Pembetinaan ikan betok, Anabas testudineus (Bloch, 1792) menggunakan larutan susu dan kedelai melalui perendaman larva
[Feminization of climbing perch, Anabas testudineus (Bloch, 1792) through larvae immersion milk solutions and soy milk]

## Helmizuryani , Boby Muslimin, Khusnul Khotimah
Program Studi Budidaya Perairan Fakultas Pertanian Universitas Muhammadiyah Palembang Jalan Jendral A. Yani 13 Ulu Palembang
Diterima: 15 Oktober 2016; Disetujui: 21 Maret 2017

## Abstrak
Kemampuan ikan betok, Anabas testudineus (Bloch, 1792) untuk tumbuh secara efektif dapat dilakukan dengan pembe- tinaan menggunakan bahan aktif steroid alami yang berasal dari susu sapi melalui perendaman larva. Penelitian ini ber- tujuan untuk meningkatkan nisbah kelamin betina, sintasan, dan pertumbuhan larva ikan betok. Bahan uji pada peneliti- an ini adalah larva usia tujuh hari yang didapatkan dari hasil pemijahan induk dengan penyuntikan secara semi alami. Tempat pemeliharaan larva dilakukan di panti benih. Penentuan nisbah kelamin larva ikan dilakukan di  laboratorium biologi  dan  pengamatan  air  diuji  di  Laboratorium  Kimia  Fakultas  Pertanian  Universitas  Muhammadiyah  Palembang dari bulan Maret sampai bulan Mei 2016. Perlakuan uji dilakukan dengan perendaman larva pada media, yaitu susu sapi (P1), susu kedelai (P2), dan campuran keduanya (P3). Masing-masing perlakuan direndam selama 10 jam dengan dosis perlakuan sebesar 2ml L -1 dan larva sebanyak 50 ekor L -1 direndam pada stoples ukuran 10 liter. Setelah proses peren- daman, larva dipelihara dalam akuarium ukuran 30x30x30 cm 3 selama 60 hari untuk diamati nisbah kelamin dan tingkat pertumbuhannya. Metode sampling yang digunakan adalah  pengambilan sampel secara acak. Sampling pada ikan uji dan air diamati setiap 10 hari sekali dengan jumlah sampling sebanyak 40% pada ikan. Hasil penelitian menunjukkan perlakuan perendaman dengan larutan susu sapi adalah yang tertinggi, sintasan larva ikan betok sebesar 61,11%, per- tumbuhan panjang sebesar 3,77 cm, pertumbuhan bobot sebesar 1,69 g, dan nisbah kelamin betina sebesar 77,78% .
Kata penting: ikan betok, pembetinaan, susu sapi dan kedelai, perendaman larva

## Abstract
The  ability  of  climbing  perch ,  Anabas  testudineus (Bloch,  1792)  to  grow  effectively  can  be  done  for  a  sex  reversal research aims to increase the ratio of the female sex, survival, and growth of the larvae of climbing perch. The research material is a juvenile of 7 days old which is gained from induce breeding methods. The research was conducted at a hatchery. Sex ratio was observed in biology laboratory and water quality was observed in chemical laboratory of the University of Muhammadiyah Palembang from March to May 2016. Post-larva was immersed with three media for the treatment i.e. milk (P1), soya milk (P2) and the mix (P3). The immersion was done by 10 hours; used 2 ml L -1 dozed on each part and 50 post-larva were immersed on jar sized 10 liters. After immersing the post-larva was reared during 60 days in aquarium sized 30x30x30 cm 3 for observation of sex ratio and growth. Sampling method used is a random sampling. The post-larva and water were observed every 10 days with 40% material sample of post-larva. The result showed that best grow is in P1 (61.11%).  The length growth is 3.77 cm, biomass growth is 1.69 g, and produce sex ratio of female is 77.78%.
Keywords: climbing

## Pendahuluan
Ikan  betok, Anabas  testudineus (Bloch, 1792) adalah spesies  ikan  asli  Indonesia  yang tersebar  di  beberapa  perairan  umum  daratan di Pulau Kalimantan,  Sumatera, dan Jawa. Ikan  ini adalah salah satu jenis ikan penetap ( blackfishes ) yang umumnya hidup liar di perairan rawa,
sungai,  dan  danau.  Permintaan  terhadap  ikan betok  ini  cukup  tinggi. Di Kalimantan  ukuran konsumsi  ikan  betok  memiliki  harga  antara  Rp 30.000-45.000 kg -1 sedangkan  di  Sumatera  har- ganya  antara  Rp  16.000-Rp  20.000  (Etika et  al .
