## Pengaruh Pemberian Probiotik Terhadap Kandungan Protein Pada Pakan Komersial
Anshar Haryasakti 1 , Imanuddin 2 , dan Muhammad Hirwan Wahyudi 3
1,2,3 Sekolah Tinggi Pertanian Kutai Timur, Sangatta, Kutai Timur, Kalimantan Timur
1 Email: haryasaktia@yahoo.com

## ABSTRACT
This study aimed to determine the effect of probiotics  on nutrient content (protein) of commercial feed. The Research was conducted on June up to September 2017 for 3 months  at  the  Aquaculture  Laboratory  of  East  Kutai  Agricultural  College  and  at  the Fisheries  Technology  Laboratory  of  Fisheries  and  Marine  Sciences  Mulawarman University. The descriptive method was used in this research. The used samples were applied in 4 treatments, which were the treatments using 0 ml, 6 ml, 7 ml, and 8 ml Em4 in  each  kilogram  of  feed.  The  results  showed  that  the   7  ml  kg -1 dose  had  given  the highest value (10,14%), followed by 8 ml kg -1 of dose  (9,79%), 6 ml kg -1 (6.30% ) and the lowest was 0 ml kg -1 (6.11%),  respectively. Keywords: Aquaculture, Commercial feed, Fish feed dose, Probiotics, Protein.

## ABSTRAK
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  pengaruh  pemberian  probiotik  terhadap kandungan  nutrisi  (Protein)  pakan  komersial.  Penelitian  ini  dilaksanakan  pada  Juni sampai dengan September 2017 selama 3 bulan bertempat di Laboratorium Akuakultur Sekolah Tinggi Pertanian Kutai Timur dan di Laboratorium Teknologi Hasil Perikanan Fakultas  Perikanan  dan  Ilmu  Kelautan  Universitas  Mulawarman.  Metode  yang digunakan dalam penelitian ini adalah metode deskriptif. Sampel yang digunakan ada 4 perlakuan yaitu 0 ml, 6 ml, 7 ml, dan 8 ml dosis EM4 dalam setiap kilogram  pakan. Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  dosis  7  ml  kg -1 pakan  memberikan  nilai  yang tertinggi (10,14%), kemudian secara berturut-turut dosis 8 ml kg -1 pakan (9,79%), dosis 6 ml kg -1 pakan (6,30%) dan yang terendah adalah dosis 0 ml kg -1 pakan (6,11%). Kata  kunci: Budidaya  perikanan,  Probiotik,  Dosis  pakan  ikan,  Protein,  Pakan komersial.

