## PERBANDINGAN EKSPRESI RESEPTOR ET B PADA TIKUS WISTAR OBES DAN NON OBES HAMIL
Evi Hudriyah Hukom
Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Papua
Alamat korespondensi : (evihudriyahhukom@gmail.com/082194707697)

## ABSTRAK
Pada ibu hamil, obesitas dapat menyebabkan terjadinya peningkatan tekanan darah hingga 2 kalilipat. Tujuan dari studi ini adalah membandingkan ekspresi reseptor ET B antara tikus wistar hamil obes  dan  hamil  non  obes.  Penelitian  ini  dilaksanakan  di  Laboratorium  Entomologi  Fakultas Kedokteran Universitas Hasanuddin Makassar. Penelitian ini adalah desain kontrol pasca uji. Sampel terdiri atas 11 tikus wistar yang dibagi menjadi 2 kelompok, yaitu 5 sampel dalam kelompok obes dan 6 sampel dalam kelompok nonobes. Data dianalisis dengan menggunakan uji-T tidak berpasangan. Hasil  penelitian  menunjukkan  ekspresi    Reseptor  ET B tidak  menunjukkan  perbedaan  bermakna  (p= 0.067)  pada  kelompok  obes  dengan  kelompok  nonobes. Walaupun  begitu  ekspresi  ET B pada  tikus wistar  obes  hamil  lebih  rendah  (0.87  pg/ml)  dibandingkan  pada  tikus  wistar  nonobes  hamil  (1.52 pg/ml).  Kesimpulan  penelitian ini  yaitu tidak  terdapat perbedaan  yang  bermakna  antara  tikus  wistar hamil obes dengan hamil non obes.

