## POTENSI SELADA AIR ( Nasturtium Officinale R. Br) SEBAGAI ANTIOKSIDAN DAN AGEN ANTIPROLIFERASI TERHADAP SEL MCF-7 SECARA IN VITRO
( Antioxidant and agent anti-proliferation of extract Watercress [ Nasturtium officinale R. Br ] for MCF-7 cells in vitro )
Dewi Rahmayani Rahman 1* , Rimbawan 1 , Siti Madanijah 1 , Sri Purwaningsih 2 1 Departemen Gizi Masyarakat, Fakultas Ekologi Manusia (FEMA), Institut Pertanian Bogor, Bogor 16680 2 Departemen Teknologi Hasil Perairan, Fakultas Perikanan Ilmu Kelautan (FPIK), Institut Pertanian Bogor, Bogor 16680

## ABSTRACT
This study aimed to determine the potential of watercress extract as an antioxidant and antiproliferation against cancer cells in vitro. Cells used in this study were breast cancer culture cells (MCF-7) and vero cells. Watercress was extracted using water solvent and 70% ethanol. Phytochemical test was performed on both types of extract. Toxicity test was measured using BSLT method, assessment of antioxidant activity was measured using DPPH method and inhibitory proliferation in cancer cell was measured using MTT Assay method. Analysis of the data using ANOVA, if there is a significant difference between treatments will be followed up with Duncan test. The results of phytochemical tests showed that watercress extracts had bioactive content namely flavonoids, tannins, saponins, and steroids. The result of BSLT test showed that the strongest extract toxicity was 70% ethanol extract with LC 50 value of 406.02 ppm and had the highest antioxidant activity with IC50 value of 102.26 ppm, while proliferation inhibitory test found in MCF-7 breast cancer cells had IC50 value of 1.696 μg / ml and not toxic to vero cells. Result showed that the ethanolic extract of Nasturtium Officinale gave a significant effect on MCF-7 breast cancer cells inhibition (p=0.015) at concentration 50, 400, 800 and 1000 ppm. The mechanism of proliferative inhibition was associated with phytochemical content present in watercress.
Keywords : antioxidant, cancer cell, nasturtium officinale, phytochemical

## ABSTRAK
Penelitian ini bertujuan mengetahui potensi dari ekstrak  selada air sebagai antioksidan dan antiproliferasi terhadap sel kanker secara in vitro . Sel yang digunakan pada penelitian ini yaitu sel kultur kanker payudara (MCF-7) dan sel vero. Selada air diekstrak dengan menggunakan pelarut air dan etanol 70%, uji fitokimia dilakukan pada kedua jenis ekstrak. Uji toksisitas menggunakan metode BSLT, penilaian aktivitas antioksidan diukur dengan menggunakan metode DPPH dan daya hambat proliferasi pada sel kanker menggunakan metode MTT Assay. Analisis data menggunakan ANOVA, jika terdapat pengaruh nyata antar perlakuan dilakukan uji lanjut berupa uji Duncan dengan menggunakan program SPSS. Hasil uji fitokimia menunjukkan bahwa ekstrak selada air memiliki kandungan bioaktif yaitu flavonoid, tanin, saponin, dan steroid. Hasil uji BSLT menunjukkan bahwa toksisitas ekstrak paling kuat adalah ekstrak etanol 70% dengan nilai LC 50 sebesar 406,02 ppm dan aktivitas antioksidan tertinggi dengan nilai IC 50 sebesar 102,26 ppm, sedangkan uji daya hambat proliferasi pada sel kanker payudara MCF-7 ditemukan nilai IC 50 1,696 µg/ml dan tidak bersifat toksik pada sel vero. Berdasarkan hasil uji ANOVA ekstrak etanol selada air berpengaruh signifikan terhadap daya hambat sel MCF-7 dengan nilai p sebesar (p=0,015) pada konsentrasi 50, 400, 800 dan 1000 ppm. Mekanisme daya hambat proliferasi dikaitkan dengan kandungan fitokimia yang terdapat pada selada air.
Kata Kunci: a ntioksidan, fitokimia, nasturtium officinale , sel kanker
* Korespondensi: Telp: +6285298394334 , Surel: dewirahmayanirahman@gmail.com
J. Gizi Pangan, Volume 12, Nomor 3, November 2017
ISSN 1978-1059  EISSN 2407-0920 DOI: 10.25182/jgp.2017.12.3.217-224 Terakreditasi SK Menristek Dikti 12/M/Kp/II/2015
Rahman dkk.

## PENDAHULUAN
Penggunaan bahan alam sebagai obat- obatan tradisional sejak dahulu kala telah diterima secara luas baik di negara berkembang maupun di negara-negara maju. Selama 20 tahun terakhir perhatian dunia terhadap obat-obatan tradisional telah meningkat. World Health Organization (WHO) menyebutkan bahwa 65% dari penduduk negara maju menggunakan pengobatan tradi- sional dan obat-obat dari bahan alami (Depkes RI 2007). Tanaman dikenal mempunyai kemampuan menghasilkan metabolit sekunder yang tinggi dan telah digunakan untuk pengobatan penyakit. Banyak produk alam menunjukkan adanya bahan biologi  yang  menarik  dan  mempunyai  aktifitas farmakologi sebagai bahan kemoterapi yang di- gunakan untuk pengembangan pengobatan mo- dern. Penggunaan herbal telah digunakan sejak tahun 1990. Pada beberapa tanaman ditemukan kandungan melimpah dari metabolit sekunder seperti tanin, terpenoid, alkaloid, flavonoid (So - lanki & Selvanagayam 2013). Selada air ( Nasturtium  officinale R. Br.) adalah tumbuhan yang tergolong dari famili Bras- sicaceae berasal dari Eropa dan Asia. Selada air biasanya dikonsumsi sebagai sayuran atau salad.
Selada air merupakan sumber vitamin A dan C yang baik, mengandung niasin, asam askorbat, tiamin, riboflavin, dan zat besi (Stephens 2012). Masyarakat Turki menggunakan tumbuhan ini untuk mengobati sakit perut (Ozen 2009). Sela- da air juga digunakan sebagai obat untuk diabe- tes, bronkitis, diuresis, sebagai anti-ulserogenik, mengobati  kudis,  tuberkulosis,  influenza,  asma, suplemen nutrisi, melancarkan pencernaan, an- timikroba, serta antikarsinogenik (Hoseini et al , 2009). Selada air merupakan salah satu sayuran yang mempunyai efek antikanker, penelitian ini memprediksi kandungan selada air yaitu phenetyl isothiocyanate yang berperan sebagai anti kanker dengan menggunakan metode docking analysis (Rajalakshmi & Agalyaa 2010). Menurut Ibrahim et al . (2015), selada air mengandung senyawa isotiosinat, kaemferol glikosida dan l-triptofan yang berfungsi untuk menangkal radikal bebas, membantu memperbaiki kerusakan dan sinte- sis DNA. Penelitian mengenai selada air belum banyak dilakukan di Indonesia dan hanya sebatas pada kandungan fitokimia dan antioksidan. Oleh sebab itu, diperlukan penelitian yang berbasis in vitro untuk  mengetahui  efektifitas  dan  peranan selada air. Penelitian ini bertujuan mengetahui
potensi dari ekstrak selada air sebagai antioksi- dan dan inhibitor pembelahan sel yang tidak ter- kendali pada kanker.

## METODE
Desain, tempat, dan waktu Desain yang digunakan dalam penelitian ini yaitu penelitian eksperimental dengan meng- gunakan  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  de- ngan dua kelompok perlakuan berupa ekstrak etanol dan ekstrak air, tujuh taraf dan tiga kali ulangan yang dilaksanakan secara bertahap pada periode waktu bulan April sampai Novem- ber 2016. Identifikasi ilmiah tanaman selada air dilakukan di Pusat Penelitian Biologi LIPI bagi - an Herbarium. Analisis fitokimia, dan uji BSLT dilakukan di Pusat Studi Biofarmaka IPB. Pen- gujian secara in vitro dilakukan pada pada sel vero (sel normal) dan cell line MCF-7 (sel kanker payudara) dilakukan di Pusat Studi Satwa Prima- ta (PSSP) IPB.
Bahan dan Alat Bahan-bahan yang digunakan berupa se- lada air, etanol 70%, etil asetat, akuades, larutan 1,1-difenil-2 pikrilhidrazin (DPPH), asam askor- bat, larutan buffer fosfat pH 7,0, eter, HCl, amil alkohol, serbuk Mg, kloroform, amonia, H 2 SO 4 , FeCl 3 , pereaksi Meyer, pereaksi Wagner, pe- reaksi  Dragendorf,  pereaksi  Lieberman-Bucha - rd, reagen Folin-Ciocalteu, AlCl 3 , CH 3 COONa, media pertumbuhan ( dulbecco’s  modified  eagle medium (D-MEM)  (Gibco,  USA Fetal Bovine Serum (FBS)  (Hyclone,  USA),  penisilin-strept - omisin (Invitrogen, USA), phosphate buffer sa- line (PBS),  (Gibco, USA), trypsin (Gibco, USA), DMSO (Sigma USA), etanol (Merck, Germany), MTT (Sigma, USA).
Alat yang digunakan oven, cawan porse- len, timbangan analitik, erlenmeyer, pipet mikro, inkubator, corong pisah, tabung reaksi, labu vo- lumetrik, penangas air, autoklaf, rotary evapora- tor , ELISA microplate reader , biosafety cabinet level-2, (Nuaire,  USA),  inkubator  CO 2 (Binder, Germany), alat sentrifugasi (Tommy, Japan), inverted microscope (Nikon, Japan), flask T25 (Corning, USA), tabung 15 mL (Corning, USA), tabung  1.5  mL  (Axygen,  USA),  perangkat  he - mositometer, improved neubauer 96-wells tis- sue culture plate (Corning,  USA), 12-wells tis- sue culture plate (Corning, USA), micro pippet , 200ul,  1000ul  (Gilson,USA),  pipet  tips  200ul,
1000ul (Axygen, USA).
Antioksidan dan agen antiproliferasi selada air pada sel MCF-7
Tahapan penelitian Preparasi  sampel  selada  air . Preparasi sampel selada air dilakukan dengan menimbang bahan selada air sebanyak 1-3 kg, kemudian di- oven  pada  suhu  50˚C  selama  5  hari.  Selada  air yang sudah kering selanjutnya digiling dengan blender. Selanjutnya tepung selada air diekstrak dengan air dan etanol 70% (Wetwitayaklung & Phaechamud 2011).
Ekstraksi sampel selada air . Ekstraksi di- lakukan dengan cara merebus simplisia sebanyak 50 gram ke dalam pelarut air 300 ml, sedangkan ekstrak etanol, dengan cara memasukkan 50 g serbuk selada air ke dalam pelarut etanol 70%. Larutan ekstrak air maupun etanol kemudian di letakkan di atas shaker selama 6 jam pada ke- cepatan 110 rpm. Campuran dipisahkan dan fil - trat yang diperoleh dipekatkan menggunakan rotary evaporator sehingga diperoleh ekstrak air dan ekstrak etanol 70%.
Uji  fitokimia  (Harborne  1987) . Uji  fito- kimia adalah uji yang dilakukan untuk menentu- kan senyawa aktif dari ekstrak tumbuhan. Pene- litian tahap ini bertujuan untuk mengetahui kom- ponen  fitokimia  yang  terkandung  pada  selada air secara kualitatif. Analisa kualitatif dilakukan dengan beberapa uji yaitu: alkaloid, saponin, fla - vonoid, triterpenoid/steroid.
Identifikasi  alkaloid . Sebanyak 0,0549 g sampel dilarutkan dalam beberapa tetes asam sulfat 2N kemudian diuji dengan tiga pereaksi alkaloid, yaitu pereaksi Dragendorff, pereaksi Meyer dan pereaksi Wagner. Hasil uji dinyatakan positif bila dengan pereaksi Meyer terbentuk endapan putih kekuningan, endapan coklat de- ngan pereaksi Wagner dan endapan merah hingga jingga dengan pereaksi Dragendorff.
Identifikasi flavonoid . Sebanyak 0,0549g sampel ditambahkan 0,1mg serbuk magnesium dan 0,4ml amil alkohol dan 4ml alkohol kemu- dian campuran dikocok. Terdapatnya kandungan flavonoid ditunjukkan dengan terbentuknya war - na merah, kuning, atau jingga pada lapisan amil alkohol. Identifikasi  saponin . Sebanyak 0,0549 g sampel ditambahkan dengan 5ml akuades lalu dididihkan selama 5 menit. Selanjutnya larutan disaring, filtratnya dikocok dengan kuat. Adanya kandungan saponin ditandai dengan timbulnya buih yang stabil selama 10 menit setelah pengo- cokan. Identifikasi  triterpenoid  dan  steroid . Se- banyak 0,0549g sampel dilarutkan dalam 2ml kloroform, setelah itu ditambahkan 10 tetes an- hidrat asetat dan 3 tetes asam sulfat pekat. Reaksi
positif ditunjukkan dengan terbentuknya larutan berwarna kecoklatan atau violet (triterpenoid) atau warna hijau kebiruan (steroid).
Uji aktivitas antioksidan DPPH (1,1-dife- nil-2-pikrilhidrazil) . Ekstrak kasar selada air dan bagian-bagiannya dari hasil ekstraksi tunggal di- larutkan dalam etanol dengan konsentrasi 0,100, 200, 400, 600, 800 dan 1000 ppm. Antioksidan sintetik BHT digunakan sebagai pembanding. Larutan  DPPH  dibuat  dalam  kondisi  suhu  ren - dah dan terlindung dari cahaya matahari, dengan menggunakan kristal DPPH dalam pelarut meta- nol  dengan  konsentrasi  1mM.  Larutan  ekstrak dan larutan antioksidan pembanding BHT yang telah dibuat, masing-masing diambil 4,5ml dan direaksikan dengan 500μL larutan DPPH 1mM. Campuran tersebut kemudian diinkubasi pada suhu  37˚C  selama  30  menit  dan  diukur  absor - bansinya menggunakan spektrofotometer pada panjang gelombang 517 nm. Absorbansi larutan blanko juga diukur untuk melakukan persen inhi- bisi. Larutan blanko dibuat dengan mereaksikan 4,5  ml  pelarut  methanol  dengan  500  μl  larutan DPPH 1mM dalam tabung reaksi, setelah itu ak- tivitas antioksidan dari masing-masing sampel dan antioksidan pembanding BHT dinyatakan dengan persen inhibisi (% inhibisi).
% Inhibisi =
Nilai konsentrasi sampel (ekstrak maupun antioksidan BHT) dan persen inhibisinya diplot masing-masing pada sumbu x dan y pada persa - maan regresi linear. Persamaan regresi linear yang diperoleh dalam bentuk persamaan y = a + bx digunakan untuk mencari nilai IC 50 ( inhibitor concentration 50%) dari masing-masing sampel dengan menyatakan nilai y sebesar 50 dan nilai x yang akan diperoleh sebagai IC 50 . Analisis  uji  daya  toksisitas  ekstrak  se- lada air (BSLT) . Uji toksisitas dilakukan untuk mengkaji daya toksisitas ekstrak selada air ( Nas- turtium officinale R. Br). Daya toksisitas diuji de- ngan metode Brine Shrimp Lethality Test (BSLT) yang merupakan pengujian toksisitas pada larva artemia salina. Persiapan larva udang dilaku- kan dengan menetaskan telur udang dalam air laut  pada  suhu  28˚C  dengan  pengadukan  terus menerus. Setelah inkubasi 24 jam, ekstrak selada air dilarutkan dalam air laut dengan konsentrasi (0, 100, 200, 400, 600, 800 dan 1000 ppm). Se- banyak 10 larva udang ditambahkan dalam setiap tabung yang mengandung sampel. Setelah 24 jam kemudian jumlah larva yang hidup dihitung dan
dicatat. Persentasi kematian setiap tabung diten- tukan dengan rumus persen mortalitas = jumlah larva mati/jumlah larva hidup x 100% (Sumanthy & Sasidhiran 2011). Nilai LC 50 ditentukan de- ngan probit analysis . Uji  viabilitas  terhadap  sel  vero  dan  uji daya  hambat  terhadap  sel  lestari  MCF-7  de- ngan  MTT  assay  (Mattana  et  al.  2012) . Sel vero dan sel MCF-7 dibiakkan selama 24 jam dalam media Dulbecco’s Modified Eagle’S Me - dium (DMEM). Sel vero dan sel MCF-7 yang telah dibiakkan selanjutnya ditambahkan de- ngan ekstrak selada air sebanyak 100 µL dengan konsentrasi ekstrak 50, 100, 200, 400, 600, 800, 1000 ppm. Inkubasi dilakukan dalam waktu 48 jam pada inkubator dengan suhu 37˚C, sel yang tidak mendapat perlakuan ekstrak selada air di- gunakan sebagai kontrol.
Uji MTT assay dilakukan setelah inkubasi 48 jam dengan menambahkan 5mg/ml reagen 3-(4-,5 dimethylthiazol -2- yl )-2,5- difenil tetrazo- lium bromide (MTT) sebanyak 10µl ke dalam setiap well , kemudian diinkubasi selama 4 jam pada suhu 37˚C dan atmosfer 5% CO 2 . Sel hidup akan bereaksi dengan reagen MTT membentuk formazan. Formazan dilarutkan menggunakan etanol 70% lalu nilai serapannya diukur meng- gunakan ELISA reader panjang gelombang 595 nm. Hasil uji serapan dikonversikan ke dalam bentuk persentase viabilitas menggunakan ru- mus: %viabilitas = (absorbansi sampel/absorbasi kontrol) x 100% sedangkan untuk uji daya ham - bat sel lestrari MCF-7. Nilai IC 50 ditentukan de- ngan persamaan regresi antara persen kematian dan log konsentrasi, dengan memasukkan Y= 50, dari persamaan tersebut dan dihasilkan nilai X, IC 50 merupakan antilog dari nilai X (Prakash et al . 2011).
Pengolahan dan analisis data Pengolahan data dilakukan dengan meng- gunakan Microsoft Excel 2010 dan SPSS 2016 . Analisis data menggunakan ANOVA (Gaspersz 1991) setelah sebelumnya dilakukan uji ho- mogenitas untuk melihat persebaran data normal. Jika terdapat perbedaan yang nyata antar per- lakuan akan ditindaklanjuti dengan uji Duncan (Steel & Torrie 1989).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Karakteristik sampel Tanaman selada air diperoleh dari areal persawahan di Desa Cibitung, Berdasarkan ha-
Rahman dkk.
sil  determinasi  dari  LIPI,  selada  air  termasuk dalam famili Brasicaceae. Selada air memiliki daun dengan bentuk agak bulat berdiameter seki- tar 1,5-3 cm dan tumbuh didaerah perairan atau rawa-rawa.
