Ekologia : Jurnal Ilmiah Ilmu Dasar dan Lingkungan Hidup
https://journal.unpak.ac.id/index.php/ekologia

## UJI AKTIVITAS EKSTRAK ETANOL KOMBINASI DAUN PANDAN WANGI DAN DAUN JAMBU BIJI TERHADAP Shigella dysenteriae
Oom Komala 1 , Durrotun Nafisah Abd.Nf 2 ,  dan Novi Fajar Utami 2
1 Program Studi Biologi, Fakultas MIPA – Universitas Pakuan
2 Program Studi Farmasi, Fakultas MIPA – Universitas Pakuan Email : oomkomalaunpak@gmail. com
diterima: 18 September 2021; direvisi: 1 Oktober 2021; disetujui: 5 Oktober 2021

## ABSTRAK
Disentri  dapat  diobati  dengan  menggunakan daun  pandan  wangi  ( Pandanus  amarylifolius) dan daun jambu biji ( Psidium guajava). Penelitian bertujuan untuk mengetahui aktivitas kombinasi ekstrak  etanol  96%  daun  pandan  wangi  dan  daun  jambu  biji  dalam  menghambat  pertumbuhan bakteri Shigella dysenteriae. Metode . Ekstraksi daun pandan wangi dan daun jambu biji masing- masing  dilakukan  dengan  menggunakan  metode  maserasi  dengan  pelarut  etanol  96%.  Untuk kombinasi,  masing-masing    ekstrak  tersebut  disatukan.  Ekstrak  yang  diperoleh  masing-masing diuji  konsentrasi  hambat  minimum  (KHM).  Nilai  KHM  ekstrak  daun  pandan  wangi  diperoleh pada konsentrasi 30% dan ekstrak daun jambu biji diperoleh pada kosentrasi 40%. Uji lebar daya hambat  (LDH)  dengan  metode  difusi  cakram  dilakukan  terhadap  ekstrak  tunggal  dan  ekstrak kombinasi,  dengan  perlakuan  konsentrasi  30%  ekstrak  tunggal  daun  pandan  wangi  (K1),  40% ekstrak  tunggal  daun  jambu  biji  (K2),  kombinasi  1  (ekstrak  daun  pandan  wangi  30%+  ekstrak daun jambu biji 40%) (K3), kombinasi 2 (ekstrak daun pandan wangi 35%+ ekstrak daun jambu biji  40%)  (K4),  kombinasi  3  (ekstrak  daun  pandan  wangi  40%+  ekstrak  daun  jambu biji 40%) (K5).  Lebar  daya  hambat  (LDH)  hasil  penelitian  perlakuan  terhadap S. dysenteriae dianalisis menggunakan RAL dan uji Duncan. Hasil penelitian menunjukkan bahwa kombinasi ekstrak daun pandan  wangi  dan  daun  jambu  biji  lebih  efektif  dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri S. dysenteriae .  Kombinasi  ekstrak  daun  pandan  wangi  dan  ekstrak  daun  jambu  biji  yang  paling efektif dalam menghambat pertumbuhan bakteri S. dysenteriae adalah kombinasi 3 (ekstrak daun pandan wangi 40%+ ekstrak daun jambu biji 40%) dengan rata-rata lebar daya hambat 5,625 mm.
Kata Kunci: Daun Jambu Biji, Daun Pandan Wangi, Kombinasi, Shigella dysenteriae
ACTIVITY TEST OF ETHANOL EXTRACT COMBINATION OF Pandanus amarylifolius LEAVES AND Psidium guajava LEAVES TO S. dysenteriae

