*) Peneliti  pada  Balai  Besar  Riset Pengolahan  Produk  dan  Bioteknologi  Kelautan  dan  Perikanan; Email: idjanuar@gmail.com

## KORELASI KANDUNGAN FUKOSANTIN DARI Turbinaria sp. TERHADAP NUTRIEN LAUT DI PANTAI BINUANGEUN DAN KRAKAL
Hedi Indra Januar *) dan Thamrin Wikanta *)

## ABSTRAK
Pigmen  fukosantin  merupakan  senyawa  potensial  di  bidang  nutrasetikal.  Pigmen  ini  banyak terdapat  pada  alga,  salah  satunya  dalam  Turbinaria  sp. yang  umum  ditemukan  di  perairan  pesisir Indonesia.  Untuk  memaksimalkan  produksi  fukosantin  dalam  upaya  pengembangan  industri nutrasetik al  di  wilayah  pesisir,  perlu  dik etahui  parameter  lingk ungan  yang  optimal  untuk biosintesisnya.  Pada  tinjauan  pustaka,  telah  diketahui  bahwa  nutrien  nitrogen  dan  atau  fosfat berpengaruh  besar  terhadap  pertumbuhan  alga  di  laut.  Berdasarkan  hal  tersebut,  maka  makalah ini  bertujuan  untuk  menemukan  lingkungan  optimal  bagi  Turbinaria  sp.  dalam  memproduksi fukosantin,  berdasarkan  analisis  korelasi.  Data  yang  dikorelasikan  merupakan  fukosantin Turbinaria  sp.  dari  perairan  pesisir  pantai  Krakal  (Yogyakarta)  dan  Binuangeun  (Banten).  Kadar fukosantin  di  tiap  sampel  diperbandingkan  berdasarkan  puncak  areanya  pada  kromatogram dari  injeksi  1  mg  ekstrak  n-heksana  Turbinaria  sp.  pada  sistem  kromatografi  cair  kinerja  tinggi. Hasil  analisis  menunjukkan  bahwa  area  puncak  fukosantin  berbeda  secara  nyata  pada  variasi lokasi  pengambilan  sampel (P  =  7,99  x  10 -6 ),  waktu  pengambilannya  (P  =  6  x  10 -3 ),  dan  interaksi keduanya  (P  =  3  x  10 -3 ).  Sementara  analisis  korelasi  menunjukkan  bahwa  interaksi  kadar  fosfat dan suhu dapat menjadi prediktor yang berkorelasi kuat (R = 0,986)  dan signifikan (P = 1,09 x 10 7 ) terhadap  area  puncak  fukosantin  (R 2 =  96,5%).  Hasil  ini  selaras  dengan  pembatas  pertumbuhan alga  di  laut  dan  fungsi  proteksi  pigmen  sebagai  proteksi  radiasi  ultraviolet.  Oleh  karena  itu,  maka pemilihan  tempat  produksi  fukosantin  akan  optimal  di  muara  limpasan  wilayah  pertanian  yang dapat  mengandung  fosfat  dalam  jumlah  tinggi.
