BIOTROPIKA Journal of Tropical Biology
https://biotropika.ub.ac.id/
Vol. 8  |  No. 3 | 2020 | DOI: 10.21776/ub.biotropika.2020.008.03.06

## SKRINING FITOKIMIA DAN PENETAPAN KANDUNGAN TOTAL FENOLIK EKSTRAK DAUN TUMBUHAN SAPU-SAPU (Baeckea frutescens L.)

## PHYTOCHEMICAL SCREENING AND DETERMINATION OF TOTAL PHENOLIC CONTENT OF PLANT LEAF EXTRACTS SAPU-SAPU (Baeckea frutescens L.)
Dewi Septia Ningsih 1) , Henri 1)* , Occa Roanisca 2) , Robby Gus Mahardika 2)

## ABSTRAK
Tumbuhan sapu-sapu (Baeckea frutescens L.) merupakan salah satu jenis keanekaragaman  hayati  yang  tumbuh  dan  persebarannya  cukup  banyak di  Indonesia.  B.  frutescens  L  diketahui  memiliki  senyawa  metabolit sekunder  aktif  yang  dapat  dimanfaatkan  sebagai  obat,  antibakteri,  dan antioksidan.  Penelitian  ini  dilakukan  untuk  menganalisis  kandungan senyawa metabolit sekunder yang terdapat pada B. frutescens L. Metode yang digunakan adalah ekstraksi dilanjutkan dengan pengujian fitokimia kualitatif  yang  terdiri  dari  tujuh  pengujian  yakni  uji  fenol,  tanin, flavonoid,  saponin,  alkaloid,  steroid  dan  terpenoid  serta  pengujian kuantitatif  yakni  pengujian  total  fenolik  ekstrak  B.  frutescens  L.  Hasil penelitian  menunjukkan  bahwa  didapatkan  persentase  bobot  rendemen ekstrak daun B. frutescens L. sebesar ekstrak n-heksan 5,39%, ekstrak etil asetat  14,54%  dan  ekstrak  etanol  yakni  19,81%.  Hasil  pengujian fitokimia  kualitatif  menujukkan  senyawa  fitokimia  yang  terkandung  di dalam  tumbuhan  B.  frutescens  L.  yakni  pada  ekstrak  n-heksan  hanya terdapat  senyawa  steroid  dan  pada  ekstrak  etil  asetat  terdapat  senyawa fenolik,  tanin,  flavonoid,  dan  alkaloid.  Selain  itu,  pada  ekstrak  etanol terdapat senyawa fenolik, tanin, flavonoid, saponin, steroid, dan alkaloid. Pengujian  total  fenolik  ekstrak  daun  tumbuhan  B.  frutescens  L.  untuk pelarut  etil  asetat  yakni  0,24%  dan  pelarut  etanol  yakni  sebesar  0,14% dihitung  terhadap  senyawa  fenol  asam  galat.  Hasil  penelitian  ini diharapkan  dapat  menjadi  informasi  untuk  penelitian  lebih  lanjut mengenai pemanfaatan kandungan metabolit sekunder B. frutescens L.
Kata kunci: Baeckea frutescens L., skrining fitokimia, total fenolik

## ABSTRACT
Sapu-sapu  plant  (Baeckea  frutescens  L.)  is  a  type  of  biodiversity  that grows and spreads quite a lot in Indonesia. B. frutescens L. is known to have  active  secondary  metabolite  compounds  that  can  be  used  as  a medicine,  antibacterial,  and  antioxidant.  This  study  was  conducted  to analyze the content of secondary metabolites found in B. frutescens L. The method  used  was  extraction,  followed  by  qualitative  phytochemical testing  consisting  of  seven  tests,  namely  phenol,  tannin,  flavonoid, saponins,  alkaloids,  steroids,  and  terpenoids  as  well  as  testing. quantitative, namely the total phenolic test of B. frutescens L. extract. The results  showed  that  the  yield  weight  percentage  of  B.  frutescens  L.  leaf extract  was  5.39%  n-hexane  extract,  14.54%  ethyl  acetate  extract,  and 19.81 ethanol extract. %. The results of qualitative phytochemical testing showed that the phytochemical compounds contained in the B. frutescens L.  plant, namely  the n-hexane  extract  contained  only  steroid  compounds and  ethyl  acetate  extract  contained  phenolic  compounds,  tannins, flavonoids,  and  alkaloids.  Besides,  the  ethanol  extract  contains  phenolic compounds,  tannins,  flavonoids,  saponins,  steroids,  and  alkaloids.  The total  phenolic  test  of  the  plant  leaf  extract  of  B.  frutescens  L.  for  ethyl
Diterima   : 13 Agustus 2020
Disetujui   : 29 Agustus 2020

## Afiliasi Penulis:
1) Program Studi Biologi,
Universitas Bangka Belitung, Bangka Belitung, Indonesia 2) Program Studi Kimia, Universitas Bangka Belitung,
Bangka Belitung, Indonesia

## Alamat Korespondensi:
* biology.henry@gmail.com

## Cara Sitasi:
Ningsih, DS, Henri, O. Roanisca,
& RG. Mahardika. 2020.
