Versi Online: http://journal.ipb.ac.id/index.php/jtip
DOI: 10.6066/jtip.2015.26.1.44 Hasil Penelitian
Terakreditasi Dikti: 80/DIKTI/Kep/2012

## 3-MONOKLORO-1,2-PROPANDIOL  PADA  KEMASAN  KERTAS  DUPLEKS SERTA  MIGRASINYA  KE DALAM  SIMULAN  PANGAN
[3-Monochoro-1,2-Propandiol in Duplex Paper Packaging and Its Migration Into Food Simulant]
Ira Dwi Rachmani 1) ,  Feri Kusnandar 1) , Nancy Dewi Yuliana 1) , Yane Regina 1) , Muh. Yusram Massijaya 2) ,  dan Slamet Budijanto 1) *
1) 2) Departemen Hasil Hutan, Fakultas Kehutanan, Institut Pertanian Bogor, Bogor
Diterima 29 Agustus  2014 / Disetujui 23 Maret 2015

## ABSTRACT
3-Monochloro-1,2-propandiol (3-MCPD) is a carcinogenic food contaminant. 3-MCPD is formed during food processing, and can also b e  derived from food contact packaging materials, including paper. Wet- strength resin is often added into paper food packaging to provide moisture resistance and thus enhancing food shelf-life and consumer usage. The wet-strength resins which are manufactured from epichlorohydrin- b ased starting materials, are known to initiate the formation of 3 -MCPD. Thus, the ob jectives of this study were:  1)  to  validate  an  analytical  method  for  the  analysis  3-MCPD  in  duplex  paper  packaging,  2)  to analyze3-MCPD  content  in  duplex  paper,  and  3)  to  analyze  3-MCPD  migration  from  duplex  paper packaging  into  food  simulants.  3-MCPD  content  in duplex paper was analyzed b y a validated GC -MS method with linearity value (R 2 ) of 0.993, limit of detection (LOD) of 6.65 ppb , limit of quantification (LOQ) of 22.15 ppb , and recovery range of 83.00 –114.13%. The 3-MCPD content of five sample duplex papers ob tained from different packaging paper manufacturers were ranging from 753.43 to 825.36 ppb , and there was no significant differences b etween the samples. Direct contact b etween food simulants and duplex paper for 24 hours at 40°C generated migration of 3 -MCPD at levels of 40.55 to 57.61%.
Keywords: 3-MCPD, analytical method validation, food packaging, migration

## ABSTRAK
3-Monokloro-1,2-propandiol  (3-MCPD)  merupakan  senyawa  kontaminan  pada  makanan  yang bersifat karsinogenik. 3-MCPD tidak hanya terbentuk melalui proses pengolahan pangan, namun dapat berasal  dari  residu  material  kemasan  pangan  yang  kontak  dengan  bahan  pangan.  Pada  proses pembuatan kertas kemasan seringkali ditambahkan wet strength resin sebagai bahan tambahan untuk memberikan  ketahanan  terhadap  basah  dan  lembab. Wet  strength  resin yang  berasal  dari  bahan berbasis epiklorohidrin diketahui dapat memicu terbentuknya 3-MCPD. Penelitian ini bertujuan untuk: 1) memvalidasi metode analisis komponen 3-MCPD pada kemasan kertas dupleks, 2) menganalis kadar 3 - MCPD  pada  kemasan  kertas  dupleks,  dan  3)  menganalisis  migrasi  3 -MCPD  dari kemasan kertas dupleks ke dalam simulan pangan. Kada r 3-MCPD pada kemasan kertas dupleks dianalisa dengan metode GC-MS tervalidasi dengan nilai linieritas ( R 2 ) 0,993, limit deteksi (LOD) 6,65 ppb, limit kuantitasi (LOQ) 22,15 ppb, dan rentang akurasi 83,00 –114,13%. Kadar 3-MCPD pada sampel kemasan kertas dupleks dari lima produsen kertas berkisar antara 753,43 hingga 825,36 ppb dan kadar ini tidak berbeda nyata pada taraf uji 5%. Kontak langsung antara simulan pangan dan kemasan kertas dupleks selama 24 jam pada suhu 40°C menyebabkan migrasi komponen 3-MCPD sebesar 40,55 hingga 57,61%.
Kata kunci: 3-MCPD, validasi metode analisis, kemasan pangan, migrasi 1
*Penulis Korespondensi: E-mail:  slamet.budijanto@gmail.com
Departemen Ilmu dan Teknologi Pangan, Fakultas Teknologi Pertanian, Institut Pertanian Bogor, Bogor

