http://journal.uinsgd.ac.id/index.php/biodjati

## STUDI AWAL KULTUR BIJI SOWANG (Xanthostemon novaguineense Valet.) SECARA IN-VITRO
Sri Wilujeng 1 , Verena Agustini 2
1 Program Studi Kehutanan, Fakultas Kehutanan, Universitas Winaya Mukti
2 Jurusan Biologi, FMIPA, Universitas Cenderawasih
Diterima 21 April 2017 Disetujui 28 Mei 2017 Publish 31 Mei 2017
Korespondensi : e-mail : 1 sriwilujeng@yahoo.co.id
2 verena.agustini@gmail.com
e-ISSN : 2541-4208 p-ISSN : 2548-1606
Abstrak.  Sowang  (Xanthostemon  novoguineense  Valet.)  diidentifikasi sebagai  spesies  endemik  Papua.  X.  novaguineense  merupakan  jenis tumbuhan  New  Guinea  bagian  barat  dengan  data  ilmiah  yang  sangat terbatas.  Di  alam,  jumlah  tegakan  dan  habitat  sowang  saat  ini  telah menyusut  karena  eksploitasi  hasil  hutan  dan  konversi  lahan.  Sementara eksploitasi kayu sowang dan konversi  habitat sowang tetap berlangsung, usaha meregenerasi belum tampak di masyarakat, kemampuan regenerasi sowang  secara  alamijuga  sangat  rendah.  Hal  ini  merupakan  ancaman kepunahan  bagi  populasi  sowang.Penelitian  ini  dilakukan  untuk mengidentifikasi media in-vitro yang sesuai bagi perkecambahan biji dan pertumbuhan tunas sowang. Percobaan dirancang dengan memperlakukan  dua  jenis  media  perkecambahan  yakni  VW  yang dimodifikasi dan MS dengan zpt, 20 ulangan, setiap satu unit percobaan berisi 30 benih sowang yang ditanam di media, dilakukan di laboratorium kultur  jaringan  FMIPA  Universitas  Cenderawasih  Jayapura.  Variabel penelitian adalah hari muncul tunas, persen perkecambahan, penampilan tunas  dan  tinggi  tunas  pada  usia  tunas  60  hari.  Data  dianalisis  dengan independent  sample  t  test.  Hasil  penelitian  menunjukkan  tidak  terdapat signifikansi  pada  variabel-variabel  hari  muncul  tunas,  persen perkecambahan,  penampilan  tunas  dan  tinggi  tunas  antara  perlakuan media  VW  yang  dimodifikasi  danMS  dengan  zpt.  Rata-rata  hari  muncul tunas  adalah  5.50  hari  dan  5.55hari,  rata-rata  persen  perkecambahan adalah 63.55% dan 61.40%, rata-rata skor penampilan tunas adalah 2.85 dan 2.75 serta rata-rata panjang tunas adalah2.84 cm dan 2.67 cm. Kata kunci : sowang, endemik, regenerasi, in-vitro.
Abstract. Sowang (Xanthostemon novoguineense Valet.) is identified as an endemic  species  of  Papua.  X.  Novaguineense,originated  from  west  New Guinea,  is  a  species  with  limited scientific  information.  Nowadays, in its own habitat, sowang’s quantity of sapling and area population has been decreasing for exploitations and land conversions. As those exploitations and  land  conversions  occur,  and  with  sowang  low  natural  regeneration ability,there  still  no  community  effort  for  sowang  regeneration.  It  is endangering sowang population to extinction.The study was conducted to identify in-vitro media suitable for seed germination and seedling growth of  sowang.  The  experimental  units  were  set  up  using  two  germination media,  modified  VW  and  MS  with  zpt,  in  tissue  culture  laboratory  of FMIPA  Cenderawasih  University.  Each  experiment  was  carried  out  to
http://journal.uinsgd.ac.id/index.php/biodjati
include  30  seeds,  and  then  replicated  20  times.  Observed  variable  were days count of germination, seedling percentage, seedling appearance and height on age 60 days. The data were analyzed using independent sample t  test.  The  result  showed  no  significant  effect  on  observed  variables between  modified  VW  media  and  MS  with  zpt  media  treatment.The average  days  of  seedling  to  appear  are  5.50  days  and  5.55  days,  the average  seedling  percentage  are  63.55%  and  61.40%,  the  average  or appearance score on age 60 days are 2.85 and 2.75 while the average of seedling height are 2.84 cm and 2.67 cm respectively. Key words: sowang, endemic, regeneration, in-vitro

