Gambaran Diferensiasi Sel Darah Putih Tikus (Ratitus norvegicus) Betina Pada Starvasi (The description of differential leukocyte count of female rat (rattus norvegicus) in starvation)
Safrida
Dosen Program Studi Pendidikan Biologi FKIP Unsyiah Banda Aceh 23111 Email: idabiologi@yahoo.co.id

## Abstract
Starvation  causes  food  and  liquid  deficit  that  needed  by  body.  Percentage differential leukocyte count includes  neutrophil,  eosinophil,  basophil,  limphosit  and  monosit  will  give indication towards infection reaction. The aim of this research is to detect influence starvation of the  description differential  leukocyte count in  adult  female  rat  during  certain range  of  time. The experimental  method  used  in  this  research  is  Randomized  complete  design  with  3  blocks  of treatments and 3 times repetition. The block of treatments are control (K), fasting eat rats (PMK), fasting  drink  rats  (PMN). The  data  of percentage differential  leukocyte count is analyzed  by Analysis  of  Variance  (ANOVA)  and  then  continued  by  Duncan  Multiple  Range  Test  at  95% confidence  interval  (5%  significance  level). The  result  showed  that  statistically  insignificant percentage  of  limphosit,  neutrophil,  and  monosit  in  PMK  and  PMN  bloks  when  compared  with control, and basophil  was  not found. While,  treatment PMK and PMN in 18 hours treatment, 42 hours treatment,  and 66 hours treatment increase percentage eosinophil.
Key words: Differential leukocyte count, Starvation, Rattus norvegicus

## PENDAHULUAN
Darah  merupakan  salah  satu  cairan tubuh  yang  terdapat  dalam  pembuluh darah dan  mengalir  ke  seluruh  tubuh,  tersusun  dari cairan  yang  disebut  plasma  (60-70%)  terdiri dari air, protein, lemak, karbohidrat, mineral, enzim,  hormon,  dan  sisanya  sel-sel  darah yang  terdiri  dari  eritrosit,  leukosit  dan trombosit  (Swenson  1970,  Widjajakusuma dan  Sikar  1986).  Pemeliharaan  terhadap kestabilan  zat-zat  tersebut  dilaksanakan  oleh suatu  mekanisme  yang  disebut  homeostasis, yaitu istilah yang digunakan untuk mempertahankan  keadaan  statis  atau  konstan dalam  lingkungan  interna  yang  menjamin kelangsungan hidup individu (Guyton 1995).
Pada  hakikatnya  semua  organ  dan jaringan  tubuh  melakukan  fungsi  yang membantu mempertahankan keaadaan konstan  tersebut  (Guyton  1995).  Begitu  juga dengan  darah  yang  ada  dalam  tubuh  akan mengikuti  pola  homeostasis. Bila  darah berfluktuasi  di  luar  batas  normal  berarti  ada kelainan fungsi organ atau sistem pengaturannya.  Darah  mempunyai  peranan penting  dalam  sirkulasi  tubuh,  sehingga  dari gambaran darah
diharapkan dapat mengetahui status fisiologi individu.
Nutrisi  sangat  diperlukan  dalam menjaga homeostasis darah. Menurut
Anggorodi  (1979)  kekurangan  makanan  dan
cairan  akan  berpengaruh  terhadap  volume darah  dalam  tubuh  dimana  elemen-elemen pembentuk  darah  akan  terganggu. Kondisi puasa (starvasi) menyebabkan kekurangan makanan  dan  cairan yang  diperlukan  tubuh. Untuk  mengetahui efek defisiensi nutrisi dan cairan pada starvasi, maka salah satu caranya dengan  mengamati  perubahan  gambaran darah  antara  lain  sel  darah  putih. Sel  darah putih  adalah  bagian  dari  sistem  ketahanan tubuh  yang  terpenting. Karena  variasi  yang luas  pada  penghitungan  jumlah  normal  sel darah  putih,  maka  selain  penghitungan jumlah  sel  darah  putih, differensiasi  butir darah putih yang mencakup netrofil, eosinofil,  basofil,  limfosit  dan  monosit  akan memberikan indikasi yang lebih baik terhadap  reaksi  infeksi. Penelitian ini menggunakan tikus putih (Rattus norvegicus) strain  Sprague  Dawley  sebagai  hewan  coba karena  tikus  putih  mempunyai  sifat-sifat yamg mudah ditangani dan lebih menguntungkan dalam percobaan (Smith dan Mangkoewidjojo 1988).

