KARTIKA: JURNAL ILMIAH FARMASI , Desember 2023, 8(2), 67-76 p-ISSN 2354-6565 / e-ISSN 2502-3438 DOI: 10.26874/kjif.v8i2.650
POTENSI EKSTRAK JAHE MERAH ( Zingiber officinale Roscoe var. sunti ), PEGAGAN ( Centella asiatica (L.) Urb.) DAN  KAYU MANIS ( Cinnamomum Burmanni (C.Ness & T.Ness)) SEBAGAI HERBAL PENUNDA KEPIKUNAN
POTENTIAL EFFECT OF RED GINGER (Zingiber officinale Roscoe var. sunti), GOTU KOLA (Centella asiatica (L.) Urb.) ) AND CINNAMON (Cinnamomum Burmanni (C.Ness & T.Ness) ) AS HERB FOR DEMENTIA PREVENTION
Gerardine Emeralda 1 , Soraya Riyanti 1 *, Yenni Karlina 1
1 Kelompok Keilmuan Biologi Farmasi, Fakultas Farmasi, Universitas Jenderal Achmad Yani Cimahi, Indonesia 40285
*Corresponding author email : anti.piper81@gmail.com

## Abstrak
Demensia atau kepikunan merupakan sindrom yang disebabkan oleh gangguan di otak. Sebanyak  60-70%  demensia  disebabkan  oleh  penyakit  alzheimer.  Penyakit  alzheimer disebabkan  oleh  adanya  penurunan  asetilkolin  (ACh)  karena dihidrolisis  oleh  enzim asetilkolinesterase  (AChE).  Penghambatan  aktivitas  enzim  AChE  digunakan  sebagai terapi penyakit alzheimer. Tanaman herbal memiliki potensi untuk menghambat enzim asetilkolinesterase karena memiliki banyak kandungan kimia. Tujuan dari penelitian ini adalah menentukan aktivitas peghambatan enzim AChE dari 3 jenis tumbuhan yang ada di Indonesia yaitu jahe merah ( Zingiber officinale Roscoe var. sunti ), pegagan ( Centella asiatica (L.) Urb. ) , dan kayu manis ( Cinnamomum burmanni (C.Ness & T.Ness)) serta kombinasi  masing-masing  ekstrak.  Proses  ekstraksi  simplisia  menggunakan  metode maserasi dalam etanol 96%. Pengujian aktivitas penghambat  asetilkolinesterase  (AChE) menggunakan  metode Ellman .  Hasil  penelitian  menunjukkan  ekstrak  etanol  herba pegagan, dan kulit kayu manis berturut- turut sebesar 818,011 μg/mL dan 186,737 μg/mL, sedangkan ekstrak etanol jahe merah memiliki nilai IC 50 > 1000 μg/mL. Nilai IC 50 zat aktif  donepezil  adalah 0,277  μg/mL.  Ekstrak  etanol kulit  kayu  manis  menunjukkan aktivitas penghambatan enzim AChE paling baik. Kombinasi ekstrak rimpang jahe merah dan  kulit  kayu  manis  dengan  nilai IC 50 293,166 μg/mL lebih  lemah  dari  ekstrak tunggalnya, diduga sifat kombinasi kedua ekstrak tersebut antagonis. Ekstrak etanol kulit kayu manis paling berpotensi untuk dikembangkan lebih lanjut sebagai  herbal  penunda kepikunan.
Kata kunci : Kepikunan, jahe merah, pegagan, kayu manis.

## Abstract
Dementia is a syndrome caused by a variety of brain disorder. About 60-70% dementia is caused  by  alzheimer  disease. Decrease  in  acetylcholine  level  led  by  the  hydrolysis  of acetylcholinesterase  enzym  (AChE)  has  been  the  common  cause of Alzheimer disease. Inhibitory activity of AChE enzyme is used in the alzheimer disease therapy. Herbal plants have the potential as the AChE inhibitor because it contains a lot of chemical compounds. This study aims at studying the inhibitory activity of acetylcholinesterase enzyme of three plants existing in Indonesia, namely Red Ginger (Zingiber officinale Roscoe var. sunti),
KARTIKA: JURNAL ILMIAH FARMASI , Desember 2023, 8(2), 67-76 DOI: 10.26874/kjif.v8i2.650
Gotu Kola (Centella asiatica (L.) Urb. ) and Cinnamon (Cinnamomum burmanni (C.Ness & T.Ness) ) as well as the combination of their respective extracts. Simplicia was extracted with maceration method using ethanol 96%. AChE inhibitory activity was tested using Ellman method. The results show that IC 50 value of ethanolic extracts of Gotu Kola and Cinnamon herbs are 818.011 μg/mL and 186.737 μg/mL respectively, while for red ginger is > 1000 μg/mL. The IC 50 value of donepezil active substance is 0.277 μg/mL. Ethanolic extract  of  Cinnamon  was  found  to  have  the  best  inhibitory  activity  of  AChE  enzyme. Combined extracts of red ginger and cinnamon with the IC 50 value of 293.166 μg/mL has been the most effective inhibitor of AChE enzyme. Cinnamon  ethanolic  extract  has  the greatest potential for further development in the herbal extracts for dementia prevention.
Keywords : dementia, red ginger, gotu kola, cinnamon.

## PENDAHULUAN
Daya ingat merupakan salah satu hal terpenting dalam kehidupan manusia sebagai  penunjang  untuk  melakukan aktivitas sehari-hari. Semakin bertambahnya usia, ada gangguan umum yang  sering  dialami  manusia  salah satunya adalah  demensia (Gustri, 2019). Demensia  merupakan  suatu  sindrom progresif yang disebabkan oleh berbagai penyakit  penyakit  otak  yang  dapat mempengaruhi  daya  ingat , pemikiran, perilaku dan kemampuan untuk melakukan aktivitas sehari-hari. Meskipun  demensia  sering  menyerang orang tua, akan tetapi hal tersebut bukan bagian  normal  dari  penuaan  (WHO, 2012).
Angka  kejadian  demensia  akan terus  bertambah,  jumlah  total  penderita demensia  di  seluruh  dunia  akan bertumbuh  hampir  2  kali  lipat  setiap  2 tahun. Hasil penelitian juga menyebutkan bahwa akan ada satu kasus baru disetiap empat detik. Sebanyak 60-
70% demensia disebabkan oleh penyakit alzheimer  (WHO,  2012).  Penyakit alzheimer  disebabkan  oleh  penurunan jumlah asetilkolin (ACh) pada otak atau adanya  peningkatan  aktivitas  enzim
asetilkolinesterase  (AChE)  (Liesener  et al., 2007). Enzim AChE berperan dalam pengaturan jumlah ACh pada saat proses transmisi  sinyal  di  otak  dengan  cara memecah ACh menjadi kolin dan asetat.
Aktivitas penghambatan enzim asetilkolinesterase  digunakan  sebagai pendekatan pada terapi penyakit alzheimer  yang  merupakan  penyebab utama  dari  demensia  atau  kepikunan (Gunawan,  Setiabudy,  Nafrialdi,  & Elysabeth,  2007;  Wiesner, Kříz, Kuca, Jun, & Koca, 2007).
Sebagian  besar  obat  penyakit alzheimer  adalah  penghambat  enzim asetilkolinesterase akan tetapi keberhasilan pengobatannya masih terbatas  karena  masih  adanya  efek samping  yang  dihasilkan  (Sharma, 2019). Indonesia merupakan negara yang kaya  akan  rempah-rempah.  Selain digunakan  untuk  sumber  makanan, tanaman  juga  digunakan  sebagai  obat tradisional.  Sebanyak  70%  populasi dunia masih mengandalkan herbal untuk menjaga kesehatannya dan banyak yang mengharapkan  adanya  efek  lebih  baik yang muncul dari dari kombinasi herbal (Che,  Wang,  Chow,  &  Lam,  2013). Sudah banyak   tanaman      yang     diuji
KARTIKA: JURNAL ILMIAH FARMASI , Desember 2023, 8(2), 67-76 DOI: 10.26874/kjif.v8i2.650
aktifvitas penghambatan enzim asetilkolinesterase karena memiliki banyak kandungan kimia yang potensial.
Senyawa  kimia  yang  memiliki  aktivitas penghambatan  enzim  AChE  adalah alkaloid,  flavonoid,  steroid,  saponin, terpenoid, polifenol, tanin, minyak atsiri (Bui  &  Nguyen,  2017;  Natarajan, Shunmugiah, & Kasi, 2013). Tujuan dari penelitian  ini  adalah  menguji  tanaman yang ada di Indonesia yaitu jahe merah, pegagan  dan  kayu  manis  serta kombinasinya terhadap aktivitas penghambatan  enzim  AChE  secara in vitro menggunakan  metode Ellman . Aktivitas  penghambatan  enzim  AChE yang diperoleh dapat dijadikan pendekatan  dalam  mengembangkan produk herbal penunda kepikunan.

## METODE PENELITIAN Bahan
Simplisia  rimpang  jahe  merah ( Zingiber  officinale Roscoe  var. sunti ), simplisia  herba  pegagan  ( Centella asiatica ) dan simplisia kulit kayu manis ( Cinnamomum Burmanni ) diperoleh dari Kebun  Tanaman  Obat  Bumi  Herbal Dago, Bandung.

## Tahapan Penelitian
Preparasi Ekstrak Pengujian Dilakukan  pegujian  standarisasi simplisia  dan  penapisan  fitokimia sebelum simplisia diolah menjadi ekstrak. Pembuatan  esktrak  etanol  dilakukan menggunakan metode maserasi. Ekstrak cair yang diperoleh kemudian dipekatkan dengan  menggunakan  alat  penguap vakum putar.
Uji Aktivitas Inhibitor Asetilkolinesterase Pengujian  aktivitas  inhibitor asetilkolinesterase menggunakan metode kromogenik  yang merujuk  pada  metode Ellman tahun  1961  dengan  sedikit modifikasi.  Bahan  yang  digunakan diantaranya  enzim  asetilkolinesterase (AChE) yang berasal dari Electrophorus electricus (C3389,  Sigma  Aldrich), substrat  asetiltiokolin  iodida  (ATCI) (A5751, Sigma Aldrich), 5- 5’ -dithiobis- 2-nitrobenzoic  acid  (DTNB)  (D8130, Sigma  Aldrich),  larutan  dapar  Tris-HCl 50 mM pH 8 dan donepezil HCl sebagai inhibitor asetilkolinesterase.
Ekstrak etanol ketiga tanaman uji dibuat  variasi  kosentrasi.  Dimasukkan 60 μL larutan  ekstrak  dan  20 μL AChE
0,26  U/mL  kedalam 96-microwell  plate kemudian  diinkubasi  selama  5  menit pada suhu 25 o C. Setelah itu,
ditambahkan  20 μL  ATCI  15 mM  dan diinkubasi kembali selama 15 menit pada suhu  25 o C.  Reaksi  enzimatis kemudian dihentikan  dengan  penambahan  100 μL DTNB  3  mM.  Absorbansi  sampel diukur  menggunakan Elisa reader pada panjang  gelombang  405  nm  (Balkis, Tran, Lee, & Ng, 2015; Nuria, Sukandar, Suganda, & Insanu, 2019). Aktivitas inhibitor asetilkolinesterase  dapat  diamati  secara visual dari warna larutan yang dihasilkan, semakin  bening  warna  kuning  yang dihasilkan  maka  aktivitas  inhibitor asetilkolinesterase semakin besar. Selanjutnya  dilakukan  perhitungan  % penghambatan  dengan  menggunakan rumus dibawah ini:
% 𝑃𝑒𝑛𝑔ℎ𝑎𝑚𝑏𝑎𝑡𝑎𝑛 = [𝐴𝑏𝑠.  𝑘𝑜𝑛𝑡𝑟𝑜𝑙 − 𝐴𝑏𝑠. 𝐵𝐿 − 1] − [𝐴𝑏𝑠.  𝑘𝑜𝑛𝑡𝑟𝑜𝑙 − 𝐴𝑏𝑠. 𝐵𝐿 − 2] [𝐴𝑏𝑠.  𝑘𝑜𝑛𝑡𝑟𝑜𝑙 − 𝐴𝑏𝑠. 𝐵𝐿 − 1] 𝑥 100% Keterangan: Abs.kontrol : Absorbasi untuk kontrol 100% aktivitas enzim (enzim + ATCI + DTNB) Abs.sampel : Absorbansi untuk aktivitas enzim dengan penghambatan (sampel+enzim+ATCI+DTNB) Abs BL-1 : Absorbansi blangko tanpa penghambat (enzim + DTNB) Abs BL-2 : Absorbansi blangko dengan penghambat (sampel + enzim + DTNB)

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pada  tahap  awal  penelitian, dilakukan pemeriksaan karakterisasi dan standarisasi simplisia untuk memastikan simplisia yang diuji memenuhi
standarisasi  yang  menjamin  kualitas simplisia.  Pemeriksaan  yang  dilakukan meliputi  pemeriksaan  makroskopis  dan mikroskopis, penentuan kadar air, kadar sari larut air dan larut etanol, kadar abu total.  Hasil  yang  diperoleh  kemudian dibandingkan dengan hasil yang terdapat
pada  literatur  rujukan  yang  digunakan yaitu Farmakope Herbal Indonesia (FHI, 2008). Simplisia jahe merah (a) berwarna putih kekuningan, berbau khas aromatis,  berbentuk  serbuk  yang  tidak terlalu  keras,  simplisia  pegagan  (b) berwarna  hijau,  berbau  aromatis  lemah, berbentuk  serbuk  halus  dan  simplisia kayu  manis  (c)  berwarna  coklat kekuningan,  berbau  khas  aromatis  dan berbentuk serbuk keras. Hasil  pengamatan  tersebut sesuai dengan yang tertutulis dalam FHI. Hasil pengamatan  makroskopis  dapat  dilihat pada Gambar 1.
Gambar 1. Hasil pengamatan maksroskopis simplisia uji: Simplisia jahe merah (a), simplisia pegagan (b) dan simplisia kayu manis (c).
Fragmen pengenal yang ada pada jahe  merah  adalah  butir  pati,  pada pegagan adalah stomata jenis anomositik dan  pada  kayu  manis  adalah  parenkim
yang  mengandung  sel  minyak  (Depkes
RI, 2008). Pada pengamatan mikroskopis didapatkan  fragmen  pengenal  yang sesuai  dengan  FHI.  Hasil  pengamatan
KARTIKA: JURNAL ILMIAH FARMASI , Desember 2023, 8(2), 67-76 DOI: 10.26874/kjif.v8i2.650
mikroskopis  dari  fragmen  pengenal ketiga  tanaman  uji  dapat  dilihat  pada
Gambar 2.
Gambar 2. Hasil pengamatan mikroskopis simplisia uji, (a) butir pati jahe merah, (b) Stomata tipe anomositik pegagan, dan (c) parenkim kayu manis.
Hasil  pemeriksaan  standarisasi simplisia  berikutnya  dapat  dilihat  pada Tabel 1. Simplisia  yang  diperoleh  juga diuji kandungan bahan aktifnya melalui  proses  penapisan  fitokimia. Kandungan bahan aktif yang terkandung dalam simplisia dapat dilihat pada Tabel 2. Tabel 1. Hasil pemeriksaan standarisasi simplisia. Parameter Sampel Hasil (%) Syarat Mutu (%) (Depkes RI, 2008) Kadar air (v/b) Jahe merah 5 ≤ 10 Pegagan 5 ≤ 11 Kayu manis 5 ≤ 12,5 Kadar sari larut air  (b/b) Jahe merah 16,480 ± 1,005 ≥ 15,6 Pegagan 27,840 ± 0,950 ≥ 28,3 Kayu manis 17,149 ± 1,587 ≥ 4,0 Kadar sari larut etanol (b/b) Jahe merah 7,891 ± 0,812 ≥ 4,3 Pegagan 26,000 ± 0.276 ≥ 2,1 Kayu manis 23,040 ± 0,215 ≥ 16,0 Kadar abu total (b/b) Jahe merah 4,133 ± 0,086 ≤ 5,0 Pegagan 8,076 ± 0,150 ≤ 18,05 Kayu manis 2,438 ± 0,103 ≤ 10,5 Ekstraksi dilakukan
menggunakan  metode  maserasi  untuk mengurangi  kerusakan  bahan aktif  yang tidak tahan panas. Setelah ekstrak etanol didapatkan,  dilakukan  pengukuran  % rendemen ekstrak dan bobot jenis ekstrak (Tabel  3).  Ekstrak  etanol  yang
didapatkan  kemudian  dipantau  kembali kandungan  bahan  aktifnya  melalui penapisan  fitokimia  sebelum  digunakan pada  pengujian.  Pemantauan  tersebut bertujuan  untuk  melihat  senyawa  aktif apa  saja  yang  masih  terkandung  pada sampel setelah melewati proses ekstraksi
yang  diperkirakan  memiliki  aktivitas dalam  pengujian  penghambatan  enzim asetilkolinesterase. Hasil penapisan fitokimia  untuk  ketiga  ekstrak  dapat dilihat pada Tabel 2. Tabel 2 . Hasil penapisan fitokimia. Golongan Senyawa Jahe Merah Pegagan Kayu Manis S E S E S E Alkaloid - - - - - - Tanin - - + - + + Polifenol + + + + + + Flavonoid + + + + + + Kuinon + + + + + + Saponin - - + - + - Steroid dan Triterpenoid + + + + + - Monoterpenoid dan Seskuiterpenoid + + + - + +
Keterangan : S=Sampel, E=Ekstrak
Tabel 3. Hasil pengukuran rendemen dan bobot jenis ekstrak etanol sampel uji. Sampel Rendemen ekstrak (%) Bobot Jenis (g/mL) Ekstrak etanol jahe merah 18 0,809 Ekstrak etanol pegagan 43,5 0,809 Ekstrak etanol kayu manis 52 0,817
Tabel 4. Nilai IC 50 sampel uji Sampel IC 50 (μg/mL) Donepezil HCl 0,278 Jahe merah >1000 Pegagan 818,011 Kayu manis 186,737 Jahe merah + pegagan ( kombinasi A) 555,139 Jahe merah + kayu manis (kombinasi B) 293,166 Pegagan + kayu manis (kombinasi C) 349,792 Jahe merah + pegagan + kayu manis (kombinasi D) 643,917 Ekstrak  etanol  dari  ketiga tanaman dan kombinasinya diuji aktivitas penghambatan enzim AChE menggunakan metode Ellman. Donepezil HCl  digunakan  sebagai  pembanding dalam pengujian aktivitas penghambatan enzim AChE. Tujuan digunakan pembanding  adalah  untuk  validasi metode  yang  digunakan.  Hasil IC 50 dari pembanding dan sampel uji ditampilkan
KARTIKA: JURNAL ILMIAH FARMASI , Desemeber 2023, 8(2), 67-76 DOI: 10.26874/kjif.v8i2.650
pada Tabel 4. Suatu bahan dinyatakan berpotensi  sebagai  inhibitor  AChE  jika nilai IC 50 yang dihasilkan lebih kecil dari 1000 μg/mL (Nuria et al., 2019). Ekstrak dinyatakan memiliki potensi yang tinggi sebagai penghambat AChE jika IC 50 < 20 μg/mL , potensi sedang pada 20 < IC 50 < 200 μg/mL dan potensi rendah pada 200 < IC 50 <  1000  μg/mL  (Dos  Santos, Gomes,  Pinto,  Camara,  &  De  Andrade Paes,  2018).  Data  hasil  pengujian aktivitas  penghambatan  enzim  AChE menunjukkan  bahwa  hanya  ekstrak
etanol  jahe  merah  yang  tidak  memiliki aktivitas  penghambatan  enzim  AChE karena memiliki nilai IC 50 >1000 μg/mL. Pada  penelitian  terdahulu  ekstrak  air rimpang  jahe  putih  dan  rimpang  jahe merah  menunjukkan  kedua  rimpang tersebut memiliki aktivitas penghambatan  enzim  AChE  serta  hasil kombinasi  kedua  jenis  jahe  tersebut menghasilkan  efek  sinergis  (Oboh, Ademiluyi, & Akinyemi, 2012). Ekstrak hidro alkohol Centella asiatica juga sudah diteliti dapat menghambat 50% aktivitas AChE pada konsentrasi 100- 150 μg/mL (Mukherjee, Kumar, & Houghton, 2007). Adanya  perbedaan  nilai  aktivitas penghambatan bila dibandingkan dengan penelitian  ini,  hal  tersebut  bisa disebabkan oleh perbedaan pelarut yang digunakan dalam proses ekstraksi.
Jika  diurutkan  dari  yang  paling berpotensi  sebagai  penghambat  enzim AChE  berdasarkan  nilai IC 50 nya,  kayu manis memiliki potensi yag paling besar kemudian  disusul  dengan  kombinasi  B, kombinasi C, kombinasi A, kombinasi D dan  pegagan  tunggal.  Senyawa  kimia yang  memiliki  aktivitas  penghambatan enzim AChE adalah alkaloid, flavonoid, steroid,  saponin,  terpenoid,  polifenol, tanin, esensial oil (Bui & Nguyen, 2017; Natarajan  et  al.,  2013).  Pada  penelitian ini, senyawa yang diduga berperan dalam menghasilkan aktivitas sebagai inhibitor AChE adalah tanin, polifenol, flavonoid, steroid, terpenoid dan minyak atsiri. Data hasil  penapisan  fitokimia  menunjukkan bahwa  ketiga  ekstrak  mengandung flavonoid.
Sejumlah flavonoid telah diisolasi dari  tumbuhan  untuk  dilihat  potensi penghambatan  AChE  nya.  Flavonoid
yang diisolasi dari Syzygium samarangense  yaitu  senyawa  2′,4′ - dihidroksi- 6′metoksi - 3′,5′ -dimetil- dihidrokalkon  menunjukkan  aktivitas penghambatan sangat besar yaitu 98,5% pada konsentrasi 0,25 mM (Khan, Marya, Amin,  Kamal,  &  Patel,  2018).  Jenis flavonoid  lain  yang  memiliki  potensi sebagai penghambat enzim AChE adalah quersetin yang didapatkan dari Agrimonia  pilosa  dengan  nilai IC 50 sebesar  19,8  μM  (Jung  &  Park,  2007). Ekstrak  etanol  kayu  manis  memiliki aktivitas  yang  paling  baik  jika dibandingan dengan ekstrak tanaman lain karena  memiliki  nilai IC 50 sebesar
186,737  μg/mL.  Senyawa  yang  diduga berperan aktif dalam proses penghambatan  enzim  AChE  pada  kayu manis  adalah  tanin  dan  minyak  atsiri yang  dimiliki  oleh  kayu  manis.  Hal tersebut didukung dengan data penapisan fitokimia  ekstrak  yang  diperoleh  yang menunjukkan  tanin  positif  pada  ekstrak etanol  kayu  manis  saja  dan  aroma  khas kayu  manis  pada  ekstrak  yang  dimiliki esktrak  etanol  kayu  manis.  Beberapa minyak atsiri juga telah diteliti  memiliki
KARTIKA: JURNAL ILMIAH FARMASI , Desember 2023, 8(2), 67-76
DOI: 10.26874/kjif.v8i2.650 aktivitas  penghambatan  AChE  yaitu minyak atsiri dari Cinnamomum zeylanicum,  Aframomum  melegueta yaitu  sebesar  45,88  dan  28,97  μg/mL (Estevam Ribeiro  et al., 2019; Owokotomo,  Ekundayo,  Abayomi,  & Chukwuka, 2015). Pada pengujian kombinasi tanaman  hanya  kombinasi  A  yang menunjukkan adanya efek sinergis. Efek sinergis  dapat  diartikan  jika  nilai kombinasi  antara  satu  atau  lebih komponen lebih baik dibandingkan nilai tunggalnya  (Zhou  et  al.,  2016).  Hal tersebut dilihat dari nilai IC 50 jahe merah yaitu IC 50 >1000 μg/mL, akan tetapi bila jahe  merah  dikombinasikan  dengan pegagan maka aktivitasnya menjadi lebih baik  dibandingkan  dengan aktivitas  dari jahe  merah  dan  pegagan  tunggal.  Pada pengujian  kombinasi  lainnya  tidak menghasilkan  aktivitas  yang  lebih  baik daripada  aktivitas  kayu  manis  tunggal. Hal  tersebut  bisa  terjadi  karena  dalam kombinasi  ekstrak  mengandung  banyak senyawa  kimia  sehingga  aktivitas  yang dihasilkan merupakan hasil dari interaksi dari senyawa-senyawa yang  ada.
Kemungkinan  interaksi  yang  muncul dalam kombinasi sampel yang digunakan bersifat  antagonis  (saling  meniadakan).
Sifat antagonis dapat diartikan bila hasil yang muncul dari kombinasi menghasilkan  nilai  yang  lebih  rendah (Borgert,  Borgert,  &  Findley,  2005). Meskipun  demikian,  kombinasi  ekstrak yang  dibuat  masih  memiliki  potensi untuk dikembangkan lebih lanjut sebagai penghambat  enzim  AChE  karena memiliki nilai IC 50 < 1000 μg/mL
KESIMPULAN
Hasil  penelitian  menunjukkan nilai IC 50 untuk  ekstrak  herba  pegagan, dan  kulit  kayu  manis  berturut-turut sebesar  818,011  μg/mL  dan  186,737 μg/mL,  sedangkan  ekstrak  jahe  merah memiliki nilai IC 50 > 1000 μg/mL. Nilai IC 50 zat  aktif  donepezil  adalah  0,277 μg/mL.  Ekstrak  etanol  kulit  kayu manis menunjukkan  aktivitas  penghambatan enzim  AChE  paling  baik.  Kombinasi ekstrak uji memberikan hasil yang lebih lemah bila dibandingkan dengan ekstrak kayu  manis,  diduga  dari  kombinasi sampel  uji  tersebut  terdapat  interaksi kimia yang menimbulkan efek antagonis. Berdasarkan hasil penelitian ini, ekstrak kayu  manis  berpotensi  dikembangkan sebagai  penghambat  asetilkolinesterase dan  memerlukan  pengujian  lebih  lanjut secara in vivo pada hewan coba.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Peneliti  mengucapkan  terima kasih  kepada  PT.  Indofood  Sukses Makmur Tbk. atas pendanaan penelitian yang diberikan melalui program
Indofood  Riset  Nugraha  tahun  2019- 2020.

## DAFTAR PUSTAKA
Balkis, A., Tran, K., Lee, Y. Z., & Ng, K., 2015.  Screening  Flavonoids  for Inhibition  of  Acetylcholinesterase
Identified  Baicalein  as  the  Most Potent Inhibitor. Journal of Agricultural Science , 7(9), 26 – 35.
Borgert, C. J., Borgert, S. A., & Findley, K. C., 2005. Synergism, antagonism, or additivity of dietary supplements: Application of theory to case studies .
Thrombosis  Research ,  117(1 – 2), 123 – 132.
KARTIKA: JURNAL ILMIAH FARMASI , Desember 2023, 8(2), 67-76 DOI: 10.26874/kjif.v8i2.650
Bui,  T.  T.,  &  Nguyen,  T.  H.,  2017. Natural product for the treatment of
Alzheimer’s  disease. Journal  of
Basic and Clinical Physiology and
Pharmacology , 28(5), 413 – 423. Che, C. T., Wang, Z. J., Chow, M. S. S., & Lam, C. W. K. (2013). Herb-herb combination for therapeutic enhancement  and  advancement: Theory, practice and future perspectives. Molecules ,  18(5),
5125 – 5141. Departemen Kesehatan Republik Indonesia, 2008. Farmakope Hebal Indonesia. Dos Santos, T. C., Gomes, T. M., Pinto, B.  A.  S.,  Camara,  A.  L.,  &  De Andrade  Paes,  A.  M.,  2018. Naturally occurring acetylcholinesterase  inhibitors  and their  potential  use  for  Alzheimer’s disease  therapy. Frontiers  in Pharmacology , 9(OCT), 1 – 14.
