DOI : 10.5281/zenodo.3343011

## PENGEMBANGAN ELEKTRODE BIOSENSOR LIPASE TERMOSTABIL ISOLAT BANYUWEDANG YANG DIAMOBIL DENGAN PVC UNTUK PENENTUAN KADAR TRIGLISERIDA
DGE. Sastra Wiguna 1) , KD. Wirmandiyanthi 2) , IGPNA. Santika 3) 1) Program Studi Pendidikan Biologi FPMIPA IKIP PGRI BALI
2) Program Studi Yoga Kesehatan Fakultas Brahma Widya IHDN Denpasar
3) Program Studi Pendidikan Jasmani Kesehatan dan Rekreasi FPOK IKIP PGRI Bali E-Mail : 1) dewasastra@ikippgribali.ac.id, 2) dwirmandiyanthi@gmail.com, 3) ngurahadisantika@gmail.com

## ABSTRAK
Penelitian ini bertujuan untuk (1) menentukan rentang kerja (suhu dan pH) elektrode biosensor lipase  termostabil  isolat  Banyuwedang  yang  diamobil  dengan  menggunakan  PVC  dan  (2) menentukan kadar trigliserida dalam emulsi minyak olive dengan elektrode biosensor tersebut. Subjek  penelitian  ini  adalah  elektrode  biosensor  trigliserida.  Objek  penelitian  adalah  Rentang Kerja (Suhu dan pH) elektrode biosensor dan kadar trigliserida dalam emulsi minyak olive. Data suhu  dan  pH  optimum  serta  kadar  trigliserida  dalam  emulsi  minyak  olive  dianalisis  secara deskriptif kualitatif. Hasil penelitian menunjukkan bahwa Rentang kerja biosensor berdasarkan pengukuran kedua jenis elektrode didapatkan pada pH 6,0 hingga 8,0 dan  pada suhu  10-70 o C. Hubungan  kadar  trigliserida  yang  terukur  terhadap  emulsi  minyak  olive  yang  digunakan diperoleh  hubungan  bahwa  kadar  trigliserida  terukur  berbanding  lurus  dengan  emulsi  minyak olive  yang  digunakan  dan  diperoleh  persamaan  Y  =  0,009X  –  0,026,  dengan  Y  adalah  kadar trigliserida  yang  terukur  sebagai  konsumsi  oksigen  (ppm)  dan  X  adalah  emulsi  minyak  olive yang digunakan (ppm).

## Kata kunci : biosensor lipase banyuwedang, trigliserida, emulsi minyak olive

## ABSTRACT
The aim of this  research is (1) to overcome range (temperature and pH) of biosensor electrode lipase  termostabil  Banyuwedang  Isolat  that  was  immobiled  by  PVC  and  (2)  to  overcome trigliserida  disposal  on  olive  oil  using  biosensor  elektrode.  The  subject  of  this  research  is biosensor  trigliserida  elektrode.  Obyek  of  this  research  is  range  (temperature  and  pH)  of biosensor elektrode and triglyceride disposal on olive oil. The result of this research show that the  range  of  biosensor  has  pH  6,0  -  8,0  and  the  temperature  10-70 o C.  The    relation  of triglyceride disposal with olive oil that was used showing that  triglyceride disposal linear with olive oil that was used and has show by the equality Y = 0,009X – 0,026, with Y is triglyceride disposal as oxygen consumed (ppm) and X is olive oil that was used (ppm).
Keywords : lipase banyuwedang biosensor, ttriglyceride, olive oil emulsion

