## PERUBAHAN EKSPRESI HEAT SHOCK PROTEIN 70 AKIBAT PAPARAN MEDAN  ELEKTROMAGNETIK EXTREMELY LOW FREQUENCY PADA MAKROFAG PERITONEUM MENCIT YANG DIINFEKSI Toxoplasma gondii
Mochammad Arief Tau fi qurochman
Bagian Histologi Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret Jl. Ir Sutami 36A Surakarta Korespondensi: Mochammad Arief Tau fi qurochman email: arief_tq@yahoo.com

## ABSTRAK
Penelitian dilakukan untuk mengetahui efek  paparan medan elektromagnetik  ELF sebesar 100 µT 8 jam/ hari selama 2 dan 4 minggu terhadap ekspresi HSP  70   makrofag peritoneum mencit yang diinfeksi dengan Toxoplasma  gondii.  Jenis  penelitian  ini  adalah  Eksperimen  Biomedik  menggunakan  rancangan randomized separate  posttest control group design dengan hewan coba mencit  strain Balb/c, melalui  pengamatan ekspresi HSP  70  ,  terdiri  dari  3  kelompok  kontrol  dan      4  kelompok    perlakuan,    tiap  kelompok  terdiri  dari  4  hewan coba. Pengamatan jaringan menggunakan metode imunohistokimia indirek, hasilnya  dianalisis menggunakan uji statistik Independent t-test antar kelompok setelah dilakukan uji homogenitas dan normalitas data penelitian ( α =0.05). Hasil penelitian menunjukkan bahwa akibat paparanME ELF dengan itensitas 100   µT  selama 2 minggu belum mampu melemahkan atau memutus rantai DNA gen HSP 70 promotor region tetapi menimbulkan stres seluler yang berakibat teraktifasinya  HSF 1 melalui konversi menjadi trimer yang akan meregulasi secara cepat sintesis HSP 70 . Paparan medan elektromegnetik ME ELF  selama 4 minggu   dapat melemahkan bahkan memutus rantai DNA hsp 70 promotor region, sehingga sintesis HSP akan terhambat secara signi fi kan (p<0.05). Terdapat peningkatan secara signi fi kan ekspresi HSP 70 makrofag peritoneum mencit yang terpapar ME ELF dengan  itensitas  100      µT  selama  2  minggu  pada  kelompok  yang  terinfeksi      toxoplasma  gondii  dan  terjadi penurunan secara signi fi kan ekspresi HSP 70 pada kelompok terpapar ME ELF selama4 minggu pada kelompok yang terinfeksi Toxoplasma gondi  dibandingkan dengan konrol
Kata Kunci: Medan Electromagnetik ELF, HSP 70, Makrofag, Toxoplasma gondii.

## ABSTRACT
This research was done to investigate the effect of the ELFelectromagnetic fi eld exposure with the intensity of 100µT  for 8 hours/day for 2 weeks and  4 weeks on the HSP 70 expression of peritoneal macrophages of the mice infected with Toxoplasmagondi. This research used the biomedical experimental method with randomized post-test control group design. It involved 28 experimental mice of Balb/c strain, and they were divided into four treatment groups and three separate control group. Tissue observation used  indirect immunohistochemical technique. Its result was analyzed by using  independent-t test following the homogeneity and normality tests on the data of research ( α = 0.05). The ELF electromagnetic exposure with the intensity of 100µT for 2 weeks induces cellular stress which activates HSF 1  will regulate the synthesis of HSP 70 promptly. Conversely, the ELF electromagnetic fi eld exposure for 4 weeks has been able to weaken the chain of DNA in the promoter region of hsp70 gene. As a result, the synthesis of HSP will signi fi cantly be impeded (p<0.05). There is a signi fi cant increase in the HSP 70 expresionof peritoneal macrophages of the mice exposed to the ELF electromagnetic fi eld with the intensity of 100µT for 2 weeks in the groups which were infected with toxoplasma gondii, but there is a signi fi cant decrease in the HSP 70 expresion of peritoneal macrophages of the mice exposed to the ELF electromagnetic fi eld with the intensity of 100µT for 4 weeks in the groups which were infected with Toxoplasma gondii.  .
Keywords : ELF Electromagnetic fi eld , HSP 70, Macrophage, Toxoplasma gondii.

