## FORMULASI EDIBLE  FILM ANTIBAKTERI  EKSTRAK  DAUN  CENGKEH (S yzygium  aromaticum L.)  DENGAN  VARIASI  KONSENTRASI  SORBITOL SEBAGAI PLASTICIZER
Formulation  of  Antibacterial  Edible  film  Clove  Leaf  Extract  (Syzygium  aromaticum  l.)  with  variation sorbitol concentration as a plasticizer
Penulis / Author (s) Nur Ida 1
1,3 Universitas Islam Makassar, Makassar Rusli 2
2 Universitas Muslim Indonesia, Makassar
Sriyanti 1
Koresponden : Nur Ida
e-mail korespondensi: idasaid78@gmail.com Accepted:15 Desember 2023
DOI: https://doi.org/10.32382/mf.v20i1.185
ARTICLE INFO ABSTRACT / ABSTRAK Keywords: Edible film is a practical dosage form that can be developed as a carrier  for  anti-bacterial  medicinal  ingredients.  The  clove  plant (Syzygium aromaticum L.) contains antibacterial compounds so it can  be  developed  into  an  antiseptic  edible  film  preparation. Differences in additional ingredients in edible film preparation can impact the physical attributes of the product. This research aims to assess  the  impact  of  sorbitol  plasticizer  concentration  in  the formulation  of  edible  film  preparation  of  Clove  leaf  extract (Syzigium aromaticum). The study also evaluates its antibacterial activity  against  porphyromonas  gingivalis.  The  research methodology encompasses macerated extraction using 70% ethanol extract,  minumum  Inhibitory  Concentration  (MIC)  testing, formulation of edible films with a 2,5%, concentration of clove leaf extract, and sequential variations in sorbitol concentration of as a plasticizer ( 0% - FI, 0,7% - F2, 1,4% - F3, 2,8% - F4), physical quality  test  include  organoleptic  tests,  thickness  tests,  brittleness tests, and pH tests, followed by an antibacterial test of the prepared film.  Results from the physical quality assesment for all formulas indicate  that  the  organoleptic  characteristis  of  edible  film  had  a brown color, a characteristic odor, a soft texture, and a sweet taste, the thickness ranged form 0,10-0,11 mm, the friability ranged form 0,6-0,7% and the pH is 5,5. Antibacterial activity test results show inhibition  zones  ranging  from  7,55±0,60-7,71±0,24  mm.  The study’s  conclusion  reveals  that  variations  in  sorbitol  plasticizer concentration  of  do  not  adversely  affect  the  physical  quality  of edible  film  and  it  exhibits  antibacterial  activity  against
Antibacterial
Edible films Porphyromonas gingivalis Syzygium aromaticum L Kata Kunci Antibakteri Edible films Porphyromonas gingivalis Syzygium aromaticum L

## Media Farmasi
https://ojs3.poltekkes-mks.ac.id/index.php/medfar/

## Open access article
Porphyromonas gingivalis .
Edible  film  adalah  salah  satu  bentuk  sediaan  praktis  yang berpeluang untuk dikembangkan sebagai pembawa bahan obat anti bakteri. Tanaman Cengkeh ( Syzygium aromaticum L.) mengandung senyawa  antibakteri  sehingga  berpeluang  dikembangkan  menjadi sediaan edible film antibakteri. Perbedaan bahan tambahan dalam sediaan edible film dapat berpengaruh terhapad mutu fisik sediaan termasuk bahan plasticizer.  Riset ini dilakukan dengan tujuan untuk dan menentukan dampak perbedaan konsentrasi plasticizer sorbitol dalam formula edible film yang mengandung ekstrak daun cengkeh ( Syzygium aromaticum L.) dan menentukan aktifitas antibakterinya terhadap  Porphyromonas  gingivalis.  Metode  riset  mencakup ekstraksi  menggunakan  maserasi  cairan  penyari  etanol  70%,  uji Konsentrasi  Hambatan  Minimum  (KHM),  formulasi  edible  film yang  ditambahkan    ekstrak  daun  cengkeh  2,5%  dan  variasi konsentrasi sorbitol sebagai plasticizer berturut-turut 0% (F1), 0,7% (F2), 1,4% (F3), 2,8% (F4), uji mutu fisik meliputi uji organoleptik, uji  ketebalan,  uji  kerapuhan  dan  uji  pH,  dilanjutkan  uji  aktifitas antibakteri sediaan. Hasil pengujian mutu fisik pada semua formula menunjukkan data organoleptik edible film memiliki warna coklat, bau khas, tekstur lunak serta rasa manis, uji ketebalan berkisar 0,10- 0,11 mm, uji kerapuhan berkisar 0,6-0,7% dan uji pH 5,5 dan hasil uji aktivitas antibakteri terhadap sediaan memiliki zona hambatan berkisar  7,55±0,60-7,71±0,24  mm.  Kesimpulan  penelitian menunjukkan  bahwa  variasi  konsentrasi Plasticizer sorbitol  tidak mempengaruhi mutu fisik edible film dan Edible film ekstrak daun cengkeh  ( Syzygium  aromaticum L.)  mampu  menghambat pertumbuhan bakteri Porphyromonas gingivalis.

