## Medika Kartika : Jurnal Kedokteran dan Kesehatan
EFEK EKSTRAK ETANOL DAUN PETAI CINA ( Leucaena glauca . Benth.)

## TERHADAP FUNGSI  DAN GAMBARAN HISTOPATOLOGIS HATI TIKUS MODEL FIBROSIS HATI
(EFFECT OF CHINESE PETAI EXTRACT ON THE IMPROVEMENT OF

## FUNCTION AND HISTOPATHOLOGIC MOUSE LIVER FIBROSIS MODEL)
Ardella Tri Novianti 1,2 , Endry Septiadi 1 , Vita Murniati Tarawan 3 , Andri Rezano 3 , Achadiyani 3
1 Program Studi Magister Ilmu Kedokteran Dasar, Fakultas Kedokteran Universitas Padjadjaran 2 Departemen Anatomi, Fakultas Kedokteran Universitas Jenderal Achmad Yani 3 Departemen Anatomi, Fisiologi dan Biologi Sel, Fakultas Kedokteran Universitas Padjadjaran Email korespondensi: endry.idol@gmail.com

## ABSTRAK
Petai cina ( Leucaena glauca, Benth . ) secara empiris digunakan untuk mengobati penyakit hati. Daun  petai  cina  mengandung  antioksidan  dan  zat  aktif  seperti  tanin,  saponin,  alkaloid,  dan saponin yang dapat membantu perbaikan fungsi hati pada fibrosis. Tujuan penelitian ini adalah untuk  menganalisis  efek  ekstrak  etanol  daun  petai  cina  terhadap  perbaikan  fungsi  dan histolopatologis  hati  tikus  model  fibrosis.  Kelompok  uji  dibagi  menjadi  kontrol  negatif  yang diberi aquades, kelompok perlakuan 1 diberikan ekstrak etanol daun petai cina selama 14 hari dengan dosis 2,25 mg/200  grBB tikus,  dosis 4,5 mg/200  grBB tikus (kelompok perlakuan 2), dan  dosis  9  mg/200  grBB  tikus  (kelompok  perlakuan  3).  Data  dianalisis  menggunakan ANOVA,  dilanjutkan  dengan  uji  a  Scheffe  dan  uji  Kruskal-Wallis  dilanjutkan  uji  Mann- Whitney . Hasil  penelitian  menunjukkan  terdapat  perbedaan  signifikan  kelompok  perlakuan dengan  kelompok  kontrol  terhadap  penurunan  kadar  SGOT  (p=0,001),  SGPT  (p=0,000), peningkatan jumlah hepatosit normal (p=0,000), dan penurunan derajat fibrosis (p=0,04). Hasil uji  Kruskal-Wallis  menunjukkan  derajat  fibrosis  pada  kelompok  kontrol  berbeda  bermakna (p=0,04)  dengan  kelompok  perlakuan.  Hasil  uji  Mann-Whitney  menunjukkan  derajat  fibrosis pada  kelompok  kontrol  berbeda  bermakna  (p<0,05)  dengan  kelompok  perlakuan  3  dengan dosis  9  mg/200gram  BB  tikus  (p=0,015).  Ekstrak  etanol  daun  petai  cina  ( Leucaena  glauca, Benth . ) mengandung  flavonoid  yang  dapat  mengurangi  proliferasi  sel  stellate  di  hati, mengurangi  aktivasi  proliferasi  sel  Kuppfer,  mengurangi  jumlah  sel  nekrotik,  dan  produksi
ARTIKEL PENELITIAN
Novianti et al. Medika Kartika : Jurnal Kedokteran dan Kesehatan (2017)1(1):1-14
matriks  ekstraselular  (kolagen)  dan  menurunkan  derajat  fibrosis  serta memiliki  efek memperbaiki  fungsi  hati  dengan  menurunkan  kadar  SGOT  dan  SGPT,  meningkatkan proliferasi sel hati yang normal, serta menurunkan derajat fibrosis .
Kata kunci: daun petai cina, fibrosis hati, masson trichrome , SGOT, SGPT

## ABSTRACT
Chinese  petai  (Leucaena  glauca Benth .)  empirically  used  to  treat  liver  disease.  Chinese petai  leaves  contain  antioxidants  and  active  substances  such  as  tannins,  saponins, alkaloids,  and  saponins  that  can  improve  liver  function  in  fibrosis.  The  objective  of  the study  was  to  analyze  e f f e c t   o f   ethanol  extract  of  Chinese petai on the improvement of function  and  histopathologic  mouse  liver  fibrosis  model.  The  test  group  was  divided  into negative  control  that  given  aquades,  the  treatment  group  1  was  given  ethanol  extract  of chinese  petai  leaf  for  14  days  with  a  dose  of  2.25  mg/200gBW  rat,  4.5  mg/200gBW  rat (treatment  group  2),  and  9  mg/200gBW  rat  (treatment  group  3).  Data  analysis was  d o n e using  ANOVA  and  followed  by  Scheffe  test.  The  data  of  fibrosis  degree  analyzed  with Kruskal-Wallis  test  and  Mann-Whitney  test  subsequently.  The  result  of  this  study was  a significant  difference  between  treatment  group  and  control  group  on  decreased  levels  of SGOT  (p  =  0.001),  SGPT  (p  =  0.000),  increased  n u m b e r   o f  normal  hepatocytes  (p  = 0.000),  and  decreased  fibrosis  degree  (p  =  0.04).  The  result  of  Kruskal-Wallis  test  showed fibrosis  degree  in  the  control  group  was  significantly  different  (p  =  0.04)  with  the treatment  group.  Mann  Whitney  test  showed  fibrosis  degree  in  control  group  was significantly  different  (p<0.05)  with  treatment  group  3  with  9  mg/200gBB  rat  (p  = 0.015).  The  conclusion  were  Chinese  petai  leaves  (Leucaena  glauca Benth .)  ethanol extract  containing  flavonoids  could  reduce  stellate  cell  proliferation  in  the  liver,  reduce Kuppfer  cell  proliferation  activation,  reduce  necrotic  cells,  extracellular  matrix  (collagen) production,  and  decrease  fibrosis  degree.  These  extracts  had  improved  liver  function  by decreasing  levels  of  SGOT  and  SGPT,  promoting  normal  liver  cells  proliferation,  and decreasing fibrosis degree.
Key words : chinese petai, liver fibrosis, SGOT, SGPT

