## Jurnal Kesehatan
P-ISSN: 2354-5852 | E-ISSN  2579-5783 https://doi.org/10.25047/j-kes.v11i1.289

## Efek Seduhan Tepung Daun Kelor terhadap Kadar Glukosa Darah Puasa Tikus Diabetes Melitus
Adhiningsih Yulianti 1 , Ahmad Andi Setiawan 2 , Uun Ratriantari 3
Program Studi Gizi Klinik Jurusan Kesehatan, Politeknik Negeri Jember, Indonesia 1 Puskesmas Cermee Bondowoso , Indonesia 2 Rumah Sakit Paru Jember E-mail: adhiningsih@polije.ac.id

## Abstract
Diabetes Mellitus (DM) is a group of metabolic disease with characteristic which caused by abnormal insulin secretion, insulin process or both of it. Moringa is a plant which have high bioactive compound. Flavonoid total content of a moringa powder is a 473,3 mg/100 g. The study aimed to analyze the efffect Steep of  Moringa leaf flour on fasting blood glucose levels of diabetic rats. Experimental with pretest posttest control group design was used in this study. A total of 15 male Sprague dawley rats who obtained LPPT 4 Gadjah Mada University at Yogyakarta was selected as research samples. Rats were assigned to three experimental group (negative control group, positive control group, and treatment group). Negative control group (n=5) was given intraperitoneal  injection  with phosphat buffer saline (PBS), positive control group (n=5)  was given intraperitoneal  injection  with single low dose STZ (30mg/kgBB), and treatment group (n=5) was given intraperitoneal  injection  with single low dose STZ (30mg/kgBB) and moringa leaf flour steeping at 3,75 g/kgBB. Fasting blood glucose levels was analyzed using GPO-PAP methods after 3 days STZ-induced rats. Data analysis used Kruskal wallis and One Way Anova test. Pretest and posttest fasting blood glucose levels had a significant difference between groups (p=0.008 and p=0,000). Moringa leaf flour steeping to decrease fasting blood glucose levels of diabetics rats.
Keywords : Moringa leaves flour, fasting glucose blood level, Diabetes Mellitus

## Abstrak
Diabetes Mellitus (DM) adalah suatu kelompok penyakit metabolik dengan karakteristik yang disebabkan oleh kelainan sekresi insulin, proses insulin atau keduanya. Kelor merupakan tanaman yang memiliki senyawa bioaktif yang tinggi. Kandungan total flavonoid bubuk kelor adalah 473,3 mg/100 g. Penelitian bertujuan untuk menganalisis pengaruh Tepung Daun Kelor Seduh terhadap kadar glukosa darah puasa tikus diabetes. Eksperimental dengan desain kelompok kontrol pretest posttest digunakan dalam penelitian ini. Sebanyak 15 ekor tikus Sprague dawley jantan yang diperoleh LPPT 4 Universitas Gadjah Mada Yogyakarta dipilih sebagai sampel penelitian. Tikus ditugaskan ke tiga kelompok eksperimen (kelompok kontrol negatif, kelompok kontrol positif, dan kelompok perlakuan). Kelompok kontrol negatif (n=5) diberikan injeksi intraperitoneal dengan phosphat buffer saline (PBS), kelompok kontrol positif (n=5) diberikan injeksi intraperitoneal dengan STZ dosis rendah tunggal (30mg/kgBB), dan kelompok perlakuan (n=5). ) diberikan injeksi intraperitoneal dengan STZ dosis tunggal rendah (30mg/kgBB) dan seduhan tepung daun kelor sebanyak 3,75 g/kgBB. Kadar glukosa darah puasa dianalisis menggunakan metode GPO-PAP setelah 3 hari tikus yang diinduksi STZ. Analisis data menggunakan uji Kruskal wallis dan One Way Anova. Kadar glukosa darah puasa pretest dan posttest memiliki perbedaan bermakna antar kelompok (p=0,008 dan p=0,000). Seduhan tepung daun kelor untuk menurunkan kadar glukosa darah puasa tikus diabetes.
Kata kunci: tepung daun kelor, kadar glukosa darah puasa, Diabetes Mellitus
Naskah masuk: 08 November 2021, Naskah direvisi: 08 Agustus 2022, Naskah diterima: 15 Agustus 2022 Naskah diterbitkan secara online: 31 April 2023 ©2022/Penulis. Artikel ini merupakan artikel dengan akses terbuka di bawah lisensi CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0)

