## PENAPISAN FITOKIMIA DAN ANALISIS KADAR FLAVONOID
TOTAL  RIMPANG TEMU MANGGA ( Curcuma mangga Valeton &
Zijp. ) DENGAN PERBEDAAN POLARITAS PELARUT
Dwi Susiloningrum 1 , Dania Indrawati 2 1-2 Program Studi S-1 Farmasi, Stikes Cendekia Utama Kudus Email: dsusiloningrum@gmail.com

## ABSTRAK
Rimpang  temu  mangga  merupakan  salah  satu  tanaman  keluarga Zingeberaceae .  Rimpang  ini banyak  ditemukan  di  Indonesia  dan  digunakan  sebagai  tanaman  obat.  Salah  satu  metabolit dalam tanaman ini adalah flavonoid. Tujuan Penelitian ini untuk mengetahui metabolit sekunder dan kadar flavonoid dari rimpang temu mangga dengan perbedaan polaritas pelarut. Penelitian ini  adalah  penelitian  eksperimental.  Rimpang  temu  mangga  diekstraksi  dengan  cara  maserasi menggunakan  pelarut  etanol  80 %  dan  etil  asetat.  Ekstrak  etanol  80  % dan ekstrak  etil  asetat dilakukan  pengujian  kandungan  metabolit  sekunder  dengan  cara  penapisan  fitokimia  metode tabung  dan  kromatografi  lapis  tipis  (KLT).  Penentuan  kadar  flavonoid  total  menggunakan metode  spektrofotometri  UV-Vis.  Data  dianalisis  menggunakan  uji  normalitas  data Shapiro- Wilk dan homogenitas dan dilanjutkan uji independent sample t-test . Hasil Penapisan fitokimia metode  tabung  ekstrak  etanol  80  %  dan  ekstrak  etil  asetat  mengandung  flavonoid,  tanin, saponin, dan alkaloid. Analisis kromatografi lapis tipis pada ekstrak etanol 80 % dan ekstrak etil asetat  mengandung  flavonoid  yaitu  timbulnya  bercak  noda  berwarna  kuning  dengan  nilai  Rf berturut-turut yaitu 0,68 dan 0,7. Berdasarkan uji independent sample t test tidak ada perbedaan bermakna pada kadar flavonoid total ekstrak etanol 80 % dan ekstrak etil asetat yaitu 65,77 % ± 2,21 dan 60,92 % ± 4,55.
Kata  Kunci : Rimpang  temu  mangga  ( Curcuma  mangga Valeton  &  Zijp.),  Kadar Flavonoid Total, etanol, etil asetat

## ABSTRACT
Temu  mangga  rhizome  is  a  plant  of  the  Zingeberaceae  family.  This  rhizome  is  found  in Indonesia and is used as a medicinal plant. One of the metabolites in this plant are flavonoids. The purpose of this study was to determine the secondary metabolites and levels of flavonoids from the temu  mangga  rhizome  with  difference in polarity  of the  solvent.  This research is an experimental research. Temu mango rhizome was extracted by maceration using ethanol 80% and ethyl acetate as solvent. The 80% ethanol extract and ethyl acetate extract were tested for secondary metabolite content by means of phytochemical screening using tube method and thin layer  chromatography  (TLC).  Determination  of  total  flavonoid  levels  using  the  UV-Vis spectrophotometric method. The data were analyzed using the Shapiro-Wilk data normality test

## CENDEKIA UTAMA
Jurnal Keperawatan dan
Kesehatan Masyarakat
STIKES Cendekia Utama Kudus
P-ISSN  2252-8865 E-ISSN  2598-4217 Vol. 9, No. 2 - Oktober, 2020
Tersedia Online: htpp://jurnal.stikescendekiautamakudus.ac.id
and  homogeneity  and  continued  with  the  independent  sample  t-test.  Results  Phytochemical screening by tube method of 80% ethanol extract and ethyl acetate extract contained flavonoids, tannins,  saponins,  and  alkaloids. Thin  layer  chromatography analysis  of  80% ethanol  extract and ethyl acetate extract contained flavonoids, namely the appearance of yellow stains with Rf values  of  0.68  and  0.7,  respectively.  Based  on  the  independent  sample  t  test,  there  was  no significant  difference  in  the  total  flavonoid  levels  of  80%  ethanol  extract  and  ethyl  acetate extract, namely 65.77% ± 2.21 and 60.92% ± 4.55.
Keywords: Curcuma mangga Valeton & Zijp, total flavonoids, ethanol, ethyl acetat