## PENDAHULUAN
Trigliserida alami adalah triester dari asam lemak berantai panjang dan  gliserol.  Trigliserida  merupakan ukuran  lemak  yang  lebih  kecil  (Santika, 2016).  Apabila  keberadaan  trigliserida dalam darah berlebih dapat meningkatkan resiko terkena artheroclerosis dan
hipertensi.
Artheroclerosis ditandai  oleh  penebalan lapisan  dalam  dinding  pembuluh  darah arteri  sehingga  terjadi  penyempitan lumen  pembuluh,  membatasi  aliran darah dan elastisitas pembuluh,
merangsang  pembentukan  pembekuan darah yang menghambat aliran darah dan
DOI : 10.5281/zenodo.3343011
dapat  mengakibatkan  kerusakan  pada jantung,  otak  dan  jaringan  paru-paru yang  sifatnya  fatal  (Wallach,  1996). Meningkatnya  trigliserida  dalam  darah juga dapat menyebabkan resiko arterikoroniari  (CAD, Coronary  artery diseaseis ) (Klotzsch and Namara, 1990). Adanya berbagai penyakit yang disebabkan oleh kadar trigliserida berlebih  di  dalam  darah  sehingga  perlu diketahui  kadar  trigliserida  dalam  darah secara  dini.  Oleh  karena  itu,  deteksi secara  cepat  dan  murah  pada  penentuan trigliserida terus dijajagi.
Sejumlah metode telah
diterapkan  untuk  penentuan  gliserida dalam  serum  darah,  seperti  metode enzimatis  (Fossati,  and  L.  Prencipe, 1982),  flourometri  (Voysey,  and  D.C. Wilton,  1994),  bioluminisense  (Lowry, et al., 1951), kromatografi (Bjorkhem, et al., 1989) dan HPLC ( High Performance Liquid Chromatography ) (Okazaki, et al, 1998). Metode-metode ini tidak populer, sebab  presisinya  rendah,  peralatan  yang digunakan  sangat  mahal,  membutuhkan pretreatment (perlakuan  awal)  dan derivatisasi  analit yang relatif besar.
Metode lain yang dapat mengatasi  berbagai  kekurangan  tersebut yaitu metode kalorimetri yang menggunakan  rangkaian  enzim  lipase, gliserol kinase, gliserol-3-fosfat oksidase dan  peroksidase.  Metode  ini  lebih sederhana,  sensitif,  dan  spesifik  bila dibandingkan  dengan  metode  yang digunakan sebelumnya, sehingga metode ini  sangat  baik  untuk  analisis  rutin. Namun,  bila  sampel  yang  dianalisis banyak  maka  jumlah    enzim  yang dibutuhkan    menjadi  sangat  banyak, sehingga  biaya  yang  dikeluarkan  juga besar.  Selain  itu  alat  yang  digunakan juga  tidak  praktis  dan  efisien.  Metode yang  dapat  mengatasi  dua  kendala  ini yaitu  metode  yang  dikembangkan  oleh
Bhambi et  al .  (2006).  Metode  ini menggunakan  pengukuran  trigliserida secara potensiometer dengan mengamobil enzim lipase, gliserol kinase,  gliserol-3-fosfat  oksidase  pada membran  PVC  serta  menempelkan  pada DO  meter.  Kegunaan  PVC  didasarkan atas kemampuannya melakukan
pertukaran  ion,  daya  adsorpsi  dan  sifat katalitiknya  (Xiang  LI, et  al., 2005). Peningkatan  daya  guna  PVC  sebagai solids  support dapat  dilakukan  dengan mengaktivasi  PVC  secara  fisis  dengan penambahan glutaraldehida 2,5% (Bhambi et al ., 2006). Namun pengukuran tersebut masih menggunakan enzim lipase dari mikroba mezofilik. Penggunaan enzim lipase dalam rangkaian biosensor untuk analisis trigliserida  mengikuti  alur  mekanisme reaksi  enzimatis,  yang  dapat  diuraikan sebagai  berikut  :  trigliserida  yang terkandung  dalam  sampel  akan  dipecah oleh  enzim  lipase  menjadi  asam  lemak dan  gliserol.  Gliserol  selanjutnya  oleh enzim  gliserol  kinase  (GK)  diubah menjadi  gliserol-3-fosfat. Dalam kondisi aerob  (O 2 )  oleh  enzim  gliserol-3-fosfat oksidase (GPO) diubah menjadi dehidroksiaseton  fosfat  (DHAP)  dan H 2 O 2 (Bhambi et al., 2006).
Berkurangnya  kelarutan  oksigen  karena membentuk  H 2 O 2 diukur  dengan  alat DO-meter, yang dikaitkan dengan enzim yang telah diamobilisasi dengan membran PVC. Penggunaan PVC
didasari  pada  sifatnya  yang  tahan terhadap  bahan  kimia,  harga  murah, tidak  beracun,  afinitas  dan  respon  yang tinggi dengan ligan kimia yang sederhana.
Berdasarkan  penelitian  yang dilakukan  Bhambi  (2006)  diperoleh bahwa  penggunaan  enzim  lipase  dari mikroba mezofilik dalam analisis
DOI : 10.5281/zenodo.3343011
trigliserida kurang efektif. Hal ini karena lipase  yang  digunakan  tidak  tahan dengan  suhu  tinggi,  sehingga  respon yang  dihasilkan  relatif  lambat.  Kendala ini  dapat  diatasi  dengan  menggunakan enzim  lipase  termostabil  dari Bacillus BYW2  (Isolat  Banyuwedang)  yang diamobilisasi dengan menggunakan pengamobil  PVC  yang  telah  diaktivasi secara fisik.
Oleh  karena  itu,  penelitian  ini dilakukan dengan tujuan untuk menentukan rentang kerja (suhu dan pH) elektrode  biosensor  lipase  termostabil isolat  Banyuwedang  yang  diamobil dengan menggunakan PVC dan menentukan  kadar  trigliserida  dalam emulsi minyak olive yang diukur dengan elektrode  biosensor  lipase  termostabil isolat  Banyuwedang  yang  diamobil dengan membran PVC.
Manfaat  dari  penelitian  ini adalah  dapat  diperoleh  alat  untuk menentukan  kadar  trigliserida  dalam emulsi minyak olive  yang menggunakan lipase  termostabil  isolat  Banyuwedang yang diamobil dengan membran PVC .