## Kata Kunci: Disfungsi Endotel, Hamil, Reseptor Endotelin-B, Obes

## PENDAHULUAN
Obesitas  terjadi  pada  dewasa  maupun anak-anak  dan  merupakan  kejadian  yang mendunia  (Jiang  et  al.,  2014).  Kejadian obesitas  pada  ibu  hamil  telah  menimbulkan kecemasan  kurang  lebih  10  tahun  terakhir (Teo  et  al.,  2016).  Obesitas  adalah penumpukan  lemak  yang  tidak  normal  dan dapat mengganggu kesehatan dimana ditandai  dengan  Indeks  Massa  Tubuh  yang lebih  dari  30  kg/m2  (WHO,  2016).  Kejadian obesitas pada kehamilan dapat menyebabkan peningkatan  tekanan  darah  dua  hingga  tiga kali  lipat  (Masra,  2016).  Kejadian  hipertensi pada  ibu  hamil  atau  yang  merupakan  tanda terjadinya  preklampsia  adalah  salah  satu penyebab kematian di dunia (Rhoberts et al., 2013).
Penelitian oleh Dumais (2016), didapatkan bahwa sebagian besar responden obesitas  I  mengalami  pre-eklampsi  (66,7%) dan  sebagian  kecil  pasien  obesitas  II  tanpa mengalami  pre-eklampsia  yaitu  sebanyak  14 responden  (33,3%).  Hasilnya  menunjukkan bahwa wanita hamil dengan obesitas memiliki risiko  tiga  kali  lebih  besar  untuk  mengalami preeklampsia  dibandingkan  Studi  tentang obesitas  menunjukkan  bahwa  seseorang yang obesitas akan mengalami inflamasi pada dinding vaskuler (Matthew et al., 2016). Studi sebelumnya juga menunjukkan bahwa Adanya  peningkatan  metabolisme  lipid  pada obesitas juga dapat menyebabkan peningkatan produksi reactive oxygen species (ROS) baik di peredaran darah maupun di sel
adiposa (Furukawa et al., 2004). Hal ini berarti bahwa  obesitas  dapat  menyebabkan  stress oksidatif  (Bautista  et  al.,  2011).  Yang berakibat terjadi penurunan enzim aintioksidan  di  dalam  peredaran  darah.
(Lilyasari, 2007). Menurut Oparil
dalam jurnal Widiyatmoko  (2010),  keadaan  hipertensi menunjukkan  adanya  gangguan  fungsi  yang menyebabkan  ketidaknormalan  pada  struktur dan  fungsi  dari  vaskuler  salah  satunya  yaitu kerusakan pada fungsi endotel. Penelitian lain oleh  Stern  dan  rekannya  dalam  hipertensi dengan obesitas juga mengungkapkan bahwa obesitas menyebabkan gangguan pada fungsi endotel  dan  hipertensi  yang  mana  terjadi karena stress oksidatif merangsang inaktivasi Nitric oxide (Lilyasari, 2007).
Pada  ibu  hamil  terjadi  peningkatan konsentrasi  endotelin-1,  apabila  disertai dengan  obesitas  akan  terjadi  gangguan  pada jaringan lemak dan menyebabkan peradangan serta  gangguan  pada  pengaturan  endokrin, hal ini mampu merusak homeostasis pembuluh darah dan mengakibatkan gangguan  pada  fungsi  endotel  yang  memicu berkurangnya  bioavailabilitas  nitrat  okside (NO), akhirnya terjadi lebih banyak pelepasan endotelin-1  (Lantorno  et  al.,  2014;  Campia  et al.,  2014).  Endotelin-1  dapat  berikatan  dan mengaktivasi  reseptor  ET A dan  ET B yang akhirnya memicu terjadinya vasokontriksi atau vasodilatasi  pembuluh  darah  serta  proliferase sel pembuluh darah (Thorin & Clozel, 2010)
Jumlah  reseptor  ET B didalam  vaskuler dapat mempengaruhi tekanan darah, reseptor ini akan aktif bila berikatan dengan endotelin-1 yang  selanjutnya  akan  mengaktifkan  jalur produksi  NO  yang  berperan  pada  pelebaran pembuluh  darah  (Luscher  &  Matthias,  2000). Pelepasan  Nitric  Oxide  dipicu  oleh  reseptor ET B .  NO  yang  dilepaskan  dan  berdifusi kedalam sel otot polos pada pembuluh darah. NO  kemudian  mengikat  enzim  guanylate cyclase  (GC)  yang  pada  akhirnya  memicu terjadinya relaksasi pembuluh darah, relaksasi ini menyebabkan terjadinya pelebaran pembuluh darah (Archer et al., 2010).
Penelitian  mengenai  ekspresi  reseptor ET B pada  obesitas  ataupun  pada  masa kehamilan  masih  kurang  atau  bahkan  belum ada.  Melihat  studi  menunjukkan  bahwa  terjadi peningkatan  ekspresi  reseptor  ET A pada obesitas  maka  diduga  ekspresi  reseptor  ET B cenderung  menurun.  Namun  hal  ini  masih harus dipastikan.
Berdasarkan  dari  uraian  diatas  maka peneliti  bermaksud  melihat  ekspresi  reseptor ET B pada  tikus  wistar  obes  hamil  dan  non obes  hamil.  Dengan  tujuan  untuk  mengetahui perbedaan  ekspresi  reseptor  ET B antara  tikus wistar obes hamil dan non obes hamil.

## BAHAN DAN METODE
Lokasi, populasi, dan sampel Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Entomologi Fakultas Kedokteran Universitas Hasanuddin Penelitian
ini merupakan  penelitian  eksperimental  dengan desain penelitian post test only control design. Populasi dalam penelitian ini yaitu semua tikus wistar betina dewasa obes dan non obes yang berusia  produktif  dan  karakteristik  fisik  sehat, yang  diperoleh  dari  Laboratorium  Entomologi Fakultas  Kedokteran  Universitas  Hasanuddin Makassar.  Sampel  penelitian  dipilih  sesuai kriteria inklusi,  yaitu  tikus  wistar  berusia  >120 hari dan belum pernah hamil, tikus wistar obes dengan  nilai  indeks  obesitas  Lee  >0.3  dan mengalami  kehamilan,  tikus  wistar  non  obes dengan  nilai  indeks  obesitas  Lee  <0.3  dan mengalami  kehamilan,  tidak  ada  kelainan anatomis, dan bergerak aktif.
1.  Kriteria inklusi
a.  Tikus  wistar  berusia  >120  hari  dan belum pernah hamil sebelumnya
b.  Tikus  wistar  obes  dengan  nilai  indeks obesitas  Lee  >0.3  dan  mengalami kehamilan
c.  Tikus  wistar  non  obes  dengan  nilai indeks obesitas Lee <0.3 dan mengalami kehamilan
d.  Tidak ada kelainan anatomis
2.  Kriteria esklusi
a.  Tikus yang sakit
b.  Tikus cacat