## PENDAHULUAN
Dari  beberapa  penelitian  yang  pernah dilakukan  sebelumnya  menunjukkan  bahwa  baik frekuensi tinggi maupun frekeuensi rendah medan elektromagnetik  ternyata  dapat  menghambat resistensi terhadap infeksi. Penurunan sitoproteksi ditemukan  pada  embrio  ayam  setelah  mendapat paparan  Medan  Elektromagnetik Extremely Low  Frequency  (ELF) dengan  intensitas  8  µT selama 4 hari berturut-turut (Di Carlo et al, 2002). Paparan  medan  elektromagnetik ELF dengan intensitas0,2  µT  4  jam/  hari  selama  5  hari  dapat menimbulkan    penurunan  jumlah  partikel    asing yang berhasil difagosit makrofag dan peningkatan konsentrasi  ACTH serum  sebesar 33,06% secara signi fi kan pada hewan Guenia Pig jantan   (Zare, 2006). Aktivitas fagositosis merupakan salah satu upaya  individu  untuk  melakukan  fungsi  proteksi terhadap      agen  asing  yang  masuk  kedalam tubuh  dan  proses  biodegradasinya.    Mengacu pada  rekomendasi  WHO  bahwa  intensitas paparan  medan  magnet ELF di  lingkungan  rata- rata  masih  berada  di  bawah  nilai  ambang  batas yang  diperkenankan  WHO  yaitu  dibawah  100 mT  (SCENIHER,  2006,  Johansson,  2009). Namun  dari  beberapa  penelitian  epidemiologi maupun  eksperimental  telah  mendukung  adanya peningkatan  risiko  beberapa  jenis  kanker  oleh paparan  medan  magnet  pada  intensitas  rendah, sehingga  masih  ada  kekhawatiran  kemungkinan dampak  kesehatan  oleh  paparan  medan  magnet pada  intensitas  rendah  (<100  µT).  oleh  karena itu mekanisme respons imun oleh paparan medan magnet ELF pada  intensitas  lingkungan  100  µT masih perlu dikaji lebih lanjut.
Perlu  kejelasan  efek  paparan  medan elektromagnetik ELF terhadap  penurunan  respon imun  yang berkitan  dengan  aktivitas fagositosis makrofag    secara  patobiologi  molekuler. Kenyataan  menunjukkan  bahwa    pemanfaatan peralatan  elektronik    di  rumah  tangga  dan  di lingkungan  pekerjaan  semakin  meningkat  hal ini  menyebabkan  risiko  kejadian  paparan  medan elektromagnetik ELF pada  individu  menjadi semakin  besar  dan  individu  yang  mengalami penurunan imunitas  berkaitan dengan penurunan aktivitas  fagositosis  makrofag  akan  semakin banyak terjadi.
Paparan  medan  Elektromagnetik ELF akan  menginduksi HSP 70  yang  bertujuan untuk  membantu  mempertahankan  konforrmasi
protein  sel  selama  periode  stress.      Dilaporkan bahwa  paparan  medan  elektromagnetik ELF menyebabkan  peningkatan  stress  protein HSP 70 dan HSP  110 hanya  pada  waktu  tertentu (Frahm  ,  Mattson  ,  Simco  ,  2010) . Paparan medan magnet 50 Hz , sebesar 2 µ T   yang yang ditimbulkan oleh lilitan Helmholtz selama 10-12 minggu,  pada  limabelas  marmot  jantan  dewasa menimbulkan  penurunan  aktivitas  sitotoksik NK cells ,dibandingkan dengan kontrol. Data ini menunjukkan bahwa NK Cells sebagai salah satu komponen sistem imun yang mampu membunuh beberapa  jenis  sel  tumor  dapat  dihambat aktivitasnya  oleh  paparan  medan  magnet  50  Hz. Dari uraian  tersebut di atas menunjukkan bahwa hasil  penelitian  eksperimen  baik  secara  invivo mapun invitro sampai saat ini masih belum cukup untuk  menjelaskan  mekanisme  secara  mendasar patobiomolekuler paparan medan elktromagnetik ELF 50 Hz, 100 µ T  terhadap aktivitas fagositosis makrofag.
Medan elektromegnetik- ELF secara langsung  dapat  berinteraksi  dengan  membran sel  terutama  dengan  ion  negatif  pada  dinding bagian  dalam  kanal  protein  dan  mengubah  arah dipole magnet sehingga susunan ion yang semula memiliki  formasi  acak  menjadi  searah  yang berakibat  permiabilitas  membran  meningkat. Kondisi ini akan berakibat proses fagositosis pada tahap adhesi mikroba  oleh  makrofag  melalui ikatan  nonspesi fi k  terutama  gaya  elektrostatik terganggu  dan      gangguan  ini  mengakibatkan tahap ingesti menjadi tidak efektif(Nagura  et al, 1993; Walleczek, 1992 ; Yeung et al. 2006). Paparan  medan  elektromagnetik  ELF dalam  waktu  singkat  merupakan  stimulasi  stress yang  akan  menginduksi  gene hsp 70  dalam beberapa  menit.  Dalam  kondisi  stress,    regulasi transkripsi  gene hsp 70  dimediasi  oleh heat shock  transcription  factor 1  (HSF1)  yang  akan mengalami  aktivasi  secara  lengkap  melalui konversi struktural monomer menjadi trimer dan mengalami  translokasi  dalam  inti.  HSF1  terikat pada heat shock elements (HSEs) dalam gene hsp 70 promotor region dan akan meregulasi secara cepat  sintesis HSP sebagai  respon  dari  berbagai stress  lingkungan.  Dalam  kondisi  normal  ketika gene hsp 70 tidak diinduksi untuk transkripsi, maka RNA  Polymerase  II ( RNA  P II)    menghentikan regio transcription initiation site pada nukleotida ke  20-40.  Stimulasi  stress  akan  melepaskan
pengaruh RNA  P II  dalam waktu  kurang dari  30 menit, dengan demikian akan terjadi peningkatan ekpresi HSP 70 (Karniranta, 2002).
