## UJI DAYA ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL UMBI WORTEL
( Daucus carota L.) TERHADAP Staphylococcus aureus DAN Escherichia coli

## SECARA IN VITRO
Arsenius Y. Sirait 1) , Nancy C. Pelealu 1) , Paulina V.Y. YamLean 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
Infectious  diseases is  one of  the  problems in the field  of health from  time  to  time  continue to grow. Staphylococcus aureus (S. aureus) and  Escherichia coli (E. coli) is a bacterium that causes most infections in the community and nosocomial infections. This study aims to provide information about the antibacterial  activity  of  ethanol  extract  of  carrot  root  of  carrot  (Daucus  carota  L.)  on  Staphylococcus aureus  and  Escherichia  coli  in  vitro.  Extraction  was  done  by  maceration  method  using  ethanol  96%. Testing  for  antibacterial  activity  using  agar  diffusion  method  (Kirby  and  Bauer  diffusion  modified)  by way  of  pitting. Antibacterial  activity test results  analyzed by  One  Way  Anova  (analysis  of  variance  one way)  followed  by  Duncan test.  The  result  showedvthat  extract  concentrations  of    5%,  10%,  20%,  40%, and  80%  have  to  provide  activities  that  inhibits  the  growth  of  test  bacteria.  Any  increase  in concentrations of 5% (3,50 mm), 10% (3,67 mm), 20% (4,83 mm), 40% (5.16 mm) and 80% (6, 67 mm) for a review of Escherichia coli and a concentration of 5% (3,17 mm), 10% (3.83 mm), 20% (4,00 mm), 40%  (4,17  mm)  and  80%  (4,33  mm)  to  review  the  bacterium  Staphylococcus  aureus.  But  not  effective hearts  activities  inhibit  bacteria  due  to  inhibition  zone  from  the  second  test  bacteria  each  singer  were moderate. As for inhibiting have to use a strong inhibition zone (5-10 mm) or the most powerful (> 20 mm).
Keywords: Antibacterial activity, Daucus Carota L, pathogen bacterial, the agar diffusion method

## ABSTRAK
Penyakit  infeksi  merupakan  salah  satu  masalah  dalam  bidang  kesehatan  yang  dari  waktu  ke waktu  terus  berkembang. Staphylococcus  aureus  (S.  aureus) dan Escherichia  coli  (E.  coli) merupakan bakteri  penyebab terbanyak  infeksi di  komunitas  dan  infeksi  nosokomial.  Penelitian ini  bertujuan  untuk dapat memberikan informasi tentang aktivitas antibakteri dari ekstrak etanol umbi wortel ( Daucus carota L.)  terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus dan Escherichia  coli secara  in  vitro.  Ekstraksi  dilakukan dengan  cara  maserasi  menggunakan  pelarut  etanol  96%.  Pengujian  aktivitas  antibakteri  menggunakan metode difusi agar (difusi Kirby dan Bauer yang dimodifikasi) dengan cara sumuran. Hasil uji aktivitas antibakteri  dianalisa  dengan  metode One  Way  Anova (Analisa  varians  satu  arah)  dilanjutan  dengan  uji Duncan.  Hasil  data  menunjukkan  bahwa  konsentrasi  ekstrak  5%,  10%,  20%,  40%,  dan  80%  telah memberikan  aktivitas  yang  menghambat  pertumbuhan  bakteri  uji.  Ekstrak  etanol  umbi  wortel  ( Daucus carota L.)  memiliki  efek  antibakteri..Terdapat  penambahan  diameter  zona  hambat  pada  setiap  kenaikan konsentrasi 5% (3,50 mm) , 10% (3,67 mm), 20% (4.83 mm), 40% (5,16 mm) dan 80% (6,67 mm) untuk bakteri Escherichia  coli dan  konsentrasi  5%  (3,17  mm)  ,  10%  (3,83  mm),  20%  (4,00  mm),  40%  (4,17 mm) dan 80% (4,33 mm) untuk bakteri Staphylococcus aureus . Namun tidak efektif dalam menghambat aktivitas  bakteri  dikarenakan  zona  hambat  dari  kedua  masing-masing  bakteri  uji  ini  termasuk  sedang. Sedangkan untuk menghambat harus menggunakan zona hambat yang kuat (5-10 mm) atau paling kuat ( > 20 mm).
Kata Kunci: Aktivitas antibakteri, Daucus Carota [L], bakteri patogen, metode difusi agar

## PENDAHULUAN
Penyakit  infeksi  merupakan  salah satu  masalah  dalam  bidang  kesehatan yang  dari  waktu  ke  waktu  terus berkembang.  Penyakit  infeksi  banyak disebabkan  oleh  mikroorganisme  flora normal,  sebagai  contoh,  beberapa  bakteri penting yang dapat menyebabkan penyakit ialah Staphylococcus aureus dan Escherichia coli (Jawetz et al., 2005).
