Penambahan minyak cengkeh Syzygium aromaticum dalam pakan untuk memperbaiki kinerja pertumbuhan ikan mas
Cyprinus carpio Linnaeus 1758
[The supplementation of clove oil Syzygium aromaticum in the diet to improve the growth performance of common carp Cyprinus carpio Linnaeus 1758]
Tira Silvianti 1,  , Dedi Jusadi 2 , Sri Nuryati 2
1 Program Studi Ilmu Akuakultur, Sekolah Pascasarjana, Institut Pertanian Bogor Jln. Raya Dramaga, Kampus IPB Dramaga Bogor 16680
2 Departemen Budidaya Perairan, FPIK-IPB Jln. Agatis, Kampus IPB, Dramaga, Bogor 16680
Diterima: 05 Oktober 2015; Disetujui: 26 April 2016

## Abstrak
Penelitian ini dilakukan dengan tujuan mengevaluasi penambahan minyak cengkeh Syzygium aromaticum dalam pakan untuk meningkatkan kinerja pertumbuhan ikan mas Cyprinus carpio . Penelitian dilakukan pada bulan Februari hingga bulan April 2015, di Laboratorium Produksi, Kolam Percobaan Departemen Budidaya Perairan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Institut Pertanian Bogor. Ikan uji yang digunakan adalah mas dari varietas Majalaya yang berbobot 3,90 ±1,08 g. Ikan ditebar pada akuarium berukuran 50×40×35 cm 3 (volume 150 L) dengan kepadatan 25 ekor ikan setiap akuarium. Selama masa pemeliharaan, ikan diberi pakan yang mengandung minyak cengkeh dengan dosis 0, 5, 10, 15, atau 100 mg 100 g -1 pakan dengan masing-masing tiga ulangan. Uji pertumbuhan dilakukan selama 56 hari, dilanjutkan dengan uji kecernaan selama 10 hari. Ikan diberi pakan tiga kali dalam sehari, yaitu pukul 08.00, 12.00, dan 16.00. Ha- sil penelitian menunjukkan bahwa kinerja pertumbuhan ikan mas dipengaruhi oleh penambahan minyak cengkeh. Ikan yang diberi pakan dengan penambahan minyak cengkeh pada dosis 100 mg 100 g -1 pakan secara signifikan memiliki ki- nerja pertumbuhan dan status kesehatan terbaik, termasuk profil gambaran darah dan tinggi vili usus.
Kata penting: Cyprinus carpio , kinerja pertumbuhan, minyak cengkeh,

## Abstract
The aim of this research was to determine the effect of the diet supplemented with clove oil Syzygium aromaticum on the growth performance of common carp, Cyprinus carpio . The experiment was carried out from February to April 2015 at the Laboratory Production, Department of Aquaculture, Faculty of Fisheries and Marine Sciences, Bogor Agricultural University. Common carp, strain Majalaya with an initial body weight of 3.90±1.08 g were reared in the 50×40×35 cm 3 aquaria (150 L volume) at density of 25 fish per aquaria. During the rearing period, fish were fed on the diet contained with  clove  oil  with  a dose of  0, 5, 10,  15, or  100  mg  100  g -1 diet  with  three  replications.  The  experiment  for  growth performance was conducted for 56 days and followed by digestibility test for 10 days. The fish were fed three times a day at  08:00, 12:00  and  16:00 hours.  The  results  showed  that  the  growth  performances  of  fish  were  affected  by  clove  oil supplementation. Fish fed on the diet supplemented with clove oil at a dose of 100 mg 100 g -1 diet significantly had the best growth performance and health status, including blood profile and the intestinal villus length .
Keywords : Cyprinus carpio , growth performance, Syzygium aromaticum oil

## Pendahuluan
Ikan  mas  merupakan  jenis  ikan  air  tawar yang dominan dibudidayakan di Jawa Barat. Pe- ngembangan  budi  daya  ikan  mas  di  Jawa  Barat masih  dihadapkan  pada  kendala  makin  mening- katnya  harga  pakan  secara  periodik.  Di  sisi  lain, nilai  efisiensi  pakan  cenderung  tetap  atau  menu- run. Keadaan demikian meningkatkan biaya pro-
duksi budi daya, sedangkan harga ikan cenderung tetap.  Oleh  karena  itu  diperlukan  upaya  untuk meningkatkan  efisiensi  pakan  agar  biaya  pro- duksi menurun. Salah satu upaya yang dapat dila- kukan  yaitu  dengan  penambahan  minyak  ceng- keh di dalam formulasi pakan.
Berdasarkan  penelitian  yang  telah  dilaku- kan  Gaber  (2000),  diketahui  bahwa  penambahan 8  mg  minyak  cengkeh  100  g -1 pakan  dapat  me- ningkatkan kinerja pertumbuhan ikan nila. Bobot
Penulis korespondensi Surel: tirasilvianti@yahoo.com
tubuh ikan meningkat 261% dengan nilai konver- si pakan 2,2; sedangkan pakan yang tidak ditam- bah  minyak  cengkeh  hanya  menghasilkan  per- tambahan  bobot  sebesar  128,2%,  dengan  nilai konversi pakan  3,6. Peningkatan kinerja pertum- buhan tersebut, seiring dengan peningkatan status kesehatan ikan berupa gambaran darah yaitu total eritrosit, total leukosit, kadar hemoglobin dan he- matokrit  meningkat  yang  paling  baik  pada  pe- nambahan dosis tersebut.
Minyak  cengkeh  merupakan  bahan  alami yang mudah tersedia secara massal, sehingga pe- nerapannya mudah dilakukan. Menurut Goni et al . (2009),  kandungan  minyak  cengkeh  terdiri  atas 82%  eugenol,  10%  β  karyophilene,  2,9%  α  hu- melene,  0,5%  eugenol  acetate,  dan  0,4%  δ-ca- dinene.  Eugenol  memiliki  aktivitas  antioksidan yang  efeknya  sama  dengan  α  tokoferol  dalam menghambat  peroksidase  lipid  (Ogata et  al .
2000).  Hasil penelitian Mu’nisa (2009) memper- lihatkan  bahwa  ekstrak  daun  cengkeh  memiliki peran  sebagai  senyawa  antioksidan  dan  antiper- kolesterolemia  (menekan  tingginya  kadar  ko- lesterol dalam darah) pada kelinci. Minyak ceng- keh juga dapat menyebabkan perubahan permea- bilitas  sel  bakteri.  Oleh  karena  itu  minyak  ceng- keh  dapat  menghambat  pertumbuhan  sejumlah besar  bakteri  gram  negatif  maupun  positif  dan beberapa  jenis  kapang  (Nunez  &  Aquino  2012), sehingga  penggunaan  minyak  cengkeh  pada  do- sis  tertentu  diduga  dapat  menghambat  aktivitas mikroflora  saluran  pencernaan  yang  merugikan. Penggunaan  minyak  cengkeh  telah  diakui  aman oleh The United States Food and Drug Adminis- tration  (USFDA)  bila  tidak  melebihi  dosis  1500 ppm  di  semua  kategori  makanan  (Gulcin et  al . 2012).  Berdasarkan  uraian  di  atas,  penelitian  ini dilakukan dengan tujuan untuk mengevaluasi pe- nambahan  minyak  cengkeh  dalam  pakan  untuk meningkatkan kinerja pertumbuhan ikan mas.

