## ________________________________________________________________

## Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Metanol Daun Paku Resam (Glechenia
liearis Burm.) pada Tiga Bakteri Penyebab Akne Vulgaris
Salmi 1* , Monica Kharisma Swandi
1. Prodi Biologi Fakultas Pertanian Perikanan dan Biologi Universitas Bangka Belitung Kampus Terpadu Universitas Bangka Belitung, Merawang Kabupaten Bangka, Provinsi Kepulauan Bangka Belitung, 33172
*Corresponding author: namiesalmi@gmail.com
Received:  13 November 2022; Accepted: 29 December 2022
Abstract: Acne  vulgaris  or  acne  is  a  skin  disease  caused  by  a  bacterial  infection.  This  study  aimed  to  evaluate  the antibacterial activity of methanol extract of paku resam leaves ( Gleichenia linearis Burm.) on three different  acne-causing bacteria Propionibacterium  acnes ATCC  6919, Staphylococcus  epidermidis ATCC  12228 , and Staphylococcus  aureus ATCC 25923. The research consisted of an antibacterial activity test using the disc diffusion method, a minimum inhibitory concentration (MIC) test, a minimum bactericidal concentration (MBC) test, and an equivalence test of antibacterial activity with  clindamycin  as  a  positive  control.  This  study  found  that  the  methanol  extract  of  paku  resam  leaves  had  a  significant effect ( p <0.05) on inhibiting the growth of the three bacteria at all concentrations tested, namely 2.5; 5; 10; 15; 20; 30%. The MIC  value  of  the  extract  was  lower  for P. acnes ATCC 6919  and S.  epidermidis ATCC 12228 by 1.63%,  compared  to S. aureus ATCC 25923 by 3.25%. The KBM value of methanol extract of paku resam leaves was lower for P. acnes ATCC 6919 and S. epidermidis ATCC 12228 (3.25%) compared to S. aureus ATCC 25923 (6.5%). The equivalence test showed that the antibacterial activity of the methanol extract of paku resam did not as strong as clindamycin inhibitory activity to the acne-causing  bacteria.  In  conclusion,  the  methanolic  extract  of  paku  resam  leaves  has  antibacterial  activity  toward  three acne-causing  bacteria  based  on  the  antibacterial  test,  MIC,  and  KBM  tests,  but  its  activity  was  still  lessened  than clindamycin.
Keywords: acne, antibacterial activit, methanol extract, paku resam
Abstrak :  Akne  vulgaris  atau  jerawat  merupakan  salah  satu  penyakit  kulit  yang  dapat  disebabkan  oleh  infeksi  bakteri. Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengevaluasi  aktivitas  antibakteri  ekstrak  metanol  daun  paku  resam  ( Glechenia  linearis Burm.)  pada Propionibacterium acnes ATCC  6919, Staphylococcus  epidermidis ATCC 12228 dan Staphylococcus aureus ATCC  25923  bakteri  penyebab  jerawat.  Pengujian  terdiri  atas  uji  aktivitas  antibakteri  dilakukan  dengan  metode  difusi cakram,  uji  konsentrasi  hambat  minimum  (KHM),  uji  konsentrasi  bunuh  minimum  (KBM)  dan  uji  kesetaraan  aktivitas antibakteri dengan antibiotik klindamisin sebagai kontrol positif. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak metanol daun paku  resam  berpengaruh nyata  (p<0.05)  menekan pertumbuhan ketiga  bakteri pada  semua  konsentrasi  yang diujikan yaitu 2.5; 5; 10; 15; 20; 30 %. Nilai KHM ekstrak lebih rendah terhadap P. acnes ATCC 6919 dan S. epidermidis ATCC 12228 sebesar  1.63%,  dibandingkan  pada S.  aureus ATCC  25923  sebesar  3.25%.  nilai  KBM  ekstrak  metanol  daun  paku  resam lebih rendah terhadap P. acnes ATCC 6919 dan S. epidermidis ATCC 12228 (3.25%) dibandingkan pada S. aureus ATCC 25923 (6.5%). Hasil uji kesetaraan menunjukkan bahwa aktivitas antibakteri ekstrak metanol paku resam masih lebih rendah dibandingkan  klindamisin.  Sebagai  kesimpulan,  ekstrak  metanol  daun  paku  resam  mampu  menghambat  pertumbuhan  3 bakteri penyebab jerawat berdasarkan uji antibakteri, KHM dan KBM, namun aktivitasnya masih lebih rendah dibandingkan klindamisin.
Kata Kunci: ekstrak metanol, jerawat, paku resam, aktivitas antibakteri.
DOI: 10.15408/pbsj.v4i2.30474

## 1. PENDAHULUAN
Akne vulgaris atau dikenal dengan jerawat merupakan  penyakit  kulit  kronis  yang  disebabkan oleh  berbagai  faktor.  Penyakit  ini  menempati peringkat  kedelapan  sebagai  penyakit  kulit  yang paling  umum  terjadi  dengan  estimasi  global  9.38% (Heng  &  Chew,  2020).  Penyakit  ini  ditemukan  pada
berbagai rentang usia, namun lebih banyak pada usia remaja  14-17  tahun  (Dhamayanti,  2019).  Akne vulgaris  dipicu  oleh  berbagai  faktor  eksternal  yang menyebabkan  ketidakseimbangan  bakteri  komensal kulit  sehingga  meningkatkan  kesempatan  bakteri patogen untuk tumbuh. Sari et al . (2020) melaporkan

