KANDUNGAN PROTEIN KASAR DAN SERAT KASAR PADA DAUN KACANG TANAH ( Arachis hypogaea ) YANG DIFERMENTASI DENGAN BAKTERI Enterobacter cloacae WPL 111 SEBAGAI BAHAN PAKAN ALTERNATIF IKAN
CONTENT OF CRUDE PROTEIN AND CRUDE FIBER IN PEANUT LEAVES ( Arachis hypogaea ) WHICH IS FERMENTED BY Enterobacter cloacae WPL 111 AS ALTERNATIVE FISH FEED STUFF
Karlina Hardianing Pangestu, Agustono dan Widya Paramita Lokapirnasari
Fakultas Perikanan dan Kelautan Universitas Airlangga Kampus C Mulyorejo - Surabaya, 60115 Telp. 031-5911451

## Abstract
Feed  is  an  element  that  really  support  the  activities  of  aquaculture,  there  for  the  feed  that  is available must be adequate and meet the needs of the fish. Efforts to reduce feed costs, some farmers use alternative feed ingredients as a substitute for feed ingredients. Peanut leaves in the form of flour can be used as  fish  feed in pellet  form. Peanut is potential biological resources to be used as  feed to the  waste produce sufficient  forage  nutritional  value. Peanut leaves nutrition consist of, the dry  matter 96,2754%, 29,7397%  crude  fiber,  17,2475%  crude  protein  (Unit  Inspection  Services  Consulting  and  Training  of Faculty  of  Veterinary  Medical  Laboratory  Airlangga  University,  2014).This  research  been  used Completely Randomized Design (CRD) method with five treatments and four replications. The treatment used were control (P0), the provision of Enterobacter cloacae WPL 111 5% (P1), 10% (P2), 15% (P3) and  20%  (P4)  with  each  repeated  four  times.  Parameters  observed  were  content  of  crude  protein  and crude  fiber  after  fermentation  for  seven  days  in  anaerob  facultative.  Data  about  the  contain  of  crude protein  and  crude  fiber  obtained  from  this  studied  were  analyzed  with  analysis  of  variants  to  determine the  effect  of  treatment.  Different  between  treatments  were  tested  with  Duncan;s  multiple  range  test (DMRT). These results indicate that administration Enterobacter cloacae WPL 111 10% gave significant effect  of  the  increase  in  crude  protein  content  in  the  fermented  leaves  peanut  and    administration Enterobacter  cloacae WPL  111  5%  gave  significant  effect  of  the  decrease  in  crude  fiber  content  in  the fermented leaves peanut. The suggested dosage to reduce the content of crude fiber and increase the crude protein content in the fermented leaves peanut is 10%.
Keywords : Peanut leaves, Enterobacter cloacae WPL 111, crude protein, crude fiber

## Pendahuluan
Pakan  berperan  sangat  penting  pada usaha budidaya perikanan, sehingga pakan yang tersedia harus memenuhi kebutuhan nutrisi ikan tersebut.  Pakan  memberikan  kontribusi  terbesar yaitu  mencapai  60  sampai  70%  dari  total  biaya produksi  (Handajani,  2008).  Salah  satu  upaya untuk  mengurangi  biaya  pakan  yaitu  dengan pemanfaatan  bahan  baku  pakan  alternatif. Bahan  pakan  alternatif  ikan  pada  umumnya berasal  dari  berbagai  limbah  yang  kandungan nutrisinya  masih  dapat  dimanfaatkan  sebagai bahan  pakan  ikan.  Limbah  dari  pertanian umumnya  menpunyai  kandungan  protein  yang rendah  tetapi  kandungan  seratnya  tinggi (Rokhmani, 2008).
Bahan  pakan  alternatif  yang  dapat dimanfaatkan  adalah  daun  kacang  tanah.  Daun kacang tanah dapat dimanfaatkan sebagai pakan alternatif  ikan  karena  kemudahan  dalam memperoleh,  mengelola  dan  tidak  termasuk
bahan  makanan  manusia.  Kandungan  nutrisi limbah  daun  kacang  tanah  yaitu  berat  kering 96,2754%,  serat  kasar  29,7397%,  protein  kasar 17,2475% (Unit Layanan Pemeriksaan Laboratoris Konsultasi dan Penelitian FKH UA, 2014). Fermentasi merupakan kemajuan bioteknologi  dengan  memanfaatkan  mikroba dan  merupakan cara alternatif optimalisasi daur ulang  limbah  pertanian  (Muis  dkk,  2008).
