Vol. 6 No. 3, September 2020 : 1-95 P-ISSN : 2407-8441/℮-ISSN : 2502-0749
PERBEDAAN KARAKTERISTIK JANIN PADA TIKUS PUTIH ( Rattus norvegicus ) BUNTING YANG DIBERI DOSIS BERTINGKAT TIMBAL ASETAT
Teresia Suminta RS 1* Arni Amir 2 , Aisyah Elliyanti 3,4
1 Program studi S2 Ilmu Kebidanan Fakultas Kedokteran Universitas Andalas Padang
2 Bagian Biologi Fakultas Kedokteran Universitas Andalas Padang
3 Bagian Fisika Kesehatan Fakultas Kedokteran Universitas Andalas Padang
4 Bagian Radiologi Divisi Kedokteran Nuklir Rumah Sakit Dr. M. Djamil Padang
*Email : teresiasumintars@gmail.com

## ABSTRAK
Timbal  (Plumbum/Pb)  adalah  jenis  logam  beracun  yang  bersifat  kumulatif  di  dalam  tubuh  dan  akan mempengaruhi  beberapa  sistem  tubuh  termasuk  mekanisme  yang  melibatkan  stres  oksidatif  yang  dimediasi perubahan  fungsi  ovarium  dan/atau  plasenta  yang  mungkin  mengakibatkan  gangguan  transpor  nutrisi  dan oksigen untuk janin, meningkatkan peroksidasi lipid serta bersifat kompetitif terhadap kalsium. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui perbedaan karakteristik  janin pada tikus putih bunting (Rattus norvegicus) yang diberi  dosis  bertingkat  timbal  asetat.  Penelitian  ini  menggunakan  metode Post  Test  Only  Control  Group. Jumlah sampel 28 ekor tikus ( Rattus norvegicus). Sampel diambil secara acak, dibagi 4 kelompok. Kelompok (K) tanpa diberi perlakuan. Kelompok (P1) diberi timbal asetat dosis 50mg/L. Kelompok (P2) diberi timbal asetat dosis 75mg/L. Kelompok (P3) diberi timbal asetat dosis 100mg/L. Pemberian timbal  sejak hari pertama hingga  19  kebuntingan,  kemudian  diterminasi  pada  hari  ke-20.  Berat  badan  janin  tikus  ditimbang,  panjang badan diukur dan penghitungan jumlah janin. Data pertumbuhan janin dianalisis dengan menggunakan uji non paramatrik Kruskal  wallis dan  dilanjutkan  dengan  uji Mann  whitney. Hasil  analisis Mannwithney menunjukkan  bahwa  ada  perbedaan  berat  badan  janin  (p=0.000),  panjang  janin  (p=0.000)  dan  jumlah  janin (p=0.000) yang diberikan paparan timbal asetat dosis bertingkat. Dapat disimpulkan bahwa pemberian timbal asetat  mengakibatkan  perbedaan  yang  bermakna  terhadap  pertumbuhan  janin  intra  uterin.  Oleh  karena  itu Perlu  dilakukan  penelitian  lebih  lanjut  mengenai  pengaruh  paparan  timbal  yang  diberikan  sepanjang  siklus kehidupan tikus putih (Rattus norvegicus) dan kemudian dilakukan pengukuran kadar timbal darah induk serta penilaian terhadap onset janin.
Kata Kunci : Timbal Asetat, Pertumbuhan Janin, Tikus Putih

## ABSTRACT
Lead  (Pb) is a type of toxic metal that is cumulative in the body and will affect several body systems including mechanisms involving oxidative stress mediated changes in ovarian and/or placenta function that may result in  impaired  transport  of  nutrients  and  oxygen  to  the  fetus,  increase  lipid  peroxidation  and  be  competitive against  calcium.  The  study  aimed  to  find  out  the  difference  in  fetal    karakteristik  characteristics  in  bunting white rats (Rattus norvegicus) who were given tiered doses of lead acetate. This research uses the Post Test Only  Control  Group  method.  The  sample  count  of  24  mice  (Rattus  norvegicus).  The  samples  were  taken randomly, divided into 4 groups. Group (K) without being treated. Group (P1) administered lead acetate dose 50mg/L.  Group  (P2)  administered  lead  acetate  dose  75mg/L.  Group  (P3)  administered  lead  acetate  dose 100mg/L. lead administration   from the first day to 19 years, then terminated on the 20th day. The weight of the rat fetus is weighed, the length of the body is measured and calculation the number of fetuses. Data fetal growth  was  analyzed  using  a  non-paramatric    test  of  Kruskal  wallis  and  continued  with  the  Mann  whitney test. Mann whitney analysis shows that there is a difference in fetal weight (p=0.000), fetal length (p=0.000) and the number of fetuses (p=0.000) given exposure to lead acetate dose storied doses. It can be concluded that  the  administration  of  lead  acetate  results  in  a  meaningful  difference  to  intrauterine  fetal  growth. Therefore, further research is needed on the effect of lead exposure given throughout the life cycle of white rats  (Rattus  norvegicus)  and  then  carried  out  measurements  of  the  mother's  blood  lead  levels  as  well  as assessment of fetal onset.
