## Borneo Journal Of Medical Laboratory Technology
Efektivitas Antimikroba Ekstrak Biji Manjakani (Quercus Infectoria) Terhadap Penghambatan Candida Sp.
Antimicrobial Effectiveness of Manjakani Seed Extract (Quercus infectoria) Against Inhibition of Candida sp.
Armivia Puteri Djailani 1
Ganea Qorry Aina 2*
Tiara Dini Harlita 3
1 Politeknik Kesehatan Kementerian Kesehatan Kalimantan Timur, Samarinda, Indonesia
*2 Politeknik Kesehatan Kementerian Kesehatan Kalimantan Timur, Samarinda, Indonesia
3 Politeknik Kesehatan Kementerian Kesehatan Kalimantan Timur, Samarinda, Indonesia
*email: ganea.aina@gmail.com

## Abstrak
Biji  manjakani  secara  empiris  digunakan  untuk  mengobati  berbagai  macam penyakit sebagai antiinflamasi, antibakteri dan antijamur. Tujuan penelitian ini Menganalisis  efektivitas  antimikroba  ekstrak  biji  manjakani (Q.  infectoria) terhadap penghambatan Candida sp. Penelitian ini merupakan adalah penelitian eksperimental  dengan  acak  lengkap  (RAL)  dua  faktor.  Faktor  1  yaitu  jenis pelarut ( n- heksan, etil asetat dan etanol 96%) dan faktor 2 yaitu konsentrasi (50%, 75% dan 100%). Sampel yang digunakan adalah ekstrak biji manjakani yang diperoleh  dengan  maserasi  bertingkat  menggunakan  pelarut n -heksan,  etil asetat dan etanol 96%. Pada penelitian ini mikroba uji yang digunakan adalah Candida sp.  uji  antimikroba  menggunakan  metode  difusi  agar  ( Kirby  Bauer ), dengan kontrol positif flukonazol 150 mg dan kontrol negatif aquadest. Analisis data  yang  digunakan  adalah One Way  Anova dan uji  lanjutan  metode Duncan dengan taraf signifikasi 0,05. Hasil yang didapatkan pada penelitian ini terdapat pengaruh diameter zona hambat ekstrak biji manjakani terhadap penghambatan Candida sp. Konsentrasi yang paling efektif pada etanol 96% konsentrasi 100% sebesar  14,80  mm  dan  efektivitas  sebesar  47,31%  dengan  kontrol  positif flukonazol 150 mg sebesar 31,28 mm. Dapat disimpulkan bahwa ekstrak biji manjakani  ( Q.  infectoria )  memiliki  efektivitas  antimikroba  terhadap penghambatan Candida sp., namun potensinya masih dibawah flukonazol.
Kata Kunci: Antimikroba, Candida sp. , Flukonazol, Biji Manjakani. Keywords :
A ntimicrobial, Candida sp., fluconazole,
Manjakani seeds.

## Abstract
Manjakani seeds are empirically used to treat various diseases as anti-inflammatory, antibacterial and antifungal. The aim of this research is to analyze the antimicrobial effectiveness of manjakani seed extract (Q. infectoria) against inhibition Candida sp. This  research  is  an  experimental  study  with  two  factors  completely  randomized (CRD). Factor 1 is the type of solvent (n-hexane, ethyl acetate and 96% ethanol and factor  2  namely  concentration  (50%,  75%  and  100%).  The  samples  used  were manjakani  seed  extract  which  were  obtained  by  multilevel  maceration  using  a solventn-hexane, ethyl acetate and 96% ethanol. In this study, the test microbe used was Candida sp. antimicrobial test using the agar diffusion method (Kirby Bauer), with a positive control of fluconazole 150 mg and a negative control aquadest. Data analysis  used  is  One  Way  Anova  and  advanced  test  methods  Duncan  with  a significance level of 0.05. The results obtained in this research were the influence of the  diameter  of  the  inhibition  zone  of  the Manjakani  seed  extract  against inhibition Candida sp. The most effective concentration was 96% ethanol, 100% concentration of 14.80 mm and an effectiveness of 47.31% with a positive control of fluconazole 150 mg of 31.28 mm. It can be concluded that manjakani seed extract (Q. infectoria) has antimicrobial effectiveness against inhibition Candida sp., but its potency is still below that of fluconazole.