Bakteri Staphylococcus  aureus  (S. aureus) dan Escherichia  coli  (E.  coli) merupakan  bakteri  penyebab  terbanyak infeksi di komunitas dan infeksi nosokomial. Bakteri S. aureus merupakan bakteri  patogen  utama  pada  manusia. S. aureus bersifat  koagulase  positif,  yang membedakannya dari spesies lain. Hampir setiap  orang  pernah  mengalami  berbagai infeksi S.  aureus selama  hidupnya,  dari keracunan  makanan  yang  berat  atau infeksi  kulit  yang  kecil,  sampai  infeksi yang  tidak  bisa  disembuhkan  (Sleight  & Timbury,  1995;  Brooks et  al., 2008). Banyak  tanaman  sayur  yang  dapat digunakan  sebagai  tanaman  obat,  salah satunya  adalah  wortel  (Daucus  carotaL.). Wortel  merupakan  tanaman  sayur  yang banyak  kegunaannya  bagi  pelayanan kesehatan  masyarakat  di  dunia.  Selain kaya    akan  kandungan  gizi,  terutama vitamin A juga berkhasiat untuk penyembuhan berbagai penyakit (Rukmana, 1995).
Pada penelitian sebelumnya uji aktivitas  antibakteri  ekstrak  etanol  umbi wortel dilakukan terhadap Propionibacterium acnes dan
Pseudomonas  aeruginosa menggunakan metode  dilusi  padat.  Konsentrasi  ekstrak yang  digunakan  7%,  8%,  9%,  10%,  dan 11%  yang  hasilnya  tidak  memiliki aktivitas antibakteri terhadap Propionibacterium acnes dan
Pseudomonas aeruginosa . Simplisia yang diperoleh  diekstraksi  dengan  metode maserasi,  tujuannya  untuk  mendapatkan ekstrak  kental  yang  digunakan  dalam
penelitian (Widya A. Pra e y n ng  m   2011) Berdasarkan  hasil  penelitian  tersebut diatas maka peneliti ingin mengetahui ada tidaknya  efek  antimikroba  ekstrak  etanol Daucus carota terhadap bakteri Staphylococcus  aureus dan Escherichia coli .  Konsentrasi  ekstrak  yang  digunakan sebesar 5, 10, 20, 40, dan 80%.

## METODOLOGI PENELITIAN Alat dan Bahan
Alat  alat  yang  digunakan  antara lain:  erlenmeyer  (Approx  GG  –  17)  , gelas  ukur  (Pyrex),  gelas  kimia  (pyrex), tabung reaksi (Pyrex), rak tabung reaksi, pipet tetes (Pyrex), penangas air
(IEC.CAT No 1920-001), blender (Miyako),  ayakan mesh 65  (Han  Jaya The  Best  Quality)  ,  kaca  arloji, timbangan analitik (ADAM), labu ekstraksi  (Pyrex)  ,  batang  pengaduk, stirer,  cawan  petri,  rotary  evaporator (Steroglass  Strike  300),    jarum  ose, pinset,  inkubator  (Incucell)  ,  laminar  air flow  (N-Biotek  Leading),  pencadang,
autoklaf (KT-30S No.805027), mikropipet  (Eco Pipette by  ΔPP  50  μl) m       be  k l   (Tw   ’n  Flex)  d n kamera.
Bahan-bahan  yang  digunakan antara  lain:  umbi  wortel  ( Daucus  carota L.),  bakteri  uji (Staphylococcus  aureus, dan Escherichia  coli ),  Carboxy  Methyl Cellulose  (CMC),  aquades  steril,  etanol 96%,  tablet  Ciprofloxacin  500  mg, Nutrient  Agar  (NA),  H 2 SO 4 0,36  N, BaCl 2 .2H 2 O  1,175%,  NaCl  0,9%,  kertas saring, kertas label dan aluminium foil .

## Persiapan Sampel
Umbi  Wortel  sebanyak  5  kg dibersihkan  dari  kotoran,  kemudian dicuci  di  bawah  air  mengalir  sampai bersih, ditiriskan, lalu dikeringkan dengan cara diangin-anginkan dan dipanaskan  dalam  oven.  Sampel  yang telah kering diserbukkan dengan
menggunakan  blender,  serbuk  yang dihasilkan  diayak  menggunakan  ayakan mesh 65  hingga  diperoleh  serbuk  yang
PHARMACON Jurnal Ilmiah Farmasi – UNSRAT  Vol. 5 No. 4 NOVEMBER 2016 ISSN 2302 - 2493
halus dan seragam. Hasilnya dimasukkan ke dalam wadah gelas tertutup (Gunawan dan Mulyani, 2004).

