Widiatmono, B.R., et.al Jurnal Sumberdaya Alam dan Lingkungan
Pengaruh Kepadatan Mikroalga Chlorella sp. terhadap Bioremediasi Logam Krom Pada Limbah Cair Industri Penyamakan Kulit.

## The Influenced of Chlorella sp. Cells Density in Chromium Bioremediation of Tannery
Wastewater
Bambang Rahadi Widiatmono 1 , dan Fajri Anugroho 1 , dan Fadil Arif T. Munaf 2 Fakultas Teknologi Pertanian, Universitas Brawijaya, Jl. Veteran Malang 65145 Mahasiswa Program Studi Teknik Lingkungan, Universitas Brawijaya, Jl Veteran Malang 65145
*Email Korespondensi : jbrahadi@ub.ac.id

## ABSTRAK
Permasalahan kerusakan lingkungan yang disebabkan oleh limbah yang dihasilkan oleh industri penyamakan kulit merupakan limbah cair yang mengandung logam Cr (krom). Salah satu teknik yang  dapat  digunakan  untuk  pemulihan  kondisi  perairan  yang  tercemar  logam  krom  adalah dengan  bioremediasi  menggunakan  mikroalga.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui potensi Chlorella  sp .  sebagai  alternatif  penurunan  kadar  logam  Cr  pada  limbah  cair  industri penyamakan  kulit  ( biological  treatment )  dengan  menguji  kemampuan Chlorella  sp .  dalam kepadatan sel yang berbeda-beda. Hasil penelitian menunjukkan suhu limbah cair selama 7 hari pertama mengalami fluktuasi dan diikuti dengan kondisi  suhu yang cenderung stabil sampai hari  ke-11.  Kepadatan  sel Chlorella  sp .  mengalami  peningkatan  sampai  hari  ke-7,  setelah  itu jumlah kepadatan sel menurun pada perlakuan kepadatan rendah dan tinggi sampai hari ke-11. Penurunan kadar krom total limbah cair berbanding lurus dengan waktu pengamatan, pada hari ke-3 terjadi penurunan sebesar 2,4587-4,1299 mg/L, pada hari ke-7 sebesar 0,0074-1,6713 mg/L, dan  pada  hari  ke-11  sebesar  0,0333-0,1213  mg/L.  Penurunan  kadar  krom  total  limbah  cair memiliki hubungan berbanding terbalik dengan peningkatan kepadatan sel, terlihat pada hari ke-3 perlakuan kepadatan sel rendah memiliki kadar krom total limbah cair terkecil dengan nilai 0,0204 mg/L, diikuti perlakuan kepadatan sedang dan tinggi sebesar 0,1277 mg/L dan 0,4560 mg/L, serta kontrol sebesar 1,6917 mg/L.
Kata Kunci : Bioremediasi, Chlorella sp ., Kepadatan, Krom Total

## Abstract
Environmental  harm  problem  caused  by  the  tanning  industry  as  a  result  of  wastewater  that produced containing heavy metal Cr (chromium). A way that can be used to recovery polluted water conditions with chromium is bioremediation using microalgae. Microalgae has many advantages that made it as a choice that suited to eliminate specific content and reducing heavy metal concentration in waste or contaminated environment. This study aim to know the potensial of Chlorella sp. as chromium reduction alternative in tannery wastewater (biological treatment) at different cells density. The study shows that
Widiatmono, B.R., et.al

## Jurnal Sumberdaya Alam dan Lingkungan
temperature of wastewater fluctuated for 7 first days and stable for the next until the 11th day. Chlorella sp. cells density increased until the 7th day, after that decrease at the low and high cells density until the 11th  day.  The  decreased  of  total  chromium  concentration  in  wastewater  directly  proportional  with observation time, on the 3rd day occurred a decrease from 2.4587 mg/L to 4.1299 mg/L, 0.0074 mg/L to 1.6713 mg/L on the 7th day, and 0.0333 mg/L to 0.1213 mg/L on the 11th day. Moreover, the decreased of total chromium concentration in wastewater directly upside with the increased of cells density seen on the 3rd day, the lowest total chromium concentration had by the low cells density with 0.0204 mg/L, followed by the medium and the high cells density respectively with 0.1277 mg/L and 0.4560 mg/L, and the control with 1.6917 mg/L.
