Journal Syifa Sciences and Clinical Research (JSSCR)
Volume 4 Nomor 2
Journal Homepage: http://ejurnal.ung.ac.id/index.php/jsscr , E-ISSN: 2656-9612 P-ISSN:2656-8187 DOI : https://doi.org/10.37311/jsscr.v4i2.14161
Formulasi Dan Uji Aktivitas Repellent Spray Minyak Atsiri Bunga Marigold  ( Tagetes erecta L.) Pada Nyamuk Aedes aegypti
(Formulation and Activity Test of Repellent Spray Marigold Flower Essential Oil ( Tagetes erecta L.) in Aedes aegypti Mosquitoes)
Nur Alfiah Irfayanti 1* ,  Jasmiadi 1 , Alda Ta.ri 1
1 1 Jurusan Farmasi, Fakultas MIPA, Universitas Islam Makassar, Jl. Perintis Kemerdekaan 9 No. 29 Kota Makassar 90245, Indonesia
* Penulis Korespondensi. Email: fia.irfayanti@gmail.com

## ABSTRAK
Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  aktivitas  sediaan  spray  minyak  atsiri bunga marigold (Tagetes erecta L. ) pada nyamuk Aedes aegypti . Minyak atsiri bunga marigold menggunakan metode destilasi air dengan menggunakan aquadest dan kelinci sebagai hewan uji.  Penelitian  dilakukan  dengan  mengambil  lima  perlakuan,  yaitu  satu  kelompok  kontrol negatif K(-), tiga kelompok perlakuan dengan variasi konsentrasi (P1) 2,5%, (P2) 5%, P(3) 10% dan satu kelompok kontrol positif K(+). Hasil penelitian menunjukkan bahwa repellent spray memiliki daya tolak, kontrol (-) sebesar 50,67%, konsentrasi 2,5% sebesar 68,33%, konsentrasi 5% sebesar 78,67%, konsentrasi 10% sebesar 96% dan kontrol (+) sebesar 100%. Hasil pengujian daya  proteksi  menunjukkan  bahwa repellent spray  yang  mengandung  minyak  atsiri  bunga marigold memiliki aktivitas tertinggi pada konsentrasi 10%. Berdasarkan hasil analisis statistik menunjukkan bahwa f hitung lebih besar dari f tabel 5% dan 1% dan hasil dari uji  lanjutan SNK (Newman Keuls) menunjukkan bahwa konsentrasi 10% tidak berbeda nyata dari kontrol (+).
Kata Kunci: Bunga Marigold ( Tagetes erecta L. ) , Repellent, Nyamuk Aedes aegypti
Diterima: 28-04-2022 Disetujui: 3-05-2022 Online: 15-05-2022

## ABSTRACT
The purpose of this study was to determine the activity of spray preparations of marigold flower essential oil  (Tagetes  erecta  L.)  on  the  Aedes  aegypti  mosquito.  Marigold  flower  essential  oil  using  water distillation method using aquadest and rabbits as test animals. The study was conducted by taking five treatments,  namely  one  negative  control  group  K(-),  three  treatment  groups  with  variations  in concentration (P1) 2.5%, (P2) 5%, P(3) 10% and one positive control group K( +). The results showed that  repellent  spray  had  repulsion,  control  (-)  was  50.67%,  2.5%  concentration  was  68.33%,  5% concentration was 78.67%, 10% concentration was 96% and control (+ ) by 100%. The results of the protection test showed that the repellent spray containing marigold flower essential oil had the highest activity at a concentration of 10%. Based on the results of statistical analysis showed that the calculated f is greater than f table 5% and 1% and the results of the follow-up test of SNK (Newman Keuls) showed that the concentration of 10% was not significantly different from the control (+).

## Keywords:
Marigold flower (Tagetes erecta L.), Repellent, Aedes aegypti mosquito
Received: 2022 -04-28 Accepted: 2022 -05-3 Online: 2022 -05-15

## 1. Pendahuluan
DBD adalah penyakit demam akut yang disebabkan oleh virus dengue, yang masuk  ke  peredaran  darah  manusia  melalui  gigitan  nyamuk dari Aedes aegypti dan Aedes albopictus sebagai vektor utama penularan penyakit DBD [1].  Kasus DBD secara nasional yang dilaporkan pada tahun 2019 tercatat sebanyak 138.127 kasus. Jumlah ini meningkat dibandingkan tahun 2018 sebesar 65.602 kasus. Inside rate (IR) DBD pada tahun 2019 sebesar 51,48 per 100.000 penduduk angka ini menunjukkan peningkatan dibandingkan dua tahun sebelumnya yaitu tahun 2016 dan 2017 ketika IR DBD sebesar 26,1  dan  24,75  per  100.000  penduduk.  IR  DBD  di  Sulawesi  Selatan  per  100.000 penduduk pada tahun 2019 sebesar 36,89 ini menunjukkan Sulawesi Selatan memiliki IR rendah dibandingkan dengan provinsi lainnya. Angka case fatality rate (CFR) atau angka kematian DBD di Sulawesi Selatan sebesar 0,58 angka kematian [1].
Ada berbagai macam cara untuk menghindari gigitan nyamuk salah satunya dengan  pemakaian  anti  nyamuk  berbentuk  lotion,  cream,  spray  sebagai repellent . Repellent adalah  bahan  yang  memiliki  kemampuan  untuk  melindungi  manusia  dari gigitan nyamuk bila dioleskan ke permukaan kulit. Di Indonesia, hampir semua lotion anti  nyamuk  yang  beredar  mengandung  bahan  kimia  sintesis  berbahanaktif diethyltoluamide (DEET).  Efek  samping  seperti  menimbulkan  masalah  iritasi  ringan maupun  berat  terhadap  kulit.  Untuk  mengurangi  dampak  yang  ditimbulkan  dari penggunaan  insektisida  kimia  dan  bahan  kimia  sintesis  yang  mengandung  racun, diperlukan cara lain yang lebih aman, efektif, dan efisien serta ramah lingkungan, yaitu insektisida daritumbuh-tumbuhan  [2].
Berdasarkan  penelitian  yang  telah  dilakukan  terdapat  13  tanaman  yang mampu hidup dengan baik dan mudah ditemukan diwilayah Indonesia dan memiliki kemampuan repellent dengan  daya  tolak  diatas  60%.  Salah  satunya  adalah  bunga marigold  [3–5].  Bunga  marigold  mengandung  senyawa  eugenol,  flavanoid,  alkaloid, saponin,  tanin  dan  triterpenoid  memberikan  efek repellent terhadap  nyamuk Aedes aegypti [6,  7].  Minyak  atsiri  dengan  kandungan  eugenol  dapat  mengusir  nyamuk dengan cara mengganggu indera penciumannya [8].
Berdasarkan penelitia sebelumnya dijelaskan bahwa minyak atsiri bunga tahi kotok ( Tagetes erecta L .) yang dibuat dalam bentuk obat anti nyamuk elektrik cair dengan konsentrasi 100% memiliki daya bunuh terhadap nyamuk Culex quiquefasciatus [7, 8]. Berdasarkan  uraian  diatas,  maka  dapat  dirumuskan  masalah  yaitu  apakah  formulasi minyak atsiri bunga marigold (Tagetes erecta L .) dalam bentuk sediaan spray memiliki aktivitas  sebagai repellent pada  nyamuk Aedes  aegypti. Tujuan  penelitian  ini  untuk mengetahui aktivitas sediaan spray minyak atsiri bunga marigold (Tagetes erecta L .) pada nyamuk Aedes aegypti.
2.  Metode

## Alat dan Bahan
Alat-alat  yang  digunakan  adalah  kurungan  nyamuk,  alat  destilasi,  labu  ukur (Pyrex ® ), corong pisah (Pyrex ® ), gelas kimia (Pyrex ® ), gelas ukur (Pyrex ® ), timbangan analitik (Ohaus ® ), corong, botol repellent spray, pipet skaladan lain-lain.
Bahan-bahan yang digunakan adalah aquadest, bunga marigold (Tagetes erecta L .), n-heksan  ( C 6 H 12 N 4 ) ,  natrium  sulfat  ( Na 2 SO 4 ) ,  etanol  70%  (C 2 H 6 OH)  dan propilenglikol (C 3 H 8 O 2 ) .

## Prosedur Kerja Penelitian
Pengambilan Sampel Bunga Marigold ( Tagetes erecta. L)
Sampel Bunga Marigold ( Tagetes erecta. L), diperoleh dari Desa Kurrusumanga, Kecamatan  Belopa,  Kabupaten  Luwu,  Sulawesi  Selatan  (Lintang  Selatan  -3 o 38’84.0” Bujur Timur 120 o 33’65.7). Bunga yang dipilih adalah bunga berwarna oranye dipetik satu persatu secara manual.

## Preparasi Sampel
Bunga  marigold  yang  telah  dikumpulkan  sebanyak  500  gram    dibersihkan kelopaknya  sehingga  hanya  tersisa  mahkota  bunga.  Mahkota  bunga  marigold  yang sudah bersih ditimbang beratnya.

## Proses Destilasi Minyak Atsiri Bunga Marigold
Bunga marigold kemudian didestilasi untuk memisahkan minyak atsiri. Cara yang digunakan yaitu bunga marigold sebanyak 100 gram dimasukkan ke dalam labu alas bulat. Kemudian ditambahkan n-heksan sebanyak 40 mL dan tambahkan aquadest sampai  semua  simplisia  terendam  sebanyak  1000  mL,  kemudian  dipanaskan  sampai didapatkan tetesan minyak dan air pada kaca erlenmeyer yang telah dipasang pada alat destilasi, lalu dipisahkan komponen minyak dan air menggunakan corong pisah dengan cara dimasukkan minyak atsiri kedalam corong pisah dan tambahkan natrium sulfat sebanyak 30 mL sampai diperoleh minyak atsiri yang murni . Dihitung rendemennya kemudian  minyak  disimpan  dibotol  vial  dan  disimpan  ditempat  yang  terlindung cahaya.

## Rancangan Formula

## Pembuatan formula
Pertama-tama  masukkan  minyak  atsiri  ke  dalam  labu  ukur  kemudian tambahkan dengan propilenglikol lalu di tambahkan etanol 70% sedikit demi sedikit hingga minyak atsiri larut dan tercampur rata dengan semua bahan, lalu dimasukkan ke dalam wadah botol spray 100 mL dengan konsentrasi minyak atsiri yang berbeda. Berikut merupakan rancangan formula.
Tabel 1. Hasil Pengamatan Organoleptik Bentuk fisik Formula Penampakan Aroma Kelarutan Kontrol (-) 2,5% 5% 10% Jernih Khas Larut Jernih Khas Larut Jernih Khas Larut Jernih Khas Larut

## Pengujian Pada Nyamuk
Pengujian dilakukan dengan menggunakan 5 kurungan berukuran panjang 30 cm, lebar 30 cm, dan tinggi 30 cm, kurungan terbuat dari plastik berbingkai kayu. Di bagian  sisi  depan  terdapat  1  lubang  untuk  memasukan  kelinci  dan  diberi  jaring sepanjang ± 20 cm. Populasi yang digunakan dalam penelitian ini adalah nyamuk Aedes aegypti betina stadium dewasa, nyamuk dewasa tersebut dari hasil pengembangbiakkan yang  diperoleh  dari  Fakultas  Kedokteran  Universitas  Hasanuddin,  sampel  yang digunakan berupa nyamuk aedes aegypti sebanyak 375 nyamuk yang berusia 2-5 hari, hal ini dikarenakan pada umur tersebut nyamuk dianggap telah produktif [10].
Penelitian ini menggunakan 5 ekor kelinci percobaan dalam kondisi yang sehat, sebelum percobaan kelinci terlebih dahulu diaklimatisasi selama 5 hari agar kelinci tidak stress dan sebelum perlakuan diberi makan setelah itu dicukur bagian punggung kelinci dengan luas 4 cm x 4 cm menggunakan alat cukur elektrik agar dapat memperlihatkan pembuluh darahnya.
Langkah-langkah pengujian terhadap subjek uji :
a. Terlebih dahulu menyiapkan alat dan bahan yang akan digunakan dalam penelitian seperti  kurungan  nyamuk,  stopwatch, nyamuk Aedes  aegypti dewasa  betina,  spray yang sudah dibuat dan subjek uji yaitu kelinci
b. Proses  selanjutnya  adalah  nyamuk Aedes  aegypti dipindahkan  dari  cup  kedalam kurungan uji yang dilakukan secara manual
c. Setelah  nyamuk Aedes  aegypti betina  berjumlah  25  ekor  dalam  masing-masing kendang  terpenuhi,  langkah  selanjutnya  adalah  memasukkan  kelinci  yang  telah dicukur terlebih dahulu dan telah disemprotkan dengan spray yang mengandung beberapa konsentrasi kedalam kurungan
d. Percobaan dilakukan selama 3 jam yang dimulai pada pukul  15.00  - 17.00 dengan waktu pengamatan selama 20 menit tiap konsentrasi, diulangi sebanyak 3 kali
e. Amati dan hitung jumlah nyamuk yang hinggap pada kelinci.
Hasil yang diperoleh melalui daya proteksi repellent dengan rumus :
Keterangan : K  =  Jumlah nyamuk yang diberi perlakuan R  = Jumlah nyamuk yang hinggap pada hewan coba perlakuan [2].

## 3.  Hasil dan Pembahasan

## Hasil Destilasi Minyak Atsiri Bunga Marigold
Penelitian  menggunakan  sampel  bunga  marigold,  bagian  mahkota  bunga marigold  didestilasi  menggunakan  destilasi  air  karena  metode  tersebut  merupakan metode yang sederhana dan dapat digunakan untuk bahan-bahan yang tahan terhadap pemanasan. Kandungan utama minyak atsiri yang terdapat pada bunga marigold yaitu terdiri  dari  senyawa  terpenoid  yang  didalamnya  terkandung  bahan  aktif  berupa eugenol. Penelitian Yeh mengenai  eugenol  memiliki stabilitas  termal yang baik  [11]. Kandungan eugenol yang diuji tidak berubah meskipun telah dipanaskan pada suhu 180 o C selama 3 jam, sehingga kandungan eugenol pada bunga marigold tidak rusak apabila pada suhu 70 o C, destilasi pada penelitian ini dilakukan selama 6 jam.
Tabel 2. Hasil Perhitungan Berat Rendemen Sampel Berat Simplisia (g) Bobot Minyak Atsiri (g) Berat Rendamen (%) Bunga Marigold 100g 18,62g 18,62 %
Tabel  2  menunjukkan  bahwa  hasil  rendemen  yang  diperoleh  dari  destilasi minyak atsiri bunga marigold dengan perbandingan 1 : 10 yaitu 18,62%. Diperoleh hasil minyak atsiri dalam bentuk cairan jernih dan memiliki aroma khas seperti pada gambar berikut :

## Gambar 1. Minyak Atsiri Hasil Destilasi   Bunga Marigold
Pada penelitian yang dilakukan oleh Leila hasil rendemen yang diperoleh dari minyak atsiri bunga marigold yaitu 2,39%, penyulingan dilakukan selama 3 jam [12]. Hal  ini  berbeda  dengan  penelitian  yang  telah  dilakukan  karena  kemungkinan disebabkan oleh tempat tumbuh, suhu dan iklim pada daerah pengambilan sampel [13].

## Formula Sediaan Spray
Sediaan  spray  minyak  atsiri  bunga  marigold  dibuat  menggunakan propilenglikol sebagai kosolven dan etanol sebagai pembawa. Umumya minyak atsiri dapat larut dengan baik dalam etanol dan pelarut organik lainnya, namun sukar larut dalam  air  dan  kurang  larut  dalam  etanol  yang  kadarnya  kurang  dari  70%  [11,12]. Minyak atsiri dengan menggunakan propilen glikol sebagai kosolven dapat menambah kelarutan suatu zat. Konsentrasi propilen glikol sebagai kosolven dalam sediaan aerosol 10-30% [15,16]. Berdasarkan hasil formulasi dapat dilihat pada gambar berikut:
Gambar 2. (a) K(-) (b) Repellent 2,5% (c) Repellent 5% (d) Repellent 10%
Dari hasil pembuatan repellent spray minyak atsiri bunga marigold, spray yang mengandung propilenglikol dan etanol terlihat jernih dan memiliki bau yang khas.

## Hasil Pengujian Pada Nyamuk Aedes aegypti
Berdasarkan  dari  perilaku  nyamuk  yang  hinggap  selama  penelitian menunjukkan ada beberapa yang memilih untuk menggigit hingga kenyang, dan ada juga  yang  hinggap  sebentar  lalu  terbang  hal  itu  dipicu  oleh  gerakan  kelinci  yang terganggu akibat aktivitas nyamuk yang terlalu sering menghinggap dan menggigit.
Tabel 3. Hasil Pengamatan Daya Tolak Nyamuk
Konsentrasi Ulangan Jumlah Nyamuk (Kontrol -) 2,5% 5% 10% (Kontrol +) NM  NH  DT  NM  NH  DT  NM  NH  DT  NM  NH  DT NM  NH  DT I 25 11 14 44%  15 10 60%  20 5 80%  23 2 92%  25 0 100% II 25 12 15 48%  17 8 68%  19 6 76%  25 0 100%  25 0 100% III 25 15 10 60%  17 8 68%  20 5 80%  24 1 96%  25 0 100% 50.67% 68.33% 78.67% 96% 100%
Ket : NM : Nyamuk Menghindar NH : Nyamuk Hinggap DT : Daya Tolak
Hasil  perhitungan  daya  tolak  nyamuk  pada  konsentrasi  2,5%  yaitu  68,33%, konsentrasi 5% yaitu 78,67% konsentrasi 10% yaitu 96% pada k(-) yaitu 50,67%, terdapat perbedaan repellent spray,  seiring  meningkatnya  konsentrasi  yang  digunakan  terjadi juga peningkatan daya tolak terhadap nyamuk, terdapat nyamuk yang hinggap untuk spray yang tidak mengandung minyak atsiri dan yang mengandung minyak atsiri, hal ini  membuktikan  bahwa  formulasi  minyak  atsiri  bunga  marigold  memiliki  aktivitas pada nyamuk aedes aegypti .  Semakin tinggi konsentrasi minyak atsiri maka semakin baik
a b c
a
a d
a
pula daya tolaknya terhadap nyamuk [18]. Minyak atsiri dari bunga marigold memiliki sifat reppelent dan memiliki aroma  yang cukup menyengat.
Penelitian bunga marigold mengandung eugenol, flavonoid, alkaloid, saponin, tanin dan triterpenoid yang memberikan efek repellent terhadap nyamuk Aedes aegypti [6]. Penelitian eugenol yang terkandung dalam minyak atsiri dapat digunakan sebagai bahan repellent alami  [19].  Eugenol  mengeluaran  bau  khas  yang  terdeteksi  melalui antena  nyamuk,  bau  ini  nantinya  diterjemahkan  oleh  nyamuk  sebagai  sesuatu  yang harus dihindari yang kemudian akan mengubah perilaku nyamuk untuk tidak hinggap.
Hasil  uji  aktivitas repellent didukung  oleh  hasil  analisis  statistik  yang menunjukkan bahwa ada perbedaan pengaruh pada i kontrol (-), konsentrasi 2,5%, 5%, 10% dan kontrol (+) terhadap kemampuan menolak nyamuk. Dilihat dari f hitung lebih besar dari f tabel 5% dan 1%, uji lanjutan dibutuhkan untuk melihat perlakuan mana yang  memberikan  perbedaan  yang  signifikan,  sehingga  uji  lanjutan  yang  digunakan yaitu uji SNK (Newman Keuls) karena nilai koefisien keseragaman (KK) yang diperoleh adalah 6,3%. Hasil dari uji SNK didapatkan bahwa untuk P1 – P2 menunjukkan hasil yang tidak signifikan yang artinya adanya perbedaan yang tidak nyata antar perlakuan.

## 4.  Kesimpulan
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  telah  dilakukan  dapat  disimpulkan  bahwa spray  minyak  atsiri  bunga  marigold (Tagetes  erecta L. ) memberikan  aktivitas repellent pada nyamuk Aedes aegypti dengan daya tolak pada konsentrasi 2,5% sebesar 68,33%, konsentrasi 5% sebesar 78,67%, konsentrasi 10% sebesar 96%

## Referensi
[1]  R. I. Kemenkes, “Profil Kesehatan Indonesia Tahun 2019, Jakarta.” 2020.
[2]  A. Kardinan and A. Dhalimi, “Potensi adas (Foeniculum vulgare) sebagai bahan aktif lotion anti nyamuk demam berdarah (Aedes aegypti),” 2010.
[3]  M. Marini and H. Sitorus, “Beberapa Tanaman yang Berpotensi sebagai Repelen di Indonesia,” SPIRAKEL , vol. 11, no. 1, pp. 24–33, 2019.
[4]  M. P. Sari and R. P. Susilowati, “EFEKTIVITAS INFUSA UMBI BAWANG MERAH (Allium  cepa)  DAN  KULIT  JERUK  LIMAU  (Citrus  amblycarpa)  TERHADAP LARVA Aedes aegypti,” Vektora J. Vektor Dan Reserv. Penyakit , vol. 12, no. 2, pp. 147–154, 2020.
[5]  E.  E.  N.  AZIZAH,  “Daya  Insektisida  Alami  Berbahan  Dasar  Bunga  Tahi  Kotok (Tagetes  erecta  L.)  Konsentrasi  50%  terhadap  Nyamuk  Culex  quinquefasciatus Dewasa,” PhD Thesis, Universitas Gadjah Mada, 2017.
[6]  N.  Shinta,  “Uji  aktivitas  repelen  ekstrak  etanol  bunga  marigold  (Tagetes  erecta) terhadap nyamuk Aedes aegypti,” Pharmauho J Farm. Sains Dan Kesehat. , vol. 6, no. 2, pp. 54–59, 2020.
[7]  M. M. Cutwa and G. F. O’Meara, Photographic guide to common mosquitoes of Florida . Florida  Medical  Entomology  Laboratory,  University  of  Florida  Jacksonville  …, 2006.
[8]  A.-T.  H.  Mossa,  “Green  pesticides:  Essential  oils  as  biopesticides  in  insect-pest management,” J. Environ. Sci. Technol. , vol. 9, no. 5, p. 354, 2016.
[9]  B. Khanal, “Effects of growing conditions of marigold in Ilam district, Nepal,” Am. J. Plant Sci. , vol. 5, no. 22, p. 3389, 2014.
[10]  W.  H.  Organization, International  health  regulations  (2005) .  World  Health Organization, 2008.
[11]  H.-F. Yeh, C.-Y. Luo, C.-Y. Lin, S.-S. Cheng, Y.-R. Hsu, and S.-T. Chang, “Methods for thermal stability enhancement of leaf essential oils and their main constituents from indigenous cinnamon (Cinnamomum osmophloeum),” J. Agric. Food Chem. , vol. 61, no. 26, pp. 6293–6298, 2013.
[12]  L. Amuamuha, A. Pirzad, and H. Hadi, “Effect of varying concentrations and time of Nanoiron foliar application on the yield and essential oil of Pot marigold,” Int. Res. J. Appl. Basic Sci. , vol. 3, no. 10, pp. 2085–2090, 2012.
[13]  S.  Nur,  J.  A.  Baitanu,  and  S.  A.  Gani,  “Pengaruh  tempat  tumbuh  dan  lama penyulingan secara hidrodestilasi terhadap rendemen dan profil kandungan kimia minyak atsiri daun kemangi (Ocimum canum Sims L.),” J. Fitofarmaka Indones. , vol. 6, no. 2, pp. 363–367, 2019.
[14]  A. Agusta, Minyak atsiri tumbuhan tropika Indonesia . Penerbit ITB, 2000.
[15]  E. B. Vadas, “Stability of Pharmaceutical Products. dalam Remington: The Science and  Practice  of  Pharmacy.  Volume  1.  Editor:  Alfonso  Gennaro.”  London: Lippincott Williams & Wilkins, 2010.
[16]  R. C. Rowe, P. Sheskey, and M. Quinn, Handbook of pharmaceutical excipients . Libros Digitales-Pharmaceutical Press, 2009.
[17]  E. K. Patel, A. Gupta, and R. J. Oswal, “A review on: mosquito repellent methods,” IJPCBS , vol. 2, no. 3, pp. 310–317, 2012.
[18]  B. Kuncoro and M. Y. Hasibuan, “Formulasi Sediaan Spray Daun Dan Batang Serai Wangi (Cymbopogon Nardus L.) Sebagai Antinyamuk Culex Sp,” J. Farmagazine , vol. 7, no. 1, pp. 45–50, 2020.
[19]  M. Ginting, D. A. Pinem, and C. F. Zuhra, “ANALISIS KOMPONEN KIMIA, UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAN UJI ANTIOKSIDAN MINYAK ATSIRI DAUN BUNGA TAHI AYAM (Tagetes Erecta L),” 2016.