## EKSPLORASI SENYAWA METABOLIT SEKUNDER PADA KULIT BATANG TANAMAN DUWET (Syzygium cumini L.) DENGAN METODE LIQUID CHROMATOGRAPH MASS SPECTROMETRY (LCMS)
Titik Wijayanti , Dwi Candra Setiawan
Program Studi Pendidikan Biologi IKIP Budi Utomo Malang Jl. Citandui 46 Malang (Kampus C)
Email: kititn71@gmail.com

## SECONDARY METABOLITES EXPLORATION IN DUWET (Syzygium cumini L.) STEM BARK USING LIQUID CHROMATOGRAPH MASS SPECTROMETRY METHOD

## ABSTRACT
Research  has  been  conducted  to  determine  the  content  of  secondary metabolites  in  Duwet  ( Syzygium  cumini L.)  plant  stem  bark  using  Liquid Chromatograph  Mass  Spectrometry  method.  There  were  63  secondary metabolites. Five compounds with the largest composition, were gallic acid, cuminiresinol,  epiafzelechin,  and  syzygiresinol  A.  Secondary  metabolite compounds  in  the  bark  of  Duwet  plants  were  classified  into  13  groups  of compounds, including: phenolics, flavonoids, lignans, triterpenoids, sugars, and  others.  Secondary  metabolite  compounds  contained  have  important phytochemical activities, including as antidiabetic, antibacterial, antioxidant, antihepatotoxic, anti-inflammatory, and others.
Keywords: duwet, secondary metabolites, stem bark

## ABSTRAK
Telah  dilakukan  penelitian  untuk  menganalisis  kandungan  senyawa metabolit  sekunder  pada  kulit  batang  tanaman  Duwet  ( Syzygium  cumini L) dengan  metode Liquid  Chromatograph  Mass  Spectrometry .  Terdapat  63 senyawa  metabolit  sekunder.  Lima  senyawa  dengan  komposisi  terbesar, adalah  gallic  acid,  cuminiresinol,  epiafzelechin,  dan  syzygiresinol  A. Senyawa  metabolit  sekunder  dalam  kulit  batang  tanaman  Duwet  tergolong dalam 13 golongan senyawa, diantaranya adalah: fenolat, flavonoid, lignan, triterpenoid,  gula,  dan  lain  lain.  Senyawa  metabolit  sekunder  yang terkandung  mempunyai  aktivitas  fitokimia  penting,  diantaranya  sebagai antidiabetes,  antibakteri,  antioksidan,  antihepatotoksik,  antiinflamasi,  dan lain sebagainya.
Kata kunci: duwet, metabolit sekunder, kulit batang

## PENDAHULUAN
Tanaman Duwet merupakan tanaman langka karena keberadaannya saat ini yang semakin sulit ditemukan baik sebagai tanaman liar maupun sebagai peneduh pekarangan rumah, terutama di wilayah Jawa Timur (Wellapradiska, 2015). Hal ini sangat berbeda dengan  kondisi  sekitar  20  tahun  yang  lalu,  dimana  dengan  sangat  mudah  ditemukan. Salah  satu  faktornya  adalah  karena  buah  duwet  tidak  terlalu  banyak  disenangi  karena rasa  buahnya  yang  sangat  asam  dan  sepat.  Namun,  tanaman  duwet  merupakan  jenis tanaman  yang  memiliki  potensi  sebagai  tanaman  obat  (Pari  and  Saravanan,  2008; Wellapradiska, 2015).
Tanaman  Duwet  merupakan  tanaman  yang  termasuk  dalam  genus Syzigium dan suku Myrtle , famili Myrtaceae . Penyebaran di seluruh dunia walaupun tidak merata, ada di  daerah  tropis  dan  subtropis.  Terdapat  1100  spesies  dan  secara  alami  terdistribusi mulai  dari  afrika  dan  Madagaskar  sampai  di  Asia  Tenggara  hingga  Timur  Laut Australia. Tanaman pada famili ini dikenal kaya akan senyawa volatil yang bermanfaat secara  medis  (Mahmoud, et  al .,  2001).  Buah  pada  famili  ini  biasa  dikonsumsi  dan digunakan secara tradisional sebagai obat.
Syzygium cumini ( S. cumini ) (L) Skeels merupakan spesies yang dikenal baik dan sering  dibudidayakan.  Sinonim S.  cumini adalah Eugenia  jambolana Lam., Myrtus cumini Linn, Syzygium  jambolana DC, Syzygium  jambolanum (Lam)  DC, Eugenia djouant Perr, Calyptranthes  jambolana Willd, Eugenia  cumini (Linn)  Druce  dan Eugenia  caryophyllifolia Lam.  Secara  umum  dikenal  dengan jambolan,  black  plum, jamun,  java  plum,  indian  blackberry,  portuguese  plum,  malabar  plum,  purple  plum, jamaica dan damson  plum .  Sedangkan  di  Indonesia  biasa  dikenal  dengan  nama jambulan,  jamblang (Jawa  Barat), duwet dan juwet (Jawa  Timur),  dan jambu  kaliang (Sumatera Barat) (Steenis, 2005).