Keywords : Lead  Acetate, Fetal  Growth, White Rats

## PENDAHULUAN
Polusi logam berat merupakan salah satu masalah lingkungan yang utama pada saat ini, dikarenakan ion logam tetap ada dilingkungan oleh  karena  sifatnya  yang  tidak  terdegradasi. Kecenderungan  toksisitas  dan  bioakumulasi logam berat di  lingkungan merupakan ancaman  serius  bagi  kesehatan  organisme hidup.  Tidak sama halnya seperti  kontaminasi bahan  organik,  logam  berat  tidak  dapat diuraikan  oleh  proses  kimia  atau  biologis 1 . Salah  satu  jenis  logam  berat  yang  sifatnya kumulatif  didalam  tubuh  adalah  timbal. Logam  ini  menyebabkan  bahaya  lingkungan dan dilaporkan sangat beracun 2 . Institute for Health Metrics and Evaluation (IHME)  memperhitungkan  bahwa pada tahun 2017, paparan timbal menyumbang 1,06  juta  kematian  dan  24,4  juta  tahun kehilangan  hidup  yang  sehat  ( Disability- Adjusted Life Years (DALYs) di seluruh dunia karena  efek  jangka  panjang  pada  kesehatan. Paparan timbal ini memberikan dampak besar terhadap  status  kesehatan  terutama  pada negara  berpenghasilan  rendah  dan  menengah. IHME juga memperkirakan bahwa pada tahun 2016, paparan timbal menyumbang 63,2% dari beban global disabilitas intelektual perkembangan  idiopatik,  10,3%  dari  beban global  penyakit  jantung  hipertensi,  5,6%  dari beban  global  penyakit  jantung  iskemik  dan 6,2%  dari  beban  global  stroke  ( World  Health Organization, 2019). Paparan timbal diperkirakan  menyumbang  0,6%  dari  beban penyakit global, dengan beban tertinggi ada di negara berkembang 3 .
Logam  berat  timbal  juga  merupakan salah satu logam berat yang bersifat toksik jika kadarnya  di  dalam  tubuh  melebihi  ambang batas  yang  ditetapkan The  National  Institute for  Occupational  Safety  and  Health (NIOSH) tahun  2015  yaitu  sebesar  5µg/dl  pada  orang dewasa.  Namun  banyak  penelitian  ilmiah menunjukkan  bahwa  paparan  timbal  pada
level  “aman”  juga  tidak  menjamin  bahwa gejala  toksisitas  tidak  akan  muncul,  baik dalam dosis akut maupun dari dosis kumulatif. Selain  itu,  tidak  ditemukan  bukti  bahwa  nilai ambang  konsentrasi  timbal  darah  (5µg/dl) tidak  memiliki  dampak  buruk  terhadap kesehatan 4 .
Upaya  lebih  lanjut  diperlukan  untuk penurunan  penggunaan  dan  pelepasan  timbal guna mengurangi eksposur terhadap lingkungan  dan  pekerjaan,  terutama  untuk anak-anak  dan  wanita  usia  subur 5,6 .  Secara umum,  rute  terbesar  dalam  proses  pemaparan timbal ke dalam tubuh manusia adalah melalui makanan.  Lebih  dari  80%  dari  asupan  timbal harian  berasal  dari  konsumsi  makanan, kotoran  dan  debu.  Timbal  adalah  jenis  logam berat  yang  dapat  terakumulasi  selama  proses metabolik  yang  mana  jenis  logam  berat  ini pada  dasarnya  tidak  layak  dikonsumsi  oleh tubuh  manusia  namun  dapat  masuk  melalui makanan  dengan  berbagai  cara,  seperti  udara, air  dan  tanah  atau  selama  proses  memasak makanan 5 . Pada wanita hamil yang telah terkontaminasi  dengan  timbal  sejak  kecil, timbal akan disimpan di tulang dan dikeluarkan dari tulang selama kehamilan dan menyusui dan masuk lagi  ke peredaran darah. Pada  wanita  dengan  kondisi  ini,  lebih  dari 85%  timbal  yang  masuk  ke  tubuh  akan diserap,  kemudian  akan  masuk  kealiran  darah plasenta, dari plasenta ke janin dan menyebabkan  efek  samping  yang  serius  pada kesehatan  janin 7 .  Timbal  ibu  bisa  dengan mudah melewati plasenta dan masuk ke dalam sirkulasi  darah  janin  mulai  sekitar  minggu  ke 12-14  kehamilan,  membuat  janin  rentan keracunan timbal 8,9 .
Timbal didalam tubuh akan
diamplifikasi  di  hati dan ginjal 10 . Peningkatan kadar timbal menyebabkan kerusakan oksidatif  dengan  meningkatkan  produksi Reactive Oxygen Species (ROS) radikal bebas,
mengurangi sistem pertahanan antioksidan sel, dengan mekanisme penurunan kadar glutathione  (antioksidan)  didalam  tubuh, menghambat  ketergantungan  enzim  sulfhidril atau  aktivitas  enzim  antioksidan  dan/atau meningkatkan
peroksidasi lipid (peningkatan malondialdehid (MDA).
Mekanisme peningkatan ROS ini, selama  proses  kehamilan  mengakibatkan perubahan  fungsi  ovarium  dan/atau  plasenta yang  mungkin  mengakibatkan  gangguan transpor  nutrisi  dan  oksigen  untuk  janin. Perubahan fungsi plasenta juga dapat menyebabkan
penghambatan fungsi transportasi senyawa penting didalam plasenta seperti  transport  Zn 2+ ,  yang  sangat  penting bagi  pertumbuhan  dan  perkembangan  janin. Hal  ini  dapat  mengganggu  pertumbuhan  dan perkembangan  janin  secara  normal  seperti mengurangi  berat  lahir  janin,  seperti  yang diamati  dalam  penelitian  ini,  dimana  terdapat pengurangan yang signifikan pada jumlah dan berat  lahir  dari  tikus  yang  terpajan  Pb.  Kasus keracunan  timbal  juga  telah  dilaporkan  dan dikaitkan dengan sterilitas, keguguran, abortus,  kelahiran  prematur,  dan  kematian bayi 11,12,13 .
