## AKTIVITAS ANTIBAKTERI SENYAWA METABOLIT SEKUNDER DARI FRAKSI
ETIL ASETAT DAUN LENGKENG (Dimocarpus longan Lour.)

## DAN UJI AKTIVITAS
ANTIBACTERIAL ACTIVITIES OF SECONDARY METABOLITE COMPOUNDS FROM ETHYLE ACETATE FRACTION OF COMPLETE LEAVES (Dimocarpus longan Lour.)

## AND ACTIVITY TEST
Bustanul Arifin 1* , Suryati 2 , Olly Norita Tetra 3 , Sucy Maghfirah 4
1234 Jurusan Kimia Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Andalas Kampus Limau Manis Unand Padang 25613
* email koresponden : ba_arifin@yahoo.co.id

## Abstrak
Isolasi  dan  karakterisasi  struktur  senyawa  metabolit  sekunder  dari  fraksi  etil  asetat  daun  lengkeng (Dimocarpus longan Lour.)  telah dilakukan dan dipelajari aktivitas antibakterinya. Isolasi dilakukan dengan  teknik  kromatografi  kolom  gravitasi  menggunakan  fasa  diam  silika  gel  dan  fasa  gerak  n- heksana,  etil  asetat  dan  metanol  dengan  sistem  elusi  peningkatan  kepolaran  (SGP)  dan  isokratik. Pemurnian  senyawa  hasil  isolasi  dilakukan  dengan  cara  triturasi.  Senyawa  murni  hasil  isolasi  yang diperoleh berupa padatan putih dengan titik leleh 126-127  C dan menunjukkan uji positif triterpenoid dengan  pereaksi  Liebermann-Burchard.  Karakterisasi  struktur  senyawa  triterpenoid  hasil  isolasi menggunakan data spektrum UV menunjukkan bahwa triterpenoid hasil isolasi tidak memiliki ikatan rangkap  berkonjugasi.  Analisis  data  spektrum  IR  menunjukkan  bahwa  triterpenoid  hasil  isolasi memiliki pita serapan gugus OH (3326,46 cm -1 ), ikatan C–O (1270,80 cm -1 dan 1038,76 cm -1 ) dan geminal  dimetil  (1379,46  cm -1 )  yang  merupakan  ciri  khas  senyawa  triterpenoid.  Uji  aktivitas antibakteri  dilakukan  dengan  metode  difusi,  hasilnya  menunjukkan  senyawa  triterpenoid  memiliki daya  hambat  lemah  dibanding  dengan  amoxicillin  dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli .
Kata kunci: antibakteri, daun lengkeng, etil asetat, triterpenoid

## Abstract
The isolation and structural characterization of the compounds secondary metabolites  from the ethyl acetate  fraction  of  longan  leaves  (Dimocarpus  longan  Lour.) have  been  carried  out  and  their antibacterial  activity  has  been  observed.  Isolation  was  carried  out  by  using  gravity  column chromatography technique using silica gel stationary phase and mobile phase n-hexane, ethyl acetate and methanol with polarity enhancement elution system (SGP) and isocratic system. The purification of  the  isolated  compound  was  carried  out  by  trituration.  The  isolated  pure  compound  obtained  is  a white  solid  with  a  melting  point  of  126-127  C  and  shows  a  positive  test  for  triterpenoids  with Liebermann-Burchard  reagent.  Structural  characterization  of  isolated  triterpenoid  compounds  using UV  spectrum  data  showed  that  the  isolated  triterpenoid  did  not  have  conjugated  double  bonds. Analysis of the IR spectrum data shows that the isolated triterpenoid  has an  absorption  band of OH groups (3326.46 cm -1 ), C-O bonds (1270.80 cm -1 and 1038.76 cm -1 ) and geminal dimethyl (1379.46 cm -1 ) which are characteristic of compounds triterpenoids. The antibacterial activity test was carried out  by  the  diffusion  method,  the  results  showed  that  triterpenoid  compounds  had  weak  inhibition compared  to  amoxicillin  in  inhibiting  the  growth  of Staphylococcus  aureus and Escherichia  coli bacteria.
Keywords: antibacterial activity, longan leaves, ethyl acetate

