## ANALISIS KANDUNGAN PROKSIMAT, ANTIOKSIDAN DAN TOKSISITAS EKSTRAK DAUN SAMAMA (Anthocephalus Macrophylus) DENGAN PENAMBAHAN FULI PALA ( Myristica fragrant Houtt) SEBAGAI MINUMAN FUNGSIONAL
Khadijah* 1 , Ahmad Muhsin Jayali 1 , Indah Rodianawati 2
1 Program Studi Pendidikan Kimia, Universitas Khairun, Ternate 2 Program Studi Teknologi Hasil Pertanian, Ternate email : *1 talimbangan@gmail.com, 1 jayali.iam@gmail.com, 2 rodiana79@gmail.com Manuscript recieved:29-09-2019 Revision Accepted: 01-11-2019

## Abstract
Samama and Nutmeg Leaf formulations especially in the Fuli section which can be used as additives (flavor) in a food or beverage material is a natural potential that needs to be utilized optimally, so it is  necessary  to  do  a  more  in-depth  study  of  Carbohydrate,  Protein  and  Fat  content,  as  a  food ingredient and antioxidant content after mixing Samama extract and Nutmeg mace which is thought to  have  the  ability  as  an  antioxidant  so  that  it  can  be  utilized  as  a  Potential  Health  Drink  for development. In this research, analysis of proximates, antioxidant levels and toxicity of a mixture of dried  Samama  leaves  with  Nutmeg  mace  at  various  concentrations  was  0.1%;  0.25%;  0.5%;  0.75%; and  1%.  The  results  showed  that  the  combination  of  Samama  leaf  (Anthocepallus  macrophyllus) with  Nutmeg  mace  ( Myristica  fragrants Houtt)  had  the  ability  to  reduce  free  radicals  with  DPPH method  with  moderate  intensity,  where  IC 50 produced  was  117.6  to  126.92  µg  /  mL  (moderate category was 101 - 150 µg / mL), with proximate analysis results in accordance with SNI 01-3836- 2013 standards for ash content, crude fiber, protein, carbohydrate and fat levels which are almost the same  for  each  formula  followed  by  toxicity  (LC 50 )  <1000  µg  /  mL  in  mixtures  with  mace concentrations  of  0.1%  which  is  378.27  µg  /  mL  so  that  they  are  said  to  be  toxic  and  not recommended for direct consumption, whereas mace concentrations of more than or equal to 0.25% are categorized as not toxic because they have an LC 50 > 1000 µg / mL so it is safe as a functional drink.
Keywords: Samama Leaf, Fuli of Nutmegs, antioxidant, toxicity

## Abstrak
Perpaduan daun Samama dan Pala terutama pada bagian fuli yang dapat dijadikan sebagai bahan tambahan  ( flavor )  dalam  suatu  bahan  makanan  maupun  minuman  merupakan  potensi  alam  yang perlu  dimanfaatkan  secara  optimal,  sehingga  perlu  dilakukan  kajian  lebih  mendalam  tentang kandungan  karbohidrat,  protein  dan  lemak,  sebagai  suatu  bahan  pangan  dan  kandungan antioksidan setelah pencampuran ekstrak Samama dan fuli Pala yang diduga memiliki kemampuan sebagai  antioksidan  sehingga  dapat  dimanfaatkan  sebagai  minuman  kesehatan  yang  potensial untuk  dikembangkan.  Dalam  penelitian  ini  dilakukan  analisis  proximat,  kadar  antioksidan    dan toksisitas  dari  campuran  daun  kering  Samama  dengan  fuli  Pala  pada  berbagai  konsentrasi  yaitu 0,1 %; 0,25%; 0,5%; 0,75%; dan 1%. Hasil penelitian menunjukkan bahwa perpaduan daun Samama ( Anthocepallus  macrophyllus )  dengan  fuli  Pala  ( Myristica  fragrants Houtt)  memiliki  kemampuan mereduksi  radikal  bebas  dengan  metode  DPPH  dengan  intensitas  sedang,  dimana  IC 50 yang dihasilkan sebesar 117,6 sampai 126,92 µg/mL (kategori sedang adalah 101  – 150 µg/mL), dengan hasil analisis proximat yang sesuai dengan standar SNI 01-3836-2013 untuk kadar abu, kadar serat kasar, protein, karbohidrat dan lemak yang hampir sama untuk setiap formula dilanjutkan dengan toksisitas  (LC 50 )  <  1000  µg/mL  pada  campuran  dengan  konsentrasi  fuli  sebesar  0,1%  yaitu  378,27 µg/mL sehingga dikatakan toksik dan tidak direkomendasikan untuk dikonsumsi secara langsung, sedangkan  dengan  konsentrasi  fuli  lebih  dari atau  sama  dengan  0,25%  dikategorikan  tidak  toksik karena memiliki LC 50 > 1000 µg/mL sehingga aman sebagai suatu minuman fungsional.
Kata Kunci : Daun Samama, Fuli pala, antioksidan, toksisitas

