## UJI EFEKTIVITAS ANTHELMINTIK EKSTRAK RIMPANG BANGLE

## (Zingiber purpureum Roxb.) TERHADAP CACING Ascaridia galli SECARA IN VITRO
Submitted : 28 Nov 2015
Edited : 15 Des 2015
Accepted : 21 Des 2015
Yanthy Susanti, Indri Astuti, Ade Ari Dwi Astuti

## Akademi Farmasi IKIFA
Email : susantiyanthy@gmail.com

## ABSTRACT
The  research  was  conducted  to  observe  anthelmintic  efficacy  on  rhizome  extract  bangle  against Ascaridia  galli  by  in  vitro  procedure.  Experimental  study  was  conducted,  with  samples  rhizomes  bangle powder and  maceration method in three concentrations of 2%, 4% and 8%. The experimental animals used is Ascaridia galli with NaCl 0.9% as negative control and a pyrantel pamoate suspension as positive control with  concentrations  of 0.2%,  0.4%  and  0.6%.  The  study  was  conducted  in  July  2014  at  the  Laboratory  on IKIFA Academy of Pharmacy. The data analysis used is a probit analysis. Results of Research was rhizome extract bangle (Zingiber purpureum Roxb.) having as anthelmintic efficacy against Ascaridia galli with LC 50 2.29% and LT 50 in 4 hours 3 minutes 18 seconds.
Keywords : Zingiber purpureum Roxb., Ascaridia galli, anthelmintic , pirantel pamoat.

## PENDAHULUAN
Infeksi  cacing  merupakan  salah  satu  penyakit yang  paling  umum  tersebar  dan  menjangkit  lebih dari 2 milyar manusia di seluruh dunia. Walaupun penyakit  ini  sudah  umum,  namun  pembasmian penyakit  cacing  masih  tetap  merupakan  suatu masalah antara lain disebabkan oleh kondisi sosial- ekonomi di beberapa bagian dunia (1) .
Saat  ini  sudah  banyak  tersedia  obat-obat  baru yang lebih spesifik dengan kerja lebih efektif, salah satunya  pirantel  pamoat,  namun  obat  ini  memiliki efek  samping  antara  lain  gangguan  saluran  cerna dan  kadang  kala  sakit  kepala,  sehingga  perlu alternatif  pengobatan  yang  lebih  aman  bagi masyarakat yaitu dengan menggunakan obat bahan alam (1) .
Ripang  bangle (Zingiber  purpureum  Roxb.) merupakan  Salah  satu tanaman  yang  telah  dikenal luas  sebagai  obat.  Setelah  dilakukan  penelitian tanaman  ini  mengadung  minyak  atsiri,  flavonoid, saponin,  tanin,  triterpenoid  dan  glikosida  yang salah  satunya  berkhasiat  sebagai  obat  cacing (anthelmintik) (2) .
Salah  satu  jenis  cacing  penyebab  penyakit  ini adalah cacing gelang Ascaridia galli , yaitu spesies cacing  gelang  yang  menyerang  unggas  (ayam) yang  terdapat  dalam  usus  ayam  yang  terinfeksi cacing tersebut. Cacing ini digunakan karena lebih mudah diperoleh.
Penelitian  dilakukan  secara in  vitro terhadap ekstrak  rimpang  bangle  dengan  menggunakan metode  pengujian  pengukuran  kematian  dan paralisis cacing.

## BAHAN
Serbuk  rimpang  bangle (Zingiber  purpureum Roxb.) yang  diperoleh  dari  Balitro  Bogor,  air suling, suspensi pirantel pamoat (merk Combantrin),  larutan  NaCl  0,9%,  etanol  96%, cacing Ascaridia galli dengan panjang 8-11 cm.

## METODE PENLITIAN

## Persiapan hewan uji
Larutan  NaCl  0,9%  disiapkan  secukupnya dalam botol air mineral. Ayam kampung yang baru dipotong di tempat pemotongan ayam di pasar
Cempaka  Putih  Jakarta  Pusat  dibelah  satu  persatu ususnya. Bila ayam tersebut terinfeksi cacing maka akan  di  temukan  cacing Ascaridia  galli. Cacing diambil  menggunakan  pinset  lalu  dimasukkan kedalam  larutan  NaCl  0,9%  yang  telah  disiapkan. Cacing diseleksi dengan mengukur panjangnya (8- 11  cm)  sebanyak  280  ekor  cacing.  Cacing  hanya dapat  digunakan  satu  kali  setiap  penelitian  dan tidak dapat disimpan terlalu lama.

