Pengaruh Ekstrak Etanol Daun Pegagan ( Centella asiatica (L.) Urban) Terhadap Jumlah Trombosit Tikus Putih ( Rattus norvegicus )

## Ni Luh Putu Indah Sari Fatmawati, Sulasmi
Program Studi Sarjana Terapan Teknologi Laboratorium Medis, Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Nasional

## Abstrak
Pegagan  merupakan  tanaman  obat  yang  mengandung  beberapa  bahan  aktif  yang  bermanfaat  bagi  kesehatan. Salah  satu  kandungan  aktif  daun  pegagan  adalah  flavonoid  seperti  kuersetin.  Kuersetin  merupakan  senyawa kelompok  flavonoid  yang  banyak  terkandung  pada  tanaman  serta  memiliki  kemampuan  meningkatkan  jumlah trombosit  dalam  darah.  Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  pengaruh  dan  dosis  yang  paling berpengaruh  pada  pemberian  ekstrak  etanol  daun  pegagan  ( Centella  asiatica (L.)  Urban)  terhadap  jumlah trombosit  tikus  putih  ( Rattus  norvegicus ).  Penelitian  ini  merupakan  penelitian  analitik  eksperimental  dengan “ Post  test  only  kontrol  group  design ”.  Pembagian  kelompok  menggunakan  teknik  sampling Simple  Random Sampling .  Terdapat  4  kelompok  yaitu  kontrol  (-),  kontrol  (+),  perlakuan  450  mg/kgBB  dan  900  mg/kgBB. Pemberian  perlakuan  dilakukan  selama  22  hari  lalu  dilakukan  pengukuran  jumlah  trombosit  menggunakan hematology  analyzer abacus  3CT.  Data  penelitian  dianalisa  menggunakan One-Way  ANOVA dengan  SPSS. Didapatkan  hasil  uji  normalitas Shapiro-Wilk dengan  nilai  sig>0.05;  uji  homogenitas Levene  Test dengan  nilai sig.>0.05;  uji One-Way  ANOVA dengan  nilai  sig<0.05;  dan  uji Post  Hoc  Tukey pada  perlakuan  450  mg/kgBB dan  900  mg/kgBB  memberikan  nilai  sig<0.05.  Terdapat  pengaruh  yang  signifikan  terhadap  jumlah  trombosit tikus putih ( Rattus norvegicus ) setelah dilakukan pemberian ekstrak etanol daun pegagan ( Centella asiatica (L.) Urban) dengan dosis 450 mg/kgBB dan 900 mg/kgBB
Kata Kunci : Daun Pegagan, Kuersetin, Ekstrak Etanol, Jumlah Trombosit, Tikus Putih
The Effect of Pegagan Leaf ( Centella asiatica (L.) Urban) Ethanol Extract on Trombosit Count White Rats ( Rattus norvegicus )

## Abstract
Several  active  ingredients  that  are  beneficial  for  health  are  contained  by  pegagan,  which  is  a  medicinal  plant. Flavonoids such as quercetin are one of the active ingredients in pegagan leaves. The number of platelets in the blood can be increased by quercetin,  which is a compound of the flavonoid group  widely  found in plants. The effect and the most influential dose of ethanol extract of pegagan ( Centella asiatica (L.) Urban) on platelet count of  white  rats  ( Rattus  norvegicus )  were  to  be  determined  by  the  study.  The  research  is  a  experimental  analytic research with “ Post test only kontrol gropup design ”. The division groups are formed using the Simple Random Sampling technique.  There  are  4  groups,  namely  the  control  (-),  control  (+),  treatment  450  mg/kgBB  and  900 mg/kgBB. The treatment was carried out for 22 days  and then the platelet count was measured using an abacus 3CT hematology  analyzer .  The  research  data  were  analyzed  using One-Way  ANOVA with  SPSS.  The  result  of the Shapiro-Wilk normality  test  were  obtained  with  a  sig  value>0.05;  the  homogeneity  test  of  the Levene  test with a sig value>0.05; the One-Way ANOVA test with a sig value<0.05; and the Tukey Post Hoc test on the 450 mg/kgBB and 900 mg/kgBB treatments gave a sig value<0.05. A significant effect on the platelet count of white rats ( Rattus norvegicus ) is observed after the administration of ethanol extract of pegagan ( Centella asiatica (L.) Urban) leaves at doses of 450 mg/kgBB and 900 mg/kgBB.
