# Korespondensi:  Departemen  Budidaya,  Fakultas  Perikanan  dan Ilmu  Kelautan,  Institut  Pertanian  Bogor.  Jl.  Rasamala,
Kampus  IPB,  Darmaga,  Bogor  16680,  Indonesia. Tel.  +  62  251  8622909;  8622911 E-mail:  siflounder@gmail.com;  dedidj@apps.ipb.ac.id
Tersedia  online  di:  http://ejournal-balitbang.kkp.go.id/index.php/jra

## PENGARUH  FREKUENSI PEMBERIAN  Moina sp.  SEBAGAI  PAKAN  AWAL PADA PEMELIHARAAN LARVA IKAN GABUS Channa striata DENGAN SISTEM AIR HIJAU
Adang  Saputra *,**) ,  Dedi  Jusadi *)# ,  Muhammad  Agus  Suprayudi *) ,  Eddy  Supriyono *) ,  dan Mas  Tri  Djoko  Sunarno **)
*) Departemen Budidaya, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Institut Pertanian Bogor Jl. Rasamala, Kampus IPB, Darmaga,  Bogor 16680
**) Balai Riset Perikanan Budidaya Air Tawar dan Penyuluhan Perikanan Jl. Sempur  No. 1, Bogor 16445
(Naskah diterima: 11 April 2018; Revisi final: 8 Oktober 2018; Disetujui publikasi: 8 Oktober 2018)

## ABSTRAK
Ikan gabus Channa striata merupakan salah satu komoditas ikan air tawar yang memiliki nilai ekonomis tinggi. Kendala dalam pengembangan budidaya ikan gabus adalah tingginya tingkat kematian pada stadia pemeliharaan  larva.  Tingginya  kematian  pada  stadia  larva  karena  kecukupan  jumlah  pakan  dan  nutrisi pakan  awal  yang  tidak  optimum.  Tujuan  percobaan  adalah  menentukan  frekuensi  pemberian Moina  sp. yang  tepat  sebagai  pakan  awal  pada  pemeliharaan  larva  ikan  gabus  pada  sistem  air  hijau  (dengan menambahkan Chlorella sp.). Penelitian dirancang dengan rancangan acak lengkap. Perlakuan yang diberikan adalah frekuensi pemberian Moina sp. per hari sebagai pakan awal: A. enam kali tanpa pemberian Chlorella sp. (kontrol), B. enam kali + Chlorella sp., C. empat kali + Chlorella sp., dan D. dua kali + Chlorella sp. Hasil penelitian menunjukkan  pemberian pakan  awal dari  jenis Moina  sp. pada  pemeliharan  larva ikan  gabus pada sistem air hijau dengan frekuensi pemberian dua, empat, dan enam kali dalam sehari memberikan performa  sintasan  (93,42%-94,29%)  dan  pertumbuhan  tidak  berbeda  secara  nyata  (P>0,05).  Frekuensi pemberian  Moina  sp.  sebanyak  dua  kali  sehari  merupakan  perlakuan  yang  efektif  untuk  sintasan  dan pertumbuhan larva ikan gabus pada pemeliharaan dengan sistem air hijau.
KATA KUNCI: larva ikan gabus; frekuensi pemberian pakan; Moina sp.; sintasan; pertumbuhan; air  hijau
ABSTRACT: Effects of different feeding frequencies using Moina sp. as an initial food on growth and survival of snakehead Channa striata larvae reared in green water system. By: Adang Saputra, Dedi Jusadi, Muhammad Agus Suprayudi, Eddy Supriyono, and Mas Tri Djoko Sunarno
Snakehead fish Channa striata is one of the highly-valued freshwater fish commodity. However, its aquaculture development is hampered by a high mortality during larval stage rearing. This high mortality is suspected to be caused by insufficient quantity and quality of food. The purpose of this study was to determine the appropriate feeding frequency using Moina sp. as an initial food for snakehead fish larvae reared in a green water system (Chlorella sp.). A completely randomized design was arranged for this experiment where the treatments consisted of different feeding frequencies of Moina sp. given to the larvae as follows: A) six times a day without the addition of Chlorella sp. (control); B) six times a day with the addition of Chlorella sp.; C) four times a day with the addition of Chlorella sp.; and D) two times a day with the addition of Chlorella sp. The results of the experiment showed that the survival rate (93.42%- 94.29%) and growth of the larvae reared in the green water system with were not significantly different (P>0.05). However, this study suggested that feeding frequency of two times per day was sufficient to support an optimum growth and survival of snakehead larvae reared in a green water system.
KEYWORDS: larvae snakehead fish; feeding frequency; Moina sp.; survival; growth; green water