## Pembuatan ekstrak rimpang bangle
Sebelum  digunakan,  serbuk  rimpang  bangle dideterminasi  terlebih  dahulu  di  Lembaga  Ilmu Pengetahuan  Indonesia  (LIPI)  Bogor  dengan  hasil menyatakan bahwa serbuk rimpang bangle tersebut adalah benar rimpang bangle (Zingiber purpureum Roxb.) .  Serbuk  rimpang  bangle  sebanyak  30  g dimasukkan  ke  dalam  wadah  maserasi,  lalu tambahkan 300 ml etanol 96% direndam selama 6 jam  sambil  sesekali  diaduk,  kemudian  didiamkan sampai  24  jam.  Maserat  dipisahkan  dan  proses diulangi  2  kali  dengan  jenis  dan  jumlah  pelarut yang sama. Semua maserat dikumpulkan kemudian dipekatkan dengan oven bertekanan rendah pada suhu 50 0 C hingga diperoleh ekstrak kental (3) .

## Pembuatan deret konsentrasi ekstrak
Konsentrasi  ekstrak  dibuat  menjadi  2%,  4%,  dan 8% b/v (4) . Ekstrak kental ditimbang masing-masing sebanyak  2  g,  4  g,  dan  8  g. Masing-masing  hasil timbangan  tersebut  dilarutkan  ke  dalam  larutan NaCl   0,9% sebanyak 100 ml dalam beaker glass, kemudian  dimasukkan ke  dalam  cawan  petri masing-masing konsentrasi sebanyak 25 ml. Setiap konsentrasi dilakukan pengulangan sebanyak 5 kali.

## Pembuatan larutan pirantel pamoat
Suspensi  pirantel  pamoat  10  ml  (konsentrasi 2,5%)  disiapkan,  kemudian  diencerkan  dengan larutan  NaCl  0,9%  sehingga  didapat  konsentrasi pirantel  pamoat  masing-masing  sebesar  0,2%, 0,4%,  dan  0,6%  sebanyak  25  ml (5) .  Setiap konsentrasi  dilakukan  pengulangan  sebanyak  5 kali.