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  dilakukan  pada  dua tempat  yaitu  pemeliharaan  tikus (umur  12 minggu) dilakukan pada Laboratorium Metabolisme  Fakultas  Kedokteran  Hewan IPB,  dan  analisis  darah  dilakukan  pada
Laboratorium  Fisiologi  dan  Farmakologi Fakultas Kedokteran Hewan Institut Pertanian Bogor. Penelitian ini menggunakan metode  eksperimental  yaitu  pola  rancangan acak  lengkap  (RAL)  dengan  3  (tiga) kelompok  percobaan  masing-masing  terdiri dari  3  (tiga)  ekor.  Kelompok  1:  Kontrol  (K), kelompok  2:  tikus  puasa  makan  (PMK), kelompok  3:  tikus  puasa  minum  (PMN). Sediaaan  apus  darah  diwarnai  dengan pewarna Giemsa. Bentuk granulosit (eosinofil : granula merah, besar-besar; basofil : granula biru tua, besar-besar; neutrofil : granula netral dan  halus;)  dan  agranulosit  (  limfosit  :  inti bulat, biru tua, sitoplasma sedikit, biru muda; monosit:  inti  berlekuk,  biru  tua,  sitoplasma banyak,  biru  muda). Setelah  bentuk  jenis- jenis  BDP  diamati,  kemudian  dihitung persentase masing-masing jenis pada preparat ulas darah tersebut. Pengamatan dan penghitungan masing-masing jenis sel dilakukan  hingga  jumlah  semua  jenis  sel mencapai  100,  dan  hasilnya  dinyatakan dalam %. Data dianalisis dengan menggunakan Analysis of Variance
(ANOVA)  dan  dilanjutkan  dengan  Uji Duncan dengan selang kepercayaan  95%  (α
=  0.05)  dengan  menggunakan  perangkat lunak SAS (Mattjik dan Sumertajaya 2006).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Jenis-jenis Butir Darah Putih (BDP) Differensiasi butir darah putih mencakup  limfosit,  neutrofil,  monosit, dan eosinofil.
a. Limfosit Hasil  penelitian  terhadap  persentase limfosit  tikus  betina  pada  semua  perlakuan terlihat  pada Tabel 1.  Hasil  penelitian menunjukkan bahwa persentase limfosit tidak berbeda nyata pada semua kelompok perlakuan..
Hasil  uji  ANOVA  menunjukkan bahwa  perlakuan  tidak  berpengaruh  nyata  (P <  0.05)  terhadap  persentase  limfosit.  Hal  ini disebabkan karena waktu percobaannya tidak lama, defisiensi  makanan  dan  cairan  pada tikus  perlakuan  puasa  belum  akut sehingga jumlah  limfosit  dalam  keadaan  normal. Menurut  Medicastore  (2009) limfosit  T berfungsi  sebagai perlindungan  terhadap infeksi  virus  dan  merusak  beberapa  sel kanker, sedangkan limfosit B berperan dalam pembentukan antibodi.

## Tabel 1.
Pengaruh perlakuan terhadap limfosit tikus putih betina Limfosit(%) Kelompok Perlakuan K PMK PMN Data awal/base line 52.6±20.03 a 65.3±12.42 a 65.6±6.65 a 18 jam perlakuan 50±13.11 a 61.3±8.08 a 60.6±16.80 a 42 jam perlakuan 66±4.58 a 67.3±22.14 a 55±18.68 a 66 jam perlakuan 56.6±19.65 a 73.6±17.89 a 59±8.88 a Direcovery selama 72 jam 62±9.89 a 58.3±18.14 a 59.6±16.86 a
K: Kontrol, PMK: puasa makan, PMN: puasa minum Angka yang  diikuti  huruf  yang  berbeda  pada  baris  yang  sama  menunjukkan  perbedaan  nyata  pada  taraf  uji 5%.