## LATAR BELAKANG
Tanaman  obat  adalah  tanaman  yang  salah  satu  atau  seluruh  bagiannya mengandung senyawa aktif yang dapat bermanfaat bagi kesehatan tubuh. Tanaman obat dapat digunakan dalam pencegahan maupun pengobatan penyakit. Bagian tanaman yang sering digunakan yaitu daun, buah, bunga, akar, rimpang, batang (kulit) dan getah atau resin (Sada, 2010). Salah satu tanaman obat yang ada di Indonesia adalah rimpang temu mangga.
Rimpang temu mangga ( Curcuma mangga Valeton &Zijp) merupakan salah satu keluarga Zingeberaceae dan memiliki kandungan metabolit sekunder seperti  flavonoid ((Madihah, Alfina, dan Gani, 2016).
Flavonoid mempunyai 15 atom karbon dengan cincin benzen (C6) yang tertarik dengan rantai propana (C3) sehingga terbentuk susunan rantai C6-C3-C6. Berdasarkan penelitian  Marliani,  Budiana,  &  Anandari  (2017)  menjelaskan  bahwa  penggunaan pelarut berpengaruh terhadap kadar flavonoid yang diperoleh dari proses ekstraksi.
Flavonoid  merupakan  metabolit  sekunder  yang  bersifat  polar  karena  tersebar luas  pada  tumbuhan  yang  berbentuk  glikosida  dan  berikatan  dengan  gula.  Metabolit sekunder  ini  dapat  larut  dalam  pelarut  polar  seperti  etanol,  air,  metanol,  serta  pelarut semi polar seperti etil asetat, maupun campuran pelarut tersebut yang dapat digunakan untuk  menarik  senyawa  flavonoid  dari  tanaman  tersebut  (Ekawati  dan  Suirta,  2017). Sebaliknya,  flavonoid  juga  mempunyai  aglikon  yang  bersifat  kurang  polar  seperti isoflavon,  flavanon,  flavon,  serta  flavonon  yang  cenderung  lebih  mudah  larut  dalam pelarut seperti eter dan kloroform (Markham, 1988).
Metabolit  sekunder  dalam  tumbuhan  dapat  diperoleh  dengan  cara  ekstraksi. Faktor  yang  harus  diperhatikan  dalam  proses  ekstraksi  salah  satunya  yaitu  pemilihan pelarut  yang  harus  sesuai  dengan  polaritas  suatu  senyawa.  Berdasarkan  kepolarannya pelarut  dibagi  menjadi  tiga  yaitu  pelarut  polar,  semi  polar,  dan  non  polar  (Suryani  & Permana, 2015). Hal ini sesuai dengan prinsip like dissolve like dimana senyawa yang bersifat polar akan larut dalam pelarut polar dan senyawa yang bersifat non polar akan larut dalam pelarut non polar (Arifianti, Oktarina, & Kusumawati, 2014). Berdasarkan hal  tersebut,  maka  dilakukan  penapisan  fitokimia  dengan  metode  tabung  dan  KLT (Kromatografi  Lapis  Tipis)  dan  analisis  kadar  flavonoid  total    rimpang  temu  mangga dengan perbedaan  polaritas pelarut yaitu  etanol 80% dan etil asetat.

## METODE PENELITIAN Jenis Penelitian
Dalam  penelitian  ini  digunakan  penelitian  eksperimental  secara  deskriptif  kuantitatif yaitu  penetapan  kadar  flavonoid  total  dari  ekstrak  etanol  80  %  dan  ekstrak  etil  asetat rimpang temu mangga ( Curcuma mangga Valeton & Zijp.) dan penapisan fitokimia.

## Populasi dan Sampel Penelitian
Sampel yang digunakan dalam penelitian ini adalah ekstrak  rimpang temu mangga (Curcuma mangga Valeton & Zijp.) yang diambil di Dukuh Kandangmas, desa Masin, kecamatan Dawe, kabupaten Kudus.

## Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  untuk  ekstraksi  yaitu  neraca  analitik  (Ohaus),  botol  kaca (gelap),  blender,  ayakan  44  mesh,  kertas  saring  (whatman-50),  corong,  gelas  ukur, erlenmeyer, water  bath (DHH-4),  cawan  porselin,  sudip.  Alat  yang  digunakan  untuk skrining fitokimia yaitu tabung reaksi, rak tabung, penjepit tabung, pipet tetes, penangas air.  Alat  yang  digunakan  untuk  KLT  antara  lain  Plat  KLT  (G 60 F 254 ), great  chamber , pipa kapiler, Lampu UV 254 nm. Alat yang digunakan untuk penetapan kadar flavonoid total  yaitu  neraca  analitik  (Ohaus),  spektrofotometri  Visibel  (Biobase),  labu  ukur (herma), beaker glass, pipet volume, mikro pipet (scilogex).
Bahan  yang  digunakn  untuk  ekstraksi  antara  lain  rimpang  temu  mangga ( Curcuma  mangga Valeton  &  Zijp.),  etanol  80  %,  etil  asetat.  Bahan  untuk  skrining fitokimia  terdiri  dari  ekstrak  rimpang  temu  mangga  ( Curcuma  mangga Val),  serbuk magnesium, HCl pekat, NaOH 10 %, air panas, FeCl 3 1 %, HCl 2 N, pereaksi mayer, pereaksi dragendorf, pereaksi wegner. Bahan yang digunakan untuk kromatografi lapis tipis  yaitu  ekstrak  rimpang  temu  mangga  ( Curcuma  mangga Valeton  &  Zijp.), pengembang  metanol  dan  kloroform,  uap  amoniak.  Bahan  untuk  penetapan  kadar flavonoid total terdiri dari ekstrak rimpang temu mangga ( Curcuma mangga Valeton & Zijp.), larutan baku kuersetin, etanol p.a, AlCl 3 2 %, natrium asetat 1 M, aquadest

## Pelaksanaan Percobaan
Penelitian ini  menggunakan rimpang temu mangga ( Curcuma mangga Valeton & Zijp.) yang selanjutnya akan dilakukan sortasi basah untuk memisahkan kotoran atau benda asing pada tanaman sebelum dilakukan pencucian. Pengeringan pada penelitian ini dilakukan dengan cara diangin-anginkan atau sinar matahari tidak langsung (ditutup kain  hitam).  Proses  selanjutnya  setelah  diperoleh  simplisia  kering  yaitu  dilakukan penyerbukan dengan cara diblender. Serbuk simplisia diayak menggunakan ayakan no 44 mesh, adapun tujuan dari pengayakan yaitu untuk menyeragamkan ukuran serbuk.
Hasil  serbuk  rimpang  temu  mangga  ( Curcuma  mangga Valeton  &  Zijp.) kemudian  ditimbang  200  mg  untuk  masing-masing  pelarut  yaitu  etanol  80  %  dan  etil asetat untuk selanjutnya dilakukan ekstraksi.
Metode  Ekstraksi  dalam  penelitian  ini  menggunakan  metode  maserasi.  Serbuk rimpang  temu  mangga  ( Curcuma  mangga Valeton  &  Zijp.)  diekstraksi  menggunakan variasi  pelarut yaitu etanol 80 % dan etil asetat. Proses maserasi dalam penelitian ini dilakukan  dengan  dengan  menggunakan  perbandingan  1:6  (200  mg  dalam  1200  mL pelarut).
Sampel  direndam  dalam  wadah  kaca  yang  tertutup  rapat  dan  terhindar  dari cahaya dan didiamkan selama 24 jam dengan sesekali dilakukan pengadukan, kemudian dilakukan  penyaringan  untuk  memisahkan  filtrat  dan  residu.  Residu  yang  dihasilkan
diremaserasi  dengan  pelarut  dan  jumlah  yang  sama  sampai  diperoleh  larutan  yang jernih. Proses maserasi dalam penelitian ini dilakukan selama 3 x 24 jam yang ditandai dengan larutan menjadi jernih. Selanjutnya dilakukan penapisan fitokimia.

## Penapisan Fitokimia
Penapisan  fitokimia  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  metode  tabung  dan KLT.

## Identifikasi flavonoid dengan metode tabung
Sebanyak  0,1  g  ekstrak  dipanaskan  dengan  5  mL  aquadest  selama  5  menit, kemudian dibagi menjadi 3 tabung reaksi dan dilakukan uji :
a. Uji Wilstater Filtrat sebanyak 1 mL ditambahkan dengan serbuk magnesium dan 2 tetes HCl pekat selanjutnya  dikocok.  Perubahan  yang  nampak  yaitu  terbentuk  warna  jingga menandakan  adanya  senyawa  flavon,  sedangkan  jika  terbentuk  warna  merah  tua menunjukkan adanya senyawa flavonol (Marliana, Suyanti, & Suyono,. 2005).
b. Uji Bate-Smith
Filtrat  sebanyak  1  mL  kemudian  ditambahkan  dengan  HCl  pekat  beberapa  tetes, setelah  itu  dipanaskan  diatas  penangas.  Perubahan  warna  yang  terjadi  pada  sampel yaitu  merah tua sampai ungu (Marliana, Suyanti, & Suyono, 2005). Terbentuknya warna  merah  tua  sampai  ungu  menunjukkan  adanya  flavonoid  jenis  antosianidin (Rahayu, Kurniasih, & Amalia, 2015).
c. Uji NaOH 10 %
Filtrat  sebanyak  1  mL  ditambahkan  dengan  larutan  NaOH  10  %  beberapa  tetes sampai  terjadi  perubahan  warna  (Harborne,  1996).  Perubahan  warna  yang  terjadi menunjukkan adanya senyawa fenol (Rahayu, Kurniasih, & Amalia, 2015).