2013). Untuk memenuhi  permintaan  terhadap ikan tersebut nelayan  hanya  mengandalkan hasil tangkapan dari alam yang bersifat musiman. Ke- rusakan habitat, pengalihan fungsi lahan, eksploi-
_____________________________ Penulis korespondensi
Alamat surel: helmizuryani@gmail.com
tasi berlebih, dan pembangunan waduk dapat me- nyebabkan  penurunan  populasi  ikan  bahkan  da- pat menyebabkan kepunahan spesies (Wargasas- mita  2002,  Sawitri  &  Iskandar  2006).  Melihat adanya  kondisi  ini,  dikhawatirkan  pada  masa yang  akan  datang  keberadaan  ikan  betok  di  Su- matera  Selatan  akan  terancam.  Pencegahan  ikan ini dari kepunahan perlu dilakukan dengan upaya budi  daya  (Ross et  al .  2008) agar  produksi ikan betok dapat berlangsung secara berkelanjutan.
Teknik pengarahan kelamin ( sex reversal ) adalah  rekayasa  hormonal  untuk  mengubah  ka- rakter seksual betina ke jantan (penjantanan) atau dari jantan menjadi betina (pembetinaan) (Mardi- ana  2009).  Pada  penerapan  teknologi  ini  ikan yang  seharusnya  berkelamin  jantan  diarahkan perkembangan gonadnya menjadi betina (pembe- tinaan)  dan  dari  betina  menjadi  jantan  (penjan- tanan). Hal ini bisa dilakukan karena gonad ikan ketika baru menetas belum berdiferensiasi secara jelas  menjadi  jantan  atau  betina  (Zairin  2002). Salah satu cara untuk mengarahkan ikan berkela- min  betina  adalah  menggunakan  hormon  estro- gen, yaitu hormon estradiol-17ß yang merupakan salah  satu  hormon  sintetik.  Namun  saat  ini  hor- mon sintetik dilarang pemakaiannya. Kementeri- an Kelautan dan Perikanan melarang penggunaan 21  jenis  obat-obatan  dalam  kegiatan  budi  daya perikanan, salah satunya steroid sintetik estradiol -17ß (Kepmen No. 52/Kepmen-KP/2014 tentang klasifikasi obat ikan) . Oleh karena itu perlu dila- kukan  kajian  terhadap  hormon  alami  dan  bahan alami untuk menggantikan hormon sintetik, yaitu menggunakan  susu  sapi  dan  susu  kedelai.  Susu kedelai  yang  merupakan  salah  satu  olahan  dari bahan  baku  kedelai  mengandung  hormon  fitoes- trogen dari klas isoflavon yang dapat bekerja se- perti  hormon  estrogen.  Susu  sapi  adalah  bahan makanan  yang  banyak  mengandung  estrogen alami.
Penggunaan susu sebagai bahan alami di- harapkan dapat membantu pembetinaan ikan be- tok  dengan  tujuan  memaksimalkan  nisbah  kela- min  tunggal  betina  dan  meningkatkan  pertum- buhan  saat  budidaya.Hasil  penelitian  Hidayat et al .  (2016)  memperlihatkan  bahwa  pertumbuhan ikan  betok  atau  papuyu  berdasarkan  jenis  kela- min jantan dan betina yang dipelihara mulai dari benih  sampai  dewasa  selama  delapan  bulan  me- miliki  hasil  tingkat  pertumbuhan  yang  berbeda. Ikanbetina  menunjukkan  pertumbuhan  bobot mutlak  dan  laju  pertumbuhan  harian  ikan  betina masing-masing 1,48 kali dan 1,17 kali lebih ting- gi  dibandingkan  dengan  ikan  jantan.  Tujuan  pe- nelitian  ini  adalah  untuk  meningkatkan  nisbah kelamin  larva  ikan  betok  ( Anabas  testudineus, Bloch, 1972)  kelamin  tunggal betina mengguna- kan susu sapi dan susu kedele.

## Bahan dan metode
Penelitian  dilakukan  di  Laboratorium Basah  Budidaya  Perairan,  Laboratorium  Biologi dan Laboratorium Kimia Fakultas Pertanian Uni- versitas  Muhammadiyah  Palembang  dari  bulan Maret sampai Mei 2016. Ikan uji yang digunakan adalah larva ikan betok  yang berumur  tujuh hari dengan bobot 0,01-0,02 g larva -1 . Induk yang ma- tang  gonad  dipijahkan  secara  semi  alami,  yaitu dengan  menyuntikkan  ovaprim  ke  induk  betina sebanyak  0,3  ml  kg -1 dan  induk  jantan  sebanyak
0,1 ml kg -1 di bawah pangkal sirip punggung ke- mudian dipasangkan antara jantan betina dengan perbandingan  1:2.  Pemijahan  berlangsung  dua hari kemudian, selanjutnya induk jantan dan beti- na dipindahkan dari wadah penetasan.
