Indonesian Journal of Pharmaceutical Science and Technology Journal Homepage : http://jurnal.unpad.ac.id/ijpst/ UNPAD

## Gastroprotective Effect of Green Algae Extract ( Ulva lactuca L) on Gastric Rats
Wahyu Widyaningsih*, Siti N. Afdaliah
Faculty of Pharmacy, Universitas Ahmad Dahlan, Yogyakarta - Indonesia
Submitted 9 July 2019; Revised 19 February 2020; Accepted 30 Maret 2020; Published 10 June 2020 *Corresponding author: widyaningsihwahyu@yahoo.com

## Abstract
Gastric ulcer is a disease of the digestive tract characterized by mucous damage to secretion of gastric acid and pepsin. One of the potential gastroprotector plants is green algae. The purpose of this study was to examine the gastroprotective effect of ethanol extract of green algae (EEGH) Ulva lactuca L on the gastric of ethanol-induced rats. This study used 36 rats, divided into 6 groups. Group I is a normal group. Group II negative control, ethanol 96% induced. Group III positive control, given comparison of ranitidine dose of 15.75 mg/kgBW. Groups IV, V and VI were given multilevel EEGH, namely 125, 250 and 500 mg/kgBW. The treatment was carried out for 14 days, on the 14th day ethanol 96% was induced and then dissected. Research data on gastric ulcer index and protection ratio were analyzed using  One Way ANOVA  with  a  confidence  level  of  95%. The  results  of  the  EEGH  statistical  test dose of 500 mg/kgBW with negative controls showed a significant difference with p value of 0.013 (p<0.05). The EEGH 500 mg/kgBW has the ability as an effective gastroprotector, as shown from the gastric ulcer index value of 0.5 and the protection ratio of 78.94%. Keywords: Ethanol, gastroprotector, protection ratio, ulcer index, Ulva lactuca L.

## Efek Gastroprotektif Ekstrak Etanol Ganggang Hijau ( Ulva lactuca L) pada Lambung Tikus

## Abstrak
Tukak lambung merupakan penyakit pada saluran pencernaan ditandai oleh adanya kerusakan mukosa sekunder akibat sekresi asam lambung dan pepsin. Salah satu tanaman yang berpotensi sebagai gastroprotektor adalah ganggang hijau. Tujuan penelitian ini adalah menguji efek gastroprotektif ekstrak etanol ganggang hijau (EEGH) Ulva lactuca, L. pada lambung tikus yang diinduksi etanol. Penelitian ini menggunakan 36 ekor tikus, dibagi kedalam 6 kelompok. Kelompok I adalah kelompok normal. Kelompok II kontrol negatif, diinduksi etanol 96%. Kelompok III kontrol positif, diberi pembanding ranitidin dosis 15,75 mg/kgBB. Kelompok IV, V dan VI diberi EEGH dosis bertingkat yaitu 125, 250 dan 500 mg/kgBB. Perlakuan dilakukan selama 14 hari, pada hari ke-14 tikus diinduksi etanol 96% lalu dibedah. Data penelitian indeks tukak lambung dan rasio proteksi dianalisis dengan uji Kolmogorov-Smirnov dan uji Levene, selanjutnya di uji menggunakan One Way ANOVA dengan taraf kepercayaan 95%. Hasil uji statistik EEGH dosis 500 mg/kgBB dengan kontrol negatif menunjukkan adanya perbedaan signifikan dengan nilai p 0,013 (p<0,05), sedangkan EEGH dosis 125 mg/kgBB dan 250 mg/kgBB tidak berbeda signifikan dengan kontrol negatif. Ekstrak etanol ganggang hijau Ulva lactuca , L. dosis 500 mg/kgBB memiliki kemampuan sebagai gastroprotektor yang efektif, dilihat dari nilai indeks tukak lambung yaitu 0,5 dan rasio proteksi yaitu 78,94%. Kata Kunci: Etanol, indeks tukak, gastroprotektor, rasio proteksi, Ulva lactuca L.

