## Sintesis dan Uji Aktivitas Antioksidan Senyawa 4,4’ - dinitrodibenzalaseton dengan Metode DPPH
Jessica a) , Tutuk Budiati a) *, Catherine Caroline a)
a) Fakultas Farmasi, Universitas Katolik Widya Mandala Surabaya
Senyawa  d ibenzalaseton  dan  turunannya  yaitu  senyawa  4,4’ -dinitrodibenzalaseton  adalah  salah  satu  jenis antioksidan  sintetik  dan  tergolong  ke  dalam  analog  Kurkumin.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  menentukan aktivitas  antioksidan  dari  senyawa 4,4’ -dinitrodibenzalaseton  hasil  sintesis.  Senyawa  d ibenzalaseton  dan  4,4’ - dinitrodibenzalaseton  disintesis  melalui  reaksi  kondensasi Claisen-Schmidt dengan  perbandingan benzaldehida/4-nitrobenzaldehida dan aseton adalah 2:1 mEq dengan menggunakan katalis NaOH. Hasil sintesis dilakukan uji kemurnian dan uji identifikasi struktur dengan menggunakan spektroskopi Inframerah. Persentase rendemen  hasil  sintesis  d ibenzalaseton  dan  4,4’ -dinitrodibenzalaseton  berturut-turut  adalah  92,30%  dan 96,70%.  Uji  aktivitas  antioksidan  dilakukan  dengan  metode  DPPH  yang  dinyatakan  dengan  nilai  IC 50 ,  dengan menggunakan pembanding Kurkumin dan Vitamin C. Perolehan rata-rata nilai IC 50 dari senyawa dibenzalaseton, 4,4’ -dinitrodibenzalaseton, kurkumin dan vitamin C secara berturut-turut adalah 66 mM, 1,6 mM, 0,074 mM, dan 0,0846 mM. Hal ini menunjukkan bahwa aktivitas antioksidan senyawa 4,4’ -dinitrodibenzalaseton (IC 50 =1,6 mM) lebih  besar  dibanding  dengan  senyawa  dibenzalaseton  (IC 50 =66  mM)  yang  disebabkan  oleh  penambahan  dua gugus  nitro.  Aktivitas  antioksidan  yang  dimiliki  oleh  Kurkumin  lebih  tinggi  dari  senyawa  hasil  sintesis.  Potensi antioksidan dari 4,4’ -dinitrodibenzalaseton terhadap vitamin C sebesar 5,28%.
Kata kunci: kondensasi Claisen- Schmidt, 4,4’ -dinitrodibenzalaseton, antioksidan, DPPH.
Synthesis and Antioxidant Activity of 4,4’ -dinitrodibenzalacetone by DPPH Method
Diben zalacetone  and  its  derivative,  4,4'-dinitrodibenzalacetone,  are  one of  the  synthetic  antioxidant  types antioxidant and are classified as curcumin analogues. This study aims to determine the antioxidant activity of the synthesized  4,4'-dinitrodibenzalacetone  compound.  Dibenzalacetone  and  4,4'-dinitrodibenzalacetone  were synthesized  through  Claisen-Schmidt  condensation  reaction  with  a  benzaldehyde/4-nitrobenzaldehyde  and acetone ratio of 2: 1 mEq using NaOH as catalyst. The purity of the synthesized compounds was carried out by its melting  point  and  thin  layer  chromatogram;  the  structural  identification  using  infrared  spectroscopy.  The  yield percentages  of  dibenzalacetone  and  4,4'-dinitrodibenzalacetone  were  92.30%  and  96.70%,  respectively.  The antioxidant activity test was carried out by the DPPH method which was stated with the IC 50 value, using curcumin and  Vitamin  C  as  comparison  compounds.  The  average  IC 50 value  of  the  compound  dibenzalacetone,  4,4'- dinitrodibenzalacetone, curcumin and vitamin C were 66 mM, respectively. 1.6 mM, 0.074 mM, and 0.0846 mM. This shows that the antioxidant activity of 4,4’ -dinitrodibenzalacetone compound (IC 50 = 1.6 mM) is greater than dibenzalacetone  compound  (IC 50 =  66  mM)  due  to  the  addition  of  two  nitro  groups.  The  antioxidant  activity possessed  by  curcumin  is  higher  than  the  synthesized  compound.  The  antioxidant  potential  of  4,4'-dinitro- dibenzalacetone against vitamin C is 5.28%.