## PENDAHULUAN
Edible film adalah kemasan yang dapat dimakan berupa lembaran tipis yang digunakan untuk  membungkus  atau  mengemas  produk pangan. Edible  film terbuat  dari  bahan biopolimer  yang  terbagi  menjadi  tiga  kategori utama:  hidrokoloid,  lipida,  dan  komposit. Beberapa penelitian telah menggunakan berbagai metode,  termasuk  modifikasi  bahan  baku  dan penambahan  zat  lain  seperti  plastisizer, emulsifier,  dan  bahan  aktif  alami  maupun sintetis.  Penambahan  ini  bertujuan  untuk mendapatkan  edible  film  dengan  karakteristik yang lebih diinginkan . ( Santoso, 2020 ) Plasticizer merupakan komponen utama dalam  pembentukan  edible  film  yang  memiliki peran  penting.  Sebagai  suatu  substansi  non- volatil,  plasticizer  merupakan  bahan  organik dengan berat molekul rendah dan memiliki titik didih  tinggi.  Ketika  ditambahkan  ke  dalam material  lain,  plasticizer  dapat  mengubah  sifat fisik  dari  material  tersebut.  Fungsi  utama penambahan plasticizer adalah untuk mengurangi  kekakuan  dari  polimer,  sekaligus meningkatkan  fleksibilitasnya.  Karakteristik berat molekul rendah pada plasticizer memungkinkannya untuk dapat masuk ke dalam matriks  polimer  protein  dan  polisakarida,  yang pada  gilirannya  berdampak  pada  peningkatan
kemampuan pembentukan dan fleksibilitas film yang dihasilkan. ( Santoso, 2020 ) Beberapa  jenis  plasticizer  melibatkan gliserol, sorbitol, polivinil alkohol, dan polietilen glikol,  tetapi  gliserol  dan  sorbitol  adalah  yang sering digunakan dalam pembuatan edible film. Sorbitol  tergolong  sebagai  plasticizer  yang efektif  karena  memiliki  keunggulan  dalam mengurangi ikatan hidrogen internal pada ikatan antarmolekul,  sehingga  bermanfaat  untuk menghambat penguapan air dari produk. Selain itu,  sorbitol  dapat  larut  dalam  setiap  rantai polimer, memudahkan gerakan molekul polimer, mudah  ditemukan  dalam  jumlah  besar, terjangkau  secara  ekonomis,  dan  bersifat  tidak beracun. Perbedaan konsentrasi plasticizer dapat mempengaruhi  kualitas  fisik  dari  edible  film, sehingga  diperlukan  optimasi  untuk  mencapai mutu edible film yang optimal Syiami et al., 2021 Edible  film  yang  mengandung  bahan antimikroba memiliki potensi penggunaan pada produk  penyegar  nafas  untuk  menghambat pertumbuhan  bakteri  penyebab  bau  mulut  atau bakteri  yang  dapat  menyebabkan  karies  gigi. Bahan  antimikroba  yang  dapat  dimasukkan  ke dalam edible film umumnya berasal dari ekstrak tanaman  ( Hijriawati  &  Febriana,  2016). Salah satu  esktrak  tanaman  yang  dapat  di  tambahkan kedalam edible  film adalah  ekstrak  cengkeh ( Syzygium aromaticum L.)
Umumnya yang digunakan dari tanaman cengkeh  adalah  bunganya  baik  sebagai  rempah maupun untuk herbal atau pengobatan. Namun, penggunaan  bunga  cengkeh  ini  hanya  bersifat musiman  karena  berbunga  hanya  sekali  dalam setahun.  Tanaman  cengkeh  juga  memeiliki bagian lain yang berpotensi mempunyai manfaat yang  serupa  dengan  bunganya  yaitu  daun cengkeh.  Daun  cengkeh  memiliki  kelebihan karena merupakan produk dari tanaman cengkeh yang  ada  sepanjang  hidup  tanaman  cengkeh, sehingga  pemanfaatannya  dapat  digunakan sepanjang tahun (Jannah et al., 2020 ) Penelitian Paliling  (2016) dan Suhendar (2019) menunjukkan  bahwa  ekstrak  bunga cengkeh memiliki kemampuan untuk menghambat pertumbuhan bakteri
Porphyromonas  gingivalis  dan  Streptococcus mutans,  yang  merupakan  penyebab  karies  gigi. Penelitian yang dilakukan  oleh Browi  Nugroho dan  rekan-rekannya  juga  membuktikan  bahwa penambahan  minyak  cengkeh  dalam  pasta  gigi yang  mengandung  hidroksiapatit-nanosilver- minyak cengkeh dapat menghambat pertumbuhan  bakteri  penyebab  karies  gigi. Aktivitas  antibakteri  yang  terdapat  pada  bunga cengkeh memberikan peluang untuk melakukan penelitian  terhadap  aktivitas  antibakteri  pada daun cengkeh, sehingga menjadi fokus penelitian pada studi ini ( Dwisatya Ramadhani et al., 2022 ),
(Nugroho  &  Cahyaningrum,  2023 ).  Selain  itu, ekstrak metanol dari daun cengkeh juga terbukti memiliki  aktivitas  penghambatan  terhadap pertumbuhan bakteri Streptococcus mutans yang menjadi  penyebab  karies  gigi (Suhendar  & Sogandi, 2019 ).
Pengobatan  karies  gigi  dapat  diterapkan melalui metode mekanis dan kimiawi. Salah satu upaya  pencegahan  secara  mekanis  melibatkan kegiatan  menyikat  gigi,  membersihkan  bagian dalam  gigi,  menggunakan  tusuk  gigi,  dan melakukan  pembilasan  mulut.  Secara  kimiawi, pendekatan  ini  melibatkan  penggunaan  obat kumur  yang  mengandung  sifat  antiseptik  atau antibakteri,  yang  bertujuan  untuk  menghambat pembentukan  plak  gigi.  Senyawa  dengan  sifat antibakteri  atau  antiseptik  dapat  berasal  dari bahan  kimia  sintetik  atau  ekstrak  tumbuhan ( Hamsar & Ramadhan, 2019 ). Salah satu bentuk pencegahan  karies  gigi  yang  praktis  dan  dapat menggantikan obat kumur adalah bentuk edible film yang mengandung bahan anti mikroba. Berdasarkan uraian di atas maka  tujuan dari  penelitian  ini  yaitu  untuk  menentukan pengaruh  konsentrasi plasticizer sorbitol  dalam formulasi  sediaan edible  film ekstrak  daun cengkeh  ( Syzygium  aromaticum L.)  dan menentukan  aktifitas  antibakterinya  terhadap
Porphyromonas gingivalis.

