Jurnal Ilmu dan Industri Peternakan pISSN 2355-0732, eISSN 2716-2222 http://journal.uin-alauddin.ac.id/index.php/jiip/index Volume 10 Nomor 1: 1-13, Juni 2024 DOI: https://doi.org/10.24252/jiip.v10i1.39397
Efek Hepatoprotektor Ekstrak Etanol Daun Kelor ( Moringa oleifera ) pada Ayam Petelur Fase Layer Akhir Produksi
Hepatoprotective Effect of Ethanol Extract of Moringa Leaves (Moringa oleifera) on Laying Hens in Final Layer Production Phase
Tiara Ridho Gusti 1 , Diding Latipudin 2 , Andi Mushawwir 2 1 Program Studi Ilmu Peternakan, Fakultas Peternakan, Universitas Padjadjaran
2 Laboratorium Fisiologi Ternak dan Biokimia, Departemen Nutrisi Ternak dan Teknologi Pakan, Fakultas Peternakan, Universitas Padjadjaran
Jalan Ir. Soekarno Km. 21 Jatinangor, Sumedang 45363, Jawa Barat, Indonesia *Korespondensi E-mail: tiaragustir@gmail.com
Diterima 11 Juli 2023; Disetujui 16 September 2023

## ABSTRAK
Dua puluh ekor ayam petelur tipe hy-line brown berumur 102 minggu dipelihara sebagai objek penelitian, untuk mengetahui pengaruh pemberian ekstrak etanol daun  kelor  terhadap  kesehatan  hati  ayam  petelur  fase  layer  akhir  produksi. Penelitian  menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  dengan  metode eksperimental yang terdiri dari 4 perlakuan dan 5 ulangan. Setiap ulangan terdiri dari satu ekor ayam petelur. Perlakuan diberikan selama masa pemeliharaan 35 hari, yaitu P0 = ransum basal tanpa ekstrak etanol daun kelor, P1 = ransum basal mengandung ekstrak etanol daun kelor 0,08%, P2 = ransum basal mengandung ekstrak  etanol  daun  kelor  0,12%,  P3  ransum  basal  mengandung  ekstrak  etanol daun  kelor  0,16%.  Pengambilan  sampel  dilakukan  dengan  memilih  masing- masing  1  ekor  pada  setiap  unit  percobaan  sehingga  terdapat  20  sampel. Parameter  yang  diamati  pada  penelitian,  yaitu  profil  enzim  transferase  (AST, ALT,  dan  GGT)  serta  profil  biomarker  aktivitas  radikal  bebas  (MDA,  ALP, bilirubin,  dan  uric  acid).  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  pemberian ekstrak  etanol  daun  kelor  dalam  ransum  berpengaruh  nyata  (P<0,05)  terhadap profil enzim transferase dan biomarker aktivitas radikal bebas. Fungsi hati ayam petelur tetap optimal melalui pemberian ekstrak etanol daun kelor dengan kadar 0,16% dalam ransum.
Kata kunci : Ayam Petelur, Kelor, Antioksidan, Enzim Transferase, Radikal Bebas

## ABSTRACT
Twenty  Hy-Line  Brown  laying  hens  aged  102  weeks  were  reared  as  research objects to determine the effect of an ethanol extract of Moringa oleifera leaves on the liver health of laying hens in the final layer of production. The study used a completely randomized design (CRD) with an experimental method consisting of 4 treatments and 5 replications. Each repetition consisted of one laying hen. The treatment was given for a maintenance period of 35 days, namely P0 = basal diet without  ethanol  extract  of  Moringa  oleifera  leaves;  P1  =  basal  diet  containing 0.08%  ethanol  extract  of  Moringa  oleifera  leaves;  P2  =  basal  diet  containing ethanol extract of Moringa oleifera leaves (0.12%); and P3 = basal diet containing 0.16%  ethanol  extract  of  Moringa  oleifera  leaves.  Sampling  was  carried  out  by
selecting one individual in each experimental unit, so that there were 20 samples. The parameters observed in the study were profiles of transferase enzymes (AST, ALT,  and  GGT)  and  profiles  of  free  radical  biomarkers  (MDA,  ALP,  bilirubin, and  uric  acid).  The  results  showed  that  administration  of  an  ethanol  extract  of Moringa leaves in the ration had a significant effect (P 0.05) on the profile of the transferase  enzyme  and  markers  of  free  radical  activity.  The  liver  function  of laying hens remained optimal after administering an ethanol extract of Moringa leaves with a content of 0.16% in diet.
Keywords :  Laying  Hens,  Moringa,  Antioxidants,  Transferase  Enzymes,  Free Radicals

