## JIUBJ Jurnal Ilmiah
Universitas Batanghari Jambi
Jurnal Ilmiah Universitas Batanghari Jambi 23, 1 (2023): 406-413 DOI: 10.33087/jiubj.v23i1.3681 http://ji.unbari.ac.id/index.php/ilmiah

## Evaluasi Tepung Kedele Terproteksi Tanin Kondensasi dari Ekstrak Daun Sengon (Albizia falcataria) terhadap Ketahanan Degradasi oleh Mikroba di Rumen
Ratu Putri Ganesa, Afzalani Afzalani*, Fadillah Hermiseptia,

## Raguati Raguati, Fachroerrozi Hoesni
Dinas Tanaman Pangan dan Hortikultura Provinsi Sumatera Selatan Fakultas Peternakan Universitas Jambi *Corresponding email: afzalani@unja.ac.id
Abstract.  Soybean  meal  (SBM)  is  a  quality  feed  with  high  protein  and  organic  matter  content  but  is  easy  to degrade  by  microbes  in  the  rumen.  A  high  degradation  rate  in  the  rumen  causes  potential  protein  loss  as ammonia  and  energy  in  the  form  of  fermentation  heat,  CO2  gas,  and  methane  gas.  This  study  aimed  to determine the effect of SBM protected with condensed tannins (TK) from sengon leaves on its fermentability by rumen microbes. This study used a completely randomized design (CRD) consisting of four treatments and five replications.  Treatments  were  of  P1  =  SBM  unprotected  with  condensed  tannin  (CT)  (control);  P2  =  SBM- protected 2% CT; P3 = SBM-protected 4% CT, and P4 = SBM- protected 6% CT. The amount of CT (0, 2, 4, 6%) was calculated and converted to the amount of sengon leaves equivalent to 0, 226.24, 452.49, and 678.72 g/kg SBM based on CT content in sengon leaves of 8.84%. SBM samples were weighed as much as 0.5 g, then put  into  a  serum  bottle  with  a  capacity of  100 ml, added  40 ml  of a  mixture  of rumen  fluid  and McDougall's buffer  (1:4  v/v),  closed  with  a  rubber  stopper,  climb  sealed  using  an  aluminum  seal,  and  incubated  in  an incubator for 3, 6, 9, 12, 24, and 48 hours. The variable measured was in vitro cumulative gas production (GP), methane  production  (CH4),  dry  matter  degradation  (DMD),  organic  matter  degradation  (OMD),  metabolism energy  (ME),  and  production  of  microbial  protein  (PMP).  The  results  showed  that  the  treatment  of  SBM protected  with  condensed  tannins  from  sengon  leaf extract had a significant  effect (P<0.05) on  reducing GP, CH4,  DMD,  OMD,  ME,  and  PMP.  The  Treatment  of  P1  (control)  was  higher  produced  of  GP,  CH4,  DMD, OMD, ME, and PMP (P<0.05) compared to P2, P3, and P4. But between P2, P3, and P4 were not significantly different (P>0.05). This study concluded that the use of condensed tannin at levelof 2% could be used to protect soybean meal from microbial degradation in the rumen.