## Jurnal Kesehatan
Vol. 11 No. 1 April 2023
1. Pendahuluan Diabetes Melitus merupakan kelompok penyakit metabolik dengan karakteristik yang disebabkan kelainan sekresi insulin, kerja insulin atau keduanya (Fang et al ., 2019). Defisiensi insulin menyebabkan gula tidak bisa masuk kedalam hepar sehingga menyebabkan berbagai macam gangguan kesehatan lain atau komplikasi. Komplikasi yang sering ditemukan pada penderita DM adalah gagal ginjal, penyakit kardiovaskular, kerusakan retina, gangguan saraf, dan risiko amputasi bagian tubuh (Putra, 2014). Penanganan penderita DM tipe 2 dapat dilakukan dengan terapi non farmakologis yaitu  terapi zat gizi (diet) dan olahraga. Alternatif terapi zat gizi untuk DM dapat menggunakan tanaman kelor ( Moringa oleifera ). Daun kelor (Moringa oleifera)
mengandung antioksidan yaitu vitamin C dan flavonoid sehingga mempunyai aktivitas yang kuat sebagai sebagai scavenger oksidan yang mampu menghambat reaksi oksidasi Reactive Oxygen Species (ROS) dan meningkatkan aktivitas Superoxide Dismutase (SOD),
Glutation Peroxidase (GSH) dan katalase yang menyebabkan penurunan stress oksidatif dalam sel. Penurunan stress oksidatif menyebabkan  penurunan  kerusakan  sel  β pankreas sehingga mempercepat regenerasi sel  β  pankreas  dan  menyebabkan penurunan kadar gula darah (Ambarwati dkk., 2014). Tepung daun kelor (Moringa oleifera ) memiliki beberapa zat hipotensif, antikanker, dan antibakterial. Tepung daun kelor (Moringa oleifera ) sebagai suplemen protein dan kalsium karena mempunyai nilai gizi tinggi. Produk-produk daun kelor seperti ekstrak, bubuk, dan teh bertujuan untuk mempermudah penggunaan dimasyarakat serta meningkatkan daya simpan, namun belum terdapat penelitian ilmiah mengenai pengaruh pemberian seduhan tepung daun kelor terhadap penurunan kadar glukosa darah. Seduhan tepung daun kelor mempunyai potensi sebagai minuman tinggi antioksidan (Djamil, 2017). Hasil penelitian sebelumnya, Ulya (2016) menyatakan bahwa pengaruh tepung daun kelor (Moringa oleifera) pada dosis 1500 mg/kgBB/hari menunjukkan pengaruh yang
sangat kuat terhadap penurunan kadar glukosa darah tikus wistar DM. Berdasarkan latar belakang diatas, penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek seduhan tepung daun kelor terhadap kadar glukosa darah puasa tikus diabetes melitus.
2. Metode Penelitian ini sudah mendapatkan persetujuan dari Komite Etik Penelitian Kesehatan Politeknik Negeri Jember No 8786/PL17/LL/2018.  Jenis penelitian yang digunakan adalah penelitian eksperimental , dengan desain Pretest-Postest dengan kelompok kontrol (Pretest-Postest with
Control Group) (Yasaroh  dkk., 2021) . Penelitian dilaksanakan di Laboratorium Biomedik Fakultas Kedokteran Gigi dan Laboratorium Bioscience Rumah Sakit Gigi dan Mulut Universitas Negeri Jember.
2.1 Metode Pengumpulan Data Sampel yang digunakan adalah 15 ekor tikus putih Sprague dawley dengan berat 200-250 gram, berumur 2-3 bulan, yang diperoleh dari Unit Pra-Klinik dan Pengembangan Hewan Percobaan Laboratorium Penelitian dan Pengujian Terpadu Universitas Gadjah Mada Yogyakarta.
Alat dan bahan yang digunakan adalah  kandang plastik dengan tutup terbuat dari kawat ram,  sonde lambung, timbangan analitik, gelas ukur, dan mikrohematokrit, tepung daun kelor, streptozotocin (STZ) 30 mg/kgBB, larutan dekstrosa 10%, dan larutan phosfat buffer salin (PBS). Tepung daun kelor diperoleh dengan pembelian secara online . Seduhan tepung daun kelor dibuat dengan cara 3,75 g/kgBB  tepung daun kelor diseduh sampai  5  ml  air hangat dengan suhu 40 ° C (Rahmawati dan Candra, 2015). Semua kelompok tikus  dilakukan adaptasi selama 7 hari. Tikus diinduksi menggunakan streptozotocin (STZ) dengan dosis 30 mg/kgBB dosis tunggal secara intraperitoneal.  Kelompok kontrol negatif diberikan induksi PBS, sedangkan kelompok kontrol positif dan kelompok perlakuan diinduksi STZ. Pembuatan larutan STZ dilarutkan dalam 0,1 M phosfat buffer saline pH 4,5.