Larva hasil penetasan setelah berumur tu- juh hari direndam dalam perlakuan susu sapi, su- su kedele, dan campuran susu sapi dan kedele se- lama  10  jam  dengan  dosis  2  ml  L -1 air  dalam stoples ukuran 10 liter dengan kepadatan 50 ekor.
Setelah  proses  perendaman,  larva  dipelihara  da- lam  akuarium  ukuran  30x30x30  cm 3 selama  60 hari dengan ketinggian air 20 cm. Selama peme- liharaan ikan diberi pakan alami Artemia salina, kemudian  cacing Tubifex ,  dan  selanjutnya  pelet dengan frekuensi tiga kali sehari (pagi, siang, dan sore). Penyiponan  dan  penggantian  air  sebesar 10%  dari  volume  air  akuarium  dilakukan  setiap 10 hari sekali.
Rancangan  yang  digunakan  adalah  ran- cangan acak lengkap, dengan tiga perlakuan dan tiga  ulangan.  Perlakuan  P1:  perendaman  dengan larutan susu sapi, perlakuan P2: perendaman de- ngan larutan susu kedelai, dan perlakuan P3: pe- rendaman dengan campuran larutan susu sapi dan susu kedelai.
Ikan  diamati  setiap  hari  untuk  dilihat  ke- matiannya dan dicatat. Pada akhir penelitian dihi- tung  nilai  sintasannya  yaitu  jumlah  ikan  yang masih hidup setelah waktu tertentu dengan meng- gunakan rumus (Effendi 2004).
S = Keterangan:  S=  sintasan  (%),  N t =  jumlah  ikan  yang masih hidup pada waktu t. N o = jumlah awal ikan uji.
Sampling  dilakukan  setiap  10  hari  sekali untuk  melihat  pertumbuhan  sebanyak  30%  atau 15 ekor pada setiap akuarium. I kan uji ditimbang bobotnya  menggunakan  timbangan  digital  (kete- litian  0,1  g),  dan  diukur  panjangnya  mengguna- kan  penggaris  aluminium  (ketelitian  0,1  cm). Menurut  Effendi  (2004),  pertumbuhan  dihitung dengan rumus:
W m = W t - W o L m = L t - L o Keterangan: W m = pertumbuhan berat, W t = berat akhir ikan  (g),  W o =  berat  awal  ikan  (g),  L m =  pertumbuhan panjang,  L t =  panjang  akhir  ikan  (cm),  L o =  panjang awal ikan (cm)
Kualitas air media diukur sebagai data pe- nunjang yang meliputi pH, suhu, oksigen terlarut, dan ammonia. Suhu air diukur dengan termome-
ter setiap hari, sedangkan oksigen terlarut diukur menggunakan  DO  meter,  pH  menggunakan  pH meter,  dan  NH 3 menggunakan  spektrofotometer yang diukur setiap 10 hari sekali.
Jenis  kelamin  ikan  ditentukan  pada  akhir penelitian saat ikan berumur 60 hari. Pemeriksa- an gonad ikan uji dilakukan dengan metode ase- tokarmin (Zairin 2002). Larutan asetokarmin di- buat dengan cara melarutkan 0,6 g bubuk karmin dalam 100 ml asam asetat 45%. Larutan dididih- kan dalam becker ukuran 300 ml selama 2-4 me- nit kemudian didinginkan. Setelah dingin larutan disaring  dengan  kertas  saring whatman  size 40 mesh.  Selanjutnya  larutan  dimasukkan  kedalam botol  tertutup  dan  disimpan  pada  suhu  ruang 28 o C.  Larutan  asetokarmin  ini  berfungsi  mem- perjelas/mempermudah pengamatan dengan menggunakan mikroskop.
Langkah  selanjutnya  adalah  pengambilan gonad  ikan  sebagai  sampel  sejumlah  10%  dari total  ikan  uji.  Gonad  dihaluskan  dan  diletakkan di  atas  gelas  obyek  dan  diberi  larutan  asetokar- min  sebanyak  dua  tetes.  Gelas  obyek  ditutup dengan gelas penutup. Gonad dalam bentuk pre- parat  siap diamati dibawah  mikroskop  binokuler dengan  pembesaran  40x  dengan  skala  0,0025 µm. Gonad  jantan  berupa  testis,  sedangkan  go- nad betina berupa ovari. Ovari dicirikan bewarna merah  muda,  diisi  butiran-butiran  telur,  berben- tuk gel transparan seperti jaringan gonad lembut, menempati  bagian  posterior  rongga  badan,  se- dangkan testis bewarna keputih-putihan berisi sel sperma sangat halus, dan menempel pada rongga badan.