ABSTRACT: Correlation between fucoxanthin contents in Turbinaria sp. and  sea  water nutrients at Binuangeun and Krakal Coasts. By: Hedi Indra Januar and Thamrin Wikanta
Fucoxanthin  pigment  is a  potential  compound  in nutraceutical.  It  is  commonly found  in  algae such  as  in  Turbinaria  sp.,  a  very  abundant  species  in  Indonesian  coastal.  To  maximize  the production  of  fucoxanthin  for  the  development  of  nutraceutical  industry  in  the  coastal  area,  it  is important to identify the optimal environmental parameters for its biosynthesis. It has been reported that nitrogen and or phosphate nutrients affect the growth of algae. Therefore, this paper aimed to obtain  an  optimal  environment  for  Turbinaria  sp.  to  produce  fucoxanthin  based  on  correlation analysis.  Correlated  data  were  fucoxanthin  isolated  from  Turbinaria  sp.  that  was  collected  from Krakal (Yogyakarta) and Binuangeun (Banten) coasts. Fucoxanthin contents in each sample were compared  based  on the  peak areas  in  chromatogram after 1 mg injection  of  n-hexane  extract of T. decurrrens in the HPLC system. The analysis results showed that the peak areas of fucoxanthin were significantly  different among sampling locations (P = 7.99 x 10 -6 ), sampling  periods (P = 6 x 10 -3 ) and interaction of both (P = 3 x 10 -3 ). Whereas the correlation analysis revealed that interaction between phosphate and temperature could be a predictor that strongly (R = 0.986) and significantly correlated (P = 1.09 x 10 -7 ) with the peak areas of fucoxanthin (R 2 = 96.5%). These results were in line with growth limiting factor in seawater and  the function of fucoxanthin as  ultraviolet protector. Based on these results, it is suggested that the suitable location for fucoxanthin production is in the area of agricultural run-off  that contains  an  elevated concentration of dissolved phosphate.
KEYWORDS: fucoxanthin, Turbinaria sp., sea  water  nutrient

## PENDAHULUAN
Pigmen fukosantin merupakan salah satu pigmen karotenoid  bioaktif  dari  alga  yang  potensial  untuk dikembangkan sebagai bahan nutrasetikal. Bentuk formulasi dari senyawa ini telah dipasarkan sebagai
produk komersial, karena memiliki aktivitas sebagai penurun  berat badan (Anon., 2009; 2010 a ; 2010 b ). Selain itu, senyawa yang merupakan provitamin A ini juga telah lama diketahui memiliki bioaktivitas sebagai antioksidan  dan  antikarsinogenik  yang  mampu menetralisir radikal bebas (Harborne, 1987). Walaupun
pada alga terdapat beberapa jenis senyawa karotenoid lainnya, akan tetapi pigmen fukosantin merupakan senyawa mayor yang memiliki bioaktivitas antioksidan (Yan  et  al.,  1999).  Salah  satu  makroalga  yang memiliki kandungan karotenoid yang tinggi adalah golongan alga coklat yaitu Turbinaria sp. Biota ini dapat tumbuh  alami  di  kawasan  pesisir  Indonesia.  Oleh karena itulah, pengembangan Turbinaria sp. dengan cara budidaya secara massal dan dilanjutkan dengan pengolahan menjadi bahan baku nutrasetikal dapat menjadi sumber ekonomi alternatif di wilayah pesisir.
Pada  alga  komersial  yang  digunakan  sebagai bahan pangan seperti agar dan karaginan (kelompok metabolit primer) nutrifikasi air laut telah diketahui sangat berguna dalam mempercepat pertumbuhan budidayanya (Anon., 2008). Oleh karena itu, hal yang sama diduga terjadi juga pada metabolit sekunder seperti fukosantin. Sebagai biota yang hidup di air, produksi  metabolit  primer  maupun  sekunder  dari m ak roalga  dipengaruhi  ol eh  nutri en  y ang mempengaruhi kesuburan perairan. Hal inilah yang mendasari  penulisan  makalah  ini.  Sebagai  studi kasus, dalam makalah ini dibuat penelaahan korelasi antara konsentrasi senyawa fukosantin  dari Turbinaria sp. di wilayah perairan pesisir Binuangeun (Banten) dan Krakal (Yogyakarta) dengan kondisi nutrien dan beberapa parameter kualitas perairan lainnya. Jika korelasi ini diketahui, maka pemilihan area potensial di  suatu  wilayah  pesisir  untuk  pengembangan nutrasetikal dari alga tersebut dapat diketahui hanya berdasarkan uji parameter kimia airnya, yang relatif lebih  cepat  dan  mudah  dibandingkan  dengan  uji penentuan kadar fukosantin.
SENYAWA FUKOSANTIN  DARI ALGA Turbinaria sp.
