e-issn: 2716-4608 p-issn: 2655-366X
SENSITIVITY TEST OF VIBRIO sp BACTERIA ISOLATED FROM DUMAI SEA WATERS TO ANTIBIOTICS (CIPROFLOXACIN, ERYTROMYCIN AND STREPTOMYCIN)
Febi Anisa Fitri* 1 , Feliatra 2 , Dessy Yoswati 2
1 Student of the Faculty of Fisheries and Marine Universitas Riau, Pekanbaru
2 Lecturer at the Faculty of Fisheries and Marine Universitas Riau, Pekanbaru *febi.anisafitri@student.unri.ac.id

## ABSTRACT
The research was conducted from Feb until April 2019. The purpose of this study was to examine the resistance of Vibrio sp bacteria toward antibiotics (ciprofloxacin, streptomycin and erythromycin) isolated from Dumai sea waters. The spread of Vibrio sp bacteria has been found  in  sea  waters, Vibrio sp  bacteria  have  been  found  on  the  surface  of  faecal contaminated water and the existence of the population is related to organic waste disposal. Antibiotic  susceptibility  test  was  performed  using  Kirby-Bauer  method.  Resistance  test showed that isolated V2, V9, V11, V13, V19, V23, V24 dan V28 were resistant to antibiotic ciprofloxacin, streptomycin and erythromycin with inhibitory zones ranging from 7,1 to 31,7 mm. Isolated V2 and V9 are resistant to erythromycin, isolated V11, V13, V19, V23 and V28 are resistant to streptomycin and isolated V24 is resistant to ciprofloxacin.
Keywords: Vibrio sp, Pathogenic Bacteria, Resistance, Antibiotics

## I. PENDAHULUAN
Pencemaran  limbah  dalam  suatu perairan  mempunyai  hubungan  dengan jenis  dan  jumlah  mikroorganisme  dalam perairan  tersebut.  Air  buangan  kota  dan desa  yang  berpenduduk  padat  tidak  hanya meningkatkan pertumbuhan bakteri koliform  akan  tetapi  juga  meningkatkan jumlah  bakteri  patogen  seperti Salmonella, Shigella, Vibrio cholera dan Pseudomonas.
Tingginya kandungan bakteri patogen akan mengkontaminasi  biota-biota  yang  ada  di perairan  tersebut.  Menurut  Feliatra  et  al. (2012)  kehadiran  jenis  bakteri  patogen seperti Vibrio sp., Aeromonas sp.,  dan Pseudomonas sp  dapat  menyebabkan penyakit pada ikan budidaya sehingga perlu diantisipasi untuk pencegahannya.
Bakteri Vibrio sp  adalah  bakteri Gram  negatif  yang  berbentuk  batang bengkok,  oksidase  dan  katalase  positif,
memfermentasikan  glukosa  tanpa  meng- hasilkan  gas  dan  mempunyai  flagel  polar. Bakteri  ini  sangat  umum  dijumpai  di  air payau  dan  laut.  Sebagian  bersifat  saproba namun ada beberapa spesies yang menyebabkan  penyakit  Vibriosis  pada hewan  akuatik  termasuk  ikan.  Penyebaran bakteri Vibrio sp  di  perairan  laut  telah banyak ditemukan karena bakteri Vibrio sp merupakan  bakteri  yang  berasal  dari  laut (Mahbubillah,  2011),  selain  di  ekosistem perairan, bakteri ini banyak ditemukan pada permukaan  air  yang  terkontaminasi  feses dan keberadaan jumlah penduduk berkaitan dengan pembuangan limbah organik, sehingga  penyebaran  bakteri  Vibrio  sp sangat mudah ditemukan.
Menurut  Feliatra et  al. (2012) kehadiran  jenis  bakteri  patogen Vibrio sp, Aeromonas sp  dan Pseudomonas sp  akan menyebabkan penyakit pada biota laut yang
p-issn: 2655-366X
perlu diantisipasi pencegahannya. Beberapa penelitian  telah  banyak  dilakukan  untuk mencegah bakteri
patogen yang menginfeksi  ikan  yaitu  dengan  senyawa antimikroba.  Senyawa  antimikroba  dapat diperoleh  dari  tanaman,  hewan  atau dihasilkan  oleh  mikroba  yang  umumnya dikenal dengan istilah biopreservatif.
Uji  resistensi  merupakan  pengujian yang dilakukan untuk mengetahui kepekaan bakteri terhadap suatu antibiotik.
Penggunaan  antibiotik  yang  berlebih  atau tidak terkendali menyebabkan efek samping yang berbahaya, yang
menyebabkan bakteri-bakteri tertentu resisten  (tahan)  terhadap  antibiotik.  Uji resistensi  yang  akan  di  uji  adalah  bakteri Vibrio sp  yang  diisolasi  dari  perairan  laut Dumai terhadap 3 antibiotik yaitu Ciprofloxacin, Erythromycin dan
Streptomycin.