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  dilakukan  di Laboratorium Organik Jurusan Pendidikan Kimia, Universitas Pendidikan  Ganesha  di  Singaraja.  Alat yang  dipergunakan  dalam  penelitian  ini meliputi ; Neraca  analitik,  Kaca  arloji, Corong,  Pipet  volum,  Pipet  ukur,  Labu ukur,  Erlenmeyer,  Gelas  kimia,  Buret, Statif dan klem, Batang pengaduk, Pipet tetes,  Magnetik  strirer,  Gelas  ukur,  DO- meter,  pH  meter.  Bahan-bahan  yang dipergunakan dalam penelitian ini  yaitu: Membran  PVC,  Glutaraldehida  2,5%, Buffer  Na-fosfat  0,1  M  (pH  6,  6,5,  7, 7,5,  dan  8,  Enzim  lipase  termostabil isolat  Banyuwedang,  Aquades,  Minyak olive,  GPO  (gliserol-3-posfat  oksidase),
GK (gliserol kinase), tissu,  LAS  (Linear Alkil  Sulfonat),  ATP,  MgCl 2 dan  Kertas saring.

## Penetuan  Rentang  Kerja  Elektrode Enzim
Elektroda  enzim  yang  telah dibuat  kemudian  dilakukan  penentuan rentang  kerja  dari  elektroda  itu.  Dipepet sebanyak 18 mL buffer na-fosfat (0,1 M) kedalam  gelas  kimia.  Ditambahkan emulsi  minyak  olive  sebanyak  2  mL.
Campuran tersebut kemudian ditambahkan  dengan  aquades  hingga volume  100  mL.  Penentuan  Rentang
Kerja (Suhu dan pH) biosensor dilakukan  melalui  pengukuran  kelarutan oksigen  yang  dihasilkan  dari  konsumsi oksigen dengan respon pada berbagai pH dan suhu percobaan.
Penentuan Trigliserida
Elektroda DO-meter yang dilapisi membran PVC-enzim digunakan untuk  menentukan  kadar  trigliserida dalam  emulsi  minyak  olive.  Kadar trigliserida  dalam  emulsi  minyak  olive dapat diketahui dengan adanya konsumsi oksigen  pada  pengukuran  elektrode eksperimen  untuk  membentuk  H 2 O 2 . Penggunaan oksigen tersebut akan menyebabkan perubahan kelarutan oksigen  yang  terukur  antara  kontrol  dan eksperimen. Dalam penentuan kadar trigliserida  dengan  biosensor  ini  dapat dilakukan dengan dua tahap :
Tahap I  :  Pada  Tahap  I  ini  dilakukan penentuan kelarutan oksigen menggunakan elektrode  biosensor  dengan membran PVC tanpa enzim (elektrode kontrol). Dipepet sebanyak  18  mL  buffer  na- fosfat  (0,1  M)  dengan rentang  kerja  pH  dan  suhu yang  diperoleh  dan  variasi volume emulsi minyak
DOI : 10.5281/zenodo.3343011
olive. Campuran tadi ditambahkan dengan aquades hingga volume 100 mL. Kemudian diukur dengan elektrode kontrol. Tahap II  :  Pada tahap I telah diperoleh konsentrasi oksigen terlarut dari  hasil  pengukuran  oleh elektrode  kontrol  (oksigen terlarut  awal),  untuk  tahap II  ini  dilakukan  penentuan kelarutan oksigen menggunakan elektrode biosensor  membran  PVC- enzim  teramobil  (elektrode eksperimen). Dipepet sebanyak  18  mL  buffer  na- fosfat  (0,1  M)  dengan rentang  kerja  pH  dan  suhu yang  telah  diperoleh  serta emulsi minyak olive dengan  variasi  konsentrasi dan  ditambahkan  aquades hingga  volume  100  mL. Kemudian  diukur  dengan elektrode eksperimen.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Penentuan rentang kerja elektrode pada berbagai pH

