PHARMACON – PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,

## ANTIOXIDANT ACTIVITY TEST OF EXTRACT ETHANOL SPONGE (Leucetta chagosensis) COLLECTED FROM THE MANTEHAGE ISLANDS

## UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL SPONS ( Leucetta chagosensis)

## YANG DIKOLEKSI DARI KEPULAUAN MANTEHAGE
Agata Mega Kinanti 1)* , Adithya Yudistira 1) , Erladys Rumondor 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115 *agatakinanti28@gmail.com

## ABSTRACT
Sponges are not only rich in secondary metabolites, but also have the ability to synthesize various compounds, such  as  alkaloids,  peptides,  and  terpenoids.  These  compounds  are  reported  to  have  activity  as  antitumor, antifungal, antibacterial, and also as an antioxidant. This study aims to determine the antioxidant activity of the marine animal sponge Leucetta chagosensis. This research is a laboratory experiment with testing of the ethanol  extract  of  sponge  Leucetta  chagosensis  with  the  DPPH  [1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl  method]  to analyze antioxidant activity using a UV-Vis spectrophotometer with a wavelength of 517 nm. The results of this study indicate that the ethanol extract of the sponge  Leucetta chagosensis  from Mantehage Island has antioxidant activity in each concentration of the test. The greatest antioxidant levels were found in the sponge Leucetta chagosensis with a concentration of 0.6 mg / L, reaching a percentage of 57.23%..
Keywords : Antioxidants, DPPH, Leucetta chagosensis, Mantehage Islands

## ABSTRAK
Sponge tidak hanya kaya akan metabolit sekunder, tapi juga memiliki kemampuan untuk menyintesis berbagai macam  senyawa,  seperti  alkaloid, peptide ,  dan  terpenoid.  Senyawa-senyawa  tersebut  dilaporkan  memiliki aktifitas sebagai antitumor, antijamur, antibakteri, dan juga sebagai antioksidan. Penelitian ini bertujuan Untuk mengetahui  aktivitas  antioksidan  dari  hewan  laut  sponge Leucetta  chagosensis .  Penelitian  ini  merupakan eksperimental  laboratorium  dengan  pengujian  terhadap  ektrak  etanol  sponge Leucetta  chagosensis dengan metode  DPPH  [ 1,1-difenil-2-pikrilhidrazil ]  untuk  menganalisis  aktivitas  antioksidan  dengan  menggunakan spektrofotometer UV-Vis dengan panjang gelombang 517 nm. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa ekstrak etanol  sponge Leucetta  chagosensis dari  Pulau  Mantehage  mempunyai  aktivitas  antioksidan  disetiap konsentrasi pengujian. Kadar antioksidan yang paling besar terdapat pada sponge Leucetta chagosensis dengan konsentrasi 0,6 mg/L dengan mencapai persentase 57,23% .
Kata kunci : Antioksidan, DPPH, Leucetta chagosensis, Pulau Mantehage
PHARMACON – PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,

## PENDAHULUAN
Secara  geografis,  Indonesia  berada  pada posisi  yang  strategis.  Terletak  di  antara  Benua Asia  dan  Australia,  serta  diapit  oleh  Samudra Hindia dan Pasifik ditambah dengan iklim tropis- nya  membuat  Indonesia  menjadi  negara  dengan potensi  sumber  daya  laut  yang  beraneka  ragam, salah  satu  diantaranya  adalah  sponge ( Porifera ). Perairan  Indonesia  diketahui  memiliki  lebih  dari 1500  spesies  sponge  yang  telah  teridentifikasi. Keanekaragaman  biota  laut  Indonesia  juga menjadi indikasi adanya keanekaragaman struktur senyawa (Haedar et al , 2016). Sponge merupakan biota  laut  yang  potensial  untuk  menghasilkan metabolit  sekunder  yang  memiliki  sifat  bioaktif. Hasil  metabolit  sekunder  dari  beberapa  sponge terbukti  mengandung  senyawa-senyawa  aktif sebagai  " lead  compound "  dalam  pengembangan obat  antibiotik,  antikanker,  antivirus,  antibakteri, antioksidan  dan  Iain-lain.  Hal  ini  membuktikan bahwa sponge sangat potensial dalam pengembangan  industri  farmasi,  mengingat senyawa-senyawa aktif yang dihasilkan mempunyai  perbedaan  dengan  senyawa  yang dihasilkan  oleh  tumbuh-tumbuhan  darat  yang selama ini merupakan sumber utama bahan obat- obatan (Murniasih, 2003).
Sponge  tidak  hanya  kaya  akan  metabolit sekunder,  tapi  juga  memiliki  kemampuan  untuk menyintesis berbagai  macam  senyawa,  seperti alkaloid, peptide ,  dan  terpenoid.  Senyawa- senyawa  tersebut  dilaporkan  memiliki  aktifitas sebagai antitumor, antijamur, antibakteri, dan juga sebagai antioksidan (Arai, 2014).
Antioksidan  merupakan  senyawa  yang dapat  menetralkan  atau  meredam  radikal  bebas, serta  menghambat  terjadinya  oksidasi  pada  sel tubuh, sehingga dapat mencegah atau mengurangi terjadinya  kerusakan  sel.  Antioksidan  diketahui dapat  menghambat  kerja  radikal  bebas.  Sebagai salah satu upaya untuk mengoptimalkan pemanfaatan bahan alam laut Indonesia, dilakukan penelitian dengan tujuan awal menguji aktivitas antioksidan dan mengidentifikasi senyawa  berkhasiat  sebagai  antioksidan  (Hanani et  al ,  2006).  Salah  satu  metode  yang  digunakan dalam menguji aktivitas antioksidan yaitu metode DPPH ( 1,1-difenil-2-pikrilhidrazil ). Metode pengujian ini merupakan metode yang konvensial dan  telah  lama  digunakan  untuk  penetapan aktivitas  senyawa  antioksidan.  Metode  DPPH mudah  digunakan,  cepat,  cukup  teliti  dan  baik digunakan  dalam  pelarut  organik  (Widyastuti, 2010).
Radikal  bebas  adalah  suatu  atom  atau molekul yang sangat reaktif dengan elektron yang tidak  memiliki  pasangan. Radikal  bebas  mencari reaksi-reaksi  agar  dapat  memperoleh  kembali elektron  pasangannya.  Selain  itu,  radikal  bebas dapat  mengalami  tubrukan  kaya  energi  dengan molekul  lain,  yang  merusak  ikatan  didalam molekul,  sehingga  radikal  bebas  dapat  merusak membran sel atau DNA sel yang rentan (Corwin, 2009).
Metode  uji  antioksidan  yang  digunakan pada  penelitian  ini  adalah  metode  peredaman radikal  bebas  DPPH  (1,1-difenil-2-pikrilhidrazil). Metode ini memerlukan sedikit sampel, sederhana, mudah,  cepat,  dan  peka  untuk  mengevaluasi aktivitas  antioksidan  dari  senyawa  bahan  alam (Hanani et al , 2006).

## METODOLOGI PENELITIAN Waktu dan Tempat Penelitian
Pengambilan dan preparasi sampel dilakukan  di  perairan  Kepulauan  Mantehage. Sedangkan  untuk  penelitian  ini  dilakukan  di Laboratorium  Farmasi  Lanjut  Program  Studi Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, dan di Laboratorium Hama dan Penyakit Tumbuhan Fakultas Pertanian Universitas Sam  Ratulangi  pada  bulan  Oktober  2020  – Desember 2020.

## Bentuk Penelitian
Bentuk dari penelitian ini adalah eksperimental  laboratorium  dengan  rancangan penelitian  dimana  sampel  sponge Leucetta chagosensis disiapkan  dan  diekstraksi  dengan metode  maserasi  menggunakan  pelarut  etanol kemudian  dilakukan  uji  aktivitas  antioksidan menggunakan  metode  DPPH  ( 1,1-diphenil-2- picrylhydarzyl ).

## Alat dan Bahan Alat
Alat-alat  yang  digunakan  pada  penelitian ini  yaitu scuba  diving ,  kamera,  gunting,  pisau, wadah botol, kertas saring, aluminium foil , cawan porselin, ziplok, sarung tangan, telenan, gelas ukur, erlenmeyer,  baker  glass,  tabung  reaksi,  vortex, mikro pipet, timbangan digital, spatula, evaporator, spektrofotometer UV-Vis.

## Bahan
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  yaitu  ekstrak  etanol  dari  sponge Leucetta chagosensis ,  etanol  96%,  DPPH  [ 1,1-difenil-2-
PHARMACON – PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,
pikrilhidrazil ],  dan  serbuk  vitamin  C p.a sebagai pembanding.

## Pengambilan dan Preparasi Sampel
Sampel  sponge Leucetta  chagosensis diambil  dari  perairan  Kepulauan  Mantehage. Sampel  diambil  dengan  menggunakan  alat  bantu ( scuba  diving ,  tabung  oksigen,  ziplok  dan  pisau), kemudian dimasukkan dalam ziplok dan diberikan label,  sampel  dimasukkan  kedalam  kotak  dingin ( cool box ) yang berisi es batu. Sampel yang telah didapat langsung dibersihkan, lalu dipotong kecil- kecil dan langsung dimasukkan kedalam botol lalu diisi dengan pelarut etanol 96%. Di Laboratorium Farmasi  Lanjut  Program  Studi  Farmasi  Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam
Universitas  Sam  Ratulangi  sampel  tersebut diekstraksi menggunakan metode maserasi

## Ekstrasi Sampel
Sampel  sponge Leucetta  chagosensis sebanyak  250  g  dimaserasi  dengan  pelarut  etanol 96% sebanyak 200 mL dengan 3 kali pengulangan selama  24  jam.  Sampel  kemudian  disaring  untuk mendapatkan  filtrat.  Hasil  yang  didapatkan kemudian diuapkan menggunakan evaporator yang akan  menghasilkan  ekstrak  kasar  dari  sampel sponge Leucetta chagosensis.

## Pembuatan Larutan Stok 100 mL
Sebanyak 100 mg ekstrak sponge Leucetta chagosensis dilarutkan dalam 100 mL etanol 96%. Dengan  masing-masing  konsentrasi  0,5,  0,6,  dan 0,7  mg/L,  dihitung  dengan  menggunakan  rumus pengenceran, yaitu:
Dari masing-masing hasil yang didapatkan dari hasil V1 dipipet dan ditambahkan etanol 96% hingga  mencapai  tanda  batas  (10  mL),  kemudian dipindahkan  ke  dalam  tabung  reaksi  dan  ditutup dengan  menggunakan aluminium foil untuk digunakan pada perlakuan selanjutnya.

## Pembuatan Larutan DPPH
Sebanyak 4 mg serbuk DPPH ditimbang  dan  dilarutkan  dalam  etanol  96% sebanyak  100  mL.  Selanjutnya  larutan  stok DPPH dilakukan pengujian kontrol, di uji pada spektrofotometer  UV-Vis.

## Pembuatan Larutan Vitamin C
Vitamin C p.a ditimbang sebanyak 10 mg dan dilarutkan dalam etanol 96% sebanyak 10 mL, kemudian buat larutan stok untuk konsentrasi 0,5, 0,6, dan 0,7 mg/L dengan ditambahkan etanol 96% sampai tanda batas (10 mL) pada masing – masing larutan  sebanyak  3  kali  pengulangan.  Sampel vitamin C p.a di pipet sebanyak 2 mL dimasukan kedalam  tabung  reaksi  dengan  masing-masing konsentrasi  0,5,  0,6,  dan  0,7  mg/L  dan  di tambahkan 2  mL larutan DPPH kedalam  masing- masing  kosentrasi  dan  divortex  selama  5  detik sebanyak  3  kali  pengulangan.  Diuji  pada spektrofotometer UV-Vis dengan panjang gelombang 517 nm.
Pengujian Aktivitas Antioksidan dengan Metode DPPH
Larutan  kontrol  DPPH  diuji  pada spektrofotometer  UV-Vis  dengan  panjang gelombang 517 nm sebagai absorbansi kontrol dalam  pengujian  ini.  Sampel  diinkubansi selama  30  menit  pada  suhu  37 0 C.  Untuk mengetahui  aktivitas  dari  penangkal  radikal bebas  tersebut,  di  uji  pada  spektrofotometer. Berubahnya  warna  ungu  menjadi  warna kuning  menunjukkan  efisiensi  penangkal radikal  bebas.  Diukur  absorbansi  pada spektrofotometer  UV-Vis  dengan  panjang gelombang 517 nm setelah diinkubasi selama 30  menit  berubahnya  warna  menjadi  kuning menunjukan bahwa, masing-masing konsetrasi menunjukkan  efisiensi  penangkal  radikal bebas di uji dengan spektrofotometer UV-Vis dengan panjang gelombang 517 nm. Kemudian  diamati  perbandingan  dengan vitamin  C p.a sebagai  standar.  Aktivitas penangkapan  radikal  bebas  (persen  inhibisi) dihitung  sebagai  presentase  berkurangnya warna DPPH dengan menggunakan rumus :

