## JANHUS Journal of Animal Husbandry Science
Jurnal Ilmu Peternakan Fakultas Pertanian, Universitas Garut P ISSN : 2548-7914, E ISSN : 2775-0469

## ANALISIS TOTAL BAKTERI DAN KOLIFORM PADA MEDIA PERTUMBUHAN MAGGOT Black Soldier Flies DENGAN FORMULASI MEDIA FESES SAPI POTONG, ENDAPAN SUSU, DAN SAMPAH ORGANIK DAPUR
(Analysis of Total Bacteria and Coliforms In Black Soldier Flies Larvae Growth Media with Beef Cattle Feces, Milk sludge, and Kitchen Organic Waste Formulations)
Hepia Rahmadita 1 ;  Yuli Astuti Hidayati 2 ; Ellin Harlia 3
1 Mahasiswa Fakultas Peternakan, Universitas Padjadjaran, Sumedang 45363, Indonesia
2,3 Staff Pengajar Fakultas Peternakan, Universitas Padjadjaran, Sumedang 45363, Indonesia
Email :
1 hepia20001@mail.unpad.ac.id
3 ellin.harlia@unpad.ac.id

## Abstrak
Limbah  endapan  susu  dan  feses  sapi  potong  dapat  menyebabkan  masalah  utama  untuk lingkungan  apabila  tidak  diolah  dengan baik.  Salah  satu  solusi  untuk menangani  limbah tersebut  yaitu  menggunakannya  sebagai  media  pertumbuhan maggot BSF.  Keberadaan mikroba  dalam  media  pertumbuhan  magot  memberikan  peran  positif  maupun  peran negatif. Penelitian ini memiliki tujuan untuk mengetahui jumlah bakteri dan koliform pada media  pertumbuhan  sampah  organik  dapur  dan  endapan  susu.  Metode  yang  digunakan yaitu eksploratif data yang diperoleh dilakukan analisis statistik menggunakan uji paired t- test dengan 4 perlakuan dan 5 ulangan. Perlakuan terdiri atas P0 = sampah organik dapur, P1 = Sampah organik dapur dan feses sapi potong, P2 = sampah organik dapur dan endapan susu, dan P3 = feses sapi potong, sampah organik dapur, dan endapan susu. Hasil penelitian menunjukkan  bahwa  formulasi  media  pertumbuhan maggot BSF  memberikan  pengaruh yang  berbeda  terhadap perubahan  total  bakteri  dan  koliform  pada  awal  dan  akhir  proses degradasi.  Formulasi  media  pertumbuhan  endapan  susu  dan  sampah  organik  dapur memberikan penurunan total bakteri dan koliform tertinggi.
Kata kunci: Bakteri, Endapan susu, Koliform, Maggot , Feses.

## Abstract
Milk  sludge  and  beef  cattle  feces  can  cause  major  problems  for  the  environment  if  not treated properly. One solution for dealing with this waste is to use it as a growth medium for BSF maggots. The presence of microbes in maggot growth media provides both positive and negative roles. This research aims to determine the number of bacteria and coliforms in maggot growth media from beef cattle feces, Milk sludge and kitchen organic waste. The
method used was experimental. The data obtained was analyzed using a paired t-test with 4 treatments and 5 replications. The treatment consisted of P0 = kitchen organic waste, P1 = kitchen organic waste and beef cow feces, P2 = kitchen organic waste and Milk sludge, and P3 = beef cow feces, kitchen organic waste and Milk sludge. The results showed that the  BSF  maggot  growth  media  formulation  had  a  different  effect  on  changes  in  total bacteria  and  coliforms  at  the  beginning  and  end  of  the  degradation  process.  The formulation of Milk sludge growth media and kitchen organic waste provided the highest reduction in total bacteria and coliforms.
Keywords:  Bacteri, Coliform, Feces, Maggot, Milk Sludge.

