## INKORPORASI  OLEAT  DAN  EKSTRAK  ANTOSIANIN  PADA  FILM  GELATIN SEBAGAI  INDIKATOR  pH UNTUK  KEMASAN  PINTAR
[Incorporation of Oleic Acid and Anthocyanin in Gelatin Films as

## pH Indicators for Intelligent Packaging]
Azis Boing Sitanggang 1,2) *, Muhammad Fakhrian Irsali 1) , dan Saroat Rawdkeun 3)
1) Departemen Ilmu  dan Teknologi Pangan, Fakultas Teknologi Pertanian, Institut Pertanian Bogor, Bogor, Indonesia
2) Southeast Asian Food and Agricultural Science and Technology (SEAFAST) Center, Institut Pertanian Bogor, Bogor, Indonesia
3) Food Technology Program, School of Agro-Industry, Mae Fah Luang University, Chiang Rai 57100, Thailand
Diterima  27 Agustus 2019 / Disetujui 12 Mei 2020

## ABSTRACT
This study was aimed to develop and investigate the characteristics of the intelligent films made from gelatin  with  oleic acid (OA) and anthocyanin extract incorporation. Anthocyanin was extracted from red cab b age (RC), sweet potato (SP), b lack b ean coat seed (BB), and purple rice (CR), and then tested for pH sensitivity.  Anthocyanin  from  SP  was  selected as  it showed the highest pH sensitivity. Gelatin film was incorporated with 20% of anthocyanin extract and 50% OA. The film s with OA and anthocyanin extracts incorporation was selected for application as the color changes can b e ob served clearly at pH 2 -11. Red color  was  present  on  the  film  added  with  anthocyanin  extract  from  SP.  OA  incorporation  significantly decreased  the  elongation of the film, while it was on the contrary for anthocyanin extract incorporation. Both  OA  and  anthocyanin  extracts  incorporation  decreased  thickness,  moisture  content,  and  tensile strength  of  the  film  significantly  (P<0.05).  Additionally,  there  was  a  reduction  trend  of  water  vapor permeab ility  for  gelatin  film  incorporated  with  OA  and  anthocyanin.  However ,  this  reduction  was insignificantly different with the control (P>0.05). The incorporation of OA provided wavier surface s while anthocyanin extract incorporation enhanced the compactness and smoothness of the film s, and provided smoother surfaces of the film. A higher enthalpy was needed for melting the film with anthocyanin extract.
Keywords: anthocyanin, b iodegradab le packaging, gelatin film , intelligent packaging, oleic acid

## ABSTRAK
1
Penelitian ini bertujuan mengembangkan dan menyelidiki karakteristik film cerdas dari gelatin dengan inkorporsai asam lemak oleat (OA) dan ekstrak antosianin sebagai indikator alami. Antosianin diekstrak dari kol merah (RC), ubi jalar (SP), kacang hitam (BB), dan beras ungu (CR) kemudian diuji sensitivitas pH. Antosianin dari SP dipilih sebagai indikator karena mampu menunjukkan sensitivitas pH tertinggi. Film gelatin diinkorporasikan dengan 20% ekstrak antosianin dan 50% asam oleat kemudian diuji karakteristik- nya dengan kontrol dan film yang diinkorporasi OA atau ekstrak antosianin. Film dengan inkorporasi OA dan ekstrak antosianin dipilih  karena dapat menunjukkan perubahan warna yang jelas pada pH 2-11. Warna merah mendominasi pada film yang ditambahkan ekstrak antosianin. Penambahan OA pada film secara signifikan menurunkan elongasi film namun sebaliknya untuk penambahan ekstrak antosianin. Penambahan  OA  dan  antosianin  menurunkan  kete balan,  kadar  air,  dan  kekuatan  tarik  film  secara signifikan ( P <0,05). Penurunan angka permeabilitas uap air terdapat pada film dengan inkorporasi OA walaupun tidak signifikan bila dibandingkan dengan kontrol ( P >0,05). Asam oleat memberikan permukaan yang lebih bergelombang sementara penambahan ekstrak antosianin meningkatkan kekompakan film dan memberikan permukaan yang lebih halus pada film. Entalpi yang lebih tinggi diperlukan untuk mencairkan film dengan ekstrak antosianin.
Kata kunci: antosianin, asam lemak oleat, film gelatin, kemasan b iodegradab le , kemasan pintar
*Penulis Korespondensi: E-mail: boing.lipan@apps.ipb.ac.id

