## Sasambo Journal of Pharmacy
https://jffk.unram.ac.id/index.php/sjp
___________ Email: agriana.rh@unram.ac.id (*Corresponding Author)
Copyright © 2023, The Author(s).
This article is distributed under a Lisensi Creative Commons Atribusi 4.0 Internasional .

## Teh herbal terstandar simplisia bunga gemitir ( Tagetes erecta Linn.) sebagai kandidat antioksidan baru
Kadar Riansyah 1 , Aliefman Hakim 2 , Agriana Rosmalina Hidayati 1*
1 Program Studi Farmasi, Fakultas Kedokteran, Universitas Mataram, Mataram, Indonesia.
2 Program Studi Pendidikan Kimia, Fakultas Ilmu Keguruan dan Pendidikan, Universitas Mataram, Mataram, Indonesia.
DOI: https://doi.org/10.29303/sjp.v4i1.194
Article Info
Abstract: Empirically, gemitir flower (Tagetes erecta Linn.) has been used for generations as an alternative to treat whooping cough and eye pain medication. Gemitir flower is potential as an antioxidant because it contains secondary metabolites of phenolic groups, flavonoids, and  alkaloids  that  have  been  shown  to  have  antioxidant  activity.  As  a  pharmaceutical products,  medicinal  plants  must  be  guaranteed  quality  and  safety.  This  study  aims  to determine the suitability of the simplicia quality of gemitir flowers by standardization based on  Indonesian  Herbal  Pharmacopoeia  and  Indonesian  Materia  Medica,  and  also  to determine the antioxidant potential of standardized herbal teas of gemitir flowers. This first step of this research were standardization of gemitir flower simplicia based on specific and non-specific  parameters,  followed  by  making  standardized  herbal  tea  of  gemitir  flower. Antioxidant activity test was carried out on tea preparations using the DPPH method. The results  showed  that  the  simplicia  of  gemitir  flower  met  all  the  standard  parameters  of specific and non-specific standardization with an ash content value of 3,47%, acid insoluble ash content of 0,11%, water soluble extract content of 24,86%, ethanol soluble extract content of 21,67%, drying shrinkage content of 9,33%, moisture content of 9,23% and foreign organic matter of 0,3%. Standardized herbal tea simplicia gemitir flower was able to inhibit 50% of DPPH free radicals at a volume of 33,87 µL. Based on the results, it can be concluded that the empirical use of gemitir flower tea potential as a natural antioxidant. Received : 2022-12-21 Revised : 2023-03-29 Accepted : 2023-04-28
Keywords: antioxidant, gemitir flower ( Tagetes erecta Linn.), herbal tea, standardized
Citation: Riansyah, K., Hakim, A.,  & Hidayati, A. M. (2023). Teh herbal terstandar simplisia bunga gemitir ( Tagetes erecta Linn.) sebagai kandidat antioksidan baru. Sasambo Journal of Pharmacy, 4 (1), 45-52.
https://doi.org/10.29303/sjp.v4i1.194

## Pendahuluan
Pemanfaatan  tanaman  sebagai  bahan  obat  telah dilakukan  sejak  lama  oleh  nenek  moyang  kita  yang dibuktikan dari naskah-naskah lama seperti pada usada atau lontar (Sutomo,  2019).  Salah  satu  tanaman  yang memiliki  manfaat  dalam  pengembangan  bahan  obat tradisional adalah bunga dari tanaman gemitir ( Tagetes erecta Linn.).  Tanaman  gemitir  dibudidayakan  secara luas  untuk  tujuan  pengobatan,  tanaman  hias,  dan pewarna makanan alami (Moliner et al., 2018).
Gemitir (Tagetes erecta Linn.) merupakan tanaman dari  famili Asteraceae ,  yang  tersebar  luas  di  seluruh
dunia  dan  memiliki  warna  yang  bervariasi  seperti kuning, oranye dan kuning kecoklatan (Valyova et al., 2012).  Bunga  gemitir  memiliki  kandungan  metabolit sekunder  berupa  terpenoid,  minyak  atsiri,  fenol, flavonoid dan karotenoid (Santi, 2021).
Radikal  bebas  diproduksi  oleh  tubuh  untuk memenuhi  fungsi  biologis  penting  seperti  fagositosis, pertumbuhan  sel,  dan  signal  intraseluler.  Produksi radikal bebas yang berlebihan akan sangat berbahaya, karena  bersifat  reaktif  dan  mudah  menyerang  sel-sel sehat  dalam  tubuh  (Youngson,  2005).  Radikal  bebas berpotensi memperparah penyakit system
kardiovaskular,  baik  melalui  peroksidasi  lipid  atau vasokonstriksi (Lachance, 2001).
Senyawa aktif yang mampu menangkal aktivitas radikal  bebas  adalah  antioksidan.  Antioksidan merupakan suatu zat yang memiliki kemampuan untuk memperlambat proses oksidasi yang berdampak negatif di  dalam  tubuh  (Irmawati,  2014).  Antioksidan merupakan  senyawa-senyawa  pemberi  elektron  yang dapat  menghambat  atau  mencegah  kerusakan  akibat oksidasi. Antioksidan bekerja dengan cara mendonorkan  atom  hidrogen  ke  radikal  hidroksil sehingga  terbentuk  air  (Youngson,  2005).  Aktivitas antioksidan  dalam  tanaman  dapat  dipresiksi  dari kandungan metabolit sekundernya. Pada bunga gemitir metabolit sekunder yang berperan sebagai antioksidan adalah senyawa flavonoid, fenol dan karotenoid (Santi, 2021).
Penelitian sebelumnya oleh Pramitha et al., (2018) menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  bunga  gemitir memiliki aktivitas penghambatan radikal DPPH dengan nilai  IC 50 118,86  ppm.  Uji  aktivitas  antioksidan  yang dilakukan  oleh  Youssef  et  al.,  (2020)  menggunakan metode  DPPH  juga  menyebutkan  ekstrak  etil  asetat bunga  gemitir  menghasilkan  nilai  IC 50 sebesar  32,5  ± 0,12 µg/mL. Nilai ini lebih besar dari senyawa standard yang  digunakan  yaitu  BHT  dengan  IC 50 113,32  ±7,89 µg/mL,  dan juga  ekstrak metanol  yang  menghasilkan IC 50 paling rendah sebesar 144,74±8,78 µg/mL.
Teh herbal merupakan salah satu jenis minuman herbal  yang  terbuat  dari  daun,  biji,  bunga  atau  akar berbagai  tanaman.  Minuman  ini  memiliki  aroma  dan rasa  yang  khas  dengan  kandungan  komponen bioaktifnya  yang  bermanfaat  baik  bagi  kesehatan (Kusuma et al., 2020). Teh herbal biasanya dibuat dari simplisia tanaman yang dikeringkan.
Standardisasi  simplisia  diperlukan  agar  dapat diperoleh  bahan  baku  yang  seragam,  sehingga menjamin  efek  farmakologis  (Badan  Pengawas  Obat dan  Makanan,  2005).  Berdasarkan  standar  Farmakope Herbal  Indonesia,  persyaratan  mutu  simplisia dilakukan berdasarkan dua parameter yakni parameter spesifik  dan  non  spesifik.  Analisis  parameter  spesifik ditujukan  untuk  mengidentifikasi  secara  kualitatif maupun  secara  kuantitatif  suatu  senyawa  aktif  yang berperan  dalam  suatu  bahan  alam  (Saifuddin  et  al., 2011).
Penelitian ini bertujuan untuk menstandardisasi simplisia  bunga  gemitir  dalam  bentuk  teh  herbal. Selanjutnya  penelitian  ini  juga  akan  menentukan aktivitas penangkal radikal DPPH teh terstandar bunga gemitir untuk mengetahui khasiat antioksidannya.

