## AKTIVITAS ANTIMIKROBA DAN ANTIDIABETES EKSTRAK ETANOL
BIJI BUAH CEMPEDAK HUTAN ( Artocarpus integer (Thunb) Merr)
Rahmiwati Hilma 1 , Erna Puspita Dewi 1 , Haiyul Fadhli 2
1 Program Studi Kimia, Universitas Muhammadiyah Riau.
2 Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Riau Email Korespodensi: rahmiwatihilma@umri.ac.id

## ABSTRAK
Secara empiris biji buah jempedak hutan Artocarpus integer (Thunb) Merr telah digunakan oleh masyarakat Kampar (Propinsi Riau) sebagai obat tradisional untuk mengobati  diare dan obat untuk penyakit diabetes. Beberapa ekstrak tanaman genus  Artocarpus telah diteliti memiliki khasiat sebagai antimikroba dan antidiabetes. Berdasarkan uji fitokimia, ektsrak etanol biji buah A.integer (Thunb) Merr mengandung beberapa senyawa metabolit sekunder seperti: terpenoid, alkaloid, saponin, fenolik, tanin dan flavonoid. Pada penelitian ini dilakukan uji aktivitas anti bakteri, antijamur dan antidiabetes ekstrak etanol biji buah Artocarpus integer (Thunb) Merr. Uji aktivitas antibakteri dan antijamur dilakukan dengan metode difusi agar dengan mengukur zona hambat ekstrak. Uji aktivitas antidiabetes dilakukan dengan mengukur % inhibisi ekstrak terhadap enzim α -glukosidase secara in vitro. Hasil pengujian menunjukkan bahwa ekstrak biji cempedak A. integer (Thunb) Merr aktif sebagai antibakteri, antijamur dan antidiabetes. Ekstrak etanol biji buah A.integer (Thunb) Merr memiliki daya hambat terhadap E. coli sebesar 9,89 mm (konsentrasi 3%), 10,41 mm (konsentrasi 5%), dan 11,98 mm (konsentrasi 7%). Daya hambat terhadap S aureus sebesar: 10,27 mm (konsentrasi 3%), 12,15 mm (konsentrasi 5%), dan 13,17 mm (konsentrasi 7%), Daya hambat terhadap C. Albicansy sebesar: 8,71 mm (konsentrasi 3%), 12,96 mm (konsentrasi 5%), dan 19,49 mm (konsentrasi 7%). Hasil uji aktivitas antidiabetes menunjukkan bahwa pada konsentrasi 100 ppm ekstrak etanol biji buah  A.integer (Thunb) Merr memiliki % inhibisi sebesar 19,45 % dengan nilai IC 50 sebesar 301,23 ppm.
Kata kunci : A. integer (Thunb) Merr, antibakteri, antijamur,  inhibisi α-glukosidase,

## 1  PENDAHULUAN
Banyak  tanaman  obat  yang  secara estimologi telah digunakan untuk menyembuhkan infeksi-infeksi yang disebabkan  oleh  bakteri  yang  sekarang  telah kebal.  Saat  ini,  berdasarkan  penelitian  yang dilakukan  oleh  WHO,  para  ilmuan  di  Eropa dan Asia mengungkapkan bahwa kenyataannya  banyak  tanaman  obat  yang memiliki khasiat sebagai antibakteri, antijamur dan  antidiabetes  (Lienny,  2013).  Penelitian tentang pemanfaatan tanaman untuk antijamur dan antidiabetes telah dilakukan Hilma, et al., 2012,  dimana  ekstrak  n-heksan    kulit  buah kelengkeng  ( D. longan )  aktif  sebagai antijamur.  Ekstrak  metanol  dan  ekstrak  etil asetat kulit buah D. Longan memiliki aktivitas inhibisi  terhadap  enzim  α-glukosidase  secara
in vitro dengan  substrat p -nitrofenil-α-D- glukopiranosida  (pNPG).  Nilai IC 50 ekstrak methanol diperoleh sebesar 297, 21 ppm  dan 305,55 ppm untuk ekstrak etil asetat.
Tumbuhan  cempedak  hutan  juga  telah digunakan  untuk  pengobatan  tradisional.  Biji buah  jempedak  hutan A.integer (Thunb)  Merr telah lama digunakan oleh masyarakat Kampar (Propinsi Riau)  sebagai  obat untuk  mengobati diare  dan  untuk  penyakit  diabetes.  Bagian yang digunakan dari tumbuhan tersebut adalah bijinya.  Beberapa  penelitian  tentang  tanaman cempedak sebelumnya melaporkan, diantaranya:  Ersam,  T.  2001,  dimana  kulit batang  cempedak  dapat  digunakan  sebagai bahan  tali  serta  memiliki  fungsi  sebagai antikanker,  anti  virus,  antiinflamasi,  diuretil dan  antihipertensi.  Daun  tanaman  ini  juga
direkomendasikan  oleh  pengobatan  ayurveda sebagai  obat  antidiabetes  karena  ekstrak  daun nangka  memberi efek  hipoglikemi (Chandrika et al .  2006).  Selain  itu  daun  nangka  juga berkhasiat  melancarkan  air  susu  dan  sebagai obat koreng (Hutapea 1993). Menurut Prakash et  al.  (2009),  daun  nangka  dalam  pengobatan tradisional  digunakan  sebagai  obat  demam, bisul, luka dan penyakit kulit. Penelitian yang dilakukan oleh Edwin et al., 2014 melaporkan bahwa  biji  cempedak A. Integrifolia memiliki efek  farmakologis  antipiretik,  antijamur, menurunkan tekanan darah tinggi (hipertensi), diabetes militus, kurang nafsu makan, demam, masuk  angin,  dan  eksim.  Ekstrak  air  biji cempedak A. Integrifolia meningkatkan aktivitas  fagositosis  atau  untuk  meningkatkan daya  imun  pada  mencit.  (Rahmawati, et.al. 2014).  Salep  ekstrak  etanol  daun  Nangka mempunyai  efek  terhadap  penyembuhan  luka terbuka (Hamzah, et al .,2013).
E. coli adalah  salah  satu  bakteri penyebab  diare.  Penyakit  infeksi  disebabkan oleh  berbagai  mikroorganisme  seperti  jamur dan  bakteri.  Selain E. Coli , Staphylococcus aureus juga  penyebab  penyakit  infeksi  pada hewan dan manusia (Roslizawati, 2013).
Diabetes  melitus  merupakan  keadaan hiperglikemia  darah  yang  disebabkan  karena kurangnya  tersediaan  insulin,  rusaknya struktur  insulin  yang  disekresikan  oleh pangkreas  atau  karena  keduanya.  Penyakit  ini dapat  terjadi  pada  semua  lapisan  umur  dan bersifat menahun atau kronik (Monika, 2006). Penyakit diabetes melitus memerlukan penggunaan  obat  sintetis  jangka  panjang dengan  biaya  yang  sangat  mahal  dan  dengan efek  samping  terhadap  lambung,  maka    perlu dilakukan  penelitian  untuk  mencari  agen  baru penghambat  enzim  α-glukosidase  dari  bahan alami  (Lam et al., 2008).  Namun  aktivitas antimikroba dan antidiabetes biji cempedak A. integer (Thunb) Merr belum pernah dilaporkan, maka untuk itu pada penelitian ini dilakukan  uji  aktivitas  antibakteri,  antijamur
dan  antidiabetes  ekstrak  etanol  biji  buah cempedak hutan A. integer (Thunb) Merr.

