## ISSN: 0215-7950
Tel: 0251-8629354, Faks: 0251-8629362; Surel: widodo@apps.ipb.ac.id

## Volume 18, Nomor 2, Maret 2022
Halaman 53–65 DOI: 10.14692/jfi.18.2. 53–65
Penapisan Cendawan Laut sebagai Agens Pengendalian Hayati Colletotrichum acutatum pada Tanaman Cabai

## Screening of Marine Fungi as Biological Control Agent of
Colletotrichum acutatum on Chili
Nur Asmasari Syam, Efi Toding Tondok, Kustiariyah Tarman, Widodo * Institut Pertanian Bogor, Bogor, 16680

## ABSTRAK
Antraknosa merupakan penyakit penting pada tanaman cabai di Indonesia yang disebabkan oleh Colletotrichum acutatum . Antraknosa sangat merugikan karena menurunkan hasil produksi. Tujuan penelitian adalah mendapatkan cendawan laut yang berpotensi menghambat pertumbuhan C. acutatum dan menekan penyakit antraknosa, serta mengidentifikasi isolat cendawan laut yang potensial sebagai agens pengendalian hayati. Potensi agens hayati mengacu pada hasil penapisan seperti uji antagonis dan senyawa organik volatil (SOV), sedangkan penghambatan penyakit antraknosa pada cabai didasarkan pada hasil pengukuran insidensi penyakit dan diameter gejala antraknosa. Hasil uji menunjukkan semua isolat cendawan laut berpotensi menghambat pertumbuhan C. acutatum dan menghasilkan SOV, serta dapat menekan insidensi penyakit antraknosa pada cabai. Empat galur cendawan laut, yaitu 4145, B3st2, GN322, Z521 memiliki potensi menjadi agens pengendalian hayati penyakit antraknosa pada cabai.  Hasil identifikasi empat galur tersebut berdasarkan analisis sikuen nukleotida adalah Fusarium proliferatum 4145, Trichoderma harzianum B3st2, fungal endofit GN322, dan Fusarium solani Z521.
Kata kunci: antraknosa, identifikasi, insidensi penyakit, senyawa organik volatil

## ABSTRACT
Anthracnose is an important disease of red chili plants in Indonesia caused by Coletotrichum acutatum. Anthracnose is a very detrimental disease because it reduces yields. This study aimed to obtain marine fungi that have the potency to inhibit the growth of C. acutatum and suppress anthracnose disease, as well as to identify the potential of marine fungal isolates as biological control agents. The biological control agents’ potency was determined based on screening results such as antagonist test and volatile organic compound (VOC) while suppression of anthracnose disease on chili was evaluated by measuring the incidence of disease and the diameter of anthracnose symptoms. The results showed that all marine fungal isolates had the potential to inhibit the growth of C. acutatum and produce VOC.  All the isolates has also the capability to suppress the incidence of anthracnose in chilies. Four strains of marine fungal, i.e. 4145, B3st2, GN322, Z521. Based on analysis of nucleotide sequences, the Fusarium proliferatum 4145, Trichoderma harzianum B3st2, fungal endophyte GN322, and Fusarium solani Z521 can be used as biological control agents C. acutatum on chili.
Keywords: anthracnose, disease incidence, identification, volatile organic compound

## PENDAHULUAN
Cabai ( Capsicum annuum ) merupakan tanaman hortikultura, salah satu komoditas pertanian dengan nilai ekonomi tinggi di Indonesia. Produktivitas cabai merah nasional tahun  2016  sampai  2019  berfluktuasi.  Pada tahun 2019 total produktivitas cabai merah meningkat sebesar 3.76% dibandingkan dengan tahun 2018, namun masih belum dapat mencukupi kebutuhan cabai nasional (BPS 2019). Nurahmi et al. (2011) menyatakan bahwa produktivitas cabai merah dapat mencapai 20 ton ha -1 . Produktivitas cabai merah dapat disebabkan oleh beberapa faktor antara lain anomali iklim, hama, dan penyakit. Gangguan penyakit merupakan salah satu kendala dalam upaya budi daya tanaman cabai di Indonesia. Penyakit antraknosa yang disebabkan oleh Colletotrichum sp. merupakan salah satu penyakit penting pada tanaman cabai, yang dapat menurunkan hasil sebesar 90% (Suyanti et al . 2020). Penyakit antraknosa pada tanaman cabai menyebabkan mati pucuk dan busuk kering pada daun batang, sedangkan gejala khas yang ditimbulkan pada buah cabai ialah bercak cokelat kehitaman pada permukaan buah. Antraknosa dapat disebabkan oleh C. acutatum , C. capsici , dan C. gloeosporioides (Widodo dan Hidayat
2018) dan yang paling banyak ditemukan pada pertanaman cabai di Indonesia ialah C. acutatum . Pengendalian penyakit antraknosa biasa- nya menggunakan fungisida sintetik yang apabila digunakan terus menerus dapat menimbulkan ketahanan pada patogen, kerusakan lingkungan, peningkatan biaya produksi, dan residu pada buah. Upaya yang telah dilakukan untuk mengendalikan penyakit antraknosa pada cabai yang ramah lingkungan ialah penggunaan pestisida nabati Agr I (Paradisa et al . 2020) yang dapat menghambat pertumbuhan C. acutatum dan C. gloeosporioides namun tidak mampu mengendalikan patogen yang telah berada di dalam jaringan tanaman. Penggunaan nanokitosan Ag ChNPs 500 ppm dan Cu- ChNPs 1000 ppm mampu menghambat
