ascaris  suum  in  vitro .  Biofarmasi  J.  Nat. Prod. Biochem. 10. https://doi.org/10.13057/biofar/f100101
Hanafiah MR.,  Yuniarni U,  Choesrina R, 2022. Studi Literatur Aktivitas Antelmintik pada Tanaman  Pepaya  (Carica  papaya  L.) terhadap  Cacing  Gelang  Babi  (Ascaris suum Goeze) . Bandung Conf. Ser. Pharm.
2. https://doi.org/10.29313/bcsp.v2i2.4210
Lee  J,  Ryu  JS.  Current Status  of  Parasite Infections  in  Indonesia:  A  Literature Review. Korean J Parasitol . 2019;57(4):329-339.
doi:10.3347/kjp.2019.57.4.329 Liu  M,  Panda  S.  J.,  Luyten  W.,  2022. Plant- Based Natural Products for the Discovery and  Development  of  Novel  Anthelmintics against  Nematodes .  Biomolecules.  2020 Mar;  10(3):  426.  Published  online  2020 Mar  9.  doi:  10.3390/biom10030426. PMCID: PMC7175113. PMID: 32182910 https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/article s/PMC7175113/
Mahatriny, N. N., Payani, N. P. S., Devi, P. K. S., Yulita, S., Astuti, K. W., dan Oka, I. B.  M. (2014). Uji    Aktivitas    Anthelmintik Ekstrak  Etanol    Daun    Pepaya    Pada Cacing Gelang Babi . Program Kreativitas
Mahasiswa-Penelitian, pp. 1-5.
Mutiarawati,  D.T.,  2020. In  Vitro  Anthelmintic
Activity  of  Acalypha  Indica  Leaves
Extracts . Heal. Notions 4. https://doi.org/10.33846/hn40305 Menteri  Kesehatan.2017. Peraturan  Menteri
Kesehatan  Republik  Indonesia  Nomor  15 Tahun  2017  Tentang  Penanggulangan Cacingan . Menteri Kesehatan Pratama,  R.  A.  2021. Potensi  Anthelmintik Mangga  Arumanis  (Mangifera  indicaL.). Jurnal Medika Hutama, Vol. 2, No. 2, pp. 498-500 Ridwan  Y.,  Satrĳa  F,  Handharyan  E.  2020. Aktivitas  Anticestoda  In  Vitro  Metabolit Sekunder  Daun  Miana  (Coleus  blumei . Benth)  terhadap  Cacing  Hymenolepis microstoma  In  Vitro . Jurnal  Medik Veteriner DOI: 10.20473/jmv.vol3.iss1.2020.31-37  April 2020,  Vol.3  No.1,  31-37  online  pada https://e-journal.unair.ac.id/JMV    J  Med Vet 2020 , 3(1):31-37. pISSN: 2615-7497; eISSN: 2581-012X | 31 Roring,  T.,  Simbala,  H.E.I.,  De  Queljoe,  E., 2019. Uji Efek Antelmintik Ekstrak Etanol Daun  Pinang  Yaki  (Areca  Vestiaria) Terhadap  Cacing  Gelang  (Ascaris Lumbricoides) Secara In Vitro . Pharmacon 8. https://doi.org/10.35799/pha.8.2019.2931 3 Sumual,  P.F.,  Bodhi,  W.,  Lebang,  J.S.,  2021 .
Uji  Aktivitas  Antelmintik  Ekstrak  Etanol Daun  Sirih  (Piper  Betle  L.)  Terhadap Cacing  Gelang  (Ascaris  Lumbricoides)
Secara  In  Vitro. Pharmacon 10. https://doi.org/10.35799/pha.10.2021.340 38
Open  Access  This  article  is  licensed  under  a  Creative  Commons Attribution  4.0  International  License,  which  permits  use,  sharing, adaptation, distribution, and reproduction in any medium or format, as long  as  you  give  appropriate  credit  to  the  original  author(s)  and  the source, provide a link to the Creative Commons license, and indicate if
changes were made. The images or other third-party material in this article are included in the article’s Creative Commons license unless indicated otherwise in a credit line to the material. If material is not included in the article’s Creative Commons license and your intended use is not permitted by statutory regulation or exceeds the permitted use, you will need to obtain permission directly from the copyright holder. To view a copy of this license, visit http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/.