Jurnal Ilmiah Kesehatan Sandi Husada hhttps://akper-sandikarsa.e-journal.id/JIKSH Volume 9,  Nomor 2, Desember 2020, pp 719-725 p-ISSN: 2354-6093 dan e-ISSN: 2654-4563 DOI: 10.35816/jiskh.v10i2.394
Literatur Review
Pengaruh Pemberian Monosodium Glutamat Terhadap Jumlah Sel Purkinje Cerebellum Pada Tikus
The Effect of Monosodium Glutamate Againsts to the Number of Cerebellar Purkinje Cells of Rats
Ilham Nugroho
Pendidikan Dokter, Fakultas Kedokteran, Universitas Lampung
Artikel info
Artikel history: Received; Juli 2020 Revised: Agustus 2020 Accepted; Agustus 2020

## Abstrak
Monosodium glutamat merupakan suatu garam natrium dari asam  glutamat  yang  merupakan  salah  satu  asam  amino paling  banyak  ditemukan  di  alam.  Meskipun  monosodium glutamat mempunyai kemampuan untuk meningkatkan nafsu makan,  sebuah  kasus  melaporkan  bahwa  monosodium glutamat dapat bersifat racun terhadap manusia dan hewan percobaan. Korteks cerebellum mengandung sel purkinje dan lapisan sel granular. Akumulasi glutamat yang berlebihan di sinapsis  sel  purkinje  pada  korteks  cerebellum  dapat menyebabkan  penurunan  kemampuan  neuronal  untuk mempertahankan  kadar  normal  dari  glutamat  sehingga terjadi  kematian  sel  purkinje  dan  gangguan  fungsi  sinapsis. Tujuan:  Mengetahui  pengaruh  pemberian  monosodium glutamat terhadap jumlah sel purkinje cerebellum pada tikus. Metode:  Menggunakan  studi  literatur  dari  jurnal  baik nasional maupun internasional dengan cara meringkas topik pembahasan dan membandingkan hasil yang disajikan dalam artikel.  Hasil:  Pemberian  monosodium  glutamat  pada  tikus dengan  dosis  3,5  mg/gBB  per  hari  selama  10  hari  dengan administrasi  parenteral  mengakibatkan  penurunan  jumlah sel  purkinje  pada  cerebellum  tikus.  Kesimpulan:  Akumulasi monosodium  glutamat  yang  berlebihan  dengan  glutamat sebagai  komponen  utama  menjadi  penyebab  penurunan jumlah sel purkinje cerebellum pada tikus. Abstract. Background:  Monosodium  glutamate  is  asodium  salt  of glutamic acid which is one of the most common amino acids found  in  nature.  Although  monosodium  glutamate  has  the ability  to  increase  appetite,  a  case  has  been  reported  that monosodium  glutamate  can  be  toxic  to  humans  and experimental  animals.  The  cerebellum  cortex  contains purkinje  cells  and  a  layer  of  granular  cells.  Excessive accumulation  of  glutamate  in  purkinje  cell  synapses  in  the
cerebellum cortex can cause a decrease in the neuronal ability to maintain  normal levels of glutamate resulting in death of purkinje  cells  and  impaired  synaptic  function.  Objective:  To determine the effect of monosodium glutamate administration  on  the  number  of  cerebellar  purkinje  cells  of rats. Methods: Using literature studies from both national and international journals by summarizing the topic of discussion and  comparing  the  results  presented  in  the  article.  Results: Administration of monosodium glutamate to rats at a dose of 3.5  mg/g  bw  per  day  for  10  days  with  parenteral administration  resulted  in  a  decrease  in  the  number  of purkinje  cells  in  the  rat's  cerebellum.  Conclusion:  Excessive accumulation  of  monosodium  glutamate  with  glutamate  as the  main  component  causes  a  decrease  in  the  number  of  of cerebellar purkinje cells of rats. Keywords: Kopi Robusta; Monosodium Glutamat;
Sel Purkinje Cerebellum;
Coresponden author:
Email: ilhamnpriyadi@gmail.com
artikel dengan   akses terbuka dibawah lisensi CC BY  4.0

## Pendahuluan
Monosodium glutamat (MSG) merupakan suatu garam natrium dari asam glutamat yang merupakan asam amino non-esensial dan paling banyak ditemukan di alam (Kazmi et al., 2017). Identifikasi rumus molekul asam glutamat yaitu C5H9NO4 dilakukan pertama kali oleh Ritthausen (Stańska & Krzeski, 2016). Di dalam tub uh manusia terdapat tiga reseptor glutamat  yaitu  mGluR1,  mGluR4,  dan  T1R1  +  T1R3  (Kurihara,  2015).  Hal  tersebut mendasari  pengakuan  umami  atau  cita  rasa  dari  glutamat  secara  internasional  sebagai rasa dasar kelima yang diketahui berbeda dari asam, asin, manis, dan pahit (Roper, 2017). Salah  satu  contoh  dari  zat  aditif  pada  makanan  adalah  monosodium  glutamat  yang berperan  sebagai  pengawet  dan  penambah  cita  rasa.  Secara  global,  konsumsi  MSG mengalami peningkatan dengan perkiraan konsumsi 3-4 g/hari sebagai bahan penyedap di  berbagai  macam  makanan  (Sharma  et  al.,  2013).  Keamanan  dalam  penggunaan monosodium glutamat menimbulkan berbagai kontroversi baik dalam pengamatan skala lokal maupun global. MSG mempunyai efek positif pada tubuh yaitu meningkatkan berat badan  dengan  cara  memperbaiki  kemampuan  palatabilitas  terhadap  makanan  dan meningkatkan  pusat  nafsu  makan  (Sayed  et  al.,  2016).  Selain  itu,  glutamat  mempunyai peran dalam pembentukan ingatan dan menunjang dalam proses belajar (Hawkins & Viña, 2016).
Meskipun MSG mempunyai kemampuan untuk meningkatkan kepekaan terhadap rasa dan memperbaiki  nafsu  makan,  sebuah  kasus  melaporkan  bahwa  MSG  dapat  bersifat  racun terhadap  manusia  dan  hewan  percobaan.  Sebuah  penelitian  menunjukkan  adanya kerusakan otak dengan paparan dosis MSG 3 g dan 6 g per oral selama 14 hari pada tikus Wistar  dewasa.  Hal  tersebut  membuktikan  bahwa  MSG  bersifat  toksik  dan  dapat mempengaruhi berbagai kondisi fisiologis dan patologis pada sistem saraf pusat mamalia (Owoeye  &  Salami,  2017).  Hasil  observasi  pada manusia  menunjukkan  bahwa  konsumsi MSG yang berlebihan dapat menimbulkan efek samping berupa takikardia, depresi, kejang, migrain,  dan  timbulnya  ruam  pada  kulit  (Ashraf  et  al.,  2017).  Kekhawatiran  telah meningkat  mengenai  konsumsi  MSG  yang  berlebihan  sebagai  faktor  risiko  terjadinya
obesitas berkaitan dengan kemampuan MSG untuk meningkatkan palatabilitas (He et al., 2011).
Glutamat  merupakan  neurotransmitter  utama  di  cerebellum  yang  terutama  pada  bagian korteks mengandung sel purkinje dan lapisan sel granular yang tediri dari beberapa jenis tipe  sel  (Ashraf  et  al.,  2017).  Cerebellum  merupakan  suatu  regio  di  otak  yang  memiliki peran  penting  dalam  koordinasi  dan  kontrol  pergerakan  yang  disadari  serta  proses integrasi antara persepsi sensoris dan motorik (Hashem et al., 2012). Akumulasi glutamat yang  berlebihan  di  sinapsis  sel  purkinje  pada  korteks  cerebellum  dapat  menyebabkan penurunan  kemampuan  neuronal  untuk  mempertahankan  kadar  normal  dari  glutamat. Hal  ini  memicu  stimulasi  yang  berlebihan  dari  metabotropic  glutamate  receptors (mGluRs)  dan  AMPAR  sehingga  terjadi  kaskade  molekuler.  Hal  ini  menyebabkan terjadinya peningkatan kadar kalsium intraseluler yang selanjutnya mengaktifkan enzim degradatif tergantung kalsium dan jalur apoptosis sehingga terjadi kematian sel purkinje dan gangguan fungsi sinapsis (Abass & El-Haleem, 2011).

## Metode
Metode  yang  digunakan  adalah  berupa  studi  literatur  dari  berbagai  jurnal  nasional maupun internasional. Metode ini digunakan dengan tujuan untuk meringkas suatu topik terkini  agar  meningkatkan  suatu  pemahaman.  Studi  literatur  menyajikan  ulang  materi yang  telah  diterbitkan  sebelumnya  serta  melaporkan  fakta  atau  analisis  baru  dari  studi literatur yang relevan kemudian membandingkan hasil tersebut dalam artikel.

## Hasil Dan Pembahasan

## Gambar a
Gambar b Tabel 1. Perbandingan Jumlah Sel Purkinje Cerebellum Antara Kelompok Perlakuan MSG dan Kelompok Kont Kelompok Jumlah Sel Purkinje (Mean ± 2 SD) Kruskal-Wallis Test P-value 1.Kelompok Perlakuan MSG 2.1 ± 1.29 15.661 0.000* 2. Kelompok Kontrol  6.1 ± 2.33
Pada gambar a) korteks cerebellum kelompok kontrol menunjukkan lapisan sel molekuler (MCL) dan lapisan sel purkinje (PCL) tersusun pada satu garis dengan adanya lapisan sel granular  (GCL)  yang  padat  disekitarnya.  Selaput  meninges  tersusun  utuh.  Terdapat substansi  putih  yang  jelas  diisi  dengan  sel  fusiform  yang  kurang  padat.  Folia  cerebellar dipisahkan  oleh  sulkus  yang  dalam  dan  panjang.  Pada  gambar  b)  korteks  cerebellum kelompok perlakuan MSG menunjukkan lapisan sel purkinje (PCL) dengan sel-sel nekrotik
yang berjarak lebar. Dengan adanya pemberian MSG, efek degeneratif ditunjukkan dengan terjadinya nekrosis sel purkinje dan dibuktikan secara statistik adanya penurunan jumlah sel purkinje serta berjarak lebar karena edema (Aidaros et al., 2019).

## Hasil Morfometrik
Penelitian  yang  dilakukan  oleh  Aidaros  et  al  menunjukkan  adanya  perbedaan  yang signifikan secara statistik antara kedua kelompok dalam hal jumlah sel purkinje (p-value <0,001)  karena  tikus  yang  menerima  MSG  memiliki  jumlah  sel  purkinje  terendah  (rata- rata  2,1  sel),  dibandingkan  dengan  kelompok  kontrol  (rata-rata  6,1  sel)  (Aidaros  et  al., 2019).  Dari  sampel  penelitian  yang  dilakukan  oleh  Prastiwi  et  al  pada  4  kelompok perlakuan  berjumlah  masing-masing  enam  tikus,  didapatkan  hasil  sebagai  berikut (Prastiwi et al., 2015).
Tabel 2. Perkiraan Jumlah Sel Purkinje Cerebellum Pada 4 Kelompok Perlakuan
Grup (n=6) C T 2.5 T 3.0 T 3.5 P- value Jumlah Sel Purkinje (10 3 ) 275.9 ± 6.2 264.7 ± 3.2 262.3 ± 3.0  238.6 ± 6.2  0.000 Keterangan: n : Jumlah Tikus; C : Kontrol 2 ml NaCl 0.9% (intraperitoneal); T 2.5  : 2.5 mg/g BB MSG + 2 ml NaCl 0.9% (intraperitoneal);
T 3.0  : 3.0 mg/g BB MSG + 2 ml NaCl 0.9% (intraperitoneal); T 3.5  : 3.5 mg/g BB MSG + 2 ml NaCl 0.9% (intraperitoneal). Penelitian yang dilakukan oleh Prastiwi et al menunjukkan analisis statistik ANOVA satu arah  bahwa  terdapat  perbedaan  yang  signifikan  dari  kelompok  dalam  perkiraan  jumlah sel  purkinje.  Perbedaan  paling  signifikan  dengan  uji  post  hoc  multiple  comparison mengungkapkan  bahwa  jumlah  sel  purkinje  dari  kelompok  T3.5  secara  signifikan  lebih rendah daripada kelompok tikus lainnya (Prastiwi et al., 2015).
Penelitian  yang  dilakukan  oleh  Prastiwi  et  al  menunjukkan  bahwa  pemberian monosodium  glutamat  pada  tikus  dengan  dosis  3,5  mg/gBB  per  hari  selama  10  hari dengan  administrasi  parenteral  mengakibatkan  penurunan  jumlah  sel  purkinje  pada cerebellum  tikus.  MSG  dengan  glutamat  sebagai  komponen  utama  dapat  menyebabkan kematian  sel  Purkinje  dengan  mengaktivasi  reseptor  glutamat  secara  berlebihan.  Sel purkinje  di  korteks  cerebellum  menerima  salah  satu  input  glutamatergik  yaitu  climbing fibers sehingga apabila terjadi pengaktifan reseptor glutamat secara berlebihan seperti N- methyl-D-aspart ate receptor (NMDAR), α -amino-3-hydroxy-5-methyl-4- isoxazolepropionic acid receptor (AMPAR), dan kainate akibat adanya akumulasi glutamat maka  dapat  menyebabkan  terjadinya  eksitotoksis  dan  kematian  pada  sel  purkinje (Prastiwi et al., 2015).
Proses  eksitotoksis  oleh  glutamat  diawali  dengan  proses  peningkatan  konsentrasi  ion Ca2+  intraseluler selama 5-10 menit lalu  diikuti dengan fase laten selama 2 jam dengan konsentrasi  ion  Ca2+  normal,  dan  terakhir  terjadi  kenaikan  konsentrasi  ion  Ca2+ intraseluler  secara  bertahap  yang  diikuti  dengan  kematian  sel.  Akibat  dari  terjadinya kematian sel tersebut adalah pembentukan nitric oxide yang berinteraksi dengan radikal bebas superoksida membentuk peroksinitrit yang menyebabkan kerusakan DNA pada sel. Selanjutnya,  kerusakan  DNA  yang  terjadi  menimbulkan  aktivasi  poly(ADP)-ribose
polymerase  1  (PARP-1)  secara  berlebihan  yang  melepaskan  polimer  poly(ADP)-ribose (PAR)  ke  sitoplasma  yang  selanjutnya  akan  mengaktivasi  calpains.  Aktivasi  calpains menyebabkan  sintesis  apoptosis-inducing  factor  (AIF)  oleh  mitokondria  yang menyebabkan  peristiwa  fragmentasi  DNA,  kondensasi  kromatin,  dan  kematian  sel  (Lau dan  Tymianski,  2010).  Kematian  sel  jalur  apoptosis  tergantung  caspase  merupakan kematian  sel  oleh  glutamat  yang  terjadi  di  sel  kortikal  primer  yang  melibatkan  aktivasi caspase-3 dan calpain serta produksi apoptosis-inducing factor (AIF) dari mitokondria ke sitosol  dan  inti  sel.  Proses  mediasi  apoptosis  dipengaruhi  oleh  adanya  Caspase  yang merupakan suatu protease sistein (King et al., 2013).
Gambar a

