KELARUTAN VITAMIN D 3 (Cholecalciferol) DALAM SISTEM KEFIR SUSU KAMBING
Dany Abyyudha, Nurmasari Widyastuti, Gemala Anjani *
Departemen Ilmu Gizi, Fakultas Kedokteran, Universitas Diponegoro Jl. Prof. Sudarto SH, Tembalang, Semarang, Jawa Tengah 50275, Indonesia
* Penulis Penanggungjawab. E-mail: gemaanjani@gmail.com

## ABSTRACT
Background :  Goat  milk  kefir  is  a  fermented  product  that  contains  many  probiotic  bacteria.  Vitamin  D 3 is  the  best fortification  and  is  commonly  used  in  dairy  products.  Solubility  info  is  needed  to  determine  the  solubility  level  of vitamin D 3 from vitamin D 3 encapsulation and fortified goat milk kefir. The aim of the study is knowing the optimization of vitamin D3 solubility in goat's milk and goat's milk kefir.
Method : This research is included in the field of food production with the Quasi Experimental Research method with a completely randomized design. This study used vitamin D 3 fortification with the addition of fortification at 0 by using a dissolution method with water and methanol.
Results : Optimization of vitamin D 3 solubility was read at 600 IU by using a method of dissolving with water. Conclusion :  Vitamin  D 3 fortification  in  the  goat  milk  system  produced  a  more  significant  value  of  goat  milk  kefir without  fortification.  The  method  of  dissolving  with  water  produces  vitamin  D 3 better  than  the  method  of  dissolution with methanol seen from the value of optimization of higher readable vitamin D 3
Keyword : Kefir; goat milk; goat milk kefir; vitamin D 3 ; fortification

## ABSTRAK
Latar  Belakang :  Kefir  susu  kambing  merupakan  produk  fermentasi  yang  mengandung  banyak  bakteri  probiotik. Vitamin  D 3 merupakan  fortifikan  terbaik  dan  biasa  digunakan  pada  produk  olahan  susu,.  Info  kelarutan  diperlukan untuk mengetahui kadar vitamin D 3 dari vitamin D 3 enkapsulasi dan kefir susu kambing terfortifikasi. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui optimasi kelarutan vitamin D 3 di dalam susu kambing dan kefir susu kambing. Metode :  Penelitian  ini  termasuk  dalam  bidang  food  production  dengan  metode  Quasi  Eksperimental  Research (Eksperimental  Semu)  dengan  rancangan  acak  lengkap.  Penelitian  ini  menggunakan  fortifikasi  vitamin  D 3 dengan penambahan fortifikan pada jam ke-0 dengan menggunakan metode pelarutan dengan air dan methanol.
Hasil : Optimasi kelarutan vitamin D 3 terbaca sebesar 600 IU dengan menggunakan metode pelarutan dengan air. Kesimpulan :  Fortifikasi  vitamin  D 3 pada  sistem  susu  kambing  menghasilkan  nilai  yang  lebih  signifikan  kefir  susu kambing  tanpa  fortifikasi.  Metode  pelarutan  dengan  air  menghasilakan  vitamin  D 3 lebih  baik  daripada  metode pelarutan dengan methanol dilihat dari nilai optimasi vitamin D 3 terbaca lebih tinggi.
Kata Kunci : Kefir; susu kambing; kefir susu kambing; vitamin D 3 ; fortifikasi

## PENDAHULUAN
Susu  kambing  kambing  mengandung  4,5% lemak.  Lemak  yang  terdapat  pada  susu  kambing tergolong  tinggi  asam  lemak  rantai  sedang  (MCT) dan asam lemak rantai pendek sehingga lebih mudah untuk  diserap. 1 Susu  kambing  memiliki  kandungan protein,  vitamin  A,  tiamin,  riboflavin,  niasin, pantotenat,  kalsium,  fosfor,  yang  lebih  tinggi dibandingkan  dengan  susu  sapi.  Namun,  baik  susu kambing  maupun  susu  sapi  memiliki  kandungan vitamin B 6 , vitamin C, dan vitamin D yang rendah. 2 Susu  kambing  memiliki  kandungan  asam lemak rantai sedang 40% lebih banyak daripada susu sapi.  Kandungan  asam  linoleat  terkonjugasi  pada susu kambing lebih besar 62% dibandingkan dengan susu  sapi.  Kandungan  asam  lemak  jenuh  dan  asam lemak  jenuh  rantai  tunggal  pada  susu  kambing  dan
susu  sapi  hampir  sama,  namun  kandungan  asam lemak tidak  jenuh rantai panjang lebih banyak pada susu  kambing.  Asam  lemak  omega  6  dan  omega  3, dua  jenis  asam  lemak  tidak  jenuh  rantai  panjang, juga  lebih  tinggi  pada  susu  kambing,  dimana  rasio omega 6 : omega 3 pada susu kambing lebih rendah daripada susu sapi. 3