## ABSTRACT
Dysentery  can  be  treated  using Pandanus  amarylifolius leaves  and Psidium  guajava leaves.  This  study  aimed  to  determine  the  activity  of  the  combination  of  96%  ethanol extract  of P.  amarylifolius leaves  and P.  guajava leaves  in  inhibiting  the  growth  of Shigella  dysenteriae bacteria.  Methods.  Extraction  of P.  amarylifolius leaves  and P. guajava leaves respectively by using the maceration method with 96% ethanol solvent. For the combination treatment, each of these extracts was combined. Each extract obtained was  tested  for  minimum  inhibitory  concentration  (MIC).  The  MIC  value  of P. amarylifolius leaf  extract  was  obtained  at  a  concentration  of  30%  and P.  guajava leaf extract  was  obtained  at  a  concentration  of  40%.  Inhibitory  width  test  (IWT)  by  disc diffusion  method  was  carried  out  on  single  extracts  and  combination  extracts,  with treatment concentrations of 30% single extract of P. amarylifolius leaf (K1), 40% single extract of P. guajava leaf (K2), combination 1 ( P. amarylifolius leaf). 30%+ P. guajava leaf 40%) (K3), combination 2 (35% P. amarylifolius leaf + 40% P. guajava leaf) (K4), combination 3 (40% P. amarylifolius leaf + 40% P. guajava leaf) (K5). The width of the
inhibition  of  the  research  results  of  the  treatment  against S.  dysenteriae were  analyzed using  a  completely  randomized  design  and  Duncan's  test.  The  results  showed  that  the combination of P. amarylifolius leaf extract  and P. guajava leaf was more effective in inhibiting the growth of S. dysenteriae bacteria. The combination of P. amarylifolius leaf extract and P. guajava leaf extract that was most effective in inhibiting the growth of S. dysenteriae bacteria  was  combination  3  (40% P.  amarylifolius leaf  extract  +  40% P. guajava leaf extract) with an average inhibitory width of 5.625 mm.
Keywords: Combination, P. amarylifolius Leaves, P.guajava Leaves, S. dysenteriae

## PENDAHULUAN
Disentri merupakan salah satu penyakit diare  akut  dengan  kondisi  kronis  meliputi diare, nyeri perut, demam, mual dan muntah. Tinja  yang  melewati  usus  besar  berjalan dengan cepat karena bakteri telah menembus usus besar (Munfaati et al., 2015). Salah satu penyebab disentri adalah
Shigella dysenteriae atau  disebut  sebagai  penyakit disentri basiler, yaitu suatu infeksi peradangan akut saluran pencernaan dengan kondisi  kronis  yang  dapat  berakibat  fatal pada  penderita  jika  tidak  ditangani  dengan benar  (Arthasari,  2015).  Menurut  WHO (2016)  dari  165  juta  angka  kejadian  diare yang  disebabkan  oleh Shigella  dysenteriae setiap  tahun,  sekitar  99%  terjadi  di  negara berkembang. Pada tahun 2013, menunjukkan angka  kematian  sebanyak  28.000  hingga 48.000 kasus kematian yang disebabkan oleh Shigella  dysenteriae, sebagian  besar  kasus terjadi  di  negara  berkembang  dan  lebih dominan  terjadi  pada  anak-anak  usia  di bawah 5 tahun.