## Keywords: soybean meal; condensed tannin; protected; ruminal degradation

## PENDAHULUAN
Pakan  sumber  protein  harganya  relatif mahal,  sehingga  perlu  upaya  perbaikan  nilai efisiensi  penggunaannya  melalui  intervensi teknologi proteksi serta upaya alternatif penyedian  pakan  murah  dengan  kandungan nutrisi  yang  baik  dan  tidak  menyebabkan masalah  lingkungan  (Afzalani  et  al.,  2021). Tepung  kedelai  merupakan  pakan  sumber protein  kualitas  tinggi  dengan  kandungannya mencapai 49%. Namun  kandungan protein pada tepung  kedelai  tergolong  memiliki  karakteristik tingginya kandungan Rumen Degradable Protein (RDP), dimana  solublilitasnya di  rumen 60-80%,  dan  waktu  48  jam  bisa  mencapai 21,149  g  N/jam.  Protein  pakan  yang  mudah terdegradasi akan mempengaruhi jumlah nitrogen  yang  tersedia  untuk  sintesis  protein (Hristov et al., 2019).
Protein  yang  didegradasi  oleh  mikroba akan  menghasilkan  amonia,  dengan  pasokan energi dari karbohidrat, bakteri akan menggunakan  amonia  untuk  sintesis  mikrobial protein.  Tingginya  kandungan  protein  pada tepung  kedelai  serta  diikuti  dengan  tingginya degradasi  di  rumen  oleh  mikroba,  maka  perlu dilakukan  proteksi  protein  agar  mengurangi degradasinya  di  rumen.  dan  dapat  dengan optimal  diserap  di  usus  halus.  Maka  perlu dilakukan proteksi untuk protein pakan di dalam rumen menggunakan cara alami.
Banyak  cara  yang  dapat  dilakukan  untuk memproteksi  protein  pakan  tepung  kedelai dengan cara pemanasan (ekstrusi) dan perlakuan secara  kimia  (Sajati  et  al.,  2012).  Namun  kedua cara  ini  kurang efisien,  saat  dilakukan pemanasan,  dapat  menyebabkan  protein  pakan terdenaturasi  dan  kehilangan  kandungan  asam
Ratu Putri Ganesa, Afzalani Afzalani, Fadillah Hermiseptia, Raguati Raguati, Fachroerrozi  Hoesni., Evaluasi Tepung  Kedele  Terproteksi  Tanin  Kondensasi  dari  Ekstrak  Daun  Sengon  (Albizia  falcataria)  terhadap Ketahanan Degradasi oleh Mikroba di Rumen
amino. Sedangkan perlakuan secara kimia dapat bersifat  karsinogen.  Cara  yang  efisien  dalam memproteksi protein yaitu dengan menggunakan senyawa  alami  berupa  metabolik  sekunder tanaman  yang  mengandung  tanin.  Mekanisme kerja  tanin  dalam  memproteksi  protein  yaitu dengan  membentuk  ikatan  komplek  tanin- protein.  Ikatan  ini  akan  terlepas  di  abomasum karena  pH  abomasum  dibawah  3,5,  selanjutnya protein  akan  bypass  di  rumen  dan  di  usus  halus akan  di  serap  dalam  bentuk  asam  amino. Kandungan  tanin  pada  daun  sengon  dapat memproteksi protein agar tidak didegradasi oleh mikroba  di  dalam  rumen  atau  dikelompokkan kedalam rumen undegradable protein (RUDP).
Daun  sengon  berpotensi  untuk  digunakan sebagai  pakan  ternak  ruminansia  dilihat  dari potensi  ketersediaannya  secara  kuantitas  mudah didapat. Daun sengon biasanya dikembangkan di hutan  tanaman  industri  yang  memanfaatkan kayunya  sedangkan  daunnya  banyak  terbuang karena  hasil  pemangkasan.  Suryadi  (2008) melaporkan bahwa daun  sengon dapat dijadikan suplemen hijauan pakan untuk ternak ruminansia.  Pemberian  pakan  berupa complete feed dengan  bahan  dasar  daun  sengon  dapat meningkatkan  konsumsi  pakan,  pertambahan bobot  badan  dan  efisiensi  pakan  pada  kambing peranakan ettawa (Efendi et al., 2020). Selain itu daun  sengon  mempunyai  kandungan  metabolik sekunder  berupa  tanin  kondensasi  (TK)  sebesar 8,84% (Afzalani et al., 2022). Kandungan tannin kondensasi  yang  terkandung  di  daun  sengon potensial  untuk  digunakan  sebagai  protektor protein  bahan  pakan.  Tanin  dapat  memproteksi protein dengan cara membentuk ikatan kompleks  tanin-protein,  di  abomasum  ikatan  ini akan  terlepas  dan  terjadi  pencernaan  protein secara enzimatis di usus halus dan diserab dalam bentuk  asam  amino  bebas.  (Marhaeniyanto  and Susanti,  2018).  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahu efektifitas penggunaan berbagai taraf tannin  kondensasi  sebagai  protektor  tepung kedele  dilihat  dari  ketahanan  degradasinya  oleh mikroba di rumen.

## Tinjauan Literature Ekstraksi Tanin Kondensasi Dari Daun Sengon
Pembuatan ekstrak tannin kondensasi dari daun sengon dilakukan dua tahap.
1. Daun  sengon  dikeringkan  dibawah  sinar matahari,  setelah  kering  kemudian  digiling menggunakan  mesin  giling  tepung  dengan ukuran  saringan  1  mm,  lalu  direndam  dalam
air  dengan  perbandingan  1:10  (w/v)  selama 12  jam  sesuai  dengan  konsentrasi  tannin kondensasi  yang  digunakan  yakni  2%,  4% dan  6%  dari  berat  kering  tepung  kedele (soybean  meal=SBM).  Kandungan  tannin kondensasi  pada  daun  sengon  yakni  8.84% atau setara 88.4 g/kg berat kering udara daun sengon  (Afzalani  et  al.,  2022).  Untuk memperoleh konsentrasi TK 2%, 4% dan 6%, maka daun sengon yang digunakan sebanyak 226,24  g/kg  SBM,  452,49  g/kg  SBM  dan 678,73  g/kg  SBM.  Setelah  12  jam  campuran daun  sengon  dan  air  selanjutnya  disaring menggunakan  empat  lapis  kain  untuk memperoleh ekstraknya.
2. Ekstrak  yang  diperoleh  dipanaskan  selama  ± 60  menit  sampai  ekstrak  tersebut  mengental dan  selanjutnya  didinginkan.  Setelah  dingin dicampur  dengan  1  kg  SBM,  dibiarkan selama  ±  6  jam  dan  selanjutnya  dikeringkan dalam oven suhu 60-70℃.