## Gambar a

## Pengamatan Mikroskopik Pewarnaan H&E
Pada gambar a) korteks cerebellum kelompok kontrol menunjukkan gambaran histologis cerebellum  normal  dengan  tiga  lapisan  sel  kortikal  yang  tersusun  dengan  baik.  Lapisan molekuler  yang  hampir  bebas  ditempati  sebagian  besar  oleh  akson  dan  dendrit,  lapisan tunggal  sel purkinje  besar, dan  lapisan  padat sel  granular  dan  substansi  putih  di  tengah setiap folium. Panah berwarna kuning menunjukkan lapisan sel purkinje. Panah berwarna merah  menunjukkan  lapisan  molekuler.  Panah  berwarna  hijau  menunjukkan  lapisan granuler.  Panah  berwarna  hitam  menunjukkan  axon  pada  substansi  putih  cerebellum. Panah  berwarna  biru  menunjukkan  fissura  cerebellum.  Jumlah  sel  purkinje  pada pengamatan adalah 23.00 ± 6.43. Pada gambar b) korteks cerebellum kelompok perlakuan dengan pemberian MSG 6 gram menunjukkan jarak antara sel purkinje yang berdekatan menjadi semakin lebar apabila dibandingkan dengan kelompok kontrol. Panah berwarna kuning  menunjukkan  sel  purkinje.  Panah  berwarna  hijau  menunjukkan  inti  sel  dari  sel purkinje.  Panah  berwarna  merah  menunjukkan  dendrit  sel  purkinje  bergeser  ke  lapisan molekuler. Panah berwarna biru menunjukkan inti sel gelap pada lapisan granuler. Jumlah sel  purkinje  pada  pengamatan  adalah  25.00  ±  6.00.  Gambaran  histologis  cerebellum menunjukkan adanya  sedikit  peningkatan jumlah  sel  purkinje  jika dibandingkan  dengan kelompok kontrol, yang secara statistik terbukti tidak signifikan. MSG dilaporkan bahwa dalam kultur sel neuron dapat menyebabkan apoptosis dan nekrosis (Ashraf et al., 2017).
Dari  sampel  penelitian  yang  dilakukan  oleh  Hashem  et  al  pada  2  kelompok  perlakuan berjumlah masing-masing sepuluh tikus, didapatkan hasil sebagai berikut (Hashem et al., 2012).
Gambar a Gambar b

