OPTIMASI PERTUMBUHAN ISOLAT FUNGI INDIGEN Penicillium sp. LBKURCC153

## PENDEGRADASI NAFTALENA MENGGUNAKAN GLUKOSA SEBAGAI KOSUBSTRAT PADA MINIMAL MEDIUM
THE GROWTH OPTIMIZATION OF INDIGENOUS FUNGI ISOLATE Penicillium sp. LBKURCC153 FOR NAPHTHALENE DEGRADATION USING GLUCOSE AS COSUBSTRATE ON MINIMUM MEDIUM
Aisyah fitrida 1 , Riryn Novianty 2* Saryono 3 , Amir Awaluddin 4 , Nova Wahyu Pratiwi 4
1234 Program Studi Kimia , Fakultas MIPA Universitas Riau, Indonesia
*Email: rirynnovianty@lecturer.unri.ac.id
Diterima: 21 Februari 2020. Disetujui: 10 Maret 2020. Dipublikasikan: 30 April 2020
Abstrak: Naftalena merupakan salah satu polutan yang sulit untuk didegradasi karena termasuk kedalam kelompok PAH dan bersifat karsinogenik. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk menguji efektifitas isolat fungi indigen dari Provinsi  Riau  untuk  mendegradasi  senyawa  toksik  naftalena  dengan  penambahan  glukosa  sebagai  kosubstrat pertumbuhan. Degradasi naftalena oleh isolat fungi dipengaruhi oleh beberapa parameter, diantaranya biomassa, pH dan persentase degradasi yang diukur pada 0, 4, 8, 12 dan 16 hari inkubasi. Berdasarkan dari parameter biomassa isolat fungi Penicillium sp. LBKURCC153 mengalami fase eksponensial sampai hari ke-16. Pada fase eksponensial terjadi pertambahan jumlah sel secara maksimum yang menunjukkan respon positif terhadap penggunaan glukosa dan naftalena sebagai sumber karbon dan energi. Isolat mengalami penurunan pH dari  7 sampai  3,8  yang artinya ada  aktivitas  pertumbuhan  yang  menghasilkan  asam-asam  organik  dari  proses  degradasi  naftalena.  Isolat  juga mampu  mendegradasi  naftalena  sebesar  27,5%  oleh Penicillium sp.  LBKURCC153  pada  media  dengan penambahan glukosa pada waktu optimum selama 4 hari inkubasi. Kesimpulannya, penambahan kosubstrat glukosa dapat meningkatkan persentase degradasi naftalena oleh Penicillium sp. LBKURCC153.
Kata Kunci : Biodegradasi, fungi, glukosa, naftalena
Abstract: Naphthalene is one of the pollutants that is difficult to degrade because it belongs to the PAH group and it was carcinogenic. The purpose of this study was to test the effectiveness of an indigenous fungi  isolate  from  Riau  Province  to  degrade  naphthalene  toxic  compounds  with  glucose  as  growth cosubstrate. Naphthalene degradation by fungi isolates was influenced by several parameters, including biomass,  pH  and  percentage  degradation  measured  at  0,  4,  8,  12  and  16  days  of  incubation.  Based  on biomass parameters, the isolate of Penicillium sp. LBKURCC153 experienced an exponential phase until the 16th day. In the exponential phase, the maximum number of cells increases which shows a positive response to the use of glucose and naphthalene as the carbon and energy source. Isolate decreased their pH  from  7  to  3,8,  that  mean  proves  the  growth  activity  produce  organic  acid  metabolites  of  degrade naphthalene.  Isolate  were  also  able  to  degrade  naphthalene  respectively  27,5%  by Penicillium sp. LBKURCC153  in  medium  with  glucose  at  optimation  time  until  4  th  day  incubation.  In  conclusion, glucose cosubstrate can increase  naphthalene degradation percentage by Penicillium sp. LBKURCC153.
