Article History: Received : January, 5 th 2021; Accepted : March, 23 rd 2022 Rekayasa  ISSN:  2502-5325  has  been  Accredited by  Ristekdikti (Arjuna) Decree: No. 23/E/KPT/2019 August 8th, 2019 effective until 2023
Cite this as: Mutammimah,  S.,  Supriyanto  &  Mu’tamar,  M.F.F.  (2022 ). Aktivitas  Antioksidan  dan  Antibakteri  Ekstrak  Daun  Kersen (Mutingia  Calabura  L)  dengan  Metode  Microwave  Assisted Extraction . Rekayasa 15 (1). 21-28 pp. doi: https://doi.org/10.21107/rekayasa.v15i1.13229
© 2021 Mutammimah
Rekayasa , 2022; 15(1): 21-28 ISSN: 0216-9495 (Print) ISSN: 2502-5325 (Online)
Aktivitas Antioksidan dan Antibakteri Ekstrak Daun Kersen ( Muntingia Calabura L ) dengan Metode Microwave Assisted Extraction Siti Mutammimah 1 , Supriyanto 1* , Mohammad Fuad Fauzul Mu’tamar 1
1 Prodi Teknologi Industri Pertanian Fakultas Pertanian Universitas Trunojoyo Madura Jl. Raya Telang No 02 Kamal Bangkalan Madura 69162 Jawa Timur *priyantosby17@gmail.com
DOI: https://doi.org/10.21107/rekayasa.v15i1.13229

## ABSTRACT
Kersen (Mutingia calabura) is a wild plant that is not cultivated and not many people know its benefits. So far kersen plants are only used as a shade even though the plant has the potential as an antioxidant and antibacterial. The purpose of this study  is  to  find  out  the  antioxidant  and  antibakeri  activity  of  kersen  leaf  extract.  The  method  used  for  extraction  is Microwave  Assited  Extraction  (MAE)  with  variations  in  temperature  and extraction time.  Analysis  of  antioxidant activity uses the DPPH method by calculating IC 50 values while for analysis of antioxidant anctivity using the bland zone method. The results showed that the temperature and time of extraction affect antioxidant and antibacterial activity. The best treatment is obtained from low temperature treatment and extraction time for 7 minutes with IC 50 and bland zone values of 44.21 ppm and 11.05 mm,respectively.
Key words : Mutingia calabura , antioxidant, antibacterial, IC 50

## PENDAHULUAN
Tanaman  kersen  ( Muntingia  calabura  L ) merupakan salah satu jenis tanaman yang tumbuh liar  diberbagai  tempat  di  Indonesia.  Tanaman  ini sering  diabaikan  dan  hanya  digunakan  sebagai pohon  peneduh  dikarenakan  daunnya  yang rindang.  Padahal  tanaman  ini  memiliki  banyak manfaat  untuk  kesehatan  manusia  diantaranya sebagai  obat  sakit  kepala,  obat  batuk,  asam  urat, antioksidan,  antikanker,  diabetes  dan  lainnya (Zahara  dan  Suryady,  2018).  Manfaat-manfaat tersebut  belum  dikenal  secara  luas  oleh masyarakat  Indonesia.  Masyarakat  di  Peru memanfaatkan  daun  kersen  ini  sebagai  obat tradisional anti radang dan obat sakit kepala (Hadi, 2009).
Menurut  Nurhasanah  (2012),  kandungan senyawa  metabolit  sekunder  yang  terdapat  pada daun  kersen  berupa  flavonoid,  polifenol,  alkaloid, saponin, tanin, steroid-triterpenoid, monoterpena- seskuiterpena yang berpotensi sebagai antioksidan yang  dapat  menangkal  senyawa  radikal  bebas. Selain  itu,  kandungan  senyawa  flavonoid  yang berupa  flavanol,  flavon  dan  auron  pada  daun
kersen  memiliki  sifat  antimikroba  (Arum et  al ., 2012).
Manfaat dari tanaman kersen antar lain sebagai antioksidan  alami,  yang  tentunya  lebih  aman dibandingkan dengan antioksidan sintetik. Antioksidan  merupakan  senyawa  yang  dapat memutus  reaksi  rantai  oksidatif  yang  disebabkan oleh  radikal  bebas  dengan  cara  memberikan elektronnya  kepada  molekul  radikal  bebas (Kumalaningsih, 2006). Radikal bebas adalah suatu molekul  atau  atom  yang  memiliki  satu  atau  lebih elektron  tidak  berpasangan  yang  sifatnya  sangat reaktif  dan  tidak  stabil  (Winarti,  2010).  Radikal bebas yang reaktif ini sangat berbahaya karena ia akan  mencari  pasangan  baru  dengan  cara menyerang  elektron  molekul  dari  senyawa  lain seperti DNA  dalam inti sel. Kerusakan DNA  dapat menyebabkan penyakit degeneratif seperti kanker, katarak dan lain sebagainya (Kumalaningsih, 2006). Radikal  bebas  yang  disebabkan  oleh  reaksi oksidasi  dapat  terjadi  setiap  saat  bahkan  disaat bernafas  sekalipun.  Secara  alami  tubuh  manusia

