UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI PASTA GIGI EKSTRAK BIJI PINANG ( Areca catechu L . ) TERHADAP Streptococcus mutans DAN Staphylococcus aureus
ANTIBACTERIAL ACTIVITY TEST of TOOTHPASTE OF BETEL NUT ( Areca catechu L.) EXTRACT AGAINST Streptococcus mutans AND Staphylococcus aureus
Nur Afni 1 , Nasrah Said 1 , Yuliet 2 .
1 Program Studi Farmasi, Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi (STIFA) – Pelita Mas, Palu
2 Jurusan Farmasi, Fakultas MIPA, Universitas Tadulako, Palu
Received 28 Januari 2015, Accepted 27 Februari 2015

## ABSTRAK
Biji pinang ( Areca catechu L.) merupakan bahan alam yang memiliki aktivitas antibakteri diantaranya terhadap Streptococcus  mutans dan Staphylococcus  aureus .  Berdasarkan    hal  tersebut  maka  biji  pinang diformulasikan  dalam  sediaan  pasta  gigi  yang  memiliki  aktivitas  sebagai  antibakteri.  Penelitian  ini  bertujuan untuk  mengetahui aktivitas antibakteri pasta  gigi ekstrak biji pinang dengan variasi  konsentrasi 1,5%, 3% dan 4,5% dan untuk mengetahui konsentrasi efektif ekstrak biji pinang dalam pasta gigi yang memenuhi mutu fisik kimia dan memiliki aktivitas antibakteri terhadap Streptococcus mutans dan Staphylococcus aureus . Rancangan penelitian yang digunakan adalah Rancangan Acak Lengkap (RAL). Ekstraksi dilakukan dengan cara maserasi menggunakan  pelarut  etanol  96%.  Ekstrak  kental  yang  diperoleh  diformulasikan  dalam  sediaan  pasta  gigi dengan  konsentrasi  1,5%,  3%  dan  4,5%.  Semua  formula  pasta  gigi  diuji  mutu  fisik  kimia  (organoleptik, homogenitas,  pH,  viskositas  dan  pembentukan  busa)  dan  aktivitas  antibakteri.  Data  yang  diperoleh  pada pengujian  mutu  fisik  kimia  dianalisis  secara  deskriptif  dan  data  aktivitas  antibakteri  dianalisis  secara  statistik menggunakan  metode One  Way ANOVA  pada  taraf  kepercayaan  95%,  dilanjutkan  dengan  uji Duncan menggunakan  program  SPSS.  Hasil  pengujian  antibakteri  menunjukkan  bahwa  pasta  gigi  dengan  konsentrasi ekstrak  biji  pinang  1,5%,  3%  dan  4,5%  menunjukkan  aktivitas  antibakteri  tehadap Streptococcus  mutans dan Staphylococcus  aureus .  Formula  pasta  gigi  yang  efektif  sebagai  antibakteri  terhadap  bakteri  uji adalah  F3 dengan  konsentrasi  ekstrak  biji  pinang  4,5%  yang  menghasilkan  diameter  daya  hambat  untuk Streptococcus mutans sebesar  11,37  mm  dan Staphylococcus  aureus sebesar  20,03  mm.  Hasil  pengujian  mutu  fisik  kimia menunjukkan semua pasta gigi ekstrak biji pinang memenuhi mutu fisik kimia pasta gigi.
Kata kunci : Ekstrak biji pinang, pasta gigi, antibakteri, Streptococcus mutans , Staphylococcus aureus

## ABSTRACT
Betel  nut  ( Areca  catechu L.)  is  a  natural  material  that  has  antibacterial  activity  content  against Streptococcus  mutans and Staphylococcus  aureus .  Under  these  conditions,  betel  nuts  were  formulated  in  a toothpaste  that  has  antibacterial  activity.This  study  aims  to  determine  the  antibacterial  activity  of  betel  nut extract  in  toothpaste  with  various  concentrations  of  1.5%,  3%  and  4.5%  and  to  determine  the  effective concentration  of  betel  nut  extract  in  toothpaste  that  meets  the  physical  quality  of  chemical  and  antibacterial activity against Streptococcus mutans and Staphylococcus aureus. The research design  used  was a completely randomized design (CRD). Extraction was done by maceration using ethanol 96%. Viscous extract obtained in the  preparation  of  toothpaste  formulated  with  a  concentrations  of  1.5%,  3%  and  4.5%.  All  tested  formula toothpaste  physical  quality  of  chemical  (organoleptic,  homogeneity,  pH,  viscosity  and  foaming)  and antibacterial activity. The data obtained in the physical quality of chemical testing were analyzed descriptively and  antibacterial  activity  data  were  statistically  analyzed  using One  Way ANOVA  at  95%  confidence  level, followed  by Duncan test  using  SPSS.  The  test  results  show  that  the  antibacterial  toothpaste  with  betel  nut extract  concentrations  of  1.5%,  3%  and  4.5%  show  antibacterial  activity  against Streptococcus  mutans and Staphylococcus aureus. Formula toothpaste as an antibacterial effective against bacteria test is F3 with betel nut extract concentration of 4.5%, which result in the diameter of the inhibition of Streptococcus mutans by 11.37

## GALENIKA Journal of Pharmacy Vol. 1 (1) : 48 – 58
mm  and  20.03  mm  for Staphylococcus  aureus .  The  test  results  show  all  the  physical  quality  of  chemical toothpaste betel nut extracts meet the physical quality of chemical toothpaste.
Keywords : Betel nut extracts, Toothpaste, Antibacterial, Staphylococcus aureus, Streptococcus mutans.

