PHARMACON – PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,

## FORMULATION AND ANTIBACTERIAL TEST FOR LIQUID SOAP WITH ETHANOL EXTRACT OF SOURSOP LEAVES (Annona muricata Linn) AGAINST  Staphylococcus aureus BACTERIA

## FORMULASI DAN UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI SEDIAAN SABUN CAIR EKSTRAK
ETANOL DAUN SIRSAK ( Annona muricata Linn) TERHADAP BAKTERI Staphylococcus aureus
Angelika P. Legi 1)* , Hosea Jaya Edy 1) ,  Surya Sumantri Abdullah 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115 *angelikalegi1999@gmail.com

## ABSTRACT
Soursop  leaves  (Annona  muricata  Linn)  contain  tannins,  alkaloids,  saponins,  and  flavonoids  that function  as  antibacterial.  The  purpose  of  this  study  was  to  formulate  liquid  soap  soursop  leaf extract  ethanol  which  is  good  physically  and  to  test  the  inhibitory  power  of  soursop  leaf  extract liquid  soap  with  a  concentration  of  1%;  3%;  5%;  and  7%  against  Staphylococcus  aureus.  This research  uses  laboratory  experimental  methods.  Based  on  the  results  of  the  study,  it  showed physical  evaluations  such  as  organoleptic  (green  and  dark  green,  peppermint  oil,  liquid),  foam height test was 70-73.33 mm, water content test was 42.79-36.62%, alkali content test free 0.051- 0.074%,  and  the  pH  test  was  8.99-9.74.  Liquid  soap  with  ethanolic  extract  of  soursop  leaves  has antibacterial activity with an average diameter of F1 (2.8 mm) in the weak category, F2 (7.6 mm) in the weak category, F3 (10.6 mm) in the strong category, and F4 (12.3 mm) is in a strong category. In conclusion, the ethanolic extract  of  soursop leaves  can be formulated into liquid  soap that are physically good and have the greatest antibacterial activity at a concentration of F4 (12.3 mm).
Keywords : Soursop leaves, Liquid Soap, Antibacterial .

## ABSTRAK
Daun  sirsak  ( Annona  muricata Linn) memiliki  kandungan  senyawa  tanin,  alkaloid,  saponin,  dan flavonoid  yang  berfungsi  sebagai  antibakteri.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  memformulasikan sabun cair ekstrak etanol daun sirsak  yang baik secara fisik  serta menguji daya hambat sabun cair ekstrak  daun  sirsak  dengan  konsentrasi  1%;  3%;  5%;  dan  7%  terhadap  bakteri Staphylococcus aureus. Penelitian  ini  menggunakan  metode  eksperimental  laboratorium.  Berdasarkan  hasil penelitian menunjukan evaluasi  fisik  seperti organoleptik  (berwarna hijau dan hijau tua, beraroma khas  peppermint,  berbentuk  cair),  uji  tinggi  busa  yaitu  70-73,33  mm,  uji  kadar  air  yaitu  42,79- 36,62%, uji kadar alkali bebas 0,051-0,074%, dan uji pH yaitu 8,99-9,74. Sabun cair ekstrak etanol daun  sirsak  memiliki  aktivitas  antibakteri  dengan  diameter  rata-rata  untuk  F1  (2,8  mm)  berada dikategori lemah, F2 (7,6 mm) berada dikategori lemah, F3 (10,6 mm) berada dikategori kuat, dan F4  (12,3  mm)  berada  dikategori  kuat.  Kesimpulannya,  ekstrak  etanol  daun  sirsak  dapat diformulasikan menjadi sediaan sabun cair yang baik secara fisik dan memiliki aktivitas antibakteri paling besar yaitu pada konsentrasi F4 (12,3 mm).
Kata Kunci : Daun Sirsak, Sabun Cair, Antibakteri.
PHARMACON – PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,

