## UNJUK KERJA SPEKTROFOTOMETER UNTUK ANALISA ZAT AKTIF KETOPROFEN
Dwi Warono 1) , Syamsudin 2)
Jurusan Teknik Kimia, Fakultas Teknik

## Universitas Muhammadiyah Jakarta
Syamsudin_ab@gmail.com
ABSTRAK. Unjuk kerja spektrofotometer dapat dilihat secara tidak langsung dari beberapa pengulangan data yang di dapat dari sampel dan standar ketoprofen yang di analisa secara berkesinambungan, sekaligus menentukan baik tidaknya hasil yang didapat untuk kemudaian digunakan dalam analisa harian.
Unjuk  kerja  spektrofotometer  Shimadzu  1700  dengan  menggunakan  standar  baku  primer ketoprofen standar USP yang telah diketahui kadarnya dengan pasti pada proses pengujian.
Unjuk kerja alat spektrophotometer dapat dikatakan dalam keadaan baik, hal ini dapat dilihat dari enam kali data pengulangan pengukuran yang konsisten selama tiga hari berturut-turut dengan menggunakan sampel ketoprofen injeksi 100 mg/mL.
Unjuk  kerja  spektrofotometer  Shimadzu  1700 dikatakan  baik dengan  nilai  galat  kurang dari 2,0%. parameter yang diuji seperti ketepatan dan ketelitian lebih dari 98% ( hasil yang di dapat 99.787%), linearitas dengan nilai regresi diatas 0.995 (hasil yang didapat 0.9995), ketelitian, perolehan  kembali,  selektivitas,  dan  kapabilitas  memberikan  hasil  yang  baik  karena  telah memenuhi persyaratan yang ditetapkan untuk setiap parameter.

## PENDAHULUAN

## Latar Belakang
Kebutuhan  masyarakat  akan  masalah kesehatan sangat penting, baik masyarakat  ekonomi  lemah  ataupun masyarakat  ekonomi  kuat.  Dengan semakin meningkatnya  kemakmuran yang
diikuti
dengan semakin meningkatnya kemajuan ilmu pengetahuan dan teknologi, maka tuntutan  terhadap  pelayanan  kesehatan makin meningkat termasuk dengan mutu obat  yang  dipasarkan.  Oleh  sebab  itu, tanpa memandang strata sosial
penggguna  obat,  obat  harus  disiapkan untuk  tujuan  kesehatan  manusia  secara umum  dan  setiap  industri  farmasi  harus menerapkan  cara  pembuatan  obat  yang baik untuk menjamin mutu dan keamanan.  Obat  merupakan  komoditas untuk  digunakan  pada  manusia  secara langsung terutama manusia yang berada dalam  kondisi  yang  sedang  mengalami gangguan kesehatan.
Salah  satu  upaya  yang  dilakukan  untuk menjamin  bahwa  obat  yang  dipasarkan bermutu  dan  baik  adalah  dengan melakukan  pengujian  terhadap  metode analisis untuk memastikan bahwa metode  analisis  dan  peralatan  yang tersedia dapat digunakan untuk senantiasa mencapai hasil yang
diinginkan.  Validasi  pengujian  terhadap metode  analisis  yang  digunakan  dalam menetapkan identifikasi, kekuatan, kualitas,  dan  kemurnian  dari  obat  yang dihasilkan.
Proses validasi dilakukan untuk menjamin bahwa  metode  analilsis  yang  diterapkan absah  sehingga  tidak  mempengaruhi ketelitian  dan  ketepatan  hasil  pengujian untuk pemeriksaan rutin. Menurut Basic of Good  Manufacturing  Practices  for  Phar- maceutical  Product dari The  Pharma- ceutical  Inspection  Convention  (PIC), validasi merupakan upaya untuk mendapatkan  dan  mendokumentasikan bukti  yang  menyatakan  bahwa  suatu metode dapat dipercaya dalam batas yang sudah  ditetapkan  sebelumnya.  Adapun sasaran  validasi  dalam  praktik  adalah untuk  menjamin  prosedur  produksi  yang
aman,  menjamin  reprodusibilitas  dari proses  yang  dihasilkan,  dan  untuk menekan serendah-rendahnya risiko penyimpangan  yang  mungkin  timbul, pengan demikian, validasi adalah tindakan yang diperlukan agar obat yang dihasilkan memenuhi  persyaratan  mutu  yang  telah ditetapkan.