## 1.  Pendahuluan
Tukak lambung merupakan suatu penyakit atau gangguan pada saluran pencernaan yang ditandai oleh adanya kerusakan mukosa sekunder akibat sekresi asam lambung dan pepsin. Berdasarkan penelitian di Amerika, sekitar 31-57% penderita tukak lambung disebabkan karena infeksi bakteri Helicobacter pylori dan penggunaan non steroidal anti inflammatory drugs (NSAIDs). 1,2 Ketidakseimbangan faktor agresif dan faktor defensif merupakan awal terjadinya tukak lambung. Salah satu faktor agresif yang dapat meningkatkan resiko erosi mukosa lambung dan pembentukan ulkus adalah  etanol.  Etanol  dapat  meningkatkan produksi reactive oxygen species (ROS) dan menurunkan kadar antioksidan seluler sehingga dapat merusak sawar mukosa. 3 Pengobatan farmakologi yang digunakan untuk mengatasi tukak lambung antara lain antasida, proton  pump  inhibitor (PPI), antagonis reseptor H-2, prostaglandin, sukralfat dan bismut subsitrat. 4,5 Selain obat-obat tersebut, masyarakat masih menggunakan tanaman obat tradisional untuk menyembuhkan penyakit tukak lambung. 6 Salah satu tanaman yang potensi sebagai gastroprotektor  yaitu  ganggang  hijau  ( U. lactuca , L). Menurut beberapa penelitian yang telah dilakukan, menunjukkan bahwa ekstrak etanol dari U. lactuca memiliki potensi sebagai antihiperlipidemia, antioksidan, antiangiogenesis dan antihepatitis. 7 Tanaman  ganggang  hijau  ( U. lactuca , L)  memiliki  kandungan  fitokimia  antara lain alkaloid, karbohidrat, protein dan asam amino, sterol, saponin, fenol, amilum, kuinon,  flavonoid,  glikosida  jantung  dan klorofil. 7,8 Berdasarkan aktivitas antioksidan yang dimiliki, ekstrak etanol U. lactuca , L. diharapkan dapat berperan sebagai gastroprotektor terhadap induksi etanol dengan cara menangkap radikal bebas dan meningkatkan kerja enzim antioksidan, sehingga mencegah terjadinya kerusakan pada sel.
2. Metode 2.1.  Alat dan Bahan
Alat yang digunakan antara lain peralatan maserasi yaitu toples dan pengaduk,  timbangan  analitik  (Kern:  ABS 220-4 Analytical  Balance),  seperangkat  alat rotary  evaporator  (IKA  Rotary  Evaporator RV 10 Digital V), pompa vakum, waterbath (Yenaco:  Shaking  Waterbath  YNC-SWB- 50L),  kandang,  alat  bedah,  suntikan  oral untuk tikus (Terumo), cawan porselin (Pyrex) dan peralatan gelas yang lazim digunakan (Pyrex). Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini antara lain ekstrak etanol ganggang  hijau  (EEGH)  Ulva  lactuca,  L., hewan uji tikus galur Wistar dewasa usia 2-3  bulan  (BB  180-200  gram),  etanol  96% (Brataco),  larutan  pembawa  poly-vinyl pirolidon  (PVP)  1%  (Linkwell),  ranitidin (Hexpharm),  aquades,  pakan  (BR2)  dan minum hewan.
2.2. Ekstraksi Ganggang Hijau
Serbuk kering ganggang hijau dimaserasi menggunakan pelarut etanol 96% dalam wadah tertutup. Pengadukan mekanik dilakukan pada 3 jam perendaman pertama kemudian dibiarkan selama 48 jam sambil diaduk. Setelah perendaman, pelarut dipisahkan dari ampas simplisia menggunakan kain penyaring khusus. Maserat yang diperoleh kemudian diuapkan dengan menggunakan alat rotary evaporator pada suhu 40°C hingga diperoleh ekstrak kental. Ekstrak  etanol  ganggang  hijau U. lactuca , L. dibuat dalam bentuk  larutan suspensi untuk selanjutnya digunakan sebagai sampel uji dalam menentukan efek gastroprotektif terhadap parameter indeks tukak  lambung  dan  rasio  proteksi.  Ekstrak etanol ganggang hijau U. lactuca , L. dilarutkan dalam larutan pembawa PVP 1%.
