Info Artikel Received : 05 April 2021 Vol. 15  No. 1  Tahun 2021 Revised : 10 April 2021 p-ISSN : 1978-5054 Accepted : 20 April 2021 e-ISSN : 2715-9493

## KAJIAN KONSENTRASI BAP DAN NAA TERHADAP MULTIPLIKASI KENCUR IN VITRO
Samanhudi 1 , Bambang Pujiasmanto 1 , Ekky Permata Dewi 2
1 Program Studi Agroteknologi, Fakultas Pertanian UNS dan Pusat Penelitian dan Pengembangan Bioteknologi dan Biodiversitas LPPM UNS, Jl. Ir. Sutami 36A Surakarta, Indonesia
2. Mahasiswa Program Studi Agroteknologi, Fakultas Pertanian UNS, Jl. Ir. Sutami 36A Surakarta, Indonesia
Koresponden Email:  samanhudi@staff.uns.ac.id

## Abstrak
Perbanyakan  kencur  ( Kaempferia  galanga) melalui  budidaya  konvensional  mempunyai  beberapa  masalah, antara  lain  penyediaan  bibit  dan  serangan  patogen.  Penyediaan  bibit  merupakan  masalah  paling  utama  dalam budidaya kencur secara konvensional. Salah satu cara penyediaan bibit kencur secara cepat yaitu dengan metode kultur  jaringan.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mendapatkan  kombinasi  BAP  dan  NAA  yang memberikan  efek terbaik  terhadap  pertumbuhan  eksplan  kencur in  vitro .  Penelitian  ini  dilaksanakan  di  Laboratorium  Fisiologi Tumbuhan dan  Bioteknologi  Fakultas  Pertanian,  Universitas  Sebelas  Maret  Surakarta,  mulai  bulan Maret  2018 sampai dengan April 2019. Rancangan yang digunakan adalah Rancangan Acak Lengkap dengan dua faktor (BAP dan NAA). Peubah pengamatan meliputi saat muncul tunas, tinggi tunas, jumlah tunas, saat muncul akar, panjang akar, jumlah akar, saat muncul daun, dan jumlah daun. Hasil penelitian menunjukkan bahwa pemberian BAP 2 ppm dan NAA 0 ppm mampu menghasilkan rata-rata 2 tunas dengan rata-rata tinggi tunas tertinggi yaitu 4 cm, sedangkan  pemberian  BAP  2  ppm  dan  NAA  1  ppm  mampu  menghasilkan  akar  sebanyak  7  buah.  Hal  ini membuktikan bahwa pemberian BAP sampai taraf 2 ppm dan NAA taraf 1 ppm dapat memacu pertumbuhan tunas dan akar tanaman kencur secara in vitro .
Kata Kunci: Kencur, Multiplikasi, BAP, NAA

## Abstract
Propagation  of  kencur  ( Kaempferia  galanga )  through  conventional  cultivation  has  several  constraints, including  providing  seeds  and  attacking  pathogens.  The  provision  of  seeds  is  the  most  important  problem  in conventional  kencur  cultivation.  One  way  to  provide  kencur  seeds  quickly  is  by  tissue  culture  method.  This research  aims  to  obtain  the  combination  of  BAP  and  NAA concentration  which  give  the  best  effect  on kencur growth in vitro. The research was conducted at the Plant  Physiology and Biotechnology  Laboratory Faculty of Agriculture,  Universitas  Sebelas  Maret  Surakarta,  from  March  2018  to  April  2019.  A  completely  randomized design with two factorials (BAP and NAA) was used. The observed parameters include the time of shoot growing, shoot height, shoot number, time of root growth, root length, root number, time of leaf growth, and leaf number. The result showed that adding 2 ppm BAP and 0 ppm NAA was able to produce shoots with an average of 2 shoots with the highest average shoot height of 4 cm while giving 2 ppm BAP and 1 ppm NAA was able to produce as many as 7 roots. This shows that giving BAP to a level of 2 ppm and NAA to a level of 1 ppm can stimulate the growth of shoots and roots of kencur in vitro.
Keywords : Kencur, Multiplication, BAP, NAA

## PENDAHULUAN
Tanaman  kencur  merupakan  tanaman  yang banyak digunakan sebagai ramuan obat tradisional  dan  sebagai  bumbu  dalam  masakan sehingga para petani banyak yang membudidayakan tanaman kencur sebagai hasil pertanian  yang  diperdagangkan.  Penyediaan bibit  merupakan  masalah  paling  utama  dalam budidaya kencur secara konvensional. Karakteristik  kencur  yang  bersifat  dorman
menjadi  kendala  utama  sehingga  tidak  tersedia secara  kontinyu.  Kencur  hanya  dapat  ditanam pada musim hujan karena pada musim kemarau rimpang  mengalami  dormansi  sehingga  perlu adanya penyediaan bibit yang tidak berasal dari rimpang serta dapat ditanam disetiap waktu.
