## EKSTRAK DAUN PILADANG ( Solenostemon scutellarioides (l.) codd)

## MENURUNKAN KADAR PROCALCITONIN DAN FGF-2 SALIVA PADA TIKUS WISTAR MODEL PERIODONTITIS KRONIS

## PILADANG LEAF EXTRACT DECREASES SALIVARY PROCALCITONIN AND FGF-2 LEVELS IN CHRONIC PERIODONTITIS MODEL RATS
Christiana Cahyani Prihastuti 1 *) , Ario Ditto Primandaru 2 , A Haris Budi Widodo 1 , Tuti Sri Suhesti 3 , Fanni Kusuma Djati 1 , Amilia Ramadhani 1 , Rinawati Satrio 1
1 Departemen Biologi Oral, Jurusan Kedokteran Gigi, Fakultas Kedokteran, Universitas Jenderal Soedirman
Jl. Dr. Soeparno, Karangwangkal, Grendeng, Kecamatan Purwokerto, Kabupaten Banyumas, Jawa Tengah, Indonesia
2 Mahasiswa Jurusan Kedokteran Gigi, Fakultas Kedokteran, Universitas Jenderal Soedirman Jl. Dr. Soeparno, Karangwangkal, Grendeng, Kecamatan Purwokerto, Kabupaten Banyumas,
Jawa Tengah, Indonesia
3 Departemen Teknologi Farmasi, Jurusan Farmasi, Fakultas Ilmu-ilmu Kesehatan, Universitas Jenderal Soedirman
Jl. Dr. Soeparno, Karangwangkal, Grendeng, Kecamatan Purwokerto, Kabupaten Banyumas, Jawa Tengah, Indonesia

## ABSTRAK
Periodontitis kronis merupakan inflamasi jaringan periodontal yang  disebabkan oleh biofilm  bakteri  plak  dan  ditandai  dengan  pembentukan  poket  periodontal,  resesi  gingiva, resorpsi  tulang  alveolar  yang  berakibat  pada  kegoyangan  gigi.  Perawatan  utama periodontitis  kronis  adalah scaling  root  planing (SRP)  untuk  menghilangkan  bakteri sebagai  etiologi  utama  namun  seringkali  membutuhkan  terapi adjuvant .  Pengembangan terapi adjuvant dari bahan alami diharapkan dapat mengurangi efek samping, salah satunya daun piladang  yang diketahui mengandung senyawa aktif seperti flavonoid, saponin, serta tanin. Penelitian ini bertujuan untuk  mengetahui pengaruh ekstrak daun piladang terhadap kadar  procalcitonin  dan fibroblast  growth  factor-2 (FGF-2)  saliva  pada  tikus  model periodontitis  kronis.  Dua  puluh  lima  tikus  Wistar  jantan  2-3  bulan,  berat  badan  150-200 gram  dan  dibagi  menjadi  5  kelompok,  yaitu  kelompok  periodontitis  kronis  dengan perlakuan ekstrak daun piladang dosis 150 mg/kg BB, 300 mg/kg BB, dan 600 mg/kg BB (P1,  P2,  P3),  kelompok  periodontitis  kronis  dengan  perlakuan  Na-CMC  1%  (kontrol negatif/ KN), serta kontrol sehat (KS). Perlakuan selama tiga hari dilanjutkan pengambilan sampel saliva pada hari ke-empat. Kadar procalcitonin dan FGF-2 saliva diukur dengan uji ELISA.  Analisis  statistic  menggunakan  uji One-Way  Anova dilanjutkan Post  hoc LSD. Hasil  menunjukkan  penurunan  kadar  procalcitonin  dan  FGF-2  saliva  pada  kelompok perlakuan  ekstrak  daun  piladang  (P1,  P2,  P3)  seiring  peningkatan  konsentrasi  ekstrak, berbeda  signifikan  daripada  kontrol  negatif  (p≤0,05),  dan  menyamai  kondisi  sehat (p>0,05).  Hal  ini  mengindikasikan  ekstrak  daun  piladang  dapat  mempercepat  fase inflamasi dan proliferasi pada tikus model periodontitis kronis.