## METODE Desain, Tempat dan Waktu
Penelitian  ini  merupakan  eksperimen laboratorium  yang  melibatkan  formulasi  edible film  dengan  tambahan  ekstrak  daun  cengkeh. Konsentrasi ekstrak ditentukan berdasarkan hasil uji KHM, sementara variasi konsentrasi sorbitol juga  dimasukkan  dalam  formulasi.  Setelah  itu, dilakukan  uji  mutu  fisik  serta  uji  aktivitas antibakteri  terhadap  Porphyromonas  gingivalis pada edible film yang telah selesai diproduksi

## Alat dan Bahan
Alat  -alat  yang  digunakan  adalah  alat cetak edible film (modifikasi), alat uji ketebalan film  (jangka  sorong),  ayakan  mesh  40, beaker glass ,  blender,  cawan    petri,  desikator,  gelas ukur, hot  plate ,  kaca  arloji,  LAF  (Laminar  Air Flow), magnetic stirrer , oven, pH meter, roche friabilator , rotary  evaporator ,  spatel,  tabung reaksi, termometer, timbangan, wadah maserasi dan waterbath .
Bahan-bahan  yang  digunakan  adalah aquadest, Dimetilsulfoksida (DMSO),  daun cengkeh ( Syzygium aromaticum L.), etanol 70%, GF  (Kontrol  Pembanding),  HPMC,  mentol, minyak  permen, Mueller  Hinton  Agar (MHA), natrium  sakarin,  natrium  klorida,  nipagin,  pati jagung dan sorbitol.

## Bakteri Uji
Bakteri  uji  pada  penelitian  ini  adalah Porphyromonas gingivalis

## Pengambilan dan pengolahan sampel
Sampel penelitian ini ialah daun cengkeh ( Syzygium  aromaticum L.)  diperoleh  dari  Desa Lawulo,  Kecamatan  Samaturu,  Kabupaten Kolaka,  Provinsi  Sulawesi  Tenggara.  Titik Koordinat:  Lintang  Selatan  (S)  -3.968690°, Bujur  Timur  (E)  121.490010°.  Daun  cengkeh ( Syzygium  aromaticum L.) yang  telah dikumpulkan kemudian dibersihkan dengan cara dicuci dengan air mengalir, Setelah dicuci, daun tersebut  ditiriskan,  dipotong-potong  kecil,  dan dikeringkan  dengan  cara  diangin-aginkan. Langkah  selanjutnya  melibatkan  penggunaan blender  untuk  menserbukkan  daun  cengkeh, yang kemudian diayak dengan mesh 40. Pembuatan Ekstrak Daun Cengkeh ( Syzygium aromaticum L.) Metode  ekstraksi  yang  dipilih  dalam penelitian  ini  adalah  metode  maserasi, menggunakan  pelarut  etanol  70%.  Tahap  awal melibatkan penimbangan serbuk simplisia daun cengkeh  ( Syzygium  aromaticum L.)  sebanyak
500  g,  yang  kemudian  dimasukkan  ke  dalam wadah  maserasi.  Campuran  tersebut  kemudian dicampur  dengan  pelarut  etanol  70%  sebanyak 1700 mL. Proses maserasi dilaksanakan selama dua  kali  24  jam  dengan  sesekali  pengadukan. Setelah  itu,  filtrat  etanol  dipisahkan  dari  residu dengan metode penyaringan. Dilanjutkan dengan tahap  remaserasi,  di  mana  sampel  direndam dalam etanol 70% sebanyak 700 mL selama satu kali  24  jam  dengan  sesekali  diaduk.  Setelah periode  24  jam,  dilakukan  penyaringan  untuk mendapatkan  filtrat  yang  kemudian  diuapkan menggunakan rotary evaporator hingga diperoleh  ekstrak  kental.  Ekstrak  tersebut selanjutnya  ditimbang,  dan  rendamennya dihitung

## Sterilisasi Alat
Alat-alat  yang  digunakan  dicuci  hingga bersih dengan aquades kemudian alat-alat gelas dikeringkan  lalu  dibungkus  dengan  kertas  dan disterilkan menggunakan oven pada suhu 180 o C selama 2 jam. Alat-alat yang berskala dan tidak tahan terhadap pemanasan dan alat yang terbuat dari plastik disterilkan dalam autoklaf pada suhu 121 o C selama 15 menit. Ose disterilkan dengan cara dipijarkan pada lampu spiritus.
Penyiapan  Media Mueller  Hinton  Agar

## (MHA)
Mueller  Hinton  Agar  seberat  21  g  di  larutkan dalam 1 L aquadest, diaduk hingga merata sambil dipanaskan  menggunakan  tungku  pemanas magnetik hingga benar-benar larut dan kemudian disesuaikan  pH-nya  hingga  mencapai  rentang 7,2-7,4.  Setelah  itu,  media  tersebut  disterilkan menggunakan  autoklaf  selama  15  menit  pada suhu  121 o C.  Sejumlah  10  mL  Mueller  Hinton Agar  dituangkan  ke  dalam  cawan  petri  steril dengan  kedalaman  4  mm,  dan  media  dibiarkan mengeras  dalam  posisi  horizontal.  Cawan  petri tersebut  kemudian  digunakan  sebagai  tempat untuk melakukan uji antibakteri Peremajaan Bakteri uji
Porphyromonas  gingivalis yang  berasal dari biakan murni diambil sebanyak 1 ose dengan menggunakan  jarum  ose  steril  dalam  kondisi yang aseptis kemudian digoreskan pada medium MHA pada pH 7. Bakteri yang telah digores pada medium  MHA  kemudian  diinkubasi  dalam inkubator pada suhu 37 o C selama 1x24 jam.

