PERBEDAAN JUMLAH TROMBOSIT PADA DARAH EDTA YANG SEGERA DIPERIKSA DAN PENUNDAAN SELAMA 1 JAM DI LABORATORIUM RSJ GRHASIA YOGYAKARTA

## Sujud, Ratih Hardiasari, Anik Nuryati
Jurusan Analis Kesehatan Kemenkes Yogyakarta Ngadinegaran MJ III/62 Yogyakarta 55143, 0274-374200 e-mail : Sujud70@yahoo.com.id
Abstract :  Pre-analytical phases is a very  important  stage and need to be considered properly. Pre-analytical phases of which is the process of blood sampling, sample delivery, the inclusion of the type  of  inspection,  sample  preparation  and  selection  tools. A fact  which  still  often  the  case that their neglect by nurses or laboratory personnel in taking and processing the blood samples. Blood  samples  for  examination  platelet  counts  as  much  as  possible  is  done  properly  and  the sample  must  be  examined  in  less  than  1  hour  after  taking  blood.  Delays  checks  can  cause  a decrease in platelet count. Delays often occur for over an hour due to the shipment of samples from wards that are not immediately performed or work shift lab personnel. The aim of research to determine the difference in the number of platelets in the blood EDTA is immediately checked and a delay of 1 hour by using KX-21 Hematology analyzer. Experimental study design with pre- and post-test study without control. The study was conducted at the Laboratory of RSJ Grhasia Yogyakarta, with the object of research is venous blood from patients RSJ Grhasia between the ages of 20-50 years of both men  - men and women.  Data were  analyzed parametric statistical tests Paired samples t-test. The results of significant research value of the results of parametric statistical  tests  Paired  samples  t-test  was  0,000  (sig  <0.05). There  is  a  difference  between  the number of blood platelets EDTA is immediately checked and a delay of 1 hour.
Keywords : platelet count, blood EDTA, time delays.
Abstrak : Tahapan Pra-analitik merupakan tahapan yang sangat penting dan perlu diperhatikan dengan  baik.  Tahapan  pra-analitik  diantaranya  adalah  proses  pengambilan  darah,  pengiriman sampel, pencatuman jenis pemeriksaan, persiapan sampel dan pemilihan alat. Fakta yang masih sering terjadi yaitu adanya pengabaian oleh perawat atau tenaga laboratorium dalam mengambil dan  mengolah  sampel  darah.  Pengambilan  sampel  darah  untuk  pemeriksaan  jumlah  trombosit sebisa mungkin dilakukan dengan benar dan sampel harus segera diperiksa dalam waktu kurang dari 1 jam setelah pengambilan darah. Penundaan pemeriksaan dapat menyebabkan penurunan jumlah  trombosit.  Penundaan  sering  terjadi  selama  lebih  satu  jam  dikarenakan  pengiriman sampel  dari  bangsal  yang  tidak  segera  dilakukan  atau  pergantian shift kerja  petugas laboratorium. Tujuan penelitian untuk mengetahui perbedaan jumlah trombosit pada darah EDTA yang  segera  diperiksa  dan  penundaan  selama  1  jam  dengan  menggunakan  alat Hematology Analizer KX-21. Penelitian  eksperimen  dengan  desain  penelitian pre  and  post  test  without control. Penelitian dilakukan di Laboratorium RSJ Grhasia Yogyakarta, dengan obyek penelitian adalah darah vena dari pasien RSJ Grhasia dengan umur antara 20  – 50 tahun baik laki – laki maupun perempuan. Data  dianalisa uji statistik parametrik Paired Sampel t-Test. Hasil penelitian Nilai signifikan dari hasil uji statistik parametrik dengan Paired Sampel t-Test adalah 0,000 (sig <0,05). Ada  perbedaan  antara  jumlah  trombosit  darah  EDTA  yang  segera  diperiksa  dan penundaan selama 1 jam.
Kata Kunci :Jumlah trombosit, darah EDTA, waktu penundaan.