## TECHNO: JURNAL PENELITIAN
Jurnal homepage : http://ejournal.unkhair.ac.id/index.php/Techno Volume 08 Nomor 02 Oktober 2019 DOI: http://dx.doi.org/10.33387/tk.v8i2.1320

## PENDAHULUAN
Keanekaragaman  tumbuhan  di  Indonesia  sangat  memungkinkan  untuk  ditemukan beranekaragam jenis senyawa kimia. Beberapa jenis senyawa kimia itu telah banyak ditemukan tetapi  berdasarkan  sejarah  penemuan  dan  pengembangannya  tidak  dapat  dipungkiri  bahwa mungkin  akan  ditemukan  senyawa-senyawa  kimia  baru  yang  didapatkan  berdasarkan  hasil penelitian tanaman-tanaman baru yang akan diteliti.
Berkaitan  dengan  senyawa  kimia  hasil  metabolit  sekunder  seperti  terpenoid,  golongan  fenol, alkaloid,  flavonoid  dan  sebagainya  banyak  sekali  terdapat  di  dalam  tumbuhan  dan  sangat potensial  untuk  diteliti  dan  dikembangkan  oleh  para  peneliti  di  Indonesia  dalam  rangka pencarian bahan baku obat antioksidan alami (Fitriya., et al. , 2010).
Penggunaan  sumber  daya  alam  sebagai  obat  tradisional  lebih  diminati  karena  relatif  tidak menimbulkan efek samping, berbeda dengan obat-obat sintetik yang seringkali mangakibatkan efek  samping  yang  lebih  berbahaya  bagi  kesehatan.  Apalagi  setelah  krisis  ekonomi  yang dialami oleh beberapa negara asia termasuk Indonesia menyebabkan melonjaknya harga obat- obat sintetik, sehingga daya jangkau masyarakat terhadap obat-obat sintetik semakin rendah. Penggunaan  bahan  alam  sebagai  obat  tradisional  dan  sebagai  bahan  dasar  obat  merupakan salah  satu  alternative  pengobatan.  (Rahmaniar,1996;Nugroho,2006).  Hasil  survei  etnobotani yang dilakukan memperlihatkan bahwa salah satu tumbuhan yang potensial adalah tumbuhan tropika  Indonesia  yang  dikenal  dengan  nama  Jabon  Merah.  Tumbuhan  tersebut  banyak ditemukan  di  daerah  Maluku,  Maluku  Utara  dengan  nama  daerah  Samama  (Ternate, Halmahera) dan nama latinnya Anthosephalus macrophyllus .
Akhir-akhir  ini  penggunaan  senyawa  antioksidan  berkembang  dengan  pesat  baik  untuk makanan  maupun  pengobatan.  Penggunaan  sebagai  obat  makin  berkembang  seiring  dengan makin bertambahnya pengetahuan tentang aktifitas radikal bebas terhadap beberapa penyakit degeneratif seperti penyakit jantung dan kanker (Endang., et al., 2005 . ).
Beberapa  penelitian  pendahuluan  menemukan  kandungan  metabolit  sekunder  yang  dimiliki oleh  daun  Samama  sangat  potensial  untuk  dikembangkan  sebagai  bahan  dasar  pembuatan obat, demikian pula dengan kandungan antioksidan pada  daun Samama asal Ternate sebesar 80.34 µg/mL pada daun muda dan 43,49 µg/mL pada daun tua (Khadijah., et al .,2017), dimana jika kandungan antioksidan (IC 50 ) < 50 µg/mL, intensitasnya sangat kuat dan antioksidan (IC 50 ) = 50 - 100 µg/mL, intensitasnya kuat (Armala, 2009).
Penelitian  ini  dilakukan  untuk  mengetahui  kandungan  kadar  air,  abu,    protein,  karbohidrat, lemak  dan  serat  kasarnya  (analisis proximate ),  kandungan  antioksidan  serta  toksisitas  dari ekstrak  daun  Samama  yang  telah  ditambahkan  pala  sebagai  perisai  alami  sehingga  dapat dimanfaatkan sebagai suatu bahan pangan fungsional.

## METODE PENELITIAN
Metode  penelitian  ini  mengacu  pada  metode  penelitian  yang  lazim  digunakan  dalam mengisolasi  senyawa  organik  bahan  alam  yang  meliputi  pemilihan  spesies,  penentuan  lokasi pengambilan sampel, persiapan dan pengambilan sampel tumbuhan, pengolahan sampel yang meliputi ekstraksi, uji antioksidan, uji toksisitas.

## B.1.. Waktu dan Tempat Pengambilan Sampel
Penelitian  ini  dilakukan  pada  bulan  Mei-November  2018  di  Laboratotium  Dasar  dan Laboratorium  Kimia,    FKIP  Unkhair.  Sampel  daun Anthocephalus  macrophyllus diambil  dari kampus  II  Unkhair  di  kelurahan  Gambesi,  Kecamatan  Kota  Ternate  selatan,  Kota  Ternate, Maluku Utara.