Tidak  hanya  melibatkan  mekanisme stress  oksidatif didalam  tubuh, ion  Pb2+  yang berasal dari Pb asetat juga mampu menggantikan  tempat  kation  bivalen  seperti Ca2+,  Mg2+  dan  kation  monovalen  yang secara langsung dapat mengganggu metabolisme  sel.  Selain  itu,  timbal  dalam tulang dapat mengganti kalsium yang menyebabkan  kelumpuhan. Half  live dalam tulang 600-3.000 hari 14,15
Berdasarkan  masalah  yang  ditemukan dan belum banyaknya penelitian yang menghubungkan antara paparan timbal terhadap  kondisi  janin  hewan  coba,  maka peneliti  tertarik  untuk  mengetahui    perbedaan karakteristik  janin  pada  tikus  putih  (Rattus
norvegicus) bunting yang diberi dosis bertingkat timbal asetat.

## BAHAN DAN CARA
Penelitian  ini  merupakan  penelitian eksperimen  dengan  metode Post  Test  Only Control  Group. Populasi  penelitian  adalah tikus  putih  ( Rattus  norvegicus )  yang  didapat dari  unit  pemeliharaan  hewan  percobaan dengan  pertimbangan  tikus  adalah  mamalia coba  atau  sering  disebut  dengan  hewan laboratorium.  Jumlah  sampel    yaitu  sebanyak 28  ekor  dengan  kriteria  inklusi  dan  kriteria eksklusi, sebagai berikut:
1. Kriteria inklusi
a. Tikus putih ( Rattus norvegicus ) bunting
b. Umur 2-3 bulan
c. Berat badan rata-rata 200-250 gram
d. Tikus dalam keadaan sehat
e. Tidak ada kelainan anatomis
2. Kriteria eksklusi
a. Tikus sakit selama perlakuan
b. Tikus mati selama perlakuan
Sampel  diambil  secara  acak,  dibagi  4 kelompok.  Kelompok  (K)  tanpa  diberi perlakuan. Kelompok (P1) diberi timbal asetat dosis  50mg/L.  Kelompok  (P2)  diberi  timbal asetat  dosis  75mg/L.  Kelompok  (P3)  diberi timbal  asetat  dosis  100mg/L.  Pemberian timbal    sejak  hari  pertama  hingga  hari  ke  -19 kebuntingan,  kemudian  diterminasi  pada  hari ke-20.  Selanjutnya  dilakukan  penimbangan Berat  badan  janin  tikus,  pengukuran    panjang badan  dan  penghitungan  jumlah  janin. Pemeliharaan  hewan  coba    dilakukan  di
Animal House
Fakultas Kedokteran Universitas Andalas (UNAND).
Pengambilan  sampel  dilakukan  dengan pembedahan.  Tikus  betina  yang  telah  mati diletakkan  diatas  papan  fiksasi,  kemudian dilakukan laparatomi, mengeluarkan janin dari kantong amnion kemudian melakukan penimbangan,  pengukuran  serta  penghitungan jumlah janin.
Data  pengukuran  berat  badan,  panjang badan, jumlah janin, dianalisis terlebih dahulu dengan  uji  normalitas  data  menggunakan  uji Shapiro  Wilk. Karena  pada  variabel  berat badan,  panjang  badan  dan  jumlah  janin didapatkan  data  tidak  terdistribusi  normal maka  dilanjutkan  dengan  uji Kruskal  Wallis. Hasil  analisis  statistik  menggunakan  uji Kruskal  Wallis dan  dilanjutkan  dengan  uji Mann Whitney.

## HASIL

## 1. Berat Badan Janin
Rerata  Berat  Badan  Janin  Tikus ( Rattus  norvegicus )  pada  Kelompok

## Kontrol dan Kelompok Perlakuan
Hasil  uji  normalitas  berat  badan  janin didapatkan  data  berdistibusi  normal (p≥0,05), namun tidak homogen (p≤0,05) kemudian  dilakukan  transformasi  data. Hasil  transformasi  didapatkan  data  tetap tidak  homogen.  Kemudian  dilanjutkan dengan uji non parametrik.

## Tabel  1.    Rerata  Berat  Badan  Janin Antar Kelompok Sesudah Perlakuan
Kelompok Subjek N BB (g) Rerata ± SD P Kontrol 6 2.00 ± 0.056 0.000 P1 6 1.79 ± 0.021 P 2 6 1.59 ± 0.101 P3 6 1.29 ± 0.199
Tabel  1  menunjukkan  bahwa  rerata berat  badan  janin  kelompok  kontrol adalah  2.00  ±  0.056,    perlakuan  1 adalah 1.79  ±  0.021,  perlakuan  2  adalah  1.59  ± 0.101,  perlakuan  3  adalah  1.29  ±  0.199. Analisis  kemaknaan  dengan  uji Kruskal-
Wallis ,  menunjukkan  bahwa  nilai  p  =
0,000.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa terdapat  perbedaan  yang  bermakna  pada berat  badan  janin  tikus  akibat  pemberian timbal asetat dosis bertingkat.
