## PENGARUH MASSA RAGI DAN WAKTU FERMENTASI TERHADAP BIOETANOL DARI BIJI DURIAN
Farida Hanum, Nurhasmawaty Pohan, Mulia Rambe, Ratih Primadony*, Mei Ulyana Departemen Teknik Kimia, Fakultas Teknik Universitas Sumatera Utara, Medan
Jalan Almamater Kampus USU Medan 20155, Indonesia
*E-mail: ratihsipayung@gmail.com

## Abstrak
Bioetanol  merupakan  etanol  yang  terbuat  dari  tanaman  yang  mengandung  pati,  gula,  dan  tanaman  berselulosa lainnya.  Penelitian  ini  menggunakan  biji  durian  yang  mengandung  karbohidrat  dan  gula  yang  cukup  tinggi  sebagai bahan baku dan bertujuan untuk membuat bioetanol dari biji durian dengan variasi massa ragi yang ditambahkan dan waktu  fermentasi.  Variabel  yang  digunakan  adalah  perubahan  massa  ragi  3%;  6%;  dan 9%,  pH  fermentasi  4,5  dan waktu  fermentasi  0;  24;  48;  72;  dan  96  jam.  Dari  analisis  yang    dilakukan  diperoleh  hasil  kadar  bioetanol  yang tertinggi sebesar 18,9988% pada massa ragi 6% dan waktu fermentasi 48 jam.
Kata Kunci : bioetanol, asam klorida, biji durian

## Abstract
Bioethanol  is the ethanol made from plants that contains starch, sugar, and the others cellulose plants. This study uses durian  seeds  that  contain  carbohydrate  and  sugar  as  basic  material  and  the  purpose  is  to  make  bioethanol    from durian  seeds  with  the  variation  of  yeast  mass  added  and  fermentation  time.  The  variables  used  were  the  changes  of yeast mass 3%; 6%; and 9%, fermentation pH was 4,5, and fermentation times were 0; 24; 48; 72; and 96 hours. The results  of  experiment  were  the  bioethanol  concentration  was  18.9988%  at  the  yeast  mass  6%  with  48  hour  for  the fermentation.
Keywords : ethanol, hydrochloric acid, durian seeds

## Pendahuluan
Ketersediaan  energi  merupakan  syarat  mutlak khususnya dalam pelaksanaan pembangunan nasional baik pada saat ini maupun masa yang akan datang,  guna  menjamin  pemenuhan  pasokan  energi yang  merupakan  tantangan  utama  bagi  bangsa Indonesia.  Kebutuhan  energi  umumnya  didominasi oleh energi fosil seperti minyak bumi, gas bumi dan batu  bara.  Sumber  energi  fosil  ini  merupakan sumber  energi  yang  terbatas  yang  memerlukan antisipasi untuk mengurangi ketergantungan terhadap energi tersebut [15].
Salah  satu  alternatif      pengganti  bahan  bakar fosil  adalah  dengan  bioenergi  seperti  bioetanol. Bioetanol  adalah  bahan  bakar  nabati  yang  tak pernah  habis  selama  mentari  masih  memancarkan sinarnya,  air  tersedia,  oksigen  berlimpah  dan  kita mau  melakukan  budidaya  pertanian.  Sumber bioetanol  dapat  berupa  singkong,  ubi  jalar,  tebu, jagung,  sorgum  biji,  sorgum  manis,  sagu,  aren, nipah, lontar, kelapa dan padi [10].

