## PEMBUATAN STRIP TEST DAN IDENTIFIKASI FENILBUTAZON PADA JAMU PEGAL LINU
Submitted : 11 Agustus 2020 Edited : 22 Desember 2020 Accepted : 29 Desember 2020
Henny Nurhasnawati, Triswanto Sentat, Adi Prasetiyo
Program Studi Diploma III Farmasi, Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Samarinda Email : hennynurhasnawati@gmail.com

## ABSTRACT
Jamu  (Indonesian herbal medicine)  are  prohibited  from  containing  chemicals  medicine which are isolated or synthetic chemical compounds. Chemical compounds which is commonly added  in  jamu  pegal  linu  (rheumatic  pain) is  phenylbutazone.  One  simple  alternative  test  for detecting chemicals  medicine content  is  to  use  a  strip test.  The  purpose  of  this  study  was  to determine  the  presence or  absence  of  phenylbutazone content in jamu using  a strip  test.  The research  conducted  is  experimental  research.  This  study  used  6  samples  of jamu  pegal  linu which were extracted using 95% ethanol solvent. The strip test is carried out by immobilizing reagents  into  Whatman’s  filter  paper using  the  impregnation  method.  Data  obtained  from observations of the color change of the strip test. The results showed that strip test made with alizarin red reagent and potassium hexacyanoferate (III) identified 2 samples of jamu pegal linu containing phenylbutazone, namely sample D and E, from 6 samples that circulated in Sungai Pinang District, Samarinda.
Keywords: chemical medicine, identification, jamu, phenylbutazone, strip test

## PENDAHULUAN
Jamu merupakan obat  tradisional Indonesia. Menurut  Peraturan  Menteri Kesehatan  Republik  Indonesia  Nomor  007 Tahun  2012  tentang  Registrasi  Obat Tradisional, bahwa obat tradisional dilarang mengandung  bahan  kimia  obat  yang merupakan  hasil  isolasi  atau  sintetik berkhasiat obat. Bahan kimia obat ditambahkan  oleh  produsen  jamu  yang tidak  bertanggungjawab  untuk  menambah khasiat  dan  memberikan  efek  jamu  yang lebih cepat.
Jamu yang sering ditambahkan bahan kimia  obat  adalah  jamu  pegal  linu.  Salah satu  bahan  kimia  obat  yang  ditambahkan dalam jamu pegal linu adalah fenilbutazon. Menurut  Public  Warning  BPOM  No.
HM.01.1.2.07.20.18
tahun 2020,
fenilbutazon merupakan  bahan  kimia  yang
banyak  disalahgunakan  selain  sildenafil sitrat  dan  parasetamol  dalam  jenis  jamu yang berbeda.
Jamu  pegal  linu  merupakan jamu yang  banyak  dikonsumsi  oleh  para  pekerja berat.  Jamu  pegal  linu  dikonsumsi  untuk mengurangi  rasa  nyeri,  capek,  nyeri  otot dan  tulang,  memperlancar peredaran  darah, memperkuat daya tahan tubuh dan
menghilangkan sakit seluruh badan (1) .
Fenilbutazon dicampurkan dalam
jamu  pegal  linu,  rematik  dan  asam  urat.
Penggunaan yang kurang tepat dan berlebihan dapat menyebabkan mual, muntah,  ruam  kulit,  muka  sembab (moon face),  bengkak  tubuh  karena  penumpukan cairan (edema), perdarahan lambung, hepatitis,  radang  ginjal,  gagal  ginjal  dan berkurangnya jumlah leukosit (leukopenia) (2) .
Analisis  bahan  kimia  obat  sudah banyak dilakukan menggunakan kromatografi  lapis  tipis.  Metode  ini  relatif lama  sehingga  kurang  efektif,  sehingga dibuatlah metode
baru dengan menggunakan strip indikator atau strip test. Strip  test biasa  digunakan  sebagai  alat untuk menguji kadar gula darah, kolesterol, asam urat, dan test kehamilan.
Strip  test merupakan  alat  diagnosa
sederhana yang digunakan untuk menentukan perubahan warna dalam analisis standar.  Cara  penggunaannya
adalah  dengan  meneteskan  sampel  pada membran atau mencelupkan membran pada sampel  sehingga  pengujian  tidak  harus dilakukan di laboratorium. Proses identifikasi ditunjuk-kan oleh adanya perubahan warna yang terjadi akibat reagen yang  diimobilisasi  pada  membran  bereaksi secara spesifik dengan sampel (3) .
Strip test mengandung reagen
spesifik  yang  diimobilisasi  dalam  suatu membran  atau  media.  Jenis  membran  yang sering  digunakan  yaitu nata  de  coco, poliamida,  polistiren  divinilbenzen dan kertas  selulosa.    Kertas  saring Whatman ® digunakan  dalam  pembuatan strip  test ini karena  bahan  yang  ekonomis  dan  mudah didapat.
Identifikasi  bahan  kimia  obat  pada jamu  menggunakan strip  test mampu mengidentifikasi bahan kimia obat parasetamol  pada  jamu  pegal  linu,  asam urat  dan  rematik  serta  asam  mefenamat pada  jamu  flu  tulang (4) .  Metode strip  test juga  dapat  mengidentifikasi  bahan  kimia obat  parasetamol  pada  jamu  asam  urat,  flu tulang,  sakit  gigi  dan  pegal  linu (5) . Selain itu strip  test  juga  mampu  mengidentifikasi bahan kimia obat sildenafil sitrat pada jamu penambah stamina (6) .
Berdasarkan uraian di atas, dilakukan pembuatan strip test dan identifikasi  bahan kimia  obat  fenilbutazon  pada  jamu  pegal linu. Pengambilan  sampel  dilakukan  di
beberapa pedagang  atau  kios  jamu  di wilayah Kecamatan Sungai Pinang, Samarinda,  mengingat  di  daerah  tersebut terdapat beberapa kios jamu.