## b. Neutrofil
Hasil  penelitian  terhadap  persentase neutrofil  tikus  betina  pada  semua  perlakuan terlihat  pada Tabel 2.  Hasil  penelitian menunjukkan bahwa persentase limfosit tikus kontrol tidak berbeda nyata dengan perlakuan tikus  puasa  makan  dan  puasa  minum  pada perlakuan  awal,  18  jam  perlakuan,  42  jam perlakuan,  66  jam  perlakuan  dan  setelah direcovery selama 72 jam.
Hasil  uji  ANOVA  menunjukkan bahwa perlakuan tidak berpengaruh  nyata (P < 0.05) terhadap persentase neutrofil. Hal ini
berarti jumlah neutrofil dalam  keadaan normal. Menurut Medicastore (2009) neutrofil membantu melindungi tubuh melawan  infeksi  bakteri  dan  jamur  dan mencerna  benda  asing  sisa-sisa  peradangan. Menurut  penelitian  Ali et  al. (2010) persentase  neutrofil  adalah  salah  satu parameter
yang digunakan
untuk mendiagnosa  kasus  apendiks  akut  (acute appendicitis).
Tabel 2. Pengaruh perlakuan terhadap persentase neutrofil tikus putih betina
Neutrofil(%) Kelompok Perlakuan K PMK PMN Data awal/base line 36.6±22.30 a 28±10.44 a 29.6±7.37 a 18 jam perlakuan 39.3±11.06 a 30±3.46 a 32.3±32.3 a 42 jam perlakuan 26.3±5.13 a 25.6±17.00 a 55±18.69 a 66 jam perlakuan 36±14.79 a 17.3±15.60 a 31±11.78 a Direcovery selama 72 jam 34±9.89 a 37.6±18.87 a 37.6±16.44 a
K: Kontrol, PMK: puasa makan, PMN: puasa minum
Angka  yang  diikuti  huruf  yang  berbeda  pada  baris  yang  sama  menunjukkan perbedaan  nyata  pada  taraf  uji 5%.

## c. Monosit
Hasil  penelitian  terhadap  persentase monosit  tikus  betina  pada  semua  perlakuan terlihat  pada Tabel 3.  Hasil  penelitian menunjukkan bahwa persentase monosit tikus kontrol tidak berbeda nyata dengan perlakuan tikus puasa makan dan puasa minum pada 18 jam  perlakuan,  42  jam  perlakuan,  66  jam perlakuan  dan  setelah  direcovery  selama  72 jam. Namun pada awal perlakuan tikus puasa minum dan tikus  puasa  makan  mempunyai nilai  yang  rendah  apabila  dibandingkan dengan kontrol.
Hasil  uji  ANOVA  menunjukkan bahwa perlakuan awal berpengaruh  nyata (P <  0.05)  terhadap  persentase  monosit.  Uji lanjut Duncan
menunjukkan bahwa persentase monosit pada awal perlakuan tikus
puasa  minum  mempunyai  nilai  yang  rendah apabila  dibandingkan  dengan  kontrol  namun tidak  berbeda  nyata  dengan  tikus  puasa makan.
Sedangkan persentase monosit pada tikus  puasa  makan  dan  tikus  puasa  minum tidak berbeda nyata dengan kontrol pada pada 18  jam  perlakuan,  42  jam  perlakuan,  66  jam perlakuan  dan  setelah  direcovery  selama  72 jam.  Hal  ini berarti defisiensi  makanan  dan cairan pada tikus perlakuan puasa belum akut sehingga  jumlah neutrofil dalam  keadaan normal. Menurut Medicastore (2009) monosit mencerna  sel-sel  yang  mati  atau  yang  rusak dan  memberikan  perlawanan  imunologis terhadap berbagai organisme penyebab infeksi.

## Tabel 3.
Pengaruh perlakuan terhadap persentase monosit tikus putih betina Monosit (%) Kelompok Perlakuan K PMK PMN Data awal/base line 2.3±0.57 a 1.6±0.57 ab 1.6±0.00 ab 18 jam perlakuan 3.6±3.78 a 3±2.00 a 2±1.00 a 42 jam perlakuan 2±1.15 a 1.3±0.57 a 1.6±1.00 a 66 jam perlakuan 4.3±3.51 a 5.6±2.08 a 3±1.00 a Direcovery selama72 jam 2±0.00 a 1.3±0.57 a 1±0.70 a
K: Kontrol, PMK: puasa makan, PMN: puasa minum Angka  yang  diikuti  huruf  yang  berbeda  pada  baris  yang  sama  menunjukkan  perbedaan  nyata  pada  taraf  uji 5%.

