## ARTIKEL RISET
URL artikel: http://jurnal.fkmumi.ac.id/index.php/woh/article/view/woh3205
Isolasi Bakteri Rhizosfer Tanaman Nilam (Pogostemon Cablin Benth. )
Yang Berpotensi Sebagai Penghasil Senyawa Antibakteri Terhadap Bakteri Penyebab Infeksi Saluran Pencernaan
Zakiya Maulidiyah 1 , K Seniwati 2 , Rusli 3 , Tadjuddin Naid 4 1,3,4 Laboratorium Mikrobiologi, Fakultas Farmasi, Universitas Muslim Indonesia 2 Laboratorium Biokimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Hasanuddin Email Penulis Korespondensi ( K ): seniwatid@gmail.com zakiyahyunus292@gmail.com 1 , seniwatid@gmail.com 2 , rusli@umi.ac.id 3 , tadjuddinnaid@umi.ac.id 4
(08124266134)

## ABSTRAK
Penelitian  tentang  isolasi  bakteri  rhizosfer  pada  tanaman  nilam (Pogostemon  cablin Benth. ) telah  dilakukan. Penelitian  ini  bertujuan  untuk  memperoleh  isolat  bakteri  rhizosfer  tanaman  nilam  yang  berpotensi  sebagai penghasil senyawa antibakteri terhadap bakteri penyebab infeksi saluran pencernaan. Tahap pertama, dilakukan isolasi  bakteri  yang  berasal  dari  rhizosfer  tanaman  nilam.  Uji  skrining  antibakteri  dengan  metode  tanding, diperoleh isolat IBRN-3 dan IBRN-5  menghambat pertumbuhan semua bakteri uji. Isolat IBRN-3 dan IBRN-5 difermentasi.  Hasil  fermentasi  diesktraksi  dengan  pelarut  etil  asetat  menghasilkan  ekstrak  etil  asetat  fermentat kering.  Dilakukan  identifikasi  Kromatografi  Lapis  Tipis  terhadap  ekstrak  etil  asetat  IBRN-3  dan  IBRN-5 menggunakan  eluen  kloroform:  metanol  (8:1)  dan  diilanjutkan  dengan  uji  KLT-Bioautografi.  Diperoleh  hasil bercak pada IBRN-3 dengan nilai Rf 0.93 menghambat bakteri E. coli, S. aureus , nilai Rf 0.82 menghambat B. subtillis , S. dysenteriae , nilai Rf 0.64 menghambat S. aureus dan S. thypii , nilai Rf 0.89, 0.36, 0.24 menghambat S. dysenteriae, nilai Rf 0.84 dan 0.74 menghambat S. aureus. Sedangkan untuk IBRN-5, diperoleh bercak dengan nilai Rf 0.91 menghambat B. subtillis, E. coli S. thypii , nilai Rf 0.95 menghambat S. aureus, S. dysenteriae , nilai Rf 0.84 menghambat B. subtillis, S. thypii , nilai Rf 0.83 menghambat S. dysenteriae , dan nilai Rf 0,74 menghambat S.  thypii. Disarankan  menggunakan  dosis  isolat  bakteri  rhizosfer  tanaman  nilam  yang  sesuai  untuk  mencegah infeksi saluran pencernaan.
Kata kunci: Bakteri rhizosfer; tanaman nilam; infeksi saluran pencernaan
Window of Health : Jurnal Kesehatan, Vol. 3 No. 2 (April, 2020) : 132-139                       E-ISSN 2614-5375 Terakreditasi Nasional Peringkat 3 No. 36/E/KPT/2019

## Article history :
Received 17 Februari 2020 Received in revised form 7 Maret 2020 Accepted 20 Maret 2020 Available online 25 April 2020
licensed by Creative Commons Attribution-ShareAlike 4.0 International License .

## PUBLISHED BY :
Public Health Faculty Universitas Muslim Indonesia

## Address :
Jl. Urip Sumoharjo Km. 5 (Kampus II UMI) Makassar, Sulawesi Selatan.
