## SKRINING FITOKIMIA DAN KANDUNGAN TOTAL FLAVANOID PADA BUAH
Carica pubescens Lenne & K. Koch DI KAWASAN BROMO, CANGAR, DAN

## DATARAN TINGGI DIENG

## Eko Budi Minarno
Jurusan Biologi Fakultas Saintek, Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim Malang Email: budi_minarno@yahoo.com

## ABSTRAK
Carica  pubescens Lenne & K. Koch is one of the species in the tropics, which adapt to the plateau  environment  and  low  temperatures.  In  Indonesia,  this  plant  is  found  at  Cangar, Bromo,  and  Dieng  Plateau.  This  study  aims  to  determine  the  results  of  phytochemical screening and total flavonoids in fruit samples were taken from the third place. Qualitative and  quantitative  tests  carried  out  in  the  Laboratory  of  Department  of  Biology  and Chemistry,  Faculty  of Science  and  Technology ,  Maulana  Malik  Ibrahim  State  Islamic University, Malang. Analysis of total flavonoids using a spectrophotometer at λ = 510 nm. The results of qualitative phytochemical screening tests on samples of  C. pubescens  fruits at Cangar, Bromo, and Dieng Plateau shows that the positive sample contains flavonoids, polyphenols,  tannins,  and  triterpenoids.  Quantitative  test  results  show  that  the  C. pubescens at Cangar contains  total flavonoids quercetin equivalent with value 800 mg / L, Bromo with value 816.65 mg / L, and Dieng Plateau with value 633.35 mg / L, respectively. Keywords:  Carica  pubescens  Lenne  &  K.  Koch,  flavonoids,  phytochemicals, spectrophotometers, Bromo, Cangar, Dieng Plateau

## PENDAHULUAN
Carica  pubescens Lenne  &  K.  Koch merupakan  salah  satu  tanaman  khas  dataran tinggi di Indonesia dengan kandungan vitamin C tinggi  yang  berpotensi  sebagai  bahan  alami dalam penyembuhan mukosa mulut. Di Indonesia,  spesies  ini  biasa  dikenal  dengan sebutan  “karika”,  dapat  dijumpai  di  kawasan Bromo  dan  Cangar  Jawa  Timur,  serta  Dataran Tinggi  Dieng,  Jawa  Tengah.    Spesies  ini merupakan anggota familia Caricaceae, sehingga  memiliki  kelompok  Genus  yang  sama dengan  pepaya  ( Carica  papaya )  dan  nampak memiliki kemiripan yang tinggi secara morfologi. Berbeda dengan pepaya, tanaman ini tumbuh di tempat dengan ketinggian 1.400-2400 meter  di  atas  permukaan  laut  (dpl),  temperatur rendah,  dan  curah  hujan  tinggi  sehingga penduduk  setempat  sering  menyebut  pula dengan sebutan pepaya gunung. Morfologi buah C. pubescens ditunjukkan pada Gambar 1.
Gambar 1. Morfologi buah C. pubescens Studi mengenai tanaman obat dan potensinya untuk kesehatan dewasa ini banyak dikembangkan,  tidak  terkecuali  penelitian  pada tanaman C.  pubescens .  Buah  dari  tanaman  ini telah diteliti kandungannya sebagai zat antioksidan  dan  sumber  flavanoid.  Flavonoid adalah senyawa yang terdiri dari 15 atom karbon yang  umumnya  tersebar  di  dunia  tumbuhan. Flavonoid  tersebar  luas  di  tanaman  mempunyai banyak  fungsi.  Flavonoid  adalah  pigmen tanaman  untuk  memproduksi  warna  bunga merah atau biru pigmentasi kuning pada kelopak yang digunakan untuk menarik hewan penyerbuk.  Flavonoid  hampir  terdapat  pada
semua  bagian  tumbuhan  termasuk  buah,  akar, daun dan kulit luar batang (Lumbessy, 2013).
Sebagai  tanaman  yang  berpotensi  obat, buah C.  pubescens memiliki    potensi  dalam proses  penyembuhan  luka.  Luka  merupakan gangguan  kontinuitas  suatu  jaringan  sehingga terjadi pemisahan jaringan yang semula normal. Luka  dapat  disebabkan  oleh  trauma  yang ditimbulkan  dari  gangguan  emosional  yang hebat  dan  tindakan-tindakan  fisik.  Salah  satu contoh  trauma  adalah  trauma  mekanik,  yang penyebabnya  antara  laun  prosedur  perawatan dental,  kecelakaan,  atau  tergigit  sendiri  sering terjadi pada mukosa rongga mulut. Trauma atau luka ditandai dengan peradangan dan kerusakan jaringan  mukosa  mulut.  Proses  penyembuhan luka  dengan  penambahan  zat  bioaktif  dari  buah C.  pubescens diperlukan  untuk  perbaikan jaringan yang rusak.
Kuersetin adalah senyawa kelompok flavonol  terbesar,  kuersetin  dan  glikosidanya berada  dalam  jumlah  sekitar  60-75%  dari flavonoid. Kuersetin dipercaya dapat melindungi tubuh dari beberapa jenis penyakit degenerative dengan  cara  mencegah  terjadinya  proses peroksidasi  lemak.  Kuersetin  memperlihatkan kemampuan mencegah proses oksidasi dari Low Density  Lipoproteins (LDL)  dengan  cara menangkap  radikal  bebas  dan  menghelat  ion logam  transisi.  Para  ilmuwan  telah  melakukan penelitian untuk mengidentifikasi dan mengetahui  jumlah  kandungan  flavonoid  dari berbagai  jenis  makanan.  Konsentrasi  tertinggi dari  flavonol  ditemukan  dalam  sayuran  seperti pada  bawang  dan  brokoli,  dalam  buah  seperti apel,  ceri,  beri,  dan  pada  minuman  seperti anggur merah (Waji dan Sugrani, 2012)
C.  pubescens mempunyai  banyak manfaat  dalam  kehidupan  sehari-hari.  Hasil penelitian  Simirgiotis  (2009)  menunjukkan teridentifikasinya  19  senyawa  fenol  pada  buah yang  tumbuh  di  Chili.  Buah  tanaman  ini mengandung  zat  antioksidan  yang  mampu menangkal bahaya radikal bebas dan mengandung enzim pencernaan yang meningkatkan  kerja  alat  pencernaan,  absorbsi nutrien, mengurangi stress pencernaan, menjaga pH, menjaga kesehatan usus serta menyeimbangkan  enzim-enzim  alami  tubuh (Rock,  2009). C.  pubescens kaya  akan  vitamin C, serat, dan enzim papain sebagaimana terdapat pada C.  papaya ,  membantu  pencernaan, bermanfaat  untuk  lambung  dan  usus  besar (Hochman, 2007).
