TINGKAT KEBERHASILAN INSEMINASI BUATAN PADA BABI MENGGUNAKAN SEMEN YANG DIBERI EKSTRAK MESOCARP Borassus ﬂabellifer Linn YANG DI PRESERVASI SELAMA 4 HARI PADA SUHU13°C
Hermilinda Parera* 1 , Bernadus Ndoen 2 , Yonas Lino 3 , Nathan Adoe 4 1, 3, 4 Program Studi Kesehatan Hewan Politeknik Pertanian Negeri Kupang.
Jln.  Prof Dr Herman Yohanes. Lasiana Kupang
2 Program Studi Produksi Ternak Politeknik Pertanian Negeri Kupang.
Jln. Prof Dr Herman Yohanes. Lasiana Kupang
*Korespondensi: milindaparera81@gmail.com .

## ABSTRACT
This study aims to determine the succesfull of artificial insemination (AI) in sows using semen added with 0,01% mesocarp extract of Borassus ﬂabellifer Linn as an antioxidant source and preserved at 13 °C for four days. This study used 16 Duroc-Landrace crossbred sows with ages of 1-3 years that had given birth for at least 1 time. The sows was divided into two groups: group I (K1) using semen with Beltsville Thawing Solution (BTS) diluent preserved at 13 °C for 3 days, and Group II (K2) using semen with BTS diluent given 0.01% extract mesocarp B. flabellifer Linn and preserved at 13 ° C for four days. Evaluation of the success rate of artificial insemination  were described by the number of non  retrun  rate  (NRR),  service  per  conception  (S/C)  and  conception  rate  (CR),  which  continued analyzed using t-test. The results showed that the NRR value of the K1 and K2 were not significantly different  (P>  0.05)  between  the  two  groups  with  values  of  80%  and  77,7%,  respectively.  The  S/C value  of  group  K1  was  1.25  was  not  significantly  different  (P>  0.05)  from  the  K2  with  the  value  of 1.125. Whereas, the value of CR of the K1 is 75% showed no significant difference with the K2 87.5% (P> 0.05). It can be concluded that the use of semen given BTS diluent and 0.01% mesocarp extract B. flabellifer  Linn  and  preserved  at  13  °  C  for  up  to  4  days  can  be  used  in  artificial  insemination, because it has the same capabilities with semen that given BTS diluent and preserved at 13 ° C for 3 days.
Key Words: sows, extract mesocarp Borassus ﬂabellifer Linn, service per conception conception rate, non retrun rate

## PENDAHULUAN
Pada  umumnya  inseminator  babi  di  Kota  dan  Kabupaten  Kupang  dalam memberikan  pelayanan  kawin  suntik  atau  inseminasi  buatan  pada  babi  masih menggunakan  semen  segar.  Semen  segar  yaitu  semen  yang  ditampung  dari pejantan  dan  dikemas  dalam  botol  dan  dibawah  ke  lapangan  untuk  langsung digunakan  dalam  pelayanan  inseminasi  buatan.  Semen  segar  ini  tidak  dapat bertahan lebih lama dari 24 jam, sehingga setiap akan melakukan pelayanan IB minimal 1 jam sebelumnya dilakukan penampungan semen. Semen segar tanpa melalui proses pengenceran akan mudah mengalami penurunan kualitas seperti penurunan  motilitas  dan  daya  hidup.  Kesulitan  lain  jika  menggunakan  semen segar yaitu sangat sensitif baik terhadap perubahan suhu maupun goncangan, sehingga untuk lokasi inseminasi yang jauh kualitas semen dapat menurun.