Email : jurnal.woh@gmail.com , jurnalwoh.fkm@umi.ac.id Phone : +62 85255997212
Penerbit : Fakultas Kesehatan Masyarakat Universitas Muslim Indonesia
Window of Health : Jurnal Kesehatan, Vol. 3 No. 2 (April, 2020) : 132-139                       E-ISSN 2614-5375

## ABSTRACT
Research on isolation of rhizosphere bacteria in patchouli (Pogostemon cablin Benth.) Plants. This study aims to obtain patchouli plant rhizosphere bacteria that have the potential to produce antibacterial compounds against bacteria that cause digestive tract infections. The first stage, isolation of bacteria originating from the patchouli plant  rhizosphere.  Antibacterial  screening  test  using  a  match  method,  obtained  IBRN-3  and  IBRN-5  isolates inhibited the growth of all test bacteria. IBRN-3 and IBRN-5 isolates were fermented. The fermentation results are extracted with ethyl acetate solvent to produce dry fermentate ethyl acetate extract. Thin Layer Chromatography was identified on the ethyl acetate extract of IBRN-3 and IBRN-5 using chloroform: methanol (8: 1) eluent and followed by TLC-Bioautography test. The results of spotting on IBRN-3 with Rf value 0.93 inhibited the bacteria E. coli, S. aureus, Rf value 0.82 inhibited B. subtillis, S. dysenteriae, Rf value 0.64 inhibited S. aureus and S. thypii, Rf value 0.89, 0.36, 0.24 inhibits S. dysenteriae, Rf values 0.84 and 0.74 inhibit S. aureus. Whereas for IBRN-5, patches obtained with Rf value 0.91 inhibited B. subtillis, E. coli S. thypii, Rf value 0.95 inhibited S. aureus, S. dysenteriae, Rf value 0.84 inhibited B. subtillis, S. thypii, Rf value 0.83 inhibits S. dysenteriae, and Rf value 0.74 inhibits S. thypii. It is recommended to use the appropriate dosage of patchouli rhizosphere bacterial isolates to prevent digestive tract infections.
Keywords: Rhizosphere bacteria; patchouli plants; gastrointestinal infections

## PENDAHULUAN
Infeksi saluran pencernaan masih menjadi salah satu masalah kesehatan yang besar di Indonesia, terutama di daerah dengan tingkat sanitasi yang rendah dan jumlah populasi yang sangat padat. Infeksi saluran pencernaan disebabkan oleh mikroorganisme patogen salah satunya ialah bakteri. Penyakit ini seiring waktu semakin meningkat, dibuktikan dengan tingginya prevalensi penyakit diare  dan demam tifoid. 1 Demam  tifoid  adalah  penyakit  demam  akut  yang  disebabkan  oleh  infeksi  bakteri Salmonella enterica khususnya turunannya, Salmonella typhi. 2
Penyebab kematian di Indonesia karena diare dengan proporsi kematian untuk seluruh kelompok umur sebesar 3.5%, berada dalam urutan 13 dari 22 penyebab kematian baik penyakit menular atau pun penyakit tidak menular. Jika dikelompokkan berdasarkan kelompok penyakit menular maka proporsi kematian karena diare adalah sebesar 13.2% yang berada pada urutan ke 4 dari 10 penyebab kematian. 3 Demam  tifoid  adalah  penyakit  demam  akut  yang  disebabkan  oleh  infeksi  bakteri Salmonella enterica khususnya  turunannya, Salmonella  typhi. 2 Namun  dapat  pula  disebabkan  oleh Salmonella paratyphi A, Salmonella typhi B, dan Salmonella paratyphi C. Komplikasi dapat lebih sering terjadi pada  individu  yang  tidak  diobati  sehingga  memungkinkan  terjadinya  pendarahan  dan  perforasi  usus ataupun  infeksi fecal seperti  visceral  abses. 4 Salmonella typhi adalah  bakteri  Gram  negatif  yang menyebabkan spektrum sindrom klinis yang khas termasuk gastroenteritis, demam enterik, bakteremia, infeksi endovaskular, dan infeksi fecal seperti osteomielitis atau abses. 4 Manifestasi klinis demam tifoid dimulai dari yang ringan (demam tinggi, denyut jantung lemah, sakit kepala) hingga berat (perut tidak nyaman,  komplikasi  pada  hati  dan  limfa). 5 Seiring  dengan  meningkatnya  kasus  resistensi  terhadap antibakteri, mendorong terus dilakukannya penelitian untuk menghasilkan antibakteri jenis baru yang lebih efektif untuk membunuh bakteri penyebab penyakit. 6
Penyebab kematian di Indonesia karena diare dengan proporsi kematian untuk seluruh kelompok umur sebesar 3.5%, berada dalam urutan 13 dari 22 penyebab kematian baik penyakit menular atau pun
Window of Health : Jurnal Kesehatan, Vol. 3 No. 2 (April, 2020) : 132-139                       E-ISSN 2614-5375
penyakit tidak menular. Jika  dikelompokkan berdasarkan kelompok penyakit menular maka proporsi kematian karena diare adalah sebesar 13.2% yang berada pada urutan ke 4 dari 10 penyebab kematian. (3)
Penggunaan  antibakteri  yang  tidak  tepat  turut  mendorong  munculnya  masalah  resistensi. Diantara  penyebabnya  adalah  pemakaian  antibakteri  di  kalangan  masyarakat  tanpa  pengawasan, peresepan antibakteri oleh dokter tanpa pedoman dan tanpa kontrol, serta dosis dan lama pemberian yang tidak tepat.