## PENDAHULUAN
Kulit merupakan lapisan atau jaringan terluar yang  menutupi  seluruh  tubuh  dan  melindungi tubuh  dari  bahaya  yang  datang  dari  luar, utamanya terhadap bakteri. Selain untuk melindungi  tubuh,  kulit  juga  berfungsi  sebagai tempat  ekskresi.  Zat  berlemak,  air,  ion-  ion,  dan keringat  merupakan  contoh  dari  hasil  ekskresi kulit.  Hasil  ekskresi  yang  bercampur  dengan kotoran,  mengakibatkan  bakteri  banyak  dikulit dan  dapat  menyebakan  infeksi  jika  terjadi  vulnus pada kulit (Barel et al ., 2001).
Staphylococcus  aureus merupakan  bakteri Gram-Positif  berbentuk  bulat  berdiameter  0,7-1,2 μm,  tersusun  dalam  kelompok-kelompok  yang tidak  teratur  seperti  buah  anggur,  fakultatif anaerob,  tidak  membentuk  spora,  dan  tidak bergerak. Berdasarkan bakteri yang tidak membentuk  spora  maka Staphylococcus  aureus termasuk  jenis  bakteri  yang  paling  kuat  daya tahannya.  Pada  agar  miring  dapat  tetap  hidup sampai  berbulan-bulan,  baik  dalam  lemari  es maupun pada suhu kamar. Dalam keadaan kering pada  benang,  kertas,  kain dan  dalam  nanah  dapat tetap  hidup  selama  6-14  minggu  (Syahrurahman et al ., 2010).
Produksi  sabun  mengalami  perkembangan sehingga  menjadi  lebih  lembut  dan  dapat digunakan untuk mandi. Semakin berkembangnya teknologi  dan  pengetahuan  sehingga  sabun  cair menjadi  banyak  macam  jenisnya.  Sabun  cair diproduksi untuk berbagai keperluan seperti untuk mandi,  pencuci  tangan,  pencuci  piring  ataupun alat-alat rumah tangga dan sebagainya. Karakteristik  sabun  cair  tersebut  berbeda-beda untuk  setiap  keperluannya,  tergantung  pada komposisi  bahan  dan  proses  pembuatannya. Keunggulan sabun cair antara lain mudah dibawa bepergian  dan  lebih  higenis  karena  biasanya disimpan  dalam  wadah  yang  tertutup  rapat (Wijana et al., 2009).
Hasil  penelitian  yang  dilakukan  oleh  Melisa et  al .,  (2015)  daun  sirsak  merupakan  jenis  bahan alam  yang  memiliki  kandungan  tanin,  alkaloid, saponin,  dan  flavonoid  yang  berfungsi  sebagai antibakteri.  Hasil  penelitian  menunjukkan  adanya daya  hambat  dari  ekstrak  daun  sirsak  terhadap pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  aureus setelah  proses  inkubasi  pada  suhu  37ºC  pada inkubator  selama  24  jam.  Berdasarkan  penelitian yang  dilakukan  oleh  Lili et  al., (2017) menunjukkan  bahwa  sediaan  gel hand  sanitizer ektrak  etanol  daun  sirsak  memiliki  aktivitas antibakteri pada konsentrasi 12%.
Berdasarkan  hal  yang  telah  dijelaskan  diatas maka perlu dilakukan penelitian lebih lanjut untuk mengetahui aktivitas antibakteri dari ekstrak daun sirsak  dalam  bentuk  sediaan  sabun  cair  terhadap bakteri Staphylococcus aureus.

## METODOLOGI PENELITIAN Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian  dilaksanakan  bulan  Desember 2020  –  April  2021  di  Laboratorium  Penelitian Lanjut Program Studi Farmasi, Fakultas
Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam,
Universitas Sam Ratulangi Manado.

## Rancangan Penelitian
Penelitian yang dilakukan bersifat eksperimental  laboratorium.  Ekstrak  daun  sirsak ( Annona  muricata Linn)  dibuat  formulasi  dalam bentuk sediaan sabun cair dengan konsentrasi 1%, 3%,  5%,  dan  7%  kemudian  dilakukan  evaluasi sediaan  fisik  dan  uji  daya  hambat  sabun  cair terhadap bakteri Staphylococcus aureus.

## Alat dan Bahan Alat
Alat yang digunakan pada penelitian ini ialah blender (WARING ® ) ,  kertas  saring, aluminium foil ,  wadah  stoples,  ayakan,  timbangan  analitik ( AE Adam ® ) ,  alat-alat  gelas,  corong, hot  plate magnetic ( ACIS ® ) ,  jarum ose, pembakar bunsen, batang pengaduk, stirrer , pH meter ( CP − 505 ® ) , buret  dan  statif,  mikropipet,  sudip,  mistar berskala,  pencadang,  autoklaf  ( ALP ® ) ,  oven ( MMM Group ® ) , laminary  air  flow ( LAF ® ) , inkubator ( EcoCell ® ) .

## Bahan
Bahan  yang  digunakan  yaitu  daun  Sirsak, bakteri Staphylococcus  aureus, media Nutrient Agar ,  etanol  96%, Carboxymethylcellulosum Natrium ( CMC-Na),  minyak  zaitun, kalium hidrosikda (KOH),  asam  stearat, Beta  Hydroxy Acid (BHA), Sodium  Lauryl  Sulfate (SLS), pengaroma  ( pepper  mint) ,  fenolftalein,  aquades, asam  sulfat  ( H 2 SO 4 )  1%, Barium  Klorida ( BaCl 2. 2H 2 O ) 1,175%, NaCl, sabun X.

## Prosedur Penelitian Pengambilan Sampel
Sampel  yang  digunakan  pada  penelitian  ini ialah  daun  sirsak  yang  diambil  di  sekitaran  Desa Tenga,  Kecamatan  Tenga,  Kabupaten  Minahasa- Selatan.
PHARMACON – PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,

