AKTIVITAS ANTIBAKTERI SENYAWA FENOLIK EKSTRAK ROSELA ( Hisbiscus sabdariffa ) YANG DIHASILKAN DARI BEBERAPA VARIASI METODE DAN LAMA PENGERINGAN

## ANTIBACTERIAL ACTIVITY OF ROSELLE (Hisbiscus sabdariffa) EXTRACT PHENOLICS COMPOUND PRODUCED WITH VARIYING DRYING METHODS AND DURATIONS
Ike Sitoresmi M Purbowati)*, Sujiman, dan Ali Maksum
Laboratorium Teknologi Pengolahan Pangan, Jurusan Teknologi Pertanian, Fakultas Pertanian, Universitas Jenderal Soedirman, Jalan Dr. Suparno, Karangwangkal, Purwokerto 53123, Indonesia.
Email: ikesitoresmi@yahoo.co.id
Makalah: Diterima 10 Januari 2018; Diperbaiki 10 April 2018; Disetujui 20 April 2018

## ABSTRACT
Wet  roselle  is  a  highly  perishable  material  subject  to  uncontrolled  microbial  spoilage  because  it contains  80-90%  of  water.    Therefore,  dehydration  process  is  the  important  step  to  extend  shelflife  of  raw material  and  keeping  its  native  properties  before  utilization  for  different  purposes.  The  objective  of  this  study was to determine the method and duration of roselle drying which yields extracts with high phenolic compounds and  antibacterial  activity. The  research  has  been  conducted in  three  different  methods,  i.e.cabinet  dryer,  a direct exposure on  sun  light as weel as by using a glasshouse effect panel with duration of driying: 1,3,5,and 7 hours.  The  observed  parameters  werewater  content,  pH,  amount  of  phenolic  compounds,  and  antibacterial activity. The data obtained were analyzed using analysis of variance (ANOVA) with further test DMRT (Duncan Multiple  Range  Test)  and  linier  regression.  The  best method  from these study was cabinet  dryer  with drying duration of 7 hours which have water content of 7.5%, total phenolic compounds of 22.43 mg/100 g, pH 1, and  antibacterial  activities  against  Eschericiacoli  and  Staphylococcus aureus were 8.74  mm and 7.06 mm, respcetively . Drying rate equation for this methode was Y= -22.93x +122.8.
Keywords: phenolics compound, drying, roselle, antibacterial activity

## ABSTRAK
Rosella basah adalah bahan yang sangat mudah rusak oleh pembusukan mikroba yang tidak  terkendali karena  mengandung  80-90%  air.    Oleh  karena  itu,  proses  pengeringan  adalah  langkah  penting  untuk memperpanjang  umur  simpan  rosela  dan  menjaga  sifat  aslinya  sebelum  digunakan  untuk  keperluan  yang berbeda.  Tujuan dari penelitian ini adalah untuk menentukan metode dan lama waktu pengeringan rosela yang menghasilkan  ekstrak  dengan  jumlah  senyawa  fenolik  dan  aktivitas  antibakteri  yang  tinggi.    Penelitian  telah dilakukan menggunakan tiga metode pengeringan yang berbeda yaitu pengering kabinet, paparan  langsung pada sinar matahari dan dengan menggunakan panel efek rumah kaca masing-masing dengan waktu pengeringan: 1, 3, 5, 7 jam. Parameter yang diamati adalah: kadar air, pH, jumlah senyawa fenolik, dan aktivitas antibakteri. Data yang  diperoleh  dianalisis  menggunakan  analisis  varians  (ANOVA)  dan  uji  lanjut  DMRT  ( Duncan Multiple Range  Test )  dan  regresi  linier.  Metode  terbaik  dari  penelitian  ini  adalah  pengering  kabinet  dengan  waktu pengeringan selama 7 jam yang memiliki nilai kadar air 7,5%, total senyawa fenolik 22,43 mg/100 g bahan, pH 1,  dan  aktivitas  antibakteri  terhadap Eschericia  coli dan Staphylococcus  aureus yang  ditunjukkan  dengan panjang diameter zona bening berturut-turut sebagai berikut: 8,74 mm dan 7,06 mm. Persamaan laju pengeringan menggunakan metode pengering kabinet adalah Y = -22,93x + 122,8.
Kata kunci: aktivitas antibakteri, senyawa fenolik, pengeringan, rosela

