ISSN: 1410-8917
e-ISSN: 2597-9914
Jurnal Kimia Sains dan Aplikasi 20 (3) (2017): 130 - 135
Jurnal Kimia Sains dan Aplikasi

## Journal of Scientific and Applied Chemistry
Journal homepage: http://ejournal.undip.ac.id/index.php/ksa
Konsentrasi Hambat Minimum (KHM) Kadar Sampel Alang-Alang ( Imperata cylindrica ) dalam Etanol Melalui Metode Difusi Cakram
Moh. Mulyadi a , Wuryanti a , Purbowatiningrum Ria Sarjono a*
a Biochemistry Laboratory, Chemistry Department, Faculty of Sciences and Mathematics, Diponegoro University, Jalan Prof. Soedarto, Tembalang, Semarang 50275
* Corresponding author: purbowatining@live.undip.ac.id
A r t i c l e   I n f o A b s t r a c t
Keywords:
Minimum Inhibitory Concentration (MIC), Antibacterial, Reeds Bacteria are microorganisms arround us. Recent study was sought an alternative source that  serves  as  an  antibacterial  because  some  pathogenic  bacteria  to  be  resintant  with antibacterial. Materials are reported to have antibacterial activity among the reeds. Reed efficacious drug for acute kidney inflammation, antibacterial, vomiting blood, gonorrhea, and nosebleeds. This study aimed to obtain the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) of  the  sample  degree  as  an  antibacterial  reeds  and  obtain  the  data  most  potent antibacterial  activity  of  the  sample  degree  against  the  reeds  to Escherechia  coli, Pseudomonas  aeroginosa,  Staphylococcus  aureus  and  Bacillus  subtilis .  One  of  the  methods method  used  is  the  preformance  test  antibacterial  paper  disk  diffusion  method.  This method is done by placing a paper disc that had been soaked in the test solution on solid media has been inoculated with the bacteria test. Once inoculated, the bacterial growth was  observed  to  see  the  clear  zone  around  the  disc.  Zone  inhibitation  that  is  formed around  the  discs at  the  lowest  concentration  of  antibacterial  is  the  MIC.  MIC  from  the sample  degree  of  the  reeds  against Escherechia  coli bacteria, Pseudomonas  aeroginosa, Staphylococcus aureus and Bacillus subtilis in a row of leaf sample degree in ethanol by 7%, 7%, 8% and 9%, for the sample degree flowers in ethanol of interest at 7%, 7%, 9% and 7%, and for the sample degree roots in ethanol of 7%, 8%, 10% and 8%. The third sample degree of reeds showed a good potential to inhibite bacteria Escherichia coli . The sample degree  of  leaves  and  flowers  are  more  potential  than  roots  of  reeds  to  inhibite Pseudomonas aeroginosa . On the other hand, the most potential for inhibitation Bacillus subtilis and Staphylococcus  aureus are  sample  degree  of  reeds  leaves  and  flowers, respectively.
.