Skrining  fitokimia  dan  penetapan kandungan  total  fenolik  ekstrak daun tumbuhan Sapu-Sapu ( Baeckea  frutescens L.). Journal of  Tropical  Biology 8  (3):  178- 185.
acetate  solvent  was  0.24%  and  ethanol  solvent,  namely  0.14%,  was calculated for the phenol compound gallic acid. The results of this study are expected to provide information for further research on the utilization of the secondary metabolites content of B. frutescens L.
Keywords: Baeckea  frutescens  L., phenolic  compound,  secondary metabolites

## PENDAHULUAN
Tumbuhan menghasilkan senyawa metabolit
sekunder yang biasanya dimanfaatkan  dalam  industri  obat-obatan. Alkaloid, flavonoid, saponin, steroid, dan tanin merupakan  beberapa  golongan  senyawa  kimia yang  merupakan  hasil  metabolisme  sekunder pada  tumbuhan  [1].  Konstituen  kimiawi  yang berbeda  pada  tanaman  obat  memiliki  aktivitas biologis  yang  dapat  meningkatkan  kesehatan manusia melalui industri farmasi dan makanan, namun  juga  mewakili  nilai  penting  dalam industri  parfum,  agrokimia,  kosmetik  [2]. Metabolit  sekunder  tumbuhan  merupakan kelompok  senyawa  yang  sangat  besar  dengan berat  molekul  kecil,  yang  difungsikan  untuk tujuan perlindungan terhadap serangga, mikroba,  dan  herbivor.  Selain  itu,  berperan dalam  upaya  beradaptasi  dengan  kondisi lingkungan yang merugikan. Metabolit sekunder  tumbuhan  di  alam  ini  memainkan peran  penting  sebagai  antibakteri,  antijamur, antivirus, herbisida, dan insektisida [3].
Tumbuhan  memiliki  kemampuan  untuk mensintesis berbagai  metabolit sekunder beragam  struktur  dan  kerangka  karbon  yng begitu  kompleks.  Tumbuhan  tingkat  tinggi diketahui  mulai  dimanfaatkan  sekitar  14-28% ekstrak sebagai obat-obatan dan 74% diketahui memiliki  fungsional  lainnya  atau  penggunaan sebagai  obat  tradisional  [4].  Pemanfaatan tumbuhan sebagai obat sudah banyak dilakukan  akan  tetapi  ada  sekitar  250.000 spesies  tumbuhan  tertinggi  di  dunia,  hanya  5- 15% yang telah diperiksa senyawa bioaktifnya [5].
Tumbuhan  sapu-sapu  ( Baeckea  frutescens L.) merupakan salah satu jenis
keanekaragaman  hayati  yang  tumbuh  dan persebarannya  cukup  banyak  di  Indonesia. B.
frutescens L.  memiliki  nama  daerah  yang berbeda  seperti  ujung  atap  atau  jungrahab. Tumbuhan  ini  merupakan  tumbuhan  dari famili  Myrtaceae  yang  persebarannya  cukup luas.  Tumbuhan  ini  banyak  ditemukan  di daerah  berpasir  seperti  pantai  dan  kadang terdapat  pada  dataran  tinggi  dengan  kondisi tanah  yang  kurang  subur. B.  frutescens L.
merupakan  tumbuhan  semak-semak  berkayu menyerupai  pohon  cemara  yang  memiliki aroma  khas  [6].  Sehingga  tumbuhan  ini digolongkan  sebagai  tumbuhan  aromatik karena  aromanya  yang  khas.  Selain  itu, memiliki  karakter  secara  morfologi  berdaun halus,  berbentuk  sepeti  jarum  kecil,  dan merupakan tumbuhan perdu [7].
Tumbuhan B.  frutescens L.  merupakan salah  satu  jenis  tumbuhan  yang  memiliki senyawa  metabolit  sekunder  aktif.  Senyawa- senyawa turunan dari golongan flavanoid salah satunya yakni flavonon [8]. Namun, sejauh ini skrining  fitokimia B.  frutescens L.  masih belum  cukup  banyak  dilakukan  terutama  di Bangka Belitung. Skrining fitokimia merupakan  metode  sederhana  yang  sering digunakan  dan  merupakan  tahap  awal  untuk mengidentifikasi  atau  mengetahui  kandungan dan  golongan  senyawa  yang  terdapat  pada simplisia uji [1]. Perlunya dilakukan penelitian untuk mengetahui kandungan senyawa metabolit  sekunder  yang  terdapat  pada B. frutescens L.  sehingga  diharapkan  dapat menambah  data  kandungan  fitokimia B. frutescens L. yang ada di Bangka Belitung dan dapat menjadi informasi untuk penelitian lebih lanjut  mengenai  pemanfaatan  kandungan metabolit sekundernya.

## METODE PENELITIAN
Pengambilan sampel. Pengambilan sampel penelitian  dilakukan  pada  kawasan  Hutan Kerangas  Area  Pantai  Lintas  Timur  Bangka Belitung. Sampel yang diambil berupa seluruh bagian  daun B.  frutescens L.  dan  selanjutnya dicuci  menggunakan  air  mengalir  serta ditiriskan. Sampel dikeringkan dengan menggunakan oven pada suhu 50ºC selama 2 x 24  jam,  kemudian  sampel  tersebut  dihaluskan dengan menggunakan blender .
