BioEksakta: Jurnal Ilmiah Biologi Unsoed Volume 4, Nomor 1 (2022): 46-52 E-ISSN: 2714-8564
Histopatologi Hepar Mencit ( Mus musculus ) Jantan yang Diberi Air Rebusan Plastik terhadap Antioksidan Alami

## Nuridha Audinia Safitri, Atang*, Eko Setio Wibowo
Fakultas Biologi, Universitas Jenderal Soedirman, Purwokerto Jalan dr. Suparno No. 63 Grendeng Purwokerto 53122 Telp. (0281) 638794 Faks. (0281) 631700 *Email: atang.fabio@unsoed.ac.id Rekam Jejak Artikel: Diterima   : 27/07/2021 Disetujui  : 23/06/2022

## Abstract
Plastic in Indonesian daily life cannot be avoided anymore. Materials for the manufacture of plastic can cause  free radicals to the body, thus affecting the immune system. These materials  are  including  phthalates  and  bisphenol-A  (BPA),  which  commonly  called  as plasticizers. Free radicals in the body can be inhibited with antioxidants. Antioxidants can be  obtained  from  endogenous  (inside  the  body)  and  exogenous  (outside  the  body).  The purpose of this study was to determine the damage level of liver histopathological structure as the result of plastic boiled water induction towards natural antioxidants feeding on male mice  ( Mus  musculus ).  This  study  used  an  experimental  method  with  a  completely randomized design (CRD) consisting of six treatments and five replications for 21 days. The  treatments  included  two  control  groups  and  four  other  groups  treated  with  plastic boiled water and natural antioxidants. The independent variable is natural antioxidants and the dependent variable is the liver histopathology of male mice. The qualitative parameters observed  were  the  liver  histopathological  structure  of  male  mice  is  in  the  state  of inflammatory cell infiltration, degeneration, and necrosis. The research data is an overview of  the  liver  histopathological  structure  of  male  mice.  The  obtained  data  were  analyzed using descriptive qualitative analysis method. Oral induction of boiled-plastic water can affect the changes of liver histological structure. Natural antioxidants given in male mice can maintain the tissue structure as the result of boiled-plastic water induction. The results showed  the  damage  level  of  male  mice  liver  histopathological  structure  as  reversible degeneration.
Key words: Antioxidants , bisphenol-A , free radicals , liver histopathology , mice

## Abstrak
Plastik dalam kehidupan sehari-hari di Indonesia sudah tidak dapat dihindari lagi. Bahan dalam  pembuatan  plastik  dapat  menimbulkan  radikal  bebas  bagi  tubuh  sehingga berpengaruh terhadap sistem imunitas tubuh. Bahan tersebut di antaranya phthalate dan bisphenol-A (BPA)  yang  biasa  disebut  dengan plasticizers .  Radikal  bebas  dalam  tubuh dapat dihambat dengan antioksidan. Antioksidan terdapat secara endogen (di dalam tubuh) dan eksogen (di luar tubuh). Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui tingkat kerusakan struktur  histopatologi  hepar  akibat  induksi  air  rebusan  plastik  terhadap  pemberian antioksidan alami pada mencit ( Mus musculus ) jantan. Penelitian ini menggunakan metode eksperimental dengan Rancangan Acak Lengkap (RAL) yang terdiri atas enam perlakuan dan lima kali ulangan selama 21 hari. Perlakuan meliputi dua kelompok kontrol dan empat kelompok  lainnya  diberikan  air  rebusan  plastik  dan  antioksidan  alami.  Variabel  bebas berupa  antioksidan  alami  dan  variabel  terikat  berupa  histopatologi  hepar  mencit  jantan. Parameter kualitatif yang diamati, yaitu struktur histopatologi hepar mencit jantan berupa infiltrasi sel radang, degenerasi, dan nekrosis. Data penelitian berupa gambaran struktur histopatologi hepar mencit jantan. Data  yang diperoleh dianalisis menggunakan  metode analisis kualitatif deskriptif. Induksi air rebusan plastik secara oral dapat mempengaruhi perubahan struktur histologi hepar. Pemberian antioksidan alami dapat mempertahankan struktur  jaringan  akibat  induksi  air  rebusan  plastik.  Hasil  penelitian  yang  diperoleh menunjukkan  tingkat  kerusakan  struktur  histopatologi  hepar  mencit  jantan  berupa degenerasi yang bersifat reversibel.