## B.2..  Alat Penelitian
Oven listrik, timbangan analitik, cawan aluminium, desikator, tang penjepit, cawan porselen 30 mL, pembakar bunsen atau hot plate , tanur listrik, labu Kjeldahl 300 mL, Satu set alat destilasi, erlenmeyer  250  cc,  buret  50  cc  skala  0.1 mL,  aatu  set  alat  sokhlet,  kertas  saring  bebas  lemak, corong, erlenmeyer, petridish, penangas air, pipet ukur 10 mL, alat penghitung koloni ( colony counter ),  tabung  reaksi,  alat  penghomogen  ( vortex ),  rak  tabung  reaksi,  tissue,  LAF,  inkubator, autoklaf.

## B.3. Bahan Penelitian
H 2 SO 4 teknis dan p.a., HCl 0.1 N, NaOH 32%, tablet Kjedahl, asam borax 3%, indikator Methyl Red , indikator pp, Buffered Peptone Water (BPW), PCA ( Plate Count Agar ), alkohol 70 %, alkohol 80%,  alkohol  96%,  larutan  Luff  Schrool,  HCl  3%,  KI  20%,  H 2 SO 4 25%,  CaCO 3 ,  larutan  Na- thiosulfat 0.1 N, Pb asetat, asam oksalat, Pereaksi anthrone 0.1%, Larutan glukosa standar 0.2 mg/ml,  HCl  25%,  H 2 SO 4 1.25%,  NaOH  3.25%,  NaOH  10%,  HCl  pekat,  NH 4 OH  12%,  dan Petroleum eter.

## B.4. Prosedur Penelitian

## 1. Ekstraksi
Sampel Anthocephalus  macrophyllus dibagi  atas  dua  bagian,  yatu  sampel  daun  muda  dan  tua yang masih segar (fresh) dan sampel daun muda dan tua yang sudah dikeringkan. Kemudian sampel ditimbang lalu dihaluskan dengan blender kemudian ditambahkan dengan bubuk pala (fuli)  (%b/b),  selanjutnya  dilakukan  pengujian  analisis  proximat,  antioksidan  dan  toksisitas dengan melarutkan dalam alkohol dan air.

