BIOINSEKTISIDA TERHADAP NYAMUK AEDES AEGYPTI BERBAHAN DASAR EKSTRAK ETANOL DAUN SERAI (CYMBOPOGON CITRATUS)

## BIOINSECTICIDE AGAINST AEDES AEGYPTI MOSQUITOES DERIVED FROM LEMONGRASS (CYMBOPOGON CITRATUS) LEAVES ETHANOL EXTRACT
Jennifer Wiranatha 1 , Robby Makimian 2 , Rita Dewi 3, *
1 Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Unika Atma Jaya, Jl. Pluit Raya no. 2, Jakarta, 14440
2 Departemen Parasitologi, Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Unika Atma Jaya, Jl. Pluit Raya no. 2, Jakarta, 14440
3 Departemen Biokimia-Kimia, Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Unika Atma Jaya, Jl. Pluit Raya no. 2, Jakarta, 14440
* Korespondensi: rita.dewi@atmajaya.ac.id

## ABSTRACT
Introduction: Dengue hemorrhagic fever is one of the most common infectious diseases in Indonesia. The vector of this disease is Aedes aegypti (Ae. aegypti). Dengue hemorrhagic fever can be controlled by a few measures,  one  of  them  is  using  insecticide.  However,  frequent  use  of  chemical  insecticide  could  lead  to resistance  and  is  harmful  to  non-target  organisms.  One  of  the  solutions  for  this  problem  is  the  use  of bioinsecticide derived from lemongrass (Cymbopogon citratus or C. citratus) leaves extract.
Methods: The design of this study is true experimental post-test only control group. The population used are adult Ae. aegypti mosquitoes. For each experiment, 10 mosquitoes are required and given the extract of C. citratus in 2%, 10%, and 20% concentrations, and negative control respectively.The lethal effect of the extract is observed in 10, 30, 60 minutes and 6, 12, 18, 24 hours.
Results:  There  is  a  significant  difference  in  the  lethal  effect  of  Ae.  aegypti  mosquitoes  with  variations  in duration of exposure to the C. citratus leaves extract (p = 0.007), but no significant difference with variations in extract concentration given (p = 0.281).
Conclusion: C. citratus leaves extract has bioinsecticidal effect on Ae. aegypti mosquitoes. The optimal result of mosquito mortality is achieved by using the extract in 20% concentration with duration of 12 hours. Key Words: Aedes aegypti, bioinsecticide, Cymbopogon citratus, extract, lemongrass

## ABSTRAK
Pendahuluan: Demam  berdarah  dengue  merupakan  salah  satu  penyakit  yang  cukup  lazim  di  Indonesia. Vektor dari penyakit ini adalah Aedes aegypti ( Ae. Aegypti ). Demam berdarah dengue dapat dikontrol dengan penggunaan  insektisida,  akan  tetapi  penggunaan  insektisida  kimiawi  yang  berlebihan  dapat  menyebabkan resistensi serta memiliki efek toksik bagi organisme yang bukan merupakan target (non-target). Oleh karena itu,  penggunaan  bioinsektisida  dari  daun  serai  ( Cymbopogon  citratus atau C.  citratus )  dapat  menjadi  salah satu solusinya.
Metode: Penelitian  ini  merupakan  penelitian  dengan  desain true  experimental  post  test  only  control  group . Populasi yang digunakan dalam penelitian ini adalah nyamuk dewasa Ae aegypti . Pada setiap uji digunakan 10 ekor nyamuk yang diberikan ekstrak C. citratus dengan konsentrasi 2%, 10%, 20%, serta kontrol negatif. Efek letal nyamuk diamati dalam waktu 10, 30, 60 menit dan 6, 12, 18, 24 jam.
Hasil: Terdapat perbedaan signifikan (p = 0,007) dalam efek letal nyamuk Ae. Aegypti pada berbagai durasi pajanan ekstrak daun C. citratus , akan tetapi tidak terdapat perbedaan signifikan (p = 0,281) pada paparan ekstrak daun C. Citratus dengan konsentrasi yang bervariasi.
