© (2017) Sekolah Pascasarjana Universitas Airlangga, Indonesia

## Kadar Malondialdehid tikus model Sindroma Ovarium Polikistik dengan daun kelor
(Moringa oleifera)
Lisa Purbawaning Wulandari* 1 , Budi Santoso 2 , Bambang Purwanto 3
1 Mahasiswa Magister Ilmu Kesehatan Reproduksi, Fakultas Kedokteran, Universitas Airlangga Surabaya, Jalan Mayjend Prof. Dr. Moestopo No. 6 - 8, Airlangga, Gubeng, Surabaya, Jawa Timur 60285 Indonesia, Telp (031) 5501078
2 Departemen Obstetri dan Ginekologi, Fakultas Kedokteran, Universitas Airlangga, RSUD Dr. Soetomo
3 Departemen Fisiologi, Fakultas Kedokteran, Universitas Airlangga e-mail: * 1 lisawuland@gmail.com , 2 wadek2@fk.unair.ac.id, 3 bpaifo@gmail.com

## Abstrak
Sindroma  Ovarium  Polikistik  (SOPK)  merupakan  endokrinopati  paling  umum  pada perempuan yang sering dikaitkan dengan resistensi insulin, hyperandrogenemia, peradangan kronis,  dan  oxydative  stress.  Tingkat  oxydative  stress  pada  SOPK  diamati  secara  signifikan berkorelasi dengan obesitas, bahkan ditemukan memainkan peran penting dalam patogenesis kanker.  Antioksidan  adalah  substansi  yang  diperlukan  tubuh  untuk  menetralisir  radikal bebas,  penggunaan  kelor  (Moringa  Oleifera)  sebagai  antioksidan  perlu  diteliti  sebagai alternatif  pengobatan  terhadap  oxydative  stress  pada  SOPK  dengan  resistensi  insulin. Penelitian eksperimen ini menggunakan tikus Rattus norvegicus strain wistar betina berusia 3 bulan  dengan  berat  100-130  gram  dibagi  menjadi  4  kelompok  (n=8).  Tikus  model  SOPK diberikan  injeksi  testosteron  propionat  sebesar  1  mg/100grBB  secara  intramuskular  selama 28 hari, selanjutnya diberikan ekstrak daun kelor (Moringa Oleifera) dengan dosis 250 dan 500  mg/KgBB  selama  14  hari.  Kemudian  dilakukan  pengukuran  berat  badan  dan pemeriksaan kadar Malondialdehid (MDA) dalam darah. Hasil penelitian menunjukan bahwa kadar  MDA  pada  kelompok  kontrol  SOPK  naik  secara  signifikan  (p<0.05)  dibandingkan dengan  kontrol  normal.  Pemberian  ekstrak  daun  kelor  (Moringa  Oleifera)  500  mg/KgBB menunjukan penurunan yang signifikan (p<0.05) terhadap kadar MDA dibanding kelompok kontrol  SOPK.  Pemberian  ekstrak  daun  kelor  (Moringa  Oleifera)  sebagai  antioksidan terbukti dapat menurunkan kadar MDA tikus betina model SOPK dengan resistensi insulin.
Kata  kunci :  Kadar  Malondialdehid,  ekstrak  daun  kelor  (Moringa  Oleifera),  Sindroma Ovarium Polikistik

## Abstract
Polycystic  Ovary  Syndrome  ( PCOS )  is  the  most  common  endocrinopathy  in  women often  associated  with  insulin  resistance,  hyperandrogenemia,  chronic  inflammation,  and oxydative stress. The rate of oxydative stress on SOPK observed significantly correlated with obesity, was even found to play an important role in the pathogenesis of cancer. Antioxidants are substances that the body needs to neutralize free radicals, the use of Moringa Oleifera as an antioxidant should be investigated as an alternative treatment for oxydative stress in PCOS with insulin resistance. This experimental study used a 3-month-old female Rattus norvegicus strain of wistar strain weighing 100-130 grams divided into 4 groups (n = 8). PCOS model rat were  given  intramuscularly  1 mg/ 100grB W injections  for  28  days,  then  Moringa  Oleifera extract  was given  with  dose  250  and  500  mg /KgB W for  14  days.  Then  performed  weight measurement and examination of levels of Malondialdehyde (MDA) in the blood. The results showed that MDA levels in the PCOS control group increased significantly (p <0.05) compared with  normal  controls.  Moringa  leaf  extract  (Moringa  Oleifera)  500  mg  /  KgBB  showed significant decrease (p <0.05) to MDA level compared to control group of PCOS . Provision of Moringa leaf extract (Moringa Oleifera) as an antioxidant proven to decrease levels of MDA female rat PCOS model with insulin resistance.
Keywords : Malondialdehid levels, Moringa Oleifera leaf extract, Polycystic Ovary Syndrome

## 1. PENDAHULUAN
Sindroma  Ovarium  Polikistik  (SOPK) merupakan  endokrinopati  paling  umum  pada perempuan,  menyerang  perempuan  pada  usia reproduksi  (5  –  10%),  mempunyai  resistensi terhadap  insulin  (50  –  70%),  hiperplasi endometrium  (35%),  dapat  terjadi  kanker endometrium  (3  –  5  kali  lipat),  mengalami recurrent pregnancy loss (36 – 56%) (Homburg, 2008). Prevalensi gambaran klinis SOPK sangat beragam.  Franks  (1989)  dalam  penelitiannya melaporkan  dari  300  wanita  SOPK  mengalami amenore (52%), oligomenore (28%), hirsutisme (64%), mengalami obesitas (35%), dengan acne ( 27%), alopecia  ( 3%),  dengan  tanda-tanda akantosis  nigrikan  (kurang  dari  1%),  dan mengalami  infertilitas  (42%)  (Balen  et  al., 2005).
Definisi  SOPK  mencakup    beberapa kriteria klinis, biokimia serta morfologi ovarium.
Wanita dengan siklus regular dan hiperandrogenisme  diakui  bisa  menjadi  bagian sindroma  ini.  SOPK  dapat  didiagnosis    jika mempunyai  dua  dari  tiga  kriteria  berikut  ini  ; ovarium  polikistik,  oligo/anovulasi  atau  bukti klinis/biokimia  dari  hiperandrogenisme  (Fauser et  al.,  2012).  SOPK  telah  dianggap  sebagai penyakit  sistemik  kronis  bukan  penyakit  lokal yang sederhana, dan itu sering dikaitkan dengan resistensi  insulin  (IR),  hyperandrogenemia, peradangan  kronis,  dan oxydative  stress (OS), meskipun  patogenesis  belum  didefinisikan dengan  baik. Reactive  Oxygen  Species (ROS) dapat  menginduksi  pelepasan  faktor-faktor inflamasi  dan  respon  inflamasi  melalui  aktivasi nuclear  factor-kB (NF-kB), activated  protein-1 (AP-1)  dan hypoxia-inducible  factor-1 (HIF- 1)(Touyz,  2005).  Selanjutnya oxydative  stress
(OS)  bersama  inflamasi  dapat  menginduksi resistensi  insulin  melalui post  insulin  receptor signaling pathway , insulin receptor substrate 1- phosphatidyl  inositol  3  kinase-protein  kinase  B (IRSI-PI3K-PKB/Akt) pathway .
Resistensi insulin mengarah pada kompensasi  hiperinsulinemia,  meningkatkan frekuensi  GnRH  dan  sekresi  pulsasi  LH sehingga  produksi  androgen  di  ovarium meningkat.  Insulin  dan  IGF-1  secara  tidak langsung  juga  dapat  meningkatkan  kadar androgen  dengan  menurunkan  produksi  SHBG ( Sex  Hormone  Binding  Globulin )  di  hati  dan menekan  sintesis  IGFBP-1  ( Insuline  Like Growth  Factor  Binding Protein-1 )  secara
langsung,  cepat,  dan  lengkap  baik  di  hati  dan ovarium  sehingga  level  IGF-I,  IGF-II,  dan testosteron  bebas  meningkat. Insulin dan Insulin-Like Growth Factor-1 (IGF-I) bertanggung jawab mengganggu ovulasi.