Kata kunci : daun piladang, fibroblast growth factor-2 , periodontitis kronis, procalcitonin

## ABSTRACT
Chronic  periodontitis  is  an  inflammation  of  periodontal  tissues  caused  by  plaque bacterial  biofilms  and  is  characterized  by  periodontal  pocket  formation,  gingival recession,  alveolar  bone  resorption  which  results  in  tooth  loosening.  The  primary treatment  of  chronic  periodontitis  is  scaling  root  planing  (SRP)  to  eliminate  bacteria  as the  main  etiology  but  often  requires  adjuvant  therapy.  The  development  of  adjuvant therapy from natural materials is expected to reduce side effects, one of which is piladang leaves  which  are  known  to  contain  active  compounds  such  as  flavonoids,  saponins,  and tannins.  This  study  aimed  to  determine  the  effect  of  piladang  leaf  extract  on  salivary procalcitonin and fibroblast growth factor-2 (FGF-2) levels in chronic periodontitis model rats.  Twenty-five  male  Wistar  rats  aged  2-3  months,  body  weight  150-200  grams,  were divided  into  5  groups,  namely  chronic  periodontitis  groups  treated  with  piladang  leaf extract treatment doses of 150 mg/kgBW, 300 mg/kgBW, and 600  mg/kgBW  (P1,  P2, P3, respectively),  chronic  periodontitis  group  treated  with  1%  Na-CMC  (negative  control  / KN),  and  healthy  control  group  (KS).  Treatment  was  given  for  three  days  followed  by saliva sampling on the fourth day. Salivary procalcitonin and FGF-2 levels were measured by  ELISA  test.  Statistical  analysis  was  conducted  using  One-Way  Anova  test  followed  by Post hoc LSD. The results show a decrease in  salvary procalcitonin and FGF-2 levels in the piladang leaf extract treatment groups (P1, P2, P3) as the concentration of the extract increased,  significantly  different  from  the  negative  control  group  (p≤0.05),  and  equal  to healthy  conditions  (p>0.05).  This  indicates  that  piladang  leaf  extract  can  accelerate  the inflammatory and proliferative phases in chronic periodontitis model rats.
Keywords :  piladang  leaves,  fibroblast  growth  factor-2,  chronic  periodontitis, procalcitonin
Penulis korespondensi:
Christiana Cahyani Prihastuti Jurusan Kedokteran Gigi, Fakultas Kedokteran, Universitas Jenderal Soedirman Jl. Dr. Soeparno, Karangwangkal, Purwokerto Email:christiana.prihastuti@unsoed.ac.id

## PENDAHULUAN
Periodontitis  merupakan  kondisi  inflamasi  dan  kerusakan  pada  jaringan  pendukung gigi yang terjadi secara progresif. Penyakit ini ditandai dengan inflamasi gingiva, supurasi, pembentukan  poket  periodontal,  resesi  gingiva,  kegoyangan  gigi,  serta  kerusakan  tulang alveolar  (Al-Harthi  dkk.,  2013). Global  Burden  of  Disease  Study (GBD)  menyatakan bahwa periodontitis menempati posisi ke-6 sebagai penyakit dengan prevalensi tertinggi di dunia,  yaitu  sebesar  11,2%,  dan  terus  meningkat  sebesar  57,3%  dari  tahun  1990  hingga 2010  (Jin  dkk.,  2016).  Prevalensi  periodontitis  di  Indonesia  masih  tergolong  tinggi,  yaitu sebesar 70% dari total populasi (Wardhana dkk., 2015). Jenis penyakit periodontitis  yang paling  banyak  terjadi  adalah  periodontitis  kronis  (Newman  dkk.,  2019).  Kerusakan  pada
ekstrak daun piladang ( solenostemon scutellarioides (l.) codd) menurunkan kadar procalcitonin dan fgf-2 saliva pada tikus wistar model periodontitis kronis ( christiana cahyani prihastuti)
periodontitis  kronis  diawali  oleh  inflamasi  karena  aktivitas  dan  produk  dari  bakteri Porphyromonas gingivalis (PG), berupa lipopolisakarida (LPS) dan kolagenase yang akan menginduksi  respon  imun  dan  menyebabkan  kerusakan  jaringan  (Hajishengallis  dan Lamont, 2014).
Berbagai indikator dapat dijadikan marker terjadinya kerusakan jaringan periodontal, salah satunya adalah procalcitonin. Procalcitonin merupakan suatu protein fungsional yang terdiri dari 114-116 asam amino dan berperan aktif secara imunologis pada kondisi infeksi bakteri  (Dharaniyadewi  dkk,  2015).  Kadar  procalcitonin  meningkat  pada  kondisi periodontitis ringan hingga berat dan akan berangsur turun setelah  pemberian pengobatan yang  rutin  (Redman  dkk,  2016).  Kadar  procalcitonin  saliva  dilaporkan  berkorelasi  positif terhadap kadar procalcitonin serum (Renjith dan Sujatha, 2021).