Simpulan: Ekstrak daun C. citratus memiliki efek bioinsektisida terhadap nyamuk Ae. aegypti . Efek mortalitas nyamuk terbaik sebesar 100% diperoleh dalam waktu 12 jam dengan pemberian ekstrak dalam konsentrasi 20%.
Kata Kunci: Aedes aegypti , bioinsektisida, Cymbopogon citratus , ekstrak, serai

## ARTIKEL PENELITIAN

## PENDAHULUAN
Demam  berdarah  dengue  disebabkan oleh  nyamuk Aedes  aegypti ( Ae.  aegypti ), yang merupakan nyamuk dari famili culicidae. 1
Penyebaran nyamuk ini terjadi secara global, baik  di  area  tropis  maupun  subtropis. Ae. aegypti terutama  tersebar  di  area  urban, sedangkan Ae.  albopictus di  area  rural. 2
Nyamuk Ae.  aegypti berkembang  dari  fase telur,  larva,  pupa,  hingga  menjadi  nyamuk dewasa.  Proses  ini  berlangsung  selama kurang lebih 8-10 hari pada suhu ruangan dan bergantung  kepada  ketersediaan  makanan. 3
Nyamuk  dewasa Ae.  aegypti ,  baik  jantan maupun  betina,  mengkonsumsi  nektar  dari tanaman sebagai sumber makanannya. Akan tetapi,  nyamuk  betina  membutuhkan  darah untuk  menghasilkan  telur.  Nyamuk  betina pada  umumnya  menghisap  darah  manusia dari  pagi  hingga  petang,  dengan  puncaknya setelah matahari terbit dan sebelum matahari terbenam, tetapi dapat juga menghisap darah pada malam hari di daerah dengan penerangan  yang  baik.  Tempat  hidupnya antara  lain  berupa  semak-semak  atau rerumputan yang terdapat di halaman rumah, wadah berisi air seperti penampungan air, dan penampungan air bawah tanah. 4
Angka  kejadian  infeksi  virus  dengue meningkat  secara  drastis  di  seluruh  dunia pada beberapa dekade terakhir. 5 Insidensinya meningkat sebanyak 30 kali lipat dalam kurun waktu  50  tahun  terakhir.  Hal  ini  diduga berkaitan dengan perubahan iklim dunia yang cenderung  mengalami  peningkatan  suhu. 6
Virus dengue merupakan virus dengan beban penyakit terbesar di antara arbovirus lainnya,
dengan  perkiraan  10.000  kematian  dan  100 juta infeksi simptomatik per tahun di lebih dari 125  negara. 7 Data  Direktorat  Jenderal  Pen- cegahan dan Pengendalian Penyakit Kemen- terian Kesehatan Republik Indonesia menun- jukkan  bahwa  pada  tahun  2015  terdapat kasus demam berdarah dengue di 34 provinsi di  Indonesia  dan  insidensinya  di  DKI  Jakarta adalah sebesar 48,67 per 100.000 penduduk. 8 Hal  yang  dapat  dilakukan  untuk  me- ngontrol transmisi virus dengue adalah melalui kontrol  terhadap  vektor  penyebabnya,  salah satunya adalah dengan cara menyemprotkan insektisida. 5 Penggunaan  insektisida  kimiawi yang  berlebihan  dapat  menyebabkan  resis- tensi  nyamuk  terhadap  insektisida  tersebut. 9
Selain  itu,  insektisida  kimiawi  juga  diketahui mengandung komponen beracun yang berba- haya  bagi  manusia  dan  organisme  yang bukan merupakan target. 9 Oleh karena itu, di masa  yang  akan  datang  bioinsektisida memiliki potensi sebagai alternatif yang lebih ramah  lingkungan  dan  relatif  lebih  aman digunakan bagi manusia dan lingkungan. 10
Salah satu tanaman yang dapat diguna- kan  sebagai  bahan  dasar  bioinsektisida adalah Cymbopogon  citratus ( C.  citratus ).