## Pembuatan Ekstrak
Ekstrak  umbi  wortel  dibuat  dengan cara  maserasi.  Sebanyak  60  gr  serbuk simplisia  umbi  wortel  dimasukkan  ke dalam  erlenmeyer,  kemudian  direndam dengan  larutan  etanol  96%  sebanyak  225 mL,  ditutup  dengan aluminium  foil dan dibiarkan  selama  5  hari  sambil  sesekali diaduk.  Setelah  5  hari,  sampel  yang direndam  tersebut  disaring  menggunakan kertas  saring  menghasilkan  filtrat  1  dan residu  1.  Ampas  yang  ada  kemudian ditambah  dengan  larutan  etanol  96% sebanyak 75 mL, ditutup dengan aluminium  foil  dan  dibiarkan  selama  2 hari  sambil  sesekali  diaduk.  Setelah  2 hari, sampel tersebut disaring menggunakan kertas saring menghasilkan filtrat  2  dan  residu  2.  Filtrat  1  dan  2 dicampur  menjadi  satu,  lalu  dievaporasi menggunakan rotary evaporator, sehingga diperoleh  ekstrak  kental  umbi  wortel. Ekstrak  kental  yang  dihasilkan  dibiarkan pada suhu ruangan hingga seluruh pelarut etanol  menguap.  Ekstrak  ditimbang  dan disimpan  dalam  wadah  gelas  tertutup sebelum  digunakan  untuk  pengujian (Depkes RI, 1986).
Sterilisasi Alat
Alat-alat  yang  digunakan  dalam penelitian aktivitas antibakteri ini
disterilkan terlebih dahulu. Alat-alat gelas disterilkan  dalam  oven  pada  suhu  170 o C selama  ±  2  jam,  jarum  ose  dan  pinset dibakar  dengan  pembakaran  diatas  api langsung  dan  media  disterilkan  dalam autoklaf  pada  suhu  121 o C  selama  15 menit (Lay dan Hastowo, 1992).

## Pembuatan Kontrol Negatif
Kontrol  negatif  dibuat  dari  CMC 1%  dengan  cara:  1  gr  serbuk  CMC dilarutkan  dalam  100  mL  aquades  steril. Dikocok sampai larutan homogen.

## Pembuatan Kontrol Positif
Kontrol  positif  dibuat  dari  sediaan tablet  Ciprofloxacin  500  mg.  Tablet Ciprofloxacin digerus, lalu ditimbang dan
disetarakan  dengan  50  mg  ciprofloxacin murni.  Kemudian  serbuk  Ciprofloxacin sebanyak  50  mg  dilarutkan  dalam  50  mL larutan  CMC  untuk  memperoleh  larutan C p oflox c n  50  μg/50  μL.  Sel nj  ny diencerkan  dengan  diambil  1  mL  dari larutan  Ciprofloxacin  50  mg/50  mL  dan digenapkan  sampai  10  mL  dengan  CMC 1%.
Pembuatan Larutan Uji Pembuatan larutan uji hasil ekstraksi  umbi  wortel  (Daucus  carota  L.) dalam  berbagai  konsentrasi  dengan  cara sebagai berikut :
a. Dibuat  larutan  uji  5%  b/v  dengan cara ditimbang 0.05 g ekstrak etanol umbi  wortel  kemudian  dilarutkan dalam 1 mL larutan CMC.
b. Dibuat  larutan  uji  10%  b/v  dengan cara  ditimbang  0.1  g  ekstrak  etanol umbi  wortel  kemudian  dilarutkan dalam 1 mL larutan CMC.
c. Dibuat  larutan  uji  20%  b/v  dengan cara  ditimbang  0.2  g  ekstrak  etanol umbi  wortel  kemudian  dilarutkan dalam 1 mL larutan CMC.
d. Dibuat  larutan  uji  40%  b/v  dengan cara  ditimbang  0.4  g  ekstrak  etanol umbi  wortel  kemudian  dilarutkan dalam 1 mL larutan CMC.
e. Dibuat  larutan  uji  80%  b/v  dengan cara  ditimbang  0.8  g  ekstrak  etanol umbi  wortel  kemudian  dilarutkan dalam 1 mL larutan CMC.
Pembuatan Media
(a) Media Agar Miring Nutrient Agar (NA) sebanyak 0,46 gr dilarutkan dalam 20 mL  aquades (23 gr/1000 mL) menggunakan erlenmeyer. Setelah itu dihomogenkan  dengan  stirer  diatas penangas air  sampai  mendidih.
Sebanyak  5  mL  dituangkan  masing- masing  pada  3  tabung  reaksi  steril dan  ditutup  dengan  aluminium  foil. Media  tersebut  disterilkan  dalam outoklaf pada suhu 121 o C selama 15 menit, kemudian dibiarkan pada suhu ruangan  selama  ±  30  menit  sampai media  memadat  pada  kemiringan
PHARMACON Jurnal Ilmiah Farmasi – UNSRAT  Vol. 5 No. 4 NOVEMBER 2016 ISSN 2302 - 2493
30 o .  Media  Agar  miring  digunakan untuk inokulasi bakteri (Lay, 1994).
(b) Media Dasar Media  dasar  dibuat  dengan  cara ditimbang Nutrient Agar (NA) sebanyak  2,3  gr,  lalu  dilarutkan dalam  100  mL  aquades  (23  gr/1000 mL) menggunakan erlenmeyer.
Setelah  itu,  dihomogenkan  dengan stirrer diatas  penangas  air  sampai mendidih. Media yang sudah homogen ini disterilkan dalam outoklaf pada suhu  121 o C selama 15 menit,  kemudian didinginkan sampai suhu 45-50 o C.  Media  dasar digunakan  dalam  pembuatan  media pengujian sebagai lapisan dasar.