## REKAYASA
Journal of Science and Technology https://journal.trunojoyo.ac.id/rekayasa
juga dapat menangkal radikal bebas dalam kondisi normal  dengan  adanya  senyawa  anti  radikal  yang diproduksi dalam tubuh. Akan tetapi, kemampuan ini  sangat  terbatas  dan  akan  terus  berkurang dengan bertambahnya usia. Sehingga akan sangat berbahaya jika radikal bebas dalam tubuh melebihi kapasitas  kemampuan  anti  radikal  dalam  tubuh (Fathurrachman, 2014).
Manfaat lain dari tanaman kersen yaitu sebagai antimikroba.  Antimikroba  adalah  senyawa  yang dapat  menghambat  aktivitas  dan  pertumbuhan mikroba (Yasni, 2013). Penelitian Arum et al (2012) menyebutkan  bahwa  senyawa  flavonoid  yang berupa flavanol, flavon, dan auron yang diperoleh dari  ekstrak  etanol  dan  metanol  daun  kersen memiliki  daya  antibakteri  terhadap  bakteri E.  coli, P. aeruginosa, S. aureus dan B. subtilis . Berdasarkan hasil  penelitian  Sulaiman et  al (2017),  ekstrak etanol daun kersen dengan memiliki daya hambat antibakteri terbesar terhadap pertumbuhan bakteri Streptococcus viridans .
Penelitian  mengenai  manfaat  tanaman  kersen sebagai antioksidan dan antimikroba telah banyak dilakukan.  Berbagai  metode  mulai  dari  metode ekstraksi,  jenis  dan  konsentrasi  pelarut  dilakukan untuk  memaksimalkan  pemanfaatan  tanaman kersen  mulai  dari  buah,  daun,  kulit  batang,  dan bunga  kersen.  Menurut  Farida et  al (2009)  buah kersen  yang  memiliki  aktivitas  antioksidan  yang paling  tinggi  yaitu  buah  kersen  matang  segar dengan  menggunakan  metode  DPPH.  Sedangkan Kuntoroni et al (2013) menyatakan bahwa aktivitas antioksidan pada ekstrak metanol daun kersen tua lebih  kuat  dibandingkan  ekstrak  metanol  daun kersen muda.
Beberapa penelitian mengenai metode ekstraksi  juga  telah  dilakukan,  mulai  dari  metode konvensional  seperti  metode  maserasi,  soxhletasi, infusa,  perkolasi  dan  lain  sebagainya  hingga metode yang menggunakan
gelombang elektromagnetik.  Pada  penelitian  Daniswara et  al (2017) yang menggunakan perbandingan ekstraksi metode microwave  hydrodistillation dengan metode soxhlet  extraction .  Hasil  penelitiannya membuktikan  metode  ekstraksi  menggunakan microwave dapat  bekerja  lebih  cepat  dan  lebih efisien  dibandingkan  dengan  metode  ekstraksi konvensional. Hasil penelitian Fikarani (2015) yang menggunakan  metode  MAE  ( Microwave  Assisted Extraction )  dengan  perbedaan  konsentrasi  bahan dan  pelarut  aquades  (1:25,  1:35,  1:45)  dan perbedaan  waktu  ekstraksi  (12,  16,  20  menit)
membuktikan  bahwa  perlakuan  terbaik  yang dihasilkan  dari  perlakuan  tersebut  yaitu  dengan menggunakan  rasio  pelarut  1:45  (b/v)  dengan waktu  12  menit.  Sedangkan  penelitian  mengenai aktivitas  antioksidan  dan  antibakteri  daun  dari tanaman  kersen  ( Muntingia  calabura  L )  dengan menggunakan metode ekstraksi MAE masih belum dilakukan.  Berdasarkan  latar  belakang  tersebut, pada  penelitian  ini  akan  menggunakan  metode ekstraksi  MAE  dengan  menggunakan  waktu  (3,5 dan  7  menit)  dan  suhu  (Low  dan  Med-Low)  yang berbeda  untuk  mengetahui  aktivitas  antioksidan dan  antibakteri  pada  ekstrak  daun  kersen ( Muntingia calabura L ).

## METODE PENELITIAN Alat
Microwave  merk  Panasonic,  rotary  evaporator merk B-One Model RE 1000 HN, spektrofotometer SP  V1100    grinder,  inkubator,  autoklaf,  dan  alat- alat gelas lainnya untuk analisis.

## Bahan
Daun Muntingia calabura L yang diperoleh dari Bangkalan,
larutan DPPH (2,2-difenil-1-
pikrilhidrazil)  untuk  analisa  antioksidan,    pereaksi Mayer,  pereaksi  Dragendrof  untuk  analisis fitokimia  dan  bahan-bahan  untuk  analisis  daya hambat  bakteri    E.  Coli.  Bahan-bahan  kimia  yang dipakai adalah pa ( pro analisys ) produk merck.

