103
This work is licensed under a Creative Commons Attribution-ShareAlike 4.0 International License

## Analisis Proksimat dan Kolagen pada Kulit Ikan Tawassang (Naso thynnoides)
Endah Dwijayanti 1*) , Rachmin Munadi 2 , Mirna Wati Farnatubun 3
Program Studi Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Islam Makassar,
Jl. Perintis Kemerdekaan km.9 No. 29 Makassar, Indonesia 90245 Email: endahdwijayanti.dty@uim-makassar.ac.id

## ABSTRAK
Analisis  proksimat  merupakan  analisis  yang  dilakukan  untuk  mengetahui  komposisi  kimia  pada  suatu  bahan  yang meliputi  analisis  kadar  air,  abu,  protein,  lemak,  dan  karbohidrat,  sedangkan  kolagen  merupakan  protein  serabut  yang memberikan  kekuatan  dan  fleksibilitas  pada  jaringan  tulang.  Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui kandungan proksimat dan kadar kolagen pada kulit ikan tawassang ( Naso thynnoides ).  Kolagen yang diperoleh setelah ekstraksi  melalui  tiga  tahap  yaitu  tahap  deproteinisasi  dengan  larutan  NaOH  0,05  M,  tahap  hidrolisis  dengan  larutan CH 3 COOH 0,5 M dan tahap ekstraksi dengan aquades pada suhu 45 ºC, hasil dalam bentuk serat berwarna kecoklatan dengan  berat  kolagen  2,61  g.  Hasil  dari  analisis  proksimat  menunjukan  kandungan  proksimat  tertinggi  yaitu  pada protein sebesar 79,27 %, diikuti kadar lemak 77,45 %, kadar abu 16,87 %, kadar air 0,11 %, kadar karbohidrat 0,039 %. Pengukuran  kadar  kolagen  ekstrak  pada  kulit  ikan  tawassang  ( Naso  thynnoides )  menggunakan  Spektrofotometer  UV- Vis  pada  panjang  gelombang  231  nm,  menunjukan  kadar  kolagen  ekstrak  kulit  ikan  tawassang  ( Naso  thynnoides ) sebesar  6,27  %.  Hasil  ini  menunjukan  kulit  ikan  tawassang  ( Naso  thynnoides )  dapat  dimanfaatkan  sebagai  bahan alternatif pengganti kolagen yang mudah diperoleh dan halal selain kolagen yang bersumber dari tulang sapi dan tulang babi.
Kata kunci: analisis; proksimat; tawasang; Naso thynnoides; kolagen

## ABSTRACT
Proximate analysis was conducted to determine the chemical composition which includes moisture, ash, protein, fat and carbohydrate  content,  while  collagen  is  a  fibrous  protein  that  provides  strength  and  flexibility  to  bone  tissue.  The purpose of this study was to determine the proximate content and levels of collagen in Tawassang’s skin fishes (Naso thynnoides). The collagen obtained  after extraction went through three stages, namely the deproteinization stage with 0.05  M  NaOH  solution,  the  hydrolysis  stage  with  0.5  M  CH3COOH  solution  and  the  extraction  stage  with  distilled water at  45 ºC in the  form of  brownish  fibers with a collagen weight of 2.61 g. The results of the proximate analysis showed  that the  highest  proximate  content  was  in the  protein  of  79.27%,  followed  by  the  fat  content of  77.45%,  ash content of 16.87%, water content of 0.11%, carbohydrate content of 0.039%. Then, measurement of collagen levels in Tawassang’s  skin  fishes  using  a  UV-Vis  Spectrophotometer  at  a  wavelength  of  231  nm,  showed  that  the  collagen content of Tawassang’s skin fishes extract was 6.27%. These results indicate that Tawassang’s skin fishes can be used as an alternative material to replace collagen from beef and pork bones.
Keywords: analysis; proximate; tawasang; Naso thynnoides; collagen

