## PEMANFAATAN BEBERAPA KALDU HEWAN SEBAGAI BAHAN FORMULA CAIR
Pseudomonas fluorescens P60 UNTUK MENGENDALIKAN Sclerotium rolfsii PADA TANAMAN MENTIMUN
THE USE OF SEVERAL ANIMAL BROTHS AS LIQUID FORMULA FOR Pseudomonas fluorescens P60 FOR CONTROLLING Sclerotium rolfsii ON CUCUMBER
Loekas Soesanto * , Endang Mugiastuti, dan Ruth Feti Rahayuniati Fakultas Pertanian Universitas Jenderal Soedirman, P.O. Box 125, Purwokerto 53101 *Penulis untuk korespondensi. E-mail: lukassus26@gmail.com

## ABSTRACT
A research aiming at knowing the potency of several animal broths as organic liquid formula of Pseudomonas fluorescens P60, soaking period of Sclerotium rolfsii sclerotia, and its application method on cucumber stem-end rot was done. Completely randomized design and randomized block design both arranged by factorial were used for in vitro and in planta tests, respectively. The first factor was six kinds of animal broth, i.e., golden snail, local chicken, broiler chicken, catfish, cow bone, and rat. The second one for in vitro test was the soaking period in the Pseudomo- nas fluorescens P60 formula, i.e., 0, 1, 10, and 100 hours and for in planta one was application methods, i.e., seed soa- king or crop spraying. Result of the research showed that the best animal broth as liquid formula for Pseudomonas fluorescens P60 was golden snail broth indicated by suppression of sclerotial germination up to 97.4% after soaking for 100 hours. The best application method to suppress the disease was spraying method showed by suppressed of sclerotial germination, longer incubation period, and suppressed disease incidence and sclerotial late population of 55.79, 147.35, 66.67, and 59.68%, repectively. Spraying the formula could also increase crop height difference, fresh and dry weight of crop, fresh and dry weight of root, and root length to 146.83, 86.62, 112.5, 87.88, 140, and 159.68%, respectively.
Key words: animal broth, cucumber, Pseudomonas fluorescens P60, Sclerotium rolfsii

## INTISARI
Penelitian dengan tujuan untuk mengetahui potensi beberapa kaldu hewan sebagai formula cair organik Pseudo- monas fluorescens P60, lama perendaman sklerotium Sclerotium rolfsii , dan cara aplikasinya terhadap penyakit busuk pangkal batang mentimun dilakukan. Rancangan acak lengkap faktorial dan rancangan acak kelompok faktorial digu- nakan dalam penelitian in vitro dan in planta . Faktor pertama yang diuji adalah enam jenis kaldu yang terdiri atas kaldu keong mas, ayam kampung, ayam potong, ikan lele, tulang sapi, dan tikus. Faktor kedua pada penelitian in vitro adalah lama perendaman dalam formula kaldu Pseudomonas fluorescens P60 selama 0, 1, 10, dan 100 jam dan pada in planta adalah cara aplikasi terdiri atas rendam benih atau siram. Hasil penelitian menunjukkan bahwa kaldu hewan terbaik sebagai bahan formula cair Pseudomonas fluorescens P60 adalah kaldu keong mas, yang ditunjukkan dengan penekanan perkecambahan sklerotium sebesar 97,4% pada perendaman 100 jam. Aplikasi formula cair terbaik untuk penekanan penyakit busuk pangkal batang adalah siram, yang ditunjukkan oleh penekanan perkecambahan sklero- tium, memperlama masa inkubasi, serta penekanan kejadian penyakit dan populasi akhir sklerotium masing-masing ad- alah 55,79, 147,35, 66,67, dan 59,68%. Pemberian formula cair juga mampu meningkatkan selisih tinggi tanaman, bobot basah dan kering tanaman, bobot basah dan kering akar, dan panjang akar berturut-turut sebesar 146,83, 86,62, 112,5, 87,88, 140, dan 159,68%.
Kata kunci: kaldu hewan, mentimun, Pseudomonas fluorescens P60, Sclerotium rolfsii

## PENGANTAR
Mentimun  ( Cucumis  sativus L.)  merupakan salah satu jenis sayuran dari keluarga timun-timunan (Cucurbitaceae). Tanaman ini menghasilkan buah yang  dipanen  ketika  belum  masak  benar  untuk dijadikan sayuran atau penyegar, tergantung jenis- nya (Linayanti et al ., 2000). Badan Pusat Statistik (2009)  mencatat  bahwa  dari  tahun  2006  sampai 2009, produksi mentimun secara nasional menurun,
yaitu dari 598,890 ton hingga 575,995 ton. Penu- runan ini terjadi karena adanya alih fungsi lahan maupun adanya serangan Organisme Pengganggu Tumbuhan (OPT). Salah satu OPT penting yang menyerang  tanaman  mentimun  adalah  jamur Sclerotium rolfsii Sacc., penyebab penyakit busuk pangkal  batang  (Semangun,  2008).  Patogen  ini dapat membentuk sklerotium sebagai struktur isti- rahat atau dorman, sehingga sukar untuk dikenda-
Jurnal Perlindungan Tanaman Indonesia, Vol. 17, No. 1, 2011: 7–17
likan, karena dapat bertahan di dalam tanah selama bertahun-tahun  walaupun  tidak  ada  inang  dan lingkungan yang tidak sesuai dengan pertumbuhan- nya (Agrios, 2005).
Salah satu alternatif pengendalian penyakit yang aman dan ramah lingkungan adalah dengan meng- gunakan agensia hayati, salah satunya adalah bak- teri Pseudomonas fluorescens P60 (Soesanto, 2000; Soesanto & Termorshuzen, 2001). Pseudomonas fluorescens P60 sudah banyak diaplikasikan untuk mengendalikan  beberapa  patogen  tular-tanah, seperti Fusarium oxysporum f.sp. capsici pada cabe (Maqqon et al., 2006), F. oxysporum f.sp. allii pada bawang merah (Santoso et al ., 2007), F. oxysporum
f.sp. gladioli pada bunga gladiol (Soesanto et al. , 2008; Wardhana et al ., 2009), dan F. oxysporum f.sp. lycopersici pada  tomat  (Mugiastuti et  al., 2010). Akan  tetapi,  aplikasi  agensia  hayati P . fluorescens P60  di  lapangan  masih  mengalami kendala, terutama formulasi agensia hayati dengan bahan  pembawanya. Formulasi  umumnya  masih tergolong mahal, sukar didapat, dan sukar diterap- kan di lapangan (Hanudin et al ., 2004; Schisler et al ., 2004). Oleh karena itu, perlu adanya formulasi yang murah, mudah didapat dan dapat diterapkan. Formulasi  cair  organik  yang  berasal  dari  kaldu hewan  berpotensi  untuk  dikembangkan  sebagai bahan pembawa P. fluorescens P60 untuk formulasi, karena  kaldu  mengandung  nutrisi  yang  tinggi. Hal  ini  didukung  oleh  Sulistiono  (2010),  yang menyatakan bahwa dalam kaldu banyak mengan- dung protein.
Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui potensi  formula  cair  berbahan  pembawa  kaldu hewan untuk formulasi Pseudomonas fluorescens P60 , pengaruh lama perendaman sklerotium, dan cara aplikasi terbaik P. fluorescens P60 dalam for- mula  cair  dalam  mengendalikan  penyakit  busuk pangkal batang.

## BAHAN DAN METODE
Penelitian  ini  dilaksanakan  dalam  dua  tahap, yaitu in vitro di Laboratorium Perlindungan Tanam- an dan in planta di rumah kasa Fakultas Pertanian Universitas  Jenderal  Soedirman,  selama  empat bulan, dilaksanakan dari Mei sampai Agustus 2010.
Penyiapan Isolat Isolat  jamur S.  rolfsii (koleksi  Laboratorium Penyakit Tumbuhan, Fakultas Pertanian, Universi- tas Jenderal Soedirman) ditumbuhkan pada medium
PDA dan diinkubasi selama empat hari pada suhu kamar. Selanjutnya, miselium dipindah secara asep- tis pada medium potongan seresah jerami steril dan diinkubasi.  Sklerotium  yang  terbentuk  dipanen untuk digunakan di dalam penelitian ini. Isolat bak- teri   antagonis P. fluorescens P60 (Soesanto, 2000) ditumbuhkan pada medium King’s B dan diinkubasi selama 2×24 jam pada suhu kamar.

## Penyiapan Formula Cair
Formula cair disiapkan dari kaldu hewan, yang dibuat  dengan  merebus  daging  hewan  uji,  yaitu keong mas (setelah dibuang cangkangnya), ayam kampung dan ayam potong (setelah dibersihkan), ikan lele (setelah dibersihkan), tulang sapi, dan tikus (setelah dibersihkan), masing-masing sebanyak 1 kg dalam 4 l air sampai mendidih, dan masing-masing ditambah terasi 8 g (Septiani, 2010). Setelah men- didih, masing-masing larutan kaldu yang terbentuk disaring  dan  langsung  dimasukkan  ke  dalam masing-masing  jerigen  steril  dan  ditutup  serta dibiarkan sampai dingin. Selanjutnya, 200 ml/l sus- pensi P.  fluorescens P60  dimasukkan  ke  dalam masing-masing jerigen secara aseptis, ditutup rapat, disimpan pada suhu kamar, dan sesering mungkin dikocok sampai waktu diperlukan.
Penyiapan Medium Tanam Medium  tanam  terdiri  atas  campuran  tanah, pasir,  dan  pupuk  kandang  dengan  perbandingan 1:1:1 (b/b/b). Campuran tersebut diuap-panaskan selama 30 menit dan dimasukkan ke dalam polibag.

## Penyiapan Tanaman Mentimun
Benih mentimun (merk Panah Merah) direndam terlebih dahulu dalam air steril selama 20 menit,  ke- mudian direndam dalam formula cair P. fluorescens P60 selama 30 menit atau langsung ditanam pada medium tanam yang telah disiapkan, sesuai dengan perlakuan.
Pemberian Perlakuan Infestasi sklerotium S. rolfsii dilakukan sehari sebelum  tanam,  dengan  menambahkan  masing- masing 10 sklerotium ke lubang tanam. Sklerotium dimasukkan ke kantung kain trico berpori 0,1 mm. Perlakuan formula cair P. fluorescens P60 diberikan dalam dua cara. Cara pertama, formula disiramkan ke lubang tanam sesaat sebelum tanam sebanyak 10 ml  setiap  lubang  tanam  dengan  kerapatan  10 8 upk/ml. Cara kedua dengan perendaman benih men- timun  selama  20  menit  dalam  formula  tersebut sesaat sebelum tanam, yang benihnya kemudian di- tiriskan dan ditanam dalam medium tanam.
Jurnal Perlindungan Tanaman Indonesia                                                                Vol. 17 No. 1 8
Rancangan Percobaan Penelitian in vitro . Rancangan yang digunakan adalah Rancangan Acak Lengkap (RAL) faktorial. Faktor pertama yang diuji adalah jenis formula cair organik, terdiri atas enam jenis kaldu dan kontrol, yaitu kontrol air steril (K), kaldu keong mas (F1), kaldu ayam kampung (F2), kaldu ikan lele (F3), kaldu ayam potong (F4), kaldu tulang sapi (F5), dan kaldu tikus (F6). Faktor kedua yang diuji adalah lama  perendaman  sklerotium  dalam  formula P. fluorescens P60, yaitu 0 jam (sesaat sampai basah merata) (W0), 1 jam (W2), 10 jam (W3), dan 100 jam  (W4).  Jumlah  kombinasi  perlakuan  ada  28, masing-masing perlakuan diulang empat kali . Penelitian in  planta . Rancangan  percobaan yang digunakan adalah Rancangan Acak Kelompok Faktorial (RAK) faktorial. Faktor pertama adalah jenis formula cair organik, terdiri atas enam jenis kaldu sesuai penelitian in vitro dan kontrol sebanyak dua perlakuan (kontrol positif dengan air steril dan kontrol  negatif  dengan  fungisida  berbahan  aktif mancozeb) . Faktor kedua adalah cara aplikasi, me- liputi siram (A1) dan rendam benih (A2). Kombi- nasi kedua faktor berjumlah 16 dan setiap perlakuan diulang tiga kali.
Variabel Pengamatan Penelitian in vitro . Persentase perkecambahan sklerotium dihitung dengan rumus (R ahayu, 2008):
Keterangan: P = perkecambahan (%), a = jumlah sklerotium  yang  berkecambah,  dan  b  =  jumlah keseluruhan sklerotium.
Penelitian in planta . Variabel pengamatan in planta meliputi: masa inkubasi, kejadian penyakit, populasi akhir sklerotium S. rolfsii , kepadatan akhir P. fluorescens P60, selisih tinggi tanaman, panjang akar, bobot basah tanaman, bobot kering tanaman, bobot basah akar, dan bobot kering akar. Perhitung- an kejadian penyakit menggunakan rumus (Sinaga, 2006):
P = α × 100% b KP = n × 100% N
Soesanto et al .: Pemanfaatan Kaldu Hewan sebagai Bahan Formula Cair Pseudomonas fluorescens P60 9
Keterangan: KP = Kejadian penyakit (%), n = Jum- lah tanaman yang terserang, N = Jumlah tanaman yang diamati.

## Analisis Data
Data  yang  diperoleh  dianalisis  dengan  uji  F untuk mengetahui pengaruh dari perlakuan yang dicoba. Apabila berbeda nyata, dilanjutkan dengan
DMRT  ( Duncan’s  Multiple  Range  Test ) dengan tingkat kesalahan 5%.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Penelitian In vitro
Hasil  analisis  statistika  perlakuan  tunggal perkecambahan sklerotium menunjukkan berbeda nyata antara perlakuan dengan kontrol (Tabel 1), tetapi tidak berbeda nyata antar-formula. Namun demikian,  secara  umum  formula  terbaik  dalam menekan  perkecambahan  sklerotium  adalah  F1 yaitu kaldu keong mas sebesar 43,1% atau sebesar 55,79% jika dibandingkan dengan kontrol. Semen- tara perkecambahan pada F5, F3, F2, F4, F6, dan K masing-masing sebesar 48,1; 48,8; 50; 50; 53,1; dan 97,5%. Tingginya penekanan perkecambahan sklerotium dalam formula kaldu keong mas diduga pada formula tersebut antagonis dapat tumbuh baik karena nutrisi (protein) yang dibutuhkan tersedia, sehingga perkembangan dan pertumbuhannya baik.