## Metodologi Penelitian

## Alat dan Bahan Penelitian
Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah alat  gelas  laboratorium,  ayakan  40  mesh,  blender (Miyako®),  lemari  es  (Sharp®),  kertas  saring,  rak tabung reaksi, water bath (Labnet®), timbangan analitik (Ohause  EP214®),  pipa  kapiler,  plat  KLT  (Merck®), eksikator,  kertas  saring  bebas  abu,  krus,  oven (Memmert®),  penjepit  krus,  tanur  (Carbolite®), spektrofotometer  UV-Vis  (Spektral®),  dan  vortex (Labnet®).
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah  simplisia  bunga  gemitir  ( Tagetes  erecta Linn.), silika gel, akuades, amil alkohol teknis (Merck®), besi (III) klorida 5% b/v teknis (Merck®), etanol 96% v/v pro analysis (Merck®), pereaksi Dragendorff teknis, pereaksi Liebermann-Burchard teknis (Merck®), pereaksi Mayer teknis,  pereaksi  Wagner  teknis,  serbuk  magnesium teknis,  AlCl 3 5%  teknis,  diklorometan pro  analysis (Merck®), metanol pro analysis (Merck®), asam klorida teknis  (2  N  dan  4  N)  (Merck®),  n-heksana  teknis (Merck®),  kloroform  teknis  (Merck®),  2,2-  difenil-1- pikrilhidrazil (DPPH), asam askorbat teknis (Brataco®).

## Pembuatan Simplisia Bunga Gemitir
Bunga gemitir setelah berumur 45 hari dikoleksi dari  Desa  Keru,  Kecamatan  Narmada,  Kabupaten Lombok  Barat  pada  titik  koordinat  8 ° 35’28.9 ” S 116 ° 14’41.8”E  dengan  ketinggian  136  mdpl.  Bagian tanaman  yang  dibuat  sebagai  simplisia  hanya  bagian mahkota  bunganya  saja.  Pembuatan  simplisia  bunga gemitir  ini  meliputi  sortasi  basah  yakni  memisahkan bagian  mahkota  bunga  dari  bagian  yang  tidak digunakan  dalam  penelitian,  pencucian,  perajangan, pengeringan, sortasi kering yakni memisahkan sampel yang busuk atau bagian lain yang masih tertinggal, dan penyimpanan yang nantinya dihaluskan menggunakan blender  sampai  terbentuk  serbuk  halus.  Pengeringan dilakukan dengan menggunakan kulkas selama 10 hari dengan suhu 10°C.