## PENDAHULUAN
Pertumbuhan  kebutuhan  konsumen  terhadap keamanan  dan  kualitas  pangan  saat  ini  mendorong proses  pengembangan  pengemasan  pangan  yang inovatif  (Choi et  al., 2017).  Kemasan  pintar  atau intelligent  pack aging merupakan  salah  satu  pe- ngembangan  lebih  lanjut  dari  konsep  pengemasan dalam  aspek  komunikasi.  Kemasan  pintar  memiliki kemampuan  untuk  pemantauan  secara  langsung kondisi  dari  pangan  tersebut  melalui  indikator  inter- nal  dan  eksternal  (Robertson,  2013)  Indikator  yang digunakan,  seperti  label  elektronik  dan  indikator diagnostik  visual,  umumnya  ditempelkan,  diinkorpo- rasi,  atau  dicetak  pada  kemasan  pangan  tersebut sebagai  sumber  penyedia  informasi  terkait  kualitas pangan  selain  tanggal  kedaluwarsa  yang  tercetak pada  kemasan  pangan.  Kemasan  pintar  harus  ber- sifat  sederhana  namun  dapat  diterapkan  secara  efi- sien  untuk  menjamin  bahwa  produk  dapat  diterima oleh  konsumen  selama  masa  penyimpanannya (Pereira et al., 2015).
Selain  pewarna  sintetik  (bromokresol  ungu,  bro- mokresol  hijau,  bromofenol  biru,  klorofenol  merah, dan  kresol  merah),  pewarna  alami  telah  banyak  di- kaji  dalam  berbagai  studi  sebagai  indikator  pH (Balbinot-Alfaro et  al., 2019).  Sebagai  hasil  ekstrak dari  sumber  alami  (umumnya  nabati),  pewarna  alami bersifat  terbarukan  dan  cenderung  tidak  toksik,  serta lebih  mudah  untuk  dibuat  dibandingkan  pewarna sintetik.  Beberapa  jenis  zat  warna  alami  telah dikem- bangkan  dari  berbagai  sumber  seperti  kurkumin,  an- tosianin,  ekstrak  aronia  hitam  ( Aronia  melanocarpa ) dan  lainnya  (Prietto et  al., 2017).  Antosianin  meru- pakan  zat  warna  alami  yang  menarik  perhatian  para peneliti  karena  sifat  perubahan  strukturnya  yang unik.  Perubahan  struktur  ini  bergantung  pada  kondi- si  pH  dari  larutan  polar  yang  memengaruhi  warna- nya.  Perubahan  ini  secara  umum  bersifat  reversibel (Zhang et  al., 2014).  Penggunaan  kemasan  pintar berupa  indikator  pH  telah  banyak  dikembangkan untuk  menunjukkan  kualitas  bahan  pangan  secara aktual.  Beberapa  contohnya  adalah  film  yang  ditam- bahkan  dengan  metil  merah  dan  bromokresol  ungu digunakan  untuk  indikator  penurunan  kualitas  da- ging;  bromo-kresol  hijau  film  digunakan  untuk  me- mverifikasi  kerusakan  filet  ikan  ikan  melalui  pelepas - an  amina  yang  mudah  menguap;  film  dari  pati  ja- gung  ataupun  kitosan  dengan  penambahan  anto- sianin  telah  umum  digunakan  untuk  indikator  terjadi- nya  kebusukan  dari  produk-produk  olahan  daging (Balbinot-Alfaro et al., 2019).
Gelatin  telah  banyak  digunakan  sebagai  bio- polimer edible (dapat  dimakan)  karena  mudah  diper- oleh  melalui  hidrolisis  parsial  dari  jaringan  hewani. Sifat  gelatin  yang  mudah  terurai  menyebabkan  gela- tin  banyak  dipelajari  dalam  penerapannya  untuk  ber- bagai  produk,  salah  satunya  yaitu  sebagai  kom-
ponen pengemasan pangan (Kaewprachu dan Rawdkuen,  2014).  Namun,  film  gelatin  yang  bersifat hidrofilik  memiliki  sifat  perlindungan  yang  kurang baik  terhadap  permeasi  uap  air.  Komponen  hidro- fobik,  seperti  lemak  dan  minyak,  dapat  diinkorporasi- kan pada film untuk  meningkatkan  sifat  ini (Tongnuanchan et  al., 2015).  Pengaruh  inkorporasi lemak  pada  film  dapat  berupa  perubahan  tekstur  film dan  kinerja  antosianin  sebagai  indikator  pH.  Asam oleat  memiliki  potensi  tersendiri  sebagai  salah  satu komponen  lipid  yang  digunakan.  Meskipun  memiliki pengaruh  yang  lebih  sedikit  terhadap  peningkatan sifat  perlindungan  uap  air  pada  film,  asam  oleat memberikan  sifat  transparansi,  fleksibilitas,  dan  ke- halusan  yang  lebih  baik  pada  film  dibandingkan dengan  lemak  yang  tinggi  akan  asam  lemak  jenuh (Limpisophon et  al., 2010).  Penelitian  ini  bertujuan mengembangkan  film  gelatin  sebagai  kemasan  pin- tar  biodegradasi  dengan  inkorporasi  asam  lemak oleat  dan  ekstrak  antosianin  sebagai  indikator  alami dan  menguji  karakteristik  fisik,  kimia,  dan  mekanik dari  film.

## BAHAN  DAN METODE

## Bahan
Gelatin  serbuk  ( commercial  food  grade  bovine gelatin ,  Type  B  150  bloom)  dan  Gliserol  diperoleh dari  Nutrition  SC  Co,  Ltd.  (Nakhenpathem,  Thailand) dan  Merck  (Darmsstadt,  Germany).  Bahan  kimia  lain (HCl,  methanol,  NaOH,  paraffin  dan  asam  oleat)  di- peroleh  dari  Scientific  and  Technological  Instru- ments  Center  Store,  Mae  Fah  Luang  University, Thailand.  Kol  merah  (Brassica  oleracea),  ubi  jalar ungu  ( Ipomoea  batatas ),  beras  merah  Thailand ( Oryza  sativa L.),  kacang  hitam  ( Phaseolus  vulga- ris ),  ikan  nila  ( Oreochromis  niloticus ),  garam  kasar, nasi,  dan  gula  merah  diperoleh  dari  pasar  tradisional di Chiang  Rai, Thailand.

## Pembuatan ekstrak antosianin
Pengecilan  ukuran  sampel  dilakukan  dengan pemotongan  kol  merah  (RC)  dan  ubi  jalar  ungu (SP),  pengupasan  dan  perendaman  kulit  kacang  hi- tam  (BB),  dan  penghancuran  beras  merah  Thailand (CR)  dengan  blender.  Sampel  ditimbang  lalu  dima- serasi  dalam  campuran  85  mL  etanol  70%  dan  15 mL  1  M  HCl  dengan  rasio  1:10  (v/v)  terhadap  pela- rut.  Rendaman  sampel  disimpan  selama  24  jam  pa- da  suhu  5°C  dalam  wadah  gelap  kemudian  difiltrasi menggunakan  kain  kasa  untuk  memperoleh  ekstrak antosianin.
Pembuatan  film  gelatin  (Faseha  dan  Rawdkuen, 2016)
Larutan  untuk  pembuatan  film  dibuat  dengan pencampuran  gelatin  serbuk  dalam  air  destilata  (to-
tal  protein  dalam  larutan  3%  b/v).  Gliserol  ditam- bahkan  sebanyak  25%  b/b  dari  protein.  Larutan  film diinkubasi  pada  suhu  60°C  selama  30  menit  dengan sedikit  pengadukan.  Asam  oleat  dicampur  dengan lesitin  (25%  b/b  asam  oleat)  ditambahkan  sebanyak 50%  b/b  protein  dari  larutan  film.  Larutan  dihomoge- nisasi  dengan ultra  turrax  homogenizer (IKA,  USA) dengan  kecepatan  rotasi  5,000  rpm  selama  10  me- nit.  Buih  yang  berlebih  dipisahkan  dengan  sentrifu- gasi  dengan  kecepatan  6000  rpm  selama  5  menit pada  suhu  ruang.  Antosianin  ditambahkan  sebanyak 20%  dari  total  volume  larutan  yang  dipersiapkan  se- belumnya.  Sekitar  4  g  larutan  film  dituangkan  pada cetakan  silikon  lalu  dikeringkan  selama  24  jam sebe- lum  dimasukkan  ke  dalam humidity  chamber (Bin- der,  Germany)  pada  suhu  25±0,5°C  dan  kelem- bapan  relatif  ( relative  humidity ,  RH)  50±5%  selama 24  jam.
Uji sensitivitas  pH  ekstrak  dan film (Chaovanalikit et al., 2009)
Pengaturan  pH  20  mL  ekstrak  antosianin  dila- kukan  dengan  penambahan  1  N  HCl  dan  1  N  NaOH. Ekstrak  lalu  dipipet  ke  dalam 96-well  microplate pada  pH  2-12.  Pengujian  sensitivitas  film  dilakukan dengan  pemotongan  film  berukuran  2×2  cm 2 dan direndam  dalam  cawan  berisi larutan  buffer  pH 2-11.
Uji warna film (Ibraheem et al., 2012) Penentuan  warna  film  (5×5  cm 2 )  pada  ruang warna  CIELab  dilakukan  dengan colorimeter (Hunter Lab  Color  Quest  XE)  pada  lima  titik  berbeda  dengan tiga  kali  pengulangan.  Mengacu  pada,  parameter yang  diukur  pada  ruang  warna  CIELab  yaitu  tingkat keterangan  (L*)  dari  hitam  (0)  hingga  putih  (100), tingkat  kroma  (a*)  antara  hijau  (-a*)  dan  merah (+a*),  dan  nilai  warna  atau hue (b*)  antara  kuning (+b*)  dan  biru  (-b*).  Ketebalan  film  (2×5  cm 2 )  diukur dengan  mikrometer  (Mitutoyo,  Japan)  pada  10  titik berbeda  per  sampel.
Uji sifat mekanik film (Kaewprachu dan Rawdkuen, 2014)
Film  dikondisikan  pada  RH  50±5%,  suhu  25°C, selama  48  jam  sebelum  daya  regang  dan  sifat  elo- ngasi  dari  film  diukur  dengan  universal  testing  ma- chine  (Instron  5566,  Massachusets,  USA)  dengan panjang  awal  lembaran  3  cm  dan  kecepatan cross- head 30  mm/menit  dengan  sel  beban  100  N.  Data dikalkulasikan  dengan  perumusan  sebagai  berikut:

## Uji kadar air (AOAC, 2012)
Kadar  air  dihitung  berdasarkan  persentase  ke- hilangan  berat  pada  sampel  setelah  dikeringkan  da- lam  oven  pada  suhu  105°C  selama  24  jam  terhadap bobot  awal  sampel.
Uji  permeabilitas  uap  air  film  (Chambi  dan Grosso, 2011)
Lembaran  film  diletakkan  di  atas  wadah  silinder berisi  gel  silika  (0%  RH)  dan  direkatkan  dengan  pa- rafin  dan  cincin  logam.  Wadah  kemudian  diletakkan di  dalam humidity  chamber pada  suhu  25°C  dan  RH 50%  dan  ditimbang  tiap  setiap  1  jam  dan  pengamat- an  dilakukan  selama  8  jam.  Kalkulasi  permeabilitas uap  air  ( water  vapor  permeability ,  WVP)  dari  sampel dengan  satuan  g·mm -1 ·h -1 ·cm -2 ·Pa -1 yaitu  sebagai berikut:
P - - P -

## P
dimana, w merupakan  perubahan  bobot  wadah  (g), x sebagai  ketebalan  film  (mm), A sebagai  area  dari film  (cm 2 ), t yaitu  waktu  interval  (h), P perbedaan  tekanan  uap  air  antara  wadah  sampel (dengan  RH  =  R 2 )  dan chamber (dengan  RH  =  R 1 ). N       P          h        pengalian  tekanan  uap  air tersaturasi  pada  suhu  25°C  (S  =  3166  kPa)  dengan selisih  dari  RH  dalam  wadah  dan  ruang  penyimpan- an.  Penentuan  nilai  WVP  dilakukan  dalam  tiga  pe- ngulangan  per  sampel.
Uji  komposisi  spectrum  infra  merah film (Limpan et  al., 2010)
Spektroskopi  infra  merah  pada  sampel  dilaku- kan  dengan  metode fourier  transform  infrared  spec- troscopy (FTIR)  pada  suhu  ruang  dengan  pemindai- an  64  kali  pada  resolusi  4  cm -1 .  Sampel  diukur  pada rentang  4000-650  cm -1 untuk  menghindari  tumpang tindih  pada  pita spektrum
Uji sifat  termal film (Pelissari et al., 2012) Sifat  termal  sampel  dianalisis  dengan  metode differential scanning calorimetry (DSC,  Mettler Toledo,  Ohio,  USA).  Sekitar  2-5  mg  sampel  dalam pelat  aluminium  hermetis  dipanaskan  pada  rentang suhu  -60  sampai  150°C  dengan  laju  pemanasan 10°C/menit  dan  pemberian  gas  nitrogen  (20  mL/ menit).  Pelat  aluminium  kosong  digunakan  sebagai referensi.
RC
SP BB
CR
2  3  4  5  6  7  8  9  10 11 12 pH
Pengamatan  mikrostruktural  film  (Faseha  dan Rawdkeun, 2016)
Mikrostruktur film  diamati  dengan  metode mikroskop  pemindai  electron  (SEM,  LEO/1450  VP, Carl  Zeiss  Microscopy  GmbH,  Jena,  Germany). Sampel  film  dilapisi  karbon  dan  diletakan  pada penjepit  sampel.  Tegangan  akselerasi  ( accelerating voltage )  diatur  pada  5,0  kV  dan  perbesaran  1000× pada  permukaan  film  dan  sayatan  melintang  dari film.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Sensitivitas  ekstrak dan film terhadap perubahan
pH
Gambar  1  menunjukkan  perubahan  warna  pa- ling  signifikan  terjadi  pada  ekstrak  RC  dan  SP  pada pH  2-12.  Ekstrak  SP  memiliki  sensitivitas  pH  ter- tinggi,  ditunjukkan  oleh  perbedaan  warna  pada  pH  9 dan  10  yang  lebih  signifikan  dibandingkan  ekstrak RC,  sehingga  dipilih  untuk  penelitian  ini.  Perubahan warna  serupa  dari  ekstrak  ubi  jalar  ungu  (SP)  juga dilaporkan h  M h         ’   h et  al. (2014) dalam  penelitiannya,  terlepas  dari  jenis  kultivarnya. Informasi  ini  menjadi  dasar  penggambaran  perubah- an  struktur  dari  peonidin-3-(6"-kaffeoyl)-soforosida- 5-glikosida,  bentuk  umum  antosianin  dari  ubi  ungu. Warna  ubi  ungu  yang  dominan  merah  disebabkan oleh  tingginya  rasio  peonidin  terhadap  sianidin  (>1). Peonindin  membentuk  warna  magenta  pada  jaring- an  tumbuhan  (Raghvendra et  al., 2011).  Perubahan warna  pada  film  terlihat  lebih  jelas  dengan  inkorpo- rasi  asam  oleat  (Gambar  2).  Film  dengan ekstrak SP menunjukkan  warna  merah  pada  pH  2  dan  berku- rang  seiring  dengan  peningkatan  pH  hingga  pH  5. Warna  berubah  menjadi  biru  saat  pH  mencapai  6 –9 dan  perlahan  berubah  menjadi  hijau  pada  pH  10  ke atas.  Film  kontrol  memiliki  penampakan  yang  sama
dengan  film  yang  ditambahkan  dengan  ekstrak  SP pada  pH  2.
Gambar  1.  Uji  sensitivitas  pH  pada  ekstrak  kol  me- rah  (RC),  ubi  jalar  ungu  (SP),  kulit  ka- cang  kedelai  hitam  (BB),  dan  beras  me- rah  (CR)