## Cara Sitasi
Wilujeng, S., & Agustini, V.  (2017). Studi Awal Kultur Biji Sowang ( Xanthostemon novaguineense Valet.) Secara In-Vitro. Jurnal Biodjati , 2 (1), 64-71.

## PENDAHULUAN
Sowang  ( Xanthostemon  novoguineense Valet.)  diidentifikasi  oleh  Whitmore  et  al. (1997)  merupakan  spesies  endemik  Papua. Wilson  &  Pitisopa  (2007)  mengemukakan bahwa X.  Novaguineense merupakan  jenis tumbuhan  New  Guinea  bagian  barat  dengan data  ilmiah  yang  sangat  terbatas.  Pernyataan ini  sesuai  dengan  kondisi  sekarang  bahwa belum  ada  laporan  ilmiah  yang  komprehensif mengenai X.  novaguineense .  Beberapa  studi tentang sowang belum memiliki validitas yang dapat  diverifikasi  secara  ilmiah  sehingga informasi  yang  ada  tidak  dapat  digunakan sebagai acuan.
Daerah  habitat  tumbuhan  sowang  di Jayapura adalah pegunungan Cycloop. Pegunungan  Cycloop  terletak  membujur  di sebelah  utara  kota  dan  kabupaten  Jayapura. Sowang  tumbuh  tidak  merata  di  Pegunungan Cycloop.  Sowang  hanya  tumbuh  di  sisi  barat, selatan  sampai  timur  Pegunungan  Cycloop. Sowang  memiliki  ketahanan  terhadap  api  atau kebakaran  tetapi  memiliki  daya  regenerasi yang  sangat  rendah.  Di  alam,  jumlah  tegakan dan  habitat  sowang  saat  ini  telah  menyusut karena  eksploitasi  hasil  hutan  dan  konversi lahan. Eksploitasi kayu sowang dilakukan oleh masyarakat tradisional secara besar-besaran.
Kekuatan  kayu  sowang  merupakan alasan masyarakat untuk melakukan
eksploitasi  kayu  ini.  Konversi  lahan  terjadi karena perluasan pemukimam dan pembangunan di kota dan kabupaten Jayapura. Sementara  eksploitasi  kayu  sowang  dan konversi  habitat  sowang  tetap  berlangsung, usaha meregenerasi belum tampak di masyarakat,  regenerasi  sowang  berlangsung secara  alami.  Hal  ini  merupakan  ancaman kepunahan  bagi  populasi  sowang  (Wilujeng, 2010).
Biji  sowang  berbentuk  bulat  pipih dengan  diameter  1,5-2  mm,  ringan,  tidak berbulu  dan  tidak  bersayap  (Wilujeng  & Simbiak, 2014). Ukuran  biji  sowang termasuk dalam  kategori  biji  yang  sangat  kecil.  Tidak semua  proses  perkecambahan  biji  berukuran kecil memiliki kemampuan menumbuhkan dan membuatakar  berfungsi  tepat  pada  saat dibutuhkan.  Hal  ini  diduga  terjadi  pada  biji sowang. Hasil penelitian Wilujeng & Agustini (2017)  menunjukkan  bahwa  daya  kecambah sowang  yang  disemai  di  media  tanah  tempat tumbuhnya,  sangat  rendah  (tertinggi  18  %). Benih  sowang  mulai  berkecambah  pada  10 hari  setelah  tanam  (hst)  hingga  mencapai puncak pada 17 hst, kemudian anakan sowang berangsur-angsur mati sejak 21 hst hingga mati secara keseluruhan pada 38 hst.
http://journal.uinsgd.ac.id/index.php/biodjati
Anggrek  (Orchidaceae)  memiliki  biji yang sangat kecil dan ringan, bahkan diketahui tidak  memiliki  endosperm,  untuk  dapat berkecambah  dengan  keberhasilan  tinggi,  biji anggrek umumnya memerlukan kondisi aseptik  in-vitro  dengan  suplai  energi  dan  hara mineral  yang  lengkap  pada  media  kulturnya. Formulasi  media  yang  dapat  digunakan  untuk mengecambahkan  biji  anggrek  diantaranya adalah Knudson C, Vacin dan Went (VW) atau Murashige dan Skoog (MS) yang mengandung garam  mineral  esensial  bagi  pertumbuhan anakan  dari  biji  anggrek.  Penelitian  dengan menggunakan  media  dasar  MS  menunjukkan bahwa  media  MS  dapat  dijadikan  media perkecambahan dan pertumbuhan Phalaenopsis hibrida. Pada  tingkat  perkecambahan  media MS  menghasilkan  jumlah  kecambah  lebih rendah dibandingkan dengan media growmore (Yusnita & Handayani, 2011).
Untuk memperoleh anakan sowang yang memiliki kemampuan bertahan hidup di habi tat aslinya, diperlukan perlakuan khusus pada saat biji  berkecambah  hingga  menjadi  anakan. Perlakuan khusus dimaksud adalah persemaian biji  dengan  kultur  in-vitro.  Penggunaan  kultur in-vitro bertujuan untuk mengantisipasi anakan kehilangan  sumber  nutrisi  karena  endosperm yang  kecil  sementara  akar  belum  berfungsi optimal.