## Pengumpulan Data
Tikus  wistar  yang  menjadi  sampel  adalah tikus  >120  hari.  Tikus  kelompok  obes  diberi diet  tinggi  karbohidrat  dan  tinggi  lemak  agar menjadi  obes  sementara  tikus  kelompok kontrol (non obes) diberi diet standar. Setelah mengalami obes, tikus kemudian di kawinkan agar  terjadi  kehamilan.  Kemudian  tikus  pada kelompok  obes  dan  kontrol  masing-masing dilakukan  pemeriksaan  reseptor  ET B pada bagian ventrikel jantung dan uterus. Pemeriksaan ekspresi reseptor ET B dilakukan dengan menggunakan ELISA Kit di laboratorium Entomologi Fakultas Kedokteran Universitas Hasanuddin.).

## Pengolahan Data
1. Editing
Tahap  pemeriksaan  hasil  pengumpulan data  yang  bertujuan  untuk  mengetahui kelengkapan,  kejelasan  makna  jawaban, konsistensi  maupun  relevansi  dengan penelitian.
2. Codingsheet Tahap pemberian kode agar memudahkan proses pengolahan dan analisis data.
3. Data entry
Tahap  memasukkan  data  yang  telah dikumpulkan  untuk  diolah  pada  komputer dengan program SPSS.

## Analisa Data
Data  penelitian  diolah  menggunakan SPSS. Untuk mengetahui perbedaan ekspresi reseptor  ET B pada  jantung  tikus  wistar  obes hamil  dan  non  obes  hamil  digunakan  Mann- Whitney Test dikarenakan uji normalitas untuk ekspresi  reseptor  ET B pada  jantung  tikus wistar  obes  hamil  dan  non  obes  hamil  tidak terdistribusi normal.

## HASIL PENELITIAN
1.  Karakteristik sampel Karakteristik  Umum  Tikus  Wistar  Obes Hamil dan Non Obes Hamil.
NO Subjek BB (g) PB (mm) Usia (bulan) 1 Obes1 267 160 10 2 Obes2 275 165 10 3 Obes3 272 160 10 4 Obes4 280 165 10 5 Obes5 265 160 10 6 NonObes1 185 160 10 7 NonObes2 195 160 10 8 NonObes3 187 160 10
9 NonObes4 196 160 10 10
NonObes5 204 160 10
11 p* NonObes6 0.000 186 160 10
Dari  tabel  1  dapat  dilihat  bahwa semua  sampel  berusia  10  bulan.  Sampel pada  kelompok    tikus  wistar  obes  memiliki rata-rata  beran  badan  271.8  g,  dan  pada sampel  tikus  wistar  non  obes    rata-rata berat badannya sekitar 192.17 g. Sedangkan  panjang  badan  rata-rata  untuk tikus  wistar  obes  yaitu  162  mm  dan  non obes  160  mm.  Ditemukan  hubungan bermakna  antara  berat  badan  tikus  obes hamil dan non obes hamil (p=0.000).
2.  Perbandingan Ekspresi Reseptor Et b pada Jantung  dan  Uterus  Tikus  Obesdan  Non
Obes Hamil Subjek EKSPRESI ET B Jantung Min Max  Mean SD Obes 0.32  3.03 0.87 1.21 NonObes 0.48  3.12 1.52 1.21 Ekspresi ET B Uterus Obes 0,83  2.18 1.44 0.58 NonObes 0.44  2.26 1.51 0.82 P EKSPRESI ET B Jantung= * 0.067
P Ekspresi ET B Uterus= ** 0.869
* Uji Mann-Whitney ** Uji T Tidak Berpasangan
Pada  tabel  2  diatas  menunjukkan ekspresi  reseptor  ET B pada  jantung  tikus obes  hamil  paling  tinggi  yaitu  3.03  pg/ml dan  yang  paling  rendah  yaitu  0.32  pg/ml dengan rata-rata yaitu 0.87 pg/ml. Sedangkan  ekspresi  reseptor  ET B pada jantung  tikus  non  obes  hamil  paling  tinggi yaitu  3.12  pg/ml  dan  yang  rendah  0.48 pg/ml  dengan  rata-rata  1.52  pg/ml.  Dan ekspresi  reseptor  ETB  dari  Uterus  tikus obes  hamil  paling  tinggi  yaitu  dengan  nilai 2.18  pg/ml  dan  memiliki  nilai  minimal  yaitu 0.83  pg/ml  sehingga  didapati  rata-ratanya yaitu  1.44  pg/ml.  Sedangkan  ekspresi  ET B dari  Uterus  tikus  non  obes  hamil  paling rendah  yaitu  0.44  pg/ml  dan  paling  tinggi 2.26  pg/ml    dengan  rata-rata  1.51  pg/ml. Namun  belum  ditemukan  perbedaan bermakna  antara  ekspresi  reseptor  ET B pada  jantung  tikus  obes  hamil  dengan ekspresi  reseptor  ET B pada  jantung  tikus non obes hamil (p=0.067). Dan juga belum ditemukan  perbedaan  bermakna  antara
ekspresi  reseptor  ET B pada  uterus  tikus obes hamil dan ekspresi reseptor ET B pada uterus tikus non obes hamil (p=0.869).
3.  Probabilitas Reseptor Et b pada Tikus Obes dan Non Obes Hamil
Subjek  Mean p Interprestasi ET B Uterus Obes 1.44 *0.869 Tidak ada Perbedaan Non Obes 1.51
ET B Jantung Obes 0.87 **0.067 Tidak ada Perbedaan Non Obes 1.52