Shigella  dysenteriae dapat  bertahan hidup  di  lingkungan  asam  (lambung)  dan menyerang  sel-sel  epitel  usus  besar  untuk dapat menginfeksi manusia yang menyebabkan  usus  mengalami  inflasi  serta sel-sel  akan  mati,  sehingga  diare  tampak berdarah  dan  berlendir.  Tanda-  tanda  inilah yang menjadi karakteristik Shigella dysenteriae (Arthasari,  2015).  Selama  ini masyarakat  menggunakan  obat  seperti ciprofloxacin untuk mengobati disentri yang memiliki  efek  samping  bagi  kesehatan seperti  mual,  muntah,  diare,  dispepsia  dan nyeri  abdomen.  Cara  alternatif  yang  dapat digunakan  untuk  menghambat Shigella dysenteriae yaitu  dengan  menggunakan
bahan  alam  diantaranya  pandan  wangi (Ariana,  2017)  dan  daun  jambu  biji (Maulidiyyah dkk.,2017).
Berdasarkan  penelitian  yang  telah dilakukan  secara  terpisah  menunjukkan bahwa  daun  pandan  wangi  (Ariana,  2017) dan  daun  jambu  biji  (Maulidiyyah,  2017) memiliki kandungan flavonoid, saponin, dan tanin. Flavonoid memiliki sifat efektif dalam menghambat  pertumbuhan  bakteri  dengan cara inaktivasi protein. Mekanisme aktivitas antibakteri flavonoid didasarkan pada kemampuannya untuk menonaktifkan adhesi mikroba  dan  protein  transpor  selubung  sel (Farhadi, et al.,2019). Fenol bersifat lipofilik yang  akan  merusak  membran  mikroba, memiliki  kemampuan  untuk  mendenaturasi protein  dan  merusak  membran  sel  tanpa dapat  diperbaiki.  Saponin  berfungsi  sebagai antibakteri dan antimikroba. Hal ini didasarkan pada sifat sitotoksik dari saponin dan  kemampuannya  dalam  mempengaruhi permeabilitas membran sitoplasma sehingga sel  mikroba  menjadi  lisis. Saponin  quinoa menyebabkan  kerusakan  parah  pada  bakteri yang  diuji  melalui  degradasi  dinding  sel diikuti  oleh  gangguan  membran  sitoplasma dan  protein  membran,  yang  mengakibatkan kebocoran isi sel (Dong, et. al ., 2020).
Hasil  penelitian  yang  dilakukan  oleh Ariana (2017) menunjukkan hasil konsentrasi  hambat  minimum  dari  ekstrak etanol  daun  pandan  wangi  terhadap  bakteri Shigella dysenteriae yaitu 25% dan konsentrasi  50%  merupakan  konsentrasi untuk  membunuh Shigella  dysenteriae. Sedangkan  pada  konsentrasi  60%  di  dapat hasil  diameter  daya  hambat  sebesar  11,90 mm (Jacky et al , 2019). Hasil penelitian yang dilakukan  oleh  Risnasari  dkk  (2016)
menunjukkan bahwa ekstrak daun jambu biji memiliki  efek  antibakteri  terhadap Shigella dysenteriae yang dapat menghambat pertumbuhan Shigella  dysenteriae pada konsentrasi  15%  dengan  lebar  daya  hambat sebesar 3,80 mm.
Tujuan penelitian adalah untuk mengetahui  efektivitas  dari  kombinasi ekstrak etanol daun pandan wangi dan daun jambu biji terhadap bakteri Shigella dysenteriae dibandingkan  dengan  masing- masing ekstrak serta  obat ciproploxacin.