## 1 Pendahuluan
Limbah industri peternakan secara on-farm maupun off-farm meningkat setiap tahunnya. Secara off-farm ,  pemeliharaan  sapi  potong  untuk  memenuhi  kebutuhan  protein  hewani  menghasilkan limbah  cair  yaitu  urin  serta  limbah  padat  yaitu  feses.  Secara  on-farm,  pengolahan  susu menghasilkan  limbah  yaitu  endapan  susu  yang  memiliki  karakter  rentan  ditumbuhi  bakteri. Disamping itu, Aktivitas manusia dalam memenuhi kebutuhan akan bahan pangan tidak terlepas dari  limbah  yang dihasilkan  yaitu  sampah  organik dapur.  Limbah organik  yang belum  melalui proses pengolahan diolah termasuk kedalam senyawa kompleks, dan jika dibuang secara langsung tidak akan bisa diserap oleh lingkungan dan berpotensi mencemari lingkungan.
Salah satu upaya untuk mengelola dan mendayagunakan limbah feses sapi potong, endapan susu, dan sampah organik dapur yaitu dengan menggunakannya sebagai media pertumbuhan maggot BSF. Faktor yang memengaruhi proses degradasi maggot BSF adalah ketersediaan nutrisi (C/N 15-30),  pH  (6,5-7,5),  suhu  (30-36 o C),  kadar  air  (60-90%)  (Beesigamukama  dkk.,  2021). Kandungan  nutrisi  media  yang  akan  diberikan  kepada maggot penting  untuk  memaksimalkan kemampuan maggot mereduksi limbah organik (Rahmadhani, dkk. 2022). C/N rasio sapi potong 7,5  dan  endapan  susu  4,2  sehingga  diperlukan  sampah  organik  dapur  untuk  menyeimbangkan nisbah C/N (Foster, 2006; Hasil Analisa Laboratorium Nutrisi, 2024).
Maggot BSF ( Hermetia illucens ) adalah fase larva dari lalat jenis Black Soldier Flies yang bisa digunakan sebagai bahan pakan sumber protein serta residu dari larva BSF dapat digunakan untuk pupuk kompos. Lalat Black Soldier Flies memiliki lima siklus selama hidupnya yaitu fase telur, larva,  pre  pupa,  pupa,  dan  imago  (Wynants  dkk.,  2019). Maggot BSF  tidak  dapat  mencerna senyawa  kompleks  sehingga  media  pertumbuhan  perlu  didegradasi  dengan  bantuan mikroorganisme  sebelum  diberikan  pada maggot BSF  (Fitriana  dkk.,  2023).  Pada  proses degradasi  ditambahkan  bioaktivator  EM4  yang  berfungsi  sebagai  starter  untuk  meningkatkan mikroorganisme pengurai. Sumber karbohidrat dibutuhkan untuk pertumbuhan mikroorganisme pada bioaktivator EM4. Salah satu sumber karbohidrat yang dapat digunakan molases (Walpajri dkk.,  2023).
Maggot BSF menguraikan limbah organik menjadi bentuk yang lebih sederhana tidak lepas dari bantuan bakteri. Namun, tidak semua bakteri yang terkandung pada media pertumbuhan maggot adalah bakteri menguntungkan. Pada feses sapi potong dan endapan susu, mengandung bakteri koliform yang menjadi indikator pencemaran yaitu bakteri koliform fekal dan koliform non fekal. Pada  fase  menuju  prepupa,  larva  BSF  akan  melepaskan  senyawa  antibakteri  pada  biomassa kompos sehingga kompos terhindar dari bakteri patogen (Lalander dkk., 2013). Tujuan penelitian ini untuk menganalisis kualitas mikroba yaitu  total bakteri dan koliform pada media pertumbuhan
maggot dengan  kombinasi  feses  sapi  potong,  endapan  susu,  dan  sampah  organik  dapur  untuk menemukan formulasi media pertumbuhan maggot terbaik agar kasgot yang dihasilkan sesuai dengan SNI 14-7030-2004.

## 2 Bahan dan Metode Penelitian

## Materi dan Waktu Penelitian
Materi yang diteliti pada penelitian ini adalah media pertumbuhan maggot BSF dengan berbagai formulasi feses sapi potong, endapan susu, dan sampah organik dapur. Penelitian dilakukan pada Desember 2023 – Februari 2024 di Teaching Farm Sapi Potong dan Laboratorium Mikrobiologi dan Penanganan Limbah Fakultas Peternakan Universitas Padjadjaran.

## Bahan penelitian
Bahan yang diperlukan pada penelitian ini yaitu feses sapi potong, endapan susu, sampah organik dapur,  telur maggot BSF,  EM4,  molases, Brilliant  Green  lactose  Broth (BGLB,  1  set  zat pewarnaan  Gram,  NaCl  Fisiologis  0,9%, Eosin  Methylene  Blue  Agar  (EMBA),  Nutrient  Agar. Alat yang dibutuhkan pada penelitian ini yaitu baki, silo, ram nyamuk, jaring, autoclave , blue tip, mikrotip, erlenmeyer, tabung reaksi, cawan petri, inkubator, timbangan, laminar, colony counter, vortex , tabung durham, mikroskop, osse, bunsen, dan object glass.