## PENDAHULUAN
Ayam ras petelur merupakan jenis ayam yang memiliki kemampuan memproduksi telur  yang  tinggi.  Telur  yang  dihasilkan  oleh  komoditi  ini  sangat  potensial  karena  dapat dijadikan sebagai penyumbang sumber protein hewani bagi masyarakat Indonesia. Namun seiring  dengan  bertambahnya  umur,  ayam  mulai  mengalami  penurunan  kemampuan produksi yang disebabkan karena adanya penurunan fungsi organ dan proses degenerasi sel yang  bertambah  secara  alamiah  (Zulfikar,  2013;  Jiwandini  dkk.,  2020).  Pada  saat  ayam berumur 90-100 minggu, jumlah produksi telah berada di bawah angka 70% ( HyLine Brown Management  Guide , 2019).   Hal  ini diperparah  dengan  hadirnya radikal  bebas  sebagai  hasil samping  metabolisme  pada  saat  pembentukan  energi.  S emakin  bertambahnya  umur produksi radikal bebas dalam tubuh akan terus meningkat, namun mekanisme pertahanan endogen sebagai penghambat menurun ( Trüeb, 2009) . Produksi radikal bebas yang melebihi kapasitas  antioksidan  yang  ada,  akan  mengarahkan  sel  menuju  stres  oksidatif,  apoptosis, hingga nekrosis (Mushawwir dan Latipudin, 2013).
Kondisi  stres  oksidatif  pada  ayam  petelur  berdampak  negatif  pada  beberapa komponen  penyusun  membran  sel  sehingga  dapat  meningkatkan  degenerasi  dinding  sel, degenerasi  hidropik,  hingga  kerusakan  fungsi  organ.  Kerusakan  organ  hati  menyebabkan enzim  spesifik  yang  mengkatalis  metabolisme  di  hati  bermigrasi  menuju  sistem  sirkulasi darah  (Setiyowati  dkk.,  2018).  Enzim-enzim  ini  termasuk  ke  dalam  kelompok  enzim transferase, yaitu enzim Aspartate aminotransferase (AST), Alanine aminotransferase (ALT), dan Gamma  glutamyl  transferase (GGT).  Sekresi  ketiga  enzim  tersebut  ke  dalam  plasma  darah mengakibatkan  kadarnya  meningkat  sehingga  dapat  digunakan  untuk  menganalisa kesehatan  hati.  Selain  enzim  transferase,  efek  hepatoprotektor  dapat  dianalisa  melalui beberapa biomarker radikal bebas seperti Malondialdehyde (MDA), Alkaline phosphatase (ALP),
bilirubin total, dan uric acid . Aktivitas mereka diukur dalam serum telah dikenal secara luas sebagai parameter untuk mendeteksi kerusakan hepatoselular.
Hepatoprotektor adalah senyawa atau zat berkhasiat yang dapat melindungi sel-sel hati  terhadap  pengaruh  zat  toksik  yang  dapat  merusak  hati.  Hati  memiliki  peran  yang sangat  penting  dalam  tubuh  seperti  metabolisme  glukosa  dan  lipid,  absorbsi  lemak  dan vitamin  yang  larut  dalam  lemak,  detoksifikasi  terhadap  zat  toksik,  membantu  sistem pencernaan, serta sebagai organ utama vitelogenesis untuk sintesis prekursor yolk , terutama lipid yang digunakan sebagai bahan dasar proses folikulogenesis untuk menghasilkan telur.
Hati  juga  mengatur  fungsi  yang  meliputi  sintesis  protein,  sekresi  enzim  biokimia,  dan detoksifikasi  xenobiotic  (Azma,  2016;  Mushawwir  dan  Latipuddin,  2013;  Chiu  dkk.,  2018). Hati  yang  sehat  dan  berfungsi  dengan  optimal  diharapkan  dapat  memperpanjang  usia produktif ayam petelur.
Kelor  ( Moringa  oleifera) merupakan  salah  satu  jenis  tanaman  yang  banyak mengandung  zat  aktif  yang  dapat  berperan  sebagai  hepatoprotektor.  Tanaman  kelor memiliki  banyak  kandungan  senyawa  aktif  berupa  antioksidan  terutama  pada  bagian daunnya  (Rofiah,  2015).  Ekstrak  etanol  daun  kelor  mengandung  senyawa  bioaktif  yaitu flavonoid,  terpenoid,  alkaloid,  saponin  dan  tannin  (Anwar  dkk.,  2007;  Rivai,  2020). Flavonoid merupakan kelompok dari senyawa fenolik yang memiliki sifat antioksidan kuat (Husna dkk., 2022). Efektifitas flavonoid sebagai antioksidan untuk memperbaiki kerusakan hepatoselular  telah  dibuktikan  oleh  penelitian  Jiwandini  dkk.  (2020)  yang  didapatkan dari tanaman herbal pegagan ( Centella asiatica ), ditandai dengan adanya penurunan kadar enzim AST,  ALT,  dan  GGT  pada  ayam  petelur  berumur  119  minggu.  Mekanisme  penghambatan radikal  bebas  oleh  antioksidan  yaitu  menangkap  radikal  bebas  dan  radikal  peroksil  lipid, menghilangkan bio-molekul yang rusak akibat proses oksidasi, mencegah, dan menghambat pembentukan radikal bebas (Seifu dkk., 2012).
Berdasarkan  uraian  di  atas,  maka  dalam  penelitian  ini  dilakukan  studi  untuk membuktikan  efektifitas  hepatoprotektor  dari  ekstrak  etanol  daun  kelor  ( Moringa  oleifera ) terhadap profil enzim transferase dan biomarker radikal bebas pada ayam petelur fase layer akhir produksi. Pemberian dalam bentuk ekstrak bertujuan untuk menarik komponen kimia yang  terdapat  pada  daun  kelor. Ekstraksi  ini  didasarkan  pada  prinsip  perpindahan  massa komponen zat ke dalam pelarut, yaitu perpindahan mulai terjadi pada lapisan antar muka kemudian berdifusi masuk ke dalam pelarut (Meigaria dkk., 2016).

