e-ISSN 2540-9840 p-ISSN 1412-3770
Accredited by Ministry of Education, Culture,                                      DOI: https://doi.org/10.35799/jis.v23i1.43998 Research and Technology No: 105/E/KPT/2022         Available online at https://ejournal.unsrat.ac.id/v3/index.php/jis

## Uji Aktivitas Antihiperglikemia Ekstrak Etanol, Fraksi Metanol dan n- Heksana Daun Talas (Colocasia esculenta (L) Schott)
Rachma Nurhayati 1*) , Nadia Pramasari 2) , Rosa Hesturini 3)
1) Program Studi Pendidikan Profesi Apoteker, Fakultas Farmasi, Institut Ilmu Kesehatan Bhakti Wiyata, Jl. K.H. Wachid Hasyim No.65, Kediri, Indonesia
2,3) Program Studi Sarjana Farmasi, Fakultas Farmasi, Institut Ilmu Kesehatan Bhakti Wiyata, Jl. K.H. Wachid Hasyim No.65, Kediri, Indonesia
*) Corresponding author: rachma.nurhayati@iik.ac.id

## ABSTRAK
Daun talas ( Colocasia esculenta (L) Schott) merupakan tanaman dari keluarga Araceae yang memiliki  aktivitas  antihiperglikemia  karena  mengandung  metabolit  sekunder  seperti flavonoid,  tanin,  saponin,  polifenol  dan  alkaloid.  Tahapan  pengujian  diperlukan  untuk membuktikan  adanya  aktivitas  antihiperglikemia  pada  ekstrak  etanol,  fraksi  metanol  dan fraksi  n-heksana  daun  talas  yang  diberikan  pada  tikus  putih  jantan  setelah  diinduksi streptozotocin  dan  aloksan.  Metode  penelitian  eksperimental  menggunakan  55  ekor  tikus putih  jantan  dengan  9  perlakuan  yaitu,  kelompok  1  normal,  kelompok  2  kontrol  negatif CMC-Na, kelompok 3 kontrol positif metformin 500 mg, kelompok 4 ekstrak etanol dosis 200  mg/Kgbb  (induksi  streptozotocin),  kelompok  5  fraksi  metanol  dosis  38,1  mg/KgBB (induksi  streptozotocin),  kelompok  6  fraksi  n-heksan  dosis  9,2  mg/KgBB  (induksi streptozotocin), kelompok 7 ekstrak etanol dosis 200 mg/Kgbb (induksi aloksan), kelompok 8 fraksi metanol dosis 38,1 mg/KgBB (induksi aloksan) dan kelompok 9 fraksi n-heksana dosis 9,2 mg/KgBB (induksi aloksan). Pengecekan kadar glukosa menggunakan glukometer Easy Touch . Hasil penelitian  menujukkan  bahwa secara statistik ekstrak etanol daun talas dengan  dosis  200  mg/KgBB  baik  diinduksi  menggunakan  aloksan  dan  streptozotocin memiliki  aktivitas  paling  baik  dalam  menurunkan  kadar  glukosa  darah  pada  tikus  putih jantan.
Kata kunci : Antihiperglikemia; daun talas; ekstrak; fraksi

## Antihyperglycemic Activity Test of Ethanol Extract, Methanol and n- Hexane Fraction of Taro Leaves (Colocasia esculenta (L) Schott)

## ABSTRACT
Taro  leaf  ( Colocasia  esculenta (L)  Schott)  is  a  plant  from  the  Araceae  family  that  has antihyperglycemic  activity  because  it  contains  secondary  metabolites  such  as  flavonoids, tannins,  saponins,  polyphenols  and  alkaloids.  This  study  was  aimed  to  determine  the antihyperglycemic  activity  of  ethanol  extract,  methanol  fraction  and  n-hexane  fraction  of taro  leaves  given  to  male  white  rats  after  streptozotocin  and  alloxan  were  induced.  The experimental research method used 55 male white rats with 6 treatments. Group 1 normal, group  2  negative  control  CMC-Na,  group  3  positive  control  metformin  500  mg,  group  4 ethanol  extract  at  a  dose  of  200  mg/Kgbb  (streptozotocin  induction),  group  5  methanol fraction at a dose of 38, 1 mg/KgBW (streptozotocin induction), group 6 n-hexane fraction at a dose of 9,2 mg/KgBW (streptozotocin induction), group 7 ethanol extract at a dose of 200 mg/Kgbb (aloxan induction), group 8 methanol fraction at a dose of 38, 1 mg/KgBW (aloxan  induction)  and  group  9  n-hexane  fraction  at  a  dose  of  9,2  mg/KgBW  (aloxan induction).  Glucose  levels  were  checked  using  an  Easy  Touch  glucometer.  The  results showed that statistically the ethanol extract of taro leaves at a dose of 200 mg/KgBW was the most effective in lowering blood glucose in male white rats.
Keywords: Antihyperglycemia; extract; fraction; taro leaves
(Article History:  Received 22-11-2022; Accepted 28-02-2023; Published 13-04-2023)