Keyword : Bioremediation, Cells density, Chlorella sp., Total Chromium

## PENDAHULUAN
Permasalahan  kerusakan  lingkungan  yang disebabkan  oleh  industri  penyamakan  kulit akibat limbah cair yang dihasilkan mengandung logam Cr (krom) (Esmaeili et al ., 2005).  Pengolahan  limbah  yang  kurang terencana  akan  menimbulkan  permasalahan seperti  pencemaran  sungai  oleh logam  berat. Krom  merupakan  golongan  “ Three  Big Heavy Metal ” yaitu Cr, Pb, dan Hg. Krom merupakan logam  berat  yang  sangat  beracun  dan  tidak dibutuhkan  oleh  tubuh  manusia.  Krom bersifat  karsinogenik  karena  dapat  merusak struktur  kromatin  dan  fungsi  sel  (Banfalvi, 2011). Salah satu teknik yang dapat digunakan untuk  pemulihan  kondisi  perairan  yang tercemar  logam  krom  adalah  dengan bioremediasi menggunakan mikroalga (Purnawati et al ., 2015).
Bioremediasi merupakan teknik remediasi (pemulihan)  kondisi  lingkungan  dengan memanfaatkan  organisme  dalam  proses pemulihannya. Remediasi lingkungan dengan bioremediasi  lebih  murah  dan  efektif dibandingkan teknik remediasi dengan proses fisik  dan  kimia.  (Soeprobowati  dan  Hariyati, 2013a).  Menurut  Chekroun  dan  Baghour (2013).  Beberapa  jenis  mikroalga  yang  dapat digunakan  dalam  mereduksi  kandungan logam  berat  dalam  perairan  tercemar diantaranya
Laminaria
japonica , Fucus vesicularis , Asparagopsis  armata , Fucus  spiralis , Spirogyra sp , dan Chlorella sp (Zeraatkar et al ., 2016).
Penelitian  Wetipo et  al .  (2013)  mendapati bahwa Chlorella  sp. yang  diberikan  logam  Cr dengan konsentrasi 10 mg/L dapat menurunkan  kadar  logam  tersebut  sebesar 33%.  Sedangkan Chlorella  pyrenoidosa mampu menurunkan konsentrasi  logam  Cr  dari
limbah industri tekstil, industri plastik, dan air lindi  masing-masing  sebesar  79,28%,  79,06%, dan  52,69%  dalam  15  hari  untuk  limbah industri tekstil dan plastik serta 17 hari untuk air  lindi  (Soeprobowati  dan  Hariyati,  2013a). Penelitian  ini  menggunakan  mikroalga Chlorella sp . dalam upaya menurunkan kadar logam  berat  Cr  pada  limbah  cair  industri penyamakan  kulit.  Penelitian  dilakukan dengan mengkultur mikroalga dalam sampel limbah cair industri penyamakan kulit dengan kepadatan  sel  yang  berbeda-beda.  Kultur mikroalga  dilakukan  selama  10  hari  dengan menggunakan  bak  kaca  yang  diberi  cahaya dan aerasi secara konstan. Hasil dari peneltian ini  diharapkan  memperoleh  data  mengenai kemampuan Chlorella sp . sebagai bioremediator dalam mereduksi kadar logam Cr  pada  limbah  cair  industri  penyamakan kulit  dengan  kepadatan  sel  yang  optimal. Selain  itu,  hasil  dari  penelitian  ini  dapat mengungkapkan  efektfitas  penurunan  logam berat Cr pada air tercemar oleh Chlorella sp .

## BAHAN DAN METODE
Metode  yang  digunakan  dalam  penelitian yaitu  metode  eksperimental.  Metode pengambilan  sampel  limbah  cair  yang digunakan  yaitu  metode grab  sample . Peneltian menggunakan 4 perlakuan yaitu perlakuan  kepadatan  rendah  (1x106 sel/mL),  kepadatan  sedang  (1,5x106 sel/mL), kepadatan tinggi (2x106 sel/mL), dan  kontrol  (0x106  sel/mL).  Hasil penurunan  yang  diperoleh  dianalisis secara statistik untuk mengetahui pengaruh  perlakuan  dan  perbedaan kemampuan mikroalga.
Pengambilan  dan  pengujian  kadar  krom limbah cair industri penyamakan kulit
Widiatmono, B.R., et.al

## Jurnal Sumberdaya Alam dan Lingkungan
Pengambilan sampel limbah cair dilakukan pada  inlet  IPAL  industri  tepatnya  pada saluran  pembuangan  limbah  cair  pada proses tanning . Setelah limbah cair diambil lalu dilakukan pengujian kadar krom total pada  Laboratorium  Lingkungan  PJT  1 Malang. Selama menunggu hasil uji kadar krom  total  keluar,  limbah  cair  didiamkan dalam jerigen.
