___________________________________________________________________________ L. Win: Jurusan Keperawatan Akademi Keperawatan Selong

## OLAHRAGA INTENSITAS SEDANG TERHADAP WAKTU PEMBEKUAN DARAH PADA TIKUS PUTIH DENGAN PAJANAN ASAP ROKOK

## Lalu Win
Abstrak :  Asap  rokok  merupakan  aerosol    heterogen  dari  pembakaran  tembakau  dan  pembungkusnya.  Setiap batang  rokok mengandung lebih dari 4000 bahan kimia, 400 diantaranya beracun dan kira-kira 43 diantaranya bersifat  karsinogenik.  Rokok  mempunyai  hubungan  erat  dengan  kanker  paru,  emfisema  dan  bronkhitis  kronis. Selain itu , rokok juga merupakan salah satu faktor risiko terjadinya aterosklerosis. Salah satu faktor risiko baru yang  belum  sepenuhnya  diketahui  adalah  homosistein.    Merokok  merupakan  salah  satu    faktor    yang  dapat menyebabkan  peningkatan  kadar  homosistein  plasma.  Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  mengetahui  pengaruh olahraga intensitas sedang terhadap waktu pembekuan darah tikus putih yang di pajan asap rokok  . Rancangan penelitian  yang  digunakan  adalah postest  only  control  group  design .  Sampel  adalah  30  ekor    tikus  putih ( Rattusnorvegicus ) jantan dewasa yang telah berumur 2 sampai 3 bulan dengan berat badan160-175gr, dengan kondisi sehat fisik. Tikus dibagi secara acak dalam 3 klompok : Kelompok kontrol  yang tidak diberikan pajanan asap rokok dan olahraga hanya diletakkan pada air dangkal pada saat K2 berenang.  Kelompok yang diberikan pajanan asap rokok tanpa olahraga     Tikus diberikan pajanan asap rokok kretek sebanyak 2 batang/ hari dengan menggunakan smooking pump , dengan menempatkan tikus pada kotak kaca. Meletakkan tikus pada air dangkal pada saat K2 berenang.  Kelompok yang diberikan pajanan asap rokok dan olahraga 30 menit setelah diberikan pajanan asap rokok, tikus direnangkan selama 80% waktu kemampuan renang maksimal dengan beban 6% berat badan.  Hasil penelitian menunjukkan bahwa pajanan asap rokok  memperpendek waktu pembekuan darah pada tikus putih. Olahraga intensitas sedang mencegah pemendekan waktu pembekuan darah pada tikus putih dengan pajanan  asap  rokok.  Kesimpulan  dari  penelitian  olahraga  intensitas  sedang  terhadap  waktu  pembekuan  darah pada tikus putih dengan pajanan asap rokok.
Kata Kunci : Asap rokok, Olah raga, Pembekuan darah.

## EXERCISE INTENSITY ARE FREEZING TIME OF BLOOD IN RATS WITH WHITE SMOKE EXPOSURE
Abstract: Cigarette  smoke  is  a  heterogeneous  aerosols  from  burning  tobacco  and  wrapping.  Each  cigarette contains  over  4000  chemicals,  400  of  them  are  poisonous  and  approximately  43  of  which  are  carcinogenic. Smoking is closely linked with lung cancer, emphysema and chronic bronchitis. In addition, smoking is also a risk factor for atherosclerosis. One of the new risk factors are not fully known is homocysteine. Smoking is one of the factors that can lead to increased plasma homocysteine levels. The purpose of this study was to know the influence of moderate intensity exercise on blood clotting time in rats that pajan smoke. The design of the study is a posttest only control group design. The sample is 30 rats (Rattusnorvegicus) adult males over the age of 2 to 3  months  with  severe  badan160-175gr,  with  a  healthy  physical  condition.  Rats  were  randomly  divided  into  3 tiem: The control group that was not given exposure to cigarette smoke and exercise just put in shallow  water when  swimming  K2.  The  group  that  was  given  exposure  to  cigarette  smoke  without  exercise  Mice  given exposure to cigarette smoke as much as 2 cigarettes / day using a pump smooking, by placing the mice in a glass box. Putting rats in shallow water when swimming K2. The group that was given exposure to cigarette smoke and exercise for 30 minutes after being given the exposure to cigarette smoke, mice direnangkan for 80% of the time  swimming  ability  6%  maximum  load  weight.  The  results  showed  that  exposure  to  cigarette  smoke
shortening  clotting  time  in  rats.  Moderate  intensity  exercise  prevented  shortening  clotting  time  in  rats  with exposure to cigarette smoke. Conclusions from the study of moderate intensity exercise on blood clotting time in rats with exposure to cigarette smoke.
Keywords : Cigarette Smoke, Exercise, Blood Clotting.