## Preparasi Sampel
Daun sirsak diambil langsung dari  pohonnya sebanyak  3  kg  kemudian  disortasi  basah  untuk dipisahkan  dari  pengotor  dan  bagian  tanaman yang  tidak  digunakan  dalam  penelitian  yang terbawa  pada  saat  proses  pengumpulan  daun sirsak.  Daun  sirsak  selanjutnya  dicuci  bersih menggunakan  air  mengalir.  Setelah  itu  dilakukan perajangan  agar  daunnya  cepat  kering.  Proses pengeringan  dilakukan  dengan  cara  diangin- anginkan  pada  suhu  ruangan  yang  tidak  terpapar sinar  matahari  secara  langsung.  Hal  ini  bertujuan agar  zat  kimia  yang  terdapat  pada  daun  tidak rusak  akibat  paparan  sinar  matahari  langsung. Daun  sirsak  yang  telah  dikeringkan  disortasi kering untuk memisahkan sampel dengan pengotor  lain  yang  masih  tertinggal  pada  daun sirsak kering. Setelah disortasi kering, daun sirsak dihaluskan  dengan  blender  kemudian  diayak. Pengayakan dilakukan untuk memperkecil ukuran partikel sampel sehingga dapat memperluas sudut kontak antara pelarut dan sampel agar memudahkan proses penarikan zat aktif pada saat diekstraksi.  Serbuk  simplisia  yang  didapat sebanyak 340 gram.
Ekstrak  daun  sirsak  diekstraksi  dengan  cara dingin  yaitu  metode  maserasi.  Hal  yang  sangat berpengaruh  terhadap  ekstraksi  menggunakan maserasi ialah tidak adanya penambahan pemanasan  yang  akan  menyebabkan  ekstrak mengalami  kerusakan  senyawa  aktif  atau  dikenal dengan  proses  denaturasi  (Miller,  1975).  Pelarut yang digunakan untuk  merendam simplisia  yaitu
etanol  96%.  Etanol  merupakan  pelarut  yang sangat  baik  untuk  ekstraksi  karena  dapat mengekstraksi  senyawa  polar  dan  non  polar. Kandungan  air  yang  terdapat  pada  etanol  dapat mengekstraksi  senyawa-senyawa  fenolik  yang kebanyakan  bersifat  polar,  sedangkan  etanol mempunyai dua gugus yang berbeda kepolarannya,  yaitu  gugus  hidroksil  yang  bersifat polar  dan  gugus  alkil  yaitu CH 3 −CH 2 − yang bersifat  non-polar.  Adanya  kedua  gugus  tersebut pada  etanol  diharapkan senyawa-senyawa  dengan tingkat  kepolaran  yang  berbeda  akan  terekstrak dalam etanol (Harbone, 1987).
Sebanyak 300 gram daun sirsak , dimasukkan ke dalam toples kaca dan direndam dengan pelarut etanol 96% selama  5 hari sambil sesekali diaduk. Pengadukan  dilakukan  agar  supaya  senyawa- senyawa  target  dapat  larut  dengan  baik  dalam pelarut  etanol.  Setelah  itu  dilanjutkan  dengan penyaringan  sehingga  didapat  filtrat  1  dan  residu 1.  Residu  yang  terbentuk  kemudian  diremaserasi dengan  pelarut  yang  sama  selama  3  hari  sambil sesekali  diaduk.  Setelah  3  hari,  dilakukan penyaringan  sehingga  menghasilkan  filtrat  2  dan residu  2.  Filtrat  1  dan  filtrat  2  dicampurkan kemudian  dievaporasi  pada  suhu  40°  C  sehingga diperoleh  ekstrak  kental.  Proses  evaporasi bertujuan  untuk  mendapatkan  ekstrak  kental sampel  dengan  cara  memisahkan  pelarut  dengan ekstrak  melalui  mendidihkan  atau  menguapkan pelarut pada suhu tertentu (Poedjiadi, 1994).

