## Aktivitas Antibakteri Nanoemulsi Minyak Lengkuas (Alpinia galanga L. Willd) dalam Menghambat Pertumbuhan Helicobacter pylori
Yulianto Ade Prasetya 1)* , Khoirun Nisyak 1) , Eviomitta Rizki Amanda 1)
1) Program Studi Diploma III Teknologi Laboratorium Medis, Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan (STIKES) Rumah Sakit
Anwar Medika, Jalan Raya By Pass Krian Km.33 Sidoarjo, Jawa Timur, Indonesia
*) Alamat korespondensi:  yuliantoadeprasetya@gmail.com

## ABSTRAK
Helicobacter  pylori  termasuk  bakteri  patogen  oportunistik  yang  berkolonisasi  di  lambung  dan mampu  memicu  terjadinya  peradangan  lokal.  Infeksi  bakteri  ini  apabila  tidak  segera  diobati  dapat berkembang menjadi penyakit yang lebih serius seperti gastritis atrofi, metaplasia usus, dan noncardia gastric adenocarcinoma.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  aktivitas  nanoemulsi  minyak  lengkuas  (Alpinia galanga  L.  Willd)  dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri  H.  pylori.  Nanoemulsi  minyak  lengkuas  dibuat dengan  mencampurkan  fase  air  sedikit  demi  sedikit  ke  dalam  fase  minyak  dan  surfaktan  dengan  bantuan magnetic  stirrer  dan  ultrasonikator.  Karakterisasi  nanoemulsi  minyak  lengkuas  dilakukan  dengan  alat Particle Size Analyzer (PSA) untuk  mengetahui ukuran  droplet yang terbentuk dan spektrofotometer UV-Vis pada  panjang  gelombang  630  nm  untuk  mengetahui  persentase  transmitan.  Uji  aktivitas  antibakteri nanoemulsi  minyak  lengkuas  terhadap  H.  pylori  dilakukan  dengan  metode  difusi  sumuran.  Hasil  penelitian menunjukkan  bahwa  nanoemulsi  minyak  lengkuas  mampu  menghambat  pertumbuhan  bakteri  H.  Pylori. Pada  konsentrasi  yang  paling  rendah  (kadar  hambat  minimum=KHM)  yaitu  1%  (ukuran  droplet  19,9  nm) memiliki  zona  penghambatan  sebesar  9,5  mm.  Nanoemulsi  minyak  lengkuas  dapat  digunakan  sebagai kandidat pengobatan infeksi lambung yang disebabkan oleh H. pylori.
Kata kunci: Bakteri, Helicobacter pylori, minyak atsiri, nanoemulsi, nanoteknologi
Antibacterial Activity of Galangal (Alpinia galanga L. Willd) Oil Nanoemulsion in Inhibiting the Growth of Helicobacter pylori
Yulianto Ade Prasetya 1)* , Khoirun Nisyak 1) , Eviomitta Rizki Amanda 1)
1) Diploma III Medical Laboratory Technology, Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan (STIKES) Anwar Medika Hospital, Jalan
Raya By Pass Krian Km.33 Sidoarjo, East Java, Indonesia
*) Email:  yuliantoadeprasetya@gmail.com

## ABSTRACT
Helicobacter pylori is an opportunistic pathogenic bacterium that colonizes the stomach and provokes a  local  inflammation.  This  bacterial  infection  is  expected  to  develop  into  more  serious  diseases  such  as atrophic gastritis, intestinal metaplasia, and noncardia gastric adenocarcinoma. This research aimed to study the  activity  of  galangal  (Alpinia  galanga  L.  Willd)  oil  nanoemulsion  in  inhibiting  the  growth  of  H.  pylori. Galangal oil nanoemulsion was made by mixing the air phase into the oil phase and surfactant with magnetic stirrer and ultrasonicator. Characterization of galangal oil nanoemulsion was performed with a Particle Size Analyzer (PSA) to determine the size of the droplets formed and UV-Vis spectrophotometer at a wavelength of  630  nm  to  look  for  the  transmittance  results.  The  galangal  oil  nanoemulsion  antibacterial  activity  test against  H.  pylori  was  carried  out  using  the  well-diffusion  method.  The  results  showed  that  galangal  oil nanoemulsion  was  able  to  inhibit  the  growth  of  H.  pylori  bacteria.  The  lowest  concentration  (minimum inhibitory  concentraton=MIC)  of  1% (droplet  size  19.9 nm)  had  an  inhibition  zone  by  9.5  mm.  Galangal  oil nanoemulsion can be used as a candidate for the treatment of gastric infections caused by H. pylori.