Data hasil pengamatan diproses dengan ta- bulasi  dalam  tabel  rancangan  acak  lengkap  dan dianalisis menggunakan  uji F. Bila hasil analisis didapatkan nilai F hitung < F tabel (5% dan 1%), maka tidak dilakukan uji lanjutan, sedangkan bila F  hitung  >  F  tabel,  maka  dilakukan  uji  lanjutan
berdasarkan  koefisien  keragaman.  Nilai  rataan sintasan,  persentase  nisbah  kelamin  yang  diha- silkan ditampilkan dalam kurva atau histogram.

## Hasil
Sintasan  larva  ikan  betok  selama  peneli- tian disajikan pada Gambar 1. Sintasan larva ikan betok  pada  semua  perlakuan  yang  dicobakan memberikan hasil yang berpengaruh tidak nyata, hal ini terlihat dari nilai F hitung (0,64) lebih ke- cil daripada nilai F tabel (5,14).
Hasil  pengamatan  pertumbuhan  panjang dan  bobot  larva  ikan  betok  selama    penelitian disajikan pada Gambar 2 dan 3. Hasil analisis ke- ragaman pada pengamatan pertumbuhan panjang larva ikan betok dari semua perlakuan perendam- an  susu  memberikan  hasil  yang  berpengaruh  ti- dak  nyata.  Hal  ini  terlihat  dari  nilai    F  hitung (1,46)  lebih  kecil  daripada  nilai  F  tabel  (5,14). Pengamatan  bobot  ikan  pada  semua  perlakuan perendaman  susu  memberikan  hasil  yang  berpe- ngaruh  tidak  nyata  dengan  nilai  F  hitung  (0,44) lebih kecil dari pada nilai F tabel (5,14).
Gambar 1. Grafik rata-rata sintasan larva ikan betok selama penelitian
Gambar 2.  Grafik rata-rata pertumbuhan panjang larva ikan betok selama penelitian
a a a 46 48 50 52 54 56 58 60 62 P1 P2 P3 Si nt as an ( % ) Perlakuan a a a 3.1 3.2 3.3 3.4 3.5 3.6 3.7 3.8 P1 P2 P3 P an ja ng ( cm )
Gambar 3. Grafik rata-rata pertumbuhan bobot larva ikan betok selama penelitian
Gambar 4. Grafik nisbah kelamin betina larva ikan betok selama penelitian
Gambar 5. Gambar gonad ikan betok (A) betina, (1) oogonia, (2) oosit  (B) jantan
a a a 1.40 1.45 1.50 1.55 1.60 1.65 1.70 1.75 P1 P2 P3 B ob ob t ( gr am ) Perlakuan B A AB 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 P1 P2 P3 P er se nt as e B et in a (% ) Perlakuan A B 1 2
Hasil analisis sidik ragam pada nisbah ke- lamin  betina  larva  ikan  betok  pada  taraf  uji  5% terlihat  perbedaan  yang  nyata    pada  Gambar  4. Perlakuan  perendaman  dengan  larutan  susu  sapi berbeda  nyata  terhadap  perlakuan  perendaman dengan  susu  kedele  dan  perlakuan  perendaman dengan campuran susu sapi dan susu kedele.
Kualitas  air  selama  penelitian  dilakukan bernilai sebagai berikut: suhu berkisar antara 28- 32 o C, pH sebesar 6,1-7,2, oksigen terlarut berki- sar antara 4,45-8,94 mgL -1 , dan ammonia 0,0205- 0,24 mgL -1 .
Hasil  pengamatan  gonad  dengan  mikros- kop menunjukkan bahwa gonad betina dan jantan memiliki perbedaan (Gambar 5). Gonad ikan be- tina mempunyai sel telur yang berbentuk bundar yang di dalamnya terdapat inti sel. Gonad betina ikan  betok  berbentuk  gel  transparan  seperti  ja- ringan  yang  lembut  berisikan butiran  butiran  te- lur.  pewarnaan  menggunakan asetokarmin terli- hat sel telur berbentuk bulat dan terdapat inti sel bewarna  pudar  yang  dikelilingi  sitoplasma  ber- warna  merah.  Sebaliknya,  pada  gonad  jantan tidak  terlihat butiran telur,  melainkan garis-garis halus yang terlihat menyebar dengan sel sperma- tozoa  berupa  titik  halus  menyebar  (Hidayat 2016).

## Pembahasan
Perendaman  larva ikan betok umur 7 hari selama 10 jam dalam larutan susu tidak membe- rikan perbedaan yang nyata terhadap sintasan lar- va  ikan  betok.  Hasil  ini  menunjukkan  bahwa  ke tiga jenis bahan perendaman larva tidak membe- rikan persentase sintasan larva betok yang berbe- da jauh. Sintasan larva ikan betok selama peneli- tian berkisar antara 51,11-61,11%. Sintasan larva ikan betok dipengaruhi oleh padat tebar, salinitas, dan pakan (Mahmood et al . 2004, Morioka et al . 2009,  Chotipuntu  &  Ayakul  2010,  Jannat et  al .