## METODE PENELITIAN Alat dan Bahan Penelitian
Alat-alat  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  alat  gelas  standar, magnetic stirrer dan neraca analitik.
Bahan-bahan  yang  digunakan  dalam penelitian ini adalah kertas saring Whatman ® , reagen  alizarin red,  kobalt  (II) nitrat  heksahidrat,  kalium  heksasianoferat (III),  larutan  pembanding  fenilbutazon, aquades,  etanol  95%  dan  sampel jamu pegal linu.

## Pengumpulan Sampel
Pada  penelitian  ini,  sampel  yang digunakan    sebanyak  6  jamu  pegal  linu yang  dikumpulkan  dari 3 pedagang  atau kios  jamu  di  wilayah  Kecamatan  Sungai Pinang, Samarinda.

## Pembuatan  Larutan  Sampel,  Larutan Pembanding dan Reagen Strip Test

## Larutan Sampel
Pembuatan  larutan  sampel  mengacu pada penelitian sebelumnya (5) . Sampel jamu ditimbang kurang lebih 2 gram dimasukkan ke dalam gelas kimia. Sampel ditambahkan etanol    95%  sebanyak  100  ml,  kemudian diaduk  dengan  menggunakan magnetic stirrer selama  30  menit.  Ekstrak  cair  dari sampel jamu disaring, kemudian ditampung di gelas piala.

## Larutan Pembanding Fenilbutazon
Fenilbutazon ditimbang sebanyak 50 mg kemudian dilarutkan dengan etanol 95% sebanyak 10 ml di dalam gelas piala, diaduk sampai larut.

## Reagen Strip Test Alizarin Red
Alizarin red ditimbang  sebanyak  5 mg,  kemudian    dilarutkan  dalam  aquades dan diencerkan sampai menjadi 25 ml.
Kobalt (II) Nitrat Kobalt (II) nitrat heksahidrat
ditimbang  sebanyak  3,65  g,  kemudian dilarutkan  dalam  aquades  dan  diencerkan sampai menjadi 25 ml.

## Kalium Heksasianoferat (III)
Kalium heksasianoferat
(III) ditimbang  sebanyak  0,2745  g,  dilarutkan dalam  aquades  dan  diencerkan  sampai menjadi 25 ml.

## Pembuatan Strip  Test dan  Kelayakan Reagen Strip Test
Pembuatan  strip  test  mengacu  pada penelitian  sebelumnya (5,  6) . Kertas  saring Whatman ® nomor  1  dipotong dengan ukuran  1  x  5  cm.  Masing-masing  kertas saring  ditetesi  reagen  alizarin red,  kobalt (II) nitrat, dan kalium heksasianoferat (III). Kertas saring dikeringkan pada suhu ruang.
Uji  kelayakan  reagen  dilakukan dengan  membandingkan  perubahan  warna yang  terjadi  dari  reaksi  antara  larutan pembanding fenilbutazon dengan  beberapa reagen.  Juga  dilakukan  uji menggunakan kontrol  negatif yaitu etanol  95%. Apabila ditemukan  perubahan  warna  maka  reagen tersebut  dikategorikan  layak  untuk  dibuat strip test.