## Rancangan Penelitian
Penelitian  ini  dilakukan  dengan  menggunakan Rancangan  Acak  Lengkap  dengan  2  faktor  yaitu waktu  dan  suhu  ekstraksi.  Waktu  ekstraksi  yang digunakan  yaitu  3  menit,  5  menit,  dan  7  menit. Sedangkan  suhu  yang  digunakan  yaitu  suhu  Low dan Med Low. Pada penelitian ini akan dilakukan 3 kali  ulangan  sehingga  nantinya  akan  ada  18 sampel.

## Pembuatan Ekstrak
Pembuatan  ekstrak  daun  kersen  dilakukan menurut metode Fikarani (2015) yang dimodifikasi. Ekstraksi  yang  digunakan  yaitu  dengan  metode Microwave  Assisted  Extraction perbandingan  1:7 antara  bahan  dan  pelarut.  Dari  masing-masing sampel  ditimbang  sebanyak  70  gram  dan ditambahkan  dengan  pelarut  aquadest  sebanyak 490  ml.  Kemudian  sampel  dimasukkan  kedalam alat  microwave  dan  di  setting  berdasarkan perlakuan waktu (3, 5, dan 7 menit) dan suhu yang
digunakan  (Low  dan  Med  Low).  Lalu  sampel disaring  menggunakan  kertas  saring  dengan bantuan  alat  pompa  vacuum.  Selanjutnya  ekstrak diuapkan  dalam  rotary  evaporator  dengan  suhu 49 o C untuk mendapatkan ekstrak kental.

## Analisis fitokimia
Uji fitokimia ekstrak kersen meliputi  identifikasi flavonoid,  alkaloid,  saponin  dan  tannin  menurut metode Hanani (2016).

## Uji Aktivitas Antioksidan Metode DPPH
Pembuatan  larutan  DPPH  dilakukan  dengan menimbang  sebanyak  4  mg  DPPH.  Kemudian dilarutkan  dalam  labu  ukur  100  ml  dengan menggunakan  pelarut  metanol  p.a  (pro  analisa). Setelah  volume  dicukupkan  dalam  tanda  batas, larutan ditempatkan pada ruang gelap (Fathurrachman, 2014).
Untuk  pembuatan  pembuatan  larutan  blanko dilakukan  dengan  menambahkan  larutan  DPPH sebanyak  2  ml  dengan  2  ml  pelarut  metanol  p.a dan  dimasukkan  kedalam  tabung  reaksi.  Tutup tabung reaksi menggunakan kapas dan alumunium  foil  dan  homogenkan  dengan menggunakan  vortex.  Setelah  itu,  larutan diinkubasi  selama  30  menit  dalam  ruang  gelap. Kemudian,  larutan  tersebut  diukur  absorbansinya menggunakan  alat  spektofotometri  pada  panjang gelombang 516 nm (Fathurrachman, 2014).
Pembuatan  larutan  uji  dilakukan  dengan menggunakan sampel ekstrak dari masing-masing perlakuan dibuat larutan induk 1000 ppm dengan menimbang sampel  ekstrak sebanyak 50 mg yang dilarutkan dalam labu ukur 50 ml dan ditambahkan metanol  p.a  hingga  tanda  batas.  Larutan  induk dibuat  menjadi  variasi  konsentrasi  10  ppm,  20 ppm,  dan  30  ppm.  Kemudian  larutan  uji  dari masing-masing konsentrasi dipipet sebanyak 2 ml dan  ditambahkan  2  ml  larutan  DPPH  0,1  mM. Selanjutnya  larutan  uji  di  vortex  dan  diinkubasi dalam  ruang  gelap  selama  30  menit,  lalu  diukur absorbansinya  menggunakan  spektofotometri pada panjang gelombang 516 nm.
Penentuan Nilai IC 50 ( Inhibitory Concentration ) Parameter  yang  digunakan  untuk  mengetahui aktivitas  antioksidan  dari  masing–masing  sampel yaitu  dengan  mengetahui  nilai  IC 50 dan perhitungan  tingkat  inhibisi.  IC 50 merupakan bilangan  yang  menunjukkan  konsentrasi  ekstrak dalam  menghambat  proses  oksidasi  sebesar  50%.
Nilai  IC 50 diperoleh  dari  hasil  persamaan  regresi hasil  pengukuran  dari  masing-masing  konsentrasi larutan  uji.  Semakin  kecil  nilai  IC 50 ,  maka  semakin tinggi  aktivitas  antioksidannya  (Yasni,  2013). Perhitungan  tingkat  inhibisi  dapat  dilakukan dengan rumus berikut :
𝑇𝑖𝑛𝑔𝑘𝑎𝑡 𝐼𝑛ℎ𝑖𝑏𝑖𝑠𝑖 (%) = (𝐴𝑏𝑠 𝐵𝑙𝑎𝑛𝑘𝑜 − 𝐴𝑏𝑠 𝑆𝑎𝑚𝑝𝑙𝑒) (𝐴𝑏𝑠 𝐵𝑙𝑎𝑛𝑘𝑜) 𝑥 100%

