© 2021 Penulis. Dibawah lisensi CC BY-SA 4.0. Ini adalah artikel Akses Terbuka yang didistribusikan di bawah ketentuan Creative Commons Attribution (CC BY), yang mengizinkan penggunaan, distribusi, dan reproduksi tanpa batas dalam media apa pun, selama penulis dan sumber aslinya disebutkan. Tidak diperlukan izin dari penulis atau penerbit.

## Journal of Experimental and Clinical Pharmacy (JECP)
Doi: 10.52365/jecp.v1i2.213 http://jurnal.poltekkesgorontalo.ac.id/index.php/JECP/
2021, 1(2), 56-71
Research Article

## PENDAHULUAN
Penyakit  infeksi  adalah  salah  satu  masalah  kesehatan  yang paling  utama  di  negara-negara  berkembang  termasuk  Indonesia. Penyakit infeksi ini dapat disebabkan oleh bakteri gram positif
Tinta  cumi-cumi  ( Loligo  pealeii )  diketahui  mengandung  melanin  yang memiliki  potensi  sebagai  antibakteri.  Penelitian  ini  dilakukan  untuk mengetahui  aktivitas  antibakteri  fraksi  etil  asetat  cumi-cumi  dalam menghambat  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  epidermidis dan Pseudomonas  aeruginosa .  Desain  penelitian  ini  merupakan  quasi eksperimental  dengan  metode  difusi  cakram  (Kirby-Bauer).  Adapun variasi  konsentrasi  tinta  cumi  ( Loligo  pealeii) dalam  penelitian  ini  yakni 32%,  35%, dan  38%  b/v.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  fraksi  etil asetat tinta cumi-cumi yang memiliki aktivitas daya hambat terbesar yaitu konsentrasi  38%  dengan  rerata  zona  hambat  terhadap  pertumbuhan bakteri Staphylococcus epidermidis sebesar 23,02 mm dengan kategori sangat kuat dan terhadap pertumbuhan bakteri Pseudomonas aeruginosa sebesar 12,2 mm dengan kategori kuat, dan secara statistik pada uji One Way Anova menunjukkan  hasil  signifikan  dengan  nilai  signifikansi  p<0,05. Berdasarkan hasil tersebut dapat disimpulkan bahwa fraksi etil asetat tinta cumi-cumi  memiliki  aktivitas  penghambatan  terhadap  pertumbuhan bakteri Staphylococcus  epidermidis dan Pseudomonas  aeruginosa dengan konsentrasi yang paling efektif dari fraksi etil asetat tinta cumi-cumi yaitu konsentrasi 38%.
Kata  kunci :  Antibakteri,  Pseudomonas  aeruginosa,  Staphylococcus epidermidis, Tinta cumi-cumi.

## ABSTRAK
Uji Aktivitas Fraksi Etil Asetat Tinta Cumi-Cumi ( Loligo pealeii ) terhadap Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus epidermidis dan Pseudomonas aeruginosa
Hasnita 1 , Muhammad Yusuf 1 *, Andi Meinar Dwi Rantisari 1
1 Program Studi Sarjana Farmasi Universitas Megarezky, Makassar, Indonesia

## INFO ARTIKEL
Dikirim : 3 Mar 2021 Revisi : 20 Mei 2021 Diterima : 17 Jul 2021
*Corresponding Author:
Muhammad Yusuf, Program Studi Sarjana Farmasi Universitas Megarezky, Makassar,
Indonesia,
Telp/Mail: +62-852-4166-6469 yusuf.sukarta@gmail.com
seperti Staphylococcus  epidermidis dan  bakteri  gram  negatif  seperti
Pseudomonas aeruginosa (Noor et al., 2016).
Staphylococcus  epidermidis dan Pseudomonas  aeruginosa merupakan bakteri  yang  dapat  menghasilkan  biofilm  yang  menyebabkan  infeksi nasokomial  atau Healthcare  Associated  Infections (HAIs).  Berdasarkan prevalensi infeksi nosokomial rumah sakit di dunia lebih dari 1,4 juta atau sedikitnya  9%  pasien  rawat  inap  di  seluruh  dunia  mendapatkan  infeksi nosokomial. Pada tahun 2013 Departemen Kesehatan RI, telah melakukan survey  di  10  Rumah  Sakit  Umum  Pendidikan  dan  diperoleh  angka  yang cukup tinggi yaitu 6-16% angka infeksi nosokomial dengan rata-rata 9,8%. Survey  yang  telah  dilakukan  di  10  rumah  sakit  di  DKI  Jakarta menunjukkan  bahwa  pasien  rawat  inap  yang  terinfeksi  selama mendapatkan perawatan di rumah sakit yaitu sebanyak 9,8%  (Depkes RI, 2013; Riani & Syafriani, 2019; Sophian & Muindar 2021).
Indonesia  terdiri  dari  beberapa  pulau  salah  satunya  adalah Pulau Lae-Lae yang merupakan satu pulau kecil yang termasuk dalam kawasan wisata  pulau  di  Kota  Makassar, Sulawesi  Selatan. Mata  pencaharian penduduk di Pulau Lae-Lae yaitu berprofesi sebagai nelayan (Lindawanti, 2017).  Sehingga  hasil  laut  yang  didapatkan  oleh  nelayan  tersebut  bisa dimanfaatkan  sebagai  pengobatan.  Salah  satu  hasil  laut  yang  memiliki khasiat farmasetika yaitu cumi-cumi ( Loligo sp) (Rahayu, Pangemanan, and Mintjelungan 2019). Cumi-cumi ( Loligo sp) sangat efektif untuk pengobatan penyakit  dan  juga  pengembangan  produksinya  sangat  potensial, mengingat sumber daya yang berada di Indonesia masih cukup besar dan belum  sepenuhnya  dimanfaatkan  apalagi  cumi-cumi  ( Loligo sp)  dapat dijual dengan harga yang tinggi (Permana, Mudzakir, and Fitri 2015). Cumi  –  cumi  memiliki  karakteristik  spesifik  yaitu  adanya  kantong tinta yang kaya dengan melanin  (Derby, 2014; Vioni et al ., 2018). Melanin atau pigmen hitam merupakan melanoprotein yang mengandung 10-15 % asam amino esensial dan  non  esensial serta polisakarida sulfat   (Luo dan Liu, 2013; Vioni et al ., 2018). Tinta yang dihasilkan oleh cumi-cumi ( Loligo sp) ini yang mengandung melanin dan protein ini berkhasiat sebagai anti tumor,  untuk  membunuh  sel  kanker,  antioksidan,  anti  radiasi,  anti rotavirus  dan  antibakteri  (Mangindaan et  al .,  2019).  Walaupun  memiliki banyak  kandungan  yang  bermanfaat  tetapi  tinta  cumi  ini  tidak dimanfaatkan atau dibuang karena dianggap limbah yang memiliki warna hitam dan menghasilkan yang rasa amis (Vioni et al. 2018).
Beberapa  penelitian  sebelumnya  yang  pernah  dilakukan  yaitu  uji daya  hambat  ekstrak  tinta  cumi-cumi (Loligo sp ) terhadap  pertumbuhan bakteri Staphylococcus  aureus telah  dilaporkan  oleh  Rahayu et  al (2019)  Di Manado  yang  menyatakan  bahwa  ekstrak  tinta  cumi-cumi  ( Loligo sp) memiliki  daya  hambat  terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus. Penelitian
lainnya yang dilakukan Sari et al (2019) dengan judul The Effectiveness of Melanin  from  Squid  Ink  ( Loligo sp)  as  Antibacterial  Agent  Against Escherichia  coli and Listeria  monocytogenes menyatakan  bahwa  konsentrasi paling  efektif  melanin  dari  tinta  cumi  sebagai  agen  antibakteri  terhadap Escherichia coli dan Listeria  monocytogenes adalah 32%.
Berdasarkan  latar  belakang  tersebut  maka  peneliti  tertarik  untuk melakukan penelitian mengenai Uji Aktivitas Fraksi Etil Asetat inta Cumi- Cumi  ( Loligo pealeii )  Terhadap  Pertumbuhan  Bakteri Staphylococcus epidermidis dan Pseudomonas aeruginosa.

