## 58 VOLUME 13 NOMOR 2 DESEMBER 2017

## PENGARUH PEMBERIAN RHODAMIN B PERORAL SUBAKUT TERHADAP
PERUBAHAN KETINGGIAN MUKOSA GASTER TIKUS PUTIH GALUR WISTAR ( Rattus norvegicus Strain Wistar )
Pravangesta  Anggit  Anjasmara 1 ,  Muhammad  Fadhol  Romdhoni 2 ,  Mustika  Ratnaningsih 2 1 Mahasiswa  Fakultas  Kedokteran,  Universitas  Muhammadiyah  Purwokerto
2 Dosen  Fakultas  Kedokteran,  Universitas  Muhammadiyah  Purwokerto

## ABSTRAK
Latar  Belakang :  Rhodamin  B  merupakan  zat  pewarna  sintetis  yang  digunakan  untuk  pewarna  tekstil,  namun  banyak disalahgunakan sebagai zat pewarna makanan. Hal ini sangat berbahaya bagi kesehatan karena Rhodamin B mengandung zat kimia yang berbahaya dan reaktif. Jika di konsumi dalam jangka panjang maka akan menyebabkan iritasi saluran cerna dan mengakibatkan gastritis.
Tujuan : Mengetahui pengaruh pemberian Rhodamin B peroral subakut terhadap perubahan ketinggian mukosa gaster tikus wistar.
Metode : Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental dengan rancangan post test only with control design . Sampel berupa 24 tikus wistar jantan yang memenuhi kriteria inklusi dan eksklusi, kemudian diadaptasi dan dibagi secara acak menjadi 4 kelompok.K merupakan kelompok kontrol hanya diberikan makanan dan minuman standar. P1 diberi Rhodamin B peroral 3,5mg/kgBB,  P2  diberi  Rhodamin  B  peroral  7mg/kgBB,  P3  diberi  Rhodamin  B  peroral  14mg/kgBB.  Setelah  30  hari dilakukan terminasi  dan  diambil  organ  gaster  untuk dibuat  preparat  histopatologi.
Hasil : Rerata ketinggian mukosa gaster pada kelompok K=987,054µm; P1=732,170µm; P2=587,187µm; P3=525,967µm. Hasil  uji One  Way  Anova didapatkan  perbedaan  ketinggian  mukosa  pada  semua  kelompok  (P  <  0,05)  dan  uji Post  Hoc menggunakan uji LSD didapatkan perbedaan yang bermakna pada K-P1 (P=0,009), K-P2 (P=0,000), K-P3 (P=0,000), P1- P3 (P=0,025). Tetapi tidak terdapat perbedaan bermakna pada P1-P2 (P=0,103) dan P2-P3 (P=0,479). Uji korelasi Spearman didapatkan  hubungan  negatif  yang  sangat  kuat  antara  pemberian  Rhodamin  B  dosis  bertingkat  terhadap  perubahan ketinggian mukosa gaster(r=-0,781).
Kesimpulan : Pemberian Rhodamin B peroral subakut berpengaruh terhadap perubahan ketinggian mukosa gaster tikus wistar. Semakin  tinggi dosis yang diberikan,  semakin rendah ketinggian  mukosa gaster.
Kata Kunci : rhodamin b, ketinggian mukosa gaster, peroral