## PENDAHULUAN
Buah  lengkeng  (Dimocarpus  longan Lour.) dari famili Sapindaceae adalah buah yang disukai  oleh  masyarakat  indonesia  karena rasanya yang manis (Orwa C dkk, 2009). Selain buahnya, daun tumbuhan lengkeng juga digunakan  oleh  masyarakat  indonesia  sebagai obat  tradisional  diantaranya  adalah  untuk mengobati  penyakit  diare,  sakit  perut,  pereda demam  dan  antiradang.  (Fajriyah  L,  2016) Beberapa  bioaktivitas  tanaman  lengkeng  yang sudah  diketahui  yaitu  ekstrak  daun  lengkeng bersifat sebagai antipiretik, antiinflamasi, antioksidan,  antiviral  terhadap  virus  hepatitis  C, antikanker,  sedangkan  ekstrak  biji  lengkeng bersifat  anti  jamur  dan  ekstrak  buah  lengkeng berpotensi  sebagai  terapi  herbal  atau  agen pencegahan  untuk  pengobatan  osteoporosis, antikanker,  antijamur  dan  antimikroba. (Park  et al. 2016) Beberapa penelitian melaporkan bahwa bioaktivitas  dari  ekstrak  daun  lengkeng  seperti sebagai  antipiretik,  antiinflamasi,  antioksidan, antikanker dan antibakteri telah dipelajari.(Rangkadilok et al. 2012)
Penggunaan tumbuhan untuk obat tradisional  berkaitan  dengan  senyawa  kimia yang  terkandung  pada  tumbuhan  tersebut. Senyawa  kimia  ini  sering  disebut  dengan metabolit  sekunder  di  antaranya  golongan flavonoid,  fenolik,  terpenoid,  steroid,  alkaloid, saponin dan kumarin. (Zhang et al. 2020)
Penentuan aktivitas farmakologi dari buah lengkeng  dan  penggunaanya  dalam  kesehatan juga  telah  dilaporkan.  (Rakariyatham  et  al. 2020)  sedangkan  aktivitas  antioksidan  dan kandungan fenolik total dari daun lengkeng yang tergolong sangat kuat  ada pada ekstrak metanol, fraksi  etil  asetat,  butanol  dan  air  juga  telah diteliti oleh Annisa, P (2018)
Belum adanya penelitian tentang  aktivitas antibakteri  senyawa  metabolit  sekunder  dari fraksi  etil  asetat  daun  lengkeng menjadi  alasan peneliti  untuk  mengisolasi  senyawa  metabolit sekunder  dari  fraksi  etil  asetat  daun  lengkeng (Dimocarpus  longan  Lour.)  serta  uji  aktivitas antibakteri senyawa hasil isolasi dalam menghambat  pertumbuhan  bakteri  gram  positif Staphylococcus  aureus dan  gram  negatif Escherichia coli dengan metode difusi. Pemilihan  bakteri  ini  disebabkan  karena  kedua bakteri  ini  sering  menimbulkan  infeksi  pada manusia.  Di  lain  hal,  bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia  coli merupakan  bakteri standar  untuk  uji  aktivitas  antibakteri.  Tujuan
dari penelitian  ini  adalah untuk mengisolasi  dan mengkarakterisasi  senyawa  metabolit  sekunder dari fraksi etil asetat daun lengkeng ( Dimocarpus  longan  Lour .)  dan  menentukan aktivitas  antibakteri  senyawa hasil  isolasi dalam menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus  aureus dan Escherichia  coli dengan metode difusi.

## METODOLOGI PENELITIAN Alat dan Bahan
Peralatan yang digunakan yaitu beberapa  pipa  kapiler, rotary evaporator (Heidolph  Laborota  4000),  lampu  UV  (λ  254 dan  356  nm),  dan  seperangkat  alat  distilasi. Sedangkan untuk karakterisasi senyawa menggunakan Spektrofotometer Ultraviolet- Visible  (Thermo  Scientific,  Genesys  10  UV- Vis), Spektrofotometer Fourier Transform Infrared  (Thermo  Scientific,  Nicolet  iS10), Melting Point Appratus (Metrohm).
Bahan  yang  digunakan  yaitu  130  g ekstrak pekat metanol daun lengkeng (Dimocarpus  longan  Lour.),  silika  gel  60 F254,plat  KLT,Iod(I2),  aluminium  foil,  dimetil sulfoksida  (DMSO),  butanol,    n-heksana,  etil asetat,  metanol,  etanol  dan  diklorometana (DCM).  Sedangkan  reagen  yang  digunakan untuk  uji  fitokimia  adalah  pereaksi  Mayer (merkuri  (II)  klorida  dan  kalium  iodida)  untuk identifikasi  alkaloid,  pereaksi  Liebermann- Burchard  (anhidrida  asetat  dan  asam  sulfat pekat) untuk identifikasi triterpenoid dan steroid, shinoda  test  (bubuk  magnesium  dan  asam klorida  pekat)  untuk  identifikasi  flavonoid,  besi (III)  klorida  untuk  identifikasi  fenolik.  Pada  uji aktivitas antibakteri digunakan bakteri S. aureus, E.  coli, amoxicillin  500  mg,  Media  Mueller- Hinton Agar (MHA) dan Nutrient Agar (NA).

