## EFEK EKSTRAK ETANOL DAUN SINGKONG

## ( Manihot Utilissima Pohl) SEBAGAI OBAT ALTERNATIF ANTI REMATIK TERHADAP RASA SAKIT PADA MENCIT
Submitted : 30 Oktober 2017 Edited : 19 Desember 2017
Accepted : 29 Desember 2017
Setya Enti Rikomah, Elmitra, Diana GustinaYunita
Akademi Farmasi Al-Fatah Bengkulu Jl.Indragiri gang 3 Serangkai Padang Harapan Bengkulu Email : setyaentirikomah@gmail.com

## ABSTRACT
Medicinal  plants  used  for  generations  one  of  which  is  crop  cassava  leaves.  Cassava leaves  is  believed  to  cure  rheumatism,  gout, anemia,  constipation, and  to  increase  endurance. This study aims to determine the Effects Of Ethanol Leaf Extract Singkong (Manihot Utilissima Pohl) As Drug Alternatif Antirheumatic Of Pain On Mice. This study was an experimental study using  25  mice.  These  animals  were  divided  into  five  groups  where  each  group  consisted  of  5 mice. Cassava leaf extracts as a control test, flamar gel as a positive control, and distilled water as a negative control.  Observations were made for 45 minutes using a hot excitatory response in the form of a decrease in a lick or jump after the treatments. The results showed a decline in the  response  of  mice  to  lick  the  feet  or  jump  to  the  heat  stimuli  were  administered  after administration of cassava leaf extract. Cassava leaf extract has an effect antirheumatic to pain in mice. Based on the analysis of SPSS best  dose in this study is  the first dose (0.65mg / 20gr mice BB).
Keywords : Cassava leaves, Antirheumatic, Mice, Pain

## PENDAHULUAN
Masyarakat  Indonesia  telah  lama memanfaatkan tumbuhan obat sebagai upaya alternatif  untuk  penanggulangan  masalah kesehatan, dimana penggunaannya dilakukan  secara  turun-temurun.  Berkaitan dengan  masalah  kesehatan  yang  ada, hendaknya informasi yang diberikan  kepada masyarakat  harus  benar  dan  disertai  dengan data ilmiah yang berasal dari hasil penelitian tumbuhan yang berkhasiat sebagai obat (1) . Tumbuhan  obat  yang  digunakan secara  turun-temurun  salah  satunya  ialah tanaman  daun  ubi  singkong.  Kandungan yang  terdapat  dalam  daun  singkong  yaitu air,  fosfor,  karbohidrat,  kalsium,  vitamin  C, protein,  lemak,  vitamin  B1,  zat  besi, flavonoid,  saponin,  tanin  dan  triterpenoid (2) .
Masyarakat  mempercayai  daun  singkong memiliki berbagai manfaat untuk pengobatan penyakit. Daun singkong
dipercaya  dapat  mengobati  rematik,  asam urat,  anemia, konstipasi, serta untuk meningkatkan daya tahan tubuh (3) .

## METODOLOGI PENELITIAN Alat Dan Bahan
Alat-alat  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  botol  berwarna  gelap, beaker  glass , hot  plate ,  termometer, timbangan analitik, tissue, pot obat, handscoon latex ,  masker latex ,  gelas  ukur pyrex , stopwatch ,  pipet  tetes  dan  kandang mencit.
Bahan-bahan  yang  digunakan  pada penelitian  ini  yaitu  daun  ubi  singkong
(Manihot  Utilissima Pohl ) ,  etanol  70%, aquadest,  flamar  gel,  hewan  uji  yang digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah mencit (Mus  musculus) dengan  berat  badan 20-30 gram.

## Pengambilan Sampel
Sampel  daun  ubi  singkong (Manihot Utilissima  Pohl) diambil  di  Jalan  Tutwuri RT.  04  Rw.  02  Kelurahan  Surabaya, Kecamatan  Sungai  Serut  Kota  Bengkulu. Waktu  panen  dilakukan  pada  pagi  hari, dimana  daun  ubi  singkong (Manihot Utilissima Pohl) masih segar.