pertumbuhan C. capsici sebesar 17.3% dan 42.3% dan secara nyata menekan insidensi penyakit pada tanaman cabai varietas Tanjung, Ciko, dan Kencana (Eris et al . 2019). Sudirga dan Suprapta (2021) menyatakan bahwa ekstrak daun Ficus septica mengandung senyawa bioaktif anticendawan yang dapat digunakan untuk mengendalikan penyakit antraknosa C. acutatum . Pemanfaatan cendawan laut yang kaya akan kandungan senyawa bioaktif merupakan salah satu alternatif pengendalian hayati. Metabolit penicibilaenes A yang diproduksi oleh cendawan laut Penicillium bilaiae MA-267 berpotensi sebagai anticendawan terhadap C. gloeosporioides (Meng et al . 2014). Cendawan laut hidup dalam habitat yang memiliki kadar garam tinggi, nutrisi terbatas, tekanan tinggi, variasi suhu, kompetisi dengan bakteri, virus, dan cendawan lainnya sehingga cendawan laut memiliki jalur metabolik spesifik (Liberra dan Lindequist 1995). Oleh karena itu, cendawan laut menjadi sumber potensial penghasil senyawa metabolit yang dapat dimanfaatkan sebagai antikanker, antibakteri, dan anticendawan (Wang et al . 2016 dan Fang et al . 2018). Senyawa baru yang telah diisolasi dari cendawan laut setiap tahun jumlahnya terus meningkat, mencapai 328 senyawa baru pada tahun 2016 (Blunt et al . 2018). Sebanyak 448 senyawa metabolit sekunder berasal dari cendawan. Cendawan laut berkontribusi 25% dari total senyawa metabolit sekunder baru dari organisme laut (Carroll et al. 2019). Cendawan laut Aspergillus sp. ZA-01 memproduksi senyawa bioaktif aspergi- xanthone I yang berperan sebagai antivibrio terhadap Vibrio parahemolyticus (Zhu et al. 2018). Pengendalian hayati untuk penyakit antraknosa pada cabai dengan cendawan laut belum banyak dipelajari, namun demikian beberapa peneliti melaporkan bahwa Trichoderma atroviride dan T. asperelloides , yang berasal dari laut, dapat menurunkan intensitas penyakit rebah kecambah oleh Rhizoctonia solani pada kacang buncis (Gal- Hemed et al . 2011). Talaromyces tratensis KUFA 0091 secara nyata dapat menghambat
Jurnal Fitopatologi Indonesia
Syam et al. pertumbuhan Bipolaris oryzae sebesar 46% dan dapat dijadikan sebagai agens hayati pengendalian penyakit bercak daun cokelat pada padi (Dethoup et al . 2017). Berdasarkan hal tersebut, diharapkan cendawan laut dapat menjadi alternatif agens hayati untuk pengendalian penyakit antraknosa pada buah cabai, yang disebabkan oleh C. acutatum .

## BAHAN DAN METODE
Peremajaan Cendawan Sebanyak 27 galur cendawan laut yang digunakan  merupakan  koleksi  Laboratorium Mikrobologi Hasil Perairan, Departemen Teknologi Hasil Perairan, dan cendawan C. acutatum BDG 1525 berasal dari Laboratorium Mikologi Tumbuhan, Departemen Proteksi Tanaman, IPB. Cendawan tersebut diremaja- kan pada medium agar-agar dekstrosa kentang (ADK) dan diinkubasi pada suhu ruang selama tujuh hari.
Uji Antagonisme Uji antagonisme dilakukan pada 27 galur cendawan laut yang dipasangkan dengan C. acutatum. Sebagai kontrol koloni C. acutatum ditumbuhkan pada medium ADK tanpa cendawan laut. Pengujian ini diulang sebanyak tiga kali.
Uji antagonis galur-galur cendawan laut dan C. acutatum dilakukan menggunakan metode uji ganda. Koloni C. acutatum (Ø = 0.5 cm) ditumbuhkan terlebih dahulu pada medium ADK dengan jarak 3 cm dari tepi cawan selama tiga hari. Selanjutnya, cendawan laut (Ø = 0.5 cm) ditumbuhkan dalam cawan yang sama dengan jarak 3 cm dari koloni C. acutatum , dan diinkubasikan pada suhu ruang. Pengamatan dilakukan setiap hari dengan mengukur jari-jari koloni cendawan laut dan C. acutatum sebanyak dua kali. Data yang diperoleh ditabulasi menggunakan Microsoft Office Excel 2019. Persentase daya hambat (I) dihitung menggunakan rumus:
I = (R 1 – R 2 ) R 1 × 100%, dengan
R 1 , jari-jari koloni C. acutatum yang menjauhi koloni cendawan laut; dan R 2 , jari-jari koloni C. acutatum yang mendekati koloni cendawan laut. Selain itu mekanisme interaksi antara galur cendawan laut dan C. acutatum diamati melalui antibiosis, lisis, dan kompetisi. Galur cendawan laut yang berpotensi akan diuji lanjut.
Uji Produksi Senyawa Organik Volatil Produksi senyawa organik volatil (SOV) galur cendawan laut diamati dengan membandingkan diameter C. acutatum pada perlakuan uji dan kontrol. Sebanyak 15 galur cendawan laut dari hasil uji antagonis digunakan sebagai perlakuan dan masing-masing diulang tiga kali.
Medium yang digunakan ialah ADK dengan konsentrasi 25%, 50%, 75%, dan 100%. Uji SOV oleh cendawan laut dilakukan menggunakan dua cawan petri berdiameter yang seragam. Medium ADK standar dituang ke dalam cawan bagian bawah, sedangkan medium ADK perlakuan (konsentrasi tertentu) dituang ke dalam cawan bagian atas.
Koloni cendawan C. acutatum (Ø = 0.5 cm) ditumbuhkan pada cawan petri bagian bawah, setelah berumur dua hari diberi perlakuan dengan cendawan laut (Ø = 0.5 cm) yang ditumbuhkan pada cawan petri bagian atas. Selanjutnya cawan bagian atas tersebut ditangkupkan ke cawan bagian bawah dan direkatkan dengan plastik supaya SOV-nya tidak menguap dan diinkubasi selama tujuh hari pada suhu ruang (Raza et al . 2015; Maknunah dan Sinaga 2018).
Produksi SOV diamati dengan mem- bandingkan diameter C. acutatum pada perlakuan uji dengan kontrol. Tingkat penghambatan relatif (THR) oleh cendawan laut dihitung dengan rumus (Yuan et al . 2012):
THR = (D k – D P ) D k × 100%, dengan D k , diameter koloni C. acutatum pada kontrol; dan D p , diameter koloni C. acutatum pada perlakuan cendawan antagonis. Data diolah menggunakan program Minitab 21.1. Perlakuan yang menunjukkan beda nyata diuji lanjut dengan uji Tukey pada taraf 5%.