## 1 Pendahuluan
Pakan salah satu faktor terpenting yang berpengaruh terhadap pertumbuhan dan kelangsungan hidup ikan yang akan dibudidaya. Pakan merupakan biaya terbesar dalam suatu  sistem  budidaya  mencapai  40-60%  dari  biaya  produksi  (Sahwan,  2004).  Pada budidaya  ikan  secara  intensif,  pakan  merupakan  komponen  biaya  produksi  yang  paling tinggi  yaitu  60%-70%  dari  biaya  operasional.  Hal  ini  disebabkan  karena  tingginya  harga bahan baku pakan yang sampai saat ini sebagian besar masih diimpor.
Salah  satu  cara  yang  dapat  ditempuh  untuk  meningkatkan  efisiensi  pakan  agar mudah  dicerna  adalah  dengan  penambahan  probiotik  dalam  pakan  buatan  (Haetami, 2008). Putra (2010) menyatakan bahwa dalam meningkatkan nutrisi pakan, bakteri yang terdapat dalam probiotik memiliki mekanisme dalam menghasilkan beberapa enzim untuk pencernaan  pakan  seperti  amylase,  protease,  lipase  dan  selulose.  Enzim  tersebut  yang akan membantu menghidrolisis pakan (molekul kompleks), seperti memecah karbohidrat,
ISSN 2549-7383 (online)
ISSN 2354-7251 (print)
protein dan lemak menjadi molekul yang lebih sederhana dengan mempermudah proses pencernaan dan penyerapan dalam saluran pencernaan ikan.
Effective  Microorganisme 4  (EM4)  mengandung  berbagai  mikroorganisme  yang bermanfaat,  yaitu Laktobacillus yang  bermanfaat  untuk  memfermentasi  bahan  organik menjadi  senyawa  asam  laktat,  bakteri  fotosintetik  yang  berfungsi  menyerap  gas-gas beracun  dan  panas  dari  proses  fermentasi,  ragi  ( yeast )  yang  mempunyai  peran  dalam memfermentasi  bahan  organik  menjadi  senyawa  alkohol,  gula  dan  asam  amino  dan Actinomycetes yang berfungsi untuk menghasilkan senyawa antibiotik yang bersifat toksik terhadap bakteri patogen dan mampu melarutkan ion-ion fosfat dan ion-ion mikro lainnya (Wididana, 1996). Jenis probiotik komersial yang dijual bebas di pasar umumnya dominan mengandung  bakteri Lactobacillus .  Bakteri  ini  merupakan  salah  satu  mikroorganisme dalam proses fermentasi, yang apabila terdapat dalam bahan makanan atau pakan, akan dapat meningkatkan kecernaan pakan dan pertumbuhan ikan membantu salah satu jenis probiotik  yang  tersedia  di  pasaran  adalah  EM4,  probiotik  ini  mengandung  bakteri Lactobacillus sp., Acetobacter sp., Streptomycetes sp., dan Yeast . Beberapa kandungan nutrisi  yang  dibutuhkan  ikan  yaitu  protein,  lemak  dan  karbohidrat,  untuk  menghemat pemberian  pakan  maka  dilakukan  penelitian  Pemberian  probiotik  terhadap  kandungan protein  pakan  dengan  bantuan  probiotik.Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui pengaruh  pemberian  probiotik  (EM4)  terhadap  kandungan  protein  pakan  komersil,  serta mengetahui dosis probiotik yang terbaik.

## 2 Metodologi Penelitian

## Waktu dan Tempat
Penelitian  ini  dilaksanakan  pada  tanggal  Juni  sampai  dengan 1  September  2017 selama  3  bulan  bertempat  di  Laboratorium  Budidaya  Perairan  Sekolah  Tinggi  Pertanian Kutai Timur, dan di Laboratorium Teknologi Hasil Perikanan Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Universitas Mulawarman, Samarinda.

## Rancangan Penelitian
Penelitian  ini  menggunakan  metode  deskriptif.  Parameter  yang  diuji  adalah perbedaan dosis probiotik komersial EM4 pada pakan. Dosis probiotik yang diberikan terdiri atas 4 perlakuan. Perlakuan yang diuji sebagai berikut :
1.  Perlakuan A = 0 ml EM4/kg pakan
2.  Perlakuan B = 6 ml EM4/kg pakan
3.  Perlakuan C = 7 ml EM4/kg pakan
4.  Perlakuan D = 8 ml EM4/kg pakan

## Alat dan Bahan
Alat yang digunakan untuk penelitian ini dapat dilihat pada tabel berikut :
Tabel 1. Alat yang Digunakan Untuk Penelitian No Nama Alat Jumlah Fungsi 1 Toples 4 buah Sebagai wadah pakan yang akan diteliti 2 Tissue - Untuk membersihkan alat 3 Kamera - Untuk dokumentasi 4 Spektrofometer Visible (Labu) 1 unit Untuk destruksi hasil protein 5 Tabung Reaksi 8 buah Untuk mereaksikan larutan 6 Tabung Kjehdahl 4 buah Tempat bahan yang akan diendapkan 7 Pemanas Kjehdahl 1 unit Digunakan untuk memanaskan suatu zat 8 Alat distilasi 1 unit Untuk keperluan destilasi 9 Buret 50 ml 1 buah Memberikan secara tetes demi tetes sejumlah volume larutan yang diketahui dengan teliti pada proses titrasi 10 Erlenmeyer 250 ml 4 buah Untuk menampung larutan yang akan dititrasi 11 Spatula 2 buah Untuk mengaduk larutan 12 Kertas timbang - Untuk menimbang zat padat 13 Batu didih 15 buah Untuk meratakan panas dan untuk menghindari titik lewat didih 14 Gelas ukur 25 ml 1 buah Sebagai tempat penimbangan zat dan tempat larutan 15 Pipet tetes 2 buah Digunakan untuk mengambil larutan 16 Corong gelas 1 buah Untuk menyaring suatu zat
Bahan yang digunakan untuk penelitian dapat dilihat pada tabel 2 berikut ini:
Tabel 2. Bahan yang Digunakan Untuk Penelitian No Nama Bahan 1 Probiotik 2 Pakan komersial 3 Aquades 4 Larutan H 2 SO 4 pekat 5 Garam Kjehdahl 6 Larutan Asam Borat 7 Larutan Protein Standar

