## UJI EFEKTIVITAS IODIUM YANG BERASAL DARI RUMPUT LAUT (Eucheuma spinosum) TERHADAP BAKTERI  (Escherichia coli)
EFFECTIVENESS TEST OF IODIUM FROM SEAWEED (Eucheuma spinosum) AGAINST BACTERIA (Escherichia coli)
Apri Arisandi 1,2* , Akhmad Farid 1,2 , Rizka Ayu Wulandari 2 , Ratri Diah Muktisari 3
1 Program Studi Magister Pengelolaan Sumberdaya Alam, Fakultas Pertanian, Universitas Trunojoyo Madura
2 Program Studi Manajemen Sumberdaya Perairan, Fakultas Pertanian, Universitas Trunojoyo Madura
3 Laboratorium Ilmu-Ilmu Dasar, Universitas Trunojoyo Madura Jl. Raya Telang, PO. Box. 2 Kamal, Bangkalan-Madura
*Corresponding author email: apri_unijoyo@yahoo.com
Submitted: 17 October 2023 / Revised: 14 November 2023 / Accepted: 16 November 2023
http://doi.org/10.21107/juvenil.v4i4.22676

## ABSTRAK
Berbagai  jenis  penyakit  yang  dipicu  oleh  bakteri  dan  fungi  telah  banyak  menyebar  luas  terutama  di negara  berkembang  seperti  Indonesia.  Penggunaan  antibiotik  berbahan  sintetik  seperti  ampisilin, kotrimoksasol dan tetrasiklin secara intens dapat menyebabkan kecenderungan terjadinya resistensi galur bakteri patogen. Tujuan penelitian ini untuk mengetahui kandungan iodium yang terdapat rumput laut  (Eucheuma  spinosum)  serta  efektivitas  iodium  rumput  laut  terhadap  pertumbuhan  bakteri Escherichia  coli.  Metode  yang  digunakan  titrasi  untuk  mengetahui  kandungan  iodium  dalam  50  g sampel  dengan  pelarut  Chloroform  (CHCl 3 )  dan  Disc  Diffusion  Test  untuk  mengetahui  peranannya sebagai  antibakteri  Escherichia  coli.  Hasil  analisa  diketahui  semakin  tinggi  kadar  iodin  atau  iodium maka  daya  hambat  bakteri  Escherichia  coli  semakin  besar  dalam  10 𝜇𝑙 ekstrak.  Kadar  iodium  pada ekstrak Eucheuma spinosum berada pada kisaran 0,38% hingga 1,22%, sedangkan pada Yodor vex (disinfektan hasil pabrik) sebagai kontrol positif sebesar 0,38%, dengan menghasilkan diameter zona hambat yang tinggi.
Kata kunci: Eucheuma spinosum, Escherichia coli, Antibakteri, Daya hambat.

## ABSTRACT
The background of this analysis, various types of diseases triggered by bacteria and fungi have spread widely, especially in developing countries like Indonesia. The intense use of synthetic antibiotics such as  ampicillin,  co-trimoxazole  and  tetracyclines  can  lead  to  a  tendency  for  resistance  to  pathogenic bacteria.  The  purpose  of  this  study  was  to  determine  the  iodine  content  in  seaweed  (Eucheuma spinosum)  and  the  effectiveness  of  seaweed  iodine  on  the  growth  of  Escherichia  coli  bacteria.  The method  used  is Titration to  determine  the  iodine  content  in  50  g  of  sample  with  Chloroform  (CHCl3) solvent and Disc Diffusion Test to determine its role as an antibacterial Escherichia coli. The results of the analysis show that the higher the level of iodine or iodine, the greater the inhibition of Escherichia coli bacteria in 10µl of extract. The yield of crude extract of Eucheuma spinosum was 21% + 53%, while the iodine content was known by different treatments of 0.38% + 1.22%. The content of iodine levels in Eucheuma spinosum seaweed is an effective indicator as an antibacterial for Escherichia coli.
Keywords: Eucheuma spinosum, Escherichia coli, Antibacterial, Inhibition.