Menurut Hayati (2010), metabolit sekunder  adalah  senyawa  hasil  biogenesis  dari metabolit  primer.  Umumnya  dihasilkan  oleh tumbuhan tingkat tinggi, yang bukan merupakan senyawa  penentu  kelangsungan  hidup  secara langsung,  tetapi  lebih  sebagai  hasil  mekanisme pertahanan diri organisme. Kandungan senyawa metabolit  sekunder  telah  terbukti  bekerja sebagai  derivate  antikanker,  antibakteri  dan antioksidan,  antara  lain  adalah  golongan alkaloid, tanin, golongan polifenol dan turunanya. Menurut Robinson (1991) alasan lain melakukan  fitokimia  adalah  untuk  menentukan ciri senyawa aktif penyebab efek racun atau efek yang  bermanfaat,  yang  ditunjukan  oleh  ekstrak tumbuhan  kasar  bila  diuji  dengan  sistem biologis.  Pemanfaatan  prosedur  fitokimia  telah mempunyai  peranan  yang  mapan  dalam  semua cabang  ilmu  tumbuhan.  Meskipun  cara  ini penting  dalam semua telaah kimia dan biokimia juga telah dimanfaatkan dalam kajian biologis.
Sejalan  dengan  hal  tersebut,  menurut Moelyono  (1996)  analisis  fitokimia  merupakan bagian dari ilmu farmakognosi yang mempelajari metode atau cara analisis kandungan kimia yang terdapat dalam tumbuhan atau  hewan  secara  keseluruhan  atau  bagian- bagiannya, termasuk cara isolasi atau pemisahannya. Pada tahun terakhir ini fitokimia atau kimia tumbuhan telah berkembang menjadi satu  disiplin  ilmu  tersendiri,  berada  diantara kimia  organik  bahan  alam  dan  biokimia tumbuhan,  serta  berkaitan  dengan  keduanya. Bidang  perhatiannya  adalah  aneka  ragam senyawa  organik  yang  dibentuk  dan  ditimbun oleh  tumbuhan, yaitu mengenai struktur kimianya, biosintesisnya, perubahan serta metabolismenya,  penyebarannya  secara  ilmiah dan fungsi biologisnya (Harborne, 1984).
Skrining  fitokimia  merupakan  cara  untuk mengidentifikasi  bioaktif  yang  belum  tampak melalui  suatu  tes  atau  pemeriksaan  yang  dapat dengan  cepat  memisahkan  antara  bahan  alam yang  memiliki  kandungan  fitokimia  tertentu dengan  bahan  alam  yang  tidak  memiliki kandungan fitokimia tertentu. Skrining fitokimia merupakan  tahap  pendahuluan  dalam  suatu penelitian  fitokimia  yang  bertujuan  untuk memberikan gambaran tentang golongan senyawa  yang  terkandung  dalam  tanaman  yang sedang  diteliti.  Metode  skrining  fitokimia dilakukan  dengan  melihat  reaksi  pengujian warna  dengan  menggunakan    suatu  pereaksi warna. Hal penting yang berperan penting dalam skrining  fitokimia  adalah  pemilihan  pelarut  dan
metode  ekstraksi  (Kristianti  dkk.,  2008). Skrining  fitokimia  serbuk  simplisia  dan  sampel dalam  bentuk  basah  meliputi  pemeriksaan kandungan  senyawa  alkaloida,  flavonoida, terpenoida/  steroida,  tanin  dan  saponin  menurut prosedur  yang  telah  dilakukan  oleh  Harbone (Harbone, 1987) dan Depkes (Depkes, 1995).
Menurut Harborne (1984) senyawa metabolit  sekunder  yang  umum  terdapat  pada tanaman  adalah  :  alkaloid,  flavanoid,  steroid, saponin, terpenoid dan tannin. a. Alkaloid
Alkaloid adalah suatu golongan senyawa yang  tersebar  luas  hampir  pada  semua  jenis tumbuhan.  Semua  alkaloid  mengandung  paling sedikit satu atom nitrogen yang biasanya bersifat basa  dan  membentuk  cincin  heterosiklik (Harborne,  1984).  Alkaloid  dapat  ditemukan pada  biji,  daun,  ranting  dan  kulit  kayu  dari tumbuh-tumbuhan. Kadar alkaloid dari tumbuhan  dapat  mencapai  10-15%.  Alkaloid kebanyakan  bersifat racun,  tetapi ada  pula  yang sangat  berguna  dalam  pengobatan.  Alkaloid merupakan  senyawa  tanpa  warna,  sering  kali bersifat  optik  aktif,  kebanyakan  berbentuk kristal  tetapi  hanya  sedikit  yang  berupa  cairan (misalnya nikotin) pada suhu kamar (Sabirin, et al., 1994).
Suatu cara mengklasifikasi alkaloid adalah didasarkan pada jenis cincin heterosiklik   nitrogen  yang  terikat.  Menurut klasifikasi  ini  alkaloid  dibedakan  menjadi  ; pirolidin (1), piperidin (2), isoquinolin (3), quinolin (4)  dan  indol  (5).  Alkaloid  pada umumnya berbentuk kristal yang tidak berwarna,  ada  juga  yang  berbentuk  cair  seperti koniina (6), nikotin (7). Alkaloid  yang berwarna sangat jarang  ditemukan  misalnya  berberina  (8) berwarna kuning. Kebasaan alkaloid menyebabkan senyawa ini mudah terdekomposisi  terutama  oleh  panas,  sinar  dan oksigen  membentuk  N-oksida.  Jaringan  yang masih  mengandung  lemak,  maka  dilakukan ekstraksi pendahuluan petroleum eter. b. Tanin
Secara   kimia  terdapat   dua  jenis  tanin, yaitu:  (1)  tanin  terkondensasi  atau  flavolan  dan (2) tanin yang terhidrolisis.
