Kadar radikal superoksid (O2-), nitric oxide (NO) dan asupan lemak  pada pasien hipertensi dan tidak hipertensi
Pudji Astutik 1 , Merryana Adriani 2 , Bambang Wirjatmadi 2

## ABSTRACT
Background : Hypertension closely related to impaired endothelial dependent vasodilation due to a decline in the availability of nitric oksid (NO) and high fat intake, decreased Nitric Oksid caused due to increased levels of superoksid.
Objective : to analyze the differences in the levels of Superoksid Radical (O2-), Nitric oxide (N0) and fat intake in patients with hypertension and not hypertension .
Methods : this research is cross sectional, research amount sampelnya taken at random. 24 respondent patients consisting of 12 cases control, and 12 the age of 65 40- tahun.pengambilan samples conducted in outpatient installation regional general hospital Sidoarjo. Done bseline superoksid levels, nitric oxide and recall fat intake.
Results :  the  average  rate  of  Superoksid  respondents  not  hypertension  0.250±  0, 034U/mL,    0,314± 056U/mL  hypertension, Average levels of Nitric oksid respondents not hypertension 116,083± 46,962µ M, of which hypertension 72,333± 40,51µ M, average consumption of fat respondents not hypertension 41,65± 8, 32gram, 51,52± 6,74gram hypertension . Based on the test results the difference against Superoksid levels of both research groups using a t-test two samples are free retrieved the value p  <  0,05  (p  =  0,004),  NO  content  retrieved  the  value  p  <  0,05  (p  =  0,023),  fat  intake  obtained  the  value  of  p  <  0,05  (p  = 0,004) which means that there is a meaningful difference in the levels of Superoksid, Nitric oxide and the level of fat intake among respondents with no hypertension and hypertension.
Conclusion :  there  is  a  radical  difference  in  the  levels  of  Superoksid,  NO  (Nitric  Oxide)  and  fat  intake  in  patients  with hypertension and not hypertension.
Key words : hypertension, radical superoksid, nitric oxide, fat consumption

## ABSTRAK
Latar  Belakang :  Hipertensi  erat  kaitannya  dengan  gangguan  vasodilatasi  yang  terjadi  karena  menurunnya  kadar  Nitrit Oksida (NO) dan asupan tinggi lemak. Penurunan NO disebabkan karena meningkatnya kadar superoksida. Tujuan : Tujuan dari penelitian ini adalah menganalisis perbedaan kadar superoksida, nitrit oksida, dan asupan lemak pada pasien dengan hipertensi dan tidak hipertensi.
Metoda :  Studi  cross  sectional  pada  24  pasien  di  Instalasi  Rawat  Jalan  Rumah  Sakit  Umum  Daerah  Kabupaten  Sidoarjo, berumur 40-65 tahun, dipilih secara acak, yang terbagi dalam dua kelompok, 12 pasien tidak hipertensi dan 12 pasien dengan hipertensi. Data yang dikumpulkan adalah kadar superoksida, nitrit oksida dan asupan lemak.
Hasil :    Rerata  kadar  superoksida  pada  responden  yang  tidak  hipertensi  adalah  0.250±  0,  034U/mL  dan  0,314±  056U/mL pada responden dengan hipertensi. Rerata kadar NO pada responden yang tidak hipertensi adalah 116,083± 46,962µ M dan 72,333±  40,51µ  M  pada  responden  dengan  hipertensi.  Rerata  asupan  lemak  pada  responden  yang  tidak  hipertensi  adalah 41,65±  8,  32  gram,  dan  51,52±  6,74  gram  pada  responden  dengan  hipertensi.    Uji  perbedaan  terhadap  kadar  superoksida kedua kelompok dengan menggunakan uji t dua sampel bebas diperoleh nilai p < 0,05(p = 0,004), NO(p= 0,023), dan asupan lemak (p= 0,004) yang menunjukkan terdapat perbedaan yang bermakna pada kadar superoksida, NO, asupan lemak antara kelompok  responden dengan tidak hipertensi dan hipertensi.
Simpulan :    Ada  perbedaan  kadar  superoksida,  nitrit  oksida,  dan  asupan  lemak  pada  pasien  dengan  hipertensi  dan  tidak hipertensi.