## Pembuatan Suspensi Bakteri Uji
Bakteri  uji  yang  telah  diremajakan  diambil menggunakan jarum ose steril dan diresuspensikan dalam tabung yang berisi 5 mL larutan  NaCl  steril  0,9%.  Kekeruhan  yang dihasilkan  kemudian  diukur  hingga  setara dengan  standar  McFarland  0,5%,  yang  setara dengan pertumbuhan sekitar 1,5x10^8 CFU/mL
Uji Konsentrasi Hambat Minimun Antibakteri (KHM) Pengujian Konsentrasi Hambatan
Minimum  (KHM)  ekstrak  daun  cengkeh ( Syzygium         aromaticum L.) dilakukan dengan metode  difusi  agar  ( disc  diffuson  kirby )  pada pengujian  menggunakan  kertas  cakram  ( paper disk )  dengan  cara  membuat  beberapa  varian konsentrasi  ekstrak  etanol  daun  cengkeh  yang diuji  yaitu  20%,  10%,  5%,  2,5%,  1,25%  dan 0,625%.  Pembuatan  dimulai  dari  konsentrasi 20%  dengan  menimbang  ekstrak  daun  cengkeh sebanyak  2  g.  Kemudian  ditambahkan  dengan DMSO 10% sebanyak 2 mL dicukupkan dengan aquadest  steril  sampai  10  mL  konsentrasi selanjutnya  dibuat  dengan  cara  mengencerkan konsentrasi 20% sesuai perhitungan.
Media MHA dituangkan ke dalam cawan petri steril, setelah itu, 20 μL suspensi bakteri uji ditambahkan  perlahan  ke  dalam  cawan  petri. Cawan  petri  digoyangkan  dengan  gerakan memutar  untuk  memastikan  bakteri  uji tercampur rata dalam medium agar. Medium agar didiamkan sampai memadat.
Kertas  cakram  steril  yang  kosong dimasukkan ke dalam masing-masing bahan uji dengan volume 5 mL selama 2 menit agar larutan dapat  meresap  ke  dalam  kertas  cakram  dengan baik.  Setelah  itu,  kertas  cakram  diangkat  dan dibiarkan  mengering  selama  5  detik.  Kertas cakram  pada  setiap  kelompok  bahan  uji ditempatkan  di  atas  permukaan  agar  dengan menggunakan  pinset  steril.  Proses  inkubasi dilakukan  dalam  inkubator  pada  suhu  37oC selama  1x24  jam.  Selanjutnya,  zona  hambat diamati dan diukur dengan menggunakan jangka sorong  dalam  milimeter.  Konsentrasi  terkecil yang memiliki zona hambat dinyatakan sebagai nilai KHM.

## Formulasi Sediaan
Tabel 1. Rancangan Formula Edible film Ekstrak Daun Cengkeh Bahan Kegunaan Konsentrasi Bahan Dalam Formula (%) F1 F2 F3 F4 Ekstrak Daun Cengkeh Zat aktif 2,5 2,5 2,5 2,5 Pati Jagung Pembawa 6 6 6 6 HPMC Pembawa 4 4 4 4 Sorbitol Plasticizer - 0,7 1,4 2,8 Na. Sakarin Pemanis 0,25 0,25 0,25 0,25 Mentol Perasa 0,1 0,1 0,1 0,1 Minyak Permen Pengaroma 1 1 1 1 Nipagin Pengawet 0,18 0,18 0,18 0,18 Aquadest Pelarut ad 100 ad 100 ad 100 ad 100
Keterangan:
- F1 : Formula tanpa sorbitol 0%
- F2 : Formula dengan konsentrasi sorbitol 0,7%
- F3 : Formula dengan konsentrasi sorbitol 1,4%
- F4 : Formula dengan konsentrasi sorbitol 2,8%
Pembuatan Edible film
Pati  jagung  didspersikan  dengan  6  ml aquadest,  lalu  dipanaskan  pada  suhu  sekitar  ± 60oC hingga terjadi gelatinisasi yang menghasilkan larutan jernih. HPMC dikembangkan  dalam  aquadest,  kemudian sorbitol  ditambahkan  dan  diaduk,  sambil menjaga suhu sekitar ± 60oC. Selanjutnya, kedua gelatinisasi,  yaitu  gelatinisasi  pati  jagung  dan gelatinisasi HPMC dengan sorbitol, dicampurkan  pada  suhu  ±  60oC.  Setelah  itu, bahan-bahan  lainnya  (ekstrak  Daun  Cengkeh, larutan natrium sakarin, nipagin, mentol, minyak permen,  dan  sisa  aquadest)  ditambahkan  pada suhu  kamar,  diaduk  hingga  homogen,  lalu dituangkan  dan  diratakan  pada  cetakan.  Proses pengeringan dilakukan pada suhu ruang selama 4x24  jam,  kemudian  produk  dilepaskan  dari cetakan  dan  dipotong-potong  menjadi  ukuran 2,2x3,2  cm  (dengan  berat  sekitar  ±  0,1  g). Formula  F2,  F3,  dan  F4  dibuat  dengan  metode yang  sama,  dengan  variasi  jumlah  sorbitol masing-masing sebesar 0,14 g untuk formula 2, 0,28 g untuk formula 3, dan 0,56 g untuk formula 4 ( Harmely et al., 2015) .
Evaluasi Sediaan Edible film

## Pengujiaan Organoleptik
Pengujian  organoleptik  dilakukan  pada suhu  ruang  (15-30 o C),    antara  lain  pengamatan bentuk,  warna,  bau  dan  rasa  dari edible  film . (Harmely et al., 2015 ).

