© Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Maarif Hasyim Latif p-ISSN : 2548-8333 e-ISSN : 2549-2586

## PERBEDAAN HASIL PENUNDAAN SAMPEL FFP (Fresh Frozen Plasma)  36 JAM DAN 48 JAM TERHADAP PEMERIKSAAN APTT (Activated Partial Thromboplastin Time)
Novi Ersanto 1) , Jhoni Pramanda Tubulau 1) , Titik Sundari 2) , Siti Nur Husnul Yusmiati 2)
1) Prodi D4 Teknologi Laboratorium Medis, Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas Maarif Hasyim Latif
2) Prodi D3 Teknologi Laboratorium Medis, Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas Maarif Hasyim Latif Email: siti_nur_husnul@dosen.umaha.ac.id

## ABSTRACT
Blood  transfusion  is  the  transfer  of  blood  from  one  person  (donor)  into  the  vein  of  another person (recipient). Blood components include cellular and non-cellular components. The results of the study were conducted to determine the differences in the results of 36-hour and 48-hour FFP (Fresh Frozen Plasma) samples stored at room temperature against APTT (Activated Partial Thromboplastin Time) examination. The sample was FPP (Fress Frozen Plasma) from Dr. Soetomo Hospital Surabaya, which obtained significant results, namely there was a difference in the plasma APTT value with a delay of 36 hours, plasma with a delay of 48 hours with plasma with a delay of 30 minutes or without delay, while the plasma APTT value with a 30-minute delay as a control for the normal APTT value. The Mann- Whitney  statistical  test  showed  that  there  was  a  significant  difference  (p<0.05)  between  30-minute plasma with 36-hour delay plasma p=0.00 and 48-hour delay plasma with p=0.000. The conclusion in the hematological examination, especially the APTT examination, if there is a delay in the examination, it should be examined no more than two hours.
Keywords : Fress Frozen Plasma, Activated Partial Thromboplastin Time