1) Tanin terkondensasi atau flavolan Tersebar luas dalam tumbuhan angiospermae, terutama pada tumbuhan- tumbuhan  berkayu.  Nama  lainnya  adalah proantosianidin  karena  bila  direaksikan  dengan asam  panas,  beberapa  ikatan  karbon-karbon penghubung  satuan  terputus  dan  dibebaskanlah
monomer antosianidin. Kebanyakan proantosianidin  adalah  prosianidin  karena  bila direaksikan  dengan  asam  akan  menghasilkan sianidin. Proantosianidin dapat dideteksi langsung dengan mencelupkan jaringan tumbuhan  ke  dalam  HCl  2M  mendidih  selama setengah  jam  yang  akan  menghasilkan  warna merah  yang  dapat  diekstraksi  dengan  amil  atau butil  alkohol.  Bila  digunakan  jaringan  kering, hasil  tanin  agak  berkurang  karena  terjadinya pelekatan tanin pada tempatnya didalam sel. 2) Tanin yang terhidrolisis
Terbatas  pada  tumbuhan  berkeping  dua. Terutama  terdiri  atas  dua  kelas,  yang  paling sederhana  adalah  depsida  galoiglukosa.  Pada senyawa ini glukosa dikelilingi oleh lima gugus ester galoil atau lebih. Jenis kedua, inti molekul berupa  senyawa  dimer  asam  galat,  yaitu  asam heksa  hidroksidifenat  yang  berikatan  dengan glukosa.  Bila  dihidrolisis  menghasilkan  asam angelat.  Cara  deteksi  tanin  terhidrolisis  adalah dengan mengidentifikasi asam galat/asam elagat dalam  ekstrak  eter  atau  etil  asetat  yang dipekatkan (Harborne,1987).
c. Terpenoid Terpenoid merupakan komponen- komponen  tumbuhan  yang  mempunyai  bau  dan dapat  diisolasi  dari  bahan  nabati  dengan penyulingan yang disebut minyak atsiri. Minyak atsiri  yang  berasal  dari  bunga  pada  awalnya dikenal dari penentuan struktur secara sederhana,  yaitu  dengan  perbandingan  atom hidrogen  dan  atom  karbon  dari  senyawa terpenoid  yaitu  8:5  dan  dengan  perbandingan tersebut  dapat  dikatakan  bahwa  senyawa tersebut adalah golongan terpenoid.
Steroid  adalah  terpenoid  yang  kerangka dasarnya terbentuk dari sistem cincin siklopentana prehidrofenantrena.
Steroid
merupakan golongan senyawa metabolik sekunder  yang  banyak  dimanfaatkan  sebagai obat.  Hormon  steroid  pada  umumnya  diperoleh dari  senyawa-senyawa  steroid  alam  terutama dalam tumbuhan (Djamal, 1988).
Menurut Harborne (1984), saponin adalah glikosida triterpen dan sterol. Saponin merupakan  senyawa  aktif  permukaan  dan bersifat  seperti  sabun,  serta  dapat  dideteksi berdasarkan  kemampuannya  membentuk  busa yang  stabil  dalam  air  dan  menghomolisis  sel darah  merah.  Dari  segi  pemanfaatan,  saponin sangat ekonomis sebagai bahan baku pembuatan hormon  steroid,  tetapi  saponin  kadang-kadang dapat  menyebabkan  keracunan  pada  ternak (Robinson, 1991).

## Eko Budi Minarno
d.  Minyak Atsiri
Minyak  atsiri  bukanlah  senyawa  murni akan  tetapi  merupakan  campuran  senyawa organik yang kadang kala terdiri dari lebih besar dari 25 senyawa atau komponen yang berlainan. Sebagian  besar  komponen  minyak  atsiri  adalah senyawa  yang  hanya  mengandung  karbon,  dan hidrogen  atau  karbon,  hidrogen  dan  oksigen yang  tidak  bersifat  aromatik  yang  secara  umum disebut  terpenoid.  Minyak  atsiri  adalah  zat berbau  yang  terkandung  dalam  tanaman. Minyak  ini  disebut  juga  minyak  menguap, minyak eteris, minyak esensial karena pada suhu kamar  mudah  menguap.  Istilah  esensial  dipakai karena minyak atsiri mewakili bau dari tanaman asalnya.  Dalam  keadaan  segar  dan  murni, minyak atsiri umumnya tidak berwarna. Namun, pada  penyimpanan  lama  minyak  atsiri  dapat teroksidasi.  Untuk  mencegahnya,  minyak  atsiri harus  disimpan  dalam  bejana  gelas  yang berwarna gelap, diisi penuh, ditutup rapat, serta disimpan  di  tempat  yang  kering  dan  sejuk (Gunawan & Mulyani, 2004).
Berikut  penjelasan  beberapa  cara  yang biasa  ditempuh  dalam  skrining  fitokimia. Pemeriksaan golongan flavonoid dapat dilakukan  dengan  uji  warna  yaitu  fitokimia untuk menentukan keberadaan senyawa golongan  flavonoid  dan  uji  adanya  senyawa polifenol.  Uji  keberadaan  senyawa  flavonoid dari  dalam  sampel  digunakan  uji  Wilstatter,  uji Bate-Smith,  dan  uji  dengan  NaOH  10%. Sedangkan  uji  adanya  senyawa  polifenol dilakukan  dengan  larutan  penambahan  FeCl3 adapun  uji  tersebut  secara  lengkap  sebagai berikut (Achmad, 1986., Harbone, 1987): 1) Uji Wilstatter
Isolat ditambahakan 2-4 tetes HCl pekat dan 2-3 potong kecil logam Mg. Perubahan warna terjadi diamati  dari  kuning  tua  menjadi  orange (Achmad, 1986).
2) Uji Bate-Smith
Isolat  ditambahkan  HCl  pekat  lalu  dipanaskan dengan  waktu  15  menit  di  atas  penangas  air. Reaksi  positif  jika  memberikan  warna  merah (Achmad, 1986).
3) Uji dengan NaOH 10%
Isolat  ditambahkan  pereaksi  NaOH  10%  dan reaksi  positif  apabila  terjadi  perubahan  warna yang spesifik (Harbone, 1987).
4) Uji Golongan Polifenol Isolat  ditambahkan  larutan  FeCl 3 10%  dalam akuades.  Reaksi  positif  jika  memberikan  warna hijau,  merah,  ungu,  biru,  atau  hitam  yang  kuat (Harbone, 1987).
