## Analisis Penangkapan Radikal Bebas Jamu Rosella dan Fenolik Totalnya
Free radical scavenging analysis of Jamu Rosella and The Total Phenolic Compound Farisya  Nurhaeni 1 ,  Purwanto 2* ,  Iramie  Duma  Kencana  Irianto 1 ,  Latifah  Nisa  Fiqoh 1 , Febriana Ardiyanti 1 1 D3 Farmasi Politeknik Kesehatan Bhakti Setya Indonesia, Yogyakarta 2 Departemen Biologi Farmasi, Fakultas Farmasi, Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta Corresponding author: Purwanto: Email: purwanto_fa@ugm.ac.id Submitted: 29-12-2023 Revised: 05-05-2024 Accepted: 06-06-2024

## ABSTRAK
Dengan semakin berkembangnya tingkat aktivitas manusia, semakin tinggi pula prevalensi penyakit-penyakit  yang  diakibatkan  oleh  radikal  bebas,  yang  salah  satunya  disebabkan  oleh  pola hidup  dan  polusi  yang  ada.  Untuk  menanggulangi  radikal  bebas  tersebut  diperlukan  antioksidan, yang  mana  salah  satu  sumber  utamanya  adalah  dari  tanaman  herbal.  Guna  meningkatkan pemanfaatan herbal tersebut, pembuatan sediaan seperti jamu adalah diperlukan karena sediaan ini yang banyak diminati masyarakat. Dalam penelitian ini, herbal seperti bunga rosella, rimpang kunyit, rimpang jahe, sereh, dan jeruk nipis dipilih sebagai bahan jamu godhog yang kaya akan antioksidan. Dalam hal sebagai sediaan jamu,  produk ini terbukti cukup aktif dapat menangkap radikal bebas dengan  reagen  DPPH.  Kandungan  fenolik  dan  flavonoid  dalam  sediaan  jamu  tersebut  adalah komponen utama yang bertanggung jawab terhadap aktivitas penangkapan radikal bebasnya.
Kata kunci: antioksidan; fenolik; jamu; radikal bebas

## ABSTRACT
As the level of  increasing human activity, the higher prevalence of diseases caused by free radicals, one of which is caused by lifestyle patterns and existing pollution. To overcome these free radicals, antioxidants are needed, that one of the main sources of which is herbal plants. In order to speed up the usage of these herbs, making herbal preparations such as jamu is necessary because of a great demand of this dosage form by the society. In this research, herbs such as rosella flowers, turmeric  rhizomes,  ginger  rhizomes,  lemongrass  and  lime  were  chosen  as  ingredients  for  jamu godhog (boiled jamu) which are rich in antioxidants. In terms of herbal medicine, this product has been  proven  to  be  quite  active  in  capturing  free  radicals  with  DPPH  reagent.  The  phenolic  and flavonoid content in these herbal preparations are the main components responsible for their free radical scavenging activity Keywords: antioxidant; phenolic; jamu; free radical

## PENDAHULUAN
Antioksidan  merupakan  senyawa  yang  dapat  mencegah  terjadinya  reaksi  oksidasi  yang diakibatkan  oleh  radikal  bebas.  Antioksidan  sangat  penting  dalam  melindungi  sel-sel  tubuh  dari kerusakan yang disebabkan oleh radikal bebas. Dalam kinerjanya, antioksidan dapat menghambat reaksi oksidasi dengan mengikat molekul radikal bebas (Lingga, 2012). Antioksidan alami banyak terdapat dalam tanaman dan umumnya mengandung        senyawa fenolik seperti asam fenolik, flavonoid, lignin,  stilben,  dan  tannin  (Silvia  et  al.,  2018;  Ulewicz-Magulska  &  Wesolowski,  2019).  Dalam perkembangannya, tanaman merupakan sumber antioksidan alami yang banyak digunakan dalam memenuhi kebutuhan antioksidan  tubuh (Ulewicz-Magulska & Wesolowski, 2019).
Salah satu tanaman yang banyak digunakan di masyarakat dan mempunyai efek antioksidan yang  tinggi  adalah  bunga  rosella  ( Hibiscus  sabdariffa ).  Bunga  rosella  telah  digunakan  secara tradisional sebagai makanan, minuman herbal, minuman panas dan dingin, sebagai flavouring agent dalam  industri  makanan  serta  sebagai  obat  herbal.  Komponen kimia aktif  utama yang terdapat dalam  rosella  adalah  asam- asam  organik,  antosianin,  polisakarida  dan  flavonoid.  Dari  senyawa- senyawa  tersebut,  antosianin  (delfinidin-3-glukosida)  dan  asam  protokatekuat  adalah  metabolit yang  mempunyai  aktivitas  antioksidan  yang  tinggi  (Da-Costa-Rocha  et  al.,  2014).  Penelitian

