HUBUNGAN KONSUMSI SENG SEBAGAI KOFAKTOR MAKANAN TRADISIONAL MINANGKABAU DENGAN NEUTROFIL ELASTASE DALAM CAIRAN SULKUS GINGIVA PADA PENYAKIT PERIODONTAL
(RELATION OF ZINC CONSUMPTION AS COFACTOR IN MINANGKABAU TRADITIONAL FOOD WITH NEUTROPHIL ELASTASE LEVEL IN
GINGIVAL CREVICULAR FLUID IN PERIODONTAL DISEASE)

## Nila Kasuma
Departemen Periodonsia Fakultas Kedokteran Gigi, Universitas Andalas Jl. Perintis Kemerdekaan No.77, Padang-Sumatra Barat 25121

## Abstract
This study involved 66 people consist of 22 healthy samples, mild gingivitis, and periodontitis samples. Enzyme levels were tested using ELISA technique. This is a cross-sectional study that compared the levels of enzyme neutrophil elastase in  healthy  samples,  mild  gingivitis  and  mild  periodontitis  in  each  group.  Data  was  analyzed  using  univariate  way  to describe each variable, to see normal distribution (p> 0.05) Kolmogorov Smirnof Test was used. The levels of neutrophil elastase was the highest in mild periodontitis with an average of 9.42 ± 1.06 ng / dl. Levels of zinc consumption is highest in  healthy  patients  with  an  average  of  6.39  ±  1.26  mg.  Pearson  Correlation  Test  was  used  to  prove  the  relationship between  the  concentration  of  neutrophil  elastase  with  zinc  consumption  in  Minangkabau  traditional  food.  The  result showed  that  there  was  a  significant  relationship  (p  =  0,000)  between  neutrophil  elastase  concentration  with  zinc consumption  levels  in  Minangkabau  foods.  The  relationship  between  neutrophil  elastase  and  zinc  showed  a  strong correlation negative pathway (r = -0, 784). In conclusion, there was a relationship between neutrophil elastase with zinc as a cofactor in Minangkabau traditional food in periodontal disease.
Key words: periodontitis, neutrophil elastase, zinc

## Abstrak
Penelitian ini melibatkan 66 orang sampel terdiri atas 22 orang sehat, 22 orang mengalami gingivitis ringan dan 22 orang mengalami periodontitis awal. Kadar enzim yang diteliti diuji dengan menggunakan teknik ELISA. Rancangan penelitian adalah cross  sectional yang  membandingkan  kadar  enzim  netrofil  elastase  pada  sampel  sehat,  gingivitis  ringan  dan periodontitis  awal.  Untuk  melihat  distribusi  normal  (p>  0,05)  dilakukan  tes  Kolmogorov  Smirnof.  Terdapat  kadar neutrofil elastase yang paling tinggi pada periodontitis ringan dengan rata-rata 9,42 ± 1,06 ng/dl. Kadar konsumsi seng yang paling tinggi adalah pada pasien sehat dengan rata-rata 6,39 ± 1,26 mg. Tes Pearson Correlation digunakan untuk membuktikan  hubungan  antara  konsentrasi  neutrofil  elastase  dengan  konsumsi  seng  pada  makanan  tradisional Minangkabau.  Hasil  penelitian  menunjukkan  korelasi  yang  signifikan  ( p =  0,000)  antara  konsentrasi  neutrofil  elastase dengan  kadar  konsumsi  seng  pada  makanan  tradisional  Minangkabau.    Hubungan  antara  neutrofil  elastase  dan  seng menunjukkan  korelasi  yang  kuat  berarah  negatif  (r=  -0,784).  Sebagai  kesimpulan,  terdapat  hubungan  konsumsi  seng sebagai  kofaktor  makanan tradisional  Minangkabau  dengan  neutrofil  elastase  dalam gingival  crevicular fluid penyakit periodontal.
