Lontar: Journal of Community Health e-ISSN 2685-2438
Volume 01 Nomor 02, Juni 2019
UJI EFEKTIVITAS EKSTRAK LENGKUAS ( Alpinia galanga ) SEBAGAI ANTIBAKTERI Escherichia coli
Melinda Agustin Hiala 1 , Utma Aspatria 2 , Rut R. Riwu 3
1-3 Prodi Ilmu Kesehatan Masyarakat Fakultas Kesehatan Masyarakat Universitas Nusa Cendana

## ABSTRACT
Food  is  a  source  of  nutrition  for  humans  and  is  also  a  source  of  food  for  microorganisms.  The  growth  of microorganisms  in  foodstuffs  can  cause  unwanted  physical  or  chemical  changes  causing  food  to  be  bad  for consumption. Therefore to maintain the quality, the food must be given of preservatives. However, people may misuse the preservatives leading to the low safety of food that threatens health. Natural preservatives of plants is more advisable to minimize the risk.
The aim of this research was to see the effect of galangal extract ( Alpinia galanga ) using 60% ethyl acetate solvent in inhibiting the growth of Escherichia coli bacteria through diffusion disk method. The measured parameter was the  inhibition  zone  formed  around  the  disc  paper  with  a  24-hour  incubation  period.  This  research  was  an experimental study by making galangal extract in certain concentrations.
Based on the measurements, the average inhibitory zone diameter at three repetitions with 24 hours observation showed  that  the  galangal  extract  in  several  concentrations  effectively  inhibited  the  growth  of Escherichia  coli bacteria. The result showed that the higher the concentration of the extract the larger the mean drag zone formed around the disk paper. The most effective concentration was 20 ml concentration with 25,6 mm inhibition (0.000 (P <0,05), F = 89,592). Bibliography: 25 (1998-2017)

## PENDAHULUAN LatarBelakang
Bahan  makanan  merupakan  sumber  gizi  bagi  manusia  dan  juga  merupakan  sumber  makanan  bagi mikroorganisme.  Pertumbuhan  mikroorganisme  dalam  bahan  pangan  dapat  menyebabkan  perubahan  yang menguntungkan  seperti  perbaikan  bahan  pangan  secara  gizi,  daya  cerna  ataupun  daya  simpannya.  Selain  itu pertumbuhan mikroorganisme dalam bahan pangan juga dapat mengakibatkan perubahan fisik atau kimia yang tidak  diinginkan,  sehingga  bahan  pangan  tersebut  tidak  layak  dikonsumsi.  Kejadian  ini  biasanya  terjadi  pada pembusukan  bahan  pangan.  Bahan  pangan  bertindak  sebagai  perantara  atau  substrat  untuk  pertumbuhan mikrorganisme patogenik dan organisme lain penyebab penyakit. Penyakit menular yang cukup berbahaya seperti tifus, kolera atau disentri mudah tersebar melalui bahan makanan (1)
Istilah  keracunan  makanan  sering  digunakan  untuk  menyebut  gangguan  yang  disebabkan  oleh mikrorganisme, mencakup gangguan-gangguan yang diakibatkan termakannya toksin yang dihasilkan organisme- organisme  tertentu  dan  gangguan-gangguan  akibat  terinfeksi  organisme  penghasil  toksin.  Toksin-toksin  dapat ditemukan secara alami pada beberapa tumbuhan dan hewan atau suatu produk metabolit toksik yang dihasilkan suatu  metabolisme.  Dengan  demikian,  intoksikasi pangan  adalah  gangguan  akibat  mengkonsumsi  toksin  dari bakteri yang telah terbentuk dalam makanan, sedangkan infeksi pangan disebabkan masuknya bakteri ke dalam tubuh  melalui  makanan  yang  telah terkontaminasi dan sebagai akibat reaksi tubuh terhadap bakteri atau  hasil- hasil metabolismenya (2).
Badan POM telah mencatat 128 kasus keracunan pangan yang menjadi Kejadian Luar Biasa (KLB) selama tahun 2011 berasal dari 25 (dua puluh lima) propinsi. Dilaporkan jumlah orang yang terpapar sebanyak 18.144 orang, sedangkan kasus KLB keracunan pangan ( case ) yang dilaporkan sebanyak 6.901 orang sakit dan 11 orang meninggal dunia. Berdasarkan data tersebut diketahui nilai Attack Rate (AR) sebesar 38,10%. Dari seluruh hasil pengujian  masih  ditemukan  produk  pangan  yang  mengandung  bahan  berbahaya  yang  disalahgunakan  sebagai BTP,  yaitu  sebanyak  162  sampel  mengandung  Boraks,  110  sampel  mengandung  Rhodamin  B,  228  sampel mengandung Formalin dan 4 sampel mengandung Methanyl Yellow (3).