Sumber  mikroorganisme  penghasil  antibiotik  antara  lain  berasal  dari  tanah,  air  laut,  lumpur, kompos,  dan  lain-lain.  Namun  kebanyakan  mikroba  penghasil  antibiotika  diperoleh  dari  mikroba tanah terutama jenis streptomices dan jamur. 7
Setiap spesies bakteri rhizofer akan menghasilkan senyawa metabolit sekunder yang berbeda satu sama  lainnya  sehingga  kemampuan  mengendalikan  penyakit  akan  berbeda-beda.  Oleh  karena  itu, skrining bakteri rhizofer sebagai agens hayati merupakan hal yang sangat penting dalam pengendalian penyakit.
Syarifuddin dkk menyatakan telah berhasil mengisolasi metabolit sekunder berupa antibiotik dari bakteri rhizosfer Isolat bakteri AL 6, salah satu isolate bakteri dari  rizosfer Saccarum officinarum L., dapat menghambat pertumbuhan E.coli. 8
Berdasarkan uraian diatas, maka tujuan dari penelitian ini yaitu mencari  antibakteri jenis baru yang lebih efektif untuk membunuh bakteri penyebab penyakit dengan  mengisolasi bakteri rhizosfer tanaman nilam ( Pogostemon cablin Benth.) yang berpotensi menghasilkan senyawa antibakteri terhadap bakteri penyebab infeksi saluran pencernaan.

## METODE
Alat-alat yang digunakan pada penelitian ini adalah autoklaf, cawan petri, gelas Erlenmeyer, gelas ukur,  gelas  kimia,  inkubator, Laminar  Air  Flow (LAF),  lempeng  KLT  G60  F254,  lemari  pendingin, mikroskop listrik, oven, rotary shaker , dan timbangan analitik. Adapun bahan-bahan yang digunakan adalah. Bahan-bahan yang digunakan pada penelitian ini adalah air suling, antimicrobial susceptibility test disc, etil asetat, larutan kristal violet, larutan iodium, etanol, larutan safranin, lempeng KLT, medium nutrient  agar  (NA),  Medium  nutrient  broth  (NB),  bakteri  uji  ( Bacillus  subtilis,  Escherichia  coli, Staphylococcus aureus, Salmonella typhi, Shigella dysenteriae) dan sampel  rhizosfer tanaman nilam ( Pogostemon cablin Benth.). Sampel rhizosfer tanaman nilam diambil  dengan cara tanah tersebut digali dengan  kedalaman  15  cm  dari  permukaan  tanah.  Setelah  itu  sampel  diambil  dengan  menggunakan sendok stainless steel yang  telah  disemprot  dengan  etanol  70%.  Sampel  dimasukkan  ke  dalam  botol coklat yang telah disterilkan, kemudian sampel dibawa ke laboratorium.
