http://ejurnal.umri.ac.id/index.php/photon

## Potential Analysis of 10 Types of Carbon Sources for Amylase Production from
Silvera Devi*, Saryono, Itnawita, Mukhlis, Lorena O.S. Jurusan Kimia FMIPA Universitas Riau Kampus Bina Widya Km 12,5, Jln Raya Soebrantas, Pekanbaru, Indonesia
*Correspondence e-mail: silvera.devi@lecturer.unri.ac.id
Abstract Production  of  amylase  from  Aspergillus  sp  LBKURCC304  in  liquid  medium  for  11  days  at  50 o C  with  starch  as  a  carbon source (Merck: KGaA), resulted in amylase crude extract with relatively low activity of 0.0302±0.0041 U/mL. This amylase activity can be optimized and one way is to replace the carbon source, therefore it is necessary to analyze the potential of 10 other types of carbon sources, including cassava starch, corn, taro, purple sweet potato, potato, breadfruit, canna, gembili, gadung and sago. The activity of the crude amylase extract produced was determined by the Nelson-Semogyi method and the  protein  content  by  the  Lowry  method.  Data  on  amylase  activity  and  protein  content  were  tested  statistically  using Duncan's Multiple Range Test (DMNRT) method at a significance level of 5%. The results of this study indicate that a liquid production medium with a carbon source of sago starch has the potential to be utilized for the production of amylase from Aspergillus sp. LBKURCC304, because it produced the highest amylase activity, namely 0.0391±0.0017 U/mL with a protein content  of  0.4471±0.0115  mg/mL.  This  amylase  activity  was  129%  greater  than  the  amylase  activity  with  starch  as  a carbon source. The highest protein content was in the carbon source of canna, which was 0.7651±0.0096 mg/mL. Keywords : Carbon source; Amylase; Aspergillus sp

## Abstrak
Produksi  amilase  dari  Aspergillus  sp  LBKURCC304  dalam  medium  cair  selama  11  hari  pada  suhu  50oC  dengan  sumber karbon pati (Merck: KGaA), menghasilkan ekstrak kasar amilase dengan aktivitas yang relatif rendah yaitu 0,0302±0,0041 U/mL. Aktivitas amilase ini dapat dioptimalkan dan salah satu caranya adalah dengan menggantikan sumber karbon, oleh karena itu perlu dilakukan analisis potensi 10 jenis sumber karbon lainnya, antara lain pati singkong, jagung, talas, ubi jalar ungu, kentang, sukun, ganyong, gembili, gadum dan sagu. Aktivitas ekstrak kasar amilase yang dihasilkan ditentukan dengan metode Nelson-Semogyi dan kadar protein dengan metode Lowry. Data aktivitas amilase dan kandungan protein diuji  secara  statistik  menggunakan  metode  Duncan's  Multiple  Range  Test  (DMNRT)  pada  taraf  signifikansi  5%.  Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa media produksi cair dengan sumber karbon pati sagu berpotensi untuk dimanfaatkan untuk  produksi  amilase  dari  Aspergillus  sp.  LBKURCC304,  karena  menghasilkan  aktivitas  amilase  tertinggi  yaitu 0,0391±0,0017  U/mL  dengan  kandungan  protein  0,4471±0,0115  mg/mL.  Aktivitas  amilase  ini  129%  lebih  besar dibandingkan aktivitas amilase dengan pati sebagai sumber karbon. Kandungan protein tertinggi terdapat pada sumber karbon tanaman ganyong yaitu 0,7651±0,0096 mg/mL.
Kata kunci : Sumber karbon; Amilase; Aspergillus sp

