POTENSI Bacillus spp. DARI RIZOSFER TANAMAN KEDELAI UNTUK MENGENDALIKAN PENYAKIT REBAH KECAMBAH
( Sclerotium rolfsii Sacc.)
Popi Oktania * , Husda Marwan dan Asniwita
Jurusan Agroekoteknologi Fakultas Pertanian, Universitas Jambi Jl. Raya Jambi – Ma. Bulian KM.15 Mendalo Darat, 36136 popioktania2@gmail.com (* Penulis untuk korespondensi )

## Abstrak
Bacillus merupakan  rizobakteri  yang  dapat  menghambat  patogen  tanaman  dengan mekanisme  antagonis  berupa  antibiosis. Bacillus spp.  dapat  mengendaliakan  penyakit rebah kecambah yang disebabkan oleh Sclerotium rolfsii pada tanaman kedelai. Penelitian ini bertujuan untuk mendapatkan isolat bakteri Bacillus spp. dari rizosfer tanaman kedelai untuk  mengendalikan  penyakit  rebah  kecambah  pada  tanaman  kedelai.  Pelaksanaan pengujian  bakteri  dilakukan  secara in  vitro dan in  planta .  Pengujian  secara in  planta menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap  dengan  14  perlakuan  terdiri  atas  2  perlakuan kontrol  (sehat  dan  sakit),  1  perlakuan  menggunakan  fungisida,  dan  11  perakuan menggunakan  isolat  bakteri Bacillus spp.  Hasil  pengujian  menunjukan  bahwa  perlakuan bakteri Bacillus spp.  berpengaruh  nyata  terhadap  persentase  rebah  kecambah.  Terdapat beberapa isolat mampu menekan penyakit rebah kecambah sebelum muncul kepermukaan tanah dan semua bakteri Bacillus spp. mampu menekan penyakit rebah kecambah setelah muncul kepermukaan tanah pada tanaman kedelai.
Kata kunci : rizobakteri, Bacillus spp., penyakit rebah kecambah, Sclerotium rolfsii.

## PENDAHULUAN
Tanaman  kedelai  merupakan  salah  satu  komoditi  yang  penting  di  Indonesia (Adisarwanto, 2008). Menurut Badan Pusat Statistik (2016), Produktivitas kedelai Provinsi Jambi  pada  tahun  2015  sebesar  1,372  ton/ha.  Produktivitas  ini  masih  dibawah produktivitas nasional yaitu sebesar 1,569 ton/ha.
Salah  satu  penyebab  rendahnya  produktivitas  kedelai  dapat  disebabkan  oleh penyakit. Penyakit rebah kecambah ( damping  off ) merupakan salah satu  penyakit penting bagi tanaman kedelai dan jenis kacang-kacangan lainnya seperti kacang tanah dan kacang hijau  di  Indonesia,  penyakit  tersebut  dapat  menyebabkan  kehilangan  hasil  hingga  100  % (Sastrahidayat et al., 2007).
Pengendalian  dengan  cara  biologi  merupakan  salah  satu  upaya  untuk mengendalikan  penyakit  rebah  kecambah  yang  ramah  lingkungan.  Pengendalian  tersebut menggunakan  bakteri  antagonis  dari  rizosfer  tanaman.  Bakteri  yang  hidup  dalam  sistem perakaran  tanaman  dan  memberikan  keuntungan  bagi  tanaman  dikenal  sebagai Plant
Growth Promoting Rhizobacteria (PGPR).
Menurut  penelitian  yang  dilakukan  oleh  Abidin et  al. (2015)  bahwa  perlakuan bakteri  antagonis Bacillus sp.  dan Pseudomonas sp.  mampu  menghambat  pertumbuhan cendawan patogen S. rolfsii secara in vitro . Hasil penelitian tersebut menunjukkan bahwa, persentase penghambatan bakteri
Bacillus sp. (UB-ABS1) terhadap S. rolfsii secara in vitro pada 2 hsi, 3 hsi, dan 4 hsi yaitu sebesar 19,96%, 41,73%, 52,83%. Hasil penelitian  yang dilakukan oleh Nawangsih et al. (2014)  menyatakan  bahwa  Isolat  bakteri  TP-32  merupakan  bakteri  tahan  panas  yang diisolasi  dari  rizosfer  kedelai  pada  sistem  PHT-  Biointensif  memiliki  persentase penghambatan terhadap S. rolfsii secara in vitro sebesar 95,6 %.
Penelitian ini bertujuan untuk memperoleh isolat Bacillus spp. dari rizosfer kedelai yang  berpotensi  untuk  mengendalikan  penyakit  rebah  kecambah  yang  disebabkan  oleh patogen S. rolfsii pada tanaman kedelai.