## Tujuan penelitian
Tujuan  penelitian  adalah  mengetahui  ke- mampuan  unjuk  kerja  alat  spectrophoto- meter  untuk  digunakan  dalam  penentuan validitas  atau  keabsahan  dari  metode analisis  ketoprofen  dalam  ketoprofen  100 mg/2 mL injeksi.

## Validasi Metode
Validasi  adalah  proses  atau  tindakan pembuktian  dengan  cara  yang  sesuai untuk menunjang bahwa prosedur analisis sesuai dengan tujuan yang diharapkan.Validasi metode analisis adalah suatu proses pembelajaran laboratorium melalui penetapan serangkaian  unjuk  kerja  yang  khas  untuk menerapkan  metode  analisis  yang  ingin dicapai. Parameter-parameter penting yang  digunakan  dalam  validasi  metode analisis  bahan  aktif  ketoprofen  dalam Ketoprofen  100  mg/2  mL  njeksi  adalah ketepatan (accuracy), linearitas,  ketelitian (precision), perolehan  kembali (recovery), selektivitas, dan kapabilitas metode analisis.
Akurasi metode  adalah  ukuran  kedekatan antara hasil yang benar secara teoretis dari hasil  yang  didapat.  Ketepatan  dilaporkan dalam  persen  perolehan  kembali  dengan menepatkan kadar analit yang ditambahkan  pada  sampel  atau  sebagai perbedaan  antara  nilai  rata-rata  dan  nilai sebenarnya yang dapat diterima bersama-sama dengan interval
kepercayaannya.  Ketepatan  harus  dinilai sekurang- kurangnya tiga konsentrasi yang meliputi  rentang  yang  ditetapkan,  untuk standar  digunakan  sekurang-kurangnya tiga  titik,  yaitu  standar  80%,  100%,  dan 120%.
Linearitas adalah  kemampuan  dari  suatu
metode  analisis  untuk  menunjukkan  hasil konsentrasi yang linear terhadap kepekatan analit dalam jangkauan kepekatan tertentu. Hasil yang didapatkan harus  linear  terhadap  konsentrasi  larutan baku  dengan  nilai  koefisien  korelasi mendekati 1.00.
Presisi atau  ketelitian  dari  suatu  metoe analisis adalah kedekatan hasil pengukuran  analisis  contoh  yang  sama yang  dilakukan  secara  berulang-ulang. Ketentuan  prosedur  analisis  biasanya dinyatakan  sebagai  varian,  simpangan baku, atau simpangan baku relatif dari segi pengukuran.
Perolehan  kembali adalah  kemampuan metode preparasi sampel yang digunakan untuk  bahan  aktif  dalam  matriks  atau plasebonya  sehingga  didapatkan  kembali kadar yang mendekati nilai sebenarnya.
Selektivitas menunjukkan kemampuan metode  analisis  untuk  mengukur  secara akurat dan spesifik respons dalam lingkungan  senyawa  pengganggu  yang mungkin  ada  dalam  sampel.  Absorbans matriks harus < 1 %.
Kapabilitas  metode  analisis menunjukkan kapasitas atau kemampuan metode analisis
yang digunakan untuk
pemeriksaan  kadar  bahan  aktif  dalam sampel.  Ketentuan  umum  kapabilitas berdasarkan CPOB adalah Kp > 2.5 = Kapabilitas sangat baik Kp 2.4 - 1.0 = Kapabilitas baik hingga buruk Kp < 1 = Kapabilitas tidak dapt diterima 7‘
Dengan  perhitungan  sesuai  persamaan berikut
Kp = (BASS-BBS)-(2xRSlD) (6 X SD) Keterangan: Kp - Kapabilitas metode analis BAS = Batas atas spesifikasi
BBS  = Batas bawah spesifikasi SD = Standar deviasi RSD = Relatif standar deviasi