## Pharmaceutical and Biomedical Sciences Journal
Volume 4(2), 2022, 69-78
bahwa Propionibacterium  acnes dan Staphylococcus epidermidis lebih  dominan  ditemukan  pada  kulit dengan  akne  vulgaris.  Bakteri  lain  yang  juga ditemukan  yaitu S.  aureus,  S.  hominis,  S. haemolyticus , Leuconostic mesentroides , Micrococcus  luteus , Kocuria  varians , S.  vitulinus , S. aohnii , S. arlette dan Dermacoccus nishinomyanesis.
Penanganan  akne  vulgaris  harus  dilakukan  dengan cepat  dan  tepat.  Tatalaksana  yang  perlu  dilakukan diantaranya membatasi pertumbuhan bakteri menggunakan antibiotik, mengurangi inflamasi dengan obat golongan kortikosteroid dan menghambat  mikrokomedo  dengan  retinoid  (Sanjay, 2011).  Kendala  yang  muncul dalam  menangani  akne vulgaris  dapat  terjadi  karena  adanya  peningkatan resistensi bakteri terhadap antibiotik. P. acnes dan S. epidermidis dilaporkan  mengalami  resistensi  dalam 4-6  minggu  setelah  pemberian  anbiotik  eritromisin dan  klindamisin  secara  topikal.  Pada  pemberian antibiotik  secara  oral  juga  ditemukan  efek  samping lainnya  berupa  gangguan  keseimbangan  mikrobiota usus  (Claudel et  al .,  2019).  Hal  inilah  yang menyebabkan  penemuan  kandidat  senyawa  dengan aktivitas  antibakteri  dapat  menjadi  solusi  alternatif dalam pengobatan akne vulgaris.
Paku  resam  ( Gleichenia  linearis Burm.)  merupakan salah  satu  jenis  paku  yang banyak  ditemui  di  tempat terbuka  dan  menjadi  spesies  pionir  suksesi  lahan kritis.  Dominansinya  pada  permukaan  tanah  dan menghambat pertumbuhan lain menyebabkan tumbuhan  paku-pakuan  ini  digolongkan  sebagai tumbuhan  invasif.  Penggunaan  paku  resam  secara empiris  dalam  pengobatan  tradisional  telah  banyak dilakukan.  Di  Asia  tenggara,  paku  resam  secara tradisional digunakan dalam pengobatan demam, luka dan  ulkus.  Paku  resam  dimanfaatkan  dalam pengobatan  berbagai  jenis  penyakit  kulit  oleh masyarakat  Malaysia  (Othman et  al., 2020).
Penggunaan paku resam dalam pengobatan tradisional  juga  dilakukan  oleh  masyarakat  Desa Saham, Kalimantan Barat dan Masyarakat Desa Bukit Mas,  Sumatera  Utara  memanfaatkan  paku  resam sebagai  salah  satu  bahan  dalam  pengobatan trandisional mereka (Winda, et al ., 2016; Nasution et al ., 2016).
Masyarakat Bangka Belitung memanfaatkan  paku  resam  sebagai  alternatif  sabun cuci  muka  alami.  Rizal  (2017)  melaporkan  bahwa paku  resam  memiliki  aktivitas  antioksidan  dan antibakteri.  Aktivitas  antibakteri  ekstrak  paku  resam telah  diuji  pada  beberapa  bakteri  seperti S.  aureus , Bacillus cereus , B. subtilis , Pseudomonas aeruginosa dan Micrococcus  luteus (Lai et  al., 2009).  Namun, penelitian  terhadap  bakteri  penyebab  akne  vulgaris belum  banyak  dilaporkan.  Oleh  karena  itu,  penting untuk  dilakukannya  penelitian  ini  dengan  tujuan mengevaluasi  aktivitas  antibakteri  ekstrak  metanol daun paku resam terhadap tiga jenis bakteri penyebab jerawat yaitu P. acnes , S. epidermidis dan S. aureus .

## 2. BAHAN DAN METODE
Bahan  yang  digunakan  dalam  ekstraksi  sampel  yaitu metanol. Bahan yang digunakan untuk uji antibakteri, KHM  dan  uji  kesetaraan  diantaranya  nutrient  agar (NA),  nutrient  broth  (NB),  alkohol  70%,  akuadest, dan klindamisin.  Bakteri  uji yang  digunakan  yaitu S. epidermidis ATCC 12228 , P. acnes ATCC 6919 dan S. aureus ATCC 25923 .
2.1  Pengumpulan  sampel  dan  preparasi  sampel paku resam
Daun  paku  resam  yang  dipilih  adalah  daun  paku resam  muda  yang  terletak  pada  ujung  tangkai  dan bewarna  hijau  muda.  Daun  berasal  dari  tumbuhan paku  resam  yang  tumbuh  di  lingkungan  kampus Universitas  Bangka  Belitung.  Daun  yang  telah dikumpulkan,  disortasi,  dicuci  dengan  air  mengalir dan  dikeringkan  anginkan  lalu  dikeringkan  dalam oven dengan suhu 50°C selama 24 jam. Daun kering
selanjutnya  dihaluskan  dengan  blender  dan  disaring untuk mendapatkan ukuran serbuk yang seragam.

## 2.2 Ekstraksi daun paku resam
Ekstraksi daun paku resam dilakukan dengan metode maserasi.  Serbuk  daun  direndam  dalam  pelarut metanol  dengan  perbandingan  1:10.  Perendaman dilakukan  selama  3x24  jam  di  atas shaker dengan kecepatan 150 rpm. Filtrat diperoleh dari penyaringan menggunakan  kertas  saring  untuk  selanjutnya dipekatkan dengan rotary evaporator pada suhu 50°C hingga diperoleh ekstrak berbentuk pasta.