## LATAR BELAKANG
Data  epidemi  rokok  di  dunia  menunjukkan bahwa rokok  menyebabkan kematian lebih dari lima juta  orang  setiap  tahunnya  (Depkes  RI,  2010). Tingginya populasi dan konsumsi rokok menempatkan  Indonesia  menduduki  urutan  ke-5 tertinggi  di  dunia  setelah  Cina,  Amerika  Serikat, Rusia  dan  Jepang  dengan  perkiraan  konsumsi  220 milyar  batang  pada  tahun  2005  (Depkes  RI,  2010). Asap  rokok  merupakan  aerosol    heterogen  dari pembakaran  tembakau  dan  pembungkusnya.  Setiap batang  rokok  mengandung  lebih  dari  4000  bahan kimia,  400  diantaranya  beracun  dan  kira-kira  43 diantaranya bersifat karsinogenik (Yoga, 2001 dalam Christyaningsih,  2002).  Persentase  merokok  di Indonesia  sendiri  mencapai  24,2%  pada  orang dewasa  dan  25,3%  pada  remaja  pada  keseluruhan populasi    (WHO,  2009).  Rokok  mempunyai hubungan  erat  dengan  kanker  paru,  emfisema  dan bronkhitis  kronis. Selain  itu , rokok juga  merupakan salah  satu  faktor  risiko  terjadinya  aterosklerosis (Halliwel,1999).  Aterosklerosis  terjadi  melalui  suatu proses yang komplek dan multifaktorial. Berdasarkan studi  epidemiologis  yang    banyak  dilakukan, menetapkan  bahwa  faktor  risiko  aterosklerosis  yang penting  seperti merokok,  hipertensi,  diabetes mellitus,  dan  riwayat  keluarga.  Pada  kenyatannya banyak  penderita  terkena  serangan  jantung  maupun stroke  tanpa  riwayat  konvensional  ini  (Wijaya, 1998).  Para  peneliti  mulai  mendalami  beberapa
faktor  risiko  lain  yang  menyebabkan  aterosklerosis. Salah satu faktor risiko baru yang belum sepenuhnya diketahui  adalah  homosistein.    Merokok  merupakan salah  satu    faktor    yang  dapat  menyebabkan peningkatan  kadar  homosistein  plasma  (Verhoef,  et al.,  2002  ).  Homosistein  merupakan  senyawa  antara yang  dihasilkan  pada  metabolisme  metionin,  suatu asam  amino  essensial  yang  terdapat  dalam  beberapa bentuk  di  plasma  (Pusparini,2002).  Homosistein mempengaruhi  beberapa  faktor  yang  terlibat  dalam kaskade  pembekuan  darah,  seperti  menurunkan aktivitas anti trombin (Meyer ,1996 dalam Pusparini, 2002).  Trombin  adalah  suatu  serin  protease  yang terbentuk  dari  prekusornya  di  sirkulasi  yaitu protrombin. Trombin katalisasi perubahan fibrinogen menjadi fibrin. Trombin memiliki efek lain, meliputi aktivasi  trombosit,  sel  endotel  ,  leukosit  melalui reseptor  yang  terangkai  ke  protein  G  (Sherwood ,2001).  Homosistein  juga  menghambat  aktivitas kofaktor  trombomodulin  dan  aktivasi  protein  C, meningkatkan  aktivitas  faktor  V  dan  faktor  XII, mengganggu  sekresi  faktor  von  willebrand  oleh endotel  dan  mengurangi  sintesis  prostasiklin  (Meyer ,1996  dalam  Pusparini,2002).  Prostasiklin  memiliki efek  anti  agregasi  (Sherwood  ,2001).Berkurangnya sintesis  prostasiklin  akan  menyebabkan  terjadinya trombosis,  namun  hasil  ini  masih  dipertentangkan (Mayer  ,1996  dalam  Pusparini,2002). Mayer menyatakan bahwa homosistein meningkatkan metabolisme  asam  arakhidonat  trombosit  normal,
sehingga  terjadi  peningkatan  tromboksan  A2, akibatnya  akan  terjadi  akumulasi  yang  berlebihan dari  agregator  trombosit  yang  memungkinkan  untuk terjadinya  trombosis  (Pusparini,  2002).  penelitian Spalver dkk (2004) menunjukkan bahwa homosistein mempercepat pembentukan trombus melalui peningkatan kaskade pembekuan darah dan peningkatan  agregasi  trombosit.    Homosistein  juga menekan  trombolisis  alami  melalui  penurunan aktivator  plasminogen  jaringan.  Hal  yang  paling penting  untuk  mencegah  pembekuan  dalam  sistem vaskuler  normal  adalah  pertama  kehalusan  endotel yang  mencegah  kontak  aktivasi  sistem  pembekuan intrinsik  (Guyton  &  Hall  2008).  Prostasiklin  juga dapat  mencegah  pembekuan  darah  dalam  sistem vaskuler  normal.  prostasiklin  merupakan  suatu  zat yang  menghambat  agregasi  trombosit  (Sherwood ,2001).  Homosistein  menyebabkan  kerusakan  pada endotel,  keruskan  tersebut  menyebabkan  penurunan produksi  prostasiklin  yang  dapat  menyebabkan bekuan darah dalam sistem vaskuler normal sehingga terjadi trombosis. Hubungan peningkatan homosistein  dengan  penyakit  vaskuler  pertama  kali dikemukakan  oleh  Mc  Cully  pada  tahun  1969, melaporkan  adanya  aterosklerosis  disertai  trombosis arteri  pada  otopsi  dua  orang  anak  yang  mempunyai kadar  homosistein  darah  dan  urin  tinggi.  Berbagai penelitian  epidemiologi  telah  dilakukan  sebagai konfirmasi  terhadap  hipotesis  Mc  Cully  tersebut, hasil penelitian menunjukkan bahwa hiperhomosisteinemia merupakan faktor risiko terjadinya aterosklerosis dan aterotrombosis (Pusparini,  2002).  Peningkatan  kadar  homosistein dalam  darah  telah  ditegakkan  sebagai  faktor  risiko
yang  dapat  menyebabkan  terjadinya  trombosis  dan penyakit vaskuler (Clarke ,et al.,1991). Hiperhomosisteinemia  akan  meningkatkan kejadian aterotrombosis  vaskuler pada individu dengan faktor resiko  yang  lain  seperti  kebiasaan  merokok  dan hipertensi (Graham , et al,1997). Beberapa penelitian menunjukkan  bahwa  hiperhomosistein  merupakan faktor  risiko  yang  signifikan  terhadap  aterosklerosis dan terjadinya penyakit jantung koroner (Christen, et al, 2000;  Irawan ,dkk, 2005 ). Beberapa gaya hidup seperti merokok, konsumsi alkohol, kopi berlebihan , dan  kurang  olahraga  dapat  meningkatkan  kadar homosistein (Verhoef, at al., 2002 dalam  Surjadjaja , 2005).  Kegiatan  olahraga/  latihan  fisik  sangat bermanfaat bagi kesehatan Latihan fisik dapat terbagi dalam berbagai macam bentuk. Salah satu pembagian tersebut  adalah  berdasarkan  pemakaian  oksigen  atau sistem  energi  dominan  yang  digunakan  dalam  suatu latihan,  yaitu  latihan  aerobik  dan  anaerobik.  Latihan aerobik  adalah  latihan  yang  menggunakan  energi yang  berasal  dari  pembakaran  dengan  oksigen,  dan membutuhkan  oksigen  tanpa  menimbulkan  hutang oksigen  yang  tidak  terbayar.  Contoh  latihan  aerobik adalah  lari,  jalan,  treadmill,  bersepeda,  renang (Sukmaningtyas,  dkk.,  2004).  Hasil  penelitian Tomohiro,  et  al.,  (2006):  latihan  aerobik  teratur menurunkan homosistein plasma pada hiperhomosistein dari 23,1 (12.1) menjadi 19,6 (7.6) μmol/l,.  Pengaruh  olahraga  intensitas  sedang terhadap  waktu  pembekuan  darah  pada  tikus  putih dengan  pajanan  asap  rokok  Sejauh  ini  belum diketahui.
Jenis  penelitian  ini  adalah  penelitian eksperimental laboratories untuk  mengetahui  pengaruh  olahraga intensitas  sedang  terhadap  waktu  pembekuan  darah tikus  putih  yang  di  pajan  asap  rokok  dengan memberikan  perlakuan  pada  kelompok  eksperimen dan dibandingkan dengan kelompok kontrol.