## Prosedur Penelitian
Prosedur penelitian dilakukan dengan 2 tahapan yaitu tahap persiapan yang terdiri dari  proses  pembuatan  pakan  probiotik  dan  tahap  pelaksanaan  penelitian,  yang  terbagi menjadi  penelitian  pendahuluan  yaitu  pengujian  pakan  di  Laboratorium  Konsentrasi Budidaya Perairan, sebelum dikirim ke Laboratorium Teknologi Hasil Perikanan Fakultas Perikanan  dan  Ilmu  Kelautan  Universitas  Mulawarman  dan  penelitian  lanjutan.  Proses pemberian  probiotik  dilakukan  dengan  mencampurkan  probiotik  tersebut  pada  pakan komersial  dengan  cara  campurkan  probiotik  dan  pakan komersial  yang  telah  dihaluskan dan difermentasi selama 12 jam kemudian dikirimkan ke laboratorium.

## Penelitian Terdahulu
Penelitian pendahuluanyaitu pengujian pakan di Laboratorium Budidaya Perairan, Sekolah  Tinggi  Pertanian  Kutai  Timur,  sebelum  dikirim  ke  Laboratorium  Teknologi  Hasil
ISSN 2549-7383 (online)
ISSN 2354-7251 (print)
Perikanan  Fakultas  Perikanan  dan  Ilmu  Kelautan  Universitas  Mulawarman.  Penelitian pendahuluan ini dilakukan untuk mengetahui berapa lama waktu yang dibutuhkan dalam proses fermentasi sampai sampel pakan rusak dengan cara:
1.  Persiapan alat dan bahan yang digunakan seperti wadah berupa toples, pakan, gelas ukur dan aquades
2.  Pakan  yang  digunakan  dihaluskan  sebanyak  1  kg  kemudian  masukkan  ke  dalam wadah. Mencampurkan 100 ml aquades dengan 7 ml probiotik
4.  Campuran aquades dan probiotik dimasukkan kedalam wadah yang berisi pakan dan aduk sampai rata
5.  Menutup wadah rapat dan melakukan pengamatan terhadap kerusakan pakan (jamur akan tumbuh pada pakan)

## Persiapan Uji Pakan
Prosedur pembuatan pakan sampel/uji yakni :
1.  Pakan  uji  ditimbang,  wadah  fermentasi  pakan  uji  disiapkan  sebanyak  4  buah,  lalu dimasukkan ke dalam wadah toples masing-masing 1.000 gram
2.  Masing-masing  probiotik  yang  akan  digunakan  ditambahkan  ke  dalam  wadah  yang telah disiapkan, sesuaikan dengan perlakuan
3.  Tutup rapat toples dan dibiarkan selama 12 jam
4.  Bahan uji yang telah difermentasi kemudian dilakukan uji kandungan nutrisi (protein) di laboratorium