## Identifikasi flavonoid dengan metode KLT
Fase diam yang digunakan yaitu plat silika gel G 60 F 254 dan fase gerak kloroform :  metanol  (14:1)v/v.  Ekstrak  ditotolkan  pada  plat  silika  gel  G 60 F 254 yang  sebelumnya sudah  diaktifasi  pada  suhu  100  ºC  selama  1  jam,  kemudian  plat  dimasukkan  dalam chamber berisikan fase gerak yang sudah jenuh. Noda yang terbentuk pada plat silika di amati dibawah sinar UV pada panjang gelombang 254 nm dan di uap dengan penampak noda yaitu amoniak.

## Analisis Kadar Flavonoid total Pembuatan larutan baku kuersetin
Kuersetin ditimbang sebanyak 100 mg dan dilarutkan dalam 100,0 mL etanol p.a sebagai larutan induk kuersetin 1000 ppm. Larutan induk tersebut diencerkan menjadi konsentrasi  100  ppm  sehingga  diperoleh  larutan  stok  kuersetin.  Larutan  stok  dibuat pengenceran  dengan  seri  konsentrasi  40,  60,  80,  dan  100  ppm.  Larutan  standart kuersetin sebanyak 0,1 mL ditambahkan 0,1 mL aluminium (III) klorida 2 %, 0,1 mL natrium asetat 1 M dan 2 mL etanol p.a kemudian diinkubasi selama 30 menit.
Rf = Jarak senyawa yang terelusi Jarak senyawa yang mengelusi

## Penentuan panjang gelombang maksimum kuersetin
Salah satu seri  pengenceran larutan standar kuersetin konsentrasi 60 ppm yang telah di inkubasi selama 30 menit di ukur serapannya pada panjang gelombang 400-500 nm.  Panjang  gelombang  yang  menunjukkan  serapan  tertinggi  disebut  panjang gelombang maksimum.

## Penentuan operating time
Penentuan operating time dilakukan pada larutan kuersetin konsentrasi 60 ppm, diamati  absorbansinya  pada  panjang  gelombang  maksimum  yang  telah  diperoleh dengan  interval  waktu  2  menit  selama  60  menit  sampai  diperoleh  absorbansi  yang stabil.

## Penentuan Kurva Baku Kuersetin
Panjang gelombang maksimum yang diperoleh selanjutnya dilakukan penentuan kurva baku kersetin. Larutan standar 40, 60, 80 dan 100 ppm dipipet sebanyak 0,1 mL dimasukkan  ke  dalam  labu  ukur  10  mL.  Larutan  standar  ditambahkan  0,1  mL aluminium klorida 2 %, 0,1 mL natrium asetat 1 M dan ditambahkan etanol p.a 2 mL, dikocok sampai homogen. Larutan di inkubasi pada suhu kamar dan di diamkan susuai dengan  waktu  stabil  yang  diperoleh  dari operating  time .  Larutan  standar  kuersetin diukur serapannya, kemudian dihubungkan antara konsentrasi larutan standar kuersetin dengan  hasil  serapannya  pada  panjang  gelombang  maksimum  sehingga  diperoleh persamaan regresi linier.

## Penentuan Kadar Flavonoid Total
Larutan sampel 100 ppm dipipet sebanyak 0,1 mL , dimasukkan ke dalam labu ukur 10 mL, ditambahkan 0,1 mL aluminium (III) klorida 2 %, 0,1 mL natrium asetat 1 M  dan  ditambahkan  etanol  p.a  2  mL,  di  gojok  sampai  homogen.  Larutan  sampel diinkubasi pada suhu kamar sesuai yang diperoleh dari hasil operating time . Pengukuran serapan  dilakukan  menggunakan  spektrofotometri  visibel  pada  panjang  gelombang maksimum. Replikasi dilakukan sebanyak tiga kali (Chang et al ., 2002) .
Rumus penentuan kadar flavonoid total (%)
Keterangan : C = Konsentrasi kuersetin (ppm atau mg/1000 mL) V = Volume total ekstrak (mL) Fp = Faktor pengenceran m = Berat Sampel (mg)