Keywords: Bacteria, essential oil, Helicobacter pylori, nanoemulsion, nanotechnology

## PENDAHULUAN
Helicobacter  pylori merupakan  bakteri Gram negatif berbentuk spiral, memiliki flagel lopotrikus, mampu berkolonisasi pada lambung  dan  memicu  terjadinya  peradangan lokal.  Infeksi  lambung  yang  disebabkan  oleh H.  pylori apabila  tidak  segera  diobati  dapat menjadi  penyakit  yang  lebih  serius  seperti gastritis atrofi, metaplasia usus, dan noncardia gastric  adenocarcinoma [1]. Hampir  50% penduduk di dunia terinfeksi H. pylori [2] dan infeksi ini menjadi semakin tinggi pada negara belum  berkembang  (93,6%)  dibandingkan negara  berkembang  (15,5%)  [3].  Hal  ini dikaitkan dengan berbagai faktor seperti umur, status  sosial  ekonomi,  sanitasi,  kepadatan tempat  tinggal,  merokok,  penggunaan  obat antiinflamasi  nonsteroid,  golongan  darah  O, berat  badan  dan  riwayat  keluarga  yang terjangkit tukak lambung yang dapat mentrasmisikan bakteri H. pylori [1]. Prevalensi  kanker  lambung  di  Indonesia tercatat  sebanyak  2,8/100.000  kasus  [4]. Pengobatan  untuk  infeksi  ini  sangat  sulit karena membutuhkan terapi kombinasi sedikitnya  dua  antibiotik  dikarenakan  adanya multidrug  resistance [5] . Pencarian  alternatif pengobatan  terbaru  berupa  zat  aktif  dari tumbuhan mulai banyak dikembangkan karena lebih efektif, murah, mudah dalam penggunaan,  aman,  toksisitas  rendah,  dan mampu  mencegah  penyebaran  gen  resistensi antarspesies mikroorganisme [5].
Minyak  atsiri  merupakan  salah  satu  zat aktif  dari  tumbuhan  yang  terbukti  efektif melawan  berbagai  macam  mikrooganisme. Minyak  atsiri  lengkuas  ( Alpinia  galanga [L]. Willd.) terbukti sebagai antimikroba, antijamur, dan antiamoeba [7], yang mengandung  metil-sinamat  48%,  sineol  20%- 30%,  eugenol,  kamfer  1%,  seskuiterpen,  δ- pinen,  galangin,  galangol,  dan  beberapa senyawa flavonoid [8]. Penelitian Yuharmen et al . [9] menunjukkan adanya aktivitas penghambatan  pertumbuhan Escherichia  coli dan Staphylococcus  aureus oleh  minyak lengkuas.  Penelitian Khoerrunisa  [8] juga membuktikan bahwa rimpang lengkuas memiliki  sifat  sebagai  antibakteri  terhadap Staphylococcus  aureus,  Micrococcus  luteus, dan Bacillis  cereus dengan  metode disk diffusion  test, namun  pemanfaatannya  dalam menghambat  atau  membunuh H. pylori belum pernah  dilaporkan  sebelumnya.  Bakteri  ini
cukup sulit untuk diobati karena sifatnya yang tahan  asam,  mampu  berpenetrasi  ke  mukosa lambung  manusia,  dan  resisten  terhadap berbagai  macam  antibiotik,  maka  diperlukan teknologi baru dengan pendekatan nanoteknologi. Minyak lengkuas pada penelitian  ini  dibuat  dalam  ukuran  nano droplet ,  yaitu  ukuran  20-100  nm  dan diharapkan mampu berpenetrasi dalam membran  bakteri.  Nanopartikel  memiliki  luas permukaan  yang  tinggi  dan  reaktivitasnya spesifik  sehingga  sesuai  untuk  bahan  obat dalam  berbagai  dosis  serta  meningkatkan regulasi sistem penghantaran obat dalam tubuh [10]. Beberapa penelitian menunjukkan bahwa minyak  atsiri  yang  dibuat  dalam  bentuk nanoemulsi mampu meningkatkan kemampuannya  sebagai  antibakteri  seperti pada  nanoemulsi  dari Cymbopogon  flexuosus sebagai  antimikroba  terhadap Mycobacterium foruitum,  M.  massiliense, dan M.  abscessus [11] dan  nanoemulsi  minyak Eucalyptus globulus mampu  menghambat  pertumbuhan Candida  albicans,  C.  tropicalis dan C. glabrata [12].  Berdasarkan  latar  belakang tersebut,  penelitian  ini  bertujuan  untuk membuat  nanoemulsi  dari  minyak  lengkuas untuk  menghambat  pertumbuhan H.  pylori . Pembuatan  nanoemulsi  dilakukan  dengan mencampurkan fase air sedikit demi sedikit ke dalam  fase  minyak  dan  surfaktan  dengan bantuan magnetic  stirrer dan  ultrasonikator.
