## EKSPLORASI ISOLAT BAKTERI RIZOSFER BAMBU TANA TORAJA TOLERAN LOGAM BERAT
EXPLORATION OF HEAVY METAL TOLERANT BACTERIA FROM RHIZOSPHERE SOIL OF TANA TORAJAS’ BAMBOO
Maisya Zahra Al Banna 1 , Widiastini Arifuddin 2*)
1,2 Program Studi Pendidikan Biologi, Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan,  Universitas Patompo. Jalan Inspeksi Kanal Citraland No. 10, Makassar, Sulawesi Selatan, Kode Pos: 92114
* Email: widiastiniarifuddin88@gmail.com
Diterima: 08 Juni 2022. Disetujui: 04 Juli 2022. Dipublikasikan: 10 Agustus 2022
Abstrak: Tana Toraja memiliki keragaman bambu  yang amat tinggi. Tanaman  bambu memiliki peran penting dalam aspek bioenergy dan pengelolaan lingkungan. Beberapa penelitian telah mengungkap bambu sebagai agen fitoremediasi tanah tercemar logam berat. Daerah rizosfer bambu telah diketahui pula sebagai tempat yang ideal bagi  pertumbuhan  mikroorganisme  potensial.  Dalam  penelitian  ini  digunakan  lima  isolat  bakteri  yang  berasal dari lima jenis rizosfer bambu berbeda, yang diberi kode Htl.2, Hpr.6, Hk.1, hh.5 dan Hb.1. Selain itu digunakan pula  tiga  jenis  logam  berat  berbeda  yaitu  merkuri  (Hg),  timbal  (Pb)  dan  kromium  (Cr),  konsentrasi  yang digunakan adalah 5 ppm dan 10 ppm. Kemampuan adaptasi isolat bakteri terhadap masing-masing logam berat diamati berdasarkan zona bening yang terbentuk di sekitar cawan petri. Berdasarkan hasil pengujian, isolat Htl2, Hpr.6 dan Hb.1 membentuk zona bening terluas pada media yang mengandung logam Hg. Isolat Hh.5, Hpr.6 dan Hk.1  membentuk  zona  bening  terluas  pada  logam  Pb,  sedangkan  untuk  logam  Cr  isolat  yang  menunjukkan respon  terbaik  adalah  Hb.1,  Hh.5  dan  Hpr.6.  Hasil  pengamatan  morfologi  diketahui  bahwa  dari  kelima  isolat bakteri  terdapat  empat  isolat  tergolong  sebagai  bakteri  Gram  negatif,  dan  satu  isolat  merupakan  bakteri  Gram positif.  Hasil  penelitian  ini  merupakan  studi  awal  untuk  menentukan  bakteri  prespektif  digunakan  dalam rehabilitasi tanah tercemar logam berat.
Kata Kunci : Bambu, isolat bakteri rizosfer, logam berat.
Abstract: Tana  Toraja  has  a  high  diversity  of  bamboo.  Bamboo  plants  play  a  significant  role  in  bioenergy programs and environmental management. Some  studies had showed bamboo as a phytoremediation agent  for heavy soil contaminated soil. Their rizosphere soil also an ideal habitat for potential microorganisms, which has been  reported  by  many  studies.  In  this  study  we  used  five  bacteria  isolates,  which  isolated  from  different rhizosphere  soil  of  tana  torajas’  bamboo,  namely  Htl.2,  Hpr.6,  Hk.1,  Hh.5  and  Hb.1.  We  used  three  different heavy metal, they are mercury (Hg), plumblum (Pb) and chromium (Cr) with a consentration range are 5 ppm and  10  ppm.  The ability  of  isolates bacteria to adapt to heavy  metals  was  indicated  by  the formation  of  clear zones on petridisc. Based on the results, all bacterial isolates showed different responses to heavy metal presence in their media culture. Isolates bacteria Htl2, Hpr.6 and Hb.1 form a relatively high clear zone in the heavy metal mercury (Hg). Isolates bacteria Hh.5, Hpr.6 and Hk.1 showed a high clear zone for plumbum metal (Pb), while in  chromium  metal  (Cr)  media  there  are  an  Hb.1,  Hh.5  and  Hpr.6  isolate  forms  a  high  clear  zone.  Based  on morphological  observations,  there  are  four  bacteria  isolates  classified  as  Gram-negative,  and  one  isolate  as Gram-positive.  These  results  are  preliminary  studies  to  find  bacteria  that  are  prospectively  used  in  the rehabilitation of heavy metal contaminated soils.
Keywords : bamboo, heavy metal, rhizosphere isolates bacteria.

## PENDAHULUAN
Rizosfer  merupakan  daerah  di  sekitar  akar tanaman  sebagai  tempat  proses  aktif  dari biogeokimia yang mempengaruhi proses metabolisme untuk memelihara kesehatan tanaman.  Mikroorganisme  yang  ada  di  rizosfer dapat  melakukan  proses  dekomposisi  bahan organik  yang  masuk  ke  dalam  tanah,  siklus  unsur hara  seperti  karbon,  nitrogen,  fosfor  dan  sulfur serta  mengurai  senyawa  organik  maupun anorganik,  sehingga  menjadi  faktor  utama  untuk meningkatkan tingkat kesuburan tanah [1].