## BAHAN DAN METODE

## Waktu dan Lokasi Penelitian
Penelitian  dilakukan  di  Doyo  Baru Kabupaten  Jayapura  untuk  pengambilan  biji sowang. Pelaksanaan kultur in-vitro dilakukan di  laboratorium  kultur  jaringan  FMIPA Universitas Cenderawasih.

## Pelaksanaan Penelitian
Penelitian  ini  dirancang  menggunakan dua perlakuan yakni penggunaan media tanam
in-vitro. Perlakuan pertama adalah penggunaan media  tanam  VW  yang  dimodifikasi  dengan penambahan  air  kelapa  dan  sari  tomat. Perlakuan kedua adalah media MS dengan zat pengatur  tumbuh  (zpt).  Percobaan  diulang  20 kali sehingga diperoleh 40 satuan percobaan.

## Pelaksanaan Percobaan Sterilisasi Alat
Sterilisasi  dilakukan  terhadap  botol kultur,  scalpel,  pinset  dan  petridish.  Peralatan dicuci  dengan  menggunakan  detergen,  dibilas, kemudian  dikeringkan.  Alat-alat  yang  sudah kering dibungkus dengan kertas (kecuali botol kultur). Semua alat tersebut disterilisasi dengan autoclave selama 45 menit.

## Pembuatan Media Tanam
Penimbangan dilakukan terhadap masing-masing  bahan  hara  makro  dan  hara mikro  sesuai  komposisi  media  dasar  VW  dan MS dengan penambahan 20 g sukrosa dan 12 g agar.  Untuk  media  VW  ditambahkan  150  ml air  kelapa  dan  50  ml  sari  tomat,  sementara untuk  media  MS  ditambahkan  2  mg Benzyl Adenine (BA)  dan  6  mgNapthalene  Acetic Acid  (NAA).  Aquades  ditambahkan  hingga volume  larutan  mencapai  1000  mL.  Larutan diaduk  dan  dididihkan.Larutan  dikondisikan pada  kisaran  pH  5  –  6  dengan  menggunakan NaOH dan HCl. Kemudian larutan dituangkan ke dalam botol kultur, sebanyak  25 mL setiap botol.  Botol  ditutup  dengan    aluminium  foil, sterilisasi  dengan  autoclave  selama  45  menit. Setelah  itu,  botol-botol  ditempatkan  pada  rak- rak kultur.