## Jurnal Kesehatan
Vol. 11 No. 1 April 2023
Tikus dipuasakan terlebih dahulu 10-12 jam sebelum diinduksi. Induksi STZ dilakukan pada hari ke-8. Tiga hari setelah induksi yaitu pada hari ke-11 dilakukan pemeriksaan kadar glukosa darah puasa, untuk menghindari efek samping dan risiko terjadinya hipoglikemik maka diberikan larutan dekstrosa 10% (Rohilla dan Ali, 2012). Pemantauan kadar glukosa darah puasa tikus dilakukan pada hari ke-11 setelah  induksi STZ. Kelompok perlakuan diberikan seduhan tepung daun kelor dengan dosis tepung 3,75 g/kgBB diseduh dengan air hangat bersuhu 40 o C. Intervensi diberikan secara oral menggunakan sonde lambung. Perlakuan tersebut dilakukan selama 14 hari.  Pemantauan kadar glukosa darah (Postest) dilakukan pada hari ke-26. Metode yang digunakan dalam analisa kadar glukosa darah puasa  adalah metode glycerol-3-phoshateoxidase-phenol aminophenazone (GPO-PAP), dimana prinsip kerjanya adalah  oksidasi dan hidrolisis enzimatis. Metode (GPO-PAP) ini menggunakan spektrofotometri (Zulkarnain, 2013).

## 2.2 Metode Analisis Data
Data dianalisis menggunakan uji Kruskal Wallis dan One Way Anova .
3. Hasil dan Pembahasan Rerata kadar glukosa darah puasa pretest paling rendah adalah kelompok kontrol negatif yaitu 86,2 mg/dl, sedangkan rerata tertinggi adalah kelompok kontrol perlakuan yaitu 410,8 mg/dl. Hal ini menunjukkan bahwa kadar glukosa darah puasa pada kelompok kontrol negatif dalam kategori normal, sedangkan pada kelompok kontrol positif dan perlakuan mempunyai kadar glukosa darah puasa lebih dari 300 mg/dl dan menunjukkan bahwa tikus dalam kondisi hiperglikemia.
Rerata kadar glukosa darah puasa posttest paling rendah adalah kelompok kontrol negatif yaitu 71,8 mg/dl, sedangkan kadar glukosa darah puasa tertinggi pada kelompok kontrol positif yaitu 450,6 mg/dl. Rerata kadar glukosa darah puasa kelompok negatif mengalami penurunan 14,4 mg/dl, namun masih dalam katagori normal. Rerata glukosa darah puasa kelompok positif mengalami peningkatan 79 mg/dl, sedangkan
pada kelompok perlakuan mengalami penurunan 28,2 mg/dl, namun masih dalam keadaan hiperglikemia. Kadar glukosa darah puasa pretest dan posttest ditampilkan pada Gambar 1.