Tanaman  ini  merupakan  tanaman  dari  famili poaceae,  yang  biasanya  hidup  di  daerah tropis dan habitat aslinya adalah terestrial. 11,12
Tanaman  ini  dapat  tumbuh  dengan  baik  di daerah  yang  banyak  terkena  sinar  matahari, hangat, dan lembab. 12 C. citratus merupakan tanaman perennial (dapat hidup dalam jangka waktu yang panjang) dan dapat tumbuh tinggi hingga mencapai 1,8 meter. Daun tanaman ini berwarna  hijau  kebiruan  terang  dan  permu-
kaannya  halus. 13 Pseudostem -nya  berwarna kuning kecoklatan atau kemerahan. 14
Beberapa  penelitian  pernah  dilakukan untuk  mengetahui  kemampuan  ekstrak C.
citratus sebagai larvasida maupun insektisida.
Penelitian  Bossou ,  et  al. pada  tahun  2013 menunjukkan  bahwa  minyak  atsiri  daun C. citratus memiliki  daya  insektisida  terhadap nyamuk Anopheles gambiae dengan efek letal sebesar 100% pada pemberian ekstrak dalam konsentrasi 0.5%. 15 Selain itu, Ekesiobi , et al. pada tahun 2010 pernah melakukan penelitian serupa  dan  hasilnya  menunjukkan  bahwa ekstrak etanol daun C. citratus memiliki daya larvasida terhadap larva instar 3 dan 4 Culex quinquesfasciatus .  Dalam  waktu  24  jam, sebanyak 100% dari sampel mengalami efek letal  dengan  pemberian  ekstrak  tersebut dalam  konsentrasi  300  mg/L. 16 Meskipun efektivitas  dari  ekstrak  ini  sudah  pernah diamati  dalam  penilitian  terdahulu,  penelitian ini  lebih  menekankan  penggunaan  ekstrak dengan metode yang berbeda yaitu penguapan.
Selain bermanfaat karena daya larvasida dan insektisidanya, tanaman ini juga bermanfaat bagi kehidupan sehari-hari sebagai  bumbu  dapur  dan  minyak  atsirinya dapat digunakan untuk pewangi. 14 Ekstrak C. citratus juga memiliki banyak manfaat biologis seperti  efek  anti  inflamasi,  antioksidan, antifungal, dan antibakterial. 17
Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk  me- ngetahui  efektivitas  daya  bioinsektisida  eks- trak C. citratus terhadap nyamuk Ae. aegypti .
Secara khusus, penelitian ini bertujuan untuk melihat  adanya  perbedaan  antara  efek  letal
yang  dihasilkan  tiap  waktu  pajanan  dan kon- sentrasi pajanan ekstrak C. citratus terhadap nyamuk Ae. aegypti .

## METODE
Desain  penelitian  ini  adalah true experimental-post-test  only  control  group. Populasi  yang  digunakan  pada  penelitian  ini adalah nyamuk Ae. aegypti yang dikembang- biakkan  di  Laboratorium  Bersama  Fakultas Kedokteran  dan  Ilmu  Kesehatan  Universitas Katolik  Indonesia  Atma  Jaya.  Sampel  yang digunakan adalah sebanyak  10 ekor nyamuk Ae.  aegypti untuk  setiap  uji,  dengan  total  70 ekor.  Daun C.  citratus diperoleh  dari  Balai Penelitian  Tanaman  Obat  dan  Rempah (Balittro) Bogor dalam bentuk daun yang telah dikeringkan  dan  disertifikasi  oleh  Pusat Konservasi  Tumbuhan  Kebun  Raya  Bogor- LIPI  untuk  mengetahui  kesesuaian  spesies tanaman  yang  digunakan.  Sebanyak  700 gram serbuk dari daun C. citratus yang telah dikeringkan  tersebut  digunakan  sebagai bahan untuk pembuatan ekstrak. Penelitian ini dilakukan pada bulan Oktober hingga Desember  2019  di  Laboratorium  Biokimia- Kimia  dan  Laboratorium  Bersama  Fakultas Kedokteran  dan  Ilmu  Kesehatan  Universitas Katolik Indonesia Atma Jaya Jakarta.