## Rancangan Penelitian
Rancangan penelitian yang digunakan adalah postest only control group design (Zainuddin, 2000).
Populasi,  Sampel,  Besar  sampel  dan  Teknik

## Pengambilan Sampel
Populasi  dalam  penelitian  ini  adalah  tikus  putih ( Rattusnorvegicus )  jantan dewasa yang telah berumur  2  sampai  3  bulan  dengan  berat  badan160- 175gr,  dengan  kondisi  sehat  fisik.  Sampel  dari penelitian ini adalah darah tikus putih ( Rattusnorvegicus )  jantan  dewasa.  Besar  sampel ditentukan  berdasarkan  rumus Federer (Hanafiah,
1991) :
(t-1)(r-1) >15
(3-1)(r-1) >15
r>8,5 dibulatkan menjadi 9 ekor
Keterangan : t =  jumlah kelompok r = jumlah replikasi jadi jumlah replikasi  minimal perkelompok adalah = 9. Sampel penelitian dalam menghindari kemungkinan hewan coba mati, digunakan(f) +10 % sehingga  replikasi  dikalikan          1/1  –f  (  Zainudin, 1998  mengutip  Higgins  dan  Kleinbaun,  1995  ), sehingga:  1/(1-0,1)  x    =  9,9  dibulatkan  menjadi  10 ekor.  Replikasi  pada  penelitian  ini  adalah10ekor/ kelompok dan jumlah sampel keseluruhan 30 ekor.
Teknik pengambilan sampel : Tehnik pengambilan sampel  yang  digunakan  adalah  s imple  random sampling (Sugiyono,  2007).  Kriteria  sampel  yang memenuhi,  yaitu  tikus  putih  ( Rattus  norvegicus ) jantan  dewasa  dengan  berat  badan  150-175  g, berumur  2 sampai 3 bulan, kondisi sehat fisik.
Tempat : Tahapan  penelitian  pemeliharaan  hewan coba  hingga  pengambilan  unit  analisis  dan pemeriksaan  waktu  pembekuan  darah  dilakukan Laboratorium Biokimia Fakultas Kedokteran Universitas Airlangga Surabaya.

## Variabel Penelitian
Variabel independent : olahraga dan pajanan asap rokok.
Variabel dependen      : waktu pembekuan darah .
Variabel moderator    : berat badan tikus
Variabel  kendali                  : karakteristik  Binatang percobaan  :  umur  tikus,  jenis  kelamin  tikus,  dan strain tikus bahan makanan tikus putih: pakan standar untuk  tikus  putih,  cara  perlakuan,  cara  pemberian pajanan  asap  rokok,  cara  pemeriksaan  waktu pembekuan darah.

## Bahan Penelitian dan Instrumen Penelitian
Bahan  penelitian  : Hewan  coba  adalah  tikus  putih ( Rattus  novergicus )  galur  Wistar,  jantan,  umur  2 sampai 3 bulan 150-175g, dengan kondisi sehat fisik. Pemilihan  hewan  coba  jenis  ini  dikarenakan beberapa  alasan  yaitu:  (1)  digunakan  dalam penelitian sebelumnya yang terkait, (2) mudah dalam pemberian  perlakuan  dan  pemeliharaan,  struktur biologi  mirip  dengan  manusia  (kusumawati,  2004). Kesehatan  hewan  coba  berbadan  sehat  dengan  ciri- ciri  fisik  sebagai  berikut:  bermata  jernih,  bulu
mengkilat,  gerakan  aktif/lincah,  feses  baik,  tidak lembek,  berat  badan  tidak  turun  10%  selama aklimatisasi.    Rokok  kretek  merek  tertentu  yang sama dengan  kadar nikotin :  2,3 mg dantar  : 39  mg. Ketamin  HCL  injeksi,  dosis  yang  digunakan  20-40 mg/kgBB  untuk  anestesi  hewan  coba. Instrumen penelitian  : kandang  ukuran  40  x  30  x  15  cm,  (2) Timbangan torsion  balance (3)  spidol    untuk memberi  tanda    pada  tikus,(4)  Spuit  untuk mengambil  darah  dan  pemberian  anaestesi,  (5) Tabung reaksi tempat pemeriksaan waktu pembekuan  darah,(6)stopwatch  10  digit  untuk menentukan  waktu  pembekuan  darah  dan  waktu renang,  (7)  kotak  kaca  60  cm  x  40  cm    sebagai tempat pajanan asap rokok, (8) smoking pump untuk pajanan  asap  rokok,  (6)  Ember  renang  dengan diameter 50 cm, tinggi 60 cm dengan kedalaman air 40 cm.
Unit analisis : Darah sebanyak 3 ml.
Cara Pengumpulan Data :
Aklimatisasi  dan  Perlakuan  Hewan  Coba  :
Aklimatisasi  adalah  pemeliharaan  hewan  coba dengan  kondisi  yang  sama  agar  dapat  beradaptasi. Aklimatisasi  dilakukan  selama  1  minggu  (7  hari). Hewan  coba  yang  sakit  atau  mati,  akan  dikeluarkan dari penelitian.
Tikus dibagi secara acak dalam 3 klompok : 1). Kelompok kontrol
Tidak diberikan pajanan  asap rokok dan olahraga hanya  diletakkan  pada  air  dangkal  pada  saat  K2 berenang
2). Kelompok  yang  diberikan  pajanan  asap  rokok tanpa olahraga
Tikus  diberikan  pajanan  asap  rokok  kretek sebanyak  2  batang/  hari  dengan      menggunakan smooking pump , dengan menempatkan tikus pada kotak  kaca.  Meletakkan  tikus  pada  air  dangkal pada saat K2 berenang.
3). Kelompok yang diberikan pajanan asap rokok dan olahraga
30  menit  setelah  diberikan  pajanan  asap  rokok, tikus direnangkan selama 80% waktu kemampuan  renang  maksimal  dengan  beban  6% berat badan.

## Pemeliharaan  dan  perawatan  hewan  coba  :
Pemeliharaan  dan  perawatan  hewan  coba  dilakukan sebuah  kandang  yang ada di Laboratorium Biokimia Fakultas Kedokteran Universitas Airlangga surabaya. Kandang  terbuat  dari  plastik  yang  dimodifikasi  dan ditutup  dengan  anyaman  kawat  aluminium  dan beralaskan  sekam.  Sekam  diganti  setiap  hari  untuk menjaga  kebersihan  kandang  dan  kesehatan  hewan coba.  Ukuran  kandang  40  x  30  x  15  cm  ,  setiap kandang  diisi 3-4 ekor hewan  coba.
Cara pengambilan sampel darah tikus : Pengambilan sampel darah berasal dari jantung tikus, dimana  sebelumnya  dilakukan  anestesi  dengan menggunakan  ketamin HCl injeksi  dengan dosis 20- 40 mg/Kg BB pada daerah kaki belakang, kemudian dilakukan  dekapitasi  (Kusumawati,  2004).  Setelah mata  meredup  dan  badan  tidak  bergerak,  kemudian kulit  perut  diinsisi  dengan  pisau  bedah  dan  setelah terlihat jantungnya, dengan spuit 5 ml diambil darah dari  jantung  sebanyak  3  ml.  Darah  dimasukkan  ke dalam  3 tabung reaksi yang telah disiapkan masing- masing  1  ml  untuk  memeriksa  waktu  pembekuan darah.
Cara  Pengolahan  dan  Analisis  Data  : Data  hasil penelitian ditabulasi dan dianalisis dengan menggunakan program Statistical Product and Service  Solution  (SPSS)  for  Windows  XP yang
meliputi analisis statistik : (1) Analisis deskriptif, (2) analisis
ujinormalitasdistribusi
data,
(3)
ujihomogenitas, (4) analisis analitik denganUji anova one w .