## PENDAHULUAN
Berbagai  penyakit  hati,  baik hepatitis  maupun  akibat  paparan  zat
toksin  lainnya  masih  menjadi  masalah kesehatan dunia. Sekitar 2 miliar
penduduk  dunia  pernah  terinfeksi  virus Hepatitis B dan 360 juta orang diantaranya terinfeksi  kronis,  yang  akan  berpotensi menjadi  fibrosis  dan  berkembang  menjadi sirosis serta karsinoma hepatoselular dengan angka kematian sebesar 250.000 per tahun. 1,2 Penyebab  utama  fibrosis  hati  di negara-negara  industri  yaitu  infeksi  virus hepatitis  C  dan  penyalahgunaan  alkohol, sedangkan di Asia dan Afrika adalah hepatitis B.  Di  Indonesia  penyebab  utama  fibrosis  hati yaitu  infeksi  virus  hepatitis  B  dan  C. 3,4 Di
Indonesia  data  prevalensi  sirosis  hati  belum ada  secara  detail.  Pola  penyakit  penyebab kematian  yang  dirawat  di  rumah  sakit  di Provinsi Jawa Barat tahun 2006 pada penderita usia 45-64 tahun karena sirosis hati menduduki no.7 yaitu sebesar 2,91% . 4,5
Pengobatan  penyakit  hati  seperti sirosis maupun hepatitis pada saat ini masih banyak  memiliki  efek  samping,  seperti anemia hemolitik dan teratogenik.
Pengobatan  konvensional  untuk  penderita penyakit hati dapat menyebabkan ketidaknyamanan  pada  sebagian  pasien, misalnya  karena  biayanya  yang  masih cukup  mahal,  terjadinya  kekambuhan,  dan resistensi  obat.  Pengobatan  antifibrotik pada  saat  ini  lebih  mengarah  kepada peradangan  dan  tidak  terhadap  fibrosis.  Di masa  datang,  menempatkan  sel  stelat sebagai  target  pengobatan  dan  mediator fibrogenik akan merupakan terapi utama. 1,6
Salah  satu  tanaman  yang  juga digunakan oleh masyarakat untuk pengobatan  penyakit  hati  yaitu  daun  petai cina.  Petai  cina  juga  disebut Leucaena glauca , Benth, merupakan tanaman tradisional  yang  memiliki  nama  daerah diantaranya  pete  cina, lamtoro,  petet, pelanding,  peuteuy atau  dalam  bahasa inggris  disebut lead  tree. Petai  cina merupakan tanaman yang mudah ditemukan  di  masyarakat,  dan  biasanya berada  di  iklim  tropis  sehingga  dapat ditemukan di banyak Negara. 7,8
Daun petai cina mengandung alkaloid,  saponin,  tanin  dan  flavonoid. Alkaloid berperan untuk proses detoksifikasi  dalam  menetralisir  racun. Tanin diketahui dapat menghentikan pendarahan,  memiliki  efek  antioksidan  dan antiseptik.  Flavonoid  termasuk  senyawa fenolik  alam  yang  potensial  sebagai antioksidan.  Obat-obat  yang  berfungsi sebagai  antioksidan  dapat  menghambat peroksidasi lipid, meningkatkan vaskularisasi  dan  menginisisasi  sintesis DNA. Flavonoid dan saponin juga diketahui  memiliki  aktivitas  antimikroba dan  anti  inflamasi.  Penelitian  mengenai efek ekstrak etanol daun petai cina terhadap fungsi  hati  tikus  dan  pengujian  secara histopatologis  belum  pernah  dilakukan sebelumnya. 7,9,10