## PENDAHULUAN
Indonesia mempunyai potensi sumberdaya laut yang  luar  biasa  besar,  salah  satunya  rumput laut  tetapi  sayang  pemanfaatannya  masih terbatas untuk diambil agar dan karagenannya.
Diversifikasi produk diharapkan dapat meningkatkan  nilai  ekonomi,  sehingga  dalam penelitian  ini  dilakukan  pengujian  iodium sebagai  antibakteri.  Berbagai  jenis  penyakit yang dipicu oleh bakteri dan fungi telah banyak berjangkit  terutama  di  negara  berkembang
seperti  Indonesia.  Penggunaan  antibiotik berbahan sintetik seperti ampisilin, kotrimoksasol  dan  tetrasiklin  secara  intens dapat menyebabkan kecenderungan terjadinya resistensi  galur  bakteri  patogen.  Penyakit infeksi dan resistensi obat antibakteri merupakan  permasalahan  yang  memerlukan perhatian besar, oleh karena itu perlu dilakukan penelitian  mengenai  disinfektan  dan  antiseptik berbahan  alami  dari  tumbuhan  sebagai alternatif  antimikroba  yang  tidak  menimbulkan efek  samping.  Hasil  penelitian  Hafizah et  al.
(2016), mengatakan salah satu biota laut yang bisa dimanfaatkan sebagai bahan obat adalah rumput  laut.  Indonesia  merupakan  pemasok utama  rumput  laut  dunia  yaitu  sekitar  60-70% kebutuhan pasar dunia (Lubis et al., 2013).
Rumput  laut  jenis Eucheuma  spinosum merupakan  rumput  laut  penghasil  senyawa keragenan  yang  mampu  membentuk  gel  yang halus, dan mudah dibentuk atau lunak. Rumput laut Eucheuma  spinosum juga  digunakan sebagai  bahan  baku  makanan  karena  kaya akan  mineral,  elemen  makro  dan  mikro, sehingga  dapat  digunakan  sebagai  bahan pangan yang fungsional dalam pengembangan produk  sumber  iodium  terbaik.  Menurut penelitian  Iwada et  al. (2021),  bahwa  kadar iodium  rumput  laut  dalam  100g  mengandung 409,35 ppm atau 0.0409%.
Bakteri Escherichia coli merupakan salah satu jenis  bakteri  yangi  dapat  dijadikan  sebagai indikator pencemaran di perairan yangi mampu menimbulkan  berbagai  jenis  penyakit  bagi makhluk  hidup.  Bakteri Escherichia  coli dapat menyebabkan penyakit diare karena bakteri ini apabila  tidak  sengaja  termakan  oleh  manusia dapat menyebabkan gangguan saluran pencernaan  (Afif et  al .,  2015).  Penelitian  ini dilakukan  menggunakan  bakteri Escherichia coli karena diharapkan  mendapat  informasi serta  bukti  ilmiah terkait  adanya  potensi  untuk menghambat aktivitas bakteri tersebut dengan adanya  kandungan  iodium  dalam Eucheuma spinosum.
Tujuan penelitian adalah mengetahui  kandungan  iodium  yang  terdapat. Rumput  laut  ( Eucheuma  spinosum )  dan Mengetahui  efektivitas  iodium  rumput  laut terhadap pertumbuhan bakteri Escherichia coli .

## MATERI DAN METODE Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian  ini  dilaksanakan  pada  bulan  Juli 2022 hingga bulan Oktober 2022 di Laboratorium  Dasar  Universitas  Trunojoyo untuk ekstraksi rumput laut dan untuk uji daya hambat  bakteri.  Bahan  baku  rumput  laut  jenis Eucheuma  spinosum berasal  dari  sentra budidaya  rumput  laut  Kecamatan  Saronggi, Kabupaten  Sumenep  yang  berada  pada koordinat  (7°8'3.16"S,  113°52'33.36"E).  Peta lokasi penelitian disajikan pada Gambar 1 .
Gambar 1. Peta lokasi Penelitian

## Alat dan Bahan
Alat yang digunakan dalam penelitian ini yakni blender,  botol  semprot,  bunsen,  buret,  cawan
petri,  centrifuge,  corong  kaca,  erlenmeyer, gelas beaker, gelas ukur, gunting, handphone, hot  plate,  jangka  sorong  digital,  jaring,  jarum oce,  kertas  saring,  labu  ukur,  nampan,  oven,
perforator,  pinset,  pipet  tetes,  rak  tabung reaksi,  sanoclave,  shaker  rotator  orbital, spatula,  spreader  glass,  tabung  reaksi,  dan timbangan  digital.  Bahan  yang  digunakan adalah  alkohol  70%,  alumunium    foil,  amilum, aquades, Chloroform (CHCl 3 ), bakteri ( Escherichia  coli ),  rumput  laut  ( Eucheuma spinosum ),  kapas,  kertas  buram,  kertas  label, larutan  iodine,  NA  (Nutrient  Agar),  Natrium Clorida  (NaCl),  Natrium  Tiosulfat  (Na 2 S 2 O 3 ), nutrient agar, paper disc, plastik warp, spirtus, tisu, dan Yodor Vex.

