STUDI BIOAVAILABILITAS DAN MOLECULAR DOCKING SENYAWA FENOLIK Ocimum sanctum L. SEBAGAI INHIBITOR RESEPTOR ESTROGEN ALFA PADA SEL

## KANKER PAYUDARA

## BIOAVAILABILITY AND MOLECULAR DOCKING STUDY OF PHENOLIC COMPOUNDS OF Ocimum sanctum L. AS ESTROGEN RECEPTOR ALPHA INHIBITOR IN BREAST CANCER CELL LINE
Fawwaz Muhammad Fauzi 1* , Yusfia Urwatul Wutsqa 1 , Nur Azizah Rohmatika 1
1 Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan KHAS Kempek, Gempol, Kab. Cirebon 45161 *Korespondensi: fawwazmuh@stikeskhas.ac.id

## ABSTRAK
Salah  satu  pendekatan  dalam  pengobatan  kanker  payudara  adalah  dengan  penggunaan  tamoksifen sebagai  inhibitor  reseptor  estrogen  alfa  (RE-α).  Namun  penggunaan  tamoksifen  dapat  menimbulkan  efek samping seperti pendarahan, penggumpalan darah bahkan meningkatnya resiko kanker endometrium, sehingga perlu  dikembangkan  inhibitor  RE-α  alternatif  dari  senyawa  bahan  alam.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk memprediksi  potensi  senyawa  fenolik  dari  Kemangi  (Ocimum  sanctum  L.)  sebagai  inhibitor  RE-α menggunakan metode in silico.
Metode in silico digunakan untuk mengidentifikasi senyawa yang memiliki potensi tertentu dengan selektivitas  yang  lebih  tinggi  menggunakan  simulasi  komputer.  Pengumpulan  senyawa  fenolik  pada  O. sanctum L. menggunakan database Knapsack, prediksi bioavailabilitas menggunakan webserver SwissADME dan molecular docking menggunakan software PLANTS dengan target protein RE-α (PDBID: 3ERT).
Sebanyak 26 senyawa dari total 40 senyawa fenolik yang telah teridentifikasi memiliki bioavailabilitas yang baik. Lima diantaranya diprediksi memiliki potensi untuk dikembangkan menjadi inhibitor RE-α karena memiliki skor docking yang rendah, yakni Tulsinol A, B, C, D dan G memiliki skor docking berturut-turut sebesar  -91,304;  -106,970;  -104,923;  -105,862  dan  -89,059.  Beberapa  senyawa  tersebut  memiliki  interaksi protein-ligan  yang  sama  dengan  4-OHT  dan  native  ligand  estradiol  yang  diduga  memiliki  peran  dalam menginhibisi pertumbuhan sel kanker payudara.
Kata kunci : O. sanctum L., Reseptor Estrogen Alfa (RE-α), bioavailabilitas, molecular docking

## ABSTRACT
One approach to treating breast cancer is the use of tamoxifen as an  estrogen receptor alpha (RE-α) inhibitor. However, the use of tamoxifen can cause side effects such as bleeding, and blood coagulation, and even increase the risk of endometrial cancer, so it is necessary to develop alternative ER-α inhibitors from natural compounds. This research aimed to predict the potential of phenolic compounds from basil (Ocimum sanctum L.) as ER-α inhibitors were used in silico methods.
The  in  silico  method  was  used  to  identify  compounds  that  have  a  certain  potential  with  higher selectivity using computer simulations. Collection of phenolic compounds in O. sanctum L. used the Knapsack database, bioavailability prediction used the SwissADME webserver, and molecular docking used PLANTS software with the RE-α protein target (PDBID: 3ERT).
A total of 26 compounds out of a total of 40 phenolic compounds that have been identified have good bioavailability. Five of them are predicted to have the potential to be developed into ER-α inhibitors because they have a low docking score, namely Tulsinol A, B, C, D and G have a docking score of -91.304; -106,970; -104,923;  -105,862  and  -89,059  respectively.  Some  of  these  compounds  have  the  same  protein-ligand interactions as 4-OHT and the native ligand estradiol which is thought to have a role in inhibiting the growth of breast cancer cells.
Keywords : O. sanctum L., Estrogen Receptor Alpha (ER-α), bioavailability, molecular docking