Karakterisasi  nanoemulsi  minyak  lengkuas dilakukan  dengan  alat Particle  Size  Analyzer (PSA)  untuk  mengetahui  ukuran droplet yang terbentuk  dan  spektrofotometer  UV-Vis  pada panjang gelombang 630 nm untuk mengetahui persentase  transmitan.  Aktivitas  nanoemulsi minyak lengkuas dilakukan dengan menentukan  kadar  hambat  minimum  (KHM) yang dilakukan dengan teknik difusi sumur.

## METODE PENELITIAN
Sampel  minyak  atsiri  lengkuas  (Alpinia galanga  (L.)  Willd). Minyak  atsiri  lengkuas ( Alpinia  galanga (L.)  Willd)  dibeli  di  CV.
Nusaroma Jakarta dan dikarakterisasi senyawa yang  terkandung  di  dalamnya  menggunakan Gas Chomatography-Mass Spectrometry (GC- MS)  di  Laboratorium  Instrumentasi  Jurusan Kimia Universitas Brawijaya Malang.
Kultur  Helicobcater  pylori.  Helicobacter pylori yang digunakan berasal dari Laboratorium  Mikrobiologi  Fakultas  MIPA
Universitas Brawijaya Malang. Bakteri ditumbuhkan  dalam  media Brucella  Broth dengan  penambahan  darah  domba  5%  dan diinkubasi  suhu  35◦C  dengan  kadar  CO 2 10% selama 48 jam.
Pembuatan nanoemulsi minyak lengkuas (Alpinia galanga L. Willd). Prosedur pembuatan  nanoemulsi  minyak  lengkuas mengacu  pada  Quatrin et  al. [12]  dengan modifikasi.  Fase  minyak  dibuat  sebanyak  5 mL dengan konsentrasi minyak lengkuas yang digunakan  adalah  1%,  2%,  3%,  4%,  dan  5% kemudian  diaduk  dengan magnetic  stirrer selama sepuluh menit. Sebanyak  5 mL Tween 80 sebagai surfaktan dimasukkan sedikit demi sedikit sambil dilakukan pengandukan menggunakan magnetic stirrer dengan kecepatan 1000 rpm selama 15 menit. Fase air ditambahkan  hingga  mencapai  volume  air nanoemulsi  yaitu  20  ml  dan  dimasukkan sedikit demi sedikit sambil dilakukan pengadukan  dengan magnetic  stirerr dengan kecepatan  1500  rpm  selama  15  menit. Nanoemulsi minyak lengkuas kemudian dimasukkan  dalam    ultrasonikator  dengan frekuensi  50  KHz  selama  45  menit  pada  suhu ruang.  Hasil  visual  nanoemulsi  minyak lengkuas  yang  diharapkan  yaitu  terlihat  jernih dan transparan.