## Prosedur penelitian Persiapan Sampel
Rumput  laut Eucheuma  spinosum .  Sampel yang  telah  dicuci  kemudian  akan  direndam dalam  air  kapur. Rumput  laut Eucheuma spinosum yang  telah  direndam  kemudian dikeringkan  pada  sinar  matahari  dengan  suhu 45 0 C selama 3 hari. Sampel yang telah kering kemudian dicuci hingga bersih dari kapur, dan dikeringkan kembali.

## Ekstraksi Iodium Rumput Laut
Ekstraksi dilakukan dengan cara menghaluskan  50  gr  sampel  rumput  laut menggunakan blender dan mortar alu. Maserasi dilakukan dengan menggunakan Chloroform  100  ml  perbandingan  1:2  (b/v) kemudian  di shaker  rotary  orbital selama  72 jam dengan kecepatan 120 rpm. Larutan yang telah  disaring  kemudian  dikeringkan  dalam oven dengan waktu yang berbeda beda yaitu: 1 Jam, 3  Jam, 24  Jam,  48  Jam  yang  ditutup dengan Alumunium foil.

## Pengujian Kadar Iodium
Jumlah kadar iodium dihitung dengan menggunakan metode titrasi  dengan membuat larutan  amilum  1%  dan  larutan  Natrium Tiosulfat. Larutan Na 2 S 2 O 3 0.1N dibuat dengan menimbang Na 2 S 2 O 3 sebanyak 6,25 gr, kemudian  menambahkan  dengan  aquades sebanyak 100 ml menuangkan pada labu ukur dan  disimpan  pada  tempat  gelap.  Setelah homogen menambahkan 1 ml iodin 0,1N, homogenkan kemudian tambahkan amilum 1% hingga berubah warna dari kuning menjadi  kuning  kecoklatan  sebanyak  5  tetes. pengujian  kadar  iodin  menggunakan  titrasi mengacu  pada  Slamet  dan  Bambang  (2002), yaitu :
Angka Yodium = 𝑚𝑙 𝑡𝑖𝑡𝑟𝑎𝑠𝑖 (𝑏𝑙𝑎𝑛𝑘𝑜−𝑐𝑜𝑛𝑡𝑜ℎ) 𝑚𝑙 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 x  N thio x 12,691 ………………………………………. (1)
Kadar Iodium = 𝐴𝑛𝑔𝑘𝑎 𝑌𝑜𝑑𝑖𝑢𝑚 𝐵𝑒𝑟𝑎𝑡 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 𝑘𝑒𝑟𝑖𝑛𝑔 x  100% ... (2)

## Pembuatan Suspensi Bakteri Uji
Suspensi  bakteri  bakteri  uji  dilakukan  dengan menimbang  0,42  NA  dalam  15  ml  aquades dengan  tetapan  28  gr  dalam  1000  ml, setelah itu  masukan  ke  dalam  erlenmeyer  dan  tutup rapat dengan alumunium foil untuk melindungi NA  agar  tidak  tumpah. Media  NA  kemudian disterilisasi  menggunakan  sanoclave  dengan suhu 121 0 C selama 30 menit, kemudian tuang pada  tabung  reaksi  sebanyak  5  ml. Kondisi pada  saat  kultur  bakteri  berlangsung  dapat dipastikan  telah  steril.  Menurut  Indrianto (1990),  perhitungan  media  Na  dengan  rumus pengenceran berikut.
V1 . M1 = V2. M2 ……………..…………….. (3)
Pengujian Daya Hambat Antibakteri Eschericia coli
Pengujian daya hambat antibakteri iodium yang berasal  dari  rumput  laut  dilakukan  dengan tujuan  membuktikan  penghentian  aktivitas bakteri Escherichia  coli dengan  memfilter ektrak  rumput  laut  dengan  larutan  kontrol menggunakan  Yodor  Vex. Menurut  Hafizah et al. (2016),  bahwa  pengujian  pengamatan aktivitas bakteri dilakukan dengan menambahkan media agar sebanyak 15 ml ke dalam  cawan  petri  dan  ratakan  menggunakan spreader, biakan bakteri diambil dan dihomogenkan  dengan  media  agar. Cawan petri  yang  berisi  bakteri  uji  dan  diekstrak senyawa  antibakteri  diinkubasi  selama  24 jam pada  suhu  37 0 C.  Menurut  Kumesan et  al.
(2013) perhitungan daya hambat
menggunakan persamaan berikut;
Diameter Zona Hambat = (D1−Dp)+(D2−Dp)
2 …. (4)