Ekstraksi  sampel. Simplisia  dari  daun B. frutescens L.yang  digunakan  sebanyak  300  g kemudian  dilakukan  maserasi  dengan  metode maserasi  bertingkat  menggunakan  pelarut n - heksan,  etil  asetat  dan  etanol  (teknis).  Metode maserasi dilakukan dengan merendam simplisia  dalam  suatu  pelarut.  Remaserasi dilakukan  selama  1  x  24  jam  sambil  sesekali
diaduk,  kemudian  maserat  dipisahkan  dari residu  menggunakan  corong Buchner yang selanjutnya diuapkan dengan rotary evaporator pada  suhu  50ºC.  Persentase  bobot rendemen  ekstrak  dihitung  mengacu  pada rumus:
% 𝑅𝑒𝑛𝑑𝑒𝑚𝑒𝑛 = Bobot ekstrak kental (g) Bobot sebelum dieksrtak (g) 𝑥 100%

## Skrining Fitokimia
Uji  fenol. Uji    fenol  dilakukan  dengan sebanyak  0,5  g  ekstrak  ditambahkan  3-4  tetes FeCl 3 terjadinya  perubahan  warna  hitam kebiruan  hingga  hitam  pekat  menunjukkan adanya kandungan fenol [9].
Uji  tanin. Uji  tanin  dilakukan  dengan sebanyak  0,5  gram  ekstrak  ditambahkan dengan  10  mL  air  panas,  dan  ditetesi  dengan FeCl 3 1% terbentuknya warna hijau kehitaman menunjukkan adanya kandungan tanin [10].
Uji  flavonoid. Uji  flavonoid  dilakukan dengan sebanyak 0,5 g ekstrak dan ditambahkan etanol sebanyak 5 mL, setelah itu dilakukan pemanasan ±5 menit dan ditambahkan HCl pekat sebanyak 10 tetes  dan 0,2  gram  serbuk  magnesium.  Sehingga terbentuknya  warna  hitam  kemerahan,  kuning atau jingga menunjukkan hasil positif flavonoid [11].
Uji  saponin. Sebanyak  0,5  gram  ekstrak dimasukkan ke dalam tabung reaksi kemudian ditambahkan  dengan  akuades  yang  telah dipanaskan  sebelumnya  sebanyak  10  mL. Campuran dikocok kuat kurang lebih selama 1 menit. Selanjutnya didiamkan selama 10 menit dan  diamati  buih  atau  busa  yang  terbentuk yang menandakan hasil positif saponin [11].
Uji alkaloid. Uji alkaloid dilakukan dengan sebanyak 0,5 g ekstrak kemudian ditambahkan kloroform sebanyak 2 ml, amonia sebanyak 10 ml  serta  10  tetes  H 2 SO 4 .  Campuran  dikocok dan  dibiarkan  hingga  membentuk  dua  lapisan. Lapisan  H 2 SO 4 yang  terbentuk  dipindahkan dalam  tiga  tabung  reaksi  dengan  volume masing-masing  tabung  2,5  ml.  Ketiga  larutan diuji  dengan  pereaksi  Mayer,  Dragendorf,  dan Wagner.  Hasil  positif  pereaksi  Mayer  ditandai dengan  terbentuknya  endapan  putih,  pada pereaksi Dragendorf terdapat endapan berwarna  merah  atau  jingga  sedangkan  untuk pereaksi  Wagner  terdapat  endapan  berwarna coklat [10].
Uji  steroid  dan  terpenoid. Sebanyak  0,5g ekstrak  dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi yang  kemudian  ditambahkan  H 2 SO 4 pekat sebanyak  2  ml.  Larutan  dikocok  perlahan  dan
dibiarkan  beberapa  menit.  Warna  biru  sampai hijau  menunjukkan  hasil  positif  uji  steroid sedangkan  untuk  warna  merah  kecoklatan sampai  ungu  menunjukkan  hasil  positif  uji terpenoid [12].
Uji kuantitatif fenol. Ekstrak sebanyak 10 mg  dilarutkan  dengan  10  mL  metanol kemudian diambil sebanyak 0,5 mL dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi  yang kemudian ditambahkan dengan 0,5 mL reagen Folin-Ciocalteau  dan  2,5  mL  larutan  Na 2 CO 3 7,5%.  Tabung  reaksi  divortex  selama  1  menit dan  diinkubasi  pada  suhu  ruang  selama  15 menit.
Absorbansi diukur dengan spektrofotometri UV-Vis pada panjang gelombang  maksimum  756  nm.  Kadar  total fenolik dinyatakan dalam mg Equivalen Asam Gallat /g [13].