Pengunaan  semen segar dalam waktu yang lama  memerlukan preservasi dengan  pengencer  dan  temperatur  tertentu  agar  motilitas  dan  daya  hidup spermatozoa tetap terjaga.Semen babi berbeda dengan semen ternak lain karena semen  babi  sangat  sensitif  terhadap cold shock. Pada saat  suhu  rendah  terjadi perubahan struktur phospolipid pada  membran plasma  sehingga  menyebabkan membaran  plasma  babi  tidak  stabil  pada  suhu  rendah  dan  menyebabkan penurunan  kualitas  spermatozoa.  Sumardani  dkk  (2008)  mengatakan  motilitas semen  segar  babi  yang  disimpan  selama  24  jam  pada  suhu  18°C  mempunyai motilitas 34,44%. Selama proses penampungan, pengenceran dan penyimpanan dingin  spermatozoa  akan  menghasilkan  menghasilkan reactive  oxygen  species (ROS).  Senyawa ROS mengakibatkan    peroksidasi  lipid  yang  dapat memicu hilangnya  integritas  membran, menyebabkan  peningkatan  permeabilitas  sel, inaktivasi enzim, kerusakan struktur DNA, dan kematian sel (Robertson., 1990). Spermatozoa  babi  sangat  rentan  terhadap  peroksidasi  lipid  (Carolini  et  al., 2000).
Inovasi baru diperlukan dalam bidang reproduksi untuk mempertahankan kualitas semen yang dapat disimpan pada suhu lemari es agar penampungan  semen  tidak  dilakukan  setiap  saat  salah  satunya  dengan penambahan  antioksidan  pada  pengencer  semen.  Salah  satu  bahan  pengencer yang  digunakan  untuk  pengenceran  semen  babi  adalah Beltsville  Thawing Solution (BTS).  Selama  proses  penyimpanan  pada  suhu  dingin  di  samping mengalami  kejutan  dingin,  spermatozoa  juga  mengalami  stres  oksidatif  atau terjadi  serangan ROS, untuk  itu  dalam  pengencer  perlu  ditambahkan antioksidan.  penambahan  antioksidan  pada  pengencer  semen  babi  dapat memberikan  perlindungan  selama  pendinginan  dan  penyimpanan.  Bentuk perlindungan  yang  diberikan  antioksidan  dengan  mencegah  pembentukan radikal  bebas  dengan  menghilangkan  prekusor  radikal  bebas  atau menginaktivasi katalis (Halliwell,1994).
Peningkatan kualitas spermatozoa dapat dilakukan dengan menambahkan  senyawa  antioksidan  di  dalam  pengencer  semen  (Rizal,  2005). Antioksidan  berasal  dari  potensi  alam  lokal  yang  murah  dan  mudah  diperoleh dan  dapat  ditambahkan  dalam  pengencer  untuk  membantu  mempertahankan kualitas spermatozoa yang dapat disimpan dalam jangka watu lama dalam suhu lemari  es.  Bahan-bahan  tersebut  bisa  berasal  dari  bahan  lokal  seperti  buah lontar.  Salah  satu  sumber  antioksidan  alami  untuk  mempertahankan  motilitas
spermatozoa  dan  viabilitas  spermatozoa  yang  dapat  ditemukan  di  Kupang berasal dari tanaman Borassus ﬂabellifer Linn (Parera dkk., 2017).
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  tingkat  keberhasilan Inseminasi buatan (Non retrun rate, Service per conception dan Conception rate ) menggunakan  semen  yang  diberi  0,01%  ekstrak  mesocarp Borassus  ﬂabellifer Linn yang di preservasi selama 4 hari pada suhu 13°C.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  menggunakan  babi  Peranakan Duroc  Lendrace (PDL)  umur 1-3  tahun  berjumlah  16  ekor  dengan  syarat  induk  produktif  pernah  beranak minimal 1 kali. Penelitian ini terdiri dari dua kelompok dengan dua kali ulangan. Semen diperoleh dari pembibitan yang ada di kota Kupang. Semen dikoleksi dan diperiksa  dilaboratorium  anatomi  patologi  Politani  Kupang.  Semen  yang memenuhi  syarat  dilakukan  pengenceran  dan  diberi  perlakuan.  