## Teori
Durian (Durio  zibethinus) merupakan  tanaman buah  berupa  pohon  Sebutan  durian  diduga  berasal dari  istilah  Melayu  yaitu  dari  kata  duri  yang  diberi akhiran -an sehingga menjadi durian [8]. Biji durian (pongge)  memiliki  kandungan  pati  yang  cukup tinggi  sehingga  dapat  digunakan  sebagai  pengganti bahan  makanan    dan  dapat  dimanfaatkan  sebagai bioetanol [1].
Alkohol  (khususnya  etanol)  dapat  dibuat  dari berbagai bahan hasil pertanian. Secara umum bahan-
bahan  tersebut  dapat  dibagi  dalam  tiga  golongan yaitu:
1) Bahan yang mengandung turunan gula (molases, gula tebu, gula bit, sari buah anggur, dan sari buah lainnya),
2) Bahan-bahan yang mengandung pati biji-bijian, kentang, dan tapioka), dan
3) Bahan  yang  mengandung  selulosa  (kayu,  dan beberapa limbah pertanian  lainnya).
Selain  dari  ketiga  jenis  bahan  tersebut  diatas etanol juga dapat dibuat dari bahan bukan dari hasil pertanian  tetapi  dari  bahan  yang  merupakan  hasil proses lain. Sebagai contohnya adalah etilen. Bahan- bahan  yang  mengandung  monosakarida  langsung dapat  difermentasi,  akan  tetapi  disakarida,  pati maupun  karbohidrat  kompleks  harus  dihidrolisis terlebih  dahulu  menjadi  komponen  yang  sederhana yaitu monosakarida [4].
Bahan-bahan  tersebut  diatas  harus  mengalami perlakuan  pendahuluan  sebelum  masuk  kedalam proses  fermentasi  agar  proses  tersebut  berjalan dengan  optimal.  Disakarida  (seperti  gula  pasir) harus  dihidrolisis  menjadi  glukosa  dan  fruktosa. Terbentuknya  glukosa  dan  monosakarida  yang  lain menunjukkan  bahwa  proses  pendahuluan  telah berakhir dan bahan selanjutnya telah siap difermentasi.  Secara  kimiawi  reaksi  dalam  proses fermentasi  berjalan  cukup  panjang,  karena  terjadi suatu  deret  reaksi  yang  masing-masing  dipengaruhi oleh enzim khusus [4].
Seperti  diketahui,  etanol  dikategorikan  dalam dua kelompok utama :
1) Etanol 95-96 % v/v, disebut “etanol hidrat” yang dibagi dalam :
 Technical/raw spit grade , digunakan untuk bahan bakar spirtus, minuman , desinfektan dan pelarut
 Industrial  grade ,  digunakan  untuk  bahan baku industri pelarut
 Potable  grade ,  untuk  minuman  berkualitas tinggi.
2) Etanol  >  99.5  %  v/v,  digunakan  untuk  bahan bakar.  Jika  dimurnikan  lebih  lanjut  dapat digunakan  untuk    keperluan    farmasi    dan pelarut    di  laboratorium    analisis.    Etanol  ini disebut fuel  grade  thanol (FGE)    atau anhydrous    ethanol (etanol  anhidrat)    atau etanol  kering,  yakni    etanol    yang    bebas  air atau  hanya   mengandung   air  minimal.
Etanol memiliki banyak manfaat bagi masyarakat  karena  memiliki  sifat  yang  tidak beracun.  Selain  itu,  etanol  juga  memiliki  banyak sifat-sifat, baik secara fisika maupun kimia. Adapun sifat-sifat fisika etanol dapat dilihat pada tabel 1.
Tabel 1. Sifat-Sifat Fisika Etanol [9]
Sifat-Sifat Fisika Etanol Keterangan Berat Molekul 46,07 gr/grmol Titik Lebur -112 o C Titik didih 78,4 o C Densitas 0,7893 gr/ml Indeks bias 1,36143 cP Viskositas 20 o C 1,17 cP Panas penguapan 200,6 kal/gr Warna Cairan tidak berwarna Kelarutan larut dalam air dan eter Aroma memiliki aroma yang khas
Etanol  dimanfaatkan  untuk  berbagai  keperluan, antara lain:
1) Bahan baku industri atau senyawa kimia, contoh: industri  minuman  beralkohol,  industri  asam asetat dan asetaldehid.
2) Pelarut  dalam  industri,  contoh:  industri  farmasi, kosmetika dan plastik.
3) Bahan desinfektan, contoh: peralatan kedokteran, rumah tangga dan peralatan di rumah sakit.
4) Bahan baku motor. Etanol  atau  etil  alkohol  yang  di  pasaran  lebih dikenal sebagai alkohol merupakan senyawa organik dengan rumus kimia C 2 H 5 OH. Dalam kondisi kamar, etanol berwujud cairan yang tidak berwarna, mudah menguap,  mudah  terbakar,  mudah  larut  dalam  air dan  tembus  cahaya.  Etanol  adalah  senyawa  organik golongan  alkohol  primer.  Sifat  fisik  dan  kimia etanol  bergantung  pada  gugus  hidroksil.  Faktor- faktor  yang  dapat  mempengaruhi  jumlah  etanol
yang dihasilkan dari fermentasi adalah mikroorganisme dan media yang digunakan, adanya komponen media yang dapat menghambat pertumbuhan serta kemampuan fermentasi mikroorganisme  dan  kondisi  selama  fermentasi. Selain  itu,  hal-hal  yang  perlu  diperhatikan  selama fermentasi  adalah  pemilihan  khamir,  konsentrasi gula, keasaman, ada tidaknya oksigen dan suhu dari perasan buah. Pemilihan sel khamir didasarkan pada jenis  karbohidrat  yang  digunakan  sebagai  medium untuk  memproduksi  alkohol  dari  pati  dan  gula digunakan Saccharomyces cerevisiae . Proses fermentasi  sama  dengan  pH  optimum  untuk  proses pertumbuhan  khamir  yaitu  pH  4,0-4,5.    Etanol dihasilkan  dari  gula  yang  merupakan  hasil  aktivitas fermentasi sel khamir. Khamir yang baik digunakan untuk  menghasilkan  etanol  adalah  dari  genus Saccharomyces .  Kriteria  pemilihan  khamir  untuk produksi  etanol  adalah  mempunyai  laju  fermentasi dan  laju  pertumbuhan  cepat,  perolehan  etanol banyak,  tahan  terhadap  konsentrasi  etanol  dan glukosa  tinggi,  tahan  terhadap  konsentrasi  garam tinggi,  pH  optimum  serta  fermentasi  rendah, temperatur  optimum  fermentasi  sekitar  25-30  tahan terhadap stress fisika dan kimia [2].