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Rendemen  Baeckea  frutescens  L. Metode maserasi yang digunakan memiliki keuntungan yaitu  peralatan  dan  prosedur  yang  digunakan sangat  sederhana,  pelaksanaannya  mudah karena  tidak  memerlukan  perlakuan  khusus yaitu  hanya  dengan  merendam  sampel  dalam pelarut  pengekstraksi  sambil  sesekali  diaduk serta  metode  ini  dapat  menghindari  rusaknya senyawa  yang  bersifat  termolabil.  Pemilihan metode ekstraksi sangat mempengaruhi rendemen  yang  dihasilkan,  rendemen  ekstrak daun tumbuhan B. frutescens L. yakni sebesar; ekstrak n -heksan  5,39%,  ekstrak  etil  asetat 14,54%  dan  ekstrak  etanol  yakni  19,81% (Tabel 1).
Rendemen hasil ekstraksi dengan menggunakan  tiga  jenis  pelarut  yang  berbeda menghasilkan  persentase  rendemen  yang berbeda. Banyaknya hasil rendemen dipengaruhi  oleh  sifat  kelarutan  komponen bioaktifnya.  Hasil  persentase  rendemen  daun tumbuhan B. frutescens L. tertinggi didapatkan pada  penggunaan  pelarut  etanol,  sehingga kemungkinan  besar  senyawa  bioaktif  yang terdapat  pada  ekstrak  daun B.  frutescens L. lebih  bersifat  polar.  Etanol  merupakan  pelarut ideal yang sering digunakan karena merupakan pelarut  pengekstraksi  salah  satu  yang  mampu mengekstrak  senyawa  fitokimia  dalam  jumlah yang  lebih  banyak  dan  hampir  untuk  semua senyawa  dengan  berat  molekul  rendah  seperti saponin dan flavonoid [14].
Tabel 1. Hasil rendemen B. frutescens L.
Pelarut Ekstrak (g) Rendemen (%) n -heksan 16,17 5,39 Etil asetat 43,62 14,54 Etanol 59,45 19,81
Hasil penelitian menunjukkan bahwa pelarut  yang  berbeda  menghasilkan  hasil rendemen yang bervariasi. Hal ini dikarenakan perbedaan  polaritas  pelarut  ekstraksi  dapat menyebabkan  variasi  yang  luas  pada  kadar senyawa bioaktif dalam ekstrak. Hasil ekstraksi  yang  lebih  tinggi  diamati  pada ekstrak  etanol,  dibandingkan  dengan  ekstrak etil  asetat  dan n- heksan,  yang  menunjukkan bahwa  efisiensi  ekstraksi  lebih  menyukai pelarut  yang  sangat  polar.  Hal  ini  dapat dikaitkan  dengan  kelarutan  yang  lebih  tinggi dari senyawa ini dalam etanol daripada pelarut lain  yang  diuji  [15].  Pelarut  ekstraksi berpengaruh pada hasil ekstraksi dan kandungan  senyawa  bioaktif,  sehingga  secara signifikan  memengaruhi  aktivitas  biologis ekstrak [16].
Pelarut  etanol  memiliki  berat  molekul rendah  sehingga  mampu  membuat  ikatan hidrogen  bercampur  dan  larut  dengan  H 2 O sampai dengan kelarutan yang tidak terhingga. Etanol  memiliki  gugus  polar  yang  sangat kuat dikarenakan  terdapat  gugus  hidroksil  (-OH) dengan  nilai  keelektronegatifan  oksigen  yang sangat  tinggi  dan  mampu  mengikat  hidrogen sehingga dapat berikatan dengan molekul polar dan  molekul  ion.  Hasil  rendemen  yang menggunakan  pelarut  etil  asetat  lebih  kecil apabila dibandingkan pelarut etanol dikarenakan  adanya  gugus metoksi  yang  tidak begitu kuat, sehingga menyebabkan terbentuknya  ikatan  hidrogen.  Nilai  rendemen terkecil didapatkan pada pelarut n -heksana, hal ini menunjukkan bahwa senyawa bioaktif yang bersifat  non  polar  pada  sampel  daun B. frutescens L. jumlahnya sedikit [17].
Senyawa fitokimia ekstrak n-heksan, etil asetat,  dan  etanol. Uji  fitokimia  dilakukan untuk  mengetahui golongan  senyawa  yang terkandung pada daun tumbuhan sapu-sapu ( B. frutescens L).  Berdasarkan  hasil  penelitian yang telah dilakukan diketahui bahwa golongan  senyawa  fitokimia  (Tabel  2)  yang terkandung di dalam tumbuhan B. frutescens L yakni;  pada  ekstrak n -heksan  hanya  terdapat steroid,  pada  ekstrak  etil  asetat  terdapat fenolik, tanin, flavonoid, dan alkaloid, sedangkan  pada  ekstrak  etanol  terdapat
fenolik,  tanin,  flavonoid,  saponin,  steroid,  dan alkaloid.
Hasil yang sama ditunjukkan pada penelitian sebelumnya bahwa senyawa fitokimia yang terkandung dalam ekstrak daun B.  frutescens L.  yakni  fenolik,  flavonoid,  dan glikosida [18]. Pengujian pada ekstrak daun B. frutescens L.  yang  menggunakan  pelarut  etil asetat  dan  pelarut  etanol  diketahui  terdapat senyawa fenolik. Senyawa fenolik ditunjukkan terjadinya perubahan warna hitam pada sampel uji  namun  tidak  terlalu  pekat  setelah ditambahkan  dengan  FeCl 3 1%.  Senyawa fenolik  dinyatakan  positif  apabila  terdapat perubahan warna hitam kebiruan hingga hitam pekat  pada  saat  penambahan  FeCl 3 1%  [19] dan  FeCl 3 dapat  bereaksi  dengan  gugus  –OH aromatis [20].