## Analisis Penangkapan Radikal Bebas Jamu Rosella dan Fenolik Totalnya
sebelumnya  menunjukkan  bahwa  ekstrak  air  bunga  rosella  dapat  menghambat  aktivitas  xantin oksidase, melindungi sel dari kerusakan peroksidasi lipid, serta meningkatkan enzim superoksida dismutase,  katalase  dan  glutation peroksidase yang berperan sebagai antioksidan alami di dalam tubuh.
Potensi  bunga  rosella  sebagai  agen  antioksidan  dapat  dikembangkan  dalam  ramuan jamu godhog , salah satu bentuk sediaan obat tradisional yang mudah dan murah digunakan di masyarakat. Ramuan jamu godhog terdiri atas bahan segar atau simplisia atau campuran keduanya yang dibuat dengan cara direbus. Ramuan jamu terdiri atas beberapa tanaman obat yang berkedudukan sebagai bahan  aktif  utama  berkhasiat,  bahan  aktif  pendukung  berkhasiat,  bahan  penstabil  dan  bahan tambahan ( corrigen ) (Hayati et al., 2019). Formulasi ramuan jamu godhog yang akan dibuat pada penelitian ini terdiri atas bahan aktif utama yang berkhasiat sebagai antioksidan yaitu: bunga rosella ( H.sabdariffa ), rimpang jahe emprit ( Zingiber officinale ) dan  rimpang  kunyit  (Dhanik et  al., 2017;
Obouayeba et al., 2014; Park et al., 2019); sebagai corrigen odoris digunakan daun sereh; dan sebagai bahan penstabil untuk kurkumin dalam air yang membutuhkan pH <7 digunakan buah jeruk nipis (Kharat et al., 2017); serta gula batu sebagai corrigen saporis (pemanis) (Sumarni et al., 2019). Jamu godhog rosella yang kaya antioksidan ini diharapkan dapat digunakan untuk pencegahan atau perawatan kesehatan. Guna membuktikan efek farmakologis  seperti yang diharapkan, maka  perlu  dilakukan evaluasi  terhadap  formulasi  ramuan  jamu  yang  dihasilkan,  yang  diantaranya  adalah  uji  aktivitas antioksidan dengan metode DPPH, analisis kandungan flavonoid total, analisis kandungan fenolik total serta identifikasi kandungan senyawa dengan Kromatografi Lapis Tipis.

## METODE
Bahan Penelitian Bahan yang digunakan untuk membuat jamu godhog adalah bunga rosella, jahe emprit, kunyit, sereh,  jeruk  nipis,  gula  batu  dan  air.  Bahan  yang  digunakan  untuk evaluasi  sediaan  jamu  godhog adalah reagen DPPH, methanol p.a, reagen Folin-Ciocalteau, natrium karbonat, alumunium klorida, natrium asetat, asam  asetat glasial,  etil asetat,  asam  formiat,  toluena,  asam  galat, FeCl 3 , heksana, timol, (Sigma), pereaksi anisaldehid asam sulfat.

