p-ISSN 2527-6751
Respon Histomorfometrik Aorta Tikus Putih terhadap Pemberian Berbagai Kadar Vco dan Olive Oil
White Rat Aorta Histomorfometrik Response to Giving Various Levels of VCO and Olive Oil
Enny Yusuf Wachidah Yuniwarti*, Muhammad Anwar Djaelani Departemen Biologi, Fakultas Sains dan Matematika, Universitas Diponegoro Jl. Prof. Soedarto, SH, Tembalang, Semarang *Email: enny_yusuf@yahoo.co.id
Diterima 20 Juni  2016 / Disetujui 19 Agustus 2016

## ABSTRAK
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengkaji  efek  asam  lemak  jenuh  yang  menggunakan  VCO  dan  efek  asam lemak  tak  jenuh  yang  menggunakan  olive  oil  terhadap  histomorfometrik  aorta  tikus  putih  yang  diamati melalui pengukuran ketebalan tunika intima. Penelitian ini menggunakan tikus putih sebanyak 25 ekor yang dibagi dalam lima perlakuan, yaitu P1 adalah kelompok kontrol, P2 merupakan kelompok yang diberi Olive Oil 10 mL/kg pakan, P3 merupakan kelompok yang diberi Olive Oil 5 mL/kg pakan, P4 merupakan kelompok yang  diberi  VCO  10  mL/kg  pakan  dan  P5  merupakan  kelompok  yang  diberi  VCO  5  mL/kg  pakan.  Tiap perlakuan  diulang  sebanyak  5  kali  ulangan.  Data tebal  tunika  intima  yang  didapat,  dianalisis  menggunakan analisis  of  varians (ANOVA)  dengan  design  penelitian  menggunakan  rancangan  acak  lengkap  dengan  lima perlakuan  dan  lima  ulangan.  Hasil  yang  didapat  menunjukkan  tidak  terdapat  beda  nyata  antar  perlakuan, sehingga  dapat  disimpulkan  bahwa  pemberian  olive  oil  maupun  virgin  coconut  oil  tidak  menimbulkan perbedaan respon histomorfometrik aorta tikus putih.
Kata kunci : tikus putih, tunika intima, olive oil, vco

## ABSTRACT
This  research  aimed  to  determine  differences  of  intimal  thickening  after  feeding  saturated  fatty  acid  and unsaturated  fatty  acid.  Elevated  level  of  fatty  acid  may  contribute  to  damage  of  intimal  thickening  use histomorphometric analysis  of  aorta.  This  research  used  25  white rat. The  method  applied  was  Completely Randomized Design in which the factor was five levels of VCO and Olive Oil namely P1, P2, P3, P4 and P5. P1was the control group, P2 was a group with 10 mL Olive Oil /kg feed. P3 was a group with 5 mL Olive Oil /kg feed. P4 was a group with 10 mL VCO /kg feed. P5 was a group with 5 mL VCO /kg feed.  Each group repeated five times. Feed and water were given ad libitum for four weeks. The result showed that there was no significant of intimal thickening between treatments.
Keywords : albino rat, tunica intima, VCO, Olive Oil

## PENDAHULUAN
Aorta  merupakan  pembuluh  darah  yang terdiri atas tiga lapisan, yang paling dalam adalah tunika intima atau tunika interna terdiri atas selapis sel  endotel  yang  membatasi  permukaan  dalam pembuluh.  Otot  polos  dan  jaringan  ikat  jarang halus  terdapat  di  bagian  sub  endotel.  Lapisan
berikutnya adalah tunika media yang tersusun atas otot  polos  melingkar,  diantara  otot  polos  terdapat kolagen,  elastin  dan  proteoglikan.  Tunika adventitia dipisahkan dengan tunika media melalui membran  elastika  tipis, terdiri  atas  serabut  elastin dan  kolagen  (Komolafe et  al .,  2013).  Metode analisis histomorfometrik aorta dapat digambarkan
melalui  ketebalan  tunika  intima  (Ageraek et  al ., 1999).