Kefir  adalah  olahan  susu  fermentasi  yang berasal  dari  pengunungan  Kaukasus.  Fermentasi adalah  metode  yang  telah  digunakan  ribuan  tahun yang  lalu  untuk  memperpanjang  umur  simpan makanan.    Fermentasi  merupakan  proses  kimia dimana  enzim  memecah  substansi  organik  menjadi lebih  kecil,  hal  inilah  yang  menyebabkan,  lebih mudah  dicerna,  stabil,  dan  meningkatkan  kualitas gizi. 4 Kefir  dibuat  dari  aktifitas  fermentasi  bibit kefir,  starter  alami  yang  mengandung  beragam
Submitted : 27 April 2019 Accepted : 12 Agustus 2019 Volume 8, Nomor 3, Tahun 2019, Halaman 138-145 Online di : http://ejournal3.undip.ac.id/index.php/jnc/

## J OURNAL OF N UTRITION C OLLEGE
bakteri  asam  laktat,  asam  asetat,  dan  ragi  di  dalam matriks polisakarida. Salah satu fitur dari kefir yang berbeda  dari  produk  susu  fermentasi  lainnya  adalah bibit  kefir  dapat  dipulihkan  setelah  fermentasi dengan  sedikit  peningkatan  biomassa  bibit  kefir hingga 25% dari jumlah fermentasi awal. 5,6
Kefir  diolah  dengan  menambahkan  secara sengaja  bibit  kefir  dalam  susu  yang  telah dipasteurisasi,  diperam  dan  konsentrasi  bibit  kefir akan  menentukan  lama  pemeraman  dan  keasaman yang terbentuk, sehingga akan berpengaruh terhadap kualitas  produk  akhir  yang  dihasilkan.  pH  kefir berkisar  antara  4,2  hingga  4,6. 7 Selama  fermentasi 24  jam  dengan  suhu  20-25 0 C  terjadi  penurunan jumlah  laktosa  susu  secara  perlahan,  diikuti  juga dengan penurunan pH. Selama fermentasi, bibit kefir bertambah  ukuran  dan  jumlahnya.  Bakteri  asam laktat  dalam  bibit  kefir  membutuhkan  enzim  yang dihasilkan  ragi  untuk  pertumbuhan,  sedangkan  ragi menggunakan  produk  hasil  fermentasi  bakteri  asam laktat  sebagai  sumber  karbon  dan  energi  sehingga bakteri  asam  laktat  dan  kefir  dapat  tumbuh  dengan perbandingan  yang  seimbang.    Penambahan  bibit kefir 30 gram per liter susu dan lama pemeraman 24 jam  pada  suhu  ruang  menghasilkan  kefir  dengan kualitas yang sesuai dengan standar susu fermentasi. 6 Beberapa    penelitian  lain  menyebutkan rasio  1:20  hingga  1:50  merupakan  rasio  optimum antara bibit kefir dan susu. 8,9,10
Kefir  susu  kambing  merupakan  salah  satu produk  fermentasi  susu  yang  mengandung  banyak bakteri  probiotik,  seperti lactobacilli,  lactococi, leuconostoc, dan acetobacteria. Susu  fermentasi  ini mengandung  alkohol  0,5  –  1  %.  Bakteri  yang menyebabkan terbentuknya alkohol adalah Sacharomyces kefir dan Torula kefir. 9 Jika disimpan dengan  baik,  aktivitas  bakteri  kefir  dapat  bertahan hingga  satu  tahun.  Selama  penyimpanan  produksi CO 2 oleh ragi atau bakteri asam laktat heterofermentatif menyebabkan kemasan kefir dapat menggembung,  sehingga  kemasan  kefir  perlu diperhatikan. 11
Vitamin  D 3 atau  kolekalsiferol,  merupakan bentuk  dari  vitamin  D  yang  memiliki  fungsi  seperti hormon  steroid,  yang  bersifat  inert  dan  dapat diperoleh  oleh  tubuh  melalui  hasil  sintesis  dari  7- dehidrokolesterol ketika kulit terpapat oleh sinar UV B  atau  didapat  dari  diet. 12 Vitamin  D 3 juga  bisa diperoleh  dari  diet,  yang  kemudian  diserap  melalui usus  secara  difusi  pasif dalam  bentuk  misel  dibantu oleh  lemak  dan  garam  empedu. 13 Vitamin  D 3 dapat ditemukan dalam dua jenis pengemasan yaitu berupa serbuk  dan  enkapsulasi  (minyak).  Dalam  prosesnya muncul dugaan adanya perubahan jumlah vitamin D 3 yang  difortifikasikan  pada  kefir  tersebut  sehingga perlu  dilakukan  penelitian  untuk  mengetahui  faktor
apa  saja  yang  berpengaruh  terhadap  perubahan kandungan  vitamin  D 3 di  dalam  sistim  kefir fortifikasi  vitamin  D 3 agar  dapat  menjadi  acuan untuk  penelitian  selanjutnya.  Vitamin  D 3 biasa digunakan oleh peneliti sebagai fortifikan baik pada susu  kambing  murni  maupun  produk  olahan  susu, beberapa produk olahannya yaitu kefir, yoghurt, dan keju. 14
Penelitian  yang  telah  dilakukan  oleh Farah dkk pada  tahun  2017  belum  mengkaji  perihal kelarutan  vitamin  D 3 . 15 Sedangkan  data  tersebut diperlukan untuk mengtahui jumlah kadar sebenarnya  dari  vitamin  D 3 pada  vitamin  D 3 enkapsulasi  dan  vitamin  D 3 standar  yang  digunakan sebagai  fortifikan  serta  jumlah  kadar  vitamin  D 3 sebenarnya  dalam  sistem  kefir  susu  kambing terfortifikasi  vitamin  D 3 .  Berdasarkan  temuan tersebut  peneliti  merasa  perlu  dilakukan  penelitian terhadap  kelarutan  vitamin  D 3 pada  kefir  susu kambing terfortifikasi vitamin D 3.