## Uji Degradabilitas Tepung Kedele Terproteksi
Uji  degradibilitas  SBM  terproteksi  tannin kondensasi  dari  ekstrak  daun  sengon  dilakukan menggunakan  teknik in  vitro  gas berdasarkan prosedur (Afzalani et al., 2022). Sebanyak 0.5 g sampel  SBM  terproteksi  sesuai  perlakuan dimasukkan ke dalam botol serum kapasitas 100 ml, kemudian ditambah 40 ml larutan campuran cairan  rumen  dan  buffer  McDougall  dengan perbanding  1:4  v/v.  Kemudian  ditutup  dengan penutup  karet  ( rubber  stopper )  dan  diklem menggunakan alumunium seal, diinjeksi dengan syringe melalui karet penutup untuk mengeluarkan gas sebagai titik awal dimulainya inkubasi. Inkubasi sampel dilakukan menggunakan inkubator pada suhu 39 o C dengan interval  waktu  inkubasi  selama  3,  6,  9,  24,  48 jam.
Produksi gas diukur sesuai interval  waktu inkubasi  dengan  menyuntikan glass  syringe melalui  karet  penutup.  Produksi  gas  diukur dengan  membaca  melalui  skala  pada glass syringe .  Pengukuran  produksi  gas  metana dilakukan dengan metode trapping CH 4 modifikasi  Afzalani  et  al.  (2022)  menggunakan larutan  NaOH  4  M.  400  ml  NaOH  dimasukkan kedalam washing gas bottle (Duran TM ) kapasitas 500  ml.  Gas  hasil  pengukuran  menggunakan glass syringe, selanjutnya  dimasukkan  kedalam saluran in-let selang  pada washing  gas dengan cara mendorong piston syringe dengan melewati larutan  NaOH  untuk  menangkap  gas  CO 2 ,  dan
Ratu Putri Ganesa, Afzalani Afzalani, Fadillah Hermiseptia, Raguati Raguati, Fachroerrozi  Hoesni., Evaluasi Tepung  Kedele  Terproteksi  Tanin  Kondensasi  dari  Ekstrak  Daun  Sengon  (Albizia  falcataria)  terhadap Ketahanan Degradasi oleh Mikroba di Rumen
pada  saluran  out-let  dipasang glass  syringe untuk  mengukur  gas  metana  yang  tidak  diserap oleh larutan NaOH.
Pada  akhir  waktu  interval  inkubasi  48 jam,  proses  fermentasi  sampel  SBM  dihentikan dengan  cara  membuka  karet  penutup  botol serum,  ditetesi  2-3  tetes  larutan  HgCl 2 jenuh, dimasukkan  dalam  tabung  sentrifugasi,  lalu disentrifugasi  dengan  kecepatan  3500  rpm selama  ±  15  menit  guna  memisahkan  antara endapan dan supernatannya. Selanjutnya supernatant  diukur  pH  menggunakan  pH  meter. Sedangkan endapannya digunakan untuk mengukur  degradasi  bahan  kering  dan  bahan organic.

## Pengukuran  Degradasi  Bahan  Kering  dan Bahan Organik
Endapan  yang  berasal  dari  pemisahan sampel hasil inkubasi 48 jam, dimasukkan dalam cawan  porselin  yang  sudah  diketahui  beratnya, kemudian kering dalam oven suhu 105 o C selama 8 jam,  dinginkan dalam desikator lalu ditimbang. Sampel selanjutnya dipijarkan dalam tanur  listrik  suhu 500 o C sampai berwarna putih, didinginkan  dalam  desikator  lalu  ditimbang. Degradasi bahan kering (DBK) Dihitung dengan rumus:
Degradasi bahan organik (DBO)
Dihitung dengan rumus:
Energi  Metabolisme  dan  Produksi  Protein Mikroba
Nilai
Metabolisme
Energy (ME)
diestimasi  menggunakan  persamaan  Menke  and Steingass (1988), seperti berikut :
ME (MJ/kg BK) = 1,68 + 0,1418GP + 0,0217EE – 0,038CA,
Dimana:  ME  :  Metabolisme  Energi;  GP  :  Gas total inkubasi 24 jam; EE : Kadar lemak pakan; CA : Kadar abu pakan
Produksi protein mikroba dihitung berdasarkan  persamaan  (Blümmel  et  al.,  1997), dimana
PPM  (mg/g  BK)  =  mg  BKTR  –  (ml  gas  x  2,2 mg/ml),
Dimana:  PPM  :  Produksi  protein  mikroba;  mg BKTR : Bahan kering tercerna; ml gas : gas total inkubasi 24 jam; 2,2 mg/ml : Faktor stokiometri yang menggambarkan mg atom C, H dan O yang digunakan  untuk  memproduksi  VFA  dalam setiap 1 ml gas yang dihasilkan.

## METODE
Penelitian dilaksanakan dalam Rancangan Acak  Lengkap  (RAL)  yang  terdiri  dari  empat perlakuan  dan  lima  ulangan.  Perlakuan  yang diberikan  terdiri  :  P1  =  SBM  tanpa  diproteksi tannin  kondensasi  (TK)  (kontrol);  P2  =  SBM- diproteksi  2%  TK;  P3  =  SBM-diproteksi  4% TK,  dan  P4  =  SBM-diproteksi  6%  TK.  Untuk mengetahui pengaruh perlakuan terhadap parameter yang diukur dilakukan analisis ragam sesuai  dengan  rancangan  penelitian  yang digunakan.  Sementara  itu  perbedaan  pengaruh antar  perlakuan  diuji  dengan  menggunakan  uji jarak  Duncan.  Sedangkan  uji  polynomial orthogonal  dilakukan  untuk  melihat  pengaruh taraf  TK  dalam  memproteksi  SBM  terhadap parameter  yang  diukur.  Analisis  data  dilakukan dengan menggunakan aplikasi SPSS.

## HASIL
Keberhasilan proses proteksi bahan pakan yang  memiliki  nilai  nutrisi  tinggi  dari  degradasi di  rumen  dapat  dilihat  melalui  pengukuran produksi  gas  total,  gas  metan,  degradasi  bahan kering  (DBK),  degradasi  bahan  organic  (DBO), nilai  energy  metabolism  dan  produksi  protein mikroba.