Tabel 2. Hasil uji skrining B. frutescens L.
Uji Fitokimia Hasil n - heksan etil asetat etanol Fenolik - + + Tanin - + + Flavonoid - + + Saponin - - - Steroid + - - Terpenoid - + + Alkaloid Dragendorf - - - Mayer + - - Wagner - + -
Ket: (+) uji dinyatakan mengandung senyawa fitokimia (-) uji dinyatakan tidak mengandung senyawa fitokimia
Hasil  pengujian  pada  ekstrak  daun B. frutescens L.  menggunakan  pelarut  etil  asetat dan  etanol  menunjukkan  terdapatnya  senyawa tanin.  Senyawa  tanin  dibuktikan  dengan terjadinya perubahan warna ekstrak yakni hijau kehitaman.  Hasil  dinyatakan  positif  apabila terjadi  perubahan  warna  hijau  kehitaman  pada saat penambahan FeCl 3 1% [11]. Hal ini karena penambahan  FeCl 3 pada  tanin  akan  dapat membentuk  senyawa  kompleks  dengan  ion Fe 3+ [21].
Senyawa  flavonoid  dinyatakan  positif apabila  pada  saat  pengujian  terjadi  perubahan warna  hitam  kemerahan,  kuning,  atau  jingga [11].  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa ekstrak  etil  asetat  dan  etanol  pada  daun B. frutescens L. mengandung senyawa flavonoid, hal  tersebut  dibuktikan  dengan adanya perubahan  warna  hitam  kemerahan  pada ekstrak  yang  diuji.  Penambahan  HCl  dan bubuk  magnesium,  perubahan  warna  ekstrak
menjadi  hitam  kemerahan  menunjukkan  hasil positif  flovonoid  [22].  Tujuan  penambahan beberapa  tetes  larutan  HCl  dan  bubuk  Mg adalah  untuk  mereduksi  inti  benzopiron  yang terdapat  dalam  struktur  flavonoid  sehingga terbentuk  garam  flavilium  berwarna  merah atau jingga [21].
Warna  biru  sampai  hijau  menunjukkan hasil positif senyawa steroid, sedangkan untuk warna merah kecoklatan sampai ungu menunjukkan  hasil  positif  uji  terpenoid  [12]. Berdasarkan  hasil  pengujian  pada  daun B. frutescens L.  yang  mengandung  senyawa steroid pada ekstrak etil asetat dan etanol. Hal ini  ditunjukkan  dengan  terjadinya  perubahan warna  ekstrak  menjadi  biru  sampai  hijau, sedangkan untuk pengujian terpenoid menunjukkan  hasil  positif  pada  ekstrak  etil asetat  dan  etanol  daun B.  frutescens L. Perubahan  warna  yang  terjadi  diakibatkan adanya  senyawa  terpenoid  dan  steroid, sehingga    terjadi  perubahan  warna  ungu  dan biru-hijau  dan  bereaksi  dengan  H 2 SO 4 . Perbedaan  warna  yang  dihasilkan  disebabkan oleh  adanya  perbedaan  gugus  pada  atom  C-4 [20].
Pengujian  fitokimia  senyawa  alkaloid dilakukan  dengan  menggunakan  tiga  pereaksi yakni  pereaksi  Dragendorff,  pereaksi  Mayer, dan pereaksi Wagner. Pengujian menggunakan ketiga pereaksi ini untuk mengetahui perubahan warna setelah dilakukannya pengujian  sifat  kelarutannya.  Hasil  pengujian yang  telah  dilakukan  menunjukkan  ekstrak  n- heksan  daun B.  frutescens L.  mengandung senyawa  alkaloid.  Hasil  positif  ditunjukkan pada  pegujian  dengan  menggunakan  pereaksi Mayer yakni terdapat endapan berwarna putih. Pengujian positif alkaloid menggunakan pereaksi  Mayer  ditandai  dengan  terbentuknya endapan  putih  pada  larutan  [11].  Pengujian senyawa  alkaloid  dengan  pereaksi  Mayer, menunjukkan hasil positif dengan terbentuknya  endapan  berwarna  putih.  Pada identifikasi  alkaloid  dengan  pereaksi  Mayer, nitrogen  dalam  alkaloid  diperkirakan  bereaksi dengan  ion  logam  kalium  (K + )  dari  Kalium tetraiodomerkurat  (II)  menghasilkan  kompleks pengendapan kalium-alkaloid. Alkaloid diketahui  terdiri  dari  atom  nitrogen  yang memiliki  elektron  pasangan  bebas.  Elektron pasangan  elektron  bebas  diperiksa  untuk membentuk  ikatan  koordinat  kovalen  dengan ion logam [23].
