## Journal of Scientech Research and Development Volume 5, Issue 1, June 2023
P-ISSN 2715-6974 E-ISSN 2715-5846 Open Access at: https://idm.or.id/JSCR/index.php/JSCR
BAKTERI PADA RUMPUT LAUT Kappphycus alvarezii DI PERAIRAN KAMPUS POLIKANT, DESA SATHEAN

## BACTERIA  ON  Kappphycus  alvarezii  SEAWEED  IN  POLIKANT  CAMPUS WATERS, SATHEAN VILLAGE
Yuni Irmawati 1 , Puput Nurul Hikmah Renngur 2 , Fransina Della Rahayaan 3 , Nussy Lokra Latar 4
1,2,3,4 Politeknik Perikanan Negeri Tual Email: yunipolikant@gmail.com

## INFO ARTIKEL ABSTRAK
Kata kunci Bakteri, K.  alvarezii, Rumput Laut, Perairan. Aktivitas  pembudidayaan  rumput  laut  berkurang  bahkan  terhenti, terutama pada musim pancaroba dengan intensitas hujan yang tinggi disertai  angin  kencang,  menyebabkan  perubahan  kondisi  fisik  dan kimia  perairan.    Hal  ini  mengakibatkan  rumput  laut  menjadi  stres, sehingga  mudah  terserang  patogenitas  bakteri  karena  menurunnya sistem  imun  tubuh,  dimana  thalus  perlahan  akan  berubah  warna menjadi putih, lunak, rapuh dan mudah patah.  Faktor pemicu akibat perubahan  kondisi  lingkungan  perairan  tidak  dapat  dikendalikan, akan tetapi perkembangan dan infeksi sekunder dari bakteri patogen dapat  dicegah  dan  ditangani  apabila  diketahui  jenis  bakterinya. Penelitian ini bertujuan untuk mengidentifikasi bakteri pada rumput laut K.  alvarezii yang  terpapar  ice-ice,  sehat  dan  air  pemeliharaan. Sampel  diisolasi  dan  di  tanam  pada  media  TSA  dan  TCBS, selanjutnya  dilakukan  uji  pewarnaan  gram  dan  uji  biokimia  untuk menentukan  jenis  bakteri.    Hasil  identifikasi,  didapatkan  lima  (5) jenis  bakteri,  yaitu V.  alginolyticus , V.  fluvialis , V.  parahaemolyticus , Aeromonas sp., dan Pasteurella sp.
Copyright © 2023 JSR. All rights reserved .

## ARTICLE INFO ABSTRACT
Keywords: Bacteria, K. alvarezii, Seaweed, Waters. Seaweed cultivation activities decrease or even stop, especially during the transition season with high rain intensity accompanied by strong winds, causing changes in the physical and chemical conditions of the waters. This causes seaweed to become stressed, making it susceptible to  bacterial  pathogenicity  due  to  a  decrease  in  the  body's  immune system, where the thallus slowly turns white, soft, brittle and easily broken.  Trigger  factors  due  to  changes  in  aquatic  environmental conditions  cannot  be  controlled,  however,  the  development  and secondary  infection  of  pathogenic  bacteria  can  be  prevented  and handled if the type of bacteria is known. This study aims to identify bacteria in K. alvarezii exposed to ice-ice, healthy and rearing water. Samples  were  isolated  and  planted  on  TSA  and  TCBS  media,  then gram staining and biochemical tests were carried out to determine the type  of  bacteria.  From  the  identification  results,  five  (5)  types  of bacteria  were  obtained,  namely  V.  alginolyticus,  V.  fluvialis,  V. parahaemolyticus, Aeromonas sp., and Pasteurella sp.
Copyright © 2023 JSR. All rights reserved .