Keywords : biodegradation, fungi, glucose, napthalene

## PENDAHULUAN
Minyak  bumi  adalah  campuran  kompleks senyawa  organik  yang  terdiri  atas  senyawa hidrokarbon  dan  non  hidrokarbon  yang  berasal  dari sisa-sisa  mikroorganisme,  tumbuhan  dan  binatang yang tertimbun selama berjuta-juta tahun. Hidrokarbon  minyak  bumi  merupakan  senyawa organik  yang  terdiri  dari  karbon  dan  hidrogen  dan dapat  digolongkan  menjadi  dua  jenis,  yaitu hidrokarbon alifatik dan hidrokarbon aromatik [1]. Polycylic  Aromatic  Hydrocarbon (PAH) merupakan  hidrokarbon  yang  mempunyai  cincin benzen yang saling berikatan. Kelarutan PAH dalam air akan terus berkurang seiring dengan
bertambahnya  cincin  benzen  penyusun  struktur molekul  tersebut.  Rendahnya  kelarutan  senyawa PAH  menyebabkan  keterbatasan  biaovabilitas  dan efisiensinya pada proses bioremediasi [2].
Hasil  penelitian  [3],  PAH  yang  ada  di  tanah akan  dijerap oleh partikel  koloid tanah dalam waktu yang  singkat.  Penjerapan  ini  semakin  lama  akan semakin  persisten  karena  terjadi  akumulasi  tanpa adanya  penguraian  oleh  mikroorganisme.  Hal  ini disebabkan  karena  PAH  bersifat  hidrofobik  yaitu memiliki  tingkat  kelarutan  yang  sangat  rendah terhadap air. Sifat hidrofobik ini menyebabkan PAH berpotensi  untuk  mengikat  bahan  organik  dan mampu  membentuk  mikropolutan  yang  kemudian
terendap  dalam tanah.  Senyawa PAH bila  masuk  ke dalam  darah  akan  diserap  oleh  jaringan  lemak  dan mengalami  oksidasi  dalam  hati  membentuk  fenol. Berikutnya akan terjadi reaksi konjugasi membentuk glukoronida  yang  larut  dalam  air,  kemudian  masuk ke  ginjal.  Senyawa  antara  yang  terbentuk  adalah epoksida  yang  beracun  dan  dapat  menyebabkan kerusakan pada sumsum tulang [4].
Naftalena  adalah  salah  satu  kelompok senyawa  PAH  dominan  yang  terkandung  dalam minyak  bumi  [5].  Keracunan  naftalena  dapat menyebabkan  penyakit  anemia  haemolitik  dan nefrotoksisitas  pada  manusia  [6].  Paparan  naftalena pada  manusia  dapat  merusak  sel  darah  merah sehingga menyebabkan anemia haemolitik [7]. Untuk itu dibutuhkan suatu metode yang ramah lingkungan untuk menguraikan bahan kimia ini.
Biodegradasi  oleh  mikroorganisme,  adalah cara  yang  tepat,  efektif  dan  hampir  tidak  ada pengaruh  sampingan  pada  lingkungan  karena  tidak menghasilkan  racun  [8].  Menurut  [9]  menyatakan bahwa  mikroba  indigen  lebih  banyak  digunakan dalam  proses  pengolahan  lahan  tercemar  karena lingkungannya  lebih  sesuai  dengan  lingkungan tercemar  tersebut  serta  kemungkinannya  lebih  kecil untuk  mengalami  proses  inhibisi.  Penggunaan mahluk  hidup  berupa  mikroorganisme  mampu memberikan  metode  degradasi  yang  ramah lingkungan  seperti  fungi Aspergillus  aculeatus, Aspergillus  flavus dan Aspergillus  fumigatus yang digunakan  untuk  mendegradasi  limbah  berbahaya [10].
Isolat fungi indigen Penicillium sp. (LBKURCC153)  yang  diisolasi  dari  tanah  tercemar tumpahan  minyak  bumi  di  Badan  Operasi  Bersama PT  Bumi  Siak  Pusako-Pertamina  Hulu,  Kabupaten Siak,  Provinsi  Riau  telah  teruji  dapat  mendegradasi naftalena dengan persentase degradasi naftalena oleh isolat  pada  media  tanpa  glukosa  adalah  sebesar 21,5%  setelah  diinkubasi  selama  16  hari  [11]. Namun,  kemampuan  isolat  fungi  indigen  tersebut dalam  mendegradasi  senyawa  naftalena  masih rendah.  Efektivitas  biodegradasi  dapat  ditingkatkan dengan  memanipulasi  parameter  lingkungan  untuk mendukung pertumbuhan mikroba dan mendegradasi dengan lebih cepat [12].
