## ANTIBACTERIAL ACTIVITY TEST OF EXTRACTS AND FRACTIONS OF ALGAE
Caulerpa racemosa FROM MANTEHAGE ISLAND WATERS OF NORTH MINAHASA AGAINST THE GROWTH OF Escherichia coli AND Staphylococcus aureus BACTERIA

## UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK DAN FRAKSI ALGA Caulerpa racemosa

## DARI PERAIRAN PULAU MANTEHAGE MINAHASA UTARA TERHADAP
PERTUMBUHAN BAKTERI Escherichia coli DAN Staphylococcus aureus
Yosefa E. H. Ritan 1) , Defny S. Wewengkang 1) , Jainer P. Siampa 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115 *etheldredaaritann26925@gmail.com

## ABSTRACT
Algae Caulerpa racemosa are able to produce chemical content that leave the potential to be antibacterial. The purpose of this study was to determine whether the extracts and fractions of algae Caulerpa racemosa had  antibacterial  activity  against  the  Gram-negative  bacteria  Escherichia  coli  and  the  Gram-positive bacteria Staphylococcus aureus. The sample was extracted using the maceration method with 95% ethanol and the fractionation method used was liquid-liquid fractionation. Antibacterial activity testing was carried out  using  the  disc  diffusion  agar  method.  The  results  obtained  from  the  antibacterial  activity  test  on Escherichia  coli  bacteria  produce  an  inhibition  zone  in  all  extracts  and  fractions  used  while Staphylococcus  aureus  bacteria  produced  an  inhibition  zone  for  all    extracts  and  fractions,  in  ethanol extract with inhibitory value 6.72mm, n-hexane fraction 7.53mm, chloroform fraction 6.93mm and fraction methanol 7.32mm, respectively. The extracts and fractions of algae Caulerpa racemosa samples showed no activity  against  Escherichia  coli,  while  Staphylococcus  aureus  has  performed  antibacterial  activity  with moderate category. The conclusion of this study, extracts and fractions of algae caulerpa racemosa had no antibacterial  activity  on  the  bacteria  Escherichia  coli  while  bacteria  Staphylococcus  aureus  had antibacterial activity with moderate inhibition.
Keywords : Algae Caulerpa racemosa, Antibacterial, Escherichia coli, Staphylococcus aureus.

## ABSTRAK
Alga Caulerpa  racemosa mampu  menghasilkan  kandungan  kimia  yang  berpotensi  sebagai  antibakteri. Tujuan  dari  penelitian  ini  yaitu  untuk  mengetahui  aktivitas  antibakteri    ekstrak  dan  fraksi  dari  alga Caulerpa racemosa di Perairan Pulau Mantehage Minahasa Utara terhadap bakteri Escherichia coli sebagai bakteri  Gram-negatif dan Staphylococcus aureus sebagai bakteri Gram-positif.  Sampel diekstraksi dengan menggunakan  metode  maserasi  dengan  pelarut  etanol  95%  dan  metode  fraksinasi  yang  digunakan  yaitu fraksinasi cair-cair. Pengujian aktivitas antibakteri yang dilakukan menggunakan metode difusi agar. Hasil yang  didapat  dari  uji  aktivitas  antibakteri  pada  bakteri Escherichia  coli tidak  menghasilkan  zona  hambat pada  semua  ekstrak  dan  fraksi  yang  digunakan  sedangkan  pada  bakteri Staphylococcus  aureus menghasilkan  zona  hambat  pada  semua  ekstrak  dan  fraksi  yaitu,  ekstrak  etanol  dengan  daya  hambat 6,72mm, fraksi n-heksan 7,53mm, fraksi kloroform 6,93mm dan fraksi metanol 7,32mm. Kesimpulan dari penelitian ini, ekstrak dan fraksi dari sampel alga Caulerpa racemosa tidak memiliki aktivitas pada bakteri Escherichia coli sedangkan pada bakteri Staphylococcus aureus memiliki aktivitas antibakteri dengan daya hambat yang sedang.
Kata Kunci : Alga Caulerpa racemosa , Antibakteri, Escherichia coli , staphylococcus aureus