Perbedaan  Rerata  Berat  Badan  Janin ( Rattus norvegicus ) Pada Kelompok Perbedaan  rerata  berat  badan  janin antar  kelompok  disajikan  pada  tabel  2 sebagai berikut.
Tabel 2.Perbedaan Rerata Berat Badan Janin  Tikus  Pada  Masing-Masing Kelompok Penelitian.
Berdasarkan  tabel  2    dapat  diketahui bahwa  terdapat  perbedaan  bermakna rerata  berat  badan  janin  pada  kelompok kontrol  dengan  kelompok  perlakuan  1, kelompok  kontrol  dengan  kelompok perlakuan  2,  kelompok  kontrol  dengan kelompok perlakuan 3, kelompok perlakuan  1  dengan  kelompok  perlakuan 2, kelompok perlakuan 1 dengan kelompok  perlakuan  3,  dan  kelompok perlakuan  2  dengan  kelompok  perlakuan 3, karena p≤0,05.
2. Panjang Badan Janin Rerata  Panjang  Badan  Janin  Tikus ( Rattus  norvegicus )  pada  Kelompok Kontrol dan Kelompok Perlakuan
Hasil uji normalitas panjang badan janin  didapatkan  data  berdistibusi  normal (p≥0,05), namun tidak homogen (p≤0,05) kemudian  dilakukan  transformasi  data. Hasil  transformasi  data  didapatkan  data tetap tidak homogen, kemudian dilanjutkan dengan uji non parametrik.
Kelompok  Tingkat Kebermaknaan Berat Badan Kontrol P1 P2 P3 Kontrol - 0,004* 0,004*  0,004* P1 0,004* - 0,004*  0,004* P2 0,004* 0,004* - 0.037* P3 0,004* 0,004* 0.037* - *) ada perbedaan
Tabel  3.    Rerata  Panjang  Badan  Janin Antar Kelompok Sesudah Perlakuan
Tabel  3  menunjukkan  bahwa  rerata panjang    badan  janin  kelompok  kontrol adalah  2.29  ±  0.094,    perlakuan  1 adalah 1.89  ±  0.088,  perlakuan  2  adalah  1.69  ± 0.095,  perlakuan  3  adalah  1.43  ±  0.257.
Analisis  kemaknaan  dengan  uji Kruskal- Wallis ,  menunjukkan  bahwa  nilai  p  = 0,000.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa terdapat  perbedaan  yang  bermakna  pada panjang badan janin tikus akibat pemberian timbal asetat dosis bertingkat.
Perbedaan  Rerata  Panjang  Badan Janin  Tikus  Betina  ( Rattus  norvegicus )
Pada Kelompok Kontrol Dan Perlakuan
Perbedaan  rerata  panjang  badan  janin antar  kelompok  disajikan  pada  tabel  4 sebagai berikut.
Tabel  4.    Perbedaan  Rerata  Panjang Badan  Janin  Tikus  pada    masing- masing Kelompok Penelitian.
Kelompok Tingkat Kebermaknaan Panjang Badan Kontrol P1 P2 P3 Kontrol - 0,004*  0,004*  0,004* P1 0,004* - 0,01*  0,006* P2 0,004* 0,01* - 0.106 P3 0,004* 0,006* 0.106 -
*) ada perbedaan
Berdasarkan tabel  4 dapat  diketahui bahwa  terdapat  perbedaan  bermakna rerata panjang badan janin pada kelompok kontrol  dengan  kelompok  perlakuan  1, kelompok  kontrol  dengan  kelompok
perlakuan  2,  kelompok  kontrol  dengan kelompok perlakuan 3, kelompok perlakuan 1 dengan kelompok perlakuan 2 dan  kelompok  perlakuan  1  dengan kelompok  perlakuan  3  karena  p≤0,05. Sedangkan  pada  kelompok  perlakuan  2 dengan  kelompok  perlakuan  3  tidak memperlihatkan perbedaan yang bermakna (p≥0,05)
3. Jumlah Janin
Rerata  Jumlah  Janin  Tikus  ( Rattus norvegicus )  pada  Kelompok  Kontrol dan Kelompok Perlakuan
Hasil  uji  normalitas  jumlah  janin didapatkan  data  tidak  berdistibusi  normal (p≤0,05), kemudian dilakukan transformasi data. Hasil  transformasi  data didapatkan  data  tetap  tidak  berdistribusi normal,  kemudian  dilanjutkan  dengan  uji non parametrik.
Tabel  5.    Rerata  Jumlah  Janin  Antar Kelompok Sesudah Perlakuan
Kelompok Subjek N Jumlah Janin Median ± SD P Kontrol 6 8 ± 0.548 0.000 P 1 6 5 ± 0.753 P 2 6 4 ± 0.548 P 3 6 2 ± 0.753
Tabel 5 dan Gambar 3 menunjukkan bahwa  rerata  jumlah  janin  kelompok kontrol  adalah  7.5  ±  0.548,    perlakuan  1 adalah    5.17  ±  0.753,  perlakuan  2  adalah 3.5  ±  0.548,  perlakuan  3  adalah  1.83  ± 0.753.  Analisis  kemaknaan  dengan  uji Kruskal-Wallis, menunjukkan bahwa nilai p  =  0,000.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa terdapat  perbedaan  yang  bermakna  pada jumlah  janin  tikus  akibat  pemberian timbal asetat dosis bertingkat.