Fermentasi
dapat dilakukan dengan menggunakan mikroba, baik mikroba proteolitik maupun  mikroba  selulolitik  (Hidayat  dkk., 2006).  Tujuan  fermentasi  adalah  meningkatkan kadar  protein,  menurunkan  serat  kasar,  dan meningkatkan  kecernaan  bahan  pakan  yang mengandung  ligno-selulosa  (Soundstol  dan Coxworth, 1984 yang dikutip oleh Sovia, 2002).
Serat  kasar  yang  tinggi  menjadi  faktor pembatas pemanfaatan bahan-bahan hasil samping agroindustri. Kandungan selulosa pada
serat  kasar  merupakan  komponen  utama penyusun  dinding  sel  yang  merupakan  polimer glukosa  yang  dapat  dipecah  melalui  hidrolisis asam  dan  enzimatis  (Murni et  al., 2008). Keberadaan lignin dan hemiselulosa merupakan penghambat  utama  dalam  hidrolisis  selulosa. Hasil fermentasi diharapkan terjadi peningkatan terhadap  kualitas  bahan  pakan  yang  akan digunakan  sebagai  campuran  pakan  ikan  dan mampu meningkatkan pertumbuhan ikan (Widiastuti, 2007).
Pada  penelitian  ini  digunakan  bakteri selulolitik Enterobacter  cloacae WPL  111. Bakteri selulolitik  menghasilkan enzim selulase yang  akan  menghidrolisis  selulosa  menjadi selobiosa  dan  glukosa.  Bakteri  selulolitik menghasilkan  enzim  selulase  yang  dapat menghidrolisis  selulosa  menjadi  karbohidrat terlarut  yang  selanjutnya  dapat  dimanfaatkan oleh ternak sebagai sumber energi.

## Materi dan Metode
Tempat dan Waktu Penelitian Kegiatan penelitian ini telah  dilakukan di Departemen Peternakan Fakultas Kedokteran Hewan  Universitas  Airlangga  Surabaya  pada bulan Agustus 2014.
Peralatan Penelitian
Peralatan yang digunakan dalam penelitian ini adalah kantong plastik ukuran 0,5 kg,  spuit,  gelas  ukur,  timbangan  digital,  pisau, mesin  penggiling  pakan,  pH  paper,  oven, nampan plastik dan sendok.
Bahan Penelitian Bahan-bahan  yang  digunakan  dalam penelitian ini adalah limbah daun kacang tanah. Bakteri yang digunakan dalam proses fermentasi  merupakan  bakteri  selulolitik  yaitu
Enterobacter cloacae WPL 111 yang
didapatkan dari Departemen Peternakan Fakultas Kedokteran Hewan Universitas
Airlangga  dengn  kepadatan  2,22  Skala  Mc
Farland (6.66 x 108 CFU/ml). Bahan penunjang lain  dalam  penelitian  ini  adalah  tetes  tebu  dan akuades steril.
Metode Penelitian
Metode yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  metode  eksperimen  untuk mengetahui  kandungan  protein  kasar  dan  serat kasar pada daun kacang tanah yang difermentasi dengan Enterobacter cloacae WPL 111 dengan dosis yang berbeda. Penelitian ini menggunakan Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  dengan  lima perlakuan dan empat ulangan.
Prosedur Kerja a. Pembuatan Tepung Daun Kacang Tanah
Daun kacang tanah dipisahkan antara batang dan  daunnya,  selanjutnya  daun  kacang  tanah dikeringkan  dalam  oven  dengan  suhu  60°C selama 24 jam. Daun yang sudah kering digiling dengan ukuran 1  mm  sehingga menjadi tepung. Tepung  daun  kacang  tanah  yang  sudah  kering dibagi  dalam  kantong  pastik  masing-masing sebanyak 50 gram.
b. Pencampuran  Tepung  Daun  Kacang  Tanah dengan Enterobacter
Tepung    daun  kacang  tanah  yang  telah ditimbang sebanyak 50 gram dimasukkan dalam baki  untuk  dicampur  dengan  larutan  fermentor.