Salah  satu  cara  penyediaan  bibit  kencur secara  cepat  dengan  metode  kultur  jaringan kencur.  Kultur  jaringan  yaitu  suatu  teknik
Info Artikel Received : 05 April 2021 Vol. 15  No. 1  Tahun 2021 Revised : 10 April 2021 p-ISSN : 1978-5054 Accepted : 20 April 2021 e-ISSN : 2715-9493
menumbuhkan  sel,  jaringan,  organ  tanaman dalam  media  secara  aseptik.  Eksplan  yang digunakan  yakni  tunas  kencur.  Pada  tanaman yang  diperbanyak  secara  vegetatif,  maka  kultur jaringan merupakan metode yang dapat digunakan  untuk  melakukan  konservasi  [1]. Oleh  karena  itu,  pendekatan  kultur  jaringan dapat  digunakan  sebagai  alternatif  untuk memperbanyak  tanaman  dengan  cepat  dan dalam  jumlah  besar  [2],  termasuk  perbanyakan pada tanaman kencur [3].
Perbanyakan tanaman melalui kultur jaringan perlu  dipacu  menggunakan  beberapa  zat pengatur tumbuh agar hasilnya sesuai keinginan. Penggunanaan  zat  pengatur  tumbuh  seperti sitokinin  dan  auksin  untuk  menginduksi multiplikasi tunas tergantung dari jenis tanaman dan  konsentrasi  zat  pengatur  tumbuh  yang digunakan.  Zat  pengatur  tumbuh  BA  (Benzyl Adenin)  paling  banyak  digunakan  karena mempunyai  aktivitas  yang  kuat  dibanding kinetin [3]. Transfer embrio Kaempferia rotunda yang telah berkembang sempurna ke dalam MS Medium  yang  hanya  berisi  BAP  6  mg/l  juga menghasilkan  planlet  embrio  yang  matang  [4]. Zat  pengatur  tumbuh  yang  digunakan  pada penelitian  ini  adalah Benzyl  Amino  Purine (BAP)  dan Naphthalene  Acetic  Acid (NAA). Fungsi dari kedua zat pengatur tumbuh tersebut adalah merangsang pertumbuhan tunas dan akar. Jika  BAP  lebih  dominan  maka  akan  memacu pertumbuhan tunas dan jika NAA lebih dominan maka akan memacu pertumbuhan akar, sehingga untuk mendapatkan pertumbuhan tunas dan akar yang berimbang  maka diperlukan perbandingan konsentrasi  antara  kedua  ZPT  tersebut  secara seimbang.
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mendapatkan konsentrasi  BAP  dan  NAA  yang  tepat  dalam meningkatkan  multiplikasi  kencur  in  vitro. Penelitian  ini  diharapkan  dapat  memberi manfaat  berupa  pengetahuan  bagi  pelaku  usaha dalam bidang penyediaan bibit kencur sehingga dapat menyediakan bibit secara cepat.

## MATERIAL DAN METODE
Penelitian  ini  dilakukan  di  Laboratorium Fisiologi  Tumbuhan  dan  Bioteknologi  Fakultas Pertanian  Universitas  Sebelas  Maret  Surakarta, mulai  bulan  Maret  2018  sampai  dengan  April 2019.  Penelitian  ini  menggunakan  Rancangan Acak Lengkap (RAL) faktorial yang terdiri atas 2 faktor. Faktor pertama adalah konsentrasi BAP
yang terdiri atas empat taraf yaitu 0 ppm (B0), 2 ppm (B1), 4 ppm (B2), dan 6 ppm (B3). Faktor kedua adalah konsentrasi NAA yang terdiri atas empat  taraf  yaitu  0  ppm  (N0),  0,5  ppm  (N1),  1 ppm  (N2),  1,5  ppm  (N3),  sehingga  diperoleh satu  kontrol  dan  15  kombinasi  perlakuan  dan masing-masing diulang sebanyak tiga kali.
Tata  laksana  penelitian  meliputi  persemaian kencur,  pencucian  botol  kultur,  pembuatan larutan  stok  dan  media  Murashige  and  Skoog (MS),  sterilisasi  alat  dan  eksplan,  kemudian penanaman eksplan dalam media MS. Penanaman eksplan dilakukan di dalam Laminar Air  Flow  (LAF).  Pemeliharaan  dilakukan dengan cara menyemprotkan alkohol sehari dua kali untuk meminimalisir terjadinya kontaminasi. Pemanenan planlet kencur dilakukan  setelah  12  minggu  setelah  tanam (MST).
