## UJI AKTIVITAS EKSTRAK KENTAL ETANOL PANDAN HUTAN JENIS BARU (Freycinetia sessiliflora RIZKI) TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI Staphylococcus aureus
Fitri Sri Rizki*, Ade Ferdinan Akademi Farmasi Yarsi Pontianak
*Email: fitrisririzki.cici69@gmail.com
Artikel diterima: 19 November 2019; Disetujui: 4 Maret 2020 DOI: https://doi.org/10.36387/jiis.v5i1.403

## ABSTRAK
Pandan  hutan  jenis  baru  ( Freycinetia  sessiliflora Rizki)  adalah  salah  satu spesies yang ditemukan pada tahun 2015 di Gunung Passi Kalimantan Barat. Para peneliti  menemukan  pandan  spesies  baru  itu  sangat  berbeda  dari  pandan  lain. Hasil  skrinning  fitokimia  daun  pandan  ( Freycinetia  sessiliflora Rizki) mengandung  senyawa  metabolit  skunder  yaitu  alkaloid,  flavonoid,  terpenoid- steroid, saponin, fenol dan tannin. Berdasarkan senyawa metabolit sekunder yang terkandung sehingga dilakukan penelitian untuk menguji aktivitas ekstrak pandan tersebut dengan bakteri Staphylococcus aureus . Ekstrak tanaman pandan yang di peroleh menggunakan metode maserasi dengan pelarut etanol sehingga diperoleh ekstrak kental yang akan digunakan untuk menguji aktivitas daya hambat terhadap bakteri Staphylococcus aureus dengan menggunakan metode cakram disk Kirby- Bauer. Ekstrak pandan di buat dalam 5 konsentrasi berbeda yaitu 5%, 10%, 15%, 20%  dan  25%.  Kemudian  dilakukan  pengukuran  zona  bening  yang  terbentuk sekitar  kertas  cakram.  Data  di  analisis  oleh  anova  satu  arah  dengan  tingkat kepercayaan  95%.Berdasarkan  hasil  penelitian  diperoleh  hasil  daya  hambat ekstrak  pandan  jenis  baru  terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus dengan  rata- rata diameter hambat konsentrasi 5% sebesar 10,86 mm, konsentrasi 10% sebesar 11,46 mm, konsentrasi 15% sebesar 11,8 mm, konsentrasi 20% sebesar 12,24 mm dan konsentrasi yang tertinggi 25% sebesar 12,9 mm.
Kata  kunci:  Freycinetia  sessiliflora Rizki,  Ekstrak  Pandan  Jenis  Baru, Staphylococcus aureus

## ABSTRACT
A new species of the pandanus (Freycinetia sessiliflora Rizki) is one species found in the year 2015 on Passi Mount, West Kalimantan. The researchers found the  pandanus  new  species  which  is  very  different  from  other  pandanus.  The results of skrinning phytochemical leaves of the pandanus (Freycinetia sessiliflora Rizki)  containing  a  compound  of  a  secondary  metabolite  namely  alkaloid  , flavonoid  ,  terpenoid-steroid  ,  saponin  ,  phenol  and  tannin.  Based  on  secondary metabolite  compounds  which  done  research  to  test  the  activity  of  the  pandanus extract  bacteria  Staphylococcus  aureus.  Plant  extracts  pandanus  in  get maceration with a solvent use of ethanol to achieve an extract will be used to test the  activity  of  obstruent  against  bacteria  Staphylococcus  aureus  by  using  the
method of kirby-bauer disk. Extract pandanus made in 5 different concentrations are   5 % , 10 % , 15 % , 20 % and 25 %. Then it will be the measurement of clear zone formed about  paper  discs .Analyze by anova data  in  one direction with the levels of trust 95 %. Based on the research done an obstruent extracts the results of  a  new  species  of  pandanus  against  bacteria  staphylococcus  aureus  with  an average diameter obstruent concentration 5%  of 10,86, mm the concentration of 10 %  of 11,46, mm the concentration of 15 % of  11,8, mm the concentration of 20% of  12,24 mm and the highest 25% of  12,9 mm.