Proses ekstraksi dilakukan dengan me- tode maserasi. Pelarut yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  etanol  96%.  Proses ekstraksi  dilakukan  dengan  cara  merendam bubuk  dari  daun C.  citratus yang  telah  dike- ringkan  di  dalam  labu  Erlenmeyer  berisi  eta- nol.  Setiap  24  jam  dilakukan  penyaringan, filtrat  akan  disimpan  dan  ke  dalam  residu
ditambahkan  kembali  etanol.  Filtrat  hasil penyaringan  setiap  harinya  disimpan  hingga hari  ke-3,  kemudian  diproses  dalam rotary evaporator .  Hasil  dari rotary  evaporator disimpan  dalam  wadah  kedap  udara  berisi silica  gel dan  diamati  hingga  mengental seperti gel. Ekstrak kemudian dibuat menjadi larutan  dengan  akuades  dalam  konsentrasi 2%, 10%, dan 20%.
Nyamuk  dewasa Ae.  aegypti dikem- bangbiakkan  oleh  penulis  dari  fase  telur hingga  dewasa.  Larva  diberi  makan  dengan menggunakan  pelet,  sedangkan  nyamuk  de- wasa  diberikan  larutan  gula  yang  diteteskan pada kapas.
Uji  efektivitas  dilakukan  dengan  per- tama-tama  menguapkan  sebanyak  100  mL akuades  dengan  penguap  elektrik  di  dalam glass chamber berukuran 70 cm x 70 cm x 70 cm  yang  telah  berisi  10  ekor  nyamuk Ae. aegypti .  Tindakan  ini  bertujuan  sebagai  kon- trol negatif, yang dilakukan untuk mengetahui apakah  ada  faktor-faktor  lain  yang  mungkin memengaruhi  efek  letal  nyamuk  yang  akan diuji.  Setelah  itu,  ekstrak  diuapkan  di  dalam glass chamber dengan konsentrasi 2%, 10%, dan  20%.  Angka  kematian  nyamuk  diamati dan  dihitung  pada  menit  ke-10,  30,  60,  dan jam  ke-6,  12,  18,  24.  Penelitian  ini  diulangi sebanyak  satu  kali  untuk  masing-masing konsentrasi.
Uji  efek  letal  nyamuk Ae.  aegypti terhadap  waktu  pajanan  ekstrak  daun C. citratus dilakukan  dengan  uji repeated measures ANOVA  untuk  menguji  efek  letal. Syarat  dari  uji tersebut adalah  distribusi  data yang  normal,  oleh  karena  itu  dilakukan  uji
normalitas  data  dengan  uji  Shapiro-Wilk. Hasilnya  adalah  distribusi  data  tidak  normal, sehingga  penulis menggunakan  uji  Friedman sebagai  uji  alternatif  pengganti  uji repeated measures ANOVA.
Efek mortalitas nyamuk dan hubungan- nya  dengan  perbedaan  konsentrasi  ekstrak yang diberikan pada nyamuk diuji dengan one way ANOVA.  Syarat  dari  uji  ini  adalah  distri- busi data yang normal, oleh karena itu dilaku- kan  uji  normalitas  data  berupa  uji  Shapiro- Wilk.  Hasil  dari  uji  tersebut  menyatakan bahwa  data  berdistribusi  normal,  sehingga digunakan uji one way ANOVA.