Semen  dibagi menjadi  dua  kelompok  perlakuan  yaitu  kelompok  I  (K1)  mengunakan  semen dengan  pengencer Beltsville  Thawing  Solution (BTS)  yang  disimpan  selama  3 hari pada suhu 13°C dan Kelompok II (K2) semen dengan pengencer BTS yang diberi  0,01%  ekstrak mesocarp Borassus  ﬂabellifer Linn dan  dipreservasi  pada suhu  13°C  selama  4  hari.  Semen  yang  digunakan  untuk  IB  adalah  semen dengan  viabilitas  tidak  dibawah  50%.  Selama  penyimpanan  setiap  hari dilakukan pengecekan motilitas dan  viabilitas spermatozoa.  Evaluasi  dilakukan terhadap nilai non retrun rate service per conception dan conception rate . Analisis data  yang  digunakan  untuk  mengetahi  perbedaan  dari  kedua  perlakuan  data dianalisis menggunakan pembanding nilai tengah independent t-test (steel  dan Torrie, 1989) selain itu data ditabulasikan dan dijelaskan secara deskriptif

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Setelah  dilakukan  inseminasi  buatan  (IB)  pada  ternak  babi,  perlu dilakukan pengecekan pada hari ke 20-21 selama dua kali berturut-turut untuk memastikan kebuntingan sudah terjadi, yaitu babi tidak memperlihatkan tanda- tanda  estrus.    Suatu  pemeriksaan  kebuntingan  secara  tepat  dan  dini  sangat penting  bagi  program  evaluasi  keberhasilan  inseminasi  buatan.  Deteksi kebuntingan  dapat  dilakukan  dengan  melihat  indikasi  eksternal  seperti  tidak adanya gejala birahi sesudah IB, kelenjar susu membesar, ternak betina menjadi
lamban dan tenang dalam pergerakannya. Pada penelitian ini salah satu indikasi kebuntingan  secara  eksternal  adalah  tidak  adanya  gejala  birahi  setelah  20-21 hari  dilakukan IB dan adanya perubahan pada kelenjar susu (Gambar 1a dan B)
Gambar 1 indikasi kebuntingan ekternal: a) kelenjar susu membesar; b) mukosa vagina pucat dan likat
Indikasi  kebuntingan  berupa    kelenjar  mammae  membesar  dan    puting  mulai membesar  dan  tegang  disebabkan  adanya  perkembangan  flaccid  glandula mammae  (Gordon,  1983).  Lebih  lanjut  Hafez  (1993)  mengatakan  glandula mammae  mulai  berkembang  pada  kebuntingan  45  hari  dan  maksimal  pada kebuntingan 60 hari. Selain itu indikasi kebuntingan pada ternak yaitu adanya perubahan  pada  alat  kelamin  dimana  mukosa  vagina  terlihat  pucat  dan  likat (Partodihajro, 1982). Pada umur kebuntingan 60-90 hari tanda-tanda eksternal kebuntingan  pada  induk  babi  dapat  dilihat  dengan  adanya  perubahan  fisik seperti  distensi  abdomen,  pembesaran  ambing  dan  vulva  membengkak (Priyanka, 2017).
Non-return  rate  atau  presentase  hewan  yang  tidak  kembali  minta  kawin atau bila tidak ada permintaan inseminasi lebih lanjut dalam waktu 21 sampai 35 atau 60 sampai 90 hari merupakan salah satu  metode deteksi kebuntingan setelah  perkawinan  (Almond  dan  Dial  1986).  Nilai  Non  Retrun  rate  kelompok perlakuan K1 dan K2 dapat dilihat pada tabel 1.
Tabel 1. Nilai Non Retrun Rate dari Kedua Perlakuan
Perlakuan (jenis Semen) Jumlah Babi di IB Jumlah  Babi  yang kembali IB Jumlah  Babi IB NRR K1= (BTS+ Semen) 8 2 10 80% K2= (BTS+ EBF 0,01%+semen) 8 1 9 77,7%
Berdasarkan tabel 1. dapat dilihat nilai non retrun rate ada perbedaan yang tidak signifikan pada kedua perlakuan. Perlakuan (K1): semen dengan pengencer  BTS
A B