## BAHAN DAN METODE

## Pembuatan  Ekstrak  Etanol  Daun  Petai

## Cina
Daun  petai  cina  diperoleh  dari perkebunan  petai  cina  di  daerah  Kampung Sayati,  Kopo  Bandung.    Pohon  petai  cina berada  pada  dataran  dengan  ketinggian 1500-1700  m,  dengan  suhu  udara  rata-rata 23-30°C  dan  ketinggian  pohon  bervariasi antara  1,5-3  m.  Daun  yang  dipakai  adalah daun  petai  cina  muda  yang  terletak  di pucuk  pohon,  kemudian  dicuci,  ditiriskan dan  dikeringkan.  Ekstrak  daun  petai  cina merupakan  hasil  ekstraksi  daun  petai  cina muda.  Daun  petai  cina  yang  telah  dipilih, lalu  dibersihkan  dengan  air  mengalir  yang bersih, kemudian diiris- iris setipis mungkin dengan menggunakan pisau Stainless steel .
Proses  dilanjutkan  dengan  tahap pengeringan. Simplisia ini kemudian
dihaluskan menjadi serbuk, serbuk dimaserasi  sebanyak  3x  tahapan  dengan menggunakan etanol 70%, kemudian dipekatkan  menggunakan  penguap  vakum putar ( rotary evaporator) hingga menghasilkan  ekstrak  daun  petai  cina dengan  konsentrasi  70%.  Dosis  ekstrak daun petai cina yang digunakan adalah 2,25 mg/200grBB, 4,5 mg/200grBB dan 9mg/200grBB tikus. Seluruh proses pembuatan  ekstrak  etanol  daun  petai  cina dibuat  di  Laboratorium  Fakultas  Farmasi Institut Teknologi Bandung.

## Hewan Coba
Obyek  penelitian  yang  digunakan yaitu tikus ( Rattus novergicus ) jantan galur Wistar,  usia  8-10  minggu  dengan  berat badan  200-300  gram  yang  diperoleh  dari Laboratorium Biofarma Bandung.
Kemudian  pada  hewan  ini  dilakukan adaptasi di laboratorium Bagian Farmakologi Fakultas Kedokteran
Universitas  Padjajaran  Bandung  selama  7 hari.

## Pembuatan Tikus Model Fibrosis Hepar
Induksi model fibrosis hepar dilakukan  dengan  menggunakan  CCl 4 . Dosis  CCl 4 10  %  yang  digunakan  adalah  1 ml/kg  BB tikus intraperitoneal dua kali per minggu (4 minggu).

## Kelompok Perlakuan
Kelompok perlakuan dibagi menjadi 4  kelompok.  Kelompok  1  merupakan kelompok  kontrol  negatif  yaitu  tikus disuntikkan  CCl 4 dosis  1  ml/kgBB  secara intraperitoneal  2  kali  seminggu  selama  4 minggu  dan  hanya  diberi  makan  pakan standar. Kelompok P1 merupakan kelompok  perlakuan  1  yaitu  tikus  diberi ekstrak etanol daun petai cina per oral 2,25 mg/200grBB tikus 1 kali per hari selama 14 hari.  Kelompok  P2  merupakan  kelompok perlakuan 2 yaitu tikus diberi ekstrak etanol
daun petai cina per oral 4,5 mg/200grBB 1 kali  per  hari  selama  14  hari.  Kelompok  P3 merupakan  kelompok  perlakuan  3  yaitu tikus  diberi  ekstrak  etanol  daun  petai  cina per  oral  9  mg/200grBB  1  kali  per  hari selama  14  hari.  Tikus  dikorbankan  pada hari  ke  3  dan  17  (masing-masing  3  ekor) untuk  dihitung  kadar  SGOT  dan  SGPT darah, serta dilihat gambaran histopatologis hatinya.

## Pengukuran Fungsi Hati
Pengukuran  fungsi  hati  dilakukan  dengan mengukur  kadar  SGOT  dan  SGPT  yang
diambil  dari  darah  tikus  menggunakan spektofotometri  dan  dinyatakan  dalam satuan U/L (unit/liter) . Pengukuran dilakukan di Laboratorium Klinik Diagnostik.

## Penilaian Histopatologi
Penelitian  ini  menggunakan  penilaian derajat  fibrosis  sistem  skoring  dari  Ishak modifikasi  HAI,  dinilai  dari  adanya  septa fibrosis,  ekspansi  fibrosis  ke  area  portal, jaringan ikat portal ke portal (P-P bridging ) atau ke sentral (P-C bridging ), serta adanya sirosis (Tabel 1).
Tabel 1. Penilaian Ishak Modifikasi HAI (Guido et al 2011)
Tahap Modifikasi: Perubahan arsitektur, fibrosis, dan sirosis Perubahan Skor Tidak ada fibrosis 0 Ekspansi fibrosis pada beberapa area porta, dengan atau tanpa septa  tanpa short fibrous septa 1 Ekspansi fibrosis pada banyak area porta, dengan atau tanpa septa 2 Ekspansi fibrosis pada hampir seluruh area porta dengan bridging P-P occasional portal to portal (P- P) bridging 3 Ekspansi fibrosis pada hampir seluruh area porta dengan bridging P-P atau P-C 4 Bridging (P-P dan/atau P-C) dengan nodul (inkomplit sirosis) 5 Sirosis 6

## Analisis Data
Eksperimen hewan dilakukan dalam  rangkap  dua  dan  diulang  tiga  kali dengan  menggunakan  kontrol  yang  sesuai dan  data  dikumpulkan.  Hasil  dinyatakan sebagai SD atau Mean + SEM. Signifikansi statistik perbedaan dilakukan dengan menggunakan:  Uji  t  tidak  berpasangan.
ANOVA  satu  arah  diikuti  dengan  uji scheffe. P <0,05 dianggap signifikan.