Kata kunci : Antioksidan , bisphenol-A , histopatologi hepar , mencit , radikal bebas

## PENDAHULUAN
Indonesia  termasuk  penghasil  sampah plastik  terbesar  kedua  setelah  Cina  hingga mencapai 187,2 juta ton dan 14% plastik berasal dari  jenis  kantong  plastik  kresek  atau  kemasan makanan  (Jambeck et  al .,  2015).  Plastik termasuk  bahan  polimer  sintesis  dibuat  dengan campuran  bahan plasticizers seperti phthalate dan bisphenol-A (BPA),  bahan  tersebut  dapat Menimbulkan  radikal  bebas  dalam  tubuh (Ilmiawati et al ., 2017). Bisphenol-A (BPA)  bersifat  lipofilik  dan tidak  stabil.  Bisphenol-A  dapat  meningkatkan senyawa radikal di dalam tubuh dan menyebabkan  terjadinya  stres  oksidatif yaitu ketidak seimbangan antara radikal bebas dengan antioksidan  endogen  dalam  tubuh.  Kadar phthalate dan  BPA  dalam  kemasan  makanan atau  minuman  dapat  meningkat  ketika  suhunya dinaikkan  karena  pemanasan  sehingga  dapat larut ke dalam makanan dan bersifat karsinogenik  yang  dapat  menyebabkan  radikal bebas dalam tubuh (Karuniastuti, 2013).
Antioksidan  merupakan  senyawa  yang dapat menetralisir radikal bebas dengan menghambat oksidasi molekul lain dan berfungsi sebagai  penangkap  radikal  bebas.  Antioksidan endogen  yang  terdapat  pada  tubuh,  yaitu superoksida dismutase (SOD), glutation peroksidase (GPx), dan katalase (CAT) (Sulaiman et  al .,  2017).  SOD  akan  mengubah radikal anion superoksida (O 2 - ) menjadi hidrogen peroksida (H 2 O 2 ). Produk H 2 O 2 diubah  menjadi H 2 O  dan  O 2 oleh  katalase,  selanjutnya  H 2 O 2 dikatalisis
menjadi senyawa
organik hidroperoksida (ROOH) oleh glutation peroksidase  (Parwata,  2016).  Tubuh  manusia membutuhkan antioksidan eksogen jika terpapar radikal  bebas  berlebihan  karena  Menimbulkan stress  oksidatif  yang  melibatkan  aktivitas berbagai  antioksidan  enzimatis  (seperti  SOD, GPX,  dan  CAT)  dan  senyawa  antioksidan (Sanger et al ., 2018).
Antioksidan  eksogen  dapat  berasal  dari asupan makanan dan minuman yang dikonsumsi tiap  hari  (Vaya  &  Aviram,  2001).  Kandungan antioksidan pada sayur dan buah seperti vitamin C,  flavonoid,  β-karoten,  dan  senyawa  fenolat memiliki dampak positif terhadap kondisi sistem imun.  Senyawa-senyawa  ini  berperan  dalam aktivitas  antioksidan,  antikanker,  antiviral,  dan anti-inflamasi (Juanda et al ., 2015).
Antioksidan  eksogen  dalam  penelitian  ini bersumber dari tanaman wortel, jeruk, tauge, dan ubi  jalar  ungu.  Wortel  memiliki  kandungan antioksidan  alami  yang  beranekaragam  seperti karotenoid golongan β-karoten (Mangunsong et al ., 2019). Jeruk memiliki kandungan
antioksidan  alami  berupa  flavonoid  (flavanon dan  asam  hidroksi  sinamat)  dan  vitamin  C (Abeysinghe et  al .,  2007).  Tauge  memiliki kandungan  antioksidan  alami  berupa  vitamin  E (α-tokoferol)  dan  fitosterol  (Anggraeny et  al ., 2014).  Ubi  jalar  ungu  memiliki  kandungan antioksidan  alami  berupa  antosianin  golongan flavonoid  yang  ditunjukkan  dengan  warna kebiruan pada ubi (Prior, 2003).
Berdasarkan  latar  belakang  penelitian, rumusan  masalah  dalam  penelitian  ini,  yaitu apakah  pemberian  antioksidan  alami  dapat mempertahankan  kondisi  histopatologi  hepar mencit  ( Mus  musculus )  jantan  yang  dapat berubah  akibat  induksi  air  rebusan  plastik. Tujuan penelitian ini adalah mengetahui tingkat kerusakan  struktur  histopatologi  hepar  akibat induksi  air  rebusan  plastik  terhadap  pemberian antioksidan  alami  pada  mencit  ( Mus  musculus ) jantan. Penelitian ini diharapkan dapat memberi manfaat sebagai sumber informasi ilmiah terkait kemampuan  antioksidan  alami  yang  berpotensi sebagai agen alami pencegah proses pembentukan radikal bebas.

