## Borneo Journal Of Medical Laboratory Technology

## PENGARUH SERUM YANG DISIMPAN SELAMA LIMA HARI SUHU 2-8°C DENGAN SERUM YANG DIPERIKSA LANGSUNG PADA PEMERIKSAAN KOLESTEROL TOTAL
The Effect Of Serum Stored For Five Days Temperature Of 2-8°C With Serum That Is Checked Directly On Total Cholesterol Testing
Chalies Diah Pratiwi 1*
Hariyanto 2
Andyanita Hanif Hermawati 3
Intan Niawati Fajrin 4
*1 STIKes Hutama Abdi Husada, Tulungagung, Indonesia
*email: diahchalies@gmail.com

## Abstrak
Pemeriksaan  kolesterol  darah  pada  saat  ini  menjadi  tren  pemeriksaan laboratorium  yang  banyak  diminati  oleh  sebagian  besar  masyarakat  karena banyak  penyakit  yang  disebabkan  oleh  hiperkolesterolemia  akibat  pola  makan yang  salah  atau  kadar  kolesterol  tinggi.  Alat  yang  rusak,  reagen  habis,  jumlah sampel  yang  banyak,  jarak  laboratorium  dengan  tempat  pengambilan  sampel terlalu  jauh  dan  pemadaman  listrik  mengakibatkan  penundaan  pemeriksaan laboratorium,  sehingga  diperlukan  penyimpanan  sampel.  Tujuan  penelitian  ini adalah  mengetahui  pengaruh  penyimpanan  serum  selama  lima  hari  dengan serum  yang  diperiksa  langsung  terhadap  pemeriksaan  kolesterol  total.  Desain penelitian  yang  digunakan  adalah  eksperimen.  Populasi  dalam  penelitian  ini adalah  semua  mahasiswa  perempuan  Tingkat  3  Program  Studi  D3  Analis Kesehatan  STIKes  Hutama  Abdi  Husada  Tulungagung  dengan  menggunakan teknik Purposive sampling sebanyak 15 responden. Penelitian ini dilakukan pada bulan  Mei  2018.  Data  yang  diperoleh  diolah  menggunakan  software  SPSS  16 dan dianalisis dengan teknik uji Paired t Test. Hasil penelitian ini menunjukkan nilai  rata-rata  kadar  kolesterol  total  pada  serum  yang  diperiksa  langsung sebesar  163  mg/dl  sedangkan  yang  disimpan  selama  lima  hari  suhu  2-8°C sebesar 158 mg/dl. Setelah dilakukan uji paired diperoleh nilai Pvalue = 0,000 sehingga  Pvalue  =  0,000  < α =  0,05  maka  dapat  disimpulkan  ada  pengaruh antara kadar kolesterol total yang diperiksa langsung dan disimpan selama lima hari  suhu  2-  8°C.  Penyimpanan  serum  selama  lima  hari  mempengaruhi  hasil pemeriksaan  kolesterol  total  yang  menyebabkan  terjadinya  penurunan  kadar kolesterol total, namun penurunan yang terjadi tidak signifikan .

## Kata Kunci:
Kolesterol total, serum, waktu penyimpanan
Keywords : Total cholesterol, serum, storage time

## Abstract
Examination  of  blood  cholesterol  at  this  time  become  the  trend  of  laboratory examination that much in demand by most people because of many diseases caused by  hypercholesterolemia  due  to  wrong  diet  or  high  cholesterol  levels.  Damaged equipment, reagent exhausted, large number of samples, laboratory distance with the sampling site too far and power outages resulted in delayed  laboratory  examination, so  that  required  storage  of  samples.  The  purpose  of  this  study  was  to  determine the  effect  of serum storage for five days with serum that was examined directly to the examination  of  total  cholesterol.  The  research  design  used  was  experiment. Population  in  this  research  is  all  female  student  Level  3  Study  Program  D3  Health Analyst STIKes Hutama Abdi  Husada  Tulungagung  by  using  technique  of  Purposive sampling  counted  15  respondents.  This  research  was  conducted  in May 2018. The data obtained were processed using SPSS 16 software and analyzed by Paired t Test. The results of this study showed the average value of total cholesterol levels in serum examined directly at 163 mg / dl while stored for five days temperature of 2-8 ° C at 158  mg  /  dl.  After  the  paired  test  obtained  value  of  Pvalue  =  0,p000  so  Pvalue  = 0,000 < α = 0.05 it can be concluded there is a influence between total cholesterol levels are checked directly and stored for five days temperature 2-8 ° C. Five days of serum storage affects the results of total cholesterol tests that lead to a decrease in total cholesterol, but the decrease is not significant