## PENDAHULUAN
Indonesia merupakan negara yang  terus menggalakkan  potensi  perikanan,  salah  satunya  dalam pengolahan  limbah  kulit  ikan  menjadi  kolagen  yang memberikan  keuntungan  dalam  pemecahan  masalah limbah  perikanan  dan  pemenuhan  kebutuhan  kolagen dalam negeri untuk penghematan devisa karena hampir sekitar  tiga  perempat  dari  total  berat  ikan  merupakan limbahnya (Koli dkk., 2012).
Kolagen merupakan  protein  dengan  struktur berserat dan menjadi komponen utama suatu organisme hidup. Pemanfaatan ekstrak kolagen diantaranya untuk industri  kosmetik,  farmasi  (penyembuh  luka),  dan makanan  karena  kolagen  memiliki  sifat  daya  tarik ( tensile strength ) yang tinggi, antigenisitas rendah, dan biokompatibilitas  yang  baik.  Kolagen  juga  dapat menginduksi  koagulasi  trombosit,  mempengaruhi diferensiasi sel, dan berkontribusi dalam penyembuhan luka (Subhan dkk., 2017; Romadhon dkk., 2019)
Industri kolagen  sebenarnya  saat  ini  sudah banyak dikembangkan, sebagian besar kolagen tersebut diproduksi  dari  kulit  dan  tulang  sapi  dan  babi. Beberapa tahun belakangan penyakit Bovines Pongifoem  Encephalopathy (BSE)  atau  sapi  gila  yang tengah  disebabkan  oleh  mikroorganisme  seperti  virus atau  bakteri.  Pada  tahun  2017,  Organisasi  Kesehatan Dunia  (WHO)  melaporkan  kasus  penyakit  sapi  gila paling  banyak  ditemukan  di  Inggris,  diikuti  Perancis, Spanyol,  Irlandia  dan  Amerika.  Penyakit  ini  juga ditemukan  di  beberapa  negara-negara  Asia.  Penyakit sapi  gila  dapat  menulari  manusia  yang  diberi  istilah Variant Creutzfeldt Jakob Disease (VCJD) yang terjadi akibat  mengonsumsi  otak  atau  sumsum  tulang  sapi yang terinfeksi penyakit BSE (Manik dkk., 2019).
Efek  dari  penyakit  BSE,  penderita  akan mengalami  gangguan  saraf,  gerakan  otot  yang  tidak terkendali  dan  hilangnya  koordinasi  antar  anggota tubuh.  Selain  itu,  kolagen  yang  bersumber  dari  tulang babi  kurang  sesuai  dengan  keyakinan  agama  tertentu misalnya  Islam,  Yahudi,  dan  Hindu.  Hal  tersebut menjadi  kebimbangan  di  kalagan  produsen  jika digunakan kolagen dari sapi dan babi. Oleh karena itu, perlu  penelusuran  sumber  lain  sebagai  penghasil kolagen yang aman dan halal (Choi dkk., 2013).
Kolagen  yang  berasal  dari  ikan  menggandung kadar  protein  di  atas  80  %  dan  18  jenis  asam  amino esensial,  yang  tujuh  di  antaranya  merupakan  asam amino esensial. Oleh karena itu, pemanfaatan kulit ikan yang  merupakan  limbah  hasil  perairan  mulai  diminati sebagai alternatif sumber kolagen. Potensi pemanfaatan kulit  ikan  sebagai  sumber  kolagen  dapat  dilakukan dengan  uji  analisis  proksimat.  Analisis  proksimat merupakan  analisis  yang  dilakukan  untuk  mengetahui komposisi  kimia  pada  suatu  bahan  yang  meliputi analisis  kadar  air,  kadar  abu,  kadar  protein,  kadar lemak,  dan  kadar  karbohidrat.  Manfaat  dari  analisis proksimat  dalam  membandingkan  kualitas  komoditi sejenis  apakah  potensial  sebagai  bahan  makanan sumber  kalori,  sumber  protein,  sumber  mineral  dan sumber kolagen (Lestari dkk., 2013).
Beberapa  penelitian  menunjukkan  kulit  ikan mengandung  kolagen  di  antaranya  penelitian  yang dilakukan  oleh  Astiana,  (2016)  yang  mengekstrak kolagen  dari  kulit  ikan  ekor  kuning  ( Caesio  cuning ) mendapatkan kadar sebesar 1,49 %. Penelitian  lainnya dari  Romadhon,  dkk.,  (2019)  kolagen  pada  ikan  nila (Oreochromis  niloticus) sebesar  0,94  %,  serta  pada ikan  bandeng  ( Chanos  chanos) kadar  kolagen  yang diperoleh 1,84 % (Paudi dkk., 2022).
Berdasarkan  data  penelitian  tersebut  dapat dimungkinkan  pada  jenis  kulit  ikan  lain  mengandung kolagen.  Salah  satunya  ikan  tawassang (Naso thynnoides) yang  merupakan  salah  satu  komoditas perikanan  yang digemari  masyarakat dalam  memenuhi kebutuhan  protein  hewani  karena  memiliki  daging yang tebal serta dapat berpotensi untuk dibudidayakan, sehingga  perlu  dilakukan  pengujian  proksimat  dan kadar kolagen pada ikan tawassang (Naso thynnoides).