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Metode Ekstraksi dalam penelitian ini menggunakan metode maserasi. Pemilihan penggunaan  metode  maserasi  karena  metode  sederhana,  mudah  dan  tanpa  melalui proses  pemanasan  (Kusuma et  al .,  2011).  Metode  ini  cocok  untuk  metabolit  sekunder yang  tidak  tahan  panas  seperti  flavonoid,  karena  dilakukan  tanpa  melalui  proses pemanasan sehingga kemungkinan rusaknya komponen bahan aktif dalam sampel dapat dihindari (Salmia, 2016).
F = C x V x Fp m x 100 %
Penelitian  ini  menggunakan  variasi  polaritas    pelarut  etanol  dan  etil  asetat. Pemilihan  cairan  penyari  (pelarut)  merupakan  faktor  penting  dalam  sebuah  ekstraksi karena akan mempengaruhi jenis dan jumlah zat aktif yang terkandung dalam ekstrak. (Arifianti,  Oktarina,  &  Kusumawati  2014).  Prinsip like  dissolve like ,  dimana senyawa yang bersifat polar akan larut dalam pelarut polar dan senyawa yang bersifat non polar akan larut dalam pelarut non polar.
Tabel 1 Hasil ekstraksi etanol 80 % dan ekstrak etil asetat rimpang temu mangga Sampel Serbuk (g) Ekstrak (g) Rendemen (% b/b) Ekstrak Etanol 80 % Ekstrak Etil Asetat 200 200 23,42 20,19 11,71 10,09
Hasil maserasi diperoleh ekstrak etanol 80 % 23,42 gram dan ekstrak etil asetat 20,19 gram. Rendemen yang diperoleh dari masing-masing pelarut yaitu 11,71 % dan 10,09  %.  Penelitian  ini  rendemen  yang  diperoleh  ekstrak  etanol  80  %  lebih  tinggi dibanding ekstrak etil asetat. Hal ini menunjukkan bahwa pelarut etanol 80 % mampu mengekstraksi senyawa lebih baik, karena berdasarkan kesamaan sifat kepolaran anatara pelarut  dengan  senyawa.  Penggunaan  jenis  pelarut  dengan  perbedaan  polaritas  dapat berpengaruh  terhadap  rendemen  yang  dihasilkan.  Berdasarkan  konstanta  dielektrik suatu  pelarut,  semakin  tinggi  konstanta  dielektriknya  maka  pelarut  bersifat  semakin polar. Konstanta dielektrik yang dimiliki etanol yaitu 30 sedangkan pada etil asetat yaitu 6,0 (Verdiana, Widawarta, & Permana., 2018).