## Warna film
Gambar  3  menunjukkan  film  gelatin  kontrol  me- miliki  kenampakan  yang  jernih  sedangkan  film  de- ngan  asam  oleat  lebih  keruh.  Warna  merah  muda pada  film  dengan  inkorporasi  antosianin  mengindi- kasikan  dominasi  antosianin  dalam  bentuk  kation flavylium  akibat  proses  ekstraksi  asam  (Khoo et  al., 2017). Hasil  analisis  warna  pada  film  gelatin  yang dibentuk  disajikan  pada  Tabel  1.  Film  gelatin  dengan penambahan  asam  oleat  memiliki  tingkat  kecerahan paling  tinggi  (L*:  93,36±0,09; P <0,05).  Film  dengan ekstrak  antosianin  memiliki  kecerahan  lebih  rendah dan  berwarna  kekuningan  dibandingkan  dengan  film tanpa  ekstrak  antosianin.  Penambahan  lipida  pada film  berkontribusi  pada  pembentukan  warna  kuning, menyebabkan  peningkatan  nilai hue pada  film.  Hal ini  mungkin  disebabkan  oleh  oksidasi  lipid  pada  saat proses  pencetakan  (Bourtoom  dan  Chinnan,  2009).
Gambar  2.  Uji sensitivitas  pH  pada  film  dengan  20% ekstrak antosianin  tanpa  (a)  dan  dengan  asam oleat  (b)
Kontrol 2 3 4 5 6 11 10 9 8 7
A B C D
Keterangan: A= Film gelatin kontrol tanpa inkorporasi (G), B= Film dengan inkorporasi asam oleat (GO), C= Film dengan  ekstrak  antosianin (GA), D= Film dengan in- korporasi asam oleat dan ekstrak antosianin (GOA)
Gambar  3.  Bentuk film  gelatin
Tabel  1.   Hasil  pengukuran  warna  pada  sampel
(ruang  warna  CIELab) Sampel L* a* b* G 92,12±0,15 b -1,30±0,05 b 4,23±0,28 b GO 93,36±0,09 a -1,65±0,03 b 5,10±0,11 a GA 87,57±0,32 d 6,38±0,36 a 1,01±0,03 d GOA 88,49±0,53 c 5,98±0,53 a 2,88±0,10 c
Keterangan: Data dipresentasikan dalam bentuk rata -rata ±  standar  deviasi.  Perbedaan  superskrip  pada  data (n=3)  menunjukkan  data  berbeda  secara  signifikan ( P <0,05).  G=  film  kontrol;  GO=  film  dengan  asam oleat; GA= film dengan ekstrak antosianin; GOA= film dengan asam oleat dan ekstrak antosianin

## Sifat mekanik film
Data  ketebalan,  daya  regang,  dan  elongasi  film disajikan  pada  Tabel  2.  Film  dengan  penambahan asam  oleat  dan  ekstrak  antosianin  memiliki  ketebal- an  tertinggi  (Wang et  al., 2014).  Penambahan  asam lemak  dan  pewarna  pada  larutan  etanol-air  berkon- tribusi  pada  peningkatan  ketebalan  pada  film  gelatin (Musso et  al., 2017).  Daya  regang  dan  elongasi  film menurun  saat  film  ditambahkan  asam  oleat  sedang- kan  penambahan  ekstrak  antosianin  meningkatkan sifat  elongasi  dari  film.  Penambahan  antosianin  pa- da  film  dapat  memfasilitasi  mobilitas  rantai  senyawa
pembentuk  struktur  film  serta  penurunan  pH  film yang  mengakibatkan  depolimerasi  gelatin  (Stoll, 2015).  Kedua  faktor  ini  dapat  meningkatkan  sifat plastis  dari  film  yang  dihasilkan.  Pengurangan  daya regang  dapat  dikaitkan  dengan  rendahnya  kohesi dalam  jaringan  biopolimer  yang  disebabkan  kecen- derungan  fase  lipida  untuk  menghambat  pemben- tukan  ikatan  intermolekuler  antar  protein  (Rocca- Smith et  al., 2016).  Penambahan  antosianin  dalam etanol-HCl  pada  larutan  film  juga  berkontribusi  ter- hadap  penurunan  kepadatan  film  akibat  perbedaan dari  pembukaan  rantai  molekuler  atau  ikatan  silang antar  jaringan  protein  (Denavi et al., 2009).
Tabel  2.   Ketebalan  dan  sifat mekanik dari  film Sampel Ketebalan (µm) Daya Regang (MPa) Elongasi (%) G 46,11± 2,34 d 1,2592±0,3162 a 199,44± 12,29 bc GO 61,30± 2,99 b 1,2081±0,4357 a 175,56± 22,19 c GA 50,28± 4,57 c 0,5393±0,4221 b 164,44± 34,57 a GOA 68,38± 5,95 a 0,5230±0,0667 b 141,11± 42,57 ab
Keterangan:  Data  dipresentasikan  dalam  bentuk  rata - rata±standar deviasi. Perbedaan superskrip pada data (n=3,  untuk  ketebalan  film  n=10)  menunjukkan  data berbeda  secara  signifikan  ( P <0,05).  G=  film  kontrol; GO= film dengan asam oleat; GA= film dengan ekstrak antosianin; GOA= film dengan asam oleat dan ekstrak antosianin