## 1. Pendahuluan
Amilase merupakan enzim yang mampu menghidrolisis pati menjadi dekstrin, maltosa, dan glukosa (Simair et al., 2017). Amilase digunakan pada industri tekstil, farmasi, pulp dan kertas, pakan, detergen, dan juga industri makanan (Sindhu et al., 2017; Tiwari et al., 2015). Amilase termofilik merupakan salah satu jenis enzim amilase yang banyak diminati dalam proses industri dan bioteknologi karena dapat beraktivitas pada suhu tinggi yakni 50°C atau lebih (Mohammad et al., 2017), sehingga mampu memperkecil risiko terjadinya kontaminasi pada saat produksi (Dwianto, 2015).
Manfaat dari enzim amilase ini relative cukup banyak sehingga penelitian untuk mengisolasi serta mengoptimalisasikan  produksi  amilase  dari  beberapa  mikroorganisme  masih  tetap  berlangsung. Laboratorium  Riset  Enzim,  Fermentasi  dan  Biomolekuler  Jurusan  Kimia  FMIPA  UNRI  memiliki  koleksi
http://ejurnal.umri.ac.id/index.php/photon
sejumlah isolat bakteri dan jamur hasil isolasi daerah Pekanbaru (Riau) maupun di luar daerah Riau yang berpotensi untuk menghasilkan beberapa enzim hidrolitik salah satu isolatnya nya adalah  Aspergillus LBKURCC304.
Aspergillus  sp.  merupakan  salah  satu  jenis  jamur  yang  banyak  digunakan  dalam  memproduksi  amilase (Rodrigues,  2016).  Data  hasil  penelitian  dari  Saryono  et  al.  (2018),  menyatakan  bahwa    jamur  termofilik Aspergillus sp. LBKURCC304 isolat dari sumber air panas Bukik Gadang, Kabupaten Solok, pada media padat mampu menghasilkan amilase dengan rasio zona bening sebesar 1,90. Potensi adanya aktivitas amilase ini, juga didukung dengan hasil penelitian oleh (Widylia, 2020), bahwa  Aspergillus sp. LBKURCC304 diinkubasi selama  11  hari,  dalam  media  produksi  cair  menggunakan  amilum  sebagai  sumber  karbonnya  mampu menghasilkan amilase dengan aktivitas sebesar 0,0302±0,0041 U/mL.
Optimalisasi  produksi  dan  aktivitas  amilase  dari  jamur  Aspergillus  sp.  LBKURCC304  dapat dilakukan,  salah  satu  cara  adalah  dengan  menganti  sumber  karbon  dalam  media  produksinya.  Beberapa hasil  penelitian  menyatakan  bahwa  sumber  karbon  berbeda  pada  media  produksi  akan  menghasilkan aktivitas  amilase  yang  berbeda  juga.  Aspergillus  sp.  KT-11  isolat  dari  koleksi  kultur  Pusat  Penelitian Bioteknologi LIPI, Cibinong-Bogor menggunakan tepung sagu sebagai sumber karbon mampu memproduksi amilase  dengan  aktivitas  sebesar  2.024  U  (Melliawati  et  al.,  2006).  Hasil  penelitian  (Benassi  et  al.,  2012) menyebutkan bahwa penggunaan karbohidrat singkong, jagung, barli, dan gandum sebagai sumber karbon, mampu memproduksi amilase dengan aktivitas sebesar 890 U, 861 U, 880 U, dan 1048 U, yang nilainya lebih besar dibandingkan dengan maltosa dengan aktivitas amilase sebesar 763 U dari  Aspergillus phoenicis yang diisolasi  di  Ribeirao  Preto-Sao  Paulo,  Brazil.  Hasil  penelitian  ini  menunjukkan  bahwa  karbohidrat  alami potensial digunakan sebagai sumber karbon untuk produksi amilase dari jamur Aspergillus sp, disamping itu penggunaan pati ( karbohidrat) alami dapat meningkatkan pemanfaatan sumber daya alam hayati, salah satunya  Indonesia  yang  merupakan  produsen  sagu  terbesar  di  dunia,  khususnya  di  Provinsi  Riau, Kalimantan, dan Papua.
Pada penelitian ini dilakukan analisis potensi 10 jenis sumber karbon untuk produksi amilase dari aspergillus sp. LBKURCC304  yaitu menggunakan karbohidrat singkong, jagung, sukun, talas, kentang, ubi jalar ungu, ganyong, sagu gembili, dan gadung. Produksi amilase dilakukan selama 11 hari pada suhu 50°C. Aktivitas  enzim  amilase  dan  kadar  protein  yang  dihasilkan  ditentukan  secara  kuantitatif  dengan  metode Nelson-somogyi  dan  metode  Lowry,  kemudian  aktivitas  spesifik  enzim  dihitung  dengan  perbandingan antara aktivitas amilase dengan kadar proteinnya.
Aktivitas amilase dapat diukur berdasarkan perhitungan gula pereduksi dari hasil hidrolisis pati (amilum). Salah satu metode yang dapat digunakan ialah metode Nelson-Somogyi dengan prinsip yaitu gula pereduksi akan  mereduksi  Cu2+ menjadi  Cu+ Selanjutnya  apabila  ditambahkan  arsenomolibdat  akan  terbentuk kompleks  [AsMo4VMo8VIO40]7- bewarna  biru  kehijauan.  Intensitas  warna  yang  terbentuk  ini  ekivalen dengan  jumlah  gula  pereduksinya.  Perhitungan  aktivitas  enzim  dilakukan  dengan  menggunakan data absorbansi larutan yang diperoleh  pada pengujian aktivitas enzim  kedalam persamaan regresi linear
http://ejurnal.umri.ac.id/index.php/photon
menggunakan larutan standard glukosa.
Metode Lowrey ini menggunakan reagen Folin-Ciocalteau  untuk mendeteksi gugus fenol dan pengukuran  serapan  cahaya  oleh  ikatan  kompleks  yang  berwarna  biru.  Ikatan  peptide  dapat membentuk  komplek  berwarna  ungu  dengan  ion  Cu2+   dalam  suasana  basa  dan kemudian terjadi reaksi  reduksi  Cu2+ menjadi  Cu+ .  Selanjutnya  ion  Cu+ akan  mereduksi  reagen  Folin  Ciocalteu. Senyawa  komplek  (phosphor  molybdo  tungstate)   dan  menghasilkan  hetero-polymolybdenum  blue akibat reaksi oksidasi gugus aromatic (rantai samping asam amino). Kekuatan warna biru bergantung pada  kandungan  residu  tryptopan  dan  tyrosine-nya.  Batas  deteksinya  berkisar  pada  konsentrasi 0,01mg/mL.