Keywords:  Freycinetia  sessiliflora  Rizki,  a  new  species  of  pandanus  extract,

## Staphylococcus aureus

## PENDAHULUAN
Pandan  merupakan  tanaman yang  sering  dimanfaatkan  daunnya. Pandan  termasuk  ke  dalam  family Pandanaceae yang terdiri dari beberapa  marga  yaitu Pandanus, Sararanga, Freycinetia, Marteli dendron dan Benstoneana.
Telah  ditemukan  pandan  yang termasuk marga Freycinetia di Kalimantan Barat merupakan spesies baru  yangterdapat  di  Gunung  Passi Singkawang, jenis pandan ini
dinamai Freycinetia sessiliflora
Rizki. Pandanaceae telah  lama dikenal  dan  digunakan  bukan  hanya oleh  masyarakat  di  Indonesia,  tetapi juga  oleh  masyarakat  dunia  baik sebagai  tanaman  hias  maupun  untuk fungsi lainnya. Menurut Stone (1976),  organ  tumbuhan Freycinetia memiliki  kegunaan  bagimanusia. Akar-akar gantung yang tua
digunakan  untuk  membuat  tambang, selain  itu  tumbuhan  ini  juga  sebagai tanaman  penghasil  minyak  wangi yang  berasal  dari  tongkol  bunga. Berdasarkan data empiris, di berbagai tempat tongkol bunga dapat dimakan setelah dikukus. Daun-daun penumpu  tongkolnya  yang  berwarna merah  menyala  dapat  digunakan sebagai  zat  pewarna  merah  untuk arak Cina contohnya jenis F. gaudich (Heyne, 1927).
Daun pandan Freycinetia sessiliflora Rizki mengandung senyawa metabolit alkaloid,
flavonoid, terpenoid-steroid, saponin, fenol dan tannin.Berdasarkan senyawa  metabolit  sekunder  yang terkandung  oleh  pandan  tersebut, maka pandan Freycinetia sessiliflora Rizki  ini  memiliki  khasiat  dan manfaat yang dapat dikembangkan di bidang  kesehatan,  farmasi,  biologi
dan
kedokteran.
Penelitian
Mardiyaningsih,  A.  dan  Aini,  R.
(2014),  ekstrak  etil  asetat  daun pandan  wangi  dapat  menghambat pertumbuhan  bakteri Staphylococcus aureus dengan  rata-rata  diameter zona  hambat  10  mm  dan  11,33  mm. Kemudian  pada  ekstrak  campuran dari  etanol-  etil  asetat  (1:1  v/v)  juga dapat menghambat pertumbuhan
bakteri Staphylococcus aureus
dengan  rata-rata  diameter  zona hambat  masing-masing  13,33  mm dan  15,67.  Ekstrak  etil  asetat  dan
campuran etanol etil asetat kemungkinan mampu menyari senyawa aktif yang bersifat antimikroba.  Adapun  tujuan  dari penelitian ini yaitu untuk mengetahui apakah  ekstrak  daun  pandan  hutan ini  dapat  menghambat  pertumbuhan bakteri S. aureus .

## METODE PENELITIAN
Alat-alat yang digunakan
dalam  penelitian  ini  antara  lain: autoclaf ( american75X ), batang pengaduk,  baskom,  cawan  petri, enkas,  erlenmeyer  ( pyrex ),  beaker gelas  ( pyrex ),  gelas  ukur  ( pyrex ), inkubator  ( memmert ),  lampu  spritus,
jangka sorong ( insize ), kertas saring, kertas  sampul,  mikro  pipet  ( dragon med ),  neraca  analitik  ( HWH ),  oven (memret incubator IN30 ), ose,
tabung  reaksi  ( pyrex) ,  toples  kaca dan vacum rotary evaporator
( scilogex ).