## PENDAHULUAN
Kanker payudara merupakan jenis kanker nomor dua yang paling banyak di derita wanita di dunia. Data  IARC  (2024) menunjukkan bahwa  prevalensi kanker  payudara  di  Indonesia  mencapai  209.748  dalam lima tahun terakhir dan tingkat kematiannya sebanyak 14,4%. Reseptor estrogen alfa (RE-α) adalah salah satu protein  yang  berperan  pada  kasus-kasus  kanker  payudara.  Aktivasi  reseptor  ini  oleh  estrogen  dianggap berperan  penting  dalam  peningkatan  proliferasi,  sehingga  RE-α  dijadikan  target  terapi  dalam  pengobatan kanker payudara (Farzaneh dan Zarghi, 2016).
Tamoksifen  merupakan Selective  Estrogen  Receptor  Modulators (SERMs)  yang  bekerja  sebagai antagonis RE-α yang umum digunakan dalam terapi kanker payudara (Ellis dkk, 2015). Namun penggunaan tamoksifen  diketahui  memiliki  beberapa  efek  samping  yang  berbahaya  seperti  peningkatan  resiko  kanker endometrium hingga dua kali lipat, pendarahan vagina, gejala depresi dan penggumpalan darah (Abdmouleh dkk,  2020).  Maka  alternatif  pencarian  kandidat  obat  baru  untuk  terapi  kanker  payudara  dapat  diupayakan melalui kajian terhadap senyawa-senyawa yang berasal dari bahan alam.
Kemangi ( Ocimum sanctum L.) merupakan tanaman yang banyak tumbuh di daerah tropis seperti di Indonesia.  Tanaman  ini  lazim  dimanfaatkan  sebagai  sayur  atau  lalapan.  Selain  itu,  O. sanctum L.  juga mempunyai  khasiat  mengatasi  batuk,  demam,  sakit  kepala,  dan  lain-lain  (Chowdhury  dan  Koike,  2010; Rahman  dkk,  2013). Ocimum  sanctum L.  baik  dalam  bentuk  ekstrak maupun  senyawanya  telah  dilaporkan memiliki  aktivitas  farmakologis  seperti  antikanker,  antioksidan,  antiinflamasi,  antidiabetes,  antimikroba, antistress,  leishmanicidal,  mosquitocidal  dan  radiative  protector.  Beberapa  metabolit  sekunder  yang terkandung dalam O. sanctum L. adalah fenolik sederhana, polifenol (flavonoid, kumarin, neolignan), minyak atsiri, triterpenoid, seskuiterpenoid, steroid, glikosida dan cerebroside (Singh dan Chaudhuri, 2018).
Berdasarkan  data-data  tersebut,  penelitian  ini  dilakukan  untuk  memprediksi  interaksi  senyawa metabolit  sekunder  yang  terkandung  pada  O. sanctum L.  sebagai  inhibitor  RE-α  dengan  metode  in  silico. Metode in silico yang digunakan meliputi prediksi bioavailabilitas dengan webserver SwissADME, molecular docking dengan software PLANTS dan visualisasi dengan software Discovery Studio Visualizer 2021 untuk mengkaji model interaksi senyawa dengan protein dari skor docking dan interaksi protein-ligannya, sehingga didapatkan  profil  senyawa  kandidat  untuk  antikanker  payudara.  Metabolit  sekunder  yang  dijadikan  objek penelitian ini dikhususkan pada kelompok fenolik karena memiliki peran penting dalam aktivitas antikanker (Nagaprashantha dkk, 2011).

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  menggunakan  metode in  silico berupa  simulasi  dan  pemodelan  molekuler  dengan software tertentu yang merupakan bagian dari Structure Base Drug Design (SBDD) untuk mengetahui potensi senyawa fenolik pada O. sanctum L. sebagai inhibitor RE-α pada sel kanker payudara.

## Alat
Hardware yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  perangkat  laptop  Lenovo  Slim  3, processor AMD Ryzen 5 4000 series, sistem operasi Windows 11 Home 64-bit, RAM 8 GB.  Software yang digunakan pada  penelitian  ini  adalah  PLANTS,  Marvinsketch,  YASARA,  Discovery  Studio  Visualizer  2021  dan webserver SwissADME.
Bahan
Bahan yang digunakan pada penelitian ini adalah struktur 3D target RE-α yang terkompleks dengan ligan 4-OHT (PDBID: 3ERT)  dari webserver RCSB ( https://www.rcsb.org/structure/3ERT ) dengan resolusi 1,90 Å, Senyawa fenolik dari O. sanctum L. dari database Knapsack
( http://www.knapsackfamily.com/knapsack_ core/ ).