## PENDAHULUAN
Alga  hijau  seperti  Caulerpa  racemosa merupakan  salah  satu  jenis  alga  hijau  yang hidup  menyebar  dibeberapa  perairan  di Indonesia.  Alga  Caulerpa  racemosa  memiliki ciri  –  ciri  seperti  thallus  yang  berwarna  hijau seperti  tanaman  rumput,  terdiri  dari  banyak cabang tegak dan pada puncak cabang terdapat bulatan-bulatan  seperti  anggur  (Yudasmara, 2014).    Alga  Caulerpa  racemosa  telah diketahui  memiliki  aktivitas  antibakteri  dilihat dari  uji  yang  telah  dilakukan  dimana  terdapat tanda  spektrum  luas  terhadap  bakteri  patogen Gram-negatif  dan  Gram-positif  yang  diuji dengan  zona  hambat  12-16  mm  (Kandhasamy dan Arunachalam, 2008).
Infeksi  yang  disebabkan  oleh  bakteri dapat  diobati  dengan  antibakteri.  Escherichia coli  dan  Staphylococcus  aureus  merupakan contoh  dari  bakteri  yang  dapat  menyebabkan infeksi  pada  manusia.  Bakteri  Staphylococcus aureus biasanya ditemukan di hidung, tenggorokan  dan  lapisan  luar  epidermis. Staphylococcus  aureus  merupakan  bakteri Gram-positif berbentuk bulat dan tumbuh pada suhu  optimum  37°C  (Wulandari,  2017). Infeksi  yang  menyebabkan  kerusakan  pada kulit atau luka yang terdapat pada organ tubuh dapat  terjadi  ketika  bakteri  Staphylococcus aureus  mengalahkan  mekanisme  pertahanan tubuh.  Ketika  bakteri  Staphylococcus  aureus masuk  ke  peredaran  darah  bakteri  ini  dapat menyebar  ke  organ  lain  dan  menyebabkan infeksi (Melki dkk., 2012).
Bakteri  Escherichia  coli  merupakan bakteri  normal  pada  usus  namun  bakteri  ini dapat  bersifat  patogen  jika  dalam  keadaan tidak  normal.  Bakteri  Escherichia  coli  pada keadaan  tidak  normal  dapat  menyebabkan beberapa penyakit seperti diare, infeksi saluran kemih,  pneumonia  (radang  paru-paru),  infeksi luka  terutama  di  dalam  abdomen  dan meningitis  atau  biasa  dikenal  dengan  radang selaput otak (Dima dkk., 2016).
Berdasarkan uraian diatas, maka peneliti  tertarik  untuk  melakukan  pengujian aktivitas  antibakteri  dari  alga Caulerpa racemosa yang  diambil  dari  perairan  Pulau Mantehage  pada  bakteri Escherichia  coli dan bakteri Staphylococcus aureus.

## METODOLOGI PENELITIAN
Bentuk, Waktu dan Tempat Penelitian Bentuk Penelitian
Penelitian  ini  berbentuk  eksperimen laboratorium  yang  dilakukan  dengan  cara
menguji  komponen  yang  diekstrak  dari  alga Caulerpa  racemosa sebagai  antibakteri  pada Escherichia coli dan Staphylococcus aureus .

## Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian  ini  dilaksanakan  pada  bulan Oktober  2020  sampai  Maret  2021  di  Program Studi  Farmasi  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu Pengetahuan Alam dan di Laboratorium Hama dan  Penyakit  Tumbuhan  Fakultas  Pertanian Universitas Sam Ratulangi.

## Alat dan Bahan Alat
Alat yang digunakan dalam penelitian  ini  yaitu  masker,  sarung  tangan, gunting, botol 600 ml, talenan, cool box , pisau, Erlenmeyer (Pyrex), corong, rotary evaporator, timbangan  analitik,  corong  pisah, gelas  ukur,  gelas  kimia  (Pyrex),  cawan  petri, autoklaf,  pinset,  pembakar  spritus, magnetic stirrer ,  pipet  tetes, micro  tubes , hot plate, vortex, batang pengaduk, Laminar air flow, rak tabung reaksi, tabung reaksi, lemari pendingin, 906ethanol906, mikropipet, mistar berskala.