## MATERI DAN METODE
Penelitian  dilaksanakan  di Animal  House dan  Laboratorium  Struktur  dan  Perkembangan Hewan,  Fakultas  Biologi,  Universitas  Jenderal Soedirman.  Metode  yang  digunakan  pada penelitian  ini  adalah  metode  eksperimental menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) yang  terdiri  atas  enam  perlakuan  dan  lima  kali ulangan selama 21 hari dan satu minggu periode aklimatisasi.  Hewan  uji  yang  digunakan  adalah mencit  ( Mus  musculus )  jantan  galur  Balb/c berumur  8–10  minggu  dengan  berat  20–25  g sebanyak  30  ekor.  Perlakuan  meliputi  dua kelompok  kontrol  dan  empat  kelompok  lainnya diberikan  antioksidan  alami.  Adapun  perlakuan yang dicobakan meliputi:
K+  : Akuades 0,5 mL (sehat) K–  : Air rebusan plastik 0,25 mL + akuades 0,25 mL (negatif) P1 : Air rebusan plastik 0,25 mL + jus wortel 0,25 mL
P2 : Air rebusan plastik 0,25 mL + jus jeruk 0,25 mL
P3 : Air rebusan plastik 0,25 mL + jus tauge 0,25 mL
P4 : Air rebusan plastik 0,25 mL + jus ubi jalar ungu 0,25 mL
Pembuatan  air  rebusan  plastik  dilakukan dengan  sebanyak  100  g  plastik  direbus  dalam 1000 mL akuades hingga volumenya tersisa 100 mL.  Pembuatan  jus  antioksidan  dilakukan
dengan  sebanyak  200  g  masing-masing  pada wortel,  jeruk,  tauge,  dan  ubi  jalar  ungu  dijus tanpa  ada  tambahan  bahan  lain  apapun. Pemberian air rebusan plastik dan jus antioksidan dilakukan secara oral  menggunakan  sonde, satu kali  sehari  selama  21  hari  pada  pukul  08.00– 10.00 WIB.
Mencit  dibedah  pada  hari  ke-21  setelah perlakuan.  Mencit  dimatikan  dengan  cara dislokasi leher lalu dibedah pada bagian ventral mulai dari depan anus ke lateral kanan dan kiri menuju anterior tubuh.  Organ  hepar  yang diperoleh  diisolasi  dan  dimasukkan  ke  dalam botol  sampel  berisi  larutan  NBF  10%  sebagai media penyimpanan.
Hepar  diproses  melalui  preparasi  sediaan histologi menggunakan metode parafin (Soentoro,  1987;  yang  telah  dimodifikasi  oleh Laboratorium  Struktur  dan  Perkembangan Hewan  Fakultas  Biologi  Universitas  Jenderal Soedirman). Hepar yang telah diisolasi dipotong dengan  kisaran  ukuran  1  x  1  cm  lalu  difiksasi dalam  larutan  NBF  10%  selama  1  x  24  jam. Sampel hepar didehidrasi dalam larutan alkohol bertingkat (70, 80, dan 96%) lalu alkohol 100% (dua kali ganti) masing-masing selama 45 menit. Sampel  dilakukan  penjernihan  ( clearing )  dalam campuran  alkohol:xylol  (3:1,  1:1,  1:3)  lalu diikuti  xylol  murni  I  dan  II  masing-masing selama 30 menit.
Sampel diinfiltrasi di dalam inkubator (Jeio Tech  IB-600  M)  pada  temperatur  58–60  ºC dimasukkan  ke  dalam  campuran  xylol:parafin (3:1,  1:1,  1:3)  masing-masing  selama  30  menit kemudian dipindahkan ke dalam parafin murni I dan  parafin  murni  II  masing-masing  selama  60 menit. Selanjutnya, sampel ditanam ( embedding ) dalam parafin pada blok kertas ukuran 5 x 5 cm. Sampel  diiris  ( cutting )  menggunakan  mikrotom putar  (Manual  Microtom  KD-1508  A)  dengan ketebalan 5 µm. Pita hasil irisan yang diperoleh dipindahkan  ke  dalam  baskom  berisi  air  hangat agar  sampel  mengembang  lalu  ditempelkan ( affixing )  pada object  glass yang  telah  dilapisi gelatin kemudian diinkubasi minimal selama 12 jam.  Selanjutnya,  jaringan  pada object  glass dideparafinisasi dalam larutan xylol murni I dan II  masing-masing  selama  5  menit.  Jaringan direhidrasi dalam larutan alkohol 100% (dua kali ganti)  lalu  alkohol  96,  80,  dan  70%,  kemudian dibilas dengan akuades masing-masing sebanyak 30 celupan. Jaringan diwarnai ( staining ) dengan pewarna Haematoxylin + Eosin (HE)  selama  5 menit  untuk Haematoxylin dan  1  menit  untuk
Eosin , kemudian  masing-masing dibilas dengan akuades  sebanyak  30  celupan.  Jaringan  yang telah diwarnai didehidrasi dalam larutan alkohol bertingkat (70, 80, dan 96%) lalu alkohol 100% (dua  kali  ganti)  masing-masing  sebanyak  30 celupan. Jaringan dilakukan penjernihan ( clearing )  dalam  larutan  xylol  murni  I  dan  II masing-masing  selama  2  menit.  Jaringan kemudian  di mounting menggunakan  entellan.
Preparat diamati di bawah mikroskop cahaya.