Mikroorganisme  pada  rizosfer  yang  terdiri dari  bakteri  rizosfer  memiliki  peranan  sebagai sumber  fitohormon  eksogen,  fiksasi  nitrogen diazotrofik,  pelarut  fosfat  dan  produksi  enzim  1- aminosiklopropana-1-karboksilat (ACC) deaminase  [2];  [3];  [4].  Fitohormon  yang diproduksi  oleh  bakteri  rizosfer  dapat    mengubah percabangan  akar  dan  perkembangan  rambut  akar dan  dengan  demikian  berdampak  pada  perolehan fosfor  dan  nitrogen  [5];  [6].  Selain  itu,  dapat menghambat  agen  patogen  yang  merugikan tanaman  [7].  Bakteri  rizosfer  juga  dapat
memproduksi fitohormon jenis asam indol-3-asetat (IAA)  yang  dapat  meningkatkan  pertumbuhan tanaman dan dapat dikembangkan sebagai sumber pupuk hayati [8].
Bambu  sebagai  jenis  rumput  raksasa memiliki  biomassa  tinggi,  serta  kemampuan adaptasi  yang  sangat  baik  terhadap  stress lingkungan. Beberapa penelitian berhasil mengungkap  bahwa  bambu  memiliki  potensi sebagai tanaman dalam rehabilitasi tanah tercemar akibat aktivitas antropogenik ataupun kontaminasi logam berat [9]; [10].
Penelitian  tentang  bakteri  rizosfer  bambu telah  banyak  dilaporkan  seperti  penelitian  tentang isolasi Bacillus sp.  dan Pseudomonas  fluorescens dari  rizosfer  bambu  untuk  menekan  bakteri patogen Ralstonia  solanacearum [11],    potensi bakteri  rizosfer  bambu  dalam  memproduksi  IAA [12],  potensi  mikroba  rizosfer  bambu  dalam menekan patogen tanaman Phytophthora palmivora [13], dan isolasi bakteri rizosfer resisten terhadap pestisida dan herbisida [14]. Penelitian  mengenai  kemampuan  resistensi bakteri  rizosfer  bambu  terhadap  logam  berat  di Indonesia belum banyak dilaporkan dan berdasarkan  hasil  penelusuran  diperoleh  bahwa  di Sulawesi  Selatan  belum  ada  peneliti  yang melaporkan hal tersebut. Untuk itu, peneliti tertarik mengkaji  kemampuan  resistensi  bakteri  rizosfer bambu  terhadap  logam  berat  yang  terdiri  dari merkuri (Hg), timbal (Pb), dan kromium (Cr). Pada penelitian  ini  digunakan  Hg,  Pb,  dan  Cr dikarenakan  ketiga  jenis  logam  berat  tersebut paling  beracun  dan  tidak memiliki fungsi esensial dalam  siklus  hidup  bagi  organisme  baik  hewan, tumbuhan maupun manusia serta keberadaannya di tanah  tidak  dapat  terdegradasi  sehingga  akan terakumulasi.  Akumulasi  logam  berat  pada  tanah akan menghambat aktivitas mikroorganisme  tanah dan  berpengaruh  terhadap  kualitas  dan  kesuburan tanah  [15].  Logam  berat  dapat  mengubah  struktur tanah dan sifat biokimia tanah seperti pH, keadaan redoks  tanah,  dan  spesifitas  enzim  tanah  yang berkaitan  dengan  siklus  Nitrogen  (N),  Posfor  (P), dan  Sulfur  (S).  Keberadaan  logam  berat  Hg,  Pb, dan Cr di tanah merupakan hasil kegiatan manusia berupa  limbah  kegiatan  pertambangan,  industri, kegiatan  pertanian  berupa  penggunaan  pupuk mineral,  penggunaan  pestisida,  asap  rokok,  serta asap kendaraan [15]; [16].
Pada penelitian ini digunakan rizosfer bambu asal  Tana  Toraja  dikarenakan  Tana  Toraja memiliki  sebaran  jenis  bambu  paling  banyak dibandingkan dengan wilayah lainnya di Sulawesi Selatan. Hasil  dari penelitian  ini  diharapkan  dapat menjadi  referensi  penggunaan  bakteri  rizosfer bambu  dalam  proses  rehabilitasi  tanah  tercemar logam berat.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  dilaksanakan  pada  bulan November  2021  sampai  April  2022  di Laboratorium  Biologi  STKIP  Pembangunan Indonesia  Makassar  dan  Laboratorium  Biologi Universitas Islam Negeri Alauddin Makassar. Alat yang  digunakan  yaitu  seperangkat  alat-alat  gelas, gunting,  pipet  volume,  pipet  mikro,  jarum  ose, autoklaf, Laminar air-flow, neraca analitik, shaker, inkubator,  oven,  mikroskop,  plastik  wrap,  jangka sorong,  dan  mistar.  Bahan  yang  digunakan  yaitu aquades,  etanol  75%,  media  NA  (Nutrien  Agar), NB  (Nutrien  Broth),  MHA  (Muller  Hilton  Agar), larutan  HgCl 2 ,  larutan  Pb(NO 3 ) 2 ,  larutan  CrCl 3 , alluminium foil, kertas cakram.

## Peremajaan Isolat Bakteri Rizosfer Bambu
Sebanyak 5 (lima) isolat bakteri rizosfer yang merupakan  koleksi  isolat  Laboratorium  Biologi STKIP  Pembangunan  Indonesia  digunakan  pada penelitian  ini.  Isolat-isolat  tersebut  merupakan hasil  isolasi  bakteri  rizosfer  dari  tanah  sekitar perakaran  dengan  kedalaman  kurang  lebih  20  cm bambu Tana Toraja yang terdiri dari bambu talang ( Schizostachyum  brachycladum ),  bambu  kuning ( Bambusa  vulgaris ),  bambu  hitam  ( Gigantochloa atroviolaceae ), bambu paring ( Bambusa arundinacea ) dan Gigantochloa apus . Pada proses peremajaan,  setiap  isolat  bakteri  diambil  secara aseptis kemudian dimasukkan ke dalam media NA dan diinkubasikan pada suhu 30  C selama 24 jam. Isolat bakteri dari media NA dipindahkan ke media NB kemudian dishaker selama 24 jam.
Pengujian Kemampuan Resistensi Isolat Bakteri Rizosfer terhadap Logam Berat Tahap  ini,  dibuat  larutan  HgCl 2 ,  Pb(NO 3 ) 2 , dan  CrCl 3 dengan  konsentrasi  masing-masing  5 ppm dan 10 ppm. Selanjutnya mencelupkan kertas cakram  ke  dalam  masing-masing  larutan  tersebut. Isolat  bakteri dari media  NB dimasukan ke dalam cawan petri yang berisi MHA padat dan kemudian disebarkan  hingga  rata.  Kertas  cakram  yang mengandung  larutan  Hg,  Pb,  dan  Cr  dimasukkan ke  dalam  cawan  petri  yang  berisi  MHA  dan diinkubasi  selama  24  jam.  Paramater  uji  yang diamati  adalah  zona  hambat  yang  terbentuk  dari masing-masing  perlakuan.  Menurut  [17],  zona hambat diamati dengan cara mengukur zona terluar dari kertas cakram sampai pada batas terluar zona hambat  dengan  menggunakan  jangka  sorong. Adapun rumus  yang digunakan untuk  menghitung zona bening adalah:
Z = d1 + d2
2 − X
Keterangan: d1 = diameter vertikal zona bening pada media d2 = diameter horizontal zona bening pada media X  = ukuran paperdisc

## Jurnal Inovasi Pendidikan dan Sains
Vol. 3 No. 2, Agustus 2022 : 61-67

## Pengamatan  Karakteristik  Morfologi  Isolat Bakteri Rizosfer Bambu
Pengamatan  karakteristik  morfologi  isolat bakteri  rizosfer  bambu  terdiri  dari  bentuk  koloni, elevasi,  pigmen,  bentuk  sel  dan  pengecatan  Gram untuk  mengetahui  jenis  dinding  sel  yang  dimiliki.
[18].

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Logam  berat  memiliki  berat  atom  tinggi dengan  jumlah  atom  di  atas  20.  Beberapa  logam berap seperti kobalt (Co), tembaga (Cu), besi (Fe), molibdemun  (Mo),  nikel  (Ni),  V  dan  zeng  (Zn) dibutuhkan  dalam  jumlah  amat  kecil  oleh organisme,  yang  disebut  dengan  tra
Namun  terdapat  beberapa  jenis  logam  seperti timbal  (Pb),  kromium  (Cr),  cadmium  (Cd), merkuri  (Hg)  dan  arsen  (As)  yang  tidak  memiliki nilai  biologi  penting  dalam  kehidupan  organisme namun  menimbulkan  efek  berbahaya  sehingga logam tersebut dinyatakan sebagai logam beracun. Ketika logam berat terserap di dalam lapisan tanah, logam  tersebut  akan  berubah  menjadi  fraksi mineral  anorganik  tidak  terlarut.  Berbeda  dengan jenis  polutan  lainnya,  logam  berat  beracun  tidak dapat terurai secara kimia maupun biologi
Tabel 1. Perhitungan zona bening isolat bakteri rizosfer terhadap logam merkuri (Hg) pada dua konsentrasi
Asal Inokulum Isolat Kode Isolat Rizosfer perakaran bambu talang Htl.2 0,55 Rizosfer perakaran bambu paring Hpr.6 0,65 Rizosfer perakaran bambu kuning Hk.1 0,4 Rizosfer perakaran bambu hitam Hh.5 0,47 Rizosfer perakaran bambu   bulo Hb.1 0,47
ISSN 2721-9119

## Pengamatan  Karakteristik  Morfologi  Isolat
Pengamatan  karakteristik  morfologi  isolat ntuk  koloni, elevasi,  pigmen,  bentuk  sel  dan  pengecatan  Gram untuk  mengetahui  jenis  dinding  sel  yang  dimiliki.
Logam  berat  memiliki  berat  atom  tinggi dengan  jumlah  atom  di  atas  20.  Beberapa  logam berap seperti kobalt (Co), tembaga (Cu), besi (Fe), molibdemun  (Mo),  nikel  (Ni),  V  dan  zeng  (Zn) at  kecil  oleh organisme,  yang  disebut  dengan  trace  elemen. Namun  terdapat  beberapa  jenis  logam  seperti timbal  (Pb),  kromium  (Cr),  cadmium  (Cd), merkuri  (Hg)  dan  arsen  (As)  yang  tidak  memiliki nilai  biologi  penting  dalam  kehidupan  organisme namun  menimbulkan  efek  berbahaya  sehingga kan sebagai logam beracun. Ketika logam berat terserap di dalam lapisan tanah, logam  tersebut  akan  berubah  menjadi  fraksi mineral  anorganik  tidak  terlarut.  Berbeda  dengan jenis  polutan  lainnya,  logam  berat  beracun  tidak ologi [19].

## Pertumbuhan  Isolat  Bakteri  Rizosfer  Pada Media Yang Mengandung Logam Hg
Dalam  penelitian  ini  digunakan  tiga  jenis logam berat berbeda, yaitu Hg, Pb dan Cr, dengan konsentrasi  masing-masing  5  ppm  dan  10  ppm. Resistensi  isolat  bakteri  rizosfer  terhadap  logam berat  diamati  berdasarkan  zona  bening  yang terbentuk  pada  media  pertumbuhan  yang mengandung konsentrasi tertentu dari logam berat. Zona bening ( clear zone ) yang terbentuk di sekitar kertas  saring  yang  mengandung  logam  Hg mengindikasikan kemampuan isolat bakteri toleran terhadap keberadaan logam Hg (Gambar 1).
(a)
(b)
Gambar 1 . Zona bening yang terbentuk pada setiap isolat bakteri rizosfer pada media pertumbuhan yang mengandung logam (a) Hg, (b)
Pb, dan (c) Cr
Hasil  perhitungan  zona  bening  yang terbentuk  pada  media  pertumbuhan  yang mengandung logam Hg ditampilkan pada Tabel 1.
Perhitungan zona bening isolat bakteri rizosfer terhadap logam merkuri (Hg) pada dua konsentrasi
berbeda Zona bening yang terbentuk pada media pertumbuhan (mm) Konsentrasi 5 ppm Konsentrasi 10 ppm I II III Rata- rata I II III 0,55 0,47 0,50 0,5 0,85 0,77 0,85 0,65 0,65 0,52 0,6 0,65 0,6 0,52 0,4 0,22 0,25 0,29 0,1 0,15 0,1 0,47 0,42 0,25 0,38 0,35 0,25 0,37 0,47 0,35 0,17 0,33 0,62 0,72 0,67 9119 (Online)

## Pertumbuhan  Isolat  Bakteri  Rizosfer  Pada Media Yang Mengandung Logam Hg
Dalam  penelitian  ini  digunakan  tiga  jenis Pb dan Cr, dengan masing  5  ppm  dan  10  ppm.
Resistensi  isolat  bakteri  rizosfer  terhadap  logam berat  diamati  berdasarkan  zona  bening  yang terbentuk  pada  media  pertumbuhan  yang mengandung konsentrasi tertentu dari logam berat. erbentuk di sekitar kertas  saring  yang  mengandung  logam  Hg mengindikasikan kemampuan isolat bakteri toleran terhadap keberadaan logam Hg (Gambar 1).
(c)
. Zona bening yang terbentuk pada isolat bakteri rizosfer pada media
pertumbuhan yang mengandung logam (a) Hg, (b)
Hasil  perhitungan  zona  bening  yang terbentuk  pada  media  pertumbuhan  yang mengandung logam Hg ditampilkan pada Tabel 1.
Perhitungan zona bening isolat bakteri rizosfer terhadap logam merkuri (Hg) pada dua konsentrasi
pertumbuhan (mm) Konsentrasi 10 ppm III Rata- rata 0,85 0,82 0,52 0,59 0,1 0,11 0,37 0,32 0,67 0,67
Berdasarkan  data  Tabel  1,  lima  isolat  bakteri rizosfer  menunjukkan  kemampuan  yang  beragam sebagai  respon  terhadap  kandungan  logam  Hg  di dalam media pertumbuhannya. Zona bening terbesar yang terbentuk dari media mengandung logam Hg 5 ppm ditunjukkan oleh isolat Hpr.6 dengan nilai zona terukur  0,6  mm.  Isolat  Htl.2  mampu  membentuk zona bening sebesar 0,5 mm, kemudian zona bening dari isolat Hh.5 dan Hb.1 masing-masing adalah 0,38 dan  0,33  mm.  Isolat  Hk.1  menunjukkan  nilai  zona bening terukur paling rendah yaitu 0,29 mm. Pada konsentrasi logam Hg 10 ppm, isolat Htl.2 membentuk  zona  bening  paling  luas  dengan  ukuran 0,82 mm, kemudian isolat Hb.1 dengan zona terukur sebesar  0,67 mm,  dan zona bening  dari isolat  Hpr.6 adalah  0,59  mm.  Masing-masing  isolate  Hh.5  dan Hk.1  menunjukkan  zona  bening  berukuran  0,32  dan 0,11 mm.
Dari hasil Tabel 1, isolat bakteri yang memiliki prospek  untuk  dilanjutkan  dalam  penelitian pengembangan isolat bakteri  resisten  logam  merkuri adalah  isolat  Htl.2  yang  berasal  dari  daerah  sekitar perakaran  bambu  talang,  isolat  Hpr.6  yang  berasal dari rizosfer akar bambu paring, dan isolat Hb.1 yang berasal dari rizosfer bambu bulo.
Kemampuan seluruh  isolat  bakteri untuk hidup dan  membentuk  zona  bening  pada  medium  yang mengandung logam Hg secara langsung menunjukkan  peran  bakteri  dalam  dekomposisi senyawa  organik  melalui  proses  biologi.  Keberadan logam  Hg  pada  media  pertumbuhan  isolat  bakteri dapat  terlihat  dari  pengujian  sederhana  dengan mengukur  zona  bening  yang  terbentuk  di  sekitar paperdisc  yang  mengandung  logam  Hg,  serta pengamatan  morfologi  koloni  bakteri  yang  tumbuh pada  media.  Penelitian  [20]  menemukan  kandungan logam  Hg  pada  media  pertumbuhan  menyebabkan terjadinya  perubahan  warna  koloni  pada  isolat
bakteri  menjadi  berwarna  cenderung  lebih  gelap. Perubahan  warna  koloni  terjadi  karena  terbentuknya metalotionein sebagai  respon  pertahanan diri bakteri terhadap logam Hg.