## PENDAHULUAN
Kandidiasis  merupakan  salah  satu  infeksi  jamur  yang banyak  terjadi  di  Indonesia.  Indonesia  merupakan negara  beriklim  tropis  yang  memiliki  karakteristik berupa suhu dan kelembaban yang cukup tinggi (Sari et al, 2019).  Penyakit  kandidiasis  tergolong  dalam  infeksi oportunistik yang disebabkan oleh pertumbuhan jamur genus Candida secara  berlebihan.  Di  dalam  tubuh manusia, Candida hidup sebagai parasit atau saprofit baik di dalam mulut, saluran pernafasan, saluran pencernaan ataupun vagina (Yanti, 2016). Candida sp. dikenal sebagai fungi  dimorfik  yang  merupakan  flora  normal  di  dalam tubuh  manusia.  Wanita  mudah  terkena  infeksi  saluran reproduksi karena struktur anatominya, ditandai dengan adanya  gejala  keputihan  ( fluor  albus )  yang  merupakan peristiwa alamiah. Setidaknya tiga per empat wanita di dunia  pernah  mengalami  keputihan  sekali  seumur hidupnya, namun hal ini perlu diwaspadai karena dapat berkembang menjadi infeksi akibat adanya bakteri, virus, jamur dan parasit (Fitria, 2020).
World  Health  Organization (WHO)  menyatakan  bahwa masalah kesehatan reproduksi wanita yang buruk telah bertambah  mencapai  33%  dari  jumlah  total  beban penyakit yang menyerang pada wanita di seluruh dunia. Menurut  Departemen  Kesehatan  Republik  Indonesia, kasus  keputihan  mendominasi  kasus  penyakit reproduksi seksual di Indonesia. Sebanyak 75% wanita Indonesia pernah mengalami keputihan minimal satu kali dalam hidupnya dengan 45% wanita diantaranya pernah mengalami keputihan dua kali atau lebih (Regilta, 2021). Pengobatan  yang  digunakan  untuk  keputihan  adalah dengan mengonsumsi obat yang diberikan dari fasilitas kesehatan  seperti  Flukonazol . Flukonazol merupakan obat antijamur yang banyak digunakan tapi tetap dengan resep yang telah ditentukan. Pengobatan secara medis saat  ini  banyak  mengalami  keluhan  seperti  terjadinya resistensi,  berulangnya  kembali  infeksi  saluran reproduksi  oleh  keputihan,  perlu  adanya  pengawasan dokter, serta efek samping toksik lainnya, hal ini dapat terjadi  karena  penggunaan  obat  antijamur  yang  tidak
sesuai  aturan.  Untuk  itu  dibutuhkan  pengobatan alternatif  yang  dapat  membantu  bahkan  dapat menggantikan  penggunaan  bahan  obat-obatan  sintestis dengan yang lebih alami.
Biji  manjakani  ( Q.  infectoria )  merupakan  tanaman  obat tradisional  yang  terdapat  di  Indonesia.  Biji  manjakani secara  empiris  digunakan  untuk  mengobati  berbagai macam  penyakit  sebagai  antiinflamasi,  antibakteri  dan antijamur. Di dalam biji manjakani memiliki kandungan flavonoid, alkoloid, tannin, fenol, saponin, triterpenoid, dan kuinon. Mekanisme kerja senyawa yang dimiliki biji manjakani  yaitu  dapat  merusak  fungsi  membran  sel jamur serta mempunyai efek sebagai antijamur dengan bereaksi terhadap dinding sel dan menembus membran sel  karena  dapat  merusak  protein  (Ciptaningrum  & Ikhssani, 2022).
Beberapa  penelitian  telah  melaporkan  bahwa  ekstrak biji manjakani mampu menghambat pertumbuhan jamur Candida sp. Namun, pada penelitian yang akan dilakukan ini  peneliti  menggunakan  metode  ekstraksi  bertingkat dengan  menggunakan  3  pelarut  yang  tingkat kepolarannya  yang  berbeda,  agar  dapat  diketahui efektivitas  antimikroba  pada  masing-masing  fraksi  dari pelarut  dalam  menghambat  pertumbuhan Candida sp. Tujuan dari penelitian ini untuk mengetahui kemampuan efektivitas  ekstrak  biji  manjakani  ( Q.  infectoria) sebagai antimikroba dalam menghambat Candida sp.

## METODE PENELITIAN
Penelitian ini dilakukan dengan menggunakan rancangan acak  lengkap  (RAL)  dua  faktor  yaitu  ekstrak  biji manjakani ( Q. infectoria) dengan konsentrasi 50%, 75%, dan  100%  yang  diencerkan  dalam aquadest .  Kontrol positifnya menggunakan flukonazol 150 mg dan kontrol negatifnya adalah aquadest steril.

## IDENTIFIKASI TUMBUHAN
Determinasi        tumbuhan        manjakani  ( Q.  infectoria) dilakukan    di  Laboratorium    Biologi,    Fakultas
Matematika    dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam,  Universitas Mulawarman.

## PREPARASI SAMPEL
Biji manjakani dicuci terlebih dahulu dengan air  mengalir hingga bersih. Biji manjakani lalu dikeringkan dalam oven dengan  suhu  50 o C  selama  1x24  jam  kemudian  biji dihaluskan  menggunakan grinding  mesh hingga  menjadi serbuk.

## EKSTRAKSI BIJI MANJAKANI
Pembuatan ekstrak biji manjakani menggunakan metode maserasi bertingkat modifikasi dari penelitian (Harlita et al ,  2018). Serbuk  biji  manjakani  ditimbang  sebanyak 1000  g  kemudian  dimasukkan  dalam  wadah  kaca  dan dimaserasi dengan pelarut n- heksan sebanyak 2000 ml (perbandingan  1:2  (b/v)).  Sampel  dimaserasi  selama 3x24 jam dengan perlakuan diaduk setiap 1 jam. Filtrat dipisahkan  dari  residu  dengan  cara  disaring menggunakan kertas saring. Residu ter sebut kemudian ditambahkan  pelarut  etil  asetat  sebanyak  2000  ml. Sampel  dimaserasi  selama  3x24  jam dengan  perlakuan diaduk setiap 1 jam. Filtrat dipisahkan dari residu dengan cara  disaring  menggunakan  kertas  saring  kemudian ditambahkan  pelarut  etanol  96%  sebanyak  2000  ml. Sampel dimaserasi selama 3x24 jam dan disimpan pada suhu  kamar  (28 o C) dan  terlindung dari  sinar matahari serta  wadah  kaca  ditutup  menggunakan aluminium  foil dengan perlakuan diaduk setiap 1 jam. Filtrat dipisahkan dari  residu  dengan  cara  disaring  menggunakan  kertas saring. Filtrat yang dihasilkan dari ketiga pelarut tersebut kemudian  dipekatkan  menggunakan rotary  evaporator pada suhu 50 0 C dengan kecepatan putar 30 rpm hingga diperoleh  ekstrak  kental.  Ekstrak  yang  diperoleh ditimbang,  dihitung  nilai  rendemennya,  dimasukkan  ke dalam  botol  steril  untuk  mencegah  kontaminasi  dan disimpan.

## PEMBUATAN LARUTAN UJI
Larutan  uji  dibuat  dengan  menimbang  sebanyak  1  g ekstrak  kental  biji  manjakani  kemudian  dilarutkan menggunakan aquadest 100  ml  untuk  mendapatkan larutan standar 10 mg/ml. ekstrak yang tidak dapat larut dengan  sempurna  ditambahkan  pengemulsi  berupa tween 80.

## UJI DIAMETER ZONA HAMBAT EKSTRAK
Pengujian  diameter  zona  hambat  metode  disc  difusi Kirby-Bauer , dengan perbandingan 1:1 konsentrasi 50 %, 75% dan 100%. Jamur ujinya adalah Candida sp. ATCC 10231. Pengujian dilakukan di Laboratorium Kesehatan Provinsi  Kalimantan  Timur,  pada  Laboratorium Mikrobiologi.  Kontrol  positif  yang  digunakan  adalah flukonazol 150  mg dan  kontrol  negatifnya  adalah aquades steril.
Siapkan suspensi jamur uji yang telah distandarisasi dan media  kultur  SDA plate. Kultur  jamur  uji  diambil menggunakan kapas lidi steril, kemudian diinokulasikan secara spread pada medium SDA plate. Kertas cakram steril  berdiameter  6  mm,  ditetesi  dengan  larutan ekstrak  yang  telah  dibuat  sebanyak  15 μ l,  kemudian diletakkan  pada  permukaan  media  SDA plate dan ditekan  secara  perlahan  menggunakan  pinset  agar menempel sempurna pada permukaan media. Kemudian diinkubasi  pada  suhu  37 o C  selama  24  jam.  Diameter zona  hambat  yang  terbentuk  diukur  menggunakan penggaris  pada  batas  terpanjang  dan  batas  terpendek daerah hambat yang terbentuk dalam satuan milimeter (mm) (Zeniusa et al ., 2019).

## ANALISIS DATA
Data  diameter  zona  hambat dalam  bentuk  persentase dengan  rumus  persamaan  yaitu  sebagai  berikut  : (Surjowardojo et al ., 2016)
I = (d2-d1) d1 x 100%
Keterangan : I = Aktivitas Penghambatan
d 1 = Kertas Cakram d 2 = Zona Hambat
Persentase  data  aktivitas  kemudian  dihitung  efektifitas antimikrobanya dengan membandingkan diameter zona hambat  dengan  diameter  zona  hambat  yang  yang dihasilkan  oleh  antibiotik  kontrol  positif  yaitu flukonazol. Efektivitasnya menggunakan rumus persamaan  sebagai  berikut    dapat  dihitung  dengan  : (Surjowardojo et al ., 2016)
E= D D ₐ x 100%
Keterangan :
E = Efektivitas antimikroba
D  = Diameter zona hambat ekstrak pelarut nonpolar, semipolar dan  polar biji manjakani D ₐ = Diameter zona hambat antibiotik kontrol positif (mm)
Analisa  data  dalam  penelitian  ini  menggunakan  analisis satu  arah (One  Way  Anova). Dari  data  diameter  zona hambat  yang  didapat  dilakukan  uji  normalitas  dan  uji varian data. Uji normalitas dilakukan untuk mengetahui apakah data yang telah terdistribusi normal. Uji varian data dilakukan untuk mengetahui apakah data yang telah dikumpulkan  memiliki  data  yang  homogen  atau  tidak. Jika  data  terdistribusi  normal  dan  homogen  maka analisis data dilanjutkan ke uji One Way Anova dengan uji lanjutan Duncan .

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## HASIL
Tabel I. Nilai rendemen ekstrak biji manjakani Jenis ekstrak Jenis pelarut Bobot ekstrak (gram) Warna ekstrak Konsentrasi (%) Biji manjakani n- heksan 15,42 Hijau muda 1,5% Etil asetat 189,06 Kuning kecoklatan 18,9% Etanol 96% 235.,44 Coklat kehitaman 23,5%
Sebelum dilakukan pengujian aktivitas antimikroba, hasil ekstraksi  dilakukan  uji  bebas  etanol  untuk membebaskan ekstrak dari etanol sehingga didapatkan ekstrak murni tanpa adanya kontaminasi, dan tidak akan menimbulkan positif palsu pada perlakuan sampel. Hasil yang  diperoleh  dari  uji  tersebut  adalah  larutan  tidak berubah warna yang sehingga dapat disimpulkan bahwa
kedua ekstrak telah bebas etanol dan dapat dilanjutkan dengan menguji ekstrak terhadap Candida sp.
1. Rerata  uji  pendahuluan  diameter  zona  hambat ekstrak  biji  manjakani  konsentrasi  100%  pada berbagai  jenis  pelarut  terhadap  penghambatan Candida sp.
Gambar 1. Rerata Diameter Zona Hambat Ekstrak Biji Manjakani Konsentrasi 100% terhadap Penghambatan Candida sp.
Berdasarkan Gambar 1 diketahui bahwa diameter zona hambat  yang  terbentuk  menunjukkan  ekstrak  biji manjakani memiliki daya hambat sedang pada pelarut n- heksan,  kuat  pada  pelarut  Etil  Asetat  dan  Etanol  96% terhadap penghambatan Candida sp. Penentuan kriteria ini  berdasarkan  klasifikasi  respon  zona  hambat  Davis dan  Stout  (1971)  sebagai  berikut  :  respon  lemah (diameter 5 mm), respon sedang (diameter 5-10 mm), respon  kuat  (diameter  10-20mm),  dan  respon  sangat kuat (diameter ˃ 20 mm).
2. Rerata  diameter  zona  hambat  ekstrak  biji manjakani  dengan  berbagai  jenis  pelarut  pada konsentrasi  50%,  75%  dan  100%  terhadap penghambatan Candida sp.
Adapun  hasil  uji  antimikroba  pada  variasi  pelarut  dan konsentrasi dari ekstrak biji manjakani didapatkan hasil yang bervariasi pada setiap fraksinya, yang disajikan pada gambar berikut :
Gambar 2. Rerata Diameter Zona Hambat  Ekstrak Biji Manjakani terhadap Penghambatan Candida sp.
Gambar 2 menunjukkaan bahwa ekstrak biji manjakani pada berbagai variasi pelarut dan konsentrasi memiliki kemampuan  sedang  sampai  kuat    dalam  menghambat pertumbuhan Candida sp. konsentrasi yang berbeda dari
setiap fraksi memberikan pengaruh terhadap diameter zona  hambat  yang  terbentuk,  dimana  terjadinya peningkatan  diameter  zona  hambat  sesuai  dengan peningkatan konsentrasi.
6 7,71 8,19 12,33 13,29 14,6 11,66 14,42 14.8 0 2 4 6 8 10 12 14 16 50% 75% 100% Diam et er z on a h am b at ( m m ) Konsentrasi ekstrak n-heksan Etil asetat Etanol 96% 8,23 14,29 14,74 0 5 10 15 n-heksan Etil asetat Etanol 96% Diam et er z on a h am b at (m m ) Jenis pelarut
Kontrol Diameter Zona Hambat Pengulangan 1 Pengulangan 2 Rerata Kontrol positif 31,29 mm 31,27 mm 31,28 mm Kontrol negatif (aquadest) 6 mm 6 mm 6 mm Kontrol negatif (Pengemulsi Tween 80 ) 6 mm 6 mm 6 mm Tabel III. Data hasil perhitungan efektivitas pelarut etanol 96% Kelompok Perlakuan Efektivitas Ekstrak Rerata ulangan Kontrol positif Efektivitas 50% 11,66 mm 31,28 mm 37,27% 75% 14,42 mm 31,28 mm 46,09% 100% 14,80 mm 31,28 mm 47,31% Berdasarkan Tabel II efektivitas antimikroba didapatkan dengan  cara  membandingkan  zona  hambat  pada perlakuan  yang  terbaik    dengan  kontrol  positif  yaitu flukonazol 150 mg. adapun hasil yang didapatkan sebesar
47,31%.