Karakterisasi  sampel  daun C.  pubescens yang  tumbuh  di  Dataran  Tinggi  Dieng  telah dilakukan,  meliputi  kajian  ciri  morfologi, aktivitas  antioksidan,  dan  pola  pita  protein. Masalah  yang  dihadapi  sekarang  yaitu  belum tersedianya data lengkap mengenai uji kandungan  kimia  berupa  skrning  fitokimia  dan kandungan  total  flavanoid  pada  sampel  buah yang  tumbuh  di  Bromo,  Cangar,  dan  Dataran Tinggi  Dieng. Dengan  demikian  penelitian  ini perlu untuk dilakukan.
Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui hasil skrining fitokimia dan kandungan  total  flavanoid  sampel  buah C. pubescens yang  tumbuh  di  Cangar,  Bromo,  dan Dataran Tinggi Dieng.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  dilakukan  pada  bulan September  sampai  dengan  Desember  2014. Kegiatan  pengambilan  sampel C.  pubescens dilakukan di  kawasan Bromo dan Cangar, Jawa Timur  serta  Dataran  Tinggi  Dieng,  Jawa Tengah.  Kegiatan  skrining  fitokimia  dan  uji kandungan  total  flavanoid  dilaksanakan  di Laboratorium Fisiologi Tumbuhan,
Laboratorium  Fisiologi  Hewan,  Laboratorium Pendidikan, dan Laboratorium Genetika, Jurusan  Biologi  serta  Laboratorium  Kimia Organik  di  Fakultas  Sains  dan  Teknologi  UIN Maulana Malik Ibrahim Malang.
Alat  yang  digunakan  untuk  pengambilan sampel  buah C.  pubescens adalah  kamera, kantong  plastik,  pita  meter,  pisau,  kertas  label, dan  alat  tulis.  Untuk  skrining  fitokimia  dan  uji total  kandungan  flavonoid,  alat  yang  digunakan antara  lain:  penumbuk,  oven,  pipet  tetes,  pipet mikro, neraca elektrik, tabung reaksi, rak tabung reaksi, pengaduk kaca, spatula, cawan porselen, kertas  saring,  corong  kaca,  toples  maserasi, gelas ukur, hotplate , rotary vacuum evaporator , kuvet, dan spektrofotemeter.
Bahan  utama  berupa  sampel  buah C. pubescens Lenne  &  K.  Koch.  Bahan  untuk  uji kandungan  total  flavonoid  meliputi  methanol 80%, nitrogen, HCl pekat, bubuk Mg, kuersetin, NaNO 2, AlCl 3 ,  NaOH,  aquades,  FeCl 3 ,  pereaksi Mayer ,  pereaksi  Dragendorf,  asam  asetat anhidrat,  asam  sulfat,  kloroform, blue  tip ,  dan masker.
Setelah  sampel  diambil  dari  lapangan yaitu  kawasan  Bromo  dan  Cangar,  Jawa  Timur serta Dataran Tinggi Dieng, Jawa Tengah, maka selanjutnya dilakukan analisis di laboratorium. a. Preparasi Sampel
Sampel  buah  dicuci  dan  dikeringkan  selama  ±1 minggu.  Proses  perajangan  hingga  berbentuk serbuk  halus  dilakukan  untuk  memperoleh  luas permukaan  yang  lebih  besar  agar  proses penetrasi  pelarut  ke  dalam  bahan  dapat berlangsung dengan optimal.
b. Proses Ekstraksi Ekstraksi  buah C.  pubescens dilakukan  pada serbuk sampel dengan cara maserasi menggunakan  pelarut  methanol    pada  suhu ruang.  Hasil  maserasi  disaring  kemudian diuapkan pelarutnya menggunakan rotary vacuum evaporator . Selanjutnya ekstrak dipekatkan  dengan  penambahan  nitrogen  dan inkubasi  pada  suhu  30 ⁰ C  sampai  pelarut  habis menguap.  Ekstrak  yang  diperoleh  tersebut menjadi  stok  ekstrak  buah  dan  disimpan  pada gelas ekstrak.
c. Skrining Fitokimia 1) Uji Flavanoid Uji  flavanoid  pada  penelitian  ini    dilakukan dengan dua metode sebagai berikut.
a) Uji Wilstatter
Isolat ditambahakan 2-4 tetes HCl pekat dan 2-3 potong kecil logam Mg. Perubahan warna terjadi diamati  dari  kuning  tua  menjadi  orange (Achmad, 1986).
b) Uji Bate - Smith
Isolat  ditambahkan  HCl  pekat  lalu  dipanaskan dengan  waktu  15  menit  di  atas  penangas  air. Reaksi  positif  jika  memberikan  warna  merah (Achmad, 1986).
2) Uji Saponin Uji  saponin    dilakukan    menurut Simes    et    al . (Sangi et    al .,    2008).    Ekstrak  sampel    buah sebanyak 1 gram dimasukkan  ke  dalam  tabung reaksi, kemudian  ditambahkan  akuades  hingga seluruh  sampel    terendam,    dididihkan    selama 2-3  menit,    dan  selanjutnya  didinginkan, kemudian  dikocok  kuat-kuat.  Hasil    positif ditunjukkan    dengan    terbentuknya    buih  yang stabil.
3) Uji Alkaloid
Uji  alkaloid  dilakukan  dengan  terlebih  dahulu melarutkan  1  gram  ekstrak  buah  ke  dalam pelarutnya yaitu metanol. Selanjutny sebanyak 2 ml  larutan  tersebut  diuapkan  pada  cawan porselen menggunakan hotplate . Residu dilarutkan  dengan  5  ml  HCl  2N.  Larutan  yang diperoleh  dibagi  ke  dalam  3  tabung  reaksi. Tabung  prtama  ditambah  dengan  3  tetes  HCl 2N,  tabung  kedua  ditambah  dengan  3  tetes pereaksi Dragendorff , sedangkan pereaksi ketiga ditambah  dengan  3  tetes  pereaksi Mayer . Terbentuknya  endapan  menunjukkan  bahwa
sampel  tersebut  mengandung  alkaloid.  Reaksi dengan  pereaksi Dragendorff akan  terbentuk endapan jingga, dengan pereaksi Mayer terbentuk kuning.
4) Uji Polifenol dan Tanin Uji  tanin  dilakukan  menurut  Miranda  (Sangi et al .,  2008).    Ekstrak  sampel    ditambah    metanol sampai  sampel  terendam semuanya. Kemudian ditambahkan 2-3  tetes  larutan FeCl 3 1%. Hasil positif  ditunjukkan  dengan terbentuknya warna hitam kebiruan atau hijau.