## 2. Metodologi

## 2.1. Alat dan Bahan
Bahan  : Potato Dextrose Agar (PDA) (Merck Cat. No.1.10130.0500), Akua DM steril,Alkohol Antiseptik 70% (Brataco), MgSO4.7H2O (Merck Cat. No.1.05886), Amilum, NaH2PO4, Na2HPO4, NaOH, HCl,. Bufer Fosfat pH 7  0.05M,  NaKC4H4O6.4H2O,  Na2CO3,  NaHCO3,  Na2SO4,  CuSO4.5H2O,  H2SO4,  reagen  Nelson-Somogyi, (NH4)2MoO4,  Na2HAsO4.7H2O,  reagen  Arsenomolibdat,  Glukosa,  Bovine  Serum  Albumin,  Reagen  Folin- Ciocalteau,  karbohidrat  singkong,  jagung,  sukun,  talas,  kentang,  ubi  jalar  ungu,  ganyong,  sagu  gembili, gadung dan mikroorganisme (Isolat Aspergillus sp. LBKURCC304 koleksi Laboratorium Enzim, Fermentasi dan Bio Molekuler FMIPA UNRI.)
Alat  :  Autoklaf  (All  America  model  1925/KY-23D),  oven  (Fisher  Scientific  mode  655F),  rotary shaker(Lab  TechScientific  International),  waterbath(Grant  Instrument  Type  SUB  28),vortex  mixer  (H-VM- 300),  pH  meter  (Hanna  Instrument  H18014),  incubator  (Memmert),  Laminar  Air  Flow,  kertas  saring Whatman  (No.1),  corong  Buchner,  pipet  mikro  (BIO-RAD)  100/1000  µL,  refrigerator,  box  steril, spektrofotometer  UV-Vis  (Thermoscientific  genesys  10S),  Vortex,  jarum  ose,  cork  bohrer  1  cm,  batang  L, desikator,  timbangan  analitik  (KERN  ABJ-NM/ABS-N),  dan  alat–alat  standar  laboratorium  lainnya  sesuai prosedur kerja.

## 2.2. Pembuatan inokulumAspergillus sp.  LBKURCC304  pada   media PDA
Pembuatan media PDA mengikuti prosedur yang terdapat pada kemasan produk. Isolat Aspergillus LBKURCC304  diremajakan  dengan  cara   isolat  ini  diambil  dari  stok  dengan  ose steril kemudian di  inokulasikan pada  permukaan  media PDA  agar  miring  dan  diinkubasi  pada  suhu  50oC selama  7  hari.  Selanjutnya  ditambahkan  3  mL  aquades  steril , kemudian  digerus  menggunakan  jarum ose agar sporanya lepas. Suspensi diambil sebanyak 250 µL, diinokulasikan  diatas permungkan media PDA dalam  cawan  petri,   diratakan  dengan spreader steril.  Selanjutnya  diinkubasi  pada  suhu  kamar  selama  3 hari.
http://ejurnal.umri.ac.id/index.php/photon

