## DAYA HAMBAT EKTRAK  DAUN JARAK PAGAR  (Jatropha curcas L)
TERHADAP PERTUMBUHAN Candida albicans
THE INHIBITORY ACTIVITY OF DAUN JARAK PAGAR (Jatropha curcas L) AGAINST THE GROWTH OF Candida albicans
Susi susi 1 , Gusti Revilla 2 , Fitri Anggini 3 , Putri Ovieza Maizar
1,3,4 Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Andalas
2 Fakultas Kedokteran Universitas Andalas Corresponding author : susi@dent.unand.ac.id

## ABSTRAK
Candida albicans merupakan jamur flora normal bersifat opportunistik didalam rongga mulut yang dapat menyebabkan  terjadinya denture  stomatitispada  daerah  rongga  mulut. Penelitian  ini bertujuan untuk menetapkan  potensi hambat ekstrak  daun  jarak  pagar  terhadap  pertumbuhan Candida  albicans (ATCC 10231) pada permukaan akrilik. Desain penelitian eksperimental laboratorium dengan Post test only with control  group.  Sampel    20  buah  pelat  resin  akrilik heat  cured yang  dikontaminasikan dengan  suspensi Candida albicans (0.5X10 8 cfu/ mL) dan diinkubasi secara aerob, selama 24 jam. Sampel  dibagi menjadi 4 kelompok dan direndam selama 8 jam dalam ekstrak daun jarak pagar konsentrasi 10% (G1), 15% (G2), 20% (G3) dan akuades (G4). Ekstrak daun jarak pagar dibuat secara maserasi dengan etanol 96%. Koloni masing-masing sampel dihitung dengan Tally counter. Data dianalisis dengan One Way Anova (p<0,05). Hasil penelitian menunjukkan bahwa jumlah koloni Candida albicans terkecil ditemukan pada kelompok konsentrasi  20% dibandingkan  dengan kelompok kontrol.  Hasil  analisa  One  Way Anova menunjukkan adanya perbedaan jumlah koloni Candida albicans antar kelompok (p<0.05). Hasil Uji Least Significance Different terdapat perbedaan bermakna antara kelompok kontrol dengan kelompok konsentrasi 15%, dan 20% (p<0.05). Kesimpulan ekstrak daun jarak pagar dapat menghambat pertumbuhan Candida albicans pada pemukaan akrilik Kata kunci: Candida albicans, ekstrak daun jarak pagar, maserasi

## ABSTRACT
Candida Albicans is a normal flora fungus , that is opportunistic in oral cavity which can cause denture stomatitis prosthesis. Denture stomatitis can be prevented by keeping the prosthesis clean.
The  objective  of  this  study was to determine the  effect  of Jatropha Curcas  L extract (JCE) against  the growth of Candida Albicans( ATCC 10231) between groups (C. albicans grew on acrylic plate with JCL) )tested and control (C. albicans grew on acrylic plate without added JCL). The design of the study is the laboratory experimental using Post Test only with a control group. Samples of 20 heat cured acrylic resin plates were contaminated with Candida Albicans suspension for 24 hours. Samples were divided into 4 groups  and  immersed  for  8  hours  in Jatropha  curcas  L extract  in  10% (G1),  15% (G2) 20% G3) of concentration and aqua distillate (control/ G4). Jatropha curcas L extract was made by maceration with 96% ethanol. The colonies of each sample were calculated by the Tally counter. Data were analyzed by One Way ANOVA (p <0.05). Results of study showed that the least Candida albicans colonies foundwas in group 3 and the most Candida albicans colonies were found in control group (G4). Statistically, the one way ANOVA analysis showed differences in the number of Candida albicans colonies in each group (p <0.05). The Significance Different Test Results showed that there were significant differences between the control group with the concentration group of 15% and 20% (p <0.05). So it can be concluded that Jatropha  curcas  L extract  can  inhibit  the  growth  of Candida Albicans on  acrylic  plate and  it  was concentration dependency.