## METODOLOGI  PENELITIAN

## Alat, Bahan dan Metode
Alat  -  alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah  peralatan  sederhana  laboratorium,  oven,  tanur, desikator,  timbangan  analitik,  Foss  (KJELTEC), sokhlet, freeze  dryer ,  Spektrofotometer  UV-Vis  T60 sebagai instrument analisanya.
Bahan-bahan  yang  digunakan  pada  penelitian ini  adalah  kulit  ikan  tawassang (Naso  thynnoides) Aquadest  (H 2 O),  H 2 SO 4 pekat,  selenium  mix,  asam asetat  glasial  (CH 3 COOH),  n-heksan,  kertas  saring, kolagen p.a, Natrium hidroksida (NaOH).

## Prosedur Kerja
1. Preparasi sampel
Sampel yang diperoleh terlebih dahulu dipisahkan dari dagingnya, kemudian dicuci dengan air mengalir  untuk  menghilangkan  kotoran  dan  sisa-sisa daging  yang  menempel  pada  kulit  ikan  tawassang. Setelah  bersih,  kulit  ikan  tawassang  dikeringkan  di bawah  sinar  matahari  selama  10  jam.  kemudian dikeringkan  dalam  oven  7  jam,  kemudian  dipotong kecil-kecil dengan dimensi 0,5 x 0,5 cm dan ditimbang.
2. Analisis Proksimat
a. Analisis Kadar Air
Cawan  porselin  dikeringkan  dalam  oven  pada suhu  105  ºC  selama  60  menit  kemudian  didinginkan dalam desikator selama 15 menit lalu ditimbang hingga beratnya  konstan.  Sampel  ditimbang  sebanyak  1  g dalam  cawan  dan  dikeringkan  dalam  oven  pada  suhu 105  ºC  selama  480  menit.  kemudian  dimasukkan  ke dalam desikator dan ditimbang hingga beratnya konstan. Kadar  air  ditentukan  menggunakan  persamaan  (1) sebagai berikut :    (AOAC, 2005).
Kadar air = w - (w1 - w2)
w1 - w2 x 100 % .............................. (1)
Keterangan: W   = Berat sampel sebelum dikeringkan W1  = Berat cawan + sampel W2  = Berat cawan kosong

## b. Analisis Kadar Abu
Cawan dikeringkan dengan oven pada suhu 105 ºC  selama  60  menit,  kemudian  didinginkan  dalam desikator  selama  15  menit  lalu  ditimbang  hingga beratnya  konstan.  Sampel  ditimbang  sebanyak  1,02  g dalam  cawan  dan  dipijarkan  di  atas  nyala  api  kompor listrik  hingga  tidak  berasap  lalu  dimasukkan  ke  dalam tanur  pengabuan  dengan  suhu  600  ºC  selama  120 menit.  Abu  dimasukkan  ke  dalam  desikator  dan ditimbang  hingga  beratnya  konstan.  Kadar  abu ditentukan  menggunakan  pada  persaman  (2)  sebagai berikut :      (AOAC, 2005).
Kadar abu= w1 - w2 w x100 % .................................... (2)
Keterangan: W   = Berat sampel sebelum dikeringkan W1  = Berat cawan + sampel W2  = Berat cawan kosong

## c. Analisis Kadar Protein
Sampel  ditimbang  sebanyak  0,50  g,  kemudian dimasukkan  ke  dalam  labu  kjeldahl  100  mL,  lalu ditambahkan selenium mix 1 g dan  8 mL H 2 SO 4 pekat. Sampel  didestruksi  pada  suhu  410  °C  selama  kurang lebih 60  menit  sampai  larutan  berwarna kuning  jernih, lalu  didinginkan  hingga  sampel  benar-benar  dingin. Selanjutnya  distilasi  dengan  menggunakan  alat  Foss, lalu dicatat hasil analisis yang diperoleh. Kadar protein ditentukan  menggunakan  pada  persaman  (3)  sebagai berikut :   (AOAC., 2005)
Kadar protein 100 % = Kadar protein Bahan kering x 100 % ........ (3)