## PENDAHULUAN
Penyakit gigi dan mulut yang banyak ditemukan  pada  masyarakat  adalah  karies gigi.  Karies  gigi  merupakan  penyakit jaringan keras gigi, yaitu email, dentin dan sementum  yang  disebabkan  aktivitas mikroorganisme dalam meragikan karbohidrat.  Hal  ini  ditandai  dengan demineralisasi  enamel.  Secara  normal, rongga  mulut  terdapat  berbagai  macam koloni  mikroorganisme,  salah  satunya adalah Streptococcus
mutans .
Streptococcus  mutans merupakan  bakteri kariogenik yang dapat meragikan karbohidrat  dan  menghasilkan  asam, bakteri  ini  tumbuh  dalam  suasana  asam dan  dapat  menempel  pada  permukaan gigi. 1
Salah  satu  cara  mencegah  terjadinya karies  adalah  dengan  menggosok  gigi menggunakan  pasta  gigi.  Penambahan bahan  antibakteri  pada  pasta  gigi  dapat mengurangi  jumlah  bakteri  penyebab karies. Saat  ini  pasta  gigi  yang  beredar  di pasaran banyak menggunakan fluor sebagai  bahan  yang  digunakan  untuk memperkuat  gigi  dan  menjadikan  gigi lebih  putih,  tetapi  fluor  tidak  dapat membunuh  bakteri  gigi  secara  efektif  dan dapat  menyebabkan  fluorosis  email  pada kadar  yang  berlebihan. 2 Diperlukan  suatu produk pasta gigi  yang dapat menghambat pertumbuhan  bakteri  penyebab  karies tanpa mengurangi kualitasnya.
Salah  satu  bahan  alam  yang  dapat digunakan  sebagai  bahan  pengganti  untuk mencegah  karies  gigi  adalah  biji  pinang ( Areca catechu L.). Biji pinang mengandung  senyawa  alkaloid,  flavonoid, tanin, saponin, dan polifenol yang diketahui  berkhasiat  sebagai  antibakteri. 3
Beberapa  penelitian  menunjukkan  ekstrak etanol  biji  pinang  dapat  menghambat bakteri seperti Staphylococcus aureus,
Escherchia colli, Pseudomonas aeruginosae, dan Candida albicans.
Sanarto  dkk,  2011  dalam  penelitiannya menunjukkan  bahwa  ekstrak  biji  pinang ( Areca  catechu L.)  dapat  menghambat pertumbuhan bakteri Streptococcus mutans dengan  Kadar  Hambat  Minimum  (KHM) pada  konsentrasi  1,5%  yang  ditandai dengan  tidak  adanya  pertumbuhan  bakteri pada  media  agar. 4 Selain  itu,  Puspawati dkk, 2008 dalam penelitiannya menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  biji pinang  mempunyai  aktivitas  antibakteri terhadap bakteri uji Staphylococcus aureus dengan  Konsentrasi  Bunuh  Minimum (KBM) adalah 1,57% . 5
Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk mengetahui aktivitas antibakteri pasta  gigi ekstrak  biji  pinang  dan  untuk  mengetahui konsentrasi yang efektif ekstrak biji pinang dalam  pasta  gigi  yang  memenuhi  mutu fisik  kimia  dan  memiliki  aktivitas  sebagai antibakteri.  Rancangan  penelitian  yang digunakan adalah Rancangan Acak Lengkap (RAL). Data yang diperoleh pada pengujian  mutu  fisik  kimia  dianalisis secara  deskriptif  dan  data  aktivitas antibakteri  diolah  secara  statistik  dengan metode One  Way ANOVA  pada  taraf keparcayaan  95%.  dilanjutkan  dengan  uji Duncan menggunakan program SPSS.

## METODE PENELITIAN
Penelitian dilaksanakan di Laboratorium Fitokimia dan Farmakognosi STIFA  Pelita  Mas  Palu,  Laboratorium Farmasetik program studi Farmasi FMIPA Universitas  Tadulako  dan  Laboratorium Kesehatan  Palu,  mulai  bulan  Juni  sampai Agustus 2014.

## Alat yang digunakan
Alat-alat  gelas  (Pyrex),  Autoclave (Vertical Type Autoclave), Batang
pengaduk, Bejana maserasi, Blender (Cosmos),  Bunsen,  Cawan  petri,  Cawan porselin, Cover glass, Hot plate , Inkubator, jarum ose, Laminar air flow, Lumpang dan alu,  Neraca  analitik  (Sarltorius),  Oven, Penggaris,  Pipet  mikroliter  (Socorex), Pipet  tetes,  pH-meter  (Consort), Vacuum rotary evaporator (Buchi R-3000), Sendok tanduk,  Viskometer Brookfield, Wadah pasta gigi.

## Bahan yang digunakan
Aquadest,  Bakteri Streptococcus mutans ,  Bakteri Staphylococcus  aureus , Biji  pinang  ( Areca  catechu L.),  Etanol 96%,  Gliserin,  Kapas  steril,  Kalsium karbonat,  Menthol,  Natrium  benzoat, Natrium lauryl sulfat, Natrium Carboxymethyl Cellulose,
Natrium sakarin, NaCl 0,9%, Nutrien agar (NA).

## Penyiapan dan Determinasi Sampel
Sampel yang digunakan adalah biji pinang ( Areca catechu L.) dengan ciri-ciri buah  berwarna  hijau  yang  diperoleh  dari Ampana, Kabupaten Tojo Unauna, Sulawesi  Tengah  dan  telah  dideterminasi di  Herbarium  UPT.Sumber  Daya  Hayati Sulawesi Universitas Tadulako.