Studi  terdahulu  menjelaskan  beberapa  senyawa  yang  terkandung  dalam  tanaman duwet.  Biji  buah  duwet  mengandung  alkaloid,  jambosine,  jambolin  glikoside.  Studi yang lain juga melaporkan adanya  flavonoid, fenolat, vitamin dan antosianin  pada biji tanaman duwet. Daun kaya akan senyawa flavonol glikosida (Mahmoud, et al ., 2001); quercetin,  myrcetin,  triterpenoid;  esterase,  galloyl  carboxylase  dan  tanin.  Batang  kaya akan senyawa betulinic acid, friedelin, epifriedenalol, beta sitosterol, eugenin dan ester
asam  lemak  dari  epi  friedelanol;  quercetin,  kaempferol,  myricetin,  gallic  acid,  ellagic acid;  bergenin,  flavonoid  dan  tanin.  Bunga  kaya  akan  senyawa  kaempferol,  quercetin, myricetin,  isoquercetin,  myrcetin  3-L-arabinoside,  quercetin  3  D  galactoside, dihydromyricetin;  oleanolic  acid,  acetyl  oleanolic  acid,  eugenol  triterpenoid  A  dan eugenol triterpenoid B. Akar kaya akan senyawa flavonoid glikosida (Vaishnava, et al ., 1992)  dan  isorhamnetin  3  o-rutinoside  (Vaishnava, et  al .,  1990).  Buah  kaya  akan senyawa  rafinosa,  glukosa,  fruktosa,  asam  sitrat,  asam  malat,  asam  galat,  antosianin. Tanaman duwet juga kaya akan minyak atsiri yang didapatkan dari daun segar, batang, biji  dan  buah  (Kumar, et  al .,  2004),  dimana  di  dalamnya  mengandung  pinene, camphene,  myrcene,  limonene,  ocimene,  terpinene,  terpinolene,  bornyl  acetate, copaene,  caryophyllene,  humulene,  cadinene;  myrcene,  terpineol,  geranyl  butyrate, terpinyl valerate (Vijayanand, 2001).
Senyawa  metabolit  sekunder  yang  terkandung  pada  tanaman  duwet  sejak  lama digunakan  sebagai  obat  tradisional  oleh  masyarakat.  Batang  duwet  mempunyai  sifat sepat, manis, mudah tercerna, anthelmintic, dan digunakan untuk pengobatan gangguan tenggorokan,  bronkitis,  asma,  disentri,  maag.  Batang  duwet  juga  mempunyai kemampuan  membersihkan  darah.  Buah  duwet  mempunyai  rasa  sepat,  manis,  dan dingin  secara  tradisional  sering  digunakan  untuk  mengurangi  bau  mulut,  gangguan lambung,  diuretik  dan  antidiabetes.  Biji  duwet  juga  mempunyai  juga  mempunyai kegunaan  medis  untuk  mengobati  gangguan  pencernaan  dan  baik  untuk  pengobatan diabetes.  Abu  daun  duwet  sering  digunakan  untuk  memperkuat  gigi  dan  gusi.  Cuka yang dibuat dari buah duwet yang masak baik untuk pencernaan dan digunakan sebagai agen diuretik dapat pula digunakan untuk pengobatan diare kronis.
Studi di India, menunjukkan bahwa tanaman duwet telah lama digunakan sebagai obat  rakyat  untuk  pengobatan diabetes. Selain itu digunakan untuk  pengobatan luka di mulut,  kanker,  diare,  dan  gangguan  pencernaan  lainnya.  Studi  yang  lain  menunjukkan bahwa  duwet  telah  lama  digunakan  untuk  pengobatan  liver,  pembersih  darah, memperkuat gigi dan gusi, dan menyingkirkan infeksi kurap di kepala (Sagrawat, et al ., 2006).  Sejak  tahun  1960  sampai  1970,  tanaman  duwet  dipandang  secara  komersial sebagai  tanaman  antidiabetes.  Hal  ini  ditandai  dengan  beberapa  studi  yang  berkaitan dengan  khasiat  antidiabetes  beberapa  bagian  tanaman  duwet  pada  hewan  coba  yang
dikondisikan diabetes. Batang tanaman duwet mempunyai kemampuan menginduksi sel yang mampu memproduksi  insulin pada epitel  pankreas hewan coba (Schossler, et  al ., 2004)  dan  secara  signifikan  mampu  menurunkan  kadar  gula  darah  pada  hewan  coba yang diperlakukan dengan ekstrak batang duwet secara oral (Villasenor and Lamadrid, 2006).  Kebanyakan  studi  hanya  membuat  perlakuan  tanpa  ada  kajian  tentang  profil fitokimia yang terdapat  di dalamnya. Sehingga senyawa  yang berperan dalam  aktivitas antidiabetes  belum  sepenuhnya  diketahui.  Beberapa  formulasi  herbal  yang  merupakan kombinasi dari beberapa tanaman termasuk didalamnya tanaman duwet juga tersedia di pasar dan menunjukkan  potensi  aktivitas antidiabetes dan telah digunakan secara rutin oleh penderita diabetes.
Selain  itu  beberapa  bagian  tanaman  duwet  dilaporkan  juga  mempunyai  aktivitas antioksidan  (Sultana, et  al .,  2007),  anti  inflamasi  (Muruganandan, et  al .,  2001), neuropsycho-pharmacological,  antimicrobial  (Chandrasekaran  and  Venkatesalu,  2004), anti bacterial  (Nascimento, et  al ., 2000), antileishmanual  dan antifungal  (Braga, et  al ., 2007),  nitric  oxide  scavenging  (Jagetia  and  Baliga,  2004),  free  radical  scavenging (Silva, et  al .,  2006),  anti  diarrheal  (Mukherjee, et  al .,  1998),  antifertility, gastroprotective,  dan  anti-ulcerogenic  (Ramirez  and  Rao,  2003)  dan  aktivitas radioprotective (Jagetia and Baliga, 2003).

## MATERIAL DAN METODE

## Subjek Penelitian
Kulit  batang  duwet  diambil  dari  tanaman  Duwet  yang  berasal  dari  desa  Lopang Kecamatan Kembangbahu Kabupaten Lamongan Jawa Timur. Kulit batang duwet yang telah  dibersihkan  dipotong-potong  menjadi  ukuran  yang  lebih  kecil  kemudian dikeringanginkan hingga kering.

## Prosedur Penelitian
Analisis  kandungan  metabolit  sekunder  kulit  batang  duwet  melalui  tahapan: (1) Ekstraksi  kulit  batang :  Kulit  batang  yang  telah  kering  dihancurkan  dengan  mesin
penghancur  kayu  maksindo  tipe  9FH-40.  Serbuk  kayu  ditimbang  sebanyak  50  g, dimasukkan dalam botol schott bertutup kemudian ditambahkan 200 ml metanol 100%.
Larutan diaduk hingga homogen, tutup botol dan didiamkan selama 24 jam  pada suhu kamar,  kemudian  disaring  dengan  kertas  saring whatmann no  42,  hingga  didapatkan filtrat  yang  ditampung  dalam  erlenmeyer.  Residu  pada  kertas  saring,  kemudian dipindahkan  ke  botol schott bertutup  kemudian  dilakukan  proses  maserasi  dengan penambahan metanol 100% sebanyak 200 ml dan selanjutnya dilakukan filtrasi. Proses maserasi  dan  filtrasi  dilakukan  hingga  didapatkan  filtrat  yang  tidak  berwarna.  Semua filtrat  digabung  menjadi  satu  dan  dilakukan  evaporasi  untuk  menghilangkan  pelarut metanol  dan  mendapatkan  ekstrak  kental.  Proses  evaporasi  dengan  menggunakan evaporator putar Buchi rotavapor R 210, V 850 Vaccum controller , B 491 bath, V 700 vacum  pump.  Evaporasi  menggunakan  media  air  sebagai  pemanasan  yang  diatur  pada suhu pemanasan 40 ˚C. Putaran 40 rpm, dan tekanan vaccum 10  mbar. Ekstrak kental yang didapatkan disimpan pada suhu 4 ˚C untuk proses selanjutnya. Timbang sebanyak 0,01  g  Ekstrak  kemudian  dilarutkan  dengan  pelarut  metanol  99%  sebanyak  100  ml, sehingga  didapatkan  larutan  ekstrak  100  mg/l.  Untuk  homogenisasi,  tabung  diletakkan pada vortex yang diatur pada 5000 rpm selama 10 menit. Larutan didiamkan selama 30 menit  pada  suhu  kamar.  Selanjutnya  larutan  disentrifugasi  pada  kecepatan  8000  rpm selama 10 menit, sehingga didapatkan supernatan. (2) Presipitasi protein : Sebanyak 2 ml supernatan ekstrak dimasukkan ke dalam tabung sentrifuge , kemudian ditambahkan 3 ml asetonitril yang diasamkan dengan 0,2% asam format. Larutan  disentrifugasi pada kecepatan  8000  rpm  selama  30  detik.  Supernatan  yang  diperoleh  ditampung  untuk proses selanjutnya. (3) Pemurnian dengan SPE (Solid Phase Extraction): Sebanyak 1 ml  80:20  (asetonitril  :  air)  dimasukkan  pada  kolom  Sep-Pak  C18  Cartridge  (1  cc,  100 mg),    sebanyak  0,5  ml  larutan  yang  keluar  ditampung.  Selanjutnya  sebanyak  1  ml sampel  ke  dalam  kolom  Sep–Pak,  kemudian  sebanyak  0,5  ml  larutan  yang  keluar ditampung.  Selanjutnya  sebanyak  0,5  ml  larutan  80:20  asetonitril/air  dimasukkan  ke dalam  kolom  Sep–Pak,  kemudian  sebanyak  0,5  ml  larutan  yang  keluar  ditampung. Selanjutnya  sebanyak  0,25  ml  200  mM  amonium  format  dalam  larutan  50:50 asetonitril/metanol  ditambahkan  ke  dalam  kolom  Sep-Pak,  kemudian  sebanyak  0,5  ml larutan  yang  keluar  ditampung.  Kemudian  sebanyak  0,2  ml  larutan  25:75
asetonitril/buffer (25 mM amonium format pH 4,5) ditambahkan ke dalam kolom Sep- Pak,  sebanyak  0,5  ml  larutan  yang  keluar  diambil  dan  ditampung.  Larutan  siap digunakan untuk diinjek pada LCMS.

## Analisis dan Intepretasi Data
Setalah  dilakukan  pemurnian,  larutan  kemudian  diinjek  menggunakan  LCMS untuk  mengetahui  spektrum  kromatografinya.  Pertama-tama  botol  larutan  harus dibersihkan  dengan  baik  dan  dalam  kondisi  kering,  bebas  dari  kontaminan.  Semua larutan harus disaring dengan membran filter, celluloce asetate 0,45 mikrometer. Semua larutan,  setelah  disaring,  harus  dilakukan degassing ,  untuk  menghilangkan  gas  yang terdapat dalam larutan.
Perangkat  LCMS  yang  digunakan  adalah Shimadzu  LCMS–8040  LC/MS dengan kolom  Shimadzu,  Shim  Pack  FC-ODS  (2  mm  D  x  150  mm,  3  µm).  Sebanyak  1  µl larutan  sampel  diinjekkan  pada  LCMS  yang  diatur  pada  tegangan  kapiler:  3  kV,  suhu kolom  35  C,  fase  gerak  metahol  90%  dalam  akuades,  mode  fase  gerak  gradien (metanol:akuades)  15/85  pada  0-5  menit,  20/80  pada  5-24  menit  dan  90/10  pada  24 sampai selesai. Kecepatan alir 0,5 ml/menit. Mode MS tipe ion [M]+, ionisasi ESI, Scan MS:  0,6  sec/scan  (mz:  10-1000),  waktu  analisis:  80  menit.  Perangkat  lunak  PC  yang digunakan Shimadzu LabSolution LCMS for Windows ver 5,6.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  uji  dengan  LCMS  menunjukkan  adanya  63  kromatogram  yang  merupakan senyawa  metabolit  sekunder  yang  terdapat  pada  sampel  kulit  batang  tanaman  Duwet. Tampilan profil kromatogram LCMS dapat ditampilkan pada Gambar 1.

## Gambar 1. Profil kromatogram LCMS kulit batang duwet
Profil  kromatogram  LCMS  pada  Gambar  1  menunjukkan  jumlah  kromatogram senyawa  metabolit  sekunder  yang  terdapat  pada  kulit  batang  duwet  sebanyak  63 senyawa.  Komposisi  senyawa  metabolit  sekunder  kulit  batang  tanaman  duwet  sesuai hasil LCMS pada Tabel 1 adalah sebagai berikut.
Tabel 1. Hasil Uji LCMS Sampel Kulit Batang Duwet
No puncak Nama Senyawa Bobot Molekul Komposisi (%) No puncak Nama Senyawa Bobot Molekul Komposisi (%) 1 Niacin 123,1110 0,87924 33 β Amyrin 426,7290 1,78461 2 Arabinose 150,1300 1,34619 34 Friedelan 3 one 426,7290 1,50512 3 3,4 Dihydroxybenzoic acid 154,1210 0,94281 35 Lupeol 426,7290 1,73192 4 Xylose 150,1300 1,86644 36 Friedelinol 428,7450 1,27542 5 Pyridoxine 169,1800 1,06943 37 Isovitexin 432,3810 2,19439 6 Gallic acid 170,1200 3,29243 38 Vitexin 432,3810 1,77195 7 Caffeic acid 180,1590 1,31564 39 Apigetrin 432,3810 1,92323 8 Galactose 180,1560 1,73224 40 Orientin 448,3800 1,58886 9 Mannose 180,1560 1,85154 41 Epicatechin gallate 442,3760 2,00579 10 Mycaminose 191,2270 1,31019 42 Folic acid 441,4040 0,81546 11 Ferulic acid 194,1860 1,14333 43 Luteolin 7 glucoside 448,3800 1,77822 12 Eugenin 206,1970 1,70785 44 Ampelopsin B 454,4780 0,95492 13 Pantothenic acid 219,2370 1,21255 45 Betulinic acid 456,7110 1,30952 14 Biotin 244,3090 0,82873 46 Isoquercitrin 464,3790 1,71554 15 Thiamin 265,3545 1,56852 47 Myricitrin 464,3790 1,08837 16 Epiafzelechin 274,2720 2,61985 48 β Amyrin acetate 468,7660 1,35197 17 Cuminiresinol 280,3200 2,92641 49 Ampelopsin A 470,4770 1,05462 18 Kaempferol 286,2390 2,35421 50 Quercituron 478,3620 1,71248
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 -100 900 1900 2900 3900 4900 5900 0 1, 42 8 1, 60 2 1, 66 4 2, 53 9 2, 81 1 3, 04 2 4, 64 3 4, 71 3 4, 72 9 5, 00 7 5, 04 3 5, 57 1 6, 85 5 7, 32 9 8 9, 04 5 9, 78 3 9, 98 5 10 ,3 22 10 ,5 11 ,4 01 11 ,4 27 11 ,5 03 11 ,5 14 12 ,0 63 12 ,1 22 12 ,1 79 12 ,4 21 12 ,9 58 13 14 ,4 02 15 ,6 22 16 17 ,1 63 18 19 ,2 11 19 ,3 19 19 ,3 41 19 ,6 14 19 ,7 39 20 21 ,3 85 21 ,3 87 21 ,3 89 22 ,1 72 22 ,1 83 22 ,3 23 22 ,6 28 23 ,3 22 23 ,5 17 24 ,0 18 24 ,1 19 24 ,1 33 24 ,5 76 25 ,8 35 25 ,8 52 26 ,3 05 26 ,3 11 27 28 29 30 ,8 65 31 32 33 ,0 31 33 ,5 63 34 35 ,5 17 36 ,8 52 36 ,8 78 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 ,1 66 46 ,5 77 47 48 49 50 51 52 53 54 ,1 84 55 56 57 58 59 60 ,0 09 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 TI C RT (min) Chr LCMS, Sample ID: Kulit batang duwet 3
No puncak Nama Senyawa Bobot Molekul Komposisi (%) No puncak Nama Senyawa Bobot Molekul Komposisi (%) 19 Epicatechin 290,2710 2,61978 51 Isorhamnetin 3 O β D galactopyranoside 478.4060 1,37848 20 Ellagic acid 302,1940 1,91510 52 Raffinose 504,4380 1,37912 21 Quercetin 302,2380 1,77701 53 β Glucan 504,4380 1,59521 22 Epigallocatechin 306,2700 2,22574 54 Kaempferol 3 (6" malonylglucoside) 534,4260 1,64581 23 Myricetin 318,2370 1,05666 55 Schaftoside 564,4960 1,08074 24 Ampelopsin 320,2530 1,70789 56 Naringin 580,5390 1,44307 25 Bergenin 328,2730 1,20184 57 Rutin 610,5210 1,57583 26 Syzygiresinol A 358,3460 2,35529 58 Isorhamnetin 3 O rutinoside 624,5480 1,70572 27 Chlorogenic acid 354,3110 1,74587 59 Myricetin 3 robinobioside 626,5200 1,57479 28 Riboflavin 376,3690 0,94277 60 Mannan 666,5790 1,44325 29 Stellasterol 398,6750 1,12578 61 Samarangenin A 760,6130 1,15167 30 Cuminoside A 410,4630 1,52121 62 Glucomannan 828,7200 1,92900 31 β Sitosterol 414,7180 1,54248 63 Samarangenin B 912,7180 0,91409 32 Epiafzelechin 3 O gallate 426,3770 1,91582
Tabel  1    menunjukkan  terdapat  lima  senyawa  (komposisi  terbesar)  yaitu  gallic acid (3,29243%), cuminiresinol (2,92641%), epiafzelechin (2,61978%), syzygiresinol A (2,35529%).  Klasifikasi  senyawa  metabolit  sekunder  pada  kulit  batang  duwet berdasarkan golongan senyawa ditampilkan pada Tabel 2.
Tabel 2. Klasifikasi Kromatogram Senyawa Metabolit Sekunder Kulit Batang Duwet
Golongan Senyawa Vitamin B Niacin,  Pyridoxine,  Pantothenic  acid,  Biotin,  Thiamin,  Riboflavin,  Folic acid, Monosakarida Arabinose, Xylose, Galactose, Mannose, Fenolat 3,4  Dihydroxybenzoic  acid,  Gallic  acid,  Caffeic  acid,  Ferulic  acid, Eugenin,  Ellagic  acid,  Epigallocatechin,  Bergenin,  Chlorogenic  acid, Epicatechin gallate, Gula deoksi Mycaminose Flavonoid Epiafzelechin,  Epicatechin,  Epiafzelechin  3  O  gallate,  Apigetrin, Isoquercitrin, Myricitrin, Naringin, Rutin, Samarangenin A, Samarangenin B, Lignan Cuminiresinol, Syzygiresinol A Flavonol Kaempferol,  Quercetin,  Myricetin,  Quercituron,  Isorhamnetin  3  O  β  D galactopyranoside, Kaempferol 3 (6" malonylglucoside), Isorhamnetin 3 O rutinoside, Myricetin 3 robinobioside, Flavanonol Ampelopsin, Ampelopsin B, Ampelopsin A, Triterpenoid β Sitosterol, β Amyrin, Friedelan 3 one, Lupeol, Friedelinol, Betulinic acid, β Amyrin acetate, Seskuiterpenoid glukosida Cuminoside A
Golongan Senyawa Flavon Isovitexin, Vitexin, Orientin, Luteolin 7 glucoside, Schaftoside, Trisakarida Raffinose Polisakarida β Glucan, Mannan, Glucomannan
Tabel  2  menunjukkan  terdapat  13  golongan  dalam  senyawa  metabolit  sekunder pada kulit batang duwet. Golongan senyawa metabolit sekunder tersebut adalah vitamin B,  monosakarida,  fenolat,  gula  deoksi,  flavonoid,  lignan,  flavonol,  flavanonol, triterpenoid, seskuiterpenoid glukosida, flavon, trisakarida, dan polisakarida. Golongan dengan jumlah senyawa terbanyak adalah fenolat dan flavonoid, masing-masing dengan 10  senyawa.  Golongan  dengan  komposisi  terbesar  adalah  senyawa  fenolat  dengan 17,496%.
Berdasarkan  senyawa  metabolit  sekunder  yang  terkandung  pada  kulit  batang duwet,  maka  kulit  batang  tanaman  duwet  mempunyai  berbagai  aktivitas  yang  penting. Rangkuman aktivitas senyawa metabolit sekunder yang terkandung dalam kulit batang Duwet ditampilkan pada Tabel 3.

## Tabel  3. Aktivitas Senyawa Metabolit Sekunder Kulit Batang Duwet
No Aktivitas Nama Senyawa 1 Antichilblain Niacin (Werbach, 1993).
2
Antidermatitic Niacin (Davies and Stewart, 1990).
3
Antihistaminic Niacin (Werbach, 1993). 4 Antidiabetic Arabinose,  Xylose  (Duke  and  James,  1992),  Pyridoxine (Werbach,  1993),  Caffeic  acid,  Mycaminose,  Cuminiresinol, Ampelopsin, Cuminoside A, Schaftoside, Glucomannan, Lupeol, Isoquercitrin (Duke and James, 1992. 5 Antibacterial 3,4 Dihydroxybenzoic acid, Gallic acid, Mycaminose, Cuminiresinol,  Myricetin,  Syzygiresinol  A,  Cuminoside  A, Ferulic acid (Duke and James, 1992). 6 Antiatherosclerotic Pyridoxine  (Werbach,  1993),  Glucomannan  (Duke  and  James, 1992). 7 Antiautistic Pyridoxine (Davies and Stewart, 1990). 8 Antihepatotoxic Gallic  acid,  Epicatechin  gallate,  Ferulic  acid,  Epicatechin, Epiafzelechin  3  O  gallate  (Vlietinck,  et  al.,  1985),  β  Amyrin, Apigetrin,  Luteolin  7  glucoside,  Ampelopsin  B,  Ampelopsin  A (Duke and James, 1992), Isorhamnetin  3  O  β  D galactopyranoside (Chang, et al., 1985). 9 Antiinflammatory Gallic  acid,  Ferulic  acid  (Kroes,  1991),  Betulinic  acid  (Recio, 1994),  Myricitrin,  Bergenin,    β  Amyrin  acetate,  β  Amyrin, Friedelan 3 one, Friedelinol (Duke and James, 1992). 10 Aldose-Reductase- Inhibitor Caffeic  acid  (Ichikawa,  1991),  Kaempferol  (Oliveira,  et  all., 1997),  Quercetin  (Mao  and  Zhang,  1993),  Chlorogenic  acid (Yoshikawa, et al., 1999).
No Aktivitas Nama Senyawa 11 Antihemolytic Caffeic acid, Chlorogenic acid (Ohnishi, et al., 1994). 12 Energy Galactose, Mannose, Raffinose (Duke and James, 1992). 13 Anticystitic Mannose (Duke and James, 1992). 14 Analgesic Ferulic acid (Chang, et al., 1985). 15 Antiallergic Ferulic acid (Leung and Foster, 1995). 16 Antiaggregant Eugenin (Duke and James, 1992). 17 Anticephalagic Pantothenic acid (Leung and Foster, 1995). 18 Antifatigue Pantothenic acid (Leung and Foster, 1995). 19 Antihypercholesterolemic Pantothenic acid (Werbach, 1993). 20 Antiseborrheic Biotin (Pizzorno and Murray, 1985).
21
Antialzheimeran Thiamin (Werbach, 1993). 22 Antigastritic Thiamin (Leung and Foster, 1995). 23 Beta-Adrenergic Receptor Blocker Epiafzelechin (Zhu, et al., 1997). 24 Antiherpetic Kaempferol (Amoros, et al., 1992). 25 Antilymphocytic Kaempferol (Duke and James, 1992). 26 Antioxidant Epicatechin,  Epigallocatechin,  Epiafzelechin  3  O  gallate (Uchida,  et  al.,  1990);  Isovitexin  (Nigg  and  Seigler,  1992); Epicatechin  gallate  (130),  β  Amyrin  acetate,  Quercituron, Kaempferol 3 (6" malonylglucoside), Myricetin 3 robinobioside, Samarangenin  A,  Samarangenin  B  (Duke  and  James,  1992); Myricetin (Huang and Lee, 1992). 27 Anticancer Ellagic  acid  (Joseph,  et  al.,  2001),  Betulinic  acid,  Stellasterol,  β Sitosterol (Madhavi, et al., 1998). 28 Anticataract Ellagic acid (Shimizu, et al., 1989). 29 Adrenergic Receptor Blocker Epigallocatechin (Zhu, et al., 1997). 30 Lipoxygenase-Inhibitor Epigallocatechin (Huang and Lee, 1992). 31 Antitussive Bergenin (Yeung, et al., 1985). 32 Antiphotophobic Riboflavin (Davies and Stewart, 1990). 33 Antihyperlipoproteinaemic  Stellasterol, β Sitosterol.
34 Gastroprotective
β Amyrin (Duke and James, 1992).
35 Antitumor Lupeol (Werbach, 1993). 36 Antithyroid Vitexin (Werbach, 1993). 37 cAMP-Phosphodiesterase- Inhibitor Vitexin (Schussler, et al., 1991), Orientin (Pizzorno and Murray, 1985). 38 Immunostimulant Epicatechin gallate (McKenna, et al., 2000). 39 Anticervicaldysplasic Folic acid (Pizzorno and Murray, 1985). 40 Antitumor-Promoter Myricitrin (Yasukawa, et al., 1989). 41 Fiber β Glucan, Mannan (Duke and James, 1992). 42 Antineuropathic Naringin  (Werbach,  1993),  Rutin,  Isorhamnetin  3  O  rutinoside
(Duke and James, 1992).
Tabel 3 menunjukkan bahwa kulit batang tanaman Duwet mempunyai kandungan senyawa metabolit sekunder yang kaya aktivitas fitokimia yang bermanfaat dalam dunia kesehatan. Informasi penelitian ini dapat menjadi dasar pemanfaatan kulit batang Duwet dengan penelitian-penelitian ilmiah lebih lanjut dalam dunia medis baik upaya preventif maupun pengobatan.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian,  disimpulkan  bahwa  telah  ditemukan  63  senyawa metabolit  sekunder  pada  kulit  batang  tanaman  duwet  ( Syzigium  cumini L.) menggunakan  metode  LCMS  ( Liquid  Chromatograph  Mass  Spectrometry ).  Senyawa metabolit  sekunder  dengan  komposisi  terbesar  adalah  gallic  acid  dengan  3,292%. Terdapat 13 golongan untuk 63 senyawa metabolit sekunder yang ada pada kulit batang duwet.  Golongan  terbesar  pada  kulit  batang  duwet  adalah  fenolat  dengan  17,496%. Terdapat  13  aktivitas  fitofarmaka  dari  63  senyawa  metabolit  sekunder  dalam  kulit batang tanaman duwet.

## DAFTAR PUSTAKA
Amoros,  M.,  Simoes,  C.M.O.,  Girre,  L.  1992.  “Synergistic  effect  of  flavones  and flavonols against herpes simplex virus type 1 in cell culture: comparison with the antiviral activity of propolis”. J Natural Products 55(12), 1732-1740.
Braga  FG,  Bouzada  MLM,  Fabri  RL,  Matos  MO,  Moreira  FO,  Scio  E.  2007. “Anleishmanial  and  antifungal  activity  of  plants  used  in  traditional  medicine  in Brazil”. J. Ethnopharmacol , 111, 396-402.
Chandrasekaran  M,  Venkatesalu,  V.  2004.  “Antibacterial  and  antifungal  activity  of Syzygium jambolanum seeds”. J Ethnopharmacol , 91, 105-108.
Chang,  H.  W.,  Yeung,  W.  W.  Tso  and  A.  Koo.  1985. Advance  in  Chinese  Medicinal Materials  Research ..  Eds.  H.  M.  World  Scientific  Publishing  Co.,  Philadelphia Pa., page 69.
Davies,  S.,  and  Stewart,  A.  1990. Nutritional  Medicine .  Avon  Books,  New  York. 509pp.

## Wijayanti, Titik dan, Setiawan, D. C. Senyawa Metabolit Sekunder
Werbach, M. 1993. Healing with Food . Harper Collins, New York, 443 pp.
Duke, and James, A. 1992. Handbook of phytochemical constituents of GRAS herbs and other economic plants . Boca Raton, FL. CRC Press.
Huang,  M.T.,  Ho,  C.T.  and  Lee,  C.Y.1992. Phenolic  Compounds  in  Food  and  Their Effects  on  Health.  Antioxidants  &  Cancer  Prevention ..  ACS  Symposium  Series 507.ACS, Washington 402 pp.
Ichikawa,  K.  1991.  “Isolation  and  Structure  Determination  of  Aldose  Reductase Inhibitors  from  Traditional  Thai  Medicine,  and  Syntheses  of  Their  Derivatives”. Sankyo Kenkyusho Nempo , 43, 99-110.
Jagetia  GC,  Baliga  MS.  2003.  “Evaluation  of  the  radioprotective  effect  of  the  leaf extract  of Syzygium cumini  (jamun) in  mice exposed to  a lethal  dose of gamma irradiation”. Nahrung , 47, 181-185
Jagetia  GC,  Baliga  MS.  2004.  “The  evaluation  of  nitric  oxide  scavenging  activity  of certain Indian medicibal plants in vitro a preliminary study”. J Med Food ,7, 343- 348.
Joseph, J., Nadeau, D. and Underwood, A. 2001. The Color Code . Hyperion, NY.
Shimizu,  M.,  Horie,  S.,  Terashima,  S.,  Ueno,  H.  1989.”  Studies  on  Aldose  Reductase Inhibitors  from  Natural  Products.II.  Active  Components  of  a  Paraguayan  Crude Drug  'Para-parai  mi,'  Phyllanthus  niruri”. Chem.  Pharm.  Bull .  37(9),  2531-2532, 1989.
Kroes, B.H. 1991. “Anti-Inflammatory Activity of Gallic Acid”. Planta Medica , 58(6),
499.
Kumar  A,  Naqvi  AA,  Kahol  AP,  Tandon,  S.  2004.  “Composition  of  leaf  oil  of Syzygium cumini from north India”. Indian Perfum , 48, 439-441.
Leung,  A.  Y.  and  Foster,  S.  1995. Encyclopedia  of  Common  Natural  Ingredients 2nd Ed. John Wiley & Sons, New York. 649 pp.
Mao, X. M., Zhang, J. Q. 1993. “Inhibition of Aldose Reductase by Extracts of Chinese Herbal Medicine”. Zhongguo Zhongyao Zazhi , 18(10), 623-624
Madhavi,  D.  L.,  Bomser,  J.,  Smith,  M.,  Singletary,  K.  1998.  “Isolation  of  Bioactive Constituents from Vaccinium myrtillus (Bilberry) Fruits and Cell Cultures”. Plant Sci ., 131(1), 95-103.
Mahmoud Il, Marzouk MS, Moharram FA, El Gindi MR, Hassan AM. 2001. “Acylated flavonol  glycosides  from  Eugenia  jambolana  leaves”. Phytochemistry ;  58,  1239- 1244.
McKenna, D. J., Hughes, K., and Jones, K. 2000. “Green Tea Monograph”. Alternative Therapies , 6(3), 61-82
Mukherjee PK, Saha K, Murugesan T, Mandal SC, Pal M, Saha BP. 1998. “Screening of  anti  diarrhoeal  profile  of  some  plant  extracts  of  a  spesific  region  of  West Bengal India”. J Ethnopharmacol , 60, 85-89.
Muruganandan  S,  Srinivasan  K,  Chandra  S,  Tandan  SK,  Lal  J,  Raviprakash,  V.  2001. “Antiinflamantory activity of Syzygium cumini bark”. Fitoterapia , 72, 369-375.
Nascimento  GF,  Locatelli  J,  Freitas  PC,  Silva  GL,.  2000.  “Antibacterial  activity  of plants  extracts  and  phytochemicals  on  antibiotic-resistant  bacteria”. Braz  J Microbiol , 31,  247-256.
Nigg,  H.N.  and  Seigler,  D.S.  1992. Phytochemical  Resources  for  Medicine  and Agriculture . Plenum Press, New York. 445 pp.
Ohnishi, M., Morishita, H., Iwahashi, H., Toda, S., Shirataki, Y., Kimura, M., and Kido, R. 1993. “Inhibitory Effects of Chlorogenic Acids on Linoleic Acid Peroxidation and Haemolysis”. Phytochemistry , 36(3), 579-583.
