## Uji Aktivitas Antioksidan Minyak Argan ( Argania spinosa L.)

## Dalam Bentuk Sediaan Mikroemulsi
Nur Ain Thomas 1* , Juliyanty Akuba 2 ,Moh. Adam Mustapa 3 ,Adiva Sidangoli 4 1,2 Jurusan Farmasi, Fakultas Olahraga dan Kesehatan, Universitas Negeri Gorontalo, Gorontalo * E-mail: nurain.thomas@gmail.com
Article Info: Received: 21 September 2020 in revised form: 13 Oktober
2020 Accepted: 1 Februari Available Online: 1 Februari 2021

## ABSTRACT
Argan oil ( Argania spinosa L.) is an oil that has benefits as a natural antioxidant  which  is  good  for  health.  Microemulsion  is  a thermodynamically stable delivery system;  transparent;  has a small globule size and consists of a mixture of oil, water, surfactant and co- surfactant  which  has  great  potential  in  delivering  dermal  active substances  by  increasing  transdermal  permeability  in  topical  drug delivery. This research aimed to formulate argan ( Argania spinosa L.) oil  into  microemulsion  dosage  form  and  determine  the  antioxidant activity using DPPH method. The study began with the optimization of  base  into  several  concentration  variations  of  surfactant  and  co- surfactant. The formula made into 7 namely F1, F2, F3, F4, F5, F6 and F7,  evaluated  using  organoleptic  test  and  centrifugation  test.  The results  showed  the  base  of  F6  which  had  the  clear,  transparent physical appearance and no separation occured. The F6 base was then made into microemulsion dosage with 3 concentration variations of argan ( Argania spinosa L.) oil, namely F1 (0.5%), F2 (1%) and F3 (1.5%). The 3 formulas were tested for the physical stability which included pH test, viscosity test, centrifugation test and freeze-thaw test.  The testing of antioxidant activity carried out by in vitro using the DPPH method which then calculated for the IC 50 value on t 0 and t 28 . From the  results  of  the  physical  stability  test  at  room  temperature  and freeze-thaw,  the  3  formulas  met  the  organoleptic,  pH  and centrifugation tests. The antioxidant activity values of IC 50 were F1 (t 0 = 291.14 𝜇 g/mL; t 28 = 230.43 𝜇 g/mL), F2 (t 0 = 89.02 𝜇 g/mL; t 28 = 129.01 𝜇 g/mL), F3 (t 0 = 81.07 𝜇 g/mL; t 28 = 116.30 𝜇 g/mL). The statistical test result of T test showed the p value = 0,896, (>0.05), which indicated that there  was no  significance difference in the antioxidant activity result between the 3 formulas on t 0 and t 28 .
Keywords : Antioxidant
Microemulsion Argan Oil
Argania spinosa L.
Corresponding Author:
Nur Ain Thomas
Jurusan Farmasi Fakultas Olahraga dan
Kesehatan
Universitas Negeri Gorontalo E-mail:
nurain.thomas@gmail.com
Copyright © 2021  IJPE-UNG
This open access article is distributed under a Creative Commons Attribution (CC-BY-NC-SA) 4.0 International license.
How to cite (APA 6 th Style): Thomas.N.A.,Akuba.J.,Mustapa.M.,Sidangoli.A.(2021). Uji Aktivitas Antioksidan Minyak Argan (Argania spinosa L.) Dalam Bentuk Sediaan Mikroemulsi.Indonesian Journal of Pharmaceutical  (e-Journal), 1 (1), 30-39.
Indonesian Journal of Pharmaceutical Education (e-Journal) 2021; 1 (1): 30 –39 ISSN : 2775-3670 (online) Journal Homepage: http://ejurnal.ung.ac.id/index.php/ijpe/index DOI: 10.22487/.ijpe.vlil.9951
Thomas , et al., 2021; Indonesian Journal of Pharmacetical Education (e-Journal); 1(1): 30 - 39