## Metode penelitian
Pengumpulan bahan
Bahan-bahan herbal basah (bunga rosella, rimpang jahe, rimpang  kunyit, sereh, jeruk nipis dan gula batu) diperoleh dari Pasar Beringharjo dan Pasar Prambanan Daerah Istimewa Yogyakarta.
Pembuatan jamu godhog rosella
Jamu godhog rosella dibuat dengan formula yang diperoleh berdasarkan optimasi penelitian yang yang telah dilakukan pada penelitian pendahuluan. Formula yang digunakan dapat dilihat pada Tabel I.
Semua bahan tersebut dicuci dengan air mengalir. Kunyit dan sereh dimemarkan, sedangkan jahe  dimemarkan  dan  diatas  api.  Setelah  itu  jahe  dimasukkan  dalam  air  mendidih  dan  ditunggu selama  2  menit.  Setelah  itu,  masukkan  bahan  lain  seperti  kunyit,  rosella,  sereh  dan  gula  batu dimasukkan dan ditunggu selama 5 menit. Tambahkan  perasan jeruk nipis dan direbus lagi selama 1 menit.  Tahap terakhir adalah penyaringan jamu guna memisahkan ampas dengan larutan jamu.
Penentuan Aktivitas Antioksidan dengan Metode Penangkapan Radikal Bebas Aktivitas  antioksidan  dengan  metode  penangkapan  radikal  bebas  dalam  penelitian  ini ditetapkan dengan reagen DPPH. Reagen ini dibuat dengan konsentrasi konsentrasi 0,4 mM dalam methanol p.a.  Untuk analisis sampel jamu, sebanyak 25, 50, 100, 200, dan 400 µL jamu dimasukkan dalam  labu  takar  5  ml,  kemudian  ditambahkan  1  ml  larutan  DPPH  0,4  mM,  dan  ditambahkan methanol p.a sampai  batas tanda. Larutan digojok sampai homogen dan dibiarkan di tempat gelap selama 5 menit, kemudian serapan dibaca dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 520 nm (İ. Gulcin & Alwasel, 2023) .

## Penentuan Kandungan Flavonoid Total
Kandungan flavonoid total ditentukan secara spektrofotometri dengan reagen AlCl 3 . Sebanyak 500 µL jamu godhog rosella ditambah dengan 1500 µL methanol p.a, 100 µL larutan AlCl3 10%, 100 µL natrium   asetat 1 M, dan 2800 µL akuades. Campuran  divorteks selama 5 detik dan  didiamkan selama 30 menit pada suhu kamar. Serapan larutan dibaca pada panjang gelombang 415 nm. Sebagai blanko adalah sama dengan pengerjaan sampel jamu, tetapi tanpa penambahan larutan AlCl 3 (Khan et al., 2018).

## Penentuan Kandungan Fenolik Total
Kandungan fenolik total ditentukan dengan metode spektrofotometri  dengan reagen Folin- Ciocalteau.  Sebanyak 300 µL sampel jamu  dinambah dengan 7,7 mL akuades; 0,5 mL reagen Folin- Ciocalteau dan  1,5 ml larutan                   Na2CO3  20%. Selanjutnya larutan divorteks dan diinkubasi selama 2 jam  pada suhu  kamar. Setelah  itu serapan  larutan  dibaca  dengan spektrofotometer  pada panjang gelombang 765 nm (Khan et al., 2018).
Identifikasi  Kandungan Fenolik dan Terpenoid dengan KLT Identifikasi  kandungan  senyawa  kimia  dalam  sampel  jamu  dilakukan  dengan  kromatografi lapis tipis (KLT). Sebagai fase diam digunakan plate silika gel 60 F254, dengan menggunakan fase gerak dan pembanding yang sesuai untuk tiap golongan senyawa uji, seperti tertera di bawah ini :
Fenolik Fase gerak : Etil asetat : asam formiat : toluen : air (6:1.5:2:0.5) Standar : Asam galat 1 mg/mL Deteksi : FeCl 3
Terpenoid Fase gerak : Heksana : etil asetat (93:7) Standar : Timol  1 mg/mL Deteksi : Anisaldehid asam sulfat