## Uji Antibakteri
Pembuatan  Medium Nutrien  Broth (NB) dilakukan  dengan  melarutkan  0,65  gram  bubuk medium NB kedalam 50 ml aquades menggunakan  erlenmeyer  dan  ditutup  dengan alumunium  foil.  Kemudian  dilakukan  pemanasan diatas  hot  plate  dengan  bantuan  pengaduk  stir sekitar  15  menit  hingga  bubuk  benar-benar terlarut  sepenuhnya.  Dituangkan  kedalam  tabung reaksi  masing-masig  5  ml  dan  ditutup  dengan alumunium  foil,  Setelah  itu  media  disterilisasi menggunakan  autoclave  selama  ±15  menit  pada suhu 121 o C (Ratnasari, 2017).
Persiapan  mikroba  uji  dilakukan  dengan inokulasi bakteri  media  NB dan diinkubasi selama 24  jam  pada  suhu  37oC.  Kemudian  kultur  bakteri tersebut diambil 0,1 ml dan ditambahkan kedalam 9,9  ml  media  NB  baru.  Selanjutnya  diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37 o C (Yasni, 2013). Selanjutnya  pembuatan  medium  nutrient  Agar (NA) dilakukan dengan melarutkan 5,6 gram bubuk NA  kedalam  200  ml  aquades  steril  menggunakan erlenmeyer dan ditutup mengguanakan alumunium foil. Kemudian diaduk  dan dipanaskan diatas hot plate selama ±15  menit hingga larutan menjadi  bening.  Selanjutnya  media  disterilkan dalam  autoclave  selama  15  menit  dengan  suhu 121oC.  Setelah  itu,  media  dituangkan  kedalam petridish  steril  dan  didiamkan  hingga  media memadat (Ratnasari, 2017).
Uji  daya  hambat  menggunakan  metode  difusi agar dilakukan dengan menuangkan  sebanyak 0,1 ml bakteri aktif kedalam petridish yang sudah terisi NA.  Kemudian  diratakan  dengan  mengguanakan metode  sebar  ( spread  plate ).  Selanjutnya,  cakram disk  dicelupkan  kedalam  tiap  perlakuan  dan diletakkan  pada  permukaan  media  NA.  Setiap petridish diisi 3 cakram disk untuk satu perlakuan. Setelah  itu,  media  diinkubasi  pada  suhu  37 o C selama  48  jam  (2  hari).  Kemudian  diamati  dan diukur  diameter  penghambatan  pertumbuhan bakteri  disekitar  paper  disk  yang  berupa  areal
bening  dengan  menggunakan  jangka  sorong (Yasni, 2013).

## Analisis Data
Data yang telah diperoleh dari hasil penelitian, dianalisis  menggunakan  ANOVA  pada  taraf signifikasi 5% dengan bantuan software SPSS versi 25. Persamaan matematika dari  uji ANOVA adalah sebagai berikut :
Y ijk = 𝜇 + 𝛼𝑖 + 𝛽𝑗 + (𝛼𝛽)𝑖𝑗 + 𝜀𝑖𝑗𝑘 Keterangan :
Yijk    =  nilai  parameter  yang  ke  k  yang  diperoleh dari  kommbinasi  perlakuan  wakktu ekstraksi ke-I  dan lama ekstraksi ke-j µ       = Rata-rata nilai parameter sesungguhnya αi      = Pengaruh perlakuan waktu ekstraksi ke i  I      = pengaruh perlakuan lama ekstraksi ke-j (α  )ij= Pengaruh interaksi ke-i dan ke j
 ijk   = Pengaruh galat perlakuan ke i dan ke j pada satuan percobaan ke k.
Apabila  dari  hasil  uji  ANOVA  menunjukkan  hasil yang  berpengaruh  nyata,  maka  akan  dilakukan Duncan  Multiple  Range  Test (DMRT)  untuk mengetahui  beda  nyata  antar  perlakuan. Persamaan uji DMRT ditunjukkan sebagai berikut :
𝑅𝑝 = 𝑟𝛼, 𝑝 𝑥 𝑑𝑏 𝑔𝑎𝑙𝑎𝑡 𝑥 𝑆𝑦
S y = √ 𝐾𝑇𝐺 𝑟 R p = nilai kritis DMRT 𝑟𝛼, 𝑝 = Nilai tabel dengan α 5%,  ulangan 3 db     = derajat bebas galat persobaan Sy      = Rerata standar deviasi percobaan KTG   = kuadrat tengan galat r = ulangan