## Verifikasi Tanaman
Verifikasi  tanaman  dilakukan  di Laboratorium Biologi Fakultas MIPA
Universitas  Bengkulu  disesuaikan  dengan
Atlas Tanaman Obat Indonesia.

## Pembuatan Simplisia Daun Singkong
Daun singkong dipisahkan dari tangkai  dan  pengotor  lainnya.  Selanjutnya dicuci  bersih  di  bawah  air  mengalir, ditiriskan  dan  ditimbang  berat  basahnya sebanyak  2000  gr,  kemudian  dikeringkan dengan  di  anginkan  selama  2  minggu, selanjutnya  ditimbang  berat  keringnya sebanyak  200  gr  kemudian  di  remah-remah. Hasil  simplisia  disimpan  dalam  wadah plastik  yang  tertutup  rapat  untuk  dipakai pada perlakuan selanjutnya.

## Pembuatan Ekstrak
Simplisia  daun  singkong  di  lakukan penyarian  dengan  metode  maserasi.  Metode ini  dilakukan  dengan  cara  daun  singkong yang telah di rajang lalu dikeringkan, setelah kering, blender daun singkong hingga halus, masukkan dalam botol berwarna gelap untuk proses  maserasi  dan  ditambahkan  etanol 70%  hingga  menutupi  simplisia,  lakukan perendaman  selama  lima  hari,  dan  sambil dikocok  dengan  lama  proses  pengocokan satu  hari  yaitu  lebih  kurang  2  jam  (tidak
harus  serentak  pada  pengocokannya),  lalu disimpan  pada  temperatur  kamar  serta terlindung  dari  cahaya  atau  sinar  matahari, setelah  5  hari  ganti  pelarut  etanol  dengan pelarut etanol baru dan selanjutnya perlakukan  sama  dengan  yang  pertama, lakukan sebanyak tiga kali penyaringan.
Penggantian  pelarut  dilakukan  untuk mempercepat proses ekstraksi, karena pelarut  pertama  kemungkinan  sudah  jenuh oleh senyawa sehingga tidak dapat melarutkan kembali senyawa yang diharapkan.  Kemudian  hasil  ekstraksi  dari proses maserasi daun ubi singkong dipekatkan  dengan  menggunakan rotary evaporator.

## Pengujian Flavonoid Pada Ekstrak
Ekstrak diambil 1 gr uapkan,
basahkan sisa dengan aseton P,  tambahkan sedikit  serbuk  asam  borat  P,  dan  serbuk halus asam oksalat P. Panaskan hati-hati di atas  penangas  air  dan  hindari  pemanasan yang berlebihan. Campur sisa yang diperoleh  dengan  10  ml  eter  P.  Amati dengan  sinar  ultraviolet  254  nm.  Flavonoid dalam  sampel  ditandai  dengan  larutan berfluoresensi kuning intensif (4) .

## Uji Kelarutan
Buret di isi aquadest, dan buret lain di isi dengan etanol 96%. Ekstrak diambil 2 gr dan  dititrasi  menggunakan  buret.  Lalu dilihat  masing-masing  ekstrak  larut  total dengan berapa banyak volume yang digunakan (5) .

## Uji Organoleptis
Ekstrak  diambil  1 gr  dan  diletakkan kedalam cawan porselen kemudian lebarkan sampai  5  cm  menggunakan  sudip,  amati warna,  bau,  rasa  dan  bentuk  ekstrak.  dan ditambahkan

## Perhitungan Rendemen

## Uji Susut Pengeringan
Krus  Porselen  yang  telah  dikeringkan selama  30  menit  dalam  oven  kemudian  di masukkan  ekstrak  sebanyak  1  gr  lalu timbang.  Kemudian  krus  di  goyang  agar ekstrak  merata.  Krus  masukkan  kembali dalam  oven  selama  1  jam  dengan  suhu 105 o C. Setelah dikeluarkan didinginkan  lalu di  timbang.  kemudian  hitung  persentase susut pengeringan.
Ket: A=  Berat Krus Kosong
B=  Berat Krus + Ekstrak sebelum pengeringan C=  Berat Krus + Ekstrak setelah pengeringan Uji Kadar Abu
Ekstrak  Sebanyak  1  gram,  lalu masukkan kedalam krus yang telah ditimbang  dan  ditara,  kemudian  dipijar  atau dipanaskan  dengan  kompor  listrik  sampai menjadi  abu,  kemudian  dinginkan,  lalu timbang,  dan  hitung  persentase  kadar abunya.
Ket : A=  Berat Simplisia Sebelum dipijar B=  Berat Simplisia Setelah dipijar