## Prediksi Bioavailabilitas
Kode simplified  molecular-input  line-entry  system (SMILES)  senyawa  fenolik O.  sanctum L.  dari database Knapsack di input ke dalam webserver SwissADME untuk mendapatkan data bioavailabilitas dengan visualisasi  metode Boiled-Egg (Daina  dan  Zoete,  2016;  Daina  dkk,  2017).  Senyawa  yang  terakumulasi  di dalam boiled-egg dilanjutkan pada studi molecular docking .

## Molecular Docking
Validasi metode dilakukan terlebih dahulu sebelum melakukan molecular docking dengan beberapa tahapan, yaitu preparasi protein dan ref_ligand, serta redocking . Preparasi protein dan ref_ligand dilakukan dengan cara membuka file PDB 3ERT pada aplikasi YASARA, dihilangkan molekul airnya dan ditambahkan atom  hidrogen  kedalam  kompleks  makromolekul.  Ligan  asli  kemudian  dihapus  sedangkan  protein  target dibiarkan  dan  disimpan  dengan  format  mol2.  Ligan  asli  dipreparasi  pada  aplikasi  Marvinsketch  dengan
protonasi  pada  pH  7,4  dan  dibuat  10  konformasi  yang  selanjutnya  dilakukan redocking dengan  aplikasi PLANTS.  Radius  kooordinat  pusat  ikatan  ditampilkan  dan  dilakukan  analisis  RMSD.  Metode docking dianggap valid apabila RMSD <2 Å.
Senyawa  fenolik  dari O.  sanctum L.  yang  lolos  pada  prediksi Boiled-Egg dipreparasi  strukturnya dengan aplikasi Marvinscketch dan dilakukan docking dengan PLANTS seperti pada tahap validasi. Docking juga  dilakukan  terhadap  ligan  alami  estradiol.  Skor docking yang  didapatkan  dari  estradiol,  4-OHT  dan senyawa fenolik O. sanctum L. dibandingkan untuk menentukan ikatan protein-ligan yang paling stabil. Skor docking terendah  menunjukkan  kompleks  ikatan  yang  paling  stabil.  Visualisasi  hasil docking kemudian dilakukan dengan software Discovery Studio Visualizer 2021 untuk melihat interaksi residu asam amino dan ligan secara 2D maupun 3D.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Senyawa Fenolik dari O. sanctum L.
Tabel I. Daftar Senyawa Fenolik dari O. sanctum L. No Nama Senyawa Kelompok Senyawa 1 p-Coumaric acid
Fenolik sederhana
2 p-Coumaryl alcohol
3 Coniferyl alcohol
4 Caffeic acid 5 Eugenol 6 Chavicol 7 Coniferaldehyde 8 Ferulic acid 9 Sinapic acid 10 5-Hydroxyferulic acid 11 p-Coumaraldehyde 12 Ocimarin
Kumarin
13 Apigenin 7-O-β-D-glucopyranoside Flavonoid
14
Apigenin
15 Galuteolin 16 Molludistin 17 Tulsinol A 18 Vitexin 19 Isovitexin 20 Vicenin 2 21 Luteolin 22 Orientin 23 Apigenin 7-O-glucuronide 24 Isoorientin 25 Luteolin 7-O-glucuronide 26 Aesculin 27 Quercetin 28 Isothymusin 29 Cirsimaritin 30 Salvigenin 31 Cirsilineol 32 Eupatorin 33 Gardenin A 34 Luteolin 5-O-glucoside 35 Tulsinol B Neolignan 36 Tulsinol C 37 Tulsinol D 38 Tulsinol E 39 Tulsinol F 40 Tulsinol G
Terdapat  40  senyawa  fenolik O.  sanctum L.  yang  didapatkan  dari webserver Knapsack  terdiri  dari beberapa senyawa fenolik sederhana, kumarin, flavonoid dan neolignan seperti yang ditunjukkan pada Tabel I.