Penghambatan Penyakit Antraknosa pada Buah Cabai Sebanyak empat galur cendawan laut dari hasil uji SOV yang berpotensi diuji lanjut dalam penghambatan penyakit antraknosa pada buah cabai. Uji ini dilakukan pada biji cabai varietas Pilar F1 secara in planta di rumah kaca. Hasil panen buah cabai digunakan sebagai bahan  untuk  menguji  empat  filtrat  cendawan laut terpilih. Pengamatan dilakukan terhadap lima buah cabai dan setiap perlakuan diulang sebanyak empat kali. Peubah yang diamati ialah insidensi penyakit antraknosa pada buah cabai pada hari ketujuh setelah inokulasi.
Penyiapan Filtrat Cendawan Laut . Biakan berumur tujuh hari pada medium ADK dipotong dengan diameter 0.5 cm. Biakan ini  dimasukkan  ke  dalam  100  mL  medium cair dekstrosa kentang, lalu diinkubasi dalam inkubator bergoyang pada kecepatan 100 rpm selama 14 hari. Filtrat cendawan laut disaring dengan kertas saring whatman nomor 1. Selanjutnya  filtrat  cendawan  laut  ini disentrifugasi pada kecepatan 6000 rpm selama satu menit dan diambil filtratnya. Permukaan biji cabai merah disterilkan dengan NaOCl 1% selama lima menit kemudian dibilas tiga kali dengan akuades steril. Selanjutnya biji cabai direndam dalam  filtrat  konidium  cendawan  laut 10 6 cfu mL -1 selama 12 jam dan disemai pada baki semai yang berisi medum semai. Pada umur empat minggu bibit cabai dipindah tanam ke kantung plastik yang berisi medium tanah dengan pupuk kandang (1:1), dan disiram  filtrat  cendawan  laut.  Bibit  sebagai kontrol hanya disiram dengan akuades steril. Pemeliharaan tanaman dilakukan dengan penyiraman dan pemupukan secara berkala, sampai tanaman berbuah.
Buah cabai dipanen dan diuji lanjut. Buah dicuci bersih dan disterilisasi permukaan menggunakan NaOCl 1% selama dua menit, serta dibilas dengan akuades steril sebanyak tiga kali. Buah yang telah disterilkan permukaannya direndam selama lima  menit  dalam  filtrat  cendawan  laut  dan dikeringanginkan. Buah cabai ditetesi 20 μL
filtrat konidium C. acutatum dengan kerapatan 10 6 cfu mL -1 . Pengamatan dilakukan terhadap diameter gejala nekrosis pada cabai pada tujuh hari setelah inokulasi. Insidensi penyakit (IP) antraknosa dihitung menggunakan rumus:
IP =       nN × 100%, dengan n, jumlah buah yang bergejala; dan N, jumlah buah yang diamati. Data diperoleh kemudian diolah menggunakan program Minitab 21.1. Perlakuan yang menunjukkan beda nyata diuji lanjut dengan uji Tukey pada taraf 5%.
Identifikasi Cendawan Identifikasi
Morfologi. Karakter morfologi cendawan laut yang diamati ialah koloni makroskopis dari warna, pola pertumbuhan, dan tekstur pada medium ADK pada hari ketujuh. Pengamatan mikroskopis meliputi spora reproduksi dan hifa dengan metode slide culture . Identifikasi Molekuler . Sebanyak empat galur dari hasil uji penghambatan antraknosa pada  buah  cabai  dipilih  untuk  diidentifikasi molekuler. Ekstraksi DNA dilakukan dengan mengikuti metode Abd-Elsalam et al . (2003). Primer universal ITS1 (depan) dan ITS4 (belakang)  digunakan  untuk  amplifikasi DNA (White et al. 1990). Produk PCR hasil amplifikasi  dikirim  ke  First  BASE  Malaysia untuk dirunut susunan nukleotidanya. Analisis dilakukan  dengan  BLAST  yang  terdapat dalam situs NCBI.

## HASIL
Uji Antagonisme Sebanyak dua galur, galur B3st2 dan B1st1, hasil uji antagonis dari 27 galur cendawan laut memiliki potensi menekan pertumbuhan C. acutatum dengan daya hambat lebih dari 50% pada hari ketujuh (Gambar 1). Cendawan laut galur 4145, A4st3, dan BAR21 menunjukkan mekanisme antibiosis yang ditandai dengan munculnya  zona  hambat  (Gambar  2).  Lebar zona hambat galur 4145, A4st3, dan BAR21 pada hari kelima, masing-masing mencapai 5.5, 6.5, dan 7.7 mm (Gambar 2).
Jurnal Fitopatologi Indonesia
Syam et al.
Cendawan laut galur A4st1, B1st1, B3st2, B5st2, BAR24, GN322, KT13, KT26, KT31, SKT313, SKT323, dan Z521 mampu tumbuh dominan di atas koloni patogen C. acutatum . Galur-galur tersebut mampu menekan per- tumbuhan C. acutatum dan menunjukkan adanya kompetisi (Gambar 2). Sebanyak 15 galur cendawan laut dipilih untuk uji lanjut.
Uji Produksi Senyawa Organik Volatil Uji produksi SOV dari 15 galur cendawan laut pada medium ADK dengan konsentrasi yang berbeda dapat menghambat pertumbuhan C. acutatum . Tingkat penghambatannya relatif bervariasi, berkisar antara 4.18% dan 25.39% (Tabel 1). Penghambatan tertinggi dihasilkan oleh B3st2 sebesar 25.39% selanjutnya secara
0 10 20 30 40 50 60 B3 st 2 B1 st 1 KT 31
B A R 2 4 B5 st 2 GN3 22
B A R 2 1 KT 26 A 4s t3 A 4s t1 SK T313 41 45 KT 13 Z5 21 SK T323 B A R I .I K C Fd st4
10 1B 4 B A R 2 6 KHC 01 6 1H st1 KHC 00 9 B5 st 3 B2 st 2 H2 H B KR K P4z i Penghambatan (%) Galur cendawan laut
Gambar 1  Penghambatan relatif cendawan laut terhadap pertumbuhan koloni Colletotrichum acutatum .