## Prosedur kerja

## Fraksinasi ekstrak metanol dan uji fitokimia
Ekstrak  pekat  metanol  sebanyak  130  g difraksinasi  menggunakan  pelarut  n-heksana, etil  asetat,  dan  butanol.  Ekstrak  pekat  metanol disuspensi  dengan  air  dan  ditambahkan  n- heksana  dengan  pengadukan  ±  5  menit.  Setelah diaduk,  campuran  didiamkan  hingga  terbentuk dua  lapisan  yaitu  lapisan  fraksi  n-heksana  dan lapisan air. Lapisan atas yang merupakan lapisan fraksi  n-heksana  dipisahkan  dari  lapisan  air. Fraksinasi  menggunakan  pelarut  nheksana dilakukan  sampai  warna  fraksi  n-heksana  tidak pekat  lagi.  Fraksinasi  dilanjutkan  menggunakan
pelarut etil asetat dan butanol dengan pengerjaan sama seperti fraksinasi menggunakan n-heksana. Dari proses fraksinasi ini diperoleh empat fraksi yaitu  fraksi  n-heksana,  fraksi  etil  asetat,  fraksi butanol,  dan  fraksi  sisa.  Masing-masing  fraksi dipekatkan  dan  dikeringkan,  Berat  masing- masing  fraksi  ditimbang  dan  dilakukan  uji fitokimia untuk mengetahui kandungan metabolit  sekunder  yang  terkandung  dalam masing-masing  fraksi,  pengerjaannya  sama dengan  uji  kandungan  metabolit  sekunder  pada ekstrak metanol.

## Pemisahan senyawa dengan kromatografi kolom
Pemisahan  senyawa  metabolit  sekunder dari  fraksi  etil  asetat  dilakukan  dengan  teknik kromatografi  kolom  menggunakan  fasa  diam silika  gel  dan  fasa  gerak  n-heksana,etil  asetat dan metanol.
Pemurnian senyawa hasil isolasi dimurnikan  lebih  lanjut  dengan  cara  triturasi menggunakan  etil  asetat.  Cara  ini  dilakukan berulang  kali  hingga  didapatkan  padatan berwarna  putih.  Selanjutnya  senyawa  hasil isolasi dilakukan uji kemurnian.

## Uji kemurnian senyawa
Uji  kemurnian  senyawa  hasil  isolasi dilihat  jumlah  spot  nodanya  dengan  KLT  yang dielusi menggunakan eluen etil asetat, setelah itu plat diletakkan dalam chamber berisi uap I 2 . Uji KLT  dengan  melakukan  elusi  menggunakan  3 jenis  eluen  yaitu  dengan  etil  asetat,  etil  asetat  : metanol  (9,5:0,5)  dan  (9:1).  Hasil  elusi  dilihat dengan  menggunakan  pengungkap  noda  cahaya lampu  UV  λ254  nm  dan  λ365  nm,  selanjutnya dilakukan pengujian dengan pereaksi Liebermen-Burchard.  Selain  itu  dilakukan  juga pengujian titik leleh.

## Karakterisasi senyawa
Karakterisasi dilakukan dengan spektrofotometer  UV  dan  Fourier  Transform Infra  Red  (FTIR)  untuk  mengetahui  informasi mengenai gugus fungsi senyawa tersebut.