Asam  lemak  jenuh  merupakan  bagian terbesar  yang  terkandung  dalam  Virgin  Coconut Oil ( VCO),  selain  itu  juga  kaya  akan  antioksidan serta  mampu  menurunkan  kadar  trigliserid    dan kolesterol.  Komponen  unsaponifiable  seperti vitamin E dan polyphenol yang terdapat di dalam VCO mampu meningkatkan enzim-enzim antioksidan dan menurunkan kandungan peroksida (Lu  dan  Tan,  2009).  Beberapa  penelitian menunjukkan  bahwa  VCO  mampu  meningkatkan aktivitas  fagositosis  makrofag  pada  ayam  yang diinfeksi  virus  avian  influenza  (Yuniwarti et  al ., 2013).  Virgin  coconut  oil  mampu  meningkatkan antioksidan    (Nevin  dan  Rajamohan  2006),  juga menimbulkan  efek  antithrombotic  (Nevin  dan Rajamohan, 2007)..
Asam  oleat  merupakan  asam  lemak  tak jenuh  dan  terdapat  paling  banyak  pada  Olive  oil sehingga  termasuk  dalam  kelompok  MUFA  atau mono  unsaturated fatty  acid.  Kandungan  olive  oil yang  terdiri  atas  asam  lemak  dan  vitamin menyebabkan  olive  oil  berperan  pada  proses mineralisasi  dan  perkembangan  tulang,  serta berperan  sebagai  antioksidan  karena  adanya oleocanthal  dan  oleuropein  yang  serupa  dengan vitamin E (Saleh dan Hanan, 2011). Olive oil juga mengandung  komponen  fenol  yang  mempunyai efek positif terhadap beberapa parameter fisiologis seperti  lipoprotein  plasma,  kerusakan  oksidatif, inflamasi serta aktivitas antimikrobial (Cicerale et al ., 2010).
Diet lemak yang mengandung asam lemak jenuh  dan  asam  lemak  tak  jenuh  diperkirakan mempunyai  dampak  yang  berbeda  karena perbedaan  absorpsi  asam  lemak  tersebut  akan mempengaruhi  oksidasi,  pembentukan  energi  dan pembentukan  lemak  total  (Su  and  Jones,  1993). Triasilgliserol  atau  trigliserida  merupakan  lemak yang  paling  banyak  terdapat  dalam  tubuh  (Skeaff dan  Mann,  2014).  Peningkatan  trigliserid merupakan  penanda  bagi  terjadinya  kondisi  sakit atau  kelainan  metabolisme,  maka  peningkatan trigliserid  yang  terjadi  dapat  menyebabkan
pankreatitis ( Brown et al ., 2012). Infeksi pankreas dapat  memicu  terjadinya  aterosklerosis.  Proses infeksi dapat menyebabkan terjadinya aterosklerosis  melalui  inflamasi  yang  melibatkan pembuluh  darah.  Aterosklerosis  merupakan penebalan  dinding  arteri  atau  aorta  yang membentuk lesi. Lesi tersebut berupa lemak  yang dilapisi  jaringan  fibrosa,  yang  dapat  mengganggu aliran darah yang selanjutnya dapat menyebabkan kematian jaringan (Permana et al., 2013).
Berdasarkan hal tersebut maka perlu untuk diteliti  lebih  lanjut  mengenai  efek  asam  lemak jenuh  yang  menggunakan  VCO  dan  efek  asam lemak  tak  jenuh  yang  menggunakan  olive  oil terhadap histomorfometrik aorta tikus putih.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  tentang  efek  asam  lemak  jenuh dan  asam  lemak  tak  jenuh  terhadap  berbagai parameter  fisiologis  dilakukan  di  laboratorium Struktur  dan  Fungsi  Hewan,  Departemen  Biologi, FSM-UNDIP.  Penelitian  ini  menggunakan  tikus putih jantan sebanyak 25 ekor yang dibagi dalam 5 kelompok  perlakuan  yaitu  P1  adalah  kelompok kontrol,  P2  merupakan  kelompok  yang  diberi Olive  Oil  10  mL/kg  pakan,  P3  merupakan kelompok  yang  diberi  Olive  Oil  5  mL/kg  pakan, P4  merupakan  kelompok  yang  diberi  VCO  10 mL/kg  pakan  dan  P5  merupakan  kelompok  yang diberi  VCO  5  mL/kg  pakan.  Tiap  perlakuan diulang sebanyak 5 kali ulangan. Perlakuan selama 4  minggu.  Data  tebal  tunika  intima  yang  didapat dari  pengamatan  preparat  mikroanatomi  aorta melalui  mikroskop  yang  dilengkapi  kamera  dan dihubungkan  dengan  komputer.  Analisis  data menggunakan  analisis  of  varians  (ANOVA) dengan  rancangan  penelitian  menggunakan rancangan  acak  lengkap  dengan  lima  perlakuan dan lima ulangan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Berdasarkan hasil analisis data menunjukkan bahwa tebal tunika intima aorta tikus putih  kontrol  maupun  perlakuan,  baik  yang
menggunakan VCO maupun olive oil pada dosis 5 dan  10  mL/  kg  pakan  berbeda  tidak  nyata.  Hasil analisis  tebal  tunika  intima  tersebut  dapat  dilihat pada Gambar 1.
Perlakuan  vco  dan  olive  oil  tidak menunjukkan  adanya  tebal  tunika  intima  yang berbeda  antar  perlakuan  maupun  kontrol,  yang diamati melalui preparat mikroanatomi aorta tikus putih sebagaimana tampak pada Gambar 2.  Tebal tunika  intima  yang  tidak  berbeda  nyata  tersebut diduga  karena  VCO    meskipun  merupakan  asam lemak  jenuh  namun  mempunyai  kandungan terbesar  asam  laurat  yang  merupakan  rantai medium  dengan  panjang  C  12.  Telah  terjadi
sugesti  di  masyarakat  bila  mengkonsumsi  asam lemak  jenuh  maka  akan  meningkatkan  kolesterol dalam  darah.  Komponen  terbesar  VCO  adalah asam  lemak  jenuh  yang  mempunyai  rantai medium. Medium  chain  fatty  acid ini  akan  lebih mudah diabsorpsi dan selanjutnya akan lebih cepat menghasilkan  energi  dan  bukan  lemak.  Tidak terbentuknya  lemak  tubuh  secara  berlebihan  pada pemberian  vco  menyebabkan  perlakuan  dengan vco  tidak  menunjukkan  terjadinya  perbedaan perlemakan pada aorta yang dapat diamati melalui tebal tunika intima yang tidak berbeda nyata baik dengan kontrol maupun dengan perlakuan olive oil (Marina et al ., 2000).
Gambar 1. Tebal Tunika Intima Aorta Tikus Putih pada Akhir  Perlakuan
Keterangan :
P1: kelompok kontrol, P2 kelompok yang diberi Olive Oil 10 mL/kg pakan, P3 kelompok yang diberi Olive Oil 5 mL/kg pakan, P4 kelompok yang diberi VCO 10 mL/kg pakan dan P5 kelompok yang diberi VCO 5 mL/kg pakan.
Digesti  asam  lemak  jenuh  memerlukan garam  empedu  untuk  emulsifikasi  dan    lipase pankreas  untuk  digesti  tetapi  molekul  medium chain  trigliserid  dari  coconut  oil  sangat  mudah untuk  diabsorpsi  sehingga  tidak  memerlukan garam  bilus  maupun  enzime  lipase.  Asam  lemak bebas  yang  telah  didigesti  dan  monogliserid  akan langsung  masuk  ke  dalam  sel  mukosa  intestinum dan  selanjutnya  masuk  ke  dalam  mitokondria hepar  (Liau  et  al.,  2011).  Oksidasi  asam  lemak jenuh  melalui  rangkaian  yang  lebih  pendek dibanding  asam  lemak  tak  jenuh.  Urutan  proses oksidasi  asam  lemak  jenuh  diawali  dengan
oksidasi  Asil  KoA,  asam  lemak  jenuh  diaktifkan terlebih  dahulu  dengan  bantuan  enzim  Asil  KoA dehidrogenase  yang  terdapat  di  dalam  membran mitokondria. Enzim dehidrogenase akan membebaskan  2  atom  hidrogen  dari  gugus  asil untuk  membentuk  gugus  enoil  dalam  bentuk isomer  trans.  Asil  KoA  dehidrogenase  tidak mengandung  Fe  dan  memindahkan  elektron  ke ubiquinon  lewat  suatu  jalur  yang  diawali  oleh suatu  flavoprotein  yang  disebut  flavoprotein pemindah  elektron,  diikuti  oleh  flavoprotein  lain yang  membentuk  kompleks  dengan  Fe-sulfida (McGilvery dan Goldstein, 1996).