## METODE
Penelitian  ini  dilaksanakan  di  Laboratorium Terpadu Universitas Diponegoro Semarang. Pengambilan  data  dilakukan  pada  bulan  Agustus 2018  hingga  Desember  2018.  Ruang  lingkup penelitian  ini  termasuk  dalam  bidang food production .  Penelitian  ini  merupakan  penelitian dengan  metode Quasi  Eksperimental  Research (Eksperimental Semu).
Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental semu menggunakan fortifikasi vitamin  D 3 dengan  penambahan  fortifikan  pada jam ke-0,  fortifikasi  vitamin  D 3 dengan  penambahan fortifikan sebanyak 200 IU, 400 IU, 600 IU, 800 IU, dan  1000  IU,  serta  1  kelompok  kontrol  (tanpa fortifikasi  vitamin  D 3 ).  Uji  konsentrasi  kadar  pada sampel  dilakukan  setelah  24  jam  inkubasi  sampel, setelah zat fortifikan ditambahkan dengan perbandingan  antara  kelompok  kontrol  dengan kelompok perlakuan.
Subjek  penelitian  ini  adalah  vitamin  D 3 kefir susu  kambing  yang  terbuat  dari  proses  fermentasi susu  kambing  cair  sebagai  bahan  utama  dengan starter biji kefir (kefir grains) dan bakteri asam laktat ( Lactobacillus  Acidophilus dan Saccharomyces ), dengan  penambahan  zat  fortifikan  berupa  D 3 (kolikalsiferol).  Susu  kambing  cair  menggunakan susu  kambing  peranakan  ettawa  yang  didapatkan dari  Omah  Kefir  Ungaran.  Starter  biji  kefir  (kefir grains)  didapat  dari  Omah  Kefir  Ungaran.  Zat fortifikan  vitamin  D 3 (kolikalsiferol)  didapat  dari Mega Store Indonesia. Kelompok kontrol menggunakan kefir susu kambing vitamin D 3 . Tahapan penelitian diawali dengan pembuatan kefir  dengan  menyiapkan  susu  kambing  sebanyak
1liter  yang  telah  dipanaskan  hingga  suhu  70 o C selama  30  menit  lalu  ditambahkan  starter  biji  kefir (kefir  grains)  sebanyak  50g  diinkubasi  selama  24 jam  dengan  suhu  ruang  24-25 0 C    terjadi  proses fermentasi menjadi kefir susu kambing. 16 Penambahan zat fortifikan vitamin D 3 sebanyak 200 IU, 400 IU, 600 IU, 800 IU, dan 1000 IU. Penelitian ini  bertujuan  untuk  mengetahui  kelarutan  kadar vitamin  D 3 pada  kefir  susu  kambing.  Kandungan konsentrasi  D 3 seluruh  sampel  penelitian  diuji menggunakan  metode spektrofotometri dengan panjang gelombang vitamin D 3 264 nm.
Variabel  bebas  dalam  penelitian  ini  adalah fortifikasi  vitamin  D 3 .  Variabel  terikat  dalam penelitian  ini  adalah  kandungan  vitamin  D 3 .  Data yang  digunakan  dalam  penelitian  yaitu  uji  kadar vitamin  D 3. Metode  pengenceran  menggunakan  air dan  methanol.  Metode  pengenceran  dengan  air menggunakan metode 50 kali pengenceran sedangkan  pada  metode  pengenceran  methanol menggunakan  100  kali  pengenceran.  Pengolahan data menggunakan software statistik.

## HASIL
Vitamin D 3 Standar dalam Methanol Vitamin D 3 Standar ( Sigma )
Gambar 1. Grafik Absorbansi Vitamin D 3 Standar dalam Methanol dengan Satuan PPM.
