## SKRINING FITOKIMIA DAN PENETAPAN KANDUNGAN FLAVONOID TOTAL EKSTRAK METANOLIK HERBA BOROCO (Celosia argentea L.)
Abd.Malik, Ferawati Edward, Risda Waris, Laboratorium Farmakognosi Fitokimia Universitas Muslim Indonesia abd.malik@umi.ac.id

## ABSTRACT
Phytochemical Screening and Determination of Total Flavonoids Content of Methanolic Extracts of Boroco Herbs (Celocia argentea L). Boroco plant is often used as a traditional medicine for anti inflammatory,  diuretic,  hypertension,  dysentery.  Chemical  constituents  in  boroco  herbs  (Celocia argentea L.)  are  alkaloids  and  flavanoids,  glycosides,  tannin  and  saponin  (2003)  .  Each  sample extraction using 96 % methanol of maceration method. Then performed to determine the class of phytochemical screening of active compounds are contained in the sample. Determination of total flavanoids done by chang et al method (2002) of Boroco herbs. Result of the study showed the total flavanoids content of methanolic extract of boroco herbs calculated as a rutin for 2.57%.
Keywords: Boroco (Celosia argentea L.), Rutin, Flavonoid Total
I. PENDAHULUAN Latar Belakang Boroco bernama latin Celosia argentea L., yang  termasuk  kedalam  family tumbuhan Amaranthaceae. Tanaman ini dikenal  dengan  nama-nama  daerah  seperti bayam  ekor  belanda,  bayam  kucing  (Bangun, 2012).
Tanaman Boroco ini adalah tumbuhan yang  tumbuh  tegak,  tingginya  sekitar  30-100 sentimeter,  sering  tumbuh  liar  di  sisi  jalan, pinggir  selokan,  tanah  lapang  terlantar. Batangnya bulat dengan alur kasar memanjang, bercabang  banyak,  warna  ijau  atau  merah. Daunnya berwarna hijau atau merah, berbentuk bulat  telur  memanjang,  ujung  lancip,  tepinya bergerigi  halus  hampir  rata.Bunganya  bulir panjang  3-10  sentimeter,  warna  merah  muda atau ungu, bijinya hitam cerah, bunga tumbuh di ujung-ujung cabang (Bangun, 2012).
Boroco biasa ditemukan liar di daerah berpasir yang basah, seperti di tepi selokan atau di  tepi  sungai,  tegalan,  kebun  dan  semak. Kadang  juga  dibudidayakan  sebagai  tanaman hias  atau  sayuran.  Asalnya  mungkin  dari Amerika,  tersebar  ke  cina  selatan,  Sri  lanka, India,  Afrika.  Di  Indonesia  dapat  ditemukan pada ketinggian 1-1.700  m di atas permukaan laut (Dalimartha, 2003).
Perbanyakan  tanaman  boroco  dapat dilakukan  dengan  biji  atau  setek.  Seluruh bagian  tanaman  boroco,  baik  segar  maupun
kering  dapat  digunakan  untuk  mengobati beberapa penyakit (Permadi, 2006).
Herba Boroco mengandung flavonoid dan  polifenol.  (Dalimartha,2003).  Senyawa flavonoid adalah senyawa polifenol dengan inti terdiri  dari  15  atom  karbon,  tersusun  atas  dua cincin  gugus  benzene  yang  dihubungkan menjadi satu oleh rantai linier yang terdiri dari 3  atom  karbon.  Flavonoid  umumnya  terdapat pada  tumbuhan  terikat  dengan  gula  sebagai glikosida (Sovia, 2006).

## II. METODE PENELITIAN A. Pengolahan Sampel
Bahan penelitian berupa herba, kemudian  dibersihkan  dengan  air  mengalir hingga  bersih,  lalu  dikeringkan pada  tempat yang  tidak  terkena  sinar  matahari  langsung, setelah itu dirajang dan diserbukkan.

## B. Metode Esktraksi
Serbuk  simplisia  ditimbang  300  gram kemudian dimasukkan dalam wadah maserasi. Cairan  pengekstraksi  metanol  sebanyak  1  L dimasukkan kedalam wadah maserasi, biarkan beberapa  jam  kemudian  tambahkan  1  L metanol  hingga  seluruh  serbuk  sampel terendam,  lalu  ditutup  rapat.  Wadah  maserasi disimpan  pada  tempat  yang  terlindungi  dari cahaya matahari langsung selama 5 hari sambil dilakukan  pengadukan  sesering  mungkin. Campuran  kemudian  disaring  dan  ampasnya
direndam lagi dengan cairan penyari yang baru. Proses penyarian selanjutnya dilakukan sebanyak  4  kali  dengan  metanol  setiap  kali sebanyak  2  L.  Ekstrak  cair  dikumpulkan kemudian  dipekatkan  dengan  menggunakan alat  Rotavapor  hingga  diperoleh  ekstrak metanol kental.
1. Skrining Fitokimia
a. Uji Alkaloid
Ditimbang  500  mg  serbuk simplisia,
Ditambahkan 1 mL asam klorida 2 N dan 9 mL aquadest, panaskan di atas tangas air selama 2 menit, dinginkan dan saring, pindahkan 3 tetes filtrat  pada  kaca  arloji, tambahkan  2  tetes larutan  Bouchardat (Jika  terdapat  endapan berwarna  cokelat  sampai  hitam,  maka  serbuk mengandung  alkaloid), tambahkan  2  tetes larutan  Mayer (Jika  terbentuk  endapan menggumpal berwarna putih atau kuning yang larut dalam metanol P, maka sebuk mengandung alkaloid).
b. Uji Flavonoid
 Larutan Percobaan Sari 0,5 g serbuk yang diperiksa atau sisa  kering  10  mL  sediaan  berbentuk  cairan, dengan  10  mL  metanol  P,  menggunakan  alat pendingin balik selama 10 menit. Saring panas melalui  kertas  saring  kecil  berlipat,  encerkan filtrat  dengan  10  mL  air.  Setelah  dingin tambahkan  5  mL  eter  minyak  tanah  P,  kocok hati-hati  diamkan.  Ambil  lapisan  metanol, uapkan  pada  suhu  40 o dibawah  tekanan.  Sisa dilarutkan dalam 5 mL etil asetat P, saring.
 Cara Kerja 1. Uapkan  hingga  kering  1  mL  larutan percobaan, sisa dilarutkan dalam 1 mL sampai  2  mL  etanol  (95%)  P, tambahkan  0,5  g  serbuk  seng  P  dan  2 mL asam klorida 2 N, diamkan selama 1  menit.    Tambahkan  10  tetes  asam klorida  pekat  P,  jika  dalam  waktu  2 menit  sampai  5  menit  terjadi  warna merah  intensif,  menunjukkan  adanya flavonoid (glikosida-3-flavonol). 2. Uapkan  hingga  kering  1  mL  larutan percobaan, sisa dilarutkan dalam 1 mL etanol  (95%)  P,  tambahkan  0,1  g serbuk magnesium P dan 10 tetes asam klorida  P,  jika    terjadi  warna  merah jingga sampai merah ungu, menunjukkan  adanya  flavonoid.  Jika terjadi
warna kuning jingga,
menunjukkan  adanya  flavon,  kalkon dan auron.
3. Uapkan  hingga  kering  1  mL  larutan percobaan,  basahkan  sisa  dengan aseton  P,  tambahkan  sedikit  serbuk halus  asam  borat  P  dan  serbuk  halus oksalat  P,  panaskan  hati-hati  diatas tangas air dan hindari pemanasan yang berlebihan. Campur sisa yang diperoleh dengan 10 mL eter P. Amati dengan  sinar  UV  366  nm,  larutan berfluorosensi kuning
intensif,
menunjukkan adanya flavonoid.
c. Uji Glikosida
 Larutan Percobaan
Sari filtrat 3 kali, tiap kali dengan 20 mL  campuran  3 bagian  volume  kloroform  P dan  2  bagian  volume  isopropanol  P.  Pada kumpulan  sari  tambahkan  natrium  sulfat anhidrat P, saring, dan uapkan pada suhu tidak lebih  dari  50 o .  Larutan  sisa  dengan  2  mL metanol P.
 Cara Percobaan 1. Uapkan  0,1  mL  larutan  percobaan  di atas  tangas  air,  larutkan  sisa  dalam  5 mL asam asetat anhidrat P. Tambahkan 10  tetes  asam  sulfat  P,  terjadi  warna biru  atau  hijau  menunjukkan  adanya glikosida (reaksi Liebermann
Burchard).
2. Masukkan  0,1  mL  larutan  Percobaan dalam  tabung  reaksi,  uapkan  di  atas tangas  air.  Pada  sisa  tambahkan  2  mL air dan 2 tetes Molish LP. Tambahkan hati-hati  2 mL asam sulfat P, terbentuk cincin  berwarna  ungu  pada  batas cairan,  menunjukkan  adanya  ikatan gula (reaksi Molish).
d. Uji Saponin
Masukkan  0,5  g  serbuk  kedalam tabung reaksi, tambahkan  10  mL  air  panas, dinginkan dan kocok kuat-kuat selama 10 detik jika  zat  yang  diperiksa  berupa  sediaan  cair, encerkan 1 mL sediaan, tambahkan 10 mL air dan  kocok  kuat-kuat  selama  10  menit, terbentuk  buih  yang  mantap  selama  tidak kurang dari 10 menit, setinggi 1 cm sampai 10 cm. Pada penambahan 1 tetes asam klorida 2 N, buih tidak hilang.

## e. Uji Tanin (Fransworth, 1966)
Sejumlah  200  mg  ekstrak  kental dilarutkan  dalam  5  mL  air  suling  panas  dan diaduk. Setelah  dingin  disentrifugasi  dan
bagian  cairan  didekantisir  dan  diberi  larutan NaCl 10% kemudian disaring. Filtrat sebanyak masing-masing  1  mL  dikerjakan  sebagai berikut ;
a. Tambahkan 3 ml larutan gelatin 10% dan diperhatikan endapannya.
b. Tambahkan  2  tetes  larutan  FeCl 3, dan diperhatikan  terjadinya perubahan  warna menjadi hijau violet.
c. Ditambahkan  3  mL  larutan  NaCl-gelatin (gelatin 1% dalam larutan NaCl 10%) dan diperhatikan adanya endapan.
2. Penentuan Kandungan Flavonoid Total (Chang et al, 2002).
Ekstrak  sebanyak  10  mg  dilarutkan dalam 10 mL metanol, diambil 1 mL kemudian ditambahkan  3  mL  metanol,  0,2  mL  AlCl3 10%,  0,2  mL  kalium  asetat,  5,6  mL aqubedistilata,  simpan  30  menit  pada  tempat gelap dengan suasana suhu kamar, absorbansinya  di  ukur  pada  spektrofotometri UV-Vis  dengan  panjang  gelombang 415  nm. Kadar  flavonoid  total  dinyatakan  dalam  gram rutin equivalen (RE).

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Hasil Penelitian
Tabel  1. Hasil  Skrining  Fitokimia  dari  Herba
Buroco Skrining Fitokimia Sampel Uji alkaloid + Uji flavonoid + Uji glikosida + Uji saponin + Uji tannin + Tabel  2. Hasil  pengukuran  absorbansi  larutan standar rutin Konsentrasi (ppm) Absorbansi 2 1,023 4 1,338 8 1,735 10 1,89
Gambar 2. Kurva kalibrasi rutin pada panjang gelombang 415 nm Tabel  3.  Hasil  pengukuran  kadar  flavonoid

## total
Sampel Absorbansi Konsentrasi Flavonoid Total Ekstrak herba boroco 1,895 25,71 2,57

## B. Pembahasan
Tanaman  herba  Boroco  (Celosia argentea L) dikumpulkan kemudian dilakukan proses pencucian, sortir basah dan kering untuk mendapatkan simplisia. Tanaman herba Boroco  (Celosia  argentea L)  dikeringkan dengan  cara  dijemur  ditempat  yang  tidak terkena sinar matahari langsung. Setelah kering sampel  diserbukkan.  Kemudian  dilakukan ekstraksi  dengan  metode  maserasi.  Metode maserasi  dipilih  dalam  penelitian  ini  karena merupakan metode yang mudah dilakukan dan menggunakan alat-alat sederhana, yaitu cukup dengan  merendam  sampel  dalam  pelarut (Voigt, 1995).
Pelarut yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  metanol.  Digunakan metanol  karena  pelarut  ini  dapat  melarutkan hampir semua senyawa organik yang ada pada sampel,  mudah  menguap  sehingga  mudah dibebaskan  dari  ekstrak  (Andayani, et  al. 2008). Rendaman pada saat maserasi disimpan ditempat  yang  terlindungi  dari  cahaya,  hal  ini dilakukan  untuk  mencegah  reaksi  yang dikatalisis cahaya  atau  mencegah  terjadinya perubahan warna (Voigt, 1995).
Setelah didapatkan ekstrak, dilakukan skrining fitokimia untuk menentukan golongan senyawa  aktif  dari  tanaman  ini. Skrining fitokimia  merupakan  cara  sederhana  untuk
0 2 4 6 8 10 12 0.000 0.500 1.000 1.500 2.000 Ab so rb an si Konsentrasi (ppm) Rutin Series2 y=0.875+0.107 r = 0.992
melakukan  analisis kualitatif  kandungan senyawa yang terdapat dalam tumbuhan. Pada penelitian  ini  skrining  yang  dilakukan  adalah uji  alkaloid,  uji  flavanoid,  uji  saponin,  uji tannin,  dan  uji  glikosida.  Karena  uji-uji tersebut  sudah  mewakili  beberapa  golongan senyawa yang terdapat dalam tanaman.