yang  dipreservasi  selama  3  hari  pada  suhu  13°C  adalah  80%  sedangkan  (K2) semen dengan pengencer BTS yang diberi ekstrak mesocarp Borassus ﬂabellifer Linn 0,01% dan dipreservasi pada suhu 13°C selama 4 hari adalah 77,7%. Hasil analisis t  test dimana  nilai t  hitung -0,555  dengan sig 0,564  >  0,05  kedua perlakuan  tidak  berbeda  nyata  (P>0,05).  Presentase  NRR  lebih  rendah  pada semen  yang  diberi  tambahan  ekstrak Borassus  ﬂabellifer Linn disebabkan adanya  antioksidan  dalam  ekstrak  mesocarp Borassus  ﬂabellifer Linn yang menghambat  atau  mencegah  kerusakan  pada  membran  plasma  spermatozoa akibat  proses  adaptasi  spermatozoa  terhadap  bahan  pengencer  dan  proses pendinginan yang mengakibatkan gangguan permeabilitas membran, menurunkan aktivitas metabolisme sel dan menyebabkan kematian sel. Subowo (1995) bahwa pada membran plsma sel terdapat organel-organel sel yang mudah rusak  akibat  kerusakan  mekanik,  bila  terjadi  kerusakan  membran  plasma  sel akan  mengakibatkan  terganggunya  suplai  energi  dan  menurunkan  motilitas spermatozoa. Maxwell  and  Waston  (1996)  membran  plasma  sel  spermatozoa kaya  akan  asam  lemak  tak  jenuh  sehingga  rentan  terhadap  kerusakan  akibat peroksidasi  lipid.  Antioksidan  adalah  suatu  senyawa  yang  pada  konsentrasi rendah berfungsi melindungi sistem biologi terhadap suatu efek yang berpotensi merusakkan  dari  suatu  proses  atau  reaksi  yang  menyebabkan  oksidasi  yang meluas dengan cara menunda atau  menghambat oksidasi dari subtrat tersebut (Lenzi et  al. ,  2002).  Pemanfaatan  antioksidan  seperti  ß  karoten  sebagai penyusun semen dapat meningkatkan kualitas semen yang diolah (Rizal 2010). Non  retrun  rate merupakan  diagnosa  awal  kebuntingan  pada  babi  setelah insemisi  buatan  dengan  melihat  tidak  kembalinya  gejala  estrus  (Atkinson et.al . 1986)  Flowers et  al ., (1999) megatakan  tidak munculnya  gejala  estrus setelah inseminasi  buatan  merupakan  indikasi  awal  kebuntingan  dan  indikasi  ini memberikan tingkat ketepatan lebih dari 85%.
Service  per  conception (S/C)  adalah  angka  yang  menunjukan  jumlah semen  yang  digunakan  untuk  menghasilkan  kebuntingan  atau  angka  yang menunjukan jumlah perkawinan yang dapat  menghasilkan suatu kebuntingan. Pada penelitian ini nilai S/C yang diperoleh dapat dilihat pada  gambar 2.
Gambar 2. Nilai S/C
Berdasarkan  gambar    2.  nilai  S/C  dari  perlakuan  (K1)  semen  dengan pengencer    BTS    yang  dipreservasi  selama  3  hari  pada  suhu  13°C  adalah  1,25 dan  (K2)  semen  dengan  pengencer  BTS  yang  diberi  0,01%  ekstrak mesocarp Borassus ﬂabellifer Linn dan dipreservasi selama 4 pada suhu 13°C adalah 1,125 dengan nilai t hitung -1.000 dengan sig 0.351 karena sig > 0,05 maka nilai S/C dari  semen  perlakuan  K1  dan  K2  tidak  berbeda  nyata  (P>0.05).  Hal  ini disebabkan karena kualitas semen K1 dan K2 yang digunakan untuk inseminasi buatan  tidak  berbeda  meskipun  disimpan  dalam  waktu  yang  berbeda.  Jumlah perkawinan per kebuntingan merupakan salah satu faktor yang mempengaruhi efisiensi  reproduksi.  Nilai  S/C  yang  baik  adalah  berkisar  antara  1-2.  Makin rendah  nilai  tersebut  makin  tinggi  tingkat  kesuburan  ternak  induk  tersebut (Toelihere,  1993).  Tinggi  rendahnya  nilai  S/C  dapat  dipengarui  oleh  beberapa faktor  keterampilan  inseminator,  waktu  melakukan  IB  dan  pengetahuan peternak  dalam  mendeteksi  birahi  (Sulaksono.,dkk  2010).  Lebih  lanjut  Putra (2001) keberhasilan inseminasi pada induk ternak dipengaruhi oleh estrus, lama estrus,  waktu  antara  muncul  estrus  dan  ovulasi  serta  kualitas  sperma  yang digunakan.