## HASIL
Efek letal 100% ekstrak C. citratus pada nyamuk Ae.  aegypti dicapai  paling  cepat dengan  konsentrasi  ekstrak  sebesar  20% yaitu  pada  jam  ke-12,  sedangkan  dengan konsentrasi  ekstrak  sebesar  10%  diperlukan waktu 24 jam. Jumlah total kematian nyamuk yang  diberikan  ekstrak  dengan  konsentrasi 2%  setelah  24  jam  adalah  90%.  Konsentrasi ekstrak  yang  dapat  menimbulkan  efek  letal pada  sebesar  50%  dari  sampel  (LC 50 )  pada penelitian ini untuk konsentrasi 2%, 10%, dan 20% adalah 4,3% dalam waktu 24 jam. 18 LC 100 atau konsentrasi yang menyebabkan efek letal 100%  pada Ae.  aegypti adalah  10%  dalam waktu 24 jam dan 20% dalam waktu 12 jam. 18
Hasil  di  atas  menunjukkan  bahwa ekstrak  daun C.  citratus dapat  bermanfaat sebagai  bioinsektisida  bagi  nyamuk Ae. aegypti .  Hasil  uji  Friedman  menunjukkan bahwa  terdapat  perbedaan  signifikan  pada mortalitas  nyamuk Ae.  aegypti yang  terpajan
ekstrak daun C. citratus dalam kurun waktu 10 menit,  30 menit,  60  menit,  6  jam,  12 jam,  18 jam, dan 24 jam, dengan nilai p sebesar 0,007 ( p <0,05). Hal ini menunjukkan bahwa semakin lama  waktu  pajanan  ekstrak C.  citratus terhadap  nyamuk Ae.  aegypti ,  semakin
banyak  pula  nyamuk  yang  mati.  Sedangkan hasil  analisis  uji one  way ANOVA  untuk menguji  efek  mortalitas  pada  nyamuk  yang terpajan  ekstrak  dalam  berbagai  konsentrasi tidak menunjukkan perbedaan yang signifikan dengan nilai p sebesar 0,281 ( p >0,05).
Tabel 1. Persentase Ae. aegypti yang Mengalami Efek Letal Konsentrasi Waktu 10 menit  30 menit  60 menit 6 jam 12 jam 18 jam 24 jam 2% 0% 10% 30% 55% 65% 75% 90% 10% 0% 20% 35% 60% 70% 80% 100% 20% 15% 40% 70% 85% 100% 100% 100% Kontrol negatif 0% 0% 0% 0% 0% 0% 0%

## DISKUSI
Uji  Friedman  yang  menilai  efek  letal nyamuk Ae.  aegypti terhadap  waktu  pajanan ekstrak daun C. citratus menghasilkan nilai p sebesar 0,007 ( p < 0,05), yang berarti terdapat perbedaan  signifikan  pada  efek  letal  nyamuk Ae.  aegypti yang  terpajan  ekstrak C.  citratus dalam  waktu 10 menit, 30 menit, 60 menit, 6 jam, 12 jam, 18 jam, dan 24 jam.
Hasil penelitian ini didukung oleh bebe- rapa penelitian serupa yang pernah dilakukan oleh  peneliti  lain  pada  tahun-tahun  sebe- lumnya. Siriporn Phasomkusolsil dan Mayura Soonwera  sebelumnya  telah  melakukan penelitian  serupa  di  Bangkok,  Thailand  pada tahun 2011. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa angka mortalitas sebesar 100% diper- oleh  pada  pemberian  ekstrak  dengan  kon- sentrasi 10%, dengan knockdown time (KT 50 ) kurang dari 1 menit. 19
Zulfikar,  Wiwit  Aditama,  dan  Frans Yosep  Sitepu  juga  pernah  melakukan  pene- litian serupa di Banda Aceh pada tahun 2015.
Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa rata- rata jumlah nyamuk yang mengalami efek letal setelah 5x pajanan ekstrak adalah 90%. 20
Selain  itu,  pada  tahun  2018  di  Lubuk- linggau  juga  pernah  dilakukan  penelitian terhadap  nyamuk  dewasa  oleh  Dea  Mutiara, Fitria  Lestari  dan  Yuni  Krisnawati.  Hasil penelitian  ini  menyatakan  bahwa  mortalitas 100%  tidak  hanya  diperoleh  dengan  kontrol positif, tetapi juga  dengan  ekstrak C.  citratus pada  konsentrasi  80%.  Peneliti  juga  menya- takan  bahwa  kematian  nyamuk  semakin meningkat  dengan  bertambahnya  waktu  pa- janan antara nyamuk dengan sari pati daun C. citratus sehingga jumlah nyamuk yang meng- alami  efek  letal  dalam  24  jam  semakin  lama semakin meningkat. 21
Penelitian  oleh  Yulianis,  Dachriyanus, dan Agius Adya Putra di Jambi menggunakan populasi uji berupa nyamuk dewasa Culex sp . Mortalitas  nyamuk  100%  diperoleh  dengan pemberian  ekstrak  dalam  konsentrasi  10% dan 15% hanya dalam waktu 1 menit. 22
Kesimpulan  yang  dapat  diambil  dari penelitian-penelitian  tersebut  adalah  ekstrak C.  citratus memiliki  daya  bioinsektisida  ter- hadap nyamuk Ae. aegypti , yang terbukti dari efek letal sebesar 90-100% walaupun dengan metode  ekstraksi  dan  metode  pemberian ekstrak  yang  berbeda-beda.  Efektivitas  bio- insektisida dari C. citratus ini disebabkan oleh kandungan  zat  aktifnya,  seperti  geranial  dan neral  yang  memiliki  efek  insektisidal. 23
Geranial  dan  neral  bersifat anti-feedant yang menghambat  aktivitas  makan  dari  nyamuk. Selain itu, terdapat kandungan terpenoid yang dapat  melakukan  penetrasi  melalui  kutikula sehingga membantu proses degradasinya. 24
Efek mortalitas nyamuk dan hubungan- nya  dengan  perbedaan  konsentrasi  ekstrak yang diberikan pada nyamuk diukur dengan uji one way ANOVA, yang hasilnya menunjukkan bahwa nilai p adalah sebesar 0,281 ( p > 0,05).
Hasil  ini  menunjukkan  bahwa  tidak  terdapat perbedaan  signifikan  pada  efek  letal  nyamuk Ae.  aegypti yang  terpajan  ekstrak C.  citratus
dalam  konsentrasi  2%,  10%,  dan  20%.  Hal tersebut mungkin dapat terjadi karena zat aktif dari ekstrak C. citratus bekerja sebagai racun pernafasan pada nyamuk. Racun pernafasan ini  dapat  masuk  ke  tubuh  nyamuk  melalui trakea  pada  lubang  kecil  yang  ada  pada kerangka  luar  tubuh  nyamuk  yang  disebut spirakel.  Spirakel  hanya  akan  terbuka  jika nyamuk sedang terbang dan akan tertutup jika nyamuk  sedang  beristirahat. 25 Pada  saat dilakukan penelitian, terdapat beberapa nyamuk yang sedang beristirahat di tepi glass chamber , sehingga  ada kemungkinan  bahwa zat  aktif  pada  ekstrak  tidak  dapat  masuk  ke
trakea  nyamuk  dengan  cepat.  Hal  ini menyebabkan  kematian  nyamuk  menjadi tertunda.
Beberapa  hal  perlu  menjadi  perhatian dalam  penelitian  ini.  Salah  satu  di  antaranya adalah  proses  pembuatan  ekstrak  dengan metode  maserasi  memakan  yang  memakan waktu  cukup  lama  dari  proses  perendaman daun  hingga  menjadi  ekstrak  berbentuk  gel. Selain  itu,  pelarut  yang  digunakan  dalam proses ini cukup banyak. Jumlah bahan dasar dalam hal ini daun C. citratus yang diperlukan untuk  pembuatan  ekstrak  ini  cukup  banyak karena hasil akhir ekstrak yang berbentuk gel hanya  sekitar  10%  dari  berat  bahan  dasar yang  digunakan.  Pada  penelitian  ini  jumlah nyamuk  yang  digunakan  untuk  setiap  uji hanya  sebanyak  10  ekor  dan  jumlah  peng- ulangan  percobaan  hanya  satu  kali  karena keterbatasan jumlah ekstrak yang dihasilkan. Hal  ini  mungkin  dapat  memengaruhi  hasil akhir dari penelitian.

## SIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  ini,  dapat disimpulkan  bahwa  ekstrak C.  Citratus pada konsentrasi  2%,  10%,  dan  20%  dapat memberikan  efek  letal  sebagai  bioinsektisida terhadap nyamuk Ae. aegypti. Efek letal paling optimal yaitu sebesar 100% (10 ekor) dicapai pada konsentrasi 20% dalam waktu 12 jam.