Peubah  pengamatan  meliputi  saat  muncul tunas,  jumlah  tunas,  tinggi  tunas,  saat  muncul akar,  jumlah  akar,  panjang  akar,  saat  muncul daun,  dan  jumlah  daun.  Data  hasil  penelitian yang  diperoleh  dianalisa  secara  deskriptif, karena  dari  uji  kenormalan  data,  sebaran  data tidak  normal  dan  kelengkapannya  kurang  dari 50%.  Sehingga  data  tidak  dapat  dianalisis dengan menggunakan analisis ragam.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Saat Muncul Tunas
Kemunculan  tunas  merupakan  salah  satu parameter  penting  penentu  keberhasilan  dalam multiplikasi  tunas.  Semakin  banyak  tunas  yang terbentuk  akan  berkorelasi  positif  dengan  bibit yang  dapat  dihasilkan  melalui  kultur  jaringan. Hasil  pengamatan  terhadap  kemunculan  tunas disajikan pada Tabel 1. Berdasarkan pada Tabel 1,  dapat  dilihat  bahwa  secara  keseluruhan eksplan  yang  ditanam  tidak  semua  perlakuan dapat  menumbuhkan  tunas  hingga  periode pengamatan berakhir, yaitu 12 MST.
Kemunculan tunas tercepat (4 HST) terdapat pada perlakuan BAP 6 ppm dengan NAA 1 ppm. Sedangkan  kemunculan  tunas  terlama  terdapat pada  perlakuan  BAP  0  ppm  dengan  NAA  0,5 ppm  yaitu  selama  18  HST.  Menurut  [5]  bahwa sitokinin dikenal untuk meningkatkan pembentukan dan pertumbuhan tunas, sedangkan  auksin  mendorong  induksi  dan perkembangan akar. BAP yang dikombinasikan dengan  auksin  (IAA  dan  NAA)  menunjukkan efek sinergis. Penambahan zat pengatur tumbuh
Info Artikel Received : 05 April 2021 Vol. 15  No. 1  Tahun 2021 Revised : 10 April 2021 p-ISSN : 1978-5054 Accepted : 20 April 2021 e-ISSN : 2715-9493
BAP pada media kultur juga sangat berpengaruh terhadap  kecepatan  munculnya  tunas.  BAP dengan  konsentrasi  2  ppm  dapat  mempercepat munculnya  tunas  eksplan  cendana  [6].  Induksi tunas in vitro kencur juga dapat dilakukan pada media MS yang dilengkapi dengan BAP 2 mg/l dan IAA 0,5 mg/l [7].
Secara  keseluruhan  eksplan  yang  ditanam tidak  semua  perlakuan  dapat  menumbuhkan tunas.  Tingginya  kontaminasi  menghambat terbentuknya  tunas  pada  eksplan  kencur. Kontaminasi  yang  terjadi  di  dominasi  oleh kontaminan  eksternal  yang  berasal  dari  dalam eksplan (endofit) berupa jamur.
Tabel 1. Median dan Modus Saat Muncul Tunas (HST) pada Eksplan dengan Berbagai Konsentrasi BAP dan NAA.
BAP NAA Median Modus 0 ppm 0,5 ppm 1 ppm 1,5 ppm 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 0 ppm 2 ppm 4 ppm 6 ppm 14 11 7 5 10 8 10 8 - - 5 5 18 7 12 - - 5 9 - 10 - 9 - 9 15 5 9 7 10 7 4 - - - - 10 5 10 - - - 7 7 - 7 - - 10 7,5 8 6 10 7 7 5 Median 8 9 8 7 Modus 5 9 9 7
Keterangan: HST = hari setelah tanam, ppm = part per million, - = tidak muncul tunas

## Jumlah Tunas
Pengamatan  jumlah  tunas  dilakukan  untuk melihat  macam  respon  eksplan  yang  diberi konsentrasi  ZPT  yang  berbeda.  Pembentukkan tunas in  vitro sangat  menentukan  keberhasilan
produksi  benih  yang  dapat  di  produksi.  Hal  ini sangat  menentukan  keberhasilan  produksi  bibit secara  cepat  dan  banyak.  Hasil  pengamatan jumlah tunas yang tumbuh disajikan pada Tabel 2.