Tanah yang telah diambil selanjutnya diisolasi dengan metode pengenceran. Rhizosfer sebanyak 1 gram dicampur dan dibuat suspensi yaitu dengan mencampurkan 9 mL air steril kemudian dikocok selama  15  menit.  Suspensi  tersebut  diambil  sebanyak  1  mL  kemudian  dimasukkan  ke  dalam  tabung berisi 9 mL air steril dan dibuat pengenceran sampai pengenceran 10 -5 . 9
Window of Health : Jurnal Kesehatan, Vol. 3 No. 2 (April, 2020) : 132-139                       E-ISSN 2614-5375
Isolat  bakteri  yang  didapat  dari  proses  sebelumnya  ditumbuhkan  pada  media  NA  yang  baru dengan  menggunakan  metode  gores  kuadran.  Bakteri  diambil  dengan  menggunakan  ose,kemudian digoreskan  pada  kuadran  pertama.  Jarum  ose  disterilkan,  ujung  dari  penggoresan  pertama  kemudian diteruskan  dengan  menariknya  pada  kuadran  kedua  dan  digores  kembali.  Begitu  seterusnya  hingga kuadran ke empat. Bakteri yang tumbuh terpisah pada empat kuadran tersebut diremajakan pada media NA sebagai isolat murni untuk digunakan pada penelitian selanjutnya. 10
Bakteri uji  yang  digunakan    adalah Staphylococcus  aureus,  Escherichia  coli,  Bacillus  subtilis, Salmonella typhi dan Shygella dysenteriae masing-masing diambil satu ose lalu diinokulasi dengan cara digoreskan  pada  medium  Nutrient  Agar  (NA),  diinkubasikan  selama  1  x  24  jam  pada  suhu  37 O C  . Suspensi  bakteri    yang  sudah  diremajakan  ditambahkan  NaCl  fisiologis  0.9%  sebanyak  10  Ml  dan dikocok.
Disiapkan  suspensi  bakteri  uji,  diinokulasikan  2  mL  suspensi  bakteri  uji  kedalam  cawan  petri tersebut,  lalu  dituang  9  mL  medium  Nutrient  Agar  (NA),  diatur  sedemikian  rupa antimicrobial susceptibility  test  dics yang  telah  direndam  dalam  vial  yang  berisi  metabolit  sekunder  dari  isolat, kemudian  diletakkan  dalam  cawan  petri  yang  telah  berisi  medium  dan  suspensi  bakteri,  diinkubasi selama 1 x 24 jam pada suhu 37 O C, dan diamati dan diukur zona hambatan yang terbentuk. 11
Untuk produksi senyawa antibiotik, isolat yang telah diperoleh selanjutnya ditumbuhkan pada labu Erlenmeyer 500 mL yang mengandung 100 mL medium cair nutrient broth (NB) dan diinkubasi pada suhu 37 O C selama 1 x 24 jam. 12
Fermentasi  dilakukan  selama  7  hari  pada  kondisi  ter-shaker  dengan  kecepatan  200  rpm. Selanjutnya  media  hasil  fermentasi  disaring  untuk  memisahkan    miselia  dan  supernatan.  Untuk penyiapan ekstrak senyawa metabolit isolat, sebagian fermentat dipartisi cair-cair dengan menggunakan pelarut  etil  asetat.  Ekstrak  larut  etil  asetat  yang  diperoleh  kemudian  diuapkan  lalu  disimpan  dalam desikator untuk digunakan pada pengujian  selanjutnya. 12
Pengujian  KLT  dilakukan  yaitu  masing-masing  ekstrak  dilarutkan  dengan  kloroform:  metanol (1:1)  lalu  ditotolkan  pada  lempeng  KLT  ukuran  7  x  1  cm  menggunakan  pipa  kapiler.  Kemudian dimasukkan    ke  dalam  bejana  kromatografi  yang  dijenuhkan  dengan  cairan  pengelusi  kloroform  : metanol (8:1), kemudian dibiarkan  terelusi, lalu dikeluarkan dari bejana, diamati dibawah sinar UV 254 nm dan UV 366 nm diperhatikan flouresensi, dihitung nilai Rf-nya. 11
Untuk analisis KLT bioautografi dilakukan yaitu kedalam cawan petri dituangkan medium NA yang dicampur dengan suspensi bakteri. Setelah memadat, lempeng KLT yang telah dielusi, diletakkan diatas permukaan media agar. Setelah 60 menit lempeng tersebut diangkat dan dipindahkan, kemudian medium yang telah ditempeli lempeng KLT diinkubasi pada suhu 37 O C selama 1 x 24 jam, diamati zona hambatan yang terbentuk. 11 .