## 2.      METODE PENELITIAN Waktu dan Tempat
Penelitian ini telah dilaksanakan pada bulan  Februari  –  April  2019.  Kegiatan isolasi bakteri Vibrio sp dan uji sensitivitas dilakukan  di  Laboratorium  Mikrobiologi Laut  Fakultas  Perikanan  dan  Kelautan Universitas Riau.

## Metode Penelitian
Penelitian  ini  menggunakan  metode eksperimen untuk melakukan uji sensitivitas  pada  bakteri Vibrio sp  yang diisolasi dari perairan laut Dumai dengan 3 antibiotik  berbeda.  Data  primer  diperoleh dari  hasil  pengamatan,  pengukuran  dan pengujian.  Data  sekunder  diperoleh  dari studi  pustaka  dan  literatur-literatur  serta diskusi  dengan  pembimbing.  Data  yang diperoleh dari hasil isolasi, identifikasi dan analisis  disajikan  dalam  bentuk  tabel  dan gambar.
Pengujian sensitivitas bakteri patogen dilakukan dengan metode difusi agar,  yang mengacu  pada  metode  menurut  Wolf  dan Gibbons et al. (1996).

## Prosedur Penelitian
Pengujian sensitivitas bakteri patogen dilakukan dengan metode difusi agar,  yang mengacu  pada  metode  menurut  Wolf  dan Gibbons et  al .  (1996).  Bakteri  patogen  uji yang  telah  dimurnikan  didalam  media  NB di  ambil  sebanyak  0,5  µL  dan  ditanam kedalam    media  NA  dan  diratakan homogen. Setelah media yang berisi biakan bakteri  patogen  memadat  diberi  kertas cakram  yang  ditetesi  dengan  larutan antibiotik  yakni  Ciprofloxacin  ®500mg, Erythromycin    ®250mg  dan  Streptomycin ®100mg  sebagai kontrol positif dan kertas cakram  yang  ditetesi  media  NB    sebanyak 0,5  µL  sebagai  kontrol  negatif  dan dilakukan  pengulangan  sebanyak  3  kali. Selanjutnya  di  inkubasi  pada  suhu  28 o C selama  24  jam.  Filtrat  yang  mengandung substansi  antibakteri  akan  melakukan penghambatan  terhadap  bakteri  patogen yang  dibuktikan  dengan  adanya  zona bening  di  sekitar  cakram.  Besarnya aktivitas antibakteri ditentukan dengan cara mengukur  diameter  zona  bening  di  sekitar cakram.
Besarnya  aktivitas  dan  zona  hambat yang  terbentuk  dapat  dipengaruhi  oleh beberapa  faktor  yaitu  jenis  atau  spesies bakteri,  suhu  dan  waktu  kontak  antara bakteri  dengan  zat  uji  dan  keberadaan bahan  organik  lain  dalam  zat  uji  tersebut (Fazier dan Westhoff dalam Yuhana, 2011) zona bening yang terbentuk disekitar kertas cakram merupakan zona aktivitas antimikroba  terhadap  bakteri  patogen.
Terbentuknya  zona  bening  dikarenakan adanya penghambatan senyawa antimikroba  terhadap  sel-sel  mikroba, secara  umum  mekanisme  kerja  dari  suatu senyawa  antimikroba  dapat  dilakukan dengan  cara  mengganggu  atau  merusak penyusun  dinding  sel,  bereaksi  dengan membran sel yang menyebabkan peningkatan permeabilitas seluler, inaktifasi enzim-enzim essensial dan
destruksi  atau  inaktifasi  fungsi  dan  materi genetik (Sari et al ., 2013).