## PENDAHULUAN
Rumput  laut Kappaphycus alvarezii merupakan  salah  satu  komoditi  perikanan  yang memiliki  potensi  besar  untuk  dikembangkan,  karena  pemanfaatannya  cukup  luas, baik untuk bahan pangan, maupun sebagai bahan baku berbagai industri.  Selain itu, kelebihan  dalam  pembudidayaan K.  alvarezii ini  adalah  bahan  baku  yang  mudah didapat  dengan  harga  yang  relatif  terjangkau,  teknologi  sederhana,  waktu  masa panen yang relatif singkat serta penanganan pascapanen yang mudah.
Perairan  di  sekitar  kampus  Politeknik  Perikanan  Negeri  Tual  (Polikant),  Desa Sathean, Kabupaten Maluku Tenggara,  sering dijadikan sebagai  lokasi  budidaya K. alvarezii dengan sistem long line.  Akan tetapi pada waktu-waktu tertentu, aktivitas pembudidayaan  rumput  laut  berkurang  bahkan  terhenti,  terutama  pada  musim pancaroba dengan intensitas hujan yang tinggi disertai angin kencang, menyebabkan perubahan  kondisi  fisik  dan  kimia  perairan.    Hal  ini  mengakibatkan  rumput  laut menjadi  stres,  sehingga  mudah  terserang  patogenitas  bakteri  karena  menurunnya sistem  imun  tubuh,  dimana  thalus  perlahan  akan  berubah  warna  menjadi  putih, lunak,  rapuh  dan  mudah  patah.  Fitrian  (2015)  setiap  perubahan  lingkungan  yang ekstrim  menyebabkan  stress  pada  organisme  perairan  sehingga  berpengaruh terhadap turunnya status kesehatan rumput laut.
Faktor  pemicu  akibat  perubahan  kondisi  lingkungan  perairan  tidak  dapat dikendalikan, akan tetapi perkembangan dan infeksi sekunder dari bakteri patogen dapat  dicegah  dan  ditangani  apabila  diketahui  jenis  bakterinya.  Untuk  itu  perlu dilakukan penelitian tentang jenis bakteri rumput laut K. alvarezii baik yang terpapar
ice-ice, sehat maupun dari air pemeliharaan, sehingga dapat dijadikan sebagai bahan rujukan untuk pencegahan maupun penanganan terhadap patogenitas bakteri.

## METODE

## Alat dan Bahan
Penelitian ini dilaksanakan pada bulan November-Desember. Sampel diperoleh dari rumput  laut K. alvarezii yang  dibudidayakan  di  perairan  sekitar  dermaga  Kampus Polikant,  Desa  Sathean.  Sampel  dianalisis  pada  Laboratorium  Mikrobiologi, Politeknik Perikanan Negeri Tual.
Peralatan  yang  digunakan  antara  lain;  erlenmeyer,  tabung  reaksi, petri  dish,  beaker glass, gelas ukur, objek glass, cover glass , spatula, lampu bunsen, laminary flow, mikro pipet,  jarum  ose,  bunsen,  botol  steril,  mikroskop,  inkubator,  timbangan  analitik, hotplate stirrer, oven, autoclave dan Identification Kits.
Bahan  yang  digunakan antara  lain;  sampel  rumput  laut K. alvarezii yang  sehat  dan terpapar ice-ice, serta air lokasi budidaya, TSA ( Trypticase Soy Agar ), TCBS ( Thiosulfat Citrat Bilesalt Sucrose ), pewarnaan Gram, (kristal violet, lugol iodine, safranin), bahan uji  biokimia  (media  Oksidase-Fermentasi/OF),  Media  MR-VP/Methyl  red-Voges Proskauer, Citrat/Simmons Citrat Agar, reduksi nitrat, uji karbohidrat, Sim, larutan fisiologis, akuades, inrofloks,  aquades, alkohol, kapas, alumunium foil dan tissue.