2012). Persentase sintasan pada penelitian ini ter- golong  tinggi  untuk  pemeliharaan  larva.  Hal  ini terlihat dari hasil penelitian yang telah dilakukan oleh beberapa penelitian sebelumnya. Larva yang dipelihara pada skala laboratorium menghasilkan sintasan  sebesar  17-54%  (Maidie et  al .  2015),
38-55% (Susila 2016), dan 30-50% (Mahmood et al .  2004).  Pada  masa  larva,  ikan  betok  menga- lami masa rentan, karena pada masa ini ikan be- tok  memiliki  sifat  kanibal  pada  umur enam  hari setelah menetas (Maidie et al . 2015) dan sejalan dengan  pendapat  Morioka et  al. (2009)  bahwa pada usia sepuluh hari pascatetas larva memiliki sifat kanibal dan pada usia lima hari setelah me- netas larva sudah mulai ditumbuhi gigi, sehingga perlu adanya perkiraan padat tebar yang tepat se- lama masa pemeliharaan agar angka sintasan da- pat menjadi baik. Selama pelaksanaan penelitian tidak  ditemukan  adanya  jasad  atau  sisa  tubuh ikan, namun terdapat beberapa ikan yang memi- liki ukuran tubuh yang lebih lebih besar sehingga diperkirakan  persentase  sintasan  yang  rendah akibat adanya kanibalisme larva.
Padat tebar pada penelitian ini 50 ekor per akuarium dengan sintasan mencapai 61%. Menu- rut Susila (2016), sintasan larva ikan betok dapat mencapai  55%  dengan  padat  tebar  larva  seba- nyak 10 ekor  L -1 dan  mencapai 38%  dengan pa- dat  tebar  30  ekor  L -1 ,  karena  padat  tebar  pada larva  dapat  menyebabkan  terjadinya  stress  se- hingga respon terhadap pakan menurun dan juga rentan terhadap patogen.
Selain  padat  tebar,  sintasan  juga  dipenga- ruhi oleh pakan. Hal ini dikarenakan sintasan di- pengaruhi  oleh  selain  ketersediaan  pakan,  juga penyesuaian  jenis pakan.  Pada  penelitian  ini pa- kan awal yang diberikan pada larva berupa Arte- mia salina , selanjutnya pada usia dua puluh hari diberikan  pakan berupa  cacing  sutera.  Kesesuai- an  pakan  cacing  sutera  pada  larva  ikan  sejalan
dengan penelitian Mahmood et al. (2004) bahwa larva  ikan  betok  yang  diberikan  cacing  sutera memiliki persentase sintasan yang lebih baik ya- itu  sebesar  61%  dibandingkan  dengan Artemia salina (50%) dan rotifer (30%).
Perlakuan  perendaman  berbagai  jenis  la- rutan susu berpengaruh tidak nyata terhadap per- tumbuhan  panjang  dan  bobot  larva  ikan  betok. Salah  satu  faktor  yang  memengaruhi  pertum- buhan adalah faktor eksternal, yaitu kondisi ling- kungan dan pakan. Dalam penelitian ini, ikan be- tok diberi pakan alami berupa cacing sutera sela- ma dua puluh hari  dan dilanjutkan dengan pem- berian  pakan  ikan  berupa  pellet.  Pertumbuhan ikan  dapat  berkembang  dengan  baik  bila  diberi pakan cacing sutera, karena tingginya kandungan nutrisi  pada  cacing  sutera  yang  terdiri  atas  57% protein,  13,30%  lemak  dan  2,04%  karbohidrat (Anggraini  &  Nurlita  2013).  Pakan  pellet  yang diberikan  selama  penelitian  merupakan  pakan buatan  yang  memiliki  nilai  protein  sebesar  32% sebagai sumber energi yang dibutuhkan. Hasil ini sependapat dengan Asyari (2007) bahwa makan- an  yang  didapat  oleh  ikan  digunakan  untuk  per- gerakan, pemulihan organ tubuh yang rusak, dan selebihnya  dimanfaatkan  untuk  pertumbuhan. Faktor  ekternal  lainnya  adalah  lingkungan,  khu- susnya  suhu.  Pada  penelitian  ini  suhu  air  yang diberlakukan  skala  laboratorium  adalah  30 o C. Faktor  suhu  menurut  Liana  (2007),  di  derajat tersebut  dapat  meningkatkan  aktivitas  metabo- lisme  tubuh  ikan  sehingga  dapat  meningkatkan nafsu  makan  ikan  yang  menghasilkan  pertum- buhan yang baik.