Vitamin D 3 enkapsulasi
Vitamin D 3 Dalam Susu Kambing

## Metode Pengenceran dengan Methanol
Gambar 3. Grafik Susu Terfortifikasi Vitamin D 3 dengan Metode Pelarutan Methanol (IU)
Gambar 4. Grafik Konsentrasi Vitamin D 3 Terbaca pada Susu Terfortifikasi Vitamin D 3 dalam Pelarut Methanol
Gambar  1  merupakan  grafik  standar  dari vitamin  D 3 .  Data  pada  grafik  tersebut  didapatkan melalui pengujian spektrofotometri pada vitamin D 3 dalam  methanol  dan  digunakan  sebagai  standar pengujian vitamin D 3 pada sistem kefir. Syarat agar grafik  tersebut  bisa  digunakan  sebagai  standar pengujian  yaitu  terletak  pada  nilai  R 2 ketika  data- data  yang  didapatkan  dari  uji  spektrofotometri digunakan  untuk  membuat  grafik  tersebut.  Nilai maksimal  pada  R 2 adalah  1,  untuk  itu  syarat  agar dapat  digunakan  sebagai  standar  penelitian  maka nilai  R 2 haruslah  mendekati  angka  1,  semakin mendekati  maka  dianggap  semakin  baik  dan  dapat meningkatkan  nilai  validitas  terhadap  pengujian yang  akan  dilakukan.  Pada  gambar  1  didapatkan nilai R 2 sebesar 0,99733 dengan begitu grafik diatas bisa digunakan sebagai standar untuk pengujian nilai vitamin  D 3 pada  sistem  kefir.  Vitamin  D 3 yang digunakan pada pengambilan data pembuatan grafik standar tersebut menggunakan vitamin D 3 berbentuk
-0,5 0 0,5 1 1,5 2 2,5 3 3,5 0 20 40 60 80 a bs Fortifikasi vitamin D 3 (ppm) -0,5 0 0,5 1 1,5 2 2,5 3 3,5 0 500 1000 1500 a bs Fortifikasi  Vitamin D 3 (IU)
0 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,35 0 200 400 600 800 1000 a bs Fortifikasi  Vitamin D 3 (IU ) y = 0,4333x + 279,83 R² = 0,9654 0 100 200 300 400 500 600 700 800 0 500 1000 1500 K o ns ent ra si V D 3 ter ba ca Fortifikasi Vitamin D 3 (IU)
bubuk  yang  didapat  dari  vitamin  D 3 bermerek Sigma . Dalam grafik tersebut menunjukan absorbansi  vitamin  D 3 dalam  konsentrasi  yang berbeda dengan satuan konsentrasi berupa PPM.
Gambar  2  merupakan  grafik  standar  lain dengan  bahan  dasar  vitamin  D 3 pada  kapsul  yang kemudian dilarutkan dalam methanol kemudian diuji menggunakan  alat  spektrofotometri  dan  kemudian didapatkan  data  hasil  pengujian  tersebut,  data tersebut  digunakan  untuk  membuat  grafik  standar
dari  vitamin  D 3 bentuk  kapsul  yang  kemudian didapatkan hasil grafik meningkat disetiap konsentrasi  dengan  R 2 sebesar  0,99652.  Dengan hasil  tersebut  maka  grafik  diatas  dapat  digunakan sebagai standar penelitian. Pada grafik tersebut dapat dilihat  bahwa  adanya  peningkatan  absorbansi  pada konsentrasi  satu  dengan  yang  lainnya,  konsentrasi tersebut menggunakan satuan IU.
Tabel 1. Data Fortifikasi Vitamin D 3 , Absorbansi, Vitamin D 3 + Pelarut, dan Konsentrasi Vitamin D 3
Terbaca dalam IU Fortifikasi Vitamin D 3 (IU) Abs Vitamin D 3 + Pelarut Konsentrasi Vitamin D 3 Terbaca (IU) 0 0,138 61 306,09 200 0,173 72 360,78 400 0,228 89 446,715 600 0,269 102 510,78 800 0,323 119 595,155 1000 0,428 152 759.215
Data  pada  Tabel  1  menginformasikan  data hasil  pengujian  spektrofotometri  pada  sampel  susu kambing  dengan  pelarut  methanol.  Tabel  1 menampilkan data fortifikasi vitamin D 3 , absorbansi, vitamin  D 3 +  pelarut,  dan  konsentrasi  vitamin  D 3 terbaca  dalam  IU.  Sampel  susu  kambing  tanpa fortifikasi vitamin
D 3 dengan pelarutan menggunakan
methanol menghasilkan data konsentrasi vitamin D 3 terbaca sebesar 306.09 IU.
Metode Pengenceran dengan Air.