Kata kunci : hipertensi, kadar superoksida, nitrit oksida, asupan lemak

## PENDAHULUAN
Pada  tahun  2020    diperkirakan  kasus  penyakit  tidak menular  akan  meningkat  menjadi  73%    sebagai penyebab  kematian,  dan  merupakan  60%    beban penyakit  dunia.  WHO  SEARO  ( South  East  Regional Office ) termasuk  Indonesia,  Thailand, Myanmar  serta
berbagai negara Asia selatan, melaporkan bahwa  52% penyebab  kematian  di  tahun  2000  adalah  penyakit tidak  menular, 9% akibat kecelakaan  dan  39%  akibat penyakit  menular  serta  penyakit  lainnya. 1 Salah  satu penyakit tidak menular tersebut adalah  hipertensi.
Berdasarkan    data  The  National  Health  and Examination Survey  NHANES ) menunjukkan bahwa dari tahun 1999 – 2000, insiden hypertensi pada orang dewasa  adalah  sekitar    29-31%,  yang  berarti  terdapat 58-65  juta  penderita  hypertensi  di  Amerika,  dan
1 Magister  Fakultas  Kesehatan  Masyarakat  Universitas Airlangga, Indonesia
2 Fakultas  Kesehatan  Masyarakat  Universitas  Airlangga, Indonesia
terjadi  peningkatan  15 juta  dari  data  NHANES)  pada tahun 1988-1991. 2
Prevalensi  hipertensi    di  Indonesia  berdasarkan hasil  Survei  Kesehatan  Rumah  Tangga  tahun  2004 sebesar  21%  (Litbang-Kes.  2005)  dan  meningkat menjadi 32,2% pada tahun 2007,.(Depkes 2007).
Penyakit  Hipertensi  merupakan  masalah  yang besar    dan  serius.  Disamping  karena  prevalensinya yang  tinggi  dan  cenderung  meningkat  di  masa  yang akan  datang,  juga  karena  tingkat  keganasan  penyakit yang  diakibatkan  sangat  tinggi  seperti  penyakit jantung,  stroke,gagal  ginjal  dan  lain  lain,  juga menimbulkan  kecacatan  permanen  dan  kematian mendadak.  Kehadiran  hipertensi  pada  kelompok dewasa  muda,  sangat  membebani  perekonomian keluarga,  karena  biaya  pengobatan  yang  mahal  dan membutuhkan  waktu  yang  panjang,  bahkan  seumur hidup. 3
Beberapa penelitian menunjukkan bahwa gangguan vasodilatasi yang tergantung endotel terjadi pada  penderita  hipertensi,  karena  fungsi  endotel berhubungan  dengan  bioaktivitas  dari  NO  yang tergantung  interaksinya  dengan  ROS  khususnya superoxid.  Reaksi  NO  dengan  superoxid  akan dihasilkan  peroxynitrit  (ONOO-)  yang  merupakan reaktif  nitrogen  spesies.  Peroksinitrit  ini  akan mengoksidasi BH4 (pteridin tetrahydrobiopterin) yang merupakan  kofaktor  untuk  NOS  (Nitric  oxide syntthase). Situasi ini akan mengakibatkan NOS untuk menghasilkan  superoksida  daripada  menghasilkan NO,sebagai akibatnya sintesis NO menurun. Penurunan  kadar  NO  menyebabkan  proses  relaksasi endotel  terganggu  sehingga  berakibat  terjadinya hipertensi . 4 Peningkatan produksi superoxid dapat meningkatkan  degradasi  NO  untuk  menurunkan sintesisNO.  Degradasi  NO  akan  menyebabkan disfungsi vasomotor, aktivasi endotel mengekpresikan molekul  adhesi,  proliferasi  otot  polos  menginduksi, ekspresi  gen  inflamasi,  menginduksi  apoptosis, migrasi  dan  reorganisasi  matrik  seluler  yang  dapat mengganggu  vasorelaksasi  yang  tergantung  endotel  , semuanya ini merupakan mekanisme yang mengawali terjadinya hipertensi. 5