## BAHAN DAN METODE Pembuatan Ekstrak
Ekstrak  daun  pandan  wangi  dan  daun jambu  biji  dibuat  dengan  metode  maserasi dengan  cara  merendam  masing-  masing sebanyak  500  gram  serbuk  daun  pandan wangi  dan  daun  jambu  biji  dengan  5  liter etanol  96%  (1  :  10).  Maserasi  dilakukan dalam  botol  coklat  selama  3  hari.  Pertama dilakukan dengan 2 liter etanol 96%, dikocok setiap 6 jam sekali selama 15 menit. Setelah perendaman  selama  1  hari,  kemudian disaring  menggunakan  kain  batis.  Residu dimaserasi    kembali  dalam  etanol  96% sebanyak  1,5  liter,  dilakukan  seperti pengerjaan yang pertama dilakukan sebanyak  2  kali  pengulangan.  Kemudian filtrat  yang  di  dapat  digabungkan  dan dipekatkan  dengan  vacum  dryer  hingga diperoleh  ekstrak  kental.  Ekstrak  pandan wangi dan jambu biji pada penelitian ini diuji fitokimia  meliputi  uji  alkaloid,  saponin, tannin, flavonoid.

## Pengujian Antibakteri Penetapan Konsentrasi Hambat Minimum (KHM)
Pengujian
Konsentrasi Hambat Minimum (KHM) pada ekstrak daun pandan wangi dan daun jambu biji dilakukan dengan menggunakan metode dilusi padat. Konsentrasi  yang  dibuat  untuk  pengujian Konsentrasi  Hambat  Minimum  (KHM)  ini adalah  20  %,  25  %,  30  %,  dan  35  %  untuk ekstrak daun pandan wangi sedangkan untuk ekstrak  daun  jambu  biji  dibuat  konsentrasi 10%, 20%, 30% dan 40%.
Larutan  uji  daun  pandan  wangi  dan daun  jambu  biji    diambil  masing-masing sebanyak  2  ml  lalu  dimasukkan  ke  dalam cawan  petri  yang  telah  diisi  dengan  25  ml media Brain Heart Infussion (BHI) agar yang telah  diinkubasi  dan  telah  di  dinginkan, kemudian  ditambahkan  bakteri Shigella dysenteriae sebanyak 50 µl suspensi bakteri 10 3 CFU/ml  pada  media,  dihomogenkan, selanjutnya  diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37°C.
Hasil  inkubasi  yang  telah  dilakukan kemudian  diamati  ada  atau  tidaknya pertumbuhan  bakteri Shigella  dysenteriae pada  media  agar.  Konsentrasi  Hambat Minimum  (KHM)  yang  didapat  merupakan konsentrasi  terendah  dari  ekstrak  daun pandan wangi dan daun jambu biji yang tidak terjadi pertumbuhan bakteri pada media agar Brain Heart Infussion (BHI).

