THE EFFECT OF NANOCHITOSAN FROM RHINOCEROS BEETLE (Xylotrupes gideon) TOWARDS GIC

## SURFACE ROUGHNESS ON CRITICAL pH OF THE SALIVA
Deviyanti Pratiwi*, Gabriel Rainheart Genesis**, Komariah***, Rosalina Tjandrawinata****

## ABSTRACT
Background: Xylotrupes gideon  is a harmful  insect  because  it  damages the shoots of coconut trees. Xylotrupes gideon has begun to be used in the form of nanochitosan  as  an  alternative  in  dentistry.  The  addition  of  nanochitosan  to Glass  Ionomer  Cement  (GIC)  material  is  a  modification  to  improve  the properties  of  GIC,  such  as  surface  roughness  caused  by  acidic  conditions (critical saliva pH). Nano-sized chitosan is able to increase stability and better absorption,  thus  inhibit  demineralization  and  increase  tooth  hardness.  This research  aimed  to  investigate  the  effect  of  nanochitosan  from  Xylotrupes gideon on the surface roughness of GIC at critical saliva pH.
Method: This research type conducted is an experimental laboratory. Samples of 10 mm (height) x 2 mm (diameter) divided into 2 groups, (A) Unmodified GIC (control group), (B) GIC modified with 10% nanochitosan solution. Samples of the treatment and control group are stored in the incubator at 37 0 C for 1 hour before early surface roughness testing and continued in critical saliva pH (5,5) for 7 days in the incubator before the final test. The surface roughness tester using sutrotonic s-100 series.
Result: There was an increase in the surface roughness of conventional GIC by 0.133 µm and GIC nanochitosan by 0.122 µm. The results of the paired t- test  before  and  after  immersion  in  the  two  groups  showed  that  there  was  a significant  difference  (p  <0.05)  between  conventional  GIC  and  nanochitosan GIC.  The  independent  t-test  results  showed  that  there  was  no  significant difference (p> 0.05) between the nanochitosan GIC and conventional GIC. Conclusion: Nanochitosan can reduce the surface roughness value of GIC at critical saliva pH, although there is no significant difference to conventional GIC.

## PENDAHULUAN
Semen  Ionomer  Kaca  (SIK)  masih  menjadi pilihan  untuk  bahan  restoratif  karena  sifat  dan karakteristiknya.  SIK  terbentuk  dari  reaksi  asam polimer  lemah  dengan  cairan  yaitu  bubuk  kaca kalsium  fluoroaminosilikat  dan  larutan  asam poliakrilat yang memiliki sifat berikatan baik dengan struktur gigi, biokompatibel dengan keadaan pulpa, dan  melepaskan  fluor. 1 SIK  memiliki  beberapa kelemahan sebagai bahan restorasi seperti rentan
terhadap  kelembaban  pada  saat setting ,  waktu kerja  yang  lama,  mudah  larut  dalam  air  yang berdampak  terhadap  kekerasan  dan  daya  tahan dari  permukaan  restorasi. 2 Sifat  larutnya  suatu bahan  yang  kurang  baik  dapat  mempengaruhi kekasaran permukaan dari SIK. 3
Kekasaran permukaan menentukan kualitas dari  bahan  restorasi.  Kekasaran  permukaan  pada bahan  restorasi  dapat  menyebabkan  perubahan warna pada tumpatan dan akumulasi plak gigi yang
*Departement of Dental Material, Faculty of Dentistry, Trisakti University, Indonesia **Undergraduate Student, Faculty of Dentistry, Trisakti University, Indonesia ***Departement of Biology Oral, Faculty of Dentistry, Trisakti University, Indonesia ****Departement of Dental Material, Faculty of Dentistry, Trisakti University, Indonesia
Correspondence : dvyanti88@gmail.com
Keywords: Glass ionomer cement, Nanochitosan, Xylotrupes gideon, Surface roughness