## PENDAHULUAN
Sumber  utama  senyawa  bioaktif  antibakteri adalah tanaman. Salah satu tanaman yang berpotensi adalah  rosela.  Beberapa  manfaat  dan  kegunaan kelopak rosela yang telah diketahui dan diteliti yaitu: sebagai  pewarna  makanan  (Arueya  dan  Akomolafe , 2014; Mardiah, 2010), antioksidan (Purbowati et al ., 2016; Maksum et al ., 2018), dan sebagai flavouring (Ruangsri et al ., 2008).
Sebagaimana  hasil  pertanian  pada  umumnya, rosela  memiliki  sifat  mudah  rusak  ( perishable )  dan bulky .    Rendahnya  daya  simpan  ini  terutama
disebabkan  kandungan  air  dalam  kelopak  rosela yang  tinggi  yaitu  90,42%  (Chumsri et  al .,  2008). Hal  ini  berakibat  pada  sulitnya  transportasi  dan penanganan  bahan.    Kadar  air  yang  tinggi menyebabkan  kelopak  rosela  mudah  mengalami kerusakan,  baik  kerusakan  akibat  faktor  fisik, mekanis, enzimatis maupun mikrobiologis.
Strategi  menghadapi  masalah  ini  adalah dengan  pengeringan.    Akan  tetapi,    kandungan bioaktif yang berasal dari sel tanaman sangat mudah rusak bila terpapar oleh panas dan cahaya.  Menurut Sipahli et  al .  (2017),  ekstrak  kelopak  rosela  yang dipanaskan  80°C  selama  6  jam  akan  mengalami
Jurnal Teknologi Industri Pertanian 28 (1):19-27 (2018) ISSN: 0216-3160    EISSN: 2252-3901
Tersedia online http://journal.ipb.ac.id/index.php/jurnaltin Nomor DOI: 10.24961/j.tek.ind.pert.2018.28.1.19
penurunan  jumlah  antosianin  dan  pH  seiring meningkatnya waktu pemanasan.  Retensi antosianin pada  pemanasan  50°C  lebih  tinggi  dibanding pemanasan pada suhu 80°C.  Purbowati et al . (2016) menunjukkan  bahwa  pada  suhu  60,  70,  80,    dan 90°C  dengan  pemanasan  hingga  45  menit,  ekstrak kelopak  rosela  memiliki  aktivitas  antioksidan  dan antibakteri  yang  semakin  menurun.    Hal  ini disebabkan karena terjadi penurunan retensi antosianin  dan  senyawa  fenolik  yang  terkandung  di dalam ekstrak dari 82% menjadi 27%.
Berbagai  metode  pengeringan  yang  telah digunakan  adalah:  pengering  matahari,  pengering menggunakan  sistem  efek  rumah  kaca,  dan pengering  kabinet.  Pengeringan  dengan  matahari masih merupakan metode yang sering dilakukan. Hal ini  dikarenakan  praktis  dan  murah.  Namun kekurangan  metode  ini  adalah  sangat  tergantung pada  cuaca,  rendahnya  kualitas  bahan  kering  yang dihasilkan, lama proses pengeringan, dan kemungkinan  terkontaminasi  oleh  debu,  tanah,  dan serangga ( Ekechucwu, 2010).
Metode  pengering  dengan  sistem  efek rumah  kaca  dan  pengering  kabinet  digunakan dengan  asumsi  lebih  meningkatkan  kontrol  proses pengeringan,  kualitas  bahan  kering  yang  dihasilkan lebih baik dengan meminimalisir kerusakan kandungan  bioaktif  dan  kualitas  sensori.    Pengering menggunakan sistem efek rumah kaca menggunakan sumber  panas  sinar  matahari  yang  terlebih  dahulu disimpan  pada  panel  penangkap  panas  kemudian panas  tersebut  disebarkan  keseluruh  bagian  alat menggunakan  blower.    Kelebihan  alat  ini  adalah mampu  mengurangi  fluktuasi  perubahan  suhu  yang terjadi secara mendadak akibat perubahan cuaca. Hal ini  dimungkinkan  karena  panel  penangkap  panas diharapkan mampu menyimpan panas yang diterima dan  mengeluarkannya  saat  dibutuhkan.  Sehingga proses  pengurangan  kadar  air  dapat  terus  terjadi (Ajayi et al ., 2017)
Metode  pengeringan  kabinet  menggunakan udara  panas  yang  bekerja    dengan    cara menguapkan  air   dari  bahan (Sachin et al ., 2010). Sumber  panas  yang  digunakan  berasal  dari  energi listrik.  Kelebihan  alat  pengering  ini  adalah  suhu pengeringan  yang  digunakan  dapat  ditetapkan konstan.  Hal  ini  dimungkinkan  karena  saat  suhu yang diinginkan tercapai, alat yang menghubungkan sumber  panas  dengan  elemen  pemanas  dalam  alat akan terputus dengan sendirinya.
Tiga  metode  yang  dipilih  dalam  penelitian ini  merupakan  metode  pengeringan  alami,  semi alami  dan  buatan.    Pemilihan  metode  dan  lama pengeringan yang tepat didasarkan pada karakteristik bahan  baku,  karakteristik  bahan  kering  yang dikehendaki,  kondisi  pengeringan,  dan  biaya (Planinic et  al .,  2015).    Untuk  itu  maka  perlu ditentukan  metode  dan  lama  pengeringan  rosela yang  menghasilkan  ekstrak  dengan  kandungan
senyawa  fenolik  dan  aktivitas  antibakteri  yang tinggi.

## BAHAN DAN METODE Bahan
Bunga  rosela  merah  ( Hibiscus  sabdariffa ) berasal  dari  wilayah  Muria  Pati  Ayam,  Kesatuan Pemangku  Hutan  (KPH)  Pati,  Jawa  Tengah.  Bahan kimia  yang  dibutuhkan  antara  lain  reagen  Folin Ciocalteu,  Na 2 CO 3 ,  asam  galat, nutrient  agar  (NA) , nutrient  broth  (NB) ,    kertas  cakram,  kertas Whatman,  akuades  dan  bahan  kimia  lain  untuk analisis.

## Alat
Peralatan  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  meliputi  pengering  kabinet,  efek  rumah  kaca chamber, microwave elektrolux, buret, shaker , pipet mikro, filler, blender , multiwell plates , spektrofotometer,  timbangan  analitik,    Selain  itu juga digunakan peralatan gelas untuk analisis seperti tabung reaksi, erlenmeyer, gelas ukur dan labu ukur.