## 3.     HASIL DAN PEMBAHASAN Uji Sensitivitas
Jenis bakteri Vibrio sp yang didapatkan berdasarkan hasil isolasi dan uji lanjut  digunakan  untuk  uji  sensitivitas terhadap  antibiotik  yang  dilakukan  dengan cara  in-vitro.Hasil  yang  diperoleh  pada  uji
sensitivitas  bakteri Vibrio sp  ke  32  isolat yang  didapat  terhadap  3  antibiotik  berbeda yang  dilakukan  pengulangan  sebanyak  3 kali  dan  untuk  hasil  rata-rata  daya  hambat paling resisten dapat dilihat pada (Tabel 1). Masing-masing antibiotik memiliki kemampuan  yang  berbeda-beda  dalam menghambat  pertumbuhan  bakteri Vibrio sp,  yang  ditunjukkan  adanya  zona  bening disekitar kertas cakram.
Tabel 1. Rata-Rata Daya Hambat Bakteri Vibrio Terhadap 3 Antibiotik
Keterangan : R : Rata-rata, SD : Standar Deviasi, Cakram 6 mm
Senyawa antimikroba yang
menyerang  bakteri  akan  merusak  dinding selnya  atau  mencegah  sintesisnya,  Dinding sel yang rusak akan menimbulkan plamolisis.  Jika  protoplas  ini  diletakkan pada  lingkungan  dengan  tekanan  osmotik tertentu,  mereka  akan  mengambil  cairan dengan cepat, mengembang dan pecah. Jika fungsi integritas ini rusak maka makromolekul  dan  ion  keluar  dari  sel kemudian  terjadi  sel  lisis  bahkan  terjadi kematin. Membran sitoplasma dapat dengan  mudah  dikacaukan  oleh  agen antimikroba yang mengakibatkan
terhambatnya pertumbuhan bakteri patogen (Jawetz et al., 2005 dalam Moritania et al.
2019).
Berdasarkan  jumlah  stasiun  yaitu  5 stasiun  didapat  8  isolat  terpilih  (Tabel  1) yaitu  stasiun  1  terpilih  isolat  V2  dengan rata-rata  antibiotik  ciprofloxacin  21,6  mm, erythromycin  17,3  mm  dan  streptomycin 12,3  mm,  stasiun  2  terpilih  isolat  V9
dengan  rata-rata  antibiotik  ciprofloxacin 26,5  mm,  erythromycin  10,2  mm  dan streptomycin  10,8  mm  serta  isolat  V11 dengan  rata-rata  antibiotik  ciprofloxacin 22,9  mm,  erythromycin  11,5  mm  dan streptomycin  7,9  mm,  stasiun  3  terpilih isolat  V13  dengan  rata-rata  antibiotik ciprofloxacin  21,4  mm,  erythromycin  17,9 mm  dan  streptomycin  7,1  mm  serta  isolat V19 dengan rata-rata antibiotik ciprofloxacin  20,8  mm,  erythromycin  24,2 mm  dan  streptomycin  11,0  mm,  stasiun  4 terpilih  isolat  V23  dengan  rata-rata antibiotik ciprofloxacin 26,8 mm, erythromycin  31,7  mm  dan  streptomycin 12,6  mm  serta  isolat  V24  dengan  rata-rata antibiotik ciprofloxacin 16,0 mm, erythromycin  30,0  mm  dan  streptomycin 22,5 mm untuk stasiun 5 terpilih isolat V28 dengan  rata-rata  antibiotik  ciprofloxacin 23,6  mm,  erythromycin  27,2  mm  dan streptomycin  19,1  mm.  Hasil  dari  ke-32 isolat  bakteri  dari  uji  sensitivitas  didapat  8
Kode Isolat Diameter Zona Hambat (mm) Ciprofloxacin Erythromycin Streptomycin R ± SD R ± SD R ± SD V2 21,6 ± 5,8 17,3 ± 7,8 12,3 ± 3,3 V9 26,5 ± 2,5 10,2 ± 4,5 10,8 ± 3,4 V11 22,9 ± 5,2 11,5 ± 9,3 7,9 ± 4,3 V13 21,4 ± 6,9 17,9 ± 5,2 7,1 ± 1,5 V19 20,8 ± 0,6 24,2 ± 0,6 11,0 ± 3,4 V23 26,8 ± 2,5 31,7 ± 8,1 12,6 ± 1,6 V24 16,0 ± 2,2 29,8 ± 3,8 22,5 ± 1 V28 23,6 ± 2,4 27,2 ± 13,5 19,1 ± 5,9
isolat bakteri Vibrio yang termasuk resisten (Tabel  1)  karena  memiliki  rata-rata  yang terkecil dari isolat yang lainnya.
Menurut  Melki et  al .,  (2010)  dalam penelitiannya terdapat perbedaan komposisi dan struktur dinding sel pada setiap bakteri. Bakteri  gram  negatif  mengandung  lipid, lemak  atau  substansi  seperti  lemak  dalam presentasi  lebih  tinggi  dari  pada  yang dikandung bakteri gram positif.
Pada  bakteri  Gram  negatif  struktur selnya lebih kompleks yang terdiri atas tiga lapis, yaitu lapisan luar berupa lipoprotein , lapisan tengah lipopolisakarida , dan lapisan dalam peptidoglikan (Syawal et al.,
2017).