## Penetapan Lebar Daya hambat (LDH)
Pada penelitian ini dilakukan uji Lebar Daya Hambat (LDH) dari kombinasi ekstrak daun pandan wangi dan ekstrak daun jambu biji dengan perbandingan konsentrasi tunggal masing-masing ekstrak daun pandan wangi dan ekstrak daun jambu biji.
Terdapat  7  kelompok  perlakuan  yang dilakukan  dalam  penelitian  ini,  yaitu  ke-1 adalah  ekstrak  tunggal  daun  pandan  wangi dengan  konsentrasi  30%  yang  diambil  dari nilai KHM, ke-2 yaitu ekstrak tunggal daun jambu  biji  dengan  konsentrasi  40%  yang diambil dari nilai KHM, ke-3, 4, dan 5 adalah kombinasi  ekstrak  daun  pandan  wangi dengan  konsentrasi  30%,  35%  dan  40% sedangkan  untuk  ekstrak  daun  jambu  biji dengan  konsentrasi  tetap  yaitu  40%, kelompok  K+  merupakan  kontrol  positif antibiotik  ciprofloxacin  dengan  konsentrasi 100  ppm,  dan  kelompok  K-  merupakan kontrol negatif berupa DMSO 10% sebanyak 2 ml.
Tabel 1 . Konsentrasi Ekstrak Daun Pandan Wangi dan Daun Jambu Biji serta kombinasi ekstrak
Perlakuan Ekstrak Daun Pandan Wangi Ekstrak Daun Jambu Biji Cipro floxacin DMSO 10% Ke-1 30% - - - Ke-2 - 40% - - Ke-3 30% 40% - - Ke-4 35% 40% - - Ke-5 40% 40% - - K+ - - 100 ppm - K- - - - 2 ml
Pengujian Lebar Daya Hambat (LDH) dilakukan  dengan  menggunakan  metode difusi  kertas  cakram.  Konsentrasi  larutan yang  diujikan  adalah  konsentrasi  ekstrak daun  pandan  wangi  tunggal,  konsentrasi ekstrak daun jambu biji tunggal, konsentrasi ekstrak  campuran  daun  pandan  wangi  dan daun  jambu  biji,  kontrol  positif  antibiotik ciprofloxacin sebanyak 100 ppm dan kontrol negatif  DMSO  10%  sebanyak  2  ml.  Media agar Brain  Herat  Infussion (BHI)  sebanyak 25 ml yang telah dicampur dengan inokulum bakteri  50  µl  dituang  ke  dalam  cawan  petri kemudian  ditunggu  hingga  media  agar memadat.
Setelah media agar memadat dilakukan pengujian  dengan  cara  meletakan  kertas cakram  yang  telah  diisi  dengan  larutan  uji diatas permukaan media agar. Kertas cakram agak ditekan untuk memastikan bahwa kertas cakram tersebut menempel pada permukaan media agar. Cawan petri kemudian diinkubasi  dalam  oven  dengan  suhu  37°C selama 24 jam.
Media agar Brain Heart Infussion (BHI) yang telah diinkubasi dilakukan pengamatan dan  diukur  zona  hambat  yang  terbentuk, bagian bening yang terdapat disekitar kertas cakram diukur dengan menggunakan penggaris  untuk  mengetahui  nilai  Lebar Daya  Hambat  (LDH)  yang  didapat  dari ekstrak tunggal dan ekstrak kombinasi yang diuji. Nilai Lebar Daya Hambat (LDH) yang paling  besar  merupakan  konsentrasi  yang paling  efektif  dalam  menghambat  bakteri Shigella dysenteriae.

## Analisis Data
Untuk  mengetahui  adanya  perbedaan disetiap  perlakuan  nilai  data  Lebar  Daya Hambat  (LDH)  antara  ekstrak  tunggal  dan ekstrak  kombinasi  dilakukan  analisis  secara statistik  menggunakan  Rancangan  Acak Lengkap (RAL) dengan 6 kali perlakuan dan 4  kali  pengulangan.  Apabila  terdapat perbedaan  dilanjutkan  dengan  uji  Duncan untuk menetukan ranking.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Serbuk Simplisia
Daun  pandan  wangi  dan  daun  jambu biji  yang  digunakan  pada  penelitian  ini adalah  daun  segar  yang  masih  utuh  dan berwarna  hijau.  Karakteristik  dari  serbuk simplisia daun pandan wangi yaitu berwarna hijau  tua,  tekstur  serbuk  halus  dan  berbau aromatik  khas.  Karakteristik  dari  serbuk simplisia  daun  jambu  biji  yaitu  serbuk berwarna hijau muda, tekstur halus, memiliki bau yang khas, rasa kelat.
A B
Gambar 1. Serbuk Simplisia Daun Pandan Wangi (A) dan Daun Jambu Biji (B)
Simplisia daun pandan wangi diperoleh hasil  simplisia  kering  dengan  bobot  1,1  kg sehingga  di  dapat  hasil  rendemen  simplisia sebesar  25,11%.  Sementara  dari  penelitian Oom  dkk,  (2017)  di  dapat  simplisia  daun pandan wangi sebanyak 1,5 kg dengan nilai rendemen  sebesar  37,5%.  Sedangkan  daun jambu biji setelah dilakukan pengeringan di dapat hasil simplisia kering sebanyak 1,35 kg sehingga di dapat rendemen simplisia sebesar 29,37%.  Faktor  yang  dapat  mempengaruhi nilai rendemen tersebut adalah kandungan air yang  terkandung  pada  simplisia.  Semakin tinggi kadar air maka akan membuat serbuk menjadi lebih berat. Begitu pula dengan suhu yang  digunakan  dalam  pembuatan  ekstrak dapat  menjadi  salah  satu  faktor  yang  dapat
mempengaruhi nilai rendemen. Suhu ekstraksi yang terlalu tinggi akan menyebabkan  hilangnya  senyawa-senyawa yang  tidak  tahan  terhadap  pemanasan sehingga akan terjadi oksidasi (Ibrahim et al., 2015 ) .

## Ekstrak kental
Karakteristik  dari  ekstrak  kental  daun pandan wangi adalah ekstrak berwarna hitam, memiliki bau yang khas, wangi, berminyak. Ektrak  kental  daun  jambu  biji  memiliki karakteristik  ektrak  berwarna  hitam,  bau khas, lengket.
A

## B
Gambar 2. Ekstrak Kental Daun Pandan Wangi (A) dan Daun Jambu Biji (B)
Hasil  pengujian  kadar  air  pada simplisia  serbuk  daun  pandan  wangi  yang diperoleh  dengan  nilai  rata-rata  sebesar 4,91% dan hasil kadar air ekstrak etanol daun pandan  wangi  diperoleh  dengan  nilai  rata- rata sebesar 3,82%. Hasil pengujian kadar air pada simplisia serbuk daun jambu biji yang diperoleh  dengan  nilai  rata-rata  sebesar 6,56% dan hasil kadar air ekstrak etanol daun jambu  biji  diperoleh  dengan  nilai  rata-rata sebesar  5,97%.  Hasil  pengujian  kadar  abu pada  simplisia  serbuk  daun  pandan  wangi memiliki rata-rata sebesar 5,93%, sedangkan untuk  hasil  pengujian  kadar  abu  ekstrak etanol  daun  pandan  wangi  memiliki  nilai rata-rata sebesar 7,23%.
Simplisia  serbuk  dan  ekstrak  etanol daun  pandan  wangi  dan  daun  jambu  biji mengandung  metabolit  sekunder  alkaloid, flavonoid,  tanin,  dan  saponin.  Berdasarkan penelitian  ilmiah  yang  telah  dilakukan  oleh Ariana  (2017)  dan  Maulidiyyah  (2017) membuktikan bahwa daun pandan wangi dan daun  jambu  biji  mengandung  senyawa metabolit sekunder seperti alkaloid, flavonoid, tanin, dan saponin.

## Hasil Uji Konsentrasi Hambat Minimum (KHM)
Pengujian  KHM  dilakukan  dengan menggunakan metode dilusi padat. Pengujian ini  dilakukan  untuk  melihat  empat  jenis konsentrasi berbeda daun pandan wangi dan daun  jambu  biji  yang  dapat  menghambat pertumbuhan  bakteri Shigella  dysenteriae pada  media  agar.  Deret  konsentrasi  yang digunakan  pada  pengujian  KHM  ini  adalah 20%,  25%,  30%  dan  35%  untuk  sampel ekstrak etanol daun pandan wangi. Dan deret konsentrasi 10%, 20%, 30%, dan 40% untuk pengujian  KHM  dengan  sampel  ekstrak etanol daun jambu biji.
Dari hasil pengamatan yang dilakukan di  dapat  hasil  bahwa  daun  pandan  wangi dengan konsentrasi 30% dan daun jambu biji dengan  konsentrasi  40%  (Gambar  3  dan  4) dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri Shigella  dysenteriae .  Hal  ini  karena  ekstrak etanol  daun  pandan  wangi  dan  daun  jambu biji  memiliki  senyawa  metabolit  sekunder seperti  alkaloid,  flavonoid,  saponin,  dan tanin  yang  dapat  menghambat  pertumbuhan bakteri tersebut.
Hasil  penelitian  yang  dilakukan  oleh Ariana (2017) menunjukkan hasil konsentrasi  hambat  minimum  dari  ekstrak etanol  daun  pandan  wangi  terhadap  bakteri Shigella dysenteriae yaitu 25% dan konsentrasi  50%  merupakan  konsentrasi untuk  membunuh Shigella  dysenteriae. Sedangkan  pada  konsentrasi  60%  di  dapat hasil  diameter  daya  hambat  sebesar  11,90 mm (Jacky et al , 2019). Hasil penelitian yang dilakukan  oleh  Risnasari  dkk  (2016) menunjukkan bahwa ekstrak daun jambu biji memiliki  efek  antibakteri  terhadap Shigella dysenteriae yang dapat menghambat pertumbuhan Shigella  dysenteriae pada konsentrasi  15%  dengan  diameter  daya hambat sebesar 3,80 mm. Adanya perbedaan hasil KHM dengan penelitian ini (Gambar 3 dan 4) pada ekstrak daun pandan wangi dan ekstrak daun jambu ini kemungkinan kualitas ekstrak yang berbeda.
Gambar 3. Hasil Uji Konsentrasi Hambat Minimum (KHM) Daun Pandan Wangi Terhadap Shigella dysenteriae. KHM pada Konsentrasi 30%.
Gambar 4. Hasil Uji Konsentrasi Hambat Minimum (KHM) Daun Jambu Biji Terhadap Shigella dysenteriae. KHM pada Konsentrasi 40%.