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## HASIL

## Data Penelitian
Penelitian  yang  dilakukan  memiliki  data  berupa variabel  bebas  yang  meliputi  :  olahraga  intensitas sedang  dan  pajanan  asap  rokok,  variabel  tergantung meliputi: waktu pembekuan darah (menit), sedangkan  variabel  moderator  berupa  berat  badan tikus (gram). Data hasil penelitian selanjutnya diolah dengan  uji  normalitas  data  dengan  menggunakan Kolomogorov smirnov , uji homogenitas menggunakan Anova satu arah, uji untuk
membandingkan
pengaruh antar variabel menggunakan uji statistik Anova one way.

## Analisis dan Hasil Penelitian
Uji homogenitas berat badan
Berat badan merupakan data berskala rasio. Sebelum dilakukan  pengujian  homogenitas  menggunakan anovaone  way yang  mensyaratkan  data  berdistribusi normal, maka terlebih dahulu dilakukan penghitungan  normalitas  data  dengan  menggunakan kolomogorov  smirnov .  Hasil  uji  normalitas  dapat dilihat pada tabel  1.
Tabel 1. Hasil Uji Normalitas Berat Badan Hewan Coba Kelompok Perlakuan Tahun 2012
One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
BB Hewan Coba Waktu Pembekuan Darah N 30 30 Normal Parameters Mean 167,67 4,49 Std. Deviation 5,68 0,67 Kolmogorov-Smirnov Z 1,06 0,54 Asymp. Sig. (2-tailed) 0,22 0,93
Hasil  uji  normalitas  menunjukkan  harga p=0,22  (˃  0,05)  pada  kelompok  1-3  dengan  jumlah sampel  30  ekor.  Maka  dapat  disimpulkan  seluruh data berat badan berdistribusi normal.
Uji homogenitas dilakukan untuk mengetahui apakah sampel  pada  penelitian  ini  memiliki  kondisi  awal yang  sama  antara  semua  kelompok  dan  juga  untuk memastikan  bahwa  berat  badan  sebagai  variabel moderator  tidak  mempengaruhi  perlakuan  yang diberikan.  Hasil  uji  homogenitas  dapat  dilihat  pada tabel 2.

## Tabel 2. Hasil  Uji  Homogenitas  Berat  Badan Hewan  Coba  Pada  Kelompok  Perlakuan
Tahun 2012
Uji  homogenitas  yang  telah  dilakukan  menunjukkan hasil p=0,22 (˃0,05) yang berarti tidak ada perbedaan yang  bermakna.  Maka  dapat  disimpulkan  bahwa ketiga kelompok hewan coba adalah homogen.
Deskripsi data variabel tergantung
BB Hewan Coba
N 30 Kolmogorov-Smirnov Z 1,06 Asymp. Sig. (2-tailed) 0,22
Tabel  3.  Nilai  Rata-Rata  Dan  Standar  Deviasi Variabel Tergantung (Waktu Pembekuan Darah Tahun 2012 Perlakuan N Mean Std. Deviation P0 10 4,85 0,43 P1 10 3,76 0,38 P2 10 4,87 0,48 Total 30 4,49 0,67
Hasil  penelitian  menunjukkanbahwa  rerata  waktu pembekuan  darah  yang  terpanjang  (4,87)  adalah hewan  coba  dengan  perlakuan  pajanan  asap  rokok dan  olahraga  (P2),  sedangkan  rerata waktu pembekuan  darah  terpendek  (3,76)  adalah  hewan coba dengan perlakuan pajanan asap rokok (P1).

## Uji normalitas variabel tergantung
Uji  normalitas  merupakan  syarat  untuk  uji  statistik lebih lanjut. Apabila data berdistribusi normal, maka digunakan  statistik  parametrik.  Uji  normalitas dilakukan  dengan menggunakan kolomogorov- smirnov  test .  Hasil  uji  normalitas  tampak  pada  tabel 4.
Tabel 4. Hasil Uji Normalitas Variabel Tergantung  (Waktu  Pembekuan  Darah) Pada  Hewan  Coba  Pada  Kelompok Perlakuan Tahun 2012
Hasil uji normalitas menunjukkan harga p=0,93(>0,05), maka dapat disimpulkan data variabel
tergantung  berdistribusi  normal.  Uji  homogenitas hasil  pemeriksaan  waktu  pembekuan  darah  dengan levene test ditunjukkan pada tabel 5.
Tabel  5.  Uji  Homogenitas  Varian    Tergantung (Waktu Pembekuan Darah) Pada
Kelompok Perlakuan Tahun 2012 Waktu Pembekuan darah Levene Statistic df1 df2 Sig. 0,31 2 27 0,73
Berdasarkan  uji  homogenitas  waktu  pembekuan darah dengan Levene test , nilai p=0,73 (P>0,05). Hal ini menunjukkan bahwa waktu pembekuan darahvariannya homogen.
Analisis  pengaruh  variabel  bebas  dan  variable tergantung dengan Anova one way
Pengujian  pengaruh  variabel  bebas  dengan  variabel tergantung  menggunakan anova  one  way. Hasil  uji dapat dilihat pada table 6.
Tabel  6.  Hasil Analisis Waktu Pembekuan Darah  Hewan  Coba  Pada  Kelompok Perlakuan Tahun 2012

## ANOVA
Waktu Pembekuan darah
Sum of Squares Df Mean Square F Sig. Between Groups 8,13 2 4,06  21,68  0,00 Within Groups 5,06 27 0,19 Total 13,19 29
Hasil pengujian didapatkan p=0,000 (p<0,05), hal ini menunjukkan  bahwa  waktu  pembekuan  darah  pada hewan  coba  terdapat  perbedaan  yang  bermakna. Hasil  analisa  data  waktu  pembekuan  darah  pada kelompok antar perlakuan (p0, p1, p2) dilakukan post hoc test dengan anova , dapat dilihat pada tabel 7.
Tabel 7.   Hasil Analisa Post Hoc Test Dengan Anova Terhadap Waktu Pembekuan Darah Hewan Coba Pada  Kelompok Antar Perlakuan Tahun 2012
Multiple Comparisons
Waktu Pembekuan Darah N 30 Normal Parameters a Mean 4,49 Std. Deviation 0,67 Most Extreme Differences Absolute 0,10 Positive 0,07 Negative -0,10 Kolmogorov-Smirnov Z 0,54 Asymp. Sig. (2-tailed) 0,93

## Dependent Variable:Waktu Pembekuan darah
(I) Hewan Coba  (J) Hewan Coba Mean Difference (I-J) Std. Error Sig. Tukey HSD P0 P1 1,10 * 0,19 0,00 P2 -0,01 0,19 1,00 P1 P0 -1,10 * 0,19 0,00 P2 -1,11 * 0,19 0,00 P2 P0 0,01 0,19 1,00 P1 1,11 * 0,19 0,00 Bonferroni P0 P1 1,10 * 0,19 0,00 P2 -0,01 0,19 1.00 P1 P0 -1,10 * 0,19 0,00 P2 -1,11 * 0,19 0,00 P2 P0 0,01 0,19 1.00 P1 1,11 * 0,19 0,00
*. The mean difference is significant at the 0.05 level.
Hasil analisis data  menunjukkan bahwa ada perbedaan  rata-rata  waktu  pembekuan  darah    yang bermakna  antarakelompok  kontrol  yang  tidak  diberi perlakuan  (p0)  dengan    kelompok  yang  diberikan pajanan  asap  rokok  (p1)    dengan  nilai  p=0,000 (p<0,05).  Waktu  pembekuan  darah  antara  kelompok perlakuan  pajanan asap rokok (p1) dengan kelompok perlakuan  pajanan  asap  rokok  dan  renang  (p2) terdapat  perbedaan  yang  bermakna  dengan  nilai p=0,000  (p<0,05).  Sedangkan  waktu  pembekuan darah  padakelompok  perlakuan  pajanan  asap  rokok dan renang (p2) dengan kelompok kontrol yang tidak diberi  perlakuan  (p0)  tidak  terdapat  perbedaan  rata- rata waktu pembekuan darah yang bermakna dengan nilai p=1,00 (>0,05).