## PENDAHULUAN
Ikan gabus Channa striata termasuk ikan air tawar yang mempunyai nilai ekonomis tinggi sebagai ikan konsumsi dalam bentuk segar maupun olahan (Kusmini et al., 2016), serta kandungan albuminnya yang mampu mempercepat  proses  penyembuhan  luka  setelah proses operasi (Wahab et al., 2015). Tingginya tingkat kematian selama stadia larva menjadi kendala dalam pengembangan budidaya ikan gabus (Amornsakun et al., 2011). Keberhasilan pemeliharaan larva ikan akan menentukan keberhasilan kegiatan pendederan dan pembesaran ikan gabus. Salah satu faktor yang diduga penyebab tingginya kematian larva ikan gabus adalah akibat penyediaan dan nutrien pakan awal yang tidak mencukupi. Hasil penelitian Amornsakun et al. (2011) menunjukkan bahwa pakan awal terbaik untuk larva ikan gabus adalah Moina sp.
Penyediaan  pakan  awal  yang  tidak  sesuai menyebabkan  kematian  pada  larva  ikan  baik  pada lingkungan alami maupun pada wadah budidaya (Yúfera &  Darias,  2007).  Kondisi  ini  menghambat perkembangan  ontogenik,  sehingga  menurunkan aktivitas  berenang  dan  nafsu  makan  larva  ikan (Kestemont et al., 2007). Kekurangan nutrien pakan dapat  menyebabkan  kelainan  morfologi  dan perlambatan pertumbuhan (Nhu et al., 2010; Bonaldo et  al.,  2011),  serta  memengaruhi  proses perkembangan  larva  ikan  white  sturgeon  Acipenser transmontanus (Lee et al., 2014).
Strategi  pemberian  pakan  awal  yang  tepat merupakan  kunci  keberhasilan  dalam  pemeliharaan larva ikan. Menurut Blaxter & Ehrlich (1974), begitu cadangan pakan endogen habis maka larva melakukan transisi ke pakan eksogen untuk menjamin sintasan dan pertumbuhannya. Pakan eksogen yang diberikan pada umumnya pakan alami misalnya naupli Artemia sp. pada larva Octopus vulgaris (Iglesias et al., 2006), naupli kopepoda (Lindley et al., 2011), dan alga hijau (Lazo et al., 2000). Pada larva ikan gabus pakan awal yang diberikan adalah Moina sp. (Amornsakun et al., 2011). Permasalahan yang dihadapi dalam pemanfaatan Moina sp. adalah cepatnya degradasi nutrien pada tubuh Moina sp. jika pada wadah pemeliharaan ketersediaan makanan tidak mencukupi (Das et al., 2007). Degradasi nutrien pada Moina sp. berdampak terhadap rendahnya nutrien  yang  diterima  larva  ikan  (Adeyemo  et  al., 1994).
Salah satu alternatif untuk menyediakan Moina sp. berkualitas baik bagi larva ikan gabus adalah melalui aplikasi  “sistem air  hijau”  (green  water  system)  yaitu dengan  penambahan  mikroalga  pada  media pemeliharaan  larva  ikan.  Alternatif  lainnya  adalah melalui pemberian Moina sp. dengan frekuensi yang
tepat pada pemeliharaan larva ikan gabus. Menurut Neori  (2011),  mikroalga  hijau  seperti  Chlorella  sp. memiliki peran penting dalam menyediakan nutrien bagi zooplankton dalam sistem budidaya. Penggunaan mikroalga  hijau  sebagai  sistem  air  hijau  mampu menyediakan  protein  dan  lemak  yang  cukup  tinggi sebagai sumber nutrien untuk pakan alami (Islam et al.,  2017).  Hasil  penelitian  Bouchnak  et  al.  (2014) menunjukkan  Moina  macrocopa  dan  Moina  micrura mampu memanfaatkan Chlorella  sp. sebagai  sumber nutrien dan mampu meningkatkan kandungan nutrien dari  kedua  jenis  Moina  tersebut.  Penelitian  terkait frekuensi  pemberian  pakan  awal  sudah  dilakukan, antara lain pada larva ikan spotted seatrout Cynoscion nebulosus  (Manley  et  al.,  2015),  larva  ikan  black  sea bass Centropristis striata (Russo et al., 2017), dan larva amazonian  fish  Pyrrhulina  brevis  Steindachner,  1876 (Veras  et  al.,  2014).  Frekuensi  pemberian  naupli Artemia  enam  kali  dalam  satu  hari  mampu meningkatkan  pertumbuhan  yang  lebih  cepat  pada larva uropean mudminnow Umbra krameri (Demeny et al.,  2014).  Frekuensi  pemberian  pakan  empat  kali sehari  memberikan  pengaruh  terbaik  untuk mendukung pertumbuhan dan sintasan larva ikan black sea bass Centropristis striata (Russo et al., 2017), enam kali sehari mampu meningkatkan pertumbuhan larva ikan spotted seatrout Cynoscion nebulosus (Manley et al.,  2015).  Namun  frekuensi  pemberian  pakan  awal yang tepat untuk pemeliharaan larva ikan gabus belum tersedia  informasinya.
Indikator pertumbuhan larva ikan dalam keadaan optimum di antaranya pH dan konsentrasi Ca 2+ cairan tubuh.  Nilai  pH  dan  konsentrasi  Ca 2+ cairan  tubuh merefleksikan  proses  metabolisme  dan  proses fisiologis  (Kwong  et  al.,  2014),  serta  pertumbuhan pada  stadia  larva  (Tataje  et  al.,  2015).  Perubahan gradien  pH  cairan  tubuh  memengaruhi  perubahan sistem hormonal (Furukawa et al., 2011), stres (Mai et al., 2010), dan transpor aktif ion Na + , H + , dan Cl - (Evans et al., 2005). Apabila pH dan Ca 2+ cairan tubuh dalam keadaan tidak optimum memberikan pengaruh terhadap  aktivitas  enzim  (Mai  et  al.,  2010), pertumbuhan  (Kakizawa  et  al.,  1996)  dan  sintasan (Wilson et al., 1999).
Perkembangan aktivitas enzim pencernaan dapat merefleksikan efektivitas saluran  pencernaan dalam memanfaatkan  pakan,  sehingga  dapat  digunakan sebagai indikator status nutrisi pada perkembangan larva (Chen et al., 2007). Menurut Wang et al. (2006), jenis enzim utama untuk mencerna makanan adalah protease, amilase, dan lipase. Menurut Micale et al. (2006), pada kondisi saluran pencernaan larva belum berkembang, sumber makanan larva bertumpu pada pakan alami seperti pada larva ikan chinese longsnout
catfish Leiocassis longirostris (Günther) selama sepuluh hari (Liu et al., 2012), larva ikan butter catfish Ompok bimaculatus (Bloch) selama 7-17 hari (Pradhan et al., 2014),  larva  ikan  white  sea  bream  Diplodus  sargus selama  2-13  hari  (Guerreiro  et  al.,  2010),  dan  larva ikan southern flounder (Paralichthys lethostigma) selama 11-23 hari (Cynthia et al., 2009).
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  menentukan frekuensi  pemberian  Moina  sp.  sebagai  pakan  awal yang tepat pada pemeliharaan larva ikan gabus dengan sistem air hijau. Evaluasi dilakukan pada pertumbuhan dan sintasan larva ikan gabus yang dipelihara selama 15 hari.

## BAHAN DAN METODE

## Waktu dan  Tempat
Percobaan  dilaksanakan  di  Laboratorium  Basah Nutrisi  dan  Teknologi  Pakan,  Balai  Riset  Perikanan Budidaya Air Tawar dan Penyuluhan Perikanan, Bogor. Percobaan dilaksanakan pada tahun 2007, selama 15 hari masa pemeliharaan.

## Wadah  Pemeliharaan
Sebanyak 12 buah akuarium kaca ukuran 40 cm x 40 cm x 40 cm, dengan ketinggian air 10 cm (volume air 16 L) digunakan sebagai wadah percobaan. Air yang digunakan berasal dari sumur yang telah diendapkan selama dua hari. Setiap akuarium dilengkapi pemanas elektrik kapasitas 100 watt dan di-setting pada suhu 30°C  untuk  mendapatkan  suhu  air  sekitar  29°C. Masing-masing  wadah  dilengkapi  aerasi  yang bersumber  dari  aerator.  Sisa  pakan  dan  feses dibersihkan  menggunakan  teknik  sifon.  Selama percobaan  tidak  dilakukan  pergantian  air  hanya menambah sesuai jumlah air yang berkurang karena penyifonan.

