Jurnal Pharmascience, Vol .03, No.02, Oktober 2016, hal: 14 - 22 ISSN-Print. 2355 – 5386 ISSN-Online. 2460-9560 http://jps.unlam.ac.id/

## Research Article

## Efek Ekstrak Minyak Ikan Patin
( Pangasius hypopthalmus ) Terhadap Peningkatan Memori dan Fungsi Kognitif  Mencit
Berdasarkan Passive Avoidance Test
*Hidayaturrahmah,  Muhamat, Ali Akbar
Program Studi Biologi FMIPA Universitas Lambung Mangkurat *Email: rahmahidayahipb09@yahoo.com

## ABSTRAK
Salah  satu  produk  pangan  fungsional  dari  ikan  air  tawar  dan  dikenal  sebagai sumber  protein  adalah  ikan  patin  yang  banyak  ditemukan  di  Kalimantan  Selatan. Minyak dari ikan tidak hanya bisa dihasilkan oleh ikan air laut tetapi bisa juga berasal dari ikan air tawar seperti ikan patin. Ekstrak minyak ikan patin mengandung omega 3 (EPA dan DHA), dan omega 6 (ARA) yang sangat bagus sebagai asupan gizi, kesehatan, pertumbuhan  dan  perkembangan  sel  khususnya  pada  memori  otak.  Penelitian  ini bertujuan untuk mengkaji pengaruh ekstrak minyak ikan patin terhadap peningkatan memori dan fungsi Kognitif pada mencit berdasarkan passive avoidance test . Penelitian ini  menggunakan  rancangan  acak  lengkap  (RAL)  dengan  5  perlakuan  dan  4 pengulangan. Perlakuan yang digunakan berupa pemberian ekstrak minyak ikan patin dengan dosis 26, 52, 104 mg/Kg BB, pirasetam dan aquadest. Pengukuran  memori otak dilakukan  dengan  uji passive  avoidance  test .  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa pemberian ekstrak minyak ikan patin berpengaruh terhadap peningkatan memori otak dan fungsi Kognitif.
Kata kunci: minyak , ikan patin, memori, fungsi kognitif, mencit

## ABSTRACT
One of the functional food product of freshwater fish and is known as a protein source  is  catfish  commonly  found  in  South  Kalimantan.  From  fish  oil  can  not  only  be produced by sea water fish but can also come from freshwater fish such as catfish. Patin fish oil extract containing omega-3 (EPA and DHA) and omega 6 (ARA) was very nice as nutrition,  health,  growth  and  development,  especially  in  the  brain's  memory  cells.  This study aims to assess the effect of oil extracts of catfish to the improvement of memory and cognitive  function  in  mice  by  passive  avoidance  test.  This  study  uses  a  completely randomized design (CRD) with 5 treatments and 4 repetitions. The treatments used for the provision of oil extracts of catfish at a dose of 26, 52, 104 mg / kg, piracetam and distilled water. Measurement of brain memory is done by using passive avoidance test. The results
showed  that  the  extract  oil  catfish  effect  on  the  increase  in  the  brain's  memory  and cognitive function.
Keywords: oil, catfish, memory, cognitive function, mice