## 2  METODOLOGI PENELITIAN 2.1. Ekstraksi
Serbuk  kering  biji  cempedak diekstraksi dengan  metode  maserasi.  Sebanyak  600  g serbuk biji cempedak direndam dengan etanol yang  sudah  didestilasi  dalam  botol  gelap sampai terendam sempurna. Simplisia dimaserasi  selama  3  hari  dan  terlindung  dari cahaya  matahari.  Kemudian  maserat  yang telah  direndam  disaring  menggunakan  kertas saring kemudian filtratnya dipekatkan menggunakan rotary evaporator .  Ampas  dari maserasi  pertama,  kemudian  diremaserasi kembali  sampai  warna  filtratnya  bening  dan diuapkan lagi.

## 2.2. Uji Fitokimia
a. Uji Alkaloid
Pemeriksaan alkaloid, digunakan metode Culvenor-Fizgerald  dimana  ekstrak  etanol  biji buah A. integer (Thunb)  Merr  sebanyak  4  g digerus  dalam  lumpang  porselen.  Tambahkan 10 mL larutan kloroform beramoniak 0,05 M, diaduk  kemudian  disaring  kedalam  tabung reaksi  tambahkan  1  mL  asam  sulfat  2,  kocok selama  2  menit  biarkan  hingga  terbentuk  dua lapisan  dan  terjadi  pemisahan.  Ambil  lapisan asam  (atas)  dan  tambahkan  1-2  tetes  pereaksi Mayer  atau  pereaksi  Dragendorff,  jika terbentuk  endapan  putih  dengan  pereaksi Mayer  atau  warna  jingga  dengan  pereaksi Dragendorff  menunjukkan  hasil  positif  untuk alkaloid.

## b. Uji Flavonoid
Tambahkan  4  g  ekstrak  dengan  5  mL kloroform dan beberapa tetes lapisan air  pada plat  tetes  ditambahkan  1-2  butir  logam magnesium  dan  beberapa  tetes  asam  klorida pekat.  Terbentuknya  warna  jingga,  merah muda  sampai  merah  menandakan  adanya senyawa flavonoid

## c. Uji Fenolik
Beberapa tetes lapisan air pada plat tetes ditambah  1-2  tetes  larutan  besi  (III)  klorida  1 %. Bila terbentuk warna hijau berarti terdapat senyawa fenolik.

## d. Uji Saponin
Lapisan air dalam tabung reaksi dikocok selama  5  menit.  Apabila  terbentuk  busa  yang stabil  selama  15  menit  atau  lebih  setelah pengocokan  maka  sampel  dinyatakan  positif saponin.

## e. Uji Terpenoid dan Steroid
Lapisan kloroform disaring melalui pipet yang  berisi  norit.  Hasil  saringan  di  pipet  2-3 tetes dan dibiarkan  mengering pada plat tetes. Setelah kering ditambahkan pereaksi Liebermann-Burchard  (2  tetes  asam  asetat anhidrat  dan  1  tetes  asam  sulfat  pekat). Terbentuknya  warna  merah  berarti  positif adanya  terpenoid  dan  warna  hijau  biru  berarti positif.