Akan  tetapi Speci fi c  DNA  sequences pada  promoter  gene hsp 70  memberikan  respon terhadap  medan  elektromagnetik  .  Studi  sistem model  biokimia  menunjukkan  bahwa  medan elektromagnetik juga dapat berinteraksi langsung dengan  elektron  DNA.  Medan  elektromagnetik dengan  energi  rendah  akan  menginduksi repons  stress,  namun  peningkatan  energi  atau pertambahan  waktu  paparan  dapat  melemahkan sampai  memutus  rantai  DNA.  Kondisi  itu  dapat menyebabkan penurunan ekspresi HSP 70  (Blank and Godman, 2009).
Akumulasi  ion  Ca  dalam  sitosol  dapat berpengaruh  sama  terhadap  elektron  DNA khususnya  pada  gen hsp  70  promotor  region yang  berakibat  pelepasan  hambatan RNA  P  II terhadap transcription  ignition  side  region pada      nukleotida  ke  20-40tidak  dapat  optimal, sehingga sisntesis HSP 70 akan terganggu (Frahm et  al. ,  2004)    Oleh  karenanya  ketika  terjadi stress  seluler  berupa  peningkatan    ROS  akibat masuknya  mikroba  ke  dalam  sel  tidak  dapat memicu  peningkatan  ekspresi HSP 70.  Dengan demikian maka proses refolding enzimatis untuk enzim-enzim  biodegradasi  mikroba      antara  lain adalah Defensin, Cathepsin G, Lisozim, Laktoferin akan tergangguyang akhirnya akan memperlemah proses biodegradasi enzimatis mikroba.
Masalahnya  adalah  :  apakah    paparan medan  elektromagnetik ELF sebesar  100  µT  8 jam/  hari  selama  2  minggu  dan  4  minggu  dapat mengakibatkan    perubahan  ekspresi HSP 70 pada  aktivitas  fagositosis  makrofag  peritoneum mencit yang diinfeksi dengan Toxoplasma gondii ? Dengan demikian penelitian ini bertujuan untuk menjelaskan  secara  imunopatobiologi  pengaruh paparan medan elektromagnetik ELF sebesar 100 µT  8  jam/  hari  selama  2  dan  4  minggu  terhadap ekspresi HSP 70  pada  mencit  yang  diinfeksi dengan Toxoplasma  gondii  . Hasil  penelitian  ini diharapkan  dapat  sebagai  dasar  pertimbangan untuk  melakukan  upaya    preventif  timbulnya efek samping pada para individu yang mengalami paparan  medan  elektromegnetik ELF disekitar peralatan listrik pada intensitas 100 µT .

## METODE
Penelitian  ini  menggunakan  rancangan randomized  separate    posttest  control  group design. dengan  hewan  coba  mencit strain Balb/c jantan,  berumur  10  minggu,  terdiri  dari 4  kelompok    perlakuan  yang  mendapat  paparan medan  elektromegnetik ELF selama  2  dan 4  minggu    dan  3  kelompok  kontrol  .      Setiap kelompok  terdiri  dari  4  hewan  coba.    Dua  hari sebelum diterminasi setiap hewan coba kelompok perlakuan  diinfeksi  dengan Toxoplasma  gondii dengan dosis 10 3 tachyzoite secara intraperitoneal. Pemeriksaan  terhadap  ekspresi HSP 70  dalam sitoplasma  makrofag  peritoneum  hewan  coba dilakukan  menggunakan metode imunohistokimia indirek,  hasilnya    dianalisis  menggunakan  uji statistik Independent t-test antar kelompok setelah dilakukan  uji  homogenitas  dan  normalitas  data penelitian  ( α =0.05).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pengambilan data ekspresi HSP 70 makrofag peritoneum mencit dilakukan melalui pemeriksaan secara  mikroskopis  dengan  pembesaran  100  x, setiap 100 sel di setiap lapangan pandang untuk 5 lapangan pandang dengan kriteria penilaian : Skor 0 bila sitoplasma makrofag berwarna biru, skor 1 bila berwarna kuning kecoklatan dan skor 3 bila berwarna coklat.