## d. Analisis Kadar Lemak
Sampel  ditimbang  sebanyak  2  g  kemudian dimasukkan ke dalam klonsong sokhlet dan diekstraksi mengguakan  pelarut  n-heksan.  Ekstrak  n-heksan  yang diperoleh  kemudian  dikeringkan  di  dalam  oven  pada suhu 100 ºC selama 60 menit. Kadar lemak ditentukan mengunakan  pada  persamaan  (4)  sebagai  berikut: (AOAC., 2005)
Kadar lemak = Bobot lemak terekstrak Bobot sampel x 100 % ............. (4)

## e. Analisis Kadar Karbohidrat
Analisis  karbohidrat  dilakukan  secara by difference yaitu  hasil  pengurangan  dari  100  %  dengan kadar  air,  kadar  abu,  kadar  protein,  kadar  Lemak  dan Kadar  karbohidrat  ditentukan  dengan  rumus  pada persamaan (5) sebagai berikut: (Nurhidayah, dkk., 2019)
Kadar KH = 100 % - (k1)+(k2)+(k3)+(k4)  .............. (5)
Keterangan: KH  = kadar karbohidrat k1   = kadar air k2   = kadar abu k3   = kadar protein k4   = kadar lemak.

## 3. Ekstraksi Kolagen
Ekstraksi  kolagen  dilakukan  dengan  tiga  tahap, yaitu  deproteinisasi  menggunakan  larutan  natrium hidroksida  (NaOH),  perendaman  dalam  larutan  asam asetat (CH 3 COOH) dan ekstraksi dengan air.

## a. Proses Deproteinisasi
Kulit  ikan  sebanyak  100  g  direndam  dengan larutan  NaOH  0,05  M  dengan  rasio  1:10  (b/v)  selama 600  menit  dan  setiap  120  menit  pelarut  NaOH  diganti dengan  yang  baru,  kemudian  sampel  kulit  ikan  hasil proses  deproteinisasi  dengan  perendaman  NaOH, disaring dan dicuci dengan air suling sampai mencapai pH netral  (pH 7).

## b. Proses Hidrolisis
Sampel  kulit  ikan  yang  telah  dinetralkan, direndam  kembali  dengan  larutan  CH 3 COOH  0,5  M selama  120  menit  dengan  rasio  1:10  (b/v),  diukur kembali  pH  nya.  Kemudian  sampel  kulit  ikan  hasil proses  dengan  perendaman  CH 3 COOH  disaring  dan dicuci kembali dengan air  suling  sampai  mencapai pH netral (pH 7).

## c. Proses Ekstraksi dengan Air
Residu  hasil  hidrolisis  diekstraksi  dengan  air pada suhu 45 ºC selama 120 menit dengan rasio antara kulit  dengan  air  adalah  1:5  (b/v),  kemudian  disaring dengan  kertas  saring.  Hasil  ekstraksi  berupa  kolagen larut air, selanjutnya dikeringkan dengan menggunakan Freeze Dryer untuk memperoleh kolagen dalam bentuk serbuk.