## Tabel 1
Rentang Kerja Elektrode pada Berbagai pH pH Kelarutan Oksigen Elektrode Kontrol (x) (ppm) Kelarutan Oksigen Elektroda Eksperimen (y) (ppm) KOP (x-y) (ppm) KOT (ppm) 6,0 5,46 5,32 0,14 0,11 6,5 5,56 5,40 0,16 0,14 7,0 5,52 5,31 0,21 0,16 7,5 5,44 5,20 0,24 0,19 8,0 5,54 5,28 0,26 0,15
Keterangan : KOT = Konsumsi Oksigen Teoritis KOP = Konsumsi Oksigen Praktis
Data hasil
pengukuran rentang  kerja  elektrode  kontrol  dan eksperimen  pada  berbagai  pH  serta konsumsi oksigen yang digunakan dapat dilihat  pada  Tabel  1.  Tabel  tersebut menunjukkan  bahwa  ada  kenaikan konsumsi  oksigen  secara  praktik  dari pH  6,0  hingga  pH  8,0.  Penentuan Rentang Kerja pH.
Salah  satu  variabel  yang digunakan  dalam  menentukan  rentang
kerja  dari  biosensor  yaitu  pH.  Pada penelitian  ini  digunakan  variasi  pH yaitu 6,0; 6,5; 7,0; 7,5; dan 8,0 (Bhambi et  al., 2006).  Variasi  pH  ini  diujikan pada  dua  jenis  elektrode  yang  berbeda yaitu elektrode yang hanya menggunakan  membran  PVC  tanpa menggunakan enzim (Elektrode Kontrol) dan elektrode yang menggunakan  membran  PVC  serta enzim  yang  teramobil  pada  membran
DOI : 10.5281/zenodo.3343011
(Elektrode Eksperimen). Semua perlakuan  tersebut  dilakukan  pada  suhu kamar. Berdasarkan data hasil pengukuran dengan menggunakan elektrode kontrol dan elektrode eksperimen  seperti  pada  Tabel  1.  dapat terlihat  konsentrasi  kelarutan  oksigen yang  terukur  pada  elektrode  kontrol  (x) dan  elektrode  eksperimen  (y).  Jika diamati  konsentrasi  kelarutan  oksigen pada pengukuran menggunakan elektrode eksperimen mengalami penurunan dari hasil pngukuran menggunakan
elektrode kontrol.
Penurunan ini disebabkan oleh bereaksinya emulsi minyak olive
dengan enzim-enzim yang terdapat pada membran  PVC,  dimana  enzim-enzim tersebut  akan  mengubah  oksigen  pada larutan  menjadi  hidrogen  peroksida. Berubahnya  oksigen  menjadi  hidrogen peroksida  dinyatakan  sebagai  oksigen terkonsumsi.
Besarnya konsumsi oksigen  ini  dapat  dihitung  dengan mengurangkan hasil pengukuran elektrode kontrol dengan hasil pengukuran  pada  elektrode  eksperimen, secara  matematika  dapat  ditulis  x-y.

## Penentuan Rentang Kerja Elektrode Pada Berbagai Suhu
Data  hasil  pengukuran  rentang  kerja  elektrode  kontrol  dan  eksperimen  pada berbagai suhu disajikan pada Tabel 2.