## HASIL DAN PEMBAHASAN Uji Fitokimia
Uji  fitokimia  dilakukan  untuk  mengetahui  ada atau  tidaknya  senyawa  metabolit  sekunder  yang berpotensi  sebagai  antioksidan  dan  antibakteri pada  ekstrak  daun  kersen.  Uji  fitokimia  pada ekstrak daun kersen berupa uji flavonoid, alkaloid, saponin  dan  tanin.  Hasil  uji  fitokimia  yang  telah dilakukan  disajikan  pada  Tabel  1. Berdasarkan  uji fitokimia  yang  telah  dilakukan  menunjukkan bahwa semua perlakuan pada ekstrak daun kersen mengandung senyawa flavonoid, alkaloid, saponin dan tanin. Hasil penelitian tersebut sesuai dengan penelitian  yang  telah  dilakukan  oleh  Nurhasanah (2012)  yang  menyatakan  bahwa  kandungan senyawa  metabolit  sekunder  yang  terdapat  pada daun  kersen  berupa  flavonoid,  polifenol,  alkaloid,
saponin, tanin, steroid-triterpenoid, monoterpena- seskuiterpena yang berpotensi sebagai antioksidan yang  dapat  menangkal  senyawa  radikal  bebas. Tabel 1.  Hasil Uji Fitokimia Ekstrak Daun Kersen
Senyawa  flavonoid  merupakan  salah  satu metabolit  sekunder  yang  dapat  mempengaruhi aktivitas  antioksidan  dan  telah  dibuktikan  dapat mencegah  kerusakan  sel  akibat  reaksi  oksidatif (Fathurrachman,  2014).  Menurut  Yasni  (2013), flavonoid merupakan salah satu golongan terbesar dari  senyawa  fenol  yang  mampu  menghambat pertumbuhan  bakteri.  Hasil  uji  flavonoid menunjukkan  reaksi  positif  jika  terbentuk  warna merah  dan  semua  perlakuan  menunjukkan  reaksi tersebut.
Menurut  Hanani  (2014),  salah  satu  fungsi  dari alkaloid  yaitu  untuk  mempertahankan  diri  dari serangan  mikroorganisme,  virus  ataupun  dari serangan serangga. Hasil uji alkaloid menunjukkan reaksi positif jika terbentuk endapan kuning pada pereaksi  Mayer  dan  terbentuk  endapan  merah pada  pereaksi  Dragendorf,  semua  perlakuan menunjukkan reaksi tersebut. Saponin ini memiliki fungsi  sebagai  antibakteri.  Mekanisme  kerja saponin yaitu berinteraksi dengan membran sterol (Yasni, 2013). Hasil uji saponin menunjukkan reaksi positif  jika  terbentuk  buih  pada  sampel  yang diujikan.  Semua  perlakuan  yang  telah  diuji menunjukkan  reaksi  positif.  Tanin  merupakan suatu  senyawa  polifenol  yang  memiliki  sifat antibakteri  (Yasni,  2013)  dan  antioksidan  (Hanani, 2014).  Hasil  uji  Tanin  akan  menunjukkan  reaksi positif jika terdapat endapan putih. Semua sampel yang telah diuji menunjukkan reaksi positif.