Pembuatan fermentor
yaitu dengan mencampurkan  aquades  dan  tetes  tebu  dengan dosis 3% dari jumlah tepung daun kacang tanah sampai merata, kemudian ditambahkan Enterobacter sesuai dengan dosis yang ditentukan pada perlakuan.
c. Proses Fermentasi
Tepung  daun  kacang  tanah  yang  telah dicampur  secara  homogen  dengan  larutan fermentor  dimasukkan  dalam  kantong  plastik dan  diikat.  Proses  fermentasi  dilakukan  pada suhu  34-37°C  dan  dalam  suasana  anaerob selama  tujuh  hari.  Setelah  proses  fermentasi selesai,  hasil  tepung  daun  kacang  tanah fermentasi  tersebut  diangin-anginkan  kemudian dianalisis proksimat untuk mengetahui kandungan serat kasar dan protein kasar.
Parameter Pengamatan Parameter  utama  yang  diamati  dalam penelitian  ini  adalah  nilai  kandungan  protein kasar  dan  serat  kasar.  Nilai  kandungan  tersebut diketahui dengan melakukan analisis proksimat.
Analisis Data
Data  yang  diperoleh,  diolah  dengan menggunakan Analysis  of  Variant (ANOVA) untuk  mengetahui  ada  tidaknya  pengaruh perlakuan yang diberikan. Jika terdapat pengaruh  maka  dilakukan  Uji  Jarak  Berganda Duncan  dengan  taraf  nyata  α  =  0,05  untuk mengetahui  perlakuan  mana  yang  memberikan hasil  tertinggi  dan  terendah  (Kusriningrum, 2010).

## Hasil dan Pembahasa
a. Protein Kasar Kandungan  protein  kasar  tertinggi adalah pada perlakuan P3 dimana P3 merupakan perlakuan  penambahan  Enterobacter  15%, sedangkan  perlakuan  terendah  yaitu  P0  dimana
P0  merupakan  kontrol  tanpa  penambahan Enterobacter.
Tabel  1.  Kandungan  protein  kasar  berdasarkan bahan  kering  100%  pada  daun  kacang tanah yang difermentasi dengan bakteri selulolitik Enterobacter  cloacae WPL 111. Perlakuan Protein kasar (%) ± SD P0 (0%) P1 (5%) P2 (10%) P3 (15%) P4 (20%) 17,2500a ± 0,5000 19,7500b ± 0,5000 22,0000c ± 0,8165 22,2500c ± 0,9574 21,7500c ± 0,5000 Keterangan
a,b,c  :   Superskrip  yang  berbeda  pada    kolom yang  sama  menunjukkan    perbedaan yang nyata (p < 0,05)
b. Serat Kasar
Berdasarkan uji jarak berganda Duncan ( Duncan’s  Multiple  Range  Test )  didapatkan hasil  kandungan  serat  kasar  dari  ke  lima perlakuan diketahui P0 (0%) memiliki kandungan serat kasar tinggi yang tidak berbeda nyata  dengan  perlakuan  P3  (15%)  namun berbeda  nyata  dengan  P1  (5%),  P2  (10%)  dan P4  (20%).  Kandungan  serat  kasar  yang  rendah yaitu  P1  dengan  penambahan  Enterobacter  5% tidak  berbeda  nyata  dengan  penambahan Enterobacter 20% (P4).
Tabel  2.  Kandungan  serat  kasar  berdasarkan bahan kering 100% pada daun kacang tanah  yang  difermentasi  dengan bakteri selulolitik
Enterobacter cloacae WPL 111. Perlakuan          Serar Kasar (%) ± SD P0 (0%) P1 (5%) P2 (10%) P3  (15%) P4 (20%) 32,0000c ± 0,0000 29,0000a ± 1,1547 30,7500b±0,9574 31,0000bc±0,0000 30,0000ab ± 0,8165
Keterangan a,b,c  :   Superskrip  yang  berbeda  pada    kolom yang  sama  menunjukkan    perbedaan yang nyata (p < 0,05)
Berdasarkan hasil penelitian fermentasi daun  kacang  tanah  dengan Enterobacter cloacae WPL  111  selama  7  hari  menunjukkan
bahwa penambahan Enterobacter cloacae WPL 111  pada  setiap  perlakuan  menunjukkan perbedaan  yang  nyata  terhadap  peningkatan kandungan protein kasar daun kacang tanah jika dibandingkan dengan dosis penambahan Enterobacter  cloacae WPL  111  0%  (P0) sebagai  kontrol.  Kandungan  protein  kasar  yang tinggi  terdapat  pada  dosis  15%  (P3)  dengan nilai  22,2500%  yang  tidak  berbeda  nyata dengan  perlakuan  pemberian  dosis  10%  (P2) dan pemberian dosis 20% (P4). Apabila dilihat dari
efisiensi penggunaan Enterobacter cloacae WPL 111  yang  tepat  adalah  dosis    10%  (P2), mengingat  bahwa  dosis  10%  (P2)  telah  mampu meningkatkan kandungan protein kasar menjadi 22,0000%  dengan  memberikan  nilai  protein kasar  yang  tidak  berbeda  nyata  dengan pemberian  dosis  yang  lebih  tinggi  yaitu  15% (P3)  yang  dapat  meningkatkan  kandungan protein kasar menjadi 22,2500% dan pemberian dosis  20%  (P4)  yang  dapat  meningkatkan kandungan protein kasar menjadi 21,7500%.