## Pengamatan Mikroskopik Pewarnaan H&E
Pada  gambar  a)  korteks  cerebellum  kelompok  kontrol  menunjukkan  bahwa  korteks cerebellum terdiri dari lapisan molekuler superfisial yang terdiri dari sel dan serat yang tersebar; lapisan dalam sel granuler tersusun oleh inti padat; dan lapisan sel purkinje yang muncul  sebagai  satu  lapisan  kontinyu  dari  sel  besar  di  persimpangan  antara  lapisan molekuler superfisial dan lapisan dalam sel granuler. Pada gambar b) korteks cerebellum kelompok perlakuan dengan pemberian MSG menunjukkan beberapa sel purkinje dengan sitoplasma  berwarna  gelap  dan  inti  gelap yang  menyusut.  Pemeriksaan  lapisan  granuler menunjukkan  beberapa  sel  dengan  inti  gelap.  Area  degenerasi  yang  dikelilingi  oleh  sel inflamasi juga terlihat. Panah tebal menunjukkan sel purkinje gelap yang menyusut. Panah tipis  menunjukkan  sel  granuler  dan  panah  ganda  menunjukkan  area  degenerasi  yang dikelilingi oleh sel inflamasi ditandai dengan kepala panah (Hashem et al., 2012).
Tubuh manusia menerima glutamat dari dua sumber utama yaitu baik dari makanan yang mengandung  glutamat  bebas  (komponen  alami  atau  ditambahkan  dalam  bentuk  MSG) maupun  dari  hasil  pencernaan  protein  (Wijayasekara  &  Wansapala,  2017).  Tingkat glutamat  bebas  yang  terkandung  di  tubuh  orang  dewasa  yaitu  sekitar  10  gram  serta memiliki  konsentrasi  glutamat  yang tinggi  pada  otak  yaitu  12,0  μmol/g  (Henry -Unaeze, 2017).  Adanya  karakteristik  ¬blood-brain  barrier  di  otak  yang  bersifat  impermeabel terhadap glutamat dan efektif dapat membatasi masuknya glutamat dari darah ke dalam otak sehingga tingkat konsentrasi glutamat di otak akan tetap stabil (Fernstrom, 2018).

## Simpulan Dan Saran
Konsumsi monosodium glutamat yang berlebihan dapat mempengaruhi struktur histologi serta menyebabkan penurunan jumlah sel purkinje pada cerebellum. Sel purkinje dan sel granular  pada  kelompok  yang  diberikan  monosodium  glutamat  menunjukkan  beberapa gangguan  seluler  dan  perubahan  degeneratif.  Dengan  ditemukan  hasil  penelitian  ini, terdapat adanya kemungkinan bahwa fungsi cerebellum sebagai organ untuk koordinasi dan  kontrol  gerakan  sukarela  dapat  terpengaruh  secara  merugikan.  Disarankan  agar penelitian lebih lanjut dilakukan untuk menguatkan temuan ini.