Dari hasil sidik ragam nisbah kelamin be- tina  larva  ikan  betok  dengan  perlakuan  peren- daman  menggunakan  bahan  alami  yaitu  larutan susu  sapi  yang  direndam  selama  10  jam  berpe- ngaruh  sangat  nyata  terhadap  pembetinaan  larva ikan betok karena kandungan estrogen pada susu
sapi. Menurut Wedekind (2010), ikan yang terpa- par  estrogen  dapat  memengaruhi  dan  mengarah- kan  perubahan  gonad  ikan  menjadi  betina  yang sebelumnya  berjenis  kelamin  jantan,  bahkan da- pat  menyebabkan  kemandulan.  Oleh  karena  itu diperlukan  kisaran dosis  yang tepat pada aplika- sinya. Estrogen juga dapat membantu dalam per- cepatan  bentuk  vitelogenesis  pada  gonad  ikan betina (Pinto et al . 2014). Estrogen pada larutan susu sapi  memiliki  nilai  sebesar 0,093 mg  mL -1 , sedangkan  pada  estrogen  sintet
-estradiol sebesar  0,065  mg  mL -1 (Grgurevic et  al .  2016).
Selain  dosis  diketahui  masa  efektif  perendaman bahan  estrogen.  Umumnya  perendaman  dengan dosis  yang  tinggi  membutuhkan  waktu  peren- daman yang singkat dan sebaliknya.
Pemberian  estrogen  pada  tahap  awal  ini berkaitan dengan stadia awal  perkembangan  lar- va ketika gonad berada dalam periode yang labil untuk dipengaruhi hormon dari luar. Akhir perio- de yang labil ini belum diketahui secara pasti se- hingga diduga periode ini masih terjadi pada sta- dia larva. Terdapat beberapa jenis estrogen, yaitu
a) natural  animal  estrogen ,  b) natural  plant  es- trogenic ,  dan  c) syntetic  estrogenic (Pinto et  al.
2014). Natural  animal  estrogen memiliki  ikatan estrogen  yang baik sehingga estrogen dapat ber- peran  dalam  pembentukan  fisiologis  reproduksi ikan dan mampu meningkatkan fungsi imun.
Pada  stadia  awal  perkembangan  gonad larva ikan, jenis kelamin belum terbentuk secara sempurna. Pada periode ini, gonad dapat diarah- kan  jenis kelaminnya  menjadi jantan atau betina dengan bantuan hormon dari luar. Pemberian es- trogen  dapat  membantu  dalam  pembentukan  je- nis kelamin betina.
Menurut  Ariyanto et  al. (2010),  terdapat dua faktor yang berpengaruh terhadap diferensia- si atau pembentukan nisbah kelamin, yaitu faktor genetik secara internal dan faktor lingkungan se-
cara  eksternal.  Umur  organisme,  waktu  peren- daman,  dosis,  dan  temperatur  adalah  faktor-fak- tor  yang  dapat  memengaruhi  deferensiasi  kela- min ikan (Ariyanto et al. 2010, Budd et al . 2015,
Shao et al . 2017). Suhu sebagai faktor eksternal dapat  berperan  dalam  proses  diferensiasi  kela- min. Pada penelitian Ariyanto et al. (2010), larva ikan nila dengan pemberian suhu 24 o C memberi- kan jumlah ikan jantan yang lebih sedikit diban- dingkan  dengan  pemberian  suhu  25 o C  memiliki keberhasilan  untuk  pembentukan  kelamin  betina yang lebih baik. Rangkaian penelitian yang dila- kukan oleh Budd et al. (2015) memberikan hasil yang  berbeda,  yakni  ikan  kakap  ( Lates  calcari- fer ) diberi perlakuan dengan suhu 20 o C memberi- kan  persentase  kelamin  jantan  sebesar  73%  dan pada  suhu  15 o C  menghasilkan  persentase  kela- min  betina  sebesar  77 o C,  sedangkan  pada  ikan lidah  ( Cynoglossus  semilaevis )  yang  diberikan perlakuan dengan suhu 20 o C menghasilkan 73% ikan  berkelamin  betina.  Bila  dibandingkan  de- ngan  penelitian  ini,  pemberian  suhu  antara  28- 32 o C  menghasilkan  nisbah  kelamin  betina  sebe- sar  77,78%.  Perbedaan  ini  disebabkan  adanya kemampuan    thermosensitivitas  yang  berbeda- beda pada ikan karena faktor genetik dalam pem- bentukan organ tubuh, khususnya pada pemben- tukan gonad (Budd et al . 2015).