## MATERIAL DAN METODE

## Material
Desain penelitian ini adalah quasi eksperimental menggunakan fraksi etil asetat tinta cumi-cumi ( Loligo pealeii ) dengan metode Disc Diffusion (Tes Kirby-Bauer) menggunakan  paper  disc  untuk  menguji  aktivitas  fraksi  etil asetat  tinta  cumi-cumi  ( Loligo  pealeii )  sebagai antibakteri Staphylococcus epidermidis ,  bakteri  uji Pseudomonas  aeruginosa ,  tinta  cumi-cumi  ( Loligo pealeii ), etil asetat, kapas steril, kertas label, medium MHA ( Mueller Hinton
Agar ), medium NA ( Nutrient agar ), NaCl 0,9%, tisu dan paper disc .

## Metode
Pengambilan Sampel
Sampel yang berupa cumi-cumi ( Loligo pealeii ) segar diambil di Pulau Lae-Lae Kota Makassar, Sulawesi Selatan.

## Fraksinasi Tinta Cumi-Cumi
Tinta  cumi-cumi  didapatkan  dari  cumi-cumi  segar  ( Loligo  pealeii ) sebanyak  15  kg  yang  diperoleh  dari  nelayan  dicuci  dengan  air  mengalir kemudian dilakukan pembedahan untuk mengeluarkan kantung tintanya.
Cumi-cumi  diletakkan  secara  postero-ventral  dan  dibelah  menggunakan gunting  bedah.  saluran  pencernaan  dipisahkan  dengan  Saluran  tinta  dan organ  lainnya.  Untuk  mengeluarkan  kantung  tinta  cumi  saluran  tinta dijepit  menggunakan  pinset  dan  kantung  tinta  dikeluarkan  dari  tubuh cumi-cumi, kemudian saluran tinta dipotong menggunakan gunting bedah steril.  Hasil  kantung  tinta  yang  diperoleh  ditampung  dalam  botol  steril berwarna coklat.
Fraksinasi tinta cumi-cumi dilakukan melalui pemisahan fase larutan menggunakan  corong  pisah.  Untuk  mengeluarkan  tintanya  kantung  tinta diremas secara perlahan. sebanyak 40 ml Tinta cumi-cumi beserta pelarut
masing-masing  sebanyak  250  ml  etil  asetat  dan  aquadest  dimasukkan  ke dalam  corong  pisah,  lalu  dikocok  dengan  kuat.  Setelah  itu  corong didiamkan  agar  terjadi  pemisahan  dua  fase  larutan  yang  berbeda,  yakni fase larutan etil asetat dan fase larutan air. Tinta cumi-cumi pada fase larut etil  asetat  dan  fase  larut  air  dipisahkan  dan  dievaporasi  menggunakan rotary vacuum evaporator pada suhu 60 0 c sehingga didapatkan ektrak kental sebanyak  22  gram  untuk  fase  etil  asetat  dan  14  gram  untuk  fase  air  dan selanjutnya ekstrak tersebut digunakan dalam pengujian antibakteri.

## Sterilisasi Alat
Menyiapkan  alat  dan  bahan  yang  digunakan.  Sebelum  dilakukan penelitian  semua  alat  yang  akan  digunakan  disterilkan  terlebih  dahulu. Untuk alat-alat gelas disterilkan dalam oven pada suhu 170 0 C selama ± 2 jam,  sedangkan  untuk    jarum  ose  dan  pinset  disterilkan  dengan  cara dibakar diatas api langsung serta media dan alat yang mempunyai ukuran atau  berskala  menggunakan  sterilisasi  basah  pada  autoclaf  dengan  suhu 121 0 C selama 15 menit .

## Pembuatan Kontrol
Kontrol positif yang digunakan adalah injeksi Cefoperazone sodium 1000 mg sebanyak 1 ml. Kontrol negatif yang digunakan adalah Aquadest steril sebanyak 1 ml.

## Pembuatan Larutan Uji
Larutan uji tinta cumi-cumi ( Loligo pealeii ) dalam berbagai konsentrasi dengan cara sebagai berikut
Larutan uji 32% Ditimbang  0,32  gram  ekstrak  tinta  cumi-cumi  ( Loligo pealeii )  kemudian dilarutkan dengan Aquadest steril sebanyak 1 ml.

## Larutan Uji 35%
Ditimbang  0,35  gram  ekstrak  tinta  cumi-cumi  ( Loligo pealeii )  kemudian dilarutkan dengan 1 ml Aquadest steril.