## Uji anthelmintik
Cacing  yang  digunakan  sebanyak  280  cacing Ascaridia  galli yang  dibagi  menjadi  7  kelompok perlakuan  dimana  masing-masing  konsentrasi menggunakan 8 ekor cacing (6) . Perlakuan dilakukan dengan merendam cacing Ascaridia galli ke dalam
zat uji   pada  masing-masing  kelompok,  kemudian diamati  setiap  15  menit  sampai  seluruh  cacing mati. Cacing  diusik  dengan  batang  pengaduk,  jika cacing tidak bergerak dimasukkan ke dalam beaker gelas yang berisi larutan NaCl suhu 50 0 C. Diusik dengan  batang  pengaduk,  jika  cacing  mati,  catat waktu dan jumlah cacing  yang  mati. Jika cacing bergerak pengamatan kembali pada langkah perendaman cacing dengan zat uji.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Berikut ini adalah hasil dari perlakuan suspensi pirantel  pamoat  dengan  berbagai  konsentrasi terhadap cacing Ascaridia galli.
Tabel 1 menunjukkan bahwa suspensi pirantel pamoat pada konsentrasi terkecil mampu mematikan  100%  cacing  pada  jam  ke  11 sedangkan  konsentrasi  terbesar  mematikan  100% cacing  pada  jam  ke  7.  Data  tersebut  digunakan pada perhitungan LC 50 dengan menghitung regresi linear  yang  menghasilkan  persamaan  garis  y  = 8.3321x  +  9.745.  Harga  LC 50 suspensi  pirantel pamoat  yang  didapat  adalah  sebesar  0.2695%. Waktu  kematian  dilakukan  analisa  LT 50 dengan menggunakan  data  konsentrasi  yang  mendekati harga  LC 50 yaitu  0,2%.  Perhitungan  berdasarkan regresi linear log waktu (x) dengan nilai probit (y). Persamaan  garis  yang  diperoleh  adalah  y  = 10.267x  -  3.6897  .  Harga  LT 50 pirantel  pamoat adalah 7 jam 1 menit 15 detik.
Tabel  2  menunjukan  bahwa  ekstrak  rimpang bangle pada konsentrasi terkecil mampu memtikan 100% cacing pada jam ke-6 sedangkan konsentrasi terbesar  dapat  mematikan  100%  cacing  pada  jam ke-5  yang  kemudian  digunakan  untuk  menghitung LC 50. Perhitungan  berdasarkan  regresi  linear menghasilkan persamaan garis yaitu y = 6.1771x + 2.7725.  Harga  yang  didapat  dari  ekstrak  rimpang bangle adalah sebesar 2.29%. Kemudian dilakukan analisa LT 50 dengan menggunakan data konsentrasi yang mendekati harga LC 50 yaitu 2%. Perhitungan berdasarkan  regresi  linear  antara  log  waktu  (x) dengan  nilai  probit  (y).  Persamaan  garis  yang diperoleh adalah y = 14.782x - 3.9869. Harga LT 50 yang didapat dari ekstrak rimpang bangle adalah 4 jam 3 menit 18 detik.
Tabel 1. Jumlah kematian cacing pada suspense pirantel pamoat Waktu Jumlah kematian cacing Ascaridia galli Konsentrasi larutan pirantel pamoat Jam Menit 0,2% 0,4% 0,6% 1 15 0 0 0 30 0 0 0 45 0 0 0 60 0 0 0
2 75
0 0 0 90 0 0 0 105 0 0 0 120 0 0 1 3 135 0 0 3 150 0 0 3 165 0 0 4 180 0 0 5 4 195 0 0 5 210 0 5 6 225 1 5 6 240 1 7 6 5 255 1 11 7 270 1 15 10 285 1 15 12 300 3 17 15 6 315 3 19 22 330 4 20 27 345 8 21 31 360 8 21 36
7
375 11 22 40 390 13 24 405 13 28 420 13 30
8
435 20 35
450 21 39 465 21 40 480 23 9 495 24 510 24 525 26 540 26 10 555 26 570 29 585 30 600 33 11 615 36 630 37 645
39 660 40
rimpang bangle Waktu Jumlah kematian cacing Ascaridia galli Konsentrsi ekstrak rimpang bangle Jam Menit 2% 4% 8% 1 15 0 0 0 30 0 0 0 45 0 0 0 60 0 0 0 2 75 0 0 0 90 0 0 0 105 0 1 4 120 0 1 4 3 135 0 2 4 150 0 2 4 165 1 2 4 180 4 5 5 4 195 4 8 9 210 7 10 13 225 8 14 16 240 11 15 20 5 255 12 18 24 270 12 21 29 285 18 26 35 300 20 31 40
6
315 25 40
330 33
345 34 360 40
Tabel  3. Waktu  kumulatif  kematian  100%
populasi cacing (jam) Kelompok Jenis perlakuan Konsentrasi (%) Waktu kumulatif kematian 100% populasi cacing (jam) 1 Larutan NaCl 0.9 36 2 Ekstrak rimpang bangle 2 6 4 6 8 5 3 Suspensi pirantel pamoat 0.2 11 0.4 8 0.6 7
Berdasarkan  waktu  kumulatif  pada  tabel  3 dapat  diketahui  bahwa  kematian  cacing  dalam ekstrak  rimpang  bangle  berada  diantara  kematian cacing dalam suspensi pirantel pamoat dan larutan NaCl.
Gambar  1. Grafik  LC 50 ekstrak  rimpang  bangle dan pirantel pamoat
Gambar 1 menunjukan perbedaan LC 50 antara pirantel  pamoat  dengan  ekstrak  rimpang  bangle. Selanjutnya  dapat  dihitung  dosis  perbandingan antara  ekstrak  rimpang  bangle  dengan  pirantel pamoat :
Diketahui : LC 50 pirantel pamoat (pp) = 0,2695%
LC 50 ekstrak rimpang bangle (erb) = 2,29%
Dosis pirantel pamoat (pp) = 10mg/kg BB
Ditanyakan : Dosis  ekstrak  rimpang  bangle (erb) ?
Jawab         :
Dosis  erb  =  85,1301  mg/kgBB  (Dosis  ekstrak rimpang bangle)
Gambar  2. Grafik  LT 50 pirantel  pamoat  dan ekstrak rimpang bangle
Gambar 2 menunjukan bahwa ekstrak rimpang bangle membutuhkan waktu lebih cepat dibandingkan  pirantel  pamoat  dalam  membunuh cacing.