## 2. Analisa Proksimat
Penentuan  Kadar  Air ,  adapun  cara  kerjanya  adalah  cawan  porselen  yang  telah  dicuci  bersih, dikeringkan di dalam oven selama 1 jam dengan temperatur 105 0 C. kemudian didinginkan di dalam eksikator sekitar 10-20 menit dan ditimbang (C). Sampel dihitung sebanyak 0,5-1 gram (D)  dan  dimasukkan  ke  dalam  cawan  porselen.  Kemudian  cawan  dan  sampel  tersebut dikeringkan  dalam  open  105 0 C  selama  112-16  jam.  Cawan  dan  sampel  (E)  dikeluarkan  dari oven dan didinginkan dalam eksikator selama 10-20 menit sampai diperoleh berat tetap.
Penentuan  Kadar  Abu ,  adapun  cara  kerjanya  antara  lain  :  cawan  porselen  yang  telah  dicuci bersih, dikeringkan di dalam oven sekitar 1 jam pada temperatur 105 0 C. kemudian didinginkan dalam eksikator sekitar 10-20 menit dan ditimbang dengan teliti (F). Sampel ditimbang dengan teliti sebanyak 3 gram untuk sampel hijauan atau 5 gram untuk kosentrat (G) dan dimasukkan ke  dalam  cawan  porselen.  Pijarkan  sampel  yang  terdapat  dalam  cawan  porselen  hingga
berasap. Bakar cawan porselen berisi sampel dan tanur bersuhu 600 0 C. biarkan sampel terbakar selama  3-4  jam  atau  sampai  warna  sampel  berubah  menjadi  putih  semua.  Setelah  sampel bewarna  putih  semua,  kemudian  dinginkan  dalam  tanur  pada  suhu  120 0 C  sebelum dipindahkan ke dalam eksikator. Setelah dingin timbang dengan teliti (H).
Penentuan  Protein  Kasar ,  adapun  cara  kerjanya  antara  lain:  timbang  sampel  dengan  teliti sejumlah 0,3 gram (I) dan masukkan kedalam tabung destruksi. Tambahkan kira-kira 0,2 gram katalis  campuran  dan  5  ml  H 2 SO 4 pekat.  Panaskan  campuran  tersebut  dalam  lemari  asam. Perhatikan  proses  destruksi  selama  pemanasan  agar  tidak  meluap.  Destruksi  dihentikan  bila larutan  sudah  menjadi  hijau  terang  atau  jernih,  lalu  dinginkan  dalam  lemari  asam.  Larutan dimasukkan  ke  dalam  labu  destilasi  dan  diencerkan  dengan  60  ml  aquades.  Masukkan beberapa buah batu didih. Tambahkan pelan-pelan melalui dinding labu 20 ml NaOH 40% dan segera  hubungkan  dengan  destilator.  Suling  (NH 3 dan  air)  ditangkap  oleh  labu  erlenmeyer yang berisi 25 ml H 2 SO 4 0,3N dan 2 tetes indikator campuran (methyl red 0,1% dan bromcresol green  0,2%  dalam  alkohol).  Penyulingan  dilakukan  hingga  nitrogen  dari  cairan  tersebut tertangkap  oleh  H 2 SO 4 yang  ada  di  dalam  erlenmeyer  (2/3  dari  cairan  yang  ada  pada  labu destilasi menguap atau terjadi letupan-letupan kecil atau erlenmeyer mencapai volume 75 ml). Labu erlenmeyer berisi sulingan diambil dan dititer kembali dengan NaOH 0,3N (J). Perubahan biru ke hijau menandakan titik akhir titrasi. Bandingkan dengan titer blanko (K).
Penentuan  Lemak  Kasar antara  lain:  timbang  sampel  dengan  teliti  sebanyak 1 gram 9 L)  dan bungkus  dengan  kertas  saring  bebas  lemak.  Keringkan  dalam  oven  105 0 C  selama  5  jam, dinginkan  dalam  eksikator  dan  timbang  (M).  Sampel  dimasukkan  kedalam  tabung  ekstraksi soxhlet.  Alat  soxhlet  diisi  dengan  pelarut  lewat  kondensor  dengan  corong.  Alat  pendingin dialirkan dan panas dihidupkan. Ekstraksi berlangsung selama 16 jam sempai pelarut pada alat soxhlet terlihat jernih. Sampel dikeluarkan dari alat soxhlet dan keringkan ke dalam oven 105 0 C selama 5 jam, kemudian dinginkan dalam eksikator dan timbang (N).
Penentuan  Serat  Kasar antara  lain:  keringkan  kertas  saring  whatman  No.  41  di  dalam  oven 105 O C  selama  1  jam  dan  timbang  (O).  timbang  dengan  teliti  1  gram  (P)  sampel  masukkan kedalam  gelas  piala.  Tambahkan  50  ml  H 2 SO 4 0,3N  dan  didihkan  selama  30  menit.  Cairan disaring  melalui  kertas  saring  yang  telah  diketahui  beratnya  didalam  corong  Buchner  yang telah dihubungkan dengan pompa vokum. Kertas saring bersama residu dicuci berturut-turut dengan 50 ml H 2 O panas, 50 ml H 2 SO 4 0,3 N, 50 ml H 2 O panas dan aseton. Kertas saring berisi residu  dimasukkan  kedalam  cawan  porselen  bersih  dan  kering  dengan  menggunakan  oven. Cawan  berisi  sampel  yang  dikeringkan  ke  dalam  oven  105 0 C  sampai  didapat  berat  yang konstan, didinginkan dalam eksikator dan ditimbang (Q). Pijarkan sampel dalam cawan hingga tak  berasap.  Kemudian  cawan  bersama  isinya  dimasukkan  ke  dalam  tanur  600 0 C  selama  3-4 jam.  Setelah  isi  cawan  berubah  menjadi  abu  yang  bewarna  putih,  diangkat,  didinginkan  dan ditimbag (R).
Kadar Karbohidrat dengan cara mengurangkan kandungan  zat makanan dalam bahan pakan (% abu, protein kasar, lemak kasar, dan serat kasar) dari % BK bahan.

## 3. Uji Aktivitas Antioksidan
Aktivitas antioksidan dianalisa dengan terlebih dahulu membuat larutan DPPH (1,1-diphenyl- 2-phikril-hidrazil) yaitu melarutkan Kristal DPPH kedalam methanol pada konsentrasi 0,01 M. Kemudian,  mengambil  1  ml  DPPH  0,01  M  dan  menambahkan  metanol  hingga  volumenya  5
ml,lalu mengukur absorbansinya pada panjang gelombang 517 nm sebagai absorbansi kontrol. Proses  selanjutnya  yaitu  pengukuran  absorbansi  sampel  dari  ekstraksi  dengan pelarut  n- heksana.  Langkah  pengukuran  absorbansi  sampel  dengan  mengambil  200  mg  sampel  dan melarutkannya dalam 5 ml metanol sambil memvortek selama 1 jam. Kemudian, mengambil 1 ml campuran tersebut dan menambahkan 1 ml DPPH 0,01 M serta metanol hingga volumenya 5 ml. Kemudian sampel diukur absorbansinya pada panjang gelombang 517 nm. Mengulangi analisa absorbansi sampel dengan sampel dari hasil ekstraksi dengan pelarut chloroform dan etil  asetat.  Data  absorbansi  sampel  yang  diperoleh  digunakan  untuk  penentuan  Inhibition Concentration  (IC)  (%).  Inhibition  Concentration  (IC)  (%)  yaitu  konsentrasi  suatu  zat antioksidan yang menyebabkan 50% DPPH kehilangan karakter radikal.