Higiene dan sanitasi masih menjadi masalah yang serius dalam produksi pangan, hal ini ditunjukkan dengan temuan  kandungan  mikroba  dalam  sampel  pangan,  yaitu  sebanyak  399  sampel  mengandung  kapang  khamir melebihi  batas  yang  diizinkan,  536  sampel  mengandung  ALT  melebihi  batas  yang  diizinkan,  340  sampel mengandung MPN Coliform melebihi batas yang diizinkan, 81 sampel mengandung APM E. coli melebihi batas yang  diizinkan,  22  sampel  mengandung S.  aureus melebihi  batas  yang  diizinkan,  dan  12  sampel  mengandung Pseudomonas aeroginosa melebihi batas yang diizinkan (4).
Kasus diare di Provinsi Nusa Tenggara Timur pada tahun 2016 mencapai 138.243 kasus dan yang ditangani hanya  89.269  kasus.  Pada  tahun  2017  sejak  januari  hingga  juli  tercatat  3.363  kasus  diare  di  Kota  Kupang dikarenakan cuaca dan virus yang menyebar (5).
Lontar: Journal of Community Health e-ISSN 2685-2438
Volume 01 Nomor 02, Juni 2019
Bakteri Escherichia  coli merupakan  salah  satu  bakteri  yang  menurut  penemunya  dapat  membangun seluruh  patogenitasnya  pada  infeksi  saluran  pencernaan  sehingga  penyakit  yang  sering  ditimbulkannya  adalah diare.Pada umumnya bakteri ini dapat ditemukan dalam usus besar manusia. Bakteri ini juga bersifat aerobic dan juga aerobic fakultatif serta merupakan penghuni normal pada usus sehingga menyebabkan infeksi (6).
Lengkuas (Alpinia galanga) merupakan salah satu jenis tanaman yang dimanfaatkan masyarakat sebagai bahan penyedap masakan. Lengkuas biasanya tumbuh di pekarangan rumah. Lengkuas diketahui dapat digunakan sebagai antibakteri  karena  mampu  menghambat aktivitas  mikroba. Zat anti  mikroba dapat bersifat bakterisidal (membunuh  bakteri),  bakteristatik  (menghambat  pertumbuhan  bakteri),  fungisidal  (membunuh  kapang), fungistatil  (menghambat  pertumbuhan  kapang)  ataupun  germisidal  (menghambat  germinasi  spora  bakteri). Bahan-bahan alami memiliki aktivitas menghambat mikroba yang disebabkan oleh komponen tertentu yang ada di  dalamnya.  Senyawa  yang  terkandung  di  dalam  lengkuas  yaitu  senyawa  fenol,  flavonoida  dan  minyak  atsiri (7,8).
Senyawa aktif antibakteri yang terkandung dalam lengkuas adalah fenol yang telah lama digunakan sebagai antiseptik  dan  memiliki  daya  antibakteri.  Rimpang  lengkuas  mengandung  minyak  atsiri,  yang  pada  umumnya dibagi  menjadi dua yaitu  golongan hidrokarbon dan hidrokarbon teroksigenasi  yang  memiliki daya antibakteri yang kuat (9). Oleh karena itu, penulis tertarik untuk melakukan penelitian dengan judul uji efektivitas ekstrak lengkuas ( Alpinia galanga ) sebagai antibakteri Escherichia coli .

## METODE
Jenis penelitian yang digunakan adalah penelitian eksperimen karena pada penelitian ini dilakukan perlakuan untuk memanipulasi objek (10). Desain ini digunakan karena percobaan dilakukan di laboratorium dan kondisi lingkungan dapat dikontrol dengan studi kasus bentuk tunggal ( One Shot Case Study ) yaitu sebuah eksperimen tanpa adanya tes awal. Perlakuan penelitian ini adalah perbedaan dosis ekstrak lengkuas, banyaknya perlakuan adalah 4 perlakuan dan setiap perlakuan diberikan ulangan sebanyak 3 kali. Sampel dalam penelitian ini adalah lengkuas yang diambil dari tempat penjualan (Pasar Tradisional Oesapa).