## Analisa Data
Analisa  lanjutan  data  yakni  dilakukan  uji statistika  pada  analisa  daya  hambat  aktivitas antibakteri Eschericia coli menggunakan analisa  ragam One  Way (ANOVA).  Uji  ragam dengan selang kepercayaan 5% menggunakan Software SPSS,  apabila  hasil  uji  pada  RAL (Rancangan  Acak  Lengkap)  menunjukkan beda nyata dilakukan uji lanjut dengan Duncan 5%.  Kategori  :  Sig  <0,5  =  berbeda  nyata, sedangkan Sig >0,5 = tidak berbeda nyata.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Ekstraksi Eucheuma spinosum
Ekstraksi  rumput  laut  ( Eucheuma  spinosum) dilakukan  dengan  beberapa  perlakuan  untuk
meghasilkan ekstrak dengan kandungan kadar iodium  terbaik.  Hasil  perhitungan  rendemen ekstrak  uji  antibakteri Eschericia  coli dapat dilihat pada Gambar 2 .
Gambar 2 . Hasil Rendemen Ekstrak rumput laut dengan pelarut Chlorofom
Dimana,  A:  Ekstrak  Percobaan  1a;  B:  Ekstrak Percobaan  1b;  C:  Ekstrak  Percobaan  2a;  D: Ekstrak  Percobaan  2b;  E:  Ekstrak  Percobaan 2c;  F:  Ekstrak  Percobaan  3a;  G:  Ekstrak Percobaan 3b
Analisa  bahan  baku Eucheuma  spinosum dilakukan  meliputi  analisa  rendemen,  dan iodium.  Pelarut  Chloroform  (CHCl 3 )  yang digunakan  ditentukan  dengan  dalam  50  gr sampel hingga titik terendamnya sampel yakni 100  ml  pelarut.  Hasil  ekstraksi Eucheuma spinosum yang telah dilakukan dengan metode maserasi  kinetik  dari  berat  sampel  kering hingga menghasilkan rendemen ekstrak kasar, ekstrak berwarna kuning keputihan.
Berdasarkan Gambar 2 diketahui bahwa dalam per  50  gr  ekstrak  kasar  sampel  terdapat rendemen kisaran 21,6% hingga 53%. Menurut penelitian  Mardiah et  al. (2014)  bahwa  dalam per  50  gr  ekstrak  kasar  menghasilkan  9,17% per  gram  ekstrak  kasar.  Perlakuan  A  hingga Perlakuan  E merupakan hasil supernatant dari sentrifuge, kemudian pada perlakuan F dan G hasil  evaporasi  dengan  oven  dengan  suhu 44 0 C  perbedaan  perlakuan  tersebut  yang menjadikan  hasil  rendemen  yang  berbeda. Proses maserasi perlakuan A hingga perlakuan E dipengaruhi adanya zat pengotor atau bahan lainnya  yang  masih  tercampur  dalam  proses ekstraksi.  Menurut  Ghomi  dan  Ghasemzadeh (2011) dalam Maligan et al. (2016). Rendemen suatu  ekstrak  dipengaruhi  oleh  adanya beberapa  faktor  eksternal  yakni  metode ekstraksi yang dipilih, pelarut yang digunakan, rasio perbandingan pelarut, suhu, waktu.
Rendemen ekstrak fraksi kloroform lebih besar dari  pada  rendemen  fraksi  lainnya.  Hasil rendemen  ini  diduga  bahwa  kandungan golongan  senyawa  yang  bersifat  semipolar dalam  rumput  laut Eucheuma  spinosum lebih banyak dari pada senyawa polar dan nonpolar. Rendemen  terbaik  ada  di  percobaan  F  dan percobaan  G.  Hal  ini  terjadi  dipengaruhi  oleh adanya faktor suhu lingkungan dan penyimpanan. Ekstrak maserasi apabila semakin  rendah  suhu  dan  lama  penyimpanan ekstrak  maka  rendemen  semakin  rendah, sedangkan  pada  oven  ekstrak  akan  baik apabila  dengan  suhu  konstan  40 0 C  maka rendemen akan tinggi (Baroroh, 2017).