Data  yang  diambil  merupakan  gambar histopatologi  hepar  dari  lima  lapang  pandang yang  berbeda  dengan  perbesaran  mikroskopis 400  X  yang  diperoleh  dari  setiap  perwakilan sampel diamati  sebanyak  satu irisan. Data  yang diperoleh  dianalisis  menggunakan  metode analisis  kualitatif  deskriptif.  Hasil  preparasi histologis hepar dideskripsikan mengenai struktur  yang  teramati  dibandingkan  dengan struktur histologis hepar yang normal.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Senyawa kimia bisphenol-A (BPA) sebagai bahan  dasar  penyusun  plastik  berpotensi menyebabkan  kerusakan  pada  jaringan  hepar. Paparan  BPA  dapat  membentuk  radikal  bebas dalam  tubuh  sehingga  menyebabkan  terjadinya stres  oksidatif  yang  dapat  mempengaruhi perubahan  struktur  jaringan  hepar.  Pengaruh paparan  BPA  tersebut  dapat  dinetralisir  dengan pemberian  antioksidan  alami.  Hasil  penelitian yang  dilakukan  dapat  dilihat  pada  gambaran histopatologi  hepar  mencit  ( Mus  musculus ) jantan.
Hasil  penelitian  menunjukkan  gambaran mikroskopis histopatologi hepar pada mencit K– sebagai kontrol sakit (Gambar 1.b) menunjukkan adanya infiltrasi sel radang, degenerasi, dan inti piknotik. Infiltrasi sel radang adalah respon suatu sel terhadap zat toksik atau patogen. Pernyataan ini didukung oleh Pramesti et al . (2017), bahwa peradangan  sel  merupakan  pertahanan  sel  dari zat toksik atau penyakit untuk mempertahankan struktur dan memperbaiki fungsi jaringan. Hal ini juga  diperkuat  oleh  pernyataan  Makiyah  & Khumaisah (2018), bahwa peradangan ditunjukkan  adanya  sel  limfosit  dan  leukosit polimorfonuklear  yang  terlokalisasi  di  sekitar vena  sentralis.  Hasil  pengamatan  pada  Gambar 1.b  merupakan  gambaran  sederhana  dari  sel-sel penyusun hepar sehingga belum bisa menunjukkan sel limfosit dan leukosit polimorfonuklear secara pasti.
Gambar 1. Kontrol Histologi Hepar Mencit Jantan dengan Pewarnaan HE Keterangan: (a). K+; (b). K– (A, sel hepatosit normal; B, sinusoid; C, vena sentralis; D, infiltrasi sel radang; E, degenerasi; F, piknotik). Perbesaran 400 X, bar = 100 µm.
Gambar 2. Perlakuan Histologi Hepar Mencit Jantan dengan Pewarnaan HE Keterangan:  (a).  P1;  (b). P2;  (c).  P3;  (d). P4  (B,  sinusoid;  C,  vena  sentralis;  E,  degenerasi;  F, piknotik; G, Artefak). Perbesaran 400 X, bar = 100 µm.
Mekanisme  kerusakan  sel  hepar  diawali dengan  proses  peradangan  lalu  terjadi  degenerasi dengan  ciri  pembengkakan  sel  kemudian  dapat mengalami piknotik ditunjukkan oleh inti sel yang menghitam.  Ciri  tersebut  dapat  teramati  pada  K– (Gambar 1.b). Gambaran mikroskopis histopatologi hepar pada mencit K+ (Gambar 1.a) sebagai  kontrol  sehat  terlihat  normal  atau  tidak terdapat kerusakan. Hasil ini sesuai dengan Utomo et  al .  (2012),  yang  menunjukkan  histologi  hepar normal ditandai sel hepatosit memiliki bentuk sel bulat/oval  dengan  kondisi  sel  masih  tersusun secara  radier,  terdiri  dari  satu  nukleus/lebih  dari satu nukleus (binukleat) yang terletak di tengah sel, dan terdapat lempeng hepatosit.
Gambaran  mikroskopis  histopatologi  hepar pada mencit K– (Gambar 1.b), P1, P2, P3, dan P4 (Gambar 2.) menunjukkan bahwa terjadi kerusakan berupa degenerasi. Menurut Sijid et al . (2020),  degenerasi  sel  merupakan  permulaan kerusakan  sel  yang  disebabkan  oleh  toksin.  Sel
yang  mengalami  degenerasi  akan  menyebabkan struktur sel  menjadi tidak normal sebelum  terjadi kematian  sel.  Sel  hepatosit  yang  mengalami kerusakan degenerasi mengakibatkan sel membengkak  atau  edema  yang  disebabkan  oleh toksik (Fitriani et al ., 2020).