## PEMBAHASAN
Merokok  merupakan  faktor  risiko  utama terhadap  penyakit  kardiovsakuler.  Merokok  akan meningkatkan  risiko  penyakit    kardiovaskuler meliputi  gangguan  hemostatik,  abnormalitas  lipid, dan  disfungsi  endotel  (Sussana,  dkk,  2003).
Mekanisme  hemostasis  melibatkan  beberapa  sistem fisiologi  yang  saling  berkaitan.  Salah  satu    Fungsi utama  hemostasis  adalah  menjaga  keenceran  darah ( blood fluidity ) sehingga darah dapat mengalir dalam sirkulasi  dengan  baik  (Bakta  ,  2000).  Penelitian  ini bertujuan  untuk  menjelaskan  pengaruh  pajanan  asap rokok  terhadap  waktu  pembekuan  darah  dan pengaruh  olahraga  intensitas  sedang  terhadap  waktu pembekuan  darah  pada  tikus  putih  dengan  pajanan asap  rokok.  Sampel  yang  dgunakan  adalah  hewan coba  tkus  putih (Rattus  novergicus )  ,  hal  ini  pernah dilakukan  pada  penelitian  sebelumnya  oleh  Davis (2004)    untuk  menaikkan  homosistein  dengan memberi  pajanan  asap  rokok  pada  tikus  putih.  Jenis kelamin  yang  dipilih  jantan  untuk  homogenitas sampel  dan  karena  pada  tikus  betina  terdapat  siklus estrous yang  diduga  dapat  mempengaruhi  profil hematologi  tikus  (Lord  &Murphy,  1972).  Dalam penelitian  iniPerlakuan  olahraga  intensitas  sedang, diberikan      dalam  bentuk  renang  dengan  beban. Perlakuan lahraga intensitas sedang pernah dilakukan pada  penelitian  sebelumnya  untuk  meningkatkan
jumlah trombosit (Lister, 2008). Uji normalitas pada penelitian  ini  menggunakan  uji Kolomogorov- Smirnov satu  sampel  yang  dilakukan  pada  semua kelompok  yaitu  variabel  moderator  berat  badan  dan variabel  dependen  waktu  pembekuan  darah.  Uji normalitas  bertujuan  untuk  mengetahui  apakah sebuah  data  mengikuti  atau  mendekati  distribusi normal.  Uji  normalitas    merupakan  salah  satu prasyarat  dalam  menentukan  uji  statistik  parametrik atau  non  parametrik.  Hasil  uji  normalitas  berat  bada hewan coba tikus putih dan waktu pembekuan darah pada  penelitian  ini  menunjukkan  data  berdistribusi normal  (p>0,05).Uji  homogenitas  data  dengan Lavene test pada  variabel  dependen  menunjukkan bahwa  waktu  pembekuan  darah  pada  ketiga kelompok  homogen  (p>0,05)  .  Jumlah  kelompok dalam  penelitian  ini  terdiri  dari  tiga  kelompok  , terdiri  dari  kelompk  kontrol  (K0),  kelompok  dengan pajanan  asap  rokok  (K1),  kelompok  dengan  pajanan asap  rokok  dan  olahraga.  Salah  satu  Penyakit kardiovaskular yang mempunyai hubungan eratdengan  gangguan  pada  mekanisme  hemostasis adalah  aterosklerosis . Aterosklerosis  diawali  oleh perlukaan pada sel endotelial (Ross,1993). Homosistein  merupakan  salah  satu  penyebab perlukaan sel endotelial tersebut, karena homosistein merupakan  asam  amino  yang  sangat  reaktif,  bersifat vaskulotoksik  dan  thrombogenik  (Herzlich,  1996). Menurut  Verhoef,  et  al  (2002)  dalam  Surjadjaja (2005),  merokok  merupakan  salah  satu  faktor  yang mempengaruhi  kadar  total  homosistein  dalam plasma.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa hiperhomosisteinemia merupakan faktor risiko untuk terjadinya aterosklerosis dan aterotrombosis.
Kurang  olahraga  merupakan  salah  satu  faktor  yang mempengaruhi peningkatan kadar homosistein (Verhoef,  etal.,  2002).  Hasil  penelitian  Tomohiro,et al.,  (2006):  latihan  aerobik  teratur  menurunkan homosistein plasma pada hiperhomosistein. Peningkatan aktivitas tubuh dengan cara berolah raga secara  teratur  dapat  menurunkan  faktor  risiko  dari penyakit  kardiovaskular,  dan  sebaliknya  kurang melakukan  aktivitas  fisik  merupakan  faktor  penting peningkatan  risiko  pada  penyakit  kardiovaskular (Rattu ,2000). Hasilanalisis  deksriptif  mengenai waktu pembekuan darah yang ditunjukkan   tabel 5.1 pada hewan coba kelompok kontrol (K0) dibandingkan dengan kelompok dengan pajanan asap rokok  (K1)  menunjukkan  bahwa  rerata  waktu pembekuan darah K1 lebih pendek dibandingkan K0 dengan  hasil  uji  analitik    menggunakan  analisis statistik anova  one  way menunjukkan  hasil  yang signifikan  dengan  nilai  p=0,00  (p<0,05).  Hal  ini menunjukkan bahwa pajanan asap rokok memperpendek waktu pembekuan darah pada hewan coba. Hasil penelitian ini mendukung penelitian yang dilakukan  Ivan  U.H,  (2008)  dengan    kesimpulan yang didapat dari hasil analisis data dan pembahasan adalah terdapat perbedaan kecepatan waktu perdarahan  yang  bermakna  antara  mencityang dipajan rokok dengan mencit yang tidak dipajan asap rokok  dan  terbukti  bahwa  merokok  mempengaruhi waktu  perdarahan  yaitu  memperpendek  waktu perdarahan  sebelumnya  bahwa  pajanan  asap  rokok memperpendek  waktu  perdarahan.  Hal  ini  sesuai dengan  teori  yang  menyatakan  bahwa  merokok merupakan  salah  satu  faktor  yang  mempengaruhi kadar total homosistein dalam plasma (Verhoef et  al