(c) Media Pembenihan Media  pembenihan  dibuat  dengan cara  ditimbang  5,75  gr  NA,  lalu dilarutkan  dalam  250  mL  aquades (23  gr/1000  mL)  menggunakan erlenmeyer.  Setelah  itu,  masing- masing media dihomogenkan dengan stirer  diatas  penangas  air  sampai mendidih.  Media-  media  yang  sudah homogen ini disterilkan dalam outoklaf pada suhu  121 o C selama 15 menit,  kemudian didinginkan sampai suhu  ±  45-50 o C.  Media  dasar  dan media  pembenihan  digunakan  dalam pembuatan  media  pengujian  sebagai lapisan dasar dan lapisan kedua.
Inokulasi Bakteri pada Media Agar Miring
Bakteri  uji  diambil  dengan  jarum ose  steril,  lalu  ditanamkan  pada  media agar  miring  dengan  cara  menggores. Selanjutnya  diinkubasi  dalam  inkubator pada suhu 37 o C selama 24 jam. Perlakuan yang  sama  dilakukan  pada  setiap  jenis bakteri uji (Siregar, 2009).
Pembuatan Standar Kekeruhan Larutan (Larutan Mc.Farland)
Larutan  H2SO4  0,36  N  sebanyak 99,5  mL  dicampurkan  dengan  larutan BaCl2.2H2O  1,175%  sebanyak  0,5  mL dalam  erlenmeyer.  Kemudian  dikocok sampai  terbentuk  larutan  yang  keruh. Kekeruhan  ini  dipakai  sebagai  standar
kekeruhan  suspensi  bakteri  uji  (Victor, 1980).

## Pembuatan Suspensi Bakteri Uji
Bakteri  uji  yang  telah  diinokulasi diambil  dengan  kawat  ose  steril  lalu disuspensikan kedalam tabung yang berisi 2  mL  larutan  NaCl  0,9%  hingga  di peroleh  kekeruhan  yang  sama  dengan standar  kekeruhan  larutan  Mc.  Farland. Perlakuan  yang  sama  dilakukan  pada setiap jenis bakteri uji.

## Pembuatan Media Pengujian
Lapisan  dasar  dibuat  dengan menuangkan  masing-masing  10  mL  NA dari media dasar ke dalam 9 cawan petri, lalu  dibiarkan  sampai  memadat.  Setelah memadat,  pada  permukaan  lapisan  dasar diletakkan  7  pencadang  baja  yang  diatur sedemikian  rupa  jaraknya  agar  daerah pengamatan  tidak  saling  bertumpuh. Kemudian,  suspensi  bakteri  dicampurkan ke dalam media pembenihan NA. Setelah itu, dituangkan 25 mL campuran suspensi dan media pembenihan tersebut ke dalam tiap cawan petri yang diletakkan pencadang sebagai lapisan kedua. Selanjutnya,  pencadang  diangkat  secara aseptik  dari  cawan  petri,  sehingga akhirnya  terbentuklah  sumur-sumur  yang akan digunakan dalam uji antibakteri. Uji Aktivitas Antibakteri secara in- vitro
Larutan  uji  ekstrak  etanol  daun mayana dengan berbagai konsentrasi (5%, 10%,  20%,  40%  dan  80%);  larutan  CMC 1%  sebagai  kontrol  negatif;  larutan C p oflox c n 50 μg/50 μl  eb g   kon  ol positif,  masing-masing  diteteskan  pada m    y ng  be bed    eb ny k  50  μl. Kemudian  cawan  petri  diinkubasi  dalam inkubator  pada  suhu  37 o C  selama  1x24 jam.
Pengamatan dan Pengukuran Pengamatan dilakukan setelah 1x24  jam  masa  inkubasi.  Daerah  bening merupakan  petunjuk  kepekaan  bakteri terhadap antibiotik  atau  bahan antibakteri lainnya yang digunakan sebagai bahan uji yang  dinyatakan  dengan  lebar  diameter zona  hambat.  Diameter  zona  hambat
PHARMACON Jurnal Ilmiah Farmasi – UNSRAT  Vol. 5 No. 4 NOVEMBER 2016 ISSN 2302 - 2493
diukur  dalam  satuan  milimeter  (mm) menggunakan  mistar  berskala  dengan cara  diameter  keseluruhan  dikurangi diameter  sumuran  7  mm.  Kemudian diameter zona hambat tersebut dikategorikan kekuatan daya antibakterinya  berdasarkan  penggolongan
Davis and Stout (1971).