## Hasil Uji Lebar Daya Hambat (LDH)
Pengujian  LDH  antibakteri  ekstrak daun pandan wangi, ekstrak daun jambu biji, dan  kombinasi  ekstrak  dari  keduanya  pada penelitian  ini  menggunakan  metode  difusi cakram  dan  media  agar  yang  digunakan adalah  BHI  ( Brain  Heart  Infussion ).  Hasil pengujian  LDH  dapat  dilihat  pada  Tabel  2 dan  Gambar  5.  Dari  hasil  pengamatan diperoleh nilai LDH yang paling baik adalah kontrol  positif  Ciprofloxacin  100  ppm dengan  nilai  rata-rata  sebesar  6  mm  dan masuk ke dalam kategori sedang. Kombinasi ekstrak  daun  pandan  wangi  40%  dan  daun jambu  biji  40%  memiliki  nilai  LDH  yang mendekati kontrol positif ciprofloxacin yaitu memiliki  nilai  rata-rata  sebesar  5,375  mm dengan kategori sedang. Nilai LDH terendah adalah ekstrak tunggal daun pandan wangi 30% dengan  rata-rata  4,25  mm  dan  masuk  ke dalam  kategori  lemah  terhadap  daya hambatnya.
Tabel 2. Nilai Hasil Lebar Daya Hambat (LDH)
Perla kuan Rata-rata Nilai LDH (mm) Kategori* K1 K2 K3 K4 K5 K+ K- 4,25±0,288 b 4,5±0,408 b 4,875±0,25 b 5,375±0,478 c 5,625±0,478 c 6±0,408 c 0±0 a
Lemah (<5) Lemah (<5) Lemah (<5) Sedang (5-10) Sedang (5-10) Sedang (5-10) Tidak ada hambatan
Keterangan : huruf superskrip (a,b,c) yang sama menunjukkan tidak berbeda nyata DPW = Daun Pandan Wangi
DJB   = Daun Jambu Biji *      = Kategori Menurut Safitri et al ., (2017) .
Dilihat  dari  hasil  penelitian  yang dilakukan bahwa kombinasi ekstrak memiliki  hasil  yang  lebih  baik  dari  ekstrak tunggal.  Dapat  dibuktikan  dengan  semakin tingginya  nilai  kosentrasi  dari  daun  pandan wangi pada kombinasi daun jambu biji maka akan  semakin  besar  nilai  LDHnya.  Ekstrak kombinasi yang paling efektif adalah ekstrak kombinasi  3  yaitu  ekstrak  daun  pandan wangi 40% dan daun jambu biji 40% dengan nilai diameter rata-rata sebesar 5,625mm.
Gambar 5. Uji Lebar Daya Hambat (LDH) ekstrak Daun Pandan Wangi dan Daun Jambu Biji
Keterangan : K1=30% edp     K2=  40%  edj K3=30% edp +40% edj    K4= 35% edp +40% K5= 40% edp + 40% edj       K+=100 ppm Ciprofloxacin      K-=  DMSO 10%
Ekstrak etanol daun pandan wangi dan daun jambu biji memiliki senyawa metabolit sekunder seperti alkaloid, flavonoid, saponin, dan tanin yang dapat menghambat pertumbuhan  bakteri  tersebut.  Alkaloid bekerja  sebagai  antibakteri  dengan  cara mengganggu komponen penyusun peptidoglikan  pada  sel  bakteri,  sehingga lapisan  dinding  sel  tidak  terbentuk  secara utuh  dan  menyebabkan  kematian  sel. Mekanisme kerja alkaloid sebagai antibakteri melalui  penghambatan  sintesis  dinding  sel akan  menyebabkan  lisis  pada  dinding  sel bakteri sehingga pertumbuhan bakteri terhambat  bahkan  menyebabkan  kematian
pada bakteri (Othman, et al ., 2019). Menurut Farhadi,  et  al.  (2019) flavonoid  memiliki sifat efektif dalam menghambat pertumbuhan  bakteri  dengan  cara  inaktivasi protein. Saponin  quinoa  menyebabkan kerusakan  parah  pada  bakteri  yang  diuji melalui  degradasi  dinding  sel  diikuti  oleh gangguan  membran  sitoplasma  dan  protein membran, yang mengakibatkan kebocoran isi sel  (Dong, et.  al .,  2020). Sedangkan  tanin memiliki mekanisme mempresipitasi protein bakteri  sehingga  terjadi  inaktivasi  enzim yang  diproduksi  bakteri  dan  menginaktivasi protein transport dinding sel bakteri sehingga merusak dinding sel bakteri (Aisyah, 2015).
Senyawa aktif yang terkandung mampu  menjadi  agen  antidiare  yang  tidak hanya  menjadi  inhibitor  efek  spasmogenik pada  usus  tetapi  dapat  memberikan  efek sebagai inhibitor pertumbuhan dan perkembangan  bakteri  penyebab  diare.
Terhambatnya
pertumbuhan dan perkembangan  bakteri  penyebab  diare  di usus akan mencegah proses iritasi pada usus dan  mengurangi  peningkatan  kecepatan gerakan  peristaltik  usus.  Hal  ini  dapat mengurangi  kontraksi  usus  sehingga  dapat menghentikan diare.
Hasil  pengujian  dari  ekstrak  daun pandan  wangi  30%,  daun  jambu  biji  40% serta  ekstrak  kombinasi  daun  pandan  wangi 30% dan daun jambu biji 40% memberikan pengaruh  lebar  daya  hambat  yang  sama. Demikian  pula  dengan  kombinasi  ekstrak daun pandan wangi 35% dan daun jambu biji 40%  serta  kombinasi  ekstrak  daun  pandan wangi  40%  dan  daun  jambu  biji  40%  yang dapat  dijadikan  sebagai  alternatif  untuk mengatasi  disentri  karena  memberikan pengaruh  yang  sama  dengan  kontrol  positif ciprofloxacin sehingga efektif dalam menghambat  bakteri Shigella  dysenteriae. Dari hasil pengolahan data yang memberikan pengaruh  yang  berbeda  adalah  kontrol negatif DMSO 10%. Berdasarkan plot rataan perlakuan menujukkan bahwa K+ (Ciprofloxacin  100  ppm)  memberikan  rata- rata  nilai  LDH  terbesar  dibandingkan  yang lain, sedangkan K- (DMSO 10%) memberikan  rata-rata  nilai  LDH  terendah
dibandingkan yang lain. Obat alternatif untuk mengatasi disentri dapat diaplikasikan dalam bentuk  tablet,  sirup,  kapsul,  dan  lain sebagainya.

## KESIMPULAN DAN SARAN Kesimpulan
Campuran  ekstrak  etanol  96%  daun pandan wangi dan daun jambu biji memiliki aktivitas sebagai antibakteri yang lebih kuat daripada ekstrak tunggalnya dalam menghambat  pertumbuhan  bakteri Shigella dysenteriae . Ekstrak kombinasi daun pandan wangi      40%  dan  daun  jambu  biji  40% merupakan  campuran  konsentrasi  yang memiliki  daya  hambat  tidak  jauh  berbeda dengan  antibiotik  ciprofloxacin  100  ppm dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri Shigella dysenteriae.

## Saran
1. Untuk mendapatkan efek antibakteri yang lebih kuat perlu dilakukan penelitian lebih lanjut  terhadap  efektivitas  ekstrak  daun pandan wangi dan daun jambu biji
2. Untuk  kombinasi  ekstrak  daun  pandan wangi  dan  daun  jambu  biji  perlu dilakukan  penelitian  formulasi  sediaan oral seperti sirup atau tablet.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terima kasih disampaikan kepada Labaoratorium  Farmasi  FMIPA  UNPAK, Laboratorium  Biologi  Institut  Pertanian Bogor, BALITTRO dan Gramarly.

## DAFTAR PUSTAKA
Aisyah.  (2015).  Daya  Hambat  Ekstrak Pandan Wangi ( Pandanus amaryllifolius Roxb) terhadap Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus aureus. Skripsi . Fakultas Kedokteran Gigi. Universitas Hasanuddin. Makassar. Arthasari, D.A.A. (2015). Aktivitas Antibakteri Kombinasi Ekstrak Etanol  Biji  Dan  Batang  Pepaya ( Carica Papaya L.) Terhadap Bakteri Shigella dysenteriae Dan Streptococcus pyogenes Serta
Bioautografinya.  Naskah  Publikasi. Fakultas Farmasi, Universitas Muhammadiyah Surakarta, Surakarta. Ariana,  Diah.  (2017).  Uji  Antibakteri Perasan Daun Pandan Wangi (Pandanus amarylifolius Roxb) Terhadap Shigella  dysentriae.  The Journal Of Muhammadiyah
Medical  Laboratory  Technologist 2 (1): 67-72.
Dong, S., Yang, X., Zhao, L., Zhang, F., Hou, Z.,  Xue,  P.  (2020).  Antibacterial activity  and  mechanism  of  action saponins from Chenopodium quinoa Willd. husks against foodborne pathogenic  bacteria.  Industrial  Crops and Products, 149. https://doi.org/10.1016/j.indcrop.2020. 112350 Farhadi,  F.,  Khamemeh,  B.,  Iranshahi,  Me., and Iranshahi, Mi. (2019). Antibacterial activity of flavonoids and their structure-activity relationship: An updated review, Phytotherapy Research, 33 , 13-40. DOI:
10.1002/ptr.6208
Ibrahim,  AM.  Yunita  dan  Feronika  HS.
(2015).  Pengaruh  Suhu  dan  Lama Waktu  Ekstraksi  Terhadap  Sifat
Kimia  dan  Fisik  Pada  Pembuatan
Minuman  Sari  Jahe  Merah  Dengan
Kombinasi Penambahan Madu
Sebagai Pemanis. Jurnal Pangan dan Agroindustri. 3 (2):530-541.
Jacky. Putri, D.A., Azizah, M. (2019). Uji Aktivitas Anti Bakteri Ekstrak Etanol Daun  Pandan  Wangi  (Pandanus amarylifolius Roxb) Terhadap Bakteri Penyebab Diare. Palembang. Jurnal Kesehatan Saelmakers
Perdana Vol. 2 (1). Komala, O., Nur’aini, P., Indriati, D. (2017). Uji  Antibakteri  Sediaan  Obat  Kumur Ekstrak Daun Pandan Wangi ( Pandanus amaryllifolius Roxb) Terhadap Streptococcus mutans .
Jurnal Ekologia, 17. (1). Maulidiyyah,  DS.  Husin,  UA.  Budiman
Budiman.  (2017). Uji  Sensitivitas Ekstrak  Daun  Jambu  Biji  (Psidium
guajava)  Pada  Shigella  dysentriae :
Fakultas Kedokteran. Universitas Islam Bandung. Bandung. Munfaati,  P.N.,  Ratnasari,  E  &  G. Trimulyono. (2015). Aktivitas
Senyawa  Antibakteri  Ekstrak  Herba Meniran  ( Phyllantus  niruri )  Terhadap Pertumbuhan Bakteri Shigella dysentriae Secara  In  Vitro. Jurnal
Lentera Bio, 4 (1) : 64-71.
Othman , L., Sleiman , A., & Abdel-Massih , R.M.  (2019).  Antimicrobial  Activity of  Polyphenols  and  Alkaloids  in
Middle Eastern Plants. Front Microbiol ., 10, 911. doi: 10.3389/fmicb.2019.00911
Risnasari,  Setyawati,  T.,  &  Nursyamsi.
(2016). Antibacterial Effect Of Extract Guava  Leaves  (Psidium  guajava  L) Against  Bacteria  Shigella  dysentriae On  The  In  Vitro .  Biochemistry Departement. Faculty of Medicine and Health Sciences. Tadulako University.
Palu.
Safitri, G. L., Wibowo, M. A., & Idiawati, N.
(2017).  Uji  Aktivitas  Antibakteri Ekstrak  Kasar  Buah  Asam  Paya ( Eleiodoxa Conferta ( Griff .) Buret ) Terhadap Bakteri Staphylococcus
Aureus  Dan  Salmonella  Thypi. Jkk ,
6 (1), 17–20.
WHO.  (2016).  Dysenterie  (Shigellosis).
Diakses Selasa, 6 Juni 2017.
http://www.who.int/selection_medicin es