## Metode Penelitian
Metode  yang  digunakan  adalah  metode  eksploratif  dengan  empat  perlakuan  dan  lima  ulangan, yaitu :
P0 : Sampah organik dapur (100%); P1 : Sampah organik dapur (50%) dan feses sapi potong (50%); P2 : Sampah organik dapur (50%) dan endapan susu (50%); P3 : Sampah organik dapur (33,33%), feses sapi potong (33,33%), dan endapan susu  (33,33%)
Data  hasil  penelitian  kemudian dianalisis  secara  statistik  menggunakan Uji  Paired  t-test untuk membandingkan  sampel  sebelum  dan  setelah  degradasi  oleh maggot BSF. Seluruh data  diolah menggunakan software IBM SPSS 25.

## Metode Pemeliharaan Maggot BSF
Feses sapi potong, endapan susu, dan sampah organik dapur yang akan digunakan sebagai media pertumbuhan maggot BSF masing-masing dilakukan fermentasi menggunakan EM4 selama 7 hari secara  anaerob.  Bersamaan  dengan  proses  fermentasi,  dilakukan  penetasan  telur maggot BSF sebanyak  1  gram  menggunakan  ampas  tahu  sebanyak  50  gram.  Setelah  usia maggot BSF mencapai  7  hari, maggot BSF  diberikan  pakan  yang  telah  difermentasi  sesuai  perlakuan. Frekuensi  pemberian  pakan  dilakukan  1  kali  dalam  5  hari.  Biomassa maggot dan  biomassa kompos dipanen setelah usia maggot BSF 21 hari. Pengambilan sampel dilakukan sebanyak 2 kali untuk mengetahui total bakteri dan koliform , yaitu pada saat setelah fermentasi dan setelah media menjadi kompos.

## Peubah yang Diamati
Peubah yang diamati adalah total bakteri dan koliform yang dihasilkan dari residu maggot BSF formulasi limbah feses sapi potong, endapan susu, dan sampah organik dapur.
1) Total bakteri
Metode yang digunakan untuk prosedur analisis total bakteri adalah metode cawan tuang ( pour plate )  dengan  pengenceran  sampai  10 -10 (Tortora  dkk.,  2012).  Prosedur  diawali  dengan menimbang 10 gram sampel kemudian ditambahkan pada 90 ml larutan  NaCl Fisiologis dalam erlenmeyer lalu homogenkan. Suspensi 1 ml dari pengenceran 10 -1 diambil dan dimasukan dalam 9  ml  NaCl  fisiologis  untuk  memperoleh  suspensi  pengenceran  10 -2 ,  prosedur  ini  dilanjutkan sampai  diperoleh  pengenceran  10 -10 .  Setelah  prosedur  pengenceran  selesai,  Diambil  1  ml  dari suspensi  pengenceran    10 -10 kemudian  dimasukkan  ke  dalam  cawan  petri.    Selanjutnya, dituangkan 20 mL media Nutrient agar pada cawan petri, dan biarkan hingga mengeras.  Cawan diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37°C. Koloni yang tumbuh pada cawan dapat dengan rumus sebagai berikut:
∑ 𝑚𝑖𝑘𝑟𝑜𝑏𝑎 = ∑ 𝐾𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖 𝑥 1 𝑇𝑖𝑛𝑔𝑘𝑎𝑡 𝑝𝑒𝑛𝑔𝑒𝑛𝑐𝑒𝑟𝑎𝑛 𝐶𝐹𝑈/𝑔𝑟

## 2) Koliform
Pengujian koliform terdiri dari 3 tahap yaitu uji penduga, uji penguat, dan uji pelengkap  (Yousef dan Carlstrom, 2003).
a) Uji penduga
Uji  penduga  dilakukan  menggunakan  metode  M ost  Probable  Number (MPN)  untuk mengetahui jumlah koliform secara kuantitatif. Prosedur diawali dengan menyiapkan 9 buah tabung reaksi berisi 10 ml media Brillian Gren Lactose Brooth (BGLB).  Masukkan 0,1 ml, 1 ml , dan 10 ml suspensi sampel ke dalam masing - masing 3 tabung reaksi berisi BGLB  steril  yang  telah  diberi  tabung  durham  terbalik.  Selanjutnya,  tabung  diinkubasi selama  24  jam  pada  suhu  37°C.  Tabung  positif  ditandai  dengan  adanya  gas  yang terbentuk pada tabung durham. Jumlah tabung positif ditulis dan disesuaikan dengan tabel MPN.
b) Uji Penguat
Uji penguat dilakukan untuk memastikan keberadaan koliform pada sampel dengan cara mengambil  1  ose  dari  tabung  positif  dan  digoreskan  pada  cawan  berisi  media Eosin Methylen  Blue Agar (EMBA) . Selanjutnya, inkubasi  media  selama  24  jam  pada  suhu 37°C.  Pengamatan  kualitatif  apabila  berwarna  hijau  metalik  menunjukan  fekal  dan apabila berwarna merah muda atau pink menunjukan non fekal.
c) Uji Pelengkap
Uji  pelengkap  dilakukan  dengan  pewarnaan  Gram  untuk  mengidentifikasi  bakteri koliform secara mikroskopis guna mengetahui warna dan bentuk bakteri.
Vol. 8; No.  2; Juni 2024 Halaman 64-73