Penambahan  glukosa  sebagai  kosubstrat mampu meningkatkan pertumbuhan mikroorganisme secara signifikan. Oleh karena itu, pada penelitian ini ditambahkan  glukosa  pada  media  MM  sebagai kosubstrat pertumbuhan untuk meningkatkan keefektifan biodegradasi naftalena [9].

## METODE PENELITIAN Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah  timbangan  analitik  ( Mettler  AE  200 ),  oven ( Fisher  Scientific  Isotemp  Oven  model 655F), Autoclave  (All  America  model 1925/KY-23D) , waterbath (Sibata  WK-24), Vortex  mixer Genie  2 TM, orbital  shaker ( Daihan  Labtech CO.,  LTD)),
Laminar  Air  Flow  Cabinet (LAFC)  ( Esco    Micro PTE  LTD  30 Loyang  Drive  Singapore 1750), spektrofotometer  UV-Vis  (Genesys  10S  UV-Vis v4.002  2L9N175013) ,  pH  meter  ( Horiba  Scientific Laqua  Act D-71G), centrifuge ( Hitachi  Centrifuge CT 15RE), desikator, inkubator ( Heraeus Instrument D6450 ) ,  corong  pisah,  mikropipet  dan  alat-alat standar laboratorium lainnya sesuai prosedur kerja. Bahan  yang  digunakan  pada  penelitian  ini adalah aluminium foil, alkohol antiseptik 70%, asam sitrat,  kentang,  agar  batang, dextrosa monohidrat, akua  demineralisasi  (akua  DM),  (NH 4 ) 2 SO 4 , K 2 HPO 4 ,  MgSO 4 .7H 2 O,  FeSO 4 .7H 2 O,  KH 2 PO 4 , Tween 80,  naftalena,  aseton,  NaCl,  NaOH,  heksana, kapas,  benang  jagung,  plastik  wrap,  kertas  saring Whatman No. 42 dan spritus.
Peremajaan  Isolat  Fungi  pada  Media Potato Dextrose Agar (PDA) Peremajaan  isolat  fungi  dapat  dilakukan dengan  prosedur  sebagai  berikut:  kentang  dikupas, dicuci  dan  dipotong  kecil-kecil  lalu  ditimbang sebanyak 20 gram. Kentang tersebut ditambahkan 50 mL  akua  DM  dan  direbus  hingga  mendidih, kemudian disaring dan diambil filtratnya. Selanjutnya  sebanyak  1,7  gram  agar  batang  dan  2 gram dextrose dimasukkan  ke  dalam  filtrat  dan ditambahkan  akua  DM  hingga  volume  100  mL. Filtrat  dipanaskan  hingga  agar  batang  larut.  Setelah larut, media PDA disterilisasi menggunakan autoklaf pada  tekanan  15  psi  dan  suhu  121 o C  kemudian didinginkan  dan  diinkubasi  selama  1  jam  di  dalam waterbath (60 o C) dan  ditambahkan asam sitrat 10% sebanyak  500  µL.  Media  PDA  dituang  ke  tabung reaksi.  PDA  yang  telah  membeku  didiamkan  pada suhu kamar. Bila tidak ada kontaminasi, media PDA dapat digunakan.
Isolat  fungi Penicillium sp.  (LBKURCC153) diremajakan  pada  media Potato  Dextrose  Agar (PDA)  dibuat  dengan  prosedur  sebagai  berikut: miselia fungi diambil dari biakan murni menggunakan  jarum  ose  yang  telah  disterilisasi dengan  api  dari  lampu  spritus  kemudian  diinokulasi ke  atas  media  agar  miring  PDA.  Media  yang  sudah ditanami  tersebut,  kemudian  diinkubasi  pada  suhu kamar.