## Pembuatan Serbuk Simplisia
Sampel buah pinang yang
digunakan  dikumpulkan  dan  selanjutnya dilakukan sortasi basah lalu dicuci dengan air  mengalir.  Buah  pinang  yang  telah dibersihkan  dibelah  dan  bagian  biji
dipotong kecil-kecil kemudian dikeringanginkan.  Simplisia  yang  telah kering  disortasi  kering  dan  dibuat  serbuk dengan  cara  diblender  dan  diayak.  Serbuk simplisia  disimpan  dalam  wadah  bersih dan tertutup rapat.
Pembuatan Ekstrak Daun Kersen ( Muntingia calabura L) Serbuk simplisia biji pinang sebanyak 600 g diekstraksi dengan pelarut etanol 96% menggunakan metode maserasi.  Serbuk  dimasukan  ke  dalam bejana  kemudian  dituangi  dengan  pelarut etanol  96%,  ditutup  dan  dibiarkan  selama 3  x  24  jam  pada  suhu  ruang  sambil berulang-ulang  diaduk  agar  zat  aktif terekstraksi  sempurna.  Setelah  3  hari ekstrak disaring, kemudian residu diekstraksi  kembali  dengan  pelarut  etanol. Bejana  ditutup  dan  dibiarkan  pada  suhu ruang dan terlindung dari cahaya selama 3 x  24  jam  lalu  disaring.  Ekstrak  yang diperoleh
dipekatkan
dengan menggunakan vacuum  rotary  evaporator untuk memisahkan pelarut dengan zat aktif lalu  diuapkan  lagi  dengan  menggunakan penangas  air hingga  diperoleh  ekstrak kental  biji  pinang.  Ekstrak  kemudian ditimbang  untuk  mengetahui  berat  dan presentase ekstrak.

## Formulasi Pasta Gigi Ekstrak Biji Pinang
Tabel 1. Formulasi  Pasta Gigi Dengan Variasi Konsentrasi Ekstrak Biji Pinang
Bahan(%) Fungsi Formula F1 F2 F3 F4 Ekstrak Biji Pinang Bahan aktif 1,5 3 4,5 0 Kalsium karbonat Abrasif 45 45 45 45 Gliserin Humektan 25 25 25 25 Natrium karboksimetilselulosa (Na CMC) Pengikat 1,5 1,5 1,5 1,5
Natrium lauryl sulfat Surfaktan 1 1 1 1 Natrium benzoat Pengawet 0,1 0,1 0,1 0,1 Natrium sakarin Pemanis 0,2 0,2 0,2 0,2 Menthol Pengaroma 0,2 0,2 0,2 0,2 Aquadest Pelarut ad 100 ad 100 ad 100 ad 100
Keterangan :
F1 :  Formula pasta gigi ekstrak biji pinang dengan konsentrasi 1,5%
F2 :  Formula pasta gigi ekstrak biji pinang dengan konsentrasi 3%
F3 :  Formula pasta gigi ekstrak biji pinang dengan konsentrasi 4,5%
F4 :  Formula pasta gigi tanpa ekstrak biji pinang

## Prosedur pembuatan Pasta gigi
Menimbang  bahan  aktif  ekstrak  biji pinang  dengan  variasi  konsentrasi  1,5%,  3%, dan  4,5%  dan  bahan  tambahan  kalsium karbonat, gliserin, natrium karboksimetilselulosa  (Na  CMC),  natrium lauryl  sulfat,  natrium  benzoat,  natrium sakarin,  menthol  dan  aquadest.  Melarutkan Na  CMC  dalam  air  panas  didiamkan  selama 15 menit, setelah itu diaduk homogen sebagai massa  1.  Menggerus  kalsium  karbonat,  dan menambahkan  sodium  lauryl  sulfat  gerus homogen,  kemudian  menambahkannya  pada massa  1  menjadi  campuran  sambil  digerus homogen  sebagai  massa  2.  Melarutkan ekstrak  etanol  biji  pinang  dengan  gliserin diaduk  homogen  dan  menambahkan  pada massa  2  sambil  digerus  sampai  homogen. Melarutkan  natrium  benzoat  dan  natrium sakarin  kedalam  sisa  air  dan  diaduk  sampai larut  sempurna.  Kemudian  ditambahkan  pada massa  2  digerus  homogen  sampai  terbentuk massa  pasta.  Menambahkan  menthol  ke dalam massa pasta, digerus sampai homogen, kemudian memasukkan pasta kedalam tube.