## Penurunan Kadar Air Kelopak Bunga Rosela
Kelopak  bunga  rosela  yang  tua,  utuh  dan bersih  dipisahkan  dari  kelopak  yang  rusak  atau busuk.    Kelopak  bunga  dipisahkan  dari  bijinya kemudian  dicuci  dengan  air  bersih  lalu  ditiriskan. Setelah itu dilakukan pengeringan dengan menggunakan  metode  pengering  matahari,  efek rumah  kaca  (ERK),  dan  pengering  kabinet  masing masing  dengan  lama  pengeringan  1,3,5,  dan  7  jam (Sangwan et al ., 2012 yang dimodifikasi). Kemudian  kelopak  bunga  rosela  yang  dihasilkan dibungkus  plastik  yang  rapat  untuk  menghindari pengaruh kelembaban.
Ekstraksi  Kelopak  Bunga  Rosela  (Purbowati et al., 2016)
Sebanyak  10  g  kelopak  bunga  rosela ditambahkan dengan 100 mL akuades. Campuran ini kemudian dimasukan pada microwave dan dilaksanakan  ekstraksi  pada  daya  250  W  selama  5 menit.  Campuran  kemudian  disaring  menggunakan kertas Whatman.

## Analisis Sifat Kimia Dan Aktivitas Antibakteri
Ekstrak  rosela  yang  dihasilkan  tersebut kemudian  dianalisis    karakteristik    kimia  yang meliputi:  analisis    kadar  air  (AOAC,  2000),    total senyawa  fenolik  (Chew et  al., 2009),  dan  pH. Aktivitas  antibakteri  diuji  dengan  pengukuran panjang  diameter  zona  bening  yang  terbentuk ( Doughari et al., 2006).
Total Senyawa Fenolik (Chew et al ., 2009) Total fenol ditentukan menggunakan metode  Folin-Ciocalteu.    Sebanyak  0,4  mL  larutan sampel ditambahkan 1,5 mL Folin-Ciocalteu reagent (10%,v/v).    Setelah  diinkubasi  5  menit  dicampur
dengan  1,5  mL  (w/v)  larutan  Na 2 CO 3 7,5%.  Setelah 90 menit inkubasi pada suhu ruang dan gelap diukur absorbansi  pada  765  nm.  Asam  galat  digunakan sebagai standar. Hasil yang didapat direpresentasikan  sebagai  mg  ekuivalen  asam  galat (GAE)/g bahan.
Analisis  Aktivitas  Antibakteri  (Doughari et  al., 2006).
Aktivitas  antibakteri  ditunjukan  dengan panjang  diameter  zona  bening  yang  terbentuk. Media  NA  steril  sebanyak  20  mL  diinokulasikan dengan  20  µL  kultur  segar  berumur  24  jam  dalam media NB, dikocok merata kemudian dituang dalam cawan  petri  steril  dan  dibiarkan  membeku. Sebanyak  10  µL  ekstrak  kelopak  bunga  rosela diteteskan  dalam  kertas  cakram  berukuran  6  mm, kemudian kertas cakram diletakkan pada cawan petri yang  berisi  media  agar  padat.    Selanjutnya  cawan- cawan  diinkubasi  selama  24  jam  pada  suhu  37 o C. Pengamatan  dilakukan  dengan  mengukur  zona bening  di  sekitar  kertas  cakram  dengan  alat  kaliper yang  menyatakan besarnya aktivitas antibakteri.