## PENDAHULUAN
Pengemasan mempunyai peran penting dalam  keseluruhan  rantai  pasok  pangan,  terutama dalam  proses  produksi  dan  pengawetan  bahan pangan.  Fungsi  kemasan  pangan  antara  lain  se- bagai  wadah  yang  mempermudah  distribusi,  me- lindungi  dari  kerusakan,  mempertahankan  mutu pangan,  memberikan  kenyamanan  bagi  konsumen dan  sebagai  alat  untuk  mengkomunikasikan  produk pangan  kepada  konsumen.  Berbagai  variasi  bahan baku  kemasan,  kemasan  kertas  merupakan  salah satu  pilihan  yang  banyak  digunakan  dan  diminati oleh  konsumen,  relatif  murah,  ramah  lingkungan, penggunaan  energi  yang  efisien  dalam  produksi, dan  mudah  dicetak  (Coles et  al., 2007).  Salah  satu jenis  kemasan  kertas  yang  banyak  dijumpai  di pasaran  adalah  kertas  dupleks.  Kertas  dupleks merupakan  kertas  multi-lapis  yang  80 –100%  bahan bakunya  berasal  dari  kertas  daur  ulang  (Coles et  al., 2007).  Dalam  pembuatan  kertas  dupleks  dan kemasan  kertas  pada  umumnya,  dilakukan  penam- bahan  bahan  kimia  tertentu  yang  berfungsi  mem- bantu  proses  produksi  untuk  menghasilkan  kualitas lembaran  kertas  seperti  yang  diharapkan.  Penam- bahan  bahan  kimia  dalam  produksi  kemasan  kertas untuk  produk  pangan  diatur  dalam  regulasi  yang telah  ditetapkan  untuk  menjamin  keamanan  peng- gunaannya.
3-Monokloro-1,2-propandiol (3-MCPD) me- rupakan  senyawa  kontaminan  yang  terbentuk  pada proses  pengolahan  pangan.  Kontaminan  ini  tidak terdapat  pada  bahan  baku  tetapi  terbentuk  oleh reaksi  kimia  tertentu  selama  proses  pengolahan. Perhatian  serius  diberikan  kepada  3-MCPD  karena senyawa  ini  bersifat  karsinogenik.  Meskipun  belum terdapat  data  bahwa  3-MCPD  menimbulkan  kanker pada  manusia,  namun  sejumlah  penelitian  mem- buktikan  3-MCPD  bersifat  karsinogenik  pada  hewan percobaan  (Cho et  al., 2008).  Tikus  yang  diberi asupan  3-MCPD  mengalami  toksisitas  akut  pada ginjal  dan  organ  reproduksi  dengan  nilai  LD 50 se- besar  150  mg/kg  berat  badan . Pemberian  3-MCPD dengan  dosis  lebih  dari  25  mg/kg  berat  badan perhari  dapat  menimbulkan  luka  pada  sistem  syaraf pusat tikus dan mencit (Stadler  dan  Lineback,  2009).
3-MCPD  ditemukan  pada  produk  kecap,  saus tiram,  atau  produk  pangan  lainnya  yang  me- ngandung  protein  nabati  terhidrolisis  asam.  Selain itu,  3-MCPD  juga  ditemukan  pada  minyak  goreng, produk  olahan  daging,  keju,  dan  roti  (Abu-El-Haj et al., 2007;  Baer et  al., 2010;  Razak et  al., 2012; Wenzl et  al., 2007).  Lebih  lanjut,  dari  studi  Chung et al. (2008)  yang  menguji  318  sampel  makanan  di sejumlah  pasar  retail  di  Hongkong,  ditemukan sebanyak  101  sampel  (32%)  mengandung  3-MCPD pada  kisaran  3 –66  ppb.  Studi  lain  mengungkapkan
bahwa  3-MCPD  tidak  hanya  ditemukan  pada  produk pangan,  tapi  juga  pada  kemasan  kertas.  Kehadiran 3-MCPD  pada  kemasan  kertas  dipicu  oleh  senyawa epiklorohidrin  (Hamlet et  al., 2002).  Dalam  industri kemasan,  epiklorohidrin  diketahui  sebagai  resin berkekuatan  menahan  lembab  ( wet-strength )  yang paling  umum  digunakan  dalam  pembuatan  kertas dan  karton.  Berdasarkan  Peraturan  Kepala  BPOM (2011),  epiklorohidrin  terkategori  sebagai  zat  kontak pangan  yang  diizinkan  penggunaannya  sebagai bahan  penolong  dalam  produksi  kemasan  pangan, dan  tanpa  persyaratan  batas  migrasi.  Senyawa  ini ditambahkan  sebagai  komponen  kertas  dan  karton yang  kontak  dengan  pangan  yang  mengandung  air dan  lemak.
Pace  dan  Hartman  (2010)  melaporkan  bahwa kemasan  karton  yang  melibatkan  epiklorohidrin dalam  pembuatannya  mengandung  3-MCPD  dalam kadar  yang  melebihi  batas  ambang  toleransi,  yaitu 300  ppb.  Namun,  hingga  saat  ini  informasi  me- ngenai  kandungan  3-MCPD  pada  kemasan  kertas dupleksdi  Indonesia  belum  tersedia.  Oleh  sebab  itu, dibutuhkan  penelitian  untuk  mengetahui  kadar  dan potensi  migrasinya  ke  dalam  produk  pangan.  Pe- ngembangan  metode  analisis  3-MCPD  masih  ter- batas,  terutama  jenis  matriksnya,  serta  belum  ada- nya  metode  analisis  terstandar,  sehingga  pihak  ber- wenang  lebih  memilih  metode  analisis  dengan parameter  uji  validasi  sebagai  pengganti  metode standar  (Hrncirik et al., 2011).
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  memvalidasi metode  analisis  komponen  3-MCPD  yang  telah dimodifikasi  pada  kemasan  kertas,  menganalisis kandungan  3-MCPD  kemasan  kertas  dupleks  dan menganalisis  migrasi  3-MCPD  dari  kemasan  kertas dupleks  ke dalam  simulan pangan.

## BAHAN  DAN METODE

## Bahan
Bahan utama yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  lima  sampel  kertas  dupleks  dan kertas virgin dari  lima  produsen  kertas  di  Indonesia. Minyak  jagung  bermerek  dagang  Tropicana  yang diperoleh  dari  pasar  lokal.

