## UJI EFEKTIVITAS LARVASIDA DAUN MIMBA (Azadirachta indica) TERHADAP LARVA LALAT Sarcophaga
PADA DAGING UNTUK UPAKARA YADNYA DI BALI
A.A. Lidya Nirmala Dewi, I W. Karta, N.L. Candra Wati, N.M. Andini Dewi
Jurusan Analis Kesehatan, Politeknik Kesehatan Denpasar Denpasar, Indonesia
Email: lidya.nirmaladewi@gmail.com, iwayankartaganesh@gmail.com

## Abstrak
Jenis Lalat Sarchopaga dapat merusak daging yang digunakan dalam sarana upacara yadnya di Bali  yang  dapat  menimbulkan  bau  dan  tampilan  tidak  menarik.  Berbagai  cara  telah  dilakukan  untuk mengatasinya, namun belum optimal dapat menanggulanginya. Pada penelitian ini akan digunakan  daun mimba ( Azadirachta indica ) untuk  mencegah pengaruh negatif dari lalat ini.  Tujuan penelitian ini untuk mendeskripsikan  efektivitas  larvasida  daun  mimba  terhadap  larva  lalat Sarchopaga pada  daging  yang digunakan sebagai sarana upakara di Bali. Kelompok perlakuan ini yaitu penggunaan daun mimba 25% sebagai  larvasida,  kelompok  kontrol  positif  yaitu  penggunaan  minuman  bersoda,  dan  kelompok  kontrol negatif yaitu tidak mendapat perlakuan. Hasil uji One Way Anova diperoleh hasil nilai probabilitas p (0,000) < α (0,05) yang menunjukkan adanya perbedaan  jumlah kematian larva  pada perlakuan rebusan daun mimba  25  %,  kontrol  negatif  dan  kontrol  positif.  Perlakuan  daun  mimba  konsentrasi  25%  memberikan jumlah  kematian  larva  yang  lebih  tinggi  dibandingkan  terhadap  kontrol  positif  dengan  perbedaan persentase sebesar 60%. Daun mimba lebih efektif sebagai larvasida jika dibandingkan dengan minuman bersoda.    Perebusan  daging  dengan  menambahkan  daun  mimba  dapat  digunakan  untuk  menghindari pembusukan yang disebarkan oleh lalat daging ( Sarchopaga).
Kata kunci : daun mimba, lalat daging, larvasida

## Abstract
Sarchopaga Flies type can damage the meat used in the ritual paraphernalia yadnya in Bali that can cause odors and unattractive appearance. Various ways have been made to handle it, but not optimal can cope. This research will be used leaves of neem (Azadirachta indica) to prevent the negative effects of  these  flies.  The  purpose  of  this  study  to  describe  the  effectiveness  of  neem  leaf  larvicides  against Sarchopaga fly larvae in meat is used as a means upakara in Bali. The treatment group, namely the use of neem leaves 25% as larvicides, the positive control group, namely the use of soft drinks, and a negative control group that did not receive treatment. One Way test results obtained by the results of the probability p (0.000) <α (0.05) which shows the difference in the number of larvae mortality in the treatment of neem leaf  decoction of  25%,  negative  control  and a  positive  control. Treatment  of  neem  leaf  concentration  of 25%  gives  the  number  of  larval  mortality  is  higher  than  the  positive  control  with  the  difference  in  the percentage of 60%. Neem leaf was found to be more effective as larvicides when compared to soft drinks. Boiling  meat  by  adding  neem  leaves  can  be  used  to  avoid  decomposition  spread  by  the  flies  meat ( Sarchopaga ).
Key words: Azadirachta indica , larvicides , Sarchopaga

## PENDAHULUAN
Lalat  merupakan  jenis  serangga, termasuk  subordo Cyclorrapha ,  ordo Diptera yang  sering  di  jumpai  dalam keseharian  kita  dan  pada  hampir  semua
jenis  lingkungan.  Di  ekosistem  lalat  dapat berperan  dalam  proses  pembusukan, sebagai  predator,  parasit  pada  serangga, sebagai pollinator (Byrd & Castner, 2001), penyebab myasis (David, B.V., Anathakrishnan, 2004), dan dapat
berperan  sebagai  vektor  penyakit  saluran pencernaan seperti kolera, typhus, disentri (Santi,  2001).  Lalat  juga  dapat  membawa bakteri patogen, Protozoa, telur serta larva cacing  (Chandra,  2005).  Lalat  dapat menularkan penyakit melalui bahan makanan
atau minuman yang terkontaminasi  oleh  bibit  penyakit  yang menempel pada tubuh, kaki, tarsi (Graczyk, Knight,  &  Tamang,  2005)  dan  proboscis. Lalat  menimbulkan  adanya  belatungan pada  media  yang  dihinggapi  dan  tempat media  bertelurnya.  Hal  ini  menimbulkan penampilan  yang  buruk  dan  bau  tidak sedap pada media seperti daging.