## MATERI DAN METODE

## Materi
Ternak percobaan yang digunakan untuk penelitian ini adalah ayam petelur tipe Hy- Line Brown fase layer akhir produksi sebanyak 20 ekor berumur 102 minggu yang dipelihara selama  35  hari.  Penelitian  dilaksanakan  pada  bulan  April  sampai  Juni  2023.  Pemeliharaan dilakukan  di  Kandang  Ayam  Petelur  Sukarapih,  Desa  Sukarapih,  Kecamatan  Tanjungsari,
Kabupaten  Sumedang.  EEDK  dicampurkan  ke  dalam  ransum  basal  sesuai  dengan perlakuan.  Ransum  diberikan  terbatas  sesuai  standar  kebutuhan  dan  air  minum  secara adlibitum .  Ayam  petelur  dipelihara  dalam  kandang  tipe semi  opened  house dengan  sistem baterai dan dipilih berdasarkan hasil recording dalam setiap unit percobaan.

## Metode
Penelitian ini dilaksanakan dengan menggunakan metode Rancangan Acak Lengkap (RAL). Terdiri dari 4 perlakuan yaitu tanpa dan dengan pemberian EEDK. Setiap perlakuan terdiri atas 5 kali ulangan sehingga terdapat 20 unit percobaan. Setiap unit percobaan terdiri dari  1  ekor ayam  petelur.  Kelima  perlakuan  tersebut  yaitu  P0:  Ransum  basal  tanpa EEDK; P1: Ransum basal mengandung EEDK 0,08%; P2: Ransum basal mengandung EEDK 0,12%; dan P3: Ransum basal mengandung EEDK 0,16%.

## Prosedur Penelitian

## a. Pembuatan Ransum Percobaan
Ransum  percobaan  yang  digunakan  pada  penelitian  ini  adalah  campuran  antara konsentrat  Royal  K-36  KM,  jagung,  dedak  padi,  dan  mineral  mix.  Ransum  kemudian dicampur  dengan  ekstrak  daun  kelor  sebagai feed  additive .  Formulasi  ransum  disajikan dalam Tabel 1 berikut:
Tabel 1. Kandungan Nutrien dan Energi Metabolis Bahan Pakan
Bahan Pakan Energi Metabolis Protein Kasar Lemak Kasar Serat Kasar Ca P (kkal/kg) ...............................(%)............................... Jagung a) 3370 8,60 3,90 2,00 0,02 0,10 Dedak a) 1630 12,00 13,00 12,00 0,12 0,20 Mineral Mix b) - - - - 32,50 1,00 Konsentrat b) 2250 36,00 5,00 7,00 12,00 2,00
Sumber: a) Abun dkk. (2012), b) Kemasan Produk
Tabel 2. Kandungan Nutrisi dan Komposisi Ransum Basal
Bahan Pakan Komposisi Penggunaan a) (%) Jagung 49,37 Dedak 16,00 Konsentrat 33,13 Mineral Mix 1,50 Total 100 Kandungan Nutrien b) Energi Metabolis (kkal/kg) 2670 Protein Kasar (%) 17,60 Serat Kasar (%) 5,23 Lemak Kasar (%) 5,33 Calsium (%) 4,49 Fospor (%) 0,76 Sumber: a) Formulasi  menggunakan  aplikasi Animal  Feed
Formulation Software b) Disusun berdasarkan SNI 8290.6:2016

## b. Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Kelor
Pembuatan ekstrak menggunakan metode maserasi dengan modifikasi perbandingan pelarut berdasarkan Fatmawati dan Aji (2019). Sebanyak 3,2 kg daun kelor disortasi basah agar  terpisah  dari  kotoran  yang  melekat.  Simplisia  kering  daun  kelor  sebanyak  1,1  kg diperoleh  dengan  cara  pengeringan  dalam  oven  pada  suhu  50˚C  hingga  kadar  air  kurang dari 13%, kemudian diserbuk hingga berbentuk tepung. Serbuk simplisia dimaserasi dengan etanol 70% (1:5) selama 3 hari, kemudian disaring. Ampas diremaserasi sebanyak dua kali dengan pelarut yang sama. Maserat diuapkan dengan menggunakan vacum rotary evaporator (suhu  55-60°C)  hingga  tidak  ada  lagi  uap  etanol  yang  menetes  pada  labu  alas  bulat penampung kaca rotary evaporator dan dilanjutkan dengan waterbath pada suhu 50°C hingga didapatkan ekstrak kental daun kelor.

## c. Pemberian Ekstrak Etanol Daun Kelor
Ransum percobaan dicampurkan dengan EEDK sebanyak masing-masing perlakuan, kemudian  diberikan  sebanyak  120  g/ekor/hari.  Pemberian  ransum  dilakukan  sebanyak  2 kali,  yaitu  60  g  pada  pagi  hari  dan  60  g  pada  sore  hari.  Pemberian  air  minum  secara adlibitum .
6 Tiara, dkk
Efek Hepatoprotektor Ekstrak Etanol Daun Kelor

## d. Pengambilan Sampel
Pengambilan  sampel  dilakukan  pada  akhir  pemeliharaan.  Sampel  diambil  dari keseluruhan  unit  percobaan,  sehingga  didapatkan  20  sampel.  Sampel  darah  diambil menggunakan  spuit  yang  ditusukkan  ke  pembuluh  vena  bagian  sayap  ( vena  pectoralis externa )  sebanyak  3  mL.  Sampel  darah  masuk  ke  dalam  vakutainer  ber-EDTA  kemudian dikocok secara perlahan-lahan dan disimpan di dalam cooling box sebelum darah dianalisis untuk menghindari terjadinya penggumpalan pada darah.