Bahan-bahan  yang  digunakan pada  penelitian  ini  antara  lain:  aqua pro injeksi,amoxicillin sebagai control positif,
bakteri Staphylococcus  aureus ,  etanol  96% larutan  NaCl  fisiologis,  medium Müller-Hinton  Agar (MHA),  pandan hutan F. sessiliflora Rizki.
Ekstraksi  dilakukan  dengan metode maserasi.Sampel Pandan hutan F.  sessiliflora Rizki    yang telah dihaluskan dimasukan kedalam toples  kaca.  Kemudian  dituangi pelarut etanol 96% 1 : 3, lalu ditutup dan  dibiarkan  selama  3x24  jam, sambil  sering  diaduk-aduk.  Hasil maserasi disaring
dengan mengunakan  kain  flanel,  ampas kemudian diperas sehingga diperoleh ekstrak  cair  etanol.  Ekstrak  cair etanol dipekatkan dengan mengunakan  rotary  evaporator  pada suhu  40ᵒC.Pemekatan  ini  dilakukan sampai diperoleh ekstrak
kental.Selanjutnya dilakukan perhitungan randemen ekstrak.
Ekstrak  etanol  pandan  hutan F. sessiliflora Rizki akan dibuat dengan masing-masing konsentrasi 5%,
10%,  15%,  20%  dan  25%b/v  dibuat dengan  cara  menimbang  ekstrak Pandan hutan F. sessiliflora sebanyak 0,5g, 1g, 1,5g, 2g, 2,5g, dan masing- masing  dimasukkan  dalam  pot  salep yang  telah  berisi  aqua  pro  injeksi hingga 10 ml dan kocok hingga larut. Kertas cakram steril dengan diameter 1  cm  yang  telah  di  disiapkan direndam  kedalam  masing-masing larutan  sampel  selama  15  menit secara aseptic sesuai konsentrasi.
Pengujian daya hambat ekstrak etanol  pandan  hutan F.  sessiliflora Rizki  dilakukan  dengan  metode Kirby  Baueryaitu  metode  difusi mengunakan  kertas  cakram  (cakram disk).Di  buat  Suspensi  bakteri  uji dengan NaCl fisiologis, kemudian di pipet  kedalam  cawan  petri  sebanyak 1  ml,  kemudian  ditambahkan  10  ml medium  Müller-Hinton Agar (MHA) steril  yang  telah  didinginkan  sampai suhu 40°C-45°C. Cawan petri ditutup dan  digoyang-goyangkan hingga  tercampur  homogen,  lalu
dibiarkan sampai membeku. Selanjutnya, kertas cakramdi rendam dalam  sampel  pada  masing-masing konsentrasi ekstrak, kemudian kertas cakram  diletakkan  pada  permukaan medium
Müller-Hinton Agar (MHA)  yang  telah  berisi  bakteri  uji kemudian diinkubasi didalam inkubator pada suhu 37°C selama 24 jam dengan posisi terbalik.
Penentuan daya hambat pertumbuhan  bakteri  uji  dilakukan dengan mengukur luas daerah bening sekitar  kertas  cakram.  Pengamatan dilakukan setelah diinkubasi didalam inkubator  selama  24  jam  dengan mengunakan  alat  jangka  sorong, selanjutnya zona bening yang terbentuk  pada  setiap  kertas  cakram diukur  dari  3  sisi  yang  berbeda, kemudian  di  rata-ratakan,  dengan perhitungan nilai skala utama ditambah  dengan  hasil  perkalian skala nonius dengan angka ketelitian.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Sampel  yang  digunakan  pada penelitian  ini  adalah  pandan  hutan spesies  baru  dengan  nama  latin Freycinetia  sessiliflora Rizki.  yang mana  sampel  diambil  dari  gunung
Passi, Singkawang Provinsi
Kalimantan Barat. Sampel kemudian diolah  menjadi  simplisia  kering dengan  berat  basah  1  kg  yang dirajang untuk mempermudah proses pengeringan,  kemudian  dikeringkan menggunakan dry  cabinet selama  3 hari  dan  didapatkan  berat  kering 224,81  gram.Simplisia  dihasilkan untuk  mempermudah  proses  difusi zat  aktif  ke  pelarut,  kemudian diekstraksi  dengan  metode  maserasi karena  metode  ini  baik  digunakan unutk  menarik  zat  berkhasiat  yang tahan pemanasan maupun tidak tahan pemanasan,  serta  sederhana  dalam pengerjaan dan alat-alat yang digunakan.  Pelarut  yang  digunakan untuk  maserasi  adalah  etanol  96%.