Selain  itu,  kadar fibroblast  growth  factor (FGF-2)  dapat  menjadi marker proses penyembuhan  jaringan  periodontal.  FGF-2  dilaporkan  meningkat  pada  kondisi periodontitis  kronis.  Hal  ini  berkaitan  dengan  proses  inflamasi,  aktivitas  migrasi  serta proliferasi  fibroblas  dan  sel  endotel,  serta  proses  angiogenesis  yang  terjadi  pada  jaringan periodontal  (Yun  dkk.,  2010).  Pada  proses  penyembuhan  jaringan,  makrofag  memiliki peran  dalam  fagositosis  bakteri  dan  produknya,  memproduksi  faktor  proangiogenik,  dan menginduksi  produksi  fibroblas  dengan  mensekresi  berbagai growth  factors ,  antara  lain FGF-2 (Gurtner dkk., 2008; Reinke dan  Sorg, 2012). Penelitian oleh Queiroz dkk. (2008) menunjukkan  kadar  FGF-2  yang  diambil  dari  sampel  darah  pada  kelompok  penderita periodontitis  kronis  (34,8  ±  128,2  pg/mL)  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan  kelompok sehat (14,1 ± 39,9 pg/mL).
Perawatan utama periodontitis kronis adalah dengan menghilangkan bakteri sebagai penyebab  utama  periodontitis,  yaitu  melalui scaling dan root  planing (SRP).  Selain perawatan  utama,  seringkali  dibutuhkan  perawatan adjuvant, berupa  agen  antimikroba, antiinflamasi,  maupun host  modulation  therapy (HMT)  untuk  menunjang  keberhasilan perawatan  periodontitis  (Newman  dkk.,  2012).  Beberapa  bahan  alami  diketahui  memiliki senyawa yang dapat memodulasi respon inflamasi sehingga dapat menjadi alternatif dalam perawatan adjuvant periodontitis kronis, salah satunya adalah daun piladang.
Daun  piladang  yang  disebut  juga  sebagai  daun  iler  atau  daun  miana  (mayana) ( Solenostemon  scutellarioides  (L.)) banyak  dimanfaatkan  oleh  masyarakat  Indonesia sebagai  tanaman  hias  (Suva  dkk.,  2015).  Tanaman  piladang  mudah  ditemui  di  berbagai tempat dan telah digunakan dalam pengobatan tradisional di Indonesia, seperti mengobati nyeri  haid,  obat  batuk,  dan  menghentikan  perdarahan  setelah  melahirkan  (Wakhidah  dan Silalahi,  2014).  Daun  piladang  mengandung  berbagai  senyawa  metabolit  aktif  yaitu flavonoid,  saponin,  tanin,  dan  polifenol  yang  berfungsi  sebagai  immunomodulator (Kumala,  2009).  Penelitian  sebelumnya  mengenai  manfaat  ekstrak  etanol  daun  piladang menunjukkan penurunan volume eksudat pada punggung tikus  yang mengalami inflamasi dengan  induksi  karagen  dengan  dosis  efektif  ekstrak  etanol  daun  piladang  sebesar  600 mg/kg BB tikus secara peroral (Aria dkk., 2016).
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  pengaruh  pemberian  ekstrak  etanol  daun piladang konsentrasi 150 mg/kgBB, 300 mg/kgBB, dan 600 mg/kgBB terhadap biomarker procalcitonin  dan  FGF-2  saliva  pada  tikus  Wistar  model  periodontitis  kronis.  Saliva digunakan  karena  pengambilan  sampel  yang  bersifat  non-invasif  dan  dapat menggambarkan kadar biomarker pada serum darah.

## METODE PENELITIAN
Jenis  penelitian  adalah  penelitian  eksperimental  laboratoris  dengan  rancangan penelitian posttest-only  with  control  group  design. Penelitian  dilaksanakan  di Laboratorium  Pusat  Studi  Pangan  dan  Gizi  Pusat  Antar  Universitas  (LPSG  PAU)  UGM serta Laboratorium Riset dan Teknologi FK Unsoed . Sejumlah 25 ekor tikus Wistar dibagi menjadi  lima  kelompok  menggunakan  teknik simple  random  sampling :  kelompok perlakuan  ekstrak  daun  piladang  ( Solenostemon  scutellarioides )  dengan  dosis  150 mg/kgBB (P1), 300 mg/kgBB (P2), dan 600 mg/kgBB (P3) serta kelompok perlakuan Na- CMC 1% (Kontrol Negatif/ KN) dan kelompok Kontrol Sehat (KS).

## Alat dan Bahan
Bahan Bahan yang digunakan pada penelitian ini adalah lipopolisakarida (LPS), daun piladang ( Solenostemon scutellarioides (L.) Codd), etanol 70%, ketamin, benang ligature , disposible syringe 1 mL, Elisa-Kit procalcitonin dan FGF-2 ( Elabscience ®).
Sampel  tikus  Wistar  berjenis  kelamin  jantan  berusia  2-3  bulan  dengan  berat  badan 150-200 gram.