## 2.3 Uji  aktivitas  ekstrak  metanol  daun  paku resam
Ekstrak  metanol  dengan  konsentrasi  30%  dibuat dengan  melarutkannya  dengan  DMSO  5%.  Larutan ini selanjutnya diencerkan hingga diperoleh konsentrasi yang lebih kecil 20%, 15%, 10%, 5% dan 2.5%.  Kontrol  positif  dan  negatif  disiapkan  berupa klindamisin  0.03%  (+)  dan  larutan  DMSO  0.5%  (-). Pengujian  aktivitas  antibakteri  dilakukan  pada  saat bakteri  dalam  fase  pertumbuhan  optimum  (nilai absrobansi  0.6-0.8).  Sebanyak  0.1  mL  bakteri  uji disebar  dengan  teknik  spread  plate  diatas  media  NA yang  telah  memadat  dalam  cawan  petri.  Kertas cakram  dengan  diameter  6  mm  direndam  dalam ekstrak  daun  paku  resam  dengan  variasi  konsentrasi (30%, 20%, 15%, 10%, 5%, dan 2.5%, kontrol positif dan  kontrol  negatif  selama  15  menit.  Kertas  cakram kemudian  diletakkan  di  atas  media  NA  yang  sudah dilapisi  bakteri  uji,  lalu  diinkubasi  selama  24  jam. Pengujian dilakukan sebanyak 3 kali pengulangan.

## 2.4 Penentuan  konsentrasi  hambat  minimum
(KHM) ekstrak metanol daun paku resam.
Larutan  uji  ekstrak  metanol  daun  paku  resam  dibuat dengan konsentrasi yang bervariasi  sebanyak 0.5 mL ekstrak  ditambahkan  pada  tabung  reaksi  yang  berisi
9.5  mL  NB  sehingga  diperoleh  konsentrasi  akhir ekstrak; 6.5%, 3.25%, 1.63%, 0.81%, 0.4% dan 0.2%. Hal  yang  sama  juga  dilakukan  pada  kontrol  positif dan  negatif.  DMSO  0.5%  digunakan  sebagai  kontrol negatif  dan  klindamisin  0.03%  digunakan  sebagai kontrol positif. Sebanyak 1 ose bakteri uji diinokulasi dalam  campuran  ekstrak/  DMSO  5%/  klindamisin secara  aseptik  yang  kemudian  diinkubasi  pada  suhu 37°C  selama  24  jam.  Kekeruhan  diamati  pada  akhir masa  inkubasi  untuk  menentukan  nilai  KHM. Pengujian  dilakukan  sebanyak  3  kali  pengulangan. Konsentrasi ekstrak yang dapat menghambat pertumbuhan bakteri dinyatakan sebagai nilai KHM.

## 2.5 Penentuan  konsentrasi bunuh  minimum
(KBM) ekstrak metanol daun paku resam
Satu  ose  bakteri  yang  tumbuh  pada  media  NB pengujian  KBM  diinokulasi  pada  media  NA  dengan teknik  streak  plate,  kemudian  diinkubasi  pada  suhu 37°C  selama  24  jam.  Konsentrasi  terendah  ekstrak yang  menyebabkan  pertumbuhan  koloni  <  0.1%  dari jumlah  koloni  inokulum  awal  dinyatakan  sebagai KBM.

## 2.6 Penentuan  kesetaraan  aktivitas  antibakteri dengan antibiotik klindamisin
Serial  larutan  klindamisin  dengan  konsentrasi  12.5; 25; 50; 100; 150 dan 300 µg/mL disiapkan dan diukur zona  hambatnya  pada  ketiga  bakteri.  Kurva  standar dibuat dengan menghubungkan konsentrasi klindamisin  ( x )  dan  zona hambat  ( y )  yang dihasilkan sehingga  didapat  suatu  persamaan  linear.  Kesetaran aktivitas  ekstrak  dengan  klindamisin  diperoleh dengan  memasukkan  zona  hambat  ekstrak  ( x )  pada persamaan linear kurva standar.

## 2.7 Teknik analisis data
Data  dianalisis  secara  kualitatif  dan  kuantitatif dengan  melihat  aktivitas  antibakteri  dan  konsentrasi
hambat  minimum  ekstrak  daun  paku  resam  terhadap bakteri P.  acnes ATCC  6919 ,  S.  epidemidis ATCC 12228 ,  S.  aureus ATCC  25923 .  Data  aktivitas antibakteri  dinyatakan  sebagai  rerata  luas  area hambat±SD.  Pengaruh ekstrak berdasarkan luas zona hambat  dianalisis  dengan  ANOVA  dan  uji  lanjut DNMRT  (α  0.05)  untuk  melihat  beda  nyata  antar konsentrasi  ekstrak.  Data  KHM  dan  KBM  ekstrak dinyatakan  dalam  nilai  (+)  jika  ada  pertumbuhan bakteri pada konsentrasi ekstrak tertentu dan (-) tidak ada  pertumbuhan  bakteri  pada  konsentrasi  ekstrak tertentu.  Nilai  kesetaraan  aktivitas  antibakteri diperoleh  dengan  memasukkan  zona  hambat  ekstrak metanol  paku  resam  ke  dalam  persamaan  kurva standar klindamisin.