## 4. Uji Toksisitas dengan Menggunakan Metode Brine Shrimp Lethality Test (BSLT)

## 1. Penyiapan sampel
Sampel  ditimbang  sebanyak  100  mg,  ditambahkan  kloroform  sampai  dengan  volume  10  mL (konsentrasi  larutan  induk  =  10  mg/ml).  Dari  larutan  induk  dipipet  ke  dalam  vial  masing- masing  0,5 ml, 0,05 ml, 0,005 ml sehingga diperoleh konsentrasi  10 µg/ml, 100 µg/ml, 1000 µg/ml, kemudian pelarutnya diuapkan lalu ditambahkan 3 ml air laut.

## 2. Penyiapan larva Artemia salina Leach
Telur Artemia salina Leach dimasukkan ke wadah berisi air laut, diaerasi di bawah sinar lampu selama 24 jam. Telur akan menetas setelah 24 jam dan menjadi larva. Aerasi diteruskan selama 24 jam. Larva yang berumur 2 (dua) hari digunakan sebagai hewan uji.

## 3. Pelaksanaan pengujian
Ke dalam masing-masing vial yang berisi sampel uji serta kontrol dimasukkan 10-15 ekor larva udang.  Volume  vial  dicukupkan  hingga  5  ml  dengan  air  laut.  Setelah  24  jam,  dilakukan pengamatan  jumlah  larva  udang  yang  mati.  Tiap  sampel  uji  dan  kontrol  dilakukan  replikasi sebanyak  3  kali.  (Kontrol  =  kloroform  0,5  ml  diuapkan,  dikerjakan  seperti  penetapan  sampel uji).

## 4. Pengumpulan dan Analisa Data
Data  pengamatan  jumlah  larva  yang  mati  dari  masing-masing  perlakuan  dikumpulkan kemudian dihitung persentase kematian yang selanjutnya dianalisis probit untuk memperoleh LC 50 (µg/mL).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pada  penelitian  ini  dilakukan  pemeriksaan  berupa  analisis  proximat  berupa  kadar  air,  abu, protein, lemak, karbohidrat dan serta kasar berdasarkan metode AOAC pada campuran daun Samama dan fuli  pala dengan berbagai konsentrasi (formulasi)  0,1%; 0,25%; 0,5%; 0,75%; dan 1%  dalam  2  gram  daun  Samama  yang  telah  dikeringkan  tanpa  terkena  matahari  langsung, untuk menghindari rusaknya senyawa kimia bila terkena matahari langsung seperti senyawa- senyawa  flavonoid  dan  volatile.  Selanjutnya  dilakukan  pengukuran  aktivitas  antioksidan dengan  metode  DPPH  pada  formula  yang  telah  ditentukan  sebelumnya.  Kemudian  untuk
mengetahui  toksisitas  dari  suatu  bahan  pangan  fungsional  dilakukan  uji  sitotoksik  dengan menggunakan pengujian terhadap kematian larva udang Artemia salina leach atau Brine Shrimp Lathality Test (uji BSLT) seperti disajikan dalam tabel berikut ini:

## Tabel 1, Hasil uji Proximat
Formulasi Air (%) Abu (%) Protein (%) Lemak (%) Serat Kasar (%) Karbohidrat (%) A 10,71 7,12 10,27 2,96 16,05 52,89 B 10,64 7,38 10,44 3,11 16,58 51,85 C 10,66 7,28 10,07 3,05 15,69 53,25 D 10,82 7,43 10,73 2,90 15,78 52,34 E 10,81 7,31 10,12 2,43 16,70 52,62 SNI 01-3836-2013 < 10% < 8% <16%
Keterangan:
A = fuli 0,1% b/b; B = fuli 0,25% b/b; C= fuli 0,5% b/b;D = fuli 0,75% b/b dan E = fuli 1% b/b
Air  merupakan  komponen  penting  dalam  bahan  pangan  karena  air  dapat  mempengaruhi penampakan,  tekstur  dan  citarasa  makanan.  Persyaratan  kadar  air  dalam  suatu  ramuan merupakan parameter penting untuk menilai keadaan ramuan tersebut. Berdasarkan data pada Tabel 1, formula B memiliki kadar air paling kecil yaitu 10,64%, dan terbesar pada Formula D yaitu 10,82%. Kadar air yang dimiliki oleh kelima formulasi Samama dan fuli tersebut belum memenuhi standar untuk simplisia kering, yaitu lebih dari 10% namun hal ini dapat disiasati dengan  waktu  pengeringan  yang  lebih  lama  untuk  mengurangi  kadar  air  dari  suatu  sampel atau  simplisia.  Keberadaan  air  dalam  bahan  pangan  juga  ikut  menentukan  terjadinya kerusakan dalam bahan pangan tersebut, karena air dapat dimanfaatkan oleh mikroorganisme untuk pertumbuhannya (Fardiaz et al., 1992).
Kadar  abu  suatu  bahan  menunjukkan  keberadaan  kandungan  mineral  atau  bahan-bahan anorganik.  Berdasarkan  analisis  kadar  abu  pada  Tabel  1,  Formula  D  memiliki  lebih  banyak bahan anorganik dibandingkan formula lainnya. Hal ini terlihat dari nilai kadar abu formula D yang lebih besar daripada kadar abu lainnya. Menurut Gaman dan Sherrington (1992), unsur mineral  adalah  unsur  yang  diperlukan  tubuh  dalam  jumlah  yang  relatif  kecil,  tetapi keberadaannya tetap diperlukan sebagai zat pembangun dan pengatur.
Lemak merupakan salah satu komponen penting pada bahan pangan. Pada sayuran dan buah- buahan komponen ini umumnya dijumpai dalam 26 jumlah yang kecil, yaitu tidak lebih dari 0,5  %  basis  basah  (Potter  dan  Hotchkiss,  1995).  Kelima  formula  yang  digunakan  untuk pembuatan teh herbal ini  memiliki kadar lemak yang rendah. Kandungan lemak yang rendah dalam  buah-buahan  dan  sayuran  mempunyai  peranan  penting  dalam  mempertahankan tekstur, rasa, bau, zat warna dan lain-lain (Pantastico, 1986).
Kelompok nutrien lain yang penting adalah protein. Protein merupakan penyusun utama sel- sel  tubuh.  Membran  sekeliling  sel  terbuat  dari  protein.  Protein  juga  didapatkan  didalam  sel. Protein  penting  untuk  pembentukan  enzim,  antibodi,  dan  beberapa  hormon.  Substansi  ini diproduksi  dalam  sel  dan  dalam  beberapa  hal  dilepaskan  ke  aliran  darah  (antibodi  dan hormon)  atau  ke  dalam  usus  (enzim  pencernaan)  (Gaman  dan  Sherrington,  1992).  Menurut Suhardjo dan Clara (1987), bahan-bahan protein dapat diperoleh tanaman dari tanah dan udara sekitarnya  dan  nitrogen  yang  diperoleh  dari  tanah  berada  dalam  bentuk  senyawa  nitrat  dan nitrit.
Serat  merupakan  salah  satu  zat  yang  dibutuhkan  oleh  tubuh  karena  serat  dapat  membantu memperlancar pencernaan pada tubuh manusia. Fungsi utama serat adalah (1) memperlambat kecepatan  pencernaan  pati  sehingga  aliran  energi  ke  tubuh  menjadi  berkurang,  (2) memperlambat pengosongan lambung sehingga memberi perasaan kenyang yang lebih lama, (3) memperlambat penyerapan glukosa dalam usus sehingga membantu mengatur kebutuhan insulin (4) meningkatkan kebutuhan saluran pencernaan dengan cara meningkatkan motilitas atau  pergerakan  usus  besar,  (5)  mengurangi  resiko  penyakit  jantung,  (6)  mengikat  asam empedu  dalam  usus,  (7)  mengikat  lemak  dan  kolesterol  dalam  usus  halus  yang  kemudian dikeluarkan melalui feses (Stark dan Madar, 1994). Berdasarkan hasil analisis kadar serat kasar pada  penelitian  ini,  daun  ceremai  memiliki  kandungan  serat  yang  cukup  tinggi.  Kandungan serat  yang  tinggi  dalam  bahan  makanan  berguna  untuk  memperlancar  pencernaan  dalam tubuh. Serat kasar menurut Muchtadi (1989) merupakan residu dari makanan yang tidak dapat dihidrolisis dengan bahan kimia.
Berdasarkan  data  penelitian  yang  dilakukan  untuk  semua  jenis  formulasi  telah  memenuhi standar SNI 01-3836-2013 untuk teh herbal kering dalam kemasan.
Tabel 2. Aktivitas Antioksidan dan Toksisitas Formulasi Antioksidan (IC50) Toksisitas (LC50) A 117,60 378.27 B 121,29 1122 C 126,92 317029.74 D 119,31 9366.99 E 122.90 2,58 x 10 9
Keterangan:
A = fuli 0,1% b/b; B = fuli 0,25% b/b; C= fuli 0,5% b/b; D= fuli 0,75% b/b dan E = fuli 1% b/b
Berdasarkan  penelitian  yang  telah  dilakukan  oleh  Khadijah,dkk  (2017)  telah  diketahui  kadar antioksidan  dari  daun  Samama  ( Anthocepallus  macrophyllus )  sebesar  80.34  µg/mL  pada  daun muda,  dan  43.49  µg/mL  pada  daun  tua  Samama.  Pada  penambahan  fuli  pala  terlihat penurunan aktivitas antioksidan dan niai toksisitas dari simplisia daun  Samama. Hal ini juga dipengaruhi  oleh  jenis  daun  Samama  yang  dimanfaatkan  yaitu  sebagian  besar  adalah  daun muda dengan menambahkan pula sedikit daun tua. Terlihat pada Tabel 2, aktivitas antioksidan dengan  formulasi  yang  berbeda  menunjukkan  aktivitas  penangkapan  radikal  bebas  hampir sama  untuk  semua  formulasi  yang  dilakukan  dimana  intensitas kekuatan  antioksidan  berada pada  level  sedang  (101-150  μg/ml).  Menurut  Molyneux  (2004),  ekstrak  dinyatakan  sebagai antioksidan bila nilai IC 50 kurang dari 200 μg/ml. Daya hambat terhadap radikal bebas DPPH diukur secara spektrofotometri UV-VIS berdasarkan perubahan warna yang terjadi.
Pada  pengukuran  toksisitas  dengan  menggunakan  uji  BSLT  menunjukkan  bahwa  semakin besar  fuli  yang  ditambahkan,  maka  toksisitasnya  semakin  menurun,  sehingga  aman  untuk dikonsumsi sebagai suatu bahan pangan fungsional (minuman fungsional).