## BAHAN DAN METODE
Penelitian  ini  dilaksanakan  di  Laboratorium  Penyakit  Tanaman  dan  Rumah  Kaca Fakultas Pertanian Universitas Jambi dari bulan November 2016 sampai dengan September 2017.
Bahan-bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  tanah  dari  rizosfer tanaman  kedelai,  isolat  cendawan S.  rolfsii koleksi  laboratorium,  benih  kedelai  varietas Anjasmoro,  media  tanam  (tanah,  pupuk  kandang,  pasir)  steril,  alkohol  70%,  NaClO  2%, akuades steril, plastik tahan panas, plastik, spritus, kapas, kertas label, polybag, fungisida bahan  aktif  Mankozeb,  media Potato  Dextrose  Agar (PDA),  media Tryptic  Soy  Agar (TSA)  dan  media Corn  Meal  Sand (CMS).  Alat-alat  yang  digunakan  adalah  termometer, autoclave ,  laminar air  flow ,  cawan  petri,  gelas  piala,  kompor,  timbangan  digital, timbangan,  lampu  bunsen,  jarum oose , object  glass , cover  glass , vortex , glass  beads, erlenmeyer, hands sprayer, mortal, bak plastik (41 x 32 cm), mikropipet, tisu, spidol, pena, buku  tulis dan kamera.
Metode penelitian meliputi uji penghambatan pertumbuhan S. rolfsii secara in vitro dan  uji  penekanan  penyakit  rebah  kecambah  pada  tanaman  kedelai  dengan  isolat  bakteri Bacillus spp

## Pelaksanaan Penelitian
Isolasi bakteri Bacillus spp. dari rizosfer tanaman kedelai
Sampel  tanah  diambil  dengan  metode purposive  sampling. Sampel  tanah  diambil  dari rizosfer  beberapa  varietas  kedelai  di  lokasi  yang  berbeda.  Varietas  Anjasmoro  (SA) diambil  dari  Desa  Sebapo  Kec.  Mestong,  Varietas  Lokal  1  (SM)  di  Desa  Suka  Makmur Kec.  Muara  Jambi,  Varietas  Dega  (G1),  Dena  2  (G2),  Varietas  Anjasmoro  (G3)  dan Varietas Dena 1(G4) di Desa Kota Baru Kec. Geragai dan Varietas Lokal 2 (KK) di Kota Kandis Kec. Dendang.
Sampel  tanah  diambil  sebanyak  lima  titik  pada  setiap  varietas  dengan  jarak  yang berbeda-beda, masing-masing titik diambil sekitar 0,5 kg tanah pada kedalaman tanah 15- 30  cm.  Kemudian  sampel  tanah  dikering  anginkan  dan  ditumbuk  dengan  mortal.  Sampel tanah tersebut masing-masing diambil sebanyak
100  g  dan  dikompositkan  sehingga  didapatkan  500  g  tanah,  setelah  itu  dimasukkan  ke kantung plastik.
Sebanyak 10 g tanah sampel disuspensikan pada 90 ml air steril dalam erlenmeyer dan dishaker dengan kecepatan 150 rpm selama 30 menit  (Khaeruni et al. , 2010). Isolasi bakteri Bacillus spp.  menggunakan  metode  Eliza et  al. (2007)  yang  telah  dimodifikasi. Suspensi  sampel  dilakukan  pengenceran  berseri  10 -1 -10 -9 ,  kemudian  masing-masing suspensi  pengenceran  10 -1 ,  10 -3 ,  10 -5 ,  10 -7 dan  10 -9 dikocok  dan  dipanaskan  di  dalam penangas  air  pada  suhu  75-80 0 C  selama  10  menit.  Sebanyak  100  µl  suspensi  diteteskan pada  media tryptic  soy  agar (TSA),  kemudian  diratakan  menggunakan glass  beads . Selanjutnya diiinkubasi selama 3 hari dan dilihat koloni yang tumbuh. Koloni yang tumbuh dengan  ciri-ciri  koloni  yaitu  umumnya  berwarna  putih  sampai  kekuningan  atau  putih suram,  tepi  koloni  pada  umumnya  tidak  rata,  permukaannya  kasar  dan  tidak  berlendir, beberapa  koloni  ada  yang  cenderung  kering  bubuk,  koloni  besar  dan  tidak  mengkilat (Hatmanti, 2000).