## PENDAHULUAN
Diabetes  melitus  (DM)  merupakan  penyakit  metabolik  kronis  akibat  adanya gangguan sekresi insulin, sensitivitas insulin atau keduanya. Pada pasien diabetes melitus ditandai  dengan  adanya  hiperglikemi.  Dampak  dari  penyakit  diabetes  melitus  yaitu komplikasi  mikrovaskular,  makrovaskular  dan  neuropatik  (Sease  dan  Shealy,  2016). Berdasarkan data dari International Diabetic Federation (IDF) tahun 2019, jumlah pasien diabetes melitus di Indonesia mencapai 10,7 juta jiwa yang menduduki peringkat ke-7 dari 10 negara-negara dengan penderita penyakit diabetes melitus paling banyak di dunia (IDF, 2019).
Metformin  merupakan  obat  pilihan  pertama  untuk  penyakit  DM  tipe  II.  Obat metformin  menjadi  pilihan  lini  pertama  karena  memiliki  efektifitas  relative  baik,  efek hipogikemi  yang  rendah,  tidak  memengaruhi  peningkatan  berat  badan,  memperbaiki kardiovaskular  dan  harganya  murah.  Namun,  pada  sebagian  pasien  tidak  dapat mengkonsumsi metformin karena adanya alergi, efek samping pada gastrointestinal seperti mual dan muntah, dan kontraindikasi karena mengalami gangguan ginjal kronis, asidosis, hipoksia dan dehidrasi (Perkeni, 2019; Wang et al ., 2018).
Pengobatan  penunjang  dengan  memanfaatkan  tanaman  herbal  telah  banyak digunakan.  Salah  satu  tanaman  yang  berkhasiat  sebagai  obat  yaitu  tanaman  talas  yang termasuk dalam suku Araceae (Schoch et al ., 2020). Di beberapa negara, daun dari tanaman talas digunakan untuk sumber makanan. Daun talas memiliki kandungan senyawa flavonoid, alkaloid, fenol, glikosida, saponin, selulosa, steroid, tanin, terpenoid, mineral, quinon, serta vitamin seperti fosfor, kalium, niasin, riboflavin, tiamin, zat besi dan vitamin C (Keerthy & Joshi, 2019; Subhash et al ., 2012; Wijaya et al ., 2014). Daun talas memiliki aktivitas sebagai antimikroba,  antijamur,  antiinflamasi,  hepatoprotektif,  dan  antidiabetes  (Dutta  &  Aich, 2017;  Keerthy  &  Joshi,  2019;  Kumawat et  al .,  2010;  Patil  &  Ageely,  2011).  Pemberian ekstrak  etanol  daun  talas  400  mg/kg  pada  tikus  yang  diinduksi  aloksan  secara  signifikan mampu menurunkan kadar gula darah pada tikus (Kumawat et al ., 2010). Penelitian lain juga menunjukkan bahwa dengan menggunakan dosis 200 mg/kg ekstrak etanol daun talas juga memiliki  efektivitas  dalam  menurunkan  kadar  gula  darah  (Bisala et  al. ,  2019).  Aktivitas sebagai  antidiabetes  pada  daun  talas  diduga  akibat  adanya  kandungan  senyawa  alkaloid, saponin, flavonoid, tanin dan polifenol (Nasution, 2015). Senyawa alkaloid, flavonoid, tanin dan  polifenol  bersifat  polar  (Halimu et  al .,  2017;  Hendryani et  al .,  2015;  Prayoga et  al ., 2019;  Romadanu et  al .,  2014),  sedangkan  saponin  bersifat  non  polar  (Iffah et  al. ,  2018).
Untuk  mengetahui  aktivitas  antidiabetes  senyawa-senyawa  tersebut  dapat  dilakukan fraksinasi  yang  bertujuan  untuk  memisahkan  senyawa-senyawa  tersebut  berdasarkan perbedaan kepolaran dari ekstrak etanol yang belum dilakukan di penelitian sebelumnya.
Tahapan  pengujian  untuk  membuktikan  adanya  aktivitas  ekstrak  etanol,  fraksi metanol  dan  fraksi  n-heksana  daun  talas  ( Colocasia  esculenta (L.)  Schott)  dalam menurunkan kadar gula darah tikus putih jantan yang diinduksi streptozotocin dan aloksan perlu  dilakukan.  Penggunaan  pelarut  metanol  pada  proses  fraksinasi  diharapkan  mampu menarik senyawa polar seperti flavonoid, alkoloid, tanin dan polifenol. Sedangkan pelarut n-heksana diharapkan mampu menarik senyawa non polar nya yaitu saponin.

## METODE PENELITIAN

## Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan selama 2 bulan di Laboratorium Analisis Makanan Minuman dan Laboratorium Analisis Obat Fakultas Farmasi, Institut Ilmu Kesehatan Bhakti Wiyata, Kediri.

## Alat dan Bahan
Lempeng  KLT  silica  gel  60  F 254 aluminium  sheets  20  x  20  cm  (Merck),  bejana pengembang 10 x 10 cm (Camag), KLT scanner 3 dengan UV detektor (Camag), Linomat 5 (Camag), winCATS software versi 1.4.8.2012 (Camag), Glukometer dan Glukotest strip test (Easy Touch), Standar kuersetin (Sigma Aldrich), simplisia daun daun talas (Colocasia esculenta) (Materia  Medika,  Malang) , aloksan  (Sigma  Aldrich),  streptozotocin  (Sigma Alfrich), tablet metformin 500 mg (Hexapharm Jaya), etanol 70% p.a (Laboratorindo Jaya Pekasa),  aquades  (Dee  One  Lab,  Surabaya),  etil  asetat  p.a  (PT.SmartLab,Indonesia),  n- Heksan p.a (PT.Smart-Lab Indonesia), HCl (Laboratorindo Jaya Pekasa), NaCl (PT.Smart- Lab, Indonesia), FeCl3 (Merck, Germany), H2SO4 ( Merck, Germany), asam asetat (Merck Germany), hewan coba tikus putih jantan ( Rattus novergicus ).