## Uji Life Time Strip Test
Uji life  time strip test digunakan untuk  mengetahui  berapa  lama  daya  tahan reagen  dalam  kertas  saring.  Uji  dilakukan dengan  cara  menetesi  masing-masing strip test dengan larutan pembanding dan dilihat perubahan warnanya. Pengamatan dilakukan setiap hari selama 1 bulan hingga
strip test tidak  mampu  memberikan perubahan warna.

## Analisis Data
Analisis  yang  digunakan  bersifat deskriptif berupa data kualitatif berdasarkan hasil penelitian di Laboratorium  Kimia  Analisis  Farmasi, Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Samarinda.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Strip test digunakan untuk menentukan  perubahan  patologis  dalam analisis  standar dan    merupakan  alat pendeteksi sederhana. Penggunaannya sangat  mudah  dengan  mencelupkan  atau meneteskan  sampel  pada  permukaan strip.
Reaksi antara reagen spesifik yang terkandung  dalam strip dengan  sampel, akan  menunjukkan  perubahan  warna  yang spesifik.  Reagen  spesifik  digunakan  untuk memudahkan dalam proses identifikasi.
Teknik  pembuatan strip  test dapat dilakukan dengan cara imobilisasi.
Beragam  teknik  imobilisasi telah  dikenal diantaranya:  impregnasi,  adsorpsi,  dan entrapment. Proses identifikasi atau deteksi metode strip  test dapat  berlangsung  karena adanya reaksi antara sampel dengan reagen yang  terimobilisasi  di  dalam  membran (7) . Kelebihan strip  test dibanding  dengan  alat pendeteksi  lain  adalah  memberikan  respon yang  cepat  sekitar  60  sampai  120  detik setelah  direaksikan  dengan  sampel,  hemat biaya dan waktu, serta mudah dilakukan (8) .

## Pembuatan Strip Test
Strip  test dibuat  dari  kertas  saring Whatman ® No. 1 yang diimpregnasi dengan reagen  alizarin red, kobalt  (II)  nitrat,    dan kalium  heksasianoferat  (III).  Kertas  saring Whatman ® dipilih karena mempunyai kualitas  serat  kapas  yang  tinggi,  berpori menengah,  memiliki  permukaan  yang  licin dan ketebalan yang cukup.
Pembuatan strip  test menggunakan teknik imobilisasi yaitu memasukkan reagen  ke  dalam  material  atau  alat.  Kertas saring Whatman ® ditetesi  dengan  reagen alizarin red, kobalt  (II)  nitrat,  dan  kalium heksasianoferat  (III)  kemudian  didiamkan sampai menghasilkan warna yang jelas dari masing-masing reagen, setelah itu dikeringkan  pada  suhu  ruang.  Perubahan warna  yang  jelas  pada  kertas  saring mengindikasikan  partikel  reagen  sudah secara  optimal  terikat  ataupun  terjerap  ke dalam kertas saring.
Uji  kelayakan strip  test dilakukan
dengan cara meneteskan larutan pembanding fenilbutazon dengan
konsentrasi  5  mg/ml  pada strip  test dan diamati perubahan  warna  secara  visual. Hasil  uji  kelayakan Strip  Test dapat  dilihat pada tabel 1.
Strip test dinyatakan berhasil mengidentifikasi  zat  aktif  dengan  respon berupa perubahan warna yang mudah untuk diamati (7) . Berdasarkan pengamatan perubahan  warna  secara  visual  dapat diketahui  bahwa strip  test dengan  reagen alizarin
red dan reagen kalium heksasianoferat  (III)  yang  layak  dibuat sebagai reagen strip test.
Perubahan  warna  yang  terjadi  pada strip  test  dengan  reagen  alizarin red dan
kalium  heksasianoferat  (III)  diduga  karena terbentuk senyawa kompleks.