## Metodologi Penelitian
Pembuatan Tepung Biji Durian
1. Sebanyak 10 kg biji durian dicuci bersih.
2. Biji  durian  dibersihkan  dari  kulit  arinya  yang berwarna cokelat.
3. Biji durian dicuci bersih.
4. Diiris dengan ketebalan 2-3 mm
5. Lendir  dari  biji  durian  yang  telah  diirisi dihilangkan  dengan  cara  menambahkan  garam pada biji durian, dicampur, diaduk-aduk dibawah air mengalir sampai keluar busa.
6. Direndam dengan air kapur selama 1 jam.
7. Ditiriskan  lalu  dicuci  dengan  air  mengalir sampai lendir berkurang dan ditiriskan.
8. Dijemur di bawah sinar matahari.
9. Hasil pengeringan kemmudian dihaluskan dengan  mesin  pengiling  dan  diayak  dengan ayakan  50  mesh  hinga  diperoleh  tepung  biji durian[11].

## Tahap Pesiapan Bahan Fermentasi
1. Ditimbang sebanyak 100 gr tepung biji durian
2. Dimasukkan  ke  dalam  beker  gelas  ukuran  500 ml
3. Ditambahkan aquadest sebanyak 250 ml
4. Ditambahkan HCl 0,5 M sampai pH 2,3
5. Campuran  dipanaskan  di  dalam  panci  pengukus sambil  diaduk-aduk  selama  30  menit  pada  suhu 93-95 o C [11].

## Tahap Fermentasi
1. Campuran didinginkan pada suhu kamar.
2. Didinginkan  dan  disaring  hingga  tidak  ada ampas dalam larutan hasil hidrolisis.
3. Ditambahkan larutan Natrium hidroksida (NaOH) atau asam  klorida hingga pH campuran bahan sampai pada 4,5.
4. Ditambahkan  ragi Saccharomyces  cerevisiae masing-masing sebanyak 3% dari berat bahan.
5. Campuran  diaduk  rata,  kemudian  ditutup  dalam wadah fermentasi.
6. Campuran disimpan dan dibiarkan pada temperatur kaamr dengan waktu 48 jam, 72 jam, dan 96 jam.
7. Dengan  menggunakan  pHmeter,  setiap  hari  pH bahan  dikontrol  sehinggan  tetap  pada  pH  4,5 (jika pH menurun ditambahkan larutan NaOH).
8. Prosedur  diulangi  untuk  perlakuan  massa  ragi 6% dan 9% dari massa bahan[11].

## Tahap Destilasi
1.  Peralatan  destilasi  dirangkai  kemudian  hasil fermentasi dimasukkan ke  dalam labu leher tiga.
2.   Ditambahkan 50 ml aquadest lalu di aduk rata.
3.   Larutan dipanaskan hingga suhu mencapai 80 o C 4.   Destilat ditampung dan diukur volumenya[14].