5) Uji Minyak Atsiri
Uji  minyak  atsiri  dilakukan  dengan  terlebih dahulu  menyiapkan  1  ml  ekstrak  yang  telah dilarutkan dalam pelarutnya. Selanjutnya larutan tersebut  diuapkan  pada  cawan  poselen  di  atas hotplate  hingga  dipeoleh  residu.  Dari  residu tersebut jika tercium bau yang khas maka positif mengandung minyak atsiri.
6) Uji Triterpenoid
Uji  triterpenoid  dilakukan  dengan  terlebih dahulu  menyiapkan  2  ml  ekstrak  yang  telah dilarutkan  dalam  pelarutnya.  Larutan  tersebut kemudian  diuapkan  di  dalam  caan  porselen. Residu dilarutkan dengan 0,5 ml  kloroform dan ditambahkan  0,5  asam  asetat  pekat  anhidrad. Asam  sulfat  pekat  sebanyak  2  ml  ditambahkan melalui  dinding  tabung  reaksi.  Reaksi  positif triterpenoid  ditunjukkan  dengan  terbentuknya cincin  kecoklatan  atau  violet  pada  perbatasan larutan.
d. Kandungan Total Flavonoid 1)  Pembuatan Kurva Kalibrasi Kuersetin Kurva standar dibuat berdasarkan metode Rohman  dkk.  (2006).  Larutan  kuersetin  dalam methanol  dibuat  dalam  konsentrasi  700,  800, 900,  1000,  dan  1100  mg/L.  Sebanyak  0,5  ml larutan  dari  berbagai  konsentrasi  direaksikan dengan  2  ml  akuades  dan  0,15  ml  NaNo2  5% kemudian  didiamkan  selama  6  menit.  Sebanyak 0,15  ml  AlCl3  10%  ditambahkan  ke  dalam larutan,  kemudian  diencerkan  hingga  volume total  mencapai  5  ml  dan  didiamkan  selama  15 menit.  Pada  akhirnya,  absorbansi  dari  larutan standar diukur pada panjang gelombang 510 nm menggunakan  spektrofotometer  UV-Vis.  Kurva standar diperoleh dari hubungan antara konsentrasi (mg/L) dengan absorbansi. b.   Penentuan Total Flavanoid
Terlebih  dahulu  dibuat  larutan  dari ekstrak  sampel  yang  telah  dilarutkan  dengan plarutnya  (methanol)  sebesar  1100  mg/L. Sebanyak  0,5  ml  larutan  direaksikan  dengan  2 ml  akuades  dan  0,15  ml  NaNO2  5%  kemudian didiamkan  selama  6  menit.  Sebanyak  0,15  ml
AlCl3  10%  ditambahkan  ke  dalam  larutan, kemudian  diencerkan  hingga  volume  total mencapai 5 ml dan didiamkan selama 15 menit. Selanjutnya,  absorbansi  dari  larutan  ekstrak diukur  pada  panjang  gelombang  510  nm menggunakan spektrofotometer UV-Vis. Penentuan kandungan total flavonoid dinyatakan sebagai ekuivalen kuersetin dalam mg/L ekstrak.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Penyiapan Ekstrak C. pubescens Pengambilan  sampel buah dari tiga  tempat, yakni  dua  tempat  di  Jawa  Timur  meliputi kawasan Bromo dan Cangar serta satu tempat di Jawa  Tengah,  yakni  di  Dataran  Tinggi  Dieng, Wonosobo. Studi literatur telah dilakukan untuk mendapatkan  metode  ekstraksi  dan  konsentrasi ekstrak  sampel  buah C.  pubescens yang dibutuhkan dalam uji kualitatif maupun kuantitatif Buah C.  pubescens merupakan  buah dengan  biji  terselubung  pembungkus  yang berlendir,  disebut sarcotesta .  Maka,  sebelum pengeringan  atau  penghilangan  kadar  air, sampel  dicuci  terlebih  dahulu  dari  pengotor, bagian biji dan sarcotesta dihilangkan selanjutnya dipotong segitiga dengan ukuran ± 2 cm selanjutnya dikeringanginkan..
Proses  pengeringan  sampel  buah C. pubescens dilakukan dengan menggunakan oven dengan  suhu  60 ⁰ C  selama  ±  24  jam  supaya  zat flavanoid  terlindung  dari  kerusakan.  Sampel yang  telah  dikeringkan  selanjutnya  ditimbang untuk  mengetahui  berat  kering.  Ekstrak  buah tersebut diperoleh dengan mengekstraksi senyawa  aktif  dari  simplisia  menggunakan pelarut  yang  sesuai,  yaitu  methanol pro  analys . Metode yang diterapkan pada ekstraksi buah C. pubescens adalah  metode  maserasi,  sesuai dengan  kepentingan  dalam  memperoleh  sari pada  buah  karika.  Maserasi  buah  dilakukan dengan  proses  pengekstrakan  simplisia  pada temperatur ruangan (26ºC sampai dengan 28ºC), sehingga  zat-zat  yang  terkandung  di  dalam simplisia  relatif  aman.  Selanjutnya  ekstrak dipekatkan  dengan rotary  vacuum  evaporator dan inkubator.
Skrining Fitokimia Sampel Buah C. pubescens
Analisis  secara  kualitatif  dilakukan dengan  skrining fitokimia  untuk  mengetahui keberadaan senyawa flavanoid, saponin, alkaloid, polifenol, minyak atsiri, dan triterpenoid  serta  tanin  pada  sampel  buah  buah
C.  pubescens .  Hasil  skrining  bioaktif  tersaji pada Tabel 1.
Tabel 1. Hasil skrining fitokimia terhadap buah

## C. pubescens
No. Jenis Skrining Fitokimia Gambar Keteranga n 1 Flavanoid positif 2 Saponin negatif 3 Alkaloid negatif
4 Polifenol dan Tanin positif 5 Minyak atsiri
negatif
6 Triterpenoid positif
a. Flavanoid
Hasil  skrining  fitokimia  menunjukkan bahwa  buah C. pubescens memiliki  kandungan senyawa  flavonoid.  Dalam  penelitian  ini dilakukan  dua  uji  untuk  mengidentifikasi senyawa  flavanoid,  yaitu  uji Wilstatter dan  uji Bate-Smite .  Reaksi  positif  pada  uji Wilstatter ditunjukkan  dengan  adanya  warna  jingga sedangkan  reaksi  positif  pada  uji Bate-Smite ditunjukkan  dengan  adanya  warna  merah. Warna  merah  pada  uji    flavonoid    dikarenakan terbentuknya garam  flavilium  (Achmad, 1986) menurut reaksi berikut.