Data dalam penelitian ini adalah data yang diperoleh langsung dari hasil pemeriksaan sampel uji efektivitas esktrak lengkuas terhadap bakteri Escherichia coli di laboratorium  yaitu data hasil laboratorium  dan panduan buku  dan  jurnal  berupa  data  tentang  penelitian  lengkuas  maupun  informasi  terkait  dengan  lengkuas  ( Alpinia galanga ) dan bakteri Escherichia coli .
Analisa  analitik  digunakan  untuk  menganalisis  efektivitas  ekstrak  lengkuas (Alpinia  galanga) sebagai antimikroba Escherichia  coli dengan  uji  menggunakan  uji One  Way  Anova dengan  bantuan  aplikasi  program statistik SPSS for window . Syarat uji One Way Anova adalah sebaran data harus normal dan varians data harus sama. Untuk mengetahui sebaran data digunakan uji Kolmograv-smirnov test , sedangkan untuk menguji varians data menggunakan Levene’s test .

## HASIL
1. Gambaran Umum Lokasi Penelitian
Luas  wilayah  ditinjau  dari  daerah  Penelitian  mengenai  uji  efektivitas  ekstrak  lengkuas  ( Alpinia  galanga ) sebagai antibakteri Escherichia coli menggunakan sampel lengkuas yang diambil dari pasar tradisional Oesapa yang  kemudian  diolah  hingga  menjadi  ekstrak  memakai  pelarut  etil  asetat  60%  dengan  menggunakan  metode evaporasi.
Penelitian ini menggunakan empat (4) dosis, yaitu 5 ml, 10 ml, 15 ml dan 20 ml yang dilakukan sebanyak tiga kali pengulangan dengan lama waktu inkubasi 24 jam. Pengujian ini dilaksanakan pada tanggal 5-11 juni 2017 di Laboratorium F-MIPA Jurusan Biologi Undana Kupang.
Hasil pengamatan pertumbuhan bakteri Escherichia coli setelah diberi ekstrak lengkuas  ( Alpinia galanga ) dengan berbagai dosis yang diinkubasi selama 24 jam dapat dilihat pada pembahasan berikut:
2. Gambaran Hasil Penelitian a. Zona hambat ekstrak lengkuas ( Alpinia galanga ) pada bakteri Escherichia coli Uji  efektivitas  ekstrak  lengkuas  ( Alpinia  galanga )  sebagai  antibakteri  bakteri Escherichia  coli diuji menggunakan metode difusi cakram dengan 4 macam dosis ekstrak lengkuas yaitu 5 ml, 10 ml, 15 ml dan 20 ml. Hasil uji efektivitas ekstrak lengkuas ( Alpinia galanga ) terhadap bakteri Escherichia coli dapat dilihat pada tabel berikut:
Tabel 1. Daya hambat ekstrak lengkuas ( Alpinia galanga ) terhadap bakteri Escherichia coli
Ulangan Bakteri Perlakuan Daya hambat (mm) E. coli Ekstrak 5 ml 16.7 Ekstrak 10 ml 18.9
Lontar: Journal of Community Health e-ISSN 2685-2438
Volume 01 Nomor 02, Juni 2019 1 Ekstrak 15 ml 22.2 Ekstrak 20 ml 24.1 2 E. coli Ekstrak 5 ml 17.8 Ekstrak 10 ml 18.5 Ekstrak 15 ml 21.5 Ekstrak 20 ml 24.8 3 E. coli Ekstrak 5 ml 17.4 Ekstrak 10 ml 19.6 Ekstrak 15 ml 22.6 Ekstrak 20 ml 25.6
Tabel di atas menunjukkan beberapa diameter zona bening sebagai tolok ukur daya hambat ekstrak lengkuas ( Alpinia galanga ) terhadap pertumbuhan bakteri Escherichia coli pada media perlakuan dengan berbagai dosis . Berdasarkan data di atas dapat dilihat bahwa besar daya hambat pertumbuhan bakteri paling tinggi berada pada dosis 20 ml yaitu pada pengulangan ketiga sebesar 25,6 mm, sedangkan daya hambat pertumbuhan bakteri paling rendah berada pada dosis 5 ml yaitu pada ulangan pertama sebesar 16,7 mm.