Kata kunci: periodontitis, neutrofil elastase, seng

## PENDAHULUAN
Mikronutrien   seperti   seng   berperan   dalam  re-
generasi,  mengontrol  stress  oksidatif , dan  respons imun  yang  adekuat.  Oleh  karena  itu  elemen  ini sangat  esensial  dalam  menjaga  kesehatan  tubuh.
Kadar  seng  merupakan  faktor  yang  berkontri- busi dalam kondisi inflamasi, salah satunya penyakit periodontal. 1
Penyakit periodontal berkembang  dari tahap early lession pada marginal  gingivitis menjadi  perio- dontitis yang sangat destruktif, yang ditandai dengan kerusakan  jaringan  pendukung,  epitelium, attach- ment loss (kehilangan perlekatan), kerusakan tulang dan  mobiliti  gigi  bahkan  kehilangan  gigi  apabila tidak  segera  dirawat. 2 Penyakit  periodontal  terjadi karena interaksi antigen bakteri dengan jaringan host sehingga  mengaktivasi neutrofil, produksi antibodi, dan resorpsi tulang. 3
Angka  kejadian  penyakit  periodontal  merupakan penyakit  kedua  terbanyak  di  rongga  mulut  karena terapi  inisial  pada  gingivitis  yaitu  skeling  dan root planing ternyata  tidak  dapat  menyingkirkan  penya- kit  periodontal  secara  tuntas.  Di  bidang  kedokteran gigi  perkembangan  diagnostik  dan  terapi  terus  di- lakukan,  salah  satunya  dengan  pengambilan  media biologis yang dipilih yaitu air liur, serum, plak sub- gingiva,  biopsi  jaringan,  dan  cairan  sulkus  gingiva ( gingival  crevicular  fluid )  untuk  mengukur  tingkat inflamasi  agar  dapat  memilih  terapi  yang  tepat. Gingival Crevicular Fluid (GCF) adalah eksudat in- flamasi  yang  disekresikan  gingiva  pada  sulkus  gi- ngiva  tepat  di  pertemuan  antara  gingiva  dan  gigi. Komposisi  GCF  adalah  subtansi host ,  dan  bakteri supragingival dan subgingival.  Subtansi host terdiri atas  molekul  yang  berasal  dari  darah  dan  jaringan periodontal. Sel inflamatori dan imun menginfiltrasi ke  jaringan  periodontal,  marker  inflamasi  yaitu  en- zim  sitokin,  interleukin,  dan  produk  penghancuran jaringan  juga ditemukan di GCF. 4
Konsentrasi  GCF  pada  keadaan  normal  adalah rendah,  namun  pada  keadaan  inflamasi  terjadi  pe- ningkatan. Pasien dengan penyakit periodontal aktif menunjukkan konsentrasi GCF yang lebih tinggi di- bandingkan pasien yang sehat. 5 Gingival crevicular fluid (GCF)  adalah  metode  analisis  periodontitis yang non invasif , sebagai indikator dan marker ke- rusakan  jaringan  penghubung  dan  tulang  yang  ber- guna dalam  menentukan  keparahan penyakit perio- dontal. 6
Pada  periodontitis,  level  sitokin  dan  aktivitas  en- zim yang berasal dari host di GCF digunakan untuk mendeteksi  inflamasi  dan  respon host terhadap periodontopatogen  yaitu P.gingivalis dan  bakteri lainnya.  Respons host yang  efektif  dimediasi  oleh neutrofil, ditandai dengan influx neutrofil ke sulkus gingiva.  Salah  satu  mekanisme  antimikrobial  neu- trofil adalah dengan  melepaskan enzim yaitu Neu- trofil  Elastase  (NE)  yang  dapat  menghancurkan bakteri periodontopatogen. 7
