DOI: https://doi.org/10.24114/jbio.v7i3.28388

## JBIO: JURNAL BIOSAINS
(The Journal of Biosciences)
http://jurnal.unimed.ac.id/2012/index.php/biosains email : jbiosains@unimed.ac.id
FORMULASI DAN UJI AKTIVITAS ANTIKEJANG SEDIAAN KAPSUL EKSTRAK ETANOL DAUN TITANUS ( Leea aequanta L.) TERHADAP OTOT POLOS  TRAKEA MARMUT ( Cavia cobaya) SECARA IN VITRO
Dian Ika Perbina br Meliala, Sofia Rahmi , Delisma Simorangkir, Beriman Putra Harefa* Jurusan Farmasi, Progam Studi Farmasi, Fakultas Farmasi, Institut Kesehatan Deli Husada, Deli Tua *email korespondensi : be.putraharefa@gmail.com
Diterima:  Oktober 2021; Direvisi: November 2021; Disetujui: Desember 2021

## ABSTRAK
Kendala  utama  dalam  mengkonsumsi  obat  tradisional  adalah  proses  peracikan  yang  dianggap merepotkan sehingga seringkali menimbulkan ketidaknyamanan dalam mengkonsumsinya. Untuk tujuan efisiensi, mudah dan praktis dalam penggunaan, perlu dibuat dalam bentuk sediaan seperti kapsul. Kapsul adalah sediaan padat yang terdiri dari obat dalam cangkang keras atau lunak yang larut. Daun titanus ( Leea aequata L.) merupakan tanaman obat yang dimanfaatkan oleh masyarakat daerah Tanah Karo Provinsi Sumatera  Utara  sebagai  obat  antitetanus.  Tetanus  adalah  penyakit  akut  dan  seringkali  fatal  yang disebabkan oleh eksotoksin yang dihasilkan oleh bakteri Clostridium tetani . Tetanus sering diawali dengan kejang ringan pada otot rahang yang sering disebut dengan trismus. Terkadang kejang mempengaruhi otot- otot yang membantu pernapasan, yang dapat menyebabkan masalah pernapasan. Penelitian ini bertujuan untuk memformulasi kapsul EEDT dan menguji aktivitas antikejang pada otot polos trakea marmut secara in vitro . Efek relaksasi diuji setelah trakea marmut dikontraksi dengan asetilkolin (EC 80 = 1,0454 x 10 -3 M), kemudaian diberikan konsentrasi kumulatif kapsul EEDT 0,5-4 mg/mL dan konsentrasi atropin sulfat 6,95 x 10 -6 - 2,08 x 10 -2 mg/mL. Hasil uji efek relaksasi menunjukkan bahwa granul EEDT dapat menurunkan kontraksi otot polos trakea marmut yang diinduksi asetilkolin. Granul EEDT pada konsentrasi 3,5 mg/mL (102,8817 ± 0,1316) memiliki kemampuan yang sama dengan atropin sulfat 6,95 x 10 -3 mg/mL (102,7748 ± 0,3231) dalam menurunkan kontraksi otot polos trakea marmut yang diinduksi oleh asetilkolin 1,0454 x 10 -3 M (p>0,005). Kapsul EEDT dengan konsentrasi 3,5 mg dan 4 mg memiliki efektivitas yang sama, yaitu 102,8817  ±  0,1316.  Dari  penelitian  ini  dapat  disimpulkan  bahwa  sediaan  kapsul  EEDT  memiliki  efek relaksasi pada otot polos trakea marmut terisolasi dengan kemampuan yang tidak jauh berbeda dengan atropin sulfat.
Kata Kunci : Sediaan kapsul, EEDT, trakea marmut, relaksasi, in vitro .

## FORMULATION AND TESTING OF ANTICONVULSANT ACTIVITY OF TITANUS LEAVES
( Leea aequanta L.) ETHANOLIC EXTRACT CAPSULES ON GUINEA PIG (Cavia cobaya)

## TRACHEA SMOOTH MUSCLE IN VITRO

## ABSTRACT
The  main  obstacle  to  consuming  traditional  medicine  is  the  compounding  process  which  is considered troublesome so that it often causes discomfort to consume it. For the purpose of efficiency, easy and practical in use, need to be made in dosage forms such  as capsules. Capsules are solid preparations consisting of a drug in a soluble hard or soft shell. Titanus leaf (Leea aequata L.) is a medicinal plant that is used by the people of the Tanah Karo area, North Sumatra Province as an antitetanus drug. Tetanus is an acute and often fatal disease caused by an exotoxin produced by the bacterium Clostridium tetani. Tetanus often begins with a mild spasm of the jaw muscles which is often referred to as trismus. Sometimes the spasm affects the muscles that help with breathing, which can cause breathing problems. The aim of this study was to formulate EEDT capsules and to test its anticonvulsant activity on the smooth muscle of the guinea pig trachea in vitro. The relaxation effect was tested after the guinea pig's trachea was contracted with acetylcholine (EC 80 = 1,0454 x 10 -3 M), then the cumulative concentration of EEDT capsules was 0.5-4 mg/mL and atropine sulfate concentration of 6.95 x 10 -6 - 2.08 x 10 -2 mg/mL. The results of the relaxation
effect  test  showed  that  EEDT  granules  could  reduce  acetylcholine-induced  guinea  pig  trachea  smooth muscle contraction. EEDT granules at a concentration of 3.5 mg/mL (102,8817 ± 0,1316) had the same ability as atropine sulfate 6.95 x 10 -3 mg/mL (102,7748 ± 0,3231) in reducing guinea pig trachea smooth muscle  contraction  induced  by  acetylcholine  1,0454  x  10 -3 M  (p>0.005).  EEDT  capsules  with  a concentration of 3.5 mg and 4 mg had the same effectiveness, that is 102,8817 ± 0,1316. From this study, it can be concluded that the EEDT capsule preparation has a relaxing effect on the smooth  muscle of the isolated guinea pig trachea with an ability that is not much different from atropine sulfate.
Keywords: Capsule preparation, EEDT, guinea pig trachea, relaxation, in vitro.

