(Karantina  Ikan  Ngurah  Rai,  2004).  Kejadian lernaeosis di perairan Bangka Belitung mencapai 33% (Karantina Ikan Pangkalpinang, 2004).
P e n g e n d a l i a n l e r n a e o s i s d e n g a n menggunakan  bahan  kimia  maupun  antibiotik  untuk menanggulangi  infeksi  sekunder  yang  sudah  sering dilakukan  selama  ini  belum  dapat  memenuhi  target. Hal ini terbukti masih tingginya kejadian lernaeosis di kolam-kolam  budidaya  di  Indonesia  (Hardjamulia, 1 9 7 6 ) .   P e n g e n d a l i a n   p e n y a k i t   s e l a m a   i n i menggunakan  antiparasit  yang  dapat  menimbulkan resistensi  dan  residu  pada  ikan  sehingga  diperlukan bahan biologis untuk pengendaliannya (Lastuti, dkk., 2006).
Berdasarkan  permasalahan  tersebut  maka perlu dikembangkan cara pencegahan yang tepat dan akurat  melalui  penelitian  awal  dengan  cara mengidentifikasi whole protein  dari Lernaea dengan metode SDS-PAGE. Metode SDS-PAGE tersebut pada dasarnya  digunakan  untuk  mengkarakterisasi  protein dari ektoparasit yang mungkin terdapat di permukaan tubuh parasit ikan (Handajani dan Samsundari, 2005). Penelitian  ini  dilakukan  untuk  mengetahui  karakter protein L.  cyprinacea berdasarkan  berat  molekul dengan  SDS-PAGE.  Hasil  penelitian  ini  diharapkan dapat digunakan sebagai bahan acuan untuk penelitian lebih  lanjut  dalam  pembuatan  vaksin  untuk menanggulangi lernaeosis .

## Pendahuluan
Serangan  wabah  dan  hama  penyakit  ikan serta  penurunan  kualitas  lingkungan  budidaya merupakan faktor penyebab kegagalan usaha budidaya ikan  dan  udang  (Achjar  dan  Rismunandar,  2003). Lernaeosis adalah penyakit parasiter pada ikan yang disebabkan  oleh  serangan  ektoparasit  copepoda  dari genus Lernaea . Ektoparasit ini dapat ditemukan pada seluruh  permukaan  tubuh,  rongga  mulut  dan  insang ikan  (de  Magalhaes,  2006).  Kabata  (1985) menjelaskan bahwa lima spesies Lernaea ditemukan di Asia  Tenggara  dan L.  cyprinacea (Linnaeus,1758) merupakan jenis yang umum ditemukan, khususnya di daerah tropis seperti Indonesia.
Ektoparasit  ini  menyerang  ikan  liar,  ikan budidaya, ikan hias bahkan dapat juga ditemukan pada amphibi  seperti  katak  (Nagasawa et  al. ,  2007).
Kematian  pada  ikan  dapat  disebabkan  karena kekurangan  darah  dan  infeksi  sekunder  oleh  bakteri dan jamur (Perez-Bote, 2006).