## Instrumen Spektrofotometer UV-VTS
Spektrofotometer UV-VIS atau spektrofotometer  ultraviolet-sinar  tampak memanfaatkan  sinar  dengan  panjang
gelombang  180-380  nm  untuk  daerah  UV dan 380-780 nm untuk daerah visible atau sinar tampak. Spektrofotometer ini jenisnya terdiri  Was  berkas  tunggal (single  beam) dan  berkas  rangkap (double  beam). Perbedaan  pada  keduanya  adalah  pada spektrofotometer double beam pengukuran dapat dilakukan secara bersamaan antara kuvet  yang  berisi  larutan  contoh  atau standar dan kuvet yang berisi blanko dalam satu  ruang  sehingga  pembacaan  serapan zat  tidak  dipengaruhi  oleh  perubahan tegangan  listrik  karena  blangko  dan  zat diukur pada saat yang bersamaan. Secara umum sistem spektrofotometer terdiri atas sumber  radiasi,  monokromator,  sel,  foto sel,  detektor,  dan  tampilan (display). Seperti terlihat pada gambar 1.

## Gambar 1. Bagan alat spectrofotometer
Sumber  radiasi  berfungsi  memberikan energi  radiasi  pada  daerah  panjang gelombang  yang  tepat  untuk  pengukuran dan mempertahankan intensitas sinar yang tetap  pada  pengukuran.  Sumber  radiasi untuk  spektrofotometer  UV-VIS  adalah lampu hidrogen atau deuterium dan lampu filamen. Lampu hidrogen digunakan untuk mendapatkan  radiasi  di  daerah  ultraviolet sampai 350 ran. Lampu filamen digunakan untuk  daerah  sinar  tampak  sampai inframerah dekat dengan panjang gelombang 350 nm sampai sekitar 250 nm.
Monokromator  berfungsi  menghasilkan radiasi  monokromatis  yang  diperoleh dilewatkan  melalui  kuvet  yang  berisi sampel  dan  blanko  secara  bersaman dengan bantuan cermin berputar.
Sel atau kuvet adalah tempat bahan yang akan  diukur  serapannya.  Kuvet  harus dibuat  dari  bahan  yang  tidak  menyerap radiasi  pada  daerah  yang  digunakan, umumnya  terbuat  dari  kaca  tembus  sinar tetapi  bisa  pula  terbuat  dari  plastik.  Sel yang  terbuat  dari  kuarsa  baik  untuk
spektroskopi  UV-VIS.  Kuvet  dari  bahan kaca  silikat  biasa  tidak  dapat  digunakan untuk  spektroskopi  ultraviolet  karena bahan  kaca  i  ilikat  dapat  menyerap ultraviolet.
Fotosel berfungsi menangkap cahaya yang diteruskan
zat dan kemudian mengubahnya  menjadi  energi  listrik  yang kemudian  akan  disampaikan  ke  detektor.
Detektor  adalah  material  yang  dapat menyerap energi dari foton dan mengubahnya  dalam  bentuk  lain,  yaitu energi listrik.
Display atau  tampilan  mengubah  sinar listrik  dari  detektor  menjadi  pembacaan yang berupa meter atau angka yang sesuai dengan hasil yang dianalisis. Prinsip kerja spektrofotometer adalah berdasarkan hukum Lambert-Beer, yaitu seberkas sinar dilewatkan  suatu  larutan  pada  panjang gelombang tertentu, sehingga sinar
tersebut sebagian ada yang diteruskan dan sebagian  lainnya  diserap  oleh  larutan. Besarnya  sinar (A) berbanding  lurus dengan  konsentrasi  zat penyerap (C) dan jarak yang ditempuh sinar (a) dalam larutan (tebal larutan, b).
Hukum Lambert-Beer A = a.b.C
Keterangan: A = Serapan (absorbans) C =  Konsentrasi a = Koefisiensi serapan spesifik b = Tebal larutan
Pada spektrofotometer UV-VIS, zat diukur dalam  bentuk  larutan.  Analit  yang  dapat diukur  dengan  spektrofotometer  sinar tampak  adalah  analit  berwarna  atau  yang dapat  dibuat  berwarna.  Analit  berwarna adalah analit yang memiliki sifat menyerap cahaya  secara  alami.  Analit  yang  dibuat berwarna adalah analit yang tidak berwarna  sehingga  harus  direaksikan dengan  zat  tertentu  untuk  membentuk senyawa  yang  menyerap  cahaya  pada panjang
gelombang tertentu.
Pembentukan  warna  untuk  zat  atau senyawa  yang  tidak  berwarna  dapat dilakukan dengan  pembentukan  kompleks atau dengan cara oksidasi sehingga analit menjadi berwarna.
Masalah-masalah  dalam  pengukuran spektrofotometer Sumber-sumber masalah dalam pengukuran secara spektrofotometri menurut Christian (1994) adalah 1.  Penyimpangan  kimia  dapat  terjadi bila ada perubahan-perubahan akibat proses kimia, seperti senyawaan yang dianalisis bereaksi  dengan  senyawaan  lain atau pelarut yang digunakan. 2.  Penyimpangan alat dapat diakibatkan oleh kemungkinan masih  adanya  sinar  yang  bersifat polikromatik.  Tuntutan  ini  sukar dipenuhi karena monokromator kurang mampu mengisolasi panjang gelombang yang benarbenar monokromatik. Di samping kelemahan monokromator,  juga  ada  pengaruh sinar  sesatan.  Sinar  ini  terjadi karena  pantulan  permukaan  alat optis yang digunakan dan hamburan sinar oleh dinding dalam peralatan untuk kemudian menerobos  celah  tanpa  lewat monokromator menuju detektor. 3.  Penyimpangan  terhadap  hukum Lambert Beer
Hukum Lambert Beer berlaku untuk konsentrasi  media  yang encer  dan jika  '  terlalu  pekat  maka  fungsi absorbans  terhadap  konsentrasi menjadi tidak linear.