Gambar 5.1 Hasil pengamatan secara imunohistokimiaekspresi HSP 70
makrofag peritoneum sediaan  hewan   yang   mendapat paparan ME  selama  2  minggu  dan  diinfeksi Toxoplasma gondii dengan  pembesaran  400x.        Angka  1,  2,  3 menunjukkanskorekspresi HSP 70  dalam  sitoplasma makrofag (No Sediaan Subjek : 1111 )
Gambar 5.2 Hasil pengamatan secara imunohistokimia HSP 70  makrofag  peritoneum  sediaan    hewan  coba tanpa  mendapat  paparan  ME,  diinfeksi Toxoplasma gondii , pembesaran 400x.  Angka 1, 2, 3 menunjukkan skorekspresi HSP 70 dalam sitoplasma makrofag. (No Sediaan Subjek : 1121)
Setelah    dilakukan  pengambilan  data dan  tabulasi,    data  dianalisis  menggunakan  uji independent  t-tes antara  kelompok  perlakuan dengan kontrol yang sesuai dengan  hasil sebagai berikut;
Tabel  1. Hasil  analisis  data  ekspresi HSP 70 pada  kelompok Separate  control menggunakan independent t-tes antar  kelompok  0  minggu  ( K0) ,  2  minggu  ( K0 1 ) dan  4  minggu  ( K0 2 )  tanpa  paparan  medan elektromagnetik dan tanpa diinfeksi Toxoplasma gondii . (ME-,To-). KELOMPOK No. Subjek Uji-t 1 2 3 4 X p Sign. K0  (0 mgg) 197 236 207 226 216.50
0.931
0.820 NS NS
K0 1 (2 mgg) 169 268 215 222 218.50 K0 2 (4 mgg) 199 229 232 217 221.75
Tidak terdapat perbedaan secara signi fi kan eksprei HSP 70 antar kelompok kontrol 0 minggu,
2 minggu dan 4 minggu (p>0.05)
Tabel 2. Hasil pengambilan data  ekspresi HSP 70 makrofag peritoneum mencit kelompok kontrol 2 minggu dan 4 minggu  ( K0 1,2 ) dan kelompok yang mendapat perlakuan 2 minggu (K1,K2) dan 4 minggu ( K3,K4 ).
Lama Perlakuan Kelompok  Subjek Ekpresi HSP 70 No. Subjek 1 2 3 4 X SD 2 minggu K0 1 : ME (-) To (-) 169 268 215 222 218.50 17.71 K1 : ME (+) To(+) 352 334 602 342 420,00 20,02 K2 : ME (-) To (+) 285 286 308 160 259,75 69,86 K0 2 : ME (-) To (-) 199 229 232 217 218,75 17,73 4 minggu K3 : ME (+) To(+) 143 105 189 143 145,00 35,42 K4 : ME (-) To (+) 319 241 252 214 256,50 39,53
Tabel  3  . Hasil  Analisis  data  menggunakan  uji independent  t-tes ekspresi HSP 70 makrofag  peritoneum mencit untuk setiap kelompok perlakuan selama 2 minggu (K1, K2)  dan selama 4 minggu (K3,K4) dibandingkan dengan kontrol.
Lama Perlakuan Kelompok X0 (X 1,2,3,4 ) p Sign 2 minggu
K0 1 : ME (-) To(-) K1 : ME (+)To(+)
216.50
420,00 0,032 S K2 : ME (-)To (+) 259.75 0,334 NS 4 minggu
K0 2 :ME (-) To (-) 218.75 K3 : ME (+) To(+) 145.00 0,007 S K4 : ME (-) To (+) 256.50 0,165 NS
secara signi fi kan ekspresi HSP 70 pada kelompok yang mendapat paparan ME ELF selama 4 minggu dan  diinfeksi  dengan Toxoplasma  gondii (K3) dibandingkan dengan kontrol (p<0,05).
Terdapat  peningkatan  secara  signi fi kan ekspresi  HSP  70  pada  kelompok  yang  mendapat paparan  ME ELF selama2  minggu  dan  diinfeksi dengan Toxoplasma  gondii (K1)  dibandingkan dengan  kontrol  (p<0,05).  Terdapat  penurunan
Tabel 4. Hasil analisis data menggunakan Uji independent t-test perbedaan ekspresi HSP 70 makrofag peritoneum mencit antar kelompok perlakuan 2 minggu (K1,K2) dan 4 minggu (K3,K4)
Lama Perlakuan Kelompok X p Sign 2 minggu K1 : ME (+) To(+) 420,00 0,026 S K2 : ME (-) To (+) 259,75 4 minggu K3 : ME (+) To(+) 145.00 0,007 S K4 : ME  (-) To(+) 256,50
Terdapat  perbedaan    secara  signi fi kan ekspresi HSP 70  antara  kelompok  K1  dan  K2. Paparan  ME ELF selama 2 minggu, menimbulkan perbedaan secara signi fi kan peningkatkan ekspresi HSP 70  makrofag  peritoneum    dibandingkan dengan yang tidak terpapar ME ELF pada hewan coba  yang  diinfeksi  dengan Toxoplasma  gondii (p<0.05 ). Terdapat  perbedaan    secara  signi fi kan ekspresi HSP 70  antara  kelompok  K3  dan  K4. Paparan  ME ELF selama 4 minggu, menurunkan secara  signi fi kan  ekspresi HSP 70  makrofag peritoneum dibandingkan dengan kelompok yang tidak  terpapar  ME ELF pada  hewan  coba  yang diinfeksi Toxoplasma gondii (p<0,05 ).