Isolasi cendawan Sclerotium rolfsii
Isolat S.  rolfsii koleksi  Laboratorium  Penyakit  Tanaman  diinokulasi  ke  tanaman kedelai. Reisolasi cendawan dilakukan dengan cara mengambil sklerotia dari S. rolfsii yang tumbuh  disekitar  tanaman  kedelai  dan  ditumbuhkan  pada  media  PDA.  Biakan  diinkubasi selama  4-5  hari  sampai  miselium  tumbuh  dan  memenuhi  permukaan  cawan.  Kemudian diidentifikasi menggunakan buku Barnett (1960) dan dibuat stok inokulum.
Uji daya hambat Bacillus spp. terhadap S. rolfsii s ecara in vitro
Pengujian daya hambat isolat bakteri terhadap S. rolfsii pada media PDA dilakukan dalam  dua  tahap.  Pada  uji  tahap  pertama,  potongan  biakan S.  rolfsii berdiameter  0,5  cm diinokuasikan ditengah cawan petri, kemudian 4 isolat Bacillus spp. digores memanjang (2 cm)  dengan  jarak  1  cm  dari  tepi  cawan  (Gambar  1).  Aktivitas  penghambatan  diamati secara  kualitatif  berdasarkan  adanya  zona  hambat  yang  terbentuk  disekitar  koloni  bakteri (Astuti,  2007).  Pengamatan  dilakukan  pada  2  hari  setelah  inokulasi  (hsi).  Isolat  bakteri yang menunjukkan adanya zona hambat selanjutnya diuji terhadap S. solfsii dengan metode uji ganda.
Gambar 1. Skema pengujian daya hambat isolat bakteri terhadap S. rolfsii pada tahap pertama : (A) koloni S. rolfsii; (B 1 – B 4 ) Isolat bakteri.
Uji  ganda  dilakukan  dengan  menggoreskan  isolat  bakteri  berjarak  3  cm  dari  tepi cawan  pada  media  PDA  dan  3  cm  dari  koloni  cendawan S.  rolfsii berdiameter  0,5  cm (Gambar 2). Miselia cendawan yang digunakan umur 5-7 hari dan koloni cendawan masih aktif  tumbuh.  Biakan  diinkubasi  pada  suhu  ruang  selama  3  x  24  jam  dan  dilakukan pengamatan pada 2x24 jam dan 3x24 jam.
Gambar  2. Skema  uji  ganda isolat  bakteri  terhadap S.  rolfsii :  (A) koloni S. rolfsii; (B) Isolat bakteri; (R1) Jari-jari koloni S. rolfsii yang menjauhi koloni bakteri; (R2) Jari-jari koloni S. rolfsii yang mendekati koloni bakteri.
I =
X 100%
Pengamatan dilakukan dengan mengukur jari-jari koloni cendawan S. rolfsii.
Persentase  daya  hambat   bakteri  terhadap S. rolfsii dihitung  menggunakan rumus sebagai berikut :
Keterangan :
I = Persentase daya hambat (%) R1 = Jari-jari koloni S. rolfsii yang menjauhi koloni bakteri R2
= Jari-jari koloni S. rolfsii yang mendekati koloni bakteri
Uji in planta Bacillus spp. terhadap penyakit rebah kecambah
Uji in  planta dilakukan  dengan  menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL) dengan perlakuan yang digunakan yaitu 11 isolat Bacillus spp. yang memiliki daya hambat tinggi terhadap S. rolfsii pada uji in vitro , 2 perlakuan kontrol (sehat dan sakit), 1 perlakuan fungisida dan setiap perlakuan diulang sebanyak 3 kali.