## Prosedur Uji Antirematik Terhadap Rasa
Sakit

## Penyiapan Hewan Uji
Hewan  uji  yang  akan  digunakan dalam  penelitian  ini  ialah  mencit  sebanyak 25 ekor.

## Prosedur Penelitian
Metode pengujian antirematik terhadap  rasa  rasa  sakit  dilakukan  dengan metode hotplate, dengan pengamatan jumlah geliat  pada  mencit.  Pengamatan  dilakukan setiap  5  menit  selama  60  menit.  Sebelum pemberian  obat,  catat  dengan  menggunakan stopwatch  waktu  yang  diperlukan  mencit untuk  mengangkat  dan  menjilati  kaki depannya  sebagai  waktu  respon,  catat sebagai  respon  normal  atau  respon  sebelum perlakuan.  Tiap  kaki  mencit  diletakkan diatas hot  plate kemudian  berikan  obat secara  topikal  dengan  pengolesan  sebanyak 3  kali, stopwatch dihidupkan  dan  sebagai
patokan,  bahwa  mencit  mulai  merasakan nyeri pada waktu mengangkat atau menjilati kaki depan. Kemudian buat tabel pengamatan.

## Pemberian Perlakuan Pada Hewan Uji
Kelompok  1  diolesi  aquadest  sebagai kelompok  negatif,  kelompok  2  diolesi dengan  Flamar  gel  dengan  dosis  0,52mg dengan  pengolesan  sebanyak  3  kali  sebagai kelompok  positif,  kelompok  3  diolesi ekstrak daun ubi singkong dengan dosis 0,65 mg  dengan  pengolesan  sebanyak  3  kali, kelompok  4  diolesi  ekstrak  daun  ubi singkong  dengan  dosis  1,3mg  dengan pengolesan  sebanyak  3  kali,  kelompok  5 diolesi  ekstrak  daun  ubi  singkong  dengan dosis1,95mg dengan pengolesan  sebanyak 3 kali.
% KadarAbu = 𝐴 − 𝐵 𝐴 x 100% % Susut Pengeringan = 𝐵−𝐴 −  𝐶−𝐴 𝐵−𝐴 x 100% % Rendemen = Berat Ekstrak yang diperoleh Berat Sampel yang digunakan × 100
Analisis Data Data yang diperoleh dianalisis menggunakan  analisa  data  ANOVA  satu arah ( one way ) menggunakan program SPPS 18.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  verifikasi  menyatakan  bahwa tanaman  yang  digunakan  dalam  penelitian yaitu tanaman singkong keluarga Euphorbiaceae ,  Nama  ilmiah Manihot utilissima Pohl yang disahkan dengan nomor surat15/UN30.28.LAB.BIOLOGI/PM/2016. Sampel daun Singkong yang
diperoleh  sebanyak  200  gr  diekstraksi menggunakan  metode  maserasi.  Proses maserasi  dilakukan  selama  5  hari  dan remaserasi  selama  2  hari.  Hasil  maserat kemudian  diuapkan  dengan  menggunakan Rotary  evaporator pada  suhu  40 o C  sampai diperoleh ekstrak kental sebanyak 20,96 gr.
Rendemen merupakan persentase bagian  bahan  baku  yang  dapat  digunakan atau  dimanfaatkan  dengan  total  bahan  baku. Semakin  tinggi  nilai  rendemen  menandakan bahwa  bahan  baku  tersebut  memiliki peluang  untuk  dimanfaatkan  lebih  besar (6) . Rendemen  merupakan  persentase  sampel perlakuan  sebelum  dan  setelah.  Rendemen ekstrak  kental  etanol  daun  singkong  sebesar 1.048%.Rendemen  yang  dihasilkan  sangat kecil  sehingga  untuk  menghasilkan  ekstrak memerlukan  sampel  banyak  Ekstrak  etanol daun  singkong  yang  didapat  berwarna  hijau kehitaman,  berbau  khas,  rasa  pahit  dan bentuknya ekstrak kental.
Hasil  yang  di  dapatkan  menggunakan aquadest  yaitu  14,50  ml,  dan  di  titrasi menggunakan  buret  yang  berisi  etanol  96% hasil  yang  di  dapatkan  9,5  ml.  jadi  dari kedua hasil tersebut kelarutan ekstrak dalam aquadest  berdasarkan  Farmakope  Indonesia masuk  kedalam  bagian  10-30  yaitu  ekstrak singkong larut dalam aquadest dan kelarutan ekstrak  dalam  etanol  96%  berdasarkan Farmakope Indonesia masuk kedalam
bagian  1-10  yaitu  ekstrak  singkong  mudah larut dalam etanol 96% (6) .
Penetapan susut pengeringan di lakukan  dengan  tujuan  untuk  mengetahui besarnya  kadar  air  yang  hilang  pada  saat proses  pengeringan,  dari  hasil  pengujian ekstrak  etanol  daun  singkong  diperoleh bahwa nilai susut pengeringan sebesar 5,5%. Range  kadar  air  tergantung  terhadap  jenis ekstrak  yaitu  ekstrak  cair  >30%,  ekstrak kering  <10%,  ekstrak  kental  5-30% (7) .  Hal ini menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun singkong termasuk dalam ekstrak kental.