Gambaran  mikroskopis  histopatologi  hepar pada mencit K– (Gambar 1.b), P1, P2, P3, dan P4 (Gambar  2.)  ditemukan  inti  sel  yang  menghitam atau  piknotik,  tetapi  inti  sel  yang  mengalami piknotik  ini  di  semua  kelompok  perlakuan  K– (Gambar  1.b),  P1,  P2,  P3,  dan  P4  (Gambar  2.) masih  sedikit  jika  dibandingkan  dengan  sel  yang mengalami  degenerasi.  Menurut  Amalia  (2009), sel  yang  mengalami  nekrosis  tampak  inti  sel menghitam dan lebih padat (piknotik) lalu hancur (karioreksis)  kemudian  menghilag  (kariolisis). Kerusakan  sel  tahap  nekrosis  yang  ditemukan masih  terbatas  pada  inti  sel  yang  mengalami piknotik.
a b a b c d
Gambaran mikroskopis histopatologi pada K– (Gambar 1.b), P1, P2, P3, dan P4 (Gambar 2.) juga terlihat  adanya  dilatasi  (pelebaran)  sinusoid  dan kongesti  pada  vena  sentralis.  Sinusoid  dan  vena sentralis  pada  K–  (Gambar  1.b)  terlihat  kerusakan yang lebih parah dibandingkan kelompok perlakuan P1,  P2,  P3,  dan  P4  (Gambar  2.).  Kerusakan  yang terjadi dari gambaran mikroskopis antara kelompok perlakuan  P1,  P2,  P3,  dan  P4  (Gambar  2.)  tidak berbeda jauh.
Dilatasi sinusoid yang terlihat pada gambaran mikroskopis  K–  (Gambar  1.b)  menunjukkan sinusoid mengalami pelebaran, susunan ruang antar sinusoid  tidak  beraturan,  dan  batas  antar  sinusoid tidak  terlihat  jelas.  Batas  sinusoid  pada  perlakuan P1, P2, P3, dan P4 (Gambar 2.) masih terlihat jelas serta  mendekati  struktur  normal.  Dilatasi  pada sinusoid  dapat  disebabkan  akibat  desakan  dinding sinusoid  karena  adanya  bendungan  pada  vena berupa  darah  yang  disebabkan  oleh  zat  toksik (Wicaksono et al ., 2015).
Vena sentralis pada gambaran mikroskopis K–
(Gambar  4.1.b)  menunjukkan  diameter  yang  lebih luas jika dibandingkan dengan kelompok perlakuan P1,  P2,  P3,  dan  P4  (Gambar  2.).  Kerusakan  yang terjadi  di  vena  sentralis  pada  kelompok  perlakuan P1,  P2,  P3,  dan  P4  (Gambar  2.)  menunjukkan pelebaran vena sentralis dan adanya bendung darah yang  tidak  berbeda  jauh.  Menurut  Sijid et  al . (2020),  kongesti  (bendung  darah)  terjadi  karena adanya  volume  darah  yang  meningkat  akibat pelebaran  dari  pembuluh  darah  kapiler.  Kongesti ditunjukkan  dengan  lumen  pembuluh  darah  yang dipenuhi oleh sel-sel darah.
Hasil  gambaran  mikroskopis  pada  penelitian ini  diduga  ditemukan  adanya  artefak  yang diperlihatkan  sebagai  contoh  perwakilan  pada Gambar  2.c  ditunjukkan  oleh  huruf  G.  Artefak merupakan  benda  yang  tidak  diinginkan  tampak pada  hasil  akhir  sediaan,  benda  ini  tidak  ada  pada jaringan  asli.  Hal  ini  dapat  terbentuk  karena pembuatan  sediaan  yang  kurang  sempurna  seperti teknik  dan  proses  pewarnaan  yang  berhubungan dengan  intepretasi  struktur  sel  atau  jaringan tersebut.  Artefak  dapat  pula  disebabkan  karena kondisi  lembab  sehingga  proses  pengeringan lambat, fiksasi yang kurang baik, dan kontaminasi dari air atau udara yang mengandung bakteri, spora, jamur, atau partikel debu (Mau & Desato, 2013).
Perubahan morfologi sel hepar yang mengalami  kerusakan  dapat  bersifat  subletal (degeneratif) atau letal (nekrotik). Menurut Maulida et  al .  (2013),  perubahan  degeneratif  bersifat reversibel, jika paparan suatu zat toksik dihentikan maka sel yang mengalami kerusakan akibat toksik tersebut  dapat  kembali  normal.  Sebaliknya, nekrosis  bersifat  irreversibel,  sel  yang  mengalami nekrosis  tidak  dapat  kembali  seperti  semula  dan akan mengalami kematian. Menurut Pramesti et al . (2017),  bahwa  kerusakan  yang  terjadi  bersifat reversibel  maka  sel-sel  hati  dapat  melakukan regenerasi.  Hal  ini  sesuai  dengan  Utomo et  al .
(2012),  bahwa  hepar  memiliki  kemampuan regenerasi  yang  tinggi,  jika  terjadi  kerusakan jaringan akibat zat toksik akan memacu mekanisme pembelahan  sel  dan  terus  berlangsung  sampai perbaikan massa jaringan tercapai. Proses regenerasi sel hati kemungkinan terjadi dengan baik dalam penelitian ini.