(Rojas et al., 2014).
SOPK adalah kelainan endokrin, patofisiologinya  masih  belum  diketahui secara  jelas.  Kontributor  genetik  dan lingkungan  terhadap  gangguan  hormonal bergabung  dengan  kontributor  lain  seperti obesitas, disfungsi ovarium, dan abnormalitas  hipofisis  yang  berkontributor kuat terhadap etiologi SOPK (dideteksi pada sekitar  60-80%  kasus).  Resistensi  insulin juga  merupakan  kontributor  SOPK  dan terdeteksi  sekitar  50-80%  pada  wanita dengan  SOPK,  terutama  pada  pasien  SOPK yang memiliki tingkat keparahan lebih tinggi dan obesitas.
Wanita  yang  kurus  dan  wanita  dengan SOPK  derajat  ringan  tampaknya  mengalami resistensi  insulin  dan  hiperinsulinemia  yang tidak  berat.  Resistensi  insulin  berkontribusi terhadap  gambaran  metabolik  tetapi  juga terhadap  gambaran  reproduksi  melalui hiperandrogen,  hirsutisme,  infertilitas,  dan komplikasi kehamilan. Obesitas juga memperburuk  faktor  peningkatan  risiko SOPK  terkait  gangguan  toleransi  glukosa, diabetes  melitus  tipe  2,  dan  penyakit kardiovaskuler,  sedangkan  obesitas  juga mempengaruhi  gambaran  psikologis  SOPK (Valkenburg et al., 2008, Teede et al., 2011).
Kelainan  utama  yang  terlibat  dalam patofisiologi SOPK (Homburg, 2003), yaitu; 1) Produksi androgen ovarium yang berlebih Jumlah  pembentukan  androgen  ovarium yang berlebihan adalah penyebab utama dari SOPK,  hampir semua  mekanisme  enzimatik pada  SOPK  yang  mengakibatkan  produksi androgen  meningkat.  Peningkatan  insulin dan  LH,  baik  secara  sendirian  ataupun bersamaan  akan  meningkatkan  produksi androgen. Abnormalitas steroidogenik andrenal  umum  didapatkan  pada  wanita dengan hiperandrogen termasuk pada SOPK.
Pasien dengan SOPK menunjukkan terutama peningkatan produksi androgen dari
ovarium, peningkatan kadar androgen adrenal  terutama dehydroepiandrosterone sulfate (DHEAS)  terdapat  pada  20-30% pasien SOPK. Androgen adrenal mempunyai
kontribusi  pada  phenotype  SOPK,  yaitu hirsutisme.  Secara  keseluruhan  penyebab dari  peningkatan  kadar  androgen  adrenal yang  berlebihan  pada  SOPK  belum  jelas diketahui.  Peningkatan  kadar  androgen adrenal  pada  SOPK  tampaknya  ditentukan oleh  faktor  ekstra  adrenal  seperti  steroid ovarium  dan  insulin.  Efek  utama  dari androgen  ekstra  adrenal  dan  insulin  adalah meningkatkan aktifitas sulfotransferase, menghambat konversi DHEA menjadi DHEAS (Rusnasari, 2005). Jumlah androgen yang berlebih mengakibatkan  gangguan  folikulogenesis sehingga mengakibatkan gangguan
menstruasi  dan  pengembangan  beberapa kista  di  ovarium.  Androgen  (testosteron) mengakibatkan  menurunnya  jumlah  dan efektivitas  protein  pengangkut  glukosa, khususnya glucose  transporter  type  4 (GLUT-4) yang bertanggung jawab terhadap pengangkutan  glukosa  di  otot  dan  lemak sehingga terjadi resistensi insulin.
Testosteron menyebabkan peningkatan asam lemak  bebas  dengan  cara  memfasilitasi lipolisis  dan  pemecahan  lemak  abdomen. Peningkatan  androgen  dan  asam  lemak bebas  akan  menghambat  ekskresi  insulin  di hepar  dan  pengangkutan  glukosa  di  otot,
serta akhirnya
menyebabkan
hiperinsulinemia dan  resistensi  insulin
(Marshall,  2001,  Mukherjee  and  Maitra, 2010). 2) Morfologi ovarium yang abnormal Morfologi  ovarium  polikistik  merupakan gambaran utama dari SOPK yang didefinisikan sebagai menstruasi tidak teratur  dan  hiperandrogenisme.  Keberadaan morfologi  ovarium  polikistik  tidak  cukup untuk mendiagnosis SOPK dan dapat terlihat pada  wanita  normal  (Bostancı  et  al.,  2012). Pada penderita SOPK folikel tampak seperti kantung  berisi  cairan  yang  terlihat  di  dalam ovarium.  Morfologi  ultrasonografi  dari ovarium  polikistik  ditandai  dengan  adanya 12  atau  lebih  folikel  ovarium  yang ukurannya antara 2-9 mm, mempunyai rerata atresia  yang  lambat  dan  sensitif  terhadap FSH  eksogen.  Folikel  ini  disebut  sebagai kista.  Mereka  diatur  secara  perifer  di  dalam ovarium pada pasien SOPK.
Pembesaran volume stroma hampir selalu ada, menyebabkan penambahan volume total dari  ovarium  >10cc.  Penyebab  kelainan
morfologi ini diduga karena adanya androgen  yang  berlebihan.  Androgen  yang berlebihan  juga  dapat  mempercepat  proses pertumbuhan  folikel  primer  sampai  dengan stadium  folikel  per-antral  dan small  antral dibandingkan  dengan  ovarium  yang  normal. Kombinasi  dari  beberapa  faktor  yang menyebabkan  perubahan  pada  morfologi ovarium  dan  karakteristik  pada  ovarium polikistik  antara  lain  adalah  kelebihan beberapa faktor yang menghambat kerja dari FSH  endogen  (seperti  follistatin, epidermal growth factor ,dll) dan kelebihan factor anti- apoptotic (BCL-2) yang dapat memperlambat turn  over dari  folikel  yang terhambat ini. (Tan, 2011).
3) Kadar serum LH yang berlebihan Wanita  dengan  siklus  menstruasi  normal akan  berbeda  dengan  wanita  SOPK.  Pada wanita  dengan  SOPK  akan  menunjukkan sekresi  LH  yang  tinggi  dan  sekresi  FSH yang  rendah  secara  konstan.  Peningkatan rasio  LH/FSH  2-3:1  secara  laboratoris dipakai untuk menunjukkan sekresi gonadotropin  yang  meningkat.  Peningkatan serum LH pada wanita dengan SOPK antara 30-90% (Rusnasari, 2005).
Salah  satu  yang  mendasari  regulasi abnormal GnRH pada SOPK sampai saat ini tetap belum jelas. Beberapa teori menyatakan  bahwa  ada  perubahan  input sistem neuronal GnRH yang disebabkan oleh insulin,  IGFs,  dan  steroid  sex  selama  fase pubertas  yang  akan  menginduksi  terjadinya disregulasi GnRH. Peningkatan kadar estrone  yang  kronik,  aromatisasi  estrogen yang lemah secara perifer dari androstenedion  pada  SOPK  diduga  pula menghambat  sensitivitas  GnRH  secara langsung  sintesis  gonadotropin  melalui reseptor GnRH (Rusnasari, 2005).
Kadar  serum  LH  yang  berlebihan didapatkan  lebih  kurang  40-50%  wanita dengan  SOPK  yang  dideteksi  pada satu  kali pemeriksaan  sampel  darah.  Kadar  LH  yang tinggi  lebih  banyak  terdapat  pada  wanita dengan berat badan yang kurus dibandingkan  dengan  wanita  yang  obesitas, walaupun  kadar  serum  FSH  dalam  batas normal,  tetapi  didapatkan  penghambatan intrinsik  pada  kerja  FSH.  Kadar  prolaktin mungkin sedikit meningkat.