## 4. KESIMPULAN DAN SARAN
Berdasarkan hasil penelitian ini dapat diketahui  bahwa  hasil  uji  sensitivitas  di peroleh  8  isolat  dari  32  isolat  yang  diuji resistensinya  yaitu  stasiun  1  isolat  V2, stasiun 2 isolat V9 dan V11, stasiun 3 isolat V13 dan V19, stasiun 4 isolat V23 dan V24 serta  stasiun  5  isolat  V28  yang  tergolong dalam  bakteri  kategori  kuat  karena  zona bening  yang  terbentuk  paling  kecil  yang mengartikan  bakteri  tersebut  masih  tetap tumbuh  pada  area  antibiotik  yang  diuji. Isolat  V2  dan  V9  resisten  terhadap antibiotik  Erythromycin,  isolat  V11,  V13, V19,  V23  dan  V28  resisten  terhadap antibiotik Streptomycin, isolat V24 resisten terhadap antibiotik Ciprofloxacin.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Feliatra., Y. Fitria, dan Nursyirwani. (2012). Antagonis Bakteri Probiotik yang Diisolasi dari  Usus  dan  Lambung  Ikan  Kerapu  Bebek  ( Cromileptes  altivelis )  terhadap  Bakteri Patogen . Jurnal Perikanan dan Kelautan , volume 17(1), pages 16-25
2. Jatwetz,  E.,  J.Melnick.  (2005).  Jakarta:  EGC  Jawetz,  Melnick  and  Adelberg Mikrobiologi Kedokteran.
3. Mahbubillah, MA. (2011). Buku Budidaya Udang Vannamei
4. Melki., W. Ayu, Kurniati. (2010). Uji Antibakteri Ekstrak Gracilaria sp (Rumput Laut) terhadap  Bakteri Escherichia  coli dan Staphylococcus  aureus .  Universitas  Sriwijaya, Indralaya-Indonesia
5. Moritania, R., I. Effendi, Feliatra. (2019). Isolation and Antagonism of Bacteria Test of Biota  in  the  Mangrove  Ecosystem  Kayu  Ara  River  Siak  Regency. Asian  Journal  of Aquatic Sciences , volume 2(3), pages 21-27
6. Sari, Y.N.M., S. Sumyarti dan Jamsari. 2013. Isolasi, Karakterisasi dan Identifikasi DNA Bakteri  Asam  Laktat  (BAL)  yang  Berpotensi  Sebagai  Antimikroba  dari  Fermentasi Markisa Kuning (Passiflora edulisvar flavicarfa). Jurnal Kimia Unand (ISSN No.  2303- 3401), Vol 2(2).
7. Syawal,  H.,  R.  Karnila,  A.  Dirta,  R.  Kurniawan.  (2017).  Ekstrak  Daun Rhizophora sp. Menghambat  Pertumbuhan  Bakteri Streptococcus  agalactiae dan Edwardsiella  tarda. Jurnal Veteriner , volume 18(4), pages 604-609
8. Wolf,  C.E  dan  W.R  Gibbons.  (1996).  Improved  method  for  the  determination  of nisin. Journal Appl. Bacteriology , volume 80(4), pages 453-457.
9. Yuhana,  N.,  A.  Irianto  dan  H.  Pramono.  2011.  Rekayasa  Mikroorganisme  Inisiator Perifiton  pada  Kolam  Budidaya  Ikan  Tilapia  dengan  Pemberian  Konsorsia Mikroorganisme Unggul. Jurnal Perikanan (J. Fish Sci.), volume XIII(1), pages 13-21