jika  tidak  ditangani  dalam  jangka  panjang  dapat mengakibatkan  kerusakan  gigi  serta  jaringan pendukungnya. 4 Permukaan yang kasar menyebabkan retensi dan proliferasi dari berbagai mikroorganisme yang menimbulkan masalah pada rongga  mulut  dan  penyakit  periodontal. 1 SIK merupakan bahan restorasi yang digunakan dalam jangka waktu lama dalam rongga mulut dan dapat mengalami perubahan pada kekasaran permukaan karena  kontaminasi  dari  saliva  maupun  asam, sehingga  perlu  dilakukan  evaluasi  terhadap  nilai kekasaran  permukaan.  Parameter  pengukuran yang  digunakan  adalah  kekasaran  rata-rata  garis tengah (Ra). Menurut Bollen (2017), nilai kekasaran permukaan  kritis  untuk  kolonisasi  bakteri  dari bahan restorasi berada di angka 0 ,2 μm. Jika nilai kekasaran permukaan di atas angka 0,2 μm maka berpotensi  meningkatkan  perlekatan  bakteri  dan plak gigi yang dapat meningkatkan risiko karies. 5
Saliva  merupakan  salah  satu  asam  yang terdapat dalam rongga mulut. Semakin rendah nilai pH  saliva  maka  kandungan  asam  dalam  larutan saliva  lebih  banyak,  sebaliknya  jika  nilai  pH  saliva tinggi  maka  kandungan  basa  dalam  larutan  saliva yang lebih banyak. 6 Perubahan dari pH saliva dapat dipengaruhi  beberapa  faktor  seperti  diet,  stimulasi sekresi  saliva,  dan  aktivitas  oral  mikroorganisme. Perubahan  dari  pH  saliva  secara  berulang  dapat mempengaruhi struktur gigi dan bahan restorasi. 7 Kitosan adalah biomaterial dalam kedokteran gigi yang didapatkan dari cangkang kepiting, udang dan  serangga  melalui  proses  deasetilasi  alkalin kitin. Salah satu serangga yang dapat dimanfaatkan  menjadi  kitosan  adalah  kumbang tanduk (Xylotrupes  gideon) .  Serangga  jenis  ini dianggap  merugikan  karena  merusak  pucuk tanaman kelapa, untuk memanfaatkan kerugian ini maka diolah menjadi kitosan. 8 Kitosan merupakan basa  lemah  dan  tidak  mudah  larut  dalam  air  dan pelarut  organik,  namun  dapat  larut  dalam  cairan
yang  asam  seperti  asam  asetat.  Penambahan kitosan  sebesar  10%  v/v  pada  larutan  SIK ditemukan dapat menurunkan kekasaran permukaan  jika  dibandingkan  SIK  konvensional pada
perendaman minuman isotonik. 9
Pengembangan  kitosan  menadi  bentuk  nano  juga dapat  meningkatkan  fungsi  dari  kitosan  yaitu menghambat demineralisasi email. 10
Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk mengetahui pengaruh nanokitosan kumbang tanduk  ( Xylotrupes  Gideon) terhadap  kekasaran permukaan SIK pada pH saliva kritis (5,5) dengan perendaman pada suhu 37 o C selama 7 hari.

## METODE PENELITIAN
Desain  penelitian  ini  adalah  eksperimental laboratorik dengan rancangan pretest dan posttest control design untuk melihat pengaruh nanokitosan kumbang  tanduk (Xylotrupes  gideon) terhadap kekasaran  permukaan  SIK  pada  pH  saliva  kritis (5,5).  Penelitian  ini  menggunakan  semen  ionomer kaca  GC  Fuji  Tipe  IX (GC  corporation,  Tokyo, Japan) .  Larutan  nanokitosan  dicampur  dengan liquid SIK (GC  IX  High  Strength  Posterior Restoration) dalam  rasio  10%  v/v.  Jumlah  sampel yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  berjumlah  12 sampel  dengan  diameter  10  mm  x  2  mm  yang terbagi  atas  2  kelompok.  Kelompok  1  merupakan kelompok  SIK  konvensional  (kelompok  kontrol) yang terdiri atas 6 sampel, kelompok 2 merupakan kelompok  SIK  modifikasi  nanokitosan  kumbang tanduk (Xylotrupes  gideon) yang  terdiri  atas  6 sampel.
Penelitian  diawali  dengan  mengencerkan larutan  nanokitosan  kumbang  tanduk  dengan konsentrasi  3000  ppm  menjadi  konsentrasi  200 ppm  dengan  menggunakan  air  tanpa  mineral. Larutan nanokitosan dengan konsentrasi 200 ppm diambil  sebanyak  0,3  mL  dan  ditambahkan  ke dalam 2,7 mL liquid SIK untuk mendapatkan larutan
nanokitosan dengan konsentrasi 10% v/v.
Kemudian  larutan  nanokitosan  dan liquid SIK dicampur hingga homogen sebelum digunakan.
