## A R T I K E L

## Aplikasi  Konsorsium Mikrob Filosfer dan Rizosfer Untuk Meningkatkan Pertumbuhan dan Hasil  Tanaman Padi
Application of Phyllosphere and Rhizosphere Microbial Consortium to Improve Rice Growth and Production
Aris Aksarah Pas, Didy Sopandie, Trikoesoemaningtyas, Dwi Andreas Santosa
Institut Pertanian Bogor (IPB)
Kampus IPB Darmaga, PO BOX 220, Bogor 16002 Email : pasarisaksarah@yahoo.co.id Diterima : 23 Januari 2015 Revisi : 19  Maret  2015                             Disetujui : 26  Maret 2015

## ABSTRAK
Pendekatan secara biologi, memanfaatkan konsorsium mikrob filosfer dan mikrob rizosfer merupakan langkah alternatif mengurangi dampak negatif penggunaan pupuk sintetik,  untuk mencapai produksi padi yang tinggi. Penelitian ini bertujuan untuk mempelajari peran konsorsium mikrob filosfer dan mikrob rizosfer terhadap  pertumbuhan dan hasil tanaman padi. Penelitian dilakukan mulai bulan Januari hingga Mei 2014, di Green House Indonesian Centre For Biodiversity and Biotecnology , Bogor. Dalam penelitian ini digunakan konsorsium mikrob terbaik hasil seleksi, yaitu konsorsium mikrob filosfer Fm48 dari daun tumbuhan Emmerrilia ovalis Miq  Dandy  dan  konsorsium  mikrob  rizosfer  R15  dari  rizosfer  tumbuhan Physalis angulata L.  Penelitian menggunakan Rancangan Acak Kelompok (RAK) satu faktor,  yang terdiri atas tiga perlakuan, yaitu : pemberian pupuk N sintetik setengah dosis anjuran yaitu  30 N/ha, pemberian pupuk  N sintetik sesuai dosis anjuran, yaitu 60 kg N/ha dan pemberian kombinasi konsorsium mikrob filosfer  Fm48  dan  mikrob  rizosfer  R15  dengan  diberi  pupuk  N  sintetik    setengah  dosis  anjuran.  Hasil penelitian menunjukkan bahwa, aplikasi kombinasi konsorsium mikrob dengan pemberian pupuk N sintetik setengah dosis anjuran, meningkatkan jumlah anakan, bobot kering tanaman, jumlah anakan produktif dan bobot segar malai setara dengan pemberian pupuk N sintetik sesuai dosis anjuran.
kata kunci : konsorsium mikroba, isolat, filosfer, rizosfer

## ABSTRACT
Biological approach, by utilizing phyllosphere and rhizosphere microbial consortium, offers an alternative method to avoid the negative impact of synthetic fertilizer to the environment to achieve higher rice production. This research aims to study the role of phyllosphere and rhizosphere microbial consortium on the growth and yield of rice plants. The study was conducted from January to May 2014 in Green House Indonesian Centre For Biodiversity and Biotechnology, Bogor . Microbial consortium of phyllosphere Fm48 from plant leaves Emmerrilia ovalis Miq Dandy and microbial consortium of rhizosphere R15 from plant rhizosphere Physalis angulata L. are selected for this study. This research is designed in randomized block design with one factor, which consists of three treatments, namely: half recommended dose of synthetic N fertilizer  (30 kg N/ha), recommended dose of Synthetic N fertilizer (60 kg N/ha), and a combination of microbial consortium of phyllosphere and rhizosphere microbes plus half recommended dose of synthetic N fertilizer. The results show that the applications of microbial consortium combined with half of recommended dose of synthetic N fertilizer, increases the number of tillers, plant dry weight, number of productive tillers, and panicles fresh weight equivalent to the use of recommended dosage of synthetic N fertilizer.
keywords : microbial consortium, isolates, phyllosphere, rhizosphere.

