# Korespondensi:  Balai  Riset  Perikanan  Budidaya  Air  Payau  dan Penyuluhan  Perikanan.  Jl.  Makmur  Dg.  Sitakka  No.  129,
Maros  90512,  Sulawesi  Selatan,  Indonesia. Tel.  +  62  411  37154 E-mail:  mulyaningrum@kkp.go.id
Tersedia  online  di:  http://ejournal-balitbang.kkp.go.id/index.php/jra

## PEREMAJAAN  BIBIT RUMPUT  LAUT  Gracilaria  verrucosa  HASIL  KULTUR  JARINGAN MELALUI  SELEKSI  MASSA
Sri  Redjeki  Hesti  Mulyaningrum # ,  Andi  Indra  Jaya  Asaad,  Hidayat  Suryanto  Suwoyo,  dan Erfan  Andi  Hendrajat
Balai Riset Perikanan Budidaya Air Payau dan Penyuluhan Perikanan Jl. Makmur Dg. Sitakka No. 129, Maros 90512, Sulawesi Selatan
(Naskah diterima: 26 Juli 2019; Revisi final: 19 September 2019; Disetujui publikasi: 19 September 2019)

## ABSTRAK
Penelitian ini bertujuan untuk menguji performa bibit rumput laut Gracilaria verrucosa hasil kultur jaringan yang  diremajakan dengan  metode seleksi  massa. Penelitian  dilaksanakan di  tambak percobaan  Marana, Maros, Sulawesi Selatan; menggunakan dua petakan tambak berukuran sekitar 2.500 m 2 . Seleksi dilakukan berdasarkan perhitungan laju pertumbuhan harian (LPH), menggunakan sistem long line selama dua siklus dengan durasi 30 hari/siklus. Bibit rumput laut hasil seleksi kemudian dipelihara dengan sistem tebar dasar dan dibandingkan dengan kontrol internal dan kontrol eksternal dengan memasang sembilan unit hapa berukuran  1  m  x  1  m  x  1  m,  dengan  tiga  ulangan  untuk  masing-masing  perlakuan.  Perhitungan  LPH, kandungan  agar,  dan  kekuatan  gel  dilakukan  setiap  30  hari  dan  setiap  15  hari  dilakukan  monitoring terhadap kualitas air yakni salinitas, suhu, nitrat, dan fosfat. Hasil yang diperoleh memperlihatkan adanya peningkatan  LPH  yang  signifikan  (P<0,05)  dari  siklus-I  (2,67  ±  0,38%/hari)  menjadi  (3,56  ±  0,25%/hari) pada siklus-II, dengan respons seleksi sebesar 21,48%-22,34% dan diferensial seleksi sebesar 9,70%-10,16%. Pertumbuhan  rumput  laut  hasil  seleksi  lebih  tinggi  (3,23  ±  0,50%/hari)  dibandingkan  dengan  kontrol internal (2,12 ± 0,02%/hari), dan kontrol eksternal (1,69 ± 0,09%/hari) (P<0,05). Kontrol internal memiliki kandungan  agar  yang  lebih  tinggi  (20,07  ±  12,97%)  dari  rumput  laut  hasil  seleksi  (16,07  ±  1,58%)  dan kontrol eksternal  (8,29 ± 1,69%) (P<0,05);  namun hasil seleksi  memiliki kekuatan gel yang  lebih tinggi (761,15 ± 208,90 g/cm 2 ) dari kontrol internal (322,44 ± 244,29 g/cm 2 ), dan kontrol eksternal (297,42 ± 44,16 g/cm²) (P<0,05). Peremajaan bibit rumput laut hasil kultur jaringan dengan metode seleksi massa mampu meningkatkan performa bibit rumput laut G. verrucosa.
KATA KUNCI: respons seleksi; diferensial seleksi; G. verrucosa; seleksi massa; peremajaan
ABSTRACT: Propagation of tissue-cultured seaweed seed, Gracilaria verrucosa using mass selection method. By: Sri Redjeki Hesti Mulyaningrum, Andi Indra Jaya Asaad, Hidayat Suryanto Suwoyo, and Erfan Andi Hendrajat
This study was aimed to determine the performance of tissue-cultured seaweed seed Gracilaria verrucosa, which was propagated using mass selection method. The study was conducted in the experimental ponds in Marana, Maros, South Sulawesi. The mass selection was conducted in two ponds of 2,500 m2. The selection was made by culturing the seaweed seed using the long line system for two cycles in 30 days/cycle duration during which the daily growth rates (DGR) of seaweed seeds were measured. The selected seaweed seeds were then cultivated in the ponds using broadcast system and the growth was compared with the internal and external controls consisted of nine units of 1 m x 1 m x 1 m hapa, with three replications for each treatment (selected seed, internal control, and external control). The measurements of DGR, agar yield, and gel strength were conducted every 30 days, while water quality monitoring i.e. salinity, temperature, nitrate, and phosphate were conducted every 15 days. The results showed that the DGR of seaweed seed increased significantly (P<0.05) from 2.67 ± 0.38%/day in cycle-I to 3.56 ± 0.25%/day in cycle-II, the selection response was 21.48%-22.34% and the differential selection was 9.70%-10.16%. The daily growth rate of selected seaweed seed was significantly higher (3.23 ± 0.50%/day) (P<0.05) compared to internal (2.12 ± 0.02%/
day) and external controls (1.69 ± 0.09%/day). Internal control has higher agar yield (20.07 ± 12.97%) compared to the selected seed (16.07 ± 1.58%) and external control (8.29 ± 1.69%) (P<0,05). The selected seed has higher gel strength (761.15 ± 208.90 g/cm 2 ) compared to internal control (322.44 ± 244.29 g/cm 2 ), and external control (297.42 ± 44.16 g/cm 2 ) (P<0,05). Propagated tissue-cultured seaweed seed using the  mass selection method could improve the overall performance of seaweed seed.
KEYWORDS: selection response; selection differential; G. verrucosa; mass selection; propagation
(Titlyanov & Titlyanova, 2010; Hurtado et al., 2015). Salah  satu  metode  alternatif  untuk  mengatasi persoalan-persoalan tersebut adalah penyediaan bibit rumput laut melalui kultur jaringan dan seleksi massa. Salah satu tujuan kultur jaringan adalah propagasi klon rumput laut sebagai bahan baku budidaya. Budidaya rumput  laut  pada  skala  komersil  memerlukan  bibit dengan karakter fenotipe yang diinginkan dalam jumlah besar, kultur jaringan merupakan salah satu metode terbaik untuk menyediakan bibit dalam volume yang besar (Reddy et al., 2008; Yong et al., 2014). Seleksi massa merupakan salah satu teknik pemuliaan tanaman dengan metode pemilihan sekelompok individu dari suatu populasi berdasarkan fenotipe yang serupa. Pada beberapa spesies tanaman, seleksi massa merupakan metode  yang  penting  sebagai  upaya  untuk meningkatkan  kinerja  populasi  untuk  karakter tertentu.  Dalam  seleksi  massa,  populasi  yang terseleksi biasanya dievaluasi terhadap populasi yang tidak  terseleksi  untuk  mengukur  efektivitas  seleksi (Luckett & Halloran, 2003). Pada rumput laut, seleksi massa diaplikasikan untuk memperoleh bibit rumput laut dengan performa yang baik (Pong-Masak et  al., 2011).
Balai  Riset  Perikanan  Budidaya  Air  Payau  dan Penyuluhan  Perikanan  (BRPBAPPP)  Maros,  telah mengembangkan  metode  kultur  jaringan  untuk menyediakan  bibit  rumput  laut  G.  verrucosa,  dan hasilnya  telah  dikembangkan  di  beberapa  lokasi budidaya seperti di Kabupaten Bone (Daud et al., 2013), Maros (Daud et al., 2014), Sinjai (Daud, 2014), Pangkep (Daud  et  al.,  2015),  dan  Luwu  (Makmur  & Mulyaningrum, 2018). Salah satu kendala yang dihadapi dalam pengembangan bibit rumput laut G. verrucosa hasil kultur jaringan adalah tidak adanya peremajaan bibit setelah dibudidayakan di tambak. Bibit rumput laut hasil kultur jaringan yang telah dikembangkan di masyarakat  digunakan  secara  berulang-ulang  pada beberapa  siklus  budidaya.  Untuk  itu,  perlu  upaya peremajaan  bibit  rumput  laut  hasil  kultur  jaringan dengan metode seleksi massa. Metode seleksi dipilih untuk  peremajaan  bibit  rumput  laut  hasil  kultur jaringan  karena  metode  ini  dapat  meningkatkan performa bibit rumput laut (Pong-Masak et al., 2011). Penelitian ini bertujuan untuk menguji performa bibit rumput  laut  G.  verrucosa  hasil  kultur  jaringan  yang diremajakan dengan metode seleksi massa.