## 2.3 Produksi enzim amilase dari Aspergillus sp  LBKURCC304
Disediakan  11  erlemeyer  berukuran  250  mL  yang  kemudian  diisi  masing-masing  100mL  media  produksi cair dengan  sumber  karbon  (karbodidrat) berbeda.(komposisi  media:  karbohidrat  0,5  gram. Yeast  extract 0,2  gram,  KH2PO4 0,1  gram,   MgSO4.7H2O  0,05  gram, Buferfosfat  0,05  M  pH  7  100mL  . media  ini disterilisasi  di  autoklaf  pada  suhu  121°C  tekanan  15  psi  selama  20menit). tambahkan inokulum  Aspergillus LBKURCC304 sebanyak  2  plug  (diameter  1  cm)  menggunakan cork  borer steril dan   diinokulasikan  kedalam  media  produksi  cair  amilase  dan diinkubasi  di rotary  shaker (150  rpm  suhu 50 o C, 11 hari).
Ekstrak kasar enzim amilase yang dihasilkan  disaring dengan kertas Whatman No.1 Filtrat (ekstrak kasar amilase) ditentukan aktivitas enzim amilase   dan kadar proteinnya sedangkan kertas saring dengan miselia ditimbang untuk menentukkan berat biomassa

## 2.3. Penentuan berat biomassa Aspergillus sp LBKURCC304
Menggunakan  metode  gravimetri.    Kertas  sarng  Whatman  No.  1  yang  digunakan  telah  diketahui  berat konstrannya. Selanjutnya kertas saring yang mengandung miselium hasil penyaringan, dikeringkan di dalam oven  pada  suhu  ±90oC  selama  1  jam,  kemudian  ditimbang.  Proses  ini  dilakukan  beberapa  kali  sampai beratnya  konstan,  sehingga  diperoleh  berat  biomassa  Aspergillus  LBKURCC304  di  dalam  masing-masing media dengan sumber karbon berbeda.

## 2.4. Penentuan aktivitas enzim amilase
Aktivitas  enzim  amylase  dapat  diukur  melalui  gula  pereduksi  yang  terbentuk  dari  hasil  hidrolisis  amilum oleh amylase menggunakan metode Nelson-Somogyi. Lima tabung reaksi disediakan, untuk tabung uji (3x), kontrol  dan  blanko.  Kedalam  tabung  uji  dimasukkan  masing-masing  0,5  mL   substrat  amilum  2%,  tabung kontrol dan blanko dibiarkan kosong dan diletakan di waterbath pada suhu 50oC selama 5 menit.
Selanjutnya kedalam tabung uji dan kontrol ditambahkan 0,5 mL ekstrak kasar enzim tampa mengeluarkan tabung  reaksi  dari waterbath dan  diinkubasi  kembali  selama  30  menit.  selanjutnya masing-masing ditambahkan 1 mL reagen Nelson-Somogyi. Pada tabung kontrol ditambahkan 0,5 mL substrat amilum 2% , untuk  blanko  ditambahkan  1  mL  buffer  fosfat  0,05  M  pH  7  kemudian  divorteks.  Tabung  uji,  kontrol  dan blangko ini kemudian dimasukkan kedalam penangas air mendidih selama 20 menit, kemudian didinginkan pada suhu kamar.
Kedalam semua tabung reaksi ditambahkan 1 mL Reagen arsenomolibdat dan 7mL aqua DM  dan divorteks.  Setelah  di  diamkan  selama  30  menit  adorbansi  dari  warna  yang  dihasilkan  diukur  dengan spekrofotometer UV-Vis  pada panjang gelombang 540. Prosedur ini diulang kembali untuk setiap  ekstrak kasar enzim amilase yang dihasilkan  dengan sumber karbon berbeda.
Satu  unit  aktivitas  enzim didefenisikan  sebagai  banyaknya 1  μmol  gula  pereduksi hasil  hidrolisis  1  mL enzim permenit. Untuk mengetahui besarnya aktivitas enzim dapat dihitung dengan rumus berikut:
http://ejurnal.umri.ac.id/index.php/photon
Gula pereduksi uji (µmol)–kontrol (µmol)
Vol. enzim (mL) x waktu inkubasi (menit)

## 2.5. Penentuan  kadar protein ekstrak kasar amilase
Disediakan  14  tabung  reaksi,  10  tabung  reaksi  untuk  standar  protein  dengan  berbagai  konsentrasi  ,  1 tabung reaksi untuk blanko dan 3 tabung reaksi untuk uji kadar protein ekstrak kasar enzim masing-masing volumenya 1 mL. Kedalam semua tabung reaksi ini kemudian ditambahkan 5 mL reagen Lowry dan 0,5 mL reagen  Folin  Ciocalteau  kemudian   divorteks.  dan  didiamkan  selama  30  menit  pada  suhu  ruang.  Larutan berwarna ini diukur adsorbansi dengan spektrofotometer UV-Vis pada α 700 nm.