b. Hasil analisis One Way Anova efektivitas berbagai dosis ekstrak lengkuas ( Alpinia galanga ) terhadap pertumbuhan bakteri Escherichia coli Hasil  uji  analisis  statistik One  Way  Anova untuk  mengetahui  perbedaan  efektivitas  berbagai  dosis  ekstrak lengkuas ( Alpinia galanga ) terhadap pertumbuhan bakteri Escherichia coli pada berbagai dosis dapat dilihat pada tabel berikut:
Tabel  2.  Hasil  analisis One  Way  Anova efektivitas  berbagai dosis  ekstrak  lengkuas  ( Alpinia  galanga ) terhadap pertumbuhan bakteri Escherichia coli
Jumlah Kuadrat Derajat Kebebasan Rerata Kuadrat Uji F Nilai Signifikansi Antar Kelompok 100.342 3 33.448 89.592 .000 Dalam Kelompok 2.987 8 .373 Total 103.329 11
Tabel di atas menunjukkan bahwa hasil analisis uji One Way Anova diperoleh nilai p = 0,000 (p < 0,05). Dengan demikian dapat disimpulkan bahwa ada perbedaan tingkat efektivitas antara dosis yang satu dengan dosis yang  lain.  Karena  terdapat  perbedaan  yang  signifikan  dari  keempat  dosis  maka  dilakukan  uji  lanjutan  untuk mengetahui beda nyata terkecil dari dosis tersebut. Hasil uji beda nyata terkecil (uji Duncan ) dapat dilihat pada tabel berikutnya:
Tabel 3. Hasil Uji Post Hoc Duncan pemberian ekstrak lengkuas ( Alpinia galanga ) terhadap pertumbuhan bakteri Escherichia coli
Konsentrasi N Subset for alpha = 0.05 1 2 3 4 5 3 17.300 10 3 19.000 15 3 22.100 20 3 24.833 Sig. 1.000 1.000 1.000 1.000
Tabel di atas menunjukkan bahwa hasil uji Duncan pada 5 ml, 10 ml, 15 ml dan 20 ml memiliki perbedaan yang nyata. Hasil uji Duncan dapat dilihat dari nilai harmonic mean yang dihasilkan tiap kelompok berada dalam kolom subset yang sama atau berbeda. Pada tabel hasil uji di atas dapat dilihat bahwa kelompok sampel berada pada kolom subset yang berbeda. Dengan demikian dapat disimpulkan bahwa semua dosis yang digunakan dalam penelitian ini memiliki tingkat perbedaan yang signifikan.

## PEMBAHASAN
a. Zona hambat ekstrak lengkuas ( Alpinia galanga ) terhadap bakteri Escherichia coli dengan dosis 5 ml,
10 ml, 15 ml dan 20 ml
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  pemberian  ekstrak  lengkuas  pada  bakteri Escherichia  coli mampu menghambat pertumbuhan bakteri tersebut pada media perlakuan. Adanya variasi zona bening sebagai tolok ukur daya  hambat  dari  berbagai  dosis  menunjukkan  efek  antimikroba  yang  diduga  dipengaruhi  oleh  kandungan senyawa fenol, flavoinoida dan minyak atsiri yang terkandung dalam lengkuas. Dalam dunia kedokteran senyawa fenol  telah  lama  dikenal  sebagai  antiseptik  dan  dipercaya  memiliki  daya  antibakteri.  Rimpang  lengkuas mengandung  minyak  atsiri  berwarna  kuning  kehijauan,  kurang  lebih  1%.  Minyak  atsiri  pada  umumnya  dibagi menjadi  dua  komponen,  yaitu  golongan  hidrokarbon  dan  hidrokarbon  teroksigenasi  yang  memiliki  daya  anti bakteri yang kuat (9).
Senyawa  fenol  berperan  pada  mekanisme  pertahanan  mikroorganisme.  Pada  konsentrasi  rendah  fenol bekerja dengan merusak membran sel sehingga menyebabkan kebocoran sel. Pada konsentrasi tinggi, fenol dapat berkoagulasi dengan protein seluler dan menyebabkan membran sel menjadi tipis. Aktivitas tersebut sangat efektif ketika bakteri dalam  tahap pembelahan, di  mana lapisan  fosfolipid di sekeliling  sel  dalam  kondisi sangat tipis sehingga fenol dapat dengan mudah berpenetrasi dan merusak isi sel. Adanya fenol mengakibatkan struktur tiga dimensi  protein  sel  bakteri  berubah  sifat.  Deret  asam  amino  protein  tersebut  tetap  utuh  setelah  berubah  sifat, namun aktivitas biologisnya menjadi rusak sehingga protein tidak dapat melakukan fungsinya (9).