## Gambar 1. Kadar Glukosa Darah Puasa Pretest dan Postest
Hasil uji normalitas menggunakan Shapiro Wilk menunjukkan kadar glukosa darah puasa pretest antar kelompok berdistribusi tidak normal (p < 0,05). Analisis kadar glukosa darah puasa pretest selanjutnya menggunakan uji Kruskal Wallis , dan terdapat perbedaan kadar glukosa puasa yang bermakna antar kelompok perlakuan (p=0,008). Perbedaan kadar glukosa darah puasa pretest ditampilkan pada tabel 1.
Tabel 1. Perbedaan Kadar Glukosa Darah Puasa Pretest Kelompok Rerata±SD (mg/dl) p Kontrol Negatif 86,20±16,75 0,008 Kontrol Positif 371,60±106,46 Perlakuan 410,80±89,39 Rerata kadar glukosa darah puasa pretest pada kelompok kontrol negatif dalam kategori normal yaitu berada direntang 50-135 mg/dl, sedangkan pada kelompok kontrol positif dan perlakuan dalam kondisi hiperglikemik yaitu lebih dari 135 mg/dl. Perbedaan kadar glukosa darah puasa antar kelompok dikarenakan perbedaan perlakuan yaitu pada kelompok kontrol positif dan
86.2 371.6 410.8 71.8 450.6 382.6 0 50 100 150 200 250 300 350 400 450 500 Kontrol Negatif Kontrol Positif Perlakuan Pretest Postest