## Ikan Uji
Larva  ikan  gabus  yang  digunakan  berasal  dari penijahan  satu  populasi  induk  generasi  ke-2  (G-2) sebanyak  tiga  pasang  (tiga  jantan  dan  tiga  betina) dengan ukuran rata-rata 300 g/induk. Setelah larva ikan gabus berumur dua hari dari menetas dengan bobot 0,42 ± 0,08g dan panjang 5,42 ± 0,24 mm diambil secara acak, selanjutnya dimasukkan ke dalam wadah percobaan. Padat tebar dalam wadah percobaan adalah 50 ekor/L (800 ekor/wadah) (Amornsakun et al., 2011).

## Rancangan  Percobaan
Percobaan dirancang menggunakan rancangan acak lengkap dengan empat perlakuan dan tiga kali ulangan. Perlakuan yang diberikan adalah frekuensi pemberian Moina sp. sebagai pakan awal, yaitu: A. enam kali dalam
sehari  tanpa  penambahan  Chlorella  sp.  (kontrol);  B. enam kali dalam sehari + Chlorella sp.; C. empat kali dalam sehari  + Chlorella sp.;  dan D. dua  kali dalam sehari + Chlorella sp.

## Pemberian  Moina  sp.  dan  Chlorella  sp.
Moina  sp.  yang  digunakan  berasal  dari  kolam budidaya  ikan  lele  milik  masyarakat  di  Parung, Kabupaten Bogor. Sebelum digunakan sebagai pakan awal, Moina sp. dipelihara selama dua hari pada wadah berukuran  4.000  L  yang  sudah  diberi  Chlorella  sp. Jumlah dan waktu pemberian Moina sp. disajikan pada Tabel 1. Chlorella sp. yang digunakan merupakan hasil kultur massal secara terkontrol dengan kepadatan 4,3 x 10 9 sel/mL sebagai media sistem air hijau. Pemberian Chlorella sp. dilakukan dua kali dalam sehari yaitu pukul 07.00 WIB dan pukul 13.00 WIB sebanyak 250 mL setiap pemberian/wadah.

## Parameter  Uji
Data kematian larva ikan gabus dicatat setiap hari untuk menghitung sintasan pada akhir pemeliharaan (Huisman,  1987).  Pengukuran  bobot  individu  dan panjang total pada akhir percobaan dilakukan terhadap 30 ekor benih ikan gabus dari masing-masing wadah percobaan.  Bobot  individu  diukur  menggunakan timbangan  digital  dengan  ketelitian  dua  desimal, sedangkan panjang total diukur menggunakan millime- ter block. Sebanyak 10 ekor larva ikan gabus dari masing- masing  perlakuan  dikumpulkan  menjadi  satu (komposit/pool)  kemudian  digerus  menggunakan mortar  dan  diambil  cairan  tubuhnya  melalui  proses sentrifugasi 7.000 rpm selama 10 menit. Selanjutnya cairan tubuh tersebut digunakan untuk pengukuran pH dan kalsium cairan tubuh dan diukur menggunakan pH-meter  (Thermo  Scientific  pH  bench)  dan  Ca-meter dengan ketelitian dua desimal.
Proses  pengukuran  aktivitas  enzim  dilakukan dengan  mengambil  larva  ikan  gabus  secara  acak sebanyak tiga ekor (bobot larva sekitar 2 g/ekor) dari masing-masing  wadah  percobaan  pada  akhir pemeliharaan. Selanjutnya larva ikan gabus ditimbang dan dihomogenisasi (1 g/10 mL) dalam buffer dingin yang mengandung Tris-HCl 41-50 mM; CaCl 2 20 mM dengan pH 7,5; dan disentrifugasi dengan kecepatan 12.000  rpm  selama  15  menit  pada  suhu  4°C. Supernatan diambil kemudian disimpan pada freezer - 80°C  untuk  dianalisis  total  protein  dan  aktivitas enzimnya. Konsentrasi protein terlarut dalam sampel ditentukan dengan menggunakan albumin bovine se- rum sebagai standar (Bradford, 1976).
Aktivitas  amilase  dihitung  berdasarkan Worthington  (1991)  menggunakan  pati  sebagai substrat. Larutan pati 1% dalam 0,02 M Na 2 HPO 4 dan

## Ta b el 1 . W ak tu d an ju m la h p em b er ia n Moi na s p . p ad a p em el ih ar aa n la rv a ik an g ab u s se la m a p en el it ia n
Ta bl e 1. Fe ed in g ti m e an d am ou nt of Mo in a sp . fe d to sn ak eh ea d la rv ae r ea ri ng d ur in g th e ex pe ri m en t K e te ra n g an : Fr ek u e n si p e m b er ia n M oi na s p . d al am s eh ari : A . e n am k al i ta n p a p en am b ah an C hl or el la s p . ( ko n tro l) ; B . e n am k al i + C hl or el la s p .; C . em p at k al i + C hl or el la s p .; d an D . d u a ka li + C hl or el la s p .
R em ar ks : Fe ed in g fr eq ue nc y of M oi na s p. p er d ay : A ) si x ti m es a d ay wi th ou t C h lo re ll a sp . (c on tr ol ); B) s ix t im es a d ay w it h C h lo re ll a sp .; C ) fo ur t im es a d ay wi th C h lo re ll a sp .; a nd D ) two
ti m es a d ay wi th C h lo re ll a sp .
0,006 M buffer NaCl (pH 6,9) diinkubasi menggunakan ekstrak enzim selama empat menit pada suhu 95°C. Sebanyak 0,5 mL larutan asam dinitrosalisilat (DNS) 1% ditambahkan dan dipanaskan selama lima menit. Setelah  larutan  asam  dinitrosalsilat  mendidih, sebanyak 5 mL akuades ditambahkan pada campuran dan  absorban  kemudian  diukur  menggunakan spektrofotometer pada panjang gelombang 540 nM. Blanko disiapkan sama seperti untuk contoh, namun tanpa penambahan ekstrak enzim. Maltose sebanyak 0,3-5  mol/mL digunakan sebagai pembentuk kurva standar.  Aktivitas  spesifik  -amilase  didefinisikan sebagai 1  g maltose yang diproduksi per menit.
Aktivitas  lipase  dihitung  menggunakan  emulsi minyak zaitun sebagai substrat dan Tris-HCl sebagai buffer  sesuai  dengan  metode  Borlongan  (1990).  Uji aktivitas enzim dilakukan dengan menambahkan 1 mL ekstrak  enzim kasar  ke dalam  1  mL substrat  dalam 1,5 mL buffer yang mengandung Tris-HCl 0,1 M pada pH 8,0. Campuran tersebut diinkubasi selama enam jam  pada  suhu  37°C.  Selanjutnya  reaksi  enzim dihentikan dengan penambahan 3 mL etilalkohol 95%. Proses  selanjutnya  adalah  dititrasi  dengan  0,01  N NaOH.  Thymolphthalein  0,9%  (w/v)  dalam  etanol digunakan  sebagai  indikator.  Pembuatan  blanko dilakukan  dengan  cara  yang  sama  kecuali  sampel ekstrak enzim kasar. Satu unit aktivitas enzim lipase (U) didefinisikan sebagai volume (mL) 0,01 N NaOH yang diperlukan untuk menetralkan asam lemak yang dilepas  dari  substrat  selama  enam  jam  inkubasi. Aktivitas protease dikuantifikasi dengan menggunakan kasein  sebagai  substrat  (Asgari  et  al.,  2013).  Lebih lanjut, 200  L ekstrak enzim kasar dicampur dengan 200  L substrat (1% larutan kasein dalam 60 mM HCl) dan diinkubasi selama 10 menit pada suhu 37°C. Reaksi dihentikan dengan menggunakan 1 mL larutan 5% asam trikhloroasetat, diamkan selama 30 menit, selanjutnya tabung disentrifuse pada kecepatan 5.000 rpm selama 20 menit pada suhu 4°C. Sebanyak 0,5  L supernatan diinkubasi menggunakan 0,5 M NaOH (1 mL) dan regen Folin–Ciocalteu (0,3 mL) selama 10 menit pada suhu 25°C,  selanjutnya  absorban  dari  supernatan  diukur menggunakan  spektrofotometer  pada  panjang gelombang  720  nm.  Kurva  standar  yang  digunakan adalah kurva standar tirosin 0-50  g/mL. Satu unit pro- tease didefinisikan sebagai sejumlah  g Tirosin yang dirilis per menit per mL pada suhu 37°C.