## Pengujian pH
Pengukuran  pH  dilakukan  menggunakan
pH  meter  yang  sebelumnya  dikalibrasi  dengan larutan dapar pH 4 dan pH 7. Proses pengukuran pH edible film ekstrak daun cengkeh melibatkan larutan 1 g edible film yang dilarutkan dalam 10 mL air suling. Selanjutnya, pH meter dicelupkan ke  dalam  larutan  tersebut,  dan  angka  yang ditunjukkan pada pH meter mencerminkan nilai pH  edible  film  ekstrak  daun  cengkeh  .  Syarat pemeriksaan pH adalah berada dalam rentang pH mulut  agar  tidak  menyebabkan  iritasi  pada mukosa  mulut,  yang  idealnya  berada  dalam kisaran 5,5-7,9 (Harmely et al., 2015) .

## Pengujiann Ketebalan
Pengukuran  Ketebalan  Ketebalan  edible film diukur menggunakan mikrometer pada lima lokasi  yang  berbeda.  Hasil  pengukuran dijumlahkan,  dan  ketebalan  rata-ratanya  dicari. Syarat ketebalan edible film seharusnya kurang dari 0,25 ( Harmely et al., 2015 ).

## Pengujian Kerapuhan
Pemeriksaan  Kerapuhan  Pemeriksaan kerapuhan  edible  film  mengikuti  metode  yang dijelaskan  oleh  Harmely  et  al.  (2015), menggunakan  Roche  Friabilator.  Dalam  uji  ini, 20 lembar edible film yang bebas debu ditimbang bersamaan  (W1),  kemudian  dimasukkan  ke dalam Roche Friabilator. Alat dijalankan selama 4  menit  dengan  kecepatan  putaran  25  rpm. Setelah dibersihkan dari debu, 20 lembar edible film  tersebut  ditimbang  kembali  (W2). Kerapuhan  edible  film  dihitung  dengan rumus edible film dapat dihitung dengan rumus:
Kerapuhan = 1 - !" !# x 100%
Pada  pemeriksaan  kerapuhan edible  film belum  ada  persyaratan  mutu  dalam  kerapuhan edible  film maka  kerapuhan  dari  produk  yang berada di pasaran dijadikan sebagai pembanding.

## Pengujian  Aktivitas  Antibakteri  Sediaan Edible film
Uji  Aktivitas  Antibakteri  sediaan  edible film  dilakukan sesuai dengan metode difusi agar padat.  Uji  ini  dimulai  dengan  menyiapkan  tiga cawan  petri  steril  untuk  media  pertumbuhan bakteri. Media MHA dituangkan ke dalam cawan petri  steril,  lalu  20  μL  suspensi  bakteri  uji ditambahkan perlahan. Cawan petri digoyangkan secara  memutar  untuk  memastikan  bakteri  uji merata  dalam  medium  agar,  dan  medium
dibiarkan  hingga  mengeras.  Larutan  uji disiapkan  dengan  melarutkan  satu  lembar sediaan edible film ukuran 2,2x3,2 cm (dengan berat ± 0,1 g) dalam 1 mL aquadest steril. Setelah larut  dan  homogen,  kertas  cakram  steril dicelupkan ke dalam larutan uji selama 2 menit kemudian diangkat dan diangin-anginkan selama 5  detik.  Kertas  cakram  pada  masing-masing kelompok  bahan  uji  ditempatkan  dengan  hati- hati  pada  permukaan  agar  menggunakan  pinset steril.  Selanjutnya,  inkubasi  dilakukan  dalam inkubator  pada  suhu  37oC  selama  1x24  jam. Setelah  itu,  zona  hambat  diamati  dan  diukur dengan  menggunakan  jangka  sorong  dalam satuan milimeter di sekitar kertas cakram

## HASIL Pengamatan Hasil Ekstraksi Daun Cengkeh
Tabel 2.  Data Hasil Rendamen Ekstrak Daun Cengkeh ( Syzygium aromaticum L.) dengan Cairan Penyari Etanol 70%
Berat simplisia dimaserasi   Jumlah pelarut Berat ekstrak   Rendamen 500 g 2400 ml 39,14 g 7,82%