## Bahan
Bahan-bahan  yang  digunakan  yaitu alga Caulerpa racemosa, bakteri uji Escherichia  coli dan Staphylococcus  aureus , etanol, akuades, metanol, n-heksan, kloroform , pepton,  natrium  klorida , ekstrak  daging  ( meat extract ), agar, kloramfenikol paper disc , kertas cakram  ( paper  disc) , tissue, aluminium  foil , kertas saring.

## Pengambilan Sampel
Sampel  alga Caulerpa  racemosa diambil  dari  perairan  Pulau  Mantehage menggunakan alat bantu (masker, snorkel, fins dan  tabung  oksigen).  Sampel  yang  diperoleh dimasukkan  ke  dalam zipper  lock  bag dan diletakkan  di  dalam cool  box ,  kemudian langsung dibawa ke Laboratorium
Farmakognosi  dan  Fitokimia,  Program  Studi Farmasi  Universitas  Sam  Ratulangi.  Sampel difoto  dan  diberi  label  serta  nomor  sampel, untuk selanjutnya dideterminasi.

## Ekstraksi Sampel
Ekstrak  alga Caulerpa  racemosa dibuat dengan cara maserasi. Sampel dibersihkan dan dipotong kecil-kecil dimasukkan ke dalam botol 600 ml, kemudian direndam dengan pelarut etanol sampai sampel terendam  semuanya  dan  dibiarkan  selama  24
jam. Sampel yang direndam disaring menggunakan  kertas  saring  menghasilkan filtrat  1  dan  debris  1.  Debris  1  kemudian diremaserasi  dengan  pelarut  etanol  sampai terendam  semuanya  dan  dibiarkan  selama  24 jam,  sampel  tersebut  disaring  menggunakan kertas saring menghasilkan filtrat 2 dan debris 2.  Debris  2  kemudian  diremaserasi  dengan pelarut  etanol  sampai  terendam  semuanya  dan dibiarkan  selama  24  jam,  sampel  tersebut disaring menggunakan kertas saring menghasilkan filtrat 3 dan debris 3. Filtrat 1,2, dan  3  dicampur  menjadi  satu  kemudian disaring, lalu dievaporasi menggunakan rotary evaporator pada suhu 40 ℃ hingga kering dan selanjutnya ditimbang menggunakan timbangan  analitik.  Selanjutnya  ekstrak  kasar alga Caulerpa  racemosa digunakan  dalam fraksinasi dan pengujian antibakteri (Silap dkk, 2020).

## Fraksinasi Sampel
Ekstrak kasar alga Caulerpa racemosa yang diperoleh dimasukkan ke dalam erlenmeyer,  kemudian  dilarutkan  dengan metanol 80% sebanyak 100 mL. Setelah larut, dimasukkan  ke  dalam  corong  pisah  dan ditambahkan  pelarut  n-heksan  sebanyak  100 mL  setelah  itu  dikocok  dalam  corong  pisah sampai  homogen.  Dibiarkan  sampai  terbentuk lapisan metanol dan lapisan n-heksan, kemudian  masing-masing  lapisan  ditampung dalam  wadah  yang  berbeda.  Lapisan  n-heksan kemudian  dievaporasi  menggunakan rotary evaporator hingga  kering,  lalu  ditimbang  dan diperoleh fraksi n-heksan. Selanjutnya, lapisan metanol  ditambahkan  akuades  sebanyak  100 mL kemudian dipartisi dengan pelarut kloroform dengan perbandingan 1:1 v/v dalam corong  pisah,  setelah  itu  dikocok  kembali sampai  homogen.  Dibiarkan  sampai  tebentuk dua  lapisan  yaitu  lapisan  metanol  dan kloroform,  kemudian  masing-masing  lapisan ditampung  dalam  wadah  yang  berbeda. Lapisan  kloroform  selanjutnya  dievaporasi menggunakan rotary evaporator hingga kering lalu  ditimbang  berat  sampel  dan  diperoleh fraksi  kloroform.  Lapisan  metanol  kemudian dievaporasi  menggunakan rotary  evaporator hingga  kering,  lalu  ditimbang  dan  diperoleh fraksi  metanol.  Ketiga  fraksi  yang  diperoleh akan  digunakan  dalam  pengujian  antibakteri. Rendemen-rendemen fraksi dihitung berdasarkan persamaan sebagai berikut:
𝑅𝑒𝑛𝑑𝑒𝑚𝑒𝑛 = 𝐵𝑒𝑟𝑎𝑡 ℎ𝑎𝑠𝑖𝑙 𝑒𝑘𝑡𝑟𝑎𝑘 𝐵𝑒𝑟𝑎𝑡 𝑒𝑘𝑡𝑟𝑎𝑘 𝑎𝑤𝑎𝑙 𝑥 100%