Estevam  Ribeiro,  P.  R.,  De  Carvalho
Neto, M. F., Chagas, E. A., Chagas,
P. C., Takahashi, J. A., De Melo, A.
C.  G.  R.,  De  Melo  Filho,  A.  A., 2019. Acetylcholinesterase inhibitory  potential  in  cinnamon seed oil (cinnamomum zeylanicum nees)  lauraceae  from  Roraima, Brazil. Chemical Engineering Transactions , 75(March), 361 – 366.
Gunawan,  S.  G.,  Setiabudy,  R., Nafrialdi,  &  Elysabeth.,  2007.
Farmakologi  dan  Terapi,  Edisi. Jakarta:  Departemen  Farmakologi dan Terapeutik, FKUI. Gustri, L., 2019. Hubungan Asupan Zat Gizi  dengan  Kejadian  Demensia. Journal  of  Nutrition  and  Health ,
7(2), 39 – 42.
Jung,  M.,  &  Park,  M.,  2007.
Acetylcholinesterase  inhibition  by flavonoids  from  Agrimonia  pilosa. Molecules , 12(9), 2130 – 2139. Khan, H., Marya, Amin, S., Kamal, M.
A., & Patel, S., 2018. Flavonoids as acetylcholinesterase inhibitors: Current  therapeutic  standing  and future  prospects. Biomedicine  and
Pharmacotherapy ,  101  (October
2017), 860 – 870.
Liesener,  A.,  Perchuc,  A.  M.,  Schöni, R.,  Schebb,  N.  H.,  Wilmer,  M.,  & Karst,  U.,  2007.  Screening  of acetylcholinesterase  inhibitors  in snake venom by electrospray mass spectrometry .  Pure  and  Applied Chemistry , 79(12), 2339 – 2349.
Mukherjee,  P.  K.,  Kumar,  V.,  & Houghton, P. J., 2007. Screening of Indian  Medicinal  Plants  for Acetylcholinesterase Inhibitory Activity. Phytother  Res ,  21(12),
1142 – 1145.
Natarajan,  S.,  Shunmugiah,  K.  P.,  &
Kasi,  P. D.,  2013.  Plants traditionally  used  in  age-related brain  disorders  (dementia):  An ethanopharmacological
survey.
Pharmaceutical  Biology ,  51(4),
492 – 523. Nuria, M. C., Sukandar, E. Y., Suganda, A.  G.,  &  Insanu,  M.,  2019. Aktivitas Inhibisi Asetilkolinesterase  Empat  Jenis Sayuran  Secara  in  Vitro.  JIFFK : Jurnal Ilmu Farmasi Dan Farmasi Klinik , 16(01), 43. Oboh, G., Ademiluyi, A., & Akinyemi, A., 2012. Inhibition of Acetylcholinesterase Activities and Some Pro-Oxidant  Induced   Lipid
KARTIKA: JURNAL ILMIAH FARMASI , Desember 2023, 8(2), 67-76
DOI: 10.26874/kjif.v8i2.650
Peroxidation  in  Rat  Brain  by  Two Varieties  of  Ginger  (Zingiber officinale). National  Center  of Biologycal Information . Owokotomo,  I.  A.,  Ekundayo,  O., Abayomi,  T.  G.,  &  Chukwuka,  A. V., 2015. In-vitro anti- cholinesterase  activity  of  essential oil  from  four  tropical  medicinal plants. Toxicology Reports , 2, 850 –
857. Sharma,  K.,  2019. Cholinesterase inhibitors as Alzheimer’s therapeutics (Review) . 1479 – 1487. WHO. 2012. Dementia, a public health priority . Wiesner, J., Kříz, Z., Kuca, K., Jun, D., & Koca, J., 2007. Acetylcholinesterases - The structural similarities and differences. Journal  of  Enzyme Inhibition and Medicinal Chemistry , 22(4), 417 – 424.
Zhou, X., Seto, S. W., Chang, D., Kiat, H.,  Razmovski-Naumovski,  V., Chan, K., & Bensoussan, A., 2016.
Synergistic  effects  of  Chinese herbal medicine: A comprehensive review of methodology and current research. Frontiers in Pharmacology , 7, 1 – 16