## Pengamatan Hasil Uji KHM
Tabel 3. Hasil  Pengamatan  Uji  Konsentrasi  Hambatan  Minimum  (KHM)  Metode  Difusi  Ekstrak  Daun Cengkeh ( Syzygium aromaticum L.) terhadap Porphyromonas gingivalis Bakteri Konsentrasi (%) Zona Hambat (mm) Nilai KHM (%) Porphyromonas gingivalis 0,625 8,62 0,625 1,25 9,84 2,5 11,19 5 12,81 10 13,92 20 15,77 Keterangan :
Konsentrasi terkecil yang di uji masih menghambat, sehingga konsentrasi yang ditetapkan sebagai nilai Konsentrasi Hambatan Minimum (KHM)
Gambar 1.   Hasil  Uji  Konsentrasi  Hambatan  Minimum  (KHM)  Ekstrak  Daun  Cengkeh  ( Syzygium aromaticum L.) terhadap Porphyromonas gingivalis 20% 10% 5% 2,5% 1,25% 0,625%
Hasil Pengamatan
Pengujian Formula 1 2 3 4 kontrol Organoleptik Warna Bau Bentuk Rasa Coklat
Khas Lunak Agak Manis
Coklat Khas Lunak Manis Coklat Khas Lunak Manis Coklat Khas Lunak Manis Coklat Khas Lunak Manis Ketebalan 0,11 ± 0,01 0,10 ± 0,02 0,11 ± 0,02 0,11 ± 0,01 0,08 pH 5,5 ± 0,00 5,5 ± 0,11 5,5 ± 0,00 5,5 ± 0,00 5,5 ± 0,00 Kerapuhan 0,7 ± 0,1 0,6 ± 0,05 0,6 ± 0,00 0,6 ± 0,00 - Aktivitas anti Bakteri 7,71 ± 0,24 7,55 ± 0,60 12,15 ± 0,25 7,71 ± 0,24 - Keterangan: - F1 : Formula tanpa sorbitol 0%
- F2 : Formula dengan konsentrasi sorbitol 0,7%
- F3 : Formula dengan konsentrasi sorbitol 1,4%
- F4 : Formula dengan konsentrasi sorbitol 2,8%
Standar  kerapuhan  edible  film  belum  ada  sehingga  produk  yang  beada  di  pasaran  dijadikan  sebagai pembanding (Harmely et al., 2015)
Replikasi I Replikasi II Replikasi III
Gambar 2.  Uji  Aktivitas  Sediaan Edible  film Ekstrak  Daun  Cengkeh  terhadap  Bakteri  Porphyromonas gingivalis Gambar 3.  Sediaan Edible film
a. Edible film formula 1
b. Edible film formula 2
c. Edible film formula 3
d. Edible film formula 4
e. Edible film dengan basis
f. Edible film pembanding
K+ K+ K+ K- K- K- F1 F3 F3 F1 f e d c b a K-
PEMBAHASAN
Hasil ekstraksi daun cengkeh ( Syzygium  aromaticum L.)  yang  diperoleh dengan  metode  maserasi  menggunakan  pelarut etanol  70%.  Keputusan  menggunakan  metode maserasi  didasarkan  pada  pertimbangan  bahwa metode  ini  tidak  melibatkan  pemanasan, sehingga dianggap lebih aman untuk mencegah potensi  kerusakan  pada  senyawa  yang  rentan terhadap suhu tinggi. Pelarut etanol 70% dipilih karena  sifatnya  yang  tidak  bersifat  toksik, mampu  mencegah  pertumbuhan  bakteri  dan jamur,  serta  memiliki  keunggulan  dalam mengekstraksi  senyawa  flavonoid  dengan ketersediaan yang lebih banyak dan kemudahan perolehan.
Pengujian Konsentrasi Hambatan
Minimum  (KHM)  pada  ekstrak  daun  cengkeh ( Syzygium  aromaticum L.)  dilakukan  sebagai dasar penentuan dosis sediaan edible film , karena penilitian  sebelumnya  data  yang  tersedia  hanya data aktifitas antibakteri ekstrak bunga cengkeh terhadap Porphyromonas gingivalis . Hasil Hasil pengujian diperoleh nilai KHM 0,625%. Makin tinggi  konsentrasi  makin  besar  pula  diameter hambatan dari esktrak yang berkesuaian dengan penelitian Suhendar (Suhendar & Fathurrahman, 2019) .  Data  KHM  ini  selanjutnya  digunakan untuk  pengembangan  formula edible  film, menjadi  acuan  untuk  penetapan  konsentrasi edible film yang akan di buat. Konsentrasi 2,5% untuk  sediaan  dipilih  diatas    nilai  KHM  untuk mendapatkan hambatan yang optimal.
Bahan-bahan  tambahan  sorbitol  sebagai plasticizer divariasiksan pada konsentrasi 0,7%,
1,4%  dan  2,8%  yang  bertujuan  untuk memperoleh formula yang menghasilkan edible film yang  paling  optimal  dan  memenuhi  syarat mutu fisik. Selanjutnya di peroleh data pengijian sifat  fisik    sebagaimana  tercantum  pada  table hasil.
Pada uji organoleptik sediaan edible film ekstrak daun cengkeh ( Syzygium aromaticum L.) Semua  formula  memberikan  warna  coklat transparan,  bau  khas,  rasa  manis  dan  bentuk lunak  dan  agak  lembab,  tidak  ada  perbedaaan yang tajam antar masing-masing formula dengan perbedaan  jumlah  sorbitol  sebagai plasticizer.
Perbedaan  warna  hanya  terjadi  antara  formula dengan  ekstrak  dan  formula edible  film tanpa ekstrak. Hal ini di sebabkan karena warna yang dihasilkan oleh edible film akibat adanya warna dari ekstrak.
Hasil  pengujian  ketebalan  edible  film menunjukkan  bahwa  ketebalan  dari  setiap formula edible film berkisar antara 0,10 hingga 0,11  mm,  sedangkan  ketebalan  kontrol  adalah 0,08  mm.  Hasil  pengujian  menunjukkan  bahwa
penambahan  sorbitol  tidak  menghasilkan perbedaan ketebalan yang signifikan.
Penyebabnya  mungkin  karena  konsentrasi sorbitol  yang  digunakan  tidak  terlalu  berbeda, sehingga  edible  film  yang  dihasilkan  memiliki ketebalan  yang  seragam.  Variasi  dalam  nilai ketebalan kemungkinan dipengaruhi oleh durasi waktu  pengeringan  yang  berkisar  antara  72 hingga  96  jam.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa edible  film  yang  berasal  dari  ekstrak  daun cengkeh memenuhi standar yang ditetapkan oleh Harmely et al. (2015), karena ketebalannya tidak melebihi  batas  maksimum  sebesar  0,25  mm Harmely  et  al.,  (2015) ,  karena  tidak  melebihi batas ketebalan yaitu 0,25 mm. Ketebalan edible film  memiliki  relevansi  dengan  kenyamanan penggunaan oleh pasien. Edible film yang terlalu tipis  mungkin  sulit  diambil  dari  wadahnya.  Di sisi  lain,  jika  edible  film  terlalu  tebal,  hal  itu dapat mempengaruhi penampilan visual, tekstur, dan kenyamanan rasa saat digunakan.
