POTENSI  KULIT  BATANG Cinnamomum  burmannii Bl.  DALAM MENCEGAH  INFERTILITAS;  KAJIAN  TERHADAP  BERAT  TESTIS DAN JUMLAH SPERMATOZOA MENCIT (Mus musculus) MODEL
DIABETES MELLITUS TIPE-1
THE  POTENTIAL  OF  Cinnamomum  burmannii  Bl.  BARK  IN  PREVENTING INFERTILITY;  A  STUDY  ON  TESTIS  WEIGHT  AND  SPERMATOZOA  COUNT  IN TYPE-1 DIABETES MELLITUS MICE (Mus musculus)
Mechiavel  Moniharapon 1 ,  Abdul  M  Ukratalo 1* ,  Nadira  Pattimura 2 ,  Efraim  Samson 1 dan Victory O Pangemanan 3
1 Program  Studi  Biologi  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam  Universitas  Pattimura,  Ambon,
2 Program Studi Ilmu Keperawatan, STIKES Pasapua Ambon 3 Progam Profesi Dokter Fakultas Kedokteran Universitas Pattimura, Ambon, Indonesia *Corresponding author: abdulalmusaad@gmail.com

## ABSTRACT
Key words :
Cinnamomum burmanii; testis weight; spermatozoa; antioxidants Cinnamomum  burmannii  is  one  type  of  spice  that  contains  antioxidants,  thereby neutralizing  free  radicals  and  reducing  oxidative  stress  caused  by  diabetes  mellitus.  The purpose  of  this  research  is  to  examine  the  role  of  methanol  extract  from  the  bark  of Cinnamomum burmannii in increasing testicular weight and the number of spermatozoa in mice (Mus musculus) with type-1 diabetes mellitus. Twenty mice were divided into groups: K- (control), K+ (mice injected with STZ without medication), P1 (dose of 200 mg/kg body weight),  P2  (dose  of  400  mg/kg  body  weight),  and  P3  (dose  of  800  mg/kg  body  weight). Before  administering  the  extract,  the  initial  blood  sugar  levels  were  measured. Subsequently, in the K+, P1, P2, and P3 groups, STZ was injected at a dose of 0.2 ml, and if blood  sugar  levels  increased  (>128  mg/dL),  the  P1,  P2,  and  P3  groups  were  given Cinnamomum  burmanii  bark extract according to  the predetermined dose for  14 days. On the  last  day,  surgery  was  performed  to  collect  the  testes  and  observe  the  number  of spermatozoa. The results showed that the administration of methanol extract from the bark of Cinnamomum burmanii had an effect on increasing testicular weight and the number of spermatozoa in diabetic mice.
Article History: Recieved: 13 November 2023 Revised: 22 November 2023 Accepted: 29 November 2023 © 2023 Jurusan Biologi FMIPA Universitas Pattimura
Copyright © 2023 Biofaal Journal Homepage: https://ojs3.unpatti.ac.id/index.php/biofaal/index E-mail: biofaaljournal@gmail.com
This  article  is  an  open  access  article  distributed a  Creative  Commons  Attribution-NonCommercial-ShareAlike  4.0 International License
How to cite:
Moniharapon M, Ukratalo AM, Pattimura N, Samson E, and Pangemanan, VO. 2023. The potential of Cinnamomum burmannii Bl. bark in preventing infertility;  a  study on testis  weight  and spermatozoa count in  type-1 diabetes  mellitus  mice  ( Mus  musculus ). Biofaal Journal. 4(2): 108-117.

## BIOFAAL Journal
Desember 2023   Volume 4 Nomor 2   Halaman 108-117 E-ISSN: 2723-4959
https://doi.org/10.30598/biofaal.v4i2pp108-117

## A. PENDAHULUAN
Diabetes Melitus (DM) merupakan kumpulan penyakit metabolik yang dicirikan oleh tingginya  kadar  glukosa  darah  secara  kronis  akibat  gangguan  sekresi  insulin,  kerja  insulin, atau  keduanya  (Purwanti  et  al.,  2023;  Ukratalo  et  al.,  2023;  Wahyuni  et  al.,  2019). Prawitasari, 2019 menyatakan bahwa penurunan produksi insulin dapat dipicu oleh sejumlah faktor,  termasuk  kerusakan  pada  jaringan  sel  β  pankreas. Reaction  Oxygen  Species (ROS) dapat  merusak  jaringan  sel  β  pankreas,  yang  pada  akhirnya  mengakibatkan  penurunan produksi insulin. Selain itu, kondisi hiperglikemia juga dapat menimbulkan komplikasi kronis seperti  penyakit  kardiovaskular  (seperti  iskemi  miokard  atau  kardiomiopati),  gangren, kegagalan  ginjal  kronis,  retinopati,  dan  neuropati.  Kontrol  gula  darah  yang  tidak  memadai seringkali mengarah pada munculnya komplikasi yang lebih serius (Sarasati, 2019).
Bulqis  et  al  (2020)  mencatat  bahwa  keadaan  penyakit  Diabetes  Melitus  (DM)  yang berlangsung secara berkelanjutan menimbulkan kekhawatiran terutama pada pria, karena DM dapat mempengaruhi fungsi reproduksi laki-laki pada berbagai tahap, termasuk dalam proses spermatogenesis.  Selain  berpotensi  mengganggu  spermatogenesis,  DM  juga  dapat mengakibatkan  ketidaknormalan  fungsi  kelenjar  seks  aksesori,  fenomena  ini  terkait  dengan peningkatan ROS. Pada individu yang menderita DM, peningkatan ROS dapat menyebabkan kerusakan  pada  membran  mitokondria,  yang  pada  gilirannya  mengakibatkan  kehilangan fungsi  potensial  membran  mitokondria  dalam  memicu  apoptosis  sel  sperma  (Dutta  et  al., 2021; Pourmasumi et al., 2017).
Diabetes  tidak  hanya  menyebabkan  penurunan  konsentrasi  sperma,  melainkan  juga mengganggu  pergerakannya.  Sperma  yang  mengalami  hambatan  dalam  perkembangannya cenderung  menunjukkan  sejumlah  kelainan,  termasuk  kelainan  morfologi  dan  penurunan kualitas  hidup  spermatozoa  (Kumar  &  Singh,  2015;  Sharma  et  al.,  2015).  Selanjutnya, inflamasi  pada  saluran  reproduksi  laki-laki  juga  dapat  menyebabkan  pergerakan  sperma menjadi kurang efektif (Temidayo & Du Plessis, 2018). Testis adalah organ reproduksi jantan yang  mampu  menghasilkan  spermatozoa.  Beberapa  faktor  dapat  menyebabkan  testis  tidak berfungsi  secara  optimal,  salah  satunya  adalah  masuknya  radikal  bebas  dalam  jumlah  besar ke  dalam  tubuh.  Radikal  bebas  dapat  mengakibatkan  penurunan  fertilitas  pada  pria, berkurangnya nafsu seksual, serta membahayakan motilitas sperma yang pada akhirnya dapat menghambat  kemampuan  sperma  untuk  membuahi  sel  telur.  Stres  oksidatif  dapat meningkatkan  jumlah  Reactive  Oxygen  Species  (ROS),  yang  dapat  merusak  membran  sel, membentuk  lipid  peroksida  atau  malondialdehyde  (MDA).  Jika  kondisi  ini  berlanjut,  dapat menyebabkan  kerusakan  pada  sistem  membran  sel  dan  bahkan  kematian  sel  (Jannah  et  al., 2018).
Tujuan  utama  terapi  medis  bagi  pasien  diabetes  adalah  mengontrol  kadar  glukosa darah  melalui  pemberian  obat  hipoglikemik  atau  antihiperglikemik  oral  serta  insulin (Hardianto,  2020).  Meskipun  demikian,  metode  ini  tidak  selalu  efektif  dan  dapat menimbulkan efek samping yang tidak diinginkan. Penggunaan sumber alami dari tumbuhan semakin  menjadi  pilihan  yang  populer  sebagai  metode  pengobatan  alternatif  untuk  pasien diabetes mellitus, khususnya dalam mengatasi masalah hiperglikemia.
Moniharapon, dkk Biofaal Journal, vol 4(2), pp. 108-117, Desember 2023
Kayu  manis  ( Cinnamomum  burmannii Bl.)  merupakan  sejenis  rempah-rempah  yang umumnya  digunakan  sebagai  bahan  penyaji  aroma  dan  rasa  dalam  makanan  dan  minuman, serta  sebagai  aditif  dalam  pembuatan  parfum,  obat-obatan,  dan  memiliki  potensi  sebagai antimikroba. Komposisi kayu manis melibatkan  minyak atsiri, safrol, sinamadehid, saponin, flavonoid,  eugenol,  tanin,  damar,  kalsium  oksanat,  dan  zat  penyamak.  Flavonoid,  tannin, saponin,  dan  fenol  dalam  kulit  batang  kayu  manis  diyakini  memiliki  kemampuan  untuk menetralisir  radikal  bebas  dan  mengurangi  stres  oksidatif  yang  disebabkan  oleh  diabetes mellitus,  sehingga  menjaga  keseimbangan  antara  jumlah  ROS  dan  antioksidan  (Michalak, 2022;  Sirait  et  al.,  2023).  Senyawa  flavonoid  telah  terbukti  secara  signifikan  meningkatkan spermatogenesis  pada  tikus  diabetik.  Selain  itu,  flavonoid  dan  saponin  juga  dapat menghambat apoptosis pada sel germinal testis tikus diabetik dan memiliki sifat sitoprotektif pada jaringan testis.
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengevaluasi  peran  ekstrak  metanol  dari  kulit  batang Cinnamomum  burmannii dalam  meningkatkan  berat  testis  dan  jumlah  spermatozoa  pada mencit ( Mus musculus ) dengan diabetes mellitus tipe-1.

## B. METODE PENELITIAN

## Tipe Penelitian

## Penelitian ini merupakan penelitian eksperimen

## Rancangan  Penelitian
Penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan lima perlakuan dan  tiga  kali  ulangan.  Adapun  pembagian  dan  perlakuan  masing-masing  kelompok  sebagai berikut:
Kelompok K+ :  Kelompok  mencit  yang  diberi  streptozotocin  dosis  0,2  ml  dan  tidak diberi obat Kelompok K- :  Kelompok tanpa perlakuan (tidak diberi streptozotocin dan juga obat)
Kelompok P1 :  Diinjeksi  dengan  streptozotocin  dosis  0,2  ml  dan  diberi  ekstrak  kulit batang Cinnamomum burmannii dosis 200 mg/kg BB
Kelompok P2 :  Diinjeksi  dengan  streptozotocin  dosis  0,2  ml  dan  diberi  ekstrak  kulit batang Cinnamomum burmannii dosis 400 mg/kg BB.
Kelompok P3 :  Diinjeksi  dengan  streptozotocin  dosis  0,2  ml  dan  diberi  ekstrak  kulit batang Cinnamomum burmannii dosis 800 mg/kg BB.

## Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  wadah  pengurung  mencit, Timbangan  Ohaus  digital,  Erlenmeyer,  alat  sonde,  alat  bedah  hewan  percobaan  ( scalpel ), pinset,  gunting,  jarum,  meja  lilin),  kaca  objek,  cawan  petri,  mikroskop,  haemocytometer, hand counter, dan kamera digital. Sedangkan bahan yang digunakan adalah kulit batang kayu manis,  metanol,  aquades,  STZ  (streptozotosin),  mencit  (hewan  uji),  aluminiumfoil,  alkohol
70%,  kertas  saring,  kapas,  tissue,  Formalin,  Mencit  jantan  25  ekor,  makanan  hewan percobaan dan air PAM, larutan giemsa, alkohol 70%, NaCl 0,9, aquades, dan sekam padi.

## Prosedur Kerja

## Penyiapan Hewan Coba
Sebanyak  20  ekor  mencit  jantan  dibagi  menjadi  lima  kelompok  dan  diaklimatisasi selama 1 minggu dalam ruang laboratorium.
Injeksi Streptozotocin pada Mencit
Dosis STZ pada tikus 40 mg/kgBB. Untuk tikus 200 g= 200 g/1000 g x 40 mg = 8 mg. Faktor konversi dari tikus 200 g ke mencit 20 g = 0,14. Pada mencit 20 g = 8 x 0,14 = 1,12 mg/ mencit. Rata-rata BB mencit = 25 g. Dosis streptozotocin untuk mencit 25 g = (25 g/ 20 g) x 1,12 mg = 1,4 mg. Total kebutuhan = 1,4 mg x 16 ekor x 3 hari = 67,2 mg.
Dosis  pengenceran  =  67,2  mg  +  10  ml  aquadest  =  ±  10  ml  lalu  dibagi    5  kelompok mencit (3 hari perlakuan) = 0,2 ml (intra peritoneal).

## Penyiapan Bahan Uji
Sampel  kulit  batang Cinnamomum  burmanii diambil,  kemudian  dipotong  kecil-kecil dan dikeringkan dalam ruang laboratorium. Setelah kering di haluskan dengan blender untuk mendapatkan  serbuk  dari  kulit  batang Cinnamomum  burmanii yang  selanjutnya  dilakukan ekstraksi  dengan  pelarut  metabol  menggunakan  metode  maserasi.  Setelah  itu,  diuapkan dengan rotari evavorator untuk mendapatkan ekstrak pekat
Prosedur Pengujian
Sebelum diberikan ekstrak kulit batang Cinnamomum burmanii terlebih dahulu diukur kadar  gula  darah  pada  kelompok  K-,  K+,  P1,  P2  dan  P3  Pengukuran  kadar  gula  darah menggunakan alat glukotest dan strip gula darah. Apabila kadar gula darah sudah mengalami peningkatan  (>128  mg/dL),  maka pada  kelompok  P1,  P2  dan  P3  diberi  ekstrak  kulit batang Cinnamomum  burmanii. Pemberian  ekstrak  methanol Cinnamomum  burmanii dilakukan selama 14 hari. Pada kelompok P1, P2, dan P3 masing-masing diberi 0,2 ml/ekor/hari.
Penimbangan Berat testis dan Perhitungan Jumlah Spermatozoa Mencit
a. Berat Testis
Pada  hari  terakhir,  mencit  dibedah  untuk  diambil  testisnya.  Sebelum  dilakukan pembedahan,  mencit pada  tiap  kelompok perlakuan  dibius  dengan  menggunakan  eter  dalam wadah  tertutup, hingga  mencit  sudah  dalam  keadaan  sedasi  dan  hanya  terlihat  pernafasan perut.  Kemudian  mencit  dibedah  dan  testis  diambil,  selanjutnya  ditimbang  dengan menggunakan timbangan digital.
b. Perhitungan Jumlah Spermatozoa
Jumlah spermatozoa dihitung dengan cara larutan stok sperma dihisap memakai pipet hisap hemositometer sampai tanda 0,5 lalu larutan NaCl fisiologis dihisap sampai tanda 101, dan pipet  dikocok.  Dibuang beberapa  tetes pada  kertas  tisu,  kemudian  diteteskan pada bilik hitung yang sudah ditutup dengan kaca penutup dan sudah disiapkan di mikroskop, kemudian
diperiksa  di  bawah  mikroskop.  Dihitung  dengan  menggunakan  rumus  jumlah  spermatozoa terhitung (s) x pengenceran x 1 ml NaCl = s x 20.000 =juta/mm 3 .

## Analisis Data
Data hasil pengamatan terhadap berat testis dan jumlah spermatozoa dianalisis dengan Analisis  of  Varians (ANOVA)  menggunakan  program  SPSS  24.0  Jika  terdapat  perbedaan yang nyata maka dilanjutkan dengan uji BNT pada taraf signifikan 0,05%.

## C. HASIL DAN PEMBAHASAN

## Berat Testis Mencit
Rata-rata  berat  testis  mencit  kelompok  mencit  kontrol  negatif,  kelompok  kontrol positif  dan  kelompok  mencit  DM  tipe  1  yang  diterapi  dengan  ekstrak  metanol  kulit  batang Cinnamomun burmanii yang dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Rata-rata berat testis mencit
No. Perlakuan Berat Testis (g) ± SD Kiri Kanan 1 Kontrol Negatif 0,38 ± 0,036 a 0,47 ±  0,030 a 2 Kontrol Positif 0,13 ± 0,051 b 0,13 ± 0,029 b 3 Dosis 200 mg/kg BB 0,19 ± 0,015 c 0,19 ± 0,015 c 4 Dosis 400 mg/kg BB 0,26 ± 0,012 d 0,26 ± 0,021 d 5 Dosis 800 mg/kg BB 0,33 ± 0,030 e 0,32 ± 0,031 e
Keterangan: Superskrip dengan huruf yang sama tidak berbeda nyata (P > 0,05).
Berdasarkan  hasil  pada  tabel  1,  diketahui  bahwa  rata-rata berat  testis  kiri  dan  kanan mencit  DM  pada  kelompok  kontrol  positif  lebih  rendah  jika  dibandingkan  dengan  rata-rata berat  testis  mencit  pada  kelompok  mencit  DM  yang  diberi  ekstrak Cinnamomun  burmanii . Berdasarkan  hasil Analisis  Of  Varian (ANOVA)  menunjukkan  bahwa  pemberian  ekstrak metanol  kulit  batang Cinnamomun  burmanii berpengaruh  terhadap  peningkatan  berat  testis mencit  diabetes  mellitus  (α  =  0,05%).  Hasil  uji  BNT  pada  taraf  signifikan  0,05% menunjukkan bahwa rata-rata berat testis kiri dan kanan pada kelompok K-, K+, P1, P2 dan P3 saling berbeda nyata.
Injeksi  streptozotocin  (STZ)  pada  mencit  dalam  penelitian  ini  mengakibatkan penurunan berat testis mencit. Hal ini dapat diamati dari berat testis yang lebih rendah pada kelompok kontrol positif jika dibandingkan dengan kelompok mencit yang diinjeksi STZ dan diberi ekstrak metanol kulit batang kayu manis dosis 200 mg/kg BB, 400 mg/kg BB, dan 800 mg/kg BB. Berat testis dipengaruhi oleh jaringan yang membentuknya. Testis terdiri dari dua kompartemen fungsional, yaitu tubulus seminiferus dan ruang interstisial di antara keduanya. Spermatogenesis  terjadi  di  tubulus  seminiferus,  sedangkan biosintesis  androgen  terjadi pada sel  Leydig  interstisial.  Sel-sel  Leydig  bertanggung  jawab  untuk  memproduksi  testosteron, sedangkan di ruang interstisial terdapat makrofag, sel otot polos perivaskular, dan sel endotel vaskular. Komunikasi fungsional dan junctional yang erat antara sel Sertoli dan sel germinal
sangat penting untuk spermatogenesis. Sel Sertoli berperan dalam membantu perkembangan sel  germinal  melalui  berbagai  mekanisme,  seperti  memfasilitasi  pergerakan  dan  pelepasan spermatozoa  matang,  menjaga  barrier  darah  testis  (BTB),  dan  menghasilkan  cairan  tubulus seminiferus (Chang et al., 2013).
Gangguan  fungsi  organ  reproduksi  merupakan  salah  satu  dampak  yang  ditimbulkan oleh  diabetes  mellitus  pada  tahap  kronik  (Defeudis  et  al.,  2022;  He  et  al.,  2021).  Penderita diabetes  mellitus  mengalami  penurunan  kadar  testosterone,  tikus  yang  diinduksi  aloksan mengalami  penurunan  kadar  testosteron.  Tambahan  pula,  streptozotosin  dan  aloksan memiliki  efek  sitotoksik  diabetogenik  yang  sebanding  dalam  menyebabkan  kerusakan  pada sel  beta  pankreas  pada  hewan  percobaan.  Penurunan  kadar  testosteron  dapat  mengganggu proses inisiasi sel Sertoli. Peran yang sangat vital dari sel Sertoli dalam menjaga keberadaan sel germinal akan berkurang seiring dengan berkurangnya jumlah sel germinal. Berkurangnya berat testis pada akhirnya disebabkan oleh penurunan jumlah sel Leydig, sel Sertoli, dan sel germinal (Adamczewska et al., 2022).
Pemberian ekstrak metanol dari kulit batang Cinnamomun burmanii dengan dosis 200 mg/kg  BB,  400  mg/kg  BB,  dan  800  mg/kg  BB  dalam  penelitian  ini  telah  menunjukkan dampak positif terhadap peningkatan berat testis mencit. Rata-rata berat testis kiri dan kanan cenderung  serupa,  kecuali  pada  kelompok  mencit  yang  diinjeksi  streptozotocin  dan  diberi ekstrak  metanol  kulit  batang Cinnamomun  burmanii dengan  dosis  500  mg/kg  BB,  di  mana berat testis kiri mencapai 0,33 g dan berat testis kanan sebesar 0,32 g. Peningkatan berat testis dalam  penelitian  ini  dapat  diatribusikan  kepada  kandungan  antioksidan  alami,  seperti flavonoid,  yang  terdapat  dalam  kulit  batang Cinnamomun  burmanii. Flavonoid  diduga memiliki  kemampuan  untuk  menekan  peningkatan  radikal  bebas  yang  dapat  mengganggu spermatogenesis.  Dengan  demikian,  ketika  jumlah  sel  spermatogenik  meningkat,  testis mengalami  penambahan  berat.  Berdasarkan  penelitian  ini,  dapat  disimpulkan  bahwa  kulit batang Cinnamomun  burmanii mengandung  flavonoid  yang  berperan  sebagai  antioksidan. Fungsi  antioksidan  tersebut  penting  untuk  menetralisir  radikal  bebas  dengan  berinteraksi langsung  dengan  oksidan  atau  radikal  bebas,  mencegah  pembentukan  jenis  oksigen  reaktif, mengubah  oksigen  reaktif  menjadi  bentuk  yang  kurang  toksik,  dan  flavonoid  berkontribusi pada perbaikan kerusakan sel dan jaringan yang mungkin terjadi.

## Jumlah Spermatozoa
Rata-rata  jumlah  spermatozoa  mencit  kelompok  mencit  kontrol  negatif,  kelompok kontrol  positif  dan  kelompok  mencit  diabetik  yang  diterapi  dengan  ekstrak  metanol  kulit batang Cinnamomun burmanii jumlah spermatozoa mencit dapat dilihat pada Tabel 2.
Berdasarkan  hasil  perhitungan  pada  Tabel  1  menunjukkan  bahwa  rata  –  rata  jumlah spermatozoa pada kelompok kontrol negatif sebanyak 761.33 x 10 4 , pada kelompok kontrol positif,  rata  –  rata  jumlah  spermatozoa  sebanyak  190.67  x  10 4 .  Pada  kelompok  mencit diabetik yang diterapi dengan ekstrak metanol kulit batang Cinnamomun burmanii dosis 200 mg/kg  BB,  rata  –  rata  jumlah  spermatozoa  sebanyak  349.33  x  10 4 ,  pada  kelompok  mencit diabetik yang diterapi dengan ekstrak metanol kulit batang Cinnamomun burmanii dosis 400 mg/kg BB, rata – rata jumlah spermatozoa mencit sebanyak 542.67 x 10 4 dan pada kelompok
Moniharapon, dkk Biofaal Journal, vol 4(2), pp. 108-117, Desember 2023
mencit  diabetik  yang  diterapi  dengan  ekstrak  metanol  kulit  batang Cinnamomun  burmanii dosis 800 mg/kg BB, rata – rata jumlah spermatozoa sebesar 670.00 x 10 4 .
Tabel 2. Rata – rata jumlah spermatozoa mencit
Perlakuan Rata – rata Jumlah Spermatozoa (juta/mm 3 ) ± SD Kontrol Negatif 761.33 x 10 4 ± 37.74 a Kontrol Positif 190.67 x 10 4 ± 12.05 b Dosis 200 mg/kg BB 349.33 x 10 4 ± 13.01 c Dosis 400 mg/kg BB 542.67 x 10 4 ± 75.48 d Dosis 800 mg/kg BB 670.00 x 10 4 ± 12.00 e
Keterangan: Superskrip dengan huruf yang sama tidak berbeda nyata (P > 0,05).
Berdasarkan hasil Analisis Of Varian (ANOVA) dengan menggunakan program SPSS 24,0  menunjukkan  bahwa  pemberian  ekstrak  metanol  kulit  batang Cinnamomun  burmanii berpengaruh terhadap peningkatan jumlah spermatozoa mencit diabetes mellitus (α = 0,05%). Hasil uji BNT menunjukkan bahwa rata-rata jumlah spermatozoa pada kelompok K-, K+, P1, P2 dan P3 saling berbeda nyata.
Injeksi  streptozocin  dalam  penelitian  ini  mengakibatkan  penurunan  jumlah spermatozoa pada mencit. Terlihat dari rata-rata jumlah spermatozoa yang lebih rendah pada kelompok  mencit  kontrol  dibandingkan  dengan  kelompok  mencit  yang  diinjeksi streptozotocin dan diberi ekstrak metanol kulit batang Cinnamomun burmanii . Penurunan ini terjadi  karena  racun  yang  terdapat  dalam  streptozotocin.  Streptozotocin  membuat  produksi superoksida dan Nitrit Oksida (NO) dalam mitokondria meningkat, selanjutnya mengaktivasi protein kinase C (PKC) dan pembentukan advanced glycosilated end- products (AGEs) yang mana  keduanya  akan  mengganggu  fungsi  sel  β.  Gangguan  fungsi  sel  β  ini  menyebabkan terjadinya  Diabetes Melitus. Diabetes melitus, selain mengakibatkan gangguan metabolisme tubuh  yang  kompleks,  juga  dapat  menimbulkan  berbagai  komplikasi  yang  dapat mempengaruhi  seluruh  bagian  tubuh  manusia,  termasuk  gangguan  pada  sistem  reproduksi (Damasceno et al., 2014; Shi et al., 2018).
Arundani et al (2021) menyatakan bahwa Diabetes Melitus (DM) yang tidak dikelola dengan  baik  dapat  menyebabkan  masalah  infertilitas  melalui  kerusakan  salah  satu  organ reproduksi  pria,  yaitu  testis.  Hal  ini  pada  akhirnya  dapat  mengurangi  kualitas  spermatozoa dan  menyebabkan  tantangan  kesuburan  pada  pria.  Infertilitas  akibat  diabetes  melitus  dapat disebabkan  oleh  kerusakan  pada  epididimis,  mengganggu  migrasi  spermatozoa,  serta menghambat fungsi reproduksi, yang pada gilirannya dapat mengakibatkan penurunan jumlah sel  spermatogonium,  jumlah  spermatozoa  dalam  testis  dan  epididimis,  penurunan  diameter tubulus seminiferus, dan penurunan motilitas  (Ding et al., 2015)
Dalam proses reproduksi, testis menjalankan dua fungsi utama: menghasilkan hormon dan  spermatozoa.  Hormon  testosteron  diproduksi  oleh  sel  Leydig,  sementara  spermatozoa diproduksi  oleh  sel  epitel  tubulus  seminiferus.  Penurunan  kadar  FSH  dalam  darah memengaruhi  sel  Sertoli,  menghambat  produksi  hormon  ABP  (Androgen  Binding  Protein), yang  dapat  mengganggu  proses  spermatogenesis.  Sebaliknya,  penurunan  kadar  LH  dalam darah  memengaruhi  sel  Leydig  dengan  mengurangi  produksi  hormon  testosteron.  Efek  dari
defisiensi  testosteron  mencakup  penurunan  libido,  kualitas  ereksi  yang  buruk,  kurangnya spermatozoa dalam semen, dan penurunan kualitas spermatozoa (Parhizkar et al., 2013).
Selain itu, kemungkinan bahwa radikal bebas yang dihasilkan oleh streptozotocin juga berkontribusi  pada  penurunan  jumlah  spermatozoa  pada  kelompok  kontrol  positif  dalam penelitian ini. Hal ini disebabkan oleh potensi kerusakan membran spermatozoa oleh jumlah radikal  bebas  yang  berlebihan.  Aitken  (2017)  menyoroti  bahwa  membran  plasma spermatozoa  kaya  akan  fosfolipid  dan  asam  lemak  tak  jenuh,  sehingga  rentan  terhadap serangan  radikal  bebas,  khususnya  radikal  hidroksil.  Radikal  hidroksil  ini  dapat  dengan mudah  menembus  membran plasma, memicu  reaksi  rantai  yang  dikenal  sebagai peroksidasi lipid. Akibatnya, rantai asam lemak terputus, menghasilkan senyawa yang bersifat toksik bagi sel spermatozoa (Benko et al., 2022).
Terjadinya  peroksidasi  lipid  ini  disebabkan  oleh  ketidakseimbangan  antara  jumlah antioksidan dan radikal bebas, dimana dalam sitoplasma spermatozoa hanya terdapat sedikit enzim  antioksidan  seperti  superokside  dismutase  dan  glutation  peroksidase.  Pembentukan Reactive  Oxygen  Species (ROS)  adalah  suatu  proses  fisiologis  tubuh,  tetapi  apabila  terjadi peningkatan yang berlebihan, dapat berdampak negatif pada tubuh. Untuk menetralisir ROS, tubuh  memerlukan  asupan  antioksidan.  Antioksidan  dalam  semen  dapat  mengontrol  kadar ROS, menjaga agar tidak meningkat di luar batas fungsi normalnya, dan melindungi sperma dari  kerusakan  akibat  stres  oksidatif.  Selain  itu,  antioksidan  juga  berperan  sebagai  senyawa yang  dapat  menetralkan  dan  melawan  bahan  toksik  (radikal  bebas),  serta  menghambat oksidasi sel untuk mengurangi kerusakan sel (Alahmar, 2019; Kowalczyk, 2022).
Pemberian ekstrak metanol dari kulit batang Cinnamomun burmanii dengan dosis 200 mg/kg  BB,  400  mg/kg  BB,  dan  800  mg/kg  BB  mampu  meningkatkan  rata-rata  jumlah spermatozoa  pada  mencit  dengan  diabetes  mellitus.  Hal  ini  disebabkan  oleh  kandungan antioksidan  alami  seperti  flavonoid,  saponin,  dan  tannin  dalam  kulit  batang Cinnamomun burmanii .  Flavonoid  terbukti  sangat  efektif  dalam  mencegah  peroksidasi  lipid,  yang bertanggung  jawab  atas  kerusakan  membran  spermatozoa  dan  DNA  mitokondria  pada penderita  diabetes  mellitus.  Phospholipid  memegang  peran  penting  dalam  struktur  dan aktivitas  spermatozoa.  Integritas  struktur  membran  sel  spermatozoa  yang  utuh  akan menyebabkan peningkatan jumlah spermatozoa (Arundani et al., 2021).

## D. KESIMPULAN
Hasil  uji  statistik  menunjukkan  bahwa  pemberian  ekstrak  methanol  kulit  batang Cinnamomun  burmanii berpengaruh  nyata  terhadap  peningkatan  berat  testis  dan  jumlah spermatozoa mencit diabetes mellitus. Pemberian ekstrak methanol kulit batang Cinnamomun burmanii dosis  800  mg/kg  BB  lebih  efektif  dalam  meningkatkan  berat  Testis  dan  jumlah spermatozoa mencit diabetes mellitus.

## E. DAFTAR PUSTAKA
Adamczewska,  D.,  Słowikowska-Hilczer,  J.,  &  Walczak-Jędrzejowska,  R.  (2022).  The  fate  of  leydig  cells  in men with spermatogenic failure. Life , 12 (4), 570.
Aitken,  R.  J.  (2017).  Reactive  oxygen  species  as  mediators  of  sperm  capacitation  and  pathological  damage. Molecular Reproduction and Development , 84 (10), 1039–1052. Alahmar,  A.  T.  (2019).  Role  of  oxidative  stress  in  male  infertility:  an  updated  review. Journal  of  Human Reproductive Sciences , 12 (1), 4. Arundani, P., I’tishom, R., & Purwanto, B. (2021). Pemberian Ekstrak Rumput Kebar (biophytum petersianum klotszch)  terhadap viabilitas  spermatozoa  mencit  (mus  musculus)  diabetes  melitus. Oceana  Biomedicina Journal , 4 (1), 26–37.
Benko, F., Ďuračka, M., Baňas, Š., Lukáč, N., & Tvrdá, E. (2022). Biological Relevance of Free Radicals in the Process of Physiological Capacitation and Cryocapacitation. Oxygen , 2 (2), 164–176.
Bulqis, A. R., Ermayanti, N., & Wirasiti, N. (2020). Perbedaan kualitas sperma pada pasien penderita diabetes mellitus tipe 1 dan 2 di rsud. Lamadukelleng, sengkang, sulawesi selatan. SIMBIOSIS , 8 (1), 17–27. Chang, C. L. T., Lin, Y., Bartolome, A. P., Chen, Y.-C., Chiu, S.-C., & Yang, W.-C. (2013). Herbal therapies for  type  2  diabetes  mellitus:  chemistry,  biology,  and  potential  application  of  selected  plants  and compounds. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine , 2013 . Damasceno, D. C., Netto, A. O., Iessi, I. L., Gallego, F. Q., Corvino, S. B., Dallaqua, B., Sinzato, Y. K., Bueno,
A.,  Calderon,  I.  de  M.  P.,  &  Rudge,  M.  V.  C.  (2014).  Streptozotocin-induced  diabetes  models: pathophysiological mechanisms and fetal outcomes. BioMed Research International , 2014 . Defeudis, G., Mazzilli, R., Tenuta, M., Rossini, G., Zamponi, V., Olana, S., Faggiano, A., Pozzilli, P., Isidori, A. M.,  &  Gianfrilli,  D.  (2022).  Erectile  dysfunction  and  diabetes:  A  melting  pot  of  circumstances  and treatments. Diabetes/Metabolism Research and Reviews , 38 (2), e3494.
Ding,  G.-L.,  Liu,  Y.,  Liu,  M.-E.,  Pan,  J.-X.,  Guo,  M.-X., Sheng,  J.-Z.,  &  Huang,  H.-F.  (2015).  The  effects  of diabetes on male fertility and epigenetic regulation during spermatogenesis. Asian Journal of Andrology , 17 (6), 948.
Dutta,  S.,  Sengupta,  P.,  Slama,  P.,  &  Roychoudhury,  S.  (2021).  Oxidative  stress,  testicular  inflammatory pathways, and male reproduction. International Journal of Molecular Sciences , 22 (18), 10043. Hardianto,  D.  (2020).  TELAAH  KOMPREHENSIF  DIABETES  MELITUS:  KLASIFIKASI,  GEJALA, DIAGNOSIS, PENCEGAHAN, DAN PENGOBATAN: A Comprehensive Review of Diabetes Mellitus: Classification,  Symptoms,  Diagnosis,  Prevention,  and  Treatment. Jurnal  Bioteknologi  &  Biosains Indonesia (JBBI) , 7 (2), 304–317.
He, Z., Yin, G., Li, Q. Q., Zeng, Q., & Duan, J. (2021). Diabetes mellitus causes male reproductive dysfunction: a review of the evidence and mechanisms. In Vivo , 35 (5), 2503–2511.
Jannah,  R.,  Setiasih,  N.  L.  E.,  &  Suastika,  P.  (2018).  Histopatologi  Testis  Tikus  Penderita  Diabetes  Mellitus Pasca Pemberian Ekstrak Daun Kelor. Buletin Veteriner Udayana , 10 (2), 176–182. Kowalczyk,  A.  (2022).  The  role  of  the  natural  antioxidant  mechanism  in  sperm  cells. Reproductive  Sciences , 29 (5), 1387–1394.
Kumar, N., & Singh, A. K. (2015). Trends of male factor infertility, an important cause of infertility: A review of literature. Journal of Human Reproductive Sciences , 8 (4), 191.
Michalak,  M.  (2022).  Plant-derived  antioxidants:  Significance  in  skin  health  and  the  ageing  process. International Journal of Molecular Sciences , 23 (2), 585.
Parhizkar, S., Yusoff, M. J., & Dollah, M. A. (2013). Effect of Phaleria macrocarpa on sperm characteristics in adult rats. Advanced Pharmaceutical Bulletin , 3 (2), 345.
Pourmasumi, S., Sabeti, P., Rahiminia, T., Mangoli, E., Tabibnejad, N., & Talebi, A. R. (2017). The etiologies of  DNA  abnormalities  in  male  infertility:  An  assessment  and  review. International  Journal  of Reproductive Biomedicine , 15 (6), 331.
Prawitasari,  D.  S.  (2019).  Diabetes  melitus  dan  antioksidan. KELUWIH:  Jurnal  Kesehatan  Dan  Kedokteran , 1 (1), 48–52.
Purwanti, E., Mintarsih, M., & Sukoco, B. (2023). Pengetahuan dan Kepatuhan Minum Obat Antidiabetik pada Pasien Diabetes Melitus Tipe II. Jurnal Keperawatan Silampari , 6 (2), 1129–1138. Sarasati,  F.  (2019). Uji  Efektivitas  Ekstrak  Etanol  Daun  Sukun  (Artocarpus  altilis  (Park.)  Fosberg)  Terhadap Penurunan Kadar Glukosa Darah Total Mencit (Mus musculus L.) Yang Diinduksi Aloksan . Sharma, R., Agarwal, A., Rohra, V. K., Assidi, M., Abu-Elmagd, M., & Turki, R. F. (2015). Effects of increased paternal  age  on  sperm  quality,  reproductive  outcome  and  associated  epigenetic  risks  to  offspring. Reproductive Biology and Endocrinology , 13 , 1–20. Shi, G.-J., Shi, G.-R., Zhou, J., Zhang, W., Gao, C., Jiang, Y., Zi, Z.-G., Zhao, H., Yang, Y., & Yu, J.-Q. (2018). Involvement of growth factors in diabetes mellitus and its complications: a general review. Biomedicine & Pharmacotherapy , 101 , 510–527.
Sirait, T. S., Arianto, A., & Dalimunthe, A. (2023). Phytochemical Screening of Cinnamon Bark (Cinnamomum burmanii)(C.  Ness  &  T.  Ness)  C.  Ness  ex  Blume  Ethanol  Extract  and  Antioxidant  Activity  Test  with DPPH  (2,  2-diphenyl-1-picrylhydrazyl)  Method. International  Journal  of  Science,  Technology  &
Management , 4 (1), 254–259.
Temidayo,  S.  O.,  &  Du  Plessis,  S.  S.  (2018).  Diabetes  mellitus  and  male  infertility. Asian  Pacific  Journal  of Reproduction , 7 (1), 6–14.
Ukratalo,  A.  M.,  Kakisina,  P.,  &  Mailoa,  M.  N.  (2023).  The  Effect  of  Eucheuma  cottonii  Extract  on  Body Weight  and  Blood  Sugar  Levels  of  Mouse  (Mus  musculus)  Diabetes  Mellitus  Type  1. Jurnal  Biologi Tropis , 23 (3), 554–563. Wahyuni, K. I., Setiadi, A. A. P., & Wibowo, Y. I. (2019). Efektivitas Edukasi Pasien Diabetes Mellitus Tipe 2 Terhadap Pengetahuan dan Kontrol Glikemik Rawat Jalan  di RS  Anwar Medika. Pharmascience , 6 (01), 1–9.