Analisis Data
Data  hasil  pengujian  aktivitas ekstrak  etanol  umbi  wortel  ( Daucus carota L.) terhadap diameter zona hambat pertumbuhan bakteri
Staphylococcus aureus , Escherichia  coli dianalisa secara statistik  menggunakan  metode  One  way anova  (analisa  varians  satu  arah)  dengan progr Statistical Product Services Solution (SPSS 17) dengan taraf
kepe c y  n  95%        α  =  0 05 dilanjutkan dengan uji Duncan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Ekstraksi
Hasil  maserasi  yang  diperoleh ditampung, lalu ampas dimaserasi
kembali  dengan  pelarut  etanol  96% sebanyak  75  mL  selama  2  hari  sambil sesekali  diaduk.  Hasil  maserasi  yang didapatkan  berupa  filtrat  yang  berwarna orange  tua  kehitaman  sebanyak  225  mL.
Selanjutnya diuapkan menggunakan rotary evaporator maka diperoleh ekstrak kental 2,9045 gram  dengan warna orange tua kehitaman.
Uji Daya Antibakbteri Ekstrak Etanol Umbi Wortel ( Daucus carota L.) Menurut  hasil  uji  aktivitas  antibakteri ekstrak  etanol  umbi  wortel  ( Daucus carota L.)  melalui  pengamatan  1  x  24 jam  masa  inkubasi  dengan  3  kali pengulangan untuk
masing-masing bakteri  uji,  kepekaan  bakteri  terhadap antibiotik  dapat  diamati  berdasarkan terbentuknya zona hambat (daerah bening di  sekitar  sumuran/pencadang).  Zona hambat  yang  terbentuk  memiliki  panjang diameter sekitar 7 mm.
Tabel  1.  Hasil  Pengukuran  Diameter  Zona  Hambat  Ekstrak  Etanol  Umbi  Wortel ( Daucus carota L.) Bakteri Escherichia coli
Ulangan Diameter Zona Hambat (mm) Kontrol (+) Kontrol (-) 5% 10% 20% 40% 80% E.c 1 4,00 4,00 5,50 10,00 5,50 35,50 0,00 E.c 2 3,50 5,00 4,50 2,00 6,00 36,50 0,00 E.c 3 3,00 2,00 4,50 3,50 8,50 34,00 0,00 Rata-Rata 3,50 3,67 4,83 5,16 6,67 35,33 0 Keterangan : E.c 1 = Escherichia coli pengulangan pertama E.c 2 = Escherichia coli pengulangan kedua E.c 3 = Escherichia coli pengulangan ketiga
Tabel  2.  Hasil  Pengukuran  Diameter  Zona  Hambat  Ekstrak  Etanol  Umbi  Wortel ( Daucus carota L.) Bakteri Staphylococcus aureus
Ulangan Diameter Zona Hambat (mm) Kontrol (+)  Kontrol (-) 5% 10% 20% 40% 80% S.a 1 3,50 4,00 3,00 5,00 5,00 14,00 0,00 S.a 2 2,50 3,50 4,00 4,00 4,00 17,00 0,00 S.a 3 3,50 4,00 5,00 3,50 5,00 15,00 0,00 Rata-Rata 3,17 3,83 4,00 4,17 4,33 15,33 0
Keterangan : E.c 1 = Staphylococcus aureus pengulangan pertama E.c 2 = Staphylococcus aureus pengulangan kedua E.c 3 = Staphylococcus aureus pengulangan ketiga
Pada  pengujian  ini,  dilakukan inkubasi  pada  suhu  37 0 C  yang  bertujuan untuk memaksimalkan pertumbuhan bakteri.  Selanjutnya  akan  di  dapatkan diameter  zona  hambatnya  dari  kedua bakteri  tersebut  dimana  kekuatan  zona hambat  bakteri  tersebut  di  kategorikan kekuatan  daya  hambatnya  menurut  davis dan stout sebagai berikut :
(a) Sangat kuat (zona hambat ialah > 20 mm)
(b) Kuat (zona zambat ialah 10-20 mm)
(c) Sedang  (zona  hambatnya  ialah  5-10 mm)
(d) Lemah  (zona  hambatnya  ialah  <  5 mm)
Berdasarkan  hasil  uji One  Way  Anova yang sudah dilakukan menunjukkan  nilai signifikan  0,000  (p<0.05  untuk  bakteri Staphylococcus  aureus dan Escherichia coli yang  artinya  terdapat  perbedaan yang signifikan terhadap pengaruh perlakuan  yang  diberikan  oleh  bakteri  uji tersebut.  Diameter  zona  hambat  ini terbentuk secara statistika dengan perbedaan  satu  dengan  yang  lain.  Hal  ini dapat menunjukkan bahwa kontrol positif dan  kelima  konsentasi  ekstrak  etanol umbi  wortek  ini  baik  pada  konsenstrasi 5%,  10%,  20%,  40%,  dan  80%  dapat memberikan  aktivitas  yang  menghambat pertumbuhan bakteri
Staphyloccous
aureus dan Escherichia coli.