## PENDAHULUAN
Rumput laut Gracilaria sp. termasuk spesies yang banyak dibudidayakan untuk tujuan komersil terutama sebagai  bahan  baku  utama  agar-agar.  Gracilaria merupakan rumput laut yang menempati urutan kedua spesies di dunia yang banyak dibudidayakan khususnya di  Cina sebanyak  70%,  dan  Indonesia sebanyak  28% dari  total  produksi  global  (FAO,  2016).  Sekitar  80% dari total produksi agar-agar di dunia bersumber dari Gracilaria sp. Permintaan pasar dunia terhadap rumput laut  Gracilaria  sp.  terus  meningkat  seiring  dengan peningkatan  produksi  agar-agar  di  Eropa,  Afrika, Amerika,  dan  Asia  Pasifik  (Wikfors  &  Ohno,  2001; Bixler & Porse, 2011).
Penyediaan bibit rumput laut secara konvensional dapat diperoleh dari sumber alam dan perbanyakan vegetatif dari sisa hasil budidaya. Metode penyediaan bibit  secara  konvesional  ini  memiliki  beberapa kelemahan di antaranya ketersediaan bibit yang sangat tergantung  dari  kondisi  alam,  adanya  potensi penurunan kualitas rumput laut karena pemakaian bibit yang  berulang-ulang  dalam  beberapa  kali  siklus budidaya, umur bibit yang melebihi standar, dan tidak ada perbaikan kualitas bibit (Ask & Azanza, 2002; Gra- ham  et  al.,  2007).  Menurut  Kim  et  al.  (2017), pemanfaatan bibit dari alam memiliki permasalahan pada  variasi  fisiologinya  seperti  pertumbuhan  dan kandungan agar. Eksploitasi sumber bibit rumput laut dari  alam  secara  berlebihan  memiliki  konsekuensi terhadap  persoalan  ekologi,  ekonomi,  dan konsekuensi  sosial  secara  global  (Titlyanov  & Titlyanova,  2010;  Rebours  &  Karlsen,  2007). Penggunaan  bibit  dari  sisa  hasil  budidaya  juga menimbulkan  permasalahan  tersendiri.  Budidaya rumput  laut  menggunakan bibit  sisa  hasil  budidaya juga  memungkinkan  penurunan  kualitas  bibit, terbawanya kembali parasit atau patogen dari rumput laut  hasil  panen  sebelumnya  pada  siklus  budidaya selanjutnya  dan  dapat  mengakibatkan  penurunan produksi (Hurtado et al., 2006; Vairappan et al., 2008; Saminathan et al., 2015).
Berbagai  upaya  dilakukan  untuk  meningkatkan produktivitas  seperti  perbaikan  metode  budidaya, perbaikan strain melalui pemanfaatan plasma nutfah yang terseleksi sebagai bibit, perbaikan pengelolaan lahan budidaya, serta perbaikan manajemen budidaya

## BAHAN DAN METODE

## Lokasi  Penelitian  dan  Persiapan  Tambak
Penelitian  dilaksanakan  di  Instalasi  Tambak Percobaan Marana, Maros, Sulawesi Selatan pada bulan April-Juli  2018  menggunakan  dua  petakan  tambak masing-masing berukuran sekitar 2.500 m 2 . Sebagai persiapan  terlebih  dahulu  dilakukan  pengeringan tambak,  kemudian  dilakukan  pemupukan menggunakan pupuk SP-36 dan pupuk urea dengan perbandingan 1:2 atau 25 kg (SP-36) dan 50 kg (urea) untuk setiap petak dengan dosis 250 kg/ha. Petakan- 1  digunakan  untuk  seleksi  rumput  laut  hasil  kultur jaringan dengan metode long line, sedangkan petakan- 2 untuk pemeliharaan rumput laut hasil seleksi.