## ABSTRAK
Minyak  Argan  ( Argania  spinosa L.)  merupakan  salah  satu  minyak  yang  memiliki  manfaat antioksidan alami yang baik untuk kesehatan. Mikroemulsi adalah suatu sistem penghantaran yang stabil secara termodinamika, transparan, memiliki ukuran globul yang kecil, terdiri dari campuran  minyak,  air,  surfaktan  dan  ko-surfaktan  yang  memiliki  potensi  besar  dalam penghantaran zat aktif secara dermal dengan meningkatkan permeabilitas transdermal dalam penghantaran obat secara topikal. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk memformulasikan minyak  argan  ( Argania  spinosa L.)  dalam  bentuk  sediaan  mikroemulsi  serta  mengetahui aktivitas  antioksidannya  menggunakan  metode  DPPH.  Penelitian  diawali  dengan  optimasi basis dengan variasi konsentrasi surfaktan dan kosurfaktan. Dibuat 7 formula basis yaitu F1, F2, F3, F4, F5, F6 dan F7. Ketujuh formula dievaluasi organoleptik dan sentrifugasi. Didapatkan basis F6 yang memiliki tampilan fisik jernih, transparan dan tidak terjadi pemisahan. Basis F6 dibuat sediaan mikroemulsi dengan 3 variasi konsentrasi minyak argan ( Argania spinos L.), F1 0,5%,  F2  1%  dan  F3  1,5%.  Ketiga  formula  diuji  stabilitas  fisik  meliputi  uji  pH,  viskositas, sentrifugasi  dan freezethaw, pengujian  aktivitas  antioksidan  secara in  vitro menggunakan metode DPPH, dihitung nilai IC50 pada t 0 dan t 28 . Hasil uji stabilitas fisik sediaan pada suhu ruang dan freeze-thaw , ketiga formula memenuhi uji organoleptik, pH dan sentrifugasi. Nilai aktivitas antioksidan dengan nilai IC 50 F1 (t 0 = 291.14 𝜇 g/mL; t 28 = 230.43 𝜇 g/mL), F2 (t 0 = 89.02 𝜇 g/mL; t 28 = 129.01 𝜇 g/mL), F3 (t 0 = 81.07 𝜇 g/mL; t 28 = 116.30 𝜇 g/mL). Hasil uji statistik T Test p  value  =  0,896,  (>0.05),  menunjukkan  tidak  ada  perbedaan  signifikan  hasil  aktivitas antioksidan ketiga formula pada t 0 dan t 28 . Kata Kunci: Antioksidan, Mikroemulsi, Minyak Argan, Argania spinosa L.

## 1.  Pendahuluan
Salah satu penyebab timbulnya berbagai penyakit kronis dan degeneratif adalah radikal bebas.  Radikal  bebas  memiliki  energi  yang  tinggi  dan  bersifat  sangat  reaktif,  yang disebabkan oleh kandungan elektron yang tidak berpasangan pada orbital terluarnya. Sehingga saat kadar radikal bebas di dalam tubuh melebihi batas normal, maka radikal bebas  akan  menjadi  suatu  senyawa  yang  berbahaya  bagi  tubuh  manusia.  Kulit merupakan  organ  yang  melapisi  seluruh  permukaan  tubuh  makhluk  hidup  dan mempunyai fungsi untuk melindungi tubuh dari pengaruh luar. Efek oksidatif radikal bebas dapat menyebabkan peradangan dan penuaan dini, yang disebabkan lipid pada kulit  yang  memiliki  fungsi  menjaga  kulit  agar  tetap  segar  berubah  menjadi  lipid peroksida karena bereaksi dengan radikal bebal sehingga mempercepat penuaan. Antioksidan merupakan senyawa yang menghambat, mencegah atau menghilangkan kerusakan oksidatif pada molekul target. Antioksidan adalah lini pertahanan pertama dalam melawan kerusakan radikal bebas, dan sangat penting untuk menjaga kesehatan dan kesejahteraan yang optimal [1]. Penggunaan  antioksidan alami mendapat perhatian yang sangat besar karena penggunannya yang aman dibandingkan antioksidan sintetik. Minyak argan merupakan salah satu minyak yang berasal dari Maroko yang memiliki manfaat  sebagai  antioksidan  alami  yang  baik  bagi  kesehatan.  Minyak  argan  adalah minyak  yang  stabil  karena  mengandung  sejumlah  besar  antioksidan  alami,  terutama tokoferol  yang  merupakan  molekul  dengan sifat  antioksidan  dan  radikal  bebas  yang kuat  [2].  Minyak  argan  mengandung  senyawa  fenolik  yang  tinggi  dan  merupakan penangkal  radikal  kuat  dan  dapat  digunakan  sebagai  sumber  potensial  antioksidan alami untuk penggunaan medis dan komersial [3].
Untuk mencapai efek optimum antioksidan dari minyak argan, maka diperlukan suatu sistem penghantaran yang baik yaitu dalam bentuk sediaan mikroemulsi. Mikroemulsi merupakan suatu sistem penghantaran yang stabil secara termodinamika, transparan serta memiliki ukuran globul yang kecil, terdiri dari campuran minyak, air, surfaktan dan ko-surfaktan. Dimana mikroemulsi memiliki potensi besar dalam penghantaran zat
aktif    secara  dermal  bagi  senyawa  hidrofilik  dan  lipofilik  dengan  meningkatkan permeabilitas  transdermal  dalam  penghantaran  obat  secara  topikal  serta  memiliki beberapa  kelebihan  diantaranya  yaitu  dapat  menjaga  kestabilan  obat  yang  labil, pelepasan obat terkontrol serta melarutkan obat yang bersifat hidrofobik maupun larut dalam minyak [4].
Salah satu metode yang paling umum digunakan untuk menguji aktivitas antioksidan adalah  dengan  menggunakan  radikal  bebas  1,1-diphenyl-2-  picrylhydrazil  (DPPH). Metode DPPH dapat memberikan hasil yang akurat, reliabel, cepat dan praktis sehingga sering  digunakan.  Pada  penelitian  ini  minyak  argan  diformulasikan  dalam  bentuk sediaan  mikroemulsi  dan  menguji  aktivitas  antioksidan  menggunakan  metode pemerangkapan radikal bebas 1,1-diphenyl-2-picryhydrazil (DPPH).