## Standardisasi Parameter Spesifik
1. Organoleptis Serbuk  simplisia  diamati  secara  fisik menggunakan  indera  penciuman,  pengecap,  dan penglihatan  untuk  mendeskripsikan  bentuk, warna, bau, dan rasa.
2. Penetapan Kadar Sari Larut Air
Sebanyak  5  g  serbuk  simplisia  dimaserasi selama 24 jam dengan 100 mL air kloroform (2,5 mL kloroform dalam akuades 1000 mL), menggunakan labu ukur sambil berkali-kali dikocok selama 6 jam pertama  dan  kemudian  dibiarkan  selama  18  jam. Filtrat yang diperoleh sebanyak 20 mL disaring dan
diuapkan  hingga  kering  di  atas hot  plate , dipanaskan  sisa  menggunakan  oven  pada  suhu 105°C hingga bobot tetap dan dihitung kadar dalam persen  sari  yang  larut  dalam  air.  Kadar  sari  larut dalam  air  sebaiknya  tidak  kurang  dari  30% (Farmakope Herbal Indonesia Edisi II, 2017).
3. Penetapan Kadar Sari Larut Etanol
Sebanyak  5  g  serbuk  simplisia  dimaserasi selama  24  jam  dengan  100  mL  etanol  95%  v/v, menggunakan  labu  ukur  sambil  berkali-kali dikocok  selama  6  jam  pertama  dan  kemudian dibiarkan  selama  18  jam.  Filtrat  disaring  dan sebanyak 20 mL diuapkan hingga kering di atas hot plate,  dipanaskan  sisa  filtrat  pada  suhu  105 ℃ hingga  bobot  tetap  dan  dihitung  kadar  dalam persen sari yang larut dalam etanol 95% v/v. Kadar sari larut dalam etanol sebaiknya tidak kurang dari 28% (Farmakope Herbal Indonesia Edisi II, 2017).

## Standardisasi Parameter Nonspesifik
Berdasarkan Farmakope Herbal Indonesia Edisi II (2017), standardisasi nonspesifik meliputi:
1. Susut pengeringan Ditimbang  ekstrak  sebanyak  1  g  dan dimasukkan kedalam kurs  porselin  tertutup yang sebelumnya  telah  dipanaskan  pada  suhu  105 ℃ selama  30  menit  dan  telah  ditera.  Sebelum ditimbang, ekstrak diratakan dalam kurs porselin, dengan  menggoyangkan  kurs  hingga  membentuk lapisan setebal 5–10 mm. Masukkan ke dalam oven, buka tutupnya, keringkan pada suhu 105°C hingga bobot  tetap.  Dinginkan  dalam  eksikator.  Lakukan replikasi  sebanyak  3  kali  kemudian  dihitung persentasenya.
2. Kadar Abu Serbuk simplisia sebanyak 2-3 g dimasukkan ke  dalam  krus.  Krus  berisi  serbuk  simplisia dimasukkan  ke  dalam  tanur,  dipijarkan  perlahan hingga  arang  habis,  didinginkan  dan  ditimbang hingga bobot tetap, kemudian dihitung kadar abu.
3. Kadar Abu Tidak Larut Asam
Abu  yang  diperoleh  pada  penetapan  kadar abu,  dididihkan  dengan  25  mL  asam  klorida  4  N selama  5  menit.  Bagian  tidak  larut  asam  disaring dengan  kertas  saring  bebas  abu  kemudian  dicuci dengan air panas dan dipijarkan hingga bobot tetap di dalam tanur, ditimbang dan dihitung kadar abu tidak larut asam.
4. Kadar air Cawan  aluminium  dipanaskan  dalam  oven pada  suhu  105°C  selama  1  jam  dan  didinginkan dalam  eksikator  selama  ±  15  menit,  selanjutnya ditimbang berat cawan aluminium kosong. Sampel bubuk teh bunga gemitir ditimbang sebanyak ± 2 g dalam  cawan  aluminium  yang  telah  diketahui
beratnya, selanjutnya dikeringkan dalam oven pada suhu  100–105°C  selama  6  jam,  kemudian didinginkan  dalam  eksikator  dan  ditimbang. Selanjutnya  dilakukan  pemanasan  dalam  oven pada suhu 100-105°C selama ± 1 jam, didinginkan dalam eksikator selama ± 15 menit dan ditimbang. Perlakuan  ini  diulangi  sampai  tercapai  berat konstan  (selisih  berat  ±  0,0002  g).  kemudian dihitung kadar airnya.
5. Bahan organik asing
Simplisia  ditimbang  sebanyak  500  g, diratakan di atas kertas putih. Bahan organik asing dipisahkan  dari  simplisia,  ditimbang  dan ditetapkan  jumlahnya  dalam  persen.  Simplisia sebaiknya mengandung tidak lebih dari 2% bahan organik asing.

## Skrining Fitokimia
1. Uji Tabung
a. Uji Fenolik
Sebanyak 10 mg simplisia dilarutkan ke dalam 5  mL  aquades, kemudian  ditambahkan  FeCl 3 5%. Sampel mengandung fenolik ditunjukkan dengan  terbentuknya  warna  biru  atau  biru ungu (Ayu, 2015).
b. Uji Alkaloid Sampel uji ditimbang sebanyak 0,5 g kemudian ditambahkan 1 mL asam klorida 2 N dan 9 mL akuades,  dipanaskan  di  atas  penangas  air selama  2  menit,  didinginkan  dan  disaring. Filtrat  yang  diperoleh  dipakai  untuk  uji alkaloid,  diambil  3  tabung  reaksi,  lalu  ke dalamnya dimasukkan 0,5 mL filtrat. Tabung reaksi  pertama  ditambahkan  2  tetes  pereaksi Mayer  akan  terbentuk  endapan  berwarna putih  atau  kuning.  Tabung  reaksi  kedua ditambahkan  2  tetes  pereaksi  Wagner  akan terbentuk  endapan  coklat.  Tabung  reaksi ketiga  ditambahkan  2  tetes  pereaksi Dragendorf  akan  terbentuk  endapan  putih. Sampel  dikatakan  mengandung  alkaloid  jika terjadi  endapan  atau  kekeruhan  pada  paling sedikit dua dari tiga percobaan di atas (Reubun et al., 2020).
c. Uji Flavonoid Sebanyak 1 g sampel uji ditambahkan 10 mL air  panas,  didihkan  selama  5  menit  dan disaring dalam keadaan panas, ke dalam 5 mL filtrat  ditambahkan  0,1  g  serbuk  magnesium dan 1 mL asam klorida pekat dan 2 mL amil alkohol,  dikocok  dan  dibiarkan  memisah. Sampel  disebut  mengandung  flavonoid  jika terjadi warna merah pada lapisan amil alkohol (Reubun et al., 2020).
2. Kromatografi Lapis Tipis
Pemisahan dengan Kromatografi Lapis Tipis (KLT) dilakukan  dengan  menggunakan  beberapa  eluen dengan  tingkat  kepolaran  yang  berbeda  yakni diklorometan:metanol  dengan  perbandingan  9:1 untuk  mendapatkan  pelarut  yang  mampu memberikan  pemisahan  yang  baik  serta  noda  zat warna yang bagus. Bercak pada plat KLT diamati di bawah  lampu  UV  254  nm  dan  UV  365  nm. Penentuan  golongan  senyawa  pada  uji  KLT dilakukan dengan penyemprotan plat KLT dengan beberapa pereaksi seperti pada tabel 1 (Alen et al., 2017).
Tabel 1. Pereaksi uji KLT untuk identifikasi metabolit
sekunder Nama Senyawa Pereaksi Alkaloid Dragendorff Fenol FeCl 3 Flavonoid AlCl 3

