Journal Syifa Sciences and Clinical Research (JSSCR)
Volume 6 Nomor 3, 2024
Journal Homepage: http://ejurnal.ung.ac.id/index.php/jsscr , E-ISSN: 2656-9612 P-ISSN:2656-8187 DOI : https://doi.org/10.37311/jsscr.v6i1.23386

## Analisis Natrium Benzoat dan Rhodamin B Pada Saos Tomat Pasaran yang Beredar di Kota Gorontalo
Ishak Isa 1* , Muhammad Taupik 2 , Lilis Lebie 3 , Fahrul Ilham 4
1 Jurusan Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pendidikan Alam, Universitas Negeri Gorontalo, Bone Bolango, Gorontalo, Indonesia
2,3 Jurusan Farmasi, Fakultas Olahraga dan Kesehatan, Universitas Negeri Gorontalo, Jl. Jenderal Sudirman No. 06 Kota Gorontalo 96128, Indonesia
4 Jurusan Peternakan Fakultas Pertanian Universitas Negeri Gorontalo, Bone Bolango, Gorontalo, Indonesia
* Penulis Korespondensi. Email: isi@ung.ac.id

## ABSTRAK
Natrium benzoat merupakan garam natrium dari asam benzoat yang sering digunakan pada saos  tomat.  Didalam  bahan  pangan  natrium  benzoat  akan  terurai  menjadi  bentuk  aktifnya yaitu asam benzoat pangan natrium benzoat tidak boleh melebihi 0,1% dalam bahan makanan. Rhodamin B merupakan pewarna tekstil dan kertas. Zat ini sangat berbahaya jika terhirup, mengenai  kulit,  mengenai  mata  dan  tertelan.  Tujuan  penelitian  yaitu  untuk  mengetahui jumlah kadar natrium benzoat dan pewarna rhodamin B pada saos tomat yang  beredar dikota gorotalo. Sampel saos tomat yang digunakan diambil secara random diketiga pasar yang ada dikota gorontalo baik  yang tidak memiliki izin edar atau yang tidak memiliki yang jelas dan tidak memiliki ijin BPOM. Metode penetapan kadar Natrium benzoat dan pewarna rhodamin B  dilakukan  dengan  metode  spektrofotometri  UV-Vis.  Hasil  yang  didapatkan  yaitu  kadar senyawa pengawet natrium benzoat pada ketiga sampel yaitu sampel A sebesar 0,9363 gr/kg sampel  B  sebesar  1,5469  gr/kg  sampel  C  sebesar  1,8725  gr/kg.  Kadar  senyawa  pewarna Rhodamin B pada ketiga sampel yaitu sampel A sebesar 0,7515 sampel B sebesar 1,5015 sampel C sebesar 2,5833. Dari hasil perhitungan kadar ini bisa dilihat bahwa semua sampel sudah melebihi ambang batas penggunaan natrium benzoat  dan Rhodamin B.

## Kata Kunci:
Natrium Benzoat; Rhodamin B; Saos Tomat; Spektrofotometri UV-Vis
Diterima: 09-10-2023 Disetujui: 21-12-2023 Online: 15-01-2024

## ABSTRACT
Sodium benzoate is the sodium salt of benzoic acid which is often used in food ingridiends, for example in tomato sauce. In foodstuffs, sodium benzoate will break down into its active from or benzoate acid. However, the use of sodium benzoate should not exceed 0,1% in food ingedients. Meanwhile, Rhodamin B is a textle and pape day where this substance is very harmful if inhald, in contact with skin. In eyes and  swallowed.  The  research  aimed  to  determine  the  amount  of  sodium  benzoat  and  rhodamin  B  in tomato sauce circulating in Gorontalo City. The samples of tomato sauce were obtained randomly from three markets in Gorontalo City regardless of its conditions whether those who did not have circulation permit or did not have obvious composition and BPOM permit. The method for determinating sodium benzoate and rhodamine B levels was carried out using UV-Vis spectrophotometry. The results obtained were sodium benzoate preservative levels in the three samples were 0,9363 g/kg in sample A, 1,5469 g/kg in sample B, and 1,8725 g/kg in sample C. Meanwhile, the rhodamine B levels in the three samples were 0,7515 in sample A, 1,5015 in sample B, and 1,5833 in sample C. Based on the results of this

## 1.  Pendahuluan
Produk olahan memerlukan bahan tambahan makanan berupa pengawet dan pewarna untuk memperpanjang masa penyimpanan salah satunya adalah tomat yang diolah dalam bentuk saus. Saus tomat merupakan salah satu produk olahan yang bahan dasarnya adalah tomat dan memiliki sumber vitamin A dan C yang cukup tinggi [1]. Saus  tomat  adalah  cairan  kental  atau  pasta  yang  terbuat  dari  bubur  buah  berwarna menarik (biasanya merah), mempunyai aroma dan rasa yang merangsang. Saus tomat dibuat dari campuran bubur buah tomat dan bumbu-bumbu. Pasta ini berwarna merah sesuai warna tomat yang digunakan [2]. Banyaknya produk saus tomat dengan merek yang berbeda dipasaran, membuat produsen bersaing meningkatkan daya tahan saus dengan menambahkan zat aditif (bahan tambahan). Bahan tambahan/pengawet yang boleh dicampurkan pada makanan adalah bahan tambahan yang telah mendapat izin beredar dari departemen kesehatan [3].
Keamanan pangan merupakan syarat penting yang harus ada pada pangan yang akan  dikonsumsi  oleh  manusia.  Pangan  yang  bermutu  dan  aman  dikonsumsi  bisa berasal dari dapur rumah tangga maupun dari industri pangan. Banyak bahan-bahan yang ditambahkan ke dalam makanan dan minuman, sebagai contoh rodhamin B yang banyak  digunakan  untuk  pewarna  dan  natrium  benzoat  digunakan  untuk  bahan pengawet terhadap makanan dan minuman [4].
Natrium  benzoat  merupakan  garam  natrium  dari  asam  benzoat  yang  sering digunakan pada bahan makanan. Di dalam bahan pangan, natrium akan terurai menjadi bentuk  aktifnya  yaitu  asam  benzoat  [5].  Pemakaian  natrium  benzoat  realtif menguntungkan  karena  dapat  mempertahankan  mutu  bahan  pangan  dengan memberikan  daya  tahan  kualitas  saus  lebih  lama  akan  tetapi,  penggunaan  bahan pengawet natrium benzoat pada saus tomat tidak selalu aman terutama jika digunakan dalam jumlah berlebihan [6].
Batas  natrium  benzoat  yang  di  izinkan  dalam  makanan  di  Indonesia,
berdasarkan Permenkes RI No. 722/Menkes/Per/IX/1988 dan
No.1168/Menkes/Per/X/1999  batas  maksimal  penggunaan  natrium  benzoat  adalah 0,1%  atau  1  gram  asam  benzoat  setiap  1  kg  bahan  makanan  [7].  Penetapan  natrium benzoat  dilakukan  dengan  cara  titrasi  ( titrimetri) atau  juga  dilakenal  sebagai  analisis volumetri,  dimana  zat  yang  akan  dianalisis  dibiarkan  bereaksi  dengan  zat  lain  yang konsentrasinya diketahui dan dialirkan dari buret dalam bentuk larutan, misalnya pada sampel  yang  terlebih  dahulu  sudah  diekstrak  dengan  bahan-bahan  kimia  yang setelahnya dititrasi dengan NaOH yang sesudah dibakukan dengan asam okslat.
Titrasi  adalah  pengukuran  volume  suatu  larutan  dari  suatu  reaktan  yang dibutuhkan untuk bereaksi sempuna dengan sejumlah reaktan lainnya, seringkali juga titrasi digunakan untuk mengukur volume yang larutan yang ditambahkan pada suatu larutan yang telah diketahui volumenya. Biasanya konsentrasi dari salah satu larutan, dikenal sebagai larutan standar, telah diketahui dengan tepat [4].
concentration calculation, it is observable that all samples have exceeded the threshold for using sodium benzoate and rhodamine B.
Copyright © 2024 Jsscr. All rights reserved.
Keywords:
Sodium Benzoate; Rhodamine B; Tomato Sauce; UV- Vis Spectrophotometry
Received: 2023 -10-09 Accepted: 2023 -12-21 Online: 2024 -01-15
Rhodamin B adalah pewarna sintesis yang digunakan pada industri tekstil dan kertas. Rhodamin B berbentuk serbuk kristal merah keunguan dan dalam larutan akan berwarna  merah  terang  berpender.  Zat  ini  sangat  berbahaya  jika  terhirup,  mengenai kulit,  mengenai  mata  dan  tertelan.  Dampak  yang  terjadi  dapat  berupa  iritasi  pada saluran pernapasan, iritasi kulit, iritasi pada mata, iritasi pada saluran pencernaan dan air  seni  akan  berwarna  merah  atau  merah  muda  [8].  Rhodamin  B  dapat  bersifat karsinogenik dan memacu pertumbuhan sel kanker jika digunakan terus menerus[9]. Sifat karsinogenik tersebut disebabkan oleh unsur N+ (nitronium) dan Cl- (klorin) yang terkandung  pada  Rhodamin  B  yang  bersifat  sangat  reaktif  dan  berbahaya[9]. Penumpukan rhodamin B pada hati akan menyebabkan gangguan fungsi hati berupa kanker hati dan tumor hati [10].
2.  Metode

## Prosedur Kerja Natrium Benzoat
Proses penyiapan sampel
Saos  tomat  ditimbang  sebanyak  50  gr  lalu  dimasukan  kedalam  erlemeyer, kemudian dibuat reagen buffer, timbang natrium sitrat 40 gr dan asam sitrat 26 gr.

## Ekstrak sampel
Sampel saos tomat dimasukan kedalam erlemeyer ditambahkan larutan buffer 25  ml  lalu  dikocok.  Sampel  lalu  dimasukan  kedalam  corong  pisah,  pipet  25  ml kloroform,  dilakukan  sebanyak  3  kali  hingga  terkumpul  sebanyak  75  ml  kloroform, masukan 25 ml kedalam corong pisah sampel dikocok dan dikeluarkan uapnya hingga terpisah  dengan  kloroform  dan  sampel.  Lapisan  kloroform  ditampung  dan  pada erlemeyer ditutup dari  setiap ekstrak, lakukan sebayak 3 kali hingga terkumpul  dari sampel sebanyak 75 ml.

## Uji Natrium Benzoat Secara Kualitatif
Filtrak yang diperoleh dipipet sebanyak 5 ml dimasukan pada tabung reaksi lalu tambahkan  3  ml  NH 3 sampel  dikocok-kocok  sampai  larutan  menjadi  basa  kemudian diuapkan diatas penangas air sampai menghasilkan residu dan residu yang dihasilkan dilarutkan dengan penangas air lalu dinginkan dan ditambahkan 3-4 tetes FeCl 3 tunggu beberapa menit hingga terjadi endapan berwarna coklat menunjukan adanya natrium benzoat.

## Uji Natrium Benzoat Secara Kuantitatif ( Metode Titrimetri)
Filtrat hasil ekstrak dipipet sebanyak 10 ml dimasukan kedalam erlemeyer lalu masukan 5 ml buffer kedalam larutan sari kloroform kemudian uapkan diatas waterbath 80 o C sampai mengering dan diangkat biarkan sisa kloroform menguap, angkat residu dan larukan kedalam 5 ml alkohol lalu tambahkan 3-5 pp (fenoftalein) titrasi dengan larutan  NaOH  0,05  N,  ulangi  sampai  3  kali  volume  larutan    NaOH  yang  digunakan dicatat  adanya  perubahan  dari  tidak  berwarna  menjadi  berwarna  merah  muda menunjukan adanya natrium benzoat.
Analisis Data
Keterangan :
V NaOH = Volume NaOH N NaOH = Normalitas
BE. Na. Benzoat
= 122,12 gr/mol mg = berat sampel, contoh saus tomat Kadar Natrium Benzoat  = Vol naOH x N.NaOH x BE. Na.Benzoat mg x 100 :  [11]

## Prosedur Kerja Uji Rodhamin B

## Pembuatan larutan HCl 4N
Dipipet  33  mL  HCl  37%  dimasukan  ke  dalam  labu  ukur  100  mL  lemudian ditambahkan aquadest sampai tanda batas.
Pembuatan NaOH 10%
Ditimbang 5 gr NaOH dimasukan dalam labu ukur 50 mL lalu ditambah sedikit aquadest dihomogoenkan, kemudian dicukupkan aquadest sampai tanda batas. Pembuatan NH 4 OH 10% Ditimbang 5 gr NH 4 OH dimasukan dalam labu ukur 50 mL lalu ditambahkan sedikit aqadest dan dihomogenkan kemudian dicukupkan aquadest sampai tanda batas. Uji Rodhamin B Secara Kualitatif Preparasi Sampel
Ditimbang 10 gr sampel ditambahkan 10 gr amonium hidroksida (NH 4 OH) 2% (yang  telah  dilarutkan  dalam  etanol  70%)  dikocok  lalu  didiamkan  selama  30  menit. Disaring larutan menggunakan kertas saring hasil filtrat dituaangkan ke dalam cawan kemudian  dipanaaskan  diatas  kot  plat.  Dimasukan  residu  ke  dalam  10  mL  ait  yang mengandung  asam.  Larutan  asam  dibuat  dengan  mencampurkan  10  mL  air ditambahkan 5 mL asam asetat 10%. Dimasukan benang wol kedalam larutan asam dan didihkan  selama  10  menit,  kemudian  dibilas  dengan  aquadest  kemudian  dimasukan kedalam  larutan  basa  yaitu  10  mL  amoniak  2%  dan  didihkan.  Benang  wol  akan melepaskan pewarna, pewarna akan masuk ke dalam larutan basa tersebut, larutan basa tersebut yang akan digunakan sebagai sampel.

## Uji Reaksi Warna
Dimasukan sampel sebanyak 1 mL ke dalam 4 buah tabung reaksi. Dimasukan baku  pembanding  rhodamin  B  ke  dalam  tabung  reaksi  yang  berbeda  sebagai  baku pembanding. Ditambahkan baku pembanding HCl pekat, H 2 SO 4 pekat, NaOH 10% dan NH 4 OH 10% ke dalam masing-masing tabung, amati perubahan warna yang terjadi dan disesuaikan dengan warna baku pembandingnya yaitu rhodamin B diulangi sebanyak 3 kali [4]
Uji Kuantitatif

## Pembuatan Larutan Baku
Ditimbang 50 mg rhomadin B dan dilarutan dengan methanol dalam labu ukur 50 mL samapi tanda batas ( LB1). Diperoleh larutan baku 1000 ppm. Dari larutan ini dipipet  2,5  mL  dimasukan  ke  dalam  gelas ukur  50  mL  diencerkan  dengan  methanol sampai  batas  tanda  kemudian  dihomogenkan  (LB2).  Diperoleh  larutan  baku  dengan konsentrasi 50 ppm.

## Penentuan Panjang Gelombang Maksimum Larutan Rhodamin B
Dipipet 2 mL dari (LB2) dan dimasukan ke dalam labu ukur 50 mL, kemudian dicukupkan dengan methanol sampai 50 mL (konsentrasi 2 ppm). Diukur serapan pada panjang  gelombang  400-800  nm  dengan  menggunakan  blanko,  sebagai  blangko digunakan methanol.

## Penentuan Waktu Kerja Larutan Rhodamin B
Dipipet 2 mL larutan kerja rhodamin B 50 ppm dan dimasukan kedalam labu ukur  50  mL  (konsentrasi  2  ppm)  lalu  ditambahkan  metanol  sampai  tanda  garis kemudian dihomogenkan. Diukur pada panjang gelombang maksimum yang diperoleh selama 30 menit.

## Penentuan Linearitas Kurva Kalibrasi
Dari larutan baku 2 pipet sebanayk 2 mL, 4 mL, 6 mL, 8 mL dan 10 mL  dengan menggunakan  pipet  volum.  Kemudian  dimasukan  ke  dalam  labu  ukur  50  mL  dan masing-masing  diencerkan  dengan  metanol  sampai  garis  tanda  (konsentrasi  masing- masing  2,4,6,8  dan  10)  mL.  Kemudian  diukur  serapan  pada  panjang  gelombang maksimum  yang  diperoleh  dan  sebagai  blangko  digunakan  metanol  akan  diperoleh kurva kalibrasi dan absorbansi.

## Preparasi Sampel
Sejumlah  lebih  kurang  5  gr  cuplikan  saus  dimasukan  ke  dalam  labu  ukur. Kemudian  ditambahkan  16  tetes  HCl  4  N  ditambahkan  30  mL  metanol  kemudian dihomogenkan.  Lalu  disaring  dengan  membuang  2-5  mL  filtrat  pertama  dilakukan berulang sampai larutan sampel jernih. Filtrat dimasukan ke dalam labu ukur  50 mL kemudian dicukupkan dengan metanol sampai tanda batas dan dihomogenkan. Dipipet 2 m L filtrat kemudian dimasukan dalam labu ukur 25 mL dicukupkan dengan metanol sampai  tanda  dan  dihomogenkan.  Diukur  serapan  pada  panjang  gelombang maksimum.

## Analisis data
Adapun dihitung kadar rhodamin B pada sampel dengan menggunakan kurva kalibrasi dengan persamaan regresi y=bx+a . Rumus perhitungan kadar[12]
Keterangan : K : Kadar Rhodamin B dalam sampel (mcg/g) X : kadar Rhodamin B sesudah pengenceran V : Volume sampel (mL) Fp : Faktor pengenceran Bs : Berat sampel Analisis Data
Data hasil pengukuran kerva standar didapatkan pada persamaan garis regresi yaitu  Y  =  bx  +  a,  dan  kadr  rhodamin  B  dalam  sampel  didapatkan  dari  perhitungan persamaan garis regresi tersebut. [13] Keterangan :
Y : Variable dependen/serapan a : konstanta/intersep b : koefisien regresi/kemiringan x : variable independen/konsentrasi
Untuk  mengetahui  apakah  persamaan  tersebut  dapat  dipakai  sebagai perhitungan penetapan sebagai konsentrasi larutan maka selanjutnya ditentukan harga koefisien koordinasi (r) dengan rumus : [16]
r 2 = 𝑛∑𝑥𝑦−(∑𝑥)(∑𝑦) √(𝑛∑𝑥 2 )−(∑𝑥) 2 ×(𝑛∑𝑦 2 )−(∑𝑦) 2

## 3.  Hasil dan Pembahasan
Pada proses analisis kualitatif natrium benzoat menggunakan sampel sebanyak 20 gram dan ditambahkan NaCl jenuh.NaCl jenuh yaitu untuk memecah emulsi saos tomat, karena dengan adanya ditambahkan elektrolit dapat mengakibatkan terjadinya pemecah  emulsi[17].  NaOH  10%  ditambahkan  kedalam  sampel  hingga  alkalis  yang ditunjukan dengan perubahan kertas lakmus merah menjadi biru. Penambahan NaOh 10% bertujuan untuk mengalkalis larutan sampel agar seluruh senyawa benzoat yang
K =  X x V x Fp

## BS
terdapat dalam sampel sebagai garam yang larut dalam air[18]. Dilakukan pengadukan yang bertujuan untuk membuat larutan menjadi homogen dan didiamkan selaam 2 jam dengan  tujuan  partikel-partikel  terdispersi  yang  tidak  larut  dalam  air  seperti  lemak dapat  mengendap  dalam  bentuk  garam  asam  lemak.  Kemudian  sampel  disaring menggunakan kertas saring tujuannya agar partikel-partikel yang tidak larut dalam air dan  sapat  dipisahkan  dari  larutan.  Filtrat  yang  diperoleh  ditambahkan  dengan  HCl hingga  larutan  bersifat  asam  yang  ditandai  dengan  perubahan  kertas  lakmus  biru menjadi merah.
Tabel 1. Hasil uji kualitatif sampel saos tomat beredar di kota Gorontalo
Pada  proses  analisis  kualitatif  Rhodamin  B  menggunakan  3  sampel,  masing- masing  sampel  ditimbang  10  gram  ditambahkan  10  gram  amonium  hidroksida (NH 4 OH) 2% (yang telah dilarutkan dalam etanol 70%) dikocok lalu didiamkan selama 30  menit.  Kemudian  disaring  larutan  menggunakan  kertas  saring  dan  hasil  filtrat dituangkan  ke  dalam  cawan  setelah  itu  dipanaskan  diatas  hot  plat.  Larutan  asam dicampurkan kedalam 10ml air ditambahkan 5 ml asam asetat 10%. Dimasukan benang wol ke dalam larutan asam dan didihkan selama 10 menit, kemudian dibilas dengan aquades dan dimasukan kedalam larutan basa yaitu 10 ml amoniak 2% dan didihkan. Benang  wol  akan  melepaskan  warna,  pewarna  akan  masuk  ke  dalam  larutan  basa tersebut. Berdasarkan hasil uji kualitatif yang didapatkan menunjukan bahwa sampel saos  tomat  beredar  di  kota  Gorontalo  yang  tidak  memiliki  izin  edar  tersebut mengandung  bahan  pengawet  Natrium  Benzoat  dan  pewarna  Rhodamin  B.  Hasil tersebut bisa dilihat pada tabel 1.
Berdasarkan hasil uji kadar natrium benzoat yang dilakukan menunjukan bahwa pada kadar ketiga sampel pada saus tomat yang beredar di pasar kota Gorontalo (tabel 2). Sampel A (0,9393 gr/kg) belum melebihi ditetapkan oleh peraturan BPOM RI No. 36 tahun  2013,  sedangkan  sampel  B  (1,5469  gr/kg)  dan  sampel  C  (1,8725  gr/kg)  telah melebihi  batas  penggunaan  natrium  benzoat  yang  telah  ditetapkan  oleh  peraturan BPOM RI No. 36 tahun 2013.
Tabel 2. Hasil uji kuantitatif natrium benzoat sampel saos tomat
Kode Sampel Keterangan Natrium Benzoat      Reaksi Warna          Rhodamin B             Reaksi Warna A + Endapan merah kecoklatan + Jingga B + Endapan merah kecoklatan + Kuning C + Endapan merah coklatan + Biru Sampel Kadar Rata-Rata (g/kg) Kadar Rata-Rata Penggunaan Maksimum (g/kg) A 0,9363 1 g/kg B 1,5469 1 g/kg C 1,8725 1 g/kg
Pada pemeriksaan kadar natrium benzoat diawali dengan menggunakan sampel sebanyak 20 gr dan ditambahkan NaCl jenuh. NaCl jenuh yaitu untuk memecah emulsi saus  tomat,  karena  dengan  adanya    ditambahkan  elektrolit  dapat  mengakibatkan terjadinya pemecahan emulsi. Selain itu elektrolit pada lapisan berair akan mengurangi kelarutan komponen dalam air[20]. NaOH 10% ditambahkan ke dalam sampel hingga alkalis yang ditunjukan dengan perubahan kertas lakmus menjadi biru. Penambahan NaOH  10%  bertujuan  untuk  mengalkaliskan  larutan  sampel,  agar  seluruh  senyawa benzoat yang terdapat dalam sampel terdapat sebagai garamnya yang larut dalam air.
Selanjutnya  dilakukan  pengadukan  yang  bertujuan  untuk  membuat  larutan menadi  homogen.  Didiamkan  sampel  selama  2  jam  dengan  tujuan  partikel-partikel terdispersi  yang  tidak  larut  dalam  air  seprti  lemak  dapat  mengendap  dalam  bentuk garam asam lemak. Kemudian sampel di saring menggunakan kertas saring tujuannya aagar partikel-partikel yang tidak larut dalam air dapat dipisahkan dari larutan. Benzoat akan berada dalam larutan air pada filtrat dalam bentuk garamnya[21].
Filtrat  yang  diperoleh  ditambahkan  HCl  hingga  larutan  bersifat  asam  yang ditandai  dengan  oerubahan  kertas  lakmus  biru  menjadi  merah.  Penambahasan  HCl bertujuan untuk membuat senyawa menjadi asam yang tidak larut dalam air tapi larut dalam  pelarut  organik  (kloroform)  sehingga  mempermudah  proses  ekstrakasi  atau proses  pearikan  senyawa[22].  Larutan  asam  kemudian  dekstraksi  menggunakan metode  ekstraksi  cair-cair  yang  menggunakan  corong  pisah  dan  pelarut  kloroform sebanyak 3 kali. Tujuan dilakukannya ekstraksi adalah untuk pemisahan suatu senyawa yang didasarkan pada 2 pelarut berbeda sesuai dengan tingkat kepolarannya dengan perbandingan konsentrasi sehingga terdapat dua lapisan yang terpisah [23].
Hasil ekstraksi tersebut terdapat 2 lapiran, yaitu lapisan atas adalah fase sampel atau  saus  tomat  sedangkan  lapisan  bawah  adalah  fase  pelarut  yaitu  kloroform. Selanjutnya lapisan klorofrom ditampung untuk masing-masing sampel dan diuapkan dengan penangas air. Residu yang didapatkan ditambahkan air dan diuapkan sekali lagi selama  10  menit.  Kemudian  larutan  yang  ditambahkan  beberapa  tetes  pereaksi  F e Cl 3 15% ke dalam amsing-masing sampel. Hasil analisis secara kualitatif yang didapatkan, menunjukan  selurut  sampel  positif  mengandung  senyawa  natrium  benzoat  yang ditandai  dengan  terbentuknya  endapan  berwarna  merah  kecoklatan.  Hal  ini  terjadi karena adanya reaksi ikatan antara 3 buah ion benzoat dari natrrium benzoat dari ion ferri (Fe 3= ) dari feririklorida yang membentuk senyawa khelat ferribenzoat dan natrium klorida [24].
Analisis  yang  dilakukan  untuk  menentukan  kadar  senyawa  benzoat  dalam sampel dapat dilakukan menggunakan metode titrimetri atau dengan cara titrasi pada larutan  sampel.  Sebelum  dititrasi  sampel  diberi  perlakuan  sehingga  mendapatkan senyawa  natrium  benzoat.  Filtrat  hasil  ekstrak  dipipet  sebanyak  10  ml  dimasukan kedalam  erlemeyer  lalu  masukan  5  ml  buffer  kedalam  larutan  dari  kloroform  lalu uapkan diatas waterbath  80 o C sampai mengering diangkat dan dibiarkan sisa kloroform menguap. Angkat residu dan dilarutkan dalam 5 ml alkohol lalu ditambahkan   3-4 ml PP (fenoftalen) tirrasi dengan larutan NaOH 0,05 N, ulangi sampai 3 kali volume larutan NaOH  yang  digunakan  dicatat,  adanya  perubahan  dari  tidak  berwarna  menjadi berwarna merah muda menunjukan adanya natrium benzoat.
Dari hasil pengujian secara kuantitatif, maka diperoleh kadar senyawa natrium benzoat pada saos tomat secara berurutan yaitu. A (0,9363 g/kg) B (1, 5469 g/kg) dan sampel C (1,725 g/kg) berdasarkan hasil yang didapatkan menunjukan bahwa ketiga sampel A belum melebihi ambang batas penggunaan natrium benzoat dalam makanan tetapi 2 sampel yakni sampel B dan C telah melebihi ambang batas penggunaan natrium
benzoat.  Menurut  peraturan  kepala  badan  pengawasan  obat  dan  makanan  Republik indonesia  Nomor  36  tahun  2013  dalam  saus  tomat  yakni  1  g/kg  bahan.  Dengan demikian  dari  ketiga  sampel  yang  diteliti  1  sampel  belum  melebihi  ambang  batas penggunaan  natrium  benzoat  dalam  makanan  tetapi  2  sampel  yang  telah  melebihi ambang batas dan tidak layak dikonsumsi.
Pembuatan baku pembanding rhodamin B dengan menimbang 25 mg rhodamin B  kemudian  masukan  ke  dalam  erlenmeyer,  tambahkan  25  mL  etanol  96%  dikocok hingga homogen lalu ditutup dengan aluminium foil. Hal ini bertujuan untuk membuat baku  rujukan  dalam  menganalisis  rhodamin  dalam  sampel.  Dimasukan  sampel sebanyak  1  mL  ke  dalam  4  buah  tabung  reaksi.  Memasukan  baku  pembanding rhodamin  B  ke  dalam  tabung  reaksi  yang  berbeda  sebagai  baku  pembanding. Menambahkan baku pembanding HCl pekat, H 2 SO 4 pekat, NaOH 10% dan NH 4 OH 10% ke  dalam  masing-masing  tabung,  mengamati  perubahan  warna  yang  terjadi  dan disesuaikan dengan warna baku pembandingnya yaitu rhodamin B, maka warna akan berubah menjadi jingga (HCL pekat), kuning (H 2 SO 4 pekat), biru (NaOH 10%) dan biru (NH 4 OH 10%) [24].
Gambar 1. Reaksi yang menghasilakan fluoresensi dari rodamin B
Hasil analisis secara kualitiatif yang didapatkan menunjukan seluruh saampel positif rhodamin B yang ditandai dengan tidak lunturnya warna pada benaang wol yakni tetap berwarna yang sesuai dengan warna baku pembanding rhodamin [24]. Hal ini terjadi karena bentuk rhodamin B basa adalah tidak berwarna dan tidak memiliki fluoresensi yang  terdeteksi.  Namun  dengan  adanya  asam  dan  dalam  kondisi  asam bentuk  yang tidak berwarna ini mengalami transformasi menjadi pewarna rhodamin berwarna yang stabil dan sangat berfluoresensi. Pada gambar merupakan reaksi yang menghasilakan fluoresensi dari rodamin B.
Tabel 3. Pengukuran Baku standar Rodamin B menggunakan Spektrofometri UV-Vis Rodamin B (ppm) Nilai Absorbansi 0,2 0,071 0,4 0,111 0,6 0,154 0,8 0,199 1 0,243
Penetapan kadar Rhodamin B dalam saus tomat didauhului dengan menentukan persamaan kurva linear dari standar rodamin (tabel 3). Berdasarkan hasil pengukuran menggunakan  spektrofotometri  UV-Vis  diperoleh  persamaan  y  =  0,216x  +  0,026. Penentuan konsetrasi yang terdapat dalam sampel saos tomat dapat dilihat dari jumlah konsentrasi rata-rata sampel yang merupakan jumlah konsentrasi senyawa Rhodamin B yang  terkandung  dalam  10  gram  bahan  saus  tomat  yang  diperoleh  berdasarkan pembacaan  absorbansi  dari  100  ml.  Hasil  ekstrak  terakhir  dalam  rangkain  prosedur analisis kuantitatif.
Tabel 4. Hasil uji kuantitatif Rodamin B sampel saos tomat Sampel Rata-Rata Absorbansi Kadar Rata-Rata Mg/L A 0,088 0,288 B 0,094 0,313 C 0,097 9,329
Berdasarkan hasil pengujian secara kuantitatif, maka diperoleh kadar Rhodamin B pada saos tomat secara berurutan A (0, 288 ppm) B (0,313 ppm) dan C (0,329 ppm). Hasil  ini  bisa  dilihat  pada  tabel  4.  Berdasarkan  hasil  yang  didapatkan  menunjukan bahwa  ketiga  sampel  saos  tomat  telah  mengandung  bahan  pewarna  Rhodamin  B. Dengan  demikian  ketiga  sampel  yang  telah  diteliti  tersebut  tidak  aman  untuk dikonsumsi.  Hal  ini  sesui  dengan  pendapat  yulianti  (2008),  menyatakan  bahwa pemerintah  indonesia  melalui  peraturan  mentri  kesehatan  (permenkes) No.239/Menkes/per/v/85 menetapkan Rhodamin B termasuk salah satu zat berbahaya dan dilarang diganakan pada produk pangan. Zat tersebut dapat menyebapkan iritasi pada kulit dan saluran pernapasan serta bersifat karsinogenik yang dapat menyebabkan kangker. Rhodamin B dalam konsentrasi tinggi dapat menyebabkan kerusakan hati.

## 4.  Kesimpulan
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  telah  dilakukan,  maka  dapat  ditarik kesimpulan  bahwa,  saus  tomat  yang  beredar  di  wilayah  kota  Gorontalo  dan  tidak memiliki  izin  edar  yang  telah  di  analisis  baik  secara  kualitatif  maupun  secara kuantitatif positif mengandung pengawet natrium benzoat dan pewarna rhodamin B. Kadar pengawet natrium benzoat yang terkandung pada 3 sampel saus tomat yang beredar di wilayah kota Gorontalo diperoleh kadar untuk sampel A,B dan C secara berurutan  sebesar  0,9363  g/kg,  1,5469  g/kg,  dan  1,8725  g/kg,  sehingga  dapat disimpulan dari ketiga sampel di teliti maka sampel A belum melebihi ambang batas tetapi 2 sampel B dan C telah melebihi syarat sesuai peraturan Badan Pengawasan Obat dan Makanan RI No. 36 tahun 2013 yaitu tidak melebih batas penggunaanya yaitu 1 g/kg. Kadar rodhamin B yang terkandung dalam saus tomat yang beredar di wilayah kota Gorontalo diperoleh kadar untuk sampel A,B dan C secara berututan sebesar 0,288 mg/L, 0,313 mg/L, 0,329 mg/L. Nilai kadar ini menunjukan berapa kadar rhodamin B dalam sampel.

## Referensi
[1] Sella ,  2013 Analisis  Pengwaet  Natrium  Benzoat  Dan  Pewaran  Rhodamin  Pada Saus Tomat J dari Pasar Tradisional L Kota Blitar .http ://Jurnal Ilmiah Mahasiwa Universitas Surabaya Vol 2. No 2. Diakses pada tanggal 5 Januari 2014.
[2] Cecep, S. D. (2015). Keamanan Pangan Untuk Kesehatan Manusia . Yogyakarta: Gosyen Publishing.
[3] Eka.  (2013). Rahasia  Mengetahui  Makanan  Berbahaya .  Jakarta:  Titik  Media Publisher.
[4] Gandjar, I. G., & Abdul, R. (2012). Kimia Farmasi Analisis . Yogyakarta: Pustaka Pelajar.
[5] Harmita,2004.  Petunjuk  Pelaksanaan  Validasi  Metode  dan  Cara  Perhitungannya. Majalah
Ilmu Kefarmasian [ serial on internet ]. Vol
1  (3).  [Dikutip  23  maret  2018]. Herliani,  2010.  Dan Sintetis  Pengawet  Makanan Alami Bandung : Alfabeta.
[6] Mussahad,  D.,  &  Hartuti,  N.  (2013). Produk  Olahan  Tomat .  Jakarta:  Penebar Swadaya.
[7] Siaka , 2009, Analisis Bahan Pengawet Benzoat Pada Saus Tomat yangBeredar di Wilayah  KotaDenpasar ,  http://jurnal.pdii.lipi.go.id,diakses  pada  tanggal  8  Maret 2010.
[8] Taher, S, 2009, Analisis Kadar Tembaga (Cu) Pada Ikan Kembung (Restrelliger Brachvsoma)  Dengan  Metode  Spektrofotometri  Serapan  Atom  (SSA). Skripsi, Jurusan  Pendidikan  Kimia.  Fakultas  Matematika  dan  IPA.  Universitas  Negeri Gorontalo.
[9] Wijaya, D. 2011, Waspada Zat adiktif dalam Makanan , Jogjakarta: Penerbit Buku Biru.
[10] Patong  (2013). Analisis  dan  Aspek  Kesehatan  Bahan  Tambahan  Pangan , Edisi Kedua Cetakan I. Bumi Aksara: Jakarta.
[11] Yesi Delayanti Saiya, 2014. “ Analisis Bahan Pengawet Benzoat pada Saus Tomat yang di Jual di Pasar Tradisional Kota Gorontalo ”.(http://eprints.ung.ac.id diakses 29 April 2014).
[12] Yulianti,  N.  2007. Awas Bahaya dibalik  Lezatnya  Makanan. CV.  ANDY Offset, Yogyakarta.
[13] Yulianti,  N.  2008. Racun  di  Sekitar  Kita . Edisi  Pertama.  CV.  ANDY  Offset, Yogyakarta .
[14] Awang Rahmat,  2003 . Kesan Pengawet  Dalam Makanan, http:// www.prn2.usm. My . Diakses Tanggal 1 Maret 2015
[15] Apriyantono,  A.,  Fardiaz  D.,  Puspitasari  N.  L.,  Sedarnawati,  dan  Budiyanto  S., 1989, Petunjuk  Laboratorium  Analisis  Pangan,  Departemen  Pendidikan  dan Kebudayaan  Direktorat  Jendral  Pendidikan  Tinggi  Pusat  Antar  Universitas Pangan dan Gizi Bogor : IPB
[16] Bassett, J., Denney, R.C., Jeffrey, G.H., dan Mendham, J. 1994. Buku Ajar Vogel: Kimia Analisis Kuantitatif Anorganik. Alih Bahasa A. Hadnyana P. Dan L. Setiono. Vogel’s  Textbook  of  Quantitative  Inorganic  Analysis  Including  Elementary Instrumental Analysis, Fourth Edition . 1991. Jakarta: EGC.
[17] Nursanti,2004. Gambaran  Kandungan  Natrium  benzoate  pada  produk  –produk saus  tomat  yang  beredar  di  Kota  Medan  Tahun  2004 ,  Fakultas  Kesehatan Masyarakat. Universitas Sumatera Utara, Medan.
[18] Tranggono,  Z.N.,  Wibowo  D.,  Murdjiati  G.,  dan  Mary  A.,  1990, Kimia  Nutrisi Pangan , Jogjakarta : UGM.
[19] Winarno,  Srikandi  F,  Dedi  F,  1994, Pengantar  Teknologi  Pangan ,  Jakarta:  PT Gramedi
[20] Yulianti,  N.  2007. Awas Bahaya dibalik  Lezatnya  Makanan. CV.  ANDY Offset, Yogyakarta.
[21] Awang Rahmat, 2003 . Kesan Pengawet  Dalam Makanan, http:// www.prn2.usm. My . Diakses Tanggal 1 Maret 2015
[22] Hambali, E., A. Suryani dan M. Ihsanur, 2006. Membuat Saus Cabai dan Tomat . Jakarta : Penebar Swadaya.
[23] Nursanti,2004. Gambaran  Kandungan  Natrium  benzoate  pada  produk  –produk saus  tomat  yang  beredar  di  Kota  Medan  Tahun  2004 ,  Fakultas  Kesehatan Masyarakat. Universitas Sumatera Utara, Medan
[24] Tranggono,  Z.N.,  Wibowo  D.,  Murdjiati  G.,  dan  Mary  A.,  1990, Kimia  Nutrisi Pangan , Jogjakarta : UGM.