## Ketoprofen
Ketoprofen merupakan kelompok analgesik  bukan  narkotik  yang  dibagi berdasarkan  struktur  kimia,  di  antaranya adalah turunan asam propionat. Golongan obat analgesik umumnya digunakan sehari-hari,  yaitu  untuk  mengurangi  rasa sakit,  untuk  menurunkan  suhu  tubuh,  dan juga  dapat  memberikan  efek  antiinflamasi dengan  menghambat  pembentukan  pros- taglandin. Definisi analgesik sendiri adalah obat-obat  yang  dapat  meringankan  atau menghilangkan rasa nyeri tanpa menghilangkan  kesadaran.  Salah  satu contoh dari golongan ini adalah ketoprofen. Ketoprofen  merupakan  zat  aktif  yang terdapat  dalam  obat  ketoprofen  100  mg/2
mL injeksi. Ketoprofen merupakan turunan asam  propionat,  yaitu  suatu antiinflamasi nonsteroid (AINS). Ketoprofen mempunyai aktivitas  antiinflamasi,  antipiretik,  dan analgesik  secara  sentral  dan  perifer. Rumus  stuktur  kimia  ketoprofen  dapat dilihat pada Gambar 2.
Ketoprofen  memiiki  nama  lain  seperti  ke- toprofenum,  asam-2-(3-benzoilfenil)  pro- pionat,  dan  asam  m-benzoiihidratropik. Ketoprofen memiliki rumus molekul C16H14O3 dan bobot molekul 254.3.
Kandungan  Ketoprofen  100  mg/2  mL injeksi Ketoprofen 100 mg/2 mL injeksi merupakan  salah  satu  obat  generik  yang mengandung  ketoprofen  100  mg  setiap  2 mL  injeksi.  Fungsinya  adalah  untuk mengurangi  rasa  nyeri  akibat  peradangan pada  berbagai  keadaan  rematik  dan kelainan  degeneratif  pada  sistem  otot rangka.