## Seleksi  Bibit
Bibit rumput laut yang digunakan merupakan bibit hasil  kultur  jaringan  hasil  penelitian  tahun  2013 (Mulyaningrum et al., 2014) yang telah dibudidayakan di tambak masyarakat. Seleksi dilakukan berdasarkan perhitungan  laju  pertumbuhan  harian  (LPH) menggunakan sistem long line sesuai dengan metode yang  dikembangkan  oleh  Pong-Masak  et  al.  (2011). Rumput laut hasil kultur jaringan ditimbang sebanyak 30  g  setiap  rumpun dan  diikat  pada  tali  bentangan dengan  panjang  sekitar  30  m  dengan  jarak  antar rumpun 15-20 cm. Setiap bentangan diikat pada bambu pancang  dengan  ketinggian  15-20  cm  dari  dasar tambak.
Seleksi dilakukan selama dua siklus dengan lama pemeliharaan 30 hari/siklus. Pada akhir setiap siklus seleksi,  yakni  30  hari  dilakukan  pengukuran  LPH dengan menimbang bobot setiap rumpun. Pengukuran LPH dilakukan pada semua rumpun dengan menimbang rumpun satu per satu. Bibit rumput laut dengan LPH tertinggi-1  merupakan  bibit  rumput  laut  yang terseleksi,  sedangkan  bibit  yang  tidak  terseleksi digunakan  sebagai  kontrol  internal.  Penentuan karakter pertumbuhan bibit rumput laut hasil seleksi dilakukan  dengan  menghitung  respons  seleksi  dan diferensial seleksi. Respons seleksi (  G) merupakan selisih antara bobot rata-rata populasi terseleksi (Ps) dan  bobot  rata-rata kontrol  (Pc).  Diferensial  seleksi (S) merupakan selisih antara bobot rata-rata populasi terseleksi  (x’)  dan  bobot  rata-rata  populasi  awal  (x) (Luckett & Halloran, 2013).
Bibit yang terseleksi kemudian dipelihara dengan sistem tebar dasar (broadcast system) pada petakan yang telah disiapkan sebelumnya dengan kepadatan 1.250 kg/petak.

## Pemeliharaan  Bibit  Hasil  Seleksi
Bibit rumput laut hasil seleksi dipelihara dengan sistem tebar dasar (broadcast system) pada petakan yang telah  disiapkan.  Selama  pemeliharaan  dilakukan pemupukan susulan dengan pupuk urea setiap 15 hari dengan dosis 10% dari pemupukan awal (5 kg/petak).
Performa  bibit  rumput  laut  hasil  seleksi dibandingkan  dengan  kontrol  internal  dan  kontrol eksternal  (bibit  lokal)  yang  merupakan  rumput  laut hasil budidaya di sekitar lokasi penelitian. Monitor- ing  performa  bibit  rumput  laut  dilakukan  dengan memasang sembilan unit hapa berukuran 1 m x 1 m, dengan tiga hapa untuk masing-masing sumber bibit (seleksi,  kontrol  internal,  dan  kontrol  eksternal). Setiap hapa diisi rumput laut dengan bobot awal 500 g/hapa  dan  dipasang  secara  acak  pada  bagian  inlet, tengah,  dan  outlet  tambak.  Analisis  pertumbuhan, kandungan agar, dan kekuatan gel dilakukan setiap 30 hari; sedangkan pengamatan kualitas air yang meliputi salinitas, suhu, nitrat, dan fosfat dilakukan setiap 15 hari.  Kandungan  agar  dianalisis  dengan  metode ekstraksi air panas dan kekuatan gel dianalisis dengan alat  Brookfield  CT3  Texture  Analyser  mengacu  pada metode Ahmad et al. (2011) dengan konsentrasi agar sebesar 3% (b/v) sesuai metode Indriawati (2007).

## Analisis  Data
Data pertumbuhan rumput laut pada seleksi siklus- I dan II dianalisis secara statistik dengan analisis uji t untuk  mengetahui  apakah  terdapat  perbedaan pertumbuhan  pada  siklus-I  dan  siklus-II.  Data pertumbuhan rumput laut hasil seleksi, kontrol inter- nal  dan  kontrol  eksternal,  kandungan  agar  dan kekuatan  gel  rumput  laut  dianalisis  secara  statistik menggunakan analisis ragam (ANOVA) dan uji lanjut Duncan. Data respons seleksi, diferensial seleksi, dan kualitas  air  yakni  salinitas,  suhu,  nitrat,  dan  fosfat dianalisis secara deskriptif.