Uji pH dilakukan untuk melihat pH yang dihasilkan  pada  sediaan edible  film .  Menurut Harmely  et  al.,  (2015) pH  sediaan  edible  film seharusnya  sesuai  dengan  rentang  pH  mulut, yaitu antara pH 5,5–7,9, agar tidak menyebabkan iritasi  pada  mukosa  mulut.  Hasil  pengujian menunjukkan  bahwa  pH  sediaan  edible  film adalah 5,5. Dari hasil tersebut, dapat disimpulkan bahwa  penambahan  konsentrasi  sorbitol  tidak berpengaruh signifikan terhadap perubahan nilai pH  pada  masing-masing  formula.  Hal  ini menandakan bahwa edible film yang berasal dari ekstrak daun cengkeh aman digunakan di dalam mulut.
Uji kerapuhan dilakukan untuk mengevaluasi  tingkat  kerapuhan  edible  film, dengan nilai kerapuhan edible film yang beredar di  pasaran  dijadikan  sebagai  acuan.  Hasil pengujian  kerapuhan  sediaan  edible  film menunjukkan  nilai  berkisar  antara  0,6  hingga 0,7%,  dan  kerapuhannya  sebanding  dengan kerapuhan pada pembanding (0,6%). Dalam uji kerapuhan,  dengan  penambahan  sorbitol  pada semua formula edible film, semuanya tetap utuh dan hanya mengalami sedikit pengurangan berat. Pengurangan berat ini disebabkan oleh gesekan antara edible film yang diuji dan alat pengujian kerapuhan (Harmely et al., 2015).
Data uji mutu fisik di atas menunjukkan bahwa  variasi  konsentrasi  plasticizer  sorbitol tidak  menghasilkan  perbedaan  yang  signifikan, dan semua formula memenuhi standar mutu yang telah ditetapkan. Oleh karena itu, formula dengan konsentrasi  terendah  dapat  dianggap  sebagai formula yang paling efektif.
Uji  aktivitas  antibakteri  pada  sediaan edible  film  ekstrak  daun  cengkeh  (Syzygium
aromaticum L.) terhadap bakteri Porphyromonas gingivalis bertujuan untuk memastikan efektivitas  antibakteri  ekstrak  dalam  bentuk edible film. Pada pengujian formula 1 edible film yang mengandung ekstrak tanpa sorbitol, terlihat diameter zona hambatan sebesar 7,71 ± 0,24 mm, lebih besar dibandingkan dengan formula 3 yang mengandung  ekstrak  dengan  sorbitol,  yang memiliki diameter hambatan sebesar 7,55 ± 0,60 mm.  Informasi  ini  menunjukkan  bahwa keberadaan  plasticizer  sorbitol  dapat  sedikit mengurangi diameter zona hambat. Mungkin hal ini  disebabkan  oleh  peningkatan  viskositas larutan  uji  yang  dihasilkan  oleh  sorbitol, sehingga  memperlambat  difusi  bahan  aktif  dari kertas cakram
Diameter zona hambatan pada edible film
dengan konsentrasi 2,5% lebih kecil dibandingkan dengan daya hambat ekstrak 2,5% (500  µg/20  µL).  Hal  ini  terjadi  karena  jumlah edible  film  yang  digunakan  dalam  uji  hanya sebagian  kecil  dari  total  produksi  edible  film, yaitu  0,1  g  dari  total  2,5  g  edible  film.  Oleh karena itu, jumlah ekstrak dalam sediaan hanya mencapai  50  µg/20  µL.  Senyawa  antibakteri utama dalam ekstrak adalah eugenol, yang dapat menghambat pertumbuhan bakteri Porphyromonas gingivalis.
Sediaan  yang  tidak  mengandung  ekstrak (kontrol  negatif)  tidak  menunjukkan  aktivitas penghambatan,  menandakan  bahwa  aktivitas tersebut berasal dari bahan aktif dan bukan dari sediaan  atau  bahan  dasarnya.  Pengamatan  pada kontrol  positif  menunjukkan  zona  hambatan sebesar  12,15  ±  0,25  mm.  Kontrol  positif  yang digunakan  adalah  obat  kumur  ( Chlorhexidine gluconate 0,2%),  yang  terbukti  efektif  dalam menghambat pertumbuhan bakteri dan plak pada rongga mulut, serta mencegah terjadinya karies gigi  dengan  cara  meningkatkan  permeabilitas membran  sel  bakteri  dan  mengkoagulasi makromolekul sitoplasma. Kurniawati (2018) Cengkeh mengandung sejumlah senyawa kimia,  termasuk  fenol,  flavonoid,  hidroksi benzoat, dan asam hidrokinetik. Senyawa kimia utama  yang  dominan  dalam  cengkeh  adalah eugenol.  Cengkeh  telah  terbukti  efektif  dalam menghambat  pertumbuhan  mikroorganisme dengan  rentang  aktivitas  yang  meliputi  bakteri, jamur,  protozoa,  dan  virus.  Ekstrak  cengkeh dalam  bentuk  etanol,  metanol,  aseton,  dan minyak atsiri menunjukkan aktivitas antimikroba terhadap bakteri Gram positif dan Gram negatif. Cengkeh  juga  menunjukkan  sifat  bakteriostatik dan bakteriosidik dengan mekanisme kerja yang merusak dinding sel. (Kalalo et al., 2020 ).
Daun  cengkeh,  khususnya,  mengandung senyawa bioaktif seperti 3-allyl-6-
methoxyphenol-eugenol,  caryophyllene  1,4,7,- cycloundecatriene,  1,5,9,9-tetramethyl,  phenol, 2-methoxy-4-(2-propenyl), dan eugenol acetate. Senyawa-senyawa ini dianggap sebagai kandidat potensial  dalam  menghasilkan  senyawa  aktif untuk  mengatasi  masalah  karies  gigi (Suhendar & Sogandi, 2019)