Keywords:  : Pegagan Leaf, Quercetin, Ethanol Extract, Platelet Count, White Rats
Korespondensi: Sulasmi, Program Studi Sarjana Terapan Teknologi Laboratorium Medis, Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Nasional, Jalan Raya Solo-Baki, Bangorwo, Kwarasan, Kec. Grogol, Kab. Sukoharjo, Jawa Tengah, nomor HP 081226873220, e-mail sulasmi@stikesnas.ac.id

## Pendahuluan
Darah adalah cairan tubuh yang bertugas membawa  nutrisi  dan  oksigen  ke  seluruh  sel tubuh,  membawahasil  metabolisme  selserta bersirkulasi  di  sistem  peredaran  darah  dan jantung.  Darah  terdiri  atas  55%  cairan/plasma dan  45%  sel  darah.  Komponen  sel  darah terdapat  3  macam  antara  lain  sel  darah  merah sel  darah  merah,  sel  darah  putih,  dan  keping darah(Firani, 2018).
Keping  darahatau  sering  disebut  dengan trombosit yaitu fragmen sitoplasma megakariosit  yang  terbentuk  dalam  sumsum tulang dan tidak berinti(Wuan et al ., 2021). Sel trombosit  mempunyai  ciri-ciri  antara  lain  tidak berinti,  bulat  dengan  diameter  0,75-2,25  mm dan  volume  5-8  fl  sertabentuk  cakram bikonveks. Trombosit matang berukuran sekitar 2-4  µm  (Kiswari,  2014).  Terdapat  3  fungsi trombosit  yaitu  adhesi,  agregasidan  reaksi pelepasan.  Trombosit  juga  berfungsi  dalam proses  pembekuan  darah,  sebagai  sumbat  pada cedera  vascular,  mencegah  virus  dan  bakteri yang  masuk  ketubuh,  serta  mempertahankan struktur jaringan tubuh jika terjadi luka(Durachim  &  Astuti,  2018).  Sel  trombosit dalam  setiap  milimeter  kubik  darah  manusia yaitu  150.000–  400.000  sel.  Sedangkan  pada tikus  terdapat  sekitar  500.000  –  1,3  juta  sel trombosit  dalam  setiap  milimeter  kubik  darah (Harkness & Wagner, 1995). Kondisi menurunnya jumlah trombosit hingga di bawah nilai  normal  disebuttrombositopenia.Beberapa faktor yang dapat menyebabkan trombositopenia  antara  lain  pengaruh  alkohol, virus, infiltrasi sumsum tulang, radiasi, kemoterapi, dan obat-obatan.Penderita trombositopenia  umumnya  akan  mengalami perdarahan  dan timbul  bintik-bintik  perdarahan di  seluruh  bagian  tubuh  (Andreas  &  Sixteen, 2016).
Demam  Berdarah  Dengue  (DBD)  adalah penyakit  endemi  penyebab  trombositopenia baik  di  wilayah  tropis  maupun  subtropis, disebabkan karena virus dengue serta disebarkan melalui  gigitan  jenis  nyamuk A.  albopictus atau A.  aegypti (WHO,  2018). World  Health Organization (2023)mengatakan  bahwa  kasus demam  berdarah  telah  meningkat  lebih  dari  8 kalilipat dalam dua dekade , terakhir. Pada tahun 2000  sebanyak  505,43  ribukasus  mengalami peningkatan hingga 2,4 juta kasus di 2010, serta pada 2019 mencapai hingga 5,2 juta kasus.Menurut Kementerian Kesehatan Repbulik  Indonesia (2023), tahun 2021 tercatat sebanyak
73.518  kasus  DBD,  sementara  itu  pada tahun  2022  tercatat  sebanyak  131.265  kasus DBD.
Penyebab  terjadi  trombositopenia  yaitu akibat infeksi virus dengue masih kontroversial, hal  tersebut  dapat  terjadi  karena  mekanisme supresi, destruksi atau pemendekan masa hidup sel  trombosit  di  sumsum  tulang(Rena et  al ., 2009).  Selain  itu,  trombositopenia  juga  dapat dipengaruhi  obat-obatan.  Salahsatu  obat  yang mempengaruhi hal tersebut yaitu kotrimoksazol.
Kotrimoksazol  merupakan  kombinasi kemoterapik  trimethoprim  dan  sulfametoksazol bersama  memberikan  efekmenghambat  reaksi enzimatik  obligat 2  tahap  pada  mikroba  secara berurutan.  Penggunaan  kotrimoksazol  secara klinis  yaitu  sebagai  pengobatan  untuk  infeksi saluran  cerna,  infeksi  genital,  infeksi  saluran pernafasan,  infeksi  saluran  kemih  serta  infeksi yang  disebabkan  oleh  bakteri  (Ayunirrahim, 2022). Penelitian yang dilakukan oleh Wijayanti (2013)menjelaskan bahwa
sekelompok  tikus  yang  diinjeksi  kotrimoksazol selama  8  hari  mengalami  penurunan  jumlah trombosit. Salah satucara mengatasi trombositopenia  adalah  memanfaatkan  bahan alam yang berkhasiat di lingkungan sekitar.