## Uji aktivitas antibakteri
Uji  aktivitas  antibakteri  dari  senyawa hasil  isolasi  dilakukan  dengan  menggunakan metode  difusi  sumuran  dengan  cara  membuat lubang/sumur  pada  media  agar  yang  telah ditanami  dengan  bakteri  uj  sedangkan  pada lubang/sumur  diletakkan  kapas  yang  telah dibasahi larutan uji.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Hasil fraksinasi ekstrak metanol
Hasil  fraksinasi  ekstrak  metanol  ekstrak pekat  metanol  difraksinasi  dengan  metode partisi  cair-cair  menggunakan  corong  pisah dengan pelarut n-heksana, etil asetat dan butanol secara berturut-turut untuk memisahkan senyawa  berdasarkan  tingkat  kepolarannya (Savitri,  Wewengkang,  and  Sudewi  2016). Proses  partisi  dilakukan  berulang  kali  sampai semua komponen senyawa non polar larut dalam pelarut  n-heksana,  senyawa  semi  polar  larut dalam  pelarut  etil  asetat  dan  butanol,  senyawa polar  larut  dalam  pelarut  air  yang  ditandai dengan tidak adanya warna ekstrak pada pelarut terakhir  (bening).  Selanjutnya  masing-masing fraksi  dipekatkan  dengan  menggunakan  rotary evaporator,  ditimbang  massanya  dan  masing- masing fraksi tersebut dilakukan uji fitokimia.
Hasil fraksinasi dapat dilihat pada Tabel 1 dimana  jumlah  fraksi  yang  diperoleh  sangat dipengaruhi  oleh  jumlah  senyawa  yang  terlarut oleh  masing-masing  pelarut.  Sehingga  dapat dikatakan  ekstrak  metanol  daun  lengkeng mengandung  lebih  banyak  senyawa  semipolar yang  terdapat  pada  fraksi  etil  asetat,  lalu  diikuti senyawa  polar  pada  fraksi  air  dan  senyawa  non polar pada fraksi n-heksana.
Tabel 1. Hasil fraksinasi ekstrak pekat metanol Pelarut Berat fraksi (g) N-Heksana 20,2282 Etil asetat 71,9445 Butanol 4,6532 Air 33,1728
Uji  fitokimia  ekstrak  metanol,  fraksi  n-heksana, fraksi  etil  asetat,  fraksi  butanol  dan  fraksi sisa/air
Uji fitokimia dilakukan untuk
mengetahui  kandungan  kimia  yang  terdapat pada  sampel.  Ditemukan  bahwa  daun  lengkeng mengandung senyawa flavonoid, fenolik, steroid, terpenoid dan alkaloid, sedangkan fraksi n-heksana  mengandung  fenolik,  steroid  dan triterpenoid,  fraksi  etil  asetat  mengandung flavonoid,  fenolik,  steroid,  triterpenoid  dan alkaloid,  dan  fraksi  butanol  mengandung flavonoid,  fenolik  dan  triterpenoid.  Hasil  uji fitokimia  ekstrak  metanol  daun  lengkeng memiliki  sedikit  perbedaan  dengan  hasil pengujian  fitokimia  yang  sudah  dilaporkan sebelumnya, dimana daun lengkeng mengandung senyawa flavonoid, fenolik, steroid,  triterpen  dan  saponin. Perbedaan  yang
72 | Jurnal Zarah , Vol. 8 No. 2 (2020)
terdapat  pada  uji  fitokimia  ini  dapat  disebabkan oleh  perbedaan  lingkungan  tempat  tumbuhnya tanaman karena lingkungan sangat mempengaruhi  kandung  metabolit  sekunder yang dimiliki oleh tanaman