Tabel  2  berisi  informasi  terkait  nilai  fortifikasi, absorbansi, dan konsentrasi vitamin D 3 terbaca (IU). Susu  kambing  tanpa  fortifikasi  dengan  pelarut  air dan kemudian dihangatkan sebelum diuji menggunakan metode spektrofotometri mendapatkan  hasil  492  IU,  dimana  hasil  tersebut lebih  tinggi  dibandingkan  dengan  metode  pelarutan menggunakan  methanol  yang  hanya  306.09  IU. Konsentrasi vitamin D 3 pada sampel 200 IU dan 400 IU namun tidak sesuai dengan estimasi dimana pada sampel 200 IU peningkatan hanya terjadi sebesar 46 IU  dan  sampel  400  IU  yang  hanya  sebesar  83  IU. Sampel  600  IU  konsentrasi  vitamin  D 3 terbaca sebesar  606  IU.  Keadaan  tersebut  menandakan adanya  tanda-tanda  kejenuhan  yang  terjadi  pada angka  600  IU,  dilihat  dari  sampel  800  IU  yang hanya 638 IU dan optimasi terjadi pada sampel 1000 IU yang menghasilkan 719 IU.
Gambar 5. Grafik Menunjukan Absorbansi Vitamin D 3 terhadap Konsentrasi Vitamin D 3 yang Terbaca
Gambar 6. Fortifikasi Vitamin D 3 Terbaca pada Susu dengan Metode Pengenceran Air 0 0,5 1 1,5 2 2,5 0 200 400 600 800 1000 a bs Fortifikasi Vitamin D 3 (IU) y = 0,2094x + 489,95 R² = 0,9715 0 100 200 300 400 500 600 700 800 0 500 1000 1500 K o ns ent ra si v it a m in D 3
ter ba ca Fortifikasi Vitamin D 3 (IU)
Tabel 2. Data Fortifikasi Vitamin D 3, Absorbansi, dan Vitamin D 3 yang Terbaca
Fortifikasi Vitamin D 3 (IU) Abs Konsentrasi Vitamin D 3 terbaca (IU) 0 1,516 492 200 1,664 538 400 1,783 575 600 1,882 606 800 1,985 638 1000 2,244 719
Vitamin D 3 dalam Kefir Susus Kambing

## Metode Pengenceran dengan Methanol
Gambar 7. Grafik Absorbansi Vitamin D 3 dalam Kefir dengan Metode Pelarutan Methanol.
Gambar 8. Grafik Konsentrasi Vitamin D 3 Terbaca dalam Kefir terhadap Kadar Fortifikan dalam Satuan IU.
Tabel  3  menunjukan  data  terkait  kadar vitamin  D 3 dalam  kefir  dengan  metode  pelarut methanol,  dalam  tabel  pada  kefir  tanpa  fortifikasi didapatkan  hasil  340.47  IU  vitamin  D 3 angka tersebut  menginformasikan  data  kandungan  vitamin D 3 dalam  kefir  susu  kambing.  Angka  tersebut relevan  jika  dilihat  bahwa  kandungan  vitamin  D 3 dalam susu kambing yang juga berkisar diangka 300 IU.  Kemudian  pada  sampel  dengan  fortifikasi  200 IU  terjadi  peningkatan  dimana  konsentrasi  vitamin
D 3 yang  terbaca  sebesar  385.78  IU.  Sampel  400  IU mengalami penurunan vitamin D 3 yang difortifikasikan dimana konsentrasi vitamin D 3 yang terbaca  hanya  388.90  IU,  penurunan  berlanjut  pada sampel berikutnya yaitu pada sampel 600 IU hingga 1000  IU,  dimana  konsentrasi  vitamin  D 3 yang terbaca  hanya  berkisar  diangka  400  IU.  Hal  ini menandakan  adanya  kejenuhan  pada  sampel  kefir terhadap  fortifikasi  vitamin  D 3 diangka  400  IU. Namun  adanya  fakta  dilapangan  dimana  tidak larutnya  sampel  secara  sempurna  terhadap  pelarut methanol  diduga  menjadi  faktor  lain  penyebab kondisi jenuh tersebut.