Karakterisasi nanoemulsi minyak lengkuas. Nanoemulsi  minyak  lengkuas  yang telah dibuat kemudian dikarakterisasi meliputi ukuran droplet dan  kejernihan.  Penentuan ukuran droplet menggunakan Particle  Size Analyzer (PSA)  di  Pusat  Penelitian  Nanosains dan Nanoteknologi (PPNN) Institut Teknologi Bandung  (ITB),  yang  membutuhkan  sebanyak 15  mL  sampel  nanoemulsi  minyak  lengkuas untuk  analisisnya.  Nanoemulsi  juga  dilakukan analisis kejernihan menggunakan spektrofotometer  UV-Vis,  yaitu  sebanyak  1 mL  sampel  nanoemulsi  minyak  lengkuas dimasukkan  ke  dalam  kuvet  kemudian persentase  transmitan  dibaca  pada  panjang gelombang 630 nm.
Uji  aktivitas  antibakteri  nanoemulsi minyak  lengkuas  terhadap  H.  pylori. Kultur bakteri  ditumbuhkan  pada  media Brucella Broth dengan  penambahan  darah  domba  5% selama 48 jam suhu 37◦C dan kadar CO 2 10% hingga mencapai kepadatan bakteri sebesar 10 7 CFU/ml.  Satu  mililiter  kultur  uji  dimasukkan ke  dalam  tabung  reaksi  yang  berisi Brucella agar yang  masih  cair  (suhu  40◦C)  dan dihomogenasi  menggunakan  vortex.  Kultur
kemudian  dimasukkan  dalam  cawan  Petri steril  dan  dibiarkan  hingga  memadat.  Media yang  telah  padat  kemudian  diberi  lubang menggunakan cork  borer (diameter  6  mm).
Nanoemulsi minyak lengkuas sebanyak 50 µL kemudian  dimasukkan  ke  dalam  sumuran  dan dibiarkan  berdifusi  selama  satu  jam  suhu ruang.  Kultur  kemudian  diinkubasi  dalam inkubator CO 2 10% pada suhu 37◦C selama 48 jam.  Kontrol  negatif  yang  digunakan  adalah akuades  steril,  sedangkan  kontrol  positif menggunakan  antibiotik  sefotaksim  30  µL. Zona  penghambatan  dihitung  berdasarkan diamater  zona  bening  yang  terbentuk,  dengan kriteria  9  mm  nonaktif;  9-12  mm  aktif parsial; 13-18 mm aktif; 18 mm sangat aktif. Pengujian  ini  dilakukan  dilakukan  sebanyak tiga ulangan .

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Identifikasi  senyawa  yang  terkandung dalam  minyak  lengkuas  ( Alpinia  galanga (L.)
Willd)  dapat  dilihat  dari  puncak  dan  waktu retensi  dari  data  kromatogram  (Gambar  1). Puncak tertinggi  yaitu nomer sembilan berupa metil  sinamat  dan  puncak  nomer  enam merupakan  zineol.  Hasil  kromatogram  pada Tabel  1  menunjukkan  bahwa  metil  sinamat memiliki  persentase  tertinggi  sebesar  46,68% dan  diikuti  oleh  senyawa  zineol  sebesar 20,41% dan pinen 10,80%.
Senyawa  utama  dalam  minyak  lengkuas adalah  metil  sinamat  yang  mudah  sekali memadat  menjadi  granul  walaupun  dalam penyimpanan  yang  tertutup  rapat,  sehingga pembuatan  dalam  bentuk  nanoemulsi  untuk terapi  sangat  tepat  untuk  digunakan  [13] karena cenderung lebih stabil. Methyl cinnamate  merupakan  senyawa  turunan  dari cinnamate  acid.  Turunan  cinnamate  ((5- nitrofuran-2-yl)methyl-(2E)-3-phenyl-prop-2- enoate,  menunjukkan  aktivitas  penghambatan yang  baik  terhadap  biofilm Candida  albicans . Senyawa tersebut mampu menghambat pembentukan  biofilm  dan  dapat  mengurangi aktivitas  metabolik  dari  biofilm  yang  sudah terbentuk  sebelumnya.  Selain  itu,  minyak lengkuas  ( Alpinia  galanga (L.)  Willd)  dapat menghambat  produksi  enzim  eksoprotease pada  sistem quorum  sensing Aeromonas hidrophil [15]. Metil sinamat terbukti memiliki bioaktivitas  hambatan  bakteri  lebih  baik dibandingkan  turunannya  seperti  etil  sinamat, butil  sinamat,  dan  2-butil  sinamat  dalam
menghambat  pertubuhan  bakteri Escherichia coli, Bacillus subtilis, Pseudomonas aeruginosa, dan Candida albicans [16].