Hal  ini  sejalan  dengan  pendapat  Sulistiono (2010),  yang  menyatakan  bahwa  dalam  kaldu banyak mengandung protein, bahkan kandungan protein dalam keong dapat mencapai 16–50%. Data dari Dinas Peternakan dan Perikanan Jakarta Pusat (1992) menyebutkan, dalam 100 g daging ayam antara lain mengandung 18 g protein. Kandungan protein dalam 100 g daging ikan lele sebesar 11,2 g (Direktorat Jenderal Perikanan Budidaya, 2010). Astawan (2004) menyatakan, komposisi daging re- latif mirip satu sama lain, daging sapi kandungan proteinnya yang berkisar 15–20% dari berat bahan, dan kadar kolesterol daging sekitar 500 mg/100 g. Sementara  nilai  protein  daging  tikus  seimbang dengan  daging  sapi  atau  ayam,  sementara  kadar lemaknya lebih rendah (Tempo, 1978).
Berdasarkan  analisis  statistika  terhadap  per- lakuan  tunggal  lama  perendaman  sklerotium, menunjukkan  hasil  yang  berbeda  sangat  nyata. Waktu yang paling baik dalam menekan perkecam- bahan sklerotium, yaitu perendaman selama 100 jam, kemudian diikuti perendaman 10 jam, dan 1 jam  (Gambar  1).  Hal  ini  karena  semakin  lama sklerotium  direndam,  maka  faktor  penghambat menjadi  lebih  besar  pula,  yaitu  antibiotika  yang menempel pada sklerotium (Soesanto et al ., 2003). Antibiotika tersebut kemudian dapat menyebabkan terjadinya  lisis  pada  sklerotium.  Antibiotika melakukan reaksi biokimia secara langsung setelah sklerotium  direndam  dan  akan  tidak  mengun- tungkan untuk pertumbuhan dan perkecambahan sklerotium (Keel et al., 1992).
Penelitian In planta
Pengaruh Perlakuan terhadap Komponen Patosistem Masa inkubasi dan gejala. Hasil analisis antar- perlakuan dengan kontrol tidak menunjukkan perbe- daan nyata terhadap masa inkubasi penyakit (Tabel 2). Namun demikian, secara umum dapat dilihat perlakuan P. fluorescens P60 dalam formula cair organik  mampu  memengaruhi  patogen S.  rolfsii
penyebab  penyakit  busuk  pangkal  batang.  Masa inkubasi  terlama  pada  perlakuan  formula  kaldu ayam  kampung, yaitu  lebih  dari  29,88  hsi  atau tanaman tidak bergejala, diikuti perlakuan formula kaldu keong mas, yaitu 28,25 hsi. Hal ini membuk- tikan  formula  tersebut  mampu  menunda  masa inkubasi,  jika  dibandingkan  dengan  kontrol  air steril, yaitu 12,083 hsi dan kontrol fungisida, yaitu
Jurnal Perlindungan Tanaman Indonesia                                                                Vol. 17 No. 1 10
Perlakuan Perkecambahan sklerotium (%) Perlakuan Perkecambahan sklerotium (%) F hit F 49,98 ** W1K 97,50 a K 97,50 a W1F1 65,00 d F1 43,10 c W1F2 67,50 cd F2 50,00 bc W1F3 70,00 cd F3 48,80 bc W1F4 70,00 cd F4 50,00 bc W1F5 70,00 cd F5 48,10 bc W1F6 75,00 bcd F6 53,10 b W2K 97,50 a F hit W 232,10 ** W2F1 17,50 fghi W0 88,60 a W2F2 30,00 ef W1 73,60 b W2F3 27,50 efg W2 37,50 c W2F4 30,00 ef W3 23,60 d W2F5 25,00 efgh F hit W×F 6,75 ** W2F6 35,00 e W0K 97,50 a W3K 97,50 a W0F1 87,50 ab W3F1 2,50 i W0F2 90,00 ab W3F2 12,50 ghi W0F3 82,50 abc W3F3 15,00 fghi W0F4 87,50 ab W3F4 12,50 ghi W0F5 87,50 ab W3F5 10,00 hi W0F6 87,50 ab W3F6 15,00 fghi
Tabel 1. Pengaruh perlakuan terhadap perkecambahan sklerotium Sclerotium rolfsii
Keterangan: Angka yang diikuti huruf yang sama pada kolom yang sama tidak berbeda nyata pada DMRT taraf kesalahan 5%. Kontrol/air steril (K), formula kaldu keong mas (F1), formula kaldu ayam kampung (F2), formula kaldu ikan lele (F3), formula kaldu ayam potong (F4), formula kaldu tulang sapi (F5), formula kaldu tikus (F6); perendaman 0 jam (sesaat sampai basah merata) (W0), perendaman 1 jam (W1), perendaman 10 jam (W2), dan perendaman 100 jam (W3).
Gambar 1. Perkecambahan sklerotium (%) dan berbagai waktu perendaman; kontrol/air steril (K), formula kaldu keong mas (F1), formula kaldu ayam kampung (F2), formula kaldu ikan lele (F3), for- mula kaldu ayam potong (F4), formula kaldu tulang sapi (F5), dan formula kaldu tikus (F6) Waktu perendaman (jam) Pe rse nt as e p er ke ca m ba ha n (% ) K F1 F2 F3 F4 F5 F6
Soesanto et al .: Pemanfaatan Kaldu Hewan sebagai Bahan Formula Cair Pseudomonas fluorescens P60 11
Perlakuan Masa Inkubasi (hsi) tn Kejadian Penyakit (%) Populasi akhir patogen (butir) Populasi akhir antagonis (upk/g) F hit F 1,45 3,66 ** 5,35** 111,25 ** K1 12,083 50,000 a 24,110 a 0,0 d K2 17,362 38,888 a 15,057 b 0,0 d F1 28,250 16,667 b 9,722 b 98,3 a F2 29,888 16,667 b 9,833 b 95,7 ab F3 26,083 16,665 b 11,390 b 91,7 abc F4 23,833 16,665 b 14,945 b 82,7 c F5 28,083 16,667 b 15,002 b 84,7 bc F6 24,500 16,665 b 11,333 b 90,0 abc F hit A 1,27 2,92 1,19 94,45 ** A1 21,743 27,778 14,709 54,1 b A2 25,778 19,443 13,139 81,6 a F hit F×A 0,21 0,32 0,02 4,76 ** K1A1 7,500 55,557 25,220 0,0 d K1A2 16,667 44,443 23,000 0,0 d K2A1 18,167 33,333 15,223 0,0 d K2A2 16,557 44,443 14,890 0,0 d F1A1 27,500 22,223 10,667 82,3 b F1A2 29,000 11,110 8,777 114,3 a F2A1 30,443 22,223 10,777 76,0 bc F2A2 29,333 11,110 8,890 115,3 a F3A1 23,500 22,220 12,223 74,3 bc F3A2 28,667 11,110 10,557 109,0 a F4A1 19,333 22,220 15,780 60,7 c F4A2 28,333 11,110 14,110 104,7 a F5A1 27,500 22,223 15,780 69,0 bc F5A2 28,667 11,110 14,223 100,3 a F6A1 20,000 22,220 12,000 70,7 bc F6A2 29,000 11,110 10,667 109,3 a
Keterangan: Angka yang diikuti huruf yang sama pada kolom yang sama tidak berbeda nyata pada DMRT taraf kesalahan 5%. Kontrol dengan air steril (K1), kontrol dengan fungisida (K2), aplikasi rendam benih  (A1), aplikasi  siram  formula  (A2).  Formula  kaldu  keong  mas  (F1),  formula  kaldu  ayam  kampung  (F2), formula kaldu ikan lele (F3), formula kaldu ayam potong (F4), formula kaldu tulang sapi (F5), formula kaldu tikus (F6).