## Sterilisasi Biji dan Penanaman
Biji dipindahkan ke kertas saring, dilipat kemudian dilakukan sterilisasi dengan merendam  biji  dalam  larutan  chlorox  20%. Perendaman  dilakukan  selama  30  menit  lalu dipindahkan  ke  aquadest  selama  5  menit,
http://journal.uinsgd.ac.id/index.php/biodjati
diulangi  3  kali.  Pada  saat  biji  dipindah  dalam aquadest, pemindahan dilakukan dalam keadaan  steril  di  dalam  Laminar  Air  Flow (LAF).  Biji  dalam  kertas  saring  yang  telah disterilisasi kemudian diletakkan pada petridish,  biji  diambil  dengan  menggunakan jarum  ose  dan  diinokulasikan  pada  media dalam  botol  sesuai  dengan  perlakuan.  Setiap botol merupakan satu  unit percobaan, ditanam 30  biji  sowang.  Botol  ditutup  dengan aluminium  foil,  dilapisi  dengan  plastik prophopilen.  Semua  proses  penanaman  ini dilakukan di dalam LAF.

## Pemeliharaan
Pemeliharaan  botol-botol  kultur  berisi biji  dilakukan  dengan  cara  meletakkan  pada rak-rak  kultur.  Untuk  mencegah  kontaminasi, botol-botol  tersebut  disemprot  dengan  alkohol 70 % setiap dua hari sekali.

## Pengamatan dan Pengumpulan Data
Pengamatan dilakukan terhadap pertumbuhan  tunas.  Parameter  pengukuran adalah :
a. Hari muncul tunas (hari) Pengamatan  dilakukan  setiap  hari  dengan menghitung hari saat muncul tunas pertama kali yang dinyatakan dalam hst (hari setelah tanam).  Angka  hst  ditandai  dengan  adanya pembengkakan  atau  munculnya  jaringan kehijauan  pada  permukaan  biji.  Angka  hari muncul tunas merupakan hari pertama salah satu atau lebih biji berkecambah dalam satu unit percobaan.
b. Persen perkecambahan (%) Pengamatan  dilakukan  dengan  menghitung biji  yang  berkecambah  pada  hari  terakhir percobaan.  Angka  persen  perkecambahan merupakan  persentase  dari  biji  yang berkecambah dari semua biji yang diinokulasi dalam satu unit percobaan.
c. Penampilan tunas (skor) Pengamatan  tunas  dilakukan  pada  akhir percobaan secara visual. Pengamatan dilakukan  dengan  cara  pemberian  nilai dimana  penampakan  tunas  yang  terbentuk dibagi  ke  dalam    4  skor  (Gultom  et  al., 2012) yakni :
0 = Biji tidak berkecambah
1 = Biji berkecambah, tunas tidak sempurna
2 =  biji  berkecambah,  tunas  kurang sempurna
3 = biji berkecambah, tunas sempurna Angka  penampilan  tunas  merupakan rata-rata  skor  penampilan  tunas  pada umur  60  hari  setelah  biji  pertama berkecambah, dalam satu unit percobaan.
4 = Panjang tunas (cm) Panjang  tunas  diukur  pada  akhir percobaan mulai dari tempat munculnya tunas  (pangkal)  sampai  ujung  tunas terpanjang. Angka panjang tunas merupakan hasil rata-rata panjang tunas pada  umur  60  hari  setelah  biji  pertama berkecambah, dalam satu unit percobaan.