## Pengolahan dan Analisis Data
Data yang diperoleh dianalisa menggunakan  analisis  sidik  ragam  pada  tingkat keyakinan  5%,  Duncan Multiple  Range  Test serta regresi linier.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Kadar Air
Hasil  penelitian  sebagaimana  terlihat  pada Gambar  1  menunjukkan  bahwa  pada  semua  metode pengeringan,  makin  lama  waktu  pengeringan  maka kadar  air  dalam  kelopak  rosela  kering  yang dihasilkan  makin  turun.    Kondisi  ini  ditunjukkan dengan tanda negatif pada slope persamaan.  Hal ini karena  makin  lama  terjadi  kontak  antara  udara
kering dengan  material  menyebabkan  makin banyak perpindahan  massa  air  dari  material.    Hal  ini  sesuai penelitian  oleh  Husni et  al. (2014)  yang  menyatakan bahwa  penurunan  kadar  air  akan  terus  berlangsung dengan  semakin  lamanya  waktu  pengeringan. Mardiah et al. (2012) menyatakan bahwa panas yang melewati  tumpukan  bahan  menyebabkan  air  keluar dari    bahan.  Makin  besar  jumlah  panas,  jumlah  air yang diuapkan  juga makin besar, sehingga kadar air bahan  akan  berkurang.    Akibatnya  rendemen kelopak  rosela  kering  yang  dihasilkan  pun  semakin sedikit.
Hasil  penelitian  juga  menunjukan  nilai kadar  air  yang  berbeda  untuk  setiap  metode pengeringan.    Kadar  air  kelopak  rosela  kering  yang dihasilkan  menggunakan  metode  pengering  kabinet yaitu  7,5%.    Nilai  ini  lebih  rendah  dibandingkan metode  pengering  sinar  matahari  yaitu  11,30%  dan metode    ERK  yaitu  64,38%.    Perbedaan  ini disebabkan  karena  pada  metode  pengering  kabinet, suhu  yang  digunakan  konstan,  tidak  berfluktuasi seperti  pada  pengering  matahari  dan  ERK.    Suhu pengeringan  yang  konstan  akan  mengakibatkan penguapan  massa  air  dari  kelopak  bunga  rosela berjalan kontinyu seiring lamanya waktu pengeringan.    Menurut Husni  et  al .  (2014),    suhu pengeringan dibawah sinar matahari cenderung tidak stabil,  sehingga  kelopak  bunga  rosela  yang  dikering menggunakan  metode  ini  tidak  dapat  menguap dengan konstan.
Selain  itu,  metode  pengering  kabinet merupakan pengeringan yang terkontrol menggunakan  suhu  50°C,  sedangkan  pada  metode pengering  matahari  dan  ERK  suhu  rata-rata  yang terukur  berturut-turut  40°C  dan  35°C.    Akibatnya, dengan suhu rata-rata dibawah suhu yang digunakan pada  metode  pengeringan  kabinet,  maka  kadar  air akhir  yang  dihasilkan  dari  metode  pengeringan matahari  dan  ERK  lebih  tinggi  dibandingkan  kadar air  yang  dihasilkan  dari  metode  pengering  kabinet.
Gambar 1.  Pengaruh variasi lama pengeringan terhadap kadar air rosela pada berbagai metode pengering
0 20 40 60 80 100 120 0 1 3 5 7 K ad ar A ir ( %) Lama Pengeringan (Jam) Pengeringan Matahari Pengeringan Kabinet Pengeringan ERK Linear (Pengeringan Matahari) Linear (Pengeringan Kabinet) Linear (Pengeringan ERK) y= -2,28x + 90,07 R 2 = 0,89 y= -16,78x + 116,8 R 2 = 0,75
y= -22,93x + 122,8
R 2 = 0,94
Perbedaan suhu pengeringan juga mengakibatkan  perbedaan  laju  pengeringan.    Pada Gambar 1 juga terlihat bahwa laju pengeringan yang dinyatakan  oleh slope persamaaan  linier  regresi menggunakan  metode  pengering  kabinet  adalah 22,93.    Nilai  ini  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan metode  pengering  matahari  yaitu  16,78  maupun metode efek rumah kaca yaitu 2,29.  Persamaan y = -22,93x  +  122,8  ini  berarti  dengan  menggunakan metode  pengering  kabinet,  setiap  penambahan lama  pengeringan  setiap  satu  satuan  waktu  akan menurunkan  kadar  air bahan sebesar 22,98 satuan. Sehingga  dapat  disimpulkan  laju  pengeringan menggunakan  pengering  kabinet  lebih  tinggi dibandingkan pengeringan  matahari  maupun ERK. Laju  pengeringan  yang  lebih  tinggi,  pada  jangka waktu pengeringan yang sama akan berakibat pada lebih  rendahnya  kadar  air  di  akhir  waktu pengeringan.
Hasil  penelitian  juga memperlihatkan bahwa  suhu  rata-rata  ERK  lebih  rendah  dari  suhu udara  luar.    Kondisi  ini  menunjukan  kinerja  alat dalam  menangkap energi panas sinar  matahari tidak 100%.    Selain  itu  penggunaan  blower  untuk meratakan  intensitas  panas  dalam  alat  diduga  justru mengakibatkan  panas  cepat  keluar  dari  alat.  Hal inilah  yang  diduga  mengakibatkan  kadar  air  rosela pada  metode  pengeringan  ERK  paling  tinggi  yaitu 64,38%.
Kadar  air  kelopak  rosela  kering  dipasaran berkisar 10-11%, sedangkan kadar air kelopak rosela kering yang menggunakan metode pengeringan sinar matahari  dengan  lama  pengeringan  7  jam  rata-rata adalah  11,3%.    Perbedaan  ini  karena  petani  rosela mengeringkan  kelopak  bunga  rosela  pada  paparan langsung  sinar  matahari  selama  lebih  dari  7  jam. Biasanya  setelah  sinar  matahari  mulai  redup, dilanjutkan  esok  hari  berikutnya.      Penggunaan metode  pengeringan  ini  karena  mudah  dan  murah. Hikmah et  al .  (2009)  menyatakan  bahwa  semakin lama  waktu  pengeringan  menyebabkan  penurunan rendemen dan kadar air yang dihasilkan.
Pengeringan merupakan proses penghilangan      sejumlah      air  dari    material.  Pada proses  pengeringan,  air  dihilangkan  dengan  prinsip perbedaan  kelembaban    antara    udara  pengering dengan  bahan  yang  dikeringkan.    Material  biasanya dikontakkan  dengan  udara  kering  yang  kemudian terjadi perpindahan massa air  dari material ke udara pengering  (Winarti et  al. ,  2015).    Secara  umum keuntungan  dari pengeringan adalah bahan menjadi awet  dengan  volume  bahan  menjadi  lebih  kecil sehingga memudahkan dalam pengangkutan, pembusukan  akan  terhenti,  dengan  demikian  bahan yang  dikeringkan  dapat  mempunyai  waktu  simpan yang lama.