## HASIL DAN BAHASAN

## Pertumbuhan
Seleksi bibit selama dua siklus dengan metode long line memperlihatkan peningkatan LPH bibit rumput laut hasil  seleksi,  di  mana  pada  siklus-II  LPH  rata-rata sebesar (3,56 ± 0,25%/hari) lebih tinggi daripada siklus I (2,67 ± 0,38%/hari) (Gambar 1). Hasil analisis uji t memperlihatkan bahwa pertumbuhan rumput laut pada seleksi  siklus-I  berbeda  nyata  dengan  siklus-II (P<0,05).
Performa  pertumbuhan  bibit  rumput  laut  pada setiap  rumpun  juga nampak  semakin  membaik  dari siklus-I  hingga  siklus-II.  Hal  ini  dapat  dilihat  secara visual pada siklus-II rumput laut memiliki rumpun yang lebih rimbun dengan percabangan yang lebih banyak dibanding pada siklus-I (Gambar 2).
Dari hasil analisis pola pertumbuhan rumput laut (Tabel  1),  diperoleh  estimasi  respons  seleksi  pada kisaran 12,17-25,76 g atau sebesar 21,48%-22,34% dan diferensial  seleksi  pada  kisaran  6,20-12,88  g  atau sebesar 9,70%-10,16%. Respons seleksi dan diferensial seleksi yang diperoleh pada penelitian lebih rendah dari hasil yang diperoleh Parenrengi et al. (2016) pada rumput  laut  Kappaphycus  striatum  di  mana  estimasi respons seleksi berada pada kisaran 66,48%-100% dan
diferensial seleksi 47,5%-75,17%. Pong-Masak & Sarira (2018)  melaporkan  seleksi  pada  rumput  laut Kappaphycus  alvarezii  dapat  meningkatkan pertumbuhan rumput laut hasil seleksi sebesar 5,53%/ hari dari kontrol 2,19%/hari.
Menurut  Ariyanto  (2015),  seleksi  harus memperhatikan  latar  belakang  populasi  yang  akan diseleksi  sehingga  respons  seleksi  yang  diperoleh sesuai  harapan. Respons seleksi merupakan indikasi kemajuan  hasil  seleksi,  hasil  yang  diharapkan  dari seleksi  rumput  laut  adalah  meningkatnya  rata-rata bobot rumpun rumput laut pada suatu populasi. Salah satu faktor yang memengaruhi respons seleksi adalah diferensial  seleksi.  Nilai  diferensial  seleksi  dapat ditingkatkan dengan memperkecil jumlah rumpun yang
Gambar 1. Laju pertumbuhan harian rumput laut G. verrucosa pada seleksi bibit selama dua siklus. Figure 1. Daily growth rate of G. verrucosa on two cycles seed selection.
0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 I II LP H ( % /h ar i) / D G R (% /d ay ) Siklus (Cycle)
Gambar 2. Performa rumpun bibit rumput G. verrucosa laut hasil kultur jaringan pada siklus-I (A) dan siklus-II (B).
Figure 2. Clump performance of tissue cultured seaweed G. verrucosa seed on cycle-I (A) and cycle-II (B). A
B
diseleksi, semakin kecil jumlah rumpun yang diseleksi semakin  besar  nilai  diferensial  seleksi,  sehingga kemajuan  hasil  seleksi  per  generasi  akan  semakin besar.
LPH rumput laut pada perbanyakan bibit dengan metode tebar dasar selama dua siklus seperti disajikan pada Tabel 2. Rata-rata LPH rumput laut dari siklus-I dan siklus-II, hasil seleksi lebih tinggi (3,23 ± 0,50%/ hari) dibandingkan dengan kontrol internal (2,12 ± 0,02%/hari), dan kontrol eksternal (1,69 ± 0,09%/hari).
Hasil  analisis  ragam  (ANOVA)  memperlihatkan bahwa seleksi bibit berpengaruh signifikan terhadap pertumbuhan rumput laut G. verrucosa baik pada siklus- I maupun siklus-II (P<0,05).
Peremajaan  bibit  dengan  metode  seleksi  massa selama dua siklus telah memperlihatkan peningkatan pertumbuhan bibit rumput laut, meskipun kisaran LPH yang diperoleh pada penelitian ini masih lebih rendah dari kisaran LPH pada uji multilokasi bibit rumput laut hasil kultur jaringan pada beberapa daerah yang telah dilakukan pada penelitian sebelumnya (Tabel 3).
Perbedaan pertumbuhan ini diduga karena umur bibit rumput laut yang sudah lama dan pemakaian bibit
hasil  kultur  jaringan  yang  berulang-ulang  untuk budidaya. Menurut Hurtado & Cheney (2003), metode konvensional dengan menggunakan 10%-40% sisa hasil panen  untuk  siklus  budidaya  berikutnya  dapat menyebabkan  penurunan  keragaman  genetik, penurunan LPH, dan kandungan agar, serta peningkatan risiko  penyakit.