Data senyawa fukosantin diambil berdasarkan pada penelitian  Wikanta  et  al.  (2004;  2005),  dari  biota Turbinaria sp. (Gambar 1) dengan sebanyak empat kali pengambilan  sampel (April  dan Agustus  pada tahun 2004 serta 2005) dari kawasan pesisir pantai Krakal dan Binuangeun.
Pada  ekstrak  kasar  dengan  menggunakan  n- heksana  dari  Turbinaria  sp.  terdapat  aktiv itas antioksidan kuat, yang selanjutnya diketahui bahwa sumber  dari  aktiv itas  terdapat  pada  senyawa fukosantin (Wikanta et al., 2005). Chasanah et  al. (2007) menerangkan bahwa senyawa fukosantin dapat teridentifikasi  sebagai  puncak  di  menit  ke  20,5  di sistem kromatografi cair kinerja tinggi menggunakan fasa  diam  C18  dan  fasa  gerak  gradien  air  dan asetonitril (Gambar 2). Karakteristik spektroskopis dari senyawa ini adalah UV-Vis yang maksimum pada panjang  gelombang  440 nm dengan  berat molekul m/z 658 (Blunt & Blunt, 2008).
Fukosantin  tersebut  merupakan  senyawa  yang terbentuk (biosintesis) dari reaksi desaturasi senyawa phytoene yang terbentuk dari GGPP (Geranyl Genanyl Pyrophosphate), seperti pada Gambar 3. Konfigurasi struktur fukosantin dapat dilihat pada Gambar 4.
Struktur fukosantin  adalah unik, sehingga memiliki bioaktivitas tinggi karena adanya ikatan gugus 5,6– monoepoksida (a dalam Gambar 4) dan ikatan allenic yang tidak umum (b dalam Gambar 4) Maeda et al.
Gambar 1. Biota Turbinaria sp.
(2008).  Kedua  ikatan  tersebut  diperkirakan  dapat menetralisir  radikal  bebas  melalui  mekanisme pem ecahan  rantai  bebas  dan  singlet  oksigen quenching (Hall & Cuppert 1997 dalam Januar et al., 2004).  Kandungan  fukosantin  diperbandingkan berdasarkan luas area puncaknya pada kromatogram HPLC  yang  akan  sebanding  dengan  kadarnya (Romero et al., 2004). Luas area puncak fukosantin dari fraksi n-heksana Turbinaria sp. Binuangeun dan Krakal dapat dilihat pada Tabel 1.
Luas area puncak pada suatu kromatogram akan sebanding  dengan  konsentrasi  senyawa  yang bersesuaian (Srinubabu et al., 2006). Oleh karena itulah jika dibandingkan, maka luas area fukosantin akan sebanding dengan perbandingan konsentrasi senyawa tersebut pada masing-masing sampel (Tabel 1). Pada penelitian tersebut, %RSD (Relative Standard Deviation) dari tiap ulangan analisis area fukosantin dari  masing-masing  sampel  cukup  besar.  Secara teoritis, tingginya nilai ketidakpastian  pada proses
Gambar 2. Kromatogram senyawa fukosantin (3) dalam fraksi n-heksana Turbinaria sp. (Sumber: Chasanah et al., 2007).
Gambar 3. Skema biosintesis fukosantin dari GGPP (Sumber: Liang et al., 2006).
GGPP Pitopen Lisopen α -Karoten β -Karoten Anterasantin Zeasantin Violasantin Diadinosantin Fukosantin
Gambar 4. Struktur senyawa fukosantin dari Turbinaria sp. (a: ikatan gugus 5,6-monoepoksida; b: ikatan allenic yang tidak umum; Sumber: Blunt & Blunt, 2008).
penetapan area puncak kromatogram mengakibatkan variasi  hasil  analisis  yang  cukup  besar.  Variasi tersebut dapat bersumber dari beberapa macam faktor ketidakpastian.  Pada  analisis  spektroskopi,  faktor efisiensi ekstraksi serta derivatisasi merupakan faktor yang  sulit  dikontrol  dan  dapat  menyebabkan perbedaan yang cukup besar (Romero et al., 2004). Hal  inilah  yang  menyebabkan  secara  umum  nilai %RSD dari ulangan masing-masing perlakuan seperti yang  diperlihatkan  pada  Tabel  1  lebih  dari  10%.