## Aspek Etik Penelitian
Semua  tikus  dipelihara  menurut panduan  untuk  perawatan  dan  penggunaan hewan  coba di Fakultas  kedokteran Universitas Padjadjaran.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Pengamatan Gambaran fibrosis hati
Gambaran mikroskopis tikus hewan coba  yang  normal  dengan  pewarnaan Masson  Trichrome (Gambar  1A)  dapat terlihat sel normal  hepatosit tersusun radier dengan    membran  inti  yang  utuh  dan  inti terlihat  jelas  di  tengah.  Vena  sentralis terlihat jelas  dan  pada  jaringan  hati  normal tidak terdapat gambaran serat fibrosis yang pada  skor  Ishak  modifikasi Histology Activity  Index (HAI)  dikategorikan  dengan skor 0.
Pada  pewarnaan Masson  Trichrome dapat  terlihat  hepatosit  tersusun  radier dengan    membran  inti  yang  sebagian  besar rusak  dan  inti  beberapa  terlihat  di  pinggir atau  tidak  terlihat  jelas  di  tengah  sel  hati. Pada  seluruh  sediaan  mikroskopis  terdapat gambaran  serat  fibrosis  berwarna  kebiruan yang menutupi hampir seluruh jaringan hati yang  pada  skor  Ishak  modifikasi Histology Activity  Index (HAI)  dikategorikan  dengan skor  6  (sirosis)  (Gambar  1B).  Dengan pewarnaan Masson Trichrome dapat terlihat hepatosit tersusun  radier  dengan    membran inti  yang  sebagian  rusak  dan  inti  beberapa terlihat di pinggir atau tidak terlihat jelas di tengah  sel  hati.  Pada  sediaan  mikroskopis terdapat  gambaran  serat  fibrosis  yang membuat bridging dari portal ke portal dan
portal ke sentral smenutupi hampir sebagian besar jaringan hati yang pada skor Ishak  modifikasi Histology  Activity  Index (HAI)  dikategorikan  dengan  skor  5  (sirosis inkomplit) (Gambar 1C). Dengan pewarnaan Masson Trichrome dapat terlihat hepatosit tersusun  radier  dengan    membran inti  yang  sebagian  rusak  dan  inti  beberapa terlihat di pinggir atau tidak terlihat jelas di tengah  sel  hati.  Pada  sediaan  mikroskopis terdapat  gambaran  serat  ekspansi  fibrosis pada  hampir  seluruh  area  porta  dengan bridging menutupi  hampir  seluruh  area porta  jaringan  hati  (portal  ke  portal  dan portal  ke  sentral)  yang  pada  skor  Ishak modifikasi Histology  Activity  Index (HAI) dikategorikan  dengan  skor  4  (Gambar  1D). Dengan  pewarnaan Masson  Trichrome dapat  terlihat  hepatosit  tersusun  radier dengan    membran  inti  yang  sebagian  utuh dengan inti utuh dan sebagian rusak dengan inti  beberapa  terlihat  di  pinggir  atau  tidak terlihat jelas di tengah sel hati. Pada sediaan mikroskopis terdapat gambaran serat ekspansi  fibrosis  pada  sebagian  area  porta dengan bridging menutupi  hampir  seluruh area  porta  jaringan  hati  (portal  ke  portal) yang  pada  skor  Ishak  modifikasi Histology Activity  Index (HAI)  dikategorikan  dengan skor 4 (Gambar 1E).
Gambar 1 (A) Gambaran Histologi Hepar Normal, skor 0, tanpa fibrosis, C vena sentral, H radially arranged hepatocytes (B) Gambaran Histologi Hepar Fibrosis (Kontrol), skor 6, cirrhosis (tanda panah), C=vena sentral. (C) Gambaran Histologi Hepar Fibrosis (Kelompok 1), skor 5, C vena sentral. (D) Gambaran Histologi Hepar Fibrosis (Kelompok 2), skor 4, C vena sentral. (E) Gambaran Histologi Hepar Fibrosis (Kelompok 3), score 3, C vena sentral.
Pewarnaan Masson Trichrome, Pembesaran 100x.