## Bahan dan metode

## Analisis kandungan bahan aktif minyak cengkeh
Minyak  cengkeh  yang  digunakan  dipero- leh  dari  penyedia  minyak  atsiri  di  kota  Bogor. Minyak cengkeh dianalisis kandungan bahan ak- tifnya  di  Balai  Penelitian  Tanaman  Rempah  dan Obat (BALITRO), Bogor. Analisis dilakukan de- ngan Gaskromatografi Agilent N890 dengan tipe kolom Carbowax 20 M dengan volume contoh 0,1 µl. Kondisi alat yang digunakan yaitu suhu kolom initial  60 0 C,  suhu  kolom  final  180 0 C,  suhu injektor  220 0 C,  suhu  detektor  250 0 C,  detektor FID, dan gas pembawa N 2 . Laju alir N 2 adalah 1 ml menit -1 , laju alir H 2 30 ml menit -1 , dan laju alir udara  tekan  40  ml  menit -1 .  Berdasarkan  hasil analisis  didapatkan  komposisi  bahan  aktif  mi- nyak  cengkeh  yaitu  eugenol  58,27%, ß-carophy- len 31,29% dan metil eugenol 0,41%.

## Pembuatan pakan uji
Penelitian  ini  terbagi  menjadi  dua  tahap yaitu  uji  pertumbuhan  dan  uji  kecernaan  pakan. Pakan  untuk  uji  pertumbuhan  dan  uji  kecernaan menggunakan formula yang sama, namun pada uji kecernaan  pakan  ditambahkan  kromium  (Cr 2 O 3 ) sebanyak  0,5%  sebagai  indikator  (NRC  1993). Pakan uji merupakan pakan hasil formulasi bahan baku  (Tabel  1)  yang  ditambahi  minyak  cengkeh dengan dosis berbeda yaitu 0, 5, 10, 15, dan 100 mg  100  g -1 pakan  dengan  kadar  protein  pakan berkisar  29,14-31,20%  dan  gross  energi  (GE) 409,68-423,60  kkal/100  g.  Setiap  perlaku-an terdiri  atas  tiga  ulangan.  Minyak  cengkeh  yang ditambahkan  pada  pakan  uji  sebelumnya  di- emulsikan dengan 2% telur (20 g kg -1 pakan) ser- ta 250 ml air. Adonan pakan uji dicetak pada me- sin pencetak pelet berdiameter 1-2 mm kemudian dikeringkan dalam oven bersuhu 40 ºC selama 24 jam. Hasil proksimat pakan perlakuan pada pene- litian ini disajikan pada Tabel 2.
Tabel 1. Formulasi pakan uji Bahan baku Perlakuan minyak cengkeh dalam pakan (mg 100 g -1 pakan) 0 5 10 15 100 Tepung ikan (%) 15 15 15 15 15 Tepung tulang dan daging (%) 10 10 10 10 10 Tepung  kedelai (%) 25 25 25 25 25 Minyak ikan (%) 2 2 2 2 2 Metionin (%) 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 Lisin (%) 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 Pollard (%) 39,75 39,74 39,74 39,73 39,65 Tapioka (%) 3 3 3 3 3 Minyak jagung (%) 1 1 1 1 1 Vitamin & mineral (%) 3 3 3 3 3 NaCl (%) 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 Minyak cengkeh (%) 0 0,005 0,01 0,015 0,1 Total 100 100 100 100 100 Tabel 2. Hasil proksimat pakan perlakuan Parameter Perlakuan minyak cengkeh dalam pakan (mg 100 g -1 pakan) 0 5 10 15 100 Protein (%) 29,14 30,67 29,43 29,30 31,20 Lemak (%) 8,09 7,90 8,44 8,36 7,93 Serat kasar (%) 4,67 5,36 4,25 4,07 4,64 Abu (%) 10,79 12,74 10,74 11,47 12,02 BETN (%) 44,17 39,92 43,77 43,31 41,29 GE (kkal 100g -1 ) 420,33 409,68 423,60 420,24 418,56 Keterangan : GE = gross energy (Watanabe 1988), 1g protein = 5,6 kkal GE, 1 g karbohidrat/BETN = 4,1 kkal GE, 1g lemak = 9,4 kkal GE

## Pemeliharaan ikan
Wadah  budi  daya  ikan  yang  digunakan adalah  akuarium  berukuran  100×50×40  cm -3 se- banyak  15  buah  dengan  volume  air  masing-ma- sing akuarium 150 L. Setiap akuarium dilengkapi dengan aerator untuk menjaga kelarutan oksigen, thermostat sebagai  pengatur  suhu,  dan top  filter untuk  mengurangi  kekeruhan  akibat  bahan  orga- nik di dalam akuarium.
Ikan yang digunakan adalah ikan mas  va- rietas Majalaya dengan bobot rata-rata 3,91±1,08 g yang diperoleh dari Balai Besar Pengembangan Budidaya  Air  Tawar  (BBPBAT)  Sukabumi.  Se- belum  diberi  perlakuan,  ikan  diadaptasikan  sela- ma  sepuluh  hari.  Lima  ekor  ikan  dibius,  lalu  di- simpan ke dalam freezer untuk keperluan analisis proksimat ikan awal.
Pemeliharaan ikan untuk uji pertumbuhan dilakukan  selama  56  hari.  Ikan  yang  digunakan yaitu  sebanyak  25  ekor  dalam  setiap  akuarium. Selama  pemeliharaan,  ikan  diberi  pakan  dengan metode at  satiation (pemberian  pakan  seke- nyangnya)  dengan  frekuensi  pemberian  tiga  kali sehari,  yaitu  pukul  08:00,  12:00,  dan  16:00.  Pe- nimbangan  bobot  ikan  dilakukan  pada  hari  ke-0 dan hari ke-57. Kondisi kualitas air dijaga de-ngan penyiponan  dan  penggantian  air  sebanyak  25% setiap 2-3 hari sekali. Selama masa pemeli-haraan, dilakukan pengukuran kualitas air pada hari ke-0 dan  ke-25,  sedangkan  pengamatan  suhu  air dilakukan  setiap  hari.  Nilai  kualitas  air  yang diperoleh meliputi suhu air berkisar 28-31ºC, pH 7,29-7,55,  oksigen  terlarut  4,60-6,20  mg  L -1 ,  al-
kalinitas 80-168 mg L -1 CaCO 3, dan total amonia nitrogen 0,03-0,13 mg L -1 .
Pada akhir masa pemeliharaan, ikan dipu- asakan selama satu hari kemudian ditimbang bo- botnya.  Tiga  ekor  ikan  dari  setiap  akuarium  di- ambil dan dijadikan satu untuk dilakukan analisis gambaran  darah  dan  proksimat  tubuh.  Tiga  ekor ikan  dari  setiap  akuarium  diambil  untuk  diukur panjang  usus,  bobot  hati,  serta  dilakukan  histo- logi usus untuk mengukur tinggi vili usus. Selan- jutnya dua ekor ikan setiap akuarium diambil un- tuk keperluan uji kelimpahan total dan jenis bak- teri di usus.
Perlakuan  uji  kecernaan  pakan  dimulai pada hari ke-57 hingga hari ke-67. Ikan yang di- gunakan  yaitu  sebanyak  13  ekor  dengan  bobot rata-rata  9,87±0,97  g  dari  sisa  uji  pertumbuhan. Ikan  diberi  pakan  berkromium  dengan  frekuensi pemberian  tiga  kali  sehari.  Feses  ikan  mulai  di- kumpulkan  pada  hari  ke-60  (ditandai  dengan  fe- ses bewarna hijau) hingga jumlahnya mencukupi untuk  keperluan  analisis.  Feses  disimpan  dalam botol  film  dan  diletakkan  dalam freezer guna menjaga  kesegarannya,  untuk  kemudian  diana- lisis kandungan kromiumnya.