## f. Uji Tanin
1 mg ektrak ditambah air panas kemudian diteteskan  Besi  (III)  klorida.  Jika  terbentuk warna  hijau  kehitaman  menandakan  terdapat senyawa tanin.
2.3. Uji  Aktivitas  Antibakteri  dengan Metode Difusi
1. Pembuatan Media Nutrient Agar
Sebanyak  2  g  serbuk  medium Nutrien Agar (NA), dilarutkan dalam 100 mL aquadest dalam erlenmeyer dan dipanaskan sampai larut hingga  mendidih.  Masukkan  sebanyak  10  mL pada  masing-masing  tabung  reaksi  ditutup dengan kain kasa dan kapas disterilkan dalam autoklaf  pada  suhu  121  °C  selama  15  menit (Lay, 1994).
2. Pembuatan Media Nutrient Broth
Sebanyak  0,2  g  serbuk  medium Nutrien Broth (NB), dilarutkan dalam 25 mL aquadest
dalam erlenmeyer dan dipanaskan sampai larut hingga  mendidih.  Kemudian  disterilisasikan dalam  autoklaf  pada  suhu  121  °C  selama  15 menit.

## 3. Pembuatan Larutan Sampel
Sampel ekstrak ethanol A. integer (Thunb) Merr  dibuat  dalam  konsentrasi  3%,  5%  dan 7%  (mg/mL).  Kontrol  negatif  menggunakan DMSO  dan  kontrol  positif  menggunakan kloromfenikol.

## 4. Pengujian Mikrobiologis Antibakteri
Pengujian  daya  hambat  ekstrak  ethanol Artocarpus integer (Thunb)  Merr  terhadap pertumbuhan  bakteri E. coli dan S. aureus dilakukan dengan metode difusi menggunakan kertas  cakram.  Medium  NA  10  mL  dalam tabung  reaksi  didinginkan  dalam  water  bath pada  suhu  50 o C,  kemudian  tambahkan  1mL biakan  bakteri  ke  dalam  NA  kemudian homogenkan  dengan  vortex.  Dituangkan  ke dalam cawan petri dan dibiarkan hingga media mengeras.  Kertas  cakram  direndam  dalam larutan  sampel  selama  15  menit  dan dikeringkan.  Kertas  cakram  ditempatkan  pada permukaan media yang telah memadat. Media yang  telah  diisi  sediaan  uji  kemudian diinkubasi  pada  suhu  37 o C  selama  24  jam, selanjutnya dilakukan pengamatan dan pengukuran  diameter  zona  hambat  yang terbentuk menggunakan jangka sorong.
2.4. Uji  Aktivitas  Antijamur  dengan Metode Difusi
1. Pembuatan Media Potato Dextro Agar
Sebanyak  29  g  serbuk  Medium Potato Dextro Agar (PDA),  dilarutkan  dalam  1000 mL aquadest dalam erlenmeyer dan dipanaskan  sampai  larut  hingga  mendidih. Masukkan  sebanyak  15  mL  pada  masing- masing tabung reaksi ditutup dengan kain kasa dan  kapas  disterilkan  dalam  autoklaf  pada suhu 121 °C selama 15 menit.
2. Pembuatan Media Water Pepton
Sebanyak  10  g  serbuk  medium Water
Pepton (WP)  dilarutkan  dalam  500mL aquadest  dalam  erlenmeyer  dan  dipanaskan sampai  larut  hingga  mendidih.  Kemudian disterilisasikan  dalam  autoklaf  pada  suhu  121 °C selama 15 menit.

## 3. Pembuatan Larutan Sampel
Sampel  ekstrak  ethanol  biji  buah A. integer (Thunb) Merr dibuat dalam konsentrasi 3  %,  5  %  dan  7  %  (mg/mL).  Kontrol  negatif menggunakan  DMSO  dan  kontrol  positif menggunakanketokonazol.

## 4. Pengujian Mikrobiologis Antijamur

## Pengujian daya hambat ekstrak ethanol
A.integer (Thunb) Merr terhadap pertumbuhan jamur Candida albicans dilakukan  dengan metode  difusi  menggunakan  kertas  cakram. Medium  PDA  20  mL  dalam  tabung  reaksi didinginkan dalam waterbath pada suhu 50 o C, kemudian  tambahkan  1  mL  biakan  bakteri kedalam  PDA  kemudian  homogenkan  dengan vortex.  Dituangkan  ke  dalam  cawan  petri  dan dibiarkan  hingga  media  mengeras.  Kertas cakram direndam dalam larutan sampel selama 15  menit  dan  dikeringkan.  Kertas  cakram ditempatkan pada permukaan media yang telah memadat.  Media  yang  telah  diisi  sediaan  uji kemudian  diinkubasi  pada  suhu25  °C  selama 2x24  jam,  selanjutnya  dilakukan  pengamatan dan  pengukuran  diameter  zona  hambat  yang terbentuk.
Uji  aktivitas  antidiabetes  dengan  Uji inhibisi  enzim α -glukosidase  secara in- vitro
Penyiapan  larutan  pereaksi  uji  inhibisi enzim α-glukosidase 1. Larutan buffer fosfat pH 7 2. Larutan  buffer  fosfat  pH  dibuat  dari campuan 1,361 gr potassium dihidrogenphosphate  dalam  100  ml pelarut.  Untuk  mendapatkan  pH  7 ditambahkan  35  grdisodium  hidrogen phosphate  lalu  ditambahkan  aquadest hingga 1000 ml.
3. Larutan natrium karbonat 0.1 M
4. Sebanyak  0.53  gr  natrium  karbonat dilarutkan dalam 50 ml aquades.
5. Larutan enzim 0.2 unit
6. Sebanyak  1  mg  enzimα-Glukosidase dilarutkan  dalam  10  ml  buffer  fosfat saline  pH  7  yangmengandung  20  mg
Bovin Serum Albumin.
7. Larutan substrat p-nitrofenil-α-D- glukopiranosida (p-NPG) 20 mM 8. Larutan substrat p-NPG dengan konsentrasi  20  mM  dibuat  dengan menimbang sebanyak 0.1507 p-NPG dan dilarutkan dalam 25 ml buffer fosfat pH .