## Hasil Isolasi Senyawa Metabolit Sekunder
Fraksi etil asetat dipilih untuk dilakukan pemisahan  karena  fraksi  ini  bersifat  semi  polar dan  lebih  banyak  mengandung  senyawa.  Isolasi senyawa  metabolit  sekunder  dari  fraksi  etil asetat menggunakan metode kromatografi kolom dengan  fasa  diam  berupa  silica  gel  60  F254. Pemisahan senyawa dengan metode kromatografi kolom bertujuan untuk memisahkan  senyawa-senyawa  yang  ada  dalam fraksi  secara  bergradien  dengan  meningkatkan kepolaran  elusi  dari  non  polar  hingga  polar. Pada  penelitian  ini  silika  gel  yang  digunakan diaktivasi terlebih dahulu dengan cara memanaskan  di  dalam  oven  yang  bertujuan memperbesar  luas  permukaan  silika  sehingga pemisahan menjadi lebih baik. Sistem elusi yang digunakan  pada  pemisahan  senyawa  metabolit sekunder  fraksi  etil  asetat  merupakan  sistem elusi  dengan  metode  SGP  (Step  Gradient Polarity)  dengan  fasa  gerak  dimulai  dari campuran  n-heksana  dengan  etil  asetat,  etil asetat  dan  campuran  etil  asetat  dengan  metanol. Sistem  elusi  SGP  digunakan  agar  didapatkan pemisahan yang sesuai dengan tingkat kepolaran.  Hasil  pemisahan  senyawa  metabolit sekunder  ditampung  dalam  botol  vial  dimana total vial yang diperoleh sebanyak 432 vial hasil tampungan  untuk  keseluruhan  eluen  yang digunakan. Hasil kolom ini dilihat pola nodanya dengan  KLT  dibawah  sinar  lampu  UV  pada setiap  interval  5  vial.  Setiap  vial  yang  memiliki pola noda yang sama digabung menjadi satu sub fraksi  yang  lebih  sederhana  sehingga  secara garis besar diperoleh 8 sub fraksi (sub fraksi A- H).  Hasil  penggabungan  8sub  fraksi  dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel  2.  Hasil  penggabungan  8  sub  fraksi berdasarkan pola noda KLT
Sub Fraksi No. Vial Massa (g) A 1 – 7 0 B 8 – 26 0,0041 C 27 – 46 0,0102 D 47 – 69 0,0295 E 70 - 101 0,0551 F 102 - 252 0,8703 G 253 - 338 13,2917 H 339 - 432 1,2894
Berdasarkan  pola noda  pemisahan senyawa yang dimonitor dengan KLT terhadap 8 sub  fraksi  pada  Tabel  2,  sub  fraksi  G  (13,2917 g)  memiliki  pola  pemisahan  yang  lebih  bagus dan  massa  yang  lebih  besar  dibanding  fraksi lainnya,  sehingga  sub  fraksi  G  dilakukan pemisahan lebih lanjut dengan metoda kromatografi  kolom  menggunakan  fasa  diam silika gel dan sistem elusi isokratik dengan eluen etil asetat sebanyak 800 mL.
Hasil  pemisahan  senyawa  pada  sub fraksi  G  didapatkan  sebanyak  68  vial  hasil tampungan  dan  selanjutnya  dimonitor  pola pemisahan nodanya menggunakan KLT dibawah sinar lampu UV pada setiap interval 3  vial.  Sub Fraksi  yang  memiliki  pola  noda  yang  sama digabung sehingga secara garis besar diperoleh 3 sub fraksi G. Hasil penggabungan 3 sub fraksi G dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel  3.  Hasil  penggabungan  3  sub  fraksi berdasarkan pola noda KLT
Sub fraksi No.Vial Massa (g) G.1 1 – 17 3,10 G.2 8 – 51 5,42 G.3 52 - 68 0,11
Berdasarkan  pola noda  pemisahan senyawa  terhadap  3  sub  fraksi  G  pada  Tabel  3, sub  fraksi  G.1(3,1  g)  memiliki  pola  noda  yang terpisah  dengan  bagus  dibanding  fraksi  lainnya, sehingga sub fraksi G.1 dilakukan re- kromatografikolom  menggunakan  fasa  diam silika  gel  dan  sistem  elusi  SGP  dengan  eluen dimulai  dari  n-heksana,  campuran  n-heksana dengan  etil  asetat,  dan  etil  asetat.  Hasil pemisahan  subfraksi  G.1  diperoleh  193  botol vial,  selanjutnya  vial  hasil  tampungan  dilihat secara  terawang  untuk  melihat  senyawa  yang tertinggal  ketika  seluruh  pelarut  telah  menguap. Berdasarkan  pengamatan  terdapat  padatan  putih pada  vial  87-103,  selanjutnya  vial-vial  ini dilakukan  uji  KLT  untuk  melihat  pola  nodanya dan  didapatkan  satu  noda  tunggal  yang  masih tailing  setelah  plat  KLT  diberi  penampak  noda Liebermann-Burchard.  Selanjutnya  vial  yang berisi  padatan  dan  pola  noda  yang  sama digabung  menjadi  satu  sub  fraksi  G.1.1.  Sub fraksi  G.1.1  tersebut  selanjutnya  dimurnikan dengan cara triturasi berulang kali menggunakan etil  asetat  untuk  menghilangkan  pengotornya sehingga diperoleh padatan putih seberat 7,5 mg.

## Uji kromatografi lapis tipis
Uji  kemurnian  senyawa  hasil  isolasi  diuji dengan  KLT  dan  hasilnya  dilihat  dengan penampak  noda  I 2 karena  I 2 merupakan  reagen menampak  noda  yang  universal  untuk  KLT41. Penggunaan  penampak  noda  ini  menunjukkan adanya  noda  tunggal  berwarna  kuning  dengan Rf 0,275 seperti terlihat pada Gambar 1. Setelah plat  diletakkan  dalam  chamber  berisi  uap  I 2 . Noda  tunggal  ini  menunjukkan  bahwa  senyawa hasil isolasi telah murni.
Gambar 1. Hasil monitor senyawa hasil isolasi pada plat KLT dengan penampak noda I 2
Untuk  menentukan  kemurnian  senyawa hasil isolasi dilakukan juga uji KLT menggunakan 3 jenis eluen. Hasil uji kemurnian senyawa hasil isolasi pada plat KLT menunjukkan  1  spot  noda  setelah  diberikan reagen  penampak  noda  Lieberman  Burchad, dapat dilihat pada Tabel 4.
Tabel  4.  Hasil  uji  kemurnian  senyawa  hasil  isolasi menggunakan  KLT  dan  pereaksi  Liebermann- Burchard
Eluen Rf Penampak noda Lampu UV Pereaksi LB λ254 λ365 Etil asetat 0,275 - - 1 noda ungu Etil asetat : Metanol (9,5 : 0,5) 0,65 - - 1 noda ungu Etil asetat : Metanol (9 : 1) 0,80 - - 1 noda ungu Penambahan pereaksi Liebermann-
Burchard  yang  dioleskan  pada  plat  KLT menunjukkan  adanya  noda  tunggal  berwarna ungu  setelah  dipanaskan.  Adanya  noda  tunggal berwarna ungu mengidentifikasi bahwa senyawa hasil  isolasi  merupakan  senyawa  golongan
triterpenoid.  Uji  fitokimia  dilakukan  untuk mengetahui golongan senyawa metabolit sekunder  yang  terdapat  pada  senyawa  hasil isolasi.  Hasil  uji  fitokimia  menunjukkan  larutan senyawa  hasil isolasi berwarna merah keunguan setelah  ditetesi  anhidrida  asetat  dan  asam  sulfat pekat. Hal ini menandakan bahwa senyawa hasil isolasi  termasuk  kedalam  golongan  triterpenoid. (Bambang C and Va 2012)
Rentang titik leleh senyawa hasil isolasi yaitu  126-127  C.  Rentang  titik  leleh  senyawa yang  diuji  sebesar  1  C.  Hal  ini  menjelaskan bahwa  senyawa  hasil  isolasi  dari  fraksi  etil asetat  telah  murni.  Senyawa  dikatakan  murni bila rentang titik lelehnya ≤2  C.
Hasil  karakterisasi  senyawa  dapat  dilihat  pada Gambar 2.
Gambar 2. Spektrum UV senyawa hasil isolasi
Berdasarkan pita serapan yang diperoleh dari spektrum UV menunjukkan adanya serapan maksimum  (λmaks)  pada  274  nm  yang  diduga berasal dari transisi n  * oleh suatu kromofor C-O.  Hasil  ini  menunjukkan  bahwa  senyawa hasil  isolasi  tidak  memiliki  ikatan  rangkap berkonjugasi.  Ikatan  rangkap  berkonjugasi terbentuk  karena  transisi  eletronik  π  π*  oleh gugus  C=C  yang  memiliki  pergeseran  panjang gelombang  ke  daerah  yang  lebih  besar.  Tidak adanya  ikatan  rangkap  berkonjugasi  juga didukung  oleh  data  IR  yang  menunjukan  tidak adanya gugus C=C pada senyawa hasil isolasi.
Hasil  FTIR  senyawa  yang  diperoleh dapat dilihat pada Gambar 3.
74 | Jurnal Zarah , Vol. 8 No. 2 (2020)
Gambar 3. Spektrum FTIR senyawa hasil isolasi