## Pengujian Mutu Fisik Kimia Pasta Gigi
Pengujian  mutu  fisik  kimia  sediaan pasta  gigi  ekstrak  biji  pinang  dilakukan dengan beberapa pengujian antara lain : 1. Uji organoleptik
Pengamatan  organoleptik  pasta  gigi meliputi  bentuk,  warna,  dan  aroma  yang diamati  secara  obyektif.  Pengamatan  ini bertujuan untuk  melihat  terjadinya perubahan secara  signifikan  pada  sediaan  yang  telah dibuat.  Pengujian  dilakukan  setiap  minggu selama 3 minggu penyimpanan.
2. Uji homogenitas
Pengujian homogenitas dilakukan dengan  cara  pasta  gigi  yang  akan  diuji dioleskan  pada  gelas  obyek  untuk  diamati homogenitasnya.  Apabila  tidak  terdapat butiran-butiran  kasar  diatas  gelas  obyek tersebut,  maka  pasta  gigi  yang  diuji dinyatakan  homogen,  sedangkan  adanya butiran-butiran  kasar  menunjukkan  bahwa pasta  gigi    tidak  homogen.  Pengujian dilakukan  setiap  minggu  selama  3  minggu penyimpanan.
3. Uji keasaman (pH)
Pengukuran pH dilakukan dengan cara mencelupkan  alat  pH  meter  kedalam  sediaan pasta sampai menunjukan angka yang konstan setelah  beberapa  saat.  Nilai  pH  didapatkan dari  angka  tersebut.  Pengujian  dilakukan setiap minggu selama 3 minggu penyimpanan. 4. Uji viskositas Penentuan viskositas dilakukan
dengan menggunakan alat Viskometer Brookfield  menggunakan  spindel  nomor  6 dan  dan  pada  kecepatan  2  rpm,  memasang spindel  pada  gantungan  spindel  kemudian menurunkan  spindel  sedemikian  rupa  hingga tercelup  kedalam  sampel.  Dibiarkan  spindel berputar  dan  dibaca  angka  yang  ditunjukkan oleh  jarum  merah  tersebut  untuk  menghitung viskositas. Pengujian dilakukan setiap minggu selama 3 minggu penyimpanan.
5. Uji pembentukan busa
Uji  pembentukan  busa  dilakukan dengan  cara  membuat  larutan  1%  dari berbagai  konsentrasi  pasta  gigi  ekstrak  biji pinang  dalam  air.  Kemudian  dimasukan kedalam  gelas  ukur  berpenutup,  lalu  dikocok
selama  1  menit.  Kemudian  mengukur  tinggi busa  yang  terbentuk.  Pengujian  dilakukan setiap minggu selama 3 minggu penyimpanan.

## Uji  Aktivitas  Antibakteri  Pasta  Gigi Ekstrak Biji Pinang
1.  Sterilisasi Alat dan Bahan
Sterilisasi  dilakukan  dengan  cara  yang sesuai  terhadap  masing-masing  alat.  Alat-alat yang  disterilkan  harus  dalam  keadaan  bersih dan  kering.  Tabung  reaksi,  gelas  ukur, erlenmeyer,  cawan  petri  ditutup  mulutnya dengan  kapas  lalu  aluminium  foil.  Kemudian disterilkan  dalam  oven  pada  suhu  180 0 C, selama  2  jam.  Medium  pembenihan  dan larutan  NaCl  distrerilisasi  dengan  autoklaf pada suhu 121 0 C selama 30 menit. Pinset dan jarum  ose  disterilkan  dengan  cara  dipijarkan pada nyala bunsen.
2. Pembuatan medium nutrien agar (NA)
Menimbang  medium  Nutrien  Agar (NA)  sebanyak  2,3  gram  dilarutkan  dalam 100  ml  aquadest  menggunakan  erlenmeyer. Media  dihomogenkan  diatas  penangas  air sampai media Nutrien Agar benar-benar larut. Larutan  tersebut  kemudian  disterilkan  dalam autoklaf  pada  suhu  121 0 C  selama  15  menit. Disimpan  pada  lemari  pendingin,  dan dipanaskan kembali ketika digunakan.
3. Penyiapan Bakteri Uji
Bakteri  uji Streptococcus  mutans dan Staphylococcus  aureus yang  berasal  dari biakan  murni,  masing-masing  diambil  1  ose lalu  diinokulasikan  dengan  cara  digoreskan pada  medium  Nutrien  Agar  (NA)  miring. Setelah itu diinkubasi pada suhu 37 0 C selama 24 jam.
Biakkan  bakteri  diambil  dengan  jarum ose  steril  lalu  disuspensikan  kedalam  tabung reaksi  yang  berisi  10  ml  larutan  NaCl  0,9% sampai  didapat  kekeruhan  suspensi  bakteri yang sama dengan kekeruhan standar Mc.Farland ,  ini  berarti  konsentrasi  suspensi bakteri  adalah  10 8 CFU/ml.  Konsentrasi suspensi bakteri  10 8 CFU/ml  yang digunakan pada pengujian aktivitas antibakteri.
4. Uji  Aktivitas  Antibakteri  Pasta  Gigi Ekstrak Biji Pinang
Uji daya antibakteri pada penelitian ini menggunakan  metode  difusi  dengan  cara
sumuran.  Prosedur  yang  dilakukan  adalah Menyiapkan  medium  Nutrien  Agar  (NA) yang  telah  disterilkan  dalam  autoklaf  suhu 121 0 C  selama  15  menit.  Kemudian  dalam keadaan masih hangat nutrien agar dituangkan pada  10  cawan  petri  steril  berukuran  9  cm sebanyak 15 ml, lalu didiamkan hingga padat. Menyiapkan  suspensi  bakteri Streptococcus mutans dan Staphylococcus aureus yang telah diinokulasikan  dalam  NaCl  0,9%,  lalu mencelupkan  kapas  steril  ke  dalam  suspensi bakteri  kemudian  dioleskan  pada  medium NA.  Membuat  sumuran  (lubang)  pada medium  nutrien  agar  menggunakan  alat  tips diameter  7  mm,  kemudian  menyiapkan sampel pasta gigi sebanyak 0,1 g pada variasi konsentrasi  1,5%,  3%,  4,5%,  kontrol  negatif dan  kontrol  positif.  Pengujian  dilakukan dengan  cara  memasukkan  pasta  gigi  dengan berbagai konsentrasi masing-masing sebanyak 0,1  g  ke  dalam  sumuran,  kemudian  cawan petri  diinkubasi  selama  24  jam  pada  suhu 37 0 C.  Pengukuran  dilakukan  pada  zona bening  yang  terbentuk  disekeliling  sumuran yang menunjukkan zona hambat pertumbuhan bakteri.