Dari hasil analisis data penelitian   terdapat peningkatan  secara  signi fi kan  ekspresi HSP 70pada  kelompok  yang  mendapat  perlakuan paparan ME ELF selama 2 minggu dan diinfeksi
Toxoplasma gondii dibandingkan dengan kontrol (p<0,05 ). Hal ini menunjukkan bahwapaparan ME ELF selama 2 minggu  menyebabkan permiabilitas membrane  sel  terhadap  ion  Ca  meningkat  dan terjadi  akumulasi  ion  Ca  dalam  sitosol  namun belum  dapat    mempengaruhi  elektron  DNA pada  Gen HSP  70    promotor  region .  Sementara itu  Infeksi Toxoplasma  gondii memicuakti fi tas fagositosismakrofagyang menimbulkan Respiratory  Brust dan  akan  mengaktifkan secara  lengkap HSF-1  monomer menjadi trimer yang menyebabkan  lepasnya  hambatan RNA Polymerase  II terhadap Trancription  initiation site region sehingga produksi HSP 70 meningkat secara   signi fi kan (Karniranta, 2002).
Perlakuan  dengan  infeksi Toxoplasma gondii tanpa  paparan  medan  elektromagnet ELF menyebabkan  peningkatan  tidak  signi fi kan
ekspresi HSP 70      dibandingkan  dengan  kontrol ( p>0,05 ).  Hal  ini  bisa  terjadi  karena  dengan tidak  terjadinya  akumulasi  ion  Ca  dalam  sitosol akibat  tidak  adanya  paparan  ME ELF, maka pelepasan hambatan RNA  Polymerase II terhadap Trancription initiation site region tidak maksimal sehingga  masih  terjadi  sintesis HSP 70    namun peningkatan ekspresinya   tidak signi fi kan.
Perlakuan  dengan    paparan  medan elektromagnet ELF selama  4  minggu  dengan infeksi Toxoplasma gondii , menyebabkan penurunan  Ekspresi HSP 70  secara  signi fi kan dibandingkan  dengan  kontrol    (p<0,05).    Hal ini  dapat  terjadi  karena  akumulasi  ion  Ca  akibat paparan  ME ELF selama  4  minggu      dapat melemahkan  atau  memutus  rantai  DNA  Gen HSP 70  promotor region. Akibatnya  pelepasan hambatan RNAP II      terhadap transcription ignition    site    region pada    nukleotida  ke  20- 40    tidak  optimal    sehingga      sintesis HSP 70 akan  terganggu,  oleh  karena itu ketika  terjadi stress    seluler  berupa  peningkatan  ROS      akibat masuknya Toxoplasma  gondii ke      dalam  sel tidak  dapat  memicu peningkatan  ekspresi HSP 70.  Dengan    demikian      maka  proses refolding enzimatis    untuk      enzim-enzim  biodegradasi mikroba  antara   lain  adalah Defensin,  Catepsin G, Lisozim  dan  Lactoferin  akan  terganggu  yang akhirnya akan memperlemah  proses biodegradasi enzimatis.(Albar, 2006 dan Li, Srivastava, 2004)
Perlakuan  dengan  infeksi Toxoplasma gondii , tanpa paparan medan elektromagnet ELF tidak    terjadi    peningkatan  secara      signi fi kan ekspresi HSP 70 (p <0,05). Hal ini  bisa terjadi karena dengan adanya  infeksi Toxoplasma gondii tanpa  adanya  paparan  medan    elektromagnetik ELF dapat  menimbulkan stress  oksidatif  namun belum  cukup untuk  meregulasi HSF 1 monomer menjadi  trimer    sehingga    pelepasan      hambatan RNAP II  terhadap Transcription initiation  site region tidak    optimal  sehingga    terjadi  sintesis HSP 70 namun  tidak  secara   optimal.
Tidak  terdapat perbedaan  secara  signi fi kan ekspresi HSP 70 antara kelompok  yang  dipapar dan tidak dipapar medan  elektromagnetik ELF selama 2   minggu  yang pada kedua kelompok  diinfeksi Toxoplasma gondii (p >0,05).  Hal  ini  bisa  terjadi karena  paparan  medan    elektromagnetik ELF selama  2   minggu      menyebabkan permiabilitas membrane  sel  terhadap  ion  Ca  meningkat  dan terjadi  akumulasi  ion  Ca  dalam  sitosol  namun
belum  dapat    mempengaruhi  elektron  DNA pada  Gen HSP  70    promotor  region .  Sementara itu  Infeksi Toxoplasma  gondii memicuakti fi tas fagositosismakrofagyang menimbulkan Respiratory  Brust dan  akan  mengaktifkan secara  lengkap HSF-1  monomer menjadi trimer yang menyebabkan  lepasnya  hambatan RNA Polymerase II terhadap Trancription initiation site region sehingga produksi HSP 70 meningkat secara bersamaan baik  pada kelompok  terpapar  maupun yang  tidak  terpapar    medan      elektromagnetik ELF sehingga      ekspresi HSP 70  pada  kedua kelompok tidak berbeda secara  signi fi kan.