4) Hiperinsulinemia
Hiperinsulinemia  yang  disebabkan  oleh resistensi insulin terjadi pada wanita dengan SOPK  dan  obesitas  sentral  (lebih  kurang 80%),  hiperinsulinemia ini  juga  terjadi  pada wanita  dengan  SOPK  yang  berbadan  kurus (lebih  kurang  30-40%).  Hal  ini  disebabkan oleh  kelainan  pada insulin  post-receptor dimana  seharusnya  yang  bekerja  fosforilasi tirosin  tetapi  yang  terjadi  adalah  fosforilasi serin,  hal  ini  memberi  efek  pada  transport glukosa  yang  masuk  ke  dalam  sel  otot ataupun  lemak.  Pada  keadaan  resistensi insulin  terjadi  gangguan  sinyal  transduksi insulin  yang  melibatkan  dua  jalur  utama yaitu p38 Mitogen Activated Protein Kinase (MAPK)  dan Phosphatidilinositol  3  Kinase (PI3K) (Kusumastuty and Ratnawati, 2013). Resistensi  insulin  secara  bermakna  di eksaserbasi  oleh  obesitas  dan  merupakan faktor  utama  dalam  patogenesis  anovulasi dan hiperandrogenisme. Kelainan fungsi dari sel  beta  pankreas  juga  ditemukan  pada SOPK.
Keadaan hiperinsulinemia berakibat pada timbulnya  hiperandrogen  melalui  beberapa mekanisme,  pada  hati  akan  berakibat menurunkan produksi SHBG serta penurunan IGFBP-1. Penurunan SHBG akan meningkatkan  estradiol  serta  testosteron bebas  (dalam  bentuk  aktif)  dalam  darah, sedangkan  penurunan  IGFBP-1  berakibat meningkatkan  bioavalibitas  IGF-1  di  sel teka,  hal  ini  sangat  berperan  dalam  proses maturasi folikel serta steroidogenesis. Bersama  dengan  IGF-2  yang  dihasilkan  di sel  teka  maka  IGF-1  akan  merangsang ovarium  untuk  memproduksi  androgen melalui rangsangan pada reseptor IGF-1, hal ini berakibat pada peningkatan androstenedion  dan  testosteron  (Slowey, 2001, Balen et al., 2005).
Penelitian terdahulu telah mengungkapkan bahwa  tingkat  OS  meningkat  secara  signifikan pada  pasien  dengan  SOPK  dibandingkan dengan  normal,  saat  status  oksidatif  dievaluasi oleh  penanda  sirkulasi,  seperti malondialdehid (MDA), superoksida  dismutase (SOD),  dan glutathione peroxidase (GPx) (Zuo et al., 2015). Produk  reaksi  peroksidasi  lipid  telah  banyak digunakan sebagai biomarker untuk OS. MDA, yang  dihasilkan  selama  dekomposisi  asam lemak tak jenuh ganda, adalah salah satu produk akhir  yang  stabil  dari  peroksidasi  lipid  yang dapat  berfungsi  sebagai  biomarker  yang  baik.
Penelitian  yang  dilakukan  oleh  Sabuncu  et  al (2001),  Zhang  et  al  (2008)  dan  Kuscu  et  al (2009)  menunjukan  tingkat  kadar  serum  MDA yang  meningkat  secara  signifikan  pada  pasien SOPK  dibandingkan  dengan  non  SOPK  (Yeon Lee et al., 2010).
Tingkat OS juga diamati secara signifikan berkorelasi  dengan  obesitas,  resistensi  insulin, hyperandrogenemia ,  dan  peradangan  kronis (Zuo  et  al.,  2015).  Lebih  dari  itu,  OS  dalam SOPK,  ditemukan  memainkan  peran  penting dalam  patogenesis  kanker. Reactive  Oxygen Species (ROS)  bisa  menyebabkan  perubahan genetik dengan menyerang DNA, menyebabkan kerusakan  DNA,  seperti  DNA strand  breaks, point  mutations,  aberrant DNA cross-linking , dan  DNA- protein  cross-linking (Ziech  et  al., 2011).
Oxydative  stress sering  disebut  sebagai ketidakseimbangan  antara  oksidan  dan antioksidan. Ketika ketidakseimbangan menguntungkan oksidan, maka pembentukan Reactive  Oxygen  Species (ROS) yang berlebihan  membahayakan tubuh kita dengan berbagai cara. ROS adalah radikal bebas dengan pusat oksigen. Elektron  yang  tidak  berpasangan  di  kulit terluar  adalah  konfigurasi  yang  sangat  tidak stabil,  dan  radikal  bebas  dengan  cepat bereaksi  dengan  molekul  atau  radikal  lain untuk  mencapai  konfigurasi  yang  stabil  dari pasangan  elektron  pada  kulit  terluarnya (Agarwal et al., 2005). Dengan kata lain, sel- sel reproduksi dan jaringan akan tetap stabil hanya  ketika  status  antioksidan  dan  oksidan seimbang.
Enzim Superoxide  Dismutase (SOD) yang  terdapat  di  mitokondria  dan  sitosol, Glutathione  Peroxidase (GPX), Glutathione reductase ,  dan catalase merupakan  system pertahanan yang melengkapi untuk menangkal  serangan  radikal  bebas  atau oksidan sehingga dapat membatasi kerusakan  yang  diakibatkan  oleh  radikal bebas  (Jackson,  2005).  Sistem  pertahanan lain  di  dalam  tubuh  selain  enzim  untuk menangkal  serangan  radikal  bebas  adalah antioksidan  yang  berupa  Selain  itu  terdapat juga sistem pertahanan mikronutrien yaitu ß- karoten,  vitamin  C  dan  vitamin  E.  Sistem pertahanan ini bekerja dengan beberapa cara antara  lain  berinteraksi  langsung  dengan radikal bebas, oksidan, atau oksigen tunggal, mencegah  pembentukan  senyawa  oksigen
reaktif,  atau  mengubah  senyawa  reaktif menjadi  kurang  reaktif  (Winarsi,  2005). Namun  dalam  keadaan  tertentu,  produksi radikal  bebas  atau  senyawa  oksigen  reaktif melebihi  sistem  pertahanan  tubuh,  kondisi yang disebut sebagai stres oksidatif (Agarwal et al., 2005).
Pada  kondisi  stres  oksidatif,  imbangan normal  antara  produksi  radikal  bebas  atau senyawa oksigen reaktif dengan kemampuan antioksidan alami tubuh untuk mengeliminasinya mengalami gangguan sehingga  menggoyahkan  rantai  reduksi- oksidasi  normal,  sehingga  menyebabkan kerusakan  oksidatif  jaringan.  Kerusakan jaringan  ini  juga  tergantung  pada  beberapa faktor,  antara  lain:  target  molekuler,  tingkat stres  yang  terjadi,  mekanisme  yang  terlibat, serta waktu dan sifat alami dari sistem yang diserang (Winarsi, 2005).
Penelitian yang ekstensif dengan menggunakan  sistem  model  dan  dengan material  biologis in  vitro ,  secara  jelas menunjukkan  bahwa  radikal  bebas  dapat menimbulkan perubahan kimia dan kerusakan terhadap protein, lemak, karbohidrat,  dan  nukleotida.  Bila  radikal bebas  diproduksi in  vivo ,  atau in  vitro di dalam  sel  melebihi  mekanisme  pertahanan normal, maka akan terjadi berbagai gangguan  metabolik  dan  seluler.  Jika  posisi radikal  bebas  yang    terbentuk  dekat  dengan DNA,  maka  bisa  menyebabkan  perubahan struktur  DNA  sehingga  bisa  terjadi  mutasi atau sitotoksisitas.