## Prosedur Analisa
a. Penentuan Jumlah Bioetanol (ml)
1. Destilat  hasil  destilasi  yang  ditampung (bioetanol)  diukur  dengan  meggunakan  gelas ukur.
2. Volume dicatat untuk tiap-tiap perlakuan [11].
b.  Analisis Densitas Bioetanol (gr/ml)
1. Piknometer  diisi  dengan  bioetanol  hasil destilasi dan ditimbang   massanya.
2. Selisih  massa  antara  piknometer  kosong  dan yang  berisi  bioetanol  merupakan  massa bioetanol.
3. Densitas bioetanol diperoleh dengan membagi massa bioetanol dengan volumenya.
4. Dicatat densitas yang diperoleh pada tiap-tiap perlakuan [11].

## c.  Analisis Spesific Grafity (sg) dan API
Grafity (G)
1. Densitas  bioetanol  telah  ditentukan  pada prosedur sebelumnya.
2. Dihitung nilai Spesific Grafity untuk masing- masing sampel dengan menggunakan persamaan berikut:
) 1 ( ) ( ) ( 3 3   m kg air densitas m kg sampel densitas sg 
3. Dihitung  nilai  API  grafity  untuk  masing- masing  sampel  dengan  persamaan  sebagai berikut :
) 2 ( 5 , 131 5 , 141      sg G
4. Lalu dicatat semua harga spesific  grafity dan API grafity untuk tiap-tiap perlakuan [11].
d. Analisis Nilai Kalor (NK )
1.   Nilai  kalor  dihitung  dengan  menggunakan persamaan 3.
) 3 ( ) / ) 10 ( 40 650 , 18 ( 9673727 , 3 2046226 , 2  kg kkal G x x NK   
2.   Dicatat  semua  nilai  kalor  yang  diperoleh untuk tiap-tiap perlakuan [11].
e.   Analisis  Kadar  Bioetanol  dengan  Metode  Berat Jenis
Nilai  densitas  yang  diperoleh  sebelumnya  di cocokkan pada tabel 2 [9]. Kadar etanol dihitung dengan  menginterpolasi  data  densitas  dan  kadar etanol.

## Tabel 2. Konversi Berat Jenis - Kadar Etanol
Kadar Etanol Berat Jenis Larutan Etanol (Pada suhu 30 o C) Kadar Etanol Berat Jenis Larutan Etanol 0 0,99568 25 0,95607 1 0,99379 26 0,95442 2 0,99194 27 0,95272 3 0,99014 28 0,95098 4 0,98839 29 0,94922 5 0,98670 30 0,94741 6 0,98507 31 0,94557 7 0,98347 32 0,94370 8 0,98189 33 0,94180 9 0,98031 34 0,93986 10 0,97875 35 0,93790 11 0,97723 36 0,93591 12 0,97573 37 0,93390 13 0,97424 38 0,93186 14 0,97278 39 0,92979 15 0,97133 40 0,92770 16 0,96990 41 0,92558 17 0,96844 42 0,92344 18 0,96697 43 0,92128 19 0,96547 44 0,91910 20 0,96395 45 0,91692 21 0,96242 46 0,91472 22 0,96087 47 0,91250 23 0,95929 48 0,91028 24 0,95769 49 0,90805
Hasil dan Pembahasan

