DAYA FITO-RESPON EKSTRAK ETANOL DAUN  KELOR ( Moringa oleifera )

## TERHADAP SEL OSTEOSIT DAN MATRIKS TULANG MANDIBULA
TIKUS ( Rattus norvegicus )

## THE PHYTO-RESPONSE POWER OF ETHANOL EXTRACT OF MORINGA LEAVES
TO OSTEOCYTES AND MANDIBULAR BONE MATRIX OF WISTAR RAT ( RATTUS NORVEGICUS )
Chairunas, Dewi Saputri, Meutia Komala Putri Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Syiah Kuala Corresponding Author: chairunas.omfs@unsyiah.ac.id

## Abstrak
Cahaya lampu diketahui  memiliki dampak buruk terhadap perkembangan tulang. Paparan berlebihan dari cahaya lampu dapat menurunkan kadar melatonin pada manusia yang mengakibatkan tanda-tanda osteoporosis tahap awal. Studi sebelumnya menyatakan melatonin dapat menekan estrogen yang akan berdampak menghambat aktivitas osteoklas. Untuk mencegah kerusakan tulang maka dapat diberikan obat  alami  yang  diketahui  dapat  meningkatkan  metabolisme  tulang.  Senyawa  flavonoid  yang terkandung  dalam  daun  kelor  ( Moringa  oleifera )  berfungsi  membantu  metabolisme  kalsium  dengan cara  menginduksi  penurunan  resorpsi  tulang.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  daya  fito- respon ekstrak etanol daun kelor terhadap osteosit dan matriks tulang mandibula yang terpapar cahaya lampu  fluoresen.  Sampel  penelitian  menggunakan  tikus  wistar  jantan  sebanyak  10  ekor.  Tikus tersebut  dipaparkan  pada  cahaya  lampu  fluoresen  kemudian  diberi  ekstrak  daun  kelor  yang  diolah dengan  teknik  maserasi.  Pembuatan  preparat  histologi  menggunakan  pewarnaan hematoxylyn  eosin. Mikroskop ( Olympus BX-51) dengan perbesaran 400X digunakan dalam perhitungan sel osteosit dan matriks tulang. Data penelitian dianalisa menggunakan uji One Way Analysis of Variance (ANOVA) dengan nilai p<0,05. Hasil penelitian ini memperlihatkan bahwa daya fito-respon ekstrak etanol daun kelor  pada  tulang  mandibula  yang  terpapar  cahaya  lampu  fluoresen  dapat  meningkatkan  jumlah  sel osteosit dan dapat mempertahankan matriks tulang sehingga masa tulang tetap terjaga.
Kata Kunci: Tulang Mandibula, Sel Osteosit, Matriks Tulang, Daun Kelor, Cahaya Lampu Fluoresen

## Abstract
Light  is  known  to  have  a  negative  impact  on  bone  development.  Excessive  exposure  to  light  can decrease  melatonin  levels  in  humans,  resulting  in  early  signs  of  osteoporosis.  Previous  studies  have suggested  that  melatonin  can  suppress  estrogen  which  will  have  an  impact  on  inhibiting  osteoclast activity.  To  prevent  bone  damage,  natural  drugs  are  known  to  increase  bone  metabolism.  The flavonoid  compounds  contained  in Moringa  oleifera leaves  help  metabolize  calcium  by  inducing decreased  bone  resorption.  This  study  aims  to  determine  the  phyto-responsiveness  of  the  ethanol extract  of Moringa  oleifera leaves  against  osteocytes  and  mandibular  bone  matrix  exposed  to fluorescent light. The research sample used 10 male wistar rats. The rats were exposed to fluorescent light  and  then  given Moringa  oleifera leaf  extract  which  was  processed  by  maceration  technique. Histological preparations were  made using hematoxylyn eosin staining. A  microscope ( Olympus BX- 51 ) with a magnification of 400X was used in the calculation of osteocytes and bone matrix cells. The research  data  were  analyzed  using  the One  Way  Analysis  of  Variance (ANOVA)  test  with  p  value <0.05.  The  results  of  this  study  indicate  that  the  phyto-responsiveness  of  the  ethanol  extract  of Moringa oleifera leaves on  mandibular bone exposed to fluorescent light can increase the number of osteocytes and maintain bone matrix so that bone mass is maintained.
Keywords :  Mandibular  Bones,  Osteocyte  Cells,  Bone  Matrix, Moringa  Oleifera, Fluorescent  Light