## HASIL DAN PEMBAHASAN Hasil
Pengujian ini dilakukan untuk mengetahui aktivitas dari penangkal radikal bebas, di uji pada spektrofotometer. Hasil pengujian disajikan pada tabel dibawah ini:
V 1 .M 1 = V 2 .M 2
%Inhibisi = 𝐴 𝑘𝑜𝑛𝑡𝑟𝑜𝑙 − 𝐴 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 𝐴 𝑘𝑜𝑛𝑡𝑟𝑜𝑙 ×  100%
PHARMACON – PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,
Tabel  1 .  Hasil  perbandingan  pengujian Aktivitas Antioksidan  Ekstrak  Etanol  Sponge Leucetta chagosensis dengan Vitamin C p.a

## Pembahasan
Uji  aktivitas  antioksidan  suatu  tanaman maupun biota laut sangat penting dilakukan untuk mengetahui  apakah  dari  tanaman  atau  biota  laut tersebut  terbukti  memiliki  aktivitas  pengikatan terhadap  radikal  bebas,  Marzuki  (2018).  Pada penelitian  ini,  biota  laut  yang  digunakan  yaitu sponge Leucetta chagosensis.
Uji  aktivitas  ini  menggunakan  metode DPPH ( 1,1-difenil-2-pikrilhidrazil ) karena metode ini adalah metode yang paling sederhana, mudah, cepat  dan  peka  serta  hanya  memerlukan  sedikit sampel  untuk  mengevaluasi  aktivitas  antioksidan dari  senyawa  bahan  alam  sehingga  digunakan secara  luas  untuk  menguji  kemampuan  senyawa yang  berperan  sebagai  pendonor  electron. Pengukuran  antioksidan  dengan  metode  DPPH pada  prinsipnya  adalah  mengukur  terjadinya pemudaran warna dari radikal DPPH akibat adanya antioksidan  yang  dapat  menetralkan  molekul radikal bebas. Jadi, radikal DPPH yang sebelumnya  berwarna  akan  kehilangan  warnanya jika  ada  antioksidan,  karena  antioksidan  akan menyumbang  elektronnya  kepada  radikal  DPPH, sehingga  radikal  yang  sebelumnya  tidak  stabil (akibat  adanya  elektron  yang  tidak  berpasangan) menjadi  stabil  (elektron  pada  radikal  bebas
menjadi berpasangan karena mendapat sumbangan elektron  dari  antioksidan).  Pada  dasarnya, karakteristik  antioksidan  adalah  mudah  untuk menyumbangkan elektron, semakin mudah memberikan  elektron  maka  sifat  antioksidannya semakin  kuat.  Pada  uji  DPPH  ini  digunakan panjang gelombang 517 nm, larutan DPPH tersebut diukur  pada  panjang  gelombang  400  sampai  600 nm dan hasil yang didapat adalah 0,894.
Sebelum  melakukan  pengujian  DPPH dilakukan  pembuatan  larutan  stok  Tujuan  dari pembuatan  larutan  stok  sendiri  ialah  untuk menghindari  penimbangan  yang  berulang-ulang setiap kali membuat media. Dengan adanya larutan stok,  pembuatan  media  selanjutnya  tinggal mengencerkan  larutan  stok    saja.  Larutan  stok dibuat  hanya  untuk  satu jenis bahan.  Langkah  ini bertujuan untuk menghindari pengendapan larutan.
Sampel  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  adalah  sponge Leucetta  chagosensis dimana sampel  ini  diekstraksikan  dengan  menggunakan metode  maserasi.  Pelarut  yang  digunakan  untuk sampel tersebut adalah etanol 96% karena pelarut ini  hampir  bisa  melarutkan  semua  senyawa organik, baik polar atau pun non polar. Konsentrasi yang digunakan untuk sponge Leucetta chagosensis adalah  0,5,    0,6,  dan  0,7  mg/L.
Masing-masing dari konsentrasi tersebut dicampurkan  dengan  larutan  DPPH  kemudian divortex  dan  diinkubasi  selama  30  menit  pada tempat  yang  gelap.  Kemudian  setelah  sampel diinkubasi  masing-masing  dari  ekstrak  dilakukan pengukuran absorbansi dengan menggunakan alat spektrofotometer UV-Vis dengan panjang gelombang  517  nm,  pada  setiap  konsentrasi dilakukan  sebanyak  3  kali  pengulangan.  Dalam penelitian ini dibuat 3 kali pengulangan pada setiap konsentrasi yang bertujuan untuk mengetahui hasil dari  masing-masing  konsentrasi  kemudian  hasil yang  didapatkan  akan  dihitung  rata-ratanya, sehingga dari hasil rata-rata tersebut dapat dilihat seberapa besar aktivitas antioksidan dalam sampel sponge Leucetta  chagosensis dibandingkan  dari sampel vitamin C.
Hasil  penelitian  didapat  pada  tabel  1 menunjukan nilai persentase inhibisi pada ekstrak etanol sponge Leucetta chagosensis yang memiliki aktivitas  antioksidan  dengan  rata-rata  53,43%  di konsentrasi  0,5  mg/L,  57,23%  di  konsentrasi  0,6 mg/L,  dan  di  konsentrasi  0,7  mg/L  yaitu  sebesar 47,93%.  Ini  menunjukan  bahwa  sampel  tersebut memiliki  kadar  antioksidan.  Menurut  Molyneux (2004) nilai standar kadar antioksidan adalah 50%. Pada  ekstrak  etanol  sponge Leucetta  chagosensis
Konsentrasi Pengulangan Rata-rata I II III 0,5 ppm Ekstrak 74,5 % 37,3 % 48,8 % 53,43 % Vitamin C 96,8 % 92,7 % 97,6 % 95,7 % 0,6 ppm Ekstrak 54,2 % 62,1 % 55,4 % 57,23 % Vitamin C 97,6 % 98,6 % 98,8 % 98,3 %
0,7 ppm Ekstrak 51,7 % 53,3 % 38,8 % 47,93 % Vitamin C 98,8 % 99,6 % 98,9 % 99,1 %
PHARMACON – PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,
memiliki  persen  inhibisi  rata-rata  paling  tinggi yaitu sebesar 57,23 %. Penigkatan persen inhibisi pada  ekstrak  etanol  sponge Leucetta  chagosensis menandakan  bahwa  konsentrasi  ekstrak  yang ditambahkan  mempengaruhi  kemampuan  ekstrak dalam  merendam  radikal  bebas.  Namun  hal tersebut  tumpang  tindih  dengan  hasil  yang  ada dimana pada sampel sponge Leucetta chagosensis menunjukkan  nilai  persen  inhibisi  yang  didapat pada konsentrasi rendah yaitu pada konsentrasi 0,6 ppm  mempunyai  nilai  persen  inhibisi  yang  lebih tinggi yakni sebesar 57,23%  dibandingkan dengan konsentrasi yang lebih tinggi yaitu konsentrasi 0,7 ppm didapat nilai persen inhibisi yang rendah yaitu sebesar  47,93%.  Ketidakstabilan  absorbansi  yang diperoleh  tersebut  dapat  dimungkinkan  karena rentang  variasi      konsentrasi  yang  dipilih  tidak begitu signifikan. Hasil absorbansi ini tidak  sesuai dengan  hukum  Lambert-Beer  yang    menyatakan semakin  tinggi  konsentrasi    maka  semakin  tinggi pula nilai absorbansi suatu sampel (Kristianingrum, 2010).
Hasil pengujian perbandingan  aktivitas  antioksidan  ekstrak  etanol sponge Leucetta chagosensis dan vitamin C (Tabel 1) juga menunjukkan bahwa aktivitas antioksidan ekstrak  etanol  sponge Leucetta  chagosensis lebih rendah dibandingkan dengan vitamin C.
Rendahnya aktivitas antioksidan ini kemungkinan  disebabkan  oleh  berbagai  faktor, diantaranya  karena  metode  ekstraksi  yang digunakan  kemungkinan  tidak  cukup  menarik komponen  kimia  yang  bersifat  antioksidan  dalam sponge Leucetta chagosensis . Selain itu vitamin C merupakan  senyawa  murni  sedangkan  ekstrak etanol  sponge Leucetta  chagosensis masih merupakan  senyawa  campuran  dan  belum diketahui  kandungan  senyawanya  yang  bersifat antioksidan,  dimana  adanya  senyawa  yang  tidak bersifat antioksidan kemungkinan bisa mempengaruhi aktivitas antioksidan ekstrak etanol sponge Leucetta  chagosensis itu  sendiri.Menurut penelitian  Palekahelu  (2018),  rendahnya  nilai rendemen juga dapat mempengaruhi hasil.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  dari  hasil  penelitian  yang telah  dilakukan  maka,  dapat  disimpulkan  bahwa ekstrak  etanol  sponge Leucetta  chagosensis yang diperoleh dari Pulau Mantehage memiliki aktivitas antioksidan disetiap konsentrasi. Aktivitas antioksidan tertinggi  terlihat  pada  konsentrasi  0,6 mg/L dengan mencapai presentase 57,23%.

## SARAN
Perlu  dilakukan  penelitian  lebih  lanjut untuk mengetahui senyawa aktif yang terkandung dalam ekstrak etanol sponge Leucetta chagosensis dan pengujian aktivitas antioksidan dengan metode lain  dan  sebaiknya  membandingkan  hasilnya dengan penelitian ini .

## DAFTAR PUSTAKA
Arai M, Chisu H, Yoshi Y, A Setiawan, Motomasa K. 2014. Aaptamines, Marine Spongean Alkaloids, as Anti-Dormant Mycobacterial  Substances. J.  Nat  Med . 68 : 372-376. Corwin, E J. 2009. Buku Saku Patofisiologi Edisi Ketiga .  Penerjemah:  Yudha  E  K, Wahyuningsi E, Yulianti D, dan Karyuni P E. Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC.
Haedar,  Sadarun,  B.,  Palupi,  Ratna,  D.,  2016. Potensi  keanekaragaman  jenis  dan sebaran spons di Perairan pulau saponda laut kabupaten konawe. Sapa Laut . 1 (1): 1-9.
Hanani  E,  Mun’im  A,  Sekarini  R,  dan Wiryowidagdo  S.  2006.  Uji  Aktivitas Antioksidan Beberapa Sponge Laut dari Kepulauan  Seribu. Jurnal  Bahan  Alam Indonesia , Vol 5, No.1. Kristianingrum, Susila. 2010. Spektroskopi Ultraviolet dan Sinar Tampak (Spektroskopi UV–Vis) . Universitas
Negeri Yogyakarta, Yogyakarta.
Marzuki,  I.  2018. Eksplorasi  Sponge  Indonesia  : Seputar  Kepulauan  Spermonde .  Nas Media Pustaka, Makassar. Molyneux,  P.  2004. The  Use  of  The  Stable  Free Radikal  DPPH. J.Sci. Technol. 26  (2 )  :
211-219. Murniasih T. 2003. Metabolit sekunder dari sponge sebagai bahan obat-obatan.
Oseana .; 28 (3):27–33.
Palekahelu,  N.  2018.  Aktivitas  Antioksidan  dan Antibakteri  dari  Ekstrak  Etanol  dan Metanol Daun Kapehu ( Guioa diplopetala ). Jurnal  Ilmiah Farmasi 3 ( 2 ).
Widyastuti,  N.  2010.  Pengukuran  Aktivitas Antioksidan  Dengan  Metode  CUPRAC, DPPH  dan  FRAP  Serta  Korelasinya Dengan Fenol dan Flavonoid Pada Enam Tanaman [Skripsi]. FMIPA  Institut Pertanian Bogor. Bogor