Penentuan Kadar Flavonoid Ekstrak Etil Asetat Daun Sukun ( Artocarpus altilis )

## Determination of Flavonoid Content of Ethyl Acetate Extract of Breadfruit Leaves (Artocarpus altilis)

## A.Trihadi Kusuma, Andi Adelah, Zainal Abidin, Ahmad Najib
Universitas Muslim Indonesia, Jl. Urip Sumoharjo No.KM. 5, Panaikang, Panakkukang, Kota Makassar, Sulawesi Selatan 90231
Kontak : andi.trihadi84@gmail.com
Abstrak
Daun sukun (Artocarpus altilis) merupakan salah satu obat tradisional yang sudah lama digunakan untuk mengatasi berbagai penyakit. Beberapa senyawa  yang telah  diketahui  mampu  mengambat pertumbuhan kanker yang terdapat dalam daun sukun adalah senyawa golongan flavonoid. Penelitian ini bertujuan untuk menentukan kadar flavonoid ekstrak  etil  asetat  daun  sukun.  Sampel  diekstrak  menggunakan  metode  maserasi  dengan  pelarut  etil  asetat. Penentuan  kadar  flavonoid  menggunakan  spektrofotometri  yang  diukur  pada  panjang  gelombang  435  nm,  dengan pembanding  kuersetin  (QE).  Hasil  penelitian  ini  menunjukkan  kandungan  flavonoid  pada  ekstrak  etil  asetat  daun sukun adalah 29,442±1,20 mgQE/g.
Kata Kunci : Daun Sukun (Artocarpus altilis) , flavonoid, kuersetin, spektrofotometer UV-Vis

## Abstract
Breadfruit  leaf (Artocarpus  altilis)  is  one  of  some  traditional  medicine  had  been  used  for  treatment  of  various diseases. Some compounds that have been knows as cancer agent in breadfruit leaf are flavonoids. This study aimed to  determine  the  flavonoid  content  of  ethyl  acetate  extract  of  breadfruit  leaves.  The  sample  were  extracted  by maceration method using ethyl acetate. Determination of flavonoid content use spectrophotometry methods at  the maximum wavelength 435 nm with quercetin as standard (QE). The result showed content flavonoid in ethyl acetate extract of the breadfruit leaves were 29,442±1,20 mgQE/g.
Keywords : Breadfruit leaves (Artocarpus altilis), flavonoid, quercetin, UV-Vis spectrophotometer

## PENDAHULUAN
Tumbuhan  yang  berkhasiat  sebagai  obat memiliki  zat  –  zat  penting  yang  sangat berperan  dalam  menentukan  aktivitas  kerja tumbuhan obat tersebut, salah satunya  yaitu  - senyawa  golongan  flavonoid.  Zat  ini  salah satunya berpotensi sebagai antioksidan (Selawa, Runtuwene, & Citraningtyas, 2013). Senyawa-senyawa golongan flavonoid mempunyai  berbagai  fungsi  penting  untuk kesehatan,  antara  lain  dalam  menurunkan risiko  serangan  penyakit  kardiovaskular,
tekanan  darah,  aterosklerosis,  dan  sebagai antioksidan (Hodgson & Kevin, 2006).
Flavonoid  merupakan  golongan  terbesar senyawa  fenol  alam  (Harborne,  1987). Flavonoid merupakan senyawa yang ditemukan  pada  buah-buahan,  sayur-sayuran, dan  beberapa  minuman  yang  memiliki beragam manfaat biokimia dan efek antioksidan (Cristobal & Donald, 2000). Oleh karena  itu  makanan  yang  kaya  flavonoid dianggap penting untuk mengobati penyakit – penyakit,  seperti  kanker  dan  penyakit  jantung
(yang  dapat  memburuk  akibat  oksidasi lipoprotein  densitas-rendah)  (Heinrich,  Petko, Maria, Anton, & Antonin, 2009).
Manfaat  flavonoid  yang  telah  diketahui, antara  lain  untuk  melindungi  struktur  sel, meningkatkan efektifitas vitamin C, antiinflamasi,  mencegah  keropos  tulang  dan sebagai  antibiotik  (Lumbessy,  Abidjulu,  & Paendong,  2013).  Selain  itu  flavonoid mempunyai efek antihipertensi, dan isoflavon tertentu  merangsang  pembentukan  estrogen dan  insektisidal    (Nugrahaningtyas,  Matsjeh, & Wahyuni, 2005).
Beberapa tanaman obat Indonesia mengandung senyawa flavonoid, salah satunya  yaitu  tanaman  sukun,  yang  secara empiris  digunakan  sebagai  obat  penyakit pembesaran limpa dan sebagai obat luar pada penyakit  kulit  (Heyne,  1987).  Selain  itu beberapa  senyawa  isolat  dari  daun  sukun ( Artocarpus  altilis ) mempunyai  aktivitas biologi  diantaranya  antiplatelet,  antifungi, antibakteri,  penghambatan  sel  leukemia, antitumor, antioksidan, ACE inhibitor ,
antidiabetes, anthehelmintik, protease inhibitor ,  immunomodulator,  antiinflamasi, penghambat  biosintesis  melanin,  dan  sebagai agen  kosmetik  (Handa,  Khanuja,  Longo,  & Rakesh, 2008).
Kadar flavonoid hasil ekstraksi tergantung dari  penyari  yang  digunakan.  Salah  satu penyari yang dapat menyari senyawa flavonoid  dalam  konsentrasi  yang  besar adalah etil asetat (Stankovic, 2011). Konsentrasi  flavonoid  pada  daun  sukun sangat mempengaruhi aktivitas yang nantinya dihasilkan. Penelitian ini bertujuan menentukan  kadar  flavonoid  dalam  daun sukun,  khususnya  pada  ekstrak  etil  asetat daun  sukun.  Hasil  penelitian  ini  dapat menjadi  acuan  dalam  memanfaatkan  daun sukun  sebagai  bahan  aktif  dalam  membuat ekstrak  yang  digunakan  sebagai  antioksidan atau antiinflamasi.