## Evaluasi  kadar  SGOT  Darah  Tikus Model Fibrosis Hati
Hasil  analisis  SGOT  darah  tikus model fibrosis diperlihatkan melalui tabel2. Pada hasil uji ANOVA didapatkan perbedaan  kadar  SGOT  yang  nyata  atau bermakna  antar  kelompok  dengan  nilai p<0,001  (bermakna  bila  p<0,05).    Hal  ini
menunjukkan  bahwa  terdapat  perbedaan bermakna  kadar  SGOT  antara  kelompok kontrol dengan semua kelompok perlakuan. Untuk mengetahui kelompok yang memiliki  nilai  paling  bermakna,  maka dilanjutkan  dengan  uji  lanjut  dengan metode Scheffe.
H C C C C C A D E C B
Tabel 2. Uji ANOVA Kadar  SGOT Tikus Model Fibrosis Hati
Kelompok Mean (Standar Deviasi) P Hari ke-3 Hari ke-17 Kelompok kontrol 3.0030 (0.18601) 3.0875 (0.26873) 0.001 Kelompok P 1 2.8922 (0.41800) 2.3247 (0.19815) Kelompok P 2 2.9179 (0.47590) 2.1324 (0.01036) Kelompok P 3 2.7620 (0.06676) 2.0633 (0.02978) R Squared = 0.761 (data log_SGOT)
Kontrol : tikus hanya diberi aquades per oral 14 hari
P1
: tikus diberi ekstrak etanol daun petai cina per oral 2,25 mg/200gram BB tikus 14 hari P2
: tikus diberi ekstrak etanol daun petai cina per oral 4,5 mg/200gram BB tikus 14 hari
P3
: tikus diberi ekstrak etanol daun petai cina per oral 9 mg/200gram BB tikus 14 hari
Uji  Scheffe didapatkan  hasil  kadar SGOT tikus model fibrosis kelompok dosis 1  tidak  memiliki  nilai  p  yang  bermakna p=0,076 (p>0,05)  terhadap  kelompok kontrol.  Kadar  SGOT  kelompok  dosis  2 (p=0,028)  dan  dosis  3  (p=  0,07)  memiliki nilai  p  yang  bermakna  (p<0,05)  terhadap kelompok  kontrol.  Kadar  SGOT  kelompok dosis 2 tidak memiliki nilai yang bermakna dengan  kelompok  dosis  3  (p=0,910).  Dari uji  tersebut  didapatkan  kadar  SGOT kelompok dosis 2 dan 3 tidak memiliki nilai perbedaan yang bermakna, sehingga dengan  dosis  2  dapat  memberikan  efek penurunan  kadar  SGOT  pada  tikus  model fibrosis dengan dosis yang paling kecil.

## Hasil  Evaluasi  Kadar  SGPT  Tikus Model Fibrosis Hati
Hasil SGPT darah diperlihatkan melalui tabel  3.  Dari  hasil  uji  ANOVA  didapatkan perbedaan kadar SGPT tikus model fibrosis yang  bermakna  antar  kelompok  kontrol
dengan  kelompok  perlakuan  dengan  nilai p<0,000  (bermakna  bila  p<0,05).  Hal  ini menunjukkan  bahwa  terdapat  perbedaan bermakna  kadar  SGPT  antara  kelompok kontrol dengan semua kelompok perlakuan. Dari uji Scheffe SGPT  menunjukkan kadar SGPT  tikus  model  fibrosis  kelompok  dosis 1  tidak  memiliki  nilai  p  yang  bermakna p=0,050 (p bermakna bila p<0,05) terhadap kelompok  kontrol.  Kadar  SGOT  kelompok dosis  2  (p=0,001)  dan  dosis  3  (p=0,000) memiliki  nilai  p  yang  bermakna  (p<0,05) terhadap  kelompok  kontrol.  Kadar  SGPT kelompok dosis 2 tidak memiliki nilai yang bermakna  dengan  kelompok  dosis  3 (p=0,609).  Dari  uji  tersebut  didapatkan kadar SGPT kelompok dosis 2, dan 3 tidak memiliki  nilai  perbedaan  yang  bermakna, sehingga dengan dosis 2 dapat memberikan efek  penurunan  kadar  SGPT  pada  tikus model  fibrosis  dengan  dosis  yang  paling kecil.
Tabel 3. Uji ANOVA Kadar  SGPT Tikus Model Fibrosis Hati
Kelompok Mean (Standar Deviasi) P Hari ke-3 Hari ke-7 Kelompok kontrol 3.3127 (0.21562) 3.2332 (0.27240) 0.000 Kelompok P 1 3.2118 (0.34426) 1.9761 (0.17652) Kelompok P 2 3.0592 (0.49762) 1.8966 (0.03648) Kelompok P 3 2.7077 (0.23785) 1.8197 (0.10633) R Squared = 0.884 (data log_SGPT)
Kontrol: tikus hanya diberi aquades per oral 14 hari P1 : tikus diberi ekstrak etanol daun petai cina per oral 2,25 mg/200gram BB tikus 14 hari P2 : tikus diberi ekstrak etanol daun petai cina per oral 4,5 mg/200gram BB tikus 14 hari P3   : tikus diberi ekstrak etanol daun petai cina per oral 9 mg/200gram BB tikus 14 hari