Hasil  yang  diperoleh  dari  penelitian  ini,  menunjukkan  bahwa  ekstrak Alpinia  galanga efektif  dijadikan sebagai antibakteri Escherichia coli , di mana semakin tinggi dosis yang diberikan maka semakin besar pula daya hambat yang dihasilkan. Semakin tinggi dosis maka semakin tinggi pula daya hambat yang dihasilkan. Hal ini dikarenakan semakin banyak dosis maka semakin banyak pula senyawa kimia tersebut di dalamnya sehingga lebih efektif dalam menghambat pertumbuhan bakteri (11).
b. Perbedaan  daya  hambat  pada  berbagai  dosis  ekstrak  lengkuas  ( Alpinia  galanga )  terhadap pertumbuhan bakteri Escherichia coli Hasil uji menggunakan One Way Anova yang dilakukan untuk mengetahui perbedaan daya hambat antar dosis ekstrak lengkuas terhadap pertumbuhan bakteri Escherichia coli diperoleh nilai signifikansinya p = 0,000 (p < 0,05) antar dosis yang berbeda. Dengan demikian dapat disimpulkan bahwa ada perbedaan yang signifikan antara keempat dosis yang digunakan.
Adanya  perbedaan  besar  daya  hambat  pada  tiga  kali  pengulangan  diduga  dipengaruhi  oleh  variasi  dosis ekstrak lengkuas ( Alpinia galanga ). Dari hasil penelitian menunjukkan daya hambat sebanding dengan dosis yang diberikan,  artinya  semakin  tinggi  dosis  ekstrak  lengkuas  yang  diberikan  maka  semakin  besar  pula  daya hambatnya.  Hal  ini  dikarenakan  semakin  tinggi  dosis  maka  efek  toksik  dalam  ekstrak  lengkuas  juga  semakin tinggi. Jika dalam tubuh lengkuas bermanfaat untuk mencegah virus dalam tubuh karena mengandung antipiretik dan analgesik yang terdapat dalam umbi lengkuas tersebut.
Lontar: Journal of Community Health e-ISSN 2685-2438
Volume 01 Nomor 02, Juni 2019
Hasil uji lanjutan untuk mengetahui beda nyata terkecil (Uji Duncan ) dari dosis 5 ml, 10 ml, 15 ml dan 20 ml menunjukkan terdapat perbedaan daya hambat yang signifikan antara masing-masing dosis dan perlakuan.

## KESIMPULAN
a. Ekstrak  lengkuas  efektif  menghambat  pertumbuhan  bakteri Escherichia  coli dan  dosis  yang  paling  efektif adalah dosis 20 ml dengan besar daya hambat 25,6 mm.
b. Ada perbedaan efektivitas ekstrak lengkuas (Alpinia galanga ) pada dosis 5 ml, 10 ml, 15 ml dan 20 ml dalam menghambat pertumbuhan bakteri Escherichia coli , sesuai hasil uji Post Hoc Duncan pada tabel.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Irianto, K dan Waluyo, K., 2004. Gizi dan Pola Hidup Sehat . Yrama Widya: Bandung 2. Berg, J.M., Tymoczko, J.L., Stryer, L (2002). Molecular Cell Biology (5 th ed). WH Freeman. ISBN 0-7167- 4955-6 3. BPOM., 2011. Laporan Tahunan BPOM RI Tahun 2011. 4. BPOM., 2015. Laporan Tahunan BPOM RI Tahun 2015. 5. Wahyunigsih, Sri. " Penderita Diare di Kota Kupang Masih Tinggi” . http://m.harnas.co/2017/08/03/ penderita- diare-di-kota-kupang-masih-tinggi. diakses (20 Oktober 2017).
6. Jawetz, E, J. Melnick, et al., 2005, Mikrobiologi Kedokteran , Edisi 20, 238 –240, EGC, Jakarta. 7. Hapsari S., 2010. Pengaruh ekstrak jahe (Zingiber officianale) terhadap penghambat mikroba perusak pada ikan nila (Oreochromis niloticus) , Surakarta.
8. Udjiana,  S.,  2008. Jurnal  upaya  pengawetan  makanan  menggunakan  ekstrak  lengkuas.  teknologi  separasi , 1(2).
9. Parwata,  M.O.A.  dan  Dewi,  P.F.S., 2008. Isolasi  dan  Uji Aktivitas  Antibakteri  Minyak Atsiri  dari  Rimpang Lengkuas (Alpinia galanga L.). Jurnal kimia, 2(2), pp.100–104.
10. Nazir,  M.  (2003). Pola  rancangan  acak  lengkap  non  faktorial . Pola  rancangan  acak  lengkap  non faktorial (Vol. 6). 11. Midun.,  2012. Uji  Efektivitas  Ekstrak  Lengkuas  Merah  (Alpinia  purpurata  K.  Schum)  dalam Menghambat Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus aureus dan Bakteri Escherichia coli dengan Metode Disc Diffusion.