## I. PENDAHULUAN
U mumnya pengelolaan lahan sawah di Indonesia,  untuk mencapai produksi padi yang tinggi, petani masih terus menggunakan
pupuk sintetik dalam memenuhi kebutuhan nutrisi tanaman. Penggunaan pupuk sintetik secara intensif pada lahan pertanian dalam jangka panjang dapat menyebabkan kerusakan
struktur tanah, penurunan kadar organik tanah, dan pencemaran lingkungan.
Pendekatan secara biologi dengan me- manfaatkan  konsorsium  mikrob  filosfer  dan mikron  rizosfer  yang  memiliki  kemampuan menambat N, melarutkan P dan menyekresikan hormon tumbuh tanaman merupakan salah satu langkah untuk mengurangi penggunaan pupuk anorganik dan memperbaiki kualitas lingkungan. Konsorsium mikrob adalah  kumpulan mikrob yang hidup bersama dan berinteraksi baik sesamanya maupun dengan tanaman inangnya (Lindquist, 2001). Mikrob tidak dapat dipisahkan dengan lingkungan biotik dan abiotik dari suatu ekosistem, karena berperan sebagai pengurai. Mikrob  yang  berada  di  dalam  tanah  (rizosfer) berperan penting dalam proses pembusukan, humifikasi  dan  mineralisasi  (Rao,  2007; Egamberdieva,  2008).  Mikrob  yang  menghuni daun  (filosfer)  yang  pada  mulanya  diragukan keberadaannya, kini telah diyakini peneliti berimplikasi nyata terhadap peningkatan prod- uksi  tanaman  (Vorholt,  2012;  Reisberg,  dkk., 2013).
Dewasa ini, para ilmuwan telah menemu- kan bahwa rhizobia endofit mampu menginfeksi beberapa spesies tanaman lain, seperti padi, jagung, barley, gandum, kanola dan selada serta berkembang baik pada ruang antar sel epidermis, korteks dan jaringan. Kolonisasi rhizobia  endofit  dalam  tanaman  dapat  me- ningkatkan pertumbuhan dan hasil gabah padi, gandum, jagung dan barley (Chi, dkk., 2010).
Para Ilmuan IRRI menyatakan, sejumlah besar N atmosfir terus menerus ditambat pada rizosfer  tanaman  padi  (Rao,  2007).  Aerenkim pada tanaman padi mentransfer udara dari atmosfir  ke  rizosfer.    Udara  yang  ditransfer  ke zona  perakaran  mengandung  cukup  N 2 untuk kegiatan penambatan N 2 oleh bakteri di dalam rizosfer. Bakteri tersebut termasuk dalam genus Beijerincka, Azotomonas, Pseudomonas, Flavobacterium, Azozpirillum, Azotobacter (Rao,  2007).  Hasil  penelitian  Hindersah  dan Tualar  (2004),  inokulasi  rizobakteria  memberi konstribusi sekitar 15 kg N/ha/tahun. Jena (1992) melaporkan, penyemprotan isolat bakteri yang mampu menambat N 2 pada daun tanaman padi meningkatkan hasil 20 – 34 persen . Padua, dkk.,
(2001) melaporkan bahwa bakteri penambat N 2
( Herbaspirillum seropodicae dan Bulkholderia brasilensis yang hidup pada daun tanaman padi secara nyata menyekresikan fitohormon auksin. Hasil  penelitian  Gusmaini  (2005),  melaporkan bahwa  pemberian  konsorsium  mikrob  filosfer meningkatkan serapan N, yang diikuti dengan peningkatan serapan P dan K pada tanaman padi.
Efektivitas pemanfaatan mikrob ditentu- kan kemampuannya beradaptasi dengan lingkungan. Kendala ini dijawab dengan meman- faatkan mikrob dalam bentuk konsorsium. Aplikasi mikrob dalam bentuk konsorsium dapat menurunkan resiko kegagalan pemanfaatan mikrob di lapangan.
Penelitian ini bertujuan untuk mempelajari peran  konsorsium  mikrob  filosfer  dan  mikrob rizosfer melalui kemampuannya dalam menam- bat N 2 , melarutkan P dan menghasilkan hormon tumbuh tanaman terhadap pertumbuhan dan hasil tanaman padi.

## II. METODOLOGI

## 2.1.  Desain penelitian
Penelitian dilaksanakan mulai bulan Januari hingga Mei 2014. Persiapan konsor- sium mikrob dilaksanakan di Laboratorium Bioteknologi Tanah, Departemen Ilmu Tanah dan  Sumberdaya  Lahan,  Fakultas  Pertanian, IPB.   Percobaan pot  dilaksanakan di Green House Indonesian Centre For Biodiversity and Biotecnology (ICBB)  Situ  Gede,  Bogor. Penelitian ini dilaksanakan menggunakan Rancangan Acak Kelompok (RAK) satu faktor. Perlakuan terdiri atas tiga perlakuan, yaitu ½ dosis N (Pemberian pupuk N sintetik setengah dosis anjuran), 1 dosis N (Pemberian  pupuk  N sintetik sesuai dosis anjuran) dan Pemberian kombinasi    konsorsium  mikrob  filosfer  Fm48 +  mikrob  rizosfer  R15  dengan  diberi  pupuk N sintetik setengah dosis anjuran. Setiap perlakuan terdiri atas 5 subunit percobaan diulang sebanyak 3 kali, sehingga terdapat 45 satuan percobaan. Peubah pertumbuhan yang diamati meliputi tinggi tanaman umur 30 dan 60 HST,  jumlah anakan umur 30 dan 60 HST, bobot basah dan bobot kering tanaman. Peubah hasil meliputi jumlah anakan produktif, bobot segar malai per rumpun, jumlah total biji per rumpun dan  bobot 1000 butir gabah.
Bahan media tanah yang digunakan berasal dari Desa Situ Burung Bogor, dibersihkan dari kotoran dengan menggunakan saringan 2 – 5 mm, kemudian ditimbang seberat 10 kg, dimasukkan ke dalam ember plastik, lalu diinkubasi selama 3 minggu.  Benih padi sebelum ditanam disterilisasi terlebih dahulu, yaitu direndam dengan alkohol 3 – 5 menit, kemudian direndam chlorox 3 persen selama 3 – 5 menit, dibersihkan dengan aquades hingga baunya hilang. Kemudian dimasukkan ke dalam petridis dan direndam dalam aquades selama tiga hari, hingga terbentuk tunas kecambah. Setelah berkecambah ditanam pada media pembibitan dari tanah yang steril selama satu minggu, selanjutnya bibit siap tanam. Bibit padi ditanam pada media yang telah disiapkan, satu minggu setelah tanam diinokulasikan masing- masing  3  konsorsium  mikrob  filosfer  dan mikrob rizosfer, yaitu dengan cara disemprot ke tanaman dan tanah masing-masing tanaman, dengan dosis 10 8 spk/ml, frekuensi pemberian 2 kali sebulan sebanyak 5 – 10 ml/tanaman sampai tanaman berumur 1 bulan. Selanjutnya pemberian dilakukan sebanyak 15 – 20 ml/ tanaman hingga 3 bulan 2 minggu (14 MST).
Penelitian ini menggunakan konsorsium mikrob filosfer dan mikrob rizosfer yang diisolasi dari ekosistem di wilayah pada Kabupaten Sigi Provinsi Sulawesi Tengah. Selanjutnya konsorsium diseleksi dengan metode seed treatment dan uji vegetatif. Dalam penelitian ini digunakan konsorsium terbaik hasil seleksi terhadap pertumbuhan dan hasil padi, yaitu konsorsium FM48 dan R15. Konsorsium mikrob Fm48 merupakan konsorsium filosfer dari daun tumbuhan Emmerrilia ovalis Miq Dandy dan konsorsium mikrob R15 merupakan konsorsium rizosfer  dari  rizosfer  tumbuhan Physalis angulata L.
Budidaya yang dilakukan berupa teknik budidaya penanaman padi sawah. Pengge- nangan dipertahankan selama fase vegetatif dan fase generatif. Bibit padi hasil semai ditanam pada pot yang telah disiapkan. Satu minggu setelah tanam diinokulasikan dengan konsorsium mikrob. Konsorsium mikrob  filosfer diinokulasikan dengan cara disemprot ke daun tanaman dan konsorsium mikrob rizosfer diinokulasikan dengan cara disemprot ke tanah. Penyemprotan dilakukan dengan dosis 10 8
spk/ml, frekuensi pemberian dua kali sebulan sebanyak 5 – 10 ml/tanaman sampai tanaman berumur 1 bulan. Selanjutnya pemberian dilakukan sebanyak 15 – 20 ml/tanaman hingga 3 bulan 2 minggu (14 MST). Perlakuan ½ dosis N diberi pupuk N setengah dosis anjuran, yaitu 30 kg N/ha, sedangkan perlakuan 1 dosis N diberi pupuk N sesuai dosis anjuran, yaitu 60 kg N/ha. Untuk mendukung pertumbuhan tanaman diberikan pupuk P dan K sesuai dosis anjuran yaitu 60 kg P 2 O 5 /ha dan 50 kg K 2 O/ha diberikan seluruhnya pada saat tanam.