Tabel 2. Median dan Modus Jumlah Tunas pada Eksplan dengan Berbagai Konsentrasi BAP dan NAA
BAP NAA Median Modus 0 ppm 0,5 ppm 1 ppm 1,5 ppm 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 0 ppm 2 ppm 4 ppm 6 ppm 1 2 2 2 1 2 1 1 - - 1 1 1 1 1 - - 1 2 - 2 - 1 - 1 1 1 1 1 2 1 2 - - - - 1 1 - - - - 2 - - 2 - - 1 1 2 1 1 1 2 1 Median 1 1 1 1,5 Modus 1 1 1 1
Keterangan: ppm = part per million, - = tidak muncul tunas
Berdasarkan  Tabel  2,  dapat  dilihat  bahwa pemberian  konsentrasi BAP sebesar 2 ppm  dan NAA  0  ppm    memiliki  daya  multiplikasi  baik dengan  jumlah  tunas  sebanyak  2  tunas  pada ulangan  pertama  dan  kedua,  namun  tidak berbeda  dengan  beberapa  perlakuan  yang  lain yang  rata-rata  hanya  menghasilkan  1-2  tunas. Hal  ini  menunjukkan  bahwa  pemberian  BAP yang lebih tinggi dari NAA dapat menghasilkan jumlah  tunas  lebih  banyak.  Hasil  ini  didukung hasil  penelitian  [8]  bahwa  konsentrasi  NAA yang  lebih  rendah  dikombinasikan  dengan  BA dapat meningkatkan perbanyakan tunas.
Regenerasi  tunas  pada  tanaman  kencur  juga telah  dilaporkan  oleh  [9].  Jumlah  tunas  yang tinggi  (19,4  pucuk  per  eksplan)  dan  persentase regenerasi  pucuk  (85%)  dicapai  ketika  eksplan rimpang diperlakukan dengan 2,0 mg/l BAP dan 0,2  mg/l  NAA.  Kombinasi  perlakuan  1  mg/l BAP dan 0,5 mg/l IAA juga dapat menginduksi multiplikasi tunas yang tinggi yaitu sebesar 11,5 tunas  per  eksplan  pucuk  [10].  Tunas  muda rimpang  kencur  yang  diambil  sebagai  eksplan dan  ditanam  pada  media  MS  dengan  ditambah NAA  0,54  µM  dan  BA  8,87  µM  dapat menginduksi beberapa tunas [11].
Info Artikel Received : 05 April 2021 Vol. 15  No. 1  Tahun 2021 Revised : 10 April 2021 p-ISSN : 1978-5054 Accepted : 20 April 2021 e-ISSN : 2715-9493

## Tinggi Tunas
Salah  satu  indikator  pertumbuhan  pada eksplan  yang  ditanam  secara in  vitro adalah tinggi  tunas.  Melalui  pengamatan  tinggi  tunas maka  dapat  diketahui  pengaruh  BAP  dan  NAA yang digunakan dalam pertumbuhan organ suatu eksplan. Hasil pengamatan terhadap tinggi tunas dari  eksplan  disajikan  pada  Tabel  3.  Hasil penelitian  menunjukkan  bahwa  tidak  semua eksplan dapat menumbuhkan tunas.
Berdasarkan  Tabel  3  diketahui  bahwa  rata- rata  tinggi  tunas  tertinggi  terdapat  pada perlakuan BAP 2 ppm dan NAA 0 ppm yaitu 4 cm, namun peningkatan konsentrasi BAP diatas 2 ppm tidak  meningkatkan tinggi tunas. Hal ini
menunjukkan  bahwa  efektivitas  BAP  dalam memacu pertumbuhan tunas kencur in vitro yaitu pada konsentrasi 2 ppm. Pada perlakuan BAP 0 ppm  dan  NAA  1,5  ppm  memiliki  tinggi  tunas terendah  yakni  0,4  cm.  Hal  ini  menunjukkan bahwa  tinggi  tunas  dikendalikan  oleh  BAP, sedangkan NAA berperan sesuai fungsinya yaitu untuk  mengatur perakaran.  Pemberian sitokinin ke  dalam  media  kultur  dapat  meningkatkan konsentrasi  zat  pengatur  tumbuh  endogen  di dalam  sel  tanaman  sehingga  menjadi  faktor pemicu  terhadap  respon  pertumbuhan  dan perkembangan jaringan tanaman. Respon jaringan  terhadap  BAP  diantaranya  terjadinya pemanjangan tunas.