## I. PENDAHULUAN
Peningkatan kesejahteraan penduduk telah  mendorong  terjadinya  perubahan pola  makan  yang  ternyata  berdampak negatif pada meningkatnya berbagai macam  penyakit  degeneratif.  Berdasarkan hal  tersebut,  pemerintah  mulai  gencar meningkatkan  produk  pangan  fungsional. Pangan  fungsional  merupakan  makanan yang mampu memberikan efek menguntungkan bagi  kesehatan disamping efek  nutrisi  yang  secara  prinsip  memang dimiliki oleh makanan tersebut.
Salah satu produknya adalah ikan air tawar yang dikenal sebagai sumber protein bermutu  tinggi,  seperti  ikan  patin  yang banyak  ditemukan  di  Kalimantan  Selatan. Sebagai  bahan  pangan  fungsional,  ikan memiliki  banyak  keunggulan  dibanding produk  hewan  lainnya  seperti  dari  segi jumlahnya yang melimpah, harganya lebih murah,  lebih  mudah  dicerna,  banyak mengandung  asam  lemak  tidak  jenuh termasuk DHA, EPA, dan ARA, kandungan mineralnya lebih lengkap, serta ikan  lebih  cepat  disajikan  dan  dapat diterima oleh lapisan masyarakat (Winarti,
2010).
Ikan patin ( Pangasius
hypopthalmus )  merupakan  salah  satu  ikan
yang mudah berkembang biak di Indonesia,  serta  komoditas  utama  ikan  air tawar  yang  ditargetkan  oleh  pemerintah Indonesia  dalam  perikanan  budidaya (Julaikha, 2014). Selama tahun 2004-2009, produksi  ikan  patin  di  Kabupaten  Banjar menunjukkan kenaikan yang sangat signifikan. Jika  pada  tahun  2004  produksi patin  hanya  mencapai 448,45  ton,  maka pada  tahun  2009  menjadi  4236  ton atau hampir 10 kali lipatnya (KKP, 2013).
Ikan  patin  memiliki  karakteristik yang  berbeda  dibandingkan  dengan  jenis ikan  air  tawar  lainnya  yaitu  memiliki daging yang berukuran besar dan berwarna putih.  Ikan  patin  mempunyai  kandungan lemak  yang  cukup  banyak  dibandingkan dengan  jenis  ikan  air  tawar  lainnya  yaitu sekitar  40%  (Lestari,  2010).  Menurut Panagan  (2012),  berdasarkan  analisis kandungan  gizi  ikan  patin  mengandung 16,08% protein, kandungan lemak/minyak sekitar  5,75%,  karbohidrat  1,5%,  abu 0,97%  dan  air  75,7%.  Jika  dibandingkan dengan kadar lemak/minyak ikan air tawar lain seperti ikan gabus dan ikan mas  yaitu 4,0% dan 2,9%, ikan patin memiliki kadar lemak/minyak yang lebih tinggi.
Minyak  ikan  merupakan  asupan minyak esensial yang mengandung banyak
nutrisi penting yang dibutuhkan oleh tubuh manusia  karena  mengandung  sekitar  25% asam  lemak  jenuh  dan  75%  asam  lemak tak  jenuh  (Isnani,  2013).  Minyak  yang terkandung  dalam  ikan  umumnya  adalah asam  lemak  tak  jenuh  yang  diantaranya dikenal  dengan  omega-3  dan  omega-6. Asam  lemak  alami  yang  termasuk  asam lemak omega-3 adalah asam eikosapentaenoat  atau  EPA  dan  asam dokosaheksaetanoat  atau  DHA.  Asam lemak  yang  termasuk  omega-6  adalah asam  linoleat  dan  asam  arakhidonat  atau ARA.  Menurut  penelitian  dari  Panagan (2012),  ekstrak  minyak  ikan  yang  berasal dari  ikan  patin  lebih  banyak  mengandung EPA, DHA dan ARA yaitu masing-masing sebesar  0,21-2,48%,  0,95-9,96%,  dan 0,349-1,105% dibandingkan dengan ekstrak minyak ikan lele dengan kandungan  EPA  0,43-1,55%  dan  DHA 0,68-0,71%  (Gunawan,  2014)  dan  ekstrak minyak  ikan  nila  dengan  kandungan  EPA 1,15% dan DHA 1,03% (Yoshiara, 2013).
Adapun  fungsi  utama  dari  DHA, ARA  dan  EPA  yaitu  dapat  membantu proses tumbuh-kembang otak (kecerdasan), perkembangan janin, perkembangan indra penglihatan, perkembangan  saraf,  sistem  kekebalan tubuh  balita  dan  fungsi  kardiovaskular (Julaikha,  2014).  Berdasarkan  banyaknya manfaat minyak ikan, terutama kandungan EPA,  DHA  dan  ARA  bagi  kesehatan
manusia.  Hal  tersebut  akan  mendorong untuk  dilakukan  produksi  minyak  ikan yang merupakan produk pangan fungsional  yang  mampu  mempengaruhi tumbuh-kembang,  fungsi  kognitif  belajar dan memori otak pada anak-anak.
Intelegensi    dan  tumbuh–kembang anak-anak dapat diketahui dari pengukuran fungsi  koqnitif  dan  memori.  Fungsi Kognitif  adalah  kemampuan  berpikir  dan memberikan  rasional,  termasuk  proses belajar,  menilai,  orientasi,  persepsi  dan memperhatikan, sedangkan memori mengacu  pada  proses  dimana  informasi yang  baru  saja  didapatkan  itu  disimpan dan  dipergunakan  untuk  kegiatan  yang akan  datang  (Herlina,  2011).  Tujuan penelitian  ini  adalah  mengkaji  pengaruh ekstrak  minyak  ikan  patin  terhadap peningkatan    memori  dan  fungsi  kognitif mencit berdasarkan passive avoidance test pada mencit.