## Starter Inokulum Fungi
Starter Inokulum fungi dapat dilakukan dengan prosedur  sebagai  berikut:  Miselia  fungi Penicillium sp.  (LBKURCC153)  ditambahkan  air  salin  (NaCl 0,85%) sebanyak 3 mL dan diserut dengan jarum ose. Setelah itu dipipet  dengan pipet  mikro sebanyak  0,5 mL  dan  di  masukkan  ke  dalam  media  PDA  dalam petri. Kemudian di ratakan dengan batang L.  Media yang  sudah  ditanami  tersebut,  kemudian  diinkubasi pada suhu kamar.

## Biodegradasi Naftalena Pembuatan Larutan Stok Naftalena
Larutan  stok  naftalena  10  mM  dibuat  dengan melarutkan  0,128  g  naftalena  dalam  50  mL  aseton, kemudian  dimasukkan  kedalam  labu  takar  100  mL dan  ditambahkan  aseton  sampai  tanda  batas  dan dihomogenkan.
Pembuatan Minimal  Medium (MM)  dengan Penambahan Glukosa Minimal  Medium (MM)  digunakan  untuk  uji degradasi  naftalena  oleh  isolat  fungi.  MM  dibuat dengan melarutkan 2 g (NH 4 ) 2 SO 4 , 1 g K 2 HPO 4 , 1 g KH 2 PO 4 ,  0,2  g  MgSO 4 .7H 2 O,  0,01  g  FeSO 4 .7H 2 O, 0,02%  tween  80  ke  dalam  1000  mL  akua  DM  dan ditambahkan glukosa sebanyak 10 g (Bourguignon et al .,  2014).    pH  media  diukur  sampai  menjadi  7. Setelah  itu,  media  MM  yang  sudah  ditambahkan glukosa  dimasukkan  kedalam  Erlenmeyer  100  mL sebanyak 29,4 mL.  Media disterilkan dalam autoklaf dengan suhu 121 o C tekanan 15 psi selama 20 menit. Setelah  media  dingin,  larutan  naftalena  10  mM ditambahkan  ke  dalam  masing-masing  Erlenmeyer yang  berisi  media  sebanyak  0,6  mL  sehingga konsentrasi  akhir  naftalena  menjadi  0,2  mM. Kemudian media didiamkan selama 1 hari. Bila tidak ada kontaminasi, maka media dapat digunakan..

## Optimasi  Pertumbuhan  Isolat  Fungi  dengan Penambahan Glukosa
Optimasi  pertumbuhan  isolat  fungi  dalam mendegradasi naftalena dengan penambahan glukosa sebagai  kosubstrat  pertumbuhan,  dengan  prosedur sebagai  berikut:  isolat  fungi  sebanyak  3  plug (diameter  5  mm)  diinokulasikan  pada  media  MM (29,4  mL)  yang  sudah  ditambahkan  glukosa  (0,3  g) dan  naftalena  (6  mL)  dalam  Erlenmeyer  100  mL. Semua  Erlenmeyer  ditutup  dengan  kapas,  kain  kasa dan  alumunium  foil.  Sebagai  kontrol  digunakan media  MM  (29,4  mL)  yang  sudah  ditambahkan glukosa  (0,3  g)  dan  naftalena  (6  mL)  tanpa  isolat fungi. Eksperimen ini dilakukan secara triplo.

## Uji Biodegradasi Naftalena di MM cair
Uji  biodegradasi  naftalena  diinkubasi  selama 16  hari  pada rotary  shaker dengan  kecepatan  150 rpm pada suhu ruang. Inokulum dimonitor pada hari ke  0,  4,  8,  12  dan  16  dengan  mengukur  pH menggunakan  pH  meter,  menghitung  biomassa dengan  cara  mengukur  berat  keringnya.  Sampel  di saring  menggunakan  kertas  saring  Whatman  no.  42. Setelah  itu  dikeringkan  dalam  oven.  Selanjutnya ditimbang  berat  keringnya.  Filtrat  diambil  dan ditambahkan  heksana  (1:1)  untuk  mengekstraksi naftalena. Selanjutnya disentrifugasi dengan kecepatan  1200  rpm  selama  10  menit untuk memisahkan  fase  organik  dan  fase  air.  Kemudian  1 mL  larutan  pada  fase  organik  diambil  dan  diukur absorbansinya pada  hari  ke  0,  4,  8,  12  dan  16 inkubasi menggunakan spektrofotometer  UV-Vis pada panjang gelombang 289 nm. Konsentrasi residu naftalena dapat dihitung menggunakan kurva standar
naftalena dengan larutan blanko heksana. Persentase biodegradasi  nafalena  dapat  dihitung  melalui persamaan berikut [13].