## Persiapan media tanam
Media  tanam  yang  digunakan  adalah  pasir,  tanah  yang  telah  diayak,  dan  pupuk kandang.  Perbandingan  dosis  pasir,  tanah,  dan  pupuk  kandang  adalah  2:1:1  (v:v:v). Sebelum dimasukan kedalam bak plastik, media tanam terlebih dahulu disterilkan dengan metode  Tyndalisasi.  Kemudian  media  diinkubasikan  selama  1  minggu  sebelum dipergunakan. Campuran media tanam tersebut dimasukan ke dalam bak plastik berukuran 41 x 32 cm dan masing-masing di isi dengan 5 kg media tanam.

## Pengujian daya kecambah benih
Uji  daya  kecambah  benih  dilakukan  dengan  metode  Blotter,  sebanyak  100  benih sampel kedelai diambil secara acak. Selanjutnya didesinfektan dengan larutan NaClO 2% selama 2 menit dan dibilas dengan air steril. Benih dimasukan ke dalam cawan petri yang dialasi dengan 5 lembar kertas saring  yang sudah dibasahi dengan akuades. Setiap cawan petri diletakan sebanyak 10 benih kedelai dengan jarak yang sama dengan jarak yang sama. Pengujian dilakukan selama 7 hari. Kemudian dihitung persentase daya kecambah dengan rumus :
Perbanyakan cendawan S. rolfsii dan aplikasi ke media tanam
Cendawan S.  rolfsii diperbanyak  menggunakan  media Corn  Meal  Sand (CMS) dengan menggunakan perbandingan 98% pasir, 2% tepung jagung dan ditambahkan 20% akuades.  Infestasi  cendawan S.  rolfsii dilakukan  dengan  cara  mencampur  satu  kantong plastik cendawan S. rolfsii yang dibiakan pada media CMS (50 g) kedalam media tanam dan  diaduk  sampai  kedalaman  5  cm  dari  permukaan  tanah.  Selanjutnya  diinkubasikan selama 1 minggu sebelum tanam.
Perbanyakan bakteri Bacillus spp. dan aplikasi suspensi bakteri ke media tanam
Isolat Bacillus spp.  yang  terpilih  dibiakan  dalam  media  TSA  dan  diinkubasi selama  2  x  24  jam,  selanjutnya  sel  bakteri  dipanen  dengan  cara  menambahkan  5  ml akuades  ke  dalam  cawan  petri  dan  digores  menggunakan  jarum oose .  Bakteri  dibiakan pada  media  pepton  5%  dan  di  inkubasikan  pada  inkubator  bergoyang  selama  72  jam. Konsentrasi  suspensi  diatur  dengan  menggunakan spectrofotometer hingga  menjadi  10 9 cfu/ml  (OD 600 =  0,16)  yang  selanjutnya  digunakan  sebagai  inokulum  untuk  aplikasi bakteri antagonis (Thompson, 1996).
Benih  kedelai  disterilisasi  permukaan  dengan  menggunakan  NaClO  2%  dan direndam  selama 2 menit,  selanjutnya dibilas dengan akuades sebanyak 3  kali. Aplikasi bakteri Bacillus spp.  dilakukan  dua  tahap  yaitu  dengan  merendam  benih  kedelai  dan penyiraman suspense bakteri pada media tanam. Tahap pertama,  benih  direndam  dalam 100  ml  suspensi  bakteri  dengan  kerapatan  10 9 cfu/ml selama 6 jam, lalu benih dikering anginkan,  selanjutnya  ditanam  dalam  wadah  yang  telah  disediakan  (Khaeruni  dan Rahman,  2012).  Tahap  kedua,  ketika  benih  ditanam  dilakukan  penyiraman  suspensi bakteri  pada  setiap  lubang  tanam  dengan   volume   15   ml   dengan   kerapatan   10 9 cfu/ml (Abidin et   al., 2015).   Untuk  perlakuan  kontrol  benih  direndam  dalam  akuades  steril selama 6 jam.

## Penanaman dan pemeliharan tanaman
Benih  kedelai  yang  digunakan  yaitu  benih  yang  memiliki  ukuran  relatif  sama besar,  bebas  dari  kerusakan  karena  mekanis  dan  benih  yang  telah  diberi  perlakuan perendaman  suspensi  bakteri.  Sebanyak  30  benih  yang  sudah  diberi  perlakuan  ditanam pada  masing-masing  wadah  kecambah  dengan  jarak  tanam  10  x  4  cm.  Pemeliharaan tanaman  dilakukan  dengan  melakukan  penyiraman  settiap  hari  pada  pagi  atau  sore.

## Parameter pengamatan
Persentase kecambah terserang sebelum muncul ke permukaan tanah ( pre- emergence damping off )
Persentase kecambah terserang dihitung berdasarkan jumlah kecambah yang tidak muncul ke permukaan tanah sampai tanaman berumur 1 minggu.
Kecambah  yang  tidak  muncul  dilakukan  pembongkaran  dan  pengamatan  terhadap kecambah  yang  tidak  sakit.  Persentase  kecambah  terserang  sebelum  muncul  ke permukaan tanah ( Pre-emergence damping off ) dapat dilakukan menggunakan rumus:
Keterangan : S = persentase terserang sebelum muncul ke permukaan tanah ( Pre- emergence damping off )
A = jumlah benih yang ditanam
B = jumlah kecambah yang muncul ke permukaan tanah D = persentase daya kecambah benih
Persentase  kecambah  terserang  setelah  muncul  kepermukaan  tanah  ( Post- emergence damping off )
Pengamatan  kecambah  terserang  setelah  muncul  kepermukaan  tanah  dilakukan setiap  hari  setelah  kecambah  muncul  ke  permukaan  tanah  sampai  tanaman  berumur  2 minggu. Persentase kecambah yang terserang dapat dihitung dengan rumus :
Keterangan : K =   persentase kecambah terserang setelah muncul ke permukaan tanah ( post emergence damping off )
n =   jumlah kecambah terserang setelah muncul ke permukaan tanah ( post- emergence damping off )
N =   jumlah benih yang muncul

## Penekanan penyakit rebah kecambah
Persentase  penekana  penyakit  rebah  kecambah  dapat  dihitung  dengan menggunakan rumus sebagai berikut :
Keterangan : PP = penekanan penyakit lk  =  intensitas penyakit pada tanaman kontrol sakit li = intensitas penyakit pada perlakuan ke i.