## Formulasi Sabun Cair Ekstrak Etanol Daun Sirsak
Tabel 1. Formulasi Sabun Cair Ekstrak Etanol Daun Sirsak BAHAN SATUAN (% b/v) FUNGSI KONSENTRASI FI F2 F3 F4 Ekstrak Daun Sirsak % Zat aktif 1 3 5 7 Minyak zaitun % Asam lemak 30 30 30 30 KOH % Basa 16 16 16 16 CMC-Na % Pengisi dan pengental 1 1 1 1 SLS % Surfaktan 1 1 1 1 Asam stearat % Penstabil 0,5 0,5 0,5 0,5 BHA % Antioksidan 1 1 1 1 peppermint oil % Pengaroma 2 2 2 2 Aquadest % Pelarut Ad 100 Ad 100 Ad 100 Ad 100
PHARMACON – PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,
Pembuatan  Sabun  Cair  Ekstrak  Etanol  Daun Sirsak
Sabun cair dari ekstrak daun sirsak ini dibuat dalam  4  formulasi  dengan  konsentrasi  yang berbeda-beda yaitu 1%, 3%, 5%, dan 7%.
Semua  bahan  ditimbang  terlebih  dahulu sesuai dengan formula yang telah dibuat. Minyak zaitun  dimasukkan  sebanyak  30  mL  ke  dalam gelas  kimia  kemudian  ditambahkan  dengan  KOH sebanyak 16 mL sedikit demi sedikit sambil terus dipanaskan  pada  suhu  50°  C  dan  diaduk menggunakan magnetic  stirrer hingga  terbentuk pasta  sabun.  Pasta  sabun  ditambahkan  dengan  30 mL  aquadest,  lalu  dimasukkan  CMC-Na  yang telah dikembangkan dalam aquades panas, diaduk hingga  homogen.  Kemudian  ditambahkan  asam stearat, aduk hingga homogen. Ditambahkan SLS dan  aduk  hingga  homogen.  Ditambahkan  BHA, diaduk hingga homogen. Ditambahkan pengaroma, diaduk hingga homogen. Dimasukkan ekstrak  daun  sirsak,  diaduk  hingga  homogen. Sabun  cair  ditambahkan  dengan  aquadest  hingga volumenya  100  mL.  Sabun  dimasukkan  kedalam wadah bersih yang telah disiapkan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Formulasi  sediaan  sabun  cair  dibuat  dengan menggunakan  zat  aktif  yaitu  ekstrak  etanol  daun sirsak.  Sediaan  sabun  cair  ini  diformulasikan dengan  basis  sabun  yaitu  Minyak  Zaitun  sebagai asam  lemak  dan Kalium  hidroksida (KOH) sebagai  basa  untuk  membentuk  pasta  sabun . Bahan  yang  digunakan  sebagai  pengental  dan pengisi massa dari sabun yaitu Carboxymethylcellulosum  Natricum  (CMC-Na) . Selanjutnya  penambahan  Asam  Stearat  sebagai penetral  atau  penstabil  bertujuan  agar  basa  yang tidak  berikatan  dengan  minyak  atau  basa  yang bersifat  bebas  dapat  ditarik  dan  berikatan  dengan zat  penetral  (Dimpudus et  al ,  2017).  Selanjutnya penambahan Sodium Lauryl Sulfate (SLS) sebagai surfaktan  yang  menghasilkan  busa  pada  sabun cair. Selanjutnya penambahan Beta Hydroxy Acid (BHA)  sebagai  antioksidan.  Pengaroma  yang digunakan untuk memberi keharuman pada sabun yaitu  minyak  peppermint.  Alasan  penggunaan minyak  peppermint  karena  disesuaikan  dengan sampel yang digunakan yaitu daun.
Tabel.2 Hasil Uji Organoleptik Sediaan Bentuk Aroma Warna F0 Cair Khas Putih
F1 Cair Khas Hijau F2 Cair Khas Hijau F3 Cair Khas Hijau Tua F4 Cair Khas Hijau Tua
Uji  organoleptik  bertujuan  untuk  melihat tampilan  fisik  dari  suatu  sediaan  yang  meliputi bentuk,  warna,  dan  aroma.  Bentuk  dari  masing- masing  formula  menunjukkan  sabun  cair  yang dihasilkan  pada  penelitian  ini  yaitu  cair  dan homogen  dilihat  dari  tidak  adanya  pemisahan antara  fase  minyak  dan  fase  cair.  Aroma  yang dihasilkan  yaitu  aroma  peppermint  yang  berasal dari pengaroma minyak peppermint.
Penggunanaan  pengaroma  ini  bertujuan  untuk memberi  aroma  yang  harum  pada  sabun  cair. Sedangkan  warna  sediaan  sabun  cair  berwarna hijau  dan  hijau  tua  yang  dihasilkan  dari  ekstrak etanol  daun  sirsak.  Semakin  tinggi  konsentrasi esktrak  etanol  daun  sirsak  dalam  formula  maka akan  semakin  gelap  warna  sediaan  sabun  cair. Berdasarkan  hasil  yang  diperoleh,  hasil  pada  uji organoleptis  ini  sudah  memenuhi  standar  yang telah ditetapkan Standar Nasional Indonesia (SNI) yaitu  berbentuk  cair,  dan  memiliki  aroma  dan warna khas.
Tabel.3 Hasil Uji Tinggi Busa
Hasil Pengukuran Tinggi Busa (𝐦𝐦) . Sediaa n Perlakuan Rata- rata Keterang an 1 2 3
F1 69 70 73 70 ± 2,08 Memenu hi Syarat F2 70 72 74 73 ± 2 Memenu hi Syarat F3 68 73 75 72 ± 3,60 Memenu hi Syarat F4 70 74 76 73,33 ± 3,05 Memenu hi Syarat
Uji  tinggi  busa  dilakukan  dengan  melihat daya busa yang dihasilkan sabun cair yang dibuat apakah  sudah  sesuai  dengan  standar  tinggi  busa yang  ditetapkan  oleh  Standar  Nasional  Indonesia (SNI) yaitu 13-220 mm. Sabun dengan busa yang
PHARMACON – PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,
berlebihan dapat mengiritasi kulit. Hasil pengujian tinggi busa pada semua formulasi sabun cair  berada pada  nilai   70-70,33  mm  yang  berarti sabun  cair  sudah  memenuhi  standar  yang ditetapkan oleh Standar Nasional Indonesia (SNI). Reaksi  saponifikasi  yaitu  reaksi  pembentukan sabun  yang  membutuhkan  adanya  basa  dan minyak,  reaksi  saponifikasi  ditandai  dengan terbentuknya  busa  (Susanti  dan  Guterres,  2018). Selain proses saponifikasi yang dapat menghasilkan  busa,  SLS  juga  merupakan  bahan yang  dapat  menghasilkan  busa  pada  sabun  cair. Salah  satu  daya  tarik  dari  sabun  ialah  kandungan busanya.  Fungsi  busa  dalam  sabun  mencegah redeposisi  artinya  agar  partikel  kotoran  yang sudah terlarut diair  oleh  sabun  tidak  terjatuh atau mengendap  lagi  sehingga  kotoran  dapat  dibuang bersama  air  sebelumnya  (Sahambangung et  al ., 2019).
Tabel.4 Hasil Uji Kadar Air Sabun Cair Ektrak Daun Sirsak
Hasil Perhitungan Kadar Air (%) . Sediaa n Perlakuan Rata- rata Keterang an 1 2 3
F1 40, 81 43, 66 43, 90 42,79 ± 1,71 Memenu hi Syarat F2 38, 41 37, 57 37, 12 37,7 ± 0,65 Memenu hi Syarat F3 36, 80 35, 98 38, 68 37,15 ±1,3 8 Memenu hi Syarat F4 35, 05 38, 79 36, 04 36,62 ± 1,93 Memenu hi Syarat
Pengujian  kadar air  dilakukan  dengan  tujuan untuk  mengetahui  presentase  kandungan  air  yang terdapat  dalam  sediaan  sabun  cair  dimana  kadar air dapat menyebakan bakteri, kapang dan khamir untuk  berkembang  biak  sehingga  mempengaruhi perubahan terhadap sediaan. Kadar air maksimum untuk sediaan sabun cair harus <60% sesuai yang telah  ditetapkan  oleh  Standar  Nasional  Indonesia (SNI).  Hasil  yang  didapat  menunjukkan  bahwa semua  sediaan  sabun  yang  dibuat  memenuhi syarat  yang  ditetapkan  oleh  SNI.  Semakin  tinggi konsentrasi ekstrak maka semakin kecil
presentase  kadar  air  yang  didapatkan  (Dimpudus et al ., 2017)