## HASIL
Hasil pemurnian isolat bakteri rhizosfer tanaman nilam: isolat IBRN-1, IBRN-2, IBRN-3, IBRN- 4, IBRN-5, dapat dilihat pada gambar 1 di bawah ini.
Window of Health : Jurnal Kesehatan, Vol. 3 No. 2 (April, 2020) : 132-139                       E-ISSN 2614-5375
Gambar 1. Hasil pemurnian isolat bakteri rhizosfer tanaman nilam: isolat IBRN-1, IBRN-2, IBRN-3, IBRN-4, IBRN-5.
Adapun gambar 2 di bawah ini memperlihatkan hasil uji mikroskopik isolat rhizosfer tanaman nilam.
Gambar 2. Hasil uji mikroskopik isolat rhizosfer tanaman nilam: isolat IBRN-1, 3 dan 5 adalah gram negatif dan isolat IBRN-2 dan 4 adalah gram positif
Tabel 1 dibawah ini memperlihatkan hasil uji skrining antibakteri isolat rhizosfer dari tanaman nilam. Skrining dilakukan dengan mengukur diameter zona hambat dari masing-masing isolat.
Tabel 1. Hasil uji skrining aktivitas antibakteri isolat rhizosfer tanaman nilam ( Pogostemon cablin Benth.) No. Bakteri Uji Diameter Zona Hambatan (mm) IBRN-1 IBRN-2 IBRN-3 IBRN-4 IBRN-5 1 EC 13.98 13.62 17.17 14.51 14.89 2 SD 15.5 14.42 15.88 14.89 15.33 3 ST 11.35 11.49 16.24 13.23 13.53 4 SA 10.33 12.93 13.69 9.65 13.99 5 BS 14.89 15.33 13.86 13.53 11.99
Ket:  EC= Eschericia coli
SD= Shigella dysenteriae
ST= Salmonella thypii
SA= Staphylococcus aureus
BS= Bacillus subtilis
Window of Health : Jurnal Kesehatan, Vol. 3 No. 2 (April, 2020) : 132-139                       E-ISSN 2614-5375
Adapun  tabel  2  di  bawah  ini  memperlihatkan  hasil  uji  Kromatografi  Lapis  Tipis  (KLT)- Bioautografi dari kromatogram ekstrak fermentat isolat rhizosfer tanaman nilam, dengan menggunakan eluen klorofom.
Tabel 2. Hasil uji KLT-Bioautografi dari kromatogram ekstrak fermentat isolat rhizosfer tanaman nilam ( Pogostemon cablin Benth .) dengan menggunakan eluen kloroform: metanol (8:1).
Ket:  EC= Eschericia coli
SD= Shigella dysenteriae
ST= Salmonella thypii
SA= Staphylococcus aureus
BS= Bacillus subtilis

## PEMBAHASAN
Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi bakteri rhizosfer tanaman nilam ( Pogostemon cablin Benth.)  yang  berpotensi  sebagai  penghasil  senyawa  antibakteri  terhadap  bakteri  penyebab  infeksi saluran  pencernaan.  Penelitian  ini  diawali  dengan  mengisolasi  bakteri  rhizosfer  tanaman  nilam ( Pogostemon  cablin Benth.).  Koloni  bakteri  yang  diperoleh  dimurnikan  pada  medium  NA  dengan metode kuadran.
Hasil isolasi dari rhizosfer tanaman nilam ( Pogostemon cablin Benth.) diperoleh 5 isolat, yaitu: IBRN-1, IBRN-2, IBRN-3, IBRN-4, dan IBRN-5. Pemurnian ini bertujuan untuk memperoleh koloni bakteri tunggal. Hasil pemurnian isolat bakteri rhizosfer tanaman nilam dapat dilihat pada gambar 1.