Tabel 3. Data Kadar Vitamin D 3 , Absorbansi, dan Konsentrasi Vitamin D 3 yang Terbaca
Fortifikasi Vitamin D 3 (IU) Abs Vitamin D 3 + Pelarut Konsentrasi Vitamin D 3 Terbaca (IU) 0 0,16 68,09375 340,46875 200 0,189 77,15625 385,78125 400 0,191 77,78125 388,90625 600 0,207 82,78125 413,90625 800 0,223 87,78125 438,90625 1000 0,237 92,15625 460,78125

## Metode pengenceran dengan air
Gambar 9. Grafik Absorbansi Vitamin D 3 dalam Kefir dengan Metode Pengenceran Air
Gambar 10. Grafik Konsentrasi Vitamin D 3 Terbaca terhadap Kadar Vitamin D 3 Fortifikan dalam Satuan IU
0 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0 500 1000 1500 a bs Fortifikasi Vitamin D 3 (IU) 0 50 100 150 200 250 300 350 400 450 500 0 500 1000 1500 K o n sen tr asi v it a m in D 3 te rb ac a Fortifikasi Vitamin D 3 (IU) 0 0,5 1 1,5 2 2,5 0 500 1000 1500 a bs Fortifikasi Vitamin D 3 (IU) 0 100 200 300 400 500 600 700 0 500 1000 1500
K o ns ent ra si v it a m in D 3 ter ba ca Fortifikasi Vitamin D 3 (IU)
Tabel 4. Data Kadar Vitamin D 3 , Absorbansi, dan Konsentrasi Vitamin D 3 pada Kefir dengan Metode Pengenceran Air
Fortifikasi Vitamin D 3 (IU) Abs Konsentrasi Vitamin D 3 Terbaca (IU) 0 1,022 337,46875 200 1,815 585,28125 400 1,945 625,90625 600 1,963 631,53125 800 1,975 635,28125 1000 2,058 661,21875
Tabel 4 merupakan informasi data fortifikasi vitamin  D 3 ,  absorbansi,  dan  konsentrasi  vitamin  D 3 terbaca  dalam  satuan  IU  pada  sampel  kefir  dengan metode pelarutan menggunakan air dan dihangatkan. Sampel  kefir  tanpa  fortifikasi  dengan  pelarut  air menunjukan  hasil  vitamin  D 3 yang  terbaca  sebesar 337.47  IU  angka  tersebut  terpaut  cukup  jauh  jika dibandingkan  dengan  data  vitamin  D 3 terbaca  pada susu  kambing  dengan  metode  pelarutan  yang  sama yaitu  492  IU.  Hal  tersebut  menandakan  terjadinya degredasi  nilai  vitamin  D 3 ketika  susu  kambing dibuat  menjadi  kefir. Sampel  dengan  fortifikasi  200 IU  menunjukan  hasil  yang  sesuai  dimana  terjadi peningkatan  sekitar  250  IU  dan  sampel  fortifikasi 400  IU  yang  mengalami  penurunan  dari  estimasi nilai  kandungan  yang  diharapkan  sebesar  112  IU. Sampel  fortifikasi  600  IU  menunjukan  tanda-tanda kejenuhan  dimana  angka  yang  dihasilkan  hanya sebesar  606  IU.  Hal  ini  diperkuat  dengan  nilai sampel  800  IU  dan  1000  IU  yang  masing-masing berkisar diangka 600 IU.  Dengan begitu bila ditarik kesimpulan  bahwa  kefir  susu  kambing  terfortifikasi vitamin D 3 mengalami kejenuhan kandungan vitamin D 3 diangka 600 IU.

## PEMBAHASAN Kefir
Pengujian  yang  dilakukan  terhadap  kefir dengan  menggunakan  metode  pelarut  berbahan methanol  menghasilkan  fakta  baru  bahwa  produk kefir  tidak  dapat  terlarut  dengan  bahan  methanol, namun  kefir  dapat  terlarut  secara  baik  pada  metode pelarut berbahan dasar air.
Kefir susu kambing  yang  dilarutkan dengan metode pelarut methanol menjadikan kefir berbentuk semi padat yang mana seharusnya dapat terlarut dan menghasilkan  sampel  berwarna  putih  keruh.  Hal ini menjadikan  kurangnya  informasi  vitamin  D 3 yang didapat dalam sampel kefir tersebut.

## Susu Kambing
Susu  kambing  menjadi  bahan  utama pembuatan  kefir  pada  penelitian  ini.  Susu  kambing yang  tidak  difortifikasikan  vitamin  D 3 memiliki
kandungan  vitamin  D 3 sebesar  306.09  IU  dengan menggunakan  metode  pelarutan  berbahan  methanol dan  492  IU  menggunakan  metode  pelarutan berbahan  dasar  air  yang  kemudian  dihangatkan dengan  tujuan  agar  vitamin  D 3 dapat  terlarut sempurna dengan susu kambing yang diujikan.
Susu  kambing  yang  difortifikasi  mengalami peningkatan  kandungan  vitamin  D 3 yaitu,  pada fortifikasi 200 IU menjadi 360.78 IU dan fortifikasi 400 IU menjadi 446.715, namun pada fortifikasi 600 IU,  800  IU,  dan  1000  IU  kandungan  vitamin  D 3 dalam  sampel  tersebut  cenderung  mengalami penurunan  dimana  masing-masing  sampel  secara berurutan  menjadi  510.78  IU,  595.155  IU,  dan 759.215 IU. Hal tersebut menunjukan bahwa adanya kehilangan  jumlah  kandungan  vitamin  D 3 dalam sampel  susu  kambing  terfortifikasi  yang  diduga terjadi  karena  adanya  reaksi  kimia  yang  berakibat pada  berkurangnya  jumlah  kandungan  vitamin  D 3 dalam sampel tersebut.

## Metode Pelarut
Penelitian  ini  menggunakan  dua  bahan pelarut  yaitu  menggunakan  methanol  dan  air  yang kemudian dihangatkan. Pelarutan sampel diperlukan untuk  menjadikan  sampel  agar  dapat  terbaca  saat dilakukan pengujian menggunakan alat spektrofotometri  dimana  alat  tersebut  tidak  dapat memproses  sampel  yang  tidak  dapat  ditembus  oleh pantulan  cahaya,  untuk  itu  mengingat  sampel  susu kambing  dan  kefir  susu  kambing  memiliki karakteristik  warna  yang  putih  solid  maka  perlu dilakukan  pengenceran  agar  dapat  dilakukan pengujian  untuk  mengetahui  kandungan  vitamin  D 3 di dalamnya.
Metode pelarutan berbahan methanol dan air merupakan  bahan-bahan  pelarut  yang  umum  dan populer  digunakan  untuk  penelitian,  masing-masing bahan  pelarut  memiliki  keunggulan  dan  kelemahan tergantung  pada  bahan  penelitian  yang  digunakan. Penelitian kali ini menggunakan bahan dasar sampel berupa susu kambing dan berfokus pada vitamin D 3 yang mana memiliki sifat tidak larut dalam air.
Metode  pelarut  baik  methanol  maupun  air tidak  memiliki  masalah  kelarutan  dengan  sampel susu  kambing.  Sampel  dapat  terlarut  dengan  baik dan  menghasilkan  kelarutan  vitamin  D 3 sesuai  yang diharapkan.  Namun  ada  perbedaan  hasil  uji  pada metode  pelarut  methanol  dan  air.  Hasil  uji menggunakan sampel dengan pelarut methanol pada susu kambing menghasilkan kelarutan susu kambing tanpa fortifikasi sebesar 306.09 IU dan pada metode pelarut  menggunakan  air  yang  dihangatkan  sebesar 492  IU.  Kemudian  pada  sampel  kefir  yang  tidak terfortifikasi vitamin D 3 dengan menggunakan bahan pelarut  berupa  methanol  menghasilkan  kelarutan vitamin  D 3 terbaca  sebesar  340.47  IU  dan  pada
metode  pelarutan  menggunakan  air  yang  kemudian dihangatkan sebesar 337.46 IU.
Metode  pelarutan  methanol  pada  sampel susu  kambing  terfortifikasi  vitamin  D 3 dengan besaran  fortifikan  200  IU,  400  IU,  600  IU,  800  IU, dan  1000  IU  dengan  pengujian  spektrofotometri menghasilkan  data  kelarutan  masing-masing  secara berurutan sebesar 360.78 IU, 446.715 IU, 510.78 IU, 595.15  IU,  dan  759.21  IU.  Sedangkan  pada  sampel kefir  susu  kambing  terfortikasi  dengan  besaran fortifikan  sampel  yang  sama  dengan  sampel  susu kambing  menghasilkan  data  kelarutan  sebesar 385.78  IU,  388.90  IU,  413.90  IU,  438.90  IU,  dan 460.78 IU.
Metode  pelarutan  menggunakan  air  yang kemudian  dihangatkan  pada  kefir  susu  kambing terfortifikasi vitamin D 3 mendapatkan data kelarutan vitamin D 3 terbaca seperti yang tertera pada Tabel 4 dimana  vitamin  D 3 pada  sampel  kefir  mengalami penurunan  jika  dibandingkan  dengan  sampel  susu kambing  pada  Tabel  2  hal  ini  dikarenakan  reaksi kimia  pada  kefir  yang  mengakibatkan  adanya degradasi  kadar  vitamin  D 3 dalam  sampel  tersebut sedangkan  pada  sampel  susu  kambing  tidak. Optimasi  kelarutan  vitamin  D 3 pada  sampel  kefir terjadi pada angka 600 IU dimana pada Tabel 2 dan Tabel  4  terlihat  sampel  kefir  dengan  fortifikasi  800 IU  dan  1000  IU  hanya  menghasilkan  kelarutan vitamin D 3 terbaca sebesar 600 hingga 700 IU.

## SIMPULAN
Perbedaan  kelarutan  vitamin  D 3 terbaca terjadi  pada  sistem  kefir  susu  kambing  berdasarkan metode  pelarutnya.  Metode  pelarutan  menggunakan air  menghasilkan  data  kelarutan  lebih  baik dibandingkan dengan metode pelarutan menggunakan  methanol,  dilihat  dari  optimasi kelarutan  dengan  metode  air  hingga  sebesar  600  IU Perlu  dilakukan  penelitian  lebih  lanjut  terhadap metode  pelarutan  sampel  untuk  memperkecil  bias dan mendapatkan hasil yang lebih baik.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Chen M, Liu J, Lin C, Yeh Y, Al C, et al. Study of  the  Microbial  and  Chemical  Properties  of Goat  Milk  Kefir  Produced  by  Inoculation  with Taiwanese  Kefir  Grains.  J.  Anim  Sci. 2005;18(5):711-5.
2. Park  YW, ́rez  MJ,  C  MR,  Haenlein  GFW. Physico-chemical  characteristics  of  goat  and sheep milk. Small Rumin Res. 2007;68:88–113.
3. Raynal-ljutovac  K,  Lagriffoul  G,  Paccard  P, Guillet I, Chilliard Y. Composition of goat and sheep milk products : An update. J Small Rum Res. 2008;79:57–72.
4. Hanlein,  WGF.  The  Nutritive  Value  of  Sheep
Milk.  International  Journal  Animal  Science. 2001;160(2):253–68.