## Sterilisasi Alat
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian  aktivitas  antibakteri  ini  disterilkan terlebih  dahulu.  Alat-alat  gelas  disterilkan dengan  autoklaf  pada  suhu  121˚C  selama  15 menit,  pinset  dibakar  dengan  pembakaran  di atas  api  langsung  dan  media  disterilkan  di autoklaf  pada  suhu  121˚C  selama  15  menit (Ortez,2005).

## Pembuatan media cair B1
Pepton  0,5  g,  ekstrak  daging  ( meat extract )  0,3  g,  natrium  klorida  0,3  g,  dan aquades  sebanyak  100  mL  diaduk  sampai  rata kemudian  dibuat  homogen  menggunakan magnetic stirrer lalu diautoklaf pada suhu 121 ˚C  selama  15  menit,  ukur  pH  dengan menggunakan  kertas  pH.  Dipipet  1  mL  media cair  B1,  kemudian  masukkan  dalam  tabung reaksi dan tutup dengan aluminium foil . Media cair  B1  siap  digunakan  sebagai  media  kultur bakteri (Ortez, 2005)

## Kultur Bakteri
Media  cair  B1  yang  sudah  disiapkan sebelumnya,  ditambahkan  dengan  masing- masing bakteri yang sudah dikultur ( Escherichia  coli dan Staphylococcus  aureus ) dipipet  sebanyak  100  µL  kedalam  tabung reaksi yang berbeda. Tutup dengan aluminium foil tiap  tabung  reaksi  dan  dimasukkan kedalam inkubator selama 1x24 jam pada suhu 37 ˚C (Silap dkk, 2020).

## Pembuatan Kontrol Positif dan Kontrol Negatif
Kontrol positif dalam pengujian antibakteri  ini  menggunakan  kloramfenikol paper  disc. Kontrol  negatif  yang  digunakan dalam  penelitian  ini  yaitu  menggunakan pelarut metanol, dengan cara membuat larutan stok metanol dengan mengambil sebanyak 200 µL  metanol  kemudian  ditotolkan  pada  kertas cakram (Silap dkk, 2020).

## Pembuatan Larutan Uji
Larutan  uji  dibuat  dengan  cara  2  mg ekstrak kasar alga Caulerpa racemosa kemudian  dilarutkan  dalam  400μL  metanol sehingga  menghasilkan  konsentrasi  larutan  uji sebesar  250  μg/50  μL.  Perlakuan  yang  sama dilakukan pada fraksi n-heksan, fraksi kloroform dan fraksi metanol (Ortez, 2005).

## Pembuatan Media Agar B1
Pepton  0,5  g,  ekstrak  daging  ( meat extract ) 0,3 g, natrium klorida 0,3 g, agar 1,5 g dan  aquades  sebanyak  100  mL  diaduk  sampai rata  kemudian  dibuat  homogen  menggunakan magnetic stirrer lalu diautoklaf pada suhu 121 ˚C  selama  15  menit.  Lakukan  pengujian  pH dengan  kertas  pH.  Media  agar  B1  siap digunakan untuk uji aktivitas antibakteri (Silap dkk, 2020).

