KONSENTRASI HAMBAT MINIMUM (KHM) KADAR EKSTRAK ETANOL BATANG BAJAKAH TAMPALA ( Spatholobus littoralis Hassk) TERHADAP BAKTERI ESCHERICHIA COLI MELALUI

## METODE SUMURAN
Submitted : 15 Agustus 2019 Edited : 20 Desember 2019 Accepted : 30 Desember 2019
Mochammad Maulidie Alfiannor Saputera, Tio Widia Astuti Marpaung, Noverda Ayuchecaria
Akademi Farmasi ISFI Banjarmasin Email : mochammadsaputera16@gmail.com

## ABSTRACT
Empirically, one of the plants that are widely used by the Dayak tribe as a medicine is the bajakah tampala (Spatholobus littoralis Hassk.) This plant is claimed to be able to treat several diseases  such  as  abdominal  pain,  diarrhea  and  dysentery.  But  until  now  studies  on  the antibacterial  activity  of  bajakah  tampala  have  never  been  done.  This  study  studied  the antibacterial activity of bajakah ethanol extract against the growth of Escherichia coli bacteria and minimum inhibitory value (MIC). This type of research is experimental research. The stem bajakah  Tampala  looks  like  it  wastaken  from  the  inland  forest  in  Garung  Village,  Jabiren District, Pulang Pisau Regency, Central Kalimantan. The sample of this study was 70% ethanol extract  of  bajakah  tampala  stems  obtained  by  maceration.  Extract  payment  of  antibacterial activity  using  a  concentration  of  3.12%;  6.25%;  12.5%;  25%  and  50%.  The  positive  control used is ampicillin 0.01 mg/ml and negative control using distilled  water. Tests are carried out by  the  well  method.  The  tested  data  were  analyzed  statistically  by  the  One-Way  ANOVA  test method. The results of the study showed that the ethanol extract bajakah tampala could inhibit the  growth  of  E.  coli  bacteria.  The  biggest  inhibition of  E.  coli  bacteria  at  a  concentration of 50% with an average inhibition diameter of 20.32 mm. included in the category of very strong. The minimum inhibitory concentration of extract batang bajakah tampala is 6.25%
Keywords : Antibacterial, Bajakah tampala, Escherichia coli

## PENDAHULUAN
Infeksi  merupakan  reaksi  lokal  atau sistemik  karena  invasi  kuman  yang  masuk ke  dalam  tubuh.  Penyakit  infeksi  masih merupakan  penyebab  utama  morbiditas  dan mortalitas  di  dunia (1) .  Sebanyak  25  juta kematian  di  seluruh  dunia,  sepertiganya disebabkan  oleh  penyakit  infeksi  yang menjadi  masalah  kesehatan  di  dunia terutama  di  negara  berkembang  karena tingkat  pengetahuan  dan  kesadaran  akan pentingnya  kesehatan  penduduknya  masih rendah (2) . Menurut survei data yang
dilakukan kementrian kesehatan Riset Kesehatan  Dasar  pada  tahun  2013  angka diare  di  Kalimantan  Selatan  mengalami kenaikan  dari  angka  (2,5%)  menjadi (5,0%) (3) .  Bakteri  yang  dapat  menyebabkan terjadiya infeksi contohnya E. coli Escherichia coli adalah nama sejenis bakteri yang  hidup  di  dalam  usus  hewan  dan manusia.
Penggunaan  antibakteri  merupakan solusi  untuk  menangani  berbagai  penyakit infeksi.  Antibakteri  merupakan  senyawa yang  mampu  menghambat  pertumbuhan