Gambar 2. Reaksi terbentuknya garam flavilum
b. Saponin
Kandungan  saponin  pada  sampel  buah C.  pubescens dinyatakan  negatif,  yakni  dengan tidak munculnya busa setelah pengocokan. Sifat yang  dimiliki  saponin  antara  lain  mempunyai rasa  pahit,  membentuk  busa  yang  stabil    dalam larutan    air.  Ditinjau  dari  rasa  buahnya, C. pubescens tidak  memiliki  rasa  pahit.  Jika memungkinkan  terdapat  sedikit  saponin  pada buah  maka  dengan  proses  pengeringan  akan menghilangkan  kandungan  saponin  tersebut. Menurut  Robinson  (1995)  senyawa  yang memiliki  gugus    polar    dan    nonpolar    bersifat aktif  permukaan sehingga  saat saponin dikocok dengan    air  dapat  membentuk    misel.  Pada struktur    misel,    gugus    polar  menghadap    ke luar  sedangkan  gugus  nonpolarnya menghadap ke  dalam, keadaan  inilah  yang tampak seperti busa.  Sementara  itu  penelitian  oleh  Rahmawati (2014) menyatakan saponin C. papaya ditemukan pada sampel daun.
c. Alkaloid
Berdasarkan  hasil  pengujian  terhadap sampel  buah C.  pubescens ,  diketahui  bahwa sampel  tersebut  negatif  alkaloid.  Ketika  ditetesi dengan  reagen  Dragendroff  dan  reagen Mayer , sampel  buah C.  pubescens berubah  warna menjadi  jingga  kecokelatan,  namun  tidak dihasilkan adanya endapan.
Tujuan penambahan HCl pada uji alkaloid pada penelitian ini  karena alkaloid bersifat basa sehingga diekstrak dengan pelarut yang mengandung  asam  (Harborne,  1996).  Pada penelitian  ini  kemungkinan  kompleks  kalium alkaloid yang terbentuk tidak sampai batas jenuh sehingga  tidak  mampu  membentuk  endapan. Pada uji positif alkaloid dengan pereaksi Mayer , diperkirakan  nitrogen  pada  alkaloid  akan bereaksi  dengan  ion  logam  K + dari  kalium tetraiodomerkurat  (II)  membentuk  kompleks kalium-alkaloid  yang  mengendap.  Hasil  positif alkaloid  pada  uji Dragendorff juga  ditandai
dengan  terbentuknya  endapan  coklat  muda sampai kuning, yaitu kalium alkaloid.
d. Polifenol dan Tanin
Berdasarkan  hasil  skrining  fitokimia, diketahui  bahwa  sampel  buah C.  pubescens positif  mengandung  senyawa  polifenol  dan tanin.    Hal    ini    dapat    dilihat  dari    perubahan warna    yang    terjadi    pada    saat    penambahan larutan  FeCl 3 1%  yaitu  warna  hijau  kehitaman. Pada penambahan larutan FeCl 3 1% diperkirakan  larutan  ini  bereaksi  dengan  salah satu  gugus  hidroksil  yang    ada    pada    senyawa tanin.    Pereaksi    FeCl 3 dipergunakan    secara luas    untuk    mengidentifikasi  senyawa  fenol termasuk tanin (Robinson, 1995).
Gambar 3. Reaksi pada uji polifenol dan tanin
e. Minyak Atsiri
Sampel  buah C.  pubescens pada penelitian  dimungkinkan  tidak  mengandung minyak  atsiri  karena  tidak  diperoleh  residu dengan  bau  yang  khas  setelah  larutan  uji diuapkan  pada  cawan  porselen.  Bau  yang ditimbulkan tidak tajam.
f. Triterpenoid
Hasil    skrining    fitokimia  menunjukkan bahwa  dalam  sampel  buah C.  pubescens positif mengandung  triterpenoid,  ditandai  dengan terbentuknya  cincin  kecoklatan  pada  larutan  uji setelah penambahan asam sulfat pekat sebanyak 2  ml  melalui  dinding  tabung.  Beberapa penelitian  menunjukkan  bahwa  tanaman C. papaya mengandung metabolit sekunder triterpenoid  menunjukkan  bahwa  senyawa tersebut  memiliki  aktivitas  sebagai  antibakteri yaitu  monoterpenoid  linalool,  diterpenoid, phytol, triterpenoid saponin, triterpenoid glikosida (Marlinda, 2013).
Uji Kuantitatif Sampel Buah C. pubescens
Penentuan  kadar  flavanoid  total    diawali dengan membuat kurva standar kuersetin dengan konsentrasi 700, 800, 900, 1000, dan 1100 mg/L pada  panjang  gelombang  510  nm  seperti  pada
Gambar  3.  Kurva  ini  berguna  dalam  membantu menentukan  kandungan  flafanoid  total  sampel buah C. pubescens .
Gambar 4. Kurva standar kuersetin Penelitian terhadap larutan standar kuersetin  menghasilkan  persamaan  regresi  y  = 2E-05x+0,001  dengan  pengukuran  linearitas sebesar 0,922. Andriyani dkk. (2008) menyatakan bahwa nilai linearitas yang mendekati  satu menunjukkan persamaan regresi tersebut  linear  dan  dapat  digunakan.  Dapat dikatakan  bahwa  absorbansi  merupakan  fungsi yang besarnya berbanding lurus dengan konsentrasi  dan  mengikuti  persamaan  regresi linear:
y = Ax + B
dengan:
x: konsentrasi (mg/L) y: absorbansi (A)
Persamaan tersebut pada kurva kalibrasi standar kuersetin digunakan sebagai pembanding  dalam  analisis  kuantitatif  pada pengukuran  kandungan  flavonoid  total  ekstrak metanol sampel buah C. pubescens . Berdasarkan hasil  pengukuran  terhadap  konsentrasi  ekstrak sebesar 1100 mg/L maka diperoleh data sebagai beikut.