Hasil  skrining  fitokimia  dari  herba boroco (Celosia  argentea L)  pada tabel  1 menunjukkan positif (+) untuk uji alkaloid, uji flavonoid,  uji  tannin,  uji  saponin  dan  uji glikosida.  Hasil  tersebut  berbeda  dengan literatur yang mendapatkan hasil negatif (-) uji glikosida.
Analisa  kandungan  flavonoid  total pada penelitian ini dilakukan dengan menggunakan  larutan  standar  rutin  dengan konsentrasi (µg/mL) 2, 4, 8, dan 10 pada tabel 2 berturut-turut  menghasilkan  absorbansi
1,023,  1,338,  1,734,  1,89  dengan  warna  yang dihasilkan adalah warna kuning. Senyawa rutin adalah  zat  padat,  berwarna  kuning  dan  larut dalam  air,  tetapi  rutin  ini  lebih  banyak  larut dalam  air  dibandingkan  aglikon  kuersetin (Fitria, 2007).. Semakin  tinggi  konsentrasi yang  digunakan,  maka  semakin  pekat  warna kuning  yang  akan  dihasilkan. Digunakan larutan  standar  rutin  karena  kebanyakan flavonoid yang paling sering ditemukan dalam tanaman  dalam  bentuk  glikosida  seperti kuarsetin 3-rutinosida (Harbone, 1998).
Berdasarkan  Gambar  1  dapat  dilihat bahwa  kurva  kalibrasi  dengan  persamaan regresi  untuk  absorbansi  rutin  sebesar  y  = 0.875+0.107. Larutan standar senyawa flavonoid  diperoleh  hubungan  yang  linear antara  absorbansi  dengan  konsentrasi  pada pengukuran  absorbansi  yang  ditunjukkan dengan  nilai  koefisien  korelasi  sebesar  0.992 Nilai (r).
Absorbansi  ekstrak  metanol  herba boroco  sebanyak  1,895.  Dari  nilai  absorbansi tersebut dapat diketahui  konsentrasi  flavonoid dari  ekstrak  metanol  herba  boroco  dengan menggunakan persamaan regresi menghasilkan konsentrasi  (mg/L)  sebesar  25,71.  Untuk pengukuran kadar flavonoid total ekstrak herba boroco diawali  dengan  pembuatan  larutan standar  rutin,  ditimbang  2,5  mg  rutin  dan dilarutkan  dalam  10  mL  methanol  pa menghasilkan 1000 ppm. Larutan standar rutin dibuat  menjadi  beberapa  konsentrasi  (ppm) yaitu  2,  4,  8  dan  10.  Ini  dimaksudkan  untuk mengurangi  ketidakpastian  analisa  sehingga ketelitian akan meningkat (Wiryawan, 2008).
Masing-masing konsentrasi rutin dipipet  1  mL  dan  di  reaksikan  dengan  3  ml metanol  yang  berfungsi  sebagai  peningkat kelarutan,  ditambah  0,2ml  AlCl 3 10%  yang berfungsi  untuk  memberikan  efek  batokromik yaitu  menggeser  ke  panjang  gelombang  yang lebih  tinggi  dan  terjadi  juga  peningkatan intensitas  larutan  standar  rutin  menghasilkan warna yang lebih kuning sehingga reaksi warna yang  terbentuk  dapat  diamati  dengan  mata telanjang dan dapat diukur pada spektrofotometri UV-Vis. Kemudian ditambahkan  0,2  ml  kalium  asetat  yang berfungsi sebagai penstabil agar efek batokromik  yang  terjadi  dapat  dipertahankan. Lalu  ditambahkan  5,6  ml  aquabidestilata, menghasilkan  warna  kuning.  Didiamkan  pada suhu  kamar  dalam  keadaan  gelap  selama  30 menit  agar  reaksi  antara  larutan  standar  rutin dengan  pereaksi-pereaksi  dapat  berlangsung sempurna.
Pada  pengukuran absorbansi  sampel, ditimbang 10 mg ekstrak dan dilarutkan dengan 10ml methanol pa lalu dipipet 1ml dari larutan sampel dan ditambahkan 3 ml methanol, 0,2 ml AlCl3  10%,  0,2  ml  kalium  asetat  dan aquabidestillata. Kemudian diukur absorbansinya  dengan  spektrofotometri  UV- Vis pada panjang gelombang 415 nm.