Zineol yang merupakan komponen tertinggi ke-2  setelah  metil  sinamat  dalam  kandungan minyak  lengkuas  juga  terbukti  mampu menghambat  pertumbuhan Bacillus  cereus [17].  Zineol  atau  1,8  Sineol  merupakan  eter siklik dengan nama sistematik 1,3,3-trimethyl- 2-oxabicycol[2,2,2]octane  yang  termasuk  ke dalam  kelompok  hidrokarbon  teroksigenasi monoterpen.  Senyawa  ini  selain  sebagai antibakteri  terhadap  kelompok  Gram  positif dan  negatif,  juga  memiliki  sifat  sebagai antikanker, antitumor, antifungi, antiinflamasi, dan  antioksidan  [18].  Minyak  lengkuas memiliki  mekanisme  kerja  sebagai  antibakteri dengan  cara  merusak  membran  dalam, membran  luar,  dan  mengakibatkan  terjadinya koagulasi  sitoplasma.  Selain  itu,  komponen yang  terdapat  di  minyak  lengkuas  mampu mengakibatkan  perubahan  pH  internal  dan denaturasi protein [19].
Pembuatan  nanoemulsi  dilakukan  dengan mencampurkan  fase  organik  dan  fase  minyak. Kedua fase  dihomogenasi menggunakan sonikator  untuk  memecah  partikel-partikel menggunakan  campuran  surfaktan  tween  80. Perbandingan konsentrasi antara surfaktan dan
minyak  lengkuas  menentukan  keberhasilan pembentukan nanoemulsi. Selain itu, alat yang digunakan  juga  berpengaruh.  Untuk  memecah partikel-partikel emulsi minyak dapat digunakan magnetic  stirrer dan  sonikator, kemudian ukuran nanoemulsi minyak dikarakterisasi menggunakan PSA. Penggunaan tween lebih efektif untuk pembuatan  nanoemulsi  dibandingkan  dengan biopolimer  lain  seperti  caseinat  dan  beta lactoglobulin  [21].  Ukuran  droplet  yang diharapkan  adalah  dalam  bentuk  nano  yaitu berkisar  20  -  100  nm  [18].  Hasil  analisis menggunakan  PSA  (Tabel  2)  menunjukkan bahwa nanoemulsi 1% memiliki ukuran paling kecil  yaitu  sebesar  19,9  nm  sedangkan  paling besar  berukuran  47,9  nm  pada  konsentrasi nanoemulsi 5%. Hal ini menunjukkan semakin besar  konsentrasi  minyak  lengkuas  yang digunakan  untuk  nanoemulsi  maka  ukuran droplet nano  yang  dihasilkan  semakin  besar, sehingga  diperlukan  surfaktan  yang  lebih banyak dan waktu homogenisasi menggunakan stirer dan sonikasi yang lebih lama. Walaupun demikian,  semua  nanoemulsi  yang  terbentuk telah memenuhi kriteria  yaitu kurang dari 100 nm.    Nanoemulsi  yang  dihasilkan  memiliki bau  khas  dari  minyak  lengkuas  dan  berwarna bening.  Nanoemulsi  yang  baik  memiliki  % transmitan medekati 99% seperti air.