Kejadian lernaeosis pada kolam budidaya di Indonesia  perlu  mendapatkan  perhatian,  kerena kejadian  lernaeosis  sering  menyerang  ikan  budidaya baik  di  kolam  maupun  keramba  jaring  apung (Karantina Ikan Ngurah Rai, 2004). Pos Karantina Ikan El  Tari  Kupang  (2004)  melaporkan  bahwa  kejadian lernaeosis  di  Kabupaten  Kupang  mencapai  33,33%, sedangkan  pada  karamba  jaring  apung  ikan  nila  di Kabupaten Bangli mencapai 60% dalam kurun dua hari

## KARAKTERISASI  PROTEIN
Lernaea cyprinacea DENGAN METODE ELEKTROFORESIS SDS-PAGE
CHARACTERIZATION OF PROTEIN Lernaea cyprinacea BY USING SDS-PAGE ELECTROPHORESIS METHOD
Gunanti Mahasri, Ulia Fajriah dan Sri Subekti
Fakultas Perikanan dan Kelautan Universitas Airlangga Kampus C Mulyorejo - Surabaya, 60115 Telp. 031-5911451

## Abstract
One of the diseases that often attack are fish is parasitic disease caused by Lernaea cyprinacea, called Lernaeosis . This ectoparasites could be detected on skin, gill, eyes, fin or inside of mouth and  nostril of fishes. The aim of the study was to know the character is tic of L.cyprinacea protein based on molecular weight using SDS-PAGE. The results of this study were expected as Lernaeosi s vaccine candidate. The experiment used SDS-PAGE with 12% separating gel, 3% stacking gel, voltage 110 volts 28 A and gel staining using coomassie blue. The result showed that, there were eight protein bands with molecular weight 82.3, 73.3, 66.6, 60.5, 54.9, 27.5, 23.1  and 19.8 kDa. Among them, the bands with molecular weight 27.5, 23.1 and 19.8 kDa were thicker and clearer than the others.
Key words : Lernaeosis, SDS-PAGE, protein
Bahan  utama  dari  penelitian  ini  adalah parasit L.  cyprinacea stadia  dewasa  yang  diperoleh dari ikan gurami yang terserang lernaeosis . Ikan yang terserang lernaeosis terlebih  dahulu  dibersihkan dengan  menggunakan aquadest agar  kotoran  yang menempel di tubuh ikan hilang. Pengambilan Lernaea dilakukan secara manual dengan menggunakan pinset, dan diusahakan agar parasit secara utuh dapat tercabut. Identifikasi Lernaea dilakukan  menurut  kunci identifikasi  dari  Kabata  (1985). Lernaea yang terkumpul  dicuci  dengan aquadest agar  bebas  dari kotoran dan lendir.
Untuk  menentukan  konsentrasi  protein digunakan  metode  Bradford  dengan  kit Bio-Rad Protein  Assay dan  dibaca  dengan  menggunakan spektrofotometer UV-Visible  dengan  panjang gelombang 595 nm.
Analisis  protein L.  cyprinacea dilakukan dengan  teknik  SDS-PAGE  dengan  komposisi separating  gel  12%  dan  stacking  gel  3%.  Larutan akrilamid  12%  dimasukkan  dalam glass  plate , dilanjutkan dengan pemberian butanol diatas gel dan dibiarkan  hingga  mengeras.  Butanol  dibuang  dan dikeringkan  dengan  menggunakan  kertas  saring whatmann. Larutan  akrilamid  3%  dituangkan  diatas separating gel yang telah mengeras. Kemudian comb atau  sisir  dipasang  pada  gel  dan  biarkan  beberapa menit  hingga  gel  mengeras  dan comb dilepas.  Gel beserta platenya dipasangkan pada alat elekroforesis, kemudian  dituangkan running  buffer hingga  gel terendam.
Sampel  yang  akan  dielektroforesis  terlebih dahulu diberi laemmli buffer dengan perbandingan 1 :
1, kemudian dipanaskan selama 3 – 5 menit. Sampel yang telah dipanaskan dimasukkan pada sumur-sumur yang  terdapat  pada  gel  yang  telah  direndam  oleh running  buffer.  Sebagai  marker,  digunakan  protein dengan  berat  molekul  pada  kisaran  11  –  95  kDa (PeqGOLD,  Peqlab  Biotechnologie  GmbH).  Alat elektroforesis  ditutup  dan  mesin  dijalankan  dengan tegangan  listrik  110  volt  dan  28 A.  Setelah running selesai  yang  ditandai  dengan  warna  biru  yang diperoleh dari laemmli buffer telah bergerak ke bagian bawah gel, mesin dimatikan dan gel direndam dalam larutan pewarna ( Comassie Brilliant Blue ). Pewarnaan dengan coomassie blue dilakukan dengan perendaman gel  hasil running dalam  larutan staining sambil digoyang dengan shaker selama 30 menit.