## Tabel.5 Hasil Uji Kadar Alkali Bebas Sabun Cair Ekstrak Daun Sirsak
Hasil Perhitungan Kadar Alkali Bebas (%)
Sedia an Perlakuan Rata- rata keterang an 1 2 3 F1 0,0 56 0,0 55 0,0 44 0,051 ± 0,0066 Memenu hi Syarat F2 0,0 66 0,0 56 0,0 66 0,062 ± 0,0057 Memenu hi Syarat F3 0,0 66 0,0 67 0,0 56 0,063 ± 0,0060 Memenu hi Syarat F4 0,0 77 0,0 67 0,0 78 0,074 ± 0,0060 Memenu hi Syarat
Uji  alkali  bebas  bertujuan  untuk  mengukur jumlah  alkali  atau  basa  yang  tidak  berikatan dengan  asam  lemak  atau  minyak  zaitun.  Hal  ini penting  karena  alkali  memiliki  sifat  yang  keras dan  dapat  menyebabkan  iritasi  pada  kulit  (Rizky, 2013).  Berdasarkan  Standar  Nasional  Indonesia (SNI),  standar  alkali  bebas  pada  sabun  cair maksimal  0,1%.  Hasil  yang  di  dapat  dari penelitian  ini  menunjukkan  bahwa  sabun  cair ekstrak  etanol  daun  sirsak  terbukti  sesuai  dengan standar  yang  ditetapkan  oleh  SNI.  Hal  ini disebabkan  karena  pada  saat  pembuatan  sabun cair  dilakukan  pemanasan  yang  cukup  lama disertai  dengan  pengadukan  sehingga  sabun  telah menjadi  pasta,  karena  KOH  yang  merupakan salah  satu  pembentuk  basis  sabun  sudah  beraksi dengan  asam  lemak  dalam  hal  ini  minyak  zaitun (Korompis et al ., 2020)
Tabel.6 Hasil Uji pH

