## Ad-Dawaa’ J. Pharm. Sci. 3 (2)

## Aktivitas Antianemia Filtrat Limbah Kentos Kelapa (Cocos nucifera) Terhadap Mencit Yang Diinduksi Natrium Nitrit

## Antianemic Activity of Coconut (Cocos nucifera) Haustorium Waste Filtrate in Mice Induced by Sodium Nitrite
Adzimahtinur Pradawahyuningtyas * , Mukti Priastomo, Laode Rijai
Laboratorium Penelitian dan Pengembangan Farmaka Tropis, Fakultas Farmasi, Universitas Mulawarman
Jl. Kuaro, Gunung Kelua, Samarinda Utara, Gn. Kelua, Kec. Samarinda Ulu, Kota Samarinda, Kalimantan Timur
Kontak korespondensi *: elitearga@gmail.com

## ABSTRAK
Penelitian  ini  bertujuan  mengetahui  aktivitas  antianemia  dari  limbah  kentos  kelapa  (Cocos  nucifera Haustorium)  terhadap  mencit  yang  diinduksi  natrium  nitrit  secara  per  oral  selama  43  hari.  Kondisi  anemia ditentukan  dengan  menghitung  kadar  hemoglobin  menggunakan  metode Point  of  Care  Test (POCT)  dengan  alat easytouch®  GCHb  dan  dihasilkan  rata-rata  kadar  Hb  7,96  ±  0,05  g/dL.  Setelah  kondisi  anemia  tercapai,  diberi perlakuan uji selama 21 hari dengan membagi mencit ke dalam empat kelompok perlakuan masing - masing terdiri atas 3 ekor mencit. Kelompok blangko diberi  air suling, kelompok kontrol  diberi suplemen Inbion®  dengan dosis 0,65  mg  /  20  g  BB, kelompok  I  dan  II  diberi  filtrat  kentos  kelapa  dengan  dosis  masing  masing  5g/kgBB  dan 15g/kgBB.  Kemudian  diukur  kadar  hemoglobin  dan  jumlah  eritrosit.  Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  diperoleh rata  -  rata  kadar  hemoglobin  kelompok  blangko, kontrol, I  dan  II  berturut-turut  yaitu  13,9  g/dL,  15,4  g/dL,  16,03 g/dL  dan  16,8  g/dL.  Jumlah  eritrosit  saat  anemia  yaitu  1.750.000/mm 3 dan  setelah  pemberian  kentos  kelapa  yaitu 8.260.000/mm 3. Dari penelitian ini dapat disimpulkan bahwa aktivitas antianemia tertinggi yang dimiliki oleh filtrat limbah  kentos  kelapa  terdapat  pada  dosis  15  g/kgBB  dan  memiliki  perbedaan  kadar  hemoglobin  yang  signifikan (p<0,05) terhadap kelompok blangko.
Kata Kunci: Anemia, Kentos Kelapa , Hemoglobin, Eritrosit

## ABSTRACT
This  study  aims  to  determine  the  anti-anemia  activity  of  coconut  milk  (Cocos  nucifera  Haustorium)  waste against mice induced by sodium nitrite orally for 43 days. The condition of anemia was determined by calculating the hemoglobin level using the Point of Care Test (POCT) method with the easytouch® GCHb tool and the resulting Hb level was 7.96 ± 0.05 g / dL. After the anemia condition is achieved, the test treatment is given for 21 days by dividing the mice into 5 treatment groups each consisting of 3 mice. The blank group was given distilled water, the control group was given Inbion® supplements at a dose of 0.65 mg / 20 g BW, groups I and II were given coconut concentrate  filtrate  at  a  dose  of  5g  /  kg  and  15g  /  kg,  respectively.  Then  measured  the  hemoglobin  level  and  the number of erythrocytes. Based on the results of the study, the average hemoglobin levels of the blank, control, I and II groups were 13.9 g / dL, 15.4 g / dL, 16.03 g / dL and 16.8 g / dL, respectively. The number of erythrocytes during anemia  was  1,750,000  /  mm3  and  after  giving  coconut  kentos  was  8,260,000  /  mm3.  From  this  study  it  can  be concluded that the highest anti-anemia activity possessed by coconut kentos waste filtrate is at a dose of 15g / kgBW and has a significant difference in hemoglobin levels (p <0.05) with the blank group.
Keywords: Anemia, Coconut Haustorium, Hemoglobin, Erythrocytes

## Ad-Dawaa’ Journal of Pharmaceutical Sciences
ISSN: 2654-7392, E-ISSN: 2654-6973 Vol. 3, No. 2, Desember 2020, Hal. 90 – 96 DOI: 10.24252/djps.v3i2.16477

## PENDAHULUAN
Keadaan  tubuh  yang  baik  umumnya  dapat dilihat  dari  kandungan  darah  pada  tubuh seseorang yang berada dalam rentang normal. Kondisi  tubuh  yang  menunjukkan  kadar hemoglobin  (Hb)  dibawah  nilai  normal  yang disertai  jumlah  eritrosit  dibawah  normal merupakan  kondisi  anemia  (Fitriany  & Saputri,  2018).  Salah  satu  penyebab  kondisi anemia  umumnya  adalah  defisiensi  zat  besi yang  terjadi  karena  kebutuhan  zat  besi  tubuh meningkat sedangkan zat besi tidak diproduksi  di  dalam  tubuh  sehingga  perlu asupan  zat  besi  dari  makanan  atau  minuman. Defisiensi  zat  besi  menyebabkan  tubuh kesulitan  membentuk  sel  darah  merah sehingga  sel  darah  merah  yang  terbentuk memiliki  ukuran  yang  lebih  kecil  dan berwarna  lebih  muda.  Kadar  hemoglobin yang  berkurang  ini  menyebabkan  asupan oksigen  tidak  maksimal  untuk  diedarkan  ke seluruh jaringan tubuh (Aulia, 2017).
Di  negara  berkembang  seperti  Indonesia, anemia  masih  menjadi  tantangan  dalam kesehatan dan kecukupan gizi. Hasil Riskesdas  2018  menyatakan  bahwa  di Indonesia sebesar 48,9% ibu hamil mengalami  anemia.  Sebanyak  84,6%  anemia pada  ibu  hamil  terjadi  pada  kelompok  umur 15-24  tahun.  Kondisi  anemia  pada  ibu  hamil dapat  meningkatkan  resiko  kematian  saat melahirkan  dan  bayi  terlahir  dengan  berat badan rendah (prematur) (Kementerian Kesehatan,  2019).  Gejala  yang  ditimbulkan dapat  mengurangi  produktivitas  yaitu  lemas,
mudah  letih,  konsentrasi  menurun,  serta pusing  (Fitriany  &  Saputri,  2018).  Menteri Kesehatan  Republik  Indonesia  memberikan nilai  rujukan  kadar  hemoglobin  berdasarkan umur dan jenis kelamin diantaranya adalah 11 gram/dl untuk anak usia 6 bulan - 6 tahun, 12 gram/dl  untuk  anak  usia  6  -  14  tahun,  13 gram/dl untuk  pria dewasa, 12 gram/dl untuk wanita  dewasa,  11  gram/dl  untuk  ibu  hamil, dan 12 gram/dl untuk ibu menyusui lebih dari 3 bulan (Aulia, 2017).
Kelapa  ( Cocos  nucifera L.)  merupakan tumbuhan  yang  memiliki  banyak  manfaat  di setiap  bagiannya  seperti  kentos  kelapa. Kentos  kelapa  adalah  bagian  distal  embrio pada  biji  yang  membesar  dalam  buah  kelapa hingga endosperma menghilang secara ekstensif (Sugimuma & Murakami, 1990). Di Indonesia  belum  banyak  yang  mengetahui kandungan  penting  dalam  kentos  kelapa, sehingga  umumnya  bagian  kentos  kelapa  ini terbuang  begitu  saja.  Penelitian  karakterisasi biokimia dan nutrisi kentos kelapa menyebutkan kentos kelapa memiliki kandungan  seperti  karbohidrat,  protein,  asam lemak,  fenolik,  serta  mineral.  Mineral  yang terdapat pada kentos kelapa diantaranya yakni kalsium, kalium, magnesium, fosfor, mangan, besi,  tembaga  dan  zink.  Jumlah  zat  besi  di tiap  100  g  nya  sebesar  43,4  –  56,6  %  dari total  mineral  yaitu  2,5  mg/100g  kentos kelapa. Selain zat besi, kandungan magnesium  yang  mencapai  104  mg/100  g kentos  kelapa  mendukung  potensi  kentos kelapa sebagai  sumber  zat  besi dan
magnesium yang dapat meningkatkan
pembentukan hemoglobin tubuh (Manivannan, et al., 2018).

## METODE  PENELITIAN
Alat dan bahan
Alat-alat yang digunakan adalah
easytouch ® GCHb, haemocytometer, mikroskop optik BN107 ® , timbangan analitik, pipet  ukur,  dan  gunting  bedah.  Bahan-bahan yang  digunakan  adalah  kentos  kelapa,  air suling,  natrium  nitrit  (Merck ® ),  suplemen Inbion ® ,  alkohol  70%,  larutan  hayem  standar diperoleh  dari  Laboratorium  Bio  Analitika Surabaya.

## Prosedur Uji Etik
Penelitian  ini  telah  disetujui  oleh  Komisi Nasional  Etik  Penelitian  Kesehatan  di
Fakultas
Kedokteran Universitas Mulawarman Samarinda.

## Penyiapan Sampel
Filtrat  kentos  kelapa  dibuat  dalam konsentrasi  25  dan  75%.  Kentos  kelapa dipilih  yang  segar  dengan  ciri–ciri  berwarna putih  atau  putih  kekuningan  dengan  lapisan luar  utuh  atau  tidak  berlubang.  Sampel dipotong  dan  diambil  bagian  yang  dapat dikonsumsi. Selanjutnya sampel dicuci bersih dan  segera  diangin  –anginkan  hingga  kering. Potongan  sampel  masing-masing  ditimbang 25  dan  75  g  kemudian  dihaluskan  dengan mortir  dan  stamper,  kemudian  ditambahkan akuades  hingga  100  mL,  diaduk.  Sampel disaring  untuk  mendapatkan  filtrat.  Filtrat
kentos  kelapa  diberikan  dalam  dosis  oral sebanyak 5 dan 15 g/kgBB.
Pembuatan larutan Inbion ® untuk perlakuan  pada  kelompok  kontrol  yaitu digunakan  dosis  0,65  mg/20  g  BB  dalam  0,4 mL/hari. Larutan
Inbion ® dibuat menggunakan  81,25  mg  bubuk  Inbion ® yang dilarutkan  dan  ditambahkan  dengan  akuades hingga  mencapai  tanda  batas  labu  ukur  50 mL.

## Prosedur pembuatan larutan NaNO2
Larutan  NaNO 2 dibuat  dalam  dosis  2,5 mg/mL  untuk  perlakuan  dalam  patologis anemia.  Serbuk  NaNO 2 ditimbang  sebanyak 62,5  mg  dan  dilarutkan  dengan  akuades hingga mencapai 25 mL (Hamidah, Anggereini, & Nurjanah, 2017).

## Penentuan Kadar Hemoglobin
Perlakuan  patologis  anemia  diberikan melalui  pemberian  NaNO 2 dengan  dosis  1 mg/20  g  BB/hari.  Perlakuan  ini  diberikan selama  43  hari,  yaitu  hingga  kondisi  anemia tercapai  (kadar  Hb  <  8  g/dL  ).  Mencit dipuasakan dari pakan selama  8 jam sebelum pengukuran  Hb.  Hal  ini  dilakukan  karena eritrosit  dan  hemoglobin  akan  mengalami peningkatan apabila dipuasakan selama 17-20 jam  (Fitria  &  Sarto,  2014).  Penentuan  kadar hemoglobin metode POCT dilakukan menggunakan  seperangkat  alat Easytouch ®
GCHb.  Sampel  darah  diambil  langsung  dari ekor  mencit  yang  telah  dipotong  bagian ujungnya.  Darah  pertama  yang  keluar  diusap menggunakan  kapas  yang  telah  dibasahi
alkohol  70%,  kemudian  darah  kedua  yang keluar dimasukkan kedalam strip tes hemoglobin.  Hasil  pemeriksaan  akan  muncul pada  monitor  sebagai  kadar  hemoglobin dalam satuan g/dL.
Setelah kondisi anemia tercapai, kelompok  perlakuan  dibagi  menjadi  empat kelompok masing - masing terdiri dari 3 ekor mencit  dan  diberi  perlakuan  selama  21  hari. Kelompok  perlakuan  terbagi  menjadi  (I) blangko,  (II)  Kontrol  Inbion ® dosis  0,65  mg /20  gBB,  serta  sampel  (III  dan  IV)  dengan dosis  5  dan  15  g/kgBB.  Pengukuran  kadar hemoglobin  selanjutnya  dilakukan  pada  hari ke-21 menggunakan metode POCT.

## Penghitungan jumlah eritrosit
Penghitungan  jumlah  eritrosit  dilakukan setelah  perlakuan  uji  selama  21  hari  dengan metode  Hayem.  Darah  diambil  dari  tabung vakutainer  EDTA  sebanyak  10µL  kemudian diencerkan  dengan  larutan  hayem  sebanyak 1990  µL  kedalam  tabung  reaksi  untuk mendapatkan  pengenceran  200  kali.  Hasil pengenceran  dialirkan  ke  dalam  kotak  hitung hingga  memenuhi  kotak  hitung.  Selanjutnya eritrosit  dihitung  di  bawah  mikroskop. Perhitungan dilakukan menggunakan rumus:
Jumlah eritrosit per mm 3 = n x 10000 dimana  n  adalah  jumlah  eritrosit  yang terhitung pada 5 kotak (Norsiah, 2015).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Natrium nitrit digunakan sebagai penginduksi  anemia  karena  nitrit  tidak dieksresikan  oleh  tubuh  sehingga  kadarnya
terakumulasikan dalam tubuh dan menyebabkan masalah kesehatan (Ambarwati,  2012).  Nitrit  akan  berikatan dengan  hemoglobin  yang  menyebabkan pembentukan Reactive Oxygen Species (ROS). ROS ini bekerja dengan menyebabkan stress  oksidatif  pada  membran  eritrosit.
Akibatnya, eritrosit tidak dapat mempertahankan bentuknya dan terjadi hemolisis  lebih  cepat  (Ambarwati,  2012). Namun  Departemen  Kesehatan  RI  masih memperbolehkan  nitrit  untuk  dikonsumsi pada  manusia  yaitu  0,4  mg/kg/hari.  Kondisi anemia  yang  diperoleh  pada  penelitian  ini dicapai  setelah  semua  mencit  diinduksi natrium  nitrit  selama  43  hari.  Kadar hemoglobin  pada  hari  ke  43  diukur menggunakan metode POCT untuk mengetahui pencapaian kondisi anemia (<11g/dL)  dan  didapatkan  hasil  rata  –  rata yaitu 7,96 ± 0,05 g/dL.
Kadar  hemoglobin  dari  masing  masing kelompok tersaji dalam tabel 1. Kelompok uji III  dan  IV  tidak  memiliki  perbedaan  yang signifikan  dengan  kelompok  II.  Hal  ini menunjukkan  bahwa  filtrat  kentos  kelapa dosis  5  dan  15  g/kgBB  memiliki  aktivitas yang sama dengan  suplemen Inbion ® sebagai antianemia.  Kelompok  III  dan  IV  berbeda signifikan  dengan  kelompok  I.  Hal  ini menunjukkan  bahwa  kelompok  III  dan  IV memberikan aktivitas antianemia.
Hasil  penelitian  menunjukkan  jumlah eritrosit  meningkat  setelah  diberikan  kentos kelapa dibandingkan terhadap keadaan
patologi  setelah  pemberian  natrium  nitrit (lihat  tabel  2).  Hal  ini  menunjukkan  bahwa Natrium  nitrit  mampu  membuat  kondisi anemia dengan mempercepat hemolisis eritrosit  sehingga  jumlah  eritrosit  dibawah nilai  normal  (Ambarwati,  2012).  Selain  itu, hal  ini  juga  menunjukkan  bahwa  pemberian filtrat  kentos  kelapa  selama  21  hari  mampu meningkatkan jumlah eritrosit karena memiliki  kandungan  zat  besi  yang  tinggi yaitu  mencapai  2,53  ±  0,2  mg  per  100  g kentos  kelapa  kering  (Manivannan,  et  al., 2018).
Gambaran  mikroskopik  pada  gambar  1.a menunjukkan  kondisi  anemia  setelah  diberi perlakuan  induksi  natrium  nitrit  selama  43 hari  dimana  jumlah  sel  eritrosit  lebih  sedikit dan  bentuk  sel  eritrosit  tidak  normal  (tidak bikonkaf).  Pada  gambaran  eritrosit  kondisi anemia,  terlihat  bentuk  eritrosit  berupa poikilositosis  (bentuk  bervariasi)  (Pratiwi, Widyastuti,  &  Utama,  2017).  Hal  ini dipengaruhi  oleh  mekanisme  natrium  nitrit