Tabel 1. Luas area puncak fukosantin dari ekstrak kasar n-heksana Turbinaria sp. Binuangeun dan Krakal
Namun, pengujian Kruskal-Wallis menunjukkan bahwa tidak  terdapat  perbedaan  yang  nyata  antara  tiap ulangan (P = 0,694), sehingga penelaahan korelasi layak dilakukan.
KUALITAS PERAIRAN PANTAI BINUANGEUN DAN KRAKAL
Secara umum, analisis parameter perairan yang diambil dari habitat Turbinaria sp. yaitu  salinitas, pH,
Sumber: Wikanta et al. (2004; 2005).
Binuangeun Agustus 2004 33,425 25,432 30,145 29,667 4017,85 13,54 Juli 2005 38,761 31,342 29,432 33,178 4928,15 14,85 Krakal Agustus 2004 102,034 95,431 124,532 107,332 15256,84 14,21 April 2005 70,656 67,549 54,318 64,174 8676,05 13,52 SD %RSD Lokasi Wa ktu sa mpling Area  Fukosa ntin 2 1 3 Ra ta -rata
Tabel 2. Parameter lingkungan lokasi pengambilan sampel di Pantai Binuangeun dan Krakal
Sumber: Wikanta et al. (2004; 2005).
Lokasi W aktu sam pling Ulangan Salinitas (ppt) pH Suhu ( 0 C) Fosfat (ppm) Nitrat (ppm) Nitrit (ppm ) Amonia (ppm) Agustus 2004 1 33 8,00 29 < 0,001 0,020 < 0,001 < 0,001 2 33 8,20 29 < 0,001 0,010 < 0,001 < 0,001 3 33 8,10 29 < 0,001 0,020 < 0,001 < 0,001 Juli 2005 1 33 8,40 29 < 0,001 0,020 < 0,001 < 0,001 2 33 8,30 29 < 0,001 0,020 < 0,001 < 0,001 3 33 8,30 29 < 0,001 0,010 < 0,001 < 0,001 Agustus 2004 1 33 8,55 29 0,110 0,070 0,007 0,080 2 33 8,53 29 0,120 0,100 0,007 0,090 3 33 8,55 29 0,140 0,060 0,007 0,090 April 2005 1 33 8,20 28 0,080 0,010 0,006 0,002 2 33 8,10 27 0,100 0,010 0,003 0,002 3 33 8,10 26 0,070 0,020 0,006 0,001 Binuangeun Krakal
dan suhu tidak berbeda jauh antara kedua lokasi dan waktu  pengambilan  sampel  (Tabel  2).  Perbedaan mendasar di antara kedua lokasi adalah tingkat nutrien yang ada di lingkungannya. Tingkat nutrien untuk fosfat umumnya  tidak  lebih  dari  0,1  ppm,  amonia  tidak melebihi 0,02 ppm, nitrat tidak melebihi 0,1 ppm, dan nitrit  tidak  melebihi  0,001  ppm  (Effendi,  2003). Perairan Pantai Binuangeun, pada saat pengambilan sampel  di  bulan  Agustus  2004  maupun  Juli  2005 terlihat miskin akan unsur hara. Sedangkan nutrien di Pantai Krakal menunjukkan tingkat nutrien yang lebih dari tingkat normal perairan laut.
Penelaahan  berdasarkan  analisis  komponen utama  dari  data  pada  Tabel  2  dilakukan  dengan merujuk  pada  metode  perhitungan  SPSS  Ver  15 (Anon., 2006) terhadap 6 variabel (salinitas dikeluarkan karena tidak memiliki variasi antar lokasi pengambilan sampel) dengan hasil ditunjukkan pada Tabel 3.