## A b s t r a k
Kata kunci:
Kosentrasi  Hambat Minimum  (KHM), Antibakteri,  Alang- alang Bakteri merupakan mikroorganisme yang berada di sekitar kita. Penelitian yang sering dilakukan untuk mencari sumber alternatif lain yang berfungsi sebagai antibakteri karena adanya beberapa bakteri yang menjadi resisten terhadap suatu antibakteri. Bahan-bahan yang dilaporkan memiliki aktifitas antibakteri diantaranya adalah alang-alang. Alang- alang berkhasiat untuk obat radang ginjal akut, antibakteri, muntah darah, kencing nanah dan mimisan. Penelitian ini bertujuan untuk memperoleh Kosentrasi Hambat Minimum (KHM)  kadar  sampel  alang-alang  sebagai  antibakteri  serta  memperoleh  data  aktifitas antibakteri  yang  paling  potensial  kadar  sampel  alang-alang  terhadap Escherechia  coli, Pseudomonas  aeroginosa,  Staphylococcus  aureus  dan  Bacillus  subtilis . Salah  satu  metode yang  digunakan  dalam  uji  antibakteri  yaitu  metode  difusi  cakram  kertas.  Metode  ini dilakukan  dengan  meletakkan  cakram  kertas  yang  telah  direndam  larutan  uji  di  atas media  padat  yang  telah  diinokulasi  dengan  bakteri  uji.  Pertumbuhan  bakteri  diamati setelah  diinokulasi  untuk  melihat  zona  bening  disekitar  cakram.  Zona  bening  yang
terbentuk di sekitar cakram pada konsentrasi antibakteri terendah merupakan nilai KHM. KHM  kadar  sampel  alang-alang  terhadap  bakteri Escherechia  coli,  Pseudomonas aeroginosa,  Staphylococcus  aureus dan Bacillus  subtilis berturut-turut  dari  kadar  sampel daun dalam etanol sebesar 7%, 7%, 8% dan 9%; untuk kadar sampel bunga dalam etanol sebesar 7%, 7%, 9% dan 7%; dan untuk kadar sampel akar dalam etanol 7%, 8%, 10% dan 8% . Ketiga  kadar  sampel  alang-alang  cukup  potensial  untuk  meghambat  bakteri Escherichia coli . Kadar sampel daun dan bunga lebih potensial dibandingkan akar alang- alang untuk menghambat Pseudomonas aeroginosa . Kadar sampel yang paling potensial untuk menghambat Bacillus subtilis dan Staphylococcus aureus berturut-turut adalah kadar sampel daun dan kadar sampel bunga alang-alang.

## 1. Pendahuluan
Alang-alang tumbuh liar di hutan, ladang, lapangan rumput dan tepi jalan pada daerah kering yang mendapat sinar  matahari.  Tanaman  yang  mudah  menjadi  banyak ini  bisa  ditemukan  pada  ketinggian  1-2700  m  di  atas permukaan  laut  [1].  Garrity dkk. [2]  melaporkan  luas padang  alang-alang  di  Indonesia  mencapai  8,5  juta hektar  atau  sekitar  4,47%  dari  luas  wilayah  Indonesia. Alang-alang bukan hanya sebagai pesaing bagi tanaman lain terutama tanaman pangan dalam mendapatkan air, unsur  hara  dan  cahaya  tetapi  juga  menyebabkan pengaruh negatif pada tanaman lain [3]. Dibalik dampak negatif  dari  alang-alang  yang  telah  di  sebutkan  di  atas ternyata alang-alang berkhasiat untuk obat radang ginjal akut,  muntah  darah,  kencing  nanah  dan  mimisan. Menurut  Koh dkk. [4]  khasiat  farmakologi  alang-alang sebagai  antidiuretik,  anti  inflamasi,  neuroprotektif  dan antibakteri.
Berbagai penelitian telah dilakukan untuk menyelidiki  manfaat  dari  alang-alang.  Sripanidkulchai dkk. [5]  melaporkan  antibakteri  dari  ekstrak  air  alang- alang ( Imperata  cylindrica ) dengan  konsentrasi  hambat minimum (KHM) terhadap Escherichia coli , Pseudomonas aeroginosa,  Staphylococcus  aureus sebesar  62,5  mg/mL dan Klebsiella  sp. dengan  KHM  >125.0  mg/mL.  Alang- alang  yang  digunakan  merupakan  alang-alang  dari Thailand dengan bagian yang digunakan berupa rimpang (rizoma)  alang-alang.  Khaerunnisa  (2009)  melaporkan adanya senyawa bioaktif dari akar alang-alang ( Imperata cylindrica ) yang dimanfaatkan sebagai antioksidan. Telah dilakukan  oleh  Mak-Mensah  (2010)  uji  antihipertensi dari ekstrak etanol daun Imperata cylindrica pada hewan. Hasil  yang  diperoleh  pada  konsentrasi  160  dan  320 mg/mL  mampu  menurunkan  tekanan  hati  dari  266 menjadi  180  mmHg  dengan  dosis  efektif  EC 50 =  0,013. Adanya beberapa bakteri patogen yang menjadi resistan terhadap antibakteri yang sudah ada dipasaran sehingga dianggap perlu adanya antibakteri alternatif, karena itu pada  penelitian  ini  akan  dilakukan  uji  antibakteri menggunakan  ekstrak  etanol  daun,  bunga  dan  akar alang-alang.  Bakteri  patogen  yang  akan  digunakan terhadap ekstrak alang-alang adalah Escherichia coli dan Pseudomonas yang merupakan bakteri gram negatif serta bakteri Staphylococcus  aureus dan Bacillus  subtilis merupakan bakteri gram positif. Bakteri Escherichia coli dapat menyebabkan diare sedangkan bakteri Pseudomonas aeroginosa dapat menyebabkan infeksi pada luka  bakar.  Bakteri Staphylococcus  aureus dapat menyebabkan  infeksi  pada  kulit.  Bakteri Bacillus subtilis
dapat  menyebabkan  makanan  manjadi  busuk  dan bersifat racun jika dikonsumsi.
Sampel  yang  digunakan  berupa  akar,  daun  dan bunga  alang-alang  dari  belakang  laboratorium  obat Universitas Diponegoro Tembalang Semarang. Pemilihan sampel dimaksudkan untuk membandingkan aktivitas  antibakteri  tiap  bagian  alang-alang.  Sampel tersebut  digunakan  dalam  kondisi  kering.  Tahap selanjutnya  dilakukan  maserasi  menggunakan  etanol untuk memperoleh ekstrak sampel. Pada proses maserasi sekaligus  pembuatan  variasi  konsentrasi  dengan perbandingan sampel dan etanol (w/w). Masing-masing variasi  konsentrasi  dilakukan  uji  terhadap  bakteri  uji. Zona  bening  yang  terbentuk  pada  media  yang  telah diinokulasi  bakteri  disekitar  cakram  kertas  yang  di celupkan sampel menunjukkan aktivitas penghambatan dari  sampel  terhadap  bakteri  uji.  Pencelupan  cakram kertas ke dalam larutan sampel sampai merata di seluruh permukaan  cakram  kertas.  Konsentrasi  terendah  dari sampel yang mampu menghambat pertumbuhan bakteri uji  merupakan  nilai  Konsentrasi  Hambat  Minimum (KHM).
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  memperoleh Kosentrasi  Hambat  Minimum  (KHM)  kadar  sampel alang-alang sebagai antibakteri serta memperoleh data aktifitas antibakteri yang paling potensial kadar sampel alang-alang  terhadap  Escherechia  coli, Pseudomonas aeroginosa , Staphylococcus aureus dan Bacillus subtilis .