## PEMBAHASAN
Pada  penelitian  ini  dilakukan  7  kelompok perlakuan uji anthelmintik dengan suhu 37 0 C pada masing-masing  perlakuan  yaitu  :  kelompok perlakuan  pertama  dengan  larutan  NaCl  0,9% sebagai  kontrol  negatif  karena  sifatnya  isotonis sehingga tidak merusak membran sel tubuh cacing dan  bertujuan  untuk  mengetahui  kelangsungan hidup  cacing  di  dalam  lingkungan  yang  dibuat sesuai  dengan  kondisi  di  dalam  usus  (inangnya) dimana cacing tersebut hidup. Dari hasil penelitian, berdasarkan  perlakuan  kontrol  negatif  diketahui bahwa  waktu  kelangsungan  hidup Ascaridia  galli adalah  36  jam.  Pengukuran  waktu  dihitung  dari jam  ke-0  yaitu  pada  waktu  cacing  dimasukkan dalam  larutan  NaCl  0,9%  di  dalam  cawan  petri dengan  suhu  dikondisikan  37 0 C  sampai  cacing mati semua yaitu pada jam ke-36.
Kelompok  perlakuan  kedua  sampai  keempat dengan  menggunakan  suspensi  pirantel  pamoat sebagai  kontrol  positif  yang  merupakan  obat cacing.  Pirantel  pamoat  dibuat  dengan  tiga konsentrasi  yaitu  0,2%,  0,4%,  dan  0,6%. Berdasarkan  perlakuan  suspensi  pirantel  pamoat dengan  konsentrasi  0,2%  waktu  kematiannya adalah  11  jam,  larutan  konsentrasi  0,4%  waktu kematiannya  adalah  8  jam,  larutan  konsentrasi 0,6%  waktu  kematiannya  adalah  7  jam.  Dapat dilihat  bahwa  semakin  tinggi  konsentrasi  pirantel pamoat,  maka  semakin  pendek  waktu  yang diperlukan  untuk  membunuh  cacing Ascaridia galli . Dari garis probit diperoleh R = 0,8695, yang juga berarti 87% kematian cacing dipengaruhi oleh konsentrasi dari pirantel pamoat.
Kelompok  perlakuan  kelima  sampai  ketujuh adalah  larutan  uji  dengan  menggunakan  ekstrak rimpang  bangle  dengan  tiga  konsentrasi.  Pada perlakuan  zat  uji  dengan  metode  maserasi menunjukkan  bahwa  waktu  kematian  tercepat terdapat  pada  konsentrasi  8%  yaitu  selama  5  jam, diikuti dengan konsentrasi 4% yaitu selama 6 jam, dan konsentrasi 2% dengan waktu kematian 6 jam. Menurut  data  diatas  dapat  diketahui  bahwa semakin besar konsentrasi ekstrak rimpang bangle, semakin  cepat  pula  waktu  yang  dibutuhkan  dalam
0.00% 0.50% 1.00% 1.50% 2.00% 2.50% Pirantel Pamoat
Ekstrak Rimpang Bangle Series1 0.27% 2.29%
0:00:00 1:12:00 2:24:00 3:36:00 4:48:00 6:00:00 7:12:00 Pirantel
Pamoat Ekstrak Rimpang Bangle Series1 7:01:15 4:03:18
membunuh cacing Ascaridia galli . Diperoleh garis probit  R  =  0,9459  yang  berarti  95%  kematian cacing  dipengaruhi  oleh  konsentrasi  dari  ekstrak rimpang bangle.
Dari  hasil  penelitian  kelompok  larutan  uji ekstrak rimpang bangle berkhasiat sebagai anthelmintik  terhadap  cacing Ascaridia  galli karena  waktu  kematian  100%  cacing  pada konsentrasi  terkecil  lebih  cepat  dibandingkan waktu  kematian  seluruh  cacing  pada  kontrol negatif  dengan  menggunakan  larutan  NaCl  0,9% dan kelompok kontrol positif pirantel pamoat.
Tabel 4. Perbandingan LC 50 dan LT 50 suspensi
pirantel pamoat dan ekstrak rimpang bangle
No. Perlakuan LC 50 (%) LT 50 1 Suspensi pirantel pamoat 0,2695 7 jam 1 menit 15 detik 2 Ekstrak rimpang bangle 2,29% 4 jam 3 menit 18 detik
Dari  data  diatas  bisa  dikatakan  ada  hubungan antara LC 50 dengan LT 50 semakin besar harga LC 50 dari suatu larutan maka semakin cepat waktu LT 50 dan  sebaliknya  semakin  kecil  harga  LC 50 semakin lama waktu yang dibutuhkan untuk harga LT 50 .