## Pengujian Aktivitas Antibakteri
Metode yang digunakan dalam penelitian  ini  yaitu  metode  difusi  agar  ( disc diffusion  Kirby  and  Bauer ).  Pada  pengujian aktivitas  antibakteri  ini,  cakram  ( paper  disc ) yang digunakan berukuran 6 mm dengan daya serap  50  µL  tiap  cakram.  Sampel  yang  telah ditentukan  kosentrasinya  250  µg/50  µL ditotolkan pada masing-masing cakram dengan menggunakan  mikropipet.  Untuk  media  agar B1  yang  sudah  diautoklaf  pada  suhu  121  ˚C selama  15  menit,  kemudian  dinginkan  sampai suhu 40 ˚C. Tuangkan media agar B1 ke cawan petri,  ambil  sebanyak  100  µL  bakteri  yang telah di kultur dalam tabung reaksi, dipipet dan diinokulasi  pada  media  agar  B1    dan  tunggu sampai  media  agar  B1  mengeras.  Masing- masing  cawan  petri  diberi  label  dan  nomor sampel  yang  sesuai.  Letakkan  kertas  cakram yang telah ditotolkan sampel uji alga Caulerpa racemosa dengan  pinset  kedalam  cawan  petri lalu  diinkubasi  selama  1x24  jam    (Ortez, 2005).

## Pengamatan  dan  Pengukuran  Diameter Zona Bening
Pengamatan  dilakukan  setelah  24  jam masa  inkubasi.  Daerah  pada  sekitaran  cakram menunjukkan kepekaan bakteri terhadap antibiotik atau bahan antibakteri yang digunakan  sebagai  bahan  uji  yang  dinyatakan dengan  diameter  zona  bening  yang  terbentuk. Diameter  zona  bening  diukur  menggunakkan mistar  berskala  dengan  cara  diukur  diameter zona  bening  horizontal  ditambahkan  dengan diameter  zona  bening  vertikal  lalu  dibagi  dua. Diameter  ≤  5  mm  memiliki  kekuatan  daya hambat  lemah,  6-10  mm  daya  hambat  sedang, 11-20 mm daya hambat kuat dan ≥21 mm daya hambat sangat kuat (Susanto dkk, 2012).

## HASIL DAN PEMBAHASAN Determinasi Sampel
Determinasi  alga Caulerpa  racemosa dilaksanakan  di  Program  Studi  Farmasi Fakultas  Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan Alam  Universitas  Sam  Ratulangi  Manado. Determinasi sampel dilakukan untuk mengetahui  apakah  sampel  yang  diambil  dan dilakukan  pengujian  aktivitas  antibakteri adalah sampel yang sesuai.

