Pemberian Konsentrasi Benzyle Amino Purine (BAP) dan Inokulan Bradyrhizobium japonicum terhadap Pertumbuhan Bintil Akar Tanaman Kedelai Hitam
Rama Adi Pratama, Kiki Zakiah Fakultas Pertanian, Universitas Garut ramatarigan@uniga.ac.id

## ABSTRAK
Kedelai  ( Glycine  max (L.)  Merril)  merupakan  tanaman  pangan  yang  penting sebagai  sumber  protein  nabati.  Penelitian  ini  akan  dilakukan  di  Kecamatan Tarogong Kaler Kabupaten Garut. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh pemberian BAP dan PGPR terhadap jumlah bintil akar total dan jumlah bintil  akar  efektif.  Lokasi  penelitian  berada  pada  ketinggian  tempat  650  meter. Rancangan pada penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Kelompok (RAK) Faktorial  yang terdiri dari 2 faktor  yaitu  empat taraf konsentrasi Benzyle  Amino Purine  (BAP)  dan  empat  taraf  inokulan Bradyrhizobium  japonicum .  Tiap perlakuan diulang sebanyak dua kali, maka jumlah keseluruhan : 4 x 4 x 2 = 32. Hasil  menunjukkan  tidak  terjadi  interaksi  pemberian  konsentrasi  BAP  dan Bradyrhizobium  japonicum namun  memberikan  pengaruh  mandiri  terhadap masing-masing pemberian pengaruh tersebut.
Kata Kunci : Kedelai, BAP, bradyrhizobium

## ABSTRACT
Soybean  (Glycine  max  (L.)  Merril)  is  an  important  food  crop  as  a  source  of vegetable  protein.  This  research  will  be  conducted  in  Tarogong  Kaler  District, Garut Regency. The purpose of this study was to determine the effect of BAP and PGPR  administration  on  the  total  number  of  root  nodules  and  the  number  of effective  root  nodules.  The  research  location  is  at  a  height  of  650  meters.  The design  in  this  study  uses  Factorial  Randomized  Block  Design  (RBD)  which consists of two factors, namely four levels of Benzyle Amino Purine concentration (BAP)  and  four  levels  of  inoculant  Bradyrhizobium  japonicum.  Each  treatment was repeated twice, then the total number: 4 x 4 x 2 = 32. The results showed that there was no interaction between the concentration of BAP and Bradyrhizobium japonicum but had an independent effect on each of these effects.
Keyword : Soybean, BAP, bradyrhizobium

## PENDAHULUAN
Kedelai  ( Glycine  max (L.)  Merril)  merupakan  tanaman  pangan  yang penting  sebagai  sumber  protein  nabati.  Kedelai  juga  merupakan  komoditas  yang telah  dibudidayakan  di  Indonesia  sebagai  bahan  baku  industri  pangan  dan  non pangan. Di Indonesia terdapat dua macam kedelai yang berkembang, yaitu kedelai kuning dan kedelai hitam. Kedelai kuning memiliki kandungan lemak lebih tinggi, sehingga  sering  digunakan  sebagai  bahan  baku  pembuatan  minyak  kedelai. Kedelai  hitam  memiliki  kandugan  lemak  yang  lebih  rendah  dan  memiliki kandungan  protein  lebih  tinggi.  Kedelai  hitam  merupakan  bahan  baku  utama dalam industri kecap.
Kedelai  hitam  mempunyai  kandungan  fenolik,  tanin,  antosianin  dan isoflavon  serta  aktivitas  antioksidan  lebih  tinggi  dibanding  kedelai  kuning  (Xu dan  Chang,  2007).  Menurut  Xu  dan  Chang  (2007)  kedelai  hitam  kandungan flavonoidnya  6  kali  lebih  banyak  dibanding  kedelai  kuning  (kandungan  total flavonoid  kedelai  kuning  dan  hitam  berturut-turut  0,41  dan  2,57  mg  ekuivalen dengan  katekin  per  gram)  dan  aktivitas  antioksidan  15  kali  lebih  tinggi  ( DPPH scavenging capacity kedelai kuning dan hitam berturut-turut 1,40 dan 17,58 μmol ekuivalen  Trolox  per  gram)  sedangkan  menurut  Astadi  dkk, (2009)  kulit  kedelai hitam varietas Mallika memiliki kandungan antosianin 1,36 g/100 g dan senyawa fenolik 6,46 g/100 g.
Berkembangnya industri kecap di Indonesia secara langsung berpengaruh terhadap peningkatan kebutuhan akan kedelai hitam. Berdasarkan laporan Badan Pusat Statistik bahwa produksi kedelai pada tahun 2014 adalah 15,51 kuintal per hektar  meningkat  sebanyak  1,16%  menjadi  15,69  kuintal  per  hektar  pada  tahun 2015  (Badan  Pusat  Statistik,  2016).  Walaupun  terjadi  peningkatan  hal  tersebut masih  belum  dapat  mencukupi  kebutuhan  akan  kedelai  nasional.  Rendahnya tingkat  produktivitas  ini  menyebabkan  tidak  terpenuhinya  kebutuhan  kedelai dalam negeri dengan kondisi permintaan dan kebutuhan masyarakat dari tahun ke tahun yang terus meningkat seiring dengan bertambahnya jumlah penduduk. Oleh karena  itu,  perlu  adanya  peningkatan  mutu  benih  untuk  menghasilkan produktivitas  yang  tinggi  dengan  mutu  benih  yang  tinggi  pula,  sehingga
ketersediaan  benih  bermutu  dapat  terwujud  dalam  rangka  mendukung swasembada kedelai.
Ketersediaan  varietas  benih  kedelai  hitam  yang  bermutu  itu  sendiri jumlahnya masih terbatas. Faktor pembatas produksi kedelai salah satunya adalah benih  yang  bermutu  (Anggraeni  dan  Suwarno,  2013).  Menurut  Baihaki  (2002) bahwa  penggunaan  benih  kedelai  yang  bersertifikat  oleh  petani  masih  sangat rendah  yaitu  sekitar  5%.  Cara  yang  dapat  dilakukan  untuk  mendapatkan  varietas yang unggul yaitu melalui seleksi, introduksi dan persilangan. Adanya  perbedaan respon    genotipe      terhadap    lingkungan    menyebabkan    timbulnya    perbedaan fenotipe    pada    setiap    tanaman.    Dari    penampilan    fenotipe    tersebut    suatu perbedaan  sifat  karakter  dapat  diketahui  apakah  di  pengaruhi  oleh  genetik atau  lingkungan  sehingga  dapat  memudahkan  pemulia  untuk  melakukan  proses seleksi    setiap    genotipe    untuk    mengetahui    genotipe    yang    lebih    baik    pada suatu daerah (Welsh, 2005).
Selain  pemilihan  benih  yang  bermutu,  aspek  budidaya  dan  kualitas  tanah juga harus diperhatikan. Kedelai sebagai tanaman semusim menyerap N, P dan K dalam  jumlah  relatif  besar.  Untuk  mendapatkan  hasil  kedelai  yang  tinggi diperlukan  hara  mineral  dalam  jumlah  yang  cukup  dan  seimbang.  Namun demikian, pemberian pupuk anorganik secara intensif dan bahan lain yang kurang ramah terhadap tanah akan mengakibatkan kondisi tanah menurun dan tergolong lahan sakit. Oleh karena itu, pemberian pupuk anorganik harus diimbangi dengan pemberian pupuk organik dan pupuk hayati.
Pupuk organik berperan penting dalam meningkatkan serta mempertahankan  kualitas  tanah.  Pupuk  hayati  juga  membantu  meningkatkan efisiensi  serapan  hara,  memperbaiki  pertumbuhan  dan  hasil  tanaman,  serta meningkatkan  ketahanan  hama  dan  penyakit.  Kualitas  tanah  dan  serapan  yang baik  akan  menopang  pertumbuhan  dan  produktivitas  tanaman.  Pupuk  hayati mengandung mikroorganisme yang berguna bagi tanaman.
Salah  Salah  satu  kelebihan  dari  tanaman  kacang-kacangan  yaitu  mampu bersimbiosis  mutualisme  dengan  bakteri  rhizobium  sebagai  penyedia  nitrogen. Salah  satu  bakteri  rhizobium  adalah Bradyrhizobium  japonicum .  B  japonicum juga termasuk bakteri yang hidup disekitar rhizosphere maka dapat dikatan bakteri
ini bagian dari plant growth promoting rhizobacteria. Fungsinya yaitu membantu dalam  pertumbuhan  dan    produksinya  tanaman  serta  membantu  secara  bertahap dalam  memulihkan  kesuburan  tanah.  Beberapa  bakteri  dari  kelompok  PGPR adalah  bakteri  penambat    nitrogen  seperti  genus  Rhizobium,  Azotobacter, Azospirillum  dan  bakteri  pelarut  fosfat  seperti  genus  Bacillus,  Pseudomonas, Arthrobacter, Bacterium dan Mycobacterium (Biswas et al, 2000).
Bradyrhizobium  japonicum adalah  salah  satu  jenis  bakteri  bintil  akar (BBA) yang berperan penting dalam meningkatkan produktivitas tanaman kedelai secara  simbiosis.  Bintil  akar  merupakan  proses  kompleks  yang  membutuhkan koordinasi ekspresi kedua gen bakteri dan tanaman. Flavonoid dalam eksudat akar tanaman  menginduksi  ekspresi  dari  gen  bintil  di Bradyrhizobium (Smith  dan Wollum,  1989).  Di  dalam  bintil,  BBA  mengubah  nitrogen  menjadi  amonia sebagai  suplai  nitrogen  bagi  pertumbuhan  tanaman  (Atlas  dan  Bartha,1981). Bradyrhizobium japonicum juga menghasilkan lendir dari karbohidrat permukaan sel  yang  sebagian  besar  berupa  polisakarida  ekstraseluler  (EPS  )  dan  berfungsi sebagai toleransi terhadap asam (Lounch dan Miller, 2001)
Sitokinin  (BAP)  berfungsi  sebagai  perangsang  pertumbuhan  tunas, berpengaruh  terhadap  metabolisme  sel,  pembelahan  sel,  merangsang  sel, mendorong  pembentukan  buah  dan  biji,  mengurangi  dormansi  apikal,  serta mendorong inisiasi tunas lateral (Wattimena, et al, 1992).
Sitokinin merupakan nama kelompok hormon tumbuh yang sangat penting sebagai  pemacu  pertumbuhan  dan  morfogenesis  dalam  kultur  jaringan  seperti halnya pada auksin, selain sitokinin alami juga terdapat sintetisnya yang tergolong dalam zat pengatur tumbuh (Santoso dan Fatimah, 2005).
Sitokinin merupakan senyawa organik yang menyebabkan pembelahan sel yang dikenal dengan proses sitokinesis. Sitokinin mempengaruhi berbagai proses fisiologis di dalam tanaman terutama mendorong pembelahan sel. Salah satu jenis ZPT dari golongan sitokinin yang sering dipakai dalam kultur jaringan yaitu BAP (6-benzylaminopurine).  6-Benzilaminopurine  (BAP)  merupakan  salah  satu sitokinin  sintetik  yang  aktif  dan  daya  merangsangnya  lebih  lama  karena  tidak mudah  dirombak  oleh  enzim  dalam  tanaman.  Penggunaan  BAP  dengan konsentrasi  tinggi  dan  masa  yang  panjang  dapat  menentukan  kemampuan
pembentukan  jumlah  tunas  dan  bentuk  tunas.  Pada  konsentrasi  BAP  yang  lebih tinggi dan masa induksi yang lebih lama menyebabkan penampakan abnormal dan menyebabkan penurunan jumlah regenerasi yang diperoleh (Gunawan, 1995).
Aktivitas sitokinin tergantung juga dari aktivitas fitohormon yang lainnya, terutama  auksin  baik  dalam  efek  menghambat  maupun  efek  yang  mendorong pembelahan  sel  (Wattimena, et  al ,  1992).  Sitokinin  dan  auksin  memiliki  peran yang sangat penting dalam hal menginduksi tunas adventif. Nisbah keduanya akan menentukan apakah suatu kalus akan membentuk tunas adventif, akar, atau tunas adventif dan akar (Armini, et al , 1991).

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  akan  dilakukan  di  Kecamatan  Tarogong  Kaler  Kabupaten Garut.  Lokasi  penelitian  berada  pada  ketinggian  tempat  650  meter.  Rancangan pada  penelitian  ini  menggunakan  Rancangan  Acak  Kelompok  (RAK)  Faktorial yang  terdiri  dari  2  faktor  yaitu  empat  taraf  Konsentrasi  BAP  dan  empat  taraf inokulan Bradyrhizobium  japonicum .  Tiap  perlakuan  diulang  sebanyak  dua  kali, maka jumlah keseluruhan : 4 x 4 x 2 = 32

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Berdasarkan  hasil  analisis  menunjukkan  tidak  terjadi  interaksi  antara pengaruh konsentrasi BAP dan Bradyrhizobium japonicum terhadap jumlah bintil akar  total.  Namun  memberikan  pengaruh  mandiri  dari  masing-masing  perlakuan yang diberikan. Hasil analisis terdapat pada Tabel 1.
Tabel 1. Hasil Analisis Konsentrasi BAP dan Bradyrhizobium japonicum terhadap
Jumlah Bintil Akar Total Perlakuan Jumlah Biji Bintil Akar Total (butir) Konsentrasi POC Rumput Laut (P) p 1 = 0 ppm 17,50  a p 2 = 0.4 ppm 19,38  ab p 3 = 0.8 ppm 22,25 c p 4 = 1.2 ppm 20,00 bc
Inokulan Bradyrhizobium japonicum (B)
b 1 = tanpa isolat B. japonicum 18,50 a b 2 = B. japonicum 10 5 18,75 ab
b 3 = B. japonicum 10 6 21,00 b b 4 = B. japonicum 10 7 20,88 b
Keterangan:  Angka  rata-rata  yang  diikuti  huruf  yang  sama  pada  setiap  kolom,  tidak berbeda nyata menurut Uji Jarak Berganda Duncan pada taraf 5%.
Hasil  menunjukkan  bahwa  jumlah  bintil  akar  berpengaruh  terhadap pemberian  BAP.  Nilai  tertinggi  terdapat  pada  pemberian  BAP  pada  konsentrasi 0,8  ppm  (p 3 )  yaitu  22,25.  Sedangkan  pada  perlakuan  pemebrian  inokulan B. japonicum 10 6 dengan nilai 21. Namun tidak berbeda nyata dengan B. japonicum 10 7 dengan nilai 20,88.
Berdasarkan  hasil  analisis  menunjukkan  tidak  terjadi  interaksi  antara pengaruh konsentrasi BAP dan Bradyrhizobium japonicum terhadap jumlah bintil akar  total.  Namun  memberikan  pengaruh  mandiri  dari  masing-masing  perlakuan yang diberikan. Hasil analisis terdapat pada Tabel 1.
Tabel 2. Hasil Analisis Konsentrasi BAP dan Bradyrhizobium japonicum terhadap Jumlah Bintil Akar Efektif
Perlakuan Jumlah Bintil Akar Efektif (butir) Konsentrasi BAP (P) p 1 = 0 ppm 6,00 a p 2 = 0.4 ppm 7,63 b p 3 = 0.8 ppm 8,75 b p 4 = 1.2 ppm 8,75 b Inokulan Bradyrhizobium japonicum (B)
b 1 = tanpa isolat B. japonicum 6,38 a b 2 = B. japonicum 10 5 6,88 a
b 3 = B. japonicum 10 6 9,00 b
b 4 = B. japonicum 10 7 8,88 b
Keterangan:  Angka  rata-rata  yang  diikuti  huruf  yang  sama  pada  setiap  kolom,  tidak berbeda nyata menurut Uji Jarak Berganda Duncan pada taraf 5%.
Hasil  menunjukkan  bahwa  jumlah  bintil  akar  berpengaruh  terhadap pemberian  BAP.  Nilai  tertinggi  terdapat  pada  pemberian  BAP  pada  konsentrasi 0,8  ppm  (p 3 )  yaitu  8,75.  Sedangkan  pada  perlakuan  pemebrian  inokulan B. japonicum 10 6 dengan nilai 9. Namun tidak berbeda nyata dengan B. japonicum 10 7 dengan nilai 8,88.

## KESIMPULAN
1. Tidak  terjadi  interaksi  antara  pemberian  konsentrasi  Benzyle  Amino Purine (BAP) dan Bradyrhizobium japonicum terhadap jumlah bintil akar total dan jumlah bintil akar efektif.
2. Terdapat  pengaruh  mandiri  pemberian  Benzyle  Amino  Purine  (BAP)  dan Bradyrhizobium  japonicum terhadap  jumlah  bintil  akar  total  dan  jumlah bintil akar efektif.

## DAFTAR PUSTAKA
Adisarwanto, 2008. Budidaya Kedelai Tropika. Penebar Swadaya. Jakarta.
Astadi, I.R., M. Astuti, U. Santoso and P.S. Nugraheni. 2009. In vitro antioxidant activity  of  anthocyanins  of  black  soybean  seed  coat  in  human  low  density lipoprotein (LDL) . Food Chem., 122: 659-663.
Anggraeni,  N.  D  dan  Faiza  C.  Suwarno,  2013.  Kemampuan  Benih  Kedelai (Glycine  max  L.)  untuk  Mempertahankan  Viabilitasnya  setelah  Didera dengan Etanol. Agrohorti . 1(4):34-44
Badan  Pusat  Statistik,  2016.  Produksi  Tanaman  Kedelai  Indonesia. http//www.bps.go.id/ (Diakses 23 Maret 2016)
Barber,  Stanley  A.  1984.  Soil  Nutrient  Bioavailability.  Wiley  Interscience Publication. United States of America.
Baihaki,  A.  2002.  Review  Pemuliaan  Tanaman  dalam  Industri  Perbenihan Indonesia.  Di  dalam:  E.  Murniati  dkk,  Editor.  Industri  Benih  di  Indonesia Aspek  Penunjang  Pengembangan.  Bogor  (ID):  Institut  Pertanian  Bogor. Hlm 1-6
Biswas    JC,    Ladha    JK,    Dazzo    FB.    2000.    Rhizobial    inoculation    improves nutrient    uptake    and    growth    of  lowland    rice.    Soil    Sci.    Soc.Am.    J. 64:1644-1650
Dupponois, Robin. 2006. Mycorrhiza Helper Bacteria : Their Ecological Impact in Mycorrhizal Symbiosis. Handbook of Microbial Fertilizers. The Haworth Press, Inc. United States of America.
Dupponois,  Robin  and  Garbaye.  1990.  Some  Mechanisms  Involved  in  Growth Stimulation  of  Ectomycorrhizal  Fungi  by  Bacteria.  Canadian  Journal  of Botany 68: 2148 – 2152.
Fernando D, Nakkeeran, Zhang Yilan.  2005. biosynthesis of antibiotics by PGPR and  its  relation  in  biocontrol  of  plant  diseases.dalam: Z.A.  Siddiqui  (ed.), PGPR:  Biocontrol  and  Biofertilization 67-109. Springer,  Dordrecht,  The Netherlands
Lounch,  H.A. & Miller, K.J. 2001. Synthesis of a low-molecular-weight form of exopolysaccharide  by Bradyrhizobiumjaponicum USDA  110. Appl Environ Microbiol., 67, 1011- 1014
Welsh,  J.R.,  2005 .   Fundamentals  of  Plant  Gnenetics  and  Breeding .  John Willey  and Sons, New York. 453 pp.
Xu,  B.J.  and  S.K.S.  Chang.  2007 .  A  Comparative  study  on  phenolic  profils  and antioxidant  of  legums  as  affected  by  extraction  solvents .  J.  Food Sci.,72(2):159-166.