## 2.6. Analisis data
Data aktivitas enzim amilase, kadar protein dan aktivitas spesifik enzim yang diperoleh dari hasil penelitian ini diuji secara statistik dengan metode Analysis of Variance (ANOVA), Uji Duncan’s New Multiple Range Test (DNMRT) pada taraf 5%,

## 3. Hasil dan Pembahasan

## 3.1. Penentuan berat biomassa Aspergillus sp LBKURCC30 4
Berat biomassa  dari  Aspergillus sp LBKURCC304  dalam beberapa sumber karbon datanya dapat dilihat pada Tabel 1.
Pada Tabel 1 dapat dilihat bahwa berat biomassa dari Aspergillus sp LBKURCC304 berturut-turut 3 terbesar adalah pada sumber jangung > Gadung > Sukun.
Tabel 1. Berat biomassa vs sumber karbon. Sumber Karbon Biomassa (g) Jagung 0,4451 Gadung 0,3630 Sukun 0,3291 Ubi ungu 0,3141 Gembili 0,2381 Singkong 0,1309 Sagu 0,1019 Talas 0,0739 Kentang 0,0736 Ganyong 0,0731 Tanpa sumber karbon 0,0304
http://ejurnal.umri.ac.id/index.php/photon
3.2. Penentuan aktivitas dan kadar protein ekstrak kasar amilase dari Aspergillus sp. LBKURCC304 dengan 10 variasi sumber karbon.
Data hasil pengukuran aktivitas enzim amilase kadar proteinnya dari ekstrak kasar amilase dari Aspergillus sp. LBKURCC304 dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2. Aktivitas dan kadar protein ekstrak kasar amilase  dari Aspergillus sp . LBKURCC304 pada 10
sumber karbon berbeda. Sumber Karbon Aktivitas enzim (U/mL) Kadar protein (mg/mL) Sagu 0,0391± 0,0017 a 0,4471± 0,0115 e Ubi ungu 0,0205± 0,0040 c 0,5325± 0,0040 c Sukun 0,0267± 0,0009 b 0,3436± 0,0009 h Ganyong 0,0068± 0,0005 ef 0,7651± 0,0096 a Talas 0,0065± 0,0010 ef 0,6017± 0,0198 b Gembili 0,0070± 0,0004 def 0,5951± 0,0231 b Singkong 0,0092±0,0019 d 0,5178±0,0345 c Kentang 0,0078± 0,0006 de 0,4701± 0,0275 d Gadung 0,0078± 0,0022 de 0,3968± 0,0046 g Jagung 0,0049± 0,0008 fg 0,5174± 0,0035 c Kontrol 0,0029± 0,0007 g 0,4190± 0,0048 f
Pangkat huruf yang sama pada  Tabel 2 dalam  satu  kolom menyatakan nilai dalam  statistik tidak berbeda  secara  nyata  pada  tingkat  5%  (p  ≥  0,05)  berdasarkan  uji  Duncan  jarak  berganda.  Setelah  data aktivitas  amilase  dan  kadar  protein,  diuji  secara  statistik  ternyata  3  Aktivitas  amilase  yang  tertinggi  dari Aspergillus  sp .  LBKURCC304  yang  dihasilkan  pada  media  produksi  dengan  sumber  karbon  sagu    sebesar 0,0391±  0,0017  U/mL  >ubi  ungu  0,0205±  0,0040  U/mL  >    sukun  0,0267±  0,0009  U/mL.  Ke-3  aktivitas amilase  ini  berbeda  secara  signifikan  dan  juga  dengan    sumber  karbon  yang  lainnya.  Aktivitas  amilase terkecil diperoleh pada kontrol yaitu media tanpa sumber karbon karbohidrat dengan nilai sebesar 0,0029± 0,0007 U/mL.