## Daftar Rujukan
Abass, M. A., & El-Haleem, M. R. A. (2011). Evaluation of monosodium glutamate  induced neurotoxicity and nephrotoxicity in adult male albino rats. J Am Sci, 7(8), 264-76. Aidaros,  A.  E.  E.,  Ibrahim,  A.  A.,  Mohammed,  H.  O.,  &  Hassan,  N.  H.  (2019).  Effect  of monosodium   glutamate on the cerebellar cortex of male albino rat and protective role of vitamin C.
ZUMJ, 25(2), 250-60.
Ashraf,  S.,  Yasoob,  M.,  Amin,  M.,  Khan,  M.  A.,  &  Bukhari,  M.  H.  (2017).  Effects  of monosodium   glutamate on purkinje cells of the cerebellum of adult albino rats. APMC, 11(1), 1-5.
Fernstrom, J. D. (2018). Monosodium glutamate in the diet does not raise brain glutamate concentrations  or  disrupt  brain  functions.  Ann  Nutr  Metab,  73(5),  43-52. https://doi.org/10.1159/000494782
Hashem, H. E., Safwat, M. D. E., & Algaidi, S. (2012). The effect of monosodium glutamate on the cerebellar  cortex  of  male  albino  rats  and the  protective  role  of  vitamin  C (histological   and  immunohistochemical  study).  J  Mol  Hist,  43,  179-86. https://doi.org/10.1007/s10735-011-9380-0
Hawkins, R. A., & Viña, J. R. (2016). How glutamate is managed by the blood-brain barrier. MDPI, 5(37), 1-7. https://doi.org/10.3390/biology5040037
He, K., Du, S., Xun, P., Sharma, S., Wang, H., Zhai, F., & Popkin, B. (2011). Consumption of monosodium  glutamate  in  relation  to  incidence  of  overweight  in  Chinese  adults:
China   Health  and  Nutrition  Survey  (CHNS).  Am  J  Clin  Nutr,  93,  1328-36. https://doi.org/10.3945/ajcn.110.008870
Henry-Unaeze,  H.  N.  (2017).  Update  on  food  safety  of  monosodium  L-glutamate  (MSG). Pathophysiol, 24, 243-9.
Kazmi, Z., Fatima, I., Perveen, S., & Malik, S. S. (2017). Monosodium glutamate: review on clinical reports. Int J Food Prop, 20(2), 1807-15. https://doi.org/10.1080/10942912.2017.1295260 King, A. E., Southam, K. A., Dittmann, J., & Vickers, J. C. (2013). Excitotoxin-induced caspase-
3  activation  and  microtubule  disintegration  in  axons  is  inhibited  by  taxol.  Acta Neuropathol Commun, 1(59), 1-9. https://doi.org/10.1186/2051-5960-1-59
Kurihara,  K.  (2015).  Umami  the  fifth  basic  taste:  history  of  studies  on  receptor mechanisms and role  as  a  food  flavor.  Biomed  Res  Int,  2015,  1-10. http://dx.doi.org/10.1155/2015/189402 Lau,  A.,  &  Tymianski,  M.  (2010).  Glutamate  receptors,  neurotoxicity  and neurodegeneration
Eur J Physiol, 460, 525-42. https://doi.org/10.1007/s00424-010-0809-1
Owoeye, O., & Salami, O. A. (2017). Monosodium glutamate toxicity : sida acuta leaf extract ameliorated  brain  histological  alterations,  biochemical  and  haematological changes in
Wistar rats. Afr J Biomed Res, 20(2), 173-82.
Prastiwi, D., Djunaidi, A., & Partadiredja, G. (2015). High dosage of monosodium glutamate causes  deficits  of  the  motor  coordination  and  the  number  of  cerebellar  Purkinje cells of  rats. Hum Exp Toxicol, 1-9. https://doi.org/10.1177/0960327115572706 Roper, S. D. (2017). Taste: mammalian taste bud physiology. Neurosci Biobehac Rev, 1-9. http://dx.doi.org/10.1016/B978-0-12-809324-5.02908-4
Sayed, H. Y. M., Abd-Elhalim, D. M., Hussain, M. A., & Korayem, H. E. (2016). Monosodium- glutamate-induced cerebellar toxicity; possible role of nitric oxide in adult albino rats.   Am J Sci, 12(1), 123-31. Sharma,  A.,  Prasongwattana,  V.,  Cha'on,  U.,  Selmi,  C.,  Hipkaeo,  W.,  &  Boonnate,  P.,  et  al. (2013). Monosodium  glutamate  (MSG)  consumption  is  associated  with urolithiasis and urinary tract  obstruction  in  rats.  PLoS  ONE,  8(9),  1-9. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0075546 Stańska,  K.,  &  Krzeski,  A.  (2016).  The  umami  test:  from  discovery  to  clinical  use.
Otolaryngol   Pol, 70(4), 10-15. https://doi.org/10.5604/00306657.1199991 Wijayasekara,  K.,  &  Wansapala,  J.  (2017).  Uses,  effects  and  properties  of  monosodium glutamate (MSG) on food & nutrition. Int J Food Sci Nutr, 2(3), 132-43..