## Larutan Uji 38%
Ditimbang  0,38  gram  ekstrak  tinta  cumi-cumi  ( Loligo pealeii )  kemudian dilarutkan dengan Aquadest steril sebanyak 1 ml.

## Pembuatan Media Agar Miring
Nutrient  Agar (NA)  sebanyak  0,23  gram  dilarutkan  dalam  10  ml  air suling  (23/1000)  menggunakan  erlenmeyer  kemudia  dihomogenkan dengan batang pengaduk diatas water bath hingga mendidih. Dituangkan
Sebanyak 5 ml kedalam 2 buah tabung reaksi yang sudah disterilkan dan ditutup dengan kapas serta dilapisi dengan aluminium foil. Media tersebut disterilkan kedalam autoklaf pada suhu 121 0 C selama 15 menit, kemudian dibiarkan  dengan  posisi  kemiringan  30 0 pada  suhu  ruangan  selama  ±  30 menit  sampai  media  memadat.    Media  ini  digunakan  pada  inokulasi bakteri (Muljono, and Manampiring 2016).

## Inokulasi Bakteri Media Agar Miring
Diambil masing-masing satu koloni bakteri Staphylococcus epidermidis dan Pseudomonas  aeruginosa menggunakan  jarum  ose  steril.  Ditanamkan pada media agar miring kemudian gores secara zig-zag diatas permukaan media  agar  miring,  mulai  dari  ujung  sudut  bawah  sampai  sudut  atas. Diinkubasi pada  inkubator  pada suhu  37 0 C selama  1x24  jam  (Farid et  al .,
2020).

## Pembuatan Suspensi Bakteri
Bakteri Staphylococcus  epidermidis  dan  Pesudomonas  aeruginosa yang telah  diinokulasi  masing-masing  dibuat  suspensi,  diambil  dengan menggunakan  jarum  ose steril  lalu  dimasukkan pada  tabung  reaksi yang berisi NaCl 0,9% kemudian dihomogenkan (Yusuf et al ., 2020).

## Pembuatan Media Pengujian MHA
Timbang Mualler  Hinton  Agar sebanyak  18,24  gram.  Masukkan kedalam  erlenmeyer,  dan  larutkan  dengan  480 ml Aquadest steril.Dihkan diatas  water  bath  sambil  diaduk-aduk.  Kemudian  diangkat  dan  tutup erlenmeyer  dengan  kapas  yang  dilapisi  dengan  aluminium  foil.  Sterilkan dalam autoklaf pada suhu 121 0 C selama 15 menit . Setelah  steril  diangkat  dari  autoklaf  dengan  hati-hati.  Kemudian media dituang ke dalam cawan petri sebannyak 20 ml percawan(Ngantung 2016).
Uji  Aktivitas  Antibakteri  Secara  In-Vitro  Terhadap  Bakteri Staphylococcus epidermidis.
Disiapkan  cawan  petri,  kemudian  dituang  suspensi  bakteri  uji Staphylococcus  epidermidis kedalam  cawan  petri  setelah  itu  medium  MHA dituang secara aseptis pada cawan petri sebanyak 20 ml sambil digoyang- goyangkan  secara  teratur  hingga  terbentuk  lapisan  yang  homogen  dan dibiarkan satu media yang memadat dalam cawan petri.  Kemudian paper disc direndam kedalam larutan bahan uji ekstrak tinta cumi-cumi dengan konsentrasi 32% b/v, 35% b/v, 38% b/v dan kontrol positif berisi sediaan antibiotik Cefoperazone  sodium serta  kontrol  negatif  yang  berisi    akuadest steril  kemudian  didiamkan  selama  30    menit. Paper  disc yang  telah direndam  didalam  masing-masing  uji  sampel  dan  kontrol  pembanding,
kemudian diletakkan pada permukaan media MHA yang telah memadat. Diletakan secara aseptik menggunakan pinset steril. Setelah itu cawan petri yang sudah berisi uji sampel dan control diinkubasi dalam inkubator pada suhu 37 0 C selama 2x24 jam. Selanjutnya diameter daerah bening disekitar paper disc diukur menggunakan jangka sorong.

## Uji Aktivitas Antibakteri Terhadap Bakteri Pseudomonas aeruginosa
Disiapkan  cawan  petri,  kemudian  dituang  suspensi  bakteri  uji Pseudomonas  aeruginosa kedalam  cawan  petri  dan  dituang  secara  aseptis pada  medium  MHA  sebanyak  20  ml  sambil  digoyang-goyang  secara teratur sehingga terbentuk lapisan yang homogen dan dibiarkan memadat. Kemudian paper  disc direndam  kedalam  larutan  bahan  uji  ekstrak  tinta cumi-cumi  dengan  konsentrasi  32%  b/v,  35%  b/v,  38%  b/v  dan  kontrol positif  berisi  sediaan  antibiotik Cefoperazone  sodium serta  kontrol  negatif yang berisi  Aquadest steril kemudian didiamkan selama 30  menit. Paper disc yang  telah  direndam  dimasing-masing  bahan  uji  dan  kontrol pembanding  diletakkan  pada  permukaan  media  MHA  yang  telah memadat  secara  aseptik  dengan  menggunakan  pinset  steril.  Setelah  itu cawan petri diinkubasi dalam inkubator pada suhu 37 0 C selama 2x24 jam. Selanjutnya  diameter  daerah  bening  disekitar paper  disc diukur menggunakan jangka sorong.

## Analisis Data
Data yang diperoleh dalam penelitian ini yaitu berdasarkan diameter zona  hambat  diperoleh  uji  normalitas  data  menggunakan Shapiro-Wilk , selanjutnya dianalisis statistik parametrik menggunakan One Way ANOVA dan dilanjutkan dengan uji lanjutan post hoc test LSD.