## 2.2  Analisis Data
Data yang diperoleh diolah dengan analisis ragam dan apabila ada beda nyata dilanjutkan dengan Uji jarak berganda Duncan pada taraf 5 persen. Olah data menggunakan program computer SAS ( Statistical Analysis System) for windows versi 9.1 (Matjik dan Sumertajaya, 2006).
2.2.1.  Identifikasi Mikrob Secara Molekuler
Metode isolasi DNA mengacu pada publikasi  Atashpaz,  dkk.,  (2010)  yang  telah dimodifikasi.  Gen  16S  rRNA  diamplifikasi menggunakan mesin Polymerase Chain Reaction (PCR, dice mini TAKARA), Primer yang  digunakan  adalah  16F27  primer  5’AGA GTT TGA TCM TGG CTC AG-3’, R1492 5’-TAC GGY  TAC  CTT  GTT  ACG  ACTT-3’  (Santosa, 2001). PCR master mix ( Thermo  scientific dreamtaq green PCR Master mix(2x) ) disiapkan dalam volume akhir 50 µl yang mengandung 25µL PCR master mix , 5 µM primer forward , 5 µM primer reverse , 1 µl ekstrak DNA dan air bebas nuclease sampai volume akhir tercapai. Proses  amplifikasi  dilakukan  sebagai  berikut: denaturasi awal selama 3 menit pada suhu 95 o C, denaturasi pada suhu 95 o C selama 30 detik, annealing pada  suhu  48 o C selama 30 detik  dan  ekstension  pada  suhu  72 o C selama 1,5 menit. Setelah 30 siklus berakhir, ditambah dengan  ekstension  akhir  pada  suhu  72 o C selama 10 menit. Produk PCR dielektroforesis pada gel agarose 1,5 persen dengan tambahan pewarna ethidium bromide menggunakan buffer TAE  1x.  Produk  PCR  dikirim  ke  PT.  Genetika Science Indonesia, Jakarta untuk disekuen. Hasil sekuen DNA dibandingkan dengan sekuen pada database European Bioinformatic Institute (EBI) menggunakan piranti FA STA 3 pada situs http ://www.ebi.ac.uk .

## 2.2.2.  Uji  Kemampuan  Isolat  Menambat  N
2

## Secara Kualitatif
Uji kemampuan isolat untuk menambat N 2 secara kualitatif dilakukan dengan cara ditumbuhkan  pada  media  NFb  ( Nitrogen free bromthymol ) dengan komposisi per liter : asam malat 5,0 g, K 2 HPO 4 0,5 g; MgSO 4 .7H 2 O 0,2 g; NaCl 0,1 g; CaCl 2 .2H 2 O 0,02 g. Larutan unsur minor 2 ml, larutan bromthymol blue 0,5 persen dalam  2  N  KOH  2  ml,  FeEDTA  1,64  persen 4  ml,  vitamin    1  ml  dan  agar    1,75  g.  Tingkat keasaman  larutan  diatur  hingga  6,8  dengan pemberian KOH. Sepuluh (10) ml larutan kultur murni suspensikan dalam 90 ml larutan garam fisiologis steril, lalu lakukan pengenceran hingga 10 7 .  Satu  (1)  ml  ditambahkan  ke  media  NFb dan diinkubasi selama 1 minggu. Pelaksanaan diulang tiga kali. Setelah 1 minggu diinkubasi terjadi perubahan warna dari hijau menjadi biru dan membentuk pelikel putih di bawah permukaan. Penambatan N 2 oleh mikrob akan menyebabkan  kenaikan  pH  media  karena membentuk  NH 4 + .  Setelah  beberapa  hari  pH meningkat lebih dari 1,0 unit (Saraswati, dkk., 2007).