Uji  kadar  abu  tujuannya  untuk mengetahui  jumlah  senyawa  anorganik (kotoran, tanah, tanah liat dan lain-lain yang terdapat dalam sampel yang terbentuk dalam sampel  atau  melekat  pada  sampel  selama proses pembuatan ekstrak) dari sisa pemijaran,  dari  hasil  uji  kadar  abu  ekstrak etanol  daun  singkong  didapatkan  hasil 74,5%.Dari hasil pengujian persentase kadar abu yang didapatkan sangat besar dikarenakan  dalam  proses  pengujian  masih manual  menggunakan  kompor  listrik  dan suhu tidak selalu konstan serta dalam proses yang  masih  manual  itu  abu  yang  dihasilkan bisa  saja  terbawa  oleh  udara  saat  proses pemijaran.  Hasil  pemeriksaan  senyawa flavonoid dari daun singkong ekstrak positif mengandung  flavonoid  karena  jika  larutan berfluoresensi  kuning  intensif  ketika  dilihat dibawah  Sinar  Ultraviolet  366  nm  maka ekstrak positif mengandung senyawa flavonoid (4) .
Gambar 1. Perbandingan  Rata-rata  Respon
Mencit Tiap Kelompok 0 100 200 300 400 500 HASIL RATA-RATA AUC EFEK ANTI REMATIK TERHADAP RASA SAKIT kontrol negatif dosis 1 dosis 2 dosis 3
Hasil  pengamatan  dilakukan  dengan
cara menghitung nilai AUC yang merupakan gambaran  luas  dibawah  kurva  pada  respon analgetika  dari  setiap  kelompok  perlakuan perhitungan AUC dilakukan dengan
membandingkan  nilai  AUC  suatu  kelompok perlakuan  maka  semakin  kecil  nilai  AUC suatu  kelompok  perlakuan  maka  semakin bagus pengaruh analgetika terhadap kelompok  perlakuan  tersebut  sebaliknya. Hasil  rata-rata  AUC  kelompok  perlakuan Flamar  gel  yaitu  204,5,  hasil  rata-rata  AUC
kelompok perlakuan Aquadest yaitu 419,5,hasil rata-rata AUC kelompok perlakuan  dosis  1  yaitu  290,  hasil  rata-rata AUC  kelompok  perlakuan  dosis  2  yaitu 314,5  dan  hasil  rata-rata  AUC  kelompok perlakuan dosis 3 yaitu 326,5.
Uji ANOVA digunakan untuk melihat perbedaan  yang  signifikan  dari  kelima kelompok perlakuan. Jika sig <0,05 maka di artikan  terdapat  perbedaan  yang  bermakna (signifikan) pada tiap data.
Uji One-Way ANOVA  ( Analisis  Of
Varians )  dengan  taraf  kepercayaan  95%,
dimana terlebih
dahulu ditentukan normalitas  dan  homogenitas.  Hasil  data terdistribusi  normal  (p>0,05)  dan  data homogen  (p>  0,05)  untuk  melihat  perbedan yang signifikan.
Hasil uji ANOVA nilai sig dari setiap kelompok perlakuan 0,000,  jadi karena nilai sig  <0,05  maka  dari  setiap  kelompok perlakuan  mempunyai  perbedaan  yang signifikan.
Duncan  didasarkan  pada  sekumpulan nilai  beda  nyata  yang  ukurannya  semakin besar,  digunakan  untuk  menguji  perbedaan diantara semua perlakuan.
Ekstrak  daun  ubi  singkong  dosis  1 dengan  kontrol  negatif  pada  uji  LSD memiliki perbedaan yang signifikan. Hal ini menunjukkan  ekstrak  daun  ubi  singkong dosis 1 dapat berkhasiat sebagai  antirematik terhadap  rasa  sakit  tetapi  tidak  sebaik kontrol  positif.  Ekstrak  daun  ubi  singkong
dosis  2  dengan  kontrol  negatif  pada  uji duncan  memiliki  perbedaan  signifikan.  Hal ini  menunjukkan  dosis  daun  ubi  singkong berkhasiat sebagai antirematik terhadap rasa sakit akan tetapi tidak sebaik kontrol positif. Ekstrak  daun  ubi  singkong  dosis  3  dengan kontrol  negatif  pada  uji  duncan  memiliki perbedaan yang signifikan, ini menunjukkan dosis  3  berkhasiat  sebagai  antirematik terhadap  rasa  sakit  tetapi  tidak  sebaik kontrol positif. Dari hasil tersebut menunjukkan  ekstrak  etanol  daun  singkong mengandung senyawa flavonoid yang memiliki  khasiat  sebagai  analgetik  (pereda nyeri  atau  sakit).  Mekanisme  kerjanya adalah menghambat kerja enzim siklooksigenase,  dengan  demikian  akan mengurangi  produksi  prostaglandin  oleh asam  arakidonat  sehingga  mengurangi  rasa nyeri, selain itu flavonoid juga menghambat degranulasi neutrofil sehingga akan
menghambat  pengeluaran  sitokin,  radikal bebas,  serta  enzim  yang  berperan  dalam peradangan (7) .