## PENDAHULUAN
Transfusi  merupakan  pemindahan  darah dari  donor  kepada  resipien.  Komponen  darah meliputi  komponen  selular  (korpuskuli)  dan non  selular  (plasma).  Korpuskuli,  yang  terdiri atas  eritrosit,  leukosit,  dan  trombosit  (Aridya dan Yuniarti, 2023). Penggunaan Fresh Frozen Plasma  (FFP)  dapat  menjadi  pengganti  dan meningkatkan  faktor  koagulasi  sebesar  20% setelah dilakukan transfusi. FFP dapat digunakan  pada  pasien  terindikasi  pendarahan akibat gagal hati, overdosis warfarin,
Disseminated  Intravascular  Coagulation  (DIC) akut.  FFP  juga  berfungsi  sebagai  pengganti faktor  IX  (Hemofilia  B)  serta  faktor  inhibitor koagulasi  I,  II,  III,  dan  IV  (Fajriyani et  al ., 2019).  Cara  memperoleh  FFP  adalah  dengan pemisahan  dari  Whole  Blood  (WB)  atau melalui  plasma  pheresis  yang  umumnya  dapat berisi  150-250  ml  FFP  yang  mengandung koagulan dan antikoagulan dengan konsentrasi
yang sama dengan individu normal (Luo, et al., 2022).
Penggunaan  FFP  dalam  dunia  medis telah  meningkat  hingga  lebih  dari  20%  dalam beberapa  tahun  terakhir.  Sebanyak  374.760 kantung  FFP  di  tahun  2001  dan  385.236 kantung FFP di tahun 2002 di Inggris (Stainsby, et al ., 2000). Peningkatan hingga 70% terjadi di Amerika  Serikat  dalam  tahun  2001-2009,  dari 3,9 juta kantung FFP di tahun 2001 menjadi 5,7 juta  kantung  FFP  pada  tahun  2009  (Veera, 2012).  Pada  tahun  2014  dan  tahun  2016  FFP telah digunakan sebanyak 278.691 kantung dan 264.699  kantung  di  Indonesia.  Data  dari Instalasi  Transfusi  Darah  (ITD)  RSUD  Dr. Soetomo  menjelaskan  bahwa  FFP  paling banyak digunakan  pada  bulan  Oktober  sampai Desember  pada  tahun  2019.  FFP  golongan darah  O  yang  paling  banyak  digunkana  (420 kantung),  diikuti  golongan  darah  B  (353 kantung), golongan darah B (339 kantung), dan
© Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Maarif Hasyim Latif p-ISSN : 2548-8333 e-ISSN : 2549-2586
golongan darah AB (81 kantung) (Veera, 2012). Plasma  adalah  cairan  darah  yang  mengandung air,  elektrolit  dan  protein.  Semua  plasma umumnya  mengandung  protein  koagulasi dengan kandungan yang relatif berbeda. Protein koagulasi  dapat  digunakan  pada  semua  pasien dengan desifit koagulasi (Merah et al ., 2023).
FFP  tersimpan  dalam  bentuk  padatan yang harus dicairkan terlebih dahulu pada suhu 37 o C  dengan waterbath sebelum  digunakan.
Sesuai  dengan  peraturan  tentang  Standar Pelayanan Transfusi Darah, menjelaskan bahwa setelah FFP dicairkan dapat disimpan pada suhu 2℃ - 6℃ maksimal 24 jam. FFP yang disimpan setelah  24  jam  menjadi recovered  plasma
(Kemenkes, 2015).
Penyimpanan  FFP  dalam  suhu  ruang maksimal  adalah  4  jam.  Suhu  dan  lama penyimpanan dapat menurunkan faktor koagulasi pada FFP terutama pada keadaan cair (Fajriyani, et  al ,  2019).  Penelitian  mengenai pengaruh  suhu  dan  lama  penyimpanan  FFP telah  banyak  dilakukan,  namun  penelitian tentang kadar faktor koagulasi pada penundaan FFP cair masih belum banyak dilakukan. Oleh karena itu peneliti tertarik melakukan penelitian tentang pengaruh nilai APTT ( Activated Partil Thromboplastin Time) pada FFP (Fresh Frozen Plasma) cair yang dilakukan penundaan selama 36 jam dan 48 jam.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  merupakan  penelitian eksperimental  yaitu post  test  control  group design. Melakukan pengamatan dan pemeriksaan  langsung  yang  bertujuan  untuk mengetahui  perbedaan  yang  timbul  sebagai akibat dari perlakuan dan pengamatan terhadap hasil pemeriksaan APTT dengan FPP penundaan 36 jam dan 48 jam pada suhu ruang (22-24 o C).  Sampel  dalam  penelitian  ini  yaitu sampel FFP Cair untuk dilakukan pemeriksaan APTT  dengan  penundaan  36  jam  dan  48  jam pada suhu ruang (22-24 ℃).

## Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian  dilakukan  pada  tanggal  31 Mei-Juni 2021 yang dilaksanakan di Laboratorium Hematologi Fakultas Ilmu Kesehatan  Universitas  Maarif  Hasyim  Latif, Sidoarjo.

## Alat dan Bahan
Alat yang digunakan yaitu mikropipet 50 µL  dan  100  µL, sysmex CX  -50.  Bahan  yang digunakan  diantaranya  reagen  CaCl 2 ,  reagen pathrombin S dan sampel FFP.

## Prosedur Pemeriksaan
Tahap  pra  analitik  adalah  tahap  awal sampel  untuk  disiapkan.  Sampel  FFP  yang
sudah  dicairkan  dilakukan  penundaan  36  jam dan  48  jam  pada  suhu  ruangan.  Kemudian dilakukan pemeriksaan APTT. Prosedur pencairan  sampel,  sampel  yang  masih  beku dimasukkan  kedalam  plasma thawing  bath . Kemudian ditekan tombol start (mulai menhitung  atau  mencatat  hasilnya,  ditungu  20 menit. Setelah itu sampel dibawa ke Laboratorium Hematologi Fakultas Ilmu
Kesehatan  Universitas  Maarif  Hasyim  Latif dilakukan  penundaan  selama  36  jam  dan  48 jam.