## JURNAL ILMIAH MANUNTUNG, 5(2), 167-173, 2019  MOCHAMMAD MAULIDIE ALFIANNOR SAPUTERA
bakteri (4) . Penggunaan antibakteri yang tidak
terkontrol  dapat  mendorong  terjadinya resistensi terhadap antibakteri yang
diberikan (5) .
Bajakah  tampala  adalah  salah  satu tumbuhan  yang  hidup  di  desa  Garung Kabupaten Pulang Pisau Propinsi Kalimantan Tengah. Bajakah tampala adalah salah  satu  spesies  tumbuhan  dari  genus
Spatholobus yang tersebar dan banyak hidup di  daerah Asia,  dimana  29  spesies diantaranya tumbuh dan hidup di hutan Asia
Tenggara (6) . Salah satu tumbuhan yang
dimanfaatkan  secara  empiris  sebagai  obat oleh  masyarakat  di  desa  Garung  adalah bajakah  tampala  (Spatholobus  littoralis Hassk).
Berdasarkan pengalaman secara turun-  temurun  dari  masyarakat,  air  rebusan dari batang bajakah tampala dapat digunakan  sebagai  obat  sakit  perut  biasa, diare  maupun  disentri.  Penggunaannya sebagai  obat  tradisional  oleh  masyarakat setempat  adalah  dengan  cara  meminum  air rebusan dari batangnya.
Skrining  fitokimia  yang  dilakukan bahwa  ekstrak  etanol  bajakah  tampala terbukti  memiliki  senyawa  kimia  berupa flavonoid, saponin, dan tannin (8) . Daun serai menunjukkan  bahwa  flavonoid  dan  saponin memiliki  aktivitas  antibakteri  terhadap Escherchia  coli (7) .  Maka  dari  itu  penelitian ini  dimaksudkan  untuk  melihat  konsentrasi hambat  minimum  ekstrak  etanol  batang bajakah  tampala  terhadap  aktivitasnya  pada bakteri Escherchia coli.

## METODE PENELITIAN
Sampel  penelitian  ini  adalah  batang bajakah  tampala ( Spatholobus littoralis Hassk). Batang bajakah tampala diambil dari hutan pedalaman di Desa Garung, Kecamatan  Jabiren,  Kabupaten  Pulang Pisau, Kalimantan Tengah yang
menggunakan  konsentrasi  ekstrak  etanol
batang bajakah tampala (Spatholobus littoralis  Hassk) 50%,  25%,  12,5%,  6,25%
dan 3,12%. Sebagai kontrol positif amoksisilin dan kontrol negatif aquadest.

## Pengolahan Simplisia
Pembuatan  simplisia  batang  bajakah tampala  dimulai  dengan  melakukan  sortasi basah batang bajakah tampala. Sortasi basah bertujuan  untuk  membuang  kotoran  yang menempel  pada  batang  bajakah  tampala. Kemudian  dilakukan  pencucian  batang bajakah  tampala  dengan  air  bersih.  Batang kemudian  ditiriskan  untuk  mengurangi jumlah air bilasan agar pengotor yang tersisa dalam  air  bilasan  cucian  ikut  terbuang. Batang  ditimbang  untuk  mendapatkan  berat basah. Batang dirajang agar proses pengeringan dan penggilingan mudah dilakukan.  Rajangan  kemudian  dikeringkan di  bawah  sinar  matahari  langsung  selama  3 hari.  Rajangan  dihaluskan  menggunakan blender  menjadi  serbuk  dan  kemudian ditimbang sebagai berat serbuk simplisia.

## Pembuatan Ekstrak Etanol
Ekstrak etanol batang bajakah tampala dibuat  dengan  metode  maserasi.  Sebanyak 250  gram  serbuk  simplisa  dimasukan  ke dalam  bejana  maserasi.  Tambahkan  etanol 2,5  L  etanol  70%  (perbandingan  1:10)  atau hingga  terendam.  Simpan  di  tempat  yang terlindung  dari  cahaya  matahari  selama  3  x 24 jam, dan sesekali dilakukan pengadukan. Maserat  dipisahkan  dengan  cara  disaring. Dilakukan remaserasi dengan menambahkan 2 L etanol 70% remaserasi dilakukan 3 x 24 jam. Filtrat kemudian diuapkan menggunakan rotary  evaporator pada  suhu 50°C untuk mempercepat pemisahan pelarut dengan  ekstrak  berkhasiat.  Ekstrak  yang sudah  setengah  menguap  diuapkan  kembali menggunakan waterbath pada  suhu  50°C memastikan  masih  ada  sisa  pelarut  pada ekstrak sehingga menjadi ekstrak kental.

