http://ejurnal.umri.ac.id/index.php/photon

## Uji Toksisitas Ekstrak Daun Belimbing Wuluh (Averrhoa bilimbi L.) terhadap Ulat Grayak (Spodoptera frugiperda)

## Nofripa Herlina*, Tria Pratikasari, Novia Gesriantuti
Program Studi Biologi, Fakultas MIPA dan Kesehatan, Universitas Muhammadiyah Riau Jl Tuanku Tambusai, Pekanbaru, Riau, Indonesia
*Correspondence e-mail: nofripaherlina@umri.ac.id

## Abstract
Belimbing wuluh is a tropical tree that grows as a wild tree or planted because it contains many benefits. Belimbing wuluh is useful  as  traditional  medicine  and  has  secondary  metabolite  compounds  such  as  tannins,  flavonoids  and  saponins  that function as insecticides. This study aims to determine the potential of Belimbng wuluh leaf extract as a natural insecticide against Fall armyworm (S. frugiperda) and to determine the concentration that can kill 50% of Fall armyworms (LC50). The method used for this research is a completely randomized design (CRD), Belimbing wuluh leaf extract made by maceration method.  The  concentration  of  the  extract  used  was  0%,  60%,  80%,  and  100%.  The  test  larvae  used  were  40  tails.  The parameters observed were mortality and speed of death. The result of this study showed that the number of Fall armyworm deaths was 66 from the total number of 120 larvae. This proves that Belimbing wuluh leaf extract has the potential as a natural insecticide against Fall armyworm (S. frugiperda). Based on probit analysis the effective concentration to kill 50% of Fall armyworm larvae was 59,9%.
Keywords: Belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi L.), LC50, Mortality, Fall armyworm (Spodoptera frugiperda)

## Abstrak
Belimbing wuluh merupakan pohon tropis yang tumbuh sebagai pohon liar maupun ditanam karena mengandung banyak manfaat, Belimbing wuluh bermanfaat sebagai obat tradisional dan memiliki senyawa metabolit sekunder seperti tannin, flavonoid dan saponin yang berfungsi sebagai insektisida. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui potensi ekstrak daun Belimbing wuluh sebagai insektisida alami terhadap ulat grayak (S. frugiperda) dan mengetahui konsentrasi yang dapat mematikan 50% ulat grayak (LC50). Metode yang digunakan untuk penelitian ini adalah metode Rancangan Acak Lengkap (RAL), ekstrak daun Belimbing wuluh dibuat dengan metode maserasi. Konsentrasi ekstrak yang digunakan 0%, 60%, 80%, dan 100%. Larva uji yang digunakan sebanyak 40 ekor. Parameter yang diamati adalah mortalitas dan kecepatan kematian. Hasil penelitian ini menunjukkan jumlah kematian ulat grayak adalah 66 ekor dari jumlah total larva 120 ekor. Hal ini membuktikan  bahwa  ekstrak  daun  Belimbing  wuluh  berpotensi  sebagai  insektisida  alami  terhadap  ulat  Grayak  (S. frugiperda). Berdasarkan analisis probit konsentrasi yang efektif untuk membunuh 50% larva ulat grayak adalah 59,9%. Kata kunci : Belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi L.), LC50, Mortalitas, Ulat Grayak (Spodoptera frugiperda)