Pelarut  etanol  digunakan  karena bersifat universal yang dapat menarik zat polar maupun non polar. Simplisia  dimaserasi  selama  3x24 jam  lalu  filtrat  yang  didapatkan diuapkan menggunakan rotary evaporator hingga  didapatkan  hasil randemen  ekstrak  18,28%  (>10%). Hasil  randemen  yang  didapatkan menunjukkan  keefektivan  pada  saat ekstraksi. Karena semakin besar nilai rendemennya  maka  semakin  efektif pula  proses  ekstraksinya.  Hal  ini dipengaruhi  oleh  lamanya  ekstraksi, jenis pelarut yang digunakan sebagai penyaring,  ukuran  partikel  simplisia, metode dan lamanya ekstraksi (Leksono dkk, 2016).
Gambar. 1 Grafik Daya Hambat Terhadap Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus aureus Uji aktivitas antibakteri diawali dengan  proses  sterilisasi  dengan tujuan untuk membunuh
mikroorganisme  dan  menghindari terjadinya kontaminasi mikroba. Sterilisiasi  alat-alat  gelas  dilakukan
10.86 11.46 11.8 12.24 12.9 9.5 10 10.5 11 11.5 12 12.5 13 13.5 5% 10% 15% 20% 25%
Rata-rata daya hambat (mm)
Linear (Rata-rata daya hambat (mm))
dalam  autoklaf  karena  memiliki keunggulan  yaitu  waktu  sterilisasi yang  relative  singkat  dan  efektif untuk  alat-alat  gelas  yang  memiliki rongga. Selanjutnya dilakukan peremajaan bakteri untuk mendapatkan  bakteri  yang  aktif  dan mencegah  terjadinya  kerusakan  pada bakteri.  Sebelum  dilakukan  aktivitas antibakteri dilakukan suspense bakteri  dengan  NaClfisiologis  pada bakteri  uji  yang  bertujuan  untuk mengencerkan  bakteri  uji  agar  dapat menyebar rata dan homogen.
Pengujian  daya  hambat  ekstrak kental etanol pandan hutan jenis baru ( Freycinetia sessiliflora Rizki)
terhadap pertumbuhan bakteri
Staphylococcus aureus dengan
menggunakan  konsentrasi  5%,  10%,
15%, 20%, dan 25%. Uji
mikrobiologi  yang  dilakukan  dengan metode  tuang  menggunakan  cakram disk.  Pengujian  ini  menggunakan kontrol  positif  dan    negatif,  sebagai kontrol positif menggunakan
amoxicillin  dan  kontrol  negatif menggunakan  aqua  pro  injeksi. Kemudian  diinkubasi  selama  24  jam pada suhu 37° C.
Berdasarkan  hasil  pengamatan ekstrak  daun  pandan  hutan  spesies baru  ini  memiliki  daya  hambat terhadap pertumbuhan bakteri
Staphylococcus aureus yakni terdapat zona bening pada konsentrasi yang telah diujikan. Pada Gambar  1  dapat  dilihat  bahwa masing-masing  konsentrasi  ekstrak dapat menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus.
Konsentrasi ekstrak pandan Freycinetia  sessiliflora Rizki.  yang menghambat  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  aureus dengan  rata- rata  diameter  hambat  terkecil  pada konsentrasi  5%  sebesar  10,86  mm, dan  rata-rata  diameter  terbesar  pada konsentrasi  25%  sebesar  12,9  mm (Gambar 2).
