## Original Article
Analisis  Antioksidan  Ekstrak  Etanol  Daun  Ceguk (Combretum  indicum  L.)  varr.M  dengan  Berbagai  Lokasi Kalimantan Selatan, Indonesia
Samsul Hadi*, Umi Nur Hapifah, and Amalia Khairunnisa
Prodi Farmasi Universitas lambung Mangkurat ; samsul.hadi@ulm.ac.id *Corresponding author: Samsul Hadi | Email: samsul.hadi@ulm.ac.id
Received: 25 August 2022; Revised: 18 November 2022; Accepted: 2 December 2022; Published: 31 December 2022
Abstract: C. Indicum has 2 variations, especially in terms of flowers, namely elongated and rounded types with antioxidant effects. So the aim of this research is to know the antioxidant of C. Indicum leaves, one of the varieties in Banjar, Banjarbaru and Tanah Laut areas, that variety is C. indicum varr.M. Antioxidant testing using TLC and  quantitative  using  UV-Vis  spectrophotometer.  The  antioxidant  results  qualitatively  have  antioxidant activity marked by a yellowish white stain. The quantitative test results of Banjar, Banjarbaru and Tanah Laut have 97.2219±0.263 ppm, 50.0832±0.078 ppm and 56.2046±0.185 ppm IC50 values. The results of One Way Anova analysis  on  the  ethanol  extract  of  elongated  C.  indicum  leaves  from  Banjar,  Banjarbaru  and  Tanah  Laut  had significant differences between each location and other locations. Based on these results Banjarbaru has the best antioxidants.

## Keywords: C. indicum; antioxidant; locate
Abstract: C. Indicum memiliki 2 variasi terutama dilihat bagian bunga yaitu tipe memanjang membulat dengan berefek antioksidan. Sehingga tujuan penelitiannya adalah mengetahui antioksidan daun C. Indicum salah satu varietas  di  daerah  Banjar,  Banjarbaru  dan  Tanah  Laut,  varietas  itu    adalah    C.  indicum  varr.M.  Pengujian antioksidan  menggunakan  KLT  dan  kuantitatif  menggunakan  spektrofotometer  UV-Vis.  Hasil  antioksidan secara kualitatif memiliki aktivitas antioksidan ditandai adanya noda putih kekuningan. Hasil uji kuantitatif Banjar, Banjarbaru dan Tanah Laut memiliki sebesar 97,2219±0,263 ppm, 50,0832±0.078 ppm dan 56,2046±0.185 ppm nilai IC50. Hasil analisis One Way Anova pada ekstrak etanol daun C. indicum tipe memanjang dari Banjar, Banjarbaru dan Tanah Laut memiliki perbedaan bermakna antar masing-masing lokasi dengan lokasi lainnya. Berdasarkan hasil tersebut Banjarbaru memiliki antioksidan terbaik.
Keywords: C. indicum; antioksidan, lokasi