## Ekstraksi dan Fraksinasi Sampel
Sampel  alga Caulerpa  racemosa yang diambil dari pulau Mantehage, Minahasa Utara diekstraksi  menggunakan  metode  maserasi. Ekstraksi  menggunakan  metode  maserasi dikarenakan  pengerjaannya  mudah  dan  tidak menggunakan  panas  sehingga  kandungan kimia  pada  sampel  yang  tidak  tahan  akan panas  tidak  rusak.  Pada  proses  maserasi kandungan  kimia  pada  sampel  dapat  ditarik oleh  pelarut  dikarenakan  adanya  perbedaan konsentrasi  di  dalam  dan  di  luar  sel,  sehingga menyebabkan  dinding  sel  sampel  pecah karena  tidak  dapat  menahan    tekanan  dari perbedaan konsentari (Restiana, 2018).
Ekstraksi  alga Caulerpa  racemosa metode  maserasi  dengan  pelarut  etanol  95% dikarenakan  pelarut  etanol  dengan  konsentrasi 95% merupakan konsentrasi tinggi yang dapat menarik kandungan kimia pada sampel dengan baik dan pelarut etanol juga bersifat toksiksitas rendah,  sehingga  kandungan  kimia  pada sampel tidak rusak. Maserasi dilakukan selama 3  x  24  jam  dengan  pelarut  yang  sama. Pengulangan  maserasi  atau  remaserasi  pada sampel bertujuan untuk memaksimalkan penarikan  kandungan  kimia  pada  sampel  oleh pelarut  yang  digunakan  (Mujipradana  dkk, 2018).  Setelah  didapatkan  filtrat  dari  hasil maserasi,  filtrat  tersebut  dievaporasi  sehingga menghasilkan  ekstrak  kasar.  Penggunaan evaporator  bertujuan  untuk  menarik  pelarut pada hasil maserasi dengan suhu 40 derajat C, karena  suhu  yang  digunakan  harus  di  bawah titik  didih  pelarut  sehingga  tidak  merusak kandungan  kimia  pada  sampel  saat  proses evaporasi.
Hasil ekstrak kasar yang diperoleh dari proses  evaporasi,  selanjutnya  digunakan  ke tahap  fraksinasi.  Proses  fraksinasi  bertujuan untuk  memisahkan  kandungan  kimia  dari sampel  sesuai  dengan  tingkat  kepolarannya. Metode  fraksinasi  yang  digunakan  yaitu fraksinasi  cair-cair  dimana  disesuaikan  dengan perbedaan  tingkat  kepolaran  dari  tiap-tiap
pelarut.  Pelarut  yang  digunakan  yaitu  pelarut metanol sebagai pelarut polar, pelarut n-heksan sebagai pelarut non polar dan pelarut kloroform sebagai  pelarut  semi  polar.  Pada  proses fraksinasi,  pengocokan  dilakukan  karena  dapat memaksimalkan  dan  membantu  penarikan  dari setiap  pelarut  terhadap  kandungan  kimia  yang ada  pada  sampel.  Pada  proses  fraksinasi  akan terbentuk 2 lapisan dimana merupakan pemisah antara  pelarut-pelarut  yang  digunakan  dan  juga dapat  membantu  dalam  memisahkan  pelarut
satu  dengan  yang  lainnya  setelah  proses fraksinasi.  Pelarut  dengan  massa  jenis  yang lebih  besar  akan  berada  dibagian  bawah, sedangkan  pelarut  dengan  massa  jenis  kecil akan berada dibagian atas. Hasil fraksinasi yang diperoleh dari ketiga pelarut tersebut kemudian di evaporasi lagi sehingga menghasilkan ekstrak kasar  masing-masing  yang  akan  digunakan dalam  uji  aktivitas  antibakteri.  Hasil  ekstrak dari  fraksinasi  yang  di  evaporasi  dapat  dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Rendemen ekstrak dan fraksi alga Caulerpa racemosa No Sampel Berat (g) Rendemen (%) Warna 1 Ekstrak Etanol 9,64 6,88 Coklat pekat 2 Fraksi n-Heksan 0,45 9,00 Hijau Tua 3 Fraksi Kloroform 0,31 6,20 Coklat muda 4 Fraksi Metanol 3,01 60,20 Coklat muda
Jumlah ekstrak kasar memiliki bobot atau berat yang berbeda dikarenakan penggunaan pelarut yang  tingkat  kepolarannya  berbeda,  sehingga  kandungan  kimia  yang  tertarik  dalam  proses  fraksinasi tertarik sesuai tingkat kepolarannya