## 3 Hasil dan Pembahasan

## Total Bakteri
Rataan  total  bakteri  pada  media  pertumbuhan maggot BSF  campuran  sampah  organik  dapur, endapan  susu,  dan  feses  sapi  potong  sebelum  degradasi  dan  setelah  degradasi  oleh maggot disajikan pada Tabel 1
Tabel 1. Pengaruh Perlakuan terhadap Total Bakteri
Perlakuan Total Bakteri Sig ≤ 0,05 (2-tailed) Sebelum degradasi (…x 10 10 CFU/g) Setelah degradasi (…x 10 8 CFU/g) P0 80 ± 17,79 35,2 ± 9,9 0,000* P1 58,4 ± 28,19 37,6 ± 12,2 0,000* P2 132,6 ± 53,21 53,8 ± 13,8 0,000* P3 102,8 ± 46,64 57,2 ± 20,2 0,000* Keterangan:
P 0 = Sampah Organik Dapur (100%);
P 1 = Sampah Organik Dapur (50%) dan Feses Sapi Potong (50%);
P 2 = Sampah Organik Dapur (50%) dan Endapan Susu (50%);
P 3 = Sampah Organik Dapur (33,34%), Feses Sapi Potong (33,34%), dan  Endapan susu (33,34%); *  =  terdapat  perbedaan  yang  nyata  antara  sampel  sebelum  dan  setelah  degradasi maggot BSF (P<0,05)
Tabel 1, menunjukkan bahwa total bakteri pada pada seluruh perlakuan terdapat perbedaan yang signifikan (P<0,05). Hal ini mengindikasikan bahwa setiap perlakuan berpengaruh menurunkan total  bakteri  pada  media  pertumbuhan maggot BSF.   Penurunan  total  bakteri  ini  terjadi  karena perubahan lingkungan fisik dan kimia yang memengaruhi kehidupan mikroorganisme pada media pertumbuhan maggot BSF.  Sejalan  dengan  penelitian  Nur  dkk.,  (2016)  bakteri  pada  proses degradasi  dapat berkurang  karena  adanya  fase  perlambatan  perkembangan  akibat  kurangnya nutrisi yang tersedia pada substrat. Selain itu, menurut Pradiksa dkk., (2022) terjadi adanya proses degradasi unsur hara oleh bakteri dan maggot BSF yang mengakibatkan jumlah bakteri menurun . Penurunan  ini  menunjukkan  bahwa  kompos  telah  memasuki  fase  kematangan  (Siagian  dkk., 2021).
Tabel 2. Kadar Air, pH, dan Suhu Pada Media Pertumbuhan Maggot BSF Perlakuan Kadar Air Suhu pH Awal Akhir Awal Akhir Awal Akhir P0 76 ± 2,81 41,1 ± 8,39  26,25 ±0,5 31± 0,82 3,92 ± 0,06  8,41 ± 0,20 P1 77,1 ± 0,68 50,4 ± 7,73  26,5 ± 0,58  31,25 ± 1,5  4,6 ± 0,20 7,43 ± 0,38 P2 82,3 ± 1,15 66,2 ± 2,18  26,75±0,50  31,75±1,26  4,9 ± 0,08 7,44 ± 0,14 P3 80,7 ± 1,15 64,3 ± 6,04  26,5 ± 0,58  36,75±2,22  4,8 ± 0,16 7,25 ± 0,48
Sumber : Hasil Analisa Laboratorium Mikrobiologi dan Penanganan Limbah Peternakan (2024)
Selain  kandungan    nutrisi,  jumlah  bakteri  juga  dipengaruhi  pH,  suhu,  dan  kadar  air.  pH  pada kasgot berdasarkan  yaitu kisaran 8,41 dan 7,25 (Tabel 2). Menurut Suwatanti dkk., (2017) pada pH  tersebut,  tidak  terdapat  aktivitas  bakteri  pembentuk  asam  organik  dan  disebabkan  oleh aktivitas mikroorganisme yang rendah. Suhu pada proses degradasi maggot yaitu 27 o C – 36 o C.
Bakteri  yang  tumbuh  pada  fase  tersebut  adalah  bakteri  mesofilik  yang  dalam  proses penguraiannya  sinergis  dengan  degradasi maggot BSF.  Kadar  air  pada  kasgot  mengalami penurunan  menjadi  kisaran  41,1%  –  64,3%,  Penurunan  kadar  air  ini  diakibatkan  oleh  proses penguapan serta proses degradasi oleh maggot BSF. Menurut Ratna dkk., (2017) mikroorganisme membutuhkan  kadar  air  yang  optimal  untuk  tumbuh  dan  berkembang.  Kadar  air  yang  rendah menyebabkan aktivitas mikroba mengalami penurunan (Ratna dkk., 2017).