Metabolisme  BPA  terjadi  setelah  berada  di dalam tubuh. Bisphenol -A yang masuk melalui oral lalu  dimetabolis  di  traktus  gastrointestinal  (TGI) dan  hepar. Bisphenol -A  yang  telah  diabsorpsi  di TGI  lalu  masuk  ke  hepar.  Proses  yang  terjadi  di hepar  BPA  akan  menjadi  senyawa  inaktif,  BPA akan  berkonjugasi  dengan  asam  glukuronat membentuk  konjugat  BPA- glucuronic  acid dan beberapa bereaksi dengan sulfat membentuk BPA- sulfat. Bisphenol -A yang telah mengalami konjugasi akan didetoksifikasi kemudian masuk ke dalam  sirkulasi  hingga  ginjal  dan  diekskresikan dalam  urin. Bisphenol -A  bentuk  bebas/aktif  yang dapat  memberikan  efek  merugikan  bagi  tubuh (Perdana & Jacobus, 2016).
Berdasarkan penelitian terdahulu oleh Sulaiman et  al .  (2017),  menyatakan  bahwa  BPA menyebabkan terjadinya penyakit degeneratif. BPA yang  berlebih  dapat  memicu  peningkatan  radikal bebas  lalu  menyebabkan  stres  oksidatif.  Hal tersebut  dapat  menurunkan  aktivitas  enzim antioksidan  dan  kapasitas  antioksidan  total  dalam tubuh.  Kerusakan  oksidatif  akibat  radikal  bebas akan  dinetralisir  dengan  antioksidan  enzimatik. Antioksidan  enzimatik  yang  berperan  paling pertama,  yaitu  SOD  dengan  mengkatalis  konversi O 2 - menjadi  H 2 O 2 sehingga  radikal  bebas  menjadi lebih  stabil.  BPA  yang  melebihi  ambang  batas mengakibatkan  tubuh  tidak  dapat  melakukan kompensasi  sehingga  kadar  SOD  mengalami penurunan  dan  radikal  bebas  dalam  sel  akan meningkat.  Hal  ini  diperkuat  oleh  pernyataan Maulida et  al .  (2013),  bahwa  stres  oksidatif  akan menghasilkan  hidrogen  peroksida  yang  dapat bereaksi  dengan  senyawa  dalam  tubuh  dan membentuk  radikal  hidroksil  yang  sangat  reaktif sehingga  menyebabkan  peroksidasi  lipid.  Reaksi peroksidasi  lipid  dapat  merusak  membran  sel sehingga  struktur  sel  tidak  normal  dan  fungsi  sel menurun.
Hasil penelitian menunjukkan tingkat kerusakan  hepar  dari  kelompok  perlakuan  P1,  P2, P3,  dan  P4  (Gambar  2)  tidak  berbeda  jauh  dan mendekati  kontrol  sehat  (Gambar  1.a).  Hal  ini disebabkan oleh aktivitas radikal bebas dari induksi air  rebusan  plastik  dapat  dinetralisir  oleh antioksidan. Peran antioksidan dari esktrak wortel, jeruk,  tauge,  dan  ubi  jalar  ungu  terhadap  efek samping air rebusan plastik sebagai zat hepatotoksik  mampu  mencegah  kerusakan  hepar lebih parah.
Kandungan antioksidan pada wortel berupa β- karoten dan tauge berupa vitamin E dapat melawan oksigen  perusak  khususnya  radikal  bebas  dan peroksidasi  lipid  dalam  jaringan  (Makiyah  &
Khumaisah, 2018). β-karoten akan mengikat energi eksitasi  singlet  oksigen  ( 1 O 2 )  radikal  ke  dalam rantai sehingga melindungi integritas membran sel dari  peroksidasi  lipid  dan  menghentikan  reaksi rantai  dari  radikal  bebas  (Fretes et  al .,  2012). Vitamin  E  dapat  memutus  rantai  peroksidasi  lipid yang berperan pada membran sel dalam menghadapi aktivitas ROS (Maulida et al ., 2013). Kandungan  antioksidan terutama  golongan flavonoid dan fenolat dapat meredam radikal bebas dengan  cara  mendonorkan  H+  pada  radikal  bebas sehingga  menjadi  netral  pada  jeruk  dan  ubi  jalar ungu berupa flavanon dapat berperan sebagai anti- inflamasi dan memacu aktivitas makrofag sehingga meningkatkan sistem kekebalan tubuh (Makiyah & Khumaisah,  2018).  Proses  peroksidasi  lipid  yang menghasilkan radikal peroksil dapat dihambat oleh flavonoid  melalui  mekanisme  pendonoran  atom hidrogen (Cahyani et al ., 2021).
Ubi  jalar  ungu  juga  mengandung  antosianin yang merupakan zat warna alami yang bersifat larut dalam  air  (Husna et  al .,  2013).  Antosianin  dapat berfungsi  menurunkan  akumulasi  lemak  dalam hepar  (Paramita et  al .,  2019).  Jeruk  juga mengandung  vitamin  C  yang  dapat  mengurangi peroksidasi lipid. Vitamin C berperan pada sitosol yang dapat mengikat superoksida dan radikal bebas (Maulida et al ., 2013). Vitamin C dapat mendukung daur  ulang  pembentukan  vitamin  E  (redoks  α- tokoferol) (Setiawati et al ., 2020).