Bahan alamtersebutadalah tanaman pegagan.Pegagan( Centella  asiatica (L.)  Urban) adalah  tanaman  herbal  yang  tumbuh  dan ditemukan  di  negara  Indonesia(Ramandey  & Bunei,  2021).  Tinggi  dari  tanaman  ini  berkisar 5,39  –  13,3  cm.  Tanaman  ini  memiliki  daun berwarna  hjau  tua,  ujung  membulat,  tepian bergerigi, susunan tulang daun menjari, pangkal daun  tumpu,  permukaan  atas  halus,  dan permukaan  bawah  terdapat  bulu-bulu  berwarna putih  yang  termasuk  perubahan  dari  jaringan epidermis  yang  disebut  trikoma  daun.  Pegagan juga  memiliki  tangkai  dengan  panjang  sekitar 10 – 15 cm(Susetyani et al ., 2020). Tanaman ini memiliki  beberapa  senyawa  kimia.  Penelitian skrining fitokimia yang dilakukan oleh Susetyarini  &  Nurrohman  (2022)menjelaskan bahwa ekstrak tanaman ini mempunyai berbagai  senyawa  kimia  seperti  flavonoid, alkaloid,  tannin,  dan  saponin.  Sedangkan rebusan  tanaman  ini  hanya  mengandung senyawa  tanin  dan  flavonoid.  Golongan senyawa flavonoid yang terkandung di dalamnya yaitu kuersetin dan glikosida (Sutardi,  2017).  Senyawa  flavonoid  berupa kuersetin yang terdapat pada pegagan mampumeningkatkan  jumlah  trombosit  sebagai immunostimulator (Hamad et  al .,  2015; Soegijanto et al ., 2010).
Penelitian yang dilakukan oleh Jiwantoro &  Jannah  (2020)menjelaskan  bahwa  ekstrak pegagan yang mengandungasam bebas, vitamin C  dan  B,  mineral,  saponin,  triterpenoid,  dan flavonoid mampu mempengaruhi jumlah keping  darah  (trombosit)  tikus  putih  yang diinduksi  dengan  asap  rokok.  Penelitian  lain yang  dilakukan  Hendrayati  (2015)menjelaskan bahwarebusan daun pegagan mampu meningkatkan jumlah
trombositdalam darahmencit  meskipun  tidak  signifikan.  Dari penelitian  yang  telah  dilakukan  diatas  maka peneliti mengembangkan dengan menggunakan ekstrak  etanol  daun  pegagan  untuk  mengetahui pengaruhnya  terhadap  jumlah  trombosit  pada tikus putih.

## Metode
Desain penelitian ini yaituanalitik eksperimental  dengan Post-test  Only  Control Group  Design .  Pelaksanaan  penelitian  dimulai dari  bulan  Juni  hingga  September  2023. Determinasi  tanaman  dengan  nomor  pengujian KM.04.02/XI.6/1449/2023.  Pembuatan  ekstrak etanol,  uji  skrining  fitokimia,  dan  pengecekan kadar  senyawa  kuersetin  pada  daun  pegagan dilakukan di Lembaga UPF Pelayanan Kesehatan Tradisional Dr. Sardjito.
Aklimatisasi,  pemberian  injeksi  dan  perlakuan pada  tikus  putih  dilakukan  di  Laboratorium Farmakologi  STIKES  Nasional.  Pemeriksaan jumlah  trombosit  tikus  putih  jantan  setelah perlakuan dilakukan di Laboratorium Hematologi STIKES Nasional.
Subyekdari  penelitian  ini  yaitu  tikus putih  jantan  yang  berusia  2  –  4  bulan  dengan berat sekitar 150 – 250 gr. Penelitian ini terdiri atas  4  kelompok  perlakuan  antara  lain  kontrol negatif  (KN),  kontrol  positif  (KP),perlakuan  1 (P1),  dan  perlakuan  2  (P2).Jumlah  tikus  dalam penelitian  inidihitung  menggunakan  rumus Federer dan  koreksi  besar  sampel,  sehingga diperolehtotal  sampel  sebanyak  32ekor  tikus. Teknik sampling yang digunakan berupa Simple Random  Sampling .Masing-masing  kelompok terdiri  dari  8  tikus  yang  ditempatkan  dalam kandang  berukuran  40x30cm  dengan  bagian atas  ditutup  anyaman  kawat  besi,  kemudian ditempatkan  pada  ruangan  tertutup  dengan ventilasi  dan  penerangan  cukup.  Pembersihan kandang  dilakukantiga  kali  seminggu,  hal tersebut  bertujuan  untuk  melindungi  hewan coba dari kotoran yang menyebabkan infeksi.
Penelitian  ini  dimulai  dari  melakukan penimbangan berat badan tikus, lalu aklimatisasi selama 7 hari. Selanjutnya
dilakukan  pembagian  tikus  dimana  terdapat  8 ekor  tikus  tiap  masing-masing  kelompok, kemudian dilakukan
pemberian obat kotrimoksazol  dengan  dosis  172,8  mg/kg  BB secara  peroral  pada  masing-masing  kelompok selama 8 hari. Selanjutnya dilakukan pemberian aquadest  pada  kelompok  KN;  trolit  dosis  0,36 gr/kg  BB  pada  kelompok  KP;  ekstrak  etanol daun  pegagan  dosis  450  mg/kg  BB  pada kelompok  P1  dan  ekstrak  etanol  daun  pegagan dosis  900  mg/kg  BB  pada  kelompok  P2 sebanyak 2,5 mL secara peroral selama 14 hari.
Pengambilan darah tikusmelalui pembuluh darah sinus retro-orbital mata, untuk menghitung jumlah trombosit. Kemudian jumlah  trombosit  darah  tikus  diperiksa  dengan menggunakan alat Hematology analyzer Abacus  3CT.  Data  hasil  pemeriksaan  tersebut dianalisis  dengan  uji  statistik  parametrik One- Way  ANOVA dan Post-Hoc  Tukey  HSD karena distribusi data tersebut normal dan varian antar kelompok  samaatau  homogen.  Penelitian  ini telah mendapatkan persetujuan etik dari Komisi Etika Penelitian Kesehatan Universitas Muhammadiyah  Purwokerto  dengan  nomor
KEPK/UMP/129/VII/2023.

## Hasil
Di  bawah  ini  merupakan  hasil  rendemen ekstrak daun pegagan metode maserasi menggunakan  pelarut  etanol  70%,  dengan  alat rotary evaporator .
Tabel 1.Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Pegagan Pelarut Berat serbuk daun (gr) Berat ekstrak kental (gr) Rendeman (%) Etanol 70% 192 47,88 24,94
Pembuatan  ekstrak  etanol  tanaman  ini menggunakan  daun  kering  yang  dijadikan serbuk.  Serbuk  daun  yang  digunakan  yaitu sebanyak  192gram,  menghasilkan  ekstrak kental  sebanyak  47,88gram  dengan  rendeman sebesar 24,94%.
Tabel  2.  Skrining  Fitokimia  Senyawa  Flavonoid danPengukuran  Kadar  Kuersetin  dalam Ekstrak Etanol Daun Pegagan Parameter Satuan Hasil Metode Uji Skrining Fitokimia Flavonoid - Positif Tube test Kadar senyawa Kuersetin % 0,552 Spektrofotomet ri UV-Vis
Skrining  fitokimia  senyawa  flavonoid menggunakan metode tube test didapatkan hasil positif.  Sedangkan  pengukuran  kadar  kuersetin dalam  ekstrak  menggunakan  spektrofotometri UV-Vis didapatkan hasil sebesar 0,552%.

## Tabel 3. Karakteristik Data Jumlah Trombosit
Rata-rata Minimum Maksimum KN KP P1 P2 418500.00 546833.33 557666.67 576833.33 355000 481000 501000 447000 476000 587000 628000 854000
Dilihat  dari  Tabel  3  menunjukan  bahwa kelompok KN mempunyai nilai rerata terendah, hal  tersebut  karena  kelompok  KN  hanya diinjeksi menggunakan larutan kotrimoksazol.Sedangkan kelompok P2
mempunyai  nilai  rerata  tertinggi  diantara kelompok  lainnya.  Selanjutnya  melakukan  uji normalitas data menggunakan uji Shapiro-Wilk .
Tabel  4.  Uji  Normalitas  Data  Jumlah  Trombosit
Tikus Putih Dosis Pemberian Sig ( p ) Hasil  Jumlah Trombosit KN KP P1 P2 0.056 0.521 0.831 0.130
Uji  normalitasdata  menggunakan  uji Shapiro- Wilk pada  Tabel  4  menunjukkan  bahwasetiap kelompok tikus mempunyai p value >0.05 maka diasumsikan bahwa data masing-masing kelompok tersebut terdistribusinormal.Kemudian melakukanuji
homogenitas  data  menggunakan  uji Levene Test .
Tabel  5.  Uji  Homogenitas  Data  Jumlah    Trombosit
Tikus Putih Levene Statistic Sig( p ) Hasil  Jumlah Trombosit 2.506 0.088
Uji  homogenitas  data  menggunakan  uji Levene Test pada Tabel 5 menunjukkan p value = 0.088  ( p >0.05)  yang  diasumsikan  jikadata terdistribusi homogen. Dilihat dari Tabel 4 dan 5  maka  analisa  data  dapat  dilanjutkan menggunakan  uji One-Way  ANOVA untuk melihat  ada  atau  tidak  pengaruh  pemberian ekstrak daun pegagan terhadap jumlah trombosit tikus putih.