Gambar 2  Hasil uji antagonisme galur cendawan laut (kanan) dengan cendawan Colletotrichum acutatum (kiri) pada tujuh hari setelah inokulasi.
4145 A4st A4st3 B3st2 B1st1 B5st2 BAR21 BAR24 KT13
GN322
KT26 KT31 SKT313 Z521
SKT323
berurutan B1st1, Z521, dan 4145 sebesar 24.58%, 20.19%, dan 20.03%. Cendawan laut galur 4145 memiliki daya hambat tertinggi pada medium ADK 100% (Gambar 3).

## Penghambatan Penyakit Antraknosa pada
Buah Cabai Hasil analisis data menunjukkan bahwa insidensi penyakit antraknosa pada cendawan laut galur 4145, B3st2, GN322, dan Z521 berbeda nyata dengan kontrol. Galur 4145 dan GN322 tidak berbeda nyata, namun berbeda nyata pada perlakuan galur B3st2 dan Z521. Galur B3st2 dan Z521 mampu menekan perkembangan penyakit antraknosa pada buah cabai dengan insidensi penyakit sebesar 20% . Cendawan laut galur 4145 dan GN322 berpengaruh terhadap penekanan insidensi penyakit antraknosa masing-masing sebesar 45% dan 35%. Rata-rata diameter gejala penyakit antraknosa pada buah cabai yang memperoleh perlakuan cendawan laut
galur 4145, B3st2, GN322, dan Z521 masing- masing sebesar 3.02, 1.60, 1.76, dan 0.94 mm berbeda nyata dengan kontrol sebesar 5.18 mm (Tabel 2).
Identifikasi Cendawan Identifikasi  Morfologi. Pengamatan karakteristik makroskopis cendawan laut galur 4145 memiliki bentuk koloni bulat, elevasi datar, tepian rata, struktur miselium beludru, warna koloni pada permukaan atas putih dan pada permukaan bawah cawan petri berwarna ungu. Cendawan ini memiliki hifa hialin dan berseptat, serta mikrokonidium aseptat berukuran 18.84 µm (Gambar 4a). Dari karakteristik tersebut diduga merupakan anggota genus Fusarium . Cendawan laut galur B3st2 berbentuk filamen,  elevasi  menonjol,  tepian  rata, struktur miselium seperti kapas, warna koloni permukaan atas putih kehijauan, dan pada permukaan bawah kuning kehijauan.
Kontrol
ADK 25%
ADK 50% ADK 100%
ADK 75%
Gambar 3  Pengaruh senyawa organik volatil cendawan laut galur 4145 terhadap pertumbuhan Colletotrichum acutatum pada hari ketujuh setelah inokulasi.
Gambar 4  Karakteristik morfologi makroskopis (koloni tampak atas dan bawah) dan mikroskopis galur cendawan laut pada hari ketujuh.
4145 B3st2 GN322 Z521
Tabel 1  Tingkat penghambatan relatif senyawa organik volatil cendawan laut terhadap pertumbuhan Colletotrichum acutatum pada berbagai konsentrasi medium ADK Galur cendawan laut Konsentrasi medium ADK 25% 50% 75% 100% 4145 18.14 ± 2.45 abcdefgh 17.76 ± 0.98 abcdefghi 13.71 ± 1.84 cdefghijk 20.03 ± 2.21 abcde A4st1 16.54 ± 3.71 abcdefghi 14.11 ± 1.53 bcdefghijk 18.50 ± 1.42 abcdefg 10.98 ± 0.86 defghijk A4st3 17.26 ± 0.68 abcdefghi 16.50 ± 1.22 abcdefghi 12.54 ± 4.94 cdefghijk 12.07 ± 3.46 cdefghijk B1st1 21.66 ± 9.11 abcd 20.81 ± 9.04 abcd 22.34 ± 6.48 abc 24.58 ± 1.34 ab B3st2 25.39 ± 3.29 a 21.04 ± 2.91 abcd 18.14 ± 1.59 abcdefgh 13.33 ± 0.77 cdefghijk B5st2 14.54 ± 3.15 bcdefghijk 15.66 ± 0.82 abcdefghij 5.48 ± 1.28 jk 7.67 ± 1.80 hijk BAR21 12.69 ± 2.54 cdefghijk 13.10 ± 1.53 cdefghijk 6.97 ± 1.79 ijk 9.01 ± 3.03 fghijk BAR24 13.50 ± 4.64 cdefghijk 12.59 ± 0.93 cdefghijk 13.08 ± 0.73 cdefghijk 13.02 ± 0.96 cdefghijk GN322 19.38 ± 1.35 abcdef 17.74 ± 0.45 abcdefghi 13.16 ± 2.68 cdefghijk 9.73 ± 0.54 efghijk KT13 12.01 ± 0.63 cdefghijk 16.90 ± 2.06 abcdefghi 4.18 ± 2.42 k 8.26 ± 0.46 ghijk KT26 13.84 ± 2.42 bcdefghijk 13.89 ± 2.24 bcdefghijk 15.34 ± 0.56 abcdefghij 14.19 ± 4.31 bcdefghijk KT31 14.98 ± 5.44 abcdefghijk 18.76 ± 1.34 abcdefg 12.05 ± 2.45 cdefghijk 7.13 ± 2.20 ijk SKT313 14.90 ± 1.07 abcdefghijk 13.81 ± 1.13 bcdefghijk 13.77 ± 1.90 cdefghijk 12.54 ± 3.84 cdefghijk SKT323 13.50 ± 0.55 cdefghijk 17.14 ± 0.43 abcdefghi 17.30 ± 10.75 abcdefghi 7.57 ± 1.02 hijk Z521 20.20 ± 0.65 abcde 17.01 ± 0.64 abcdefghi 9.16 ± 1.35 fghijk 11.00 ± 1.24 defghijk
*Angka yang diikuti oleh huruf yang sama tidak berbeda nyata pada taraf uji 5% (uji Tukey).