Salah  satu  jenis  lalat  yang  tidak sehat  bagi  lingkungan  yaitu  lalat  daging. Lalat ini termasuk dalam genus Sarcophaga ,  artinya  pemakan  daging. Larva dari banyak jenis-jenis lalat ini hidup dalam daging,  tetapi  pembiakan bisa  juga terjadi  dalam  kotoran  binatang  (Santi, 2001).  Lalat  ini  tentunya  merugikan  bagi masyarakat, karena menyebabkan terjadinya  percepatan  pembusukan,  salah satunya  adalah  sarana upakara  yadnya yang  menggunakan  daging  di  Bali. Upakara  yadnya atau  dikenal  dengan banten merupakan  sarana  persembahan dalam  upacara  keagamaan  agama  Hindu yang  menggunakan  bahan  dari  daging seperti babi, ayam, sapi, kerbau, ikan, dan daging  lainnya  (Sudarsana,  2010).  Lalat Sarcophaga sering  menghinggapi  dan bertelur pada sarana upakara yang terbuat dari  daging,  seperti banten  bangun , bebangkit .  Sarana  upakara  ini  biasanya menggunakan  daging  yang  direbus  dan dibuat dengan kreativitas sedemikian rupa membentuk bentuk-bentuk tertentu. Bebantenan ini biasanya didiamkan sampai  upacara  keagamaan  selesai. Dengan adanya lalat daging, menyebabkan terjadinya pembusukan dan bau yang tidak sedap.
Masyarakat  Bali  yang  beragama Hindu  melakukan  antisipasi  terhadap serangan  lalat  daging  seperti Sarcophaga terhadap  daging  pada  banten  upacara yadnya. Antisipasi  yang dilakukan dengan menyemprotkan  minuman  bersoda  dan beralkohol  pada  daging.  Namun,  cara  ini belum  efektif  karena  setelah  alkohol menguap,  lalat  kembali  menghinggapi
daging.  Oleh  karena  itu,  diperlukan  suatu upaya  terbarukan  dengan  memanfaatkan bahan lokal yang memiliki aktivitas sebagai larvasida ataupun insektisida. Bahan lokal yang  dapat  digunakan  yaitu  daun  mimba ( Azadirachta indica ).
Daun mimba di Bali dikenal dengan daun  intaran.  Daun  ini  sering  digunakan sebagai dedaunan dalam upakara yadnya dan  sebagai  symbol  alis  pada  saat menghias  jenazah  sebelum  dikubur  atau dikremasi.  Daun  mimba  telah  diteliti memiliki kandungan aktif yang bermanfaat sebagai  anti-inflamasi,  antitumor,  efek diuretik, insektisida, anti jamur, anti bakteri, larvasida nyamuk, dan antimalarial (Biswas,  Chattopadhyay,  Banerjee,  & Bandyopadhyay,  2002).  Tanaman  mimba mengandung  zat  aktif azadiractin ,  minyak gliserida, polifenol, acetiloksifuranil dekahidrotetrametil acid , ksosiklopentanatoffiiran , asetat-keton,
monoterpen,  dan heksahidrositetrametil fenantenon (nimbol)  (Hariana,  2013). Senyawa  seperti  azadirachtin  berfungsi sebagai antifeedant (mencegah)  dan sebagai repellent (penolak)  sehingga sebagai  insektisida  dan  larvasida.  Ekstrak daun  mimba  lebih  aman  dan  efisien digunakan  karena  mudah  diperoleh,  tidak toksik  terhadap  manusia  serta  mudah terurai  sehingga  aman  bagi  lingkungan (Kardinan, 2000).
Azadirachtin berdampak pada pertumbuhan  semua  fase  larva  serangga, pupa,  dan  serangga  dewasa.  Mekanisme kerjanya akan mempengaruhi metabolisme hormon  serangga  pada  otak.  Semakin tinggi  konsentrasi  Azadirachtin,  maka jumlah racun yang mengenai kulit serangga semakin banyak, sehingga dapat menghambat
pertumbuhan dan
menyebabkan  kematian  serangga  lebih banyak.  Senyawa  Azadirachtin  dapat menghambat pertumbuhan serangga hama, mengurangi nafsu makan, mengurangi produksi dan penetasan telur, meningkatkan  mortalitas,  mengaktifkan infertilitas  dan  menolak  hama  di  sekitar pohon mimba. Ekstrak mimba yang terbuat dari  daun,  bunga,  dan  biji  mimba  dapat digunakan  untuk  mengendalikan  berbagai jenis  hama,  misalnya Helopelthis  sp. ,  ulat jengkal, Aphis  sp ., Nilarvata  sp .,  dan
Sitophilus  sp .  Daun  mimba  juga  dapat meningkatkan  mortalitas  larva  nyamuk (Fathoni, Yanuwiadi, & Leksono, 2013).
Tanaman mimba ( Azadirachta indica ),  terutama  dalam  biji  dan  daunnya mengandung  beberapa  komponen  dari produksi metabolit sekunder seperti azadirachtin,  salanin,  meliantriol,  nimbin dan nimbidin yang diduga sangat bermanfaat,  baik  dalam  bidang  pertanian (pestisida  dan  pupuk),  maupun  farmasi (kosmetik dan obat-obatan. Mimba mempunyai  spektrum  yang  luas,  efektif untuk mengendalikan serangga lunak (200 spesies)  antara  lain  belalang,  trips,  ulat, kupu-kupu putih dan lain-lain. Penggunaan daun  mimba  sebagai  pestisida  alam  yang aman bagi mahkluk hidup dan lingkungan. Berdasarkan  hal  tersebut,  maka  dalam penelitian  ini  akan  diuji  aktivitas  larvasida daun  mimba  terhadap  lalat Sarchopaga pada  daging  yang  digunakan  sebagai sarana  upakara  di  Bali.  Hal  ini  berkaitan dengan kandungan-kandungan dalam daun  mimba  akan  terserap  pada  daging saat proses perendaman, sehingga nantinya dapat sebagai larvasida larva lalat daging.