## Pembuatan Teh Herbal Terstandar
Sebanyak 15 g simplisia bunga gemitir yang telah dihaluskan menggunakan  blender  dan  diayak  dengan ayakan  mesh  40,  kemudian  dimasukkan  ke  dalam kantong teh celup.

## Preparasi Sampel untuk Uji Antioksidan
Teh yang sudah dikemas dimasukkan ke dalam gelas kemudian ditambahkan air panas suhu 80-100°C 250 mL. Selanjutnya didiamkan hingga 3-5 menit.

## Uji Aktivitas Antioksidan metode DPPH
1. Pembuatan Stok DPPH
Sejumlah 4 mg DPPH (BM 394,32) ditimbang menggunakan  timbangan  analitik,  kemudian dilarutkan  dengan  100  mL  etanol  p.a.  Larutan dihomogenkan  menggunakan  vortex.  Pengerjaan dilakukan  pada  wadah  gelap  dan  kondisi  yang terhindar dari cahaya.
2. Pembuatan Larutan Pembanding Asam Askorbat Asam  askorbat  ditimbang  sebanyak  25  mg dan dilarutkan dalam 25 mL etanol p.a dalam labu ukur,  kemudian  dihomogenkan  menggunakan vortex.
3. Pembuatan Larutan Uji
Larutan uji dibuat dengan dosis 15 mg dan ditambahkan  250  mL  air  panas  dengan  suhu  80- 100 ℃ .  Kemudian  dibuat  seri  konsentrasi  dari larutan induk tersebut menjadi 100, 150, 200, 250, dan 300 ppm.
4. Penentuan  Panjang Gelombang Maksimum
Sebanyak  1  mL  larutan  DPPH  40  ppm dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi,  kemudian ditambahkan 4 mL etanol. Larutan dihomogenkan dan  diukur  absorbansinya  pada  rentang  panjang gelombang 400-600 nm selama operating time yang diperoleh dari pengujian sebelumnya. Blanko yang digunakan yaitu etanol 96%.

## 5. Penentuan Operating time
Sebanyak 1 mL larutan induk asam askorbat 6 ppm ditambah 1 mL stok DPPH 0,004% b/v dan 3  mL  akuades.  Kemudian  dihomogenkan  dan diukur dengan panjang gelombang 516 nm dengan selang setiap 1 menit selama 60 menit.
6. Pengujian
a. Pengukuran absorbansi blanko Dimasukkan 1 mL larutan stok DPPH kedalam tabung reaksi dan ditambahkan 4 mL etanol p.a selanjutnya  larutan  tersebut  dihomogenkan selama  30  detik  dan  didiamkan  selama operating  time.  Pengerjaan  dilakukan  pada wadah  gelap  dan  kondisi  yang  terhindar  dari cahaya.  Larutan  dibaca  absorbansinya  pada panjang gelombang maksimum.
b. Pengukuran absorbansi  larutan pembanding Sebanyak  2  mL  asam  askorbat  dimasukkan kedalam tabung reaksi dan ditambahkan 2 mL DPPH.  Selanjutnya  larutan  dihomogenkan selama  30  detik  dan  didiamkan  selama operating  time.  Pengerjaan  dilakukan  dalam wadah gelap dan terhindar dari cahaya.
c. Pengukuran absorbansi larutan uji Sebanyak  2  mL  DPPH  (400  ppm)  dilarutkan dengan  2  mL  sampel  dengan  konsentasi  100, 150, 200, 250, dan 300 ppm dalam tabung reaksi. Larutan dihomogenkan dan diinkubasi selama 20 menit dalam kondisi gelap pada suhu ruang, kemudian diukur absorbansinya pada panjang gelombang 516 nm.

## Hasil dan Pembahasan
Hasil  dari  pembuatan  simplisia  bunga  gemitir diperoleh rendemen simplisia kering terhadap simplisia basah sebesar 16%. Nilai persentase rendemen simplisia tersebut diperoleh dari hasil pembagian jumlah sampel kering dibagi dengan jumlah sampel basah. Dari 2500 g simplisia  basah  setelah  dikeringkan  menggunakan metode dingin menjadi 400 g.