## Tabel 2 Rentang Kerja Elektrode pada Berbagai Suhu
Suhu ( 0 C) pH Kelarutan Oksigen Elektrode Kontrol (x) ppm Kelarutan Oksigen Elektroda Eksperimen (y) ppm KOP (x-y) ppm KOT (ppm) 10 7,0 6,32 5,97 0,35 0,48 20 7,0 5,86 5,57 0,29 0,24 30 7,0 5,52 5,31 0,21 0,16 40 7,0 4,96 4,79 0,17 0,12 50 7,0 3,87 3,73 0,14 0,09 60 7,0 1,94 1,82 0,12 0,08 70 7,0 1,24 1,14 0,10 0,01
Keterangan : KOT = Konsumsi Oksigen Teoritis KOP = Konsumsi Oksigen Praktis
Data hasil
pengukuran rentang  kerja  elektrode  kontrol  dan eksperimen  pada  berbagai  suhu  serta konsumsi oksigen yang digunakan dapat dilihat  pada  Tabel  1.  Tabel  tersebut menunjukkan  bahwa  terjadi  penurunan konsumsi  oksigen  secara  praktik  mulai dari suhu 10 0 C hingga suhu 70 0 C.
Variabel lain yang mempengaruhi  kerja  biosensor  adalah suhu.  Suhu  menjadi  varibel  yang diperhitungkan  karena  adanya  fakta bahwa enzim memiliki perbedaan kemampuan  pada  suhu  yang  berbeda pula. Fakta yang lain juga menerangkan bahwa  apabila  enzim  melewati  ambang
DOI : 10.5281/zenodo.3343011
batas  suhu  maka  akan  menyebabkan kerusakan  pada  enzim.  Pada  penentuan rentang kerja suhu biosensor, Suhu yang digunakan  yaitu  variasi  suhu  dari  10 o - 70 o C.  Hal  ini  mengingat  enzim  lipase Banyuwedang  memiliki  suhu  optimum pada  50 o C  dan  maksimum  pada  suhu 70 o C.
Berdasarkan  data  pada  Tabel
2.  teramati  bahwa  konsentrasi  kelarutan oksigen  pada  elektrode  eksperimen  dan elektrode kontrol  mengalami  penurunan seiring naiknya suhu. Hal ini disebabkan pengaruh suhu pada konsentrasi kelarutan oksigen, dimana suhu semakin besar  akan  menyebabkan  oksigen  yang mula-mula  larut  dalam  larutan  sedikit demi  sedikit  berubah  menjadi  gas seiring  dengan  bertambahnya  suhu (Putranegoro,  2009).  Seperti  halnya
pada penentuan rentang kerja pH, maka penurunan konsentrasi kelarutan
oksigen  yang  terukur  pada  elektrode eksperimen  dibandingkan  konsentrasi kelarutan  oksigen  yang  terukur  pada elektrode kontrol pada penentuan rentang  kerja  suhu  disebabkan  oleh bereaksinya emulsi minyak olive dengan enzim-enzim yang terdapat pada membran PVC. Konsumsi Oksigen Data hasil
pengukuran rentang  kerja  elektrode  kontrol  dan eksperimen  pada  berbagai  volume emulsi  minyak  olive  serta  konsumsi oksigen  yang  digunakan  dapat  dilihat pada Tabel 1. Tabel tersebut menunjukkan  bahwa  ada  kenaikan konsumsi  oksigen  secara  praktik  dari volume 2 mL hingga 20 mL. y = 0,093x - 0,026 R² = 0,999 0 0,2 0,4 0,6 0,8 1 1,2 1,4 1,6 1,8 2 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 Ko ns um si Oks ig en (p pm ) Emulsi Minyak Olive (mL) Konsumsi Oksigen Secara Praktis
Konsumsi Oksigen Secara Teoritis