## 4. Analisis Kolagen
Serbuk  kolagen  ditimbang  sebanyak  50  mg  dan dilarutkan  dalam  10  mL  asam  asetat  0,5  M  kemudian distirer  hingga  larut,  kemudian  dimasukkan  ke  dalam labu 50 mL, dicukupkan volumenya sampai tanda batas dengan  asam  asetat  0,5  M.  Selanjutnya  diambil  5  mL untuk  dilakukan  pengukuran  dengan  menggunakan spektrofotometer UV-Vis.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui kandungan proksimat dan kolagen pada ikan tawasang ( Naso  thynnoides ).  Analisis  proksimat  adalah  analisis yang  dilakukan  untuk  mengetahui  komposisi  pada suatu bahan meliputi kadar air, abu, protein, lemak dan karbohidrat,  dan  menjadi  acuan  untuk  menentukan proses  ekstraksi  kolagen  dari  kulit  ikan  tawassang sehingga  dapat  diketahui  apakah  pada  kulit  ikan
y = 0.001x + 0.2104 r = 0.9903 0,000 0,200 0,400 0,600 0,800 0 200 400 600 Abs or b an si
Kolagen (ppm)
tawassang  dapat  dijadikan  sebagai  bahan  alternatif kolagen yang aman.
Tabel  1. Hasil  Analisis  Proksimat  pada  Kulit  Ikan Tawassang (Naso thynnoides) Komponen Kadar (%) Air 0,11 Abu 16,87 Protein 79,27 Lemak 77,45 Karbohidrat 0,037
Hasil pada tabel 1, menunjukkan pada kulit ikan tawassang,  kandungan  proksimat  tertinggi  adalah senyawa  protein  dengan  kadar  79,27  %.  Kandungan protein  yang  tinggi  pada  kulit  ikan  tawassang  ( Naso thynnoides )  sesuai  dengan  syarat  mutu  kolagen berdasarkan  Standarisasi  Nasional  Indonesia  tahun 2014  ( SNI  8076-2014)  yaitu ≥  75  %,  sehingga kulit ikan tawassang ( Naso thynnoides ) dapat dijadikan sebagai  bahan  alternatif  kolagen  yang  merupakan produk turunan dari protein.
Protein  adalah  sumber  asam  amino  yang  terdiri dari unsur karbon, oksigen, hidrogen dan nirogen yang berfungsi  sebagai  zat  pembangun  jaringan-jaringan baru,  pengatur  proses  saat  diekstraksi  selanjutnya. Kolagen  merupakan  protein  jaringan  ikat  yang merupakan  protein  yang  lebih  sulit  diekstrak  jika dibandingkan  dengan  protein  lain  sehingga  pada  saat perendaman  menggunakan  NaOH,  protein-protein  non kolagen  akan  larut  terlebih  dahulu,  karena  kolagen biasanya  tidak  dapat  larut  dalam  larutan  alkali  (Liu, dkk., 2015).
Kolagen  adalah  salah  satu  dari  jaringan  ikat utama  protein  hewani  dengan  proporsi  30  %  dari total protein  tubuh  sebagai  komponen  utama  dari  jaringan ikat,  otot,  gusi  dan  kulit.  Kolagen  pada  kulit  ikan tawassang (Naso thynnoides) diperoleh melalui 3 tahap yaitu tahap pertama deproteinisasi, tahap hidrolisis dan tahap ekstraksi.
Tahap deproteinisasi merupakan proses penghilangan protein pada kulit ikan tawassang dengan larutan  NaOH  0,05  M  yang  bertujuan  untuk menghilangkan  protein  non  kolagen  pada  kulit  ikan tawassang (Naso thynnoides). sehingga protein kolagen mudah  larut  pada  saat  diekstraksi  selanjutnya.  Pada tahap  ini  terjadi  perubahan  materi  secara  kimia  yaitu reaksi  antara  kolagen  kulit  (satu  dari  tiga  asam  amino yang terkandung dalam rantai peptidanya adalah glisin) dengan NaOH (Ida, 2016).