## Analisis  kadar  3-MCPD  pada  kemasan  kertas dupleks
Pengembangan  dan  validasi  metode  analisis 3-MCPD  dilakukan  terhadap  metode  Pace  dan Hartman  (2010)  yang  telah  dimodifikasi.  Analisis kadar  3-MCPD  dilakukan  terhadap  sampel  kertas dupleks  yang  berasal  dari  lima  produsen  kertas. Sampel  kertas  dupleks  dipotong  dengan  ukuran maksimal  5  x  5  mm 2 .  Sampel  ditimbang  seberat  1  g pada  tabung  bertutup,  ditambah  20  mL  air  destilata,
dan  disimpan  pada  suhu  ruang  selama  24  jam. Ekstrak  disaring  dengan  kertas  saring  Whatman No.1  dan  tabung  dibilas  dengan  5  mL  air  destilata. Kepada  ekstrak  ditambahkan 100  μL  3-MCPD- d5 10 μg/mL  dan  8  g  NaCl,  lalu  diaduk  hingga  larut. Kemudian,  larutan  tersebut  dituang  ke  kolom SPE Agilent  Chem  Elut (Agilent,  USA),  dan  dibiarkan selama  15-20  menit.  Kolom  kemudian  dielusi dengan  250  mL  dietil  eter    (Merck,  Jerman)  dengan kecepatan  10  mL/menit.  Untuk  menghilangkan residu  air,  kepada  eluan  ditambahkan  15  g  Na 2 SO 4 anhidrat (Merck, Jerman). Ekstrak dipekatkan dengan vacuum  rotary  evaporator R-II  (Buchi, Flawil,  Swiss)  pada  suhu  35°C  hingga  sekitar  10 mL. Sejumlah Na 2 SO 4 anhidrat ditambahkan pada ekstrak  hasil  pemekatan.  Ekstrak  dipindahkan secara  kuantitatif  ke  dalam  vial  4,0  mL  dan  dipekat- kan  secara  perlahan  hingga  kering  dengan  hem- busan  gas N 2 pada  suhu ruang.
Ekstrak yang telah dikeringkan segera ditambah  1  mL  isooktan  HPLC grade (Sigma- Aldrich,  USA) dan  50  μL  hepta  floro  butiril  imadazol (HFBI)  (Sigma-Aldrich,  USA).  Vial  dikocok  dengan vortex  (Thermo  Scientific,  NC,  USA).  Ekstrak  3- MCPD  diderivatisasi  pada  sebuah waterbath (GFL Waterbath  1002,  Burgwedel,  Jerman)  pada  suhu 75°C  selama  20  menit.  Vial  didinginkan  hingga mencapai  suhu  sekitar  40°C,  kemudian  ditambah- kan  1,0  mL  air  destilata  dan  divortex  selama  30 detik.  Vial  didiamkan  hingga  terpisah  antara  lapisan air  dan  isooktan.  Fase  isooktan  dipindahkan  dengan hati-hati  menggunakan  pipet  mikro  (Eppendorf, Hamburg,  Jerman)  ke  dalam  vial  2,0  mL  dan  diberi Na 2 SO 4 anhidrat.  Setelah  5  menit,  ekstrak  dipindah- kan  ke  vial  2,0  mL  baru  dan  siap  untuk  dianalisis dengan  GC-MS  (Shimadzu  Q2010,  Kyoto,  Jepang). Ekstraksi  dan  analisis  dilakukan  sebanyak  2  kali ulangan.