Kultivasi Chlorella sp . Biakkan  murni Chlorella  sp .  didapatkan  dari Aquatik-Biofloq  FPIK  Universitas  Brawijaya. Kultivasi  dilakukan  dengan  menggunakan wadah  erlenmeyer  1000  mL.  Perbandingan jumlah  biakkan  murni  dengan  media  air mieral  adalah  1  :  4  dimana  100  mL  biakkan murni  dicampur  dengan  400  mL  air  mineral sehingga  total  volume  sebanyak  500  mL. Pupuk  walne  ditambahkan  pada  kultur sebanyak  1  mL  sebagai  sumber  nutrisi Chlorella sp . Kultur dilakukan selama 14 hari.

## Sterilisasi Alat
Penelitian  menggunakan  12  buah  bak  kaca dengan dimensi 10 cm x 10 cm x 20 cm sebagai wadah  limbah  cair  penyamakan  yang  akan diremediasi.  Sterilisasi  terlebih  dahulu dilakukan  pada  alat-alat  penelitian  non- elektronik  sebelum  digunakan.  Tahapan sterilisasi  yang  dilakukan  merujuk  pada Purnamawati et  al .  (2015),  yakni  semua peralatan  non  elektronik  dicuci  dengan menggunakan sabun pencuci perabotan gelas, kemudian dibilas dengan aquades. Setelah itu, peralatan dibilas dengan larutan alkohol 70%. Selanjutnya  dibilas  dengan  aquades  dan ditiriskan hingga hilang bau alkoholnya.

## Penyiapan Media
Limbah  cair  yang  telah  didiamkan  selama  2 minggu  kemudian  diencerkan  1000x  dengan air  PDAM  dan  dihomogenkan.  Biakkan Chlorella  sp. yang  didapat  dari  hasil  kultivasi dihitung  kepadatan  selnya.  Pengukuran kepadatan  ini  menggunakan haemacytometer Neubauer  Improved  sesuai Persamaan  1
(Purnamawati et  al. ,  2015).mSetelah  itu Chlorella  sp. ditambahkan  dalam  1000  mL limbah  cair  yang  terlah  diencerkan,  dengan jumlah volume sebanyak 100 mL, 158 mL, 222 mL,  dan  0  mL  untuk  masing-masing perlakuan  kepadatan  rendah,  sedang,  tinggi, dan  kontrol.  Nilai  ini  didapatkan  dengan menggunakan  Persamaan  2  (Purnamawati et
al ., 2015). Pupuk walne ditambahkan kedalam limbah  cair  sebanyak  1  mL  pada  semua perlakuan.  Kondisi  lingkungan  limbah  cair diatur  pada  pencahayaan  4100-5700  lux  (2 buah lampu 18 watt) dan aerasi dengan debit udara 2,25 L/menit selama 24 jam. Kondisi pH limbah cair  terukur  pada  rentang  8.1-8.6 selama proses bioremediasi.

## Uji Krom Total
Pengujian kadar krom total dilakukan pada hari ke-3,  hari  ke-7,  dan  hari  ke-11  bioremediasi. Masing-masing perlakuan dan ulangan diambil sebanyak 100 mL dan disentrifugasi menggunakan centrifuge (LMC-4200R)  pada 7500  rpm  selama  3  menit  untuk  memperoleh cairan  supernatan  (Napan  et  al.,  2016).  Cairan supernatan  kemudian  diukur  kadar  krom totalnya  menggunakan  AAS  dengan  metode analisa APHA 3111 B-2005 pada Laboratorium PJT 1 Malang.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Konsentrasi  Krom  Total  Limbah  Cair Hasil pengujian  kadar  krom  total  limbah  cair  pra- penelitian menentukan pretreatment limbah cair pra-penelitian  sebelum  dilakukan  penelitian. Konsentrasi  krom  total  limbah  cair  pada penelitian  merupakan  hasil  pengujian  sampel yang  diambil  setelah  diberikan  pretreatment. Hasil  pengujian  kadar  krom  total  limbah  cair pra-penelitian  dan  penelitian  disajikan  pada Tabel 1.
Widiatmono, B.R., et.al Jurnal Sumberdaya Alam dan Lingkungan Tabel 1 Hasil Pengujian Sampel Limbah Cair Penyamakan Kulit Parameter Hasil, mg/L (ppm) Baku Mutu* (mg/L) Pra-Penelitian Penelitian Krom Total 126300 4,1503 0.6 *)Sumber : Peraturan Gubernur Jawa Timur No. 72 Tahun 2013. Berdasarkan hasil dari beberapa penelitian sebelumnya,  mendapati  bahwa Chlorella vulgaris dan Chlorella miniata mampu menyerap logam krom secara optimal dengan konsentrasi krom  awal  sampai  50  mg/L  pada  suhu  25°C dan pH 1,5-4,5 (Gokhale et al. , 2008; Han et al., 2006).  Oleh  karena  itu,  pada  penelitian dilakukan treatment awal pada sampel limbah cair  yang  diambil  berupa  pengendapan  dan pengenceran.  Hal  ini  dilakukan  untuk menurunkan  kadar  krom  total  dari  sampel sehingga  cocok  untuk  pertumbuhan Chlorella sp .  Setelah  dilakukan  pengendapan dan pengenceran,  sampel  limbah  cair  diuji  kadar krom totalnya.