Perkembangan dari mikroba tergantung pada karbon yang tersedia, dengan meningkatnya  jumlah  mikroba  tersebut  maka terjadi  kompetisi  diantara  mikroba  untuk mendapatkan  karbon,  sehingga  ketersedian karbon  menjadi  faktor  pembatas  (Rifqiyah, 2005 dalam Rachmasari, 2011). Pada perlakuan P2 (10%) mendapatkan hasil protein kasar yang tinggi  dan  dikatakan  sebagai  dosis  yang  efisien karena pada dosis ini mikroba dapat memperoleh  sumber  nutrisi  dengan  cukup dibandingkan  dengan  perlakuan  P3  (15%)  dan P4  (20%)  yang  tidak  berbeda  nyata  dengan  P2 (10%)  karena  dengan  meningkatnya  jumlah mikroba  dapat  terjadi  kompetisi  diantara mikroba untuk mendapatkan nutrisi.
Bakteri Enterobacter  cloacae WPL 111  merupakan  mikroba  yang  merupakan protein  sel  tunggal  yang  dalam  tubuhnya mengandung  nitrogen.  Jumlah  koloni  mikroba yang  bertambah  selama  prosese  fermentasi secara  tidak  langsung  dapat  meningkatkan kandungan  protein  kasar  dari  suatu  bahan karena  mikroba  merupakan  sumber  protein  sel tunggal  (Wuryantoro,  2006 dalam Priskila, 2007).  Menurut  Sumarsih  (2009)  protein  sel tunggal  merupakan  istilah  yang  digunakan untuk  protein  kasar  murni    yang  berasal  dari mikroorganisme  bersel  satu  atau  banyak  yang sederhana  seperti  bakteri,  khamir,  jamur, ganggang  dan  protozoa.  Mikroba  menghasilkan enzim, Enterobacter cloacae WPL 111 menghasilkan  enzim  selulase  yang  secara  tidak langsung dapat meningkatkan kandungan protein  kasar  pada  daun  kacang  tanah  karena
enzim merupakan protein. Berdasarkan hasil penelitian fermentasi daun  kacang  tanah  dengan Enterobacter cloacae WPL 111 menunjukkan bahwa penambahan Enterobacter  cloacae WPL  111 dengan dosis 5% (P1) memberikan hasil penurunan  serat  kasar  yang  baik  yaitu 29,0000%  namun  tidak  berbeda  nyata  dengan dosis 20% (P4) yaitu 30,0000%.
Bakteri yang digunakan dalam fermentasi  ini  adalah Enterobacter  cloacae WPL  111  dengan  kepadatan  2,22  Skala  Mc Farland  (6.66  x  108  CFU/ml).  Penurunan  serat kasar  pada  penelitian  ini  disebabkan  oleh
Enterobacter cloacae WPL 111 yang merupakan  bakteri  selulolitik  yang  dapat memproduksi  enzim  selulase.  Enzim  selulase merupakan  enzim  kompleks  yang  terdiri  dari endoselulose  dan  eksoselulose.  Enzim  ini  akan memecah  selulosa  menjadi  selobiosa.  Enzim yang mendegradasi selulosa yaitu endoglukanase  /  karboksil  metal  sululase  (endo –  1,4  –  β  –  glukanase),  eksoglukanase  / selobiohidrolase  (ekso  –  1,4  –  β  –  glikanase) dan  selobiase  (β  –  glukosidase)  (Hardjo  dkk.,
1989; Schlege; dan Schmidt, 1994). Endoglukanase  memecah  unit  gukosil  dari selulo-oligosakarida/selulodekstrin. Eksoglukanase  memecah  unit  gukosil  dari selulo-oligosakarida dengan melepaskan selobiosa,  kemudian  selobiase  menghidrolisis selobiosa  dan  oligosakarida  menjadi  glukosa (Hardjo dkk., 1989).

## Kesimpulan
Kesimpulan pada penelitian ini adalah : pemberian Enterobacter  cloacae WPL  111 dapat  meningkatkan  kandungan  protein  kasar pada  daun  kacang  tanah  yang  difermentasi dengan dosis optimal 10%. Pemberian Enterobacter    cloacae WPL  111  dapat menurunkan  kandungan  serat  kasar  pada  daun kacang  tanah  yang  difermentasi  dengan  dosis optimal  5%. Dosis  yang  disarankan  untuk menurunkan kandungan serat kasar dan meningkatkan  kandungan  protein  kasar  pada daun  kacang  tanah  yang  difermentasi  adalah 10%.  Melakukan  penelitian  lebih  lanjut  dengan lama  waktu  fermentasi  yang  berbeda    untuk mengetahui  pengaruh  lama  fermentasi  terhadap prningkatan  kandungan  protein  kasar  dan penurunan  serat  kasar  pada  fermentasi  daun kacang tanah. Melakukan penelitian lebih lanjut yang  mengarah  kepada  aplikasi  langsung terhadap  terapan  pemanfaatan  daun  kacang tanah  fermentasi  pada  ikan  herbivore  untuk melihat  kualitas  pakan  secara  kimiawi,  fisika dan  biologis  yang  di  dalamnya  meliputi
kecernaan pakan dan pertumbuhan.

## Daftar Pustaka
Handajani,  H  dan  W.  Wahju.  2010.    Nutrisi Ikan. UMM Press. Malang.  hal 57-78. Hardjo,  S.,  N.S.  Indrasari.,  dan  T  .    Bantacut. 1989.  Biokonversi:    Pemanfaatan Limbah  Industri    Pertanian.  Pusat Antar  Universitas.    Institut  Pertanian Bogor. Bogor.
Hidayat, N.,M,Padaga dan  S.   Suhartini.  2006. Mikrobiologi  Industri.    Andi  Offset. Yogyakarta. hal  15-31.
Kusriningrum.  2010.  Perancangan    Percobaan. Airlangga University  Press.  Surabaya. hal 172.
Muis,  A.,  C.  Khairani.,  Sukarjo  dan    Y.P. Rahardja.  2008.  Petunjuk    Teknis
Teknologi  Pendukung    Pengembangan
Agribisnis  Si  Desa    PAMI.  Badan
Penelitian dan Pengembangan Pertanian. Balai  Pengkajian Teknologi Pertanian.  Sulawesi Tengah. Hal 44. Murni,  R.,  Suparjo.,  Akmal  dan  B.L.    Ginting. 2008. Buku Ajar Teknologi Pemanfatan  Limbah    Untuk  Pakan. Laboratorium Makanan Ternak Fakultas    Peternakan.  Universitas Jambi. hal  28.
Priskila,  F.  2007.  Pengaruh  penggunaan Kambucha Terhadap Protein Kasar dan Serat  Kasar  pada  Fermentasi  Daun Talas.  Fakultas  Kedokteran  Hewan
Universitas Airlangga. Surabaya. Rokhmani,  S.  2008.  Peningkatan  Nilai    Gizi Bahan  dari  Limbah  Pertanian    Melalui Fermentasi Lokakarya Nasional Potensi  dan  Peluang    Pengembangan Usaha    Agribisnis    Kelinci.  Balai Penelitian Ternak.  Bogor. hal 15.
Schlegel,  H.G.  dan  K.  Scuhmidt.  1994.
Mikrobiologi  Umum.  Gajah  Mada University Press. Yogyakarta. hal  468- 505.
Sumarsih,  S.  2009.  Diktat  Kuliah    Mikrobiolog Dasar. UPN press.  Yogyakarta.
Widiastuti, R.R. 2007. Formulasi Pakan  Buatan dengan  Teknologi    Fermentasi  pada Budidaya  Ikan    Nila  (Oreochromis niloticus  Linn).    Jurusan  SITH-ITB. Bandung. hal  19.