## Uji Aktivitas Antioksidan
Aktivitas antioksidan ekstrak daun kersen dapat dilihat  dari  nilai  IC 50 yang  didapatkan.  IC 50 merupakan  besarnya  konsentrasi  ekstrak  yang dapat  menghambat  oksidasi  pada  DPPH  sebesar 50%  (Yasni,  2013).  Hasil  analisis  antioksidan dengan  menunjukkan  bahwa  waktu  yang digunakan  dalam  proses  ekstraksi  berpengaruh nyata  (P  <0,05)  terhadap  IC 50 yang  dihasilkan. Sedangkan  suhu  dan  interaksi  antara  suhu  dan waktu tidak berpengaruh nyata terhadap IC 50 yang
dihasilkan. Pengaruh waktu ekstraksi terhadap nilai rata-rata IC 50 disajikan pada Tabel 2.
Tabel 2.   Pengaruh Waktu terhadap IC 50 Waktu (menit) IC 50 (ppm) 3 45,34a 5 44,21a 7 63,22b
Keterangan:  Notasi  yang  sama  menunjukkan  hasil  tidak berbeda nyata
Berdasarkan  Tabel  2  menunjukkan  bahwa semakin  lama  waktu  ekstraksi  menyebabkan  nilai IC 50 semakin  besar.  Hal  tersebut  menunjukkan semakin besar nilai IC 50 maka aktivitas antioksidan yang  dimiliki  akan  semakin  kecil,  begitu  juga sebaliknya. Semakin kecil nilai IC 50 , maka aktivitas antioksidan  akan  semakin  besar.  Trend  pengaruh waktu  ekstraksi  terhadap  nilai  IC 50 disajikan  pada Grafik 1.
Gambar 1. Pengaruh Waktu Esktraksi Terhadap Nilai IC 50 Ekstrak Daun Kersen Gambar  diatas  menunjukkan  bahwa  perlakuan waktu  7  menit  memiliki  hasil  yang  berbeda  nyata dengan  perlakuan  waktu  3  menit  dan  5  menit. Penggunaan  waktu  ekstraksi  yang  terlalu  lama menyebabkan senyawa kimia yang telah terekstrak akan  semakin  banyak  yang  rusak.  Sedangkan penggunaan  waktu  yang  terlalu  singkat  dapat menyebabkan  tidak  semua  senyawa  kimia  dapat terekstrak dari bahan (Yulantari et al. 2017). Hal ini sesuai dengan penelitian yang dilakukan oleh Fikarani (2015), bahwa perlakuan terbaik dari 3  perlakuan  waktu  esktraksi  yang  telah  dilakukan pada  daun  kersen  menggunakan  metode  MAE yaitu  12  menit  (paling  singkat)  dengan menghasilkan  nilai  IC 50 sebesar  58,116±5,59%. Berdasarkan  analisis  IC 50 ekstrak  daun  kersen mempunyai aktivitas antioksidan yang sangat aktif. Hal  tersebut  didasarkan  penggolongan  aktivitas antioksidan menurut Fathurrachman (2014).
Tabel 3. Sifat Antioksidan Berdasarkan Nilai IC 50
Nilai IC 50 Sifat Antioksidan < 50 ppm Sangat aktif 50-100 ppm Aktif 101-250 ppm Sedang 250-500 ppm Lemah >500 ppm Tidak aktif
Nilai  IC 50 menunjukkan  besarnya  konsentrasi dari  senyawa  uji  yang  dapat  meredam  aktivitas radikal  bebas  sebanyak  50%.  Semakin  kecil  nilai IC 50 yang  didapatkan,  menunjukkan  bahwa semakin tinggi aktivitas antioksidannya. Pengaruh suhu  ekstraksi  terhadap  aktivitas  antioksidan menunjukkan  bahwa  semakin  tinggi  suhu  maka nilai IC 50 semakin tinggi.
Tabel 4.  Pengaruh Suhu terhadap IC 50 Suhu IC50 (ppm) Low 49,98a Medlow 51,86a
Keterangan:  Notasi  yang  sama  menunjukkan  hasil  tidak berbeda nyata
Berdasarkan  Tabel  4  penggunaan  suhu ekstraksi low dan medlow menghasilkan nilai IC50 yang  tidak  berbeda  nyata.  Hal  ini  dikarenakan perbedaan  antara  suhu  low  dan  medlow  tidak terlalu jauh. Suhu low yang digunakan pada proses ekstraksi  yaitu  antara  suhu  31 o C  sampai  35 o C, sedangkan  pada  suhu  medlow  yaitu  antara  34 o C sampai  42 o C.  Menurut  Sekarsari et  al. (2019), penggunaan  suhu  yang  terlalu  tinggi  melebihi 50 o C  akan  menyebabkan  senyawa  aktif  seperti flavonoid  akan  ikut  teroksidasi.  Selain  itu,  Aulia dan Simon (2018), menyatakan bahwa pemanasan atau  suhu  yang  berlebih  akan  menyebabkan  sel terdegradasi  sehingga  aktivitas  antioksidan  akan menurun.