Perbedaan  Rerata  Jumlah  Janin  Tikus ( Rattus  norvegicus )  Pada  Kelompok Kontrol dan Perlakuan
Kelompok Subjek N PB (cm) Rerata ± SD P Kontrol 6 2.29 ± 0.094 0.000 P 1 6 1.89 ± 0.088 P 2 6 1.69 ± 0.095 P 3 6 1.43 ± 0.257
Perbedaan  rerata  jumlah  janin  antar kelompok  disajikan  pada  tabel  6  sebagai berikut.
Tabel  6.      Perbedaan  Rerata  Jumlah Janin  Tikus  pada    masing-masing
Kelompok Penelitian.
Kelompok  Tingkat Kebermaknaan Panjang Badan
Kontrol P1 P2 P3 Kontrol - 0,003* 0,003*  0,003* P 1 0,003* - 0,006*  0,003* P 2 0,003* 0,006* - 0,006* P 3 0,003* 0,003* 0,006* - *) ada perbedaan
Berdasarkan tabel 6 diketahui bahwa  terdapat  perbedaan  bermakna jumlah  janin  pada  kelompok  kontrol dengan  kelompok  perlakuan  1,  kelompok kontrol  dengan  kelompok  perlakuan  2, kelompok  kontrol  dengan  kelompok perlakuan  3,  kelompok  perlakuan  1 dengan  kelompok  perlakuan  2,  kelompok perlakuan 1 dengan kelompok perlakuan 3 dan  kelompok  perlakuan  2  dengan kelompok perlakuan 3 karena p≤0,05.

## PEMBAHASAN
Perbedaan  Rerata  Berat  Badan  Janin Tikus Putih ( Rattus norvegicus )
Pada  penelitian  ini  ditemukan  bahwa pada  kelompok  kontrol  (tanpa  perlakuan) rerata  berat  badan  janin  lebih  tinggi  yaitu sebesar  2.00  gram  dibandingkan  dengan kelompok  perlakuan  1  (dosis  timbal  asetat 50mg/L)  yaitu  sebesar  1.79  gram,  kelompok perlakuan 2 (dosis timbal asetat 75mg/L) yaitu sebesar  1.59  gram  dan  kelompok  perlakuan  3 (dosis  timbal  asetat  100mg/L)  yaitu  sebesar 1.29 gram.
Selama awal kehamilan, timbal anorganik melintasi membran plasenta dengan cepat  dan  dalam  jumlah  yang  signifikan, bahkan  pada  kadar  yang  sangat  rendah didalam darah ibu. Konsentrasi timbal didalam darah ibu sangat berkorelasi dengan
konsentrasi  pada  tali  pusat  dan  menunjukkan gerakan transplasental timbal ke janin 16 .
Trofoblas didalam labirin dan kelompok trofospongium yang terpajan timbal mengalami degenerasi, infiltrasi inflamasi dan deposisi  fibrin.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa paparan terus menerus selama kehamilan pada tikus mengakibatkan cedera reproduksi. Analisis ultrastruktural mengungkapkan bahwa terjadi pembengkakan mitokondria dan distensi  reticular  endoplasma  kasar,  hasil  ini juga dikonfirmasi  dengan penelitian lain  yang menunjukkan bahwa timbal dapat merangsang aktivasi mediator proinflamasi dan menyebabkan  stres  oksidatif.  Kerusakan cytoarchitecture  dan  sitoplasma  kemungkin mengakibatkan gangguan pada proses pertukaran  nutrisi  dan  oksigen  antara  ibu  dan janin 17 .
Hasil  uji  dengan  menggunakan  uji Mann-Whitney dapat  disimpulkan  bahwa, terdapat  perbedaan  yang  bermakna  antara berat badan janin pada setiap kelompok. Hasil penelitan  ini  sejalan  dengan  penelitian  Wang et  al ,  2009  dimana  terdapat  pengaruh  yang signifikan  antara  kadar  timbal  didalam  darah ibu  dengan  penurunan  berat  badan  janin, panjang  tubuh,  dan  berat  plasenta  antara kelompok perlakuan dengan kelompok kontrol 17 .
Pemilihan  dosis  pada  penelitian  ini  juga diacu pada kadar yang mana tidak menimbulkan  gejala  toksisitas  pada  penelitian sebelumnya. Hal  ini sejalan dengan penelitian Zhu et al , 2010 dimana di antara wanita hamil yang memiliki kadar timbal darah <10 μg/dL, kadar  timbal  darah  (akar  kuadrat  diubah) menunjukkan  hasil  yang  berbanding  terbalik dengan berat lahir. Penelitian tersebut menunjukkan  bahwa  pada  peningkatan  kadar timbal  darah  terjadi  penurunan  berat  lahir  per 1-μg /dL. Kemungkinan ini lebih besar terjadi pada  konsentrasi  timbal  darah  yang  lebih rendah  daripada  pada  konsentrasi  yang  lebih
tinggi.  Hasil  ini  penting,  mengingat  tingginya prevalensi  tingkat  rendah  paparan  timbal  di antara wanita hamil dan kontroversi mengenai rekomendasi  terkait  intervensi  pada  tingkat timbal darah ibu 9 .