## ABSTRACT
Background : Rhodamine B is synthetic coloring pigment used to give color in textiles industry. However, Rhodamine B is often abused as food coloring. This is very dangerous for health because Rhodamine B contains harmful and reactive chemicals. If this is consumed in long time, it can cause intestinal irritation and gastritis.
Aim : To prove the effect of  giving orally subacute Rhodamine B to the changes of  gastric mucosal thickness of  wistar rats. Method : This study was experimental with post test only control group design. Samples were 24 male wistar rats that met inclusion and exclusion criteria, and were adapted and devided randomly into 4 groups. K was control group that was given standard food and standard drink. P1 was given Rhodamine B  orally with dose of  3,5mg/kg. P2 was given Rhodamine B  orally  with  dose  of   7mg/kg.  P3  was  given  Rhodamine  B  orally  with  dose  of   14mg/kg.  After  30  days  the  rats  were terminated and their gasters were taken for histopathological examination.
Result  : The  mean  of  gastric  mucosal  thickness  in  each  group  was  K=987,054µm;  P1=732,170µm;  P2=587,187µm; P3=525,967µm. The result of  One Way Anova test showed significant difference of  mucosal thickness in all groups (P < 0,05) and Post Hoc test with LSD test showed significant differences in K-P1 (P=0,009), K-P2 (P=0,000), K-P3 (P=0,000), P1-P3 (P=0,025). While there were no significant differences in P1-P2 (P=0,103) and P2-P3 (P=0,479). Spearman correlation test showed a very strong negative relation between the giving of Rhodamine B in gradual doses to the changes of gastric mucosal thickness (r=-781).
Conclusion : Giving orally subacute Rhodamine B can cause gastric mucosal thickness change on wistar rats. The higher Rhodamin B dose given, the thinner the gastric mucosal thickness.
Keywords : rhodamine b, gastric mucosal thickness, orally

## PENDAHULUAN
Rhodamin  B  merupakan  zat  pewarna berupa  serbuk  kristal  berwarna  hijau  atau  ungu kemerahan, tidak berbau, serta mudah larut dalam larutan  warna  merah  terang  berfluoresan  sebagai bahan  pewarna  tekstil  atau  pakaian,  namun  pada kenyataannya  Rhodamin  B  masih  banyak disalahgunakan sebagai zat pewarna makananYamlean, (Paulina V. Y. 2011). Rhodamin B banyak ditemukan pada makanan jajanan seperti bubur delima, cendol, kolang-kaling, cincau, kerupuk, sirup,  minuman  kemasan,  es  doger,  dan  manisan (Winarno, F.G. 2004) . Alasan penggunaan Rhodamin B  sebagai  bahan  tambahan  makanan  antara  lain karena harganya yang jauh lebih murah dibandingkan dengan zat warna pangan yang aman bagi kesehatan dan juga kurangnya pengetahuan produsen industri rumah  tangga  tentang  zat  pewarna  apa  saja  yang diperbolehkan dan yang  tidak diperbolehkan pada makanan (Winarno,  F.G.  2004).
Serangkaian penelitian telah dilakukan untuk membuktikan  penggunaan  Rhodamin  B  sebagai bahan  pewarna  makanan.  Penelitian  pada  tahun 2003 di kabupaten Bandung di temukan Rhodamin B  pada  kerupuk,  jeli/agar-agar,  aromanis,  dan minuman  dalam  kadar  antara  7.841-3.226,55  ppm (Trestiati,  M.  2003). Penelitian  pada  tahun  2004, ditemukan 67% cabe merah giling yang mengandung Rhodamin  B  di  pasar-pasar  tradisional  di  DKI Jakart (Djarismawati, Sugiharti., Nainggolan, R. 2004). Penelitian pada tahun 2014 ditemukan jajanan yang mengandung  Rhodamin  B  sebanyak  15  sampel  di pasar tradisional kota Bandar Lampung (Permatasari, A.,  Susantiningsih,  T.,  Kurniawaty,  E.  2014) Rhodamin  B  berbahaya  bagi  kesehatan manusia  karena  sifat  kimia  dan  kandungan  logam beratnya.Rhodamin B mengandung senyawa klorin
(Cl).Senyawa  klorin  merupakan  senyawa  halogen yang berbahaya dan reaktif.Selain itu, Rhodamin B juga memiliki senyawa pengalkilasi (CH3-CH3) yang bersifat  radikal  sehingga  dapat  berikatan  dengan protein,  lemak,  dan  DNA  dalam  tubuh.  Jika  di konsumi  dalam  jangka  panjang  maka  akan menyebabkan  iritasi  saluran  cerna  dan mengakibatkan perubahan ketinggian mukosa gaster. 6 Oleh  karena  itu,  penelitian  ini  penting  dilakukan untuk mengetahui pengaruh pemberian Rhodamin B  terhadap  perubahan  ketinggian  mukosa  gaster tikus wistar.
METODE
Penelitian  ini  merupakan  penelitian eksperimental  dengan  rancangan post  test  only  with control  design .  Penelitian  ini  dilakukan  pada  bulan April-Mei  2017  di  Laboratorium  Farmakologi Fakultas  Kedokteran  Universitas  Muhammadiyah Purwokerto  dan  Laboratorium  Riset  Fakultas Kedokteran  Universitas  Jendral  Soedirman.Sampel berupa 24 tikus wistar jantan yang memenuhi kriteria inklusi dan eksklusi, kemudian diadaptasi selama 7 hari dan dibagi secara acak menjadi 4 kelompok. K merupakan  kelompok  kontrol  hanya  diberikan makanan  dan  minuman  standar  tanpa  diberi Rhodamin B. P1 diberi Rhodamin B peroral dengan dosis 3,5mg/kgBB, P2 diberi Rhodamin B peroral dengan  dosis  7mg/kgBB,  P3  diberi  Rhodamin  B peroral  dengan  dosis 14mg/kgBB.  Setelah  30  hari perlakuan, kemudian dilakukan terminasi dan diambil organ gaster untuk dibuat preparat histologi.Organ lambung  difiksasi  dengan  menggunakan  larutan Netral  Buffer  Formalin  10%.Pengecatan  jaringan gaster  tikus  menggunakan  pewarna  Hematoxylin Eosin  (HE).Kemudian  preparat  tersebut  diamati dengan  mikroskop  cahaya  pembesaran  40x  dalam