2002).  Studi menunjukkan bahwa perokok memiliki kadar  homosistein  yang  lebih  tinggi  dibandingkan non-perokok. Peningkatan homosistein sesuai dengan jumlah rokok yang dihisap ( Archana , 2000). Perokok cenderung  memiliki  kadar  vitamin  B6,  asam  folat dan B12 lebih rendah, yang semuanya mempengaruhi kadar homosistein (Callaghan ,2002). Defisiensi  asam  folat,  vitamin  B6,  B12  dapat menyebabkan terjadinya hiperhomosisteinemia (Walsh,  2002,  dalam  Surjadjaja,2005).  Asam  folat berperan  pada  proses  penurunan  kadar  homosistein dalam darah. Dalam  metabolisme  homosistein, asam folat  sebagai  donor  metil  (dalam  bentuk  5  metil tetrahidrofolat)  dan  vitamin  B-12  berperan  sebagai ko-enzim.  Asam  folat  merupakan  faktor  penentu dalam  reaksi  remetilasi,  ketidakhadiran  donor  metil dalam  reaksi  tersebut  tidak  dapat  diambil  alih  oleh vitamin  B-12  (Pietrzik  dan  Bronstrup,1996  dalam Permadi  ,1999).  Vitamin  B6  atau  piridoksal  fosfat diperlukan sebagai ko-faktor untuk enzim sistationin β-sintase  yang  berperan  dalam  reaksi  transulfurasi homosistein menjadi sistationin dan sistein (Martin,1992).  Homosistein    juga  mempengaruhi beberapa  faktor  yang  terlibat  dalam  kaskade pembekuan  darah,  seperti  menurunkan  aktivitas  anti trombin .  Selain  itu  homosistein  juga  menghambat aktivitas  kofaktor  trombomodulin  dan  aktivasi protein  C,  meningkatkan  aktivitas  faktor  V  dan faktor  XII,  mengganggu  sekresi  faktor  von Willebrand  oleh  endotel  dan  mengurangi  sintesis prostasiklin . (Pusparini, 2002). Prostasiklin merupakan  suatu  zat  yang  menghambat  agregasi trombosit,  prostasiklin  diproduksi  oleh  endotel normal,  dengan  demikian  sumbat  trombosit  terbatas
pada defek dan tidak  menyebar ke jaringan vaskuler normal (Sherwood, 2001). Trombin bekerja sebagai enzim  untuk  mengubah fibrinogen menjadi  benang fibrin yang  merangkai trombosit ,  sel  darah  dan plasma  untuk  membentuk  bekuan  (Guyton&Hall, 2008). trombin juga  berfungsi  (1)  mengaktifkan faktor  XIII  untuk  menstabilkan  jaring  fibrin  yang sudah terbentuk; (2) meningkatkan agregasi trombosit, yang pada gilirannya penting untuk proses pembekuan;  (3)  bekerja  melalui  umpan  balik  untuk mempermudah pembentuk trombin (Sherwood ,2001).  Sebagai akibat dari peningkatan trombin dan produksi  prostasiklin  mengakibatkan  peningkatan agregasi trombosit. Hubungan peningkatan homosistein  dengan  penyakit  vaskuler  pertama  kali dikemukakan  oleh  Mc  Cully  pada  tahun  1969. Dilaporkan  adanya  aterosklerosis  disertai    trombosis arteri  pada  otopsi  dua  orang  anak  yang  mempunyai kadar  homosistein  darah  dan  urin  yang  tinggi. Berdasarkan  observasi  tersebut  Mc  Cully  membuat hipotesis bahwa hiperhomosisteinemia dapat menyebabkan  penyakit  vaskuler  (Pusparini,  2002). Hasil  penelitian  yang  dilakukan  Pusparini  (2002) menunjukkan bahwa hiperhomosisteinemia merupakan faktor risiko untuk terjadinya aterosklerosis  dan  aterotrombosis.  Trombosis  adalah keadaan dimana terjadi  pembentukan  massa bekuan darah  intravaskuler,  yang  berasal  dari  konstituen darah,  pada  orang  yang  masih  hidup.  Dalam pengertian  yang  luas  thrombus  dapat  bersifat fisiologik  disebut  sebagai  • hemostatic  thrombus . yang  berguna  untuk  menutup  kerusakan  dinding pembuluh  darah  setelah injury ,  dapat  juga  bersifat patologik,  disebut  sebagai• pathologic  thrombus ,
thrombus yang  justru  dapat  menyumbat  lumen pembuluh  darah.  Pada  umumnya  yang  dimaksud dengan  thrombosis  ialah  pembentukan pathologic thrombus (Deitcher  ,dkk,  2004).  Teori triad  of Virchow , s mengungkapkan, terdapat tiga faktor yang berperan  dalam  patofisiologi  trombosis,  yaitu kelainan  dinding  pembuluh  darah,  perubahan  aliran darah  dan  perubahan  daya  beku  darah.  Beberapa penelitian  menunjukkan  bahwa    darah  penderita trombosis  lebih  cepat  membeku  dibandingkan  orang normal. Keadaan tersebut disebut hiperkoagulabilitas ( Rahajuningsih ,2007). Analisis deskripitif mengenai waktu  pembekuan  darah  (tabel  5.3)  menunjukkan bahwa  waktu  pembekuan  darah  pada  hewan  coba dengan    perlakuan  pajanan  asap  rokok  dan  olahraga (K2)lebih  panjang  dibanding    dengan  hewan  coba dengan  pajanan  asap  rokok  (K1).  Berdasarkan  hasil uji statisti posthoc dengan anova one way didapatkan bahwa  perbedaan  tersebut  bermakna  dengan  nilai p=0,00  (p<0,05).  Hasil  penelitian  ini  sesuai  dengan hasil penelitian  oleh Hastuti (2007) pada orang coba tentang    pengaruh  latihan  fisik  jangka  pendek menggunakan  metode  Harvard  step  terhadap  waktu perdarahan, menyimpulkan bahwa terjadi peningkatan  waktu  perdarahan  setelah  latihan  fisik jangka  pendek.  Randeva  et  al  (2002)  menyatakan bahwa latihan menurunkan plasma total homosistein. Secara  mekanis,  pengaruh  aktivitas  fisik  pada konsentrasi homosistein dapat mendukung peningkatan  dan  penurunan  berdasarkan  perubahan protein  dan  gugus  metil.  Berolahraga  dapat meningkatan katabolisme metionin melalui homosistein  untuk  sintesis  sistein  atau  prekursor gluconeogenic akan mengakibatkan  penurunan
dalam konsentrasi homosistein. Penurunan konsentrasi  metionin  dari  asupan  makanan  dan  atau katabolisme  meningkat  melalui  olahraga . Olahraga akan meningkatkan sintesis metionin dari homosistein  untuk  pembentukan  protein  dengan asumsi  individu  memiliki  status  vitamin  B  yang cukup untuk remetilasi. Oleh karena itu, peningkatan remetilasi  dari  homosistein  oleh  karena  perubahan kebutuhan  metionin  untuk  sintesis  protein  selama latihan  akan  mengurangi  konsentrasi  homosistein. Hal tersebut menunjukkan bahwa olahraga intensitas sedang dapat mencegah pemendekan waktu pembekuan  darah  dengan  mencegah  peningkatan homosistein  dalam  darah  pada  pajanan  asap  rokok. Aplikasi  pada  manusia  bahwa  merokok  tidak  baik untuk  keshatan  dan  merupakan  faktor  risiko  untuk penyakit  kardiovaskuler  dan  gangguan  vaskuler. Pajanan  asap  rokok  dapat  memperpendek    waktu pembekuan  darah  pada  tikus  putih.  pada  penelitian ini,  olahraga  bermanfaat  mencegah  salah  satu  risiko yang  ditimbulkan  oleh  rokok  yaitu  mencegah pemendekan  waktu  pembekuan  darah  pada  tikus putih.  Akan  tetapi  masih  banyak  risiko    lain  yang dapat ditimbulkan oleh rokok.