## 3 HASIL DAN PEMBAHASAN

## 3.1 Aktivitas  antibakteri  ekstrak  metanol  daun paku resam
Pengujian  aktivitas  antibakteri  ekstrak  metanol  daun paku  resam  dilakukan  dengen  metode  difusi-cakram. Metode  ini  memiliki  beberapa  keuntungan  seperti kesederhanaan  metode,  biaya  yang  murah,  dapat digunakan untuk pengujian beberapa bakteri dan agen antimikroba  serta  mudah  dalam  menginterpretasikan hasilnya (Balouri et al., 2016). Metode ini juga umum digunakan dalam skrining antibakteri ekstrak tanaman,  minyak  esensial  dan  obat  lainnya  (Das et
al., 2010). Aktivitas antibakteri ekstrak metanol daun paku resam ditentukan berdasarkan pada zona bening yang  terbentuk  disekitar  kertas  cakram  yang  dikenal sebagai  zona  hambat  (Gambar  1).  Kekuatan antibakteri  dapat  dikelompokkan  dalam  3  kategori berdasarkan  nilai  zona  hambatnya  yaitu  kategori lemah (<5 mm), sedang (6-10 mm), kuat (11-20 mm) dan  sangat  kuat  (>  21  mm)  (Surjowardojo et  al., 2015).
Rerata  diameter  zona  hambat  ekstrak  metanol  daun paku  resam  pada  3  jenis  bakteri  penyebab  jerawat dapat  terlihat  pada  Tabel  1  dan  Gambar  1.  Analisis statistik menggunakan ANOVA menunjukkan bahwa pemberian  ekstrak  metanol  daun  paku  resam berpengaruh  nyata  pada  pertumbuhan  bakteri  uji ( p <0.05). Uji lanjut menggunakan DNMRT menunjukkan  bahwa  ekstrak  metanol  daun  paku resam  memiliki  rerata  zona  hambat  yang  berbeda nyata  pada  tiap  konsentrasi  yang  berbeda  terhadap bakteri P.  acnes dan S.  epidermidis .  Aktivitas antibakteri ekstrak daun paku resam dapat dikategorikan  beraktivitas  sedang  terhadap P.  acnes pada  konsentrasi  15%  dan  beraktivitas  kuat  pada konsentrasi 10%, 20% dan 30%. Pada S. epidermidis , ekstrak metanol daun paku resam beraktivitas sedang pada konsentrasi 10% dan 20% dan beraktivitas kuat pada konsentrasi 14% dan 30%. Aktivitas antibakteri terhadap S.  aureus teramati  lemah  dengan  nilai  zona hambat  <  5  mm  dan  hanya  ditemukan  pada
Tabel 1. Pengaruh aktivitas antibakteri berbagai konsentrasi ekstrak metanol daun paku resam terhadap bakteri P. acnes ATCC 6919 , S. epidermidis ATCC 12228 , dan S. aureus ATCC 25923
No Konsentrasi Ekstrak Metanol (%) Rata-rata Diameter Zona Hambat (mm) Propionibacterium acnes Staphylococcus epidermidis Staphylococcus aureus 1 2.5 6,77 b 5,72 b 0,00 a 2 5.0 9,61 c 8,64 c 0,00 a 3 10.0 12,38 e 10,23 d 2,83 b 4 15.0 10,40 cd 11,26 de 0,00 a 5 20.0 11,88 de 10,88 d 0,00 a 6 30.0 14,02 f 12,61 e 4,51 b 7 Kontrol (+) 22,46 g 20,04 f 23,54 c 8 Kontrol (-) 0,00 a 0,00 a 0,00 a
Keterangan:  Angka-angka  yang  diikuti  huruf  yang  bebeda  pada  kolom  menunjukkan  hasil  berbeda  nyata  berdasarkan  uji DNMRT pada α 0.05
konsentrasi  10%  dan  30%.  Perbandingan  terhadap aktivitas  antibakteri  klindamisin  0.03%  sebagai kontrol positif menunjukkan bahwa ekstrak methanol daun  paku  resam  memiliki  aktivitas  yang  lebih rendah  dan  berbeda  nyata  secara  statistik  ( p <0.05) pada ketiga jenis bakteri penyebab jerawat.
Ketiga  bakteri  uji, P.  acnes , S.  epidermidis dan S. aureus merupakan  bakteri  Gram  positif.  Bakteri Gram  positif  memiliki  sensitivitas  yang  lebih  tinggi terhadap  senyawa  antibakteri  dibandingkan  bakteri Gram  negatif.  Hal  ini  disebabkan  oleh  perbedaan
struktur  dinding  sel  bakteri  Gram  positif  lebih sederhana  dibandingkan  bakteri  Gram  negatif. Bakteri  Gram  positif  tidak  memiliki  membran  luar dan membran plasmanya dilapisi lapisan peptidoglikan yang lebih tebal sehingga memudahkan senyawa antibakteri masuk ke dalam selnya (Jubeh et al., 2020; Breijyeh et al., 2020). Aktivitas antibakteri ekstrak  metanol  paku  resam  pada S.  aureus tercatat paling  rendah.  Hal  ini  diduga  karena  adanya mekanisme  resistensi S.  aureus terhadap  senyawa antibakteri  dalam  ekstrak  metanol  daun  paku  resam. Jubeh et  al. (2020)  menyebutkan  ada  beberapa
Gambar 1. Zona hambat berbagai konsentrasi (%) ekstrak metanol daun paku resam terhadap bakteri (A) P. acnes ATCC 6919 , (B) S. epidermidis ATCC 12228 dan (C) S. aureus ATCC 25923; a) 2.5%, b) 5.0%, c) 10%, d) 15%, e) 20%, f) 30%, g) klindamisin 0,03% (300 ppm) (kontrol positif), dan h) akuades steril (kontrol negatif).
Tabel  2.    Konsentrasi  hambat  minimum  ekstrak  metanol  daun  paku  resam  terhadap  bakteri  penyebab  jerawat berdasarkan kekeruhan pada media cair setelah inkubasi 24 jam
Jenis Bakteri Uji Konsentrasi Ekstrak Metanol Daun (%) 6.5 3.25 1.63 0.81 0.4 0.2 Propionibacterium acnes - - - + + + Staphylococcus epidermidis - - - + + + Staphylococcus aureus - - + + + +
Keterangan:  Positif  (+)  =  media  keruh  (ada  pertumbuhan  bakteri  uji),  Negatif  (-)  =  media  tidak  keruh  (tidak  ada pertumbuhan bakteri)
mekanisme  resistensi  bakteri  Gram  positif  terhadap senyawa  antibakteri  seperti  kemampuan  menurunkan permeabilitas  diding  sel,  over-ekspresi  pompa efflux , dan  produksi  enzim  pendegradasi  dan  pengubah antibiotik.