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Dalam penelitian ini, objek penelitian yang digunakan adalah berbentuk jamu godhog. Jamu adalah  obat  herbal  asli  Indonesia  yang  secara  turun  temurun  telah  digunakan  untuk  menjaga kesehatan  masyarakat.  Walaupun  obat-obat  modern  banyak  beredar  di  tengah  masyarakat,  jamu masih sangat populer baik di daerah pedesaan maupun perkotaan  (Kusumo et al., 2020). Apalagi dengan  semakin  banyaknya  prevalensi  penyakit  degeneratif,  penggunaan  jamu  menjadi  semakin gencar di masyarakat sebagai pengobatan alternatif dengan manfaat yang beragam. Selain itu dengan bahan baku jamu yang mudah ditemukan dan harga murah, aplikasi jamu dapat dengan lebih mudah untuk dilakukan sendiri di rumah, yang mana bentuk jamu godhog adalah salah satunya.
Formula jamu dalam penelitian ini menggunakan beberapa herbal, yaitu rosella, kunyit, jahe emprit, sereh, dan jeruk nipis. Gula batu digunakan sebagai bahan pemanis. Bunga rosella diketahui banyak  mengandung  senyawa  golongan  antosianin  dan  flavonoid  serta  mempunyai  aktivitas farmakologi seperti antioksidan, antibakteri, antidiabetes dan anti hipertensi (Da-Costa-Rocha et al., 2014). Kunyit adalah herbal yang mengandung senyawa golongan kurkuminoid yang mempunyai efek  farmakologis  yang  telah  terbukti,  misalnya  sebagai  antiinflamasi,  antioksidan,  mengatasi gangguan pencernaan, dan meningkatkan daya tahan tubuh (Syamsudin et al., 2019). Sementara itu, rimpang  jahe  banyak  mengandung  minyak  atsiri  dan  senyawa  aktif  seperti  gingerol  yang  telah terbukti  mampu  meningkatkan  daya  tahan  tubuh  dan  mengatasi  gangguan  pencernaan (Simanjuntak, 2012), sedangkan sereh dan jeruk nipis diketahui mempunyai efek yang poten dalam memperbaiki sistem pencernaan dan sistem imunitas tubuh (Suprayatmi et al., 2019). Dari formula sebagaimana tertera dalam Tabel I, dihasilkan jamu yang berbau khas, segar dan rasa yang enak. Walaupun  penelitian  tentang  jamu  adalah  sedang  digalakkan  pemerintah  melalui  program saintifikasi  jamu,  namun  penelitian  tentang  jamu  juga  mempunyai  keterbatan,  yang  antara  lain adalah masa simpan sediaan yang tidak lama, belum adanya bukti ilmiah yang cukup untuk jamu

## Analisis Penangkapan Radikal Bebas Jamu Rosella dan Fenolik Totalnya
yang  mempunyai  beberapa  bahan  herbal,  dan  kandungan  kimia  yang  relatif  rendah  dalam  jamu sehingga menyulitkan dalam analisisnya.

## Aktivitas Penangkapan Radikal Bebas
Penentuan  aktivitas  penangkapan  radikal  bebas  pada  jamu  rosella  dilakukan  secara spektrofotometri dengan reagen DPPH (1,1-difenil-2-pikrilhidrazil). Uji ini umum digunakan untuk menentukan  efisiensi  kinerja  dari  suatu  antioksidan (İ.  Gulcin  &  Alwasel,  2023 ),  terutama  untuk senyawa murni, produk makanan minuman dan ekstrak herbal. Selain itu reagen DPPH juga sensitif, sederhana, dan cepat prosesnya (I. Gulcin, 2020). Senyawa antioksidan akan bereaksi dengan radikal DPPH melalui  transfer  elektron atau  dengan  menyumbangkan  radikal hidrogen (radikal H), yang kemudian akan menjadikan molekul DPPH menjadi molekul netral dan terjadi pergeseran warna dari ungu menjadi kuning. Hasil penentuan aktivitas penangkapan radikal bebas dari jamu rosella dapat dilihat pada Tabel I.
Dari Tabel I di atas dapat dilihat bahwa jamu rosella mempunyai nilai IC 50 sebesar 490,3 ppm, yang mana nilai ini jauh dari nilai IC 50 senyawa pembanding yaitu kuersetin dengan nilai IC 50 sebesar 2,8  ppm.  Kuersetin  dipilih  sebagai  baku  pembanding  karena  kuersetin  merupakan  senyawa flavonoid  yang  memiliki  aktivitas  antioksidan  yang  stabil (İ.  Gulcin  &  Alwasel,  2023) .  Dari  nilai penangkapan radikal bebas yang diperoleh, yaitu 490,3 ppm; dari nilai tersebut maka aktivitasnya tergolong  rendah.  Tetapi  yang  perlu  dicatat  bahwa  dalam  sediaan  jamu,  penggunaannya  adalah sering sehingga hal ini sesuai dengan falsafah jamu yaitu memberikan efek dalam jangka panjang dalam penggunaan yang lama. Dalam hal ini, walaupun bunga rosella mengandung senyawa kimia dengan efek penangkapan radikal bebas yang tinggi, simplisia ini tidak dapat dilakukan penambahan dalam  jumlah  yang  besar  dalam  sediaan  jamu  karena  rasa  asam  yang  menjadi  pertimbangan sehingga dikhawatirkan menjadikan sediaan jamu menjadi kurang diterima oleh masyarakat. Selain itu, senyawa kurkuminoid dalam rimpang kunyit yang juga bertanggung jawab terhadap aktivitas penangkapan radikal bebas adalah tidak mudah larut dalam air, sehingga konsentrasi dalam sediaan jamu  adalah  tidak besar.  Dikarenakan sediaan jamu  mengandung senyawa terpenoid yang cukup tinggi, yaitu dari sereh dan rimpang yang digunakan, senyawa terpenoid ini tampak dengan jelas dalam hasil analisis dengan menggunakan Kromatografi Lapis Tipis, seperti pada Gambar 1 berikut ini.
Dari Gambar 1 terlihat bahwa dalam elusi sampel muncul bercak berwarna ungu cerah setelah disemprot  dengan  pereaksi  anisaldehid  asam  sulfat,  yang  menandakan  bahwa  dalam  sampel mengandung senyawa terpenoid.