## Validasi metode analisis 3-MCPD
Validasi  metode  analisis  dilakukan  dengan cara  melakukan  uji  kesesuaian  sistem,  uji  linieritas, uji  akurasi  dan  keterulangan,  serta  penentuan  limit deteksi  ( limit  of  detection ,  LOD)  dan  limit  kuantitasi ( limit  of  quantification ,  LOQ)  dengan  mengikuti panduan  EURACHEM  (1998)  dan  AOAC  (2005).  Uji kesesuaian  sistem  metode  analisis  3-MCPD  meng- gunakan  instrumen  GC-MS  dilakukan  dengan  meng- injeksi  standar  3-MCPD  (Sigma-Aldrich,  USA)  dan standar  internal  3-MCPD- d5 (Sigma-Aldrich,  USA) pada  konsentrasi  tertentu  sebanyak  enam  kali ulangan.  Konsentrasi  larutan  standar  3-MCPD- d5 dan  3-MCPD  yang  digunakan  berturut-turut  adalah 10 μg/mL dan 0,5 μg/mL.
Uji  linieritas  metode  dilakukan  dengan  analisis hasil  ekstrak  3-MCPD  dari  kertas virgin yang  telah diadisi  ( spik e )  dengan  6  konsentrasi  standar  3-
MCPD  pada  kisaran  0,1 –10  μg/g  sampel.  Kertas virgin digunakan  sebagai  perlakuan  tanpa  sampel ( blank   sample )  dengan  matriks  menyerupai  sampel kertas  dupleks.  Uji  akurasi  ( recovery )  dan  uji keterulangan  ( repeatability )  dilakukan  dengan  meng- gunakan  kertas virgin yang  diadisi  dengan  standar 3-MCPD  pada  konsentrasi  tertentu.  Kertas virgin yang  telah  diadisi  ini  kemudian  dianalisis  kandungan 3-MCPDnya.  Nilai  akurasi  dari  metode  dihitung dengan  rumus:
Nilai  akurasi (%)  = onsentras   ang d temu an- onsentras  tanpa ad s     100 onsentras  ad s
Nilai  limit  deteksi  ( limit  of  detection ,  LOD)  dan limit  kuantitasi  ( limit  of  quantitation ,  LOQ)  dari instrumen  ditentukan  dengan  injeksi  standar  3- MCPD  pada  konsentrasi  terendah  yang  masih  dapat terdeteksi. Dilakukan tujuh penentuan dengan injeksi  standar  3-MCPD  pada  konsentrasi  0,134 µg/mL.  Standar  deviasi  (SD)  dari  ketujuh  penentuan tersebut  dihitung.  Nilai  LOD  alat  dinyatakan  sebagai 3  kali  standar  deviasi,  sedangkan  LOQ  adalah  10 kali standar  deviasi.
Penentuan  persentase  migrasi  komponen  3- MCPD  dari  kemasan  kertas  dupleks  ke  dalam simulan pangan
Penentuan persentase migrasi 3-MCPD menggunakan  sampel  kertas  dupleks  yang  memiliki kandungan  3-MCPD  tertinggi.  Uji  migrasi  mengacu pada  metode  FDA  (2007)  dengan  menggunakan tiga  jenis  simulan  pangan  yaitu  etanol  10%,  etanol 50%,  (Merck,  Jerman)  dan  minyak  jagung.  Uji migrasi  menggunakan  desain  alat  yang  dimodifikasi dari  Pace  dan  Hartman  (2010)  seperti  dapat  dilihat pada  Gambar  1.
Gambar  1.  Alat  uji  migrasi  3-MCPD  dari  kemasan kertas  ke  bahan  pangan  (modifikasi dari  Pace dan  Hartman,  2010)
y = 1,1860x + 0,2430 R² = 0,9927 0 4 8 12 16 20 0 2 4 6 8 10 12 14 R a s io A re a 3 -M C PD / 3 -M C PD -d5 3-MCPD ( μg/g)
Simulan  pangan  sebanyak  30  mL  ditempat- kan  dalam  alat  migrasi  dan  dibiarkan  kontak  dengan sisi  bagian  dalam  kertas  dupleks  selama  24  jam pada inkubator suhu 40°C. Simulan pangan kemudian diekstrak  dan  dihilangkan  residunya dengan  cara  yang  sama  seperti  analisis  3-MCPD pada  sampel  kertas,  sehingga  diperoleh  kandungan 3-MCPD  yang  bermigrasi  ke  dalam  simulan  pangan. Persentase  migrasi  3-MCPD  diperoleh  dari  per- sentase  hasil  pembagian  konsentrasi  3-MCPD simulan  pangan  dengan  konsentrasi  3-MCPD  pada sampel  kertas.  Ekstraksi  dan  analisis  dilakukan sebanyak  3 kali ulangan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pengembangan  dan  validasi  metode  analisis  3- MCPD
Validasi  metode  merupakan  salah  satu  pe- nunjang  dalam  memperoleh  data  hasil  penelitian yang  valid.  Validasi  metode  dilakukan  apabila metode  yang  digunakan  dalam  suatu  pengujian  atau penelitian  merupakan  metode  yang  benar-benar baru  atau  apabila  telah  dilakukan  modifikasi  pada metode  yang  telah  divalidasi.  Parameter  yang  umum digunakan  pada  validasi  metode  analisis  adalah kesesuaian sistem, akurasi atau kecermatan, linieritas,  presisi  atau  keseksamaan,  batas  deteksi dan  batas  kuantitasi  (Codex  Stan,  2010;  AOAC, 2005;  EURACHEM,  1998).  Dalam  penelitian  ini dilakukan  modifikasi  pada  metode  analisis  3-MCPD Pace dan  Hartman  (2010).
Modifikasi  dilakukan  terhadap  jumlah  sampel yang  digunakan  dalam  analisis,  yaitu  hanya  1  g dengan  jumlah  pelarut  yang  telah  disesuaikan, penggunaan vacuum  rotary  evaporator yang  meng- adopsi  prinsip  kerja  Dry-Vap ® evaporating  system. Serta  perbedaan  spesifikasi  dan  kondisi  analisis instrument  GC-MS.  Penggunaan  sampel  dan  pelarut dengan  jumlah  lebih  sedikit  bertujuan  untuk  efisiensi bahan.  Peralatan  yang  lebih  sederhana  dan  umum digunakan dalam laboratorium dipilih dengan harapan  metode  ini  dapat  diaplikasikan  lebih  luas untuk  pengukuran  kadar  3-MCPD  pada  kemasan kertas.

## Kesesuaian  sistem
Hasil  uji  kesesuaian  sistem  dapat  dilihat  pada Tabel  1.  Dari  hasil  pengujian  diperoleh  nilai  deviasi standar  relatif  (RSD)  untuk  waktu  retensi  3-MCPD- d5 ,  waktu  retensi  3-MCPD  dan  rasio  luas  peak  area masing-masing  0,075;  0,072  dan  1,753%.  Nilai  ter- sebut  sesuai  dengan  standar  RSD  yang  disarankan untuk  prosedur  analisis  komponenen  berjumlah sangat  sedikit ( trace )  yaitu di bawah  2%.