Tabel 2. Penentuan flavanoid total sampel buah C. pubescens pada pengambilan konsentrasi ekstrak 1100 mg/L No.  Asal Sampe l Abso rbansi Kandungan flavanoid total ekuivalen kuersetin (mg/L) 1 Bromo  0,017 800 2 Cangar  0.01733 3 816,65 3 Dieng,   0.01366 7 633,35
Dari hasil tersebut dapat diketahui bahwa kandungan  flavanoid total tertinggi  adalah  pada ekstrak  sampel  yang  berasal  dari  kawasan
Cangar, Batu, Jawa Timur sebesar 816,65 mg/L ekuivalen  kuersetin  pada  pengambilan  1100 ppm  ekstrak.  Hal  ini  dimungkinkan  karena adanya perbedaan tempat tumbuh tanaman yang didukung  oleh  iklim  dan  unsur  tanah.  Sitompul dan  Guritno  (1995)  menerangkan  bahwa  untuk dapat  berkembang  biak  dan  menyelesaikan siklus  hidupnya  secara  lengkap,  tanaman membutuhkan  keadaan  lingkungan  tertentu, yaitu  keadaan  lingkungan  yang  dapat  untuk mengekspresikan  program  genetiknya  secara penuh.  Perbedaan  genetika  dan  lingkungan tumbuh  yang  optimum  pada C.  pubescens memberikan  penampilan  pertumbuhan  yang optimum.  Suatu  model  klasik  yang  sampai sekarang  tetap  berlaku  dapat  digunakan  adalah penampilan  tanaman  (P)  sebagai  fungsi  dari faktor genetik tanaman (G) dan lingkungan (E).
Sampel  buah C.  pubescens yang  diambil dari kawasan Cangar berasal dari tumbuhan liar pada  ketinggian  ±  1.600  meter  dpl,  kurang matang,  dan  berukuran  relatif  lebih  kecil daripada sampel buah dari dua kawasan lainnya. Di Dataran Tinggi Dieng, tanaman C. pubescens merupakan  tanaman  budidaya  yang  ditanam pada  ketinggian  ±2000  meter  dpl  sehingga pertumbuhan buah optimal. Di Kawasan Bromo, sampel  buah  diambil  pada  ketinggian  ±  1.700 meter dpl dan memiliki ukuran yang relatif sama dengan  sampel  buah  yang  berasal  dari  Dataran Tinggi  Dieng. Hasil  penelitian  Rohyami  pada tahun  2012  menjelaskan  bahwa  kandungan senyawa  flavanoid  pada  buah  masak Phaleria macrocarpa rata-rata  1,7647  mg.L-1  sedangkan pada buah mentah rata-rata adalah 2,1535 mg.L- 1, menunjukkan perbedaan kandungan flavanoid pada tingkat kematangan yang berbeda.
Tumbuhan dalam satu spesies yang sama, dalam  hal  ini C.  pubescens teradaptasi  secara berbeda-beda  terhadap  keadaan  suhu  yang menyangkut minimum, optimum, dan maksimum  untuk  hidupnya  secara  keseluruhan. Demikian untuk komponen fungsi fisiologisnya, walaupun  suhu  dapat  berubah  dengan  variasi pada kondisi yang berbeda dan menurut keadaan tumbuhan. Sallisbury dan Ross (1995) menerangkan  bahwa  cahaya  memacu  sintesis flavanoid  dalam  beberapa  sel  terspesialisasi  di salah satu organ. Produksi flavanoid memerlukan  gula  sebagai  fosfoenolpiruvat  dan eritrosa-4-fosfat  yang  menediakan  beberapa atom  karbon  yang  diperlukan  bagi  cincin-B flavanoid serta sebagai unit asetat untuk cincin– A  flavanoid.  Gula,  khususnya  sukrosa,  dapat diperoleh  dari  proses  peruraian  pati  atau  lemak
di organ penyimpan saat perkembangan kecambah  atau  dari  fotosintesis  di  sel  yang mengandung klorofil. Cahaya juga berefek pada susunan kloroplas.
Secara  umum,  dapat  dijelaskan  bahwa lingkungan memberikan pengaruh yang signifikan  terhadap  kandungan  kimia  pada spesies C.  pubescens jika  spesies  tersebut tumbuh  di  tempat  yang  berbeda  meskipun kondisi  lingkungan    sama  yakni  temperatur rendah, ketinggian di antara 1.400 – 2.400 meter dpl, dan berada di sekitar sumber belerang.

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil analisis, maka diperoleh kesimpulan sebagai berikut. 1. Hasil uji kualitatif melalui skrining fitokimia terhadap  sampel C.  pubescens yang  tumbuh di  kawasan  Cangar,  Bromo,  dan  Dataran Tinggi  Dieng  menunjukkan  bahwa  sampel tersebut positif memiliki kandungan flavanoid, polifenol dan tanin, serta triterpenoid.
2. Hasil  uji  kuantitatif  menunjukkan  bahwa pada C.  pubescens yang  tumbuh  di  kawasan Cangar  memiliki  kandungan  total  flavanoid ekuivalen  kuersetin  sebesar  800  mg/L,    di Bromo  sebesar  816,65  mg/  L,  dan  Dataran Tinggi Dieng  sebesar 633,35 mg/L.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan  terima  kasih  kami  sampaikan kepada  LPPM  UIN  Maulana  Malik  Ibrahim Malang  yang  telah  mendukung  dan  mendanai penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Achmad,  S.A.  1986. Kimia  Organik  Bahan Alam . Jakarta: Karnunika Ajizah, A.2004. Sensitivitas Salmonella typhirium terhadap Ekstrak Daun Psidium guajava L. Bioscientiae. 1 : p. 31-38.
Andriyani,  R.  Lisawati,  Y.  dan  Maimunah, 2008.  Penentuan  Aktivitas  Antioksidan, Kadar  Fenolat  Total  dan  Likopen  pada Buah  Tomat  ( Solanum  lycopersicum L.), Jurnal  Sains  dan  Teknologi  Farmasi ,  13,
3-4
Anonim. 2009. Terpenoid. http://nadjeeb.wordpress.com [10 Februari 2011]
Departemen  Kesehatan  RI,  1989,  Materia Medika Indonesia, Jilid VI, Jakarta.
Djamal,  R.,  1988. Tumbuhan  Sebagai  Sumber Bahan Obat. Pusat Penelitian. Universitas Negeri Andalas.