## Analisis data
Data  hasil  pengamatan  penghambatan Bacillus spp.  terhadap S.  rolfsii dianalisis secara  deskriptif.  Data  hasil  pengamatan  daya  hambat  dual  kultur  secara in  vitro dan pengamtan in  planta dianalisis  untuk  mengetahui  pengaruh  perlakuan  dengan menggunakan analisis ragam dan dilanjutkan dengan uji DMRT ( Duncan Multiple Range Test ) pada taraf 5%.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Hasil
Uji penghambatan bakteri Bacillus spp. terhadap pertumbuhan koloni S. rolfsii
Hasil  isolasi  bakteri  dari  rizosfer  tanaman  kedelai  diperoleh  120  isolat Bacillus spp.dan  terdapat  51  isolat  yang  mampu  menghambat  pertumbuhan  patogen S.  rolfsii secara in vitro (Lampiran 3). Berdasarkan pengamatan secara kualitatif terdapat 17 isolat bakteri  yang  memiliki  zona  bening  lebih  besar  dari  jumlah  keseluruhan  isolat  yang mampu  menghambat S.  rolfsii .  Hasil  persentase  daya  hambat  bakteri Bacillus spp. terhadap S. rolfsii secara in vitro menunjukkan bahwa rata-rata kemampuan daya hambat bakteri dibawah 50% (Tabel 1).
Persentase  daya  hambat Bacillus spp.  terhadap S.  rolfsii secara in  vitro antara  39,45% sampai  55%.  Hasil  evaluasi  persentase  daya  hambat Bacillus spp.  terhadap S.  rolfsii terdapat  11 isolat  yang  digunakan  untuk  uji in  planta di  rumah  kaca.  Isolat  tersebut  terdiri  atas  3  isolat Varietas Anjasmoro, 4 isolat Varietas Dena 1, 3 isolat Varietas Lokal 1 dan 1 isolat Varietas Dena 2.
Tabel 1. Persentase daya hambat Bacillus spp. terhadap S. rolfsii secara in vitro
Isolat Bakteri Daya Hambat (%) B.G1-3 45,27 B.G1-4 41,38 B.G3-10 44,70 B.G3-20 45,23 B.G3-27 55,00 B.G4-3 39,88 B.G4-4 45,25 B.G4-5 41,35 B.G4-6 46,59 B.G4-7 45,93 B.G4-15 39,45 B.G4-18 42,04 B.G4-19 39,90 B.SM-2 45,00 B.SM-4 48,44 B.SM-15 42,70 B.SM-16 40,60

## Persentase pree-emergence damping off
Berdasarkan  hasil  analisis  ragam  dari  persentase pree-emergence  damping  off pada tanaman  kedelai,  menunjukkan  bahwa  perlakuan  bakteri Bacillus spp.  dan  kontrol  sakit tidak berbeda nyata.
Tabel  2.  Persentase pree-emergence  damping  off dengan  pemberian  bakteri Bacillus spp. pada tanaman kedelai
Perlakuan Pree-emergence damping off (%) Penekanan Penyakit (%) Kontrol sehat 0,00 a * Kontrol sakit 51,56 bcde * Fungisida 13,78 a 73,28 B.G3-10 40,44 bcde 21,56 B.G3-20 47,11 bcde * B.G3-27 57,11 de * B.G4-4 54,89 cde * B.G4-6 59,33 e * B.G4-7 39,33 bcd 23,71 B.G4-18 43,78 bcde 15,09 B.SM-2 33,78 b 34,49 B.SM-4 51,56 bcde * B.SM-15 33,78 b 34,49 B.G1-3 36,00 bc 30,18
Keterangan  :  Angka  yang  diikuti  huruf  yang  sama  menunjukkan  tidak  berbeda  nyata  berdasarkan  uji Duncan Multiple Range Test pada taraf 5%.*= tidak terjadi penekanan penyakit
Namun  berbeda  nyata  terhadap  kontrol  sehat  dan  fungisida.  Isolat  B.SM-2  dan B.SM-15 memiliki presentase penyakit terendah sebesar 33,78% dan penekanan penyakit tertinggi sebesar 34,49% dibandingkan dengan isolat lainnya (Tabel 2).

## Persentase post-emergence damping off
Hasil  analisis  sidik  ragam  terhadap  persentase post-emergence  damping  off menunjukkan  bahwa  perlakuan  bakteri Bacillus spp.  berpengaruh  nyata  terhadap  kontrol (Tabel  3).  Pemberian  bakteri Bacillus spp.  dapat  menekan  penyakit post-  emergence damping off sebesar 35,16% sampai 77,06%.

## Pembahasan
Bakteri Bacillus spp.  tergolong  memiliki  mekanisme  antagonis  berupa  antibiosis terhadap cendawan patogen. Hal tersebut ditandai dengan adanya zona hambat di sekitar koloni bakteri. Eliza et al. (2007) menyatakan bahwa senyawa antifungal yang dihasilkan oleh  bakteri  secara  umum  mengakibatkan  terjadinya  pertumbuhan  yang  abnormal  pada hifa  (malformasi),  yang  ditunjukkan  dengan  pembengkakan  dan  pemendekan  hifa  yang mengakibatkan hifa tidak dapat berkembang dengan sempurna.
Tabel  3.  Persentase post-emergence   damping  off dengan pemberian  bakteri Bacillus spp. pada tanaman kedelai Perlakuan Post-emergence damping off (%) Penekanan Penyakit (%) Kontrol sehat 0,00  a * Kontrol sakit 56,94 e * Fungisida 10,91 b 80,84 B.G3-10 22,86 bc 59,85 B.G3-20 22,02 bc 61,33 B.G3-27 27,82 cd 51,14 B.G4-4 21,76 bc 61,73 B.G4-6 36,92 d 35,16 B.G4-7 16,23 bc 71,50 B.G4-18 16,93 bc 70,27 B.SM-2 18,35 bc 67,77 B.SM-4 15,6  bc 72,60 B.SM-15 23,54 bc 58,66 B.G1-3 13,06 b 77,06
Keterangan : Angka yang diikuti huruf yang sama menunjukkan tidak berbeda nyata berdasarkan uji Duncan Multiple Range Test pada taraf 5%. *= tidak terjadi penekanan penyakit
Kemampuan  daya  hambat  bakteri Bacillus spp.  terhadap S.  rolfsii secara  umum dibawah 50%. Kemampuan daya hambat yang tinggi secara in vitro menunjukkan bahwa isolat-isolat  tersebut  memiliki  sifat  antagonis  terhadap  cendawan  patogen.  Hal  tersebut berkaitan  dengan  kemampuan  antagonis  setiap  isolat  bakteri  dalam  memproduksi  enzim ekstraseluler  seperti  kitin,  protase,  dan  selulase.  Selain  produksi  enzim  ekstraseluler, kemampuan  antagonis  suatu  bakteri  rizosfer  juga  dipengaruhi  oleh  kemampuan memproduksi  siderofor  (Khaeruni et  al. ,  2010).  Kitinase  mendegradasi  kitin  yang merupakan  komponen  penyusun  dinding  sel  cendawan  seperti Fusarium  oxysporum , Rhizoctonia solani, dan S. rolfsii (Raaijimaker et al ., 2008).
Persentase pree-emergence  damping  off pada  tanaman  kedelai  yang  telah diberikan  perlakuan  isolat Bacillus spp.  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan  fungisida. Terdapat  beberapa  isolat Bacillus spp.  yang  menunjukkan  persentase pree-emergence damping off lebih rendah dibandingkan dengan kontrol sakit. Persentase pree-emergence damping  off terendah  terjadi  pada  perlakuan  isolat  B.SM-15  dan  B.SM-2  yaitu  sebesar 33,78%  dengan  penekanan  penyakit  34,49%.  Hasil  tersebut  dapat  dikarenakan kemampuan  kolonisasi  bakteri  pada  lingkungan.  Menurut  Yuliar  (2008),  jumlah  bakteri yang  semakin  banyak  akan  menghasilkan  jumlah  metabolit  sekunder  yang  semakin banyak  juga,  sehingga  akan  meningkatkan  penghambatan  bakteri  terhadap  patogen. Penggunaan  agens  PGPR  sebagai  biokontrol  dengan  hasil  yang  maksimal  masih  sulit dikarenakan  kemampuannya  dalam  beradaptasi  (Anisa,  2011).  Serangan  cendawan patogen  sangat  cepat  sementara  kolonisasi  bakteri  belum  baik,  sehingga  cendawan patogen  lebih  awal  mengkolonisasi  dari  agens  biokontrol,  hal  ini  mengakibatkan  agens biokontrol belum mampu mengaktifkan sifat antagonisnya.
Persentase post-emergence  damping  off pada  tanaman  kedelai  dengan  perlakuan bakteri Bacillus spp.  lebih  rendah  dibandingkan  dengan  kontrol  sakit.  Isolat  B.G1-3 merupakan  perlakuan  terbaik  untuk  menghambat  penyakit post-  emergence  damping  off pada  tanaman  kedelai  dengan  penekanan  penyakit  sebesar  77,06%.  Kesesuaian  aplikasi agens  hayati  dapat  mempengaruhi  tingginya  kejadian  penyakit  pada  tanaman.  Hal  ini berkaitan  dengan  penelitian  yang  telah  dilakukan  oleh  Safrina  (2012),  bahwa  perlakuan perendaman  benih  dapat  mempengaruhi  munculnya  kejadian  penyakit  dan  laju pertambahan  tinggi  tanaman  kedelai.  Perlakuan  benih  dengn  PGPR  akan  menghasilkan pembentukan  koloni  PGPR  sedini  mungkin  sehingga  dapat  mencegah  pembentukan koloni  patogen  pada  akar  (Khalimi,  2009).  Selain  itu  rizobakteria  dapat  menghambat
patogen  tanaman  secara  langsung  dan  tidak  langsung.  Menurut  Astuti  (2007),  bakteri Bacillus sp.  yang  diisolasi  dari  rizosfer  tanaman  kedelai  mempunyai  potensi  sebagai pemacu  pertumbuhan  tanaman  dan  dapat  mensintesis  IAA,  melarutkan  fosfat, menghasilkan  siderofor,  serta  mampu  menghasilkan  senyawa  antifungi.  Produksi siderofor,  antibiotik  dan  HCN  oleh  rizobakteria  mampu  menurunkan  pertumbuhan fitopatogen.
Hasil  penelitian  ini  menujukan  bahwa  persentase  rebah  kecambah  pada  tanaman kedelai  sebelum  muncul  kepermukaan  tanah  ( pree-emergence  damping  off )  terendah sebesar  33,78%  dan  tertinggi  sebesar  59,3%.  Penyakit  rebah  kecambah  setelah  muncul dipermukaan tanah ( post-emergence damping off ) persentase tertinggi mencapai 27,82%. Permukaan  akar  merupakan  tempat  yang  kaya  nutrisi  sehinga  dapat  menarik  keragaman mikroorganisme.  Sehingga  persaingan  untuk  mendapatkan  nutrisi  dan  tempat  adalah mekanisme  mendasar  PGPR  melindungi  tanaman  dari  fitopatogen  (Duffy,  2001). Kemampuan bakteri untuk beradaptasi dan kolonisasi, dapat disebabkan dari sifat bakteri yang    meliputi  motilitas  kemotaksis  terhadap  eksudat  benih  dan  akar  serta  produksi komponen  spesifik  untuk  melekat  pada  akar.  Kolonisasi  akar  dengan  inokulasi  bakteri adalah langkah penting dalam interaksi antara bakteri yang menguntungkan dan tanaman inang.
Menurut  Abidin et  al. (2015)  perlakuan  bakteri  antagonis  isolat Bacillus spp. mampu menekan penyakit rebah kecambah. Seluruh perlakuan dengan pemberian bakteri Bacillus spp. dapat menekan penyakit rebah kecambah post- emergence damping off pada tanaman  kedelai  secara in  planta. Mekanisme  terpadu  yang  diduga  dapat  menekan kejadian  penyakit  adalah  potensi  kitinase,  β-  1,3  glukanase,  siderofor,  kemampuan kompetisi agens, antibiotik, enzim peroksidase dan potensi lainnya (Tahar, 2009).