## Prosedur Penelitian

## Determinasi Tanaman
Determinasi tanaman bertujuan untuk mengetahui kebenaran dari tanaman yang akan digunakan  sebagai  bahan  uji.  Determinasi  tanaman  dilakukan  di  MMI  (Materia  Medika Indonesia) kota Batu Jawa Timur.

## Penetapan Kadar Air
Penetapan kadar air pada simplisia daun talas dapat dilakukan dengan metode gravimetri. Cawan dipanaskan pada suhu 105ºC selama 30 menit setelah itu dilakukan penimbangan cawan kosong. Sebanyak 1 gram serbuk simplisia daun talas dimasukkan ke dalam cawan yang telah dikeringkan, kemudian cawan dan s ampel dikeringkan pada suhu 105ºC hingga diperoleh bobot tetap. Syarat mutu kadar air dari simplisia tidak lebih dari 10% (Depkes RI, 2020).

## Pembuatan Simplisia Daun Talas
Daun  talas  dikumpulkan  dan  disortasi  basah  kemudian  dicuci  dengan air  mengalir untuk menghilangkan kotoran yang melekat. Setelah itu ditiriskan dan dijemur dibawah sinar matahari  selama satu  hari  kemudian  ditimbang  berat basah.  Untuk  mempercepat pengeringan dimasukkan kedalam lemari pengering dengan suhu 40-50°C. Simplisia yang kering kemudian disortasi kering ditimbang kembali dan diperoleh berat simplisia. Setelah dilakukan  penimbangan  simplisia  dihaluskan  dengan  menggunakan  blender  untuk menghasilkan  serbuk  simplisia.  Serbuk  simplisia  yang  sudah  jadi  disimpan  dalam plastik untuk mencegah lembab dan pengotoran lainnya sebelum di ekstraksi.

## Pembuatan Ekstrak Daun Talas
Pembuatan  ekstrak  etanol  daun  talas  ( Colocasia  esculenta (L.)  Schott)  dilakukan dengan  metode  maserasi. Proses  maserasi  dilakukan  dengan perbandingan  1:10 menggunakan pelarut etanol 70% selama 5 hari. Ekstrak kemudian disaring menggunakan corong  buchner.  Dilakukan  remaserasi  kemudian  filtrat  dikumpulkan  dan  dimasukkan kedalam waterbath pada suhu 50ºC untuk menguapkan pelarut etanol yang terdapat dalam filtrat sehingga didapatkan ektrak kental.

## Uji Bebas Etanol
Pengujian bebas etanol dilakukan dengan cara dilarutkan ekstrak dengan H 2 SO 4 dalam tabung reaksi kemudian ditambahkan dengan asam asetat dan ditutup menggunakan kapas, tabung reaksi dipanaskan hingga mendidih kemudian diidentifikasi bau ester pada kapas, apabila tidak tercium bau ester maka ekstrak tersebut tidak mengandung etanol (Kemenkes RI, 2017).

## Pembuatan Fraksi Metanol dan n-Heksan
Ektrak etanol daun talas dilarutkan dengan metanol dan aquadest dengan perbandingan 8:2  dengan  volume  100  ml.  Ekstrak  yang  telah  dilarutkan  dengan  metanol  dan  aquadest dimasukkan kedalam corong pisah dan ditambahkan 100 ml n–heksan kemudian di fraksinasi. Lapisan  n-heksan  dan  lapisan  metanol  dipisahkan  kemudian  ditambahkan  n-heksan  baru  dan dilakukan pengulangan  hingga  berwarna jernih.  Filtrat  hasil  fraksinasi  diuapkan menggunakan waterbath pada suhu 50ºC.

## Uji Skrining Fitokimia Ekstrak Daun Talas
Skrining  fitokimia  merupakan  tahap  awal  identifikasi  senyawa  metabolit  sekunder. Skrining fitokimia dilakukan pada senyawa alkaloid, saponin, tanin, flavonoid dan polifenol yang diduga memiliki aktivitas antihiperglikemia.

## Uji Alkaloid
Sampel ditimbang sebanyak 0,5 gram kemudian dimasukkan kedalam tabung reaksi, dilarutkan  dengan  1  ml  HCl  2N  dan  9  ml  air,  dibagi  menjadi  3  bagian,  dapat  dikatakan hasilnya  positif  mengandung  alkaloid  apabila  ditambahkan  dengan  pereaksi  mayer  akan membentuk  endapan  putih  (putih  kekuningan),  dan  jika  ditambahkan  dengan  pereaksi wanger  akan  menghasilkan  endapan  coklat  dan  jika  ditambahkan  dengan  pereaksi dragendrof akan menghasilkan endapan merah jingga (Adhayanti et al ., 2018).

## Uji Saponin
Sampel  ditimbang  0,5  gram  kemudian  dimasukkan  kedalam  tabung  reaksi, ditambahkan 10 ml air panas dan dikocok selama 10 menit, hingga terbentuk busa atau lebih kemudian  ditetesi  dengan  HCl  2N,  apabila  buih  tidak  hilang  dengan adanya  penambahan HCl 2N maka ekstraksi tersebut positif mengandung saponin (Adhayanti et al ., 2018).

## Uji Tanin
Sampel dimasukkan kedalam tabung reaksi, ditambahkan 10 ml air panas kemudian dikocok, ditambahkan 20 ml NaCl 10% dan disaring. Filtrat yang dihasilkan ditambahkan FeCl3  dan  apabila  terjadi  perubahan  warna  menjadi  biru  tua  atau  hitam  maka  positif mengandung tanin (Adhayanti et al ., 2018).

## Uji Flavonoid
Sampel  ditimbang  sebanyak  0,5  gram  kemudian  ditambahkan  dengan  etanol, ditambahkan 5-6 tetes HCl pekat apabila menghasilkan warna merah berarti menunjukkan adanya  flavonoid  dan  ada  tidaknya  senyawa  flavon  dapat  ditandai  dengan  pembentukan warna orange (Adhayanti et al ., 2018).

## Uji Polifenol
Larutan sampel uji sebanyak 1 ml direaksikan dengan larutan besi (III) klorida 10%, apabila terjadi warna biru tua, biru kehitaman atau biru kehijauan maka menunjukkan adanya senyawa polifenol (Adhayanti et al ., 2018).

## Uji Steroid dan Triterpenoid
Sampel ditambahkan kloroform, asam asetat anhidrat dan asam sulfat pekat. Hasil positif terbentuk warna jingga/ungu untuk triterpenoid dan warna hijau untuk steroid (Adhayanti et al. , 2018).

## Penentuan Dosis
Dosis  Metformin  dihitung  dari dosis  lazim  yang dikonversikan ke dalam  tikus.  Faktor konversi dengan BB 70 kg ke tikus dengan BB 200 g adalah 0,018. Dosis terapi metformin untuk tikus adalah 45mg/KgBB. Dosis ekstrak etanol daun talas berdasarkan literatur dosis yang efektif untuk  menurunkan  kadar  gula  darah yaitu  200mg/KgBB.  Dosis  fraksi  yaitu  dari  persen  (%) rendemen fraksi dibagi total persen rendemen fraksi dikalikan dosis efektif ekstrak etanol daun talas (Reagan‐Shaw et al ., 2008).

## Persiapan Hewan Uji
Tikus ditimbang dan diadaptasikan terlebih dahulu dengan lingkungan selama 1 minggu dan dikandangkan dengan suhu normal serta diberi makan pellet BR II. Hewan uji dibagi menjadi 9 kelompok terdiri dari kelompok 1 kontrol normal yaitu tidak ada perlakuan terhadap hewan uji, kelompok  2  kontrol positif  yaitu  diberi metformin dengan dosis  9 mg/200 kgBB, kelompok  3 kontrol  negatif  yaitu  diberi  CMC  Na 0,5%,  kelompok  4  diberi  ekstrak  etanol  (induksi streptozotocin), kelompok  5  diberi  fraksi  metanol  (induksi  streptozotocin),  kelompok  6  diberi fraksi n  –  heksan (induksi streptozotocin),  kelompok  7 diberi ekstrak etanol (induksi aloksan), kelompok 8 diberi fraksi metanol (induksi aloksan), kelompok 9 diberi fraksi n – heksan (induksi aloksan).  Perlakuan  selanjutnya  hewan  uji  dilakukan  pengukuran  kadar  glukosa  awal  untuk memastikan semua tikus memiliki kadar glukosa yag normal sebelum diberikan perlakuan. Setelah diadaptasikan tikus diukur kadar glukosa hari pertama (T0), kemudian 3 kelompok perlakuan tikus diinduksi streptozotocin dan 3 kelompok perlakuan lain di induksi aloksan dengan dosis masing- masing 30mg/kg BB dan 125 mg/kgBB secara intraperitoneal untuk merusak sel beta pankreas agar kadar gula darah tikus meningkat (Tendean et al ., 2017).

## Pengukuran Kadar Glukosa Darah
Pengukuran kadar  glukosa darah pada tikus putih menggunakan alat Easy  Touch yang sebelumnya telah dikalibrasi. Pengambilan darah dilakukan dengan memotong ujung ekor tikus sehingga mengeluarkan darah. Darah diteteskan pada strip test kemudian akan terlihat hasil pada alat pengukur. Pengukuran kadar glukosa darah dilakukan sebanyak 3 kali yaitu pada hari ke 1 sebelum diinduksi dengan aloksan (T0A) dan streptozotocin (T0B), hari ke 3 setelah diinduksi aloksan (T1A) dan hari ke 7 setelah diinduksi dengan streptozotocin (T1B), hari ke 10 setelah diinduksi aloksan (T2A) dan hari ke 14 setelah diinduksi streptozotocin (T2B) (Samsuri et al ., 2020).

## Pengolahan dan Analisis Data
Nilai penurunan kadar glukosa darah tiap kelompok (n = 5) dibuat rata-rata dan disajikan dalam  bentuk  grafik.  Hasilnya diuji  secara  statistik  dengan  menggunakan  one-way  ANOVA dengan taraf kepercayaan 95%.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Determinasi Tanaman
Determinasi tanaman daun talas ( Colocasia esculenta (L.) Schott) dilakukan di UPT Laboratorium Herbal Materia Medica Batu Malang, hasil determinasi menunjukkan bahwa benar tanaman tersebut adalah tanaman talas dengan famili Araceae dan spesies Colocasia esculenta (L.) Schott. Kunci determinasi:1b-2b-3b-4b-6b-7b-9b-10b11b-12b-13b-14b-15b- 197b-208a-209a:Araceae-1b-2b-3a-3:C. esculentum .

## Uji Kadar Air
Pada  penetapan  kadar  air  pada  simplisia  sangat  penting  karena berkaitan  dengan banyaknya  jumlah  air yang  terkandung  di  dalam  simplisia.  Kadar  air  yang  tinggi  pada simplisia apabila melebihi dari persyaratan mutu simplisia dapat menyebabkan terjadinya pertumbuhan bakteri dan jamur pada simplisia sehingga dapat menyebabkan senyawa yang terkandung di dalam simpisia menjadi rusak. Syarat mutu kadar air dari simplisia yaitu tidak lebih dari 10% (Departemen Kesehatan RI, 2000).  Hasil uji rata-rata kadar air pada simplisia daun talas adalah 8% sehingga masih memenuhi syarat mutu.

## Uji Bebas Etanol
Uji bebas etanol dilakukan untuk memastikan bahwa ekstrak yang dihasilkan tidak mengandung  etanol  lagi  sehingga  didapatkan  ekstrak  yang  murni tanpa  ada  kontaminasi. Hasil pengujian diperoleh bahwa ekstrak daun talas tidak tercium bau ester yang khas dari etanol sehingga dapat disimpulkan bahwa ekstrak telah bebas dari etanol.

## Pembuatan Fraksi Metanol dan Fraksi n-Heksana
Fraksinasi  pada  ekstrak  daun  talas  bertujuan  untuk  memisahkan  komponen  - komponen  aktif  dari  ekstrak  yang  dihasilkan.  Pelarut  yang  digunakan  untuk  melarutkan ekstrak  saat  proses  fraksinasi  adalah  metanol:air  dengan  perbandingan  8:2.  Alasan penambahan  air  sebagai  pelarut  saat  fraksinasi  yaitu  ekstrak  tidak  dapat  larut  sempurna dalam  metanol.  Flavonoid  diduga  merupakan  senyawa  yang  sangat berperan  sebagai antidiabetes  karena  mampu  memberikan  perbaikan  kondisi  penderita  diabetes  melalui mekanisme kerja insulinomimetic dan antihiperglikemik (Candra et al. , 2012). Pada proses fraksinasi  ini,  flavonoid  akan  tertarik  pada  fraksi  yang  polar  yaitu  fraksi  metanol  karena flavonoid  memiliki  sifat  polar.  Selain  flavonoid,  senyawa  lain  seperti  alkaloid,  tanin  dan polifenol yang diduga memiliki aktivitas sebagai antidiabetes juga akan tertarik pada fase polar. Pelarut n-heksana dalam proses fraksinasi ini digunakan untuk menarik senyawa non- polar yang diduga memiliki aktivitas antidiabetes pada daun talas yaitu senyawa saponin. Pada penelitian ini tidak digunakan pelarut semipolar karena senyawa yang diduga memiliki aktivitas sebagai antidiabetes pada daun talas hanya bersifat polar dan non polar.

## Skrining Fitokimia
Dari  penelitian  ini  dilakukan  skrining  fitokimia  dan  didapatkan  hasil bahwa  daun talas memiliki kandungan senyawa metabolit sekunder alkaloid, flavonoid, tanin, saponin dan polifenol. Data pengujian disajikan pada Tabel 1.

## Hasil Uji Aktivitas Antidiabetes
Hasil pengujian aktivitas antidiabetes ekstrak dan fraksi daun talas pada tikus putih jantan  yang  diinduksi  aloksan  dan  steptozotocin  disajikan  pada  Tabel  2  dan  Tabel  3. Pengukuran kadar glukosa darah pada kelompok kontrol negatif yang diberikan CMC – Na 0,5%  dibandingkan  dengan  kelompok  perlakuan  lainnya  menunjukkan  adanya  sedikit penurunan  yaitu  168,6  ±  14,57.  Hal  ini  dikarenakan,  suspensi  CMC-Na  0,5%  hanya berfungsi sebagai pembanding yang tidak memberikan efek terhadap laju penurunan kadar glukosa darah (Soriton et al ., 2014).
Tabel 1. Skrining fitokimia ekstrak etanol, fraksi metanol dan fraksi n-heksana daun talas
Kandungan Kimia Hasil (+) literature Hasil Uji Ekstrak Etanol Fraksi Metanol Fraksi n- Heksana Alkaloid Terbentuk endapan menggumpal putih/kuning Endapan kuning + + - Flavonoid Terbentuknya warna kuning jingga atau merah jingga Endapan kuning jingga + + - Tanin Terbentuk warna biru tua atau hitam Terbentuk warna hitam + + - Saponin Terbentuk buih yang stabil tidak kurang dari 1-10 cm Terbentuk buih yang stabil + - + Polifenol Terbentuk warna biru tua, biru kehitaman atau biru kehijauan Terbentuk biru kehitaman + + -
Kelompok kontrol positif diberikan metformin 9 mg dengan konversi pemberian ke tikus  putih  sebesar  200  gram/BB.  Metformin  digunakan  sebagai  kontrol  positif  karena mampu  memberikan  perbaikan  jaringan  perifer  terhadap  insulin  tanpa  mempengaruhi sekresi insulin (Nangoy et al ., 2019). Metformin diberikan secara oral dalam bentuk suspensi dikarenakan  metformin  tidak  larut  dalam  air  sehingga  diberikan  dalam  bentuk  suspense menggunakan  agen  pensuspensi  CMC-Na.  Hasil  kontrol  positif  metformin  menunjukan terjadi  penurunan  kadar  glukosa  darah  paling  besar.  Kontrol  positif  berfungsi  sebagai pembanding untuk melihat pengaruh antidiabetika oral terhadap sampel yang akan diteliti
Tabel 2. Penurunan kadar glukosa darah pada tikus putih jantan yang diinduksi aloksan
Perlakuan Kadar Glukosa Darah (mg/dl) Selisih penurunan (T2-T1) T0A T1A T2A CMC - Na 0,5% 83,6 ± 15,24 175,6 ± 15,89 168,6 ± 14,57 7,0 ± 6,96 Metformin 93,2 ± 12,07 146,4 ± 27,30 94,8 ± 16,75 51,6 ± 24,80 Ekstrak Etanol 79,4 ± 16,47 184,4 ± 35,43 135,4 ± 24,61 49,0 ±23,37 a Fraksi Metanol 92,2 ± 13,04 205,2 ± 71,94 172,4 ± 81,28 32.8 ±15,57 a Fraksi n-Heksan 89,6 ± 0,95 158,8 ± 26,44 142,2 ± 24,23 16,2 ± 12,46 b
a : tidak berbeda signifikan dengan kontrol positif; b : berbeda signifikan dengan kontrol positif
Tabel 3. Penurunan kadar glukosa darah pada tikus putih jantan yang diinduksi streptozotocin
Perlakuan Kadar Glukosa Darah (mg/dl) Selisih penurunan (T2-T1) T0A T1A T2A CMC - Na 0,5% 104,0 ± 31 118,2 ± 100,68 171,4 ± 85,03 16,8 ± 16,45 Metformin 115,0 ± 18,10 199,2 ± 37,38 141,4 ± 26,64 59,8 ± 16,46 Ekstrak Etanol 97,2 ± 18,31 205,6 ± 64,92 150,2 ± 67,66 55,4 ± 14,55 a Fraksi Metanol 91,0 ± 19,73 180,2 ± 31,79 127,6 ± 25,98 49,0 ±8,86 a Fraksi n-Heksan 105,0 ± 6,89 164,6 ± 18,82 135,0 ± 21,00 28,88 ± 28,00 b
a : tidak berbeda signifikan dengan kontrol positif; b : berbeda signifikan dengan kontrol positif
Kelompok perlakuan dosis ekstrak daun talas yang digunakan yaitu 200 mg/KgBB dan dosis fraksi metanol daun talas 190,8 mg/KgBB. Hasil pengukuran kadar glukosa darah dilihat  dari  selisih  penurunan  menunjukkan  bahwa  metformin  memiliki  aktivitas menurunkan  glukosa  paling  tinggi,  kemudian  ekstrak  etanol,  fraksi  metanol  dan  terakhir fraksi n-heksan.
Dari  Tabel  2  dan  Tabel  3  dapat  diketahui  bahwa  terdapat  kenaikan  kadar  glukosa darah setelah dilakukan induksi aloksan dan streptozotocin pada tikus putih (T1) dan semua perlakuan mampu menurunkan kadar glukosa darah pada tikus (T2), sehingga ekstrak etanol, fraksi methanol dan fraksi n-heksan memiliki efektivitas menurunkan kadar glukosa darah pada tikus yang diinduksi aloksan dan streptozotocin. Uji One Way Anova dan LSD ( Least Signifikan  Difference )  digunakan  untuk  membuktikan  ada  atau  tidaknya  perbedaan penurunan kadar glukosa darah kelompok perlakuan. Diperoleh nilai signifikan < 0,05 yang menunjukan terdapat perbedaan signifikan pada semua kelompok perlakuan.
Uji  LSD  dilakukan  untuk  melihat  adanya  perbedaan  pada  setiap  kelompok perlakuan. Dari hasil pengujian diketahui bahwa kelompok perlakuan ekstrak etanol daun talas 200 mg/KgBB tidak berbeda signifikan dengan kontrol positif (metformin) karena nilai sig > 0,05. Sehingga dapat disimpulkan bahwa ekstrak etanol daun talas dosis 200 mg/KgBB dapat  menurunkan  kadar  glukosa  darah.  Hal  ini  sejalan  dengan  penelitian  Bisala et  al ., (2019)  yang  menunjukkan  bahwa  ekstrak  daun  talas  dengan  dosis  200  mg/KgBB  efektif menurunkan  kadar  glukosa  darah  pada  tikus  yang  disebabkan  karena  adanya  metabolit sekunder seperti alkaloid, flavonoid, saponin, tanin dan polifenol.
Pada penelitian ini dilanjutkan ke tahap fraksinasi karena pada penelitian sebelumnya belum  ada  peneliti  yang  melakukan  hingga  tahap  fraksinasi.  Fraksi  yang  digunakan  pada pelitian ini yaitu fraksi metanol dan fraksi n – heksana. Kelompok perlakuan fraksi metanol daun  talas  190,8  mg/KgBB  tidak  berbeda  signifikan  dengan  kontrol  positif  (metformin) karena  nilai  sig  >  0,05  baik  pada  mencit  yang  diinduksi  aloksan  maupun  streptozotocin. Sehingga dapat disimpulkan bahwa fraksi metanol daun talas dosis 190,8 mg/KgBB dapat menurunkan  kadar  glukosa  darah.  Kelompok  perlakuan  fraksi  n  -  heksan  daun  talas  9,23 mg/KgBB berbeda signifikan dengan kontrol positif (metformin) karena nilai sig < 0,05 baik pada  mencit  yang  diinduksi  aloksan  maupun  streptozotocin.  Sehingga  dapat  disimpulkan bahwa  fraksi  n  -  heksan  daun  talas  dosis  9,23  mg/KgBB  secara  statistik  kurang  efektif menurunkan kadar glukosa darah.