## Analisis  Data
Data  hasil  perhitungan  dianalisis  menggunakan analisis  variansi  (ANAVA)  dengan  aplikasi  program MINITAB 16 dan software Microsoft Excel 2013 untuk menampilkan grafik. Apabila hasilnya berbeda nyata, maka  dilanjutkan  dengan  uji  Duncan.  Data  yang dianalisis  secara  statistik  kuantitatif  meliputi:
sintasan, bobot akhir, panjang total, pH cairan tubuh, kalsium cairan tubuh, dan aktivitas enzim.

## HASIL DAN BAHASAN
Hasil  perhitungan  terhadap  sintasan  larva  ikan gabus  yang  dipelihara  pada  sistem  air  hijau menunjukkan  frekuensi  pemberian  pakan  tidak memberikan  pengaruh  secara  nyata  (P>0,05). Perhitungan sintasan dilakukan secara visual melalui penghitungan larva ikan gabus yang hidup pada akhir pemeliharaan.  Sintasan  larva  ikan  gabus  sesuai perlakuan adalah: A. 91,96 ± 0,52%; B. 94,29 ± 0,51%; C. 93,92 ± 0,26%; dan D. 93,42 ± 0,38% (Gambar 1).
Manajemen pemberian pakan termasuk didalamnya aplikasi frekuensi pemberian pakan memiliki peranan penting dalam menentukan keberhasilan pemeliharaan larva  ikan  (Villarroel  et  al.,  2011).  Hasil  penelitian menunjukkan  frekuensi  pemberian  pakan  berbeda tidak memberikan pengaruh nyata terhadap sintasan larva ikan gabus yang dipelihara pada sistem air hijau (P>0,05); namun berbeda sangat nyata dengan kontrol (P<0,05). Kondisi ini menunjukkan pemeliharaan larva ikan gabus yang diberi air hijau cukup diberi pakan awal sebanyak dua kali dalam sehari. Hasil ini sesuai dengan hasil penelitian Nhu et al. (2010) dan Goddard (1996)  yang  menyatakan  bahwa  kecukupan  nutrien dalam  pakan  awal  menjadi  penentu  terhadap peningkatan sintasan dan pertumbuhan larva ikan yang dipelihara.
Penambahan  Chlorella  sp.  dalam  wadah pemeliharaan larva ikan gabus sebagai asupan nutrien bagi  Moina  sp.  berdampak  terhadap  peningkatan kualitas Moina sp. Peningkatan kualitas nutrien Moina sp.  melalui  penambahan  Chlorella  sp.  mampu mempertahankan performa Moina sp. dalam kondisi prima.  Kondisi  ini  akan  meningkatkan  performa sintasan dan pertumbuhan larva ikan gabus. Hal ini sejalan dengan hasil penelitian Kibria et al. (2001) di mana peningkatan kualitas Moina australiensis mampu meningkatkan sintasan larva ikan silver perch Bidyanus bydianus. Lebih lanjut Martin et al. (2006) menyatakan bahwa pemberian Moina micrura dengan penambahan alga mampu meningkatkan sintasan postlarva udang putih Litopenaeus schmitti.
Pola pertambahan bobot individu larva ikan gabus yang dipelihara pada sistem air hijau terus meningkat dari  awal  sampai  hari  ke-15  (Gambar  2A).  Bobot individu larva ikan gabus yang dipelihara pada sistem air hijau dengan frekuensi pemberian pakan dua kali dalam sehari relatif lebih tinggi dibandingkan perlakuan lainnya. Bobot akhir larva ikan gabus paling rendah diperoleh pada pemeliharaan tanpa pemberian air hijau (kontrol).
Frekuensi pemberian Moina sp. sebanyak enam kali sehari  tanpa  penambahan  Chlorella  sp.  memberikan pertambahan bobot relatif paling rendah dibandingkan perlakuan lainnya. Kondisi ini menunjukkan Moina sp. kehabisan nutrien karena dipelihara pada kondisi tidak terdapat  bahan  organik,  bakteri  atau  alga  sebagai sumber makanannya. Sehingga dari sisi nutrisi, Moina sp. pada kondisi tersebut memiliki kandungan nutrisi yang  rendah.  Status  nutrisi  Moina  sp.  berdampak terhadap status nutrisi larva ikan gabus yang berperan sebagai  predatornya.  Kondisi  ini  berdampak  secara langsung  terhadap  pertambahan  bobot  larva  ikan gabus.  Pertambahan  bobot  larva  ikan  gabus  untuk perlakuan selain kontrol mengalami kenaikan secara signifikan diduga karena Moina sp. pada perlakuan ini telah  memanfaatkan  Chlorella  sp.  sebagai  sumber nutrien.  Hasil  ini  sesuai  pendapat  Lee  et  al.  (2014) dan  Adeyemo  et  al.  (1994)  yang  menyatakan pertumbuhan  larva  ikan  sangat  dipengaruhi  oleh kualitas pakan awal yang baik.
Derajat  keasaman  (pH)  cairan  tubuh  larva  ikan gabus tidak berbeda nyata antar perlakuan (P>0,05) seperti  tertera  pada  Gambar  3A.  Kondisi  ini menunjukkan frekuensi pemberian pakan dua, empat,
dan enam kali dalam sehari tidak berpengaruh secara nyata terhadap pH cairan tubuh larva ikan gabus selama diberi air hijau. Hasil perhitungan kalsium cairan tubuh larva ikan gabus tidak berbeda secara nyata (P>0,05) seperti  terlihat  pada  Gambar  3B.  Kondisi  ini menunjukkan  frekuensi  pemberian  pakan  tidak berpengaruh  secara  nyata  terhadap  kalsium  cairan tubuh larva ikan gabus selama diberi air hijau.
Frekuensi pemberian Moina sp. tidak memberikan pengaruh nyata terhadap pH dan kalsium cairan tubuh larva ikan gabus di akhir masa pemeliharaan (P>0,05). Nilai pH cairan tubuh larva ikan gabus berkisar antara 4,45-9,67  sedangkan  kalsium  cairan  tubuh  berkisar antara  150-9.083  mg/L.  Kondisi  ini  merefleksikan proses metabolisme dan proses fisiologis larva ikan gabus berjalan dengan optimum. Terlihat dari performa sintasan  dan  pertumbuhan  larva  ikan  gabus  dalam keadaan optimum. Menurut Barton et al. (1987) dan Li et  al.  (2014),  apabila ikan  mengalami  stres  dapat menyebabkan kematian pada larva ikan yang dipelihara.
Pemberian pakan dengan frekuensi yang berbeda memberikan pengaruh nyata terhadap aktivitas lipase (P<0,05). Performa larva ikan gabus yang dipelihara
Gambar 1. Sintasan larva ikan gabus C. striata yang dipelihara selama 15 hari. Figure 1. Survival of snakehead fish C. striata larvae after 15 days rearing period.
91,96  0,52 a 94,29  0,51 b 93,92  0,26 b 93,42  0,38 b 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 A B C D Si n ta sa n ( Su rv iv al ) (% ) Perlakuan (Treatments)
Keterangan: Frekuensi pemberian Moina sp. dalam sehari selama penelitian: A. enam kali tanpa penambahan Chlorella sp. (kontrol); B. enam kali + Chlorella sp.; C. empat kali +
Chlorella sp. dan D. dua kali + Chlorella sp. Angka yang diikuti huruf superskrip yang sama menunjukkan tidak adanya perbedaan yang nyata (P>0,05) Remarks: Daily  feeding  frequency of  Moina  sp. to  snakehead fish  larvae  during the  experiment A) six times a day without Chlorella sp. (control); B) six times a day with Chlorella sp.; C)  four  times  a  day  with  Chlorella  sp.;  and  D)  two  times  a  day  with  Chlorella  sp. Numbers  followed  by  the  same  superscript  letter  indicates  no  significant  difference
(P>0.05)
Gambar 2. Pola pertambahan larva ikan gabus selama 15 hari masa pemeliharaan; (A) panjang total, (B) bobot individu.
Figure 2. Growth pattern of snakehead fish larvae during 15 days rearing period; (A) absolute length, (B) individual weight. 0.0 2.0 4.0 6.0 8.0 10.0 12.0 14.0 Panjang awal Initial length 5 10 15 Pa n ja n g t o ta l
A bs ol ut e le ng th (m m ) Waktu pemeliharaan (hari) Rearing period (days) A B C D 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 Bobot awal Initial weight 5 10 15 B o b o t in d ivi d u
In di vi du al w ei gh t (g ) Waktu pemeliharaan (hari) Rearing period (days) A B C D
Keterangan; Frekuensi pemberian Moina sp. dalam sehari selama penelitian: A. enam kali tanpa penambahan Chlorella sp. (kontrol); B. enam kali + Chlorella sp.; C. empat kali + Chlorella sp., dan D. dua kali + Chlorella sp.
Remarks: Daily  feeding frequency of Moina sp. to  snakehead fish  larvae  during  the experiment: A) six  times  a  day without Chlorella sp. (control);  B)  six times  a day with Chlorella sp.; C)  four times a day  with Chlorella sp.; and  D) two times  a  day  with  Chlorella  sp.)
Keterangan: Frekuensi pemberian Moina sp. dalam sehari selama penelitian: A. enam kali tanpa penambahan Chlorella sp. (kontrol); B. enam kali + Chlorella sp.; C. empat kali + Chlorella sp., dan D. dua kali + Chlorella sp. Angka yang diikuti huruf superskrip yang sama menunjukkan tidak adanya perbedaan yang nyata (P>0,05). Remarks: Daily  feeding  frequency  of  Moina  sp.  to  snakehead  fish larvae  during  the  experiment:  A)  six  times  a  day without Chlorella sp. (control); B) six times a day with Chlorella sp.; C) four times a day with Chlorella sp.; and D)  two times  a day  with Chlorella  sp. Numbers  followed  by  the  same superscript  letter  indicates  no significant  difference  (P>0.05)
7.18  0.96 6.82  1.28 7.10  1.26 6.52  1.21 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 A B C D p H c ai ra n t u b u h B od y pl as m a pH Perlakuan (Treatments) 436.67  58.38 a 433.33  57.74 a 437.50  62.50 a 441.67  62.92 a 0 100 200 300 400 500 600 A B C D K al si u m c ai ra n t u u h ( m g /L ) B od y pl as m a ca lc iu m ( m g -1 ) Perlakuan (Treatments)
Gambar 3. (A) pH cairan tubuh larva ikan gabus C. striata dan (B) kalsium cairan tubuh larva ikan gabus C. striata yang dipelihara selama 15 hari.
Figure 3. (A) body plasma pH of snakehead fish C. striata larvae and (B) body plasma calcium of snakehead fish C. striata larvae after 15 days rearing period.
Panjang awal Initial length Bobot awal
Initial weight
Keterangan: Frekuensi pemberian Moina sp. dalam sehari selama penelitian: A. enam kali tanpa penambahan Chlorella sp. (kontrol); B. enam kali + Chlorella sp.; C. empat kali + Chlorella sp. dan D. 2 kali +
Chlorella sp. Angka yang diikuti huruf superskrip yang sama menunjukkan tidak adanya perbedaan yang nyata (P>0,05)
Remarks: Daily  feeding frequency  of  Moina  sp.  to  snakehead  fish  larvae  during  the  experiment:  A)  six  times  a  day without Chlorella sp. (control);  B) six times a day with Chlorella sp.;  C) four times a day  with Chlorella sp.;  and  D)  two times  a day  with Chlorella  sp. Numbers  followed by  the  same  superscript  letter  indicates no  significant  difference  (P>0.05)
Gambar 4. Aktivitas lipase, protease, dan amilase (mU/mg protein) larva ikan gabus C. striata yang dipelihara selama 15 hari.
Figure 4. Lipase, protease, and amilase (mU/mg protein) activity in snakehead C. striata larvae 15 days rearing period.
0,.44  0.060 a
0.60  0.080 b
0.55  0.04 ab 0.60  0.07 b 0.00 0.10 0.20 0.30 0.40 0.50 0.60 0.70 0.80 A B C D A kt ivi ta s lip as e (  U /m g p ro te in ) Li pa se a ct iv it y (  U m g p ro te in -1 ) Perlakuan (Treatments) 0.08  0.005 a 0.09  0.007 a 0.09  0.011 a
0.09  0.005 a 0.00 0.01 0.02 0.03 0.04 0.05 0.06 0.07 0.08 0.09 A B C D A kt ivi ta s p ro te as e (  U /m g p ro te in ) Pr ot ea se a ct iv it y (  U m g p ro te in -1 ) Perlakuan (Treatments) 0.006 ± 0.001 a
0.006 ± 0.002 a 0.007 ± 0.001 a 0.007 ± 0.001 a 0.000 0.001 0.002 0.003 0.004 0.005 0.006 0.007 0.008 0.009 A B C D A kt ivi ta s am il as e (  U /m g p ro te in ) A m ila se a ct iv it y (  U /m g pr ot ei n -1 )
Perlakuan (Treatments)
tanpa  air  hijau  dengan  frekuensi  pemberian  pakan enam kali memiliki aktivitas lipase 0,44 ± 0,06  mU/ mg protein; sedangkan aktivitas lipase larva ikan gabus yang  dipelihara  pada  air  hijau  dengan  frekuensi pemberian  pakan enam,  empat, dan  dua kali  sehari berturut-turut: 0,60 ± 0,08; 0,55 ± 0,04; dan 0,60 ± 0,06  mU/mg  protein  (Gambar  4).  Hasil  ini menggambarkan  aktivitas lipase  dipengaruhi  secara nyata  oleh  pemberian  Chlorella  sp.  namun  tidak dipengaruhi oleh frekuensi pemberian Moina sp.
Aktivitas protease larva ikan gabus yang dipelihara pada  sistem  air  hijau  dengan  berbagai  frekuensi pemberian  pakan  tidak  berbeda  nyata  (P>0,05) (Gambar 4). Larva ikan gabus yang dipelihara tanpa air hijau  dengan  frekuensi  pemberian  pakan  enam  kali sehari  aktivitas  proteasenya  relatif  paling  rendah dibandingkan  yang  diberi  air  hijau.  Kondisi  ini menggambarkan aktivitas enzim protease larva ikan gabus yang dipelihara pada air hijau tidak dipengaruhi oleh frekuensi pemberian pakan dua, empat, dan enam kali sehari.
Hasil perhitungan aktivitas amilase larva ikan gabus yang tidak diberi air hijau (0,006 ± 0,001 mU/mg pro- tein) lebih rendah dibandingkan dengan yang diberi air  hijau.  Aktivitas  amilase  larva  ikan  gabus  yang dipelihara pada  air hijau  dengan berbagai  frekuensi pemberian  pakan  tidak  berbeda  nyata  (P>0,05) (Gambar 4). Frekuensi pemberian Moina sp. berbeda tidak memberikan pengaruh nyata terhadap aktivitas enzim lipase, protease, dan amilase larva ikan gabus (P>0,05) namun pemberian Chlorella sp. memberikan pengaruh  nyata  terhadap  aktivitas  lipase  larva  ikan gabus  (P<0,05).  Aktivitas  protease  berkisar  antara 0,084-0,086  mU/mg  protein  sedangkan  amilase berkisar antara 0,006-0,007 mU/mg protein. Berbeda dengan  aktivitas  protease  dan  amilase,  aktivitas  li- pase dipengaruhi oleh frekuensi pemberian Moina sp. Berdasarkan kondisi tersebut, seluruh protein, lemak, dan karbohidrat yang terdapat dalam Moina sp. dapat dicerna dengan baik dan digunakan untuk memenuhi kebutuhan energi dan pembentukan jaringan bagi larva ikan  gabus.  Kondisi  ini  sesuai  dengan  penelitian Ribeiro et al. (1999) yang menyatakan bahwa aktivitas lipase pada ikan Solea senegalensis 2-8 kali lebih tinggi dibandingkan  dengan  aktivitas  amilase.  Tingginya aktivitas  lipase pada  awal  perkembangan larva  ikan menunjukkan  proses  pemanfaatan  butir  lemak  (oil globe)  yang  terdapat  pada  kuning  telur  dan  pola kenaikan  aktivitas  lipase  akan  diikuti  penurunan aktivitas  protease  sampai  kemudian  mencapai  titik konstan (Cahu & Zambonino-Infante, 1994).

## KESIMPULAN
Pemberian  pakan awal  dari jenis  Moina  sp.  pada pemeliharan larva ikan gabus yang diberi air hijau (Chlo- rella  sp.)  dengan  frekuensi  pemberian  pakan  dua, empat,  dan  enam  kali  dalam  sehari  memberikan performa sintasan (93,4%-94,3%) dan pertumbuhannya tidak berbeda nyata. Frekuensi pemberian Moina sp. dua kali sehari sebagai pakan awal pada pemeliharaan larva ikan gabus dengan sistem air hijau paling efisien untuk sintasan dan pertumbuhan larva.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penelitian  ini  dibiayai  dari  Anggaran  Balai  Riset Budiaya Air Tawar dan Penyuluhan Perikanan, Tahun Anggaran 2017.

## DAFTAR  ACUAN
Adeyemo, A.A., Oladosu, G.A., & Ayinla, A.O. (1994).
Growth and survival of fry of African catfish spe- cies,  Clarias  gariepinus  Burchell,  Heterobranchus bidorsalis  Geoffery  and  Heteroclarias  reared  on Moina dubia in comparison with  other first feed sources. Aquaculture, 119, 41-45.
Amornsakun, T., Sriwatana, W., & Promkaew, P. (2011). Feeding  behaviour  of  snake  head  fish  Channa striatus larvae. Songklanakrin Journal of Science and Technology, 33, 665-670.
Asgari,  R., Rafiee,  G.,  Eagderi, S.,  Noori,  F., Agh,  N., Poorbagher,  H.,  &  Gisbert,  E.  (2013).  Ontogeny of  the  digestive  enzyme  activities  in  hatchery produced  beluga  Huso  huso.  Aquaculture,  417, 33-40.
Barton,  B.A.,  Schreck,  C.B.,  &  Barton,  L.D.  (1987). Effects of chronic cortisol administration and daily acute stress on growth, physiological conditions, and  stress  responses  in  juvenile  rainbow  trout. Dis. Aquat. Org., 2, 173- 185.
Blaxter,  J.H.S.  &  Ehrlich,  K.F.  (1974).  Changes  in behaviour during starvation of herring and plaice larvae.  The  early  life  history  of  fish.  Berlin: Springer-Verlag, p. 575-588.
Bonaldo,  A.,  Parma,  L.,  Badiani,  A.,  Serratore,  P.,  & Gatta, P.P. (2011). Very early weaning of common sole  Solea  solea  L.  larvae  by  means  of  different feeding regimes and three commercial microdiets: Influence  on  performances,  metamorphosis development and tank hygiene. Aquaculture, 321, 237-244.
Borlongan,  I.G.  (1990).  Studies  on  the  digestive  li- pases of milkfish, Chanos chanos. Aquaculture, 89, 315-325.
Bouchnak,  R.,  Christian,  E.,  &  Steinberg,  V.  (2014).
Algae diets and natural xenobiotics impact energy allocation in cladocerans II. Moina macrocopa and Moina micrura. Limnologica-Ecology and Management of Inland Waters, 44, 23-31.
Bradford, M.M. (1976) A rapid and sensitive method for  the  quantitation  of  microgram  quantities  of protein  utilizing  the  principle  of  protein  dye binding. Ana. L. Biochem., 72, 248-254.
Cahu, C.L. & Zambonino-Infante. (2004). Substitution of  live  food  by  formulated  diets  in  marine  fish larvae. Aquaculture, 200, 161-180.
Chen,  B.N.,  Qin,  J.G.,  Carragher,  J.F.,  Clarke,  S.M., Kumar, M.S., & Hutchinson, W.G. (2007). Delete- rious effects of food restrictions in yellowtail king- fish Seriola lalandi during early development. Aqua- culture, 271, 326-335.
Cynthia K., Faulk, G., & Holt, J. (2009). Early weaning of southern flounder, Paralichthys lethostigma, lar- vae and ontogeny of selected digestive enzymes. Aquaculture, 296, 213-218.
Das,  S.K.,  Tiwari,  V.K.,  Venkateshwarlu,  G.,  Reddy, A.K., & Chettri, J.K. (2007). Growth, survival and fatty  acid  composition  of  Macrobrachium rosenbergii (de Man, 1879) post larvae fed HUFA- enriched Moina micrura. Aquaculture, 269, 464-475,
Demény,  F.,  Trenovszki,  M.M.,  Tatár,  S.,  Sipos,  S.,
Urbányi, B., & Müller, T. (2014). Effect of feeding frequency  on  the  growth  of  the  european mudminnow  larvae  Umbra  krameri  WALBAUM, 1792  reared  in  controlled  conditions.  Bulgarian Journal of Agricultural Science, 20, 670-674.
Evans,  D.H.,  Piermarini,  P.M.,  &  Choe,  K.P.  (2005). The multifunctional fish gill: dominant site of gas exchange, osmoregulation, acid base regulation, and  excretion  of  nitrogenous  waste.  Journal  of Physiology Reverse, 85, 97-177.
Furukawa, F., Watanabe, S., Inokuchi, M., & Kaneko, T. (2011). Responses of gill mitochondria-rich cells in mozambique tilapia exposed to acidic environ- ments (pH 4.0) in combination with different sa- linities. Comparative Biochemistry Physiology, 158, 468-476.
Goddard,  S.  (1996).  Feed  management  in  intensive aquaculture.  New  York  (US):  Chapman  and  Hall, 194 pp.
Guerreiro,  I.,  de  Vareilles,  M.,  Pousão-Ferreira,  P., Rodrigues, V., & Ribeiro, L.  (2010). Effect of age at  weaning  on  digestive  capacity  of  white seabream  Diplodus  sargus.  Aquaculture,  300, 194-205.
Huisman,  E.A. (1987).  The principles  of fish  culture production.  Departement  of  Aquaculture.
Wageningen  Agricultural  University.  Netherland, 311 pp.
Iglesias, J., Fuentes, L., Sánchez, J., Otero, J.J., Moxica, C.,  &  Lago,  M.J. (2006).  First  feeding  of  Octopus vulgaris  Cuvier,  1797  pralarvae  using  Artemia: Effect of prey size, prey density and feeding fre- quency. Aquaculture, 261, 817-822.
Islam,  H.,  Alamin,  M.,  Hasan,  M.S.,  Mondal,  S.,  & Hossain,  M.M.M.  (2017). Fish  culture  in  indoor- tank  using  green  water  technology.  Journal  of Entomology and Zoology Studies, 5, 2498-2502.
Kakizawa, S., Kaneko, T., & Hirano, T. (1996). Eleva- tion  of  plasma  somatolactin  concentrations  du- ring acidosis in rainbow trout Oncorhynchus mykiss. J. Exp. Biol., 199, 1043-1051.
Kestemont,  P.,  Xueliang,  X.,  Hamza,  N.,  Maboudou, J., & Toko, I.I. (2007). Effect of weaning age and diet  on  pikeperch  larviculture.  Aquaculture,  264, 197-204.
Kibria, Nugegoda, Fairclough, Lam, & Bradley. (2001). Utilization  of  wastewater  grown  zooplankton: Nutritional  quality  of  zooplankton  and  perfor- mance of silver perch Bidyanus bidyanus (Mitchell 1838) Teraponidae fed on wastewater grown zoo- plankton. Aquaculture Nutrition, 5, 221-227.
Kusmini, I,I., Gustiano, R., Prakoso, V.A., & Ath-thar, M.H.F. (2016). Perbenihan dan budidaya ikan gabus. Jakarta: Penebar Swadaya, 76 hlm.
Kwong,  R.W.M.,  Kumai,  Y.,  &  Perry,  S.F.  (2014).  The physiology of  fish at  low pH:  the zebrafish  as a model system. The Journal of Experimental Biology, 217, 651-662.
Lazo, J.P., Dinis, M.T., Holt, G.J., Faulk, C., & Arnold, C.R.  (2000).  Co-feeding  microparticulate  diets with algae: toward eliminating the need of zoo- plankton at first feeding in larval red drum Sciaenops ocellatus. Aquculture, 188, 339-351.
Lee, S., Wang, Y., Hung, S.S.O., Strathe, A.B., Fangue, N.A., &  Fadel, J.G.  (2014). Development  of opti- mum  feeding  rate  model  for  white  sturgeon Acipenser transmontanus. Aquaculture, 433, 411-420.
Li,  X.F.,  Tian,  H.Y.,  Zhang,  D.D.,  Jiang,  G.Z.,  &  Liu, W.B. (2014). Feeding frequency affects stress, in- nate immunity and disease resistance of juvenile blunt snout bream Megalobrama amblycephala. Fish & Shellfish Immunology, 38, 80-87.
Lindley,  L.C.,  Phelps,  R.P.,  Davis,  D.A.,  &  Cummins, K.A.  (2011).  Salinity acclimation  and  free  amino acid enrichment of copepod nauplii for first-feed- ing  of  larval  marine  fish.  Aquaculture,  318, 402-406.
Liu,  B.,  Zhu,  X.,  Lei,  W.,  Yang,  Y.,  &  Xie,  S.  (2012). Effects of different weaning strategies on survival
and growth in chinese longsnout catfish Leiocassis longirostris  Günther  larvae.  Aquaculture,  364, 13-18.
Mai,  W.J.,  Yan,  J.L.,  Wang,  L.,  Zheng,  Y.,  Xin,  Y.,  & Wang, W.N. (2010). Acute acidic exposure induces p53-mediated oxidative stress and DNA damage in tilapia Oreochromis niloticus blood cells. Aquatic Toxicology, 100, 271-281.
Manley,  C.B.,  Rakocinski,  C.F.,  Lee,  P.G.,  &  Blaylock, R.B.  (2015).  Feeding  frequency  mediates aggression  and  cannibalism  in  larval  hatchery- reared  spotted  seatrout,  Cynoscion  nebulosus. Aquaculture, 437, 155-160.
Martin, L., Arenal, A., Fajardo, J., Pimentel, E., Hidalgo, L.,  Pacheco,  M.,  García,  C.,  &  Santiesteban,  D. (2006).  Complete  and  partial  replacement  of Artemia nauplii by Moina micrura during early post- larval culture of white shrimp Litopenaeus schmitti. Aquaculture Nutrition, 12, 89-96.
Micale, V., Garaffo, M., Genovese, L., Spedicato, M.T., & Muglia, U. (2006). The ontogeny of the alimen- tary tract during larval development in common pandora  Pagellus  erythrinus  L.  Aquaculture,  251, 354-365.
Neori,  A.  (2011).  “Green  water”  microalgae:  The leading  sector  in  world  aquaculture.  Journal  of Applied Phycology, 23, 143-149.
Nhu, V.V., Dierckens, K., Nguyen, H.T., Hoang, T.M.T., & Sorgeloos, P. (2010). Effect of early co-feeding and different weaning diets on the performance of  cobia  Rachycentron  canadum  larvae  and  juve- niles. Aquaculture, 305, 52-58.
Pradhan, P.K., Jena, J., Mitra, G., Sood, N., & Gisbert, E. (2014). Effects of different weaning strategies on  survival,  growth  and  digestive  system  deve- lopment  in  butter  catfish  Ompok  bimaculatus (Bloch) larvae. Aquaculture, 424, 120-130.
Ribeiro, R., Zambonino-Infante, J.L., Cahu, C., & Dinis, M.T.  (1999).  Development  of  digestive  enzymes in larvae of Solea senegalensis, Kaup 1858. Aquacul- ture, 179, 465-473.
Russo,  D.J.,  Watanabe,  W.O.,  Kinsey,  S.T.,  &  Seaton, P.J. (2017). Effects of feeding frequency of live prey
on  larval  growth,  sur vival,  resistance  to hyposalinity  stress,  Na + /K + ATPase  activity,  and fatty  acid profiles  in  black  sea bass  Centropristis striata. Aquaculture, 470, 56-67.
Tataje, D.A.Y., Baldisserotto, B., & Filho, E.Z. (2015).
The  effect  of  water  pH  on  the  incubation  and larviculture  of  curimbatá  Prochilodus  lineatus
Valenciennes, 1837 (Characiformes:
Prochilodontidae).  Neotropical  Ichthyology,  13, 179-186.
Veras, G.C., Brabo, M.F., Dias, J.A., Abe, H.A., Nunes, M.P., & Murgas, L.D.S. (2014). The effect of pho- toperiod and feeding frequency  on larval of the amazonian  ornamental  fish  Pyrrhulina  brevis (Steindachner, 1876). Aquaculture Research, p. 1-7.
Villarroel, M., Alavriño, J.M.R., & López-Luna, J. (2011). Effect  of feeding  frequency  and  one day  fasting on tilapia Oreochromis niloticus and water quality. Israel Journal Aquaculture Bamidgeh, 63, 609-715.
Wahab,  S.Z.,  Kadir,  A.B.,  Hussein,  N.H.,  Omar,  J., Yunus,  R.,  Baie,  S.,  Noor,  N.M.,  Hassan,  I.I., Mahmood,  W.H.,  Razak,  A.B.,  &  Yusoff,  W.Z. (2015).  The  effect  of  Channa  striatus  (Haruan) extract on pain and wound healing of post-lower segment  caesarean  section  women.  Ev-Based Comp. Alt. Med., 15, 1-7.
Wang, C., Xie, S., Zhu, X., Lei, W., Yang, Y., & Liu, J. (2006). Effects of age and dietary protein level on digestive enzyme activity and gene expression of Pelteobagrus  fulvidraco  larvae.  Aquaculture,  254, 554-562.
Wilson,  R.W.,  Wood,  C.M.,  Gonzalez,  R.J.,  Patrick, M.L.,  Bergman,  H.L.,  Narahara,  A.,  &  Val,  A.L. (1999).  Ion and  acid–base  balance  in three  spe- cies  of  amazonian  fish  during  gradual  acidifica- tion  of  extremely  soft  water.  Physiol.  Biochem. Zool., 72, 277-285.
Worthington.  (1991).  Enzymes,  the  physics  and chemistry  of  life.  New  York:  Simon  and  Schuster Publisher, p. 171-173.
Yúfera,  M.  & Darias,  M.J.  (2007).  The onset  of  exo- genous feeding in marine fish larvae. Aquaculture, 268, 53-63.