## Sumber : Data Primer 2017 *Uji T tidak Berpasangan
Berdasarkan  tabel  3  terlihat  bahwa nilai  probabilitas  probabilitas  ekspresi  ET B pada Uterus tikus obes dan non obes hamil yaitu  0.869  (p>0.05).  Nilai  probabilitas ekspresi  ET B pada  Jantung  tikus  obes  dan non obes hamil yaitu 0.067 (p>0.05). Hal ini menunjukkan  tidak  adanya  korelasi  antara ekspresi  ET B pada  tikus  wistar  obes  dan non obes hamil.
Studi  ini  tidak  menunjukkan  adanya perbedaan bermakna (p=0.067). Tetapi dari rata-rata  ekspresi  reseptor  ET B terdapat perbedaan  ekspresi  reseptor  ET B pada jantung  tikus  wistar  obes  dan  non  obes hamil.  Dimana  pada  jantung  tikus  wistar obes hamil jauh lebih rendah dibandingkan pada  jantung  tikus  wistar  non  obes  hamil yaitu  0.87  pg/ml  dan  1.52  pg/ml.  Keadaan rendahnya  ekspresi  reseptor  ET B pada obes hamil  ini disebabkan karena keadaan obes memicu peningkatan kadar endothelin-1, tingginya endothelin-1 menyebabkan rendahnya ekspresi reseptor ET B .  Sebaliknya  keadaan  lebih  tingginya ekspresi reseptor ET B pada tikus non obes hamil  disebabkan  karena  tidak  adanya peningkatan  kadar  endothelin-1  yang akhirnya  ekspresi  reseptor  ET B tidak mengalami penurunan. Hal tersebut berlaku pula pada ekspresi reseptor ET B yang lebih rendah  pada  uterus    tikus  wistar  obes dibandingkan  pada  uterus  tikus  wistar  non obes.
Pada  penelitian  ini  juga  ditemukan adanya  perbedaan  ekspresi  reseptor  ET B antarajantung  dan  uterus  tikus  wistar  obes hamil.  Dimana  ekspresi  reseptor  ET B pada jantung  lebih  rendah  yaitu  0.87  pg/ml dibandingkan  ekspresi  reseptor  ET B pada uterus  tikus  wistar  obes  hamil  yang  lebih tinggi  1.44  pg/ml.  Perbedaan  distribusi
reseptor  endotelin  di  dalam  berbagai jaringan berkaitan dengan efek endotelin di dalam  jaringan  tersebut.  Ikatan  endotelin dengan reseptornya sangat kuat   disosiasi berlangsung  relatif  lambat, sehingga memungkinkan  efek  endotelin  berlangsung cukup  lama.  Reseptor  ET A terutama terdapat  di  jantung,  pembuluh  darah  otak, dan  otot  polos  vaskuler.  Sementara reseptor  ET B terdistribusi  luas  terutama  di dalam ginjal, uterus, sistim saraf pusat, dan sel endotel (Herwana, 2002).