## Total Koliform
Berdasarkan     hasil    pengamatan dan perhitungan selama penelitian diperoleh  data  rata-rata total  jumlah    koliform  pada  media  pertumbuhan maggot BSF.  Total  koliform  kasgot  sudah memenuhi syarat SNI 14-7030-2004 tentang spesifikasi kompos dari sampah organik domestik yang mana tercantum pada kandungan Escherichia coli pada kompos maksimal 1000 MPN/gr. Berdasarkan  Tabel  3,  terdapat  perbedaan  rata-rata  jumlah  coliform  antara  sampel  sebelum  dan setelah degradasi oleh maggot BSF. Untuk mengetahui besarnya pengaruh   perlakuan,   dilakukan uji paired t-test.
Tabel 3. Pengaruh Perlakuan Terhadap Total Koliform
Perlakuan Total Koliform Sig ≤ 0,05 (2-tailed) Sebelum degradasi (MPN/g) Setelah degradasi (MPN/g) P0 0,10 ± 0,06 0,06 ± 0,03 0,177 P1 2,60 ± 1,26 1,98 ± 0,45 0,313 P2 0,24 ± 0,11 0,04 ± 0,02 0,047* P3 0,53 ± 0,30 0,12 ± 0,12 0,127
Hasil analisis data pada Tabel 3. menunjukkan bahwa pada P2 terdapat penurunan koliform antara media pertumbuhan sebelum degradasi dan setelah menjadi kasgot (P<0,05). Penurunan bakteri koliform  ini  dipengaruhi  oleh  kondisi  lingkungan  dan  substrat  tempat  bakteri  tumbuh.  P2 (Sampah organik dapur dan endapan susu) memiliki suhu awal 26,75 o C dan suhu akhir 31,75 o C. Menurut Liu dkk., (2008) Eschericia coli berkurang efektif pada media pertumbuhan maggot BSF yang disimpan pada suhu suhu 27 o c dan 31 o C . pH memiliki peran penting dalam pertumbuhan dan perkembangbiakan patogen. pH media pertumbuhan maggot BSF pada P2 (sampah organik dapur dan endapan susu) mengalami  peningkatan dari 4,9 menjadi 7,44. Erickson dkk., (2004) menyatakan  bahwa  BSF  mengurangi  populasi S. enterica dan E. coli dalam  kotoran  ayam, dengan  meningkatkan  pH  menjadi  8,8–9,2.  Hal  ini  diduga  terjadi  akibat  meningkatnya  kadar amonia,  yang  secara  fisiologis  diproduksi  oleh  metabolisme  larva.  Substrat  tempat  bakteri  dan maggot BSF tumbuh yaitu sampah organik dapur dan endapan susu memiliki kadar protein yang tinggi. Lopes dkk., (2020) menyatakan bahwa larva yang diberikan pakan mengandung protein memiliki aktivitas antimikroba lebih tinggi terhadap bakteri genus Enterobacteriaceae dibanding larva yang diberi pakan tinggi lignin. Hal ini terjadi karena perbedaan sekresi peptide antimikroba pada tubuh maggot BSF.
Pada P0, P1 dan P3 tidak terdapat perbedaan nyata antara media pertumbuhan sebelum degradasi dan  setelah  menjadi  kasgot  (P>0,05).    Hal  ini  diakibatkan  bakteri  koliform  pada  media pertumbuhan maggot BSF  sudah menurun  sebelum degradasi maggot akibat proses  fermentasi secara anaerob dengan penambahan starter EM4 yang memberikan kondisi tidak optimal untuk pertumbuhan bakteri koliform. pH pada media pertumbuhan maggot BSF yang berkisar 3,9 – 4,8 (Tabel  2).  pH  asam  diakibatkan  tingginya  aktivitas  bakteri  pembentuk  asam  laktat  yang menguraikan  bahan  menjadi  asam.  Menurut  Susilawati  dkk.,  (2015)  bakteri  asam  laktat mereduksi bakteri koliform dengan merusak dinding sel bakteri yang menyebabkan lisis, sehingga
terjadi  kebocoran  nutrien  di  dalam  sel.  Lebih  lanjut  Harahap  dkk.,  (2019)    melaporkan  bahwa bakteri  asam  laktat  menghasilkan  zat  antibakteri    seperti  hidrogen  peroksida  (H 2 O 2 ),  karbon dioksida (CO 2 ), diasetil dan bakteriosin.

## Uji Penguat Koliform
Media pertumbuhan maggot BSF yang telah dilakukan uji penduga secara kuantitatif dilanjutkan dengan  uji  penguat  pada  media Eosin  Methylene  Blue  Agar (EMBA)  untuk  mengidentifikasi bakteri fekal dan non fekal. Hasil penelitian pada Tabel 4. Menunjukkan bahwa bakteri koliform pada  media  pertumbuhan  sebelum  proses  degradasi  oleh maggot BSF  teridentifikasi  sebagai kelompok  bakteri  koliform  non  fecal . Tidak  teridentifikasi  adanya  bakteri  koliform fecal dikarenakan  penurunan  pH  saat  proses  fermentasi.  Menurut  Wahyuni  dkk.,  (2017)  bakteri Eschericia coli pada kondisi semakin asam akan berkurang sebanyak 40% dan pada kondisi basa mengalami penurunan sebanyak 30% untuk setiap kenaikan pH.
Tabel 4. Data Hasil Pengamatan Bakteri Koliform Fecal dan Non Fecal
Ulangan Perlakuan Sebelum Degradasi Maggot BSF Setelah Degradasi Maggot BSF P0 P1 P2 P3 P0 P1 P2 P3 1 NF NF - NF NF NF - NF 2 NF NF NF NF NF NF - NF 3 NF NF NF NF NF NF - NF 4 NF NF NF NF NF NF NF NF 5 NF NF NF NF NF NF NF NF
Keterangan : NF = Non Fecal
Tabel  4.  menunjukkan  bahwa  kasgot  pada  semua  perlakuan  tidak  terdapat  golongan  bakteri koliform  fekal.  Hal  ini  dikarenakan maggot BSF  dapat  mereduksi  bakteri  patogen  terutama Eschericia coli. Marusich dkk., (2020) menyatakan Larva H. illucens memiliki kandungan asam laurat yang tinggi serta dikenal sebagai agen antimikroba alami dan bekerja dengan mengganggu membran sel, sehingga efektif untuk mengendalikan berbagai patogen pada kasgot. Lopes dkk.,
(2020) menyatakan bahwa inaktivasi pada kasgot terus berlangsung bahkan tanpa adanya maggot BSF.

## Uji Pelengkap Koliform
Gambar  1. Hasil Pewarnaan  Bakteri Gram Negatif
Uji  pelengkap  dilakukan  dengan  pewarnaan  untuk  mengetahui  bentuk,  warna,  dan  Gram  dari bakteri  pada  isolat  EMBA  pada  sampel  sebelum  dan  setelah  degradasi maggot BSF.  Hasil pewarnaan  Gram  menunjukkan  bentuk  basil  dan  ditandai  dengan  warna  koloni  merah  .  Paray
dkk., (2023) menyatakan bahwa warna merah diakibatkan karena dinding sel bakteri Gram negatif memiliki kandungan lipid yang tinggi dan lapisan peptidolglikan yang tipis sehingga mudah rusak saat  dicuci  dengan  alkohol.  Hal  ini  menyebabkan  bakteri  tidak  dapat  mempertahankan  cairan pewarna kristal violet dan saat diwarnai air fuchsin akan berwarna merah. Bakteri koliform yang diidentifikasi pada kompos diantaranya yaitu Klebsiella sp., Citrobacter sp , Eschericia coli dan Enterobacter areogenes (Yuliansari dkk., 2020).
Penelitian  yang  dilakukan  oleh  Li  dkk.,  (2023)  menemukan  bahwa  pada  saluran  pencernaan maggot BSF  terdapat  bakteri  genus Citrobacter dan Klebsiella .  Bakteri  anggota  genus Citrobacter mempunyai bentuk batang dengan diameter antara 2- 6 µm, termasuk bakteri Gram negatif  yang  bersifat  motil,  anaerob  fakultatif  dan  tumbuh  optimum  pada  suhu  37 o C.  Bakteri anggota genus Klebsiella mempunyai bentuk batang dengan diameter antara 0,3-1,0 µm, termasuk bakteri Gram negatif yang bersifat non motil, anaerob fakultatif dan tumbuh pada suhu optimal 37 o C.