## KESIMPULAN
Dalam  penelitian  ini  dilakukan  analisis  proximat,  kadar  antioksidan    dan  toksisitas  dari campuran daun kering Samama dengan fuli pala pada berbagai konsentrasi yaitu 0,1%; 0,25%; 0,5%;  0,75%;  dan  1%.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  perpaduan  daun  Samama ( Anthocepallus  macrophyllus )  dengan  fuli  Pala  ( Myristica  fragrants  Houtt )  memiliki  kemampuan
mereduksi  radikal  bebas  dengan  metode  DPPH  dengan  intensitas  sedang,  dimana  IC 50 yang dihasilkan  sebesar  117,6  sampai  126,92  µg/mL  (kategori  sedang  adalah  101-150  µg/mL), dengan hasil analisis proximat yang sesuai dengan standar SNI 01-3836-2013 untuk kadar abu, kadar  serat  kasar,  protein,  karbohidrat  dan  lemak  yang  hampir  sama  untuk  setiap  formula dilanjutkan  dengan  toksisitas  (LC 50 )  <  1000  µg/mL  pada  campuran  dengan  konsentrasi  fuli sebesar  0,1%  yaitu  378,27  µg/mL,  sedangkan  dengan  penambahan  fuli  lebih  dari  atau  sama dengan 0,25% dikategorikan tidak toksik  karena memiliki LC 50 > 1000 µg/mL sehingga aman sebagai suatu minuman fungsional.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Terima  kasih  kepada  LPPM  Universitas  Kharun  yang  telah  membiayai  penelitian  ini  melalui Hibah penelitian tingkat Fakultas dengan nomor 674/UN44/KU.08/2019.