Berdasarkan  data  hasil  karakterisasi senyawa  hasil  isolasi  dengan  spektrofotometer FTIR yang terdapat pada Gambar 3 memberikan interpretasi  data  yaitu  beberapa  serapan  penting pada  daerah  bilangan  gelombang  3326,46  cm -1 yang  melebar  menunjukkan  adanya  regangan OH  yang  didukung  vibrasi  ulur  C–O  pada bilangan  gelombang  1270,80  cm -1 dan  1038,76 cm -1 ,  adanya  serapan  yang  tajam  pada  daerah 2972,71  cm -1 dan  2876,96    cm -1 menunjukkan adanya regangan C–H alifatik, didukung dengan adanya pita serapan didaerah 1379,46 cm -1 yang merupakan  vibrasi tekuk ikatan C–H dari gugus CH 3 .  Serapan  di  daerah  1379,46  cm -1 ini merupakan serapan untuk gugus geminal dimetil (dua  gugus  metil  pada  karbon  yang  sama)  yang merupakan  gugus  yang  khas  untuk  senyawa- senyawa  triterpenoid  pentasiklik.  (Yunazar Manjang 2000)
Hasil uji aktivitas antibakteri terhadap senyawa hasil isolasi
Uji aktivitas antibakteri terhadap senyawa  triterpenoid  hasil  isolasi  dilakukan dengan  metoda  difusi  sumuran  terhadap  bakteri S.  aureus dan E.  coli .  Pada  percobaan  ini digunakan  variasi  konsentrasi  untuk  melihat kemampuan senyawa yang telah diisolasi dalam menghambat pertumbuhan bakteri yang ditandai dengan  terbentuknya  zona  bening  disekitar sumuran  yang  berisi  senyawa  uji.  Variasi  yang digunakan  yaitu  25,  50, 100, 200,  400,  dan  800 mg/L, kontrol positif yang digunakan amoxicillin  dengan  konsentrasi  20  mg/L  dan kontrol  negatif  pelarut  DMSO.  Data  hasil  uji aktivitas  antibakteri  senyawa  hasil  isolasi  dapat dilihat pada Tabel 5.
Tabel  5.  Hasil  uji  aktivitas  antibakteri  senyawa triterpenoid hasil isolasi
Larutan Uji Konsentrasi (mg/L) Diameter  Zona  Bening (mm) S.aureus E.coli Senyawa  hasil isolasi 25 1,7 0,7 50 2,2 1,0 100 3,0 2,6 200 400 4,0 5,1 3,0 3,4 800 6,3 4,0 Kontrol (+) amoxicillin 20 9,4 8,0 Kontrol (-) - - -
Tabel  5  menjelaskan  zona  bening optimum senyawa hasil isolasi pada  kedua  jenis bakteri  terdapat  pada  konsentrasi  tertinggi  yaitu 800  mg/L  dan  zona  bening  semakin  berkurang seiring  dengan  berkurangnya  konsentrasi  yang diberikan. Hal ini menunjukkah bahwa konsentrasi  berpengaruh  terhadap  kemampuan senyawa untuk  menghambat  pertumbuhan bakteri.  Zona  bening  senyawa  hasil  isolasi  pada konsentrasi  25  mg/L  lebih  kecil  dibandingkan dengan  zona  bening  amoxicillin  sehingga  dapat disimpulkan  bahwa  senyawa  triterpenoid  hasil isolasi mempunyai kemampuan dapat menghambat pertumbuhan bakteri S. aureus dan E.  coli dengan  daya  hambatnya  kategori  lemah dibandingkan  amoxicillin.  Bakteri S.  aureus lebih  besar  zona  beningnya  dibandingkan  zona bening  pada  bakteri E.  coli disebabkan  karena senyawa  hasil  isolasi  merupakan  senyawa triterpenoid  yang  bersifat  polar  karena  tidak larut  dalam  heksana  namun  larut  dalam  etanol, sedangkan  bakteri S.  aureus dinding  selnya disusun  oleh  peptidoglikan  yang  bersifat  polar sehingga  senyawa  hasil  isolasi  lebih  mudah masuk  pada  lapisan  peptidoglikan  dibanding pada  lapisan  lipid  yang  bersifat  non  polar  yang terdapat pada bakteri E. coli .