Pemanfaatan  ekstrak  C.  Citratus  seba- gai  bahan  bioinsektisida  cukup  menjanjikan, tetapi masih membutuhkan data lebih banyak. Penelitian  selanjutnya  sebaiknya  mengguna- kan  metode  ekstraksi  lain  yang  dapat menghasilkan ekstrak dengan kandungan zat
aktif  yang  sama  baiknya  tetapi  lebih  efisien, menggunakan bahan dasar dan pelarut dalam jumlah  yang  lebih  besar,  menambah  jumlah nyamuk  yang  digunakan  dalam  tiap  uji  dan melakukan pengulangan percobaan lebih dari satu kali.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Integrated  Taxonomic  Information  System .  Aedes aegypti (Linnaeus,  1762)  [Internet].  Integrated
Taxonomic  Information  System  on-line  database;
[cited 2019 Apr 20]. Available from: https://www.itis. gov/servlet/SingleRpt/SingleRpt?search_topic=TS N&search_value=126240#null
2. Kraemer  MU,  Sinka  ME,  Duda  KA,  Mylne  AQ, Shearer  FM,  Barker  CM,  et  al.  The  global distribution of the arbovirus vectors Aedes aegypti and Ae. albopictus. eLife [Internet]. 2015 Jun [cited 2019 Apr 20];4:1 –18.
3. Disease  Control  and  Prevention,  National  Center for  Emerging  and  Zoonotic  Infectious  Diseases (NCEZID),  Division  of  Vector-Borne  Diseases (DVBD).  Life  cycle  of Aedes  aegypti and Ae. albopictus mosquitoes [Internet].
Centers for Disease  Control  and  Prevention.  [cited  2019  Apr 20]. Available from: https://www.cdc.gov/ mosquitoes/about/life-cycles/aedes.html
4. National  Center  for  Emerging  and  Zoonotic
Infectious  Diseases,  Division  of  Vector  Borne Diseases,  Dengue  Brach.  Dengue  and  the  Aedes aegypti  mosquito  [Internet].  2015  [cited  2019  Apr 20].  Available  from:  https://health.hawaii.gov/ docd/files/2015/11/CDC_aegypti_factsheet.pdf
5. World  Health  Organization.  Dengue  and  severe dengue  [Internet].  2019  [cited  2019  Apr  20]. Available  from:  https://www.who.int/news-room/ fact-sheets/detail/dengue-and-severe-dengue
6. Ebi  KL,  Nealon  J.  Dengue  in  a  changing  climate. Environ  Res  [Internet].  2016  Nov  [cited  2019  Apr 20];151:115 –123.
7. Stanaway JD, Shepard DS, Undurraga EA, Halasa YA, Coffeng LE, Brady OJ, et al. The global burden of  dengue: an  analysis  from  the  Global  Burden  of Disease  Study  2013.  Lancet  [Internet].  2016  Jun
[cited 2019 Apr 20];16(6):712 –723.
8. Kementerian  Kesehatan  RI.  Situasi  DBD  di Indonesia.  Jakarta:  Kementrian  Kesehatan  RI; 2016.
9. Hamid  PH,  Prastowo  J,  Ghiffari  A,  Taubert  A, Hermosilla C. Aedes aegypti resistance development  to  commonly  used  insecticides  in Jakarta, Indonesia. PLoS One [Internet]. 2017 Dec
[cited 2019 Apr 20];12(12):1 –11.
10.  Ojewumi ME, Banjo MG, Oresegun MO. Analytical investigation of the extract of lemongrass leaves in repelling mosquito. Int J Pharm Sci Res [Internet]. 2016 Dec [cited 2019 Apr 20];8(5):2048 –2055.
11.  Integrated Taxonomic Information System .
Cymbopogon  citratus (DC.)  Stapf  [Internet]. Integrated  Taxonomic  Information  System  on-line database;  [cited  2019  Apr  20].  Available  from: https://www.itis.gov/servlet/SingleRpt/SingleRpt?s earch_topic=TSN&search_value=41613#null
12.  Center for Agriculture and Bioscience International. Cymbopogon  citratus  (lemongrass)  [Internet]. [cited  2019  Apr  20].  Available  from:  https://www. cabi.org/isc/datasheet/17377
13. Yeşil Y, Akalın E. Comparative morphological and anatomical characteristics of the species known as lemongrass  (limonotu):  Melissa  officinalis  L., Cymbopogon  citratus  (DC)  Stapf.  and  Aloysia citriodora  Palau.  İstanbul  Ecz  Fak  Derg/J  Fac Pharm Istanbul [Internet]. 2015 Jan [cited 2019 Apr 20];45(1):29 –37.