Hasil  pewarnaan  direndam  dalam  150  ml
asam  asetat,  kemudian  direndam  dalam  larutan destaining sambil  digoyang  selama  30  menit.  Hasil rendaman kemudian dicuci dengan asam asetat sampai
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui karakter  protein L.  cyprinacea dengan  metode  SDS- PAGE.

## Materi dan Metode Penelitian
Tempat dan Waktu Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Biologi  Molekuler  Veteriner,  Laboratorium  Patologi Klinik  Fakultas  Kedokteran  Hewan  Universitas Airlangga,  Laboratorium  Pendidikan  Perikanan Fakultas  Perikanan  dan  Kelautan  Universitas Airlangga dan Laboratorium Biokimia Jurusan Kimia Fakultas  Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam Universitas Brawijaya Malang pada bulan September sampai dengan bulan Oktober 2008.
Peralatan Penelitian
Peralatan  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  yaitu  nampan  bedah,  mikroskop  cahaya,  cawan Petri,  pinset,  tabung  reaksi,  pipet,  mikropipet, tip, object glass, cover glass, beaker glass, kertas saring whatmann  no.  1,  mortar,  tubes  dan  microtubes, sentrifus, peralatan elektrophoresis (Merek Bio-Rad), Chamber untuk running SDS-PAGE  (Merek  Bio- R a d ) , f re e z e r ( - 2 0 º C ) , w a t e r b a t h   s h a k e r (SibataWS120Japan).

## Bahan Penelitian
L.  cyprinacea yang  digunakan  pada penelitian  ini  diperoleh  dari  ikan  gurami ( Osphronemus  gouramy )  yang  terinfestasi Lernaea .
Bahan  yang  digunakan  untuk  isolasi L.  cyprinacea yaitu aquadest, 1 x P hosphate Buffered Saline Tween- 20 (PBST), Phenylmethylsulfonyl  Fluoride (PMSF), Ethanol  absolut, Buffer Tris-Cl, Phosphate  Buffered Saline (PBS).
Bahan yang digunakan untuk analisis protein dengan  metode  SDS-PAGE  adalah butanol, Acrylamide,  bis  Acrylamide,  ammonium  persulphate (APS), Tetra Methyl Diamine (TEMED), tris HCl, E buffer, deterjen Sodium  Dodecyl  Sulphate (SDS), methanol,  asam  asetat, formaldehyde, ddH2O  dan pewarna Comassie Brilliant Blue .
Metode Penelitian
Metode  penelitian  yang  digunakan  adalah metode deskriptif yaitu penelitian yang berusaha untuk menuturkan  pemecahan  masalah  yang  ada  saat  ini berdasarkan  data,  diharapkan  penelitian  ini  dapat menjawab  pertanyaan  tentang  bagaimana  karakter protein parasit L. cyprinacea (Narbuko dan Achmadi, 2007).
Keterangan :   a.  Bagian Sirip pectoral b.  Bagian rongga mulut c.  Lernaea yang menancap pada permukaan tubuh ikan
Karakterisasi  protein L.  cyprinacea yang dilakukan  dengan  teknik  SDS-PAGE  dengan separating  gel  12%  dan  Stacking  gel  3%  dengan pewarnaan gel menggunakan coomassie brilliant blue . Proses  elektroforesis  menggunakan  tegangan  listrik 110  volt  dengan  28  A.  Gel  hasil  SDS-PAGE memperlihatkan  adanya  delapan  pita  ( band )  protein. Perhitungan berat molekul dari protein Lernaea yang diperoleh  dapat  dilakukan  dengan  menggunakan regresi  linear.  Hasil  isolasi  protein  menunjukkan bahwa  dari  694 Lernaea didapatkan crude  protein berupa pelet yang disimpan dalam suhu -21ºC dalam larutan Buffer Tris-Cl 20 mM.
