UJI FITOKIMIA DAN PENENTUAN Inhibition Concentration 50% PADA BEBERAPA TUMBUHAN OBAT DI PULAU TIDORE
Wiwin Abdullah 1) , Max Revolta J. Runtuwene 1) , dan Vanda Selvana Kamu 1)
1) Jurusan Kimia FMIPA Universitas Sam Ratulangi, Manado e-mail: wiwinabdullah@ymail.com ; max_runtuwene@yahoo.com ; vandakamu@yahoo.com

## ABSTRAK
Penelitian  ini  dilakukan  untuk  mengetahui  senyawa  aktif  yang  terkandung  melalui  pengujian fitokimia dan aktivitas antioksidan pada tumbuhan obat di pulau Tidore. Uji aktivitas antioksidan menggunakan  metode  DPPH  dilanjutkan  dengan  perhitungan Inhibition  Concentration 50% (IC 50 ).  Hasil  yang  diperoleh  adalah  biji  buah  mojoi  terkandung  senyawa  alkaloid  dan  saponin, buah coro terkandung alkaloid, flavonoid, dan saponin, pada daun ofo terkandung  alkaloid, tanin, flavonoid,  steroid,  dan  saponin  dan  pada  rimpang  kuso  mafola  terkandung  alkaloid,  tanin, flavonoid,  steroid,  dan  saponin.  Nilai  IC 50 sebagai  berikut  biji  rimpang  kuso  mafola  37,30  ppm, buah coro 250,17 ppm, daun ofo 976,10 ppm  dan buah mojoi 1001, 07 ppm.
Kata kunci :Tumbuhan  obat, DPPH, antioksidan dan uji fitokimia.
PHYTOCHEMICALS TEST AND DETERMINATION Inhibition Concentration 50% ON SOME MEDICINAL PLANTS IN THE TIDORE ISLAND

## ABSTRACT
This  study  was  conducted  to  determine  the  active  compounds  contained  in  an  assessment  of phytochemical  and  antioxidant  activity  in  the  medicinal  plants  of  Tidore  island.  The  test antioxidant activity was used DPPH method. In the test results to the phytochemical ,  that  mojoi fruit seeds contained alkaloids and saponins, fruit coro (alkaloids, flavonoids, and saponins), ofo leaves  (alkaloids,  tannins,  flavonoids,  steroids,  and  saponins)  and  ethanol  extract  of  rhizome kusomafola (alkaloids, tannins, flavonoids, steroids, and saponins.  In   calculation of IC 50 values for rhizome kusomafola 37.30 ppm, 250.17 ppm coro fruit, 976.10 ppm ofo leaf extract, and fruit seed extract mojoi 1001.07 ppm.
Keywords: Medicinal plants, DPPH, antioxidant and phytochemical test.

## PENDAHULUAN
Masyarakat  dengan  pola  hidup  yang semakin  moderen  tak  terlepas  dari  ancaman dan  tuntutan  kesehatan,  sehingga  berbagai penyakit  dapat  timbul  dari  pola  hidup  yang kurang  sehat.  Bahaya  penyakit  yang  timbul akibat pola hidup yang kurang sehat ini, salah satunya  disebabkan  oleh  radikal  bebas. Adanya  radikal  bebas  di  dalam  tubuh manusia  berperan  dalam  patologi  dari berbagai penyakit degeneratif.
Keanekaragaman  hayati  Indonesia  sangat berpotensi  dalam  penemuan  senyawa  baru sebagai  antioksidan.  Senyawa  antioksidan memiliki  peran  yang  sangat  penting  dalam kesehatan.
Karakter
utama senyawa
antioksidan adalah
kemampuannya menangkap  radikal  bebas  (Prakash,  2001). Antioksidan  adalah  zat  yang  dapat  menunda, memperlambat  dan  mencegah  terjadinya proses  oksidasi  atau  menetralisir  radikal bebas  (Fajriah et  al. ,  2007).  Pada  umumnya antioksidan  mengandung  struktur  inti  yang sama yaitu mengandung cincin benzena tidak jenuh  disertai  gugus  hidroksi  atau  gugus amino (Ketaren, 1986).
Di  pulau  Tidore  provinsi  Maluku utara  terdapat  tumbuhan  obat  yang  menurut masyarakat setempat digunakan untuk pengobatan penyakit kanker seperti daun ofo, biji  buah  mojoi,  buah  coro,  dan    rimpang kuso mafola.
Penelitian  ini  dilakukan    untuk menganalisis senyawa fitokimia dan aktivitas antioksidan pada ekstrak etanol daun ofo, biji buah  mojoi,  buah  coro  dan  rimpang  kuso mafola  yang  biasa  digunakan  sebagai tumbuhan  obat  oleh  masyarakat  di  pulau Tidore.