## Jalannya Penelitian
1. Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Piladang
Daun piladang  diambil dari perkebunan di Baturraden,  Kabupaten Banyumas, dipilih daun  berwarna  merah  keunguan,  dari  helai  ke-6  dan  disisakan  5  helai  paling  atas. Daun  dibersihkan  dan  ditimbang  sebanyak  2  kg  lalu  dikeringkan  di  udara  terbuka. Daun  kering  dijadikan  serbuk  dan  ditimbang  sebanyak  700  gram  dan  ditambahkan etanol 70% hingga terendam setinggi 2 cm  (w/p=1:5). Campuran dibiarkan selama 3 hari  sambil  sesekali  diaduk.  Remaserasi  dilakukan  hingga  diperoleh  maserat  jernih, selanjutnya  filtrat  dijadikan  satu  dan  diuapkan  menggunakan rotary  evaporator bersuhu  60°C  dan  dipekatkan  menggunakan waterbath bersuhu  70°C.  Ekstrak etanol daun piladang kemudian dibuat dalam bentuk suspensi menggunakan Na-CMC 1%.
2. Pembuatan Model Tikus Periodontitis Kronis Tikus  dianastesi  menggunakan  injeksi  ketamin  HCl  intramuscular  pada  otot  paha belakang dengan dosis 200 mg/KgBB. Induksi periodontitis dilakukan dengan injeksi LPS PG yang telah diencerkan pada intrasulkuler gingiva gigi insisivus pertama kanan RB  bagian  labial  dengan  dosis  5μg/0,05  ml  sebanyak  0,02  ml  menggunakan  jarum insulin  sebanyak  1  kali  dalam  sehari.  Ligasi  dilakukan  menggunakan  benang  sutra ukuran 3,0 pada daerah subgingiva   di sekeliling  gigi insisivus anterior RB selama 5 hari.  Kondisi  periodontitis  pada  tikus  dapat  diamati  secara  klinis  berupa  gingiva oedematous  dan  eritematous  serta  secara  radiografi  terdapat  gambaran  penurunan tulang alveolar.
3. Pemberian Perlakuan Ekstrak daun piladang dengan dosis 600, 300, 150 mg/kgBB dimasukkan ke lambung tikus  secara  peroral  menggunakan  teknik  sondasi  sebanyak  2x  sehari  selama  3  hari dengan jeda 12 jam setelah 1 kali pemberian.
4. Pengambilan Sampel Saliva Sampel  saliva  dikumpulkan  menggunakan  strip  kertas  saring  yang  ditempatkan  pada dasar mulut tikus kemudian strip disimpan dalam tabung.
5. Euthanasia Hewan Coba
ekstrak daun piladang ( solenostemon scutellarioides (l.) codd) menurunkan kadar procalcitonin dan fgf-2 saliva pada tikus wistar model periodontitis kronis ( christiana cahyani prihastuti)
Tikus  dieuthanasia  dengan  inhalasi  eter  dosis  letal  pada  hari  ke-4.  Eter  10%  ditetesi kapas kemudian diletakkan di dalam botol kaca, selanjutnya tikus dimasukkan pula ke dalam botol kaca dan ditutup rapat. Tikus diamati denyut jantung dan nafasnya.
6. Penghitungan Kadar Procalcitonin dan FGF-2 Kadar  Procalcitonin  dan  FGF-2  saliva  diukur  menggunakan  ELISA reader dengan menentukan optical  density (OD value) dari  setiap wells secara  langsung  dengan microplate reader pada panjang gelombang 450 nm.

## Analisis Data
Analisis  data  menggunakan  SPSS.  Uji  normalitas  Saphiro-Wilk  test  dan  uji homogenitas  Levene  test  menunjukkan  data  terdistribusi  normal  dan  homogen  (p>0,05). Uji  beda  menggunakan  uji  parametrik One-Way  Anova dengan  tingkat  kepercayaan  95% (p≤0,05) dan dilanjutkan dengan uji Post Hoc Least Significance Difference (LSD).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  pengukuran  kadar  procalcitonin  saliva  menunjukkan  penurunan  kadar  pada kelompok  perlakuan  seiring  peningkatan  konsentrasi  ekstrak  dengan  kadar  terendah ditemukan  pada  perlakuan  ekstrak  daun  piladang  konsentrasi  600  mg/kgBB  (P3).  Kadar procalcitonin  saliva  tertinggi  ditemukan  pada  kelompok  kontrol  negatif  tanpa  perlakuan (KN) (Gambar 1) .