## 4 Kesimpulan
Terdapat  perbedaan  total  bakteri  dan  koliform  pada  media  pertumbuhan maggot BSF  sebelum degradasi dan setelah menjadi kasgot. Formulasi media pertumbuhan kombinasi sampah organik dapur dan endapan susu memberikan penurunan total bakteri dan koliform tertinggi. Bakteri yang teridentifikasi  menunjukkan kelompok bakteri non fekal.

## 5 Ucapan Terima Kasih
Ucapan terima kasih kepada ALG Universitas Padjadjajaran yang telah memberikan hibah riset sehingga penelitian dapat terlaksana dengan baik.

## 6 Daftar Pustaka
Badan Standardisasi Nasional. (2004). Spesifikasi Kompos dari Sampah Organik Domestik. SNI 19-7030-2004. Jakarta.
Beesigamukama, D., Mochoge, B., Korir, N. K., K.M. Fiaboe, K., Nakimbugwe, D., Khamis, F. M., Subramanian, S., Wangu, M. M., Dubois, T., Ekesi, S., & Tanga, C. M. (2021). Low- cost Technology for Recycling Agro-industrial Waste Into Nutrient-Rich Organic Fertilizer Using Black Soldier Fly. Waste Management , 119 , 183–194.
Erickson,  M.  C.,  Islam,  M.,  Sheppard,  C.,  Liao,  J.,  &  Doyle,  M.  P.  (2004).  Reduction  of Escherichia coli O157:H7 and Salmonella enterica serovar enteritidis in Chicken Manure by Larvae of the Black Soldier Fly. Journal of Food Protection , 67 (4), 685–690.
Fitriana, A. R., Akbar, A. F., & Bagastyo, A. Y. (2023). The Effect of Fermentation Process on Increasing  Biodegradable  Organic  Waste  Reduction  with  Black  Soldier  Fly  (BSF)  Larva Bioconversion Method. Sustinere: Journal of Environment and Sustainability , 7 (1), 81–90.
Foster, P. (2006). The production of vermicompost from dairy sludge and its value as a plant growth medium.
Harahap, A. E., Febriyanti, R., & Halidasiah, K. (2019). Kualitas Mikrobiologis Silase dengan Berbagai  Kombinasi  Kulit  Buah  Serta  Jerami  Jagung  (Zea  mays  L.)  dan  Level  Tepung
Jagung yang Berbeda. Jurnal Peternakan , 16 (1), 25–33.
Lalander,  C.,  Diener,  S.,  Magri,  M.  E.,  Zurbrügg,  C.,  Lindström,  A.,  &  Vinnerås,  B.  (2013). Faecal Sludge Management With the Larvae of the Black Soldier F;y (Hermetia illucens) - From a Hygiene Aspect. Science of the Total Environment , 458 – 460 , 312–318.
Li, X., Mei, C., Luo, X., Wulamu, D., & Zhan, S. (2023). Dynamics of the intestinal bacterial community  in  black  soldier  fly  larval  guts  and  its  influence  on  insect  growth  and development. Insect Science , 30 , 947–963. https://doi.org/10.1111/1744-7917.13095
Liu,  Q.,  Tomberlin,  J.  K.,  Brady,  J.  A.,  Sanford,  M.  R.,  &  Yu,  Z.  (2008).  Black  Soldier  Fly (Diptera: Stratiomyidae) Larvae Reduce Escherichia coli in Dairy Manure. Environmental Entomology , 37 (6), 1525–1530. https://doi.org/10.1603/0046-225X-37.6.1525
Lopes,  I.  G.,  Lalander,  C.,  Vidotti,  R.  M.,  &  Vinnerås,  B.  (2020).  Reduction  of  Bacteria  in Relation to Feeding Regimes When Treating Aquaculture Waste in Fly Larvae Composting. Frontiers in Microbiology , 11 , 1–10.
Marusich,  E.,  Mohamed,  H.,  Afanasev,  Y.,  &  Leonov,  S.  (2020).  Fatty  Acids  From  Hermetia illucens  Larvae  Fat  Inhibit  the  Proliferation  and  Growth  of  Actual  Phytopathogens.
Microorganisms , 8 (9), 1–21. https://doi.org/10.3390/microorganisms8091423