## Uji Antibakteri
Aktivitas  antibakteri  pada  ekstrak  daun  kersen dapat  dilihat  dengan  adanya  zona  hambat  yang terbentuk seperti areal bening disekitar paper disk. Semakin  tinggi  zona  hambat  yang  dihasilkan, maka  aktivitas  antibakteri  juga  semakin  tinggi. Hasil  analisis  Varian  menunjukkan  bahwa  waktu, suhu,  serta  interaksi  antara  waktu  dan  suhu  yang digunakan dalam proses ekstraksi tidak berpengaruh  nyata  (P<0,05)  terhadap  zona hambat  antibakteri  yang  dihasilkan.  Adanya  zona hambat  pada  daun  kersen  menunjukkan  adanya senyawa  kimia  yang  bersifat  antibakteri  seperti flavonoid,  treterpen,  steroid,  saponin,  dan  tanin (Manarisip et  al., 2019).  Pengaruh  suhu  terhadap
zona  hambat  anti  bakteri  disajikan  pada  Tabel  5 dan Grafik 2.
Tabel 5.   Pengaruh Waktu terhadap Zona Hambat
Waktu (menit) Zona hambat (mm) 3 11,73a 5 9,98a 7 9,62a
Keterangan:  Notasi  yang  sama  menunjukkan  hasil  tidak berbeda nyata
Hasil  analisis  berdasarkan  tabel  diatas  bahwa perlakuan  waktu  tidak  berbeda  nyata  terhadap zona hambat antibakteri E. coli . Daya hambat yang dihasilkan  lebih  besar  dibandingkan  hasil penelitian  yang  telah  dilakukan  oleh  Sulaiman  et al.  (2017).  Penelitian  tersebut  dilakukan  terhadap bakteri
Streptococcus viridans dengan mengunakan metode maserasi dan pelarut etanol. Zona  hambat  yang  dihasilkan  yaitu  sebesar  9,93 mm.
Grafik 2. Pengaruh Waktu Ekstraksi Terhadap Daya Hambat Bakteri Ekstrak Daun Kersen
Tabel 6.   Pengaruh Suhu terhadap Zona Hambat
Suhu Zona hambat (mm) Low 11,05a Medlow 9,83a
Keterangan:  Notasi  yang  sama  menunjukkan  hasil  tidak berbeda nyata
Sehingga  senyawa  yang  bersifat  antibakteri semakin banyak yang rusak akibat waktu dan suhu yang  semakin  tinggi.  Menurut  Manarisip et  al (2019),  terbentuknya  zona  hambat  pada  ekstrak daun  kersen  dikarenakan  adanya  senyawa flavonoid,  steroid,  tanin,  saponin  dan  triterpen yang  berfungsi  sebagai  antibakteri.  Sifat  daya hambat  antibakteri  dikatagorikan  menjadi  sangat kuat  (>20  mm)  kuat  (10-20  mm)  sedang  (55-10 mm) dan lemah  (< 5).
Gambar 3.  Zona Hambat Antibakteri Ekstrak Daun Kersen (A1) suhu low 3 menit, (A2) suhu low 5 menit, (A3) suhu low 7 menit, (B1) suhu medlow 3 menit, (B2) suhu medlow 5 menit, (B3) suhu
medlow 7 menit.
Hasil analisis Tabel 6 menunjukkan bahwa suhu yang digunakan dalam proses ekstraksi menghasilkan  zona  hambat  yang  tidak  berbeda nyata.  Hasil  uji  anti  bakteri  diketahui  bahwa diameter  penghambatan  ekstrak  daun  kersen terhadap  bakteri E.  coli memiliki  daya  hambat yang  cukup  besar.  Diameter  penghambatan terbesar  dan  memiliki  sifat  anti  bakteri  kuat terdapat pada perlakuan suhu low dengan waktu 3 menit.  Hal  ini  dikarenakan  semakin  lama  waktu ekstraksi  dan  semakin  tinggi  suhu  ekstraksi mengakibatkan  daya  hambat  terhadap  bakteri semakin kecil.

## KESIMPULAN
Perbedaan  waktu  ekstraksi  memiliki  pengaruh nyata  terhadap  aktivitas  antioksidan  ekstrak  daun kersen.  Semakin  lama  waktu  ekstraksi  maka aktivitas  antioksidan  akan  semakin  rendah  (nilai IC50 tinggi). Sedangkan perbedaan suhu ekstraksi tidak  berpengaruh  nyata  terhadap  aktivitas antioksidan.  Hal  ini  dikarenakan  suhu  yang digunakan masih dibawah 50 o C. Sehingga senyawa kimia  seperti  flavonoid  tidak  sampai  teroksidasi. Sifat  antioksidan  ekstrak  daun  kersen  tergolong sangat  aktif.  Perbedaan  suhu  dan  waktu  ekstraksi tidak  berpengaruh  nyata  terhadap  daya  hambat antibakteri  ekstrak  daun  kersen.  Namun  diameter penghambatan  antibakteri  ektrak  daun  kersen terhadap Escherichia coli cukup besar yaitu sebesar 11,73 mm (perlakuan terbaik).

## DAFTAR PUSTAKA
Arum, Y. P., Supartono, dan Sudarmin. 2012. Isolasi dan Uji Daya Antimikroba Ekstrak Daun Kersen (Muntingia calabura). Jurnal MIPA. 35 (2) : 165-
174.
Aulia, L. P., dan Simon B. W. 2019. Optimasi Proses Ekstraksi  Daun  Sirsak  (Annona  muricata  L.) Metode  MAE  (Microwave  Assisted  Extraction) dengan Respon Aktivitas Antioksidan dan Total Fenol. Jurnal Agroindustri Halal. 4 (1) : 79-87.
Daniswara  E.  F.,  Taufik  I.  R.,  dan  Mahfud.  2017. Ekstraksi  Minyak  Akar  Wangi  dengan  Metode Microwave  Hydrodistillation  dan  Soxhlet Extraction. Jurnal Teknik ITS. 6 (2) : 380-383.
Farida,  Y.,  Setyorini  S.,  dan  Witha  L.  S.  2009.  Uji Aktivitas  Antioksidan  pada    Buah  Talok (Muntingia  calabura  L.)  dengan  Metode  DPPH dan Rancimat. Seminar Nasional PATPI. Jakarta: Universitas Pancasila.
Fathurrachman,  D.  A.  2014.  Pengaruh  Konsentrasi Pelarut  Terhadap  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak Etanol  Daun  Sirsak  (Annona  muricata  Linn) dengan  Metode  Perendaman  Radikal  Bebas. [Skripsi].  Jakarta:  UIN  Syarif  Hidayatullah Jakarta.
Fikarani,  I.  N.  2015.  Ekstraksi  Daun  Kersen (Muntingia  calabura  L.)  Metode  Microwave Assisted Extraction (Kajian Bahan : Rasio Pelarut dan Lama Waktu Ekstraksi) dan Sitotoksitasnya pada  Sel  kanker  Hela.  [Thesis].  Malang: Universitas Brawijaya.
Hadi,  Mohandis.  2009.  Efek  Ekstrak  Daun  Talok (Muntingia calabura L) terhadap Aktivitas Enzim SGPT  pada  Mencit  yang  Diinduksi  Karbon Tetraklorida.  [Skripsi].  Surakarta:  Universitas Sebelas Maret.
Hanani,  Endang.  2016.  Analisis  Fitokimia.  Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC.
Jayanudin, Ayu Z. L., Feni N. 2014. Pengaruh Suhu dan Rasio Pelarut Ekstraksi terhadap Rendemen dan  Viskositas  Natrium  Alginat  dari  Rumput Laut  Cokelat  (Sargassum  sp).  Jurnal  Integrasi Proses. 5 (1) : 51-55.
Kamaluddin, M. H., Musthofa L., dan Yusuf H. 2014. Analisa Pengaruh Microwave Assisted Extraction  (MAE)  terhadap  Ekstraksi  Senyawa Antioksidan  Catechin  pada  Daun  Teh  Hijau
(Camellia Sinensis) (Kajian Waktu  Ekstraksi  dan Rasio Bahan:Pelarut). Jurnal Keteknikan Pertanian Tropis dan Biosistem. 2 (2) : 147-155.
Kumalaningsih,  S.  2006.  Antioksidan  Alami. Surabaya: Trubus Agrisarana.
Kuntoroni,  E.  M.,  Setya  F.,  dan  Maria  D.  A.  2013.
Stuktur  Anatomi  dan  Uji  Aktivitas  Antioksidan Ekstrak  Metanol  Daun  Kersen  (Muntingia calabura). Prosiding Semirata FMIPA. Lampung: Universitas Lampung.
Lathif,  Y.  2016.  Pengaruh  Lama  Fermentasi  dan Variasi  Konsentrasi  Daun  Kersen  (Muntingia calabura  L.)  terhadap  Total  Asam,  pH  Medium dan  Aktivitas  Antioksidan  Kefir  Air  Teh  Daun Kersen  (Muntingia  calabura  L.).  [Skripsi]. Malang: Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim Malang.
Nurhasanah,  Nenden.  2012.  Isolasi  Senyawa Antioksidan  Ekstrak  Metanol  Daun  Kersen (Muntingia  calabura  Linn).  [Skripsi].  Cimahi: Universitas Jenderal Achmad Yani.
Pratimasari,  D.  2009.  Uji  Aktivitas  Penangkap
Radikal Buah Carica papaya L. Dengan Metode DPPH  dan  Penetapan  Kadar  Fenolik  serta Flavonoid Totalnya. [Skripsi]. Surakarta: Universitas Muhammadiyah Surakarta.
Puspitasari,  A.  D.  dan  Lean  S.  P.  2017.
Perbandingan  Metode  Ekstraksi  Maserasi  dan Sokletasi  terhadap  Kadar  Fenolik  Total  Ekstrak Daun Kersen (Muntingia calabura). Jurnal Ilmiah Cendekia Eksakta. 2 (1) : 1-19.
Ratnasari, M. 2017. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun  Kersen  (Muntingia  calabura  L.)  dalam Bentuk  Sediaan  Gel  terhadap  Staphylococcus aureus dan Escherichia coli. [Skripsi].
Yogyakarta: Universitas Atma Jaya Yogyakarta.
Sekarsari, S., I Wayan R. W., dan Anak A. G. N. A. J.
2019.  Pengaruh  Suhu  dan  Waktu  Ekstraksi dengan  Gelombang  Ultrasonik  terhadap Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Daun  Jambu  Biji (Psidium guajava L.). Jurnal Ilmu dan Teknologi Pangan. 8 (3) : 267-277.
Solekhah,  F.  2018.  Analisis  Harga  Pokok  Produksi dan  Harga  Pokok  Penjualan  Jagung  di Kecamatan  Sekampung  Udik  Kabupaten Lampung  Timur.  [Skripsi].  Bandar  Lampung: Universitas Lampung.
Sulaiman, A. Y., Pudji A., dan Shita D. P. S. 2017. Uji Antibakteri  Ekstrak  Daun  Kersen  (Muntingia calabura  L.).  Indonesian  Journal  for  Health Sciences. 1 (2) : 1-6.
Tamu,  F.  2017.  Formulasi  dan  Uji  Efektifitas Antioksidan  Krim  Ekstrak  Etanol  Daun  Kersen. [Skripsi]. Makassar: Universitas Negeri Alauddin Makassar.
Winarti, S. 2010. Makanan Fungsional. Yogyakarta:
Graha Ilmu. Wonorahardjo, S. 2013. Metode-Metode
Pemisahan Kimia. Jakarta: Akademia Permata.
Yasni,  S.  2013.  Teknologi  Pengolahan  dan Pemanfaatan Produk Ekstraktif Rempah. Bogor: IPB Press.
Yuliantari, N. W. A., I Wayan R. W., dan I Dewa G. M. P. 2017. Pengaruh Suhu dan Waktu Ekstraksi terhadap  Kandungan  Flavonoid  dan  Aktivitas Antioksidan  Daun  Sirsak  (Annona  muricata  L) Menggunakan Ultrasonik. Media Ilmiah Teknologi Pangan.  4 (1) : 35-42. Zahara,  M.  dan  Suryady.  2018.  Kajian  Morfologi dan  Review  Fitokimia  Tumbuhan  Kersen (Muntingia calabura L). Jurnal Ilmiah Pendidikan dan Pembelajaran. 5 (2) : 69-74.