## KESIMPULAN DAN SARAN

## Kesimpulan
1. Pajanan  asap  rokok    memperpendek  waktu pembekuan darah pada tikus putih.
2. Olahraga intensitas sedang mencegah pemendekan  waktu  pembekuan  darah  pada  tikus putih dengan pajanan asap rokok.

## Saran
1. Perlu  dilakukan  penelitian  lanjutan  dengan rentang  waktu  yang  lebih  lama  dengan  berbagai dosis pajanan asap rokok dan beberapa intensitas latihan  terhadap  kadar  homosistein  plasma  dan gregasi trombosit.
2. Mengingat  beberapa  bahaya  merokok  bagi kesehatan,  salah  satunya  adalah  memendeknya waktu  pembekuan  darah  yang  merupakan representasi  gangguan  vaskuler,  sebaiknya  untuk tidak merokok atau berhenti merokok.
3. Apabila  rokok  tidak  bisa  dihentikan,  dianjurkan untuk  berolahraga.  Olahraga  dapat  mencegah salah  satu  faktor  risiko  yang  ditimbulkan  oleh rokok,  karena  merokok  memiliki  faktor  resiko lain yang dapat mengganggu kesehatan .

## DAFTAR PUSTAKA
Anonim,  1998, Polycyclic  aromatic  hydrocarbons, US  Dept  of  Health  and  human  Services, public health services . http//ntp- server.niehs.nih.gov/htdocs/PAHs-
Archana  McEligot  , 2000, Relationships  between smoking,  homocysteine  &  folate ,  viewed 18  April  2012,  <file:///H:/rokok  dan homosistein english.htm>
Bakta  IM.,  2000, Thrombosis:  pandangan  dari  segi hematologi . Majalah Penyakit Dalam Udayana;1:26-34.
Bompa  TO,1994. Theory  and  methodology  of training the key to athletic performance . 3rd ed. Hunt Publishing Company. Pp 24-25
Bollander GC, 2002. Focus on homocysteine and the vitamins: involved in its metabolism , second enlarged  et  revised  editionClarke  R,  Daly L., Robinson K., 1991 , Hyperhomocysteinemia  :  an  independent risk  factors  for  vascular  disease ,  N.  Eng  J Med; 324: 1149-1155
Bollager  AP,  Everds  NE,  2010.,  Hematology  of laboratory    rodents:  mouse  (musculus). Dalam:  weiss  DJ,  wardrop  KJ,  editor, scalm´s veterinary hematology 6th ed, USA Blackwell publishing Ltd.
Cadroy  Y,  Pillard  F,  Sakariassen  KS,  Thalamas  C, Boneu  B,  Riviere  D,  2002, Strenuous  but not moderate exercise increase the trombotic  tendency  in  healthy  sedentary male volunters, viewed
9 April 2012 www.jap.physiology.org
Christen WG,  Anjani UA, Glyn RJ, Hennekens  CH, 2000, Blood  levels  of  homocysteineand increased  risk  of  cardiovascular  disease- causal  or  causal ,  Arch  Intern  Med,;  160: 422.
Callaghan  PO,  Meleady  R,  Fitzgerald  T,  Graham  I,
2002, Smoking  and  plasma  homocystein , Eur  Heart  J,  viewed  18  april  2012 <http://rokok dan homosistein2.htm>
Christyaningsih  J,  2002, Pengaruh  suplementasi vitamin  E  dan  C  terhadap  aktivitas  enzim superoide  dismutase  (SOD)  dalam  eritrosit tikus yang terpapar asap rokok , Tesis Pasca Sarjana Universitas Airlangga Surabaya.
Deitcher  SR,  Rodgers  GM.(2004), Thrombosis  and antithrombotic  therapy .  In:    Greer  JP,
Foerster  J,  Lukens  JN,  Rodgers  GM,
Paraskevas F, Glader B, editors. instrobe • s    Clinical  Hematology.  11th  ed.
Philadelphia: Lippincott-Williams & Wilkins.
Deforche  B., Changes  in  fat  mass,  fat  free  mass  and aerobic fitness in severely  obesitas children and  adolescents  following  arab  residential treatment programme . Eur J Pediatr.
Davis JA. Brown AT, Chen H, Wang Y, Poirier LA., 2004, Ciggarette  smokeiIncrease  intimal hyperplasia and homocystein in Rat carotid endarterectomy ,  viewed  8  Mei  2012 <http://www.ncbinlm.nih.gov/pubmed/1531
3378>.
Depkes  RI,2010, Rokok  membunuh  lima  juta  orang setiap tahun.
Hastuti  B,  2007, Pengaruh  latihan  fisik  jangka pendek  menggunakan  metode  harvard  step
terhadap  waktu  perdarahan .  Artikel  karya tulis ilmiah. FK Undip Semarang
Heijer  M,  Koster  T,  Blom  HJ,  Reitsma  PH,
Vandebroucke  JP,  Rosedall  FR,  1996, Hiperhomocysteinemia  as  risk  factor  for deep-vein thrombosis . NEJM.
Fox EL, 1993, The Physiological basis exercise and sport 5 th ed. USA : WM.Crown Comunication
Guyton  A,  Hall  J,  2008, Buku  ajar  fisiologi kedokteran Edisi  11.  Jakarta  Penerbit  Buku Kedokteran EGC.
Guyton  A,  Hall  J,  2006, Texbook  of  medical physiology, Philadelpia . Pennsylvania Graham  IM,  Daly  LE,  Refsum  HM,  1997, Plasma homocysteine  as  a  risk  factor  forvascular disease , JAMA,; 227: 1775-1781.
Handin R, 2004, Disorder of platelet and vessel Wall . Dalam:  Fauci,  editor.  Harrison , s  principles of internal medicine. Inggris: The McGraw- Hill Companies, hlm 673-675.
Halliwel,  B,  Gutteridge  (1999). Free  radical  in biology  and  medicine ,  third  edition,  Oxford University Press, N.Y. pp. 478
Hanafiah  KA,  1991, Rancangan  percobaan;  teori dan aplikasi , jakarta. Raja Grafindo Persada Herlzich  BC.,  1996, Plasma  homocystein,  folate, vitamin  B6  and  coronary  arteri  disease risk ., AM Coll. Nutr, 15: 109-110
Hastuti  B,  2007, Pengaruh  latihan  fisik  jangka pendek  menggunakan  metode  Harvard  step terhadap  waktu  perdarahan .  Artikel  Karya Tulis Ilmiah. Universitas Diponegoro Semarang Irawan B, Sja’baniM, AstoniMA, 2005,
Hyperhomocysteinemia as risk for coronary hearth disease , Journal Kedokteran
Brawijaya, Desember Vol XXI, No.3, , 103-
149.
Ivan  UH,  2008, Pengaruh  paparan  asap  rokok terhadap  waktu  perdaraha  pada  mencit , viewed 22 Mei 2012
Permadi  IAR,  1999, Pengaruh  suplementasi  vitamin B6,  B12  dan  asam  folat  terhadap  kadar
homosistein  plasma  pasa  lansia .  Tesis
Program Pasca sarjana Universitas Indonesia. Jakarta Kauhansky K, 2008. Historical Review : Megakaryopoesis  and  thromboiesis .  Blood 111: 981-986
Kauhansky  K,  2009. Determinants  of  platelet number  and  regulation  of  thrombopoesis . Hematology: 147-152.
Kusumawati  D,  2004. Bersahabat  dengan  hewan coba ,  Yogyakarta:  Gajah  Mada  University Press.
Lister  INE,  2008, Pengaruh  latihan  aerobic intensitas  ringan  dan    sedang  terhadap jumlah  trombosit  pada  remaja  putri  di Universitas  Prima  Indonesia .  Tesis  sekolah Pasca sarjana Universitas sumatra Utara.
Lord BI, Murphy Jr MJ,1972. The estrous cycle and hemopoietic  stem  cell  in  the  mouse ,  Blood vol 40 no 3.
Mirkin  G,  2007, Exercise  Lowers  Homocystein , viewed 9 Mei 2012 <http//:www.DrMirikin.com>
Martin  DW,  (1992), Vitamin  yang  larut  dalam  air dalam biokimia harper, Jakarta., EGC.
Mayer EL , Jacobsen DW, Robinson K,
1996, Homocysteine and coronary atherosclerosis . JACC. 27: 517-27. Neuman JA, 2010, Exercise prevents hyperhomcysteinemia  in  a  folate-deficient mouse  model ,  Iowa.  Iowa  State  University
Ames
Ardle  WD,  Katch  FI,  and  Katch  VL,1966 Exerchise hysiology .  2nd  ed.  Phiadelphia:  Lea  & Febiger.
Pusparini, 2002. Homosistein faktor resiko baru (non tradisional)  penyakit  kardiovaskuler .  J. Kedokteran Trisakti, vol 21 no.1, hal. 32-33 Rattu AJM.,(2000), Blood Coagulation Variabel In Response To Short Term Exercise . Jurnal Kedokteran Yarsi; 8(1). pp. 92-100
Refsum  HS.,  Smith  D.,Ueland  PM.,  Nexo  E.,  Clark R.,  McParthin  J.,  dkk,  2004. Facts  and recomendation  about  total  homocystein
determination;An  Expert  opinion.  Clincal chemistry . Vol: 50 No 1.
Randeva  Hs.,Lewandowski  KC.,  Drzewoski  J.,
Brooke-Wavell K., Collaghan
C., Czzupryniak  L.,  2002, Exercise  decrease plasma  total  homocysteine  in  overweight young women with polycystic ovary syndroma . Viewed 24 April 2012,
< file://H:/olahraga dan  homosistein  2  html
>.
Splaver  A.,  Lamas  G.A.,  Hennekens  C.H.,  2004,
Homocysteine  and  cardiovascular  disease: biological mechanisms, observational epidemiology and the need for randomized trials . Am Heart J;148: 34-40.
Surjadjaja  M,  2005, Pengaruh  pemberian  vitamin B12  terhadap  kadar  homosistein  vagan dewasa ,  Tesis  Pasca  sarjana  Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia.
Sukmaningtyas  H,  Pudjonarko  D,  Basjar  E,  2004,
Pengaruh  Latihan  Aerobik  dan  Anaerobik terhadap Sistem Kardiovaskuler dan Kecepatan Reaksi . Media Medika Indonesia
Sugiyono,  2007, Metode  penelitian  kuantitatif  dan kualitatif, Bandung . Alfabeta
Sussana D., Hartono B., Fauzan H., 2003, Penentuan kadar  nikotin  dalam  asap  rokok ,  Makara Kesehatan 7:2
Sherwood  L,  (2001), Fisiologi  manusia,  dari  sel  ke sistem , EGC.Jakarta
Setjowati N, Sujudi H, Astuti TW, Widodo A, 1998. Free  radical  and  vitamin  E  influence  are about  the  number  circulating  endothel  of blood  rat  on  chronic  clove-flavoured cigarette fume
exposure .
Majalah Kedokteran Unibraw.
Tomohiro  O,  Rankinen  T,  Gagnon  J,  Lussier  CS, Davignon J, Leon S,  2006. Effect of reguler exercise  on  homocysteine  concentrations : the HERTAGE Family Study.
Verhoef  P.,  Pasman  WJ.,  Vliet  T.,  Urgert  R.,  Katan MB.,  2002, Controbution  of  caffein  to homocystein  raising  effect  of  coffee :  a randomozed  controlled  trial  in  humans Am.J. Clin. Nutr. 76, 1224
Widodo  MA.  1995. Efek  pemicu  radikal  bebas  dan vitamin E pada diabetes komplikasi pembuluh  darah  tikus  diabetes. Laporan Penelitian  hibah  Bersaing  1992-1995  ; Malang.  Fakultas  Kedokteran  Universitas Brawijaya
World Health Organisation, 2009. WHO reporton the global tobacco epidemic 2009. Wijaya A, 1998. Faktor resiko penyakit kardiovaskuler
perspektif baru, Dalam forum Diagnostikum No2/1 .Lab.Prodia Welch & Loscalzo, 1998, Mechanism of Homocysteine  and  atherothrombosis , New
Engl J Med. Zainuddin M, 2000, Metodologi penelitian ,
Surabaya. Program Pasca sarjana Universitas Airlangga