## 2.  Metode

## 2.1 Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  yaitu  alat-alat  gelas,  timbangan  analitik,  Spektrofotometer  UV- VIS, hot plate, magnetic stirrer, indikator pH , sentrifugasi, viskometer brokfield. Bahan yang digunakan pada penelitian ini yaitu minyak argan ( Argania Spinosa L), Tween 80, Alkohol, Isopropil Miristat, gliresin, dan aquades.
2.2 Prosedur Kerja
2.2.1 Optimasi Basis Mikroemulsi
Surfaktan dan ko-surfaktan dicampur (campuran 1), pada campuran 1 ditambahkan fase minyak  (campuran  2).  Selanjutnya  distirer    dengan  menggunakan  magnetic  stirrer hingga homogen. Campuran 2 ditambahkan air sedikit demi sedikit dan distirer kembali menggunakan  magnetic  stirrer  dengan  kecepatan  200  rpm  selama  3  menit  sampai terbentuk  campuran  yang  homogen  dan  bening.  Setelah  diperoleh  campuran  yang homogen  dilakukan  ultrasonikasi  selama  15  menit  dan  didiamkan.  Pengamatan dilakukan  selama  24  jam  pada  setiap  basis  formula  melalui  pengamatan  tingkat kekeruhan dan dilanjutkan dengan uji sentrifugasi.

## 2.2.2 Formulasi Mikroemulsi Minyak Argan
Gliserin  dan  alkohol  sebagai  kosurfaktan  dicampur  dan  diaduk  hingga  homogen (campuran 1). Fase minyak yaitu minyak argan dan IPM dicampur dan diaduk hingga homogen  (campuran  2).  Campuran  2  dimasukkan  kedalam  fase  air  yaitu  tween  dan diaduk hingga jernih lalu ditambahkan campuran 1 dan diaduk menggunakan magnetic stirrer hingga homogen dengan kecepatan 200 rpm  selama 3 menit. Setelah diperoleh campuran  yang  homogen  dilakukan  ultrasonikasi  selama  15  menit  dan  didiamkan hingga 24 jam.
2.2.3  Evaluasi Sediaan
1. Pengamatan Organoleptis Pemeriksaan organoleptis meliputi warna, bau, dan kejernihan.
2. Evaluasi Sentrifugasi
Uji  stabilitas  mekanik  dilakukan  dengan  cara  sentrifus  dengan  kecepatam  3750  rpm selama  5  jam.  Setelah  disentrifugasi  dilihat  mikroemulsi  tetap  jernih,  tidak  terjadi pemisahan fase, atau terbentuk endapan.

## 3. Evaluasi Freeze-thaw
Evaluasi  dilakukan  dengan  menempatkan  sediaan  pada  suhu  4 0 C  selama  24  jam kemudian dipindahkan dan ditempatkan pada ruangan bersuhu 40 0 C selama 24 jam, proses ini dihitung 1 siklus. Evaluasi ini berlangsung selama 7 siklus dengan mengamati perubahan pH dan viskositas serta tampilan sediaan.
2.2.4  Uji Aktivitas Antioksidan
Thomas , et al., 2021; Indonesian Journal of Pharmacetical Education (e-Journal); 1(1): 30 - 39