## Pemeriksaan kontrol APTT
Sebanyak 50 µL kontrol APTT ke dalam reaction  tube , dimasukkan  ke  dalam  well , ditambahkan  50  µL  reagen pathrombin S (hitung  mundur  180/240  detik),  10  menit sebelum berakhir kemudian ditambahkan 50 µl Reagen CaCl 2 , tunggu sampai hasil keluar dan mencatat  hasil.  Prosedur  pemeriksaan  APTT penundaan  36  jam  dengan  cara  sampel disimpan  pada  suhu  ruang  selama  36  jam. Setelah  itu  dilakukan  pemeriksaan  APTT. Prosedur pemeriksaan APTT penundaan 48 jam dengan cara sampel disimpan pada suhu ruang selama  48  jam.  Setelah  itu  dilakukan pemeriksaan APTT.
© Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Maarif Hasyim Latif p-ISSN : 2548-8333 e-ISSN : 2549-2586

## Analisis Data
Data  hasil  pemeriksaan  APTT  yang dilakukan  penundaan 36  jam  dan  48  jam  yang
telah  terkumpul  dan  kemudian  dianalisis dengan  menggunakan  Statistik Uji  One  Way Anova

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pemeriksaan  APTT  (Activated  Partial Thromboplastin Time), FFP cair penundaan 36 jam  dan  48  jam,  didapatkan  hasil  sebagai berikut  (Tabel  1).  Rerata  pengukuran  APTT pada penyimpanan 30 menit adalah 37.3 detik, penyimpanan 36 jam adalah 41 detik dan pada penyimpanan 48 jam adalah 51.3 detik.
Berdasarkan  analisis  data  dengan  uji normalitas  menggunakan  uji  Shappiro  Wilk didapatkan  pada  kontrol negatif  nilai  p=0,685. Kelompok perlakuan 36 jam nilai p=0,515.Kelompok  perlakuan  48  jam  nilai p=0,006. Sehingga data pada kelompok negatif dan  kelompok  perlakuan  36  jam  berdistribusi normal, dimana data yang berdistribusi normal mempunyai  nilai  p>0,05.  Pada  uji  Levene didapatkan  nilai  p=0,007,  sehingga  data  pada kelompok negatif, kelompok perlakuan 36 jam dan kelompok  perlakuan 48  jam  menunjukkan data  bervariasi  tidak  homogen,  dimana  data yang homogen mempunyai nilai p>0,05.
Pengujian  dengan  uji  Mann-Whitney sampel  menunjukkan  terdapat  perbedaan bermakna  (p<0.05)  antara  kontrol  negatif  dan kelompok perlakuan penundaan 36 jam dengan nilai p=0,010. Sedangkan perlakuan penundaan 48  jam,  hasil  uji  Mann-Whitney  menunjukkan terdapat  perbedaan  bermakna  (p<0.05)  antara kontrol  negatif  dan  kelompok  perlakuan penundaan 48 jam dengan nilai p=0,000. Hasil uji  Mann-Whitney  pada  sampel  menunjukkan terdapat  perbedaan  bermakna  (p<0.05)  antara kelompok  perlakuan  penundaan  36  jam  dan kelompok perlakuan penundaan 48 jam dengan nilai  p=0,000Hasil  penelitian  yang  dilakukan untuk mengetahui pengaruh penundaan 36 jam dan 48  jam  yang disimpan  pada  suhu 22-24 o C terhadap  nilai  APTT  pada  sampel  FFP  cair menunjukkan  signifikan  perbedaan  terhadap nilai  APTT  antara  kelompok  perlakuan penundaan  36  jam  dan  kelompok  perlakuan
penundaan  48  jam  dengan  kontrol  negatif (tanpa  penundaan).  Perbedaan  yang  terlihat mengindikasikan  adanya  pemanjangan  nilai APTT pada kelompok perlakuan penundaan 36 jam  dan  kelompok  perlakuan  penundaan  48 jam.  Sedangkan  nilai  APTT  pada  kontrol negatif  yang  tidak  dilakukan  penundaan menunjukkan  tidak  ada  pemanjangan  nilai APTT.  Penundaan  36  jam  dan  48  jam  yang dilakukan pada kelompok perlakuan, menyebabkan  nilai  APTT  memanjang.  Hal  ini disebabkan  karena  adanya  penundaan  waktu pemeriksaan  yang  akan  menghambat  aktifitas faktor-faktor pembekuan.