## Skrining Fitokimia Simplisia Buga Gemitir
Uji  skrining  fitokimia  pada  simplisia  bunga gemitir  difokuskan  kepada  golongan  metabolit sekunder yang potensial memiliki aktivitas antioksidan seperti  flavonoid,  fenolik,  dan  alkaloid.  Pada  uji
skrining fitokimia menggunakan uji tabung, diperoleh hasil yang dapat dilihat pada Tabel 2 .
Tabel 2. Hasil skrining fitokimia simplisia bunga
gemitir Target metabolit sekunder Reagen uji Hasil Flavonoid Mg  +  HCl  +  amil alkohol positif Fenolik FeCl 3 positif Alkaloid Reagen (Mayer, Wagner, Dragendorff) positif
Dari  hasil  tersebut  diketahui  simplisia  bunga gemitir  positif  mengandung  flavonoid,  alkaloid,  dan fenolik.  Pada  uji  flavonoid  hasil  positif  ditunjukkan dengan timbulnya warna merah jingga pada larutan uji. Penambahan serbuk logam Mg tersebut bertujuan agar membentuk  ikatan  dengan  gugus  karbonil  pada senyawa flavonoid, kemudian penambahan HCl pekat bertujuan  untuk  pembentukan  garam  flavilium  yang ditandai  dengan  perubahan  warna  merah  jingga (Departemen Kesehatan Republik Indonesia, 1995).
Pada  uji  fenolik,  hasil  positif  ditandai  dengan timbulnya  warna  hijau  atau  biru  kehitaman  pada larutan uji. Pembentukan warna pada uji ini disebabkan oleh  adanya  reaksi  antara  senyawa  fenol  dengan  ion Fe 3+, dimana  ion  tersebut  akan  mengalami  reaksi hibridisasi. Ion Fe 3+ bertindak sebagai atom pusat yang akan  berikatan  dengan  atom  O  pada  masing-masing senyawa  polifenol  sehingga  terbentuk  kompleks yang berwarna biru kehitaman (Ergina et all., 2014).
Pada  uji  alkaloid,  hasil  positif  ditandai  dengan adanya kekeruhan atau endapan pada minimal 2 dari 3 reaksi dengan reagen Wagner, Mayer, dan Dragendorff. Pada uji alkaloid dengan pereaksi Mayer, diperkirakan nitrogen pada alkaloid akan bereaksi dengan ion logam K + dari  kalium  tetraiodomerkurat  (II)  membentuk kompleks  kalium-alkaloid  yang  mengendap  berwarna putih. Hasil positif alkaloid pada uji Dragendorff juga ditandai dengan terbentuknya endapan yang berwarna coklat  muda sampai  kuning,  endapan  tersebut  adalah kalium-alkaloid  (Ayu,  2015).  Penambahan  reagen Wagner pada sampel akan membentuk endapan coklat jika sampel positif mengandung alkaloid, hal ini terjadi karena iodin bereaksi dengan ion I - dari kalium iodida menghasilkan  ion  I 3- yang  berwarna  coklat.  Pada  uji Wagner, ion logam K + akan membentuk ikatan kovalen koordinat  dengan  nitrogen  pada  alkaloid  membentuk kalium-alkaloid (Marliana, 2005). Hasil pengujian pada penelitian ini didapatkan 2 reaksi positif antara sampel dengan  reagen  Wagner  dan  Mayer  yang  ditandai
dengan  adanya  endapan  coklat  pada  reagen  Wagner, dan kekeruhan pada reagen Mayer.
Hasil  yang  sama  didapatkan  saat  identifikasi golongan  senyawa  menggunakan  KLT  (Kromatografi Lapis  Tipis).  Hasil  positif  didapatkan  pada  senyawa golongan  flavonoid,  alkaloid,  dan  fenolik  seperti ditunjukkan pada gambar 1, 2, dan 3.
Gambar 1. Profil KLT dari ekstrak etanol bunga gemitir pada uji flavonoid dengan fase gerak diklorometan:metanol (9:1, v/v).  Pada pengamatan sinar tampak sebelum disemprot AlCl 3 5% (A), sinar tampak setelah disemprot AlCl 3 5% (B), lampu UV 366 nm sebelum disemprot AlCl 3 5% (C), lampu UV 366 nm setelah disemprot AlCl 3 5% (D), lampu UV 254 nm sebelum disemprot AlCl 3 5% (E), lampu UV 254 nm setelah disemprot AlCl 3 5% (F).
Pada uji flavonoid, dapat dilihat pada Gambar 1 , hasil  positif  setelah  penyemprotan  reagen  AlCl 3 yakni adanya noda berwarna kuning pada plat jika dilihat di sinar  tampak  dan  akan  berpendar  berwarna  hijau kekuningan pada UV 366 nm dan warna abu pada UV 254  nm.  Golongan  senyawa  flavonoid  akan  bereaksi dengan  reagen  AlCl 3 membentuk  senyawa  kompleks yang ditandai dengan warna kuning hingga kehijauan pada noda (Harbone, 1987).
Gambar 2. Profil KLT dari ekstrak etanol bunga gemitir pada uji fenolik dengan fase gerak diklorometan:metanol (9:1, v/v). Pada pengamatan sinar tampak sebelum disemprot FeCl 3 5% (A), sinar tampak setelah disemprot FeCl 3 5% (B), lampu UV 366 nm sebelum disemprot FeCl 3 5% (C), lampu UV 366 nm setelah disemprot FeCl 3 5% (D), lampu UV 254 nm sebelum disemprot FeCl 3 5% (E), lampu UV 254 nm setelah disemprot FeCl 3 5% (F).
A B C D E F A B C D E F
Pada uji golongan senyawa alkaloid dapat dilihat pada Gambar  3 ,  reagen  yang  digunakan  adalah dragendorff. Reaksi positif ditunjukkan dengan adanya noda berwarna jingga pada plat setelah penyemprotan dilihat  di  sinar  tampak, dan  akan  berwarna  abu  pada UV  254  nm  dan  366  nm.  Perubahan  warna  tersebut terjadi  karena  atom  nitrogen  pada  senyawa  alkaloid yang mempunyai pasangan elektron bebas digunakan untuk  membentuk  ikatan  kovalen  koordinasi  dengan ion  logam  K + dari  kalium  tetraiodobismutat membentuk kompleks kalium-alkaloid (Miroslav, 1971).
Gambar 3. Profil KLT dari ekstrak etanol bunga gemitir pada uji alkaloid dengan fase gerak diklorometan:metanol (9:1, v/v). Pada pengamatan sinar tampak sebelum disemprot Dragendorff (A), sinar tampak setelah disemprot Dragendorff (B), lampu UV 366 nm sebelum disemprot Dragendorff (C), lampu UV 366 nm setelah disemprot Dragendorff (D), lampu UV 254 nm sebelum disemprot Dragendorff (E), lampu UV 254 nm setelah disemprot Dragendorff (F).
Pada uji golongan senyawa fenolik dapat dilihat pada Gambar  2 ,  ragen  yang  digunakan  adalah  FeCl 3 yang  ditandai  dengan  adanya  noda  berwarna  abu- hitam  pada  plat  jika  dilihat  di  sinar  tampak.  Adanya warna abu-hitam tersebut dikarenakan polifenol dapat melepaskan  ion  H + dan  membentuk  ion  fenoksi  yang akan  membentuk  senyawa  kompleks  besi  (III) heksafnolat  (Marliana,  2015). Senyawa  fenolik  akan berwarna abu dalam sinar UV 254 nm dan 366 nm.
Nilai  Rf  yang  dihasilkan  adalah  0,76  untuk senyawa  flavonoid  dan  fenolik,  sedangkan  untuk senyawa alkaloid nilai Rf nya yaitu 0,8. Nilai tersebut menandakan  masih  masuk  kedalam  nilai  rentang  Rf yang baik yaitu 0,2-0,8 (Gandjar, 2007).

## Standardisasi Bunga Gemitir
Standardisasi simplisia bunga gemitir dilakukan untuk  menjamin  mutu,  keamanan,  dan  kualitas  dari simplisia.  Aspek  parameter  spesifik  memfokuskan kepada  senyawa  aktif  yang  memberikan  efek farmakologis  bagi  tanaman  tersebut  atau  dengan  kata lain  hanya  dimiliki  oleh  tanaman  tersebut.  Aspek parameter  nonspesifik  difokuskan  pada  aspek  yang
berperan dalam keamanan konsumen secara langsung. Standar  parameter  mutu  simplisia  sesuai  dengan standar yang tertera pada Farmakope Herbal Indonesia II  dari  bunga  kesumba  ( Carthamus  tinctorius )  yang memiliki  famili  yang  sama  dengan  bunga  gemitir. Berdasarkan penelitian yang dilakukan, diperoleh hasil uji  organoleptis  adalah  simplisia  bunga  gemitir memiliki  warna  kuning-oranye,  memiliki  bau  agak menyengat  (seperti  teh)  dan  memiliki  rasa  hambar. Simplisia bunga gemitir dapat dilihat pada Gambar 4 .
Gambar 4. Simplisia bunga gemitir
Hasil standardisasi simplisia bunga gemitir dapat dilihat pada Tabel 3 , dikatakan bahwa simplisia bunga gemitir  telah  memenuhi  semua  persyaratan  mutu standar  spesifik  dan  nonspesifik  berdasarkan  standar Farmakope Herbal Indonesia Edisi II.
Tabel 3. Hasil standardisasi bunga gemitir
Parameter Hasil Standard berdasarkan Farmakope Herbal Indonesia II Kadar abu 3,47% < 4,6% Kadar abu tidak larut asam 0,11% < 1,6% Kadar sari larut air 62,16% > 6,1% Kadar sari larut etanol 27,08% > 2,6% Susut pengeringan 9,33% < 10% Kadar air 9,22% < 10% Bahan organik asing 0,3% < 1 %

## Pembuatan Teh Herbal Bunga Gemitir
Teh herbal merupakan salah satu jenis minuman herbal  yang  terbuat  dari  daun,  biji,  bunga  atau  akar berbagai  tanaman.  Minuman  ini  memiliki  aroma  dan rasa  yang  khas  dengan  kandungan  komponen bioaktifnya  yang  bermanfaat  baik  bagi  kesehatan (Kusuma  et  al.,  2020)  pembuatan  teh  herbal  bertujuan untuk memudahkan penggunaannya ketika dikonsumsi masyarakat. Sediaan teh lebih praktis dan memiliki dosis yang seragam sehingga lebih efektif jika dikonsumsi.  Teh  herbal  bunga  gemitir  dibuat  dari simplisia  halus  yang  telah  diayak  sebelumnya menggunakan  ayakan  dengan  mesh  40  untuk
A B C D E F
mendapatkan serbuk simplisia yang halus (Departemen Kesehatan Republik Indonesia, 2017).

## Uji Aktivitas Antioksidan
Hasil  penentuan  panjang  gelombang  DPPH adalah 516 nm. Hal ini sesuai dengan teori dimana nilai panjang  gelombang  maksimum  ini  sesuai  dengan panjang  gelombang  teoritis  DPPH  yaitu  517  ±  2  nm (Molyneux,  2004).  Nilai  panjang  gelombang  tersebut kemudian  digunakan  untuk penentuan operating  time . Hasil  yang  didapatkan  adalah  absorbansi  yang  stabil pada  waktu  ke  20,  21,  dan  22  menit.  Oleh  karena  itu operating time yang digunakan adalah 20 menit. Nilai ini sudah masuk dalam rentang teoritis nilai operating time DPPH berkisar 10-35 menit (Rastuti, 2012).
Uji  aktivitas  antioksidan  terhadap  teh  herbal terstandar  simplisia  bunga  gemitir  dilakukan  dengan prosedur  yang  sama  dengan  pembanding  asam askorbat. Pembanding asam askorbat yang digunakan adalah  15  mg/250  mL,  sedangkan  sampel  yang digunakan  yaitu  15  g/250  mL.  Dosis  teh  yang digunakan  dalam  penelitian  ini  sesuai  dengan  dosis empiris.  Hasil pengujian  aktivitas  antioksidan  standar asam askorbat diperoleh nilai IC 50 sebesar 4,52 ± 0,20 pm yang  menunjukkan  aktivitas  yang  kuat.  Nilai  IC 50 sampel  teh  herbal  terstandar  bunga  gemitir  memiliki nilai IC 50 sebesar 188,00 ± 0,80 ppm yang menunjukkan aktivitas antioksidan yang sedang.
Aktivitas  antioksidan  sampel  yang  tergolong sedang dikarenakan pengujian menggunakan seduhan simplisia  tidak  menggunakan  ekstrak.  Hal  ini  sesuai dengan  penelitian  Youssef  et  al.,  (2020)  yang menyatakan  ekstrak  etil  asetat  bunga  gemitir menghasilkan  nilai  IC 50 sebesar  32,5  ±  0,12  ppm yang menunjukkan  aktivitas  antioksidan  kuat.  Perbedaan aktivitas antioksidan pada sampel seduhan  teh  herbal bunga  gemitir  dan  ekstrak  etil  asetat  bunga  gemitir dikarenakan  proses  ekstraksi  yang  berbeda  sehingga kadar metabolit sekunder yang terdapat pada masing- masing  sampel  berbeda.  Selain  itu,  perbedaan  ini berpengaruh  pada  parameter  lingkungan  sehingga kadar  metabolit  sekunder  yang  berbeda  (Liu  et  al., 2016).
Aktivitas  antioksidan  dalam  tanaman  dapat diprediksi  dari  kandungan  metabolit  sekundernya. Pada bunga gemitir, metabolit sekunder yang berperan sebagai  antioksidan  adalah  senyawa  flavonoid,  fenol dan alkaloid (Santi, 2021). Aktivitas peredaman radikal bebas senyawa polifenol dipengaruhi oleh jumlah dan posisi  hidrogen  fenolik  dalam  molekulnya.  Semakin tinggi  jumlah gugus  hidroksil  pada  inti  flavonoidnya, maka  akan  menghasilkan  aktivitas  antioksidan  yang lebih tinggi (Es-Safi, 2007). Senyawa flavonoid memiliki beberapa  efek,  diantaranya  menghambat  peroksidasi lipid,  menekan  kerusakan  jaringan  oleh  radikal  bebas
dan menghambat aktivitas beberapa enzim (Fereidoon, 1997).  Senyawa  alkaloid,  terutama  indol,  memiliki kemampuan untuk menghentikan reaksi rantai radikal bebas  secara  efisien.  Beberapa  senyawa  alkaloid  lain yang bersifat antioksidan adalah quinolon, kafein yang dapat  bertindak  sebagai  peredam  radikal  hidroksil (Fereidoon, 1997) dan melatonin yang berperan penting menjaga sel dari pengaruh radiasi dan toksisitas obat- obatan (Vijayalaxmi et al., 2002).
Hasil skrining fitokimia terhadap simplisia bunga gemitiri  menunjukkan  bahwa  simplisia  bunga  gemitir mengandung golongan senyawa flavonoid, fenolik, dan alkaloid diduga berperan penting dalam penghambatan aktivitas  radikal  bebas.  Hasil  aktivitas  antioksidan  teh herbal  terstandard  simplisia  bunga  gemitir  tergolong sedang (Jun, et al. 2006).   Hasil tersebut menunjukkan simplisia  bunga  gemitir  potensial  dijadikan  sebagai sediaan  teh  herbal  terstandar  atau  sediaan  farmasi lainnya yang berkhasiat sebagai antioksidan.

## Kesimpulan
Berdasarkan  penelitian  yang  telah  dilakukan, maka  dapat  disimpulkan  bahwa  simplisia  bunga gemitir  ( Tagetes  erecta Linn.)  memenuhi  seluruh parameter  standardisasi  spesifik  dan  nonspesifik berdasarkan Farmakope Herbal Indonesia  edisi II dan Materia  Medika  Indonesia.  Teh  herbal  terstandar simplisia bunga gemitir ( Tagetes erecta Linn.) potensial sebagai  sediaan  yang  memiliki  aktivitas  antioksidan dengan nilai IC 50 sebesar 188,00 ± 0,80 ppm.