Hasil positif pegujian alkaloid juga didapatkan  pada  ekstrak  etil  asetat  daun B. frutescens L.  dengan  menggunakan  pereaksi
Wagner  yakni  terdapat  endapan  berwarna coklat.  Pengujian    dengan  pereaksi  Wagner dinayatakan positif dengan ditandai terbentukanya  endapat  berwarna  coklat  pada larutan  [11].  Endapan  yang  terdapat  pada  uji alkaloid dengan menggunakan pereaksi Wagner  adalah  kalium-alkaloid.  Iodin  yang bereaksi dengan ion I - dari kalium iodida pada pembuatan pereaksi Wagner menghasilkan ion I 3- yang  berwarna  coklat.  Endapan  yang dihasilkan  diduga  merupakan  ion  logam  K + yang membentuk suatu ikatan kovalen dengan nitrogen  pada  alkaloid  sehingga  terjadi pembentukan secara kompleks kalium-alkaloid yang dapat mengendap [10].
Hasil  di  atas  menunjukkan  senyawa metabolit sekunder yang dihasilkan dipengaruhi oleh jenis pelarut yang digunakan pada  saat  proses  ekstraksi.  Ekstraksi  dapat dilakukan berdasarkan sifat kepolarannya pada suatu  zat  dalam  pelarut  saat  dilakukan  proses ekstraksi.  Pada  umumnya  pelaut  polar  seperti air, metanol, etanol, butanol, asam asetat, asam format  dan  lainnya  dapat  melarutkan  senyawa yang  bersifat  polar.  Senyawa  non  polar  tentu juga  hanya  akan  larut  menggunakan  pelarut yang bersifat non-polar seperti eter, kloroform, dan  heksan.  Jenis  pelarut  dan  kualitas  pelarut menentukan  suatu  keberhasilan  proses  dalam ekstraksi.  Pelarut  yang  digunakan  harus mampu  melarutkan  suatu  zat  yang  dibutuhkan atau diinginkan, mempunyai titik yang rendah, murah,  tidak  toksik  dan  tidak  mudah  terbakar [24].  Senyawa-senyawa  yang  bersifat  polar merupakan  senyawa  golongan  fenol  (fenolik, flavonoid, tanin, saponin, dan lignan), sedangkan  alkaloid  dan  steroid  merupakan senyawa yang bersifat non polar [17].
Kadar  total  fenolik. Berdasarkan  hasil pengukuran absorbansi masing-masing konsentrasi larutan standar asam galat menggunakan spektrofotometer UV-Vis, diperoleh  nilai  absorbansi  yang  diolah  dengan menggunakan Microsoft  Excel ,  didapatkan kurva  kalibrasi  larutan  standar  asam  galat berupa  grafik  kurva  konsentrasi  versus absorbansi.  Kurva  persamaan  garis  linear untuk  penetapan  kadar  total  fenolik  pada ekstrak etil asetat dan etanol daun B. frutescens L. seperti pada Gambar 1.
Berdasarkan  grafik  yang  didapat  diketahui bahwa  kurva  baku  asam  galat  ditetapkan dengan menggunakan persamaan regresi linier, yang menyatakan hubungan antara konsentrasi asam  galat  dinyatakan  sebagai  x  dan absorbansi  asam  galat  dengan  pereaksi  Folin- Ciocalteu dinyatakan sebagai y. Pada
penelitian ini diperoleh persamaan kurva baku asam galat pada konsentrasi 0, 0,2 dan 0,5 ppm yaitu y = 6,82221x +0,7048 dengan r 2 = 0,978.
Gambar 1 . Kurva kalibrasi asam galat
Berdasarkan hasil perhitungan dengan persamaan  regresi  larutan  standar  diperoleh kadar total fenolik ekstrak daun B. frutescens L untuk  pelarut  etil  asetat  yakni  0,24%  dan pelarut  etanol  yakni    sebesar  0,14%  dihitung terhadap senyawa fenol asam galat (Tabel 3).
Berdasarkan hasil tersebut diketahui bahwa senyawa  fenolik  pada  ekstrak  etil  asetat  lebih besar dibandingkan dengan ekstrak etanol. Hal ini  dikarenakan  berat  molekul  fenolik  yang mendekati  berat  molekul  etil  asetat  sehingga lebih  mudah  pelarut  etil  asetat  untuk mengekstrak  senyawa  fenolik. Tingginya  total polifenol pada pelarut etil asetat diduga adanya golongan  polifenol  yang  memiliki  berat molekul  yang  sama  dengan  pelarut  etil  asetat seperti  tanin  dan  flavanol  [25].  Senyawa fenolik  umumnya  lebih  mudah  diekstrak  oleh pelarut organik yang bersifat semi polar [26].
Tabel 3. Hasil pengukuran kadar total fenolik
Sampel Absorbansi Total fenolik (mgGAE/g) Total fenolik (%) EEADS 0,535 0,0024 mgGAE/g 0,24% EEDS 0,804 0,0014 mgGAE/g 0,14%
Ket: EEADS: Ekstrak Etil Asetat Daun Sapu-Sapu EADS: Ekstrak Etanol Daun Sapu-Sapu
Asam  galat  digunakan  sebagai  larutan standar  dikarenakan  sebagai  salah  satu  fenol alami  dan  stabil.  Asam  galat  merupakan senyawa fenolik turunan asam hidroksibenzoat yang merupakan golongan asam fenol sederhana  [13].  Asam  galat  sebagai  senyawa tripenol  dengan  berat  molekul  rendah  yang terjadi  secara  alami  telah  banyak  digunakan sebagai  aktivitas  biologis  dan  farmakologis yang beragam, seperti antioksidan [27].