Menurut  Rahmah  dan  Chairunnissa
(2021) jangka waktu penundaan sampel plasma dengan  antikoagulan  CPD  ( Citrate  Phospate Dextrose )  untuk  penyimpanan  pada  22-24 o C pemeriksaan harus dilakukan maksimal dalam 2 jam.  Pemanjangan  APTT  merupakan  indikasi defisiensi salah satu faktor koagulasi atau dapat terjadi  karena  adanya  inhibitor  koagulasi (Ardina, et al ., 2020). APTT akan tetap terjaga apabila  FFP  disimpan  tidak  lebih  dari  24  jam (Palta, et al ., 2014).
Feng et  al. (2014)  menjelaskan  bahwa pengaruh waktu penyimpanan FFP antara 2 jam hingga  24  jam  pada  suhu  rendah  4 o C menghasilkan  ukuran  APTT  yang  berbeda.
Ukuran  rerata  APTT  terpanjang  adalah  pada lama  waktu  penyimpanan  24  jam  yaitu  33.4 detik.  Semakin  pendek  masa  penyimpanan makan  pendek  waktu  pengukuran  APTT. Dimulai dari 2 jam, 4 jam, 6 jam, 8 jam dan 12 jam penyimpanan adalah 28.4 detik, 29.1 detik, 29.7 detik, 29.7 detik dan 30.7 detik.
Kuantitas  faktor  koagulan  dan  jumlah kontaminan  bakteri  mempengaruhi  kualitas FFP  dan  menjadi  parameter  pengukuran penting. Kuantitas faktor koagulasi dapat dinilai dari  semua  kadar  faktor  koagulasi.  Adapun  10
© Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Maarif Hasyim Latif p-ISSN : 2548-8333 e-ISSN : 2549-2586
faktor  yaitu  faktor  I  (fibrinogen),  faktor  II (prothrombin), faktor V, faktor VII, faktor VIII, faktor  IX,  faktor  X,  faktor  XI,  faktor  XII  dan faktor  XIII.  Secara  umum,  kuantitas  faktor koagulasi  dalam  FFP  dapat  dinilai  dari  nilai APTT  dan  PPT  yang  menilai  jalur  koagulasi ekstrinsik  dan  jalur  intrinsik  (Isaacs et  al ., 2004).
Pemanjangan  dan  pemendekan  APTT dipengaruhi oleh kestabilan penyimpanan FFP, suhu,  waktu  penyimpanan  dan  ketepatan
pemipetan  reagen  yang  digunakan.  Reagensia disimpan  pada  suhu  2-8℃,  tidak  boleh dibekukan.  Vial  reagensia  yang  telah  dibuka stabil selama 14 hari (Zhao et al ., 2017). Hal ini menjelaskan  adanya  perbedaan  antara  kontrol pada  penelitian  ini  yang  menghasilkan  mean 37.3 detik dibandingkan dengan penelitian Feng et  al .  (2014)  dengan  28.4  detik  pada  waktu  2 jam penyimpanan
Tabel 1. Hasil Perbedaan Penundaan Sampel FFP ( Fresh Frozen Plasma ) Cair 36 jam dan 48 jam Terhadap Pemeriksaan APTT ( Activated Partial Thromboplastin Time ) No Pemeriksaan APTT Plasma 30 menit (detik) Plasma 36 Jam (detik) Plasma 48 Jam (detik) 1 30,3 42,9 60,7 2 34,2 45,3 81,7 3 25,9 33,7 50,1 4 36,3 43,0 53,9 5 33,7 39,8 47,2 6 29,6 35,6 44,3 7 41,1 42,7 50,0 8 38,9 40,2 42,9 9 40,5 40,9 45,2 10 34,1 40,7 56,1 11 35,2 38,2 40,8 12 37,5 35,7 41,9 13 40,4 40,2 47,0 14 38,9 38,7 40,2 15 39,2 39,9 43,2 16 45,6 46,7 57,1 17 43,9 45,3 55,8 18 44,2 42,7 54,2 19 38,2 40,2 52,1 20 37,5 44,3 55,8 21 37,2 43,9 57,1

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian yang dilakukan telah menunjukkan terdapat perbedaan  bermakna  (p<0.05)  hasil  APTT antara  plasma  30  menit  dengan  penundaan plasma  36  jam  dengan  nilai  p=0,000  antara plasma  30  menit  dengan  penundaan  48  jam
dengan p=0.00.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Terima  kasih  kepada  seluruh  staf laboratorium  Hematologi  Universitas  Maarif Hasyim atas kerja samanya dalam penelitian ini
© Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Maarif Hasyim Latif p-ISSN : 2548-8333 e-ISSN : 2549-2586