## Prediksi Bioavalabilitas
Bioavailabilitas  adalah  parameter  untuk  menentukan  apakah  suatu  senyawa  kandidat  obat  mampu diabsorpsi didalam tubuh (Anggraeni dkk, 2023). Sehingga, prediksi bioavailabilitas penting untuk dilakukan. Prediksi  bioavailabilitas  dilakukan  dengan  menggunakan webserver SwissADME,  mencakup  6  parameter bioavailabilitas (lipofilisitas, polaritas, ukuran partikel, kelarutan, fleksibilitas dan saturasi) yang terinteragrasi dengan metode Boiled-Egg (Daina dkk, 2017). Metode Boiled-Egg digunakan untuk memprediksi absorpsi gastrointestinal dan penetrasi sawar darah otak suatu senyawa yang berguna untuk penemuan dan pengembangan obat baru. Senyawa yang berada pada lingkaran putih merupakan senyawa yang dapat diabsorpsi pada saluran pencernaan, sedangkan senyawa yang berada  pada  zona  kuning  diprediksi  mampu  menembus  sawar  darah  otak  (Daina  dan  Zoete,  2016).  Hasil metode klasifikasi Boileg-Egg dapat dilihat pada Gambar 1.

## Gambar 1. Pemodelan Boiled-Egg
Senyawa fenolik dari O. sactum L. yang terlokalisasi pada lingkaran putih berikut kuning diprediksi memiliki  bioavailabilitas  yang  tinggi  dan  merupakan  senyawa  yang  selanjutnya  akan  dilakukan docking terhadap  protein  target.  Tabel  II  menunjukkan  bahwa  terdapat  26  senyawa  dari  total  40  senyawa  yang diprediksi  memiliki  bioavailabilitas  tinggi  dan  memenuhi  aturan  Lipinski.  Artinya  26  senyawa  tesebut terprediksi dapat melalui absorpsi gastrointestinal dan menembus sawar darah otak. Absorpsi gastrointestinal dan penetrasi sawar darah otak merupakan tahapan farmakokinetik yang sangat krusial bagi suatu kandidat obat dapat mencapai target aksinya (Daina dan Zoete, 2016).
Tabel II. Daftar Senyawa Fenolik dari O. sanctum L. yang lolos dari aturan Lipinski dan
Pengklasifikasian Boiled-Egg No Prediksi Bioavailabilitas Total Senyawa Nama Senyawa 1 Tinggi 26 p-Coumaric acid, p-Coumaryl alcohol, Coniferyl alcohol, Caffeic acid, Eugenol, Chavicol, Coniferaldehyde, Ferulic acid, Sinapic acid, 5- Hydroxyferulic acid, p-Coumaraldehyde, Ocimarin, Apigenin, Tulsinol A, Luteolin, Quercetin, Isothymusin, Cirsimaritin, Salvigenin, Cirsilineol, Eupatorin, Gardenin A, Tulsinol B, Tulsinol C, Tulsinol D, Tulsinol G 2 Rendah 9 Tulsinol E, Tulsinol F, Molludistin, Aesculin, Galuteolin, Apigenin 7-O-β-glucupyranoside, Apigenin 7-O-β-glucuronide, Vitexin, Isovitexin Molecular Docking
Molecular docking diawali dengan melakukan validasi metode melalui proses redocking ligan alami dari protein RE-α (3ERT) untuk membuktikan bahwa protein 3ERT yang telah diunduh adalah valid dan dapat digunakan  untuk  proses docking .  Parameter  RMSD  ( Root  Mean  Square  Deviation )  digunakan  untuk  tahap
validasi.  Jika  nilai  RMSD  kurang  dari  2,0  Å,  maka  hasil docking dapat  dikatakan  valid  (Purnomo,  2013). Semakin  kecil  nilai  RMSD,  maka  konformasi  ligan  yang  diprediksikan  juga  dapat  dianggap  baik  karena semakin mendekati konformasi aslinya.
Gambar 2. Validasi metode 3ERT dengan 4-OHT