## Skrining Fitokimia
Uji  Flavonoid  Sebanyak  1  ml  larutan uji  masing-masing  dimasukkan  ke  dalam tabung  reaksi.  ditambah  dengan  2-3  mL larutan  Pb  Asetat  (timbal  asetat),  positif flavonoid  jika  terdapat  endapan  kuning kecoklatan (9) .  Sebanyak  100  mg  ekstrak dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi  dan ditambahkan  10  ml  air  panas.  Campuran didinginkan  dan  kocok  secara  kuat  selama 10 menit sehingga terbentuk buih. Buih yang tidak  menghilang  selama  10  menit  dengan tinggi  buih  1-10  cm  menunjukkan  adanya saponin. Sebanyak 100 mg ekstrak
dimasukan  ke  dalam  tabung  reaksi  dan ditambahkan  3  tetes  larutan  FeCl 3 0,5  M timbulnya  warna  biru  kehitaman.  Campuran kemudian ditambahkan larutan H 2 SO 4 terbentuknya  endapan  coklat  menunjukan adanya tannin (10) .

## Uji Aktivitas Antibakteri
Uji  aktivitas  antibakteri  dilakukan menggunakan  metode  sumuran.  Media MHA  yang  sudah  ditambahkan  suspensi bakteri dibiarkan memadat. Lubang sumuran kemudian  dibuat  pada  media  yang  sudah memadat.  Beri  label  pada  masing-masing lubang  sumuran  dengan  masing-masing konsentrasi serta  kontrol negatif dan positif. Setelah  diberi  label,  masukan  ekstrak  ke dalam lubang masing sumuran pada masing- masing  konsentrasi,  kontrol  positif  dan kontrol  negatif.  Perlakuan  ini  diulang sebanyak  empat  kali.  Setelah  itu  diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37°C.

## Uji daya hambat minimum
Pengamatan dilakukan 1x24 jam masa inkubasi.  Daerah  bening  yang  dihasilkan merupakan petunjuk kepekaan bakteri terhadap  antibiotik  atau  bahan  antibakteri lainnya  yang  digunakan  sebagai  bahan  uji. Hasil  tersebut  dinyatakan  dengan  lebar diameter  zona  hambat.  Diameter  zona hambat  diukur  dalam  satuan  millimeter
(mm) menggunakan jangka sorong. Kemudian diameter zona hambat dikategorikan  kekuatan  daya  antibakterinya berdasarkan penggolangan (11) .
Pengukuran zona hambat yang
terbentuk  diukur  vertical  dan  horizontal dengan  satuan  mm  menggunakan  jangka sorong (12) .
Zona hambat = (D1−D3)+(D2−D1) 2 D1 = Diameter vertical D2 = Diameter horizontal D3 = Diameter sumur (±5mm)
KHM  adalah  konsentrasi  minimal  zat antimikroba yang mampu menghambat pertumbuhan bakteri setelah diinkubasi 24 jam dan  tidak  tumbuh  koloni  bakteri  yang diketahui  dengan  cara  mengamati  banyaknya koloni  bakteri  yang  tumbuh (13) .  KHM  juga
merupakan teknik untuk menentukan konsentrasi  minimum  zat  antimikroba  yang dibutuhkan  dalam  menghambat  pertumbuhan suatu  mikroorganisme.  Konsentrasi  hambatan minimum (KHM) adalah konsentrasi antibiotik terendah yang masih dapat menghambat pertumbuhan organisme tertentu.
Menyatakan  bahwa  prosedur  ini  digunakan untuk  menentukan  konsentrasi  antinniotik yang masih efektif untuk mencegah pertumbuhan  patogen  dan  mengindikasikan dosis antibiotik yang efektif untuk mengontrol infeksi pada pasien (11) .