2.3. Uji  In  Vivo  Efek  Gastroprotektif Ekstrak Etanol Ganggang Hijau
Penelitian uji efek gastroprotektif ekstrak etanol ganggang hijau U. lactuca ,
L. dilakukan selama 14 hari perlakuan, menggunakan hewan uji tikus Wistar yang berusia 2-3 bulan. Tikus dibagi menjadi 6
kelompok perlakuan, tiap kelompok berjumlah 6  ekor  tikus.  Hewan  uji  tikus  diberi  makan dan minum secukupnya. Sebelum perlakuan, tikus diadaptasikan selama 1 minggu dengan kondisi laboratorium. Kelompok hewan uji dibagi menjadi:
1)  Kelompok I : kontrol normal, tikus normal yang hanya diberi pakan dan minum  standar.
2)  Kelompok II : kontrol negatif, tikus diberi pakan dan minum standar.
3)  Kelompok III  : kontrol positif, selain diberi pakan minum standar, tikus diberi perlakuan obat ranitidin dosis 15,75 mg/ kgBB sebagai pembanding.
4)  Kelompok IV  : kelompok perlakuan, tikus diberi ekstrak etanol ganggang hijau dosis 125   mg/kgBB 1x sehari.
5)  Kelompok V : kelompok perlakuan, tikus diberi ekstrak etanol ganggang hijau dosis 250 mg/kgBB 1x sehari.
6)  Kelompok VI  : kelompok perlakuan, tikus diberi ekstrak etanol ganggang hijau dosis 500 mg/kgBB 1x sehari.
Satu jam setelah pemberian perlakuan hari ke-14, hewan uji pada kelompok II, III, IV, V, dan VI diinduksi etanol 96% dengan dosis 2 ml/200 gBB secara per oral. Tikus kemudian dipuasakan selama 24 jam lalu dikorbankan dengan diuapi karbon dioksida. Pembedahan dilakukan terhadap hewan uji, lambung diisolasi dan dibuka, selanjutnya dibersihkan dengan larutan NaCl 0,9%, dibentangkan di permukaan datar dan diamati lesi tukak yang terbentuk. 9,10
2.3.1. Pengamatan Lesi Tukak Lambung Tukak lambung dihitung dan di skoring dengan  metode  skoring  Hanafi  dkk  (2014), yang  di  modifikasi.  Modifikasi  dilakukan agar jumlah tukak yang terbentuk <3, dapat dikategorikan dan di skoring. Cara skoring metode ashok ditentukan berdasarkan jumlah lesi atau tukak yang terbentuk pada mukosa lambung tikus dengan memberikan skor 0 sampai 3. Tukak dihitung 1 jika terdapat kerusakan atau hilangnya jaringan pada lapisan mukosa lambung di satu titik dan
seterusnya. 11,12
Data indeks tukak lambung dan rasio proteksi dianalisis dengan uji Kolmogorov- Smirnov dan uji Levene untuk mengetahui normalitas dan homogenitas data. Selanjutnya diuji dengan analisis One-Way ANOVA jika data tersebut terdistribusi normal dan homogen,  tingkat  signifikansi  diuji  dengan SPSS student  sample  t-test dengan taraf kepercayaan 95%. Jika data tidak terdistribusi normal dan tidak homogen maka dilakukan uji statistik non-parametrik dengan uji Kruskal- Wallis untuk melihat ada atau tidaknya perbedaan bermakna antara kelompok hewan uji, dilanjutkan dengan uji Mann-Whitney untuk mengetahui kelompok mana yang memiliki perbedaan bermakna.

## 3.  Hasil
3.1. Hasil uji makroskopis lambung
Setelah dilakukan perlakuan terhadap lambung tikus dengan induksi etanol pada berbagai kelompok hewan uji, terlihat jelas perbandingan antar kelompok perlakuan. Gambaran makroskopis mukosa lambung pada masing-masing kelompok perlakuan uji efek gastroprotektif ekstrak etanol ganggang hijau U. lactuca , L. dapat dilihat pada Gambar 1.
3.2. Hasil  uji  efek  gastroprotektif  terhadap indeks ulser Setelah dilakukan perhitungan indeks ulser berdasarkan perbandingan antara jumlah total skor dengan jumlah hewan masing- masing kelompok, data indeks ulser kemudian dibandingkan dengan kelompok kontrol.13 Data rata-rata skoring tukak lambung dan nilai indeks ulser ekstrak etanol U. lactuca L dapat dilihat pada Tabel 1 dan Gambar 2.