Tabel 3. Tinggi Tunas (cm) Pada Berbagai Konsentrasi BAP dan NAA BAP NAA Rata – Rata 0 ppm 0,5 ppm 1 ppm 1,5 ppm 0 ppm 2 ppm 4 ppm 6 ppm 2,4 4 2,1 2,4 2,3 2,1 2,1 - 1,2 3 2,3 2,4 0,4 1 2,2 1,3 1,5 2,5 2,2 2 Rata-rata           2,7               2                 2,2                1,2
Keterangan: - = tidak muncul tunas

## Saat Muncul Akar
Akar merupakan organ vegetatif utama yang menyerap  air,  mineral,  dan  bahan-bahan  yang penting  untuk  pertumbuhan  dan  perkembangan tanaman.  Pada  budidaya  kultur  jaringan pembentukkan  akar  sering  dipicu  oleh  ZPT berupa  auksin  yang  ditambahkan  ke  dalam media.  Hasil  pengamatan  terhadap  waktu munculnya  akar  disajikan  pada  Tabel  4.  Hasil penelitian  menunjukkan  bahwa  tidak  semua eksplan mampu menumbuhkan akar.
Pada Tabel 4 dapat dilihat bahwa waktu yang diperlukan  eksplan  untuk  menumbuhkan  akar berkisar  antara  10  HST  hingga  25  HST.  Saat muncul  akar  tercepat  terdapat  pada  perlakuan BAP 4 ppm dengan NAA 1 ppm yakni 10 HST. Sedangkan  muncul  akar  terlama  terdapat  pada perlakuan BAP 0 ppm dengan NAA 0 ppm yakni 25 HST. Hal ini menunjukkan bahwa pemberian auksin pada media dapat memacu  induksi akar. Menurut [12], bahwa secara umum, rasio auksin terhadap sitokinin tinggi maka akan menguntungkan  dalam  pembentukan  akar. Perakaran  eksplan  kencur  juga  dapat  dilakukan pada media MS yang mengandung auksin seperti NAA  dan  IBA.  Auksin  IBA  1,0  mg/l  dapat
meregenerasikan akar sebesar 96% [9]. Suplemen  medium  MS  dengan  IAA  1,0  mg/l IAA dan IBA 0,2 mg/l dinyatakan sebagai media terbaik untuk induksi akar kencur [7].

## Jumlah Akar
Akar  yang  terbentuk  melalui  proses  kultur jaringan  sering  pula  disebut  sebagai  akar tambahan  yaitu  akar  yang  tumbuh  pada potongan tanaman atau pada kalus dalam kultur. Semakin  banyak  dan  semakin  panjang  akar maka bidang penyerapan nutrisi dari media akan semakin  luas  pula.  Hasil  pengamatan  jumlah akar disajikan pada Tabel 5.
Berdasarkan Tabel 5, jumlah akar terbanyak yaitu  pada  perlakuan  BAP  2  ppm  dan  NAA  1 ppm yakni 7 buah. Pada umumnya induksi akar pada  kultur in  vitro dipengaruhi  oleh  adanya hormon  auksin.  Jumlah  akar  paling  sedikit umumnya terdapat pada perlakuan NAA 0 ppm dengan berbagai konsentrasi BAP.  Menurut [13] tunas  dan  akar  dapat  diproduksi  secara bersamaan  pada  media  MS  yang  didukung dengan konsentrasi sitokinin atau
dikombinasikan dengan auksin.
Info Artikel Received : 05 April 2021 Vol. 15  No. 1  Tahun 2021 Revised : 10 April 2021 p-ISSN : 1978-5054 Accepted : 20 April 2021 e-ISSN : 2715-9493
Tabel 4. Median dan Modus Saat Muncul Akar (HST) dari Eksplan dengan Berbagai Konsentrasi BAP dan NAA.
BAP NAA Median Modus 0 ppm 0,5 ppm 1 ppm 1,5 ppm 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 0 ppm 2 ppm 4 ppm 6 ppm 25 16 14 13 30 11 - 14 - - 11 - 24 16 - - - - 14 - - - - - 17 21 10 15 - - - - - - - - 18 - - - - - 11 - - 13 - - 24 16 11 14 ~ 16 14 ~ Median 14 16 16 13 Modus 11 ~ ~ ~
Keterangan: ppm = part per million, - = tidak muncul akar, ~ = tidak ada modus
Tabel 5. Median Dan Modus Jumlah Akar Dengan Berbagai Konsentrasi BAP dan NAA.