Neutrofil  elastase  adalah  salah  satu  enzim  pro-
teolitik yang terdapat di granula primer PMN ( azu- rophilic ),  dilepaskan  pada  saat  aktivasi  PMN  dan dapat  mendegradasi  protein  matriks  ekstraseluler jaringan  penghubung. 8 Neutrophyl  elastase  bekerja pada  kolagen  dengan  mendegradasi  serat-serat  ko- lagen  dan  elastin.  Elastin  yang  berfungsi  untuk memberikan  kemampuan  jaringan  untuk  meregang dan mendukung kesehatan sel. 9,10 Pemeriksaan kadar NE  berguna  pada  inflamasi  tahap  awal,  karena neutrofil merupakan sel mayor yang bermigrasi dari sirkulasi darah ketempat inflamasi 11 .Konsentrasi dan aktivitas NE di GCF dapat digunakan untuk meng- identifikasi  perbedaan  aktivitas  penyakit  antar  pa- sien periodontitis dan mengukur inflamasi gingiva. 8 Seng  adalah  salah  satu  kofaktor  neutrofil  elastase (NE). 11 Seng  tersebar  di  dalam  semua  sel  di  tubuh manusia,  dan  merupakan  ion  logam  kedua  ter-ba- nyak  setelah  zat  besi.  Seng  ditemukan  di  dalam komponen  seluler  dan  memiliki  peran  fisiologis yaitu katalisis, struktural dan fungsi regulasi. 12
Seng  adalah  nutrisi  esensial  yang  dibutuhkan manusia  untuk  fungsi  fisiologis  termasuk  imunitas, antioksidan, pertumbuhan, dan reproduksi. Defisien- si  seng mempengaruhi  sistem  imun .Studi  yang di- lakukan  oleh  Orbak  et  al. 13 pada  14  ekor  tikus Sprague-Dwaley yang  menghentikan  laktasi  pada hari ke 24 setelah lahir. Grup pertama diberikan diet dengan  defisiensi  seng,  grup  kedua  diberikan  diet yang kaya akan seng. Keadaan jaringan periodontal meliputi  indeks  gingiva (Löe-Silness),  indeks  plak (Silness-Löe), dan kedalaman poket dievaluasi pada minggu  keempat.  Kemudian  sampel  darah  yang diambil  untuk  mengukur  kadar  seng.  Skor  indeks plak  dan  indeks  gingiva  lebih  rendah  pada  grup yang diberikan diet yang kaya akan seng.
Defisiensi seng dapat mempengaruhi kapasitas re- generatif,  imunitas  alami  dan  dapatan  dengan  me- nurunkan  aktivitas  fagositosis  makrofag  dan  neu- trofil,  aktivitas natural  killer  cell ,  respons  antibodi, antioksidan, dan jumlah sel T sitotoksik. 14
Kandungan  seng  yang dikonsumsi dalam makan- an  diukur  dengan Food  Frequency  Questioner . Food  Frequency  Questionnaires (FFQs)  didesain untuk mengkaji kebiasaan diet dengan menanyakan frekuensi  makanan  dan  minuman  yang  dikonsumsi dalam periode tertentu. Metode ini sering digunakan sebagai metode mengkaji kebiasaan diet  pada studi epidemiologis dan riset tentang nutrisi.  FFQ mudah dilakukan,  tidak  membutuhkan  banyak  biaya,  dan metode  ukur  intake  makanan  yang  cepat  dan  se- derhana. 15
Tujuan  penelitian  untuk  mengetahui  hubungan konsumsi seng sebagai kofaktor yang diukur dengan Food  Frequency  Questioner pada  220  makanan tradisional  Minangkabau  dengan  kadar  neutrofil
elastase  dalam gingival  crevicular  fluid pada  pe- nyakit periodontal.