Crude protein  yang  dihasilkan,  kemudian diukur  konsentrasinya  dengan  menggunakan spektrofotometer UV-Visible  dengan  panjang gelombang  595  nm.  Setelah  dilakukan  pemeriksaan dengan  menggunakan spektrofotometer UV-Visible konsentrasi  protein  pada  sampel Lernaea diperoleh hasil 10,6849; 12,4662 dan 11,3986 µg/ml.
Gambar   2. Hasil Karakterisasi Protein L. cyprinacea dengan SDS-PAGE
Keterangan :  M = Marker, Lajur 1 – 8 = Protein
L. cyprinacea
Perhitungan  dilakukan  pada  marker  dengan perhitungan  nilai  Rf  ( Retardation  Factor ).  Nilai  Rf diperoleh dengan pembagian jarak pergerakan protein dari tempat awal dengan jarak pergerakan warna dari tempat awal. Nilai Rf tersebut dan nilai log dari Berat Molekul  (BM)  marker  kemudian  dimasukkan  pada rumus regresi linear dengan rumus Y = a + bX.
Berdasarkan  hasil  perhitungan  Rf  dan  log BM pada marker protein diperoleh persamaan regresi linear yaitu: Y = 2,0826 – 1,1199 X. Pita Protein yang diperoleh  dari  hasil  SDS-PAGE  dihitung  nilai  Rf, kemudian dimasukkan pada persamaan regresi linear
digoyang  dengan shaker. Hasil  eletroforesis  yang berupa band dapat  dilakukan  perhitungan  Rf ( Retardation Factor ) dari masing-masing band dengan rumus (Rantam, 2003):
Rf =
Kemudian  nilai  Rf  dimasukkan  dalam  persamaan regresi linear dengan rumus:
Y = a + bX Keterangan :  Y = berat molekul X = nilai Rf sampel

## Hasil dan Pembahasan
Penelitian ini menggunakan sampel Lernaea cyprinacea yang  diperoleh  dari  ikan  gurami ( Osphronemus gouramy ) pada Kolam Ikan Pendidikan
Fakultas  Perikanan  dan  Kelautan  Universitas Airlangga.  Secara  makroskopis  tubuh  ikan  gurami yang  terserang Lernaea terdapat  parasit  menyerupai cacing bewarna putih yang menancap pada permukaan tubuh, sirip, insang dan bagian dalam mulut ikan. Ikan yang terserang Lernaea akan berenang kepermukaan kolam  sambil  menggosokkan  diri  pada  pematang kolam maupun benda-benda asing disekitar kolam. Hal ini akan mengakibatkan luka pada seluruh tubuh ikan.
Berat badan ikan akan menurun, anemia dan akhirnya ikan akan mati.
Berdasarkan  hasil  identifikasi  menurut Kabata  (1985)  menunjukkan  bahwa  Lernaea  yang ditemukan  adalah L.  Cyprinacea. Secara  morfologi Lernaea yang  ditemukan  memiliki  ciri-ciri  yaitu berbentuk  seperti  cacing  yang  menancap  pada permukaan tubuh ikan, tubuh Lernaea yang ditemukan tidak  memiliki  segmen,  memiliki  kantung  telur berwarna hijau dibagian posterior tubuh. Jika Lernaea diambil dari tubuh ikan, pada bagian holdfast terdapat empat buah tanduk, dimana dua bagian tanduk lebih panjang dibandingkan dua bagian lainnya. Gambaran ikan gurami yang terserang oleh L. cyprinacea dapat dilihat pada Gambar 1.
Gambar  1.    Panah  menunjukkan  bagian  tubuh  yang terserang Lernaea
Jarak pergerakan warna dari tempat awal Jarak pergerakan protein dari tempat awal
a b c
Gambar 2. Diantara delapan pita protein tersebut pita protein  dengan  BM  27,5;  23,1  dan  19,8  kDa  terlihat lebih  tebal  dibandingkan  dengan  pita  protein  yang lain.