## Metode
Sterilisasi  peralatan  dengan  menggunakan  oven  pada  suhu  97 0 C  dan  sterilisasi bahan  menggunakan  autoclave  suhu  121 0 C  tekanan  1  atm.    Pembuatan  media dilakukan dengan melarutkan media TSA sebanyak 16 gr dan ditambahkan 400 ml aquades.  Media  TCBS  sebanyak  8,9  gr,  dan  ditambahkan  100  ml  aquades, dipanaskan  pada  hotplate,  diaduk  dengan  magnetik  stirrer  hingga  berbuih. selanjutnya disterlilkan pada autoclave suhu 121 0 C, tekanan 1 atm, didinginkan dan tuang ke dalam cawan petri dengan ketebalan 3-5 mm serta diinkubasi dengan suhu ruang 27 0 C.
Sampel rumput laut yang diambil adalah bagian thalus yang masih sehat, dan yang terpapar  ice-ice  diisolasi  dengan  cara  mengoreskan  jarum  ose  pada  bagian  thalus, dan digoreskan kembali pada media TCBSA dan TSA. Sampel air diambil sebanyak 0,1  ml,  dituang  ke  atas  media,  diratakan  dengan  spatula.  Selanjutnya  diinkubasi dalam inkubator pada suhu 28 0 C-30 0 C selama 24-48 jam.
Bakteri  yang  tumbuh  setelah  dikultur  selama  24-48  jam,  dimurnikan  pada  media TCBS atau TSA, diinkubasi pada inkubator pada suhu 28 0 C – 30 0 C selama 24-48 jam. Selanjutnya  dilakukan  pengujian  pewarnaan  Gram,  uji  biokimia  (Oksidase- Fermentasi/OF, MR-VP/Methyl red-Voges Proskauer, Citrat/Simmons Citrat Agar, reduksi  nitrat,  karbohidrat,  dan  Sim).    Hasil  yang  didapatkan,  disesuaikan  dengan pedoman pada Manual of Determinative Bacteriology (Brenner, et al ., 2005).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  pewarnaan  gram  didapatkan  bahwa  semua  isolat  bakteri  merupakan  bakteri gram negatif.  Bakteri gram negatif terjadi karena adanya pengikatan warna safranin (warna  merah  muda)  pada  struktur  dinding  sel  bakteri  yang  diamati  dengan mikroskop pada pembesaran 100x, dibandingkan dengan warna kristal violet (warna ungu)  (Irmawati  &  Dangeubun,  2014  ;  Irmawati  &  Sudirjo,  2017b).    Perbedaan  ini dikarenakan  kandungan  dari  dinding  sel,  dimana  bakteri  gram  positif  dinding selnya  tersusun  atas  PG  (Peptidoglikan)  terdapat  senyawa  yang  disebut  asam teikoat.  Bakteri  gram  negatif  mengandung  PG  (Peptidoglikan)  dalam  jumlah  yang jauh  lebih  sedikit,  akan  tetapi  di  bagian  luar  PG  terdapat  membran  luar  yang tersusun  atas  lipoprotein  dan  fosfolipid,  serta  mengandung  lipopolisakarida. Perbedaan komposisi dinding sel ini, menyebabkan bakteri gram positif dan bakteri gram negatif memiliki ketahanan yang berbeda (Rini & Rochmah, 2020).
Hasil  identifikasi  jenis  bakteri,  baik  pada  rumput  laut  yang  terpapar  ice-ice,  sehat maupun air pemeliharaan, disajikan pada tabel berikut:

## Tabel 1. Jenis Bakteri pada Rumput Laut dan Air Pemeliharaan
Sampel Jenis Bakteri Rumput laut terpapar ice-ice V. alginolyticus V. fluvialis Aeromonas sp. Pasteurella sp. Rumput laut sehat V. alginolyticus V. fluvialis V. parahaemolyticus Pasteurella sp. Air V. alginolyticus V. fluvialis V. parahaemolyticus Aeromonas sp. Pasteurella sp.