Secara kumulatif terdapat dua komponen utama dengan total merupakan 92,61% penyebab variasi antara  lokasi  pengambilan  sampel.  Komponen pertama (65,97%) berkorelasi kuat dengan pH, fosfat, nitrat, nitrit, dan amonia. Sementara komponen kedua (26,64%)  berkorelasi  kuat  terhadap  suhu.  Kelima variabel dalam komponen pertama (pH, fosfat, nitrat, nitrit, dan amonia) dapat merujuk pada variabel-variabel parameter kimia perairan, sementara komponen kedua (suhu) dapat merujuk pada fisika perairan. Sementara komponen ketiga hingga keenam merupakan variasi variabel-variabel uji yang tidak berpengaruh besar terhadap perbedaan karakteristik lokasi pengambilan sampel.  Berdasarkan  analisis  komponen  utama, maka dapat diketahui bahwa dari variasi faktor lokasi dan waktu pengambilan sampel Turbinaria sp. terdapat perbedaan  komposisi  parameter  air,  khususnya parameter kimia perairan, utamanya perbedaan tingkat
nutrien, seperti fosfat, nitrat, nitrit, dan amonia. Melalui adanya perbedaan tingkat nutrien antar lokasi dan wak tu  pengam bilan  sam pel  tersebut,  m aka dimungkinkan untuk diketahui pengaruhnya terhadap kadar fukosantin  melalui uji korelasi.
KORELASI KADAR FUKOSANTIN  Turbinaria sp.

## TERHADAP PARAMETER AIR
Tahapan  awal   pengujian  kor elasi   adalah mengetahui  normalitas  data,  sehingga  dapat ditentukan apakah pengujian parametrik atau non- parametrik dapat dilakukan. Hasil analisis Skewness dan Kurtosis terhadap data area puncak fukosantin menunjukkan  bahwa  data  adalah  normal,  dengan masing-masing nilai adalah 0,848 (SD = 0,637) dan - 0,537 (SD = 1,232). Jika data selaras dengan kurva normal, maka secara umum memiliki nilai Skewness dan Kurtosis yang tidak melebihi dua kali dari nilai standar deviasinya (Anon., 2006). Hal ini diperkuat dengan pengujian terhadap Kolmogorov-Shirmov yang menunjukkan  bahwa  kurv a  data  area  puncak fukosantin tidak berbeda nyata dengan kurva normal (P  = 0,772). Berdasarkan ketiga hasil uji tersebut, maka penelaahan lanjut terhadap data konsentrasi fukosantin    dapat  dilakukan  menggunakan  uji parametrik ANOVA (Analysis of Varience) dan regresi.
Hasil analisis ANOVA dari variasi dua tempat dan waktu  pengambilan  sampel  menunjukkan  bahwa terdapat perbedaan yang nyata antara area puncak fukosantin  berdasarkan lokasi (P = 7,99 x 10 -6 ), waktu pengambilan  (P  =  0,006),  dan  interaksi  keduanya (0,003). Hal ini menunjukkan bahwa kadar fukosantin dapat berbeda di lokasi pengambilan sampel yang berbeda,  juga  akan  berfluktuasi  di  tiap  waktu. Perbedaan  ini,  seperti  pada  dugaan  sebelumnya,
Komponen Variasi (%) Kumulatif (%) Komponen berkorelasi terhadap Variabel 1 65,97 65,97 pH (R=0,823), fosfat (R=0,862), nitrat (R=0,921) , nitrit (R=0,862), dan amonia (R=0,975) 2 26,64 92,61 suhu (R=0,965) 3 3,78 96,39 4 2,26 98,65 5 1,07 99,72 6 0,28 100,00
Tabel 3. Analisis komponen utama terhadap data parameter lingkungan lokasi pengambilan sampel di pantai Binuangeun dan Krakal
dapat terjadi akibat perbedaan parameter  kimia di perairan, terutama kandungan nutrien yang terdapat di dalamnya. Pada analisis regresi stepwise, dapat diketahui bahwa dari keseluruhan parameter yang diuji,  interaksi  kandungan  fosfat  dan  suhu  dapat menjadi prediktor yang berkorelasi kuat (R = 0,986) dan signifikan (P = 1,09 x 10 -7 ) bagi fukosantin seperti terlihat pada Gambar 5.