## HASIL
Hasil  pengukuran  zona  hambat  tinta  cumi-cumi  fraksi  etil  asetat terhadap  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  epidermidis dan Pseudomonas aeruginosa dapat dilihat pada tabel berikut:
Tabel 1. Hasil pengukuran diameter zona hambat fraksi etil asetat tinta cumi-cumi ( Loligo  pealeii )  terhadap  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  epidermidis yang diinkubasi selama 1x24 jam Kelompok Diameter Zona Hambat Rata-rata (mm) Respon Zona Hambat R1 (mm) R2 (mm) R3 (mm) I 32,45 32,60 29,90 31,65 Sangat kuat II 0 0 0 0 Tidak ada daya hambat
III 9,20 12,10 12,70 11,33 Kuat IV 13,40 11,85 13,35 12,87 Kuat V 21,60 23,65 23,80 23,02 Sangat Kuat Sumber: Data Primer Agustus 2020
Keterangan: I  =  Kontrol  positif  ( Cefoperazone  sodium );    II  =  Kontrol  negatif (Aquadest steril); III = Fraksi etil asetat tinta cumi-cumi ( Loligo pealeii ) konsentrasi 32%;  IV  =  Fraksi  etil  asetat  tinta  cumi-cumi  ( Loligo  pealeii )  konsentrasi  35%;  V  = Fraksi etil asetat tinta cumi-cumi ( Loligo pealeii ) konsentrasi 38% ; R1 = Replikasi 1; R2 = Replikasi 2; R3 = Replikasi 3.
Gambar  1. Hasil  pengukuran diameter  zona  hambat fraksi  etil  asetat  tinta  cumi- cumi ( Loligo pealeii ) terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus epidermidis yang diinkubasi selama 1x24 jam
Keterangan: I  =  Kontrol  positif  ( Cefoperazone  sodium );    II  =  Kontrol  negatif (Aquadest steril); III = Fraksi etil asetat tinta cumi-cumi ( Loligo pealeii ) konsentrasi 32%;  IV  =  Fraksi  etil  asetat  tinta  cumi-cumi  ( Loligo  pealeii )  konsentrasi  35%;  V  = Fraksi etil asetat tinta cumi-cumi ( Loligo pealeii ) konsentrasi 38% ; R1 = Replikasi 1;
R2 = Replikasi 2; R3 = Replikasi 3.
Tabel 2. Hasil pengukuran diameter zona hambat fraksi etil asetat tinta cumi-cumi ( Loligo  pealeii )  terhadap  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  epidermidis yang diinkubasi selama 2x24 jam Kelompok Diameter Zona Hambat Rata-rata (mm) Respon Zona Hambat R1 (mm) R2 (mm) R3 (mm) I 32,45 32,60 29,90 31,65 Sangat Kuat II 0 0 0 0 Tidak ada daya hambat III 8,80 12,10 12,70 11,2 Kuat IV 13,40 11,85 13,35 12,87 Kuat V 21,60 23,65 23,80 23,02 Sangat kuat Sumber: Data Primer Agustus 2020 Keterangan: I  =  Kontrol  positif  ( Cefoperazone  sodium );    II  =  Kontrol  negatif (Aquadest steril); III = Fraksi etil asetat tinta cumi-cumi ( Loligo pealeii ) konsentrasi 32%;  IV  =  Fraksi  etil  asetat  tinta  cumi-cumi  ( Loligo  pealeii )  konsentrasi  35%;  V  = Fraksi etil asetat tinta cumi-cumi ( Loligo pealeii ) konsentrasi 38% ; R1 = Replikasi 1;
R2 = Replikasi 2; R3 = Replikasi 3.
Gambar 2. Hasil pengukuran diameter zona hambat fraksi etil asetat tinta cumi-cumi  ( Loligo  pealeii )  terhadap  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus epidermidis yang diinkubasi selama 2x24 jam
Keterangan: I  =  Kontrol  positif  ( Cefoperazone  sodium );    II  =  Kontrol  negatif (Aquadest steril); III = Fraksi etil asetat tinta cumi-cumi ( Loligo pealeii ) konsentrasi 32%;  IV  =  Fraksi  etil  asetat  tinta  cumi-cumi  ( Loligo  pealeii )  konsentrasi  35%;  V  = Fraksi etil asetat tinta cumi-cumi ( Loligo pealeii ) konsentrasi 38% ; R1 = Replikasi 1; R2 = Replikasi 2; R3 = Replikasi 3.
Tabel 3. Hasil pengukuran diameter zona hambat fraksi etil asetat tinta cumi-cumi ( Loligo  pealeii )  terhadap  pertumbuhan  bakteri Pseudomonas  aeruginosa yang diinkubasi selama 1x24 jam Kelompok Diameter Zona Hambat Rata-rata (mm) Respon Zona Hambat R1 (mm) R2 (mm) R3 (mm) I 34,40 33,05 31,70 33,05 Sangat Kuat II 0 0 0 0 Tidak ada daya hambat III 4,30 1,85 3,40 3,18 Lemah IV 5,95 5,50 4,10 5,18 Lemah V 6,85 23,55 6,20 12,2 Kuat Sumber: Data Primer Agustus 2020
Keterangan: I  =  Kontrol  positif  ( Cefoperazone  sodium );    II  =  Kontrol  negatif (Aquadest steril); III = Fraksi etil asetat tinta cumi-cumi ( Loligo pealeii ) konsentrasi 32%;  IV  =  Fraksi  etil  asetat  tinta  cumi-cumi  ( Loligo  pealeii )  konsentrasi  35%;  V  = Fraksi etil asetat tinta cumi-cumi ( Loligo pealeii ) konsentrasi 38% ; R1 = Replikasi 1;
R2 = Replikasi 2; R3 = Replikasi 3.
Grafik  3. Hasil  pengukuran  diameter  zona  hambat  fraksi  etil  asetat  tinta cumi-cumi  ( Loligo  pealeii )  terhadap  pertumbuhan  bakteri Pseudomonas aeruginosa yang diinkubasi selama 1x24 jam
Keterangan: I  =  Kontrol  positif  ( Cefoperazone  sodium );    II  =  Kontrol  negatif (Aquadest steril); III = Fraksi etil asetat tinta cumi-cumi ( Loligo pealeii ) konsentrasi 32%;  IV  =  Fraksi  etil  asetat  tinta  cumi-cumi  ( Loligo  pealeii )  konsentrasi  35%;  V  = Fraksi etil asetat tinta cumi-cumi ( Loligo pealeii ) konsentrasi 38% ; R1 = Replikasi 1;
R2 = Replikasi 2; R3 = Replikasi 3.
Tabel  4. Hasil  pengukuran  diameter  zona  hambat  fraksi  etil  asetat  tinta cumi-  cumi  ( Loligo  pealeii )  terhadap  pertumbuhan  bakteri Pseudomonas aeruginosa yang diinkubasi selama 2x24 jam Kelompok Diameter Zona Hambat Rata-rata (mm) Respon Zona Hambat R1 (mm) R2 (mm) R3 (mm) I 34,40 34,30 33,20 33,97 Sangat Kuat II 0 0 0 0 Tidak ada daya hambat III 4,30 1,85 3,40 3,18 Lemah IV 5,95 5,50 4,10 5,18 Lemah V 6,85 23,55 6,20 12,2 Kuat Sumber: Data Primer Agustus 2020 Keterangan: I  =  Kontrol  positif  ( Cefoperazone  sodium );    II  =  Kontrol  negatif (Aquadest steril); III = Fraksi etil asetat tinta cumi-cumi ( Loligo pealeii ) konsentrasi 32%;  IV  =  Fraksi  etil  asetat  tinta  cumi-cumi  ( Loligo  pealeii )  konsentrasi  35%;  V  = Fraksi etil asetat tinta cumi-cumi ( Loligo pealeii ) konsentrasi 38% ; R1 = Replikasi 1;
R2 = Replikasi 2; R3 = Replikasi 3.
Grafik  4. Hasil  pengukuran  diameter  zona  hambat  fraksi  etil  asetat  tinta cumi-cumi  ( Loligo  pealeii )  terhadap  pertumbuhan  bakteri Pseudomonas aeruginosa yang diinkubasi selama 2x24 jam
Keterangan: I  =  Kontrol  positif  ( Cefoperazone  sodium );    II  =  Kontrol  negatif (Aquadest steril); III = Fraksi etil asetat tinta cumi-cumi ( Loligo pealeii ) konsentrasi 32%;  IV  =  Fraksi  etil  asetat  tinta  cumi-cumi  ( Loligo  pealeii )  konsentrasi  35%;  V  = Fraksi etil asetat tinta cumi-cumi ( Loligo pealeii ) konsentrasi 38% ; R1 = Replikasi 1; R2 = Replikasi 2; R3 = Replikasi 3.