## II. BAHAN DAN METODE

## A. Bahan
Bahan yang digunakan dalam penelitian  ini  yaitu  ikan  patin  segar  dan mencit,  serta  bahan-bahan  kimia  yang meliputi  NaCl  2,5  %,  aquadest,  bentonit 1 %, larutan biuret, metanol dan piracetam.
Alat yang digunakan dalam penelitian  ini  yaitu  alat  uji  menghindar pasif,  baki  besar, centrifuge, kompor, icebox ,  panci stainless  steel ,  hotplate
stirer,  jarum syringe ,  spatula, tube 2  mL, beaker glass , stopwatch , penyaring air dan corong pisah.

## B. Pengambilan Sampel Ikan Patin
Pengambilan  sampel  ikan  patin dilakukan  di  BBAT  (Balai  Budidaya  Ikan Air  Tawar)  Mandiangin  Kal-Sel.  Sampel ikan patin diambil dengan icebox kemudian  dicuci  bersih  dan  ditiriskan, setelah  itu  ditimbang  untuk  persiapan ekstraksi.

## C. Ekstraksi Minyak Ikan Patin
Berdasarkan  penelitian  Panagan (2012),  ikan  yang  digunakan  memiliki berat  sekitar  650-879  gram  (berumur  6 bulan) karena mampu menghasilkan kadar minyak 3,827% lebih banyak dibandingkan  minyak  ikan  cod  dengan berat yang sama yaitu 0,4%.
Pada tahap ekstraksi minyak dilakukan  dengan  metode wet  rendering yaitu  ikan  patin  yang  ditimbang  beratnya sekitar 750 gram dipotong-potong menjadi potongan  kecil  dengan  tujuan  untuk mempermudah  proses  ekstraksi.  Bagian- bagian  ikan  yang  telah  dipotong-potong kecil  dimasukkan  kedalam  panci stainless steel ,  kemudian  ditambahkan  aquades sebanyak  500  mL.  Ikan  direbus  sampai mendidih  dan  diamkan  selama  30  menit sambil  diaduk  perlahan.  Rebusan  ikan disaring untuk memisahkan antara minyak
kasar dan padatan. Lapisan minyak dan air dipisahkan dengan corong pisah (Panagan, 2012).  Diambil  lapisan  minyak,  kemudian dimasukkan  kedalam erlenmeyer untuk dipanaskan pada suhu 55°C - 60°C selama 5  menit.  Lakukan  proses  pemurnian dengan  penambahan  bentonit  sebesar  1% dengan cara dipanaskan kembali pada suhu 80°C  selama  30  menit  (Hastarini,  2012). Minyak  disentifugasi  dengan  kecepatan 10000  rpm  selama  10  menit  dengan  suhu 10°C  dan  pisahkan  minyak  dari  endapan (Julaikha, 2014).