## 3.2 Penentuan konstrasi hambat minimum (KHM) ekstrak methanol paku resam
Konsentrasi  hambat  minimum  (KHM)  ditentukan untuk  mengevaluasi  kepekaan  bakteri  terhadap ekstrak  metanol  daun  paku  resam.  Nilai  KHM merupakan  konsentrasi  terendah  dari  suatu  agen antimikroba  yang  dapat  mencegah  pertumbuhan bakteri.  Semakin  tinggi  nilai  KHM  maka  akan semakin rendah sensitivitas bakteri terhadap senyawa antibakteri  (Krochmal  dan  Wicher,  2021;  Li et  al., 2017). Nilai KHM ekstrak metanol daun paku resam pada P.  acnes , S.  epidermidis dan S.  aureus dapat dilihat  pada  Tabel  2.  Bakteri P.  acnes dan S.
epidermidis memiliki  sensitivitas  yang  lebih  tinggi dibandingkan S.  aureus terhadap  ekstrak  metanol daun  paku  resam.  Hal  ini  ditunjukkan  nilai  KHM ekstrak terhadap P. acnes dan S. epidermidis sebesar 1.63%,  sedangkan  pada S.  aureus KHM  ekstrak sebesar  3.25%.  Temuan  ini  sejalan  dengan  hasil skrining aktivitas antibakteri yang juga menunjukkan ekstrak  metanol  paku  resam  memiliki  aktivitas antibakteri yang lebih tinggi terhadap P. acnes dan S. epidermidis dibandingkan terhadap S. aureus .
3.2 Penentuan  konsentrasi bunuh  minimum