## 1. Pendahuluan
Indonesia adalah negara yang beriklim tropis yang kaya akan keanekaragaman hayati flora dan fauna. Terlihat dari  banyaknya  keanekaragaman  flora  di  Indonesia yang  tumbuh  subur  salah  satunya  adalah  Belimbing wuluh. Pohon belimbing wuluh terkadang tumbuh liar atau ditanam karena tumbuhan ini memiliki manfaat. Selain bermanfaat sebagai penambah rasa asam alami pada makanan, juga dapat dimanfaatkan sebagai bahan obat tradisional untuk berbagai penyakit di antaranya yaitu batuk, diabetes, diare dan tekanan darah tinggi (Hayati et al ., 2010). Selain manfaat di atas menurut Kumar et al . (2013), ekstrak buah dan daun Belimbing wuluh  memiliki  manfaat  yakni  antidiabetes,  antimikroba,  antifertalitas  dan  antibakteri.  Daun  belimbing wuluh mengandung senyawa metabolit sekunder seperti tannin, saponin dan flavonoid dan bisa dijadikan insektisida alami untuk mengusir serangga hama pada tanaman.
Serangga merupakan kelompok hewan paling banyak jenisnya, peranan serangga sangat penting bagi
http://ejurnal.umri.ac.id/index.php/photon
ekosistem.  Peranan  tersebut  dapat  menguntungkan  dan  dapat  pula  merugikan,  peranan  menguntungkan diantaranya adalah  sebagai  pollinator, musuh alami bagi serangga lain dan sebagai  dekomposer.  Peranan yang merugikan adalah dapat menyebabkan kerusakan yang cukup parah pada tanaman seperti organ penting tumbuhan menjadi rusak, dan dapat dikategorikan sebagai hama (Mokodompit et al. , 2018).
Salah satu serangga hama pada tanaman pertanian adalah Spodoptera yang pada fase larva, hama ini dikalangan petani dikenal dengan nama ulat grayak. Salah satu ulat grayak yang lumrah dikenal oleh petani adalah Spodoptera litura, tetapi pada awal tahun 2019 lalu, muncul spesies baru dari genus Spodoptera, yakni Spodoptera frugiperda . Hama ini merupakan satu hama baru yang menyerang tanaman Jagung di Sumatera (Kementan,  2019). S.  frugiperda sangat  merugikan  dalam  bidang  pertanian  seperti  yang  dilaporkan  oleh Shylesha et al. (2018), bahwa keberadaan dan perkembangan populasi S. frugiperda di Karnataka, India perlu diwaspadai  karena  mengakibatkan  kerusakan  yang  cukup parah pada tanaman, seperti membuat gerekan pada daun muda tanaman  dan hanya meninggalkan lapisan epidermis yang transparan. Selain itu, hama ini juga menyerang beberapa tanaman lain, seperti Kacang tunggak, Kacang tanah, Kentang, Kedelai, Kapas, dan lain-lain.  Tanaman  yang  diserang  oleh  serangga  hama  biasanya  dikendalikan  dengan  menggunakan insektisida kimia (Wismaningsih, et al., 2016). Pemakaian insektisida kimia memang sangat mudah dan cepat membunuh serangga  sasaran.  Akan tetapi,  efek yang ditimbulkan  berupa residu yang dapat merusak  dan masuk ke dalam komponen lingkungan karena bahan aktif sangat sulit terurai di lingkungan.
Mencermati  berbagai  dampak  negatif  yang  ditimbulkan  dari  penggunaan  insektisida  kimia,  maka perlu dicari alternatif lain yang lebih ekonomis dan tidak merusak lingkungan dan tanaman itu sendiri. Oleh karena  itu,  penggunaan  insektisida  alami  merupakan  salah  satu  alternatif  yang  perlu  dipertimbangkan (Listiyati et al ., 2012). Beberapa penelitian yang sudah dilakukan dari penggunaan ekstrak insektisida  alami daun Belimbing wuluh yaitu penelitian Syah et al . (2016), menyebutkan bahwa ekstrak daun Belimbing wuluh mengandung  saponin  3,61  %,  tannin  4,11%,  dan  flavonoid  1,76  %  yang  mana  kandungan  tersebut berpengaruh  terhadap  mortalitas  larva Spodoptera  litura .  Selanjutnya  penelitian  Rini et  al . (2019),  hasil penelitiannya menyimpulkan bahwa daun Belimbing wuluh dapat dijadikan sebagai insektisida alami dalam membunuh hama nimfa wereng batang cokelat. Penggunaan ekstrak insektisida alami untuk mengendalikan hama ulat grayak ( S. frugiperda ) yang sudah dilakukan oleh Salaki et  al .  (2020), menyatakan bahwa pestisida alami  Serai  wangi,  daun  Cengkeh  dan  Kayu  manis  mampu  membunuh  larva S.  frugiperda. Danar,  (2020) melakukan  uji  penapisan  perlakuan  biji  Mimba  menunjukkan  hasil  bahwa  dapat  memperpanjang  waktu perkembangan larva, menurunkan konsumsi pakan larva, dan menghambat perkembangan bobot pupa larva S.  frugiperda. Pada  saat  ini  telah  banyak  dikembangkan  bahan  alami  yang  ramah  lingkungan  untuk mengendalikan hama S. frugiperda . Mengingat kandungan metabolit sekunder yang  terdapat di dalam daun Belimbing  wuluh yang bisa dijadikan sebagai insektisida alami untuk mengendalikan serangga hama.  Maka dari itu perlu dilakukan penelitian tentang uji toksisitas ekstrak daun Belimbing wuluh ( A. bilimbi L.) terhadap ulat Grayak ( S. frugiperda ).