## 2. Metode Kerja

## Bahan dan Alat
Kadar  sampel  etanol  alang-alang  meliputi  daun, bunga  dan  akar,  Bakteri Escherichia  coli , Pseudomonas aeroginosa , Staphylococcus  aureus dan Bacillus  subtilis , Etanol, Akuades, Ekstrak ragi, Pepton, NaCl, dan bubuk agar.  Inkubator  (memert),  neraca  analitik  (Kern  870), penggaris, shaker, oven, autoklaf clinic (prestide medical series 2100), lemari pendingin, cawan petri, mikropipet (ependorf), erlenmeyer, tabung reaksi, jarum ose, botol semprot dan lampu bunsen.

## Pembuatan Larutan Ekstrak Sampel
Sampel  yang  digunakan  berupa  alang-alang  yang meliputi  daun,  bunga  dan  akar.  Masing-masing  bagian alang-alang  sebagai  sampel  dilakukan  pengeringan selama satu minggu kemudian dilakukan pemblenderan. Maserasi  selama  tiga  hari  menggunakan  etanol  70% dengan perbandingan sampel dan etanol (w/w) sehingga
langsung  diperoleh  beberapa  konsentrasi  (w/w).  Untuk memisahkan ekstrak dan sampel dilakukan penyaringan. Kadar  sampel  alang-alang  yang  dibuat  mulai  dari  6%, 7%, 8%, 9%, 10%, 20% dan 30%. Ekstrak yang diperoleh kemudian sebagai bahan antibakteri sampel yang akan di uji.