Validasi dilakukan dengan tiga tahapan, yaitu preparasi protein dan ref_ligand, preparasi ligan dan redocking .  Molekul  air  dihilangkan  pada  saat  preparasi  protein  dan  ref_ligand  agar  meringankan  kinerja hardware saat proses docking (Sabandar dkk, 2023). Selanjutnya, preparasi ligan dengan pengaturan protonasi pH 7,4 dilakukan untuk penyesuaian dengan pH tubuh manusia. Hasil validasi pada Gambar 2 menunjukkan bahwa protein dengan kode PDB 3ERT tersebut valid dengan nilai RMSD 1,3320 Å sehingga dapat digunakan pada tahap docking selanjutnya.
Tabel III. Skor Docking Senyawa Fenolik O. sanctum L., 4-OHT dan Estradiol No Nama senyawa Skor docking Jumlah asam amino terikat 1 p-Coumaric acid -62,979 2 2 p-Coumaryl alcohol -64,803 3 3 Coniferyl alcohol -66,166 3 4 Caffeic acid -68,820 2 5 Eugenol -67,524 7 6 Chavicol -63,999 7 7 Coniferaldehyde -63,223 4 8 Ferulic acid -63,438 6 9 Sinapic acid -64,393 7 10 5-Hydroxyferulic acid -64,442 6 11 p-Coumaraldehyde -64,976 4 12 Ocimarin -67,182 9 13 Apigenin -78,429 7 14 Tulsinol A -91,303 9 15 Luteolin -81,024 7 16 Quercetin -72,645 5 17 Isothymusin -65,696 11 18 Cirsimaritin -60,487 9 19 Salvigenin -74,420 11 20 Cirsilineol -73,279 14 21 Eupatorin -74,478 12 22 Gardenin A -66,158 12 23 Tulsinol B -106,970 15 24 Tulsinol C -104,923 17 25 Tulsinol D -105,862 14 26 Tulsinol G -89,059 14 27 4-OHT -101,988 5 28 Estradiol -85,972 8 Molecular  docking dilakukan  pada  26  senyawa  fenolik O.  sanctum L.,  4-OHT  dan native  ligand estradiol dan 4-OHT sebagai pembanding yang sebelumnya telah dipreparasi terhadap protein RE-α (3ERT)
dengan menggunakan PLANTS. PLANTS merupakan metode docking yang terinspirasi dari perilaku semut yang mampu menemukan jalur terpendek antara sarang dan sumber makanan. Dalam kasus docking , koloni semut artifisial digunakan untuk menemukan konformasi minimum energi terendah dengan probabilitas paling tinggi (Purnomo, 2019).
Tabel IV. Residu Interaksi antara Senyawa Fenolik O. sanctum L., 4-OHT dan Estradiol terhadap RE-α
(3ERT) No  Nama Senyawa Interaksi Asam Amino Ikatan Hidrogen Ikatan Hidrofobik 1 p-Coumaric acid - Ile389, Ile452 2 p-Coumaryl alcohol Leu384 Ile389, Ile452 3 Coniferyl alcohol Lys449, Trp383 Ile389 4 Caffeic acid Glu385 Ile452 5 Eugenol Lys449 Ile389, Ile452, Ile514, Ile386, Trp360, Lys449 6 Chavicol Lys449 Ile386, Ile389, Ile452, Ile514, Ile389, Ile452 7 Coniferaldehyde Leu448 Ile389, Lys449, Ile452 8 Ferulic acid Gly390, Lys449, Leu384 Ile389, Lys449, Ile452 9 Sinapic acid - Met388, Ile389, Ile452, Ile514, Ile386, Trp360, Phe445 10 5-Hydroxyferulic acid Lys449, Gly390, Leu387 Ile389, Lys449, Ile452 11 p-Coumaraldehyde Lys449, Leu384 Ile389, Ile452 12 Ocimarin Ala382, Trp383, Trp360 Phe445, Ile386, Lys449, Ile452, Ile389, Ile452 13 Apigenin Leu391, Arg394, Lys449, Ile452 Ile389, Lys449, Ala382 14 Tulsinol A Met357, Leu387, Leu448 Trp360, Lys449, Ile452, Ile386, Leu453, Ile514 15 Luteolin Leu391, Arg394, Lys449 Trp360, Ala382, Ile389, Lys449 16 Quercetin - Phe445, Ile389, Ala382, Lys449, Ile452 17 Isothymusin Trp383, Ala382 Leu379, Ile386, Met357, Leu384, Ile387, Trp383, Met357, Lys449, Ile452 18 Cirsimaritin Trp383, Arg515 