## Kandungan flavonoid total
Kandungan  flavonoid  total  jamu  rosella  ditentukan  secara  kolorimetri  berdasarkan pembentukan  kompleks  alumunium.  Metode  ini    paling  umum  diterapkan  untuk  penentuan kandungan total flavonoid dalam sampel makanan atau tanaman obat (Pekal & Pyrzynska, 2014). Prinsip metode ini adalah pembentukan kompleks asam stabil dengan gugus keton atom karbon no. 4 (C-4). Pereaksi AlCl 3 juga dapat membentuk kompleks asam stabil dengan gugus orto-dihidroksi
Tabel I. Aktivitas Penangkapan radikal bebas jamu rosella
Sampel Konsentrasi (ppm) Penangkapan radikal bebas (%) Nilai IC 50 (ppm) Jamu rosella 50 19,00 490,3 100 20,97 200 26,42 400 48,44 800 70,58 Kuersetin
(Pembanding)
1
10,31
2,8
2
40,67 3 57,71 4 70,10 5 89,46
pada cincin A atau B dari flavonoid (Markham, 1982). Sebagai standar dalam pengujian ini adalah kuersetin (7 seri konsentrasi) dan diperoleh persamaan kurva baku Y = 0,063 X – 0,0062; dengan R 2 = 0,997. Dari hasil perhitungan sampel diperoleh kadar flavonoid total jamu rosella adalah 2,70 µg EK/ml  jamu.  Kandungan  flavonoid  total  ini  adalah  mirip  dengan  sediaan  jamu  pada  umumnya (Sukardi et al., 2021).

## Kandungan fenolik total
Penentuan  kadar  fenolik  total  dilakukan  dengan  tujuan  untuk  memperkirakan  aktivitas penangkapan  radikal  jamu  rosella.  Senyawa  fenolik  berpotensi  sebagai  penangkap  radikal  bebas karena  adanya  gugus  hidroksil  fenolik.  Senyawa  fenolik  mempunyai  banyak  ragam,  baik  yang merupakan senyawa fenolik sederhana maupun kompleks, seperti dalam senyawa flavonoid. Dalam hal  aktivitasnya  sebagai  penangkap  radikal  bebas,  gugus  hidroksil  fenolik  akan  mendonasikan radikal  hidrogen  pada  senyawa  radikal  bebas  dan  menjadikan  radikal  bebas  tersebut  menjadi senyawa  netral  (Miguel-Chavez,  2017).  Sebagai  hasil  akhir,  senyawa  fenolik  ini  akan  menjadi bersifat radikal bebas, tetapi bersifat stabil karena terjadi efek delokalisasi elektron.
Penentuan kadar fenolik total dalam penelitian ini dilakukan dengan reagen Follin-Ciocalteu dengan  metode  spektrofotometri.  Asam  galat  digunakan  sebagai  standar  karena  merupakan senyawa fenolik sederhana dan umum ada dalam tanaman (Kupina et al., 2018). Dari analisis kurva baku  (7  seri  konsentrasi)  diperoleh  persamaan  kurva  baku  Y  =  9,0972  X  +  0,0223;  dengan  R 2 = 0,9988.  Dari  hasil  perhitungan  sampel  diperoleh  kadar  fenolik  total  jamu  rosella  adalah  3,80  µg GAE/ml jamu.
Aktivitas antioksidan dipengaruhi oleh     adanya senyawa-senyawa metabolit sekunder        seperti fenolik  dan  flavonoid. Kemampuan antioksidan dalam meredam radikal bebas akan semakin baik apabila  nilai  total  fenolik  dan  flavonoid  semakin  tinggi  (Syamsu,  2019).  Hasil  penelitian menunjukkan kadar fenolik total dan flavonoid total jamu  godhog rosella adalah 3,80 µg GAE/ml jamu  godhog  dan  2,70  µg  EK/ml  jamu  godhog.  Rendahnya  kandungan  fenolik  ini  juga  tercermin dalam profil KLT, yang mana bercak senyawa fenolik dalam sampel jamu yang kecil, sebagaimana dapat dilihat pada Gambar 2.
Gambar 1. Hasil analisis senyawa golongan terpenoid jamu rosella dengan KLT yang dilihat dengan sinar tampak. Plate A adalah sebelum disemprot dengan anisaldehid asam sulfat, sedangkan  plate  B  adalah  setelah  disemprot  dengan  anisaldehid  asam  sulfat  dan dipanaskan pada suhu 105 o C selama 2 menit. Kode S adalah sampel jamu, sedangkan kode P adalah pembanding berupa timol.