## METODE PENELITIAN

## Bahan dan alat
Bahan-bahan  yang  digunakan  seperti  etil
Gambar 1. Tampak atas (kiri) dan bawah daun sukun (kanan)
asetat,  etanol  96  %,  aluminium  klorida, kalium  asetat,  dan  kuersetin  (Merck).  Alat analisis  kadar  mengunakan  Spektrofotometer UV-Vis (Apel PD-303UV)

## Penyiapan Sampel dan Ekstraksi Sampel
Daun  sukun  yang  digunakan  sebagai sampel,  diambil  dari  Kabupaten  Sidrap. Sampel dideterminasi di Laboratorium Farmakognosi-Fitokimia  Fakultas  Farmasi Universitas  Muslim  Indonesia.  Sampel  daun sukun  yang  diambil  selanjutnya  dibuat menjadi  simplisia  dengan  cara  dikeringkan tidak  dibawah  matahari  langsung,  kemudian diserbuk untuk kemudian siap untuk diekstraksi.  Serbuk  simplisia  selanjutnya diekstraksi dengan metode maserasi menggunakan penyari etil asetat, dengan cara perendaman.  Sampel  kemudian  disaring  tiap 24 jam, ampas rendam kembali dengan cairan penyari  yang  baru.  Proses  ekstraksi  ini dilakukan  sebanyak  3  kali  replikasi  untuk mendapatkan  rendemen  ekstrak  yang  besar. Hasil  ekstraksi  ini  kemudian  dikeringkan hingga diperoleh ekstrak kering.
Penentuan
Panjang
Gelombang

## Maksimum dan Pembuatan Kurva Baku
Larutan  standar  kuersetin  dibuat dengan  berbagai  konsentrasi  yaitu  6,  8,  10, 12,  14  ppm.  Absorban  larutan  kuersetin  6 ppm  diukur  pada  range  panjang  gelombang 400 – 450 nm, di mana absorban yang paling besar  menunjukkan  panjang  gelombang maksimum. Masing-masing konsentrasi larutan kuersetin tersebut diukur absorbannya pada panjang gelombang maksimum, selanjutnya  hasil  absorban  yang  diperoleh dibuat  kurva  baku  guna  menghitung  kadar flavonoid  sampel  dengan  menggunakan persamaan  garis  lurusnya.  Perlakuan  dalam prosedur  ini  harus  sesuai  dengan  perlakuan yang  dilakukan  pada  prosedur  penentuan kadar flavonoid.