## KESIMPULAN
Senyawa  hasil  isolasi  dari  fraksi  etil asetat  daun  lengkeng  ( Dimocarpus  longan Lour. )  berupa  padatan  berwarna  putih  sebanyak 7,8 mg yang memiliki titik leleh 126-127  C dan menunjukkan  uji  positif  triterpenoid  dengan pereaksi  Liebermann-Burchard.  Sedangkan  data spektrofotometer  UV  dan  IR  menunjukkan senyawa  hasil  isolasi  tidak  mempunyai  ikatan rangkap berkonjugasi dan memiliki gugus fungsi OH,  C–O,  C–H  alifatik  dan  geminal  dimetil.
Senyawa  triterpenoid  hasil  isolasi  memiliki antivitas  antibakteri  dengan  daya  hambat  lemah dibanding amoxicillin terhadap bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli.

## DAFTAR RUJUKAN
Annisa  P.  2018.  Uji  Aktivitas  Antioksidan  Dan Penentuan  Kandungan  Fenolik  Total  Dari Daun Lengkeng (Dimocarpus longan Lour) Bambang C, and H. Va. 2012. “Isolasi Senyawa
Triterpenoid Dari Daun Ketapang Kencana (Terminalia  Muelleri  Benth)  Dan  Uji Aktivitas  Sitotoksik Dengan Metode Brine Shrimp  Lethality  Test  (BSLT).” J  Kim Sains Dan Apl 15(2):47–52. Fajriyah  L.  2016  Analisis  Keanekaragaman  dan Pengelompokan Empat Varietas Kelengkeng  (Dimocarpus  longan  Lour.) Melalui Metode Fenetik. Skripsi.
Orwa,  C,  Mutua,  A,  and  Anthony,  S.  2009.
Agroforestry  Database  4.0:  Dimocarpus longan. In
Park S, Kim JH, Son Y, Goh SH, Oh S. 2016.”
Longan  (Dimocarpus  longan  Lour.)  Fruit Extract Stimulates Osteoblast Differentiation via Erk1/2-Dependent RUNX2 Activation”. J Microbiol Biotechnol. 6 (June 2016) : 1063-1066. Rakariyatham, Kanyasiri, Dayong Zhou, Nuansri  Rakariyatham,  and  Fereidoon Shahidi.  2020.  “Sapindaceae  (Dimocarpus Longan  and  Nephelium  Lappaceum)  Seed and Peel by-Products: Potential Sources for Phenolic Compounds and Use as
Functional  Ingredients  in  Food  and  Health Applications.” Journal  of  Functional
Foods 67(September 2019):103846.
Rangkadilok,  Nuchanart,  Songsak  Tongchusak,
Rachasak Boonhok, Sansanee C. Chaiyaroj,  Varaporn  B.  Junyaprasert, Waranun  Buajeeb,  Jaratluck  Akanimanee, Thida Raksasuk, Theeralaksna Suddhasthira,  and  Jutamaad  Satayavivad. 2012.  “In  Vitro  Antifungal  Activities  of
Longan  (Dimocarpus  Longan  Lour.)  Seed Extract.” Fitoterapia . Savitri,
Ayu Tomobokan, Defny S.
Wewengkang,  and  Sri  Sudewi.  2016. “Ekstraksi,  fraksinasi  dan  uji  aktivitas antibakteri  karang  lunak  Sarcophyton  Sp. yang  diperoleh  dari  Teluk  Manado.” Pharmacon 5(1).
Rakariyatham, Kanyasiri, Dayong Zhou,
Nuansri  Rakariyatham,  and  Fereidoon Shahidi.  2020.  “Sapindaceae  (Dimocarpus Longan  and  Nephelium  Lappaceum)  Seed and Peel by-Products: Potential Sources for Phenolic Compounds and Use as Functional  Ingredients  in  Food  and  Health Applications.” Journal  of  Functional
Foods 67(September 2019):103846.
Rangkadilok,  Nuchanart,  Songsak  Tongchusak,
Rachasak
Boonhok, Sansanee C. Chaiyaroj,  Varaporn  B.  Junyaprasert, Waranun  Buajeeb,  Jaratluck  Akanimanee, Thida Raksasuk, Theeralaksna
Suddhasthira,  and  Jutamaad  Satayavivad. 2012.  “In  Vitro  Antifungal  Activities  of Longan  (Dimocarpus  Longan  Lour.)  Seed Extract.” Fitoterapia . Yunazar Manjang. 2000. Isolasi Dan
Karakterisasi  Senyawa  Terpenoid  Dan Steroid . Unand Press. Padang. 10-15.
Zhang,  Xiaofang,  Sen  Guo,  Chi  Tang  Ho,  and Naisheng  Bai.  2020.  “Phytochemical Constituents  and  Biological  Activities  of Longan  (Dimocarpus  Longan  Lour.)  Fruit: A  Review.” Food  Science  and  Human Wellness .