## Pendahuluan
Indonesia  sangat  kaya  akan  pengetahuan mengenai pengobatan tradisional. Obat tradisional sangat sering digunakan karena tidak menyebabkab efek samping oleh karena masih bisa dicerna  tubuh.  Kendala  yang  sangat  sering dijumpai  dalam  mengkonsumsi  obat  tradisional adalah  proses  peracikannya  yang  rumit,  tidak mudah  dan  tidak  efisiensi  oleh  karena  itu  obat tradisional  perlu  diformulasikan  kedalam  bentuk tablet  atau  kapsul  agar  lebih  mudah  dikonsumsi (Suharmiati, 2006).
Kapsul  adalah  sediaan  padat  yang  terdiri dari  obat  dalam  cangkang  keras  ataupun  lunak yang  bisa  larut.  Keuntungan  dari  sediaan  kapsul antara lain : mampu menutupi rasa seta bau bahan obat  yang  tidak  enak,  lebih  mudah  untuk  ditelan, cukup stabil dalam penyimpanan, bisa diisi dengan bahan obat tunggal atau kombinasi dan bahan obat berbentuk  granula,  proses  pembuatan  sederhana, lebih cepat dan praktis karena tidak membutuhkan banyak  bahan  tambahan/eksipien  (Ditjen  POM, 1995).
Tetanus  merupakan  penyakit  akut  serta kerap parah yang diakibatkan oleh eksotoxin yang dihasilkan oleh bakteri Clostridium tetani . Tetanus kerap  diawali  dengan  kejang  ringan  pada  otot rahang yang kerap disebut sebagai trismus. Kejang bisa  juga  mempengaruhi  otot  wajah,  dada,  leher, punggung,  otot  perut,  serta  bokong.  Terkadang kejang  mempengaruhi  otot  yang  membantu respirasi,  yang  dapat  menyebabkan  masalah pernapasan (Atkitson, 2012).
Pemberian  obat  antikonvulsan  dapat mengobati  kejang  otot.  Obat  ini  biasanya digunakan  untuk    merelaksasi  otot  serta  dapat mengurangi kepekaan dari jaringan saraf terhadap rangsangan.  Obat  yang  tepat  dalam  penanganan tetanus haruslah obat yang bisa mengontrol kejang dan  mengurangi  spastisitas  tanpa  mengganggu pernapasan,  gerakan-gerakan  volunter  ataupun kesadaran (BPOM RI, 2012).
Daun titanus ( Leea aequata L.) merupakan tumbuhan  obat  yang  oleh  masyarakat  di  wilayah Tanah  Karo,  Provinsi  Sumatera  Utara  digunakan sebagai  obat  antitetanus  seta  untuk  menangani luka. Bersumber pada hasil skrining fitokimia yang dilakukan  oleh  Malinda  (2015),  tumbuhan Leea aequata L.  mengandung  beberapa  metabolit
sekunder  antara  lain  :  alkaloid,  glikosida, steroid/terpenoid,  flavonoid,  saponin  serta  tanin. Tidak hanya itu, ekstrak etanol daun titanus ( Leea aequata L.)  memiliki  efek  relaksasi  terhadap  otot polos ileum marmut terisolasi yang diinduksi oleh asetilkolin (Sinaga, 2018). Organ bath merupakan instrumen  yang  sering  digunakan  untuk  menilai kontraktilitas  otot  termasuk  otot  polos  secara in vitro .  Melalui  penggunaan  instrumen  ini  jaringan otot  polos  yang  hendak  dinilai  kontraktilitasnya diletakkan  di  dalam  ruangan  yang  berisi  cairan fisiologi yang diatur suhunya serta oksigenasenya sehingga jaringan otot polos tetap dapat bertahan (Khare, 2007).
Formulasi  dan  uji  aktivitas  farmakologi sediaan  kapsul  ekstrak  daun  titanus  dalam menurunkan  kontraksi  otot  polos  trakea  belum pernah  dibuat  dan  diuji  secara  ilmiah.  Adanya penggunaan  daun  titanus  secara  tradisional  untuk mengobati tetanus yang kemudian didukung dengan adanya penelitian sebelumnya tentang karakterisasi dan aktivitas relaksasi terhadap kontraksi otot polos ileum marmut terisolasi. Berdasarkan uraian diatas, maka  peneliti  tertarik  untuk  melakukan  formulasi dan  uji  aktivitas  antikejang  sediaan  kapsul  ekstrak etanol daun titanus terhadap trakea marmut terpisah secara in vitro menggunakan alat organ bath.