## Evaluasi  Rata-rata  Jumlah  Hepatosit Normal Tikus Model Fibrosis
Hasil rata-rata jumlah sel hati normal diperlihatkan melalui tabel 4. Pada hasil uji ANOVA  didapatkan  perbedaan  jumlah hepatosit  normal  yang  bermakna  antara tikus  model  fibrosis  hati  kelompok  kontrol dan  perlakuan  dengan  nilai  p<0,000 (bermakna bila p<0,05). Hal ini menunjukkan  bahwa  terdapat  perbedaan bermakna  jumlah  hepatosit  normal  antara kelompok kontrol dengan semua kelompok perlakuan. Dari uji Scheffe didapatkan hasil
rata-rata  jumlah  hepatosit  normal  tikus model  fibrosis  hati  kelompok  kontrol memiliki perbedaan yang bermakna (p<0,05) dengan kelompok dosis 1 (p=0,010),  dosis  2  (p=0,000),  dan  dosis  3 (p=0,000).  Dari  uji  tersebut  didapatkan rata-rata jumlah hepatosit normal kelompok dosis  1,  2,  dan  3  memiliki  nilai  perbedaan yang  bermakna  (p<0,05),  sehingga  dosis perlakuan  3  dapat  memberikan  efek peningkatan  jumlah  hepatosit  normal  pada tikus model fibrosis paling baik.
Tabel 4. Uji ANOVA Jumlah Hepatosit  Normal Tikus Model Fibrosis Hati
Kelompok Mean (Standar Deviasi) P Hari ke-3 Hari ke-7 Kelompok kontrol 48.33 (0.577) 41.67 (3.215) 0.000 Kelompok P 1 49.33 (2.309) 65.33 (5.033) Kelompok P 2 72.00 (4.359) 86.33 (2.517) Kelompok P 3 87.00 (12.00) 93.00 (4.583)
R Squared = 0.947 Kontrol: tikus hanya diberi aquades per oral 14 hari P1 : tikus diberi ekstrak etanol daun petai cina per oral 2,25 mg/200gram BB tikus 14 hari
P2 : tikus diberi ekstrak etanol daun petai cina per oral 4,5 mg/200gram BB tikus 14 hari
P3 : tikus diberi ekstrak etanol daun petai cina per oral 9 mg/200gram BB tikus 14 hari
Evaluasi Derajat Fibrosis
pada