5. Satir  G,  Guzel-Seydim  ZB.  How  kefir fermentation  can  affect  product  composition? Small Ruminant Research. 2016;134:1–7.
6. Farnworth  ER.  Kefir  –  a  complex  probiotic. Food Science and Technology Bulletin: Functional Foods. 2005;2(1):1–17.
7. Otles  S,  Cagindi  O.  Kefir :  a  probiotic  dairy- composition  ,  nutritional  and  therapeutic aspects. Pakistan Journal of Nutrition.2003;2(2):54–9 8. Usmiati  SRI,  Sunarlim  R.  Pengaruh  suhu  dan lama  penyimpanan  terhadap  keasaman  dan kadar  alkohol  kefir.  Balai  Besar  Penelitian  dan Pengembangan Pertanian, Bogor. P 528–33.
9. Mayer  HK,  Fiechter  G.  Physicochemical characteristics of goat’s milk in Austria-seasonal variations  and  differences  between  six  breeds.
Journal Dairy Science
Technology.
2012;92(2):167–77.
10. Yadav  H,  Jain  S  SP.  Antidiabetic  effect  of probiotic dahi containing probiotic Lactobacillus acidophillus  in  high  fructose  fed  rats.  Nutrition Journal. 2007;23(1):62–8.
11. Rup  Mal,  Radiati  LE    dan  P.  Effect  of  Storage Duration  in  Refrigerator  Temperature  on  pH Value, Viscosity, Total Lactic Acid and Profiles Protein Dissolved of Goat Milk Kefir (Skripsi).Malang; 2013.
12. Nelms  M,  Sucher  KP,  Lacey  K,  Roth  SL. Nutrition  Therapy  and  Pathophysiology.  2nd ed. Wadsworth: Cengage Learning; 2011.
13. Cristina  M,  José  F,  Nóbrega  D,  Arlete  M, Schimith M. Insulin resistance in obese children and.  J  Pediatr.  Sociedade  Brasileira  de Pediatria; 2014;90(6):600–7.
14. Maria KA, Agnieszka P. The new insight on the regulatory  role  of  the  vitamin  D 3 in  metabolic pathways  characteristic  for  cancerogenesis  and neurodegenerative  diseases.  Ageing  Res  Rev. Elsevier B.V.; 2015;24:126–37.
15. Fauziyyah  F,  Anjani  G,  Panunggal  B.  Analisis Mikrobiologi  dan  Mutu  Gizi  Kefir  Susu Kambing Berdasarkan Waktu Fortifikasi
Vitamin D 3 ; 2017.
16. Gropper  SS,  Smith  JL,  Groff  JL.  Advanced Nutrition  and  Human  Metabolism.  5th  ed. Canada: Wadsworth Cengage Learning;
17. Ahmed AS, El-Bassiony T, Elmalt LM, Ibrahim HR. Identification of potent antioxidant bioactive peptides from goat milk proteins. Food Res Int. 2015;74:80–8.
18. Gaware  V,  Kotade  K,  Dolas  R,  Dhamak  K. ewsletter  Gaware  et  al  .  The  magic  of  kefir :  a review. Pharamcologyonline. 2011;386:376–86.
19. FAO  dan  WHO.  Codex  Alimentarius  Milk  and Milk  Products.  Codex  Alimentarius.  Roma; 2011. p 56-58.
20. Kaushik  R,  Sachdeva  B,  Arora  S,  Kapila  S,
Wadhwa BK. Bioavailability of vitamin D2 and calcium  from  fortified  milk.  Food  Chem. 2014;147:307–11.
Available from:
http://dx.doi.org/10.1016/j.foodchem.2013.09.15
0.
21. Jafari  T,  Faghihimani  E,  Feizi  A,  Iraj  B, Javanmard SH, Esmaillzadeh A, et al. Effects of vitamin  D-fortified  low  fat  yogurt  on  glycemic status,  anthropometric  indexes,  inflammation, and  bone  turnover  in  diabetic  postmenopausal women:  A  randomised  controlled  clinical  trial. Clin Nutr. 2014;35(1):67–76.
22. Cashman KD. Vitamin D : dietary requirements and  food  fortification  as  a  means  of  helping achieve  adequate  vitamin  D  status.  J  Steroid Biochem Mol Biol. 2015;148:19–26.
23. Biancuzzo  RM,  Young  A,  Bibuld  D,  Cai  MH, Winter  MR,  Klein  EK,  et  al.  Fortification  of orange juice with vitamin D 2 or vitamin D 3 is as effective as an oral supplement in maintaining vitamin D status in adults 1 – 4. Am J Clin Nutr. 2010;91(35):2–7.
24. Hasanvand E, Fathi M, Bassiri A, Javanmard M. Food  and  Bioproducts  Processing  Novel  starch based  nanocarrier  for  vitamin  D  fortification  of milk :  Production  and  characterization.  Food Bioprod Process. 2015;96:264–77.