Keywords: Claisen-Schmidt condensation, 4,4’ -dinitrodibenzalacetone, antioxidant, DPP.
* Corresponding author: Fakultas Farmasi Universitas Katolik Widya Mandala Surabaya, Jl. Raya Kalisari Selatan No. 1 Surabaya, e-mail: budiatitutuk@gmail.com

## PENDAHULUAN
Antioksidan dapat diartikan sebagai senyawa  yang  dapat  menangkal  atau  meredam dampak  negatif  dari  radikal  bebas  (Sugiharto et al. ,  2012).  Berdasarkan  sumbernya,  antioksidan dapat  dibedakan  menjadi  dua  jenis  yaitu antioksidan  enzimatik  dan  antioksidan  non- enzimatik.  Golongan  antioksidan  non-enzimatik terdiri  dari  antioksidan  alami  dan  antioksidan sintetik (Yuslianti, 2018,).
Kurkumin  merupakan  salah  satu  senyawa golongan  polifenol  dengan  bahan  aktif  berupa Zingiberaceae yang  dapat  berperan  sebagai antioksidan  untuk  mengurangi  dampak  negatif radikal  bebas  (Astuti,  2019;  Sugiharto et  al ., 2012). Senyawa 4,4’ -dinitrodibenzalaseton merupakan  salah  satu  jenis  antioksidan  sintetik yang  merupakan  analog  senyawa  Kurkumin, senyawa  alami  yang  mempunyai  berbagai aktivitas  farmakologik,  juga  berkhasiat  sebagai antioksidan (Raju et al .,2017). Senyawa  golongan dibenzalaseton  merupakan  salah  satu  analog Kurkumin  yang  juga  menunjukkan  aktivitas antioksidan. Struktur dari 4,4’ - dinitrodibenzalaseton terlihat pada Gambar 1.
Gambar 1. Struktur 4,4’ -dinitrodibenzalaseton.
Dibenzalaseton dapat dideskripsikan sebagai  penangkap  radikal  bebas  dan  memiliki sifat  antioksidan  potensial  (Rayar et  al .,  2015). Senyawa  Dibenzalaseton  dan  turunannya  dapat disintesis  melalui  reaksi  kondensasi Claisen- Schmidt ,  yaitu  reaksi  antara  aseton  dan benzaldehid atau turunannya dengan perbandingan  1:2  mEq.  Pada  penelitian  ini  akan disintesis  senyawa  Dibenzalaseton  (senyawa  1a) dan 4,4’ -dinitrodibenzalaseton  (senyawa  1b) melalui  reaksi  kondensasi Claisen-Schmidt , dengan  katalis  basa  NaOH  (Handayani,, et  al .,
2010).
antioksidan
senyawa
golongan Dibenzalaseton.  Uji  aktivitas  senyawa  1b sebagai antioksidan pernah diteliti oleh Raju et al (2017), namun  hasil  penelitian  yang  dilakukan  secara spektrofotometrik kuantitatif menunjukkan bahwa  senyawa  tersebut  tidak  memiliki  aktivitas sebagai antioksidan. Secara teori adanya gugus 4- NO 2 menyebabkan  bentuk  terkonjugasi  semakin panjang  sehingga  elektron  bebas  dapat  dengan mudah  terlepas  sehingga  makin  mudah  bereaksi dengan  radikal  bebas.  Berdasarkan  alasan tersebut,  maka  dilakukan  penelitian  untuk  dapat
melihat  pengaruh  gugus  4-NO 2 menggunakan metode DPPH.
Oleh  karenanya  senyawa  1b  hasil  sintesis akan diuji aktivitas antioksidan dengan menggunakan  metode  DPPH  (α,α -diphenyl- β - picrylhydrazyl).  Prinsip  dasar  dari  pengujian DPPH adalah pengukuran dari resonansi elektron yang  ditangkap  dengan  spektrometer  selama bereaksi  dengan  senyawa  antioksidan  (Susanto, 2019).  Sebagai  pembanding  pada  uji  antioksidan ini digunakan Kurkumin.

## METODE PENELITIAN

## Alat
Timbangan  analitis  (Sartorius,  Germany), seperangkat  alat  kromatografi  lapis  tipis,  Melting Point  Apparatus  (Stuart  Scientific  SMP1,  UK), Spektrofotometer  Inframerah  (Shimadzu  FTIR- 8400S),  Multiskan-Go  (Thermo  Fisher  Scientific, USA), Microplate 96-wells (Iwaki, Japan).
Bahan Aseton p.a. (SAP Chemicals), 4-
Nitrobenzaldehida p.a.(Merck, Jerman), Propanol p.a.  (Mallinckrodt  Chemicals,  USA),  Kurkumin p.a.  (Sigma  Aldrich,  USA),  vitamin  C  p.gg  (PT Brataco),  Natrium  Hidroksida  (Mallinckrodt Chemicals,  USA),  Asam  Klorida  (Mallinckrodt Chemicals, USA), DPPH (α,α -diphenyl- β - picrylhydrazyl)  (Sigma  Aldrich,  USA)  Heksana p.a.  (Mallinckrodt  Chemicals,  USA),  Etil  Asetat p.a.  (Mallinckrodt  Chemicals,  USA),  lempeng Silica Gel 60 F 254 (Merck, Jerman).

## Tahapan Penelitian
Terdapat  dua  tahapan  kerja,  yaitu  tahap sintesis  dan  tahap  uji  antioksidan  dari  senyawa (1a) dan (1b).

## Sintesis Senyawa Dibenzalaseton (1a) dan
4,4’ -dinitrodibenzalaseton (1b) Senyawa  turunan  benzaldehida  diambil sebanyak  5  mmol  ditambahkan  dengan  propanol p.a.  (1,25  ml)  kemudian  ditambahkan  dengan aseton  p.a.  sebanyak  0,18  ml  (2,5  mmol),  diaduk sampai  semua  bahan  terlarut.  Tambahkan  NaOH 20%  sedikit  demi  sedikit  sebanyak  1,25  ml,  aduk selama 1-3 jam pada suhu kamar. Kesempurnaan reaksi diuji setiap 1 jam secara kromatografi lapis tipis  (KLT).Tambahkan  asam  klorida  dan  cuci dengan  aquadest  yang  telah  ditambah  dengan  es batu.  Saring,  keringkan  dalam  oven  dan rekristalisasi  dengan  menggunakan  pelarut  yang sesuai.

## Uji  Kemurnian  dan  Identifikasi  Struktur Senyawa Hasil Sintesis
Uji  kemurnian  senyawa  hasil  sintesis berdasarkan  data  titik  leleh  dan  uji  kromatografi lapis  tipis  (klt)  menggunakan  merupakan  3  fase
gerak  yang  memiliki  kepolaran  berbeda.  Sebagai pembanding digunakan
4-nitrobenzaldehida untuk KLT senyawa (1b) dan Benzaldehida untuk KLT senyawa (1a).
Identifikasi struktur
secara spektrofotometer  IR  dengan  metode  pelet  KBr dan  diamati  pada  panjang  gelombang  4000-600 cm -1 .

## Uji Aktivitas Antioksidan

## Pembuatan Larutan Induk DPPH
DPPH  ditimbang  sebanyak  150  mg  dan dilarutkan dengan etanol p.a. sampai tepat 100 ml sehingga menghasilkan konsentrasi 1500 ppm.

## Penentuan Panjang Gelombang Terpilih
Larutan induk DPPH dipipet berturut-turut sebanyak  8,  10,  12,  14,  16,  18,  20,  dan  22  µl kemudian  ditentukan  absorbansi  yang  mendekati nilai 1.
Pembacaan blanko positif dilakukan dengan  cara  memipet  etanol  sebanyak  150  µl ditambah
dengan
larutan
induk DPPH konsentrasi  terpilih.  Pada  penelitian  ini,  larutan 4,4’ -dinitrodibenzalaseton berwarna merah coklat sehngga  tidak  bisa  teramati  pada  518  nm  yang merupakan panjang gelombang DPPH. Karena itu pengamatan  dilakukan  pada  tiga  panjang gelombang  (518  ±  10)nm  yaitu  508  nm,  518  nm, dan  528  nm.  Cara  perhitungan  absorbansi menggunakan  tiga  panjang  gelombang  adalah sebagai berikut (Irwan, 2016) :
: 𝐴𝑏𝑠 518 𝑛𝑚 − 𝐴𝑏𝑠 508 𝑛𝑚 + 𝐴𝑏𝑠 528 𝑛𝑚
2 = ΔA Pengukuran Absorbansi Sampel dan Pembanding
Senyawa (1a) dan senyawa (1b) diuji dengan konsentrasi  awal  berturut-turut  26000  ppm,  dan 5000  ppm.  Kemudian  keduanya  diencerkan berderet sebanyak 7x. Pembanding yang digunakan  adalah  Kurkumin;  sedangkan  Vitamin C  dipakai  untuk  validasi  metode  uji  antioksidan. Kurkumin  dan  vitamin  C  dibuat  dengan konsentrasi  berturut-turut  500  ppm  dan  100 ppm,  kemudian  diencerkan  berderet  sebanyak  7 kali.
Masing-masing  konsentrasi  baik  senyawa hasil  sintesis  maupun  pembanding  dipipet sebanyak  150  µl  ke  dalam  microplate  dan ditambahkan larutan induk DPPH dengan volume terpilih. Setelah itu diinkubasi selama 30 menit di tempat  gelap  lalu  dilakukan  pembacaan  serapan (absorbansi)  dengan  menggunakan  3  panjang gelombang yaitu 508 nm, 518 nm, dan 528 nm.
Penentuan Nilai IC 50 Kemampuan  yang  dimiliki  oleh  suatu  zat dalam  meredam  radikal  bebas  disebut  sebagai aktivitas  antioksidan  yang  dinyatakan  dalam satuan  persen.  Perhitungan  persen  aktivitas
antioksidan  dinyatakan  sebagai  berikut  (Jun et al. , 2003):

## 𝐴𝑏𝑠 𝑏𝑙𝑎𝑛𝑘𝑜 − 𝐴𝑏𝑠 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 (𝐷𝑒𝑙𝑡𝑎 𝐴)
𝐴𝑏𝑠 𝑏𝑙𝑎𝑛𝑘𝑜 X 100
Sedangkan  konsentrasi  yang  dibutuhkan  untuk dapat  meredam  radikal  bebas  sebanyak  50% disebut  dengan  nilai  IC 50 .  Perhitungan  nilai  IC 50 adalah : 50 = 𝑎 + 𝑏𝑥 , dimana nilai a dan b didapat dari nilai regresi antara konsentrasi senyawa yang digunakan  dengan  %  aktivitas  antioksidan  yang dihasilkan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Sintesis turunan Dibenzalaseton
Pada  penelitian  ini  diperoleh  hasil  sintesis berupa  padatan.  Senyawa  (1a)  serbuk  berwarna kuning  pusat  sedangkan  senyawa  (1b)  berwarna coklat seperti tampak pada Gambar 2.
Gambar 2. Senyawa Dibenzalaseton (1a) dan 4,4’ -dinitrodibenzalaseton (1b).

## Senyawa Dibenzalaseton (1a)
Senyawa  dibenzalaseton  yang  terbentuk dari  hasil  sintesis  berupa  serbuk  padatan berwarna  kuning  pucat  dan  berbau  khas;  dengan rata-rata  rendemen  sebesar  92,3  ±  4,83  %. Berdasarkan  hasil  pengujian  titik  leleh  didapat hasil  rata-rata  rentang  titik  leleh  yaitu  107  - 109 O C. Hasil  eluasi  dengan  3  fase  gerak  berbeda memberikan noda tunggal dengan Rf berbeda dari senyawa awal. Harga Rf tersebut adalah Rf = 0,40 (heksana: etil asetat = 19:1); Rf = 0,67 (heksana :
(1a)
(1b)
etil asetat (17:5, v/v); dan Rf = 0,74 (heksana : etil asetat (17:8, v/v).
Spektrum  IR  senyawa  (3a)  yang  dibuat dengan  metode  pellet  KBr  menunjukkan  adanya gugus benziliden yaitu ikatan C=C (1591 dan 1447 cm -1 ) dan C sp2 -H (3052 cm -1 ) cincin benzena; C=O (keton α,β -tak jenuh) (1651 cm -1 ).
Senyawa 4,4’ -dinitrodibenzalaseton (1b) Senyawa  4,4’ -dinitrodibenzalaseton  berupa padatan  berwarna  coklat,  tidak  berbau,  larut dalam  aseton;  asam  asetat  glasial;  dan  DMSO, sedikit larut dalam etanol; metanol; dan anhidrida asetat, tidak larut dalam air; kloroform; eter; dan etil  asetat.  Persentase  rendemen  hasil  sintesis adalah 96,70 ± 1,88%).
Hasil  eluasi  dengan  3  fase  gerak  berbeda menunjukkan  noda  tunggal,  masing-masing dengan Rf = 0,53 (aseton : heksana (1,5:3,5, v/v); Rf  =  0,60  (aseton  :  heksana  (2:3,  v/v),  dan  Rf  = 0,97 (aseton : etil asetat (2:3, v/v).
Identifikasi  inframerah  senyawa  4,4 ’ - dinitrodibenzalaseton  ditunjukkan  pada  Gambar 3. Spektrum IR senyawa (1b) yang dibuat dengan metode  pellet  KBr  menunjukkan  adanya  ikatan C=C  benzena  (1605  dan  1458  cm -1 )  dan  C sp2 -H (3082  cm -1 )  aromatis;  C=O  keton  terkonjugasi (1651  cm - 1),  bensena  tersubstitusi  trans  (852  cm - 1 );  N=C-H  imina  (2985  cm -1 )  serta  adanya  gugus NO 2 (1347 dan 1519 cm -1 ).
Gambar 3. Spektrum inframerah senyawa 4,4’ -dinitrodibenzalaseton.
Perbedaan  antara  senyawa  hasil  sintesis dengan senyawa awal ditunjukkan dengan adanya gugus  keton α,β -tak-jenuh  pada  senyawa  hasil sintesis  sedangkan  senyawa  4-nitrobenzaldehida tidak  memiliki  gugus  keton α,β -tak-jenuh melainkan  memiliki  ikatan  C-H  yang  merupakan tanda spesifik adanya gugus aldehid. Gugus keton (C=O)  ditunjukkan  dengan  munculnya  spektrum inframerah  pada  bilangan  gelombang  1604  cm -1 . Perbedaan  juga  ditunjukkan  dengan  adanya ikatan  C=C  (alkena)  yang  dimiliki  oleh  senyawa hasil  yang  ditunjukkan  dengan  munculnya spektrum  inframerah  pada  bilangan  gelombang 1648 cm -1 . Adanya gugus fenil dibuktikan dengan
adanya  ikatan  C-H  sp 2 aromatis  yang  muncul pada  bilangan  gelombang  3082  cm -1 dan  adanya ikatan  C=C  aromatis  yang  muncul  pada  bilangan gelombang 1629 dan 1458 cm -1 . Gugus nitro (NO 2 ) dibuktikan dengan
munculnya spektrum inframerah  pada  bilangan  gelombang  1347  dan 1519 cm -1 . Sintesis turunan dibenzalaseton
berlangsung  melalui  reaksi  kondensasi Claisen- Schmidt yang  terdiri  dari  3  tahapan  reaksi  yaitu pembentukan  ion  enolat,  adisi  nukleofilik terhadap gugus karbonil yang dilanjutkan dengan reaksi  eliminasi.  Mekanisme  reaksinya  terlihat pada Gambar 4.
Adanya  substituen  4-NO 2 memperlambat terjadinya  reaksi  adisi  nikleofilik  pada  karbonil. Hal ini disebabkan gugus 4-NO 2 akan menurunkan  rapatan  elektron  pada  cincin benzena  melalui  resonansi  sehingga  mempersulit terjadinya  polarisasi  gugus  C=O.  Akibatnya  ion enolat  sebagai  nukleofil  juga  lebih  lambat menyerang gugus C=O (McMurry, 2016) .
Hal  ini  bisa  teramati  berdasarkan  lama reaksi  yang  dilakukan  pada  penelitian  ini;  pada sintesis (1a) memerlukan waktu pengadukan 1 jam sedangkan  sintesis  (1b)  harus  diaduk  selama  3 jam  dengan  persen  hasil  sintesis  tidak  jauh berbeda.

## Uji Aktivitas Antioksidan
Uji  aktivitas  antioksidan  diawali  dengan penentuan  panjang  gelombang  DPPH  yang terpilih;  yaitu  pada  518  nm  dengan  absorbansi terpilih  sebesar  1,1528  pada  pemipetan  14  µl. Pembacaan  blanko  positif  dilakukan  dengan menggunakan  tiga  panjang  gelombang  yaitu  508 nm,  518  nm,  dan  528  nm  karena  senyawa  hasil sintesis  merupakan  senyawa  yang  berwarna  dan dapat  memberikan  serapan  pada  panjang gelombang  518  nm  yang  akan  mempengaruhi hasil pembacaan.
Senyawa  uji  (senyawa  (1a),  senyawa  (1b), kurkumin  dan  vitamin  C)  hasil  pengenceran sesuai prosedur kerja diuji aktivitas antioksidannya  dengan  penambahan  DPPH.  Dari delapan  konsentrasi  dipilih  4  konsentrasi  agar persamaan garis  mendekati linier.  Dilakukan tiga kali replikasi dan nilai IC 50 untuk masing-masing replikasi I, II, dan III,  kemudian ditentukan nilai rata-ratanya.  Grafik  konsentrasi  vs  %  aktivitas antioksidan  dari  ke-empat  senyawa  uji  dapat dilihat pada Gambar 5a-d. Berdasarkan persamaan  garis  dapat  ditentukan  nilai  IC 50. Dari persamaan  garis  tersebut,  ditentukan  nilai  IC 50 senyawa uji seperti yang tercantum pada Tabel 1.
Vitamin  C  digunakan  sebagai  pembanding untuk mengetahui metode DPPH yang digunakan telah valid dan dapat diterapkan dalam penentuan aktivitas antioksidan senyawa hasil sintesis. Lung dan Destiani (2017) yang telah melakukan review artikel mengenai uji aktivitas antioksidan vitamin
4000.0 3000 2000 1500 1000 450.0 35.0 40 45 50 55 60 65 70 75.0 cm-1 %T 3746,54 3460,43 3109,57 3082,58 2965,60 2935,60 2856,61 2454,66 2295,68 1686,64 1648,59 1629,59 1604,53 1560,65 1519,48 1458,68 1412,67 1347,39 1189,65 1178,65 1109,64 1013,69 987,68 852,60 833,65 755,67 742,67 702,63 656,69 647,69 630,69 543,68 480,69
A,  C,  dan  E  dengan  metode  DPPH  menyatakan bahwa  vitamin  C  tergolong  ke  dalam  senyawa antioksidan  yang  sangat  kuat  karena  memiliki rata-rata nilai IC 50 sebesar 14,79 ppm atau sebesar 0,084  mM,  sedangkan  pada  uji  aktivitas
antioksidan  kali  ini  rata-rata  nilai  IC 50 dari senyawa  vitamin  C  adalah  sebesar  0,0846  mM. Hal  ini  membuktikan  bahwa  metode  DPPH  yang digunakan telah valid dan dapat diterapkan dalam pengujian aktivitas antioksidan.
Gambar 4. Mekanisme reaksi kondensasi Claisen-Schmidt .
Aktivitas  antioksidan  dari  Kurkumin  dapat terjadi  melalui  dua  jalur,  yang  pertama  yaitu akibat  adanya  gugus  OH  fenolik  dan  yang  kedua terjadi akibat adanya gugus gugus α,β -tak-jenuh. Pada  senyawa  hasil  sintesis  aktivitas  antioksidan terjadi  hanya  melalui  satu  jalur  yaitu  akibat adanya  gugus  karbonil α,β -tak-jenuh. Hal  ini menyebabkan nilai IC 50 dari 4,4’ - dinitrodibenzalaseton  lebih  rendah  dibanding dengan  IC 50 senyawa  Kurkumin.  Ditinjau  dari struktur, pada kurkumin terdapat dua buah gugus karbonil α,β -tak-jenuh  sedangkan  pada  turunan Dibenzalaseton  hanya  terdapat  satu  gugus karbonil α,β -tak-jenuh. Dari  nilai  IC 50 yang  didapat  dari  uji aktivitas  antioksidan  diketahui  bahwa  aktivitas antioksidan  dari  senyawa  Dibenzalaseton  lebih
rendah dibanding dengan senyawa 4,4’ - dinitrodibenzalaseton  yang  dibuktikan  dengan nilai IC 50 senyawa 4,4’ -dinitrodibenzalaseton yang lebih  kecil  daripada  senyawa  Dibenzalaseton. Nilai  IC 50 yang  semakin  kecil  menunjukkan semakin  besarnya  kemampuan  senyawa  dalam meredam  radikal  bebas.  Hal  ini  disebabkan karena  adanya  gugus  Nitro  pada  senyawa  4,4’ - dinitrodibenzalaseton menyebabkan bentuk terkonjugasi  semakin  panjang  sehingga  elektron bebas  dapat  dengan  mudah  terlepas.  Ketika senyawa 4,4’ -dinitrodibenzalaseton bertemu dengan  DPPH  yang  berperan  sebagai  radikal bebas,  senyawa  4,4’ -dinitrodibenzalaseton  akan menyumbangkan  satu  elektronnya  sehingga DPPH menjadi tidak aktif.
a. Senyawa (1a)
b. Senyawa (1b) c. Kurkumin d.  Vitamin C
y = 0,0024x + 15,866
y = 0,0028x + 2,9287 y = 0,003x + 2,3172 0.0000 20.0000 40.0000 60.0000 80.0000 100.0000 0 5000 10000 15000
20000 25000 30000 % Ak tiv ita s Konsentrasi (ppm) REP 1 REP 2 REP 3 Linear (REP 1) Linear (REP 2) Linear (REP 3) y = 0,0523x + 30,931 y = 0,0705x + 8,1283 y = 0,0851x - 4,3497 0 20 40 60 80 100 120 0 200 400 600 800 1000 1200 1400 % Ak tiv ita s Konsentrasi (ppm) REP 1 REP 2 REP 3 Linear (REP 1) Linear (REP 2) Linear (REP 3) y = 1,2522x + 14,606 y = 1,2706x + 16,604 0.0000 20.0000 40.0000 60.0000 80.0000 100.0000 120.0000 0 20 40 60 80 % Ak tiv ita s Konsentrasi (ppm) REP 1 REP 2 Linear (REP 1) Linear (REP 2) y = 2,8985x + 6,778 y = 3,1249x + 3,4535 0.0000 20.0000 40.0000 60.0000 80.0000 100.0000 0 5 10 15 20 25 30 % Ak tiv ita s konsentrasi (ppm) REP 1 REP 2 Linear (REP 1) Linear (REP 2)
Tabel 1. Nilai IC 50 senyawa (1a), (1b), Kurkumin, dan Vitamin C Bahan Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi 3 Rata-rata Senyawa (1a) 0,059x10 3 mM 0,071x10 3 mM 0,068x10 3 mM 0,066x10 3 mM Senyawa (1b) 0,0011x10 3 mM 0,0018x10 3 mM 0,0019x10 3 mM 0,0016x10 3 mM Kurkumin 0,076 mM 0,071 mM 0,074 mM Vitamin C 0,0846 mM 0,0846 mM 0,0846 mM

## KESIMPULAN
Dari  hasil  penelitian  yang  telah  dilakukan dapat ditarik dua buah kesimpulan: (1) Senyawa 4,4’ -dinitrodibenzalaseton disintesis melalui reaksi kondensasi Claisen-Schmidt dengan perbandingan jumlah  senyawa  4-nitrobenzaldehida  dan aseton  sebesar  2:1  mEq.  Waktu  yang diperlukan  untuk  mendapatkan  persentase rendemen  yang  maksimal  adalah  3  jam dengan rendemen sebesar 96,70%.
(2) Senyawa  4,4’ -dinitrodibenzalaseton  hasil sintesis memiliki nilai IC 50 dengan rata-rata sebesar 0,0016x10 3 mM pada saat dilakukan  uji  aktivitas  antioksidan  dengan metode  DPPH.  Substituen  Nitro  dapat membuat  aktivitas  antioksidan  meningkat ditinjau  dari  rata-rata  nilai  IC 50 senyawa 4,4’ -dinitrodibenzalaseton  yaitu  sebesar 0,0016x10 3 mM  yang  memiliki  nilai  lebih kecil  dibanding  dengan  rata-rata  nilai  IC 50 senyawa  Dibenzalaseton  yaitu  sebesar 0,066x10 3 mM.

## DAFTAR PUSTAKA
Astuti, N. Y. 2009. Uji Aktivitas Penangkap Radikal DPPH oleh  Analog  Kurkumin  Monoketon  dan  N-Heteroalifatik Monoketon. Skripsi .  Sarjana  Farmasi.  Universitas Muhammadiyah Surakarta. Surakarta.
Handayani,  S.,  Matjeh,  S.,  Anwar,  C.  and  Atun  ,  S.  2010. Synthesis  and  Activity  Test  as  Antioxidant  of  Two Hydroxydibenzalacetones. PACCON. Thailand.
Irwan, A. 2016. Kajian Validitas Analisis Las dengan Cara Tiga  Panjang  Gelombang. Jurnal  Sains  dan  Terapan Kimia . 3(2): 184-200.
Jun, M., Fu, H. Y., Jong, J., Wan, X., Yang, C. S., and Ho, C.  T.  2003.  Comparison  of  Antioxidant  Activities  of Isoflavones  from  Kudzu  Root  ( Pueraria  lobata  Ohwi ), Journal of Food Science . 68(6): 2117-2122.
Lung,  J.  S.  K.  dan  Destiani,  D.  P.,  2017,  Uji  Aktivitas Antioksidan  Vitamin  A,  C,  E  dengan  Metode  DPPH, Farmaka . 15(1):53-62.
McMurry,  J.  2016. Organic  Chemistry . 9th  ed.  Physical Science. Canada.
Raju,  K.,  Vinod,  J.  and  Mulukuri,  S.  2017.  Synthesis  and Anti-Oxidant  Activity  of  Dibenzalketones. International Journal  of  Research  in  Pharmacy  and  Chemistry . 7(4): 585-606.
Rayar,  A.,  Veitia,  M.  S.  I.  and  Ferroud,  C.  2015.  An Efficient  and  Selective  Microwave-assisted  Claisen- Schmidt  Reaction  for  The  Synthesis  of  Functionalized Benzalacetones, SpringerPlus . 4(1): 8-12.
Sugiharto,  Ariff,  A.,  Ahmad,  S.  dan  Hamid,  M.  2012. Efektivitas  Kurkumin  sebagai  Antioksidan  dan  Inhibitor Melanin  pada  Kultur  Sel  B16F1. Journal  of  Biological Researches . 17(2): 173-176.
Susanto,  E.  2019. Peptida  Bioaktif  sebagai  Antioksidan Eksplorasi pada Ceker Ayam . DEEPUBLISH. Yogyakarta.
Yuslianti,  E.  R.  2018. Pengantar  Radikal  Bebas  dan Antioksidan . CV. Budi Utama: Yogyakarta.