## PEMBAHASAN
Hasil  uji  aktivitas  antimikroba  ekstrak  biji  manjakani terhadap Candida sp. terlebih dahulu dilakukan sebelum dilakukannya uji aktivitas ekstrak. Hasil uji aktivitas dari masing-masing  larutan n- heksan,  etil  asetat  dan  etanol 96% pada ekstrak biji manjakani menunjukkan aktivitas antimikroba terhadap Candida sp. yang ditandai dengan adanya zona hambat yang terbentuk di sekitar disc . Pada uji  pendahuluan  ini  didapatkan  diameter  zona  hambat terbesar  pada  pelarut  etanol  96%  konsentrasi  100% sebesar 14,74 mm dan diameter zona hambat terkecil pada pelarut n- heksan  sebesar 8,23 mm.
Setelah  dilakukan  uji  aktivitas  ekstrak  biji  manjakani, dilanjutkan  dengan  uji  ekstrak  biji  manjakani  dengan variasi  konsentrasi  50%,  75%  dan  100%  terhadap Candida sp.  untuk  melihat  sejauh  mana  ekstrak  biji manjakani dapat menghambat pertumbuhan Candida sp.
Hasil  uji  aktivitas  antimikroba  pelarut n- heksan,  etil asetat  dan  etanol  96%  dengan  konsentrasi  50%,  75%, dan  100%  didapatkan  hasil  bahwa  hasil  ekstrak  biji manjakani  ketiga  larutan  dengan  variasi  konsentrasi
tersebut  memiliki  aktivitas  antimikroba  terhadap Candida sp.  hal  ini  dapat  dilihat  dengan  adanya  zona hambat yang terbentuk di sekitar disc .
Gambar  2  menunjukkan  diameter  terbesar  terdapat pada  pelarut  etanol  96%  dengan  konsentrasi  100% dengan  rata-rata  sebesar  14,8  mm  dan  diameter  daya hambat terkecil pada n- heksan konsentrasi 50% Sebesar 6 mm (diameter disc) . Ketentuan kekuatan dari suatu zat uji  yaitu  bila  ukuran  diameter  zona  hambat  5  mm tergolong lemah, 5-10 mm tergolong sedang, 10-20 mm tergolong  kuat  dan ˃ 20  mm  tergolong  sangat  kuat (Davis  dan  Stout  1971).  Hasil  dari  penelitian menunjukkan bahwa diameter zona hambat ekstrak biji manjakani  tergolong  sebagai  antimikroba  dengan kekuatan tergolong kuat.
Pada  hasil  uji  ekstrak  biji  manjakani  pada  pelarut n- heksan, etil asetat dan etanol 96% konsentrasi 50%, 75% dan  100%  menunjukkan  bahwa  ekstrak  biji  manjakani pelarut  etanol  96%  konsentrasi  100%  memiliki  daya hambat yang lebih besar disbanding pelarut n- heksan dan etil  asetat  konsentrasi  50%,  75%    dan  100%.  Hal
tersebut  dikarenakan  adanya  perbedaan  senyawa  aktif yang  terkandung  antara  pada  pelarut n- heksan,  etil asetat  dan  etanol  96%.  Pada  penelitian  yang  dilakukan oleh Yanti (2016) yaitu aktivitas antifungi ekstrak etanol gal manjakani ( Q. infectoria) konsentrasi tertinggi 80.000 ppm sebesar 15,44 mm hal ini berbeda dengan hasil yang didapatkan  pada  penelitian  ini,  banyak  faktor  yang menyebabkan  aktivitas  diameter  zona  hambat  yang terbentuk berbeda dari penelitian yang telah ada yaitu tingkat  kepolaran  pelarut,  nilai  rendemen  yang didapatkan, senyawa kompleks yang terkandung dalam ekstrak serta penggunaan metode yang berbeda dapat mempengaruhi diameter zona hambat yang terbentuk. Pada hasil uji statistik menunjukkan bahwa ekstrak biji manjakani pelarut n- heksan, etil asetat dan etanol 96% dengan  konsentrasi  50%,  75%  dan  100%  memiliki pengaruh  perlakuan  ekstrak  biji  manjakani  terhadap aktivitas  antimikroba  ekstrak  biji  manjakani.  Senyawa antijamur yang terdapat dalam biji manjakani bersama- sama  membunuh Candida sp.  melalui  mekanisme perusakan  dinding  sel  jamur,  pada  dasarnya  biji manjakani  memang  dapat  menghambat  pertumbuhan Candida sp.  tetapi  dengan  variasi  konsentrasi  yang digunakan  senyawa  yang  terkandung  didalam  biji manjakani  dapat  larut  sehingga  mempengaruhi  daya hambat (Himalaya, 2017). Pada penelitian ini, ekstrak biji manjakani pelarut n- heksan, etil asetat dan etanol 96% dengan  konsentrasi  50%,  75%,  100%  menunjukkan adanya  peningkatan  diameter  zona  hambat  sesuai dengan peningkatan konsentrasi.
Setelah  dilakukan  uji  DMRT,  ekstrak  dengan  pelarut etanol 96% merupakan diameter zona hambat terttinggi dan tidak berbeda nyata dengan pelarut etil asetat dan ekstrak dengan pelarut n- heksan menghasilkan diameter zona  hambat  terendah.  Penelitian  ini  menunjukkan bahwa  setiap  pelarut  yan  digunakan,  zona  hambat terbesar  selalu  didapatkan  oleh  ekstrak  dari  pelarut etanol 96% dengan konsentrasi 50%, 75% dan 100%. Hal ini  menunjukkan  bahwa  konsentrasi  ekstrak  dengan pelarut etanol 96% memiliki potensi antimikroba yang
lebih tinggi dibandingkan dengan kedua ekstrak lainnya. Berdasarkan  hasil  tersebut,  konsentrasi  yang menghasilkan  zona  hambat  terbesar  adalah  pelarut etanol  96%  dengan  konsentrasi  100%  dengan  zona hambat  sebesar  14,80  mm  dan  daya  hambat  terkecil terdapat pada pelarut n- heksan konsentrasi 50% dengan zona hambat sebesar 6 mm.
Aktivitas daya hambat secara teknis dapat dipengaruhi oleh beberapa faktor dari bahan uji, seperti pada proses maserasi  dan  jenis  pelarut  yang  digunakan.  Proses maserasi  dilakukan  3x24  jam  pada  setiap  pelarut  yang digunakan.  Hal  ini  bertujuan  agar  memaksimalkan proses  pengambilan  senyawa  aktif  yang  terkandung didalam  biji  manjakani.  Selama  proses  perendaman berlangsung,  sampel  disimpan  dalam  wadah  yang tertutup serta berbahan kaca dan terlindung dari cahaya langsung  yang  bertujuan  mencegah  reaksi  katalisis cahaya  ataupun  perubahan  warna.  Pergantian  pelarut dilakukan  setiap  hari  sehingga  kandungan  senyawa metabolit sekuner yang terkandung pada biji manjakani terkestrak  dengan  sempurna  sampai  warna  maserat yang diperoleh memudar dan didapatkan hasil maserat yang maksimal. Hasil maserat yang diperoleh kemudian disaring  kemudian  filtrate  yang  didapatkan  dipekatkan dengan menggunakan rotary vacuum evaporator (Susanty, 2016).
Setelah  itu,  dilakukan  perhitungan  hasil  rendemen. Rendemen  merupakan  perbandingan  antara  hasil banyaknya  metabolit  yang  didapatkan  setelah  proses ekstraksi  dengan  berat  sampel  yang  digunakan. Rendemen  yang  dikatakan  baik  jika  nilainya  lebih  dari 10% (Wardaningrum, 2019). Berdasarkan hal tersebut rendemen  yang  baik  didapatkan  dari  biji  manjakani dengan pelarut etil asetat dan etanol 96%.
Jenis  pelarut  yang  digunakan  dapat  berpengaruh  pada senyawa  aktif  yang  ikut  terekstraksi.  Larutan pengekstraksi  yang  digunakan  disesuaikan  dengan kepolaran  senyawa-senyawa  yang  diinginkan.  Pelarut non  polar  akan  menarik  senyawa  non  polar,  pelarut semi pola akan menarik senyawa semi polar dan pelarut
polar  akan  menarik  senyawa  polar  (Istiqomah,  2021). Pada penelitian ini peneliti menggunakan pelarut dengan kepolaran berbeda-beda secara berurut yaitu n -heksan, etil asetat dan etanol 96%.
Pelarut n -heksan  diketahui  dapat  menarik  senyawa flavonoid  dan  alkaloid,  dimana  pada  senyawa  tersebut memiliki  sifat  sebagai  antimikroba  (Fitria,  2020). Flavonoid  sendiri  merupakan  senyawa  yang  memiliki aktivitas antimikroba dengan mekanisme kerja merusak fungsi membran sel pada jamur. Alkaloid bekerja dengan cara menyisip diantara dinding sel dan DNA kemudian mencegah replikasi DNA jamur sehingga pertumbuhan jamur akan terganggu (Komala, 2019).
Ekstrak  yang  dihasilkan  dari  pelarut  etil  asetat menunjukkan  bahwa  ekstrak  mengandung  tannin  dan fenolik.  Tannin  merupakan  poliflavanoid  senyawa ekstrak bekerja dengan cara merusak sel jamur,senyawa tanin mengerutkan dinding sel atau membran sel jamur sehingga  mengganggu  permeabilitas  sel  jamur.  Tannin juga dapat berikatan dengan protein yang mana ikatan ini  mempunyai  efek  untuk  menghambat  pembentukan dinding  sel  jamur Candida sp.  (Abrori,  2017).  Adanya kelompok hidroksil dan ikatan ganda alpha-beta dalam senyawa  fenolik  memainkan  peran  penting  dalam aktivitas antimikroba (Yanti, 2016).
Berdasarkan hasil penelitian yang dilakukan oleh Hakim (2020), penggunaan konsentrasi etanol yang digunakan sangat  mempengaruhi  hasil  dari  ekstrak  yang  didapat, meningkatnya  konsentrasi  etanol  dapat  meningkatkan laju  disolusi  dan  ekstraksi.  Penggunaan  pelarut  etanol terdapat  senyawa  yang  terkandung  didalamnya  antara lain,  flavonoid,  fenol,  saponin,  triterpenoid.  Saponin merupakan salah satu senyawa metabolit sekunder yang berfungi sebagai antifungi dan antimikroba, mekanisme kerja  saponin  adalah  dengan  menurunkan  tegangan permukaan  jamur  sehingga  meningkatkan  permebilitas sel  sehingga  terjadi  kebocoran  sel  dan  senyawa intraseluler didalam sel keluar sehingga nutrisi, protein, enzim dalam sel keluar dan jamur mengalami kematian (Sari,  2021).  Triterpenoid  sendiri  merupakan  senyawa
bioaktif  yang  memiliki  fungsi  sebagai  antijamur, triterpenoid ini dapat menghambat pertumbuha jamur, baik melalui membran sitoplasma maupun mengganggu pertumbuhan dan perkembangan spora jamur (Jalianto, 2015).
Kontrol  positif  digunakan  sebagai  pembanding  dalam menentukan  efektivitas  antimikroba  dari  ekstrak  biji manjakani ( Q. infectoria). Antibiotik flukonazol digunakan sebagai kontrol positif digunakan untuk membandingkan ekstrak dengan antibiotik yang sudah berpotensi sebagai zat  antimikroba  dengan  memeriksa  jamur  uji  memiliki resisten  atau  tidak.  Mekanisme  flukonazol  sebagai antijamur azol berkerja dengan menghambat biosintesis ergosterol  jamur,  penghambatan  ini  dapat  dicapai memalui  pengikata  obat  dan  pengaruhnya  terhadap fungsi kelompok heme pada sitokrom P450 oksidase. Flukonazol  sebagai  kontrol  positif  menghasilkan  zona hambat  sebesar  31,28  mm.  Terhadap Candida sp. Standar  interpretasi  diameter  zona  hambat  jamur Candida sp. terhadap antibiotik flukonazol berdasarkan Clinical  and  Laboratory  Standar  Institusi (2017)  yaitu resisten (≤ 2 mm), intermediet ( 4 mm), dan sensitif (≥ 8  mm)  (CLSI,  2017).    Dengan  demikian  dapat disimpulkan bahwa flukonazol sensitif terhadap Candida sp.  pada  penelitian  ini  zona  hambat  terbesar  pada ekstrak manjakani etanol 96% konsentrasi 100% sebesar 14,80 mm didapatkan efektivitas terhadap penghambatan Candida sp.  sebesar  47,31%.  Dengan demikian ekstrak biji manjakani memiliki potensi sebagai antimikroba dalam menghambat pertumbuhan Candida sp.  namun  dengan  potensinya  yang  masih  dibawa flukonazol.

## KESIMPULAN
Hasil dari ekstrak biji manjakani memiliki diameter zona hambat yang terbentuk pada fraksi n- heksan, etil asetat dan  etanol  96%  memiliki  keefektivitasan  terhadap penghambatan Candida sp. Ekstrak biji manjakani fraksi n -heksan, fraksi etil asetat, dan fraksi etanol 96% dengan konsentrasi  50%,  75%  dan  100%  memiliki  efektivitas
terhadap  penghambatan Candida sp.  Hasil  yang  paling efektif terdapat pada ekstrak biji manjakani fraksi etanol 96% dengan konsentrasi 100% yaitu sebesar 14,80 mm dan  efektivitasnya  sebesar  47,31%  dengan  kontrol positif  flukonazol  150  mg  sebesar  31,28  mm,  dapat disimpulkan  bahwa  ekstrak  biji  manjakani  memiliki efektivitas  terhadap Candida sp.,  namun  potensinya masih dibawah flukonazol.

## DAFTAR PUSTAKA
Abrori,  A.  S.  (2017).  Uji  Daya  Hambat  Ekstrak  Daun Rambutan ( Nephelium lappaceum Linn) Terhadap Jamur Candida  albicans Secara in  vitro.  Skripsi. Universitas Muhammadiyah Surabaya. Surabaya.
Ciptaningrum, I., & Ikhssani, A. (2022). Quercus infectory (Manjakani)  dan  Efeknya  terhadap  Organ  Kewanitaan. Jurnal Wawasan Kesehatan. Vol. 1, No. 1.