## Gambar 1. Hubungan Konsumsi Oksigen Secara Teoritis dan Praktis pada
Berbagai Volume Emulsi Minyak Olive Seperti halnya pada
penentuan  rentang  kerja  pH  dan  suhu, maka  penurunan  konsentrasi  kelarutan oksigen  yang  terukur  pada  elektrode eksperimen  dibandingkan  konsentrasi kelarutan  oksigen  yang  terukur  pada elektrode kontrol pada penentuan rentang  kerja  suhu  disebabkan  oleh
bereaksinya emulsi minyak olive dengan enzim-enzim yang terdapat pada membran  PVC,  dimana  enzim-enzim tersebut  akan  mengubah  oksigen  pada larutan  menjadi  hidrogen  peroksida. Konsumsi  oksigen  ini  dapat  dihitung dengan mengurangkan hasil pengukuran elektrode kontrol dengan hasil
DOI : 10.5281/zenodo.3343011
pengukuran  pada  elektrode  eksperimen.
Adapun konsumsi oksigen yang diperoleh  terlihat  pada  Gambar  1.
Perolehan ini sesuai dengan perhitungan konsumsi oksigen secara teoritik, dimana  secara  teoritik  juga  diperoleh kenaikan  konsumsi  oksigen  sebanding dengan  naiknya  volume  emulsi  minyak olive  yang  digunakan.  Selain  itu berdasarkan Gambar 1, diperoleh
persamaan  regresi  untuk  menentukan konsumsi  oksigen  secara  praktik;  Y  =
0,093X  –  0,026.  dengan  X  adalah volume  emulsi  minyak  olive  (mL)  dan Y  adalah  konsumsi  oksigen  yang  ingin diketahui (ppm).
Adapun  reaksi  yang  terjadi
pada  saat  pengukuran  menggunakan elektrode  eksperimen  adalah  sebagai berikut :
Seperti  terlihat  dalam  reaksi diatas,  ada  tiga  jenis  enzim  yang digunakan yaitu lipase yang berasal dari Isolat  Banyuwedang  yang  berfungsi mengubah  trigliserida  menjadi  asam lemak  dan  gliserol.  Kemudian  gliserol yang  dihasilkan  akan  diubah  menjadi gliserol-3-posfat  dan  ADP  oleh  enzim Gliserol  Kinase  (GK)  dengan  prekursor Mg 2+ dimana  pada  proses  tersebut terlebih  dahulu  ditambahkan  ATP. Kemudian proses terakhir adalah pengubahan  gliserol-3-posfat  menjadi
DHAP  dan  H 2 O 2 oleh  enzim  GPO
(gliserol-3-posfat Oksidase). Reaksi tersebut  mengakibatkan  berkurangnya konsentrasi  kelarutan  oksigen  yang terukur  pada  elektrode  eksperimen  jika dibandingkan  dengan  elektrode  kontrol. Berkurangnya konsentrasi kelarutan oksigen  disebabkan  karena  oksigen dalam  larutan  berubah  membentuk H 2 O 2 .  Bagaimana  mekanisme  serta reaksi  yang  terjadi  pada  elektrode biosensor  hingga  sampai  terukurnya konsumsi  oksigen  dapat  diuraikan sebagai berikut : Adapun reaksi  yang terjadi di elektrode  biosensor  (DO  meter-Enzim) sebagai berikut :
DOI : 10.5281/zenodo.3343011
(Harris, Daniel.C,  2003) Reaksi  tersebut  menunjukkan
pengaruh  konsentrasi  oksigen  terlarut terhadap  E sel reaksi.  Semakin  besar konsentrasi  oksigen  terlarut  dalam larutan  maka  semakin  besar  pula  E sel yang terukur.
Penentuan Trigliserida Hasil pengukuran dari
elektrode  kontrol  digunakan  sebagai konsentrasi  kelarutan  oksigen  mula- mula.  Dimana  pada  pengukuran  yang menggunakan  elektrode  kontrol  tidak mengandung enzim sehingga tidak akan
terjadi  reaksi  penggunaan  oksigen. Konsentrasi  kelarutan  oksigen  yang hilang  karena  berubah  menjadi  H 2 O 2 (oksigen  konsumsi)  dapat  dihitung dengan mengurangkan konsentrasi kontrol  dengan  konsentrasi.  Kadar trgliserida  diperoleh  dari  konsumsi oksigen  secara  praktis  yaitu  dengan menggunakan perhitungan. Dengan menggunakan perhitungan tersebut diperoleh  hasil  dalam  bentuk  grafik sebagai berikut.
y = 0,009x - 0,026 R² = 0,999 0 0,5 1 1,5 2 0 25 50 75
100 125
150 175 200 Kon sum si oks igen (pp m ) Kadar Emulsi Minyak Olive (ppm)
Gambar 2. Hubungan Konsumsi Oksigen Dengan Konsentrasi Emulsi Minyak Olive
Berdasarkan  grafik  tersebut dapat  diketahui  konsentrasi  trigliserida praktis  yang  diperoleh  dari  hasil perhitungan  terhadap konsumsi oksigen
yang diperoleh. Dari grafik tersebut juga dapat  kita  peroleh  persamaan  regresi untuk  menghitung  kadar  trigliserida;  Y =  2,571X  –  0,714.  dengan  X  adalah
DOI : 10.5281/zenodo.3343011
volume  emulsi  minyak  olive    (mL)  dan Y  adalah  konsentrasi  trigliserida  yang ingin ditentukan (ppm).