## 1. PENDAHULUAN
Radikal bebas merupakan senyawa yang sangat reaktif dan tidak stabil. Molekul yang sangat reaktif ini menyebabkan kerusakan oksidatif pada komponen seluler seperti DNA, protein, dan lipid. Mereka memainkan peran  sentral dalam  mekanisme  cedera sel dan kematian  sel  [1]. Antioksidan mencegah pembentukan spesies reaktif ini, atau menghilangkannya sebelum mereka dapat merusak komponen vital sel. Stres oksidatif mendefinisikan ketidakseimbangan dalam produksi spesies kimia pengoksidasi dan penghilangan efektif mereka oleh antioksidan pelindung dan enzim antioksidan. Bukti  dari  stres  oksidatif  yang  masif  dapat  ditemukan  dengan  baik  pada  penyakit  kritis  yang ditandai dengan cedera reperfusi-iskemia jaringan dan oleh respons inflamasi sistemik yang intens seperti selama sepsis dan sindrom gangguan pernapasan akut, cedera paru akut. Beberapa uji klinis telah dilakukan untuk mengurangi stres oksidatif dengan suplementasi antioksidan saja atau dalam kombinasi  dengan  terapi  standar  [2]. Penggunaan  ekstrak  atau  senyawa  dari  tumbuhan  tidak berpengaruh  langsung  terhadap  suatu  gangguan  atau  penyakit.  Akan  tetapi  akan  mempengaruhi proses biologi dari sel, salah satunya pada gangguan atherosclerosis. Pada kasus atherosclerosis ini dimulai  dengan  terbentuknya  Reactive  Oksigen  intermediet  (ROS)  secara  berlebih.  Pembentukan ROS  ini  akan  menginisiasi  terjadinya  stress  oksidative  dan  menyebabkan  gangguan  oksidative. Ketika  prose  ini  terjadi  akan  menyebabkan  gangguan  replikasi  DNA,  sintesis  protein  dan pembentukan  membrane  lipid  pada  sel.  Proses  ini  berlanjut  dan  menyebabkan  inflamasi  dan disfungsiendotelial  pada  pembuluh  darah  dan  akhirnya  meningkatkan  terjadinya  atherosklerosis. Oleh  karena  itu  penggunaan  antioksidan  dapat  mengatasi  terbentuknya  ROS  berlebih  sehingga perkembangan atherosclerosis dapat dicegah [3].
Tanaman  yang  dapat  berpotensi  sebagai  antioksidan  adalah  ceguk  (Combretum  indicum  L.) terutama di bagian daunnya. Daun C. indicum memiliki 2 variasi dengan ukuran yang berbeda yaitu tipe memanjang dan tipe membulat, yang mana daun tipe memanjang memiliki bentuk elips hingga membulat  seperti  telur,  ujung  meruncing  dengan  ukuran  134,58  ±  3,68  x  66,38    ±  1,58  mm. Sedangkan,  daun  tipe  membulat  memiliki  daun  yang  berbentuk  elips,  meruncing  dengan  ukuran 133,59 ± 4,42 x 68,79    ± 2,39 mm [4]. Daun C. indicum berkhasiat sebagai antinyeri, obat diare, sakit kepala,  rematik,  imunomodulator,  antiinflamasi,  anti  staphylococous  dan  antioksidan  [5].  Beberapa senyawa kimia yang terdapat pada daun  C. indicum ini berupa triterpenoid, steroid, tannin, fenol, saponin, flavonoid dan alkaloid yang mana senyawa tersebut memiliki kemampuan antioksidan [5]. Hal ini didukung penelitian hanif [6] yang membuktikan bahwa ekstrak metanol daun  C. indicum dengan IC 50 sebesar 48,87 ppm .
Aktivitas antioksidan dapat dipengaruhi oleh kadar dan komposisi senyawa tanaman. Faktor yang  dapat  mempengaruhi  metabolit  sekunder  suatu  tanaman  yaitu  perbedaan  lokasi  dan lingkungan seperti mineral tanah, suhu, pH, cahaya, kelembaban dan  [7]. Tanaman  C. indicum ini cukup banyak dijumpai di berbagai daerah Kalimantan Selatan, yang mana secara geografis wilayah Kalimantan  Selatan  terdiri  atas  kawasan  dataran  rendah,  dataran  sedang,  dataran  tinggi,  lahan gambut  hingga  rawa-rawa  [8].  Sehingga  peneliti  ingin  melakukan  penelitian  terhadap  analisis kualitatif  dan  aktivitas  antioksidan  pada  daun  C.  indicum  tipe  memanjang  sebagai  sumber antioksidan  alami  di  beberapa  lokasi.  Pertimbangan  pengambilan  lokasi  pengambilan  sampel  ini berdasarkan  perwakilan  dari  masing  masing  kondisi  tanah  yaitu  gambut,  dataran  rendah  dan dataran tinggi. Tanah gambut diwakili pengambilan sampel dari Banua Hanyar, Kecamatan Kertak Hanyar,  Kabupaten  Banjar.  Tanah  dataran  rendah  diwakili  pengambilan  sampel  dari
Guntungmanggis, Kecamatan Landasan Ulin, Kota Banjar Baru. Tanah dataran tinggi diwakili oleh Damar Lima, Kecamatan Batu Ampar, Kabupaten Tanah Laut.

## 2. METODOLOGI PENELITIAN

## 2.1. Alat dan bahan
Alat  dan  bahan  yang  dipakai  adalah  gelas  beaker  (Pyrex),  labu  ukur  (Iwaki),    rak tabung reaksi, tabung reaksi (Iwaki), blender (Philips), batang pengaduk, corong kaca (Pyrex), bejana maserator,  cawan  porselen,  chamber,  pipet  tetes,  propipet,  penggaris,  pinset,  pipa  kapiler,  pipet ukur,  neraca  analitik  (Ohaus),  oven  (Finco  Inc  OV  50),  lemari  pengering  (Merck),  aluminium  foil, waterbath  (Memment),  ayakan  mesh  35,  chamber  KLT,  spektrofotometer  UV  Vis  (PerkinElmer), Vortex  (Lab  Companion),  almari  UV  254-366  nm.  sampel  daun  C.  indicum  varr.M    dari  Banjar, Banjarbaru  dan  Tanah  Laut,  pelarut  etanol  96%,  metanol  p.  a,  standar  kuersetin  (Sigma),  DPPH (Sigma), H 2 SO 4 10%, plat silika gel GF 254 , etil asetat, n-heksan dan kertas saring.

## 2.2. Preparasi sampel
Daun  C.  indicum  tipe  memanjang  diperoleh  dari  3  lokasi  yang  berbeda  yaitu  lahan  gambut adalah  Kabupaten  Banjar,  dataran  rendah  adalah  Kota  Banjarbaru  dan  dataran  tinggi  adalah Kabupaten  Tanah  Laut.  Daun  C.  indicum  varr.M  yang  telah  terkumpul  dilakukan  sortasi  dan pengeringan.  Proses  pengeringan  menggunakan  oven  dengan  suhu  50°C  dan  dihaluskan menggunakan blender serta pengayakan agar partikelnya lebih seragam [9].