## KESIMPULAN DAN SARAN
Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan, maka dapat diperoleh kesimpulan bahwa :
1. Terdapat  beberapa  isolat  bakteri Bacillus spp.  tidak  dapat  menekan  penyakit  rebah kecambah sebelum muncul kepermukaan tanah pada tanaman kedelai.
2. Semua isolat bakteri Bacillus spp. mampu menekan penyakit rebah kecambah setelah muncul kepermukaan tanah pada tanaman kedelai, isolat yang terbaik untuk menekan
3. penyakit rebah kecambah setelah muncul kepermukaan tanah adalah isolat B.G1-3 di isolasi dari tanah yang ditanamani Varietas Dega di Desa Kota Baru Kec. Geragai.
4. Pemberian  bakteri Bacillus spp.  dapat  menekan  penyakit  rebah  kecambah  sebelum muncul  kepermukaan  tanah  sebesar  21,56%  sampai  34,49%,  dan  penyakit  rebah kecambah setelah muncul kepermukaan tanah sebesar 51,14% sampai 77,06%.

## Saran
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  telah  dilakukan  maka  penulis  memberikan  saran yaitu  perlu  dilakukan  penelitian  lanjut  untuk  mengetahui  cara  terbaik  aplikasi  bakteri Bacilus spp. untuk mengendalikan penyakit pada tanaman.

