15 (2) (2020) 41-49

## Jurnal Teknologi Pangan dan Hasil Pertanian
http://journals.usm.ac.id/index.php/jtphp
Lama Ekstraksi Kulit Melinjo Merah ( Gnetum gnemon L.) Berbantu Gelombang Ultrasonik Menggunakan Pelarut Etil Asetat terhadap Likopen, β - Karoten dan Aktivitas Antioksidan
Dewi Fatimatuzzahroh 1  , Bambang Kunarto 2 , Ery Pratiwi 3
1 Mahasiswa Fakultas Teknologi Pertanian Universitas Semarang, Semarang
2,3 Staff Pengajar Fakultas Teknologi Pertanian Universitas Semarang, Semarang Jurusan Teknologi Hasil Pertanian, Fakultas Teknologi Pertanian, Universitas Semarang,
Indonesia
DOI : http://dx.doi.org/10.26623/ jtphp.v13i1.1845 .
Info Artikel ___________________ Sejarah Artikel: Disubmit 1 September 2020 Direvisi 16 September 2020
Disetujui  27 September 2020
___________________ Keywords: Antioxidant Activity; Β -
Carotene; Lycopene; Melinjo Red Peels; Ultrasonic-Assisted Extraction _______________________ Abstrak ____________________________________________________________ Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui kadar  likopen  dan β -karoten  serta  aktivitas antioksidan hasil ekstraksi kulit melinjo merah ( Gnetum gnemon L .) dengan berbagai lama waktu  ekstraksi  berbantu  gelombang  ultrasonik  menggunakan  pelarut  etil  asetat. Penelitian ini dilakukan secara laboratoris di Laboratorium Rekayasa Pangan dan Kimia Teknologi  Hasil  Pertanian  Universitas  Semarang  pada  Bulan  Maret-Juni  2020. Rancangan  percobaan  yang  digunakan  adalah  rancangan  acak  kelompok  dengan  6 perlakuan dan 3 kali ulangan. Perlakuan tersebut meliputi perlakuan lama esktraksi yang terdiri dari : perlakuan lama 10 menit (P1), 20 menit (P2), 30 menit (P3), 40 menit, (P4), 50 menit (P5), dan 60 menit (P6). Parameter yang diamati adalah likopen, β -karoten dan aktivitas  antioksidan.  Data  yang  diperoleh  dianalisis  menggunakan  ANOVA,  dan apabila  perbedaan  akibat  perlakuan  dilanjutkan  dengan  uji  wilayah  ganda  Duncan (DMRT) pada taraf 0,05%. Hasil penelitian menunjukkan ekstraksi kulit melinjo merah ( Gnetum gnemon L .) berpengaruh terhadap likopen, β -karoten dan aktivitas antioksidan. Untuk mendapatkan likopen, β -karoten dan aktivitas antioksidan adalah pada waktu 20 menit (P2) yang menghasilkan likopen sebesar 209,51 ppm, β -karoten 126,44 µg/g dan aktivitas antioksidan 37,35%.
Abstract
____________________________________________________________
This research aims to know the measure of lycopene and β -carotene as well as the antioxidant activity of melinjo red peels (Gnetum gnemon L.) with variety ultrasonic-assisted extraction long times using ethyl  acetate  solvent.  This  research  was  conducted  in  a  laboratory  at  the  Laboratory  of  Food Engineering and Chemical Technology of Agricultural Products, University of Semarang in March- June 2020. The experimental design  used was a randomized block design with 6 treatments and 3 replications. .The treatment includes extraction duration treatment consisting of: 10 minutes (P1), 20 minutes  (P2),  30  minutes  (P3),  40  minutes  (P4),  50  minutes  (P5),  and  60  minutes  (P6).  The parameters  observed  were  lycopene, β -carotene  and  antioxidant  activity.  The  data  obtained  were analyzed  using  ANOVA,  and  if  the  differences  were  due  to  treatment,  it  was  continued  with  the Duncan  multiple region test (DMRT) at the 0.05% level. The results showed that the extraction of melinjo  red  peels  (Gnetum  gnemon  L.)  affected  lycopene, β -carotene  and  antioxidant  activity.  to obtain  lycopene, β -carotene  and  antioxidant  activity  is  at  20  minutes  (P2)  which  produces  209.51 ppm of lycopene, 126.44 µg / g of β -carotene and 37.35% antioxidant activity.
 Alamat Korespondensi: Dewi Fatimatuzzahroh, Fakultas Teknologi Pertanian Universitas Semarang, Jl Soekarno-Hatta, Tlogosari Semarang E-mail: dewizahroh54@gmail.com p-ISSN 1693-9115 e-ISSN 2580-846X