## SIMPULAN
Berdasarkan hasil dan pembahasan penelitian dapat  disimpulkan  bahwa  induksi  air  rebusan plastik secara oral dapat mempengaruhi perubahan struktur  histologi  hepar  mencit  ( Mus  musculus ) jantan strain Balb/c berupa peradangan, degenerasi, piknotik,  dilatasi  sinusoid,  dan  kongesti  vena sentralis  dengan  struktur  jaringan  yang  tidak beraturan.  Pemberian  antioksidan  alami  dapat mempertahankan  struktur  jaringan  akibat  induksi air rebusan plastik yang ditunjukkan dengan tingkat kerusakan  struktur  histopatologi  hepar  berupa degenerasi yang bersifat reversibel.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Puji  syukur  dipanjatkan  kepada  Tuhan  Yang Maha  Esa  yang  telah  memberi  petunjuk, kelancaran,  dan  kemudahan  setiap  tahapan penelitian  ini.  Pelaksanaan  penelitian  ini  didanai oleh  BLU  Universitas  Jenderal  Soedirman  tahun 2020.

## DAFTAR REFERENSI
Abeysinghe,  D.C.,  Li,  X.,  Sun,  C.,  Zhang,  W., Zhou,  C.  &  Chen,  K.,  2007.  Bioactive Compounds  and  Antioxidant  Capacities  in Different  Edible  Tissues  of  Citrus  Fruit  of Four  Species. Food  Chemistry ,  104(1), pp.1338–1344.
Amalia,  N.,  2009. Uji  Toksisitas  Akut  Ekstrak Valerian  (Valeriana  officinalis)  terhadap Hepar Mencit BALB/C . Semarang: Fakultas Kedokteran, Universitas Diponegoro.
Anggraeny, E., Tjandrakirana & Ducha, N., 2014. Pengaruh  Pemberian  Filtrat  Tauge  Kacang Hijau terhadap Histologi Hepar Mencit yang Terpapar  MSG. LenteraBio ,  3(3),  pp.186– 191.
Cahyani, D.I., Martino, Y.A. & Purnomo, Y., 2021. Efek Dekokta Daun Pulutan ( Urena lobata ) terhadap  Kadar Superoxide  Dismutase (SOD) dan Malondialdehyde (MDA) Hepar Ikan Zebra ( Danio rerio ) Fase Juvenile yang
Dipapar Malathion Kronik. Jurnal
Kedokteran Komunitas , 9(1), pp.1–6.
Fitriani,  R.N.,  Sitasiwi,  A.J.  &  Isdadiyanto,  S., 2020. Struktur Hepar dan Rasio Bobot Hepar terhadap  Bobot  Tubuh  Mencit  ( Mus Musculus L.)  Jantan  setelah  Pemberian Esktrak  Etanol  Daun  Mimba  ( Azadirachta Indica A.Juss). Buletin  Anatomi  dan Fisiologi , 5(1), pp.75–83.
Fretes,  H.D.,  Susanto,  A.B.,  Prasetyo,  B.  & Limantara,  L.,  2012.  Karotenoid  dari Makroalgae dan Mikroalgae: Potensi Kesehatan  Aplikasi  dan  Bioteknologi. Jurnal  Teknologi  dan  Industri  Pangan , 23(2), pp.221–228.
Husna,  N.E.,  Novita,  M.  &  Rohaya,  S.,  2013.
Kandungan Antosianin dan Aktivitas Antioksidan  Ubi  Jalar  Ungu  Segar  dan Produk Olahannya. Agritech , 33(3), pp.296– 302.
Ilmiawati, C., Reza, M., Rahmatini & Rustam, E.,
2017.  Edukasi  Pemakaian  Plastik  sebagai Kemasan  Makanan  dan  Minuman  serta Risikonya terhadap Kesehatan pada Komunitas  di  Kecamatan  Bungus  Teluk Kabung,  Padang. LOGISTA-Jurnal  Ilmiah Pengabdian  kepada  Masyarakat ,  1(1), pp.20–28.
Jambeck, J.R., Geyer, R., Wilcox, C., Siegler, T.R., Perryman, M., Andrady, A., Narayan, R. & Law, K.L., 2015. Plastic Waste Inputs from Land  into  The  Ocean. Science ,  347(6223), pp.768–771.
Juanda,  D.,  Budiana,  W.  &  Ridwan,  I.M.,  2015. Penetapan Kadar Total Fenol dan Aktivitas Antioksidan  dari  Jus  Buah  Lima  Spesies Jeruk ( Citrus sp.). Jurnal Farmasi Galenika , 2(1), pp.36–42.
Karuniastuti,  N.,  2013.  Bahaya  Plastik  terhadap
Kesehatan dan Lingkungan. Forum Teknologi , 3(1), pp.6–14.