## Pengaruh Massa Ragi Dan Waktu Fermentasi Terhadap Jumlah Bioetanol
Dari  gambar  1  terlihat  bahwa  volume  bioetanol yang  paling  banyak  dihasilkan  pada  waktu  48  jam dengan  massa  ragi  6%  yaitu  3,7  ml  kemudian  pada waktu  72  jam  sebanyak  3,3  ml  dan  pada  waktu  96 jam  sebanyak  3,3  ml.  Dari  grafik  diatas  dapat diketahui  semakin  lama  waktu  fermentasi,  volume bioetanol  akan  semakin  meningkat  sampai  batas waktu tertentu dan kemudian menurun. Hal ini telah sesuai  dengan  teori  dimana  semakin  lama  waktu fermentasi  maka  volume  bioetanol  yang  dihasilkan semakin  banyak.  Tetapi  pada  waktu  72  jam  dan  96 jam  terjadi  penurunan,  hal  ini  disebabkan  pada waktu  72  jam  dan  96  jam  bakteri  ( Saccharomyces Cerevisiae ) mengalami fase pertumbuhan diperlambat dan  mengalami fase kematian  sehingga aktivitas  bakteri  untuk  mengubah  glukosa  semakin menurun  [12].  Selain  itu,  bioetanol  yang  dihasilkan telah  diubah  menjadi  asam  asetat  oleh  bakteri tersebut sehingga volume bioetanol  yang dihasilkan mengalami penurunan.
Gambar  1.  Pengaruh  Massa  Ragi  dan  Waktu Fermentasi Terhadap Jumlah Bioetanol
Pengaruh  Massa  Ragi  Dan  Waktu  Fermentasi Terhadap Densitas Bioetanol
Dari  gambar  2  terlihat  bahwa  densitas  bioetanol diperoleh  0,966  gr/ml  dimana  densitas  tersebut melebihi  dari  densitas  bioetanol  absolut  yaitu sebesar 0,789 gr/ml [3]. Hal ini menunjukkan bahwa etanol  yang  dihasilkan  masih  belum  murni  karena bercampur  dengan  air.  Hal  ini  disebabkan  oleh distilasi  yang  dilakukan  hanya  distilasi  sederhana bukan distilasi azeotrop serta kurang telitinya dalam menjaga kestabilan temperatur distilasi sehingga uap yang  keluar  bukan  hanya  bioetanol  melainkan bercampur dengan air.
Gambar  2.  Pengaruh  Massa  Ragi  dan  Waktu Fermentasi Terhadap Densitas Bioetanol
Pengaruh  Massa  Ragi  Dan  Waktu  Fermentasi Terhadap Kadar Bioetanol
Gambar  3.  Pengaruh  Massa  Ragi  dan  Waktu Fermentasi Terhadap Kadar Bioetanol
Dari  gambar  3  terlihat  bahwa    kadar  bioetanol yang  paling  tinggi  dihasilkan  pada  waktu  48  jam dengan massa ragi 6% yaitu 18,9998 %. Dari grafik diatas  dapat  diketahui  semakin  lama  waktu fermentasi, kadar bioetanol akan semakin meningkat sampai batas waktu tertentu dan kemudian menurun. Hal  ini  berlaku  juga  untuk  massa  ragi  3%  dan  9%. Hal ini sesuai dengan teori yang menyatakan bahwa waktu  optimal  untuk  fermentasi  alkohol  adalah selama 48 jam [6].
Tetapi  kadar  glukosa  yang  dihasilkan  masih terlalu  kecil,  hal  ini  juga  disebabkan  oleh  distilasi yang  masih  sederhana  untuk  memisahkan  distilat bioetanol serta kurang telitinya dalam menjaga suhu distilasi serta perlakuan saat proses fermentasi yang juga belum optimal.

## Pengaruh  Massa  Ragi  Dan  Waktu  Fermentasi Terhadap Nilai Kalor Bioetanol
Pada  gambar  4  nilai  kalor  yang  tertinggi  pada waktu  48  jam  dengan  konsentrasi  asam  pada  saat
hidrolisis  1M  yaitu  sebesar  167,092  kkal/kg.  Nilai kalor yang diperoleh pada bioetanol yang dihasilkan dari biji durian masih sangat kecil dibandingkan dari bioetanol dari bahan baku berbeda, diantaranya nilai kalor  dari  sampah  organik  berkisar  antara  10.000  – 11.000  kkal/kg.    Nilai  kalor  yang  lebih  besar  akan menyebabkan  lebih  mudah  terbakar  sehingga kualitas  bioetanol  lebih  baik  [13].  Hal  ini menunjukkan  bahwa  kualitas  bioetanol  yang dihasilkan pada penelitian ini masih sangat rendah.
Gambar 4. Pengaruh Pengaruh Massa Ragi  dan Waktu Fermentasi Terhadap Nilai Kalor Bioetanol Perbandingan Standar Baku Mutu Bioetanol
Tabel 3. Syarat Mutu Bioetanol [3]
Badan Standar Nasional (BSN) telah menetapkan  standar  baku  mutu  bioetanol  secara
umum,  dimana  standar  ini  digunakan  untuk menyatakan  kelayakan  bioetanol  sebagai  bahan bakar.  Pada  tabel  3  akan  dilihat  apakah  bioetanol yang  dihasilkan  pada  penelitian  ini  telah  ditentukan sesuai  dengan  standar  (sudah  layak  sebagai  bahan bakar  alternatif).  Bioetanol  yang  dihasilkan  pada penelitian ini  memang belum  sesuai dengan standar bioetanol  yang  telah  ditentukan,  hal  ini  disebabkan oleh beberapa faktor diantaranya:
1. Tidak  adanya  pemberian  nutrient  pada  bakteri pengurai  sehingga  kurang  bekerja  secara optimal  dalam  mengubah  glukosa  menjadi bioetanol [7].
2. Tertimbunnya  produk  sehingga  mempercepat kematian bakteri pada saat fermentasi berlangsung [5].
3. Kurang  diperhatikan  kemurnian  dari  ragi  yang digunakan.
4. Proses  pemurnian  atau  distilasi  yang  belum optimal (dibutuhkan distilasi bertingkat).