Hal  ini  menunjukkan  bahwa  ekstrak  rimpang bangle pada konsentrasi 2%, 4%, dan 8% memiliki efek  anthelmintik  terhadap  cacing Ascaridia  galli secara  in  vitro  karena  dapat  membunuh  cacing Ascaridia galli. Namun hasil ini tidak mambuktikan bahwa ekstrak rimpang bangle lebih baik  sebagai  anthelmintik  dibandingkan  suspensi pirantel  pamoat.  Hasil  ini  diperkuat  oleh perhitungan dosis ekstrak rimpang bangle menggunakan  perbandingan  LC 50 dari  ekstrak rimpang  bangle  dengan  LC 50 pirantel  pamoat adalah  10  mg/kgBB  suspensi  pirantel  pamoat setara  dengan  85,1301  mg/kgBB  ekstrak  rimpang bangle.
Jika  dilihat  dari  hasil  pengerjaan  nilai  R  pada LC 50 suspensi  pirantel  pamoat  yang  didapatkan pada penelitian ini adalah 0,8695 dan R pada LT 50 suspensi  pirantel  pamoat  adalah  0,88885,  grafik linier  tidak  garis  lurus  atau  nilai  R  tidak  dalam
range  0,99-1  hal  ini  disebabkan  karena  adanya faktor  biologis  yang  menyebabkan  nilai  tersebut tidak  sempurna.  Selain  itu  pengaruh  teknis  saat pengerjaan  juga  mempengaruhi  tingkat  kelinearan grafik.
Penelitian ini menggunakan rimpang bangle, di dalam  rimpang  ini  terdapat  zat  aktif  yang  dapat membunuh  cacing Ascaris seperti  halnya  pirantel pamoat.  Zat  yang  dapat  mematikan  cacing  pada penelitian  ini  diduga  adalah  minyak  atsiri,  tanin, dan saponin karena mekanisme kerjanya mengantagonis  asetilkolin,  sehingga  menekan  otot polos  dan  mangalami  paralisis  otot  dan  berujung pada kematian.
Untuk  mengetahui  apakah  rimpang  bangle layak dikonsumsi oleh manusia atau dijadikan obat pengganti  obat  cacing  lain,  maka  perlu  dihitung tingkat toksisnya berdasarkan tabel LD 50, yaitu (7) : 1. LC 50 (pirantel pamoat) 0,2695%
= 0,2695 g/100 g b/b
= 2,695 g/kg = LD 50
= 0,5-5 g/kgBB = toksis sedang
2. LC 50 (ekstrak rimpang bangle) 2,29%
= 2,29 g/100g b/b = 22,9 g/kgBB = LD 50
= > 15 g/kgBB =  praktis tidak toksis
Berdasarkan perhitungan LD 50 pirantel pamoat adalah  2,695  g/kgBB  yang  jika  berdasarkan  tabel LD 50 berada  pada  kategori  toksik  sedang  yang berada  pada  nilai  0,5-5  g/kgBB.  Hal  ini menunjukkan  bahwa  pirantel  pamoat  mengandung bahan  kimia  obat  yang  dapat  mempengaruhi khasiat  sebagai  anthelmintik  pada  lavel  kategori toksik  sedang.  Pirantel  pamoat  memiliki  efek samping  seperti  gangguan  saluran  cerna  dan kadang sakit kepala (1) .
Untuk  ekstrak  rimpang  bangle  LD 50 berada pada  22,9  g/kgBB  yang  jika  berdasarkan  tabel LD 50 berada pada kategori praktis tidak toksis yang berada  pada  nilai  >  15  g/kgBB.  Hal  ini menunjukkan pada rimpang bangle tidak mengandung  bahan  kimia  obat  yang  dapat mempengaruhi  khasiat  sebagai  anthelmintik  dan kemungkinan  memiliki  efek  samping  lebih  ringan dari  pirantel  pamoat  walaupun  harus  dilakukan penelitian lebih lanjut untuk membuktikan hal ini.
Jika  dilihat  dari  segi  efektifitas,  ekstrak rimpang bangle cukup efektif karena menghasilkan
khasiat  sebagai  anthelmintik.  Hal  ini  mungkin dikarenakan  banyaknya  kandungan  kimia  yang terdapat  dalam  rimpang  bangle.  Penelitian  ini hanya  melakukan  ada  atau  tidaknya  khasiat anthelmintik yang terdapat dalam rimpang bangle. Penelitian ini belum sampai pada tahap pembuktian  zat  aktif  mana  yang  mempunyai  efek anthelmintik dalam rimpang bangle.