## Tabel 1

## Fermentabilitas tepung kedelai terproteksi tannin kondensasi dari ekstrak daun sengon
Parameter Perlakuan (%) S.E.M p-value P1 P2 P3 P4 Total Gas (ml) 91.15 c 64.50 b 53.00 a 49.50 a 2.053  <0.001 CH 4 (ml) 45.30 c 31.05 b 27.10 ab 24.80 a 1.371  <0.001 DBK (%) 76.18 b 44.61 a 42.08 a 40.57 a 2.180  <0.001 DBO (%) 79.83 b 49.83 a 47.71 a 45.32 a 1.544  <0.001 ME (MJ/kg BK) 9.61 c 5.94 b 5.52 ab 4.88 a .235  <0.001 PPM (mg/g BK) 607.02 c 353.33 b 331.71 a 327.61 a 3.653 <0.001
Ratu Putri Ganesa, Afzalani Afzalani, Fadillah Hermiseptia, Raguati Raguati, Fachroerrozi  Hoesni., Evaluasi Tepung  Kedele  Terproteksi  Tanin  Kondensasi  dari  Ekstrak  Daun  Sengon  (Albizia  falcataria)  terhadap Ketahanan Degradasi oleh Mikroba di Rumen
Angka yang diikuti superskrip huruf kecil berbeda pada baris yang sama, berbeda pada p<0.05 Sumber: data olahan