## 2.2.3.  Uji Kemampuan Mikrob Melarutkan P
Uji kemampuan bakteri melarutkan P dilakukan dengan menggunakan medium semi padat Pikovskaya yang mengandung 5 g glukosa,
5 g Ca3(PO 4 ) 2 ;  0,5  g  (NH 4 )2SO 4 ;  2  g  KCl;  0,1 g MgSO 4 .7H 2 O; 0,001 g MnSO 4 ; 0,001 FeSO 4 ; 0,5  g  yeast  ekstrak;  20  g  agar  dan  aquades 1000 ml.  Satu ml larutan dari pengenceran 10 - 4 , 10 -5 dan 10 -7 . Disebar ke dalam cawan petri. Kemudian dituang media agar Pikovskaya ke cawan petri dengan metode tuang ( pour plate ),
lalu dibiarkan membeku dan diinkubasi pada suhu  ruang  (37 o C) selama 1 – 3 hari. Adanya zona bening di sekitar bakteri mengindikasikan adanya kemampuan isolat bakteri melarutkan fosfat (Saraswati, dkk., 2007).

## 2.2.4.  Uji  Kemampuan  Mikrob  Menghasil kan Hormon Tumbuh Tanaman
Fitohormon  yang  dihasilkan  oleh  mikrob dikonsentrasikan pada tiga jenis, yaitu auksin, giberelin dan sitokonin yang dianalisis dengan menggunakan HPLC ( High Performance Liquid Chromatography ). Pengujian kemampuan konsorsium dalam menghasilkan auksin (IAA), giberelin  (GA3)  dan  sitokinin  (kinetin)  secara kuantitatif dengan menggunakan metode Unyayar, dkk., (1996). Konsorsium diinokulasi pada media NB + 20 metanol dan diinkubasikan dalam suhu ruang selama 24 jam pada mesin kocok 200 rpm. Supernatan dievaporasi pada mesin evaporasi pada suhu 35 o C. Ekstrak ditambah  dengan  HCl  2  M  hingga  pH  2,5. Partisi sebanyak tiga kali dengan etil asetat pada volume yang sama. Selanjutnya ekstrak disaring, kemudian diinjeksikan ke HPLC. Fase gerak asetonitril 12 persen dengan panjang gelombang 265 nm. Pengujian kemampuan konsorsium dalam menghasilkan sitokinin menggunakan HPLC. Ekstrak dilarutkan dengan 0,1 M KH 2 PO 4 pada pH 2,4, sentrifuge 8000 rpm pada suhu 4 o C selama 15 menit. Supernatan ditampung dalam botol yang berisi 1 g polyvenil polypirolidone. Dikocok lalu disaring, hasil penyaringan  difiltrasi  dengan  Sep-Pak  C18 (air  10  ml  +  sampel  dan  MeOH  80  persen  10 ml). Kemudian dibilas dengan air secukupnya. Larutan  diinjeksikan  ke  HPLC dengan fase gerak methanol 80 persen.
Tabel 1 .   Rata-rata  Tinggi  Tanaman  60  HST,  Jumlah Anakan  60  HST,  Bobot    Segar  dan  Bobot Kering Tanaman Saat Panen
Keterangan :   Rata-rata yang diikuti oleh huruf yang sama pada kolom yang sama menunjukkan tidak  beda nyata  berdasarkan    uji  DMRT  pada  taraf  nyata  0,05.  HST  =  Hari  sesudah  tanam,  Fm48  = konsorsium  mikrob  filosfer  dari  daun  muda  tumbuhan Emmerrilia ovalis Miq  Dandy,  R15  = konsorsium mikrob rizosfer dari rizosfer tumbuhan Physalis angulata L.