## Uji Antibakteri
Pengujian
aktivitas antibakteri menggunakan bakteri Escherichia coli sebagai bakteri
Gram-negatif dan bakteri Staphylococcus  aureus sebagai  bakteri  Gram- positif,  hal  ini  dikarenakan  untuk  melihat aktivitas antibakteri dari sampel alga Caulerpa racemosa dari  kedua  jenis  gram  bakteri. Metode  yang  digunakan  dalam  pengujian  ini yaitu metode difusi agar. Pemilihan
menggunakan  metode  difusi  agar  dikarenakan
metode  ini  mudah  dilakukan  dan  peralatannya mudah didapatkan. Pengujian aktivitas antibakteri  bertujuan  untuk  melihat  apakah sampel  alga Caulepra  racemosa dengan  suatu konsentrasi  yang  dipakai  memiliki  aktivitas antibakteri  untuk  kedua  baketri  uji  yang dipakai  (Eda,  2020).  Aktivitas  antibakteri  dari sampel  dapat  dilihat  dari  zona  hambat  yang akan terbentuk disekitar cakram.
Gambar a. Escherichia coli
Gambar b. Staphylococcus aureus
Gambar  1 .  Hasil  Uji  Aktivitas  Antibakteri  dari  Ekstrak  dan  Fraksi  Alga Caulerpa  racemosa :  (a) Escherichia  coli ,  (b) Staphylococcus  aureus. Ket:  (1)  Ekstrak  Etanol,  (2)  Fraksi
Kloroform,  (3)  Fraksi  n-Heksan,  (4)  Fraksi  Metanol,  (5)  Kontrol  Positif,  (6)  Kontrol Negatif.
Hasil  pengukuran  diameter  dan  rata- rata diameter pengamatan daya antibakteri dari sampel  alga Caulerpa  racemosa yang  dibagi menjadi  ekstrak  etanol, fraksi  n-heksan,  fraksi
kloroform  dan  fraksi  metanol  terhadap  bakteri Escherichia  coli dan Syaphylococcus  aureus ditunjukkan pada Tabel 2.
Tabel 2. Hasil pengukuran diameter zona hambat ekstrak dan fraksi alga Caulerpa racemosa terhadap Escherichia coli dan Staphylococcus aureus. Diameter Zona Hambat (mm) EtOH ChCl3 n-Hxn MeOH C+ C- Ec - - - - - - - - 21,7 - - - - - ∑ - - - - 𝒙̅ - - - - Sa 6,87 7,54 7,54 7,42 6,91 6,88 7,50 7,41 18,96 - 6,40 6,39 7,56 7,14 ∑ 20,18 20,81 22,60 21,97 𝒙̅ 6,72 6,93 7,53 7,32
Ket:  C+      =  Kontrol  Positif  ,  C-  =    Kontrol  Negatif,  Ec  =Bakteri Escherichia  coli ,Sa  =  Bakteri Staphylococcus aureus, mm= milimeter, ∑ = Jumlah total, 𝑥̅ = rata-rata
Pengamatan pada pengujian
antibakteri  ini  dilakukan  setelah  diinkubasi selama  1  x  24  jam.  Kontrol  positif  yang digunakan  yaitu  antibiotik  kloramfenikol  yang dimana  telah  diketahui  memiliki  spektrum  luas terhadap  bakteri  Gram-positif  dan  negatif, sedangkan  kontrol  negatif  yang  digunakan adalah  larutan  metanol.  Penggunaan  kontrol negatif  dan  kontrol  positif  dalam  pengujian antibakteri ini bertujuan untuk membandingkan zona hambat yang terbentuk selama pengujian.
Ekstrak  dan  fraksi  dari  alga Caulerpa racemosa tidak  menunjukan  aktivitas  terhadap bakteri Gram-negatif Escherichia coli . Sedangkan  pada  pengujian  aktivitas  antibakteri Staphylococcus aureus terdapat zona hambat di sekitaran  cakram  sebesar  7,32mm  pada  fraksi metanol,  7,53  mm  pada  fraksi  n-heksan,  6,93 mm  pada  fraksi  kloroform  dan  6,72  mm  pada ekstrak  etanol.  Hasil  zona  hambat  dari  tiap ekstrak  dan  fraksi  dikategorikan  daya  hambat sampel  alga Caulerpa  racemosa pada  bakteri Staphylococcus aureus sedang.
Dari hasil pengamatan dan pengukuran aktivitas  antibakteri  diketahui  bahwa  sampel alga Caulerpa  racemosa memiliki  aktivitas antibakteri  pada  bakteri Staphylococcus  aureus didukung  oleh  penelitian  yang  dilakukan Wulandari  (2017)  yang  berjudul  Uji  Aktivitas Antibakteri  Ekstrak  Kasar Caulerpa  racemosa dengan  Pelarut  dan  Bagian  Alga  yang  Berbeda Terhadap  Pertumbuhan Escherichia coli dan Staphylococcus  aureus ,  sampel  dari  alga
Caulerpa racemosa memiliki aktivitas antibakteri pada bakteri Staphylococcus aureus . Sedangkan  pada  bakteri Escherichia  coli tidak memiliki  aktivitas  antibakteri,  dikarenakan perbedaan  struktur  sel  pada  kedua  bakteri  ini. Bakteri Escherchia coli mempunyai dinding sel dengan  kandungan  lemak  yang  tinggi  dan struktur  dinding  sel  yang  berlapis  sedangkan bakteri Staphylococcus  aureus mempunyai struktur

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang telah  dilakukan  pada  ekstrak  dan  fraksi    alga Caulerpa  racemosa dari  Perairan  Pulau Mantehage  Minahasa  Utara  memiliki  aktivitas antibakteri  terhadap  bakteri Staphylococcus aureus dengan  kategori  sedang,  tetapi  tidak memiliki  aktivitas  antibakteri  terhadap  bakteri Escherichia coli .