## Pengujian Kandungan Protein Dengan Metode Kjehdahl
Pengujian kandungan protein dengan metode Kjehdahl dilakukan dengan 3 tahap yakni :
1.  Destruksi
Sampel dan garam kjehdahl ditimbang lalu dimasukkan ke dalam labu destruksi. H 2 SO 4 pekat 20 ml dan batu didih  dimasukkan ke dalam labu destruksi dan merangkai alat destruksi.  Proses destruksi  dilakukan  sampai  warna  larutan  dalam  labu  biru  bening. Larutan didinginkan, lalu 100 ml aquades dicampurkan.
2.  Destilasi
NaOH  30%  dimasukkan  kedalam  alat  destilasi.  Labu  destruksi  dipasang  pada  alat destilasi.  Memasangkan  destilasi  yaitu  berupa  asam  borat  2%  100  ml  yang ditambahkan indikator campuran. Larutan NaOH 30% ditambahkan hingga volumenya mencapai ± 200 ml. Tutup aliran NaOH kemudian steam dinyalakan. Destilasi berjalan sampai destilat bervolume 200 ml. Steam dimatikan kemudian buka aliran keluar untuk mengeluarkan NaOH.

## 3.  Titrasi
Larutan HCl disiapkan dalam buret dan bakukan dengan larutan boraks. Titrasi destilat dengan menggunakan HCl. Titik akhir titrasi ditunjukkan dengan warna merah muda.

## 3 Hasil dan Pembahasan
Hasil pengujian kandungan protein pada pakan komersil yang diberikan perlakuan probiotik, dapat dilihat pada tabel 3 .
Tabel 3. Hasil Penelitian Pengaruh Pemberian Probiotik Terhadap Kandungan Nutrisi (protein)
Pada Pakan Komersial Perlakuan Dosis Probiotik Protein Total (%) A 0 ml EM4 kg -1 pakan 6,11 B 6 ml EM4 kg -1 pakan 6,30 C 7 ml EM4 kg -1 pakan 10,14 D 8 ml EM4 kg -1 pakan 9,79
Pada tabel 3 dapat dilihat bahwa pemberian probiotik terhadap kandungan nutrisi (protein)  pada  pakan komersial  dengan dosis  probiotik  0  ml  EM4  kg -1 pakan  kandungan protein  sebesar 6,11%,  dosis  probiotik  6  ml  EM4  kg -1 pakan  kandungan protein  sebesar 6,30% dan dosis probiotik 7 ml EM4 kg -1 pakan kandungan proteinnya 10,14% dan pada dosis probiotik 8 ml EM4 kg -1 pakan proteinnya adalah 9,79%.
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  peningkatan  kandungan  protein  tertinggi diperoleh pada perlakuan C, kemudian perlakuan D, perlakuan B dan yang terendah pada perlakuan  A.  Tingginya  peningkatan  protein  pada  perlakuan  C  disebabkan  adanya kandungan  bakteri  pada  probiotik  yang  mampu  mengurai  senyawa  komplek  menjadi sederhana,  hal  ini  sesuai  dengan  Wang et.al .,  (2008)  yang  menyatakan  bahwa  bakteri probiotik  menghasilkan  enzim  yang  mampu  mengurai  senyawa  kompleks  menjadi sederhana  sehingga  siap  digunakan.  Bakteri  yang  terdapat  dalam  probiotik  memiliki mekanisme  dalam  menghasilkan  beberapa  enzim  untuk  pencernaan  pakan  seperti amylase, protease, lipase dan selulosa dalam meningkatkan nutrisi pada pakan, hal yang sama  juga  dikemukakan  oleh  Arief et.al., (2008)  yang  menyatakan  bahwa  enzim pencernaan  akan  membantu  menghidrolisis  nutrien  pakan  (molekul  kompleks),  seperti memecah karbohidrat, protein dan lemak menjadi molekul yang lebih sederhana yang akan mempermudah pencernaan dan penyerapan dalam saluran pencernaan ikan.
Widyawati  (2015),  menyatakan  bahwa  bakteri Lactobacillus sp.  yang  merupakan bakteri asam laktat memiliki sistem proteolitik yang mampu menghidrolisis protein makanan menjadi  peptida  dan  asam  amino. Lactobacillus sp  memiliki  komponen  utama  yang berfungsi  sebagai  pemecah  protein  yaitu  enzim  serine  protease  (PrtP).Kenaikan  nilai protein diduga akibat dari proses fermentasi yang dilakukan pada pakan selama penelitian,
ISSN 2549-7383 (online)
ISSN 2354-7251 (print)
bakteri yang terkandung dalam probiotik mampu untuk menghidrolisis pakan, karena pada fermentasi  pakan  mampu  memotong  rantai  peptida  protein  dari  rantai  panjang  protein, bakteri  akan  memanfaatkan  protein,  sehingga  bakteri  akan  berkembang  di  pakan (substrat), pemanfaatan serat oleh bakteri selulolitik dan diubah menjadi protein.
Irianto  (2007),  menyatakan  bahwa  bakteri  pada  probiotik  mampu  mensekresikan enzim-enzim pencernaan seperti protease dan amilase sehingga mampu mengoptimalkan daya cerna pakan. Hal yang sama juga dikemukakan oleh Putra (2010), melaporkan bahwa penambahan  probiotik  dalam  pakan  telah  meningkatkan  jumlah  populasi  bakteri dibandingkan  dengan  perlakuan  lainnya,  sehingga  diduga  menyebabkan  aktivitas  enzim dalam pencernaan dan kecernaan pakan meningkat. Beberapa probiotik telah digunakan pada  kegiatan  akuakultur  dan  telah  berperan  dalam meningkatkan  pertumbuhan,  tingkat kelangsungan hidup, kecernaan, efisiensi pakan, sistem kekebalan tubuh dan komposisi bakteri yang menguntungkan (probiotik) dalam saluran pencernaan ikan. Selain itu, diduga penyebab lainnya pada perlakuan C (7 ml probiotik) bakteri probiotik mampu memberikan kinerja positif dalam menghasilkan enzim-enzim yang berfungsi sebagai pemecah nutrien menjadi  senyawa  yang  lebih  sederhana (protein)  sehingga mengoptimalkan  penyerapan nutrien  pakan  pada  saluran  pencernaan,  selanjutnya  bakteri  tersebut  didalam  saluran pencernaan  ikan  akan  mensekresikan  enzim-enzim  pencernaan  seperti  protease  dan amilase  (Irianto,  2003).  Lebih  lanjut,  bakteri  tersebut  dapat  mendominasi  di  saluran pencernaan ikan dan bakteribakteri patogen akan berkurang keberadaannya sehingga ikan akan memanfaatkan bakteri baik tersebut untuk tumbuh dan ikan menjadi sehat.
Enzim yang disekresikan ini jumlahnya meningkat juga sesuai dengan jumlah dosis probiotik  yang  diberikan  pada  pakan.  Peningkatan  daya  cerna  bermakna  pula  pada semakin tingginya nutrien yang tersedia untuk diserap tubuh, sehingga protein tubuh dan pertumbuhan  meningkat,  agar  pakan  dimanfaatkan  secara  optimal  maka  dibutuhkan aktivitas  bakteri  dalam  pencernaan  yang  masuk  melalui  pakan  yang  menyebabkan terjadinya  keseimbangan  jumlah  bakteri  dalam  usus  sehingga  dapat  menekan  bakteri patogen. Menurunnya tingkat efisiensi pakan pada dosis 8 ml/kg pakan diduga akibat terlalu tingginya populasi bakteri sehingga menimbulkan persaingan pertumbuhan bakteri Bacillus sp.  dalam  pengambilan  nutrisi  atau  subtrat  yang  pada  akhirnya  menghambat  aktivitas bakteri  di  dalam  saluran  pencernaan  ikan  sehingga  sekresi  enzim  pun  menurun (Gatesoupe, 1999).
Hasil penelitian yang diperoleh ini sama dengan yang didapatkan oleh Mansyur dan Tangko  (2008),  menyatakan  bahwa  penambahan  probiotik  pada  pakan  dapat meningkatkan  nilai  protein  dan  kadar  air  sedangkan  untuk  lemak,  abu  dan  serat  kasar menurun, tetapi dengan semakin tingginya dosis probiotik yang diberikan pada pakan nilai tersebut  menurun,  hal  yang  sama  juga  dilaporkan  oleh  Arief  (2008),  bahwa  pemberian
pakan dengan  penambahan  probiotik  mampu meningkatkan  kandungan  gizi  nilai  protein dan  menurunkan  serat  kasar  pada  pakan.  Kemampuan  probiotik  ini  menjadi  salah  satu penyebab  turunnya  nilai  protein  pada  pakan  seperti  yang  diperoleh  selama  penelitian dimana pakan yang diberi probiotik 8 ml/kg pakan nilai kandungan protein setelah proses fermentasi mengalami penurunan menjadi 9,79%.

## 4 Kesimpulan
Kesimpulan  dari  penelitian  ini  yaitu  pemberian  probiotik  pada  pakan  komersial berpengaruh  terhadap  kandungan  nutrisi  (protein)  tetapi  tingginya  dosis  probiotik  tidak menjamin  tingginya  kandungan  protein  dalam  pakan  komersial.  Dosis  probiotik  yang memberikan peningkatan nutrisi tinggi dari semua perlakuan yaitu 7 ml/kg pakan dengan peningkatan kandungan protein sebesar 10,14%.

## Daftar Pustaka
Arief,  M.,  Kusumaningsih,  E.,  &  Rahardja,  B.  S.  (2008).  Kandungan  Protein  Kasar  Dan Serat  Kasar  Pada  Pakan  Buatan  yang  Difermentasi  Dengan  Probiotik. Berkala Ilmiah Perikanan , 3(2), 1-3.
Gatesoupe, F. J. (1999). The Use Of Probiotics In Aquaculture. Aquaculture , 180 (1-2), 147- 165.
Haetami. (2008).  Studi  Pembuatan  Probiotikbas   ( Bacillus licheniformis , Aspergillus niger , dan Sacharomices  cereviceae )  Sebagai  Feed  Suplement  serta  Implikasinya Terhadap  Pertumbuhan  Ikan  Nila  Merah. Laporan Penelitian .  Fakultas  Perikanan dan Ilmu Kelautan. Universitas Padjajaran.
Irianto, A. (2003). Probiotik akuakultur. Yogyakarta: Gadjah Mada University Press.
Irianto,  A.  (2007).  Potensi  Mikroorganisma:  di  Atas  Langit  Ada  Langit. Ringkasan  Orasi Ilmiah . Fakultas Biologi Universitas Jenderal Sudirman.
Mansyur,  A.,  &  Tangko,  A.  M.  (2008).  Probiotik:  Pemanfaatannya  Untuk  Pakan  Ikan Berkualitas Rendah. Media Akuakultur , 3 (2), 145-149.
Putra,  A.  N.  (2010).  Kajian  probiotik,  prebiotik  dan  sinbiotik  untuk  meningkatkan  kinerja pertumbuhan ikan nila (Oreochromis niloticus). Bogor: Institut Pertanian Bogor .
Sahwan, M. F. (2002 ). Pakan Ikan dan Udang: Formulasi, Pembuatan, Analisis Ekonomi . Penebar Swadaya.
Wang,  Y.  B.,  &  Han,  J.  Z.  (2007).  The  Role  of  Probiotic  Cell  Wall  Hydrophobicity  In Bioremediation of Aquaculture. Aquaculture , 269 (1-4), 349-354.
Wididana,  G.  N.,  Riyatmo,  S.  K.,  &  Higa,  T.  (1996). Tanya  jawab  teknologi  effective microorganism . Jakarta: INKPS dan PT. Songgolangit Persada.
Widyawati. (2015). Pengaruh Pemberian Pakan Berprobiotik Pada Populasi Mikroba Dalam Air  dan  Kadar  Protein  dalam  Sedimen  yang  Ditetapkan  Berdasarkan  Hasil Pengembangan Metode comasier, serta Pengaruhnya Pada Pertumbuhan Lobster Air  Tawar  ( Cherax  quadricarinatus ). Skripsi .  Fakultas  Farmasi.  Yogyakarta: Universitas Sanata Dharma.