## UJI KONSENTRASI HAMBAT MINIMUM (KHM) EKSTRAK DAUN
LEILEM ( Clerodendrum minahassae
L.) TERHADAP BAKTERI

## Streptococcus mutans
Hanna R. R. Situmorang 1) , Olivia Waworuntu 1) , Christy Mintjelungan 1)
1) Program Studi Pendidikan Dokter Gigi Fakultas Kedokteran  UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
Caries  is  one  of  the  dental  and  oral  diseases  that  are  often  experienced  by  the  population  of Indonesia.  Caries  is  a  disease  of  hard  dental  tissue  ,  which  consists  of  email  ,  dentin  and  cementum  , which  is  caused  by the  activity  of  microorganisms  in  fermentable  carbohydrates.  Streptococcus  mutans bacteria are known to be the main cause of dental caries . Leilem leaf (Clerodendrum minahassae L.) is one  of  a  herbal  plant  containing  of  antimicrobial  compounds,  namely  flavonoid,  fenol,  steroid  and terpenoid. A study has been held in Manado by Bontjura et al in 2015 proved that the extract of leilem leaf (Clerodendrum minahassae L.) could inhibit the Streptococcus mutans.The purpose of this study is to determine  the  minimal  inhibitory  concentration  (MIC)  of  leilem  leaf  (Clerodendrum  minahassae  L.)  to Streptococcus  mutans.  This  research  is  a  true  experimental  research  with  Randomized  Pretest-Posttest Control  Group  Design.  This  method  used  in  this  study  is  serial  dilution  method  with  turbidimetry  and spectrophotometry as the test methods. Leilem leaf was taken from Paniki, subdistrict of Mapanget, and was  extracted  with  maceration  method  using  ethanol  96%.  Streptococcus  mutans  bacterial  was  taken from  a  pure  bacterial  stock  in  Pharmacy  Laboratory  Faculty  of  Mathematics  and  Natural  Science University of Sam Ratulangi Manado.Based on this research the minimal inhibitory concentration (MIC) of leilem leaf extract (Clerodendrum minahassae  L.) to Streptococcus mutans is in the concentration of 12,5%.
Keywords :  leilem  leaf  (Clerodendrum  minahassae  L.),  Streptococcus  mutans,  minimal  inhibitory concentration (MIC), caries.

## ABSTRAK
Karies merupakan salah satu penyakit gigi dan mulut yang sering dialami oleh penduduk Indonesia. Karies adalah suatu penyakit jaringan keras gigi, yaitu email, dentin dan sementum, yang disebabkan oleh aktivitas suatu jasad renik dalam suatu karbohidrat yang dapat diragikan. Streptococcus mutans diketahui merupakan  bakteri  penyebab  utama  timbulnya  karies  gigi.  Ekstrak  daun  leilem  ( Clerodendrum minahassae L.)  merupakan  salah  satu  tanaman  herbal  yang  mengandung  senyawa  antibakteri,    yaitu flavonoid, fenol, steroid, dan terpenoid. Sebuah penelitian yang telah dilakukan oleh Bontjura dkk pada tahun  2015  di  Manado  membuktikan  bahwa  ekstrak  daun  leilem  ( Clerodendrum  minahassae L.)  dapat menghambat  bakteri Streptococcus  mutans .  Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  konsentrasi hambat  minimum  (KHM)  ekstrak  daun  leilem  ( Clerodendrum  minahassae L.)  terhadap  bakteri Streptococcus  mutans .  Penelitian  ini  merupakan  penelitian Randomized  Pretest-Posstest  Control  Group Design . Metode yang digunakan dalam penelitian ini yaitu metode serial dilusi dengan metode pengujian turbidimetri  dan  spektrofotometri.  Daun  leilem  diperoldeh  di  daerah  Paniki,  Kecamatan  Mapanget,  dan diekstraksi  dengan  metode  maserasi  menggunakan  pelarut  etanol  96%.  Bakteri Streptococcus  mutans diambil  dari  stok  bakteri  murni  Laboratorium  Farmasi  Fakultas  MIPA  Universitas  Sam  Ratulangi Manado.  Berdasarkan  penelitian  ini  dapat  disimpulkan  bahwa  konsentrasi  hambat  minimum  (KHM) ekstrak  daun  leilem  ( Clerodendrum  minahassae L.)  terhadap  bakteri Streptococcus  mutans yaitu  pada konsentrasi 12,5%.
