## ANTIOXIDANT AND SUN PROTECTION FACTOR POTENCY OF
AMBON BANANA WHITE ( Musa acuminata AAA) PEEL
EXTRACT

## Harry Noviardi, Eem Masaenah, Kurniati Indraswari
Program Studi S1 Farmasi, Sekolah Tinggi Teknologi Industri dan Farmasi Bogor, Jl. Kumbang No. 23, Bogor, Indonesia.
Corresponding author: Harry Noviardi (harry.noviardi@gmail.com)

## ARTICLE HISTORY
Received: 6 May 2020 Revised: 10 August 2020                Accepted: 14 ugust 2020

## Abstract
Ambon  banana  white  peel  contains  flavonoid  compunds.  Flavonoid  could  be potentially natural antioxidants. Antioxidants could function to ward off free radicals. Free radicals and sunlight could cause a negative intense on the skin. This research aimed to determine the antioxidant activity and sun protective factor of white Ambon banana (Musa acuminata AAA) white peel Extract. Banana peel was extracted using ethanol,  water  and  ethyl  acetate  solvent.  Determination  of  antioxidant  activity  was done  by  DPPH  method,  while  determination  of  value  sun  protective  factor  with spectrophotometric  method.  The  results  of  antioxidant  activity  showed  the  ethanol extract had IC 50 values of 121,34 μg/mL, followed by water and ethyl acetate 136,40 μg/mL, 159,88 μg/mL repectively.  The result of determination sun protective factor value ethanol extract, water fraction, ethyl acetate fraction, respectively 11,579; 3,572; 2,018 respectively. The antioxidant activity of the three extracts were belonged to the medium category. An ethanol extract of ambon banana white peel had higher value of sun protective factor.
Key words: antioxidants, banana peel, flavonoid, sunscreen.

## POTENSI ANTIOKSIDAN DAN TABIR SURYA EKSTRAK KULIT BUAH PISANG AMBON PUTIH ( Musa acuminata AAA)

## Abstrak
Kandungan senyawa golongan flavonoid yang terdapat pada kulit pisang ambon putih dapat berpotensi sebagai antioksidan alami. Antioksidan dapat berfungsi menangkal radikal bebas. Radikal bebas dan sinar matahari dapat menimbulkan dampat negatif pada kerusakan kulit. Penelitian ini bertujuan menentukan aktivitas antioksidan dan tabir surya dari ekstrak kulit pisang ambon putih ( Musa acuminata AAA). Kulit pisang ambon putih diekstraksi pelarut etanol, air, dan etil asetat dengan metode maserasi. Penentuan  aktivitas  antioksidan  dengan  menggunakan  metode  DPPH,  sedangkan penentuan  nilai  SPF  dengan  metode  spektrofotometri.  Hasil  aktivitas  antioksidan menunjukan ekstrak etanol memiliki nilai IC 50 yaitu 121,34 μg/mL, diikuti dengan fraksi air  136,40  μg/mL  dan  fraksi  etil  asetat  159,88  μg/mL.  Hasil  penentuan  nilai  SPF ekstrak etanol, fraksi air, fraksi eti asetat secara berturut-turut sebesar 11,579; 3,572; 2,018.  Aktivitas  antioksidan  ketiga  ekstrak  kulit  pisang  ambon  putih  masuk  dalam kategori sedang. Nilai SPF tertinggi terdapat pada ekstrak pelarut etanol.
Kata kunci: antioksidan, flavonoid, kulit pisang, tabir surya.