## Pengamatan Faktor Lingkungan
Suhu Limbah Cair
Suhu limbah cair mengalami fluktuasi selama 7 hari  pertama  bioremediasi.  Fluktuasi  suhu berada pada rentang nilai 25-29°C. Sedangkan, kondisi suhu setelah hari ke-7 cenderung stabil pada  nilai  26-26,5°C.  Maharsyah et  al .  (2013) menjelaskan  bahwa  jumlah  kepadatan  sel mikroalga  mempengaruhi  suhu  media  kultur. Kondisi ini dijelaskan dengan hubungan yang berbanding lurus antara peningkatan kepadatan  sel  mikroalga  dan  penambahan suhu  media  tumbuhnya.  Hal  tersebut disebabkan  oleh  semakin  meningkatnya populasi pada media maka semakin besar pula
pertukaran  gas  yang  akan  terjadi,  sehingga memungkinkan terjadi peningkatan suhu pada media  disamping  faktor  lingkungan  yang mempengaruhi. Apabila dibandingkan dengan hasil  pengamatan,  pada  hari  ke-7  dijumpai peningkatan kepadatan sel Chlorella sp . Kondisi tersebut  selaras  dengan  fluktuasi  nilai  suhu limbah  cair  yang  juga  terjadi  pada  7  hari pertama. Sedangkan pada hari ke-11, dijumpai penurunan  kepadatan  sel Chlorella sp .  yang selaras dengan kondisi suhu limbah cair yang cenderung konstan. Secara umum, suhu limbah cair  berada  pada  rentang  25-29°C,  dimana masih  dalam  rentang  suhu  optimal  bagi pertumbuhan mikroalga yaitu 25-35ºC (Richmond, 2004). Perubahan suhu limbah cair pada penelitian ditunjukkan oleh Gambar 1 .
Kepadatan Sel Chlorella sp.
Perlakuan  kepadatan  rendah  dan  kepadatan tinggi  memiliki  pola  peningkatan  kepadatan yang cenderung sama, namun berbeda dengan perlakuan  kepadatan  sedang.  Hal  tersebut kemungkinan  disebabkan  oleh human  error pada  pengambilan  dan  penanganan  sampel, atau  bisa  disebabkan  oleh  faktor  lain  yang belum  diketahui  sehingga  butuh  penelitian lebih lanjut.
Laju peningkatan kepadatan sel bertambah  pesat  untuk  perlakuan  kepadatan rendah  dan  kepadatan  tinggi  pada  hari  ke-3 dengan  jumlah  kepadatan  sel  rata-rata
Widiatmono, B.R., et.al
Jurnal Sumberdaya Alam dan Lingkungan
berturut-turut  sebesar  0,51  x  106  sel/mL  dan 0,39 x 106 sel/mL. Sedangkan, pada perlakuan kepadatan sedang laju peningkatan kepadatan sel adalah nol. Pupuk walne yang ditambahkan pada  limbah  cair  berperan  sebagai  sumber nutrien  bagi Chlorella  sp .  Astrid et  al .  (2013) menjelaskan  bahwa  komposisi  pupuk  walne memiliki  kadar  N  dan  P  sebesar  20,229  gr/L dan  4,489  gr/L.  Kebutuhan  optimum  nutrien bagi Chlorella  sp .  yaitu  pada  kadar  N  (0,14-0,7 gr/L) dan P (0,015-0,62 gr/L) (Umainana et al., 2012),  sehingga  dengan  tambahan  pupuk walne  meyebabkan Chlorella  sp .  dapat berkembang  biak  dan kepadatan  selnya meningkat  meskipun  tambahan nutrient yang dilakukan belum
mencukupi
untuk pertumbuhan optimal Chlorella sp . Penambahan  kepadatan  sel  terjadi  pada semua perlakuan dengan mikroalga pada hari ke-7.  Tetapi,  pada  kepadatan  rendah  dan kepadatan tinggi laju peningkatan kepadatannya  berkurang,  ditandai  dengan penambahan  rata-rata  kepadatan  sel  yang hanya sebesar 0,11 x 106 sel/mL dan 0,27 x 106 sel/mL  dibandingkan  hari  ke-3.  Sedangkan pada  kepadatan  sedang  laju  peningkatan kepadatan sel bertambah, ditunjukkan dengan penambahan  rata-rata  kepadatan  sel  sebesar 0,27  x  106  sel/mL  dibandingkan  hari  ke-3. Berdasarkan  penelitian  Amini  dan  Syamdidi (2006),  menjelaskan  bahwa  peningkatan kepadatan  sel  mikroalga  dibarengi  dengan penurunan konsentrasi unsur hara pada media tumbuhnya,  sehingga  konsentrasi  unsur  hara sebagai nutrien bagi mikroalga tidak sebanding dengan jumlah kepadatan sel yang ada. Hal ini menyebabkan  laju  peningkatan  kepadatan  sel menjadi berkurang.