## PEMBAHASAN
Infeksi  nasokomial  merupakan  infeksi  yang  terjadi  di  rumah  sakit oleh  kuman  yang  berasal  dari  rumah  sakit.  Bakteri Staphylococcus epidermidis dan Pseudomonas  aeruginosa merupakan  bakteri  yang  dapat mengahasilkan biofilm yang menyebabkan infeksi nasokomial. Tinta cumi- cumi  mengandung  melanin  yang  berkhasiat  sebagai  antibakteri.  Tujuan penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  aktivitas  antibakteri  fraksi  etil asetat  tinta  cumi-cumi  ( Loligo  pealeii )  dalam  menghambat  pertumbuhan bakteri Staphylococcus  epidermidis dan Pseudomonas  aeruginosa dan  untuk mengetahui konsentrasi fraksi etil asetat tinta cumi-cumi ( Loligo pealeii ) 32
%,  35  %,  dan  38  %  yang  memiliki  aktivitas  daya  hambat  terbesar  pada pertumbuhan bakteri Staphylococcus epidermidis dan Pseudomonas aeruginosa.
Pada penelitan ini digunakan metode Kirby-Bauer dengan pengujian dilakukan dengan cara disiapkan cawan petri kemudian dituang suspensi bakteri uji kedalam cawan petri setelah itu medium MHA dituang secara aseptis  pada  cawan petri  sebanyak  20 ml sambil  digoyang-goyang secara teratur  hingga  terbentuk  lapisan yang  homogen  dan  dibiarkan  memadat. Setelah itu paper disc direndam kedalam larutan uji ekstrak tinta cumi-cumi fraksi etil asetat dengan konsentrasi 32%, 35% dan 38% serta kontrol positif Cefoperazone  sodium dan  kontrol  negatif  Aquadest  steril  selama  30  menit.
Setelah  itu paper  disc yang  telah  direndam  diletakkan  diatas  permukaan media  MHA  yang  telah  memadat  secara  aseptik  dengan  menggunakan
pinset steril. Setelah itu cawan petri diinkubasi dalam inkubator pada suhu 37 0 C  selama  2x24  jam.  Setelah  dilakukan  inkubasi,  kemudian  dilakukan pengamatan  dengan  melihat  terbentuknya  hambatan  zona  bening  dan dilakukan pengukuran  diameter  zona  hambat  yang  diukur  dalam satuan millimeter (mm) menggunakan jangka sorong. Selanjutnya kekuatan zona hambat  dikategorikan  menurut  David  Stout  sebagai  berikut:  a).  zona hambat sangat kuat yaitu  ≥ 20 mm; b). zona hambat kuat yaitu 10 – 20 mm; c). zona hambat sedang yaitu 5 – 10 mm dan zona hambat lemah yaitu ≤ 5 mm. (Alana, Sari, and Apridamayanti 2017).
Setelah  mengukur  diameter  zona  hambat  selanjutnya  dilakukan analisis data dengan melakukan uji normalitas data menggunakan Shapiro- wilk untuk  jumlah  subjek  ≤  50,  selanjutnya  dianalis  parametrik menggunakan One Way ANOVA dan dilanjutkan dengan uji lanjutan post hoc test LSD .
Pada tabel 1 dan grafik 1 mengenai hasil pengukuran diameter zona hambat  fraksi  etil  asetat  tinta  cumi-cumi  ( Loligo  pealeii )  terhadap pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  epidermidis yang  diinkubasi  selama 1x24  jam  dapat  dilihat  bahwa  pengujian  aktivitas  antibakteri  terhadap bakteri Staphylococcus  epidermidis fraksi  etil  asetat  memiliki  aktivitas antibakteri.  Hal  ini  ditandai  dengan  terbentuknya  zona  bening  disekitar paper disc yang telah diberi larutan fraksi etil asetat tinta cumi-cumi setelah diinkubasi selama 1x24 jam pada konsentrasi 32%, 35% dan 38 % masing- masing zona hambat sebesar 11,33 mm, 12,87 mm, 23,02 mm dan kontrol positif sebesar 31,65 mm serta kontrol negatif tidak ada zona hambat. Berdasarkan  uji  normalitas  menunjukkan  bahwa  data  berdistribusi normal sehingga dilanjutkan dengan uji Post Hoc LSD yang menunjukkan adanya perbedaan untuk bakteri Staphylococcus epidermidis yang diinkubasi selama  1x24  jam  dengan  nilai  signifikansi  0,000  (p<0,05)  dan  dapat disimpulkan  bahwa  terdapat  perbedaan  antara  kontrol  positif  dengan kontrol  negatif,  kontrol  positif  dengan  konsentrasi  32%,  kontrol  positif dengan konsentrasi  35%,  kontrol  positif  dengan konsentrasi  38%,  kontrol negatif  dengan konsentrasi  32%,  kontrol  negatif  dengan konsentrasi  35%, kontrol  negatif  dengan    konsentrasi  38%,  konsentrasi  32%  dengan konsentrasi 38%, dan konsentrasi 35% dengan konsentrasi 38%.
Pada tabel 2 dan grafik 2 mengenai hasil pengukuran diameter zona hambat  fraksi  etil  asetat  tinta  cumi-cumi  ( Loligo  pealeii )  terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus epidermidis yang diinkubasi selama 2x 24 jam. Setelah dilakukan pengujian aktivitas antibakteri terhadap bakteri Staphylococcus  epidermidis fraksi  etil  asetat  tinta  cumi-cumi  ( Loligo  pealeii ) memiliki  aktivitas  antibakteri.  Hal  ini  dapat    ditandai  dengan  masih adanya zona bening disekitar paper disc yang telah diberi larutan fraksi etil asetat  tinta  cumi-cumi  ( Loligo  pealeii )  setelah  diinkubasi  selama  2x24  jam