Oliveira,  T.  T.,  Nagem,  T.  J.,  Miranda,  L.  C.  G.,  Paula,  V.  F.,  Teixeira,  M.  A.  1997. “Inhibitory  Action  on  Aldose  Reductase  by  Soybean  Flavonoids”. J  Braz  Chem Soc , 8(3), 211-213.
Pari, L. and Saravanan. 2008. “Hipoglycemic and antihiperglycemic effect of Syzygium cumini bark in streptozotocin induced diabetic rats”. J. Pharmacol Toxicol, 3(1), 1-10.
Pizzorno,  J.E.  and  Murray,  M.T.  1985. A  Textbook  of  Natural  Medicine .  John  Bastyr College Publications, Seattle, Washington (Looseleaf).
Ramirez,  RO,  Rao  CC.  2003.  “The  gastroprotective  effect  of  tannins  extracted  from duhat  (Syzygium  cumini  Skeels)  bark  on  HCl/ethanol  induced  gastric  mucosal injury in Spraguw Dawley rats”. Clin Hemorheol Microcirc , 29, 253-261.
Recio,  M.  1994.  “Investigations  on  the  Steroidal  Anti-Inflammatory  Activity  of Triterpenoids from Diospyros leucomelas”. Planta Medica , 61, 9.
Sagrawat  H,  Mann  AS,  Kharya  MD.  2006.  “Pharmacological  potential  of  Eugenia jambolana: a review”. Pharmacogn Mag , 2, 96-104.
Schossler DRC, Mazzanti CM, Almeida da Luzi  SC, Filappi  A, Prestes D, Ferreria da Silveira A. 2004. “Syzygium cumini and the regeneration of insulin positive cells from the pancreatic duct”. Braz J Vet Res Anim Sci , 4, 236-239.
Schussler,  M.,  Fricke,  U.,  Nikolov,  N.,  and  Holzl,  J.  1991.  “Comparison  of  the Flavonoids  Occurring  in  Crataegus  species  and  Inhibition  of  3',5'-Cyclic Adenosine Monophosphate Phosphodiesterase”. Plant Medica , 57(2), p.A-133.
Silva,  DHS,  Plaza  CV,  Bolzani  VS,  Cavalheiro  AJ,  Castro-Gamboa  I.  2006. “Antioxidants from  fruits and leaves of Eugenia  jambolana an edible Myrtaceae species from Atlantic Forest”. Plant Med , 72, 1038.
Steenis,  C.G.G.J.  2005. Flora .  Diterjemahkan  oleh:  Moeso  Surjowinoto,  dkk.  Jakarta. PT. Pradnya Paramita.
Sultana B, Anwar F, Przybylski R. 2007. “Antioxidant activity of phenolic components present  in  barks  of  Azadiracta  indica,  Terminalia  arjuna  Acacia  nilotica  and Eugenia jambolana Lam trees”. Food Chem , 104, 1106-1114.
Uchida,  U.,  Ohta,  H.,  Niwa,  M.,  Mori,  A.,  Nonaka,  G-i.,  Nishioka,  I.,  and  Zaki,  M. 1990.  “Prolongation  of  Life  Span  of  Stroke-Prone  Spontaneously  Hypertensive Rats  (SHRSP)  Ingesting  Persimmon  Tannin”. Chem.  Pharm.  Bull .,  38(4),  1049- 1052.
Vaishnava MM, Gupta KR. 1990. “Isorhamnetin 3 O rutinoside from Syzygium cumini Lam”. J Indian Chem Soc , 67, 785-786
Vaishnava  MM,  Tripathy  AK,  Gupta  KR.  1992.  “Flavonoid  glycosides  from  roots  of Eugenia jambolana”. Fitoterapia , 63, 259-260.
Vijayanand P, Rao LJM, Narasimham P. 2001. “Volatile flavour components of Jamun fruit (Syzygium cumini)”. Flavpud Fragr J , 16, 47-49.
Villasenor  IM,  Lamadrid  MRA.  2006.  “Comparative  antihyperglycaemic  potentials  of medicinal plants”. J Ethnopharmacol , 104, 129-131.
Vlietinck, A.J. and Dommisse, R.A. eds. 1985. Advances in Medicinal Plant Research . Wiss. Verlag. Stuttgart.
Wellapradiska, T. 2015. Tanaman dan Buah untuk Kesehatan . wellapradiska.blogspot.com. diakses tanggal 7 Mei 2017.
Yasukawa, K., Takido,  M., Takeuchi, M., Sato, Y., Nitta, K., and Nakagawa, S. 1989. “Inhibitory  Effects  of  Flavonol  Glycosides  on  12-O-Tetradecanoylphorbol-13- acetate-Induced Tumor Promotion”. Chem. Pharm. Bull , 38(3), 774-776, 1990.
Yeung,  W.  W.  Tso  and  A.  Koo.  1985 .  Advance  in  Chinese  Medicinal  Materials Research . Eds. H. M. Chang, H. W. World Scientific Publishing Co., Philadelphia Pa., page 200.
Yoshikawa,  M.,  et  al.  1999.  “Medicinal  Flowers.  I.  Aldose  Reductase  Inhibitors  and Three  New  Eudesmane-Type  Sesquiterpenes,  Kikkanols  A,  B,  and  C,  From  the Flowers of Chrysanthemum inducum L”. Chem Pharm Bull , 47(3), 340-345.
Zhu,  M.,  Phillipson,  J.  D.,  Greengrass,  P.  M.,  Bowery,  N.  E.,  Cai,  Y.  1997.  “Plant Polyphenols:  Biologically  Active  Compounds  or  Non-Selective  Binders  to Protein” Phytochemistry , 44(3), 441-447.