## Analisis Data
Data  hasil  penelitian  dianalisis  dengan independent  sample t  test menggunakan SPSS versi 20.

## HASIL
Pada percobaan ini biji sowang diinokulasi  pada  media  in-vitro  yang  berbeda yakni  VW  yang  dimodifikasi  dan  MS  dengan zpt.  Parameter  yang  diamati  adalah  hari muncul  tunas  (hst),  persen  perkecambahan (%), rata-rata skor penampilan tunas (skor) dan rata-rata panjang tunas (cm).
http://journal.uinsgd.ac.id/index.php/biodjati
Gambar  1. Biji  sowang  yang  diinokulasi  pada  media VW  yang  dimodifikasi  (atas)  dan  media  MS dengan zpt (bawah).
Gambar 2. Biji sowang  yang  telah berkecambah pada  media VW  yang dimodifikasi (kiri) dan media MS dengan zpt (kanan).
Tabel 1. Hasil analisis independent sample t test terhadap hari muncul tunas (hst), persen perkecambahan (%), rata-rata skor penampilan tunas (skor) dan rata-rata panjang tunas (cm) biji sowang yang diinokulasi di media VW yang dimodifikasi dan MS dengan zpt.
Parameter Perlakuan Mean ± sd t sign. Hari muncul tunas (hst) VW yang dimodifikasi 5.50 ± 0.69 .244 .809 MS dengan zpt 5.55 ± 0.61 Persen perkecambahan (%) VW yang dimodifikasi 63.55±14.45 .491 .626 MS dengan zpt 61.40 ± 13.19 Penampilan tunas (skor) VW yang dimodifikasi 2.85 ± 0.37 .777 .442 MS dengan zpt 2.75 ± 0.44 Panjang tunas (cm) VW yang dimodifikasi 2.84 ± 0.43 1.251 .218 MS dengan zpt 2.67 ± 0.40
Hasil  analisis  di  atas  menunjukkan bahwa  tidak  ada  perbedaan  yang  signifikan
pada  parameter  hari  muncul  tunas,  persen perkecambahan, penampilan tunas dan panjang
http://journal.uinsgd.ac.id/index.php/biodjati
tunas  karena  perlakuan  jenis  media  inokulasi. Percobaan  ini  dihentikan  pada  60  hst,  karena secara  visual  panjang  tunas  sudah  tidak bertambah.  Pada  fase  pemeliharaan  eksplan, seharusnya  terdapat  subkultur  dengan  media baru untuk mengganti media lama yang diduga telah habis kandungan unsur haranya. Subkultur  tidak  dapat  dilakukan  karena  tunas yang  tumbuh  sangat  rapuh,  memiliki  resiko mudah patah dan mati bila dipindahkan.