## PENDAHULUAN
Pemeriksaan  kolesterol  darah  pada  saat  ini menjadi  tren  pemeriksaan  laboratorium  yang  banyak diminati oleh sebagian besar masyarakat karena banyak penyakit  yang  disebabkan  oleh  hiperkolesterolemia akibat  pola makan  yang  salah  atau  kadar  kolesterol tinggi.  Penyakit  yang  disebabkan  oleh  kolesterol  tinggi atau  aterosklerosis  menjadi  penyakit  jantung  yang sangatlah mematikan
(Lestari, 2019).
Hiperkolesterolemia  yaitu  kondisi  dimana  kadar kolesterol dalam darah meningkat di atas batas normal (>200 mg/dL) (Kamilla & Salim, 2018).
Pemeriksaan  laboratorium  saat  ini  menjadi sangat  penting  karena  pergeseran  fungsi  hasil pemeriksaan  laboratorium  dari  penunjang  diagnosa menjadi  penegak  diagnosa  (Fatma,  2018).  Hasil pemeriksaan laboratorium akurat dan dapat dipercaya maka  harus  dilakukan  pengendalian  terhadap  pra analitik,  analitik  dan  pasca  analitik.  Tahap  pra  analitik meliputi  persiapan  pasien,  pengambilan  darah, penanganan,  persiapan  sampel,  persiapan  alat  dan bahan. Tahap analitik  meliputi pengolahan sampel dan interpretasi  hasil.  Tahap  pasca  analitik  meliputi pencatatan hasil dan pelaporan (Purbayanti,2015).
Berdasarkan  diagnosis  dokter,  prevalensi penyakit  jantung  koroner  di  Indonesia  tahun  2013 sebesar 0,5% atau diperkirakan sekitar 883.447 orang, sedangkan  berdasarkan  diagnosis  dokter,  gejala sebesar  1,5%  diperkirakan  sekitar  2.650.340  orang. Berdasarkan  diagnosis  dokter,  estimasi  jumlah penderita  jantung  koroner  di  Provinsi  Jawa  Timur sebanyak 375.127 orang (1,3%) (Kemenkes RI, 2014).
Pemeriksaan  kolesterol  total  dianalisis  karena merupakan  parameter  penting  untuk  memantau kelainan metabolism lipid yang ditandai denganpeningkatan maupun penurunan fraksi lipid dan pemeriksaan  kolesterol  total  juga  sering  dilakukan  di laboratorium  klinik  namun  tidak  pernah  dianalisis sebagai  bahan  penelitian  (Hardjono  dkk,  2013).  Alat yang  rusak,  reagen  habis,  jumlah  sampel  yang  banyak,
jarak laboratorium dengan tempat pengambilan sampel terlalu  jauh  dan  pemadaman  listrik  mengakibatkan penundaan  pemeriksaan  laboratorium,  sehingga diperlukan penyimpanan sampel.
Dalam  Pedoman  Pemeriksaan  Kimia  Klinik  ada beberapa  faktor  yang  dapat  mempengaruhi  stabilitas spesimen  seperti  kontaminan  oleh  kuman dan  bahan kimia,  terkena  paparan  sinar  matahari,  pengaruh  suhu dan  metabolisme  dari  sel-sel  hidup  seperti  sel  darah. Sehingga  terdapat  beberapa  cara  penyimpanan  untuk sampel  darah  yaitu  disimpan  dalam  bentuk  serum  di dalam  lemari  es  dengan  suhu  2-8°C.  Dengan  begitu stabilitas serum akan bertahan selama 5-7 hari (Hartini dan Suryani, 2016).
Dalam  pemeriksaan  laboratorium  sebaiknya dilakukan  segera  agar  hasil  laboratorium  akurat  dan dapat dijadikan sebagai rujukan dalam pemberian terapi. Apabila diharuskan melakukan penundaan pemeriksaan, penundaan  tidak  lebih  dari  2  jam  setelah  pengambilan sampel.  Sehingga  peneliti  berminat  untuk  meneliti tentang pengaruh serum yang disimpan selama lima hari suhu  2-8°C  dengan  serum  yang  diperiksa  langsung pada pemeriksaan kolesterol total.

## METODE PENELITIAN
Jenis  penelitian  yang  digunakan  adalah eksperimental.  Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk mengetahui pengaruh penyimpanan serum suhu 2-8°C selama lima hari dengan serum yang diperiksa langsung terhadap  pemeriksaan  kolesterol  total.  Penelitian  ini dilakukan  di  Laboratorium  Pathologi  STIKes  Hutama Abdi Husada Tulungagung.
Teknik  sampling  dalam  penelitian  ini Purposive Sampling .  15  Sampel diambil  sesuai  dengan  kriteria inklusi yaitu mahasiswi perempuan dengan berat badan 40-55kg  dan  ekslusi  yaitu  mahasisiwi  yang  sakit.  Data hasil  pengamatan  pada  penelitian  ini  di  analisis  secara kuantitatif. Uji statistik pada penelitian ini adalah Paired t  test  (uji  beda  Rerata  untuk  sampel  yang Berhubungan)

## ALAT DAN BAHAN
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah spuite 5 ml, jarum, tourniquet, tabung vakum tanpa  antikoagulan,  rak  tabung,  timer,  makro centrifuge,  botol  vial,  tabung  serologi,  rak  tabung, timer, kuvet, spektrofotometer (Microlab), clinipette 1000 µl dan 10 µl yellow tip, blue tip, dan lemari pendingin suhu 2-8ºC. Bahan yang digunakan adalah  serum,  kapas,  alkohol  70%,  plester,  reagen kolesterol,  kolesterol  standar,  aquadest,  dan extrant 5%.

## PEMBUATAN SERUM
Darah yang sudah diperoleh dari pengambilan  darah  dibiarkan  membeku  terlebih dahulu pada suhu ruang selama 30 menit, kemudian disentrifuge dengan kecepatan 3000 rpm selama 5- 15  menit.  Setelah  dilakukan  sentrifugasi  segera dipisahkan bagian serum ke dalam botol lain.

## HASIL DAN PEMBAHASAN HASIL
Data  hasil  penelitian  yang  dilakukan  di  Laboratorium Pathologi  STIKes  Hutama  Abdi  Husada  Tulungagung disajikan pada tabel 1, 2, dan 3.
Tabel  1  Hasil  Pemeriksaan  kolesterol  total yang disimpan lima hari
Kadar kolesterol total pada serum yang disimpan lima hari suhu 2-8ºC Jumlah Normal 14 Sedang 1 Tinggi -
Berdasarkan  Tabel  1  dapat  diketahui  kadar kolesterol total  yang  disimpan  selama  lima  hari suhu  2-8°C  yang bernilai  normal  (<200  mg/dl)  sebanyak  14  sampel (93%), yang bernilai sedang (200-240 mg/dl) sebanyak 1 sampel  (7%),  sedangkan  yang  bernilai  tinggi  (>240 mg/dl) sebanyak 0 sampel (0%).
Tabel  2  Hasil  Pemeriksaan  kolesterol  total yang diperiksa secara langsung
Kadar kolesterol total pada serum yang diperiksa langsung Jumlah Normal 13 Sedang 2 Tinggi -
Berdasarkan  Tabel  2  dapat  diketahui  kadar kolesterol total  yang  diperiksa  langsung  bernilai  normal  (<200 mg/dl) sebanyak 13 sampel (87%), yang bernilai sedang (200-240  mg/dl)  sebanyak  2  sampel  (13%),  sedangkan yang  bernilai  tinggi (>240  mg/dl)  sebanyak  0  sampel (0%).
Tabel  3  Kadar  Kolesterol  Total  yang  disimpan lima  hari  dengan  Kadar  Kolesterol  Total  yang diperiksa langsung
Kadar kolesterol total pada serum yang disimpan lima hari suhu 2-8ºC Kadar kolesterol total pada serum yang diperiksa langsung Mean 158 163 Standart deviasi 27,764 27,769 Minimum 102 107 Maksimum 202 202
Pada kadar kolesterol total yang disimpan lima hari suhu  2-8°C  didapatkan  nilai  rata – rata  sebesar  158 mg/dl  dan  kadar  kolesterol  total  yang  diperiksa langsung  didapatkan  nilai  rata – rata  sebesar  163 mg/dl.  Untuk  standart  deviasi  dari  kadar  kolesterol total  yang  disimpan  lima  hari  suhu  2-  8°C  adalah 27,764 dan standart  deviasi dari kadar kolestrol total yang  diperiksa  langsung adalah  27,769.  Nilai  minimum pada pemeriksaan kolesterol total yang disimpan lima hari  adalah  102  mg/dl  sedangkan  nilai  minimum  pada pemeriksaan  kolesterol  total  yang  diperiksa langsung adalah  107  mg/dl.  Nilai  maksimum  pada  pemeriksaan kolesterol  total  yang  disimpan  lima  hari  adalah  202 mg/dl  sedangkan nilai  maksimum  pada  pemeriksaan kolesterol  total  yang diperiksa  langsung  adalah  207 mg/dl.
Untuk  analisa  data  dengan Paired  t  Test yang sebelumnya  dilakukan  uji  normalitas  data  dengan menggunakan One-Sample  Kolmogrov-Smirnov Test .  Uji ini  guna  mengetahui  data  berdistribusi  normal  atau tidak.  Setelah diuji  normalitasnya,  data  yang  diujikan berdistribusi  normal  dimana  tingkat  kemaknaan α = 0,05  diperoleh  P value untuk  diperiksa  langsung  sebesar 0,976 dan diperoleh P value disimpan lima hari sebesar 0 ,993  sehingga  P value diperiksa  langsung  > α =  0,976  > 0,05 dan P value disimpan lima hari > α = 0,993 > 0,05.
Dari  hasil  tersebut  dapat  disimpulkan  data berdistribusi  normal,  kemudian  dilanjutkan  ke  uji Paired t Test .
Pada uji ini untuk interpretasinya yaitu jika P value >  0,05  maka  H 0 diterima  dan  H 1 ditolak.  Sebaliknya bila P value < 0,05 maka H 0 ditolak dan H 1 diterima. Dari uji  dini  didapatkan  hasil  signifikan  2-tailed  =  0,000 dimana P value < 0,05 maka H 0 ditolak dan H 1 diterima ; artinya terdapat pengaruh penyimpanan serum selama lima hari terhadap kadar kolesterol total.

## PEMBAHASAN
Berdasarkan  penelitian  yang  telah  dilakukan  di Laboratorium Pathologi STIKes Hutama Abdi Husada Tulungagung.  Teknik  sampling  pada  penelitian  ini adalah  Purposive  sampling  dengan  jumlah  sampel sebanyak  15  orang.  Pada  penelitian  ini  menggunakan sampel mahasiswa perempuan dikarenakan perempuan dibawah  usia  50  tahun  atau  pasca  menopause memiliki  resiko  yang  sama  dengan  pria  yaitu  2-3  kali lebih  besar  untuk  mengalami  atheroslkerosis  oleh kolesterol (Shabela, 2012).
Berdasarkan Tabel 3 pada kadar kolesterol total yang  diperiksa  langsung  didapatkan  nilai  rata-rata sebesar  163  mg/dl,  standart  dviasi  27,769,  nilai minimum  107  mg/dl  dan  nilai  maksimum  207 mg/dl. Sedangkan  kadar  kolesterol  yang  disimpan  lima  hari suhu  2-8°C  didapatkan  nilai  rata-rata  sebesar  158 mg/dl,  standart  deviasi  27,764,  nilai  minimum  102 mg/dl  dan nilai maksimum 202 mg/dl. Berdasarkan uji
statistik  Paired  t  Test  didapatkan  hasil  signifikan  2- tailed =  0,000 dimana Pvalue < 0,05 maka H0 ditolak dan  H1  diterima,  berarti  menunjukkan  adanya pengaruh  penyimpanan  serum  selama  lima  hari terhadap kadar kolesterol total. Hal ini relevan dengan penelitian  (Purbayanti,  2015)  bahwa  terdapat pengaruh  waktu  penyimpanan  serum  terhadap hasil pemeriksaan kolesterol total karena terjadi penurunan hasil  kadar  kolesterol  total  yang  langsung  diperiksa dan disimpan dalam lemari pendingin suhu 2-8°C. Hal ini  dikarenakan  didalam  serum  terdapat  sejumlah tertentu jenis enzim, salah satunya adalah enzim lipase. Enzim  lipase  merupakan  enzim  hidrolase  yang menguraikan  ikatan  ester  dan  lemak  yang terbentuk antara  gliserol  dan  asam  lemak  rantai panjang.  Enzim lipase hanya dapat mengolah lemak yang bersinggungan  dengan  permukaan  air.  Jika  air  dalam serum  kurang  maka  kemampuan  enzim  lipase  untuk memecahkan lemak sangat terbatas. Jadi penyimpanan serum  sebaiknya  tidak  terlalu  lama  untuk meminimalisir  terjadinya  penurunan  kadar  kolesterol total.
Serum  atau  plasma  jernih  bisa  langsung dianalisis,  hal  ini  dilakukan  supaya  kadar kolesterol tidak  berubah  dan  enzim-enzim  tidak  mengubah proporsi lipoprotein selama penyimpanan.
Penyimpanan  pada  suhu  4°C  selama  24  jam  dan penyimpanan  pada  suhu  kamar  (15  -  25°C)  selama  4 jam  praktis  tidak  mengubah  metabolit,  enzim-enzim dan  elektrolit-elektrolit.  Penyimpanan  pada  suhu ruangan  memungkinkan  terjadinya  perubahan  pada kolesterol  bebas  dan  ester.  Pembekuan  serum  akan menyebabkan  aktifitas  enzim  mengalami  penurunan. Serum  yang beku  harus  dicairkan  dan  diletakkan  pada suhu ruang selama 1 jam (Kristiningrum, 2018).
Faktor-faktor yang dapat menyebabkan kesalahan-kesalahan  dalam  pemeriksaan  kolesterol total  misalnya  kurangnya  pengendalian  tahap  pra analitik,  tahap  analitik,  dan  tahap  paska  analitik, kurangnya  pertimbangan  aspek-aspek  sehingga
berpengaruh  pada  presisi  dan  akurasi  seorang  ahli medis.  Adapun  faktor-faktor  lain  yang mempengaruhi hasil  pemeriksaan  kolesterol  secara  teknis  yaitu  : kebersihan  alat  yang  digunakan,  pemipetan  yang kurang  tepat,  keterampilan petugas,  gelembung  udara di  spektrofotometer,  homogenitas  yang  kurang sempurna, waktu dan suhu inkubasi yang kurang tepat..

## KESIMPULAN
Dari  hasil  penelitian  diatas  dapat  disimpulkan bahwa  adanya  pengaruh  antara  kadar  kolesterol  total yang diperiksa langsung dengan  kadar kolesterol total yang  disimpan  lima  hari  suhu  2- 8°C.  Pada  15  sampel serum  yang  diperiksa  langsung  terhadap  serum  yang disimpan lima hari suhu 2-8°C  terjadi penurunan hasil.

## DAFTAR PUSTAKA
Fatma,  Rina  Zuraida.  (2018). Perbedaan  Kadar  Ureum Pada
Plasma Lithium Heparin Dengan Penggunaan Separator Tube Dan Vacutainer Pada
Pasien  Post  Hemodialisa. Skripsi.  Yogyakarta: Jurusan Analis Kesehatan Politeknik Kesehatan Kementerian Kesehatan Yogyakarta Hardjono,  H.,  dkk.  (2003). Hasil  Test  Laboratorium Diagnostik .  Makasar:  Lembaga  Penerbitan
Universitas Hasanudin.
Hartini,  S.  dan  Suryani,  M.  E.  (2016).  Uji  Kualitas Serum  Simpanan  Terhadap  Kadar  Kolesterol Dalam  Darah  Di  Poltekkes  Kemenkes  Kaltim. Jurnal Ilmiah Manuntung , 2 (1) , 65-69. Kemenkes  RI.  ( 2014). Lingkungan  Sehat,  Jantung Sehat. Jakarta: Departemen Kesehatan RI Kristiningrum,  Yokhana  Wahyu.  (2018). Perbedaan Kadar  Kolesterol  Total  Metode  Poct  Dan  Chod- Pap. Karya  Tulis  Ilmiah.  Semarang:  Fakultas Ilmu  Keperawatan  dan  Kesehatan  Universitas Muhammadiyah Semarang.
Kamilla,  L.,  &  Salim,  M.  (2018).  Hubungan  Kadar Kolesterol  Total  Dan  Hipertensi  Dengan Kejadian  Penyakit  Jantung  Koroner  Di  RSUD dr.
Soedarso Pontianak.
Laboraturium
Katulistiwa , 2, 99 – 103. Lestari,  Ayu  Tri.  (2019). Aplikasi  Pemberian  Susu Kedelai  Dan  Jahe  Terhadap  Penurunan  Kadar Kolesterol  Pada  Penderita  Penyakit  Jantung Koroner . Karya Tulis Ilmiah.  Magelang: Fakultas Ilmu  Kesehatan  Universitas  Muhammadiyah Magelang. Purbayanti,  D.  (2015). Pengaruh  Waktu  Pada Penyimpanan Serum Untuk Pemeriksaan Kolesterol Total .  Jurnal  Surya  Medika  Volume  1  No.  1 , 8-
17.  Palngakaraya  :  Fakultas  Ilmu  Kesehatan Universitas Muhammadiyah Palangkaraya.
Shabela,  Rifdah.  (2012). Pahami  Waspadai  Cegah  dan Musnahkan Kolesterol. KLaten: Cable Book.