Selanjutnya diidentifikasi secara mikroskopik dengan melakukan pengecatan. Pengecatan gram termasuk  pengecatan  differensial  untuk  membedakan  bakteri-bakteri  yang  bersifat  gram  positif  dan gram negatif. Bakteri gram positif, pada pengamatan mikroskopis sel-sel bakteri ini tampak berwarna
No Isolat Nilai Rf Warna pada Penampak Bercak Kode Bakteri Uji Aktif UV 254 nm UV 366 nm 1. IBRN-3 0.93 0.82 0.64 0.84 0.74 0.89 0.36 0.24 Hijau muda Hijau muda Hijau muda Hijau muda Hijau muda Hijau muda Hijau muda Hijau muda Ungu berpendar Ungu berpendar
Ungu berpendar
Ungu berpendar
Ungu berpendar Ungu berpendar Ungu berpendar
Ungu berpendar SA dan EC SD dan BS SA dan ST SA SA ST ST ST 2. IBRN-5 0.91 0.84 0.95 0.87 0.74 Hijau muda Hijau muda Hijau muda Hijau muda Hijau muda Ungu berpendar Ungu berpendar Ungu berpendar Ungu berpendar Ungu berpendar BS, EC, ST BS dan SD SA dan SD
SD
ST
Window of Health : Jurnal Kesehatan, Vol. 3 No. 2 (April, 2020) : 132-139                       E-ISSN 2614-5375
biru  atau  ungu  (violet).  Sedangkan  bakteri  gram  negatif,  sel-sel  bakteri  ini  tampak  berwarna  merah seperti pada gambar 2.
Setelah  dilakukan  uji  mikroskopik,  dilakukan  uji  skrining.  Dari  hasil  uji  skrining,  diperoleh bahwa isolat IBRN-1, IBRN-2, IBRN-3, IBRN-4, dan IBRN-5 dapat menghambat semua bakteri uji, yaitu: Salmonella thypii,  Escherichia  coli,  Staphylococcus  aureus,  Shigella  disenteriae, dan Bacillus subtilis. Isolat dengan zona hambat terbesar yaitu isolat IBRN-3 dan IBRN-5. Dengan demikian, isolat ini dilanjutkan untuk difermentasi. Hasil uji skrining dapat dilihat pada tabel 1.
Fermentasi  dilakukan  dengan  mengambil  peremajaan  isolat  IBRN-3  dan  IBRN-5,  kemudian dipindahkan ke dalam medium Nutrient Broth (NB). Fermentasi dilakukan selama 7 hari dengan cara di -shaker pada kecepatan 200 rpm. Tujuan dilakukan fermentasi untuk memperoleh metabolit sekunder dari isolat dalam jumlah yang lebih banyak. Tujuan shaker yaitu untuk membantu mempercepat mikroba untuk  menghasilkan  metabolit  sekunder  dan  agar  selama  fermentasi  bakteri  akan  mencapai  fase stasioner dan menghasilkan metabolit sekunder. Untuk mempertahankan hidup, mikroorganisme dapat membuat  pertahanan  sendiri  dengan  menghasilkan  metabolit  sekunder  yang  mempengaruhi mikroorganisme lain sehingga mikroorganisme lain itu tidak dapat tumbuh dan berkembang biak. Hasil fermentasi  di  dipisahkan  antara  miselia  dan  supernatannya.  Supernatan  diekstraksi  dengan menggunakan etil asetat. Ekstrak yang diperoleh diuapkan hingga diperoleh ekstrak fermentat kering.
Ekstrak etil asetat fermentat isolat IBRN-3 dan IBRN-5 diidentifikasi dengan profil KLT dengan menggunakan eluen kloroform : metanol (8:1) hal ini karena  masing-masing pelarut memiliki kepolaran yang berbeda yang dapat memisahkan senyawa pada proses kromatografi.
Hasil  identifikasi  KLT  kemudian  dilanjutkan  uji  aktivitasnya  dengan  menggunakan  KLT- Bioautografi. Pengujian ini merupakan pengujian lanjutan yang bertujuan untuk mengetahui komponen kimia  yang  memberikan  aktivitas  sebagai  antibakteri.  Berdasarkan  hasil  uji  KLT,  esktrak  etil  asetat fermentat isolat IBRN-3 diperoleh nilai Rf 0.93 yang aktif terhadap bakteri E. coli , dan S. aureus, nilai Rf 0.82 aktif terhadap bakteri B. subtilis , S. dysenteriae, nilai Rf 0.64 aktif terhadap bakteri S. aureus, S. thypii, nilai Rf 0.89, 0.36, dan 0.24 aktif terhadap bakteri S. dysenteriae, nilai Rf 0.84 dan 0.74 aktif terhadap bakteri S. aureus. Untuk isolat IBRN-5 nilai Rf 0.91 aktif terhadap bakteri B. subtilis, E. coli, S. thypii, nilai Rf 0.84 aktif terhadap bakteri B. subtilis, S. thypii, nilai Rf 0.95 aktif teradap bakteri S. aureus, S. dysenteriae, nilai Rf 0.87 aktif terhadap bakteri S. dysenteriae, nilai Rf 0.74 aktif terhadap bakteri S. thypii. Hasil uji KLT-Bioautografi dapat dilihat pada tabel 2.