## HASIL DAN PEMBAHASAN Skrining Fitokimia
Skrining  fitokimia  bertujuan  untuk mengetahui  kandungaan  senyawa  kimia  yang terdapat pada batang bajakah tampala. Skrining fitokima  dilatar  belakangi  bahwa  senyawa flavonoid, saponin dan tanin memiliki senyawa aktivitas  antibakteri  pada  bakteri E.  Coli (7) . Tabel 1 menunjukan hasil uji skrining fitokimia bahwa  ekstrak  batang  bajakah  tamapala mengandung flavonoid, saponin, dan tanin.
Tabel 1. Hasil Skirining Fitokimia
Senyawa Pereaksi Hasil Keterangan Flavonoid Pb asetat Endapan coklat Positif Saponin Aqudest Terbentuk buih ±10 menit Setinggi 1-10 cm Positif Tanin FeCl 3 Perubahan warna biru kehitaman yang lebih dominan Positif Polifenol FeCl 3 Perubahan warna biru kehitaman yang lebih dominan Positif Alkaloid Dragendroff Meyer Tidak terbentuk Endapan Negatif Uji  pertama  yaitu  uji  flavonoid dengan pereaksi Pb asetat didapatkan hasil positif.  Flavonoid  merupakan  kelompok senyawa
fenol yang merupakan kecenderungan  untuk  mengikat  protein sehingga  dapat  menganggu  metabolisme bakteri. Ekstrak positif mengandung flavonoid  dengan  terbentuknya  endapan coklat.  Hal  ini  dikarenakan  flavonoid memiliki  cincin  benzen  yang  memiliki gugus  hidroksi  yang  membentuk  endapan coklat.
Uji  kedua  adalah  identifikasi  gugus saponin  yang  diamati  dari  terbentuknya buih.  Saponin  memiliki  struktur  misel gugus  polar  menghadap  keluar  karena mengikat  air  (hidrofilik)  sedangkan  gugus non  polar  menghadap  kedalam  karena takut  dengan  air  (hidrofobik).  Keadaan  ini yang  membuat  tampak  seperti  busa  pada saat dikocok (15) .
Indentifikasi gugus tanin dan
polifenol  dilakukan  dengan  menggunakan pereaksi  FeCl 3. Reaksi  perubahan  warna menjadi  hijau  kehitaman  diakibatkan pembentukan  senyawa  kompleks  antara tanin  dengan  FeCl.  Senyawa  kompleks yang  terbentuk  karena  adanya  kovalen kordinasi  antara  ion  atau  logam  dengan non logam (15)

## Pengecatan Gram atau Identifikasi
Bakteri Escherchia coli
Pengecatan  gram  yaitu  teknik  untuk mengidentifikasi  bakteri  yang  akan  diteliti sehingga  pengecatan  bakteri  membedakan bakteri  gram  positif  maupun  gram  negatif. Pengecatan gram bakteri menunjukan hasil berwarna merah pada bakteri gram negatif.