## 3.3. Penentuan berat biomassa Aspergillus sp LBKURCC304
Pada  penelitian  ini    sumber  karbon  yang  digunakan  adalah  karbohidrat  yang  berasal  dari  bahan  alam dengan nilai ekonomis relatif lebih murah antara lain, singkong, jagung, sukun, talas, kentang, ubi jalar ungu, ganyong,  sagu  gembili,  dan  gadung.  Pemilihan  jenis  karbohidrat  ini  didasarkan  pada  kemudahan  dalam menemukannya  dan  penggunaannya  yang  jarang  dimanfaatkan  sebagai  sumber  bahan  pangan  di masyarakat. Karbohidrat berperan sebagai sumber karbon dalam metabolisme jamur untuk menghasilkan enzim (Mahmood et al., 2016).
Karbohidrat  sebelum  digunakan  dalam  media  produksi  amilase  oleh Aspergillus  sp .  LBKURCC304 sebagai sumber karbon, ditentukan kadar airnya, supaya berat karbohidrat yang digunakan pada tiap-tiap media produksi sama, yaitu masing-masing 0,5 gram (0,5%).
http://ejurnal.umri.ac.id/index.php/photon
Data  pada  Tabel  1  menunjukkan  bahwa  berat  biomassa  dari Aspergillus sp  LBKURCC304  berturut- turut  3  terbesar  adalah  pada  sumber  jagung  0,4451g  >  gadung  0,3630g  >  sukun  0,3291g.  Biomassa Aspergillus sp LBKURCC304 dengan sumber karbon jagung dan gadung tidak berkorelasi dengan aktivitas enzim amilase yang dihasilkannya akan tetapi untuk sumber karbon sukun berat biomassa berbanding lurus dengan aktivitas amilase yang dihasilkannya.
Jika  dilihat  pada  komposisi zat kimia amilosa dari tanaman sagu, sukun dan ubi jalar ungu relatif bervariasi  antara  lain,  pati  sagu  mengandung  kadar  amilosa  sebesar  25-45%  (Ahmad  et  al.,  1999; Uthumporn et al., 2014). Pati sukun mengandung kadar amilosa sebesar 26-38% (Rincón & Pulgarin, 2004; Setiani et al., 2013), sedangkan pati ubi ungu mengadung kadar amilosa sebesar 19-35%, yang merupakan kultivar dengan kadar amilosa tertinggi dari seluruh kultivar ubi jalar (Swinkles, 1985; Ginting et al., 2014). Variasi kandungan amilosa ini diduga mempengaruhi produksi amilase yang dihasilkan oleh Aspergillus sp . LBKURCC304.  Kadar  amilosa  yang  tinggi  menginduksi  dihasilkannya  enzim  amilase  yang  lebih  banyak dalam media produksi.
3.4. Penentuan  aktivitas  enzim  dan  kadar  protein  dari  ekstrak  kasar  amilase  Aspergillus  sp. LBKURCC304 pada 10 Variasi Sumber Karbon
Penentuan  aktivitas  ekstrak  kasar  amilase  dilakukan  dengan  cara  menghitung  kadar  gula  pereduksi  yang dihasilkan  dari  hidrolisis  amilum  oleh  amilase  menggunakan  metode  Nelson  Somogyi.  Aktivitas  amilase dinyatakan sebagai unit (U) yaitu aktivitas amilase yang dibutuhkan untuk menghasilkan glukosa sebanyak 1 μmol per menit per mL enzim (μmol/menit.mL).
Data  pada  Tabel  2  menunjukkan  bahwa  3  aktivitas  ekstrak  kasar  amilase  yang  dihasilkan  oleh Aspergillus  sp .  LBKURCC304  tertinggi  adalah  dengan  menggunakan  sumber  karbon  sagu  sebesar  0,0391± 0,0017 U/mL >  ubi ungu  0,0205±  0,0040 U/mL > sukun  0,0267±  0,0009 U/mL, sedangkan aktivitas yang terendah adalah pada control yaitu tampa penambahan karbohidrat sebagai sumber karbon  yaitu sebesar 0,0029± 0,0007 U/mL.
Aktivitas amilase yang dihasilkan dari media tanpa penambahan karbohidrat sebagai sumber karbon ini menunjukkan bahwa amilase yang dihasilkan adalah enzim konstitutif dan  bukan enzim induktif.  Enzim konsitutif, adalah enzim yang dihasilkan selama metabolisme berlangsung tanpa adanya pengaruh induser (karbohidrat). Hal ini didukung oleh penelitian (Poli et al., 2006) dan (Benassi et al., 2012) yang menemukan adanya  aktivitas  amilase  yang  dihasilkan  dari  media  produksi  bakteri Anoxybacillusamylolyticus  sp .  dan jamur Aspergillus phoenicis tanpa adanya penambahan sumber karbon (karbohidrat). dan enzim amilase ini dinyatakan sebagai amilase ekstraseluler konstitutif.
Aktivitas  amilase  yang  dihasilkan  dengan  sumber  karbon  sagu,  0,0391±  0,0017  U/mL    relatif  lebih tinggi  dari  hasil  penelitian  Widylia,  2020  dengan  kondisi  penelitian  yang  sama  dengan  sumber  kabon amilum (KGaA) diperoleh aktivitas amilase dari Aspergillus sp LBKURCC304 sebesar  0,0302 ± 0,0016 U/mL. terjadi kenaikan aktivitas sebesar 129%.
Kadar protein tertinggi ekstrak kasar amilase pada Tabel 2 adalah dari media dengan sumber karbon ganyong 0,7651 ±  0,0096  mg/mL >  talas 0,5951 ±  0,0019 mg/mL >  dan gembili  0,5951±  0,0231  mg/mL. Kadar protein yang terukur ini, adalah protein total dari media produksi dan protein enzim yang dihasilkan oleh Aspergillus  sp .  LBKURCC304.  Hal  ini  didukung  oleh  penelitian  Piyachomkwam  (2001)  menyatakan
http://ejurnal.umri.ac.id/index.php/photon
bahwa pati ganyong dan talas memiliki kandungan protein yang jauh lebih tinggi dibandingkan singkong. Berdasarkan  hasil  uji  statistik  dengan  uji  Duncan  jarak  berganda,  kadar  protein  ekstrak  kasar  enzim  dari media  dengan  karbohidrat  ganyong  berbeda  nyata  dengan  kadar  protein  dari  media  talas  (p  <  0,05)  dan kadar protein dari media talas tidak berbeda secara signifikan dengan kadar protein dari media gembili.