Pengurangan laju peningkatan kepadatan sel  terjadi  pada  hari  ke-11  untuk  kepadatan sedang,  bahkan  bernilai  negatif  untuk kepadatan  rendah  dan  kepadatan  tinggi. Penurunan rata-rata kepadatan sel sebesar 0,42 x  106  sel/mL  dan  0,25  x  106  sel/mL  untuk kepadatan  rendah  dan  kepadatan  tinggi. Sedangkan, pada kepadatan sedang
penambahan  rata-rata  kepadatan  sel  sebesar 0,08  x  106  sel/mL.  Kabinawa  (2006) menjelaskan bahwa jumlah sel menurun secara geometrik  dipengaruhi  oleh  beberapa  faktor salah  satunya  adalah  ketersediaan  nutrient. Waktu  remediasi  yang  semakin  lama menyebabkan kadar nutrient pada limbah cair juga  semakin  menurun,  sehingga  tidak mencukupi  kebutuhan  Chlorella  sp.  untuk tumbuh.

## Kadar Krom Total pada Limbah Cair
Kadar  krom  total  limbah  cair  memiliki hubungan yang kuat dengan waktu pengamatan,  ditunjukkan  dengan  koefisien regresi  (R2)  persamaan  garis  tren  semua perlakuan  memiliki  nilai  yang  mendekati  1. Proses  akumulasi  ion  logam  ini  cenderung menetap dalam sel karena harga konstanta laju pelepasan logam lebih kecil dibandingkan laju penyerapannya.  Proses  penyerapan  dan akumulasi  ion  logam  dalam  sel  akan  dipecah dan diekskresikan, disimpan atau dimetabolisme  oleh  mikroalga  tergantung konsentrasi  dan  potensial  bahan  kimia tersebut.
Analisis statistik dilakukan dengan menggunakan  uji student  t-test untuk mengetahui  tingkat  signifikan  data  antar  hari pengukuran. Hasil analisis diperoleh perbedaan  signifikan  pada  penurunan  kadar krom  antara  hari  ke-3  dan  hari  ke-7,  dengan thitung  >ttabel  5%  yaitu  2,489  >  2,201. Sementara  itu,  penurunan  kadar  krom  antara hari  ke-7  dan  hari  ke-11  tidak  terdapat perbedaan  signifikan,  dengan  thitung  <ttabel 5% yaitu 1,618 < 2,201, sedangkan penurunan kadar  krom  antara  hari  ke-3  dan  hari  ke-11 terdapat perbedaan signifikan dengan thitung >ttabel  5%  yaitu  2,770  >  2,201.  Hubungan Kepadatan Chlorella  sp .  terhadap  Penurunan Kadar Krom Total
Widiatmono, B.R., et.al
Jurnal Sumberdaya Alam dan Lingkungan
Hubungan yang kuat antara kepadatan sel dan  penurunan  kadar  krom  total  limbah  cair pada hari ke-3, ditunjukkan oleh nilai koefisien korelasi  (R2)  yang  mendekati  1.  Peningkatan kepadatan  sel Chlorella  sp .  pada  hari  ke-3 berbanding  terbalik  dengan  penurunan  kadar krom  total  limbah  cair.  Hal  ini,  diperkuat dengan  uji  analisis  sidik  ragam  perlakuan secara statistika. Analisis data dengan ANOVA (signifikan nyata 5%) dan uji lanjut BNT (taraf 5%)  memberikan  hasil  berbeda  nyata.  Beda nyata  ditunjukkan  dengan  perbedaan  indeks masing-masing  perlakuan  pada  hari  ke-3. Perlakuan  kepadatan  rendah  dan  sedang memberikan  hasil  yang  cenderung  sama, ditandai  dengan  kedua  perlakuan  memiliki indeks  (a).  Perlakuan  kepadatan  tinggi  Kadar krom  total  limbah  cair  semua  perlakuan mengalami penurunan pada hari ke-3, hari ke- 7, dan hari ke-11. Penurunan kadar krom total jumlahnya  berbeda  pada  setiap  perlakuan, yang ditunjukkan dengan persamaan garis tren yang  berbeda.  Penurunan  kadar  krom  total pada perlakuan dengan penambahan Chlorella sp. mengikuti  tren  garis  fungsi  logaritma, sedangkan pada perlakuan kontrol penurunan kadar  krom  total  mengikuti  tren  garis polinomial pangkat dua. Koefisien persamaan garis pada perlakuan kepadatan rendah yaitu - 0,94,  sedangkan  pada  perlakuan  kepadatan sedang  sebesar  -0,932,  dan  pada  perlakuan kepadatan tinggi sebesar -0,923.
Penurunan kadar krom paling besar secara keseluruhan terjadi pada hari ke-3 dibandingkan  hari  ke-7  dan  hari  ke- 11.Sedangkan,  penurunan  kadar  krom  paling kecil terjadi pada hari ke-11. Kondisi tersebut, menjelaskan  bahwa  semakin  lama  waktu bioremediasi  maka  semakin  kecil  penurunan kadar krom totalnya. Jumlah penurunan kadar krom total pada hari ke-3 sebesar 2,4587-4,1299 mg/L.  Rata-rata  kadar  krom  total  limbah  cair pada  hari  ke-3  paling  tinggi  berada  pada perlakuan kontrol sebesar 1,6917 mg/L, diikuti dengan kepadatan tinggi sebesar 0,4560 mg/L,
lalu  kepadatan  sedang  sebesar  0,0333  mg/L, dan  penurunan  paling  kecil  ada  pada perlakuan  kepadatan  rendah  sebesar  0,1277 mg/L. Persen removal semua perlakuan pada hari  ke-3  untuk  kepadatan  rendah,  sedang, tinggi,  dan  kontrol  berturut-turut  sebesar 99,5%, 96,9%, 89,0%, dan 59,2%. Penurunan kadar  krom  yang  cepat  menandakan  bahwa kemampuan  penyerapan  logam  oleh Chlorella sp . sangat baik pada awal kontak. Mehta et al.
(2002)  menambahkan,  penurunan  secara drastis logam berat pada paparan awal karena perbedaan  afinitas  antara  ion  logam  dengan gugus  fungsi  yang  ada  pada  permukaan  sel mikroalga,  sehingga  menimbulkan  gaya  tarik hingga  terbentuk  ikatan  antara  keduanya ( physical absorpion ) yang cenderung berlangsung  dalam  waktu  yang  singkat,  dan terjadi pada permukaan sel mikroalga.
Penurunan kadar krom total pada hari ke-7 sebesar 0,0074-1,6713 mg/L, nilai ini lebih kecil dibandingkan  penurunan  hari  ke-3.  Tetapi, pada perlakuan kepadatan rendah mengalami kenaikan. Kondisi ini kemungkinan disebabkan  oleh human  error pada  saat sampling pengujian krom total.
Proses akumulasi ion logam ini cenderung menetap dalam sel karena harga konstanta laju pelepasan logam lebih kecil dibandingkan laju penyerapannya.  Proses  penyerapan  dan akumulasi  ion  logam  dalam  sel  akan  dipecah dan diekskresikan, disimpan atau dimetabolisme  oleh  mikroalga  tergantung konsentrasi  dan  potensial  bahan  kimia tersebut.
Analisis statistik dilakukan dengan menggunakan  uji student  t-test untuk mengetahui  tingkat  signifikan  data  antar  hari pengukuran. Hasil analisis diperoleh perbedaan  signifikan  pada  penurunan  kadar krom  antara  hari  ke-3  dan  hari  ke-7,  dengan thitung  >ttabel  5%  yaitu  2,489  >  2,201. Sementara  itu,  penurunan  kadar  krom  antara hari  ke-7  dan  hari  ke-11  tidak  terdapat perbedaan  signifikan,  dengan  thitung  <ttabel
Widiatmono, B.R., et.al
Jurnal Sumberdaya Alam dan Lingkungan
5% yaitu 1,618 < 2,201, sedangkan penurunan kadar  krom  antara  hari  ke-3  dan  hari  ke-11 terdapat perbedaan signifikan dengan thitung >ttabel 5% yaitu 2,770 > 2,201.
Hubungan Kepadatan Chlorella sp . terhadap Penurunan Kadar Krom Total
Hubungan yang kuat antara kepadatan sel dan penurunan kadar krom total limbah cair pada hari  ke-3,  ditunjukkan  oleh  nilai  koefisien korelasi  (R2)  yang  mendekati  1.  Peningkatan kepadatan  sel Chlorella  sp .  pada  hari  ke-3 berbanding  terbalik  dengan  penurunan  kadar krom  total  limbah  cair.  Hal  ini,  diperkuat dengan  uji  analisis  sidik  ragam  perlakuan secara statistika. Analisis data dengan ANOVA (signifikan nyata 5%) dan uji lanjut BNT (taraf 5%)  memberikan  hasil  berbeda  nyata.  Beda nyata  ditunjukkan  dengan  perbedaan  indeks masing-masing  perlakuan  pada  hari  ke-3. Perlakuan  kepadatan  rendah  dan  sedang memberikan  hasil  yang  cenderung  sama, ditandai  dengan  kedua  perlakuan  memiliki indeks (a). Perlakuan kepadatan tinggi.
Penelitian Srivastava et al . (2007) menemukan bahwa pada limbah penyamakan kulit  terdapat  bakteri indigenous yang diidentifikasi sebagai Acitenobacter sp. , Pseudomonas  aeruginosa ,  dan E.  Coli .  Ketiga baketri  tersebut  mampu  menurunkan  kadar krom  secara  berturut-turut  sebesar  86%,  55%, dan 45% dari konsentrasi awal sebesar 500 ppm (pada  kondisi  pH  7  dan  suhu  37°C)  selama  7 hari.

## KESIMPULAN
Chlorella  sp. mampu  menurunkan  kadar  krom total  limbah  cair  industri  penyamakan  kulit lebih  cepat  dibandingkan  tanpa Chlorella  sp .
Efektivitas  penurunan  kadar  krom  total  pada limbah  cair  terdapat  pada  hari  ke-3 bioremediasi  dengan  nilai  persen  removal
sebesar  99,5%  (kepadatan  rendah),  96,9% (kepadatan sedang), 89,0% (kepadatan tinggi), dan 59,2% (tanpa Chlorella sp .) Kadar krom total pada  limbah  cair  industri  penyamakan  kulit secara  alami  menurun  seiring  berjalannya waktu  akibat  adanya  bakteri indigenous yang memiliki  kemampuan  untuk mereduksi  krom total pada media tumbuhnya.

## DAFTAR PUSTAKA
Amini,  S.  Dan  Syamdidi.  2006. Konsentrasi Unsur  Hara  pada  Media  dan Pertumbuhan Chlorella vulgaris dengan   Pupuk Anorganik Teknis dan Analis . J urnal  Perikanan  ( J.  Fish. Sci. ) VII(2): 201-206.
Astrid,  T.,  Rahardja,  .  S.,  dan  Masithah,  E.  D. 2013. Pengaruh  Konsentrasi  Pupuk Lemna   minor  terhadap  Populasi
Dunnaliella salina .   Jurnal
Ilmiah   Perikanan dan   Kelautan 5(1): 61-66.
Banfalvi G. 2011. Cellular effects of heavy metals . Springer. London, pp. 364. Chekroun, K. B., dan Baghour, M. 2013. The Role of Algae  in  Phytoremediaton  of  Heavy Metals: A Review .  Journal  of Material and
Environmenttal Science  4(6):  873- 880.
Esmaeili, A., Nia, A. M., dan Vazirinejad,   R.
2005. Chromium  (III)  Removal  and Recovery f rom Tannery Wastewater by   Precipitation Process . American Journal  of Applied Science. Vol 2(10): 1471-1473. Gubernur  Jatim.  2013. Peraturan  Gubernur Jawa   Timur No. 72 Tahun 2013 Mengenai Baku Mutu
Limbah  Bagi Industri dan/atau
Widiatmono, B.R., et.al Jurnal Sumberdaya Alam dan Lingkungan Kegiatan Usaha  Lainnya .  Gubenur Jawa   Timur.  Surabaya. Gokhale, S. V., Jyoti, K. K., Lele, S. S. 2008. Kinetic and  Equilibrium  Modelling  of  Chromium (VI) Biosorption on Fresh and   Spent
Spirulina plantesis/Chlorella
vulgaris Biomass . Bioresour. Technol   99(9): 3600-3608.
Han,  X.,  Wong,  Y.  S.,  dan  Tam,  N.  F.  Y.  2006.
Surface  Complexation  Mechanism  and Modelling  in  Cr(III)  Biosorption  by  a Microalgal  Isolate,  Chlorella  miniata . Journal of Colloid and Interface  Science 303: 365-371.
Kabinawa,  I.  N.  K.  2006. Spirulina  :  Ganggang Penggempur  Aneka  Penyakit,  bab  5 . AgroMedia Pustaka. Tangerang.
Maharsyah,  T.,  Lutfi,  M.,  dan  Nugroho,  W.  A.