## 1. Pembuatan Larutan DPPH
Larutan DPPH 0,5 mM sebagai larutan pereaksi, dibuat dengan cara menimbang 0,018 g serbuk DPPH dan dimasukkan ke dalam labu ukur 100 mL dan ditambahkan etanol hingga tanda batas, didapatkan konsentrai 0,5 mM yang dihitung terhadap BM DPPH sebesar 394,32 /mol.
2. Pengukuran Aktivitas Antioksidan Minyak Argan ( Argania spinosa L.) Dibuat larutan stok 1000 ppm dengan cara melarutkan 0,1 g minyak argan ke dalam 100 mL metanol. Dibuat larutan standar 5 ppm, 10 ppm, 20 ppm, 40 ppm dan 80 ppm dari larutan  stok.  Diambil  2  mL  dari  masing-masing  larutan  standard  an  ditambahkan larutan DPPH sebanyak 2 mL dan ditambahkan 1 mL metanol. Larutan divorteks dan diinkubasi  selama  30  menit  pada  suhu  37 0 C.  Dibaca  absorbansinya  pada spektrofotometri UV-Vis pada panjang gelombang 519 nm.
3. Pengukuran Aktivitas Antioksidan Kontrol Positif (Vitamin E) Dibuat larutan stok 1000 ppm dengan cara melarutkan 0,1 g vitamin E ke dalam 100 mL metanol. Dibuat larutan standar 20 ppm, 40 ppm, 60 ppm, 80 ppm dan 100 ppm dari larutan  stok.  Diambil  2  mL  dari  masing-masing  larutan  standard  dan  ditambahkan larutan DPPH sebanyak 2 mL dan ditambahkan 1 mL metanol. Larutan divorteks dan diinkubasi  selama  30  menit  pada  suhu  37 0 C.  Dibaca  absorbansinya  pada spektrofotometri UV-Vis pada panjang gelombang 519 nm.
4. Uji Aktivitas Antioksidan Sediaan Mikroemulsi Minyak Argan ( Argania spinosa L.) Masing-masing  formula  F1,  F2  dan  F3  dibuat  larutan  stok  1000  ppm  dengan  cara melarutkan 0,1 g sediaan mikroemulsi ke dalam 100 mL metanol. Dibuat larutan standar 20 ppm, 40 ppm, 60 ppm, 80 ppm dan 100 ppm dari larutan stok. Diambil 2 mL dari masing-masing  larutan  standard  an  ditambahkan  larutan  DPPH  sebanyak  2  mL  dan ditambahkan 1 mL metanol. Larutan divorteks dan  diinkubasi selama 30 menit pada suhu  37 0 C.  Dibaca  absorbansinya  pada  spektrofotometri  UV-Vis  pada  panjang gelombang 519 nm. Dihitung masing-masing persen pengikatan DPPH dengan minyak argan  ( Argania  spinosa L.),  DPPH  dengan  vitamin  E  dan  DPPH  dengan  mikroemulsi minyak argan dengan menghitung persen inhibisi, dengan rumus:
% Aktivitas antioksidan= Absorbansi blanko−absorbansi sampel
Absorbansi blanko x 100%
Nilai  IC 50 ( Inhibition  Conceentration )  adalah  konsentrasi  antioksidan  ( 𝜇 g/  mL)  yang mampu  memberikan  persen  perendaman  radikal  sebanyak  50%  disbanding  dengan kontrol melalui persamaan garis. Nilai IC 50 diperoleh dari perpotongan garis antara 50% daya  hambatan  dengan  sumbu  konsentrasi,  kemudian  masukan  persamaan  y=a+bx. Dimana y=50 dan nilai x menunjukan IC 50 . 2.2.5  Analisis Data Analisis data dilakukan menggunakan uji statistik yaitu one way anova, untuk melihat stabilitas fisik sediaan mikroemulsi minyak argan ( Argania spinosa L), serta Uji T Test untuk melihat perubahan aktivitas antioksidan pada t 0 dan t 28 .

## 3.  Hasil dan Pembahasan

## 3.1 Optimasi Basis Mikroemulsi
Penelitian  diawali  dengan  optimasi  basis  terlebih  dahulu  untuk  menentukan perbandingan  minyak,  surfaktan  dan  kosurfaktan  yang  tepat  agar  terbentuk mikroemulsi  yang  stabil,  jernih  dan  transparan.  Konsentrasi  surfaktan  harus  cukup tinggi  agar  dapat  menghasilkan  tegangan  antar  muka  yang  sangat  rendah,  dan membentuk  film  antar  muka  antara  minyak  dan  air  [5].  Pada  formula  digunakan
surfaktan tween 80, memiliki nilai HLB 15 yang bersifat hidrofilik, dan sesuai dengan mikroemulsi tipe minyak dalam air (M/A) yang dibuat [6]. Selain itu, tween 80 adalah surfaktan  golongan  non  ionik,  yang  memiliki  sifat  toksisitas  rendah  dan  tidak mengiritasi kulit sehingga baik digunakan secara topical [7].