64±33 ±±± 111.45 109.16 111.77 112.81 110.87 107 108 109 110 111 112 113 114 P1 P2 P3 P4 P5 K et eb al an tu ni k a im ti m a (µ m )

## Gambar 2. Preparat Histologi Aorta Tikus Putih dengan Pewarnaan HE dan Perbesaran 100 X
Keterangan :
Tunika intima aorta tikus putih pada semua  perlakuan tampak mempunyai tebal tunika intima yang tidak berbeda nyata. Tidak tampak adanya akumulasi lipid intrasel,  maupun plak ateroma pada semua perlakuan. P1: kelompok kontrol, P2 kelompok yang diberi Olive Oil 10 mL/kg pakan, P3 kelompok yang diberi Olive Oil 5 mL/kg pakan, P4 kelompok yang diberi VCO 10 mL/kg pakan dan P5 kelompok yang diberi VCO 5 mL/kg pakan.
Olive  oil  merupakan  mono  unsaturated fatty  acid  (MUFA)  yang  mengandung  komponen phenol  terutama  hydroxytyrosol,  tyrosol,  dan oleuropein.  Olive  oil  juga  mempunyai  kandungan antioksidan  yang  besar  dan  adanya  antioksidan tersebut  melindungi  hilangnya  phenol.  Konsumsi olive  oil  akan  meningkatkan  HDL,  menurunkan LDL dan trigliserid, juga mempunyai efek proteksi terhadap  kerusakan  DNA  (Cicerale et  al., 2010). Infeksi diyakini sebagai stimulus inflamasi penting yang menyebabkan aterosklerosis. Proses inflamasi  dapat  terjadi  secara  langsung  atau  tidak langsung  melibatkan  pembuluh  darah  melalui hemostatik  dan  pemicu  inflamasi  sistemik (Permana et  al .,  2013).  Kandungan  fenol  pada Olive  Oil  dan  VCO  merupakan  antioksidan  yang akan  menghambat  kerusakan  sel  endotel  pada tunika  intima  sehingga  dapat  dicegah  terjadinya aterosklerosis (Kogilavani et al ., 2015).
Konsumsi VCO akan menurunkan komponen  lipid  yang  membahayakan  kesehatan seperti  menurunkan  kolesterol  total,  trigliserid,
phospholipid,  LDL,  VLDL  dan  meningkatkan konsentrasi  HDL.  Penelitian  lain  menunjukkan bahwa VCO mengandung komponen unsaponifiable seperti  vitamin  E  dan  polyphenol sehingga konsumsi VCO dapat meningkatkan level enzim  antioksidan  dan  menurunkan  kandungan peroksida  lemak.  Kandungan  asam  lemak  jenuh pada VCO akan membuat anti oksidan yang tinggi pada  VCO  menjadi  stabil  (Lu  dan  Tan,  2009). Berdasarkan  kandungan  fenol  yang  tinggi  pada Olive  Oil  dan  VCO  yang  mampu  menghambat aterosklerosis maka pemberian VCO dan Olive oil tidak  menyebabkan  terjadinya  aterosklerosis  yang dapat  diamati  melalui  tebal  tunika  intima  pada aorta tikus putih yang tidak berbeda nyata.

## SIMPULAN
Pengamatan  histomorfometrik  aorta  tikus putih  tidak  memberikan  respon  yang  berbeda terhadap pemberian berbagai kadar Virgin coconut oil dan Olive oil.

## DAFTAR PUSTAKA
Ageraek  M.,  Ingrid  B  Kristensen,  and  Erik  B Pedersen.  1999.  A  Histomorphometric
Method  For  Evaluating  Topographic Differences In Degree Of Early Atherosclerosis Within The Human Aorta. APMIS DOI: 10.1111/j.1699- 0463.1999.tb01484.x  Vol.  107,  Issue  7- 12March 1999 Pp 863–868.
Brown  W.  V.,  ,  J.  D.  Brunzell,  R  H.  Eckel,  N  J. Stone,. 2012. Severe hypertriglyceridemia.