Gambar 2. Zona bening yang terbentuk oleh sampel terhadap bakteri Staphylococcus aureus
Pada masing-masing konsentrasi,  hasil  yang  didapatkan
memiliki  nilai  yang  berbeda  namun kriteria kekuatan antibakterinya sama karena  termasuk  kedalam  kategori kuat  yakni  masuk  kedalam  range  10 – 20 mm.
Tabel 1. Tabel kekuatan antibakteri Diameter Zona Terang (mm) Respon Hambatan Pertumbuhan >20 10 – 20 5 – 10 0 – 5 Sangat Kuat Kuat Sedang Lemah
Gambar 3. Zona bening yang terbentuk oleh kontrol positif  dan negatif terhadap bakteri Staphylococcus aureus
Pada  kontrol  (+)  digunakan antibiotik  Amoxicillin  dari  golongan Penisilin (β-laktam) yang  mana pengamatan  dilakukan  selama  48 jam. Hasil pengukuran diameter zona hambat  pada  bakteri Staphylococcus aureus yakni  dengan  rata-rata  15,82 mm (Gambar 3).
Amoxicillin  memiliki  kerja spektrum  luas  yang  meliputi  banyak kuman  Gram-negatif  dan  Garm-
positif  (Tjay,  T.H  dan  Rahadra,  K., 2007).Mekanisme Amoxicillin dalam membunuh bakteri yaitu dengan cara menghambat  sintesis  pembentukan peptidoglikan  membran  sel  dalam tiga tahap. Tahap pertama dan kedua terjadi pada sitoplasma yaitu mengganggu  sintesis  asam  amino dengan  penambahan  spesifik  asam amino  ( L-alanine,  D-glutamic,  L- lysine ).  Tahap  ketiga  terjadi  di  luar sel  dengan  menyelesaikan cross-link pada sub unit baru.
Adanya  daya  hambat  yang terbentuk  pada  ekstrak  tanaman pandan  hutan  spesies  baru  ini dikarenakan  senyawa  aktif  yang terkandung  didalamnya  .  Senyawa tersebut  tersebut  memiliki  daya hambat terhadap bakteri Staphylococcus  aureus .  Senyawa aktif  yang  terkandung  didalamnya (Flavonoid, saponin, dan tanin).
Flavonoid
merupakan
golongan  terbesar  dari  senyawa fenol.  Senyawa  bioaktif  ini  diduga berpotensi sebagai senyawa antibakteri. Menurut pendapat Pendit et  al. (2016),  yang  menyatakan bahwa Mekanisme flavonoid sebagai antibakteri yaitu dengan cara
menghambat  sintesis  asam  nukleat, menghambat  fungsi  membran  sel,
dan menghambat metabolisme
energi. Selain flavonoid, saponin memiliki aktifitas antibakteri berspektrum luas yang mana mekanisme  kerjanya  dengan  cara merusak  membran  plasma  bakteri dengan  cara  meningkatkan  membran sel  bakteri.  Saponin  dapat  berdifusi melalui membran kemudian meningkatkan  sitoplasma  sehingga mengganggu dan mengurangi kestabilan membran dan menyebabkan sitoplasma bocor
keluar dari sel (Hopkins, 1999). Kemampuan tanin sebagai
antibakteri dilihat dari aksinya terhadap  membran  (Marfuah  dkk, 2018). Tanin mempunyai mekanisme kerja  yang  sama  dengan  fenolik lainnya dalam menghambat
pertumbuhan  bakteri Streptococcus aureus serta  dapat  bereaksi  dengan cara  inaktivasi  enzim  esensial  dan destruksi  atau  inaktivasi  fungsi  dari material genetik (Branen, 1993).

## KESIMPULAN
Adapun  pada  penelitian  ini dapat disimpulkan sebagai berikut :
1. Tanaman  pandan  hutan  spesies baru dengan nama latin ( Freycinetia  sessiliflora Rizki.) dapat menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus.