## Uji Aktivitas Antibakteri
Uji  aktivitas  pada  penelitian  ini menggunakan metode difusi lubang sumuran,  dipilihnya  metode  ini  karena lebih  mudah  diamati  diameter  zona beningnya,  bukan  hanya  dipermukaan tetapi  dapat  sampai  kedalam  medianya (16) . Metode  ini  juga  sangat  cocok  untuk melihat  hasil  daya  antibakteri  karena E. coli bersifat  anaerob  yang  dapat  ditumbuh diluar  maupun  didalam  media,  sehingga diameter  zona  hambat  nantinya  akan  jadi lebih maksimal (17) .
Tahap  awal  uji  aktivitas  antibakteri adalah  proses  sterilisasi  alat  agar  tidak terjadi kontaminasi dan tidak mengganggu proses penelitian. Alat-alat kaca disterilisasi  menggunakan  oven  dengan suhu 150°C selama 2 jam sedangkan untuk media disterilisasikan menggunakan autoclaf  dengan  suhu  121  °C  dengan tekanan  1  atm (18) .  Pada  penggunaan  media menggunakan  media Mueller  Hinton  Agar (MHA).  Media Mueller  Hinton  Agar adalah  uji  sensitivitas  antibiotik  yang
direkomendasikan oleh CLSI (Clinical and Laboratory Standar Institute) (19) .
Bakteri  diinkubasi  selama  24  jam pada  suhu  37°C,  maka  terbentuk  zona hambatan  terhadap  bakteri E.  coli. Zona hambatan  diukur  dengan  menggunakan jangka  sorong.  Berdasarkan  pengukuran yang  dilakukan  berdasarkan  rata-rata menunjukan  diameter  zona  hambat  yaitu 9,8  mm,  11,71  mm,  15,83  mm,  dan  20.32 mm.  terlihat  pada  konsentrasi  tertinggi yaitu  50%  ekstrak  batang  bajakah  tampala memiliki zona hambat 20.32 mm.
Konsentrasi  3,125%  tidak  memiliki  zona hambat.
Berdasarkan  hasil  penelitian  diatas hasil  penelitian  di  atas,  maka  dapat  dibuat tabel  data  zona  hambatan  yang  dihasilkan ekstrak  etanol  batang  bajakah  tampala terhadap E. Coli (Tabel 2) .
Zona  hambatan  yang  terbentuk  pada semua  kelompok  perlakuan  estrak  etanol bajakah tampala menunjukan bahwa
terdapat  daya  hambat  pada E.  coli.
Terdapat  perbedaan  zona  hambatan  yang terbentuk pada masing-masing konsentrasi.  Semakin  tinggi  konsentrasi ekstrak  yang  digunakan,  maka  semakin besar zona hambatan yang terbentuk.
Dengan melihat nilai rata-rata diameter zona hambat yang terbentuk pada masing-masing konsentrasi maka
berdasarkan  aktivitasnya  ekstrak  etanol batang  bajakah  tampala  diklasifikasikan menjadi  lemah  sampai  sangat  kuat, semakin besar zona hambat yang dihasilkan  semakin  besar  diameter  zona hambat didalamnya semakin besar kandungan senyawa yang berperan sebagai antibakteri pada ekstrak bajakah tampala.
Senyawa-senyawa  yang  diketahui berperan  dalam  menghambat  pertumbuhan bakteri  antara  lain  flavonoid,  saponin,  dan tanin,  dimana  zat-zat  tersebut  berfungsi
sebagai  antibakteri  dengan  mekanisme yang berbeda (20) . Zona hambatan terbentuk karena adanya senyawa-senyawa flavonoid, saponin, dan tanin. Mekanisme  kerja  flavonoid  sebagai antibakteri yaitu flavonoid bersifat lipofilik  yang  akan  merusak  membran mikroba  dan  senyawa  flavonoid  dapat mengganggu aktivitas transpeptidase peptidoglikan sehingga pembentukan dinding sel terganggu sehingga menyebabkan lisis (15) .
Senyawa  saponin  merupakan  zat yang  apabila  berinteraksi  dengan  dinding bakteri  maka  dinding  tersebut  akan  pecah. Saponin akan mengganggu tegangan permukaan dinding sel, maka saat tegangan permukaan terganggu zat
antibakteri  akan  dapat  dengan  mudah masuk ke dalam sel dan akan mengganggu metabolisme  hingga  akhirnya  terjadilah kematian bakteri (15) .
Senyawa  tanin  sebagai  antibakteri dengan menghambat enzim reverse
transkriptase  dan  DNA  topoisomerase sehingga  sel  bakteri  tidak  dapat  terbentuk. Tanin dapatmenghambat pertumbuhan bakteri dengan  cara mengganggu  transport protein,  menginaktifkan  adhesin  sel  dan menginaktifkan  enzim  di  dalam  sel bakteri (15) .
Kontrol  negatif  yang  digunakan adalah  aquadest  karena  tidak  memiliki efek  sama  sekali  terhadap  bakteri,  pada kelompok kontrol positif dengan ampicillin 10µ menunjukan rata-rata diameter  zona  hambat  terbesar  terhadap pertumbuhan bakteri Escherchia coli .
Nilai  KHM  ekstrak  etanol  batang bajakah  tampala  yaitu  konsentrasi  6,25% karena merupakan konsentrasi paling kecil yang  memiliki  zona  hambat.  Dikarenakan pada  konsentrasi  3,125%  tidak  memiliki zona hambat untuk pertumbuhan E. coli .