Pada  Tabel  1.  menunjukkan  bahwa  bakteri  pada  semua  sampel  beragam,  dengan jumlah  terbanyak  pada  sampel  air,  sebanyak  lima  (5)  jenis  bakteri,  yakni V. alginolyticus , V.  fluvialis , V.  parahaemolyticus , Aeromonas sp.,  dan Pasteurella sp. Rumput  laut  sakit,  mendapatkan    bakteri V. alginolyticus , V. fluvialis, Aeromonas sp dan Pasteurella sp.  Sedangkan  rumput  laut  sehat,  mendapatkan  bakteri V. alginolyticus , V. parahaemolyticus dan Pasteurella sp.  Jenis bakteri yang beragam pada semua sampel, diduga karena kondisi perairan mengandung nutrisi yang baik untuk pertumbuhan  bakteri.    Selain  karena  faktor  kualitas  fisik-kimia  perairan  yang berubah akibat peralihan musim pancaroba,  kemungkinan juga disebabkan adanya bahan-bahan  organik  yang  terbawa  oleh  aliran  air  hujan  dari  daratan  masuk  ke dalam perairan pada saat curah hujan tinggi.
Jenis bakteri yang didapatkan, beberapa diantaranya juga ditemukan pada penelitian Irmawati & Sudirjo (2015) hasil isolasi dari rumput laut K. alvaezii di perairan Desa Taar, Kota Tual, yakni V. vulvinicus , Pseudomonas sp. dan Pasteurella sp.  Selanjutnya bakteri V. ordalii, V. vulvinicus , Pseudomonas sp., Aeromonas sp., Pasteurella sp. isolasi K.  alvaezii di  perairan  Desa  Sathean,  Kabupaten  Maluku  Tenggara  (Irmawati  & Sudirjo,  2017b).    Faktor-faktor  yang  mempengaruhi  keberagaman  hasil  identifikasi bakteri  pada  rumput  laut,  dapat  dikarenakan  oleh  perbedaan  jenis  rumput  laut, lokasi,  waktu  pengambilan  sampel  (musim  tanam  atau  pancaroba),  kualitas  fisik- kimia perairan, teknik isolasi dan metode identifikasi yang digunakan.
Bakteri yang didapatkan, tidak semunya berperan sebagai patogen terhadap rumput laut K.  alvaezii, hal  ini  dikarenakan  kemungkinan  bakteri  menempel  ataupun bersimbion  dengan  rumput  laut.    Beberapa  penelitian  terkait  infeksi  maupun patogenitas bakteri pada rumput antara lain, Largo, et al ., (1998); Irmawati & Sudirjo,
(2017a)  jenis  bakteri  patogen  yang  menyebabkan  penyakit  ice-ice  pada  budidaya rumput  laut  antara  lain  bakteri Vibrio sp.  dengan  tingkat  infeksi  atau  patogenitas tertinggi  pada K.  alvaezii varietas  hijau. V.  alginolyticus dengan  tingkat  serangan bakteri pada rumput laut sebesar 80% (Hanna, et al ., 2006; Agustina & Marlan, 2014). V.  fluvialis patogen  pada  rumput  laut  (Arisandi, et  al .,  2017).  Bakteri Vibrio , Pseudomonas dan Bacillus merupakan  bakteri  patogen  oportunistik,  sehingga berpeluang menyebabkan penyakit ice-ice (Ihsan, 2022).   Sedangkan untuk bakteri V. parahaemolyticus menjadi patogen oportunistik pada udang vanname (Selvin, et al ., 2015). Aeromonas hydrophila penyebab penyakit Motile Aeromonas Septicemian (MAS) pada ikan baung, lele (Farhana, et al ., 2015; Muslikha, et al ., 2016).  Bakteri Pasteurella sp.  terkonfimasi  sebagai  penyebab  infeksi  pada  hewan,  diantaranya  mencit  dan ayam (Supar, et al ., 2000), sapi (Besung, et al ., 2016).