## (KBM) ekstrak metanol daun paku resam
Kepekaan bakteri terhadap suatu senyawa antibakteri juga  dapat  dinilai  berdasarkan  konsentrasi  bunuh minimum  (KBM)  dari  antibakteri.  Nilai  KBM merupakan  konsentrasi  terendah  suatu  antibakteri yang  menyebabkan  <  0.1%  inokulum  masih  dapat tumbuh  pada  media  tanpa  antibakteri.  Nilai  KBM ditentukan  dengan  mengkultur  kembali  media  kultur yang  menghambat  pertumbuhan  bakteri  pada  uji KHM dengan teknik streak-plate , kemudian diinkubasi  selama  24-48  jam  (Skyes  dan  Rankin, 2014).  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  nilai KBM ekstrak metanol daun paku resam lebih rendah terhadap P.  acnes dan S.  epidermidis (3.25%) dibandingkan  pada S.  aureus (6.5%)  (Tabel  3).  Hal ini sejalan dengan hasil pengujian aktivitas antibakteri dan KHM sebelumnya (6.5%).
Hasil  penelitian  ini  menunjukkan  bahwa  ekstrak metanol  memiliki  aktivitas  antibakteri  yang  rendah jika dibandingkan dengan kontrol positif, klindamisin.  Zakaria et  al. (2016)  juga  menemukan bahwa  ekstrak  metanol  daun  paku  resam  memiliki aktivitas yang sedang terhadap S. aureus . Nilai KHM dan  KBM  ekstrak  metanol  daun  paku  resam  adalah 0.0625%.  Nilai  ini  jauh  lebih  rendah  dibandingkan temuan  nilai  KHM  (3.25%)  dan  KBM  (6.5%)  pada penelitian  ini.  Perbedaan  sumber  daun  paku  resam diduga  menjadi  faktor  yang  mempengaruhi  aktivitas antibakteri  ekstrak.  Tidak  ditemukan  penelitian pembanding  terkait  aktivitas  antibakteri  ekstrak
Tabel 3. Konsentrasi bunuh minimum ekstrak metanol daun paku resam terhadap bakteri penyebab jerawat berdasarkan jumlah bakteri yang tumbuh pada media agar setelah inkubasi 24 jam
Jenis Bakteri Uji Konsentrasi Ekstrak Metanol Daun (%) 13.0 6.5 3.25 1.63 0.81 Propionibacterium acnes - - + + + Staphylococcus epidermidis - - + + + Staphylococcus aureus - + + + +
Keterangan  :  Positif  (+)  =  Terdapat  pertumbuhan  koloni  bakteri  uji  pada  media  agar,  Negatif  (-)  =  Tidak  terdapat pertumbuhan koloni bakteri uji pada media agar
metanol  daun  paku  resam  terhadap P.  acnes dan S. epidermidis .
Adanya  efek  penghambatan  pertumbuhan  bakteri oleh  ekstrak  metanol  daun  paku  resam  berkaitan dengan  kandungan  metabolit  sekunder  yang  terdapat pada  ekstrak.  Metabolit  sekunder  golongan  fenolik merupakan  golongan  metabolit  sekunder utama  yang memiliki aktivitas penghambatan pertumbuhan bakteri  (Das et  al., 2010).  Derivat  fenolik  seperti asam  fenolat,  flavonoid,  stilben  dan  tanin  memiliki beberapa  mekanisme  untuk  menghasilkan  efek antibakterinya.  Kelompok  senyawa  ini  mampu menekan  faktor  virulensi  mikroba  dengan  cara menghambat  pembentukan  biofilm,  mengurangi adhesi ligan-host dan  menetralisasi  toksin  bakteri.
Komponen fenolik juga mampu mengurangi fluiditas membran  bakteri,  menghambat  sintesis  asam  nukleat dan  sintesis  dinding  sel  hingga  menghambat metabolisme energi. Kemampuan ini sangat bergantung  pada  jumlah  gugus  hidroksil  senyawa fenolik  (Tako  et  al.,  2020).  Othman  et  al.,  (2020) melaporkan  bahwa  daun  paku  resam  mengandung metabolit  sekunder  kelompok  fenolik.  Ada  4 komponen  fenolik  yang  terdeteksi  pada  daun  paku resam  diantaranya  2-metoksi-4-vinilfenol,  vanilin,  4- hidroksibenzaldehida  dan  4-hidroksibezohidrazida. Aktivitas  antibakteri  sebagian  besar  polifenol bergantung  pada  interaksi  antara  polifenol  dan molekul  permukaan  dinding  sel  bakteri.  Interaksi  ini ditentukan oleh hidrofobisitas molekul permukaan sel (Bouarab-Chiban et al, 2019.
3.4  Kesetaraan  aktivitas  antibakteri  ekstrak metanol  daun  paku  resam  dengan  antibiotik klindamisin
Klindamisin  adalah  salah  satu  antibiotik  yang  sering digunakan  pada  penanganan  jerawat.  Klindamisin biasanya  dikombinasikan  dengan  benzoil  peroksida
untuk  menghasilkan  efek  yang  memuaskan  (Nguyen dan  Eichenfield,  2015).  Antibiotik  ini  berkerja dengan  menghambat  sintesis  protein  bakteri  melalui pengikatan pada situs aktif sub unit ribosom sehingga mengganggu  tahap  sintesis  protein.  Klindamisin berikatan lansung pada sub unit 23S ribosomal RNA dari  sub  unit  50S  ribosom  bakteri.  Mekanisme  kerja lain dari klindamisin dalam menghambat pertumbuhan  bakteri  yaitu  denga  menghambat  kerja peptidil transferase dan proses translokasi (Alvarez et al., 2022).
Penentuan  kesetaraan  aktivitas  antibakteri  ekstrak metanol  daun  paku  resam  dengan  klindamisin bertujuan untuk mengetahui pada konsentrasi ekstrak berapa dan konsentrasi klindamisin berapa dihasilkan daya  hambat  yang  sama.  Sebuah  kurva  standar antibiotik  dibuat  dengan  menguhubung  berbagai konsentrasi  antibiotik  ( x )  dan  zona  hambatnya  ( y ) sehingga  diperoleh  suatu  persamaan  linear  (Gambar 2).  Kesetaraan  aktivitas  ekstrak  diperoleh  dengan memasukkan  zona  hambat  ekstrak  pada  persamaan linear  sehingga  konsentrasi  antibiotik  yang  setara dengan  ekstrak  tersebut  dapat  diketahui  (Muharni, 2017).
Hubungan antara log konsentrasi klindamisin ( x ) dan zona hambatnya ( y ) terhadap P. acnes , S. epidermidis dan S. aureus dapat dilihat pada Gambar 4. Aktivitas antibakteri 1 µg/mL ekstrak metanol daun paku resam terhadap P.  acnes setara  dengan  0.38  x  10 -3 µg/mL klindamisin. Pada S. epidermidis aktivitas antibakteri 1  µg/mL  ekstrak  metanol  daun  paku  resam  setara dengan    0.50  x  10 -3 µg/mL  klindamisin.  Aktivitas antibakteri  ekstrak  lebih  kuat  pada S.  epidermidis dibandingkan pada P. acnes , namun jika dibandingkan dengan  klindamisin  aktivitasnya  masih jauh lebih rendah. Hal ini sesuai dengan pengamatan aktivitas  antibakteri  yang  telah  dilakukan.  Rerata diameter  zona  bening  yang  dihasilkan  ekstrak
berbeda  nyata  dengan  rerata  zona  bening  yang dihasilkan  oleh  klindamisin  ( p <0.05).  analisis kesetaraan  kekuatan  aktibakteri  ekstrak  terhadap S. aureus tidak  dapat  dilakukan  dikarena  zona  inhibisi yang  dihasilkan  ekstrak  berada  diluar  rentang  zona inhibisi  klindamisin  sehingga  tidak  bisa  dikonversi menggunakan persamaan linear kurva standar.