## D. Pemeliharaan Hewan Coba
Hewan  uji  yang  digunakan  dalam penelitian ini adalah mencit ( Mus musculus )  jantan  yang  berumur  sekitar  1 bulan.  Hewan  ini  diperoleh  dari  Peternak Mencit di Yogyakarta sehingga didapatkan subjek  yang  homogen  (galur,  jenis kelamin,  dan  umur)  untuk  menanggulangi efek  faktor  genetik  pada  hasil  penelitian. Sebelum  diperlakukan  sesuai  rancangan penelitian, subjek terlebih dahulu diaklimitasi selama 1 minggu serta mencit diberi  makan,  minum  dan  kandang  yang sama  dengan  tujuan  mengurangi  tingkat kestresan hewan uji dan mampu beradaptasi  dengan  kondisi  tempat  uji (laboratorium).  Hal  tersebut  dilakukan untuk menanggulangi efek faktor makanan dan  lingkungan  terhadap  hasil  penelitian. Kandang  ditempatkan  didalam  ruangan
yang  memiliki  ventilasi  dan  mendapatkan cahaya  matahari  secara  tidak  langsung. Kandang  dialasi  dengan  sekam  padi  dan dibersihkan  sedikitnya  2  kali  dalam seminggu.

## E. Rancangan Penelitian
Penelitian       ini       merupakan penelitian  ekperimental  dan  rancangan penelitian yang digunakan adalah
Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  dengan 5  perlakuan  pada  4  ulangan.  Pola pengelompokan perlakuan yaitu :
1.  Kontrol      negatif;      perlakuan      yang hanya diberikan aquadest steril.
2.  Kontrol      positif;      perlakuan      yang hanya  diberikan  Piracetam  dengan dosis 500 mg/kgBB.
3.  Perlakuan    yang    diberikan    ekstrak minyak  ikan  patin  dengan  dosis  26 mg/kgBB.
4.  Perlakuan    yang    diberikan    ekstrak minyak  ikan  patin  dengan  dosis  52 mg/kgBB.
5.  Perlakuan    yang    diberikan    ekstrak minyak  ikan  patin  dengan  dosis  104 mg/kgBB (EMIP  :  Ekstrak  minyak ikan patin (Christiana, 2008).
F. Uji  Pembelajaran/  Learning  Time (Fungsi  Kognitif)    dan  Memori

## Otak
Pada  perlakuan  I,  III,  IV,  dan  V mencit  diberi  sediaan  secara  oral  dengan menggunakan  sonde  berdasarkan  dosis
yang  telah  ditentukan  selama  3  minggu, sedangkan  untuk  perlakuan  II  mencit diberikan  sediaan  secara  oral  setiap  satu minggu  sekali  selama  tiga  minggu. Selanjutnya  akan  dilakukan  beberapa  uji dengan alat uji menghindar pasif   ( passive avoidance  test )  yang  sudah  dimodifikasi dari  Jarvik  dan  Koop  (Herlina,  2011), yaitu :

## 1. Uji Fungsi Kognitif
Uji   pembelajaran ( Learning  Time ), setiap mencit  akan  masuk  ke  ruangan  gelap  dan lama  mempelajari  lingkungan  sampai masuk  ke  ruangan  gelap  dihitung  sebagai LT atau uji belajar ( learning time ), setelah mencit  masuk  ke  ruangan  gelap  segera diberi  shock  listrik  atau  gangguan  lainnya pada kaki mencit (Herlina, 2011).
2. Uji memori otak ( Retention Time ) , Dilakukan berdasarkan pengamatan setelah  24  jam  dari  uji  fungsi  kognitif belajar  .  Uji  ini  dilakukan  dengan  cara yang  sama  dengan  uji  fungsi  kognitif belajar    yaitu  mencit  akan  masuk  ke ruangan  gelap  tanpa  diberikan  kejutan listrik,  dan  lama  waktu  menunggu  untuk masuk  ke  ruang  gelap  mewakili  proses memori yang disebut dengan RT ( retention time )  atau  uji  mengingat.  Pengukuran terdiri  dari  LT  ( learning  time )  atau  uji belajar  dan  RT  ( retention  time )  atau  uji retensi.  Waktu  antara  belajar  dan  uji retensi adalah 24 jam, yang menggambarkan  kemampuan  mengingat
jangka  pendek  dari  objek.  Waktu  yang dibutuhkan  oleh  sampel  mulai  dari  ruang kecil,  lalu  masuk  ke  dalam  ruangan  gelap dicatat  dengan  menggunakan  stopwatch. Subjek  dianggap  mampu  belajar  dengan baik  bila  sebelum  60  detik  sudah memasuki kamar gelap, sedangkan kriteria untuk kemampuan mengingat dengan baik bila  pada  uji  retensi  subyek  belum memasuki ruangan gelap selama 300 detik. Subyek  dinyatakan  belajar  dan  mengingat dengan baik apabila RT – LT > 0. Variabel lama retensi yang menggambarkan kemampuan  belajar  dan  mengingat  adalah RT – LT (Herlina, 2011).