Pada  saat  ikan  betok  memasuki  usia  30 hari  pascatetas,  pengamatan  jenis  kelamin  telah dapat dilakukan (Kwon et al . 2000). Proses awal pembentukan jenis kelamin terjadi pada saat lar- va berumur 6-14 hari (Yuniarti et al . 2007). Sela- ma proses pembentukan kelamin, ikan akan dipe- ngaruhi  oleh  beberapa  faktor,  yaitu  umur  dan ukuran,  lama perlakuan, dan  lingkungan (Phelps et  al .  2001),  spesies  ikan,  genetik,  tipe  hormon, dosis  hormon,  dan  waktu  perlakuan  (Dunham 2004).  Agar  proses  pembentukan  kelamin  ikan betok  dapat  utuh,  maka  diperlukan  penelitian
lanjutan  pada  masa  yang  akan  datang  mengenai kualitas  estrogen  alami,  interaksi  estrogen  alami terhadap  sebagai  pembentukan  imun,  faktor  in- ternal  seperti  ukuran  ikan,  dan  faktor  eksternal seperti temperatur.

## Kesimpulan
Nisbah  kelamin  betina  tertinggi  terdapat pada perlakuan perendaman dengan  larutan susu sapi  sebesar  77,78%  sedangkan  yang  terendah pada perlakuan perendaman dengan larutan susu kedelai 48,15%.

## Persantunan
Penulis  menyampaikan  terima  kasih  yang setulus-tulusnya kepada Direktorat Jenderal Pen- didikan  Tinggi  yang  telah  membiayai  penelitian ini,  Ketua  Koordinasi  Perguruan  Tinggi  Swasta Wilayah 2 Sumatera bagian Selatan. Rektor Uni- versitas  Muhammadiyah  Palembang  yang  telah memberikan izin pelaksanaan penelitian ini,  Ke- pala  Lembaga  Penelitian  dan  Pengabdian  pada Masyarakat  Universitas  Muhammadiyah  Palem- bang yang telah memfasilitasi penelitian ini, Ibu Dekan  Fakultas  Pertanian  Universitas  Muham- madiyah  Palembang  yang  telah  memberikan  se- mangat dan dukungan sehingga selesainya pene- litian, dan semua pihak yang telah ikut memban- tu dalam penyelesaian penelitian.

## Daftar pustaka
Anggraeni NM, Nurlita A. 2013. Pengaruh pem- berian pakan alami dan pakan  buatan ter- hadap pertumbuhan ikan betutu ( Oxyeleo- tris  marmorata )  pada  skala  laboratorium. Jurnal Seni Pomits , 2(1): 2337-3520.
Ariyanto  D,  Sumantadinata  K,  Sudrajat  AO 2010.  Diferensiasi  kelamin  tiga  genotip ikan  nila  yang  diberi  bahan  aromatase inhibitor. Jurnal  Riset  Akuakultur ,  5(2): 165-174.
Asyari. 2007. Pentingnya labirin bagi ikan rawa.
Bawal: Widya Riset Perrikanan Tangkap, 1(5): 161-167.
Budd  AM,  Banh  QQ,  DOmingos  JA,  Jerry  DR. 2015.  Sex  control  in  fish:  approaches, challenges  and  opportunities  for  aquacul- ture. Journal  of  Marine  Science  Enginee- ring , 3(2): 329-355.
Chotipuntu  P,  Avakul  P.  2010.  Aquaculture  po- tential of climbing perch, Anabas testudi- neus in brackish water. Journal of Science and Technology , 7(1): 15-21.
Dunham  RA.  2004. Aquaculture  and  Fisheries Biotechnology: Genetic Approaches . CABI Publ. Cambridge, USA. 357 p.
Effendi I. 2004. Pengantar Akuakultur . Penerbit Swadaya. Jakarta. 188 hlm.
Etika D, Muslim, Yulisman. 2013. Perkembang- an  diameter  telur  ikan  betok  ( Anabas testudineus )  yang  diberi  pakan  diperkaya vitamin  E  dengan  dosis  berbeda. Jurnal Perikanan dan Kelautan, 18(2): 26-36.
Grgurevic N, Koracin J, Maidic G, Snoi T. 2016. Effect of diary estrogens from bovine milk on blood hormone levels and reproductive organs in mice. Journal of Diary Science , 99(8): 1-9.
Hemizuryani,  Muslimin  B,  Yusnita  (Editor). 2015. Prosiding Seminar  Nasional  Sains dan Teknologi VI. Lampung, 3 November 2015. Lembaga Penelitian dan Pengabdian kepada Masyarakat Universitas Lampung. pp. 607-622.
Hidayat, Carman O, Alumuddin. 2016. Perbeda- an  pertumbuhan  ikan  papuyu Anabas  tes- tudineus jantan  dan  betina. Jurnal  Akua- kultur Indonesia , 15(1): 8-14.