Ile452, Trp360, Ile389, Pro324, Lys449, Phe445, Ala382 19 Salvigenin Trp383, Glu353 Ile451, Leu511, Ile389, Lys449, Leu387, Phe445, Ala382, Met357, Ile452 20 Cirsilineol Met388, Trp383, Phe455, Lys449 Ala382, Ile389, Lys449, Leu453, Met357, Ile386, Leu453, Trp360, Ile514, Ile452 21 Eupatorin Trp383, Leu511, Glu323 Ile452, Trp360, Ile514, Arg515, Lys449, Phe445, Ala382, Ile386, Ile389 22 Gardenin A Glu385, Ile389, Phe445, Leu379 Ile389, Ile452, Ile386, Lys449, Leu387, Met357, Trp383, Phe435 23 Tulsinol B Glu323, Leu387 Ile389, Pro324, Lys449, Leu387, Ile452, Leu511, Ile514, Arg515, Ile451, Leu453, Trp360, Phe445, Ile386 24 Tulsinol C Met357, Trp383, Glu353, Lys449 Met388, Lys449, Pro324, Met357, Ile386, Ile389, Leu387, Leu453, Leu511, Ile514, Arg515, Trp393, Ala382 25 Tulsinol D Lys449, Leu379, Ala382 Ala382, Met357, Leu379, Leu453, Leu384, Ile386, Leu387, Ile452, Leu391, Trp393, Lys449 26 Tulsinol G Ile386, Ile389 Met357, Ala361, Lys449, Val364, Ile386, Leu453, Leu387, Met388, Ile389, Ile452, Leu379, Ala382 27 4-OHT Glu323 Ile452, Ile514, Ile389, Lys449 28 Estradiol Ser518 Trp383, Leu384, Ala382, Lys449, Ile452, Ile386, Ile389, Trp360 Senyawa dengan skor docking yang lebih kecil dari skor docking native ligand atau ligan pembanding merupakan senyawa dengan skor docking yang baik dan berpotensi sebagai inhibitor (Purnomo, 2019). Hasil docking menunjukkan  bahwa  satu  senyawa  flavonoid,  yaitu  Tulsinol  A  (-91,303)  dan  empat  senyawa neolignan, yaitu Tulsinol B (-106,970), C (-104,923), D (-105,862) dan G (-89,059) menunjukkan skor docking yang lebih baik dibandingkan dengan native ligand estradiol (-85,972) dan 4-OHT (-101,988). Skor docking lebih lengkap ditunjukkan pada Tabel III.
Visualisasi  dari  hasil docking dilakukan  untuk  melihat  dan  menganalisis  interaksi  antara  ligan  dan residu-residu  asam  amino  dari  protein  pada  area  ikatan  ( binding  site )  dalam  bentuk  ikatan  hidrogen  dan interaksi  hidrofobik  (Sari  dkk,  2020).  Adanya  kesamaan  interaksi  protein-ligan  antara native  ligand dan senyawa uji dapat diduga berperan dalam aktivitas inhibisinya terhadap sel kanker payudara (Sabandar dkk, 2023).
Gambar 3. Visualisasi Interaksi 2D Asam Amino RE-α dengan ligan: (a) Tulsinol A, (b) Tulsinol B, (c) Tulsinol C, (d) Tulsinol D dan (e) Tulsinol G
Hasil visualisasi pada Tabel IV menunjukkan senyawa Tulsinol A, B, C, D dan G memiliki ikatan hidrogen dan ikatan hidrofobik yang lebih banyak dibandingkan estradiol maupun 4-OHT. Selain itu, terdapat beberapa  kemiripan  residu  asam  amino  yang  berinteraksi  dengan  kelima  senyawa  tersebut  apabila dibandingkan terhadap estradiol dan 4-OHT dan dapat diduga berpotensi sebagai inhibitor RE-α. Interaksi 2D ditunjukkan pada Gambar 3.
(a) (b) (c) (d)
Tulsinol A-G merupakan senyawa yang telah diisolasi dari fraksi etil asetat daun O. sanctum L. dan dilaporkan  memiliki  aktivitas leishmanicidal yang  cukup  baik  (Suzuki  dkk , 2007).  Penelitian  ini  telah menunjukkan  potensi  baru  kelima  senyawa  tersebut  yang  diprediksi  secara in  silico memiliki  aktivitas antikanker payudara.