## Jurnal Kesehatan
Vol. 11 No. 1 April 2023
perlakuan diinduksi STZ intraperitoneal low dose sehingga kadar glukosa darah puasa meningkat dibandingkan kelompok kontrol negatif yang  tidak diinduksi STZ  (Furman, 2021). Penelitian ini sejalan dengan penelitian Restuti dkk. (2018) yang menyatakan bahwa induksi STZ pada kelompok kontrol positif dan kelompok perlakuan dengan induksi low dose dapat menyebabkan tikus hiperglikemia. Streptozotosin (STZ) merupakan zat kimia yang sering digunakan untuk menginduksi hewan coba menjadi DM (Husna et al ., 2019). Efek diabetogenik yang didapatkan pada kelompok kontrol positif dan perlakuan disebabkan oleh penghancuran selektif sel pulau pankreas, sehingga tikus mengalami defisiensi insulin, hiperglikemia, polidipsia, dan poliuria yang semuanya merupakan karakteristik diabetes melitus (Furman, 2021). Peningkatan kadar glukosa darah puasa terjadi setelah diinduksi STZ. Penelitian ini sejalan dengan penelitian Saputra et al . (2018) yang menyatakan kadar glukosa darah mengalami peningkatan secara cepat setelah diinduksi STZ. STZ berikatan dengan GLUT- 2 yang memfasilitasi masuknya STZ ke dalam sitoplasma  sel  β  pankreas,  meningkatkan depolarisasi pada mitokondria sebagai akibat pemasukan ion Ca2+ yang diikuti oleh penggunaan energi berlebih sehingga terjadi kekurangan energi di dalam sel (Nurmawati, 2017; Saputra et al ., 2018). Produksi insulin terganggu akibat STZ sehingga terjadi defisiensi insulin yang menyebabkan seluruh glukosa yang dikonsumsi oleh tubuh tidak dapat diproses secara sempurna, akibatnya kadar glukosa dalam tubuh meningkat (Saputra et al ., 2018).
Hasil uji normalitas menggunakan Shapiro Wilk menunjukkan kadar glukosa darah puasa posttest antar kelompok berdistribusi normal (p>0,05). Analisis kadar glukosa darah puasa posttest selanjutnya menggunakan uji One Way Anova , dan terdapat perbedaan kadar glukosa puasa yang bermakna antar kelompok perlakuan (p=0,000). Perbedaan kadar glukosa darah puasa posttest ditampilkan pada Tabel 2. Tabel 2. Perbedaan Kadar Glukosa Darah Puasa
Posttest
Kelompok Rerata±SD (mg/dl) p Kontrol Negatif 71,80±3,8 0,000 Kontrol Positif 450,6±77,84 Perlakuan 382,6±58,77 Rerata kadar glukosa darah puasa posttest pada kelompok kontrol negatif dalam kondisi normal, sedangkan pada kelompok kontrol positif dan perlakuan dalam kondisi hiperglikemik. Kelompok kontrol positif mempunyai kadar glukosa darah puasa lebih tinggi dibandingkan kelompok perlakuan. Kelompok perlakuan diberikan seduhan tepung daun kelor 3,75 g/KgBB, namun penurunan kadar glukosa darah puasa tidak mencapai normal . Flavonoid  yang terdapat pada seduhan tepung daun kelor  berperan sebagai antioksidan yang potensial untuk memperbaiki kadar glukosa darah (Elvina dan Adriaria, 2016). Aktivitas flavonoid sebagai antihiperglikemik dapat menghambat pembentukan produk akhir glikasi protein dengan mengurangi glikasi protein yang diinduksi monosakarida, sehingga dapat meningkatkan pertahanan sel β -pankreas dari ROS berlebih dan menurunkan kadar glukosa darah puasa (Bhattacharya et al ., 2018). Penurunan kadar glukosa darah  puasa pada kelompok perlakuan tidak mencapai normal kemungkinan dapat disebabkan dosis pemberian seduhan tepung daun kelor kurang karena seduhan yang diberikan ke tikus tidak masuk secara keseluruhan pada saat disondekan. Tikus dipuasakan selama 10 jam mulai malam, sampai pagi sebelum diambil kadar glukosa darah puasa sehingga dapat mempengaruhi respon fisiologis tubuh yang dapat mengaburkan hasil kadar glukosa darah puasa. Menurut Furman (2021) waktu puasa tikus adalah 6-8 jam, yang harus dimulai dari jam  07.00  sampai jam 13.00  –  15.00, dan pengambilan darah dapat dilakukan pada jam 13.00  –  15.00.  Faktor lain yang mungkin berperan adalah tingkat stress  yang dialami tikus yaitu pada saat dilakukan penyondean. Menurut Asmariani dan Probosari (2012), frekuensi perlakuan yang didapatkan tikus (penyondean dan pembersihan kandang) dapat meningkatkan stres. Semakin banyak tikus mendapatkan perlakuan maka semakin tinggi

## Jurnal Kesehatan
tingkat stress yang dialami.  Tikus yang mengalami stres dapat meningkatkan kadar glukosa darah (Jia et al ., 2020).
4. Kesimpulan dan Saran Kesimpulan pada penelitian ini adalah pemberian seduhan tepung daun kelor dapat menurunkan kadar glukosa darah puasa pada tikus diabetes melitus namun belum mencapai nilai normal.
Penelitian selanjutnya diharapkan memperhatikan waktu puasa tikus sebelum pengambilan darah untuk pemeriksaan kadar glukosa darah puasa..