Tabel 2. Pengaruh perlakuan terhadap masa inkubasi, kejadian penyakit, populasi akhir patogen, populasi akhir antagonis
sebesar 17,362 hsi. Perlakuan formula kaldu ayam kampung  dan  formula  kaldu  keong  mas  diduga mampu memengaruhi perkembangan patogen.
Tumbuhnya P. fluorescens P60 dalam formula ikut memengaruhi perkecambahan sklerotium yang telah diinfestasikan saat aplikasi. Bakteri  tersebut menempel pada sklerotium dan menyebabkan lisis karena antibiotika yang dihasilkan, sehingga dapat menunda masa inkubasi (Weller, 1988; Raaijmak- ers & Weller, 1998; Soesanto, 2000). Sesuai penda- pat Prabowo et al. (2006), bahwa adanya penundaan masa inkubasi terjadi karena persaingan antara pato- gen dengan antagonis. Salah satu persaingan terse- but adalah adanya mekanisme antibiosis, sehingga menyebabkan  patogen membutuhkan waktu lebih lama  untuk  menginfeksi  tanaman  (Keel et  al ., 1992).
Hasil analisis aplikasi rendam dan siram me- nunjukkan hasil yang tidak berbeda nyata terhadap masa  inkubasi  (Tabel  2).  Namun  secara  umum, aplikasi  siram  cenderung    memiliki  kemampuan lebih baik daripada aplikasi rendam. Pada aplikasi siram, masa inkubasi dapat ditunda hingga 25,78 hsi, sedangkan aplikasi rendam hanya 21,74 hsi. Hal ini diduga aplikasi siram memiliki jumlah populasi P. fluorescens P60 lebih banyak daripada aplikasi rendam.  Banyaknya  populasi P.  fluorescens P60 akan  memengaruhi  lebih  lamanya  keberadaan bakteri  antagonis  tersebut  di  dalam  tanah,  yang selaras dengan hasil penelitian in vitro di atas (Tabel 1). Perendaman benih menyebabkan bakteri lebih terkonsentrasi di sekitar benih, terutama pada saat benih mulai berkecambah dibanding penyiraman
formula, sehingga P. fluorescens P60 pada aplikasi siram lebih cepat menekan perkembangan patogen S.  rolfsii . Didukung  oleh  pendapat  Howel  dan Stipanovic (1980), bahwa konsentrasi suspensi P. fluorescens pada kisaran 1,25×10 5 hingga 10 9 upk/g yang  disiram,  dapat  mencegah  penularan  jamur Pythium ultimum pada tanaman kapas. Hasil  analisis  kombinasi  formula  dengan aplikasi rendam maupun siram juga tidak berbeda nyata  terhadap  masa  inkubasi  (Tabel  2).  Masa inkubasi terlama yaitu pada perlakuan aplikasi ren- dam formula kaldu ayam kampung sebesar 30,443 hsi dan aplikasi siram formula kaldu ayam kampung yaitu 29,333 hsi atau tanaman tidak bergejala. Hal ini diduga karena bakteri P. fluorescens P60 yang ada di dalam formula tersebut mampu memengaruhi pertumbuhan patogen. Hal ini juga selaras dengan hasil  penelitian in  vitro ,  yaitu  perkecambahan sklerotium setelah direndam dalam beberapa kaldu, khususnya kaldu keong mas dan ayam kampung memiliki  tingkat  penghambatan  terhadap  perke- cambahan sklerotium yang tinggi.
Kejadian  penyakit. Hasil  analisis  kejadian penyakit menunjukkan bahwa penggunaan formula kaldu sangat berbeda nyata dalam menekan keja- dian penyakit dibanding dengan kontrol air steril dan kontrol fungisida, tetapi tidak berbeda nyata antarformula.  Kejadian  penyakit  terkecil  pada formula kaldu keong mas, kaldu ayam kampung, dan kaldu tulang sapi yaitu masing-masing sebesar 16,67% (Tabel 2). Hal ini menunjukkan bahwa bak- teri P. fluorescens P60 dalam formula kaldu keong mas, kaldu ayam kampung, dan kaldu tulang sapi mampu menekan kejadian penyakit busuk pangkal batang mencapai 66,67%, bila dibandingkan de- ngan  penggunaan  fungisida  yang  hanya  dapat menekan  sebesar  22,22%  atau  mampu  menekan penyakit  busuk  pangkal  batang  sebesar  200% dibandingkan dengan menggunakan fungisida. Tingginya nutrisi yang terkandung dalam kaldu tersebut  memungkinkan  bakteri  antagonis  dapat tumbuh dan berkembang, sehingga saat diaplikasi- kan dapat bersaing dan menekan S. rolfsii . Selain itu, keefektifan P. fluorescens P60 dalam menekan S. rolfsii diduga karena bakteri ini menghasilkan metabolit sekunder (Raaijmakers & Weller, 1998; Soesanto, 2000). Metabolit sekunder yang berperan penting  antara  lain  siderofor,  pterin,  pirol,  dan fenazin. Siderofor digunakan sebagai fungistasis dan bakteriostatis (Kloepper et al ., 1980; Weller, 1988; Soesanto, 2008). Cara aplikasi berupa rendam maupun siram ber- dasarkan hasil analisis tidak berbeda nyata dalam
menekan kejadian penyakit (Tabel 2). Namun demi- kian, aplikasi siram memiliki kecenderungan lebih mampu menekan kejadian penyakit daripada apli- kasi rendam karena aplikasi siram mampu menye- diakan jumlah lebih banyak antagonis dibandingkan dengan aplikasi rendam, yang terbatas di sekitar benih yang direndam. Hal ini terlihat dari rendahnya kejadian  penyakit  pada  aplikasi  siram  sebesar 19,44%, yang lebih rendah dibandingkan dengan aplikasi rendam sebesar 27,78%. Hasil ini juga ber- korelasi  dengan  masa  inkubasi  yang  cenderung lebih  lama  pada  aplikasi  siram.  Hal  ini  diduga aplikasi  siram  memiliki  populasi P.  fluorescens P60 yang lebih tinggi dari pada aplikasi perendam- an  benih  mentimun,  sesuai  pendapat  Howell dan Stipanovic  (1980).  Tingginya  populasi  P . fluorescens P60 pada aplikasi siram, kemungkinan bakteri  mempunyai  kemampuan  menyebar  yang tinggi, terutama karena adanya aliran air siraman. Hal ini sejalan dengan pendapat Soesanto (2000, 2008), yang  menyatakan P.  fluorescencs P60 mampu  mempertahankan  diri  pada  rhizosfer, mampu meningkatkan populasinya, menghasilkan senyawa penghambat patogen, dan mampu mengo- loni akar tanaman.