## Pensterilan Alat dan Bahan
Seluruh  alat  dan  bahan  yang  akan  digunakan dilakukan  pencucian  hingga  bersih  dan  dilanjutkan pengeringan. Langkah selanjutnya dilakukan pensterilan menggunakan  autoklaf  selama  20  menit  dengan temperatur sebesar 121°C dengan tekanan 2 atm, begitu juga media yang digunakan yang berupa media Nutrient broth dan Nutrient agar .

## Pembuatan Media
Untuk Nutrient  broth dibuat  dari  campuran  0,5  g ekstrak  ragi,  0,25  g  pepton  dan  0,25  g  NaCl  yang dilarutkan dalam 50 mL akuades pada erlenmeyer. Untuk Nutrient  agar dibuat  dari  campuran  0,5  g  ekstrak  ragi, 0,75 g pepton, 0,25 g NaCl dan 1,5 g agar yang dilarutkan dalam  akuades  150  mL  pada  Erlenmeyer  (kurang  lebih untuk 6 buah cawan petri berukuran diameter ±10 cm). Media yang akan digunakan didinginkan terlebih dahulu sebelum digunakan.

## Regenerasi Bakteri
Mengambil  bakteri  satu  mata  ose  dari  stok  bakteri yang  akan  digunakan.  Kemudian  dilakukan  inokulasi dalam media Nutrient broth (NB) dan diinkubasi selama 24  jam  pada  suhu  37°C.  Menyiapkan  2  buah  media Nutrient  broth (NB)  dengan  1  media  sebagai  kontrol negatif (tanpa diinokulasi bakteri) sebagai pembanding terjadinya  pertumbuhan  bakteri  pada  media  yang  telah diinokulasi.  Perlakuan  diulang  3  kali  untuk  regenerasi pertama yang selanjutnya digunakan untuk uji.

## Pengujian Antibakteri
Cakram dicelupkan ke dalam larutan sampel sampai merata  di  seluruh  permukaan  cakram  dengan  berbagai macam  konsentrasi  yang  telah  disiapkan.  Penuangan media nutrient agar (NA) yang telah disterilkan ke dalam petridish. Media nutrient agar (NA) yang telah dingin dan memadat selanjutnya di tanami bakteri. Bakteri yang di tanam diratakan hingga seluruh permukan nutrient agar (NA) dengan menggunakan spreader . Kemudian cakram tersebut diletakkan dalam media nutrient agar (NA) yang telah  ditanami  bakteri.  Langkah  selanjutnya  dilakukan dengan inkubasi selama 24 jam pada suhu 37°C. Aktifitas antibakteri terbesar ditunjukkan oleh luas diameter zona bening  terbesar  yang  terbentuk  dari  konsentrasi tersebut. Konsentrasi terkecil dari sampel yang mampu menghambat  bakteri  yang  diinokulasikan  dengan terbentuknya zona bening merupakan nilai Konsentrasi Hambat Minimum (KHM) dari sampel tersebut.

## 3. Hasil dan Pembahasan
Pelaksanaan  penelitian  meliputi  beberapa  tahapan yaitu regenerasi bakteri, pembuatan kadar sampel etanol daun,  bunga  dan  akar  alang-alang  serta  pengujian antibakteri  kadar  sampel  etanol  alang-alang.  Sampel
alang-alang  di  ambil  dari  belakang  Laboratorium  Obat Universitas Diponegoro.