## Analisis Penangkapan Radikal Bebas Jamu Rosella dan Fenolik Totalnya

## KESIMPULAN
Sediaan jamu rosella yang dihasilkan adalah berbau khas, segar dan mempunyai rasa yang enak. Dalam hal fungsi sebagai jamu, sediaan jamu rosella ini mempunyai efek yang cukup terhadap penangkapan radikal bebas, yang didukung dengan kandungan flavonoid dan fenoliknya.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan terima kasih diberikan kepada Yayasan Politeknik Kesehatan Bhakti Setya Indonesia atas dukungan menyediakan sarana dan prasarana sehingga penelitian ini dapat berjalan dengan baik.

## DAFTAR PUSTAKA
Da-Costa-Rocha, I., Bonnlaender, B., Sievers, H., Pischel, I., & Heinrich, M. (2014). Hibiscus sabdariffa L. :  A  phytochemical  and  pharmacological  review. Food  Chemistry , 165 ,  424 – 443. https://doi.org/10.1016/j.foodchem.2014.05.002 Dhanik, J., Arya, N., & Nand, V. (2017). A review on Zingiber officinale. Journal of Pharmacognosy and Phytochemistry , 6 (3), 174 – 184. Gulcin, I. (2020). Antioxidants and antioxidant methods-an updated overview. Archives of Toxicology ,
94 (3), 651 – 715.
Gulcin,  İ.,  &  Alwasel,  S.  H.  (2023).  DPPH  radical  scavenging  assay. Processes , 11 (8). https://doi.org/10.3390/pr11082248
Hayati,  S.,  Apriyana,  W.,  Rosyida,  V.,  Indrianingsih,  A.,  Nisa,  K.,  Ratih,  D.,  &  Indirayati,  N.  (2019). Preformulation and evaluation of jamu uyup-uyup (an Indonesian herbal galactogogue). IOP Conference Series: Earth and Environmental Science , 251 , 012022.
Khan, M. S., Yusufzai, S. K., Rafatullah, M., Sarjadi, M. S., & Razlan, M. (2018). Determination of total phenolic  content,  total  flavonoid  content  and  antioxidant  activity  of  various  organic  crude extracts of Licuala spinosa leaves from Sabah, Malaysia. ASM Science Journal , 11 (Special Issue 3), 53 – 58.
Kharat, M., Du, Z, Zhang, G., & Mcclements, D. (2017). Physical and chemical stability of curcumin in
Gambar  2.  Hasil  analisis  senyawa  golongan  fenolik  jamu  rosella  dengan  KLT  setelah disemprot  dengan  reagen  FeCl 3 .  Plate  A  adalah  hasil  analisis  yang  dilihat  dengan  sinar tampak, sedangkan sedangkan plate B adalah dilihat dengan sinar UV 366 nm. Kode S adalah sampel jamu, sedangkan kode P adalah pembanding berupa asam galat.
aqueous  solutions  and  emulsions:  impact  of  pH,  temperature,  and  molecular  environment. Journal of Agriculture and Food Chemistry , 65 (8), 1525 – 1532.
Kupina, S., Fields, C., Roman, M., & Brunelle, S. (2018). Determination of Total phenolic content using the Follin-C assay. A Journal of Analytical Chemistry and Microbiology , 101 (5), 1466 – 1472.