## G. Analisis Data
Data  yang  didapat  dari  uji  fungsi kognitif  belajar    dan  memori  otak  pada mencit  dilakukan  uji  normalitas  dan homogenitas  dengan  menggunakan  uji Kolmogorov-Smirnov dan  uji Levene .  Jika diperoleh  data  yang  terdistribusi  normal dan homogen, maka dilakukan uji parametrik Analisis Variasi (ANAVA) dan dilanjutkan  dengan  analisis Duncan .  Jika data  percobaan  tidak  terdistribusi  normal dan  homogen,  maka  dilakukan  uji  non- parametrik  menggunakan  uji Kruskal- Wallis dan  dilanjutkan  dengan  uji Mann- Whitney U .

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN
Fungsi  kognitif dan  memori  otak dilakukan  sebanyak  tiga  kali  yaitu  pada hari  ke-0,  hari  ke-11  dan  hari  ke-22  dapat dilihat pada gambar 1 dan 2.
Gambar  1 .  Hasil  analisis  uji  fungsi kognitif  belajar    hari  ke-0, hari ke-11 dan hari ke-22
Fungsi  kognitif  dan  memori  otak pada  penelitian  ini  diukur  menggunakan uji passive avoidance test (uji menghindar pasif)  .  Hasil  yang  didapat  antara kelompok  perlakuan  kontrol  negatif, kontrol  positif,  dan  pemberian  ekstrak minyak ikan patin berbeda nyata satu sama lainnya  (sig  <0,05).  Berdasarkan  hal tersebut,  hasil  yang  didapat  dari  uji menghindar  pasif  ( passive  avoidance  test) menunjukkan  bahwa  pemberian  ekstrak minyak  ikan  patin  berpengaruh  terhadap peningkatan    memori  dan  fungsi  Kognitif mencit berdasarkan passive avoidance test mencit.
Gambar  2 . Hasil analisis uji memori otak hari ke-0, hari ke-11 dan hari ke-22.
Gambar  3. Uji  menghindar  pasif  (uji fungsi  kognitif  belajar    dan memori  otak)  :  A.  mencit masih  diruang  terang;    B. mencit masuk keruang gelap.
Pada  pengamatan  hari  ke-11, didapatkan  hasil  memori  pada  uji  Anova dengan  nilai  sig  <0,05.  Hal  tersebut menyatakan bahwa ada pengaruh perlakuan  terhadap  fungsi  kognitif  belajar dan  memori  otak,  sehingga  dilakukan  lagi uji  lanjut  (uji  Duncan).  Berdasarkan  uji
lanjut,  diketahui  bahwa  ekstrak  minyak ikan patin berpengaruh terhadap peningkatan    memori  dan  fungsi  kognitif mencit berdasarkan passive avoidance test m encit (berbeda nyata).
Kontrol  positif  berupa  perlakuan dengan  pemberian  pirasetam  500  mg/kg BB  mempengaruhi  fungsi  kognitif  belajar dan  memori  otak  sedikit  lebih  besar daripada kontrol negatif  berupa perlakuan dengan pemberian aquadest. Pada pengamatan  hari  ke-22,  didapatkan  hasil yang  hampir  sama  dengan  hari  ke-11. Kontrol  positif  berupa  perlakuan  dengan pemberian  pirasetam  500  mg/kg  BB berbeda nyata dengan kontrol negatif yang berupa perlakuan dengan pemberian aquadest .