## Produksi Gas Total dan Gas Metana
Proses  fermentasi  pakan  oleh  mikroba  di rumen  mengahsilakan  produk  akhir  antara  lain volatile  fatty  acid (VFA),  ammonia  (NH 3 ), karbondioksida  (CO 2 ),  metan  (CH 4 )  serta  masa sel  mikroba.  Hasil  pengukuran  efek  taraf  TK dalam  proteksi  SBM  terhadap  produksi  gas  dan gas  metan  tercantum  pada  Tabel  1  dan  Gambar 1.  Hasil  analisis  ragam  menunjukkan  bahwa taraf  TK  nyata  menurunkan  produksi  gas  dan gas metan fermentasi SBM terproteksi di rumen. Produksi  gas  dan  gas  metan  perlakuan  P1  nyata (P<0.05)  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan perlakuan  P2,  P3  dan  P4,  namun  antara perlakuan  P2,P3  dan  P4  tidak  nyata  (P>0.05) berbeda. Penurunan produksi gas dan gas metan nyata (P<0.05) mengikuti pola persamaan linier, diamana  semaikin  tinggi  taraf  TK  yang digunakan  menyebabkan  produksi  gas  dan  gas metan fermentasi SBM terproteksi yang semakin menurun.  Hal  ini  disebabkan  karena  TK berperan dalam memproteksi SBM dari perombakan  oleh  mikroba  di  rumen  dengan membentuk  ikatan  komplek  antara  TK-protein dan  TK-dengan  karbohidrat.  Ikatan  komplek yang  terbentuk  menyebabkan  SBM  terproteksi tahan  terhadap  perombakan  oleh  enzim  yang berasal  dari  mikroba  rumen.  Akibatnya  zat makanan  terutama  karbohidrat  yang  dirombak
semakin menurun, tercermin dari jumlah gas dan gas  metan  hasil  fermentasi  SBM  di  rumen  yang semakin menurun.
Hasil  ini  sejalan  dengan  yang  dilaporkan Afzalani et al., (2022), dimana suplementasi TK yang  berasal  dari  daun  sengon  efektif  dalam menurunkan produksi  gas dan gas metan. Lebih lanjut Afzalani et al., (2022) menyatakan bahwa TK  berpengaruh  dalam  menurunkan  gas fermentasi  dalam  sistim  in  vitro  terutama dipengaruhi  oleh  terbentuknya  ikatan  komplek antara  tannin-makromolekul  yang  menghambat aktivitas  microbial  fibrolitik  enzim.  Disamping itu,  TK  mampu  menurunkan  fermentasi  dan kecernaan  bahan  organic  di  rumen  serta merubah  pola  fermentasi  melalui  perubahan antara  rasio acetat:propionate  (Jayanegara et  al., 2012,; Hassanat and Benchaar, 2013; Ningrat et al.,  2016;  Bueno  et  al.,  2020;  Afzalani  et  al., 2022).  Sementara  itu  efek  spesifik  dari  TK dalam  mereduksi  gas  metan  masih  belum diketahui  (Piñeiro-Vázquez  et  al.,  2015),  tetapi beberapa  studi  diperoleh  bahwa  terbentuknya ikatan komplek antara tannin-protein dan tannin- karbohidrat di dalam rumen, sehingga menurunkan  DBK  dan  DBO  dan  secara  tidak langsung  akan  mempengaruhi  pelepasan  H 2 (Jayanegara  et  al.,  2011;  Afzalani  et  al.,  2018; Bueno et al., 2020)
Sumber: data olahan
Gambar.1.
Hubungan taraf tannin kondensasi dalam proteksi SBM terhadap produksi gas (a) dan gas metan (b)
Degradasi Bahan Kering dan Bahan Organik Penentuan  kualitas  pakan  dapat  dilihat melalui  pengukuran  nilai  degradabilitasnya  di rumen  ternak  ruminansia  (Raguati  et  al.,  2018).
Namun  demikian,  tingginya  nilai  degradabilitas bahan  pakan  di  rumen  tidak  selalu  dapat digunakan  untuk  mengklasifikasikan  bahan pakan tersebut tergolong berkualitas baik. Bahan
Ratu Putri Ganesa, Afzalani Afzalani, Fadillah Hermiseptia, Raguati Raguati, Fachroerrozi  Hoesni., Evaluasi Tepung  Kedele  Terproteksi  Tanin  Kondensasi  dari  Ekstrak  Daun  Sengon  (Albizia  falcataria)  terhadap Ketahanan Degradasi oleh Mikroba di Rumen
pakan  dengan  kandungan  protein  dan  energy tinggi  dapat  digolongkan  menjadi  bahan  pakan berkualitas rendah, jika memiliki nilai degradabilitas  yang tinggi di rumen (Afzalani et al.,  2021;  Afzalani  et  al.,  2022).  Sehingga diperlukan  upaya  proteksi  dari  degradasi  di
rumen  dan  diharapkan by  pass ke  pencernaan pasca  rumen  (Afzalani  et  al.,  2021).  Hasil pengukuran  efek  proteksi  SBM  menggunakan beberapa  taraf  TK  dari  ekstrak  daun  sengon tercantum pada Tabel 1 dan Gambar 2.
Sumber: data olahan
Gambar.2
Hubungan taraf tannin kondensasi dalam proteksi SBM terhadap Nilai DBK (a) dan DBO (b)