## BAHAN DAN METODE
Penelitian ini dilakukan di Laboratorium  Kimia  Organik,  Laboratorium biokimia,  Laboratorium  Advance  Fakultas Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam Universitas  Sam  Ratulangi  Manado  pada bulan juni hingga oktober 2014.

## Bahan dan Alat
Bahan  baku  yang  digunakan  dalam penilitian  ini  adalah  biji  buah  mojoi,  buah coro, rimpang kuso mafola dan daun tanaman ofo yang diperoleh dari pulau Tidore Provinsi Maluku Utara.
Bahan  kimia  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  etanol  96%,  larutan H 2 SO 4 pekat, pereaksi mayer dan Dragendorff,  kloroform,  ammonia,  HCl pekat,  FeCl 3 1%,  serbuk  Mg,  asam  asetat anhidrida, 1,1- difenil -2- pikrilhidrazil (DPPH) dan akuades.
Peralatan  utama  yang  digunakan dalam penelitian adalah spektrometer UV-Vis Shimadzu Pharma 1800.

## Persiapan Sampel
Daun  ofo  yang  telah  dipetik,  buah coro  dan  biji  buah  mojoi  yang  telah  dibelah dicuci, dikeringkan diudara terbuka, dipotong kecil-kecil, kemudian dikeringanginkan selama  20  hari,  sedangkan  untuk  sampel rimpang  tanaman  kuso  mafola  awalnya dikupas  dan  bersihkan  bagian  sisik  halus yang  menempel,  dicuci,  dan  dipotong  kecil- kecil,  kemudian  dikeringanginkan  selama  20 hari.  Setelah  kering  kemudian  sampel tumbuhan  obat  tersebut  digiling  dan  diayak hingga halus dan hasil ayakan di simpan pada wadah tertutup  untuk dipakai pada perlakuan selanjutnya.

## Ekstraksi
Ekstraksi  sampel  dilakukan  dengan cara  maserasi  selama  24  jam  menggunakan
etanol 96%. Filtrat yang diperoleh dievaporasi sehingga diperoleh ekstrak pekat.

## Uji Fitokimia
Uji  fitokimia  menggunakan  metode Harbone (1987).

## Uji Aktivitas Antioksidan
Uji Aktivitas Antioksidan menggunakan    Metode  DPPH    berdasarkan Burda dan Oleszek (2001).
Nilai  DPPH  yang  dinyatakan  sebagai  persen inhibisi  (%  inhibisi)  dihitung  berdasarkan persamaan sebagai berikut:
% 𝐼𝑛ℎ𝑖𝑏𝑖𝑠𝑖
= (𝐴 𝑐𝑜𝑛𝑡𝑟𝑜𝑙 −   𝐴 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 )
𝐴 𝑐𝑜𝑛𝑡𝑟𝑜𝑙 𝑥 100%
Keterangan: A control = Absorbansi DPPH A sampel = Absorbansi DPPH + sampel
Selanjutnya ditentukan nilai Inhibition Concentration 50%  (IC 50 )  yaitu  konsentrasi sampel  yang  dapat  meredam  radikal  bebas DPPH  sebanyak  50%  dengan  menggunakan persamaan y=ax+b.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Rendemen
Rendemen tiap sampel yang dihasilkan, dipaparkan dalam tabel  berikut:
Tabel 1. Hasil Rendemen Sampel
Sampel Tanaman Berat serbuk (g) Ekstrak kental (g) Rendemen (%) Mojoi 80 8.65 10.81 Kuso mafola 80 5.52 6.90 Daun Ofo 80 3.57 4.47 Buah Coro 80 5.40 6.76
Dari  hasil  rendemen  pada  ekstrak etanol  empat  jenis  tumbuhan  obat  diatas diketahui  memiliki  rendemen  yang  kurang tinggi namun terdapat ekstrak biji buah mojoi yang  memiliki  rendemen  tinggi  dari  yang lainnya,  hal  ini  disebabkan  salah  satunya karena  faktor  kehalusan  bahan.  Menurut
Sembiring et  al. (2006),  kehalusan  bahan
mempengaruhi rendemen ekstrak yang dihasilkan.  Semakin  halus  bahan  yang digunakan,  maka  akan  semakin  tinggi rendemen yang dihasilkan, dimana permukaan dari sampel semakin luas sehingga  memperbesar  terjadinya  kontak antara  partikel  sampel  dengan  pelarut.  Selain itu,    proses  dan  waktu  perendaman.  Semakin lama  sampel  direndam  dengan  pelarut,  maka kontak  pelarut  dengan  sampel  akan  semakin baik  sehingga  komponen  didalam  sampel dapat terekstrak dengan baik.

## Uji Fitokimia
Hasil  uji  fitokimia  dapat  dilihat  pada tabel berikut.
Tabel 2 . Hasil Uji Fitokimia Senyawa Ekstrak Hasil Alkaloid Rkm D.Ofo B.Coro B.Mojoi + + + + Tanin Rkm D.Ofo B.Coro B.Mojoi + + - - Flavonoid Rkm D.Ofo B.Coro B.Mojoi + + + - Steroid Rkm D.Ofo B.Coro B.Mojoi - + - - Triterpenid Rkm D.Ofo B.Coro B.Mojoi - - - - Saponin Rkm D.Ofo B.Coro B.Mojoi + + + +
Keterangan :(+)  = terdapat dalam sampel (- ) = tidak terdapat dalam sampel (RKM)=Rimpang kuso mafola (D.O)= Daun Ofo
(B.C)=Buah coro (B.M)-Biji Mojoi Adanya alkaloid pada ekstrak tumbuan obat  dengan menggunakan pereaksi mayer, pereaksi wagner dan pereaksi dragendorf.  Pereaksi  mayer  mengandung kalium iodida dan merkuri klorida. Sementara  pereaksi  wagner  mengandung kalium  iodida  dan  iod.  Metabolisme  reaksi wagner ini terjadi jika ada asam, reaksi dapat terjadi  karena  adisi  ion  hidrogen  pada  ikatan rangkap  dua  lalu  membentuk  karbokation. Sedangkan  pereaksi  dragendorf  mengandung bismut nitrat dan merkuri klorida dalam asam nitrit berair (Seniwaty et al. 2009).
Pengujian tanin untuk ektrak tumbuhan obat dapat menghasilkan perubahan  warna  menjadi  hijau  kehitaman atau biru pada ekstrak dan hasil positif hanya pada  ekstrak  daun  ofo  dan  ekstrak  rimpang kuso mafola yang berwarna hijau.
Pada identifikasi flavonoid menunjukkan  hasil  yang  positif    karena warna larutan berubah menjadi warna kuning atau  merah    ketika  sampel  ditambahkan serbuk Mg dan HCl pekat, yang dalam hal ini menandakan keberadaan senyawa jenis flavonoid.  Menurut  Robinson  (1995),  warna merah  yang  dihasilkan  menandakan  adanya flavonoid  akibat  dari  reduksi  oleh  asam klorida  pekat  dan  magnesium.  Hasil  positif ini ditunjukan pada ekstrak daun ofo, ekstrak rimpang  kuso  mafola    dan  buah  coro. Sedangkan  untuk  ekstrak  biji  buah  mojoi menunjukan  hasil  negatif  ini  disebabkan karena  tidak  terjadi  reaksi  Mg  dan  HCl dengan flavonoid.
Pada identifikasi steroid menunjukkan hasil positif untuk jenis ekstrak daun ofo dan rimpang kuso mafola. Hal ini di buktikan  dengan  terjadinya  perubahan  warna larutan  menjadi  warna  hijau  ketika  di tambahkan  dengan  CH 3 COOH  glasial  dan H 2 SO 4 pekat  yang  menandakan  adanya senyawa  steroid.  Sedangkan  hasil  negatif  di tunjukkan  oleh  identifikasi  triterpenoid  pada keempat  jenis  ekstrak  di  karenakan  tidak terjadinya  perubahan  warna  menjadi  merah atau ungu.
Pada  pengujian  saponin  dari  empat ekstrak  tumbuhan  obat  ini  menunjukan  hasil positif    yang  berarti  mengandung  senyawa
saponin dengan terbentuknya busa yang stabil namun  pada  ekstrak  buah  coro  busa  yang terbentuk  tidak  stabil  dan  mulai  hilang busanya ketika 2 menit kemudian.

## Uji aktivitas Antioksidan
Hasil  perhitungan  IC 50 tiap  sampel dipaparkan pada tabel berikut.
Tabel 3. Nilai IC 50 Sampel IC 50 ( ppm) Rimpang kuso mafola 37, 30. Biji buah mojoi 1001,07 buah Coro 250.27 daun Ofo 976.09 Berdasarkan  dari  perhitungan  IC 50
menunjukan  bahwa  ekstrak  etanol  biji  buah mojoi  memiliki  aktivitas  antioksidan  dengan nilai  IC 50 sebesar  1001,07  ppm,  ekstrak  buah coro  pada  250.27  ppm,  ekstrak  daun  ofo 976.09  ppm,  dan  ekstrak  rimpang  kuso mafola  sebesar  37,  30  ppm.  Semakin  kecil nilai  IC 50 berarti  semakin  tinggi  aktivitas antioksidan.  Secara  spesifik,  suatu  senyawa dikatakan  sebagai  antioksidan  yang  sangat kuat  bila  nilai IC 50 <  50  ppm,  kuat  bila  nilai IC 50 bernilai  50-100  ppm,  sedangkan  bila nilai IC 50 bernilai  100-150  ppm,  dan  lemah bila  nilai IC 50 bernilai  151-200  ppm (Molyneux, 2004).
Penentuan  aktivitas  antioksidan  dilakukan dengan menggunakan metode DPPH.
Pengujian  aktivitas  dengan  metode  DPPH merupakan  metode  yang  sederhana,  mudah dan  hanya  menggunakan  sampel  dalam jumlah  yang  sedikit  dengan  waktu  yang singkat.  Hasil  reaksi  antara  DPPH  dengan senyawa  antioksidan  dapat  diketahui  melalui perubahan  warna  DPPH  dari  ungu  pekat menjadi  kuning  akibat  terjadi  resonansi struktur DPPH.

## Kesimpulan
1. Ekstrak rimpang kuso mafola mengandung alkaloid, steroid,
triterpenoid,  saponin  dan  flavonoid, daun  ofo  terkandung  alkaloid,  saponin, flavonoid, steroid, dan tannin, buah coro terkandung  senyawa  flavonoid,  saponin dan  alkaloid,  serta  buah  biji  mojoi terkandung senyawa alkaloid dan saponin.
2. Ekstrak  etanol  tumbuhan  obat  memiliki aktivitas antioksidan dengan nilai persen inhibisi  tertinggi  pada  ekstrak  rimpang kuso  mafola  diikuti  oleh  ekstrak  buah coro,  biji  buah  mojoi  dan  ekstrak  daun ofo.

## Saran
1. Perlu  dilakukan  pengujian  aktivitas antioksidan pada komponen aktif dengan menggunakan pelarut lain pada beberapa tanaman obat ini.
2. Dapat  dilakukan  pengujian  toksisitas terhadap  ekstrak  beberapa  tumbuhan obat ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Burda, S., and W. Oleszek. 2001. Antioxidant and Antiradical Activities of Flavonoids. J . Agric . Food Chem . 49: 2774-2779.
Fajriah,  S.,  A.  Darmawan,  A.  Sundowo,  dan
N.Artanti.2007. Isolasi Senyawa Antioksidan  dari  Ekstrak  Etil  Asetat Daun Benalu Dendrophthoe pentandra L. Miq yang Tumbuh pada Inang Lobi-Lobi. Jurnal Kimia Indonesia . 2: 17-20.
Harborne,    J.B.  1987.  Metode  Fitokimia.  Ed ke-2.  Padmawinata  K,  Soediro  I, Terjemahan  Pythochemical  Methods. ITB. Bandung.
Ketaren,  S.  1986. Pengantar  Teknologi
Minyak dan Lemak Pangan .
Universitas Indonesia Press, Jakarta.
Molyneux, P. 2004. The use of the stable free radikal diphenyl picrylhydrazyl (DPPH)  for  estimating  antioxidant activity. Journal Science of Technology. 2 :211-219.
Prakash,  A.  2001. Antioxidant  Activity . Medallion  Laboratories:  Analytical Progress . 2 :1-4.
Robinson,  T.  1995. Kandungan  Organik Tumbuhan Tinggi . ITB. Bandung.
Gambar 28. saponin pada buah coro
Sembiring, B. Br., Ma’mun dan Ginting, E. I. 2006.  Pengaruh  kehalusan  Bahan  dan
Lama Ekstraksi Terhadap Mutu Ekstrak Temulawak ( Curcuma xanthorriza  Roxb ). Bul.  Littro . 17: 53-
58. Seniwaty, Raihanah, Ika K. Nugraheni, Dewi Umaningrum. 2009. Skrining Fitokimia  dari  Alang-alang (Imperata Cylindrica L.Beauv) DAN Lidah Ular ( Hedyotis  Cerymbosa  L.  Lamk).  Sains dan Terapan Kimia. 2: 124-133.