## Penyiapan Larutan Uji

## Penyiapan larutan akarbose
Sebanyak  1  gram  tablet  glucobay® (akarbose)  yang  jumlahnya  4  tablet  dengan kandungan  akarbose  100  mg/tablet  digerus kemudian dilarutkan dalam buffer fosfat pH 7 dan  HCl  2  N  dengan  perbandingan  (1:1) sebanyak  100  ml  untuk  mendapatkan konsentrasi  1000  ppm,  kemudian  disentrifus lalu  bagian  ssupernatannya  diambil  dan dilakukan pengenceran hingga 100 ppm untuk pengujian inhibisi dan dibuat serial konsentrasi 0,1 ppm; 0,5 ppm; 1 ppm; 5 ppm dan 10 ppm.

## Penyiapan larutan ekstrak sampel
Ekstrak n -heksan, ekstrak etil asetat dan ekstrak  metanol  masing-masing  ditimbang  10 mg,  kemudian  dilarutkan dengan  penambahan DMSO  1  ml  dan  ditambahkan  bufer  fosfat hingga  mencapai  volume  10  ml  untuk mendapatkan  kosentrasi  1000  ppm  sebagai larutan  induk,  kemudian  pipet  500  μl  dari larutan  induk  encerkan  dengan  penambahan bufer  fosfat  500  μl  untuk  kosentrasi  500  ppm begitu seterusnya untuk pembuatan konsentrasi  50  ppm,  100  ppm,  250  ppm,  500 ppm dan 1000 ppm.
Pengujian Kontrol Blanko (B 0 )
Pada microplat reader 96 well ,  10  μl DMSO  dicampurkan  dengan  50  μl  buffer fosfat  (pH  7),  25  μl  p-NPG  20  mM  lalu inkubasi  selama  30  menit  pada  suhu  37°C. Setelah  30  menit,  reaksi  dihentikan  dengan penambahan 100 μl larutan 0,1M Na 2 CO 3 , lalu absorban dari p -nitrofenol diukur pada panjang gelombang  410  nm  dengan  spektrofotometer UV Vis.
Pengujian Blanko (B 1 ) Pada microplate reader 96 well ,  10  μl DMSO  dicampurkan  dengan  50  μl  buffer fosfat  (pH  7),  25  μl  p-NPG20  mM,  25  μl  α- glukosidase (0,2 U/ml) lalu inkubasi selama 30 menit  pada  suhu  37°C.  Setelah  30  menit, reaksi  dihentikan  dengan  penambahan  100  μl larutan  Na 2 CO 3 0,1  M,  lalu  absorban  dari p - nitrofenol diukur pada panjang gelombang 410 nm dengan spektrofotometer UV Vis.
Pengujian Kontrol Sampel (S 0 ) Pada microplat reader 96 well ,  10  μL sampel  1000  ppm  ditambah  dengan  50  μl buffer fosfat (pH 7), 25 μl p-NPG 20 mM lalu inkubasi  selama  30  menit  pada  suhu  37°C. Setelah  30  menit,  reaksi  dihentikan  dengan penambahan 100 μl larutan Na 2 CO 3 0,1 M, lalu absorban dari p -nitrofenol diukur pada panjang gelombang  410  nm  dengan  spektrofotometer UV Vis. Dilakukan pengujian yang sama pada serial konsentrasi 50 ppm, 100 ppm, 250 ppm, 500 ppm dan 1000 ppm.
Pengujian Sampel (S1) Pada microplat reader 96 well ,  10  μL sampel  1000  ppm  ditambah  dengan  50  μl buffer fosfat (pH 7), 25 μl p-NPG 20 mM, 25 μl  α-glukosidase  (0,2  U/ml)  lalu  inkubasi selama  30  menit  pada  suhu  37°C.  Setelah  30 menit  reaksi  dihentikan  dengan  penambahan 100  μl  larutan  Na 2 CO 3 0,1  M,  lalu  absorban dari p -nitrofenol  diukur  pada  panjang gelombang  410  nm  dengan  spektrofotometer UV Vis. Dilakukan pengujian yang sama pada serial konsentrasi 50 ppm, 100 ppm, 250 ppm, 500 ppm, 1000 ppm.
Pengujian  kontrol  acarbose  sebagai kontrol positif (A 0 ) Pada microplat reader 96 well ,  10  μL akarbose 1 ppm ditambah dengan 50 μl buffer fosfat  (pH  7),  25  μl  p-NPG  20  mM  lalu inkubasi  selama  30  menit  pada  suhu  37°C. Setelah  30  menit,  reaksi  dihentikan  dengan penambahan  100  μl  larutan  Na 2 CO 3  s 0,1  M, lalu  absorban  dari p -nitrofenol  diukur  pada panjang gelombang 410 nm dengan spektrofotometer UV-Vis. Dilakukan
pengujian  yang  sama  pada  serial  konsentrasi 0,1 ppm; 0,5 ppm; 1 ppm; 5 ppm dan 10 ppm.
Pengujian  acarbose  sebagai  kontrol positif (A 1 ) Pada microplat reader 96 well ,  10  μL akarbose 1 ppm ditambah dengan 50 μl buffer fosfat  (pH  7),  25  μl  p-NPG  20  mM,  25  μl  α- glukosidase (0,2 U/ml) lalu inkubasi selama 30 menit  pada  suhu  37°C.  Setelah  30  menit, reaksi  dihentikan  dengan  penambahan  100  μl larutan  Na 2 CO 3  s 0,1  M,  lalu  absorban  dari p - nitrofenol diukur pada panjang gelombang 410 nm dengan spektrofotometer UV-Vis. Dilakukan  pengujian  yang  sama  pada  serial konsentrasi  0,1  ppm;  0,5  ppm;  1  ppm;  5  ppm dan 10 ppm.
Analisa Data Persen inhibisi digunakan untuk menentukan  persentase  hambatan  dari  suatu bahan yang dilakukan terhadap aktivitas enzim α-glukosidase  (Romansyah,  2011).  Data  hasil penelitian  dalam  bentuk  absorban  kemudian dikonversikan  ke  dalam  %  inhibisi  dan dianalisa  secara  statistik  deskriptif  untuk melihat  adanya  aktivitas  inhibisi  enzim  α- glukosidase pada sampel kulit buah kelengkeng  dengan  menggunakan  rumus (Bachhawat et al , 2011):
% inhibisi . B S B 100%
Keterangan : B  =  Absorbansi  blanko  dikurangi absorbansi kontrol blanko
S    =Absorbansi  Sampel  dikurangi absorbansi kontrol sampel
Nilai persen inhibisi yang telah dihitung dari  setiap  konsentrasi  selanjutnya  digunakan untuk  perhitungan  IC 50 .  IC 50 adalah  nilai konsentrasi  suatu  bahan  untuk  menghambat aktivitas  enzim  α-glukosidase  sebesar  50%. Nilai  konsentrasi  dari  larutan  yang  telah diencerkan  dari  ekstrak  dan  persen  inhibisi diplotkan pada sumbu x dan y. kemudian nilai IC 50 dihitung dengan regresi non linear:
y = a ln(x) + b
Keterangan:    y  =  %  Inhibisi,  X=
Konsentrasi sampel, a = Intersep, b = Slope