Conception rate adalah  presentase ternak yang bunting pada perkawinan pertama.  Hasil  dari  penelitian  ini conception  rate menggunakan  kelompok (K1)semen  dengan  pengencer    BTS  yang  dipreservasi  selama  3  hari  pada  suhu 13°C  dan  kelompok  (K2)  semen  dengan  pengencer  BTS  yang  diberi  0,01% ekstrak mesocarp Borassus ﬂabellifer Linn dan dipreservasi selama 4 pada suhu 13°C dapat dilihat pada gambar 3.
Gambar 3. Nilai Conception Rate
Berdasarkan  gambar  3  rerata  hasil  analisis  inseminasi  buatan menggunakan  kelompok  (K1)  semen  dengan  pengencer    BTS  yang  dipreservasi selama 3 hari pada suhu 13°C sebesar 75 %  dan Kelompok (K2)semen dengan pengencer BTS yang diberi 0,01% ekstrak mesocarp Borassus ﬂabellifer Linn dan dipreservasi  selama  4  hari  pada  suhu  13°C  sebesar  87,5  %.  Hasil  analisis menggunakan t- test tidak berbeda nyata (P>0.05) terhadap nilai conception rate . Kelompok  (K1)memiliki  presentase conception  rate lebih  rendah  dibandingkan dengan  kelompok  semen  (K2)  hal  ini  disebabkan  karena  adanya  penurunan kualitas  semen  selama  proses  penyimpanan  yang  disebabkan  oleh  adanya reactive  oxygen  specie .  Penambahan  ekstrak mesocarp Borassus  ﬂabellifer Linn yang  mengandung  antioksidan  berupa  ß  karoten  dapat  menghambat  atau memperlambat terjadinya reactive oxygen specie dari spermatozoa. Spermatozoa babi sangat rentan terhadap ROS karena ROS dapat merangsang reaksi akrosom dalam babi sperma melalui peroksidasi lipid membran dan aktivasi PLA (Basim et  al .,  2009).  Antioksidan  sangat  penting  untuk  menurunkan reactive  oxygen species (ROS)  yang  dihasilkan  oleh  sel  termasuk  sel  sperma.  Penambahan antioksidan  ke  dalam  pengencer  semen  dapat  meningkatkan  kualitas semenbeku yang dihasilkan melalui pencegahan kerusakan pada akrosom (Rizal dan Herdis, 2010). Wilson, et al (1991) menjelakan bahwa tinggi rendahnya CR dipengaruhi oleh kondisi ternak, deteksi birahi, deteksi estrus dan pengelolahan reproduksi  yang  akan  berpengaruh  pada  fertilitas  ternak  dan  nilai  konsepsi. Nilai kegagalan kebuntingan dari inseminasi buatan dipengaruhi oleh tiga faktor kesuburan pejantan, kesuburan betina dan teknik inseminasi (Toilehere, 1993).

## KESIMPULAN
Semen  yang  diberi  pengencer  BTS  dan  0,01%  ekstrak mesocarp Borassus ﬂabellifer Linn dan dipreservasi selama 4 hari pada suhu 13°C dapat digunakan dalam  pelayanan  kawin  suntik  atau  inseminasi  buatan  karena  memiliki kemampuan yang tidak berbeda dengan semen yang diberi BTS dan dipreservasi selama 3 hari pada suhu 13°C dalam keberhasilan inseminasi berdasarkan nilai Non retrun rate, Service per conception dan Conception rate.

## DAFTAR PUSTAKA
Almond,  G.  W.  and  Dial,  G.  D.  1986. Pregnancy  Diagnosis  in  Swine:  a Comparison  of    The  Accuracies  of  Mechanical  and  Endocrine  Tests  With Return  to  Oestrus .  Journal  of  the  American  Veterinary    Meical. Association, 189:1567–1571 .
Atkinson, S., Buddle, J.R., Williamson, P., Hawkins, C.D. and Wilson, R.H. 1986. A    Comparison  Between  Plasma  Oestrone  Sulphate  Concentration  and Doppler    Ultrasound  as  Methods  for  Pregnancy  Diagnosis  in  Sows . Theriogenology, 26(4): 483-490.
Basim  J.  Awda,  Meghan  Mackenzie-Bell,  and  Mary  M.  Buhr.  2009. Reactive Oxygen  Species  and  Boar  Sperm  Function .  Journal  Biology  of Reproduction 81(3):553-561.