## JURNAL ILMIAH MANUNTUNG, 5(2), 167-173, 2019  MOCHAMMAD MAULIDIE ALFIANNOR SAPUTERA
Tabel 2. Data Hasil Uji Penelitian
Perlakuan Diameter Zona Hambat Diameter rata-rata (mm) ± SD I II III IV Konsentrasi 3,123% - - - - 0 ± 0 Konsentrasi 6,25% 10,1 9,95 9,25 9,9 9,8 ± 0,376 Konsentrasi 12,5% 11,45 11,5 10,45 13,45 11,71 ± 0,501 Konsentrasi 25% 15,9 15,35 16,7 15,4 15,83 ± 0,626 Konsentrasi 50% 19,8 20,6 20,4 20,5 20,32 ± 0,359 Kontrol Positif 30,05 30,15 31,15 31,85 30,8 ± 0,858 Kontrol Negatif - - - - 0 ± 0 Keterangan (-) = tidak ada zona hambat Analisis Data Berdasarkan  uji  normalitas  data >0,05 dan homogenitas <0,05. Berdasarkan  uji one-way Anova hasil  taraf
signifikansi <0,05 yang menunjukan
adanya perbedaan yang bermakna rata-rata diameter  zona  hambat  setiap  konsentrasi terhdap bakteri E. coli.
Pada  konsentrasi  3,125%  dan 6,25%,  12,5%  dan  25%,  25%  dan  50% terdapat  perbedaan  yang  bermakna  antara zona hambat pada karena nilai signifikansinya  <0,05.  Secara  statistik tidak terdapat perbedaan
antara konsentrasi  6,25  dan  12,5%  karena  nilai signifikansi >0,05.

## SIMPULAN
Berdasarkan penelitian yang dilakukan  bahwa  ekstrak  etanol  batang bajakah tampala memiliki aktivitas
antibakteri pada bakteri E. coli.
Konsentrasi  hambat  minimum  yaitu  pada konsentrasi  6,25%.  Konsentrasi  3,125% dan 6,25%, 12,5% dan 25%, 25% dan 50% terdapat  perbedaan  yang  bermakna  antara zona  hambat.  Konsentasi  6,25  dan  12,5% tidak  terdapat  perbedaan  bermakna  antara konsentrasi.

