## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online) DOI 10.47065/jharma.v4i2.3262
Uji Aktivitas ALT, AST dan Histopatologi Ekstrak Etanol Rimpang Temu Kunci (Boesenbergia rotunda (L.) Mansf) pada Tikus Putih Jantan
Mawandha Sari Harahap 1 , Urip Harahap 2* , Panal Sitorus 3
1 Program Studi Magister Ilmu Farmasi, Universitas Sumatera Utara, Medan, Indonesia
2 Fakultas Farmasi, Departemen Farmakologi Farmasi, Universitas Sumatera Utara, Medan, Indonesia
3 Fakultas Farmasi, Departemen Biologi Farmasi, Universitas Sumatera Utara, Medan, Indonesia Email: 1 mawandhasari17@gmail.com, 2* urip@usu.ac.id, 3 sitoruspanal@gmail.com
Abstrak −Penelitian eksperimental di bidang hepatologi pada pengembangan obat tradisional menjadi solusi farmakologis potensial untuk melindungi hati dari sirosis. Sejalan dengan itu, penelitian ini menyelidiki efek ekstrak etanol rimpang temu kunci pada sirosis hati. Tikus dibagi menjadi enam kelompok, kelompok kontrol normal tikus tidak diberikan apapun selain pellet dan air secukupnya, pada kelompok kontrol negatif diberikan secara oral CMC-Na 0,5%, 200 mg asetilsistein (dosis dikonversi ke tikus) diberikan pada kelompok  kontrol  positif,  dan  kelompok  perlakuan  diberikan  ekstrak  etanol  rimpang  temu  kunci  dosis  250,  500,  750  mg/kg  BB, diberikan setiap hari selama 10 hari. Kemudian pada hari ke 10 setelah 1 jam pemberian ekstrak dilakukan induksi dengan parasetamol 800 mg/kg BB peroral; 16 jam setelah induksi tikus dikorbankan, darah diambil untuk pemeriksaan enzim ALT dan AST, kemudian organ  hati  diambil  untuk  pemeriksaan  histopatologi.  Pemberian  ekstrak  etanol  rimpang  temu  kunci  dapat  mencegah  terjadinya kerusakkan hati melalui penurunan kadar enzim ALT dan AST pada serum darah tikus. Dosis terbaik dalam penurunan enzim ALT dan AST dihasilkan pada pemberian ekstrak etanol rimpang temu kunci 500 mg/kg BB setiap hari selama  10 hari. Pada dosis 500 mg/kg BB ekstrak etanol rimpang temu kunci secara morfologi (evaluasi dengan pewarnaan H&E) juga dapat memperbaiki jaringan hati yang rusak akibat induksi parasetamol. Perkembangan kerusakkan hati dapat diinterpensi dengan menggunakan ekstrak etanol rimpang temu kunci, sehingga status morfologi hati, struktur dan fungsi hati dapat dipertahankan.
Kata Kunci: Rimpang temu kunci, hepatoprotektif, ekstraksi
Abstract − Experimental research in the field of hepatology on the development of traditional medicine into a potential pharmacological solution to protect the liver from cirrhosis. Accordingly, this study investigated the effect of ethanol extract of temu kunci rhizome on liver cirrhosis. The rats were divided into six groups, the normal control group was given nothing but pellets and sufficient  water, the negative control group was given orally CMC-Na 0.5%, 200 mg acetylcysteine (dose converted to rat) was given to the positive control group, and the treatment group was given ethanol extract of temu kunci rhizome doses of 250, 500, 750 mg/kg BW, given daily for 10 days. Then on the 10th day after 1 hour of extract administration, induction was carried out with paracetamol 800 mg/kg BW orally; 16 hours after induction, rats were sacrificed, blood was taken for ALT and AST enzyme examination, then liver organs were taken for histopathological examination. The administration of ethanol extract of temu kunci rhizome can prevent liver damage by reducing ALT and AST enzyme levels in rat blood serum. The best dose in reducing ALT and AST enzymes was produced by giving 500 mg/kg BW of temu kunci rhizome ethanol extract every day for 10 days. At a dose of 500 mg/kg BW ethanol extract of temu kunci rhizome morphologically (evaluation with H&E staining) can also repair liver tissue damaged by paracetamol induction. The development  of liver damage can be interpended by using ethanol extract of temu kunci rhizome, so that the status of liver morphology, structure and function of the liver can be maintained.
Keywords : Rimpang temu kunci, hepatoprotective, extraction

## 1. PENDAHULUAN
Hati adalah organ yang berperan dalam metabolime racun dari dalam tubuh dan juga merupakan target dari radikal bebas ketika  terjadi  stress  oksidatif.  Stress  oksidatif  terjadi  karena  adanya  ketidak  seimbangan  jumlah  radikal  bebas  dan antioksidan  di  dalam  tubuh,  radikal  bebas  adalah  golongan  senyawa  kimia  yang  sangat  reaktif,  yang  dapat  berikatan dengan  protein  seluler  sehingga  menyebabkan  kerusakkan  DNA,  gangguan  jalur  sintesi  protein,  hilangnya  aktivitas enzim, yang pada akhirnya dapat menyebabkan kematian sel (Ndaong et  al., 2014). Penyakit hati kronis yang disebut sirosis hati  ditandai  dengan  adanya pertumbuhan jaringan yang tidak normal (nodul)  dan lembaran jaringan ikat yang menghalangi arsitektur normal hati dan tidak terhubung ke pembuluh darah normal. Nodul ini memiliki berbagai ukuran, yaitu  mikronodular  dan  makronodular. Sirkulasi  darah  di  dalam  hati  mungkin  terhambat  oleh  sirosis.  terutama  dalam situasi yang sangat parah, menyebabkan gagal hati progresif (Fransiska & Rahmadani, 2017; Hanafiah et al., 2021).
Sirosis  hati  adalah  suatu  kondisi  di  mana  terbentuknya  jaringan  parut  pada  hati  akibat  cedera  jangka  panjang, sehingga menyebabkan hati tidak berfungsi secara normal. Sirosis hati juga dikenal sebagai stadium akhir dari fibrosis hati. Hal ini mengancam jiwa termasuk pendarahan, gagal hati, dan ensefalopati. Sirosis hati tidak memiliki obat saat ini. Meluasnya  penggunaan  obat-obatan  dengan  efek  samping,  menyebabkan  sirosis  hati  menjadi  masalah  kesehatan masyarakat  yang serius  (Sujana et  al., 2022; Widjaja &  Karjadi, 2011).  Radikal bebas diproduksi  dalam jumlah besar sebagai  produk  sampingan  yang  tak  terhindarkan dari  berbagai  proses  metabolisme,  dan  dalam  kasus  tertentu,  seperti pada aktivasi  neutrofil, akan menyebabkan meningkatnya radikal bebas dalam tubuh. Selanjutnya, radikal bebas dapat diproduksi  dalam  tubuh  sebagai  reaksi  terhadap  radiasi  elektromagnetik  dari  lingkungan,  dan  dapat  diproduksi  secara langsung  sebagai  polutan  pengoksidasi  seperti  ozon  dan  nitrogen  dioksida  (Lubis  et  al.,  2023).  Kerusakan  dapat berkembang di berbagai jaringan jika antioksidan dalam tubuh lebih sedikit dibandingkan dengan jumlah radikal bebas. Ketika konsentrasi  ROS  melebihi jumlah antioksidan dalam tubuh  manusia, stres oksidatif yang berbahaya terbentuk, yang dapat menyebabkan penyakit kronis (Lubis et al., 2022; Satria et al., 2017).

## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online) DOI 10.47065/jharma.v4i2.3262
Temu  kunci  dengan  nama  latin Boesenbergia  rotunda (L.)  Mansf.  (Sinonim. Boesenbergia  pdanurata Roxb, Kaempferia  pdanurata Roxb) atau juga dikenal  sebagai  jahe Cina dan fingerroot secara tradisional banyak digunakan untuk  bumbu  masakan  secara  empiris  telah  digunakan  untuk  pengobatan  tradisional  seperti  tumor,  diare,  edema, dermatitis, pengobatan infeksi mulut (sariawan), dispepsia, perut kembung, keputihan, diuretik, batuk kering, gangguan gastrointestinal, perawatan pasca melahirkan, penyembuh luka, malaria, rematik, radang selaput lendir, peluruh air seni dan sebagai tonikum (Akmalia et al., 2016; Sujana et al., 2022). Uji aktivitas hepatoprotektif ekstrak etanol rimpang temu kunci menunjukkan penggunaan ekstrak rimpang temu kunci berbasis etanol dapat menghentikan perkembangan sirosis hati pada tikus yang diinduksi oleh thioacetamide.
Pengujian  sebelumhya  telah  dilakukan  pengujian  dampak  minyak  rajas  yang  diberikan  secara  oral  terhadap histopatologi hati dan aktivitas aminotransferase ayam kampung jantan dampak minyak rajas yang diberikan secara oral terhadap histopatologi hati dan aktivitas aminotransferase ayam kampung jantan (Teja et al., n.d.), pengujian histopatologi serta aktivitas hati kelinci lokal ( lepus sp.) yang diberi ransum tepung daun kaliandra ( Calliandra calothyrsus meissn.) dan kulit  nanas ( Ananas comosus l.)  (Wiranatha et  al., 2019), penelitian  Uji  Toksisitas Subkronik Kombinasi  Ekstrak Etanol Kunyit Dan Jahe Terhadap Fungsi Hepar Tikus Putih. Dari hasil pengujian yang dilakukan didapatkan hasil bahwa masing – masing sampel yang diujikan memiliki pengaruh terhadap ALT, AST dan Histopatologi pada hewan percobaan. Metode yang digunakan pada pengujian sebelumnya adalah menggunakan metode pelarut pendeteksinya adalah Ethylene Diamine  Tetra  Acetic  ( EDTA)  sedangkan  pada  pengujian  ini  tidak  menggunakan  reagen  pedeteksi  tersebut  tetapi memberikan hasil yang sama.
Berdasarkan latar belakang diatas, pengembangan obat tradisional terhadap sirosis hati perlu dilakukan penelitian lebih lanjut  terhadap peningkatan Alanine  transaminase (ALT), Aspartate transaminase (AST) dan efek histopatologi hati pada tikus sebagai hewan percobaan.

## 2. METODOLOGI PENELITIAN

## 2.1 Alat dan Bahan
2.1.1 Alat
Alat – alat yang digunakan pada penelitian ini adalah lat-alat gelas laboratorium, pisau (Cutter), blender (Miyako), rotary evaporator (Sigma-Aldrich, USA), cawan penguap, oven (Memmert), desikator, neraca kasar (Home Line), neraca listrik (Boeco), microplate reader , oral sonde, alat-alat bedah, microtube , seperangkat alat sentrifuse,  mortar dan stamper, spuit 1 mL, spuit 3 mL, labu ukur (iwaki), beaker glass (pyrex).

## 2.1.2 Bahan
Bahan  –  bahan  yang  digunakan  pada  penelitian  ini  adalah  rimpang  temu  kunci,  etanol  96%,  CMC-Na, N-acetyl-p- aminophenol (APAP)  (Sigma-Aldrich,  USA),  asetilsistein,  kloroform,  normal  saline,  xylol,  alcohol  96%,  aquadest, hematoxylin , alcohol acid 1% , eosin 1%, twen-2, kloroform.

## 2.2.  Pengolahan Sampel
Sampel rimpang temu kunci segar dimurnikan dari kontaminan, dicuci bersih, kemudian ditiriskan. Rimpang juga dibelah dan  ditimbang  berat  basahnya.  Setelah  itu  dikeringkan  dalam  lemari  pengering  sampai  kering  (ditunjukkan  dengan rimpang yang mudah patah), kemudian ditimbang kembali sebagai berat kering. Terakhir diblender dan ditentukan berat serbuk simplisianya. Di dalam kantong plastik berlabel, serbuk simplisia dimasukkan sebelum disimpan pada suhu ruang (Dalimunthe et al., 2022).

## 2.3 Pembuatan Ekstrak
Maserasi  adalah metode yang digunakan untuk menghasilkan ekstrak, dimana maserasi  adalah proses ekstraksi  secara perendaman  simplisia  dengan  pelarut  yang  sesuai.  Simplisia  dari  rimpang  temu  kunci  direndam  dengan  etanol  96% selama 5 hari, disaring residu diremaserasi dengan menggunakan pelarut etanol 96% selama 2 hari. Filtrat 1 dan 2 yang sudah dicampur dipekatkan hingga kental dengan menggunakan rotary evaporator (Sari et al., 2019) .

## 2.4. Penyiapan Hewan Percobaan
Penelitian ini menggunakan 24 ekor tikus putih jantan yang  sehat  dan memiliki berat  badan ± 200-240 g. Banyaknya hewan  uji  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  dihitung  berdasarkan  rumus  Frederer.  Sebelum  dilakukan  percobaan, hewan uji terlebih dahulu diaklimatisasi selama satu minggu (7 hari) dengan tetap mendapatkan pemberian makan pellet dan pemberian minum secukupnya (Kaban et al., 2020)

## 2.5. Pembuatan Suspensi Ekstrak Etanol Rimpang Temu Kunci (EERTK)
Pembuatan suspensi  EERTK dilakukan dengan cara sebagai  berikut: sebanyak  250 mg EERTK dimasukkan ke dalam lumpang  tetesi  dengan  sedikit  twen-20.  Lalu  ditambahkan  ke  dalamnya  suspensi  CMC-Na  0,5%  sedikit  demi  sedikit sambil digerus sampai homogen kemudian masukkan dalam labu tentukur berukuran 10 mL. Volume dicukupkan dengan

## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online)
DOI 10.47065/jharma.v4i2.3262
CMC-Na  0,5%  sampai  garis  tanda.  Prosedur  yang  sama  dilakukan  untuk  pembuatan  suspensi  EERTK  500  dan  750 mg/KgBB.

## 2.6   Pembuatan Suspensi N-acetyl-p-aminophenol (APAP)
Suspensi  APAP  dibuat  dengan  cara  800  mg  serbuk  murni  parasetamol  yang  telah  ditimbang  kemudian  disuspensikan CMC-Na  0,5%  sedikit  demi  sedikit,  kemudian  masukkan  dalam  labu  ukur  10  mL,  cukupkan  volume  CMC-Na  0,5% hingga 10 mL. Kemudian dihomogenkan (Senthil & Sripreethi, 2011).

## 2.7.  Desain Kelompok Uji
Sebanyak 24 ekor tikus putih jantan dibagi dalam 6 kelompok perlakuan, pada setiap kelompok terdiri dari 4 ekor tikus putih jantan.
Kelompok 1 : kontrol normal, tanpa perlakuan
Kelompok 2 : kontrol negative, diberikan suspensi CMC-Na 0,5%
Kelompok 3 : kontrol positif, diberikan suspensi setara asetilsistein 200 mg dosis manusia
Kelompok 4 : perlakuan uji 1 EERTK dosis 250 mg/kgBB
Kelompok 5 : perlakuan uji 2 EERTK dosis 500 mg/kgBB
Kelompok 6 : perlakuan uji 3 EERTK dosis 750 mg/kgBB
Setiap pemberian  perlakuan dilakukan selama 10 hari  berturut-turut sekali sehari, kemudian pada hari  ke-10 diinduksi secara peroral dengan APAP 800 mg/kgBB  pada 1 jam setelah pemberian suspense sediaan. Hewan uji tetap diberikan makanan dan minuman. Pada 16 jam setelah pemberian APAP di hari ke-11 tikus dikorbankan dengan cara dianastesi dengan kloroform lalu dikorbankan, kemudian dilakukan pembedahan dan pengumpulan darah dilakukan menggunakan jarum  suntik  langsung  dari  jantung  tikus,  darah  dimasukkan  ke  dalam  microtube,  serum  dipisahkan  dengan  cara sentrifugasi pada 1500 r/min selama 15 menit, organ hati juga diambil dan dimasukkan ke pot yang sudah berisi buffer formalin.

## 2.8 Pengukuran Parameter Biokimia Serum Terkait dengan Disfungsi Hepatik
Nilai ALT, AST  pada serum tikus ditentukan menggunakan microplate reader (Laboratorium Kesehatah Daerah Kota Medan) sesuai dengan protokol pabrikan.

## 2.9 Pemeriksaan Histopatologi
Pewarnaan hematoksilin dan eosin (H&E) dilakukan untuk mengevaluasi adanya kerusakkan pada jaringan hati, specimen jaringan difiksasi dalam larutan paraformaldehyde 4% selama minimal 24 jam, proses selanjutnya jaringan ditanam dalam blok paraffin. Blok kemudian dipotong setebal 4 µm, kemudian potongan tersebut dideparafinisasi dan diwarnai dengan hematoksilin dan eosin (H&E) untuk mengevaluasi morfologi.

## 2.10 Analisis Statistik
Analisis statistik menggunakan one way-ANOVA diikuti dengan analisis Turkey Post-Hoc, menggunakan program SPSS (Versi  25,  SPSS  Inc.,  Chicago,,  IL,  AS).  Nilai p  <  0.05 dianggap  sebagai  indikasi  perbedaan  yang  signifikan  secara statistik  antara  pengukuran  kedua  kelompok  yang  dibandingkan.  Semua  bacaan  dan  nilai  yang  dihitung  dilaporkan berdasarkan Mean ± SD.

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN

## 3.1 Ekstraksi
Ekstraksi melalui penggunaan etanol sebagai pelarut. Maserasi sampel seberat 500 gram, untuk menghitung persentase rendemen, cukup bandingkan jumlah total ekstrak yang dihasilkan dengan jumlah total simplisia yang terekstraksi dan hasilnya dikalikan dengan 100. Hasil ekstraksi disajikan pada Tabel 1
Tabel 1. Hasil ekstrasi
Simplisia Berat Simplisia Berat Ekstrak Rendemen Rimpang Temu Kunci 500 gram 52 gram 10,4%

## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online)
DOI 10.47065/jharma.v4i2.3262
3.2.   Hasil Pengujian Aktivitas Hepatoprotektif Ekstrak Etanol Rimpang Temu Kunci

## 3.2.1 Pengukuran Alanine Aminotransferase pada Serum Tikus
Alanine  aminotransferase (ALT)  adalah  suatu  enzim  yang  dapat  mengkatalis  alanine  dan  α-ketoglutarate  dan mengubahnya  menjadi  glutamate  dan  pyruvate  yang  berkontribusi  pada  metabolisme  nitrogen  selular  dan glukoneogenesis liver. Enzim ini juga dikenal dengan nama serum glutamic pyruvic transaminase (SGPT). Pengukuran kadar  ALT  pada  serum  darah  manusia  telah  terbukti  sebagai  indikator  untuk  mengevaluasi  fungsi  liver.  Adanya kerusakkan pada liver atau organ menyebabkan terjadinya peningkatan kadar ALT pada serum darah (Ghany et al., 2020). Pada penelitian ini untuk menganalisis adanya penurunan fungsi hati tikus putih jantan akibat diinduksi dengan APAP 800 mg/kg BB maka dilakukan juga pengujian terhadap enzim ALT. Hasil dari analisis one way-ANOVA diperoleh nilai signifikansi = 0.001 (p < 0.05) pada masing-masing kelompok perlakuan, yang berarti pemberian ekstrak etanol rimpang temu kunci dengan variasi dosis mampu memberikan perbedaan yang bermakna terhadap kadar enzim ALT pada tikus. Hasil rata-rata kadar ALT pada masing-masing kelompok tikus dapat dilihat pada Tabel 2
Tabel 2. Hasil pengukuran rata-rata kadar ALT pada serum darah tikus
Keterangan : a  = berbeda signifikan dengan kelompok kontrol negatif ( p < 0.05) b  = berbeda signifikan dengan kelompok kontrol normal dan berbeda signifikan dengan kontrol negatif ( p < 0.05) c  = berbeda signifikan dengan kelompok kontrol  normal ( p < 0.05)
Berdasarkan hasil analisis diperoleh rata-rata nilai kadar ALT pada kelompok kontrol normal adalah 264.5000 ± 11.73314 U/L. nilai tersebut merupakan nilai kadar standar ALT tikus dalam keadaan sehat (normal). Hasil uji statistik menunjukkan  bahwa  kadar  ALT  pada  kelompok  kontrol  normal  lebih  rendah  jika  dibandingkan  dengan  kelompok perlakuan lain yang dilakukan induksi dengan APAP 800 mg/kg BB. Kelompok kontrol  positif (asetilsistein 200 mg) memiliki rata-rata kadar ALT 293.7500 ± 36.37192 U/L dan kelompok kontrol negatif (APAP 800 mg/kg BB) memiliki rata-rata kadar ALT paling tinggi yaitu 527.5000 ± 39.26406 U/L.
Kelompok kontrol negatif menunjukkan rata-rata kadar ALT yang paling tinggi jika dibandingkan dengan semua kelompok. Ini disebabkan karena dosis APAP 800 mg/kg BB dapat menyebabkan kerusakkan hati yang ditandai dengan peningkatan kadar ALT pada serum darah hewan tikus. Akibatnya efek kerusakkan sel hati pada kelompok kontrol negatif jauh lebih besar (Lubis, Hasibuan, et al., n.d.)
Hasil analisis one way-ANOVA menunjukkan bahwa pemberian APAP dapat menginduksi  kerusakkan hati dan mengakibatkan  meningkatnya  kadar  ALT,  tingginya  kadar  ALT  dalam  serum  darah  dapat  mengindikasi  terjadinya kerusakkan sel pada hati. Terjadinya peningkatan aktivitas dari enzim ALT pada serum darah merupakan petunjuk sensitif kearah kerusakkan hati, karena kondisi kerusakkan hati yang sedang terjadi dapat mempengaruhi tingginya kadar ALT pada serum. Enzim ALT yang keluar dari sel hati kemudian akan masuk ke dalam sistem peredaran darah karena adanya perubahan permeabilitas membrane  (Jamialahmadi  et  al., 2021). Grafik  pengaruh kelompok perlakuan terhadap kadar ALT dapat dilihat pada Gambar 1.
Kelompok Rata-rata kadar AST (U/L) ± SD Kontrol Normal (P1) 264.5000 ± 11.73314 a APAP (P2) 527.5000 ± 39.26406 c Asetilsistein + APAP (P3) 293.7500 ± 36.37192 a EERTK 250 + APAP (P4) 355.0000 ± 43.39739 b EERTK 500 + APAP (P5) 282.5000 ± 35.93976 a EERTK 750 + APAP (P6) 300.7500 ± 14.45395 a

## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online) DOI 10.47065/jharma.v4i2.3262
Gambar 1. Grafik pengukuran nilai alanine aminotransferase
Berdasarkan  analisis  statistika  lanjutan  Turkey  Post-Hoc  dapat  diketahui  perbedaan  yang  lebih  spesifik  antara kelompok perlakuan, kelompok kontrol normal dengan kontrol negatif berbeda nyata dengan nilai signifikansi = 0.001 (p < 0.05), dan kelompok kontrol negatif jika dibandingkan dengan kelompok asetilsistein dan kelompok perlakuan EERTK pada dosis 250 mg/kg BB, 500 mg/kg BB, dan 750 mg/kg BB memberikan pengaruh yang signifikan pada penurunan kadar ALT jika dibandingkan terhadap kontrol negatif dengan nilai signifikansi masing-masing = 0.001 (p < 0.05).
Kelompok kontrol negatif menunjukkan rata-rata kadar ALT yang paling tinggi jika dibandingkan dengan semua kelompok. Ini disebabkan karena dosis APAP 800 mg/kg BB (Lucas et al., 2020)  dapat menyebabkan kerusakkan hati yang ditandai dengan peningkatan kadar ALT pada serum darah hewan tikus. Akibatnya efek kerusakkan sel hati pada kelompok kontrol negatif jauh lebih besar.
Pada kelompok kontrol normal jika dibandingkan dengan kelompok kontrol positif (asetilsistein 200 mg) diperoleh nilai signifikansi = 0.086 (p > 0.05), dan jika kelompok normal dibandingkan dengan kelompok perlakuan dengan dosis EERTK  dosis  500  dan  750  mg/kg  BB  dengan  nilai  signifikansi  masing-masing  =  0.967  dan  0.626  (p  >  0.05).  Pada kelompok dosis 250 mg/kg BB diperoleh nilai  signifikansi  = 0.011 (p < 0.05) menunjukkan ada perbedaan signifikan nilai kadar ALT jika dibandingkan dengan kontrol normal, namun jika dibandingkan dengan kontrol negatif diperoleh signifikansi  =  0.001  (p  <  0.05)  ini  menunjukkan  terdapat  perbedaan  yang  signifikan  pada  nilai  kadar  ALT  jika dibandingkan dengan kontrol negatif, dapat disimpulkan bahwa dosis EERTK 250 mg/kg BB dapat menurunkan kadar ALT pada serum darah tikus namun dengan nilai penurunan kadar ALT yang masih berbeda signifikan jika dibandingkan dengan kontrol normal. Sedangkan pada dosis EERTK 500 dan 750 mg/kg BB memiliki nilai signifikansi (p > 0.05) jika dibandingkan  dengan  kontrol  normal  ini  menerangkan  bahwa  tidak  terdapat  perbedaan  yang  signifikan,  sehingga  dari hasil analisis diketahui bahwa dosis asetilsistein 200 mg serta dosis EERTK 500 dan 750 mg/kg BB memiliki kemampuan untuk menurunkan kadar ALT pada serum darah tikus, yang hampir sama dengan nilai kadar ALT pada serum darah tikus pada kelompok normal.
Pemberian  ekstrak  etanol  rimpang  temu  kunci  selama  10  hari  sebelum  dilakukan  induksi  dengan  APAP memberikan pengaruh yang siginifikan terhadap penurunan kadar ALT pada kelompok EERTK 250 mg/kg BB (355.0000 ±  43.39739b  U/L),  EERTK  500  mg/kg  BB  (282.5000  ±  35.93976a  U/L),  dan  EERTK  750  mg/kg  BB  (300.7500  ± 14.45395a U/L) jika dibandingkan dengan kelompok kontrol negatif (APAP 800 mg/kg BB) yang memiliki kadar ALT paling tinggi. Hal ini menunjukkan bahwa kandungan dari flavonoid yang terkandung dalam rimpang temu kunci yang kemungkinan berperan dalam menghambat terjadinya peningkatan kadar ALT dan meningkatkan kapasitas antioksidan endogen di dalam tubuh sehingga pada akhirnya dapat menurunkan kadar ALT dalam serum darah tikus, walau belum mencapai nilai normal. Berdasarkan gambar grafik hasil statistik juga mengungkapkan bahwa dosis EERTK 250 mg/kg BB sudah dapat menurunkan kadar ALT, namun dosis EERTK yang paling baik dalam menurunkan kadar ALT adalah pada  dosis  500  mg/kg  BB.  sedangkan  pada  dosis  750  mg/kg  BB  penurunan  kadar  total  ALT  hampir  setara  dengan pemberian  dosis  EERTK  500  mg/kg  BB.  Penggunaan  asetilsistein  200  mg  sebagai  kontrol  positif  terbukti  dapat menurunkan kadar ALT dengan nilai yang hampir sama dengan dosis EERTK 500 dan 750 mg/kg BB, sedangkan jika asetilsistein dosis 200 mg dibandingkan dengan EERTK pada dosis 500 mg/kg BB maka diketahui bahwa EERTK dosis 500 mg/kg BB masih menghasilkan penurunan kadar ALT yang hampir sama.
ALT adalah enzim utama yang teragregasi dalam sitosol hepatosit. Enzim ini  dapat ditemukan di sel  – sel hati, otot, ginjal , jantung dan sebagian besar ditemukan di sitoplasma sel hati. Jumlah yang lebih terdapat pada pankreas, paru, limpa dan eritrosit. Pemeriksaan konsentrasi ALT dapat memberikan informasi yang lebih spesifik dan sensitif terhadap kerusakan  hepatoseluler  akut  dibandingkan  dengan  konsentrasi  AST  (Prasetyawan  et  al.,  2021).  ALT  terdiri  dari  496
a c a b a a 0,0000 100,0000 200,0000 300,0000 400,0000 500,0000 600,0000

## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online)
DOI 10.47065/jharma.v4i2.3262
asam amino, memiliki waktu paruh 47±10 jam, dan dikodekan oleh gen ALT, yang berada di lengan panjang kromosom. Secara fisik, enzim ALT mengkatalisis transfer gugus amino dari L-alanin ke α-ketoglutarat, dan produk yang dikonversi adalah L-glutamat dan piruvat di dalam hati, yang merupakan proses penting dari siklus asam trikarboksilat (TCA). Dalam proses ini, koenzim, piridoksal fosfat, diperlukan. ALT terutama teragregasi dalam sitosol hepatosit. Aktivitas ALT dalam sel hati kira-kira 3000 kali lebih tinggi dari aktivitas ALT serum. Ketika cedera hati terjadi, ALT dilepaskan dari sel hati yang terluka dan menyebabkan peningkatan yang signifikan dalam aktivitas ALT serum. ALT juga terdapat dalam otot, jaringan adiposa, usus, usus besar, prostat, dan otak. Namun, konsentrasi ALT dalam organ-organ ini jauh lebih rendah daripada hati (Satria et al., 2022)

## 3.2.2 Pengukuran Aspartate Aminotransferase pada Serum Tikus
Enzim aspartate aminotransferase (AST) atau disebut juga serum glutamic oxaloacetic transaminase (SGOT) ditemukan hampir  diseluruh  jaringan  tubuh  kecuali  pada  tulang.  AST  menentukan  pertukaran  kelompok  amino  yang  reversibel diantara glutamate dan aspartate. Pada organ seperti ginjal, pancreas, dan liver serta sel darah merah seperti; jaringan otot dan sel  jantung mengandung enzim tersebut. Kerusakkan pada sel  hati ataupun pada organ, jaringan serta sel  tersebut dapat menyebabkan tingginya kadar AST dalam serum darah  (Yadav et al., 2022). Pada sel – sel jantung, hati, paru – paru, limpa, ginjal, pankreas, otak dan otot rangka enzim AST ini dapat ditemukan, dengan tingkat tertinggi ditemukan di sel – sel jantung. Sehingga pemeriksaan konsentrasi AST memberikan hasil yang tidak spesifik terhadap kerusakan sel hati dibandingkan dengan ALT. Konsentrasi AST akan menjadi lebih tinggi jika terjadi nekrosis jaringan yang lebih hebat (Putri et al., 2021).
Data  hasil  uji  AST  terhadap  tikus  putih  jantan  yang  diinduksi  dengan  APAP  800  mg/kg  BB  dianalisis menggunakan one way-ANOVA . Hasil dari analisis one way-ANOVA diperoleh nilai signifikansi = 0.001 ( p < 0.05) pada masing-masing kelompok perlakuan, dari nilai yang diperoleh tersebut menunjukkan adanya perbedaan yang signifikan pada  nilai  kadar  AST  antara  kelompok  perlakuan.  Yang  berarti  pemberian  ekstrak  etanol  rimpang temu  kunci  variasi dosis dapat memberikan pengaruh yang bermakna terhadap penurunan kadar AST.
Hasil pengukuran rata-rata kadar AST pada serum darah tikus dapat dilihat apda Tabel 3 dibawah ini.
Tabel 3. Hasil Pengukuran Rata-Rata Kadar AST pada Serum Darah Tikus
Keterangan : a  = berbeda signifikan dengan kelompok kontrol negatif ( p < 0.05) b = berbeda signifikan dengan kelompok kontrol normal dan berbeda signifikan dengan kontrol negatif ( p < 0.05) c  = berbeda signifikan dengan kelompok kontrol  normal ( p < 0.05)
Berdasarkan hasil analisis diperoleh rata-rata nilai kadar AST pada kelompok kontrol normal adalah 327.7500 ± 37.85389 U/L. nilai tersebut merupakan nilai kadar standar AST tikus dalam keadaan sehat (normal). Hasil uji statistik menunjukkan  bahwa  kadar  AST  pada  kelompok  kontrol  normal  lebih  rendah  jika  dibandingkan  dengan  kelompok perlakuan lain yang dilakukan induksi dengan APAP 800 mg/kg BB. Kelompok kontrol  positif (asetilsistein 200 mg) memiliki rata-rata kadar AST 382.7500 ± 39.89465 U/L dan kelompok kontrol negatif (APAP 800 mg/kg BB) memiliki rata-rata kadar AST paling tinggi yaitu 524.7500 ± 18.02544 U/L.
Kelompok kontrol negatif menunjukkan rata-rata kadar AST yang paling tinggi jika dibandingkan dengan semua kelompok. Ini disebabkan karena dosis APAP 800 mg/kg BB (Lubis et al., 2023), dapat menyebabkan kerusakkan hati yang ditandai dengan peningkatan kadar AST pada serum darah hewan tikus. Akibatnya efek kerusakkan sel hati pada kelompok kontrol negatif jauh lebih besar. Terjadinya peningkatan aktivitas dari enzim AST pada serum darah merupakan salah  satu  petunjuk  kearah  terjadinya  kerusakkan  hati,  karena  kondisi  kerusakkan  hati  yang  sedang  terjadi  dapat mempengaruhi tingginya kadar AST pada serum. Enzim AST yang keluar dari sel hati kemudian akan masuk ke dalam sistem  peredaran  darah  karena  adanya  perubahan  permeabilitas  membran  (Chuang  et  al.,  2018).  Grafik  pengaruh kelompok perlakuan terhadap kadar AST dapat dilihat pada Gambar 2.
Kelompok Rata-rata kadar AST (U/L) ± SD Kontrol Normal (P1) 327.7500 ± 37.85389a APAP (P2) 524.7500 ± 18.02544c Asetilsistein + APAP (P3) 382.7500 ± 39.89465a EERTK 250 + APAP (P4) 401.2500 ± 13.30100b EERTK 500 + APAP (P5) 341.2500 ± 25.28998a EERTK 750 + APAP (P6) 407.0000 ± 12.88410b

## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online) DOI 10.47065/jharma.v4i2.3262
Gambar 2. Grafik pengukuran nilai aspartate aminotransferase
Hasil analisis statistika lanjutan Turkey Post-Hoc dapat diketahui perbedaan yang lebih spesifik antara kelompok perlakuan, kelompok kontrol normal dengan kontrol negatif berbeda nyata dengan nilai signifikansi = 0.001 (p < 0.05), dan kelompok kontrol negatif jika dibandingkan dengan kelompok asetilsistein dan kelompok perlakuan EERTK pada dosis 250 mg/kg BB, 500 mg/kg BB, dan 750 mg/kg BB memberikan perbedaan yang signifikan pada penurunan kadar AST jika dibandingkan terhadap kontrol negatif dengan nilai signifikansi masing-masing = 0.001 (p < 0.05).
Kelompok kontrol negatif menunjukkan rata-rata kadar AST yang paling tinggi jika dibandingkan dengan semua kelompok. Hal ini sejalan dengan dua pengujian biomarker hati yang lain yaitu terjadi peningkatan total  bilirubin dan enzim ALT pada serum darah tikus. Ini disebabkan karena dosis APAP 800 mg/kg BB (Shanmugam et al., 2013), dapat menyebabkan  kerusakkan  hati  yang  ditandai  dengan  peningkatan  kadar  dari  biomarker  kerusakkan  hati  seperti  total bilirubin,   ALT,  dan  AST  pada  serum  darah  hewan  tikus.  Akibatnya  efek  kerusakkan  sel  hati  pada  kelompok  kontrol negatif menjadi jauh lebih besar.
Kelompok  kontrol  normal  jika  dibandingkan  dengan  kelompok  kontrol  positif  (asetilsistein  200  mg)  diperoleh nilai signifikansi = 0.086 (p > 0.05), dan jika kelompok normal dibandingkan dengan kelompok perlakuan dengan dosis EERTK dosis 500 mg/kg BB nilai  signifikansi  yang diperoleh = 0.978 (p > 0.05). Pada kelompok dosis 250 dan 750 mg/kg BB diperoleh nilai signifikansi masing-masing = 0.012 dan 0.006 (p < 0.05) menunjukkan ada perbedaan yang signifikan terhadap nilai kadar AST jika dibandingkan dengan kontrol normal, yaitu kadar AST pada serum darah tikus masih sangat tinggi jika dibandingkan nilai kadar AST pada kontrol normal. Namun jika kelompok dosis EERTK 250 dan  750  mg/kg  BB  dibandingkan  dengan  kontrol negatif  diperoleh  signifikansi  masing-masing  =  0.001  (p  <  0.05)  ini menunjukkan terdapat perbedaan yang signifikan, yaitu terjadi penurunan kadar AST yang signifikan jika dibandingkan dengan kontrol negatif, dapat disimpulkan bahwa dosis EERTK 250 dan 750 mg/kg BB dapat menurunkan kadar AST pada  serum  darah  tikus  namun  dengan  nilai  penurunan  kadar  AST  yang  masih  berbeda  signifikan  jika  dibandingkan dengan kadar AST pada kontrol normal. Sedangkan pada dosis EERTK 500 mg/kg BB memiliki nilai signifikansi (p > 0.05)  jika  dibandingkan  dengan  kontrol  normal.  Ini  menerangkan  bahwa  tidak  terdapat  perbedaan  yang  signifikan, sehingga  dari  hasil  analisis  diketahui  bahwa  dosis  asetilsistein  200  mg  serta  dosis  EERTK  500  mg/kg  BB  memiliki kemampuan  untuk  menurunkan  kadar  AST  pada serum  darah  tikus,  yang  hampir  sama  dengan  nilai  kadar  AST  pada serum darah tikus pada kelompok normal.
Berdasarkan  analisis  statistik  pemberian  praterapi  EERTK  memberikan  pengaruh  yang  signifikan  terhadap penurunan kadar enzim AST pada serum darah tikus kelompok EERTK 250 mg/kg BB (401.2500 ± 13.30100b U/L), EERTK  500  mg/kg  BB (341.2500  ±  25.28998a U/L),  dan  750  mg/kg  BB (407.0000  ±  12.88410b  U/L)  dibandingkan dengan kelompok kontrol negatif (APAP 800 mg/kg BB) yang memiliki kadar enzim AST paling tinggi. Hal ini dapat menunjukkan bahwa kandungan dari flavonoid yang terkandung dalam rimpang temu kunci yang kemungkinan berperan dalam menghambat terjadinya peningkatan kadar AST dan meningkatkan kapasitas antioksidan endogen di dalam tubuh sehingga pada akhirnya dapat  menurunkan kadar  AST dalam serum  darah tikus, walau belum mencapai  nilai  normal. Berdasarkan gambar grafik hasil statistik juga mengungkapkan bahwa dosis EERTK 250 dan 750 mg/kg BB sudah dapat menurunkan  kadar  AST  jika  dibandingkan  dengan  nilai  kadar  AST  pada  kontrol  negatif.  Namun  dosis  EERTK  yang paling baik dalam menurunkan kadar AST adalah pada dosis 500 mg/kg BB. Penggunaan asetilsistein 200 mg sebagai kontrol positif terbukti dapat menurunkan kadar AST dengan nilai yang hampir sama dengan dosis EERTK 500 mg/kg BB.
a c a b a b 0 100 200 300 400 500 600

## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online) DOI 10.47065/jharma.v4i2.3262
Aspartate  aminotransaminase  (AST),  juga  dikenal  sebagai  serum  glutamat  oksaloasetat  transaminase  (SGOT), adalah  enzim  fosfat  piridoksal  (PLP).  Peningkatan  yang  signifikan  dalam  serum  (10-100  kali  normal)  dari  AST menunjukkan  kerusakan  hati  yang  parah  (hepatitis  virus  atau  nekrosis  hati  toksik)  atau  adanya  kerusakkan  pada  sel jantung (Milo et al., 2020)
Tikus  yang  diberikan  ekstrak  kental  etanol  rimpang  temu  kunci  selama  10  hari  sebelum  diinduksi  dengan  APAP, peningkatan  kadar  total  bilirubin,  enzim  ALT  dan  enzim  AST  dapat  dicegah.  Kecendrungan  efek dalam  memulihkan keseimbangan total bilirubin, enzim ALT dan enzim AST pada serum darah tikus dapat dikaitkan dengan kapasitas ekstrak etanol  rimpang  temu  kunci  dalam  mengatur  status  antioksidan  hati  atau  untuk  berpartisipasi  langsung  dalam  proses penangkal radikal bebas.
Pemberian APAP dosis 800 mg/kg BB dapat menyebabkan terjadinya kerusakkan hati pada tikus (Simorangkir et al., 2019).  Hepatotoksisitas APAP telah diketahui  disebabkan oleh pembentukkan metabolit  NAPQI toksik. Metabolit APAP  reaktif  N-acetyl-p-benzoquinone  imine  (NAPQI)  membentuk  ikatan  dengan  protein  mitokondria,  khususnya komponen rantai transpor elektron seperti ATP sintase, yang mengakibatkan malfungsi mitokondria (Qiu et al., 1998). Selanjutnya, aktivitas kompleks I (Dalimunthe et al., 2017), yang telah diidentifikasi sebagai sumber radikal bebas pada mitokondria dalam berbagai pengaturan menjadi lebih tinggi setelah overdosis APAP, dan ini berkaitan dengan tingkat keparahan kerusakan hati (Lubis et al., 2022).
Senyawa  polifenol  seperti  flavonoid  dapat  digunakan  dalam  mengobati  banyak  penyakit  termasuk  sirosis  hati. Flavonoid  (kaemferol  dan  quercetin)  terdapat  dalam  tanaman  rimpang  temu  kunci  dan  oleh  karena  itu  kemungkinan bertanggung jawab atas aktivitas stabilisasi membrane yang dapat ditunjukkan melalui penurunan kadar serum ALT dan AST yang diamati. Tingkat bilirubin yang lebih rendah menunjukkan adanya membran plasma eritrosit yang lebih stabil. Hal  ini  menyiratkan  bahwa  ekstrak  etanol  rimpang  temu  kunci  menstabilkan  membran  hepatosit  dan  karenanya mengganggu pelepasan enzim hati ke dalam darah (Harahap et al., 2018)
Berikut ini adalah mekanisme kerja flavonoid sebagai antioksidan: flavonoid sebagai antioksidan bekerja secara langsung, yaitu dengan menyumbangkan ion  hidrogen, yang dapat  digunakan untuk  melawan toksisitas radikal bebas. Selain  itu  flavonoid  berperan  sebagai  antioksidan  secara  tidak  langsung,  yaitu  dengan  meningkatkan  ekspresi  gen antioksidan endogen melalui berbagai jalur. Salah satu cara untuk meningkatkan ekspresi gen antioksidan adalah aktivasi nuclear factor erythroid 2 relates factor 2 (Nrf2), yang menghasilkan peningkatan gen yang terlibat dalam produksi enzim antioksidan endogen, seperti SOD (superoksida dismutase) dan GSH (gluthatione) sehingga mencegah terjadinya stress oksidatif (Shinta, 2015), yang kemudian dapat mencegah terjadinya kerusakkan pada sel hati (Lubis, Kaban, et al., n.d.).

## 3.2.3 Evaluasi Histopatologi
Stress  oksidatif  adalah  peristiwa  patogenik  utama  yang  terjadi  pada  beberapa  gangguan  hati,  seperti  gangguan  pada metabolism  sel  untuk  berpoliferasi, dan menjadi  penyebab utama  kerusakkan hati pada iskemia. jumlah radikal bebas yang tinggi dalam tubuh menyerang biomakromolekul yang merupakan komponen dinding sel. Akibatnya, fungsi dinding sel  menurun  sehingga  menimbulkan  kerusakkan  sel  berupa  degenerasi  (Rosidah  et  al.,  2021)  seperti  terlihat  pada kelompok  yang  hanya  diberikan  induksi  APAP  800  mg/kg  BB.  Gambar  3  menunjukkan  hasil  histopatologi  hati  tikus dengan pewarnaan hematoxylin eosin.
Jika diamati secara mikroskopis, degenerasi hidropik ditandai dengan adanya vakuola-vakuola di dalam sitoplasma sel sehingga terlihat sel hati mengalami pembengkakan dan berwarna lebih pucat. Degenerasi hidropik biasa terjadi karena
P1 P2 P3 P4 P5
P6

## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online) DOI 10.47065/jharma.v4i2.3262
terganggunya  pompa  pompa  natrium  kalium  dalam  pengaturan  keluar  masuknya  ion.  Degenerasi  hidropik  termasuk kerusakkan yang ringan karena dapat sembuh dan sel hati menjadi normal kembali ( reversible ) (Satria et al., 2017). Hasil evaluasi histopatologi dengan pewarnaan hematoxylin-eosin menunjukkan bahwa pemberian EERTK dosis 500 mg/kg BB dapat memperbaiki histopatologi jaringan hati tikus yang setara dengan pemberian asetilsistein 200 mg dosis manusia yang dikonversikan ke tikus.

## 4. KESIMPULAN
Kerusakan hati yang disebabkan induksi oleh parasetamol pada tikus dapat dihambat dengan menggunakan ekstrak etanol rimpang temu kunci (EERTK) dosis  250, 500 dan 750 mg/kg BB. secara khusus ekstrak ini memiliki  kekuatan untuk melindungi  hati  dengan  menghambat  peningkatan  enzim  ALT  dan  AST  pada  serum  darah  tikus,  selain  itu  pemberian ekstrak etanol rimpang temu kunci dapat  memperbaiki morfologi hati berdasarkan hasil evaluasi  histopatologi dengan menggunakan  pewarnaan  H&E.  efek  hepatoprotektifnya  sebanding  dengan  asetilsistein  (200  mg  dosis  manusia  yang dikonversikan  ke  hewan  tikus)  ketika  dosis  ekstrak  etanol  yang  diberikan  500  mg/kg  BB.  kemampuan  ekstrak  etanol rimpang temu kunci untuk menghambat terjadinya kerusakkan hati dari morfologi, struktur, dan fungsi terhadap paparan obat-obatan yang dapat menginduksi kerusakkan hati sangat menggembirakan dan membutuhkan penelitian lebih lanjut. Signifikansi potensi farmakologisnya dalam pengobatan sirosis hati yang berhasil dapat dieksplorasi dengan memetakan jalur molekuler aksinya di masa depan.

## DAFTAR PUSTAKA
Akmalia, R. A., Hajrah, H., & Rijai, L. (2016). Aktivitas Antiinflamasi Ekstrak Rimpang Temu Kunci (Boesenbergia pandurata) Secara In-Vitro. Proceeding of Mulawarman Pharmaceuticals Conferences , 4 , 289–294.
Chuang, L.-T., Tsai, T.-H., Lien, T.-J., Huang, W.-C., Liu, J.-J., Chang, H., Chang, M.-L., & Tsai, P.-J. (2018). Ethanolic extract of origanum  vulgare  suppresses  propionibacterium  acnes-induced  inflammatory  responses  in  human  monocyte  and  mouse  ear edema models. Molecules , 23 (8), 1987.
DALIMUNTHE, A., HASIBUAN, P. A. Z., & SATRIA, D. (2017). Cell cycle arrest activity of litsea cubeba lour: Heartwood and fruit extracts against T47D breast cancer cells. Asian Journal of Pharmaceutical and Clinical Research , 10 (11).
Dalimunthe, A., Pertiwi, D., Muhmmad, M., Kaban, V. E., Nasri, N., & Satria, D. (2022). The effect of extraction methods towards antioxidant activity of ethanol extract of Picria fel-terrae Lour. Herbs. IOP Conference Series: Earth and Environmental Science , 1115 (1), 012040.
Fransiska, M., & Rahmadani, M. (2017). Risk Factors for Liver Cirrhosis in the Islamic Hospital of Ibn Sina Bukittinggi Yarsi West Sumatra in 2016. Jurnal Kesehatan , 8 (2), 117–126.
Ghany,  M.  G.,  Feld,  J.  J.,  Chang,  K.-M.,  Chan,  H.  L.,  Lok,  A.  S.,  Visvanathan,  K.,  &  Janssen,  H.  L.  (2020).  Serum  alanine aminotransferase flares in chronic hepatitis B infection: The good and the bad. The Lancet Gastroenterology & Hepatology , 5 (4), 406–417.
Hanafiah, O. A., Hanafiah, D. S., Dohude, G. A., Satria, D., Livita, L., Moudy, N. S., & Rahma, R. (2021). Effects of 3% binahong (Anredera  cordifolia)  leaf  extract  gel  on  alveolar  bone  healing  in  post-extraction  tooth  socket  wound  in  Wistar  rats  (Rattus norvegicus). F1000Research , 10 .
Harahap, U., Hasibuan, P. A. Z., Sitorus, P., & Satria, S. (2018). Cytotoxicity Activity of Picria fel-terrae Lour. Herbs againt 4T1 and MCF-7 Breast Cancer Cells. Asian J Pharm Clin Res , 11 (1), 194–195.
Jamialahmadi, O., Mancina, R. M., Ciociola, E., Tavaglione, F., Luukkonen, P. K., Baselli, G., Malvestiti, F., Thuillier, D., Raverdy, V., & Männistö, V. (2021). Exome-wide association study on alanine aminotransferase identifies sequence variants in the GPAM and APOE associated with fatty liver disease. Gastroenterology , 160 (5), 1634-1646. e7.
Kaban,  V.  E.,  Aritonang,  J.  O.,  Hasibuan,  Y.  C.,  &  Meliala,  D.  I.  P.  (2020).  EFEKTIVITAS  PENYEMBUHAN  LUKA  SAYAT MENGGUNAKAN  SALEP  EKSTRAK  ETANOL  DAUN  SENGGANI  (Melastoma  malabathricum  L.)  PADA  KELINCI. Jurnal Penelitian Farmasi & Herbal , 2 (2), 8–14.
Lubis, M. F., Hasibuan, P. A. Z., Kaban, V. E., & Astyka, R. (n.d.). PHYTOCHEMICALS ANALYSIS AND CYTOTOXIC ACTIVITY OF Lansium domesticum Corr EXTRACT-CISPLATIN COMBINATION AGAINST PANC-1 CELL LINE . Lubis, M. F., Hasibuan, P. A. Z., Syahputra, H., Keliat, J. M., Kaban, V. E., & Astyka, R. (2023). Duku (Lansium domesticum) Leaves Extract Induces Cell Cycle Arrest and Apoptosis of HepG2 Cells via PI3K/Akt Pathways. Trends in Sciences , 20 (2), 6437–6437. Lubis, M. F., Kaban, V. E., Aritonang, J. O., Satria, D., Mulina, A. A., & Febriani, H. (n.d.). ACUTE TOXICITY AND ANTIFUNGAL ACTIVITY OF THE OINTMENT Murraya koenigii ETHANOL EXTRACT . Lubis,  M.  F.,  Syahputra,  H.,  Illian,  D.  N.,  &  Kaban,  V.  E.  (2022). Antioxidant  activity  and  nephroprotective  effect  of  Lansium parasiticum leaves in doxorubicin-induced rats .
Lucas, K. J., Lopez, P., Lawitz, E., Sheikh, A., Aizenberg, D., Hsia, S., Bee, G. B., Vierling, J., Frias, J., & White, J. (2020). Tropifexor, a highly potent FXR agonist, produces robust and dose-dependent reductions in hepatic fat and serum alanine aminotransferase in patients with fibrotic NASH after 12 weeks of therapy: FLIGHT-FXR Part C interim results. Digestive and Liver Disease , 52 , e38.
Milo,  L.  M.  A.  O.,  Widi,  A.  Y.,  &  Tangkonda,  E.  (2020).  GAMBARAN  HISTOPATOLOGI  SINUS  INFRAORBITALIS  DAN TRAKEA AYAM YANG MENUNJUKKAN GEJALA SNOT PADA PETERNAKAN AYAM DI KABUPATEN KUPANG. Jurnal Veteriner Nusantara , 3 (2), 145–155.
Ndaong, N. A., Wijayanti, A. D., & Widyarini, S. (2014). Efek Pemaparan Deltamethrin pada Broiler Terhadap Aktivitas Enzim Alanin Aminotransferase, Aspartat Aminotransferase dan Gambaran Histopatologi Hepar. Jurnal Kajian Veteriner , 2 (1), 79–87.

## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online)
DOI 10.47065/jharma.v4i2.3262
Prasetyawan, P. A., Suarsana, I. N., & Kendran, A. A. S. (2021). Kadar Alanin Aminotransferase, Aspartat Ami notransferase dan Gambaran  Histologi  Hati  Tikus  Putih  yang  diberikan  Ekstrak  Kulit  Pisang  Kepok  dan  Latihan  Intensif. Buletin  Veteriner Udayana Volume , 13 (1), 93–98.
Putri,  W.  C.  W.,  Yuliawati,  &  Rahman,  H.  (2021).  Uji  Aktivitas  Hepatoprotektor  Ekstrak  Etanol  Daun  Rambutan  (Nephelium lappaceum L.) pada Mencit Putih Jantan yang Diinduksi Parasetamol. Pharmacon: Jurnal Farmasi Indonesia , 18 (2), 148–154.
Rosidah,  Y.,  Widjaja,  S.  S.,  Auliafendri,  N.,  Lubis,  M.  F.,  Muhammad,  M.,  &  Satria,  D.  (2021).  Phytochemicals  analysis  and immunomodulatory activity of saurauia vulcani korth. Leaves extracts towards raw 264.7 cell. Medicine , 14 (2), 1378–1383. Sari, H., Kaban, V. E., Situmorang, F. R., & Fahdi, F. (2019). UJI EFEKTIVITAS ANTIDIABETES KOMBINASI EKSTRAK DAUN MENIRAN  (Phyllanthus  niruri  L.)  Dan  KELOPAK  BUNGA  ROSELLA  (Hibiscus  sabdariffa  L.)  PADA  TIKUS  JANTAN PUTIH. Jurnal Penelitian Farmasi & Herbal , 2 (1), 24–28.
Satria, D., Silalahi, J., Haro, G., Ilyas, S., & Hsb, P. A. Z. (2017). Antioxidant and antiproliferative activities of an ethylacetate fraction of Picria fel-terrae Lour. Herbs. Asian Pacific Journal of Cancer Prevention: APJCP , 18 (2), 399.
Satria, D., Waruwu, S. B., Yuandani, Y., Purnomo, H., & Harahap, U. (2022). The effect of 1.3 bis (p-Hydroxyphenyl) urea compound on IL-6, IL-1β, TNF-α and COX-2 protein expression on λ-Carrageenan-induced rats. Pharmacia , 69 (4), 927–934.
Senthil, V., & Sripreethi, D. (2011). Formulation and evaluation of paracetamol suspension from Trigonella foenum graecum mucilage.
Journal of Advanced Pharmacy Education & Research , 1 (5), 225–233.
Simorangkir, D., Masfria, M., Harahap, U., & Satria, D. (2019). Activity anticancer n-hexane fraction of Cyperus rotundus L. Rhizome to breast cancer MCF-7 cell line. Open Access Macedonian Journal of Medical Sciences , 7 (22), 3904.
Sujana,  D.,  Saptarini,  N.  M.,  Sumiwi,  S.  A.,  &  Levita,  J.  (2022).  KADAR  FENOLIK  TOTAL  EKSTRAK  TEMUKUNCI (Boesenbergia  rotunda  L)  ASAL  LEMBANG  JAWA  BARAT  DENGAN  METODE  FOLIN-CIOCALTEU:  TOTAL PHENOLIC CONTENT OF TEMUKUNCI (Boesenbergia rotunda L) EXTRACT ORIGIN IN WEST JAVA USING FOLIN- CIOCALTEU METHOD. Medical Sains: Jurnal Ilmiah Kefarmasian , 7 (3), 695–700. Teja, P. T. H. S., Arjana, A. A. G., Setiasih, N. L. E., & Merdana, I. M. (n.d.). Dampak Minyak Rajas yang Diberikan Secara Oral Terhadap Histopatologi Hati dan Aktivitas Aminotransferase Ayam Kampung Jantan . Widjaja, F. F., & Karjadi, T. (2011). Pencegahan Perdarahan Berulang pada Pasien Sirosis Hati. Artikel Pengembangan Pendidikan Keprofesian Berkelanjutan , 418 .
Wiranatha, I. G., Setyawati, I., & Wiratmini, N. I. (2019). Histopatologi serta Aktivitas Hati Kelinci Lokal (Lepus sp.) yang Diberi Ransum Tepung Daun Kaliandra (Calliandra calothyrsus Meissn.) dan Kulit Nanas (Ananas comosus L.). Metamorfosa: Journal of Biological Sciences , 6 (2), 183–190.
Yadav, S., Jangra, R., Sharma, B. R., & Sharma, M. (2022). Current advancement in biosensing techniques for determination of alanine aminotransferase and aspartate aminotransferase- a mini review. Process Biochemistry , 114 , 71–76.