## Regenerasi Bakteri
Bakteri  yang  akan  digunakan  dilakukan  regenerasi untuk merefresh bakteri  sehingga  bakteri  dapat beradaptasi pada media yang baru (diperoleh sel bakteri yang  muda).  Pembuatan Nutrient  broth (NB)  digunakan sebagai media pembiakan bakteri. NB yang dibuat terdiri dari ekstrak ragi yang digunakan sebagai sumber protein, pepton  sebagai  sumber  nitrogen  dan  NaCl  sebagai sumber  garam-garam  mineral.  Penambahan  akuades berfungsi  untuk  melarutkan  ragi,  pepton  dan  NaCl. Tahap  selanjutnya  setelah  NB  dingin,  dilakukan penanaman  bakteri  dan  kemudian  diinkubasi  dalam shaker incubator selama 24 jam dengan suhu 37°C Shaker incubator berfungsi  untuk  mengalirkan  udara  yang berada  dalam  erlenmeyer  sehingga  adanya  sirkulasi oksigen  yang  lebih  baik  untuk  pertumbuhan  bakteri. Tujuan inkubasi itu sendiri yaitu untuk mengkondisikan lingkungan  pada  suhu  optimum  perkembangan  bakteri sehingga  dapat  diketahui  bahwa  bakteri  berkembang dengan baik. Pengamatan dilakukan setelah 24 jam, pada media  NB  kontrol  terlihat  jernih  yang  menunjukan bahwa tidak terjadi pertumbuhan bakteri dalam nutrient broth tersebut,  sedangkan  pada  media  NB  yang diinokulasi  bakteri  terlihat  keruh  yang  menunjukkan adanya  pertumbuhan  bakteri  dalam nutrient  broth tersebut.

## Pembuatan Kadar Sampel Alang-alang dalam Etanol
Sampel  yang  digunakan  berupa  daun,  bunga  dan akar alang-alang. Pengambilan kadar sampel dilakukan dengan perendaman masing-masing sampel yang sudah kering dalam etanol [6].  Penggunaan etanol dimaksudkan  untuk  melarutkan  senyawa  polar  yang terkandung dalam alang-alang. Sripanidkulchai dkk. [5] melaporkan adanya senyawa aktif yang berperan sebagai antibakteri.  Pengeringan  bertujuan  untuk  mengurangi kadar air dalam sampel, sehingga senyawa yang terjebak lebih  murni.  Pemblenderan  juga  dilakukan  untuk menghancurkan  dinding sel  dari  sampel  sehingga pada waktu  perendaman,  senyawa  dalam  sampel  lebih meresap dalam etanol. Penyaringan untuk memperoleh larutan  ekstrak  alang-alang.  Pembuatan  kadar  sampel tersebut  dilakukan  saat  perendaman  6%,  7%,  8%,  9%, 10%, 20% dan 30% (w/w) terhadap etanol.