Makiyah,  A.  &  Khumaisah,  L.L.,  2018.  Studi Gambaran Histopatologi Hepar Tikus Putih Strain  Wistar  yang  Diinduksi  Aspirin Pascapemberian  Ekstrak  Etanol  Umbi  Iles- iles ( Amorphophallus variabilis Bl.) Selama
7  Hari. Majalah  Kedokteran  Bandung , 50(2), pp.93–101.
Mangunsong,  S.,  Assiddiqy,  R.,  Sari,  E.P., Marpaung,  P.N.  &  Sari,  R.A.,  2019. Penentuan  β-karoten  dalam  Buah  Wortel ( Daucus  carota )  secara  Kromatografi  Cair Kinerja  Tinggi  (U-HPLC). AcTion:  Aceh Nutrition Journal , 4(1), pp.36–41.
Mau, F. & Desato, Y., 2013. Studi Kualitas ( Quality Assurance ) Pemeriksaan Mikroskopis Malaria Di Pulau Sumba Tahun 2009. Jurnal Ekologi Kesehatan ,  12(2), pp. 79–86.
Maulida,  A.,  Ilyas,  S.  &  Hutahaean,  S.,  2013. Pengaruh  Pemberian  Vitamin  C  dan  E terhadap Gambaran Histologis Hepar Mencit ( Mus Musculus L.) yang Dipajankan Monosodium  Glutamat  (MSG). Saintia Biologi , 1(2), pp.15–20.
Parwata,  I.M.O.A.,  2016. Antioksidan .  Bali:
Universitas Udayana.
Perdana, W.Y. & Jacobus, D.J., 2016. Bisphenol A
(BPA) adalah Endocrine Disrupture Chemicals (EDC)  yang  Berperan  sebagai Agen  Diabetogenik. CDK-244 ,  43(9), pp.706–711.
Pramesti, N.K.T., Wiratmini, N.I. & Astiti, N.P.A., 2017.  Struktur  Histologi  Hati  Mencit  ( Mus musculu s  L.)  setelah  Pemberian  Ekstrak Daun  Ekor  Naga  ( Rhapidhophora  pinnata Schott). Jurnal Simbiosis , 5(2), pp.43–46.
Prior,  R.L.,  2003.  Fruits  And  Vegetables  in  The Prevention  of  Cellular  Oxidative  Damage. The American Journal of Clinical Nutrition , 78(3), pp.570–578.
Sanger,  G.,  Kaseger,  B.E.,  Rarung,  L.K.  & Damongilala,  L.,  2018.  Potensi  Beberapa
Jenis  Rumput  Laut  sebagai  Bahan  Pangan Fungsional,
Sumber Pigmen, dan Antioksidan  Alami. JPHPI ,  21(2),  pp.208– 217.
Sari,  P.K.,  Lintong,  M.  &  Loho,  L.L.,  2015.  Efek Pemberian  Anabolik  Androgenik  Steroid Injeksi  Dosis  Rendah  dan  Tinggi  terhadap Gambaran  Histopatologi  Hati  dan  Otot Rangka  Tikus  Wistar  ( Rattus  novergicus ). Jurnal e-Biomedik (eBm) , 3(1), pp.501–509.
Setiawati,  M.D.,  Indahwati,  L.  &  Khotimah,  H., 2020.  Pengaruh  Pemberian  Vitamin  C  dan Vitamin  E  terhadap  Lama  Siklus  Estrus Tikus  ( Rattus  norvegicus )  Galur  Wistar
Betina yang Diberi Rhodamin B. Journal of Issues in Midwifery , 3(3), pp.80–87.
Sijid,  S.A.,  Muthiadin,  C.,  Zulkarnain,  Hidayat, A.S.  &  Amelia,  R.R.,  2020.  Pengaruh Pemberian Tuak terhadap Gambaran Histopatologi  Hati  Mencit  ( Mus  musculus ) ICR Jantan. Jurnal Pendidikan Matematika dan Ipa , 11(2), pp.193–205.
Sulaiman,  Y.,  Aman,  I.G.M.  &  Pangkahila,  W., 2017.  Pemberian  Bisphenol-A  (BPA)  Oral Menurunkan Kadar Superoksida Dismutase dan  Meningkatkan  Kadar  F2-isoprostan pada Tikus Putih ( Rattus norvegicus ) Jantan Galur  Sprague  Dawley. Jurnal  Biomedik , 9(3), pp.152–158.
Utomo, Y., Hidayat, A., Dafip, M. & Sasi, F., 2012. Studi  Histopatologi  Hati  Mencit  ( Mus Musculus L.)  yang  Diinduksi  Pemanis Buatan. Jurnal MIPA , 35(2), pp.122–129.
Vaya,  J.  &  Aviram,  M.,  2001.  Nutritional Antioxidants:  Mechanisms  of  Action,
Analyses  of  Activities. Current  Medicinal
Chemistry–Immunology, Endocrine & Metabolic Agents , 1(1), pp.99–117.
Wicaksono,  H.S.,  Narayani,  I.  &  Setyawati,  I.,
2015.  Struktur  Hati  Mencit  ( Mus  Musculus L.)  setelah  Pemberian  Ekstrak  Daun Kaliandra  Merah  ( Calliandra  colothyrsus Meissn.). Jurnal Simbiosis III , 1(1), pp.258– 268.