Pirasetam adalah obat yang mampu mengatur fungsi serebral dengan meningkatkan  kemampuan  Kognitif  pada otak yang mengalami penurunan. Piracetam merupakan senyawa amida atau secara farmakologi dikenal sebagai subgolongan hemoreologi yang
mekanisme kerjanya menurunkan viskositas  darah  sehingga  meningkatkan aliran  darah  ke  otak.  Hal  ini  terbukti berdasarkan penelitian Syifa (2010) menggunakan  piracetam  terhadap  pasien stroke  yang  mengalami  penurunan  fungsi kognitif mendapatkan hasil yang memuaskan  dengan  peningkatan  25% fungsi  Kognitif,  2  dari  10  pasien
A B
mengalami pulih sempurna dan meningkatkan  aktivasi  aliran  darah  secara signifikan.
Berdasarkan hasil penelitian, pemberian  ekstrak  minyak  ikan  patin dengan variasi dosis tersebut dalam jangka 21  hari  mampu  mempengaruhi  fungsi kognitif  belajar    dan  memori  otak  mencit dengan  sangat  baik.  Hal  ini  dikarenakan pengaruh  dari  DHA,  EPA  dan  ARA  yang terdapat  dalam  ekstrak  minyak  ikan  patin yang mampu meningkatkan fungsi kognitif belajar  dan memori otak mencit. Omega 3 (EPA dan DHA) merupakan asam linolenat yang berfungsi untuk pembentukan  spingomielin  dan  menjadi komponen  struktural  sel  saraf  (mielin). Spingomielin yang dibentuk oleh EPA dan DHA  tadi  digunakan  untuk  membentuk membran sel otak (Diana, 2013).
Kadar  EPA  dan  DHA  pada  otak tercukupi  akan  membuat  pesan  yang disampaikan dari otak ke semua akson dan myelin yang dipercepat oleh
neurotransmitter  sesuai  dengan  perintah otak.  Perkembangan  gerak  motorik  tubuh yang  dihasilkan  menjadi  cepat  dan berkembang  dengan  baik,  sebaliknya  jika kadar EPA dan DHA kurang di otak maka membran sel mati sehingga hantaran sinyal yang  diteruskan  ke  akson  tidak  lancar. Akibatnya  neurotransmitter  tidak  bekerja serta  gerak  dan  perkembangan  motorik tubuh  menjadi  lambat.  Neurotransmitter
berfungsi  sebagai  penyampai  pesan  dari sel  saraf.  Pasokan  omega  3  sangat dibutuhkan terutama pada trimester terakhir,  pasca  kelahiran  dan  masa  dini anak. Kekurangan kedua jenis asam lemak esensial  tersebut  saat  lahir  berkorelasi dengan  berat  badan  yang  rendah,  lingkar kepala  yang  kecil  dan  ukuran  plasenta yang  kecil.  Akibatnya  perkembangan sistem  saraf  pusat  dan  kemampuan Kognitif di masa selanjutnya turut terpengaruh (Diana, 2013).