Kata  kunci :  daun  leilem  ( Clerodendrum  minahassae L.), Streptococcus  mutans ,  konsentrasi  hambat minimum (KHM), karies

## PENDAHULUAN
Dalam  rongga  mulut  manusia  terdapat banyak  mikroorganisme  baik  flora  normal maupun  yang  patogen. Streptococcus  mutans merupakan  salah  satu  flora  normal  yang berada  dalam  rongga  mulut  manusia  tetapi dapat berubah menjadi patogen apabila terjadi peningkatan populasi bakteri (Jawetz ZE,2004; Dwijayanti  KR,2011).  Bakteri Streptococcus mutans tergolong  dalam  bakteri  Gram  positif dan  bersifat  anaerob  fakultatif.  (Sumawinata N, 2004; Gronroos Lisa, 2000) Jenis bakteri ini diketahui  merupakan  bakteri  penyebab  utama timbulnya  karies  gigi  (Sabir  A.,2005). Karies adalah suatu penyakit jaringan keras gigi, yaitu email, dentin dan sementum, yang disebabkan oleh  aktivitas  suatu  jasad  renik  dalam  suatu karbohidrat  yang  dapat  diragikan  (Kidd EAM,1992).
Karies  merupakan  salah  satu  penyakit gigi  dan  mulut  yang  sering  dialami  oleh penduduk  Indonesia.  Menurut  data  dari  Riset Kesehatan  Dasar  (Riskesdas)  tahun  2013, prevalensi  masalah  gigi  dan  mulut  di Indonesia mencapai 25,9% dan indeks DMF-T mencapai  4,6%  yang  berarti  kerusakan  gigi penduduk  Indonesia  mencapai  460  buah  gigi per 100 orang (Anonim, 2013).
Berbagai  upaya  telah  dilakukan  untuk mencegah  terjadinya  karies  gigi  diantaranya modifikasi diet, pit dan fissure sealant , kontrol plak, penggunaan fluor, mengeliminasi bakteri kariogenik,  sampai  dengan  penggunaan  bahan yang  bersifat  antibakteri  (Atria  I,2012; Rosidah NA,2014; Hamada S, 1980).
Tanaman leilem (Clerodendrum minahassae  L.) merupakan  salah  satu  jenis tanaman  yang  dapat  dimanfaatkan  sebagai antibakteri  (Bontjura  S,  2015).  Jenis  tanaman ini  banyak  tumbuh  dan  sangat  umum  dikenal
di  daerah  Minahasa,  Sulawesi  Utara  (Kalangi C,2014). Pada bagian tanaman leilem (Clerodendrum  minahassae  L.) yaitu  daun , biasa  digunakan  sebagai  campuran  masakan dalam  daging  atau  ikan.  Pemanfaatan  daun leilem  tidak  hanya  sebagai  tanaman  sayuran namun  juga  berkhasiat  mengobati  sakit  perut dan  dipergunakan  sebagai  obat  cacing  (Arini DID,2015).
Berdasarkan  penelitian  Shrivastava  dkk pada  tahun  2007,  genus Clerodendrum mengandung senyawa flavonoid, fenol, steroid,  dan  terpenoid  serta  mempunyai  efek sebagai anti-inflamasi, antimikroba, antidiabetes, antimalaria, antivirus, dan antioksidan  (Shrivastava  N  ,2007).  Penelitian lebih lanjut  dilakukan oleh Bontjura dkk pada tahun 2015 membuktikan bahwa ekstrak daun leilem  memiliki  efek antibakteri  terhadap Streptococcus  mutans,  tetapi dari  penelitian tersebut  belum  diketahui  konsentrasi  hambat minimum (KHM).
Berdasarkan  uraian  di  atas  dan  dalam rangka  mengoptimalkan  pemanfaatan  potensi daun  leilem  sebagai  antibakteri,  penulis tertarik  untuk  melakukan  penelitian  uji konsentrasi  hambat  minimum  (KHM)  ekstrak daun  leilem (Clerodendrum  minahassae  L.) sebagai  antibakteri  terhadap Streptococcus mutans .

## BAHAN DAN METODE
Penelitian  ini  merupakan  penelitian eksperimental murni (true experimental design) dengan rancangan penelitian randomized  pretest-posttest  control  group design .  Penelitian  dilakukan  di  Laboratorium Farmasi  Fakultas  MIPA  Universitas  Sam Ratulangi  Manado  pada  bulan  Mei  –  Agustus
2016. Subjek dalam penelitian ini ialah bakteri biakan  murni Streptococcus  mutans yang diperoleh  dari  Laboratorium  Farmasi  Fakultas MIPA  Universitas  Sam  Ratulangi  Manado. Ekstrak daun leilem (Clerodendrum minahassae  L.). di  dapat  dengan  cara  ekstrasi dengan metode maserasi menggunakan pelarut etanol 96%. Sampel daun leilem diperoleh dari daerah  Paniki,  kecamatan  Mapanget.  Sampel diambil  lalu  ditimbang  sebanyak  2  kg, kemudian dibersihkan dengan mencuci dibawah air mengalir sampai bersih, ditiriskan, diiris  tipis-tipis,  lalu  dikeringkan  dengan  cara diangin-anginkan  pada  suhu  ruangan  kurang lebih  lima  hari.  Sampel  yang  telah  kering diserbukkan  dengan  menggunakan  blender, lalu  serbuk  daun  leilem  ditimbang  sebanyak 100  gram.  Proses  maserasi  akan  dilakukan sebanyak dua kali pengulangan. Maserasi yang pertama,  serbuk  daun  leilem  dimasukkan dalam  wadah  dan  ditambahkan  etanol  96% hingga  semua  serbuk  daun  leilem  terendam. Aduk hingga homogen, tutup segera kemudian disimpan  dalam  ruangan  yang  terhindar  dari cahaya  matahari  selama  lima  hari.  Selama perendaman,  setiap  hari  diaduk  selama  15 menit.  Setelah  perendaman  selama  lima  hari, ekstrak  disaring  dengan  menggunakan  kertas saring dan ekstrak yang tidak tersaring diambil dan  di  maserasi  lagi  menggunakan  etanol sebanyak  500  mL  dan  direndam  selama  dua hari.  Setelah  direndam  selama  lima  hari, disaring  dengan  menggunakan  kertas  saring, lalu diuapkan dengan rotary vacuum evaporator pada  temperatur  40 o C.  Ekstrak inilah yang akan dipakai dalam penelitian.
Metode penelitian yang digunakan yaitu dengan  metode  serial  dilusi  atau  pengenceran bertingkat dengan menggunakan perbandingan
1:2  (w/v).  Metode  pengujian  yang  dipakai dalam  penelitian  ialah  metode turbidimetri atau  pengujian  kekeruhan  secara  visual, kemudian  dilanjutkan  dengan  menggunakan alat spektrofotometer untuk  melihat  nilai absorban  sebagai  penentu  kekeruhan  yang akurat.  Bakteri Streptococcus  mutans yang disimpan  di  media  agar  diambil  dengan menggunakan jarum ose steril, lalu ditanamkan  pada  media  agar  miring  dengan cara  menghapus,  kemudian  diinkubasi  selama 1x24  jam.  Bakteri  yang  telah  diremajakan pada  media  agar  miring,  kemudian  diambil koloninya  dari  media  agar  miring  dengan menggunakan  jarum ose steril.  Koloni  yang diambil  dimasukan  kedalam  media  BHI-B dalam  tabung  reaksi  kemudian  diinkubasi  1  x 24 jam. Setelah diinkubasi, dilakukan pembuatan  suspensi Streptococcus  mutans sesuai  dengan  standar  kekeruhan McFarland 1. Sebanyak 11 tabung  reaksi  steril disiapkan. Setiap  tabung  uji  diberi  label  1-9,  kemudian tabung  10  diberi  label  K(+)  yang  merupakan kontrol  positif,  yaitu  tabung  yang  berisi suspensi bakteri Streptococcus mutans sebanyak  0,5  mL  setara  dengan  standar kekeruhan McFarland 1.  Tabung  11  diberi label  K(-)  yang  merupakan  kontrol  negatif, yaitu  tabung  berisi  ekstrak  daun  leilem (Clerodendrum  minahassae  L.) sebanyak  4 mL  dengan  konsentrasi  100%.  Tabung  1  diisi sebanyak 4 mL konsentrasi 100% ekstrak daun leilem (Clerodendrum  minahassae  L.  ) kemudian  dimasukkan  ke  dalam  sentrifuge selama  lima  menit  untuk  pemisahan  antara ampas esktrak dari larutan ekstrak . Tabung 2-9 diisi  dengan  2  mL  media  cair  BHI-B. Kemudian  ambil  2  mL  larutan  dari  tabung  1, dimasukkan  ke  dalam  tabung  2,  dicampur
hingga homogen sehingga didapat konsentrasi 50%. Hal  yang sama dilakukan hingga tabung 9 hingga didapatkan semua konsentrasi ekstrak dengan perbandingan 1:2 (w/v).
Pengujian  dilakukan  dengan  diambil suspensi bakteri yang telah disetarakan dengan standar  kekeruhan McFarland 1  sebanyak  0,5 mL  dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi perlakuan  label  1  lalu  diukur  nilai  absorbansi awal  dengan  spektrofotometer.  Selain  itu,  hal yang  sama  dilakukan  pada  tabung  perlakuan label  2-9.  Setiap  tabung  yang  telah  diketahui nilai  absorban  awal  kemudian  dimasukkan  ke dalam inkubator dan diinkubasi pada suhu 37 0 C  selama  1  x  24  jam.  Pada  penelitian  ini, perlakuan dan pengujian diulang sebanyak tiga kali.
Sesudah media tabung perlakuan diinkubasi  selama  1x24  jam,  semua  tabung tersebut  dilihat  kekeruhannya  secara  visual. Apabila  kekeruhan  masing-masing  tabung masih setara atau lebih keruh dari tabung K(+) yang  berisi  suspensi  bakteri Streptococcus mutans sesuai standar kekeruhan McFarland 1 berarti  bakteri  masih  dapat  bertumbuh,  tetapi ketika  larutan  dalam  tabung  terlihat  mulai lebih  jernih  daripada  tabung  K(+)  berarti pertumbuhan  bakteri  mulai  terhambat.  Hal inilah  yang  menunjukkan  konsentrasi  hambat minimum  (KHM).  Kemudian  semua  tabung perlakuan tersebut diukur lagi nilai absorbannya  dengan spektrofotometer sebagai nilai  absorban  akhir.  Jika  nilai  absorban  akhir (sesudah  inkubasi)  masing-masing  tabung lebih  besar  dari  nilai  absorban  awal  (sebelum inkubasi),  maka  disimpulkan  bahwa  masih terjadi  pertumbuhan  bakteri.  Namun,  jika sebaliknya  tidak  terdapat  perubahan  nilai absorban  akhir  dengan  absorban  awal,  atau
nilai  absorban  akhir  lebih  kecil  dari  nilai absorban  awal,  maka  disimpulkan  bahwa pertumbuhan  bakteri  dihambat.  Konsentrasi hambat minimum ditentukan dengan konsentrasi  ekstrak  terkecil  pada  tabung perlakuan  yang  pertama  kali  mengalami penurunan  atau  tidak  terjadi  perubahan  nilai absorbansi  yang  dilihat  dari  nilai  rata-rata absorbansi.

## HASIL PENELITIAN
Penelitian ini dilakukan di Laboratorium  Farmasi  FMIPA  Universitas Sam  Ratulangi  untuk  pembuatan ekstrak daun leilem, perlakuan, pengujian turbidimetri, serta pengukuran nilai absorbansi dengan menggunakan spektrofotometer UV-Vis. Hasil pengujian  turbidimetri  ekstrak  daun  leilem ( Clerodendrum  minahassae L.)  terhadap bakteri streptococcus  mutans dapat  dilihat pada tabel 1.
Tabel  1.  Hasil  uji  KHM  ekstrak  daun  leilem ( Clerodendrum  minahassae L.)  terhadap Streptococcus mutans dengan metode turbidimetri Nomor Tabung Konsentrasi Ekstrak Daun Leilem ( Clerodendrum minahassae L.) Hasil Perlakuan I Perlakuan II Perlakuan III 1 100% - - - 2 50% - - - 3 25% - - - 4 12,5% - - - 5 6,25% - - - 6 3,125% + + + 7 1,56% + + + 8 0,78% + + + 9 0,39% + + + 10 K(+) + + + 11 K(-) - - -
Keterangan : Tanda (+): larutan di dalam tabung terlihat keruh, artinya terdapat pertumbuhan bakteri. Tanda (-): larutan  di  dalam  tabung  mulai  jernih,  yang  artinya pertumbuhan  bakteri  mulai  terhambat.  K(+):  Kontrol positif  berisi  suspensi  bakteri  yang  setara  dengan
McFarland 1.  K(-):  Kontrol  negatif  yang  berisi  ekstrak daun leilem 100%.
Berdasarkan  hasil  pengujian  dengan menggunakan metode turbidimetri yang terdapat  pada  Tabel  2  di  atas  menunjukkan bahwa  hasil  nilai  negatif  terdapat  pada  ketiga perlakuan  pada  tabung  nomor  5  dengan konsentrasi  6,25%  dan  ditetapkan  sebagai konsentrasi  hambat  minimum  ekstrak  daun leilem terhadap bakteri Streptococcus mutans.
Penelitian kemudian dilanjutkan dengan pengujian melalui pengukuran nilai absorbansi menggunakan Spektrofotometer UV-Vis untuk mendapatkan  hasil  pengukuran  kekeruan secara  kuantitatif.  Nilai  absorbansi  diukur pada  konsentrasi  0,39%  -  100%,  tabung kontrol positif dan kontrol negatif sebelum dan sesudah  inkubasi  1x24  jam  (perlakuan
pertama, kedua, dan ketiga). Panjang gelombang sebelum inkubasi  yaitu 342,00 nm dan  sesudah  inkubasi  348,00  nm.  Data  hasil
pengukuran  nilai  absorbansi  menggunakan Spektrofotometer  UV-Vis  dimasukkan  ke dalam Tabel 2.
Tabel  2.  Hasil  uji  KHM  ekstrak  daun  leilem  ( Clerodendrum  minahassae L.)  terhadap  bakteri Streptococcus mutans dengan menggunakan spektrofotometri UV-Vis
Keterangan: “Tetap”  menunjukkan  nilai  absorbansi  setelah  inkubasi ≤ nilai  absorbansi  sebelum  inkubasi, yang berarti bahwa pertumbuhan bakteri terhambat. “Turun” menunjukkan nilai absorbansi setelah inkubasi ≤ nilai absorbansi sebelum inkubasi, yang berarti bahwa pertumbuhan bakteri terhambat. “Naik” menunjukkan
No Tabung
Konsentrasi Ekstrak Daun Leilem (Clerodendrum minahasae L.) Hasil Ket Perlakuan I Perlakuan II Perlakuan III Rata-rata Sebelum Inkubasi Sesudah Inkubasi Sebelum Inkubasi Sesudah Inkubasi Sebelum Inkubasi Sesudah Inkubasi Sebelum Inkubasi Sesudah Inkubasi 1 100% 4.000 3.962 4.000 4.000 4.000 3,980 4.000 3.980 Turun 2 50% 4.000 4.000 4.000 4.000 4.000 3.090 4.000 3.696 Turun 3 25% 3.828 3.792 3.918 3.746 3.828 3.789 3.858 3.775 Turun 4 12,5% 3.877 3.726 3.821 3.253 3.792 3.253 3.830 3.410 Turun 5 6,25% 3.719 3.878 3.228 3.648 3.719 3.925 3.555 3.817 Naik 6 3,125% 3.496 3.853 3.496 3.686 2.908 3.253 3.300 3.597 Naik 7 1,56% 3.313 3.639 3.135 3.178 2.599 3.925 3.015 3.580 Naik 8 0,78% 3.338 3.726 3.135 3.286 2.468 2.728 2.980 3.246 Naik 9 0,39% 3.273 3.714 3.161 3.178 2.156 3.714 2.876 3.535 Naik 10 K (+) 1.728 2.085 1.728 2.856 1.478 2.844 1.644 2.595 Naik 11 K (-) 4.000 3.686 4.000 3.925 4.000 3776 4.000 3.795 Turun
nilai  absorbansi  setelah  inkubasi  >  nilai  absorbansi  sebelum  inkubasi,  yang  berarti  bahwa  terdapat pertumbuhan bakteri.
Berdasarkan
pengujian spektrofotometer,  tabel  di  atas  menunjukkan bahwa  tabung  dengan  konsentrasi  12,5%  - 100%  (tabung  1  -  4)  terjadi  penurunan  nilai rata-rata  absorbansi  sedangkan  pada  tabung dengan  konsentrasi  0,39%  -  6,25%  (nomor  5- 9)  terjadi  kenaikan  nilai  rata-rata  absorbansi. Pada  tabung  dengan  konsentrasi  12,5%  mulai terlihat  penurunan  nilai  rata-rata  absorbansi, sehingga  konsentrasi  ini  ditetapkan  sebagai konsentrasi  hambat  minimum  (KHM)  ekstrak daun leilem terhadap Streptococcus mutans .

## PEMBAHASAN
Hasil penelitian yang didapatkan setelah inkubasi 1x24 jam melalui metode turbidimetri,  konsentrasi  hambat  minimum ekstrak daun leilem ( Clerodendrum minahassae L.) terhadap bakteri Streptococcus mutans yaitu pada konsentrasi 6,25%. Konsentrasi  ekstrak  6,25%  secara  visual terlihat  mulai  jernih  pada  perlakuan  pertama, kedua,  dan  ketiga  jika  dibandingkan  tabung dengan konsentrasi 0,39% - 3,125% (tabung 6 -  9)  yang  kekeruhannya  mendekati  tabung kontrol  positif  (tabung  10)  yang  berisi suspensi  bakteri Streptococcus  mutans yang setara dengan kekeruhan McFarland 1. Hal ini menunjukkan  bahwa  pada  konsentrasi  6,25% pertumbuhan  bakteri Streptococcus  mutans mulai  terhambat  sedangkan  pada  konsentrasi 0,39%-3,125%  (tabung  6  -  9)  masih  terdapat pertumbuhan  bakteri.  Hal  ini  disebabkan ekstrak tidak mampu menghambat pertumbuhan  bakteri  pada  konsentrasi  ekstrak yang rendah karena semakin rendah
konsentrasi,  jumLah  senyawa  aktif  dalam ekstrak  semakin  sedikit  sehingga  kemampuan ekstrak  dalam  menghambat  bakteri  berkurang (Ajizah A, 2004).
Hasil  pengamatan  konsentrasi  hambat minimum (KHM) melalui metode turbidimetri (pengamatan secara visual) pada penelitian ini sebenarnya  sudah  cukup  untuk  menentukan KHM,  namun  karena  metode  ini  bersifat kualitatif sehingga dengan dipengaruhi subjektif  dari  peneliti  dan  warna  larutan berwarna  kecoklatan  (pekat),  maka  hal  itu mempersulit penentuan dan pengamatan KHM.  Oleh  karena  itu,  untuk  mendapatkan hasil  yang  akurat  perlu  dilakukan  pengujian lebih lanjut dengan mengukur nilai absorbansi sebelum  dan  sesudah  inkubasi  menggunakan spektrofotometer  UV-Vis  (Astuningsih  C, 2014).
Pada  pengujian  konsentrasi  hambat minimum  ekstrak  daun  leilem  ( Clerodendrum minahassae L.) terhadap Streptococcus mutans dengan menggunakan metode spektrofotometri berbeda  dengan  hasil  pengamatan  kekeruhan dengan metode turbidimetri. Hasil pengukuran dengan menggunakan spektrofotometer menunjukkan  bahwa  terjadi  kenaikan  nilai rata-rata  absorbansi  sesudah  inkubasi  pada tabung  dengan  konsentrasi  0,39%  -  6,25% (tabung 5 - 9) sedangkan pada tabung 12,5% - 100%  (tabung  1  -  4)  mengalami  penurunan nilai  rata-rata  absorbansi  sesudah  inkubasi. Pada  tabung  dengan  konsentrasi  12,5% pertama  kali  terjadi  penurunan  nilai  rata-rata absorbansi, sehingga konsentrasi 12,5% ditetapkan sebagai konsentrasi hambat minimum  ekstrak  daun  leilem  ( Clerodendrum
minahassae L.) terhadap Streptococcus mutans.
Hasil  yang  berbeda  dalam  penentuan konsentrasi  hambat  minimum  pada  metode spektrofotometri  dan  metode  turbidimetri disebabkan  karena  prinsip  kerja  dari  kedua metode.  Pada  metode  turbidimetri  hanya dilakukan  pengamatan  kekeruhan  secara visual,  hal  ini  cenderung  bersifat  kualitatif sehingga  dipengaruhi  subjektif  dari  peneliti serta  risiko  terjadinya  kesalahan  relatif  lebih besar sedangkan pada metode spektrofotometri nilai  absorbansi  yang  dibaca  berupa  data kuantitatif  dan  didapatkan  hasil  analisis  yang tepat  dibandingkan  metode  turbidimetri  ( Astuningsih C, 2014; Triyati E, 1985).
Penelitian  ini  menunjukkan  bahwa terdapat  konsentrasi hambat  minimum  ekstrak daun  leilem  ( Clerodendrum  minahassae L.) terhadap Streptococcus mutans pada pengujian
secara  turbidimetri  berada  pada  konsentrasi 6,25%, sedangkan konsentrasi hambat minimum yang didapatkan berdasarkan metode spektrofotometri yaitu pada konsentrasi  12,5%.  Berdasarkan  penelitian tersebut  ditemukan  hasil  lebih  akurat  dengan menggunakan  metode  spektrofotometri,  maka konsentrasi  hambat  minimum  yang ditetapkan pada  penelitian  ini  adalah  12,5%.  Nilai konsentrasi hambat minimum ini membuktikan  bahwa  ekstrak  daun  leilem ( Clerodendrum  minahassae L.)  mempunyai daya antibakteri terhadap Streptococcus mutans dan  senyawa  aktif  yang  bersifat antibakteri pada ekstrak daun leilem
( Clerodendrum minahassae L.) yaitu flavonoid,  fenol,  steroid,  dan  terpenoid  ( Shrivastava N, 2007).

## KESIMPULAN
Berdasarkan penelitian ini dapat disimpulkan bahwa konsentrasi hambat minimum (KHM ekstrak daun leilem (Clerodendrum  minahassae  L.) terhadap bakteri Streptococcus  mutans terdapat  pada konsentrasi 12,5%.

## SARAN
Diharapkan  dapat  dilakukan  penelitian lanjutan  mengenai  uji  konsentrasi  bunuh minimum (KBM) ekstrak daun leilem (Clerodendrum  minahassae  L.) terhadap bakteri Streptococcus  mutans .  Selain  itu, diharapkan dapat dilakukan penelitian konsentrasi  hambat  minimum  (KHM)  ekstrak daun  leilem (Clerodendrum  minahassae  L.) terhadap bakteri rongga mulut lainnya.

## DAFTAR PUSTAKA
Ajizah  A.  2004. Sensitivitas  Salmonella typhimurium  terhadap  ekstrak  daun Psidium guavaja L. Samarinda: Program Studi Pendidikan Biologi FKIP Universitas Lambung Mangkurat. Anonim. 2013. Riset kesehatan dasar riskesdas  2013. Jakarta:  Kementerian Kesehatan RI; 2013.h.147-54.
Arini  DID,  Kinho  J.  2015.  Keragaman tumbuhan  berkhasiat  obat  di  hutan pantai  cagar  alam  tangkoko. Jurnal WASIAN . h. 1-8.
Astuningsih C, Setyani W, Hindratna H. 2014.
Uji  daya  antibakteri  dan  identifikasi isolat  dan senyawa katetin  dari daun  teh
( Camellia  sinensis L.  var  Assamica). Jurnal  Farmasi  Sains  dan  Komunitas . 11(2):h.50-7.
Atria  I.  2012. Pengaruh  mengunyah  permen karet probiotik yang mengandung lactobacillus  reuteri  terhadap  koloni bakteri  kariogenik streptococcus mutans pada saliva . [skripsi]. Bandung: Universitas Kristen Maranatha;.h.2.
Bontjura  S.  2015.  Uji  efek  antibakteri  ekstrak daun  leilem (Clerodendrum  minahassae
l.) terhadap bakteri streptococcus mutans . Jurnal ilmiah Farmasi- Pharmacon .; 4 (4):96-101.
Dwijayanti KR. Daya antibakteri minyak atsiri kulit  batang  kayu  manis    ( Cinnamomum burmanii BI.)  terhadap Streptococcus mutans penyebab  karies  gigi.  [Skripsi].
Yogyakarta: Universitas
Sanata Dharma;2011.h.1.
Gronroos  Lisa.  2000. Quantitative  and qualitative  characterization  of  mutans streptococci  in  saliva  and  in  the dentition . Helsinki: University of Helsinki.. p.7-11.
Hamada  S,  Slade  HD.  1980.  Biology, immunology, and cariogenicity of streptococcus  mutans . Microbiological reviews . 44 (2): 331-384.
Jawetz  ZE,  Melnick  JL,  Adelberg  EA.  2004.
Mikrobiologi  Kedokteran .  Edisi  23.
Jakarta: EGC; h.233.
Kalangi  C,  Kamu  VS,  Kumaunang  M.  2014.
Barcode DNA
tanaman leilem
( Clerodendrum
minahassae L. ) berdasarkan  gen  matK. Jurnal  MIPA unsrat online. 3(2): 108-112.
Kidd  EAM,  Sally  JB.  1992 Dasar-dasar karies penyakit dan penanggulangannya . Jakarta: EGC;.h.1-142.
Rosidah  NA.  2014. Daya  antibakteri  ekstrak daun  kendali  (Hippobroma  longiflora [L]  G.  Don)  terhadap  pertumbuhan streptococcus  mutans .  Artikel  Ilmiah Hasil  Penelitian  Mahasiswa.  Jember: Universitas Jember; h. 2, 4, 6.
Sabir  A.  2005.  Aktivitas  antibakteri  flavonoid propolis  trigona  sp  terhadap  bakteri streptococcus mutans (in vitro). Majalah Kedokteran  Gigi  (Dentika  J) .  Bagian Konservasi  Gigi  Universitas Hassanudin Makassar; 38 (3): 135-141.
Shrivastava  N,  Patel  T.  2007.  Clerodendrum and  heathcare:  an  Overview. Medicinal and  Aromatic  Plant  Science  and Biotechnology .  Gujarat,  India;  p.  142- 150.
Sumawinata N. 2004. Senarai istilah kedokteran gigi . Jakarta: EGC. .h.183.
Triyati  E.  1985.  Spektrofotometer  ultra-violet dan sinar tampak serta aplikasinya dalam oseanologi. Oseana ;10(1):h.39-47.