Fungsi  matematika  dari  grafik  area  puncak f uk osant in  di  krom atogr am   K CKT  t erhadap konsentrasi  fosfat  dan  suhu  adalah  luas  area fukosantin  =  608054  [fosfat]+  8388,203  [suhu] – 211892.
Pada  persamaan  linear  persam aan  fungsi fukosantin  terhadap fosfat dan suhu yang diperoleh dari telaah regresi, fosfat menjadi prediktor utama dengan koefisien determinan yang tinggi (R 2 = 0,906), sementara interaksi terhadap suhu menjadi prediktor selanjutnya sehingga total determinan fungsi menjadi 0,965. Oleh karena itu, produksi pigmen fukosantin Turbinaria sp. di Binuangeun dan Krakal lebih atau mengikuti selaras dengan kadar fosfat dibandingkan dengan  nitrogennya.  Faktor  lainnya,  seperti  umur thalus muda yang diduga memiliki kadar fukosantin lebih tinggi, juga dapat menjadi pengaruh. Namun,
hasil penelaahan regresi menunjukkan bahwa faktor tersebut nilainya rendah, yaitu 3,45%, yang diperoleh dari  hasil  pengurangan  100%  terhadap  nilai determinan fungsi (96,5%). Hal ini dapat dimungkinkan karena homogenitas umur Turbinaria sp. yang terdapat antara satu sampel dengan sampel lainnya.
Secara  umum ,  kandungan  kimia  perairan, terutama nutrien fosfat dan nitrogen, merupakan unsur hara yang berperan penting di dalam pertumbuhan alga (Glibert et al., 1995). Nutrifikasi kadar fosfat dan nitrogen yang tinggi akan membuat pertumbuhan alga yang cepat, atau dikenal juga dengan algae blooming. Pada perairan laut, kadar fosfat diketahui  sebagai pembatas  pertum buhan  alga (Ef endi,  2003). Sementara  untuk  konsentrasi  pigmen,  diprediksi bahwa  unsur  hara  yang  berpengaruh  adalah keberadaan  nitrogen  t otal  yang  terdapat   di lingkungannya (Rosenberg & Ramus, 1982). Regresi yang diperoleh menemukan bahwa pigmen fukosantin di perairan Binuangeun dan Krakal hanya terpengaruh oleh kandungan fosfat, bukan nitrogen. Perbedaan ini diduga disebabkan karena alga Turbinaria sp. yang diuji merupakan alga laut, sehingga hasil analisis lebih selaras dengan pembatas pertumbuhannya. Pada flora air tawar, dengan pembatas pertumbuhan kandungan
Gambar 5. Grafik nilai prediksi standar regresi fosfat dan suhu terhadap luas area fukosantin dari Turbinaria sp. Perairan Binuangeun dan Krakal.
nitrogen (Liangfeng et al., 1990), maka dapat diprediksi hasil  analisis  kandungan  pigmen  fukosantin  lebih dipengaruhi oleh kadar nitrogen perairannya.
Di samping itu, faktor fisika perairan juga dapat berpengaruh terhadap keberadaan pigmen. Faktor yang utama adalah tingkat  radiasi sinar ultraviolet matahari, karena pigmen karotenoid berfungsi sebagai anti radikal bebas bagi produsennya (Denault et al., 2000). Oleh karena tingkat intensitas matahari akan bervariasi  tergantung  musim,  hal  ini  juga  akan menyebabkan tingkat konsentrasi pigmen pada alga berfluktuasi (Glibert et al., 1995). Diduga, fluktuasi intensitas matahari pada perbedaan musim tersebut akan  selaras  dengan  f aktor  suhu,  sehi ngga teridentifikasi pada regresi yang memliki pengaruh terhadap luas area fukosantin dalam kromatogram.