## 2.3. Determinasi tanaman
Determinasi  C.  indicum  varr.M  di  Laboratorium  FMIPA  Universitas  Lambung  Mangkurat Banjarbaru.

## 2.4. Pembuatan ekstrak
Serbuk  daun  C.  indicum  tipe  memanjang  yang  diperoleh dari  ketiga  lokasi  tersebut  diambil sebanyak 25 gram dan diekstraksi menggunakan etanol 96% 1:10 (b/v). Ekstraksi selama tiga hari dengan  pergantian  pelarut  setiap  hari  di  sertai  pengadukan  tiap  8  jam.  Ekstrak  cair  disaring  dan diuapkan dengan suhu 50°C hingga diperoleh bobot konstan.

## 2.5. Analisis kualitatif antioksidan dengan metode kromatografi lapis tipis
Ekstrak  daun  ditotolkan  pada  plat  KLT  dengan  fase  gerak  n-heksan  :  etil  asetat  dengan perbandingan  9:1  (v/v).  Kemudian  plat  disemprotkan  dengan  H 2 SO 4 10%  agar  noda  lebih  tampak oleh mata [10]. Plat disemprotkan DPPH 0,4 mM , analisisnya berupa bercak kuning [11].

## 2.6. Analisis kuantitatif antioksidan dengan metode DPPH
DPPH  yang  dipergunakan  dalam  percobaan  ini  adalah  Larutan  DPPH  0,4  mM.  Kuersetin dibuat dengan konsentrasi 1, 2, 4, 6 dan 8 ppm. Masing-masing larutan diambil dan ditambahkan DPPH. Larutan kemudian diukur absorbansi menggunakan spektrofotometer UV-Vis. Ekstrak daun C. indicum dibuat seri konsentrasi 20, 40, 60, 80, dan 100 ppm. Masing-masing larutan diambil dan ditambahkan DPPH. Larutan diukur absorbansi dan dilakukan perhitungan IC 50 [12].

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN

## 3.1. Determinasi tanaman
Determinasi untuk mengetahui kebenaran sampel yang dipakai dalam penelitian  [13]. Hasil determinasi tumbuhan yang tercantum dalam surat keterangan nomor 033/LB.LABDASAR/II/2022 diketahui  bahwa  tanaman  ceguk  yang  digunakan  termasuk  dalam  famili  Combreteceae  dan  nama spesies Combretum indicum L varr.M.

## 3.2. Pembuatan ekstrak
Hasil rendemen ekstrak etanol daun C. indicum tipe memanjang dari ketiga lokasi di Tabel 1.
Tabel 1. Hasil Persen Rendemen Ekstraksi daun C. indicum dari Berbagai Lokasi
No Daerah Berat Serbuk (gram) Berat Ekstrak (gram) Rendemen (%) 1 Kabupaten Banjar 25 1,62 6,48 2 Kota Banjarbaru 25 4, 09 16,36 3 Kabupaten Tanah Laut 25 2, 15 8,60
Hasil  rendemen  ekstrak  etanol  daun  C.  indicum  dari  Kota  Banjarbaru  memiliki  persen rendemen  yang  paling  tinggi  yaitu  16,36%.  Perbedaan  hasil  rendemen  dari  penelitian  ini  dapat disebabkan  oleh  kandungan  lilin  yang  terdapat  didaun,  sehingga  walaupaun  sudah  didapatkan berat kosntan akan tetapi berat konstaan ini masih ada air yang terjebak diantara lilin [7].

## 3.3. Analisis kualitatif antioksidan dengan metode kromatografi lapis tipis
Hasil  uji  KLT  ekstrak  daun  C.  indicum  tipe  memanjang  di  berbagai  lokasi  dengan perbandingan 9:1 di Gambar 1.
Gambar 1. Analisis KLT ekstrak daun C. indicum tipe memanjang dengan eluen n-heksan : etil
Hasil penyemprotan DPPH 0,4 mM menunjukkan adanya 7 noda pada ekstrak daun C. indicum dari ketiga lokasi. Penyemprotan larutan DPPH 0,4 mM dilakukan sebagai uji pendahuluan secara kualitatif yang dapat mendeteksi senyawa antioksidan ditandai dengan munculnya bercak berwarna putih kekuningan dengan latar berwarna ungu pada plat [11]. Penyemprotan H 2 SO 4 10% dilakukan untuk  memastikan  bahwa  noda  yang  tampak  merupakan  senyawa  organik  bersifat  antioksidan. Proses  terbentuknya  warna  dari  senyawa  yang  tidak  berwarna  karena  penyemprotan  asam  sulfat berdasarkan prinsip kondensasi H 2 O dan penggabungan dari karbokation, sehingga menyebabkan lepasnya  Hidrogen  dan  mengakhibatkan  berpindahnya  ikatan  rangkap.  Senyawa  tersebut  akan mengalami resonansi. Selanjutnya karbokation akan menyebabkan adisi elektrofilik dan pelepasan Hidrogen. Proses ini akan berulang dan menyebabkan perpanjangan  konjugasi dan menimbulkan warna [10]. Hasil analisis kromatografi lapis tipis dari ketiga sampel menunjukkan bahwa ekstrak etanol  daun  C.  indicum  tipe  memanjang  mengandung  antioksidan.  Hal  ini  ditandai  adanya  noda berwarna kuning keputihan dengan plat KLT yang disemprotkan menggunakan larutan DPPH 0,4 mM.