pada konsentrasi 32%, 35% dan 38 % masing-masing zona hambat sebesar 11,2 mm, 12,87  mm, 23,02 mm dan kontrol positif sebesar 31,65 mm serta kontrol negatif tidak ada zona hambat.
Berdasarkan  uji  normalitas  menunjukkan  bahwa  data  berdistribusi normal sehingga dilanjutkan dengan uji Post Hoc LSD yang menunjukkan adanya perbedaan untuk bakteri Staphylococcus epidermidis yang diinkubasi selama  2x24  jam  dengan  nilai  signifikansi  0,000  (p<0,05)    dapat disimpulkan  bahwa  terdapat  perbedaan  antara  kontrol  positif  dengan kontrol  negatif,  kontrol  positif  dengan  konsentrasi  32%,  kontrol  positif dengan konsentrasi  35%,  kontrol  positif  dengan konsentrasi  38%,  kontrol negatif  dengan konsentrasi  32%,  kontrol  negatif dengan konsentrasi  35%, kontrol  negatif  dengan    konsentrasi  38%,  konsentrasi  32%  dengan konsentrasi 38%, konsentrasi 35% dengan konsentrasi 38%.
Perbedaan  konsentrasi  larutan  uji  yang  dimasukan  dapat mempengaruhi  besar  kecilnya  daya  hambat  yang  terbentuk  dimana semakin  besar  konsentrasi    yang  dimsuka  maka  semakin  banyak  pula komponen  zat  aktif  yang  terdapat  didalamnya  sehingga  daya  hambatan yang terbentuk juga berbeda-beda dan menjadi parameter keefektifan dari sampel uji dalam menghambat atau membunuh bakteri uji.
Dari  grafik  dapat  dilihat    bahwa  semakin  besar konsentrasi  ekstrak tinta  cumi-cumi  ( Loligo  pealeii )  maka  semakin  besar  pula  diameter  zona hambat  yang  dihasilkan.  Hal  ini  didasarkan  pada  kandungan  melanin yang terkandung dalam tiap konsentrasi yang berbeda (Wahyuni, 2018). Pada tabel 3 dan grafik 3 mengenai hasil pengukuran diameter zona hambat  fraksi  etil  asetat  tinta  cumi-cumi  ( Loligo  pealeii )  terhadap pertumbuhan bakteri Pseudomonas aeruginosa yang diinkubasi selama 1x24 jam.  Setelah  dilakukan  pengujian  aktivitas  antibakteri  terhadap  bakteri Pseudomonas aeruginosa fraksi larut etil asetat memiliki aktivitas antibakteri.
Hal ini dapat dilihat dengan terbentuknya zona bening disekitar paper disc yang  telah  diberi  larutan  fraksi  etil  asetat  tinta  cumi-cumi  setalah diinkubasi selama 1x24 jam pada konsentrasi 32%, 35% dan 38 % masing- masing  zona  hambat  sebesar  3,18  mm,  5,18  mm,  12,2  mm  dan  kontrol positif sebesar 33,05 mm sedangkan kontrol negatif tidak ada zona hambat. Berdasarkan  uji  normalitas  menunjukkan  bahwa  data  berdistribusi normal sehingga dilanjutkan dengan uji Post Hoc LSD yang menunjukkan adanya perbedaan untuk bakteri Pseudomonas  aeruginosa yang diinkubasi selama  1x24  jam  dengan  nilai  signifikansi  0,000<0,05  sehingga  dapat disimpulkan  bahwa  terdapat  perbedaan  antara  kontrol  positif  dengan kontrol  negatif,  kontrol  positif  dengan  konsentrasi  32%,  kontrol  positif dengan  konsentrasi  35%,  kontrol  positif  dengan  konsentrasi  38%,  nilai signifikansi  0,08<0,05  sehingga  dapat  disimpulkan  bahwa  terdapat perbedaan antara kontrol negatif dengan konsentrasi 38%, nilai signifikansi
0,034<0,05 sehingga dapat disimpulkan bahwa terdapat perbedaan antara konsentrasi 32% dengan konsentrasi 38%.
Pada tabel 4 dan grafik 4 mengenai hasil pengukuran diameter zona hambat  fraksi  etil  asetat  tinta  cumi-  cumi  ( Loligo  pealeii )  terhadap pertumbuhan bakteri Pseudomonas  aeruginosa yang diinkubasi selama 2 x 24  jam  dapat  dilihat  bahwa  setalah  diinkubasi  selama  2x24  jam  pada konsentrasi 32%, 35% dan  38 % masing-masing zona  hambat  sebesar 3,18 mm,  5,18  mm,  12,2  mm  dan  kontrol  positif  sebesar  33,97  mm  sedangkan kontrol negatif tidak ada zona hambat.
Berdasarkan  uji  normalitas  menunjukkan  bahwa  data  berdistribusi normal  sehingga  dilanjutkan  dengan  uji Post  Hoc LSD  untuk mengetahui apakah  seuatu  kelompok  memiliki  perbedaan  yang  signifikan  terhadap kelompok  lainnya.  Hasil  analisis  uji Post  Hoc LSD  pada  penelitian  ini menunjukkan  tanda  bintang  (*)  yang  artinya  semua  kelompok  memiliki perbedaan secara signifikan terhadap kelompok lain. Dari data tersebut uji Post  Hoc  LSD  yang  menunjukkan  adanya  perbedaan  untuk  bakteri Pseudomonas  aeruginosa yang  diinkubasi  selama  2x24  jam  dengan  nilai signifikansi  0,000  <  0,05  sehingga  dapat  disimpulkan  bahwa  terdapat perbedaan  antara  kontrol  positif  dengan  kontrol  negatif,  kontrol  positif dengan konsentrasi  32%,  kontrol  positif  dengan konsentrasi  35%,  kontrol positif dengan konsentrasi 38%, nilai signifikansi 0,07< 0,05 sehingga dapat disimpulkan  bahwa  terdapat  perbedaan  antara  kontrol  negatif  dengan konsentrasi 38%, nilai signifikansi 0,033<0,05 sehingga dapat disimpulkan bahwa  terdapat  perbedaan  antara  konsentrasi  32%  dengan  konsentrasi 38%.
Berdasarkan  hasil  pengamatan  menunjukkan  bahwa  melanin  dari tinta cumi-cumi zona hambatnya lemah sampai sangat kuat dan memiliki spektrum  yang  luas yang  dapat  menghambat pertumbuhan  bakteri  gram positif  dan  bakteri  gram  negatif  dengan  aktivitas  antibakteri  bersifat bakteriostatik  hal  ini  ditandai  dengan  tidak  terjadi  penambahan  zona hambat  dan  mulai  tumbuh  bakteri  pada  zona  bening  setelah  diinkubasi selama  2x24  jam.  Pada  penelitian  ini  bakteri  gram  negatif Pseudomonas aeruginosa memiliki  zona  hambat  yang  lebih  kecil  dibandingkan  dengan bakteri gram positif Staphylococcus epidermidis. Berdasarkan  penelitian Sari et  al (2019)  menyatakan  bahwa  melanin  dari  tinta  cumi-cumi  mampu menghambat  pertumbuhan  bakteri  gram  positif  lebih  baik  dibandingkan bakteri  gram  negatif.  Sangat  mirip  dengan  penelitian  ini  dimana  bakteri gram negatif Pseudomonas aeruginosa memiliki zona hambat yang lebih kecil dibandingkan  dengan  bakteri  gram  positif Staphylococcus  epidermidis. Hal ini terjadi karena perbedaan susunan dinding sel bakteri gram positif dan bakteri  gram  negatif.  Pada  bakteri  gram positif peptidoglikan  sebesar  40- 50%,  memiliki  teikoat,  tidak  terdapat lipopolisakarida (LPS),  protein
sebanyak  10%,  dan  lipid  sebanyak  2%  sedangkan  bakteri  gram  negatif memiliki  peptidoglikan  sebesar  5-20%,  tidak  memiliki  teikoat,  terdapat lipopolisakarida (LPS), protein sebanyak 60%, dan lipid sebanyak 20%. Hal ini  menunjukkan  bahwa  bakteri  gram  positif  lebih  rentan  terhadap senyawa  antibakteri  dari  bakteri  gram  negatif  (Harti,  2012;  Yusuf  & Alyidrus, 2020; Yusuf & Wati, 2019).
Pada  penelitian  ini  fraksi  etil  asetat  tinta  cumi-cumi  ( Loligo  pealeii ) dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  epidermidis dan Pseudomonas  aeruginosa. Hal  ini  menunjukkan  bahwa  tinta  cumi-cumi memiliki  senyawa  aktif  antibakteri  ( Loligo  pealeii )  yang  merupakan senyawa  semipolar  dimana  melanin  larut  dalam  pelarut  semipolar  yaitu etil asetat, walaupun tinta cumi-cumi itu sendiri dapat larut dalam pelarut polar seperti aquadest. Hal ini sama dengan penelitian Posangi et al. (2013) bahwa hasil pengujian antibakteri memperlihatkan tinta cumi-cumi ( Loligo sp )  fraksi  larut  etil  asetat  memiliki  memiliki  efek  antibakteri  sedangkan fraksi larut air tidak memiliki efek antibakteri.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  Fraksi  etil  asetat tinta cumi-cumi ( Loligo pealeii ) memiliki aktivitas penghambatan terhadap pertumbuhan  pada  bakteri Staphylococcus  epidermidis dan Pseudomonas aeruginosa sedangkan  tinta  cumi-cumi  ( Loligo  pealeii )  tidak  memiliki penghambatan  terhadap  pertumbuhan    bakteri Staphylococcus  epidermidis dan Pseudomonas  aeruginosa. Lebih  lanjut,  Konsentrasi  yang  paling  efektif dari  fraksi  etil  asetat  tinta  cumi-cumi  ( Loligo pealeii )  dalam  menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus epidermidis dan Pseudomonas aeruginosa yaitu konsentrasi 38%.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Penulis  mengucapkan  banyak  terima  kasih  dan  penghargaan  yang sebesar-besarnya  kepada  civitas  akademika  program  studi  S1  Farmasi, Fakultas  Farmasi,  Universitas  Megarezky  yang  sangat  berperan  dalam membantu  segala  proses penelitian  hingga  tahapan  publikasi  ini.  Peneliti juga  mengucapkan  terima  kasih  yang  sebesar-besarnya  kepada  Yayasan Pendidikan Islam Mega Rezky Makassar yang telah memfasilitasi peneliti hingga penelitian dapat berjalan dengan lancar.