## 60 VOLUME 13 NOMOR 2 DESEMBER 2017
5  lapangan  pandang,  ketinggian  mukosa  diukur dengan  menggunakan  software  ImageJ.

## HASIL
Tabel  IV.1.  Data  Ketinggian  Mukosa  Gaster Rata-rata  ketinggian  mukosa  pada  kelompok kontrol  adalah  987,054  µm,  kelompok  perlakuan dosis 3,5 mg/kgbb adalah 732,170 µm, kelompok perlakuan  dosis  7  mg/kgbb  adalah  587,187  µm dan kelompok perlakuan dosis 14 mg/kgbb adalah 525,967  µm.
Gambar  IV.1.  Rata-rata  ketinggian  mukosa gaster  kelompok  kontrol,  kelompok  3,5  mg/ kgbb, kelompok 7 mg/kgbb dan kelompok 14 mg/kgbb.
Gambar  IV.2.  Histologis  gaster  tikus  bagian korpus  setelah  perlakuan  dengan  perbesaran 40x.  A)  Mukosa  gaster  tikus  kelompok kontrol.  B)  Mukosa  gaster  tikus  kelompok perlakuan  3,5  mg/kgbb.  C)  Mukosa  gaster
tikus  kelompok  perlakuan  7  mg/kgbb.  D) Mukosa  gaster  tikus  kelompok  perlakuan  14 mg/kgbb.
Analisis  Data
Uji  normalitas  data  menggunakan Shapirowilk didapatkan data terdistribusi  normal (P > 0,05), uji homogenitas ketinggian mukosa gaster menggunakan Levene’s Test didapatkan data homogen (P  >  0,05),  oleh  karena  itu  dilanjutkan  dengan  uji parametrik One Way Anova . Pada uji One Way Anova didapatkan  perbedaan  yang  signifikan  antara kelompok  kontrol  dan  kelompok  perlakuan  (P  = 0,000),  kemudian  dilanjutkan dengan  uji  Post  Hoc dengan  menggunakan  uji LSD .  Hasilnya menunjukkan  bahwa  terdapat  perbedaan  yang signifikan pada hampir setiap kelompok (P < 0,05) yaitu,  antar  kelompok  kontrol  dengan  kelompok perlakuan  3,5  mg/kgbb  (P  =  0,009);  7  mg/kgbb (P = 0,000);dan 14 mg/kgbb (P = 0,000), kelompok perlakuan 3,5 mg/kgbb dengan kelompok perlakuan 14  mg/kgbb  (P  =  0,025).  Beberapa  hasilnya  tidak terdapat perbedaan yang signifikan (P > 0,05) yaitu, antar  kelompok  perlakuan  3,5  mg/kgbb  dengan kelompok  perlakuan  7  mg/kgbb  (P  =  0,103)  dan kelompok perlakuan 7 mg/kgbb dengan kelompok perlakuan  14  mg/kgbb  (P  =  0,479).  Kemudian dilakukan uji korelasi antara kedua variabel dengan menggunakan  uji  Spearman.  Pada  uji  korelasi Spearman  antar  pemberian  Rhodamin  B  dosis bertingkat  terhadap  perubahan  ketinggian  mukosa didapatkan  hasil  korelasi  berlawanan  arah  yang sangat  kuat  (r  =  -0,781).  Sehingga  semakin  tinggi dosis Rhodamin B yang diberikan maka ketinggian mukosa  gaster  akan  semakin  menurun.