## Kandungan  Agar  dan  Kekuatan  Gel
Kandungan agar rumput laut hasil seleksi (17,18 ±  2,76%)  yang  diperoleh  pada  siklus-I  lebih  tinggi daripada kontrol internal (10,9 ± 1,00%), dan kontrol eksternal (9,48 ± 0,24%). Pada siklus-II kandungan agar rumput  laut  kontrol  internal  (29,24  ±  0,86%)  lebih tinggi dari hasil seleksi (14,95 ± 0,67%), dan kontrol eksternal (7,09 ± 2,19%) (Gambar 3). Kandungan agar rata-rata selama dua siklus pemeliharaan menunjukkan kontrol  internal  (20,07  ±  12,97%)  lebih  tinggi  dari hasil seleksi (16,07 ± 1,58%), dan kontrol eksternal (8,29 ± 1,69%).
Hasil  analisis  ragam  (ANOVA)  memperlihatkan bahwa ketiga sumber bibit memiliki kandungan agar yang  berbeda  nyata  (P<0,05).  Uji  lanjut  Duncan memperlihatkan perbedaan yang signifikan (P<0,05)
Tabel 1. Respons  seleksi  dan  diferensiasi  seleksi  rumput  laut  G.  verrucosa  hasil  seleksi  berdasarkan karakter bobot
Table 1. Selection response and differential selection of seaweed seed G. verrucosa based on weight character
Peubah (Variables ) Seleksi-I Mass selection-I Seleksi-II Mass selection-II Bobot rata-rata populasi kontrol (Weight of non selected seed ) (g) 54.93 119.94 Bobot rata-rata populasi terseleksi (Weight of selected seed ) (g) 67.20 145.70 Bobot rata-rata populasi bibit (Weight of seed population ) (g) 61.00 132.82 Respons seleksi (Response to selection)  (g) 12.27 25.76 Diferensiasi seleksi (Differiential of selection ) (g) 6.20 12.88
Keterangan: Nilai dengan superskrip yang sama setelah nilai rata-rata menunjukkan tidak berbeda nyata (P>0,05) pada uji Duncan
Note: Values  with  the  same  superscripts  after  means  value  are  not  significantly  different  (P>0.05) in  Duncan  test Tabel 2. Laju pertumbuhan harian pada 30 hari masa pemeliharaan bibit rumput laut G. verrucosa pada siklus-I dan II dengan sistem tebar dasar
Table 2. Daily growth rate of seaweed seed G. verrucosa during 30 days cultivation on cycle-I and II using broadcast farming system
Siklus-I (Cycle-I ) Siklus-II (Cycle-II ) Seleksi (Selected seed ) 2.88 ± 0.16 a 3.59 ± 0.23 a Kontrol internal (Internal control ) 2.10 ± 0.65 ab 2.13 ± 0.09 b Kontrol eksternal (External control ) 1.63 ± 0.12 b 1.75 ± 0.10 c Bibit rumput laut
Seaweed seed LPH (%/hari) (DGR (%/day) )
pada kandungan agar hasil seleksi, kontrol internal, dan kontrol eksternal baik pada siklus-I dan siklus-II.
Hasil  penelitian  ini  lebih  tinggi  dari  hasil  yang diperoleh oleh Rejeki et al. (2018) yang memperoleh kandungan agar rumput laut G. verrucosa hasil kultur jaringan sebesar 8,4% dengan sistem budidaya tebar dasar.  Mulyaningrum  &  Suwoyo  (2018)  melaporkan kandungan agar rumput laut G. verrucosa hasil kultur jaringan yang dibudidayakan dengan metode long line berada  pada  kisaran  10,30  ±  2,15–27,84  ±  1,0%. Menurut  Villanueva  et  al.  (2010),  kandungan  agar rumput laut Gracilaria  sp. berada  pada kisaran  15%- 33%.
Rumput  laut  hasil seleksi  memiliki  kekuatan  gel lebih tinggi daripada kontrol internal maupun kontrol eksternal baik pada siklus-I dan siklus-II. Kekuatan gel rumput laut hasil seleksi pada siklus-I (613,44 ± 54,49 g/cm 2 )  lebih  tinggi  dari  kontrol  internal  (149,70  ± 36,33 g/cm²), dan kontrol eksternal (328,64 ± 42,59 g/cm 2 ).  Hal  yang  sama  juga  terjadi  pada  siklus-II  di mana  kekuatan  gel  hasil  seleksi  sebesar  (908,86  ± 65,14 g/cm 2 ), kontrol internal (495,18 ± 1,25 g/cm 2 ), dan kontrol eksternal (266,19 ± 21,92 g/cm 2 ) (Gambar 4).  Nilai  rata-rata  hasil  seleksi  (761,15  ±  208,90  g/ cm 2 ), kontrol internal (322,44 ± 244,29 g/cm 2 ), dan kontrol  eksternal  (297,42  ±  44,16  g/cm²).  Rumput
Tabel 3. Laju pertumbuhan harian rumput laut G. verrucosa hasil kultur jaringan dengan metode budidaya tebar dasar pada berbagai lokasi
Table 3.
Daily  growth  rate  of  tissue  cultured  seaweed  G.  verrucosa  using  broadcast  farming system in several locations
Keterangan (Note):  * Hasil yang diperoleh pada penelitian ini (Result of the present study)
Lokasi
Location
Kisaran LPH (%/hari)
DGR range (%/day) Referensi Reference Bone 3.80-3.82 Daud et al . (2013) Maros 4.22-6.01 Daud et al . (2014) Sinjai 4.31-4.86 Daud (2014) Pangkep 5.32-5.92 Daud et al . (2015) Luwu 3.91-5.60 Makmur & Mulyaningrum (2018) Maros * 2.88-3.59 -
Gambar 3. Kandungan agar bibit rumput laut pada umur 30 hari pada siklus- I dan II.
Figure 3. Agar yield of seaweed seed after 30 days cultivation in cycle- I and II.
Keterangan: Nilai yang diikuti oleh huruf yang sama setelah nilai rata-rata menunjukkan tidak berbeda nyata (P>0,05) pada uji Duncan Note: Values  with  the  same  superscripts  after  means  value  are  not  significantly different  (P>0.05)  in  Duncan  test
0 5 10 15 20 25 30 35 I II K an d u n gan ag ar ( A ga r yi el d) ( %) Siklus (Cycle) Seleksi/Selected seed Kontrol Internal/Internal control Kontrol eksternal/External control Seleksi  (Selected  seed) Kontrol internal (Internal control) Kontrol eksternal (External control) a c b a c b
laut hasil seleksi memiliki kekuatan gel yang berbeda nyata  dengan  kontrol  internal  maupun  kontrol eksternal (P<0,05) baik pada siklus-I maupun siklus- II. Faktor umur jaringan talus diduga menjadi penyebab adanya perbedaan kualitas agar pada rumput laut hasil seleksi,  kontrol  internal,  dan  kontrol  eksternal. Menurut Mendoza et al. (2006), umur jaringan talus sangat memengaruhi kuantitas dan kualitas pikokoloid yang dihasilkan.
Kekuatan gel rumput laut hasil peremajaan pada penelitian  ini  lebih  tinggi  dari  hasil  yang  diperoleh oleh Rahim et al. (2018) yang melaporkan kekuatan gel rumput laut G. verrucosa hasil kultur jaringan yang dibudidayakan  di  tambak  dengan  aplikasi  pupuk vermikompos  berada  pada  kisaran  65,5-77,2  g/cm 2 . Sedangkan Rejeki et al. (2018) memperoleh kekuatan gel rumput laut G. verrucosa hasil kultur jaringan yang dibudidayakan dengan sistem tebar dasar sebesar 478 ± 126 g/cm 2 , dengan konsentrasi sampel uji sebesar 1,5% (b/v). Faktor-faktor yang memengaruhi kualitas agar di antaranya spesies rumput laut, lokasi budidaya, dan  musim  (Romero  et  al.,  2007;  Marinho-Soriano, 2001). Menurut Lee et al. (2016), kondisi lingkungan di  mana  rumput  laut  Gracilaria  sp.  tumbuh  sangat memengaruhi kualitas agar yang dihasilkan. Perbedaan metode  ekstraksi  dan  analisis  kualitas  agar  yang digunakan  juga  dapat  memengaruhi  perbedaan kandungan agar dan kekuatan gel yang dihasilkan (Vuai & Mpatani, 2019; Jayasinghe et al., 2016).

## Kualitas  Air
Dari hasil monitoring kualitas air tambak selama penelitian  berlangsung  diperoleh  data  seperti disajikan  pada  Tabel  4.  Salinitas  selama  penelitian berada pada kisaran 21-30 ppt. Rumput laut Gracilaria/ Gracilariopsis  merupakan  spesies  yang  memiliki toleransi yang tinggi terhadap kisaran salinitas yakni 10-40 ppt dan tumbuh optimum pada kisaran 25-33 ppt (Kim et al., 2017).
Suhu perairan selama penelitian berada pada kisaran 28°C-30°C.  Suhu  memiliki  korelasi  yang  signifikan dengan  pertumbuhan  rumput  laut  Gracilaria,  suhu terbaik  untuk  pertumbuhan  Gracilaria  pada  kisaran 20°C-28°C (Orduña-Rojas & Robledo, 2002; Raikar et al., 2001). Menurut Choi et al. (2006), suhu optimum untuk  pertumbuhan  rumput  laut  G.  verrucosa  pada kisaran 17°C-30°C.
Kandungan nitrat yang diperoleh selama penelitian berada pada kisaran 0,0015-0,8355 g/L. Nitrat dalam perairan  diperlukan  oleh  rumput  laut  untuk metabolisme, kandungan nitrat di perairan yang opti- mum  untuk  pertumbuhan  Gracilaria  adalah  0,6-0,8 mg/L (Ganesan et al., 2011).
Unsur  fosfat  pada  perairan  berada  pada  kisaran 0,0021-0,2108  mg/L.  Menurut  Effendi  (2003), kandungan fosfat dalam perairan digolongkan dalam tiga kategori, yakni perairan dengan tingkat kesuburan rendah memiliki kandungan fosfat pada kisaran 0-0,02
Keterangan: Nilai yang diikuti oleh huruf yang sama setelah nilai rata-rata menunjukkan tidak berbeda nyata (P>0,05) pada uji Duncan
Note: Values  with  the  same  superscripts  after  means  value  are  not  significantly different  (P>0.05)  in  Duncan  test
Gambar 4. Kekuatan gel rumput laut pada umur 30 hari pada siklus-I dan siklus-II.
Figure 4. Gel strength of seaweed seed after 30 days cultivation in cycle-I and cycle-II. 0 200 400 600 800 1000 1200 I II K ek u at an g el (G el st re ng th ) ( g /c m ²) Siklus (Cycle) Seleksi/Selected seed Kontrol internal/Internal control Kontrol eksternal/External control Seleksi  (Selected  seed) Kontrol internal (Internal control) Kontrol eksternal (External control) a c b a c b
mg/L; tingkat kesuburan sedang pada kisaran 0,021- 0,05 mg/L; dan kesuburan tinggi pada kisaran 0,051- 0,2  mg/L.  Secara  umum  kondisi  perairan  selama penelitian  masih  pada  kondisi  yang  layak  untuk pertumbuhan rumput laut G. verrucosa.
Kultur  jaringan  merupakan  salah  satu  metode alternatif perbanyakan klon sebagai bahan baku bibit rumput laut.  Pemantauan bibit hasil  kultur jaringan secara terus-menerus dan isolasi klon dengan kualitas unggul untuk sifat tertentu, serta pemeliharaan strain yang  terseleksi  untuk  menjaga  kualitas  bibit  hasil kultur jaringan menjadi hal yang perlu diperhatikan (Yong et al., 2014; Reddy et al., 2008; Saminathan et al., 2015). Peremajaan bibit rumput laut hasil kultur jaringan  dengan  metode  seleksi  massa  merupakan salah  satu  upaya  untuk  memperbaharui  bibit  hasil kultur  jaringan  yang  telah  dibudidayakan  secara berulang-ulang. Seleksi tidak dapat menghasilkan gen baru namun dapat merubah frekuensi gen sehingga dapat meningkatkan mutu gen secara kualitatif maupun kuantitatif. Menurut Fadilah et al. (2016), rumput laut hasil  seleksi  memiliki  konsentrasi  hormon pertumbuhan kinetin yang lebih besar dibandingkan dengan kontrol. Dengan metode seleksi diharapkan dapat  memperbaiki  kualitas  bibit  rumput  laut  hasil kultur jaringan sesuai dengan pendapat (Baweja et al., 2009)  yang  menyatakan  bahwa  kombinasi  metode mikropropagasi dengan metode penyediaan bibit yang lain dapat meningkatkan kualitas bibit rumput laut. Untuk  menjaga  stabilitas  mutu  bibit,  peremajaan sebaiknya  dilakukan  pada  beberapa  siklus  hingga diperoleh bibit dengan performa yang stabil.

## KESIMPULAN
Peremajaan bibit rumput laut hasil kultur jaringan dengan  metode  seleksi  massa  selama  dua  siklus mampu meningkatkan performa bibit rumput laut G. verrucosa. Pertumbuhan dan kekuatan gel rumput laut hasil  seleksi  lebih  tinggi  dari  kontrol  internal  dan kontrol  eksternal,  namun  kandungan  agar  belum memperlihatkan peningkatan yang signifikan.
Tabel 4. Data kualitas air selama pemeliharaan rumput laut G. verrucosa Table 4. Water quality during seaweed G. verrucosa cultivation

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penelitian  ini  merupakan  bagian  dari  kegiatan diseminasi rumput laut yang dibiayai oleh APBN Tahun Anggaran 2018 Balai Riset Perikanan Budidaya Air Payau dan  Penyuluhan  Perikanan.  Ucapan  terima  kasih disampaikan  kepada  segenap  teknisi  litkayasa BRPBAPPP:  Bpk.  Baso  Muin,  Bpk.  Saparuddin,  Ibu Haryani,  dan  Ibu  Mujayana  yang  banyak  membantu dalam kegiatan penelitian ini.

## DAFTAR  ACUAN
Ahmad, R., Surif, M., Ramli, N., Yahya, N., Nor, A.R.M.,
&  Bekbayeva,  L.  (2011).  A  preliminary  study  on the agar content and agar gel strength of Gracilaria manilaensis  using  different  agar  extraction  pro- cesses.  World  Applied  Sciences  Journal,  15(2), 184-188.
Ariyanto, D. (2015). Seleksi yang tepat memberikan hasil yang hebat. Media Akuakultur, 10(2), 65-70.
Ask, E.I.  & Azanza,  R.V. (2002).  Advances in  cultiva- tion technology of commercial eucheumatoid spe- cies:  A  review  with  suggestions  for  future  re- search. Aquaculture, 206(3-4), 257-277.
Baweja, P., Sahoo, D., García-Jiménez, P., & Robaina, R.R.  (2009).  Review:  Seaweed  tissue  culture  as applied to biotechnology: Problems, achievements and prospects. Phycological Research, 57(1), 45-58. Bixler, H.J. & Porse, H. (2011). A decade of change in the  seaweed  hydrocolloids  industry.  Journal  of Applied Phycology, 23(3), 321-335.
Choi,  H.G.,  Kim,  Y.S.,  Kim,  J.H.,  Lee,  S.J.,  Park,  E.J., Ryu, J., &  Nam, K.W. (2006). Effects  of tempera- ture  and  salinity  on  the  growth  of  Gracilaria verrucosa  and  G.  chorda,  with  the  potential  for mariculture in Korea. Journal of Applied Phycology, 18, 269-277.
Daud,  R.,  Mulyaningrum,  S.R.H.,  &  Sahrijanna,  A. (2013).  Pemanfaatan  kebun  bibit  rumput  laut Gracillaria sp. di tambak melalui penggunaan bibit cepat tumbuh. Prosiding Seminar Nasional Perikanan
Variabel Variabels Minimum Minimum Maksimum Maximum Nilai rujukan Standard Referensi Reference Salinitas (Salinity ) (ppt) 21 30 25-33 Kim et al . (2017) Suhu (Temperature ) (°C) 28 30 17-30 Choi et al . (2006) Nitrat (Nitrate ) (mg/L) 0.0015 0.8355 0.6-0.8 Lee et al . (2016) Fosfat (Phosphate ) (mg/L) 0.0021 0.2108 0.1-0.2 Effendi (2003)
Indonesia  Hasil  Penelitian  Perikanan  dan  Kelautan, STP, Jilid 2, 269-273.
Daud,  R.,  Rosmiati, &  Mulyaningrum,  S.R.H.  (2014). Budidaya  rumput  laut  Gracilaria  sp.  hasil  kultur jaringan  di  tambak  Desa  Ampekale  Kecamatan Bontoa  Kabupaten  Maros.  Prosiding  Seminar Nasional  Tahunan  Ke-IV  Hasil-hasil  Penelitian Perikanan dan Kelautan, Undip, Jilid 2, 399-404. Daud, R. (2014). Perbanyakan bibit unggul rumput laut Gracilaria sp. menggunakan metode hapa di tambak Kabupaten Sinjai. Makalah disampaikan pada Semi- nar Nasional Tahunan XI Hasil Penelitian Perikanan dan Kelautan. Jogjakarta, 30 Agustus 2014. 5 hlm. Daud, R., Mulyaningrum, S.R.H., & Suryati, E. (2015). Perbanyakan rumput laut Gracilaria sp. hasil kultur jaringan di tambak. Prosiding Forum Inovasi Teknologi Akuakultur, hlm. 765-768.
Effendi, H. (2003). Telaah kualitas air bagi pengelolaan sumber daya dan lingkungan perairan. Yogyakarta: Kanisius, 257 hlm.
Fadilah, S., Alimuddin, Pong-Masak, P.R., Santoso, J.,
& Parenrengi, A. (2016). Growth, morphology and growth-related  hormone  level  in  Kappaphycus alvarezii produced by mass selection in Gorontalo Waters, Indonesia. Hayati Journal of Bioscience, 23, 29-34.
FAO. (2016). The State of World Fisheries and Aqua- culture 2016. Contributing to food security and nutrition for all. Rome, 200 pp.
Ganesan,  M.,  Sahu,  N.,  &  Eswaran,  K.  (2011).  Raft culture of Gracilaria edulis in open sea along the south-eastern  coast  of  India.  Aquaculture,  321, 145-151.
Graham,  M.H.,  Vásquez,  J.A.,  &  Buschmann,  A.H. (2007).  Global  ecology  of  the  giant  kelp Macrocystis: from ecotypes to ecosystems. Ocea- nography  and  Marine  Biology  Annual  Review,  45, 39-88.
Hurtado, A.Q. & Cheney, D.P. (2003). Propagule pro- duction of Eucheuma denticulatum (Burman) Collins et Harvey by tissue culture. Botanica Marina, 46(4), 338-341.
Hurtado,  A.Q.,  Critchley,  A.T.,  Trespoey,  A.,  & Lhonneur, G.B. (2006). Occurrence of Polysiphonia epiphytes  in  Kappaphycus  farms  at  Calaguas  Is., Camarines  Norte,  Phillippines.  Journal  of  Applied Phycology, 18, 301-306.
Hurtado,  A.Q.,  Neish,  I.C.,  &  Critchley,  A.T.  (2015). Developments  in  production  technology  of
Kappaphycus  in  the  Philippines:  more  than  four decades  of  farming.  Journal  of  Applied  Phycology, 27, 1945-1961.
Indriawati, K. (2007). Analisis kekuatan gel (gel strength) agar-agar  komersial berdasarkan  konsentrasi  sulfat dan  konsentrasi  3,6-anhidro–L-Galaktosa.  Skripsi. Program  studi  biokimia  MIPA.  Institut  Pertanian Bogor.
Jayasinghe, P.S., Pahalawattaarachchi, V., & Ranaweera, K.K.D.S. (2016). Effect of extraction methods on the yield and physiochemical properties of poly- saccharides extracted from seaweed available in Sri  Lanka.  Poultry,  Fisheries  &  Wildlife  Sciences, 4(1), 1-6.
Kim, J.K., Yarish, C., Hwang, E.K., Park, M., & Kim, Y. (2017). Seaweed aquaculture/ : Cultivation tech- nologies, challenges and its ecosystem services. Algae, 32(1), 1-13.
Lee, W.K., Lim, P.E., Phang, S.M., Namasivayam, P., & Ho, C.L. (2016). Agar properties of Gracilaria spe- cies (Gracilariaceae, Rhodophyta) collected from different natural habitats in Malaysia. Regional Stu- dies in Marine Science, 7, 123-128.
Luckett, D. & Halloran, G. (2013). Plant breeding. In Pratley, J. E. (Ed.). Principles of field crop produc- tion (4 th ed.). South Melbourne, Victoria, Austra- lia; New York: Oxford University Press, 73 pp.
Makmur  &  Mulyaningrum,  S.R.H.  (2018).  Evaluasi performa bibit rumput laut Gracilaria verrucosa hasil kultur  jaringan  di  Kabupaten  Luwu,  Sulawesi Selatan. Media Akuakultur, 13(1), 1-9.
Marinho-Soriano, E. (2001). Agar polysaccharides from Gracilaria  species  (Rhodophyta,  Gracilariaceae). Journal of Biotechnology, 89, 81-84.
Mendoza, W.G., Ganzon-Fortes, E.T., Villanueva, R.D., Romero,  J.B.,  & Montaño,  M.N.E.  (2006).  Tissue age as a factor affecting carrageenan quantity and quality in farmed Kappaphycus striatum (Schmitz) Doty ex Silva. Botanica Marina, 49, 57-64.
Mulyaningrum, S.R.H., Daud, R., & Badraeni. (2014). Propagasi  vegetatif  rumput  laut  Gracilaria  sp. melalui kultur jaringan. Jurnal Riset Akuakultur, 9(2), 203-214.
Mulyaningrum, S.R.H. & Suwoyo, H.S. (2018). Growth, agar yield and water quality variables affecting mass propagation of tissue cultured seaweed Gracilaria verrucosa in pond. Ilmu Kelautan, 23(1), 55-62.
Orduña-Rojas, J. & Robledo, D. (2002). Studieson the tropical  agarophyte  Gracilaria  cornea  J.  Agardh (Rhodophyta, Gracilariales) from Yucatán, México II. Biomass Assessment and Reproductive Pheno- logy. Botanic Marina, 45, 459-464.
Parenrengi, A., Fahrur, M., Makmur, & Mulyaningrum, S.R.H.  (2016).  Seleksi  rumput  laut  Kappaphycus striatum dalam upaya peningkatan laju pertumbuhan
bibit untuk budidaya. Jurnal Riset Akuakultur, 11(3), 235-248.
Pong-Masak, P.R., Priono, B., & Insan, I. (2011). Seleksi klon bibit rumput laut, Gracilaria verrucosa. Media Akuakultur, 6(1), 1-12.
Pong-Masak, P.R. & Sarira, N.H. (2018). Seleksi rumput laut Kappaphycus alvarezii (Rhodophyceae) dalam upaya  penyediaan  bibit  unggul  untuk  budidaya. Jurnal  Perikanan  Universitas  Gadjah  Mada,  20(2), 79-85.
Rahim, A.R. (2018). Application of seaweed Gracilaria verrucosa  tissue  culture using  different  doses  of vermicompost  fertilizer.  Nature  Environment  and Pollution Technology, 17(2), 661-665.
Raikar,  S.V.,  Iima,  M.,  &  Fujita,  Y.  (2001).  Effect  of temperature,  salinity  and  light  intensity  on  the growth  of  Gracilaria  spp.  (Gracilariales, Rhodophyta) from Japan, Malaysia and India. In- dian Journal of Marine Sciences, 30, 98-104.
Rebours,  C.  &  Karlsen,  Å.  (2007).  Seaweeds  in  the North:  New  scopes  for  coastal  farming.  Bioforsk Fokus, 2(13), 73-76.
Reddy,  C.R.K., Jha,  B.,  Fujita, Y.,  &  Ohno, M.  (2008). Seaweed micropropagation techniques and their potentials: An overview. Journal of Applied Phyco- logy, 20(5), 609-617.
Rejeki,  S.,  Ariyati,  R.W.,  Widowati,  L.L.,  &  Bosma, R.H.  (2018).  The  effect  of  three  cultivation  me- thods  and  two  seedling  types  on  growth,  agar content  and  gel  strength  of  Gracilaria  verrucosa. Egyptian Journal of Aquatic Research, 44, 65-70. ess - uncorrected proof007/52.
Romero,  J.B.,  Montanõ,  M.N.E.,  Merca,  F.E., Villanueva,  R.D.,  Liao,  M.L.,  &  Bacic,  A.  (2007). Seasonal  variations  in  the  composition  and  gel quality  of  agar  from  Gracilaria  edulis  in  the  Phi- lippines. Botanica Marina, 50, 191-194.
Saminathan,  K.R.,  Ashok,  K.S.,  Veeragurunathan,  V., & Mantri, V.A. (2015). Seedling production in the industrially important agarophyte Gracilaria dura (Gracilariales, Rhodophyta). Journal of Applied Phy- cology, 27, 1541-1548.
Titlyanov,  E.A.  &  Titlyanova,  T.V.  (2010).  Seaweed cultivation: Methods and problems. Russian Jour- nal of Marine Biology, 36(4), 227-242.
Vairappan, C.S., Chung, C.S., Hurtado, A.Q., Soya, F.E., Lhonneur,  G.B.,  &  Critchley,  A.  (2008).  Distribu- tion and symptoms of epiphyte infection in ma- jor  carrageenophyte-producing  farms.  Journal  of Applied Phycology, 20(5), 477-483.
Vuai,  S.A.H.  &  Mpatani,  F.  (2019).  Optimization  of agar  extraction  from  local  seaweed  species Gracilaria  salicornia  in  Tanzania.  Phycological  Re- search, 67(3), 1-6.
Wikfors, G.H. & Ohno, M. (2001). Impact of algal re- search in aquaculture. Journal of Phycology, 37(6), 968-974.
Yong, W.T.L., Ting, S.H., Yong, Y.S., Thien, V.Y., Wong, S.H.,  Chin,  W.L.,  Rodrigues,  A.F.,  &  Anton,  A. (2014). Optimization of culture conditions for the direct  regeneration  of  Kappaphycus  alvarezii (Rhodophyta, Solieriaceae). Journal of Applied Phy- cology, 26(3), 1597-1606.