Nitric  Oxide yang  juga  dikenal  sebagai  nitrogen monoksida,  merupakan  zat  perantara  yang  sangat penting  dalam  siklus  kimia  di  dalam  tubuh.  Pada manusia,senyawa NitricOxide merupakan  senyawa kimia  yang  penting  untuk  tranportasi  sinyal  listrik didalam sel-sel, dan berfungsi dalam proses fisiologis dan  patologis.  Demikian  pula,  senyawa  ini  bisa menyebabkan  pelebaran  pembuluh  darah  atau  dalam istilah  kedokteran  di  sebut  vasodilator  yang  kuat sehingga bisa menurunkan tekanan darah. 6
Nitric  Oxide (NO)  berperan  terhadap  regulasi  dan pemeliharaan tekanan pembuluh darah. NO dihasilkan
sel  endotel,  dan  memiliki  efek  vasodilatasi  dan antiproliferasi pada sel otot polos vaskular. Pelepasan NO  akan  memicu  terjadinya  relaksasi  otot  polos vaskular.  Penurunan  NO  dapat  terjadi  akibat  adanya penurunan  aktivitas  enzim Nitric  Oxide  Synthase (NOS).  Penurunan  aktivitas  NOS  menyebabkan vasokonstriksi dan hipertensi. 7
Makanan  tinggi  lemak  tidak  memberi  rasa kenyang,  hanya  memberikan  rasa  gurih  sehingga menyebabkan  volume  makanan  lebih  besar  supaya kenyang.Besarnya volume makanan dengan kandungan  lemak  tinggi,  memberikan  energi  lebih tinggi,  sehingga  menjadi  kendala  dalam  mengatur keseimbangan  energi.Kecenderungan  perilaku  makan yang  tinggi  lemak  akan  menjadi  ketidakseimbangan lemak  yang  akan  disimpan  dalam  jaringan  adiposa, mengakibatkan adanya penimbunan jaringan lemak di dalam  tubuh. 8 Selain  sebagai  tempat  penyimpanan energi, jaringan lemak juga menghasilkan faktor yang menyebabkan  hipertensi  karena  jaringan  lemak  dapat menguraikan  angiotensin  dari  sistem  angiotensin- renin. 9
Asupan Lemak yang berlebihan akan menginduksi aktifasi  sel  endotel  vaskuler,  yang  pada  gilirannya dapat  mengakibatkan  disfungsi  endotel  dan  produksi Reactive  Oxygen  Species (ROS),  penurunan  produksi Nitrit  Oksida  (NO),  dan  oksidasi  LDL  melalui peningkatan  substrat,  perubahan  konformasi  LDL yang  lebih  rentan  terhadap  oksidasi,  dan  peningkatan produksi radikal superoksida (O2-) vaskuler. 10 Lemak  yang  memiliki  Apo-B  100  (VLDL,  IDL, LDL)  bila  terdapat  dalam  jumlah  banyak  dan  dalam waktu yang lama dapat menimbulkan deposisikolesterol  dan  ester  kolesteril  pada  jaringan ikat  dinding  pembuluh  arteri.  Jaringan  otot  halus  dan jaringan  fibrosa  di  sekitarnya  akan  berproliferasi membentuk  plak.  Dengan  berjalannya  waktu,  plak akan  bertambah  besar.  Plak  yang  bertambah  besar ditambah dengan garam kalsium yang ikut mengendap akan  menyebabkan  aterosklerosis. 11 Telah  diketahui bahwa  aterosklerosis  merupakan  salah  satu  penyebab terjadinya hipertensi.
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui perbedaan  kadar  Superoxide,  Nitric  Oxide  (NO)  dan tingkat  konsumsi  Lemak    pada  pasien  Hipertensi  dan tidak Hipertensi.