## Tabel 2
Penapisan Fitokimia dengan Metode Tabung Golongan senyawa Pereaksi Keterangan Pelarut etanol Pelarut etil asetat Flavonoid  Uji wilsataer : Mg + HCl Pekat Uji bate- Smith : HCl pekat + dipanaskan Uji NaOH 10 % : larutan NaOH 10 % beberapa tetes Jingga     (+)
Merah     (+)
Oranye    (+) Jingga       (+)
Merah       (+)
Coklat kehitaman (+)
Pengujian  penapisan  fitokimia  ekstrak  etanol  80  %  dan  ekstrak  etil  asetat rimpang  temu  mangga  ( Curcuma  mangga Valeton  &  Zijp.)  menunjukkan  positif mengandung  flavonoid  yang  dibuktikan  dengan  beberapa  pengujian wilstater , bate- smith dan NaoH 10%.
Pada  uji  wilstater  menunjukkan  ektrak  etanol  80  %  dan  ekstrak  etil  asetat rimpang temu mangga ( Curcuma mangga Valeton & Zijp.) mengandung flavonoid yang ditandai dengan munculnya warna jingga. Hasil yang diperoleh tersebut sesuai dengan penelitian Rahayu, Kurniasih, & Amalia, (2015) yang menyatakan bahwa terbentuknya warna jingga menunjukkan adanya flavonoid golongan flavonol dan flavanon.
Uji Bate-Smith dalam metode ini dilakukan dengan cara menambahkan larutan HCl  pekat  kemudian  dilakukan  pemanasan.  Penambahan  HCl  pekat  bertujuan  untuk menghidrolisis  dan  memutus  flavonoid  menjadi  aglikonnya,  yaitu  dengan menghidrolisis  O-glikosil.  O-glikosil  akan  tergantikan  dengan  H + dari  asam,  karena
bersifat  elektrofilik.  Proses  Pemanasan  dilakukan  untuk  mempercepat  reaksi  hidrolisis (Estikawati & Lindawati, 2019). Hasil fitokimia menunjukkan ekstrak etanol 80 % dan ekstrak  etil  asetat  rimpang  temu  mangga  ( Curcuma  mangga Valeton  &  Zijp.) mengandung  flavonoid  yang  ditandai  dengan  munculnya  warna  merah.  Hal  ini  sesuai dengan  penelitian  Rahayu,  Kurniasih,  &  Amalia  (2015)  bahwa  terbentuknya  warna merah menunjukkan flavonoid golongan antosianidin.
Uji  NaoH  10%  Pengujian  fitokimia  ini  dilakukan  dengan  menambahkan beberapa  tetes  NaOH  10  %  akan  terjadi  perubahan  warna.  Perubahan  yang  terjadi disebabkan  karena  pereaksi  NaOH  10  %  merupakan  katalis  basa  yang  menyebabkan penguraian  senyawa  Kristin  yang  merupakan  turunan  dari  senyawa  flavon  menjadi molekul  asetofenon  (Theodora,  Gunawan,  &  Swantara,  2019).  Hasil  penapisan fitokimia  uji  NaOH  10  %  menunjukkan  ekstrak  etanol  80  %  dan  ekstrak  etil  asetat rimpang temu mangga ( Curcuma mangga Valeton & Zijp.) mengandung flavonoid yang ditunjukkan dengan perubahan warna yaitu coklat kehitaman dan orange. Hasil tersebut sesuai dengan penelitian Rahayu, Kurniasih, & Amalia (2015) yang menyatakan bahwa terjadinya perubahan warna menunjukkan adanya flavonoid golongan senyawa fenol.
(A)                              (B)                                 (C) Gambar 1
Profil kromatogram ekstrak etil asetat (I) dan ekstrak etanol 80 % (II) dengan fase diam silika G 60 F 254 dan fase gerak kloroform : metanol (14:1). (A) UV 254 nm; (B) Uap amoniak; (C) Setelah diuap amoniak diamati dibawah UV 254 nm.
Penapisan fitokimia menggunakkan metode KLT yaitu untuk mempertegas hasil yang  didapat  dari  penapisan  fitokimia  dengan  metode  tabung.  Fase  diam  yang digunakan  yaitu  plat  silika  gel  G 60 F 254 dan  fase  gerak  kloroform  :  metanol  (14:1). Ekstrak ditotolkan pada plat silika yang sebelumnya sudah diaktifasi pada suhu 100 ºC selama  1  jam,  kemudian  plat  dimasukkan  dalam chamber berisikan  fase  gerak  yang sudah  jenuh.  Tujuan  dilakukannya  aktivasi  yaitu  untuk  menghilangkan  kandungan  air yang terdapat pada plat silika agar tidak mengganggu jalannya analisis (Fath, 2016).
Hasil dari pengujian flavonoid dengan metode KLT dapat dilihat pada gambar 1. Kromatogram  yang  timbul  diamati  dibawah  sinar  UV  254  nm  dan  diuapi  amoniak. Bercak yang timbul setelah diuap dengan amoniak berwarna kuning muda dan bercak yang diamati dibawah sinar UV 254 nm dengan nilai Rf 0,68 untuk ekstrak etanol 80 % dan  0,70  untuk  ekstrak  etil  asetat.  Hasil  yang  diperoleh  sesuai  dengan  penelitian Marliana,  Suyanti,  &  Suyono  (2005)  setelah  diuap  dengan  amoniak  berwarna  kuning