Tabel 6. Pengaruh Pemberian Ekstrak Daun Pegagan Terhadap Jumlah Trombosit Tikus Putih F Sig( p ) Hasil Jumlah Trombosit 4.317 0.017
Analisis  pengaruh  pemberian  ekstrak daun  pegagan  terhadap  jumlah  trombosit  tikus putih  menggunakan  uji One-Way  ANOVA pada Tabel  6  menunjukan p  value =0.017  ( p <0.05) artinya  terdapat  pengaruhpemberian  ekstrak etanol daun pegagan terhadap jumlah trombosit tikus  putih.  Kemudian  dilanjutkan  analisa  data menggunakan  uji Post-HocTukeyHSD untuk melihat perbedaanantar kelompok.
Tabel 7. Uji Post-Hoc Tukey HSD Jumlah Trombosit Tikus Putih KN KP P1 P2 KN KP P1 P2 - 0.072 0.046* 0.020* 0.072 - 0.996 0.927 0.046* 0.996 - 0.979 0.020* 0.927 0.979 -
*: Perbedaan yang signifikan
Uji Post-Hoc  Tukey  HSD pada  Tabel  7 menunjukkan adanya perbedaan yang signifikan antara  kelompok  KN  dengan  P1  dan  P2. Kelompok  perlakuan  yang  paling  berpengaruh signifikan terhadap peningkatan jumlah trombosit  tikus  putih  adalah  kelompok  P2 dengan p value =0.020.

## Pembahasan
Hasil  penelitian  inidapat  dilihat  pada Tabel 6 yang menunjukkan nilai sig.=0.017,artinya  terdapat  pengaruhpemberian ekstrak  etanol  daun  pegagan  terhadap  jumlah trombosit  tikus  putih.  Tabel  7  menunjukkan bahwa  terdapat  perbedaan  yang  signifikan antara  kelompok  KN  dan  P1  dengan  nilai sig.=0.046;  serta  KN  dan  P2  juga  memiliki perbedaan yang signifikan dengan nilai sig.=0.020. Namun pada kelompok KP dan KN, P1,  P2;  P1  dan  P2  tidak  memiliki  perbedaan yang signifikan dengan nilai sig.>0.05. Diperoleh pula hasil rerata jumlah sel trombosit pada Tabel 3, dimana pada kelompok KN, KP, P1  dan  P2  memiliki  rerata  sebesar  418,50  ribu sel/mm 3 ;  546,83  ribu  sel/mm 3 ;  557,66  ribu sel/mm 3 ; dan 576,83 ribu sel/mm 3 . Maka dapat disimpulkan  bahwa  kelompok  P2yaitu  ekstrak dosis  900  mg/kgBB  yang  mampu  memberikan pengaruh yang lebih baik dibandingkankelompok lainnya dalam meningkatkan  jumlahtrombosit  tikus  putihyang
menurun  akibat  pemberian  obat  kotrimoksazol dengan  dosis  172,8  mg/kg  BB.  Hal  ini  sesuai dengan penelitian yang dilakukan oleh Jiwantoro  &  Jannah  (2020)yang  menjelaskan bahwa ekstrak pegagan yang  mengandungasam bebas,  vitamin  C  dan  B,  mineral,  saponin, triterpenoid,  dan  flavonoid  yang  mampu mempengaruhi jumlah keping darah (trombosit) tikus  putih  yang  diinduksi  dengan  asap  rokok. Namun,  penelitian  ini  tidak  sesuai  dengan penelitianyang  dilakukan  oleh  Hendrayati (2015)juga  menjelaskan  bahwadaun  pegagan rebus mampu meningkatkan jumlah trombositdalam  darahmencit  meskipun  tidak signifikan Penurunan jumlah trombosit dalam darah disebut trombositopenia. Trombositopenia dapat disebabkan oleh berbagai faktor termasuk peningkatan destruksi, kegagalan dalam produksi, gangguan dalam distribusi, dan dilusi. Trombositopenia  akibat  obat-obatan  tertentu jugasering  dijumpai  di  kalangan  masyarakat. Terdapat  lebih  dari  200  obat  yang  dapat menyebabkan  trombositopenia.  Beberapa  obat yang  mampu  menurunkan  jumlah  trombosit antara  lain  quinine,  quinidine,  asam  valproate, gold  sats,  heparin  dan  antibiotik  yang mengandung sulfa dan antikonvulsan (Adnyana & Sigit, 2012).
Salah satu antibiotik yang dapat menurunkan jumlah trombosit adalah kotrimoksazol.Kotrimoksazol
merupakan
kombinasi kemoterapik trimethoprim dan sulfametoksazol yang mempunyai efek menghambat2  tahap  reaksi  enzimatik  obligat secara  berurutanpada  mikroba.  Mekanisme terjadinya  penurunan  jumlah  trombosit  akibat kotrimoksazol yaitu dimulai dengan sulfonamide  menghambat  PABA  masuk  ke dalam  molekul  asam  folat.  Selain  itu, trimethoprim  juga  menghambat  reaksi  reduksi sintesis  timidin  dan  asam  folat  sehingga menyebabkan defisiensi asam folat.Hal tersebutmenyebabkan  terjadi  penurunan  jumlah trombosit  dalamdarah(Ayunirrahim,  2022).  Hal ini  didukung  penelitian  Wijayanti  (2013)yang menjelaskan  bahwa  sekelompok  tikus  yang diinjeksi kotrimoksazol selama 8 hari mengalami penurunan jumlah trombosit. Selain itu,  hal  ini  juga  didukung  dengan  hasil padaTabel  3  menunjukkan  kelompok  kontrol negatif (KN) yanghanya diinjeksi menggunakan larutan  kotrimoksazol  dosis  172,8  mg/kg  BB secara  peroral  memiliki  nilai  rata-rata  paling kecil.