Populasi  akhir P.  fluorescens P60  dan sklerotium. Hasil analisis statistika menunjukkan hasil berbeda nyata antara aplikasi siram dengan rendam. Kepadatan populasi akhir antagonis ter- tinggi yaitu sebesar 115,3×10 9 upk/g tanah terdapat pada perlakuan aplikasi siram formula kaldu ayam kampung. Tingginya populasi antagonis pada apli- kasi siram diduga karena beberapa sifat atau ke- mampuan antagonis yang mendukung kehidupan- nya. Menurut  Duffy  dan  Weller  (1995),  sifat P. fluorescens yaitu, kemampuan dalam memanfaat- kan eksudat akar, mengoloni perakaran, memperta- hankan  populasinya,  menyebar  luas,  menempel sangat kuat pada perakaran, dan daya tahan pada tanah. Sementara Soesanto (2000) dan didukung oleh Cook et al. (1998), menyatakan bahwa salah satu  sifat  bakteri P.  fluorescens P60, yaitu  lebih cepat mengoloni di sekitar rhizosfer dan mampu mempertahankan populasinya.
Sementara itu, hasil analisis terhadap populasi sklerotium pada perlakuan tunggal menunjukkan bahwa pada kontrol air steril tanpa penggunaan P. fluorescens P60, menunjukkan hasil berbeda sangat nyata dengan kombinasi perlakuan lainnya, baik aplikasi siram maupun rendam dan kontrol fungi- sida. Populasi akhir sklerotium terbanyak pada per- lakuan kontrol sebesar 24 butir/polibag. Hal tersebut dikarenakan tidak adanya mikroba antagonis yang
Soesanto et al .: Pemanfaatan Kaldu Hewan sebagai Bahan Formula Cair Pseudomonas fluorescens P60 13
berperan sebagai pesaing, sehingga patogen dapat berkembang. Hal ini selaras dengan hasil penelitian Soesanto et al. (2003), bahwa jumlah sklerotium akhir lebih tinggi pada kontrol, bahkan terjadi pen- ingkatan sebesar 106,2%.
Selain  itu,  patogen  dapat  memanfaatkan kandungan  nutrisi  di  dalam  tanah  tanpa  adanya pesaing dari mikroba antagonis, khususnya dalam memanfaatkan ion ferri yang banyak dibutuhkan patogen sebagai nutrisi penting untuk kevirulenan- nya. Menurut Lucas (1998), sklerotium membu- tuhkan  zat  besi  sebagai  nutrisi  penting  untuk virulensinya.
Kepadatan populasi akhir sklerotium terendah terdapat  pada  perlakuan  penyiraman  formula P. fluorescens berbahan pembawa kaldu keong mas sebesar  9  butir/polibag.  Hal  ini  diduga  karena bakteri P. fluorescens P60 dapat berperan sebagai pesaing  patogen.  Persaingan  yang  terjadi  adalah dalam memperoleh nutrisi. Menurut Coley-Smith dan Cooke (1971), senyawa karbon dan nitrogen merupakan  nutrisi  mutlak  yang  dibutuhkan sklerotium untuk menyintesis komponen yang akan memperbaiki  kehidupan  sel  dan  pertumbuhan vegetatif,  serta  pembentukan  struktur  tertentu. Rendahnya  populasi  sklerotium  pada  perlakuan, karena bakteri antagonis telah memperoleh nutrisi karbon dan nitrogen yang juga dibutuhkan jamur S. rolfsii . Selain itu, P. fluorescens mempunyai meka- nisme siderofor yang mengikat ion besi dan  anti- biotika (2,4-diasetilfloroglusionol) atau keaktifan fitotoksin, yang menghambat pertumbuhan sklero- tium (Dowling & O’Gara, 1994; Soesanto, 2000; Wardhana et al ., 2009), sehingga menyebabkan S. rolfsii tidak tumbuh dan berkembang.
Pengaruh  Perlakuan  terhadap  Komponen Pertumbuhan Selisih tinggi tanaman. Hasil analisis statistika menunjukkan bahwa untuk tinggi tanaman terdapat perbedaan  nyata  dari  masing-masing  perlakuan dengan kontrol. Tinggi tanaman tertinggi yaitu pada perlakuan formula kaldu keong mas sebesar 20,29 cm. Hal ini menunjukkan rerata perlakuan dengan P. fluorescens P60 lebih tinggi dibanding tanpa P. flu- orescens P60  (K1  dan  K2),  hal  ini  karena P. flurescens P60  dapat  merangsang  pertumbuhan tanaman serta mampu menekan pertumbuhan pato- gen,  sehingga  tanaman  dapat  tumbuh  baik  dan berkembang tanpa adanya serangan dari patogen. Menurut  Dowling  dan  O’Gara  (1994), P. fluorescens dapat merangsang pertumbuhan tanam- an dengan memproduksi asam salisilat dan asam indol asetat (IAA) sebagai hormon pertumbuhan
tanaman. Selain itu, sesuai dengan sifat bakteri P . fluorescens P60  sebagai  agensia  hayati  maupun sebagai  PGPR.  Hal  ini  sejalan  dengan  pendapat Soesanto (2008), yang menyatakan bahwa bakteri P . fluorescens P60  dapat  memberikan  pengaruh menguntungkan terhadap perkembangan dan per- tumbuhan tanaman, yaitu sebagai PGPR.
Bobot basah dan kering tanaman. Hasil anali- sis data bobot basah dan kering tanaman menun- jukkan hasil yang berbeda nyata antara kombinasi perlakuan dengan kontrol dan antarkontrol juga me- nunjukkan hasil yang berbeda nyata, tetapi tidak untuk bobot kering. Pramudiana (1998) melaporkan bahwa penambahan P. fluorescens asal rhizosfer ja- gung, tomat, caisim, bawang daun, kentang, seledri, wortel, dan kubis cenderung meningkatkan bobot basah tanaman.