Pada  lingkungan  tanah  sebagai  tingkatan pengamatan  yang  lebih  kompleks,  diketahui  bahwa kandungan  logam  Hg  pada  tanah  memberikan  efek signifikan terhadap populasi komunitas bakteri tanah. Perubahan  kandungan  logam  Hg  pada  tanah  turut mempengaruhi  kepadatan dan  keragaman  komunitas bakteri  tanah  [21].  Komunitas  bakteri  tersebut mengalami penurunan secara gradual seiiring dengan peningkatan  kadar  konsentrasi  Hg  dalam  tanah. Kontaminasi  logam  Hg  pada  derajat  konsentrasi sedang  atau  moderat  akan  meningkatkan  jumlah komunitas bakteri tanah persawahan, sedangkan pada derajat  konsentrasi  Hg  rendah  dan  tinggi menyebabkan peningkatan populasi bakteri diazotrof. Tingginya kandungan Hg dalam tanah berkaitan erat dengan  terbatasnya  ketersediaan  nutrisi  berupa nitrogen.  Nitrogen  yang  terbatas  jumlahnya  akan mendorong  pertumbuhan  diazotrof  karena  mampu menambat nitrogen bebas dari atmosfer [22].
Pertumbuhan Isolat Bakteri Rizosfer Pada Media Yang Mengandung Logam Pb
Timbal dapat menyebabkan munculnya penyakit  akut  dan  kronik  yang  menyerang  berbagai sistem  organ  pada  anak  maupun  orang  dewasa. Timbal  juga  diketahui  banyak  menyerang  wanita hamil  yang  dapat  menyebabkan  terganggunya perkembangan  janin,  keguguran,  serta  kelahiran prematur  [23].  Aktivitas  pertumbuhan  isolat  bakteri rizosfer  pada  media  mengandung  logam  Pb  yang dihitung  berdasarkan  zona  bening  yang  terbentuk dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2 . Perhitungan zona bening isolat bakteri rizosfer terhadap logam Pb pada dua konsentrasi berbeda
Asal Inokulum Isolat Kode Isolat Zona bening yang terbentuk pada media pertumbuhan (mm) Konsentrasi 5 ppm Konsentrasi 10 ppm I II III Rata- rata I II III Rata - rata Rizosfer perakaran bambu talang Htl.2 0,25 0,27 0,27 0,26 0,2 0,3 0,3 0,26 Rizosfer perakaran bambu paring Hpr.6 0,42 0,27 0,3 0,33 0,3 0,3 0,22 0,27 Rizosfer perakaran bambu kuning Hk.1 0,3 0,25 0,12 0,22 0,8 0,67 0,65 0,7 Rizosfer perakaran bambu hitam Hh.5 0,52 0,15 0,45 0,37 0,47 0,35 0,35 0,39 Rizosfer perakaran bambu bulo Hb.1 0,2 0,1 0,2 0,16 0,3 0,32 0,3 0,3
Berdasarkan  pengukuran  zona  bening  yang terbentuk  pada  logam  Pb  konsentrasi  5  ppm,  isolat Hh.5 menunjukkan zona bening dengan ukuran 0,37 mm  dan  merupakan  ukuran  zona  terluas  jika dibandingkan  dengan  isolat  lainnya.  Selanjutnya,
isolat Hpr.6 membentuk zona bening dengan ukuran 0,33  mm,  isolat  Htl.2,  Hk.1dan  Hb.1  berturut-turut menunjukkan  zona  bening berukuran  0,26;  0,22  dan 0,16  mm. Sedangkan  pada  logam Pb  konsentrasi  10 ppm,  diketahui  isolat  Hk.1  membentuk  zona  bening
terluas dengan  ukuran 0,7  mm. Ukuran zona  bening terbesar  selanjutnya  adalah  0,39  mm  yang  berasal dari isolat Hh.5. Sedangkan isolat lainnya yaitu isolat Hb.1,  Hpr.6  dan  Htl.2  berturut-turut  menunjukkan ukuran zona bening 0,3; 0,27 dan 0,26 mm.
Berdasarkan  pengukuran  zona  bening  pada Tabel  2,  isolat  bakteri  yang  menunjukkan  potensi dikembangkan  sebagai  bakteri  resisten  logam  Pb adalah isolat Hh.5 yang berasal dari tanah perakaran bambu hitam, isolat Hpr.6  yang berasal dari rizosfer bambu  paring,  dan  isolat  Hk.1  dari  tanah  perakaran bambu kuning.
Bakteri  memiliki  kemampuan  untuk  tumbuh dan  bertahan  hidup  pada  kondisi  lingkungan tercemar  logam  Pb,  tanpa  menimbulkan  efek merugikan terhadap laju pertumbuhan dan metabolismenya. Adapun beberapa jenis bakteri yang telah  dilaporkan  resisten  terhadap  logam  Pb  adalah Acidithiobacillus  ferrooxidans,  Citrobacter sp , Bacillus pumilus dan Pseudomonas aeruginosa [24). Bioremediasi  tanah  tercemar  logam  Pb  dapat dilakukan  dengan  memanfaatkan  satu  jenis mikroorganisme  tertentu  ataupun  melibatkan  dua atau  lebih  organisme  sekaligus,  seperti  yang  telah dilaporkan  oleh  [25]  mengenai  ko-inokulasi  bakteri Bacillus sp  dan Aspergillus  niger pada  tanaman perdu Salix  integra dapat  meningkatkan  efektivitas fitoremediasi cemaran logam Pb pada tanah.

## Pertumbuhan Isolat Bakteri Rizosfer Pada Media Yang Mengandung Logam Cr
Kromium  (Cr)  merupakan  salah  satu  jenis polutan  logam  berat  semakin  sering  ditemukan mencemari  lingkungan  terestrial  maupun  akuatik. Pada  konsentrasi  tinggi,  logam  Cr  bersifat mutagenik,  teratogenik  dan  karsinogenik  yang dapat mengkontaminasi  tanaman  maupun  hewan  [26]. Hasil pengukuran zona bening isolat bakteri rizosfer yang  ditumbuhkan  pada  media  pertumbuhan mengandung  logam  Cr  pada  konsentrasi  5  ppm  dan 10 ppm dapat dilihat dari Tabel 3.
Berdasarkan  pengukuran  zona  bening  pada media  yang  mengandung  logam  Cr  konsentrasi  5 ppm diperoleh zona bening paling besar berasal dari isolat  Hk.1  dengan  ukuran  0,47  mm,  kemudian diikuti  isolat  Hb.1  dengan  ukuran  zona  bening  0,34 mm,  isolat  Hh.5  sebesar  0,33  mm,  dan  dua  isolat Htl.2  dan  Hpr.6  masing-masing  memiliki  zona bening  berukuran  0,24  dan  0,27  mm.  Sedangkan pada  konsentrasi  10  ppm,  zona  bening  terbesar dibentuk  oleh  isolat  Hb.1  dengan  ukuran  0,35  mm, kemudian isolat Hh.5 dengan ukuran 0,34 mm. Isolat Hpr.6  menunjukkan  ukuran  zona  bening  0,25  mm, dan  isolat  Htl.2  serta  Hk.1  memiliki  zona  bening paling kecil dengan nilai masing-masing 0,15 mm.
Tabel 3 . Perhitungan zona bening isolat bakteri rizosfer terhadap logam Cr pada dua konsentrasi berbeda
Asal Inokulum Isolat Kode Isolat Zona bening yang terbentuk pada media pertumbuhan (mm) Konsentrasi 5 ppm Konsentrasi 10 ppm I II III Rata- rata I II III Rata - rata Rizosfer perakaran bambu talang Htl.2 0,22 0,27 0,22 0,24 0,27 0,1 0,1 0,15 Rizosfer perakaran bambu paring Hpr.6 0,3 0,3 0,22 0,27 0,2 0,25 0,3 0,25 Rizosfer perakaran bambu kuning Hk.1 0,5 0,42 0,5 0,47 0,17 0,12 0,15 0,15 Rizosfer perakaran bambu hitam Hh.5 0,42 0,35 0,32 0,33 0,37 0,3 0,35 0,34 Rizosfer perakaran bambu bulo Hb.1 0,5 0,27 0,25 0,34 0,62 0,22 0,2 0,35
Zona  bening  yang  dibentuk  oleh  seluruh  isolat terhadap  logam  Cr  menunjukkan  ukuran  zona  yang lebih kecil dibandingkan dengan zona yang terbentuk pada  media  mengandung  logam  Hg  dan  Pb.  Bakteri yang  bekerja  secara  spesifik  terhadap  jenis  logam tertentu  seringkali  pertumbuhannya  dihambat  oleh jenis  logam  yang  lain  [27].  Dengan  demikian meskipun  beberapa  isolat  bakteri  rizosfer  dalam penelitian  ini  menunjukkan  hasil  yang  baik  pada pengujian  dengan  logam  Hg  dan  Pb  namun  tidak menunjukkan hasil yang serupa jika diberikan logam Cr.
Bakteri  toleran  logam  Cr  secara  fisiologis mampu  menghasil  enzim  kromium  redutase  untuk mengkatalisis  perubahan  Cr(VI)  menjadi  Cr(III). Molekul  Cr(VI)  atau  kromium  heksavalen  diketahui
merupakan  bentuk  logam  Cr  yang  paling  berbahaya bagi makhluk hidup tidak terkecuali mikroorganisme.  Dengan  adanya  aktivitas  enzim kromium  reductase,  maka  maka  Cr(VI)  dikonversi menjadi molekul Cr(III) atau kromium trivalent yang sifatnya  sedikit  beracun  ( less  toxic )  dibandingkan Cr(VI) [27].

## Pengamatan  Morfologi  dan  Biokimia  Isolat Bakteri Rizosfer Bambu
Pengamatan  morfologi  seluruh  isolat  bakteri menunjukkan  bentuk  koloni  dan  pewarnaan  Gram yang  hampir  seragam  (Tabel  4).  Bakteri  Gram negatif dengan bentuk sel basil (batang) menunjukkan  sifat  resistensi  terhadap  logam  berat yang lebih rendah dibandingkan dengan isolat bakteri
dari kelompok Gram positif [28]. Sebaliknya bakteri Gram  negatif  lebih  resisten  dan  jumlahnya  lebih dominan dibandingkan bakteri Gram positif [29].
Dinding  sel  pada  bakteri  berperan  sebagai pertahanan  diri  pertama  terhadap  kehadiran makromolekul yang melekat pada bagian dinding sel.
Ion negatif pada dinding sel bakteri Gram positif dan Gram  negatif  akan  mengikat  kation  logam  sehingga menghalangi penetrasi logam ke dalam sel, proses ini disebut dengan biosorpsi [24].
Tabel 4 . Karakteristik morfologi isolat bakteri rizosfer Kode Isolat Bentuk Koloni  Elevasi Pigmen Bentuk Sel Gram Htl.2 Sirkular Raised Putih susu Bulat Negatif Hpr.6 Sirkular raised Putih susu Bulat Negatif Hk.1 Iregular Flat Putih susu Batang Negatif Hh.5 Sirkular Flat Putih bening Batang Negatif Hb.1 Iregular Flat Putih susu Batang Positif

## KESIMPULAN
Seluruh  isolat  bakteri  rizosfer  menunjukkan respon  yang  beragam  terhadap  keberadaan  logam berat  merkuri  (Hg),  timbal  (Pb)  dan  kromium  (Cr). Pada  media  pertumbuhan  yang  mengandung  logam Hg,  isolat  yang  membentuk  zona  bening  terbesar adalah  isolat  Htl.2,  Hpr.6  dan  Hb.1.  Zona  bening terbesar  yang  terbentuk  pada  media  mengandung logam  Pb  ditunjukkan  oleh  isolat  Hh.5,  Hpr.6  dan isolat  Hk.1.  Sedangkan  pada  media  yang mengandung logam Cr, isolat Hb.1, Hh.5 dan Hpr.6 menunjukkan hasil terbaik.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Ucapan  terimakasih  kami  sampaikan  kepada Balai  Penelitian  dan  Pengembangan  Lingkungan Hidup  dan  Kehutanan  Makassar  (BP2LHK)  yang telah  memberikan  izin  perolehan  sampel  di  Stasiun Uji Coba Mengkendek Kabupate Tana Toraja.

## DAFTAR PUSTAKA
[1] Susilawati, Mustoyo, Budhisurya, E., Anggono,
R. C. W., & Simanjuntak, B. H. 2013. Analisis Kesuburan Tanah Dengan Indikator
Mikroorganisme  Tanah  Pada  Berbagai  Sistem Penggunaan  Lahan Di Plateau  Dieng. J. Agric . 25(1), 64–72.
[2] Cohen,  A.C.,  Bottini,  R.,  Piccoli,  P.N.,  2008. Azospirillum brasilense Sp. 245 Produces ABA in  Chemically-defined  Culture  Medium  and Increases  ABA  Content  in  Arabidopsis  Plants. 54: 97–103. DOI 10.1007/s10725-007-9232-9
[3] Khairani,  Aini,  F.,  Riany,  H.  2019. Karakterisasi  dan  Identifikasi  Bakteri  Rizosfer Tanaman  Sawit  Jambi.  Al  Kauniyah: J.  Biol . 12(2), 198–206. DOI 10.15408/kauniyah.v12i2.11723. [4] Gupta,  S.,  &  Pandey,  S.  (2019).  ACC Deaminase Producing Bacteria With
Multifarious  Plant  Growth  Promoting  Traits Alleviates  Salinity  Stress  in  French  Bean (Phaseolus  vulgaris)  Plants. Front.  Microbiol . 10: 1–17. DOI 10.3389/fmicb.2019.01506.
[5] Holguin,  G.,  Patten,  C.L.,  Glick,  B.  R.  1999. Genetics and Molecular Biology of
Azospirillum. Biol.  Fertil.  Soils. 29:  10–23.
DOI 10/1007/s003740050519.
[6] Kiba, T., Kudo, T., Kojima, M., & Sakakibara, H.  2011.  Hormonal  Control  of  Nitrogen Acquisition : roles of auxin , abscisic acid , and cytokinin. J.  of  Exp.  Bot .,  62(4),  1399–1409. DOI 10.1093/jxb/erq410.
[7] Kazan,  K.,  &  Manners,  J.  M.  2009.  Linking Development  to  Defense:  Auxin  in  Plant  – Pathogen  Interactions. Trends  Plant  Sci .  14(7),
373–382. DOI 10.1016/j.tplants.2009.04.005.
[8] Maya, K. C. B., Gauchan, D.P, Khanal, S.N, & Chimouriya,  S.  2021.  Biocatalysis  and Agricultural  Biotechnology  Amelioration  of Growth  Attributes  of  Bambusa  nutans  subsp. cupulata  Stapleton  by  Indole-3-acetic  acid Extracted  from  Newly  Isolated  Bacillus mesonae  MN511751  from  Rhizosphere  of Bambusa  tulda  Roxburgh.  31:  1-8.  DOI 10.1016/j.bcab.2021.101920.
[9] Emamverdia  A.  dan  Y.  Ding.  2018. Phytoremediation  potential  of  bamboo  plant  in China. Ecology, Environment and Conservation 24(1): 530-539.
[10] Liao P, S. Yuan, M. Tong, H. Long, J. Zuo dan W.  Zhang.  2013.  Bamboo  Juice-Enhanced Desorption  of  Heavy  Metals  From  Soil. J. Hazard. Toxic. Radioact. Waste 17: 45-51.
[11] Irfanti,  D.  Y.,  Marsuni,  Y.,  &  Liestiany,  E. 2021.  Uji  Antagonis  Bacillus  sp.  dan Pseudomonas  berfluorescens  dari  Rhizosfer Bambu  ,  Rumput  Gajah  dan  Putri  Malu  dalam Menekan  Bakteri  Ralstonia  solanacearum. Proteksi Tanaman Tropika . 4(01), 292–298.
[12] Al Banna, M.Z. & Arifuddin, W. 2021. Potensi Bakteri  Asal  Bambu  dalam  Memproduksi  The Potential  of  Bacteria  from  Bamboo  in Producing  Indole  Acetic  Acid  (  IAA  ). Agrosainstek.