## METODE DAN BAHAN
Rancangan  penelitian  ini  adalah cross  sectional , terhadap  24  pasien  di  Instalasi  Rawat  Jalan  Rumah Sakit  Umum  Daerah  Kabupaten  Sidoarjo,  dipilih secara  acak,yang  terbagi  dalam  dua  kelompok,  12 pasien  tidak  hipertensi  dan  12  pasien  dengan hipertensi.Kriteria  inklusi  penlitian  ini  adalah  pasien
yang  berobat  di  Instalasi  Rawat  Jalan  di  RSUD Sidoarjo,  berumur  40-65tahun,  yang  telah  diperiksa tekanan  darahnya,  kemudian  dibagi  menjadi  dua kelompok    yaitu  kelompok  tidak  hipertensi  dan hipertensi  (hipertensi  primer,  hipertensi  sistolik, hipertensi  diastolik,  hipertensi  campuran).  Pasien tidak  mempunyai  komplikasi  penyakit  lain  seperti diabetes  mellitus,  gangguan  ginjal,  gangguan  jantung juga tidak mengalami stroke, serta bersedia berpartisipasi dalam penelitian ini dan bersedia diukur kadar superoxide ,  NO-nya,  dengan  menandatangani informed consent . Definisi hipertensi dalam penelitian ini berdasarkan The Seventh Report of the Joint National Commitee  on  Prevention  of  Hight  Blood  Pressure (JNC  VII).  Seseorang  dikatakan  Hipertensi  apabila tekanan  darah  diastolik  ≥  90  mmHg  dan  atau  sistolik ≥140  mmHg.  Subyek  kontrol  adalah  pasien  dengan kriteria  sama  dengan  subyek  kasus  tetapi  tidak hipertensi.Penelitian  ini  juga  sudah  disetujui  Komite Etik  Fakultas  Kesehatan  Masyarakat  Universitas Airlangga  Surabaya.  Jumlah  Responden  disesuaikan dengan  rumus. 12 Pengambilan  bahan  pemeriksaan darah diambil dari vena cubiti sampel  sebanyak 5 ml ditempatkan  pada  vacutainer  dengan  antikoagulan EDTA,  pengukuran  kadar superoxide menggunakan Superoxide  Dismutase  Assay  kit Cat  706002.  Tahap akhir  dilakukan  pembacaan  hasil Optical  Density (OD)  superoksida  menggunakan    ELlSA  reader dengan  panjang  gelombang  450  nm.  Pemeriksaan kadar  NO  diukur  secara Calorimetrik  Non-enzymatic Nitric  Oxide  Assay dan  menggunakan  kit  dari R&D Biomedical  Research  product dengan  prinsip  kerja yaitu  mengukur  kadar  nitrit  yang  merupakan  hasil degradasi  nitrik  oksida  (NO)    yang  bersifat  stabil secara  spektrofotometri  pada  panjang  gelombang 540nm.  Nitrat  yang  juga  merupakan  hasil  degradasi NO  akan  dirubah  terlebih  dahulu  menjadi  nitrit
dengan  bantuan  logam  kadmium  (Cd).Sedangkan konsumsi  lemak  diperoleh  dari recall 1x24  jam, kemudian  dikonversi  ke  gram  dengan  menggunakan DKBM, selanjutnya dibandingkan dengan AKG.
Analisa  secara  statistik    univariat  digunakan  untuk menghitung  nilai  rerata  (mean)  dan  standart  deviasi (SD)  dari  kadar superoxide ,  NO    dan  tingkat  asupan lemak  pada  setiap  kelompok.  Uji  beda  dilakukan menggunakan uji t dengan p < 0,05 untuk mencari ada tidaknya perbedaan antara kadar superoxide , NO  dan tingkat  konsumsi  lemak  pada  pasien  hipertensi    dan tidak hipertensi.

## HASIL
Karakteristik  demografi  responden pasien  bisa  dilihat pada  tabel  1.    Usia  rerata  responden  tidak  hipertensi 46,083±4,420
,responden
hipertensi 52,583±4,852.Responden wanita lebih banyak dibandingkan  pria  baik  pada  responden  tidak hipertensi  (75%)  maupun    responden  hipertensi (66,7%).  Riwayat  penyakit  keluarga  hipertensi terbanyak  adalah  dari  ibunya    pada  responden  tidak hipertensi ( 33,3%)maupun hipertensi (41,7%).
Pada  tabel  2  bisa  dilihat  rerata  kadar  superoxide responden  tidak  hipertensi            0,250±  0,034U/mL, responden  yang  hipertensi  0,314±0,056U/mL.    rerata kadar  NO  responden  tidak  hipertensi  116,083± 46,962µM, responden yang hipertensi 72,333±40,511µM.  Untuk    rerata  konsumsi  lemak responden tidak hipertensi 41,65±8,32 gram, responden yang hipertensi 51,52±6,74 gram. Berdasarkan  hasil  Uji  perbedaan  terhadap  kadar superoxide kedua kelompok penelitian dengan menggunakan uji t dua sampel bebas diperoleh nilai p <  0,05(p  =  0,004),  NO(p=  0,023),  dan  asupan  lemak (p= 0,004) yang menunjukkan
Tabel 1. Karakteristik demografi responden tidak hipertensi dan hipertensi
Variabel Kontrol (n=12) Kasus (n=12) Umur 46,0 ± 4,42                        52,5 ±4,85 Jenis Kelamin Laki –laki 3 4 Perempuan 9 8 Riwayat penyakit keluarga Tidak ada 5 2 Ada (ibu) 4 5 Ada (ayah) 2 1 Ada (ayah,ibu) 1 3 Tidak Tahu 0 1
Tabel 2. Kadar Superoxide, Nitric Oxide dan asupan lemak pada responden tidak hipertensi dan hipertensi
Variabel Tidak Hipertensi Hipertensi Kadar Superoxide Kadar Nitric Oxide Asupan Lemak Kadar Superoxide Kadar Nitric Oxide Asupan Lemak Mean 0,250              116,083              41,65 0,314                  72,333              51,52 Std. Deviasi 0,034              46,962                 8,32 0,056                  40,511                6,74 Nilai Minimum 0,214               71 27,65 0.239                  24,333               43,2 Nilai Maximum 0,322             205,666               54,55 0,394                 351,666              61,85
terdapat  perbedaan  yang  bermakna  pada  kadar superoxide ,  NO,  asupan  lemak  antara  kelompok responden  dengan  tidak  hipertensi  dan  hipertensi, seperti terlihat pada gambar 1 – 3.

## PEMBAHASAN
Berdasarkan  data  hasil  penelitian  nilai  OD  ( Optical Density )  kadar  Superoksida  didapatkan    hasil  analisis
statistik  p < 0,05 (p= 0,004) yang menunjukkan  ada perbedaan  yang  bermakna  kadar  Superoksida    pada kelompok  responden  tidak  hipertensi  dan  hipertensi, tidak  hipertensi  reratanya  sebesar  0,250±0,034U/mL, sedangkan  hipertensi  adalah  sebesar  0,314±0,056 U/mL.  Hasil  penelitian    ini    bisa    dijelaskan    bahwa adanya  perbedaan    pada    responden  tidak  hipertensi dan  hipertensi  yang    ditunjukkan  dengan    hasil    nilai OD( Optical
Gambar 1. Gambaran asupan Lemak pada Responden Ket :   = Tidak Hipertensi,   = Hipertensi
Gambar 2.  Gambaran Kadar Superoxide pada responden Ket :   = Tidak Hipertensi,   = Hipertensi
0,45 0,35 0,25 0,15 0,05 0 1 2 3 4 5
6 7 8 9 10 11 Super ok si d a N il ai A sup an Le m ak
Gambar 3. Gambaran Kadar Nitric Oxide pada responden Ket :   = Tidak Hipertensi,   = Hipertensi
Density )  superoksida-nya,  hal  ini    dimungkinkan karena  pengaruh  stress,  baik  yang  disebabkan  oleh stress  fisik  yang    berlebihan    atau    stres    emosional, karena  dalam  penelitian  ini  menunjukkan  ada hubungan  antara  stres  dan  terjadinya  hipertensi,  juga karena  dipengaruhi  kadar  lipida  darah  responden. Stress      dapat  menyebabkan sympatoadrenal discharge ,  yang  ditunjukkan    dengan    peningkatan kadar    nonadrenalin    dan  adrenalin  yang  sangat tinggi. 13 Hasil  penelitian  Sozmen et  al juga menjekaskan  katekholamine    (noradrenalin    dan adrenalin)  sebagai    sumber    yang    sangat    penting dalam    pembentukan    radikal    bebas    oksigen    yaitu dengan  cara  autooksidasi  dalam  reaksi  yang  sangat komplek. 14 Stres  juga    diketahui  akan    dapat mengurangi    efektifitas  pemanfaatan    antioksidan didalam tubuh sehingga menyebabkan ketidakseimbangan    antara    pembentu-kan    radikal bebas    dengan    sistem  scavenger  akan  timbul    suatu keadaan        yang    disebut    stres    oksidatif  dan  hal  ini dapat  menyebabkan  kerusakan  sel  yang  berakibat terjadinya penyakit, antara lain hipertensi. 15
Hasil  analisis  statistik  pada  penelitian  ini didapatkan p < 0,05 (p = 0,023)  berarti ada perbedaan yang  bermakna  kadar  NO  pada  responden    dengan tidak hipertensi dan hipertensi. artinya rata-rata kadar NO  dengan  standar  deviasi  pada  responden  dengan tidak  hipertensi  sebesar  116,083±46,962  µmol/L, sedangkan  rata-rata  dan  standar  deviasi  responden dengan hipertensi sebesar 72,333±40,511 µmol/L.