## 2. Metodologi

## 2.1.   Persiapan alat dan bahan
Penelitian  dilakukan  secara  eksperimen  menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL).  Ekstrak  daun Belimbing wuluh dibuat dengan metode maserasi dan pengujian dilakukan dengan metode celup daun ( leaf dipping  methods ).  Dasar penentuan  konsentrasi  pada  penelitian  ini  menggunakan  hasil  penelitian sebelumnya yaitu penelitian Syah (2016), Pengaruh Ekstrak Daun Belimbing Wuluh ( A. bilimbi L.) Terhadap Mortalitas  dan  Perkembangan  Larva Spodoptera  litura, konsentrasi  yang  efektif  untuk  membunuh  50% larva adalah 84,2%. Pada penelitian ini konsentrasi yang digunakan 0%, 60%, 80%, dan 100% dengan 3 pengulangan.  Data  mortalitas  dan  kecepatan  kematian  ditabulasi  dan  dianalisis  menggunakan  program SPSS  16.0.  Pengamatan  jumlah  larva S.  frugiperda yang  mati  dilakukan  selama  24  jam  dengan  6  kali
http://ejurnal.umri.ac.id/index.php/photon
pengambilan data (4 jam sekali). Data yang diperoleh selanjutnya digunakan untuk menghitung mortalitas, dan kecepatan kematian.

## 2.1. Mortalitas
Mortalitas menunjukkan tingkat kemampuan atau jumlah kematian hama yang disebabkan oleh insektisida yang  digunakan.  Mortalitas S.  frugiperda yang  dihitung  setelah  24  jam  setelah  aplikasi. Mortalitas dapat dihitung dengan rumus (mengacu pada Krisman et al ., 2016).
𝑀(%) = 𝑥 𝑦 × 100 Keterangan: M = Mortalitas (%)
x
= Jumlah hama yang mati (ekor) y = Jumlah hama uji (ekor)

## 2.2. Kecepatan kematian
Kecepatan kematian ulat grayak ditujukan untuk mengetahui cepat atau lambatnya larva yang mati dalam satuan  waktu  tertentu.  Kecepatan  kematian  ulat  grayak  dapat  dilihat  pada  interval  waktu  pengamatan. Interval  waktu  kecepatan  kematian  ulat  grayak  terbagi  menjadi  3  kategori  yakni  kategori  cepat  yaitu interval waktu pengamatan 4-8 jam setelah aplikasi, kategori sedang yaitu interval waktu pengamatan 12- 16 jam setelah aplikasi, dan kategori lambat yaitu interval waktu pengamatan 20-24 jam setelah aplikasi (Ahadi, 2019).

## 2.3. Analisis Data
Data  yang  telah  didapat  disajikan  dalam  bentuk  tabel,  selanjutnya  dianalisis  dengan  analisis  statistik. Analisis statistik yang digunakan adalah:
a. Analisis Data Mortalitas Tahap Pertama
yaitu melakukan faktor koreksi uji menggunakan pendekatan Abbot, jika perlakuan pada kontrol <5 maka angka  kematian  dapat  digunakan,  sedangkan  jika  angka  kematian  pada  kontrol  berkisar  antara  5% sampai dengan 20% maka akan dilakukan koreksi data dengan menggunakan rumus Abbot (mengacu pada Fuadzy et al ., 2015).
𝑃𝑡(%) = 𝑃𝑜 − 𝑃𝑐 100 − 𝑃𝑐 × 100 Keterangan: P t = Mortalitas terkoreksi (%) Po = Persentase mortalitas pada perlakuan (%)
Pc = Persentase mortalitas pada kontrol (%)
b. Analisis Probit
Analisis probit berfungsi untuk mengetahui LC 50 dari  ekstrak  insektisida alami terhadap mortalitas larva S. frugiperda (Aradilla, 2009). Analisis probit menggunakan SPSS 16.0 dan dapat dibuktikan dengan grafik interpolasi yaitu hasil uji sebenarnya diplotkan dalam grafik dengan sumbu X  =  konsentrasi ekstrak daun Belimbing wuluh dan sumbu Y = persentase kematian larva. Cari kisaran antar titik yang terdapat kematian 50% organisme uji dan dihubungkan dengan garis. Pada konsentrasi atau dosis 50% sumbu Y ditarik  garis  sampai  memotong  garis  antara  2  titik  tersebut.  Titik  potong  tersebut  diproyeksikan  ke sumbu X, sehingga diperoleh LC 50.
http://ejurnal.umri.ac.id/index.php/photon
c. Kriteria penilaian keefektifan suatu insektisida (mengacu pada Ulfa, 2014)
Tabel 1. Kriteria keefektifan suatu insektisida. Kategori Skor Sangat efektif 75-100% Efektif 50-74,9% Cukup efektif 25-49,9% Tidak efektif <25%