Gambar 1. Hasil kromatogram minyak lengkuas dengan GC-MS
Tabel 1. Komponen minyak lengkuas hasil komatogram menggunakan GC-MS
Gambar  2. Nanoemulsi  minyak  lengkuas  yang  terbentuk  (a)  dan  analisis  nanoemulsi  dengan Particle  Size Analyzer pada nanoemulsi minyak lengkuas 1%
Gambar 3. Zona hambat nanoemulsi minyak lengkuas terhadap H. pylori
Tabel 4. Karakteristik Nanoemulsi minyak lengkuas dan zona hambat pada H. pylori
Minyak  lengkuas  memiliki  mekanisme kerja  dalam  menghambat  bakteri  yang dikaitkan  dengan  toleransi  intrinsik.  Bakteri Gram  negatif  lebih  sensitif  terhadap  minyak atsiri  dibandingkan  Gram  positif.  Hal  ini berkaitan  dengan    tebal  dan  tipisnya  lapisan
dinding  peptidoglikan  pada  masing-masing bakteri  [22].  Pada  Gambar  3  dan  Tabel  4 menunjukkan  bahwa  nanoemulsi  minyak lengkuas  yang  terbentuk  mampu  menghambat He.  pylori dengan  kadar  hambat  minimal (KHM)  yaitu  1%  dengan  ukuran droplet
No Waktu Retensi (menit) Area (%) Tinggi (%) Komponen 1 8,418 5,14 10,80 Pinene 2 9,299 4,84 9,58 Beta-Pinene 3 9.822 1,58 3,24 p-metha-1.5-diena 4 10,207 1,01 2,05 1-Methyl-2-isopropilbenzene 5 10,300 0,60 1,24 Limonene 6 10,356 9,69 20,41 Zineol 7 11,409 1,72 3,43 1.3.3-Trymethylnorcamphor 8 13,166 1,47 2,67 Cyclohexene-1-methyl-4-(2- propanol) 9 16,213 73,94 46,48 Cinnamic Acid Sampel nanoemulsi (NE) minyak lengkuas Ukuran droplet nanoemulsi yang terbentuk (nm) Persentase transmitan (%T) Ukuran zona hambat yang terbentuk  (mm) NE 1% 19,9 99,089 9,5 NE 2% 28,1 97,147 9,8 NE 3% 30,4 96,353 10,1 NE 4% 38,5 93,115 11,1 NE 5% 47,9 91,110 10,0
(b) (a)
terkecil  19,9  nm  dan  persentase  transmitan atau  tingkat  kejernihan  paling  baik  sebesar 99,089%  mampu  menghambat  bakteri  dengan ukuran  zona  bening  sebesar  9,5  mm.  Selain senyawa  yang  terkandung  dalam  minyak lengkuas,  zona  hambat  yang  terbentuk  pada bakteri uji juga berkaitan dengan penggunaaan jenis  surfaktan.    Penggunaan  Tween  80  lebih baik  dibandingkan  dengan  Tween  20.  Tween 20 memiliki nilai HLB ( Hidrophylic- Lipophylic Balance ) lebih tinggi dibandingkan Tween  80  yang  mengakibatkan  sifatnya  lebih larut  dalam  air.  Selain  itu,  surfaktan  juga memengaruhi  kelarutan  senyawa  antimikroba yang  dalam  hal  ini  minyak  lengkuas  yang memiliki  sifat  larut  dalam  minyak.  Aktivitas nanoemulsi  minyak  lengkuas  berhubungan dengan senyawa fitokimia yang terkandung di dalamnya. Senyawa antimikroba yang tertinggi  yaitu  methyl  sinamat,  zineol,  dan alpha pinen. Senyawa metil sinamat dan pinen memiliki aktivitas antibakteri dengan mekanisme  merusak  membran  bakteri  yang bersifat  selektif  permeabel  [14].  Sinergisme dan  antagonisme  senyawa  fitokimia  dalam minyak  atsiri  memengaruhi  efek  antibakteri atau sensitivitas bakteri.
