## Uji antibakteri kombinasi ekstrak daun Biduri
( Calotropis gigantea L.) dan daun Bandotan ( ageratum conyzoides L . )
Antibacterial Test in Combination of Biduri Leaves (Calotropis gigantea L. ) and Bandotan Leaves (Ageratum conyzoides L. ) Extract.
Munira 1 , Fina Rodisa 2 , Muhammad Nasir 3

## Abstract
Background: Biduri leaves ( Calotropis gigantea (L.) W.T. Aiton and Bandotan leaves ( Ageratum conyzoides L.) are wild growing plants that are believed to be used as an antibacterial.
Objectives: This  research  was  conducted  to  determine  the  effect  of  combination  ethanolic  extract  of  Biduri  and Bandotan leaves against Staphylococcus aureus and Staphylococcus epidermidis . Methods: This research is an experimental by using Completely Randomized Design (CRD) with 4 treatments which is P0 (aquadest), P1 (Biduri leaf  extract), P2 (Bandotan leaf  extract), and P3 (combination of Biduri and Bandotan leaf extract) with 5 replications. Microbiological test used was the diffusion method.
Results: The  results  of  Anova  showed  that combination  of  Biduri  and  Bandotan  leaf  extract very  influential  in  the growth of Staphylococcus aureus dan Staphylococcus epidermidis . Duncan further test results showed that the largest average  inhibition  zone  diameter  in  inhibiting Staphylococcus  aureus was  formed  by P2  which  is  14.14  mm, significantly  different  from P1  (9.46  mm)  and  P3  (11.20  mm),  but  P1  is  not significantly  different  from P3.  Toward Staphylococcus epidermidis, the largest average inhibition zone diameter also formed by P2 which is 17.06 mm that is also significantly different from P1 (10.14 mm) and P3 (12.66 mm), and P1 is not significantly different from P3. Conclusion: The combination of Biduri and Bandotan leaf extract very influential  against Staphylococcus aureus and Staphylococcus epidermidis .
Keywords Combination, Calotropis gigantea L., Ageratum conyzoides L.

## Abstrak
Latar Belakang: Daun Biduri ( Calotropis gigantea (L.) W.T. Aiton dan daun Bandotan ( Ageratum conyzoides L.) merupakan tumbuhan yang tumbuh liar dan diyakini dapat berfungsi sebagai antibakteri.
Tujuan: Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui pengaruh kombinasi ekstrak etanol daun Biduri dan daun Bandotan terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dan Staphylococcus epidermidis . Metode: Penelitian ini bersifat eksperimental dengan menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) yang terdiri dari 4 perlakuan yaitu P0 (aquadest sebagai kontrol), P1 (ekstrak daun Biduri), P2 (ekstrak daun Bandotan), dan P3 (ekstrak kombinasi  daun  Biduri  dan  daun  Bandotan)  dengan  masing-masing  5  kali  ulangan.  Uji  mikrobiologi  menggunakan metode difusi.
Hasil: Uji Anova menunjukkan bahwa kombinasi ekstrak daun Biduri dan daun Bandotan sangat berpengaruh terhadap pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  aureus dan Staphylococcus  epidermidis .  Hasil  uji  lanjut  Duncan  menunjukkan
1 Jurusan Farmasi, Politeknik Kesehatan Kemenkes Aceh, Aceh, Indonesia. E-mail: munira.ac@gmail.com
2 Jurusan Farmasi, Politeknik Kesehatan Kemenkes Aceh, Aceh, Indonesia. E-mail: fina@gmail.com
3 Jurusan Biologi FMIPA Universitas Syiah Kuala, Aceh, Indonesia. E-mail m_nasir@unsyiah.ac.id
Penulis Koresponding: Munira :  Jurusan  Farmasi  Politeknik  Kesehatan  Kemenkes  Aceh.  Jalan  Soekarno-Hatta,  Kecamatan  Lampeunerut,  23352,  Aceh  Besar.  Aceh, Indonesia. E-mail: munira.ac@gmail.com
SAGO: Gizi dan Kesehatan 2020, Vol. 1(2) 165-171
© The Author(s) 2020
DOI: http://dx.doi.org/10.30867/sago.v1i2.410 https://ejournal.poltekkesaceh.ac.id/index.php/ gikes Poltekkes Kemenkes Aceh
bahwa  rata-rata  diameter  zona  hambat  terbesar  dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  aureus dibentuk  oleh  P2  yaitu  14.14  mm  yang  berbeda  nyata  dengan  P1  (9.46  mm)  dan  P3  (11.20  mm),  namun  P1  tidak berbeda  nyata  dengan  P3.  Pada  bakteri Staphylococcus  epidermidis rata-rata  diameter  zona  hambat  terbesar  juga dibentuk oleh P2 yaitu 17.06 mm yang juga berbeda nyata dengan P1 (10.14 mm) dan P3 (12.66 mm), dan P1 tidak berbeda nyata dengan P3.