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa proteksi  SBM  dengan  beberapa  taraf  TK  dari ekstrak daun sengon nyata (P<0.05) berpengaruh dalam menurunkan nilai DBK dan DBO dengan pola  model  persamaan  garis  linier  ŷ  =  67.26- 5.47x,  (R 2 )  =  0.64  untuk  DBK  serta  ŷ  =  71.52- 5.28x,  (R 2 )  =  0,675  untuk  DBO.  Namun demikian,  proteksi  SBM  dengan  TK  terhadap nilai  DBK  dan  DBO  perlakuan  P1  nyata (P<0.05)  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan  P2, P3  dan  P4,  sedangkan  antara  perlakuan  P2,  P3 dan  P4  tidak  nyata  berbeda  (P>0.05).  Hal  ini menunjukkan  bahwa  proteksi  SBM  dengan  TK pada  taraf  2%  efektif  dalam  memproteksi  SBM dari  degradasi  oleh  mikroba  di  rumen  serta potensial menyebabkan by pass dari degradasi di rumen.  Hasil  penelitian  ini  sejalan  dengan  yang dilaporkan  Rimbawanto  et  al.  (2015)  yang memproteksi  silase  ikan  runcah  dengan  tanin kondensasi dari daun L. leucocephala berpengaruh  sangat  nyata  (P<0,01)  dalam menurunkan  DBK  dan  DBO  seiring  dengan meningkatnya  taraf  tanin  kondensasi.  Selain  itu hasil penelitian lain yang dilaporkan Cortés et al. (2009)  menggunakan  ekstraksi  tanin  kondensasi dari  legume Calliandra  calothyrsus , Flemingia macrophylla dan Leucaena  leucocephala ,  untuk memproteksi bungkil kelapa, berpengaruh sangat  nyata  (P<0,01)  dalam  menurunkan  DBK dan  DBO  seiring  dengan  meningkatnnya konsentrasi  tanin  kondensasi  hingga  30%  dari perlakuan kontrol sebesar 900 mg/g CP).
Nilai  DBK  dan  DBO  yang  diperoleh  dari penelitian  ini  sejalan  dengan  hasil  pengukuran produksi  gas  dan  gas  metan  yang  dihasilkan. Penurunan  nilai  DBK  dan  DBO  disebabkan karena  TK  dari  ekstrak  daun  sengon  berperan dalam membentuk ikatan komplek TK- makromolekul  seperti  protein  dan  karbohidrat sehingga  tahan  terhadap  penetrasi  enzim  yang dihasilkan  oleh  mikroba  di  rumen.  Hasil  ini sejalan  dengan  yang  dilaporkan  Afzalani  et  al., (2022),  dimana  suplementasi  TK  yang  berasal dari  daun  sengon  efektif  dalam  menurunkan DBK  dan  DBO.  Lebih  lanjut  Afzalani  et  al., (2022)  menyatakan  bahwa  TK  berpengaruh dalam  menurunkan  gas  fermentasi  dalam  sistim in  vitro  terutama  dipengaruhi  oleh  terbentuknya ikatan  komplek  antara  tannin-makromolekul yang  menghambat  aktivitas  microbial  fibrolitik enzim.  Disamping  itu,  TK  mampu  menurunkan fermentasi  dan  kecernaan  bahan  organik (Jayanegara  et  al.,  2012,;  Hassanat  and Benchaar,  2013;  Ningrat  et  al.,  2016;  Bueno  et al.,  2020;  Afzalani  et  al.,  2022).  Sementara  itu Piñeiro-Vázquez  et  al.  (2015),  menyatakan bahwa beberapa studi diperoleh bahwa terbentuknya  ikatan  komplek  antara  tannin- protein  dan  tannin-karbohidrat  di  dalam  rumen, menyebabkan turunnya DBK dan DBO (Jayanegara  et  al.,  2011;  Afzalani  et  al.,  2018; Bueno et al., 2020). Hasil penelitian Marhaeniyanto  dan  Susanti  (2018)  pemberian pakan  konsentrat  yang  di  suplementasi  tepung
Ratu Putri Ganesa, Afzalani Afzalani, Fadillah Hermiseptia, Raguati Raguati, Fachroerrozi  Hoesni., Evaluasi Tepung  Kedele  Terproteksi  Tanin  Kondensasi  dari  Ekstrak  Daun  Sengon  (Albizia  falcataria)  terhadap Ketahanan Degradasi oleh Mikroba di Rumen
daun  yang  mengandung  tanin  kondensasi menyebabkan degradasi bahan organik di rumen menurun  dengan  meningkatnya  taraf  tanin kondensasi hingga 30%.
Metabolisme Energi Aktivitas  fermentasi  bahan  pakan  yang terjadi  di  rumen  oleh  mikroba  terutama  untuk menghasil  energi  guna  pemenuhan  kebutuhan bagi  mikroba.  Namun  energy  yang  dihasilkan, memiliki  korelasi  dengan  jumlah  bahan  organik yang  di  degradasi  oleh  mikroba.  Namun  tidak semua  energy  yang  dihasilkan  digunakan  oleh mikroba di rumen, sebagian akan hilang sebagai panas  fermentasi  dan  sebagai  gas  metan  (Da Fonseca  et  al.,  2019)  sehingga  menyebabkan inefisiensi  dalam  penggunaan  energi.  Sehingga diperlukan  upaya  untuk  memproteksi  bahan pakan  yang  tergolong  kualitas  baik  dari perombakan  di  rumen  (Besharati  et  al.,  2022). Hasil  pengukuran  efek  taraf  TK  terhadap  nilai metabolism  energi  (ME)  seperti  tercantum  pada Tabel 1 dan Gambar 3.
Sumber: data olahan Gambar.3
Hubungan taraf tannin kondensasi dalam proteksi SBM terhadap ME (MJ/kg BK)
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa proteksi  SBM  dengan  beberapa  taraf  TK  dari ekstrak daun sengon nyata (P<0.05) menurunkan nilai  ME  dari  SBM  terproteksi.  Hasil  uji polynomial  orthogonal  diperoleh  hubungan linier  dengan  model  persamaan  ŷ  =  8.68-0.73x, R 2 =  0.74,  dimana  semakin  meningkat  taraf  TK dari  ekstrak  daun  sengon  yang  digunakan  nilai ME  SBM  terproteksi  semakin  menurun. Penurunan  nilai  ME  ini  terjadi  sejalan  dengan menurunnya  DBO  yang  diperoleh.  Ikatan komplek  antara  TK-protein  dan  TK-karbohidrat menyebabkan  menurunnya  DBO  sehingga  ME yang  dihasilkan  dari  perombakan  BO  juga menurun.  Hasil  penelitian  ini  sejalan  dengan yang  dilaporkan  oleh  beberapa  penelitian penggunaan TK seperti (Jayanegara et al., 2009;
Bueno  et  al.,  2020;  Ifani  et  al.,  2021;  Besharati et  al.,  2022;  Afzalani  et  al.,  2022),  dimana  TK berpengaruh  dalam  menurunkan  degradasi protein,  bahan  kering.  bahan  organic  serta  nilai energy metabolism di rumen.

## Produksi Protein Mikroba
Produksi protein mikroba (PPM) membutuhkan  sumber  nitrogen  dan  energy dalam  bentuk  Adenosine  Triphosphate  ATP yang  berasal  dari  perombakan  protein  pakan, sedangkan  energi  disuplai  dari  degradasi karbohidrat  (Lu  et  al.,  2019).  Hasil  penelitian efek taraf TK yang digunakan dalam memproteksi  SBM  terhadap  PPM  tercantum pada Tabel 1 dan Gambar 4.
Sumber: data olahan Gambar 4 Hubungan antara taraf TK dalam memproteksi tepung kedelai terhadap PPM
Hasil  analisis  ragam  menunjukkan  bahwa perlakuan  taraf  TK  berpengaruh  nyata  (P<0,05) dalam  menurunkan  PPM  dari  SBM  terproteksi. Hasil  uji  polynomial  orthogonal  menunjukkan pola  hubungan  linier  antara  taraf  TK  yang digunakan  memproteksi  SBM  terhadap  PPM dengan  model  persamaan  linier  ŷ  =  533.9- 42.99x, R 2 = 0.671 seperti Gambar 8. Penurunan PPM  dikarenakan  ikatan  kompleks  tanin kondensasi  dengan  protein  pada  tepung  kedelai mengurangi  suplai  nitrogen  untuk  mikroba rumen  (McSweeney  et  al.,  2001).    Penurunan produksi protein mikroba tidak selalu berdampak  buruk  untuk  ternak  selama  jumlah protein  mikroba  masih  bisa  digunakan  untuk melakukan fermentasi pakan di rumen. Produksi protein  mikroba  tidak  efisien  karena  ATP  yang dihasilkan dari aktifitas mikroba tidak digunakan untuk  pertumbuhan  maupun  produksi,  dan cenderung  penggunaan  ATP  yang  dihasilkan untuk  keperluan  yang  diarahkan  perwatan  serta
Ratu Putri Ganesa, Afzalani Afzalani, Fadillah Hermiseptia, Raguati Raguati, Fachroerrozi  Hoesni., Evaluasi Tepung  Kedele  Terproteksi  Tanin  Kondensasi  dari  Ekstrak  Daun  Sengon  (Albizia  falcataria)  terhadap Ketahanan Degradasi oleh Mikroba di Rumen
sintesis cadangan karbohidrat atau energy dalam bentuk glikogen (Hackmann and Firkins, 2015).
Sementara  itu  Widyobroto  et  al  (2007) yang  menyatakan  bahwa  tidak  sinkronnya ketersediaan  energi  dan  protein  pada  pakan untuk mikroba rumen tidak memberikan dampak negatif  pada  pertumbuhan  mikroba  rumen  dan untuk  ternak  itu  sendiri.  Selanjutnya  Ginting (2005),  menyatakan  bahwa  kemampuan  protein pakan yang rendah untuk diubah menjadi protein mikroba  dapat  meningkatkan  produksi  ternak, karena  sumber  protein  mikroba  tidak  mampu untuk  memenuhi  kebutuhan  ternak  guna mencapai produksi yang maksimal.

## SIMPULAN
Hasil  penelitian  ini  dapat  disimpulkan bahwa  taraf  tannin  kondensasi  2%  efektif digunakan  untuk  memproteksi  tepung  kedele dari degradasi oleh mikroba di rumen.

## DAFTAR PUSTAKA
Afzalani,  A., Muthalib, R.., Dianita, R., Hoesni, F.,  Raguati,  R.,  Musnandar,  E.,  2021.
Evaluasi Suplementasi Indigofera zollingeriana  Sebagai  Sumber  Green Protein  concentrate  Terhadap  Produksi
Gas  Metan,  Amonia  dan  Sintesis  Protein Mikroba Rumen. J. Ilm. Univ. Batanghari Jamb i 21.
https://doi.org/10.33087/jiubj.v21i3.1736
Afzalani,  A.,  Muthalib,  R..,  Raguati,  R.,  2018.
Penggunaan ekstrak condensed tannin dari tepung  daun  sengon  (Albizia  falcataria) untuk mereduksi emisi gas metan fermentasi  pakan  di  rumen  in  vitro,
Pembangunan  Pertanian  Berkelanjutan Berbasis Sumberdaya Lokal . 240–248. Afzalani,  A.,  Muthalib,  R.A.,  Raguati,  R., Syahputri,  E.,  Suhaza,  L.,  Musnandar,  E., 2022.  Supplemental  Effect  of  Condensed Tannins  From  Sengon  Leaves  (Albizia Falcataria)  on  in  Vitro  Gas  and  Methane Production. J. Anim. Plant Sci. 32, 1513– 1520.
https://doi.org/10.36899/japs.2022.6.0559 Besharati,  M.,  Maggiolino,  A.,  Palangi,  V.,
Kaya,  A.,  Jabbar,  M.,  Eseceli,  H.,  De
Palo,  P.,  Lorenzo,  J.M.,  2022.  Tannin  in Ruminant  Nutrition:  Review.  Molecules
27, 1–26. https://doi.org/10.3390/molecules2723827 3 Blümmel,  M.,  Steingaβ,  H.,  Becker,  K.,  1997.
The  relationship  between  in  vitro  gas production,  in  vitro  microbial  biomass yield  and  15  N  incorporation  and  its implications for the prediction of voluntary feed intake of roughages . Br. J. Nutr . 77, 911–921. https://doi.org/10.1079/bjn19970089
Bueno,  I.C.S.,  Brandi,  R.A.,  Fagundes,  G.M.,
Benetel,  G.,  Muir,  J.P.,  2020.  The  role  of condensed  tannins  in  the  in  vitro  rumen fermentation kinetics in ruminant  species:
Feeding type involved? Animals.
https://doi.org/10.3390/ani10040635 Cortés, J.E., Moreno, B., Pabón, M.L., Avila, P., Kreuzer,  M.,  Hess,  H.D.,  Carulla,  J.E.,
2009.  Effects  of  purified  condensed tannins extracted from Calliandra, Flemingia  and  Leucaena  on  ruminal  and postruminal  degradation  of  soybean  meal as  estimated  in  vitro. Anim.  Feed  Sci. Technol. 151, 194–204. https://doi.org/10.1016/j.anifeedsci.2009.0
1.015
Da Fonseca, M.P., Da Costa Cruz Borges, A.L.,
De  Araujo  Carvalho,  P.H.,  Reis  E  Silva, R.,  Gonçãlves,  L.C.,  Borges,  I.,  Lage, H.F.,  Ferreira,  A.L.,  Saliba,  E.O.S., Jayme, D.G., Da Glória, J.R., Graça, D.S., Meneses, R.M., De Carvalho, A.Ú., Filho, E.J.F., Silva, A.A., 2019. Energy partitioning  in  cattle  fed  diets  based  on tropical  forage  with  the  inclusion  of antibiotic  additives. PLoS  One 14,  1–11. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0211 565
Efendi,  A.,  Sumartono,  S.,  Wadjdi,  M.F.,  2020. Pengaruh tingkat penggunaan daun sengon (Albizzia falcataria) dalam complete feed terhadap performan kambing PE. J. Rekasatwa Peternak . 3, 6– 10.
Ginting,  S.P.,  2005.  Sinkronisasi  degradasi protein  dan  energi  dalam  rumen  untuk memaksimalkan produksi protein mikrobia. Wartazoa 15, 1–10.
Hackmann, T.J., Firkins, J.L., 2015. Maximizing efficiency  of  rumen  microbial  protein production. Front.  Microbiol .  6,  1–16. https://doi.org/10.3389/fmicb.2015.00465 Hassanat, F., Benchaar, C., 2013. Assessment of the  effect  of  condensed  (acacia  and quebracho)  and  hydrolysable  (chestnut and valonea) tannins on rumen fermentation  and  methane  production  in
Ratu Putri Ganesa, Afzalani Afzalani, Fadillah Hermiseptia, Raguati Raguati, Fachroerrozi  Hoesni., Evaluasi Tepung  Kedele  Terproteksi  Tanin  Kondensasi  dari  Ekstrak  Daun  Sengon  (Albizia  falcataria)  terhadap Ketahanan Degradasi oleh Mikroba di Rumen
vitro. J.  Sci.  Food  Agric .  93,  332–339. https://doi.org/10.1002/jsfa.5763
Hristov,  A.N.,  Bannink,  A.,  Crompton,  L.A., Huhtanen,  P.,  Kreuzer,  M.,  McGee,  M., Nozière,  P.,  Reynolds,  C.K.,  Bayat,  A.R., Yáñez-Ruiz,  D.R.,  Dijkstra,  J.,  Kebreab, E., Schwarm, A., Shingfield, K.J., Yu, Z., 2019. Invited review: Nitrogen in ruminant nutrition: A review of measurement  techniques. J.  Dairy  Sci . 102, 5811–5852.
https://doi.org/10.3168/jds.2018-15829
Ifani,  M.,  Suhartati,  F.M.,  Rimbawanto,  E.A.,
2021.  Effect  of  Protection  of  Soybean Meal  Using  Mahogany  Leaf  Extract  in Ruminant  Diet  on  Rumen  Fermentation Products. J . Ilmu Ternak dan Vet . 26, 96– 107.
https://doi.org/10.14334/jitv.v26i3.2829
Jayanegara,  A.,  Makkar,  H.P.S.,  Becker,  K., 2009. Emisi metana dan fermentasi rumen in  vitro  ransum  hay  yang  mengandung tanin  murni  pada  konsentrat  berbeda. Media Peternak. 32, 185–195. Jayanegara,  A.,  Wina,  E.,  Soliva,  C.R., Marquardt,  S.,  Kreuzer,  M.,  Leiber,  F., 2011.  Dependence  of  forage  quality  and methanogenic  potential  of  tropical  plants on  their  phenolic  fractions  as  determined by  principal  component  analysis.  Anim.
Feed  Sci.  Technol. 163,  231–243. https://doi.org/10.1016/j.anifeedsci.2010.1
1.009
Jayanegara et al., 2012, n.d. Meta‐analysis of the relationship  between  dietary  tannin  level and.pdf. https://doi.org/10.1111/j.1439- 0396.2011.01172.x
Lu,  Zhongyan,  Zhihui  Xu,  Zanming  Shen, Yuanchun  Tian  and  Hong  Shen.,  2019. Dietary  energy  level  promotes  rumen microbial  protein  synthesis  by  improving the  energy  productivity  of  the  ruminal microbiome. Front. Microbiol . 10. https://doi.org/10.3389/fmicb.2019.00847. Marhaeniyanto, E., Susanti, S., 2018. Fermentabilitas  ruminal  secara  in  vitro suplementasi  tepung  daun  gamal,  kelor, randu dan sengon dalam  konsentrat hijau. J. Ilmu-Ilmu Peterna k. 28, 213–223. McSweeney,  C.S.,  Palmer,  B.,  McNeill,  D.M., Krause, D.O., 2001. Microbial
interactions  with  tannins:  Nutritional consequences  for  ruminants. Anim.  Feed Sci. Technol.
91, 83–93.
https://doi.org/10.1016/S0377- 8401(01)00232-2.
Menke, K.H., Steingass, H., 1988. Estimation of the  energetic  feed  value  obtained  from chemical  analysis  and  gas  production using rumen fluid. Anim. Res. Dev . 28, 7– 55.
Ningrat,  R.W.S.,  Zain,  M.,  .  E.,  Suryani,  H., 2016.  Effects  of  doses  and  different sources  of  tannins  on  in  vitro  ruminal methane,  volatile  fatty  acids  production and on bacteria and protozoa populations.
Asian J. Anim. Sci . https://doi.org/10.3923/ajas.2017.47.53 Piñeiro-Vázquez, A.T., Canul-Solís, J.R., Alayón-Gamboa,  J.A.,  Chay-Canul,  A.J., Ayala-Burgos,  A.J.,  Aguilar-Pérez,  C.F., Solorio-Sánchez,  F.J.,  Ku-Vera,  J.C., 2015.  Potential  of  condensed  tannins  for the  reduction  of  emissions  of  enteric methane  and  their  effect  on  ruminant productivity  Potencial  de  los  taninos condensados para reducir las emisiones de metano  entérico  y  sus  efectos  en producción  de  rumiantes. Arch  Med  Vet 47, 263–272.
Raguati,  Afzalani,  Musnandar,  E.,  2018. Penggunaan  Probiotik  dari  Kulit  Nenas Sebagai  Sumber  Pakan  Tambahan  Untuk
Ternak Ruminansia. J. Ilmu-Ilmu
Peternak . 21(2); 110-120.
Rimbawanto,  E.A.,  Yusiati,  L.M.,  Baliarti,  E., Utomo,  R.,  2015.  Effect  of  condensed tannin of leucaena and calliandra leaves in protein  trash  fish  silage  on  in  vitro ruminal  fermentation,  microbial  protein synthesis  and  digestibility. Anim.  Prod. 17, 83–91.
Sajati,  G.,  Prasetyo,  B.W.H..,  Surono,  2012. Pengaruh  ekstrusi  dan  proteksi  dengan tanin  pada  tepung  kedelai  terhadap produksi  gas  total  dan  metan  secara  in vitro. Anim. Agric. J. 1, 241–256.
Suryadi,  2008.  Pengaruh  suplementasi  daun sengon  (Albazia  falcataria)  terhadap kecernaan  dan  fermentabilitas  bagasse hasil  amoniasi  secara  in  vitro. J.  Ilm. Ilmu-Ilmu Peternak. 11, 93–98. Widyobroto, B.P., Budi, S.P.S., Agus, A., 2007. Pengaruh  aras  undegraded  protein  dan energi  terhadap  kinetik  fermentasi  rumen dan  sintesis  protein  mikroba  pada  sapi. J.
Indones. Trop. Anim. Agric . 32, 194–200.