## Pengujian Antibakteri Kadar Sampel Alang-alang dalam Etanol
Bakteri yang akan digunakan adalah Escherichia coli dan Pseudomonas  aeroginosa yang  merupakan  bakteri gram  negatif  serta  bakteri Staphylococcus  aureus dan Bacillus  subtilis merupakan  bakteri  gram  positif.  Alasan penggunaan  bakteri  ini  sebagai  pembanding,  karena bakteri  secara  garis  besar  dikelompokkan  berdasarkan susunan dinding selnya menjadi dua yaitu bakteri gram positif dan gram negatif [7].
Metode  yang  digunakan  dalam  uji  antibakteri  ini yaitu metode difusi cakram kertas. Metode ini dilakukan dengan meletakkan cakram kertas yang telah direndam larutan  uji  di  atas  media  padat  yang  telah  diinokulasi
dengan  bakteri.  Pencelupan  cakram  pada  larutan  uji hingga  seluruh  permukaan  cakram  basah.  Pengamatan dilakukan  setelah  bakteri  diinokulasi,  pertumbuhan bakteri  diamati  untuk  melihat  zona  bening  disekitar cakram.  Pemilihan  metode  ini  karena  mudah  dan sederhana  untuk  menentukan  aktivitas  antibakteri sampel  yang  di  uji.  Kertas  cakram  yang  digunakan berdiameter 0,5 cm.
Hasil  pengamatan  Konsentrasi  Hambat  Minimum (KHM)  dengan  kadar  sampel  daun  alang-alang  dalam etanol dapat diplotkan dalam Gambar 1
Gambar 1. Hasil Uji Antibakteri Kadar Sampel Daun Alang-alang dalam Etanol
Pada Gambar  1  terlihat bahwa  kadar  sampel  etanol daun  alang-alang  mampu  menghambat  pertumbuhan Pseudomonas  aeroginosa pada  konsentrasi  terkecil  7% diameter  sebesar  0,02  cm,  E.  coli  pada  konsentrasi  7% diameter sebesar 0,03 cm, S. aureus pada konsentrasi 8% diameter  sebesar  0,03  cm  dan  B.  substilis  pada konsentrasi 9% diameter sebesar 0,1 cm. Pada Gambar 1 terlihat bahwa terjadinya kenaikan konsentrasi dari 7% sampai  30%  kadar  sampel  daun  alang-alang  dalam etanol  maka  terjadi  pula  kenaikan  daya  hambat  dari kadar  sampel  daun  alang-alang  dalam  etanol  untuk keempat  bakteri  tersebut.  Meskipun  untuk  bakteri  B. substilis  pada  konsentrasi  10%  terjadi  penurunan  daya hambat  dibandingkan  konsentrasi  9%,  namun  pada konsentrasi 20% dan 30% terjadi kenaikan daya hambat.
Hasil  pengamatan  Konsntrasi  Hambat  Minimum (KHM)  dengan  kadar  sampel  bunga  alang-alang  dalam etanol dapat diplotkan dalam Gambar 2.
Gambar 2. Hasil Uji Antibakteri Kadar Sampel Bunga Alang-alang dalam Etanol
Pada Gambar 2 terlihat bahwa kadar sampel bunga alang-alang  dalam  etanol  mampu  menghambat pertumbuhan Pseudomonas aeroginosa pada konsentrasi terkecil konsentrasi 7% diameter sebesar 0,03 cm, E. coli pada konsentrasi 7% diameter sebesar 0,03 cm,
S. aureus pada konsentrasi 9% diameter sebesar 0,07 cm dan B. substilis pada konsentrasi 8% diameter sebesar 0,13  cm.  Pada  Gambar  2  terlihat  bahwa  terjadinya kenaikan konsentrasi dari 7% sampai 30% kadar sampel bunga  alang-alang  dalam  etanol  maka  terjadi  pula kenaikan  daya hambat dari  kadar  sampel  bunga alang- alang  dalam  etanol  untuk  keempat  bakteri  tersebut. Meskipun  untuk  bakteri  B.  Substilis  dan  E.  coli  pada konsentrasi 8%, 9% dan 10% memiliki daya hambat yang sama  namun  pada  konsentrasi  20%  dan  30%  terjadi kenaikan daya hambat.
Hasil  pengamatan  Konsentrasi  Hambat  Minimum (KHM)  dengan  kadar  sampel  akar  alang-alang  dalam etanol dapat diplotkan dalam Gambar 3
Gambar 3. Hasil Uji Antibakteri Kadar Sampel Akar Alang-alang dalam Etanol
Pada  Gambar  3  terlihat  bahwa  kadar  sampel  daun alang-alang  dalam  etanol  mampu  menghambat pertumbuhan Pseudomonas aeroginosa pada konsentrasi terkecil  8%  diameter  sebesar  0,03  cm,  E.  coli  pada konsentrasi 7% diameter sebesar 0,03 cm, S. aureus pada konsentrasi  10%  diameter  sebesar  0,09  cm  dan  B. substilis pada konsentrasi 9% diameter sebesar 0,13 cm. Pada  Gambar  3  terlihat  bahwa  terjadinya  kenaikan konsentrasi  dari  7%  sampai  30%  kadar  sampel  akar alang-alang  dalam  etanol  maka  terjadi  pula  kenaikan daya hambat dari kadar sampel akar dalam etanol alang- alang  untuk  keempat  bakteri  tersebut.  Meskipun  untuk bakteri  B.  substilis  pada  konsentrasi  9%  dan  10% memiliki  daya  hambat  yang  sama  namun  pada konsentrasi 20% dan 30% terjadi kenaikan daya hambat. Begitu juga untuk bakteri E. coli pada konsentrasi 8% dan 9%  memiliki  daya  hambat  yang  sama  namun  pada konsentrasi  10%,  20%  dan  30%  terjadi  kenaikan  daya hambat.