BAP NAA Median Modus 0 ppm 0,5 ppm 1 ppm 1,5 ppm 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 0 ppm 2 ppm 4 ppm 6 ppm 2 5 2 2 1 1 - 4 - - 1 - 2 1 - - - - 2 - - - - - 1 7 2 5 - - - - - - - - 3 - - - - - 4 - - 2 - - 2 2 2 4 2 1 2 ~ Median 2 2 3,5 3 Modus 2 2 ~ ~
Keterangan: ppm = part per million, - = tidak muncul akar, ~ = tidak ada modus

## Panjang Akar
Akar  merupakan  bagian  tanaman  yang berfungsi  untuk  menyerap  nutrisi  pada  media untuk  kemudian  diangkut  ke  bagian  tanaman yang  lain  seperti  batang,  daun  daun.  Semakin
panjang  akar  maka  penyerapan  nutrisi  menjadi lebih  optimal  karena  areal  jangkauannya  lebih luas.    Pengamatan    terhadap  panjang  akar  dari eksplan  telah  dilakukan  dan  hasilnya  disajikan pada Tabel 6.
Tabel 6. Panjang Akar (cm) Dari Eksplan Pada Berbagai Konsentrasi BAP dan NAA
BAP NAA Rata – rata 0 ppm 0,5 ppm 1 ppm 1,5 ppm 0 ppm 0,5 0,5 2,1 0,3 0,5 2 ppm 1,6 1,3 2,1 0,5 1,4 4 ppm 0,5 0,7 0,5 1,7 0,8 6 ppm 1,9 - 0,7 - 1,5 Rata – Rata 1,2 0,8 1,3 0,8 Keterangan: - = tidak muncul akar
Pada  Tabel  6  dapat  dilihat  bahwa  rata-rata panjang  akar  terendah  yakni  pada  perlakuan BAP 0 ppm dan NAA 1,5 ppm. Hal ini didukung oleh  [14]  bahwa  konsentrasi  NAA  yang  lebih tinggi  mampu  menghambat  induksi  dan perpanjangan  akar.  Peningkatan  konsentrasi auksin  merangsang  produksi  etilen  alami  yang dapat menghambat pengakaran. Rata-rata panjang  akar  tertinggi  yakni  2,1  cm  terdapat pada  perlakuan  BAP  0  ppm  dan  BAP  2  ppm
dengan kombinasi konsentrasi NAA yang sama yakni  1  ppm.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa konsentrasi  auksin  terbaik  untuk  pembentukan akar adalah pada 1 ppm.

## Saat Muncul Daun
Waktu  munculnya  daun  merupakan  salah satu variabel pengamatan yang menjadi indikasi terjadinya organogenesis. Pengamatann terhadap  muncul  daun  pada  eksplan  telah
Info Artikel Received : 05 April 2021 Vol. 15  No. 1  Tahun 2021 Revised : 10 April 2021 p-ISSN : 1978-5054 Accepted : 20 April 2021 e-ISSN : 2715-9493
dilakukan  dan  hasilnya  disajikan  pada  Tabel  7. Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  tidak semua eksplan dapat menumbuhkan daun.
Berdasarkan  Tabel  7  saat  muncul  daun tercepat (12 HST) terdapat pada perlakuan BAP 6 ppm dan NAA 0 ppm. Sedangkan kemunculan daun terlama (33 HST) terdapat pada perlakuan BAP  0  ppm  dan  NAA  1,5  ppm.  Penambahan
konsentrasi  sitokinin  sangat  memacu  respon pertumbuhan  daun.  Menurut  [15],  bahwa hormon  endogen  sudah  tercukupi  untuk membentuk  daun  tanpa  adanya  penambahan hormon eksogen, namun tanpa adanya penambahan  hormon  eksogen  mengakibatkan perlakuan  kontrol  mendapat  rerata  munculnya daun paling lama.
Tabel 7. Median Dan Modus Saat Muncul Daun (HST) Dengan Berbagai Konsentrasi BAP Dan NAA.
BAP NAA Median Modus 0 ppm 0,5 ppm 1 ppm 1,5 ppm 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 0 ppm 2 ppm 4 ppm 6 ppm 25 32 16 12 -   23 - 18 - - - - 25 21 - - - - - - - - - - 23 27 20 21 - - - - - - - - 33 - - - - - 16 - - - - - 25 25 16 18 25 ~ 16 ~ Median 2  0,5 23 2 2   4,5 Modus ~ ~ ~ ~
Keterangan: ppm = part per million, - = tidak muncul daun, ~ = tidak ada modus

## Jumlah Daun
Daun  merupakan  organ  yang  sangat  penting karena  menyimpan  cadangan  makanan  yang digunakan untuk pembentukan organ yang baru. Interaksi antara zat pengatur tumbuh dan macam eksplan sangat mempengaruhi
proses
pembentukan  daun,  yang  berpengaruh  pula terhadap  jumlah  daun  yang  akan  terbentuk. Pengamatan  terhadap  jumlah  daun  yang terbentuk telah dilakukan dan hasilnya disajikan pada Tabel 8.
Tabel 8. Median Dan Modus Jumlah Daun Dengan Berbagai Konsentrasi BAP Dan NAA.
BAP NAA Median Modus 0 ppm 0,5 ppm 1 ppm 1,5 ppm 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 0 ppm 2 ppm 4 ppm 6 ppm - 3 2 3 - 1 - 3 - - - - 1 2 - - - - - - - - - - 1 1 2 3 - - - - - - - - 1 - - - - - 2 - - - - - 1 1,5 2 3 1 1 2 3 Median 3 1,5 1,5 1,5 Modus 3 ~ 1 ~
Keterangan: ppm = part per million, - = tidak muncul daun, ~ = tidak ada modus
Berdasarkan  Tabel  8  dapat  dilihat,  bahwa daun  yang  tumbuh  kebanyakan  terdapat  pada perlakuan  NAA  0  ppm  dengan  berbagai konsentrasi  BAP  dengan  median  yakni  3. Sedangkan  jumlah  daun  terendah  terdapat  pada perlakuan  BAP  0  ppm  dengan  berbagai konsentrasi  NAA  dengan  median  yakni  1.  Hal ini sesuai  dengan penelitian [16] pada  kultur in vitro Kaempferia  parviflora ,  jumlah  daun  yang terbentuk pada masing-masing perlakuan berkisar  antara  1  sampai  3  helai.  Jumlah  daun paling banyak terdapat pada kombinasi sukrosa 90  g/l  tanpa  BAP.  Perlakuan  sukrosa  ternyata
juga  sangat  ekonomis  dan  cepat  memproduksi mikro rhizoma dalam jumlah besar dalam waktu singkat [17].
Kombinasi  hormon  auksin  dan  sitokinin mempengaruhi pertumbuhan tunas yang kemudian  berdiferensiasi  membentuk  organ tanaman  lainnya  salah  satunya  daun.  Menurut [18],  bahwa  sitokinin  sangat  efektif  dalam menginduksi tunas baik secara langsung maupun tidak  langsung  yang  selanjutnya  berdiferensiasi menjadi daun.
Info Artikel Received : 05 April 2021 Vol. 15  No. 1  Tahun 2021 Revised : 10 April 2021 p-ISSN : 1978-5054 Accepted : 20 April 2021 e-ISSN : 2715-9493

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian dapat disimpulkan:
a. Pertumbuhan  tunas  tercepat  terdapat  pada perlakuan  BAP  6  ppm  dengan  NAA  1  ppm, yaitu 4 HST;
b. Jumlah  tunas  terbanyak  terdapat  pada  BAP sebesar 2 ppm dan NAA 0 ppm, yaitu 2 tunas;
c. Tinggi  tunas  tertinggi  terdapat  pada  BAP  2 ppm dan NAA 0 ppm yaitu 4 cm;
d. Kemunculan akar tercepat terdapat pada BAP 4 ppm dengan NAA 1 ppm yakni 10 HST;
e. Rata-rata  jumlah  akar  terbanyak  terdapat pada  BAP  2  ppm  dan  NAA  1  ppm  yakni  7 buah;
f. Rata-rata panjang akar tertinggi terdapat pada BAP  0  ppm  dan  BAP  2  ppm  dengan kombinasi  konsentrasi  NAA  yang  sama  1 ppm, yaitu 2,1 cm;
g. Kemunculan  daun  tercepat  terdapat  pada BAP 6 ppm dan NAA 0 ppm, yaitu 12 HST;
h. Daun yang tumbuh terbanyak  terdapat pada NAA  0  ppm  dengan  berbagai  konsentrasi BAP dengan median yakni 3.

## DAFTAR PUSTAKA
[1] Ahmad  D,  Wicaksana  N,  Shimazaki  T, Kikuch,  A,  Jatoi  SA,  Watanabe,  KN. 2011.  Environmentally  safe  in  vitro regeneration  protocol  for  Curcuma,
Kaempferia  and  Zingiber. African  J Biotechnol . Vol. 10 No. 43: 8584–92.
[2] Ayob  Z,  Wagiran  A,  and  Samad  AA. 2013.  Potential  of  tissue  cultured medicinal plants in Malaysia. J Teknol (Sciences Eng.) Vol. 62 No.1: 111–7.
[3] Lestari EG and Hutami S. 2005. Produksi bibit  kencur  (Kaempferia  galanga  L.) melalui kultur jaringan. Ber Biol . Vol.
7 No. 6: 315–21.
[4] Mustafaanand  PH.  2014.  In-vitro  plant regeneration  in  Kaempferia  rotunda Linn. through somatic embryogenesis - a  rare  medicinal  plant. Int.  J.  Curr.
Microbiol. App. Sci Vol. 3 No. 9: 409– 14.
[5] Ngomuo  M,  Mneney  E,  and  Ndakidemi PA.  2014.  The  in  vitro  propagation techniques for producing banana using shoot tip cultures. Am J Plant Sci. Vol. 5 No. 11
[6] Ginting  BAA,  and  Resmisari  RS.  2017. Shoot  regeneration  of  Sandalwood
(Santalum  album  L.)  by  different media  and  Benzile  Amino  Purine (BAP)  concentrations .  Proc.  of  Int Conf on Green Technol. Vol. 8 No. 1: 353–7.
[7] Senarath  RMUS,  Karunarathna  BMAC, Senarath  WTPSK,  and  Jimmy  GC. 2017. In vitro propagation of Kaempferia  galanga  (zingiberaceae) and  comparison  of  larvicidal  activity and phytochemical identities of rhizomes  of  tissue  cultured  and naturally  grown  plants. J  Appl Biotechnol Bioeng . Vol. 2 No.4: 157– 62.
[8] Ferdous  MM,  Shahinozzaman  M,  Faruq MO, Paul SP, Azad MAK, and Amin, MN.  2012.  In  vitro  propagation  of  a medicinal  plant  -  mango  ginger (Curcuma amada Roxb.). Int J Biosci . Vol. 2 No. 11: 166–72.
[9] Kalpana M, and Anbazhagan M. 2009. In vitro production of Kaempferia galanga (L.) - an endangered medicinal plant. J Phytol. Vol. 1 No. 1: 56–61.
[10]   Parida  R,  Mohanty  S,  Kuanar  A,  and Nayak  S.  2010.  Rapid  multiplication and in vitro production of leaf biomass in  Kaempferia  galanga  through  tissue culture. Electron J Biotechnol . Vol. 13 No. 4.
[11]   Rajasekharan  PE,  Ambika  SR,  and Ganeshan S. 2015. In vitro regeneration  and  conservation  of Kaempferia  galanga.  2(2):  35–43. https://www.researchgate.net/publicati on/275036584
[12]   Raihana  R,  Faridah  QZ,  Julia  AA,
Abdelmageed  AHA,  and  Kadir  MA. 2011.  In  vitro  culture  of  curcuma mangga  from  rhizome  bud. J  Med Plant Res . Vol. 5 No. 28: 6418–22.
[13]   Yusuf NA, Annuar MMS, and Khalid N. 2011.  Rapid  micropropagation  of Boesenbergia  rotunda  (L.)  Mansf. Kulturpfl. (a valuable medicinal plant) from  shoot  bud  explants. African  J Biotechnol Vol 10 No.7: 1194–9.
[14]   Eldessoky  DS,  Ismail  RM,  Abdel-Hadi AHA,  and  Abdallah,  N.  2011. Establishment  of  regeneration  and transformation  system  of  sugarcane cultivar GT54-9 (C9). GM Crops. Vol.
Info Artikel Received : 05 April 2021 Vol. 15  No. 1  Tahun 2021 Revised : 10 April 2021 p-ISSN : 1978-5054 Accepted : 20 April 2021 e-ISSN : 2715-9493
2 No. 2: 126–34.
[15]   Dewi  IS,  Wahyuni  DK,  and  Purnobasuki H.  2012.  Perkembangan  kultur  daun Aglonema  sp.  var  Siam  Pearl, Aglonema  sp.  var  Lady  Valentin  dan
Aglonema  sp.  var  Lipstik  dengan perlakuan  zat  pengatur  tumbuh  IAA dan BAP. Berk. Penel. Hayati Vol. 17 :
197–203.
[16]   Kafindra L, Khumaida N, and Ardie SW.
2015. Induksi Rimpang Mikro Kaempferia  parviflora  secara  In  Vitro dengan Penambahan BAP dan Sukrosa. J  Horti  Indonesia. Vol. 6 No.1: 54–63.
[17]   Labrooy C, Abdullah TL, and Stanslas J. 2020.  Influence  of  N6-Benzyladenine and  sucrose  on  in  vitro  direct regeneration and
microrhizome
induction  of  Kaempferia  parviflora Wall. ex Baker, an important ethnomedicinal herb of Asia. Tropical Life Sci Res, Vol. 31 No. 1: 123–39.
[18]   Karjadi  A,  and  Buchory  A.  2007. Pengaruh  NAA  dan  BAP  terhadap pertumbuhan jaringan meristem bawang  putih  pada  media  B5. J  Hort. Vol. 17 No.3: 217–23.