0,097±0,035 0,076±0,012 0,070±0,033 0,219±0,110 0,076± 0,024 0.000 0.050 0.100 0.150 0.200 0.250 0.300 P1 P2 P3 KN KS K ad ar P ro ca lc it o n in

## Kelompok
Gambar I. Hasil perhitungan kadar procalcitonin saliva pada tikus Wistar model periodontitis Keterangan:  P1  =  perlakuan  ekstrak  daun  piladang  dosis  150  mg/kgBB,  P2  =  perlakuan  ekstrak  daun piladang  dosis  300  mg/kgBB,  P3  =  perlakuan  ekstrak  daun  piladang  dosis  600  mg/kgBB,  KN  =  kontrol negatif gel Na-CMC 1%, KS = kontrol sehat
Uji normalitas Saphiro-Wilk dan uji homogenitas Levene’s test menunjukkan data terdistribusi  normal  dan  homogen  (p>0,05).  Analisis  uji  beda One-Way  Anova menunjukkan  hasil  p=0,09  (p≤0,05)  yang  mengindikasikan  perbedaan  pengaruh  yang signifikan  antara  kelompok  perlakuan  terhadap  kadar  procalcitonin  saliva.  Uji Post  hoc Least  Significance  Difference (LSD)  pada Tabel  1 menunjukkan  adanya  perbedaan signifikan  antar  seluruh  kelompok  perlakuan  ekstrak  dengan  kelompok  kontrol  negatif (p≤0,05)  namun  tidak  terdapat  perbedaan  signifikan  antar  kelompok  perlakuan  ekstrak dengan kelompok kontrol sehat (p>0,05).
Tabel 1. Hasil uji Post-Hoc LSD kadar procalcitonin saliva No. Kelompok P1 P2 P3 KN KS 1. P1 0,316 0,371 0,018* 0,429 2. P2 0,316 0,911 0,002* 0,827 3. P3 0,371 0,911 0,002* 0,915 4. KN 0,018* 0,002* 0,002* 0,003* 5. KS 0,429 0,827 0,915 0,003* Keterangan:
* = terdapat perbedaan yang signifikan (p≤0,05) antar kelompok
P1 = perlakuan ekstrak daun piladang dosis 150 mg/kgBB, P2 = perlakuan ekstrak daun piladang dosis 300  mg/kgBB, P3 = perlakuan ekstrak daun piladang dosis 600  mg/kgBB,  KN = kontrol negatif gel Na-CMC 1% , KS = kontrol sehat
Peningkatan kadar procalcitonin dapat menjadi salah satu biomarker adanya inflamasi akibat infeksi bakteri, salah satunya pada kondisi periodontitis kronis. Procalcitonin adalah prekusor  protein  calcitonin  yang  disekresi  oleh  sel  C  dari  glandula  tiroid  dan  merupakan salah satu biomarker yang berhubungan dengan penyakit periodontal (Akula, 2020).  Pada penelitian  ini,  kelompok  tikus  model  periodontitis  tanpa  perawatan  (KN)  memiliki  kadar procalcitonin  yang  paling  tinggi  dibandingkan  kelompok  kondisi  sehat  (KS)  maupun perlakuan ekstrak daun piladang. Hal ini mengindikasikan induksi endotoksin LPS bakteri pada  gingiva  tikus  model  periodontitis  kronis  menyebabkan  peningkatan  kadar procalcitonin.  Hasil  ini  sejalan  dengan  penelitian  sebelumnya  yang  menunjukkan  adanya peningkatan  kadar  procalcitonin  saliva  pada  pasien  periodontitis  kronis  dibandingkan kelompok sehat. Ekspresi procalcitonin diregulasi oleh sitokin proinflamasi, seperti TNF-α dan Interleukin-6 (IL-6). Procalcitonin juga merupakan mediator sitokin proinflamasi yang berkorelasi dengan gambaran klinis pada periodonttis kronis  (Hendek dkk., 2015; Renjith dan Sujatha, 2021).
Pemberian  ekstrak  daun  piladang  selama  tiga  hari  dengan  tiga  konsentrasi  berbeda, 150,  300,  dan  600  m/kgBB,  dapat  memberikan  pengaruh  signifikan  terhadap  penurunan kadar  procalcitonin  saliva  dibandingkan  kontrol  negatif.  Hasil  ini  dapat  dipengaruhi  oleh adanya  kandungan  aktif  daun  piladang  berupa  flavonoid  dan  saponin  yang  mensupresi ekspresi  sitokin  proinflamasi.  Flavonoid  dan  saponin  dapat  memodulasi  sistem  imun dengan  menghambat  aktivitas  fosfolipasi  A2,  siklooksigenase  (COX),  lipooksigenase (LOX),  mediator  proinflamasi  serta  pembentukan Nitrit  Oxide  Synthase (NOS). Penghambatan  sekresi  sitokin  proinflamasi  akan  menghambat  aktivasi  procalcitonin sehingga  menurunkan  sekresi NF -κB  yang  berperan  dalam  produksi  PGE-2  serta mencegah  inflamasi  berkepanjangan  yang  akan  menyebabkan  destruksi  jaringan  pada kondisi  periodontitis  (Ambili  dan  Janam,  2017).  Flavonoid  juga  dapat  mencegah terbentuknya radikal bebas atau reactive oxygen species (ROS), seperti anion superoksida, dengan  cara  mendonorkan  elektron  H+  sehingga  ROS  menjadi  netral  dan  mengurangi reaksi inflamasi pada jaringan (Birben dkk., 2012).