Nur, T., Noor, A. R., & Elma, M. (2016). Pembuatan Pupuk Organik Cair dari Sampah Organik Rumah Tangga dengan Penambahan Bioaktivator EM4. Konversi , 5 (2), 5–12.
Paray, A. A., Singh, M., & Amin Mir, M. (2023). Gram Staining: A Brief Review. International Journal of Research and Review , 10 (9), 336–341. https://doi.org/10.52403/ijrr.20230934
Pradiksa, O. I., & Setyati, W. A. (2022). Pengaruh Bioaktivator EM4 Terhadap Proses Degradasi Pupuk Organik Cair serasah Cymodocea serrulata. Journal of Marine Research , 11 (2), 136– 144.
Rahmadhani,  F.  D.,  Setiani,  V.,  &  Astuti,  U.  P.  (2022).  Pengomposan  Limbah  Ikan  dan  Susu Reject menggunakan Larva Black Soldier Fly. Confrence Proceeding on Waste Treatment Technology , 2623 , 126–130.
Ratna,  D.  A.  P.,  Samudro,  G.,  &  Sumiyati,  S.  (2017).  Pengaruh  Kadar  Air  Terhadap  Proses Pengomposan Sampah Organik Dengan Metode Takakura. Jurnal Teknik Mesin , 6 (2), 63– 68. https://doi.org/10.22441/jtm.v6i2.1192
Siagian, S. W., Yuriandala, Y., & Maziya, F. B. (2021). Analisis Suhu, pH, dan Kuantitas Kompos Hasil Pengomposan Reaktor Aerob Termodifikasi dari Sampah Sisa Makanan dan Sampah Buah. Jurnal Sains &Teknologi Lingkungan , 13 (2), 166–176.
Susilawati, Y., & Nisa, D. A. M. (2015). Efektivitas Pemberian Minuman Fermentasi Berbahan Dasar Nira Siwalan (Borassus flabellifer Linn) Dengan Susu Sapi Terhadap Pertumbuhan Bakteri Escherchia coli Patogen. Jurnal Sains , 5 (10), 48–54.
Suwatanti,  E.,  &  Widiyaningrum,  P.  (2017).  Pemanfaatan  MOL  Limbah  Sayur  pada  Proses Pembuatan Kompos. Jurnal MIPA , 40 (1), 1–6. http://journal.unnes.ac.id/nju/index.php/JM
Tortora, G. J., Funke, B. R., Bair, W. B., & Weber, D. (2012). Microbiology: An Introduction with Mastering Microbiology . Pearson Educations.
Wahyuni, E. A. (2017). Karakteristik pH dan pengaruhnya terhadap bakteri Coliform di perairan Selat Madura Kabupaten Pamekasan. Jurnal Ilmu-Ilmu Perairan, Pesisir, Dan Perikanan , 6 (3), 214–220. https://doi.org/10.13170/depik.6.3.5875
Walpajri,  F.,  Febria,  F.  A.,  &  Tjong,  D.  H.  (2023).  Comparison  of  the  Potential  of  Local Microorganisms Several Bio Activators as Biological Agents for The Production of Organic Fertilizers. World  Journal  of  Advanced  Research  and  Reviews , 17 (3),  508–513. https://doi.org/10.30574/wjarr.2023.17.3.0419
Wynants, E., Frooninckx, L., Crauwels, S., Verreth, C., De Smet, J., Sandrock, C., Wohlfahrt, J., Van Schelt, J., Depraetere, S., Lievens, B., Van Miert, S., Claes, J., & Van Campenhout, L. (2019). Assessing the Microbiota of Black Soldier Fly Larvae (Hermetia illucens) Reared on  Organic  Waste  Streams  on  Four  Different  Locations  at  Laboratory  and  Large  Scale.
Microbial Ecology , 77 (4), 913–930. https://doi.org/10.1007/s00248-018-1286-x
Yousef, A. E., & Carlstrom, C. (2003). Food Microbiology: A Laboratory Manual .
Yuliansari,  D.,  &  Fatmalia,  E.  (2020).  Uji  Lanjutan  Isolasi  dan  Identifikasi  Bakteri  pada Bioaktivator  dari  Limbah  Bonggol  Pisang  (MOL)  dalam  Proses  Pengomposan  Sampah Organik Rumah Tangga. Bioscientist : Jurnal Ilmiah Biologi , 8 (2), 276.