## Penentuan Kadar Flavonoid
Ekstrak  etil  asetat  daun  sukun  dibuat larutan  dengan  konsentrasi  300  ppm  dalam etanol  96%.  Larutan  ini  sebanyak  1  mL ditambahkan  dengan  1  mL  Aluminium klorida 2% dan 1 mL kalium asetat 120 mM. Campuran larutan ini didiamkan selama 1 jam pada  suhu  kamar.  Setelah  itu  campuran larutan  diukur  pada  panjang  gelombang  435 nm  menggunakan  spektroforometer  UV-Vis, proses  ini  dilakukan  sebanyak  3  replikasi. Penentuan  kadar  flavonoid  ini  menggunakan larutan kuersetin sebagai standar dan dilakukan  juga  pengukuran  absorban  kontrol
Gambar 2. Ekstrak etil asetat daun sukun
sampel.  Kadar  flavonoid  yang  diperoleh dalam  satuan  mgQE/gram  ekstrak,  artinya tiap  gram  ekstrak  mengandung  sebanyak milligram  flavonoid  yang  ekuivalen  dengan kuesetin  (Stankovic, 2011).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian ini menggunakan metode ekstraksi untuk memisahkan komponen kimia senyawa  yang terkandung dalam daun sukun. Metode  ekstraksi  yang  digunakan  yaitu metode maserasi dengan menggunakan pelarut  etil  asetat.  Alasan  menggunakan pelarut  etil  asetat  sebab  dapat  melarutkan senyawa-senyawa  seperti  beberapa  alkaloid, flavonoid,  monoglikosida,  glikosida  (Syahri, 2016).  Pemilihan  metode  maserasi  sebab
lebih sederhana, mudah dan tanpa pemanasan. Proses  maserasi  dilakukan  secara  berulang untuk  mendapatkan  hasil  ekstrak  yang maksimal.  Perhitungan  rendemen  ekstrak yang  diperoleh  dari  50  gram  simplisia  daun sukun  yang  diekstraksi,  dapat  dilihat  pada tabel 1.
Beberapa  senyawa  turunan  fenilpropanoid seperti  flavonoid  dan  flavones  terkandung dalam  tanaman  sukun.  Lebih  dari  70  jenis senyawa  turunan  dari  jalur  fenilpropanoid yang terkandung dalam tanaman sukun, yang telah  teridentifikasi,  di  mana  beberapa senyawa  tersebut  telah  diisolasi  dan  telah menunjukkan aktivitas biologis, seperti penghambatan  agregat  platelet,  antibakteri, antifungi,  dan  antitumor  (Sikarwar,  Hui, Subramaniam,  Valeisamy,  Yean,  &  Balaji, 2014).    Aktivitas  biologis  yang  dihasilkan tersebut berhubungan dengan adanya kandungan  senyawa  turunan  dari  jalur fenilpropanoid,  seperti  flavonoid,  sehingga
Tabel   2.  Hasil pengukuran panjang
gelombang  maksimal  (ƛ maks ) kuersetin Panjang gelombang nm Absorban 400 0,173 405 0,192 410 0,215 415 0,237 420 0,254 425 0,267 430 0,276 435 0,278 440 0,270 445 0,253 450 0,230
Tabel 1. Hasil Ekstrak Etil Asetat Daun Sukun ( Artocarpus altilis ) Berat Simplisia (gram) Berat Ekstrak (gram)  % Rendamen Rata-rata % Rendamen 50,003 5,2643 10,528 10,471±0,19 50,002 5,1312 10,262 50,000 5,3126 10,625
Tabel   3.  Hasil pengukuran absorban larutan  standar  kuarsetin  pada panjang  gelombang  maksimum
435 nm. Konsentrasi (ppm) Absorbansi (y) 6 8 10 12 14 0,278 0,378 0,442 0,555 0,628
perlu  dilakukan  penelitian  untuk  menentukan kadar  kandungan  flavonoid  dari  daun  sukun, yang  bisa  jadi  acuan  dalam  pemberian pengobatan  menggunakan  ekstrak  etil  asetat daun suku.