Kadar procalcitonin saliva setelah pemberian ekstrak daun piladang semakin menurun seiring dengan peningkatan konsentrasi ekstrak. Hasil menunjukkan ekstrak daun piladang mulai  dari  konsentrasi  150  mg/kgBB  telah  dapat  mempengaruhi  penurunan  kadar procalcitonin  saliva  pada  kondisi  periodontitis.  Ekstrak  daun  piladang  konsentrasi  300 mg/kgBB  menurunkan  kadar  procalcitonin  saliva  hingga  tidak  jauh  berbeda  dengan kondisi  sehat  sedangkan  konsentrasi  600  mg/kgBB  menurunkan  kadar  procalcitonin
ekstrak daun piladang ( solenostemon scutellarioides (l.) codd) menurunkan kadar procalcitonin dan fgf-2 saliva pada tikus wistar model periodontitis kronis ( christiana cahyani prihastuti)
hingga  lebih  rendah  daripada  kontrol  sehat.  Namun  tidak  terdapat  perbedaan  signifikan pengaruh  ketiga  konsentrasi  ekstrak  dibandingkan  kelompok  kontrol  sehat.  Hal  ini mengindikasikan percepatan fase inflamasi pada proses penyembuhan periodontitis kronis pasca pemberian ekstrak daun piladang selama tiga hari.
Perhitungan  biomarker  lain,  yaitu  FGF-2  saliva,  menunjukkan  hasil  yang  semakin rendah  seiring  peningkatan  pemberian  konsentrasi  ekstrak.  Kadar  FGF-2  saliva  yang terendah  ditemukan  pada  kelompok  perlakuan  ekstrak  daun  piladang  konsentrasi  600 mg/kgBB  (P3)  sedangkan  kadar  FGF-2  tertinggi  terdapat  pada  kelompok  kontrol  negatif (KN) (Gambar 2) .
20,88±11,35 14,46±4,21 11,93±1,71 31,88±5,71 14,67±13,08 0.00 5.00 10.00 15.00 20.00 25.00 30.00 35.00 40.00 P1 P2 P3 KN KS K ad ar FG F- 2 Kelompok
Gambar II. Hasil perhitungan kadar FGF-2 saliva pada tikus Wistar model periodontitis Keterangan:  P1  =  perlakuan  ekstrak  daun  piladang  dosis  150  mg/kgBB,  P2  =  perlakuan  ekstrak  daun piladang  dosis  300  mg/kgBB,  P3  =  perlakuan  ekstrak  daun  piladang  dosis  600  mg/kgBB,  KN  =  kontrol negatif gel Na-CMC 1%, KS = kontrol sehat
Uji  statistik  Saphiro-Wilk  dan  uji  Levene’s  test  menunjukkan  data  perhitungan kadar FGF-2 saliva terdistribusi normal dan  homogen (p>0,05). Analisis One-Way Anova menunjukkan  hasil  p=0,013  (p≤0,05)  yang  mengindikasikan  adanya  perbedaan  pengaruh yang  signifikan  terhadap  kadar  FGF-2  saliva  antara  kelompok  perlakuan.  Uji Post  hoc LSD  pada Tabel  2 menunjukkan  adanya  perbedaan  signifikan  antar  kelompok  perlakuan ekstrak  dosis  300  m/kgBB  (P2)  dan  dosis  600  mg/kgBB  (P3)  dengan  kelompok  kontrol negatif  (p≤0,05)  namun  tidak  terdapat  perbedaan  signifikan  antar  kelompok  perlakuan ekstrak  dosis  150  mg/kgBB  (P1)  dengan  kelompok  kontrol  negatif  (p>0,05).  Pemberian perlakuan  ekstrak  ketiga  dosis  ekstrak  daun  piladang  tidak  berbeda  secara  signifikan dengan kelompok kontrol sehat (p>0,05).