## SIMPULAN DAN SARAN Simpulan
Berdasarkan  hasil  penelitian dan  pembahasan  dapat  disimpulkan bahwa  rentang  kerja  pH  biosensor berdasarkan  pengukuran  kedua  jenis elektrode  mengalami  kenaikan  mulai dari  pH  6,0  hingga  8,0.  Namun  untuk aplikasi pengukuran selanjutnya digunakan  pH  7,0.  Rentang  kerja  suhu biosensor berdasarkan pengukuran kedua jenis elektrode mengalami penurunan dari suhu 10-70 o C. Pengukuran  selanjutnya  menggunakan suhu 30 o C untuk mempermudah aplikasi pengukuran.
Hubungan  kadar  trigliserida terukur berbanding lurus dengan emulsi minyak  olive  yang  digunakan  dan diperoleh  persamaan,  Y  =  0,009X  –
0,026, dengan Y adalah kadar
trigliserida yang terukur sebagai
konsumsi  oksigen  (ppm)  dan  X  adalah emulsi  minyak  olive    yang  digunakan (ppm).
Saran Dalam  penelitian  ini,  sangat perlu dilakukan pengkajian dan penelitian secara lebih mendalam terhadap aplikasi biosensor dalam penentuan trigliserida.

## DAFTAR PUSTAKA
Bjorkhem, K Sandelin, and T Anders, A Simple, Fully Enzymatic Bioluminine  –  Scent  Assay For  Triglycerides  In  Serum .
Clin.  Chem. 28  (1989).  pp.
1742-1744.
Bhambi,  M.,    Minakshi  and  C.S  Pundir (2006), Preparation of Oxygen Meter Based
Biosensor  for  Determination of  Triglyceride  in  Serum, Sensor &Transducers Magazine  (S  &T  e-Digest) , Vol. 67, issue 5 pp.561-567. Fossati,  and  L.  Prencipe.  1982. Serum Triglycerides Determined Colorimetrically With An Enzyme That Produces Hydrogen Peroxide . Clin.
Chem. 28. pp. 2077-80. Harris,  Daniel.C.  2003. Quantitative Chemical  Analysis,  6 th ed .
W.H.  Freeman  &  Company. New York:p384 Klotzsch,  S.G,  and  J.R  McNamara. 1990. Trygliceride measurement : reviw of methods  and  interferences , Clin.  Chem.  36,  pp  1605- 1613.
Lowry,  N.J.  Rosenbrough,  A.L  Farr,. and  R.J.  Randall,  (1951), Protein  Measurement  With The  Folin  Phenol  Reagent . J. Biol. Chem. 193. pp. 265-275. Okazaki,  N  Komoriya,  H  Tomoike,  N Inowe,  S.  Itoh,  and  S. Hoosaki. 1998. “Quantitative Detection Method  Of  Triglycerides  In Serum Lipoproteins And Serum Free Glycerol By High Performance Liquid Chromatography”. J. Chromatogr.  B.  Biomed.  Sci. Appl. 709. pp. 179-187.
Putranegoro, David. 2009. Medical Info . www.airoxindonesia.com.
Tika, I N. I.W Redhana,dan N.P. Ristiati (2006). Isolasi,  Pemurnian
dan karakterisasi Lipase termostabil dari Bakteri termofilik yang diisolasi  dari Sumber Air Panas Banyuwedang, Kecamatan
DOI : 10.5281/zenodo.3343011
gerogak Buleleng Bali , Laporan Penelitian Fundamental, Dirjen Dikti. Voysey,  and  D.C.  Wilton,  Rapid.  1994. Sensitive Fluorometric Determination Of Serum Triglyceride  By  Measuring Lipase Liberated Fatty Acids . Clin. Chem. 40. pp. 14-17. Wallach, 1996. Interpretation of diagnostic  tests. in:  Little brown  (Ed.).  Lippin  cott. Raven Publishers. Philadelphia. PA 19106. Xiang  LI,  Yun  Long  ZENG,  Chun  Ran TANG. 2005. Glucose Biosensor Based on Carbon/PVC- COOH/Ferrocene  Composite with  Covalently  Immobilized
Enzyme . Chinese  Chemical Letters Vol.  16,  No.  10,  pp 1357-1360.