## Identifikasi
Ketoprofen mengandung tidak kurang dari 98.5% bib dan tidak lebih dari 100.5% b/b C16H14O3  dihitung  terhadap  zat  yang teiah  dikeringkan;  berbentuk  serbuk  atau habrur;  berwarna  putih  atau  hampir  putih; tidak  atau  hampir  berbau;  mudah  larut dalam  etanol,  kloroform,  eter,  dan  tidak larut  dalam  air;  suhu  lebur  9396  C;  susut pengeringan  kurang  dari  0.5%;  sisa pemijaran  kurang  dari  0.1%;  logam  berat kurang  dari  0.0002%.  Identifikasi  untuk analisis  kualitatif  dan  kuantitatif  dapat dilakukan secara spektrofotometri serapan inframerah dan serapan UV (FI, 1995).

## Cara Kerja Obat
Secara  farmakodinamik,  mekanisme  kerja ketoprofen  yang  merupakan  zat  aktif antiinflamasi  yang  akan  menghambat pembentukkan prostaglandin (suatu polipeptida) dan agregasi trombosit sehingga  akan  menghalangi  penempelan irombosit dari cairan vaskuler. Secara farmakokinetik, ketoprofen diserap secara cepat dan sempurna dalam saluran cerna.  Kadar  maksimum  dalam  plasma dicapai  dalam  waktu  60  hingga  90  menit setelah pemberian oral (45 hingga 60 menit setelah  pemberian  melalui  rektal),  99% ketoprofen terikat dengan protein plasma.

## Kontraindikasi dan Efek Samping
Kontraindikasi  dari  obat  ketoprofen  100 mg/2 mL injeksi adalah terhadap pasien-pasien  gangguan  fungsi  ginjal  dan hati  yang  berat, peptic ulcer, serta pasien yang  hipersensitif  terhadap  ketoprofen, asam  asetil  salisilat,  dan  AINS  lain.  Efek samping yang dapat ditimbulkan oleh obat ketoprofen  100  mg/2  mL  injeksi  adalah dapat  menyebabkan  mual,  muntah,  diare, konstipasi, pusing, sakit kepala, gangguan fungsi ginjal, dan konsistensi tinja lunak.

## METODOLOGI PENELITIAN

## Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian dilakukan pada tanggal 5 Maret sampai  4  Mei  2007,  di  Laboratorium  Unit Pengawasan  Mutu  PT  Novell  Pharma- ceutical Laboratories.

## Deskripsi Proses
Validasi metode analisis dilakukan dengan urutan  pembuatan  matriks  atau  plasebo, pembuatan sampel simulasi, dan pengukuran kadar sampel simulasi. Prosedur  dilakukan  duplo  untuk  setiap konsentrasi  dan  ditetapkan  pada  tiga  hari yang berbeda.
Matriks  atau  plasebo  dibuat  dengan mencampurkan  bahan-bahan  lain  yang tidak bereaksi dengan bahan aktif dengan komposisi  yang  berbeda  tanpa  adanya penambahan  bahan  aktif  dengan  jumlah sesuai kebutuhan.
Sampel simulasi dibuat dengan menambahkan sejumlah bahan aktif vketoprofen),  dengan  jumlah  tertentu
sehingga  didapatkan  konsentrasi  yang berbeda-  beda  dalam  simulasi  sampel. Komposisi  simulasi  dapat  dilihat  pada Tabel 1.
Larutan  standar  dibuat  dengan  tiga  titik konsentasi, yaitu 80% b/b, 100% b/b, dan 120% bib. Konsentrasi larutan standar 80% b/b,  100%  bib,  dan  120%  bib  secara berturut-turut  dibuat  dengan  melarutkan 20.2  mg,  25.2  mg,  30.7  mg  standar ketoprofen (potensi 99.10%  bib) ke dalam labu ukur 50.0 mL kemudian ditambahkan pelarut  hingga  tanda  batas.  Larutan disonikasi selama 10 menit. Dipipet 1.0 mL larutan  standar  ketoprofen  kemudian dimasukan  ke  labu  ukur  50.0  anL ditambahkan  pelarut  hingga  tanda  batas, dikocok homogen. Pembuatan larutan sampel. Dipipet 1.0 mL larutan  simulasi,  dimasukkan  ke  dalam labu ukur 100.0 mL kemudian ditambahkan pelarut hingga tanda batas. Dipipet 1.0 mL simulasi  yang  telah  diencerkan  ke  dalam labu ukur 50.0 mL kemudian ditambahkan pelarut hingga tanda batas.
Larutan  sampel  dan  standar  diperiksa kada.rnya dengan menggunakan spektrofotometer  UV-VIS  pada  panjang gelombang  yang  memberikan  serapan terbesar  pada  hasil scanning larutan sampel  dan  standar  pada  konsentrasi 100% b/b.

## Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  dalam  pengukuran sampel  ketoprofen  100  mg/2  mL  injeksi adalah  spektrofotometer  berkas  rangkap dengan  merk  Shimadzu  1700,  kuvet, neraca  analitik,  labu  ukur  50.0  mL,  labu ukur 100.0 mL, pipet tetes, pipet volumetrik 1.0 ml, dan spatula.
Bahan  yang  digunakan dalam  pembuatan matriks  atau  plasebo  adalah  campuran bahan  yang  telah  diatur  komposisinya tanpa  ada  penambahan  bahan  aktif (ketoprofen),  ketoprofen  sebagai  bahn aktif, dan metanol sebagai pelarut.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  yang  diperoleh  dari  beberapa parameter yang dikerjakan pada percobaan  dibandingkan  dengan  syarat yang telah ditetapkan. Syarat dari beberapa  parameter  validasi  metode penetapan  kadar  ketoprofen  (FI  1995) dapat dilihat pada Tabel 2.
Pada Spektrofotometer UV-VIS, pengukuran zat melibatkan blangko, standar,  dan  analit.  Pada  penentuan ketoprofen, selain sebagai blangko metanol  juga  berfungsi  sebagai  pelarut karena  dapat  melarutkan  analit  dengan baik,  relative  transparan (melewatkan) terhadap  daerah  spektrum  analit  yang digunakan  untuk  pengukuran  dan  tidak berinteraksi dengan molekul senyawa yang dianalisis.
Penentuan panjang gelombang yang tepat merupakan  hal  penting  untuk  dilakukan pada penenhian kadar bahan aktif ketoprofen. Panjang gelombang yang tepat untuk  pengukuran  zat  ialah  panjang gelombang  yang  menunjukkan  serapan maksimum  suatu  zat.  Untuk  mengetahui hal  tersebut  maka  terlebih  dahulu  dibuat spektrum serapan dari standar dan sampel pada konsentrasi 100% b/b yang menyatakan  hubungan  antara  absorbans
Tabel 1 Komposisi sampel simulasi Simulasi (%) Ketoprofen (gram) Matriks (mL) 80 2.012 50.00 90 2.264 50.00 100 2.515 50.00 ,110 2.767 50.00 120 3.018 50.00
dan  panjang  gelombang.  Kurva  yang berimpitan  menunjukkan  bahwa  sampel dan standar memiliki serapan pada daerah panjang  gelombang  yang  sama.  Hasil scanning larutan  standar  dan  sampel menunjukkan  bahwa  panjang  gelombang yang  memiliki  serapan  maksimum  pada larutan  standar  dan  sampel  adalah  pada panjang gelombang 254 nm seperti terlihat pada Gambar 3.
Gambar  3.  Kurva  hasil scanning larutan sampel  dan  standar  pada konsentrasi 100% b/b.