## Pemeriksaan Histopatologi
Dengan  uji  statistik  derajat  fibrosis menggunakan  uji  non  parametrik  Kruskal- Wallis  karena  data  berbentuk  data  ordinal (skoring  derajat  fibrosis).  Dilakukan  uji Kruskal-Wallis untuk menentukan perbedaan  ranking  dan  didapatkan  hasil nilai p=0,040 berbeda atau bermakna secara statistika  (p<0,05).  Hal  ini  menunjukkan bahwa  terdapat  perbedaan  derajat  fibrosis yang  bermakna  antara  kelompok  kontrol dengan  kelompok  yang  diberi  perlakuan. Untuk mengetahui kelompok yang memiliki  nilai  paling  bermakna,  maka dilanjutkan dengan uji Mann-Whitney antar kelompok.
Dari hasil uji Mann-Whitney didapatkan  hasil  derajat  fibrosis  tikus model  fibrosis  hati  kelompok  kontrol memiliki  perbedaan  yang  tidak  bermakna (p>0,05) dengan kelompok dosis 1 (p=0,589)  dan  dosis  2  (p=0,394).  Akan tetapi hasil uji Mann-Whitney pada tabel 11 menunjukkan  derajat  fibrosis  tikus  model fibrosis hati kelompok kontrol dibandingkan  kelompok  3  menunjukkan adanya  perbedaan  bermakna  (p=0,015), sehingga dengan dosis 3 (9mg/200gram BB tikus)  dapat  memberikan  efek  perbaikan derajat  fibrosis  pada  tikus  model  fibrosis. Dari uji Mann-Whitney didapatkan perbedaan  yang  tidak  bermakna  antara
derajat fibrosis hati kelompok tikus dosis 1 dengan  dosis  2  (p=0,937)  dan  3  (p=0,093). Selain itu dari uji Mann Whitney pada tabel 14  didapatkan  perbedaan  yang  tidak bermakna  antara  hasil  rata-rata  jumlah hepatosit  kelompok  dosis  dosis  2  dengan dosis  3  (p=0,0651).  Dari  hasil  statistik tersebut  didapatkan  bahwa  kelompok  P3 (dosis 9 mg/200 gramBB tikus) adalah satu- satunya  kelompok  yang  dapat  memberikan efek penurunan derajat fibrosis hati. Fibrosis hati terjadi sebagai akibat kerusakan hati kronik dalam hubungannya dengan akumulasi protein matriks ekstraselular.
Fibrosis  hati  pada  penelitian  ini menggunakan  model  hewan  fibrosis  hati  pada tikus  karena  model  ini  merupakan  model terbaik sehubungan dengan perubahan histologi,  biokimia,  dan  seluler. 1,11 Dari  hasil penelitian  secara  deskriptif  dapat  dilihat bahwa pemberian ekstrak etanol daun petai cina  pada  tikus  model  fibrosis  dapat menurunkan  kadar  SGOT  dan  SGPT  darah baik pada dosis 2,25 mg/200gram BB tikus, maupun  dosis  4,5mg/200gram  BB  tikus, dan  9  mg/200gram  BB  tikus.  Dari  uji Scheffe  dapat  disimpulkan  dengan  dosis  2 merupakan  dosis  paling  kecil  yang  dapat memberikan  efek  penurunan  kadar  SGPT pada tikus model fibrosis.
Hepatotoksik yang ditimbulkan oleh CCl 4 disebabkan  oleh  senyawa  hasil metabolisme  yang  bersifat  radikal  bebas,
yaitu  CCl 3 - dan  CCl 3 O 2 .  CCl 3 - dapat berikatan  kovalen  dengan  protein,  lemak, dan  DNA  yang  pada  akhirnya  dapat memicu  kerusakan  hepatosit.  CCl 3 O 2 dapat menyebabkan  terjadinya  peroksidasi  lemak yang  menimbulkan  disfungsi  membran  sel dan  membran  organel  sel  serta membentuk senyawa  reaktif  aldehid  yang  juga  dapat menyebabkan  kerusakan  hepatosit.  CCl 4 juga  dapat  mengaktivasi  sel  Kupffer.  Sel Kupffer  yang  teraktifasi  dapat  melepaskan berbagai mediator pro inflamasi yang dapat memperberat  kerusakan  hepatosit  dan mediator antiinflamasi yang bersifat hepatoprotektor. Selain itu, sel Kupffer juga dapat  melepaskan reactive  oxygen  species (ROS)  yang  juga  memperberat  kerusakan hepatosit. 1,3,9
Dari hasil penelitian secara deskriptif,  dapat  dilihat  bahwa  pemberian ekstrak  etanol  daun  petai  cina  pada  tikus model fibrosis dapat meningkatkan rata-rata jumlah sel hati normal baik pada dosis 2,25 mg/200gram  BB  tikus,  maupun  dosis  2,25 4,5mg/200gram BB tikus, dan 9 mg/200gram  BB tikus.  Hasil statistik dapat disimpulkan bahwa efek peningkatan jumlah sel normal dapat dicapai paling baik dengan dengan dosis 3 sebesar 9 mg/200gram BB.
Peningkatkan  rata-rata  jumlah  sel hati  normal  ini  diduga  karena  aktivitas antioksidan  yang  terkandung  dalam  daun
petai  cina  yaitu  alkaloid,  tanin,  dan flavonoid.  Serta  adanya  efek  antiinflamasi dari  alkaloid,  flavonoid,  dan  saponin. Saponin memiliki antiinflamasi, efek proteksi hepatosit dan mereduksi peroksidasi  lipid  membran.  Selain  itu saponin  juga  mereduksi  kolagen  tipe  1  di hati  (matriks  ekstraseluler  yang  secara abnormal diproduksi saat terjadi aktivasi sel stelat dan fibrosis). 12
Flavonoid merupakan senyawa yang larut  dalam  air  dan  mempunyai  aktivitas biologis,  antara  lain  sebagai  antioksidan, merupakan  reduktor  yang  baik  yang  dapat menghambat  berbagai  reaksi  oksidasi secara  enzim  dan  non-enzim,  serta  mampu bertindak sebagai pereduksi radikal hidroksil,  superoksid  dan  radikal  peroksil, sehingga dengan demikian dapat melindungi  lipid  membran  terhadap  reaksi yang merusak. Aktivitas antioksidan, antibakteri,  antiinflamasi  flavonoid  juga dapat  bekerja  dengan  cara  menghambat prostaglandin cyclooxigenase dan lipooxigenase ,  atau  dengan  cara  berikatan dengan  elastin  dan  menghambat  degradasi elastin  oleh enzim  elastase  yang  dihasilkan selama proses inflamasi. 13,14
Fibrosis  hati  terjadi  sebagai  akibat kerusakan  hati  kronik  dalam  hubungannya dengan akumulasi protein matriks ekstraselular ( extracellular  matrix ,  ECM)  yang  khas  bagi kebanyakan  jenis  penyakit  hati  kronik.
Akumulasi  protein  ECM  merusak  arsitektur hati  dengan  adanya  gambaran  pembentukan parut.  Perkem  bangan  selanjutnya  noduli  dari hepatosit  yang  beregenerasi  menjadi  sirosis. 1
Dari uji Mann Whitney didapatkan kelompok  dosis  3  merupakan  satu-satunya kelompok  yang  memiliki  nilai  bermakna dengan kelompok kontrol (p=0,015).
Penurunan  derajat  fibrosis  ini  diduga karena adanya flavonoid pada daun petai cina. Flavonoid  mencegah  terjadinya  ikatan metabolit CCL4-protein dengan
membentuk  radikal  flavonoid  dan  akan bereaksi dengan metabolit CCI 4 membentuk  kompleks  non  toksik  yang kemudian diekskresikan ke luar tubuh. 8,9,14
Flavonoid  juga  pada  beberapa  penelitian terbukti dapat mengurangi
atau
menginhibisi  proliferasi  sel  stelat  pada hati, sehingga akan mengurangi teraktifasinya  proliferasi  sel  Kuppfer, menurunkan  jumlah  sel  nekrosis,  dan produksi  matriks  ekstraseluler  (kolagen) sehingga menurunkan derajat fibrosis. 9,15
Zat-zat aktif yang terdapat di dalam daun  petai  cina  berperan  sesuai  dengan
kerangka  penting  untuk  menentukan  lokasi terapi  antifibrosis. Antifibrosis  diharapkan akan bekerja sebagai untuk menyembuhkan penyakit primer untuk mencegah kerusakan;  mengurangi  inflamasi  atau respon host untuk  menghindari  stimulasi aktivasi  sel  stelat;  menurunkan  aktivasi  sel stelat  dengan  mengurangi stress oksidatif yang  merupakan  stimulus  penting  untuk aktivasi  sel  stelat;  menetralkan  respon proliferasi  fibrogenik,  dan  pro-infamasi  sel stelat;  stimulasi  apoptosis  sel  stelat;  dan meningkatkan  degradasi  matriks  jaringan parut  baik  dengan  merangsang  sel  yang menghasilkan matriks protease, mengurangi inhibitornya, atau dengan pemberian matriks protease secara langsung. 1,16