Harbone,  J.B., 1987, Metode Fitokimia: Penuntun  Cara  Modern  Menganalisis Tumbuhan, Terbitan Kedua, ITB Bandung. Harborne JB. 1987. Metode Fitokimia .
Padmawinata  K,  Soediro  I,  penerjemah. Bandung : Penerbit ITB. Terjemahan dari : Phytochemical methods . Harborne, J.B. 1987 Metode Fitokimia Penuntun cara menganalisis Tumbuhan, terjemah Padmawinat Bandung: ITB press Harborne,  J.B.,  1984. Phitochemical  Method. Chapman and Hall ltd. London. Harborne, J.B., .B. , 1987. Phitochemical Method. Chapman and Hall ltd. London. Herbert,  R.B.,  1989. The  Biosynthesis  of Secondary  Metabolism. Campman  and Hall 29 West 35 th Street, New York.
Hidayat,  S.  2001.  Prospek  Pepaya  Gunung ( Carica Pubescens ) dari Sikunang, Pegunungan Dieng, Wonosobo. Prosiding Seminar  Sehari:  Menggali  Potensi  dan Meningkatkan Prospek Tanaman Hortikultura  Menuju  Ketahanan  Pangan. Pusat Konservasi Tumbuhan Kebun Raya
Bogor-LIPI, Bogor.
Judoamidjojo  M.,  Darwis  A.A.,  Gumbira  E.,
1990. Teknologi Fermentasi. IPB. Bogor. Kristianti, A. N, N. S. Aminah, M. Tanjung, dan B. Kurniadi.
2008. Buku Ajar Fitokimia.Surabaya: Jurusan Kimia Laboratorium  Kimia  Organik  FMIPA
Universitas
Lumbessy,Mirna. Dkk.2013. Uji total Flavonoid pada  beberapa  tanaman  obat  tradisional diwaitina  Kecamatan  Mangoli  Timur
Kabupaten  Kepulauan  Sula,  Maluku Timur. Jurnal MIPA UNSRAT.vol.02,No.01,Hal:50-55
Manitto,  P.,  1981. Biosintesis  Produk  Alami. Terjemahan  :  Koensoenmardiyah.  IKIP Semarang Press. Semarang.
Markham,  K.R.,  1982. Cara  Mengidentifikasi Falvanoid. Alih  Bahasa  :  Kosasih Padmawinata, (1988). ITB. Bandung. Markham, K.R., 1988, Techniques of Flavonoids  Identification ,  diterjemahkan oleh Kosasih Padmawinata, Penerbit ITB, Bandung.
Moelyono,  M.W.,  1996. Panduan  Praktikum Analisis Fitokimia. Laboratorium
Farmakologi  Jurusan  Farmasi  FMIPA. Universitas Padjadjaran. Bandung.
Mursiti,  S.  2013.  Isolasi,  Identifikasi,  Dan Elusidasi  Struktur  Senyawa  Alkaloid Dalam Ekstrak Metanol-Asam Nitrat Dari Biji  Mahoni  Bebas  Minyak  ( Swietenia macrophylla, King). Jurnal  MIPA  36 (2): 169-177 (2013).
Mursiti,  S.  2013.  Isolasi,  Identifikasi,  Dan Elusidasi  Struktur  Senyawa  Alkaloid Dalam Ekstrak Metanol-Asam Nitrat Dari Biji  Mahoni  Bebas  Minyak  ( Swietenia macrophylla, King). Jurnal  MIPA  36 (2): 169-177 (2013).
Natural  Resources  Conservation  Service,  2010.
Germplasm Resources Information Network  (GRIN)  Taxonomy  for  Plants. http://plants.usda.gov/java/profile? symbol=CAPU39 [15 Januari 2010]. Pusat Perlindungan Varietas Tanaman Departemen Pertanian Republik Indonesia.  2006.  Panduan  Pengujian Individual Kebaruan, Keunikan, Keseragaman dan Kestabilan. Robinson,  T.,  1991. The  Organic  Constituen  of HigherPlants. 6 th Edition.  Department  of Biochemistry. University of Massachusetts
Rock,  Red.  2009.  Product  Review  -  Wild Mountain  Papaya  Extract. http://www . associatedcontent.com/article/1987516/pr oduct_review_wild_mountain_papaya.ht ml [15 Januari 2010]. Rohman,  A.  Riyanto,  S.,  dan  Utari,  D.  2006.
Aktivitas Antioksidan,
Kandungan
Fenolat  Total,  dan  Kandungan  Flavanoid Total Ekstrak Etil asetat Buah Mengkudu serta  Fraksi-fraksinya.  Majalah  Farmasi
Indonesia, 17,137-138.
Rohyami,  Yuli.  2008.    Penentuan  Kandungan
Flavonoid  dari  Ekstrak  Metanol  Daging Buah Mahkota Dewa ( Phaleria macrocarpa Scheff Boerl. Jurnal
LOGIKA hal. 1 ‐ 8 Volume 5, Nomor 1 Sabirin,  M.,  Hardjono  S.,  dan  Respati  S.,  1994.
Pengantar  Praktikum  Kimia  Organik  II.
UGM-Yogyakarta.
Salisbury et  al .  1995. Fisiologi Tumbuhan Jilid 3 . Bandung: Penerbit ITB
Sangi,  M.;  Runtuwene,  M.R.J.;  Simbala,  H.E.I. dan  Makang,  V.M.A.  2008.  Analisis Fitokimia  Tumbuhan  Obat  di  Kabupaten Minahasa  Utara. Chemistry Progress.  Vol 1, hlm: 47-53
Sastrohamidjojo, H., 1996. Sintesis Bahan Alam. Gadjah Mada university Press. Yogyakarta.
Simirgiotis.  2009.  Identification  of  Phenolic Compounds  from  The  Fruits  of  The Mountain Papaya Vasconcellea pubescens a.  dc.  Grown  in  Chile  by  Liquid Chromatography–uv
Detection–Mass
Spectrometry. Journal  Food  Chemistry. 115:775–784.
Sitompul,  S.  M  &  B.  Guritno.  1995. Analisis Pertumbuhan  Tanaman. Gadjah Mada University Press: Yogyakarta.
Waji, R.A. dan Sugrani, Andis. Makalah Kimia
Organik Bahan Alam : Flavanoid (Quercetin).  Program  S2  Kimia  Fakultas MIPA Universitas Hasanuddin Wikipedia. 2011. Pepaya Gunung. http://id.wikipedia.org/wiki/index [10 Februari 2011].