Hal  ini  sejalan    dengan  penelitian  Santosa menyatakan  bahwa  ada  perbedaan  kadar  NO  pada pasien  hipertensi  dan  tidak  hipertensi. 4 Sesuai  dengan teori yang menyebutkan bahwa semakin rendah kadar nitrik oksida (NO) darah, semakin tinggi pula tekanan darah  sistolik  dan  diastolik,  karena  NO  merupakan senyawa  yang  bersifat  vasodilator. 16 Semakin  parah kerusakan  endotel  akibat  stres  oksidatif  yang berlebihan,  maka  produksi  NO  akan  semakin  rendah, tekanan  darah  meninggi  dan  hipertensi  bertambah
berat. 17 Hal  ini  juga  sesuai  dengan  pendapat  Taddei yang  mengemukakan  gangguan  vasodilatasi  yang bergantung endotel pada penderita hipertensi dikarenakan penurunan  ketersediaan NO. 18
Rerata tingkat konsumsi lemak  dan standar deviasi responden tidak  hipertensi adalah  sebesar  41,65±8,32 gram  dan  pada  responden  hipertensi  adalah  sebesar 51,52±6,74  gram.  Hasil  uji  statistik  menunjukkan bahwa  ada perbedaan tingkat konsumsi lemak antara responden    tidak  hipertensi  dan  hipertensi  p=0,004. Hal  ini  sesuai  dengan  penelitian    di  London 19 ,  yang menunjukkan  asupan  tinggi  lemak  berbanding  lurus dengan  kejadian  obesitas  dimana  obesitas  dapat menyebabkan  hipertensi. 20 Hasil  penelitian  ini  juga sejaqlan  dengan  hasil  penelitian  di  Teheran  pada wanita dewasa yang menemukan ada hubungan antara asupan tinggi lemak dengan kejadian hipertensi. 21 Subjek  pada  penelitian  tersebut  sering mengkonsumsi  makanan western memiliki  resiko tinggi  terhadap  peningkatan  komponen  sindroma metabolisme, antara lain resistensi insulin, peningkatan LDL, dan tekanan darah.

## SIMPULAN
Kadar superoxide pada  pasien  tidak  hipertensi lebih  rendah  tetapi    kadar Nitric  Oxide (NO)  pada pasien tidak hipertensi lebih tinggi sedangkan  tingkat asupan  lemak  pada  pasien  tidak  hipertensi  lebih rendah dibandingkan pasien hipertensi.Ada perbedaan Kadar  Superoxide,  Nitric  Oxide  (NO)  dan  tingkat asupan  lemak  pada  pasien  tidak  hipertensi  dan hipertensi .

## DAFTAR PUSTAKA
1. Survei Nasional (Surkesnas ) 2004 : SKRT 2004 - vol  2  :  Status  Kesehatan  Masyarakat  Indonesia. Jakarta:  Badan  Penelitian  dan  Pengembangan Kesehatan; 2005.
250 200 150 100 50 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 N it ro O xyde 12
2. Yogiantoro  M. Hypertensi  Esensial  Dalam  Buku Ajar  Ilmu  Penyakit  Dalam  Jilid  I  Edisi  IV.
Jakarta: Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia; 2006.