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan, lernaeosis dapat  menyebabkan  menurunnya  kualitas dan  kuantitas  dari  ikan  gurami.  Secara  kualitatif lernaeosis akan mengakibatkan penampilan dari ikan gurami  tidak  menarik  karena  terdapat  banyak  luka pada  seluruh  tubuh  ikan.  Hal  ini  akan  berakibat menurunnya nilai ekonomis dari ikan gurami sebagai ikan konsumsi.
Sampel L.  cyprinacea diperoleh  dari  ikan gurami ( O. gouramy ), yang merupakan jenis ikan air tawar  mudah  terinfestasi Lernaea. Hal  ini  sesuai dengan  pernyataan  Kabata  (1985).  Selanjutnya menurut  de  Magalhaes  (2006),  lernaeosis  dapat ditemukan  pada  seluruh  permukaan  tubuh,  rongga mulut  dan  insang  ikan.  Dalam  penelitian  ini  sampel Lernaea diperoleh  dari  seluruh  permukaan  tubuh, bagian rongga mulut dan insang ikan gurami.
Pengukuran  kadar  protein  pada  sampel Lernaea dilakukan  dengan  tiga  kali  pengulangan.
Rata-rata  hasil  perhitungan  kadar  protein  yang diperoleh adalah 10,6849; 12,4662 dan 11,3986 µg/ml. Dari  nilai  konsentrasi  protein  tersebut  sudah memenuhi  syarat  untuk  dilakukan  pemeriksaan  BM dengan  SDS-PAGE,  sesuai  dengan  pernyataan  dari Scope  (1993)  yang  menyatakan  bahwa  konsentrasi protein  terendah  yang  diperlukan  untuk  analisis protein yaitu sebesar 1,2 µg/ml.
Berdasarkan pita  protein  yang  terlihat pada gel poliakrilamid dengan separating gel 12%, stacking gel  3%,  tegangan  listrik  110  volt  28  A  dan elektroforegram pewarnaan gel dengan coomasie blue diperoleh  delapan  pita  protein  dengan  berat  molekul 82,3; 73,3; 66,6; 60,5; 54,9; 27,5; 23,1 dan 19,8 kDa. Untuk  membedakan gel  12%,  digunakan  untuk memisahkan protein dengan berat molekul 14 – 66 kDa protein.  Semakin  kecil  persentase  gel  yang  akan digunakan, maka semakin besar berat molekul protein yang  dapat dipisahkan. Kindmann and Valley (1991), menyebutkan  bahwa  tegangan  pada  elektroforesis mempunyai dua kelebihan yaitu memberikan gradien ruang gerak yang luas pada saat separasi. Sedangkan kondisi  lingkungan  elektrolit  yang  tinggi  akan mempercepat migrasi partikel. Oleh sebab itu tegangan juga  dapat  mempengaruhi  munculnya  pita  ( band ) protein yang dihasilkan.
Diantara delapan pita protein yang terbentuk, pita  protein  dengan  BM  27,5,  23,1  dan  19,8  kDa terlihat  pita  protein  yang  terbentuk  lebih  tebal  jika
Tabel 1. Perhitungan Rf dan Log BM
Keterangan :  Panjang gel = 67 mm
Tabel 2. Perhitungan protein BM L. cyprinacea
Keterangan :  Panjang gel = 67 mm Y = 2,0826 - 1, 1199 X
sehingga diperoleh nilai Y. Langkah selanjutnya dicari antilog dari nilai Y sehingga diperoleh Berat Molekul (BM)  protein L.  cyprinacea yang  sebenarnya. Karakterisasi  protein L.  cyprinacea yang dilakukan  dengan  teknik  SDS-PAGE  menunjukkan delapan  pita  (band)  protein  dengan  Berat  Molekul (BM) berturut-turut 82,3; 73,3; 66,6; 60,5; 54,9; 27,5; 23,1  dan  19,8  kDa.  Hasil  karakterisasi  protein L. cyprinacea dengan  SDS-PAGE  dapat  dilihat  pada
Karakterisasi Protein Lernaea cyprinacea ......