## DISKUSI
Ketinggian  mukosa  gaster  diukur  dari lapisan  teratas  berupa  epitel  yaitu  epitel  silindris selapis  hingga  lapisan  terbawah  berupa  lapisan muskularis mukosa. 7 Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa  pemberian  Rhodamin  B  peroral  subakut pada  tikus  putih  galur  wistar  ( Rattus  norvegicus ) berpengaruh terhadap perubahan ketinggian mukosa gaster (P < 0,05), dan hubungan antara pemberian Rhodamin  B  dengan  dosis  yang  semakin  tinggi berpengaruh secara berlawanan terhadap ketinggian mukosa  gaster,  dimana  semakin  tinggi  dosis
Kontrol 3,5 7 14 Ketinggian Mukosa Gaster (µm) 835.419 828.491 682.436 444.428 1184.836 677.344 560.236 381.256 1259.375 645.829 544.118 657.212 1015.748 954.983 607.401 529.828 670.723 761.482 636.243 536.321 902.223 524.892 492.689 606.756 Rata-rata (µm) 978.054 732.170 587.187 525.967
61
Rhodamin B yang diberikan maka semakin menurun ketinggian  mukosa  gaster.
Sesuai dengan teori bahwa pemberian bahan toksik secara terus menerus akan mengakibatkan sel melakukan  adaptasi  terhadap  stressor  dari  luar, diantaranya dengan melakukan respon berupa atrofi, hipertrofi,  hiperplasia,  dan  metaplasia.  Salah  satu bentuk  adaptasi  terhadap  stressor  dari  luar  yaitu berupa atrofi, jika sel mengalami atrofi maka akan terjadi penurunan dari ukurannya (Sander, Mochamad Aleq.  2010) .  Hal  tersebut  berhubungan  dengan kejadian kerusakan pada gaster. Gaster yang terpapar bahan  toksik  secara  terus  menerus  berakibat terjadinya kerusakan gaster. Kerusakan gaster antara lain  berupa  gastritis  dan  tukak  peptik.  Gastritis dapat  diklasifikasikan  menjadi  gastritis  erosif  dan gastritis non erosif.Gastritis erosif biasanya bersifat akut  dan  ditandai  oleh  defek  mukosa  superfisial (erosi).  Defek  ini  disebabkan  oleh  zat  kimia  dan obat misalnya aspirin, gangguan sirkulasi, atau bakteri misalnya Helicobacter pylori .
Gastritis  nonerosif  terdapat  dalam  dua bentuk:  atrofik,  bentuk  yang  lebih  sering,  atau hipertrofik,  bentuk  yang  sangat  jarang.  Teradapat dua jenis gastritis atrofik, yaitu gastritis antrum dan gastritis  fundus.Keduanya  menunjukkan  gambaran yang serupa yaitu mukosa yang mengandung lebih sedikit  kelenjar  sehingga  lebih  tipis  dari  pada mukosa  normal. Tukak  peptik  adalah  penyakit multifaktor  yang  ditandai  oleh  defek  dalam  pada mukosa  yang  meluas  ke  submukosa,  dan  bahkan ke  muskularis  lambung.  Perluasan  tukak  melalui lapisan serosa menyebabkan perforasi dan akhirnya peritonitis. Dari semua jenis kerusakan pada gaster, baik  gastritis  maupun  tukak  peptik,  akan mengakibatkan  penurunan  dari  ketinggian  lapisan mukosa  gaster.  Menurunnya  ketinggian  mukosa gaster berakibat pula menurunnya sistem pertahanan dari  mukosa  gaster,  karena  mukosa  gaster mengandung  banyak  jumlah  prostaglandin  yang mengatur pengeluaran dari mukosa bikarbonat dan mukus  serta  menghambat  sekresi  sel  parietal,  dan sangat  penting  dalam  mengatur  aliran  darah  dan perbaikan  dari  sel  epitel.
Hasil dari penelitian ini yang didukung oleh beberapa teori dan juga beberapa penelitian terdahulu membuktikan  bahwa  Rhodamin  B  merupakan  zat pewarna  makanan  yang  berbahaya  untuk dikonsumsi.Sesuai  dengan  teori  yang  mengatakan bahwa  Rhodamin  B  merupakan  zat  pewarna makanan  yang  berbahaya  karena  sifat  kimia  dan
kandungan  logam  beratnya.Rhodamin  B mengandung  senyawa  klorin  (Cl).Senyawa  klorin merupakan  senyawa  halogen  yang  berbahaya  dan reaktif. Jika tertelan, maka senyawa ini akan berusaha mencapai  kestabilan  dalam  tubuh  dengan  cara mengikat senyawa lain dalam tubuh, hal ini lah yang bersifat  racun  bagi  tubuh.

## KESIMPULAN
Pemberian  Rhodamin  B  peroral  subakut berpengaruh terhadap perubahan ketinggian mukosa gaster  tikus  putih  galur  wistar  ( Rattus  norvegicus ). Pemberian  Rhodamin  B  mengurangi  ketinggian mukosa  gaster  dan    dengan  semakin  tinggi  dosis Rhodamin  B  maka  ketinggian  mukosa  gaster semakin menurun.

## DAFTAR  PUSTAKA
Yamlean,  Paulina  V.  Y.  2011.  Identifikasi  dan Penetapan Kadar Rhodamin B pada Jajanan Kue  Berwarna  Merah  Muda  yang  Beredar di  Kota  Manado. Jurnal  Ilmiah  Sains, 11  (2), 289-295. Winarno, F.G. 2004. Kimia Pangan dan Gizi . Jakarta: PT  Gramedia  Pustaka Trestiati, M. 2003. Analisis Rhodamin B pada Makanan dan  Minum  an  Jajanan  Anak  SD .  Bandung: Departemen  Teknik  Lingkungan  Institut Teknologi Bandung.
Djarismawati,  Sugiharti.,  Nainggolan,  R.  2004. Pengetahuan Perilaku Pedagang Cabe Merah Giling  dalam  Penggunaan  Rhodamine  B  di Pasar  Tradisional  di  DKI  Jakarta. Jurnal Ekologi Kesehatan, 3:7-12.
Permatasari, A., Susantiningsih, T., Kurniawaty, E. 2014. Identifikasi Zat Pewarna Rhodamin B Dalam  Jajanan  Yang  Dipasarkan  Di  Pasar Tradisional  Kota  Bandar  Lampung. Jurnal Penelitian .  Lampung:  Fakultas  Kedokteraan Universitas  Lampung.
Sentra Informasi Keracunan Nasional (SIKerNas). 2015. Bahaya  Rhodamin  B  Sebagai  Pewarna pada  Pangan .  Badan  POM. Available  from : http://ik.pom.go.id/v2015/artikel/Bahaya- Rhodamin-B-sebagai-Pewarna-pada- Makanan.pdf   [Diakses  16  Februari 2017]1992
62 VOLUME 13 NOMOR 2 DESEMBER 2017
Eroschenko,  Victor  P.  2015. Atlas  Histologi  diFiore
Edisi 12.  Jakarta:  EGC.  Hal:  286-289.
Sander,  Mochamad  Aleq.  2010. Atlas  Berwarna Patologi Anatomi . Jakarta: Rajawali Pers. 8-11; 120-122. Isselbacher., dkk. 2012. Harrison Prinsip-prinsip Ilmu Penyakit  Dala  Edisi  13 .  Jakarta:  EGC