Terdapat  perbedaan    secara    signi fi kan ekspresi HSP 70 antara kelompok  yang  dipapar dan  tidak dipapar medan  elektromagnetik ELF selama  4    minggu    yang  pada  kedua    kelompok diinfeksi Toxoplasma  gondii (p  <  0,05).    Pada kelompok yang  dipapar   medan  elektromagnetik ELF, ekspresi HSP 70    lebih  rendah    daripada kelompok  yang  tidak  dipapar.        Hal  ini  dapat terjadi  karena  akumulasi  ion  Ca  akibat  paparan ME ELF selama  4  minggu      dapat  melemahkan atau memutus rantai DNA Gen HSP 70  promotor region. Akibatnya    pelepasan  hambatan  RNAP II   terhadap transcription  ignition  site  region pada    nukleotida  ke  20-40    tidak  optimal  atau tidak   terjadi  sehingga   sintesis HSP 70   akan terganggu  dan ekspresinya  akan menurun (Blank and Godman, 2009)
Kerja HSP lebih  banyak  di  dalam  sel  , seperti membentuk pelipatan protein tiga demensi, menyiapkan protein yang akan dibuang, dan terikat pada rantai peptida membentuk rangkaian protein. Rangkaian  protein  ini  merupakan  kumpulan peptida  normal  pada  semua  sel  yang  sehat. HSP 70 juga berperan  untuk menyingkirkan  protein yang    abnormal  dari  dalam  sel  dan  berfungsi untuk  mempresentasikan    peptida  ke  permukaan sel sebagai antigen dalam  membantu sistem imun untuk mengenal sel yang sakit ( Li Z, Srivastava  , 2004).
Berkaitan  dengan  fungsi HSP 70  sebagai “ chaperone” maka  penurunan  sintesis HSP 70 akan  berakibat  menurunnya  penyiapan  enzim- enzim  lysosom  melalui  proses refoldingenzym , sehingga  akan  berdampak  terhadap  melemahnya proses  biodegradasi  bakteri  secra  enzimatis dalam  Lysosom.  ( Guzhova  and    Margulis, 2006). HSP 70  yang  terikat  pada  protein  baru akan  mempertahankan  protein  dalam  keadaan
tidak  terlipat  untuk  membantu  transport  protein tersebut melalui membrane ke dalam endoplasmik retikulum atau mitokondria.  (Abbas et al, 2009; Albar , 2006).
Dengan demikian maka penurunan ekspresi HSP 70 pada kondisi stress selular akibat paparan ME ELF selama  4  minggu  akan  berdampak melemahnya  sistem  imun  tubuh  di  dalam menghadapi infeksi akbat melemahnya pengenalan sel yang sakit oleh sistem imun, melemahnya tahap adhesi  fagositosis,  terganggunya  sintesis  enzim lisosom  yang  diperlukan  untuk  biodegradasi secara  enzimatis  dan  terganggunya  proses transport protein melalui dinding sel.

## SIMPULAN
Berdasakan  hasil  analisis  data  dan pembahasan dalam penelitian ini maka disimpulkan bahwa paparan Medan Elektromagnetik ELF 100 µT selama 2 minggu pada kelompok hewan coba yang diinfeksi dengan Toxoplasma gondii dapat meningkatkan secara signi fi kan ekspresi HSP 70 makrofag peritoneum .
Paparan  Medan  Elektromagnetik ELF 100 µT selama 4 minggu pada kelompok  hewan coba yang diinfeksi Toxoplasma gondii menyebabkan penurunan  secara  signi fi kan    ekspresi HSP 70 makrofag peritoneum.

## SARAN
Perlu  diupayakan  tindakan  protektif terhadap  timbulnya efek samping pada individu yang mengalami paparan medan elektromagnetik ELF di  sekitar  peralatan  atau  arus  listrik  dengan intensitas ≥ 100 µT .
Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut untuk mengetahui efek  paparan medan elektromagnetik ELF 100  µT  terhadap  parameter  imunokompeten yang  lain  untuk  memperkuat  bukti  efek  paparan terhadap penurunan sistem imunitas tubuh.

## DAFTAR  PUSTAKA
Abbas A.K. Lichtman A.H., Pober J.S. 2009 . Cellular and  Molecular  Immunology .      4 th .  Ed. Philadelphia, W.B.Saunders Co. pp. 253-351
Ahlbom A. 2001. Neurodegenerative Diseases, Suicide and  Depressive  Syntoms  in      Relation  to
EMF. Bioelectromagnetics
Supplement , Stockolm, Sweden, 5:132-143. Ajioka  JW. et al . 2001. The Toxoplasma  gondii Life Cycle . Expert Rev. Mol. Med.:1-19 .