## Linieritas
Linieritas  diukur  dengan  menggunakan  nilai R 2 yang  didapat  dari  plot  antara  perbandingan  luas peak  area  dari  3-MCPD  berbanding  dengan  standar internal  3-MCPD- d5 dengan  konsentrasi  standar ad s   (dalam  μg/g .  Has l  uj   l n er tas  d saj  an  pada Gambar  2.  Nilai R 2 yang  dihasilkan  sebesar  0,993 sesuai  yang  disyaratkan  EURACHEM  (1998)  yaitu lebih  dari  0,990.
Tabel  1.  Hasil uji kesesuaian sistem metode analisis  3-MCPD  dengan  menggunakan GC-MS Ulangan Waktu Retensi 3-MCPD- d5 (Menit ke-) Waktu Retensi 3-MCPD (Menit ke-) Rasio Luas Peak Area 3-MCPD/3- MCPD- d5 1 16 , 314 16 , 505 0 , 06021 2 16 , 335 16 , 520 0 , 05966 3 16 , 336 16 , 528 0 , 05940 4 16 , 343 16 , 528 0 , 05947 5 16 , 347 16 , 535 0 , 05725 6 16 , 346 16 , 538 0 , 05974 Rata- rata 16 , 337 16 , 526 0 , 05929 SD 0 , 0122 0 , 0112 0 , 00104 %RSD 0 , 0750 0 , 0721 1 , 75287
Gambar  2.  Kurva  linieritas  metode  analisis  3- MCPD  pada  kertas  kemasan  dengan menggunakan  GC-MS

## Akurasi  dan keterulangan
Hasil  uji  akurasi  dan  keterulangan  untuk analisis  3-MCPD  ditunjukkan  pada  Tabel  2.  Konsen- trasi  standar  3-MCPD  yang  diadisi ke  dalam  kertas virgin adalah  5,36 μg/g  sampel.  Has l  uj   akurasi pada  standar  3-MCPD  bervariasi  antara  83,00 – 114,13%  dengan  rata-rata  akurasi  adalah  96,96%. Nilai  tersebut  sesuai  dengan  nilai  yang  direkomen- dasikan  oleh  AOAC  (2005)  yaitu  80 –115%  untuk
795,96 a 753,43 a 799,49 a 787,46 a 825,36 a 0 100 200 300 400 500 600 700 800 900 A B C D E Ko n s e n tra s i 3 -M C PD (p p b ) Sampel
analisis  kandungan trace dalam  sampel  dengan konsentrasi  dalam  ppm.  Hasil  uji  keterulangan analisis  3-MCPD  ditunjukkan  oleh  nilai  %  RSD  dari analisis  3-MCPD.  Nilai  keterulangan  yang  dihasilkan pada  penelitian  ini  adalah  12,78%,  lebih  rendah  dari batas  keberterimaan  yang  disarankan  oleh  AOAC (2005)  untuk  analisis trace yaitu  nilai  RSD  kurang dari  atau  sama dengan  15%.
Tabel  2.  Hasil  uji  akurasi  3-MCPD  pada  kertas kemasan  dengan  menggunakan  GC-MS
Ulangan Konsen- trasi 3-MCPD yang Diadisi (μg/g Konsen- trasi 3-MCPD pada Kertas Virgin tanpa Adisi (μg/g Konsen- trasi 3-MCPD pada Kertas Virgin dengan Adisi (μg/g Akurasi (%) 1 5 , 360 0 , 775 6 , 446 105 , 80 2 5 , 360 0 , 775 6 , 578 108 , 27 3 5 , 360 0 , 775 6 , 892 114 , 13 4 5 , 360 0 , 775 6 , 295 84 , 33 5 5 , 360 0 , 775 5 , 624 90 , 46 6 5 , 360 0 , 775 5 , 223 83 , 00 7 5 , 360 0 , 775 5 , 746 92 , 75 Rata-rata 96 , 961 SD 12 , 351 %RSD 12 , 738

## Limit deteksi dan limit kuantitasi (LOD  dan LOQ)
Data  pada  Tabel  3  menyatakan  bahwa  ins - trumen Gas  Chromatography-Mass  Spectrometry (GC-MS)  yang  digunakan  pada  penelitian  ini  dapat mendeteksi  analit  3-MCPD  pada  konsentrasi  6,64 ppb  dan  dapat  mengkuantitasi  3-MCPD  pada  kon- sentrasi  22,15  ppb.  Nilai  tersebut  lebih  tinggi dibandingkan  LOD  dan  LOQ  yang  dilaporkan  Pace dan  Hartman  (2010)  yaitu  sebesar  5  ppb  dan  9  ppb. Limit  deteksi  yang  rendah  pada  analisis  penentuan kadar  3-MCPD  sangat  diperlukan  mengingat  re- gulasi  batas  minimal  3-MCPD  yang  rendah  dalam produk  pangan,  yaitu sekitar 20  ppb  (BPOM, 2009).