## 3 HASIL DAN PEMBAHASAN

## 3.1. Hasil ekstraksi
Dari  600  gr  berat  kering  sampel  biji buah A. integer (Thunb)  Merr,  didapatkan  ± 10,  429  gr  ekstrak  total  etanol  (1,74%). Terhadap  ekstrak  ini  dilakukan  uji  profil fitokimia,  uji  aktivitas  antibakteri  dan antijamur dan antidiabetes
3.2. Hasil uji fitokimia ekstrak etanol biji buah A. integer (Thunb) Merr
Tabel.1. Pengujian fitokimia ekstrak etanol biji buah A. integer (Thunb) Merr No Gol. Senyawa Pereaksi Keterangan Hasil 1 Alkaloid Mayer Dragendorff Terbentuk endapan putih Jingga (+) (+) 2 Flavonoid Sianidin test Merah (+) 3 Fenolik FeCl 3 Hijau (+) 4 Saponin H 2 O Terbentuknya busa (+) 5 Terpenoid Steroid Liberman- Burchad Larutan merah Tidak terbentuk warna hijau (+) (-) 6 Tanin H 2 O panas Hijau Kehitaman (+)
Uji  profil  fitokimia  dilakukan  terhadap ekstrak  untuk  mengetahui  golongan  senyawa yang  terkandung  dalam  suatu  tumbuhan. Pemeriksaan diarahkan pada senyawa metabolit sekunder yang memiliki khasiat bagi kesehatan  seperti  alkaloid,  flavonoid,  fenolik, saponin,  tanin,  terpenoid  dan  steroid (Harborne, 1987).
Pada  pengujian  alkaloid  diperoleh  hasil yang  positif  karna  terbentuknya  endapan  dari penggantian  ligan.  Atom  nitrogen  yang mempunyai  pasangan  elektron  bebas  pada alkaloid  mengganti  ion  dalam  pereaksi Dragendorff  dan  pereaksi  Mayer.  Dengan penambahan pereaksi Mayer diperoleh larutan berwarna putih sesuai dengan reaksi.
Pengujian steroid dan terpenoid didasarkan  pada  kemampuan  senyawa  untuk membentuk  warna  merah  jingga  atau  ungu untuk terpenoid dan biru untuk steroid dengan
penambahan H 2 SO 4 pekat dalam pelarut asam asetat  anhidrida  (Sangi,  2013).  Hasil  yang diperoleh  pada  pengujian  ekstrak  etanol  biji buah  cempedak  menunjukkan  hasil  positif dengan  terbentuknya  warna  merah  yang menunjukkan  adanya  kandungan  terpenoid. Sedangkan  pada  pengujian  steroid  negatif karena  tidak  terbentuk  warna  biru  disaat penambahan pereaksi Liebermann-Burchard.
Penambahan  serbuk  magnesium  dan asam  klorida  pada  pengujian  flavonoid  akan menyebabkan tereduksinya senyawa flavonoid yang ada sehingga menimbulkan warna merah yang  merupakan  ciri-ciri  adanya  flavonoid (Robinson,  1995).  Pada  pengujian  flavonoid pada ektrak etanol biji cempedak menunjukkan  hasil  positif    karena  serbuk magnesium  mampu  memberikan  reaksi reduksi senyawa flavonoid sehingga larutan uji memberikan perubahan
warna.