Tabel 2  Pengaruh filtrat cendawan laut pada uji in planta terhadap perkembangan antraknosa pada buah cabai Galur cendawan laut Insidensi penyakit (%) Diameter gejala antraknosa (mm) 4145 45.00 ± 0.19bc 3.02 ± 1.69bc B3st2 20.00 ± 0.23c 1.60 ± 1.88abc GN322 35.00 ± 0.10bc 1.76 ± 1.33bc Z521 20.00 ± 0.28c 0.94 ± 0.85c Kontrol 75.00 ± 0.30ab 5.18 ± 2.37ab *Angka pada kolom yang sama dan diikuti oleh huruf yang sama tidak berbeda nyata pada taraf uji 5% (uji Tukey).
Tabel 3  Homologi nukleotida daerah ITS cendawan laut galur 4145 dengan isolat-isolat yang terdaftar di GenBank
Identitas GenBank Kode aksesi Query cover Homologi (%) Asal Fusarium proliferatum strain BH31 MH712162.1 99 99.63 China Fusarium proliferatum strain AH6 MH712164.1 98 99.45 China Fusarium proliferatum strain BH13 MH712161.1 98 99.45 China Fusarium proliferatum strain AH15 MH712165.1 99 98.57 China Fusarium proliferatum isolat GS146 MN511330.1 99 98.57 Korea Fusarium proliferatum strain MXDC5 MW391506.1 99 98.08 China Fusarium proliferatum strain SAPB4 KX343956.1 98 96.15 India Fusarium proliferatum isolat F2 MF033172.1 95 96.14 India Fusarium proliferatum isolat F28 MF993105.1 95 92.48 Tunisia Fusarium proliferatum strain AQGS33 KP721572.1 97 92.44 India
Konidiofor galur ini hialin, tegak lurus, banyak  percabangan,  fialid  tunggal,  dan konidium berbentuk bulat (Gambar 4b). Karakteristik tersebut diduga merupakan genus Trichoderma. Cendawan laut galur GN322 membentuk koloni bulat, elevasi datar, tepi bergerigi, struktur seperti kapas, warna koloni pada permukaan atas putih dan bagian bawah berwarna putih kekuningan. Galur ini mempunyai hifa berseptat, hialin, makrokonidium panjang yang ujungnya meruncing, sedangkan mikrokonidiumnya berbentuk oval, aseptat (Gambar 4c). Karakteristik tersebut diduga merupakan genus Fusarium. Cendawan laut galur Z521 membentuk koloni bulat, elevasi datar, tepi rata, struktur miselium seperti kapas, serta warna koloni putih baik pada bagian atas dan bawah cawan petri. Galur ini memiliki hifa septat, spora aseksual berupa mikrokonidium. Mikrokonidium berbentuk oval, aseptat, terbentuk secara berkelompok sebagai kepala semu ( false head )  pada  ujung  monofialid yang cenderung panjang, berukuran 10.69 μm (Gambar 4d). Karakteristik tersebut diduga merupakan genus Fusarium . Identifikasi  Molekuler. Identifikasi morfologi makroskopis dan mikroskopis cendawan laut dikonfirmasi secara molekuler menggunakan pasangan primer universal ITS1 (depan) dan ITS4 (belakang). Penyejajaran
sikuen nukleotida cendawan laut hasil amplifikasi  dengan  basis  data  di  GenBank menunjukkan bahwa cendawan laut galur 4145 memiliki homologi terdekat 99.63% dengan Fusarium proliferatum BH31 asal China (Tabel 3). Cendawan laut galur B3st2 memiliki homologi dengan Trichoderma harzianum A1S4-2 asal Malaysia 99.36% (Tabel 4). Cendawan laut galur GN322 memiliki homologi dengan cendawan endofit g109 asal China 99.26% (Tabel 5), dan galur Z521 memiliki homologi dengan Fusarium solani OUCMBI110106 asal China 99.30% (Tabel 6).

## PEMBAHASAN
Cendawan antagonis dapat menunjukkan mekanisme interaksi secara langsung dan atau tidak langsung dalam pengendalian penyakit antraknosa. Interaksi antara kedua koloni cendawan terjadi pada empat hari setelah inokulasi cendawan laut. Cendawan laut galur 4145, A4st3, dan BAR21 menunjukkan mekanisme antibiosis dengan membentuk zona penghambatan. Penghambatan ini terjadi ketika cendawan laut memproduksi senyawa metabolit dan atau antibiotik yang bersifat toksik bagi patogen sehingga menyebabkan hifa C. acutatum menjadi abnormal.
Abnormalitas yang terjadi ialah hifa putus, bengkok, dan membengkak. Pertumbuhan hifa yang abnormal pada C. acutatum
Jurnal Fitopatologi Indonesia
memperlihatkan bahwa galur cendawan laut berpotensi sebagai agens pengendalian hayati. Pada cendawan laut galur A4st1, B1st1, B3st2, B5st2, BAR24, GN322, KT13, KT26, KT31, SKT313, SKT323, dan Z521 terjadi kompetisi
dalam memperebutkan ruang dan nutrisi yang ketersediaannya terbatas.
Karim et al . (2020) melaporkan terdapat empat interaksi yang berbeda: antibiosis, lisis, hiperparasitisme, dan kompetisi.
Tabel 5 Homologi nukleotida daerah ITS cendawan laut galur GN322 dengan isolat-isolat yang terdaftar di GenBank
Identitas GenBank Kode aksesi Query cover Homologi (%) Asal Fungal endophyte sp. g109 HM537076.1 99 99.26 China Fungal endophyte sp. g107 HM537075.1 99 99.26 China Fungal sp. ARIZ B212 FJ612958.1 99 99.26 Panama Fungal sp. ARIZ L77 FJ612882.1 99 99.26 Panama Fungal sp. ARIZ L158 FJ612710.1 99 99.26 Panama Fungal sp. ARIZ L145 FJ612702.1 99 99.26 Panama Fungal sp. ARIZ L142 FJ612700.1 99 99.26 Panama Fungal sp. isolat E2706B KT996043.1 99 98.40 Ecuador Fusarium sp. BM3 KJ567458.1 99 98.40 China Uncultured fungus clone 4248_334 MT236527.1 99 91.20 Sweden
Tabel 6  Homologi nukleotida daerah ITS cendawan laut galur Z521 dengan isolat-isolat yang terdaftar di GenBank Identitas GenBank Kode aksesi Query cover Homologi (%) Asal Fusarium solani strain OUCMBI110106 KP269017.1 99 99.30 China Fusarium solani isolat GS222 MN511337.1 99 99.30 Korea Fusarium solani isolat FsolCpIN1 KC577186.1 98 99.29 India Fusarium solani strain S1 KJ145420.1 99 99.12 Korea Fusarium solani isolat 7227 MN922526.1 99 99.12 China Fusarium solani strain LW-1 EU719658.1 99 99.12 Taiwan Fusarium solani isolat FSCS6 MT107079.1 99 98.95 India Fusarium solani strain 168 MW165528.1 99 98.95 Turkey Fusarium solani strain YQC-C3 KF939488.1 99 98.94 China Fusarium solani strain AIBF 005-1 GQ229075.1 99 98.77 Brazil
Tabel 4  Homologi nukleotida daerah ITS cendawan laut galur B3st2 dengan isolat-isolat yang terdaftar di GenBank Identitas GenBank Kode aksesi Query cover Homologi (%) Asal Trichoderma harzianum isolat A1S4-2 KJ767087.1 68 99.36 Malaysia Trichoderma harzianum isolat Mc2151 MK738146.1 68 99.36 USA Trichoderma harzianum strain TH6 KC403943.1 74 97.65 India Trichoderma harzianum isolat 1A3 MN046981.1 73 97.50 Brazil Trichoderma harzianum strain TH9 KC403946.1 73 97.50 India Trichoderma harzianum strain TH3 KC403940.1 73 97.50 India Trichoderma harzianum strain CEN257 KC576680.1 72 97.44 Brazil Trichoderma harzianum strain CGAJ1T-4 KY495195.1 74 97.35 Nigeria Trichoderma harzianum strain CEN261 KC576683.1 74 97.19 Brazil Trichoderma harzianum strain TH2 KC403939.1 74 96.64 India
Neurospora sp. DG27 dapat menghambat C. truncatum dengan persentase hambatan sebesar 71.98%, Neurospora sp. DG17 dan Syncephalastrum sp. AG15 masing-masing sebesar 53.74% dan 48.28%. Mekanisme penghambatan Neurospora sp. DG27 terjadi secara antibiosis, Neurospora sp. DG17 secara kompetisi, dan Syncephalastrum sp. AG15 secara mikoparasit (Huda et al . 2019). Senyawa organik volatil ialah senyawa yang mengandung karbon dengan massa molekul rendah yang mudah menguap pada suhu dan tekanan normal. Cendawan laut galur 4145 dan B1st1 pada medium ADK 100% menghasilkan penghambatan maksimal terhadap C. acutatum . Konsentrasi nutrisi yang tinggi menyebabkan kedua galur tersebut tumbuh optimal sehingga memproduksi lebih banyak SOV. Produksi SOV optimal pada galur A4st1, KT26, dan SKT323 terjadi di medium ADK 75%. Cendawan laut galur B5st2, BAR21, KT13 dan KT31 memproduksi SOV optimal pada konsentrasi medium ADK 50%, demikian juga galur A4st3, B3st2, BAR24, GN322, SKT313, dan Z521 dapat memproduksi SOV optimal pada konsentrasi medium ADK 25%.
Produksi SOV dapat optimal jika galur tersebut tumbuh pada kondisi medium yang miskin nutrisi. Setiap cendawan memiliki respons pertumbuhan dan aktivitas metabolik yang berbeda saat ditumbuhkan dalam medium ADK. Oleh karena itu, penggunaan medium ADK dengan konsentrasi berbeda bertujuan menentukan kecenderungan setiap galur cendawan laut dalam memproduksi senyawa metabolit.
Semua cendawan laut menghasilkan SOV yang memiliki peran penting dalam pertahanan tanaman terhadap patogen. T. asperellum T1 mampu memproduksi SOV yang terbukti dari penghambatan perkembangan patogen, induksi ketahanan, dan stimulasi pertumbuhan tanaman (Wonglom et al . 2020). Aureobasidium pullulans menghasilkan SOV 2-fenil, 1-butanol-3-metil, 1-butanol-2-metil, dan 1-propanol-2-metil yang dapat digunakan sebagai agens pengendalian hayati yang
mampu menghambat pertumbuhan koloni C. acutatum (Francesco et al . 2015). Perlakuan  fitrat  cendawan  laut  mampu menekan perkembangan penyakit antraknosa pada buah cabai. Buah cabai yang diinokulasi C. acutatum menunjukkan gejala antraknosa pada waktu 72 jam setelah inokulasi. Gejala antraknosa umumnya muncul pada 24 jam setelah inokulasi C. acutatum (Muljowati et al. 2021). Gejala awal pada permukaan buah berupa bintik-bintik cokelat dan lama kelamaan bintik tersebut menjadi gelap. Rahman et al . (2012) melaporkan bahwa kultur  filtrat T. harzianum IMI-392433 dapat digunakan sebagai agens biokontrol yang efektif untuk mengendalikan penyakit antraknosa pada cabai yang disebabkan oleh C. capsici . Trichoderma koningiopsis PSU3- 2 mampu menghambat perkembangan gejala penyakit antraknosa C. gloeosporioides pada cabai (Ruangwong et al. 2021). Penelitian ini berhasil mengkarakterisasi dan  mengidentifikasi  empat  jenis  galur cendawan laut, yaitu F. proliferatum , T. harzianum, fungal  endofit  sp., F. solani . F. proliferatum ACQR8 menghasilkan senyawa terpenoid, alkaloid, fenol dan flavonoid yang berfungsi sebagai anticendawan (Singh et al . 2021). Piridin 3-butil, pirazin 3-etil-2.5- dimetil, asam palmitat, asam oleat, asam adipat, dan asam ftalat merupakan senyawa metabolit diproduksi oleh F. proliferatum FP85 yang memiliki potensi sebagai anticendawan dan antibakteri (Rasekhi et al . 2014). Cendawan T. harzianum memproduksi senyawa bioaktif asam asetat, 2-feniletil alkohol, asam heksadekanoat, asam harzianat, 6-pentil-alfa-piron, dan dihidroksiaseton berpotensi sebagai anticendawan (Yassin et al . 2021). Zeilinger et al . (2016) melaporkan T. harzianum menghasilkan senyawa 6-pentil- alfa-piron, dan 2H-piran-2-satu yang memiliki potensi anticendawan. T. harzianum WKY1 menghasilkan  fitohormon  IAA  yang  dapat meningkatkan pertumbuhan tanaman dan mengurangi keparahan penyakit (Saber et al. 2017). Senyawa asam trans-butenadioat, asam malat, tirosol, asam p-hydroxybenzoic, dan asam azelat merupakan senyawa metabolit
Jurnal Fitopatologi Indonesia
Syam et al. yang diproduksi oleh F. solani yang memiliki potensi anticendawan (Vieira et al. 2020). Penelitian kami merupakan laporan pertama dari aktivitas cendawan laut F. proliferatum 4145, T. harzianum B3st2 , cendawan  endofit sp. GN322, dan F. solani Z521 terhadap C. acutatum di laboratorium, dan rumah kaca. Hasil penelitian menunjukkan bahwa galur cendawan laut mampu menghambat pertumbuhan koloni C. acutatum dan menekan penyakit antraknosa pada buah cabai di rumah kaca.

## DAFTAR PUSTAKA
Abd-Elsalam KA, Aly IN, MA Abdel- Satar, Khalil MS, Verreet JA. 2003. PCR identification  of Fusarium genus based on nuclear ribosomal-DNA sequence data. African Journal of Biotechnology. 2(4):82–85. DOI: https://doi.org/10.5897/ AJB2003.000-1016.
Blunt JW, Carroll AR, Copp BR, Davis RA, Keyzers RA, Prinsep MR. 2018. Marine natural products. Natural Product Reports. 34:235-294. DOI: https://doi.org/10.1039/ C7NP00052A.
[BPS] Badan Pusat Statistik. 2019. Statistik Pertanian 2019: Produksi cabai besar, luas panen cabai besar, dan produktivitas cabai besar. Jakarta (ID): Badan Pusat Statistik. https://www.pertanian.go.id/ home/?show=page&act=view&id=61 [diakses 2 Januari 2022].
Carroll AR, Copp BR, Davis RA, Keyzers RA, Prinsep MR. 2019. Marine natural products. Natural Product Reports. 36(1):122–173. DOI:  https://doi. org/10.1039/C8NP00092A.
Dethoup T, Kaewsalong N, Songkumorn P, Jantasorn A. 2017. Potential application of a marine-derived fungus, Talaromyces tratensis KUFA 0091 against rice diseases. Biological Control. 119:1–6. DOI: https:// doi.org/10.1016/j.biocontrol.2017.11.008. Eris DD, Wahyuni S, Putra SM, Yusup CA, Mulyatni AS, Siswanto, Krestini EH, Winarti C. 2019. Pengaruh nanokitosan- Ag/Cu pada perkembangan penyakit antraknosa pada cabai. Jurnal Ilmu
Pertanian Indonesia. 24(3):201–208. DOI: https://doi.org/10.18343/jipi.24.3.201.
Fang W, Wang  J, Wang  J,  Shi  L,  Li  K,  Lin X, Min Y, Yang B, Tang L, Liu Y, Zhou X. 2018. Cytotoxic and antibacterial eremophilane sesquiterpenes from the marine-derived fungus Cochliobolus lunatus . Journal of Natural Products. 81(6):1405–1410. DOI: https://doi. org/10.1021/acs.jnatprod.8b00015.
Francesco  AD,  Ugolini  L,  Lazzeri  L,  Mari M. 2015. Production of volatile organic compounds by Aureobasidium pullulans as a potential mechanism of action against postharvest fruit pathogens. Biological Control. 81:8–14. DOI: https://doi. org/10.1016/j.biocontrol.2014.10.004.
Gal-Hemed  I,  Atanasova  L,  Komon- Zelazowska M, Druzhinina IS, Viterbo A, Yarden O. 2011. Marine isolates of Trichoderma spp. as potential halotolerant agents of biological control for arid-zone agriculture. Applied and Environmental Microbiology. 77(15):5100–5109. DOI: https://doi.org/10.1128/AEM.00541-11.
Huda N, Imaningsih W, Hakim SS. 2019.
Uji  antagonisme  kapang  endofit  tanaman galam ( Melaleuca cajuputi ) terhadap Colletotrichum truncatum . Jurnal Mikologi Indonesia. 3(2):59–74. DOI: https://doi. org/10.46638/jmi.v3i2.62.
Karim A, Rahmiati, Fauziah I. 2020. Isolasi dan uji antagonis Trichoderma terhadap Fusarium  oxysporum secara in vitro. Jurnal Biosains. 6:(1):18–22. Liberra K, Lindequist U. 1995. Marine fungi: a  prolific  resource  of  biologically  active natural products. Journal of Pharmazie. 50(9):583–588.
Maknunah J, Sinaga MS. 2018. Eksplorasi dan karakterisasi khamir dan bakteri sebagai agens antagonis terhadap penyebab penyakit blas pada padi. Jurnal Fitopatologi Indonesia. 14(3):83–88. DOI: https://doi.org/10.14692/jfi.14.3.83.
Meng  LH,  Li  XM,  Liu Y,  Wang  BG.  2014. Penicibilaenes A and B, sesquiterpenes with a tricyclo [6.3.1.1, 1,5 ] dodecane skeleton from the marine isolate of

## Penicillium bilaiae MA-267. Organic
Letters.  16(23):6052–6055.  DOI:  https:// doi.org/10.1021/ol503046u.
Muljowati JS, Soesanto L, Nugroho LH. 2021. Short communication: Histopathology of red chilli fruit ( Capsicum annuum ) infected with Colletotrichum acutatum of Java, Indonesia isolates. Biodiversitas. 22(2):874–880. DOI: https://doi. org/10.13057/biodiv/d220242.
Nurahmi E, Mahmud T, Rossiana SS. 2011. Efektifitas  pupuk  organik  terhadap pertumbuhan dan hasil cabai merah. Jurnal Floratek. 6(2):158–164.
Paradisa YB, Wahyuni, Mulyaningsih,
Perdani AY, Prianto AH. 2020. Evaluasi pestisida nabati dengan ekstrak mimba
( Azadirachta sp.) untuk pengendalian pertumbuhan antraknosa pada buah cabai. Jurnal Fitopatologi Indonesia. 16(3):112– 122. DOI: https://doi.org/10.14692/ jfi.16.3.112-122 . Rahman MA, Rahman MM, Kamruzzaman M, Begum MF, Alam MF. 2012. Use of  culture  filtrates  of Trichoderma strains as a biological control agent against Colletotrichum capsici causing anthracnose fruit rot disease of chili. Jurnal of Biodiversity and Environmental Sciences. 2(1):9–18.
Rasekhi F, Tajick MA, Rahimian H, Sharifimehr S. 2014. Some of phytotoxic and antimicrobial compounds extracted  from  culture  filtrates  of Fusarium proliferatum FP85. Jurnal of Biodiversity and Environmental Scie nces. 4(5):245–251. Raza  W,  Yuan  J,  Ling  N,  Huang  Q,  Shen
Q. 2015. Production of volatile organic compounds by an antagonistic strain Paenibacillus polymyxa WR-2 the presence of root exudates and organic fertilizer and their antifungal activity against Fusarium oxysporum f.sp. niveum . Biology Control. 80:89–95. DOI: https://doi.org/10.1016/j. biocontrol.2014.09.004.
Ruangwong OU, Pornsuriya C, Pitija K, Sunpapao A. 2021. Biocontrol mechanisms of Trichoderma koningiopsis PSU3-2
against postharvest anthracnose of chili pepper. Journal of Fungi. 7(4):276. DOI: https://doi.org/10.3390/jof7040276.
Saber WIA, Ghoneem KM, Rashad YM, Al- Askar A. 2017. Trichoderma harzianum WKY1: an indole acetic acid producer for growth improvement and anthracnose disease control in sorghum. Biocontrol Science and Technology. 27(5):654–676. DOI: https://doi.org/10.1080/09583157.2 017.1321733.
Singh A, Kumar J, Sharma VK, Singh DK, Kumari P, Nishad JH, Gautam VS, Kharwar RN. 2021. Phytochemical analysis and antimicrobial activity of an endophytic Fusarium proliferatum (ACQR8), isolated from a folk medicinal plant Cissus quadrangularis L.  South African  Journal of Botany. 140:87–94. DOI: https://doi. org/10.1016/j.sajb.2021.03.004.
Sudirga SK, Suprapta DN. 2021. Biological control of anthracnose disease ( Colletotrichum acutatum ) in chili peppers by crude leaf extract of fig ( Ficus septica ). Sabrao Journal of Breeding and Genetics. 53(1):79–87.
Suyanti AP, Mariana, Rosa HO. 2020. Pengaruh pemberian beberapa ekstrak gulma lahan pasang surut dalam menghambat Colletotrichum sp penyebab penyakit antraknosa pada buah cabai rawit. Jurnal Proteksi Tanaman Tropika. 3(02):215–225.
Vieira NC, Cortelo PC, Castro-Gamboa I. 2020. Rapid qualitative profiling of metabolites present in Fusarium solani , a rhizospheric fungus derived from Senna spectabilis , using  GC/MS  and  UPLC-QTOF/MS E techniques assisted by UNIFI information system. European Journal of Mass Spectrometry. 26(4):281–291. DOI:  https:// doi.org/10.1177/1469066720922424.
Wang  J,  He  W,  Huang  X,  Tian  X,  Liao  S, Yang  B,  Wang  F,  Zhou  X,  Liu  Y.  2016. Antifungal new oxepine-containing alkaloids and xanthones from the deep- sea-derived fungus Aspergillus versicolor SCSIO 05879. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 64(14):2910–2916. DOI:
Jurnal Fitopatologi Indonesia
Syam et al.
https://doi.org/10.1021/acs.jafc.6b00527. White  TJ,  Bruns  T,  Lee  S,  Taylor  J.  1990. Amplification  and  direct  sequencing of fungal ribosomal RNA genes for phylogenetics. New York (USA): Academic Press. DOI: https://doi.org/10.1016/B978- 0-12-372180-8.50042-1.
Widodo, Hidayat SH. 2018. Identification of Colletotrichun species associated with chili antracnose in Indonesia by morphological characteristics and species-specific primers. Asian Journal of Plant Pathology. 12(1):7–15. DOI: https://doi.org/10.3923/ ajppaj.2018.7.15.
Wonglom P, Ito S, Sunpapao A. 2020. Volatile organic compounds emitted from endophytic fungus T richoderma asperellum T1 mediate antifungal activity, defense response and promote plant growth in lettuce ( Lactuca sativa ). Fungal Ecology. 43:1–10. DOI: https://doi. org/10.1016/j.funeco.2019.100867. Yassin MT, Mostafa AA, Al-Askar AA, Sayed SR, Rady AM. 2021. Antagonistic activity of Trichoderma harzianum and
Trichoderma viride strains against some fusarial pathogens causing stalk rot disease of maize, in vitro. Journal of King Saud University - Science. 33(3):101363. D O I :   h t t p s : / / d o i . o rg / 1 0 . 1 0 1 6 / j . jksus.2021.101363.
Yuan J, Raza W, Shen Q, Huang Q. 2012. Antifungal activity of Bacillus amyloliquefaciens NJN-6 volatile compounds against Fusarium  oxysporum f. sp. cubense . Applied and Environmental Microbiology. 78:5942–5944. DOI: https://doi.org/10.1128/AEM.01357-12.
Zeilinger S, Gruber S, Bansal R, Mukherjee PK. 2016. Secondary metabolism in Trichoderma-Chemistry meets genomics. Fungal Biology Reviews. 30(2):74– 90. DOI: https://doi.org/10.1016/j. fbr.2016.05.001.
Zhu A, Zhang XW, Zhang M, Li W, Ma ZY, Zhu HJ, Cao F. 2018. Aspergixanthones I–K, new anti-vibrio prenylxanthones from the marine-derived fungus Aspergillus sp. ZA-01. Marine Drugs. 16(9):312. DOI: https://doi.org/10.3923/ajppaj.2018.7.15.