Akan  Z,  Aksu  B,  Tulunay  A,  Bilsel  S,  Inhan-Garip A.  2010.Electromagnetic fi eld  and  public health:  extremely  low  frequency  (ELF) . Bioelectromagnetics. 31(8):603-612. Albar  Z.,  2006. Heat  Shock  Protein .  http://www.
kalbe.co.id/ fi les/cdk// 16 Heat Shock 9.pdf/12/11/2010
Anies, 2003.  Pengendalian Dampak Kesehatan Akibat
Radiasi  Medan    Elektromagnetik. Jurnal MMI : 38 ; 4 .
Ayse  G.  Canseven 1 , Seyhan  N.,      MirshahidiS.  and ImirT . 2006.  Suppression of Natural Killer Cell Activity  on Candida Stellatoidea by a 50 Hz Magnetic Field Informa Health Care
, 25:2 pp. 79-85
Blank M and Godman R. 2009. Electromagnetic fi elds stress  living  cells . Pathophys., 16:(2-3),  pp 71-8 . References and further reading may be available for this article. To view references and further reading you must purchase this article.
Brooks  GF,  Butel  JS.,  Morse  S.A.,  2004. Jawetz, Melnick, & Adelberg’s Medical Microbiology ,  2th  ed.  The  Mc.  Graw-Hill Co. Inc. pp. 125-126
Di  Carlo A, White A.,  Guo  F.,Garrett  P.  and  Litovitz T.,  2002.  Chronic  electromagnetic fi eld exposure decreases HSP70 levels and lowers cytoprotection. J.of  Biochem. 84:3, pp. 447- 454.
Ennanue E.R and Cerotini J.C., 2003.  Immunogenicity of Antigen Bond to the Plasma Membrane of Macrophage . J.Exp.Med 132 :711.
Erwin  D  (2012). Heat  ShocProtein70 . http://www. scribd.com/doc/91179465/Heat-Shock- Protein.scribd (27 Maret 2015)
Frahm  J,  Lantow  M,    Lupke  M,  Weiss  D.G,  Simko M.2004. Extremely low frequency electromagnetic fi elds as effectors of cellular responses  in  vitro:  Possible  immune  cell activation . J Cell  Biochem.: 99 : 167: 177.
_______, Mattson M.O, Simco M.2010.  Exposure to
ELF magnetic fi elds modulate redox Related protein expression in mouse  macrophages . Toxicol Lett. pp.330-336 .
Goraca  A , Ciejka  E ., Piechota  A . 2010.    Effects  of extremely low frequency magnetic fi eld on the parameters of oxidative stress in heart. J Physiol Pharmacol . 61(3): 38.
Guzhova I and  Margulis B, 2006. Hsp70 Chaperone as a Survival Factor in Cell Pathology. St. Petersburg, Russia, Elsevier Inc. p. 108 Hiswani  M.  1996. Toxoplasmosis  Penyakit  Zoonosis yang  perlu  diwaspadai  oleh  Ibu  Hamil. http://library.usu.ac.id/download/fkm/fkm- hiswani5.pdf. 3 Januari 2014
Johansson O. 2009.   Disturbance of the immune system by  electromagnetic fi elds  A  potentially underlying  cause  for  cellular  damage  and tissue  repair  reduction  which  could  lead  to disease  and  impairment. PATPHY. 621:21. pp. 9-18.
Karnovsky M.L.  2002.  Matabolic Basic of  Phagocytic Activity . Physiol.  Rev. 42:143. p.104. Kim  Y.,  Conover  D.L,  Lots  W.G.  Cleary  .S.F.  1998. Electric  Field  Induced  Change  in  Agonist Stimulated  Calcium  Flux  oh  Human  HL- 60  Leukemia  Cells. Bioel  ectromagnetic. 19(6): 336-376.
Karniranta P, and Sistonen L. 2002. Roles of the heat shock transcription factors  in regulation of the heat shock response and beyond. FASEB J . 15, 1118-31.
Kresno S.B. 2001.  Imunologi : Diagnosis dan Prosedur Laboratorium .  4 th ed.  FKUI,    Jakarta.  pp.
102-111 KuntoroH.2009 . Dasar Filoso fi s Metodologi
Penelitian .  Surabaya.  Pustaka  Melati.  Hal 113-146; 165-188.
Lestari  C.D.2010 . Lisosom . http://senyawakimia. blogspot.com/2010/02/lisosom.html (12/1/2012)
Li  Z,  Srivastava  P.    2004.    “Heat-shock  proteins”.
Current  protocols  in  immunology  /  edited by  John  E.  Coligan  ...  [et  al.] Appendix
1: doi : 10.1002/0471142735.ima01ts58 . PMID 18432918 .