## Analisis  kadar  3-MCPD  pada  sampel  kertas dupleks
Sejumlah  penelitian  telah  dilakukan  untuk mendeteksi  residu  kontaminan  berbahaya  pada kemasan  kertas  daur  ulang,  namun  penelitian  ter- hadap  kadar  3-MCPD  pada  kertas  kemasan  masih terbatas.  Kontaminan  yang  umumnya  ditemukan dalam  kertas  dan  karton  daur  ulang  antara  lain  o- xilena,  asetofenon,  n-dodekana,  naftalena,  difenil eter,  2,3,4-trikloroanisola,  benzofenon,  diisopropil- naftalena,  campuran  isomer  (DIPN),  dibutil  ftalat, metal  stearat  bisfenol  A  (BPA),  nonilfenol  mono-
etiksilat  (NMP),  dan  nonilfenol  dietoksilat  (NDP) (Triantafyllou et al., 2007; Suciu et al., 2013).
Analisis  kandungan  senyawa  3-MCPD  di- lakukan  terhadap  lima  sampel  kertas  dupleks  yang berasal  dari  lima  produsen  kertas.  Sampel  kertas dupleks  yang  diterima  dari  produsen  dalam  bentuk plano  berukuran  A0,  dipotong  hingga  berukuran maksimal  5  x  5  mm 2 untuk  analisis.  Pengujian dilakukan  sebanyak  dua  kali  ulangan  untuk  setiap sampel  kertas.  Hasil  analisis  kandungan  3-MCPD lima  sampel  kertas  dupleks  ditampilkan  pada Gambar  3.  Kandungan  3-MCPD  antar  sampel  tidak berbeda  nyata  pada  taraf  uji  5%,  dengan  kadar terendah  753,43  ppb  pada  sampel  kertas  dupleks kode  B  dan  kadar  tertinggi  sebesar  825,36  ppb  pada sampel  kertas dupleks kode  E.
Tabel  3.  Hasil  penentuan  LOD  dan  LOQ  analisis  3- MCPD  dengan  menggunakan  GC-MS
Ulangan Konsentrasi 3-MCPD yang Diinjeksikan (ug/mL) Konsentrasi 3- MCPD Terbaca (ug/mL) 1 0 , 134 0 , 79644 2 0 , 134 0 , 79892 3 0 , 134 0 , 80201 4 0 , 134 0 , 79765 5 0 , 134 0 , 79634 6 0 , 134 0 , 79781 7 0 , 134 0 , 80114 Rata-rata 0 , 79861 SD 0 , 0022 % RSD 0 , 2774 LOD (μg/mL) (3xSD) 0 , 0067 LOQ (μg/mL) (10xSD) 0 , 0221 LOD (ppb) 6 , 6458 LOQ (ppb) 22 , 1527
Gambar  3.  Kandungan  3-MCPD  sampel  kertas dupleks
Kandungan  3-MCPD  pada  kemasan  kertas yang  diperoleh  pada  penelitian  ini  melampaui  batas toleransi  nilai  3-MCPD  yang  terkandung  dalam kemasan  kertas  yaitu  sebesar  300  ppb  (EU Standard  CEN,  1993).  Namun,  nilainya  jauh  lebih rendah  dibandingkan  hasil  pengukuran  3-MCPD pada  kertas  karton  kemasan  minuman  yang  dilapor- kan  Pace  dan  Hartman  (2010),  dengan  kisaran  4360 ppb  hingga  9870  ppb.  Liu  (2012)  bahkan  me- laporkan  kadar  3-MCPD  yang  lebih  tinggi  yaitu  pada kisaran  0,1  ppm  hingga  100  ppm  dari  seratus sampel  kertas  karton  komersial.  Tingginya  kadar  3- MCPD  yang  ditemukan  pada  kertas  kemasan minuman  dalam  penelitian  Liu  (2012)  berbanding lurus  dengan  kadar  epiklorohidrin  yang  digunakan sebagai wet  strength  resin dalam  pembuatan  kertas karton. Wet  strength  resin merupakan  bahan  kimia yang  ditambahkan  dengan  tujuan  mencegah  me- ngembangnya  serat  selulosa  karena  keberadaan  air, sehingga  meningkatkan  kekuatan  kertas  dalam keadaan  basah  (Ginebreda et  al., 2011).  Pada penelitian  ini  tidak  ada  data  mengenai  kadar  peng- gunaan  epiklorohidrin  pada  produksi  sampel  kertas dupleks.  Diduga  rendahnya  kandungan  3-MCPD pada  kertas  dupleks  disebabkan  oleh  penggunaan epiklorohidrin  pada  proses  produksi  kertas  dupleks relatif  kecil.  Hal  ini  secara  fisik  terlihat  dari ketahanan  kertas  dupleks  yang  rentan  terhadap kondisi  lembab  dan  air.  Selain  itu,  Liu  (2012)  tidak mendeteksi  keberadaan  3-MCPD  (limit  deteksi  0,01 ppm)  pada  sampel  pulp  kertas  daur  ulang.  Sehingga kertas  daur  ulang  sebagai  bahan  utama  pembuat kertas  dupleks  tidak  dapat  diduga  sebagai  sumber kontaminan  3-MCPD,  selain  epiklorohidrin.
Persentase  migrasi  3-MCPD  dari  kertas  dupleks ke simulan pangan
Kemasan  pangan  yang  terbuat  dari  kertas daur  ulang  diperuntukkan  bagi  jenis  bahan  pangan kering  seperti  tepung,  biji-bijian,  garam,  gula,  beras dan  pasta.  Untuk  jenis  bahan  pangan  cair  dan  semi padat,  umumnya  dilakukan  laminasi  menggunakan material  plastik  sebagai  penghalang  antara  kertas dan  bahan  pangan  (Binderup et  al., 2002).  Pada prakteknya,  sering  ditemukan  kertas  daur  ulang tanpa  laminasi  plastik  di  bagian  dalam,  bersentuhan langsung  dengan  bahan  pangan  yang  dikemas.
Uji  migrasi  menggunakan  desain  migrasi  satu sisi  bertujuan  untuk  mendekati  kondisi  migrasi  se- sungguhnya, dimana bahan pangan kontak langsung  dengan  bagian  dalam  kemasan  kertas dupleks  sebagai  kemasan  primer.  Uji  migrasi dilakukan  pada  kondisi  terakselerasi  yaitu  suhu 40°C  selama  24  jam,  di  mana  umumnya  penyimpa-
nan  makanan  dengan  kertas  dupleks  biasanya  tidak lebih  dari  12 jam  pada  suhu  ruang.
Simulan  pangan  yang  digunakan  dalam  uji migrasi  ini  mewakili  setiap  tipe  pangan.  Simulan 10%  etanol  mensimulasikan  pangan  berair  dan asam  (Tipe  I,  II,  IVB,  VIB  dan  VIIB),  50%  etanol mensimulasikan  jenis  pangan  dengan  kandungan alkohol  rendah  hingga  tinggi  (Tipe  VIA  dan  VIC), sementara  minyak  jagung  mewakili  jenis  makanan berlemak  (Tipe  III,  IVA,  V,  VIIA  dan  IX)  (FDA,  2007). Hasil uji migrasi  dapat  dilihat  pada  Tabel  4.
Tabel  4.  Hasil  uji  migrasi  3-MCPD  dari  kertas
dupleks  ke simulan pangan Simulan Pangan Konsentrasi 3-MCPD pada Kertas Dupleks (ppb) * Konsentrasi 3- MCPD pada Simulan Pangan (ppb) * Persen Migrasi (%) Etanol 10% 825 , 36 ± 2 , 81 475 , 48 ± 7 , 53 57 , 61 a Etanol 50% 825 , 36 ± 2 , 81 449 , 10 ± 17 , 82 54 , 41 b Minyak jagung 825 , 36 ± 2 , 81 334 , 72 ± 10 , 86 40 , 55 c
Keterangan: *Data merupakan nilai rata ± standar deviasi; Huruf  a.b.c  menunjukkan  nilai  persen  migrasi  setiap jenis simulan pangan berbeda nyata pada taraf uji 5%
Hasil  uji  migrasi  3-MCPD  dari  kertas  dupleks (sampel  E)  ke  simulan  pangan  menunjukkan  nilai persentase  migrasi  tertinggi  terdapat  pada  simulan pangan  etanol  10%  diikuti  oleh  simulan  pangan etanol  50%.  Sementara  nilai  persentase  migrasi terendah  terdapat  pada  simulan  pangan  minyak jagung,  berbeda  nyata  pada  taraf  uji  5%  dari  kedua simulan  pangan  sebelumnya.  Hasil  uji  migrasi tersebut  telah  diduga  sebelumnya  berdasarkan polaritas  komponen  3-MCPD  yang  cenderung  polar, sehingga  kontak  langsung  pada  simulan  pangan yang  lebih  polar  akan  menghasilkan  persentase migrasi  3-MCPD  yang  lebih  tinggi  pula.  Sebaliknya pada  simulan  pangan  minyak  jagung,  nilai  per- sentase migrasinya  lebih  rendah.
Kadar  3-MCPD  yang  ditemukan  pada  ketiga jenis  simulan  pangan  dengan  kisaran  334  ppb hingga  475  ppb  jauh  melebihi  batas  regulasi  BPOM yang  mensyaratkan  batas  maksimal  kandungan  3- MCPD  dalam  makanan  cair  atau  padat  yang  me- ngandung  protein  nabati  terhidrolisis  asam,  sebesar 20  dan  50  ppb.  Tingginya  kadar  3-MCPD  yang  ber- migrasi  dari  kemasaan  kertas  dupleks  ke  bahan pangan  menunjukkan  bahwa  penggunaan  kertas dupleks  sebagai  kemasan  primer  makanan,  khusus- nya  bahan  pangan  cair  atau  semi  padat  tidak dianjurkan.