## 3.4. Analisis kuantitatif aktivitas antioksidan dengan metode DPPH
`Serapan  maksimum  DPPH  yang  diperoleh  berada  pada  panjang  gelombang  515  dengan absorbansi  sebesar  1,753.  Hasil  ini  sejalan  penelitian  Aminah  [14]  yang  menyatakan  λmax  DPPH berada pada 515 nm, sejalan juga dengan lamda DPPH secara umum 515-520 [15].
3.4.1. Penentuan operating time
Hasil operating time yang diperoleh berada pada menit 46-60, karena pada rentang waktu ini tidak terjadi penurunan maupun kenaikan absorbansi. Hasil ini sejalan penelitian Salamah [16] yang menyebutkan OT berkisar 25,3-64,7.
3.4.2.  Penentuan nilai IC 50 larutan pembanding kuersetin Penentuan  nilai  IC 50 menggunakan  larutan  pembanding  kuersetin  yang  memiliki  aktivitas antioksidan sangat kuat sebagai pembanding [17]. Hasil data IC 50 larutan pembanding kuersetin di Gambar 2 dan Tabel 2.
Gambar 2. Kurva hubungan antara konsentrasi kuersetin dan persen inhibisi (%).
y = 8,02x + 3,7752 r = 0,993 Pers en inh ib is i ( %) Konsentrasi (ppm )
Tabel 2. Hasil penentuan IC 50 larutan pembanding kuersetin Konsentrasi (ppm) Persen Inhibisi (%) x ̄ Persen Inhibisi (%) x ̄ IC50 ± SD Persen RSD (%) Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi 3 1 15,4 15,27 15,1 15,257 5,763 ± 0,001 0,173 2 17,8 17,64 17,58 17,673 4 32,76 32,74 32,69 32,730 6 52,4 52,43 52,54 52,457 8 68,95 69,2 69,39 69,180
Persamaan regresi linier yang diperoleh adalah y = 8,02x + 3,7752 dengan koefisien korelasi 0,993.  Hasil  yang  didapatkan  telah  sesuai  dan  memenuhi  persyaratan  karena  koefisien  korelasi berada diantara 0,9 ≤ r ≤ 1 [18]. Nilai IC 50 yang diperoleh sebesar 5,763 ± 0,001 ppm. Berdasarkan nilai IC 50 -nya aktivitas antioksidan kuersetin termasuk sangat kuat, karena dibawah 50 ppm [15].
3.4.3. Penentuan nilai IC 50 ekstrak daun C. indicum varr.M Hasil penentuan IC 50 ekstrak etanol disajikan pada Gambar  3 dan Tabel 3, 4 dan 5, di mana koefisien korelasi yang diperoleh dari sampel ekstrak etanol daun C. indicum tipe memanjang daerah Banjar, Banjarbaru dan Tanah Laut berturut-turut yaitu 0,986, 0,980, dan 0,908. Nilai ini memenuhi persyaratan koefisien korelasi yaitu berada diantara 0,9 ≤ r ≤ 1. Nilai standar deviasi ekstrak etanol daun C. indicum dari ketiga lokasi tersebut berturut-turut yaitu 0,263, 0,073 dan 0,185. Nilai ini telah memenuhi persyaratan standar deviasi dan standar deviasi relative (RSD) yang baik yaitu ≤ 2% [19] . Nilai rata-rata IC 50 dari Kabupaten Banjar yaitu 97,2219 ± 0,263 ppm, Kota Banjarbaru 50,0832 ± 0,073 ppm, dan Kabupaten Tanah Laut 56,2046 ± 0,185 ppm.
Gambar  3..  Kemampuan  antioksidan  ekstrak  C.  indicum  varr.M  (a)  Banjar,  (b)  Banjarbaru,  dan  (c) Tanah Laut
(a) (c) (a) (b) (c)
Tabel 3. Hasil IC 50 ekstrak etanol daun C. indicum tipe memanjang dari Kabupaten Banjar
Konsentrasi (ppm) Persen Inhibisi (%) x ̄ Persen Inhibisi (%) x ̄ IC50 ± SD RSD (%) Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi 3 40 24,25 24,39 24,38 24,340 97,2219 ± 0,263 0,271 60 31,8 31,73 31,71 31,747 80 44,12 44,14 44,07 44,110 100 47,69 47,18 47,64 47,503 120 62,6 62,45 62,7 62,583
Tabel 4. Hasil IC 50 ekstrak etanol daun C. indicum tipe memanjang dari Kota Banjarbaru