## PENDAHULUAN
Tanaman  melinjo  (Gnetum  gnemon  L.)  mempunyai  banyak  manfaat  dalam  kehidupan sehari-hari (Dewi et. al, 2012). Salah satu bagian dari tanaman ini yang belum banyak dimanfaatkan adalah bagian kulit. Devina dan Suwito (2011) menyatakan bahwa kulit melinjo merah berpotensi sebagai antioksidan alami. Salah satu sumber antioksidan yang terdapat dalam kulit melinjo adalah likopen dan β -karoten. Keduanya memiliki manfaat dalam dunia kesehatan. β -karoten memberikan manfaat  sebagai  suplemen  nutrisi  maupun  prekursor  vitamin  A,  menangkal  sel  kanker  dan meminimalisir  penyakit  kardiovaskuler  (Winarsih,  2007).  Sementara  menurut  Arifulloh  (2013) Likopen  dalam  bidang  pangan  memiliki  potensi  sebagai  pewarna  alami,  sementara  dalam  bidang farmasi  likopen  dimanfaatkan  sebagai  suplemen  makanan  karena  memiliki  aktivitas  antioksidan yang tinggi. Tentunya potensi ini menjadi peluang untuk memanfaatkan limbah kulit melinjo merah melalui proses ekstraksi.
Beberapa  faktor  yang  mempengaruhi  keberhasilan  ekstraksi  adalah  metode,  pelarut  dan waktu  yang  digunakan.  Metode  ekstraksi  terbaru  yang  digunakan  saat  ini  adalah  berbantu gelombang ultrasonik atau Ultrasonic Assisted Extraction (UAE). Menurut Buanasari et al., (2019) metode ini memiliki kelebihan memberikan hasil ekstrak yang optimal sehingga dapat mengefisien waktu  dan  pelarut  yang  digunakan.  Pelarut  merupakan  salah  satu  penentu  keberhasilan  dalam melakukan  ekstraksi.  Etil  asetat  merupakan  pelarut  semi  polar  yang  mampu  menarik  senyawa- senyawa dengan rentang polaritas lebar dari polar hingga non polar (Putri et al., 2013). Etil asetat digunakan  dalam  melarutkan  ekstrak  likopen  dan β -karoten  pada  kulit  melinjo  merah  karena terdapat kesesuaian polaritas antara bahan pelarut dengan bahan yang dilarutkan (like dissolve like) dengan indeks kepolaran sebesar 4,4. Sejalan dengan penelitian Pandya et. al., (2017) menyatakan bahwa hasil ekstrak likopen pada tomat menggunakan etil asetat memiliki hasil yang lebih banyak (1,18  mg/100g)  dari  pada  etanol  (1,15  mg/100g),  heksana  (0,54  mg/100g).  Begitu  juga  dengan penelitian yang dilakukan Sembiring et. al.,  (2016) bahwa pelarut etil asetat memiliki hasil ekstrak karotenoid  pada biji  jagung  lebih besar  dari  pada  pelarut lain  seperti  etanol, air  dan butanol serta menunjukkan nilai aktivitas antioksidan yang paling tinggi.
Kulit  melinjo  merah  yang  diekstrak  oleh  Devina  (2011)  menggunakan  metode  maserasi dengan pelarut etanol:etil asetat (20:80), suhu 30ºC selama 3 jam mempunyai  aktivitas antioksidan 1723,231  ppm, β -karoten  255,20  ppm  serta  likopen  yang  belum  diketahui.  Sementara  dalam penelitian  yang  telah  dilakukan  Kunarto  dan  Sani  (2017)  kulit  melinjo  merah  yang  diekstrak menggunakan metode maserasi pada suhu 30ºC selama 4 jam dengan pelarut heksan:aseton:etanol (2:1:1) mempunyai kandungan fitokimia likopen 1440,6720 mg/kg, β -karoten 48,42 mg/100g,  dan aktivitas  antioksidan  74,98%.  Metode  maserasi  yang  digunakan  masing-masing  peneliti  masih membutuhkan  waktu  yang  cukup  lama  yaitu  berkisar  3-4  jam.  Berbeda  dengan  penelitian  yang dilakukan Meutia dan Kusnadi (2013) ekstraksi berbantu gelombang ultrasonik pada pepaya (Carica papaya L.) hanya membutuhkan waktu 15 menit dengan hasil rendemen 9,7%, aktivitas antioksidan 80,30%,  kadar β -karoten  558,5 μ g/100ml.  Keuntungan  dari  ekstraksi  ultrasonik  berbantu pengadukan  adalah  kontak  permukaan  antara  padatan  dan  cairan  yang  lebih  luas  dan  optimal, karena  kontak  langsung  antara  partikel  dan  gelombang  ultrasonik.  Sejauh  ini  belum  terdapat penilitian  mengenai  lama  ekstraksi  kulit  melinjo  merah  berbantu  gelombang  ultrasonik  (UAE) dalam  menghasilkan  likopen, β -karoten  serta  aktivitas  antioksidan  yang  optimal.  Berdasarkan  hal ini,  dilakukan  penelitian  lama  ekstraksi  kulit  melinjo  merah  (Gnetum  gnemon  L.)  berbantu gelombang  ultrasonik  dengan  pelarut  etil  asetat  untuk  meningkatkan  hasil  likopen, β -karoten  dan aktivitas antioksidan.