## KESIMPULAN DAN SARAN
Dari  hasil  penelitian  didapatkan  isolat  bakteri  rhizosfer  dengan  kode  IBRN-3  dan  IBRN-5 memiliki aktivitas antibakteri terhadap semua bakteri uji. Profil bioautografi IBRN-3 diperoleh 8 bercak aktif, dan IBRN-5 diperoleh 5 bercak aktif dalam menghambat pertumbuhan bakteri penyebab infeksi saluran pencernaan. Disarankan menggunakan dosis isolat bakteri rhizosfer tanaman nilam yang sesuai untuk mencegah infeksi saluran pencernaan.
Window of Health : Jurnal Kesehatan, Vol. 3 No. 2 (April, 2020) : 132-139                       E-ISSN 2614-5375

## DAFTAR PUSTAKA
1.   Novita  Maylia  Eka  C.  Daun  Kemangi  (Ocinum  Cannum)  Sebagai  Alternatif  Pembuatan Handsanitizier.  KESMAS  -  J  Kesehat  Masy  [Internet].  2014;9(2):136–42.  Available  from: https://journal.unnes.ac.id/nju/index.php/kemas/article/view/2843
2.   Alba S, Bakker MI, Hatta M, Scheelbeek PFD. Risk Factors of Typhoid Infection in the Indonesian Archipelago. 2016;1–14.
3.   Anorital, Andayasari L. Kajian epidemiologi penyakit infeksi saluran pencernaan yang disebabkan oleh amuba di indonesia. 2011;21:1–9.
4.   Naveed  A,  Ahmed  Z.  Treatment  of  Typhoid  Fever  in  Children :  Comparison  of  Efficacy  of Ciprofloxacin with Ceftriaxone. 2016;12(6):346–55.
5.   Krisna IG, Pratama Y, Lestari AAW. Sebagai metode diagnosis cepat demam tifoid. 2018;2(1):70– 73.
6.   Ambarwati  A.  Isolasi  Actinomycetes  Penghasil  Antibiotik  Terhadap  Escherichia  coli  dan Staphylococcus aureus. J Penelit Sains Teknol. 2011;8(1):14.
7.   Widiastutik N, Alami HN. Isolasi dan Identifikasi Yeast dari Rhizosfer. J Sains dan Seni Pomits. 2014;3(1):11–6.
8.   Syarifuddin  A,  Kamal  S,  Yuliastuti  F,  Pradani,  Missya  Putri  Kurnia;  Septianingrum  NMAN. Ekstraksi dan Identifikasi Metabolit Sekunder dari Isolat AL6 serta Potensinya sebagai Antibakteri terhadap  Escherichia  coli  (Extraction  and  Identification  of  Secondary  Metabolites  from  AL6 Isolates and Its Potential as Antibacterial against Escherichia c. J Bioteknol BIOSAINS Indones. 2019;6(December):210–8.
9.   Simatupang DS. Berbagai Mikroorganisme Rizozfer pada Tanamam Pepaya ( Carica papaya L.). Institut Pertanian Bogor; 2018.
10.   Amin M, Utami N, Satria H, Simanjuntak W. Fermentasi Hidrolisat Onggok Dengan Menggunakan Mikroba Endofitik. Bandar Lampung; 2013.
11.   Mustari  M,  Djide  MN,  Mahmud  I,  Hasyim  N.  Uji  Daya  Hambat  dan  Analisis KLT-Bioatografi Perasan  Buah  Sawo  Manila  (Achras  Zapota  Linn)  terhadap  Bakteri  Uji  Salmonella  Thyposa Mardiyah. Media Kesehat Masy Indones. 2011;7(1):25–7.
12.   Rante, Herlina; Wahyono; Murti, Yosi B;Alam G. Purifikasi dan karakterisasi senyawa anti- bakteri dari  actinomycetes  asosiasi  spons  terhadap  bakteri  patogen  resisten.  Maj  Farm  Indones. 2010;21(3):158–65.