Berdasarkan hasil ini, maka area di wilayah pesisir yang berpotensi untuk pengembangan produksi bahan baku nutrasetikal dari Turbinaria sp. dapat dipredikasi. Nutrifikasi kadar fosfat secara umum dapat berasal dari limpasan pupuk dalam saluran air pertanian ke muara. Oleh karena itu, jika budidaya ditempatkan di muara  limpasan,  maka  akan  didapat  keuntungan secara ekonomi karena pertumbuhan lebih cepat dan produksi pigmen target lebih tinggi. Selain itu, secara ekologis  j uga  akan  m enguntungk an,  karena terserapnya  fosfat  oleh  alga  akan  meminimalisir dampak berbahaya nutrifikasi air laut bagi terumbu karang di wilayah estuaria.

## PENUTUP
Korelasi antara kandungan senyawa fukosantin terhadap parameter air laut merupakan fungsi linear dari interaksi kadar fosfat dan suhu. Oleh karena itu, wilayah limpasan pertanian yang mengandung kadar fosfat tinggi dapat menjadi area yang berpotensi untuk pengembangan  produksi  bahan  baku  nutrasetikal fukosantin dari Turbinaria sp. di wilayah pesisir.

## DAFTAR PUSTAKA
Anonymous. 2006. Help  Topics on  SPSS Ver 15. SPSS Inc  1989–2006.  US.
Anonymous.  2008.  Future  prospects  for  s eaweeds industry.  fisheries  and  aquaculture  department–FAO. h t t p : / / w w w. f a o . o r g / D O C R E P / 0 0 4 / Y 3 5 5 0 E / Y3550E05.htm.  Diakses  pada  tanggal  28  Juni  2010. Anonymous.  2009.  Fucopure®10%  fukosantin.  http:// www.fucopure.c om.  Diak ses  pada  tanggal  21 Desember  2010.
Anonymous.  2010 a .  NSI  fucoxanthin  with  Pinno  Thin™- Stimulant  Free–120  Softgels,  nutraceutical  science institute.  http://www.gonsi.com/products/product- detail.c fm/sk u-835003008964.  Diak ses  pada tanggal  21  Desember  2010.
Anonymous.  2010 b .  FücoTHIN®  by  Garden  of  Life, eVitamins.  http://www.evitamins.com/  product.  asp? pid=8967#.  Diakses  pada  tanggal  21  Desember 2010.
Blunt,  J.W.  and  Blunt,  D.A.  2008.  MarinLit-Marine Literature Database.  Version   #  vpc13.5. Devised  by Munro, M.H.G. & Blunt, J.W. Maintained at various time by  Hickford,  S.J.H.,  Vigneswaran,  M.,  Celestine, Unger,  R.  E.,  Hu,  S.  Marine  Chemistry  Group, Department  of  Chemistry-University  of  Caterbury. Christchurch,  New  Zealand.
Chasanah,  E.,  W ik anta,  T.,  Amini,  S.,  Nursid,  M.,
Fajarningsih,  N.D.,  Marraskuranto,  E.,  dan  Januar, H.I. 2007. Riset Isolasi dan Uji Farmakologi Senyawa Bioaktif  dari  Biota  Laut.  Laporan  Teknis  2007.  Balai Besar  Riset  Pengolahan  Produk  dan  Bioteknologi Kelautan  dan  Perikanan.  Departemen  Kelautan  dan Perikanan.
Denault,  M.,  Stieve,  E.,  and  Valiela,  I.  2000.  Effect  of nitrogen  load  and  irradianc e  on  photosyn thetic pigment concentration in  cladophora vagabunda and gracilaria tivahiae in estuaries of waquoit bay.  Biology Bulletin  199:  223–225.
Effendi,  H.  2003.  Telaah  Kualitas  Air  Bagi  Pengelolaan Sumber  Daya  dan  Lingkungan  Perairan.  Penerbit Kanisius.  Yogyakarta.
Glibert,  P.M.,  Conley,  D.J.,  Fisher,  T.R.,  Harding,  L.J.Jr., and Malone, T.C. 1995. Dynamic  of the  1990 winter/ spring  bloom  in  chesapeake  bay.  Marine  Ecology Progress Series, 122: 27–43.