Pembuatan  sampel  dilanjutkan  dengan mengoleskan vaseline pada mould dengan ukuran 10  mm  x  2  mm.  Kemudian  bubuk  SIK  ditimbang sebanyak  0,6  gram  dan liquid SIK  sebanyak  0,3 gram  untuk  membuat  sampel.  Pengadukan dilakukan  dengan  membagi  bubuk  menjadi  2 bagian,  bagian  pertama  diaduk  dengan liquid selama  20  detik  dan  dilanjutkan  dengan  bagian kedua  selama  10  detik.  Setelah  sampel  diaduk hingga homogen, kemudian sampel dimasukkan ke dalam mould
menggunakan plastic filling .
Permukaan sampel ditutup dengan mylar strip dan glass  plate serta  diberi  pemberat  1  kg.  Sampel dibiarkan  mengeras  selama  5  menit,  kemudian pemberat, glass  plate dan mylar  strip dilepas.
Sampel  dikeluarkan  dari mould ,  lalu  dilakukan pengukuran menggunakan jangka sorong.
Sampel  yang  sudah  dibuat  disimpan  dalam inkubator  bersuhu  37 o C  selama  24  jam  sebelum dilakukan  uji  kekasaran  permukaan  awal.  Setelah dilakukan  uji  kekasaran  permukaan  awal,  maka dilanjutkan dengan perendaman sampel dalam pH saliva  kritis  selama  7  hari  di  dalam  inkubator bersuhu  37 o C  dan  dilakukan  uji  kekasaran permukaan  akhir.  Saliva  yang  digunakan  adalah saliva  buatan  dengan  komposisi  NaCL,  KSCN, NaHCO 3 , KCL, Na 2 HPO 4 , KH 2 PO 4 dan memiliki pH 5,5 untuk mensimulasikan keadaan pH saliva kritis di  dalam  rongga  mulut.  Pengujian  kekasaran permukaan dilakukan dengan menggunakan surface  roughness  tester  merk  sutrotonic  s-100 series.
Gambar  1. Detektor surface  roughness  tester sutrotonic s-100 series diletakkan pada sampel
Gambar 2. Hasil uji kekasaran permukaan menggunakan surface roughness tester sutrotonic s- 100 series.

## HASIL PENELITIAN
Data hasil penelitian yang diperoleh menunjukkan  nilai  rata-rata kekasaran  permukaan akhir  dari  sampel  SIK  konvensional  dan  SIK nanokitosan mengalami peningkatan setelah perendaman  pada  pH  saliva  kritis  (5,5)  selama  7 hari.  Nilai  peningkatan  kekasaran  permukaan diperoleh  dari  selisih  nilai  kekasaran  sesudah perendaman  dikurangi  nilai  kekasaran  sebelum perendaman.  Nilai  peningkatan  kekasaran  pada kelompok  SIK  konvensional  sebesar  0,133±0,038 µ m dan SIK nanokitosan sebesar 0,122±0,053 µ m
Gambar 3. Grafik hasil uji kekasaran permukaan
Tabel 1. Uji paired t-test kekasaran permukaan SIK konvensional dan SIK nanokitosan sebelum dan sesudah perendaman selama 7 hari dalam pH saliva kritis (p<0,05) Perlakuan N Rata-rata kekasaran permukaan ± SD (µ m) P Sebelum Sesudah Selisih SIK Konvensional 6 0,389 ± 0,100 0,522 ± 0,086 0,133 ± 0,038 0,001 SIK Nanokitosan 6 0,438 ± 0,104 0,561 ± 0,071 0,122 ± 0,053 0,004
Tabel 2. Uji independent t-test kekasaran permukaan SIK konvensional dan SIK modifikasi nanokitosan setelah perendaman selama 7 hari (p>0,05) Perlakuan N Selisih rata-rata kekasaran permukaan ± SD (µ m) P SIK Konvensional 6 0,133 ± 0,038 0,713 SIK Nanokitosan 6 0,122 ± 0,053
Berdasarkan  hasil  uji paired  t-test (tabel  1) dengan  tingkat  kemaknaan  p<0,05  yang  artinya terdapat  perbedaan  bermakna,  ditemukan pada kelompok SIK konvensional nilai p=0,001 (p<0,05) dan  SIK  nanokitosan  didapatkan  nilai  p=0,004 (p<0,05), artinya terdapat perbedaan yang bermakna  pada  SIK  konvensional  maupun  SIK nanokitosan (Xylotrupes  gideon) sebelum  dan sesudah perendaman dalam pH saliva kritis selama
7 hari.
Berdasarkan  hasil  uji independent  t-test (tabel  2) dengan  tingkat  kemankaan  p<0,05  yang artinya  terdapat  perbedaan  bermakna,  didapatkan nilai p sebesar 0,713 (p>0,05) artinya tidak terdapat perbedaan bermakna antara SIK konvensional dan SIK nanokitosan yang telah dilakukan perendaman pada pH saliva kritis.  Sehingga dapat disimpulkan bahwa  penambahan  nanokitosan  terhadap  SIK
SIK Konvensional SIK Nanokitosan Sebelum 0,389 0,438 Sesudah 0,522 0,561 Selisih 0,133 0,122
0,389 0,438 0,522 0,561 0,133 0,122 0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6
tidak  memberikan  perbedaan  bermakna  terhadap kekasaran permukaan pada perendaman pH saliva kritis selama 7 hari.

## DISKUSI
Keadaan  asam  dalam  rongga  mulut  yang berubah-ubah  dapat  menyebabkan  potensi  erosif terhadap kekasaran permukaan gigi ataupun bahan restorasi. 12 Faktor yang mempengaruhi perubahan pH  saliva  salah  satunya  adalah  diet  karbohidrat. Diet karbohidrat dapat mempercepat demineralisasi email gigi, atau menghasilkan asam melalui  proses  glikolisis  yang  dapat  menurunkan pH  saliva  menjadi  kritis. 8 Saliva  membutuhkan waktu sekitar 30 menit hingga 2 jam untuk kembali ke  pH  normal  tergantung  dari  faktor  diet  yang dikonsumsi. 13 Kekasaran permukaan yang diakibatkan pH saliva asam dapat berdampak pada perubahan warna, retensi plak dan mikroorganisme hingga penyakit gingiva dalam rongga mulut. 8,12
Pada penelitian ini, nilai kekasaran permukaan sebelum perendaman SIK
konvensional  adalah  0,389 ± 0,100 µ m  dan  SIK nanokitosan  adalah  0,438 ± 0,104 µ m.  Setelah perendaman terjadi peningkatan kekasaran permukaan pada kedua kelompok perlakuan. Nilai kekasaran permukaan pada SIK setelah perendaman dalam pH saliva kritis ditemukan lebih tinggi. Hal ini juga terlihat pada uji paired t-test pada kedua  kelompok  yang  menunjukkan  terdapat perbedaan bermakna (p<0,05) pada kelompok SIK konvensional dan SIK nanokitosan setelah perendaman  dalam  pH  saliva  kritis.  Hal  ini menujukan bahwa pH saliva kritis dapat menyebabkan  peningkatan  kekasaran  permukaan pada  kedua  kelompok.  Hasil  yang  diperoleh  ini sesuai  dengan  penelitian  Viona  (2016)  yang menyatakan  bahan  restorasi  yang  terpapar  asam dapat  membentuk  porus  dan  menyebabkan kekasaran permukaan. Nilai kekasaran permukaan
awal SIK adalah 0,5363 µ m dan nilai akhir 0,6368 µ m setelah perendaman dalam pH 2,9. 3 Penelitian Salma  (2019)  juga  menyatakan  bahwa  kekasaran permukaan  tertinggi  didapatkan  ketika  bahan restorasi  berada  dalam  pH  saliva  kritis. 10 Nilai kekasaran  permukaan  SIK  juga  akan  meningkat apabila terpapar dengan larutan asam seperti pada minuman  isotonik  (pH  2,9)  karena  larutan  asam menyebabkan  terlarutnya  ion-ion  dari  SIK  yang akan membentuk porus sehingga terjadi peningkatan kekasaran permukaan. 3
Media penyimpanan sampel  SIK juga dapat mempengaruhi  kekasaran  permukaan.  Penelitian terbaru menyatakan bahwa, SIK konvensional yang direndam pada air suling dengan suhu 37 o C selama 24 jam mengalami peningkatan kekasaran permukaan, hal ini berbanding terbalik dengan SIK modifikasi resin yang tidak mengalami peningkatan kekasaran  permukaan  saat  perendaman  pada  air suling  maupun  saliva  buatan. 11 Faktor  lain  yang menyebabkan  peningkatan  kekasaran  permukaan adalah faktor mekanis dan kimiawi yang didapatkan dari pH saliva dan minuman berkarbonasi. Hasil uji statistik menunjukkan bahwa perendaman minuman berkarbonasi dengan pH 2,5 dalam waktu tertentu dapat mempengaruhi kekasaran permukaan  dari  SIK.  Kekasaran  permukaan  yang meningkat  diakibatkan  oleh  pH  rendah  yang menyebabkan erosi pada permukaan SIK dan sifat korosif pada minuman berkarbonasi menyebabkan kelarutan pada ion SIK. 14
SIK  telah  banyak  mengalami  modifikasi untuk  memperbaiki  sifat  mekanis,  fisik  maupun kimiawi  seperti  penambahan  resin,  zirkonia, stronsium  oksida,  silika,  nanokristal,  zirkonomer karbomer  hingga  kitosan.  Hasil  modifikasi  pada bahan  SIK  dapat  memperbaiki  sifat  SIK  sehingga dapat  digunakan  sebagai  restorasi  gigi  posterior, anterior pada gigi tetap maupun pada gigi sulung. 15
konvensional memiliki kekasaran permukaan yang lebih  tinggi  dibandingkan  Semen  Ionomer  Kaca Modifikasi  Resin  (SIKMR),  modifikasi  perak maupun  modifikasi  larutan.  Selain  itu,  modifikasi SIK nanokitosan 10% dapat meningkatkan kekuatan  tekan,  kekuatan  lentur,  ketahanan  aus dan  pelepasan  fluor  yang  lebih  tinggi  jika dibandingkan dengan SIK konvensional.
Pada pemeriksaan SEM ( Scanning Electron Microscope )  diperoleh  bahwa  permukaan  SIK konvensional memilki rongga dan retakan, terlepas dari  perbedaan  nilai  kekasaran  permukaan,  pola permukaan  seperti  ini  juga  ditemukan  pada pemeriksaan  SEM  untuk  bahan  lainnya.  Faktor yang menyebabkan terjadinya retakan adalah saat pemrosesan  sampel  untuk  pengujian  SEM, sedangkan  rongga  dapat  tercipta  ketika  proses pencampuran bubuk dan cairan dari SIK. 11
Pada  penelitian  ini  dilakukan  penambahan nanokitosan  kumbang  tanduk (Xylotrupes  gideon) kedalam  larutan  SIK,  dan  didapatkan  bahwa  nilai peningkatan kekasaran permukaan SIK nanokitosan  (0,122±0,053 µ m)    lebih  rendah dibandingkan  SIK  konvensional  (0,133±0,038 µ m).
Kitosan dalam bentuk nano mempunyai ukuran 10- 1000  nm  sehingga  menunjukkan  hasil  modifikasi yang lebih efektif dengan stabilitas yang lebih baik, dan  juga  sitotoksisitas  yang  rendah.  Penelitian Sundari (2016), juga menyatakan bahwa penambahan  larutan  kitosan  10%  v/v  dapat menurunkan  kekasaran  permukaan  SIK  jika dibandingkan  dengan  kekasaran  permukaan  SIK konvensional.  Peningkatan  ketahanan  kitosan terhadap  asam  diduga  karena  gugus  amina  dan gugus  hidroksil  yang  memiliki  reaksi  kimia  tinggi. Gugus  amina  yang  dimiliki  kitosan  bermuatan positif  sehingga  mampu  menarik  molekul  yang bermuatan  parsial  negatif.  Muatan  positif  ini menyebabkan  gugus  amina  dan  hidroksil  pada kitosan  berikatan  dengan  gugus  hidroksil  dan
karboksilat  pada  SIK  melalui  ikatan  hidrogen  dan menurunkan  tegangan  permukaan.  Penurunan tegangan  permukaan  akan  meningkatkan  gaya adhesi antar komponen sehingga SIK menjadi lebih tahan terhadap asam. 9

## KESIMPULAN
Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa SIK nanokitosan kumbang tanduk (Xylotrupes Gideon) dapat  menurunkan  nilai  kekasaran  permukaan pada pH saliva kritis meskipun pada uji independent t-test tidak ada perbedaan bermakna (p>0,05).

## DAFTAR PUSTAKA
1. Pacifici E, Bossù M, Giovannetti A, La Torre G,
Guerra  F,  Polimeni  A.  Surface  roughness  of glass ionomer cements indicated for uncooperative  patients  according  to  surface protection  treatment.  Ann  Stomatol  (Roma) [Internet]. 4(3 –4):250–8.  Available  from: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/2461109 0%0Ahttp://www.pubmedcentral.nih.gov/articl erender.fcgi?artid=PMC3935351
2. Guedes  OA  guirr.,  Borges  ÁH,  Bandeca  MC oelh.,  Nakatani  MK  yose.,  de  Araújo  Estrela CR  odrigue.,  de  Alencar  AH  elen.  G,  et  al. Chemical  and  structural  characterization  of glass ionomer cements indicated for atraumatic  restorative  treatment.  J  Contemp Dent Pract. 2015;16(1):61 –7.
3.   Diansari V, Ningsih DS, Moulinda C. Evaluasi Kekasaran Permukaan Glass Ionomer Cement (GIC)  Konvensional  Setelah  Perendaman Dalam  Minuman  Berkarbonasi.  Cakradonya Dent J. 2016;8(2):111 –6.
4.     Pratiwi D, Annisa S. Pengaruh Sikat dan Pasta Gigi Anak Terhadap Kekasaran Permukaan Semen Ionomer Kaca. J Mater Kedokt Gigi. 2019;8(1):7-11
5. Da Silva RC, Zuanon ACC. Surface roughness of  glass  ionomer  cements  indicated  for atraumatic  treatment  (ART).  Braz  Dent  J. 2006;17(2):106-9
6.     Sundari I. Perbedaan Kekasaran Permukaan Gic Tanpa Dan Dengan Penambahan Kitosan Setelah Perendaman Minuman Isotonik. J Mater Kedokt Gigi. 2016;5:49 –55.
7.    Lely  MA.  Pengaruh  (pH)  Saliva  terhadap Terjadinya  Karies  Gigi  pada  Anak  Usia
Prasekolah. Bul Penelit Kesehat. 2017;45(4):241 –8.
8. Gani  BA,  Soraya  C,  Sunnati  S,  Nasution  AI, Zikri  N,  Rahadianur  R.  The  pH  changes  of artificial  saliva  after  interaction  with  oral  of artificial  saliva  after  interaction  with  oral micropathogen. Dent J (Majalah Kedokt Gigi). 2012;45(4):234.
9.      Komariah, Astuti L. Preparasi dan Karakteristik Kitin  yang  Terkandung  Dalam  Eksoskeleton Kumbanf Tanduk Rhinoceros
Beetle
(Xylotrupes  Gideon  L)  dan  Kutu  Beras (Sitophilus  oryzae  L).  Semin  Nas  IX  Pendidik Biol. 2012;9:648 –54.
10.  Komariah,  Callista  F,  Bustami  A  Del. Pretreatment Nano Kitosan Dan Nano Kalsium (X.  gideon)  Pada  Aplikasi  Home  Bleaching
Terhadap  Kekerasan  Email.  Semin  Nas Cendekiawan [Internet]. 2018;1(2460 – 8696):417 –22. Available from:
https://pdfs.semanticscholar.org/daca/6a4a09 12383b309a478c5ed024b4ec64b116.pdf
11.  Bala O, Arisu HD, Yikilgan I, Arslan S, Gullu A. Evaluation of surface roughness ad hardness of different glass ionomer cements. Eur J Dent. 2012;6(1):79-86
12.    Abdelghany  S,  Hammouda  H,  Abdellatif  AM. Effect of Saliva  pH and  Polishing Techniques on the Surface Roughness of Different Esthetic Restorative Materials in Primary Teeth. Pediatr Dent Diploma. 2019;78 –85.
13.  Ramadhani  A.  Uji  Keedalaman  Porositas Permukaan  Bahan  Pit  dan  Fissure  Sealant Berbasis  Resin  Komposit  dan  Ionomer  Kaca Setelah  Direndam  Saliva  Buatan  pH  5,5. Skripsi. 2017. 1-99 p.
14.  Chair Effendi, M., Nugraeni, Y., Hartami, E., & Nurul  Ummah,  A.  Changes  in  the  Surface Roughness  of  Glass  Ionomer  Cement  and Zirconomer  after  Immersion  in  Carbonated Beverages. J Dent Indones. 2020;27(2): 85-90
15.    Menezes-Silva,  R.,  Cabral,  R.,  Pascotto,  R., Borges, A., Martins, C., Navarro, M., Sidhu, S., &  Leal,  S.  (2019).  Mechanical  and  optical properties  of  conventional  restorative  glass- ionomer cements - a systematic review. Journal of Applied Oral Science, 27 . 16.  Komariah  K,  Ageng  A,  Kusuma  I.  Efek Kombinasi  Asam  Valproat  dan  Nano  Kitosan Kumbang Tanduk
(Xylotrupesgideon) Terhadap  Viabilitas  dan  Sitotoksisitas  Sel Kanker Lidah (HSC-3). Semin Nas Pakar ke 2 Tahun 2019. 2019;1:1 –7.