## Bahan dan Metode
Penelitian  ini  dilakukan  dengan  metode eksperimental laboratorium.

## Alat dan Bahan
Alat-alat  yang  digunakan  pada  penelitian adalah  neraca  analitik,  penjepit  tabung,  cawan porselen, desikator, rotary evaporator , mikroskop, kertas  saring,  oven,  pipet  tetes,  neraca  kasar, waterbath ,  ayakan  mesh  40,  batang  pengaduk, lemari  pengering,  lumpang  dan  alu,  kertas perkamen, alat pengisi kapsul, disintegration tester , flowmeter, jangka  sorong,  spatula,  spatel, stopwatch, timbangan  hewan,  satu  set  alat preparasi organ, Vortex, pengaduk, empat set organ bath volume 40,0 ml (ML0146/50, Panlab magnet, transduser  isometric ,  Komputer,  pipet  volume mikro, heating dan magnetic  stirrer ,  thermostat, PowerLab 15T, Quad Bridge Amplifier . Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian adalah daun titanus ( Leea aequata L.), bahan kimia yang digunakan adalah larutan kreb’s (terdiri dari
DOI: https://doi.org/10.24114/jbio.v7i3.28388
NaCl, KCl, MgCl₂, NaH₂PO₄, CaCl₂, NaHCO₃, dan D - Glukosa), gas karbogen mengandung 95% oksegen dan  5%  karbondioksida,  asetilkolin  klorida, atropine  sulfat,  dimetil  sulfoksida  (DMSO)  dan akuades,  etanol  70%,  laktosa, mg.  stearat,  talkum dan bahan- bahan berkualitas proanalisa : α -naftol, amil  alkohol,  HNO 3  (p) ,  C 4 H 6 O 3 ,  HCl (p) ,  H 2 SO 4  (p) , benzena, FeCl 3 , Bi(NO 3 ) 3 , etilasetat, I , isopropanol, KI,  kloroform,  metanol,  NaOH,  NaCl, n -heksan, HgCl 2 , serbuk  Mg, Pb(CH 3 COO) 2 dan toluen.

## Penyiapan Sampel
“ Sampel yang digunakan adalah daun titanus yang masih segar (tidak terlalu tua dan tidak terlalu muda), diambil dari Desa Sembahe, Kabupaten Deli Serdang,  Provinsi  Sumatera  Utara.  Pengumpulan sampel dilakukan secara purposif tanpa membandingkan  dengan  tumbuhan  yang  dari daerah lain.

## Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Titanus (EEDT)
Ditimbang  450  g  serbuk  simplisia  daun titanus  ( Leea  aequanta L.)  diekstraksi  secara maserasi dengan pelarut etanol 70% sebanyak 75 bagian  hingga  diperoleh  esktrak  cair.  Kemudian diuapkan  dengan  rotary  evaporator,  lalu  di  atas penangas  air  hingga  diperoleh  ekstrak  kental (Soediono, 2019).
Pembuatan  formula  Sediaan  Kapsul  Ekstrak  Etanol Daun Titanus (EEDT)
Formulasi  sediaan  kapsul  ekstrak  etanol dapat dilihat pada tabel 1.
Tabel 1. Formulasi sediaan kapsul EEDT persatuan kapsul
Bahan Formula F1 F2 F3 EEDT 2,5 mg 3,5 mg 4,5 mg Avicel 101 2% 2% 2% Aerosil 3% 3% 3% Talkum 2% 2% 2% Mg. Stearat 1% 1% 1% Avicel 102 ad 100 mg ad 100 mg
ad 100 mg

## Evaluasi Granul EEDT

## Laju Alir
Ditimbang  25  g  massa  kapsul    dan dimasukkan  ke  dalam  corong  dan  diratakan. Flowmeter dinyalakan dan waktu yang diperlukan seluruh  massa  untuk  mengalir  melalui  corong dicatat.  Laju  alir  dinyatakan  sebagai  banyaknya gram  serbuk  yang  melewati  celah  mesin  perdetik (Voight, 1989).

## Sudut Istrahat
Dimasukkan sejumlah  massa kapsul pada corong  hingga  penuh  kemudian  ratakan.  Massa yang  jatuh  akan  membentuk  kerucut  lalu  diukur tinggi  (h)  dan  jari-jari  kerucut  (r).  Kemudian d ihitung sudut istirahatnya (α) (Voight, 1989).
Bulk density dan tapped   density
Massa  kapsul  ditimbang  50  g  (m) dimasukkan ke dalam gelas ukur kemudian diukur volumenya  (V1).  Berat  jenis  (BJ)  awal  =  m/V1. Gelas  ukur  yang  berisi  massa  tablet  tersebut diletakkan  pada  alat bulk  density  tester .  Alat dipasang  pada  ketukan  sebanyak  300  kali. Percobaan  diulangi  dengan  300  ketukan  kedua untuk  memastikan  bahwa  volume  sampel  tidak mengalami  penurunan,  volumenya  diukur  (V2). Berat jenis (BJ) mampat = m/V2 (Voight, 1989).

## Evaluasi Sediaan Kapsul  EEDT

## Uji Keseragaman Bobot
Timbang saksama 10 kapsul, satu per satu, beri identitas tiap kapsul, keluarkan isi tiap kapsul dengan cara  yang  sesuai.  Timbang  saksama  tiap  cangkang kapsul  kosong  dan  hitung  bobot  netto  dari  isi  tiap kapsul  dengan  cara  mengurangkan  bobot  cangkang kapsul  dari  masing-masing  bobot  kapsul.  Dari  hasil penetapan kadar, seperti tertera pada masing-masing monografi, hitung jumlah zat aktif dalam tiap kapsul, dengan anggapan bahwa zat aktif terdistribusi secara homogen (Depkes RI, 1995).

## Uji Waktu Hancur
Sejumlah 6 kapsul, dimasukkan pada masing- masing  tabung  pada  keranjang,  yang  dibawahnya terdapat  kasa  baja  berukuran  10  mesh.  Digunakan media air bersuhu 37 ± 2ºC. Dilakukan pengamatan terhadap kapsul, semua kapsul harus hancur, kecuali bagian dari cangkang kapsul. Bila 1 atau 2 kapsul tidak hancur  sempurna,  pengujian  diulangi  dengan  12 kapsul lainnya, tidak kurang dari 16 dari 18 kapsul yang  diuji  hancur  sempurna.  Dicatat  waktu  yang diperlukan kapsul untuk hancur sempurna (Depkes RI, 1995).

## Uji Higroskopisitas
Merupakan  cara  menguji  kemampuan  bahan obat  untuk  menyerap  uap  dari  udara  setelah dibiarkan  dalam  kondisi  tertentu  selama  beberapa waktu yang diamati. Sejumlah 3 kapsul ditempatkan pada botol coklat disimpan dalam desikator. Masing- masing  perlakuan  diamati  setiap  hari  selama  tujuh hari dan setiap minggu selama sebulan. Pengamatan dilakukan terhadap perubahan bobot kapsul, bentuk kapsul dan isi kapsul (Augsburger, 2000).

## Tahapan Pengujian

## Preparasi Organ
Organ  yang  digunakan  adalah  trakea  terpisah marmut. Marmut  dikorbankan dengan  cara  dislokasi tulang  belakang  kepala  ( cervix) .  Trakea  diambil kemudian  dibersihkan  dari  lemak  dan  jaringan  lain. Saat  jaringan  sudah  rileks,  dipotong  trakea  dengan arah  melintang  untuk  mengambil  8-9  cincin  trakea dengan  pinset,  kedua  ujung  potongan  cincin  trakea
DOI: https://doi.org/10.24114/jbio.v7i3.28388
diikat dengan benang pada masing-masing arah yang berlawanan.  Benang  bagian  bawah  trakea  diikatkan pada batang penahan jaringan dan benang bagian atas trakea  dihubungkan  ke  transduser.  Kemudian dimasukkan kedalam organ bath yang diisi dengan 40 mL  larutan  Kreb’s,  dengan  suhu  larutan  37ºC  dan diaerasi  dengan  karbogen  secara  terus  menerus. Jaringan yang telah terisolasi diekuilibrasi selama 45 menit sampai diperoleh kondisi stabil (Vogel, 2002).
Pengujian  kontraksi  seri  konsentrasi  asetilkolin terhadap otot polos  trakea marmut Pengujian  terhadap  agonis  muskarinik dilakukan untuk mengukur batas maksimum yang dapat  ditunjukkan  terhadap  kontraksi  otot  polos trakea  marmut.  Pengukuran  dilakukan  secara bertingkat dengan pemberian kumulatif asetilkolin sehingga  diperoleh  konsentrasi  di  dalam  organ bath 10 -8 sampai 3 x 10 -3 M.
Tabel  2. Pemberian  asetilkolin  secara  kumulatif pada organ bath 40 mL
Konsentrasi Larutan baku asetilkolin (M) Volume yang ditambahkan kedalam organ bath (μL) Konsentrasi Asetilkolin klorida kedalam organ bath (M) 2 x 10 -6 200 1 x 10 -8 2 x 10 -6 400 3 x 10 -8 2 x 10 -5 140 1 x 10 -7 2 x 10 -5 400 3 x 10 -7 2 x 10 -4 140 1 x 10 -6 2 x 10 -4 400 3 x 10 -6 2 x 10 -3 140 1 x 10 -5 2 x 10 -3 400 3 x 10 -5 2 x 10 -2 140 1 x 10 -4 2 x 10 -2 400 3 x 10 -4 2 x 10 -1 140 1 x 10 -3 2 x 10 -1 400 3 x 10 -3
Pengujian  efek  relaksasi  granul  ekstrak  etanol  daun titanus (EEDT) pada otot polos trakea marmut melalui induksi asetilkolin
Pengujian aktivitas granul ekstrak etanol daun titanus  terhadap  peningkatan  kontraksi  trakea marmut  yang  diinduksi  asetilkolin  klorida  dilakukan dengan  penambahan  granul  ekstrak  etanol  daun titanus kedalam organ bath.
Tabel 3. Pemberian konsentrasi granul EEDT secara kumulatif pada organ bath 40 mL
Konsentrasi Larutan stok granul EEDT (mg/ml) Volume yang ditambahkan kedalam organ bath (mL) Konsentrasi EEDT dalam organ bath (mg/mL) 8 2,5 0,5 8 2,5 1 8 2,5 1,5 8 2,5 2 8 2,5 2,5 8 2,5 3 8 2,5 3,5 8 2,5 4
Pengujian efek relaksasi atropin sulfat pada kontraksi otot polos  trakea marmut melalui induksi asetilkolin Pengujian atropine sulfat terhadap relaksasi trakea  marmut  yang  diinduksi  asetilkolin  klorida dilakukan dengan pemberian konsentrasi bertingkat atropine sulfat kedalam organ bath .
Tabel  4. Pemberian  konsentrasi  atropin  sulfat secara kumulatif pada organ bath volume 40 mL
Konsentrasi Larutan baku atropine sulfat (mg/mL) Volume yang ditambahkan kedalam organ bath (μL) Konsentrasi atropine sulfat dalam organ bath (mg/mL) 0,00139 200 6,95 x 10 -6 0,00139 400 2,08 x 10 -5 0,0139 140 6,95 x 10 -5 0,0139 400 2,08 x 10 -4 0,1389 140 6,95 x 10 -4 0,1389 400 2,08 x 10 -3 1,3896 140 6,95 x 10 -3 1,3896 400 2,08 x 10 -2

## Hasil  dan Pembahasan
Hasil Karakterisasi Simplisia Hasil  Karakterisasi  simplisia  daun  titanus dapat dilihat pada tabel 5.
Tabel  5. Hasil  pemeriksaan  karakteristik  simplisia daun titanus
Sampel Parameter Hasil Simplisia daun titanus Kadar sari larut air 4,5261% Kadar sari larut etanol 20,2616% Kadar air 8,37% Kadar abu tidak larut asam 0,64% Kadar abu total 2,875%

## Hasil Skrining Fitokimia
Tabel  6. Hasil  skrining  fitokimia  simplisia  daun titanus
Senyawa Hasil pemeriksaan berdasarkan serbuk simplisia daun titanus Alkaloid + Tanin + Flavonoid + Steroid + Saponin +
Berdasarkan  data  diatas  diperoleh  simplisia mengandung  alkaloid,  tanin,  flavonoid,  steroid,  dan saponin
Hasil Formulasi Sediaan Kapsul EEDT Kadar air Tiap Fomulasi Tabel 7. Hasil pengukuran kadar air tiap formulasi
Formula Kadar Air (%) F1 2,28 F2 2,26 F3 2,24
DOI: https://doi.org/10.24114/jbio.v7i3.28388
Hasil  menunjukan  bahwa  masing-masing formula memenuhi persyaratan kadar air granul yaitu sebesar 2-5% (Williams dan Allen, 2007).
Hasil Evaluasi Granul EEDT Hasil Uji Laju Alir Tabel 8. Hasil uji laju alir granul EEDT Formula Laju alir (gram/detik) Rata-rata (gram/detik) F1 4,0916
5,1232 5,5704
5,7077 F2 5,1975
5,3835 5,2192
5,7339
F3 5,5066 5,2808 5,2854 5,0505
Dari  ketiga  formula,  setelah  diukur  dengan alat flowmeter memiliki  laju  alir  yang  hampir  sama. Laju  alir ketiga  formula  masuk  dalam  kategori   baik (4-10g/detik) (Aulton,1988).

## Hasil Uji Sudut Istrahat
Tabel 9. Hasil uji sudut istrahat granul EEDT F  Tinggi (h) (cm) Jari-jari (r) (cm) tan α= h/r α ( o ) F1 1,9 4,5
0,4220  22,89 24,09 2,0 4,4 0,4545  24,44 2,0 4,3 0,4651  24,94 F2 2,0 4,5 0,4444  23,96 24,80 2,1 4,5 0,4660  25,01 2,0 4,4 0,4545  24,44 F3 2,1 4,4 0,4777  25,51 25,15 2,1 4,45 0,4719  25,26 2,1 4,5 0,4827  25,76 Berdasarkan data diatas bahwa semua formula menunjukkan  hasil  sudut  istirahat  pada  kategori istimewa.
Hasil Uji Indeks Kompresibilitas Tabel  10. Hasil  uji  indeks  kompresibilitas  granul EEDT
F BJ awal (g/mL) BJ mampat (g/mL) Indeks Kompresibilitas(%) F1 0,4636 0,5263 13,5245 13,3593 0,4656 0,5271 13,2087 0,4646 0,5266 13,3448 F2 0,4718 0,5293 12,1873 12,1520 0,4687 0,5255 12,1186 0,4716 0,5289 12,1501 F3 0,4781 0,5316 11,1901 11,5636 0,4762 0,5320 11,7177
Berdasarkan  data  diatas  bahwa  F1,F2  dan  F3 memiliki indeks kompresibilitas dalam kategori baik.

## Hasil Evaluasi Sediaan Kapsul EEDT
Hasil Uji Keseragaman Bobot Berdasarkan penimbangan kapsul pada ketiga formula  untuk  uji  keseragaman  bobot  menunjukkan tidak  ada  yang  menyimpang  lebih  dari  persyaratan. Bobot  dari  tiap  kapsul  dari  ketiga  formula  tidak menyimpang  dari  persyaratan  penyimpangan terhadap  bobot  rata-rata.  Dimana  A  tidak  lebih  dari 10% dan B tidak lebih dari 20%. Deviasi tertinggi dari F1,  F2,    dan  F3  berturut-turut  adalah  0,6132%, 0,7184%, dan 0,3110%.

## Uji Waktu hancur
Tabel 11. Hasil Uji Waktu hancur Kapsul EEDT No. F1 F2 F3 1 2’ 5’’ 2’ 4’’ 2’ 12’’ 2 2’ 4’’ 2’ 2’’ 2’ 14’’ 3 2’ 8’’ 2’ 12’’ 2’ 6’’ 4 2’ 6’’ 2’ 8’’ 2’ 8’’ 5 2’ 12’’ 2’ 10’’ 2’ 24’’ 6 2’ 6’’ 2’ 6’’ 2’ 36’’
Uji waktu hancur untuk ketiga formula kapsul menunjukkan waktu hancur rata-rata ± 2 menit yang berarti memenuhi syarat karena dibawa 15 menit.

## Uji Higroskopisitas
Hasil  uji  higroskopis  sediaan  kapsul  EEDT dapat dilihat pada tabel 12 dan tabel 13. Tabel 12. Hasil uji higroskopis sediaan kapsul EEDT minggu pertama F Bobot hari ke- (mg) Rerata 1 2 3 4 5 6 7
F1  103,4  103,4  103,4  103,4  103,4  103,4 103,4  103,4 103,4  103,4  103,4  103,4  103,4  103,4 103,4
103,4  103,4  103,4  103,4  103,4  103,4 103,4
F2  103,2  103,2  103,2  103,2  103,2  103,2 103,2  103,2 103,2  103,2  103,2  103,2  103,2  103,2 103,2 103,2  103,2  103,2  103,2  103,2  103,2 103,2 F3  103,3  103,3  103,3  103,3  103,3  103,3 103,3  103,3 103,3  103,3  103,3  103,3  103,3  103,3 103,3 103,3  103,3  103,3  103,3  103,3  103,3 103,3
Tabel  13. Hasil  uji  higroskopis  sediaan  kapsul EEDT minggu kedua ke keenam F Bobot minggu ke- (mg) Rerata 2 3 4 5 6 F1  103,4 103,4 103,4 103,4 103,4 103,4 103,4 103,4 103,4 103,4 103,4 103,4 103,4 103,4 103,4 103,4 F2  103,2 103,2 103,2 103,2 103,2 103,2 103,2 103,2 103,2 103,2 103,2 103,2 103,2 103,2 103,2 103,2 F3  103,3 103,3 103,3 103,3 103,3 103,3 103,3 103,3 103,3 103,3 103,3 103,3 103,3 103,3 103,3 103,3
Berdasarkan  hasil  pengamatan  setiap  harinya selama  satu  minggu  bobot  F1,  F2  dan  F3  tidak menunjukkan  adanya  perubahan.  Berdasarkan  hasil uji higroskopis selama 6 minggu menunjukkan sediaan kapsul  ekstrak  etanol  daun  titanus    F1,  F2  dan  F3 menujukan hasil yang relatif stabil.
DOI: https://doi.org/10.24114/jbio.v7i3.28388
0,0000 20,0000 40,0000 60,0000 80,0000 100,0000 120,0000 1 x 10- 8 3 x 10- 8 1 x 10- 7 3 x 10- 7 1 x 10- 6 3 x 10- 6 1 x 10- 5 3 x 10- 5 1 x 10- 4 3 x 10- 4 1 x 10- 3 3 x 10- 3 % Kon tr aksi Tr ake a M ar m u t Konsentrasi Ach dalam Organ bath % Kontraksi Trakea Marmut 0,0000 20,0000 40,0000 60,0000 80,0000 100,0000 120,0000 0,5 mg/mL 1,0 mg/mL 1,5 mg/mL 2,0 mg/mL 2,5 mg/mL 3,0 mg/mL 3,5 mg/mL 4,0 mg/mL % R e laksasi Tr ake a M ar m u t Konsentrasi Granul EEDT % Relaksasi Trakea Marmut
Hasil  Pengujian  Kontraksi  Seri  Konsentrasi  Asetilkolin Klorida Terhadap Otot Polos Trakea Marmut Pengujian kontraksi otot polos trakea terisolasi dengan penambahan konsentrasi bertingkat asetilkolin (10 -8 M sampai 3x10 -3 M) dilakukan untuk mendapatkan effective concentration (EC 80 ) asetilkolin yang selanjutnya akan digunakan untuk pengujian efek relaksasi  granul  EEDT.  Hasil  pengujian  ini  diamati melalui  perubahan  %  respons  kontraksi  otot  polos trakea  terisolasi  terhadap  peningkatan  konsentrasi
asetilkolin  (10 -8 M  sampai  3  x  10 -3 M).  Setelah dilakukan  penghitungan effective  concentration 80% maka diperoleh bahwa dengan pemberian 209,08 μL larutan asetilkolin  klorida 2 x 10 -1 M akan  diperoleh konsentrasi sub maksimum asetikolin klorida 1,0454  x 10 -3 M dalam organ bath . Sehingga dengan pemberian asetilkolin  klorida  2  x  10 -1 M  maka  sudah  membuat trakea  marmut  terisolasi  mengalami  peningkatan kontraksi.  Dapat dilihat di gambar 1 .
Gambar  1. Grafik  %  kontraksi  otot  polos  trakea  terisolasi  yang  dikontraksi  dengan  seri  konsentrasi asetilkolin 10 -8 M sampai 3 x 10 -3 M. Data yang disajikan adalah nilai rata-rata ± SEM, n = 5
Hasil  Pengujian  Efek  Relaksasi  Granul  Ekstrak  Etanol Daun Titanus (EEDT) pada Kontraksi Otot Polos Trakea Marmut Melalui Induksi Asetilkolin Klorida Pengujian efek relaksasi granul ekstrak etanol daun  Titanus  (EEDT)  terhadap  otot  polos  trakea terisolasi  dilakukan  dengan  cara  mengontraksi  otot
polos  trakea  dengan  asetilkolin  1,39  x  10 -3 M  lalu dilanjutkan dengan pemberian seri konsentrasi granul EEDT 0,5 – 4 mg/mL secara kumulatif (Soares, 2012). Hasil pengujian efek relaksasi granul EEDT terhadap otot polos trakea dapat dilihat pada gambar 2 .
Gambar 2. Grafik % relaksasi setelah pemberian seri konsentrasi granul EEDT pada otot polos trakea terisolasi yang dikontraksi dengan asetilkolin 1,0454 x 10 -3 M (rata-rata ± SEM, n = 5)
DOI: https://doi.org/10.24114/jbio.v7i3.28388
0,0000 20,0000 40,0000 60,0000 80,0000 100,0000 120,0000 6,95 x 10-6 2,08 x 10-5 6,95 x 10-5 2,08 x 10-4 6,95 x 10-4 2,08 x 10-3 6,95 x 10-3 2,08 x
10-2
% R e laksasi Tr ake a M ar m u t Konsentrasi Atropin Sulfat % Relaksasi Trakea Marmut
0,0000 20,0000 40,0000 60,0000 80,0000 100,0000 120,0000 1 2 3 4 5 6 7 8 % R e laksasi Tr ake a M ar m u t Konsentrasi (mg/mL) Granul EEDT Atropin Sulfat
Hasil  Pengujian  Efek  Relaksasi  Atropin  Sulfat  pada Kontraksi  Otot  Polos  Trakea  Marmut  Melalui  Induksi Asetilkolin Klorida
Pengujian efek relaksasi atropin sulfat terhadap otot  polos  trakea  terisolasi  dilakukan  dengan  cara mengkontraksi  otot  polos  trakea  dengan  asetilkolin 1,0454  x  10 3 M,  dilanjutkan  dengan  pemberian  seri
konsentrasi  atropin  sulfat  6,95  x  10 6 – 2,08  x  10 -2 mg/mL.  Pemberian  seri  konsentrasi  atropine  sulfat menghasilkan efek relaksasi terhadap kontraksi yang diinduksi  oleh  asetilkolin  1,0454  x  10 -3 M.  Hasil pengujian efek relaksasi atropine sulfat pada kontraksi otot polos  trakea  marmot  melalui  induksi asetilkolin klorida dapat dilihat pada gambar 3 .
Gambar 3. Grafik % relaksasi setelah pemberian seri konsentrasi atropine sulfat pada otot polos trakea terisolasi yang dikontraksi dengan asetilkolin 1,0454 x 10 -3 M. Data yang disajikan adalah nilai rata-rata ± SEM, n = 5
Hasil Perbandingan % Relaksasi Atropin Sulfat dan Granul EEDT pada Kontraksi Otot Polos Trakea Marmut Melalui Induksi Asetilkolin Klorida
Pengujian  efek  relaksasi  atropin  sulfat  terhadap  otot  polos  trakea  terisolasi  dilakukan  dengan  cara mengkontraksi  otot  polos  trakea  dengan  asetilkolin  1,0454  x  10 -3 M,  dilanjutkan  dengan  pemberian  seri konsentrasi atropin sulfat 6,95 x 10 -6 – 2,08 x 10 -2 mg/mL. Efek relaksasi atropin sulfat diamati melalui pengamatan terhadap  perubahan  %  efek  relaksasi  ekstrak  pada  organ  trakea.  Pemberian  seri  konsentrasi  atropin  sulfat menghasilkan efek relaksasi terhadap kontraksi yang diinduksi oleh asetilkolin 1,0454 x 10 -3 M. Persentase efek relaksasi atropin sulfat pada otot polos trakea meningkat sejalan dengan peningkatan konsentrasi. EEDT juga memiliki pola efek relaksasi yang sama dengan atropin sulfat. Hasil perbandingan % relaksasi dari granul EEDT dan atropin sulfat dapat dilihat pada gambar 4 .
Gambar 4. Grafik % relaksasi setelah pemberian seri konsentrasi atropin sulfat (1 = 6.95 x 10 -6 ; 2 = 2.08 x 10 -5 ; 3 = 6.95 x 10 -5 ; 4 = 2.08 x 10 -4 ; 5 = 6.95x10 -4 ; 6 = 2.08x10 -3 ; 7 = 6.95 x 10 -3 ; 8 = 2.08 x 10 2 mg/mL) dan ekstrak etanol daun Titanus (EEDT) (1 = 0,5; 2 = 1; 3 = 1,5; 4 = 2; 5 = 2,5; 6 = 3; 7 = 3,5; 8 = 4 mg/mL) pada otot polos trakea terisolasi yang dikontraksi dengan asetilkolin 1,0454 x 10 -4 M. Data yang disajikan adalah nilai rata-rata ± SEM, n = 5.
DOI: https://doi.org/10.24114/jbio.v7i3.28388
0,0000 20,0000 40,0000 60,0000 80,0000 100,0000 120,0000 7 % R el aksa si Tr akea M ar m u t Konsentrasi (mg/mL) Granul EEDT 3,5 mg/mL Atropin Sulfat 6,95 x 10-3