## Senyawa Bioaktif Antibakteri Ekstrak
Eucheuma spinosum
Senyawa bioaktif antibakteri peneliti menggunakan  kadar  iodium  sebagai  bahan penentu zona hambat. Analisa pengujian iodin dilakukan dengan perlakuan Ekstrak Sentrifuge, Ekstrak Murni, Ekstrak di Oven, dan Yodor  vex.  Ekstrak  yang  digunakan  untuk antibakteri  tidak  tercampur  dengan  bahan lainnya bahkan bahan pengotor. Hasil penyaringan  ekstrak  menggunakan  kertas saring dilakukan untuk memisahkan serat kasar dengan iodin, berat yang dihasilkan juga adalah berat  basah.  Uji  kadar  iodium    menggunakan titrasi,  hasil  perhitungan  disajikan  pada Tabel
1 .
00 20 40 60 A B C D E F G 22 21,6 33 35 38 47 53 P ers en ta se R en d em en Perlakuan

## Arisandi et al., Uji Efektifitas Iodium yang Berasal dari
Tabel 1 . Jumlah Kadar iodium Ekstrak Eucheuma Spinosum Perlakuan Angka Iodium Kadar Iodium% per 50g bahan A 0.19 0.38 B 0.18 0.36 C 0.18 0.36 D 0.37 0.74 E 0.42 0.84 F 0.51 1.02 G 0.51 1.02 H 0.61 1.22 I 0.13 0.25 J 0.19 0.38
Sumber : Data Peneliti (2022).
Dimana, A: Ekstrak Murni; B: Ekstrak Setrifuge 1x; C: Ekstrak Setrifuge 2x; D: Ekstrak Oven 30 mnt; E: Ekstrak Oven 1 Jam; F: Ekstrak Oven 3 Jam; G: Ekstrak Oven 24 Jam; H: Ekstrak Oven 48 Jam; I: Ekstrak Oven 72 Jam; J: Yodor Vex
Hasil  analisa  pada  Tabel  1  diperoleh  kadar iodium  pada  ekstrak Eucheuma  spinosum berada  pada  kisaran  0,38%  hingga  1,22%, sedangkan  pada  Yodor  vex  (disinfektan  hasil pabrik)  yang  sebagai  kontrol  positif  sebesar 0,38%.  Rumput  laut  ( Eucheuma  spinosum) memiliki  kandungan  iodium  tinggi  karena  air laut  mengandung  iodium  tinggi  (Susanto  dan Widyaningsih, 2004). Menurut winarmo (1990), bahwa rumput laut merah mengandung iodium sebesar 0,1-1%, menurut Kasim (2004), tepung Rumput laut mengandung 0,15%, dan menurut Ayu  (2007), E.  spinosum mengandung  Kadar iodium sebesar 409,35 ppm atau 0,0409%. Hal ini yang memperkuat penelitian ini bahwa kadar iodium di daerah Sumenep cukup tinggi apabila telah dievaporasi.
Kadar iodium pada ekstrak sentrifuge diperoleh dari  supernatan  dengan  kecepatan  3000  rpm. Perbandingan ekstrak iodin dengan Yodor Vex masih lebih tinggi bahan disinfektan pabrik atau Yodor  vex.  Hal  ini  dipengaruhi  karena  masih adanya  bahan  pengotor  atau  bahan  lainnya yang  masih  tercampur.  Perlunya  analisa lanjutan  untuk  memperoleh  hasil  senyawa bioaktif berupa iodium  yang terbaik.
Berdasarkan Tabel  1 menunjukkan  bahwa ekstrak  telah  adanya  pengembangan  untuk memperoleh hasil iodin terbaik.
Pengembangan perlakuan untuk menghasilkan iodium  terbaik,  diantaranya:  sentrifuge  1x; sentrifuge 2x, Ekstrak murni, Ekstrak oven (30 menit,  1  Jam,  24  jam,  48  jam,  dan  72  jam). Terjadinya perubahan nilai kadar iodium, untuk
ekstrak  sentrifuge  0,36%,  dilakukan  perlakuan beda  sentrifuge  1x  dan  sentrifuce  2x  namun, hasilnya  sama  yang  menjadikan  supernatan yang diperoleh setelah ekstrak tidak ada bahan pengotor.  Hasil  evaporasi  dikembangkan menggunakan  oven  dengan  kisaran  nilai konsentrasi kadar iodium adalah 0,38% hingga 1.22%.  Tabel  1  menunjukkan  bahwa  semakin lama masa evaporasi dalam suhu 40 0 C, maka kadar iodium semakin tinggi.
Penelitian yang menggunakan perlakuan oven menghasilkan  konsentrasi  yang  tinggi  karena iodium    memiliki  sifat  polar  sehingga  sifat tersebut dapat larut dengan pelarut Chlorofom. Menurut  penelitian  Baroroh  (2017),  bahwa adanya  pegadukan  yang  semakin  lama  pada proses  maserasi  menyebabkan  terjadinya peningkatan  osmosis  antara  bahan  dengan pelarut  yang  mengakibatkan  penetrasi  pelarut ke dalam jaringan tumbuhan lewat efek kapiler sehingga  kelenjar  sel  tumbuhan  yang  dapat mudah  rusak  sehingga  menghasilkan  iodium yang  tinggi.  Ekstrak  pada  suhu  72  jam  kadar iodin  mulai  menurun,  seiring  bertambahnya waktu  dengan  kondisi  suhu  yang  tinggi  akan menyebabkan senyawa iodium akan rusak.