## Identifikasi  Fenilbutazon  Pada  Sampel Jamu Menggunakan Strip Test
Jamu yang digunakan pada penelitian ini  adalah  jamu  pegal  linu  dalam  bentuk serbuk. Sampel diambil dari pedagang atau kios-kios  jamu  di  wilayah  Kecamatan
Sungai Pinang, Samarinda. Teknik sampling  yang  digunakan  dalam  penelitian ini yaitu Purposive Sampling atau pengambilan sampel berdasarkan pertimbangan tertentu oleh peneliti. Larutan jamu dibuat dengan merendam  serbuk  jamu  ke  dalam  etanol
95%  dan  diaduk  dengan  menggunakan magnetic stirrer selama 30 menit.
Tujuannya  ialah  untuk  menarik  keluar  dan memisahkan  fenilbutazon  dari  campuran penyusun  sampel  jamu  tersebut.  Etanol 95%  digunakan  sebagai  pelarut  karena mengacu  pada  sifat  kelarutan  fenilbutazon yang larut dalam etanol 95% (9) .
Identifikasi fenilbutazon pada sampel dilanjutkan menggunakan strip test, dengan reagen alizarin red dan kalium heksasianoferat  (III).  Hasil  identifikasi fenilbutazon  pada  sampel  menggunakan strip test tertera pada tabel 2.
Tabel 1. Uji Kelayakan Strip Test
Strip Test Perubahan Warna Keterangan Warna Awal Warna Akhir Alizarin red Merah muda Merah kekuningan (+) Kobalt (II) nitrat Merah muda Merah muda (  ) Kalium heksasianoferat (III) Kuning muda Kuning kehijauan (+)
Keterangan: (+) Terjadi perubahan warna;  (  )  Tidak terjadi perubahan warna
Tabel 2. Hasil Identifikasi Fenilbutazon Menggunakan Strip Test Sampel Warna yang Dihasilkan Keterangan Alizarin Red Kalium Heksasianoferat (III) Kontrol Positif Merah kekuningan Kuning kehijauan (+) Kontrol Negatif Merah muda Kuning muda (  ) A Coklat Kuning (  ) B Coklat Kuning (  ) C Merah muda Kuning muda (  ) D Merah kekuningan Kuning kehijauan (+) E Merah kekuningan Kuning kehijauan (+) F Merah muda Kuning (  )
Keterangan: (+) Mengandung fenilbutazon; (  ) Tidak mengandung fenilbutazon
Strip  test yang  berisi  reagen  alizarin red awalnya  berwarna  merah  muda  akan berubah  menjadi  warna  merah  kekuningan jika  ditetesi  dengan  larutan  pembanding fenilbutazon. Warna yang sama ditunjukkan  oleh  2  sampel  yang  positif, yaitu sampel D dan E. Hal ini menunjukkan bahwa strip  test yang  dibuat  mampu mengidentifikasi adanya fenilbutazon  yang terkandung  dalam  sampel  jamu  pegal  linu. Sampel yang tidak mengandung fenilbutazon  menghasilkan  warna  yang tidak  sesuai  dengan  warna  yang  dihasilkan oleh larutan pembanding fenilbutazon.
Hasil  identifikasi strip  test dengan reagen  alizarin  ini  sesuai dengan strip  test yang  berisi  reagen  kalium  heksasianoferat (III). Strip  test yang  semula berwarna kuning  muda  berubah  menjadi  kuning kehijauan  jika  ditetesi  dengan  larutan pembanding  fenilbutazon.  Warna  yang sama  ditunjukkan  oleh  2  sampel  yang positif  dari  6  sampel yang  diuji, yaitu sampel  D  dan  E.  Hal  ini semakin memperkuat bahwa strip  test yang  dibuat
mampu mengidentifikasi adanya fenilbutazon yang terkandung dalam sampel jamu pegal linu.

## Life Time Strip test
Life  time  strip  test digunakan  untuk mengetahui berapa lama  daya  tahan reagen dalam  membran.  Uji life  time dilakukan dengan  cara  menetesi strip  test setiap  hari hingga strip  test tersebut  tidak  mengalami perubahan  warna  artinya  warna  sama dengan  warna strip  test awal (8) . Life  time strip  test alizarin red selama  17  hari. Setelah  17  hari, strip  test sudah  tidak menunjukkan perubahan warna seperti hari- hari  sebelumnya. Life  time hari  ke-1 strip test yang semula berwarna merah, kemudian setelah ditetesi larutan pembanding berubah menjadi merah
kekuningan.  Begitu juga dengan  hari  ke-2 hingga  hari  ke-17 strip  test masih menunjukkan perubahan warna.
Sedangkan life  time  strip  test kalium heksasianoferat  (III) diperoleh  hasil  yang lebih lama,  yaitu  hingga  30  hari. Hal  ini diduga  karena  reagen  terabsorbsi  dengan baik  dalam  kertas  saring  dan  terbentuk senyawa kompleks yang lebih stabil.

## SIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian, diketahui  bahwa strip  test dapat  dibuat dengan imobilisasi reagen alizarin red dan
kalium  heksasianoferat  (III)    ke  dalam kertas  saring Whatman ® No.  1  dengan metode  impregnasi. Hasil  identifikasi
menggunakan strip test menunjukkan
bahwa 2 sampel jamu pegal linu mengandung bahan kimia obat fenilbutazon yaitu  sampel  D  dan  E,  dari  6  sampel  jamu pegal  linu  yang  beredar  di  wilayah Kecamatan Sungai Pinang, Samarinda.

## SARAN
Perlu dikembangkan penelitian lanjutan  yaitu  akurasi strip  test terhadap beberapa  jenis  jamu  yang  berbeda.  Selain itu  juga  diperlukan  optimasi  reagen  agar diperoleh life  time  strip  test yang  lebih baik.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Fatimah,  S.,  Rahayu,  M.,  dan  Indari, D.  F.,  2017, Analisis  Antalgin  Dalam Jamu Pegal Linu Yang Dijual Di Pasar Beringharjo  Yogyakarta, Jurnal  of
Health, 4 (1): 29-34.
2. Yuliarti,  N.,  2009, Sehat,  Cantik, Bugar  dengan  Herbal  dan  Obat Tradisional, Yogyakarta: Andi.
3. Ningtyas,  K.  W.,  Zulfikar,  Piluharto, B., 2015, Identifikasi Ibuprofen, Ketoprofen dan Diklofenak Menggunakan  Strip  test  Berbasis Reagen  Spesifik  yang  Diimobilisasi pada  Membran  Nata De  Coco, Jurnal
Ilmu Dasar, 16 (2): 49-54.
4. Dirgantara,  V.  S.,  Zulfikar,  Andarini, N., 2014, Identifikasi Kualitatif Bahan Analgesik  pada  Jamu Menggunakan Prototype  Tes  Strip. Berkala  Sainstek,
2 (1): 42-48.
5. Sentat, T., Nurhasnawati, H.,
Dwinanda,  Y.  R.,  2019, Development
of  Paper-Based  Color  Test-Strip  For Paracetamol Detection In Jamu, Jurnal Ilmu Kesehatan, 7 (2): 137-145.
6. Rizky,  M.,  2018, Identifikasi  Bahan
Kimia Obat Sildenafil Sitrat pada Jamu Penambah  Stamina  Pria Menggunakan Prototipe  Strip  test, Karya  Tulis Ilmiah, Samarinda:  D-III  Akademi Farmasi Samarinda. 7. Sutrisno,  Y.  G.,  Khoirunnisa,  S.,
Agustien, D. S., Karyati, E., Fasya, N.,
Wasito,  H.,  2017, Analisis  Kualitatif Uji  Strip  Sildenafil  Sitrat  dengan
Kombinasi  Beberapa  Reagen  dalam Membran Kertas Selulosa. Jurnal Ilmu
Kefarmasian  Indonesia,  15  (2):  128-
133. 8. Hartini, D. L., 2013, Analisa Kualitatif Piroksikam dan Fenilbutazon Menggunakan  Reagen  Spesifik  yang Diimobilisasi pada Membran Poliamida  dalam  Tes  Strip, Skripsi.
Jember: Universitas Jember.
9. Anief,  M.,  2004, Ilmu  Meracik  Obat Teori  dan  Praktek,  Cetakan  ke-11, Yogyakarta:  Gadjah  Mada  University Press.
10. Nugraha,  R.,  Aprilia,  H.,  Rusnadi,  R. 2015, Pengembangan  Alat  Uji  Carik
Berbasis Polistiren Divinilbenzen (PSDVB)  untuk  Identifikasi  Bahan Kimia  Obat  Parasetamol  dalam  Jamu Pegal  Linu, Prosiding  Penelitian SPeSIA Unisba. 11. Departemen Kesehatan Republik Indonesia, 1979, Farmakope Indonesia. Edisi  III,  Jakarta:  Depkes RI.