Pegagan  merupakan  tanaman  herbal dengan  berbagai  senyawa  metabolit  sekunder.
Senyawa tersebut antara lain tannin, triterpenoid, alkaloid, saponin, flavonoid, fitosterol, steroid, asam amino, minyak volatile, dan karbohidrat (Besung, 2009). Penelitian lain terkait  skrining  fitokimia  dilakukan  oleh Susetyarini  &  Nurrohman  (2022)menunjukkan jika  ekstrak  tanaman  pegagan  mengandung senyawa  kimia  diantaranya  flavonoid,  alkaloid, tanin,  dan  saponin;  sedangkan  kandungan  dari rebusannya  yaitutanin  dan  flavonoid.  Skrining fitokimia  yang  dilakukanKhairunnisa et  al .
(2022)menjelaskanjika daunpegagan mengandung  flavonoid  golongan  flavonol. Tabel  2.  pada  penelitian  ini  juga  menunjukkan bahwa ekstraketanol dari daun
pegaganmengandung senyawa flavonoid.
Senyawa flavonoid merupakan kelompok senyawa  metabolit  sekunder  paling  banyak dalam  jaringan  tanaman.Senyawa  ini  adalah senyawa  dengan  gugus  C15  yang  terdiri  dari  2 inti  fenolat  yang  terhubung  dengan  3  unit karbon.Senyawa  ini  memiliki  struktur  dasar yang  terdiri  dari  2  gugus  aromatik  yang dihubungkan  oleh  rantai  karbon  C6-C3- C6(Panche et al ., 2016). Flavonoid mempunyai beberapa  gugus  hidroksil  sehingga  senyawa  ini larut  ke  dalam  pelarut  polar  seperti  butanol, metanoldan  etanol(Sundaryono,  2011).  Tabel  1 menunjukkan  pembuatan  ekstraketanol  daun pegagan menggunakan metode maserasi dengan pelarut  etanol  70%.Penggunaan  etanol  70% sebagai  pelarut  bergantung  pada  kepolaran senyawa flavonoid terhadap pelarut tersebut.Namun,  penggunaan  jenis  pelarut etanol dengan  konsentrasi tinggi  hingga  di  atas 70% dapat menyebabkan berkurangnya polaritas dari larutan tersebut sehingga menurunkan  kadar  flavonoid  total(Khairunnisa et al ., 2022).
Senyawa  flavonoid  yang  terdapatdalam tanaman  pegaganyaitu  kuersetin  dan  glikosida (Sutardi,  2017).  Tabel  2  menunjukkan  bahwa ekstrak  dalam  penelitian  ini  mengandung senyawa  kuersetin  sebesar  0,552%.  Kuersetin adalah  senyawa  terbesar  pada  kelompok flavonol.
Kuersetin mempunyai efek antioksidan, antivirus, antibakteri, antiinflamasi,  dan  antikanker.  Selain  itu, kuersetin juga memiliki kemampuan meningkatkan jumlah keping darah (trombosit)(Soegijanto et al ., 2010). Mekanisme kuersetin dalam
meningkatkan  jumlah  trombosit  terjadi  akibat peningkatan  jumlah  dan  aktivasi cytokine , terutama  IL-3  dan  GM-CSF,  serta  rangsangan diferensiasi dan proliferasi dari sel megakariosit yang  dikendalikan  oleh  IL-6  dan  TNF-α.

## Selanjutnya, IL-6 dapat berinteraksi dengan IL-
3  dan  CSF  menyebabkan  peningkatan  formasi koloni  sebagai progenitor  hemopoietik sehingga mempercepat  pematangan  megakariosit  dengan memperpanjang sitoplasma membentuk tonjolan yang disebut protrombosits . Kemudian protrombosits tersebut dilepaskan dari megakariosit  menjadi  sel  trombosit  sehingga jumlah  trombosit  dalam  sirkulasi  darah  akan meningkat(Soegijanto et  al .,  2010).  Selain  itu, senyawa  kuersetin  juga  mencegah  aktivitas enzim reverse transcriptase sehingga pertumbuhan  virus  dengue  dalam  tubuh penderita  DBD  akan  terhambat(Nupus et  al ., 2021).