Harborne.  J.B.  1987.  Metode  Fitokimia-Penuntun  Cara Modern  Menganalis is   tumbuhan.  Penerj emah Padmawinata, K. dan Soediro I. Edisi kedua. Penerbit ITB. Bandung. p. 6–7.
Januar, H.I., Wikanta, T., dan Nursid, M. 2004. Metode uji radikal  bebas  2,2-diphenyl  pikril  hidrazil  (DPPH) dalam  eksplorasi  bioak tivitas  antiok sidan  dari rumput  laut.  Warta  Penelitian  Perikanan  Indonesia Edisi Pasca Panen, 10 (7):  5–9.
Liangfeng, D., Guangheng,  L., and Chaoyuan, W. 1990. Effect  of  NH 4 - Non  the  pigment  content  of  laminaria japonica. Chin. J. Oceanology Limnology, 8 (2): 128– 134.
Liang, C., Zhao, F., Wei, W., Wen, Z., and Qin, S. 2006. Carotenoid  Biosynthesis  in  Cyanobacteria:  Structural and  Evolutionary  Scenarios  Based  on  Comparative Genomic s,  International  J ournal  of  Biologic al Sciences 2 (4): 197–207.
Maeda,  H.,  Tsukui,T.,    Sashima, T.,  Hosokawa,  M.,  and Miyashita, K. 2008. Seaweed carotenoid, fucoxanthin, as  a  multi-functional  nutrient.  Asia  Pacific  Journal  of Clinical  and  Nutrition,17  (Supplement  1):  196–199.
Romero,  R.,  Bagur,  M.G.,  Gazquez,  D.,  Sanchez-Vinas, M.,  Cuadros-Rodrigues,  L.,  and  Ortega,  M.  2004. Estimation  of  the  Main  Source  of  Uncertainty  in Chromatographic Analysis: Determination of Biogenic Amines.  LCGC  The  Application  Notebook : Supplement To LCGC North America, June: 95–103.
Rosenberg,  G.  and  Ramus,  J.  1982.  Ecological  Growth Strategies  in  the  Seaweeds  Grac ilaria  foliifera (Rhodophyceae)  and  Ulva  sp.  (Chlorophyc eae): Photosynthesis  and  Antenna  Composition.  Marine Ecology Progress Series, Vol 8: 233-241.
Srinubabu, G., Jaganbabu, K., Sudharani, B., Venugopal,
K.,  Girizasankar,  G.,  and  Rao,  J.V.L.N.S.  2006. Development  and  Validation  of  a  LC  Method  for  the Determination  of Pramipexole  Using  an  Experimental Design.  Chromatographia,  Vol  64:  95–100.
W ikanta,  T.,  Suryaningrum,  D.,  Sugiyono.,  Januar,  H.I., Nursid, M.,  Munifah, I.,  Kardono, B.,  dan  Hardjito,  L. 2004.  Riset  Ekstraksi  Senyawa  Bioaktif  dari  Biota
Perairan.  Laporan  Teknis  Pusat  Riset  Pengolahan Produk dan Sosial Ekonomi Kelautan dan Perikanan. Departemen  Kelautan  dan  Perikanan.
W ikanta,  T.,  Suryaningrum,  D.,  Sugiyono.,  Januar,  H.I., Nursid,  M.,  Munifah,  I.,  Faj arningsih,  N.D.,  dan Krisnawang,  H.  2005.  Riset  Ekstraksi  Senyawa Bioaktif  dari  Biota  Perairan.  Laporan  Teknis  Pusat Riset Pengolahan Produk dan Bioteknologi Kelautan dan  Perik anan.  Departemen  Kelautan  dan Perikanan.
Yan,  X.,  Chuda,  Y.,  Suzuki,  M.,  and  Nagata,  T.  1999. Fucoxanthin  as  the  Major  Antioxidant  in  Hij ik ia fusiformis,  a  Common  Edible  Seaweed.  Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry, Vol 63(3): 605-607.