Keywords: Candida albicans, Jatropha curcas L extract, maceration

## PENDAHULUAN
Kehilangan  gigi  dapat  menganggu fungsi  pengunyahan,  fungsi  bicara  dan  aspek psikologis seperti  estetika.untuk menjaga dan mengembalikan  fungsi  gigi  yang  hilang digunakan protesa  atau  gigi  tiruan 1 . Resin akrilik  atau polimetilmetakrilat merupakan bahan sebagaibasis  protesa yang  paling banyak digunakan karena warnanya  sesuai dengan  gingiva, harganya  cukup  murah, mudah dimanipulasi dan direparasi 2 . Kekurangan resin akrilik adalah berporus, menyerap  air  dan  kurang  tahan  terhadap abrasi.  Porus  atau  lubang  kecil  pada  resin akrilik  berpotensi  menjadi  tempat  retensi makanan 3 .Retensi  makanan  pada  basis  akrilik dapat  menyebabkan  meningkatnya  jumlah mikroorganisme  dalam  rongga  mulut  seperti Candida albicans 4,5 .
Candida  albicans merupakan  jamur flora  normal  bersifat  oppurtunistik  dalam rongga mulut yang akan berkembangbiak pada daerah dengan Ph rendah dan kurang oksigen. Protesa  yang  tidak  baik  dan  tidak  terjaga kebersihannya akan  meningkatkan  jumlah koloni Candida  albicans. Meningkatnya jumlah Candida  albicans akan menginduksi terjadinya denture stomatitis 6 . Denture stomatitis merupakan peradangan pada rongga mulut pada  daerah  yang  berkontak  dengan protesa akibat jamur Candida  albicans.
Prevalensi  penderita  denture  stomatitis  pada pengguna protesa 15 – 70% 7 .
Denture  stomatitis dapat  dicegah dengan  menjaga  kebersihan    protesa serta melepaskannya di malam  hari. Protesa dibersihkan  dengan  menggunakan  sikat  halus. Teknik    membersihkan  yang  salah  dapat menimbulkan  abrasi  dan    goresan  pada permukaan  yang akan  mengakibatkan  retensi plak. Pembersihan  secara  kimia  dilakukan dengan  merendam  protesa  dalam  bahan antiseptik  yang  mampu  membunuh mikroba seperti Candida  albicans yang  tumbuh  dan berkembang  pada  permukaan  protesa  yang berporus dan abrasive 8,9 .
Bahan pembersih  protesa    banyak beredar di pasaran dengan harga relatif mahal sehingga  dibutuhkan  bahan  alternatif  sebagai bahan  pembersih dengan  harga  yang  lebih murah. World Health Organization tahun 2002 meluncurkan  program Traditional  Medicine Strategy. Pemerintah Indonesia berupaya
mendorong  penggunaan  dan  pengembangan bahan  tradisional  sebagai  bahan  obat-obatan karena  bahan  tradisonal  lebih  mudah  didapat dan harganya relatif 10 .

## Tanaman jarak pagar (Jatropha curcas
L) merupakan  salah  satu  tanaman  yang  telah digunakan dalam pengobatan tradisional. Daun jarak  pagar mengandung flavonoid,  alkaloid dan  tanin 11 . Penelitian  Rahman  dkk  (2011) menyatakan ekstrak daun jarak pagar (Jatropha curcas  L)  dapat  menghambat pertumbuhan  bakteri  dan  jamur  pada  tanaman pepaya 12 . Penelitian  Sharma  dkk (2012) menyatakan  ekstrak  akar,  batang  dan  daun jarak  pagar  dapat  menghambat  pertumbuhan bakteri dan jamur 13 .
Penelitian ini bertujuan untuk menetapkan daya  hambat ektrak  daun  jarak pagar  terhadap  pertumbuhan  jamur Candida albicans pada  pelat  akrilik.Manfaat  penelitian ini  memberikan  informasi  mengenai alternatif bahan pembersih gigi.

## BAHAN DAN METODE
Desain penelitian ini adalah Eksperimental Laboratorium dengan Post test control  group  design. Sampel  penelitian adalah 20  buah plat  akrilik heat  cured berukuran  10  mm  x  10  mm  x  1mm    dengan permukaan  rata  dan  tidak  berporus sesuai dengan  kriteria  ADA (American  Dental Association) dan  jamur Candida  albicans (ATCC 10231) (gambar  1a). Ekstrak  daun jarak pagar (Jatropha curcas L) dibuat di Unit Pelaksana Teknis Daerah Balai  Laboratorium Kesehatan  Provinsi  Sumatera  Barat. Daun jarak  pagar seberat  500  gram dibersihkan  dan dikering  anginkan  selama  3  hari kemudian diblender dan dimaserasi  selama  72  jam menggunakan etanol 96%. Rotary evaporator digunakan untuk mendapatkan ekstrak kering daun  pagar. Akuades  ditambahkan  untuk mendapatkan ekstrak daun jarak pagar dengan konsentrasi 10%, 15% dan 20%.
Sampel  (20  buah  pelat  akrilik) direndam  dalam  air  selama  48  jam  untuk mengoptimalkan  penyerapan  air, mencegah distorsi    dan  mengurangi  residu  monomer setelah polimerisasi. Sampel kemudian disterilkan  menggunakan  autoklaf selama 18 menit dengan suhu 121 0 C. Sampel selanjutnya direndam  dalam  suspensi Candida  albicans (0.5X  10 8 cfu/  mL) dalam  tabung  reaksi
selama  24  jam (gambar  1b) dan  diinkubasi dalam inkubator dengan suhu 37 ⁰ C.
Sampel  dibagi  menjadi  4  kelompok dengan  konsentrasi ekstrak  daun  jarak  pagar 10% (G1),  15% (G2), 20% (G3) dan  kontrol akuades (G4). Masing-masing kelompok direndam selama  delapan  jam dengan  ektrak daun  Jarak  Pagar. Sampel  kemudian dibilas dengan air untuk menghilangkan sisa perlekatan  ekstrak  daun jarak  pagar kemudian dimasukkan  kedalam  akuades  10  ml dan divibrasi dengan vortex selama 30 detik untuk merontokkan  perlekatan Candida  albicans pada  sampel (gambar  1c). Suspensi diambil menggunakan  pipet  mikro sebanyak  0.1  ml dan diencerkan  sampai  10 -3 dimasukkan  ke Saburoud  Dextrose  Agar dan spreading inkubasi selama 48 jam dalam suhu 37 0 C.
Jumlah  koloni Candida  albicans
(gambar  1d) dihitung    menggunakan Tally counter. Data ditabulasi dan dianalisa menggunakan  uji One Way  Anova  dengan tingkat kemaknaan p ≤ 0.05.
a. b.

## c.
d.
Gambar 1
a. Biakan Candida albicans
b. Plat akrilik dalam suspensi Candida
albicans
c. Candida albicans dirontokkan dengan
vortex
d. Jumlah koloni Candida albicans

## HASIL
Berdasarkan hasil penelitian didapatkan data sebagai berikut:
Tabel 1.Koloni Candida albicans berdasarkan konsentrasi ekstrak daun jarak pagar. Kelompok n ∑ Candida albicans Mean  ±SD 95 ⁰ CI G 5 52.00±3.45 42.42-61.58 G1 5 49.60±3.97 38.58-60.62 G2 5 32.20±1.39 28.33-36.07 G3 5 22.60±2.28 16.29-28.91 Berdasarkan  tabel di  atas koloni Candida  albicans terdapat  pada semua kelompok. Kelompok  G4 memiliki  jumlah koloni candida albicans paling banyak 52.00 ± 3.450 dan  kelompok G3 memiliki  jumlah koloni  candida  albicans paling  sedikit yaitu 22.60 ± 1.393.
Hasil uji normalitas dan homogenitas dengan Saphiro  Wilk dan Levene  Test didapatkan data  merupakan data  yang  homogen dengan nilai p=0,31. Analisis  kemaknaan  dengan  uji  One  Way Anova didapatkan hasil terdapat perbedaan yang  bermakna  antara  masing-masing kelompok  (p<0,05)  dengan  nilai  F  1.270 dan  p=0.00.  Untuk  mengetahui  besar perbedaan yang signifikan diantara masing-masing  kelompok  dilakukan  uji Post  Hoc  Test dengan Least  Significant Difference test (LSD).
Tabel 2. Hasil Uji Least Significance Different (LSD) Kelompok Kontrol Konsentrasi 10% 15% 20% G4 - 0,573 0,00* 0,00* G1 0,57 - 0,00* 0,00* G2 0,00* 0,00* - 0,03* G3 0,00* 0,00* 0,03* - Bermakna = * Dari  hasil  uji  LSD  berdasarkan  tabel
5.2  menunjukkan  bahwa  terdapat  perbedaan yang  bermakna  antara  kelompok G4 dengan kelompok G2 dan G3 dengan  p=0.000
(p<0.05).  Tidak  terdapat  perbedaan  yang bermakna  antara  kelompok G4 dengan kelompok G1 dengan p=0.573.
PEMBAHASAN
Sifat porus pada pelat akrilik mempermudah  perlekatan  candida  albicans, ditemukan Candida albicans pada pelat akrilik protesa pasien sekitar 50%-65%. 6
Pertumbuhan Candida  albicans pada pelat  resin  akrilik  tidak  dapat  dilihat  karena pelat  akrilik  merupakan  media  padat.  Pada penelitian  ini  pertumbuhan (jumlah  koloni) Candida  albicans diamati setelah  jamur  ini ditumbuhkan pada Sabouraud  Dextrose  Agar (SDA)  dengan  suhu  37 0 C  selama 48  jam (gambar  1d). Candida menghasilkan  koloni - koloni  halus  yang  bewarna  krem  dan  berbau seperti  ragi. Hasil  penelitian (tabel  1) menunjukkan jumlah koloni Candida albicans pada  pelat akrilik  yang  direndam  dengan ekstrak  daun  jarak  pagar dengan  berbagai kosentrasi  lebih  sedikit  dibandingkan  dengan kontrol  (aquades). Jumlah  koloni  candida albicans pada  plat  akrilik  yang  direndam dengan ekstrak  daun jarak  pagar rata-rata 22,20±5,079 SD sedangkan  pada G4 rata-rata 52.00 ±7.714 x10 -3 cfu/ml .
Hasil  analisa  statistik menunjukkan rata-rata jumlah  koloni Candida  albican pada kelompok  G4  sebanyak 52 x 10 3 cfu/mL, , kelompok  G1  berjumlah 49 x 10 3 cfu/mL, kelompok  G2 adalah  32 x 10 3 cfu/mL dan pada  kelompok  G3 memiliki  jumlah  yang paling  sedikit 22.60 x 10 -3 cfu/mL. Hasil penelitian menunjukkan semakin tinggi konsentrasi  ektrak  daun  jarak  pagar  maka semakin  sedikit  jumlah  koloni  candida albicans  yang  terbentuk.  Menurut Cowan  dkk (1999)  daya  kerja  antimikroba dipengaruhi berbagai  faktor diantaranya konsentrasi bahan antimikroba, waktu dan suhu 14 .
Lama  perendaman  pelat  akrilik  dalam ektrak daun  jarak  pagar pada penelitian  ini    8 jam  dengan  suhu  37 0 C.    Waktu  ini  dipilih karena  merupakan  waktu  yang  ideal  untuk merendam  protesa  karena  merupakan  jam istirahat  maksimal  bagi  pasien  edentulous dimalam  hari  dimana  pasien  tidak  melakukan aktifitas. Cowan  dkk,  1999 menyatakan bahwa  semakin  lama  waktu  kerja  bahan antiseptik akan semakin efektif hasilnya dalam menghambat pertumbuhan antimikroba 14 . Hasil  penelitian  Irine  dkk (2015)  tentang ekstrak daun pandan (Pandanus amaryllifolius Roxb)dan pertumbuhan Candida albicans pada pelat  akrilik menyatakan  suhu 37 0 C adalah
suhu yang efektif dalam menghambat pertumbuhan Candida  albicans 15 . Efektifitas dan  laju  reaksi    bahan  antimikroba  dapat ditingkatkan  dengan  meningkatkan  suhu. Zat antimikroba  bekerja  dengan  merusak  suatu mikroba  melalui  reaksi-reaksi  kimia  yang dapat dipercepat dengan meningkatan suhu 14 . Hasil  analisis  uji One  Way  Anova menunjukkan    F=1.270  dan  nilai  p=0.00 dimana  terdapat  perbedaan  yang  bermakna antara kelompok perlakuan (p<0.05). Hasil  uji Post  Hoc  Test dengan Least  Significant Difference  test (LSD)  berdasarkan  tabel  5.2 menunjukkan terdapat perbedaan yang bermakna  antara  kelompok G4 dengan kelompok  yang  direndam  dengan kelompok G2  dan  G3 dengan  p=0,000    (p<0.05). Hasil penelitian ini sejalan dengan penelitian Sillma Rampadarath (2016) menyatakan ekstrak daun jarak pagar mempunyai daya hambat terhadap pertumbuhan Candida albicans 16 .
Kelompok G4 dengan kelompok  G1 tidak  menunjukkan  perbedaan  yang  signifikan dengan p=0,573 (p>0.05). Zat anti jamur yang terkandung pada ekstrak daun jarak pagar 10% paling sedikit dibandingkan konsentrasi lainnya dan  kandungan air yang dimiliki lebih banyak  sehingga    konsentrasi  antimikroba yang  terdapat  pada  ekstrak  daun  jarak  pagar sedikit,  hal  ini dapat menyebabkan  tidak adanya  perbedaan  yang  bermakna    dengan kelompok kontrol. Hasil penelitian Sukmawati dkk  melaporkan    ektrak  daun  jarak  pagar kosentrasi 12.5% mampu menghambat pertumbuhan Candida albicans 17 .
Hasil  yang  berbeda  didapatkan  dari penelitian  Harfiani  dan  Chaerani  menyatakan tidak terdapat daya hambat ekstrak daun jarak pagar kosentrasi  20%,  40%,  60%  ,  80%  dan 100% terhadap pertumbuhan Candida albicans 17 .  Pada  penelitian  ini  digunakan metoda difusi agar dengan medium Sobaround Dextrose Agar (SDA) 18 .
. Daun  jarak  pagar    efektif  digunakan sebagai  bahan  pengobatan  terutama  untuk infeksi bakteri dan jamur 19 . Ektrak daun Jarak Pagar  konsentrasi 25%  dengan  pelarut  ether mempunyai  daya  hambat yang  sama  dengan Nistatin terhadap Candida albicans sedangkan  pada  konsentrasi  12.5%  mampu menghambat pertumbuhan Candida albicans 20 . Pelarut berbeda  methanol  digunakan oleh Abdelgader dkk untuk membuat ektrak
daun jarak Pagar. Hasil penelitian menyatakan ekstrak  daun  Jarak  Pagar  dengan  konsentrasi 12.5%, 25% dan 50%  tidak mempunyai daya hambat terhadap pertumbuhan Candida albicans 20 .

## KESIMPULAN DAN SARAN
Ekstrak  daun  jarak  pagar  dengan berbagai konsentrasi dapat menghambat pertumbuhan bakteri Candida albican dan daya hambat  paling  tinggi  pada konsentrasi    20%.
Terdapat perbedaan  yang  bermakna  antara kelompok kontrol (akuades) dengan kelompok
ekstrak daun jarak pagar konsentrasi  15%  dan  20%. Tidak  terdapat perbedaan  yang  bermakna  antara  kelompok kontrol  dengan    kelompok  ekstrak  daun  jarak pagar konsentrasi 10% dengan p=0.573.
Disarankan  kepada  peneliti  selanjut untuk  melakukan  penelitian  efektifitas ekstrak daun jarak pagar terhadap Candida albicans.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Badan  Penelitian  dan  Pengembangan Kesehatan.  Laporan  Nasional  Riset Kesehatan  Dasar  (RISKESDAS)  Tahun 2007. Jakarta:  Departemen  Kesehatan RI. 140-141
2. Magdarina  Destri  Agtini. Prosentase
Pengguna  Protesa  di  Indonesia. Media Litbang Kesehatan. 2010; 20(2) 3. MCCabe,  J.F.,  Angus  W.G.  Walls. Applied Dental Material, 9th Ed.Blackwell. 2008 4. Marisa, Djulaeha E, Prajitno H. Efektifitas  perendaman  lempeng  resin akrilik  dalam  infusa  daun  kemangi (ocimum basilicum linn) terhadap Candida albicans. Journal of Prosthodontics. 2010; 1(1) : 61-70.
5. Anita  Y.  Viabilitas Sel Fibroblas  BHK- 21  pada  Permukaan  Resin  Akrilik  Rapid Heat  Cured.  Maj.  Ked.  Gigi.  (Dent.  J.), 2005; 38(5): 68-72.
6. Akpan,  A.,  Morgan,  M.  2002. Oral Candidiasis. Postgrad  Med  I, 78(992): 45-459
7. Gendreau  L 1 , Loewy  ZG. Epidemiology and  etiology  of  denture  stomatitis. J Prosthodont. 2011;20(4):251-60.  Epub
2011 Apr 4
8. Power, J.M. Jhon. Wataha. Dental Material Properties and Manipulation.
Elsivier 2008.
9. Kumar, M.N., H.M. Thippeswamy., K.N. Raghavendra  Swamy.,  A.K.  Gunjari. 2012.  Efficacy  of  Commercial  and Household  Denture  Cleaner  Against

## Candida  albicans Adherent  to  Acrylic
Denture  Bases  Resin:  An In vitro Study. Indian. Dent. Res. J., 23 (1):39-42
10. WHO. Traditional  Medicine  Strategy. Geneva:  World  Health  Organization. 2002-2005
11. Reddy,  D.M.  P., Amirah  I.,  Md.
Maksudur RK. Jatropha curcas: Plant of Medical  Benefits. Med.  Plant.  Res. J.2012; 6(14): 2691-699 12. Rahman M., Siti Hajar Ahmad., Mahmud  Tengku  Muda  Mohamed., Mohamad  Zaki  Ab.  Rahman.  Extraction of Jatropha  curcas fruits  for  antifungal activity against anthracnose (Colletotrichun gloeosporioides) of papaya. African. Biotechnology. J. 2011;10(48):9796-9799 13. Sharma Amit Kumar., Mayank Gangwar.,  Ragini  Tilak.,  Gopal  Nath., Akhoury  Sudhir  Kumar  Sinha.,  Yamini Bhusan  Tripathi.,  Dharmendra  Kumar. Comprative in  vitro Antimicrobial and Phytochemical Evaluation of Methanolic
Extract of Root, Stem  and Leaf of
Jaropha curcas Linn. PharmaoognosiI, 2011; 30():35-40
14. Cowan,    M.M. Plant  Products    as Antimicrobial    Agents,
Clinical Microbiol Rev. 1999 ; 12(4 : 564-82
15. Irine  Ardensa  Audira.,  Noor  Hafida Widyastuti.,  Fitria  Nur  Malita  Sari. Pengaruh  perendaman  plat  resin  akrilik daun  pandan (Pandanus  amaryllifolius Roxb) terhadap  pertumbuhan  jamur Candida  albicans. Naskah  Publikasi.
Surakarta. Universitas  Muhammadiyah Surakarta. 2015; 2-6 16. Sillma Rampadarath; Daneshwar Puchooa;  Rajesh  Jeewon.  Jatropa  curcas L:  Phytochemical,  antimicrobial,  and larvacidal  properties. Asian  Pac  J  Trop Biomed. 2016; 6(10) 858-865 .
17. Sukmawati Sukmawati, I Nengah
Kundera,  Gamar  Binti  Non  Shamdas. Efektivitas  Antimikroba  Ektrak  Daun Jarak Pagar (Jartropa  curcas L) terhadap pertumbuhan Jamur Candida albicans
dan Pemanfaatan sebagai Media Pembelajaran. Jurnal  Ilmiah  Pendidikan Biologi. 2017; 5(2) 18. Erna harfiani and Aulia Chaerani. Potensi Jatropas curcas  L sebagai antiseptic pada pertumbuhan Staphylococcus aureus, Escherichia coli and Candida sp. Growth.Bio-site. 2018 ; 4(1) : 1-40.
19. E.H.  Omoregie,  K.O.  Folashade Broad spectrum antimicrobial activity of extracts of Jatropha  curcas J Appl Pharm  Sci. 2013; 3(4):  83-87. 20. Mohannad Gaiballa Mohammed Abdelgader, Dr. Elham Abdelbasit Suleiman  and  Dr.  Sayed  Ibrahim  Ali. Study  of  Jatropha  curcas  as  Anti  fungal Agent. International  Journal  of  Current Medical  and  Pharmaceutical  Research. 2019; 5( 5A) : 4202-210