## 4 KESIMPULAN
Ekstrak  metanol  daun  paku  resam  memiliki  aktivitas antibakteri  pada  tiga  jenis  bakteri  penyebab  jerawat yaitu P.  acnes ATCC  6919, S.  epidermidis ATCC 12228  dan S.  aureus ATCC  25923  berdasarkan  uji antibakteri  dengan  metode  cakram,  KHM dan  KBM. Aktivitas  antibakteri  ekstrak  metanol  daun  paku resam  ini  lebih  kuat  terhadap P  acnes ATCC  6919 dan S.  epidermidis ATCC  12228  dibandingkan S. aureus ATCC 25923, namun masih lebih rendah jika dibandingkan  dengan  klindamisin.    Sebanyak  1 µg/mL  ekstrak  metanol  daun  paku  resam  memiliki aktivitas antibakteri pada P. acnes ATCC 6919 setara dengan    0.38  x  10 -3 µg/mL  klindamisin,  sedangkan pada S.  epidermidis ATCC  12228 , aktivitas antibakteri 1 µg/mL ekstrak metanol daun paku resam setara dengan  0.50 x 10 -3 µg/mL klindamisin.

## 5. UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan  terima  kasih  ditujukan  kepada  Universitas Bangka Belitung selaku pemberi dana pada penelitian ini  melalui  Skema  Penelitian  Dosen  Tingkat  Jurusan (PDTJ)  tahun  2022  melalui  Lembaga  Penelitian  dan Pengabdian  kepada  Masyarakat  dengan  kontrak penelitian Nomor: 295.H/UN50/L/PP/2022.