muda sehingga menegaskan adanya kandungan flavonoid pada ekstrak etanol 80 % dan ekstrak  etil  asetat  rimpang  temu  mangga  ( Curcuma  mangga Valeton  &  Zijp.).  Noda semakin jelas setelah diuapi dengan amoniak dengan terbentuknya warna kuning yang masuk rentang pada nilai Rf 0,2-0,75 sebagai flavonoid (Rahayu, Kurniasih, & Amalia., 2015).
Tabel 3
Kandungan Flavonoid Total Ekstrak etanol 80 % dan Ekstrak Etil Asetat Rimpang Temu Mangga ( Curcuma mangga Valeton & Zijp.) Sampel  Penimbangan Bahan (mg) Absorbansi  Konsentrasi (ppm) Kadar Flavonoid (%) Rata- rata (%) SD
Ekstrak
Etanol 80 % Ekstrak Etil
Asetat 10 10 0,461 0,479 0,500 0,409 0,423 0,468 63,33 65,33 67,66 57,55 59,11 66,11 63,33 66,33 67,66 57,55 59,11 66,11 65,77
60,92 ± 2,21
± 4,55
Gambar 2
Perbandingan Kadar Flavonoid Total Rimpang Temu Mangga ( Curcuma mangga Valeton & Zijp.) Berdasarkan Jenis Pelarut
Sebelum  dilakukan  penetapan  kadar  flavonoid  total  terlebih  daulu  menentukan panjang gelombang maksimum pada larutan standar. Panjang gelombang maksimum (λ max)  adalah  panjang  gelombang  pada  saat  serapan  maksimum  dengan  cara  membaca serapan  larutan  standar.  Tujuan  dilakukan  penetapan  panjang  gelombang  maksimum yaitu untuk mengetahui besarnya serapan yang dibutuhkan larutan standar (Andriyani, Utami,  &  Dhiani,  2010).  Larutan  standar  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  yaitu kuersetin. Pemilihan  kuersetin  sebagai  larutan  standar  karena kuersetin  merupakan flavonoid golongan flavonol yang mempunyai gugus keto pada C-4 dan memiliki gugus hidroksi pada atom C-3 atau C-5 sehingga dapat membentuk kompleks warna dengan AlCl 3.
65,77 60,92 10 20 30 40 50 60 70 K ad ar F la vo n oi d T ot al ( % ) Jenis Pelarut 1 2 Ekstrak Etanol 80 % Ekstrak Etil Asetat
Panjang  gelombang  maksimum  yang  diperoleh  dalam  penelitian  ini  yaitu  444 nm dan operating time pada menit ke-37. Kadar flavonoid total pada ekstrak etanol 80 % yaitu 65,77 % sedangkan pada ekstrak etil asetat yaitu 60,92 %. Kadar flavonoid total pada ekstrak etanol 80 % lebih besar dibanding ekstrak etil asetat rimpang temu mangga ( Curcuma  mangga Valeton  &  Zijp.).  Hal  ini  dikarenakan  senyawa  flavonoid  bersifat polar  sehingga  akan  mudah  larut  dalam  pelarut  polar.  Hasil  ini  sesuai  dengan  prinsip polarisasi,  dimana  suatu  senyawa  akan  larut  dalam  pelarut  yang  mempunyai  nilai kepolaran  sama.  Etanol  mempunyai  polaritas  yang  mendekati  polaritas  fenol  dan flavonoid  pada  tanaman  sehingga  memiliki  kemampuan  sebagai  pelarut  yang  baik dalam mengekstrak tanaman (Julianti, Irkawan, & Iwansyah., 2019).
Tabel 4
Ringkasan Hasil Uji Independent Sample T-Test Kelompok Pelarut Uji Normalitas (Shapiro- Wilk) Uji Homogenitas Uji Independent Sampel T- Test Keterangan Sig. Etanol 80 % Etil Asetat 0,916 0,439 0,355
0,355 0,091 0,091
>0,05
>0,05 Keterangan :
Uji independent sample t-test : Nilai sig >0,05, artinya tidak ada perbedaan
Hasil uji independent sampel T-Test dapat dilihat pada kolom Equal Variances assumed nilai  signifikansi  yang  ditunjukkan  yaitu  0,091  yang  artinya  lebih  besar  dari 0,05 sehingga dapat disimpulkan bahwa nilai kadar flavonoid total antara ekstrak etanol 80 % dan ekstrak etil asetat rimpang temu mangga ( Curcuma mangga Valeton & Zijp.) adalah sama atau tidak ada perbedaan yang signifikan.
Nilai kadar flavonoid dari pelarut etanol 80 % dan etil asetat tidak ada perbedaan secara signifikan. Hal ini disebabkan karena pelarut etanol termasuk pelarut polar yang memiliki nilai kepolaran 5,5 sedangkan etil asetat yaitu 4,4. Berdasarkan nilai kepolaran pelarut tersebut tidak berbeda jauh antara etanol dan etil asetat sehingga kedua pelarut memiliki nilai kadar flavonoid total yang tidak berbeda jauh pula. Jenis flavonoid polar yaitu antosianin sedangkan flavonoid semi polar yaitu flavonoid O-glikosida (Kasminh., 2019).

## SIMPULAN DAN SARAN

## Simpulan
Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan, dapat di simpulkan sebagai berikut : 1. Kadar flavonoid total dari ekstrak etanol 80 % dan ekstrak etil asetat rimpang temu mangga ( Curcuma mangga Valeton & Zijp.) yaitu 65,77 % dan 60,92 %.
2. Tidak ada perbedaan signifikan kadar flavonoid total rimpang temu mangga dengan pelarut etanol 80% dan etil asetat

## Saran
Perlu di lakukan pengujian pelarut etanol dengan berbagai konsentrasi sehingga di  peroleh  konsentrasi  yang  optimum  untuk  memperoleh  kadar  flavonoid  total  dari rimpang temu mangga.

## DAFTAR PUSTAKA
Andriyani,  D.,  Utami,  P.  I.,  &  Dhiani,  B.  A.  (2010).  Penetapan  kadar  tanin  daun rambutan ( Nephelium lappaceum .L) secara spektrofotometri ultraviolet visibel'. Jurnal Pharmacy , 7(2), 7.
Arifianti,  L.,  Oktarina,  R.  D.,  &    Kusumawati,  Idha.  (2014).  Pengaruh  jenis  pelarut pengektraksi  terhadap    kadar  sinensetin  dalam  ekstrak  daun Orthosiphon stamineus Benth . E-Journal Planta Husada , 2(1), 3.
Chang,  C.-C.,  Yang,  M.-H.,  Wen,  H.-M.,  &  Chern,  J.-C.  (2002).  'Estimation  of  total flavonoid  content  in  propolis  by  two  complementary  colorimetric  methods'. Journal of Food and Drug Analysis , 10(3), 178.
Ekawati, M. A., & Suirta, I. W. (2017). Isolasi dan identifikasi senyawa Flavonoid pada daun sembukan (Paederia foetida L) serta uji aktivitanya sebagai antioksidan.
Jurnal Kimia, 11(1).44.
Fath, M. A. (2016). Profil kromatografi lapis tipis ekstrak etanol bji adas ( Foeniculum vulgare Mill), rimpang kencur ( Kaempferia galanga L.), rimpang kunyit putih
(C urcuma  zedoaria (Berg.)  Roscoe),  herba  pegagan  ( Centella  asiatica )  serta ramuannya. Skripsi. Malang  :  Universitas  Islam  Negeri  Maulana  Malik Ibrahim.
Julianti, W. P., Ikrawan, Y., & Iwansyah, A. C. (2019). Pengaruh jenis pelarut terhadap kandungan  total  fenolik,  aktifitas  antioksidan  dan  toksisitas  ekstrak  buah ciplukan ( Physalis angulata L)'. Jurnal Riset Teknologi Industri , 13 (1), 70. Kusuma, A. T., Adelah, A., Abidin, Z., & Najib, A. (2011). Determination of Flavonoid Content of Ethyl Acetate Extract of Breadfruit Leaves ( Artocarpus altilis ). ad- Dawaa’Jour.Pharm.Sci , 1(1), 7.
Madihah,  Alfina,  F.,  &  Gani,  Y.  Y.  (2016).  Kadar  Glukosa  Darah  Dan  Gambaran Histologis Pankreas Mencit (Mus musculus L.) Yang Diinduksi Aloksan Setela Perlakuan  Ekstrak  Rimpang  Temu  Mangga (Curcuma  mangga  Val.).Jurnal Biologi V, 20(2), 64.
Marliana, S. D., Suryanti, V., & Suyono, S. (2005). The phytochemical screenings and thin layer chromatography analysis of chemical compounds in ethanol extract of  labu  siam  fruit  ( Sechium  edule  Jacq.  Swartz. )'. Biofarmasi  Journal  of Natural Product Biochemistry , 3(1), 26.
Marliani, L., Anandari, Y., & Budiana, W. (2017). Pengaruh Pelarut, Waktu Dan Suhu Ekstraksi Terhadap Kandungan Senyawa. Ijpst, 4(2), 5
Rahayu,  S.,  Kurniasih,  N.,  &  Amalia,  V.  (2015).  Ekstraksi  Dan  Identifikasi  Senyawa Flavonoid  dari  Limbah  Kulit  Bawang  Merah  Sebagai  Antioksidan  Alami. Jurnalal Kimiya, 2(1),4.
Sada,  J.  T.  (2010).  'Keragaman  Tumbuhan  Obat  Tradisional  di  Kampung  Nansfori Distrik Supiori Utara, Kabupaten Supiori–Papua'. Jurnal Biologi Papua, 2(2),
39.
Salmia.  (2016).  Analisis  Kadar  Flavonoid  Total  Ekstrak  Kulit  Batang  Kedondong Bangkok (Spondias dulcis) Dengan Metode Spektrofotometri UV-Vis. Skripsi . Makasar : Universitas Islam Negeri Alauddin Makasar.
Suryani,  N.  C.,  &  Permana,  D.  G.  M.  (2015).  Pengaruh  Jenis  Pelarut  Terhadap Kandungan  Total  Flavonoid  dan  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Daun  Matoa (Pometia pinnata) . Skripsi . Bandung :Universitas Udayana Bndung.
Theodora,  C.  T.,  Gunawan,  I.  W.  G.,  &  Swantara,  I.  M.  D.  (2019).  Isolasi  dan identifikasi golongan flavonoid pada ekstrak etil asetat daun gedi ( Abelmoschus manihot L.)'. Jurnal Kimia , 13(2), 131.
Verdiana, M., Widarta, I. W. R., & Permana, I. D. G. M. (2018). Pengaruh jenis pelarut pada ekstraki menggunakan gelombang ultrasonik terhadap aktivitas antioksidan ekstrak kulit buah lemon ( Citrus limon (Linn.) Burm F.). Jurnal Ilmu dan Teknologi Pangan (ITEPA) , 7(4), 213