Kesimpulan: Kombinasi ekstrak daun Biduri dan daun  Bandotan sangat berpengaruh terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dan Staphylococcus epidermidis .
Kata Kunci Kombinasi, Calotropis gigantea L., Ageratum conyzoides L.

## Pendahuluan
erkembangan ilmu pengetahuan dan teknologi  khususnya  di  bidang  kimia  dan farmasi telah mendorong para peneliti untuk menggali  potensi  tumbuhan  obat,  diantaranya dengan  mencari  senyawa  kimia  yang  dapat dimanfaatkan  sebagai  obat  (Ahmad,  2015).  Di antara  senyawa  kimia  yang  terdapat  pada tumbuhan  ada  yang  dapat  dimanfaatkan  sebagai antibakteri (Novita et al., 2017).
Salah satu tumbuhan liar yang diyakini dapat berfungsi  sebagai  antibakteri  adalah  Biduri ( Calotropis gigantea L . ). Beberapa penelitian telah melaporkan  hal  ini.  Salah  satunya  dilaporkan  oleh Kumala  dan  Pratiwi  (2014)  yang  mengatakan bahwa  keseluruhan  metabolit  sekunder  hasil fermentasi kapang endofit ranting tanaman  Biduri mempunyai aktivitas antibakteri spektrum luas dan anti khamir. Penelitian lainnya datang dari Dewi et al  (2018)  yang  menyimpulkan  bahwa  ekstrak etanol daun biduri dapat menghambat pertumbuhan Staphylococcus  aureus dan ekstrak dengan  konsentrasi  berbeda  akan  menyebabkan perbedaan  zona  hambat.  Sementara  Kumar  et  al (2011)  melaporkan  bahwa  biduri  mengandung senyawa  kimia  berupa  alkaloid,  glikosida,  fenolat, tanin, cardenolides, flavonoid, terpen, sterol.
Selain  Biduri,  tanaman  lain  yang  berkhasiat sebagai  antibakteri  adalah  bandotan  ( Ageratum conyzoides L.). Tanaman ini juga tumbuh secara liar dan  mengandung  senyawa-senyawa  metabolit sekunder  seperti  terpena,  sterol,  flavonoid, alkaloid, minyak atsiri, dan tanin sehingga tanaman ini  dipercaya  memiliki  banyak  manfaat  dan  salah satunya adalah sebagai antibakteri (Sugara,  2016). Ahmad  (2015)  melaporkan  bahwa  fraksinasi  dari daun  Bandotan  memiliki  aktivitas  antibakteri terhadap bakteri Salmonella thyposa, Staphylococcus  aureus dan Eschericia  coli . Selanjutnya  Garget et  al  (2015)  juga  melaporkan
bahwa  ekstrak  Bandotan  dalam  petroleum  eter dan aseton memiliki aktivitas antibakteri terhadap
Staphylococcus aureus , Bacillus subtilis , Eschericiacoli dan Pseudomonas  aerogenase . Sementara Sugara et al (2016) mengatakan bahwa ekstrak  etil  asetat  dan  fraksi-fraksi  yang terkandung  di  dalam  daun  Bandotan  memiliki aktivitas  antibakteri  berspektrum  luas  namun cenderung  lebih  sensitif  terhadap  gram  positif. Tanaman Bandotan berkhasiat sebagai pengobatan luka dan gatal-gatal. Penggunaan daun tanaman ini pada luka dipercaya dapat menghentikan pendarahan dan mempercepat proses penyembuhan  dan  mencegah  terjadinya  infeksi yang disebabkan oleh bakteri.
Bakteri  yang  sering  mengakibatkan  infeksi pada  kulit  antara  lain  adalah Staphylococcus aureus dan Staphylococcus epidermidis . Staphylococcus  aureus merupakan  salah  satu bakteri  gram  positif  yang  menyebabkan  infeksi kulit  seperti  jerawat,  abses,  keracunan  makanan, endokarditis  dan  infeksi  paru-paru  (Apriani  et  al 2014).  Sementara Staphylococcus  epidermidis merupakan  salah  satu  bakteri  gram  positif  yang dapat  menimbulkan  penyakit  pembengkakan (abses) seperti infeksi kulit dan jerawat (Qomar et al, 2018).
Sejauh ini sudah banyak dilakukan penelitian menggunakan daun Biduri maupun daun Bandotan secara  tunggal  terhadap  pertumbuhan  bakteri. Namun  belum  ada  informasi  tentang  penelitian yang  membandingkan  kemampuan  daun  biduri dan  daun  bandotan  serta  kombinasinya  terhadap pertumbuhan  bakteri.  Oleh  karena  itu  perlu dilakukan penelitian tentang uji aktivitas antibakteri  kombinasi  ekstrak  etanol  daun  Biduri ( Calotropis  gigantea L.)  dan  daun  Bandotan ( Ageratum    conyzoides L.)  terhadap  bakteri Staphylococcus aureus dan Staphylococcus epidermidis. Penelitian  ini  dilakukan  untuk mengetahui  pengaruh  kombinasi  ekstrak  etanol
P
Uji antibakteri kombinasi ekstrak daun Biduri dan daun Bandotan
daun  biduri  dan  daun  bandotan  terhadap pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  aureus dan Staphylococcus epidermidis.

## Metode
Jenis  Penelitian  ini  bersifat  experimental.  Penelitian dilakukan  pada  Maret  2019.  Proses  maserasi dilakukan  di  Laboratorium  Biologi  Farmasi  Jurusan Farmasi Politeknik Kesehatan Kementerian Kesehatan  Aceh,  proses  penguapan  dilakukan  di Laboratorium Farmakologi FKH Unsyiah Banda Aceh, uji  fitokimia  dilakukan  di  Laboratorium  Kimia  FKIP Kimia  Unsyiah,  dan  Uji  mikrobiologi  dilakukan  di Laboratorium Mikrobiologi Jurusan Farmasi Politeknik Kesehatan Kementerian Kesehatan.
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah blender ,  timbangan  digital,  toples  kaca bertutup,  corong  kaca, vacum  rotary  evaporator, beaker  glass, gelas  ukur,  erlenmeyer,  spatula, hot plate, cawan  petri,  ose  bulat,  tabung  reaksi,  rak tabung, cotton  bud ,  pinset,  lampu  bunsen,  spidol, autoklaf, penggaris dan inkubator .
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah  daun  Biduri  dan  daun  Bandotan  yang diperoleh  dari  Desa  Alue  Peunawa,  Kecamatan Babahrot  Aceh  Barat  Daya,  aquades,  etanol  70%, H 2 SO 4 ,  BaCl 2 ,  NaCl  0,9%,  bakteri Staphylococcus aureus dan Staphylococcus  epidermidis yang diperoleh  di  Laboratorium  Mikrobiologi  FKH Universitas  Syiah Kuala Banda Aceh , media Nutrient Agar (NA), kertas cakram kosong dengan diameter ± 5  mm,  kain  flannel,  kertas  label,  kapas,  dan  kertas buram.
Penyiapan Simplisia
1. Dipetik  masing-masing  daun  Biduri  dan  daun Bandotan  kemudian  dipisahkan  dari  kotoran- kotoran.
2. Ditimbang masing-masing daun Biduri dan daun Bandotan sebanyak 1 kg.
3. Dicuci  bersih  dan  dirajang  lalu  dikeringkan  di bawah  sinar  matahari  dan  ditutup  dengan  kain hitam.
4. Kemudian  diserbukkan  masing-masing  daun Biduri  dan  daun  Bandotan  yang  telah  kering menggunakan blender.
Pembuatan Ekstrak  Daun Biduri dan Daun Bandotan
1. Ditimbang  masing-masing  sebanyak  100  gram serbuk daun biduri dan daun bandotan.
2. Dimaserasi  dengan  menggunakan  1000  mL etanol  70%,  direndam  selama  6  jam  pertama sambil  sesekali  diaduk,  kemudian  didiamkan selama 18 jam.
3. Dipisahkan maserat dengan cara filtrasi.
4. Proses penyarian diulangi dengan menggunakan setengah  kali  jumlah  pelarut  pada  penyarian pertama (500 mL).
5. Dikumpulkan semua maserat kemudian diuapkan  dengan vacum  rotary  evaporator hingga  diperoleh  ekstrak  kental  (Depkes  RI, 2013).
Pembuatan Kombinasi Ekstrak Daun Biduri dan Daun Bandotan
1. Diambil ekstrak daun Biduri dan daun Bandotan yang cair masing-masing sebanyak 500 mL.
2. Dimasukkan  ke  dalam  wadah  dan  dicampurkan sampai homogen.
3. Kemudian  diuapkan  dengan vacum  rotary evaporator hingga diperoleh ekstrak kental.
Skrining Fitokimia
Skrining  fitokimia  yang  dilakukan  terhadap Daun  Biduri  dan  Daun  Bandotan  meliputi pemeriksaan  alkaloid,  saponin,  tanin,  steroid, flavonoid, dan Triterpenoid (Harbone, 1987).
Uji Mikrobiologi
1. Disiapkan  10    cawan  petri  (5  cawan  untuk  uji bakteri Staphylococcus  aureus dan  5  cawan untuk uji bakteri Staphylococcus epidermidis ).
2. Masing-masing  dituangkan  media  NA  sebanyak 20 mL dan didiamkan hingga mengeras.
3. Diinokulasi  suspensi  masing-masing  bakteri Staphylococcus  aureus dan Staphylococcus epidermidis sebanyak  0,1 mL di atas permukaan media,  lalu  diratakan  dengan  menggunakan swap cotton bud .
4. Dibagi cawan petri media menjadi 4 daerah (P0, P1,  P2,  P3).  P 0 diletakkan  cakram  yang  berisi aquadest  (kontrol),  P 1 diletakkan  ekstrak  etanol daun  Biduri,  P 2 diletakkan  ekstrak  etanol  daun Bandotan, P 3 diletakkan ekstrak etanol kombinasi daun Biduri dan daun Bandotan.
5. Semua petri diinkubasi pada suhu 37 ℃ selama 2 x  24  jam  dengan  posisi  petri  dibalik.  Diukur diameter  zona  hambat  dengan  menggunakan penggaris.
Penelitian  ini  menggunakan  Rancangan  Acak Lengkap  (RAL)  yang  dibagi  menjadi  4  perlakuan
Januari – Juni 2020
dengan masing-masing 5 pengulangan. Uji mikrobiologi dilakukan dengan menggunakan metode  difusi  cakram.  Parameter  yang  diamati adalah  diameter  zona  hambat.  Data  yang  telah diperoleh  yaitu  berupa  rata-rata  diameter  zona hambat  akan  dianalisis  dangan  menggunakan  uji Anova dan dilanjutkan dengan uji Duncan.

## Hasil

## Hasil Uji Fitokimia
Berdasarkan  hasil  uji  fitokimia    yang  telah dilakukan,  maka  diperoleh  hasil  bahwa  ekstrak etanol daun Biduri dan daun Bandotan mengandung  senyawa    alkaloid,  saponin,  tanin, flavonoid  dan  steroid,  tetapi  tidak  mengandung Triterpenoid.
Tabel  1. Hasil  uji  fitokimia  ekstrak  etanol  daun Biduri dan daun Bandotan.
Keterangan : (+)     : Mengandung senyawa yang diuji (-)      : Tidak mengandung senyawa yang diuji

## Hasil Uji Antibakteri
Berdasarkan  hasil  uji  mikrobiologi,  ekstrak  etanol daun  Biduri  dan  daun  Bandotan  serta  kombinasi keduanya  dapat  menghambat  pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dan Staphylococcus epidermidis .
Pada  bakteri Staphylococcus  aureus, rata- rata  diameter  zona  hambat  dari  ekstrak  daun Biduri  adalah  9.46  mm,  ekstrak  daun  Bandotan sebesar  14.14  mm,  dan  kombinasi  ekstrak  daun Biduri dan daun Bandotan sebesar 11.20 mm.
Setelah  dilakukan  uji  statistik  menggunakan Anova  maka  diperoleh  hasil  bahwa  kombinasi ekstrak  daun  Biduri  dan  daun  Bandotan  sangat berpengaruh  (P=0.000)  terhadap  pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus (Tabel 2).
Selanjutnya  dilakukan  uji  lanjut  Duncan  dan diperoleh hasil seperti pada Tabel 3.
Tabel  2. Hasil  uji  Anova    rata-rata  diameter  zona hambat kombinasi daun Biduri dan daun Bandotan terhadap  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus aureus .
Tabel 3. Uji lanjut Duncan rata-rata diameter zona hambat  kombinasi  daun  Biduri  dan  daun Bandotan terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus .
Super  scrip huruf  yang  berbeda  menunjukkan  adanya perbedaan yang nyata antar perlakuan (P<0.05).
Tabel  3  menunjukkan  bahwa  rata-rata diameter  zona  hambat  terbesar  adalah  ekstrak daun  Bandotan  yaitu  14.14  mm  yang    berbeda nyata  dengan  ekstrak  daun  Biduri  (9.46  mm)  dan kombinasi  ekstrak  keduanya  (11.20  mm),  namun ekstrak  daun  Biduri  tidak  berbeda  nyata  dengan ekstrak kombinasi keduanya.
Gambar  1 .  Diameter  zona  hambat  kombinasi ekstrak  daun  Biduri  dan  daun  Bandotan  terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus .
Pada  bakteri Staphylococcus  epidermidis, rata-rata  diameter  zona  hambat  yang  dibentuk oleh  ekstrak  daun  biduri  yaitu  sebesar  10.14  mm,
Uji Fitokimia Daun Biduri Daun Bandotan 1. Alkaloid a. Dragendrof + + b. Burchad + + c. Wagner + + 2. Saponin + + 3. Tanin + + 4. Steroid + + 5. Flavonoid + + 6. Triterpenoid - - Perlakuan Rerata (mm) Standar Deviasi p value Aquadest/Kontrol 0.00 0.00 0.000 Daun Biduri 9.46 0.63 Daun Bandotan 14.14 3.29 Kombinasi 11.20 1.18 Perlakuan Rata- Rata Diameter Zona Hambat (mm) ± SD Kategori Zona Hambat Aquadest (kontrol) 0.000 a ± 0.000 Tidak ada Daun Biduri 9.46 b ± .638 Sedang Daun Bandotan 14.14 c ± 3.293 Kuat Kombinasi 11.20 b ± 1.181 Kuat
ekstrak  daun  bandotan  sebesar  17.06  mm  dan kombinasi ekstrak daun biduri dan daun bandotan sebesar  12.66  mm.  Selanjutnya  hasil  uji  statistik menggunakan Anova dapat dilihat  pada table 4.
Tabel  4. Hasil  uji  Anova    rata-rata  diameter  zona hambat kombinasi daun Biduri dan daun Bandotan terhadap  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus epidermidis .
Tabel  hasil  uji  Anova  diatas  menunjukkan bahwa  kombinasi  ekstrak  daun  Biduri  dan  daun Bandotan  sangat berpengaruh (P=0.000)  terhadap pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  epidermidis. Selanjutnya  dilakukan  uji  lanjut  Duncan    dan diperoleh hasil seperti yang tertera pada table 5.
Tabel 5. Uji lanjut Duncan rata-rata diameter zona hambat  kombinasi  daun  Biduri  dan  daun Bandotan terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus epidermidis .
Super  scrip huruf  yang  berbeda  menunjukkan  adanya perbedaan yang nyata antar perlakuan (P<0.05).
Hasil  uji  lanjut  Duncan  pada  Tabel  diatas menunjukkan  bahwa  rata-rata  diameter  zona hambat terbesar terhadap Staphylococcus epidermidis juga  dibentuk  oleh  ekstrak  daun Bandotan  yaitu  17.06  mm  yang  berbeda  nyata dengan  ekstrak  daun  Biduri  (10.14  mm)  dan kombinasi ekstrak keduanya (12.66 mm), namun ekstrak daun  Biduri  tidak berbeda nyata dengan kombinasi ekstrak keduanya
Gambar  2 .  Diameter  zona  hambat  kombinasi ekstrak  daun  Biduri  dan  daun  Bandotan  terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus epidermidis .

## Pembahasan
Dari  hasil  uji  mikrobiologi  dapat  diketahui bahwa  ekstrak  etanol  daun  biduri,  daun bandotan dan kombinasinya dapat menghambat pertumbuhan bakteri
Staphylococcus  aureus dan Staphylococcus epidermidis . Hal  ini dapat  dilihat dari terbentuknya  diameter  zona  hambat  di  sekitar cakram.
Rata-rata diameter zona hambat terhadap pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  aureus yang  dibentuk  oleh  ekstrak  daun  Biduri  yaitu sebesar  9.46  mm,  ekstrak  daun  Bandotan sebesar 14.14 mm, dan kombinasi ekstrak daun Biduri  dan  daun  Bandotan  sebesar  11.20  mm. Sedangkan  rata-rata  diameter  zona  hambat pada  bakteri Staphylococcus  epidermidis yang dibentuk oleh ekstrak daun Biduri yaitu sebesar 10.14  mm,  ekstrak  daun  Bandotan  sebesar 17.06  mm,  dan  kombinasi  antara  ekstrak  daun Biduri dan daun Bandotan sebesar 12.66 mm.
Hasil  uji  Anova  menunjukkan  bahwa kombinasi ekstrak daun Biduri dan daun Bandotan sangat berpengaruh (P=0.000) dalam menghambat pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  aureus dan Staphylococcus  epidermidis .  Hal  ini  dikarenakan daun  Biduri  dan  daun  Bandotan  mengandung senyawa  kimia  yang  memiliki  aktivitas  antibakteri. Dari  hasil  uji  fitokimia  yang  telah  dilakukan menunjukkan  bahwa  daun  Biduri  ( Calotropis gigantea (L.)  W.T  Aiton)  dan  daun  Bandotan ( Ageratum conyzoides L.) sama-sama mengandung senyawa  kimia  berupa  alkaloid,  saponin,  tanin, flavonoid, dan steroid (Tabel 5). Senyawa-senyawa tersebut  diketahui  dapat  berfungsi  sebagai antimikroba  dan  dapat  mencegah  pertumbuhan mikroorganisme  yang  biasa  timbul  pada  luka
Perlakuan Rerata (mm) Standar Deviasi p value Aquadest/Kontrol 0.00 0.00 0.000 Daun Biduri 10.14 0.54 Daun Bandotan 17.06 3.82 Kombinasi 12.66 2.53 Perlakuan Rata- Rata Diameter Zona Hambat (mm) ± SD Kategori Zona Hambat Aquadest (kontrol) 0.000 a ± 0.000 Tidak ada Daun Biduri 10.14 b ± 0.638 Sedang Daun Bandotan 17.06 c ± 3.293 Kuat Kombinasi 12.66 b ± 1.181 Kuat
Januari – Juni 2020
sehingga  luka  tidak  mengalami  infeksi  yang  berat (Hidayati, 2017).
Menurut  Juliantina  et  al  (2009)  mekanisme kerja alkaloid sebagai antibakteri yaitu dengan cara menganggu  komponen  penyusun  peptidoglikan pada sel bakteri sehingga lapisan dinding sel tidak terbentuk secara utuh dan menyebabkan kematian sel  tersebut.  Sudewi  (2016)  juga  melaporkan bahwa  sebagai  antibakteri  flavonoid  bekerja dengan  membentuk  senyawa  kompleks  dengan protein  ekstraseluler  dan  terlarut  sehingga  dapat merusak  membran  sel  bakteri  dan  diikuti  dengan keluarnya  senyawa  intraseluler.  Saponin  akan menurunkan  tegangan  permukaan  sehingga mengakibatkan naiknya permeabilitas atau kebocoran  sel  bakteri  (Ngajow  et  al,  2013). Menurut  Lenny  (2016)  tanin  mempunyai  daya antibakteri dengan cara mengkerutkan dinding sel atau  membran  sel  sehingga  permeabilitas  bakteri terganggu,  yang  dapat  mengakibatkan  sel  bakteri tidak  mampu  melakukan  aktivitas  hidup  sehingga pertumbuhannya terhambat. Sedangkan mekanisme steroid sebagai antibakteri berhubungan dengan membran lipid dan sensitivitas  terhadap  komponen  steroid  yang menyebabkan  kebocoran  pada  liposom  (Rijayanti, 2014).
Uji  lanjut  Duncan  menunjukkan  bahwa rata-rata  diameter  zona  hambat  terbesar terhadap petumbuhan Staphylococcus aureus dan Staphylococcus epidermidis dibentuk oleh  ekstrak daun Bandotan (P2), yang berbeda nyata dengan ekstrak  daun  Biduri  (P1)  dan  kombinasi  ekstrak keduanya  (P3).  Padahal  daun  Biduri  dan  daun Bandotan  mengandung  senyawa  kimia  yang sama  yaitu  alkaloid,  saponin,  tanin,  flavonoid dan  steroid.  Hal  ini  mungkin  disebabkan  oleh kadar  senyawa  kimia  yang  berpotensi  sebagai antibakteri  pada  ekstrak  daun  Bandotan  lebih banyak  dibandingkan  pada  daun  Biduri  dan kombinasi  ekstrak  keduanya,  terutama  kadar flavonoid.  Namun  tidak  dapat  dipastikan  karena dalam penelitian ini tidak dilakukan uji fitokimia secara kuantitatif.
Berdasarkan  klasifikasi  respon  hambatan pertumbuhan  bakteri  menurut  Morales  (2003), diameter  zona  hambat  <5  mm  maka  aktivitas hambatan  dikatagorikan  lemah,  diameter  zona hambat  5-10  mm  maka  dikategorikan  sedang, diameter  zona  hambat  >10-20  mm  maka dikatagorikan  kuat  dan  jika  diameter  zona hambat  20  mm  atau  lebih  maka  aktivitas
penghambatan  dikatagorikan  sangat  kuat.  Hasil penelitian  menunjukkan  bahwa  ekstrak  daun Biduri  menghasilkan  diameter  zona  hambat dalam  kategori sedang, sedangkan ekstrak daun Bandotan dan kombinasi ekstrak daun Biduri dan daun  Bandotan  menghasilkan  diameter  zona hambat kategori kuat terhadap bakteri Staphylococcus  aureus dan Staphylococcus epidermidis .

## Kesimpulan
Kombinasi  ekstrak  daun  Biduri  ( Calotropis gigantea (L.)  W.T  Aiton)  dan  daun  Bandotan ( Ageratum
conyzoides L.) sangat
berpengaruhdalam  menghambat  pertumbuhan bakteri Staphylococcus  aureus dan Staphylococcus epidermidis .  Namun  Rata-rata  diameter  zona hambat  terbesar  dibentuk  oleh  ekstrak  daun Bandotan.
Penulis  berharap  agar  dapat  dilakukan penelitian  lebih  lanjut  tentang  uji  kadar  senyawa kimia dalam daun Bandotan dan daun Biduri. Serta perlu  dilakukan  penelitian  lebih  lanjut  tentang kombinasi ekstrak daun Biduri dan daun Bandotan terhadap spesies bakteri lain

## Deklarasi Konflik Kepentingan
Penulis  telah  menyatakan  bahwa  pada  artikel  ini tidak  ada  maupun  terdapat  potensi  konflik kepentingan  baik  dari  penulis  maupun  instansi sehubungan  dengan  penelitian  yang  telah dilakukan,  baik  berdasarkan  kepengarangan maupun publikasi.

## Ucapan Terima Kasih
Terima  kasih  kami  ucapkan  kepada  Direktur Politeknik Kesehatan Kemenkes Aceh, serta kepada Ketua  Jurusan  Farmasi  Politeknik  Kesehatan Kemenkes  Aceh  yang  telah  memberikan  izin kontribusi  terhadap  pelaksanaan  penelitian  ini. Ucapan  terimakasih  juga  kami  sampaikan  kepada semua  pihak  yang  telah  membantu  penulis  dalam melakukan penelitian.
Uji antibakteri kombinasi ekstrak daun Biduri dan daun Bandotan

## Daftar Rujukan
Ahmad  I.  (2015).  Aktivitas  Antibakteri  Dari  Fraksi Daun  Bandotan  ( Ageratumconyzoides L.) Secara  Kromatografi  Lapis  Tipis  Bioautografi. J. Trop. Pharm. Chem, 3(1), 29-36.
Apriani  D,  Amaliawati  N,  &  Kurniawati  E.  (2014).
Efektivitas  Berbagai  Konsentrasi  Infusa  Daun Salam  ( Eugenia  polyantha Wight)  Terhadap
Daya  Antibakteri Staphylococcus  aureus
Secara In Vitro . Jurnal Teknologi
Laboratorium , 3(1), 1-7.
Depkes  R.I.  (2013). Farmakope  Herbal  Indonesia Edisi 1. Jakarta: Depkes R.I.
Dewi  D.G.D.P.,  Mastra  N,  &  Jirna  I.N.  (2018). Perbedaan  Zona  Hambat  Pertumbuhan
Staphylococcus aureus Pada Berbagai
Konsentrasi Ekstrak Etanol Daun Biduri Secara In Vitro . Meditory , 6(1), 39-45.
Garget    P,  Grewal  A.  (2015). In  Vitro Antibacterial Activity of Ageratum conyzoides L. ( Asteraceae ). Wold  Journal  of  Pharmacy  and Pharmaceutical Sciences , 4(7), 893-897. Harborne  JB.  (1987). Metode  Fitokimia  Tumbuh- Tumbuhan. Terjemahan Kokasih Padmawinata  dan  Iwang  Soediro). Terbitan kedua.  Bandung: Penerbit ITB.
Hidayati  AS,  &  Harjono.  (2017).  Uji  Aktivitas
Antibakteri  Krim  Ekstrak  Daun  Babadotan ( Ageratum  Conyzoides L.)  dalam  Pelarut Etanol. Jurnal MIFA , 40(1), 33-38.
Juliantina FR, Citra DA, Nirwani B, Nurmasitoh T & Bowo  ET. (2009).  Manfaat  Sirih  Merah  ( Piper crocatum )  Sebagai  Agen  Anti  Bacterial Terhadap  Bakteri  Gram  Positif  dan  Gram Negatif. Jurnal  Kedokteran  dan  Kesehatan Indonesia , 1 (1), 12-20.
Kumala S, & Pratiwi A. A. (2014). Efek Antimikroba Dari Kapang Endofit Ranting Tanaman  Biduri. Jurnal Farmasi Indonesia , 7(2), 111-120.
Kumar G, Karthik L, & Rao K.V.B. (2011). A Review on  Pharmacological  and  Phytochemical  Profil of Calotropis gigantea Linn. Pharmacologyonline , 1: 1-8.
Lenny  AA.  (2016).  Daya  Hambat  Ekstrak  Buah Alpukat  ( Persea  americana  mill )  Terhadap Pertumbuhan Staphylococcus  aureus dan
Staphylococcus
epidermidis . Skripsi .
Semarang: Universitas Muhammadiyah.
Ngajow  M,  Abidjulu  J,  &  Kamu  V.S.(  2013).
Pengaruh  Antibakteri  Ekstrak  Kulit  Batang Matoa  ( Pometia  pinnata )  Terhadap  Bakteri Staphylococcus  aureus Secara  In  Vitro. Jurnal MIPA UNSRAT Online . 2(2), 128-132.
Novita,  R.,  Munira,  M.,  &  Hayati,  R.  (2017).
Formulasi  Sediaan  Salep  Ekstrak  Etanol  Pliek U Sebagai Antibakteri. AcTion: Aceh  Nutrition Journal , 2(2), 103 – 108.
Qomar MS, Budiyanto M.A.K., Sukarsono, Wahyuni S,  &  Husamah.  (2018).  Efektivitas  Berbagai Konsentrasi  Ekstrak  Daun  Kayu  Manis ( Cinnamomum burmannii [Ness.] BI) Terhadap Diameter Zona Hambat Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus epidermidis . Jurnal Biota , 4(1),
1-7.
Rijayanti  RP.  (2014).  Uji  Aktivitas  Antibakteri
Ekstrak Etanol Daun Mangga Bacang ( Mangifera foetida L.) Terhadap
Staphylococcus aureus Secara In Vitro. Skripsi . Universitas Tanjungpura.
Sudewi S, Lolo W Astuti. (2016). Kombinasi Ekstrak Buah  Mengkudu  ( Morinda  citrifolia L.)  dan Daun  Sirsak  ( Annona  muricata L.)  Dalam Menghambat  Bakteri Escherichia  coli dan Staphylococcus aureus . Skripsi , 4 (2), 36-42. Sugara  T.H.  (2016).  Uji  Aktivitas  Antibakteri  Fraksi Etil Asetat Daun Tanaman Bandotan ( Ageratum  conyzoides L). Jurnal  Ilmiah  Ibnu Sina , 1(1), 88-96.