## SIMPULAN
Berdasarkan  hasil  yang  diperoleh maka  disimpulkan  bahwa  ekstrak  etanol daun  singkong( Manihot  utilissima Pohl) memiliki  efek  antirematik  terhadap  rasa sakit  pada  mencit  ( Mus  Musculus )  dengan efek  yang  terbaik  ditunjukkan  pada  dosis1 yaitu 0,65 mg.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Ersam, T., 2004, Keunggulan Biodiversitas  Hutan  Tropika  Indonesia Dalam  Merekayasa  Model  Molekul
Alami, Prosiding  Seminar  Nasional Kimia VI, ITS, Surabaya.
2. Rukmana dan Rahmat, 1997, Ubi Kayu Budi Daya dan Pascapanen,
Yogyakarta, Kanisius.
3. Adi.Lukas T, 2006, Tanaman Obat dan Jus Untuk Asam Urat dan Rematik , PT Agromedia Pustaka, Jakarta.
4. Anonim.1989. Materia Medika Indonesia. Jilid 5-6 . Departemen
Kesehatan Republik Indonesia. Jakarta.
5. Anonim.  1979. Farmakope  indonesia . Edisi III. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. 6. Voight, 1994, Buku Pelajaran Teknologi  Farmasi ,  Edisi  5,  Gadjah Mada University Press, Yogyakarta. 7. Sudirman, S.2011. Aktivitas antioksidan  dan  komponen  bioaktif kangkung air ( Ipomoea aquatic Forsk.) [Skripsi].Institut Pertanian Bogor. Bogor.