## DAFTAR PUSTAKA
Achmad,  S.A.  2007. Keanekaragaman  Hayati  dalam  Pembelajaran  Ilmu  Kimia .  Makalah  disajikan dalam Seminar Nasional Kimia, Jurusan Kimia Universitas Negeri  Makassar, Makassar, 5 September.
Armala,  M.  M.,  2009,  Daya  Antioksidan  Fraksi  Air  Ekstrak  Herba  Kenikir  ( Cosmos  caudatuc HBK ) dan Profil KLT, Skripsi, Fakultas Farmasi UII, Yogyakarta
Atun,  S. 2005. Pengembangan  Potensi  Bahan  Alam  sebagai  Sumber  Penemuan  Obat  Baru .  Makalah disajikan  dalam  Seminar  Nasional  Kimia,  Universitas  Negeri  Yogyakarta,  Yogyakarta, 24 September.
Bhakuni, R.S., Shukla, Y.N. and Thakur, R.S. 1991. Melochicorine, A Pseudooxindole Alkaloid from Melochia corchorifolia. Phytochemistry , 30(9) : 3159-3160.
Chakrabarti, R., Vikramadithyan, R.K., Mullangi, R., Sharma, V.M., Jagadheshan, H.,  Rao, Y.N., Sairam, P. and Rajagopalan, R. 2002. Antidiabetic and Hypolipidemic Activity of Helicteres isora in Animal Models. Journal of Ethnopharmacology , 81(3) : 343-349.
Delporte,  C.,  Backhouse,  N.,  Erazo,  S.,  Negrete,  R.,  Vidal,  P.,  Silva,  X.,  Lopez-Perez,  J.L., Feliciano,  A.S.  and  Munoz,  O.  2005.  Analgesic–Antiinflammatory  Properties  of Proustia pyrifolia . Journal of Ethnopharmacology , 99 , 119–124.
Dini,  I.  2005. Penelusuran  Metabolit  Sekunder  Ekstrak  Kulit  Batang  Tumbuhan  Paliasa ( Kleinhovia hospita Linn.) dan  Bioaktivitasnya  terhadap  Artemia  salina Leach.  Tesis  tidak  diterbitkan. Makassar: Program Pascasarjana Universitas Hasanuddin.
Ersam, T. 2004. Keunggulan Biodiversitas Hutan Tropika Indonesia dalam Merekayasa Model Molekul Alami .  Makalah  disajikan  dalam  Seminar  Nasional  Kimia  VI,  Jurusan  Kimia  FMIPA  ITS, (Online),( http://www.its.ac.id/personal/files/pub/764-beckers-chem- Kimia%20ITS%20TE%2004.pdf, diakses 29 oktober 2007).
Fitriya., Anwar, L. dan Novitasari E.,2010., Isolasi Senyawa Fenolat dari Fraksi Etil Asetat Kulit Batang Tumbuhan Gandaria. Jurnal Penelitian Sains, 13(1) C : 13103 hal 10-14
Gaman, P. M. and K. B. Sherrington. 1992., The Science of Food, An Introduction To Food Science, Nutrition and Microbiology 2nd Edition ., diterjemahkan oleh Murdijati Gardjito, Sri Naruki, Agnes Murdiati, Sardjono). UGM Press.Yogyakarta.
Garuda, A., 2006, "Makanan dan Obat dari Laut: Potensi Rumput Laut", The Inflight Magazine of Lion Air 10: 32-35.
Harborne. 1987. Metode Fitokimia: Penuntun Cara Modern Menganalisis Tumbuhan , diterjemahkan oleh Kosasih Padmawinata & Iwang Soediro. Penerbit ITB, Bandung.
Heyne, K. 1987. Tumbuhan Berguna Indonesia, Jilid 3 . Departemen Kehutanan, Jakarta. Hoelzel, S.C.S.M.,  Vieira,  E.R.,  Giacomelli,  S.R.,  Dalcol,  I.I.,  Zanatta,  N.and  Morel,  A.F.  2005.  An Unusual  Quinolinone  Alkaloid  from Waltheria  douradinha . Phytochemistry 66(10 ):  1163  - 1167.
Hulawane.  J.  E.,  Hidayah.  H.  N.,  Kinho.  J.,  2011. Prospek  Pengembangan  Jabon  Merah Anthocephalus macrophyllus (Roxb.) Havill, Solusi Kebutuhan Kayu Masa Depan . Balai enelitian Kehutanan, Manado, Sulawesi Utara.
Khadijah.,  Jayali,  A  Muhsin.,Umar,  Sudir.,  Sasmita,  Iin.,2017., Penentuan  Total  Fenolik  Dan Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Etanolik  Daun  Samama  ( Anthocephalus  Macrophylus) Asal Ternate, Maluku Utara. Jurnal Kimia Mulawarman, 15(1), 11 -18
Meyer, N., Ferriginii, N.R., Putnam, J.E, Jacobsen,n D.E., Nichols, D.E., McLaughin, J.L., 1982, Brine Shrimp: A Convinient General Bioassay for Active Plant Constituens, Planta Med , 45, 31.
Morel, A.F., Flach, A., Zanatta, N., Ethur, E.M., Mostardeiro, M.A. and Gehrke, I.T.S. 1999. A New  Cyclopeptide  Alkaloid  from  The  Bark  of Waltheria  douradinha . Tetrahedron  Letters 40(52): 9205 - 9209.
Muchtadi,  D.  1989. Evaluasi  Nilai  Gizi  Pangan .  Pusat  Antar  Universitas  Pangan  dan  Gizi.  IPB. Bogor
Mudjirahmini,  D.  dan  Ersam,  T.  2006. 4-Fenilkumarin  pada  Fraksi  Polar  Ekstrak  Etil  Asetat  dari Batang Garcinia balica Miq. Makalah disajikan dalam Seminar Nasional Kimia VIII, Jurusan Kimia FMIPA ITS, Surabaya, 8 Agustus.
Molyneux,  p.  2004.  The  Use  Of  Teh  Stable  Free  Radical  DPPH  For  Estimasing  Antioxidant Activity. J. Science Tecnology. 26(3) : 211-219.
Nugroho,  A.E.  2006.  Hewan  Percobaan  Diabetel  Mellitus  :  Patologi  dan  Mekanisme  Aksi Diabetogenik. Biodiversitas 7 (4) : 378-382
Rachmaniar. 1994 . Penelitian Produk Alam  Laut, Skreening Substansi Bioaktif . Laporan Penelitian Proyek Sumber daya laut. Puslitbang Oseanologi LIPI. Jakarta
Suhardjo dan Clara M. Kusharto. 1988. Prinsip-Prinsip Ilmu Gizi ., Penerbit IPB. Bogor
Stark,  A.  and  Z.  Madar.  1994. Dietary  fiber.  In  Functional  Food .  Goldberg,  L  (Ed.).  1994.  . Chapman and Hall.
TECHNO: Vol. 08 ( 02) Oktober 2019