Pita Protein Jarak Pergerakan Protein (mm) Nilai Rf Nilai Y dari Regresi Linear BM (kDa) 1 10 0,1492 1,9155 82,3 2 13 0,1940 1,8653 73,3 3 15,5 0,2313 1,8236 66,6 4 18 0,2686 1,7818 60,5 5 20,5 0,3060 1,7399 54,9 6 38,5 0,5476 1,4391 27,5 7 43 0,6418 1,3638 23,1 8 47 0,7015 1,2970 19,8 BM Marker (kDa) Jarak Pergerakan Protein (mm) Nilai Rf Log BM 95 10 0,1492 1,9777 72 14 0,2090 1,8573 55 20 0,2985 1,7404 36 30 0,4478 1,5563 28 32,5 0,4851 1,4472 17 52,5 0,7836 1,2304 11 64 0,9552 1,0414
Hardjamulia,  A.  1976.  Problem  in  Freshwater  Fish Breeding and the Results of the Introduction of  Improved  Techniques  in  Indonesia. Research  Institude  for  Inland  Fisheries, Sukabumi, Indonesia. http://www.apific.org/ Accessed April, 25, 2008. pp 313 – 324.
Kabata,  Z.,  1985.  Parasites  and  Diseases  of  Fish
Cultured  in  the  Tropics.  London  and Philadelphia:  Taylor  &  Francis.  Hal  227  – 242.
Karantina Ikan Kupang. 2004a. Laporan Pemantauan
Daerah  Sebar  Hama  dan  Penyakit  Ikan Karantina  Tahun  Anggaran  2004  Lingkup Pos  Karantina  Ikan  El  Tari  Kupang.  Pos Karantina  Ikan  El  Tari  Kupang,  Pusat Karantina  Ikan  Departemen  Kelautan  dan Perikanan. 26 hal.
Karantina  Ikan  Ngurah  Rai.  2004b.  Laporan Pemantauan  Hama  dan  Penyakit  Ikan Karantina di Propinsi Bali Tahun Anggaran 2004. Stasiun Karantina Ikan Kelas I Ngurah Rai-Bali. 66 hal.
Karantina  Ikan  Pangkalpinang.  2004c.  Laporan P e m a n t a u a n   P o s   K a r a n t i n a   I k a n Pangkalpinang Tahun 2004. Pusat Karantina Ikan  Departemen  Kelautan  dan  Perikanan. 30 hal.
Kindlmann, P.J. and R.A. Valley. 1991. High Voltage
Electrophoresis Apparatus.  Eastman  Kodak C o m p a n y   ( R o c h e s t e r ,   N Y ) . http://www.free.patentsononline.com. Accessed September, 2008. 5 pp.
Lastuti,  N.D.R.,  F.J.  Wibisono  dan  R.  Sidiq.  2006.
Identifikasi Profil Protein Sarcoptes scabiei pada Kambing dengan Analisis SDS-PAGE.
S u r a b a y a :   u n i v e r s i t a s   A i r l a n g g a . http://www.jurnal.unair.ac.id. 6 hal.
Mahasri,  G.  2007.  Protein  Membran  Imunogenik Zoothamnium  penaei sebagai  Bahan Pengembangan Imunostimulan pada Udang Windu  ( Penaeus  monodon  Fabricus ) terhadap Zoothamniosis . Disertasi. Program
Pascasarjana  Universitas  Airlangga. Surabaya.
Nagasawa, K., A. Inoue, Su Myat and T. Umino. 2007. New  Host  Records for Lernaea cyprinacea ( Copepoda ), a Parasite of Freshwater Fishes, with a Checklist of the Lernaeidae in Japan (1915-2007). Japan: Hiroshima University, J.
Grad. Sch. Biosp. Sci. 46: 21 – 33.