## PENDAHULUAN
Tulang merupakan jaringan ikat termineralisasi  yang  memiliki  empat  jenis  sel yaitu  sel  osteoblas,  sel-sel  pelapis  tulang, osteoklas, dan osteosit. 1 Setiap tipe sel tersebut memiliki  peran  penting  bagi  perkembangan tulang, seperti  osteoblas yang berperan sebagai pembentuk  tulang  dan  osteoklas  berperan dalam  proses  resorbsi  tulang. 2 Osteosit  juga turut  berperan  dalam  pembentukan  tulang,  sel tersebut dilapisi oleh matriks tulang dan berasal dari  akhir  siklus  pembentukan  tulang  pada  sel osteoblas. 1,3
Metabolisme  kalsium  dapat  dipengaruhi oleh sejumlah obat-obatan yang akan memaksimalkan kerja tulang seperti vitamin D, kalsitonin, kalsitriol serta golongan bisfosfonat. Efek  samping  yang  ditimbulkan  dari  ketiga obat  terserbut  berbeda-beda. 4 Diketahui  bahwa cahaya matahari dapat juga dimanfaatkan untuk merangsang  sintesis  vitamin  D  di  kulit manusia,  sehingga  meningkatkan  penyerapan kalsium dalam menjaga massa tulang, mencegah osteoporosis. 5,6
Penelitian  Rostiny  (2016)  menunjukkan bahwa  tanaman  kelor  ( Moringa  oleifera ) sebagai  obat  alami  yang  diketahui  dapat mempercepat  metabolisme  kalsium  dalam tulang.  Studi  menunjukkan  bahwa Moringa oleifera memiliki  banyak  varian  fitokimia, salah  satunya  yaitu  flavonoid  yang  dapat merangsang diferensiasi dan proliferasi osteoblas, mengarah pada pembentukan tulang. 7
Penelitian International  Osteoporosis Foundation and National Osteoporosis Foundation melaporkan  pada  pekerja  malam hari  yang  selalu  terpapar  cahaya  lampu mengakibatkan  penurunan  kadar  melatonin. 8 Melatonin  bekerja  pada  tulang  dengan  cara menekan estrogen dan berdampak  menghambat aktivitas  osteoklas  akibatnya  resorbsi  tulang menjadi minimal/sebanding. 8,9
Salah  satu  cahaya  buatan  adalah  lampu fluoresen yang diketahui mempunyai efek yang buruk.  Unsur  pengisi  tabung lampu  fluoresen/ pendar  tersebut  dengan  memanfaatkan  merkuri atau  air raksa . 10 Penelitian  Saputro  (2018) menunjukkan  bahwa kandungan  merkuri  pada lampu tersebut berdampak negatif bagi kesehatan manusia maupun kesehatan lingkungan . 11 Berdasarkan  studi  pustaka  ditemukan bahwa  ekstrak  daun  kelor  memiliki  pengaruh langsung terhadap meningkatnya jumlah
osteosit  dan  matriks  tulang.  Namun  belum diketahui  apakah  ada  peningkatan  pengaruh ekstrak daun kelor apabila dikombinasikan oleh paparan  cahaya.  Selanjutnya  peneliti  tertarik menganalisis  pengaruh  pemberian  ekstrak etanol  daun  kelor  melalui  mekanisme  absorbsi pada  perkembangan  sel  osteosit  dan  matriks tulang  yang  memberikan  kontribusi  terhadap penyembuhan  tulang  setelah  dipaparkan  oleh cahaya lampu khususnya pada lampu fluoresen .