Konsentrasi (ppm) Persen Inhibisi (%) x ̄ Persen Inhibisi (%) x ̄ IC50 ± SD RSD (%) Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi 3 20 24,81 24,67 24,57 24,683 50,0832 ± 0,078 0,157 40 46,83 46,68 46,85 46,787 60 60,35 60,46 60,69 60,500 80 71,89 71,91 72,08 71,960 100 79,46 79,36 79,6 79,473
Tabel 5. Hasil IC 50 ekstrak etanol daun C. indicum tipe memanjang dari KabupatenTanah Laut
Konsentrasi (ppm) Persen Inhibisi (%) x ̄ Persen Inhibisi (%) x ̄ IC50 ± SD RSD (%) Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi 3 20 9,61 9,83 9,83 9,757 56,2046 ± 0,185 0,33 40 52,28 52,41 52,28 52,323 60 58,04 58,35 58,53 58,307 80 67,8 68,09 68,09 68,000 100 75,47 75,58 75,72 75,600
Kemampuan antioksidan terbesar ekstrak etanol daun C. indicum terdapat pada ekstrak dari Kota Banjarbaru sebesar 50,0832±0,078 ppm. Sedangkan kemampuan antioksidan  terkecil terdapat pada ekstrak dari Kabupaten Banjar sebesar 97,2219±0,263 ppm. Perbedaan nilai IC 50 pada aktivitas antioksidan  ini  disebabkan  oleh  perbedaan  tempat  tumbuh  tanaman,  sehingga  mempengaruhi komposisi kandungan senyawa antioksidan pada masing-masing ekstrak [7]. Semakin kecil nilai IC 50- nya , maka akan semakin tinggi aktivitas karena semakin kuat menangkap radikal [20] .
Hasil  persen  inhibisi  ekstrak  etanol  daun  C.  indicum  tipe  memanjang  dari  berbagai  lokasi dilakukan uji lanjutan dengan oneway anova. Hasil yang diperoleh yaitu nilai Sig. sebesar 0,000, hal ini  menunjukkan  adanya  perbedaan  signifikan  antara  rata-rata  nilai  IC 50 ekstrak  etanol  daun  C. indicum tipe memanjang dari Banjar, Banjarbaru dan Tanah Laut karena nilai Sig. ≤ 0,05. Hasil yang diperoleh dari uji Post Hoc yaitu terdapat perbedaan signifikan nilai IC 50 pada ekstrak daun C. indicum tipe  memanjang  dari  Banjar,  Banjarbaru  dan  Tanah  Laut.  Hal  ini  ditandai  dengan  adanya  tanda bintang ‘*’ yang menunjukkan bahwa setiap kelompok memiliki perbedaan yang signifikan terhadap kelompok lain [21].
Gambar 4. Diagram aktivitas antioksidan
Berdasarkan  hasil  pada  Gambar  4,  diketahui  bahwa  kelompok  yang  menunjukkan  adanya perbedaan signifikan hasil rata-rata IC 50 ialah sampel Kota Banjarbaru dan sampel Banjar, Banjarbaru dan  Tanah  Laut  serta  sampel  Kabupaten  Banjar  dan  Kabupaten  Tanah  Laut.  Perbedaan  aktivitas antioksidan  berdasarkan  rata-rata  IC 50 ini  dapat  dipengaruhi  oleh  perbedaan  lokasi  dan  kondisi tempat  tumbuh  tanaman  berupa  suhu  atau  kelembaban  di  tiap  lokasi  pada  penelitian  ini. Kemampuan  antiksodan  ekstrak  etanol  daun  C.  Indicum    varr.M  di  berbagai  wilayah  Kalimantan selatan  memiliki  nilai  IC 50 yang  lebih  besar  dibandingkan  dengan  IC 50 C.  Indicum      yang diekstraksi  menggunakan  metanol  yaitu  48,87  ppm[22],  perbedaan  kemampuan  antioksidan  juga terjadi ketika sampel diambil dari berbagai lokasi, diduga karena perbedaan secara kuantititas dari masing masing metabolitme, karena kalo dilihat dari profil KLT gambar 1, antara tiga daerah tersebut memiliki profil yang mirip. Berdasarkan Gambar 1. Golongan senyawa yang berpotensi mempunyai kemampuan  antioksidan  adalah  golongan  fenolik  dan  alkaloid,  hal  ini  ditandai  profil  KLT  yang meredam pada UV254 dan tidak terlihat dibawah UV366 dan spot ini akan terlihat ketika disempot dengan DPPH. Kedua golongan senyawa ini memiliki kemampuan mendonorkan atom Hidrogen terhadap  radikal  bebas  dan  menstabilkan  radikal  ini  didalam  strukturnya  dengan  melakukan resonansi.  