2. Daya  hambat  yang  dihasilkan pada bakteri Staphylococcus aureus dengan  konsentrasi  5% sebesar  10,86  mm,  konsentrasi 10% sebesar 11,46 mm, konsentrasi  15%  sebesar  11,8 mm,  konsentrasi  20%  sebesar 12,24  mm  dan  konsentrasi  yang tertinggi 25% sebesar 12,9 mm.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terima  kasih  peneliti  ucapkan kepada  DIKTI  selaku  lembaga  yang telah  mendanai  penelitian  ini,  serta kepada  Akademi  Farmasi  Yarsi Pontianak  yang  telah  mensupport dan memfasilitasi penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Brannen, 1993, Aktivitas Antimikroba Ekstrak Kedawung,  Jurnal  Iptek  Vol. XII no. 1
Davis  WW  &  Stout  TR.  2009.  Disc Plate Method of Microbiological Antibiotic Assay. Applied and Enviromental Microbiology . vol. 22 (4): 666-670. Heyne K. 1927. Indonesische Nuttige Planten . Diterjemahkan menjadi:  Tumbuhan  Berguna Indonesia  Jilid  ke-3.  Badan Litbang Departemen Kehutanan Indonesia, penerjemah. Jakarta (ID): Yayasan Sarana Wana Jaya. Hopkins, Willian.G, 1999, Introductions to Plant Physiology  2 nd ed.  USA  :  John Willey and Sons, Inc Leksono.P, Komala.O, Ismanto, 2016,  Aktivitas  Ekstrak  Daun
Pandan Wangi ( Pandanus amaryllifolius ) Sebagai
Antifungi Candida  albicans . Program Studi Biologi FMIPA.
Universitas Sumatera Utara. Mardiyaningsih,  A.  dan  Aini,  A. 2014.  Pengembangan  Potensi Ekstrak Daun Pandan ( Pandanus amaryllifolius Roxb) Sebagai Agen Antibakteri. Pharmaciana , vol.4(2):185-192. Poltekkes Bhakti Setya Indonesia. Yogyakarta. Marfuah.I,  Eko.N.D,  Laras.R,  2018, Kajian  Potensi  Ekstrak  Anggur
Laut ( Caulepa racemosa ) Sebagai  Antibakteri  Terhadap Bakteri Escherichia  coli dan Staphylococcus aureus.
Pelczar  MJ  &  Chan  ECS,  1988. Dasar-Dasar  Mikrobiologi  2.
Jakarta:  Penerbit  Universitas Indonesia Pendit,  P.  A.  C.  D.,  Elok  Z.,  dan Feronika H. S. 2016. Karakteristik  Fisik-Kimia  Dan Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak Daun Belimbing Wuluh ( Averrhoa  bilimbi L). Jurnal Pangan  dan  Agroindustri ,  4(1)
: 400-409.
Rizki,  F.S.,  Chikmawati,  T.,  T. Rugayah.  2015.  A  new  species of Freycinetia Gaudich ( Pandanaceae ) from west Kalimantan Indonesia. International  Journal  of  Plant Biology , vol. 6:5701. Department of Biology, Faculty of  Mathematics  and  Natural Sciences,  Bogor  Agricultural University; Herbarium Bogoriense,  Botany  Division, Research  Center  For  Biology, Indonesian Institute of Sciences, Bogor, Indonesia. Robinson T, 1995. Kandungan Organik  Tumbuhan  Tinggi. Bandung: Penerbit ITB
Stone  BC.  1967.  Material  for  a monograph of    Freycinetia (Pandanaceae)  I.  Gard  Bull
Sing . (22): 29-152.
Tjay,Tan Hoan dan Kirana Rahardja. 2007. Obat-Obat Penting Khasiat, Penggunaan dan Efek- Ffek Sampingnya . Edisi Keenam. PT.Elex media Komputindo. Jakarta.