Penurunan  berat  badan  kemungkinan juga  dapat  dikaitkan  dengan  penurunan  berat plasenta  terhadap  penghambatan  mitosis, apoptosis,  degenerasi  dan  /  atau  nekrosis trofoblas,  yang  diinduksi  oleh  cedera  plasenta langsung  atau  efek  tidak  spesifik  yang  terkait dengan  kondisi  lingkungan  ibu  yang  sangat tidak  menguntungkan  hal  ini  menyebabkan kurangnya populasi sel  yang diperlukan untuk histogenesis  normal,  kemudian  menghasilkan plasenta  kecil.  Selanjutnya  cedera  pada organel sitoplasma dapat mengganggu pertukaran  nutrisi  dan  oksigen  antara  ibu  dan janin,  dan  dapat  berkontribusi  pada  hasil kehamilan abnormal, dan berat lahir rendah 16 .

## Perbedaan  Rerata  Panjang  Badan  Janin Tikus Putih (Rattus norvegicus)
Penelitian  ini  menunjukkan  adanya perbedaan  yang  bermakna  pemberian  timbal asetat terhadap panjang janin antara kelompok kontrol dengan ketiga kelompok perlakuan.
Serta  perbedaan  yang  bermakna  antara kelompok  perlakuan  1  dengan  kelompok perlakuan  2,  kelompok  perlakuan  1  dengan kelompok  perlakuan  3,  namun  tidak  pada kelompok perlakuan 2 dan kelompok perlakuan 3. Logam mudah diserap melalui gastrointestinal  aluran  dan  mendistribusikan ke jaringan tubuh lunak seperti ginjal, sumsum tulang,  hati  dan  otak,  tetapi  terakumulasi  di dalam darah dan tulang 13 .
Mekanisme  yang  menyebabkan  timbal bisa  memberikan  efek  merugikan  pada  hasil kehamilan  termasuk  gangguan  pertumbuhan tulang  janin  disebabkan  oleh  persaingan dengan  kalsium  untuk  deposisi  ke  dalam tulang,  pengurangan  hormon  tiroid  janin,
akumulasi timbal dalam plasenta menyebabkan  fungsi  plasenta  abnormal  dan pengurangan  transfer  nutrisi,  dan  stres oksidatif 11 .
Beberapa  mekanisme  yang  mungkin terkait  dengan  pertumbuhan  panjang  janin adalah  perubahan  fungsi  sumbu  hipotalamus- hipofisis.  Pelepasan  hormon  pertumbuhan  di respons  terhadap  faktor  pelepasan  hormon pertumbuhan  menurun  pada  tikus  yang  diberi timbal 18 .
Selain  itu  metabolisme  kalsium  dan fakta  bahwa  timbal  sel  mendeteksi  timbal dengan cara yang mirip dengan kalsium, tetapi cukup berbeda untuk mengganggu metabolisme  kalsium  normal 19 .  Metabolisme kalsium  dalam  beberapa  jenis  sel  dipengaruhi oleh  timbal  dalam  cara  yang  sama,  seperti yang  ditunjukkan  pada  hepatosit  tikus  primer, osteoklas murine primer, dan sel ROS. Tulang adalah organ utama untuk penyimpanan timbal di  tubuh,  di  mana  konsentrasi  timbal intraseluler  cenderung  lebih  tinggi  dari  pada organ  lain  di  dalam  tubuh,  membuat  efek timbal pada tulang menjadi perhatian utama 20 . Hal  ini  sejalan  dengan  penelitian Anderson  et  al  (1977)  yang  menemukan bahwa tingkat pembentukan tulang dan tingkat resorpsi  tulang  menurun  pada  anjing  yang telah  menerima  dosis  timbal  tingkat  rendah untuk  periode  201  hari 21 .  Hal  ini  juga menunjukkan bahwa sintesis matriks  antar sel menurun ketika timbal dicerna.

## Perbedaan  Rerata  Jumlah  Janin  Tikus Putih (Rattus norvegicus)
Penelitian  ini  menunjukkan  adanya perbedaan  yang  bermakna  pemberian  timbal asetat  terhadap  jumlah  janin  antar  setiap kelompok perlakuan. Hal ini dapat disebabkan ketidakseimbangan  antara  peroksida  lipid  dan antioksidan  Sistem  ini  dapat  menyebabkan disfungsi  plasenta  dan  transfer  nutrisi  yang tidak  adekuat  ke  janin.  Produksi    peroksida
lipid  dan  radikal  bebas  oleh  plasenta memengaruhi integritasnya kerusakan plasenta atau komplikasi kehamilan. Tingkat peningkatan  MDA  pada  tikus  hamil  dapat menjadi  indicator  peroksidasi  lipid  dalam jaringan  plasenta.  Sebaliknya,  enzim  katalase aktivitas  dalam  kelompok  yang  sama  ini meningkat,  mungkin  karena  kemampuan enzim  antioksidan  ini  menghilangkan  radikal bebas.  Kehadiran  dari  Enzim  antioksidan dalam plasenta meningkat seiring perkembangan kehamilan normal untuk melindungi aktivitas sel sendiri dan juga janin terhadap kerusakan oksidatif.
Pada  awal  kehamilan,  eksposur  timbal sedikit  menunda  perkembangan  embrio  dan menghambat  proses  implantasi.  Implantasi adalah  proses  yang  berawal  dari  perlekatan blastokista  ke  embedding  di  dinding  rahim. Agen  beracun  dapat  mengganggu  proses implantasi  secara  langsung.  Gejala  umum keracunan timbal pada ibu hamil adalah aborsi spontan.  Manifestasinya  pada  janin  dan  bayi baru  lahir  meliputi  prematuritas,  hipotrofi janin dan malformasi 22 .