## Pendahuluan
Paparan  sinar  matahari  dalam  jumlah  berlebih  dapat  menyebabkan  kerusakan pada  kulit  seperti  terjadinya  penuan  dini 1 .  Gelombang  elektromagnetik  yang terkandung  di  dalam  sinar  matahari,  terdiri  atas  beberapa  spketrum,  antara  lain spektrum ultra violet (UV A, UV B, dan UV C), sinar infra merah, serta sinar tampak. Spektrum sinar tersebut memiliki energi yang tinggi dan bersifat karsinogenik 2 . Sinar UV  A  dan  UV  B  merupakan  spektrum  sinar  matahari  yang  dapat  menyebabkan dermatoheliosis  pada  kulit.  Radiasi  sinar  UV  dapat  menyebakan  terjadinya peningkatan kandungan pigmen melanin pada kulit 3 .  Di dalam tubuh manusia radikal bebas  dapat  menjadi  bahan  berbahaya yang  dapat menyebabkan  kerusakan  pada sel tubuh atau pertumbuhan sel yang tidak bisa dikendalikan 4 . Radikal bebas bersifat reaktif karena disebabkan oleh adanya elektron yang tidak berpasangan. Efek negatif dari paparan matahari dan radikal bebas dapat dicegah dengan menggunakan tabir surya dan antioksidan 5,6 .
Senyawa  antioksidan  dapat  menghambat  inisiasi  pembentukkan  radikal  bebas. Antioksidan berperan dalam memberikan elektron pada radikal bebas. Elektron bebas akan  menjadi  berpasangan  sehingga  dapat  mencegah  kerusakkan  sel  tubuh 7 . Antioksidan dapat berupa enzim seperti katalase, glutation perioksidase, superoksida dismutase maupun zat non-enzim yaitu vitamin E, vitamin C, beta karoten, vitamin A, metionin, katekin dan antosianin 8 . Antioksidan juga banyak terdapat pada tanaman. Kandungan fitokimia yang terdapat di dalam tanaman antara lain, golongan senyawa flavonoid, alkaloid dan tanin, berpotensi sebagai antioksidan 9 .
Tanaman pisang merupakan tanaman hortikultura penting karena kaya akan gizi dan  mempunyai  nilai  ekonomis  yang  tinggi.  Tanaman  pisang  juga  dapat  diolah menjadi produk olahan dan bagian tanaman lainnya dapat dimanfaatkan untuk bahan industri 10 . Pisang Cavendish (pisang ambon) nerupakan salah satu jenis pisang yang berpotensi sebagai antioksidan. Berdasarkan pada penelitian sebelumnya, kulit buah pisang ambon memiliki aktivitas antioksidan lebih tinggi dibandingkan dengan daging buahnya 11 .  Pisang  ambon  mengandung  senyawa  flavonoid  galokatekol  berpotensi sebagai  antioksidan.  Senyawa  golongan  fenol  seperti  asam  fenilpropanoid,  lignin, tanin,  kumarin,  falavonoid  dan  iso-flavonoid  dapat  dijadikan  bahan  aktif  tabir  surya alami 12 .  Pada  penelitian  Sari  (2014)  kulit  pisang  ambon  putih  telah  dibuat  menjadi sediaan  krim  tabir  surya  namun  sediaan  krim  tabir  surya  tersebut  menggunakan ekstrak etil asetat sedangkan senyawa flavonoid memiliki tingkat kepolaran yang lebih polar  dibandingkan  dengan  asam  asetat 13 .  Oleh  karena  itu  penelitian  ini  bertujuan untuk menentukan aktivitas antioksidan dan faktor pelindung surya pada ekstrak kulit buah pisang ambon putih dengan menggunakan pelarut etanol, air dan etil asetat.

## Metode

## Alat
Alat-alat  yang  digunakan  pada  penelitian  adalah  peralatan  gelas  laboratorium (Pyrex),  cawan  porselen,  corong  pisah,  botol  coklat,  pengayak  no.40, blender (Phillips), neraca analitik (HWH DJ 6002 A), desikator, rotary vacum evaporator (RV 10 Digital V), spektrofotometer UV- Vis (Shimadzu).

## Bahan
Bahan-bahan  penelitian  yang  digunakan,  yaitu  kulit  pisang  ambon  putih,  kertas saring, alumunium foil, Etanol 70% (Teknis), etil asetat, akuades, pereaksi Wagner (larutan  I 2 dalam  kalium  iodida),  pereaksi  Mayer  (merkuri  kalium  iodida),  pereaksi
Dragendorff  (bismut  kalium  iodida),  Vitamin  C,  DPPH  (Sigma),  HCl  pekat  (Merck), amil alkohol, HCl 2N, FeCl 3 , kloroform, dan asetat anhidrat.

## Prosedur

## Pengambilan dan Pengolahan Simplisia Kulit Pisang Ambon
Pisang ambon putih didapat dari perkebunan Kelompok Tani Berkah Tani Unggul di Sukabumi. Pisang ambon yang matang dibersihkan dan dikupas kulit pisang ambon putih.  Kulit  dicuci  hingga  bersih  dengan  air  yang  mengalir.  Proses  pengeringan sampel  dilakukan  dengan  menggunakan  oven  dengan  suhu  60ºC  selama  7  hari. Selanjutnya  kulit  pisang  ambon  putih  dibuat  serbuk  dengan  blender,  dan  diayak menggunakan  pengayak  ukuran  40  mesh.  Simplisia  serbuk  dimasukkan  ke  dalam botol coklat dan dianalisis kadar air.