## Uji Antibakteri Bakteri Escherichia coli
Uji  aktivitas  antibakteri  merupakan  metode pengujian  yang  dilakukan  untuk  mengetahui kemampuan  suatu  bahan  dalam  menghambat pertumbuhan  bakteri.  Aktivitas  antibakteri dilakukan dengan membandigkan antar perlakuan  oven  dengan  waktu  yang  berbeda yakni 1 jam, 3 jam, 24 jam, 48 jam, kemudian Yodor  Vex  (kontrol  positif),  dan  aquades (kontrol  negatif).    Perlakuan  tersebut  dipilih karena  berdasarkan  analisa  senyawa  iodium perlakuan oven paling besar. Hasil perhitungan dapat diketahui pada Gambar 3 .
Gambar 3 . Hasil Pengukuran Daya Hambat Bakteri Escherichia coli
Dimana, A: Yodor vex; B: Aquades; C: ekstrak oven 3 jam; D: Ekstrak oven 1 jam; E: Ekstrak oven 24 jam; F: Ekstrak oven 48 jam
Hasil penelitian yang ditunjukkan pada Gambar 3 menunjukkan  bahwa  pemberian  ekstrak dengan  perlakuan  48  jam  adalah  ekstrak dengan  daya  hambat  tinggi  rerata  sebesar 20,74  mm  dengan  kategori  sangat  kuat, sedangkan  kategori  lemah  ada  pada  kontrol negatif yakni aquades dengan rerata 1,84 mm kategori lemah. Daya hambat dengan perlakuan oven 48 Jam lebih besar dibandingkan yodor vex bahan disinfektan dari pabrik  yang  sebagai  kontrol  positif.  Pengujian daya hambat dilakukan dengan cara membuat Na steril, meletakkan paper disc di permukaan media,  dan  memipet  ekstrak  dengan  ukuran 10µl.  Peningkatan  aktivitas  zona  hambat dipengaruhi  oleh  besarnya  konsentrasi  pada masing-masing ekstrak. Semakin tinggi konsentrasi  ekstrak  maka  semakin  besar diameter zona bening di sekitar kertas cakram.
Menurut penelitian Hanapi et al. (2013), bahwa, senyawa  bioaktif  yang  terdapat  pada  ekstrak memiliki  sifat  antibakteri,  semakin  banyak konsentrasi  ekstrak  maka  kemampuan  untuk menghambat  bakteri  akan  semakin  besar. Antimikroba  bersifat  bakteriostatik  apabila senyawa  antimikroba  tersebut  hanya  mampu
menghambat  pertumbuhan  bakteri  apabila bakteri tersebut terus meningkat yang ditandai dengan berkurangnya diameter zona hambat.
Analisa  uji  daya  hambat  karakteristik  dari  6 perlakuan terhadap sampel ekstrak Chlorofom Eucheuma  spinosum diperoleh  diameter  zona bening  terhadap  bakteri Escherichia  coli sebesar  20.7  ±  1.8  mm,  dengan  artian  zona hambat  dari  ekstrak Eucheuma  spinosum sangat  tinggi  dan  efektif,  sedangkan  menurut penellitian  Hafizah et  al. (2016),  bahwa  ektrak rumput  laut  dengan  pelarut  metanol  terhadap bakteri E.coli adalah 6,46 ± 0,90 mm.
Hasil yang diperoleh juga menunjukkan bahwa ekstrak Eucheuma  spinosum yang  dilanjutkan dengan penguapan pada suhu oven, yaitu pada suhu 40 0 C selama 48 jam masih menunjukkan adanya  daya  hambatan  dengan  terbentuknya zona  bening  disekitar  kertas  cakram.  Hal  ini disebabkan  karena  pada  suhu  40 0 C  bukan merupakan  suhu  atau  pemanasan  yang tergolong  tinggi,  sehingga  tidak  merusak kandungan  metabolit  sekunder  pada  ekstrak alga  merah  yang  dapat  berpengaruh  pada diameter  daya  hambatan.  Hasil  zona  hambat tampak pada Gambar 4 . 0,00 5,00 10,00 15,00 20,00 25,00 A B C D E F D ia m et er Zo n a H am b at (m m ) Perlakuan Ulangan 1 Ulangan 2 Ulangan 3 Ulangan 4
Gambar 4. Hasil Uji daya Hambat Bakteri

## Analisa Statistika Data
Aktivitas  antibakteri  pada  rumput  laut  merah Eucheuma spinosum terhadap bakteri
Escherichia coli Analysis of one-way Variance
(ANOVA).  Adanya  perbedaan  dilakukan  uji lanjut  Duncan  Multiple  Range  Test  (DMRT) pada  taraf  signifikansi  5  %  (p<  0.05).  Hasil analisa  menggunakan  software  SPSS,dapat dilihat pada Tabel 2 dan Tabel 3 .
Tabel 2. Hasil Uji Oneway ANOVA
Sum of Squares Df Mean Square F Sig. Between Groups 795.622 5 159.124 19.413 .000* Within Groups 147.541 18 8.197 Total 943.162 23
Sumber : Data Peneliti (2022).
Hasil  uji  oneway  anova  berdasarkan Tabel  2 bahwa  nilai  signifikannya  <0,5    Hal  ini menunjukkan adanya perbedaan nyata sebesar  0,000.  Hasil  uji  signifikan  variamsi ANOVA  yang  menunjukkan  F=19.413  dengan nilai  beda  nyata  antar  perlakuan  terhadap
bakteri Escherichia coli sehingga perlu adanya pengujian  untuk  uji  lanjut.  Pengujian  lanjutan dialkukan  untuk  mengetahui  perlakuan  yang paling  terkecil,  hasil  Uji  Duncan    dapat  dilihat pada Tabel 3 .
Tabel 3. Hasil Duncan, Uji BNT
Perlakuan N Subset 1 2 3 4 B 4 1.8375 D 4 6.8500 C 4 8.3625 8.3625 A 4 9.3750 9.3750 E 4 12.0250 F 4 20.7375 Sig. 1.000 .253 .103 1.000
Sumber : Data Peneliti (2022).
Berdasarkan hasil pengujian Duncan terhadap beberapa  perlakuan  tersebut  merupakan prosedur  pengujian  perbedaan  diantara  rata- rata  perlakuan.  Penentuan  perlakuan  terbaik dapat  diketahui  dengan  melihat  perlakuan yang memberikan nilai rata-rata tertinggi. Hasil uji  duncan  terhadap  rata-rata  zona  hambat terhadap bakteri Escherichia coli menunjukkan perlakuan  ekstrak  oven  48  jam  merupakan rata-rata  tertinggi  dengan  notasi  huruf  yang berbeda.  Hasil  analisa  Duncan  pada Tabel  3 bahwa  perbedaan  letak  kolom  nilai  subset menunjukkan  adanya  tingkat  perbedaan  antar varian. Nilai yang terletak di kolom subset yang sama  menunjukkan  tidak  adanya  perbedaan yang  signifikan  antara  perlakuan.  Perlakuan ekstrak  oven  48  jam  memiliki  rata-rata
perlakuan  tertinggi  yakni  20,73775,  dapat disimpulkan  bahwa  ekstrak  yang  di    oven  48 jam  pada  suhu  40 0 C  adalah  mempunyai kandungan  iodin  tertinggi  dan  memiliki  zona hambat  terbaik  untuk  antibakteri Escherichia coli dan dapat dikembangkan apabila digunakan untuk bahan antiseptik.

## KESIMPULAN DAN SARAN
Kadar iodium ekstrak Rumput laut ( Eucheuma spinosum) berada pada kisaran 0,38% hingga 1,22%, Iodium tertinggi terdapat pada perlakuan ekstrak oven 48 jam sebesar 1,22%. Ekstrak  Rumput  laut  ( Eucheuma  spinosum) yang  memiliki  kandungan  iodium  dan  zona hambat terhadap pertumbuhan bakteri
D
E F
Escherichia coli yakni kisaran 1,84 mm hingga 20,74 mm. Ekstrak dengan oven 48 jam dapat menghambat  aktivitas  antibakteri  yang  paling dominan  dibandingkan  Yodor  vex  (kontrol positif).

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan  terimkasih  kami  sampaikan  kepada (Lembaga Penelitian dan Pengabdian Masyarakat)  LPPM  Universitas  Trunojoyo Madura  yang  telah  membiayai  pelaksanaan penelitian  kami  melalui  hibah  penelitian  grup riset,  sehingga  penelitian  ini  berjalan  dengan lancar.