Bobot basah dan kering yang tinggi pada kom- binasi perlakuan aplikasi siram formula kaldu ayam kampung selain disebabkan tanaman tidak terinfeksi sklerotium, juga karena P. fluorescens P60 yang dapat  menghasilkan  hormon  tumbuh,  sehingga dapat merangsang pertumbuhan tanaman. Hal ini didukung pendapat Landa et al . (2002), bahwa P. fluorescens berperan sebagai PGPR, sehingga dapat menghasilkan hormon tumbuh, di antaranya auksin, giberallin, dan sitokinin. (Tabel 3)
Bobot basah dan kering akar. Hasil analisis me- nunjukkan bahwa untuk bobot basah akar terdapat perbedaan  yang  nyata  dari  masing-masing  per- lakuan dengan kontrol (Tabel 3). Bobot basah akar tertinggi yaitu pada perlakuan aplikasi siram for- mula kaldu ayam kampung yaitu sebesar 0,064 g. Tingginya  bobot  basah  akar  tanaman  pada  per- lakuan  tersebut  diduga  karena  formula  yang diberikan mampu menekan patogen sehingga proses fisiologis tanaman dan translokasi unsur hara dari tanah ke dalam tanaman tidak terganggu. Meka- nisme P.  fluorescens P60  di  samping  melalui penekanan patogen, dapat juga dihubungkan dengan pengaruh tidak langsung yang dapat merangsang pertumbuhan akar tanaman dan berperan sebagai PGPR, sehingga dapat menghasilkan hormon tum- buh, di antaranya auksin, giberallin, dan sitokinin (Kloepper et al ., 1980; Landa et al ., 2002).
Hasil analisis terhadap bobot kering akar juga menunjukkan hasil berbeda nyata antara kombinasi perlakuan dengan kontrol. Bobot kering akar terbe- sar  yaitu  pada  perlakuan  aplikasi  siram  formula kaldu ayam kampung sebesar 0,012 g, sedangkan bobot kering akar terendah pada perlakuan kontrol dengan air steril, yaitu sebesar  0,0049 g. Tingginya bobot kering akar tanaman pada perlakuan aplikasi
siram formula kaldu ayam kampung tersebut diduga perlakuan yang diberikan mampu menekan patogen, sehingga  tidak  memberikan  kesempatan  kepada patogen untuk memenetrasi tanaman. Lebih lanjut dijelaskan Kloepper et al . (1980) dan Leong (1986), bahwa pada kondisi Fe 3+ terbatas, P . fluorescens mampu mengikatnya dengan kuat karena adanya senyawa siderofor. Besi merupakan unsur penting pertumbuhan,  karena  berfungsi  sebagai  kofaktor untuk enzim oksidasi dan reduksi. Banyak patogen membutuhkan besi sebagai nutrisi penting untuk ke- virulenannya, sehingga produksi siderofor menye- babkan Fe 3+ tidak tersedia bagi patogen. Akibatnya patogen dapat ditekan dan tanaman dapat tumbuh dengan  optimum  sehingga  berat  kering  menjadi besar (Santoso et al ., 2007).
Panjang akar. Hasil analisis terhadap panjang akar secara umum menunjukkan hasil yang berbeda nyata antara kontrol dengan kombinasi perlakuan. Ukuran akar yang terpanjang yaitu pada kombinasi perlakuan aplikasi siram formula kaldu ayam kam- pung dan aplikasi siram formula kaldu keong mas, masing-masing sebesar 7,033 cm dan 6,911 cm. Apabila dibandingkan dengan kontrol, akar terpen- dek sebesar 2,267 cm. Tingginya nilai panjang akar pada  perlakuan P.  fluorescens karena  bakteri  ini dapat menghasilkan hormon tumbuh seperti auksin, giberallin, dan sitokinin (Salmeron, 1990; Hall et al ., 1996). Hormon giberelin dibutuhkan tanaman sebagai  perangsang  pada  pertumbuhan  akar (Alizadeh & Parsaeimehr, 2011), sehingga keber- adaan bakteri ini dapat meningkatkan panjang akar mentimun.
Jurnal Perlindungan Tanaman Indonesia                                                                Vol. 17 No. 1 14
Tabel 3. Pengaruh perlakuan terhadap selisih tinggi tanaman, bobot basah tanaman, bobot basah akar, bobot kering tanaman, bobot kering akar, panjang akar
Keterangan: Angka yang diikuti huruf yang sama pada kolom yang sama tidak berbeda nyata pada DMRT taraf kesalahan 5%. Kontrol dengan air steril (K1), kontrol dengan fungisida (K2), aplikasi rendam benih (A1), aplikasi  siram  formula  (A2).  Formula  kaldu  keong  mas  (F1),  formula  kaldu  ayam  kampung  (F2), formula kaldu ikan lele (F3), formula kaldu ayam potong (F4), formula kaldu tulang sapi (F5), formula kaldu tikus (F6).
Perlakuan Selisih tinggi tanaman (cm) Bobot basah tanaman (g) Bobot basah akar (g) Bobot kering tanaman (g) Bobot kering akar (g) Panjang akar (cm) F hit F 2,72 * 2,37 * 2,55 * 3,85 ** 3,87 ** 3,31 * K1 8,222 c 1,41873 c 0,03315 b 0,08342 b 0,00540 b 2,53333 b K2 8,938 bc 1,49192 b 0,04033 ab 0,07660 b 0,00568 b 2,87223 b F1 20,290 a 2,47528 a 0,06132 a 0,14703 a 0,01087 a 6,45000 a F2 18,290 a 2,64810 a 0,06262 a 0,17037 a 0,01163 a 6,57222 a F3 16,977 ab 2,52268 a 0,05980 a 0,14722 a 0,00993 a 6,00557 a F4 18,205 a 2,29700 a 0,05812 a 0,14150 a 0,00913 a 5,74998 a F5 18,807 a 2,40910 a 0,06118 a 0,14658 a 0,01083 a 6,37223 a F6 17,895 a 2,34927 a 0,05662 a 0,14373 a 0,00928 a 5,75000 a F hit A 0,96 1,40 0,46 7,01 * 3,37 2,07 A1 14,975 2,07301 0,05248 0,11613 b 0,00832 4,83333 A2 16,931 2,33001 0,05580 0,14798 a 0,00987 5,74306 F hit F×A 0,17 0,78 0,14 1,25 0,18 0,02 K1A1 7,467 1,50727 0,03273 0,06923 0,00493 2,26667 K1A2 8,977 1,33020 0,03357 0,09760 0,00587 2,80000 K2A1 10,620 1,94627 0,04357 0,10353 0,00577 2,54447 K2A2 7,257 1,03757 0,03710 0,04967 0,00560 3,20000 F1A1 18,867 2,24870 0,05967 0,12760 0,01027 5,98890 F1A2 21,713 2,70187 0,06297 0,16647 0,01147 6,91110 F2A1 16,933 2,30053 0,06030 0,12980 0,01060 6,11110 F2A2 19,647 2,99567 0,06493 0,21093 0,01267 7,03333 F3A1 14,753 2,16733 0,05850 0,12561 0,00907 5,63333 F3A2 19,200 2,87803 0,06110 0,16883 0,01080 6,37780 F4A1 16,733 2,09930 0,05553 0,12277 0,00820 5,25553 F4A2 19,677 2,49470 0,06070 0,16023 0,01007 6,24443 F5A1 17,647 2,19333 0,05910 0,12657 0,01013 5,77777 F5A2 19,967 2,62487 0,06327 0,16660 0,01153 6,96670 F6A1 16,780 2,12133 0,05047 0,12397 0,00760 5,08890 F6A2 19,010 2,57720 0,06277 0,16350 0,01097 6,41110
Soesanto et al .: Pemanfaatan Kaldu Hewan sebagai Bahan Formula Cair Pseudomonas fluorescens P60

## KESIMPULAN
1.  Semua formula cair berbahan kaldu hewan dapat dijadikan bahan formulasi bakteri antagonis P. fluorescens . Formula terbaik adalah pada kaldu keong dengan jumlah populasi akhir 98,3×10 9 upk/g tanah.