## e. Analisis Sampel
Sampel  darah  yang  diperoleh  disentrifugasi  dengan  kecepatan 3000  rpm  selama  15 menit untuk memperoleh plasma darah. Plasma dipisahkan menggunakan mikro pipet dan ditampung  ke  dalam  tabung  koleksi  3  mL.  Plasma  darah  dianalisis  menggunakan  Teknik spektrofotometri  dengan  mencampurkan  reagen  dan  larutan  buffer  berdasarkan  petunjuk Biolabo Kit, France (2015), dengan Panjang gelombang sesuai dengan parameter.

## Analisis Data
Data  dianalisis  menggunakan  analisis  sidik  ragam  Rancangan  Acak  Lengkap.
Penentuan  perbedaan  antarperlakuan  dilakukan  dengan  menggunakan  uji  jarak  berganda Duncan.  Semua  prosedur  analisis  dilakuan  dengan  mengunakan software SPSS  IBM  25 dengan tingkat signifikansi 95%.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Kelor Terhadap Profil Enzim Transferase
Pengaruh  pemberian  berbagai  level  ekstrak  etanol  daun  kelor  dalam  ransum terhadap  profil  enzim  transferase  meliputi  enzim  AST,  ALT,  dan  GGT  berdasarkan  hasil penelitian dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 3. Profil Enzim Transferase pada Ayam Petelur Fase Layer Akhir Produksi Tanpa dan dengan Pemberian Ekstrak Etanol Daun Kelor
Perlakuan Parameter AST ALT GGT ……………(U/L)…………… P0 114,01±3,12 d 26,71±1,32 d 14,65±0,44 c P1 94,89±1,72 c 24,94±1,01 c 14,09±0,74 c P2 70,50±3,16 b 21,44±0,87 b 12,46±0,42 b P3 58,19±1,57 a 20,02±0,81 a 10,66±0,64 a
a,b,c,d Notasi huruf yang berbeda pada kolom yang sama menunjukkan perbedaan yang nyata (P<0,05)
Hasil analisis sidik ragam menunjukkan bahwa pemberian EEDK berpengaruh nyata (P<0,05) terhadap kadar enzim AST, ALT, dan GGT ayam petelur fase layer akhir produksi. Uji jarak berganda Duncan dilakukan untuk mengetahui perbedaan rataan antarperlakuan. Berdasarkan Tabel 3, kadar enzim AST pada P0 (114,01 U/L) secara signifikan (P<0,05) lebih tinggi  dibandingkan  P1  sampai  P3  yang  diberi  perlakuan  EEDK  dengan  masing-masing 94,89; 70,50; dan 58,19 U/L. Begitupula kadar enzim ALT pada P0 (26,71 U/L) berbeda nyata (P<0,05)  lebih  tinggi  dibandingkan  P1  sampai  P3  yang  diberi  perlakuan  EEDK  dengan masing-masing  24,94;  21,44;  dan  20,02  U/L.  Hasil  ini  sejalan  dengan  penelitian  Abdel- Wareth  (2021)  adanya  pengaruh  suplementasi  daun  kelor  dalam  ransum  terhadap peningkatan  kesehatan  hati  ayam  petelur  yang  ditandai  dengan  penurunan  konsentrasi enzim  AST  dan  ALT.  Berawi  dkk.  (2019)  melaporkan  bahwa  ekstrak  daun  kelor  memiliki efek substansial pada kadar AST dan ALT, disamping pengurangan kadar lipid dan tingkat peroksidasi lemak di hati tikus.
Kadar enzim GGT ayam petelur fase layer akhir produksi yang diberi EEDK pada P0 (14,65 U/L) berbeda nyata (P<0,05) lebih tinggi dibandingkan P2 (12,46 U/L) dan P3 (10,66 U/L), tetapi tidak berbeda nyata (P>0,05) dengan P1 (14,09 U/L). Penurunan kadar enzim GGT  paling  rendah  yaitu  P3  (10,66  U/L)  yang  diberi  ransum  mengandung  EEDK  0,16%.
Hasil  yang  serupa  juga  diperoleh  pada  enzim  AST  dan  ALT,  yang  menunjukkan  bahwa semakin  tinggi  pemberian  level  EEDK  menghasilkan  kadar  enzim  transferase  yang  lebih rendah.  Hal  tersebut  membuktikan  efektivitas  hepatoprotektor  dalam  EEDK  dapat menghambat  dan  memperbaiki  kerusakan  pada  hati.  Penelitian  Willy  dkk.  (2019) menghasilkan  adanya  perbaikan  gambaran  histopatologi  hati  dan  perbaikan  pada  fungsi hati  yang  ditunjukan  oleh  adanya  penurunan  kadar  ALT,  AST,  dan  GGT  yang  signifikan pada kelompok tikus yang diberi intervensi ekstrak daun kelor.
Ayam ras petelur tua pada periode akhir akan mengalami gangguan kesehatan dan penurunan produktivitas yang dipengaruhi oleh umur. Dengan meningkatnya umur secara histologik  dan  anatomik  akan  terjadi  perubahan  akibat  atrofi  sebagian  besar  sel,  berubah bentuk menjadi jaringan fibrous sehingga menyebabkan penurunan fungsi hati (Samli dkk, 2005). Enzim transferase adalah enzim yang ikut serta dalam reaksi pemindahan (transfer) suatu  radikal  atau  gugus.  Enzim  AST,  ALT,  dan  GGT  merupakan  kelompok  enzim transferase  yang  secara  spesifik  berperan  dalam  metabolisme  hati.  Ketika  produksi  atau
Efek Hepatoprotektor Ekstrak Etanol Daun Kelor
fungsi enzim ini terganggu, proses metabolisme dalam tubuh pun bisa mengalami gangguan sehingga dapat menurunkan produktivitas ayam petelur.
Perlakuan  dengan  pemberian  EEDK  pada  ketiga  enzim  transferase  cenderung memberikan  hasil  yang  lebih  rendah  dibanding  kontrol.  Kandungan  antioksidan  dalam EEDK  berfungsi  sebagai  pelindung  terhadap  peroksidasi  lemak  di  dalam  membran.
Flavonoid  seperti  quercetin,  kaempferol,  asam  fenolik,  dan  sifat  fitokimia  lainnya  dalam EEDK  diidentifikasi  sebagai  antiinflamasi,  antibakteri,  dan  antioksidan  yang  paling  kuat (Wulan  dkk.,  2019;  Berawi  dkk.,  2019). Jenis  flavonoid  yang  paling    banyak    ditemukan dalam  daun  kelor adalah quercetin. Senyawa kimia quercetin berfungsi sebagai antioksidan yang memungkinkan flavonoid dapat memperbaiki keadaan jaringan yang rusak dan proses inflamasi dapat terhambat (Anwar dkk . , 2007; Waji dan Sugrani , 2009).

## Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Kelor Terhadap Profil Biomarker Aktivitas Radikal Bebas
Pengaruh pemberian berbagai level EEDK dalam ransum terhadap profil biomarker aktivitas  radikal  bebas  meliputi  MDA,  ALP,  bilirubin  total  dan uric  acid berdasarkan  hasil penelitian dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel  4.  Profil  Biomarker  Aktivitas  Radikal  Bebas  pada  Ayam  Petelur  Fase  Layer  Akhir Produksi Tanpa dan dengan Pemberian Ekstrak Etanol Daun Kelor
Perlakuan Parameter MDA (U/L) ALP (U/L) Bilirubin (mg/dL) Uric Acid (mg/dL) P0 2,13±0,21 c 3,85±0,07 d 3,90±0,05 d 4,66±0,27 d P1 1,87±0,17 b 3,21±0,20 c 2,86±0,12 c 4,13±0,10 c P2 1,60±0,10 a 2,60±0,14 b 2,25±0,21 b 3,78±0,13 b P3 1,45±0,12 a 2,20±0,18 a 1,76±0,13 a 3,14±0,15 a a,b,c,d Notasi huruf yang berbeda pada kolom yang sama menunjukkan perbedaan yang nyata (P<0,05)
Hasil analisis sidik ragam menunjukkan bahwa pemberian EEDK berpengaruh nyata (P<0,05)  terhadap  kadar  MDA,  bilirubin,  ALP,  dan uric  acid ayam  petelur  fase  layer  akhir produksi.  Selanjutnya  dilakukan  uji  jarak  berganda  Duncan  untuk  mengetahui  perbedaan rataan antarperlakuan. Berdasarkan Tabel 4, kadar MDA pada P0 (2,13 U/L) berbeda nyata (P<0,05) lebih tinggi dibandingkan P1 sampai P3 yang diberi perlakuan EEDK yaitu masing- masing  1,87;  1,60;  dan  1,45  U/L.  Hasil  yang  sama  didapatkan  kadar  ALP  pada  P0  (3,85 mg/dL)  berbeda  nyata  (P<0,05)  lebih  tinggi  dibandingkan  P1  sampai  P3  yang  diberi perlakuan EEDK yaitu masing-masing 3,21; 2,60; dan 2,20 U/L. Berdasarkan hasil tersebut
dapat  dilihat  bahwa  pemberian  EEDK  sebanyak  0,16%  (P3)  memberikan  rata-rata  kadar MDA dan ALP yang paling rendah di antara perlakuan.
Kadar  bilirubin  total  pada  P0  (3,90  mg/dL)  berbeda  nyata  (P<0,05)  lebih  tinggi dibandingkan  P1  sampai  P3  yang  diberi  perlakuan  EEDK  yaitu  masing-masing  2,86;  2,25; dan 1,76 mg/dL.  Kemudian kadar uric acid didapatkan pada P0 (4,66 mg/dL) berbeda nyata (P<0,05) lebih tinggi dibandingkan P1 sampai P3 yang diberi perlakuan EEDK yaitu masing- masing  4,13;  3,78;  dan  3,14  mg/dL.  Berdasarkan  hasil  tersebut  dapat  disimpulkan  bahwa pemberian  EEDK  sebanyak  0,16%  (P3)  memberikan  rata-rata  kadar  bilirubin  dan uric  acid yang paling rendah di antara perlakuan.
Produk  sampingan  yang  sangat  reaktif  dari  sintesis  lipid  yang  dikenal  sebagai malondialdehyde (MDA) umumnya digunakan sebagai penanda biologis sintesis lipid untuk mendeteksi  stres  oksidatif.  Peroksidasi  lipid  diinisiasi  oleh  radikal  bebas  seperti  radikal anion  superoksida,  radikal  hidroksil,  dan  radikal  peroksil, yang  mana  akan  terus  menerus disintesis  oleh  mitokondria  (Wicaksono  dan  Kalsum,  2023;  Mushawwir  dkk,  2019).  Kadar MDA pada ayam petelur dengan perlakuan pemberian EEDK cenderung memberikan hasil yang lebih rendah dibandingkan kontrol. Hasil ini sejalan dengan temuan Wei dkk. (2016) bahwa  suplementasi  tepung  daun  kelor  secara  signifikan  dapat  menurunkan  kadar  MDA pada ayam petelur dibandingkan dengan kelompok kontrol disebabkan adanya kandungan antioksidan  yang  tinggi.  Antioksidan  dapat  menghambat  peroksidasi  lipid  dan  mencegah kerusakan sel yang disebabkan oleh stress oksidatif dengan cara menghambat ikatan reaksi rantai  oksidatif.  Rao  dkk.  (2019)  juga  melaporkan  bahwa  suplementasi  tepung  daun  kelor secara signifikan mengurangi peroksidasi lipid di hati ayam pedaging.