## BAHAN DAN METODE

## Alat dan Bahan Penelitian
Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah blender, a irtight container , flat bottomed glass  container , rotary  evaporator ,  kertas saring, seperangkat alat bedah, mikromotor, bur tulang, object  glass,  deck  glass ,  oven, microtome , staining  jar, lampu  fluoresen  5 watt. Pada pengamatan hasil penelitian menggunakan  mikroskop  cahaya,  dan  untuk pemotretan  digunakan  alat  mikrofotografi. Bahan  yang  digunakan  untuk  perlakuan  adalah ekstrak  etanol  daun  kelor.  Bahan-bahan  yang digunakan  untuk  membuat  preparat  histologi adalah larutan buffered neutral formalin (BNF) 10%, akuades, silol, alkohol dengan konsentrasi bertingkat (absolut, 95%, 90%, 80%, dan 70%), NaCl  fisiologis  0,95%,  parafin  dan  pewarna Hematoksilin Eosin (HE)

## Persiapan Hewan Coba
Tikus  wistar  ( Rattus  norvegicus )  yang memiliki  kriteria  berkelamin  jantan  dengan umur 2-3 bulan serta memiliki berat badan 200- 300g  digunakan  pada  penelitian  ini.  Tikus wistar yang digunakan pada penelitian sebanyak  10  ekor.  Satu  ekor  tikus  digunakan untuk  pemaparan  cahaya  lampu  fluoresen sebelum  perlakuan,  sedangkan  9  tikus  lainnya akan  dikelompokkan  menjadi 3  kelompok dengan  masing-masing  kelompok  terdiri  dari  3 ekor  tikus  wistar.  Kolompok  terdiri  dari kolompok  kontrol  positif  pada  pengaplikasian vitamin  D  topikal,  kelompok  kontrol  negatif pada  pengaplikasian  akuades  dan  kolompok perlakuan  pada  pengaplikasian  ekstrak  daun kelor ( Moringa oleifera ).

## Pembuatan Ekstrak Daun Kelor
Daun kelor ( Moringa oleifera ) dilakukan pengekstrakan di Laboratorium Kimia Fakultas Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam (FMIPA)  Unsyiah.  Daun  kelor  yang  dijadikan sampel  memiliki  kriteria  daun  yang  masih
muda dan berwarna hijau. Daun kelor sebanyak 1  kg  yang  diperoleh  dari  wilayah  Ajun, Kabupaten  Aceh  Besar  dan  Asrama  Unsyiah, Darrusalam, Banda Aceh.
Daun  merupakan  bagian  dari  tanaman kelor  yang  diambil  untuk  dipotong  sampai halus  kemudian  dikeringkan  dan  diangin- anginkan  hingga  2-4  hari.  Selanjutnya  daun tersebut  digiling  menggunakan  blander  hingga menjadi  bubuk  halus. Penyimpanan  bubuk  dari hasil  penggilingan  dimasukkan  ke  dalam airtight  container dan  diletakkan  pada  wadah yang  gelap,  sejuk  dan  kering.  Metode  maserasi diterapkan  untuk  proses  ekstraksi  dengan pelarut etanol 96%. Dilakukan pemisahan filtrat dan residu setiap 1 x 24 jam selama 3 hari serta diselingi  dengan  pergantian  pelarut  yang  sama. Vacuum  rotary  evaporator digunakan  untuk menghasilkan  ekstrak  kental  dari  filtrat  yang telah  terkumpul  dan  dipekatkan  pada  suhu 50 0 C . 13,14