## DAFTAR PUSTAKA
Afif,  F.,  Erly,  E.,  dan  Endrinaldi,  E.  (2015). Identifikasi Bakteri Escherichia Coli pada Air  Minum  Isi  Ulang  yang  Diproduksi Depot Air Minum Isi Ulang di Kecamatan Padang  Selatan. Jurnal  Kesehatan Andalas , 4(2), 376 –380. Ayu, A. G. (2007). Fortifikasi Rumput Eucheuma Spinosum  untu  pembuatan  Mi  Basah : universitas Brawijaya. Malang.
Baroroh,  U.  (2017). Uji  Aktivitas  Antibakteri Ekstrak Rumput Laut Merah (Eucheuma Cottonii)  Pada  Bakteri  Escherichia  Coli Dan  Staphylococcus  Aureus  (Kajian Pengaruh  Suhu  Dan  Lama  Waktu Ekstraksi) (Doctoral
dissertation,
Universitas Brawijaya).
Ghomi,  J,  S,  Ghasemzadeh,  M,  A.  (2011). Ultra-sound-assisted    synthesis    of dihydro-pyrimidine-2-thiones. J.      Serb. Chem.   Soc. 76 (5), 679-684 Hafizah,  M.  A.  A.,  Sari,  N. I.,  dan  Leksono,  T. (2016). Uji Efektivitas Antibakteri Ekstrak Rumpu Laut ( Eucheuma cottonii )
terhadap  Bakteri Bacillus  cereus dan
Pseudomonas aeruginosa . Jurnal
Perikanan , 1-9.
Hanapi,  A.,  Fasya,  A.  G.,  Mardiyah,  U.,  dan
Miftahurrahmah,  M.  (2013).  Uji  Aktivitas Antioksidan  dan  Antibakteri  Ekstrak Metanol Alga Merah Eucheuma Spinosum Dari  Perairan  Wongsorejo
Banyuwangi. ALCHEMY . Hapsari,  A.  (2008). Pengaruh  Penambahan
Tepung Rumput Laut Eucheuma Spinosum Terhadap Kualitas Bakso Ikan Gabus (Ophiocephalus striatus) (Doctoral dissertation, Universitas Brawijaya).
Indrianto, A. (1990). Kultur Jaringan Tumbuhan .  Universitas  Gadjah  Mada:
Yogyakarta.
Iwada, M., Sumarto, S., dan Dewita, D. (2021).
Pengaruh Fortifikasi Rumput Laut
( Eucheuma  spinosum )  terhadap  Mutu Pekdos. Berkala Perikanan Terubuk , 49 (2), 1033-1041.
Kasim,  S.  R.  (2004).  Pengaruh  Perbedaan
Konsentrasi Dan Lamanya Waktu Pemberian  Rumput  Laut E.  Cottoni Terhadap  Kadar  Lipid  Serum  Darah Tikus: Universitas Brawijaya. Malang.
Kumesan,  Paulina,  Yamlean,  Supriati.  (2013).
Formulasi dan Uji Aktifitas Gel Antijerawat Ekstrak Umbi Bakung
( Crinum  asiaticum  L.) terhadap  Bakteri Stafhylococcus  aureus Secara  in  Vitro. Jurrnal  Program  Studi  FMIPA.  Unsrat.
Manado.
Lubis, Y. M., Erfiza, N. M., Ismaturrahmi, I., dan
Fahrizal, F. (2013). Pengaruh Konsentrasi  Rumput  laut  ( Eucheuma cottonii) dan Jenis  Tepung pada Pembuatan  Mie  Basah. Rona  Teknik Pertanian , 6 (1), 413-420.
Maligan, J. M., Widayanti, V. T., dan Zubaidah,
E. (2016). Identifikasi Senyawa Antimikroba  Ekstrak  Mikroalga  Laut Tetraselmis chuii (Kajian Metode Ekstraksi  Maserasi,  Jenis  Pelarut,  dan Waktu Ekstraksi). Jurnal Teknologi
Pertanian , 16 (3), 195-206. Mardiyah,  U.,  Fasya,  A. G.,  Fauziyah,  B.,  dan Amalia, S. (2014). Ekstraksi, uji aktivitas antioksidan  dan  identifikasi  golongan senyawa  aktif  alga  merah Eucheuma spinosum dari perairan Banyuwangi. Alchemy , 3 (1), 39-46. Mycek,  M.  J.  (2001). Farmakologi  ;  Ulasan Bergambar  Edisi  2 .  Widya  Medika.
Jakarta.
Slamet, S., dan Bambang, H. (2002). Prosedur Analisa  Untuk  Bahan  Makanan  Dan Pertanian . Yogyakarta: Liberty . Susanto,  H.,  dan  Widyaningtyas,  D.  (2004).
Dasar-dasar Ilmu Pangan dan Gizi . Akademika. Yogyakarta. Utama,  P.  (2018). Variasi  rasio  sampel  dan silika  gel  dalam  isolasi  steroid  dan triterpenoid  alga  merah  Eucheuma spinosum  dengan  kromatografi  kolom basah (Doctoral dissertation, Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim).