https://ejournal.unkhair.ac.id/index.php/kmj

## PENETAPAN KADAR FLAVONOID TOTAL EKSTRAK METANOL DAUN JARAK PAGAR (Jatropha curcas L.) DENGAN SPEKTROFOTOMETRI UV-VIS
Determination of Total Flavonoid Content of Methanol Extract of Jatropha curcas Leaf (Jatropha curcas Ll.) By uv-vis Spectrofotometry
Fahmi Sadik, Muhammad Zulfian A. Disi
Program Studi Farmasi, Fakultas Kedokteran, Universitas Khairun
E-mail: fahmisadik@unkhair.com

## ABSTRACT
One of the wild plants that has potential as a medicinal plant is the  Jatropha curcas L. plant because it has many properties such as sores, fungi and itching, medicine for toothache, canker sores, wounds and bleeding, treating coughs and thinning phlegm, stomach. bloating and colds, treating rheumatism and difficult  bowel  movements.  Jatropha  curcas  L.  is efficacious because  it  contains  alkaloid compounds, cardiac  glycosides,  flavonoids,  saponins,  steroids,  tannins,  terpenoids,  coumarins  and  quinones, phenols,  coumarins,  quinones  and  oxalates.  To  determine  the  absorbance  of  the  extract  and  the calibration curve and to determine the total flavonoid content of Jatropha curcas L. extract. The method used in this study was to determine the total flavonoid content of the methanol extract of Jatropha curcas L. leaves using UV-Vis spectrophotometry. The results of the Jatropha curcas L. leaf extract had a total flavonoid  content  of  154.18  mg/mL.  In  determining  the  total  flavonoid  content,  the  absorbance  value obtained is directly proportional to the concentration value, in which the h igher the concentration, the greater the absorbance value obtained. From the results of the analysis of total flavonoid levels, it was found that total flavonoid levels were 154.18 mg/mL.
Keywords : Jarak Pagar, Jatropha curcas, Total flavanoids, Spectrophotometry..

## ABSTRAK
Salah  satu  tanaman    liar  yang  mempunyai  potensi  sebagai  tanaman  obat  adalah  tanaman  jarak  pagar ( Jatropha  curcas L.)  karena  memiliki  banyak  khasiat  seperti,  koreng,  fungi,  dan  gatal,  obat  sakit  gigi, sariawan,  luka  dan  pendarahan,  mengobati  batuk  dan  mengencerkan  dahak,  perut  kembung  dan  masuk angin, mengobati rematik serta sulit buang air besar. Tanaman jarak pagar ( Jatropha curcas L.) berkhasiat karena  mengandung  senyawa  alkaloid,  glikosida    jantung,  flavonoid,  saponin,  steroid,  tanin,  terpenoid, kumarin  dan  kuinon, fenol, kumarin,  kuinon  dan  oksalat. Tujuan : Untuk mengetahui absorbansi ekstrak dan  kurva  kalibrasi  serta  menentukan  kadar  flavonoid  total  dari  ekstrak  tanaman  jarak  pagar  (Jatropha curcas L.). Metode yang digunakan dalam penelitian Proses Penetapan Kadar Flavonoid Total Dari Ekstrak Metanol Daun Jarak Pagar ( Jatropha curcas L.) Menggunakan alat  Spektofotometri UV-Vis. Sebanyak 154, 18 mg/mL kadar total flavonoid yang di dapat dari ekstrak daun jarak pagar ( Jatropha curcas L.). Pada penentuan kadar flavonoid total nilai absorbansi yang didapat berbanding lurus dengan nilai konsentrasi, yang mana apabila semakin tinggi konsentrasi akan menyebabkan nilai absorbansi yang di dapat menjadi meningkat.  Dari  hasil  analisis  total  kadar  flavonoid  di  dapatkan  kadar  total  flavonoid  sebesar  154,  18 mg/mL.
Kata kunci : Jarak Pagar, Jatropha curcas, Flavanoid Total, Spektrofotometri.
This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License .

## PENDAHULUAN
Di  wilayah  Indonesia  banyak  tanaman  liar  yang  mempunyai  potensi  yang  cukup  baik  untuk dimanfaatkan sebagai tanaman obat, salah satunya  tanaman jarak pagar (Jatropha curcas L.). Tanaman jarak pagar (Jatropha curcas L.)  ini  pempunyai batang yang berkayu dan jika dirajang akan menghasilkan getah. Daunnya mempunyai bentuk yang beragam dan penpunyai 3-5 sudut dengan tulang daun menjari, tangkai tanaman ini pempunyai panjang 4-15 cm, buahnya berwarna hijau muda dan dapat berubah warna
https://ejournal.unkhair.ac.id/index.php/kmj
dan terdapat tiga ruangan, pada setiap ruang terdapat 1-3 biji. Biji  dari buah tersebut berbentuk oval atau lonjong, Jarak  pagar  bisa  tumbuh  di  daerah  yang  beriklim ekstrem (Retnowati   dkk.,   2017).
Bagian-bagian  tanaman  jarak  pagar  memiliki  kandungan  senyawa  metabolit  sekundar  seperti alkaloid,  glikosida    jantung,  flavonoid,  saponin,  steroid,  tanin,  terpenoid,  kumarin    dan    kuinon,  fenol, kumarin,  kuinon  dan  oksalat (Rahu  et  al.,  2021). Flavonoid Menurut Yulianto dkk (2018) kandungan flavonoid memiliki aktivitas antibakteri. Flavonoid berpotensi penting mengobati luka dari dan mencegah perkembang bakteri pada saat terjadi inflamasi seta penyembuhan luka menjadi lebih cepat  (Jasmadi  et al., 2016).
Tanaman jarak pagar (Jatropha curcas L.)  memiliki banyak manfaat dan khasiat karena memiliki kandungan  senyawa  betabolit  sekunder  yang  begitu  banyak.  Tanaman  jarak  pagar  (Jatropha  curcas  L.) dapat berkhasiat untuk mengobati, koreng, fungi, dan gatal, obat sakit gigi, sariawan, luka dan pendarahan, mengobati  batuk  dan  mengencerkan  dahak,  perut  kembung  dan  masuk  angin,  mengobati  rematik  serta sulit buang air besar (Riani, 2018). Salah satu cara untuk mendapatkan senyawa metabolit sekunder yang memiliki banyak manfaat yaitu dengan cara mengekstraksikan tanaman jarak pagar (Jatropha curcas L.).
Ekstraksi  ialah  satu metode untuk  memisahkan beberapa zat yang berdasarkan atas perbedaan tingkat kelarutan dari dua cairan sukar larut yang berbeda, contaohnya yaitu air dan pelarut organik lain (Deny  Romadhon,  2020).  Terdapat  beberapa  jenis  ekstraksi  yaitu  seperti  maserasi,  Perkolasi,  Soxhlet, Refluks,  Infusa.  Soxhlet  adalah  salah  satu  metode  pengekstraksian  dengan  menggunakan  prinsip pemanasan dan perendaman sampel (Departemen Kesehatan RI, 2006).

## METODE

## Desain, tempat dan waktu
Penelitian   ini   merupakan   eksperimental   laboratorium   yang   dilaksanakan   di   Laboratorium Farmasi Universitas Khairun Ternate, pada bulan juni 2023.

## Jumlah bahan dan alat
Ada  beberapa  alat  yang  dipakai  berupa  batang  pengaduk,  blender,  cawan  porselen,  chamber,  corong, erlemeyer,  gelas  ukur,  gunting,  kaca  arloji,  kuvet,  neraca  analitik,  pinset,  pipet  tetes,  rak  tabung, seperangkat alat soxhletasi, spatula, spektrofotometri UV-Vis, sudip, tabung reaksi serta wadah kaca. Ada beberapa bahan yang dipakai berupa almuniumfoil, Alumunium Klorida (AlCl 3 ), Aquadest, ekstrak daun jarak pagar (Jatropha curcas L.), Kalium Asetat (CH 3 COOK), metanol, serbuk kuersetin. Langkah-Langkah Penelitian 1. Pengumpulan dan Pembuatan sampel Dalam penyiapan Sampel daun jarak pagar ( Jatropha curcas L.), sampel diperoleh dengan cara dipetik, sampel  dipetik  pada  waktu  pagi,  sampel  diambil  dan  ditimbang  sebanyak  1  Kg.  Sampel  jarak  pagar didapat dari Kota Ternate.

## 2.   Pembuatan Ekstrak
Metode yang dapat digunakan untuk mengekstraksi senyawa kimia dari sel tumbuhan adalah metode Soxhletasi. Pada penelitian ini simplisia daun jarak pagar ( Jatropha curcas L.) ditimbang 50 gram dan kemudian  dimasukkan  ke  dalam  tabung,  sebelum  itu  sampel  sudah  dibungkus  menggunakan  kertas saring.  Kemudian  pelarut  metanol  dimasukkan  500  mL  dalam  labu  alas  bulat  pada  perangkat  alat soxhletasi.  Setelah  itu,  alat    soxhletasi  dirangkaikan.  Kemudian  mulai  dilakukan  penyarian  dengan metode soxhletasi hingga 10 siklus. Ekstrak metanol yang diperoleh kemudian dilakukan penguapan pelarutnya hingga didapatkan ekstrak yang pekat. Kemudian ekstrak pekat yang diperoleh ditimbang kemudian dihitung rendamen yang diperoleh.
3.   Penetapan Kadar Flavanoid Total
a. Pembuatan Larutan Uji
1)  Larutan AlCl 3 (Alumunium Klorida) 10% Timbang  serbuk  AlCl 3 (Alumunium  Klorida)  1gram,  Larutkan  menggunakan  aquadest  dalam beker gelas, kemudian Encerkan menggunakan aqua destilata sampai 10 mL pada labu takar.
2)  Larutan Kalium Asetat 1 M
Timbangan  serbuk  CH 3 COOK  (Kalium  asetat)  0,9814  gram,  Larutkan  menggunakan  aquadest, Encerkan pada labu takar dengan menggunakan aqua destilata sampai 10 mL. b. Pembuatan Larutan Baku Kuersetin
1) Baku Induk Kuersetin 1000 ppm Timbang  serbuk  kuersetin  50  mg,  Larutkan  dengan  metanol  p.a,  Encerkan  dengan  metanol  p.a sampai 50 mL.
2)  Baku Kerja Kuersetin 80 ppm
Pipet baku induk 0.8 mL, Encerkan sampai 10 mL menggunkan metanol p.a, sampai dihasilkan konsentrasi 80 ppm
https://ejournal.unkhair.ac.id/index.php/kmj
c.   Penentuan Operating Time (OT)
Pipet  larutan  baku  kerja  80  ppm  1  mL,  dimasukan  3  mL  metanol  p.a,  0,2  mL  larutan  AlCl 3 (Almunium klorida), dan 0.2 mL larutan CH 3 COOK 1M (Kalium asetat), diencerkan dengan aqua destilata sampai 10 mL. Diukur absorbansi dengan selang waktu 5 menit dari menit 0-60, dengan λ maksimum teoritis 430 nm, hingga didapat absorbansi yang netral. d.   Penentuan Panjang Gelombang Maksimal
Pipet  larutan  baku  kerja  80  ppm  1  mL,  dimasukan  3  mL  metanol  p.a,  0.2  mL  larutan  AlCl 3 (Almunium klorida), serta 0.2 mL larutan CH 3 COOK 1 M (Kalium asetat), ditambahkan hingga 10 mL  aqua  destilata.  Larutan  dibiarkan  hingga  mencapai  operating  time,  setelah  itu  dilakukan pengukuran absorbansi dengan rentang λ 400–500 nm e.   Penentuan Kurva Kalibrasi
Pipet  larutan  baku  induk  1000  ppm  sebanyak  0,4  mL,  0,6  mL,  0,8  mL,  1,0  mL,  dan  1,2  mL, kemudian diencerkan dengan metanol p.a sampai 10 mL hingga mencapai konsentrasi (40, 60, 80, 100, dan 120 ppm). Dipipet 1 mL pada tiap seri konsentrasi, ditambahkan 3 mL metanol p.a dalam labu takar 10 mL, larutan AlCl 3 (Almunium klorida) 0,2 mL, dan 0,2 mL larutan CH 3 COOK 1M (Kalium  asetat),  kemudian  encerkan  menggunakan  aqua  destilata  hingga  10  mL.  Dilakukan pengukuran seri kurva kalibrasi λ maksimum, dan operating time mulai dari kadar terkecil sampai kadar terbesar.
f.   Linieritas Kurva Kalibrasi
Untuk  mencari  nilai  kurva  regresi  linier  dapat  dihitung  menggunakan  persamaan  antara  seri konsentrasi  dan  absorbansi,  Setelah  itu  dilakukan  penentuan  koefisien  korelasi  dari  hasil  kurva kalibrasi.
g.   Penentuan Total Kadar Flavonoid
Timbangan ekstrak daun jarak pagar (Jatropha curcas L.) 250 mg, kemudian encerkan menggunakan aquadest sampai 25 mL. pipet 1 mL ekstrak, kemudian masukan metanol p.a 3 mL, larutan AlCl 3 (Almunium  klorida)  0,2  mL,  dan  larutan  CH 3 COOK  1M  (Kalium  asetat)  0,2  mL,  setelah  itu dicukupkan dengan aquadest sampai 10 mL. Larutan biarkan hingga tercapainya waktu operating time dan ukuran absorbansi dengan menggunakan alat spektrofotometri visibl λ maksimal.

## HASIL
Hasil yang diperoleh setelah melakukan pengukuran nilai absorbansi dengan digunakan  spektrofotometer :
Konsentrasi (mg/mL) Absorbansi 40 2,218 60 2,362 80 2,616 100 2,766 120 3,134 Tabel 1. Penentuan Kurva Kalibrasi
Dari  hasil  pengukuran  absorbansi  diatas,  dapat  ditarik  kesimpulan  yaitu  semakin  tinggi  nilai konsentrasi  dari  sampel  maka  semakin  tinggi  juga  nilai  absorbansi  dari  sampel  yang  diperoleh  pada Penetapan Kadar Flavonoid Total Daun Jarak Pagar dengan Metode Spektrofotometri UV-Vis. Hasil yang didapatkan diplotkan antara kadar dan absorbannya, jadi diperoleh persamaan regresi linear antara lain : y = 11,18x + 1724,8 dan nilai korelasi (R2) yang diperoleh yaitu 0,9733. Nilai persamaan dari kurva kalibrasi larutan  baku  kuersetin  yang  digunakan  sebagai  larutan  pembanding  untuk  menentukan  konsentrasi  dari senyawa falvanoid total pada ekstrak sampel daun Jarak pagar (Aminah et al., 2011).
https://ejournal.unkhair.ac.id/index.php/kmj

## Gambar 1. Kurva Kalibrasi
Kemudian dilakukan Linieritas Kurva Kalibrasi, Kurva kalibrasi diperoleh y = 11,18x + 1724,8. Persamaan yang dihasilkan digunakan untuk menghitung kadar flavonoid dalam sampel daun jarak pagar ( Jatropha  curcas L.).  Nilai  r  yang  didapat  adalah  R²  =  0,9733,  nilai  koefisien  korelasi  (r)  yang  didapat tersebut tidak memenuhi syarat, karena menurut Saifuddin dkk (2015), nilai minimal nilai r yang sesuai dengan persyaratan adalah 0,997.
Kemudian  dilakukan  penentuan  kadar  flavonoid  total  pada  sampel  daun  jarak  pagar  ( Jatropha curcas L.) yang ditambahkan AlCl 3 (Almunium klorida) maka akan terjadi reaksi terbentuknya kompleks antara flavonoid dan AlCl 3 (Almunium klorida) membuat terbentuknya warna kuning pada larutan serta pergeseran panjang gelombang ke arah sinar visible (Furia et al., 2014)
Gambar 2. Reaksi Flaronoid & AlCl 3 (Salmia, 2016)
Dari hasil diatas dapat dilihat bahwa AlCl 3 bereaksi dengan gugus keto pada C 4 dan gugus OH pada C 5 pada senyawa flavonol membentuk senyawa kompleks yang stabil (Salmia, 2016). Kalium asetat ditambahkan untuk menstabilkan senyawa kompleks yang terbentuk.

## PEMBAHASAN
Secara  tradisional  tanaman  Jarak  pagar  ( Jatropha  curcas L.)  banyak  dimanfaatkan  untuk mencegah dan mengatasi beberapa penyakit. Beberapa penyakit yang dapat di atasi dengan penggunaan tanaman jarak pagar ( Jatropha curcas L.) seperti penyakit keputihan pada bayi, radang pada telinga, sakit gusi  gigi,  sariawan,  anginan,  sembelit,  kandidiasis,  alergi,  pembengkak,  luka,  pendarahan,  rheumatoid arthritis, batuk, dan sebagai peluruh dahak. Tanaman banyak terkadung senyawa fenol, flavonoid, saponin, dan senyawa alkaloid (Ema sarimole dkk, 2014).
Flavonoid merupakan senyawa turunan fenol yang ditemukan di hampir semua jenis tanaman. Tanaman  obat  herbal  yang  memiliki  kandungan  senyawa  flavonoid  sudah  diketahui  memiliki  aktivitas antioksidan, antibakteri, antivirus, antiinflamasi, antialergi, dan antikanker. Antioksidan memiliki aktivitas sebagai penangkap radikal bebas dengan menyumbangkan atom hidrogen dari gugus hidroksil flavonoid. Struktur dari flavonoid dapat dilihat pada gambar dibawah ini (Neldawati et al., 2013).
y = 11,18x + 1724,8 R² = 0,9733 0 500 1.000 1.500 2.000 2.500 3.000 3.500 0 50 100 150 A b sor b an si Konsentrasi mg/mL

## Kurva Kuersetin
Absorbansi Linear (Absorbansi)
https://ejournal.unkhair.ac.id/index.php/kmj
Dalam  percobaan  Penetapan  Kadar  Flavonoid  Total  hal  pertama  yang  dilakukan  adalah penyiapan larutan uji yang meliputi penyiapan larutan Almunium klorida 10%, larutan Kalium asetan 1M dan  larutan  blangko.  Larutan  blanko  adalah  larutan  tidak  terkandung  analit  atau  larutan  yang  tidak mengandung  sampel,  blanko  biasanya  dugunakan  untuk  kalibrasi  sebagai  larutan  pembanding  (Parhan, 2018).
Setelah  dilakukan  penyiapan  larutan  uji,  kemudian  dilakukan  Penyiapan  Larutan  Baku Kuersetin. Larutan standar adalah larutan yang konsentrasinya  sudah diketahui secara pasti dari suatu zat. Kemudian  dilakukan    Penetapan  Operating  Time.  Tujuan  dari  penetapan  operating  time  adalah  untuk mengetahui  waktu  pengukuran  yang  stabil  dari  suatu  senyawa  dapat  dilihat  dengan  mengamati absorbansinya (Yugatama dkk, 2019). Dalam penelitian yang dibuat salah suatu senyawa kompleks yang digunakan adalah kuersetin dengan AlCl₃ (Almunium klorida). Untuk membentuk senyawa kompleks yang stabil    dibutuhkan  waktu  agar  kedua  senyawa  tersebut  dapat  reaksi.  Jika  reaksi  yang  terbentuk  belum sempurna  itu  terjadi  karena  pengukuran  tersebut  dilakukan  sebelum  waktu  operating  time  (Tatraaljai, 2014). Kemudian dilakukan Pentuan Panjang Gelombang Maksimal, Dari hasil analisis panjang gelombang yang  digunakan  yaitu  λ  maksimum,  dari  hasil  pengurukran  didapatkan  λ  maksimum  yang  dihasilkan sebesar 436,336 nm. hukum Lambert-Beer terpenuhi jika hasil pengukuran dari λ maksimum berbentuk lurus kurva dengan absorbansi linier (Gandjar & Rohman, 2014). Jika hasil analisis didapatkan nilai r nya paling dekat dengan angka 1 maka kurva dikatakan linier, serta memenuhi persyaratan linieritas.
Setelah  itu  dibuat  penentuan  kurva  kalibrasi  agar  dapat  mengetahui  bagaimana  hubungan konsentrasi  larutan  dengan  absorbansi,  sehingga    diketahui  konsentrasi  sampel.  Hukum  lambert-Beer terpenuhi jika kurva baku yang dihasilkan berupa garis lurus (Grace et al., 2015).

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  dan  pembahasan  diatas  dapat  disimpulkan  bahwa  pada  penentuan  kadar flavonoid total nilai absorbansi yang didapat berbanding lurus dengan nilai konsentrasi, yang mana apabila semakin tinggi konsentrasi akan menyebabkan nilai absorbansi yang di dapat menjadi meningkat. Dari hasil analisis total kadar flavonoid di dapatkan kadar total flavonoid sebesar 154, 18 mg/mL.

## DAFTAR PUSTAKA
Deny Romadhon, 2020, Formulation of Low-Fat Cheese Analogue from Sweet Corn Extract using Papain and Lime Extract as Coagulant, Food Research.
Departemen  Kesehatan,  2006,  Monografi  Ekstrak  Tumbuhan  Obat  Indonesia,  Vol.2,  Departemen Kesehatan RI, Jakarta.
Ema Sarimole dkk, 2014, Manfaat Jarak Pagar ( Jatropha curcas ) Sebagai Obat Tradisional, Program Studi Megister Biologi, Universitas Kristen Satya Wacana, Raja Ampat.
Furia et, al., 2014, Insight into the coordination mode of quercetin with the  Al(III)  ion  from  a  combined experimental and theoretical study, Dalt Trans.
Ganjar & Rohman, 2014, Kimia Farmasi Analisis, Pustaka Pelajar, Yogyakarta.
Grace et, al., 2015, Preparation and Evaluation of Herbal Peel of Mask, American Journal of Pharm Tech Research, American.
Jasmadi et, al.,  2016, Efektivitas Salep Getah Jarak Pagar 10% ( Jatrophacurcas Linn.) dan Gentamisin 0,1%  Terhadap  Percepatan  Penyembuhan  Luka  Bakar  Derajat  II  pada  Kulit  Mencit  (Mus musculus), Jurnal Medika Veterinaria.
Parhan, 2018, Penetapan kadar Na-Siklamat Pada Minuman Serbuk Instan Dan Minuman Kemasan Kaleng Yang  Diperdagangkan  Di  Delitua  Dengan  Metode  Alkalimetri,  Jurnal  Farmasimed,  Institut Kesehatan Deli Husada Delitua, Sumatra Utara.
Rahu et, al., 2021,  Determination of antimicrobial and phytochemical compounds of Jatropha curcas plant,
Saudi Journal of Biological Sciences.
Retnowati  et,  al.,    2017,  Pertumbuhan  beberapa  Genotipe  Jarak  Pagar  ( Jatropha  curcas L.)  di  Tanah Masam, Istitut Pertanian Bogor, Bogor.
Riani, 2018, Perbandingan Efektivitas Daun Jarak & Minyak Kayu Putih Dengan Daun Jarak Pagar Tanpa Minyak Kayu Putih Terhadap Kesembuhan Perut Kembung Pada Bayi 0-2 Tahun Di Wilayah Kerja  Puskesmas  Bangkinan  Kota  Tahun  2017/2018,  Program  Studi  Sarjana  Keperawatan, Universitas Pahlawan Tuanku Tambusai.
Saifuddin et, al.,  2015,  Metode Penelitian, Pustaka Pelajar, Yogyakarta.
Salmia,  S.,  2016,  Analisis  Kadar  Flavonoid  Total  Ekstrak Kulit  Batang  Kedondong  Bangkok  ( Spondias dulcis ) dengan Metode Spektrofotometri UV-Vis, Skripsi, Universitas Alauddin Makassar.
https://ejournal.unkhair.ac.id/index.php/kmj
Tatraaljai,  2014,  Efficient    melt    stabilization    of  polyethylene  with  quercetin,  a  flavonoid  type  natural antioxidant, Polym Degrad Stab.
Yugatama et, al.,  2019, Analisis Kandungan Timbal dalam Beberapa Sediaan Kosmetik yang Beredar di Kota Surakarta, Journal of Pharmaceutical Science and Clinical Research, Surakarta. Yulianto & Sunarmi, 2018, Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun Jarak Pagar ( Jatropha curcas L.) Terhadap Staphylococcus epidermidis Dan Staphylococcus aureus Secara In Vitro, Jurnal Terpadu Ilmu Kesehatan.