Penentuan kadar flavonoid yang dilakukan pada  penelitiian  ini  menggunakan  senyawa Kuersetin  sebagai  larutan  standar.  Kuersetin merupakan  golongan  flavonoid  yang  sering ditemukan  dalam  tumbuhan  dan  diketahui memiliki  banyak  aktivitas  biologis,  seperti sebagai  antioksidan.  Pengukuran  absorban untuk penentuan panjang gelombang
maksimum  dilakukan  pada  range  panjang gelombang  400  –  450  nm.  Hasil  yang diperoleh menunjukkan bahwa panjang gelombang maksimum larutan standar kuersetin  berada  pada  panjang  gelombang 435 nm (tabel 2). Hasil pengukuran absorban larutan  standar  kuersetin  (tabel  3)  dibuat menjadi  kurva  baku  yang  dapat  dilihat  pada gambar 3.
Analisis  flavonoid  dilakukan  dengan menggunakan Spektrofotometri UV-Vis karena flavonoid mengandung sistem aromatis yang  terkonjugasi  dan  dapat Gambar 3. Kurva baku kuersetin Tabel 4. Hasil perhitungan absorban sampel Replikasi Absorban Sampel Absorban Kontrol Sampel Absorban Sampel Sesungguhnya 1 0,422 0,167 0,255 2 0,441 0,167 0,274 3 0,456 0,167 0,289
Tabel   5.  Hasil Penetapan Kadar Flavonoid Total % (b/b) pada ekstrak etil asetat daun sukun.
Replikasi Absorban ekstrak sesungguhnya (y) Kandungan Flavonoid Total Awal (mg/L) Kandungan Flavonoid Total (mgQE/g ekstrak) Rata-rata Kandungan Flavonoid Total (mgQE/g ekstrak) 1 2 3 0,255 9,2305 28,054 29,442±1,20 0,274 9,6643 30,135 0,289 10,006 30,137
*  Kandungan  flavonoid  awal  adalah  kadar  flavonoid  dalam  mg/L  yang  terkandung  dalam  larutan    ekstrak daun sukun yang dibuat sesuai dengan prosedur penentuan kadar flavonoid
* Kandungan  flavonoid total adalah kadar  flavonoid  yang terkandung dalam 1 gram ekstrak dengan satuan mgQE/1 gram
y = 0.0438x + 0.0177 R² = 0.9944 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0 2 4 6
8 10 12 14 16 Ab sor bans i ( A) Konsentrasi (ppm)
menunjukkan  pita  serapan  kuat  pada  daerah UV-Vis  (Rohyami,  2008).  Namun  secara umum,  penentuan  kadar  total  flavonoid  pada suatu  sampel  tanaman  didasarkan  atas pembentukan  senyawa  kompleks  aluminium (Al-Flavonoid),  berupa  larutan  berwarna kuning.  Penambahan  garam  asetat  pada penentuan  kadar  flavonoid  dimaksudkan untuk menghasilkan pergeseran dan intensitas peak  absorban  yang  lebih  kuat  (Pekal  & Pyrzynska,  2014).  Senyawa  kompleks  khelat Al-Flavonoid  terbentuk  pada  gugus  keto  dan gugus  hidroksil  dari  flavonoid  (Sepahpour, Selamat, Manap, & Razis, 2018), reaksi yang terjadi dapat dilihat pada gambar 4.
Absorban  sampel  sesungguhnya  yang digunakan  dalam  perhitungan  merupakan hasil  pengurangan  dari  absorban  sampel terhadap  absorban  kontrol  sampel  (tabel  4). Pengukuran absorban kontrol sampel dimaksudkan  untuk  menghilangkan  pengaruh absorban  dari  warna  larutan  sampel  yang dibuat.  Hasil  penelitian  ini  diperoleh  kadar flavonoid  total  ekstrak  etil  asetat  daun  sukun sebesar  29,442  mgQE/g  ekstrak,  yang  dapat dilihat pada tabel 5.