Uji  duncan  terhadap  diameter  zona hambat  bakteri Eschirichia  coli untuk konsentrasi  5%  (3,5000  mm),  10% (3,6667  mm),  20%  (4,8333  mm),  40% (5,1667  mm),  80%  (6,6667  mm  ) menunjukkan  perbedaan  yang  nyata. Berdasarkan  hal  tersebut  menjelaskan bahwa  konsentrasi  ekstrak  umbi  wortel ( Daucus  carota L.)  telah  menghasilkan efek  yang  berbeda  dalam  menghambat pertumbuhan  bakteri Escherichia  coli. Akan  tetapi  konsentrasi  5%  (3,5000  mm) dan  konsentrasi  10%  (3,6667  mm) menunjukkan  tidak  ada  perbedaan  yang nyata,  yang  dalam  dilihat  pada  kolom subset yang  sama.  Hal  ini  berarti konsentrasi  tersebut  menunjukkan  efek yang sama dalam menghambat pertumbuhan  bakteri Escherichia  coli . Sedangkan  efek  yang  dihasilkan  pada konsentrasi  ekstrak  80%  (6,6667  mm) menunjukkan  efek  yang  paling  baik. Sedangkan  konsentrasi  paling  kecil  yang masih  bisa  menghambat  pertumbuhan pertumbuhan  bakteri Escherichia  coli pada konsentrasi ekstrak 5%.
Untuk  menunjukkan  perubahan  diameter zona  hambat  bakteri Escherichia  coli pada  masing-masing  konsentrasi  ekstrak, maka  data  pada  Tabel  1  dibuat  dengan menggunakan diagram batang pada Gambar 4.
3,5 3,7 4,8 5,2 6,7 0 2 4 6 8 5 10 20 40 80 Dia m eter Zo n a Ha m b at (m m ) Konsentrasi (%) Diameter
Gambar 4. Diagram  batang Hubungan Konsentrasi  Ekstrak Etanol  Umbi  Wortel terhadap Diameter Zona Hambat Pertumbuhan Bakteri
Escherichia coli
Uji  duncan  terhadap  diameter  zona hambat  bakteri Staphylococcus  aureus untuk  konsentrasi  5%  (3,1667  mm),  10% (3,8333  mm),  20%  (4,0000  mm),  40% (4,1667  mm),  80%  (4,3333)  menunjukkan perbedaan  yang  nyata.  Berdasarkan  hal tersebut  menjelaskan  bahwa  konsentrasi ekstrak  umbi  wortel  ( Daucus  carota L.) telah  menghasilkan  efek  yang  berbeda dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus aureus. Akan tetapi konsentrasi 10% (3,8333 mm) dan konsentrasi 20% (4,0000 mm) menunjukkan  tidak  ada  perbedaan  yang nyata, yang dapat dilihat pada kolom subset
yang  sama.  Hal  ini  berarti  konsentrasi
tersebut  menunjukkan  efek  yang  sama dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  aureus .  Sedangkan  efek yang  dihasilkan  pada  konsentrasi  ekstrak 80%  menunjukkan  efek  yang  paling  baik. Sedangkan  konsentrasi  ekstrak  terkecil yang masih dapat menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus terdapat pada konsentrasi 5%.
Untuk  menunjukkan  perubahan  diameter zona hambat bakteri Staphylococcus aureus pada  masing-masing  konsentrasi  ekstrak, maka  data  pada  Tabel  2  dibuat  dengan menggunakan diagram batang pada Gambar 5.
Gambar 5. Diagram  batang Hubungan Konsentrasi  Ekstrak Etanol  Umbi  Wortel terhadap Diameter Zona Hambat Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus aureus
Menurut  Davis  dan  Stout  (1971), kekuatan  daya  hambat  antibakteri  adalah sebagai  berikut  :  diameter  zona  hambat  5 mm atau kurang dikategorikan lemah, zona hambat  5-10  mm  dikategorikan  sedang, zona hambat 10-20 dikategorikan kuat, dan zona hambat 20 mm atau lebih dikategorikan  sangat  kuat..  Sesuai  dengan kriteria  tersebut,  maka  daya  antibakteri ekstrak  Umbi  Wortel  ( Daucus carota L) pada  bakteri Escherichia  coli dengan konsentrasi  ekstrak  5%  (3,50  mm),  10% (3,67  mm)  ,  dan  20%  (4,83  mm)  termasuk lemah  dan  konsentrasi  ekstrak  40%  (5,16 mm) dan ekstrak 80% (6,67 mm) termasuk
sedang.  Daya  antibakteri Staphylococcus aureus pada  konsentrasi  5%  (3,17  mm)  , 10%  (3,83  mm)  ,  20%  (4,00  mm),  40%
(4,17  mm)  ,  dan  80%  (4,33  mm)  termasuk lemah.
Aktivitas  ekstrak  etanol  umbi  wortel ( Daucus  carota L)  dalam  menghambat pertumbuhan bakteri Gram negatif Staphylococcus  aureus lebih  peka  bila dibandingkan  dengan  bakteri  gram  positif Escherichia  coli .  Hal  ini  disebabkan adanya  perbedaan  sttruktur  dinding  sel kedua  jenis  bakteri  tersebut.  Dinding  sel bakteri  gram  positif  terdiri  dari  bebrapa lapisan  peptidoglikan  serta  mengandung
3,2 3,8 4 4,2 4,3 0 0,5 1 1,5 2 2,5 3 3,5 4 4,5 5 5 10 20 40 80 Dia m eter Zo n a Ha m b at (m m ) Konsentrasi (%) Diameter
substansi  dinding  sel  yang  disebut  sebagai asam  teikoat,  sedangkan  untuk  dinding  sel gram  negatif  terdiri  dari  satu  atau  lebih lapisan  peptidoglikan  yang  tipis.  Semua dinding sel bakteri mengandung makromolekul  yang  disebut  peptidoglikan, komponen  ini  memiliki  fungsi  untuk mempertahankan keutuhan
sel.