## Hasil Hasil Pengukuran pH
Sedia an Perlakuan Rata- rata keterang an 1 2 3 F1 9,0 0 8,9 8 8,9 9 8,99 ± 0,01 Memenu hi Syarat
PHARMACON – PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,
F2 9,4 7 9,4 5 9,5 1 9,47 ± 0,03 Memenu hi Syarat
F3 9,6 8 9,5 9 9,6 7 9,67 ± 0,04 Memenu hi Syarat
F4 9,7 5 9,7 1 9,7 4 9,74 ± 0,02 Memenu hi Syarat
Sabun  cair  harus  melewati  uji  pH  yang bertujuan untuk mengetahui tingkat keasaman dari sediaan.  Pemeriksaan  pH  sediaan  dilakukan dengan  menggunakan  pH  meter.  Menurut  SNI, untuk  pH  sabun  cair  yang  memenuhi  standar bernilai  antara  8-11.  Pengujian  pH  diperlukan karena  sabun  cair  akan  langsung  bersentuhan dengan  kulit.  Jika  pH  yang  dihasilkan  oleh sediaan  sabun  cair  tidak  memenuhi  standar  maka dapat  menimbulkan  masalah  pada  kulit.  Nilai  pH sabun  yang  terlalu  rendah  dapat  menyebabkan peningkatan  daya  absorbsi  sabun  pada  kulit sehingga  dapat  menyebabkan  iritasi  pada  kulit, sedangkan nilai pH yang terlalu tinggi juga dapat menyebabkan  iritasi  pada  kulit  (Hernani,  2010). Berdasarkan  pegujian  yang  dilakukan,  semua formulasi  sabun  cair  ekstrak  daun  sirsak  berada pada nilai 8,99-9,74. Nilai pH tersebut menunjukkan bahwa sabun cair yang dibuat telah memenuhi standar yang ditetapkan SNI dan aman bagi kulit.
Tabel 7. Hasil Uji Antibakteri Sabun Cair Ekstrak Daun Sirsak
Hasil Pengukuran Diameter Zona Hambat ( 𝐦𝐦 ) Sediaa n Perlakuan Rata- rata keterang an 1 2 3 K (+) 11,5  12,5  13,5 12,5 ± 1 Kuat K (-) 2,5 3,5 1,5  2,5 ± 1 Lemah F1 3 1,5 4 2,8 ± 1,25 Lemah F2 6 6 11 7,6 ± 2,88 Sedang F3 11 10 11 10,6 ± 0,57 Kuat F4 13 10,5  13,5 12,3 ± 1.60 Kuat
Uji  aktivitas  antibakteri  sediaan  sabun  cair ekstrak daun sirsak terhadap bakteri
Staphyloccocus aureus dilakukan untuk mengetahui kemampuan sediaan dalam menghambat  pertumbuhan  bakteri.  Pengujian antibakteri  dilakukan  3  kali  replikasi  pada masing-masing formulasi. Hal ini agar hasil yang didapatkan lebih akurat.
Pengujian  aktivitas  antibakteri  dilakukan terhadap  sediaan  sabun  cair  ekstrak  etanol  daun sirsak  dengan  berbagai  konsentrasi  sebagai sampel  uji,  basis  sabun  sebagai  kontrol  negatif, dan sabun X sebagai kontrol positif. Metode yang digunakan  yaitu  metode  difusi  dengan  cara sumuran.  Metode  sumuran  memiliki  kelebihan dibandingkan dengan metode lain seperti cakram, yaitu lebih mudah dalam pengukuran zona hambat yang  terbentuk  dan  lebih  sensitif.  Hal  ini dikarenakan  sampel  tidak  hanya  beraktivitas diatas  media  saja,  tetapi  juga  sampai  dibawah (Junanto et al ., 2008).
Media    yang  digunakan  pada  pengujian  ini yaitu media nutrient agar yang dimana komposisinya  terdiri  dari  ekstrak  daging  sapi, peptone dan  agar.  Komposisi  yang  terpenting dalam  media  ini  ialah  karbohidrat  dan  protein yang  terdapat  dalam  ekstrak  sapi  dan peptone sesuai  dengan  kebutuhan  sebagian  besar  bakteri (Thohari et  al  , 2019).  Diameter  daya  hambat diukur dalam satuan milimeter (mm ) menggunakan mistar berskala. pengukuran dilakukan  secara  horizontal  dan  vertikal.  Hasil yang  didapat  secara  horizontal  dan  vertikal dijumlahkan  kemudian  dibagi  dua,  selanjutnya dikurangi  7  (mm ) yang  merupakan  diameter sumur  kemudian  dikurangi  dengan  2,5  yang merupakan diameter daya hambat yang dihasilkan oleh K- atau basis sabun.
Uji  daya  hambat  antibakteri  menurut  Davis dan  Stout  (1971),  dikategorikan  berdasarkan diameter  daya  hambat  yang  terbentuk  yaitu diameter  daya  hambat  5  mm  atau  kurang dikategorikan  lemah,  daya  hambat  5-10  (mm ) dikategorikan  sedang,  daya  hambat  10-20 (mm ) dikategorikan  kuat  dan  daya  hambat  20 (mm ) atau lebih dikategorikan sangat kuat.
Berdasarkan  hasil  pengujian  antibakteri, dapat dikatakan bahwa sediaan sabun cair ekstrak etanol  daun  sirsak  dengan  memvariasikan konsentrasinya,  formulasi  1  dengan  konsentrasi 1%  memiliki  daya  hambat  2,8  (mm ) dan  berada dikategori lemah,  formulasi  2  dengan  konsentrasi 3%  memiliki  daya  hambat  7,6  mm  dan  berada dikategori sedang, formulasi 3 dengan konsentrasi
PHARMACON – PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,