Perbandingan efek relaksasi antara atropin sulfat  pada  konsentrasi  6.95  x  10 -3 mg/mL (102,7748  ±  0,3231)  dengan  granul  EEDT  pada pemberian  konsentrasi  3,5  mg/mL  (102,8817  ± 0,1316) terhadap kontraksi trakea yang diinduksi dengan asetilkolin menunjukkan bahwa perbedaan persentase  relaksasi  antara  keduanya  tidak
berbeda signifikan (p > 0,05). Dapat diindikasikan bahwa  granul  EEDT  konsentrasi  3,5  mg/mL memiliki  kemampuan  yang  tidak  jauh  berbeda dengan  atropin  sulfat  konsentrasi  6.95  x  10 -3 mg/ml  dalam  menurunkan  kontraksi  yang diinduksi  dengan  asetilkolin  1,0454  x  10 -3 M. Perbandingan ini dapat dilihat pada gambar 5 .
Gambar 5. Nilai % relaksasi pemberian ekstrak etanol daun Titanus konsentrasi 3,5 mg/ml dan atropin sulfat 6,95  x  10 -3 mg/ml setelah  dikontraksi  dengan asetilkolin 1,0454 x 10-3 M.  Data yang  disajikan adalah nilai rata-rata ± SEM, n = 5
Kesimpulan Dari  hasil  penelitian  yang  telah  dilakukan dapat disimpulkan bahwa :
a. EEDT  dalam  sediaan  kapsul  memiliki  efek relaksasi terhadap kontraksi otot polos trakea marmut  terisolasi  secara in  vitro yang diinduksi dengan asetilkolin.
b. EEDT dalam sediaan kapsul pada konsentrasi 3,5  mg/mL  kemampuan  yang  tidak  jauh berbeda  dengan  atropin    sulfat  6,95  x  10 -3
mg/mL  dalam  menurunkan  kontraksi  otot polos  trakea  marmut  secara in  vitro yang diinduksi     oleh     asetilkolin     klorida 1,0454 x 10 -3 M (p > 0,05).
c. Dosis EEDT dalam sediaan kapsul yang paling efektif merelaksasi kontraksi otot polos trakea marmut secara in vitro yang diinduksi dengan asetilkolin  ialah  3,5  mg  dan  4  mg  yang memiliki  kemampuan  yang  sama  dalam
menurunkan  kontraksi  otot  polos  trakea marmut secara in vitro
Daftar Pustaka Atkinson,  W.  (2012). Tetanus  Epidemiology  and Prevention  of  Vaccine-Preventable  Diseases (12 ed.) . Public Health Foundation. Hal. 291 – 300.
Augsburger, L.L. (2000). Modern Pharmaceutics: Hard and soft Gelatin Capsule .  (Ed. 2). New York: Mercel Dekker. Halaman 212. Aulton M.E., (1988). Pharmaceutics: The Science of Dosage  Form  Design .  New  York  :  Health Science Book BPOM  RI.  (2012). Atropin  Sulfat .  Jakarta:  Sentra Informasi  Keracunan  Nasional  (Sikernas). Hal 95.
Ditjen  POM.  (1995). Farmakope  Indonesia. Edisi keempat.  Jakarta:  Departemen  Kesehatan RI. Halaman 5, 1035.
DOI: https://doi.org/10.24114/jbio.v7i3.28388
Khare, C.P. (2007). Indian Medicinal Plants. New Delhi: Springer Science Business Media, LCC. Hal. 366.
Malinda,  I.  (2015).  Skrining  Fitokimia  dan  Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Titanus  ( Leea  aequata L.)  Pengobatan Tradisional  Karo.  Medan:  Universitas Sumatra Utara. 8-10.
Sinaga,  E.  (2018).  Uji  Aktivitas  Antikejang  Ekstrak Etanol  Daun  Titanus  (Leea  Aequata  L.) Terhadap  Ileum  Marmut  Terpisah  (Cavia Porcellus)  Secara  In  Vitro. TM  Conference Series 01, 1 , 320-330.
Soediono, J. B., dkk. (2019). Uji Skrining Fitokimia dan Evaluasi Sediaan Salep Ekstrak Etanol Daun
Kemangi  (Ocimum  sanctum  (L.))  Dengan Menggunakan Basis Salep Hidrokarbon dan Basis Salep Serap. Jurnal Polanku . Volume 1. Nomor 1. ISSN: 2656-7733. Halaman 26-27. Suharmiati, Handayani, L. (2006). Cara Benar Meracik Obat Tradisional. Cetakan Pertama. Jakarta : Agromedia Pustaka. Halaman 1. Vogel, H.G., Bernward, A.S., Jurgen, S., Gunter, M., dan Wolfgang,  F.V.  (2002). Drug  Discovery  and Evaluation: Pharmacological Assays, Spinger-Verlag, Berlin Heidelberg, Germany.
Hal. 98. Voight, R. (1995). Buku  Pelajaran  Teknologi Farmasi. Cetakam II. Penerjemah: Soedani N. S. UGM- Press. Yogyakarta. Halaman 159.