## 3. Hasil dan Pembahasan
3.1  Potensi  Ekstrak  Daun  Belimbing  Wuluh  ( A.  bilimbi L.)  terhadap  Mortalitas  dan  Kecepatan Kematian Ulat Grayak ( S. frugiperda ) Pengamatan mortalitas larva instar 3 ulat Grayak ( S. frugiperda ) dilakukan selama 24 jam dengan 6 kali pengambilan  data  (4  jam  sekali).  Hasil  pengamatan  menunjukkan  bahwa  jumlah  larva  yang  mati  pada masing-masin  perlakuan  adalah 18,  22  dan  26  ekor,  sedangkan  pada  perlakuan  kontrol  tidak  terjadi kematian larva. Selanjutnya dihitung persentase mortalitas ulat Grayak pada setiap perlakuan, persentase mortalitas yang didapatkan menunjukkan bahwa semakin tinggi konsentrasi ekstrak daun Belimbing wuluh, maka  semakin  besar  persentase  mortalitas  larva S.  frugiperda .  Jumlah  larva  yang  mati  dan  persentase mortalitas pada masing-masing konsentrasi dapat dilihat pada Tabel 2 berikut.
Tabel 2. Jumlah larva yang mati dan persentase mortalitas pada masing-masing konsentrasi Konsentrasi (%) Total larva (ekor) Jumlah larva mati (ekor) Mortalitas (%) 0 30 0 0 60 30 18 60,0 80 30 22 73,3 100 30 26 86,6
Awal perlakuan larva ulat Grayak masih mengkonsumsi daun Jagung sehingga metabolit sekunder yang telah menempel pada daun Jagung akan ikut masuk ke dalam tubuh ulat Grayak. Berdasarkan  hasil penelitian Pattagading (2018), ekstrak daun Belimbing wuluh ( A. bilimbi L.) mengandung senyawa metabolit sekunder yaitu tannin (4,11%), flavonoid (1,76%), saponin (3,61%).
Gejala awal ulat Grayak setelah mengkonsumsi pakan yang telah direndam ekstrak daun Belimbing wuluh  yaitu  pergerakan  larva  yang  melambat,  hanya menetap  pada  satu  tempat,  dan  kotoran  yang dikeluarkan banyak. Ulat Grayak yang  telah  mati  dapat  dilihat  tubuh  larva  mengkerut,  berwarna  hitam, kaki menghadap ke atas, dan keluarnya cairan atau lendir. Hal ini diduga akibat senyawa metabolit sekunder yang ada pada ekstrak daun Belimbing wuluh yang berfungsi sebagai racun kontak dan racun perut.
Kondisi  larva  yang  mati  menunjukkan  ukuran  tubuh  menyusut  atau  kecil, berwarna  hitam,  dan tubuhnya mengering, hal ini diduga akibat senyawa bioaktif yang ada pada ekstrak daun Belimbing wuluh terjadi  kontak  langsung  dengan  tubuh  larva  ( lihat pada  Gambar  1).  Menurut  Darmanto  (2007),  dinding tubuh  merupakan  bagian  tubuh  serangga  yang  dapat  menyerap  senyawa  bioaktif  terkandung  dalam insektisida alami dalam jumlah yang besar. Ketika larva mengalami kontak dengan ekstrak daun Belimbing wuluh  maka  akan  menyebabkan  senyawa  metabolit  sekunder  masuk  melalui  kulit  dan  mulut  serangga sehingga  mengakibatkan  kematian  pada  serangga.  Danusulistyo  (2011),  menyebutkan  bahwa  senyawa metabolit sekunder yang berfungsi sebagai racun kontak adalah senyawa saponin, karena saponin dapat menghambat ekdisis (pergantian kulit), Racun kontak ini dapat membuat dinding tubuh larva menjadi rusak atau mengkerut.
Berdasarkan  pengamatan,  pada  konsentrasi  60%,  larva  mengkonsumsi  daun  lebih  banyak dibandingkan  dengan  konsentrasi  80%  dan  100%.  Hal  ini  terlihat dari jumlah daun yang tersisa, akan tetapi jumlah larva yang mati sedikit dan awal kematian dimulai pada 16 jam setelah aplikasi. Konsentrasi 80% dan 100%, jumlah pakan yang dikonsumsi larva sedikit dan awal kematian lebih cepat yaitu dimulai
http://ejurnal.umri.ac.id/index.php/photon
pada  8  jam  setelah  perlakuan.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  senyawa metabolit sekunder yang ada pada ekstrak daun Belimbing wuluh telah berfungsi sebagai toksik pada larva, ditunjukkan dengan kondisi larva yang  mati  memiliki  ciri-ciri  tubuh  yang  lembek,  keluarnya  cairan  atau  lendir,  dan  kaki  larva  yang menghadap ke atas, hal ini diduga akibat senyawa metabolit sekunder yang berfungsi sebagai racun perut. Kondisi larva yang mati akibat racun perut dapat dilihat pada Gambar 2.