## SARAN
Berdasarkan  hasil  dan  pembahasan aktivitas  antibakteri  ekstrak  dan  fraksi  alga Caulerpa racemosa , maka disarankan dilakukan  penelitian  lanjut  terhadap  alga Caulerpa  racemosa dengan  metode  pengujian yang lainnya .

## DAFTAR PUSTAKA
Dima,L.L.R.H,  dkk.  2016 . Uji  Aktivitas Antibakteri  Ekstrak  Daun  Kelor ( Moringa  oleifera L.)  Terhadap
Bakteri Escherichia  coli dan Staphylococcus  aureus .  Program Studi Farmasi FMIPA Universitas Sam Ratulangi: Manado.
Eda,  M,  I,  A.  2020.  Uji  Aktivitas  Antimikroba
Ekstrak  dan  Fraksi  Karang  Lunak (Sarcophyton  sp.)  Dari  Perairan Pulau  Bangka  Likupang  Terhadap Pertumbuhan Mikroba Staphylococcus aureus, Salmonella thypimurium  dan  Candida  albicas. FMIPA Universitas Sam Ratulangi: Manado
Melki., Ayu, E. P. W., dan Kurniati. 2012. Uji
Antibakteri  Ekstrak Gracilaria sp
(Rumput  Laut)  Terhadap  Bakteri
Escherichia coli dan Staphylococcus  aureus .  Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan  Alam.  Universitas Sriwijaya: Indralaya. Mpila,  D.  A.  2012.  Uji  Aktivitas  Antibakteri Ekstrak  Etanol  Daun  Mayana ( Coleus atropurpureus benth )
Terhadap  Staphylococcus  aureus, Escherichia  coli dan Pseudomas aeruginosa Secara Invitro . Program  Studi  Farmasi  FMIPA Universitas Sam Ratulangi: Manado. Ortez,  J,  H.  2005. Disk  Diffusion  testing  in manual of antimicrobial susceptibility  testing .  American
society for Microbiology.
Restiana,  F.R.2018.  Pengaruh  Lama  Maserasi
Terhadap  Kadar  Genistein  Pada Ekstraksi Tempe. [Skripsi]. Program Studi Farmasi Universitas Sanata Dharma: Yogyakarta.
Silap,  dkk.  2020.  Uji  Aktivitas  Antimikroba
Karang  Lunak Dendronephtya Sp .,  Yang  Dikoleksi  Dari  Desa Tumbak  Kecamatan  Pusomaen, Kabupaten  Minahasa  Tenggara Terhadap Escherichia Coli , Staphylococcus Aureus , Dan Candida Albicans . Jurnal Pharmacon UNSRAT. Vol. 9 (1).
Susanto, D., Sudrajat dan R. Ruga. 2012. Studi Kandungan Bahan Aktif Tumbuhan Meranti Merah ( Shorea  leprosula  Miq )  Sebagai
Sumber  Senyawa  Antibakteri . 11 (2) : 181-190.
Wulandari,  Z.  2017.  Uji  Aktivitas  Antibakteri
Ekstrak Kasar Caulerpa Racemosa Dengan  Pelarut  Dan Bagian Alga yang Berbeda Terhadap Pertumbuhan Escherichia Coli dan Staphylococcus  Aureus .  [ Skripsi ].
Universitas Brawijaya: Malang.
Yudasmara,  G,  A.  2014.  Budidaya  Anggur
Laut ( Caulerpa
Racemosa )
Melalui  Media  Tanaman Rigid Quadrant  Nets Berbahan  Bambu. Jurnal  Sains  dan Teknologi  Vol.3 No.2.