## DAFTAR PUSTAKA
Ardina,  R.,  Sartika,  F.,  dan Nainggolan, L. P.
2020. APTT (Activated
Partial
Thromboplastin  Time)  dan  (Prothrombin
Time)  pada  Penderita  Diabetes  Melitus Tipe  2  di  RSUD  dr.  Doris  Sylvanus Palangkaraya. Borneo Journal of Medical Laboratory  Technology , 2 (2):  125–129. https://doi.org/10.33084/bjmlt.v2i2.1384 Aridya,  N.  D.,  dan  Yuniarti,  E.  2023.  The Differences  Erythrocyte  and  Hemoglobin
Levels  of  Biology  Students  and  Sports Students  Universitas  Negeri  Padang. Jurnal Serambi Biologi , 8 (1): 38–43.
Fajriyani,  F.,  Eem,  H.,  Nina,  Marliana  dan Betty, N. 2019. Peranan Suhu Dan Lama Penyimpanan Fresh Frozen Plasma (FFP)
Cair  Terhadap  Nilai  Prothrombin  Time (PT). Jurnal  Riset  Kesehatan  Poltekkes
Depkes Bandung , 11 (1): 244–252. https://juriskes.com/index.php/jrk/article/ view/790
Feng, L., Zhao, Y., Zhao, H. dan Shao, Z. 2014. Effects of Storage Time and Temperature on Coagulation Test and Factors in Fresh Plasma.  Sci  Rep.  4(3868):  1-5  DOI: 10.1038/srep03868
Fernandes, H. D., Newton, S. dan Rodrigues, J.
M. 2018. Factor XII Deficiency
Mimicking Bleeding Diathesis: A Unique Presentation  and  Diagnostic  Pitfall. Cureus , 10 (6): 6–10.
https://doi.org/10.7759/cureus.2817
Isaacs, M. S., Scheuermaier, K. D., Levy, B. L.,
Scott,  L.  E., Penny,  C.  B., dan  Jacobson,
B.  F.  2004.  In  Vitro  Effects  of  Thawing Fresh-Frozen Plasma at Various Temperatures. Clinical  and  Applied Thrombosis/Hemostasis , 10 (2), 143– 148.https://doi.org/10.1177/1076029
60401000204
Kemenkes  RI.  2015.  Peraturan  Menteri
Kesehatan Republik Indonesia Nomor 91 Tahun  2015  Tentang  Standar  Mutu Pelayanan Trannfusi Darah, Kementerian Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta. Luo, Y., Ma, C., dan Yu, Y. 2022. Application of  fresh  frozen  plasma  transfusion  in  the management  of  excessive  warfarin- associated anticoagulation. Blood Science , 4 (2), 57–64. https://doi.org/10.1097/bs9.00000000000 00108 Merah, P., I., Banda, K., Fajarna, N., dan Sari,
W. 2023. Pengelolaan Komponen-
Komponen Darah di UTD . 11 (1), 1–12. Palta,  S.,  Saroa,  R.,  dan  Palta,  A.  2014. Overview  of  the  coagulation  system. Indian  Journal  of  Anaesthesia , 58 (5),
515–523. https://doi.org/10.4103/0019- 5049.144643
Rahmah,  W.  N.  dan  Chairunnissa,  A.  2021.
Pengaruh  Lama  Penyimpanan  Kantong Darah Terhadap Kadar Hemoglobin Pada Komponen  Whole  Blood  Di  Unit  Donor Darah  Pmi  Kota  Palangka  Raya Borneo Jurnal Of Medical Laboratory Teknology ,
4 (1), 242–248. Stainsby, D., MacLennan, S., dan Hamilton, P. J.  2000.  Management  of  massive  blood loss: A template guideline. British Journal of Anaesthesia , 85 (3), 487–491.
https://doi.org/10.1093/bja/85.3.487
Veera, R, Schneider, D dan Pickens, P.V., 2012. Fresh  Frozen  Plasma  (FFP)  Usage  and Appropratiateness  in  Adult  Medical  in- Patients: A Retrospective Audit.
Zhao, Y., Feng, G., Zhang, J., Gong, R., Cai, C., dan Feng, L. 2017. Effects of preanalytical frozen  storage  time  and  temperature  on screening  coagulation  tests  and  factors VIII  and  IX  activity. Scientific  Reports ,
7 (1), 1–9. https://doi.org/10.1038/s41598-
017-11777-x