Ekstraksi sampel Rendemen merupakan presentase perban- dingan antara berat bagian bahan yang dapat di- manfaatkan dengan berat total bahan. Rendemen yang diperoleh dari hasil ekstraksi etanol sebe- sar 25,31% sedangkan untuk rendemen ekstrak air sebesar 32,76%. Rendemen dipengaruhi oleh kadar air, sampel kering akan menghasilkan ren- demen lebih banyak dibandingkan dari bahan segar, karena kadar air sampel sudah berkurang sedangkan bahan segar  masih mempunyai kadar air yang tinggi.
Senyawa fitokimia Hasil uji fitokimia pada tanaman selada air terdiri dari: flavonoid, tanin, saponin dan steroid. Uji fitokimia (Tabel 1) pada penelitian ini dilaku - kan pada kondisi ketika sampel berbentuk serbuk padatan sebelum diekstrak dan setelah diekstrak dengan menggunakan etanol 70%. Pada kedua jenis  sampel  yang  dilakukan  uji  fitokimia  dite - mukan adanya kandungan yang sama, hal yang membedakan dari ketiga hasil uji fitokimia yaitu potensi kandungan fitokimia yang dimiliki mas - ing-masing jenis sampel.
Jenis sampel Flavonoid Tanin Saponin Steroid Serbuk Ekstrak air Ekstrak etanol ++ ++ +++ + ++ +++ ++ ++ + +++ ++ +++
Keterangan: + positif lemah, ++ positif kuat, +++ positif kuat sekali, - hasil negatif.

## Tabel 1. Hasil uji fitokimia selada air
Hasil dari penelitian ini sejalan dengan penelitian Aberoumand (2012) bahwa senyawa metabolit sekunder seperti alkaloid, tanin dan saponin ditemukan pada beberapa jenis tanaman yang memiliki peranan dalam pharmacology se- bagai antibakteri, antikanker, stimulan, antihiper- tensi,  vasodilator,  antiinflamasi  dan  antispamo - dik. Ren et al . (2003) menjelaskan mekanisme flavonoid sebagai antioksidan dalam mengham - bat sel kanker yaitu dengan cara menginduksi apoptosis melalui penghambatan aktivitas DNA topoisomerase I/II, modulasi signalling path- ways , penurunan ekspresi gen Bcl-2 dan Bcl-XL,
Antioksidan dan agen antiproliferas selada air pada sel MCF-7
peningkatan ekspresi gen Bax dan Bak, serta ak - tivasi endonuclease .
Aktivitas antioksidan Selada air diekstrak dengan menggunakan pelarut air dan etanol 70%, kemudian diuji ak- tivitas antioksidannya. Suatu senyawa dikatakan sebagai antioksidan sangat kuat apabila nilai IC 50 kurang dari 100 ppm, kuat apabila nilai IC 50 anta- ra 50-100 ppm, sedang apabila nilai IC 50 berkisar antara 100-150 ppm, dan lemah apabila nilai IC 50 berkisar antara 150-200 ppm (Molyneux 2003). Berdasarkan  klasifikasi  tersebut  maka  dapat  di - simpulkan ekstrak etanol selada air memiliki aktivitas antioksidan kategori sedang dengan nilai IC 50 sebesar 102,67 ppm. Hal ini dikarena- kan terdapatnya kandungan fenol dalam selada air. Penelitian Nurlatifah (2014) mengemukakan bahwa kandungan fenolik dalam suatu bahan dapat meredam radikal bebas dengan cara mengi- kat ion logam dan menginhibisi sistem enzimatis yang berperan dalam pembentukan radikal bebas seperti cyclooxigenase, mono-oxigenase atau xanthine oksidase .
Penelitian yang dilakukan oleh Salamah et al. (2011) menunjukkan bahwa nilai IC 50 selada air dengan menggunakan pelarut etanol sebesar 331,39 ppm hal ini dikarenakan ekstrak yang di- gunakan dalam penelitian menggunakan ekstrak kasar ada beberapa senyawa lain yang terikat se- lama proses ekstraksi, senyawa-senyawa ini me- ningkatan hasil rendemen akan tetapi tidak me- ningkatkan aktivitas antioksidan. Hal ini sejalan dengan penelitian Sa'adah (2016) dengan meng- gunakan metode yang sama dan menggunakan ekstrak selada air didapatkan nilai IC 50 sebesar 337,32  ppm.  Uji  antioksidan  yang  dilakukan Damayanthi et al. (2010) pada sampel bekatul dalam bentuk minuman ditemukan memiliki aktivitas antioksidan yang tinggi dan mampu mereduksi radikal bebas DPPH yang setara den- gan kemampuan vitamin C sebesar 28,74 kali. Menurut penelitian Mazandarani et al. (2012), kan-dungan total fenol dan flavonoid dari ekstrak selada air mempunyai hubungan yang positif de- ngan aktivitas antioksidan sebagai penghambat radikal  bebas.  Komponen  fenol  dan  flavonoid merupakan konstituen penting sebagai pengham- bat radikal bebas dan menstabilkan lipid peroksi- dasi (Ozen 2009).
Toksisitas ekstrak selada air ( Nasturtium  of- ficinale R. Br) Nilai  LC 50 ekstrak selada air dengan menggunakan pelarut etanol didapatkan sebesar 406,02 ppm sedangkan dengan menggunakan pelarut air didapatkan nilai sebesar 558,84 ppm. Ektrak kasar yang mempunyai nilai dibawah 100 ppm mempunyai aktivitas sitotoksik yang kuat, nilai LC 50 antara 100 ppm sampai 500 ppm mempunyai aktivitas sitotoksik yang menengah, sedangkan ekstrak dengan nilai 500 ppm-1000 ppm mempunyai sitotoksik yang lemah (Nguta et al . 2012). Berdasarkan klasifikasi diatas dapat dikategorikan ekstrak selada air memiliki efek toksisitas  menengah  dengan  nilai  LC 50 berada pada kisaran 100 ppm sampai 500 ppm baik menggunakan pelarut etanol maupun air. Hasil uji toksisitas ekstrak selada air ditampilkan pada Tabel 2. Nilai LC 50 ekstrak selada air berkisar an- tara 406,02 ppm sampai 558,84 ppm yang dapat dikategorikan sebagai toksisitas tingkat sedang. Nilai LC 50 tertinggi ditemukan pada ekstrak eta- nol dibandingkan dengan ekstrak air. Perbedaan hasil ini bisa disebabkan karena adanya perbe- daan metode pada proses ekstraksi dan kemam- puan pelarut dalam menarik komponen aktif ekstrak selada air. Metode perebusan yang meng- gunakan proses pemanasan dapat meyebabkan rusaknya komponen aktif selada air, hal tersebut diduga  menyebabkan  tingginya  nilai  nilai  LC 50 ekstrak air perebusan. Kandungan senyawa ak- tif yang terkandung pada masing-masing jenis ekstrak dapat mempengaruhi nilai toksisitasnya (Ali et al . 2013).
Hasil uji viabilitas selada air ( Nasturtium offi- cinale R. Br) terhadap sel vero dengan metode MTT Assay Persentase viabilitas sel vero pada kedua ekstrak menunjukkan nilai di atas 50%. Hasil pengujian menunjukkan bahwa ekstrak selada air tidak bersifat toksik seperti terlihat pada ektrak air konsentrasi terendah yaitu 50 ppm menunjukkan persentase viabilitas sel vero yaitu sebesar 88,09% (Gambar 1). Ekstrak etanol sela-
Tabel 2. Hasil uji toksisitas ekstrak selada air
Jenis ekstrak Nilai LC 50 (ppm) Ekstrak etanol 406,02 Ekstrak air 558,84
Rahman dkk.
da air menunjukkan persentase viabilitas sel vero diatas 100%. Hal tersebut dapat mengindikasikan bahwa ekstrak selada air memberikan nutrisi ter- hadap pertumbuhan sel vero, sehingga jumlah sel vero yang hidup lebih banyak dibandingkan jum- lah sel vero yang hidup pada kontrol.
Pengaruh konsentrasi selada air ( Nasturtium officinale R.Br) terhadap daya hambat sel kanker payudara (MCF-7) Pengaruh ekstrak selada air terhadap daya toksisitas sel kanker payudara (MCF-7) meng- gunakan metode MTT. Nilai IC 50 pada sel kanker payudara (MCF-7) paling tinggi pada ekstrak se- lada air ditemukan pada jenis pelarut air (Tabel 3). Foto morfologi sel MCF-7 tanpa pembe- rian ekstrak dan setelah pemberian ekstrak yang diamati dengan menggunakan mikroskop dapat dilihat pada Gambar 2. Perubahan morfologi sel MCF-7 dapat ditandai dengan beberapa peruba- han  fisik  (Arianingrum et al. 2011). Sel tanpa perlakuan tampak melekat pada bagian permu- kaan tempat tumbuh sel dan memiliki dinding yang halus, sedangkan sel yang mati sudah ti- dak terlihat berkoloni dan telah lepas dari tem- pat tumbuhnya. Sel yang mati akan kehilangan cairan sitoplasma karena rusaknya membran sel, sehingga pada hasil pengamatan mengggunakan
mikroskop akan menunjukkan warna hitam atau gelap. Penelitian yang dilakukan oleh Chai et al. (2015) mengenai tanaman yang tergolong EFM ( edible fresh water macrophytes ) diantaranya selada air memiliki kandungan phenethyl iso- thiocyanate (PEITC) yang berpotensi sebagai anti kan-ker dengan cara menghambat proses karsinogene-sis pada jalur inisiasi, proliferasi dan
Tabel 3. Nilai IC 50 ekstrak selada air
Jenis ekstrak selada air
Nila IC 50 (µg/ml) Etanol 70% 1.696 Air 1.786
metastasis. Ekstrak selada air pada konsentrasi 50 ppm dapat berperan sebagai antigenotoksik pada sel kanker kolon (HT-29) yang dikaitkan dengan kandungan glikosida kuersetin yang terdeteksi melalui analisis HPLC-MS pada selada air (Boyd et al . 2006). Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa ekstrak selada air dengan konsentrasi ren- dah tidak dapat menghambat sel kanker payudara (MCF-7), hanya bisa menghambat pada konsen- trasi tinggi dengan nilai IC 50 sebesar 1.696 µg/ml, sejalan dengan penelitian Rahman (2013) yang menggunakan ekstrak takokak dapat mengham- bat sel kanker MCF-7 pada konsentrasi 1.153 µg/ ml.
Gambar 2. Gambaran morfologi sel MCF-7 (sel- kanker payudara) (a) tanpa penambahan ekstrak, (b) dengan penambahan ekstrak etanol pada konsentrasi 1.000 ppm; (c) sel hidup, dan (d) sel mati.
Gambar  1.  Persentase  viabilitas  sel  vero  dengan (a) ekstrak air, (b) ekstrak etanol
(a) (b)
Hasil uji sidik ragam menunjukkan bahwa penambahan  ekstrak  berpengaruh  secara  signifi - kan terhadap persen inhibisi sel kanker payudara (MCF-7) p˂0,05 (p=0,015). Hasil uji lanjut Dun - can menunjukkan bahwa persentase pengham- batan sel MCF-7 pada konsentrasi 50 ppm ber- beda nyata dengan persentase penghambatan sel MCF-7 pada konsentrasi 800, 400 dan 1.000 ppm.
88,09 89,39 93,28  90,61 78,55 66,40 0 20 40 60 80 100 120 50 100 200 400 800 1000 viab ilitas (% ) Konsentrasi sampel (ppm) (a) 105,27 101,22 101,53 94,05 77,25 54,20 0 20 40 60 80 100 120 50 100 200 400 800 1000 via bilita s ( % ) Konsentrasi sampel (ppm) (b)

## KESIMPULAN
Hasil pengujian fitokimia pada ekstrak se - lada air ditemukan adanya kandungan flavonoid, tanin, saponin, dan steroid. Uji aktivitas antiok - sidan ditemukan hasil ekstrak etanol selada air sebesar 102,26 ppm yang berpotensi sebagai antioksidan. Pada uji toksisitas Artemia salina menunjukkan bahwa ekstrak selada air bersifat toksik dengan nilai 406,02 ppm. Pengujian tok- sisitas terhadap sel vero menunjukkan semua jenis ekstrak tidak bersifat toksik. Ekstrak sela- da air mampu menghambat sel kanker payudara MCF-7 dengan nilai IC 50 sebesar 1.696 µg/ml. Penelitian ini menyimpulkan selada air dapat dijadikan sebagai salah satu alternatif pa- ngan fungsional mengingat kandungan fitokimia dan antioksidan pada uji sel vero menunjukkan hasil bahwa selada air dapat memengaruhi per- tumbuhan sel normal. Ekstrak yang digunakan dalam penelitian ini masih dalam bentuk ekstrak kasar, disarankan untuk diadakannya uji lanjut berupa fraksinasi untuk lebih mengetahui kan- dungan yang berpotensi sebagai zat anti kanker.

## DAFTAR PUSTAKA
Aberoumand A. 2012. Screening of phytochemi- cal  compounds  and  toxic  proteinaceous protease inhibitor in some lesser-known food based plants and their effects and po- tential applications in food. IJFNS 2:16- 20.
Ali MR, Hossain M, Runa JF, Hasanuzzaman M. 2013. Preliminary cytotoxic activity of different extracts of Avrrhoa bilimbi . ICPJ 2(3):83-84. Arianingrum R, Arty IS, Atun S. 2011. Uji sititok - sik beberapa senyawa monopara hidroksi kalkon terhadap cancer cell line T47D. Ju- rnal Penelitian Saintek 16(2): 121-132.
Boyd LA, Mark J, McCann, Yumi H, Richard N, Bennett, Chris I.  R. Gill, Ian R. Rowland. 2006. Assessment of The Anti-Genotoxic, Anti-Proliferative, and Anti-Metastatic Pottencial of Crude Watercreess Extract in Human Colon Cancer Cells. Nutrition and Cancer 55(2):232-241. Chai T, Ooh KF, Quah Y, 2015. Edible freshwa- ter macrophytes: a source of anticancer and antioxidative natural products-a mini- review. Phytochem Rev 14:443–457 Damayanthi E, Kustiyah L, Malani K, Farizal H, 2010. Aktivitas Antioksidan Bekatul Lebih
Tinggi Daripada Jus Tomat dan Penurunan Aktivitas Antioksidan Serum Setelah In- tervensi Minuman Kaya Antioksidan. J Gizi Pangan 5(3):205-210.