Kesimpulan dari penelitian ini
adalahpemberian  kotrimoksazol  dengan  dosis 172,8 mg/kgBB selama delapan hari mengakibatkan penurunan jumlah keping darah (trombosit)  tikus  putih.  Hasil  penelitian  juga menunjukkan  adanya  pengaruh  pemberian ekstrak  etanol  daun  pegagan  ( Centella  asiatica (L.)Urban)  terhadap  jumlah  trombosit  tikus putih  ( Rattus  norvegicus ).Selain  itu,  terdapat juga perbedaan yang signifikan antara kelompok  KNdengan  P1  dan  P2  dengan  nilai sig.<0.05.  Namun,  pada  kelompok  KP  dengan KN,  P1,  P2;  P1  dengan  P2  tidak  memiliki perbedaan yangsignifikan dengan nilai sig.>0.05.  Diperoleh  pula  hasil  rerata  jumlah trombosit  pada  kelompok  KN,  KP,  P1,  dan  P2 adalah  418,50  ribu  sel/mm 3 ;  546,83  ribu sel/mm 3 ;  557,66  ribu  sel/mm 3 ;  dan  576,83  ribu sel/mm 3 . Hal tersebut menunjukkan bahwakelompok  P2  dapat  memberi  pengaruh yang  lebih  baik  dibandingkan  kelompok  lain dalam  meningkatkan  jumlah  trombosit  tikus yang telah menurun akibat pemberian kotrimoksazol dosis 172,8 mg/kgBB.
Saran untuk penelitian selanjutnya yaitumelakukan  penelitian  sejenis  dengan menggunakan responden yang terinfeksi demam  berdarah,  serta  dapat  melakukan  pada hewan coba dengan dosis yang lebih rendah.

## Daftar Pustaka
Adnyana,  I.  K.,  &  Sigit, J.  I.  (2012).  Effect  Of Administration  Of  Cork  Fish  (  Channa striata ) Concentrate 72 7 + ( %/ 22 ’· 6
352  ),/(  2  )  BALB  /  C  Mouse Thrombocytopenia Model. Jurnal Medika Planta , 2 (1), 13–25.
Andreas,  G.,  &  Sixteen,  S.  (2016).  How  I evaluate  and  Treat  Thrombocytopenia  In The  Intensive  Care. Blood  Journal , Vol.
128 (No. 26), 3032–3042.
Ayunirrahim,  B.  (2022). Uji  Efektivitas  Sari Buah Kurma (Phoenix dactylifera) Terhadap Gambaran Histopatologi Gaster  Mencit  Jantan  (Mus  musculus  L) Yang Diberi Aspirin . http://repository.umsu.ac.id/handle/12345 6789/19472
Besung,  K.  I.  (2009).  Pegagan  (Centella aisatica)  Sebagai  Alternatif  Pencegahan Infeksi  Pada  Ternak. Jurnal  Penelitian , Vol. 2 (No. 1).
Durachim, A., & Astuti, D. (2018). Bahan Ajar Teknologi  Laboratorium  Medik  (TLM): Hemostasis . Jakarta: Kementerian Kesehatan RI.
Firani,  N.  K.  (2018). Mengenali  Sel-Sel  Darah dan  Kelainan  Darah .  Jakarta:  UB  Press. https://bit.ly/3YbAuZW
Hamad,  I.,  Abdelgawad,  H.,  Al  Jaouni,  S., Zinta,  G.,  Asard,  H.,  Hassan,  S.,  Hegab, M.,  Hagagy,  N.,  &  Selim,  S.  (2015). Metabolic  analysis  of  various  date  palm fruit  (Phoenix  dactylifera  L.)  cultivars from  Saudi  Arabia  to  assess  their nutritional quality. Molecules , Vol. 20 (No. 8), 13620–13641. https://doi.org/10.3390/molecules200813 620
Harkness,  J.  E.,  &  Wagner,  J.  E.  (1995). Spesific  diseases  and  conditions.  in  The Biology  and  Medicine  of  Rabbits  and Rodents . Philadelphia: Williams & Wilkins.
Hendrayati,  T.  D.  (2015).  Pengaruh  Rebusan
Daun  Pegagan  (Centella  asiatica  (L.) Urban)  Terhadap  Jumlah  Keping  Darah (Trombosit) Pada Mencit (Mus musculus L.)  dan  Pemanfaatannya  Sebagai  Karya Ilmiah  Populer. Skripsi ,  33.  Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Jember
Jiwantoro,  Y.  A.,  &  Jannah,  M.  (2020). Pengaruh  Ekstrak  Pegagan  (Centella Asiatica  (L.)  Terhadap  Profil  Darah  dan Hepar  Pada  Tikus  Putih  yang  Diinduksi Asap  Rokok. Jurnal  Kesehatan  Andalas , Vol. 9 (No. 2), 230–234. https://doi.org/10.25077/jka.v9i2.1081
Kemenkes RI. (2023). Atasi Dengue, Kemenkes Kembangkan Dua Teknologi Ini . https://sehatnegeriku.kemkes.go.id/ Khairunnisa,  S.,  Hakim,  A.  R.,  &  Audina,  M. (2022).  Perbandingan  Kadar  Flavonoid Total Berdasarkan Perbedaan Konsentrasi  Pelarut  Etanol  Dari  Ekstrak Daun  Pegagan  (Centella  asiatica  [L] Urban). Journal  Pharmaceutical  Care and  Sciences , Vol.  3 (No.  1),  121–131. https://doi.org/10.33859/jpcs.v3i1.236
Kiswari,  R.  (2014). Hematologi  dan  Transfusi . Jakarta: Erlangga.