Alkaline  Phosphatase (ALP)  merupakan  enzim  yang  mengkatalisasi  hidrolisis  ester fosfat  organik  dalam  suasana  basa  secara  optimum  membentuk  bahan  fosfat  organil  dan bahan  radikal  (Sharma  dkk.,  2014).  Peningkatan  kadar  ALP  dalam  darah  disebabkan  oleh adanya  kebocoran  kanalikulus  dan  membran  plasma  pada  kerusakan  sel  hati.  Hasil pemberian  EEDK  menunjukkan  adanya  penurunan  kadar  ALP  pada  plasma  secara signifikan (P<0,05). Hasil ini sejalan dengan penelitian Arafat dkk. (2018) yang menunjukkan peran protektif ekstrak daun kelor terhadap toksisitas nefro dan hepatosis pada ayam yang ditandai dengan menurunnya kadar ALP, AST, dan ALT dalam plasma.
Semakin  bertambahnya  umur,  kondisi  fisiologis  ayam  mulai  mengalami kemunduran  yang  menyebabkan  ayam  rentan  terkena  efek  negatif  radikal  bebas.  Radikal
bebas akan menyerang komponen dalam tubuh  yang terdiri dari protein dan lipid tunggal yang  ada  di  hati.  Kerusakan  pada  hati  menyebabkan  fungsi  hati  untuk  memetabolisme bilirubin  terganggu,  akibatnya  kadar  bilirubin  dalam  serum  meningkat  (Ulinafiah,  2012).
Pemberian EEDK pada ayam petelur fase layer akhir produksi menghasilkan rata-rata kadar bilirubin  total  lebih  rendah  dibandingkan  dengan  perlakuan  kontrol.  Hal  ini  dkarenakan daun kelor ( Moringa oleifera ) mengandung tinggi antioksidan berupa flavonoid. Mekanisme kerja  dari flavonoid yaitu mengikat radikal bebas sehingga kadar bilirubin tidak meningkat (Woodhead dkk, 2012).
Asam  urat  atau uric  acid merupakan  produk  akhir  dari  metabolisme  purin  yang terjadi di dalam tubuh. Didapatkan hasil rataan kadar uric acid pada perlakuan EEDK lebih rendah dibandingkan dengan tanpa pemberian EEDK. Hasil yang serupa didapatkan dalam penelitian  Rahmawati  (2015)  dan  Putra  dkk.  (2019)  bahwa  pemberian  ekstrak  daun  kelor dapat  menurunkan  kadar  asam  urat  pada  tikus  putih  jantan  galur  wistar.  Penurunan  ini diduga  karena  adanya  kandungan  flavonoid  dalam  EEDK  yang  dapat  menghambat aktivitas    enzim    xantin    oksidase  melalui  mekanisme  inhibisi  kompetitif  sehingga  dapat menghambat pembentukan asam urat.  Secara  in-vitro  beberapa senyawa flavonoid  dapat menghambat  enzim xantin oksidase diantaranya flavonoid, luteolin, apigenin, kuersetin dan miresetin  (Kristinawati  dkk.,  2013;  Rinayanti,  2016).  Senyawa  tanin,  alkaloid,  dan  saponin dalam  EEDK  diduga  memiliki  peran  yang  hampir  sama  dengan  flavonoid,  yaitu  dapat menurunkan  kadar  asam  urat  dengan  mengurangi  aktivitas  enzim  xantin  oksidase  dalam serum  dan  meningkatkan  konsentrasi  asam  urat  dalam  urin,  serta  mengikat  radikal  bebas selama perubahan purin menjadi asam urat (Hatano dkk., 1990; Tion dkk., 2013).