Dalam  banyak  jenis  sel,  termasuk trofoblas  manusia,  stres  oksidatif  berfungsi sebagai  suatu  sinyal  untuk  secara  langsung atau  tidak  langsung  mengaktifkan  apoptosis. Meskipun apoptosis terjadi sebagai bagian dari pergantian sel normal di plasenta, jumlah yang berlebihan  dari  apoptosis  dan  stres  oksidatif mungkin  kompromi  fungsi  trofoblas  dan  bisa menjadi  yang  utama  kejadian  patologis  atau faktor  penyebab  komplikasi  yang  dialami selama kehamilan. Hal ini dapat meningkatkan terjadi  abortus,  reapsorbsi  janin,  sampai dengan  kematian  janin.  Reasorbsi  janin  inilah yang  menurunkan  angka  fetus  pada  tingkat paparan logam berat yang semakin tinggi.
Steroidogenesis juga berhubungan dengan  antioksidan  konsentrasi.  Konsentrasi estrogen  yang  tinggi  berkontribusi  terhadap antioksidan  enzimatik  yang  lebih  besar
aktivitas;  selanjutnya  stres  oksidatif  memiliki berdampak  pada  produksi  hormon  steroid diproduksi oleh sel granulosa dan bahwa oosit dalam folikel terpapar secara alami untuk stres oksidatif  yang  menyebabkan  peroksidasi  lipid dan  mempengaruhi  glikoprotein  produksi diproduksi oleh sel granulosa.
Hal  ini  sesuai  dengan  hasil  penelitian Anjum,  et  al  (2013)  yang  menunjukkan penurunan rerata jumlah janin pada kelompok yang  dipapar  timbal.  Salah  satu  teori  yang dipertimbangkan  terkait  untuk  menurunkan aliran  uteroplasenta,  yang  mengarah  untuk oksigenasi  janin  yang  buruk.  Efek  ini disebabkan  oleh  invasi  intravaskular  yang tidak adekuat trofoblas, yang mempertahankan yang  tinggi  akibatnya  resistensi  arteri  spiral cedera  endotel,  peningkatan  oksigen  reaktif spesies  (ROS)  dan  spesies  nitrogen  reaktif (RNS) 23 .  Kapasitas  antioksidan  rendah  dari plasenta  jaringan  memimpin  perkembangan oksidatif stress.
Tidak  hanya  penurunan  pada  berat badan,  panjang  badan  dan  jumlah  janin. Keracunan  timbal  yang  parah  pada  anak-anak dapat  menyebabkan  demensia,  lekas  marah, sakit kepala, kedutan otot, halusinasi, gangguan  memori,  masalah  belajar  atau perilaku,  masalah  konsentrasi  dan  perhatian, penurunan IQ, gangguan pendengaran, kegelisahan  atau  hiperaktif.  Keracunan  akut bisa  menyebabkan  kejang,  kelumpuhan  dan koma. Dalam kasus yang fatal, kerusakan otak bisa terjadi karena edema dan perubahan pada pembuluh darah 24 .
Dalam  sejumlah  penelitian  sebelumnya, paparan timbal hewan bunting dengan kisaran dosis  harian  4  sampai  32  mg  /  kg  di  berbagai tahap kehamilan telah mengungkapkan berbagai efek toksikologis pada perkembangan janin  termasuk  berat  lahir  rendah,  kelainan hematologi  yang  parah,  gangguan  implantasi, resorpsi dan malformasi 13 .

## KESIMPULAN DAN SARAN
Terdapat  perbedaan  rerata  berat  badan janin  tikus  (Rattus  norvegicus)  yang  diberi dosis  bertingkat  timbal  asetat.  Terdapat perbedaan  rerata  panjang  badan  janin  tikus (Rattus norvegicus) yang diberi dosis bertingkat  timbal  asetat.Terdapat  perbedaan rerata  jumlah  janin  tikus  ( Rattus  norvegicus ) yang diberi dosis bertingkat timbal asetat
Disarankan  kepada  peneliti  selanjutnya untuk  melakukan  penelitian  lebih  lanjut mengenai  pengaruh  paparan  timbal  yang diberikan  sepanjang  siklus  kehidupan  tikus putih  ( Rattus  norvegicus) dan  kemudian dilakukan  pengukuran  kadar  timbal  darah induk serta penilaian terhadap onset janin.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terimakasih  penulis  ucapkan  kepada komisi  etik  penelitian  fakultas  kedokteran universitas  Andalas  Padang,  laboratorium biokimia    universitas  Andalas  Padang    yang telah mendukung pelaksanaan penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
1.   Ayangbenro  AS,  Babalola  OO.  A  new strategy for heavy metal polluted environments:  A  review  of  microbial biosorbents. Int  J  Environ  Res  Public
Health . 2017. doi:10.3390/ijerph14010094 2.   Iheanacho EU, JC N, CF O. Environmental pollution and heavy metals. Eur J Biotechnol Biosci . 2017;5(5):73-78. http://www.biosciencejournals.com/archiv es/2017/vol5/issue5/5-5-25. 3.   World Health Organization. Lead poisoning and health. https://www.who.int/news-room/fact-
sheets/detail/lead-poisoning-and-health. Published  2019.  Accessed  January  10, 2020.