## DAFTAR PUSTAKA
Alana, Lulu, Rafika Sari, and Pratiwi Apridamayanti. 2017. “Penentuan Nilai FICI Kombinasi Ekstrak Kulit Daun Lidah Buaya (Aloe Vera (L.) Burm. f .) Dan Gentamisin  Sulfat  Terhadap  Bakteri  Staphylococcus  Aureus.”  Traditional Medicine Journal 22 (3)(December):175–81.
Farid,  Nurfiddin, Nurhikma  Awaluddin,  Suhartina  Hamzah,  Muhammad  Yusuf, and  Rahmania.  2020.  “Aktivitas Antibakteri  Hand  Sanitizer  Ekstrak  Etanol Daun  Kemangi  (Ocimum  Sanctum  L.)  Terhadap  Escherichia  Coli  Dan Streptococcus  Aureus.”  Media  Kesehatan  Politeknik  Kesehatan  Makassar 15(2):228–37. doi: https://doi.org/10.32382/medkes.v15i2.1764 228.
Lampe,  Munsi.  2014.  “Penganekaragaman  Dan  Penyeragaman  Dalam  Aktivitas Nelayan  Pulau  Sembilan:  Sebuah  Penjelasan  Prosesual  Dan  Kontekstual.” Antropologi Indonesia 0(1):58–73. doi: 10.7454/ai.v0i1.3578.
Mangindaan,  Rocky  J.,  Christy  N.  Mintjelungan,  and  Damajanty  H.  C. Pangemanan. 2019. “Uji Daya Hambat Ekstrak Tinta Cumi-Cumi (Loligo Sp) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Streptococcus Mutans.” Jurnal E-Biomedik. doi: 10.35790/ebm.7.2.2019.23877.
Muljono,  Patrick,  .  Fatimawali,  and  Aaltje  E.  Manampiring.  2016.  “Uji  Aktivitas Antibakteri  Ekstrak  Daun  Mayana  Jantan  (Coleus  Atropurpureus  Benth) Terhadap  Pertumbuhan  Bakteri  Streptococcus  Sp.  Dan  Pseudomonas  Sp.” Jurnal E-Biomedik 4(1):164–72. doi: 10.35790/ebm.4.1.2016.10860.
Ngantung, Angeline E. C. 2016. “Uji Aktivitas Antibakteri Dari Spons Dictyonella Funicularis Yang Diambil Pada Perairan Bunaken” Jurnal Pesisisr Dan Laut Tropis 2(1):10–16.
Noor  Mutsaqof,  Ahmad  Aniq,  Wiharto  -,  and  Esti  Suryani.  2016.  “Sistem  Pakar Untuk  Mendiagnosis  Penyakit  Infeksi  Menggunakan  Forward  Chaining.” Jurnal Teknologi & Informasi ITSmart 4(1):43. doi: 10.20961/its.v4i1.1758.
Permana, Nugraha, Abdul kohar Mudzakir, and Aristi Dian Purnama Fitri. 2015.
“Pemanfaatan Dan Pemasaran Sumberdaya Cumi-Cumi (Loligo Spp.) Yang Didaratkan  Di  Pelabuhan  Perikanan  Nusantara  (PPN)  Kejawanan  Kota Cirebon,  Jawa  Barat.”  Journal  of  Fisheries  Resources  Utilization Management and Technology 4(4):97–106. doi: 10.1080/14650040802693754.
Posangi, Jimmy, Juliatri, Robert Bara, Jean Tairas, and Jane Wuisan. 2013. “Uji Efek Antibakteri  Tinta  Cumi-Cumi  (Loligo  Sp.)  Terhadap  Bakteri  Saluran  Akar Gigi.” E-GIGI. doi: 10.35790/eg.1.2.2013.3220.
Rahayu,  Mayangsari  P.,  Damajanty  H.  C.  Pangemanan,  and  Christy  N. Mintjelungan.  2019.  “Uji  Daya  Hambat  Ekstrak  Tinta  Cumi-Cumi  (Loligo Sp)  Terhadap  Pertumbuhan  Bakteri  Staphylococcus  Aureus.”  Jurnal  E- Biomedik. doi: 10.35790/ebm.7.2.2019.23876.
Riani,  and  Syafriani.  2019.  “Hubungan  Antara  Motivasi  Dengan  Kepatuhan Perawat  Melaksanakan  Hand  Hygiene  Sebagai  Tindakan  Pencegahan Infeksi  Nosokomial  Di  Ruang  Rawat  Inap  Rumah  Sakit  A.”  Jurnal  Ners 3(23):49–59.
Sains,  Fakultas,  and  D.  A.  N.  Teknologi.  2017.  “ABSORBSI  LOGAM  BERAT KADMIUM ( Cd ) PADA CUMI CUMI ( Loligo Sp ) DI PULAU LAE-LAE.” (Cd).
Sari,  R.  C.,  I.  Wijayanti, and  T.  W.  Agustini.  2019.  “The  Effectiveness of  Melanin from Squid Ink (Loligo Sp.) as Antibacterial Agent Against Escherichia Coli and  Listeria  Monocytogenes.”  IOP  Conference  Series:  Earth  and Environmental Science 246(1). doi: 10.1088/1755-1315/246/1/012022.
Sophian,  A.  and  Muindar,  M.  (2021)  'Pengujian  Salmonella  Typhimurium  ATCC 14028  pada  Produk  Sosis,  Nugget,  Bakso,  Otak-Otak,  Tempura  dan  Cilok Menggunakan  Kit  Rapid  Test',  Journal  of  Experimental  and  Clinical Pharmacy, 1(1), 48-55.
Vioni, Nielam, Evi Liviawaty, Iis Rostini, Eddy Afrianto, and Nia Kurniawati. 2018.
“Fortifikasi Tinta Cumi-Cumi Pada Cup Cake Terhadap Tingkat Kesukaan.” Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia. doi: 10.17844/jphpi.v21i1.21264. Yusuf, Muhammad, Rugayyah\ Alyidrus, Wahyuni Irianti, and Nurfiddin Farid. 2020. “Uji Aktivitas Antifungi Ekstrak Etanol Kulit Nanas (Ananas Comosus (L.)  Merr)  Terhadap  Pertumbuhan  Pityrosporum  Ovale  Dan  Candida Albicans  Penyebab  Ketombe.”  Media  Kesehatan  Politeknik  Kesehatan Makassar 15(2):311–18. doi: https://doi.org/10.32382/medkes.v15i2.1762.
Yusuf, Muhammad, and Rugayyah Alyidrus. 2020. “Uji Antiangiogenesis Secara In Vivo  Ekstrak  Etanol  Biji  Kopi  Robusta  (Coffea  Robusta)  Dengan  Metode Chorio  Allantoic  Membrane  (CAM).”  Jurnal  Farmasi  Galenika  (Galenika Journal of Pharmacy) (e-Journal) 6(1):63–69. doi: 10.22487/j24428744.2020.v6.i1.14975.
Yusuf, Muhammad, and Aulia Wati. 2019. “Efek Infus Kayu Secang (Caesalpinia Sappan  L.)  Terhadap  Penurunan  Kadar  Gula  Darah  Mencit  (Mus Musculus).” Media Farmasi Poltekkes Makassar XV(1):1–8.