Tabel 2. Hasil uji Post-Hoc LSD kadar FGF-2 saliva No. Kelompok P1 P2 P3 KN KS 1. P1 0,263 0,125 0,063 0,279 2. P2 0,263 0,656 0,005* 0,969 3. P3 0,125 0,656 0,002* 0,629 4 KN 0,063 0,005* 0,002* 0,006* 5. KS 0,279 0,969 0,629 0,006*
Keterangan:
* = terdapat perbedaan yang signifikan (p≤0,05) antar kelompok
P1 = perlakuan ekstrak daun piladang dosis 150 mg/kgBB, P2 = perlakuan ekstrak daun piladang dosis 300  mg/kgBB, P3 = perlakuan ekstrak daun piladang dosis 600  mg/kgBB,  KN = kontrol negatif gel Na-CMC 1%, KS = kontrol sehat
FGF-2 disekresikan oleh makrofag dan merupakan biomarker fase proliferasi pada kondisi  periodontitis  kronis,  yang  mengindikasikan  aktivitas  proliferasi  fibroblast  dalam membentuk  matriks  ekstraseluler  jaringan  gingiva  serta  aktivitas  proliferasi  sel endothelium dalam proses angiogenesis dengan menginduksi famili reseptor tirosin kinase dan integrin alfa-v beta-3 (integrin αvβ3) (Seghezzi dkk., 1998). Kadar FGF-2 dilaporkan meningkat  pada  pasien  periodontitis  kronis  dibandingkan  orang  sehat  (Queiroz  dkk., 2008).  Hal  ini  sejalan  dengan  hasil  penelitian  yang  menunjukkan  kadar  FGF-2  saliva tertinggi pada model periodontitis kronis tanpa perlakuan (KN).
Penurunan kadar  FGF-2 pasca pemberian perlakuan ekstrak daun piladang diduga mengindikasikan  fase  proliferasi  dan  angiogenesis  dalam  penyembuhan  jaringan periodontal  pada  tikus  model  periodontitis  telah  dilalui  pasca  hari  ke-tiga.  Kandungan saponin  dan  tanin  pada  ekstrak  daun  piladang  berpengaruh  terhadap  proses  proliferasi jaringan  dan  menginduksi  migrasi  makrofag  pada  fase  inflamasi  yang  berpengaruh terhadap  peningkatan  produksi  berbagai growth  factors, salah  satunya  FGF-2,  yang selanjutnya  berfungsi  dalam  migrasi  dan  proliferasi  fibroblas  pada  lokasi  jejas . .  Selain saponin  dan  tanin,  flavonoid  yang  terkandung  dalam  ekstrak  etanol  daun  piladang  juga berperan dalam proses proliferasi jaringan (Jang dkk., 2015).
Ekstrak  daun  piladang  dengan  konsentrasi  300  dan  600  mg/kgBB  memberikan pengaruh penurunan kadar FGF-2 secara signifikan dibandingkan kontrol negatif dan telah dapat  menyamai  kondisi  kontrol  sehat.  Peningkatan  konsentrasi  ekstrak  daun  piladang sebanding  dengan  peningkatan  kandungan  senyawa  aktif  yang  mempercepat  fase proliferasi  menuju  fase  regenerasi  pada  model  tikus  periodontitis  kronis  dengan  ditandai penurunan kadar FGF-2.

## KESIMPULAN
Pemberian  ekstrak  daun  piladang  selama  tiga  hari  dapat  menurunkan  kadar procalcitonin  dan  FGF-2  saliva  yang  merupakan  biomarkers  inflamasi  pada  kondisi periodontitis.  Hal  ini  mengindikasikan  potensi  ekstrak  daun  piladang  sebagai  perawatan adjuvant periodontitis dengan konsentrasi paling efektif 300 mg/kgBB.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Penulis  mengucapkan  terima  kasih  kepada  Lembaga  Penelitian  dan  Pengabdian Masyarakat (LPPM) Universitas Jenderal Soedirman atas hibah penelitian.

## DAFTAR PUSTAKA
Akula,  M.  2020.  Evaluation  Of  Salivary  Procalcitonin  Levels  In  Chronic  Periodontitis Patients With Hypothyroidism Before & After Non Surgical Periodontal Therapy  -  A Clinical  Study. International  Journal  Of  Medical  Science  And  Diagnosis  Research 4 (3):1-6
Al-Harthi, L.S., Cullinan, M.P., Leichter, J.W., Thomson, W.M.. 2013.  Periodontitis Among Adult Populations In Arab World, International Dental Journal , 63:7-11.
ekstrak daun piladang ( solenostemon scutellarioides (l.) codd) menurunkan kadar procalcitonin dan fgf-2 saliva pada tikus wistar model periodontitis kronis ( christiana cahyani prihastuti)
Renjith, A. And Sujatha, L. 2021. Estimation And Correlation Of Procalcitonin In Saliva And Serum  Of  Chronic  Periodontitis  Patients  Before  And  After  Nonsurgical  Periodontal Therapy: An Analytical Comparative Study. J Indian Soc Periodontol 25(1): 29–33.
Aria,  M.,  Verawati,  Arel,  A.,  Monika.  2015.  Uji  Efek  Anti  Inflamasi  Fraksi  Daun  Piladang ( Solenostemon  Scutellarioides (L.)  Codd)  Terhadap  Mencit  Putih  Betina, Scientia, 5(2): 84-91.