## Daftar Pustaka
Ambarwati, Sarjadi, Andrew J, Kis D. (2014). Efek Moringa oleifera terhadap Gula Darah dan Kolagen Matrik Ekstraseluler Sel Pankreas Diabetes Eksperimental. Jurnal Kedokteran Brawijaya, 28(2), 74-78.
Asmariani WG, dan Probosari E. (2012).
Pengaruh Pemberian Buah Pepaya ( Carica papaya L ) terhadap Kadar Kolesterol LDL dan Kolesterol HDL pada Tikus Sprague dawley dengan Hiperkolesterolemia.  Journal of Nutrition College, 1(1), 257-264.
Bhattacharya A, Tiwari P, Sahu PK, Kumar S. (2018). A Review of the Phytochemical and Pharmacological Characteristics of Moringa oliefera .
Journal of Pharmacy and Bioallied Sciences, 10(4), 181-191. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/ar ticles/PMC6266645/ . doi: 10.4103/JPBS.JPBS_126_18
Djamil AM. (2017). Potensi Minuman Serbuk Daun Kelor ( Moringa oleifera )
sebagai sumber Antioksidan. [Skripsi]. Yogyakarta: Jurusan Kimia Fakultas Sain dan Teknologi Universitas Islam Negeri Sunan
Kalijaga.
Elvina DR, dan Adriaria M. (2016). Efek Pemberian Seduhan Kulit Buah Naga
Merah ( Hylocerheus polyrhizus ) terhadap Kadar Glukosa Darah Tikus
Sprague Dawley Hiperglikemia. Journal of Nutrition College, 5(4), 475-483.
Fang JY., Lin CH., Huang TH, Chuang SY. (2019). In Vivo Rodent Models of Type 2 Diabetes and Their Usefulness for Evaluating Flavonoid Bioactivity.
Nutrients, 11(530), 1-23.
http://www.mdpi.com . doi: 10.3390/nu11030530.
Furman  BL. (2021). Streptozotocin-Induced Diabetic Models in Mice and Rats. Current Protocols, 1(78), 1-21. http://doi.org.10.1002/cpz1.78.
Husna  F,  Suyatna  FD, Arozal  W,
Purwaningsih EH. (2019). Model Hewan Coba pada Penelitian Diabetes. Pharmaceutical Sciences and Research, 6(3), 131-141.
Jia X., Hu Y., Yang X., Liu T., Huang Y., Wei
P., Hao Y., Wang L. (2020). Stress Affects the Oscillation of Blood Glucose Levels in Rodents.
Biological Rhythm Research, 51(5), 699-708.
Nurmawati T. (2017). Studi Respon Fisiologis dan Kadar Gula Darah pada Tikus Putih ( Rattus norvegicus ) yang Terpapar Streptozotocin (STZ). Jurnal Ners dan Kebidanan, 4(3), 244- 247).
Putra  WS.  (2014). Sehat dengan Terapi Refleksi dan Herbal di Rumah Sendiri. Yogyakarta: Katahati.
Rahmawati, dan Candra AK. (2015). Pengaruh Pemberian Seduhan Daun Kelor ( Moringa oleifera Lamk ) terhadap Kadar Asam Urat Tikus Putih (Rattus novergicus). Journal of Nutrition College, 4(2), 593-598.
Restuti ANS, Yulianti A., Nuraini N. (2018). Intervensi Bubuk Kakao terhadap Perubahan Kadar Gula Darah Puasa Tikus Sprague dawley Diabetes

## Jurnal Kesehatan
Vol. 11 No. 1 April 2023
Melitus. Jurnal Riset Kesehatan, 7(2), 57-60. Rohilla A, dan Ali S. (2012). Alloxan Induced
Diabetes : Mecanism and Effects. International Journal of Research in Pharmaceutical and Biomedical Science . 3(2), 819-820.
Saputra NT, Suartha  IN,  Dharmayudha AAGO.  (2018). Agen Diabetogenik Streptozotocin untuk Membuat Tikus
Putih Jantan Diabetes Melitus. Buletin Veteriner Udayana, 10(2), 116-121.
Ulya  LF.  (2016).  Pengaruh Tepung Daun
Kelor ( Moringa oleifera ) Terhadap
Kadar Glukosa Darah dan Malondialdehide pada Tikus Diabetes Melitus Tipe 2 [Tesis]. Surakarta: Program Studi Ilmu Gizi Universitas Sebelas Maret.
Yasaroh S, Christijanti W, Lisdiana, Iswari RW. (2021). Efek Ekstrak Daun Kelor ( Moringa  oleifera )  terhadap Kadar Glukosa Darah Tikus Diabetes Induksi Aloksan. Prosiding Seminar Nasional Biologi, 224-229.
Zulkarnain. (2013). Perubahan Kadar Glukosa Darah Puasa pada Tikus Sprague dawley yang Diinduksi Streptozotocin Dosis Rendah. Jurnal Kedokteran Syiah Kuala, 13(2), 71- 76.