## IDENTIFIKASI SENYAWA METABOLIT SEKUNDER EKSTRAK n-HEKSANA
BATANG KESEMBUKAN ( Paederia foetida Linn)

## Elok Kamilah Hayati, Roihatul Muti’ah, Ifaridatul Chusna
Jurusan Kimia, Fakultas Sains dan Teknologi UIN Maulana Malik Ibrahim Malang

## ABSTRAK
Tanaman kesembukan ( Paaderia foetida Linn) merupakan salah satu tanaman yang sering dimanfaatkan oleh masyarakat sebagai obat, sehingga dapat diketahui bahwa tanaman mempunyai aktivitas biologi, begitu juga dengan bagian batangnya. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui kandungan golongan senyawa ekstrak heksanadengan metode Kromatografi Lapis Tipis (KLT).Penelitian ini dilakukan dengan mengekstraksi sampel dengan pelarut n-heksana.
Golongan  senyawa  yang  terkandung  dalam  ekstrak  klorofom  diidentifikasi  dengan  fitokimia  dengan menggunakan reagen. Pemisahan golongan senyawanya digunakan kromatografi lapis tipis (KLT).
Uji  fitokimia  menunjukkan  ekstrak  n-heksana  mengandung  steroid.  Pemisahan  dengan  KLT menggunakan  eluen  n-heksana-etil  asetat  (8:2)  menghasilkan  4  noda  dengan  nilai  Rf  berturut-turut  0,10;  0,35; 0,61; dan 0,68.
Kata kunci: Kesembukan ( Paederia foetida Linn), Artemia salina Leach, uji toksisitas, uji fitokimia.

## I. PENDAHULUAN
Salah satu keanekaragaman tumbuhan di  Indonesia  adalah  banyaknya  tumbuhan yang  dapat  dimanfaatkan  sebagai  obat,  dan salah satunya adalah tanaman Kesembukan. Kesembukan merupakan tanaman merambat  di  kebun-kebun  ataupun  lereng gunung. Kesembukan biasanya oleh masyarakat  Indonesia    digunakan  untuk mengobati  beberapa  penyakit.  penyakit lambung, nyeriusus, perut kembung, sariawan, encok, kurap, radang anak telinga (Mardisiswojo  dan  Radjakmangunsudarso, 1968).
Sejumlah senyawa golonggan steroid, terpenoid,  dan  77  komponen  senyawa minyak atsiri dalam daun, batang dan bunga dari tanaman Kesembukan ( Paederia foetida Linn.)(Shukla, dkk. 1976 dan Wong 1994 dalam Mishra, 2012).
Nilai  LC 50 ekstrak  n-heksana  batang Lesembukan  adalah  26,6033  ppm,  nilai LC 50 yang  kecil  menunjukkan  adanya senyawa aktif yang cukup aktif.
Metode  pemisahan  pertama  dalam penelitian ini menggunakan ekstraksi maserasi.  Pada  penelitian  ini  menggunakan pelarut n-heksana, (Rita, dkk., 2008).
Pemisahan  senyawa  dapat  dilakukan dengan  kromatografi  lapis  tipis  (KLT).
Eluen sangan berpengaruh dalam pemisahan senyawa.
Oleh karena itu dilakukan identifikasi dan  pemisahan  kandungan  senyawa  aktif ekstrak  heksana  yang  mempunyai  aktifitas menggunakan    kromatografi  lapis  tipis analitik  dengan  berbagai  macam  variasi eluen.

## II. METODE PENELITIAN Pelaksanaan Penelitian
Penelitian dilaksanakan di Laboratorium Kimia Organik dan Laboratorium Riset Kimia Analitik Universitas  Islam  Negeri  Maulana  Malik Ibrahim Malang pada bulan MaretsampaiJuni 2013
.

## Alat dan Bahan Penelitian
Alat-alat  yang  digunakan  adalah seperangkat  alat  gelas, rotary  evaporator vaccum ,  tabungreaksi,  lampu,  kertassaring, neracaanalitik,  corong buchner ,  dan  plat silika gel F 254 .
Bahan  yang  digunakan  meliputi batang  Kesembukan,  n-heksana, aquades ,
reagen Dragendorff, reagen Meyer, danreagen Lieberman-Burcard.