## Analisis Data
Analisis  data  hasil  analisa  yang  diperoleh  dari penelitian  ini  dianalisis  deskriptif  dalam  bentuk grafik  serta  dianalisis  secara  statistik  menggunakan uji  lanjutan Duncan jarak  berganda  taraf  5% menggunakan program SPSS..

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Parameter Biomassa Selama Biodegradasi
Naftalena Semua  mikroorganisme  memiliki  kurva pertumbuhan,  begitupun  dengan  fungi.  Penentuan kurva  pertumbuhan  fungi  pada  penelitian  ini ditunjukkan  dengan  parameter  biomassa.  Parameter biomassa  ini  ditentukan  berdasarkan  berat  kering isolat  fungi  dalam  MM  cair  selama  proses biodegradasi  naftalena.  Menurut  [3],  fungi  akan menunjukkan perbedaan pola pertumbuhan berdasarkan  periode  waktu  yang  dibutuhkan  untuk tumbuh maupun beradaptasi. Pertumbuhan mikroorganisme  dioptimalkan  dengan  memanipulasi lingkungan  hidupnya  untuk  menciptakan  kondisi optimum  yang  mendukung  pertumbuhannya  [12]. Oleh  karena  itu,  pada  penelitian  ini  ditambahkan glukosa  pada  media  MM  yang  berfungsi  sebagai kosubstrat bagi masing-masing isolat.
Berdasarkan  uji Duncan, pertumbuhan    isolat fungi  mempunyai  biomassa  yang  berbeda  secara nyata  seiring  dengan  bertambahnya  waktu  inkubasi. Hasil uji Duncan dapat dilihat pada Tabel 1 .
Pengukuran  aktivitas  ekstrak  kasar  enzim  hasil fermentasi padat dengan variasi waktu 10, 20, dan 30 hari  dilakukan  untuk    menunjukkan  bahwa  selulosa pada pulp popok  bayi  bekas  yang  mengandung  urin dapat didegradasi oleh jamur selulolitik T.asperellum LBKURCC1  dan  isolat  bakteri  S-22.  Hal  ini menunjukkan  bahwa  selulosa  popok  bayi  bekas mengandung  urin  dapat  digunakan  sebagai  sumber karbon yang bisa dilihat dari adanya aktivitas ekstrak kasar  enzim  selulase  yang  dianalisis  menggunakan metode Nelson-Somogyi.
Hasil  fermentasi  popok  bayi  bekas  menggunakan isolat  jamur  LBKURCC1  dan  bakteri  S-22  dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Hasil uji Duncan biomassa dengan penambahan glukosa
Isolat Waktu Inkubasi (Hari) 0 4 8 12 16 Penicillium sp. LBKURCC153 0,407 ± 0,032 a 1,657 ± 0,609 b 2,093 ± 0,272 b, c 2,830 ± 0,092 c 2,967 ± 0,873 c
Keterangan : a, b, c, d dan e merupakan rata-rata nilai biomassa  dari  tiga  kali  pengulangan.  Pangkat  huruf yang  sama  menyatakan  tidak  berbeda  secara  nyata pada  tingkat  5%  (p≤0.05)  pada  baris  yang  sama berdasarkan uji Duncan .
Biomassa  dari  pertumbuhan isolat fungi pada  media MM dengan penambahan glukosa dapat dilihat pada Gambar 1 berikut.
Gambar 1. Biomassa isolat fungi dalam MM cair dengan penambahan glukosa pada suhu ruang, kecepatan agitasi 150 rpm.