## KESIMPULAN
Ekstrak  etanol,  fraksi  metanol  dan  fraksi  n  -  heksan  daun  talas  memiliki  aktivitas menurunkan  kadar  glukosa  dalam  darah  tikus  yang  diinduksi  aloksan  dan  streptozotocin. Efektivitas dalam menurunkan gula darah paling baik secara berurutan adalah ekstrak etanol, fraksi metanol, dan fraksi n-heksan.

## DAFTAR PUSTAKA
Adhayanti,  I.,  Abdullah,  T.,  &  Romantika,  R.  2018.  Uji  Kandungan  Total  Polifenol  Dan Flavonoid Ekstrak Etil Asetat Kulit Pisang Raja ( Musa paradisiaca var. sapientum). Media Farmasi , 14(1), 146–152. https://doi.org/10.32382/mf.v14i1.84
Bisala, F.K., Ya’la, U. F., & Dermiati, T.  2019. Uji Efek Antidiabetes Ekstrak Etanol Daun Talas Pada Tikus Putih Jantan Hiperkolesterolemia-Diabetes. Farmakologika: Jurnal Farmasi , 16(1), 13–24.
Candra, S., D.K, K., & Widodo, Y.   2012. Pengaruh Pemberian Ekstrak Buah Belimbing Wuluh ( Averrhoa blimbi L.) Terhadap Penurunan Kadar Glukosa Darah Tikus Wistar Yang dinduksi Aloksan. Jurnal Kedokteran Diponegoro , 7(4), 1744-1754.
Departemen  Kesehatan  RI.    2000.  Parameter  Standar  Umum  Ekstrak  Tanaman  Obat.  In
Departemen Kesehatan RI (Vol. 1, 10–11).
Depkes  RI.  2020.  Farmakope  Indonesia  edisi  VI.  In Departemen  Kesehatan  Republik Indonesia .
Dutta, S., & Aich, B.  2017.  A Study of Antibacterial and Antifungal Activity of the Leaves of Colocasia Esculenta Linn. International Journal of Pharmaceutical Sciences and Research , 8 (3), 1184–1187. https://doi.org/10.13040/IJPSR.0975-8232.8(3).1184-87 Halimu,  R.B.,  Sulistijowati,  S.R.,  &  Mile,  L.    2017.  Identifikasi  kandungan  tanin  pada Sonneratia alba. Jurnal Ilmiah Perikanan dan Kelautan , 5 (4), 93–97.
Hendryani,  R.,  Lutfi,  M.,  &  Hawa,  L.C.    2015.  Ekstraksi  Antioksidan  Daun  Sirih  Merah Kering  ( Piper  crotatum )  Dengan  Metode  Pra-Perlakuan  Ultrasonic  Assisted Extraction (Kajian Perbandingan Jenis Pelarut Dan Lama Ekstraksi). Jurnal Bioproses Komoditas Tropis , 3 (2), 33–38. https://jbkt.ub.ac.id/index.php/jbkt/article/view/178. IDF.  2019.  IDF  Diabetes  Atlas.  In The  Lancet .  https://doi.org/10.1016/S0140- 6736(55)92135-8.
Iffah, A., Rani, C., & Samawi, M.  2018. Skrining Metabolit Sekunder pada Sirip Ekor Hiu Carcharhinus melanopterus . Prosiding Simposium Nasional Kelautan dan Perikanan, Universitas Hasanudin Makasar , 5, 335–342.
Keerthy, S.P., & Joshi, K.H.  2019. The pharmacological importance of Colocasia esculenta Linn : A review. Journal of Pharmacognosy and Phytochemistry , 8 (6), 1945–1948.
Kemenkes  RI.    2017.  Farmakope  Herbal  Indonesia.  In Kementerian  Kesehatan  RI . https://doi.org/10.1201/b12934-13.
Kumawat,  N.S.,  Chaudhari,  S.P.,  Wani,  N.S.,  Deshmukh,  T.A.,  &  Patil,  V.R.  2010. Antidiabetic  activity  of  ethanol  extract  of Colocasia  esculenta leaves  in  alloxan induced diabetic rats. International Journal of PharmTech Research , 2 (2), 1246–1249. Nangoy,  B.N.,  De  Queljoe,  E.,  &  Yudistira,  A.  2019.    Uji  Aktivitas  Antidiabetes  Dari Ekstrak  Daun  Sesewanua  ( Clerodendron  squamatum Vahl.)  Terhadap  Tikus  Putih Jantan  Galur  Wistar  ( Rattus  norvegicus L.). Pharmacon , 8 (4),  774-780. https://doi.org/10.35799/pha.8.2019.29353.
Nasution, N. 2015. Uji aktivitas ekstrak etanol umbi talas jepang (Colocasia esculenta (L.) Schott  var.  antiquorum)  T erhadap  Penyembuhan  Luka  Terbuka  pada  Tikus  Putih (Rattus Norvegicus) Jantan Galur Sprague Dawley [Skripsi].  Fakultas Kedokteran dan Kesehatan, UIN Syarif Hidayatullah, Jakarta.
Patil,  B.R.,  &  Ageely,  H.M.    2011.  Antihepatotoxic  Activity  of  Coloasia  Esculenta  Leaf Juice. International Journal of Advanced Biotechnology and Research , 2 (2), 296–304. Perkeni.  2019. Pedoman Pengelolaan dan Pencegahan Diabetes Melitus Tipe 2 Dewasa di Indonesia. PB. Perkeni, Jakarta.  https://doi.org/10.7748/NM.2020.E1928
Prayoga, D.G.E., Nocianitri, K.A., & Puspawati, N.N. 2019.  Identifikasi Senyawa Fitokimia dan Aktivitas Antioksidan Ekstrak Kasar Daun Pepe ( Gymnema reticulatum Br.) pada Berbagai Jenis Pelarut. Jurnal Ilmu Dan Teknologi Pangan , 8 (2), 111–121. Reagan‐Shaw, S., Nihal, M., & Ahmad, N.  2008. Dose translation from animal to human studies revisited. The FASEB Journal , 22 (3), 659–661. https://doi.org/10.1096/fj.07- 9574lsf.
Romadanu,  Rachmawati,  S.H.,  &  Lestari,  S.D.    2014.  Pengujian  Aktivitas  Antioksidan Ekstrak Daun Lotus (Nelumbo nucifera) . Jurnal Fishtech , 3 (1), 1–7.
Samsuri, D.A., Samsuri, S., & Kendran, A.A.S.   2020. Kadar Glukosa Darah Tikus Putih ( Rattus  norvegicus )  yang  Diberikan  Ragi  Tape. Indonesia  Medicus  Veterinus , 9 (4), 531–539. https://doi.org/10.19087/imv.2020.9.4.531.
Schoch, C.L., Ciufo, S., Domrachev, M., Hotton, C.L., Kannan, S., Khovanskaya, R., Leipe, D., McVeigh, R., O’Neill, K., Robbertse, B., Sharma, S., Soussov, V., Sullivan, J.P., Sun, L., Turner, S., & Karsch-Mizrachi, I.  2020. NCBI Taxonomy: A comprehensive update on curation, resources and tools. Database , 2020 (2), 1–21. https://doi.org/10.1093/database/baaa062.
Sease, J., & Shealy, K.  2016. Pharmacotheraphy principles & practice 4 th edition, (pp 651– 678). McGraw-Hill Education. Ney York.
Soriton,  H.,  Yamlean,  P.V.Y.,  &  Lolo, W.A.    2014.  Uji  Efektivitas  Ekstrak  Etanol  Daun Tapak Dara ( Catharantus roseus (L. ) G.Don) Terhadap Penurunan Kadar Gula Darah Tikus  Putih  Jantan  Galur  Wistar  ( Rattus  Norvegicus L.)  yang  Diinduksi  Sukrosa.
Pharmacon , 3 (3), 162–169.
Subhash,  C.,  Sarla,  S.,  &  Jaybardhan,  S.    2012.  Phytochemical  Screening  of  Garhwal Himalaya Wild Edible Tuber Colocasia esculenta. International Research Journal of Pharmacy , 3 (3), 181–186.
Tendean, I.K., Silintowe Kenta, Y., & Mulyani, S.   2017. Uji Ekstrak Etanol Daun Talas ( Colocasia esculenta (L.) Schott.) Terhadap Gambaran Histopatologi Pankreas Tikus Putih  Jantan  ( Rattus  norvegicus )  Hiperkolesterolemia  Diabetes. Farmakologika: Jurnal Farmasi , 14(2), 138–148.
Wang,  C.Y.,  Neil,  D.,  &  Home,  P.    2018.  2020  vision  –  An  overview  of  prospects  for diabetes  management  and  prevention  in  the  next  decade. Diabetes  Research  and Clinical Practice , 143 (2018), 101–112. https://doi.org/10.1016/j.diabres.2018.06.007. Wijaya, B.A., Citraningtyas, G., & Wehantouw, F.  2014. Potensi Ekstrak Etanol Tangkai Daun  Talas  ( Colocasia  esculenta ( L. ))  Sebagai  Alternatif  Obat  Luka  Pada  Kelinci ( Oryctolagus cuniculus ). Pharmacon , 3 (3), 211–219.