Birben  ,E.,  Sahiner,  U.M.,  Sackesen,  C.,  Erzurum,  S.,  Kalayci,  O.  2012.  Oxidative  Stress And Antioxidant Defense, World Allergy Organ J. 5(1):9-19. Dharaniyadewi,  D.,  Lie,  K.C.,  Suwanto,  S.  2015.  Peran Procalcitonin Sebagai  Penanda Inflamasi Sistemik Pada Sepsis, Jurnal Penyakit Dalam Indonesia 2(2):116-123. Gurtner,  G.C.,  Werner,  S.,  Barrandon,  Y.,  Longaker,  M.T.  2008.  Wound  Repair  And Regeneration, Nature 453: 314–321.
Hajishengallis,  G., and  Lamont, R. J. 2014. Breaking  Bad Manipulation of The Response by Porphyromonas Gingivalis, Journal Immunol 44, 328-338.
Hendek, M.K., Erdemir, E.O., Kisa, U. 2015. Evaluation of Salivary Procalcitonin Levels in Different Periodontal Diseases, J Periodontol 86(6):820-6.
Jang,  K.J.,  Choi,  S.H.,  Yu,  G.J.,  Hong,  S.H.,  Shung,  Y.H.,  Kim,  C.H.,  Yoon,  H.M.,  Kim, G.Y. 2015. Anti-Inflammatory Potential of Total Saponins Derived from The Roots of Panax  Gingseng in  Lipopolysaccharides-Activated  Raw  264.7  Macrophages, Experimental and Therapeutics Medicine 11:1109-1115.
Jin, L. J., Lamster, I. B., Greenspan, J. S., Pitts, N. B., Scully, C., Warnakulasuriya, S. 2016. Global Burden of Oral Diseases: Emerging Concepts, Management and Interplay With Systemic Health. Oraldiseases 22 : 609–619.
Kumala,  S.  2009.  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Daun  Iler  ( Coleus  Scutellarioides  Benth ) Terhadap    Beberapa  Bakteri  Gram  (+)  Dan  Bakteri  Gram  (-), Jurnal  Bahan  Alam Indonesia 7(1):12-18 .
Newman,  M.,  Takei,  H.,  Carranza,  F.  2019, Carranza’s  Clinical  Periodontology ,  13 th Ed., Elsevier Mosby, Missouri.
Queiroz,  A.C.,  Taba,  M.,  Conell,  P.A.,  Nobrega,  P.B.,  Costa,  P.P.,  Kawata,  V.K.S., Trevisian,  G.L.,  Novaes,  T.B.  2008.  Inflammation  Markers  in  Healthy  and Periodontitis  Patients:  A  Preliminary  Data  Screening, Brazilian  Dental  Journal 19(1):3-8.
Redman,  R.S.,  Kerr,  G.S.,  Payne,  J.B.,  Mikuls,  T.R.,  Huang,  J.,  Sayles,  H.R.,  Becker,  K.L, Nylén,  E.S.  2016.  Salivary  and  Serum  Procalcitonin  and  C-Reactive  Protein  as Biomarkers  of  Periodontitis  in  United  States  Veterans  with  Osteoarthritis  or Rheumatoid Arthritis. Biotech Histochem 2016; 91(2): 77–85.
Reinke,  J.M.,  and  Sorg,  H.  2012.  Wound  Repair  and  Regeneration, European  Surgical Research 49: 35-43.
Renjith  A,  and  Sujatha  L.  2021.  Estimation  And  Correlation  Of  Procalcitonin  In  Saliva  And Serum  Of  Chronic  Periodontitis  Patients  Before  And  After  Nonsurgical  Periodontal Therapy: An Analytical Comparative Study. J Indian Soc Periodontol 25(1): 29–33. Seghezzi, G., Patel, S., Ren, C.J. 1998. Fibroblast Growth Factor-2 (Fgf-2) Induces Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF) Expressions In The Endothelial Cells Of Forming Capillaries:  An  Autocrine  Mechanism  Contributing  to  Angiogenesis. J  Cell  Biol 141(7): 1659-1673.
Suva,  M.A.,  Patel,  A.M.,  Sharma,  N.  2015,  Coleus  Species:  Solenostemon  Scutellarioides, Planta Activa 2:1-5.
Wakhidah,  A.Z.  and  Silalahi,  M.  2018.  Etnofarmakologi  Tumbuhan  Miana  (Coleus Scutellariodes  (L.)  Benth)  Pada  Masyarakat  Halmahera  Barat,  Maluku  Utara.  Jurnal Pro-Life 5(2):567-578.
Wardhana, M.Y., Mayangsari, M.A., Nur, R.M. 2015. Groel Porphyromonas Gingivalis Pada Penderita  Periodontitis  Sebagai  Pemicu  Terbentuknya  Arterosklerosis,  Berkala  Ilmu Mahasiswa Kesehatan Gigi Indonesia, 3(2): 39-42.