Uji Aktivitas Antibakteri dari Ekstrak Etanol dan Beberapa Fraksi Daun Kenikir ( Cosmos caudatus Kunth.) terhadap Bakteri Penyebab Disentri Shigella sp

## Ema Ratna Sari, Nilda Lely, Dian Septimarleti
Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Bhakti Pertiwi Palembang
Intisari: Telah dilakukan uji aktivitas antibakteri dari ekstrak etanol dan beberapa fraksi daun kenikir ( Cosmos caudatus Kunth.) terhadap bakteri Shigella dysentriae ATCC 13313 , Shigella flexneri ATCC 12022 dan Shigella boydii ATCC 12985 . Ekstraksi dilakukan dengan metode maserasi dengan hasil rendemen 3,62 % b/b yang ke- mudian dilakukan fraksinasi menggunakan pelarut n-heksan, etil asetat, dan air. Kandungan kimia yang dida- pat dalam uji fitokimia bahwa daun kenikir ( Cosmos caudatus Kunth.) terdapat senyawa kimia alkaloid, flavo- noid, fenolik, saponin dan steroid. Uji aktivitas antibakteri dilakukan dengan menggunakan metode difusi agar dengan 5 variasi konsentrasi zat uji yaitu 10%, 15%, 20%,  25% dan 30% dengan menggunakan etanol destilat sebagai kontrol negatif dan tetrasiklin sebagai kontrol positif. Hasil uji menunjukkan bahwa berbagai konsen- trasi  dari  ekstrak  etanol  daun  kenikir  dan  beberapa  fraksi  dalam  perlakuan  mempunyai  aktivitas  antibakteri terhadap Shigella dysentriae ATCC 13313 , Shigella flexneri ATCC 12022 dan Shigella boydii ATCC 12985 . Pada konsentrasi zat uji 30% terhadap bakteri Shigella dysentriae ATCC 13313 menghasilkan diameter zona hambat pada ekstrak etanol daun kenikir 17,0 mm, fraksi n-heksan 13,8 mm, fraksi etil asetat 14,3 mm dan fraksi air 10,9  mm.  Terhadap Shigella  flexneri ATCC  12022 menghasilkan  diameter  zona  hambat  pada  ekstrak  etanol daun kenikir 18,6 mm, fraksi n-heksan 15,3 mm, fraksi etil asetat 15,7 mm dan fraksi air 13,8 mm. Terhadap Shigella boydii ATCC 12985 menghasilkan diameter zona hambat pada ekstrak etanol daun kenikir 20,2 mm, fraksi n-heksan 16,1 mm, fraksi etil asetat 16,9 mm dan fraksi air 15,5 mm. Jadi, yang memiliki aktivitas antibak- teri terbesar ditunjukkan pada ekstrak etanol daun kenikir terhadap bakteri Shigella boydii ATCC 12985 pada konsentrasi zat uji 30% dengan diameter zona hambat 20,2 mm.
Kata kunci: daun kenikir, Shigella sp, disentri, antibakteri
Abstract: It has been tested the antibacterial activity of ethanol extract and some fractions of leaves marigolds (Cosmos caudatus Kunth.) againts the bacteria Shigella dysentriae ATCC 13313 , Shigella flexneri ATCC 12022 dan Shigella boydii ATCC 12985 . Extraction is done by maceration method with a yield 3.62% b/b results of the fractionation was then performed using the solvent n-hexane, ethyl acetate, and water. Chemical content ob- tained in the test phytochemical that leaves marigolds (Cosmos caudatus Kunth.) Are chemical compounds of alkaloids, flavonoids, phenolics, saponins and steroids. Antibacterial activity assay carried out using agar diffu- sion method with 5 variations of concentration of test substance, wich is 10%, 15%, 20%, 25% and 30% with used destilation etanol as negative control and tetracyclin as positive control. The results of inhibition zone di- ameter measurements the ethanol extract and some fractions have a antibacterial activity againts Shigella dy- sentriae ATCC 13313 , Shigella flexneri ATCC 12022 and Shigella boydii ATCC 12985 At 30% concentration of test subtance to bacteria Shigella dysentriae ATCC 13313 inhibitory zone diameters on ethanol extract leaves marigolds of 17.0 mm, n-hexane fraction of 13.8 mm, ethyl acetate fraction of 14.3 mm, and water fraction of 10.9 mm. Againts Shigella flexneri ATCC 12022 the diameter of inhibitory zone diameters on ethanol extract leaves marigolds of 18.6 mm, n-hexane fraction of 15.3 mm, ethyl acetate fraction 15.7 mm and water fraction of 13.8 mm. Againts Shigella boydii ATCC 12985 the diameter of inhibitory zone diameters on ethanol extract leaves marigolds of 20.2 mm, n-hexane fraction of 16.1 mm, ethyl acetate fraction of 16.9 mm and water frac- tion of 15.5 mm. So, that has the greatest antibacterial activity shown in the ethanol extract of leaves marigolds to the bacteria Shigella boydii ATCC 12985 at 30 % concentration of the test substance with inhibition zone di- ameter of 20.2 mm.
Keywords: leaves marigolds, Shigella sp, dysentery, antibacterial

## 1 PENDAHULUAN
isentri merupakan penyakit infeksi saluran pen- cernaan  yang  ditandai  dengan  peradangan usus, terutama kolon dan disertai dengan nyeri pada perut,  tenesmus,  buang  air  besar  yang  sering  serta
mengandung darah dan lendir. Penyakit disentri ada dua  jenis  yaitu  disentri  amoeba  yang  disebabkan oleh  bakteri Entamoeba  coli ,  dan Vibrio  cholerae . Disentri  basiler  disebabkan  oleh  bakteri Shigella  Sp yang  merupakan  penyebab Shigellosis atau  disentri berdarah.  Bakteri  ini  menghasilkan  eksotoksin  yang
D
mempunyai  sifat  neurotoksik  dan  enterotoksik  yang berbahaya bagi manusia (Warnaini, 2013). Di dunia sekurang-kurangnya 140 juta kasus dan 600.000 ke- matian  terjadi  setiap  tahun  akibat Shigellosis pada anak-anak  dibawah  umur  5  tahun. Shigellosis keba- nyakan  ditemukan  di  negara-negara  berkembang seperti di Indonesia (Prihantoro dkk, 2006).
Upaya yang dilakukan untuk mengobati penyakit disentri akibat bakteri Shigella Sp terbatas pada anti- biotik.  Selain  memberikan  keuntungan  bagi  manu- sia,  namun  antibiotik  juga  menimbulkan  dampak negatif  yaitu  kemampuan  bakteri  dalam  memperta- hankan  diri  sehingga  makin  sulit  untuk  diberantas (Winarsih  dkk,  2010).  Menurut  Jawetz  dkk  (2005) Shigella  Sp memiliki  resistensi  terhadap  beberapa antibiotik  diantaranya  seperti  tetrasiklin,  ampisilin, dan  siprofloksasin.  Pengguanaan  antibiotik  dalam jangka  panjang  dan  tidak  tepat  dosis  juga  dapat mengganggu  fungsi  kinerja  pada  organ  ginjal,  jan- tung dan hati (WHO, 2014). Menurut Wahyuningsih M  (2010),  beberapa  orang  yang  mengkonsumsi  an- tibiotik  dapat  mengalami  jantung  berdebar-debar, detak  jantung  abnormal,  dan  masalah  hati  seperti penyakit kuning. Oleh karena itu, perlu dikembang- kan  alternatif  pengobatan  dengan  menggunakan bahan  nabati  yang  diharapkan  lebih  efektif,  efisien dan aman dalam upaya menghambat pertumbuhan bakteri Shigella Sp .
Salah satu alternatif bahan nabati yang berpoten- si  mempunyai  aktivitas  sebagai  antibakteri  adalah daun  kenikir  ( Cosmos  caudatus Kunth.).  Daun  keni- kir  dapat  dikonsumsi  sebagai  sayuran,  untuk  obat penambah  nafsu  makan,  penguat  tulang,  dan  men- gobati  gastritis  (Pebriana  dkk,  2008).  Daun  kenikir ( Cosmos  caudatus Kunth.)  banyak  dikonsumsi  ma- syarakat sebagai sayuran. Secara tradisional daun ini juga  digunakan  untuk  memperbaiki  sirkulasi  darah, mencegah  penuaan  dini,  menurunkan  suhu  tubuh, dan  menghilangkan  bau  nafas  yang  kurang  sedap. Sebuah penelitian in-vitro , yang dilakukan oleh seo- rang  peneliti  dari  Perguruan  Tinggi  di  Malaysia membuktikan, ekstrak daun kenikir terbukti berhasil membunuh berbagai jenis kuman dan jamur penye- bab penyakit. Beberapa di antara kuman itu adalah yang  menyebabkan  penyakit  pada  saluran  cerna. (Abas dkk, 2003).
Penelitian  yang  dilakukan  Putri  (2014)  diketahui ekstrak  metanol  daun  kenikir  ( Cosmos  caudatus Kunth.) memiliki aktivitas terhadap bakteri Salmonel- la  typhi penyebab  diare  dengan  konsentrasi  zat  uji 10%, 15%, 20%, 25%, dan 30%, konsentrasi 10% pa- da  ekstrak  metanol  daun  kenikir  ( Cosmos  cuadatus Kunth.)  sudah  mampu  menghambat  pertumbuhan bakteri Salmonella typhi yaitu sebesar 9,5 mm terma-
suk kategori sedang, dan pada konsentrasi 30% me- miliki diameter zona hambat yaitu sebesar 24,2 mm kategori sangat kuat.
Berdasarkan uraian diatas, perlu dilakukan pene- litian  dari  ekstrak  etanol  dan  beberapa  fraksi  (fraksi n-heksan, fraksi etil asetat dan fraksi air) daun kenikir ( Cosmos  caudatus Kunth.)  terhadap  bakteri  penye- bab disentri Shigella Sp . Pada uji aktivitas antibakteri ini,  peneliti  menggunakan  metode  difusi  agar,  sam- pel  dibagi  dalam  tiga  fraksi  yaitu  fraksi  n-heksan, fraksi etil asetat dan fraksi air. Bakteri uji yang digu- nakan  adalah Shigella  dysentriae ATCC  13313 ,  Shi- gella flexneri ATCC 12022 , dan Shigella boydii ATCC 12985.

## 2 METODOLOGI

## Alat
Seperangkat  alat  maserasi,  destilasi  vakum, rotary evaporator ,  corong  pisah  ( pyrex ),  corong  kaca  ( py- rex ), gelas ukur 10 ml ( pyrex ), Laminer Air Flow ( Indo tech ) , spektrofotometer  UV-Vis  ( BEL  photonics ), cawan petri ( pyrex ), jarum ose, jangka sorong ( tricle brand ),  autoklaf  ( portable  pressure  stear  sterilizer ), dan elektro thermal inkubator .

## Bahan
Daun kenikir segar, media Nutrien Agar (NA), NaCl 0,9%,  aquadest,  etanol  destilat  (Brataco),  etil  asetat (Brataco),  n-heksan  (Brataco),  aquadest  (Brataco), tetrasiklin, kloroform, kloroform amoniak, H 2 SO 4 2N, pereaksi Mayer, logam Mg, HCl pekat, FeCl 3 , CHCl 3 , norit,  asetat anhidrida 10%, H 2 SO 4 pekat, dan pasir bersih,  kertas  cakram.  Bakteri  uji Shigella  dysentriae ATCC 13313, Shigella flexneri ATCC 12022, dan Shi- gella boydii ATCC 12985.

## Prosedur

## Uji Fitokimia
Identifikasi Alkaloid menggunakan metode Culvenor Fitzgerald  dan  Identifikasi  Senyawa  Flavonoid,  Fe-
nolik,  Saponin,  Terpenoid  dan  Steroid  mengguna- kan metoda Simes dkk, yang dimodifikasi

## Ekstraksi dan Fraksinasi  Daun Kenikir
Daun  kenikir  segar  dibersihkan,  dirajang  dan  ditim- bang  sebanyak  2  kg.  Lalu  diekstraksi  dengan  cara maserasi. Proses maserasi  dilakukan 3 kali perenda- man  selama  5  hari  kemudian  disaring  sehingga  di- dapat  maseratnya.  Maserat  diuapkan  pelarutnya menggunakan destilasi vakum dan rotary evaporator sampai didapat ekstrak kental. Ekstrak kental etanol daun  kenikir  selanjutnya  difraksinasi  menggunakan pelarut n-heksan, etil asetat dan air.

## Sterilisasi Alat dan Bahan
Alat-alat gelas disterilkan dalam autoklaf  pada suhu 121°C  dengan  tekanan  15  lbs  selama  15  menit. Pinset, jarum ose dan kaca objek disterilkan dengan cara  pemijaran  dengan  jalan  melewatkan  pada nyala  api  selama  20  detik  (Dwidjoseputro,  1998). Laminer  Air  Flow disterilkan  dengan  cara  dibersih- kan  dari  debu  lalu  disemprot  dengan  alkohol  70%, lampu UV dinyalakan selama 10 menit.

## Pembuatan Larutan Uji dan Kontrol
Konsentrasi  yang  dibuat  yaitu  10%,  15%,  20%,  25%, 30% b/v dengan pelarut etanol destilat. Larutan kon- trol  positif  (+)  yaitu  Tetrasiklin  dibuat  dengan  kon- sentrasi  0,01%  b/v.  Larutan  kontrol  negatif  (-)  yang digunakan etanol destilat.

## Uji Penghambatan Pertumbuhan Bakteri
Sebanyak  0,1  ml  suspensi  bakteri  diteteskan  ke  da- lam tabung reaksi yang berisi 10 ml media agar,  di- homogenkan  kemudian  dituangkan  di  atas  cawan petri  yang  berisi  10  ml  media  agar  yang  telah  me- madat. Cawan petri tersebut digoyangkan beberapa kali  secara  horizontal  agar  suspensi  bakteri  merata pada seluruh permukaan agar. Kemudian dibiarkan pada suhu kamar selama 15 menit. Setiap bakteri uji ditempatkan  pada  3  cawan  petri  untuk  tiap  larutan uji dan pengujian dilakukan sebanyak tiga kali (Cap- puccino, 2009). Cakram kertas yang telah disterilkan dicelupkan ke dalam masing- masing konsentrasi zat uji  yang  telah  disiapkan  kemudian  diletakkan  pada permukaan  media  agar  yang  telah  diinokulasi  den- gan bakteri. Cawan petri yang berisi  agar inokulum diinkubasi  kedalam  inkubator  pada  suhu  37ºC  sela- ma 48 jam. Kemudian diukur diameter zona bening ( clear  zone )  yang  terbentuk  dengan  menggunakan jangka sorong (Harmita & Radji,  2008).

## Analisis Data
Pengumpulan  data  dilakukan  dengan  menganalisis kandungan kimia daun kenikir dan pengukuran zona
bening  ( clear  zone )  pada  tiap  konsentrasi  ekstrak etanol  daun  kenikir  dan  hasil  fraksi  n-heksan,  fraksi etil asetat dan fraksi air daun kenikir ( Cosmos cauda- tus Kunth.)  pada  masing-masing  bakteri  uji.  Data yang  diperoleh  disajikan  dalam  bentuk  tabel  dan dianalisis.

## 3 HASIL DAN PEMBAHASAN
Pada  ekstraksi  sampel  daun  segar  sebanyak  2  kilo- gram  didapat  ekstrak  kental  sebanyak  72,43  gram, maka  didapat  persen  rendemen  daun  kenikir  sebe- sar  3,62  %.b/b.  Fraksinasi  dilakukan  dengan  pelarut berdasarkan  tingkat  kepolarannya  yaitu  n-heksan, etil asetat dan air. Tujuan dari fraksinasi yaitu untuk memisahkan senyawa kimia berdasarkan kepolaran- nya  (Djamal, 2010). N-heksan akan menarik senya- wa yang non polar, etil asetat akan menarik senyawa semipolar dan  air akan menarik senyawa polar. Ek- strak  kental  daun  kenikir  ( Cosmos  caudatus Kunth.) sebanyak  50  gram  difraksinasikan  dan  hasil  fraksi kental  n-heksan  sebanyak  15,30  gram,  fraksi  kental etil  asetat  14,25  gram  dan  fraksi  kental  air  17,45 gram.  Berdasarkan  literatur  mengatakan  bahwa  ta- naman  kenikir  ( Cosmos  caudatus Kunth.)  memiliki kandungan  kimia  berupa  alkaloid,  flavonoid,  sapo- nin, tanin dan minyak atsiri (Rasdi dkk, 2010). Hasil uji fitokimia pada penelitian ini menunjukkan bahwa daun kenikir segar mengandung alkaloid, flavonoid, fenolik,  saponin  dan  steroid.  Ekstrak  Etanol  daun kenikir  mengandung  alkaloid,  flavonoid,  fenolik,  sa- ponin  dan  steroid.  Sedangkan  pada  fraksi  n-heksan mengandung  steroid,  fraksi  etil  asetat  mengandung flavonoid  dan  fenolik.  Pada  fraksi  air  mengandung flavonoid, fenolik dan saponin.
Ekstrak etanol daun kenikir, fraksi n-heksan, fraksi etil asetat, dan fraksi air daun kenikir ( Cosmos cauda- tus Kunth.)  kemudian  diuji  aktivitas  antibakterinya terhadap  bakteri  penyebab  disentri  dengan  metode difusi  agar.  Metode  ini  digunakan  karena  memiliki beberapa  keunggulan  dibanding  metode  lainnya seperti  peralatan  yang  digunakan  relatif  sederhana serta  pengamatan  diameter  hambat  ( clear zone) yang  mudah.  Sebagai  bakteri  uji  digunakan  bakteri Shigella  dysentriae ATCC  13313, Shigella  flexneri ATCC 12022, dan Shigella boydii ATCC 12985  yang merupakan  jenis  bakteri  gram  negatif.  Bakteri  uji yang  digunakan  merupakan  bakteri  yang  patogen dan  dapat  mewakili  bakteri  patogen  lainnya  yang menyebabkan infeksi pada manusia. Pada penelitian ini  dilakukan  pengenceran  pada  konsentrasi  10%, 15%, 20%, 25%, 30%. Sebagai kontrol positif diguna- kan  tetrasiklin.  Kontrol  positif  digunakan  untuk membandingkan  potensi  ekstrak  daun  kenikir  den- gan  tetrasiklin,  zona  hambat  yang  dihasilkan  oleh
ekstrak etanol daun kenikir lebih kecil dibandingkan dengan antibiotik tetrasiklin. Hasil pengukuran daya hambat aktivitas antibakteri dari ekstrak etanol daun
kenikir  ( Cosmos  caudatus Kunth.)  terhadap  terlihat pada Tabel 1.
________________________________________________
Tabel 1. Hasil pengamatan uji aktivitas antibakteri dari ekstrak etanol daun kenikir terhadap bakteri Shigella dysentriae ATCC 13313, Shigella flexneri ATCC 12022, dan Shigella boydii ATCC 12985 Zat Uji Konsentrasi (%) Rata-Rata Diameter Hambat ± SD Shigella dysentriae ATCC 13313 Shigella flexneri ATCC 12022 Shigella boydii ATCC 12985 Ekstrak Etanol Daun Kenkir 30% 17,0 ± 0,64 18,6 ± 0,56 20,2 ± 0,32 25% 13,2 ± 0,86 16,0 ± 0,51 17,0 ± 0,56 20% 10,8 ± 0,43 11,8 ± 0,66 14,7 ± 0,5 15% 8,03 ± 0,77 8,8  ± 0,79 10,7 ± 0,20 10% 6,66 ± 0,80 7,7  ± 0,34 8,33 ± 0,50 Kontrol  + 23,7 ± 0,60 25,6 ± 0,43 27,3 ± 0,49 Kontrol  – 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 ________________________________________________ Hasil uji aktivitas antibakteri dari ekstrak etanol daun  kenikir  menunjukkan  diameter  hambat  paling besar terhadap bakteri Shigella boydii ATCC 12985. Hal  ini  disebabkan  adanya  efek  sinergis  gabungan beberapa  golongan  senyawa  kimia  metabolit  se- kunder  yang  saling  memperkuat  dan  mempunyai aktivitas  antimikroba.  Berdasarkan  uji  fitokimia  ek- strak  etanol  daun  kenikir  mengandung  senyawa  al-
kaloid,  flavonoid,  fenol,  saponin  dan  steroid,  yang diduga  merupakan  senyawa  yang  bersifat  sebagai antibakteri.  Selain  itu  juga Shigella  boydii ATCC 12985  merupakan  penyebab dysentri  basiller yang paling ringan (Gupte, 1990).
Hasil  pengujian  uji  aktivitas  antibakteri  dari fraksi n-heksan, etil asetat dan air  daun kenikir terli- hat pada Tabel 2.
________________________________________________
Tabel 2.  Hasil pengamatan uji aktivitas antibakteri dari fraksi n-heksan, fraksi etil asetat, dan fraksi air daun kenikir terha- dap bakteri Shigella dysentriae ATCC 13313, Shigella flexneri ATCC 12022, dan Shigella boydii ATCC 12985 Fraksi Konsentrasi (%) Rata-Rata Diameter Daya Hambatan ± SD Shigella dysentriae ATCC 13313 Shigella flexneri ATCC 12022 Shigella boydii ATCC 12985 N-Heksan 30% 13,8 ± 0,30 15,3 ± 0,55 16,1 ± 0,64 25% 12,1 ± 0,30 14,0 ± 0,68 14,6 ± 0,15 20% 10,0 ± 0,73 10,3 ± 0,1 11,2 ± 0,34 15% 7,1  ± 0,78 8,1  ± 0,60 10,4 ± 0,35 10% 6,66 ± 0,64 7,2  ± 0,78 7,9  ± 0,75 Kontrol  + 21,9 ± 0,75 23,2 ± 0,1 26,2 ± 0,05 Kontrol  – 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 Etil Asetat 30% 14,3 ± 0,20 15,7 ± 0,15 16,9 ± 0,75 25% 13,0 ± 0,57 14,2 ± 0,55 15,5 ± 0,25 20% 10,2 ± 0,56 11,1 ± 0,32 11,5  ± 0,8 15% 7,2 ± 0,55 8,2 ± 0,6 10,6  ± 0,1 10% 6,7  ± 0,23 7,3 ± 0,17 8,06 ± 0,25 Kontrol  + 22,2 ± 0,05 25,2 ± 0,1 27,1 ± 0,05 Kontrol  – 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 Air 30% 10,9 ± 0,46 13,8 ± 0,85 15,5 ± 0,20 25% 10,5 ± 0,85 12,1 ± 0,35 13,2 ± 0,40 20% 8,56 ± 0,64 9,33 ± 0,51 11,1 ± 0,80 15% 6,46 ± 0,15 7,93 ± 0,75 9,7 ± 0,17 10% 6,2  ± 0,05 6,5 ± 0,05 7,7 ± 0,40 Kontrol  + 20,9 ± 0,47 22,8 ± 0,25 23,0 ± 0,15 Kontrol  - 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 ________________________________________________
Hasil uji aktivitas antibakteri dari beberapa fraksi daun  kenikir  ( Cosmos  caudatus Kunth.),  fraksi  etil asetat    menunjukkan  diameter  hambat  yang  paling besar  terhadap  bakteri Shigella  boydii ATCC  12985. Berdasarkan  uji  fitokimia,  pada  fraksi  etil  asetat mengandung  senyawa  flavonoid  dan  fenolik,  yang diduga bersifat sebagai antibakteri.
Flavonoid merupakan senyawa fenol dapat bersi- fat koagulator protein (Dwijoseputro, 1998),  senya- wa  flavonoid  dalam  merusak  membran  sel  bakteri yaitu membentuk senyawa kompleks dengan protein ekstraseluler  sehingga  membran  sel  bakteri  rusak dan diikuti dengan masuknya air yang tidak terkon- trol kedalam sel bakteri, hal ini menyebabkan pem- bengkakan dan akhirnya membran sel bakteri pecah (Black dan Jacobs, 1993). Selain itu, senyawa flavo- noid  memiliki  kemampuan  mendenaturasi  protein sel bakteri dengan cara membentuk ikatan hidrogen kompleks  dengan  protein  sel  bakteri.  Sehingga, struktur dinding sel dan membran sitoplasma bakteri yang  mengandung  protein  menjadi  tidak  stabil  dan kehilangan  aktivitas  biologinya,  akibatnya  fungsi permeabilitas  sel  bakteri  terganggu  dan  sel  bakteri akan mengalami lisis yang berakibat pada kematian sel bakteri (Harbone, 1987).
Fenolik  (fenol)  yang  kerjanya  hampir  sama seperti  flavonoid  yaitu  dapat  merusak  dan  menem- bus  dinding  sel  bakteri,  kemudian  mengendapkan protein sel mikroba sehingga merupakan racun bagi protoplasma  (Ngajow  dkk . ,  2013 ). Senyawa  fenol dalam membunuh sel bakteri ada 3 cara, yaitu men- denaturasi  protein  bakteri,  menghambat  sintesis dinding  sel,  dan  merusak  membran  sel  bakteri.  Se- nyawa fenol mendenaturasi protein sel  bakteri den- gan  cara  membentuk  ikatan  hidrogen  dengan  pro- tein  bakteri.  Hal  ini  mengakibatkan  struktur  protein bakteri  menjadi  rusak  dan  enzim  menjadi  inaktif. Akibat  terdenaturasinya  protein  sel  bakteri,  maka semua  aktivitas  metabolisme  sel  bakteri  terhenti, karena semua aktivitas metabolisme sel bakteri dika- talisis  oleh  enzim  yang  merupakan  protein  (Law- rence dan Block, 1968).
Mekanisme  fenol  dalam  menghambat  sintesis dinding  sel  bakteri  dengan  cara  meracuni  protop- lasma dan memutuskan ikatan peptidoglikan (Naidu, 2000).  Mekanisme  fenol  dalam  merusak  membran sel  bakteri,  dengan  cara  ion  H + dari  senyawa  fenol akan  menyerang  gugus  polar  (gugus  fosfat)  bakteri sehingga  molekul  fosfolipid  terurai  menjadi  asam fosfat, gliserol, dan asam karboksilat. Kondisi ini me- nyebabkan membran sel bakteri akan bocor.
Saponin sebagai antibakteri memiliki 3 cara, yaitu menghambat  permeabilitas  membran  sel,  meng-
hambat sintesis dinding sel dan menghambat sintesis protein dengan cara membentuk senyawa kompleks dengan protein bakteri melalui ikatan hidrogen  (Ri- nawati, 2011). Mekanisme steroid sebagai antibakte- ri berhubungan dengan membran lipid dan sensitivi- tas  terhadap  komponen  steroid  yang  menyebabkan kebocoran pada lipospom (Madduluri, 2013). Stero- id dapat berinteraksi dengan membran fosfolipid sel yang bersifat permaebal terhadap senyawa-senyawa lipofilik sehingga  menyebabkan integritas membran menurun  serta  morfologi  membran  sel  berubah yang  menyebabkan  sel  rapuh  dan  lisis  (Ahmed, 2007).  Alkaloid  dalam  ekstrak  daun  kenikir  meng- ganggu  penyusunan  peptidoglikan  melalui  reaksi antara  gugus  basa  dari  alkaloid  dengan  senyawa asam  amino  yang  menyusun  dinding  sel  sehingga lapisan dinding sel tidak terbentuk secara utuh (Ro- binson, 1995).
Dari penelitian ini terbukti bahwa ekstrak etanol dan beberapa fraksi (fraksi n-heksan, fraksi etil asetat dan  fraksi  air)  daun  kenikir  ( Cosmos  caudatus Kunth.)  pada  konsentrasi  10%,  15%,  20%,  25%  dan 30%  dapat  menghambat  bakteri  penyebab  penyakit dysentri  basiller yaitu  bakteri Shigella dysentriae ATCC 13313 , Shigella flexneri ATCC 12022 dan Shi- gella  boydii ATCC  12985  dengan  kandungan  kimia alkaloid, flavonoid, fenolik, saponin dan steroid.

## 4 SIMPULAN
Ekstrak  etanol  dan beberapa  fraksi  (fraksi n-heksan, fraksi etil asetat dan fraksi air) daun kenikir ( Cosmos caudatus Kunth.)  memiliki  aktivitas  antibakteri  ter- hadap  bakteri Shigella  dysentriae ATCC  13313 ,  Shi- gella flexneri ATCC 12022 dan Shigella boydii ATCC 12985.
Aktivitas  antibakteri  terbesar  adalah  ekstrak  eta- nol  daun  kenikir  ( Cosmos  caudatus Kunth.) Shigella boydii ATCC  12985,  pada  konsentrasi  30%  dengan diameter hamabat sebesar 20,2 mm.
REFERENSI _____________________________
[1] Abas, F., Shaari, K., Lajis, N.H., Israf, D.A., & Kalsom, Y.U. 2003. Antioxidative and radical scavenging prop- erties of the constituents isolated from (Cosmos cauda- tus Kunth. ). Nat. prod. sciences , 9(4), 245-248.
[2] Ahmed, Bahar. 2007. Chemistry of natural products . New Delhi: Departement of Pharmaceutical Chemistry Faculty of Science Jamia Hamdard.
[3] Black, J.M. & Jacobs, E.M. 1993. Medical surgical nurs- ing (4 th edition). Philadelphia: W.B. Saunders Compa- ny.
[4] Cappuccino and James G. 2009. Manual laboratorium mikrobiologi . Jakarta: EGC Medical Publisher.
[5] Culvenor, C.C.J & J.S. Fitzgerald. 1963. A field me- thod for alkaloid screening of plant . J. Pharm Sci . 52, 303-304.
[6] Djamal, R. 2010. Kimia Bahan Alam:Prinsip-prinsip dasar isolasi dan identifikasi. Padang: Penerbit Universitas Baiturrahmah.
[7] Dwidjoseputro, D. 1998. Dasar-dasar mikrobiologi . Jakarta: Djambatan.
[8] Gupte, Satis. 1990. Mikrobiologi dasar (Edisi III). Jakar- ta: Bina Aksara.
[9] Harbone, J.B. 1987. Metode fitokimia penuntun cara modern menganalisa tumbuhan . Diterjemahkan oleh K. Padmawinata. Bandung: ITB Press.
[10] Harmita & Radji, M. 2008. Buku ajar analisis hayati . Jakarta : EGC.
[11] Jawetz, E., Melnick, J.L & E. A. Adelberg. 2005. Mi- krobiologi kedokteran (Jilid 1). Jakarta : Salemba Baru.
[12] Lawrence, C.A. & S. S. Block. 1968. Disinfection, steri- lizaation and preservation. Philadephia: Lea and Fe- biger.
[13] Madduluri, Suresh. Rao, K. Babu, Sitaram B. 2013. In vitro evaluation of antibacterial activity of five inde- genous plants extract against five bacterial pathogens of human. International journal pharmacy and pharma- ceutical Sciences . 5(4), 679-684.
[14] Naidu, A. S. & R. A. Clemens. 2000. Natural food anti- microbial systems . LCC: CRC Press.
[15] Ngajow, M., Abidjulu J., & Kamu, V.S. 2013. Pengaruh antibakteri ekstrak kulit batang matoa ( Pometia pinna- ta ) terhadap bakteri Staphylococcus aureus secara in vi- tro . (Jurnal) MIPA , 2, 128-132.
[16] Pebriana, R.B., Wardhani Kusuma, B.W., Widayanti, E., Wijayanti, N.L.S., Wijayanti, T.R., Riyanto, S., & Meiyanto, E . 2008. Pengaruh ekstrak metanolik daun
kenikir ( Cosmos caudatus Kunth.) terhadap pemacuan apoptosis sel kanker payudara. Jurnal pharmacon , 9(1), 21-26.
[17] Prihantoro, T.,  Indra, R., & Sumarno. 2006. Efek anti- bakteri ekstrak kulit buah delima ( Punica granatum ) terhadap Shigella dysentriae secara in vitro. (Jurnal). 112(3).
[18] Putri, D.N. 2014. Uji aktivitas antibakteri ekstrak meta- nol daun kenikir (Cosmos caudatus Kunth.) terhadap bakteri Salmonella typhi. (Skripsi). Malang: Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim.
[19] Rasdi, N.M.H., Samah, O.A., Sule, A., & Ahmed, Q.U. 2010. Antimicrobial studies of ( Cosmos caudatus Kunth.) (Composite). Journal of medicinal plants re- search , 4(8), 669-673.
[20] Rinawati, N. D. 2011. Daya antibakteri tumbuhan ma- japahit (Crescentia cujete L.) terhadap bakteri Vibrio al- ginolyticus . (Skripsi). Surabaya: Jurusan Biologi Fakul- tas Matematika Ilmu Pengetahuan Alam Institut Tekno- logi Sepuluh November.
[21] Warnaini, C. 2013. Uji efektivitas ekstrak kunyit sebagai antibakteri terhadap pertumbuhan bakteri Bacillus sp. dan Shigella dysentriae secara in vitro. (Jurnal): Ma- kassar: Universitas Hasanudin.
[22] WHO. 2014. Antimicrobial resistance: global report on surveillance . 12 Februari. Web publication http : // www. who. Int / drugresistance / publications / info- graphic - antimicrobial resistance. Diakses 23 Januari 2016.
[23] Winarsih, S., Mudjiwijono, H.E., & Diane, T.S. 2010. Efek antibakteri ekstrak etanol rimpang kunyit (Cur- cuma Dometica) terhadap pertumbuhan Shigella dy- sentriae isolat 2312-F secara in vitro. (Skripsi). Malang:
Universitas Brawijaya. _________________________