3.3. Hasil Uji Derajat Putih Setelah dilakukan perhitungan rasio proteksi yang diperoleh dari rumus 14 :
Data  grafik  nilai  rasio  proteksi ekstrak etanol U. lactuca L dapat dilihat pada Gambar 3.

## 4.  Pembahasan
4.1.  Gambaran Makroskopis Kerusakan Lambung Berdasarkan pada Gambar 1, kondisi lambung pada kelompok normal terlihat berwarna normal, tidak terdapat hiperemia, pendarahan maupun tukak yang terbentuk. Pada kelompok kontrol positif, terdapat bintik-bintik pendarahan atau hiperemia pada lambung tetapi tidak ada tukak yang terbentuk, sedangkan pada kelompok negatif, terlihat adanya tukak yang terbentuk dan terjadi pendarahan pada mukosa lambung. Tukak yang terbentuk pada kontrol negatif disebabkan oleh etanol, sesuai dengan teori bahwa etanol dapat menginduksi tukak lambung. Pemberian etanol yang berlebihan dapat merusak sawar mukosa lambung dengan cara meningkatkan produksi radikal bebas berupa reactive oxygen species (ROS),  sehingga  menurunkan  kemampuan antioksidan seluler dalam mempertahankan
keseimbangan antara faktor agresif dan defensif, akibatnya kerusakan mukosa tidak dapat dihindari. 2 Sedangkan pada kontrol positif tidak terbentuk tukak lambung, artinya bahwa kontrol positif yang menggunakan perlakuan suspensi ranitidin memiliki efek perlindungan terhadap lambung. Pada kelompok kontrol negatif dengan kelompok  perlakuan  EEGH U. lactuca , L. dosis 125 mg/kgBB dan 250 mg/kgBB memiliki nilai p>0,05, sehingga dapat disimpulkan tidak terdapat perbedaan secara signifikan, yang berarti EEGH U. lactuca , L. pada dosis 125 mg/kgBB dan 250 mg/kgBB belum dapat melindungi mukosa lambung, sebaliknya antara kelompok kontrol negatif dengan  kelompok  perlakuan  EEGH U. lactuca , L. pada dosis 500 mg/kgBB memiliki perbedaan signifikan dengan nilai signifikansi 0,013 < 0,05, yang menunjukkan bahwa EEGH U. lactuca , L. dosis 500 mg/kgBB memiliki kemampuan dalam melindungi mukosa
Gambar  1. Gambaran makroskopis kerusakan lambung yang diinduksi etanol 96% pada berbagai kelompok perlakuan.
Ket: yang dilingkari adalah tukak lambung yang terbentuk.
A. Kelompok kontrol normal, lambung terlihat berwarna normal dan tidak terdapat perdarahan maupun tukak yang terbentuk.
B. Kelompok kontrol positif, terdapat bintik bintik pendarahan atau hiperemia.
C. Kelompok kontrol negatif, terdapat tukak yang terbentuk dan terjadi pendarahan pada mukosa lambung. D.
Kelompok perlakuan dosis 125 mg/kgBB, ada tukak yang terbentuk dan terjadi hiperemia.
E. Kelompok perlakuan dosis 250 mg/kgBB, terdapat tukak pada mukosa lambung.
F. Kelompok perlakuan dosis 500 mg/kgBB, tidak ada tukak yang terbentuk dan tidak terjadi hiperemia maupun pendarahan.

## lambung. Demikian juga pada kelompok
perlakuan EEGH U. lactuca , L. dosis 500 mg/ kgBB memiliki efek perlindungan yang besar terhadap lambung dibandingkan kelompok kontrol positif ranitidin.