## III.  HASIL DAN PEMBAHASAN

## 3.1.  Komponen Pertumbuhan
Hasil  sidik  ragam  menunjukkan  bahwa perlakuan inokulasi kombinasi konsorsium Fm48 dan R15 berpengaruh nyata terhadap jumlah  anakan  umur  60  HST  (Hari  Sesudah Tanam) dan bobot kering tanaman pada saat panen, tetapi berpengaruh tidak nyata terhadap tinggi tanaman dan bobot segar tanaman padi, Tabel 1 menunjukkan pertumbuhan tanaman.
Hasil uji DMRT α = 5 persen menunjukkan bahwa perlakuan pemberian pupuk N sintetik sesuai dosis anjuran menghasilkan jumlah anakan  lebih  banyak  pada  umur  60  HST, meskipun tidak berbeda nyata dengan perlakuan inokulasi kombinasi  konsorsium Fm48 dan R15 dengan diberi pupuk N sintetik setengah dosis anjuran, tetapi berbeda nyata dengan perlakuan pemberian pupuk N sintetik setengah dosis anjuran. Namun, perlakuan  inokulasi kombinasi konsorsium  mikrob  Fm48 dan R15 dengan diberi pupuk N sintetik setengah dosis anjuran menghasilkan bobot kering tanaman lebih tinggi, meskipun tidak berbeda nyata dengan perlakuan pemberian pupuk N sintetik sesuai dosis anjuran, tetapi berbeda nyata dengan perlakuan pemberian pupuk N sintetik setengah dosis anjuran.
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa perlakuan inokulasi kombinasi konsorsium Fm48 dan R15 dengan diberi pupuk N sintetik setengah dosis anjuran dapat memberikan pengaruh setara dengan perlakuan pemberian pupuk N sintetik sesuai dosis anjuran dan lebih baik dibanding perlakuan pemberian pupuk  N  sintetik  setengah  dosis  anjuran.  Hal ini menunjukkan bahwa peran konsorsium mikrob  filosfer  dan  rizosfer  mampu  memacu
pertumbuhan tanaman dan menggantikan peran pemberian pupuk N sintetik setengah dari dosis anjuran. Knief, dkk., (2012) melaporkan bahwa sejauh ini, angka dari isolat bakteri dari filosfer padi telah dikenali dan potensi interaksi yang menguntungkan dengan tanaman padi, seperti memacu pertumbuhan tanaman, menambat nitrogen atau produksi hormon tanaman dan perlindungan terhadap patogen. Mikrob filosfer dapat meningkatkan resistensi tanaman terhadap  kondisi  tercekam  (Azevado,  dkk., 2000), meningkatkan pertumbuhan tanaman (Sturs dan Nowak, 2000), menghasilkan fitohormon  (Morris,  2001)  dan  menambat  N 2 (Arif,  dkk.,  2001;  Bodenhausen,  dkk.,    2014; Werner, dkk.,  2005).
Berdasarkan  hasil  identifikasi,  anggota konsorsium  mikrob  filosfer  Fm48  dari  daun muda tumbuhan Emmerrilia ovalis Miq Dandy dan  mikrob  rizosfer  R15  dari  akar  tumbuhan Physalis angulata L, masing-masing memiliki lima  anggota  konsorsium  mikrob  filosfer  dan empat  anggota  konsorsium  mikrob  rizosfer. Tabel 2 menunjukkan jenis mikrob penyusun konsorsium dan peranannya.
Isolat  Fm48(1)  adalah  sepadan  dengan Seratia sp Strain SE-3 homologi 95,5 persen kemungkinan merupakan spesies baru. Isolat Fm48(2)  sepadan  dengan Enterobacter sp Strain KDP6 homologi 96,4 persen kemungkinan merupakan  spesies  baru.  Isolat  Fm48(3) sepadan dengan Enterobacter sp Strain MS5 homologi 96,2 persen kemungkinan merupakan spesies  baru.  Isolat  Fm48(4)  sepadan  dengan Klebsiella oxytoca Strain LRC 162 homologi 96,6 persen kemungkinan merupakan spesies  baru.  Isolat  Fm48(5)  sepadan  dengan Acinetobacter sp Strain N12 homologi 94,5 persen kemungkinan merupakan spesies
Tabel 4 .  Hasil Uji Kandungan Hormon Konsorsium Mikrob Filosfer dan Rizosfer
Keterangan : Fm48 =  konsorsium mikrob filosfer Fm48 dari daun muda tumbuhan Emmerrilia ovalis Miq Dandy, R15 = konsorsium mikrob rizosfer dari akar tumbuhan Physalis angulata L.
baru. Isolat R15(1) adalah sepadan dengan Stenotrophomonas sp Strain  U1370-101126- SW193  Homologi  96,1  persen  kemungkinan merupakan spesies baru. Isolat R15(2) adalah sepadan dengan S. acidaminiphila Strain SZH19 Homologi 92,3 persen kemungkinan merupakan spesies baru. Isolat R15(3) adalah sepadan dengan Bacillus sp Strain  SC59  Homologi  86 persen kemungkinan merupakan spesies baru dan isolat R15(4) adalah sepadan dengan Stenotrophomonas sp Strain  BCc6  Homologi 95,9 persen kemungkinan merupakan spesies baru. Drancourt, dkk., (2000) menyatakan spesies dinyatakan sama, setidaknya urutan di Gen Bank menghasilkan skor kemiripan >97  persen.  Lebih  jauh  dijelaskan,  99  persen kesamaan  cocok  untuk  identifikasi  di  tingkat
spesies dan 97 persen kesamaan cocok untuk identifikasi pada tingkat genus.
Kemampuan mikrob menambat N2 secara kualitatif  dengan  metode  media  NFb,  Media NFb  merupakan  medium  semi  padat  bebas nitrogen. Bila mikrob mempunyai karakteristik aerotaktik, yaitu berpindah dari suatu tempat di dalam medium untuk mencari keseimbangan difusi oksigen. Mikrob akan membentuk pelikel pada 5 mm dari permukaan media. Mikrob akan berpindah ke permukaan setelah N di dalam sel sudah terakumulasi (Saraswati, dkk.,  2007).  Muthukumarasamy,  dkk.,  (2007) melaporkan  pada  uji  media  NFb,  pelikel bergerak ke permukaan media, awalnya pelikel berwarna putih berubah menjadi kuning. Hal ini
Tabel 3 .  Rata-Rata Jumlah Anakan Produktif, Bobot Segar Malai, Jumlah Biji per  Malai dan Bobot 1000 Biji pada Saat Panen
Keterangan :   Rata-rata yang diikuti oleh huruf yang sama pada kolom yang sama menunjukkan tidak  beda nyata  berdasarkan    uji  DMRT  pada  taraf  nyata  0,05.  HST  =  Hari  sesudah  tanam,  Fm48  = konsorsium  mikrob  filosfer  dari  daun  muda  tumbuhan Emmerrilia ovalis Miq  Dandy,  R15  = konsorsium mikrob rizosfer dari rizosfer tumbuhan Physalis angulata L.