## PEMBAHASAN
Pemilihan  media  dasar  VW  dan  MS kultur  in-vitro  didasari  oleh  hasil-hasil penelitian sebelumnya terhadap biji yang tidak memiliki endosperm. Nurfadilah (2016) melaporkan  bahwa  media  VW  dan  MS menghasilkan  persen  perkecambahan  biji anggrek Dendrobium  taurulinum yang  relatif sama  (87.8%  dan  87.7%)  tetapi  lebih  baik secara  signifikan  dibandingkan  dengan  media Knudson C (81.2%). Penggunaan media dasar VW  untuk  kultur  biji  anggrek Bulbophyllum echinolabium yang dilakukan oleh Warseno et al. (2013) mampu menghasilkan 86%
perkecambahan. Percobaan Djajanegara (2010)
yang  memanfaatkan  150  mL  air  kelapa  pada kultur in-vitro biji anggrek bulan ( Phakaenopsis  amabilis )  menghasilkan  rata- rata  tertinggi,  tinggi  tunas  3.10  cm  dan  rata- rata  jumlah  akar  terbanyak  5.26.  Sari  tomat pada  hasil  penelitian  Muharyati  et  al.  (2015), terbukti  berpengaruh  terhadap  pertumbuhan biji  anggrek Vanda  helvola ,  24.1%  protokorm terbentuk  pada  kultur  12  minggu.  Deb  & Pongener  (2011),  menggunakan  kombinasi  3 µM  NAA  dan  6  µM  BA  dalam  media  dasar MS berhasil mencapai perkecambahan anggrek Cymbidium  aloifolium 90%  dalam  jangka waktu 45 hari.
Rata-rata hari muncul tunas sowang 5.50 dan  5.55  hst  tidak  berbeda  signifikan  antara
media VW dan media MS. Hari muncul tunas ini  lebih  singkat  dari  perkecambahan  biji sowang pada media tanah dan pupuk kandang yang  dilakukan  oleh  Wilujeng  &  Agustini (2017)  yakni  10  hst.  Warseno,  et  al.  (2013) melakukan penanaman biji anggrek Bulbophyllum  echinolabium secara  in-vitro, perkecambahan  terjadi  setelah  satu  tahun. Waktu  mulai  berkecambah  sowang  pada  5.50 – 5.55 hst di media in-vitro, sangat pendek bila dibandingkan  dengan  perkecambahan  biji anggrek Bulbophyllum echinolabium.
Rata-rata  persen  perkecambahan  biji sowang  63.55%  dan  61.40%  tidak  berbeda signifikan  antara  perlakuan  media  yang  diuji. Persen  perkecambahan  ini  lebih  tinggi  dari persen  perkecambahan  18%  dari  pengujian perkecambahan  biji  sowang  Wilujeng  & Agustini  (2017)  pada  media  tanah  dan  pupuk kandang.  Trivedi  &  Joshi  (2014)  melaporkan bahwa    biji Stereospermum  suaveolens yang direndamselama  24  jam  dalam  aquadest, dikecambahkan  pada  media  cocopeat,  MS, tanah  dan  Woody  Plant  Medium  (WPM) menghasilkan  perkecambahan  masing-masing 68%,  66%,  6%  dan  0%.  Hasil  penelitian  ini menunjukkan  bahwa  MS  menjadi  media  yang lebih  baik  untuk  persen  perkecambahan dibandingkan  dengan  media  tanah.  Media  in- vitro  tidak  selalu  dapat  menjadi  media perkecambahan setiap biji suatu spesies.
Rata-rata  skor  penampilan  tunas  yang diperoleh  pada  perlakuan  media  VW  dan  MS masing-masing  2.85  dan  2.75.  Penilaian diberikan  pada  tunas  yang  berumur  60  hari setelah biji pertama berkecambah. Kedua rata- rata  skor  tersebut  tidak  berbeda  secara signifikan.  Hasil  penelitian  Gultom  et  al. (2012)  pada  perkecambahan  biji  gaharu ( Aquilaria malaccensis ), menunjukkan kisaran skor  penampilan  tunas  0.86  –  1.85  pada  umur tunas  7  minggu.  Bila  dibandingkan  dengan skor penampilan tunas gaharu pada umur tunas
http://journal.uinsgd.ac.id/index.php/biodjati
7  minggu,  skor  penampilan  tunas  sowang  60 hari relatif baik.
Panjang  tunas  diukur  pada  hari  ke  60 setelah  biji  pertama  berkecambah,  diperoleh 2.84  cm  pada  media  VW  dan  2.67  cm  pada media  MS.  Hasil t  test pada  panjang  tunas antara  kedua  media  menunjukkan  perbedaan yang  tidak  signifikan.  Panjang  tunas  gaharu ( Aquilaria malaccensis ) pada penelitian Gultom et al. (2012), mencapai 0.76 – 1.84 cm pada  minggu  ke  7  setelah  berkecambah. Panjang  tunas  sowang  dapat  dikategorikan relatif  baik,  bila  dibandingkan  dengan  tunas gaharu.
Penelitian  ini  belum  mencapai  hasil seperti  yang  diharapkan  yakni  planlet  sowang yang  siap  dipindahkan  ke  lokasi  aklimatisasi. Pada  hari  ke  60  setelah  biji  pertama berkecambah,  percobaan  dihentikan.  Secara visual,  tunas  sowang  tidak  menampakkan adanya  pertumbuhan  yang  nyata,  sementara subkultur  tidak  dapat  dilakukan  karena  tunas sangat  rapuh,  memiliki  resiko  patah  dan  mati. Untuk itu, perlu dilakukan penelitian- penelitian  lanjutan  untuk  mendapatkan  media dan  zat  pengatur  tumbuh  yang  sesuai  bagi perkecambahan, pertumbuhan dan perkembangan tunas sowing. Pada media VW, diperlukan  variasi  modifikasi  dari  bahan organik yang digunakan atau variasi konsentrasi  kombinasi  bahan  organik  yang digunakan.  Penggunaan  media  WPM  juga perlu dicobakan mengingat sowang merupakan tumbuhan berkayu.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan terima kasih kepada DP2M Dikti Kementerian  Riset  Teknologi  dan  Pendidikan Tinggi  atas  dukungan  dana  melalui  Penelitian Hibah Bersaing Perguruan Tinggi.