## Kesimpulan
Kesimpulan dari penelitian ini adalah :
1. Jumlah  bioetanol  optimum  yang  diperoleh  pada penelitian  ini  sebesar  3,7  ml  dengan  densitas 0,9669  gr/ml  dengan  waktu  48  jam  dan pemberian jumlah ragi 6% .
2. Kadar bioetanol yang diperoleh sebesar 18,999 % dengan waktu fermentasi 48 jam.
3. Nilai  kalor  optimum  sebesar  167,092  kkal/kg dengan  waktu  fermentasi 48 jam dan pemberian jumlah ragi sebesar 6% dari jumlah bahan baku.

## Daftar Pustaka
[ 1]   AAK, Budidaya  Tanaman  Pad,  Kanisus , Yogyakarta, 1990.
[2]   Astuty,  E.  D, Fermentasi  Etanol  Kulit  Buah Pisang , Penerbit  UGM, Yogyakarta ,1991.
[3]  Badan Standar Nasional, Etanol Nabati, SNI 3565, Jakarta, 2009.
[4]   Budiyanto, H.M, Mikrobiologi Terapan, Penerbit UMM Press, Malang, 2002.
[5]   Dewati,  Retno, Kinetika  Reaksi  Hidrolisa Kulit  Durian  Menjadi  Glukosa  Dengan Katalisator  HCl  Pada  Tangki    Berpengaduk ,
Penelitian  Staf  Pengajar  Teknik  Kimia:  FTI- UPNV, Jawa Timur, 2011.
[6]  Gaur,  Kadambini, Process  Optimization  For The  Production  of  Ethanol  Via  Fermentation , Deemed Universty, Patiala, 2006.
[7]    Manurung,  Susyanti, Kombinasi  Hidrolisa Asam dan Penggunaan Enzim dalam Fermentasi Alkohol dari Bungkil Kelapa Sawit , Penerbit  Universitas  Sumatera  Utara,  Medan  , 2001.
[8]   Michael,  Brown,  “ Durio  a  Bibliographic Review” , 1997. Parameter  Satuan Mutu Standar Bioetanol Bioetanol Biji Durian Ket. Kadar Etanol % v/v Min. 94,1 18,9998 Belum sesuai Minyak Fusel mg/L Maks. 15 - - Aldehid mg/L Maks. 30 - - Metanol mg/L Maks. 30 - - Densitas gr/ml Maks. 0,8215 0,9669 Belum sesuai Spesific Grafity - Maks. 0,8215 0,9669 Belum sesuai Nilai Kalor kkal/kg Maks. 5000 167,092 Belum sesuai Keasaman (sebagai asam asetat) mg/L Maks. 30 - - Kadar Air % b/b Maks. 2 - -
[9]  Perry,  R.  H.,  D.  W.  Green and J.O.Maloney, Perry’s  Chemical  Engineers  Handbook  ,
McGraw Hill Book Company 7 th Edition, New York,1999.
[10] Prihandana, R., K. Noerwijati, P. G. Adinurani, D. Setyaningsih, S. Setiadi dan   R. Hendroko, Bioetanol  Ubi  Kayu  Bahan  Bakar  Masa Depan , Penerbit Agro Media Pustaka, Jakarta, 2008.
[11]  Pusat  Penelitian  Sumberdaya  Hayati  dan Bioteknologi, Prosedur Pembuuatan Bioetanol ,
Laboratorium  BIORIN  Institut  Pertanian Bogor, Bogor, 2010.
[12]  Riadi,  Lieke, Teknologi  Fermentasi, Penerbit Graha Ilmu, Yogyakarta, 2007.
[13]  Shuler,  Michael  L.,  and  Fikret  Kargi, Bioprocces Engineering , Prentille-Hall
International editions,1992.
[14]  Sirait,  Megawati, Pembuatan  Etanol  dari  Ubi Kayu, Penerbit  Universitas  Sumatera  Utara,
Medan, 2005.
[15]  Van  Winkel,  M., Distillation ,  McGraw- Hill. New York: 1967.