## Medical Laboratory Technology Journal
Available online at : http://ejurnal-analiskesehatan.web.id

## PENDAHULUAN
Pemeriksaan Hematologi yang termasuk dalam Faal Hemostasis yaitu Hitung
Trombosit, Clothing  Time,  Blooding  Time, Plasma  Prothrombine  Time , Activated  Partial Thromboplastin Time . Salah satu pemeriksaan faal  hemostasis  yang  penting  adalah  hitung trombosit.  Pemeriksaan  ini  bertujuan  untuk menghitung  jumlah  trombosit  yang  ada  pada tiap  1  ml  darah.  Penurunan  jumlah  trombosit yang signifikan tentu akan berpengaruh dalam proses  pembekuan  darah.  Sampel  yang  akan digunakan dalam pemeriksaan Hitung trombosit adalah darah vena dengan antikoagulan EDTA ( Ethylendiamine Tetyraacetic  Acid )  yang  berfungsi  untuk mencegah  penggumpalan  trombosit.Karena sesuatu  hal,  kadang  pemeriksaan  ini  harus tertunda  selama  beberapa  waktu.  Meskipun demikian  dianjurkan agar  semua pemeriksaan hematologi  dikerjakan  paling  lama  dua  jam setelah pengambilan sampel, karena dikawatirkan  akan  terjadi  perubahan  sifat, morfologi maupun jumlah sel yang ada.
Hitung  trombosit  merupakan  salah  satu pemeriksaan  yang  sangat  penting  untuk berbagai  kasus  baik  yang  menyangkut hemostasis  maupun  kasus  lain  yang  meliputi penegakan  diagnosis,  penilaian  hasil  terapi atau  perjalanan  suatu  penyakit,  penentuan prognosis  dan  penilaian  berat  tidaknya  suatu penyakit . Hal tersebut dapat terjadi jika dalam mengerjakan sampel harus memperhatikan hal –  hal  yang  dimulai  dari  persiapan  alat, persiapan tempat pengambilan,
cara pengambilan sampel, volume sampel, tindakan sesudah pengambilan sampel
dan penanganan sampel yang telah diambil.
Jumlah trombosit di dalam tubuh sangat dipengaruhi oleh berbagai faktor. Secara garis besar  nilai  normal  (rentang  normal)  jumlah trombosit antara 110 ribu sampai 450 ribu per mm 3 darah .
Trombosit dihitung
dengan menggunakan  mesin  hitung  elektrik  sehingga banyak  trombosit  yang  dapat  dihitung.  Teknik ini dapat menimbulkan kesalahan kalau jumlah lekosit  melebihi  100.000/mm 3 ,  bila  ada fragmentasi  eritrosit  yang  berat,  bila  larutan pengencer  tidak  bebas  partikel,  bila  sampel darah  dibiarkan  bebas  terlalu  lama  sebelum
dilakukan  pemeriksaan  atau  bila  trombosit melekat satu dengan yang lain.
Pengambilan  sampel  darah  untuk pemeriksaan  jumlah  trombosit  diusahakan dilakukan  dengan  benar  dan  harus  segera diperiksa  dalam  waktu  kurang  dari  1  jam setelah  pengambilan  darah  .  Penundaan pemeriksaan  dapat  menyebabkan  penurunan jumlah  trombosit,  tetapi  jika  terdapat  suatu sebab pemeriksaan untuk tidak bisa dilakukan segera  maka  sampel  boleh  disimpan  pada suhu 4 – 8 0 C .
Kondisi  yang  terjadi  di  Rumah  Sakit Jiwa  Grhasia  pada  prakteknya  terutama  yang sering terjadi pada rawap inap, sering terdapat penundaan pemeriksaan sampel, sering terjadi penundaan pemeriksaan sampel darah selama lebih  1  jam.  Pemeriksaan    sampel  darah tersebut  tertunda sampai melebihi waktu yang seharusnya dianjurkan  dalam  pemeriksaan sampel darah dikarenakan pengiriman sampel dari bangsal yang tidak segera dilakukan atau petugas  laboratorium  dalam  pengambilan sampel  darah  tidak  segera  diperiksa  di laboratorium  dikarenakan  pergantian  shif  jaga atau  petugas  laboratorium  dalam  melakukan pengambilan  sampel  terlalu  lama  di  bangsal dikarenakan  pasien  yang  mau  diambil darahnya  terlalu  banyak.  Peneliti  berdasarkan hal tersebut, bermaksud melakukan pemeriksaan  Hitung  Jumlah  Trombosit  pada darah  EDTA  yang  segera  diperiksa    dan penundaan selama satu jam.