Keberadaan penyakit ice-ice pada rumput laut, berkaitan dengan interaksi kompleks antara  lingkungan,  rumput  laut,  dan  mikroorganisme  oportunistik  (Egan, et  al ., 2014).  Ketidakseimbangan  lingkungan  perairan  pada  saat  pergantian  musim  atau kondisi lingkungan yang kurang mendukung, meningkatkan aktivitas virulensi dari bakteri  patogen ( Mun˜oz , et al ., 2004; Msuya, 2007).  Faktor virulensi  menunjukkan peranan  penting  dalam  patogenitas  penyakit  pada  bakteri  patogen,  dengan  fungsi utamanya  kompetensi,  adherence,  sintesis  and  ekspor  kapsul,  dan  menghindari respon imun (Aski & Tabatabaei, 2016).  Bakteri gram negatif memproduksi sejumlah toksin-toksin  dan  faktor-faktor  virulensi  ekstracelluler  yang  membuatnya  menjadi sebuah  patogen  yang  berat  ketika  sistem  imune  dirusak  (Kaufman, et al.,  2002). Respon inang terhadap infeksi bakteri patogen ditandai dengan terganggunya fungsi tubuh hingga menimbulkan penyakit (Aris, 2011).

## KESIMPULAN
Jenis bakteri  yang diisolasi  pada sampel rumput laut K. alvarezii yang terpapar ice- ice,  sakit  dan  air  pemeliharaan,  didapatkan  lima  (5)  jenis  bakteri,  yaitu V. alginolyticus , V. fluvialis , V. parahaemolyticus , Aeromonas sp., dan Pasteurella sp.

## DAFTAR PUSTAKA
Agustina  S.  S  &  Marlan.  (2014).  Identifikasi  Tingkat  Serangan  Bakteri  Yang Menginfeksi  Komoditi  Rumput  Laut  Di  Perairan  Teluk  Tolo  Dan  Teluk Tomini Kabupaten Banggai Sulawesi Tengah. Jurnal Balik Diwa , 5 (2). 34-39.
Aris  M. (2011).   Identifikasi, Patogenisitas  Bakteri  dan  Pemanfaatan Gen 16S-rRNA untuk  Deteksi  Penyakit Ice-Ice Pada  Budidaya  Rumput  Laut  ( Kappaphycus alvarezii ).  Disertasi.  Institute Pertanian Bogor.  152 Hal.
Arisandi A., Wardani M. K., Badami K., & Araninda G. D. (2017). Dampak Perbedaan Salinitas  Terhadap  Viabilitas  Bakteri  Vibrio  fluvialis  [the  Impact  of  Salinity Difference  on  Bacteria  Viability  Vibrio  fluvialis]. Jurnal  Ilmu  Perikanan  dan Kelautan , 9 (2). 91-97.
Aski  H.  S  &  Tabatabaei  M.  (2016).  Occurrence  of  Virulence-Associated  Genes  in Pasteurella  multocida  Isolates  Obtained  from  Different  Hosts. Microbial Pathogenesis , 96 . 52-57.
Brenner D. J., Krieg N. R., Staley J. T. & Garrity G. M. (2005).  Bergey’s Manu al of Systematic  Bacteriology.  2 nd ed.  Vol.  2.  The  Proteobacteria.  Part  B. Gammaproteobacteria. Springer. Michigan State University. USA.
Besung I. N. K., K. T. PG., A. L. T. Rompis., & I. G. K. Suarjana.  (2016). Prevalensi Pasteurella multocida Pada Sapi Bali di Bali. Buletin Veteriner Udayana , 8 (2). 145-150.
Egan, S., Fernandes, N. D., Kumar, V., Gardiner, M., & Thomas, T. (2014). Bacterial pathogens,  virulence  mechanism  and  host  defence  in  marine  macroalgae. Environmental Microbiologi , 16 (4), 925-938.
Farhana  A.  A.,  Saad,  C.R.,  Kamarudin  M.  S.,  &  Daud  H.  M.  (2015).  Growth performance  and  disease  resistance  towards Aeromonas  hydrophila in Hemibagrus  nemurus  (Valenciennes,  1840)  fingerlings  through  probiotic feeding. Iranian Journal of Fisheries Sciences , 14 (4). 846-856.
Fitrian T. (2015).  Hama Penyakit (Ice-Ice) Pada Budidaya Rumput Laut Studi Kasus: Maluku Tenggara. Oseana . Vol. XL (4), 1-10.