Partikel  nano droplet minyak  lengkuas mampu  mendorong  bakteri  untuk  berdifusi sehingga  memengaruh  atraksi  elektrostatik antara  muatan  positif  pada  minyak  lengkuas dan  muatan  negatif  pada  bakteri  yang  dalam hal  ini H.  pylori. Fusi  nanoemulsi  dan H. pylori yang  sangat  kuat  dapat  mengeluarkan energi  yang  ada  pada  nanoemulsi.  Senyawa aktif  dalam  nanoemulsi  minyak  lengkuas  dan energi  yang  dilepaskan  tersebut  membuat membran  bakteri  yang  bersifat  permeabel menjadi tidak stabil sehingga sel menjadi lisis dan  terjadi  kematian  sel  bakteri  [20].  Minyak lengkuas  dipilih  karena  dapat  digunakan secara  peroral  dan  sediaan  yang  mampu membuat  minyak  ini  cenderung  lebih  stabil yaitu  membuatnya  dalam  bentuk  nanoemulsi. Ukuran nano droplet yang digunakan memiliki permukaan  yang  lebih  luas,  stabil,  lebih reaktif,  dan  cocok  dalam  penghantaran  obat dalam tubuh [5]. Sehingga nanoemulsi minyak lengkuas  diharapkan  dapat  menjadi  kandidat untuk  terapi  melawan H.  pylori penyebab infeksi  lambung  sehingga  tidak  berlanjut  ke penyakit  yang  lebih  serius  seperti  gastritis atrofi,  metaplasia  usus,  dan noncardia  gastric adenocarcinoma.

## KESIMPULAN
Nanoemulsi  minyak  lengkuas  ( Alpinia galanga (L.)  Willd)  mampu  menghambat pertumbuhan H.  pylori dengan  kadar  hambat minimum    1%  (ukuran droplet 19,9  nm; persentase transmitan 99) dengan zona hambat sebesar 9,5 mm.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penelitian  ini  didanai  oleh  Kementerian Ristek,  Teknologi,  dan  Pendidikan  Tinggi, Skema  Penelitian  Dosen  Pemula  dengan Perjanjian/  Kontrak  Nomor  113/  SP2H/  LT/ DRPM/ 2019.

## DAFTAR PUSTAKA
[1] Mabeku  LBK,  Ngama  MLN,    Leundji  H (2018) Potential risk factors and prevalence of Helicobacter pylori infection  among  adult  patients  with dyspepsia  symptoms  in  Cameroon.  BMC Infectious Disease 18 (278): 1-11.
[2] Fock  KM,  Ang  TL  (2010)  Epidemiology of Helicobacter  pylori infection  and gastric cancer in Asia. Journal
Gastroenterol. Hepatol. 25: 479–486.
[3] Eusebi LH, Zagari RM, Bazzoli F  (2014) Epidemiology  of Helicobacter  pylori infection. Helicobacter 19: 1–5
[4] Global Cancer Observation (2012)
Indonesia:    Estimated  age-standardized incidence    and    mortality  rates:  both sexes.http://globocan.iarc.fr/Pages/fact_sh eets_population.aspx. Accessed: 25 December 2019.
[5] Parreira  P,  Soares  BIG,  Freire  CSR, Silvestre  AJD,  Reis  CA,  Martins  MCL, Duarte  MF  (2017)  Eucalyptus  spp.  outer bark  extracts  inhibit Helicobacter  pylori growth:  In  vitro  studies.  Industrial  Crops and Products 105: 207-214.
[6] Clark  JH,  Deswarte  FEJ  (2008)  The biofinery concept an integrated approach. Introduction  to  chemical  from  biomass. United Kindom, John Willey Sons, Ltd.
[7] Hsu  Wei-Yea,  Simonne  A,  Weissman  A, Kim  J  (2010)  Antimicrobial  activity  of greater  galanga  ( Alpinia  galanga [Linn.] Swartz]  flowers.  Food  Science  and Biotechnology 19 (4): 873-880.
[8] Khoerunnisa, U (2015) Studi farmakognosi  rimpang  dan  uji  aktivitas antimikroba minyak atsiri rimpang
lengkuas  ( Alpinia  galanga L.).  Skripsi.
Fakultas Farmasi, Universitas Airlangga.
[9] Yuharmen  Y,  Eryanti,  Nurbalatif  (2002) Uji  aktifitas  antimikroba  minyak  atsiri dan  ekstrak  metanol  lengkuas  ( Alpinia galanga ). Jurnal Nature Indonesia 12 (2): 223-227.
[10] Iravani S, Korbekandi H, Mirmohammadi SV,  Zolfaghari  B  (2014)  Synthesis  of silver  nanoparticles:  Chemical,  physical, and  biological  methods.  Research  in Pharmaceutical Sciences 9 (6): 385 – 406.