## CARA KERJA
Preparasi Sampel Sampel tanaman Kesembukan diambil bagian batangnya, kemudian dicuci bersih, dikeringanginkan. Selanjutnya  sampel  dipotong  kecil-kecil dan dikeringkan dengan oven pada suhu 27 –  37 o C  selama  1  –  2  jam.  Kemudian sampel  dihaluskan  dengan  blender  sampai berbentuk  serbuk  dan  diayak  dengan ayakan  60  mesh.  Hasil  serbuk  batang Kesembukan  yang  diperoleh  ini  digunakan sebagai sampel penelitian.
Ekstraksi Senyawa Aktif dengan Maserasi Serbuk batang Kesembukan
( Paederia  foetida L.)  ditimbang  sebanyak 60  g  dan  diekstraksi  dengan  perendaman menggunakan  300  mL  pelarut  n-heksana selama 24 jam. Pengadukan dibantu dengan shaker ,  kemudian  disaring  dan  ampasnya dimaserasi  kembali  dengan  pelarut  yang sama  sampai  diperoleh  ampas  yang  pucat. Masing-masing  filtrat  diuapkan  pelarutnya menggunakan rotary  evaporator untuk mendapatkan ekstrak pekat n-heksana.

## Uji Fitokimia dengan Reagen
Uji Alkaloid Ekstrak n-heksana batang
Kesembukan  sebanyak  2  mg  dimasukkan dalam tabung reaksi, ditambah 0,5 mL HCl 2  %  dan  larutan  dibagi  dalam  dua  tabung. Tabung  I  ditambahkan  0,5  mL  reagen Dragendorff, tabung II ditambahkan 0,5 mL reagen  Meyer.  Jika  tabung  I  terbentuk endapan  jingga  dan  pada  tabung  II terbentuk endapan kekuning-kuningan, menunjukkan  adanya  alkaloid  (Indrayani, dkk., 2006).
Uji Flavonoid Ekstrak
n-heksana batang Kesembukan  sebanyak  2  mg  dimasukkan dalam  tabung  reaksi  kemudian  dilarutkan dalam  1  –  2  mL  metanol  panas  50  %.
Setelah itu ditambah logam Mg dan 0,5 mL HCl  pekat.  Larutan  berwarna  merah  atau jingga yang terbentuk, menunjukkan adanya flavonoid (Indrayani, dkk., 2006). Uji Saponin Ekstrak n-heksana
batang Kesembukan  sebanyak  2  mg  dimasukkan dalam  tabung  reaksi  ditambah  air  (1:1) sambil  dikocok  selama  1  menit,  apabila menimbulkan  busa  ditambahkan  2  tetes HCl  1  N  dan  dibiarkan  selama  10  menit, bila  busa  yang  terbentuk  bisa  tetap  stabil maka  ekstrak  positif  mengandung  saponin (Halimah, 2010).
Uji Triterpenoid dan Steroid Ekstrak
n-heksana batang
Kesembukan  sebanyak  2  mg  dimasukkan dalam  tabung  reaksi,  dilarutkan  dalam  0,5 mL kloroform lalu ditambah dengan 0,5 mL asam asetat anhidrat. Campuran ini selanjutnya  ditambah  dengan  1  –  2  mL H 2 SO 4 pekat  melalui  dinding  tabung tersebut.  Jika  hasil  yang  diperoleh    berupa cincin kecoklatan atau violet pada perbatasan dua pelarut menunjukkan adanya triterpenoid, sedangkan jika terbentuk warna hijau kebiruan menunjukkan  adanya  steroid  (Indrayani, dkk., 2006).
UjiTanin Uji dengan LarutanFeCl 3 Ekstrak n-heksana batang
Kesembukan  sebanyak  2  mg  ditambahkan dengan  2  –  3  tetes  larutan  FeCl 3 1  %.  Jika larutan menghasilkan warna hijau kehitaman  atau  biru  tinta,  maka  bahan tersebut  mengandung  tanin  (Indrayani, dkk., 2006).

## Uji Tanin denganLarutan Gelatin
Ekstrak n-heksana batang Kesembukan  sebanyak  2  mg  dimasukkan dalam  tabung  reaksi  ditambah  dengan larutan  gelatin.  Jika  terbentuk  endapan putih, menunjukkan adanya tanin (Halimah, 2010).

## Uji Tanin Katekol dan Tanin Galat
Ekstrak n-heksana batang
Kesembukan  sebanyak  2  mg  ditambahkan dengan  larutan  formaldehid  3%:  asam klorida  pekat  (2:1)  dan  dipanaskan  dalam air panas dengan suhu 90 ºC. Jika terbentuk endapan merah, menunjukkan adanya tanin katekol.  Filtrat  dijenuhkan  dengan  Na- asetat  dan  ditambahan  larutan  FeCl 3 1%. Jika  terbentuk  warna  biru  tinta/hitam, menunjukkan  adanya  tanin  galat  (Halimah, 2010).