## DAFTAR PUSTAKA
Deb,  C.  R.,  &  Pongener,  A.  J.  (2011). Asymbiotic  seed  germination  and  in  vitro seedling  development  of Cymbidium aloifolium (L) Sw : a multipurpose orchid. J. Plant Biochem. Biotechnol , 20 (1), 90 – 95.
Djajanegara,  I.  (2010).  Pemanfaatan  limbah buah  pisang  dan  air  kelapa  sebagai  bahan media  kultur  jaringan  anggrek  bulan ( Phalaenopsis  amabilis )  tipe  229. J. TekLing , 11 (3), 373 -380.
Gultom,  M.S.,  Anna,  N.,  &  Siregar,  E.  B.  M. (2012).  Respon  eksplan  biji  gaharu ( Aquilaria  malaccensis Lamk.)  terhadap pemberian IAA secara in vitro. Peronema Forestry Science Journal , 1 (1), 1 – 6. Muharyati, Y., Deviani, M. R., & Astiti, N. P.
A.  (2015).  Pertumbuhan  anggrek Vanda helvola pada  media  yang  diperkaya  jus tomat .  Jurnal  Metamorfosa ,  11  (2),  66  – 71.
Nurfadilah,  S.  (2016).  The  effect  of  culture media and activated charcoal on asymbiotic  seed  germination  and  seedling development  of  a  threatened  orchid Dendrobium  taurulinum J.  J.  Smith  in vitro. Berita Biologi, 15 (1), 49 – 57.
Trivedi, D. R., & Joshi, A. G. (2014). Studies on  seed  germination  of Stereospermum suaveolens with  respect  to  different parameters. Environmental and Experimental Biology, 12, 33 – 37. Warseno,  T.,  Hendriyani,  E.,  &  Priyadi,  A. (2013). Konservasi dan propagasi
Bulbophyllum  echinolabium J.  J.  SM melalui kultur in  vitro. Prosiding Ekspose dan  Seminar  Pembangunan  Kebun  Raya Daerah  :  Membangun  Kebun  Raya  Untuk Penyelamatan  Keanekaragaman  Hayati dan  Lingkungan  Menuju  Ekonomi  Hijau.
http://journal.uinsgd.ac.id/index.php/biodjati
Bogor,  25  –  26  November  2013.  Hlm    773  – 783.
Whitmore, T. C., Tantra, I. G. M & Sutisna, U. (1997).  Tree  flora  of  Indonesia  check  list for  Irian  Jaya.  Agency  for  Forestry Research  and  Development.  Bogor  : Forest Research and Development Centre.
Wilson,  P.  G.  &  Pitisopa,  F.  (2007).
Xanthostemon  melanoxylon (Myrtaceae)a new  species  from  the  Solomon  Islands.
Telopea, 11 (4), 399 – 403.
Wilujeng,  S.  (2010).  The  effects  of  forest burning  and  logging  toward  regeneration ability of sowang ( Xanthostemon novaguineense Valet.) in Cycloop Mountain, Jayapura, Papua. Biodiversitas , 11 (4), 194 – 199.
Wilujeng, S & Simbiak, M. (2015). Karakteristik  morfologi Xanthostemon novoguineensis Valeton  (Myrtaceae)  dari Papua. Pros Sem Nas Masy Biodiv Indon ,
1 (3), 466–471.
Wilujeng,  S.,  &  Agustini,  V.  (2017).  Studi awal  regenerasi  sowang  ( Xanthostemon novaguineense Valet.). Jurnal  Biologi
Papua, 9 (1), 31 – 36. Yusnita, & Handayani, Y. (2011).
Pengecambahan  biji  dan  pertumbuhan seedling  Phalaenopsis  hibrida  in-vitro pada  dua  media  dasar  dengan  atau  tanpa arang aktif. Jurnal Agrotropika , 16 (2),70- 75.