## 4. Kesimpulan
Karbohidrat  Sagu  merupakan  sumber  karbon  terbaik  untuk  produksi  amilase  dari Aspergillus  sp . LBKURCC304,  karena  menghasilkan  aktivitas  ekstrak  kasar  amilase  tertinggi  yaitu  sebesar 0,0391±0,0017  U/mL  dan  aktivitas  spesifik  sebesar  0,0874±0,0049  U/mg  serta  kadar  protein tertinggi  dari  ekstrak  kasar  amilase  yang  dihasilkan Aspergillus  sp .  LBKURCC304  adalah 0,7651±0,0096 mg/mL, pada media dengan sumber karbon ganyong.

## Ucapan Terimakasih
Terimakasih kepada yang telah memberikan dana DIPA PNBP FMIPA Universitas Riau tahun 2021 melalui SK Dekan Fmipa Unri No: 103s/UN19.5.1.1.3/PLO.01.00/2021 tertanggal 18 November 2021.

## Daftar Pustaka
Ahmad, I. S., Reid, J. F., Noguchi, N., & Hansen, A. C. (1999). Nitrogen sensing for precision agriculture using chlorophyll maps. Proceeding of 1999 ASAE/CSAE-SCGR Annual International Meeting , 993035 , 13 p.
Benassi,  V.  M.,  Lucas,  R.  C. de,  Michelin,  M.,  Jorge,  J.  A.,  Terenzi,  H.  F.,  &  Polizeli,  M.  de  L.  T.  de  M.  (2012).
Production  and  action  of  an  Aspergillus  phoenicis  enzymatic  pool  using  different  carbon  sources.
Brazilian Journal of Food Technology , 15 (3). https://doi.org/10.1590/s1981-67232012005000019
Dwianto,  L.  N.  (2015).  Konversi  Enzimatik  Temperatur  Tinggi  Dengan  Enzim  Termofili. Skripsi.  Intitut Teknologi Bandung (ITB) , November .
Ginting, M. H. S., Sinaga, R. F., Hasibuan, R., & Ginting, G. (2014). Pengaruh Variasi Temperatur Gelatinisasi Pati  Terhadap  Sifat  Kekuatan  Tarik  dan  Pemanjangan  Pada  Saat  Putus  Bioplastik  Pati  Umbi  Talas.
Seminar Nasional Sains dan Teknologi , November , 1–3.
Mahmood,  S.,  Shahid,  M.  G.,  Nadeem,  M.,  Irfan,  M.,  &  Syed,  Q.  (2016).  Production  and  optimization  of  A- amylase from aspergillus Niger using potato peel as substrate. Pakistan Journal of Biotechnology , 13 (2). Melliawati,  R.,  Rohmatussolihat,  R.,  &  Octavina,  F.  (2006).  Selection  of  potential  microorganism  for  sago starch fermentation.
Biodiversitas
Journal
of Biological Diversity , 7 (2). https://doi.org/10.13057/biodiv/d070201
Mohammad,  B.  T.,  Al  Daghistani,  H.  I.,  Jaouani,  A.,  Abdel-Latif,  S.,  &  Kennes,  C.  (2017).  Isolation  and Characterization  of  Thermophilic  Bacteria  from  Jordanian  Hot  Springs:  Bacillus  licheniformis  and Thermomonas hydrothermalis Isolates as Potential Producers of Thermostable Enzymes. International
http://ejurnal.umri.ac.id/index.php/photon
Journal of Microbiology , 2017 . https://doi.org/10.1155/2017/6943952