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  dapat  disimpulkan  bahwa  pemberian  beberapa  level ekstrak  etanol  daun  kelor  dalam  ransum  hingga  0,16%  memberikan  pengaruh  terhadap kesehatan hati ayam petelur fase layer akhir produksi. Hal ini ditunjukkan dengan adanya penurunan  yang  optimal dalam  batas  normal  kadar  enzim  transferase  yang  meliputi  AST, ALT,  dan  GGT  yang  diiringi  dengan  penurunan  hasil  dari  beberapa  biomarker  aktivitas radikal bebas berupa MDA, ALP, bilirubin, dan uric acid .

## DAFTAR PUSTAKA
Abdel-Wareth,  A.  A.,  dan  Lohakare,  J.  2021.  Moringa  oleifera  leaves  as  eco-friendly  feed additive in diets of hy-line brown hens during the late laying period. Animals , 11(4), 1116.
Abun, S., Saefulhadjar, D., Haetami, K. 2012. Nilai energi metabolis dan kecernaan ransum mengandung  imbuhan  pakan  berbasis  ekstrak  limbah  udang  pada  ayam broiler. Jurnal Ilmu Ternak , 12(1), 1-6.
Adriani, L., Mushawwir, A., Widjastuti, T., Nabila, T. I. 2022. Consortium of microbiota in probiotic yogurt in inhibiting the growth of salmonella typhii which causes typhus. Animal and Food Sciences Journal Iasi, 118-123.
Anwar,  F.,  Latif,  S.,  Ashraf,  M.,  Giliani,  A.  H.  2007.  Moringa  oleifera:  a  food  plant  with multiple medicinal uses. Phytother Res , 21, 17-25.
Arafat, N., Awadin, W. F., El-Shafei, R. A., Farag, V. M., Saleh, R. M. 2018. Protective role of moringa  oleifera  leaves  extract  against  gentamicin-induced  nephro-and  hepato- toxicity in chickens. Alexandria Journal of Veterinary Sciences, 58(1), 173-185. Azma, R. 2016. Pemeriksaan laboratorium penyakit hati. Berkala Kedokteran , 12(1), 123-131. Berawi,  N,  K.,  Wahyudo,  R.,  Pratama,  A,  A.  2019.  Potensi  terapi  moringa  oleifera  (kelor) pada penyakit degeneratif. Jurnal Kedokteran Universitas Lampung , 3(1), 210-214. Chiu, Y. J., S. C. Chou, C. S. Chiu, C. P. Kao, K. C. Wu, C. J. Chen, J. C. Tsai, dan W. H. Peng. 2018. Hepatoprotective effect of the ethanol extract of polygonum orientale on carbon tetrachloride-induced  acute  liver  injury  in  mice. Journal  of  Food  and  Drug  Analysis , 26(1), 369–379.
Fatmawati, A., dan Aji, N. P. 2019. Penetapan kadar flavonoid total ekstrak etanol daun kelor (moringa  oleifera  lam)  dengan  metode  kromatografi  lapis  tipis  densitometri. Universitas Alma Ata dan Akademi Farmasi Al-Fatah Bengkulu , 1-7. Hatano , T., Yasuhara, T., Yoshihara, R., Agata I. 1990. Effect of interaction of tannina with co-existing substance. inhibitory effect of tannins and related polyphenol of xanthine oxidase, 38(5), 1224- 1229.
Husna,  P.,  Kairupan,  C.,  Lintong,  P.  2022.  Tinjauan  mengenai  manfaat  flavonoid  pada tumbuhan obat sebagai antioksidan dan inflamasi. eBiomedik , 10(1), 76-83. Hyline. 2019. Panduan manajemen hy-line brown. Dallas Center: Hyline International . Jiwandini, A., H. Burhanudin,  A. Mushawwir. 2020. Kadar enzim transaminase (sgpt, sgot) dan gamma glutamyl transpeptidase (γ -gt) pada ayam petelur fase layer yang diberi ekstrak pegagan ( Centella asiatica ). Jurnal Nutrisi Ternak Tropis dan Ilmu Pakan , 2, 112- 119.
Kristinawati, dan Nurlaela. 2013. Pengaruh pemberian filtrat buah kelor (Moringa oliefera) terhadap  kadar  asam  urat  pada  hewan  coba  tikus  putih  (Rattus  norvegicus)  strain wistar. Media Bina Ilmiah , 7(6), 27-32.
Meigaria,  K.  M,  Mudianta  I.  W.,  Martiningsih,  N.  W.  2016.  Skrining  fitokimia  dan  uji aktivitas  antioksidan  ekstrak  aseton  daun  kelor  ( Moringa  oleifera ). Jurnal  Wahana Matematika dan Sains , 10(2).
Mushawwir, A. dan D. Latipudin. 2013. Biologi sintesis telur: aspek fisiologi, biokimia dan molekuler dalam produksi telur. Graha Ilmu .
Mushawwir,  A.,  Suwarno,  N.,  Yulianti,  A.  A.  2019.  profil  malondialdehyde  (mda)  dan kreatinin  itik  fase  layer  yang  diberi  minyak  atsiri  garlic  dalam  kondisi  cekaman panas. Jurnal Ilmu dan Industri Peternakan , 5, 1-11.
Mushawwir, A., Permana, R., Latipudin, D., Suwarno, N. 2023. flavonoids avoid the damage of ileum plaque-patches of heat-stressed cihateup ducks. AIP Conference Proceedings , 2628, 140007.
Nabila, T. I., Adriani, L., Latipudin, D., Mushawwir, A., Mayasari, N. 2023. Egg quality and production  by  the  addition  of  dried  consortium  probiotics  on  late-phase  laying hens. Livestock and Animal Research , 21 (2), 103-109.
Putra,  B.,  Azizah,  R.  N.,  dan  Clara,  A.  2019.  Potensi  ekstrak  etanol  daun  kelor  (Moringa oleifera  l.)  dalam  menurunkan  kadar  asam  urat  tikus  putih. Ad-Dawaa'Journal  Of Pharmaceutical Sciences , 2(2).