## METODE
Jenis  penelitian  yang  digunakan adalah penelitian True-experimental (eksperimen  murni).  Desain  penelitian yang digunakan yaitu Posttest only-control design . Dalam penelitian ini variabel bebas adalah  rebusan  daun  mimba  dengan konsentrasi 25%. Variabel terikatnya  yaitu jumlah  kematian  larva  sebagai  potensi larvasida daun mimba terhadap pertumbuhan  larva Sarchopaga .  Variabel kontrolnya  adalah  suhu  perebusan  daun, ukuran daging, umur larva, air perebusan, lama perebusan.
Objek  dalam  penelitian  ini  adalah daun  mimba  ( Azadirachta  indica ).  Daun yang  digunakan  adalah  daun  tanaman mimba yang tidak terlalu muda atau terlalu tua, berwarna hijau tua dan tidak berlubang (diambil  sebanyak  15  helai  dari  setelah  5 helai  dari  pucuk).  Daun  mimba  dengan helaian  berbentuk  memanjang  lanset bengkok,  panjang  3-10  cm,  lebar  0,5-3,5 cm, pangkal runcing tidak simetri, tepi daun bergerigi  kasar,  remasan  berasa  pahit,
warna  hijau  muda.  Tangkai  panjang  8-20 cm.  Diperlukan  250  gram  daun  mimba segar  dalam  1  liter  air  untuk  memperoleh rebusan daun mimba konsentrasi 25 %.
Penelitian ini dilakukan di Lab Kimia Dasar  dan  Kimia  Terapan  Jurusan  Analis Kesehatan Polteknik Kesehatan Denpasar. Penelitian  ini  dilakukan  selama  5  bulan pada tahun 2016. Alat-alat yang digunakan dalam  penelitian  ini  yaitu,  neraca  analitik, gelas  kimia,  gelas  ukur,  pisau,  mangkok plastik,  nampan,  saringan  teh,  plastik bening,  talenan,  botol  air  mineral,  panci, jarum,  dan  tempat/wadah  untuk  uji larvasida.  Bahan  yang  digunakan  yaitu daun mimba muda yang diambil 15 cabang daun dari pucuk, akuades, minuman soda, darah  babi,  daging  babi  yang  biasanya untuk  pembuatan  upakara  dan  hewan  uji berupa  larva  lalat  daging  ( Sarchopaga ) instar III awal.
Larva  lalat  daging  dipersiapkan dengan  mengembangbiakan  lalat  daging. Alat  dan  bahan  dipersiapkan  untuk mengembangbiakan seperti mangkok kecil,  plastik  bening,  daging  babi,  darah, dan  botol  air  mineral.  Plastik  bening diletakkan  pada  mangkok,  kemudian ditaruh  daging  babi  yang  sudah  dipotong dan ditambahkan  darah  babi  secukupnya. Kemudian ditempatkan dan disinari cahaya matahari dan ditunggu hingga banyak lalat yang  hinggap  pada  daging.  Selajutnya, dilakukan    identifikasi  lalat  yang  hinggap pada daging babi. Lalat daging dipisahkan dan dipindahkan ke dalam botol. Dipindahkan  kembali  lalat  daging  ke mangkok lain yang telah berisi daging dan darah babi untuk memulai proses perkembangbiakan  lalat.  Larva  ditunggu kira-kira 4-5 hari hingga menjadi  instar III. Hasil  pemeliharaan  diperoleh  persediaan larva instar III awal untuk pengujian.
Unit  analisis  dalam  penelitian  ini adalah  aktivitas  larvasida  daun  mimba terhadap pertumbuhan larva lalat Sarchopaga pada  daging  yang  digunakan sebagai sarana upakara di Bali. Pertumbuhan larva lalat Sarchopaga pada daging  diamati  dalam  tiga  perlakuan  yaitu salah  satu  daging  akan  direndam  dengan air  rebusan  daun  mimba  sebanyak  250 gram  dalam  1  L  air  sehingga  konsentrasi
daun  mimba  menjadi  25  %,  kemudian daging  yang  lain  direndam  dengan softdrink  sekaligus  sebagai  kontrol  positif, dan  perlakuan  ketiga  adalah  daging  yang tidak  diberi  perlakuan  apapun  sekaligus sebagai kontrol negatif.
Terdapat  tiga  perlakuan  terhadap daging  babi.    Jumlah  pengulangan
sebanyak  tiga  kali  dan  replikasi  sebanyak tiga kali. Pengulangan yang dimadsud yaitu menggunakan  rendaman  sampel  yang sama  yang  dilakukan  sebanyak  tiga  kali (triplo), sedangkan replikasi yaitu pengulangan  kembali  perlakuan  yang sama  dalam  suatu  eksperimen,  dengan kondisi  eksperimen  yang  sama  pula. Berdasarkan  pengulangan  dan  replikasi diperoleh 27 data.
Pengujian larvasida dilakukan dengan  dengan  metode  rancangan  acak lengkap.  Masing-masing  daging  dengan perlakuan yang berbeda ditempatkan pada wadah uji larvasida. Wadah ini terbuat dari gelas  besar  yang  ditutup  dengan  kertas yang dilubangi kecil-kecil. Kemudian dimasukkan 10 ekor larva lalat daging pada setiap perlakuan, dan didiamkan.
Pengamatan  dilakukan  setiap  1  hari sampai  7  hari.  Pengamatan  dilakukan dengan cara menghitung jumlah larva yang mati  (mortalitas  larva).  Selain  itu  diamati secara kualitatif tekstur daging dan bau.
Analisa  data  dilakukan  dengan  uji Anova  untuk  menguji  ada  atau  tidak  ada perbedaan  rata-rata  pada  masing-masing sampel  pada  perlakuan  atau  kelompok yang lebih dari dua.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Rerata  jumlah  larva  mati  paling besar  dari  seluruh  pengulangan  dan replikasi  terdapat  pada  perlakuan  dengan
rendaman  daun  mimba  konsentrasi  25  % yaitu  sebesar  10  ekor  sedangkan  jumlah larva  mati  paling  kecil  dari  seluruh pengulangan  dan  replikasi  terdapat  pada kontrol negatif yaitu sebesar 0 ekor. Untuk lebih jelasnya dapat dilihat pada Tabel 1. Pada uji efektivitas larvasida peneliti mempergunakan  2  buah  kontrol,  yaitu kontrol  positif  dan  kontrol  negatif.  Untuk
kontrol  positif  peneliti  mempergunakan daging  yang  direndam  selama  30  menit dengan  minuman  bersoda.  Sedangkan untuk kontrol negatif peneliti mempergunakan  daging  tanpa  perlakuan. Uji  kedua  kontrol  tersebut  turut  dilakukan tiap kali melakukan uji efektifitas larvasida lalat  daging  ( sarchopaga )  dengan  daun mimba.  Adapun  tujuan  dari  pengerjaan kontrol  positif  dan  negatif  ialah  sebagai pembanding terhadap perlakuan dalam uji larvasida.
Pada kontrol negatif, peneliti mempergunakan  daging  yang  dipotong dengan ukuran  15 cm x 5 cm x 2 cm dan prosedur pengerjaan yang dilakukan hanya dengan meletakkan daging tanpa penambahan apapun pada toples kemudian ditambahkan 10 ekor larva lalat instar  ketiga.  Alasan  menggunakan  larva instar  ketiga  adalah  karena  larva  instar ketiga  memiliki  kemampuan  yang  lebih baik dalam menetralisir senyawa  toksik.
Larva  yang  diletakkan  pada  daging tanpa perlakuan diamati bersamaan dengan larva yang diletakkan pada daging yang  direndam  dengan  rebusan  daun mimba  konsentrasi  25%  dan  daging  yang direndam  dengan  minuman  bersoda. Adapun  hasil  yang  didapat  pada  kontrol negatif selama pengujian efektifitas larvasida  ialah  larva  mati  sebanyak  0% atau  hidup  semua  selama  7  hari.  Hal  ini
Tabel 1. Rerata Jumlah Larva Mati Pada Konsentrasi Air Rebusan Daun Mimba ( Azadirachta indica ) 25 %, Kontrol Negatif, dan Kontrol Positif Konsentrasi (perlakuan) Replikasi I Replikasi II Replikasi III Rata- rata Persentase Kematian Larva Pengulangan  Pengulangan  Pengulangan I II III I II III I II III 25 % 10  10  10  10  10  10  10  10  10 10 100% K - 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0% K + 3 5 3 5
7 5 3 3 2 4 40%
terjadi karena pada daging tidak ditambahkan  zat  apapun  yang  mampu menghambat pertumbuhan larva. Sehingga  larva  yang  diletakkan  pada daging  tanpa  perlakuan  dapat  hidup dengan baik selama 7 hari.
Pada kontrol positif, peneliti mempergunakan  daging  yang  dipotong dengan  ukuran  15  cm  x  5  cm  x  2  cm kemudian  direndam  dengan  minuman bersoda. Pada replikasi pertama ditemukan larva lalat sarcophaga yang mati di  hari  ketujuh  dengan  tiga  pengulangan, masing-masing  yaitu  3,  5,  dan  3  larva. Pada replikasi kedua ditemukan larva lalat sarcophaga  yang  mati  di  hari  ketujuh dengan  tiga  pengulangan,  masing-masing yaitu 5, 7, dan 5 larva. Pada replikasi ketiga ditemukan larva lalat sarcophaga yang mati di  hari  ketujuh  dengan  tiga  pengulangan, masing-masing yaitu 3, 3,  dan 2 larva.
Pengujian efektivitas larvasida mempergunakan  daun  mimba  dilakukan dengan cara yang sama dengan perlakuan daging  pada  kontrol  positif.  Daging dipotong  terlebih  dahulu  dengan  ukuran yang telah ditentukan, yaitu 15 cm x 5 cm x 2  cm  kemudian  direndam  dalam  rebusan daun mimba 25%. Konsentrasi 25% dibuat dari  daun  mimba  yang  dipetik  kemudian ditimbang 250 gram kemudian ditambahkan  air  sebanyak  1  liter,  dan direbus  selama  beberapa  menit  hingga mendidih.    Setelah  daun  direbus,  air rebusan  daun  mimba  digunakan  untuk merendam  daging  babi  selama  30  menit. Setelah  30  menit,  daging  kemudian diangkat  dan  diletakkan  pada  toples  yang telah  disiapkan,  kemudian  ditambahkan larva  lalat  daging  sebanyak  10  ekor  dan diamati  jumlah  larva  yang  mati  selama  7 hari.  Replikasi  pertama  dengan  tiga  kali pengulangan ialah seluruh larva mati pada hari  ketujuh.  Replikasi  kedua  dengan  tiga kali  pengulangan  ialah  seluruh  larva  mati pada hari ketujuh. Replikasi ketika dengan tiga  kali  pengulangan    ialah  seluruh  larva mati pda hari ketujuh.
Data  jumlah  kematian  larva  yang diperoleh  dalam  penelitian  ini  kemudian dianalisis  menggunakan  uji  statistik.  Hasil uji statistik menunjukkan data berdistribusi normal.  Uji  dilakukan  dengan Kruskal
Wallis untuk mengetahui adanya perbedaan  jumlah  kematian  larva  pada perlakuan  rebusan  daun  mimba  25%, kontrol  negatif  dan  kontrol  positif.  Setelah diperiksa  dengan  tingkat  kepercayaan  95 % (0,05) diperoleh hasil nilai probabilitas p (0,000)  <  α  (0,05)  yang  menandakan bahwa  ada  perbedaan  jumlah  kematian larva pada perlakuan rebusan daun mimba 25 %, kontrol negatif dan kontrol positif.
Pada kontrol positif, peneliti mempergunakan  daging  yang  direndam dengan minuman bersoda. Minuman soda merupakan  jenis  minuman  yang  berasal dari olahan air berkarbonasi.
Karbondioksida  yang  diabsorbsikan  ke dalam  air,  menyebabkan  air  menjadi berbusa.  Maka  dari  itu  pada  sejumlah masyarakat memanfaatkan sifat pengawet dalam  minuman  ini  untuk  mengawetkan daging  atau  makanan  lainnya.  Serta minuman bersoda ini umum ditemukan dan mudah  didapatkan  di  lingkungan  sekitar. Maka  dari  itu  peneliti  mempergunakan minuman  bersoda  ini  sebagai  kontrol positif.
Daging  yang  direndam  selama  30 menit  dalam  minuman  bersoda  mampu menyerap  air  karbonasi  dari  minuman bersoda, sehingga daging tersebut mengandung  air  berkarbonasi.  Adanya larva  lalat  yang  mati  pada  kontrol  positif tersebut  diakibatkan  oleh  bau  khas  dari minuman  bersoda  yang  berasal  dari  air karbonasi menyebabkan larva tidak memakan  daging  tersebut,  sehingga beberapa larva tidak dapat bertahan hidup selama 7 hari.
Kematian  yang  dialami  oleh  seluruh larva  terjadi  akibat  dari  adanya  metabolit sekunder  utama  dalam  tanaman  mimba yang  berfungsi  sebagai  insektisida  yaitu azadirachtin yang  terbentuk  secara  alami berupa  substansi  yang  termasuk  dalam kelas molekul organik tetranortriterpenoids. Senyawa  dari  daun  mimba  azadirachtin merupakan salah satu jenis senyawa yang cukup aktif yang tidak langsung mematikan serangga  akan  tetapi  melalui  proses mekanisme  menolak  makan,  menganggu pertumbuhan  dan  reproduksi  serangga (Pritima,  R.A.,  Pandian,  2008).  Adapun proses  perebusan  daun  berfungsi  untuk
membuat  zat-zat  aktif  dalam  daun  mimba keluar  dan  tercampus  dalam  air  rebusan. Air  rebusan  tersebut  kemudian  digunakan untuk merendam daging selama 30 menit. Sehingga  dapat  terserap  secara  merata dalam  daging  dan  mempengaruhi  rasa serta memberi efek bagi larva.
Dalam  uji  ini,  efektivitas  larvasida daun mimba diukur dengan membandingkan  perbedaan  jumlah  larva lalat  yang  mati  pada  perlakuan  daun mimba konsentrasi 25% dengan perlakuan minuman  bersoda  sebagai  kontrol  positif. Adapun  persentase  kematian  larva  lalat daging  ( Sarchopaga )  hingga  hari  ke-7 (Tabel  1) pada  kontrol  positif  (minuman bersoda) adalah 40%, sementara kematian pada daun mimba konsentrasi 25% adalah 100%.  Berdasarkan  pengamatan  tabel tersebut  diketahui  bahwa  perlakuan  daun mimba  konsentrasi  25%  memberikan jumlah  kematian  larva  yang  lebih  tinggi dibandingkan  terhadap  kontrol  positif dengan  perbedaan  persentase  sebesar 60%.  Sehingga  dapat  dikatakan  bahwa daun mimba lebih efektif sebagai larvasida jika dibandingkan dengan minuman bersoda.
Penelitian dilakukan dalam 3 replikasi yang tiap replikasinya terdapat
pengulangan sebanyak 3 kali. Dari seluruh pengujian larvasida, seluruhnya menunjukkan  jumlah  kematian  larva  yang berbeda  meskipun  pada  perlakuan  yang sama. Melalui uji statistik diketahui bahwa terdapat perbedaan jumlah kematian larva lalat daging ( Sarchopaga ) antara perlakuan dengan daun mimba konsentrasi 25% dan minuman bersoda.
Timbulnya  efek  kematian  terhadap larva  lalat  daging  ( Sarchopaga )  pada perlakuan  daun  mimba  konsentrasi  25% disebabkan oleh kandungan zat aktif pada daun  mimba  yaitu azadirachtin yang mampu  bertindak  sebagai antifeedant , ecdyson blocker, serta gangguan perkembangan  dan  reproduksi  serangga. Azadirachtin juga berfungsi sebagai insektisida  bagi  beberapa  jenis  serangga. Kematian  serangga  dapat  terjadi  dalam beberapa  hari,  tergantung  dari  stadia  dan siklus  hidup  serangga  target.  Akan  tetapi, apabila  termakan  dalam  jumlah  kecil  saja
mengakibatkan  serangga  tidak  bergerak dan  berhenti  makan.  Aktivitas  residu insektisida  dari  azadirachtin  ini  umumnya terjadi  antara  tujuh  sampai  10  hari  atau lebih  lama  lagi,  tergantung  dari  jenis serangga  dan  aplikasinya  (Samsudin, 2011). Azadirachtin yang dimakan serangga  meskipun  dalam  jumlah  kecil akan mengakibatkan serangga tidak dapat bergerak dan berhenti makan.
Azadirachtin memiliki  efek  primer berupa antifeedant dengan  menghasilkan stimulan  penolak  makan  spesifik  berupa chemoreceptor pada  bagian  mulut  yang mengganggu  persepsi  rangsangan  untuk makan  (Mordue  (Luntz)  et  al.,  1998). Azadirachtin juga  memiliki  efek  sekunder berupa  gangguan  perkembangan  dan reproduksi yang berefek langsung pada sel somatik dan jaringan reproduksi, disamping  itu  juga  berefek  tidak  langsung terhadap terganggunya
proses neuroendocrine.  Efek  sekunder  lainnya yaitu  sebagai ecdyson  blocker yang menghambat serangga untuk
memproduksi dan melepas hormon ecdyson  yang  bersumber  dari  sel-sel neurosekretori  (Gambar  1).  Kemampuan azadirachtin untuk memasuki organ neurosekretori  dan  ujung  sel  saraf  dalam organ  mempunyai  komponen  memblokir transmisi produk-produk dari
neurosekretori. Adanya efek ini menyebabkan  serangga  akan  terganggu pada  proses  pergantian  kulit,  ataupun proses perubahan dari telur menjadi larva, atau  dari  larva  menjadi  kepompong  atau dari kepompong menjadi dewasa. Biasanya  kegagalan  dalam  proses  ini seringkali  mengakibatkan  kematian  pada serangga.
Perlakuan  dengan  daun  mimba konsentrasi  25%  mampu  memberi  efek penolak makan sehingga terjadilah kematian  seluruh  larva  pada  hari  ke-7. Hormon ecdyson pada serangga mengatur proses  metamorfosa  serangga,  dimana produksi  hormon ecdyson membantu serangga  dalam  pembentukan  kutikula
baru  serta  enzimnya  berpengaruh  pada pengelupasan  kulit. Azadirachtin pada daun  mimba  yang  menghambat  hormon ecdyson akan berakibat pada terganggunya  proses  pergantian  kulit serangga. Sehingga apabila ada serangga yang terpapar maka hormon ecdyson akan menghambat bagian otak untuk menghasilkan hormon yang paling penting bagi  pertumbuhan  dan  perkembangan serangga. Padahal tubuh serangga sudah siap  untuk  berubah  namun  hormon  untuk berganti  kulit  (moulting)    tidak  terbentuk akhirnya  siklus  hidup  serangga  terganggu sehingga  biasanya  kegagalan  dalam proses  ini  seringkali  juga  mengakibatkan kematian pada serangga (Susanti, Sukesi,
& Soeyoko, 2012).
Senyawa  kimia  azadirachtin  dapat menghambat  proses  ganti  kulit  dengan merusak sistem fisiologi serangga.
Azadirachtin  juga  dapat  merusak  sistem kerja hormon dan merusak sistem kominikasi kimiawi dalam proses ganti kulit. Mekanisme ganti kulit dipicu dan dikendalikan  oleh  otak  AH  ( activation hormone ) melalui aliran darah, atau PTTH,
(prothoracicoptropic
hormone ) dan ecdysone .  Hormon  otak  diproduksi  oleh sel-sel neurosecretory pada  otak  dan
masuk  ke  dalam  pembuluh  darah  melalui struktur asesori otak. Kemudian bersirkulasi  ke  tempat  aktivasi  pada protoraks  serangga.  Kelenjer  kecil  di protoraks  ( prothoracic  gland )  distimulasi untuk  mensekresikan  ecdysone  (hormon molting , juga dinamakan hormon protoracid gland )  yang  memicu  pertumbuhan  dan aktivasi  molting  sel-sel  (Hadi  dkk.  2009). Sudarmadji  (1994)  menambahkan  bahwa apabila serangga telah mengalami keracunan oleh senyawa kimia azadirachtin  maka  proses  fisiologisnya akan  terganggu  yang  ditandai  dengan perubahan  perilaku  (terjadi  penolakan makan,  mengganggu  pertumbuhan  atau reproduksi secara struktural, larva menjadi tidak  aktif  (stress)  dan  akhirnya  akan mengalami kematian.
Penggunaan  daun  mimba  dapat menimbulkan  dampak  fisiologis  yaitu langsung  dan  tidak  langsung.  Dampak secara tidak langsung berpengaruh terhadap sistem endokrin. Sistem neurosecretory otak  dipengaruhi  oleh azadirachtin
yang
menyebabkan penyumbatan pengeluaran hormon morphogenetic peptida mis PTTH ( hormon prothoracicotropic ) dan allatostatins . Hormon  ini  mengontrol  fungsi  kelenjar
Gambar 1. Azadirachtin
prothoracic dan corpora  allata .  Hormon Moulting ( â-hydroxyecdysone ) dari kelenjar prothoracic pada  gilirannya  mengontrol formasi baru kutikula dan ecdyses (tindakan extrication dari  kutikula  lama) sedangkan  hormon  juvenil  (JH)  dari corpora  allata mengontrol  pembentukan tahap  remaja  serangga.  Dalam  keadaan dewasa  kedua  hormon  ini  dapat  terlibat dalam pengendalian deposisi kuning  pada telur.  Gangguan  yang  terjadi  biasanya pada disfungsi mulut dan berdampak pada kemandulan. Secara langsung, azadirachtin berpengaruh pada sel-sel dan jaringan. Azadirachtin diserap ke dalam sel dan  menyebabkan  penghambatan  kedua sel pision dan sintesis protein.
Daun  mimba  juga  mengandung senyawa aktif lain yang dapat mempengaruhi  kerja  sebagai  larvasida ataupun insektisida yaitu senyawa salannin dan nimbenen.
Senyawa salannin mempunyai daya kerja sebagai penghambat makan serangga ( antifeedant ). Senyawa
nimbinen mempunyai  daya  kerja  sebagai  antivirus dan  meliantriol  mempunyai  daya  kerja penolak serangga ( repellent ). Daya antifeedant dapat menyebabkan serangga tidak mau bertelur atau menolak memakan media  pada  masa  infestasi.  Salanin berperan  sebagai  penurun  nafsu  makan (antifeedant)  yang  mengakibatkan  daya rusak serangga sangat menurun, walupun serangganya sendiri belum mati. Meliantriol dan salanin dapat mempengaruhi  serangga  menolak  untuk makan  sehingga  akhirnya  serangga  mati kelaparan,  namun  tidak  mempengaruhi proses  pergantian  kulit  serangga.  Ekstrak daun mimba dapat dengan cepat terserap melalui  permukaan  kulit,  melumpuhkan urat  syaraf  dan  menyebabkan  kematian dengan  segera.  Selain  itu  racun  yang terkandung  pada  daun  mimba  akan berpengaruh  dalam  proses  pencernaan makanan,  menghambat  kontraksi  usus, sehingga  proses  pencernaan  makanan tidak dapat berlangsung.
Berdasarkan  hal  tersebut,  ektraksi daun  mimba  mempengaruhi  serangga melalui  berbagai  macam  cara,  antara  lain menghambat  stadium  larva,  mengganggu kopulasi dan komunikasi seksual
serangga, mencegah betina untuk meletakkan  telur,  menghambat  reproduksi atau  menyebabkan  serangga  mandul, meracunilarva dan dewasa, dan mengurangi napsu makan atau memblokir kemampuan  makan.  Oleh  karena  itu, dalam menggunakan  pestisida  nabati  dari mimba,  seringkali  hamanya  tidak  mati seketika  setelah  diaplikasi (knock  down ), namun  memerlukan  beberapa  hari  untuk mati,  biasanya  4-5  hari.  Namun  demikian, hama  yg  telah  terpapar  tersebut  daya rusaknya  sudah  sangat  menurun,  karena dalam  keadaan  sakit.  Daya  repellent berfungsi  untuk  menghambat  peletakan telur oleh serangga betina, karena serangga hanya mau bertelur pada tempat yang cocok bagi keturunannya.
Penghambatan  juga  terjadi  oleh  adanya pengaruh  bau  atau  aroma  ekstrak  yang berupa  komponen  aktif  yang  ada  pada ekstrak  daun  mimba  (Kardinan,  2000). Aromanya ini akan menghindarkan daging dari  kehadiran  lalat  sehingga  ini  dapat menghindarkan dari pembusukan.
Kandungan  flavonoid,  alkaloid  dan tannin  dalam  daun  dapat  menghambat pertumbuhan bakteri dan motilitas bakteri, merusak membran sel bakteri sehingga sel bakteri  akan  lisis  (koagulator  protein) terutama  dalam  proses  remodeling  serta menghambat pertumbuhan fibroblast sehingga  perawatan  luka  akan  lebih mudah. Selain itu, tannin berfungsi sebagai adstringen  yang  dapat  menyebabkan penciutan  pori-pori  kulit,  memperkeras kulit, menghentikan eksudat dan pendarahan yang ringan, sehingga mampu menutupi luka dan mencegah pendarahan yang  biasanya  timbul.  Selain  itu,  saponin merupakan  antimikroba  dan  memiliki kemampuan  sebagai  pembersih  dan antiseptik  sehingga  luka  tidak  mengalami infeksi  berat  dan  saponin  memiliki  tingkat toksisitas  yang  tinggi  terhadap  fungi  dan meningkatkan  kandungan  kolagen  serta mempercepat  proses  epitalisasi  sehingga proses  penyembuhan  luka  akan  lebih cepat.
Kompleksitas struktur molekul azadirachtin  menghalangi  sintesis  untuk penggunaan pestisida. Daun nimba mengandung  azadirachtin  bersama-sama dengan  beberapa  molekul  yang  terkait
secara  struktural  telah  membentuk  dasar dari  penggunaan  nimba  mengendalikan serangga.  Pendekatan  masa  depan  juga dapat  mencakup  produksi  azadirachtin untuk pengendalian serangga oleh di kultur jaringan in vitro dari nimba. Insektisida dari tanaman  nimba  efektif  terutama  sebagai mengatur  pertumbuhan  serangga  dan sterilants.  Ekstrak  nimba  telah  banyak digunakan  sebagai  pestisida  di  pertanian. Di  negara-negara  barat  utama  dunia seperti Amerika Serikat dan Kanada dan di Eropa  beberapa  insektisida  dari  tanaman nimba yang dikomersialkan telah mencapai pasar sampai saat ini. Azadirachtin  mudah terabsorbsi  oleh  tanaman,  bekerja  secara sistemik,  sedikit  racun  kontak  dan  aman bagi serangga musuh alami.

## SIMPULAN
Berdasarkan  penelitian  yang  telah dilakukan, dapat disimpulkan bahwa perlakuan  daun  mimba  konsentrasi  25% memberikan  jumlah  kematian  larva  yang lebih  tinggi  dibandingkan  terhadap  kontrol positif  dengan  perbedaan  persentase sebesar  60%.  Sehingga  dapat  dikatakan bahwa  daun  mimba  lebih  efektif  sebagai larvasida jika dibandingkan dengan minuman  bersoda.    Dengan  demikian, proses  perebusan  daging  dengan  daun mimba  yang  akan  digunakan  sebagai sarana  upacara  dapat  dilakukan  untuk menghindari pembusukan yang disebarkan oleh lalat daging ( Sarchopaga ).

## SARAN
Saran  yang  disampaikan  dalam penelitian  ini  yaitu  (1)  bagi  peneliti disarankan  untuk  melakukan  penelitian lebih  lanjut  untuk  mengetahui  persentase kandungan  zat  aktif  yang  terkandung dalam  rebusan  daun  mimba  dalam menghambat  pertumbuhan  Larva  lalat daging  (Sarcophaga),  serta  melakukan penelitian  terhadap  rebusan  daun  mimba ini dapat dilanjutkan dengan mengujikannya pada jenis larva lain untuk menambah  khasiat  dari  daun  mimba.  , serta  laporan  ini  dapat  dijadikan  sebagai referensi.
Masyarakat
khususnya masyarakat bali disarankan untuk
memanfaatkan  daun  tanaman  mimba ( Azadirachta  indica )  untuk  mengawetkan daging  yang  digunakan  pada  upakara  di
Bali dengan cara merebus daun dengan air terlebih  dahulu  dan  merendam  daging dengan  rebusan  daun  mimba  selama  30 menit.

## DAFTAR PUSTAKA
Biswas, K., Chattopadhyay, I., Banerjee, R. K.,  &  Bandyopadhyay,  U.  (2002). Biological  activities  and  medicinal properties  of  neem  (Azadirachta indica). Current  Science , 82 (11),
1336 –1345.
Byrd, J. H., & Castner, J. L. (2001). Insects of  Forensic  Importance  in  Forensic Entomology: The Utility of Arthropods in Legal Investigation . New York: CRC Press. Chandra, B. (2005). Pengantar Kesehatan Lingkungan .  Jakarta:  Penerbit  Buku Kedokteran (EGC).
David, B.V., Anathakrishnan, T. N. (2004).
General  and  Applied  Entomology . New  Delhi:  Tata  Mc  Graw  -  Hill Companies.
Fathoni,  M.,  Yanuwiadi, B., & Leksono, A.
S.  (2013).  The  effectiveness  of combination  Mahogany  (Swietenia mahogany)  seed  and  Sour  Sup (Annona muricata) leaf pesticide to the time  of  stop  feeding  and  LC50 mortality  on  armyworm  (Spodoptera litura  F.). Journal  of  Biodiversity  and Environmental Sciences (JBES) ,
3 (11), 71 –77.
Graczyk,  T.  K.,  Knight,  R.,  &  Tamang,  L. (2005).  Mechanical  Transmission  Of Human Protozoan Parasites By Insects. Clinical Microbiology Reviews , 18 (1), 128 –132.
Hariana,  A.  (2013). Tumbuhan  Obat  dan Khasiatnya . Jakarta: Penebar
Swadaya.
Kardinan,  A.  (2000). Pestisida  nabati,
Ramuan dan Aplikasi . Jakarta: Penebar Swadaya.
Mordue (Luntz), A. J., Simmonds, M. S. J.,
Ley, S. V., Blaney, W.M. , Mordue, W., Nasiruddin, M., & Nisbet, A. J. (1998). Actions  of  azadirachtin,  a  plant allelochemical, against insects.
Pesticide Science , 54 (3), 277 –284.
Pritima,  R.A.,  Pandian,  R.  S.  (2008).
Antibacterial Potency of Crude Extract of  Azadirachta  indica  A.  Juss  (Leaf)
Against Mirobes Causing Reproductive  Tract  Infections  Among
Women. Current Biotika , 2 , 2 –6.
Samsudin.  (2011).  Biosintesa  dan  cara kerja azadirachtin sebagai bahan aktif insektisida nabati. Semnas Pesnab IV , 61 –70.
Santi, D. N. (2001). Manajemen Pengendalian Lalat . Fakultas Kedokteran  Universitas  Sumatera Utara. Sudarsana,  I.  P.  .  (2010). Himpunan Tetandingan Upakara Yadnya . Denpasar: Percetakan Bali.
Susanti, N. D., Sukesi, T. W., & Soeyoko.
(2012).  Efektivitas  Ekstrak  Etanol
Daun  Mimba(Azadirachta  Indica  A. Juss)  Sebagai  Larvasida  Terhadap
Larva Aedes Aegypti, 46 –53.