Narbuko,  C.,  dan  A.  Achmadi  2007.  Metodologi Penelitian. Jakarta: Bumi Aksara. Hal 44.
dibandingkan  dengan  pita  protein  yang  lain  yang terlihat lebih tipis. Hal ini dijelaskan oleh Pasila (2008) dimana  tebal  tipisnya  pita  protein  yang  tercat merupakan  gambaran  banyaknya  protein  yang terkandung dalam profil protein. Sedangkan menurut Tung et al. (1995) dalam Mahasri (2007) tebal tipisnya pita protein pada hasil SDS-PAGE disebabkan karena terdapat  perbedaan  secara  genetik  antara  protein tersebut.
Sedangkan  menurut  Tizard  (1987),  protein yang imunogenik mempunyai berat molekul lebih dari 1000  Dalton.  Bila  dilihat  dari  berat  molekul  protein yang dihasilkan pada penelitian ini, maka protein yang diperoleh  dianalisis  lebih  lanjut  seperti  melalui blotting untuk membuktikan protein tersebut termasuk protein  imunogenik  atau  tidak.  Akan  tetapi  untuk menentukan imunogenitas suatu protein masih banyak persyaratan lain. Persyaratan tersebut menurut Tizard (1987)  antara  lain  adalah  merupakan  makromolekul, mempunyai  struktur  kimia  yang  kompleks  dan memiliki sifat keasingan dimana sifat bahan tersebut dikenali sebagai bukan unsur tubuh normal.

## Kesimpulan
Protein L.  cyprinacea dapat  dikarakterisasi menggunakan  metode  SDS-PAGE  dan  diperoleh delapan pita ( band ) protein dengan berat molekul yaitu 82,3; 73,3; 66,6; 60,5; 54,9; 27,5; 23,1 dan 19,8 kDa.
Diantara  delapan  pita  protein  tersebut  pita  protein dengan berat molekul 27,5; 23,1 dan 19,8 kDa terlihat pita  protein  yang  terbentuk  lebih  tebal  dibandingkan dengan pita protein yang lain.
Dari  pita  ( band )  protein  yang  diperoleh melalui teknik SDS-PAGE diperlukan penelitian lebih lanjut  agar  nantinya  dapat  dijadikan  sebagai  bahan acuan dalam pembuatan vaksin yang akan digunakan dalam penanggulangan lernaeosis.

## Daftar Pustaka
Achjar, M dan Rismunandar. 2003. Perikanan Darat. Bandung: Sinar Baru Algensindo. Hal 89 – 92.
de  Magalhaes,  A.L.B.,  2006.  First  Record  of
Lernaeosis in a Native Fish Species from a Natural Environment in Minas Gerais State, Brazil. Pan-American Aquatic Scie., 1 (1): 8 – 10.
Handajani,  H.  dan  S.  Samsundari.  2005.  Parasit  dan Penyakit Ikan. UMM Press. Malang. Hal 83 – 90, 191 – 195.
Tizard,  I.  R.  1987.  Pengantar  Imunologi  Veteriner.
Penerjemah oleh: M. Partodiredjo. Airlangga University  Press.  Universitas  Airlangga. Surabaya. Hal. 237 – 255.
Waluyo, J. 2004. Purifikasi dan Karakterisasi Protein Antibakteri  dari  Cacing  Tanah.  Desertasi. P r o g r a m   P a s c a s a r j a n a   U n i v e r s i t a s Airlangga. Surabaya.
Perez-Bote,  J.  L.,  2005.  First  Record  of Lernaea cyprinacea ( Copepoda: Cyclopoida )  on  the Allis Shad. Folia boilogica ( Krakow ) Spain, 53 (3 – 4): 197 – 198.
Rantam,  F.  A.  2003.  Metode  Imunologi.  Surabaya.
Airlangga University Press.hal 145 – 162.
Scopes, R. K. 1993. Protein Purification Principles and
Practice, Third Edition. New York: Springer- vertag.