didalam tubuh. Terjadi reaksi antara NO pada natrium  nitrit  dengan  hemoglobin  pada eritrosit  membentuk  nitrosohemoglobin  yang mengakibatkan kompetisi pengikatan O 2 oleh hemoglobin  dengan  NO.  Hemoglobin  yang berikatan  dengan  NO  membuat  O 2 yang terikat  lebih  rendah  sehingga  merangsang eritropoetin  untuk  melakukan  eritropoesis sehingga  terbentuk  eritrosit,  namun  proses tersebut  belum  sempurna.  Eritropoesis  yang tidak  sempurna  menghasilkan  eritrosit  yang tidak sempurna. Selain itu, natrium nitrit juga membuat  membran  eritrosit  tidak  stabil sehingga  menyebabkan  hemolisis  membran eritrosit  (Cahaya,  Aulia,  &  Nurlely,  2016). Natrium  nitrit  juga  bekerja  mengoksidasi  ion Fe 2+ dalam hemoglobin menjadi  Fe 3+ sehingga  terbentuk  methemoglobin  yang tidak dapat mengikat O 2 untuk disebarkan ke seluruh  jaringan  (Nursucihta,  Thai’in,  Putri, Utami, & Ghani, 2014).
Gambaran  mikroskopik  eritrosit  pada gambar  1.b  menunjukkan  setelah  perlakuan pemberian filtrat kentos kelapa selama 21 hari maka  jumlah  eritrosit  dan  bentuk  eritrosit menjadi  normal.  Pemberian  filtrat  kentos kelapa  selama  21  hari  didasarkan  pada penelitian  yang  dilakukan  oleh  (Sitasiwi  &
Tabel 1. Kadar Hemoglobin
Kelompok Perlakuan Rata – Rata Kadar Hemoglobin (mg/dL) Semua Kelompok Induksi Natrium Nitrit 7,96 ± 0,05 Setelah Kondisi Anemia Tercapai Kelompok I Akuades 13,9 ± 1,1 Kelompok II Inbion® 15,4 ± 0,6 Kelompok III Filtrat Kentos Kelapa 5g/kgBB 16,03 ± 0,7 Kelompok IV Filtrat Kentos Kelapa 15g/kgBB 16,8 ± 0,7 Tabel 2. Jumlah Eritrosit Perlakuan Jumlah Eritrosit (/mm 3 ) Diberi natrium nitrit 1.750.000 Diberi  filtrat  kentos kelapa 15g/kgBB 8.260.000
Isdadiyanto,  2017)  tentang  penentuan  jumlah eritrosit  mencit  dengan  perlakuan  pemberian ekstrak  etanol  daun  nimba  (Azadirachta indica)  selama  21  hari  berturut-turut  secara per oral. Hal ini dipengaruhi oleh dihentikannya  induksi  natrium  nitrit  dan kandungan  yang  terdapat  pada  filtrat  kentos kelapa,  khususnya  zat  besi.  Kentos  kelapa merupakan  bahan  nabati  sehingga  zat  besi yang  terdapat  di  dalam  kentos  kelapa umumnya adalah zat besi dalam bentuk ikatan ferri  (Fe 3+ )  (Winarno,  2004).  Didalam lambung,  Fe 3+ ini  hanya  bisa  diserap  apabila telah  direduksi  oleh  asam  lambung  menjadi Fe 2+ (Adyani  &  Rohmawaty,  2018).  Zat  besi sebagai prekursor dalam pembentukan hemoglobin  sehingga  kadar  hemoglobin meningkat,  jumlah  eritrosit  bertambah  dan oksigen  yang  dapat  diikat  oleh  eritrosit  juga bertambah (Cahaya, Aulia, & Nurlely, 2016). Ketersediaan oksigen stabil sehingga
eritropoesis  sempurna  menghasilkan  eritrosit yang  sempurna.  Selain  itu,  kentos  kelapa memiliki  kadar  protein  dan  asam  amino sehingga  dapat  membantu  dalam  proses pertumbuhan hematopoietik  dan  memainkan peran  penting  dalam  pengelolaan  proliferasi dan  diferensiasi  sel  darah  (Mun’im,  Puteri, Sari, & Azizahwati, 2016).