## DAFTAR PUSTAKA
Abidin  Z,  LQ  Aini,  dan  AL  Abadi.  2015.  Pengaruh  bakteri Bacillus spp.  dan Pseudomonas sp.  terhadap  pertumbuhan  cendawan  patogen S.  rolfsii Sacc. penyebab penyakit rebah semai pada tanaman kedelai. J. HPT Vol. 3 No. 1.
Adisarwanto T. 2008. Budi Daya Kedelai Tropika. Jakarta (ID): Penebar Swadaya.
Anisa  Y.  2011.  Pengaruh  mulsa  dan  PGPR  terhadap  insidensi  penyakit  busuk  pangkal batang ( S. rolfsii Sacc.) pada tanaman kedelai ( G. max (L) Merill) [skripsi]. Institut Pertanian Bogor. Bogor
Astuti  RP.  2007.  Rizobakteria Bacillus spp.  asal  tanah  rizosfer  kedelai  yang  berpotensi sebagai  pemacu  pertumbuhan  tanaman.  [Tesis].  Sekolah  Pascasarjana  Institut Pertanian Bogor. Bogor. Badan Pusat Statistik (BPS). 2016. Produktivitas Kedelai Menurut Provinsi  (kuintal/ha),1993-2015. https://www.bps.go.id  (diakses  pada 12 Mei 2017).
Barnett HL. 1960. Illustrated Genera of Imperfect Fungi. 2 nd edition. Burgess Publishing Co. Minneapolis, MN.
Duffy BK. 2001. Competition in encyclopedia of plant pathology, Eds. O. C. Maloy, and T.D. Murray, pp. 234-24. John Wileyand Sons, Inc.: New York, USA.
Eliza, A Munif, I Djatnika dan Widodo. 2007. Karakter fisiologis dan peranan antibiosis bakteri  perakaran  graminae terhadap fusarium dan pemacu pertumbuhan tanaman pisang. Jurnal Hortikultura. Vol. 17 No. 2.
Hatmanti  A.  2000.  Pengenalan Bacillus spp.  Balitbang  Lingkungan  Laut,  Puslitbang Oseanologi-LIPI, Jakarta.Vol. XXV, No. 1, 2000 : 31-41
Khaeruni A, GAD Sutariati, dan S Wahyuni. 2010. Karakterisasi dan uji aktivitas bakteri rizosfer  lahan  ultisol  sebagai  pemacu  pertumbuhan  tanaman  dan  agensia  hayati cendawan patogen tular tanah secara in vitro. Jurnal HPT Tropika. Vol. 10 No. 2: 123 – 130.
,  dan  A  Rahman.  2012.  Penggunaan  bakteri  kitinolitik  sebagai  agens biokontrol  penyakit  busuk  batang  oleh R.  solani pada  tanaman  kedelai.  Jurnal Fitopatologi Indonesia. Volume 8, Nomor 2, Hal. 37-43
Kloepper  JW,  RR  Ubana,  GW  Zehnder,  JF  Murphy,  E  Sikora  dan  C  Fernandez.  1999. Plant  root-bacteria  interactions  in  biological  control  of  soil  borne  diseases  and potential extension to systemic and foliar diseases. Austral Plant Pathol 28:21-26.
Nawangsih  AA,  T  Widjayanti,  dan  Y  Anisa.  2014.  Kelimpahan  bakteri  rizosfer  pada sistem pht-biointensif serta kemampuan antagonismenya terhadap
S. rolfsii pada kedelai. Bogor. Jurnal HPT Tropika. Vol. 14 No.2 : 110-120.
Nogueira  MA,  G  Diaz,  W  Andrioli,  FA  Falconi  dan  JR  Stangarlin.  2006.  Secondary metabolites  fro Diplodia  maydis and S.  rolsfii with  antibiotic  activity. J  Braz Microbiol 37:14-16.
Raaijmaker  JM,  Paulitz  TC  &  Steinberg  C.  2008.  The  rhizosphere  :  a  playground  and battlefield  for  soilborn  pathogens  and  benefecial  microorganism. Plant  Soil 10: 1007–1014.
S afrina  CPA.  2012.  Keefektifan plant  growth  promoting  rhhizobacteria sebagai  pemacu pertumbuhan  dan  penghambat  penyakit  busuk  pangkal  batang  ( S.  rolfsii Sacc.) pada kedelai. Institut Pertanian Bogor. Bogor.
Sastrahidayat  IR,  Syamsuddin  Djauhari,  dan  Nasir  Saleh.  2007.  Pemanfaatan  pellet mengandung  saproba  antagonis  dan  endomikoriza  (vam)  untuk  mengendalikan penyakit  rebah  semai  ( S.  rolfsii )  dan  meningkatkan  produksi  kedelai.  Laporan Hasil  Penelitian  Kerjasama  Kemitraan  Penelitian  Pertanian  dengan  Perguruan Tinggi (KKP3T). Fakultas Pertanian, Universitas Brawijaya. Malang. 89 th .
Tahar.  2009.  Rizobakteria Pseudomonas sp.  dan Bacillus spp.  toleran  asam  aluminium sebagai pemacu pertumbuhan tanaman dan pengendali fungi patogen akar tanaman kedelai. [Tesis]. Sekolah Pascasarjana Institut Pertanian Bogor. Bogor.
Thompson  DC,  BB  Clarke,  dan  DYKobayashhi.  1996.  Evaluation  of  bacterial  antagonis for  reduction  of  summer  patch  symptoms  in  Kentucky  bluegrass  plant  Dis.  80  : 856-862.
Yuliar.  2008.  Skrining  bioantagonistik  bakteri  untuk  agen  biokontrol Rhizoctonia  solani dan kemampuannya dalam menghailkan surfaktin. Biodiversitas Vol. 9 No. 2.