## Perlakuan Pemberian Ekstrak Daun Kelor
Pada 7 hari pertama, seluruh tikus wistar ( Rattus norvegicus ) diberi perlakuan pemaparan  cahaya  lampu  flouresen  didalam kandang selama 24 jam dalam 7 hari. Pada hari ke-7, dilakukan eutanasia menggunakan anatesi eter  pada  satu  tikus  untuk  melihat  kerusakan/ kelainan  patologi  pada  tulang  mandibula. Pemaparan  cahaya  fluresen  tetap  dilanjutkan sampai hari ke-28. Pengaplikasian ekstrak daun kelor, vitamin D dan akuades dimulai hari ke 8- 28 pada masing-masing kelompok.
Pengaplikasian tersebut dilakukan pada mukosa rahang  bawah  tikus  menggunakan cotton  bud sebanyak  2  kali  sehari  pada  10  jam  pagi  dan jam 5 sore.
Semua  tikus  yang  telah  dieutanasia dilakukan  pembedahan  pada  tulang  mandibula menggunakan  bur  tulang.  Hasil  pembedahan tersebut dimasukkan ke larutan neutral buffer formalin 10% (fiksasi) selama 24 jam. 15
EDTA 14% digunakan untuk dekalsifikasi yang kemudian dilakukan
dehidrasi, clearing jaringan, embedding menggunakan parafin, serta pemotongan jaringan dengan mikrotom pada arah longitudinal  pada  ketebalan  5  mikron  sebagai prosedur  pewarnaan hematoxylin  eosin (HE). Penggunaan  HE  digunakan  pada  prosedur pewarnaan untuk mengetahui gambaran histologis  sel  osteosit  dan  matriks  tulang.
Digunakan mikroskop ( Olympus BX-51 ) perbesaran  400X  dengan  5  kali  pandang  untuk menghitung sel osteosit dan matriks tulang. 15 Pengaplikasian  perangkat  lunak  SPSS untuk  menganalisa  hasil  pada  data  penelitian yang  dianalisis  menggunakan  uji one  way ANOVA  dengan    p<0,05  untuk  menganalisis daya  fito-respon  ekstrak  etanol  daun  kelor ( Moringa  oleifera )  terhadap  perkembangan  sel osteosit  dan  matriks  tulang  pada  mandibula tikus wistar ( Rattus norvegicus ).

## HASIL
Hasil pengamatan terhadap tulang mandibula  memperlihatkan  adanya  perbedaan gambaran  sel  tulang  secara  histopatologis. Cahaya  lampu  fluoresen  yang  telah  dipaparkan selama  7  hari  menunjukkan  matriks  tulang terlihat  disekitar  osteosit  dengan  luas  area 11930 µm 2 dalam pembesaran 400x menggunakan mikroskop cahaya. Hasil pengamatan  hari  ke-14  yang  telah  diberi ekstrak  daun  kelor,  vitamin  D  dan  akuades menunjukkan perbedaan jumlah sel osteosit.
Kelompok  perlakuan  yang  diberi  ekstrak etanol  daun  kelor  terlihat  jumlah  yang  lebih pada sel osteosit dibandingkan dengan kelompok  kontrol  positif  maupun  kontrol negatif.  Sedangkan  hasil  pengamatan  sel  yang paling  sedikit  terdapat  pada  kelompok  kontrol positif.
Gambaran matriks tulang pada kelompok perlakuan  dan  kelompok  kontrol  positif mengalami  perbesaran  luas,  sedangkan  pada kelompok kontrol negatif mengalami pengurangan jumlah luas area.
0 5 10 15 20 25 30 35 40 H7 H14 H21 H28
Tanpa Perlakuan Kontrol Negatif Kontrol Positif Perlakuan
Gambar 1. Diagram Batang Terhadap Frekuensi Osteosit Pada Kelompok Kontrol dan Kelompok Perlakuan.
Tabel 1. Distribusi Luas Matriks Tulang pada Hari ke-7, ke-14, ke-21 dan ke-28 .
Luas area H7 Matriks Tulang Kontrol Negatif Kontrol Positif Perlakuan H14 H21 H28 H14 H21 H28 H14 H21 H28 Rerata 11930 11172 12522 13172 11936 14248 14317 12079 14433 16383
*satuan luas daerah : µm 2
Pada  kelompok  perlakuan  yang  diberi ekstrak  etanol  daun  kelor  terlihat  jumlah  yang lebih  pada  sel  osteosit  dibandingkan  dengan kelompok  kontrol  positif  maupun  kontrol negatif.  Sedangkan  hasil  pengamatan  sel  yang paling  sedikit  terdapat  pada  kelompok  kontrol positif. Gambaran matriks tulang pada kelompok  perlakuan  dan  kelompok  kontrol positif  mengalami  perbesaran  luas,  sedangkan pada  kelompok  kontrol  negatif  mengalami pengurangan jumlah luas area.
Hasil  pengamatan  histopatologis  sel osteosit  dan  matriks  tulang  hari  ke-21, kelompok kontrol positif dengan vitamin D dan kelompok  kontrol  negatif  dengan  akuades mengalami  peningkatan  pada  sel  osteosit. Sementara pada kelompok perlakuan mengalami  penurunan  jumlah  sel  osteosit. Kelompok  kontrol  positif  menunjukkan  sel osteosit  paling  banyak.  Luas  area  matriks tulang  yang  terlihat  kelompok  perlakuan  dan kelompok  kontrol  positif  relatif  sama  dengan luas 14400µm 2 .
Penelitian  hari  ke-28  pada  kelompok perlakuan,  hasil  sel  osteosit  dan  matriks  tulang menunjukkan  kenaikan  yang  paling  tinggi
antara  kelompok  kontrol  positif  dan  kontrol negatif.

## PEMBAHASAN
Hasil  pengamatan  secara  mikroskopis, setelah pemaparan cahaya hari ke-7 hari sampai hari  ke-21  terlihat  jumlah  sel  osteosit  yang mengalami penurunan. Hal ini diketahui bahwa terjadinya penurunan pada sel osteosit diakibatkan  oleh  pemaparan  cahaya  lampu fluoresen  dapat  mengganggu  struktur  tulang. Dalam pembuatan lampu fluoresen memanfaatkan  merkuri  atau  air  raksa  sebagai salah  satu  unsur  pengisi  tabungnya  sehingga dampak  yang  ditimbulkan  merkuri  bagi kesehatan  manusia  dan  kesehatan  lingkungan memliki  dampak  yang  buruk. 11 Penurunan jumlah  sel  osteosit  akibat  pemaparan  cahaya Penurunan jumlah sel osteosit akibat pemaparan  cahaya  lampu  secara  terus-menerus mendukung  penelitian  sebelumnya  dimana akan  terjadi  penurunan  kadar  melatonin  pada manusia. 17
Melatonin N-acetyl -5- methoxytrypta mine merupakan  produk  sekretor  utama kelenjar  pineal  vertebrata,  di  mana  sintesis  dan
pelepasannya menunjukkan peran dalam regulasi  biologis  ritme  sirkadian,  penuaan,  dan reproduksi  yang  dapat  memengaruhi  fisiologi tulang  dengan  aktivitas  puncak  selama  periode gelap  atau  pada  malam  hari. 9,17 Melatonin sangat  berperan  dalam  pembentukan  tulang karena dapat meningkatkan estrogen yang akan berdampak  menghambat  aktivitas  osteoklastik akibatnya resorbsi tulang menjadi minimal. 8,9
Hasil  pengamatan  hari  ke-14  yang  telah diberi  ekstrak  daun  kelor,  vitamin  D  dan akuades menunjukkan perbedaan total perhitungan  sel  osteosit.  Pada  kelompok perlakuan yang diberi ekstrak etanol daun kelor terlihat  jumlah  yang  lebih  pada  sel  osteosit dibandingkan  dengan  kelompok  kontrol  positif dan  kontrol  negatif,  tetapi  jumlah  osteosit mengalami  penurunan  dari  hari  ke-7.  Hasil pengamatan  histopatologis  sel  osteosit  hari  ke- 21,  kelompok  kontrol  positif  mengalami peningkatan  pada  sel  osteosit  dan  penurunan kembali  pada  kelompok  perlakuan.  Penurunan sel  osteosit  yang  terjadi  pada  kelompok perlakuan  dikarenakan  sel  tersebut  mengalami fase  remodeling  tahap  awal.  Pada  fase  tahap awal  remodeling  adalah  fase  aktivasi  dan resorpsi  yang  berlangsung  0-2  minggu  terjadi pengaktifan pada sel osteoklas yang menyebabkan penurunan pada jumlah osteosit. 18,19
Pada  penelitian  hari  ke-21  sel  osteosit paling  banyak  terdapat  pada  kelompok  kontrol positif  pada  pemberian  vitamin  D  dengan  rata- rata  32.4. Pengamatan  luas  area  matriks  tulang pada kelompok kontrol dan kelompok perlakuan juga meningkat. Hal ini menunjukkan  bahwa  penggunaan  vitamin  D telah  memberikan  efek  pada  tulang  setalah pemakaian  2  minggu.  Hasil  penelitian  yang dilakukan  oleh  Ayu  (2009)  bahwa  pemberian vitamin  D  efektif  sebagai  langkah  yang  tepat dalam peningkatan densitas tulang. 20
Hasil pengamatan tulang mandibula tikus wistar ( Rattus norvegicus ) di bawah mikroskop cahaya pada hari ke-28 menunjukkan kelompok kontrol  negatif  menggunakan  akuades  dengan jumlah  sel  osteosit  paling  sedikit  sementara hasil  pengamatan  pada  kelompok  perlakuan menunjukkan  jumlah  sel  osteosit  yang  lebih banyak.  Jumlah  sel  osteosit  dibandingkan  hari ke-14 dan ke-21 mengalami kenaikan.
Pengamatan  matriks  tulang  hari  terakhir mengalami  perluasan  area  yang  lebih  pada kelompok  perlakuan  dibanding  kelompok kontrol.  Hal  ini  menandakan  daun  kelor
( Moringa  oleifera )  tetap  bekerja  dan  efektif digunakan  sampai  minggu  ke-3  dikarenakan bahwa  untuk  menghasilkan  sel  osteosit  akan membutuhkan  waktu  3-4  minggu  yaitu  pada fase ke-2 pada tahapan remodeling. 19

## KESIMPULAN
Adanya  perubahan  sel  osteosit  dan  luas area  matriks  tulang  mandibula  tikus  wistar ( Rattus norvegicus ) setelah dipancarkan cahaya lampu  fluoresen  dalam  waktu  24  jam.  Adanya perbedaan  terhadap  jumlah  sel  osteosit  dan luas  matriks  tulang  mandibula  tikus  wistar antara  kelompok  kontrol  dan  kelompok perlakuan  yang  diberi  ekstrak  daun  kelor ( Moringa  oleifera ).  Meningkatnya  jumlah  sel osteosit  dan  matriks  tulang  sampai  pada  hari ke-28  dapat  disimpulkan  bahwa  daun  kelor dapat menstimulasi perkembangan dan kepadatan  pada  tulang  sehingga  masa  tulang tetap terjaga.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Florencio-silva  R,  Rodrigues  G,  Sasso- cerri  E,  Simões  MJ,  Cerri  PS,  Cells  B. Biology  of  Bone  Tissue:  Structure, Function, and Factors That Influence Bone Cells. Biomed Res Int . 2015; 2015:17.
2. Cheung  MBSW,  Majeska  R,  Kennedy  O. Osteocytes : Master Orchestrators of Bone. Springer Science. Biomedical Engineering . 2014; 5-24. 3. Buenzli  PR.  Osteocytes  As  A  Record  Of Bone Formation Dynamics : A Mathematical Model Of Osteocyte
Generation  In  Bone  Matrix. J  Theor  Biol . 2015; 364: 418–27.
4. Gunawan  S.  Hormon  Paratiroid  dan  Obat Yang Mempengaruhi
Metabolisme Kalsium. In: Farmakologi dan Terapi . 5th ed.  Setiabudy  R,  Nafrialdi,  editors. Jakarta:    Departemen  Farmakologi  dan
Terapeutik Fakultas
Kedokteran
Universitas Indonesia; 2012: 451–4.
5. Veldurthy  V,  Wei  R,  Oz  L,  Dhawan  P, Jeon  YH,  Christakos  S.  Vitamin  D  , Calcium  Homeostasis  and  Aging. Bone Res. 2016; 25: 1–7.
6. Yang  Y,  Yu  Y,  Yang  B,  Zhou  H,  Pan  J. Physiological  Responses  To  Daily  Light Exposure. Sci Rep . 2016; 1–9.
7. Rostiny  ED.  The  Effect  Of  Combined Moringa  oleifera and  Demineralized Freeze-Dried  Bovine  Bone  Xenograft  On The  Amount Of Osteoblast and Osteoclast
In  The  Healing  Of  Tooth  Extraction Socket  Of Cavia  cobaya . Dent  J .  2016; 37(56): 38–43. 8. Feskanich D, Hankinson SE, Schernhammer  ES.  Nightshift  Work  and Fracture Risk : The Nurses’ Health Study. Osteoporosis Int. 2009; 537–42.
9. Res  P.  Melatonin  Effects  On  Bone:
Experimental Facts and Clinical Perspectives. J Pineal Res . 2003; 81–7.
10. Cahyono  H.  Merkuri  Dalam  Lampu Fluoresen. 2011; 8(2): 37–44.
11. Saputro  JH,  Sukmadi  T,  Karnoto. Analisa Penggunaan Lampu LED Pada Penerangan  Dalam  Rumah .  Universitas Diponegoro Semarang. 2018; 2.
12. Kusumaningtyas  E.  Mekanisme  Infeksi Candida  albicans Pada  Permukaan  Sel.
Lokakarya  Nasional  Penyakit  Zoonosis . Bogor. 2004;(30):304–13.
13. Kumala  N,  R  EDD. Potensi  Ekstrak  Daun Kelor ( Moringa oleifera ) Sebagai
Hepatoprotektor  Pada  Tikus  Putih  ( Rattus novergicus )  Yang  Diinduksi  Parasetamol Dosis Toksis. J Ilmiah Ked 5: 58–66.
14. Syahruramadhan M, Yanti NA, Darlian L. Aktivitas  Antijamur  Ekstrak  Daun  Kelor
( Moringa  oleifera  Lamck .)  dan  Daun
Kirinyuh ( Chromolaena odorata L .) Terhadap Candida albicans dan Aspergillus  flavus . J  Ampibi .  2016;  1(2): 7–12.
15. Hikmah N. Profil Osteoblas dan Osteoklas Tulang  Alveolar  Pada  Model  Tikus Diabetes  Tahap  Awal  Dengan  Aplikasi Gaya  Ortodonti  Yang  Berbeda. El  Hayah . 2015; 5: 97–102.
16. Indrawati  A.  Teknik  Pembuatan  Dan
Evaluasi Preparat Histologi Dengan Pewarnaan Hematoksilin Eosin Di Laboratorium  Histologi  Dan  Biologi  Sel Fakultas  Kedokteran  UGM  Dan  National Laboratory Animal Center (NLAC) Mahidol  University.  Universitas  Gajah Mada. 2017; 1: 11–45. 17. Suzuki N, Hattori A. Melatonin
Suppresses  Osteoclastic  and  Osteoblastic
Activities  In  The  Scales  Of  Goldfish. J Pineal Res . 2002; 33: 253–8
18. Kenkre  JS,  Bassett  JHD.  The  Bone Remodelling  Cycle. Ann  Clin  Biochem .
2018; 55(3): 308–27.
19. Katsimbri  P.  The  biology  of  normal  bone remodelling. Eur  J  Cancer  Care .  2017;
26(6): 1–5.
20. Setyorini,
Ayu dkk. Pencegahan Osteoporosis dengan Suplementasi Kalsium  dan  Vitamin  D  pada Penggunaan Kortikosteroid Jangka Panjang. Sari Pediatri . 2009; 32-8.