## 3.2. Hasil Uji Aktivitas Antibakteri
Tabel. 1. Hasil pengujian aktivitas antibakteri terhadap bakteri E. coli dan S. Aureus ekstrak etanol biji buah A.integer (Thunb) Merr No Sampel Konsentrasi (%) Diameter Hambat (mm) E. coli S. aureus 1 Kloromfenikol + 21.18 22.03 2 DMSO - 0 0 3 Ekstrak Etanol 3 9.89 10.27 5 10.41 12.15 7 11.98 13.17 Pada  hasil  pengujian  ektrak  biji  buah cempedak  terhadap  bakteri S. aureus dan E.coli menunjukkan  ekstrak  etanol  tersebut, memiliki aktivitas anti bakteri pada konsentrasi  3  %,  5  %  dan  7  %  seperti  pada tabel  3.1.  Pengujian  terhadap  bakteri E. coli didapatkan  zona  bening  pada  (kloromfenikol) sebesar  21.18  mm.  Ekstrak  etanol  pada konsentrasi  3  %  sebesar  9.89  mm,  pada konsentrasi  5  %,  sebesar  21.41  mm  dan  pada konsentrasi 7 % sebesar 51.91 mm. Dari hasil penelitian  terlihat  bahwa  nilai  zona  hambat ekstrak  terhadap E. coli mempunyai  zona bening 9.89 mm pada konsentrasi ekstrak 3 % namun  masih  rendah  dibandingkan  dengan kloromfenikol.
Pada pengujian terhadap bakteri S.aureus didapatkan  zona  bening  sebesar 10.27  mm  (konsentrasi  3%),  12.15  mm (konsentrasi  5%)  dan  sebesar  13.17  mm (konsentrasi  7  %).  Dari  hasil  ini  dapat  dilihat bahwa  nilai  konsentrasi  hambat  ekstrak terhadap S. aureus ketiga  konsentrasi  masih lebih  rendah  jika  dibandingkan  dengan amoxan .
Aktivitas  antibakteri  bisa  dikarenakan adanya  kandungan  flavonoid  san  saponin didalam  ekstrak.  Pada  umumnya  senyawa flavonoid termasuk golongan senyawa polifenol  (Setyowati et al., 2013).  Senyawa
polifenol  adalah  sekelompok  zat  kimia  yang ditemukan  melimpah  pada  tanaman.  Senyawa fenolik  terdiri  dari  paling  tidak  satu  cincin aromatik  yang  mengikat  satu  gugus  (fenol) atau  lebih  (polifenol)  gugus  hidroksil  yang  di sintesis  oleh  tanaman  sebagai  sistem pertahanan  dan  untuk  merespon  terhadap infeksi  mikroorganisme,  sehingga  tidak mengherankan  apabila  senyawa  ini  efektif sebagai senyawa antimikroba terhadap sejumlah mikroorganisme. Flavonoid berfungsi  sebagai  antibakteri  dengan  cara membentuk  senyawa  kompleks  terhadap protein  ekstraseluler  yang  mengganggu keutuhan  membran  sel  bakteri,  mendenaturasi protein  sel  bakteri  dan  merusak  membran  sel tanpa dapat diperbaiki lagi (Juliantina, 2008).
Senyawa  saponin  dapat  meningkatkan permeabilitas  dinding  usus,  memperbaiki penyerapan  nutrien  dan  juga  menghambat aktivitas  enzim  urease  (Susan et al., 2006). Pada penelitian ini ekstrak biji cempedak dapat memenuhi  kriteria  diameter  hambat  atau  aktif sebagai  antibakteri.  Kriteria  kekuatan  daya antibakteri  sebagai  diameter  zona  hambat  5 mm  atau  kurang  dikategorikan  lemah,  zona hambat  5-10  mm  dikategorikan  sedang,  zona hambat 10-20 mm dikategorikan kuat dan zona hambat 20 mm atau dikategorikan sangat kuat.

## 3.3. Hasil Uji Aktivitas Antijamur
Tabel  2.  Hasil  pengujian  antijamur  terhadap  jamur C. albicans ekstrak  biji  buah A. integer (Thunb) Merr No Sampel Konsentrasi (%) Diameter Hambat (mm) 1 Ketokenazol + 24.19 2 DMSO - 0
3 Ekstrak Etanol 3 8.71 5 12.96 7 19.49
Hasil penelitian aktivitas ekstrak etanol biji  buah A. integer (Thunb)  Merr  terhadap C.albicans pada    variasi  konsentrasi  3%,  5% dan  7%  menunjukkan  bahwa  Zona  hambat ekstrak  pada  konsentrasi  3%  adalah 8.71  mm, konsentrasi  5%  (12.96  mm)  dan  pada konsentrasi  7%  adalah  22.49  mm.  Dari  hasil ini  dapat  dilihat  bahwa  zona  hambat  ekstrak terhadap C. albican masih rendah dibandingkan  dengan  ketokenazol.  Pada antijamur ketokenazol dapat menekan aktivitas berbagai jenis jamur,
mekanisme penghambatannya  yaitu  pada  biosintesis ergosterol dalam sel jamur.
Dari  uji  pendahuluan  fitokimia  yang telah  dilakukan  terhadap  ekstrak  etanol  biji buah A. integer (Thunb) Merr  dapat diketahui berbagai  senyawa  kimia  yang  aktif untuk aktivitas ini antara lain adalah flavonoid dan  terpenoid.  Terpenoid  merupakan  senyawa bioaktif  yang  memiliki  fungsi  antijamur. Senyawa-senyawa  ini  dapat  menghambat pertumbuhan  jamur,  baik  melalui  membran sitoplasma  maupun  mengganggu pertumbuhan dan  perkembangan  spora  jamur.  Menurut (Netta,2008), mengungkapkan bahwa mekanisme  penghambatan  oleh  senyawa terpenoid masih belum diketahui dengan jelas, namun  dengan  adanya  sifat  hidrofobik  atau lipofilik pada senyawa terpenoid kemungkinan menyebabkan kerusakan sitoplasmik membran, koagulasi  sel,  dan  terjadinya  gangguan  proton pada sel jamur (Rosiska, 2012).

## 3.4. Hasil Uji Aktivitas Antidiabetes
Tabel.  3.3.  Uji  Aktivitas  Antidiabetes Ektrak  Biji  Buah A. integer (Thunb) Merr Konsentrasi (ppm) % Inhibisi lC 50 (ppm) Biji Buah Cempedak 100 19.45 10 8.49 1 6.40 301.23 0.1 0 0.01 0
Analisis  efek  penghambatan  enzim  α- glukosidase  oleh  ekstrak  biji  buah A. integer (Thunb)  Merr    dilakukan  dengan  konsentrasi 0.01  ppm,  0.1  ppm,  1  ppm,  10  ppm  dan  100 ppm. Analis inhibisi enzim α-glukosidase pada penelitian ini menggunakan instrumen microplate reader .  Metode  ini  digunakan untuk  menguji  adanya  penghambatan  enzim α-glukosidase  serta  membandingkan  reaksi enzim  substrat  tanpa  inhibitor  dan  reaksi enzim  substrat  dengan  inhibitor,  sehingga dapat  digunakan  untuk  menentukan  daya inhibisi (Purwatresna, 2012).
Uji  penghambatan  terhadap  aktivitas enzim α - glukosidase  dilakukan  dengan mengukur  serapan p- nitrofenol  pada  panjang gelombang 410 nm. Pengujian dilakukan pada kontrol  blanko  (B o ),  blanko  (B 1 ),  kontrol sampel (S o ), sampel (S 1 ), sebagai pembanding akarbose  (A 1 )  dan  kontrol  akarbose  (A o ). Pengujian  larutan  blanko  dan  kontrol  blanko dilakukan  untuk  mengetahui  aktivitas  enzim tanpa adanya sampel sebagai inhibitor. Reaksi yang  terjadi  pada  uji  daya  hambat  terhadap enzim  α-glukosidase  adalah  sampel  akan menghambat hidrolisis p- nitrofenil-α-D- glukopiranosida  menjadi p- nitrofenol  yang berwarna  kuning  dan  D-glukosa.  Intensitas warna  kuning p- nitrofenol  yang  dihasilkan diukur  dengan  spektrofotometer.  Semakin besar aktivitas inhibisi ekstrak maka jumlah p- nitrofenol  yang  dihasilkan  semakin  sedikit sehingga  intensitas  warna  kuning  akan berkurang (Fawzy, 2008).
Pada  tabel  3.3.  menunjukkan  bahwa persentase  inhibisi  ekstrak  terhadap  α- glukosidase  meningkat  sesuai  peningkatan konsentrasi.  Persentase  inhibisi  tertinggi terdapat  pada  konsentrasi  100  ppm  sebesar 19,45% dengan nilai lC 50 sebesar 301,23 ppm. Peningkatan  persentase  inhibisi  terjadi  karena pada  konsentrasi  tinggi  terdapat  lebih  banyak zat terlarut berupa komponen senyawa bioaktif dalam  ekstrak  tersebut  yang  memiliki kemampuan menghambat aktivitas α- glukosidase.  Semakin  besar  persen  inhibisi maka akan semakin tinggi daya hambat sampel terhadap α-glukosidase (Ganong, 1998).
Persen  inhibisi  ekstrak  masih  dibawah akarbose  sebagai  standar  yaitu  dengan  nilai lC 50 sebesar  0,185  ppm.  Berdasarkan  uji fitokimia  yang  telah  dilakukan  terhadap ekstrak  mengandung  berbagai  senyawa bioaktif  yaitu:  alkaloid,  steroid,  flavonoid  dan terpenoid.  Ekstrak  etanol  dapat  menghambat kerja  dari  enzim    α-glukosidase  dikarenakan adanya senyawa flavonoid yang  terkandung di dalamnya.  (Mas,  2012).  Aktivitas  yang  kecil dari  ekstrak  etanol  biji  buah  cempedak diungkinkan  terjadinya  reaksi  antagonis diantara  senyawa  yang  ada  didalam  sampel sehingga  menjadi  faktor  yang  mempengaruhi daya  hambat  terhadap  enzim  α-glukosidase semakin  rendah.  Menurut  Loranza,  2012 aktivitas  antidiabetes  sangat  kuat  jika  nilai lC 50 >26,8,  sedang  jika  nilai  lC 50 15,43-26,8 dan rendah jika nilai IC 50 <0, 1.
4 KESIMPULAN
Dari  penelitian  yang  dilakukan  dapat disimpulkan  bahwa  hasil  pengujian  golongan senyawa  metabolit  sekunder  pada  ekstrak etanol  biji  buah A.integer (Thunb)  Merr) positif  mengandung  alkaloid,  flavonoid, fenolik,  saponin,  terpenoid  dan  tanin. Pengujian  aktivitas  antibakteri  menunjukkan adanya  zona  hambat  terhadap E.coli pada konsentrasi 3% sebesar 9,89 mm. Zona hambat terhadap S.aureus pada  dikonsentrasi  3% sebesar  10,27  mm.  Aktivitas  antijamur menunjukkan  adanya  zona  hambat    terhadap
C.albicans pada  konsentrasi  3%  sebesar  8,71 mm.  Aktivitas  %  inhibisi  ekstrak  terhadap enzim  α-glukosidase  secara in vitro pada konsentrasi  100  ppm  adalah  sebesar 19,45% dengan nilai IC 50 sebesar 301.23 ppm.

## DAFTAR PUSTAKA
Andi, E F. Made, A. Tutik, W. Nancy, D.Y.
2013.  Kapasitas  Antioksidan  dan Inhibitor α-glukosidase Ekstrak Umbi
Bawang Dayak. Jurnal Teknol dan Industry Pangan. 1(4): 10-11.
Fawzy,  C.  2008.  Antidiabetic  and Antioxidant  Activitas  of  Major Flavonoids  of Cynachum acutum L. (Asclepiadaceae)  Growing  in  Egypt Z.  Naturforsch. Journal Pharmacy. 1(2): 658-662.
Harborne  J.B.  1987. Metode Fitokimia, Penuntun Cara Modren Menganalisa Tumbuhan, Terjemahan K. Padmawinata. Edisi II. Bandung: ITB Press. 634-640. Hamzah,  H.,  Fatimawali,  Paulina  V., Y.,Yamlean, Mongi, J., 2013.
Formulasi Salep Ekstrak Etanol Daun Nangka  ( Artocarpus Heterophyllus Lam.)  Dan  Uji  Efektivitas  Terhadap Penyembuhan  Luka  Terbuka  Pada Kelinci, Pharmacon Jurnal Ilmiah Farmasi (2).03
Hilma,  R.,  Mukhlisa,  S.,  Fadli,  H.,  2016. antibacterial,
antifungal and
antidiabetic  activities  of dimocarpus longan fruit  skin  extract, Prosiding SEMIRATA 2016 BIDANG MIPA,BKS-PTN BARAT ,  22-24  mei 2016, palembang
Juliantina, F.R. 2008. Manfaat Sirih Merah (piper  crocatum)  Sebagai  Agen Antibakteri  Terhadap  Bakteri  Gram Positif  dan  Gram  Negatif. JKKI –
Jurnal Kedokteran dan Kesehatan
Indonesia. 1(1): 345.
Katzung,  B.G.  2002. Farmakologi Dasar dan Klinik . Edisi II. Jakarta: Salemba Medika. 671-678.
Lam,  S.H,  Chen,  J.M,  Kang,  C.J.  Chen, C.H  dan  Lee,  S.S.  2008.  α- glukosidase  inhibitors  from  the  seeds of syagrus romanzoffiana. Phytochemistry: 10(5): 1173-1178.
Lienny,  2013. Mikrobiologi Farmasi. Jakarta: Erlangga.
Monica,  F.  2006.  Pengaruh  Pemberian  Air Seduhan  Serbuk  Biji  Alpikat  ( Persea americana Mill)  Terhadap  Kadar
Glukosa  Darah  Tikus  Wista  yang diberi  Beban  Glukosa. Skripsi. Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro. Semarang. Natta, L. Orapin, L. Krittika, A. dan Pantip. 2008. Essensial Oil From Zingiberaceae  For  Anti  Food-Borne Bacteria. International Food Research Journal . 15(4): 337-346. Rahmawati,  Triyani,  Y.,  Nilapsari,  R., 2014.  Biji  Cempedak  (Artocarpus integrifolia) terhadap aktivitas fagositosis  pada  mencit  jantan  galur Swiss, Global Medical and Health Communication , 2(2):55-59
Robinson,  T.  1995. Kandungan organik tumbuhan tingkat tinggi .  Bandung: ITB.
Rosiska, L. Widodo, M. F. dan Eko, N. D. 2012.  Aktivitas  Antijamur  Senyawa
Bioaktif  Ekstrak Gelidium Latifolium Terhadap Candida albicans. Jurnal Pengolahan dan Bioteknologi Hasil Perikanan .  1(1): 1-8.
Rostinawati,  2009. Infeksi Nosokomial Problematika dan Pengendalian . Jakarta: Salemba Medika.
Roslizawati,  2013.  Aktivitas  Antibakteri Ekstrak Etanol Bunga Rosella ( Hibiscus Sabdariffa L. )  Terhadap Escherichia coli, Salmonella typhi dan Staphylococcus aureus Dengan Metode Difusi Agar. Skripsi Fakultas FarmasiUniversitas Padjadjaran .
Jatinangor.
Sangi, M.S., Momuat, L.I. dan Kumaunang, M.,  2013.  Uji  toksisitas  dan  skrining fitokimia  tepung  gabah  pelepah  aren (Arange  pinnata). Jurnal Ilmu Sains. 12(2): 11-12.
Setyowati, H. Hanifah, H Z. dan Nugraheni, R.  P.  2013.  Krim  Kulit  Buah  Durian ( Durio Zibethinus L )  Sebagai  Obat Herbal  Pengobatan  Infeksi  Jamur ( Candida albicans ). Jurnal Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi .
Sri,  A.F.K.  2011.  Mekanisme  dan  Deteksi Molekul  Resistensi  Antibiotik  pada Bakteri. Skripsi. Jurusan  Farmasi. ITB. Bandung.
Tjay.  T.H.  dan  Rahardja,  K.  2007. Obat- obatan Penting Khasiat Penggunaan dan Efek-efek Samping .  Edisi  ke-7. Jakarta:  Elex  Media  Komputindo. 738-743, 748-749.