## 3.2  Hasil Evaluasi Organoleptik
Untuk  mengurangi  konsentrasi  surfaktan  diperlukan  kosurfaktan.  Kosurfaktan berperan  menurunkan  tegangan  antar  muka,  meningkatkan  fleksibilitas  film  yang dibentuk  surfaktan. Kosurfaktan  yang  digunakan  dalam formulasi  yaitu  gliserin  dan alkohol. Gliserin memiliki sifat yang rentan terhadap oksidasi pada penyimpanan dan juga  bisa  digunakan  sebagai  peningkat  penetrasi  sediaan  topikal  [6].  Alkohol  dan gliserin  sebagai  kosurfaktan  bisa  berpenetrasi  pada  lapisan  surfaktan  dan  minyak sehingga dapat menurunkan tegangan antarmuka air-minyak hingga kenilai terendah sehingga akan menghasilkan mikroemulsi [8].
Pada optimasi basis, fase minyak yang digunakan yaitu  isopropil  miristat (IPM). IPM bersifat tahan terhadap oksidasi dan hidrolisis, selain itu juga IPM dapat meningkatkan penetrasi dan penghantaran transdermal sehingga dapat meningkatkan absorbsi obat ke  dalam  kulit  [9].  Konsentrasi  yang  digunakan  yaitu  sebanyak  3%. Pembuatan mikroemulsi dilakukan secara hati-hati dengan memperhatikan suhu, serta waktu dan kecepatan  pengadukan.  Suhu  yang  digunakan  yaitu  suhu  ruang,  untuk  mencegah terjadinya penurunan tegangan antar muka. Proses pengadukan yang dilakukan tidak lama  dan  tidak  terlalu  cepat.  Proses  pengadukan  dapat  membentuk  sediaan mikroemulsi dengan mendispersikan fase terdispersi karena adanya energi kinetik yang diberikan  dapat  menyebabkan  fase  terdispersi  terpecah  menjadi  globul-globul  kecil. Pengadukan  yang  terlalu  lama  akan  membuat  tetesan-tetesan  dalam  mikroemulsi berbenturan  dan  akan  membentuk  globul  yang  lebih  besar,  mikroemulsi  yang dihasilkan akan menjadi tidak stabil dengan terbentuknya pemisahan fase. Sedangkan pengadukan yang telalu singkat akan menyebabkan pengumpalan bahan–bahan yang tidak homogen sehingga akan menghasilkan mikroemulsi menjadi keruh [10].
Tabel 1. Hasil optimasi basis mikroemulsi
Hasil  optimasi  basis  pada  tabel  1.  menunjukan  formula  F1  sampai  F3  meghasilkan sediaan yang keruh. Hal ini kemungkinan kurangnya jumlah surfaktan dan kosurfaktan yang  diperlukan  untuk  membentuk  lapisan  film  disekeliling  globul  sehingga mikroemulsi yang dihasilkan keruh. Formula F4 dan F5 memiliki tampilan fisik agak keruh.  Pada formula F6 dan F7 yang memiliki tampilan jernih, tetapi terdapat busa pada permukaan sediaan formula F7 sehingga dipilih formula F6. Konsentrasi tween pada
Bahan Formula % F1 F2 F3 F4 F5 F6 F7 1:8 1:9 1:10 1:11 1:12 1:13 1:14 IPM 3 3 3 3 3 3 3 Tween 80 18 20 22 24 26 28 30 Gliserin 1 1 2 3 1 2 3 Alkohol 5 6 6 6 9 9 9 Aquadest 100 100 100 100 100 100 100 Evaluasi Kejernihan Keruh  Keruh  Keruh  Agak Keruh Agak Keruh Jernih  Jernih
Thomas , et al., 2021; Indonesian Journal of Pharmacetical Education (e-Journal); 1(1): 30 - 39
formula  F6  yaitu  28%,  dimana  konsentrasi  tersebut  tidak  melebihi  batas  penerimaan kulit. Konsentrasi alkohol pada formula F6 yaitu sebesar 9%. Penggunaan konsentrasi tersebut  terbilang  aman  karena  tidak  akan  mengiritasi  kulit,  alkohol  pada  sediaan topikal akan mengiritasi kulit jika penggunaan konsentrasi diatas 50%[6].
Tabel 2. Hasil formulasi mikroemulsi Bahan Formula % F1 F2 F4 Minyak Argan 0.5 1 1.5 IPM 3 3 3 Tween 80 28 28 28 Alkohol 2 2 2 Gliserin 9 9 9 Aqudest add 100 100 100 Evaluasi kejernihan Jernih Jernih Jernih
Formula  F6  selanjutnya diuji  sentrifugasi,  dilakukan  selama  5 jam  dengan  kecepatan 3750  rpm,  tujuan  dilakukan  uji  sentrifugasi  adalah  untuk  mengetahui  apakah  terjadi pemisahan  fasa  dan  untuk  mengetahui  kestabilan  sediaan  selama  satu  tahun  apabila disimpan pada suhu kamar [11]. Tidak terdapat pemisahan pada formula F6, tidak ada pengendapan dan tetap jernih.
3.3 Formulasi Sediaan Mikroemulsi Minyak Argan ( Argania spinosa L.)
Hasil  optimasi  basis  F6  selanjutnya  ditambahkan  minyak  argan  ( Argania  spinosa L.) dengan 3 variasi konsentrasi yaitu F1 0,5%, F2 1%, dan F3 1,5%. Penambahan minyak argan pada formula  dengan cara mencampurkannya dengan fase minyak yaitu IPM. Pada  penambahan  minyak  argan  dalam  formula  tidak  menyebabkan  perubahan tampilan fisik sediaan, dimana sediaan tetap jernih dan  transparan.
3.4  Evaluasi Stabilitas Sediaan Mikroemulsi Minyak Argan ( Argania spinosa L.) Stabilitas sediaan farmasi merupakan kemampuan suatu produk untuk bertahan dalam batas yang ditetapkan sepanjang periode penyimpanan dan penggunaan, dimana sifat dan karakteristik sediaan yang dimiliki masih sama dengan pada saat dibuat [13]. Uji stabilitas terdiri dari stabilitas fisik dan kimia. Pada penelitian dilakukan uji stabilitas fisik meliputi evaluasi organoleptis, pH, viskositas, sentrifugasi dan freeze-thaw.
Tabel 3. Hasil evaluasi organoleptis Formula Warna Bau Homogenitas t 0 t 28 t 0 t 28 t 0 t 28 F1 Kuning Bening Kuning Bening Khas tween  Khas tween  Homogen  Homogen F2 Kuning Bening Kuning Bening Khas tween  Khas tween  Homogen  Homogen F3 Kuning Bening Kuning Bening Khas tween  Khas tween  Homogen  Homogen Tabel 4. Hasil evaluasi pH Waktu/T (Hari) Ph F1 0.5% F2 1% F3 1.5% 0 7 7 7 4 7 7 7 8 7 7 7
12 7 7 7 16 6 7 7 20 6 7 6 24 6 6 6 28 6 6 6
Evaluasi  organoleptik  bertujuan  untuk  melihat  perubahan  tampilan  fisik  sediaan meliputi  perubahan  warna,  bau  dan  homogenitas.  Pada  tabel    4.  menunjukkan  hasil evaluasi organoleptik formula F1, F2, dan F3 pada hari pertama dan hari ke-28, tidak mengalami  perubahan  warna,  bau  maupun  homogenitas.  Ketiga  formula  sediaan memiliki warna kuning jernih dan bauh khas tween, dimana warna dan bau tersebut dihasilkan dari surfaktan yang digunakan dengan konsentrasi lebih tinggi dari bahan lainnya, serta ketiga sediaan tampak homogen dan transparan sesuai dengan syarat dari mikroemulsi yang harus memiliki tampilan fisik yang jernih dan transparan. Pada hasil evaluasi pH ketiga formula sediaan yang didapatkan yaitu 7 dan mengalami penurunan  menjadi  6.  Evaluasi  pH  bertujuan  untuk  mengetahui  keamanan  suatu sediaan, terutama sediaan topikal. Idealnya sediaan topikal mempunyai nilai pH yang sama dengan pH kulit agar tidak terjadi iritasi pada permukaan kulit, dimana pH kulit berkisar antara 4-8 [12]. Sehingga hasil evaluasi pH sesuai dengan yang diharapkan.
Tabel 5. Hasil evaluasi viskositas Waktu/T (Hari) Viskositas F1 0.5% F2 1% F3 1.5% 0 320 212 212 4 320 212 212 8 340 200 208 12 344 228 226 16 344 244 240 20 366 220 222 24 346 212 216 28 346 268 264
Tujuan  dari  uji  viskositas  adalah  untuk  mengetahui  konsistensi  dari  sediaan  yang dibuat. Viskositas memiliki pengaruh pada penggunaan obat yang diaplikasikan secara topikal,  makin  rendah  nilai  viskositas  suatu  sediaan  makin  mudah  digunakan  dan sebaliknya makin tinggi nilai viskositas makan seiaan akan susah dioleskan pada kulit [14]. Mikroemulsi memiliki nilai viskositas kurang dari 200 cPs [13]. Berdasarkan hasil yang didapatkan pada tabel , 5 viskositas ketiga formula memiliki nilai lebih dari 200 cPs. Hal tersebut kemungkinan karena adanya gliserin yang digunakan, dimana gliserin mampu mengikat air sehingga dapat meningkatkan ukuran unit molekul.
Uji sentrifugasi dilakukan selama 5 jam dengan kecepatan 3750 rpm, tujuan dilakukan uji  sentrifugasi  adalah  untuk  mengetahui  apakah  terjadi  pemisahan  fasa  dan  untuk mengetahui kestabilan sediaan selama satu tahun apabila disimpan pada suhu kamar [11].  Pada  ketiga  formula  menunjukan  sediaan  tetap  stabil,  tidak  terjadi  pemisahan, tidak ada pengendapan dan tetap jernih.
Tabel 6. Hasil evaluasi pH pada freeze-thaw Waktu/T (Hari) Ph F1 0.5% F2 1% F3 1.5% 0 7 7 7
Thomas , et al., 2021; Indonesian Journal of Pharmacetical Education (e-Journal); 1(1): 30 - 39
4 7 7 7 8 7 6 6 12 6 6 6 16 6 6 6 20 6 6 6 24 6 6 6 28 6 6 6 Tabel 7. Hasil evaluasi viskositas pada suhu freeze-thaw Waktu/T (Hari) Viskositas F1 0.5% F2 1% F3 1.5% 0 320 212 212 4 320 212 212 8 344 216 232 12 344 216 236 16 324 200 236 20 320 200 212 24 296 200 216 28 288 184 200
Berdasarkan hasil yang didapatkan pada tabel 6 dan 7, nilai pH dan viskositas ketiga formula pada suhu freeze-thaw tidak jauh berbeda dengan nilai pH dan viskositas pada suhu ruang. Pada ketiga formula  juga tidak terjadi pemisahan yang memperlihatkan kestabilan dari sediaan yang tetap jernih dan transparan.
Tabel 8. Hasil evaluasi stabilitas sentrifugasi Waktu/T (Hari) Sentrifugasi F1 0.5% F2 1% F3 1.5% 0-28 Tidak Memisah Tidak Memisah Tidak Memisah
Minyak  argan (Argania  spinosa L.)  dalam  bentuk  mikroemulsi  sama  halnya  dengan stabilitas fisik dalam bentuk emulsi. Penelitian El-Abassi  dkk [16],  memformulasikan minyak argan (Argania spinosa L.) dalam bentuk sediaan emulsi, menghasilkan stabilitas fisik  yang  baik  selama  penyimpanan  dan  relative  monodispesrsi  hingga  120  hari penyimpanan.  Mikroemulsi  minyak  argan (Argania  spinosa L.)  yang  dihasilkan  juga memiliki stabilitas fisik yang baik.

## 3.5  Aktivitas Antioksidan
Nilai abosrbansi yang dihasilkan, digunakan untuk menunjukan aktivitas antioksidan. Pengukuran blangko DPPH diukur pada panjang gelombang 500-530. Hasil absorbansi DPPH sebagai blangko sebesar pada panjang gelombang 519 nm. Untuk minyak argan ( Argania spinosa L), didapatkan hasil IC 50 sebesar 39.50 𝜇 g/mL. Tabel 9. Hasil aktivitas antiokidan minyak argan ( Argania spinosa L.) dan vit. E Sampel IC 50 ( 𝝁 g/mL) Minyak argan 39.50 Vitamin E 17.33 Tabel 10. Hasil aktivitas antiokidan sediaan mikroemulsi minyak argan ( Argania spinosa L.) Sampel IC 50 ( 𝝁 g/mL)
Hari Pertama (t 0 ) Hari Ke-28 (t 28 ) F1 291.14 230.43 F2 89.02 129.01 F3 81.07 116.30
Hasil  penelitian  Kamal  dkk  [3],  minyak  argan  memiliki    aktivitas  antioksidan  yang dinyatakan  dengan trolox  equivalents (TE)  berkisar  antara  3.46-4.43  mg  TE/g.  Hasil penukuran vitamin E, didapatkan hasil 17,33 𝜇 g/mL. Pada tabel 4.10 menunjukan hasil aktivitas antioksidan sediaan mikroemulsi ketiga formula pada T 0 dan T 28 mengalami perubahan. Nilai IC 50 Formula F1 pada T 0 sebesar 291.14 𝜇 g/mL dan T 28 sebesar 230.43 𝜇 g/mL.  Nilai  IC 50 Formula  F2  pada  T 0 sebesar  89.02 𝜇 g/mL  dan  T 28 sebesar  129.01 𝜇 g/mL.    Nilai  IC 50 Formula  F3  pada  T 0 sebesar  81.07 𝜇 g/mL  dan  T 28 sebesar  116.30 𝜇 g/mL. Suatu senyawa dikatakan memiliki antioksidan sangat kuat jika nilai IC 50 <50, kuat 50-100, sedang 100 -150 dan lemah 151-200 [17]. Berdasarkan hasil yang didapatkan minyak argan memiliki aktivitas antioksidan yang sangat kuat. Formula F1 memiliki aktivitas  antioksidan  yang  sangat  lemah.  Sedangkan  formula  F2  dan  F3,  memiliki aktivitas antioksidan kuat dan menjadi sedang setelah penyimpanan selama 28 hari.