Journal  of  Clinical  Lipidology  (2012)  6,
397–408.
Cicerale  S.,  Lucas  L.  and  R.  Keas.  2010.
Biological Activities of
Phenolic Compounds  Present  in  Virgin  Olive  Oil. Int.  J.  Mol.  Sci. 2010, 11 ,  458-479; doi:10.3390/ijms11020458
Kogilavani  Subermaniam,  Qodriyah  Haji  Mohd Saad,  Yusof  Kamisah,  and  Faizah Othman.  2015.  Effects  of  Virgin  Coconut Oil  on  the  Histomorphometric  Parameters in the Aortae and Hearts of Rats Fed with Repeatedly Heated Palm Oil. International Journal  of  Bioscience,  Biochemistry  and Bioinformatics  Vol  5,  Number  2,  March 2015  doi:10.17706/ijbbb.2015.v5.  120- 131.
Komolafe O. A., D. A. Ofusori, O. S. Adewole, A. A.  Ayoka,  and  O.  A.  Ayannuga.  2013. Histomorphometric Studies Of The Aorta, Pulmonary  Trunk  And  Left  Ventricle  Of Streptozotocin-Induced  Diabetic  Wistar Rats  Treated  With Momordica  Charantia Extract. Diabetologia Croatica 42-1, 2013
Lu  H.  and  Tan.,  2009.  A  Comparative  study  of storage  stability  in  virgin  coconut  oil  and extra  virgin  Olive  oil  upon  thermal treatment. International  Food  Research Journal 16: 343-354 (2009)
Liau,  K.M.,1  Yeong  Yeh  Lee,  Chee  Keong Chen,and  Aida  Hanum  G.  Rasool,  An Open-Label.,    Pilot  Study  to  Assess  the Efficacy and Safety of Virgin Coconut Oil in  Reducing  Visceral  Adiposity,  ISRN
Pharmacology,  Volume  2011,  Article  ID 949686, 7 pages doi:10.5402/2011/949686
Marina A.M., Y.B. Che Mana,and I. Amin. 2009. Virgin Coconut Oil Emerging Functional Food Oil. Food Science & Technology 20 (2009) 481-487
McGilvery  R.W.  dan  G.W.  Goldstein,  1996. Biokimia:  Suatu  Pendekatan  Fungsional, Airlangga University Press.
Nevin  K.G  and  T.  Rajamohan.  2006.  Virgin coconut  oil  supplemented  diet  increases the  antioxidant  status  in  rats.  Food Chemistry 99 (2006) 260–266.
Nevin K.G and T. Rajamohan. 2007. Influence of virgin  coconut  oil  on  blood  coagulation factors, lipid levels and LDL oxidation in cholesterol  fed  SpragueeDawley  rats.  e- Journal  of  Clinical  Nutrition  and Metabolism,  2007  European  Society  for Clinical  Nutrition  and  Metabolism. Published by Elsevier Ltd. All doi:10.1016/j.eclnm.2007.09.
Permana  R,  F.  Rizqi,  A.  Pradana,  I  Dewa  A.
Susilawati,  and  T.    Ermawati.  2013. Histomorphometrical Analysis of Coronary Atherosclerosis Lesions Formation  in  Rat  (Rattus  norvegicus) Model.  Journal  of  Dentistry  Indonesia 2013, Vol. 20, No. 3, 73-77
Saleh  N.K  and  H.  A  Saleh.  2011.  Olive  Oil effectively  mitigates  ovariectomy-induced osteoporosis in rats. BMC Complementary and  Alternative  Medicine 2011,  11:10 doi:10.1186/1472-6882-11-10. http://www.biomedcentral.com/1472- 6882/11/10
Skeaff C.M dan J.  Mann. 2014. Ilmu Gizi. Editor Jim  Mann  dan  A.  Stewart  Truswell.  Alih Bahasa  Andry  Hartono.  Penerbit  EGC. Indonesia.
Yuniwarti E.Y.W, W. Asmara, W.T. Artama,  and
C.R.  Tabbu,  2013.  Virgin  Coconut  Oil Meningkatkan Aktivitas Fagositosis
Makrofag  Pascavaksinasi  Flu  Burung.
Jurnal Veteriner Vol 14 No 2 Juni 2013