## Determinasi Simplisia Kulit Pisang Ambon
Simplisia  kulit  pisang  yang  digunakan  pada  penelitian  dilakukan  determinasi. Deteminasi dilakukan pada Pusat Penelitian Biologi, LIPI Cibinong, Jawa Barat.

## Pembuatan Ekstrak Simplisia Kulit Pisang Ambon
Etanol,  air  dan  etil  asetat  digunakan  sebagai  pelarut  dalam  proses  maserasi simplisia kulit pisang ambon. Sebanyak 200 g simplisia kulit pisang direndam dengan pelarut  etanol  70%.  Ekstraksi  dilakukan  selama  3  x  24  jam.  Ekstrak  etanol  yang diperoleh  selanjutnya  dipekatkan  dengan rotary  vacuum  evaporator .  Partisi  ekstrak etanol  kulit  pisang  ambon  putih  dilakukan  dengan  menggunakan  corong  pisah. Ekstrak  etanol  kulit  pisang  ambon  putih  masing-masing  ditimbang  sebanyak  30  g disuspensikan dengan campuran air dan etanol (9:1) kemudin dimasukan ke dalam corong  pisah  dan  ditambahkan  etil  asetat  dengan  perbandingan  1:1.  Campuran dikocok selama 15 menit hingga terbentuk 2 lapisan dan dipisahkan fase-fase yang terbentuk. Fase etil asetat dan air diuapkan dengan rotary vacuum evaporator . Bobot fraksi-fraksi  ekstrak  kulit  pisang  ambon  putih  yang  diperoleh  ditentukan  nilai rendemen.  Ekstrak  kental  kulit  pisang  yang  didapat  dari  masing-masing  fraksi dilakukan penapisan fitokimia.

## Penentuan Aktivitas Antioksidan Ekstrak
Penentuan aktivitas antioksidan dilakukan terhadap ekstrak etanol, fraksi air, dan etil asetat. Vitamin C dibuat larutan induk dengan konsentrasi 1000 ppm. Sebanyak 50 mg vitamin C ditimbang dan dilarutkan pelarut etanol 50 mL. Konsentrasi standar vitamin  C  dibuat  masing-masing  2,5;  5;  7,5;  10;  12,5;  15  ppm.  Ekstrak  dan  fraksi ekstrak  kulit  pisang  ambon  putih  masing-masing  ditimbang  sebanyak  100  mg, kemudian  dilarutkan  dalam  100  mL  etanol  sehingga  diperoleh  larutan  dengan konsentrasi 1000 ppm sebagai larutan induk. Larutan induk dari masing-masing fraksi dibuat  konsentrasi  50;  75;  100;  125;  150;  175;  200  ppm.  Penentuan  aktivitas antioksidan  dilakukan  dengan  cara  ditambahkan  2  mL  larutan  DPPH  60  ppm  dan etanol  sampai  2  mL  ke  dalam  tiap-tiap  konsentrasi  pada  sampel  maupun  baku pembanding. Semua larutan diinkubasi di tempat gelap selama 30 menit. Absorbansi larutan  diukur  pada  panjang  gelombang  523  nm  dengan  spektrofotometer  UV- Vis . Persentase inhibisi ekstrak dihitung menggunakan rumus berikut:
% Inhibisi = absorbans blanko − absorbans sampel absorbans blanko × 100%

## Penentuan Nilai SPF Ekstrak
Pengujian nilai  SPF  dilakukan  pada  ekstrak,  fraksi  air,  dan  etil  asetat.  Masing- masing ekstrak dan fraksi ekstrak kulit pisang ambon putih ditimbang sebanyak 50
mg  kemudian  dimasukkan  ke  dalam  labu  ukur  100  mL  (500  ppm)  dan  diencerkan dengan etanol 70%, lalu diukur serapannya menggunakan spektrofotometer UV- Vis . Sebagai  blanko  digunakan  larutan  etanol  70%.  Nilai  SPF  dihitung  menggunakan persamaan  Mansur.  Spektrum  serapan  (Abs)  sampel  diperoleh  dengan menggunakan spektrofotometer UV- Vis pada panjang gelombang 290-320 nm dan larutan etanol 70% sebagai blanko. Nilai serapan sampel dicatat setiap interval 5 nm dari  panjang  gelombang  290-320  nm.  Hasil  pengukuran  serapan  sampel  yang diperoleh setelah pengukuran dikalikan dengan EE X I untuk masing-masing interval. jumlah EE x I yang diperoleh dikalikan dengan faktor koreksi akhirnya diperoleh nilai SPF  dari  sampel  yang  diuji.  Nilai  SPF  dari  ekstrak  dapat  tentukan  dengan menggunakan persamaan berikut
SPF = CF X  ∑ EE (λ)X I (λ) 320 290 X Abs (λ)
Keterangan:
EE  = Spektrum efek eritema I      = Spektrum intensitas sinar; Abs = Absorbansi CF  = Faktor koreksi