## METODE Bahan dan Alat
Bahan  yang  digunakan  yaitu  kulit  melinjo  merah  yang  berasal  Desa  Kalisidi,  Kecamatan Gunungpati, Kabupaten Semarang, Jawa Tengah. Etil Asetat, kertas Whatman No. 1, alumunium foil, plastik vakum, aquades, etanol 95%, n-Heksan, BHT 0,0%, larutan DPPH.
Alat yang digunakan dalam pembuatan serbuk kulit melinjo merah meliputi ayakan 30 mesh (ASTM Standart, Indonesia), neraca analitik (Denver Instrument M-310), alat ekstraksi ultrasonik bath (Bronson 3800), rotary vacuum evaporator (Buchi B-490), Freeze Dryer, botol sampel, corong kaca  (Pyrex),  tabung  reaksi  (Pyrex),  beaker  glass  (Pyrex),  gelas  ukur  (Pyrex),  spatula,  pipet  tetes, shaker  water  bath,  oven  listrik  (Memmert  U.30),  spektrofotometer  dan  kuvet  (Unico  UV-2100), Blender,  Vortex  mixer  (LW  Scientific),  rak  tabung  reaksi,  erlenmeyer,  corong  buchner,  dan magnetic stirer, labu takar.

## Prosedur Penelitian
Penelitian  kulit  melinjo  merah  dimulai  dari  menyiapkan  kulit  melinjo  merah  yang  telah diperoleh  dari  pohonnya  dengan  umur  ±75  hari  setelah  berbunga,  selanjutnya  dilakukan  sortasi yaitu  memisahkan  antara  kulit  melinjo  buruk  dan  baik.  Hasil  kulit  melinjo  merah  yang  baik dibersihkan  dengan  air  bersih  untuk  menghilangkan  kotoran,  setelah  itu  kulit  melinjo  merah dikecilkan  ukurannya  dengan  pisau  stainless  steel,  lalu  kulit  melinjo  merah  dikeringkan  dengan suhu  50°C  selama  7  jam  hingga  mencapai  kadar  air  <10%  menggunakan  oven  memmert.  Kulit melinjo  merah  yang  telah  kering  dihaluskan  menggunakan  blender  selama  3  menit  kemudian disaring dengan ayakan 30 mesh sampai mendapatkan bubuk kulit melinjo merah lolos ayak.
Bubuk  kulit  melinjo  merah  lolos  ayak  yang  telah  didapatkan,  dilakukan  ekstraksi  dengan Ultrasonic Assisted Extraction (UAE) Bronson 3800 pada suhu 30°C selama 10, 20, 30, 40, 50 dan 60 menit dengan bahan (1) : (5) pelarut. Setelah itu dilakukan penyaringan dengan menggunakan kertas  saring  Whatman  No.  1  untuk  menghasilkan  ekstrak  kulit  melinjo  merah  cair.  Kemudian dilakukan evaporasi selama 10 menit dengan suhu 50°C, kecepatan putar 200 rpm serta tekanan 10 Pa, agar mendapatkan ekstrak kulit melinjo merah kental yang selanjutnya dilakukan analisis kadar likopen dan β -karoten serta aktivitas antioksidan.

## Prosedur Analisis

## Analisis Likopen (Ginting, 2008)
Tahap ekstraksi likopen dilakukan dengan penimbangan 0,6 g sampel kedalam erlenmeyer 100 ml  kemudian  ditambahkan  5  ml  BHT  0,05%  (w/v)  dalam  aseton.  Langkah  selanjutnya ditambahkan 5  ml  etanol  95%  dan 10  ml n-heksan  lalu  diaduk pada 150 rpm  dalam  shake water bath  pada  suhu  +/-  1-10ºC  selama  15  menit  (diselimuti  es)  dan  ditambahkan  3  ml  aquades, selanjutnya diaduk kembali pada 150 rpm  shake water bath pada suhu ± 1-10ºC selama 15 menit (diselimuti es). Setalah pengadukan, didiamkan pada suhu ruang selama 5 menit (untuk pemisahan lapisan  cairan)  dan  diambil  lapisan  atas  yang  larut  n-heksan  (non  polar)  untuk  diukur absorbansinya pada λ = 503 nm (n-heksan murni digunakan sebagai banko).
Pengukuran total likopen tidak menggunakan larutan standar likopen, melainkan suatu rumus yang menghubungkan nilai absorbansi dan berat sampel dengan total likopen. Angka 0.0312 adalah konstanta  yang  diperoleh  dari  pembagian  koefisien  ekstensi  molar  likopen  (17.2x10  -  4  /M/cm) dengan berat molekul likopen (536.9 g/mol) (Baiano et al., 2005). Adapun rumus perhitungannya sebagai berikut:
Likopen (mg/kg b.b.) = A503 x 0.0312 kg sampel b.b.
Analisis β -Karoten (Octaviani et al., 2014)
Pembuatan  larutan  baku  dibuat  dengan  menimbang  seksama  ß-karoten  standar  dilarutkan dengan  etanol  absolut  p.a.  hingga  diperoleh  konsentrasi  larutan  induk  sebesar  1mg/mL.  Larutan baku  ß-karoten  50 μ g/mL  dibaca  serapannya pada panjang gelombang 452  nm  sampai  diperoleh waktu  serapan  yang  stabil.  Larutan  baku  ß-karoten  50 μ g/mL  dibaca  serapannya  pada  panjang gelombang 350-550 nm. Penentuan kurva baku dibuat seri larutan baku ß-karoten 50 μ g/mL yaitu 3,0 μ g/mL,  6,0 μ g/mL,  9,0 μ g/mL,  12,0 μ g/mL,  15,0 μ g/mL,  dibaca  pada  operating  time  dan panjang  gelombang  serapan  maksimum  yang  diperoleh.  aluminium  foil  pada  bagian  luar  dan terlindungi dari cahaya. Ditambahkan 50 mL larutan (heksana:aseton:etanol = 2:1:1) v/v, dikocok selama 30 menit dengan magnetic stirer, dan disaring dengan corong Buchner. Diambil bagian non polar dan selanjutnya digunakan untuk uji kuantitatif. Residu dari kulit melinjo merah dimasukkan ke dalam labu takar 5,0 mL kemudian ditambah pelarut organik (etanol) sampai tanda batas dan dibaca serapannya.

## Analisis Aktivitas Antioksidan (Sharma dan Bhat, 2009)
Sebanyak  1  ml  larutan  sampel  atau  standar  dimasukkan  kedalam  tabung  reaksi,  lalu penambahan  7  ml  methanol  (sebagai  blanko  adalah  8  ml  methanol).  Suspensi  kemudian ditambahkan  2  ml  larutan  DPPH  0,25  mM  (sehingga  konsentrasi  akhir  DPPH  dalam  larutan menjadi 50 µM) yang kemudian di homogenkan dengan menggunakan vortex. Rangkaian kegiatan reaksi  dilakukan  pada  ruang  gelap.  Inkubasi  dilakukan  selama  30  menit  pada  suhu  ruang  dan kemudian  diukur  absorbansinya  pada  panjang  gelombang  517  nm.  Kapasitas  dinyatakan  dalam bentuk persentase penghambatan terhadap radikal DPPH dengan perhitungan:
Kapasitas antioksidan (%) = (A blanko – A sampel) x 100%
A blanko
Keterangan:
A blanko = nilai absorbansi blanko, A sampel = nilai absorbandi larutan sampel

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Hasil Kadar Likopen
Hasil  rerata  kadar  likopen  ekstrak  kulit  melinjo  merah  (Gnetum  gnemon  L.)  dengan perlakuan lama ekstraksi berkisar antara 186,26 - 209,51 ppm. Berdasarkan hasil analisis sidik ragam menunjukkan bahwa lama ekstraksi berpengaruh nyata (p<0,05) terhadap likopen yang dihasilkan, dan setelah diuji lanjut DMRT pada taraf 5% menghasilkan beda nyata antar perlakuan. Hasil uji likopen ekstrak kulit melinjo merah (Gnetum gnemon L.) dapat dilihat pada tabel 1.
Tabel 1. Hasil Uji Likopen Ekstrak Kulit Melinjo Merah (Gnetum gnemon L.) Perlakuan likopen (ppm) P1 (10 menit) 206,60 ± 0,33 e P2 (20 menit) 209,51 ± 0,31 f P3 (30 menit) 202,02 ± 0,62 d P4 (40 menit) 198,90 ± 0,31 c P5 (50 menit) 188,08 ± 0,33 b P6 (60 menit) 186,26 ± 0,41 a
Keterangan : angka yang diikuti oleh huruf yang berbeda menunjukkan perbedaan yang nyata (p<0,05)
Efek  lama  ekstraksi  menggunakan  metode  berbantu  gelombang  ultrasonik  menunjukkan terjadi peningkatan hasil likopen secara progresif. Hal ini disebabkan oleh kontak etil asetat dengan kulit melinjo semakin lama yang menyebabkan dinding sel semakin mudah ditembus oleh pelarut sehingga  senyawa bioaktif dalam kulit melinjo semakin kuat untuk tertarik. Waktu ekstraksi yang semakin lama memungkinkan lebih banyak waktu kontak untuk gelembung kavitasi memecahkan sel  sampel,  sehingga  meningkatkan  hasil  ekstrak  komponen  bioaktif  (Wang  et  al.,  2012). Peningkatan hasil likopen terjadi penurunan pada perlakuan 30 menit (P3) dan semakin menurun pada perlakuan selanjutnya yaitu P4, P5 dan P6 karena telah mencapai titik jenuh.

## Jurnal Teknologi Pangan dan Hasil Pertanian 15 (2) (2020)
Lama  ekstraksi  berbantu  gelombang  ultrasonik  yang  semakin  bertambah  mengakibatkan degradasi  dan  isomerisasi  komponen  likopen  sehingga  menyebabkan  penurunan  likopen  setelah titik  optimum  (Liao  et  al.,  2016).  Sifat  likopen  sangat  rentan  terhadap  degradasi  ketika  terkena cahaya  dan  panas berlebih karena  strukturnya dengan rantai panjang  ikatan  rangkap  terkonjugasi (Minhthy  dan  Steven  1999;  Lee  dan  Chen  2002;  Chang  dan  Liu  2007;  Toma  et  al.  2008  ). Kehadiran karbon terkonjugasi ikatan rangkap karbon membuat likopen juga mudah terisomerisasi di  bawah  pengaruh  kelebihan  cahaya  dan  panas  selama  ekstraksi  atau  pemrosesan  (Xu  dan  Pan 2013).  Hal  ini  mengakibatkan  setelah  mencapai  titik  jenuh  pelarut  yaitu  pada  menit  ke-20 mengakibatkan likopen yang dihasilkan semakin menurun. Penelitian ini sejalan dengan penelitian Liao  et  al.,  (2016),  yang  mengekstrak  sampel  Solanum  lycopersicum  berbantu  gelombang ultrasonik,  serta  penelitian  Silva  et  al.,  (2018)  yang  mengekstrak  limbah  Solanum  lycopersicum menunjukkan hasil yang sama yaitu terjadi kenaikan hingga menit ke-20 lalu terjadinya penurunan hasil setelahnya.

## Hasil Kadar ß-Karoten
Hasil  rerata  kadar β -karoten  ekstrak  kulit  melinjo  merah (Gnetum  gnemon L. ) dengan perlakuan  lama  ekstraksi  berkisar  antara  110,22  -  126,44  µg/g.  Berdasarkan  hasil  analisis  sidik ragam  menunjukkan  bahwa  lama  ekstraksi  berpengaruh  nyata  (p<0,05)  terhadap β -karoten  yang dihasilkan, dan setelah diuji lanjut DMRT pada taraf 5% menghasilkan beda nyata antar perlakuan. Hasil uji β -karoten ekstrak kulit melinjo merah (Gnetum gnemon L. ) dapat dilihat pada tabel 2.
Tabel 2. Hasil Uji Β -Karoten Ekstrak Kulit Melinjo Merah ( Gnetum gnemon L.) Perlakuan β -karoten (µg/g) P1 (10 menit) P2 (20 menit) P3 (30 menit) P4 (40 menit) P5 (50 menit) P6 (60 menit) 124,22 ± 0,45 c
126,44 ± 0,23 d
119,25 ± 0,71 b 118,59 ± 0,13 b 118,81 ± 0,13 b 110,22 ± 0,22 a
Keterangan : angka yang diikuti oleh huruf yang berbeda menunjukkan perbedaan yang nyata (p<0,05)
Lama ekstraksi berbantu gelombang ultrasonik pada kulit melinjo merah (Gnetum gnemon L. ) memberikan  respon  peningkatan  hasil β -karoten.  Hasil  maksimum  terdapat  pada  lama  20  menit (P2),  kemudian  diikuti  penurunan  hasil β -karoten  pada  perlakuan berikutnya P3,  P4,  P5  dan  P6. Meskipun sempat terjadi sedikit peningkatan pada P5 namun tidak signifikan. Hal ini disebabkan oleh  intensitas  kontak  yang  tinggi  antara  pelarut  dan  sampel,  yang  meningkatkan  difusi  karena gradien konsentrasi karoten antara biomassa dalam dan luar (Hadiyanto et al., 2015). Semakin lama ekstraksi  dapat  meningkatkan  transfer  massa  sehingga  meningkatkan β -karoten  yang  dihasilkan. Namun  setelah  mencapai  titik  jenuh  pelarut  maka β -karoten    yang  dihasilkan  mengalami penurunan. Sejalan dengan penelitian Dey et al., (2013) yang menyatakan bahwa hasil ekstraksi β - karoten  dari  bubuk Spirulina  plantesis pada  suhu  30˚C  meningkat  secara  eksponensial  hingga beberapa menit (4 menit), kemudian meningkat secara bertahap (8 menit) dan kemudian menjadi konstan.  Peningkatan  waktu  ekstraksi  dapat  memperbesar  laju  transfer  massa  karena  paparan gelombang  ultrasonik, namun  jika  dilakukan  secara  terus-menerus   esktraksi  menjadi  sulit karena lokasi  interior  sel  (Dey et  al., 2013).  Begitu  juga  dengan  penelitian  Yilmaz et  al., (2017)  yang mengekstrak β -karoten dari Solanum lycopersicum pada suhu 15 ± 5˚C mengalami peningkatan hasil maksimum  pada  lama  15  menit  kemudian  mengalami  titik  jenuh  pada  lama  ekstraksi  20  dan  30 menit.

## Hasil Aktivitas Antioksidan
Hasil  rerata  kadar  aktivitas  antioksidan  ekstrak  kulit  melinjo  merah  (Gnetum  gnemon  L.) dengan  perlakuan  lama  ekstraksi  berkisar  antara  25,81  -  37,35%.  Berdasarkan  hasil  analisis  sidik ragam  menunjukkan  bahwa  lama  ekstraksi  berpengaruh  nyata  (p<0,05)  terhadap β -karoten  yang dihasilkan, dan setelah diuji lanjut DMRT pada taraf 5% menghasilkan beda nyata antar perlakuan. Hasil uji aktivitas antioksidan ekstrak kulit melinjo merah (Gnetum gnemon L.) dapat dilihat pada tabel 3.
Tabel 3. Hasil Uji Antivitas Antioksidan Ekstrak Kulit Melinjo Merah ( Gnetum gnemon L.) Perlakuan Aktivitas antioksidan (%) P1 (10 menit) P2 (20 menit) P3 (30 menit) P4 (40 menit) P5 (50 menit) P6 (60 menit) 36,03 ± 0,10 e 37,35 ± 0,10 f 34,65 ± 0,12 d
28,54 ± 0,10 c 26,92 ± 0,10 b 25,81 ± 0,10 a
Keterangan : angka yang diikuti oleh huruf yang berbeda menunjukkan perbedaan yang nyata (p<0,05)
Aktivitas  antioksidan  adalah  kemampuan  suatu  bahan  dalam  meredam  efek  radikal  bebas. Aktivitas  antioksidan  tertinggi  ekstrak  kulit  melinjo  merah  (Gnetum  gnemon  L.)  berbantu gelombang ultrasonik terdapat pada perlakuan lama ekstraksi 20 menit (P2). Hal ini sesuai dengan peningkatan kadar likopen dan β -karoten. Manasikana  et al., (2015) mengatakan bahwa ekstraksi berbantu gelombang ultrasonik pada Cucurbita maxima L. peningkatan kadar karoten memberikan respon  peningkatan  aktivitas  antioksidan  yang  ditandai  dengan  semakin  rendahnya  nilai  IC50. Karoten  termasuk  dalam  golongan  karotenoid  yang  dapat  berperan  sebagai  antioksidan (Mortensen,  2006).  Menurut  Astawan  dan  Kasih  (2008), β -karoten  mempunyai  kemampuan sebagai  antioksidan  yang  dapat  berperan  penting  dalam  menstabilkan  radikal  berinti  karbon. Sementara  likopen  mempunyai  aktivitas  antioksidan  dua  kali  lebih  kuat  dibandingkan  dengan β - karoten (Sayuti dan Yenrina, 2015).
Korelasi Antara Likopen dan Β -Karoten Terhadap Aktivitas Antioksidan Penelitian  ini  menunjukkan  terdapat  korelasi  antara  likopen, β -karoten  dan  antivitas antioksidan berdasarkan penangkapan radikal DPPH. Grafik korelasi antara likopen, β -karoten dan aktivitas  antioksidan  pada  ekstrak  kulit  melinjo  merah  (Gnetum  gnemon  L.)  dapat  dilihat  pada Gambar 1 dan 2.
Gambar 1. Grafik Hubungan Antara Likopen Dengan Aktivitas Antioksidan Ekstrak Kulit Melinjo Merah (Gnetum gnemon L.) Berbantu Gelombang Ultrasonik
Koefisien  korelasi  antara  likopen  dengan  aktivitas  antioksidan  sebesar  0,8609.  Antioksidan merupakan  senyawa  pemberi  elektron  (electron  donor)  atau  reduktan  (Setyawati  et  al.,  2019). Likopen  merupakan  antioksidan  yang  berperan  memberikan  donor  elektron.  Sejalan  dengan penelitian  yang  dilakukan  Setyawati  et  al.,  (2019)  pada  buah  semangka  (Citrullus  lanatu)  serta Mu’nisa,  (2012)  pada  buah  tomat (Lycopersicum  esculentum)  yang  menyatakan  bahwa  semakin tinggi kadar likopen, maka semakin tinggi pula aktivitas antioksidan yang ditandai dengan makin rendahnya nilai  IC50 . Menurut  (Mu’nisa, 2012) dari  semua  senyawa  karotenoid  ternyata  likopen relatif  lebih  efisien  sebagai  penangkap  singlet  oksigen  daripada  karotenoid  lainnya  (lebih  tinggi daripada β -karoten  dan  tokoferol)..  Hal  ini  yang  menyebabkan  adanya  korelasi  antara  likopen dengan aktivitas antioksidan.
Gambar 2. Grafik Hubungan Antara Β -Karoten Dengan Aktivitas Antioksidan Ekstrak Kulit Melinjo Merah (Gnetum gnemon L.) Berbantu Gelombang Ultrasonik
Koefisien korelasi antara β -karoten dengan aktivitas antioksidan ekstrak kulit melinjo merah (Gnetum  gnemon  L.)  berbantu  gelombang  ultrasonik  sebesar  0,7896.  Hasil  ini  menunjukkan terdapat  korelasi  antara  kedua  komponen  tersebut.  Kemampuan β -karoten  sebagai  antioksidan ditunjukkan  dalam  mengikat  radikal  oksigen  (O2),  menangkap  radikal  peroksil  dan  menghambat oksidasi  lipid  (Supriyono  et  al.,  2014).  Oleh  karena  itu,  keberadaan β -karoten  memberikan  efek pada kenaikan aktivitas antioksidan.

## Analisa Keputusan
Analisa  keputusan  menggunakan  uji  de  garmo  (Sarah-dejesus,  2014)  untuk  menentukan perlakuan terbaik berdasarkan likopen, β -karoten dan aktivitas antioksidan dapat dilihat pada Tabel 4.
Tabel 4. Total Nilai Penentuan Perlakuan Terbaik Perlakuan Total Nilai P1 P2 P3 P4 P5 P6 0,88 1
0,62 0,42 0,22 0
Semakin lama ekstraksi dapat menghasilkan likopen, β -karoten dan aktivitas antioksidan yang tinggi dan setelah melewati titik optimum akan terjadi penurunan hasil. Berdasarkan analisa maka ditetapkan  bahwa  perlakuan  lama  ekstraksi  20  menit  (P2)  merupakan  perlakuan  terbaik  yang ditunjukkan dengan hasil likopen, β -karoten dan aktivitas antioksidan tertinggi.

## SIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  lama  ekstraksi  kulit  melinjo  merah  (Gnetum  gnemon  L.) berbantu  gelombang  ultrasonik  dapat  disimpulkan  bahwa  lama  ekstraksi  kulit  melinjo  merah (Gnetum gnemon L.) berbantu gelombang ultrasonik berpengaruh nyata (p<0,05) terhadap likopen, β -karoten dan aktivitas antioksidan. Sementara perlakuan terbaik terdapat pada perlakuan 20 menit (P2)  dengan  hasil  likopen  sebesar  209,51  ppm, β -karoten  126,44  µg/g  dan  aktivitas  antioksidan 37,35%.

## SARAN
Setelah  dilakukan  penelitian  lama  ekstraksi  kulit  melinjo  merah  (Gnetum  gnemon  L.) berbantu  gelombang  ultrasonik,  perlu  dilakukan  penelitian  rasio  terbaik  serta  penelitian  lanjutan mengenai  senyawa  lain  yang  masih  terkandung  pada  kulit  melinjo  merah  (Gnetum  gnemon  L.) sehingga  dapat  memberikan  pengetahuan  baru  bagi  para  peneliti  serta  dapat  diaplikasikan  dalam dunia teknologi hasil pertanian.

## DAFTAR PUSTAKA
Arifulloh.  2013.  Ekstraksi  Likopen  dari  Buah  Tomat  (Lycopersicum  esculentum  Mill.)  dengan  Berbagai Komposisi Pelarut (Skripsi). Universitas Jember: Jember.
Astawan, M., Kasih, A. L. 2008. Khasiat Warna-Warni Makanan Gramedia. Jakarta. Baiano, A., Tamagnone, P., Marchitelli, V., Nobile, M. A. D. 2005. Quality Decay Kinetics of Semi-Preserved Sauce As Affected By Packaging. Journal of food Science. Vol. 70 No. 2 : 92-97.
Buanasari, F.Y., Cholifah, dan Chakim A. 2019. Potensi Metode Ultrasonic-Assisted Extraction (UAE) dalam Mengekstrak Senyawa Aktif dari Bahan Alam. Jurnal Farmasi & Sains Indonesia, Vol.2, No.1. Chang, C. H., Liu, Y. C. 2007. Study on lycopene, antioxidant contents variations in tomatoes under air-drying process. J Food Sci 72:E532 – E540.
Devina, N., 2011. Optimasi Proses Ekstraksi Kulit Melinjo Merah (Gnetum gnemon L.) dan Pengaruh pH dan Cahaya  terhadap  Aktivitas  Antioksidan.  Fakultas  Teknologi  Industri,  Universitas  Pelita  Harapan Kawaraci.
Dewi,  C.,  Utami,  R.,  dan  Riyadi,  N.H.  2012.  Aktivitas  Antioksidan  dan  Antimikroba  Ekstrak  Melinjo (Gnetum gnemon L.). Jurnal Teknologi Hasil Pertanian,Vol.V, No.2.
Dey, S., Rathod, K. V. 2013. Ultrasound assisted extraction of β -carotene from Spirulina platensis. Ultrasonics Sonochemistry 20: 271-276.
Ginting,  R.  Y.  2008.  Pengaruh  Pengolahan  Terhadap  Kadar  Likopen  Buah  Tomat  Dan  Pengaruh Penyimpanan  Pada  Suhu  Dingin  (Refrigeration)  Terhadap  Mutu  Produk  Olahan  Tomat  (Skripsi). Institut Pertanian Bogor : Bogor.
Hadiyanto,  H., Marsya,  M.  A.,  Fatkhiyatul,  P.  2015. Meningkatkan  Hasil Dari Β -Karoten  Dari Mikroalga  S Pirulina Platensis Menggunakan Ultrasound Bantuan Ekstraksi. Jurnal Teknologi 77 (1) : 219 – 222.
Kunarto,  B.,  and  Sani,  E.Y.  2018.  Antioxidant  Activity  of  Extract  from  Ultrasonic-Assisted  Extraction  of Durian Peels. Jurnal of Applied Food Technology 5(2) 25-29.
Lee, M. T., Chen B. H. 2002. Stability of lycopene during heating and illumination in a model system.  Food
Chem 78:425 – 432.
Liao,  J.,  Zheng,  N.,  Qu,  B.  2016.  An  Improved  Ultrasonic-Assisted  Extraction  Method  by  Optimizing  the Ultrasonic Frequency for Enhancing the Extraction Efficiency of Lycopene from Tomatoes. Food Anal. Methods 9:2288 – 2298 DOI 10.1007/s12161-016-0419-4.
Manasika,  A.,  Widjanarko,  S.  B.  2015.  Ekstraksi  Pigmen  Karotenoid  Labu  Kabocha  Menggunakan  Metode Ultrasonik  (Kajian  Rasio  Bahan:  Pelarut Dan  Lama  Ekstraksi).  Jurnal Pangan  dan  Agroindustri  3(3): 928-938.
Meutia,  A.A.  2013.  Ekstraksi  Antioksidan  Dari  Buah  Pepaya  (Carica  Papaya  L.)  Menggunakan  Metode Ultrasonic Bath (Kajian Tingkat Kematangan Pepaya Dan Proporsi Volume Pelarut : Bahan). (Thesis). Universitas Brawijaya : Malang.
Minhthy, L., Steven, J.S. 1999. Lycopene: chemical and biological properties. Food Technol 53:38 – 45.
Mortensen, A. 2006. Carotenoids and other Pigment As Natural Colorants.  Pure and Applied Chemistry. 78:
1477-1491.
Mu’nisa, A. 2012. Analisis Kadar Likopen dan Uji Aktivitas Antioksidan pada Tomat Asal Sulawesi Selatan.
Jurnal Bionature, Vol. 13, No. 1. FMIPA Universitas Negeri Makassar. Octaviani, T.,  Guntarti,  A.,  Susanti,  H.  2014. Penetapan  Kadar β -karoten  pada  Beberapa  Jenis  Cabe  (Genus Capsicum) dengan Metode Spektrofotometri Tampak. Pharmaciana, Vol.4 No.2 : 101-109. Pandya,  Dipen,  Sanjay  Akbari,  Hiren  Bhatt,  dan  Joshi  DC.  2017.  Standardization  of  Solvent  Extraction Process for Lycopene Extraction from Tomato Pomace. J Appl Biotechnol Bioeng No. 2(1): 00019. Putri, W. S., Warditiani, N. K., Larasanty, L. P. F. 2013. Skrining Fitokimia Ekstrak Etil Asetat Kulit Buah
Manggis (Garcinia mangostana L.) Jurnal Farmasi Udayana.
http://ojs.unud.ac.id/index.php/jfu/article/view/8405, diakses pada 28 Agustus 2020. Sarah-dejesus. 2014. Perhitungan Analisis De Garmo (Perlakuan Terbaik), https://www.slideserve.com/sarah- dejesus/perhitungan-analisis-de-garmo- perlakuan-terbaik diakses pada 20 Juli 2020. Sayuti, K., Yenrina, R. 2015. Antioksidan Alami Dan Sintetik. Andalas University Press : Padang. Setyawati, E., Rahayu, C. K., Haryanto, E. 2019. Korelasi Kadar Likopen Dengan Aktivitas Antioksidan Pada Buah Semangka (Citrullus Lanatus) Dan Tomat (Lycopersicum Esculentum). Analisi Kesehatan Sains 8 (2) ISSN: 2320 – 3635.
Sembiring,  E.,  Meiske  S.  Sangi,  Edi  Suryanto.  2016.  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Dan  Fraksi  Dari  Biji Jagung  (Zea mays L.). Chem. Prog. Vol. 9. No. 1.
Sharma,  O.P  dan  Bhat,  T.K.  2009.  Analytical  methods  DPPH  antioxidant  assay  revisited.  Food  Chemistry
113: 1202 – 1205.
Silva,  Yasmini  P.  A.,  Tania  A.  P.  C.  Ferreira  ,  Giovana  B.  Celli,    Marianne  S.  Brooks.  2018.  Optimization of Lycopene  Extraction  from Tomato  Processing  Waste  Using  an Eco-Friendly  Ethyl  Lactate – Ethyl Acetate  Solvent:  A Green  Valorization  Approach.  Waste  and  Biomass  Valorization (https://doi.org/10.1007/s12649-018-0317-7).
Yilmas,  T.,  Kumcouglu,  S.,  Tavman,  S.  2017.  Ultrasound-Assisted  Extraction  of  Lycopene  and β -karotene from Tomato-Processing Wastes. Ital. J. Food Sci., 29: 186.