## Tabel 2 .  Jenis Mikrob Anggota Konsorsium dan Perannya Terhadap Tanaman
Keterangan  :  Fm48  =  konsorsium  mikrob  filosfer  Fm48  dari  daun  muda    tumbuhan Emmerrilia ovalis Miq Dandy, R15 = konsorsium mikrob rizosfer dari akar tumbuhan Physalis angulata L., + (mampu), - (tidak mampu)
menunjukkan positif bagi pertumbuhan Spirillum spp., Gluconacetobacter , diazotrophicus dan Burkholderia spp.
Adanya penambatan N 2 dari mikrob yang diaplikasikan, meningkatkan pertumbuhan tanaman.  Gardner,  dkk.,  (1991)  menyatakan hubungan antara bakteri dan tanaman tingkat tinggi mempunyai kapasitas untuk mereduksi N 2 atmosfir  menjadi  amonia  (NH 3 ). Selain itu, kemampuan mikrob melarutkan P meningkatkan ketersediaan P bagi kebutuhan tanaman. Asosiasi antara tanaman dan mikrob penambat N 2 serta pelarut P sangat penting, karena N dan P adalah unsur hara makro esensial yang dibutuhkan tanaman. Nitrogen  merupakan bahan penyusun asam amino, amida, basa bernitrogen seperti purin dan protein serta bahan  penyusun  khlorofil.  Defisiensi  N membatasi pembesaran sel dan pembelahan sel serta mengganggu proses pertumbuhan yang menyebabkan tanaman kerdil, menguning dan berkurangnya berat kering hasil panen.

## 3.2.  Komponen Hasil
Hasil  sidik  ragam  menunjukkan  bahwa perlakuan inokulasi kombinasi  konsorsium Fm48 dan R15 berpengaruh nyata terhadap jumlah anakan produktif dan bobot segar malai pada saat panen, tetapi tidak berpengaruh nyata terhadap jumlah biji per malai dan bobot 1000 biji  tanaman padi, Tabel 3 menunjukan rata-rata
hasil tanaman padi.
Hasil uji DMRT α = 5 persen menunjukkan bahwa perlakuan inokulasi kombinasi konsor- sium  Fm48 dan R15 dengan diberi pupuk N sintetik setengah dosis anjuran setara dengan perlakuan pemberian pupuk N sintetik sesuai dosis anjuran terhadap jumlah anakan produktif pada saat panen, tetapi berbeda nyata dengan perlakuan pemberian pupuk N sintetik setengah dosis anjuran. Perlakuan inokulasi kombinasi konsorsium Fm48 dan R15 dengan diberi pupuk N sintetik setengah dosis anjuran menghasilkan bobot segar malai lebih tinggi, meskipun tidak berbeda nyata dengan perlakuan pemberian pupuk N sintetik sesuai dosis anjuran, tetapi berbeda nyata dengan perlakuan pemberian pupuk N sintetik setengah dosis anjuran.
Peran  konsorsium  mikrob  filosfer  dan rizosfer    berdasarkan  hasil  uji    kemampuan menghasilkan hormon menunjukkan peran anggota masing-masing konsorsium yang diberikan.  Hasil  uji  kemampuan  isolat  konsor- sium mikrob filosfer dan mikrob rizosfer meng- hasilkan hormon tumbuh, disajikan pada tabel 4.
Kandungan hormon IAA konsorsium mikrob  filosfer  Fm48  dan  mikrob  rizosfer  R15 secara kuantitatif adalah sedang, sebaliknya kandungan giberelin konsorsium adalah tinggi. Agustin, dkk., (2010) melaporkan kandungan IAA  pada  rizosfer  Jagung  sebesar  67,30  ppm.
Gambar 1 .    Perbandingan pertumbuhan dan hasil padi, pemberian pupuk N sintetik  setengah  dosis  anjuran, pemberian   pupuk N sintetik  sesuai  dosis anjuran  dan  pemberian  kombinasi  konsorsium mikrob filosfer dan mikrob rizosfer dengan pupuk N sintetik setengah dosis anjuran.
Hasil  penelitian  Gusmaini,  dkk.,  (2013),    isolat bakteri endofit mengandung  IAA 205,4 – 585,7 ppm dan Giberelin 39 – 60 ppm.
Chi, dkk., (2010) melaporkan bahwa selain sebagai  penambat  biologi,  kehadiran  rhizobia dalam akar memiliki banyak manfaat lain, yaitu produksi hormon tanaman seperti IAA dan GA. Hormon  ini  memacu  perluasan  permukaan dan arsitektur akar, sehingga meningkatkan kekuatan tumbuh bibit padi, efisiensi penyerapan fosfat, pelarut fosfat, meningkatkan respirasi akar, meningkatkan ketahanan terhadap cekaman lingkungan dan serangan patogen. Hasil  penelitian  Gofar  (2003)  menunjukkan bahwa konsorsium mikrob menghasilkan hormon  auksin  (IAA),  giberelin  (GA 3 ) dan sitokinin. Fitohormon yang terkandung di dalam mikrob penyusun konsorsium merangsang pembentukan akar, sehingga serapan hara lebih efektif. Secara alami, akar berperan sebagai saluran untuk mensuplai unsur hara dan air dari tanah ke tanaman dan lokasi sintesis serta pertukaran sejumlah hormon dalam tanaman. Pertumbuhan akar yang normal menjamin perkembangan tajuk yang normal.
Kemampuan konsorsium  Fm48 dan R15 mampu meningkatkan hasil karena konsorsium memiliki anggota penyusun yang berperan menambat N 2 , pelarut P dan menghasilkan hormon tumbuh tanaman, sehingga meningkat- kan pertumbuhan dan hasil tanaman padi. Peran mikrob tersebut selanjutnya berpengaruh terhadap peningkatan daya hasil tanaman padi. Jena (1992) melaporkan bahwa, isolat bakteri yang disemprot ke tanaman menunjukkan perbedaan dengan tanaman kontrol meliputi karakter pertumbuhan vegetatif, seperti pe- ningkatan tinggi tanaman, jumlah anakan dan peningkatan hasil. Peningkatan pertumbuhan dan hasil tanaman padi dipengaruhi oleh kemampuan mikrob menambat N 2 dan melarut- kan P serta menghasilkan hormon oleh konsor- sium mikrob filosfer isolat Fm48 dan konsorsium mikrob rizosfer isolat R15. Hal ini dapat dilihat pada Gambar 1.