## DAFTAR PUSTAKA
1. World  Health  Organization  (WHO).
The  World  Medicine  Situation  2011
3ed.  Rational  Use  of  Medicine.
Geneva. 2011. 2. Dewi,  A.  P.  (2017)  ‘ Uji  Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Biji Mahoni (Swietenia mahagoni) Terhadap Shigella dysenteriae ’, Journal  Of  Pharmacy  &  Science ,  1, pp. 15–21.
3. Kemenkes  RI,  2018. Badan  Peneltian dan Pengembangan Kesehatan Kementerian RI tahun 2018. 4. Radji,  H.  dan  M.  (2008) Analisis Hayati Buku  Ajar  Program  Studi Farmasi Universitas Indonesia.Jakarta : ECG. 5. Ariyanti,  N.  K.  (2012)  ‘ Daya  Hambat Ekstrak Kulit Daun Lidah Buaya (Aloe Barbadensis Miller) Terhadap Pertumbuhan  Bakteri  Staphylococcus aureus dan Escherichia coli’,
Orthosiphon  stamineus  Benth. E-
Journal Planta Husada Vol.2, No.1.
6. Rider,  N.  J.  W.  A.  (1998)  ‘ Historical Biogeography  of  Spatholobus  and Allies  in  SE  Asia ’,  Biogeography  and Geological  Evolution  of  SE  Asia,  pp: 259-277, Leiden, The Netherlands.
7. Zamzani  (2011), Aktivitas  Antibakteri Ekstrak Etanol Tanaman Serai (Cymbopong  Nardus  (L.)  Rendle) Terhadap Pertumbuhan Staphylococcus aureus dan Escherichia coli ’, Skripsi.
8. Saputera, M.M.A., 2018. Uji Efektivitas  Ekstrak  Etanolik  Batang Bajakah Tampala (Spatholobus littoralis  Hassk.)  Terhadap  Waktu Penyembuhan  Luka .  Jurnal  Ilmiah
Ibnu Sina, 2018; 3(2), 318-327.
9. Yuda,  P.,  Cahyaningsih,  E.  and Winariyanthi,  N.  (2017)  ‘ Skrining Fitokomia  Dan  Analisis  Kromatografi Lapis  Tipis  Ekstrak  Tanaman  Patikan Kebo (Euphorbia hirta L.) ’, Medicamento , 3(2), pp. 61–70.
10. Rijayanti,  R.  P.  (2014)  ‘ Uji  Aktivitas Antibakteri  Ekstrak  Etanol  Daun Mangga  Bacang  (Mangifera  foetida L.)  Terhadap  Staphylococcus  aureus secara  In  Vitro ’,  Universitas  Tanjung
Pura. Pontianak.
11. Davis, S. & (1971) ‘Disc Plate Method Of  Microbiological  Antibiotic  Essay ’, Journal Of Microbiology. Vol 22 No 4.
12. Toy  (2015)  ‘ Uji  daya  hambat  ekstrak rumput  laut  gracilaria  Sp  terhadap pertumbuhan  bakteri  Staphylococcus aureus ’,  jurnal  e-Gigi  (Eg),  3(1);  153- 159.
13. Tortora,  G.  J.  F.  B.  R.  &  C.  C.  L. (2010) Microbiology  an  introduction 10th edition , Pearson edition, Publishing  as  Pearson  Benjamins Cummings, San Francisco, 1301 Sansome. 14. Radji,  H.  dan  M.  (2008) Analisis Hayati Buku  Ajar  Program  Studi
Farmasi Universitas Indonesia.Jakarta : ECG. 15. Agustin, B.A., Puspawaty, N., Rukmana,  R.  M.  (2018)  ‘ Aktivitas Antibakteri Kombinasi Ekstrak Etanolik  Daun  Beluntas  (Pluchaea indica Less.) dan Meniran (Phyllanthus niruri L.) terhadap Bakteri Staphylococcus aureus ’, Indonesian Journal of Clinical Pharmacy . 16. Pratiwi,  S.  T.  (2008) Mikrobiologi Farmasi . Jakarta : Erlangga.
17. Kusuma,  S.A.F.,  2010.  Escherichia coli.  Univ.  Padjadjaran  Fak.  Farm, Jatinangor.
18. Saraswati,  F.  N.  (2015)  ‘ Uji  Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol 96% Limbah  Kulit  Pisang  Kepok  Kuning (Musa  Balbisiani)Terhadap  Jerawat Penyebab Jerawat (Stapylococcus Aureus,  Stapylococcus  Aureus  Dan Proponiu Acnes ’, 70(1), pp. 54–55.
19. Pincus,  M.  (2011) Henry’s  Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods, New York: Elsevier Saunders. 20. Febrianti, D.R., Khairina, N., &  Alisa, P. N., 2018. Uji Aktivitas Antimikroorganisme Ekstrak Jeriangau (Acorus  calamus  L.)  Terhadap  Jamur Candida albicans Dan Bakteri Staphylococcus  aureus .  Jurnal  Insan
Farmasi Indonesia, 2018; 1(1): 96-103.