## BAHAN DAN METODE
Jenis  penelitian  ini  adalah  penelitian eksperimen  yaitu  percobaan  yang  berupa perlakuan  atau  intervensi  terhadap  suatu variabel (Notoatmodjo,2005). Eksperimen yang dilakukan  yaitu  dengan  memeriksa  jumlah trombosit  pada  sampel  darah  EDTA  dengan menggunakan  metode  otomatis  memakai  alat Sysmex  yang  langsung  diperiksa.  Selain  itu juga  dilakukan  pemeriksaan  jumlah  hitung vena  mediana  cubitti dengan  obyek  penelitian berasal dari pasien Rumah Sakit Jiwa Grhasia Yogyakarta  yang  sehat  jasmani.  Riwayat penyakit  diketahui  dengan  melakukan wawancara  terhadap  keluarga  pasien  dan Buku  Medical  Record  sebelum  melakukan penelitian.  Jumlah   sampel    yang  digunakan
sebanyak  30  sampel  dengan  menggunakan antikoagulan trombosit  sampel  darah  EDTA dengan  penundaan  selama  satu  jam.  Desain penelitiannya  adalah pre  and  post  without control .  Jumlah  trombosit  dengan  sampel darah  EDTA  langsung  diperiksa  adalah pre test ,  sedangkan  jumlah  trombosit  setelah pendiaman satu jam adalah post test .
Subyek penelitian ini adalah darah vena dari  pasien  RSJ  Grhasia  DIY  sebanyak  30 sampel  baik  laki  –  laki  maupun  perempuan dengan umur sekitar 20  – 50 tahun, tidak ada riwayat  penyakit  yang  berhubungan  dengan kelainan  darah  terutama  penyakit  yang berkaitan  dengan  proses  hemostasis.  Riwayat penyakit  diketahui  dari  dengan  cara  melihat buku Medical  Record atau  buku  Daftar  Isian
Riwayat Pasien.
Jumlah  trombosit  yang  terdapat  pada tabung  vacuntainer  sampel  darah  EDTA  yang akan  diperiksa  dengan  alat Hematology Analizer KX 21

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Data  penelitian  ini  diperoleh  dari  hasil penelitian  terhadap  jumlah  trombosit  yang dilakukan pada bulan Juli 2014. Sampel darah yang  digunakan  diambil  dari  EDTA.  Masing- masing  sampel dilakukan  pemeriksaan  jumlah trombosit  dengan  menggunakan  sysmex  KX- 21 tanpa pendiaman (0 jam) dan pemeriksaan jumlah  trombosit  setelah  pendiaman  selama satu  jam.  Data  yang  diperoleh  kemudian dilakukan uji deskriptif dan statistik.

## Analisis Deskriptif

## Tabel 1. Uji Deskriptif Rata-Rata Jumlah Trombosit
Jumlah Rerata Nilai Teren- dah Nilai Tertinggi Penurunan (%) Tanpa pendiaman (0 jam) dalam (sel/mm 3 ) 30 285.333 166.000 481.000 0 Pendiaman (1 jam) dalam (sel/mm 3 ) 30 278.700 160.000 480.000 2,32%
Berdasarkan  tabel  hasil  uji  deskriptif  di  atas dapat  diketahui  dari  30  sampel  darah  EDTA tanpa  pendiaman  (0  jam)  didapatkan  rata-rata jumlah  trombosit  adalah  285.333  sel/mm 3 dengan  nilai  terendah  166.000  sel/mm 3 dan nilai tertinggi 481.000 sel/mm 3 . Dari 30 sampel darah  EDTA  yang  didiamkan  selama  1  jam didapatkan  rata-rata  jumlah  trombosit  adalah
278.700  sel/mm 3 dengan  nilai  terendah 160.000  sel/mm 3 dan  nilai  tertinggi  480.000 sel/mm 3 ,  kemudian  jika  dibandingkan  dengan tanpa pendiaman (0 jam) dihasilkan penurunan jumlah trombosit sebesar 2,32%. Dari nilai rata -rata jumlah trombosit, maka dapat ditunjukkan dengan  grafik  (gambar.5)  untuk  melihat perbedaannya.
Gambar 6: Grafik Perbedaan Rerata Jumlah Trombosit pada Darah EDTA Tanpa Penundaan (0 jam) dan Darah EDTA Dengan Penundaan 1 jam
Gambar  grafik  di  atas  menunjukkan  bahwa rata-rata  jumlah  trombosit  pada  sampel  darah EDTA  tanpa  penundaan  (0  jam)  lebih  tinggi dibandingkan  pada  sampel  darah  EDTA dengan penundaan selama 1 jam.

## Analisis Statistik
Data  yang  sudah  dianalisis  secara deskriptif  kemudian  dilakukan  uji  statistik.  Uji statistik  diawali  dengan  uji  normalitas  data untuk  mengetahui  data  penelitian  tersebut berdistribusi normal  atau  tidak  dengan menggunakan  uji One-Sample  Kolmogorov Smirnov test . Syarat uji normalitas data adalah apabila  nilai  signifikan  <0,05  maka  data tersebut  tidak  normal  (H0  ditolak)  dan  apabila nilai  signifikan  >0,05  maka  data  tersebut normal (H0 diterima).
Berdasarkan  perhitungan  statistik  untuk uji  normalitas  data  didapatkan  nilai  signifikan untuk  kelompok  data  sampel  EDTA  tanpa penundaan  (0  jam)  adalah  0,696  dan  nilai signifikan  untuk  kelompok  data  sampel  EDTA dengan penundaan 1 jam adalah 0,832. Kedua kelompok  data  menunjukan  nilai  signifikan >0,05  sehingga  dapat  disimpulkan  bahwa kedua  kelompok  data  tersebut  berdistribusi normal dan data dapat dianalisa menggunakan statistik  parametrik.
Uji  statistik  parametrik  yang  dapat menunjukan  ada  tidaknya  perbedaan  hasil jumlah  trombosit  pada  sampel  darah  EDTA tanpa  penundaan  dan  sampel  darah  EDTA dengan  penundaan  selama  1  jam  adalah  uji beda  untuk  sampel  yang  tidak  saling berhubungan  ( Paired  Sample  t-Test )  dengan taraf signifikan 5%. Syarat uji Paired Sample t- Test adalah apabila nilai signifikan <0,05 maka ada  perbedaan  (H0  ditolak)  dan  apabila  nilai signifikan  >0,05  maka  tidak  ada  perbedaan (H0 diterima).
Hasil uji beda dengan Paired Sample t- Test diperoleh  nilai  t  hitung  pada  varians homogeny  sebesar  6,896  dengan  nilai signifikan  0,000.  Berdasarkan  perhitungan statistik  nilai  signifikan  tersebut  <0,05,  maka H0  ditolak  atau  Ha  diterima,  sehingga kesimpulan dari hasil uji statistik ini adalah ada perbedaan hasil jumlah trombosit pada sampel darah EDTA tanpa penundaan (0 jam) dengan sampel darah EDTA dengan penundaan 1 jam.
Fakta  yang  didapat  dari  penelitian  ini adalah rata-rata jumlah trombosit pada sampel darah  EDTA  tanpa  pendiaman  (0  jam)  lebih tinggi  dari  pada  sampel  darah  EDTA  yang didiamkan  selama  1  jam.  Pada  sampel  darah EDTA  tanpa  pendiaman  (0  jam)  didapatkan rata-rata jumlah trombosit adalah 285.333 sel/ mm 3 sedangkan  sampel  darah  EDTA  yang didiamkan  selama  1  jam  didapatkan  rata-rata jumlah  trombosit  adalah  278.700  sel/mm 3 , kemudian jika dihitung persentase penurunannya  maka  dihasilkan  penurunan jumlah  trombosit  sebesar  2,32%.  Hal  ini dikarenakan  pada  dasarnya  darah  dengan antikoagulan  apabila  tidak  segera  diperiksa akan menyebabkan perubahan morfologi pada sel  darah.  Trombosit  akan  terus  aktif melakukan  metabolisme  jika  disimpan  pada suhu ruang. Hasil metabolisme tersebut adalah akumulasi laktat dan penurunan pH. Trombosit yang  memiliki  pH  dibawah  6,0  –6,2  akan menyebabkan  ketahan  trombosit  menurun. Selain  itu  akan  mengakibatkan  sel  trombosit mengalami perbesaran dan disintegrasi.Pengaruh  lama  pendiaman  dapat menyebabkan trombosit akan mengumpul dan membengkak  kemudian  membentuk  fragmen dengan  ukuran  yang  lebih  kecil  dari  trombosit sehingga tidak terhitung sebagai trombosit.