Sumber: Koleksi pribadi Gambar 1. Dampak senyawa saponin terhadap larva
Menurut Kaihenna et al. (2011), senyawa yang berfungsi sebagai racun perut adalah tannin, senyawa ini akan menghalangi serangga dalam mencerna makanan dan dapat menurunkan kemampuan mencerna makanan  dengan  cara  menurunkan  aktivitas  enzim  pencernaan  ( protease  dan  amilase )  yang  berperan dalam mengkatalis  protein  menjadi  asam  amino  yang  dibutuhkan  untuk  pertumbuhan  larva,  terikatnya enzim oleh  tannin, maka meyebabkan kerja  enzim  menjadi  terhambat, sehingga proses metabolisme sel dapat  terganggu  dan  larva  akan  kekurangan  nutrisi,  jika  proses  ini  berlangsung  terus,  maka  akan berdampak pada kematian larva.
(a) (b)
(c) Sumber: Koleksi pribadi
Gambar 2. Larva yang mati akibat metabolit sekunder ekstrak daun  Belimbing wuluh. (a) larva yang mati pada konsentrasi 60%, larva yang mati pada konsentrasi 80%, (c) larva yang mati pada konsentrasi 100%.
Berdasarkan  jumlah  kematian  larva  akibat  senyawa  toksik  ekstrak  daun  Belimbing  wuluh  dapat dilihat bahwa semakin tinggi konsentrasi ekstrak maka mortalitas larva ulat Grayak juga meningkat, hal ini berhubungan dengan jumlah metabolit sekunder yang ada pada ekstrak daun Belimbing wuluh ( lihat pada Tabel  3).  Menurut  Leatemia  dan  Isman  (2004)  semakin  tinggi  konsentrasi  ekstrak,  maka  akan menyebabkan  mortalitas  larva  juga  tinggi,  meskipun  daun sawi yang dikonsumsi larva dengan porsi yang sangat kecil. Hal ini dikarenakan, semakin tinggi konsentrasi ekstrak maka semakin tinggi juga jumlah toksik yang terkandung di dalam ekstrak. Sehingga walaupun sedikit jumlah daun yang dikonsumsi larva,
http://ejurnal.umri.ac.id/index.php/photon
tetapi  jumlah  toksik  yang  terakumulasi  lebih  banyak  dibandingkan  pada  perlakuan  dengan  konsentrasi rendah, sehingga mortalitas juga tinggi sebanding dengan tingginya konsentrasi. Pangnakorn et al . (2012), menyatakan bahwa setiap senyawa toksik yang masuk ketubuh larva akan terakumulasi dan perlahan akan merusak  sistem  tubuh  serta  menghambat  pertumbuhan  larva  yang  akan  berujung  pada  kematian. Berdasarkan penelitian Yunita et al . (2009), kematian larva juga diakibakan oleh ketidakmampuan larva untuk mendetoksifikasi senyawa toksik yang masuk ke dalam tubuhnya. Pengamatan kecepatan kematian ulat grayak S. frugiperda dilakukan setiap 4 jam, 8 jam,12 jam, 16 jam, 20 jam sampai 24 jam setelah aplikasi. Kecepatan kematian ulat grayak akibat ekstrak daun Belimbing wuluh dapat dilihat pada Tabel 4.2.
Tabel 3 . Jumlah larva yang mati dan Interval waktu kematian S. frugiperda Perlakuan (%) Mortalitas (%) Jam Interval Kematian (jam)
4 8 12 16 20 24 0 0 0 0 0 0 0 0 0 60 60,0 0 0 0
5 5 8 16-24 80 73,3 0 2 3 4 4 9 8-24 100 86,6 0 2 3
8 3 10 8-24 Jumlah 0 4 6 17 12 27
3.2. Lethal Consentration (LC 50 )
Gambar 3. Grafik interpolasi penentuan LC 50
Lethal Consentration (LC 50 ) merupakan konsentrasi yang dapat menyebabkan kematian 50% dari jumlah larva uji, penentuan LC 50 dilakukan dengan analisis probit dan grafik interpolasi menggunakan SPSS 16.0. Interpolasi LC 50 dapat dilihat pada Grafik 3.
Berdasarkan hasil analisis probit, diketahui nilai LC 50 24 jam pengamatan didapatkan pada konsentrasi 59,9% (lihat lampiran 4). Konsentrasi 59,9% telah dapat mematikan 50% larva S. frugiperda . Berdasarkan Kriteria  penilaian  keefektifan  suatu  insektisida  bahwa  konsentrasi  59,9%  merupakan  konsentrasi  yang
http://ejurnal.umri.ac.id/index.php/photon
efektif untuk dijadikan sebagai insektisida alami terhadap ulat Grayak.