Dikarenakan  hanya  mengandung  sedikit lapisan peptidoglikan dan tidak mengandung  asam  teikoat,  maka  dinding sel  bakteri  gram  negatif  lebih  rentan terkena  serangan  fisik  seperti  pemberian antibiotic  atau  bahan  antibakteri  lainnya. Selanjutnya  perbedaan  struktur  dinding  sel ini  juga  bisa  menyebabkan  kedua  jenis bakteri tersebut memberikan respon terhadap pewarnaan gram.

## KESIMPULAN
1. Ekstrak etanol umbi wortel ( Daucus carota L.) memiliki efek antibakteri terhadap Staphylococcus  aureus dan Escherichia coli ..
2. Terdapat penambahan diameter zona  hambat  pada  setiap  perbedaan konsentrasi  5%  (3,50  mm)  ,  10%
(3,67  mm),  20%  (4.83  mm),  40%
(5,16  mm)  dan  80%  (6,67  mm) untuk menghambat bakteri Escherichia  coli dan  konsentrasi 5%  (3,17  mm)  ,  10%  (3,83  mm), 20%  (4,00  mm),  40%  (4,17  mm)
dan 80% (4,33 mm) untuk menghambat bakteri Staphylococcus aureus .

## SARAN
Sebaiknya dilakukan penelitian lebih  lanjut  tentang  identifikasi  senyawa yang berperan sebagai antibakteri.

## DAFTAR PUSTAKA
And   P  mono  d n  Sy f ’   M.  2005.
Kolaborasi  Flash,  Dreamweaver  dan PHP  Untuk  Aplikasi  Website. Andi.
Yogyakarta
Anonim.  2010. Manfaat  Wortel  Untuk Kesehatan  dan  Kecantikan . Diakses http://resepmasakanindonesia.idcc.inf o/manfaat-wortel-untuk-kesehatan-
dan kecantikan.htm tanggal 23
februari 2012
Aliero,  A.  A.,  Aliero,  B.L.  and  Buhari,  U. 2008. Preliminary phytochemical  and antibacterial  screening  of  Scadoxus multiflorus.  International  Journal  of Pure  and  Applied  Sciences. Int.  Jor.
P. App. Scs . 2(4):13-17
Apriliaw.  2011. Alpha  Carotine dan Beta Carotine . Diaskes http://dilihat .com/news/alpha-carotine-dan-beta- carotine tanggal 25 Maret 2012
Aryulina,  D  ;  Muslim  C  ;  Manaf  S  ;  Dr. Endang  Widi  Winarni.  2006. Buku Biologi  SMA  dan  MA  Kelas  X. Erlangga. Jakarta
Berg,  A.T.,  Berkovic,  S.F.,  Brodie,  M.J., Buchhalter,  J.,  cross,  J.H.,  Boas, W.E.,  Engel,  J.,  French,  J.,  Glauser, T.A.,  Mathern,  W.,  Moshe,  S.L., Nordli,  D.,  Plouin,  P.,  Scheffer,  I.E., 2010, Revised  Terminology  and
Concepsts for Organization of Seizures  and  Eilepsies:  Report  of  the ILAE  Comission  on  Classificatio  and Terminology  2005-2009 ,  Epilepsia, 51(4), 676-685.
Berlian Nur, dan Hartuti, 2003. Wortel dan
Lobak. Penebar Swadaya. Jakarta B kov ćL.  D ško   Lj lj n   Čom ć   Sl v c Sol j ć-Sukdolak, 2006, Antibacterial  Activity  of  Some Plants  From  Family  Apiaceae in Relation to Selected Phytopathogenic Bacteria , Kragujevac J. Sci, 28 , 65-72
Cahyono, B. 2002. Wortel Teknik Budidaya  dan  Analisis  Usaha  Tani. Kanisius. Yogyakarta
Damalimartha, S., 2001,36, Resep Tumbuhan  Obat  untuk  Menurunkan Kadar Kolesterol, 5-8; 24-26. Penebar Swadaya. Jakarta
Deby A. Mpila. 2007. Skripsi Uji Aktivitas Antibakteri  Esktrak  Etanol  Daun Mayana  (Coleus  atropurpureus  [L] Benth) Terhadap Staphylococcus aureus, Escherichia coli dan Pseudomonas  aeruginosa  Secara  In- Vitro. Universitas SamRatulangi. Manado Departemen  Kesehatan  RI.  2006. Badan Penelitian dan Pengembangan
Kesehatan. Jakarta.