## BAHAN DAN METODE
Desain  penelitian  adalah Cross  Sectional  Com- parative Study. Sampel penelitian adalah pasien ber- usia 17-30 tahun yang berkunjung ke Poliklinik Gigi Rumah Sakit Umum Daerah kota Padang, Sumatera Barat, Indonesia, bersuku Minangkabau yang meng- konsumsi makanan Minangkabau setiap hari. Terdapat  tiga  kelompok  sampel.  Kelompok  per- tama  (kelompok  studi)  terdiri  atas  20  orang  pasien sehat. Kelompok kedua pasien dengan gingivitis ri- ngan yaitu 20 orang , dan kelompok ketiga 20 orang pasien periodontitis ringan.
Pengambilan  sampel  dilakukan  dengan  teknik consecutive sampling  sesuai  dengan  kriteria  inklusi dan  eksklusi.  Kriteria  inklusi  yaitu  pasien  bersedia dan menandatangani informed consent sebagai sam- pel dalam penelitian ini. Kriteria eksklusi yaitu tidak mengkonsumsi antibiotik dan anti inflamasi selama 3  bulan  terakhir,  merokok,  hamil,  mestruasi,  me- miliki  kelainan  sistemik  seperti  Diabetes  melitus, memiliki  riwayat  perawatan  periodontal  selama  3 bulan  terakhir.  Semua  subjek  telah  membaca  dan menandatangani informed  consent yang  telah  di- setujui oleh subjek dan komisi etik penelitian. Pemeriksaan  pertama  jaringan  periodontal  meng- gunakan Periodontal Disease Index menurut Russel. Pemeriksaan  gusi  atau  jaringan  periodontal  meng- gunakan  instrumen  probe  periodontal.  Alat  ini  di- gunakan  untuk  mengukur  kedalaman  saku  gusi. Kedalaman normal saku gusi berkisar 0-3 mm. Skor Periodontal Disease Index adalah:
0 = gingiva sehat
1 = gingivitis ringan
2 = gingivitis berat
4 = periodontitis ringan
Kriteria  pengukuran  6  regio  gigi  (16,  21,  24,  36, 41  dan  44)  mewakili  indeks  penyakit  periodontal menurut Russel, apabila salah satu dari 6 regio gigi hilang  dapat diganti dengan  gigi sebelahnya.
Gingiva  Crevicular  Fluid dikumpulkan  meng- gunakan absorbent  paper dilakukan  pada  pagi  hari pukul  08.00  WIB    sesuai  dengan Cicardian  Perio- dicity. Area  pengambilan  GCF  dibersihkan  dari plak. Untuk menyamakan kondisi dan meminimali- sasi  keterlibatan  bakteri  oral  pasien  dinstruksikan berkumur  menggunakan  larutan  2% chlorhexidin. Subjek  diinstruksikan  untuk  tidak  makan  dan  mi- num 1 jam sebelum pengumpulan GCF. Kemudian bibir  diretraksi  dan  diisolasi  dengan  menggunakan coton  roll.  Absorbent  paper dimasukkan  dengan
menggunakan teknik superfisial intracrevicular dan dibiarkan selama 3 menit. Absorbent paper diambil, dan  diletakkan  dalan  tabung  eppendorf  yang  telah diisi oleh Phosphate Buffer Solution . Spesimen di- beri  label.  Sampel  yang  diambil  akan  dianalisis menggunakan  ELISA  dan  disimpan  pada  suhu  - 20˚C.
Analisis level NE dilakukan di Laboratorium Bio- medik  Fakultas  Kedokteran  Universitas  Andalas, Sumatera  Barat,  Indonesia.  Sampel  yang  diambil dianalisa  menggunakan  ELISA.  Reagen  yang  di- gunakan Elastase, Human, Kit , HK319-02, Product assays,  quantity 2x96  det, standard  range 0.4-25 ng/ml, detection 0.4ng/ml, working  volume 100 µl/well.