Davis, W. W., & Stout T. R. (1971). Disc Plate Method of  Microbiological  Antibiotic  Assay. Jurnal  Applied Microbiology .
Fitria,  L.,  Shahib,  M.  N.  &  Sastramihardja,  H.  S.  2020. Perbedaan Penurunan Jumlah Koloni Candida Albicans Antara Pemberian Cebokan Rebusan Biji Manjakani Dan Daun Sirih Merah Pada Wanita Usia Subur (WUS) Yang Mengalami Keputihan. Jurnal Media Informasi Kesehatan Vol. 7, No.1.
Hakim,  A.  R.  &  Saputri,  R.  (2020).  Optimasi  Etanol Sebagai  Pelarut  Senyawa  Flavonoid  dan  Fenolik. Jurnal Surya Medika. Vol. 6, No. 1.
Harlita,  T.  H.,  Oedjijono,  &  Asnani,  A.  (2018).  The Antibacterial  Activity  of  Dayak  Onion  ( Eleutherine palmifolia  ( L.)  Merr). Toward  Pathogenic  Bacteria . Jurnal Tropical Life Sciences Research, 29(2), 39-52.
Himalaya,  D.  (2017).  Pengaruh Pemberian  Ekstrak  Biji Manjakani  ( Quercus  Infectoria  Gall )  terhadap  Bakteri Vaginosis dan Candida Penyebab Keputihan ( Leukorrhea ). Journal Of Midwifery Vol. 5, No.1. 30-44.
Istiqomah,  Y.  &  Dewi  Y.  K.  2021.  Uji  Aktivitas Antioksidan  Dari  Ekstrak  Kulit  Batang  Kesambi (Schleichera  oleosa  (Lour)  Oken)  Menggunakan Metode  Ekstraksi  Bertingkat. SPIN  Jurnal  Kimia  & Pendidikan Kimia . 22-31.
Jalianto. (2015). Uji Aktivitas Antijamur Ekstrak Etanol Biji  Buah  Langsat  ( Lansium  domesticum Corr.). Skripsi . Universitas Tanjungpura. Pontianak.
Komala,  O.,  Yulianita.,  &  Siwi,  F.  R.  (2019).  Aktivitas Antijamur  Ekstrak  Etanol  50%  Dan  Etanol  96%  Daun Pacar  Kuku Lawsonia  inemis L.  Terhadap Trichophyton mentagrophytes.  Jurnal  Ilmiah  Dasar  dan  Lingkungan Hidup. Vol. 19, No. 1.
Regilta,  W.  W.,  &  Sofiawati,  A.  (2021).  Tingkat Kesadaran  Mahasiswi  terhadap  Gejala  Keputihan Normal  dan  Abnormal. Alauddin  Scientific  Journal  of Nursing. 1-15.
Sari, A. P., Kawilarang A. P., Ervianti E., & Rohiman  A. (2019).  Profil  Pasien  Baru  Kandidiasis  ( Profile  Of  New Patient  Of  Candidiasis ), Periodical  Of  Dermatology  and Venereology , 2019, 1-11
Sari,  N.  K.  Y.  &  Sumadewi,  N.  L.  U.  (2021).  Aktivitas Antifungi  Saponin  Bunga  Kamboja  Putih  ( Plumeria acuminata )  pada Candida  albicans ATCC  10231. Jurnal Metamorfosa. Vol. 8, No. 1.
Surjowardojo, P., Susilorini, T.E., & Benarivo, V. (2016). The  Inhibitory  Power  of  Manalagi  Apple  (Malus sylveltris  Mill)  Peel  Decoction  on  the  Growth  of Escherichia  coli  and  Streptococcus  agalactiae  Causes Mastitis in Dairy Cows. Journal of Tropical Livestock. Vol. 17, no. 1. 11-21
Susanty.  &  Bachmid,  F.  (2016).  Perbandingan  Metode Ekstraksi Maserasi dan Refluks terhadap Kadar Fenolik Dari  Ekstrak  Tongkol  Jagung  ( Zea  mays  L. ). repository Univeritas Muhammadiyah Jakarta. Vol. 5, No. 2.
Wardaningrum,  R.  Y.  (2019).  Perbandingan  Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Terfurifikasi Ubi Jalar Ungu ( Ipomoea batatas L.) . Skripsi. Universitas Ngudi Waluyo. Semarang.
Yanti, N., Samingan.,  & Mudatsir. (2016).  Uji Aktivitas Antifungi  Ekstrak  Etanol  Gal  Manjakani  ( Quercus infectoria )  terhadap Candida  albicans,  Jurnal  Pendidikan Mahasiswa Biologi. 1-9
Zeniusa, P., Ramadhian, MR, Nasution, SH,  & Karima, N. (2019). Test of the Inhibitory Power of The Hijau Ethanol  Extract  Against  Escherichia  coli  In  Vitro. Medical Journal. Vol. 8, no. 2. 1-8