## KESIMPULAN
Seluruh  parameter  hasil  validasi  metode analisis  3-MCPD  pada  kemasan  kertas  yang meliputi  uji  kesesuaian  sistem,  uji  linieritas,  uji akurasi,  uji  keterulangan  dan  limit  deteksi  dan kuantitasi  memenuhi  syarat  yang  telah  ditetapkan dalam  pedoman  validasi  metode  analisis.  Dari  hasil pengukuran  kadar  3-MCPD  pada  sampel  kertas dupleks,  diperoleh  kadar  3-MCPD  paling  tinggi  pada sampel  E  sebesar  825,36  ppb  dan  terendah  pada sampel  B  sebesar  753,43  ppb.  Dari  hasil  uji  migrasi 3-MCPD  dari  kertas  dupleks  sampel  E  ke  tiga  jenis simulan  pangan,  diperoleh  persentase  migrasi  ter- tinggi  pada  simulan  pangan  etanol  10%  dan terendah  pada  simulan  pangan  minyak  jagung. Tingginya  kadar  3-MCPD  yang  dapat  bermigrasi  ke simulan  pangan  mengindikasikan  bahaya  peng- gunaan  kertas  dupleks  sebagai  kemasan  primer pangan.
Penelitian  lebih  lanjut  perlu  dilakukan  untuk mengetahui  kadar  dan  potensi  migrasi  3-MCPD pada  kertas  karton  kemasan  pangan  lainnya  dan upaya  untuk  meminimalisir  migrasi  3-MCPD  dari kertas kemasan  ke bahan  pangan.