## KESIMPULAN
Ekstrak etanol daun petai cina memperbaiki fungsi  hati  dengan  menurunkan  kadar SGOT  dan  SGPT,  memperbaiki  gambaran histopatologis  hati  dengan  bertambahnya jumlah  sel    hati  normal  dan  penurunan derajat    fibrosis    hati  pada  tikus    model fibrosis hati.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Anom  TI,  Wibawa  IDN.  Pendekatan Diagnosis  dan  Terapi  Fibrosis  Hati. Jurnal  Penyakit  Dalam,  Bagian  Ilmu Penyakit  Dalam  Universitas  Sanglah, Denpasar, 2010; 11(1).
2. Jang JH, Kang KJ, Kim YH, Kang YN, Lee  IS.  Re-evaluation  of  Experimental Model  of  Hepatic  Fibrosis  Induced  by Hepatotoxic Drugs: An Easy,
Aplicable,  and  Reproducible  Model. 2008; 2700-3.
3. Li  L,  Hu Z,  Li W,  Hu M, Ran J, Chen
P,  et  all.  Establishment  of  Standarized Liver  Fibrosis  Model  with  Different Pathological Stages in Rats. Gastroenterology Research and
Practic, 2012; 1-6.
4. Weisskirchen R., Gressner AM.
Modern  Pathogenetic  Concepts  of Liver Fibrosis Suggest Stelat Cells and TGF-beta  as  Major  Players  and Theurapetic Agents. Molecular Method Medical Journal, 2006; 10(1): 76-99
5. Dinas Kesehatan Propinsi Jawa Barat.
2006. Profil Kesehatan Propinsi Jawa Barat Tahun 2006. [sitasi 2 mei 2013]. Available from: http://www.diskes.jabarprov.go.id/appl ication/modules/ pages/ files/ CETAK_PROFIL_KESEHATAN_RE VISI_11.pdf
6. Brenner  DA,  Alcorn  JM.  Therapy  for Hepatic  Fibrosis. Hepatology  Journal,
2008; 75-83.
7. Fauziyah N. Efek Antiinflamasi Ekstrak  Etanol  Daun  Petai  Cina (Leucaena  glauca,  Benth.)  pada  Tikus Putih  Jantan  galur  Wistar.  Surakarta:
Universitas Muhammadiyah. 2008.
8. Grant  G,  More  LJ,  McKenzie  NH,
Dorward PM,  Buchan WC.  Nutritional and  hemagglutination  properties  of
several  tropical  seeds. Agricultural Science Journal, 1995;124(3):437-45.
9. Domitrovic  R,  Jakovac  H,  Tomac  J,
Sain  I.  Liver  Fibrosis  in  Mice  Induced by  Carbon  Tetrachloride  and  Its Reversion by  Luteolin. Toxicology and Applied  Pharmacology  Journal, 2009:
311-21.
10. Theise,  ND.  Liver  Biopsy  Assesment in  Chronic  Viral  Hepatitis:  A  Personal Practical Approach. Modern Pathology Journal, 2007:3-14.
11. Iredale  JP.  Models  of  Liver  Fibrosis:
Exploring  The  Dynamic  Nature  of Inflammation  and  Repair  in  A  Solid Organ. The  Journal  of  Clinical Investigation , 2007;117: 539-48.
12. Jianhong  F,  Xin  Li,  Ping  Li,  Ning  Li, Wang  T,  Shen  H.  Saikosaponin-d Attenuates  The  Development  of  Liver Fibrosis by Preventing Hepatosit Injury. Cell  Biochemistry  Journal,
2007;85:189-95.
13. Nunes  XP,  Silva  SF,  Almeida  JR, Ribeiro  LR,  Junior  LJ,  Filho  JM. Biological  Oxidations  and  Antioxidant Activity  of  Natural  Products.  In: Phytochemicals as Nutraceuticals- Global  Approaches  to  Their  Role  in Nutrition  and  Health,  Rao  V(Ed).
2012:1-11.
14. Knezevic  SV,  Blazekovic  B,  Stefan MB,  Babac  M.  Plant  Polyphenols  as
Antioxidant  Influencing  The  Human
Health. In:
Phytochemicals as
Nutraceuticals-Global  Approaches  to Their  Role  in  Nutrition  and  Health, Rao V(Ed). 2012:155-160.
15. Hamed  GM,  Bahgad  NM,  Mottaleb
FIA,  Emara  MM.  2011.  Effect  of Flavonoid  Quercetin  Supplement  on The  Progress  of  Liver  Cirrhosis  in Rats. Life  Sciences  Journal .  8(2):  641- 649.
16. Bigoniya  P,  Singh  CS,  Sukhla  A.  A comprehensive  Review  of  Different Toxicants  Used  ini  Experimental Pharmacology. International  Journal of  Pharmaceutical  Sciences  and  Drug Research, 2009;1(3):124-35.
17. Guido    M,    Mangia    A,    Faa    G. Chronic    viral    hepatitis: The Histology  Report. Digestive and  Liver Disease Journal , 2011:331-43.