Pengujian  dengan  menggunakan  standar asam  galat  yang  direaksikan  dengan  reagen Folin-Ciocalteu  akan  menghasilkan  warna kuning  yang  menandakan bahwa  ekstrak  yang diuji  mengandung  fenol,  yang  kemudian ditambahkan dengan larutan Na 2 CO 3 menghasilkan warna biru. Penambahan
Na 2 CO 3 bertujuan  agar  fenolik  dapat  beraksi dengan  reagen  Folin-Ciocalteu.  Senyawa fenolik  hanya  akan  bereaksi  dengan  reagen Folin-Ciocalteu  dalam  suasana  basa  agar terjadinya  suatu  disosiasi  proton  antara senyawa  fenolik  menjadi  ion  fenolat  dengan adanya  penambahan larutan Na 2 CO 3 [28].

## KESIMPULAN
Senyawa  fitokimia  yang  terkandung  dalam ekstrak  daun Baeckea  frutescens L.  yakni steroid  dan  alkaloid  pada  ekstrak  n-heksan. Senyawa  fenolik,  flavonoid,  tanin,  terpenoid dan alkaloid pada ekstrak etil asetat, sedangkan senyawa  fenolik,  flavonoid,  terpenoid  dan tanin pada ekstrak etanol. Hasil pengujian total fenolik ekstrak daun B. frutescens L. diketahui hasilnya pada pelarut etil asetat sebesar 0,24% dan  pelarut  etanol    sebesar  0,14%  dihitung terhadap  senyawa  fenol  asam  galat.  Penelitian ini  dapat  menjadi  dasar  uji  lanjut  mengenai identifikasi kandungan fitokimia secara kuantitatif, uji aktivitas antibakteri, antimalaria maupun antioksidan.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terima  kasih  sebesar-besarnya  kepada  Kepala Laboratorium Biologi dan
Kepala Laboratorium MIPA Dasar Universitas Bangka Belitung atas segala fasilitas laboratorium yang digunakan selama penelitian ini berlangsung.

## DAFTAR PUSTAKA
[1] Dewatisari WF, Rumiyanti L, Rakhmawati  I  (2018)  Rendemen  dan skrining  fitokimia  pada  ekstrak  daun Sanseviera sp. Jurnal Penelitian Pertanian Terapan 17: 197–202.
[2] Hassan  BAR  (2010)  Medicinal  plants (Importance  and  Uses).  Pharmaceutica Analytica Acta 3: 4172.
[3] Miguel  MG  (2010)  Antioxidant  and  anti- inflammatory activities of essential oils: A short review. Molecules 15: 9252–9287.
[4] Cavoski  I,  Caboni  P,  Miano  T  (2011) Natural pesticides and future perspectives. In Margarita Stoytcheva (Eds.), Pesticides
in the Modern World - Pesticides Use and Management.  Rijeka:  InTech  Europe,  pp 169–190.
[5] Juárez  P  (2014)  Plant-derived  anticancer agents:  a  promising  treatment  for  bone metastasis. BoneKEy Reports 3: 1–8.
[6] Supandi  M,  Wibowo  MA,  Zaharah  TA (2019)  Karakterisasi  minyak  atsiri  daun Ujung Atap ( Baeckea Frustescens L) dari hutan  Desa  Sungai  Nanjung  Kabupaten Ketapang  Kalbar.  Indonesian  Journal  of Pure and Applied Chemistry 2: 74–83.
[7] Murningsih  T  (2009)  Studi  fitokimia Baeckea  frutescens L:  Pengaruh  faktor lingkungan  terhadap  komposisi  kimia minyak atsiri. Berita Biologi 9: 569–576.
[8] Murningsih
T (2010) Aktivitas antioksidan  dan  analisis  kimia  ekstrak daun  Jungrahab  ( Baeckea  frutescens L.). Berita Biologi 10: 129–134.
[9] Azizah  Z,  Wati  SW  (2018)  Skrining fitokimia  dan  penetapan  kadar  flavonoid total ekstrak etanol daun Pare
( Momordica charantia L.). Jurnal Farmasi Higea 10: 163–172.
[10] Marliana  SD,  Suryanti  V,  Suyono  (2005)
Skrining fitokimia dan analisis kromatografi  lapis  tipis  komponen  kimia buah  labu  siam  ( Sechium  edule Jacq. Swartz.) dalam ekstrak etanol. Biofarmasi 3: 26–31.
[11] Tarukbua  YSF,  Queljoe  ED,  Bodhi  W (2018) Skrining fitokimia dan uji toksisitas  ekstrak  etanol  daun  Brotowali ( Tinospora  crispa (L.)  Hook  F.  &  T) dengan  metode  Brine  Shrimp  Lethality Test  (BSLT).  PHARMACON  Jurnal Ilmiah Farmasi-UNSRAT 7: 330–337.