2013. Efektivitas  Penambahan  Plant
Growth  Promoting Bacteria (Azospirillum sp) dalam Meningkatkan   Pertumbuhan Mikroalga (Chlolrella sp)   pada Media Limbah Cair Tahu setelah  Proses  Anaerob . Jurnal Keteknikan Pertanian Tropis   dan Biosistem 1(3): 258-
264.
Mehta,  S.  K.,  Singh,  A.,  dan  Gaur,  J.  P.  2002. Kinetics  of  Adsorption  and  Uptake  of Cu2+  by  Chlorella  vulgaris  Influence  of pH,  Temperature,  Culture  Age,  and
Cations .. Journal of Environmental  Science  and Health A37(3): 399-414.
Napan,  K.,  Kumarasamy,  K.,  Quinn,  J.  C.,  dan Wood,  B.  2016. Contamination  Levels  in Biomass  and  Spent  Media  from  Algal Cultivation System Contaminated Munaf,
et.al Jurnal Sumberdaya Alam dan Lingkungan with Metals . Journals of Algal Research 19: 39-
47.
Purnamawati,  F.  S.,  Soerprobowati,  T.  R.,  dan Izzati, M. 2015. Potensi Chlorella  vulgaris Beijerinck dalam Remediasi Logam  Berat Cd da  Pb  Skala  Laboratorium .  BIOMA.  Vol 16(2): 102-113.
Richmond,  A.  2004. Handbook  of  Microalgal Culture : Biotechnology and Applied Phycology, ch 1   and 4 . Blackwell
Publishing. Oxford.
Romera,  E.,  Gonzales,  F.,  Ballester,  A., Blazquez,  M.  L.,  dan  Munoz,  J.  A. 2007. Comparative  Study  of  Biosorption of Heavy Metals using Different   Types  of Algae .  Bioresource  Technology  98: 3344-3353.
Shun-gui,  Z.,  Li-xiang,  Z.,  Shi-mei,  W.,  dan  Di, F.  2006. Removal  of  Cr  from  Tannery Sludge  by  Bioleaching  Method .  Journal of  Environmental  Science  18(5):  885- 890.
Soeprobowati,  T.  R.  dan  Hariyati  R.  2013a.
Potensi Mikroalga Sebagai Agen
Bioremediasi  dan  Aplikasinya  dalam Penurunan  Konsentrasi  Logam  Berat pada  Instalasi  Pengolahan  Air  Limbah Industri .  Laporan  akhir  Penelitian
Fundamental.
Universitas Diponegoro. Semarang.
Soeprobowati,  T.R,  and  Hariyati,  R.  2013b. Bioaccumulation  of  Pb,  Cd,  Cu,  and  Cr by  Porphyridium  cruentum  (S.F.  Gray) Nägeli .  International  R.  Journal  of Marine  Science 3(27): 212-218.
Srivastava,  J.,  Chandra,  H.,  Tripathi,  K., Naraian,  R.,  dan  Sahu,  R.  K.  2008.
Removal of Chromium(IV) through
Biosorption by the Pseudomonas   spp.
Isolated from Tannery Effluent Journal  of Basic Microbiology   48:  135- 139.
Srivastava,  S.,  Ahmad,  A.  H.,  Thakur,  I.  S.
2007. Removal  of  Chromium  and
Widiatmono, B.R., et.al Jurnal Sumberdaya Alam dan Lingkungan Pentachlorophenol from Tannery Effluents .  Bioresource  Technology  98: 1128-1132.
Taziki,  M.  Ahmadzadeh,  H.,  Murry,  M.  A. 2015. Growth  of  Chlorella  vulgaris  in High   Concentrations  of  Nitrate  and Nitrite   for
Wastewater
Treatment.
Biotechnology   Journal 4: 1-7.
Umainana,  M.  R.,  Mubarak,  A.  S.,  dan Masithah,  E.  D.  2012. Pengaruh Konsentrasi  Pupuk  Daun  Turi  Putih (Sesbania grandiflora) terhadap Populasi Chlorella  sp. Universitas  Airlanga. Surabaya.
Wetipo, Y. S., Mangimbulude, J. C., dan Rondonuwu, F. S. 2013. Potensi Chlorella sp. sebagai Agen  Bioremediasi Logam Berat di Air. Prosiding Seminar Nasional Pendidikan X 10(1): 115-
119.
Xie, Y., Li, H., Wang, X., Son, I., Lu, Y., dan Jing, K. 2014. Kinetic Simulating of Cr(IV)   Removal by the Waste Chlorella vulgaris  Biomass. Journal of The   Taiwan Institute of Chemical Engineering 45: 1173-1782.