3. Sorof  J,  Daniels  S.  Obesity  Hypertension  in Children;  A  Problem  of  Epidemic  Proportions. Hypertension. 2007; 40:441-447.
4. Santosa  S,Ellya  R.  Peran  F2-Isoprostan  dan Nitrik Oksida Sebagai Penanada Stress Oksidatif dan Disfungsi Endotel pada Penderita Preeklamsi.  Jurnal  Kesehatan  Masyarakat.  2007; 7 (1): 47-54.
5. Taniyama,  Yoshihiro,  Griendling  KK.  "Reactive oxygen  species  in  the  vasculature  molecular  and cellular  mechanisms." Hypertension. 2003; 42 (6): 1075-1081.
6. Hermann  M,  Flammer  A,  Thomas  F.  Lüscher. "Nitric  oxide  in  hypertension." The  Journal  of Clinical Hypertension . 2006; 8 (s12): 17-29.
7. Kaplan  NM.  Hypertension  with  pregnancy  and pill, In Kaplan NM, editor, Clinical Hypertension.Williams  &Wilkins:  Baltimore, USA; 1994.
8. Wang  O,  Lobstein.  T. Worldwife  trends  in Childood  Overweight  on  Obesity. International journal of Pediatric Obesity. 2006; 1:11-25.
9. Torrance B, McGuire A, Lewnczuk. Overweight, Physical  activity  and  high  blood  pressure    in children:  a  review  of  the  literature.  Vascular Health  and  Risk  Management.  2007;  3(1):  139- 149.
10. Martins  MA,  Catta-Preta  M,  Mandarim-de- Lacerda  CA,  Aguila  MB,  Brunini  TCM,  et  al. High fat diets modulate nitric oxide biosynthesis and  antioxidant  defence  in  red  blood  cells  from C57BL/6  mice. Archives  of  biochemistry  and biophysics . 2010; 499(1): 56-61.
11. Olofsson  SO,  Boren  J.  Apolipoprotein  B:  a clinically important apolipoprotein which assembles atherogenic lipoproteins and promotes
the  development  of  atherosclerosis. Journal  of internal medicine . 2005; 258(5): 395-410.
12. Kuntoro  H. Metode  Sampling  Dan  Penentuan Besar Sampel . Pustaka Melati: Surabaya;2008.
13. Kestin  AS,    Ellis    PA,  Barnard    MR.  Effect    of strenuous  exercise  on  platelet  activation  state and  reactivity.  Circulation.  1993;  88(1):  1502- 1511.
14. Sozmen    B,    Kozaz    L,  Taskiran    D,  Tuzens. Effect    of    n    dicycloprorylmethyl    amino 2oxazoline (S  3341)  on antioxidant  status  and nitric  oxide  in  hypertensive  patients.  Current Medical  Researh  and  Opinion.  1998;  14(2):  89- 96.
15. Nicholas  K.  Regulation    of    endothelial    nitric oxide    synthase    by    tetrahydrobiopterin    in vascular    disease.    Arterioscler  Thromb  Vasc Biol. 2004; 24: 413-420.
16. Tyagi NS. Mechanisme of homocysteine induced oxidative  stress,  Am  J  Phhsiol  Heart  Circ Physiol. 2006; 289:2649-56.
17. Chao CL. Effect of methionine-induced hyperhomosistein on endothelium-dependent vasodilatation  and  oxidative  status  in  healthy adults.    Circulation. 2000; 101:485-90.
18. Tadddei  S,  Virdis  A.  Endothelial  dysfunction  in hypertension. J Nephr 2000; 13: 205-210.
19. Gregory  JW,  Lowe  S.  National  Diet  and Nutrition  Survery:  Young  People  Aged  4  to  18 Years  :  Report  of  the  Diet  and  Nutrition  Survey London, The Stationery Office; 2000.
20. Choi  JW,  Im  MW,  Pai  SH.  Nitric  oxide production  increases  during  normal  pregnancy and decreases in preeclampsia. Annals of Clinical & Laboratory Science. 2002; 32: 257-63.
21. Esmaillzadeh A, Mosug KFB, Willet W. Dietary 3,  pattern,  insulin  resistance  and  prevalence  of the  metabolic  syndrome  in  women.  Am  J  Clin Nutr. 2007; 85:910-8.