Depkes RI. 1986. Sediaan Galenik. Depkes RI. Hal. 1-16. Jakarta
Depkes  RI,  2000,  Parameter  Standar
Umum  Ekstrak  Tumbuhan  Obat (Edisi 1). Direktorat Jenderal Pengawasan  Obat  dan  Makanan. Jakarta Ganiswarna. 1995. Farmakologi dan
Terapi. EGC Kedokteran. Jakarta
Gunawan D. Mulyani, S., 2004. Ilmu Obat Alam (Farmakognosi) Jilid I . Penebar Swaday. Jakarta
Hadioetomo,  Ratna  S.1990. Mikrobiologi Dasar  Dalam  Praktek  Jilid  II .
Jakarta:  PT Gramedia.
Harbottle. H., S. Thakur, S. Zhao and D. G.
White. 2006. Genetics of Antimicrobial Resistance. Anim
Biotechnol., 17: 111-124.
J we z M; Adelbe g’ . 2005. Mikrobiologi Kedokteran.  edisi  23.  Alih  Bahasa  :
Huriwati Hartanto dkk. Penerbit Buku
Kedokteran ECG. Jakarta
Juliantina, F.R. 2008. Manfaat Sirih Merah (Piper crocatum) Sebagai Agen Anti Bakterial  Terhadap  Bakteri  Gram Positif  Dan  Gram  Negatif .  JKKI  – Jurnal  Kedokteran  dan  Kesehatan
Indonesia Lay, B, W. Dan Hastowo. 1982. Mikrobiologi. Rajawali Press. Jakarta
Ningtyas,  V.A  dan  L.Y.  Astuti.  2009.
Pemanfaatan Tandan Kosong Kelapa Sawit  Sisa  Media  Jamur  Merang (Volvariella volvacea) sebagai Pupuk Organik dengan Penambahan Aktivitas  Effective  Microorganism EM-4. Dikutip dari http://www.deptan.go.id  pada  tanggal 11 Oktober 2010. 8 halaman.
Pelczar,  Michael,  J.,  E.C.S  Chan.  1988.
Dasar-Dasar  Mikrobiologi . UI-Press. Jakarta
Prof.  Dr.  D.  Dwidjoseputro.  1985. Dasar- Dasar Mikrobiologi. Djembatan. Malang
Rahayu,  R.  Y.  2007. Komposisi  Kimia Rabbit  Nugget  dengan  Komposisi Filler Tepung Tapioka yang Berbeda. Skripsi. Fakultas Peternakan Universitas Gajah Mada. Yogyakarta
Rochani,  N.  2009. Uji  Aktivitas  Antijamur Ekstrak  Daun  Binahong  (Anredera cordifolia (Tenore) Steenis) Terhadap Candica  albicans  serta  Skrining Fitokimianya. Skripsi Tidak Diterbitkan. Fakultas  Farmasi  UMS Surakarta. Surabaya
Rukmana,  R  dan  Saputra  Sugandi.,  1995.
Hama Tanaman dan Teknik
Pengendalian. Bumi aksara. Jakarta
Setiabudy, R., Gan, V. H. 2007. Pengantar Antimikroba.  Dalam  :  Farmakologi
dan  Terapi  Edisi  5. Gata  Baru, Jakarta. Halaman 571-578.
Siregar,  Syofian.2010. Statistik  Deskriptif
Untuk Penelitian . Rajagrafindo Persada. Jakarta
Sjahid,  L.R.  2008. Isolasi  dan  Identifikasi Flavonoid  dari  Daun  Dewandaru ( Eugenia  uniflora L.).  Universitas Muhammadiyah Surakarta
Sleigh  J.D.  &  Timbury,  M.C.  1994. Notes on Medical Bacteriology. 4th edition.
Churchill Livingstone. London
Smith-Keary P. F., 1988, Genetic Elements in Escherichia coli, Macmillan Molecular  biology  series ,  London,  p. 1-9, 49-54
Soleha,  M.,  Elvistra,  H.  L.,  Fitri,  N.  & Triyani. 2009. Pola Resistensi Bakteri Terhadap  Antimikroba  di  Jakarta, Proceeding  Puslitbang  Biomedis  dan
Farmasi .  Badan  Litbang  Kesehatan.
Jakarta
Sulistyo.  1971. Farmakologi  dan  Terapi. EKG. Yogyakarta
Syamsuhidayat,  S.S.  dan  Hutapea.  J.R.
1991. Inventarisasi  Tanaman  Obat Indonesia.
Tjay T. H. dan R. Kirana, 2002, Obat-Obat Penting,  ed.  5 .  PT.  Elex  Media Komputindo. Jakarta
Warsa,  U.C.  1994. Staphylococcus  dalam Buku  Ajar  Mikrobiologi  Kedokteran.
Edisi Revisi. Penerbit Binarupa
Aksara. Jakarta Hal. 103-110. Widya  Ayu  Prasetyaningrum.2011. Uji
Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Etanol Umbi  Wortel  (Daucus  carota  L.) Terhadap  Propionibacterium  acnes dan  Pseudomonas  aeruginosa  serta skrining fitokimia. Universitas Muhammadiyah Surakarta. Surakarta