## 4. Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan, maka dapat disimpulkan bahwa ekstrak daun Belimbing wuluh berpotensi sebagai insektisida alami terhadap ulat Grayak ( S. frugiperda ) dengan jumlah kematian 66 ekor dari jumlah total 120 ekor larva. Berdasarkan analisis probit konsentrasi yang efektif untuk  membunuh 50% larva ulat grayak adalah 59,9%.

## Daftar Pustaka
Aradilla, A. S. 2009. Uji Efektifitas Larvasida Ekstrak Etanol Daun Mimba ( Azairachta indica ) Terhadap Larva Aedes aegypti. Skirpsi . Semarang. Universitas Diponegoro.
Danar, D., Yusuf, H., Tarkus, S., Syarif, H. and Neneng, S.W. 2020. The Toxicity of Neem ( Azadirachta indica ), Citronella  ( Cymbopogon  nardus ),  Castor ( Ricinus  communis ),  and  Clove  ( Syzygium  aromaticum )  oil against Spodoptera frugiperda . Jawa Barat: Jurnal Cropsaver Danusulistyo, M. 2011. Uji Larvasida Ekstrak Daun Lidah Buaya ( Aloe vera L.) Terhadap Kematian Larva Nyamuk Anopheles aconitus  Donitz.Sripsi Ilmiah. Surakarta: Universitas Muhammadiyah Surakarta. Darmanto,  Y.  2007.  Pengaruh  Ekstrak  Polar  Cocor  Bebek  ( Kalanchoe  daigremontiana )  Terhadap  Larva Plutella xylostella L. Skripsi . Program Studi Biologi. ITS. Surabaya.
Fuadzy, H., Hodijah, D.N., Jajang, A., Wirdawati, M. 2014. Kerentanan Larva Aedes aegypti Terhadap Temefos, A., Wirdawati, M. di Tiga Kelurahan Endemis Demam Berdarah Dengue Kota Sukabumi. Ciamis. Bul. Penelit. Kesehat, Vol. 43, No. 1. Hal. 41-46.
Hayati,  E.  K.,  Ghanaim,  F.  A.,  dan  Lailis,  S.  2010.  Fraksinasi  dan  Identifikasi  Senyawa  Tanin  pada  daun Belimbing Wuluh ( Averrhoa bilimbi L.). Jurnal Kimia, Vol. 4, No.1.
Krisman,  Y.,  Ardiningsih,  P.,  Syahbanu,  I.  2016.  Aktivitas  Bioinsektisida  Ekstrak  Daun  Belimbing  Wuluh
( Averrhoa bilimbi ) Terhadap Kecoak ( Periplaneta americana ). JKK. Volume 5(3). Hal. 1-7.
Kumar,  K.A.,  Guosia,  SK.,  and  Anupama,  Latha,  J.N.  2013,  “A  Review  On Phytochemical  Constituents  and Biological Assays of Averrhoa bilimbi L., I. J. P. P. S. R”, 3(4):136-139.
Leatemia, J.A., dan Isman, M.B. 2004. Efficacy of Crude Seed Extracts  of Annona Squamosa agints Diamond Back Moth, P. Xylostella in The Greenhouse. International Journal of tropical insect science 24: 150-158.
Listiyati,  A.  K.,  Nurkalis.  U.,  Sudiyanti,  Hestiningsih.  R.  2012.  Ekstraksi  Nikotin  Dari  Daun  Tembakau ( Nicotina Tabacum ) dan Pemanfaatannya Sebagai Insektisida Nabati Pembunuh Aedes Sp. Jurnal Ilmiah Mahasiswa , Vol. 2 No. 2. Hal. 67-70
Mokodompit, H.S., Pollo, H.N., Lasut, M.T. 2018. Identifikasi Jenis Serangga Hama dan Tingkatan Kerusakan pada Diospyros celebica Bakh. Manado. Eugenia Vol. 24. No.2. Hal. 64-75. Pattagading, R.T. 2018. Pengaruh Ekstrak Daun Belimbing Wuluh ( Averrhoa bilimbi L.) Terhadap Kematian larva Aedes sp. Semarang. Universitas Muhammadiyah Semarang.
Pangnakorn, U., Kanlaya. S., Kuntha, C. 2012. Effect or Wood Vinegar for Conctrolling on Housefly ( Musca domestica L.). World Academy of Science. Engineering and Technology. 65:390-393. Rini, U. S., Wirasti, Nurlae, E. 2019. Efektivitas Ekstrak Daun Belimbing Wuluh ( Averrhoa bilimbi ). Sebagai Insektisida  Alami  Terhadap  Nimfa  Wereng Batang  Cokelat  ( Nilaparvata  lugens Stal.)  Pekalongan: Universitas Muhammadiyah Pakajangan.
Salaki, C.L.  Watung,  J. 2020. Aplikasi Pestisida Organik  untuk Pengendalian  Hama Spodoptera  frugiperda pada Tanaman Jagung.  Palembang. Universitas Sriwijaya (UNSRI).
Shylesha, A. N., Jalali, S. K., Gupta, A., Varshney, R.,  Venkatesan,  T., Subaharan, P., Bakthavatsalam, N., Ballal, C. L. 2018. Studies on New Invasive Pest Spodoptera frugiperda (J. E. smith) (Lepidoptera: Noctuidae) and its Natural Enemies. Journal of biologi control, 32 (3), DOI: 10.18311/jbc/2018/21707. Syah, B.W. 2016. Pengaruh Ekstrak Daun Belimbing Wuluh ( Averrhoa  bilimbi L.) Terhadap Mortalitas dan Perkembangan Larva Spodoptera litura . Surabaya. Institut Teknologi Sepuluh November.
Ulfa, D. 2014. Efektivitas Ekstrak Daun Kecubung ( Datura metel L.) Terhadap Imago  Wereng  Batang  Coklat ( Nilaparvata  lugens Stal.) (Hemiptera:Delphacidae)  dan  Pemanfaatannya  Sebagai  Buku  Non  Teks. Skripsi. Jember; Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Jember.
http://ejurnal.umri.ac.id/index.php/photon
Wismaningsih.  E.R.,  Oktaviasari,  D.I.  2016.  Identifikasi  Pestisida  dan  Penggunaan  APD  pada  Petani Penyemprot di Kecamatan Ngantru Kabupaten Tulungagung. Jurnal Wiyata. Vol. 3 No.1. Hal. 101-105. Yunita, E.A., Suprapti, N.H., Hidayat. 2009. Ekstrak Daun Teklan ( Eupatorum riparium ) Terhadap Mortalitas dan Perkembangan Larva Aedes aeypti. Bioma , 11 (1):11-17