## KESIMPULAN
Ada  perbedaan  jumlah  trombosit  darah EDTA  yang  segera  diperiksa  dan  penundaan selama 1 jam. Jumlah minimal hitung trombosit pada  darah  EDTA  yang  segera  diperiksa setelah  pengambilan  sampel  (0  jam)  adalah 166.000  sel/mm 3 dan  maksimal  adalah 481.000  sel/mm 3 .  Jumlah  minimal  hitung trombosit  pada  darah  EDTA  setelah  waktu penundaan  selama  1  jam  adalah  160.000  sel/ mm 3 dan  maksimal  adalah  480.000  sel/mm 3 . Selisih  rerata  hitung  jumlah  trombosit  darah EDTA  yang  segera  diperiksa  dan  setelah waktu penundaan selama 1 jam adalah 2,32%

## SARAN
Penelitian  ini  berlaku  untuk  hasil pemeriksaan  pada  jumlah  trombosit  yang normal, sehingga untuk kasus kelainan jumlah trombosit seperti trombositopenia perlu penelitian lebih lanjut.

## DAFTAR PUSTAKA
Aulia, D. (1992), Pemeriksaan Penyaring pada Kelainan Hemostasis, dalam : Setyabudy, R (Ed). (1992). Hemostasis dan Trombosit. Yogyakarta  :  Balai  Penerbit FKUI.
Sacher  R. A. Dan Richard A. McPherson, alih bahasa  :  Brahm  U.Pendit  dan  Dewi Wulandari,  editor  :  Huriawati  Hartanto.
(2004). Tinjauan Klinis Hasil Pemeriksaan Laboratorium, edisi 11. Jakarta : EGC. Sukorini,  U.  Nugroho,D,  K.    Rizki,M. Hendriawan,  B.P.J    (2010). Pemantapan
Mutu Internal Laboratorium Klinik .
Yogyakarta: Alfa Media. Yamin,  G,  dkk.  (2004). Pedoman  Praktek Laboratorium yang Benar (Good
Laboratory  Practice). Jakarta  :  Direktorat Laboratorium  Kesehatan  Departemen Kesehatan RI.
Widmann  F,K,  (1992). Tinjauan  Klinis  Atas Hasil  Pemeriksaan  Laboratorium,  edisi 9. Jakarta :EGC. Widjajanto.  (2004). Regulasi  Koagulasi  dan Fibrinolisis, dalam  :  Sutaryo  (ed).2004. Tata Laksana Syok dan Perdarahan Pada DBD. Yogyakarta : Medika FK-UGM.