2.  Lama  perendaman  sklerotium  dalam  formula P.  fluorescens memengaruhi  perkecambahan. Semakin  lama  perendaman,  penekanan  per- kecambahan semakin baik. Hal ini berarti lama sklerotium  terendam  dalam  formula  akan menekan perkecambahannya.
3. Secara umum aplikasi siram merupakan yang terbaik untuk penggunaan formula di lapangan. Hal  ini  terlihat  dari  tingginya  masa  inkubasi, kejadian penyakit, kepadatan akhir sklerotium, kepadatan akhir P. fluorescens P60, selisih tinggi tanaman, panjang akar sebesar, bobot basah dan bobot kering tanaman, bobot basah dan bobot kering  akar,  berturut-turut  sebesar  25,78  hsi, 19,44%, 13 butir, 81,6×10 9 upk/g tanah, 16,93 cm, 5,74 cm, 2,33 g dan 0,15 g, serta 0,055 g dan 0,009 g.
4.  Perlakuan pemberian formula P. fluorescens P60 dapat menekan perkecambahan sklerotium, masa inkubasi, kejadian penyakit, dan populasi akhir sklerotium, berturut-turut sebesar 55,79; 147,35; 66,67; dan 59,68 %.
5.  Perlakuan pemberian formula P. fluorescens P60 dapat dapat meningkatkan selisih tinggi tanaman, bobot  basah  tanaman,  bobot  kering  tanaman, bobot basah akar, bobot kering akar, dan panjang akar, berturut-turut sebesar 146,83; 86,62; 112,5; 87,88; 140; dan 159,68 %.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis  mengucapkan  terima  kasih  kepada Direktorat  Jendral  Perguruan  Tinggi  yang  telah membantu pendanaan penelitian ini melalui Hibah Kompentensi  Batch  II  dan  kepada  Jayanto  atas bantuannya di dalam penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Agrios, G.N. 2005. Plant Pathology, 5th ed . Else- vier Academic Press, New York. 922 p.
Alizadeh, O. & A. Palsaeimehr. 2011. The Influence of Plant Growth Promoting Rhizobacteria (PGPR) on  the  Reduction  of  Abiotic Stresses  in  Crops. ELBA Bioflux 3(2): 93–99. (On-line). http://www. elba.bioflux.com.ro/docs/2011.3.93-99.pdf, modified 30/4/11.
Astawan, M. 2004. Mengapa Kita Perlu Makan Daging . (On-line). http://www.gizi.net/cgi-bin/berita/full- news.cgi?newsid1084846725,67502 , diakses 5/1/11. Badan Pusat Statistik. 2009 . Produksi Sayuran di Indonesia. (On-line).  http://www.bps.go.id/tab_ sub/view.php?tabel=1&daftar=1&id_subyek=55&no tab=15, diakses 30/4/10.
Coley-Smith, J.R. & R.C. Cooke. 1971. Survival and  Germination  of  Fungal  Sclerotia. Annual Review of Phytopathology 9: 65–92. Cook, J.R., D.W. Weller, & M.S. Thomashow. 1998. Potential for Biological Control of Root Pathogens with Pseudomonas Species Introduced into Rhizo- sphere. Phytoparasit . 26: 251–252.
Dinas  Peternakan  dan  Perikanan  Jakarta  Pusat. 1992. Manfaat  Daging,  Telur,  Susu. (On-line). http://www.jakarta.go.id/_jakpus/Ternak/datsu.htm, diakses 1/12/10.
Direktorat Jenderal Perikanan Budidaya. 2010. Ikan Lele  Memiliki  Kandungan  Gizi  yang  Tinggi  se- hingga  Bagus  untuk  Dikonsumsi . (On-line). http://www.perikanan-budidaya.dkp.go.id/index. php?option=com_content&view=article&id=199:ik an-lele-memiliki-kandungan-gizi-yang-tinggi-se- hingga-bagus-untuk-dikonsumsi& catid=148:sekre- tariat&Itemid=144, diakses 1/12/10.
Dowling, D.N. & F. O’Gara. 1994. Metabolism of Pseudomonas Involved in the Biocontrol of Plant Disease. Trends in Biotechnology 12: 133–141.
Duffy, B.K. & D.M. Weller. 1995. Use of Gaeu- mannomyces graminis var. graminis Alone and in Combination  with fluorescent Pseudomonads to Suppress Take all of Wheat. Plant Disease 79: 907– 911.
Hall,  J.A.,  D.  Peirson,  S.  Ghosh,  &  B.R.  Glick. 1996. Root Elongation in Various Agronomic Crops by  the  Plant  Growth  Promoting  Rhizobacterium Pseudomonas putida GR 12-2. Israel Journal of Plant Sciences 44: 37–42.
Hanudin, B. Marwoto, A. Syaefullah, K. Mulya, & M. Machmud. 2004. Formula Cair untuk Pengen- dalian Penyakit Layu Fusarium pada Anyelir. Jurnal Hortikultura 14 (Ed. Khusus): 403–409.
Howell, C.R. & R.D. Stipanovic. 1980. Suppression of Pythium  ultimum Induced  Damping-off  of Cotton Seedlings by Pseudomonas fluorescens and its Antibiotic Pyoluteorin. Phytopathology 70: 712– 715.
Keel, C., U. Schnider, M. Maurhofer, C. Voissard, J. Laville,  U.  Burger,  P.  Wirthner,  D.  Hass,  &  G. Defago.  1992.  Suppression  of  Root  Disease  by Pseudomonas fluorescens CHAO: Importance of
Bacterial Secondary Metabolite 2,4-diacetylphloro glucinol. Molecular Plant Microbe Interaction 5: 4– 13.
Kloepper,  J.W.,  J.  Leong,  M.  Teintze,  &  M.N. Schroth.  1980. Enhanced  Plant  Growth  by Siderophores Produced by Plant Growth-Promot- ing  Rhizobacteria . Nature 286:  885–886.  Doi: 10.1038/2868850.