5(1), 72–80. DOI
10.33019/agrosainstek.v5i1.233
[13] Susanti, W. I., Widyastuti, R., Wiyono, S. 2015. Peranan Tanah Rhizosfer Bambu sebagai Bahan untuk Menekan Perkembangan Patogen Phytophthora  palmivora  dan  Meningkatkan Pertumbuhan Bibit Pepaya. J. Tanah dan Iklim , 39(2): 65–74.
[14] Apriliya,  I.,  Prasetyo,  D.,  Selvany,  R.,  Isolasi Bakteri  Rhizosfer  Resisten  Pestisida  dan Herbisida  pada  Berbagai  Jenis  Tutupan  Lahan. 2021. Agrotekma:  Agroteknologi  dan  Ilmu Pertanian . 5(1), 64–71. DOI 10.31289/agr.v5i1.4466
[15] Abdu,  N.,  Abdullahi,  A.  A.,  &  Abdulkadir,  A. 2016.  Heavy  Metals  and  Soil  Microbes. Environ. Chem Lett . DOI 10.1007/s10311-016- 0587-x
[16] Morais,  S.,  Costa  F.G.,  Pereira,  M.L.,  2012. Heavy  Metals  and  Human  Health,  in Enviromental  Health-Emerging  Issues  and Practice. Oosthuizen J ed , pp.227-246, InTech.
[17] Bachtiar,  S.C.,  Tjahjaningsih,  W.,  Sianita,  N. 2012.  Pengaruh  Ekstrak  Alga  Cokelat (Sargassum  sp.)  terhadap  Pertumbuhan  Bakteri Escherichia  coli. J.  of  Marine  and  Coastal Science . 1(1): 53-60.
[18] Hussain,  T.,  Roohi,  A.,  Munir,  S.,  Ahmed,  I., Khan, J., Edel-hermann, V., Kim, K. Y., Anees, M.  2013.  Biochemical  Characterization  and Identification of Bacterial Strains Isolated from Drinking  Water  Sources  of  Kohat  ,  Pakistan. Afr . J. Microbiol. Res. Academic Journal . DOI 10.5897/AJMR12.2204
[19] Singh  M.,  G.  Seneviratne,  H.M.S.P  Madawala dan  M.  Vithanage. 2017.  Role  of Rhizospheric
Microbes  in  Heavy  Metal  Uptake  by  Plants. Agro-Enviromental Sustainability , DOI
10.1007/978-3-319-49727-3_8: 147-163.
[20] Irawati  W,  Patricia,  Y.  Soraya  dan  A.H Baskoro.  2012.  A  Study  on  Mercury  Resistant Bacteria  Isolated  From  a  Gold  Mine  on Pongkor  Village,  Bogor,  Indonesia. Hayati Journal of Biosciences 19(4): 197-200.
[21] Zhu  H.,  Y.  Teng,  X.  Wang,  L.  Zhao,  W.  Ren, Y. Luo dan P. Christie. 2021. Changes in clover rhizosphere microbial community and dazotrophs  in  mercury-contaminated  soil. Science of the Total Environment 767: 1-10.
[22] Liu  Y.R,  J.J  Wang,  Y.M.  Zheng,  L.M  Zhang dan JZ He. 2014. Patterns of bacterial diversity along  a  long-term  mercury-contaminated gradient  in  the  paddy  soils. Soil  microbiology . DOI 10.1007/s00248-014-0430-5: 1-9.
[23] Dobrescu A.L, A. Ebenberger, J. Harlfinger, U. Griebler,  I.  Klerings,  B.  Nubbaumer-Streit,  A. Chapman,  L.  Affengruber  dan  G.  Gartlehner.
2022.  Effectiveness  of  interventions  for  the remediation  of  lead-contaminated  soil  to prevent  or  reduce  lead  exposure-  a  systematic review. Science  of  the  Total  Environment 806: 1-9.
[24] Mitra A, S. Chatterjee, S. Kataki, R.P. Rastogi, D.K. Gupta. 2021. Bacterial tolerance strategies against  lead  toxicity  and  their  relevance  in bioremediation application. Enviromental Science  and  Pollution  Research 28:  14271- 14284.
[25] Niu X, S. Wang, J Zhou, D. Di, P. Sun dan D. Huang.  2021.  Inoculation  With  Indigenous Rhizosphere  Microbes  Enhance  Aboveground Accumulation  of  Lead  in  Salix  integra  Thunb. by Improving Transport Coefficients. Frontiers in Microbiology 12(686812): 1-14.
[26] Kamaruzzaman  M.A,  S.R.S  Abdullah,  H.A Hasan, M. Hasan, M.Idris dan N.I Ismail. 2019. Potential  of  hexavalent  chromium-resistant rhizosphere bacteria in promoting plant growth and hexavalent chromium reduction. Journal of Environmental Biology 40: 427-433.
[27] Thatoi H, S. Das, J. Mishra, B.P Rath, N. Das. 2014. Bacterial chromate  reductase, a  potential enzyme  for  bioremediation  of  hexalent chromium: a review. Journal of Environmental Management 146: 383-339
[28] Sanjaya  W.T.A,  N.S.  Khoirunnisa,  S.  Ismiani, F.  Hazra,  D.A.  Santosa.  2021.  Isolation  and characterization  of  mercury-resistant  microbes from  gold mine area in Mount Pongkor, Bogor District,  Indonesia. Biodiversitas 22(7):  2656- 2666.
[29] Chasanah  U,  Y.  Nuraini  dan  E.  Handayanto. 2018.  The  Potential  of  Mercury-Resistant Bacteria  Isolated  from  Small-Scale  Gold  Mine Tailings  for  Accumulation  of  Mercury  19(2):
236-245.