## 3.6  Uji Statistik
Aktivitas  antioksidan  ketiga  formula  pada  hari  pertam  (t 0 )  dan  hari  ke-28  (t 28 )  diuji menggunakan paired  T-Test, untuk  melihat  perbedaan  bermakna    nilai  aktivitas antioksidan  ketiga  sediaan.  Diperoleh  harga  p  value  =  0,896,  (>0.05),  hal  tersebut menunjukkan tidak ada perbedaan hasil uji aktivitas antioksidan ketiga formula pada hari pertam (t 0 ) dan hari ke-28 (t 28 ). 4.  Kesimpulan
Berdasarkan hasil  penelitian yang telah dilakukan dapat diambil  kesimpulan bahwa, sediaan mikroemulsi minyak argan ( Argania spinosa L.) memiliki aktivitas antioksidan dan  mengalami  perubahan  nilai  aktivitas  antioksidan  setelah  penyimpanan  28  hari dengan  nilai  IC 50 F1  291.14 𝜇 g/mL  menjadi  230.43 𝜇 g/mL,  F2  89.02 𝜇 g/mL  menjadi 129.01 𝜇 g/mL, F3 81.07 𝜇 g/mL menjadi 116.30 𝜇 g/mL. Hasil uji statistik T Test p value = 0,896, (>0.05), tidak ada perbedaan yang  hasil uji aktivitas antioksidan ketiga formula pada hari pertam (t 0 ) dan hari ke-28 (t 28 ).

## Referensi
[1]  Yadav,  A.  Kumari,  R.,  Yadav,  A.,  Mishra,  J.  P.,  Srivatva,  S.  &  Prabha,  S.  (2016).
Antioxidants and its functions in human body - A Review. Research in Environment and Life Sciences . Vol 9
[2]  Guillaume, D. dan Charrour, Z. (2011). Argan Oil. Medicine Review. Vol 16
[3]  Kamal,  R.,  Kharbach,  M.,  Imig,  J.  D.,  Eljmeli,  M.,  Doukkali,  Z.,  Mrabti,  H.  N., Elmsellem, H., Bouklouze, A., Cherrah, Y., Alaoui, K., ( 2017). Antioxidant activities, total polyphenolic compounds and HPLC/DAD/MS phenolic profile of argan oil derived  from  two  different  methods  of  extractions. Journal  of  Materials  and Environmental Sciences . Vol 8
[4]  Chansakaow,  S.  Sirisa-Ard,  P.  dan  Khonkarn,  R.  (2017).  Preparation, Characterization  And  Antioxidant  Activity  Of  Xanthone-Loaded  Making (Hodgsonia  Heteroclita)  Microemulsions. International  Journal  Of  Pharmacy  And Pharmaceutical Sciences . Vol 9
Thomas , et al., 2021; Indonesian Journal of Pharmacetical Education (e-Journal); 1(1): 30 - 39
[5]  Kumar, K. S., Dhachinamoorthi, D., Saravanan, R., Gopal, U. K. dan Shanmugam, V.  Microemulsions  As  Carrier  For  Novel  Drug  Delivery:  A  Review. International Journal of Pharmaceutical Sciences Review and Research . Vol 10
[6]  Rowe,  R.C.,  Paul  J.  Sheskey  ,  dan  Marian  E  Quinn.  2009. Handbook  Of Pharmaceutical Excipients. Sixth Edition. Pharmaceutical Press: London
[7] Sulastri,  E.,  Oktaviani,  C.  dan  Yusriadi.  2015.  Formulasi  Mikroemulsi  Ekstrak Bawang Hutan dan Uji Aktivitas Antioksidan. Jurnal Pharmascience. Vol 2
[8]  Martin,  A.,  James,  S.  dan  Arthur,  C.  1993. Farmasi  Fisik:  Dasar-dasar  Farmasi  Fisik dalam Ilmu Farmasetik. UI Press: Jakarta
[9]  Pamudji,  J.  S.,  Darijanto,  S.  T.  dan  Rosa,  S.  2012.  Formulasi  dan  Evaluasi Mikroemulsi  Minyak  dalam  Air  Betametason  17-Valerat. Acta  Pharmaceutica Indonesia. Vol 38
[10]  Hasrawati,  A.,  Hasyim,  N.  dan  Irsyad,  N.  A.  2012.  Pengembangan  Formulasi Mikroemulsi  Minyak  Sereh  ( Cymbopogon  nardus )  Menggunakan  Emulgator Surfaktan Nonionik. Jurnal Fitofarmaka Indonesia. Vol. 3 No.1
[11]  Lachman,  L.  Lieberman,  H.  A.  dan  Kanig,  J.  L.  1976. The  Theory  and  Practice  of Industrial Pharmacy. Lea and Febiger. Philadelphia
[12]  Vadas,  E.  B.  2000.  Stability  of  Pharmaceutical  Products,  dalam  Gennaro,  A.  R. Remington : The Sciences and Practice of Pharmacy , 20 th edition Jilid I. Philladelphia College of Pharmacy and Sciences
[13]  Danimayostu,  A.  A.,  Shofiana,  N.  M.  dan  Permatasari,  D.  2017.  Pengaruh Penggunaan  Pati  Kentang  (Solanum  tuberosum)  Termodifikasi  AsetilasiOksidasi sebagai  Gelling  agent  terhadap  Stabilitas  Gel  Natrium  Diklofenak. Pharmaceutical Journal Of Indonesia . Vol 3(1)
[14] Sinko, P. J. 2006. Martin’s Physical Pharmacy and Pharmaceutical Sciens Fifth Edition . Lippicott Wiliams & Wilkins. Philadelphia
[15]  Fitriani,  E.  W.,  Imelda,  E.,  Kornelis,  C.  dan  Avanti,  C.  2016.  Karakterisasi  dan Stabilitas Fisik Mikroemulsi Tipe A/M dengan Berbagai Fase Minyak. Pharm Sci Res . Vol 3
[16]  El-Abbassi,  A.,  Neves,  M.  A.,  Kobayashi,  I.,  Hafidi,  A.  dan  Nakajima,  M.,  2013. Preparation  and  characterization  of highly  stable  monodisperse argan  oil-in-water emulsions using microchannel emulsification. Europe Journal Lipid Science Technology . Vol 115
[17] Badarinath, A., Rao, K., Chetty, CS., Ramkanth, S., Rajan, T. dan Gnanaprakash, K. 2010. A Review on In-vitro Antioxidant Methods : Comparisons, Correlations, and Considerations. International Journal of PharmTech Research .