Jannat MK, Rahman MM, Bashar Md.N, Ahmed F, Hossain Md.Y. 2012. Effects of  stock- ing  density  on  survival,  growth  and  pro- duction  of  Thai  climbing  perch  ( Anabas testudineus )  under  fed  ponds. Journal  of Sains Malaysiana , 41(10): 1205-1210.
Liana  YP.  2007.  Efektivitas  aromatase  inhibitor yang  diberikan  melalui  pakan  buatan  ter- hadap  sex reversal ikan nila  merah Oreo- chromis sp. Jurnal Sumberdaya Perairan , 2(1):1-7.
Kwon YJ, Haghpanah V, Kongson-Hurtado ML, Mc  Andrew  JB,  Penman  JD.  2000.  Mas- culinization  of  genetic  female  nile  tilapia ( Oreochromis  niloticus )  by  dietary  admi-
nistration of an aromatase inhibitor during sexual  differentiation. The  Journal  of  Ex- perimental Zoology , 287(1): 46-53.
Maidie  A,  Sumoharjo,  Asra  SW,  Ramadhan  M, Hidayanto  DN.  2015.  Pengembangan pembenihan  ikan  betok  ( Anabas  testudi- neus) untuk  skala  rumah  tangga. Media Akuakultur , 10(1): 31-37.
Mahmood SU, Ali MS, Anwar UM. 2004. Effect of  different  feed  in  larval/fry  rearing  of climbing  perch, Anabas  testudineus (Bloch)  in  Bangladesh:  II.  Growth  and survival. Pakistan  Journal  of Zoology,
36(1): 13-19.
Mardiana  TY.  2009.  Teknologi  pengarahan  ke- lamin  ikan  menggunakan  madu. Pena Akuatika  Jurnal  Ilmiah  Perikanan  dan Kelautan, 1(1): 37-43
Morioka  S,  Ito  S,  Kitamura  S,  Vongvichith  B. 2009. Growth and morphological develop- ment of laboratory-reared larval and juve- nile  climbing  perch, Anabas  testudineus. Ichthyological Research , 56(2): 162-171.
Pinto  PIS,  Estevao  MD,  Power  DM.  Effects  of estrogen  and  estrogenic    disrupting  com- pounds in fish mineralized. Marine Drugs, 12(8): 4474-4494.
Phelps RP, Sanchez WC, Couturier GM; Abiado M, Dabrowski K. 2001. Studies on fate of methyltestosteron  and  its  metabolism  in tilapia  and  on  the  use  of  phytochemicals as an alternative method to produce a mo- nosex  population  of  tilapia. Twenty-First Annual  Technical  Report.  Aquaculture CRSP, Oregon State University, Cprvallis, Oregon, pp. 53-60
Ross LG, Carlos AMP, Ernesto JM. 2008. Deve- loping native fish species for aquaculture : the  interacting  demands  of  biodiversity, sustainable  aquaculture  and  livelihoods. Aquaculture Research, 39(7): 675-683.
Rutten  MJM.  2005.  Breeding  for  improved pro- duction  of  tilapia.  Thesis.  Wageningen. University  of  Wageningen.  Netherland. 122 p.
Sawitri  R,  Iskandar  S.  2006.  Pengaruh  pengelo- laan  hutan  produksi  terhadap  keragaman Jenis plasma nutfah perairan. Jurnal Plas- ma Nutfah , 12 (2): 76-82.
Shao  C,  Li  A,  Chen  S,  Zhang  P,  Lian  J,  Hu  Q, Sun B, Jin L, Liu S, Wang Z. 2017. Epige- netic modification and ingeritance in sexu-
al reversal of fish. Journal of Genom Re- search , 24(4): 604-615.
Susila N. 2016. Pengaruh padat penebaran terha- dap  kelangsungan  hidup  larva  ikan  betok ( Anabas  testudineus )  yang  dipelihara  da- lam baskom. Jurnal Ilmu Hewan Tropika , 5(2): 72-75.
Wargasasmita,  S.  2002.  Ikan  air  tawar  endemik Sumatera  yang  terancam  punah. Jurnal
Iktiologi Indonesia , 2(2): 41-49.
Wedekind  C.  2010.  Fish  populations  surviving estrogen  pollution. Bio  Medical  Central Biology , 12(10): 1-3.
Yuniarti  T,  Hanif  S,  Prayoga  T,  Suroso.  2007. Teknik  produksi  induk  betina  ikan  nila. Jurnal Budidaya Air Tawar , 4 (1): 32-36.
Zairin  Jr.  M.  2002. Sex  Reversal:  Memproduksi Benih  Ikan  Jantan  atau  Betina .  Penebar Swadaya. Jakarta. 96 hlm.