Setiap  subjek  diinstruksikan  untuk  mengisi Food Frequency  Questioner yang  meliputi  220  makanan Minangkabau yang diolah dengan digulai, digoreng, direbus,  ditumis,  dan  dipanggang.  Subjek  juga  di- instruksikan  untuk  mengingat  frekuensi  mengon- sumsi makanan tersebut dalam satu minggu terakhir, porsi dan ukuran dalam unit pengukuran standar. Data  dianalisis  menggunakan  SPSS  17.  Jumlah neutrofil  elastase    ditabulasi  dan  diverifikasi  secara statistik  menggunakan  Kolmogorov  Smirnof  Test untuk menguji distribusi normal dari data, hubungan antara  neutrofil  elastase  dan Periodontal  Disease Index digunakan  uji  ANOVA.  Untuk  melihat  per- bedaan kadar NE antar grup diuji dengan Post- Hoc Bonferroni.  Pearson  Correlation  Test digunakan untuk melihat hubungan konsumsi seng dengan NE.

## HASIL
Subjek penelitian terdiri atas laki-laki 35% berusia rata-rata 21,15 ± 31,18 dan 65% perempuan berusia rata-rata  23,39  ±  4,39.  Jumlah  sampel  adalah  22 orang subjek yang sehat, 22 orang pasien gingivitis ringan, dan 22 orang pasien periodontitis ringan.
Tabel 1. Rata-rata umur subyek berdasarkan jenis kelamin
Umur Jenis kelamin n  % Rata-rata 17-30 tahun Laki-laki 17  35  21,15 ± 31,8 Perempuan 49  65  23,39 ± 4,39
Terdapat  perbedaan  rata-rata  kadar  Neutrofil Elastase berdasarkan  kelompok PDI,  yang tertinggi terdapat pada Periodontitis ringan dengan rata-rata = 9,42 ± 1,06ng/dl. (Tabel 2)
Tabel 2  menunjukkan  penderita gingivitis ringan berpeluang  mengalami  peningkatan  kadar  NE  se- banyak  2,5  kali  lipat    dibanding  kondisi  sehat, sedangkan pada kondisi peridontitis ringan naik 3,7 kali lipat dibanding kondisi sehat.
Untuk  melihat  perbedaan  antar  kelompok  maka dilanjutkan  dengan  uji Post-hoc  Bonferroni .  Ter- dapat  perbedaan  rata-rata  Neutrofil  Elastase  yang signifikan  antara  kelompok  sehat  dengan  gingivitis ringan, kelompok sehat dengan periodontitis ringan, dan  juga  antara  kelompok  gingivitis  ringan  dengan periodontitis ringan (p< 0,05). (Tabel 3)
Tabel 2.  Perbedaan  rata-rata  kadar  neutofil  elastase (ng/dl)  dalam gingival  crevicular  fluid dengan penyakit periodontal Berdasarkan PDI Jenis enzim PDI n Rata-rata p Neutrofil elastase Sehat 22  2,65 ± 1,28 0,00 Gingivitis ringan 22  6,27 ± 1,13 Periodontitis ringan 22  9,42 ± 106 Total 66  6,11 ± 3,47
Tabel 3.  Hasil  uji  Post-Hoc  Bonferroni  kadar  enzim neutrofil elastase antar kelompok PDI Kadar NE PDI Sehat Gingivitis ringan Periodontitis ringan Sehat - 0,000 0,000 Gingivitis ringan 0,000 - 0,000 Periodontitis ringan 0,000 0,000 -
Tabel  4.  Perbedaan  konsumsi  seng  (mg)  diukur  dengan
Food  Frequency  Questioner pada  220  macam makanan Minangkabau berdasarkan PDI PDI n Rata-rata p Sehat 22 6,39 ± 1,26  0,00 Gingivitis ringan 22 4,51 ± 0,34 Periodontitis ringan 22 2,18 ± 0,21 Total 66 4,36
Analisis  statistik  dengan Pearson  correlation  test menunjukkan  koefisien  korelasi  (r)  adalah  -0,784 dengan significance level p= 0,000 antara kadar neu- trophil elastase dengan konsumsi seng.

## PEMBAHASAN
Hasil penelitian ini  menunjukkan  hubungan yang bermakna  antara  kadar  konsumsi  seng  sebagai  ko- faktor  yang  diukur  dengan Food  Frequency  Ques- tioner terhadap  220  jenis  makanan  tradisional Minangkabau   dengan  kadar Neutrofil Elastase da- lam Gingival Crevicular Fluid pada penyakit perio- dontal (p< 0,05).
Pada  66  orang  sampel  terjadi peningkatan kadar
neutrofil  elastase  pada  lokasi  inflamasi  dibanding- kan dengan subjek yang sehat. Ini mengindikasikan bahwa  kadar  neutrofil  elastase  pada  GCF  merupa- kan faktor resiko periodontitis. Rata-rata kadar seng yang dikonsumsi grup kontrol (sehat) adalah 6,39 ± 1,26  mg  lebih  banyak  1,41  kali  dibandingkan  kon- disi  gingivitis  ringan  dan  2,9  kali  dibandingkan kondisi periodontitis ringan. Pasien gingivitis ringan mengkonsumsi seng rata-rata 4,51 ± 0,34 mg. Pada kondisi periodontitis ringan rata-rata konsumsi seng adalah 2,18 ± 0,21 mg.
Berdasarkan  analisis  statistik  dengan Pearson Correlation  Test ,  hubungan  antara  konsumsi Seng sebagai  kofaktor  dengan  kadar  Neutrofil  Elastase arah korelasi negatif dan kekuatan korelasi kuat ( r = -0,784) dengan p = 0,000, yang artinya semakin ber- tambah konsumsi Seng  maka kadar NE rendah. Hal ini menunjukkan bahwa lokasi dengan kadar nutro- fil  elastase  yang  tinggi  mengindikasikan  resiko  pe- ningkatan alveolar  bone  loss dan attachment  loss yang  progresif  dan  sebaliknya,  semakin  rendah  ka- dar NE maka semakin rendah potensi terjadinya ke- rusakan periodontal lebih lanjut. 16
Penyakit  periodontal  merupakan  infeksi  dan  ke- rusakan jaringan periodontal sebagai respon host ter- hadap inflamasi. 17 Pada periodontitis terjadi ulserasi epitel  sehingga  menjadi  jalan  masuk  bagi  bakteri periodontopathogen .  Oleh  karena  itu  banyak  sel imunokompeten  yang direkrut ke  lamina propria di sulcus  epithelium .  Neutrofil  adalah  sel  yang  domi- nan dan merupakan sel penghasil utama NE. 18
Neutrofil  Elastase  (NE)  adalah  enzim  hidrolitik yang berfungsi dalam degradasi material asing yang ditelan dalam proses fagositik. NE adalah protein se- rin dan mengandung rantai tunggal polipeptida dasar dari  218  residu  asam  amino  yang  disatukan  oleh empat ikatan disulfide. NE  juga  memiliki  dua ran- tai  asparagines  yang  terikat  dengan  karbohidrat. Neutrofil Elastase juga dikenal sebagai ELA2 (elas- tase  2,  neutrofil)  merupakan  asam  amino  protease yang sama seperti chymotrypsin yang memiliki sub- strat spesifik yang luas. 11
Neutrofil  Elastase  merupakan  grup  enzim  serine proteinase. Active site NE, yaitu Asparagin, Histidin dan Serin. Substrat NE adalah elastin, collagen tipe III, IV, VI, dan VIII, fibronectin, laminin I, Throm- bospondin,  proteoglican. 9 Neutrofil  Elastase  dise- kresikan  oleh  neutrofil  dan  makrofag  selama  pe- radangan,  menghancurkan  bakteri  dan  jaringan  gi- ngiva,  yang mempunyai  kofaktor  seng dan magne- sium. 11