## KESIMPULAN
Senyawa Tulsinol A, B, C, D dan G diprediksi memiliki potensi sebagai inhibitor Reseptor Estrogen Alfa (RE-α) karena senyawa-senyawa tersebut memiliki skor docking yang lebih rendah dibandingkan native ligand estradiol maupun 4-OHT dan beberapa diantaranya memiliki interaksi protein-ligan yang sama dengan 4-OHT dan estradiol.

## DAFTAR PUSTAKA
Abdmouleh, F., El Arbi, M., Saad, H.B., Jellali, K., Ketata, E., Amara, I.B., Pigeon, P., Hassen, H.B., Top, S., Jaouen, G., Hammami, R., Ali, M.B., & Gupta, G.K. 2020. Antimicrobial, Antitumor and Side Effects Assessment of a New Synthesized Tamoxifen Analog. Cur. Top. In Med. Chem 20 (25).
Anggraeni,  A.D.,  Putri,  N.Y.F.,  Amalia,  S.D.,  &  Muchlisin,  M.A.  2023.  Bioavailability  and  Molecular Docking Prediction of Secondary Metabolite of Curcuma zedoaria as Potential MPRO SARS COV-2 Inhibitor. Medical Sains: Jurnal Ilmiah Kefarmasian 8 (4): 1345-1354.
Chowdhury, M.S.H. dan Koike, M. 2010. Towards Exploration of Plant-based-ethno-medicinal Knowledge of Rural Community: Basis for Biodiversity Conversation in Bangladesh. New For 40: 243-260. Daina, A. dan Zoete, V. 2016. A BOILED-Egg to Predict Gastrointestinal Absorption and Brain Penetration of Small Molecules. ChemMedChem 11: 1117-1121.
Daina, A., Michielin, O., & Zoete, V. 2017. SwissADME: A free Web Tool to Evaluate Pharmacokinetics, Drug-Likeness and Medicinal Chemistry Friendliness of Small Molecules. Scientific Reports 7: 42717. Ellis,  A.J.,  Hendrick,  V.M.,  Williams,  R.,  Komm,  B.S.  2015.  Selective  Estrogen  Receptor  Modulators  in Clinical Practice: A Safety Overview. Expert Opinion of Drug Safety 14 (6).
Farzaneh, S. dan Zarghi, A. 2016. Estrogen Receptor Ligands: A Review (2013-2015). Sci. Pharm 84: 409- 427.
IARC. 2024. Indonesia Fact Sheet Cancer: Number of New Case in 2022, Female, All Ages . World Health Organization.
Nagaprashantha,  L.D.,  Vatsyayan,  R.,  Singhal,  J.,  Fast,  S.,  Roby,  R.,  Awashti,  S.,  Singhal,  S.S.  2011. Anticancer Effect of Novel Flavonoid Vicenin-2 as a Single Agent and in Synergistic Combination with docetaxel in Prostate Cancer. Biochem. Pharmacol 82: 1100-1109.
Purnomo,  H.  2013. Kimia  Komputasi  untuk  Farmasi  dan  Ilmu  Terkait:  Uji  In  Siliko  Senyawa  Antikanker . Yogyakarta: Pustaka Pelajar.
Purnomo, H. 2019. Molecular Docking Parasetamol dan Analognya menggunakan PLANTS (Protein-Ligand ANT-System). Yogyakarta: Rapha Publishing. Rahman,  M.M.,  Masum,  G.Z.H.,  Sharkar,  P.,  Sima,  S.N.  2013.  Medicinal  Plant  Usage  by  Traditional Medicinal Practitioner of Rural Villlagers in Chuadanga Disctrict, Bangladesh. Int. J. Biodivers. Sci. Ecosyst. Serv. Manag 9: 330-338.
Sabandar, H.W.P., Purnomo, H., & Arifin, I. 2023. Molecular Docking Senyawa Jambu Biji (Psidium guajava L.)  terhadap  Reseptor  Estrogen  Alfa  sebagai  Model  Kandidat  Antikanker  Payudara. Jurnal  Ilmu Farmasi dan Farmasi Klinik 1 (1): 19-27.
Sari., I.W., Junaidin, Pratiwi, D. 2020. Studi Molecular Docking Senyawa Flavonoid Herba Kumis Kucing ( Orthosiphon  stamineus B.)  pada  Reseptor α -Glukosidase  sebagai  Antidiabiates  Tipe  2. Jurnal Farmagazine 7 (2): 54-60.
Singh,  D.,  dan  Chaudhuri,  P.K.  2018.  A  Review  Phytochemical  and  Pharmacological  Properties  of  Holy ( Ocimum sanctum L.). Industrial Crops & Product 118: 367-382.
Suzuki, A., Shirota, O., Mori, K., Sekita, S., Fuchino, H., Takano, A., Kuronayagi, M. 2017. Leishmanicidal Active Constituens from Nepalese Medicinal Plant Tulsi ( Ocimum sanctum L.). Chem. Pharm. Bull 57(3): 245-251.