Poli,  A.,  Esposito,  E.,  Lama,  L.,  Orlando,  P.,  Nicolaus,  G.,  de  Appolonia,  F.,  Gambacorta,  A.,  &  Nicolaus,  B.
(2006).  Anoxybacillus  amylolyticus  sp.  nov.,  a  thermophilic  amylase  producing  bacterium  isolated from Mount Rittmann (Antarctica).
Systematic and Applied Microbiology , 29 (4). https://doi.org/10.1016/j.syapm.2005.10.003
Rincón,  A.-G.,  &  Pulgarin,  C.  (2004). Bactericidal  action  of  illuminated  TiO2  on  pure  Escherichia  coli  and natural  bacterial  consortia:  post-irradiation  events  in  the  dark  and  assessment  of  the  effective disinfection time
- ScienceDirect . Applied Catalysis B: Environmental.
https://doi.org/https://doi.org/10.1016/j.apcatb.2003.11.013
Rodrigues,  A.  G.  (2016).  Secondary  Metabolism  and  Antimicrobial  Metabolites  of  Aspergillus.  In New  and Future Developments in Microbial Biotechnology and Bioengineering: Aspergillus System Properties and Applications (hal. 81–93). Elsevier Inc. https://doi.org/10.1016/B978-0-444-63505-1.00006-3
Setiani, W., Sudiarti, T., & Rahmidar, L. (2013). Preparasi Dan Karakterisasi Edible Film Dari Poliblend Pati Sukun-Kitosan. Jurnal Kimia VALENSI , 3 (2). https://doi.org/10.15408/jkv.v3i2.506
Simair, A. A., Qureshi, A. S., Khushk, I., Ali, C. H., Lashari, S., Bhutto, M. A., Sughra Mangrio, G., & Lu, C. (2017). Production and  Partial Characterization of í µí»¼-Amylase Enzyme  from Bacillus sp. BCC 01-50 and Potential Applications. Res. Int. 1–9 . https://doi.org/10.1155/2017/9173040
Sindhu, R., Binod, P., Madhavan, A., Beevi, U. S., Mathew, A. K., Abraham, A., Pandey, A., & Kumar, V. (2017).
Molecular  improvements  in  microbial  Α-amylases  for  enhanced  stability  and  catalytic  efficiency.  In Bioresource
Technology (Vol. 245, hal. 1740–1748). Elsevier Ltd.
https://doi.org/10.1016/j.biortech.2017.04.098
Tiwari, S., Srivastava, R., Singh,  C., Shukla, K., Singh,  R., Singh,  P., Singh, R., Singh,  N., & Sharma, R. (2015). Amylases: an Overview With Special Reference To Alpha Amylase. Journal of Global Biosciences , 4 (1),
1886–1901.
Uthumporn,  U.,  Wahidah,  N.,  &  Karim,  A.  A.  (2014).  Physicochemical  properties  of  starch  from  sago (Metroxylon  Sagu)  palm  grown  in  mineral  soil  at  different  growth  stages. IOP  Conference  Series: Materials Science and Engineering , 62 (1). https://doi.org/10.1088/1757-899X/62/1/012026
Widylia,  F.  F.  (2020).  Analisis  Produksi  Enzim  Amilase  Dari  Jamur  Termofilik  Aspergillus  sp.
LBKURCC304.  Strain  Lokal  Bukik  Gadang  Sumatra  Barat  [Universitas  Riau].  In Skripsi . https://repository.unri.ac.id/handle/123456789/10146