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  dan pembahasan  yang  telah  dilakukan,  dapat disimpulkan bahwa variasi konsentrasi plasticizer  sorbitol  tidak  memiliki  pengaruh signifikan terhadap mutu fisik edible film. Selain itu,  edible  film  ekstrak  daun  cengkeh  juga menunjukkan  aktivitas  antibakteri  terhadap Porphyromonas gingivalis..

## SARAN
Berdasarkan  temuan  dalam  penelitian  ini, disarankan untuk melanjutkan dengan penelitian uji stabilitas pada penyimpanan yang dipercepat guna  mengevaluasi  daya  tahan  sediaan  selama penyimpanan.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis  mengucapkan  terima  kasih kepada pengelola laboratorium Farmasetika dan laboratorium farmakognosi/fitokimia prodi farmasi,  dan  seluruh  pihak  yang  terlibat  dalam penelitian ini

## DAFTAR PUSTAKA
Dwisatya Ramadhani, A., Rudhanton, R., Diah, D., & Sutanti, V. (2022). Uji Efektivitas Antibakteri  Larutan  Madu  Lebah  Barat (Apis  Mellifera)  Terhadap  Bakteri Porphyromonas  Gingivalis  Secara  In Vitro  Dengan  Metode  Dilusi  Agar .  E- Prodenta Journal of Dentistry, 6(1), 540– 546. https://doi.org/10.21776/ub.eprodenta.20 20.006.01.2
Hamsar,  A.,  &  Ramadhan,  E.  S.  (2019). Penggunaan Chlorhexidine Kumur dalam Perbaikan  Indeks  Kebersihan  Gigi Pegawai Poltekkes Kemenkes RI Medan . Jurnal  Kesehatan  Gigi,  6(2),  99–103. https://doi.org/10.31983/jkg.v6i2.5482 Harmely,  F.,  Deviarny,  C.,  &  Yenni,  W.  S. (2015). Formulasi dan Evaluasi Sediaan Edible Film dari Ekstrak Daun Kemangi (Ocimum  americanum  L.)  sebagai Penyegar Mulut . Jurnal Sains Farmasi & Klinis, 1(1), 38. https://doi.org/10.29208/jsfk.2014.1.1.10 Hijriawati,  M.,  &  Febriana,  E.  (2016). Edible
Film  Antimikroba .  In  Jurnal  Farmaka (Vol. 14, Issue 1). http://search.proquest.com/. Jannah,  M.,  Muhidong,  J.,  &  Mursalim,  M. (2020). Karateristik Fisik Bunga Cengkeh (Syzygium aromaticum). Jurnal Agritechno, 34–41. https://doi.org/10.20956/at.v13i1.251 Kalalo, M. J., Gratia, B., Bidulang, C. B., Djafar, F.,  &  Edy,  H.  J.  (2020). Potensi Antimikroba Cengkeh : Review Literatur . Jurnal Farmasi Medica/Pharmacy
Medical  Journal  (PMJ),  3(2),  53. https://doi.org/10.35799/pmj.3.2.2020.32 882 Kurniawati, A. (2018). Pengaruh Kumur Ekstrak
Daun  Ungu  Terhadap  Jumlah  Bakteri dalam Saliva . Stomatognatic-Jurnal Kedokteran Gigi, 2018 15(2) : 43-46. Nugroho,  B.,  &  Cahyaningrum,  S.  E.  (2023). S ynthesis  and  characterization  of hydroxyapatite-nanosilver-clove oil (Eugenia  Caryophyllus)  as  antibacterial in  toothpaste  preparations  against streptococcus  mutans  bacteria .  Jurnal Pijar Mipa, 18(4), 659–665. https://doi.org/10.29303/jpm.v18i4.5325 Paliling, A., Posangi, J., & Anindita, P. S. (2016).
Uji daya hambat ekstrak bunga cengkeh (Syzygium aromaticum) terhadap bakteri
Porphyromonas gingivalis . E-GIGI, 4(2). https://doi.org/10.35790/eg.4.2.2016.141 59 Santoso, B. (2020). Edible Film: Teknologi dan Aplikasinya . Https://Repository.Unsri.Ac.Id/65828/1/ Buku Edible Film Final.pdf Suhendar,  U.,  &  Fathurrahman,  M.  (2019). Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Metanol Bunga  Cengkeh  (Syzygium  Aromaticum) Terhadap Bakteri Streptococcus Mutans. Fitofarmaka : Jurnal Ilmiah Farmasi, 9(1), 26–34. Https://Doi.Org/10.33751/Jf.V9i1.1257
Suhendar, U., & Sogandi, S. (2019). Identifikasi Senyawa  Aktif  Ekstrak  Daun  Cengkeh (Syzygium Aromaticum) Sebagai Inhibitor  Streptococcus  Mutans .  Al- Kauniyah:  Jurnal  Biologi,  12(2),  229– 239. Https://Doi.Org/10.15408/Kauniyah.V12 i2.12251 Syiami,  D.,  Handayani,  R.,  &  Najihudin,  A. (2021). Pengaruh  Plastisizer  Terhadap Elastisitas  Dan  Kelenturan  Edible  Film The Impact of Plasticizers to the Elasticity and  Flexibility  of  Edible  Films .  Jurnal Kesehatan Madani Medika, 12(02), 152–
158.
Open  Access  This  article  is  licensed  under  a  Creative  Commons Attribution  4.0  International  License,  which  permits  use,  sharing, adaptation, distribution, and reproduction in any medium or format, as long  as  you  give  appropriate  credit  to  the  original  author(s)  and  the source, provide a link to the Creative Commons license, and indicate if
changes were made. The images or other third-party material in this article are included in the article’s Creative Commons license unless indicated otherwise in a credit line to the material. If material is not included in the article’s Creative Commons license and your intended use is not permitted by statutory regulation or exceeds the permitted use, you will need to obtain permission directly from the copyright holder. To view a copy of this license, visit http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/.