5%  memiliki  daya  hambat  10,6  mm  dan  berada dikategori  kuat,  formulasi  4  dengan  konsentrasi 7%  memiliki  daya  hambat  12,3  mm  dan  berada dikategori  kuat.  Hal  ini  membuktikan  bahwa sediaan  sabun  cair  ekstrak  etanol  daun  sirsak memiliki  daya  hambat  mulai  dari  lemah,  sedang, dan kuat terhadap bakteri Staphylococcus aureus . Dibadingkan  dengan  penelitian  yang  dilakukan sebelumnya oleh Lili (2017) menunjukkan bahwa formulasi  sediaan  gel hand  sanitizer ekstrak etanol  daun  sirsak  dengan  konsentrasi  3%,  6% dan  9%  tidak  memiliki  daya  hambat.  Perbedaan hasil  ini  bisa  diakibatkan  karena  mutu  esktrak yang  dipengaruhi  dua  faktor  utama  yaitu  faktor biologi  dan  faktor  kimia.  Faktor  biologi  meliputi spesies  tanaman,  lokasi  tanaman  asal,  waktu pemanenan, penyimpanan bahan baku, umur serta bagian  tanaman  yang  digunakan.  Lokasi  tanaman dipengaruhi  oleh  lingkungan  seperti  tanah, atmosfir,  cuaca,  temperatur,  cahaya,  air,  senyawa organik  dan  anorganik.  Waktu  panen  juga mempengaruhi  kandungan zat  aktif  daun,  dimana kandungan  zat  aktif  mencapai  jumlah  optimal pada  saat  tanaman  akan  berbunga  (Mishra et  al., 2007). Faktor kedua yaitu faktor kimia antara lain faktor  eksternal  dan  faktor  internal.  Faktor eksternal  yang  mempengaruhi  meliputi  ukuran bahan, penyaring yang digunakan dalam ekstraksi, kandungan  logam  berat,  pestisida  pada  tanaman dan metode ekstraksi yang digunakan (Hermawan,  2007).  Berdasarkan  hasil  uji  daya hambat  antibakteri  yang  diperoleh  menunjukkan bahwa antibakteri dari F1 dengan konsentrasi 1% memiliki daya hambat yang paling kecil yaitu 2,8 mm  sedangkan  F4  dengan  konsentrasi  7% merupakan  antibakteri  yang  paling  tinggi  dari semua konsentrasi yang dibuat yaitu sebesar 12,3 mm.  Hal ini sesuai dengan pendapat Pelczar and Chan  (2005)  bahwa  semakin  tinggi  konsentrasi suatu bahan antibakteri maka aktivitas antibakterinya akan semakin kuat pula.
Adanya  aktivitas  antibakteri  dari  sediaan sabun cair ekstrak etanol daun sirsak menunjukkan
efektivitas senyawa yang
terkandung didalam ekstrak daun sirsak. senyawa aktif yang diduga memberikan aktivitas antibakteri terhadap bakteri Staphylococcus aureus yaitu senyawa flavonoid. Mekanisme kerja flavonoid  menghambat  pertumbuhan  bakteri dengan  cara  merusak  dinding  sel,  menonaktifkan kerja  enzim,  berikatan  dengan  adhesin,  dan merusak  membran  sel.  Cincin  berta  dan  gugus  – OH  pada  flavonoid  diduga  sebagai  struktur  yang
bertanggungjawab  sebagai  aktivitas  antibakteri (Cowan, 1999).
Pada penelitian ini, peneliti juga menggunakan  kontrol  positif  dan  kontrol  negatif. Penggunaan  kontrol  positif  berfungsi  sebagai kontrol  dari  zat  uji  dengan  membandingkan diameter  daerah  hambat  yang  terbentuk.  Kontrol positif  yang  digunakan  merupakan  sabun  yang sudah  beredar  dipasaran.  Berdasarkan  hasil  yang diperoleh,  daya  hambat  pada  kontrol  positif bernilai  12,5  mm  dan  kontrol  negatif  atau  basis sabun  dengan  daya  hambat  2,5  mm.  Sabun  yang beredar dipasaran yang digunakan sebagai kontrol positif  menghasilkan  daya  hambat  terhadap bakteri Staphulococcus aureus dikarenakan adanya kandungan Triclosan yang dapat memasuki  dinding  sel  bakteri  dan  mengganggu sintesis  RNA  dan  protein  bakteri  namun  lebih sering  bersifat  bakteriostatik  karena  konsentrasi yang  digunakan  rendah  (Loho et  al .,  2007). Penyebab dari basis sabun memiliki daya hambat yaitu  karena  dalam  memformulasikam  sabun  cair menggunakan  bahan  minyak  zaitun  sebagai  asam lemak.  Minyak  zaitun  memiliki  senyawa  fenolik dan  vitamin  E.  Menurut  Guenther  (1987), senyawa  fenolik  aktif  bersifat  sebagai  anti mikroorganisme  dengan  mekanisme  membentuk kompleks dengan protein sel sehingga menghambat  kerja  enzim  pada  mikroorganisme. Hal  ini  yang  membuat  basis  sabun  cair  memiliki daya hambat terhadap bakteri.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  maka  dapat disimpulkan  bahwa  formulasi  sediaan  sabun  cair ekstrak  etanol  daun  sirsak (Annona  muricata Linn ) konsentrasi  1%,  3%,  5%,  dan  7%  sudah memenuhi  syarat  mutu  sediaan  sabun  cair.  Hasil uji antibakteri sabun cair ekstrak daun sirsak dapat menghambat  bakteri Staphylococcus  aureus dengan daya hambat yang paling besar yaitu 12,3 mm pada konsentrasi 7%.

## SARAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  sediaan  sabun cair  ekstrak  etanol  daun  sirsak,  disarankan melakukan  penelitian  lebih  lanjut  untuk  uji  fisik lain  yang  belum  dilakukan  dalam  penelitian  ini serta  melakukan  penelitian  dengan  membuat esktraksi  daun  sirsak  menggunakan  metode ekstraksi  yang  lain  dan  konsentrasi  yang  lebih tinggi.
PHARMACON – PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,

## DAFTAR PUSTAKA
Badan  Standarisasi  Nasional.  1996. Standar Sabun  Mandi  Cair .  SNI  06-4085-1996. Dewan Standarisasi Nasional:  Jakarta.
Barel,  A.O.,  M.  Paye.,  H.I.  Maibach.  2001.
Handbook  of  Cosmetic  Science  and Technology.  3rd  ed .  Informa  Healthcare USA, New York.
Cowan,  M.  M.  1999.  Plant  Product  as
Antimicrobial Agent. Clinical
Microbiology Reviews, 12(4): 564-582.
Dimpudus,  S.,  P.  Yamlean.,  A.  Yudistira.  2017.
Formulasi  Sediaan  Sabun  Cair  Antiseptik
Ekstrak Etanol Bunga Pacar Air
( Impantiens  Balsamina  L. )  dan  Uji Efektivitasnya Terhadap Bakteri
Staphylococcus  aureus Secara In  Vitro . Jurnal Pharmacon . 6(3) . Guenther, E. 1987. Minyak Atsiri Jilid I . Penerbit Universitas Indonesia, Jakarta. Harborne,  J.B.  1987. Metode  Fitokimia,  Edisi  ke dua . Bandung: ITB.
Hermawan,  A.  2007.  Pengaruh  Ekstrak  Daun
Sirih (Piper betle L.) terhadap pertumbuhan  Staphylococcus  aureus  dan
Escherichia  coli  dengan  metode  Difusi Disk. Fakultas  Kedokteran  Sciences . (54)
370-381
Hernani.,  Bunasor,  T.K.,  dan  Fitriati.  2010.
Formula  Sabun  Transparan  Anti  jamur Dengan  Bahan  Aktif  Ekstrak  Lengkuas (Alpinia galanga L.Swartz.) .Bul. Litro.21(2): 192-205
Junanto,  T.,  Sutarno,  dan  Supriyadi.  2008.
Aktivitas  antimikroba  ekstrak  angsana (Pterocarpus  indicus)  terhadap  Bacillus subtilis dan Klebsiella pneumoniae. Bioteknologi 5(2): 63-69.
Korompis,  F.,  P.  Yamlean.,  W.  Lolo.  2020.
Formulasi  dan  Uji  Efektivitas  Antibakteri Sediaan  Sabun  Cair  Ekstrak  Etanol  Daun Kersen ( Muntingia Calabura L. ) Terhadap
Bakteri Staphlococcous epidermidis.
Jurnal Pharmacon . 9(1): 30-37.
Lili  W.,  B.  Mustariani.,  E.  Purmafitriah.  2017.
Formulasi  Sediaan  Gel  Hand  Sanitizer Ekstrak  Etanol  Daun  Sirsak  ( Annona Muricata Linn)  Sebagai  Antibakteri Terhadap Staphylococcus  aureus. Jurnal Farmasetis 6 (2) 47-57 Loho,  Paul,  2007. Pengaruh  Alergi  Dari Triclosan . Bogor: Institut Pertanian Bogor.
Melisa, et  al .  2015.  Uji  Daya  Hambat  Ekstrak Daun  Sirsak  (Annona  Muricata  L) Terhadap  Pertumbuhan  Staphylococcus Aureus  Secara  In  Vitro. Jurnal  Ilmiah Farmasi , UNSRAT. Vol. 4 No Mishra,  S.  K.,  Sangwan,  N.  S.,  Sangwan,  R.  S.
2007. Andrographis paniculata (kalmegh): a  review. Pharmacognosy  Reviews .  (1)
283-77.
Miller, G. T. Jr., 1975: Living in the Environment; Concepts,  Problems,  and  Alternatives, Wadsworth Publishing & Co ., Belmont. Pelczar,  M.J.  dan  Chan,  E.C.S.  2005. Dasar- Dasar  Mikrobiologi,  Jilid  I .  Penerjemah Hadiotomo,  R.S.,  Imas,  T.,  Tjitrosomo, S.S., dan Angka, S.L., UI-Press, Jakarta.
Poedjiadi,  Anna.  1994. Dasar-dasar  Biokimia . Jakarta: UI-Press. Rizky, D. N. 2013. Penetapan Kadar Alkali Bebas Pada Sabun Mandi Sediaan Padat Secara Titrimetri .  [skripsi].  Medan:  Universitas Sumatra Utara.
Sahambangung,  M.  A.,  O.S.  Datu.,  G.A.R. Tiwow.,  N.O.  Potolangi.  2019.  Formulasi Sediaan  Sabun  Antiseptik  Ekstrak  Daun Pepaya Carica
papaya.
Jurnal Biofarmasetikal Tropis . 2(1): 43-51. Susanti,  M.M  &  Guterres  A.D.A.  (2018). Pengaruh Penambahan Kalium Hidroksida (KOH) Terhadap Mutu Sabun Lunak  Berbahan  Dasar  Minyak  Goreng
Bekas. Jurnal Ilmiah Medsains , Volume 4 Nomor  01,  Desember  2018.  ISSN  2442- 8752. Politeknik Banjarnegara.
Syahrurachman, et al. 2010. Buku Ajar
Mikrobiologi  Kedokteran .  Staf  Pengajar Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia Edisi Revisi. Jakarta : Binarupa Aksara Thohari,  N.  M.,  Pestariati,  dan  Istanto,  W.  2019. Pemanfaatan Tepung Kacang Hijau (Vigna radiata L.) Sebagai Media Alternatif  NA  (Nutrient  Agar)  Untuk Pertumbuhan  Bakteri  Escherichia  coli. Jurnal Analis Kesehatan Sains , 8 (2).
Wijana,  S.,  Soemarjo,  dan  T.  Harnawi.  2009.
Studi  pembuatan  sabun  mandi  cair  dari daur  ulang  minyak  goreng  bekas  (kajian lama  pengadukan  dan  rasio  air/sabun). Jurnal  Teknologi  Pertanian. 10  (1):  54- 61.