Cerolini  S,  Maldjian  A,  Surai  PF,  Noble  RC.  2000. Viability,  Susceptibility  To Peroxidation  and  Fatty  Acid  Composition  of  Boar  Semen  During  Liquid Storage . Journal Animal Reproduction Scince 58:99–111.
Flowers, W. L., Amstrong, J. D., White, S. L., Woodard, T. O. and Almond, G. W. 1999. Real-Time  Ultrasonography  and  Pregnancy  Diagnosis  in  Swine . Proceeding American Society of  Animal Scince, Indianapolis, pp. 1–9.
Gordon,  I.  1983.  Controlled  Breeding  in  Farm  Animals.  Library  of  Congress Cataloging in Publication Data. Pp. 329-344.
Halliwell  B.  1994.  Free  Radicals  and  Antioxidants:  A  personal  view.  Nutrition Review 52:253–265.
Hafez, E. S. E. 1993. Reproduction in Farm Animals. 6 Philadelphia.
Lenzi, A., L. Gandini, F. Lombardo, M. Picardo, V.  Maresca, E. Panfili, F. Tramer, C. Boitani and F.  Dondero. 2002. Polyunsaturated Fatty Acids of Germ Cell  Membranes,  Glutathione  and  Glutathionedependent  Enzyme- PHGPx: from Basicto Clinic. Contraception 65:301 –304.
Maxwell, W.M.C. and P.F. Watson. 1996. Recent Progress in  The Preservation of Ram Semen . Journal Animal Reprodution Science ,42: 55 – 65.
Putra  H  IDK.  2001. Penerapan  Teknik  Inseminasi  Buatan  Dalam  Upaya Meningkatkan Populasi Ternak Babi . Jurnal Veteriner 2(2):65-72.
Rizal  M,  Herdis.  2010. Peran  Antioksidan  dalam  Meningkatkan  Kualitas  Semen Beku. Wartazoa,  20(3): 139-145.
Rizal  M.  2005. Efektivitas  Berbagai  Konsentrasi  ß-Karoten  terhadap  Kualitas Semen Beku Domba Garut . Journal of Animal Production, 7(1):6-13.
Steel, RGD dan JH Torrie. 1989. Prinsip dan Prosedur Statistika. Diterjemahkan oleh Bambang Sumantri. Gramedia Pustaka. Jakarta
Subowo. 1995.  Biologi Sel.  Angkasa. Bandung.
Sulaksono,  A.,  Suharyati,  S.,  dan  Santoso,  E.P.  2010.  Penampilan  Reproduksi ( Service  Per  Conception, Lama  Bunting  dan  Selang  beranak)  Kambing Boerawa Di Kecamatan Gedong Tataan dan Kecamatan Gisting. Skripsi. Fakultas Pertaniaan Universitas Lampung. Lampung.
Sumardani, N.L.G. Tuti, Y.L dan Pollung, H.S.2008. Viabilitas Spermatozoa Babi Dalam  Pengencer  Beltsville  Thawing  Solution  (BTS)  pada  tiga    Tempat Penyimpanan  Berbeda .  Seminar  Nasional  Teknologi  Peternakan  dan Veteriner 611:614.
Partodihardjo S. 1982. Ilmu Reproduksi Hewan, Mutiara. Jakarta.
Priyanka,  A.  2017. Evaluation  of  Effectiveness  of  Different  early  Pregnancy Diagnosis  Techniques  in  Sows  and  Monitoring  of  Fetometry  by  Using Ultrasound Scanning. Thesis. Department of Veterinary Gynaecology and Obstetrics College of Veterinary Science Rajendranagar. Hyderabad
Robertson L,BaileyJL, Buhr MM. 1990. Effects of ColdSshock and Phospholipase A 2 upon Intact  Boar Spermatozoa  and  Sperm  Head  Plasma  Membranes. Molecular Reproduction  Development , 26:143–149.
Toelihere MR. 1993. Inseminasi Buatan pada Ternak. Bandung: Angkasa.
Wilson  G.  Pond, Jerome  H.  Maner, Dewey  L.  Harris.  1991.  Pork  Production Systems:  Efficient  Use  of  Swine  and  Feed  Resources.  Springer  Science Bussnies Media New York .