Hasil  kadar  sampel  daun,  bunga  dan  akar  dalam etanol  menunjukkan  bahwa  bakteri  gram  positif  lebih sukar  dihambat  daripada  bakteri  gram  negatif.  Hal  ini dikarenakan dinding  sel bakteri  gram  positif  jauh  lebih tebal  dibandingkan  bakteri  gram  negatif.  Pada  bakteri gram  positif,  kandungan  peptidoglikan  dinding  selnya lebih banyak daripada lipid dan sebaliknya pada bakteri
gram negatif, pada dinding selnya kandungan lipid lebih banyak  daripada  peptidoglikan.  Menurut  [8],  bakteri gram negatif memperlihatkan tiga lapis pembungkus sel yaitu  membran  bagian  luar  (OM/outer  membran), lapisan tengah yang merupakan dinding sel atau lapisan murein dan membran plasma dalam.
Mekanisme  penghambatan  bakteri  belum  dapat diprediksikan  karena  kandungan  senyawa  aktif  yang berperan  sebagai  antibakteri  belum  diketahui  secara pasti  perlu  pemurnian  dan  identifikasi  lebih  lanjut. Umumnya suatu agen antibakteri berpengaruh terhadap sel bisa melalui penghambatan dinding sel, penghambatan fungsi membran, penghambatan sintesis protein  dan  asam  nukleat,  perubahan  molekul  protein dan asam nukleat serta penghambatan enzim [7]. Bakteri gram  negatif  memiliki  lapisan  peptidoglikan  pada dinding  sel  yang  tipis  dan  dikelilingi  lipoprotein, lipopolisakarida,  fosfolipid  dan  beberapa  protein.  Jika diuraikan lipopolisakarida mempunyai struktur lipid dan polisakarida.  Pada  bakteri  gram  positif  dinding  sel tersusun  atas  jaringan  dengan  pori  yang  banyak  dan lapisan peptidoglikan yang tebal serta dikelilingi lapisan asam ketoat.
Data  yang  diperoleh,  bakteri  gram  negatif  lebih dapat  bertahan  terhadap  ekstrak  etanol  alang-alang daripada  bakteri  gram  positif.  Ketika  kadar  sampel alang-alang dalam etanol ini bekerja pada bakteri gram positif,  kadar  sampel  akan  berikatan  dengan peptidoglikan sehingga mampu merusak dinding sel dan pertumbuhan  bakteri  gram  positif  dapat  dihambat. Berlaku  prinsip  like  dissolved  like,  mengingat  kadar sampel  alang-alang  dalam  etanol  yang  bersifat  polar begitu  juga  dengan  peptidoglikan  yang  terdiri  dari protein dan karbohidrat yang bersifat polar juga. Prinsip like dissolved like yaitu suatu senyawa polar akan larut dengan  senyawa  polar,  sebaliknya  senyawa  nonpolar akan  larut  dalam  senyawa  nonpolar.  Berbeda  dengan bakteri  gram  negatif.  Ketika  kadar  sampel  alang-alang dalam  etanol  bekerja,  tidak  dapat  langsung  berikatan dengan  peptidoglikan  namun  harus  merusak  outer membran  lebih  dahulu.  Ini  yang  menyebabkan  bakteri gram negatif lebih sukar dihambat dibandingkan bakteri gram  positif.  Kadar  sampel  etanol  alang-alang  lebih efektif  dalam  menghambat  bakteri  gram  positif dibandingkan bakteri gram negatif.
Menurut Pratama [9], respon hambatan pertumbuhan  bakteri  dapat  diklasifikasikan  sebagai berikut
Tabel 1 : Klasifikasi respon hambatan pertumbuhan bakteri Diameter zona bening Respon hambatan pertumbuhan >20 mm Kuat 16-20 mm Sedang 10-15 mm Lemah <10 mm Kurang efektif
Menurut  Tabel  1  tentang  klasifikasi  respon hambatan  pertumbuhan  bakteri,  sampel  alang-alang
yang berupa kadar sampel bunga, daun dan akar dalam etanol  memiliki  respon  hambatan  pertumbuhan antibakteri  yang  kurang  efektif.  Hal  ini  dikarenakan senyawa  yang  terlarut  dalam  etanol  berupa  campuran beberapa senyawa yang tidak kesemuanya memiliki sifat menghambat bakteri sehingga cenderung memiliki daya hambat yang kecil.
Hasil  tersebut  menunjukkan  bahwa  kadar  sampel alang-alang  dalam  etanol  mampu  digunakan  sebagai antibakteri terhadap bakteri Escherichia coli , Pseudomonas  aeroginosa , Staphylococcus  aureus dan Bacillus subtilis .