Antioksidan  yang  tergolong  kuat  ini  kerena  mereka  bukan  berbentuk  glikosida,  ketika senyawa ini berbentuk glikosida maka aktivitas antiokaidannya menurun  [23]. Jika menginginkan antikoksidan  yang  lebih  kuat  lagi  maka  perlu  dinaikkan  glikonnya  dengan  cara  hidrolisis  dan meningkatkan jumlah gugus hidroksil dalam gugus yang terikat langsung dengan gugus konjugasi ikatan π . Karena senyawa di alam cenderung berbentuk glikosida  [24] maka untuk meningkatkan kemampuan  antioksidan  dengan  jalan  hidrolisis  glikosida  menggunakan  HCL.  Glikosil  yang terhidrolisis akan tergantikan oleh atom H + dari HCL yang memiliki kemampuan elektronegatifitas yang sangat kuat.
Kondisi  lingkungan  sampel  Kota  Banjarbaru  memiliki  kelembaban  84,87%  dan  ketinggian mencapai 17 mdpl yang termasuk dataran rendah. Dataran rendah    memiliki kondisi yang optimal dalam  proses  produksi  senyawa  fitokimia  dan  antioksidan  karena  dataran  rendah  umumnya
0 20 40 60 80 100 120 Kab. Banjar Kota Banjarbaru Kab. Tanah Laut keterangan : (*) terdapat perbedaan signifikan IC 50 ± SD Lokasi pengambilan sampel 97,2219±0,263* ppm 50,0832±0,073* ppm 56,2046±0,185* ppm
mempunyai pH sebesar 5,8-6 dengan intensitas cahaya yang lebih tinggi dibandingkan Kabupaten Tanah Laut [25].
Kondisi lingkungan sampel Kabupaten Tanah Laut memiliki kelembaban 85,3% dan ketinggian mencapai  58  mdpl  yang  termasuk  dataran  sedang  hingga  tinggi.  Dataran  tersebut  umumnya memiliki pH yang lebih kecil sebesar 4-5 dan cenderung memiliki tekstur tanah  berpasir atau liat berpasir yang disebut tanah ultisol, tanah tersebut relatif kurang subur dan mempunyai kandungan unsur hara yang rendah, sehingga kandungan senyawa yang terdapat pada tanaman tumbuh pula akan rendah. Selain itu, tanaman pada daerah Kabupaten Tanah Laut cenderung mempunyai tajuk pohon  seperti  bagian  daun,  ranting  ataupun  bunga  relatif  rapat  sehingga  intesitas  cahaya  yang diperoleh pula kurang optimal [26].
Kondisi  lingkungan  sampel  Kabupaten  Banjar  memiliki  kelembaban  82,17%  dan  ketinggian mencapai 8 mdpl.    Kabupaten Banjar ini merupakan daerah gambut yang memiliki kesuburan tanah rendah,  kandungan  unsur  hara  rendah,  pH  asam  sebesar  3-4,  sehingga  berpengaruh  terhadap peningkatan unsur haranya [27].
Berdasarkan kondisi lingkungan di tiap lokasi pada penelitian ini, diketahui bahwa perbedaan tempat  dan  kondisi  lingkungan  sangat  berpengaruh  terhadap  aktivitas  antioksidannya.  Hasil penelitian  ini  menyatakan  bahwa  kemampuan  aktivitas  antioksidan  pada  Banjarbaru  merupakan dataran  rendah  memiliki  aktivitas  antioksidan  lebih  besar.  Sedangkan,  Banjar  merupakan  daerah gambut  yang  memiliki  kemampuan  aktivitas  antioksidan  paling  rendah,  Tanah  laut  merupakan dataran tinnggi dimana tekanan udara lebih rendah.  C. indicum menyukai daerah yang cenderung kering  dan  memiliki  intensitas  cahaya  tinggi,  sehingga  senyawa  metabolit  C.  indicum  di  daerah dataran rendah lebih besar dibandingkan dataran lainnya.

## 4. KESIMPULAN
Kesimpulan kemampuan antioksidan C. indicum varr.M Banjar dan Kabupaten Tanah Laut kategori  antioksidan  kuat  dengan  nilai  IC 50 secara  berturut-turut  sebesar  97,2219±0,263  ppm  dan 56,2046±0,185 ppm. Sedangkan, Banjarbaru kategori sangat kuat dengan IC 50 50,0832±0,078 ppm.
Ucapan terimakasih : Peneliti mengucapkan terimakasih terhadap Universitas Lambung Mangkurat Konflik kepentingan = -

## References
[1] M. S. Hatwalne, “Free  Radical Scavengers In Anaesthesiology And Critical Care.,”  Indian J Anaesth, Vol. 56, No. 3, Pp. 227–233, May 2012, Doi: 10.4103/0019-5049.98760.
[2] W. D. Fitriana, S. Fatmawati, And T. Ersam, “Uji Aktivitas Antioksidan Terhadap Dpph Dan Abts Dari Fraksi-Fraksi,” Snip Bandung, Vol. 2, No. Snips, Pp. 657–660, 2015.
[3] S. Singh, “Herbal Approach For Management Of Atherosclerosis: A Review,” Curr Atheroscler Rep, Vol. 21, No. 4, P. 12, 2019, Doi: 10.1007/S11883-019-0774-X.
[4] R.  P.  Gentallan  Et  Al.,  “Seed  Morphological  Characteristics  ,  Storage  Behavior  ,  And Germination Pattern Of Combretum Indicum ( L .) Defilipps,” Genet Resour Crop Evol, Vol. 9, Pp. 100–107, 2021, Doi: 10.1007/S10722-021-01239-9.
[5] I. B. K. Ardana, M. S. Anthara, And A. A. G. O. Dharmayudha, “Peran Ekstrak Daun Wudani (Quiskualis Indica Linn) Dalam Pengendalian Infeksi Cacing Pada Sapi Untuk Mendukung Swasembada Daging Sapi.,” Jurnal Farmasi Unud, Vol. 2, Pp. 1–19, 2015.
[6] H. A. Hanif, N. Hasan, M. Hossain, R. H. Khan, And N. M. M. A. Bhuiya, “Investigation On Antioxidant  And  Antimicrobial  Properties  Of  Methanolic  Extract  Of  Combretum  Indicum Leaf,”  Ournal  Of  Green  Pharmacy,  Vol.  14,  No.  2,  Pp.  169–174,  2020,  Doi: 10.22377/Ijgp.V14i02.2880.
[7] F.  F.  Sholekah,  “Perbedaan  Ketinggian  Tempat  Terhadap  Kandungan  Flavonoid  Dan  Beta Karoten  Buah  Karika  (  Carica  Pubescens  )  Daerah  Dieng  Wonosobo,”  Prosiding  Seminar Nasional Pendidikan Biologi Dan Biologi, Vol. 2, Pp. 75–82, 2017.
[8] L.  D.  R.  Dwitasari,  Muzdalifah,  And  M.  Anshar,  “Pengaruh  Infrastruktur  Terhadap  Pdrb Kabupaten/Kota  Di  Provinsi  Kalimantan  Selatan  Tahun  2014-2018,”  Jurnal  Syntax Transformation, Vol. 1, Pp. 328–334, 2020.
[9] D.  D.  Cahyanto,  Y.  Hendrawan,  And  G.  Djoyowasito,  “Kinerja  Pemisah  Kulit  Ari  Tauge Kacang Hijau (Vigna Radita L) Berdasarkan Amplitudo Ayakan Dan Variasi Putaran,” Jurnal Keteknikan  Pertanian  Tropis  Dan  Biosistem,  Vol.  7,  No.  3,  Pp.  275–284,  2019,  Doi: 10.21776/Ub.Jkptb.2019.007.03.08.
[10] Wahyuni,  N.  Ibrahim,  And  A.  W.  Nungrahani,  “Uji  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Serbuk Gergaji Kayu Eboni (,” Jurnal Biocelebes, Vol. 12, No. 1991, Pp. 54–64, 2018.
[11] N.  Rahman,  P.  Bahriul,  And  A.  Diah,  “Uji  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Daun  Salam (Syzygium  Polyanthum)  Dengan  Menggunanakan  1,1-Difenil-2-Pikrilhidrazil,”  Jurnal Akademika Kimia, Vol. 3, No. 3, Pp. 143–149, 2014.
[12] N.  Mardiah,  C.  Mulyanto,  A.  Amelia,  Lisnawati,  D.  Anggraeni,  And  D.  Rahmawanty, “Penentuan Aktivitas Antioksidan Dari Ekstrak Kulit Bawang Merah (Allium Ascalonicum L.) Dengan Metode Dpph,” Jurnal Pharmascience, Vol. 4, No. 2, Pp. 147–154, 2017.
[13] A.  A.  Styawan,  N.  Hidayati,  And  P.  Susanti,  “Penetapan  Kadar  Β-Karoten  Pada  Wortel (Daucus  Carota,  L)  Mentah  Dan  Wortel  Rebus  Dengan  Spektrofotometri  Visibel,”  Jurnal Farmasi Sains Dan Praktis, Vol. 5, No. 1, Pp. 6–10, 2019, Doi: 10.31603/Pharmacy.V5i1.2293.
[14] A.  Aminah,  H.  Hamsinah,  N.  A.  Abiwa,  And  S.  Anggo,  “Potensi  Ekstrak  Rumput  Laut (Eucheuma Cottoni) Sebagai Antioksidan,” Jurnal Ilmiah As-Syifaa, Vol. 12, No. 1, Pp. 36–41, 2020, Doi: 10.33096/Jifa.V12i1.600.
[15] Molyneux  P,  “The  Use  Of  The  Stable  Free  Radical  Diphenylpicryl-Hydrazyl  (Dpph)  For Estimating Anti-Oxidant Activity,” Songklanakarin Journal Of Science And Technology, Vol. 26, No. May, Pp. 211–219, 2004.
[16] N.  Salamah  And  E.  Widyasari,  “Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Metanol  Daun  Kelengkeng (Euphoria  Longan  (L)  Steud.)  Dengan  Metode  Penangkapan  Radikal  2,2’-Difenil-1- Pikrilhidrazil,” Pharmaciana, Vol. 5,
No. 1, Pp. 25–34, 2015, Doi:
10.12928/Pharmaciana.V5i1.2283.
[17] A. Maulana K, T. Naid, D. T. Dharmawat, And M. Pratama, “Analisa Aktivitas Antioksidan Ekstrak Biji Nangka (Artocarpus Heterophyllus Lam) Dengan Metode Frap (Ferric Reducing
J.Food Pharm.Sci 2022, 10(3), 721-731 731 Antioxidant Power),” Bionature, Vol. 20, No. 1, Pp. 27–33, 2019, Doi:
10.35580/Bionature.V20i1.9757.
[18] M. Jurwita, M. Nasir, And A. G. Haji, “Analisis Kadar Vitamin C Bawang Putih Dan Hitam Dengan Metode Spektrofotometri Uv-Vis,” Kovalen: Jurnal Riset Kimia, Vol. 6, No. 3, Pp. 252– 261, 2020, Doi: 10.22487/Kovalen.2020.V6.I3.15289.
[19] L. Febriyanti And A. Citra, “Analisis Kuantitatif Fenol Total Dan Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Air , Metanol , Dan N-Heksan Daun Pepaya Dengan Metode,” Pp. 70–77, 2021.
[20] R.  Adawiyah  And  M.  I.  Rizki,  “Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Etanol  Akar  Kalakai (Stenochlaena Palustris Bedd) Asal Kalimantan Tengah,” Jurnal Pharmascience, Vol. 05, No. 01, Pp. 71–77, 2018.
[21] S. A. Pradito, N. Muthmainah, And A. Biworo, “Perbandingan Aktivitas Antibakteri Sediaan Ekstrak  Daun  Sungkai  (  Peronema  Canescens  Jack  )  Terhadap  Bakteri  Staphylococcus Aureus,” Homeostatis : Jurnal Mahasiswa Pendidikan Dokter, Vol. 5, No. 1, Pp. 135–144, 2022.
[22] H. A. Hanif, N. Hasan, M. Hossain, R. H. Khan, And N. M. M. A. Bhuiya, “Investigation On Antioxidant  And  Antimicrobial  Properties  Of  Methanolic  Extract  Of  Combretum  Indicum Leaf,”  Ournal  Of  Green  Pharmacy,  Vol.  14,  No.  2,  Pp.  169–174,  2020,  Doi: 10.22377/Ijgp.V14i02.2880.
[23] L.  R.  Fukumoto  And  G.  Mazza,  “Assessing  Antioxidant  And  Prooxidant  Activities  Of Phenolic  Compounds,”  J  Agric  Food  Chem,  Vol.  48,  No.  8,  Pp.  3597–3604,  Aug.  2000,  Doi: 10.1021/Jf000220w.
[24] A. J. Harborne, Phytochemical Methods A Guide To Modern Techniques Of Plant Analysis. Springer
Netherlands, 1998. [Online]. Available: Https://Books.Google.Co.Id/Books?Id=Vcwhuu6iobwc
[25] S. Lallo, A. C. Lewerissa, A. Rafi’i, U. Usmar, I. Ismail, And R. Tayeb, “Pengaruh Ketinggian Tempat Tumbuh Terhadap Aktivitas Antioksidan Dan Sitotoksik Ekstrak Rimpang Lengkuas (Alpinia Galanga L.),” Majalah Farmasi Dan Farmakologi, Vol. 23, No. 3, Pp. 118–123, 2022, Doi: 10.20956/Mff.V23i3.9406.
[26] D.  Tarakanita,  T.  Satriadi,  And  A.  Jauhari,  “Potensi  Keberadaan  Fitokimia  Kamalaka (Phyllanthus  Emblica)  Tempat  Tumbuh  Berdasarkan  Perbedaan  Ketinggian,”  Jurnal  Sylva Scienteae, Vol. 02, No. 4, Pp.
645–654, 2019, [Online]. Available: Https://Ppjp.Ulm.Ac.Id/Journals/Index.Php/Jss/Article/View/1845
[27] Y.  Septrasi,  Nelvia,  And  A.  Amri,  “Pengaruh  Pemberian  Beberapa  Jenis  Ekstrak  Tanaman Sebagai Zpt Dan Rasio Amelioran Terhadap Pertumbuhan Dan Produksi Padi Varietas Inpari 12 Di Lahan Gambut,” Jurnal Online Mahasiswa Fakultas Pertanian, Vol. 1, No. 1, Pp. 1–9, 2013.
© 2022 by the authors. Submitted for possible open access publication under the terms and  conditions  of  the  Creative  Commons  Attribution  (CC  BY)  license (http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/).