Radikal  bebas  juga  bisa  bereaksi dengan  nukleotida  sehingga  menyebabkan perubahan  yang  signifikan  pada  komponen biologi sel. Bila radikal bebas merusak grup thiol maka  akan  terjadi  perubahan  aktivitas enzim.  Radikal  bebas  dapat  merusak  sel dengan  cara  merusak  membran  sel  tersebut. Kerusakan  pada  membran  sel  ini  dapat terjadi  dengan  cara:  (a)  radikal  bebas berikatan  secara  kovalen  dengan  enzim dan/atau  reseptor  yang  berada  di  membran sel,  sehingga  merubah  aktivitas  komponen- komponen  yang  terdapat  pada  membran  sel tersebut;  (b)  radikal  bebas  berikatan  secara kovalen  dengan  komponen  membran  sel, sehingga  merubah  struktur  membran  dan mengakibatkan  perubahan  fungsi  membran dan/atau mengubah karakter membran menjadi  seperti  antigen;  (c)  radikal  bebas
mengganggu  sistem  transport  membran  sel melalui ikatan kovalen, mengoksidasi kelompok thiol ,  atau  dengan  merubah  asam lemak polyunsaturated ;  (d)  radikal  bebas menginisiasi peroksidasi lipid secara langsung terhadap asam lemak polyunsaturated dinding  sel.  Radikal  bebas akan  menyebabkan  terjadinya    peroksidasi lipid membran sel. Peroksida-peroksida lipid akan  terbentuk  dalam  rantai  yang  makin panjang  dan  dapat  merusak  organisasi membran sel (Sikka et al., 1995). Peroksidasi ini akan mempengaruhi fluiditas membran, cross-linking membran,  serta struktur  dan  fungsi  membran  (Powers  and Jackson, 2008).
Mekanisme  kerusakan  sel atau jaringan akibat  serangan  radikal  bebas  yang  paling awal  diketahui  dan  terbanyak  diteliti  adalah peroksidasi  lipid.  Peroksidasi  lipid  paling banyak  terjadi  di  membran  sel,  terutama asam  lemak  tidak  jenuh  yang  merupakan komponen  penting  penyusun  membran  sel. Pengukuran  tingkat  peroksidasi  lipid  diukur dengan  mengukur  produk  akhirnya,  yaitu malondialdehyde (MDA),  yang  merupakan produk  oksidasi asam lemak tidak jenuh dan yang bersifat toksik terhadap sel.
Pengukuran kadar MDA merupakan
pengukuran  aktivitas  radikal  bebas  secara tidak  langsung  sebagai  indikator  stres oksidatif.  Pengukuran  ini  dilakukan  dengan tes Thiobarbituric Acid Reactive Substances (TBARS test ) (Powers and Jackson, 2008).
Antioksidan  adalah  substansi  yang diperlukan  tubuh  untuk  menetralisir  radikal bebas  dan  mencegah  kerusakan  yang ditimbulkan  oleh  radikal  bebas  terhadap  sel normal, protein, lemak. Antioksidan menstabilkan radikal bebas dengan melengkapi kekurangan elektron yang dimiliki  radikal  bebas,  dan  menghambat terjadinya  reaksi  berantai  dari  pembentukan radikal  bebas  yang  dapat  menimbulkan  OS.
Sejumlah penelitian pada tanaman melaporkan  bahwa  banyak  tanaman  yang mengandung  antioksidan  dalam  jumlah besar. Efek antioksidan terutama disebabkan karena  adanya  senyawa  fenol  seperti flavonoid  dan  asam  fenolat.  Biasanya senyawa-senyawa  yang  memiliki  aktifitas antioksidan  adalah  senyawa  fenol  yang mempunyai gugus
hidroksi yang
tersubstitusi  pada  posisi  orto  dan  para terhadap gugus –OH dan –OR.
Pencarian tumbuh-tumbuhan yang
mempunyai  kemampuan  potensial  sebagai terapi pencegahan dan secara keilmuan terbukti bisa  digunakan  untuk  alternatif  pengobatan sangat dibutuhkan. ( Moringa Oleifera ) ( drumstick tree, horse-radish tree, miracle tree ) yang  di  Indonesia  dikenal  dengan  nama  kelor merupakan salah satu tanaman yng mengandung antioksidan.
Tanaman kelor yang dalam bahasa latin disebut  dengan Moringa  oleifera awalnya banyak  tumbuh  di  India,  tetapi  saat  ini banyak  ditemukan  di  daerah  beriklim  tropis (Grubben,  2004).  Pada  beberapa  negara kelor  ( Moringa  oleifera) dikenal  dengan nama  benzolive, drumstick  tree,  kelor, marango,  mlonge,  mulangay,  nebeday, saijhan , dan sajna (Fahey, 2005).
Tanaman  kelor  memiliki  klasifikasi sebagai berikut; Kingdom: Plantae (Tumbuhan);  Subkingdom:  Tracheobionta (Tumbuhan  berpembuluh);  Super  Divisi: Spermatophyta  (Menghasilkan  biji);  Divisi: Magnoliophyta (Tumbuhan berbunga); Kelas: Magnoliopsida (berkeping
dua/dikotil);  Sub  Kelas:  Dilleniidae;  Ordo: Capparales;  Famili:  Moringaceae;  Genus: Moringa;  Spesies:  Moringa  oleifera  Lam (Krisnadi, 2013).
Penelitian  fitokimiawi  terhadap  tanaman Moringa  Oleifera ini  mengungkapkan  terdapat polifenol  besar  misalnya quercetin  glucoside, rutin,  kaempferol  glycoside ,  dan chlorogenic acid di dalam tepung Moringa Oleifera melalui analisis  HPLC  (Johnson,  2005).  Kandungan flavonol  dan  flavones  pada  daun  kelor dengan  perhitungan  menggunakan  kurva standar  memberikan  hasil  sebagai  berikut  : berdasarkan wet  basis (per  100  g  sampel segar),  yaitu  1,32  mg  luteolin,  95,84  mg quarcetin,  dan  20,79  mg  kaempferol, sehingga  totalnya  adalah  117,95  mg. Konsentrasi  flavonol  dan  flavone  yang diperoleh  berdasarkan dry  basis (per  100  g sampel  kering)  adalah  5,29  mg  luteolin, 384,61  mg  quarcetin,  dan  83,44  mg kaempferol  sehingga  totalnya  adalah 473,33 mg (Rahmat,2009).
Kelor  merupakan  tanaman  yang  kaya akan  nutrisi  seperti  halnya  zat  gizi  makro dan  mikro,  mineral,  vitamin.  Berbagai bagian  dari  tanaman  Kelor  seperti  daun,
akar,  biji,  kulit  kayu,  buah,  bunga  dan polong  dewasa,  bertindak  sebagai  stimulan jantung  dan  peredaran  darah,  memiliki antitumor,  anti-piretik,  anti-epilepsi,  anti- inflamasi, anti-ulcer, anti-spasmodic, diuretik, anti-hipertensi, menurunkan kolesterol, antioksidan, anti-diabetik,
hepatoprotektif,  anti-bakteri  dan  anti-jamur (Krisnadi, 2013)
Tabel  1.1  Komposisi  Nutrisi Moringa Oleifera (Gopalakrishnan et al.,
2016) *Semua hasil dalam 100 gram per materi tanaman Quercetin merupakan salah satu flavonoid yang berkhasiat sebagai antioksidan. Quercetin adalah  senyawa kelompok  flavonol  terbesar, quercetin dan glikosidanya  dalam  jumlah  sekitar  60-75% dari flavonoid. Molekuler formula quercetin adalah C15H10O7, ketika flavonol Quercetin bereaksi  dengan  radikal  bebas, Quercetin mendonorkan  protonnya  dan menjadi senyawa radikal, tapi elektron tidak berpasangan yang dihasilkan didelokasi oleh resonansi, hal  ini membuat senyawa Quercetin radikal  memiliki  energi  yang sangat  rendah  untuk  menjadi  radikal  yang reaktif.  Tiga  gugus  dari  struktur Quercetin yang  membantu  dalam  menjaga  kestabilan dan  bertindak  sebagai  antioksidan  ketika bereaksi  dengan  radikal  bebas  antara  lain; gugus O-dihidroksil pada cincin B, gugus 4-
Nutrisi Daun segar Daun kering Calories (cal) 92 329 Protein (g) 6.7 29.4 Fat (g) 1.7 5.2 Carbohydrate (g) 12.5 41.2 Fibre (g) 0.9 12.5 Vitamin B1 (mg) 0.06 2.02 Vitamin B2 (mg) 0.05 21.3 Vitamin B3 (mg) 0.8 7.6 Vitamin C (mg) 220 15.8 Vitamin E (mg) 448 10.8 Calcium (mg) 440 2185 Magnesium (mg) 42 448 Phosphorus (mg) 70 252 Potassium (mg) 259 1236 Copper (mg) 0.07 0.49 Iron (mg) 0.85 25.6 Sulphur (mg) - -
oxo dalam konjugasi dengan alkena 2,3 dan gugus  3-  dan  5-  hidroksil.  Gugus  fungsi tersebut dapat mendonorkan elektron kepada cicin  yang  akan  meningkatkan  jumlah resonansi  dari  struktur  benzene  senyawa Quercetin . Quercetin memperlihatkan aktivitas sebagai antioksidan dengan menurunkan peroksidasi  lipid  (MDA)  dan  meningkatkan aktivitas  enzim  antioksidan  pada  tikus  diabetes melitus  yang  diinduksi  STZ  (Adewole  et  al., 2007).
Moringa oleifera telah terbukti menyembuhkan  diabetes  melitus  baik  tipe  1 dan  tipe  2.  Diabetes  tipe  1  merupakan penderita    non-produksi  insulin,  dimana hormon yang mempertahankan kadar
glukosa  darah  yang  diperlukan  dalam  nilai normal. Sedangkan diabetes tipe 2 merupakan  penderita  yang  terkait  dengan resistensi  insulin.  Diabetes  tipe  2  mungkin juga  dikarenakan  disfungsi  sel  beta  yang gagal untuk mempertahankan kadar glukosa, sehingga mengurangi sinyal terhadap insulin,  yang  mengakibatkan  kadar  glukosa darah menjadi tinggi. Pada pasien hiperglikemia  dengan  sel  beta  mengalami kerusakan,  glukosa  yang  tinggi  memasuki mitokondria  dan  merilis  reaktif  spesies oksigen.  Ketika  sel  beta  memiliki  jumlah antioksidan rendah, hal ini akan menyebabkan  apoptosis  pada  sel-sel  beta sehingga  mengurangi  sekresi  insulin  yang menyebabkan hiperglikemia dan
menyebabkan  diabetes  mellitus  tipe-2.
Flavonoid seperti quersetin dan fenolat telah dikaitkan sebagai antioksidan yang membawa  efek  pengikatan  di  ROS.  Hal  ini dapat dihipotesiskan bahwa flavonoid dalam
Moringa  dapat  membebaskan  ROS  dari mitokondria,  sehingga  melindungi  sel  beta dan mengontrol
hiperglikemia (Gopalakrishnan et al., 2016).
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui bahwa  pemberian  ekstrak  daun  kelor  ( Moringa Oleifera ) sebagai antioksidan dapat menurunkan kadar  MDA  pada  SOPK  dengan  resistensi insulin. Tanaman ini merupakan tanaman asli di berbagai  negara  Asia,  berlimpah  dan  murah sebagai  sumber  makanan.  Dengan  demikian, setiap  manfaat  bagi  kesehatan  dari  tanaman  ini akan mencapai sebagian besar penduduk.

## 2. METODE PENELITIAN
Jenis  penelitian  yang  digunakan  adalah penelitian  eksperimen  dengan  menggunakan rancangan posttest  only  control  group design dikarenakan  untuk  memeriksa  hasil penelitian harus mengorbankan hewan coba. Pada awal penelitian dilakukan penghomogenan unit eksperimen penelitian. Unit  eksperimen  dalam  penelitian  ini adalah tikus putih ( Rattus nervegicus ) betina diperoleh dari peternakan Biokimia Fakultas Kedokteran  Universitas  Airlangga,  dengan kriteria sebagai berikut:
1) Kriteria inklusi
• Tikus putih jenis kelamin betina
• Berat badan 100-130 gram
• Berusia 3 bulan
• Sehat,  aktivitas  dan  tingkah  laku normal
• Swab vagina
2) Kriteria eksklusi
• Bunting
• Terdapat abnormalitas anatomi yang nampak
3) Kriteria Drop Out
• Bobot tikus menurun
• Mencit tidak  mau  makan  atau mati dalam masa penelitian
Besar  sampel  minimal  yang  digunakan berdasarkan rumus umum penelitian eksperimen one  tail dengan  uji  hipotesis pada  populasi  data  kontinyu.  Penggunaan sampel  masing-masing  kelompok  sebanyak 8  ekor  dianggap  sudah  memenuhi  jumlah replikasi minimal.
Penelitian ini dilakukan di laboratorium Kandang  Hewan  Coba  Fakultas  Kedokteran Universitas  Airlangga    selama  9  minggu. Unit eksperimen dalam penelitian ini adalah tikus Rattus norvegicus stran wistar (Laboratorium Biokimia, Fakultas Kedokteran Universitas Airlangga, Surabaya,  Indonesia)  betina  umur  3  bulan dan mempunyai berat 100-130 gram.  Tikus ini  juga  dipakai  dalam  penelitian  sebagai hewan coba model diabetes (Purwanto et al., 2013).
Sebelum  penelitian,  dilakukan  adaptasi selama  1  minggu,  kondisi  sehat  dengan aktivitas  dan  tingkah  laku  normal.  Apabila selama  adaptasi  didapatkan    kelainan anatomi  yang  tampak  dan  sedang  bunting maka  unit  eksperimen  dikeluarkan  dari penelitian. Selama penelitian, tikus dipelihara  di  dalam  kandang  plastik  ukuran
50x30  cm  dengan  alas  sekam  kayu  yang diganti setiap 4 hari sekali, pemberian pakan standart  dan  minum ad  libitum yang diletakkan  di  ruangan  berventilasi  udara alami  dan  kondisi  pencahayaan  alami  (Day &  Night).  Semua  prosedur  yang  dijelaskan telah  sesuai  dan  disetujui  oleh  komite  etik Fakultas  Kedokteran  Hewan  Universitas Airlangga.
Bahan penelitian ini menggunakan daun kelor (Moringa  Oleifera) populer  disebut sebagai  miracle  tree  merupakan  keluarga Moringaceas  yang  berasal dari  Asia  selatan. Tanaman  yang  tumbuh  cepat  ini  sangat dihargai  dan  dibudidayakan  di  daerah tropis dan  sub-tropis,  dengan  nilai  gizi  tinggi, setiap  bagian  pohon  cocok  untuk  keperluan nutrisi  maupun  komersial.  Daun  pohon  ini kaya  akan  mineral,  vitamin  dan  fitokimia penting  lainnya  (Sujatha  and  Patel,  2017). Ekstrak  daun  kelor  ( Moringa  oleifera) yang dipakai  dalam  penelitian  ini  diproses  sesuai dengan  standar  oleh  Kelorina,  PT.  Moringa
Indonesia. Ekstrak Moringa oleifera diberikan  pada  tikus  yang  mendapatkan perlakuan  dengan  dosis  250mg/kgBB  dan 500mg/kgBB  selama  14  hari  dengan menggunakan  sonde.  Jumlah  volume  daun kelor  ( Moringa  oleifera )  yang  diberikan untuk spesies Rat sebesar 0,1-0,2ml/10g atau 1-2ml/100gr ( Handout Oral Gavage
University  of  Minnesota  driven  to  discover second  edition ,  2014).  Serbuk  daun  kelor (Moringa  Oleifera) juga  dipakai  dalam beberapa penelitian untuk mengatahui efektifitasnya pada hiperglikemia kronis dan dyslipidemia (Mbikay, 2012).
Tikus betina putih Wistar strain (Rattus norvegicus)  sebanyak  32  sampel  dibagi menjadi  4  kelompok  secara  acak  (n  =  8). Satu  kelompok  kontrol  normal  non-SOPK hanya diberi aquades, sedangkan 3 kelompok yang lain adalah kelompok model SOPK. Testosteron yang dipakai untuk membuat tikus model SOPK didapatkan dari
PT.  Wonderindo  Pharmatama,  Jakarta, Indonesia dengan merk Wonder. Testosteron merupakan  hormon  yang  digunakan  untuk pembuatan model Sindroma Ovarium Polikistik  (SOPK)  pada  penelitian  ini, hormon ini diberikan kepada tikus 1 kali/hari selama  28  hari  secara  intramuskular  atau subkutan  di  paha  kiri  dengan  dosis 1mg/100grBB,  volume  yang  dimasukkan  ke
setiap tikus adalah 0,1 cc/100grBB,
diberikan  hingga  model  SOPK-resistensi insulin didapatkan. Selanjutnya  kelompok  ke-2  sebagai kontrol SOPK-resistensi insulin hanya diberikan aquades selama 14 hari, kelompok ke-3 dan ke-4 dilanjutkan dengan pemberian ekstrak  daun  kelor  (Moringa  oleifera)  (250 mg/kgBB,  peroral)  dan  (500  mg/kgBB, peroral)    selama  14  hari.  Sebelum  dan sesudah  masa  penelitian,  hewan  coba ditimbang  untuk  mengetahui  kenaikan  berat badan  selama  penelitian.  Sebelum  hewan coba  dikorbankan,  dipuasakan  selama  12 jam  lalu  diambil  darah  untuk  menganalisis kadar MDA.
Pengambilan  spesimen  darah  dilakukan langsung  ke  jantung.  Caranya  dengan menusukan syringe langsung ke jantung dan disedot  perlahan.  Darah  ditampung  pada tabung  plain  tanpa  EDTA  untuk  tujuan pengambilan  serumnya  kemudian  dibiarkan mengendap  pada  suhu  kamar  selama  1  jam, selanjutnya  dilakukan  sentrifugasi  dengan kecepatan  4500  rpm  selama  10-15  menit untuk  mendapatkan  serum  yang  dimaksud. Dari  darah  yang  diambil  sebanyak  5  ml dapat diperoleh serum sebanyak 2,5  ml.
Pengukuran  kadar  MDA  menggunakan spesimen  serum  darah  tikus  yang  kemudian diperiksa menggunakan pereaksi thiobarbituric  acid (TBA)  dengan  melalui reaksi dengan penambahan nukleofilik membentuk  senyawa  MDA-TBA.  Senyawa ini berwarna merah jambu yang dapat diukur intensitasnya dengan menggunakan spektrofotometer  pada  panjang  gelombang 532  µm.  Pengukuran  kadar  MDA  dengan metode simple spectrophotometric ini dilakukan di Laboratorium Biokimia, Fakultas  Kedokteran  Universitas  Airlangga, Surabaya, Indonesia. Hasil penelitian dianalisis secara
statistik  menggunakan  uji  Shapiro-wilk untuk  mengetahui  normalitas  data. Jika  data berdistribusi  normal  dilanjutkan  dengan  uji statistik one  way ANOVA.  Apabila  salah satu  kelompok  data  tidak  homogen  atau tidak  berdistribusi  normal,  maka  digunakan uji  non-parametrik Krukal  Wallis .  Nilai signifikan  pada  penelitian  ini  apabila variabel  yang  dianalisis  memiliki  hasil P<0,05.

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN
Unit  eksperimen  dalam  penelitian  ini adalah tikus putih ( Rattus nervegicus ) betina dengan usia ± 3 bln dan berat badan 100-130 gram  diperoleh  dari  peternakan  Biokimia Fakultas  Kedokteran  Universitas  Airlangga. Sebelum  dan  sesudah  perlakuan  dilakukan penimbangan  berat  badan  tikus  betina,  hasil penimbangan menunjukan rata-rata kenaikan berat badan tertinggi terdapat pada kelompok  model  SOPK  sebesar  74  gram, sedangkan  kenaikan  berat  badan  terendah pada  kelompok  model  PCOS  dengan perlakuan  ekstrak  daun  kelor (Moringa Oleifera) dengan  dosis  500  mg/KgBB sebesar 55.63 gram (Tabel 3.1).
Tabel  3.1  Distribusi  frekuensi  berat  badan
(gram)  tikus  betina  model  PCOS sebelum dan sesudah perlakuan Sampel Kelompok K1 K2 K3 K4 Rata-rata sebelum 115.50   121.88   112.75   119.12 Rata-rata sesudah 174.25   195.88   179.00  174.75 Kenaikan rata-rata 58.75 74 66.25 55.63 Keterangan:
K1   :   kelompok kontrol normal
K2  :  kelompok  kontrol  SOPK-resistensi insulin K3  :  kelompok  SOPK-resistensi  insulin diberi  pengobatan  ekstrak  daun kelor ( Moringa oleifera) 250mg/kgBB K4  :  kelompok  SOPK-resistensi  insulin diberi  pengobatan  ekstrak  daun  kelor (Moringa oleifera) 500mg/kgBB
Hiperinsulinemia  yang  disebabkan  oleh resistensi  insulin  terjadi  pada  lebih  kurang 80%  wanita  dengan  SOPK  dan  obesitas sentral,  didapatkan  juga  lebih  kurang  30- 40%  wanita  dengan  SOPK  yang  berbadan kurus. Hal ini disebabkan oleh kelainan pada insulin  post-receptor dimana  seharusnya yang  bekerja  fosforilasi  tirosin  tetapi  yang terjadi  adalah  fosforilasi  serin,  hal  ini memberi  efek  pada  transport  glukosa  yang masuk  ke  dalam  sel  otot  ataupun  lemak. Pada  kondisi  resitensi  insulin  terjadi gangguan  sinyal  transduksi  insulin  yang melibatkan dua jalur utama yaitu
Phosphatidilinositol  3  Kinase (PI3K)  dan p38 Mitogen  Activated  Protein  Kinase (MAPK)  (Kusumastuty  and  Ratnawati, 2013).
Resistensi  insulin  secara  bermakna dieksaserbasi  oleh  obesitas  dan  merupakan faktor  utama  dalam  patogenesis  anovulasi dan  hiperandrogenism.  Kelainan  funsgi  dari sel  beta  pankreas  juga  ditemukan  pada SOPK.
Keadaan  hiperinsulinemia  berakibat pada  timbulnya  hiperandrogen  melalui beberapa  mekanisme,  pada  hati  akan berakibat menurunkan produksi SHBG serta penurunan IGFBP-1. Penurunan SHBG akan meningkatkan  estradiol  serta  testosteron bebas  (dalam  bentuk  aktif)  dalam  darah, sedangkan  penurunan  IGFBP-1  berakibat meningkatkan  bioavalibitas  IGF-1  di  sel teka,  hal  ini  sangat  berperan  dalam  proses maturasi folikel serta steroidogenesis. Bersama  dengan  IGF-2  yang  dihasilkan  di sel  teka  maka  IGF-1  akan  merangsang ovarium  untuk  memproduksi  androgen melalui rangsangan pada reseptor IGF-1, hal ini berakibat pada peningkatan androstenedion  dan  testosteron  (Slowey, 2001, Balen et al., 2005). Hasil  pengukuran  kadar  MDA  pada sampel  darah  tikus  betina kelompok  kontrol dan  kelompok  yang  diberi  perlakuan menggunakan metode spektrofotometri, disajikan  dalam  bentuk  mean  dan  standar deviasi dapat dilihat pada tabel 3.2.
Tabel  3.2  Pengaruh  pemberian  ekstrak  daun kelor  ( Moringa  oleifera )  terhadap kadar  MDA  tikus  betina  model SOPK dengan resistensi insulin Sampel Kelompok K1 K2 K3 K4 Kadar MDA 1.939 ±0.341 5.694 ±1.464 # 3.315 ±1.128 # 1.982 ±0.383*
# signifikan  berbeda  dari  kontrol  normal (p<0.05) * signifikan  berbeda  dari  kontrol  SOPK- resistensi insulin (p<0.05)
Keterangan: K1   :   kelompok kontrol normal K2  :  kelompok  kontrol  SOPK-resistensi insulin K3  :  kelompok  SOPK-resistensi  insulin diberi  pengobatan  ekstrak  daun kelor ( Moringa oleifera) 250mg/kgBB
K4  :  kelompok  SOPK-resistensi  insulin diberi  pengobatan  ekstrak  daun  kelor (Moringa oleifera) 500mg/kgBB
Rata-rata  kadar  MDA  kelompok  K2 mengalami  peningkatan  dibanding  dengan kelompok  K1.  Rata-rata  kadar  MDA  pada semua  perlakuan  (K3  dan  K4)  mengalami peningkatan  jika  dibandingkan  dengan kelompok  K1  akan  tetapi  mengalami penurunan  jika  dibandingkan  kelompok  K2. Rata-rata  Kadar  MDA  pada  kelompok  K4 yang  diberi  perlakuan  pemberian  ekstrak daun  kelor  ( moringa  oleifera) dengan  dosis 500  mg/kgBB  memiliki  peningkatan  sedikit bahkan  hampir  memiliki  nilai  kadar  yang sama dengan kelompok kontrol normal (K1).
Hasil uji statistik one way ANOVA yang digunakan  dalam  mengukur  kadar  MDA dalam penelitian ini menunjukan nilai p < α (0.05),  artinya  bahwa  terdapat  perbedaan bermakna  kadar  MDA  antar  kelompok. Hasil uji Post Hoc Tests menunjukan bahwa tedapat perbedaan yang bermakna antara K1 dan  K2,  hal  ini  menunjukan  bahwa pembuatan  model  SOPK  berhasil  yang ditandai  dengan  meningkatnya  kadar  MDA secara bermakna.
Peningkatan  kadar  MDA  terjadi  pada sampel darah tikus betina model SOPK yang mendapatkan  injeksi  Testosteron  Propionat (TP)  sebanyak  1  mg/100grBB  secara  intra muscular selama 28 hari. Peningkatan kadar MDA  ini  dapat  terlihat  dari  kadar  MDA yang  lebih  tinggi  pada  kelompok  kontrol SOPK-resistensi insulin (K2) dengan jumlah kadar  MDA  5.694  nmol/ml  dibandingkan dengan  jumlah  kadar  kelompok  kontrol normal  yang  tidak  diberikan  perlakuan injeksi testosterone propionat dengan jumlah kadar MDA sebesar 1.939 nmol/ml. Peningkatan  Kadar  MDA  pada  tikus  betina model  SOPK  ini  menunjukan  bahwa  terjadi peningkatan oxydative stress pada kelompok tikus  yang  mendapatkan  injeksi  testosteron propionat.
Testosteron  (androgen)  menyebabkan terjadinya  peningkatan oxydative  stress dengan  cara  memfasilitasi  lipolisis  dan pemecahan lemak abdomen yang menyebabkan  peningkatan  asam  lemak bebas (Marshall, 2001). MDA yang dihasilkan  selama  dekomposisi  asam  lemak tak  jenuh  ganda,  adalah  salah  satu  produk akhir yang stabil dari peroksidasi lipid yang
dapat berfungsi sebagai biomarker yang baik untuk oxydative  stress .  Penelitian  yang dilakukan oleh Sabuncu et al (2001), Zhang et  al (2008)  dan  Kuscu et  al (2009) menunjukan tingkat kadar serum MDA yang meningkat  secara  signifikan  pada  pasien SOPK  dibandingkan  dengan  non  SOPK (Yeon Lee et al., 2010).
Pada  penelitian  terdahulu,  tingkat  OS diamati secara signifikan berkorelasi dengan obesitas, resistensi insulin,
hiperandrogenimea,  dan  peradangan  kronis. OS  dapat  menginduksi  pelepasan  faktor- faktor  inflamasi  dan  respon  inflamasi melalui  aktivasi nuclear  factor-kB  (NF-kB), activated  protein-1  (AP-1) dan hypoxia- inducible  factor-1  (HIF-1) (Touyz,  2005) yang  selanjutnya  bersama  inflamasi  dapat menginduksi  resistensi  insulin  melalui post insulin  receptor  signaling  pathway,  insulin receptor  substrate  1-phosphatidyl  inositol  3 kinase-protein kinase B (IRSI-PI3K- PKB/Akt) pathway . Resistensi insulin mengarah pada kompensasi hiperinsulinemia dan  meningkatkan  produksi  androgen  di ovarium.  Insulin  dan Insulin-Like  Growth Factor-1 (IGF-I)  inilah  yang  bertanggung jawab  mengganggu  ovulasi  (Rojas  et  al., 2014).
Hasil  uji Post  Hoc  Tests menunjukan adanya  perbedaan  bermakna  antara  K2  dan K3,  K4.  Hal  ini  berarti  pemberian  ekstrak daun  kelor  ( moringa  oleifera) pada  tikus betina  model  SOPK  dapat  menurunkan kadar MDA dalam darah.
Pemberian ekstrak daun kelor ( moringa oleifera) pada  tikus  betina  model  SOPK sebagai  anti  oksidan  dalam  penelitian  ini terbukti  dapat  menurunkan  kadar  MDA. Kadar  MDA  Kelompok  K3  yang  diberikan ekstrak  daun  kelor  ( moringa  oleifera) dengan dosis 250 mg/kgBB rata-rata sebesar 3.315  nmol/ml,  hasil  ini  lebih  rendah  dari pada  kelompok  kontrol  SOPK-resistensi insulin  (K2).  Kadar  MDA  Kelompok  K4 yang  diberikan  ekstrak  daun  kelor  ( moringa oleifera) dengan  dosis  500  mg/kgBB mempunyai  penurunan  yang  lebih  baik dibanding kalompok K2 dan K3 dengan nilai rata-rata  1.982  nmol/ml,  hasil  ini  paling mendekati  kontrol  normal  (K1)  yang  tidak diberikan perlakuan apapun (1.939 nmol/ml). Penelitian fitokimiawi terhadap tanaman Moringa oleifera ini
mengungkapkan  terdapat  polifenol  besar misalnya  quercetin  glucoside,    rutin, kaempferol  glycoside,  dan  chlorogenic  acid di  dalam  tepung  Moringa  oleifera  melalui analisis  HPLC  (Johnson,  2005).  Quercetin merupakan  salah  satu  flavonoid  yang berkhasiat  sebagai  antioksidan.  Quercetin adalah senyawa kelompok flavonol terbesar, quercetin  dan  glikosidanya  dalam  jumlah sekitar  60-75%  dari  flavonoid.  Quercetin memperlihatkan aktivitas sebagai antioksidan dengan menurunkan peroksidasi lipid  (MDA)  dan  meningkatkan  aktivitas enzim  antioksidan  pada  tikus  diabetes melitus yang diinduksi STZ (Adewole et al., 2007).  Penelitian  yang  dilakukan  oleh Oparinde dan Atiba (2014) juga menunjukan bahwa  pemberian  ekstrak  daun  kelor ( Moringa  oleifera) pada  tikus  galur  wistar dapat  melindunginya  dari oxydative  stress dengan  parameter  menurunnya  kadar  MDA dibandingkan dengan pemberian diet normal (Oparinde and Atiba, 2014).

## 4. KESIMPULAN DAN SARAN
Pemberian ekstrak daun kelor ( moringa oleifera) dalam  penelitian  ini  terbukti  dapat menurunkan kadar MDA tikus betina model SOPK.  Penelitian  ini  memiliki  keterbatasan yaitu  parameter  yang  diperiksa  hanya menggunakan  kadar  MDA  sebagai  penanda status oksidatif. Penelitian pemberian ekstrak  daun  kelor  ( moringa  oleifera) sebagai  anti  oksidan untuk  alternatif  pilihan pengobatan  SOPK  perlu  dilanjutkan  dengan menggunakan  parameter  yang  berbeda sebagai  penanda  status  oksidatif  misalnya superoksida dismutase (SOD), dan glutathione peroxidase (GPx).

## DAFTAR PUSTAKA
Adewole, S. O., Caxton-Martins, E. A. & Ojewole, J. A. 2007. Protective effect of quercetin on the morphology of pancreatic β-cells of streptozotocin- treated diabetic rats. African Journal of Traditional, Complementary and Alternative Medicines, 4 , 64-74.
Agarwal, A., Prabakaran, S. A. & Said, T. M. 2005. Prevention of oxidative stress injury to sperm. Journal of Andrology,
26 , 654-660.
Balen, A. H., Conway, G. S., Homburg, R. & Legro, R. S. 2005. Polycystic ovary syndrome: a guide to clinical management , CRC Press. Bostancı, S. M., Bayram, M., Sevinç, F. C., Paşaoğlu, H. & Elbeğ, Ş. 2012. The relationship between biochemical parameters, interleukin-6 and ovarian morphology in polycystic ovary syndrome. Journal of Clinical and Experimental Investigations, 3.
Fahey, J. W. 2005. Moringa oleifera: A Review
of the Medical Evidence for Its
Nutritional, Therapeutic, and Prophylactic Properties. Part 1. Trees for life Journal, 1.
Fauser, B. C., Tarlatzis, B. C., Rebar, R. W., Legro, R. S., Balen, A. H., Lobo, R., Carmina, E., Chang, J., Yildiz, B. O. & Laven, J. S. 2012. Consensus on women’s health aspects of polycystic ovary syndrome (PCOS): the Amsterdam ESHRE/ASRM-Sponsored 3rd PCOS Consensus Workshop Group. Fertility and sterility, 97 , 28-38. e25. Gopalakrishnan, L., Doriya, K. & Kumar, D. S.
2016. Moringa oleifera: A review on nutritive importance and its medicinal application. Food Science and Human Wellness, 5 , 49-56.
Homburg, R. 2003. The management of infertility associated with polycystic ovary syndrome. Reproductive Biology and Endocrinology, 1 , 109.
Homburg, R. 2008. Polycystic ovary syndrome.
Best Practice & Research Clinical Obstetrics & Gynaecology, 22 , 261-274. Jackson, M. J. 2005. Reactive oxygen species and redox-regulation of skeletal muscle adaptations to exercise. Philosophical Transactions of the Royal Society B: Biological Sciences, 360 , 2285-2291. Johnson, B. 2005. Clinical perspectives on the health effects of Moringa oleifera: A promising adjunct for balanced nutrition and better health. KOS health publications. Kusumastuty, I. & Ratnawati, R. 2013. Epigallocatechin Gallate Green Tea
GMB4 Clon Prevent Insulin Resistance due to High Fat Diet in Rat. Jurnal Kedokteran Brawijaya, 26 , 63-68. Marshall, K. 2001. Polycystic ovary syndrome: clinical considerations. Alternative Medicine Review, 6 , 272-272. Mbikay, M. 2012. Therapeutic potential of Moringa oleifera leaves in chronic hyperglycemia and dyslipidemia: a review. Frontiers in pharmacology, 3.
Mukherjee, S. & Maitra, A. 2010. Molecular & genetic factors contributing to insulin resistance in polycystic ovary syndrome.
Oparinde, D. P. & Atiba, A. S. 2014. Moringa oleifera Leaf Prevents Oxidative Stress in Wistar Rats.
Powers, S. K. & Jackson, M. J. 2008. Exercise- induced oxidative stress: cellular mechanisms and impact on muscle force production. Physiological reviews, 88 , 1243-1276.
Purwanto, B., Sudiana, I. K., Herawati, L. & Aksono, B. 2013. MUSCLE GLUCOSE TRANSPORTER 1 (GLUT-1) EXPRESSION IN DIABETIC RAT MODELS. Folia Medica Indonesiana,
49 , 21-25. Rojas, J., Chávez, M., Olivar, L., Rojas, M.,
Morillo, J., Mejías, J., Calvo, M. & Bermúdez, V. 2014. Polycystic ovary syndrome, insulin resistance, and obesity: navigating the pathophysiologic labyrinth. International journal of reproductive medicine, 2014. Roloff, A., Korn, S. & Gillner, S. 2009. The climate-species-matrix to select tree species for urban habitats considering climate change. Urban Forestry &
Urban Greening, 8 , 295-308. Rusnasari, V. D. 2005. HUBUNGAN
RESISTENSI INSULIN (HOMA-IR) DENGAN OBESITAS DAN PERUBAHAN HORMON ANDROGEN PADA PENDERITA SINDROMA OVARIUM POLIKISTIK. Program Pasca Sarjana Universitas Diponegoro. Sikka, S. C., Rajasekaran, M. & Hellstrom, W. J. 1995. Role of oxidative stress and antioxidants in male infertility. Journal of andrology, 16 , 464-468. Slowey, M. J. 2001. Polycystic ovary syndrome: new perspective on an old problem. Southern medical journal, 94 , 190-196. Sujatha, B. & Patel, P. 2017. Moringa Oleifera– Nature’s Gold. Imperial Journal of Interdisciplinary Research, 3. Tan, H. 2011. Perbandingan Efektifitas dan Efek Samping Pemakaian Metformin XR dan Metformin IR dalam Pengobatan PCOS yang Resisten terhadap Clomiphene
Citrate.
Teede, H. J., Misso, M. L., Deeks, A. A., Moran, L. J., Stuckey, B., Wong, J., Norman, R.
J., Costello, M. F. & Guideline, D. G.
2011. Assessment and management of polycystic ovary syndrome: summary of an evidence-based guideline. The Medical Journal of Australia, 195 , S65.
Touyz, R. M. 2005. Molecular and cellular mechanisms in vascular injury in hypertension: role of angiotensin II– editorial review. Current opinion in nephrology and hypertension, 14 , 125- 131. Valkenburg, O., Steegers-Theunissen, R. P., Smedts, H. P., Dallinga-Thie, G. M., Fauser, B. C., Westerveld, E. H. & Laven, J. S. 2008. A more atherogenic serum lipoprotein profile is present in women with polycystic ovary syndrome: a case-control study. The Journal Of Clinical Endocrinology & Metabolism, 93 , 470-476. Winarsi, H. 2005. Antioksidan Alami dan Radikal , Kanisius. Yeon Lee, J., Baw, C.-K., Gupta, S., Aziz, N. & Agarwal, A. 2010. Role of oxidative stress in polycystic ovary syndrome. Current Women's Health Reviews, 6 , 96-107. Ziech, D., Franco, R., Pappa, A. & Panayiotidis, M. I. 2011. Reactive Oxygen Species (ROS)––Induced genetic and epigenetic alterations in human carcinogenesis. Mutation Research/Fundamental and Molecular Mechanisms of Mutagenesis, 711 , 167-173. Zuo, T., Zhu, M. & Xu, W. 2015. Roles of oxidative stress in polycystic ovary syndrome and cancers. Oxidative medicine and cellular longevity, 2016.