## 4. Kesimpulan
KHM (Konsentrasi Hambat Minimum) kadar sampel alang-alang  dalam  etanol  terhadap  bakteri Escherichia coli , Pseudomonas  aeroginosa , Staphylococcus  aureus dan Bacillus  subtilis berturut-turut  dari  kadar  sampel  daun dalam etanol sebesar 7%, 7%, 8% dan 9%; untuk kadar sampel bunga dalam etanol sebesar 7%, 7%, 9% dan 7%; dan untuk kadar sampel akar dalam etanol 7%, 8%, 10% dan  8%.  Hasil  penelitian  menunjukkan  kadar  sampel alang-alang  dalam  etanol  yang  paling  potensial  pada inhibisi  bakteri  Escherichia  coli  adalah  ketiga  kadar sampel  alang-alang,  pada  inhibisi Pseudomonas aeroginosa yang  paling  potensial  adalah  kadar  sampel daun dan bunga, pada inhibisi Bacillus subtilis yang paling potensial  adalah  kadar  sampel  daun  dan  pada  inhibisi Staphylococcus aureus yang paling potensial adalah kadar sampel bunga.

## 5. Daftar Pustaka
[1]  Setiawan  Dalimartha,  Atlas  tumbuhan  obat Indonesia, Trubus Agriwijaya, 1999.
[2]  D. P. Garrity, M. Soekardi, M. van Noordwijk, R. de la Cruz, P. S. Pathak, H. P. M. Gunasena, N. van So, G. Huijun,  N.  M.  Majid,  The  Imperata  grasslands  of tropical  Asia:  area,  distribution,  and  typology, Agroforestry Systems , 36, 1, (1996) 3-29
10.1007/BF00142865
[3]  Kurniatun Hairiah, Meine van Noordwijk, Pratiknyo Purnomosidhi,  Reclamation  of  Imperata  Grassland using  Agroforesty,  in,  International  Centre  for Research in Agroforestry, Bogor, 2000.
[4]  Hwee Ling Koh, Tung Kian Chua, Chay Hoon Tan, A Guide to Medicinal Plants: An Illustrated, Scientific and Medicinal Approach, World Scientific, 2012.
[5]  Bungorn  Sripanidkulchai,  Unchalee  Tattawasart, Pisamai  Laupattarakasem,  Varima  Wongpanich, Anti-inflammatory  and  Bactericidal  Properties  of Selected  Indigenous  Medicinal  Plants  Used  for Dysuria, Thai  Journal  of  Pharmaceutical  Sciences (TJPS) , 26, 1-2, (2002) 33-38
[6]  EE  Mak-Mensah,  EO  Terlabi,  G  Komlaga, Antiypertensive  action  of  ethanolic  extract  of Imperata cylindrica leaves in animal models, Journal of Medicinal Plants Research , 4, 14, (2013) 1486-1491
[7]  Michael  J.  Pelczar,  E.  C.  S.  Chan,  Dasar-dasar mikrobiologi, R.S. Hadioetomo, Universitas Indonesia Press, Jakarta, 1988.
Jurnal Kimia Sains dan Aplikasi 20 (3) (2017): 130 – 135
[8]  M. R. J. Salton, K. S. Kim, Structure, in: S. Baron (Ed.) Medical  Microbiology ,  University  of  Texas  Medical,
Galveston, 1996.
[9]  Moch  Rachdie  Pratama,  Pengaruh  Ekstrak  Serbuk Kayu Siwak (Salvadora persica) Terhadap
Pertumbuhan  Bakteri  Streptococcus  mutans  dan Staphylococcus aureus  dengan  Metode  Difusi  Agar, Program  Studi  Biologi,  Institut  Teknologi  Sepuluh November, Surabaya