Rahmawati,  R.,  dan  Kusumastuti,  A.  C.  2015.  Pengaruh  pemberian  seduhan  daun  kelor (moringa  oleifera  lamk)  terhadap  kadar  asam  urat  tikus  putih  (rattus norvegicus). Journal of Nutrition College , 4(4), 593-598.
Rao,  S.  R.,  Raju,  M.  V.  L.  N.,  Prakash,  B.,  Rajkumar,  U.,  Reddy,  E.  P.  K.  2019.  Effect  of supplementing  moringa  (moringa  oleifera)  leaf  meal  and  pomegranate  (punica granatum)  peel  meal  on  performance,  carcass  attributes,  immune  and  antioxidant responses in broiler chickens. Animal Production Science , 59(2), 288-294.
Rinayanti, A., Rahayu, S., dan Syachfitri, R. 2016. Uji aktivitas penghambatan xantin oksidase secara in-vitro oleh isolat 6,4’-dihidroksi-4-metoksibenzofenon–2–o- ᵦ -d glukopiranosida (c20h22o10) yang diisolasi dari mahkota dewa (phaleria macrocarpa (scheff.) boerl). Pharmaceutical Sciences and Research , 3(1), 1-11. Rivai, A. T. 2020. Identifikasi senyawa yang terkandung pada ekstrak daun kelor (moringan oleifera). Indonesian Journal of Fundamental Sciences , 63-70.
Rofiah, D. 2015. Aktivitas antioksidan dan sifat organoleptik teh daun kelor dengan variasi lama pengeringan dan penambahan jahe serta lengkuas sebagai perasa alami. Skripsi. Surakarta: Universitas Muhammadiyah Surakarta.
Rusmansyah, A., Permana, R., Mushawwir, A. 2022. Korelasi asam urat (uric acid) dengan indikator  radikal  bebas  pada  ayam  broiler. Jurnal  Sains  dan  Teknologi  Industri Peternakan, 3(1): 24-30. Sharma, U., D. Pal, dan R. Prasad. 2014. Alkaline phosphatase: an overview. Indian Journal of Clinical Biochemistry , 29(3), 269–278.
Samli, H. E., Agma, A dan Senkoylu, N. 2005. Effect of storage time and temperature on egg quality in old laying hens. Journal of Applied Poultry Research , 14, 548-553. Seifu, D., F. Assefa, dan S. M. Abay. 2012. Medicinal plants as antioxidant digital repository universitas  jember  41  agents:  understanding  their  mechanism  of  action  and therapeutic efficacy. Research Signpost , 37(2), 97–145.
Setiyowati, A., Utama, I. H., dan Setiasih, N. L. E. 2018. Pengaruh penambahan tepung daun kelor  (moringa  oleifera)  pada  pakan  tikus  putih  terhadap  aktivitas  enzim  alanine aminotransferase  dan  aspartate  aminotransferase. Indonesia  Medicus  Veterinus , 7(3), 271-277.
Tiong, S, H., Looi, C, Y., Hazni H. 2018. Antidiabetic and antioxidant properties of alkaloids from Catharanthus roseus (L.) G. Don. Molecules (Basel, Switzerland), 18(8), 9770-84. Trüeb, R. M. 2009. Oxidative stress in ageing of hair. International Journal of Trichology , 1, 6-14. Ulinafiah,  M.  2012.  Pengaruh  pemberian  ekstrak  etanol  buah  mahkota  dewa  (phaleria macrocarpa  (scheff.)  boerl.)  terhadap  kadar  bilirubin  serum  tikus  yang  diinduksi minyak goreng bekas pakai. Skripsi. Universitas Jember .
Waji,  R,  A.,  dan  Sugrani  A.  2009.  Makalah  kimia  organik  bahan alam  flavanoid. Makassar: Universitas Hassanudin .
Wei Lu., J. Wang H., J. Zhang, S. G. Wu., G. H. Qi. 2016.  Evaluation of moringa oleifera leaf in laying hens: effects on laying performance, egg quality, plasma biochemistry and organ histopathological indices. Italian Journal of Animal Science , 15(4), 658-665.
Wicaksono,  W.  S.,  Kalsum,  U.  2023.  Efektivitas  daun  kelor  (moringa  oleifera)  sebagai  feed additive pakan unggas (article review). Dinamika Rekasatwa: Jurnal Ilmiah , 6(1). Willy,  T,  M.,  T.,  Nlooto,  M.,  Owira,  P.  M.  O.  2019.  Hepatoprotective  effects  of  Moringa oleifera  Lam  (Moringaceae)  leaf  extracts  in  streptozotocin-induced  diabetes  in rats. Journal of functional foods , 57, 75-82. Woodhead,  J.  L.,  Howell,  B.  A.,  Yang,  Y.,  Harrill,  A.  H.,  Clewell,  H.  J.,  Andersen,  M.  E., Watkins,  P.  B.  2012.  An  analysis  of  n-acetylcysteine  treatment  for  acetaminophen overdose using a systems model of drug-induced liver injury. Journal Of Pharmacology And Experimental Therapeutics , 342(2), 529-540.
Wulan,  A,  H.,  Widagdo,  D,  P.,  Aulia,  C.  2019.  Potensi  ekstrak  etanol  daun  kelor  sebagai antiinflamasi  dan  penetapan  kadar  flavonoid  total. Media  Farmasi  Indonesia ,  16(2): 1693-1697.
Yuliandari,  M.,  Permana,  R.,  Mushawwir,  A.  2022.  Aktvitas  peroksidasi  lipid  ayam  broiler dengan dan tanpa penambahan glutathione dalam ransum. Jurnal Sains dan Teknologi Industri Peternakan, 3(1): 18-23.
Zulfikar.  2013.  Manajemen  pemeliharaan  ayam  petelur  ras. Lentera:  Jurnal  Ilmiah  Sains  dan Teknologi , 13(1).