## KESIMPULAN
Pada  penelitian  ini  tidak  ditemukan adanya  perbedaan  bermakna  antara  ekspresi reseptor  ET B tikus  wistar  obes  yang  sedang
hamil  dan  ekspresi  reseptor  ET B non  obes yang sedang hamil. Hal ini diduga disebabkan karena  keadaan  obes  pada  sampel  belum berlangsung  lama.  Tetapi  dari  rata-rata ekspresi  reseptor  ET B terdapat  perbedaan ekspresi  reseptor  ET B pada  jantung  tikus wistar obes dan non obes hamil.

## SARAN
Disarankan  bagi  peneliti  selanjutnya yang  ingin  melakukan  penelitian  lebih  lanjut pada  judul  yang  sama  agar  diharapkan  untuk memperhatkan  jumlah  sample  dan  perbedaan berat  badan  sampel.  Saran  dari  peneliti  agar keadaan obes pada tikus dapat dibiarkan lebih lama  agar  hasil  yang  didapatkan  lebih bermakna.

## DAFTAR PUSTAKA
Archer S. L. et al. (2010). Basic Science of Pulmonary Arterial Hypertension for Clinicians. New Concepts and Experimental Therapies. 2045-2066.
Bautista M. et al . (2011). Inflammation, Oxidative Stress, and Obesity. .3117–3132.
Campia  U. et  al .  (2014). The  vascular  endothelin  system  in  obesity  and  type  2  diabetes:  pathophysiology  and therapeutic implications. Life Sci, 118, 149-55.
Dumais C. (2016). Hubungan obesitas pada kehamilan dengan preeklampsia. Jurnal e-clinic volume 4 nomor 1.
Jiang, J. et al., 2014. Does Obesity Affect the Surgical Outcome and Complication Rates of Spinal Surgery ? A Meta - analysis.
Lantorno M. et al. (2014). Obesity, Inflammation and Endothelial Dysfunction. Journla of biological regulators and homestatic agents. 28(2):169-76.
Lilyasari O. (2007). Hipertensi Dengan Obesitas : Adakah Peran Endotelin-1, 28(6), pp.460–475.
Luscher T. F. & Matthias B. (2000). Endothelins and Endothelin Receptor Antagonists102:2434-2440.
Masra A.D.A. (2016). Hubungan Obesitas dengan Terjadinya Preeklampsia pada Ibu Hamil di Beberapa Rumah Sakit di Kota Banda Aceh. Banda Aceh: Fakultas Kedokteran Universitas Syiah Kuala.
Matthew B. et al. (2016). Obesity as Predictor of Mortality of Colorectal Cancer: an Evidence-based Case Report. Acta Med Indones , 48 , 242-246.
Roberts  J.M. et  al .  (2013).  Hypertension  in  pregnancy.  Washington:  American  College  of  Obstetricians  and Gynecologist.
Teo,  J.D.,  Morris,  M.J.  &  Jones,  N.M.,  2016.  Brain  ,  Behavior  ,  and  Immunity  Maternal  obesity  increases inflammation  and  exacerbates  damage  following  neonatal  hypoxic-ischaemic  brain  injury  in  rats.  Brain Behavior and Immunity. Available at: 1.
Thorin E. & Clozel M. (2010). The Cardiovascular Physiology and Pharmacology of Endotelin-1. Adv Pharmacol, 60, 1-26.
Widiyatmoko  A.  (2010).  Perbedaan  Kadar  Endotelin-1  pada  Penderita  Hipertensi  Stadium  1  ,  2  dan  Bukan Penderita  Hipertensi  The  Difference  of  Endotelin-1  Levels  in  Hypertension  Stage  1,  2  and  Non.  10(2), pp.103–109.
World  Health  Organization.  (2016).  Obesity  and  Overweight.  Diakses  April  2017.  Available  from: http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs3