EFEK ANTIBAKTERI SEA CUCUMBER (STICHOPUS VARIEGATUS) SEBAGAI BAHAN MEDIKAMEN SALURAN AKAR TERHADAP BAKTERI ENTEROCOCCUS FAECALIS
(EFFECT OF SEA CUCUMBER (STICHOPUS VARIEGATUS) AS A ROOT CANAL MEDICAMENT AGAINST ENTEROCOCCUS FAECALIS)
Gita Tarigan*, Trimurni Abidin*, Harry Agusnar**
*Departemen Ilmu Konservasi Gigi Fakultas Kedokteran Gigi, Universitas Sumatera Utara Jl. Alumni No. 2 Kampus USU Medan **Departemen Ilmu Kimia, Universitas Sumatera Utara Jl. Bioteknologi 1 Kampus USU Medan E-mail: gitatarigan@ymail.com

## Abstract
Endodontic treatment goal is to eliminate microorganisms and their byproducts from root canal so that the teeth can be maintained  as  long  as possible  in the  mouth.  Bacteria that survives  in  normally  in the root canal  is  anaerobic  bacteria group. One of this bacteria is Enterococcus faecalis which is most commonly found in failed root canal treatment case. Calcium hydroxide is mostly used as medicins for interappointment root canal dressing during endodontic therapy. Sea cucumber is one of the natural ingredients that had been used widely as medicine. This study was aimed to determine the effects  of  Sea  cucumber  in  the  elimination  of  Enterococcus  faecalis.  The  effect  of  Sea  cucumber  to  eliminate Enterococcus faecalis was done at concentration (0.1%, 0.2%, 0.25%, 0.3%, 0.4%, 0.5%) and time (4, 6, 8, 24 hours) and viability  was  measured  by  using  3-(4,5-dimethythiazol-2-yl)  -2.5  diphenyl  tetrazoliun-bromide  (MTT)  assay  and microplate  reader  with  wave  length  650nm.  The  results  showed  that  Sea  Cucumber  had  an  effect  on  Enterococcus faecalis  at  a  concentration  of  0.3%  at  4,  6  and  at  8  hours  the  best  concentration  was  0,5%.  In  24  hours  the  best concentration to eliminate Enterococcus faecalis was 0.2 %. Statistical analysis showed that Sea cucumber had an effect on  Enterococcus  faecalis  with  significant  results  (p  <0.05).  In  conclusion,  Sea  cucumber  had  an  effect  to  eliminate Enterococcus faecalis.
Key words: endodontic treatment, Sea cucumber, Enterococcus faecalis

## Abstrak
Tujuan  perawatan endodonti adalah untuk  mengeliminasi  mikroorganisme  dan  beberapa produk  saluran  akar  sehingga gigi dapat dipertahankan selama mungkin di dalam mulut. Banyak bakteri yang didapat dalam saluran akar, salah satunya adalah bakteri anaerob yaitu Enterococcus faecalis, bakteri ini umumnya yang paling banyak ditemukan dalam saluran akar.  Umumnya  bakteri  ini  didapat  karena  adanya  kegagalan  dalam  perawatan  saluran  akar.  Bahan  medikamen  yang umumya digunakan di klinik adalah kalsium hidroksida. Sea cucumber adalah salah satu bahan alam yang sudah banyak digunakan  dibidang  kesehatan.  Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk  menentukan  efek Sea  cucumber dalam  membunuh bakteri Enterococcus  faecalis. Efek Sea  cucumber terhadap  bakteri Enterococcus  faecalis dilakukan  pada  konsentrasi (0,1%, 0,2%, 0,25%, 0,3%, 0,4%, 0,5%) dengan waktu (4, 6, 8, dan 24jam) dan dilakukan pengukuran viabilitas dengan menggunakan 3-(4,5- dimethythiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazoliun bromide (MTT) assay dan dibaca dengan microplate reader panjang gelombang 650 nm. Hasil penelitian menunjukkan Sea cucumber memiliki efek terhadap Enterococcus faecalis dari  waktu  4jam  sampai  6  jam  dengan  konsentrasi  yang  terbaik  adalah  0,3%,  sedangkan  pada  waktu  8  jam konsentrasi  yang  terbaik  dalam  membunuh  bakteri Enterococcus  faecalis adalah  0,5%.  Konsentrasi  yang  paling  kecil yaitu  0,2%  didapat  pada  waktu  24  jam.  Secara  statistik Sea  cucumber memiliki  efek  terhadap Enterococcus  faecalis dengan hasil yang signifikan (p< 0,05). Sebagai kesimpulan, Sea cucumber efektif  terhadap Enterococcus faecalis.
Kata Kunci : perawatan endodonti, Sea cucumber, Enterococcus faecalis

## PENDAHULUAN
Endodonti  merupakan bagian ilmu kedokteran gi- gi  mengenai  perawatan  penyakit  atau  cedera  pada jaringan  pulpa  dan  jaringan  periapikal.  Tujuan  pe- rawatan  endodonti  adalah  mereduksi  atau  meng- eliminasi mikroorganisme dan produknya dari salur- an  akar  sehingga  gigi  dapat  dipertahankan  selama mungkin  di  dalam  mulut.  Walaupun  instrumentasi dan  teknik  irigasi  dilakukan,  namun  mikroorganis- me  mungkin  masih  tertinggal  di  saluran  akar  ter- utama  di  dalam  tubuli  dentin.  Banyak  peneliti  me- nyatakan bahwa cleaning, shaping dan irigasi salur- an  akar  secara  signifikan  dapat  menurunkan  atau mengeliminasi  mikroorganisme  dari  saluran  akar, akan  tetapi  mengeliminasi  mikroorganisme  secara sempurna  tidak  selalu  dapat  dicapai  secara  klinis, oleh karena kompleksnya anatomi saluran akar dan keterbatasan instrumentasi dan irigasi. 1 Bakteri yang biasa  dapat  bertahan  dalam  saluran  akar  adalah golongan  bakteri  anaerob.  Salah  satunya  adalah Enterococcus  faecalis yaitu  bakteri  yang  dapat menimbulkan  infeksi  primer  dan  paling  banyak  di- temukan  dalam  saluran  akar    yang  menyebabkan kegagalan perawatan endodonti. Keberadaan bakteri ini  dapat  diketahui  dari  hasil  kultur  dan  metode Polymerase  Chain  Reaction ( PCR ).  Sundqvist  me- nemukan  sejumlah bakteri  anaerob pada perawatan saluran  akar  yang  gagal  seperti Entercoccus  faeca- lis,  Streptococcus  anginosus,  Bacteroides  gracilis dan Fusobacterium nucleatum . 2
Penyebab  utama  infeksi  pasca  perawatan  adalah mikroorganisme  yang persisten pada  apikal  saluran akar  gigi  yang  telah  dirawat. Enterococci telah dikenal sebagai bakteri yang berpotensi patogen ter- hadap  manusia  sejak  lama  dan  terlibat  dalam  in- feksi saluran akar. 8 Enterococci memiliki kemampu- an  untuk  tumbuh  dengan  atau  tanpa  oksigen  dan bertahan  pada  lingkungan  dengan  pH  alkalin  yang ekstrim. 5 Enterococcus  faecalis tidak  membentuk spora,  fakultatif  anaerob,  gram  positif  kokus,  ber- bentuk  ovoid  dengan  diameter  0,5-1µm,  biasanya tunggal, berpasangan atau berbentuk rantai pendek. 8
Bahan  medikamen  yang  paling  umum  digunakan saat  ini  ialah  kalsium  hidroksida  (Ca(OH) 2 )  dan masih  menjadi  “ gold  standard ”.  Bahan  ini  diguna- kan  sebagai  medikamen  selama  kunjungan  terapi endodonti  dan  memiliki  sifat  antibakterial  yang baik.  Secara  klinis,  kalsium  hidroksida  merupakan bahan  medikamen  yang  memiliki  kemampuan  me- nginaktifasi  endotoksin  bakteri  serta  dapat  diterima baik  sebagai  bahan  medikamen  saluran  akar.
Walaupun  demikian,  penelitian  terdahulu  menyata- kan  bahwa  kalsium  hidroksida  dapat bekerja aktif, terbatas pada beberapa hari.
Kalsium  hidroksida  juga  memiliki  beberapa  ke- lemahan, diantaranya kekuatan kompresif yang ren- dah  sehingga  dapat  berpengaruh  pada  kestabilan kalsium hidroksida terhadap cairan di dalam saluran akar   yang  akhirnya  dapat melarutkan bahan medi- kamen saluran akar. 9
Saat  ini,  kecenderungan  masyarakat  kembali  me- makai  bahan  alami  dikenal  sebagai New  Green Wave ,  yaitu  gerakan  yang  berupaya menggunakan kembali  obat-obatan  tradisional  yang  berasal  dari bahan alami yang diperoleh dari alam (biofarmaka). Sumber bahan baku obat ( medicine ) hingga saat ini sebagian besar masih berasal dari alam, baik nabati maupun  asal  hewan. 6 Salah  satunya  adalah Sea  cu- cumber ( Stichopus variegatus ) . Sea cucumber ( Stic- hopus variegatus ) adalah invertebrata laut, biasa di- temukan di laut. Sejumlah aktivitas biologis dan far- makologis dari jenis Sea cucumber ( Stichopus varie- gatus )  adalah  sebagai  anti  genetik,  kanker,  koa- gulan,  hipertensi,  inflamasi,  oksidan,  mikroba,  dan anti  tumor  serta  penyembuhan  luka. 15 Sampai  saat ini belum ada penelitian tentang Sea cucumber (Stic- hopus variegatus) dalam bidang kedokteran gigi ter- utama dalam bidang endodonti. Oleh karena itu, pe- neliti  melakukan  penelitian Sea  cucumber  (Stic- hopus  variegatus) pada  konsentrasi  berapa  dapat membunuh  bakteri Enterococcus  faecalis sehingga dapat digunakan  sebagai bahan medikamen  saluran akar.

## BAHAN DAN METODE
Jenis penelitian  yang digunakan  adalah penelitian eksperimental  laboratoris.  Pada  penelitian  ini  pem- buatan sampel dilakukan di Laboraturium Pusat Pe- nelitian Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam  Universitas  Sumatera  Utara  (FMIPA  USU), sedangkan  biakan  bakteri  dilakukan  di  Laboratu- rium Biologi Oral Universitas  Indonesia (UI). Pada penelitian  menggunakan  konsentrasi  0,1,  0,2,  0,25, 0,3, 0,4 dan 0,5% hal ini karena pada penelitian se- belumnya  menggunakan Sea  cucumber ( Stichopus variegatus )  dalam  bentuk jelly yang  dijual  di- pasaran  dengan  konsentrasi  0,5%,  dan  juga  seperti penelitian tentang bahan alami diperoleh bahwa de- ngan  konsentrasi  rendah  dapat  memberkan  pe- ngaruh  pada  bakteri.  Penelitian  ini  juga  meng- gunakan  waktu  4,6,8  dan  24  jam  dan  Ca(OH) 2 se- bagai  kontrol.  Hasil  pengukuran  konsentrasi  dan
pengaruh  pemberian Sea  cucumber  (Stichopus variegatus) menggunakan  3-(4,5- dimethythiazol-2- yl)-2,5-diphenyl tetrazoliun bromide (MTT) assay.

## HASIL
Sea  cucumber ( Stichopus  variegatus) dengan waktu  4  dan  6  jam  dan  konsentrasi  0,3%  mem- berikan  efek  yang  baik  dibandingkan  dengan  Ca (OH) 2 (Gambar  1  dan 2). Dalam  waktu 8 jam kon- sentrasi  yang  terbaik  didapat  pada  0,5  %  (Gambar 3),  sedangkan  dengan  waktu  24  jam  konsentrasi yang  dapat  mengeliminasi Enterococcus  faecalis adalah 0,2% (Gambar 4).
