## Sasambo Journal of Pharmacy
https://jffk.unram.ac.id/index.php/sjp
___________ Email: sudarmanrahman@mipa.upr.ac.id (*Corresponding Author)
Copyright© 2023, The Author(s). This article is distributed under a Lisensi Creative Commons Atribusi 4.0 Internasional .
Aktivitas  antioksidan  dan  uji  sitotoksik  infusa  daun  jarak  pagar ( Jatropha curcas )
Sudarman  Rahman 1 *,  Alayya  Adistia  Putri 1 ,  Erwin  Prasetya  Toepak 2 ,  Stevin  Carolius  Angga 2 , Ysrafil Ysrafil 3 1 Program Studi Farmasi, Fakultas MIPA, Universitas Palangka Raya, Palangka Raya, Indonesia.
2 Program Studi Kimia, Fakultas MIPA, Universitas Palangka Raya, Palangka Raya, Indonesia.
3 Program Studi Pendidikan Dokter, Fakultas Kedokteran, Universitas Palangka Raya, Palangka Raya, Indonesia.
DOI: https://doi.org/10.29303/sjp.v4i2.232
Article Info
Abstract: Antioxidants  are  crucial  in  preventing  cell  damage  caused  by  oxidation  from oxidants. The use of antioxidants from natural products such as Jatropha curcas leaves can counteract  free  radicals  due  to  the  presence of  secondary metabolites.  The main  aims  of the  study  were  to  determine  the  antioxidant  and  cytotoxic  activity  of  the  infusion  of J . curcas leaves.  The  sample  was  extracted  using  the  infusion  method.  A  qualitative phytochemical  screening  was  carried  out  using  the  test  tube  method,  antioxidant  assay using the DPPH method and cytotoxic using the BSLT method. The results showed that the  infuse  of J . curcas leaves  contained  secondary  metabolites  such  as  polyphenols  and tannins,  alkaloids,  flavonoids,  and  saponins.  In  the  antioxidant  activity  test,  infuse  of J . curcas leaves  and  vitamin  C  (control)  the  IC 50 was  58.90±2.34  ppm  and  8.78±0.21  ppm respectively.  The  infused  cytotoxic  test  contained  an  active  toxic  compound  in  shrimp larvae with an LC 50 of 200.28 ppm (LC 50 ≤ 1000 ppm). Based on the results of the study, infuse of J. curcas leaves showed potential as an antioxidant  and anticancer  agent with a strong classification.
Received : 2023-03-20 Revised : 2023-09-23 Accepted : 2023-09-27
Keywords: Infusa of Jarak pagar leaves, antioxidant activity, cytotoxic.
Citation: Rahman, S., Putri, A. A., Toepak, E. P., Angga, S. C., & Ysrafil, Y. (2023). Aktivitas antioksidan dan uji sitotoksik infusa  daun  jarak  pagar  ( Jatropha  curcas ). Sasambo  Journal  of  Pharmacy , 4 (2),  77-84.  doi: https://doi.org/10.29303/sjp.v4i2.232

## Pendahuluan
Radikal  bebas  dapat  didefinisikan  sebagai  suatu unsur  atau  kelompok  senyawa  yang  didalamnya terdapat  elektron  yang  tidak  berpasangan  (elektron ganjil)  dan  bersifat  sangat  mudah  bereaksi,  radikal bebas  dihasilkan  karena  adanya  paparan  radiasi, polutan  lingkungan,  dan  hasil  samping  dari metabolisme  obat  (Neha  et  al.,  2019).  Adanya  radikal bebas  di  dalam  tubuh  yang  terbentuk  secara berkelanjutan  dan  tidak  terpenuhinya  antioksidan endogen  dapat  menyebabkan  kerusakan  sel  pada deoxyribonucleic  acid (DNA),  protein,  lemak  dan  dapat menyebabkan  penyakit  degeneratif  lainnya  (Ali  et  al., 2020).  Salah  satu  upaya  preventif  dalam  menangkal
radikal  bebas  adalah  penggunaan  antioksidan.
Antioksidan adalah molekul-molekul yang menghambat, mengurangi,
menunda, atau menghilangkan  aksi  radikal  bebas  dan  oksidan,  serta melindungi tubuh dari kerusakan oksidatif (Lobo et al., 2010;  Ali  et  al.,  2020).  Menurut  Organisasi  Kesehatan Dunia,  obat  herbal  merupakan  sumber  utama kesehatan  primer  bagi  masyarakat  di  negara berkembang (WHO, 2013). Saat ini masyarakat tertarik dengan penggunaaan antioksidan yang bersumber dari bahan alam, dimana antioksidan dari bahan alam dapat diperoleh  dari  isolasi  senyawa  aktif  dari  berbagai tanaman, seperti pada bagian daun, akar, minyak, biji, dan buah (Spínola et al., 2015).
Salah  satu  jenis  famili  Euphorbiaceae  yaitu tanaman  jarak  pagar  ( Jatropha  curcas) .  Tanaman  ini dimanfaatkan  masyarakat  sebagai  obat  tradisional terutama  pada  bagian  daun,  dimana J.  curcas dimanfaatkan  sebagai  obat  penurun  panas,  sariawan, dan  luka  (Riani,  2018).  Hasil  pengujian  fitokimia dengan  metode  tabung,  akar  jarak J.  curcas menunjukkan golongan metabolit sekunder diantaranya  saponin,  tanin  dan  polifenol,  flavonoid, dan  alkaloid  (Rahman  et  al.,  2021).  Flavonoid  adalah senyawa golongan metabolit sekunder yang umumnya ditemukan  pada  tanaman  herbal  dan  diketahui mempunyai  aktivitas  biologi  seperti  antioksidan, antialergi, antimikroba, antiinflamasi, dan efektif untuk beberapa golongan jamur.
Berdasarkan  penelitian  Hodek  et  al.,  (2002) ekstrak  kulit  batang J . curcas terdapat  golongan senyawa  metabolit  sekunder  yakni  flavonoid,  dimana senyawa ini menunjukkan efek farmakologi diantaranya  antioksidan,  antialergi,  dan  antimikroba. Bagian-bagian tanaman jarak pagar diketahui memiliki aktivitas  antimikroba  dan  antibakteri.  Berdasarkan penelitian  Rahman  et  al.,  (2021)  dilaporkan  bahwa fraksi  etil  asetat  akar J.  curcas mempunyai  efek antibakteri terhadap S. aureus dengan zona hambat 14,3 mm  (kategori  kuat).  Selain  itu,  ekstrak  kasar  daun J. curcas yang  diperoleh  dengan  metode  maserasi menghasilkan  aktivitas  antioksidan  dengan  nilai inhibitory concentration (IC 50 ) 7,019 ppm (Setyaningsih et al., 2014).
Sejalan dengan itu, Anani et al., (2016) penelitian terhadap salah satu famili Euphorbiaceae yakni Jatropha multifida L.  dengan  metode  DPPH  (2,2-difenil-1- pikrihidrazil)  dan  FRAP  ( Ferric  Reducing  Antioxidant Power )  dilaporkan  menunjukkan  aktivitas  antioksidan. Selain  aktivitas  antioksidan,  dalam  penelitian  ini  juga dilakukan  uji  sitotoksik.  Efek  sitotoksik  dipengaruhi karena  adanya  golongan  metabolit  sekunder  dalam suatu  tanaman,  yaitu  golongan  saponin  dan  tanin diketahui dapat menghambat pertumbuhan sel kanker. Selain  itu,  flavonoid  juga  dilaporkan  memiliki  efek sitotoksik  (Marwati  et  al.,  2021).  Metode Brine  Shrimp Lethality  Test (BSLT)  menggunakan Artemia  salina merupakan  salah  satu  uji  pendahuluan  dalam mengetahui  efek  sitotoksik  (Fadhli  et  al.,  2019). Berdasarkan  penjelasan  di  atas  penting  untuk dilakukan  penelitian  terkait  pengujian  antioksidan menggunakan metode
DPPH ( 1,1-diphenyl -2- picrylhidrazil )  dan  sitotoksik  dengan  metode Brine Shrimp  Lethality  Test (BSLT)  menggunakan Artemia salina infusa daun jarak pagar ( Jatropha curcas ).

## Metode

## Alat dan Bahan
Alat-alat  penelitian  yang  digunakan  yaitu spektrofotometer  UV-VIS  (Shimadzu  UV  mini  tipe 1240), water  bath (Stuart ® ),  neraca  analitik  (Precisa ® ), mikropipet, alat gelas (Pyrex ® ), hot plate (Stuart ® ), oven, blender  (Philips ® ),  serta  alat-alat  pendukung  lainnya seperti rak tabung reaksi, batang pengaduk, pipet tetes, botol  semprot,  filler,  aquarium,  ayakan  70  mesh, spatula,  botol  timbang,  aerator,  botol  vial,  dan  lampu Philips @11 watt.
Bahan-bahan  penelitian  yang  digunakan  yaitu daun  jarak  pagar,  etanol  p.a.  (EMSURE ® ),  etanol (EMSURE ® ),  vitamin  C  (Sigma  Aldrich ® ),  DPPH  ( 1,1- diphenyl -2- picrylhidrazil )  bersumber  dari  sigma.Co, larutan  amoniak,  larutan  kloroform,  larutan  asam (Sigma Aldrich ® ), dimetil sulfoksida (DMSO), Besi (III) klorida,  Magnesium,  larutan  Natrium  Hidroksida, kertassaring,  air laut, aluminium foil, larva udang, dan aquades.

## Pembuatan infusa jarak pagar
Daun  jarak  pagar  ( Jatropha  curcas )  terlebih dahulu diidentikasi  yakni  diamati  secara  fisik  (batang, daun,  dan  buah)  di  laboratorium  biologi  FMIPA Universitas  Palangka  Raya,  kemudian  sampel  yang diperoleh  disimpan  dalam  wadah,  kemudian  dicuci dibawah air mengalir. Daun jarak pagar ditiriskan dan dipotong  hingga  ukuran  daunnya  kecil,  dilakukan pengeringan  menggunakan  oven  pada  suhu  48 ℃ selama  24  jam.  Kemudian  daun  dihaluskan menggunakan blender, kemudian diayak menggunakan ayakan ukuran 70 mesh, lalu diekstraksi dengan  menggunakan  metode  infusa.  Sebanyak  60  g serbuk daun jarak pagar diekstraksi dengan 250 mL air pada  suhu  90 ℃ selama  15  menit.  Selanjutnya  pelarut diuapkan  menggunakan waterbath pada  suhu  90 ℃ hingga  didapatkan  infusa  daun  jarak  pagar  ( Jatropha curcas ).
Pengujian  fitokimia  infusa  daun  jarak  pagar  secara kualitatif

## Uji polifenol dan tannin
Sebanyak  50  mg  infusa  daun  jarak  pagar dilarutkan  ke  dalam  5  mL  akuades.  Selanjutnya ditambahkan  beberapa  tetes  larutan  besi  (III)  klorida (FeCl 3 )  5%.  Terbentuknya  warna  hijau  menunjukkan adanya  polifenol.  Sebanyak  10  mg  infusa  daun  jarak pagar  direbus  dalam  2  mL  dimetilsulfoksida  (DMSO), disaring,  dan  dilakukan  penambahan  beberapa  tetes Feri  Klorida 0,1%.  Kemudian  apabila  terbentuk  warna biru kehitaman atau hijau kecoklatan mengindikasikan terdapat tanin (Pant et al., 2017).

## Uji alkaloid
Sebanyak  100  mg  infusa  ditambahkan  10  mL alkohol  yang  telah  diasamkan,  kemudian  direbus  dan disaring.  Sebanyak  1  mL  filtrat  yang  diperoleh, ditambahkan  amoniak  encer  dan  kloroform  masing- masing sebanyak 0,4 mL dan 1 mL, kemudian dikocok secara  perlahan-lahan.  Pada  skirining  alkaloid digunakan  2  mL  asam  asetat  untuk  mengekstraksi lapisan  kloroform.  Selanjutnya  diambil  lapisan  asam, lalu ditempatkan pada masing-masing tabung, dimana terdapat 3 tabung. Setiap tabung diuji dengan, Pereaksi Mayer (endapan putih), Pereaksi Dragendorff (endapan coklat  kemerahan),  dan  Pereaksi  Wagner  (endapan coklat).  Warna  yang  terbentuk  pada  pereaksi  yang digunakan  menunjukkan  adanya  alkaloid  (Pant  et  al., 2017).

## Uji flavonoid
Sebanyak  100  mg  infusa  dilarutkan  kedalam  2 mL  etil  alkohol  70%.  Kemudian  larutan  tersebut dimasukan  logam  Magnesium  sebanyak  0,1  mg kemudian  ditambahkan  HCl  pekat  sebanyak  0,5  mL. Warna jingga, kuning, atau merah muda mengindikasikan  terdapat  flavonoid  (Affandy  et  al., 2021).

## Uji saponin
Sebanyak  1  mL  infusa  daun  jarak  pagar dilarutkan  dengan  akuades  sebanyak  20  mL  kedalam tabung  reaksi.  Kemudian  larutan  dikocok  selama  15 menit,  sehingga  terbentuk  dua  lapisan.  Pada  lapisan atas  terbentuk  busa  yang  stabil,  dimana  busa  yang stabil mengindikasikan terdapat saponin dalam sampel (Hossain et al., 2013).

## Penentuan aktivitas antioksidan
Pembuatan  larutan  DPPH  0,3  mM  diperoleh dengan menimbang 39,43 mg serbuk DPPH, kemudian dilarutkan  ke  dalam  100  mL  etanol  p.a,  selanjutnya larutan dikocok hingga homogen.
Pengukuran  panjang  gelombang  maksimum larutan DPPH dibuat dengan melarutkan 1 mL larutan DPPH 0,3 mM dengan larutan etanol p.a ke dalam labu takar  5  mL.  Kemudian  larutan  tersebut  diukur absorbansinya  pada  panjang  gelombang  yang  sesuai dengan warna serapan (komplementer) UV-Vis larutan DPPH.
Waktu  optimal  ( operating  time )  ditentukan dengan  melarutkan  1  mL  larutan  DPPH  0,3  mM dengan  larutan  etanol  p.a  kedalam  labu  takar  5  mL. Kemudian larutan tersebut diukur absorbansinya pada menit 10, 20, 30, 40, 50, dan 60 pada panjang gelombang yang telah ditentukan sebelumnya.
Pengujian aktivitas antioksidan dengan spektrofotometer UV-Vis menggunakan metode DPPH.
Pada  uji  ini  dibuat  larutan  induk  infusa  daun  jarak pagar  (sampel)  dengan  konsentrasi  2000  ppm. Konsentrasi  ini  diperoleh  dengan  menimbang  200  mg sampel  kemudian  dilarutkan  kedalam  larutan  etanol p.a hingga volume mencapai 25 mL. Kemudian dibuat deret konsentrasi yakni 160 ppm, 100 ppm,80 ppm, 40 ppm,  20  ppm,  dan  10  ppm.  Setiap  konsentrasi ditambahkan  larutan  DPPH  0,3  mM  sebanyak  1  mL. Pada tahap ini  juga dilakukan pengukuran absorbansi kontrol,  dimana  larutan  kontrol  tersebut  terdiri  dari  1 mL  larutan  DPPH  dengan  konsentrasi  0,3  mM  dan  4 mL  larutan  etanol.  Larutan  kontrol  yang  diperoleh didiamkan  selama operating  time pada  tempat  yang gelap.  Absorbansi  diukur  pada  panjang  gelombang maksimum yakni 515-517 nm menggunakan Spektrofotometer UV-Vis.
Ujisitotoksik  metode Brine  Shrimp  Lethality  Test (BSLT) Penetasan larva udang ( Artemia salina ) Sebelum  pengujian  sitotoksik, Artemia  salina disiapkan  dengan  menetaskan  telur Artemia  salina selama    2x24  jam.  Penetasan  dilakukan  menggunakan metode dipping pada  wadah  yang  berisikan  air  laut, diberi  pencahayaan  menggunakan  lampu,  serta  diberi suplai gas oksigen pada aerator.

## Preparasilarutanuji dan sitotoksik
Larutan  uji  (infusa  daun  jarak  pagar) menggunakan  konsentrasi  2000  ppm,  dimana konsentrasi  ini  diperoleh  dengan  melarutkan  200  mg infusa  emudian  dilarutkan  kedalam  100  mL  air  laut. Kemudian  dilakukan  pengenceran  menggunakan  air laut, sehingga diperoleh seri konsentrasi 1000 ppm, 500 ppm,  250  ppm,  125  ppm,  62,5  ppm  dan  31,25  ppm. Selanjutnya  tiap-tiap  konsentrasi  dipipet  5  mL kemudian  dilarutkan  kedalam  tabung  uji.  Masing- masing  perlakuan    dikerjakan  secara  berulang sebanyak  3  kali  menggunakan  pipet  mikro.  Sebanyak 10  ekor Artemia  salina L.  diambil,  dan  dimasukkan kedalam  tabung  pengujian.  Tabung  yang  berisikan Artemia  salina ditempatkan  dibawah  lampu  Philips @11watt  dengan  jarak  ±15  cm.  Pengamatan  dilakukan selama 1x24 jam.

## Analisis data
Perhitungan  persentase  rendemen  berdasarkan (Susanty dan Bachmid, 2016).
rendemen  = berat infusa (g) berat sampel (g) x 100%
Perhitungan  persentase  inhibisi  (penangkap radikal bebas) pada sampel menggunakan persamaan
% inhibisi  = (A blanko −  (A sampel ) (A blanko ) 𝑥 100%
Penentuan nilai inhibitory concentration 50% (IC 50 ) ditentukan  dari  hubungan  konsentrasi  sampel  dengan penangkap  radikal  bebas  yang  disebut  dengan persamaan regresi linier.
Penentuan  persentase  kematian  larva  udang menggunakan persamaan :
% kematian larva  = jumlah larva mati jumlah larva total awal 𝑥 100%
Kurva konsentrasi infusa yang dapat membunuh 50%  larva Artemia  salina L.  terhadap  persentase kematian  larva  digunakan  untuk  menentukan  nilai lethal concentration 50% (LC 50 ) (McLaughlin et al., 1998).
Hasil  rata-rata  persen  penghambatan  infusa daun J.  curcas perlakauan  dulangi  secara triplo dan dilakukan  uji  normalitas  serta  menghasilkandata  yang berdistribusi  normal  (p>0,05),  analisis  dilanjutkan menggunakan  uji One  Way  Anova .  Analisis  kemudian dilakukan  menggunakan    post  hoc Tamhane untuk melihat  perbedaan  efek  persentase  penghambatan sampel  dan  vitamin  C  sebagai  kontrol  pembanding untuk  masing-masing  kelompok  perlakuan.  Pengujian secara statistik dikerjakanmenggunakan  program SPSS 16.0 dengan taraf kepercayaan 95%.

## Hasil dan Pembahasan
Ekstraksi  dan  skrining  fitokimia  infusa  daun  jarak pagar ( Jatropha curcas )
Ekstraksi  adalah  proses  penyarian  oleh  pelarut untuk menarik keluar komponen aktif yang terdapat di dalam  sel  pada  tanaman  obat  (Najib,  2018).  Penelitian ini  menggunakan  metode  dengan  cara  panas menggunakan  pelarut  air  yang disebut dengan  infusa. Infusa  didefinisikan  sebagai  salah  satu  metode ektsraksi panas, dimana terjadi penyarian oleh pelarut (air) selama 15 menit pada suhu 90 ℃ . Infusa dilakukan dengan cara merendam daun jarak pagar dalam bejana. Sampel dari ekstraksi kemudian dipekatkan menggunakan waterbath.  Waterbath digunakan  dengan tujuan  menguapkan  pelarut  dalam  hasil  ekstraksi (Artini et al., 2022).
Golongan  metabolit  sekunder  yang  tahan terhadap suhu tinggi pada umumnya memiliki struktur molekul  yang  kuat  dan  stabil.  Senyawa  golongan metabolit sekunder yang memiliki struktur yang stabil adalah alkaloid, polifenol, dan flavonoid dengan waktu penguapan  yang  tidak  terlalu  lama  (Dewi,  2019). Ekstrak  kental  yang  diperoleh  sebesar  1,753  gram dengan  rendemen  sebesar  2,92%.  Kemudian  infusa daun  jarak  pagar  dilakukan  skrining  fitokimia  secara kualitatif menggunakan metode tabung dengan tujuan untuk melihat kandungan metabolit sekunder. Hasil uji fitokimia ditunjukkan pada Tabel 1 dan Gambar 1 .
Tabel 1. Kandungan fitokimia Jatropha curcas
Metabolit Sekunder Perlakuan/Pereaksi Hasil Polifenol dan Tanin Infusa + akuades  + FeCl 3 5% Terbentuk warna hijau (positif polifenol) Infusa + DMSO + FeCl 3 0,1% Terbentuk warna hijau kecoklatan (positif tanin) Alkaloid Mayer Terbentuk endapan putih (positif alkaloid) Dragendorf Terbentuk endapan coklat kemerahan (positif alkaloid) Wagner Terbentuk  endapan coklat (positif alkaloid) Flavonoid  Infusa + logam Mg + HCl pekat larutan NaOH encer Warna jingga (positif flavonoid) Saponin Infusa + air destilasi (larutan dikocok kuat) Lapisan atas terbentuk busa yang stabil (± 10 menit) (positif saponin)
Berdasarkan  skrining  fitokimia  ( Tabel  1 )  dan Gambar 1 , infusa daun J. curcas mengandung senyawa metabolit  sekunder  antara  lain,  tanin  dan  polifenol, alkaloid,  saponin,  dan  flavonoid.  Hasil  skirining fitokimia  sejalan  dengan  penelitian  Rahman  et  al., (2022)dimana  daun  jarak  pagar  mengandung flavonoid, alkaloid, saponin, tanin dan polifenol.
(a) (b)
(c)                                             (d) Gambar 1. Metabolit sekunder infusa daun jarak pagar (a) polifenol dan tanin; (b) alkaloid; (c) flavonoid; (d) saponin

## Aktivitas antioksidan
Penentuan  aktivitas  antioksidan  menggunakan DPPH ( 1,1-diphenyl -2- picrylhidrazil ) infusa daun J. curcas diukur dengan panjang gelombang 516 nm dan waktu
optimasi  ( operating  time )  selama  30  menit  pada  suhu kamar,  dimana  pada  waktu  optimasi  ini  terjadi perubahan  warna  larutan  DPPH  dari  ungu  menjadi kuning  yang  menunjukkan  terjadi  serapan  secara optimal  (Pokorny  et  al.,  2001).  Pengujian  infusa  dan vitamin C (kontrol pembanding) bertujuan mengetahui aktivitas  antioksidan  pada  sampel  dan  vitamin  C dengan  parameter  nilai  IC 50 ( inhibitory  concentration 50%),  dimana  IC 50 merupakan  konsentrasi  yang memberikan  persentase  aktivitas  penangkap  radikal DPPH  sebesar  50%  dibanding  kontrol  (Arina  dan Rohman,  2013).  Nilai  IC 50 ditentukan  dengan menggunakan  persamaan  regresi  linier,  dimana persamaan  regresi  ini diperoleh dari  hubungan  antara konsentrasi  dan  persentase  penangkap  radikal  bebas. Hasil uji penangkap radikal DPPH dan nilai IC 50 infusa daun jarak pagar dan vitamin C (kontrol pembanding) dapat dilihat pada Tabel 2 dan Tabel 3 .
Tabel 2. Rata-rata persen penangkapan radikal bebas dan inhibitory concentration infusa daun J. curcas Konsentrasi (ppm) %Penangkapan radikal bebas 10 32,00±0,02 20 35,19±0,01 a 40 44,45±4,40 80 58,81±0,05 ab 100 66,66±0,02 abc 160 82,48±0,01 abcd 1. y = 0,334x + 31,23
R 2 = 0,974
2. y = 0,348x + 29,04
R 2 = 0,990 3. y = 0,348x + 29,02 R 2 = 0,990 1. IC 50 = 56,19
2. IC 50 = 60,23 3. IC 50 = 60,29
Rata-rata IC 50 ±SD (ppm) = 58,90±2,34
keterangan  :  nilai  menunjukkan  rata-rata  dari  3  kali  pengulangan  ± SD,  perbedaan  huruf  pada  tabel  menunjukkan  perbedaan  yang bermakna (p value <0,05). (SD : standar deviasi).
Tabel 3. Rata-rata persen penangkapan radikal bebas dan inhibitory concentration kontrol pembanding
(vitamin C) Konsentrasi (ppm) %Penangkapan radikal bebas 10 45,44±0,09 20 54,11±0,04 a 40 61,22±0,30 ab 80 76,35±0,07 abc 100 88,35±0,15 abcd 160 95,55±0,04 abcde 1. y = 0,338x + 47,03
R 2 = 0,991
2. y = 0,339x + 46,95
R 2 = 0,985
3. y = 0,337x + 47,11 R 2 = 0,982
1. IC 50 = 8,78
2. IC 50 = 8,99 3. IC 50 = 8,57
Rata-rata IC 50 ±SD (ppm) = 8,78±0,21
keterangan  :  nilai  menunjukkan  rata-rata  dari  3  kali  pengulangan  ± SD,  perbedaan  huruf  pada  tabel  menunjukkan  perbedaan  yang bermakna (p value <0,05). SD : standar deviasi).
Berdasarkan Tabel  2 dan Tabel  3 menunjukkan data  rata-rata  persentase  aktivitas  penangkap  radikal bebas dan nilai IC 50 infusa daun J. curcas dan vitamin C (kontrol positif), dimana kedua bahan uji menggunakan seri konsentrasi yaitu 160; 100; 80; 40; 20; dan  10  ppm.  Persentase  aktivitas  penangkap  radikal bebas  semakin  meningkat  dengan  peningkatan konsentrasi.  Pada  konsentrasi  terendah  (10  ppm)  dan konsentrasi  tertinggi  (160  ppm)  persentase  inhibisi infusa  daun  jarak  pagar  masing-masing  sebesar 32,00±0,02(%)  dan  82,48±0,01(%).  Dengan  konsentrasi yang  sama,  kontrol  positif  (vitamin  C)  memiliki  nilai persentase  inhibisi  yang  lebih  tinggi  dibandingkan infusa  daun  jarak  pagar,  dimana  untuk  konsentrasi terendah  10  ppm  dan  konsentrasi  tertinggi  160  ppm nilai  persentase  inhibisi  masing-masing  sebesar 45,44±0,09(%) dan 95,55±0,14(%). Peningkatan konsentrasi  sampel  uji  (infusa)  daun  jarak  pagar menunjukkan  persentase  inhibisi  yang  semakin  besar. Namun, jika dengan konsentrasi yang sama vitamin C memiliki  persentase  inhibisi  yang  lebih  besar.  Hal  ini disebabkan  karena  vitamin  C  telah  terbukti  memiliki kemampuan yang poten sebagai antioksidan (penangkap radikal DPPH) (Rudiana et al., 2021).
Inhibitory  concentration 50%  (IC 50 )  merupakan parameter  yang  digunakan  dalam  menjelaskan  hasil pengujian DPPH, dimana nilai IC 50 yang semakin kecil artinya  semakin  kuat  aktivitas  antioksidannya.  Pada penelitian  ini  diperoleh  nilai  IC 50 infusa  daun  jarak pagar  sebesar  58,90±2,34  ppm,  sedangkan  vitamin  C sebagai kontrol pembanding nilai IC 50 sebesar 8,79±0,02 ppm.  Penentuan  nilai  rata-rata  IC 50 menggunakan persamaan  regresi  linier,  dimana  persamaan  regresi linier  diperoleh  dari  hubungan  konsentrasi  dan  rerata penangkapan radikal bebas. Hasil penelitian menunjukkan bahwa nilai IC 50 infusa daun jarak pagar masuk dalam klasifikasi antioksidan kuat (IC 50 <50ppm) dan  vitamin  C  (kontrol  pembanding)  masuk  dalam klasifikasi  antioksidan  sangat  kuat.  Berdasarkan  hasil uji  statistik  menunjukkan  infusa  daun J . curcas mempunyai  aktivitas  antioksidan  dan  masing-masing konsentrasi  menunjukkan  perbedaan  yang  bermakna dalam
aktivitas antioksidan (p value <0,05). Pengklasifikasian  nilai  IC 50 terhadap  aktivitas antioksidan tersebut didasarkan pada penelitian Boly et al., (2016) yang dapat dilihat pada Tabel 4 .
Kemampuan  infusa  daun  jarak  pagar  dalam meredam  radikal  bebas  DPPH  diduga  karena  adanya golongan-golongan  senyawa  metabolit  sekunder. Kandungan metabolit sekunder golongan polifenol dan flavonoid  diduga  memberikan  aktivitas  tersebut, karena  adanya  subtituen  gugus  hidroksi  (-OH)  yang bersifat  sangat  reaktif  yang  dapat  mendonorkan  atom Hidrogen,  sehingga dapat menyebabkan radikal  bebas
(DPPH)  yang  kehilangan  proton  menjadi  lebih  stabil (Fessenden dan Fessenden, 1994).
Tabel 4. Klasifikasi aktivitas antioksidan terhadap Inhibitory concentration (IC 50 )
Inhibitory concentration (IC 50 ) (ppm) Klasifikasi aktivitas antioksidan <50 sangat kuat 50-100 kuat 100-150 sedang 150-200 lemah >200 sangat lemah
Uji  sitotoksik  metode  BSLT  ( Brine  Shrimp  Lethality Test )
Gambar 2. Persentase kematian larva udang ( Artemia salina )
Berdasarkan Gambar  2 ,  persen  kematian A. salina menggunakan  metode Brine Shrimp Lethality Test menunjukkan bahwa kematian larva udang dipengaruhi  konsentrasi  infusa  daun  jarak  pagar ( Jatropha curcas ).  Pada  konsentrasi  31,25;  62,5;  125; 250; 500;  dan  1000  ppm  persentase  kematian  larva  udang berturut-turut  12,5±0,22(%);  87,63±0,14%;  73,81±0,08%; 56±0,12%;  31,51±0,06%;  dan  95,65±1,23(%)  dimana dengan meningkatnya konsentrasi, persentase kematian  larva  udang  semakin  besar.  Pada  penelitian ini  diperoleh  nilai  LC 50 dari  sampel  (infusa),  dimana pemberian infusa daun jarak pagar dengan konsentrasi 200,28  ppm  mampu  mengakibatkan  kematian  sebesar 50% larva udang. Hasil LC 50 yang didapatkan mampu mengindikasikan bahwa sampel uji tersebut mempunyai  efek  sitotoksik  pada  konsentrasi  200,28 ppm.  Hal  ini  didasarkan  pada  penelitian  Meyer  et  al., (1982)  dimana  suatu  sampel  atau  bahan  uji  (ekstrak) dikatakan  toksik  apabila  nilai  LC 50 ≤  1000  ppm, sedangkan dikatakan tidak toksik jika nilai LC50 ≥ 1000 ppm.  Menurut  Rahmi  et  al.,  (2022)  mekanisme sitotoksik  bekerja  dengan  cara  menghambat  reseptor indra perasa sekitar mulut Artemia salina (larva udang), sehingga  larva  tersebut  tidak  menerima  rangsangan
dan  tidak  mampu  mengenali  asupan  makanan sehingga  mengakibatkan  kematian  pada  larva  udang. Efek  sitotoksik  yang  mengakibatkan  kematian  larva udang  yang  dihasilkan  suatu  bahan  uji  pada  kadar tertentu  dikarenakan  adanya  kelompok  senyawa metabolit sekunder. Adanya metabolit sekunder seperti flavonoid,  tannin,  dan  saponin  dapat  bersifat  sebagai sitotoksik  yang  dapat  menghambat  proliferasi  sel (Marwati  et  al.,  2021).  Sehingga,  jika  suatu  bahan  uji memiliki  sifat  toksik  (LC 50 ≤  1000  ppm)  menggunakan metode  BSLT,  maka  bahan  uji  tersebut  dapat dikembangkan sebagai agen antikanker.

## Kesimpulan
Berdasarkan  hasil  penelitian,  infusa J.  curcas berpotensi  sebagai  agen  antioksidan  dan  antikanker karena  menunjukkan  aktivitas  antioksidan  dengan klasifikasi kuat dimana nilai inhibitory concentration 50% (IC 50 )  sebesar  58,90±2,34  ppm  dan  menunjukkan  efek sitotoksik  pada  larva  udang  dengan  nilai  LC 50 sebesar 200,28 ppm (LC 50 ≤ 1000 ppm).

## Ucapan Terima Kasih
Pelaksanaan penelitian ini tidak lepas dari peran FMIPA  Universitas  Palangka  Raya  (UPR)  dengan skema  pendanaan  Penelitian  dan  Pengabdian  kepada Masyarakat, Koordinator Laboratorium Kimia Fakultas Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam  UPR  yang telah memfasilitasi dalam pelaksanaan penelitian.

## Daftar Pustaka
Affandy,  F.,  Wirasisya,  D.  G.,  &  Hanifa,  N.  I.  (2021). Skrining  fitokimia  pada  tanaman  penyembuh luka  di  Lombok  Timur. Sasambo  Journal  of
Pharmacy , 2 (1), 1–6. https://doi.org/10.29303/sjp.v2i1.84
Ali, S. S., Ahsan, H., Zia, M. K., Siddiqui, T., & Khan, F.
H.  (2020).  Understanding  oxidants  and antioxidants:  Classical  team  with  new  players.
Journal of Food Biochemistry , 44 (3). https://doi.org/10.1111/jfbc.13145
Anani,  K.,  Adjrah,  Y.,  Ameyapoh,  Y.,  Karou,  S., Agbonon,  A.,  de  Souza,  C.,  &  Gbeassor,  M. (2016).  Antimicrobial,  Anti-inflammatory  and antioxidant  activities  of  Jatropha  multifida  L. (Euphorbiaceae). Pharmacognosy  Research , 8 (2), 142. https://doi.org/10.4103/0974-8490.172657
Arina, N. B.,& Rohman, A.(2013). The phenolic contents and  antiradical  activity  of  IndonesianPhyllantus
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 31.25 62.5 125 250 500 1000 Pe rs en tase k em at ian ±SD Konsentrasi (ppm)
urinaria  L. International  Food  Research  Journal, 20 (3), 1119-1124.
Artini, N. P. R., Mahardiananta, I. M. A., & Nugraha, I. M.  A.  (2022).  Rancang  Bangun  Chiller  Berbasis Mikrokontroler untuk Evaporasi Senyawa Bahan Alam. Jurnal  RESISTOR  (Rekayasa  Sistem
Komputer) , 5 (1), 10–16. https://doi.org/10.31598/jurnalresistor.v5i1.108
2
Boly, R., Lamkami, T., & Guissou, I. (2016). DPPH free radical  scavenging  activity  of  two  extracts  from agelanthus
dodoneifolius (Loranthaceae) leaves. Int J Toxicol Pharmacol Research , 8 (1),29-34. https://www.semanticscholar.org/paper/DPP H-free-radical-scavenging-activity-of-two-from- Boly- Lamkami/77f38b4576ec817d93e49a581d84b51d8 0b05a58
Dewi, S.U . (2019).  Aktivitas  Antifungi  Rebusan  Daun Pandan  Wangi  ( Pandanus amaryllifolius Roxb.) Terhadap  Pertumbuhan Candida  Albicans dengan  Variasi  Lama  Waktu  Rebusan.  [Thesis Diploma  Poltekkes  Putra  Indonesia  Malang]. Poltekkes  Putra  Indonesia  Malang  Repository. https://repository.poltekkespim.ac.id/id/eprint /396/
Fadhli,  H.,  Nurdin,  A.  N.,  &  Octaviani,  M.  (2019). Potensi  Antioksidan  dari  Ekstrak  Kulit  Batang Bauhinia semibifida Roxb. Jurnal Ilmiah Ibnu Sina (JIIS):  Ilmu  Farmasi  dan  Kesehatan , 4 (1),  77–78. https://doi.org/10.36387/jiis.v4i1.257
Hodek,  P.,  Trefil,  P.,  &  Stiborová,  M.  (2002). Flavonoids-potent  and  versatile  biologically active  compounds  interacting  with  cytochromes P450. Chemico-Biological Interactions , 139 (1),  1–21. https://doi.org/10.1016/S0009-2797(01)00285-X
Hossain,  M.  A.,  AL-Raqmi,  K.  A.  S.,  AL-Mijizy,  Z.  H., Weli,  A.  M.,  &  Al-Riyami,  Q.  (2013).  Study  of total phenol, flavonoids contents and phytochemical screening of various leaves crude extracts of locally grown Thymus vulgaris. Asian Pacific  Journal  of  Tropical  Biomedicine , 3 (9),  705–
710. https://doi.org/10.1016/S2221- 1691(13)60142-2
Lobo,  V.,  Patil,  A.,  Phatak,  A.,  &  Chandra,  N.  (2010). Free  radicals,  antioxidants  and  functional  foods: Impact on human health. Pharmacognosy Reviews ,
4 (8), 118. https://doi.org/10.4103/0973-
7847.70902
Marwati, M., Anggriani, A., Burhan, A., Awaluddin, A., Nur,  S.,  Dharmayanti,  R.,  Lilingan,  E.,  & Tiboyong, M. D. (2021). Antioxidant Activity and Cytotoxicity Against WiDR Cell and Vero Cell of The  Karamunting  ( Rhonomyrtus  tomentosa L.) Leaves  Ethanol  Extract. Indonesian  Journal  of Pharmaceutical  Science  and  Technology , 8 (3),  111. https://doi.org/10.24198/ijpst.v8i3.26769
McLaughlin,  J.  L.,  Rogers,  L.  L.,  &  Anderson,  J.  E. (1998). The  Use  of  Biological Assays to Evaluate Botanicals. Drug  Information  Journal , 32 (2),  513– 524.
https://doi.org/10.1177/009286159803200223
Meyer,  B.,  Ferrigni,  N.,  Putnam,  J.,  Jacobsen,  L., Nichols,  D.,  &  McLaughlin,  J.  (1982).  Brine Shrimp:  A  Convenient  General  Bioassay  for Active  Plant  Constituents. Planta Medica , 45 (05), 31–34. https://doi.org/10.1055/s-2007-971236
Najib,  Ahmad.  (2018). Ekstraksi  Senyawa  Bahan  Alam .
Deepublish.
Neha, K., Haider, M. R., Pathak, A., & Yar, M. S. (2019). Medicinal  prospects  of  antioxidants:  A  review. European Journal of Medicinal Chemistry , 178 ,  687– 704.
https://doi.org/10.1016/j.ejmech.2019.06.010
Pant,  D.,  Pant,  N.,  Saru,  D.,  Yadav,  U.,  &  Khanal,  D.
(2017).  Phytochemical  screening  and  study  of anti-oxidant,  anti-microbial,  anti-diabetic,  anti- inflammatory  and analgesic  activities  of  extracts from  stem  wood  of  Pterocarpus  marsupium Roxburgh. Journal of Intercultural Ethnopharmacology , 6 (2), 1.
https://doi.org/10.5455/jice.20170403094055
Pokorny,  J.,  Yanishlieva,  N.,  &  Gordon,  M.  (2001).
Antiokxidants  in  Food:  Pratical  Applications .  Food Science, Technology, and Nutrition.
Rahman, S., Angga, S. C., Toepak, E. P., & Bachtiar, M. T.  (2021).  Profil  fitokimia  dan  aktivitas antibakteri  fraksi  etil  asetat  akar  jarak  pagar (Jatropha  curcas  Linn.). Sasambo  Journal  of
Pharmacy , 2 (2), 73–79. https://doi.org/10.29303/sjp.v2i2.116
Rahmi, A., Afriani, T., & Aini, A. (2022). Cytotoxic test of extract and fractions from Blumea balsamifera
leaves using Brine Shrimp Lethality Test (BSLT).
Jurnal Ilmiah Farmasi , 18 (1),
26–33. https://doi.org/10.20885/jif.vol18.iss1.art3
Riani,  R.  (2018).  Perbandingan  Efektivitas  Daun Jarak+Minyak  Kayu  Putih  dengan  Daun  Jarak
Tanpa Minyak Kayu Putih Terhadap
Kesembuhan  Perut  Kembung  Pada  Bayi  0  –  2 Tahun  di  Wilayah Kerja  Puskesmas Bangkinang Kota  Tahun  2017/2018. Jurnal  Ners , 2 (2). https://doi.org/10.31004/jn.v2i2.228
Rudiana,  T.,  Indiatmoko,  D,  D.,  &  Rohim,  D.  (2021). Aktivitas  Antioksidan  dan  Profil  Senyawa Metabolit Sekunder Ekstrak Kulit Batang Alkesa (Pouteria campechiana). (2021). Chimica et Natura Acta ,
9 (1). https://doi.org/10.24198/cna.v9.n1.33567
Setyaningsih,  D.,  Pandji,  C.,  &  Perwatasari,  D.  D. (2014).  Kajian  Aktivitas  Antioksidan  dan Antimikroba  Fraksi  dan  Ekstrak dari  Daun  Dan Ranting  Jarak  Pagar  (Jatropha  curcas  L.)  serta Pemanfaatannya  pada  Produk  Personal  Hygiene . agriTECH,
34 (2). https://doi.org/10.22146/agritech.9502
Spínola,  V.,  Pinto,  J.,  &  Castilho,  P.  C.  (2015). Identification  and  quantification  of  phenolic compounds  of  selected  fruits  from  Madeira Island  by  HPLC-DAD–ESI-MSn  and  screening for their antioxidant activity. Food Chemistry , 173 , 14–30. https://doi.org/10.1016/j.foodchem.2014.09.163
Susanty,  S.,  &  Bachmid,  F.  (2016).  Perbandingan Metode Ekstraksi Maserasi dan Refluks terhadap Kadar Fenolik dari Ekstrak Tongkol Jagung (Zea mays L.). Jurnal
Konversi , 5 (2), 87. https://doi.org/10.24853/konversi.5.2.87-92
World  Health  Organization.  (2013). WHO  traditional medicine  strategy:  2014-2023 .  World  Health Organization. https://apps.who.int/iris/handle/10665/92455