## IV. KESIMPULAN
Konsorsium  FM48  dan  R15  memiliki kemampuan menambat N 2 , pelarut P dan meng- hasilkan hormon tumbuh tanaman. Aplikasi kombinasi  konsorsium  FM48  dan  R15  dengan
pemberian pupuk N sintetik setengah dosis anjuran, meningkatkan jumlah anakan, bobot kering tanaman, jumlah anakan produktif dan bobot segar malai setara dengan pemberian pupuk N sintetik sesuai dosis anjuran, sehingga inokulasi konsorsium mikrob filosfer dan mikrob rizosfer  memiliki  potensi  untuk  menurunkan penggunaan pupuk N sintetik sebesar 50 persen tanpa berpengaruh terhadap hasil.

## Ucapan Terima Kasih
Ucapan terima kasih disampaikan kepada Dirjend Dikti yang telah memberikan beasiswa BPPS tahun 2010 – 2014 dan Hibah Doktor tahun 2014.

## DAFTAR PUSTAKA
Agustin, Nuriyani, Maira L, Emalinda O. 2010. Rhizobakteria  Penghasil  Fitohormon  IAA  pada Rhizosfir  Tumbuhan  Semak  Karamunting, Titonia dan Tanaman Pangan. J. Solum .  VII (1)
: 49 – 60.
Arif    DH,  N  Nurlaeny,    R  Hindersah,  A  Nurbaity, R Saraswaty dan AI. Sumunar. 2001. Pemanfaatan  Bakteri  Filosfer  Pemfiksasi Nitrogen untuk Mensubstitusi Pupuk N Pada Padi Gogo .  Bandung : Laporan Penelitian pada Lembaga Penelitian Universitas Padjadjaran dan Balitbangtan, Proyek Pengkajian Teknologi Pertanian Partisipatif Pusat.
Atashpaz  S,  Khani  S,  Barzegari A,  Barar  J,  Vahed SZ,  Azarbaijani  R,  Omidi  Y.  2010.    A  Robust Universal Method for Extraction of Genomic DNA from Bacterial Species. MNKPOGNOJTOTNR, mom 79, No. 4, c.562-566 .
Azevado  JL.,  Maccheroni  WJr.  Pereira  JO.  2000. Endophytic Microorganism : A Review on Insect Control and Recent Advances on Tropical Plants. Electronic J. of Biotech 3(1):1 – 4. Available at : http://www.ejb.org/content/vol3/issue/full/4.
Bodenhausen N, Bortfeld M-Miller, Martin A, Vorholt JA, 2014 . A Synthetic Community Approach Reveals Plant Genotypes Affecting the Phyllosphere Microbiota. Department of Environmental  Sciences,  ETH  Zurich,  Zurich, Switzerland,  3  Department  of  Environmental Microbiology,  Eawag,  Dubendorf,  Switzerland. PLoS Genet 10(4):  e1004283.  doi:10.1371/ journal.pgen.1004283
Chi  F,  Yang  P,  Han  F,  Jing  Y,  Shen  S.  2010. Proteomic Analysis of Rice Seedlings Infected by Sinorhizobium meliloti 1021. Proteomics 10 : 1861 – 1874.
Drancourt M, Bollet  C, Carlioz A, Martelin R, Gayral JP, Raoulti  D. 2000. 16S Ribosomal DNA Sequence Analysis of a Large Collection of Environmental
and  Clinical  Unidentifiable  Bacterial  Isolates. Journal of Clinical Microbiology 38.10:  3623– 3630.  Copyright  ©  2007, American  Society  for Microbiology. All Rights Reserved.
Egamberdieva  D,  2008). Plant Growth Promoting Properties of Rhizobacteria Isolated from Wheat and Pea Grown in Loamy Sand Soil . Department of Biotechnology and Microbiology, National University  of  Uzbekistan,  Vuzgorodok,  100174 Tashkent, Uzbekistan. Turk J Biol 32 (2008) 9-15 Gardner  FP,  RB.  Pearce,  RL  Mitchel.  1991.
Fisiologi Tanaman Budidaya .  Herawati  Susilo penerjemah;  Jakarta  :  UI  Pr.  Terjemahan  dari Physiology of Crop Plants .
Gofar  N.  2003. Eksplorasi Konsorsium Mikrob Daun Asal Tumbuhan dari Ekosistem Air Hitam Kalimantan Tengah dan Aplikasinya Sebagai Pemacu Pertumbuhan Tanaman Jagung pada Ultisol . Disertasi pada Program Pascasarjana Universitas Padjadjaran.
Gusmaini  2005. Pemanfaatan Konsorsium Mikrob Daun Berasal dari Tumbuhan Ekosistem Air Hitam untuk Memacu Pertumbuhan Vegetatif dan Generatif Padi . [Tesis].  Bogor : Sekolah Pascasarjana Institut Pertanian Bogor.
Gusmaini, Azis SA, Munif A,  Sopandie D, Bermawie N. 2013. Potensi  Bakteri Endofit dalam Upaya Meningkatkan Pertumbuhan, Produksi, dan Kandungan Andrografolid pada Tanaman Sambiloto. Jurnal Littri 19(4): 167-177.
Hindersah R, Tualar  S. 2004.  Potensi Rizobakteri Azotobacter  dalam  Meningkatkan  Kesehatan Tanah. Jurnal Natur Indonesia 5(2):127-133 Jena GFV. 1992. Effect of Spraying Nitrogen Fixing Phyllospheric Bacterial Isolates on Rice Plants. Zentralbl. Mikrobiol. 147 (1992), 441-446.