[12] Kursia S, Lebang JS, Taebe B, Burhan A, Rahim  WO,  Nursamsiar  (2016)  Uji aktivitas  antibakteri  ekstrak  etilasetat daun Sirih Hijau ( Piper betle L.) terhadap bakteri Staphylococcus epidermidis . Indonesian  Journal  of  Pharmaceutical Science and Technology 3: 72–77.
[13] Ahmad  AR,  Juwita  J,  Ratulangi  SAD (2015)  Penetapan  kadar  fenolik  dan flavonoid  total  ekstrak  metanol  buah  dan daun  Patikala  ( Etlingera  elatior (Jack) R.M.SM).  Pharmaceutical  Sciences  and Research 2: 1–10.
[14] Arifianti  L,  Oktarina  RD,  Kusumawati  I (2014) Pengaruh jenis pelarut pengekstraksi  terhadap  kadar  sinensetin dalam ekstrak daun Orthosiphon stamineus Benth. E-Journal Planto
Husada 2: 1–4.
[15] Do  QD,  Angkawijaya  AE,  Tran-Nguyen PL,  Huynh  LH,  Soetaredjo  FE,  Ismadji  S (2014)  Effect  of  extraction  solvent  on total  phenol  content,  total  flavonoid content,  and  antioxidant  activity  of Limnophila  aromatica .  Journal  of  Food and Drug Analysis 22: 296–302.
[16] Ngo  TV,  Scarlett  CJ,  Bowyer  MC,  Ngo PD, Vuong QV (2017) Impact of different extraction solvents on bioactive compounds and antioxidant capacity from the root of Salacia chinensis L. Journal of Food Quality 1–8.
[17] Romadanu  R,  Hanggita  S,  Lestari  S (2014)  Pengujian  aktivitas  antioksidan ekstrak  bunga  Lotus  ( Nelubo  nucifera ). Jurnal FishtecH 3: 1–7.
[18] Razmavar  S,  Abdulla  MA,  Ismail  SB, Hassandarvish  P  (2014)  Antibacterial activity  of  leaf  extracts  of Baeckea frutescens against  methicillin-resistant
Staphylococcus aureus . BioMed Research International 1–5.
[19] Habibi AI, Firmansyah RA, Setyawati SM (2018)  Skrining  fitokimia  ekstrak  n- heksan  korteks  batang  Salam  ( Syzygium polyanthum ). Indonesian Journal of Chemical Science 7: 1–4.
[20] Haryati  N,  Saleh  C,  Erwin  (2015)  Uji toksisitas dan aktivitas antibakteri ekstrak daun  merah  tanaman  Pucuk  Merah ( Syzygium  myrtifolium Walp.)  terhadap bakteri Staphylococcus aureus dan
Escherichia
coli . Jurnal Kimia
Mulawarman 13: 35–40.
[21] Ergina,  Nuryanti  S,  Pursitasari  ID  (2014) Uji kualitatif senyawa metabolit sekunder pada  daun  Palado  ( Agave  angustifolia ) yang  diekstraksi  dengan  pelarut  air  dan etanol.  Jurnal  Akademika  Kimia  3:  165– 172.
[22] Rumagit  HM,  Runtuwene  MRJ,  Sudewi S,  Kimia  J,  Manado  FU  (2015)  Uji fitokimia dan uji aktivitas antioksidan dari ekstrak  spons Lamellodysidea  herbacea . PHARMACON:  Jurnal  Ilmiah  Farmasi– UNSRAT 4: 183–192.
[23] Parbuntari  H,  Prestica  Y,  Gunawan  R, Nurman MN, Adella F (2018) Preliminary phytochemical screening (qualitative analysis)  of  cacao  leaves  ( Theobroma cacao L.).  EKSAKTA:  Berkala  Ilmiah Bidang MIPA 19: 40–45.
[24] Mukhriani  (2014)  Esktraksi  pemisahan senyawa  dan  identifikasi  senyawa  aktif. Jurnal Kesehatan 7: 361–367.
[25] Nur  A,  Astawan  M  (2011)  Kapasitas
antioksidan  bawang  Dayak  ( Eleutherine palmifolia )  dalam  bentuk  segar,  simplisia dan  keripik,  pada  pelarut  nonpolar, semipolar  dan  polar.  Skripsi.  Institut Pertanian  Bogor,  Departemen  Ilmu  dan Teknologi Pangan.
[26] Yanuarti  R,  Nurjanah  N,  Anwar  E, Hidayat  T  (2017)  Profil  fenolik  dan aktivitas  antioksidan  dari  ekstrak  rumput laut Turbinaria  conoides dan Eucheuma cottonii . JPHPI 20: 230–237.
[27] Badhani  B,  Sharma  N,  Kakkar  R  (2015) Gallic  acid:  A  versatile  antioxidant  with promising  therapeutic  and  industrial applications. RSC Advances. Royal
Society of Chemistry 5: 27540–27557.
[28] Alfian  R,  Susanti  H  (2012)  Penetapan kadar  fenolik  total  ekstrak  metanol kelopak  bunga  Rosella  Merah  ( Hibiscus sabdariffa Linn)  dengan  variasi  tempat tumbuh  secara  spektofotometri.  Jurnal Ilmiah Kefarmasian 2: 73–80.