## Uji ketepatan
Penetapan  ketepatan  dimaksudkan  untuk mengetahui sejauh mana ketepatan kadar ketoprofen yang dinyatakan dengan persen  perolehan  kembali.  Besarnya perbedaan  hasil  dengan  kadar  tioritis menunjukkan adanya ketidaktepatan dalam pengerjaan preparasi sampel ataupun ketidakstabilan bahan yang dianalisis. Hasil penetapan akurasi dapat di lihat pada Tabel 3.
Hasil  pada  Tabel  3,  menyatakan  bahwa rata-rata  perolehan  kembali  pada  rentang konsentrasi 80% b/b-120% b/b dengan dua kali pengulangan selama tiga hari berturut-turut  adalah  sebesar  99.787%. Besarnya  nilai  ketepatan  dapat  dilihat berdasarkan  persen  bias.  Semakin  kecil persen  bias  yang  didapat  maka  semakin besar  persen  ketepatan  metode  analisis. Hasil  penetapan  persen  bias  bisa  dilihat pada  Tabel  3.  Kisaran  kerja  yang digunakan  menunjukkan  kisaran  yang linear,  hal  ini  dapat  dilihat  dari  koefisien korelasi  yang  dihasilkan  yaitu  sebesar 0.9995. Kurva regresi linear akurasi dapat dilihat pada Gambar 4.

## Uji Linearitas
Penetapan ini dilakukan untuk menentukan kisaran kerja yang linear. Adapun rentang kerja yang digunakan dalam penetapan ini adalah 80%-120%. Hasil penetapan linearitas  dinyatakan  dengan  koefisien korelasi  (r)  yang  digambarkan  dengan persamaan  garis  lurus  yang  terlihat  pada Gambar
5.
(r)  yang  diperoleh  sebesar  0.9995. Semakin besar nilai koefisien korelasi yang didapat  semakin  besar  kelinearan  yang didapat.  Kisaran  kerja  yang  dihasilkan menunjukkan  kondisi  kerja  yang  linear yang sesuai dengan hukum Lambert Beer.

## Uji perolehan kembali
Perolehan  kembali  menyatakan  kadar yang diperoleh kembali dari hasil pengukuran dan membandingkannya dengan nilai teoretis yang telah ditetapkan. Perolehan  kembali  yang  didapatkan  pada metode  analisis  sebesar  99.787%.  Hasil yang didapat termasuk baik karena syarat perolehan kembali yang ditetapkan adalah sebesar
98.0%-102.0%.
Hal ini menunjukkan kestabilan zat yang dianalisis dan ketepatan metode analisis yang cukup besar. Hasil penetapan perolehan kembali dapat dilihat pada Tabel 4.
Gambar  6.  Kurva  hasil  uji  perolehan kembali.

## Uji ketelitian
Penetapan  ketelitian  dilakukan  untuk melihat  sejauh  mana  ketelitian  metode analisis dalam penentuan kadar. Penetapan  dilakukan  dengan  melihat besarnya simpang baku relatif (RSD) data rata-rata  selama  tiga  hari  berturut-turut. Semakin  kecil  nilai  RSD  yang  didapat maka  kemakin  besar  ketelitian  metode analisis  yang  digunakan.  Hasil  penetapan ketelitian  metode  analisis  dapat  dilihat pada Tabel 5.
Hasil  pada  Tabel  5,  menyatakan  bahwa koefisien variansi (% RSD) yang dihasilkan sebesar  0.651  %.  Nilai  ini  menyatakan bahwa  ketelitian  metode  analisis  bisa dipercaya karena telah memenuhi persyaratan,  yaitu  kurang  dari  2%.  Data perhitungan  harian  bisa  dilihat  pada Lampiran 8, 9, 10, dan 11.

## Uji selektivitas
Penetapan selektivitas dimaksudkan untuk menunjukkan bahwa metode yang spesifik mempunyai kemampuan untuk mendeteksi dan  menentukan  zat  aktif  tanpa  adanya gangguan  zat  asing  dalam  formula. Pengukuran  dilakukan  terhadap  matriks contoh, yaitu dengan melakukan identifikasi  larutan  matriks  pada  panjang gelombang  200  nm  hingga  400  nm.  Hasil yang  didapatkan  matriks  sampel  tidak terdeteksi  pada  saat  identifikasi.  Adapun syarat penerimaan pada penetapan
selektivitas adalah spektogram yang dihasilkan  tidak  menunjukkan  adanya gangguan pada pengukuran absorbans zat asing yang ada dalam formula.