## KESIMPULAN
Hasil dari penelitian yang sudah dilakukan menunjukkan  bahwa  ekstrak  etil  asetat  daun sukun mengandung senyawa flavonoid sebesar 29,442±1,20 mgQE/gram ekstrak.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Kami  mengucapkan  banyak  terima kasih  kepada  Universitas  Muslim  Indonesia (UMI),  terkhusus  kepada  Fakultas  Farmasi dan  Laboratorium  Kimia  Farmasi  UMI,  yang telah  memfasilitasi  kebutuhan  sarana  dan prasarana selama melakukan penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Cristobal,  M.,  &  Donald,  R.  (2000). Akativitas  Antiosidan  Flavonoid. Oregon State university.
Handa, S., Khanuja, S., Longo, G., & Rakesh, D.  (2008). Extraction  Technologies  for Medicinal and Aromatic Plants.
International  Centre  for  Science  and  High Technology.
Harborne,  J.  (1987). Metode  Fitokimia: Penuntun  Cara  Modern  Menganalisa Tumbuhan,. (K.  Padmawinata,  &  I.
Soediro, Trans.) Bandung: Institut Tehnologi Bandung (ITB).
Heinrich, M., Petko, D., Maria, K., Anton, S., &  Antonin,  L.  (2009). Farmakognosi  dan Fitoterapi. (R.  Winny,  Syarif,  &  dkk, Trans.) Jakarta: EGC.
Gambar  4.  Reaksi  kompleks  aluminium-flavonoid  (Sepahpour,  Selamat,  Manap,  &  Razis,
2018)
Heyne,  K.  (1987). Tanaman  Berguna Indonesia II (2 ed.). Jakarta.
Hodgson,  J.,  &  Kevin,  D.  (2006).  Review
Dietary  Flavonoid:Efects  on  Endothelial Function  and  Blood  Pressure. Journal  of the  Science  of  Food  and  Agriculture , 2492-2498.
Lumbessy,  M.,  Abidjulu,  J.,  &  Paendong,  J.
(2013). Uji Total Flavonoid pada Beberapa
Tanaman  Obat  Tradisional  di  Desa Waitina Kecematan Mangoli Timur Kabupaten Kepuluan Sula Provinsi
Maluku  Utara. Jurnal  Mipa  UNSRAT ONLINE , 2 (1), 50-55.
Nugrahaningtyas, K., Matsjeh, S., & Wahyuni, T. (2005). Isolasi dan Identifikasi  Senyawa  Flavonoid  dalam Rimpang Temu Ireng (Curcuma
aeruginosa). Jurnal  Biofarmasi  ISSN: 1693-2242 , 3 (1), 32-38. Pekal,  A.,  &  Pyrzynska, K.  (2014).
Evaluation  of  Aluminium  Complexation Reaction  for  FlavonoidContent  Assay. Food  Anal.  Methods  Vol.  7,  DOI 10.1007/s12161-014-9814-x , 1776 - 1782. Rohyami,  Y.  (2008).  Penentuan  kandungan
Flavonoid  dari  Ekstrak  Metanol  Daging Buah mahkota Dewa (Phaleria macrocarpa Scheff Boerl). Jurnal Logika , 5 (1), 2-16.
Selawa, W., Runtuwene, M. R., & Citraningtyas,  G.  (2013).  Kandungan Flavonoid  dan  Kapasitas  Antioksidan Total  Ekstrak  Etanol  Daun  Binahong (Anredera cordifolia). Jurnal Ilmiah Farmasi UNSTRAT , 18-22.
Sepahpour,  S.,  Selamat, J.,  Manap,  M.  Y.,  & Razis, A. F. (2018). Comparative Analysis of Chemical Composition,. Jounal Molecules Vol. 23 Ed 402 , 2 - 17. Sikarwar,  M.,  Hui,  B.,  Subramaniam,  K., Valeisamy,  B.,  Yean,  L.,  &  Balaji,  K. (2014).  A  Review  on  Artocarpus  altilis (Parkinson)  Fosberg  (breadfruit). Journal of  Applied  Pharmaceutical  Science  Vol.  4 Ed. 08 , 091 - 097.
Stankovic,  M.  (2011).  Total  Phenolic Content,  Flavonoid  Concentration  and Antioxidant Activity of Marrubium peregrinum  L.  Extract. Krajuevac  Journal Science , 63-72.
Syahri,  L.  (2016). Pengaruh  Fraksi  Etil Asetat  Ekstrak  Etanol  Buah  Kemukus (Piper  cubeba  L.)  Fructus  Terhadap Memori Spasial Tikus jantan Galur Wistar
Pasca Restraint Stress. Skripsi, Universitas  Wahid  Hasyim,  Fakultas
Farmasi, Semarang.