## pH
Pengaruh  lama  pengeringan  dan  interaksi antara  metode  dan  lama  pengeringan  berbeda  nyata
terhadap  pH  ekstrak  rosela  yang  dihasilkan.    Pada Gambar 2 terlihat bahwa hingga lama pengeringan 7 jam,  makin  lama  waktu  pengeringan,  pH  ekstrak yang dihasilkan makin turun.
Gambar  2.  Pengaruh  variasi  lama  pengeringan terhadap  pH  ekstrak  rosela  yang dihasilkan
Makin  lama  waktu  pengeringan,    senyawa fenolik  yang  terdapat  pada  ekstrak  makin  banyak. Hal  inilah  yang  menyebabkan  nilai  pH  menurun. Senyawa  fenolik  yang  terdapat  pada  rosela  yang sebagian  besar  adalah  antosianin,  dapat  berfungsi pula sebagai senyawa antioksidan.  Semakin banyak senyawa fenolik, makin banyak senyawa antioksidan dalam ekstrak.  Menurut Husni et al. (2014) senyawa antioksidan dari kelompok fenolik berfungsi sebagai donor  hidrogen  yang  akan  menstabilkan  senyawa radikal.    Ion  H + inilah  yang  menentukan  tingkat keasaman.    Makin  banyak  ion  H+  makin  tinggi tingkat keasaman, makin turun nilai pH.
Hasil  penelitian  menunjukkan  makin  lama waktu pengeringan untuk semua metode pengeringan,  nilai  pH  makin  menurun.    Laju penurunan  pH  terbesar  adalah  pada  metode pengering  kabinet.    Nilai  pH  1  pada  pengering kabinet  dengan  lama  pengeringan  7  jam  berdampak terbatasnya  aplikasi  pada  pangan  karena  tingkat keasamannya  yang  terlalu  tinggi.    Sehingga  lama pengeringan  dapat  dilakukan  selama  5  jam,  agar nilai  pH  meningkat  dan  dapat  diaplikasikan  pada pangan.
Pada  Gambar  3  terlihat  bahwa slope persamaan  regresi  linier  metode  pengering  kabinet adalah  0,3.    Nilai  tersebut  lebih  besar  dibandingkan metode  pengering  matahari  dan  metode  efek  rumah kaca berturut-turut yaitu 0,1 dan 0,12.  Hal ini berarti pada  pengering  kabinet  setiap  penambahan  lama waktu  pengeringan  sebesar  satu  satuan  waktu  akan menurunkan nilai pH ekstrak  rosela yang dihasilkan sebesar  0,3  satuan.    Hal  ini  disebabkan  karena temperatur  pada  pengering  kabinet  dapat  dijaga konstan  dan  kontinyu  yaitu  pada  suhu  50°C.    Pada kondisi  ini  penggunaan  metode  pengering  kabinet dengan  suhu  50°C  belum  sampai  merusak  senyawa fenolik.    Bahkan  seiring  dengan  bertambahnya waktu pengeringan, senyawa fenolik yang terekstrak akan  semakin  banyak  karena  luas  permukaan  yang kontak dengan pelarut semakin besar.
0 1 2 3 4 0 1 3 5 7 pH Lama Pengeringan (Jam) Pengeringan Matahari Pengeringan Kabinet Pengeringan ERK
Gambar 3. Pengaruh interaksi lama pengeringan dan metode pengering terhadap pH ekstrak yang dihasilkan

## Senyawa Fenolik
Metode  dan  lama  pengeringan  memiliki peranan  penting  terhadap  stabilitas  senyawa  fenolik sebab  suhu  yang  terlampau  tinggi  dapat  merusak senyawa  fenolik  yang  berakibat  pada  turunnya aktivitas antibakteri (Planinic et al ., 2015).
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  lama pengeringan  berpengaruh  nyata  terhadap  jumlah senyawa fenolik yang terdapat pada ekstrak kelopak rosela  yang  dihasilkan.    Gambar  4  menunjukkan bahwa  makin  lama  waktu  pengeringan,  jumlah senyawa fenolik yang terdapat pada ekstrak kelopak rosela  yang  dihasilkan  makin  meningkat.    Kondisi ini  terjadi  karena  makin  lama  waktu  pengeringan jumlah air yang teruapkan makin banyak.  Sehingga untuk  satu  satuan  berat  yang  sama  jumlah  massa kering  kelopak  rosela  semakin  banyak.    Semakin banyak  jumlah  massa  kering  kelopak    rosela  akan menyebabkan semakin banyak jumlah luas permukaan  rosela  yang  kontak  dengan  pelarut. Kenaikan  senyawa  fenolik  yang  berbanding  lurus dengan  lama  pengeringan  sesuai  dengan  yang dilakukan  Huriawati et  al .  (2016)  yang  menyatakan bahwa  pengeringan  menyebabkan  kadar  air  dalam bahan menjadi rendah dan menyebabkan zat-zat atau senyawa bioaktif lebih terkonsentrasi. Pada penelitian ini lama pengeringan 7 jam menggunakan metode pengering kabinet menghasilkan total phenol tertinggi yaitu 22,43 mg/100 bahan (bb).
Variasi  metode  pengeringan  yaitu  ERK, pengering matahari, dan pengering kabinet memberikan pengaruh yang nyata terhadap kandungan  total  fenol  pada  ekstrak  kelopak  rosela yang  dihasilkan.    Hingga  lama  pengeringan  7  jam, total  phenol  pada  pengeringan  kabinet  lebih  tinggi dibandingkan  pengering  matahari  dan  pengering ERK.    Hal  ini  terjadi  karena  variasi  metode pengeringan  memiliki  perbedaan  suhu  pengeringan. Suhu pada pengering kabinet  50°C, sedangkan pada pengeringan  matahari  dan  efek  rumah  kaca memiliki suhu rata-rata 40°C dan 35°C.
Menurut Santosa dan Dewi (2009) pemanasan  dapat  melepaskan  ikatan-ikatan  asam fenolik  dari  jaringan  sel  sehingga  senyawa-senyawa yang terkandung didalamnya akan terekstrak keluar. Sari et al. (2012) menyatakan bahwa suhu pengeringan  optimal  untuk  mendapatkan  total senyawa fenolik maksimum adalah 60°C. Pengeringan  menggunakan  suhu  lebih  tinggi  dari 60°C,  setelah  4  menit  akan  mendegradasi  senyawa fenolik sehingga jumlahnya akan menurun.
Metode efek rumah kaca tidak lebih efektif dibandingkan dengan pengeringan langsung mengunakan  matahari.    Pada  metode  rumah  kaca, sinar matahari terlebih dahulu ditangkap oleh elemen penyimpan  panas  kemudian  panas  yang  ada  disebar ke  seluruh  alat  menggunakan blower sehingga intensitas  panas  lebih  rendah  dibandingkan  metode pengeringan  menggunakan  paparan  sinar  matahari langsung.
Perbedaan  efektivitas  metode  pengeringan juga dapat dilihat dari slope persamaan regresi linier masing-masing  metode  sepeti  terlihat  pada  Gambar 5.    Metode  pengering  kabinet  memiliki  slope  2,70. Nilai  ini  lebih  tinggi  dibandingkan  metode pengeringan  matahari  yaitu  0,85  dan  ERK  yaitu 0,35.

## Aktivitas Antibakteri
Aktivitas  antibakteri  dari  ekstrak  tanaman disebabkan kandungan senyawa bioaktif di dalamnya  (Al  Mamun et  al. ,  2011;  Bukar et  al. , 2010),  terutama  senyawa  fenolik.    Jumlah  dan  jenis senyawa  fenolik  yang  terdapat  dalam  ekstrak menentukan tinggi dan rendahnya aktivitas antibakteri  ekstrak.    Senyawa  fenolik  diproduksi oleh tanaman sebagai respon infeksi oleh mikroorganisme  kemudian  membentuk  kompleks dengan  dinding  mikroorganisme  tersebut.    Hal  ini sesuai  dengan Al-Hashimi,  (2012)  dan  Purbowati et al. (2015)  yang  menyatakan  bahwa  polifenolik  dari rosela mampu berfungsi sebagai zat antibakteri.
0 1 2 3 4 0 1 3 5 7 pH Lama Pengeringan (Jam) Pengeringan Matahari Pengeringan Kabinet Pengeringan ERK Linear (Pengeringan Matahari) Linear (Pengeringan Kabinet) Linear (Pengeringan ERK) y= -0,10x + 2,73 R 2 = 0,66
y= -0,30x + 3,16
R 2 = 0,98 y= -0,11x + 2,65 R 2 = 0,62
Aktivitas  antibakteri  dinyatakan  dengan panjang  diameter  zona  bening  yang  ditimbulkan  di sekitar  cakram.    Menurut  Mudi  dan  Ibrahim  (2008) panjang  diameter  kurang  dari  6  mm  menunjukkan ekstrak  tidak  aktif,  sedangkan  diameter  lebih  dari  6
mm,  ekstrak  diklasifikasikan  memiliki  aktivitas antibakteri.    Gambar  6  dan  7  menyajikan  hasil aktivitas  antibakteri  ekstrak  kelopak  rosela  pada berbagai waktu pengeringan terhadap Eschericia coli dan Staphylococcus aureus.
Gambar  4.  Pengaruh  variasi  lama  pengeringan  terhadap  kandungan  total  phenol  pada  ekstrak  rosela  yang dihasilkan
Gambar 5. Pengaruh variasi lama dan metode pengering terhadap senyawa fenolik ekstrak rosela yang dihasilkan
Gambar 6. Aktivitas antibakteri pada variasi lama dan metode pengeringan terhadap E coli
0 5 10 15 20 25 1 3 5 7 T o tal F en o l (m g /1 0 0 g ) Lama Pengeringan (Jam) Pengeringan Matahari Pengeringan Kabinet Pengeringan ERK 0 5 10 15 20 25 1 3 5 7 T o ta l F en o l (mg /1 0 0 g ) Lama Pengeringan (Jam) Pengeringan Matahari Pengeringan Kabinet Pengeringan ERK Linear (Pengeringan Matahari) Linear (Pengeringan Kabinet) Linear (Pengeringan ERK) y= 0,85x + 1,02 R 2 = 0,83 y= 2,70x + 1,93 R 2 = 0,66 y= 0,35x + 1,29 R 2 = 0,97 6 6.5 7 7.5 8 8.5 9 1 3 5 7 d ia me te r zo n a b en in g ( mm ) Waktu pengeringan (Jam) pengeringan matahari pengeringan kabinet pengeringan ERK Linear (pengeringan matahari) Linear (pengeringan kabinet) Linear (pengeringan ERK) y = 0,20x + 7,43 R 2 = 0,83 y = 0,23x + 6,43 R 2 = 0,94 y = 0,28x + 6,57 R 2 = 0,99
Gambar 7.  Aktivitas antibakteri pada variasi lama dan metode pengeringan terhadap S aureus
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  lama pengeringan  berpengaruh  nyata  terhadap  aktivitas antibakteri  ekstrak,  baik  terhadap Eschericia  coli maupun Staphylococcus aureus .  Hal ini disebabkan makin  lama  waktu  pengeringan,  senyawa  fenolik yang  terekstrak  semakin  banyak,  sehingga  akivitas antibakteri  pun  juga meningkat. Aktivitas antibakteri  ini  karena  kemampuan  dari  total  phenol untuk membentuk komplek dengan ekstraseluler dan protein  terlarut  dan  membentuk  kompleks  dengan dinding sel bakteri.
Penelitian  ini  menunjukan  bahwa  lama pengeringan  berpengaruh  nyata  terhadap  jumlah total  phenol  yang  ada  dalam  ekstrak.    Sehingga perbedaan  kandungan  total  phenol  berpengaruh terhadap perbedaan aktivitas antibakteri ekstrak yang dihasilkan.    Hal  ini  ditunjukkan  dengan  ekstrak rosela  yang  mampu  menghambat  pertumbuhan bakteri  yang  dicobakan  dengan  efek  beragam, tergantung species bakteri yang digunakan. Aktivitas antibakteri ekstrak terhadap Eschericia coli sebesar  8,74  mm.    Nilai  ini  lebih  tinggi dibandingkan  terhadap Staphylococcus  aureus yaitu 7,06 mm.  Hal ini dikarenakan mikroba gram positif yaitu Staphylococcus  aureus memiliki  dinding  sel yang  relatif  lebih  tebal  dibandingkan  bakteri  gram negatif Eschericia  coli .    Gram  positif  disusun  oleh dinding sel terdiri dari rantai tetrapeptida yang terdiri dari    L-alanil-D-isoglutamil-L-lisil-D-alanin  dan jembatan  interpeptida  yang  terdiri  dari  lima  unit glisin.    Unit  asam  muramat  disubstitusi    oleh tetrapeptida  yang  dihubungkan  oleh  jembatan interpeptida  dengan  ikatan  kovelan  yang  akan menghasilkan struktur yang kuat.  Pengujian ekstrak jahe  (Ajayi et  al .,  2017),  daun  teh  (Mudau  dan Ngezimana,  2014)  terhadap  aktivitas  antibakteri, menunjukan  bahwa S  aureus merupakan  bakteri yang paling resisten
Makin  lama  waktu  pengeringan  nilai  pH yang  dihasilkan  pun  makin  menurun  seiring  dengan meningkatnya jumlah fenol. Kemampuan antibakteri pada  pH  rendah  (2-4)  menurut  Purbowati et  al.
(2015)  juga  diduga  akibat  terjadinya    sinergisme antara komponen antibakteri dan komponen pengatur  keasaman.    Substitusi  antara  komponen antibakteri  dengan  asam  klorida  sebagai  halogen menyebabkan  kerusakan  membran  sel  lebih  efektif. Hal  ini  disebabkan  karena  adanya  ion  Cl  yang mengharuskan  sel  mengeluarkan  energi  ekstra. Ekstrak  rosela  yang  dihasilkan  memiliki  pH  di kisaran 1-3.

## KESIMPULAN DAN SARAN

## Kesimpulan
Aktivitas  antibakteri  senyawa  fenolik terbaik  diperoleh  dari  metode  pengering  kabinet dengan  lama  waktu  pengeringan  7  jam  yang memiliki  nilai  total  phenol,  pH,  dan  panjang diameter  zona  bening  pada Eschericia  coli dan Staphylococcus  aureus pada  urutan  masing-masing adalah:  22,43  mg  /  100;  1;  8,74  mm;  7,  06  mm Persamaan untuk laju pengeringan kabinet adalah Y = -22,93 + 122,8.

## Saran
Perlu  dilakukan  penelitian  lebih  lanjut mengenai  pengaruh  kadar  air  terhadap  aktivitas antioksidan ekstrak rosela.

## DAFTAR PUSTAKA
AOAC.    2000. Official  methods  of  analysis  of  the association  of  official  chemists  international, 17 th ed. The  Association  of  Official  Chemists International, Gaithersburg, USA.
Ajayi  OA,  Ola  OO,  dan  Akinwunmi  OO.    2017. Effect  of  drying  method  on  nutritional composition, sensory and antimicrobial properties  of  Ginger (Zinginber  officinale) . International Food Research Journal. 24(2):
614-620.
Al-Hashimi AG. 2012.  Antioxidant and antibacterial activities  of Hibiscus  sabdariffa L  extract.
6.7 6.75 6.8 6.85 6.9 6.95 7 7.05 7.1 1 3 5 7 d ia me te r zo n an b en in g ( mm ) waktu pengeringan (Jam) pengeringan matahari pengeringan kabinet pengeringan ERK Linear (pengeringan matahari) Linear (pengeringan kabinet) Linear (pengeringan ERK) y = 0,01x + 6,84 R 2 = 0,97
y = 0,03x + 6,74
R 2 = 0,65 y = 0,01x + 6,84 R 2 = 0,63
Africa  Journal  of  Food  Science. 6(21):506- 511.
Al-Mamun,  Khatun H, Nesa L, Islam R, Munira S. 2011.  In vitro evaluation of the antibacterial, cytotoxic  and  insecticidal  activities  of
Hibiscus sabdariffa fruits. Libyan Agriculture Research Center Journal International. 2 (3): 144-149.
Arueya  GL  dan  Akomolafe  BO.    2014.    Stability studies  of  microencapsulated  anthocyanin  of roselle  ( hibiscus  sabdariffa )  in  Native  Starch and its potential application in jam production .    Journal  Environment  Science, 8(7):112-122.
Bukar  A,  Uba  A,  dan  Oyeyi  TI.    2010. Phitochemical  analysis  and  antimicrobial activity of Parkia biglobosa (Jacq) Benth.extracts againt some food-borne microorganisms. Advanced in Environmental Biology. 4(1):74-79.
Chew YL, Goh JK, dan Lim YY.  2009.  Assessment of in vitro antioxidant capacity and polyfenolic composition of selected medicinal herbs from Leguminosae family in Peninsular  Malaysia. Food  Chemical .  116: 13-18.
Chumsri  P,  Sirichele  A,  dan  Itharat  A.    2008. Studies  on  the  optimum  condition  for extraction  and  concentration  of  roselle
( Hibiscus sabdariffa Linn ) extract.
Songklanakarin Journal Science and Technology .  30 ( Suppl) 133-139.
Doughari  JH.  2006.  Antimicrobial  activity  of Tamarindus  indica Linn. Tropical  Jurnal Pharmac Research . 5:597-603.
Ekechukwu  VO.  2010.  Solar  Drying  Technology:
An overview  Paper.  Presented  at  FUTO Alternative  Energy  Conference,  Federal University of Technology Owerri.
Hikmah AF, Budhiyanti SA,  dan Ekantari N.  2009. Pengaruh  pengeringan  terhadap  aktivitas antioksidan Spirulina  platensis .    Prosiding seminar Nasional Tahunan VI Hasil Penelitian  Perikanan  dan  Kelautan,  PA-04:1- 11.
Huriawati  FW, Yuhana  L,    dan  Mayasari  T.      2016. Pengaruh  metode  pengeringan  terhadap kualitas  serbuk  seresah E  acoroides dari Pantai Tawang Pacitan. Jurnal
Bioeksperimen. 2(1):38-40.
Husni  A,  Putra  DR,  dan  Lelana  IYB.    2014. Aktivitas  antioksidan Padina  sp pada berbagai  suhu  dan  lama  pengeringan. JPB Perikanan. 9(2):165-173.
Maksum  A    dan  Purbowati  ISM.    2018.  Optimasi ekstraksi senyawa fenolik dari kelopak bunga rosella ( Hibiscus sabdariffa ) berbantu gelombang mikro. Jurnal Penelitian Pertanian. 21(2): 91-104.
Mardiah.    2010.    Ekstraksi  kelopak  bunga  dan batang rosela ( Hibiscus sabdariffa L ) sebagai pewarna  alami.  [Disertasi].    Univ.  Juanda, Bogor.
Mardiah, Noli N, dan Mashudi. 2012. penentuanmetode  pengeringan  ( cabinet  dryer dan  fluidized  bed  dryer )  terhadap  komponen dan  kapasitas  antioksidan  pada  rosela  kering ( hibiscus  sabdariffal ). Jurnal    Pertanian. 3(2): 104-110.
Mudau  FN  dan  Ngezimana  W.    2014.  Effect    of different    drying    methods    on    chemical composition   and antimicrobial activity of bush tea  ( athrixia  phylicoides ). International Journal  Agriculture  & Biology. 16(5):1011– 1014.
Mudi  SY  dan  Ibrahim  H.    2008.    Activity  of Bryophillum  pinnatum S.  kurz  ekstracts  on respiratory  tract  pathogenic  bacteria. Bayero Journal  Pure  and  Applied  Science. 1(1):43- 48.
Planinić  M,  Aliakbarian  B,  Perego  P,  Greganić  K, Tomas S dan Bucić-Kojić A.  2015. Influence of temperature and drying time one  xtraction yield  of  phenolic  compounds  from  grape pomace variety Portogizac. Journal Chemical and Biochemical Engginering Q . 29 (3): 343 - 350.
Purbowati ISM, Syamsu K, Warsiki E, Rukmini HS.
2015. Evaluasi toksisitas, aktivitas antibakteri dan antioksidan komponen bioaktif  rosela  dengan  variasi  jenis  pelarut. Jurnal Teknologi Industri Pertanian . 25 (2) :
182-189.
Purbowati ISM, Syamsu K, Warsiki E dan Rukmini HS.  2016.  Optimizationof phenol extraction from  Roselle  ( Hibiscus  sabdariffa )  by micrawave asissted extraction as antibacterial and  antioxidant  agent. Jurnal  Teknologi Industri Pertanian . 26 (1): 9-22.
Ruangsri  P,  Chumsri  P,  Anschalee  S,  Arunpora  I.
2008.    Changes  in  quality  and  bioactive properties  of  concentrated  Roselle  ( Hibiscus sabdariffa Linn)  extract. Asian  Journal  of Food & Agro-industry . 1(02):62-67.
Sachin  VJ,  Low  CL,  dan  Mujumdar  AS.  2010.
Drying  of  Foods,    Vegetables    and  Fuits . Volume 1. Singapore.
Sangwan  A,  Kawatra  A,  dan  Sehgal  S.  2012. Nutritional  composition  of  ginger  powder prepared  using  various  drying  methods. Journal  Food  Science  Technology . 51(9): 2260-2262.
Santosa    B    dan  Dewi  L.    2009.    Kandungan antioksidan  dan  fenolik  total  pada  ekstrak rosela  dan  aplikasinya  pada  pembuatan  selai. Prosiding  Seminar  Nasional  Sans  dan Pendidikan Sans. IV(3):582-593.
Sari  DK,  Wardhani  DH,  dan  Prasetyaningrum  A.
2012.    Pengujian  kandungan  total  fenol
kappahycus alvarezzi dengan metode ekstraksi  ultasonic  dengan  variasi  suhu  dan waktu.    Jurusan  teknik  kimia  fakultas  teknik UNDIP.    Prosiding  NST  ke-3  tahun  2012. Fakultas  Teknik  Universitas  Wahid  Hasyim,
Semarang.
Sipahli  S,  Mohanlall    V,  dan  Mellem  JJ.    2017.
Stability  and  degradation  kinetic  of  crude
anthocyanin  extract  from H  sabdariffa .
Journal Food Science
Technolology
Campinas. 37(2): 209-215.
Winarti  S,  Sudaryati,  dan  Usman  DS.    2015. Karakteristik  dan  aktivitas  Rosela  kering. Jurnal Rekapangan . 9(2): 17-23.