14.  National  Parks,  Singapore  Government.  Cymbo- pogon citratus (DC.) Stapf [Internet]. National Parks, Singapore  Government    [cited  2019  May  1]. Available  from:  https://www.nparks.gov.sg/flora faunaweb/flora/1/9/1918
15.  Bossou AD, Mangelinckx S, Yedomonhan H, Boko PM,  Akogbeto  MC,  De  Kimpe  N,  et  al.  Chemical composition  and  insecticidal  activity  of  plant essential  oils  from  Benin  against  Anopheles gambiae  (Giles).  Parasites  and  Vectors  [Internet]. 2013 Dec [cited 2019 May 1];6(1):1 –17.
16.  Ekesiobi AO, Anene CC, Igbodika MC, Nwigwe HC,
Emmy-Egbe  IO,  Orji  NM.  Evaluation  of  repellent and  larvicidal  activity  of  Cymbopogon  Citratus (Lemongrass)  against  Filarial  vector,  Culex Quinquefasciatus.  African  J  Educ  Sci  Technol
[Internet]. 2017 May [cited 2019 May 1];3(4):25 –32.
17.  Olorunnisola  SK,  Asiyanbi  HT,  Hammed  AM, Simsek S. Biological properties of lemongrass: An overview. Int Food Res J [Internet]. 2014 Feb [cited 2019 May 1];21(2):455 –462.
18.  AAT Bioquest, Inc. Quest Graph TM LC50 Calculator [Internet].  AAT  Bioquest,  Inc; [cited  2020 Jan  23].
Available  from:  https://www.aatbio.com/tools/lc50- calculator
19.  Phasomkusolsil S, Soonwera M. Efficacy of herbal essential oils as insecticide against Aedes Aegypti (Linn.), Culex Quinquefasciatus (Say) and Anophe- les Dirus (Peyton And Harrison). Southeast Asian J Trop  Med  Public  Heal  [Internet].  2011  Sep  [cited 2020 Jan 23];42(5):1083 –1092.
20.  Aditama W, Yosep Sitepu F, Zulfikar. The effect of lemongrass  (Cymbopogon  nardus)  extract  as insecticide against Aedes aegypti. Int J Mosq Res [Internet]. 2019 Feb [cited 2020 Jan 23];6(1):101 – 103.
21.  Putri  DM,  Lestari  F,  Krisnawati  Y.  Pengaruh  sari
pati  daun  serai  (Cymbopogon  citratus)  terhadap mortalitas nyamuk. STKIP Lubuklinggau [Internet]. 2018 Sep [cited 2020 Jan 23];1-8.
22.  Yulianis,  Putra  AA,  Dachriyanus.  Uji  aktifitas antinyamuk minyak atsiri sereh dapur dalam bentuk semprot. J Ipteks Terap [Internet]. 2018 Mar [cited 2020 Jan 23];12(1):78 –83.
23.  Hamad  A,  Nuritasari  A,  Hartanti  D.  Chemical composition  and  antimicrobial  activity  of  essential oil of lemongrass (Cymbopogon citratus). Sch Res Libr [Internet]. 2017 [cited 2020 Jan 23];9(5):109 –116. 24.  Pinto  ZT,  Sánchez  FF,  Santos  AR,  Amaral  ACF,
Ferreira JLP, Escalona-Arranz JC, et al. Chemical composition and insecticidal activity of Cymbopogon  citratus  essential  oil  from  Cuba  and Brazil  against  housefly.  Rev  Bras  Parasitol Veterinária  [Internet].  2015  Mar  [cited  2020  Jan 23];24(1):36 –44.
25.  Yudiarti  T,  Widiastuti  E,  Pratikno  H.  Buku  Ajar
Biologi. Fakultas Peternakan Universitas Diponegoro, Semarang; 2004.