Kusumo, A. R., Wiyoga, F. Y., Perdana, H. P., Khairunnisa, I., Suhandi, R. I., & Prastika, S. S. (2020). Jamu tradisional  Indonesia:  Tingkatkan  imunitas  tubuh  secara  alami  selama  pandemi. Jurnal Layanan Masyarakat , 4 (2), 465. https://doi.org/10.20473/jlm.v4i2.2020.465-471 Lingga, L. (2012). The healing power of antioxidant . PT Elex Media Komputindo. Markham, K. (1982). Techniques of flavonoid identification . Academic Press. Miguel-Chavez, R. (2017). Phenolic antioxidant capacity: a review of the state of the art . IntechOpen Limited. https://doi.org/DOI: 10.5772/66897
Obouayeba, A., Djyh, B., Diabate, S., & Djaman, J. (2014). Phytochemical and antioxidant activity of roselle (Hibiscus sabdariffa L.) petal extracts. Research Journal of Pharmaceutical Biological and Chemical Sciences , 5 (2), 1453 – 1465.
Park,  C.,  Lee,  K.,  Gul,  K.,  Rahman,  M.,  Kim,  A.,  Chun,  J.,  Kim,  H.,  &  Choi,  S.  (2019).  Phenolics  and antioxidant activity of aqueous turmeric extracts as affected by heating temperature and time. LWT Food Science and Technology , 105 , 149 – 155.
Pekal,  A.,  &  Pyrzynska,  K.  (2014).  Evaluation  of  aluminium  complexation  reaction  for  flavonoid content assay. Food Analytical Methods , 7 , 1776 – 1782.
Silvia,  D.,  Katharina,  K.,  Hartono,  S.,  Anastasia,  V.,  &  Susanto,  Y.  (2018).  Pengumpulan  data  base sumber  antioksidan  alami  alternatif  berbasis  pangan  lokal  di  Indonesia. Surya  Octagon Interdisciplinary Journal of Technology , 1 (2), 181 – 198. Simanjuntak, P. (2012). Review Studi Kimia dan Farmakologi Tanaman Kunyit (Curcuma longa L)
Sebagai Tumbuhan Obat Serbaguna. Agrium , 17 (2), 103 – 107.
Sukardi, S., Iqbal, N. I. A., & Winarsih, S. (2021). Kajian antioksidan, total fenol & total flavonoid jamu Selokarang yang diformulasi dengan jinten hitam (Nigella sativa). Food Technology and Halal Science Journal , 4 (1), 39 – 51. https://doi.org/10.22219/fths.v4i1.15623 Sumarni, W., Sudarmin, S., & Sumarti, S. (2019). The scientification of jamu: a study of Indonesia n’s traditional medicine. Journal of Physics : Conference Science , 1321 (3), 032057.
Suprayatmi,  M.,  Kusumaningrum,  I.,  Br  Siregar,  E.,  &  Fitriyani,  L.  (2019).  Pemanfaatan  sereh (Cymbopogon  citratus)  dan  stevia  (Stevia  rebaudiana  Bertoni)  untuk  meningkatkan kandungan antioksidan produk coklat yang rendah gula. Jurnal Agroindustri Halal , 5 (1), 075 – 084. https://doi.org/10.30997/jah.v5i1.1586 Syamsudin,  R.  A.  M.  R.,  Perdana,  F.,  &  Mutiaz,  F.  S.  (2019).  Tanaman  temulawak  (Curcuma xanthorrhiza  Roxb)  sebagai  obat  tradisional. Jurnal  Ilmiah  Farmako  Bahari , 10 (1),  51. https://doi.org/10.52434/jfb.v10i1.648
Ulewicz-Magulska, B., & Wesolowski, M. (2019). Total phenolic contents and antioxidant potentialof herbs used for medical and culinary purposes. Plant Food for Human Nutrition , 74 , 61 – 67.