## d. Eosinofil
Hasil  penelitian  terhadap  persentase eosinofil  tikus  betina  pada  semua  perlakuan terlihat  pada Tabel 4.  Hasil  penelitian menunjukkan  bahwa  persentase  eosinofil pada  awal  perlakuan  tikus  puasa  minum  dan puasa  makan  mempunyai  nilai  yang sama apabila dibandingkan dengan kontrol. Persentase  eosinofil  pada  18  jam  perlakuan, 42  jam  perlakuan,  66  jam  perlakuan  pada perlakuan  tikus  puasa  makan  dan  puasa minum lebih meningkat dibandingkan dengan
kontrol. Namun setelah direcovery selama 72 jam  persentase  eosinofil  pada  tikus  puasa minum  menurun  kembali  sama  dengan perlakuan awal.
Hasil  uji  ANOVA dan  uji  lanjut Duncan  menunjukkan  bahwa  perlakuan  awal berpengaruh    nyata  (P  <  0.05)  terhadap persentase  eosinofil.  Hal  ini  kemungkinan pada  tikus  puasa  minum  dan  puasa  makan ada  infeksi  parasit  sehingga  persentasenya meningkat  setelah  dipuasakan  pada  18  jam perlakuan,  42  jam  perlakuan,  66  jam
perlakuan. Menurut  Medicastore  (2009) eosinofil membunuh  parasit,  merusak  sel-sel kanker  dan  berperan  dalam  respon  alergi. Menurut Wikipedia (2009) eosinofil berhubungan  dengan  infeksi  parasit,  dengan demikian meningkatnya eosinofil menandakan banyaknya parasit. Penelitian Alam et al. (2008) bahwa kadar  eosinofil  dipengaruhi  oleh  makanan, iklim,  budaya  dan  gaya  hidup.  Kadarnya berfluktuasi
pada seseorang yang mendapatkan  stimuli  dari  lingkungan  seperti terpapar  serbuk  sari  pada  musim  semi.

## Tabel 4.
Pengaruh perlakuan terhadap persentase eosinofil tikus putih betina Eosinofil(%) Kelompok Perlakuan K PMK PMN Data awal/base line 5±1.00 a 4.6±0.57 a 5.1±0.00 a 18 jam perlakuan 7±5.29 b 9.6±6.42 a 10±3.46 a 42 jam perlakuan 5±1.73 b 10.6±5.50 a 11.3±3.21 a 66 jam perlakuan 3±1.73 b 11.3±3.21 a 12±2.64 a Direcovery  selama 72 jam 3±0.00 a 4±1.41 a 4.6±0.57 a
K: Kontrol, PMK: puasa makan, PMN: puasa minum Angka  yang  diikuti  huruf  yang  berbeda  pada  baris  yang  sama  menunjukkan  perbedaan  nyata  pada  taraf  uji 5%.

## SIMPULAN DAN SARAN

## Simpulan
Perlakuan  puasa  makan  dan puasa minum pada  tikus  betina  dewasa selama 18 jam perlakuan, 42 jam perlakuan, dan 66 jam perlakuan meningkatkan persentase  eosinofil .

## Saran
Untuk  melihat  perubahan  gambaran darah  pada  tikus  yang  dipuasakan  perlu diperpanjang waktu perlakuan sehingga dapat diketahui  berapa  lama  kondisi  tikus  yang dipuasakan dapat menjaga homoestasis fisiologi tubuhnya.

## DAFTAR PUSTAKA
Alam  J,  Quresyi  F,  Suliman  MI,  Qureshi  Z, 2008.  Seasonal  variation  in eosinophil count innormal healthy  adult  females. Gomal Journal of  Medical  Sciences.  6 (2).
Ali  S,  Shah  O,  Wani  N,  Shah  M,  Ahmed  L, Mallik  S.  2010.    Role  of  Total
Leukocyte  count,  Neutrophil Percentage,  C - reactive  protein and Ultrasonography in diagnosis of acute appendicitis.. The Internet Journal of Surgery. 23 (2). ISSN: 1528-8242.
Anggorodi  R  .  1979. Ilmu  makanan  ternak umum. Jakarta: PT Gramedia.
Guyton  AC.  1995. Fisiologi  Manusia  dan Mekanisme Penyakit (Human Physiology  and    Mechanism  of disease)  . Diterjemahkan  oleh  Ken Ariata.  Ed  ke-3.  Jakarta:  Buku Kedokteran EGC. Mattjik AA, Sumertajaya IM. 2006. Perancangan  Percobaan  Dengan
Aplikasi  SAS  dan  MINITAB.  Ed  ke-
3. Bogor: IPB Press.
Medicastore.  2009. Biologi Darah. http://medicastore.com/index.ph
p?mod=penyakit & id = 160
Smith JB, Mangkoewidjojo S. 1988. Pemeliharaan, Pembiakan Dan Penggunaan  Hewan  Percobaan  di Daerah Tropis. Jakarta:UI Press. Swenson  MJ.  1970. Dukes  Phisiology  of Domestic Animal. Cornell University Press. Ithacha.London.15-50. Widjajakusuma  R  dan  Sri  Hartini  Syafri Sikar.  1986. Kumpulan  materi kuliah Fisiologi Hewan. Jilid 1.
Jurusan Fisiologi dan
Farmakologi.  FKH  IPB.  Bogor. 28-54. Wikipedia 2009. Sel darah
putih.
http://id.wikipedia.org/w/index. php? title = Sel_darah putih&amp;action=edit".