Gambar 1 menunjukkan daerah yang paling yang besar  tereliminasi  terdapat  pada  konsentrasi  0,3% yaitu sebanyak 110 mm sedangkan daerah yang pa- ling sedikit terdapat pada konsentrasi 0,1% yaitu se- banyak 40 mm. Pada konsentrasi 0,25% menunjuk- kan  jumlah daerah  yang mengeliminasi bakteri En- terococcus  faecalis sama  dengan  kontrol  yaitu  se- banyak 80 mm.
Gambar 1. Bakteri Enterococcus faecalis yang terelimina- si  dengan  konsentrasi Sea  cucumber ( Sticho- pus variegatus ) pada waktu 4 jam dalam ben- tuk diagram
Gambar 2 menunjukkan daerah  yang paling  yang besar  tereliminasi  terdapat  pada  konsentrasi  0,3% yaitu  sebanyak  110  mm  sedangkan  daerah  yang paling  sedikit  terdapat  pada  konsentrasi  0,1%  yaitu sebanyak  38  mm.  Pada  konsentrasi  0,25%  me- nunjukkan jumlah daerah  yang mengeliminasi bak- teri Enterococcus  faecalis sama  dengan  kontrol yaitu sebanyak 80 mm (Gambar 2).
Gambar 2. Bakteri Enterococcus faecalis yang terelimina- si  dengan  konsentrasi Sea  cucumber ( Sticho- pus variegatus ) pada waktu 6 jam dalam ben- tuk diagram
Gambar 3 menunjukkan daerah yang paling yang banyak tereliminasi terdapat konsentrasi 0,5% yaitu sebanyak  150  mm  sedangkan  daerah  yang  paling sedikit  dijumpai  pada  konsentrasi  0,1%  yaitu sebanyak 50mm (gambar 3).
Gambar 3. Bakteri Enterococcus faecalis yang terelimina- si  dengan  konsentrasi Sea  cucumber ( Sticho- pus variegatus ) pada waktu 8 jam dalam ben- tuk diagram
Gambar 4 menunjukkan daerah  yang paling  yang besar  tereliminasi  terdapat  pada  konsentrasi  0,2% yaitu  sebanyak  115  mm  sedangkan  daerah  yang paling sedikit dijumpai pada konsentrasi 0,1% yaitu sebanyak 70mm (gambar 4).
Gambar 4. Bakteri Enterococcus faecalis yang terelimina- si  dengan  konsentrasi Sea  cucumber ( Sticho- pus variegatus ) pada waktu 24 jam dalam ben- tuk diagram
Hasil  analisis distribusi data dan homogenitas  va- rians  adalah  sebagai  berikut;  semua  data  jumlah bakteri Enterococcus  faecalis yang  tereliminasi  de- ngan  konsentasi Sea  cucumber dan  waktu  distri- businya tidak normal dan variansi datanya juga tidak homogen.  Hasil  ini  tidak  memenuhi  asumsi  untuk dapat  dilakukan  uji  parametrik,  oleh  karena  itu  di- lakukan  uji  Kolmogorov-Smirnov  dan  uji  non parametrik  Shapiro-Wilk  untuk  melihat  perbedaan masing-masing kelompok.

## PEMBAHASAN
Hasil  penelitian  menunjukkan Sea  cucumber (Stichopus  variegatus) pada  konsentrasi  yang  ren- dah dapat mengeliminasi bakteri Enterococcus  fae- calis yaitu  pada  konsentrasi  0,3%  dengan  waktu  4 dan 6 jam sedangkan pada konsentrasi 0,5% dengan waktu 8 jam dan pada konsentrasi 0,2% pada waktu
24  jam.  Hal  ini  sesuai  dengan  kurva  pertumbuhan bakteri  pada  waktu  24  jam  dimana  jumlah  bakteri Enterococcus faecalis lebih  banyakmati  dibanding- kan pada waktu 4, 6, dan 8 jam. Dari hasil penelitian ini didapat kesimpulan bahwa pada konsentrasi ren- dah  yaitu  pada  konsentrasi  0,3%  dan  0,2%  mem- berikan  efek  antibakteria  terhadap Enterococcus faecalis.

## Daftar Pustaka
1. Bergenholtz,  Sunquist,  Moller.  Pathogenic  mec- hanisms in pulpal desease. Quintens sence J Endod 2006; 326: 398-489.
2. Bergstrom  J,  Babcan  J,  Eliassons  S.  Tobacco smoking and dental periapical condition. Eur J Oral Sci 2004; 112: 115-20.
3. Charles  H,  Stuart  DDS,  Scott  A,  Schwartz  DDS, Thomas  J,  Beeson,  et  al. Enterococcus  faecalis: Its role  in  root  canal  treatment  failure  and  current concepts in retreatment. J Endod 2006: 32(2): 93-8.
4. Chavez  de  Paz  LE.  Redefining  the  persistent  in- fection  in  root  canals:  possible  role  of  biofilm communities. J Endod 2007; 33: 652-62.
5. Ferrari  C,  Bombana.  Effect  of  endodontic  pro- cedures  on  enterococci  and  yeasts  in  primary endodontic infections. J Endod 2005; 38: 372-386.
6. Fidgor D, Davies JK, Richards D. Starvation survi- val, growth and recovery of Enterococcus faecalis in human  serum.  Oral  Microbial  Immunol  2003;  18: 234-39.
7. Fidgor D, Gulabivala K. Survival against the odds: microbiology  of  root  canals  associated  with  post- treatment  disease.  Endodontics  Topics.  Willey Blackwell, 2011; 18: 62: 77.
8. Haapasalo  M,  Shen  Y,  Ricucci  D.  Reasons  for persistent  and  emerging  post-treatment endodontic
disease.  Endodontic  Topics.  Willey  Blackwell.
2011; 18: 31-50.
9. Harakah  HS,  Uwaydah  M,  Matar  GM.  Random Amplified  polymorphic  DNA  typing  of  E.faecalis isolated from lebanese individual. Easten J Medicine 2002; 5 (1): 18-20.
10. Stuart  CH,  Schwartz  SA,  Beeson  TJ,  Owatz  CB. Enterococcus  faecalis:  Its  role  in  root  canal  treat- ment,  failure and current concepts  in retreatment.  J Endod 2006; 32; 93-8.
11. Cheek, Julianne, Garnham B, Quan J. 2006. What’s in a number? issues in providing evidence of impact and quality of research(ers). Qualitative Health Res 2010: 16(3): 423-35.
12. Basrani  B,  Santos  JM,  Tja  L,  Bettina  H,  Grad  O, Gorduysus  J,  et  al.  Friedman.  Substantive  anti- microbial  activity  in  chlorhexidine-treated  human root  dentin.  Oral  Surgery  Oral  Medicine  Oral Patholology Oral Radiology Endodontics 2008; 94: 240-45.
13. Baumgartner  JC,  Backland  LK,  Sugita  El.  Micro- biology  of  endodontics  and  asepsis  in  endodontic practice. In : Ingle JI. Endodontics. 5 th ed., Kola: BC Decker Inc, 2012: 63-78.
14. Kudiyirickal  MG,  Ivancakova  R.  Antimicrobial agents  used  in  endodontic  treatment.  Acta  Medica 2008; 51(1): 3-12.
15. Farouk  AE,  Ghouse  FAH,  Ridzwan  BH.  New bacterial  species  isolated  from  Malaysian  sea cucumbers  with  optimized  secreted  antibacterial activity. American J Biochemistry and Biotechnolo- gy 2007; 3(2): 60-5.
16. Salazar  LED,  Figueroa  QMI,  Caciano  V,  Reto  V, Chauviere  G,  Colin  P.  Effectiveness  and  safety  of Lactobacillus  lb  in  the  treatment  of  mild  acute diarrhea in children. J Ped Gastroenterol Nutr 2007; 44: 571-6.