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian dan pembahasan  diatas  maka  dapat  disimpulkan bahwa  limbah  kentos  kelapa  memiliki aktivitas  sebagai  antianemia  karena  mampu meningkatkan  kadar  hemoglobin.  Selain  itu, filtrat  kentos  kelapa  mampu  meningkatkan jumlah eritrosit.

## DAFTAR PUSTAKA
Adyani,  K.,  &  Rohmawaty,  A.  D.  (2018). Peningkatan  Kadar  Hemoglobin  dengan Pemberian Ekstrak
Daun Salam (Syzygium  polyanthum  Walp)  pada  Tikus a b
Gambar  1.  Gambaran  mikroskopik  eritrosit  dengan  perbesaran  40  x.  (a)  kondisi  anemia dengan  perbesaran  40x.  Bentuk  sel  poikilositosis  (bentuk  bervariasi).  Jumlah  sel eritrosit  lebih  sedikit.  (b)  Eritrosit  dalam  eritrosit  setelah  diberi  filtrat  kentos kelapa dengan perbesaran 40x. Bentuk sel normal (bentuk bulat cakram bikonkaf). Jumlah sel eritrosit lebih banyak.
Model  Anemia  Defisiensi  Besi. Majalah Kedokteran Bandung, 50 (3), 167-172.
Ambarwati,  R.  (2012).  Effect  of  sodium nitrite (NaNO2) to erithrocyte and hemoglobin  profile  in  white  rat  (rattus norvegicus). Folia  Medica  Indonesiana, 48 (1), 1-5.
Aulia, G. d. (2017). Gambaran Status Anemia
Pada Remaja Putri Di Wilayah Pegunungan  Dan  Pesisir  Pantai  (Studi  Di Smp  Negeri  Kecamatan  Getasan  Dan Semarang Barat). Jurnal Kesehatan Masyarakat Universitas Diponegoro, 5 (1),
193-200. Cahaya,  N.,  Aulia,  R.,  &  Nurlely.  (2016).
Efek Daun Kelakai (Stenochlaena
palustris)  Terhadap  Jumlah  Eritrosit, Bentuk  Eritrosit  dan  Kadar  Hemoglobin (Hb) Pada Tikus Putih (Rattus norvegicus) Anemia. Seminar  Nasional  2016  Lahan Basah  ULM (pp.  531-538).  Banjarmasin: Lambung Mangkurat University Press.
Fitria,  L.,  &  Sarto,  M.  (2014).  Profil Hematologi  Tikus  (Rattus  norvegicus Berkenhout,  1769)  Galur  Wistar  Jantan dan  Betina  Umur  4,  6,  dan  8  Minggu. Biogenesis:  Jurnal  Ilmiah  Biologi,  2 (2), 94-100.
Fitriany,  J.,  &  Saputri,  A.  I.  (2018).  Anemia
Defisiensi  Besi. AVERROUS:  Jurnal
Kedokteran  dan  Kesehatan  Malikussaleh,
4 (2), 140-145.
Hamidah,  A.,  Anggereini,  E.,  &  Nurjanah.
(2017). Effect of Carica papaya Leaf Juice on  Hematology  of  Mice  (Mus  musculus) with  Anemia. Biosaintifika:  Journal  of Biology  &  Biology  Education,  9 (3),  417- 422.
Kementerian Kesehatan. (2019). Profil Kesehatan Indonesia 2018. Jakarta: Kementerian Kesehatan Republik Indonesia. Manivannan, A., Bhardwaj, R., Padmanabhan,  S.,  Suneja,  P.,  Hebbar,  K.
B.,  &  Kanade,  S.  R.  (2018).  Biochemical and nutritional characterization of coconut (Cocos  nucifera  L.)  haustorium. Food
Chemistry, 238 , 153-159. Mun’im,  A.,  Puteri,  M.  U.,  Sari,  S.  P.,  &
Azizahwati. (2016). Anti-anemia Effect of
Standardized  Extract  of  Moringa  Oleifera.
Pharmacognosy Journal, 8 (3), 255-258.
Norsiah,  W.  (2015).  Perbedaan  Kadar Hemoglobin  Metode  Sianmethemoglobin dengan  dan  Tanpa  Sentrifugasi  pada Sampel  Leukositosis. Medical  Laboratory Technology Journal, 1 (2), 72-83.
Nursucihta,  S.,  Thai’in,  H.  A.,  Putri,  D.  M., Utami,  D.  N.,  &  Ghani,  A.  P.  (2014). Antianemia  Activity  of  Parkia  speciosa Hassk  Seed  Ethanolic  Extract. Traditional Medicine Journal, 19 (2), 49-54.
Pratiwi, Z. H., Widyastuti, S. K., & Utama, I. H.  (2017).  Gambaran  Sitologi  Sediaan Ulas Darah Kambing Kacang yang didapat dari  Rumah  Potong  Kambing  Tradisional di  Denpasar  Barat. Jurnal  Indonesia Medicus Veterinus, 6 (1), 40-46. Sitasiwi,  A.  J.,  &  Isdadiyanto,  S.  (2017). Kadar  Hemoglobin  Dan  Jumlah  Eritrosit Mencit  (Mus  musculus)  Jantan  setelah Perlakuan  dengan  Ekstrak  Etanol  Daun Nimba  (  Azadirachta  indica). Buletin Anatomi dan Fisiologi, 2 (2), 161-167. Sugimuma,  Y.,  &  Murakami,  T.  (1990). Structure  and  Function  of  the  Haustorium in Germinating Coconut Palm Seed. Japan Agricultural Research Quarterly, 24 , 1-14. Winarno,  F.  (2004). Kimia  Pangan  dan Gizi.
Jakarta: Gramedia Pustaka Utama.