## 5 DAFTAR PUSTAKA
Alvarez,  L.A.,  de  Sijpe,  G.V.,  Desmet,  S., Metsemaker, W-J., Spriet, I., Allegaert, K., Rozenski, J.  (2022)  ‘Ways  to  improve  insight  into  clindamycin pharmacology  and  pharmacokinetics  tailored  to practice’ Antibiotics, 11, pp. 701. doi: 10.3390/antibiotics11050701.
Balouiri,  M.,  Sadiki,  M.,  Ibnsouda,  S.K.  (2016) ‘Methods  for  in  vitro  evaluating  antimicrobial activity:  A  review’ Journal  of  Pharmaceutical Analysis,
6, pp. 71-79.
doi: 10.1016/j.jpha.2015.11.005.
Bouarab-Chibane,  L.,  Forquet,  v.,  Lanteri,  P., Clement,  Y.,  Leonard-Akkari,  L.,  Oulahal,  N., Degraeve,  P.,  Bordes,  C.  (2019)  ‘Antibacterial properties of polyphenols: charactirization and QSAR (quantitative  structure-activity  relationship)  models’ Front. Microbiol. 10, pp.
829.
Doi: 10.3389/fmicb.2019.00829.
Breijyeh,  Z.,  Jubeh,  B.,  Karaman,  R.  (2020) ‘Resistance  of  Gram-negatif  bacteria  to  current antibacterial  agents  and  approaches  to  resolve  it’ Molecules,
25, pp. 1340. doi: 10.3390/molecules25061340.
Gambar 2. Kurva standar zona hambat klindamisin terhadap bakteri penyebab jerawat; (a) P. acnes , (b) S. epidermidis , (c) S. aureus .
Claudel,  J.P.,  Auffret,  N.,  Leccia,  M.T.,  Poli,  F., Corvec,  S.,  Dreno,  B.  (2018)  ‘Staphylococcus epidermidis:  A  potential  new  player  in  the physiopahology  of  acnes?’ Dermatology, 235,  pp. 287-294. doi: 10.1159/000499858.
Das,  K.,  Tiwari,  R.K.S.,  Shrivastava,  D.K.  (2010) ‘Techniques  for  evaluation  of  medicinal  plant products as antimicrobial agent: Current methods and future trends’ Journal of Medicinal Plants Research, 4(2), pp. 104-111. doi: 10.5897/JMPR09.030.
Dhamayanti, M., (2009) ‘Overview adolescent health problems  and  services,  Adolescent  Health  National Symposia: Current  Challenges  in  Management ,  2. 2009
Heng,  A.H.S.,  &  Chew,  F.T.  (2020)  ‘Systematic review  of  the  epidemiology  of  acnes  vulgaris’ Scientific Report , 10, pp. 5754. doi: 10.1038/s41598- 020-62715-3.
Jubeh,  B.,  Breijyeh,  Z.,  Karaman,  R.  (2020) ‘Resistance  of  Gram-positive  bacteria  to  current antibacterial  agents  and  overcoming  approaches’ Molecules,
25,
pp. 2888. doi: 10.3390/molecules25122888.
Krochmal, B.K., Wicher, R.D. (2021) ‘The minimum inhibitory  concentration  of  antibiotics  methods, interpretation,  clinical  relevance’ Pathogens, 10,  pp. 165. doi: 10.3390/pathogens10020165.
Lai, H.Y., Lim, Y.Y., Tan, S.P. (2014) ‘Antioxidative,  tyrosinase  inhibiting  and  antibacteria activities  of  leaf  extracts  from  medicinal  ferns’ Bioscience,
73(6),
pp. 1362-1366. doi: 10.1271/bbb.90018
Li,  J.,  Xie  S.,  Ahmed,  S.,  Wang,  F.,  Gu,  Y.,  Zhang, C.,  Chai,  X.,  Wu,  Y.,  Cai,  J.,  Cheng,  G.  (2017) ‘Antimicrobial  activity  and  resistance:  influencing factors’. Frontier  in  Pharmacology, 8,  pp.  364.  doi: 10.3389/fphar.2017.00364.
Liu, X.L., Xu, Y.J., Go, M.L. (2008) ‘Functionalized chalcones with basic functionalities have antibacterial activity  againts  drug  sensitive Staphylococcus aureus’  Eur.  J.  Med.  Chem. 43,  pp.  1681-1687.  doi: 10.1016/j.ejmech.2007.10.007
Majdanik,  M.M.,  Kepa,  M.  Wojtyczka,  R.D.,  Idzik, D., Wasik, T.J. (2018) ‘Phenolic compound disminish antibiotic  resistence  of Staphylococcus  aureus clinical  strains’ Int.  J.  Environ.  Res.  Public  Health, 15, pp 2321. doi: 10.3390/ijerph15102321.
Morales,  G.,  Sierra,  P.,  Mancilla,  A.,  Paredes,  A., Loyola,  L.A.,  Gallardo,  O.,  Borquez,  J.  (2003) ’Secondary  metabolites  from  four  medicinal  plants
from  Northen  Chile:  antimicrobial  activity  and biotoxicity  against Artemia  salina ’ J.  Clin.  Chem. Soc, 48, pp. N2. doi: 10.4067/S0717- 97072003000200002.
Muharni,  Fitrya,  Farida,  S.  (2017)  ‘  Uji  aktivitas antibakteri ekstrak etanol tanaman obat suku Musi di Kabupaten  Musi  Banyuasin,  Sumatera  Selatan. Jurnal  Kefarmasian  Indonesia, 7(2),  pp.  127-135. doi: 10.22435/jki.v7i2.6070.127-135.
Nasution,  J.,  Masitah,  P.D.,  Riyanto.  (2016)  ‘Kajian etnobotani  tumbuhan  obat  oleh  etnis  masyarakat  di dusun Aras Napal Kiri dan Dusun Aras Napal Kanan Desa  Bukit  Mas  Kecamatan  Besitang  Kabupaten Langkat’ Jurnal  Biosains ,  2(2),  pp.  91-96.  doi: 10.24114/jbio.v2i2.4225.
Nguyen,  T.A.,  Eichenfield,  L.F.  (2015)  ‘Profile  of clindamicin phosphate 1.2%/benzoyl peroxide 3.75% aqueous  gel  for  the  treatment  od  acnes  vulgaris’ Clinical  Cosmetic  and  Investigational  Dermatology, 8, pp. 549-554. doi:10.2147/CCID.S79628 .
Othman, R., Ramya, R., Hassan, N.M., Kamoona, S. (2020) ‘Qualitative  and  quantitative  phenolic compounds analysis of Dicranopteris linearis different  fractional  polarities  leaves  extract’ Journal of  Pharmacy  and  Nutrition  Sciences, 10,  pp.  7-12. doi: 10.29169/1927-5951.2020.10.01.2.
Rao, K.N., Venkatachalam, S.R. (2000) ‘Inhibition of dihydrofolate  reductase  and  cell  growth  activity  by the  phenanthroindolizine  alkaloids  pergularinine  and tylophorinidine:  the  in  vitro  cytotoxicity  of  these plant  alkaloids  and  their  potential  as  antimicrobial and  anticancer  agents’ Toxicol  in  vitro, 14,  pp.    53- 59. doi: 10.1016/s0887-2333(99)00092-2
Rizal, R. (2017) ‘Uji aktivitas antioksidan daun paku resam  (Gleichenia  linearis  (Burm.  F.)  S.  W.  Clarke) dengan  metode  DPPH’ Borneo Journal of Pharmascientech , 1(2), pp. 1-10.
Sanjay,  R.  (2011)  ‘Acnes  Vulgaris  treatment:  The current scenario’ Indian J. Dermatol , 56(1), pp. 7-13. doi: 10.4103/0019-5154.77543.
Sari,  L.,  Jusuf,  N.K.,  Putra,  I.B.  (2020)  ‘Bacterial identification of acnes vulgaris’ Bali Med. J, 9(3), pp. 753-756. doi: 10.15562/bmj.v9i3.1737.
Skyes,  J.E.,  Rankin,  S.C.  (2014)  Isolation  and identification  of  aerobic  and  anaerobic  bacteria,  in Canine  and  Feline  Infectious  Disease .  California: Elsevier Inc.
Surjowardojo,  P.,  Susilorini,  T.E.,  Sirait,  G.R.B. (2015)  ‘Daya  hambat  dekok  kulit  apel  Manalagi (Malus  sylvestrs  Mill.)  terhadap  pertumbuhan
Staphylococcus aureus dan Pseudomonas sp. penyebab  mastitis  pada  sapi  perah’ J.  Ternak Tropika , 16(2),
pp. 40-48. doi:
10.21776/ub.jtapro.2015.016.02.6.
Tako, M., Kerekes, E.B., Zambrano, C., Kotogan, A., Papp,  T.,  Krisch,  J.,  Vagvolgyi,  C.  (2020)  ‘Plant phenolics and phenolic-enriched extracts as antimicrobial  agents  against  food-contaminating microorganisms’ Antioxidants, 9,  pp.  165.  doi: 10.3390/antiox9020165.
Winda,  G.W.,  Budhi,  S.,  Sisilia,  L.  (2015) ‘Etnobotani  masyaralat  desa  saham  (Studi  kasus  di Desa  Saham,  Kecamatan  Sengah  Temila  Kabupaten Landak,  Kalimantan  Barat’ J.  Hutan  Lestari, 4(1), pp. 1-8. doi: 10.26418/jhl.v4i1.14206.
Zakaria,  Z.A.,  Desa,  A.M.,  Ramasamy,  K.,  Ahmat, N.,  Mohamad,  A.S.,  Israf,  D.A.,  Sulaiman,  M.R. (2016)  ‘Lack  of  antimirobial  activities  of Dicarnopteris  linearis  extracts  and  fraction’ Advance Journal of Microbiology Research, 10(1), pp. 1-5.