Hanna P. J., Altmann K., Chen D., Smith A, Cosic S., Moon P. C. & Hammond L. S. (2006). Development of Monoclonal Antibodies for the Rapid Identification of Epizootic Vibrio species. Fish Disease 15:63- 69.
Ihsan B., Yulma., & E. Retnaningrum. (2022).  Keanekaragaman Bakteri Pada Rumput
Laut  ( Kappaphycus  alvarezii )  di  Perairan  Pantai  Amal. Saintek  Perikanan: Indonesian Journal of Fisheries Science and Technology , 18 (4), 229-233.
Irmawati Y. & Dangeubun J. L.  (2014). Bakteri Pada Saluran Pencernaan Ikan Nila
( Oreochromis niloticus ). Jurnal ilmiah Agribisnis dan Perikanan, 7 (2) . 36-38.
Irmawati  Y & Sudirjo F.  (2015).  Bacteria on Kappaphycus alvarezii Seaweed in Taar Village,  Tual  City.    Poster  Presentation. Proceeding  of  The 1st International Conference on Applied Marine Science and Fisheries Technology (MSFT) .  Langgur- Kei Islands. 194-196.
Irmawati Y & Sudirjo F.  (2017, Oktober). Infection Vibrio sp. Bacteria on Kappaphycus Seaweed  Varieties  Brown  and  Green.    In IOP  Conference  Series : Earth  an Environmental Science (Vol 89, No 1, p. 012016).  IOP Publishing.
Irmawati  Y  &  Sudirjo  F.    (2017,  November).    Jenis-Jenis  Bakteri  Yang  Menginfeksi Rumput  Laut  ( Kappaphycus  alvarezii )  di  Perairan  Desa  Sathean,  Kabupaten Maluku  Tenggara. Prosiding  Seminar  Nasional  Inovasi  IPTEK  Perikanan  dan Kelautan I . 349-355.
Mun˜oz J., Pelegrin Y. F., Robledo D. (2004). Mariculture of Kappaphycus alvarezii (Rhodophyta,  Solieriaceae)  color  strains  in  tropical  waters  of  Yucata´n, Me´xico. Aquaculture, 239 (1-4), 161-177.
Kaufmann  S.  H.  E.,  Sher  A  &  Ahmed  R.  (2002). Immunology  of  Infection  Disease . Washington, DC: ASM Press.
Largo  D.  B.,  Fukami  K.,  Adachi  M  &  Nishijima  T.  (1998).  Immunofluorescent Detection  of  Iceice  Disease-Promoting  Bacterial  Strain  Vibrio  sp.  P11  of  the Farmed  Macroalga,  Kappaphycus  alvarezii  (Gigartinales,  Rhodophyta). Journal of Marine Biotechnology , 6 (3), 178-182.
Muslikha.,  Pujiyanto  S.,  Jannah  S.  N.,  Novita  H.    (2016).    Isolasi,  Karakterisasi, Aeromonas  hydrophila dan  Deteksi  Gen  Penyebab  Penyakit Motile  Aeromonas Septicemia (MAS) Dengan 16S rRNA dan Aerolysin Pada Ikan Lele ( Clarias sp.). Jurnal Biologi , 5 (4), 1-7.
Rini, C. S & Rochmah, J. (2020). Bakteriologi Dasar. UMSIDA Press . Sidoarjo.
Selvin,  J.,  Ninawe  A.S.,  Meenatchi  R  &  Kiran  G.  S.  (2015).  Control  of  Pathogenic Vibrios  in  Shrimp  Aquaculture  Using  Antiinfectives  from  Marine  Natural Products. Nutricion Acuicola . 102-141.
Supar., Y. Setiadi., Djaenuri., N. Kurniasih, & B. Poerwadikarta.  (2000).  Patogenesis Pasteurella multocida Isolat  Lokal  Pada  Mencit  dan  Ayam. Jurnal Imu Ternak dan Veteriner , 5 (1). 59-64.