Setelah  dilakukan  proses  penghilangan  protein tahap selanjutnya yaitu tahap hidrolisis yang merupakan proses  penguraian  zat  dengan  larutan  asam  asetat (CH 3 COOH)  0,5  M.  Tujuan  proses  hidrolisis  untuk membantu  meningkatkan  ion  H + yang  mengakibatkan air  lebih  mudah  berpenetrasi  ke  dalam  serat  kolagen melalui  gaya  elektrostatik  antara  gugus  polar.  Proses ini  menyebabkan  terjadinya  perubahan  materi  protein kolagen  (asam  amino  glisin)  yang  bereaksi  dengan CH 3 COOH.  Hal  ini  berpengaruh  terhadap  mutu
struktur  serat  tropokolagen  menjadi  prokolagen  ikatan nonkovalen dan pada akhirnya  memudahkan kelarutan kolagen  pada  proses  ekstraksi.  Pemutusan  ikatan  pada hidrogen dan ikatan kovalen, menyebabkan prokolagen berubah  strukturnya  menjadi  kolagen  (Jaswir,  dkk., 2011).
Setelah  memperoleh  hasil  dari  tahap  hidrolisis, selajutnya  kulit  ikan  tawassang (Naso  thynnoides) diekstrak dengan air, pada suhu 45 ºC bertujuan untuk menghindari  denaturasi  lanjut  sehingga  kolagen  tidak terkonversi  menjadi  gelatin.  Ekstraksi  kolagen  cair kemudian  dikeringkan  dengan  freeze  dryer  untuk memperoleh  kolagen  dalam  bentuk  serat  berwarna kecoklatan dengan berat 2,61 g. Penelitian sebelumnya juga  dilakukan  oleh  Dahliyanti  &  Shifani  (2022)  yang mengekstraksi kolagen dari kulit ikan selar (Selaroides leptolesis)  memperoleh  kolagen  berwarna  kecoklatan dalam bentuk padatan.
Kolagen  yang  diperoleh  selanjutnya  diuji menggunakan  Spektrofotometer  UV-Vis.  Menurut Erizal dkk., (2014), spektrofotometer UV-Vis memiliki serapan  panjang  gelombang  untuk  kolagen  pada kisaran 200-250 nm. Pengukuran kolagen pada sampel kulit  ikan  tawassan  ( Naso  thynnoides ) dengan menggunakan  metode  Spektrofotometer  UV-Vis  pada absorbansi panjang galombang 231 nm (Tabel 2).
Penentuan secara kualitatif dilaksanakan berdasarkan dengan cara komparatif yang menggunakan kurva  kalibrasi  tertentu  dengan  panjang  gelombang tertentu.  Untuk  penentuan  yang  secara  kuantitatif berdasarkan  puncak-puncak  yang  dihasilkan  spektrum dengan  adanya  senyawa  yang  kompleks  sesuai  unsur yang dianalisisnya (Yanlinastuti & Fatimah, 2016).
Tabel 2. Hasil Pengukuran Kolagen
Kolagen (ppm) Absorbansi (λ = 231 nm) 100 0,290 200 0,413 300 0,520 400 0,593 500 0,682
Gambar 1. Kurva Kalibrasi Pengukuran Kolagen
Kurva kalibrasi pengukuran kolagen menunjukkan nilai koefisien korelasi (r) = 0,9903. Hasil ini memiliki nilai  baik  karena  mendekati  1  sesuai  dengan  literatur yang  menyatakan  kriteria  penerimaan  yaitu  nilai
koefisien  korelasi  (r)  mendekati  1  (0,99≤  r  ≤  1) (Gandjar & Rohman, 2013).
Tabel  3. Hasil  Pengukuran  Kadar  Kolagen  Ekstrak Kulit Ikan Tawassang (Naso thynnoides)
Kode sampel Absorbansi Kolagen terukur (ppm) Kadar kolagen (%) Rata- Rata ± SD Simplo 0,522 311,60 6,23 6,27  % ± 0,04 Duplo 0,526 315,60 6,31 Triplo 0,523 312,60 6,25
Pada  tabel  3,  menunjukkan  kadar  kolagen  pada kulit  ikan  tawassang  ( Naso  thynnoides )  yaitu  sebesar 6,27 % (tabel 3), lebih tinggi jika dibandingkan dengan kandungan  kolagen  pada  kulit  jenis  Ikan  lainnya seperti  kulit  ikan  nila  ( Oreochromis  niloticus )  sebesar 0,94 %, kulit ikan ekor kuning ( Caesio cuning ) 1.49 % dan  kulit  ikan  bandeng  ( Chanos  chanos )  sebesar 1,84%.  Hasil  ini  menunjukkan  kulit  ikan  tawassang ( Naso thynnoides ) dapat dimanfaatkan sebagai  sumber alternatif  kolagen  yang  yang  mudah  diperoleh,  aman dan halal.