4.   Vigeh  M,  Saito  H,  Sawada  SI.  Lead exposure  in  female  workers  who  are pregnant  or  of  childbearing  age. Ind Health .
2011:255-261.
doi:10.2486/indhealth.MS1192 5.   World  Health  Organization. Exposure  To Lead:  A  Major  Public  Health  Concern .; 2010.
https://www.who.int/ipcs/features/lead..pd
f. Accessed January 10, 2020.
6.   Wani  AL,  Ara  A,  Usmani  JA.  Lead toxicity:  A  review. Interdiscip  Toxicol . 2015;8(2):55-64.  doi:10.1515/intox-2015- 0009
7.   Neda AN, Fahimeh S, Tahereh  ZK,  et  al. Lead level in umbilical cord blood and its effects  on  newborns  anthropometry. J
Clin Diagnostic Res . 2017;11(6). doi:10.7860/JCDR/2017/24865.10016
8.   Wang L, Wang Z, Liu J. Protective effect of  N-acetylcysteine  on  experimental chronic  lead  nephrotoxicity  in  immature female rats. Hum Exp Toxicol .
2010;29(7).
doi:10.1177/0960327109357270
9.   Zhu  M,  Fitzgerald  EF,  Gelberg  KH,  Lin S,  Druschel  CM.  Maternal  low-level  lead exposure  and  fetal  growth. Environ
Health Perspect . 2010;118(10):1471– 1475. doi:10.1289/ehp.0901561
10.  Alya A, Ines DB, Montassar L, Najoua G, Saloua  EF.  Oxidative  stress,  biochemical alterations,  and  hyperlipidemia  in  female rats  induced  by  lead  chronic  toxicity during  puberty  and  post  puberty  periods. Iran  J  Basic  Med  Sci .  2015;18(10). doi:10.22038/ijbms.2015.5469
11.  Taylor  CM,  Golding  J,  Emond  AM. Adverse effects of maternal lead levels on birth  outcomes  in  the  ALSPAC  study:  A prospective  birth  cohort  study. BJOG  An Int J Obstet Gynaecol . 2015.
doi:10.1111/1471-0528.12756
12.  Nakade  UP,  Garg  SK,  Sharma  A,  et  al. Lead-induced  adverse  effects  on  the reproductive system of rats with particular reference  to  histopathological  changes  in uterus. Indian  J  Pharmacol .  2015;47(1). doi:10.4103/0253-7613.150317
13.  Aprioku  J,  Siminialayi  I.  Maternal  lead exposure  and  pregnancy  outcome  in Wistar albino rats. J Toxicol Environ Heal Sci . 2013. doi:10.5897/jtehs2013.0279
14.  Sukar S, Suharjo S. Bioindikator Cemaran Timbal  pada  Rambut  Masyarakat  sekitar
Kilang Minyak. Kesmas Natl Public Heal
J .
2015;9(3).
doi:10.21109/kesmas.v9i3.569
15.  Marianti  A,  Isnaeni  W,  Anatiasari  D. EDTA Sebagai Agen Proteksi Ginjal pada Tikus  yang  Dipapar  Timbal  Asetat. J
Mipa . 2018:27-33.
16.  Sodani  IJ.  Histopathological  Changes  of the  Mice  Placenta  Exposed  to  Lead Acetate. Iraqi  JMS .  2012;10(4):339-347. http://www.colmed-nahrain.edu.iq/.
17.  Wang Y ying, Sui K xu, Li H, Ma H yan. The  effects  of  lead  exposure  on  placental NF-κB  expression  and  the  consequences for  gestation. Reprod  Toxicol .  2009:190- 195. doi:10.1016/j.reprotox.2008.12.006
18.  Schell  LM,  Denham  M,  Stark  AD, Parsons  PJ,  Schulte  EE.  Growth  of infants’  length,  weight,  head  and  arm circumferences in relation to low levels of blood  lead  measured  serially. Am  J  Hum
Biol .
2009;21:180-187.
doi:10.1002/ajhb.20842
19.  Pounds  JG,  Long  GJ,  Rosen  JF.  Cellular and  molecular  toxicity  of  lead  in  bone. Environ  Health  Perspect .  1991;91:17-32. doi:10.1289/ehp.919117
20.  Long  GJ,  Rosen  JF,  Pounds  JG.  Cellular lead  toxicity  and  metabolism  in  primary and clonal osteoblastic bone cells. Toxicol
Appl Pharmacol . 1990;102:346-361. doi:10.1016/0041-008X(90)90032-P
21.  Anderson C, Danylchuk KD. The effect of chronic low level lead intoxication on the haversian remodeling system in dogs. Lab Investig . 1977;37:466-469.
22.  Mogra S, Sharma R, Qureshi N. Effects of maternal lead acetate exposure on prenatal development  of  swiss  albino  mice. Asian J Environ Sci . 2010;4(2):216-220. 23.  Anjum MR. Supplementation of
testosterone restores the suppressed fertility  in  male  rats  exposed  to  lead during  perinatal  period. IOSR  J  Pharm . 2012;2(6):49-53. doi:10.9790/3013- 26204953
24.  Charkiewicz  AE,  Backstrand  JR.  Lead
Toxicity  and  Pollution  in  Poland. Int  J Environ Res Public Health . 2020;17(12):4385. doi:10.3390/ijerph17124385