Nupus,  Z.,  Ramadhan  Dadan  Apriyanto,  & Tissa,  O.  (2021).  Uji  Daya  Hambat Ekstrak  Bawang  Putih  (Allium  sativum L.)  Terhadap  Replikasi  Virus  Dengue (Serotipe  2  Strain  New  Guinea  C). Indonesian  Journal  of  Biomedicine  & Health Sciences , 2013–2015.
Panche, A. N., Diwan, A. D., & Chandra, S. R.
(2016). Flavonoids: An overview.
Journal  of  Nutritional  Science , Vol. 5 (No. 47), 1–15. https://doi.org/10.1017/jns.2016.41
Ramandey,  J.  M.,  &  Bunei,  P.  (2021).
Identifikasi  Tanaman  Pegagan  (Centela asiatika  L.)  Sebagai  Tanaman  Obat  Bagi Masyarakat  Suku  Mee  Di  Distrik  Tigi Timur Kabupaten Deiyai. Jurnal FAPERTANAK:  Jurnal  Pertanian  Dan Peternakan , 23–31. Rena,  N.  M.  R.  A.,  Utama,  S.,  &  Parwati,  T.
(2009). Kelainan Hematologi pada Demam  Berdarah  Dengue. Journal Penyakit  Dalam , Vol.  10 (No.  3),  218– 225.
Soegijanto, S., Azhali, M. S., Tumbelaka, A. R., Anggraini,  Rufianti,  R.,  &  Sary.  (2010).
Uji  Klinik  Multisenter  Sirup  Ekstrak
Daun Jambu Biji Pada Penderita Demam Berdarah Dengue. Medicinus , Vol.
23 (No. 1).
Sundaryono,  A.  (2011).  Uji  Aktivitas  Senyawa Flavonoid  Total  Dari  Gynura  Segetum (Lour)  Terhadap  Peningkatan  Eritrosit Dan  Penurunan  Leukosit  Padamencit (Mus  Musculus). Jurnal  Exacta , Vol.
9 (No. 2), 8–16.
Susetyani,  E.,  Latifa,  R.,  Poncojari,  W.,  &
Nurrohman,  E.  (2020). Atlas  Morfologi Dan Anatomi Pegagan (Centella asiatica(L)  Urban)  Disertai  Dengan Pengamatan SEM . 1–12.
Susetyarini,  E.,  &  Nurrohman,  E.  (2022).
Fitokimia  Ekstrak  Dan  Rebusan  Daun Pegagan  (Centella  Asiatica  (L.)  Urban.) Langkah Awal Mencari Senyawa Potensial  Kandidat  Immunomodulator. Jurnal  Sains  Riset  | , Vol. 12 (No.  1),  51– 58. http://journal.unigha.ac.id/index.php/JSR
Sutardi,  S.  (2017).  Kandungan  Bahan  Aktif Tanaman  Pegagan  dan  Khasiatnya  untuk Meningkatkan  Sistem  Imun  Tubuh. Jurnal  Penelitian  Dan  Pengembangan Pertanian , Vol.  35 (No.  3),  121–130. https://doi.org/10.21082/jp3.v35n3.2016. p121-130
WHO.  (2018).  Perilaku  Masyarakat  tentang Upaya  Pencegahan  Penyakit  Demam Berdarah  Dengue. Journal  of  Public Health  and  Community  Medicine , Vol. 1 (No. 1), 1–5.
WHO.  (2023). Dengue  and  Severe  Dengue . https://www.who.int/research
who,  L.  (2013).  Pengaruh  Pemberian  Infusa
Buah Kurma (Phoenix dactylifera) Terhadap  Perubahan  Jumlah  Trombosit Pada Tikus  Putih Jantan  Yang  Diinduksi Kotrimoksazol Naskah. Naskah Publikasi , 1–12.
Wuan,  A.  O.,  Yana,  A.  D.,  Handayati,  A.,
Santosa,  B.,  Trisna,  C.,  Yayungsih,  D., Erawati, Maharani, E. A., Cahyono, J. A., Usman,  J.  I.  S.,  Nazarudin,  M.,  Meri, Naim,  N.,  &  Prasetyaningsih,  Y.  (2021). Hematologi: Teknik Laboratorium Medik . Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC.