## Optimasi Sumber Karbon Dan Nitrogen Sebagai Co-Substrat
Untuk Pertumbuhan Bakteri Probiotik Pseudomonas sp.

## Livvy Doresti*, Willis Ari Setyati, Ita Widowati
Departemen Ilmu Kelautan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Diponegoro Jl.Prof.H.Soedarto S.H, Tembalang,Semarang, Jawa Tengah 50275 Indonesia *Corresponding author, e-mail: ivy_tanahatu@yahoo.co.id
ABSTRAK : Pencemaran limbah organik pada sistem tambak udang merupakan salah satu faktor yang menyebabkan terjadinya penurunan produksi. Limbah organik seperti sisa pakan dan feses terakumulasi  pada  substrat  perairan  sehingga  kualitas  air  menurun  dan  timbul  penyakit. Pseudomonas sp.  merupakan  bakteri  probiotik  yang  dapat  menghasilkan    enzim    pendegradasi protein    dan  amilum,  limbah  organik  yang  banyak  ditemukan  di  sistem  tambak.  Penelitian  ini dilakukan  penentuan  jenis  dan  optimasi  sumber  karbon  dan  nitrogen  untuk  pertumbuhan Pseudomonas sp.  dalam  upaya  mengetahui  komposisi  medium  yang  lebih  baik  untuk  produksi biomassa  bakteri  probiotik.  Eksperimen  yang  dilakukan  berupa  penentuan  sumber  karbon  yang meliputi  glukosa,  fruktosa  dan  molase.  Penentuan  sumber  nitrogen  meliputi  ammonium  nitrat, ammonium  klorida  dan  urea.  Pengamatan  pertumbuhan  dilakukan  dengan  metode spektrofotometri  berdasarkan  perubahan  optical  density  pada  kultur  bakteri.  Pertumbuhan Pseudomonas sp.  memilik  fase  lag  (adaptasi)  pada  jam  ke-0  hingga  jam  ke-6.  Hasil  penelitian penentuan jenis sumber karbon diperoleh glukosa dengan nilai OD laju pertumbuhan tertinggi yaitu 0.118±0.001 dan penentuan jenis sumber nitrogen diperoleh ammonium nitrat dengan nilai OD laju pertumbuhan  0.117±0.000.  Sumber  karbon  glukosa  optimum  pada  konsentrasi  4%  dengan  nilai OD  laju  pertumbuhan  0.106±0.000  dan  sumber  nitrogen  ammonium  nitrat  optimum  pada konsentrasi 0.5% dengan nilai OD laju pertumbuhan 0.112±0.002.
Kata Kunci: Optimasi, Karbon, Nitrogen , Pseudomonas sp, Pertumbuhan
Optimization of Carbon and Nitrogen Sources as Co-Substrate for the Growth of Probiotic Bacteria Pseudomonas sp.
ABSTRACT : The contamination of organic waste in the shrimp pond system is one of the factors that lowering shrimp production. Organic waste such as leftover feed and fecal matter accumulated in the waters substrate decreasing the water quality and emerging disease. Pseudomonas sp. is a probiotic  bacteria  which  can  produce  enzymes  that  degrade  proteins  and  amylum-an  organic waste  commonly  found  in  pond  systems.  This  study  was  conducted  to  determine  the  type  and optimization of carbon and nitrogen source for the growth of Pseudomonas sp. in an effort to know the composition of a better medium for probiotic biomass production. Experiments were carried out in  the  form  of  determination  of  carbon  sources  include  glucose,  fructose  and  molasses. Determination  of  nitrogen  sources  include  ammonium  nitrate,  ammonium  chloride  and  urea.  The observations of growth rate was done by spectrophotometric method based on optical density in a bacterial  culture.  The  growth  of  Pseudomonas  sp.  reached  lag  phase  (adaptation)  on  0  up  to  6 hours. Then, on 6 up to 36 hours the bacterium has exponential phase which is characterized by the significant growth. The results of the determination of carbon source obtained glucose was the highest  growth  rate  0118  ±  0001  and  determination  of  the  nitrogen  source  obtained  ammonium nitrate  with  growth  rate  0117  ±  0000  by  the  OD  value.  Optimization  carbon  source  was  at  4% concentration  of  glucose  with  the  growth  rate  0.106  ±  0.000,  and  also  the  optimization  nitrogen source was at 0.5% concentration of ammonium nitrate with growth rate of 0112 ± 0002 by the OD value.
Keywords: Optimization, Carbon, Nitrogen, Pseudomonas sp, Growth Rate

## PENDAHULUAN
Salah  satu  faktor  penyebab  kegagalan  budidaya  udang  adalah  akibat  pencemaran  limbah organik  yang  terakumulasi  pada  sistem  tambak  itu  sendiri.  Limbah  organik  berupa  penumpukan sisa  pakan  dan  kotoran  udang  yang  mengendap  pada  substrat  dasar  tambak  dapat  merusak kondisi  lingkungan  perairan  budidaya  sehingga  menimbulkan  wabah  penyakit  terhadap  biota budidaya (Garno, 2004).
Upaya  pengendalian  lingkungan  perairan  budidaya  secara  biologis  dapat  dilakukan  dengan penggunaan bakteri probiotik untuk memperbaiki kualitas perairan dan menghambat pertumbuhan pathogen.  Berdasarkan  karakteristik  formula    pakan  udang,  bakteri  probiotik   yang  efektif  dalam melakukan  bioremediasi  tambak  udang  harus  memiliki    kemampuan    mendegradasi    komponen pakan terutama protein  dan amilum. Bacillus sp. dan Pseudomonas sp. merupakan bakteri yang dapat  menghasilkan  enzim  pendegradasi    protein  dan  amilum  (Slepecky  dan  Hemphill,  2006; Alariya, 2011).
Sumber  karbon  dan  nitrogen  merupakan  komponen  utama  dalam  suatu  media  kultur  yang dibutuhkan  bakteri  untuk  proses  pertumbuhan  sel.  Setiap  organisme  memiliki  kondisi    optimal yang berbeda dalam pertumbuhan dan perkembangannya. Bakteri memiliki  kondisi  tertentu  agar enzim    yang  dihasilkan  optimal.  Dalam  medium  pertumbuhan  bakteri  seperti  Zobell  2216E  telah tersedia  nutrisi  yang  mampu  mencukupi  keberlangsungan  hidup  bakteri,  namun  diperlukan penambahan  nutrisi  agar  pertumbuhan  optimal  sesuai  dengan  jenis  bakterinya.Optimasi  dan kebutuhan  nutrisi  yang  berbeda  menjadi  hal  yang  penting  dalam  pertumbuhan,  dimana  sumber karbon  dan  nitrogen  yang  ada  pada  nutrisi  memiliki  konsentrasi  yang  baik  dapat  mempercepat produksi metabolit dari bakteri.
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui komponen sumber karbon dan nitrogen sebagai co-substrat pada pertumbuhan bakteri Pseudomonas sp. yang berpotensi sebagai bakteri probiotik dengan  kemampuan  aktivitas  bioremediasi.  Selain  itu,  mengetahui  komposisi  nutrisi  untuk produksi biomassa bakteri probiotik secara efektif.

## MATERI DAN METODE
Penelitian  ini  menggunakan  isolat  bakteri  yang  didapatkan  dari  koleksi  Laboratorium Kelautan  dengan  kode  isolat  B319  yang  diambil  dari  sedimen  mangrove.  Penelitian  terdahulu mengidentifikasi  bahwa  isolat  B319  memiliki  kemiripan  dengan Pseudomonas sp.  Medium  untuk pertumbuhan  menggunakan  Zobelll  2216E  broth.  Alat  yang  digunakan  untuk  pengukuran pertumbuhan yaitu Spektrofotometer UV/Vis.  Metode yang digunakan dalam penelitian ini adalah eksperimentall  laboratorium.  Metode  eksperimen  termasuk  dalam  metode  kuantitatif  yang dilakukan dalam laboratorium dengan adanya perlakuan ( treatment ) dalam kondisi yang terkendali (Sugiyono,  2012).  Penelitian  dilakukan  pada  bulan  Oktober  sampai  Desember  2015.  Penelitian dilakukan dengan beberapa tahap yaitu proses sterilisasi, peremajaan isolat, pembuatan medium starter  hingga  eksperimen  dilakukan  di  Laboratorium  Obat  Bahan  Alam,  Universitas  Diponegoro, Semarang. Pengukuran turbiditas atau Optical Density (OD) dengan spektrofotometer dilakukan di Laboratorium Kimia, Universitas Diponegoro.

## Medium Kultur Bakteri
Bakteri  Pseudomonas  sp.  diambil  dari  kultur  stok  kemudian  ditumbuhkan  dalam  medium Zobell  2216E  broth  double  strength  yang  tersusun  dari  0,5  gr  pepton  dan  0,1  gr  yeast  dengan medium dasar air laut 70%.

## Penentuan Jenis Sumber Karbon dan Nitrogen
Metode penentuan jenis sumber karbon dan nitrogen mengikuti prosedur  Polack –Bereka et al .  (2010).  Sumber  karbon  yang  digunakan  meliputi  glukosa,  fruktosa  dan  molase,  serta  sumber nitrogen yang digunakan meliputii ammonium  nitrat, ammonium klorida dan urea, masing-masing pada konsentrasi 1%. Semua medium diatur pada pH 7 dan diinkubasi pada suhu kamar selama 48  jam.  Pengambilan  sampel  dilakukan  setiap  6  jam  sebanyak  7  ml  kemudian  melakukan pengukuran turbiditas (OD) dengan panjang gelombang A 600 .

## Optimasi Konsentrasi Sumber Karbon dan Nitrogen
Optimasi  dilakukan  dengan  3  variasi  konsentrasi.  Sumber  karbon  dilakukan  pada  1%,  2% dan  4%,  serta  sumber  nitrogen  dilakukan  pada  0.5%,  1%  dan  1.5%.  Pemilihan  variasi  ini berdasarkan literatur  yang menyebutkan bahwa rasio C:N:P optimal adalah 100:10:1 (Alexander, 1994).  Semua  medium  diatur  pada  pH  7  dan  diinkubasi  pada  suhu  kamar  selama  48  jam. Pengambilan  sampel  dilakukan  setiap  6  jam  sebanyak  7  ml  kemudian  melakukan  pengukuran turbiditas (OD) dengan panjang gelombang A 600 (Setyati et al. 2014).

## Analisis Data
Semua  data  pertumbuhan  ditentukan    berdasarkan  kepadatan  sel  melalui  pengukuran  OD pada  A 600 kemudian  dianalisis  secara  deskriptif  dan  analisis  One  Way  Anova  dengan  Uji  Tukey p=0.05 menggunakan program SPSS .

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil pengukuran OD pada seleksi sumber karbon menunjukkan bahwa glukosa mendapati kepadatan  populasi  tertinggi  dengan  nilai  1.408.  Grafik  kepadatan  sel  (OD)  pada  seleksi  co- substrat sumber karbon menunjukkan bahwa bakteri Pseudomonas sp. mengalami fase lag pada jam ke-0 hingga jam ke-6, kemudian fase eksponensial glukosa, fruktosa dan molase berlangsung pada  jam  ke-6  hingga  jam  ke-36  ditunjukkan  pada  Gambar  1.  Fase  eksponensial  pertumbuhan bakteri Pseudomonas sp.  yang  diberikan  co-substrat  glukosa  mengalami  pertumbuhan  yang signifikan.  Kepadatan  populasi  pada  co-substrat  glukosa  mendapatkan  nilai  OD  tertinggi dibandingkan fruktosa dan molase.
Menurut  hasil  penelitian  Polak  & Berecka (2010) glukosa merupakan sumber karbon yang paling  baik  dibandingkan  monosakarida    dan    gula-gula    yang    lain  dengan    urutan    dari    yang terbaik    adalah  sebagai    berikut,    glukosa,    fruktosa,  galaktosa,    laktulose,    saccharosa    dan maltose. Pseudomonas sp.  tumbuh  optimal  dengan  glukosa  sebagai  co-substrat  sumber  karbon karena Pseudomonas sp.  mampu  melakukan  fermentasi  pada  glukosa  dikarenakan  glukosa merupakan gula sederhana yang dapat langsung dimetabolisme.
Analisis  Laju  pertumbuhan  ditunjukkan  pada Tabel  1.  Dimana  terlihat  nilai  jumlah generasi dan  waktu generasi  dari Pseudomonas sp.  Hasil  analisis  laju  pertumbuhan  menunjukkan  bahwa Pseudomonas sp  tumbuh  optimum  pada  co-substrat  glukosa  dengan  nilai  laju  pertumbuhan tertinggi yaitu 0.118±0.001.

## Penentuan Jenis Nitrogen
Hasil pengukuran OD pada seleksii sumber nitrogen menunjukkan bahwa urea mendapati nilai Optical  Density (OD) tertinggi  sebesar  1.811.  Pada  jam  ke-36  didapatkan  nilai  OD  tertinggi untuk  Ammonium  Nitrat  yaitu  1.509  dan  nilai  OD  tertinggi  untuk  Ammonium  Klorida  yaitu  0.559 pada jam ke-30 ditunjukkan pada Gambar 2.
0.000 0.200 0.400 0.600 0.800 1.000 1.200 1.400 1.600 0 6 12 18 24 30 36 42 48 54 60 OD Pengamatan jam ke- Molase Glukosa Fruktosa
Tabel 1. Laju Pertumbuhan Bakteri Pseudomonas sp pada Seleksi Co-substrat Karbon
Gambar 2. Grafik Kepadatan Sel (OD) Bakteri Pseudomonas sp. pada Seleksi Sumber Nitrogen
Secara umum terlihat bahwa urea mendapati nilai kepadatan populasi tertinggi dan memiliki laju pertumbuhan tercepat. Namun waktu yang dibutuhkan oleh pada co-subsrat ammonium nitrat dan  ammonium  klorida  untuk  mencapai  pertumbuhan  maksimal  lebih  cepat  jika  dibandingkan pada  urea.  Fase  berikutnya  adalah  fase  eksponensial  ammonium  nitrat  dan  urea  memiliki  laju pertumbuhan tercepat. Fase eksponensial dicirikan dengan adanya pertumbuhan yang signifikan. Namun demikian fase eksponensial berlangsung lama  yaitu  30  jam. Fase eksponensial adalah keadaan  pertumbuhan  yang  cepat  dengan  laju  pertumbuhan  spesifik  (µ)  konstan,    komposisi selular  tetap,  sedangkan    komposisi    kimiawi    media    biakan  berubah  akibat  terjadinya  sintesis produk  dalam penggunaan  substrat  (Judoamidjojo,  1990).
Analisis  Laju  pertumbuhan  ditunjukkan  pada Tabel  2.  Dimana  terlihat  nilai  jumlah generasi dan  waktu generasi  dari Pseudomonas sp.  Hasil  analisis  laju  pertumbuhan  menunjukkan  bahwa Pseudomonas sp  tumbuh  optimum  pada  co-substrat  ammonium  nitrat.  Ammonium  nitrat dinyatakan optimum karena memiliki laju pertumbuhan bakteri yang cepat pada fase eksponensial dan fase stasioner yang cenderung stabil.

## Optimasi Co-Substrat Karbon
Hasil  penelitian  menunjukkan Pseudomonas sp.  mengalamai  fase  lag  pada  jam  ke-0 hingga  jam  ke-6.  Fase  eksponensial  sudah  berhenti  pada  pengamatan  jam  ke-12  pada konsentrasi glukosa 1% dan 2%, berbeda dengan konsentrasi glukosa 4% yang terus mengalami pertumbuhan  sel.  Pada  fase  eksponensial  bakteri  tumbuh  dengan  cepat  dan  kebutuhan  akan energi lebih tinggi. Kecepatan pertumbuhan ini dipengaruhi oleh medium pertumbuhan, suhu, pH dan kandungan nutrien.
0.000 0.200 0.400 0.600 0.800 1.000 1.200 1.400 1.600 1.800 2.000 0 6 12 18 24 30 36 42 48 54 60 OD Pengamatan jam ke- Urea Ammonium Nitrat Ammonium Klorida
Grafik  kepadatan  sel  (OD)  pada  optimasi  co-substrat  sumber  karbon  yaitu  glukosa menunjukkan  bahwa  bakteri Pseudomonas sp.  dengan  konsentrasi  4%  memiliki  kepadatan populasi  tertinggi  dengan  nilai  1.441,  kemudian  konsentrasi  1%  dengan  nilai  OD  sebesar  1.057 dan konsentrasi 2% didapatkan nilai OD 1.030. Grafik kepadatan sel ditunjukkan pada Gambar 3.
Fase stationer  yang terjadi pada konsentrasi  glukosa 1% dan 2%  berlangsung cukup lama hingga  jam  ke-48.  Pada  fase  stasioner  jumlah  populasi  sel  tetap  karena  jumlah  sel  yang membelah sama dengan jumlah sel yang mati. Mangunwidjaja dan Suryani  (1994)  menyatakan bahwa  ukuran  sel  pada  fase  stasioner  menjadi  lebih  kecil  karena  sel    tetap  melakukan pembelahan  meskipun  zat  nutrisi  dalam  media  sudah  mulai  habis.  Selanjutnya  adalah  fase kematian,  terjadi  penurunan  jumlah  populasi  yang  disebabkan  oleh  berkurangnya  nutrien  dalam medium yang dibutuhkan untuk metabolism bakteri.
Tabel 2. Laju Pertumbuhan Bakteri Pseudomonas sp. pada Seleksi Co-substrat Nitrogen
Gambar 3. Grafik Kepadatan Sel (OD) Bakteri Pseudomonas sp. pada Optimasi Sumber Karbon
Tabel 3. Laju Pertumbuhan Bakteri Pseudomonas sp pada Optimasi Co-substrat Karbon 0.000 0.200 0.400 0.600 0.800 1.000 1.200 1.400 1.600 1.800 0 6 12 18 24 30 36 42 48 54 OD Pengamatan Jam ke- Glukosa 4% Glukosa 2%
Glukosa 1%
Analisis  Laju  pertumbuhan  ditunjukkan  pada Tabel  3.  Dimana  terlihat  nilai  jumlah generasi dan  waktu generasi  dari Pseudomonas sp.  Hasil  analisis  laju  pertumbuhan  menunjukkan  bahwa Pseudomonas sp  tumbuh  optimum  pada  co-substrat  glukosa  4%  dengan  nilai  laju  pertumbuhan tertinggi  yaitu  0.106±0.000.  Hal  ini  dikarenakan  pertumbuhan  populasi  pada  konsentrasi  4% berlangsung konstan dan cepat.

## Optimasi Co-Substrat Nitrogen
Grafik kepadatan sel (OD) pada optimasi co-substrat sumber nitrogen menunjukkan bahwa Pseudomonas sp. tumbuh optimum pada ammonium nitrat 0.5% Grafik kepadatan sel ditunjukkan pada Gambar 4.
Hasil seleksi co-substrat nitrogen pada Gambar 4 menunjukkan bahwa fase lag terjadi dari jam  ke-0  hingga  jam  6,  kemudian  fase  eksponensial  yang  terjadi  pada  ketiga  konsentrasi  yang diberikan  terjadi dari jam ke-6 hingga jam ke-36. Nilai kepadatan populasi dari ketiga konsentrasi yang diberikan tidak jauh berbeda. Analisis laju pertumbuhan didapatkan bahwa Pseudomonas sp. optimum  pada  ammonium  nitrat  0.5%  dengan  nilai  laju  pertumbuhan  sebesar  0.117±0.000 d . Analisis laju pertumbuhan ditunjukkan pada Tabel 4.

## KESIMPULAN
Kondisi  optimum   formulasi  medium   dan faktor  lingkungan  untuk  pertumbuhan dapat berbeda    dan    bersifat    spesifik    pada  berbagai    jenis    bakteri    probiotik.  Berdasarkan  hasil penelitian ini, glukosa  memberikan efek lebih  baik  dibandingkan  fruktosa dan molase sebagai sumber karbon. Penambahan  ammonium  nitrat memberikan  efek  yang  lebih  baik dibandingkan sumber    nitrogen    lain  (ammonium  klorida  dan  urea)  dan  konsentrasi  yang  dibutuhkan  untuk glukosa sebagai co-substrat karbon adalah 4% dan ammonium nitrat sebagai co-substrat nitrogen adalah  0.5%  dalam  peningkatan  pertumbuhan  dan  kepadatan  sel  sebagai  upaya  memproduksi biomassa bakteri probiotik Pseudomonas sp.
Gambar 4. Grafik Kepadatan Sel (OD) Bakteri Pseudomonas sp. pada Optimasi Sumber Nitrogen
Tabel 4. Laju Pertumbuhan Bakteri Pseudomonas sp pada Optimasi Co-substrat Nitrogen
0.000 0.500 1.000 1.500 2.000 0 6 12 18 24 30 36 42 48 54 OD Pengamatan jam ke- Ammonium Nitrat 1,5% Ammonium Nitrat 0,5%
Ammonium Nitrat 1%

## DAFTAR PUSTAKA
Alariya,  S.S., S. Sethi, S. Gupta,  and B.L. Gupta.  2013. Amylase Activity  of  a Starch Degrading Bacteria Isolated from Soil. Archives of Applied Science Research., 5 (1):15 – 24.
Alexander,  Martin.  1994. “Biodegradation  and  Bioremediation”.  United  States  of  America: Academic Press, Inc.
Atlas  ,  R.  M.  2010.    Handbook  of  Microbiological  Media.  Ed  ke-4. Washington(US):  ASM  Pr.672 pp.
Bissett, A., Burke, C., Cook, P.L.M., Bowman, J.P. 2007. Bacterial community shifts in organically perturbedsediments. Environmental Microbiology. 9(1): 46 – 60.
Garno, Y.S. 2004. Biomanipulasi Paradikma Baru Dalam Pengendalian Limbah Organik Budidaya Perikanan  di  Waduk  dan  Tambak.  Orasi  ilmiah  Pengukuhan  Ahli  Peneliti  Utama  Bidang Manajemen Kualitas Perairan. BPPT: Jakarta. Page: 58
Judoamidjojo, M., A.A. Darwis & E.G.  Sa’id. 1990. Teknolologi Fermentasi Rajawali Pers: Jakarta. 333 hlm.
Karigar, C. S. & S. S. Rao., 2011, Role of Microbial Enzymes in the Bioremediation of Pollutants: A Review. Enzyme Res. Article ID 805187,11p.http://dx.doi.org/10.4061/2011/805187 Mangunwidjaja,  D. & A. Suryani. 1994. Teknologi Bioproses. Penerbit Swadaya: Jakarta. 394 hlm. Polack-Berecka,  M.,  A.  Wasko,  M.  Kordowska-Wiater,  M.  Podlesny,  Z.  Targonski,  A.  Kubikomar.
2010. Optimization of Medium Composition for Enhancing Growth of Lactobacillus rhamnosus PEN Using Response Surface Methodology. Polish Journal of Microbiology. 59: 113-118. Setyati,  W.A  &  Subagiyo,    2012,  Isolasii  dan  Seleksi  Bakteri  Penghasill  Enzim    Ekstraseluler (proteolitik, amilolitik, lipolotik dan selulolitik) yang Berasal dari Sedimen Kawasan Mangrove. Ilmu Kelautan. 17(3):164-169.
Setyati, W.  A., M.  Erni, A.  Triyanto, Subagiyo dan M. Zainuddin. 2014.  Selection Identification and  Optimization  of  the  Growth  Water  Probiotic  Consortium  of  Mangrove  Ecosystems  as Bioremediation  and  Biocontrol  in  Shrimp  Ponds,  J.  Pengolahan  Hasil  Perikanan  Indonesia. 17(3):242-252.
Setyati,  W.    A.,  M.    Erni,  A.    Triyanto,  Subagiyo  dan  M.  Zainuddin.  2015.  Kinetika  Pertumbuhan dan  Aktivitas  Protease  Isolat  36k  dari  Sedimen  Ekosistem  Mangrove,  Karimunjawa,  Jepara. Ilmu Kelautan. 20(3):163-169.
Slepecky, R.A. and H. E.  Hemphill.  2006.  The Genus Bacillus –Nonmedical Prokaryotes. 4:530 – 562.
Subagiyo.  2015.  Pengaruh  Penambahan  Berbagai  Jenis  Sumber  Karbon,  Nitrogen  Dan Fosforpada  Medium  deMan,  Rogosa  and  Sharpe  (MRS)  Terhadap  Pertumbuhan  Bakteri Asam  Laktat Terpilih  Yang  Diisolasi  Dari  Intestinum  Udang  Penaeid.  Jurnal  Kelautan  Tropis. 18(3):127 –132
Sugiyono,  A.  J.  Lintang,  R.  A.  Sabe.  2003.  Penapisan  dan  Karakterisasi  Protease  Bakteri Termofilik Asal  Mata Air Laut Panas Poso Sulawesi Tengah.