Knief C, Nathanae, Delmotte1,  Chaffron S, Stark M,  Innerebner  G,  Wassmann  R,  Mering  C, Vorholt JA. 2012. Metaproteogenomic Analysis of Microbial Communities in the Phyllosphere and  Rhizosphere  of  Rice. Germany The ISME Journal (2012) 6, 1378–1390.
Lindquist JA. 2001. Bacteriological and Ecological Observation on the Northem Pitcher Plant, Sarracenia pupurea . Literature review , part III ; Plant Microbial Relationships.  Dept of Bacteriol Univ. Of Wisconsin, Madison, WI.
Matjik AA, Sumertajaya IM. 2006. Perancangan Percobaan dengan Aplikasi SAS dan MINITAB . Bogor : IPB Press.
Morris C. 2001.  Impact of Biofilms on the Ecology and Control of Epiphytic Bacteria. Interdisciplinary Plant Biology Seminar Spiker , January 29, 2001. Plant Pathology Station, INRA, France.
Muthukumarasamy  R,  Kang  UG,  Park  KD,  Jeon
WT, Park CY, Cho YS, Kwon SW, Song J,  Roh DH,  Revathi.(2007).  Enumeration,  Isolation and  Identification  of  Diazotrophs  from  Korean Wetland  Rice  Varieties  Grown  with  Long  Term Application of N and Compost and Their Short- Term Inoculation Effect on Rice Plant. Journal of Applied Microbiology 102 : 981-991. (2007). Padua VLM, masuda HP, Alves HM, Schwarcz KD, Baldani VLD, Ferreira PCG, Hemerly AS. 2001. Effect of Endophytic Bacterial Indole-Acetic Acid (IAA) on Rice Development .  Rio de Janeiro: Dept. Bioquimica medica.
Rao  NSS.    2007. Mikroorganisme Tanah dan Pertumbuhan Tanaman. Susilo, penerjemah. Jakarta:  UI Press. Terjemahan dari Soil Microorganism and Plant Growth . Oxford and IBM publishing CO.
Reisberg EE, Hildebrandt U, Riederer M, Hentschel U. 2013. Distinct Phyllosphere Bacterial Communities on Arabidopsis Wax Mutant Leaves. PLoS ONE 8(11): e78613. doi:10.1371/ journal.pone.0078613
Santosa DA, 2001. Rapid Extraction and Purification of Environmental DNA for Moleculer Cloning Application and Moleculer Diversity Studies. Molecular Biotecnologi . Vol. 17. 59-64. Saraswati  R,  Husen  E,  Simanungkalit  RDM.  2007. Metode Analisis Biologi Tanah . Jakarta : Balai Besar Litbang Sumberdaya Pertanian.  Badan Penelitian dan Pengembangan Pertanian. Departemen Pertanian.
Sturz AV., Nowak J. 2000.  Endophytic Communities of  Rhizobacteria  and  Strategis  Required  to Create Yield-Enhancing Association with Crops. Appl. Soil Ecol . 15 : 183 – 190.
Unyayar  S,  Topcuoglu  SF.  Unyayar  A.  1996.  A Modified Method for Extraction and Identification of  Indole-3-Acetic  Acid  (IAA),  Gibberellic  Acid (GA3), Abscicid Acid (ABA), and Zeatin Produced by Phanerochaete and Chrysosporium ME446. Bulg J. Plant Physiol . 22 (3-4) : 105-110. Vorholt JA.  2012. Microbial Life in the Phyllosphere . Macmillan Publishers Limited. All rights reserved.
828|December 2012|Volume 10.
Werner D, Newton WE. 2005. Nitrogen Fixation in Agriculture, Forestry, Ecology, and the Environment . Published by Springer, P.O. Box 17, 3300 AA Dordrecht, The Netherlands.
BIODATA PENULIS :
Aris Aksarah Pas, lahir di Donggala tanggal 21 April  1967.  Menempuh  pendidikan  S1  Fakultas Pertanian, jurusan Budidaya Tanaman Universitas Tadulako  Palu  dan  S2  Fakultas  Pasca  Sarjana Universitas Gadjah Mada.
Didy Sopandie, dilahirkan di Kuningan tanggal 22  Desember  1957.  Menyelesaikan  pendidikan S1  Departemen  Agronomi  Fakultas  Pertanian IPB, S2 Okayama University, Japan, S3 Okayama University, Japan.
Trikoesoemaningtyas, lahir di Bandung tanggal 2 Januari 1962. Menyelesaikan pendidikan S1 Fakultas  Pertanian  di  Universitas  Padjadjaran Bandung,  S2  di  Universitas  Guelp,  Canada  dan S3 Pemuliaan Tanaman di IPB.
Dwi Andreas Santosa, lahir di Blora tanggal 27  September  1962.  Menyelesaikan  pendidikan S1  Fakultas  Pertanian  di  Universitas  Gadjah Mada,  S2 Fakultas Pasca Sarjana di Universitas Padjadjaran  dan  S3  Faculty  of  Life  Sciences, Technische Universitaet Braunscweig, Jerman.