[11] Rossi  GG,  Guterres  KB,  Bonez  PC, Gundel  SS,  Aggertt  VA,  Siqueira  FS, Ourique AF, Wagnerd R, Klein B, Santoz
RCV,  Campos  MMA  (2017)  Antibiofilm activity
of nanoemulsions of Cymbopogon  flexuosus against  rapidly growing mycobacteria. Microbial Pathogenesis 113: 335-341.
[12] Quantrin  PM,  Verdi  CM,  de  Souza  ME, de Gogol SN, Klein B, Gundel A, Wagner R,  Vaucher  RD,  Ourique  AF,  Santos
RCV (2017) Antimicrobial and antibiofilm  activities  of  nanoemulsions containing Eucalyptus globulus oil
against Pseudomonas  aeruginosa and Candida spp.  Microbial  Pathogenesis 112: 230-242.
[13] Stteele  W,  Chirico  RD,  Cowell  AB, Nguyen  AJ  (2002)  Thermodynamic properties  and  ideal  gas  enthalpies  of formation  for  trans-methyl  cinnamate, alpha-methyl cinnamate, methyl methacrylate,  1-nonye  trimethylacetic acid, trimethylacetic anhydride, and ethyl trimethyl  acetate.  Journal  of  Chemical and Engineering 47 (4): 700-714.
[14] Vita  DD,  Simonetti  G,  Pandolfi  F,  Costi R,  Santo  RD,  D’Auria  FD,  Scipione  L (2016) Exploring the anti-biofilm activity of  cinnamic  acid  derivatives  in Candida albicans .  Bioorganic  and  Medicinal
Chemistry Letters 26 (24): 5931-5935.
[15] Sumayani  K,    Rahayu,  Yudi  C  (2008) Antibacterial activity of galangal rhizome juice  in  different  concentration  to  the growth  of Aeromonas  hydrophila with  in vitro method. Berkala Ilmiah Perikanan 3 (1): 83-87.
[16] Minarti AB, Ernawati T (2015) Bioaktivitas turunan metil sinamat terhadap pertumbuhan
bakteri
Escherichia coli , Staphylococcus  aureus ,
Bacillus
subtilis,
Pseudomonas
aeruginosa , dan Jamur Candida albicans . Jurnal  Kimia  Valensi:  Jurnal  Penelitian dan Pengembangan Ilmu Kimia 1 (1): 60- 64.
[17] Phanthongan P, Lomaranta P,
Chomawang  Mt,  Bunyapeapahtsar  N (2013)  Antibacterial  activity  of  essential oil and their active components from Thai spices  against  foodborne  pathogens. Science Asia 39: 472-476.
[18] Efruan GK, Martosupono M, Rondonuwo FS  (2016)  Review:  Bioaktivitas  senyawa 1,8  sineol  pada  minyak  atsiri.  Seminar Nasional  Pendidikan  dan  Saintek  (ISSN: 2557-533X).
[19] Silalahi,  M  (2017)  Essential  oil  pada
Alpinia galanga (L.) Willd dan pemanfaatanya.  Jurnal  Pro-Life  4  (1): 287-295.
[20] Lu  WC,  Da-Wei  W,  Chiun  CR,  Ching-
Hua  Y,  Jen-Chieh  T,  Yu-Ting  H,  Po- Hsien L (2018) Preparation,
characterization, and antimicrobial activity  of  nanoemulsions  incorporating citral  essential  oil.  Journal  of  food  and Drug Analysis 26 (2): 82–89.
[21] Quatrin  PM,  Verdi  CM,  Ebling  de  Souza Má,  Nunes  de  Godoi  S,  Klein  B,  Gundel A,  Wagner  R,  de  Almeida  Vaucher  R, Ourique  AF,  Vianna  Santos  RC  (2017) Antimicrobial and antibiofilm activities of nanoemulsions  containing Eucalyptus globulus oil against Pseudomonas aeruginosa and Candida spp.  Microbial Pathogenesis doi: 10.1016/j.micpath.2017.09.062. [22] Bazargani MM, Jens R (2016)
Antibioﬁlm  activity  of  essential  oils  and plant  extracts  against Staphylococcus aureus and Escherichia  coli bioﬁlms. Food Control 61: 156–164.