Luttman  W,  Bratke  K,  Kupper  M,  Myertek  D.  2006.
Phagocytosis  Assays  in  Immunology. Amsterdam pp. 172-180
Marino  A.A.  2004.  Power  Frequency  Electric  Filed Induces Biological Changes    in Successive Generation of  Mice  . Experimentia ,  36  : 309-311.
Nagura  H,Asai  Y,    Katsumata  Y,  Kojima  K.  1993. Role  of  Electric  Surface  Charge    of  Cell Membrane in Phagocytosis. J Cell  Biochem. 93:1. p 83-92.
Narita , Kashara T,  1997.  Induction of Apoptosis Cells Death in Human Leukemic Cell line, HL-60 by  ELF  Electric  magnetic  Fileds  :  analysis of the possible mechanism in vitro. In vivo.

## 11(4): 329-335.
Pockley  AG,  2002.  Heat  Shock  Protein,  In fl amation and  Cardiovascular  Desease, Circulation 105: 1012-1017
Rantam  FA,  2003. Metode  Imunologi ,  Airlangga University Press, Surabaya.
Samaj  J,  Read  N.D,  Volkmann  D,  Menzel  D,
Baluska F. 2005. The endocytic network in plants”. Trends Cell Biol. 15 (8):
425–433.
Scanalios  JG 1997. Oxidatif Stress and the Moleculler Biology  of  Antioxidant  Defenses .  Cold Spring  Harbor  Laboratory    Press.  pp  343- 351.
SCENIHR  .  2006.    Preliminary  Opinion  on  Possible effects of Electromagnetic Fields (EMF) on Human Health .  13.
Sen CK . 1995. Oxidants and Antioxidants in Exercise. J.Appl. Physiol . 79. 675.
Shen B, 1007. Increased Resistance to Oxidative Stress in Tran  sgenic  plants  by Targeting  Manitol biosynthesis to chloroplasts. Plants Physiol .
113, 1177
Srivastava  P.  2006. Heat  Shock  Protein.  Researcher from Wikipedia , http://en.wikipwedia.org/w/ index.php.29 juli 2010
Steel  R.G.D  and  Torrie  J.H.  1991. Principles  and Procedures  of  Statistic .  3th  ed.  Mc  Graw- Hill, New York.
Subowo.  2009. Imunobiologi .  ed.2.  Jakarta,  CV Sagung Seto. hal. 159-61.
Sudarti,    Cahyana N.W, Mahmudsyah S. 2006.  The In fl uence  of  Extremely  Low  Frequency (ELF)  Magnetic  Fileds  Induction  to  the Production of IFN-g on Balb/C Mice. Folia Medica Indonesian a .  42 : (2)  pp. 82-88
_____  2007.    Pengaruh  Paparan  Medan  Magnet ELF dengan  Intensitas  20-32  mT  terhadap Modulasi  Imunitas  pada  Mencit  Balb/C. Disertasi.  Kedokteran  Unair  Surabaya/ gdlhub-gdl-5189 .
Sudiana  I.K.  2005 .  Teknologi  Ilmu  Jaringan  dan Imunohistokimia . Sagung Seto, Jakarta.
Szmigielski  L, Yakovlev AG,    2006. Granulopoietic reaction  in  infected  rabbits    exposed  to  an EMF. St. Petersburg, Russia . Elsevier Inc. Tjun  KE,2014. Radikal  Bebas  dan  Reactive  Oxygen Species. http://tipscarahidupsehat.com/ radikal-bebas-dan-reactive-oxygen- species/ 12 Februari 2015
Walleczek    J.  1992.  Electromegnetic  Filed    Effect on    Cells  of  the  ImmunSystem        the  role
of  Calcium  Signaling. FASEB  J.  Oct . 6(13):3177-3185.
Wang  R,  Joseph  T,  Muhlenkamp  P,  Rajiv  J.C.  2006. Exogenous  heat  shock  protein  70    binds macrophage  lipid  raft  microdomain  and stimulates  phagocytosis,  processing,  and MHC-II  presentation  of  antigens. Blood, Vol. 107, No. 4, pp. 1636-1642.
WHO. 1998 Extremely Low Frequency (ELF) Fields . Environmental  Health Criteria .  Geneva p.35.
______,  2001. Electromagnetic fi elds  and  public
health.    Electromagnetic  Hypersensitivity . WHO  Fact  sheet  No.296.  Geneva:  World Health Organization;   pp.1-2
Yeung T . Terebiznik M, 2 Liming Y, 1 Silvius, Y 4 . 2006. Receptor  Activation  Alters  Inner  Surface Potential  During  Phagocytosis  . Science :
313: 5785, pp. 347 – 351.
Zare S.H., Hayatgeibi S., Alivandi, A.G., Ebadi. 2006. Effects Of 50 Hz Magnetic Field On Some Factors  of  The  Immune  System  In  Male Guinea  Pigs. The      Journal  of  Medical Technology . 3 : 1. pp. 2-6