Hasil tersebut dimasukan dalam rumus, penentuan  kadar  flavonoid  total  berdasarkan tesis (Malik, 2011) yaitu:
Konsentrasi x Vol.Ekstrak x 100 flavonoid total =
Berat ekstrak Hasil  yang  diperoleh  pada tabel  3 dari penentuan  kadar  flavonoid  total  dalam  estrak metanol herba boroco yaitu 2,57%.

## IV. KESIMPULAN
Dari  hasil  penelitian  yang  telah dilakukan  ,  dapat  diambil  kesimpulan  bahwa kadar  flavonoid  total  pada  ekstrak  metanol herba boroco (Celosia argentea L ) yaitu 2,57 %.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Ahmad, S.A., 1980. Kimia Organik Bahan Alam. Penerbit Kurnia : Jakarta.
2. Andayani,  Yovita  dan  Maimunah.  2008. Penentuan  Aktivitas  Antioksidan,  Kadar Fenolat  Total  dan  Likopen  pada  Buah Tomat (Solanum  lycopersicum L). Jurnal
Sains  dan  Teknologi  Farmasi.  UNAND: Padang.
3. Bangun,  Abednego.  2012. Ensiklopedia Tanaman  Obat  Indonesia. Indonesia Publishing House. 2012.
4. Chang, C. Yang, M. Wen, H. and Chern J. 2002.Estimation of total flavonoid content in  Propolis  by  two  complementary colorimetric methods.J . FoodDrug A.
5. Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan,  1979. Farmakope  Indonesia Edisi  III. Departemen  Kesehatan  RI  : Jakarta.
6. Direktorat  Jendral  Pengawasan  Obat  dan Makanan.1995 Farmakope Indonesia Edisi  IV.Departemen    Kesehatan  RI, Jakarta.
7. Direktorat  JendraI.Pengawasan  Obat  dan Makanan.  2000. Parameter  Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat.
Departemen  Kesehatan RI, Jakarta.
8. Dalimartha,S. 2003. Altas Tumbuhan Obat Indonesia  Volume  3. Niaga Swadaya. Jakarta.
9. Fitria.  2007. Isolasi  dan  Identifikasi Senyawa Flavonoid Dalam Daun Paliasa. Universitas Hasanuddin : Makassar.
10. Harborne,  J.B. 1987. Metode  Fitokimia  : Penuntun  cara  modern  menganalisa tumbuhan.  Terbitan  Kedua.  Terjemahan Kosasih Padmawinata dan Iwang Soediro. ITB : Bandung.
11. Hendayana  S.  1997. Kimia  analisis instrument. ikip semarang press.
12. Markham,
K.R. 1998. Cara Mengindentifikasi Flavonoid,  terjemahan
K. Radmawinata, Penerbit ITB : Bandung.
13. Martawijaya,M. 1989.
Atlas Kayu Indonesia. Jilid 3. Departemen Kehutanan. Badan Penelitian Dan Pengembangan Kehutanan : Bogor.
14. Miller  AL.  1996. Antioxidant  flavonoids: structure, function, and clinical usage. Alt
Med Rev 1
15. Mujahid.2011.TESIS  pemilihan  metode analisis  flavonoid  secara  spektroskopi UV-Vis  serta  penerapannya  pada  seledri (apium graviolens L) murbei (morus alba
L),  patikan  kebo  (euphorbia hirta L)  dan jeruk  nipis  (citrus  aurantifolia).Program pascasarjana program studi ilmu farmasi.fakultas
farmasi.UGM.
Yogyakarta.
16. Nugroho, A.E;  Malik,  A  and  Promono, S.2013. Total  Phenolic  And  Flavonoid Contents,  And  In  Vitro  Antihypertension Activity  Of  Purified  Extract  Of  Indonesia
Cashew Leaves. International food research journal. 20(1):299-305.
17. Sastrohamidjojo,
Hardjono. 1985. Kromatografi. Yogyakarta  :  Liberty yogyakarta.
18. Sovia,L.  2006. Senyawa  Flavonoida, Fenilpropanoida,  dan  Alkaloida[Karya Ilmiah].  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu Pengetahuan  Alam.  Universitas  Sumatera Utara : Medan.
19. Underwood  AL.1996. analisa  kimia kuantitatif,ed IV.erlangga.jakarta
20. Wildah,Dj.  2001. Isolasi  dan  Identifikasi Flavonoid Pada Daun Kemuning
[Skripsi]. Jurusan Farmasi Fakultas MIPA. Universitas Hasanuddin : Makassar.
21. Wiryawan  A,  dkk.  2008. Kimia  Analitik. Departemen Pendidikan Nasional : Jakarta.