## UCAPAN  TERIMA KASIH
Penulis  mengucapkan  terima  kasih  kepada PT.  Indah  Kiat  Pulp  dan  Paper  Tbk.  (Grup  Sinar Mas) yang  telah  mendanai  penelitian  ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Abu-El-Haj  S,  Bogusz  MJ,  Ibrahim  Z,  Hassan  H, Tufail MA. 2007. Rapid and simple determination  of  chloropropanols  (3-MCPD and  1,3-DCP)  in  food  products  using  isotope dilution  GC-MS. Food  Control 18:  81-90.  DOI: 10.1016/j.foodcont.2005.08.014.
[AOAC]  Assosiation  of  Official  Agricultural Chemists , Official  Method.  2005.  Laboratory  Quality Assurance.  Official  Methods  of  Analysis  of AOAC  International.  18 th edition.  Appendix  E:
1-6. Gaithersburg, Maryland 20877-2417, USA.
Baer  I,  De-La-Calle  B,  Taylor  P.  2010.  3-MCPD  in food  other  than  soy  sauce  or  hydrolysed vegetable  protein.  Anal  Bioanal  Chem  396: 443-456.  DOI:  10.1007/s00216-009-3177-y.
[BPOM]  Badan  Pengawas  Obat  dan  Makanan. 2009.  Peraturan  Kepala  Badan  POM  RI  No. HK.00.06.1.52.4011: Penetapan Batas
Maksimum  Cemaran  Mikroba  dan  Kimia dalam  Makanan.
[BPOM]  Badan  Pengawas  Obat  dan  Makanan. 2011.  Peraturan  Kepala  Badan  POM  RI  No. HK.03.1.23.07.11.6664:  Pengawasan  Kemas- an  Pangan.
Binderup ML, Pedersen  GA,  Vinggaard  AM, Rasmussen  ES,  Rosenquist  H,  Cederberg  T. 2002.  Toxicity  testing  and  chemical  analyses of  recycled  fiber-based  paper  for  food  contact. Food  Addit Contam  25: 13 –28.
Cho  WS,  Han  BS,  Nam  KT,  Choi  M,  Kim  SH, Jeong J,  Jang  DD.  2008.  Carcinogenicity  study  of  3- monochloro-propane-1,2-diol in sprague- dawley  rats. Food  Chem  Toxicol  46:  3172- 3177.  DOI:  10.1016/j.fct.2008.07.003.
Chung  SWC,  Kwong  KP,  Yau  JCW,  Wong  AMC, Xiao  Y.  2008.  Chloropropanols  levels  in foodstuffs  marketed  in  Hong  Kong.  J  Food Compos  Anal  21:  569-573.  DOI:  10.1016/j. jfca.2008.04.010.
Coles  R,  Dowell  DM,  Kirwan  MJ.  2007.  Food Packaging  Technology.  London:  Blackwell Publishing,  CRC  Press.
Codex  Stan.  2010.  Codex  General  Standard  for Contaminants  and  Toxins  in  Food  and  Feed. Codex  Standard  193-1995.
EU  Standard  CEN.  1993.  European  Committee  for Standardization.  Paper  and  board  intended  to Come Into Contact with Foodstuffs –
Preparation  of  a Cold  Water Extract. EN 645.
[EURACHEM]  Working  Group.  1998.  The  Fitness for Purpose of Analytical Methods. A Laboratory  Quide  to  Method  Validation  and Related  Topics. Eurachem  Guide.
[FDA] Food and Drug Administration. 2007. Guidance for Industry: Preparation of Premarket  Submissions  for  Food  Contact Substances:  Chemistry  Recommendations. Guidance  Complience  Regulatory  Information.
Ginebreda  A,  Guillen  D,  Barcelo  D,  Darbra  RM.
2011. Additives in paper industry. In:
Bilitewski  B,  Darbra  RM,  Barcelo  D,  editors. Global  Risk-Based  Management  of  Chemical Additives I: Usage and Environmental Occurance.  The  Handbook  of  Environmental Chemistry. Heidelberg:  Springer  Berlin.
Hrncirik  K,  Zelinkova  Z,  Ermacora  A.  2011.  Critical factors  of  indirect  determination  of  3-chloro- propane-1,2-diol  esters.  Eur  J  Lipid  Sci  Tech 113:  361-367.  DOI:  10.1002/ejlt.201000316.
Liu  WY.  2012.  Development  and  Validation  of  an
Chloropropanols  in  Paperboard  Food  Packag- ing  by  GC-MS  [Thesis].  Rutgers  University. New  Brunswick,  New  Jersey,  USA.
Pace  GV,  Hartman,  TG.  2010.  Migration  studies  of 3-chloro-1,2-propanediol in polyethylene extrusion-coated  paperboard  food  packaging. J Food  Addit  Contam:  Part A 27: 884-891.
Razak  RA,  Kuntom  A,  Siew  WL,  Ibrahim  NA,  Ramli MR,  Hussein  R,  Nesaretnam  K.  2012. Detection  and  monitoring  of  3-monochloro- propane-1,2-diol  (3-MCPD)  esters  in  cooking oils. Food Control 25: 355-360. DOI: 10.1016/j.foodcont.2011.10.058.
Suciu  NA,  Tiberto  F,  Vasileiadis  S,  Lamastra  L,
suspected  and  migration  into  foods  and  food
stimulant.  Food  Chem  141:  4146-4151.  DOI:
Stadler  RH,  Lineback  DR.  2009.  Process-induced Food  Toxicants.  Occurrance,  Formation,  Miti- gation  and  Health  Risks.  A  John  Wiley  & Sons,  Incc.,  Publication.  Hoboken,  New Jersey.
Triantafyllou  VI,  Demertzi  KA,  Demertzis  PG.  2007. A  study  on  the  migration  of  organic  pollutants from  recycled  paperboard  packaging  material- s  to  solid  food  matrices.  Food  Chem  101: 1759-1768.  DOI:  10.1016/j.foodchem.2006.0 2.023.
Wenzl  T,  Lachenmeier  DW,  Gokmen  V.  2007. Analysis  of  heat-induced  contaminants  (acry- lamide,  chloropropanols  and  furan)  in  carbo-
Improved Method for Determination of 10.1016/j.foodchem.2013.07.014.
Trevisan  M.  2013.  Recycled  paper-paper-
hydrate-rich food. Anal Bioanal Chem board  for  food  contact  materials:  Contaminant
389: 119 –137.