## Analisis Data
Rancangan  penelitian  yang  digunakan pada  penelitian  ini  adalah  Rancanagan  Acak Lengkap  (RAL).  Data  yang  diperoleh  pada pengujian  mutu  fisik  kimia  dianalisis  secara deskriptif dan data aktivitas antibakteri diolah secara  statistik  dengan  metode One  Way ANOVA  pada  taraf  kepercayaan  95% dilanjutkan dengan uji Duncan menggunakan program SPSS.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Hasil penelitian Pengujian Fitokimia
Tabel 2 Hasil Pengujian fitokimia ekstrak biji
pinang Kandungan kimia Keterangan Alkaloid + flavonoid + tanin + saponin + Polifenol +
Ket : (+) :  Mengandung  senyawa  yang diuji

## Tabel 3 Hasil Pengujian Organoleptik Pasta Gigi Ekstrak Biji Pinang
Formul a Pengamatan Organoleptik Hari ke-1 Hari ke-7 Hari ke-14 Hari ke-21 F1 Krem, aroma menthol, agak kental Krem, aroma menthol, agak kental Krem, aroma menthol, agak kental Krem, aroma menthol, agak kental F2 Krem kecoklatan, aroma menthol, kental Krem kecoklatan, aroma menthol, kental Krem kecoklatan, aroma menthol, kental Krem kecoklatan, aroma menthol, kental F3 Coklat, aroma menthol, sangat kental Coklat, aroma menthol, sangat kental Coklat, aroma menthol, sangat kental Coklat, aroma menthol, sangat kental F4 Putih, aroma menthol, agak lembek Putih, aroma menthol, agak lembek Putih, aroma menthol, agak lembek Putih, aroma menthol, agak lembek Tabel 4 Hasil uji homogenitas pasta gigi ekstrak biji pinang Formula Pengamatan Hari ke-1  Hari ke-7  Hari ke-14 Hari ke-21 F1 Homogen  Homogen Homogen Homogen F2 Homogen  Homogen Homogen Homogen F3 Homogen  Homogen Homogen Homogen F4 Homogen  Homogen Homogen Homogen
Tabel 5 Hasil uji pH pasta gigi ekstrak biji pinang Formul a
Rerata pH pasta gigi
Hari ke-1 Hari ke-7 Hari ke-14 Hari ke-21 F1 7,03 6,97 7,12 7,17 F2 6,90 6,83 6,92 7,02 F3 6,77 6,85 6,97 7,07 F4 7,18 6,92 6,77 7,55
Tabel 6  Hasil Uji Viskositas Pasta Gigi Ekstrak Biji  Pinang
Formul a Rerata Viskositas (Cp) Hari ke-1 Hari ke-7 Hari ke-14 Hari ke-21 F1 222.0 00 226.3 33 231.6 66 236.3 33 F2 312.3 33 323.3 33 337.0 00 350.6
66
F3 404.6 66 423.3 33 434.3 33 443.6
66
F4 196.0 00 207.3 33 220.3 33 232.0 00
Tabel  7  Hasil Uji Pembentukan Busa Pasta Gigi Ekstrak Biji Pinang
Formu
la Rerata pembentukan busa selama penyimpanan Hari ke-1 Hari ke-7 Hari ke-14 Hari ke-21 F1 27,33 25,66 25 24,33 F2 22 20,66 19,33 18
F3 19,66 18 16 15,33
F4 50 50,33 48,33 47,66
Tabel 8 Hasil Pengujian Daya Hambat Pasta Gigi Ekstrak Biji Pinang Terhadap
Streptococcus mutans Formula Diameter hambat antibakteri (mm) Rera ta A B C Formula 1  8,79 9,04 9,54 9,12 a Formula 2 10,2 9 10,5 4 10,04 10,29 b Formula 3 11,2 9 11,0 4 11,79 11,37 c Kontrol positif 24 24 24 24 d
Ket : Abjad yang berbeda menunjukkan adanya perbedaan yang signifikan

## Tabel 9 Hasil Pengujian Daya Hambat Pasta Gigi Ekstrak Biji Pinang Terhadap Staphylococcus aureus
Formula Diameter hambat antibakteri (mm) Rera ta A B C Formula 1 17,2 8 17,0 3 17,53 17,28 a Formula 2 18,5 3 18,7 8 18,78 18,69 b Formula 3 20,0 3 20,2 8 19,78 20,03 c Kontrol positif 23 22 20,5 21,83 d
Ket : Abjad yang berbeda menunjukkan adanya perbedaan yang signifikan

## Pembahasan
Pengujian fitokimia pada penelitian ini  dilakukan  untuk  mengetahui  senyawa kimia  yang  terkandung  dalam  ekstrak  biji pinang    yang  digunakan  sebagai  zat  aktif dalam pembuatan sediaan pasta gigi. Hasil pengujian  fitokimia  menunjukkan  bahwa ekstrak  biji  pinang  positif  mengandung senyawa alkaloid, flavonoid, tanin, saponin dan polifenol.
Formulasi sediaan pasta gigi ekstrak  biji  pinang  dibuat  dengan  3 konsentrasi yaitu 1,5%, 3% dan 4,5% serta formula  pasta  gigi  tanpa  ekstrak  dibuat sebagai kontrol negatif. Evalusi mutu fisik kimia  pasta  gigi  ekstrak  biji  pinang meliputi uji organoleptik, uji homogenitas, uji pH, uji viskositas, dan uji pembentukan busa.  Pengujian  dilakukan  selama  21  hari penyimpanan  dengan  pengujian  pada  hari ke-1, 7, 14, dan 21.
Pengujian organoleptik
menunjukan bahwa semakin tinggi konsentrasi  ekstrak  biji  pinang  yang digunakan  maka  warna  pasta  gigi  yang dihasilkan semakin coklat (pekat).
Perbedaan  konsentrasi  ekstrak  biji  pinang juga  mempengaruhi  bentuk  atau  tekstur pasta  gigi,  dimana  semakin  meningkatnya konsentrasi  ekstrak  maka  pasta  gigi  akan semakin  kental.  Perbedaan  konsentrasi
ekstrak  tidak  mempengaruhi  aroma  pasta gigi  ekstrak  biji  pinang.  Aroma  pasta  gigi pada  semua  formula  menunjukan  aroma yang sama yaitu berbau menthol. Kemungkinan disebabkan karena kosentrasi  ekstrak  biji  pinang  yang digunakan  rendah  dan  aroma  tajam  dari menthol  dapat  menutupi  aroma  khas  biji pinang  sehingga  tidak  terdapat  perbedaan aroma pasta gigi.
Pengujian  homogenitas  pasta  gigi F1,  F2,  F3,  dan  F4  tidak  terlihat  adanya partikel-partikel kasar sehingga menghasilkan  sediaan  pasta  gigi  yang homogen.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa semua  bahan  tambahan  dan  ekstrak sebagai  zat  aktif  yang  digunakan  dalam pembuatan  pasta  gigi  tercampur  secara merata.  Pasta  gigi  ekstrak  biji  pinang memiliki  sifat  fisik  yang  baik  dalam berbagai  konsentrasi  dengan  homogenitas tetap baik selama 21 hari penyimpanan. Pengujian  pH  selama  21  hari penyimpanan  nilai  pH  pasta gigi    F1, F2, dan F3 masih masuk dalam persyaratan pH untuk  pasta  gigi  yaitu  berkisar  antara  4,5- 10,5.  Pengujian  pH  pasta  gigi  ekstrak  biji pinang  menunjukkan  bahwa  semakin tinggi  konsentrasi  ekstrak  pada  pasta  gigi maka  semakin  rendah  pH  pasta  gigi ekstrak  biji  pinang  dan  kemungkinan
disebabkan karena senyawa-senyawa kimia  yang  terkandung  dalam  ekstrak  biji pinang  seperti  flavonoid,  tanin  dan polifenol  memiliki  pH  asam  sehingga ekstrak biji pinang cenderung memiliki pH asam.  Nilai  pH  pasta  gigi  ekstrak  biji pinang  selama  penyimpanan  21  hari mengalami  perubahan  pH  pada  masing- masing formula, tetapi masih masuk dalam standar persyaratan pH pasta gigi bedasarkan  SNI.  Perubahan  nilai  pH  pada masing-masing formula disebabkan karena faktor  lingkungan  seperti  perubahan  suhu karena  penyimpanan  dilakukan  pada  suhu ruang  serta  wadah  penyimpanan  yang kurang  kedap  sehingga  memungkinkan udara dapat masuk.
Pengujian viskositas selama
penyimpanan 21 hari menunjukkan bahwa semakin  tinggi  konsentrasi  ekstrak  yang digunakan dalam pasta gigi maka viskositas  pasta  gigi  yang  dihasilkan semakin tinggi dan kemungkinan disebabkan karena meningkatnya konsentrasi  ekstrak  dalam  pasta  gigi, menyebabkan  berkurangnya  jumlah  air dalam pasta gigi sehingga dalam mengembangkan  Na  CMC  membutuhkan air  yang  lebih  sedikit  dan  menghasilkan pasta gigi  yang lebih kental. Penyimpanan 21  hari  pasta  gigi  ekstrak  biji  pinang mengalami  peningkatan  nilai  viskositas pada masing-masing formula, tetapi semua  formula  pasta  gigi  ekstrak  biji pinang  memenuhi  standar  viskositas  pasta gigi  yaitu  mudah  dikeluarkan  dari  tube, cukup keras sehingga dapat mempertahankan  bentuk  pasta  minimal  1 menit.
Pengujian pembentukan busa selama  penyimpanan  21  hari  menunjukan semakin  tinggi  konsentrasi  ekstrak  biji pinang  yang  digunakan  dalam  pasta  gigi maka semakin sedikit busa yang dihasilkan dan  semakin  rendah  konsentrasi  ekstrak yang digunakan maka busa yang dihasilkan  akan  semakin  banyak  dan kemungkinan disebabkan karena konsentrasi  natrium  lauryl  sulfat  yang digunakan  sebagai  surfaktan  tetap  sama
yaitu  1%  sehingga  jumlah  natrum  lauryl sulfat  tidak  cukup  untuk  mengemulsi ekstrak.
Pengujian  antibakteri  pasta  gigi ekstrak  biji  pinang  dilakukan  untuk mengetahui  daya  hambat  ekstrak  biji pinang yang diformulasikan dalam sediaan pasta  gigi.  Bakteri  yang  digunakan  adalah Streptococcus  mutans dan Staphylococcus aureus . Pengujian dilakukan dengan menggunakan  metode  difusi  agar  dengan cara  sumuran.  Pasta  gigi  F1  dengan konsentrasi  ekstrak  biji  pinang  1,5%,  F2 dengan konsentrasi ekstrak biji pinang 3%, F3  dengan  konsentrasi  ekstrak  biji  pinang 4,5%,  F4  pasta  gigi  tanpa  ekstrak  biji pinang (kontrol negatif) dan kontrol positif pasta  gigi  herbal  dari  PT.  Unilever  yang beredar di pasaran.
Berdasarkan  hasil  data  statistik menggunakan One  Way ANOVA  yang dilanjutkan  dengan  uji Duncan ,  pengujian aktivitas  antibakteri  pasta  gigi  ekstrak  biji pinang  terhadap  bakteri Streptococcus mutans untuk pasta gigi dengan konsentrasi  ekstrak  biji  pinang  1,5% menghasilkan  diameter  daya  hambat  9,12 mm.  Diameter  daya  hambat  pasta  gigi dengan konsentrasi ekstrak biji pinang 3% adalah  10,29  mm  dan  diameter  daya hambat  pasta  gigi  dengan  konsentrasi ekstrak biji pinang 4,5% adalah 11,37 mm. Hasil  ini  menunjukkan  bahwa  semakin tinggi  konsentrasi  biji  pinang  dalam  pasta gigi maka diameter daya hambat antibakteri  akan  semakin  besar.  Hal  ini disebabkan karena semakin tinggi konsentrasi  bahan  uji,  yang  berarti semakin  besar  jumlah  zat  aktif  yang terkandung  dalam  ekstrak,  maka  semakin besar  pula  kemampuan  bahan  uji  dalam menghambat  pertumbuhan  suatu  bakteri. 6
Diameter  daya  hambat  untuk  kontrol positif adalah 24 mm. Hasil diameter daya hambat pasta gigi ekstrak biji pinang pada semua  formula  pasta  gigi  ekstrak  biji pinang  masih  belum  sebanding  dengan pasta  gigi  herbal  yang  beredar  di  pasaran (kontrol positif) dalam menghambat
bakteri Streptococcus mutans, tetapi semua formula pasta gigi ekstrak biji pinang telah menunjukkan  aktivitas  sebagai  antibakteri karena  suatu  bahan  baru  dapat  dikatakan memiliki aktivitas antibakteri bila diameter hambatan yang terbentuk adalah lebih dari atau  sama  dengan  6  mm  (Depkes  RI, 1989). 2 Selain  itu,  menurut  Davis  Stout kriteria  kekuatan  daya  antibakteri  adalah diameter  zona  hambat  5  mm  atau  kurang dikategorikan  lemah,  zona  hambat  5-10 mm  dikategorikan  sedang,  zona  hambat 10-20  mm  dikategorikan  kuat  dan  zona hambat  20  mm  atau  lebih  dikategorikan sangat kuat. 7 Berdasarkan kriteria tersebut, maka  kemampuan  antibakteri  pasta  gigi ekstrak biji pinang terhadap Streptococcus mutans dengan  konsentrasi  ekstrak  1,5% (9,12  mm)  memiliki  daya  antibakteri sedang  dan  konsentrasi  ekstrak  3%  (10,29 mm),  4,5%  (11,37  mm)  memiliki  daya antibakteri kuat.
Pengujian aktivitas antibakteri pasta  gigi  ekstrak  biji  pinang  terhadap bakteri Staphylococcus  aureus ,  diameter daya hambat pasta gigi dengan konsentrasi ekstrak biji pinang 1,5% adalah 17,28 mm. Diameter  daya  hambat  pasta  gigi  dengan konsentrasi  ekstrak  3%  adalah  18,69  mm dan diameter daya hambat untuk pasta gigi dengan  konsentrasi  ekstrak  4,5%  adalah 20,03 mm. Hasil ini menunjukkan menunjukkan  semakin  tinggi  konsentrasi biji pinang dalam pasta gigi maka diameter daya hambat terhadap bakteri Staphylococcus aureus semakin besar. Hal ini  disebabkan  karena  semakin  tinggi konsentrasi  bahan  uji,  yang  berarti semakin  besar  jumlah  zat  aktif  yang terkandung  dalam  ekstrak,  maka  semakin besar  pula  kemampuan  bahan  uji  dalam menghambat  pertumbuhan  suatu  bakteri. 6 Diameter  daya  hambat  untuk  kontrol positif  adalah  21,83  mm.  Hasil  diameter daya hambat pasta gigi dengan ekstrak biji pinang  4,5%  hampir  sebanding  dengan pasta  gigi  herbal  yang  beredar  di  pasaran (kontrol positif). Kemampuan daya antibakteri  pasta  gigi  ekstrak  biji  pinang terhadap Staphylococcus  aureus dengan
konsentrasi  ekstrak  1,5%  (17,28  mm),  3% (18,69  mm)  dan  4,5%  (20,03  mm) memiliki daya antibakteri kuat.
Aktivitas antibakteri dari pasta gigi ekstrak  biji  pinang  disebabkan  adanya senyawa-senyawa  kimia  yang  terdapat dalam  ekstrak  biji  pinang  seperti  alkaloid, flavonoid,  tanin,  saponin  dan  polifenol. Alkaloid  memiliki  kemampuan  sebagai antibakteri  dengan  cara  mengganggu komponen  penyusun  peptidoglikan  pada sel  bakteri,  sehingga  lapisan  dinding  sel tidak terbentuk secara utuh dan menyebabkan kematian sel tersebut. Flavonoid  berfungsi  sebagai  antibakteri dengan cara membentuk senyawa kompleks  terhadap  protein  ekstraseluler yang  menyebabkan  rusaknya  susunan  dan perubahan mekanisme membran sel bakteri.  Tanin  diduga dapat  mengkerutkan dinding  sel  atau  membran  sel  sehingga mengganggu  permeabilitas  sel  itu  sendiri. Akibat  terganggunya  permeabilitas,  sel tidak  dapat  melakukan  aktivitas  hidup sehingga  pertumbuhannya  akan  terhambat atau  bahkan  mati. 8 Saponin  dengan  cara menurunkan tegangan permukaan sehingga mengakibatkan naiknya permeabilitas  atau  kebocoran  sel  dan mengakibatkan  senyawa  intraseluler  akan keluar. 9 Polifenol berpotensi sebagai antibakteri  dengan  meracuni  protoplasma, merusak  dan  menembus  dinding  sel  serta mengendapkan protein sel bakteri. 10
Kontrol  negatif  pada  pengujian antibakteri  ini  memberikan  daya  hambat terhadap bakteri Streptococcus mutans dan Staphylococcus  aureus dengan  diameter daya  hambat  masing-masing  adalah  20,26 mm  dan  21,22  mm,  tetapi  hasil  yang diperoleh  tidak  sebanding  dengan  daya hambat  pada  tiap  formula  pasta  gigi ekstrak  biji  pinang.  Daya  hambat  yang diperoleh  pada  kontrol  negatif  disebabkan karena  pasta  gigi  menggunakan  natrium benzoat  sebagai  pengawet.  Data  diameter daya  hambat  yang  diperoleh  merupakan selisih  antara  diameter  daya  hambat sediaan  pasta  gigi  ekstrak  biji  pinang
dengan  sediaan  pasta  gigi  tanpa  ekstrak (kontrol negatif).
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang diperoleh  maka  dapat  disimpulkan  bahwa pasta  gigi  ekstrak  biji  pinang  memiliki aktivitas  antibakteri terhadap  bakteri Streptococcus  mutans dan Staphylococcus aureus. Formula  pasta  gigi  yang  efektif sebagai  antibakteri  tehadap  bakteri  uji adalah  F3  dengan  konsentrasi  ekstrak  biji pinang  4,5%  yang  menghasilkan  diameter daya  hambat  untuk streptococcus  mutans sebesar  11,37  mm  dan staphylococcus aureus sebesar 20,03 mm. Hasil pengujian mutu  fisik  kimia  menunjukkan  semua pasta  gigi  ekstrak  biji  pinang  memenuhi mutu fisik kimia pasta gigi.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Kidd,  E  dan  Bechal,  S.  1992. Dasar- Dasar Karies , Penyakit dan
Penangulangannya. Buku  Kedokteran
EGC. Jakarta. Hal:1-4, 153-155
2. Bayuarti,  Y.  2006. Kajian  proses pembuatan pasta gigi gambir (Uncaria gambir roxb) sebagai antibakteri. [skripsi]. Fakultas Teknologi Pertanian. Institut Pertanian Bogor. Bogor. Hal:2
3. Widyanigrum, H. 2011. Kitab Tanaman  Obat  Nusantara .  MedPress. Yogyakarta. Hal:418-420
4. Sanarto  Santoso,  Kuni  Ridha  Andini dan  Hirzi  Asdyaksa.  2011. Efektivitas ekstrak  etanol  biji  pinang  (Areca catechu  L.)  terhadap  pertumbuhan bakteri  Streptococcus  mutans  secara in  vitro. Fakultas  Kedokteran  Gigi Universitas Brawijaya. Hal:1-4
5. Puspawati,  N.  2008. Uji  aktivitas antibakteri ekstrak etanolik biji pinang  (Areca  catechu  L.)  terhadap Staphylococcus  aureus  ATCC  25923 dan  Pseudomonas  aeruginosa  ATCC 2785 . Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Setia Budi. Hal:1-3
6. Adrianto, A. 2012. Uji daya antibakteri ekstrak daun salam ( Eugenia  polyantha  Wight)  dalam pasta  gigi  terhadap  pertumbuhan Streptococcus mutans. [skripsi].
Fakultas  Kedokteran  Gigi  Universitas Jember. Jember. Hal:16-17
7. Rahmi  Adila,  Nurmiati  dan  Anthoni Agustien.  2013.  Uji  Antimikroba Curcuma spp.  Terhadap  Pertumbuhan Candida  albicans,  Staphylococcus aureus dan Escherichia  coli. Jurnal Biologi  Universitas  Andalas Vol.2 No.1. Hal:5-6
8. Aulia  Abdul  Hamid,  Helmie  Bafadal dan  Lisa  Puspita  Sari.  2011. Uji efektivitas  ekstrak  etanol  biji  pinang (Areca catechu L.) terhadap pertumbuhan bakteri methicilin- resistant Staphylococcus aureus (MRSA)  secara  in  vitro. Fakultas Kedokteran  Universitas  Brawijaya. Hal:2-4
9. Robinson, T. 1995. Kandungan
Organik  Tumbuhan  Tingkat  Tinggi . Institut Tekhnologi Bandung. Bandung. Hal:283,285 10. Adrianto,  K.  2012.  Efek  Antibakteri Polifenol Biji Kakao Pada Streptococcus Mutans. [skripsi].
Fakultas  Kedokteran  Gigi  Universitas Jember. Jember. Hal:45-46