4.2.  Indeks Tukak Lambung
Berdasarkan data indeks tukak lambung pada Gambar 2, dapat disimpulkan bahwa ekstrak etanol ganggang hijau U. lactuca , L. memiliki efek sebagai gastroprotektor pada dosis 500 mg/kgBB. Hasil indeks ulser menunjukkan  kelompok  perlakuan  EEGH U. lactuca , L. dosis 500 mg/kgBB memiliki kemampuan dalam melindungi mukosa lambung lebih baik dibandingkan dengan kelompok kontrol positif yaitu perlakuan suspensi ranitidin, terlihat pada Gambar 2, indeks tukak lambung kelompok perlakuan EEGH U. lactuca , L. dosis 500 mg/kgBB lebih kecil dibandingkan dengan kelompok
kontrol positif dan sebaliknya. Hal ini dapat disebabkan karena berbagai hal, diantaranya dosis ranitidin yang mungkin kurang tepat sehingga tidak efektif atau ranitidin kurang poten dalam mengatasi tukak lambung yang diinduksi dengan etanol 96%.
Menurut penelitian, ranitidin kurang efektif terhadap tukak lambung karena penekanan sekresi asam lambungnya tidak pada daerah basal dari lambung, sehingga ranitidin lebih efektif dalam menghambat sekresi asam lambung akibat dari rangsangan obat muskarinik, stimulasi vagus atau gastrin. 15 Selain itu, senyawa melatonin lebih efektif daripada ranitidin dalam mencegah terjadi luka pada lambung yang diinduksi oleh stress. 16,17 Hal  tersebut  sejalan  dengan hasil penelitian ini, karena pada ekstrak etanol ganggang hijau U. lactuca , L dosis 500 mg/kgBB lebih efektif dalam melindungi lambung yang diinduksi etanol, dibandingkan
Gambar 2. Grafik nilai indeks ulser lambung tikus yang diinduksi etanol 96% pada berbagai kelompok perlakuan
Kelompok Dosis (mg/kgBB) Rata-rata Skor (± SD) Kontrol Normal - 0 ± 0,00 Kontrol Positif 15,75 1 ± 0,40 Kontrol Negatif - 2,375 ± 0,47 Ekstrak etanol ganggang hijau U. Lactuca , L. 125 2,25 ± 0,28 Ekstrak etanol ganggang hijau U. Lactuca , L. 250 2 ± 0,00 Ekstrak etanol ganggang hijau U. Lactuca ,L. 500 0,5 ± 0,00
Tabel 1. Rata-rata skoring tukak lambung uji gastroprotektif EEGH U. lactuca , L.
dengan suspensi ranitidin, yang mana telah diketahui bahwa melatonin merupakan zat aktif utama dari tanaman ganggang hijau U. lactuca , L.
4.3.  Rasio Proteksi terhadap Tukak Lambung Berdasarkan data rasio proteksi pada Gambar 3, dapat disimpulkan bahwa ekstrak etanol ganggang hijau U. lactuca , L memiliki efek sebagai gastroprotektor pada dosis 500 mg/kgBB. Hasil rasio proteksi menunjukkan kelompok  perlakuan  EEGH U. lactuca , L dosis 500 mg/kgBB memiliki kemampuan dalam melindungi mukosa lambung lebih baik dibandingkan dengan kelompok kontrol positif yaitu perlakuan suspensi ranitidin, persen  rasio  proteksi  EEGH U. lactuca , L. dosis 500 mg/kgBB lebih besar yaitu 78,94% dibandingkan dengan kelompok kontrol positif perlakuan ranitidin yaitu sebesar 57,89%.
Efek perlindungan EEGH U. lactuca , L. terhadap tukak lambung yang diinduksi etanol pada dosis 500 mg/kgBB lebih besar dari pada dosis 125 mg/kgBB dan 250 mg/kgBB, dapat disebabkan karena dengan peningkatan dosis, maka semakin besar pula kandungan zat aktif pada EEGH U. lactuca , L. yang akan memberikan efek sebagai gastroprotektor, sehingga dengan efektif dapat mencegah terbentuknya luka atau erosi lambung yang disebabkan oleh induksi etanol. Etanol  yang  diinduksikan  cepat berpenetrasi kedalam mukosa lambung,
melepaskan radikal bebas dan meningkatkan permeabilitas mukosa sehingga memungkinkan  difusi  balik  HCl. 18,19 Selain itu, dapat menyebabkan erosi lambung, disebabkan karena dalam proses metabolisme etanol menghasilkan produk oksidasi berupa asetaldehid dan asetat yang bersifat toksik bagi sel dan jaringan. 20
Melatonin sebagai zat aktif utama pada ganggang hijau diduga kuat merupakan senyawa yang berperan penting sebagai gastroprotektor. Melatonin dapat mencegah terjadinya cedera pada sel, jaringan, dan organ maupun sistem organ yang disebabkan oleh stres oksidatif. 16 Melatonin sebagai antioksidan berperan dalam memangsa radikal bebas secara langsung, menstimulasi enzim antioksidan, meningkatkan fosforilasi oksidatif mitokondria dan menurunkan kebocoran elektron sehingga mengurangi pembentukan radikal bebas. 16
Selain melatonin, terdapat beberapa senyawa yang terkandung dalam ekstrak etanol ganggang hijau yang juga memiliki aktivitas  antioksidan  seperti  klorofil  dan flavonoid yang dapat meningkatkan aktivitas antioksidan  dari  EEGH U. lactuca , L., sehingga dengan aktivitas antioksidannya baik secara langsung maupun tidak langsung EEGH U. lactuca , L. mampu menangkal radikal bebas atau spesies oksigen reaktif sehingga dapat mencegah terjadinya stres oksidatif yang dapat menyebabkan terganggunya fungsi sel dan jaringan, mencegah terjadinya kerusakan pada sel dan
Gambar 3. Grafik nilai rasio proteksi berbagai kelompok perlakuan pada tikus yang diinduksi etanol 96%.
jaringan yang dapat mengakibatkan kerusakan pada mukosa lambung. Selain itu, melatonin dan  flavonoid  mampu  meningkatkan  aliran darah ke lambung dan meningkatkan produksi mukus sehingga dapat melindungi mukosa lambung. 16

## 5.  Simpulan
Ekstrak  etanol  ganggang  hijau U. lactuca , L. memiliki efek sebagai gastroprotektor dilihat dari parameter indeks tukak lambung dan rasio proteksi. Nilai indeks tukak lambung pada kelompok EEGH dosis 125 mg/kBB > 250 mg/kgBB > 500 mg/kgBB yaitu 2,25; 2; 0,5, sedangkan rasio proteksi  pada  EEGH  dosis  125  mg/kgBB  < 250  mg/kgBB  <  500  mg/kgBB  yaitu  5,26; 15,78;  78,94  %.  Ekstrak  etanol  ganggang hijau U. lactuca , L. yang memiliki efek gastroprotektif adalah pada dosis 500 mg/ kgBB.
Daftar Pustaka 1. Yuniati, Achmad H, Sumarno. Pengaruh Outer  Membrane  Protein  Helicobacter pylori terhadap Perubahan Histopatologi Mukosa Lambung dan S-IgA pada Mus musculus Outbred Balb/C. J Exp Life Sci. 2010; 1(1): 20-27.
2. Pratama H. Eradikasi Helicobacter pylor i. CDK-243. 2016;43(8):592-95.
3.  Irramah M, Julizar, Irawati L. Pengaruh Uncaria  gambir roxb terhadap Ulkus Gaster dan Kadar Malondialdehid Hewan Coba  yang  diinduksi  Etanol.  Majalah Kedokteran  Andalas.  2017;40(1):  1-10. http://dx.doi.org/10.22338/mka.v40. i1.p1-10.2017
4.  Lockrey G, Lim  L. Peptic Ulcer Disease in Older People. Geriatric Therapeutics. 2011;41(1): 58-61.
5. Widayat W, Ghassani IK, Rijai L. Profil Pengobatan dan DRP’s pada Pasien Gangguan Lambung (Dyspepsia,
Gastritis,  Peptic  Ulcer)  di  RSUD Samarinda. Jurnal Sains dan Kesehatan. 2018; 1(10): 539-547
6. Hanafi NA, Sutjiatmo AB, Vikasari SN. Uji  Efek  Antitukak  Lambung  Ekstrak Air  Herba  Bayam  Merah  ( Amaranthus
tricolo r L.) terhadap Tikus Wistar Betina. Kartika Jurnal Ilmiah Farmasi. 2014;2(1): 45-50. ISSN 2354-6565
7.  Widyaningsih W, Pramono S, Widyarini S, Sugiyanto. Skrining Fitokimia Ekstrak Etanol Ulva lactuca L dengan Metode Kromatografi Lapis Tipis. Media Farmasi. 2016;13(2): 199-211.
8.  Abirami RG, dan Kowsalya S. Nutrient and Nutraceutical Potential of Seaweed Biomass Ulva lactuca and Kappaphycus alvarezii . Journal of Agricultural Science and Technology. 2011;5(1): 109-15. ISSN 1939-1250
9. Sigit JI, Ribkah, Soemardji AA. Efektivitas Preventif  Omeprazol  Terhadap  Efek Samping  Tukak  Lambung Antiinflamasi Non Steroid (Asetosal) pada Tikus Galur Wistar Betina. Acta Pharmaceutica Indonesia. 2012;37(2): 48-53.
10. Widyaningsih  W,  Sary  EN,  Halimah DN, Jannah WOM. Efek Gastroprotektif Kombinasi Perasan Daun Cincau dan Kulit Manggis pada Tikus yang diinduksi Etanol. Trad Med J. 2018;23(2): 103-112 11. Hanafi NA, Sutjiatmo AB, Vikasari SN. Uji  Efek  Antitukak  Lambung  Ekstrak Air  Herba  Bayam  Merah  ( Amaranthus tricolor L) terhadap Tikus Wistar Betina. Kartika Jurnal Ilmiah Farmasi. 2014;2(1): 45-50 12. Widyaningsih  W,  Sary  EN,  Halimah DN, Jannah WOM. Efek Gastroprotektif Kombinasi Perasan Daun Cincau dan Kulit Manggis pada Tikus yang diinduksi Etanol. Trad Med J. 2018;23(2): 103-12.
13. Pertiwi R. Efek Gastroprotektor Ekstrak Etanol Umbi Garut ( Maranta arundinacea L.)  terhadap  Indeks  Tukak  Lambung, Rasio  Proteksi,  Ekspresi  protein  COX-2 dan  Gambaran  Histopatologis  Lambung pada Tikus Model Tukak Lambung [Tesis]. Yogyakarta: Fakultas Farmasi Universitas Ahmad Dahlan; 2016.
14. Saptarini NM, Suryasaputra D, Saepulhak AM. Analisis Rasio Proteksi Antiulser Sari  Buah  Pepino  ( Solanum  muricatom Aiton)  menggunakan  Mencit  sebagai Model  Hewan  Coba.  Majalah  Obat Tradisional. 2011;16(2): 75-80.

## 15. Purnama TNP. Pengaruh Pemberian Ranitidin terhadap Gambaran
Histopatologi Putamen Tikus Wistar pada Pemberian Metanol Dosis Bertingkat [Karya Tulis Ilmiah]. Semarang: Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro;
2016.
16. Magierowski M, Jasnos K, Brzozowska I, Drozdowicz D, Sliwowski Z, Nawrot
E,  Szczyrk  U,  Kwiecien  S.  Melatonin as a Therapeutic Factor in Gastric Ulcer Healing  Under  Experimental  Diabetes. Przegl Lek. 2013;70(11): 942-6.
17. Salehi B, Sharopov F, Fokou PVT, Kobylinska A, de Jonge L, Tadio K, Sharifi-Rad  J,  Posmyk  MM,  Martorell M, Martins N, Iriti M. Melatonin in Medicinal and Food Plants : Occurrence,
Bioavailability  and  Health  Potential  for Humans. Cells. 2019;8(681):1-23 18. Hajrezaie M, Golbabapour S, Hassandarvish  P,  Gwaram  NS,  Hadi AH,  Ali  HM.  Acute  Toxicity  and Gastroprotection Studies of a New Schiff Base  Derived  Copper  (II)  Complex against  Ethanol-Induced  Acute  Gastric Lesions  in  Rats.  Plos  One.  2012;7(12):
1-11.
19. Pratama MR, Muhartono. Dampak Mengkonsumsi Alkohol terhadap Kesehatan Lambung. Majority. 2019;
8(2): 254-258
20. Usman S. Tingkat Kerusakan Mukosa Lambung pada Tikus Model yang diinduksi Etanol. Mutiara Medika. 2016; 16(1): 33-40