## Hasil
Tabel 1. Kandungan fitokimia ekstrak kulit pisang ambon
Golongan senyawa Ekstrak etanol Fraksi air Fraksi etil asetat Alkaloid: Mayer Wagner Dragendorff - - - - - - - - - Flavonoid + + + Saponin + + - Tannin - - - Steroid & triterpenoid - - -
Gambar  1. Kurva  persamaan  regresi  linear  antara  konsentrasi  sampel  terhadap persentase inhibisi
Gambar 2. Nilai IC 50 ekstrak etanol dan fraksi air, etil asetat kulit pisang ambon. 7,07 121,34 136,4 159,88 0 40 80 120 160 200 Vitamin C Ekstrak Etanol Fraksi Air Fraksi Etil Asetat Nila i IC 50 (μ g /m L )
Gambar 3. Nilai SPF ekstrak etanol dan fraksi air, etil asetat kulit pisang ambon.

## Pembahasan

## Karakteristik Ekstrak Simplisia Kulit Pisang Ambon
Pisang  Ambon  Putih  yang  digunakan  diperoleh  dari  perkebunan  di  Daerah Warungkiara,  Kabupaten  Sukabumi.  Determinasi  kulit  pisang  ambon  dilakukan  di Pusat Penelitian Biologi, LIPI Bidang Botani. Berdasarkan hasil determinasi, simplisia yang digunakan dalam penelitian merupakan Musa acumiata AAA berasal dari suku Musaceae dengan  nama  daerah  pisang  ambon  putih.  Hasil  penepatan  kadar  air ekstrak kulit pisang Ambon yaitu sebesar 16,68%.
Proses ekstraksi dengan menggunakan pelarut etanol 70% sesuai dengan tingkat kepolaran  zat  aktif  yang  terdapat  pada  simplisia.  Proses  ekstraksi  dimulai  dengan merendam  serbuk  simplisia  dengan  pelarut  yang  sesuai  hingga  serbuk  simplisia terendam  selama  beberapa  hari  pada  suhu  kamar  dan  terhindar  dari  cahaya  agar kerusakan atau degradasi metabolit dapat diminimalisasi. Ekstrak cair yang didapat dari  proses  ini  sebanyak  2  liter,  ekstrak  cair  kemudian  dipekatkan  menggunakan rotary  vacuum  evaporator dengan  suhu  50ºC  dan  putaran  60  rpm  untuk menghilangkan  pelarut  pada  ekstrak.  Digunakan  suhu  sebesar  50ºC  dikarenakan senyawa  target  adalah  senyawa  flavonoid  dimana  senyawa  tersebut  tidak  tahan terhadap  pemanasan.  Didapatkan  ekstrak  kental  sebanyak  63,46  gram  berwarna coklat berbau khas, setelah proses ekstraksi dilakukan perhitungan persen rendemen. Adapun hasil persen rendemen yang didapat yaitu sebanyak 31,73%.
Partisi merupakan proses pemisahan senyawa dalam dua jenis zat pelarut yang tidak  saling  bercampur.  Partisi  bertujuan  untuk  memisahkan  senyawa  aktif  yang bercampur sehingga senyawa tertarik ke dalam masing-masing pelarut berdasarkan tingkat kepolarannya 14 . Fraksi yang di dapat dari proses partisi kemudian diuapkan menggunakan rotary vacuum evaporator . Adapun hasil % rendemen fraksi air sebesar 24,3%  dan  fraksi  etil  asetat  sebesar  12%,  hal  ini  menunjukan  bahwa  senyawa flavonoid lebih banyak tertarik pada pelarut yang bersifat polar. Kandungan fitokimia dari masing-masing ekstrak dapat dilihat pada Tabel 1. Hasil uji fitokimia pada ekstrak etanol dan fraksi air menunjukan hasil positif pada senyawa flavonoid dan saponin sedangkan  pada  fraksi  etil  asetat  menunjukan  hasil  positif  hanya  pada  senyawa flavonoid.
14,846 11,579 3,572 2,018 0 2 4 6 8 10 12 14 16 Vitamin C Ekstrak Etanol Fraksi Air Fraksi Etil Asetat N ila i S PF Perlakuan