## IV. KESIMPULAN
Kesimpulan  yang  dapat  diperoleh dari  penelitian  ini  adalah  ekstrak  minyak ikan  patin  mampu  meningkatkan  memori otak  dan  fungsi  kognitif    berdasarkan passive avoidance test pada mencit.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Terimakasih  kepada    PNBP  PUPT ULM yang telah mendanai penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Aprillia,  F.  2013. Uji  Aktivitas  Stimulan Sistem  Syaraf  Ekstrak  Biji  Pinang (Areca catechu L.) Terhadap Mencit  Putih  (Mus  musculus  L.) dan Penentuan ED 50 yang Diberikan  Secara  Oral .  Jurnal Seminar Nasional Matematika, Sains  dan  Teknologi.  Volume  4  : 51-58.
Diana,  F.  M.  2013. Omega  3  dan Kecerdasan Anak . Jurnal
Kesehatan  Masyarakat.  Volume  7
Nomor 2 : 82-88.
Gunawan,  E.  R.,  Suhendra  D.,  Handayani
S. S., Kurniawati L., Murniati, dan Nurhidayanti. 2014. Analisis Kandungan  Asam  Lemak  Omega  3 dan  6  pada  Bagian  Kepala  dan Badan  Ikan  Lele  (Clarias  Sp.)
Melalui  Reaksi  Enzimatis. Jurnal
Seminar  Nasional  Kimia  ISBN  : 978-602-0951-00-3 Hastarini,  E.,  Fardiaz,  D.,  Irianto,  H.  E., dan Budijanto, S. 2012. Karakteristik  Minyak  Ikan  Dari Limbah  Pengolahan  Filat  Minyak Ikan Patin Siam (Pangasius hypopthalmus)  dan  Patin  Jambal (Pangasius  djambal). Agritech.
Volume 32 Nomor 4 : 403-410.
Herlina,  L.  H.  2011. Pengaruh  Senyawa
Murni  dari  Pegagan  (Centella asiatica  (L.)  Urban)  Terhadap Fungsi Koqnitif Belajar dan Mengingat  dan  Efek  Toksisitas pada  Mencit  (  Mus  musculus) Betina. Jurnal  Seminar  Nasional Saint IV Fakultas MIPA Universitas Sriwijaya. Isnani,  A.  N.  2013. Ekstraksi  dan Karakterisasi  Minyak  Ikan  Patin yang  Diberi  Pakan  Pellet  di Campur Probiotik. Skripsi. Fakultas MIPA Universitas Jember.
Julaikha,  A.  2014. Karakteristik  Minyak Ikan  dari  Belly  Flap  Patin  Siam (Pangasius  hypopthalmus)  pada Berbagai Tahap Proses pemurnian. Skripsi.  Fakultas  Perikanan  dan Ilmu  kelautan  Institut  Pertanian Bogor.
Kementerian  Kelautan  dan  Perikanan (KKP).  2013. Kabupaten  Banjar Kalimantan  Selatan  Kembangkan Minapolitan Patin dan Nila. http://www.wpi.kkp.go.id/index.php/85- liputan-aktual/90-kabupaten- banjar-kalimantan-selatan- kembangkan-minapolitan-patin- dan-nila  (diakses  pada  tanggal  5 Maret 2015)
Lestari,  N.  2010. Formulasi  dan  Kondisi OptimumProses Pengolahan “High Nutritive  Value”  Margarin  dari Minyak Ikan Patin (Pangasius sp.). Jurnal  Riset  Industri  Volume  IV Nomor 1 : 35-42.
Panagan,  A.  T.,  Yohandini,  H.,  dan Wulandari,  M.  2012. Analisis Kualitatif  dan  Kuantitatif  Asam
Lemak  tak  Jenuh  Omega-3  dan
Karakterisasi  Minyak  Ikan  Patin (Pangasius pangasius). Jurnal
Penelitian Sains Volume 15 Nomor 3(C). Prasetya,  D.  Y.,  dan  Yuliani,  S.  2014. Aktivitas Ekstrak Rimpang Temulawak  (Curcuma  xanthorriza Roxb.) Pada Radial Arm Maze dan
Passive  Avoidance  Test  Tikus Model  Demensia .  Pharmaciana. Volume 4 Nomor 2 : 157-164. Winarti,  S.  2010. Makanan  Fungsional. Graha Ilmu. Yogyakarta.
Yoshiara.  2013. Penentuan  Suhu  dan
Waktu pada Ekstraksi Wet Rendering  Minyak  Ikan  dari  By- Product  Ikan  Nila  (Oreochromis niloticus) .
Skripsi. Fakultas
Perikanan  dan  Ilmu  Kelautan
Institut Pertanian Bogor.