## SIMPULAN
Dari  penelitian  ini  menunjukkan  nilai  LC 50 ekstrak  rimpang  bangle  terhadap  cacing Ascaridia galli adalah  2,29%  dan  nilai  LT 50 adalah  4  jam  3 menit  18  detik.  Dosis  ekstrak  rimpang  bangle 85,1301  mg/kgBB  setara  dengan  10  mg/kgBB pirantel pamoat. Berdasarkan nilai LD 50 menunjukkan angka 22,9 g/kgBB yang artinya jika dikonsumsi rimpang bangle praktis tidak toksis.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Tjay,  Tan  Hoan  dan  Kirana  Raharja,  2007, Obat-Obat  Penting,  edisi-6,  PT  Elex  Media Komputindo, Jakarta.
2. Soedibyo,  B.R.A.  Mooryati,  1998,  Alam Sumber  Kesehatan  Manfaat  dan  Kegunaan, Balai Pustaka, Jakarta.
3. Eliyanoor  Benbasyar,  Khairunnida,  Sarma., 2011,  Farmakognosi  II  edisi  I,  Jilid  1-2, Politeknik  Kesehatan  Kementrian  Kesehatan Jakarta II, Jakarta
4. Beriajaya, T.B. Murdiati, dan Murti Herawaty.  1998.  Efek  anthelmintik  infus  dan ekstrak rimpang bangle (Zingiber purpureum) terhadap cacing Haemonchus contortus secara in  vitro.  Jurnal  Ilmu  Ternak  dan  Veteriner 3(4): 277-282.
5. Rahayu,  Utari  Eka,  2010,  Uji  Anthelmintik Seduhan Biji Petai Cina (Leucaena leucocephala Semen) Terhadap Cacing Ascaridia  galli  Secara  In  Vitro,  KTI, Politeknik  Kesehatan  Departemen  Kesehatan Jakarta II Jurusan Farmasi, Jakarta.
6. Nur,  Ika  Setyowati,  2008,  Uji  Efektifitas Anthelmintik  Perasan  dan  Infus  Rimpang Bangle  (Zingiber  pupureum  Roxb.)  Terhadap Cacing  Ascaridia  galli  Secara  In  Vitro,  KTI, Fakultas Kedokteran  Universitas  Diponegoro, Semarang.
7. Priyanto,  2009,  Toksikologi  :  Mekanisme, Terapi  Antidotum,  dan  Penilaian  Resiko, Lembaga  Studi  dan  Konsultasi  Farmakologi, Depok.