Seng terlibat dalam metabolisme asam nukleat dan protein, proses diferensiasi dan  replikasi.  Seng  ber- fungsi  dalam  mengkontrol  imunitas  yang  diperan- tarai  sel.  Seng  dapat  meningkatkan  jumlah  sel  T-
effector,  T-prekursor,  dan  aktivitas  sel  pembentuk antibody. 19
Kerusakan   jaringan host pada   penyakit  perio- dontal dapat disebabkan oleh aktivitas neutrofil elas- tase  yang  destruktif.  Neutrofil  elastase  merupakan enzim  yang  paling  destruktif  di  tubuh  dengan  ke- mampuan untuk mendegradasi protein matriks eks- traseluler (termasuk kolagen, proteoglikan, fibronek- tin,  reseptor  platelet,  reseptor  komplemen, throm- bomodulin, surfactant paru dan cadherins ) dan pro- tein  plasma  (termasuk  faktor  komplemen,  immu- noglobulin,  beberapa  protease  dan  inhibitor  pro- tease).  Inhibitor  NE  adalah  α1-antitrypsin.  Dalam kondisi  fisiologis  kadar  NE  dan  inhibitornya  se- imbang  sehingga  dapat  meregulasi  aktivitas  NE dengan membentuk “ antiprotease screen ”. 11
Pada  keadaan  patologis,  antiprotease  didegradasi oleh  oksida-oksida  hasil  fagositosis  bakteri  seperti O 2 − ,  H 2 O 2 ,  OH  dan  OCl − .  Oleh  karena  itu  ,  kon- sentrasi  NE  menjadi  lebih  banyak  daripada  inhibi- tornya,  sehingga  menyebabkan  kerusakan  jaring- an. 20 Sebagai  kofaktor,  seng  memiliki  sifat  anti- oksidan  yang  menstabilkan  struktur  membran  sel yang  berkontribusi  pada  struktur superoxide  dis- mutase dan  menjaga  konsentrasi metallothionein jaringan, sehingga seng dapat menetralkan aktivitas destruktif  NE  yang  dipicu  oleh  oksida-oksida  hasil fagositosis.  Defisiensi  seng  dapat  mengakibatkan kerusakan jaringan akibat stres oksidatif. 21
Kesimpulan, konsumsi level seng lebih rendah pa- da  periodontitis  ringan  daripada  gingivitis  ringan dan  kelompok  kontrol  sehat.  Seng  dapat  menekan aktivitas destruktif neutrofil elastase. Konsumsi sup- lemen  seng  dapat  dipertimbangkan  sebagai  pen- cegahan dan perawatan penyakit periodontal.

## Daftar Pustaka
1. Mujico JR, Pérez-de-Heredia F, Gómez-Martínez S, Marcos  A.  In:  Mahin  K,  Malnutrition  And  In- flammation,  Inflammation,  Chronic  Diseases  And Cancer - Cell And Molecular Biology, Immunology And Clinical Bases. InTech 2012: 367-1.
2. Socransky  SS,  Haffajee  AD,  Goodson  JM,  Lindhe J. New concepts of destructive periodontal disease. J Clin Periodontol 2005;11: 21-32.
3. Nagase  H,  Visse  R,  Murphy  G.  Structure  and function  of  matrix   metalloproteinase   and  TIMP. Cardiovascular Res 2006; 69: 562-70.
4. Lamster IB, Ahlo J. Analysis of gingival crevicular fluid as applied to the diagnosis of oral andsystemic diseases. Ann N Y Acad Sci 2007; 1098: 216-29.
5. Ganowicz  E.  Salivary  diagnostics–diseases  of  the oral cavity. Dent Med Probl 2011; 48: 421-30.
6. Bostanci N, Ilgenli T, Emingil G, Afacan B, Han B, Töz  H,  et  al.  Gingival  crevicular  fluid  levels  of
RANKL  and  OPG  in  periodontal  diseases:  imply- cations  of  their  relative  ratio.  J   Clin   Periodontol 2007; 34: 370-6.
7. Carroll TP, Catherine MG, Cliff T,Noel GM, Shane JO.  Interleukin1,  neutrophil  elastase,  and  lipo- polysaccharide:  key  proinflammatory  stimuli  regu- lating  inflammation  in  cysticfibrosis.  Current  Res- piratory Medicine Reviews  2005; 1(1): 43-67.
8. Nicu  EA,  Van  der  Velden  U,  Everts  V,  Van Winkelhoff  AJ,  Roos  D,  Loos  BG.  Hyper-reactive PMNs in Fc gamma RIIa 131 H/H genotype perio- dontitis  patients.  J  Clin  Periodontol  2007;  34: 938-45.
9. Mizuno T, Yau TM, Weisel RD, Kiani CG, Li RK. Elastin stabilizes an infarct and preserves ventricular function. Circulation 2005; 30 (Suppl.9): 181-8.
10. Daamen  WF,  Verkamp  JH,  van  Hest  JCM, Kuppervelt  TH.  Elastin  as  Biomaterial  for  Tissue Enginering. Biomaterials 2007; 28: 4378-98.
11. Matsuse  H,  Yanagihara  K,  Mukae  H,  Tanaka  K, Nakazato  M,  Kohno  S.  Association  Of  Plasma Neutrophil  Elastase  Levels  With  Other  Inflam- matory  Mediators  And  Clinical  Features  In  Adult Patients  With  Moderate  And  Severe  Pneu-monia. Respir Med. 2007; 101(7):1521-8.
12. Roohani N, Richard H, Roya K, Rainer. Zinc and its importance  for  human  health:  An  integrative  re- view.J Res Med Sci 2013; 18(2): 144-57.
13. Orbak  R,  Kara  C,  Ozbek  E,  Tezel  A,  Demir  T. Effects  of  zinc  deficiency  on  oral  and  periodontal diseases  in  rats.  J  Periodontol  Res  2007;  42(2): 138-43.
14. Prasad AS, Beck FW, Snell DC, Kucuk O. Zinc In Cancer Prevention. Nutr Cancer 2009; 61: 879-87.
15. Winkvist  A,  Hörnell  A,  Hallmans  G,  Lindahl  B, Weinehall L, Johansson I. More distinct food intake patterns  among  women  than  men  in  northern Sweden: a population-based survey. Nutrition Jour- nal 2009; 8: 12.
16. Geraghty  P,  Mark  PR,  Catherine  MG,  Rachel MMB,    Tiphine  P.  Neutrophil  elastase  up-regulate cathepsin  B  and  matrix  metalloproteinase  expres- sion 2007.e-publicational@RCSI: http ://epubs. rsci. ie/medart/12.
17. Kornman  KS.  Mapping  the  pathogenesis  of  perio- dontitis: A new look.J Periodontol 2008;79 (Suppl. 8) 1560-8.
18. Boşca  AB,  Miclăuş  V,  Raţiu  C,  Melincovici  C. Matrix  Metalloproteinase-8  -  a  salivary  diagnostic biomarker  related  to  soft  tissue  destruction  in chronic periodontitis.  Annals  Of  RSCB 2012;  Vol. XVII, Issue 1.
19. Femiano F, Gombos F, Scully C. Recurrent herpes labialis: A pilot study of the efficacy of zinc therapy. Oral Pathol Med 2005; 34: 423-5.
20. Welters ID,  Hirsch  J,  Menzebach  A,  Hempelmann G,  Müller  M.  Activation  of  granulocytes  and antiproteases  in   open   heart   surgery.  Anasthesiol Intensivmed  Notfallmed  Schmerzther  2005; 40(3): 164-72.
21. Song  Y,  Leonard  SW,  Traber  MG,  Ho  E.  Zinc deficiency  affects   dna   damage,  oxidative   stress,
antioxidant defenses, and DNA repair in rats. J Nutr
2009;139(9): 1626-31.