## UCAPAN TERIMA KASIH :
Ucapan  terima  kasih  kepada  Program  Studi Kimia  Fakultas  MIPA  serta  kepada  pihak  lembaga penelitian dan pengabdian kepada  masyarakat (LP2M) Universitas Islam Makassar yang telah mendukung dan membantu pelaksanaan penelitian.

## DAFTAR PUSTAKA
Astiana, I., Nurjanah, Nurhayati, T. (2016). Karakterisasi  Kolagen  Larut  Asam  dari  Kulit Ikan  Ekor  Kuning. Jurnal  Pengolahan  Hasil Perikanan Indonesia. 19( 1 ):79-93.
[AOAC]  Association  of  Official  Analytical  Chemist..
(2005). Official  Methods  of  Analysis  (18Ed) . USA:  The  Association  of  Official  Analytical Chemist. Inc. Mayland.
Choi  J.H,  Behnam  Sh,  &  Kim  S.M.  (2013). Physicobiochemical Characteristics of Scallop Mantle  Collagen  Soluble  in  Pepsin. Journal Agricultural  Scienceand  Technology  15:293- 302.
Dahliyanti  A.  &  Shifani,  N.I.  (2022).  Ekstraksi Kolagen  dari  Kulit  Ikan  Selar  (Selaroides Leptolepis)  dengan  Menggunakan  Metode Larut Asam  dengan  Penambahan  Enzim Pepsin  dan  Papain. Jurnal  Teknologia. Volume 4(2).
Erizal,  Perkasa,  D.P.,  Abbas,  B.,  Sudirman,  S.,  & Sulistioso, G.S.  (2014). Fast Swelling
Superabsorbent  Hydrogels  Starch  Based Prepared  By  Gamma  Radiation  Techniques. Indonesia Journal of Chemestry, 14 (3) : 246- 252.
Ida,  Ayu  Kade.  (2016).  Pengaruh  Konsumsi  Protein dan  Seng  serta  Riwayat  Penyakit  Infeksi Terhadap  Kejadian  Shunting  pada  Anak Balita  Umur  24-59  Bulan  di  Wilayah  Kerja Puskesmas Nusa Penida III. Fakultas Kesehatan Masyarakat UI.
Jaswir  I,  Monsur  H.A,  Salleh  H.M.  (2011).  Nano Structural  Analysis  of  Fish  Collagen  Extracts for  New  Process  Development. African Journal  of  Biotechnology 10(81):  18847- 18854.
Koli  J.M,  Basua  S,  Nayaka  B.B, Koli  J.M,  Basua  S, Patageb S.B, Pagarkarb A.U., & Gudipatia V. (2012).  Fuctional  Characteristics  of  Gelatin Extracted from Skin and Bone of Tigertoothed Croaker  (Otolithes  ruber)  and  Pink  Perch (Nemipterus japonicas). Food Bioprod Process 90: 555-62.
Manik,  R.,  Azanuddin  A.,Panjaitan  Z.,(2019) . Sistem Pakar  Mendiagnosa  Penyakit  Mad  Cow Disease  (Sapi  Gila)  Menggunakan  Metode Certainty Factor. Jurnal Cyber Tech . 2(9). Lestari, L.A., Nisa, F.Z., & Sudarmanto. (2013). Modul Tutorial  Analisis  Zat  Gizi. BOPTN  P3-UGM Yogyakarta.
Liu  D,  Wei  G,  Li  T,  Hua  J,  Lu  J,  Regenstein  J.M,  &
Zhou P.  (2015) . Effects of Alkaline Pretreatments and Acid Extraction Conditions on  The  Acid-Soluble  Collagen  from  Grass Carp  (Ctenopharyngodon  Idella)  Skin. Food Chemistry. 172:836– 843.
Paudi,  R.,  Sulistijowati,  R.,  &  Mile,  L.,  (2022). Rendemen Kolagen Kulit Ikan Bandeng. Nikè: Jurnal  Ilmiah  Perikanan  dan  Kelautan. Volume 10, Issue 2.
Romadhon,  Darmanto  Y.S,  Kurniasih  R.A.,  (2019).
Karakteristik  Kolagen dari Tulang,  Kulit, dan Sisik  Ikan  Nila. Jurnal  Pengolahan  Hasil Perikanan Indonesia . 22(2): 403-410. Standarisasi  Nasional  Indonesia.  (2014). Kolagen Kasar dari Sisik Ikan . 17390_SNI 8076-2014. J akarta (ID): Badan Standarisasi Nasional. Subhan  F.,  Kang  H.Y.,  Lim  Y.,  Ikram  M.,  Baek S.Y., Jin  S.,  Jeong  Y.H.,  Kwak  J.Y.,  &  Yoon  S. (2017).  Fish  Scale  Collagen  Peptides  Protect Against  CoCl2/TNF-α-induced  Cytotoxicity and  Inflammation  via  Inhibition  of  ROS, MAPK, and NF-κB Pathways in HaCaT Cells. Oxidative  Medicine  and  Cellular  Longevity . 2017:1-17.
Yanlinastuti & Fatimah S. (2016). Pengaruh Konsentrasi Pelarut untuk Menentukan  Kadar Zirikonium  dalam  Paduan  U-Zr  dengan Menggunakan  Metode  Spektrofotometer  UV- Vis. Pin  Pengelolaan  Instalasi  Nuklir. ISSN 1979-2409 hal 23.