[Depkes RI] Departemen Kesehatan Repub- lik Indonesia. 2007. Keputusan Menteri Kesehatan Republik Indonesia Nomor 381 Tahun 2007 tentang Kebijakan Obat Tradisional Nasional Tahun 2007. Jakarta: Depkes RI.
Gaspersz V. 1991. Metode Perancangan Perco- baan. Bandung: Armico. Harborne JB. 1987. Metode Fitokimia. Padmawi- nata K dan Soediro L penerjemah. Band - ung : Institut Teknologi Bandung. Hoseini HF, Gohari AR, Soodabeh S, Naghi SM, Abbass H. 2009. The Effect of Nasturtium officinale of Blood Glucose Level in Dia - betic Rats . Pharmacologyonline 3: 866- 871. Ibrahim A, Ibrahim WG, Shousha, El-Sayed M, El-Sayed, Shimaa ShR 2015. Nasturtium Officinale And Raphanus  Sativus Crude Extracts Protect Ovary From Radiation-In - duced Dna Damage. WJPPS 4(4): 80-102.
Mattana CM, Satorres SE, Escobar F, Sabini L, Fusco M, Alcaraz LE. 2012. Antibacterial and  cytotoxic  activities  of Acacia  aroma extracts. Emirates Journal of Food and Ag - riculture 24: 308-313. Mazandarani M, Momeji A, Moghaddam PZ. 2012. Evaluation of Phytochemical and Antioxidant Activities from Different Parts of Nasturtium officinale R. Br in Mazan- daran. Iranian Journal of Plant Physiology 3(2):659-664.
Molyneux P. 2003. The use of the stable free ra - dikal diphenylpicrylhydrazyl (DPPH) for estimating  antioxidant  activity.  Journal Science of Technology 26(2):211-219.
Nguta JM, Mbaria JM, Gakuya DW, Gathumbi PK, Kabasa JD, Kiama SG. 2012. Evalu- ation  of  acute  toxicity  of  crude  plant  ex - tracts from kenyan biodiversity using brine shrimp, Artemia salina L . (Artemiidae). The Open Conference Proceedings Jour- nal 3:30-34.
Nurlatifah E. 2014. Analisis Kapasitas Antiok- sidan dan Kandungan Total Fenol pada Rempah dan Bahan Penyegar.[Skripsi]. Bogor: Institut Pertanian Bogor
Ozen T. 2009. Investigation of antioxidant prop - erties of Nasturtium officinale (watercress)
J. Gizi Pangan, Volume 12, Nomor 3, November 2017 223
Rahman dkk.
leaf  extract.  J  Drug  Research  66(2):187- 193.
Prakash SS, Poenam SS, Sarav AD, Maulik PS. 2011. In-vitro toxicicity evaluation of nov - el n-substituted bis-benzimidasole deriva- tives for anti-lung and anti-breast cancer activity. Annals of Biological Research. 2(1): 51-59.
Rahman N, Marliyati SA, Damanik MRM, An- war  F.  2013.  Antioxidant  Activity  and Total  Phenol  content  of  Ethanol  Extract Takokak Fruit (Solanum Torvum). PJN 12(11):973-977.
Rajalakshmi PA, Agalyaa S. 2010. Docking anal- ysis of phenethyl isothiocyanate (PEITC) from Nasturtium  officinale (watercress),
on 4(methylnitrosamino)-1-(3-pyridyl)-
1-butanone (NNK), carcinogenic action in oral cancer. IJPBS 1(4):67-74.
Ren W, Qiao Z, Wang H, Zhu L, Zhang L, 2003, Flavonoids: promising anticancer agents. Med Res Rev 23(4):519-534. Sa’adah L. 2016. Analisis Antioksidan pada Se - lada Air ( Nasturtium officinale R. Br.) se- bagai Antikanker Di dalam: nama editor.
2016 Agustus 20; Semarang, Indonesia.
Semarang: Sains Terapan: 456-459. Salamah E, Purwaningsih S, Permatasari E. 2011. Antioksidan pada selada air. Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia. 16(2): 85-91.
Steel RED, Torrie JH. 1989. Prinsip dan Prosedur Statistika. Bambang Sumantri penerjemah.
Jakarta: PT Gramedia. Stephens, James M. 2012. Watercress –Nas- turtium  officinale  R.  Br. IFAS  Extension. USA: University of Florida.
Solanki SS, Selvanayagam M. 2013. Phyto- chemical screening and study of predictive toxicity of certain medicinal plants and ex - tracts using brine shrimp. Journal Herbal Science Technology 10(1):1-4. Sumanthy V, Sasidharan S. 2011. In vivo toxic - ity  Study  of  casseia  surrattensis  flower extract. Res J Pharm Biol Chem Sci 2(3): 607-617.
Wetwitayaklung P, Phaechamud,SS T. 2011. An- tioxidant  activities  and  phenolic  content of solamun and capsicum sp. Res J Pharm Biol Chem Sci 2(2):146-154.