## Aktivitas Antioksidan dan Tabir Surya Ekstrak dan Fraksi Kulit Pisang
Metode  DPPH  digunakan  pada  penentuan  antioksidan.  Panjang  gelombang maksimum yang digunakan pada penelitian ini adalah 523 nm. Panjang gelombang tersebut  memberikan  serapan  maksimal  pada  larutan  bewarna  kuning.  Larutan sampel  setelah  diberikan  perlakuan  DPPH  akan  berubah  menjadi  warna  ungu menjadi  kuning 15 .  Vitamin  C  digunakan  sebagai  kontrol  positif  pada  penelitian  ini. Antioksidan  dapat  diukur  aktivitasnya  dengan  menetukan  nilai  IC 50 .  Nilai  IC 50 merupakan  nilai  konsentrasi  sampel  yang  dapat  menghambat  50%  radikal  bebas 1 . Deret variansi konsentrasi dibuat dari masing-masing ekstrak dan kontrol positif untuk mendapatkan nilai regresi linear (Gambar 1).
Regresi  linear digunakan untuk menentukan nilai  IC 50 sampel.  Hasil  penentuan aktivitas antioksidan dari masing-masing ekstrak menunjukkan bahwa ekstrak etanol, fraksi air, dan fraksi etil asetat kulit pisang ambon putih memiliki aktivitas antioksidan sedang dengan nilai IC 50 berturut- turut 121,34; 136,40; 159,88 μg/mL (Gambar 2). Hasil  pengukuran  aktivitas  antioksidan  menunjukkan  terdapat  hubungan berbanding  terbalik  antara  konsentrasi  dan  absorbansi  sampel.  Penurunan  nilai absorbansi  larutan  uji  menunjukkan  konsentrasi  senyawa  antioksidan  semakin meningkat.  Penurunan  niloai  absorbansi  larutan  uji  terjadi  karena  senyawa antioksidan  memberikan  hIdrogen  atau  eleKtron  sehingga  terjadi  perubahan  pada warna  DPPH.  Reaksi  penghambatan  DPPH  oleh  antioksidan  dapat  dilihat  pada Gambar 4 16 . Nilai IC 50 semakin kecil memiliki aktivitas antioksidan semakin besar 1 .
Gambar 4. Mekanisme penghambatan DPPH dari senyawa antioksidan 16 .
SPF  merupakan  nilai  kuantitatif  dari  kemampuan  tabir  surya  dalam  melindungi kulit  dari  paparan  sinar  UV 1,17 .  Semakin  tinggi  nilai  SPF,  akan  memberikan perlindungan lebih baik terhadap paparan sinar UV. Hasil pengukuran nilai SPF dari ekstrak etanol, fraksi air, dan fraksi etil asetat kulit pisang ambon putih menghasilkan nilai SPF yang berbeda. Vitamin C sebagai pembanding memiliki nilai SPF  sebesar 14,486 (Gambar 3).
Ekstrak etanol mempunyai nilai SPF yaitu 11,579 yang masuk ke dalam kategori proteksi maksimal kemudian diikuti oleh  fraksi air 3,572 dan fraksi etil asetat 2,018 yang  masuk  ke  dalam  kategori  proteksi  minimal.  Senyawa  flavonoid  mempunyai potensi sebagai tabir surya yang tinggi karena adanya gugus kromofor yang mampu menyerap sinar UV sehingga mengurangi intensitasnya pada kulit 18 .

## Kesimpulan
Aktivitas antioksidan menunjukan bahwa ekstrak etanol, fraksi air, dan fraksi etil asetat kulit pisang ambon putih memiliki aktivitas antioksidan sedang dengan nilai IC 50 berturut- turut 121,34; 136,40; 159,88 μg/ml. Ekstrak etanol mempunyai nilai SPF yaitu 11,579 yang masuk ke dalam kategori proteksi maksimal kemudian diikuti oleh fraksi air 3,572 dan fraksi etil asetat 2,018 yang masuk ke dalam kategori proteksi minimal. Kandungan fitokimia ekstrak kulit pisang ambon memiliki kandungan flavonoid yang dapat berperan sebagai antioksidan.