## Daftar Pustaka
Alen, Y., Agresa, F. L., & Yuliandra, Y. (2017). Analisis Kromatografi  Lapis  Tipis  (KLT)  Dan  Aktivitas Antihiperurisemia Ekstrak Rebung
Schizostachyum brachycladum Kurz (Kurz) Pada Mencit Putih Jantan. Jurnal Sains Farmasi & Klinis,
3 (2),
146-152.
https://doi.org/10.29208/jsfk.2017.3.2.141
Ayu,  R.,  &  Wardhani,  P.  (2015).  Uji  Aktivitas Antibakteri  Ekstrak  Kulit  Buah  Rambutan ( Nephelium  lappaceum L.,)  pada  Bakteri. IJCS  - Indonesia Journal of Chemical Science , 4 (1), 1–6.
Departemen  Kesehatan  Republik  Indonesia.  (1995). Farmakope Indonesia Edisi IV . Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia.
Departemen  Kesehatan  Republik  Indonesia.  (2000). Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat . Jakarta:  Direktorat  Jenderal  Pengawasan  Obat dan Makanan.
Departemen  Kesehatan  Republik  Indonesia.  (2017). Farmakope  Herbal  Indonesia  Edisi  II .  Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia.
Ergina.,  Nuryanti,  S.,  dan  Pursitasari,  I.  D.  (2014).  Uji Kualitatif  Senyawa  Metabolit  Sekunder  pada Daun  Palado  (Agave  angustifolia)  yang Diekstraksi dengan Pelarut Air dan Etanol. Jurnal
Akademika Kimia , 3(3), p.165-172.
Gandjar, I., dan Abdul, R. (2007). Kimia Farmasi Analisis. Yogyakarta: Gadjah Mada University Press.
Harborne, J. B. 1987. Metode Fitokimia . ITB, Bandung.
Irmawati.  (2014). Keajaiban  Antioksidan .  Jakarta:  Padi. p.1-14.
Julianto,  T.  S.  (2019). Fitokimia  Tinjauan  Metabolit Sekunder  dan  Skrining  Fitokima .  Jakarta: Universitas Islam Indonsesia.
Kusuma, I. G. N. B. P. B., Ratna, N. K. A. N., Kalalinggi, A.  G.,  &  Widarta,  I.  W.  R.  (2020).  Aktivitas Antioksidan  dan  Evaluasi  Sensoris  Teh  Herbal Bunga  Gumitir  ( Tagetes  erecta L.). Jurnal  Ilmiah Teknologi  Pertanian  Agrotechno , 5 (2),  39. https://doi.org/10.24843/jitpa.2020.v05. i02.p01
Lachance,  P.  A.,  Nakat,  Z.,  &  Jeong,  W.  S.,  (2001).
Antioxidants: an integrative approach. Nutrition . 17: 835–838.
Liu, W., Yin, D., Li, N., Hou, X., Wang, D., Li, D., & Liu, J.  (2016).  Influence  of  environmental  factors  on the active substance production and antioxidant activity  in Potentilla  fruticosa L.  and  its  quality assessment. Scientific Reports . 6(1), p.1-18.
Marlina,  S.  D.  (2005).  Skrining  Fitokimia  dan  Analisis Kromatografi Lapis Tipis Komponen Kimia Buah Labu  Siam  ( Sechium  edule Jacq.  Swartz)  dalam Ekstrak Etanol. Biofarmasi , 3(1), p.26-31.
Moliner, C., Barros, L., Dias, M. I., López, V., Langa, E., Ferreira, I. C. F. R., & Gómez Rincón, C. (2018). Edible flowers of tagetes erecta Linn. as functional ingredients:  Phenolic  composition,  antioxidant and protective effects on caenorhabditis elegans. Nutrients , 10(12).
Rastuti,  U.,  dan  Purwati.  (2012).  Uji  Aktivitas Antioksidan  Ekstrak  Daun  Kalba  ( Albizia falcataria )  dengan  Metode  DPPH  ( 1,1Difenil-2-
pikrilhidrazil ) dan Identifikasi Senyawa Metabolit Sekundernya. Molekul , 7(1), p.33-42.
Reubun,  Y.  T.  A.,  Kumala,  S.,  Setyahadi,  S.,  & Partomuan, S. (2020). Pengeringan beku ekstrak herba pegagan ( Centella asiatica ). Sainstech Farma ,
13 (2), p.113–117.
Saifuddin,  A.,  Rahayu,  V.,  &  Teruna,  H.  Y.,  (2011),
Standardisasi Bahan Obat Alam , Yogyakarta: Graha Ilmu.
Santi,  Ni,  M.  (2021).  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak Bunga  Gemitir  ( Tagetes  erecta Linn). Jurnal Farmagazine , VIII (1).
Sutomo, dan Rajif, I. (2019). Konservasi Tumbuhan Obat Tradisional  "Usada  Bali". Pusat  Penelitian Konservasi Tumbuhan dan Kebun Raya , 18(4).
Utami,  Y.  P.,  Taebe,  B.,  &  Fatmawati,  F.  (2016).
Standardisasi  Parameter  Spesifik  Dan  Non Spesifik Ekstrak Etanol Daun Murbei (Morus alba L.)  Asal  Kabupaten  Soppeng  Provinsi  Sulawesi Selatan. Journal  of  Pharmaceutical  and  Medicinal Sciences . 1 (2), p.48–52.
Valyova, M., Stoyanov, S., Markovska, Y., & Ganeva, Y. (2012). Evaluation of in vitro antioxidant activity and free radical scavenging potential of variety of Tagetes  erecta L.  flowers  growing  in  Bulgaria. International Journal of Applied Research in Natural Products , 5 (2), p.19–25.
Youngson, R. (2005). Antioksidan Manfaat Vitamin C dan E Bagi Kesehatan . Arcan. Jakarta.