## Uji kapabilitas
Kapabilitas menunjukkan kemampuan metode  analisis  untuk  pemeriksaan  kadar bahan aktif dalam sampel. Nilai kapabilitas dipengaruhi  oleh  beberapa  faktor,  seperti standar deviasi (SD), standar deviasi relatif (RSD),  batas  atas  spesifikasi  (BAS)  dan batas bawah spesifikasi (BBS). Batas atas bernilai  110  dan  batas  awah  spesifikasi bernilai  90.  Nilai  ini  berasal  dari  standar yang  berlaku  di  farmakope  bahwa  untuk analisis  zat  aktif  dalam  obat  disyaratkan kadarnya berkisar 90-110% b/b. Apabila di dalam  obat  BBS  kurang  dari  90%  b/b bahan  aktif  maka  obat  tersebut  tidak memiliki  kemampuan  mengobati  suatu penyakit.  Sebaliknya  nilai  BAS  yang  lebih dari 110% b/b bahan aktif akan mengakibatkan over dosis terhadap penggunanya.
Hasil  yang  didapat  nilai  kapabilitas  (Kp) metode sebesar 4.836 nilai ini menyatakan bahwa  kapabilitas  metode  sangat  baik karena syarat yang ditetapkan adalah lebih besar  dari  2.5  sehingga  dapat  digunakan untuk  analisis  rutin.  Contoh  perhitungan data  analisis  selengkapnya  bisa  dilihat pada Lampiran 12.

## KESIMPULAN
Hasil  unjuk  keija  spektrofotometer  untuk analisis  ketoprofen  (  untuk  metode  unjuk validasi)  menunjukkan  bahwa  unjuk  kerja alat  spektrophotometer  dalam  keadaan baik, hal ini dapat dilihat dari:
• Nilai galat dibawah 2,0%.
• Nilai ketelitian dan ketepatan
sebesar 99.787%.
• Nilai  regresi  pada  uji  linearitas sebesar 0.9995.
• Kapabilitas sebesar 4.836.
• Perolehan kembali
sebesar
99.79%.
Sehingga  metode  uji  dapat  digunakan secara rutin untuk analisis.

## DAFTAR PUSTAKA
[Depkes RI] Departemen Kesehatan Republik Indonesia. 1995. Farmakope Indonesia. Ed ke-4. Jakarta: Departemen  Kesehatan  Republik Indonesia.
Badan  Pemeriksaan  Obat  dan  Makanan. 2001. Cara  Pembuatan  Obat  yang Baik. Jakarta:  Badan  Pemeriksaaan Obat dan Makanan. BP. 1999. Vol 1 The BP  1999  The British Pharmacopeial. London:  The  Sta- tionery Office.
BP. 1999. Vol 2 The BP  1999  The British Pharmacopeia1. London:  The  Sta- tionery Office.
Christian  GD.  1994. Analytical  Chemistry. Ed ke-5. Washington: J. Willey Mutschler  E.  1991. Dinamika  Obat. Edisi kelima. Mathilda B widianto dan Anra Setiadi Ranti, penerjemah. Bandung: Institut Teknologi Bandung. Anief  M.  2004. Prinsip  Umum  dan  Dasar
Farmakologi. Yogyakarta:
Universitas Gajah Mada. Day RA dan Underwood AL. 1992. Analisis Kimia  Kuantitatif. Ed  ke-5.  AH Pudjaatmaka,  penerjemah.  Jakarta: Erlangga.
USP NF. 2006. The USP NF The National Formulary Ed.  Rockville.  United States Pharmacopeia! Convention. USP-24  NF-19.  2000. The  USP-24  The
National  Formulary 19.  Ed  ke-12 Rockville.  United  States  Pharma- copeial Convention.