## Daftar Pustaka
1.   Mulangsari DAK, Puspitasari AD. Uji Aktivitas Tabir Surya Ekstrak Etanol Daun Kersen ( Muntingia calabura ). Cendekia Eksakta. 2017; 2(2): 65-69.
2.  Widyastuti, Kusuma AE, Nurlaili, Sukmawati F.  Aktivitas Antioksidan dan Tabir Surya Ekstrak Etanol Daun Stroberi ( Fragaria x ananassa A.N. Duchesne ). Jurnal Sains Farmasi & Klinis. 2016; 3(1):19-24.
3.  Sofiana R, Wiraguna AAGP, Pangkahila W. Krim Ekstrak Etanol Biji Mengkudu (Morinda citrifolia) Sama Efektifnya Dengan Krim Hidrokuinon Dalam Mencegah Peningkatan Jumlah Melanin Kulit Marmut ( Cavia porcellus ) yang Dipapar Sinar Ultraviolet B. Jurnal e-Biomedik. 2017; 5(1):1-6.
4.  Mohammed  MT,  Kadhim  SM,  Jassim  AMN,  Isam  S.  Free  radicals  and  human health. International Journal of Innovation Sciences and Research. 2015; 4:218- 223.
5.  Whenny,  Rusli  R,  Rijai  L.  Aktivitas  Tabir  Surya  Ekstrak  Daun  Cempedak ( Artocarpus champeden spreng ). Jurnal Sains dan Kesehatan. 2015; 1(4):154- 158.
6.  Dungir SG, Katja DG, Kamu VS. Aktivitas Antioksidan Ekstrak Fenolik dari Kulit Buah Manggis (Garcinia mangostana L.). Jurnal MIPA Unsrat. 2012; 1(1):11-15.
7.  Arnanda  QP,  Nurwarda  RF.  Penggunaan  Radiofarmaka  Teknesium-99M  Dari Senyawa Glutation Dan Senyawa Flavonoid Sebagai Deteksi Dini Radikal Bebas Pemicu Kanker. Farmaka. 2019; 17(2):236-243.
8.  Zulaikhah  ST.  The  Role  of  Antioxidant  to  Prevent  Free  Radicals  in  The  Body. Sains Medika. 2017;8(1):39-45.
9.  Wimpy, Suharyanto. Uji Aktivitas Antioksidan Kombinasi Ekstrak Sarang Semut ( Myrmecodia  Pendans )  dan  Daun  Sirsak  (Annona  Muricata)  dengan  Metode DPPH (2,2-diphenyl-1-picrilhidrazyl). Journal of Pharmacy. 2014; 3:18-24.
10.  Suhartono,  R.  Sobir.  Harti,  H.  Teknologi  Sehat  Budidaya  Pisang;  Dari  Benih Sampai Pasca Panen. Bogor: Pusat Kajian Hortikular Tropika, LPPM-IPB; 2012. 11.  Someya S, Yoshiki Y, Okubo K. Antioxidant Compounds From Bananas (Musa Cavendish). Journal Food Chemistry. 2002;79(3):351-354.
12.  Suryanto E, Momuat L, Wehantouw F, Patty W. Potensi Antioksidan Fenolik Dari Famili Myrtaceae Dan Perannya Sebagai Bahan Aktif Tabir Surya. Chem. Prog. 2010; 3(2):74-80.
13.  Corradini  E,  Foglia  P,  Giansanti  P,  Gubbiotti  R,  Samperi  R,  Laganà  A. Flavonoids:  chemical  properties  and  analytical  methodologies  of  identification and quantitation in foods and plants', Natural Product Research 2011; 25: 5, 469- 495.
14.  Otsuka H. Purification by Solvent Extraction Using Partition Coefficient. Natural Products Isolation. 2006; 269-273.
15.  Wahdaningsih  S,  Setyowati  EP,  Wahyuono  S.    Aktivitas  Penangkap  Radikal Bebas  Dari  Batang  Pakis  ( Alsophila  glauca J.  Sm).  Majalah  Obat  Tradisional. 2011;16(3):156-160.
16.  Teixeira  J,  Gaspar  A,  Garrido  EM,  Garrido J,  Borges F.  Hydroxycinnamic  acid antioxidants: an electrochemical overview. Biomed Res Int. 2013; 2013:251754.
17.  Schalka  S,  Reis  VMSD.  Sun  protection  factor:  meaning  and  controversies.  An Bras Dermatol. 2011;86(3):507-515.
18.  Wolf  R,  Wolf  D,  Morganti  P,  Ruocco  V.  Sunscreens.  Clin  Dermatol. 2001;19(4):452-9.