Landa,  B.B., A.E.  de  Werd  Henricus,  B.B.  Mc- Spadden  Gardener,  &  D.M. Weller.  2002.  Com- parison  of  Three  Methods  for  Monitoring Populations  of  Different  Genotypes  of  2,4-di- acethylphloroglucinol-producing Pseudomonas fluorescens in  Rhizosphere. Phytopathology 92: 129–137. (On-line). apsjournals.apsnet.org/doi/ pdf/ 10.1094/ Phyto .2002.92.2.129, modified 21/10/10.
Leong, T. 1986. Siderophore : Their Biochemistry and  Possible  Roling  the  Biocontrol  of  Plant Pathogens. Annual Review of Phytopathology 24: 187–209.
Linayanti,  D.,  Wartoyo,  &  Try  Wahyuti.  2000. Pengaruh Saat Panen dan Suhu Penyimpanan ter- hadap Umur Simpan Kualitas Mentimun Jepang Cucumis ativus L . (On-line). http://pertanian.uns. ac.id/~agronomi/agrosains/pengsaatpanenanggurli- nayanti.pdf , diakses 5/1/11.
Lucas,  J.A.,  1998. Plant  Pathology  and  Plant Pathogen, 3 rd . Great Britian at The University Press, England. 279 p.
Maqqon, M., Kustantinah, & L. Soesanto. 2006. Pe- nekanan Hayati Penyakit Layu Fusarium Tanaman Cabai Merah. Agrosains 8: 50–56.
Mugiastuti, E., L. Soesanto, & R.F. Rahayuniati. 2010. Pemanfaatan Pseudomonas fluorescens P60 dalam Formula Cair Organik untuk Mengendalikan Penyakit Layu Bakteri pada Tanaman Tomat, p. 99– 105. In L. Soesanto, R.F. Rahayuniati, E. Mugi- astuti,  &  A.  Manan  (eds.), Prosiding  Seminar Nasional  Pengelolaan  Organisme  Pengganggu Tanaman  Ramah  Lingkungan .  Jurusan  HPT, Fakultas Pertanian, Universitas Jenderal Soedirman, Purwokerto.
Prabowo, A.K.E., N. Prihatiningsih, & L. Soesanto. 2006. Potensi Trichoderma harzianum dalam Me- ngendalikan Sembilan Isolat Fusarium oxysporum Schlecht f.sp. zingiberi Trujillo  pada  Kencur. Jurnal Ilmu-Ilmu Pertanian Indonesia 8: 76–84.
Pramudiana, A. 1998. Pemanfaatan Pseudomonas Kelompok Fluorescens untuk Pengendalian secara Hayati Penyakit Akar Gada pada Caisin . Skripsi. Fakultas Pertanian Universitas Jenderal Soedirman, Purwokerto. 67 p. (Tidak dipublikasikan).
Raaijmakers, J.M. & D.M. Weller. 1998. Natural Plant Protection by 2,4-diacetylphloroglucinol-Pro- ducing Pseudomonas spp. in Take-all Decline Soils. Molecular Plant-Microbe Interactions 11: 144–152.
Rahayu,  M.  2008. Efikasi  Isolat Pseudomonas fluorescens terhadap Penyakit Rebah Semai pada Kedelai .  (On-line).  http://pangan.litbang.deptan. go.id/berkasPDF/JurnalPP/2008/Nomor-3/no-3- 08.pdf, diakses 12/10/10.
Salmeron V., M.V.  Martinez-Toledo, & J. Gonza- lez-Lopez. 1990. Nitrogen Fixation and Production of  Auxins,  Gibberlines  and  Cytokinins  by  an Azotobacter chroococcum Strain Isolated from the Root of Zea mays in the Presence of Insoluble Phos- phate. Chemosphere 20: 417–422.
Santoso,  S.E.,  L.  Soesanto,  & T.A.D.  Haryanto. 2007.  Penekanan  Hayati  Penyakit  Moler  pada Bawang Merah dengan Trichoderma harzianum , Tri- choderma koningii , dan Pseudomonas fluorescens P60. Jurnal HPT Tropika 7: 53–61.
Schisler, D. A., P.J. Slininger, R.W. Behle, & M.A. Jackson. 2004. Formulation of Bacillus spp. for Bio- logical Control of Plant Diseases. Phytopathology 94: 1267–1271.
Semangun, H. 2008. Penyakit Tanaman Pangan di Indonesia , edisi kedua. Gadjah Mada University Press, Yogyakarta. 475 p. Septiani, D.A. 2010. Pemanfaatan Bakteri Antago- nis  sebagai  Pengendali  Hayati  Penyakit  Layu Fusarium pada Tanaman Bawang Merah . Skripsi. Fakultas Pertanian, Universitas Jenderal Soedirman, Purwokerto. (Tidak dipublikasikan).
Sinaga,  M.S.  2006. Dasar-Dasar  Ilmu  Penyakit Tumbuhan . Penebar Swadaya, Jakarta. 136 p.
Soesanto, 2000. Ecology and Biological Control of Verticillum dahliae . Ph.D. Thesis, Wageningen Uni- versity, Wageningen.
Soesanto,  L.  &  A.J.  Termorshuizen.  2001. Pseudomonas  fluorescens P60  sebagai  Agensia Hayati Jamur Patogen Tular-tanah, p. 183–186. In A. Purwantara, D. Sitepu, I. Mustika, K. Mulya, M.S. Sudjono, M. Machmud, S.H. Hidayat, Supri- adi, Widodo (eds.) , Prosiding Kongres Nasional XVI  dan  Seminar  Nasional    PFI ,  Bogor,  22–24 Agustus 2001.
Soesanto,  L.,  R.  Hidayat,  & D.S.  Utami.  2003. Prospek  Pemanfaatan Pseudomonas  fluorescens P60 untuk Pengendalian Penyakit Busuk Batang pada Kacang Tanah. Jurnal Fitopatologi Indonesia 7: 1–6.
Soesanto et al .: Pemanfaatan Kaldu Hewan sebagai Bahan Formula Cair Pseudomonas fluorescens P60
Soesanto, L., Rokhlani, & N. Prihatiningsih. 2008. Penekanan Beberapa Mikroorganisme Antagonis terhadap Penyakit Layu Fusarium Gladiol. Agrivita 30: 75–83.
Soesanto, L. 2008. Pengantar Pengendalian Hayati Penyakit  Tanaman .  PT.  Raja  Grafindo  Persada, Jakarta. 573 p.
Sulistiono.  2010. Manfaat  Daging  Keong .  (On- line). http://www.suaramerdeka.com/harian/0704/
14/ked05.htm, diakses 11/8/10.
Tempo. 1978. Dianjurkan: Makan Tikus . (On-line). http://majalah.interaktif.com/id/arsip/1978/07/29 /lin/mbm.19780729.lin72374.id.html, diakses5/1/11. Wardhana, D.W., L. Soesanto, & D.S. Utami. 2009. Penekanan Hayati Penyakit Layu Fusarium pada Subang Gladiol. Jurnal Hortikultura 19: 304–311. Weller, D.M. 1988. Biological Control of Soil-borne Plant Pathogens in the Rhizosphere with Bacteria. Annual Review of Phytopathology 26: 379–407.