## AQUASAINS
(Jurnal Ilmu Perikanan dan Sumberdaya Perairan)

## SUPLEMENTASI MINYAK IKAN UNTUK PENINGKATAN IMUNITAS
NON SPESIFIK UDANG VANAME ( Litopenaeus vannamei )
Vina Olivia Indraswati 1 · Supono 2 · Asep Saefulloh 3
Ringkasan Increased immunity shrimp be- came one of the targets of feeding with a complete nutrient constituent composition. Shrimp have a different immune system com- pared to fish in general and can be increa- sed quickly by providing the right nutrients. Research nutrient supplementation to in- crease non-specific immunity, especially in Pacific white shrimp (Litopenaeus vanna- mei) still rarely done, especially with the addition of fish oil. This research was con- ducted to study the effect of fish oil supple- mentation in different oil among lemuru oil and patin oil with a non-specific parameter of Pacific white shrimp among total hae- mocyte count (THC), the differential ha- emocyte count (DHC), challenge test with Vibrio harveyi and relative percent survival (RPS). Design of experiments using a com- pletely random design with three treatmen- ts and four replications. The treatment is adding the lemuru oil (treatment A), pa- tin oil (treatent B) and without the addi- tion of fish oil (control). The results showed that the addition of lemuru fish and patin fish oil treatment can increase THC, DHC, which affect the phagocytic activity relati- ve to the level of protection without giving
1 ) Mahasiswa Jurusan Budidaya Perairan. 2 ) Do- sen Jurusan Budidaya Perairan Fakultas Perta- nian Universitas Lampung. Jl Soemantri Brodjo- negoro No 1 Gedong Meneng Bandar Lampung 35145. 3 ) Marine Research Center PT Central Per- tiwi Bahari E-mail: supono_unila@yahoo.com
fish oil (P<0.05). The increasing of non- specific immunity of Pacific white shrimp with fish oil needs to analyze in the econo- mic side to be more economical if applied to the shrimp farmers or commercial feed mills.
Keywords fish oil, immunity, white shrimp, haemocyte, survival
Received: 25 Oktober 2014 Accepted: 2 Desember 2014

## PENDAHULUAN
Budidaya udang merupakan salah satu in- dustri besar dengan tingkat produksi se- kitar 30% dari total suplai udang dunia. Tingginya produksi tersebut adalah seba- gai konsekuensi dari padat tebar tinggi yang didukung oleh pemberian pakan buatan da- lam pemenuhan kebutuhan energi. Pakan menjadi faktor penting pada budidaya udang dengan padat tebar tinggi. Pembuatan pak- an udang membutuhkan tepung seperti te- pung ikan, tepung kepala udang, tepung cumi yang merupakan bahan dasar protein dalam pakan. Keunggulan bahan tersebut adalah memiliki profil asam amino yang lengkap serta mengandung zat atraktan.
Penambahan minyak ikan dalam pakan be- berapa manfaat, seperti dapat menambah
energi pakan (Chan et al., 1997) dan sum- ber asam lemak tak jenuh seperti linole- at. Asam lemak tak jenuh esensial umum- nya banyak terdapat dalam minyak nabati seperti minyak jagung dan minyak hewa- ni seperti minyak ikan. Minyak ikan, selain sebagai sumber energi, juga kaya akan kan- dungan asam lemak tak jenuh rantai pan- jang, terutama asam lemak omega-3 (Rus- mana et al., 2008).
Dua jenis asam lemak tak jenuh majemuk yang diduga paling potensial dapat digu- nakan sebagai bahan dasar obat-obatan ada- lah EPA ( eicosapentaenoic acid ) dan DHA ( docosahexaenoic acid ). Beberapa peneli- tian yang menguji peran EPA atau DHA dalam mengatasi berbagai penyakit yang berbahaya telah banyak dilakukan (Wiba- wa, 2005). Selain itu, penambahan lemak dalam pakan dapat menghambat aktivitas mikroba karena lemak melapisi partikel pak- an sehingga mencegah pelekatan bakteri.
Aplikasi immunostimulan sudah banyak di- lakukan pada beberapa jenis ikan baik me- lalui pakan, perendaman maupun melalui suntikan. Berbagai penelitian telah dilakuk- an untuk mendapatkan bahan yang dapat digunakan sebagai stimulus guna mening- katkan kekebalan tubuh dalam upaya me- nanggulangi penyakit, baik yang disebabk- an oleh virus, bakteri maupun mikroorga- nisme berbahaya pada ikan maupun udang (Roza and Johnny, 2004).