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN EstraksiSenyawaAktifdenganMaserasi
Tabel  1.Hasil  maserasi  ekstrak  batang
Kesembukan Pelarut Rendeman (%) (b/b) n-Heksana 0,435

## Uji Fitokimia dengan Reagen
Uji  fitokimia  dalam  penelitian  ini dilakukan pada golongan senyawa,
alkaloid, flavonoid, saponin,steroid, triterpenoid, dan tanin dengan menggunakan reagen masing-masing. Hasil uji  fitokimia  dengan  reagen  ditunjukkan pada Tabel 2
Tabel  2.  Hasil  identifikasi  uji  fitokimia ekstrak batang Kesembukan dengan
Reagen.
GolonganSenyawa Ekstrak n- heksana Alkaloid - Flavonoid - Saponin - Triter-penoid - Steroid + Tanin - Keterangan : tanda + : terkandung senyawa/ warna mud tanda  -  :  tidak  terkandung  senyawa/  tidak berwarna
PemisahanSenyawaAktifdenganKromato grafi Lapis Tipis (KLT)
Identifikasi dengan KLT
menggunakan  ekstrak  n-heksana  dengan
eluen  n-heksana-etilasetat  (8:2)  untuk memperkuat  adanya  senyawa  steroid  di bawah  sinar  UV  366  nm  ditunjukkan pada Gambar1 dan Tabel 3.
Gambar1.Hasil  KLT  pemisahansenyawa steroid  padaekstrak  n-heksanadenganeluen n-heksana-etilasetat (8:2)
Tabel 3.Hasil KLT senyawa Steroid ekstrak n-heksana  batang  Kesembukan  eluen  n- heksana-etilasetat (8:2)
No. Nilai Rf tiap noda (cm) Warnanoda di bawahsinarUV  366 nm Dugaan senyawa 1 0,10 Ungumuda Steroid 2 0,35 Ungu Steroid 3 0,58 Merahmuda - 4 0,61 Ungumuda Steroid 5 0,68 Ungumuda Steroid

## IV. KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  identifikasi  dengan uji  reagen  diketahui  bahwa  ekstrak  n- heksana  mengandung  golongan  senyawa steroid.
Pemisahan dengan KLT menggunakan  eluen  n-heksana-etil  asetat (8:2)  menghasilkan  4  noda  dengan  nilai  Rf berturut-turut 0,10; 0,35; 0,61; dan 0,68.

## SARAN
Perlu  dilakukan  pemisahan  lebih murni  dengan  kromatografi  kolom-KLTP dan hasil isolat yang dihasilkan diidentifikasi dengan instrumentasi MS.

## V. DAFTAR PUSTAKA
Halimah,  N.  2010.  Uji  Fitokimia  dan  Uji Toksisitas  Ekstrak  Tanaman  Anting- Anting (Acalypha indica Linn.) terhadap Larva Udang Artemia salina Leach.Skripsi Diterbitkan. Malang:
Fakultas Sains dan Teknologi Universitas  Islam  Negeri  Maulana
Malik Ibrahim Malang.
Indrayani, L., Soetjipto, H., dan Sihasale, L. 2006.  Skrining  Fitokimia  dan  Uji Toksisitas  Ekstrak  Daun  Pecut  Kuda ( Stachytarpheta  jamaicensis L. Vahl ) Terhadap  Larva  Udang Artemia salina Leach. Berk.  Penel.  Hayati . Vol 12, hal: 57 – 61.
Mangunwardoyo,  W.,  Cahyaningsih,  E., dan  Usia,  T.  2009.  Ekstraksi  dan Identifikasi  Senyawa  Antimikroba Herba  Meniran  ( Phyllanthus  niruri L.). J . Ilmu  Kefarmasian  Indonesia .
Vol. 7 No. 2, hal: 57 – 63.
Meyer, B.N. Ferrigni, P. J.E, Jacobsen. L.B,
Nichols  and  McLaughlin.1982.  Brine
Shrimp: A Convenient General Bioassay for Active Plant
Constituents. Planta Medica 45: 31-34. Mishra,  R.  dan  Bisht,  S.S.  2011.  Medical Values  Of  Skunk  Vine  ( Paederia foetida L.) An  Overview .  Department of  Biotechnology  Roland  Institute  of Pharmaceutical Science, Berhampur.
Morshed, H. Islam, Md.S. Parvin, S. Uddin, M.A.  Mostofa,  A.G.M  dan  Sayyed,
S.B.2012. Antimicrobial and
Cytotoxuc  Activity  of  the  Methanol Extract  of Peaderia  foetida Linn. Journal  of  Applied  Pharmaceitical Science. 02 (01); 2012: 77-80.
Rita,  W.S.,  Suirta,  I.W.,  dan  Sabikin,  A.
2008. Isolasi dan Identifikasi
Senyawa  yang  Berpotensi  sebagai Antitumor  pada  Daging  Buah  Pare ( Momordica  charantia L.). J . Kimia . Vol. 2 No. 1, hal 1 – 6.