## Analisis kimia
Analisis proksimat dilakukan terhadap ba- han baku pakan, pakan uji, dan ikan uji. Analisis proksimat  dilakukan  di  Laboratorium  Nutrisi Ikan,  Departemen  Budidaya  Perairan,  Fakultas Perikanan  dan  Ilmu  Kelautan,  Institut  Pertanian Bogor. Analisis proksimat untuk kadar air meng- gunakan metode pemanasan dalam oven bersuhu 105-110 0 C. Serat kasar menggunakan metode pe- larutan  sampel  dengan  asam  kuat,  basa  kuat  dan pemanasan.  Protein  kasar  menggunakan  metode Kjeldahl,  lemak  kering  dengan  menggunakan Soxchlet, lemak basah dengan menggunakan me-
tode Folch. Kadar abu dengan pemanasan dalam tanur bersuhu 600 0 C (Watanabe 1988).

## Parameter penelitian
Parameter yang diamati yaitu laju pertum- buhan  harian,  retensi  protein,  retensi  lemak,  efi- siensi pakan, tingkat kelangsungan hidup, indeks hepatosomatik,  panjang  usus  relatif,  dan  tinggi vili. Parameter kecernaan pakan yang diamati ya- itu  kecernaan  protein.  Parameter  kesehatan  ikan yang diamati yaitu jumlah kelimpahan total bak- teri dan jenis bakteri di usus, serta profil gambar- an darah ikan berupa jumlah sel darah merah, sel darah  putih,  hematokrit,  dan  kadar  hemoglobin. Berikut  ini  adalah  rumus  dari  parameter  peneli- tian.
 Pengukuran laju pertumbuhan harian ikan uji di- hitung menggunakan persamaan berikut:
LPH =   [√ 𝑊 𝑡 𝑊 0 𝑡 − 1] × 100
Keterangan: LPH= laju pertumbuhan harian, W t = bo- bot individu akhir pemeliharaan (g), W o = bobot indi- vidu awal pemeliharaan (g), t= lama waktu pemeliha- raan (hari)
 Nilai retensi protein dihitung dengan persamaan sebagai berikut:
RP =   [ (FP − I)
P ] × 100
Keterangan: RP= retensi protein (%), FP= jumlah pro- tein di tubuh ikan pada akhir pemeliharaan (g), I= jum- lah protein di  tubuh  ikan pada  awal  pemeliharaan  (g), P= jumlah protein yang dikonsumsi ikan (g)
 Nilai retensi lemak dihitung dengan mengguna- kan persamaan sebagai berikut:
RL =   [ (FL − I)
L ] × 100
Keterangan: RL= retensi lemak (%), FL= jumlah le- mak pada tubuh ikan pada akhir pemeliharaan (g), I= jumlah lemak pada tubuh ikan pada awal pemeliharaan (g), L= jumlah lemak yang dikonsumsi ikan (g)
 Nilai efisiensi pakan dihitung dengan  menggu- nakan persamaan sebagai berikut:
EP =   {[ (W t + D) − W 0 F ] × 100}
Keterangan: EP= efisiensi pakan (%), F  = jumlah pa- kan yang diberikan selama pemeliharaan (g), W t = bo- bot akhir pemeliharaan (g), W o = bobot awal pemeli- haraan (g), D= bobot ikan mati (g)
 Kelangsungan hidup ikan diamati selama 56 hari pemeliharaan  ikan.  Kelangsungan  hidup  ikan ditentukan dengan persamaan sebagai berikut:
TKH =   [ N t N 0 ] × 100
Keterangan: TKH = tingkat kelangsungan hidup (%), Nt= jumlah ikan akhir pemeliharaan (ekor), No= jum- lah ikan awal pemeliharaan (ekor)
 Indeks  hepatosomatik  (IHS)  diukur  dengan menimbang  bobot  hati  dibandingkan  dengan bobot  tubuh  ikan  mas  hasil  perlakuan.  IHS dihitung berdasarkan persamaan:

## 𝐼𝐻𝑆 = 𝐵𝑂𝐻 𝐵𝑇 × 100
Keterangan: IHS= indeks hepatosomatik, BOH= bobot organ hati (g), BT= bobot tubuh ikan (g)
 Panjang usus relatif diperoleh dengan mengukur panjang  usus  dibandingkan  dengan  panjang tubuh  ikan  mas  hasil  perlakuan,    dengan persamaan:

## 𝑃𝑈𝑅 = 𝑃𝑈 𝑃𝑇
Keterangan:  PU= panjang usus (cm), PT= panjang tu- buh ikan (cm).
 Pengamatan tinggi vili dilakukan dengan mela- kukan histologi usus. Pembuatan preparat histo- logis melalui empat tahapan, yaitu fiksasi, para- finasi, pemotongan jaringan, dan pewarnaan ja- ringan  dengan  hematoxylin  dan  eosin.  Perhi- tungan  tinggi  vili  diperoleh  dengan  mengukur panjang vili di bawah mikroskop dengan perbe- saran 100 kali.
Parameter  kecernaan  yang  diukur  adalah kecernaan  protein  pakan  uji.  Nilai  kecernaan  di- hitung dengan rumus sebagai berikut:
𝐾𝑃 = [1 − 𝑎 𝑎′ × 𝑏 𝑏′ ] × 100
Keterangan: KP= kecernaan protein, a= %Cr2O3 da- lam pakan, a’= %Cr2O3 dalam feses, b = %nutrien dalam pakan, b’= %nutrien dalam feses
Pengujian kelimpahan total bakteri dilaku- kan  dengan  cara  ikan  pada  setiap  perlakuan  di- bedah dan diambil organ usus bagian depan. Bo- bot  usus  ditimbang  sebanyak  0,1  g.  Selanjutnya organ  usus  digerus  dengan  mortar  steril  dengan ditambahi  larutan  fisiologis  sebanyak  1  ml.  La- rutan  fisiologis  ditambahkan  sebanyak  9  ml  dan diencerkan secara berseri hingga didapatkan kon- sentrasi 10 -3 , 10 -4 , 10 -5 , 10 -6 , 10 -7 . Tahap selanjut- nya  dari  masing-masing  seri  pengenceran  diam- bil  sebanyak  50  µl  dan  disebar  pada  media  agar TSA ( tyiptic soy agar ) lalu diinkubasi pada suhu 37 0 C selama 24 jam. Jumlah total koloni tunggal yang  tumbuh  di  media  dihitung  dan  dikarak- terisasi  berdasarkan  bentuk,  gram,  uji  oksida- tif/fermentatif, sulfida indol motility (SIM), oksi- dase  dan  katalase.  Karakterisasi  bakteri  dilaku- kan menurut metode Cowan (1974). Kelimpahan total  bakteri  dihitung  menggunakan  metode  hi- tungan  cawan  sebar  ditentukan  dalam colony forming  unit (CFU)  dengan  persamaan  sebagai berikut:
𝐽𝐵 = 𝑁 𝐽𝑃 × 1 𝑓
Keterangan: JB= banyaknya sel bakteri (CFU  g -1 ), N= jumlah koloni bakteri, JP= jumlah penebaran, f= faktor pengenceran
Pengamatan sel darah merah (eritrosit) di- lakukan  sebagai  berikut:  darah  dihisap  menggu- nakan  pipet  hemasitometer  berbulir  merah  hing- ga skala 0,5, lalu diencerkan  dengan larutan Ha- yem  sampai  skala  maksimum  101.  Kedua  ujung
ditutup  kemudian  digoyangkan  membentuk  ang- ka  delapan  selama  3-5  menit.  Selanjutnya,  larut- an  pada  bagian  ujung  pipet  yang  tidak  teraduk dibuang sebanyak 1 tetes. Tetesan berikutnya di- masukkan  ke  dalam  hemasitometer  yang  telah dilengkapi dengan kaca penutup. Perhitungan di- lakukan  di  bawah  mikroskop  dengan  perbesaran 400×. Jumlah eritrosit dihitung pada 5 kotak be- sar hemasitometer dengan faktor pengenceran 200 kali.  Penghitungan  total  eritrosit  menggunakan rumus:
𝐽𝐸 = 𝐽𝑆 ̅ × 1 𝑉𝑘𝑏 × 𝑓𝑝
Keterangan: JE= jumlah eritrosit, JS=rataan jumlah sel terhitung, Vkb= volume kotak besar, fp=  faktor peng- enceran
Sel darah putih (leukosit) diamati sebagai berikut: darah dihisap menggunakan pipet hema- sitometer  hingga  skala  0,5  lalu  diencerkan  de- ngan larutan Turk’s sampai skala maksimum 11. Kedua  ujung  ditutup  kemudian  digoyangkan membentuk  angka  delapan  selama  3-5  menit. Selanjutnya, larutan pada bagian ujung pipet yang tidak teraduk dibuang sebanyak 1 tetes.  Tetesan berikutnya dimasukkan ke dalam haemositometer yang telah dilengkapi dengan kaca penutup. Per- hitungan  dilakukan  di  bawah  mikroskop  dengan perbesaran  400 × dan  jumlah  leukosit  dihitung pada 5 kotak besar haemositometer dengan faktor pengenceran 20 kali.  Penghitungan total leukosit digunakan rumus berikut ini:
𝐽𝐿 = 𝐽𝑆 ̅ × 1 𝑉𝑘𝑏 × 𝑓𝑝
Keterangan: JL= jumlah leukosit, JS= rataan jumlah sel terhitung, Vkb= volume kotak besar, fp=  faktor peng- enceran
Pengamatan  haematokrit  sebagai  berikut. Darah  dihisap  dengan  tabung  mikrohematokrit sampai mencapai ¾ bagian tabung, lalu ujung ta- bung ditutup dengan crytoseal sedalam kira-kira 1
mm,  sehingga  terbentuk  sumbat crytoseal .  Se- telah itu, tabung mikrohematokrit tersebut disen- trifuge  selama  5  menit  pada  5000  rpm  dengan posisi  tabung  yang  bervolume  sama  berhadapan agar putaran sentrifuse seimbang. Panjang bagian darah yang mengendap (a) dan panjang total vo- lume darah yang terdapat di dalam tabung (b) di- ukur  dengan  menggunakan  penggaris.  Penghi- tungan nilai hematokrit menggunakan rumus ber- ikut ini:
𝐻𝑎𝑒𝑚𝑎𝑡𝑜𝑘𝑟𝑖𝑡 = 𝑎 𝑏 × 100
Keterangan: a= panjang natan, b= panjang total vo- lume darah
Pengukuran kadar haemoglobin (Hb) dila- kukan  dengan  metode  Sahli.  Darah  dihisap  de- ngan  pipet  sahli  sampai  skala  20  mm 3 atau  pada skala  0,02  mL,  kemudian  darah  dipindahkan  ke dalam tabung Hb-meter yang telah diisi HCl 0,1 N sampai skala 10, kemudian diaduk dan dibiarkan selama  3-5  menit.  Setelah  itu  akuades  ditam- bahkan sampai warna darah dan HCl tersebut sa- ma seperti warna larutan standar yang ada dalam Hb-meter  tersebut.  Skala  dibaca  dengan  melihat permukaan  cairan  dan  dicocokkan  dengan  skala tabung sahli yang dilihat pada skala jalur g% (ku- ning)  yang  berarti  banyaknya  haemoglobin  da- lam gram per 100 mL darah atau g dL -1 .

## Analisis data
Penelitian  ini  menggunakan  Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan lima perlakuan dan tiga  ulangan.  Semua data  yang diperoleh  ditabu- lasi  menggunakan  Microsoft  Excel  2010  dan  di- lakukan analisis sidik ragam (ANOVA) pada pa- rameter laju pertumbuhan harian, kecernaan pro- tein,  retensi  protein,  retensi  lemak,  efisiensi  pa- kan, tingkat kelangsungan hidup, indek hepatoso- matik,  panjang  usus  relatif,  tinggi  vili  dan  gam- baran  darah  ikan  mas,  dengan  taraf  kepercayaan
95% menggunakan prosedur SPSS 17.0. Jika ber- beda  nyata  antar  perlakuan  dilakukan  uji  lanjut Tukey.  Parameter  kelimpahan  total  dan  kera- gaman  bakteri  di  usus  ikan  mas  dilakukan  ana- lisis  deskriptif.  Data  yang  berbeda  nyata  antar- perlakuan  dilakukan  analisis  regresi  untuk  me- nentukan  koefisien  korelasinya  menggunakan Microsoft Excel 2010.

## Hasil
Pemberian  pakan  yang  ditambah  minyak cengkeh dengan kadar 0 mg, 5 mg, hingga 100 mg 100  g -1 pakan  selama  56  hari,  menghasilkan pertumbuhan  ikan  mas  (Tabel  3).  Laju  pertum- buhan  harian  ikan  meningkat  dan  nilai  tertinggi pada perlakuan minyak cengkeh 100 mg 100 g -1 . Sejalan dengan paling tingginya laju pertumbuh- an harian, nilai efisiensi pakan pada perlakuan 100 mg  100  g -1 pakan  juga  paling  tinggi.  Data  pada Tabel  3  juga  menunjukkan  bahwa  pemberian pakan  yang  mengandung  minyak  cengkeh  dapat meningkatkan retensi lemak dan tingkat kelangsungan  hidup  ikan  mas.  Namun,  pembe- rian  pakan  yang  mengandung  minyak  cengkeh memberi  efek  yang  sama  seperti  pada  perlakuan kontrol  terhadap  kecernaan  protein  dan  retensi protein.
Berdasarkan  hasil  yang  didapatkan  dalam penelitian  ini,  hasil  analisis  regresi  laju  pertum- buhan  harian  (LPH)  dengan  pola  kuadratik  pada Gambar 1 mengikuti persamaan y =  -0,000036x 2 + 0,0075x + 1,5415, di mana y adalah LPH dan x adalah dosis minyak cengkeh. Artinya nilai LPH meningkat seiring dengan penambahan dosis mi- nyak  cengkeh  dalam  pakan.  Setiap  kenaikan  1% dosis  minyak  cengkeh  dalam  pakan,  dapat  me- ningkatkan  nilai  LPH  sebesar  0,0075.  Berdasar- kan  analisis  korelasi  didapat  r 2 =  0,8072  dan  r  = 0,8984,  menunjukkan  korelasi  positif  atau  hu- bungan  yang  erat  antara  penambahan  minyak cengkeh dengan LPH.
Regresi  retensi  lemak  (RL)  dengan  pola kuadratik  mengikuti  persamaan  y  =  -0,0216x 2 + 2,5396x + 53,053 (Gambar 2), di mana  y adalah RL dan  x adalah dosis  minyak cengkeh.  Artinya nilai  RL  meningkat  seiring  dengan  penambahan dosis  minyak  cengkeh  dalam  pakan.  Setiap  ke- naikan  1%  dosis  minyak  cengkeh  dalam  pakan, dapat  meningkatkan  nilai  RL  sebesar  2,5396%. Berdasarkan analisis korelasi didapat r 2 = 0,8903 dan r = 0,9435, menunjukkan korelasi positif atau hubungan  yang  erat  antara  penambahan  minyak cengkeh dengan RL.
Tabel  3.  Kinerja  pertumbuhan  dan  kecernaan  protein  ikan  mas  pada  penambahan  minyak  cengkeh  dalam pakan dengan dosis berbeda Parameter uji Perlakuan minyak cengkeh dalam pakan (mg 100 g -1 pakan) 0 5 10 15 100 W o (g) 3,90±0,06 a 3,91±0,06 a 3,92±0,06 a 3,92±0,04 a 3,90±0,02 a LPH 1,62±0,08 ab 1,47±0,01 a 1,58±0,13 ab 1,71±0,08 b 1,93±0,08 c KP (%) 74,08±6,28 a 77,93±5,57 a 82,08±7,01 a 78,31±2,36 a 78,63±3,07 a RP (%) 20,53±2,71 a 17,91±0,56 a 19,07±5,65 a 17,49±0,44 a 20,86±3,86 a RL (%) 49,11±4,70 a 73,87±2,10 ab 71,15±3,20 ab 86,68±13,18 b 90,71±15,13 b EP (%) 41,56±3,16 a 39,52±0,99 a 43,20±3,49 a 45,81±1,82 a 53,38±1,81 b TKH (%) 89,33±2,31 a 97,33±2,31 b 98,67±2,31 b 100±0 b 100±0 b
Keterangan: Nilai yang tertera merupakan nilai rata-rata ± simpangan baku. Huruf tika atas di belakang ni- lai simpangan baku yang berbeda pada setiap baris menunjukkan pengaruh yang berbeda nya- ta (p<0,05); W o = bobot ikan awal, LPH= laju pertumbuhan harian, KP= kecernaan protein, RP= retensi protein, RL= retensi lemak, EP= efisiensi pakan, TKH= tingkat kelangsungan hidup.
Gambar 1. Kurva analisis regresi nilai laju pertumbuhan harian ikan mas yang diberi pakan perlakuan mi- nyak cengkeh dengan dosis berbeda
Gambar 2. Kurva analisis regresi nilai retensi lemak ikan mas yang diberi pakan perlakuan minyak cengkeh dengan dosis berbeda
Regresi  retensi  lemak  (RL)  dengan  pola kuadratik  mengikuti  persamaan  y  =  -0,0216x 2 + 2,5396x + 53,053 (Gambar 2), di mana  y adalah RL  dan  x  adalah  dosis  minyak  cengkeh.  Hal  ini menunjukkan  bahwa  nilai  RL  meningkat  seiring dengan penambahan dosis minyak cengkeh dalam pakan. Setiap kenaikan 1% dosis minyak cengkeh dalam  pakan,  dapat  meningkatkan  nilai  RL sebesar  2,5396%.  Berdasarkan  analisis  korelasi didapat r 2 = 0,8903 dan r = 0,9435, menunjukkan korelasi  positif  atau  hubungan  yang  erat  antara penambahan minyak cengkeh dengan RL.
Regresi  efisiensi  pakan  (EP)  dengan  pola kuadratik  mengikuti  persamaan  y  =  -0,0022x 2 +
0,3507x + 40,079 dengan nilai r 2 = 0,9286 dan r = 0,9636  (Gambar  3),  di  mana  y  adalah  EP  dan  x adalah  dosis  minyak  cengkeh.  Hasil  ini  mem- pelihatkan bahwa nilai EP meningkat seiring de- ngan  penambahan  dosis  minyak  cengkeh  dalam pakan.  Setiap  kenaikan  1%  dosis  minyak  ceng- keh  dalam  pakan,  dapat  meningkatkan  nilai  EP sebesar  0,3507%  dan  adanya  korelasi  positif  an- tara penambahan minyak cengkeh dengan EP. Ko- relasi ini  menunjukkan bahwa peningkatan dosis minyak cengkeh dalam pakan akan diikuti dengan peningkatan efisiensi pakan hingga mencapai nilai optimum.
y = -0,000036x 2 + 0,0075x + 1,5415 R² = 0,8072 0 0,5 1 1,5 2 2,5 0 20 40 60 80 100 120 L aj u p er tu m b u h an h ar ian dosis minyak cengkeh(mg 100 g- 1 pakan) y = -0,0216x 2 + 2,5396x + 53,053 R² = 0,8903 0 20 40 60 80 100 120 140 0 20 40 60 80 100 120 reten si lem ak ( %) dosis minyak cengkeh(mg 100 g- 1 pakan)
Gambar 3. Kurva analisis regresi nilai efisiensi pakan ikan mas yang diberi pakan perlakuan minyak ceng- keh dengan dosis berbeda
Gambar 4. Kurva analisis regresi tingkat kelangsungan hidup ikan mas yang diberi pakan perlakuan minyak cengkeh dengan dosis berbeda
Berdasarkan  kurva  pada  analisis  regresi tingkat  kelangsungan  hidup  (TKH)  dengan  pola kuadratik  mengikuti  persamaan  y  =  -0,007x 2 + 0,7842x + 91,063 (Gambar 4), di mana  y adalah TKH  dan  x  adalah  dosis  minyak  cengkeh.  Arti- nya nilai TKH meningkat seiring dengan penam- bahan dosis minyak cengkeh dalam pakan. Setiap kenaikan 1% dosis minyak cengkeh dalam pakan, dapat  meningkatkan  nilai  RL  sebesar  0,7842%. Berdasarkan analisis korelasi didapat r 2 = 0,86 dan r  =  0,9273,  menunjukkan  korelasi  positif  atau
hubungan  yang  erat  antara  penambahan  minyak cengkeh dengan TKH.
Nilai indeks hepatosomatik ( IHS) dan pan- jang  usus  relatif  (PU/PT)  tidak  berbeda pada  se- mua  perlakuan  (Tabel 4).  Namun    tinggi  vili  se- makin  meningkat  sejalan  dengan  meningkatnya kadar minyak cengkeh dalam pakan. Peningkatan terbesar adalah perlakuan 100 mg  100 g -1 pakan.
Kelimpahan  total  bakteri  di  usus  ikan  mas  ter- tinggi adalah perlakuan 100 mg minyak cengkeh 100 g -1 pakan yaitu 3,6 x 10 7 CFU g -1 .
y = -0,0022x 2 + 0,3507x + 40,079 R² = 0,9286 0 10 20 30 40 50 60 0 20 40 60 80 100 120 ef is ien si p ak an ( %) dosis minyak cengkeh(mg 100 g- 1 pakan) y = -0,007x 2 + 0,7842x + 91,063 R² = 0,86 0 20 40 60 80 100 120 0 20 40 60 80 100 120 tin gka t kelan gs u n gan h id u p (% ) dosis minyak cengkeh(mg 100 g- 1 pakan)
Tabel 4. Indeks hepatosomatik (IHS), panjang usus relatif (PU/PT), tinggi vili (TV), dan kelimpahan total bakteri di usus ikan mas pada penambahan minyak cengkeh dalam pakan dengan dosis berbeda
Parameter Uji Perlakuan minyak cengkeh dalam pakan (mg 100 g -1 pakan) 0 5 10 15 100 IHS (%) 1,41±0,13 a 1,12±0,38 a 1,62±0,27 a 1,16±0,35 a 1,14±0,21 a PU/PT 1,35±0,14 a 1,53±0,23 a 1,55±0,02 a 1,62±0,19 a 1,78±0,09 a TV (µm) 300±00 a 366,67±57,74 ab 291,67±38,19 a 400±25,00 b 508,33±38,19 c Kelimpahan bakteri (CFU g -1 ) 1,46 x 10 7 0,64 x 10 7 1,24 x 10 7 1,82 x 10 7 3,6 x 10 7
Keterangan: Nilai yang tertera merupakan nilai rata-rata ± simpangan baku. Huruf tika atas di belakang nilai simpangan  baku  yang  berbeda  pada  setiap  baris  menunjukkan  pengaruh  yang  berbeda  nyata (p<0,05).
Gambar 5. Kurva analisis regresi nilai tinggi vili ikan mas yang diberi pakan perlakuan minyak cengkeh de- ngan dosis berbeda
Penambahan  minyak  cengkeh  dalam  pa- kan  juga  berdampak  pada  perubahan  morfologi usus  ikan  mas.  Hasil  analisis  regresi  tinggi  vili usus (TV) ikan mas dengan pola kuadratik meng- ikuti persamaan  y =  -0,028x 2 + 4,823x + 305,83 (Gambar  5),  di  mana  y  adalah  TV  dan  x  adalah dosis minyak cengkeh. Hal ini berarti TV mening- kat  seiring  dengan  penambahan  dosis  minyak cengkeh dalam pakan. Setiap  kenaikan 1% dosis minyak  cengkeh  dalam  pakan,  dapat  meningkat- kan  TV  sebesar  4,823  µm.  Berdasarkan  analisis korelasi didapat r 2 = 0,8138 dan r = 0,9021, me- nunjukkan  korelasi  positif  atau  hubungan  yang erat antara penambahan  minyak cengkeh dengan TV.
Tabel 5 menyajikan jenis bakteri yang ter- dapat  pada  usus.  Pada  semua  perlakuan  ditemu- kan jenis bakteri Acinetobacter . Keragaman jenis bakteri paling banyak ditemukan pada perlakuan 100 mg minyak cengkeh 100 g -1 pakan.
Tabel  6  menunjukkan  status  kesehatan ikan mas berdasarkan gambaran darah. Jumlah sel darah  merah  dan  nilai  hematokrit  ikan  tidak berbeda  secara  signifikan  pada  semua  perlakuan pakan.  Jumlah  sel  darah  putih  pada  perlakuan kontrol  lebih  tinggi  daripada  perlakuan  lainnya, yaitu sebesar 18,30 x 10 4 sel mm -3 . Kadar hemo- globin  terus  meningkat  seiring  dengan  mening- katnya  dosis  minyak  cengkeh,  dengan  nilai tertinggi sebesar 11,87 g dL -1 (dosis 100 mg).
y = -0,028x 2 + 4,823x + 305,83 R² = 0,8138 0 100 200 300 400 500 600 0 50 100 150 tin g g i v ili (µm ) dosis minyak cengkeh (mg 100 g- 1 pakan)
Tabel 5. Jenis bakteri dominan dan karakteristik biokimiawinya pada usus ikan mas Perlakuan
(mg 100 g -1 pakan) Karakteristik Biokimia Jenis bakteri Isolat  Bentuk  Gram  O/F  SIM  Oksidase  Katalase 0 1 Batang + O + - + Bacillus 2 Batang - O - - + Acinetobacter 5 1 Batang - - - - - Bacteroides 2 Batang - O - - + Acinetobacter 10 1 Batang - O + - + Acinetobacter , Chromobacterium lividium , Pseudomonas 2 Kokus + - - - + Micrococcus 15 1 Batang - O - + + Flavobacterium 2 Batang - O - - + Acinetobacter 100 1 Batang + - + - + Bacillus, Kurthia 2 Batang - O + - + Acinetobacter, Chromobacterium lividium , Pseudomonas
Keterangan: O/F = oksidatif/fermentatif, SIM = sulfida indol motility.
Tabel 6. Gambaran darah ikan mas pada penambahan minyak cengkeh dalam pakan dengan dosis berbeda
Parameter Uji Perlakuan minyak cengkeh dalam pakan (mg 100 g -1 pakan) 0 5 10 15 100 SDM (10 6 sel mm -3 ) 2,45±0,60 a 2,68±0,26 a 1,70±0,39 a 1,83±0,51 a 2,12±0,25 a SDP (10 4 sel mm -3 ) 18,30±3,69 b 10,60±2,84 a 10,97±2,34 ab 14,97±3,07 ab 10,13±1,10 a Hematokrit (%) 25,26±4,68 a 25,86±2,28 a 20,74±2,77 a 22,77±1,59 a 22,70±1,97 a Hemoglobin (g dL -1 ) 6,87±0,12 a 7,47±1,14 ab 8,07±0,70 ab 10,53±1,86 bc 11,87±1,51 c
Keterangan: SDM = sel darah merah, SDP = sel darah putih.

## Pembahasan
Penambahan  minyak  cengkeh  dengan  do- sis yang berbeda pada pakan ikan mas menunjuk- kan  berpengaruh  terhadap  peningkatan  kinerja pertumbuhan. Berdasarkan hasil yang didapatkan dalam penelitian ini, nilai laju pertumbuhan hari- an (LPH) meningkat seiring dengan penambahan dosis minyak cengkeh dalam pakan (korelasi po- sitif).  Hal  yang  sama  dengan  parameter  efisiensi pakan,  nilainya  meningkat  seiring  dengan  pe- nambahan  dosis  minyak  cengkeh  dalam  pakan (korelasi  positif).  Hasil  ini  memiliki  pengaruh yang  sama  dengan  hasil  penelitian  Gaber  (2000) bahwa  penambahan  minyak  cengkeh  dalam  pa- kan  dengan  dosis  8  mg  100  g -1 pakan  dapat  me-
ningkatkan bobot tubuh dan efisiensi pakan ikan nila  paling  baik  dibandingkan  dengan  perlakuan lainnya,  sedangkan  untuk  ikan  mas  pada  peneli- tian  ini  hasil  terbaik  dicapai  pada  dosis  100  mg 100 g -1 pakan. Hasil penelitian Mehr et al. (2014)
juga  menunjukkan  bahwa  penambahan  minyak cengkeh  sebanyak  450  ppm  pada  formulasi  pa- kan ayam broiler yang dipelihara selama 42 hari, memperlihatkan  adanya  peningkatan  konsumsi pakan, peningkatan pertumbuhan sebesar 64,38 g ekor -1 dibanding perlakuan kontrol (56,04 g ekor - 1 ),  serta  adanya  penurunan  rasio  konversi  pakan menjadi 1,99 dibanding dengan kontrol (2,19).
Peningkatan  pertumbuhan  ikan  tertinggi pada penambahan  minyak cengkeh dengan dosis
100 mg 100 g -1 sejalan dengan peningkatan jum- lah bakteri di usus yang paling tinggi. Penambah- an  minyak  cengkeh  dalam  pakan  hingga  dosis maksimum  yang  diberikan  tidak  menyebabkan kematian  bakteri  dalam  usus  ikan,  bahkan  me- nyebabkan kepadatan bakteri semakin meningkat yaitu 3,6 x 10 7 CFU g -1 . Hal ini menandakan bah- wa  penambahan  minyak  cengkeh  dalam  pakan tidak memberikan efek negatif bagi populasi mi- kroflora  usus.  Abdel-Magied  &  Ahmed  (2011) mengatakan bahwa eugenol dalam minyak ceng- keh bersifat antitoksik (tidak berbahaya), hepato- protektif, dan membantu mengeluarkan racun da- ri usus. Akan tetapi, kepadatan bakteri yang ting- gi  pada  perlakuan  100  mg  100  g -1 tidak  mampu meningkatkan  kecernaan  pakan.  Hal  ini  terlihat dari  nilai  kecernaan  protein  yang  sama.  Diduga walaupun jumlah bakteri di usus ikan pada perla- kuan minyak cengkeh 100 mg 100 g -1 pakan lebih tinggi  daripada  perlakuan  lainnya,  namun  ikan tidak  dapat  menyerap  protein  pakan  secara maksimal. Oleh sebab itu kecernaan protein tidak berbeda pada semua perlakuan.
Penambahan  minyak  cengkeh  dalam  pa- kan  juga  berdampak  pada  perubahan  morfologi usus  ikan  mas.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  se- makin  tinggi  kadar  minyak  cengkeh  yang  dibe- rikan  ke  dalam  pakan,  ikan  yang  mengonsumsi pakan  tersebut  di  akhir  penelitian  usus  dan  vili- nya  bertambah  panjang  (korelasi  positif).  Me- ningkatnya  tinggi  vili  usus,  terutama  pada  per- lakuan  minyak  cengkeh  100  mg  100  g -1 pakan, diduga menyebabkan meningkatnya nutrien yang diserap usus, sehingga tubuh memperoleh nutrien dalam  jumlah  yang  lebih  banyak,  yang  berdam- pak pada pertumbuhan ikan di perlakuan minyak cengkeh 100 mg 100 g -1 pakan paling tinggi. Se- suai  dengan  Khojasteh  (2012)  yang  mengemu- kakan bahwa pada ikan Oncorhynchus mykiss dan Sparus  aurata yang memiliki  usus  dengan  vili
yang  panjang  dengan  fungsi  utama  sebagai penyerapan  nutrisi  dapat  mengoptimalkan  per- mukaan  usus.  Selain  itu  menurut  Nasir  (2002), semakin panjang vili pada usus menunjukkan luas penampang  vili  semakin  lebih  besar,  sehing-ga penyerapan nutrien menjadi lebih maksimal.
Penambahan  minyak  cengkeh  dalam  pa- kan  juga  dapat  meningkatkan  status  kesehatan ikan  dilihat  dari  kondisi  gambaran  darah.  Darah bertanggung  jawab  untuk  mengangkut  oksigen, karbon  dioksida,  nutrisi  dan  hormon  serta  meta- bolisme dan juga terlibat dalam produksi antibodi (Aruldoss et al . 2014). Tidak ada perbedaan jum- lah  sel  darah  merah  dan  hematokrit  pada  semua perlakuan pakan. Namun, nilai hemoglobin terus meningkat  seiring  dengan  meningkatnya  dosis minyak cengkeh. Nilai tertinggi adalah pada per- lakuan penambahan minyak cengkeh 100 mg 100 g -1 pakan  yaitu  10,8-13,6  g  dL -1 .  Nilai  hemoglo- bin  ikan  pada  umumnya  menurut  Svobodova  & Vyukusova  (1991)  adalah  6-10  g  dL -1 .  Nilai  he- moglobin  pada  perlakuan  penambahan  minyak cengkeh 100 mg 100 g -1 pakan sedikit lebih ting- gi daripada ikan normal, akan tetapi nilai tersebut masih dalam batas yang dapat ditoleransi ikan mas karena pertumbuhan ikan mas paling tinggi pada dosis tersebut.
Hemoglobin  pada  sel  darah  merah  ber- fungsi  mengangkut  oksigen  dan  mengangkutnya dari  insang  ke  jaringan  tubuh  untuk  digunakan pada  proses  metabolisme  untuk  menghasilkan energi (Moyle & Cech 2004). Semakin tinggi nilai hemoglobin maka oksigen di dalam darah menjadi semakin  banyak.  Akibatnya  proses  pencernaan dan  penyerapan  nutrien    menjadi  lebih  baik, sehingga ikan akan lebih sehat dan tumbuh lebih baik  karena  energinya  tercukupi.  Pada  akhirnya pakan lebih efisien dimanfaatkan untuk pertumbuhan  dan  efisiensi  pakan  menjadi  me- ningkat. Akan tetapi, jumlah sel darah putih (leu-
kosit) pada perlakuan kontrol lebih tinggi diban- dingkan dengan perlakuan  minyak cengkeh lain- nya,  diduga  pada  perlakuan  kontrol  sistem  imun ikan  sedikit  terganggu.  Menurut  Moyle  &  Cech (2004),  leukosit  merupakan  sel  darah  yang  ber- peran  dalam  sistem  kekebalan  tubuh.  Leukosit membantu membersihkan tubuh dari benda asing, termasuk  invasi  patogen  melalui  sistem  imun. Ikan  akan  menghasilkan  banyak  leukosit  untuk menyintesis  antibodi  dan  memfagosit  patogen. Akibat menurunnya sistem imun pada ikan adalah tingkat  kelangsungan  hidup  ikan  pada  perlakuan kontrol sedikit menurun, namun pertumbuhannya tidak  berbeda  dengan  penambahan  minyak cengkeh 5 mg hingga 15 mg 100 g -1 pakan.
Retensi  protein  menggambarkan  jumlah protein  pakan  yang  dikonsumsi  dan  digunakan untuk  pertumbuhan  dan  membangun  jaringan protein  tubuh.  Nilai  retensi  protein  pada  peneli- tian  ini  tidak  berbeda  secara  signifikan  pada  se- mua perlakuan. Namun,  nilai  retensi lemak pada penambahan minyak cengkeh 15 mg dan 100 mg 100 g -1 pakan memberikan hasil lebih tinggi dari- pada  perlakuan  kontrol.  Tingginya  nilai  retensi lemak  disebabkan  ikan  mas  lebih  dapat  meman- faatkan  protein  dibandingkan  dengan  lemak  se- bagai sumber energi. Hal ini dilihat dari nilai re- tensi  lemak  yang  lebih  tinggi  dibandingkan  de- ngan  nilai  retensi  protein.  Lemak  cenderung  di- simpan dalam jaringan sebagai penyusun struktur membran  sel  tubuh  dibandingkan  dimanfaatkan sebagai energi untuk pertumbuhan.
Hati  adalah  pusat  metabolisme  nutrien yang berasal dari saluran pencernaan (Bozidar et al .  2011).  Selain  itu  hati  juga  merupakan  organ ekskresi yang berfungsi untuk menawarkan racun yang  masuk  ke  dalam  tubuh.  Pada  penelitian  ini nilai IHS ikan pada perlakuan kontrol dan perla- kuan minyak cengkeh tidak menunjukkan perbe- daan. Hal yang serupa dengan penelitian Cabuk et
al .  (2006),  penambahan  campuran  minyak esensial  (minyak  oregano,  minyak  daun  laurel, minyak  daun  sage,  minyak  daun  myrtle,  minyak biji fennel, dan minyak kulit jeruk) dengan dosis 24 dan 48 mg kg -1 pakan tidak memengaruhi bo- bot hati ayam broiler. Penggunaan minyak ceng- keh  telah  diakui  aman  oleh  The  United  States Food and Drug Administration (USFDA) bila ti- dak  melebihi  dosis  1500  ppm  di  semua  kategori makanan (Gulcin et al . 2012).
Berdasarkan  uji  pewarnaan  gram  dan  ka- rakteristik bakteri, ditemukan jenis bakteri domi- nan  pada  usus  ikan  mas.  Pada  semua  perlakuan ditemukan jenis bakteri Acinetobacter . Jenis bak- teri yang sama yaitu Pseudomonas , Bacillus , Fla- vobacterium , Micrococcus  dan  Kurthia ditemu- kan  pada  saluran  pencernaan  ikan  bandeng  (As- lamyah  2006).  Selain  itu  ditemukan  juga  jenis bakteri Pseudomonas,  Acinetobacter,  Bacillus, dan Micrococcus pada  usus  ikan Glossogobius giuris dan Labeo rohita (Latha & Mohan 2013).
Berbagai  jenis  mikroba  yang  ditemukan  tersebut merupakan  mikroba  normal  di  dalam  usus.  Na- mun  demikian,  tidak  ditemukan    jenis  bakteri Bacteroides dan Chromobacterium lividium pada ikan  bandeng  tersebut. Chromobacterium  livi- dium merupakan  flora  normal  non  patogen  pada ikan  dan  organisme  lainnya  (Cowan  1974),  se- dangkan  bakteri Bacteroides ,  yaitu  bakteri  yang umumnya  ditemukan  dalam  saluran  pencernaan ikan  air  tawar  seperti  ikan  mas  dan  ikan  nila. Bakteri  ini  juga  sering  ditemukan  pada  air  dan sedimen  kolam  budidaya  (Tsuchia et  al .  2007).
Keragaman  jenis  dan  biomassa  mikroflora  usus yang bervariasi dipengaruhi oleh  pakan dan me- dia  pemeliharaan  ikan  tersebut  (Latha  &  Mohan 2013).  Pada  penelitian  ini  keseimbangan  mikro- flora dalam usus masih terjaga, hal itu dapat dili- hat  dari  pertumbuhan  ikan  mas  yang  masih  me- ningkat  hingga  dosis  penambahan  minyak  ceng-
keh  100  mg  100  g -1 pakan  dengan  kelangsungan hidup 100%.

## Simpulan
Penambahan minyak cengkeh di dalam pa- kan dapat memperbaiki kinerja pertumbuhan ikan mas. Penambahan  minyak cengkeh dengan dosis 100  mg  100  g -1 pakan  adalah  perlakuan  terbaik.
Penggunaan  dosis  ini  dalam  pakan  disarankan untuk  diterapkan  pada  budi  daya  ikan  guna  me- ningkatkan  kinerja  pertumbuhan  ikan  mas,  yaitu 100 mg 100 g -1 pakan.

## Daftar pustaka
Abdel-Magied N, Ahmed AG. 2011. Efficacy of clove oil as an antioxidant against radiation risk  in  male  rats. Journal  of  Radiation Research  and  Applied  Sciences 4(3):939- 955.
Aruldoss K, Kannan K, Chandira A. 2014. Effect of Cynodon dactylon on the heamatological parameters  in  the  blood  of Oreochromis mossambicus . International  Journal  of Modern  Research  and  Reviews 2(5):171- 177.
Aslamyah S. 2006. Penggunaan mikroflora salur- an  pencernaan  sebagai  probiotik  untuk meningkatkan  pertumbuhan  dan  kelang- sungan hidup ikan bandeng ( Chanos chanos Forsscal). Tesis .  Institut  Pertanian  Bogor, Bogor. 255 hlm.
Bozidar  SR,  Marko  BS,  Zoran  ZM,  Vesna  DP.
2011.  Histological  methods  in  the  assess- ment  of  different  feed  effects  on  liver  and intestine  of  fish. Journal  of  Agricultural Sciences 56(1):87-100.
Cabuk M, Bozkurt M, Alcicek A, Akbas Y, Ku- cukyilmaz  K.  2006.  Effect  of  a  herbal  es- sential  oil  mixture  on  growth  and  internal organ weight of broilers from young and old breeder  flocks. South  African  Journal  of Animal Science 36(2):135-141.
Cowan ST. 1974. Manual for the Identification of Medical  Bacteria .  Cambridge  University Press. London. 165 p.
Gaber MM. 2000. Growth response of nile tilapia fingerlings ( Oreochromis niloticus ) fed diet containing  different  levels  of  clove  oil. Egyptian  Journal  of  Aquatic  Biology  and Fisheries 4(1):1-18.
Goni  P,  Lopez  P,  Sanchez  C,  Gomez-Lus  R, Becerril  R,  Nerin  C.  2009.  Antimicrobial activity in the vapour phase of a combination of cinnamon and clove essential oils. Food Chemistry 116(4): 982-989.
Gulcin  I,  Elmastas  M,  Aboul-Einin  HY.  2012. Antioxidant activity of clove oil-a powerfull antioxidant  source. Arabian  Journal  of Chemistry 5(4): 489-499.
Khojasteh  B.  2012.  The  morphology  of  the  post gastric  alimantary  canal  in  teleost  fish. International  Journal  of  Aquatic  Science 3(2):71-88.
Latha N, Mohan MR. 2013. The bacterial micro- flora  in  the  fish  organs-a  public  health aspect. Indian  Journal  of  Advances  in Chemical Science 1(3):139-143.
Mehr  MA,  Hassanabadi  A,  Moghaddam  HN, Kermanshahi  H.  2014.  Supplementation  of clove  oil  essential  oil  and  probiotic  to  the broiler’s diet on performance, carcass traits and  blood  component. Iranian  Journal  of Applied Animal Science 4(1):117-122.
Moyle  PB,  Cech  Jr  JJ.  2004. Fishes . An  Intro- duction  to  Ichthyology .  5th  Edition.  Pren- tice Hall, Inc. New Jersey, USA. 726 p.
Mu’nisa A. 2009. Aktivitas antioksidan dan anti- hiperkolesterolemia  ekstrak  daun  cengkeh ( Eugenia  aromatica O.K)  pada  kelinci. Disertasi .  Institut  Pertanian  Bogor,  Bogor.
142 hlm.
Nasir  M.  2002.  Pengaruh  kadar  selulosa  yang berbeda dalam pakan terhadap panjang usus dan  aktivitas  enzim  pencernaan  benih  ikan gurami ( Osphronemus gouramy Lac.). Tesis .
Institut Pertanian Bogor, Bogor. 55 hlm.
[NRC]  National  Research  Council.  1993. Nu- trient requirement of Fish . Washington DC (US): National Academy Press. 124 p.
Nunez L, D’ Aquino M. 2012. Microbicide acti- vity  of  clove  essential  oil  ( Eugenia  caryo- phyllata ). Brazilian  Journal  of  Microbio- logy 43(4):1255-1260.
Ogata M, Hoshi M, Urano S, Endo T. 2000. An- tioxidant  activity  of  eugenol  and  related monomeric and dimeric compounds.
Chemical  and  Pharmaceutical  Bulletin 48(10):1467-1469.
Svobodova  Z,  Vykusova  B,  1991. Diagnostic Prevention  and  Therapy  of  Fish  Diseases and Intoxication. Research Institute of  Fish Culture and Hydrobiology. Vodnany,
Czechoslovakia. 270 p.
Tsuchia C, Sakata T, Sugita H. 2007. Novel eco- logical niche of Cetobacterium somerae , an anaerobic bacterium in the intestinal tracts of freshwater fish. Letters in Ap-plied
Microbiology 46(1): 43-48.
Watanabe  T.  1988. Fish  Nutrition  and  Maricul- ture .  Department  of  Aquatic  Biosiences. Tokyo University of Fisheries: JICA. 233 p.