## Kadar  air  dan  sifat  permeabilitas  uap  air  pada film
Kadar  air  dan  sifat  permeabilitas  uap  air  dari film  dapat  dilihat  pada  Tabel  3.  Penambahan  asam oleat  dan  ekstrak  antosianin  secara  signifikan  men- gurangi  kadar  air  pada  film.  Adanya  perubahan  inte- raksi  protein-air  parsial  dengan  protein-lipid  dan  ikat- an  hidrofobik  yang  dibentuk  dari  interaksi  protein  de- ngan  antosianin  menyebabkan  penurunan  kadar  air pada  film  (Ma et  al., 2012a;  Kaewprachu et  al., 2017).  Penambahan  asam  oleat  dan  ekstrak  anto- sianin  tidak  berpengaruh  secara  signifikan  terhadap sifat  perlindungan  uap  air  pada  film  ( P >0,05).  Meski- pun  demikian,  penurunan  permeabilitas  uap  air  ter- jadi  pada  film  dengan  asam  oleat,  dengan  atau  tan- pa  penambahan  ekstrak,  bila  dibandingkan  dengan kontrol.  Hal  ini  mengindikasikan  potensi  asam  oleat sebagai  komponen  yang  membantu  meningkatkan sifat  proteksi  terhadap  permeabiitas  uap  air  pada konsentrasi  yang  lebih  tinggi.  Potensi  ini  juga  di- dukung  oleh  penampakan  asam  oleat  yang  lebih jernih  dibandingkan  dengan  lipid  yang  tinggi  asam lemak  jenuh  (Bourtoom  dan  Chinnan,  2009).  Penye- ragaman  globula  asam  oleat  pada  matriks  film  dapat meningkatkan  sifat  perlindungan  film  serta  mengu- rangi  adsorpsi  dan  difusi  air  dalam  matriks  film.
1630,83 1544,09 1236,82 Wavenumb er cm -1 Gelatin Gelatin+Asam Oleat Gelatin+Antosianin Gelatin+Asam Oleat+Antosianin Amida A (NH str.) Amida I (C=O str.)
Amida II (NH bnd.) Amida III (NH bnd.) 3279,82 1033,00 1235,37 1537,83 1630,39 3279,34 1032,34 1035,45 1233,25 1237,50 1538,15 1538,17 1629,06 1632,00 3278,83 3283,41 T ra n sm it ta n ce (% ) 4000 3600 3200
2800 2400 2000 1800 1600 1400 1200 1000 800  650 1544,09 1236,82 1630,83
1033,21
Penggunaan microfluidizer atau  gelombang  suara ultra  dapat  diaplikasikan  dalam  proses  homogeni- sasi  larutan  film  untuk  membantu  memperbaiki  sifat ini  (Ma et  al., 2012b).  Dalam  studi  oleh  Tongnuan- chan et  al. (2013),  film  berbasis  emulsi  yang  ditam- bahkan  lesitin  kedelai  memiliki  WVP  terendah.  Pe- nambahan  lesitin  mampu  menstabilkan  dan  memu- dahkan  fase  minyak  untuk  menyebar  secara  merata pada  matriks  film.  Selain  pengembangan  pada  me- tode  homogenisasi  larutan,  visualisasi  dengan con- focal  scanning  laser  microscopy (CSLM)  dapat  dila- kukan untuk  memantau  distribusi  globula  pada  film.
Tabel  3.   Kadar  air  dan  permeabilitas  uap  air  pada film
Sampel Kadar Air (%) Permeabilitas Uap Air (10 -6 g mm h -1 cm -2 Pa -1 ) G 41,22±0,23 a 17,0015±2,4218 a GO 36,50±0,34 c 13,6736±0,4022 a GA 39,38±0,51 b 17,1215±5,4306 a GOA 33,61±0,25 d 16,6127±0,4216 a
Keterangan:  Data  dipresentasikan  dalam  bentuk  rata - rata±standar deviasi. Perbedaan superskrip pada data (n=3,  untuk  ketebalan  film  n=10)  menunjukkan  data berbeda  secara  signifikan  ( P <0,05).  G=  film  kontrol; GO= film dengan asam oleat; GA= film dengan ekstrak antosianin; GOA= film dengan asam oleat dan ekstrak antosianin

## Spektrum infra merah film
Gambar  4  menunjukkan  spektrum  FTIR  pada sampel  dengan  pola  yang  sama,  menunjukkan  tidak adanya  perubahan  signifikan  dalam  kelompok  fung- sional  film.  Pembentukan  puncak  pada  3279,82- 3283,41,  1629,06-1630,83,  1537,83-1544,09,  dan 1233,25-1237,50  merujuk  pada  amida-A,  amida  I, amida  II,  dan  amida  III  (Pradini et  al., 2018).  Puncak yang  terbentuk  pada  1032,34-1035,45  cm- 1 di  se- mua  spektrum  berasal  dari  gugus  OH  dari  gliserol yang  digunakan  sebagai plasticizer (Tongnuanchan et al., 2015).
Penambahan  asam  oleat  dan  ekstrak  antosia- nin  ke  film  meningkatkan  pergeseran  puncak  dan  in- tensitas  di  daerah  amida  dan  area  di  panjang  gelom- bang  sekitar  1032-1036  cm -1 .  Hal  ini  mungkin  dise- babkan  oleh  peningkatan  interaksi  ikatan  hidrogen dari  gugus  hidroksil  dari  ekstrak  antosianin  dengan protein,  ikatan  ionik  tautan  silang  antara  gugus  kar- boksil  yang  berasal  dari  asam  oleat  dengan  asam amino,  dan  ikatan  disulfit  (Hanani et  al., 2012).  Pe- nurunan  puncak  pada  sampel  yang  hanya  ditambah- kan  dengan  asam  oleat  atau  ekstrak  antosianin mungkin  menandakan  berkurangnya  interaksi  terse- but,  mengarah  pada  pemisahan  polimer  protein yang  lebih  cenderung  terhadap  interaksi  antar  pro- tein (Ma et al., 2016).
Gambar  4.  Kurva  spektrum FTIR  dari  film
-7,0 -6,0 -5,0 -4,0 -3,0 -2,0 -1,0 0,0 1,0 -60 -40 -20 0 20 40 60 80 100 120 140 A li ra n Pa n a s (m W ) Suhu ( °C) G GO GA GOA Bagian Protein Bagian Lemak

## Sifat termal film
Dua  daerah  sinyal  endotermik  terbentuk  pada termogram  sampel  dengan  penambahan  asam  oleat (Gambar  5),  menunjukkan  proses  pelelehan  fase  mi- nyak  pada  suhu  rendah  dan  protein  pada  suhu  yang lebih  tinggi  (Tongnuanchan et  al., 2015).  Film  de- ngan  penambahan  asam  oleat  membentuk  sinyal pada  suhu,  dengan  dan  tanpa  ekstrak,  5,17  dan 8,00°C.  Pelelehan  fase  protein  terjadi  pada  semua sampel  film  pada  suhu  78,50-99,83°C.  Pembentuk- an  dua  sinyal  serta  pelelehan  fase  protein  pada  su- hu  yang  lebih  rendah  menunjukkan  sifat  asam  oleat sebagai  senyawa  non-homogen  pada  matriks  film (Ma et  al., 2012b).  Mengacu  pada  Tabel  4,  sampel dengan  asam  oleat  dan  ekstrak  antosianin  menam- pilkan  entalpi  endotermik  yang  lebih  tinggi  diban- dingkan  dengan  sampel  tanpa  ekstrak.  Hal  ini  mung- kin  mengindikasikan  entalpi  yang  lebih  tinggi  dibu- tuhkan  untuk  pelelehan  globula  lipid  akibat  adanya gangguan  dari  ikatan  hidrogen  dari  ekstrak  antosia- nin  (Luchese et  al., 2018).  Tongnuanchan et  al. (2015)  menjelaskan  bahwa  peningkatan  persentase lipid  yang  ditambahkan  dapat  mempertahankan  fase minyak  pada  matriks  film  dalam  bentuk  fase  beratur- an  ( ordered  phase )  yang  lebih  kuat  dengan  molekul gelatin.
Gambar  5.  Kurva  analisis differential  scanning  calo- rimetry (DSC)  dari  film  kontrol  (G)  dan film  dengan  inkorporasi  asam  oleat (GO),  ekstrak  antosianin  (GA),  dan  ke- duanya  (GOA)
Penurunan  suhu  leleh  dari  fase  protein  dapat dilihat  pada  sampel  dengan  asam  oleat.  Ini  berkeba- likan  dengan  hasil  studi  oleh  Ma et  al. (2012a)  yakni
penambahan  asam  oleat  berkorelasi  positif  dengan kenaikan  suhu  leleh  dari  film.  Entalpi  endotermik tertinggi  diamati  pada  puncak  kedua  sampel  dengan ekstrak  antosianin,  mengindikasikan  adanya  tam- bahan  energi  yang  diserap  saat  proses  pelelehan film.  Energi  ini  diperlukan  untuk  pemutusan  ikatan hidrogen  serta  ikatan  intermolekul  dan  intramolekul lainnya  dan  pelepasan  molekul  air  yang  terikat  pada matriks,  selain  untuk  pembukaan  struktur  kristalin triple-helix dari  gelatin  (Pereira et  al., 2015).  Peru- bahan  dari  interaksi  intermolekuler  dan  intramole- kuler  pada  film  akibat  penambahan  komponen  yang tinggi  akan  polifenol  juga  dilaporkan  dalam  bebe- rapa  studi (Rattaya et al., 2009;  Kadam et al., 2015).
Tabel  4.   Data  analisis differential  scanning  calori- metry (DSC)  pada  film Sampel Puncak 1 (Fase Lemak) Puncak 2 (Fase Protein) T puncak (°C) Entalpi (J/g) T puncak (°C) Entalpi (J/g) G n.d. n.d. 99,17 -150,29 GO 5,17 -6,08 78,50 -153,17 GA n.d. n.d. 93,50 -181,23 GOA 8,00 -13,40 99,83 -125,35
Keterangan:  n.d:  tidak  terdeteksi  ( not  detected );  G:  film kontrol; GO: film dengan asam oleat; GA: film dengan ekstrak antosianin; GOA: film dengan asam oleat dan ekstrak antosianin; - : tidak terdeteksi

## Mikrostruktur  film
Gambar  6  menunjukkan  penampakan  mikros- kopik  dari  permukaan  dan  sayatan  melintang  dari film.  Film  dengan  asam  oleat  memiliki  struktur  yang tidak  beraturan,  dengan  atau  tanpa  penambahan antosianin.  Namun,  penambahan  asam  oleat  me- ningkatkan  ketebalan  dari  film.  Pembentukan  globu- la  minyak  pada  permukaan  dan  gelembung  udara yang  terperangkap  berkontribusi  pada  pembentukan mikrostruktur  film  yang  bergelombang  (Limpisophon et  al., 2010).  Aplikasi  proses  homogenisasi  berkece- patan  atau  berfrekuensi  lebih  tinggi,  seperti  pada homogenisasi  ultrasonik,  atau  modifikasi  pada  para- meter  lain  seperti  peningkatan  tekanan  saat  proses homogenisasi  mungkin  dapat  memperbaiki  kehalus- an  film  dengan  menurunkan  ukuran  globula  minyak yang  terbentuk  dan  meningkatkan  penyebarannya secara  homogen  dalam  matriks  film  (Kaci et  al., 2017).  Film  dengan  penambahan  ekstrak  antosianin memiliki  permukaan  yang  lebih  halus  dan  padat  ser- ta  struktur  yang  elastis.  Pembentukan  struktur  yang lebih  kompak  pada  film  dengan  ekstrak  antosianin berkaitan  dengan  interaksi  intermolekuler  antara  an- tosianin  dengan  jaringan  protein  dalam  film  gelatin (Wang et al., 2012).
Gambar  6.  Mikrograf  dari  permukaan  (1)  dan  sayatan  melintang  (2)  dari  film  gelatin  kontrol  (A)  dan  film dengan  inkorporasi  asam oleat  (B), ekstrak antosianin  (C), dan  keduanya  (D)

## KESIMPULAN
Antosianin  dari  ubi  ungu  (SP)  memberikan  sen- sitivitas  pH  tertinggi  dan  digunakan  sebagai  indikator dalam  penelitian  ini.  Film  dengan  asam  oleat  dan ekstrak  antosianin  SP  menunjukkan  perubahan  war- na  yang  paling  signifikan  pada  pH  2-11.  Inkorporasi asam  oleat  pada  film  memengaruhi  warna,  khusus- nya  kuning,  dan  kecerahan  film.  Namun,  pengaruh ini  lebih  kecil  bila  dibandingkan  dengan  inkorporasi lipid  yang  kaya  asam  lemak  jenuh.  Warna  merah mendominasi  pada  film  dengan  ekstrak  antosianin dari  SP.  Inkorporasi  asam  oleat  secara  signifikan menurunkan  sifat  elongasi  dari  film  namun  sebalik- nya  dengan  inkorporasi  ekstrak.  Inkorporasi  asam oleat  dan  ekstrak  antosianin  menurunkan  ketebalan,
kadar  air,  dan  kekuatan  tarik  dari  film  secara  signifi- kan.  Permeabilitas  uap  air  film  tidak  berubah  secara signifikan  dengan  semua  perlakuan  walaupun  penu- runan  terjadi  dengan  adanya  penambahan  asam oleat.  Penambahan  asam  oleat  dan  ekstrak  antosia- nin  memiliki  pengaruh  yang  nyata  terhadap  sifat termal  film  gelatin.  Entalpi  yang  lebih  tinggi  diperlu- kan  untuk  melelehkan  film  dengan  ekstrak  antosia- nin.  Asam  oleat  memberikan  permukaan  bergelom- bang  pada  film  dan  penggabungan  ekstrak  antosia- nin  menghasilkan  permukaan  film  yang  lebih  halus dan  kompak.  Studi  lebih  lanjut  diperlukan  untuk  me- ngembangkan  metode  homogenisasi,  formulasi  ber- kaitan  dengan  komposisi  asam  oleat  dan  ekstrak antosianin,  serta emulsifier yang  digunakan.
1A
1B 1C 1D 2A 2B 2D 2C

## DAFTAR PUSTAKA
[AOAC]  Association  of  Official  Analytical  Chemists.
2012.  Official  Methods  of  Analysis  of  the  Asso- ciation  of  Official    Analytical    Chemist  19 th Edi- tion . Association  of  Official  Analytical  Chemists , Washington  DC  USA.
Balbinot-Alfaro  E,  Craveiro  DV,  Lima  KO,  Costa HLG,  Lopes  DR,  Prentice  C.  2019.  Intelligent packaging  with  pH  indicator  potential.  Food  Eng Rev  11:  235-244.  DOI:  10.1007/s12393-019- 09198-9.
Bourtoom  T,  Chinnan  MS.  2009.  Improvement  of water  barrier  property  of  rice  starch-chitosan composite  film  incorporated  with  lipids.  Revista de  Agaroquimica  y  Tecnologia  de  Alimentos  15: 149-158.  DOI:  10.1177/1082013208105993.
Chambi  HNM,  Grosso  CRF.  2011.  Mechanical  and water  vapor  permeability  properties  of  biodegra- dables  films  based  on  methylcellulose,  gluco- mannan,  pectin  and  gelatin.  Ciênc  Tecnol Aliment  31:  739-746.  DOI:  10.1590/S0101-2061 2011000300029.
Chaovanalikit  A,  Apichayaluk  S,  Kongtong  S,  Chu- prathum  S.  2009.  Effect  of  pH  and  temperature on  the  stability  and  visual  color  of  roselle  and butterfly  pea  extracts. Agric Sci J 40: 5-8.
Choi  I,  Lee  JY,  Lacroix  M,  Han  J.  2017.  Intelligent pH  indicator  film  composed  of  agar/potato starch  and  anthocyanin  extracts  from  purple sweet  potato.  Food  Chem  218:  122-128.  DOI: 10.1016/j.foodchem.2016.09.050.
Denavi  GA,  Pérez-Mateos  M,  Añón  MC,  Montero  P, Mauri  AN,  Gomez-Guillen  MC.  2009.  Structural and  functional  properties  of  soy  protein  isolate and  cod  gelatin  blend  films.  Food  Hydrocolloid 23:  2094-2101.  DOI:  10.1016/j.foodhyd.2009. 03.007.
Faseha  A,  Rawdkuen  S.  2016.  Intelligent  gelatin  film using  anthocyanin  as  color  indicator.  J  Food Sci Agric Technol  2: 1-11.
Hanani  ZN,  Roos  YH,  Kerry  JP.  2012.  Use  of  beef, pork  and  fish  gelatin  sources  in  the  manufac - ture  of  films  and  assessment  of  their  compositi- on  and  mechanical  properties.  Food  Hydro- colloid  29:  144-151.  DOI:  10.1016/j.foodhyd. 2012.01.015.
Ibraheem  NA,  Hasan,  MM,  Khan  RZ,  Mishra  PK. 2012.  Understanding  color  models  -  a  review. ARPN  J Sci Technol  2: 265-275.
Kaci  M,  Arab-Tehrany  E,  Desjardins  I,  Banon-Deso- bry  S,  Desobry  S.  2017.  Emulsifier  free  emul- sion:  Comparative  study  between  a  new  high frequency  ultrasound  process  and  standard
emulsification  processes.  J  Food  Eng  194:  109- 118.  DOI:  10.1016/j.jfoodeng.2016.09.006.
Kadam  SU,  Pankaj  SK,  Tiwari  BK,  Cullen  PJ, O’         CP      5     v                     - mer-based  gelatin  and  casein  films  incorpo- rating  brown  seaweed Ascophyllum  nodosum extract.  Food  Packaging  Shelf  Life  6:  68-74. DOI:  10.1016/j.fpsl.2015.09.003.
Kaewprachu  P,  Rawdkuen  S.  2014.  Mechanical  and physico-chemical  properties  of  biodegradable protein-based  films:  A  comparative  study.  Food App  Biosci  J  29:  15-30.  DOI:  10.14456/fabj. 2014.2.
Kaewprachu  P,  Osako  K,  Benjakul  S,  Suthiluk  P, Rawdkeun  S.  2017.  Shelf  life  extension  for Bluefin  tuna  slices  ( Thunnus  thynnus )  wrapped with  myofibrillar  protein  film  incorporated  with catechin-Kradon  extract.  Food  Control  79:  333- 343.  DOI:  10.1016/j.foodcont.2017.04. 014.
Khoo  HE, Azlan  A, Tang  ST,  Lim  SM.  2017.  Antho- cyanidins  and  anthocyanins:  colored  pigments as  food,  pharmaceutical  ingredients,  and  the potential  health  benefits.  Food  Nutr  Res  61:  1- 21. DOI:  10.1080/16546628.2017.1361779.
Limpan  N,  Prodpran  T,  Benjakul  S,  Prasarpan  S. 2010.  Properties  of  biodegradable  blend  films based  on  fish  myofibrillar  protein  and  polyvinyl alcohol  as  influenced  by  blend  composition  and pH  level.  J  Food  Eng  100:  85-92.  DOI:  10.1016/ j.jfoodeng.2010.03.031.
Limpisophon  K,  Tanaka  M,  Osako  K.  2010.  Charac- terisation  of  gelatin –fatty  acid  emulsion  films based  on  blue  shark  ( Prionace  glauca )  skin gelatin.  Food  Chem  122:  1095-1101.  DOI:  10.1 016/j.foodchem.2010.03.090.
Luchese  CL,  Garrido  T,  Spada,  JC,  Tessaro  IC,  de la  Caba  K.  2018.  Development  and  characteri- zation  of  cassava  starch  films  incorporated  with blueberry  pomace.  Int  J  Biol  Macromol  106: 834-839.  DOI:  10.1016/j.ijbiomac.2017.08.083.
Ma  W,  Tang  CH,  Yin  SW,  Yang  XQ,  Wang  Q,  Liu F,
Wei  ZH.  2012a.  Characterization  of  gelatin- based  edible  films  incorporated  with  olive  oil. Food  Res  Int  49:  572-579.  DOI:  10.1016/j. foodres.2012.07.037.
Ma  W,  Tang  CH,  Yin  SW,  Yang  XQ,  Qi  JR,  Xia  N. 2012b.  Effect  of  homogenization  conditions  on properties  of  gelatin –olive  oil  composite  films.  J Food  Eng  113:  136-142.  DOI:  10.1016/j.jfood eng.2012.05.007.
Ma  Q,  Hu  D,  Wang  H,  Wang  L.  2016.  Tara  gum edible  film  incorporated  with  oleic  acid.  Food Hydrocolloid  56:  127-133.  DOI:  10.1016/j.food hyd.2015.11.033.
Mahmudatussa'adah  A,  Fardiaz  D,  Andarwulan  N, Kusnandar  F.  2014.  Karakteristik  warna  dan aktivitas  antioksidan  antosianin  ubi  jalar  ungu.  J Teknol  Industri  Pangan  25:  176-184.  DOI: 10.6066/jtip.2014.25.2.176.
Musso  YS,  Salgado  PR,  Mauri  AN.  2017.  Smart edible  films  based  on  gelatin  and  curcumin. Food  Hydrocolloid  66:  8-15.  DOI:  10.1016/j.food hyd.2016.11.007.
Pelissari  FM,  Andrade-Mahecha  MM,  Sobral  PJDA, Menegalli  FC.  2012.  Isolation  and  characteri- zation  of  the  flour  and  starch  of  plantain  bana- nas  ( Musa  paradisiaca ).  Starch ‐ Stärke  64:  382- 391.  DOI:  10.1002/star.201100133.
Pereira  VA,  de  Arruda  INQ,  Stefani  R.  2015.  Active chitosan/PVA  films  with  anthocyanins  from Brassica  oleraceae (red  cabbage)  as  time-tem- perature  indicators  for  application  in  intelligent food  packaging.  Food  Hydrocolloid  43:  180- 188.  DOI:  10.1016/j.foodhyd.2014.05.014.
Prietto  L,  Mirapalhete  TC,  Pinto  VZ,  Hoffmann  JF, Vanier  NL,  Lim  LT,  Dias  ARG,  Zavareze  EDR. 2017.  pH-sensitive  films  containing  anthocya- nins  extracted  from  black  bean  seed  coat  and red  cabbage.  LWT-Food  Sci  Technol  80:  492- 500.  DOI:  10.1016/j.lwt.2017.03.006.
Pradini  D,  Juwono  H,  Madurani  KA,  Kurniawan  F. 2018.  A  preliminary  study  of  identification  halal gelatin using quartz crystal  microbalance (QCM)  sensor.  Malaysian  J  Fundamental  Appl Sci  14:  325-330.  DOI:  10.11113/mjfas.v14n3.9 42.
Raghvendra,  Sharma  V,  Shakya  A,  Hedaytullah  MD, Arya  GS,  Mishra  A,  Gupta  AD,  Pachpute  AP, Patel  D.  2011.  Chemical  and  potential  aspects of  anthocyanins-a  water-soluble  vacuolar  flavo- noid  pigments  -  a  review.  Int  J  Pharm  Sci  Rev Res 6: 28-33.
Rattaya  S,  Benjakul  S,  Prodpran  T.  2009.  Pro- perties  of  fish  gelatin  film  incorporated  with seaweed  extract.  J  Food  Eng  95:  151-157. DOI:  10.1016/j.jfoodeng.2009.04.022.
Robertson  GL.  2013.  Food  Packaging:  Principles and  Practice.  414-421.  CRC  Press,  Boca Raton.
Rocca-Smith  JR,  Marcuzzo  E,  Karbowiak  T,  Centa J,  Giacometti  M,  Scapin  F,  Venir  E,  Sensidoni A,  Debeaufort  F.  2016.  Effect  of  lipid  incorpora- tion  on  functional  properties  of  wheat  gluten based  edible  films.  J  Cereal  Sci  69:  275-282. DOI:  10.1016/j.jcs.2016.04.001.
Stoll  L.  2015.  Development  and  application  of  active biodegradable  films  with  antioxidants  extracted from  wine  grape  pomace  [Thesis].  Porto  Alegre (Brasil):  Instituto  De  Ciência  E  Tecnologia  De Alimentos, Universidade Federal Do Rio Grande  Do  Sul.
Tongnuanchan  P,  Benjakul  S,  Prodpran  T.  2013.
Characteristics  and  antioxidant  activity  of  leaf essential  oil –incorporated  fish  gelatin  films  as affected  by  surfactants.  Int  J  Food  Sci  Technol 48: 2143-2149.  DOI:  10.1111/ijfs.12198.
Tongnuanchan  P,  Benjakul  S,  Prodpran  T,  Nilsuwan K.  2015.  Emulsion  film  based  on  fish  skin  gela- tin  and  palm  oil:  Physical,  structural,  and  ther- mal  properties.  Food  Hydrocolloid  48:  248-259. DOI:  10.1016/j.foodhyd.2015.02.025.
Wang  S,  Marcone  M,  Barbut  S,  Lim  LT.  2012.  The impact  of  anthocyanin ‐ rich  red  raspberry  extract (ARRE)  on  the  properties  of  edible  soy  protein isolate  (SPI)  films.  J  Food  Sci  77:  C497-C505. DOI:  10.1111/j.1750-3841.2012.02655.x.
Wang  Z,  Zhou  J,  Wang  XX,  Zhang  N,  Sun  XX,  Ma ZS.  2014.  The  effects  of  ultrasonic/microwave assisted  treatment  on  the  water  vapor  barrier properties  of  soybean  protein  isolate-based oleic  acid/stearic  acid  blend  edible  films.  Food Hydrocolloid  35:  51-58.  DOI:  10.1016/j.food hyd.2013.07.006.
Zhang  X,  Lu  S,  Chen  X.  2014.  A  visual  pH  sensing film  using  natural  dyes  from Bauhinia  blak eana Dunn .  Sensor  Actuat  B:  Chem  198:  268-273.
DOI:  10.1016/j.snb.2014.02.094.