## MATERI DAN METODE
Penelitian ini dilaksanakan pada Septem- ber - Oktober 2014 di Marine Research Cen- ter (MRC) PT.CentralPertiwi Bahari (CPB) di Sidomulyo Kabupaten Lampung Selat- an. Alat-alat untuk pemeliharaan udang vaname dan pengujian mikrobiologi digu- nakan dalam penelitian. Bahan yang digu- nakan diantaranya pakan buatan, minyak lemuru dan minyak patin ikan, udang va- name dengan berat total rata-rata 5 gram, isolat biakan Vibrio harveyi dan bahan pem- buatan preparat ulas darah.
Prosedur penelitian antara lain meliputi per- siapan pakan. Pakan dicampur minyak ik- an (3 %/kg pakan) sampai tercampur rata.
Pemeliharaan udang vaname menggunak- an wadah berukuran 100 liter yang telah dilengkapi dengan selang aerasi dan penyi- ponan untuk memenuhi parameter kuali- tas air yang dibutuhkan oleh udang vana- me. Tiap wadah diisi 20 ekor udang vana- me ukuran 5 gram. Pemberian pakan dila- kukan empat kali yakni pukul 07.00, 10.00, 14.00, dan 17.00.
Total Haemocyte Count dihitung pada hari ke-0, 7, 14, 21 dan 30. Penghitungan THC dilakukan menggunakan haemocytometer dengan prosedur (Courdova et al., 2002) sebagai berikut:
T HC =
J umlah Sel yang dihitung
V olume dihitung
X P engenceran X 10 6 (1)
Perhitungan Differential Haemocyte Count (hyalin, granular, semi granular) dihitung pada hari ke-0, 7, 14, 21, dan 30. Perhi- tungan DHC menurut (Amlacher, 1970) ada- lah sebagai berikut:
DHC = J U mlah T iap Sel Hemosit T otal Hemosit X 100% (2)
Aktivitas fagositosis dihitung pada hari ke- 7 setelah uji tantang. Pengujian aktifitas fagositosis menurut (Amlacher, 1970) ada- lah sebagai berikut:
AF (%) = P f agosit yang aktif P f agosit yang diamati X 100%
(3)
Setelah 21 hari pemberian pakan perlaku- an, semua udang diuji tantang dengan bak- teri V. harveyi melalui injeksi intramus- kular 0,1 mL larutan bakteri V. harveyi 1x108 cfu/mL. Selama periode uji tantang, udang diberi pakan kontrol. Kualitas air dimonitor agar berada dalam kondisi sta- bil dan penggantian air dilakukan setiap 3-4 hari sekali tergantung pada kondisi air. Udang mati dikeluarkan setiap hari guna mengkonfirmasi bahwa penyebab kematian adalah V. harveyi . Pengamatan terhadap mortalitas dilakukan setiap hari selama 7 hari setelah uji tantang. Pengamatan di- lakukan secara visual dengan melihat dan menghitung udang yang mati setiap hari pada unit perlakuan, dan diamati setiap hari setelah uji tantang. Nilai RPS dihi- tung sebagai berikut:
RP S = 1 − Kematian udang yang diuji tantang Kematian udang yang tidak diuji tantang X 100% (4)
Gambar 1 Fluktuasi total haemocyte count (THC) pada udang vaname ( Litopenaeus vanna- mei ) dengan pemberian minyak ikan dan waktu pengamatan yang berbeda

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hemosit merupakan salah satu komponen penting yang dapat diukur sebagai salah satu parameter imunitas udang. Pada hari ke-7 terjadi penurunan jumlah total hemo- sit (Gambar. 1). Hal tersebut diduga meru- pakan dampak dari pemberian minyak ik- an, yaitu tubuh udang vaname masih ber- adaptasi terhadap pemberian minyak ikan sebagai imunostimulan. Penurunan yang ce- pat terhadap jumlah total hemosit pada udang merupakan salah satu dampak da- ri pemberian imunostimulan. Peningkatan jumlah total hemosit tertinggi terjadi pada hari ke 14 hingga ke 21 yang diperoleh da- ri perlakuan dengan penambahan minyak ikan lemuru. Hasil ini menunjukkan bahwa pemberian minyak ikan memilki kemampu- an sebagai imunostimulan bagi udang, ka- rena mampu meningkatkan daya tahan tu- buh udang. Uji statistik menunjukkan bah- wa perlakuan penambahan minyak ikan le- muru berbeda nyata terhadap kontrol te- tapi tidak berbeda nyata terhadap penam- bahan minyak ikan patin (P<0,05).
Penurunan THC pada udang vaname ter- jadi pada pada hari ke-30 (Gambar. 1) se- telah dilakukan uji tantang. Hasil ini sesu- ai dengan pendapat (Van de Braak, 2002) yakni penurunan total hemosit setelah uji tantang berhubungan dengan aktivitas per- tahanan yang berbeda. Hemosit akan ber- migrasi ke tempat injeksi menyebabkan ber- kurangnya konsentrasi sel dalam hemolim berubah menjadi gumpalan setelah infeksi
Gambar 2 Differential haemocyte count (DHC) pada sel hyalin udang vaname ( Litopenaeus van- namei ) yang diberi penambahan minyak ikan ber- beda
bakteri yang akut dan injeksi bahan asing (Smith and Ratcliffe, 1980).
Penambahan minyak ikan dalam formula pakan memberikan pengaruh terhadap to- tal sel hyalin udang vaname yang dipeliha- ra selama 30 hari (Gambar 2) dengan mi- nyak lemuru maupun minyak patin. Hasil ini menunjukkan bahwa penambahan mi- nyak ikan pada udang dapat meningkatkan total sel hyalin udang vaname. Penambah- an minyak lemuru lebih baik dibandingkan dengan minyak patin, hasil ini disebabk- an karena minyak lemuru merupakan ikan laut sehingga memiliki kandungan protein yang lebih tinggi. Peningkatan tersebut da- pat menyebabkan meningkatnya proses fa- gositosis pada udang vaname. Hal ini sesu- ai dengan Irianto et al. (1995) bahwa kan- dungan asam lemak omega-3 bervariasi ter- gantung pada jenis ikan. Pada umumnya komposisi minyak ikan dari ikan laut lebih komplek dan mengandung asam lemak tak jenuh rantai panjang yang relatif lebih ba- nyak dibandingkan dengan ikan air tawar. Uji lanjut menunjukkan bahwa penambah- an minyak lemuru berbeda nyata dengan kontrol namun tidak berbeda nyata dengan penambahan minyak patin terhadap total sel hyalin udang vaname (P<0,05).
Hemosit pada udang dapat dikelompokkan menjadi 3 jenis yaitu sel hyalin, semigra- nular dan granular (Effendy et al., 2004). Pengamatan sel granular pada penelitian dilakukan sampai hari ke-30 pemeliharaan. Nilai sel granular paling tinggi terdapat pa- da pelakuan dengan penambahan minyak lemuru hari ke-21 yakni 107,1 dan paling
Gambar 3 Differential haemocyte count (DHC) pada sel granular udang vaname ( Litopenaeus van- namei ) yang diberi penambahan minyak ikan ber- beda
rendah terdapat pada kontrol 87,7 (Gam- bar 3). Uji lanjut menunjukkan bahwa pe- nambahan minyak lemuru berbeda nyata dengan kontrol namun tidak berbeda nyata dengan penambahan minyak patin terha- dap total sel granular udang vaname (P<0,05). Hasil Peningkatan total sel granular mam- pu meningkatkan proses fagositosis sehing- ga daya tahan udang vaname juga mening- kat.
Pengamatan sel semi granular memberik- an hasil cenderng menurun setelah uji tan- tang (Gambar 4). Jumlah sel semi granular terendah diperoleh dari perlakuan kontrol pada hari ke-7 yaitu 107 sel/ml sedangk- an yang tertinggi yaitu pada perlakuan pe- nambahan minyak lemuru hari ke-14 seba- nyak 173,4 sel/ml. Penurunan ini dipenga- ruhi oleh aktifitas fagositosis pada daerah infeksi. Intensitas infeksi pada inang yang tinggi dapat menurunkan jumlah sel pa- da granulosit. Didukung hasil uji statistik sel semi granular penambahan minyak le- muru berbeda nyata dengan kontrol tetapi tidak berbeda nyata dengan penambahan minyak patin (P<0,05).
Peningkatan kekebalan tubuh ditunjukkan dengan meningkatnya aktivitas fagositosis, sebagaimana diungkapkan Brown (2000), bahwa peningkatan kekebalan tubuh dapat diketahui dari peningkatan aktivitas sel fa- gosit dari hemosit. Penambahan minyak le- muru memberikan hasil yang paling baik pada aktivitas fagositosis dibandingkan de- ngan minyak patin dan kontrol (Gambar 5). Hasil uji anova menunjukkan bahwa pem- berian minyak ikan berpengaruh nyata ter-
Gambar 4 Differential haemocyte count (DHC) pada sel semi granular udang vaname ( Litopenaeus vannamei ) yang diberi penambahan minyak ikan berbeda.
Gambar 5 Aktivitas fagositosis udang vaname ( Litopenaeus vannamei ) yang diamati pada hari ke-7 setelah uji tantang menunjukkan hasil terting- gi dengan penambahan minyak lemuru
hadap aktivitas fagositosis udang vaname (P<0,05). Perlakuan A menghasilkan akti- vitas fagositosis paling besar yakni 86,7% diikuti oleh perlakuan B yaitu 84,7%, se- dangkan aktivitas fagositosis terendah pa- da kontrol yaitu 68,28%.
Tingkat RPS terendah terdapat pada kon- trol dengan nilai 41,2% dan tertinggi pada perlakuan A dengan penambahan minyak ikan lemuru sebesar 78,7%, sedangkan pa- da perlakuan B dengan penambahan mi- nyak ikan patin nilai RPS adalah 73,7% (Gambar 6). Uji lanjut menunjukkan ha- sil berbeda nyata dengan kontrol tetapi ti- dak berbeda nyata dengan minyak patin (P<0,05). Penambahan minyak lemuru da- lam formulasi pakan udang vaname dalam penelitian memiliki tingkat THC, DHC dan aktivitas fagositosis yang paling tinggi di- bandingkan perlakuan lain, sehingga mem- pengaruhi tingginya nilai RPS. Hal ini me-
Gambar 6 Tingkat perlindungan relatif (RPS) minyak ikan terhadap infeksi Vibrio harveyi pada udang vaname ( Litopenaeus vannamei )
nunjukan bahwa minyak ikan dapat me- ningkatkan imunitas udang vaname.

## SIMPULAN
Suplementasi minyak lemuru dalam formu- lasi pakan berpengaruh nyata terhadap me- ningkatnya sistem imun non spesifik dan nilai tingkat perlindungan relatif (RPS) yang lebih besar dibandingkan suplementasi mi- nyak patin dan tanpa suplementasi minyak ikan setelah diuji tantang dengan Vibrio harveyi .

## Pustaka
Amlacher, E. (1970). Text Book of Fish Diseases . TFH Publication, New York. Brown, K. (2000). Applied Fish Pharma- cology . Kluwer Academic Publisher. Chan, S., Huber, J., Chen, K., Simas, J. M., and Wu, Z. (1997). Effects of ru- minally inert fat and evaporative cooling on dairy cows in hot environmental tem- perature. J. Dairy Sci , 80:1172–1178. Courdova, A. I. C., Saavedra, N. H., Phi- llipis, R. D., and Ascentio, F. (2002). Generation of superoxide anion and sod activity in haemocytes and muscle of american white shrimp (litopenaeus van- namei) as a response to beta -glucan and respiratory burst activity of turbot pha- gocytes. Aquaculture . Effendy, S., Alexander, R., and Akbar, T.
(2004). Peningkatan haemosit benur udang windu (penaeus monodon fabri- cus) pasca perendaman ekstrak ragi roti
(saccharomyces cerevisiae) pada konsen- trasi yang berbeda. Jurnal Sains dan Teknologi , 14:46–53. Irianto, H. E., Suparno, Murtini, J., and Sunarya (1995). Kandungan asam lemak omega-3 beberapa jenis ikan dan produk olahan tradisional. In Prosiding Widya- karya Nasional Khasiat Makanan Tradi- sional .
Roza, D. and Johnny, F. (2004). Pening- katan kekebalan larva ikan kerapu be- bek cromileptes altivelis dengan meng- gunakan immunostimulan terhadap in- feksi vnn. In Prosiding Pengendalian Penyakit pada Ikan dan Udang Berbasis Imunisasi dan Biosecurity , Purwokerto. Rusmana, D., Piliang, W., Setiyono, A., and Budijanto, S. (2008). Minyak ikan lemuru dan suplementasi vitamin e da- lam ransum ayam broiler sebagai imuno- modulator. Animal Production , 10:110– 116.
Smith, V. and Ratcliffe, N. (1980). Cellu- lar defence reactions of the shore crab, carcinus maenas (l), in vivo hemocytic and histopathological responses to inje- cted bacteria. Journal of Invertebrate Pathology , 35:65–74.
Van de Braak, K. (2002). Hemocytic De- fence in Black Tiger Shrimp (Penaeus monodon) . PhD thesis, Wageningen In- stitute of Animal Science.
Wibawa, P. (2005). Eksplorasi potensi mi- nyak ikan layang sebagai sumber bahan baku industri non-pangan baru di indo- nesia. Jurnal MIPA , 28:202–208.