Isolat  fungi  pada  Gambar  1.  terlihat  mampu beradaptasi dan menggunakan glukosa dan naftalena sebagai  sumber  karbon  dalam  pertumbuhannya.  Hal ini  dapat  diketahui  melalui  biomassa  pertumbuhan fungi  yang  diukur  dalam  rentang  waktu  0,  4,  8,  12 dan  16  hari  yang  terus  mengalami  kenaikan.  Isolat fungi  LBKURCC153  mengalami  fase  eksponensial sampai hari  ke enam  belas waktu inkubasi. Menurut [14]  pada  fase  eksponensial,  mikroorganisme mengalami  pertumbuhan  secara  cepat.  Selain  itu, kebutuhan energi pada fase eksponensial lebih tinggi dibandingkan pada fase lag (adaptasi), stasioner dan kematian.
Pada  fase  eksponensial  mikroba  membelah dengan  cepat  dan  konstan.  Kecepatan  pertumbuhan pada  fase  ini  sangat  dipengaruhi  oleh  media  tempat tumbuhnya  seperti  pH  dan  kandungan  nutrien.  Pada penelitian  ini,  pengaruh  penambahan  glukosa terhadap pertumbuhan fungi memberikan efek positif terhadap  peningkatan  biomassa  dari  masing-masing fungi.  Terlihat  bahwa  dengan  penambahan  glukosa, fungi mempunyai biomassa sebanyak 3,63 g/L untuk LBKURCC153  setelah  diinkubasi  selama  16  hari. Sedangkan  menurut  penelitian  [11]  pertumbuhan isolat  fungi  tertinggi  pada  media  tanpa  penambahan glukosa adalah sebesar 0,48 g/L untuk LBKURCC153. Berdasarkan perbandingan ini dapat disimpulkan  bahwa  dengan  penambahan  glukosa dapat meningkatkan pertumbuhan isolat fungi 656%.

## Parameter pH Selama Proses Biodegradasi
Kemampuan
mikroorganisme dalam mendegradasi  hidrokarbon  juga  dipengaruhi  oleh faktor  pH,  karena  pH  menentukan  aktivitas  enzim yang  optimal.  Berdasarkan  uji Duncan, pH  masing- masing  isolat  fungi  berbeda  secara  nyata  seiring dengan  bertambahnya  waktu  inkubasi.  Hasil  uji Duncan dapat dilihat pada Tabel 2. Berikut:
Tabel 2. Hasil uji Duncan pH pada media MM dengan penambahan glukosa Isolat Waktu Inkubasi (Hari) 0 4 8 12 16 Penicillium sp. LBKURCC153 6,700 ± 0,000 d 3,800 ± 0,819 c 2,833 ± 0,231 a, b 2,500 ± 0,000 a 3,367 ± 0,208 b, c Kontrol 6,633 ± 0,058 b 6,533 ± 0,058 b 6,533 ± 0,058 b 6,533 ± 0,058 b 6,400 ± 0,000 a
Keterangan : a, b, c  dan d merupakan rata-rata nilai pH  dari  tiga  kali  pengulangan.  Pangkat  huruf  yang sama  menyatakan  tidak  berbeda  secara  nyata  pada tingkat  5%  (p≤0.05)  pada  baris  yang  sama berdasarkan uji Duncan .
Perubahan pH media MM dengan penambahan glukosa selama degradasi naftalena dapat dilihat pada Gambar 2 berikut:
Gambar 2. Perubahan pH media dengan penambahan glukosa selama proses    degradasi naftalena pada suhu ruang, agitasi 150 rpm
Pada  Gambar  2. dapat  dilihat  terjadinya penurunan pH pada media yang ditambahkan glukosa dari    pH  7  menjadi  3,8.  Penurunan  pH  ini  dapat terjadi  karena  adanya  aktivitas  pertumbuhan  dari fungi  dan  juga  terbentuknya  asam-asam  organik akibat  dari  degradasi  naftalena  oleh  fungi  yang mengakibatkan  pH  menjadi  lebih  asam.  [15] menyatakan  hasil  degradasi  naftalena  oleh  fungi menghasilkan  forma  dan  naftol  yang  dimetabolisme menjadi  salisilaldehid  yang dioksidasi menjadi asam salisilat  dan  didehidroksilasi  menjadi  asam  benzoat. Menurut  [16],  peningkatan  keasaman  kemungkinan besar terkait dengan produksi metabolit asam, seperti asam  benzoat  dan  ftalat  selama  biodegradasi naftalena.
Hasil  penelitian  [11],  pH  media  tanpa penambahan glukosa pada isolat fungi LBKURCC153  dari  pH  7  menjadi  6,3.  Hasil  ini dapat  dilihat  bahwa  media  dengan  penambahan glukosa  mengalami  penurunan  pH    yang lebih  asam bila  dibandingkan  dengan  media  tanpa  penambahan glukosa  yang  diteliti  oleh  [11],  hal  ini  berarti  pada media dengan glukosa fungi mempunyai pertumbuhan  yang  lebih  banyak  sehingga  asam- asam  organik  yang  terbentuk  juga  menjadi  lebih banyak  sehingga  naftalena  semakin  banyak  yang terdegradasi.
Persentase  Degradasi  Naftalena  Selama  Proses Biodegrdasi
Persentase  kemampuan  biodegradasi  isolat fungi  ditentukan  berdasarkan  konsentrasi  naftalena menggunakan  spektrofotometer  UV-Vis  pada panjang  gelombang  289  nm.  Konsentrasi  naftalena yang  terdegradasi  selama  waktu  inkubasi  dapat ditentukan  melalui  kurva  standar  naftalena  dengan larutan blanko heksana.  Pembuatan  kurva  standar bertujuan  untuk  mengetahui  serapan  masing-masing k onsentrasi dari  larutan  standar,  kemudian  dibuat grafik hubungan konsentrasi larutan standart dengan serapan [17]
Tabel 3. Persentase degradasi naftalena pada media dengan penambahan glukosa setelah inkubasi enam
belas hari. Isolat Waktu Inkuba si (Hari) Bio mas sa (g/ L) pH Konsent rasi (mM) Perse n degra dasi (%) LBKU RCC15 3 0 0,41  6,7 0,2 0 4 1,67  3,8 0,09 27,5 8 2,09  2,8 0,059 22 12 2,83  2,5 0,051 11 16 3,63  3,4 0,025 27,5 Perhitungan persentase degradasi perlu
dilakukan untuk mengetahui dengan pasti kemampuan terbaik suatu isolat dalam mendegradasi naftalena.  Persentase  degradasi  naftalena  oleh  isolat fungi dapat dilihat pada Tabel 3. Pada Tabel 3. dapat dilihat bahwa persentase degradasi naftalena tertinggi oleh Penicillium sp.  LBKURCC153  setelah diinkubasi selama 4 hari adalah 27,5%.
Berdasarkan  persentase  degradasi  naftalena untuk masing-masing isolat fungi pada media dengan penambahan  glukosa  adalah  sebesar    27,5%  oleh isolat  fungi  LBKURCC153.  Bila  dibandingkan dengan penelitian [11] persentase degradasi naftalena tertinggi untuk isolat fungi pada media tanpa glukosa adalah  19%  oleh  isolat  fungi  LBKURCC153.  Dari kedua  perbandingan  ini  dapat  disimpulkan  bahwa dengan  penambahan  glukosa  dapat  meningkatkan persentase degradasi naftalena sebesar 30,9%.
Glukosa  dapat  meningkatkan  pertumbuhan fungi  sehingga  ketika  glukosa  sudah  mulai  habis, fungi  tersebut akan menggunakan  naftalena sebagai sumber  karbon  lain  yang  menyebakan  persentase degradasi  menjadi  meningkat.  Hasil  ini  sesuai dengan  penelitian  yang  dilakukan  oleh  [18]  bahwa penambahan  kosubstrat  glukosa  pada  media meningkatkan  persentase  degradasi  benzo  [a]pirena
oleh isolat fungi sebesar dua kali lipat dari persentase media tanpa penambahan glukosa .

## KESIMPULAN
Berdasarkan  penelitian  yang  telah  dilakukan, dapat  disimpulkan  bahwa  dengan  penambahan kosubstrat  glukosa  dapat  meningkatkan  persentase degradasi naftalena oleh Penicillium sp. LBKURCC153  dengan  persentase  degradasi  27,5% diikuti  biomassa  fungi  sebesar    1,67  g/L  dan penurunan  pH  menjadi  3,8  dengan  waktu  optimum selama 4 hari inkubasi.

## DAFTAR PUSTAKA
[1] Agustin,  S.  N.  R.  2015.  Biodegradasi  minyak bumi  dengan  menggunakan  bakteri  indigen Pseudomonas  peli dari  sumur  tua  desa  Babat Toman  Musi  Banyuasin  (MUBA). Skripsi .
Palembang: Universitas Sriwijaya.
[2] Li,  J.  L.,  &  Chen,  B.  H.  2009.  Surfactant- mediated biodegradation of polycyclic aromatic hydrocarbons. J. Materials , 2.76-94.
[3] Sari,  G.  L.  2015.  Biodegradasi  polycylic aromatic  hydrocarbon  (PAH)  pada  tanah terkontaminasi  batubara  dengan  metode  co- composting. Tesis. Surabaya: Institut Teknologi Sepuluh Nopember.
[4] Kappell,  A.  D., et  al .  2014.  The  polycyclic aromatic  hydrocarbon  degradation  potential  of gulf  of  mexiconative  coastal  microbial communities  after  deepwater  horizon  oil  spill. Frontiers in Microbiology , 5, .1-14.
[5] Farini,  N.  2016.  Optimasi  kemampuan degradasi  senyawa  naftalena  oleh  bakteri  laut dan  deteksi  gennaftalena  dioksigenase. Skripsi. Bogor: Institut Pertanian Bogor.
[6] Lohmann,  R.,  Breivik,  K.,  Dachs,  J.,  &  Muir, D.  2007.  Global  fate  of  POPs:  current  and future  research  directions. Environ  Pollut , 150.150–165.
[7] Fardani,  N.  F.  2018.  Biotransformasi  metilen biru oleh jamur pelapuk putih Phlebia lindtneri .
Skripsi .  Surabaya:  Institut  Teknologi  Sepuluh Nopember.
[8] Juliani,  A.,  Lathifah,  A.  N.  d&  Nurdin,  W.  A. 2016.  Pengaruh  penambahan  kosubstrat  pada biodegradasi  crude  oil. Jurnal  Sains  dan Teknologi Lingkungan, 8(2).112-120.
[9] Ubaidillah,  N.A.,  Purnomo,  A.S.,  &  Putri, E.M.M.  2014.  Biodegradasi  metilen  biru menggunakan jamur pelapuk coklat Gleophyllum  trabeum . Jurnal  Seni  dan  Sains, 2(1).1-6.
[10] Fitrida, A., Apriyana, K., Astuti, R & Novianty, R. 2019. Biodegradasi senyawa toksik naftalena menggunakan  isolat  fungi  indigen  provinsi Riau. Laporan    Penelitian  PKM  Ristekdikti 2019. FMIPA UNRI, Pekanbaru.
[11] Vidali,  M.  2001.  Bioremediation. Puer  and Applied Chemistry , 7(73).1163-1172.
[12] Trikurniadewi,  N.  2015.  Biodegradasi  naftalen dan  fenantren  oleh Bacillus  subtilis 3KP.
Skripsi . Surabaya: Universitas Airlangga.
[13] Kosim, M. & S. R. Putra. 2010. Pengaruh suhu pada  protease  dari Bacillus  subtilis .  Prosiding
Skripsi  Semester  Genap  2009-2010.  Jurusan Kimia FMIPA ITS Surabaya.
[14] Elhusseiny,  S.  M.,  Amin,  H.  M  &  Shebl,  R.  I. 2018.  Modulation  of  laccase  transcriptome during  biodegradation  of  naphthalene  by  white rot  fungus Pleurotus  ostreatus . International Microbiology ,
[15] Bumpus, J. A., Tien, M., Wright, D. & Aust, S. D. 1985. Oxidation of persistent environmental pollutants  by  a  white  rot  fungus. Science, 228
(4706).1434-1436.
[16] Saputra, R., Noviyanti., & Cahyani, D. I. 2019. Pemanfaatan  kulit  pisang  dalam  degradasi  zat aktif  piridaben  pada  pestisida  samite  135EC. Jurnal Iptek Terapan, 13(i1).1-11.
[17] Hadibarata, T & Kristanti, R.A. 2012. Fate and cometabolic  degradation  of  benzo[a]pyrene  by white-rot  fungus Armillaria sp.  F022. Bioresource Technology , 107.314-318.