## AKTIVITAS ANTIMIKROBA EKSTRAK DAN FRAKSI ALGA
( Halimeda opuntia ) TERHADAP Escherichia coli, Staphylococcus aureus dan Candida albicans
Shinta Jolanda 1) , Defny S. Wewengkang 1) , Imam Jayanto 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
Algae Halimeda opuntia is one of the green algae type that contains bioactive compounds which can  be  used  for  the  treatment  of  various  diseases.  This  study  aimed  to  determine  the  antimicrobial activity  of  extracts  and  fractions  of  algae  Halimeda  opuntia  obtained  from  the  Lembeh  Bitung  Strait against Escherichia coli, Staphylococcus aureus and Candida albicans. The samples were extracted by maceration using ethanol solvent and fractionation using methanol, chloroform, and n-hexane solvents. Antimicrobial activity was carried out by the agar diffusion method of paper discs. The results showed that  ethanol  extract  was  able  to  inhibit  the  growth  of  Staphylococcus  aureus  and  Escherichia  coli bacteria  in  the  medium  inhibitory  category.  While  the  methanol  and  chloroform  fractions  were  only able to inhibit the growth of Staphylococcus aureus bacteria. The extract and all fractions did not show activity inhibiting the growth of Candida albicans fungi.
Keywords :  Algae,  Halimeda  opuntia,  antimicrobial  activity,  Escherichia  coli,  Staphylococcus  aureus, Candida albicans

## ABSTRAK
Alga Halimeda opuntia merupakan salah satu jenis alga hijau yang memiliki kandungan senyawa bioaktif  yang  dapat  digunakan  untuk  pengobatan  berbagai  penyakit.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui adanya aktivitas antimikroba dari ekstrak dan fraksi alga Halimeda opuntia yang diperoleh dari  Selat  Lembeh  Bitung  terhadap Escherichia  coli,  Staphylococcus  aureus dan Candida  albicans . Sampel diekstraksi dengan metode maserasi menggunakan pelarut etanol dan fraksinasi menggunakan pelarut metanol, kloroform, dan n-heksan. Aktivitas antimikroba dilakukan dengan  metode difusi agar cakram kertas. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak etanol, mampu menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli dengan kategori daya hambat sedang. Sedangkan fraksi  metanol  dan  fraksi  kloroform  hanya  mampu  menghambat  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus aureus. Ekstrak  dan  semua  fraksi  tidak  menunjukkan  aktivitas  menghambat  pertumbuhan  jamur Candida albicans .
Kata kunci : Alga, Halimeda opuntia , aktivitas antimikroba, Escherichia coli, Staphylococcus aureus , Candida albicans

## PENDAHULUAN
Indonesia  sebagai  negara  yang  kaya dengan  keanekaragaman  hayati  memiliki berbagai  macam  tanaman  laut  yang  dapat dimanfaatkan sebagai obat alternatif.
Berbagai  penelitian  menunjukkan  bahwa biota  laut  memiliki  potensi  yang  sangat besar dalam menghasilkan senyawa- senyawa aktif yang dapat digunakan sebagai bahan  baku  obat.  Sejak  tahun  1980-an, perhatian dunia pengobatan mulai terarah ke biota laut yang diketahui dapat menghasilkan senyawa aktif (Ismet, 2007).
Salah  satu  biota  laut  yang  berpotensi untuk  menjadi  bahan  baku  obat  ialah  Alga. Alga  secara  luas  digunakan  sebagai  bahan makanan, bahan bagi industri kosmetika dan juga  digunakan  untuk  pengobatan  berbagai penyakit. Pemanfaatan alga untuk pengobatan  disebabkan  karena  alga  kaya akan senyawa bioaktif yang dapat digunakan untuk  pengobatan  berbagai  penyakit  (Basir et al , 2017).
Penelitian telah banyak dilakukan untuk mengkaji  senyawa  bioaktif  berbagai  jenis alga, salah satunya alga hijau yang memiliki aktivitas  antimikroba  (Mishra et  al ,  2016).
Hal  ini  disebabkan  karena  di  dalam  alga hijau  terdapat  komponen  bioaktif  yang terdiri  dari  fenol,  alkaloid  dan  terpen  yang memiliki aktivitas antimikroba dan antioksidan  (Perez et  al ,  2016).  Salah  satu alga hijau yang memiliki potensi antimikroba  ialah  alga  dengan genus Halimeda dengan jenis Halimeda opuntia . Halimeda opuntia sendiri sering ditemukan  di  daerah  tropis  (Basir et  al , 2017)  dimana  Selat  Lembeh  Bitung  berada dalam kawasan tersebut.  Melihat  komponen bioaktifnya  serta  lokasi  penyebarannya
maka  peneliti  tertarik  untuk  melakukan penelitian  aktivitas  antimikroba  dari  alga Halimeda  opuntia yang  terdapat  di  Selat Lembeh Bitung.

## METODE PENELITIAN Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  yaitu  masker,  sarung  tangan,  gunting, pisau,  tabung  oksigen,  snorkel,  fins, zipper lock  bag ,  botol  600  ml,  talenan, cool  box , kamera underwater ,  erlenmeyer  (Pyrex), corong,  oven , timbangan  analitik,  spatula, corong  pisah,  gelas  ukur,  gelas  kimia (Pyrex),  cawan  petri,  autoklaf,  pinset, pembakar spritus, vortex mixer , micro tubes , batang  pengaduk, Laminar  air  flow, rak tabung reaksi, tabung reaksi, lemari pendingin,  inkubator,  cakram  ( paper  disc) , mikropipet, digital  caliper ,  kertas  label, spidol permanen. Bahan-bahan yang digunakan  yaitu  alga Halimeda  opuntia , mikroba uji Staphylococcus aureus, Escherichia  coli , Candida  albicans ,  etanol, akuades,  n-heksan,  kloroform,  metanol, pepton ,  beef  extract , natrium  klorida,  agar, kloramfenikol paper disc , tissue, aluminium foil , plastic wrap , kertas saring, es batu.

## Pengambilan Sampel
Sampel  alga Halimeda  opuntia diambil dari Selat Lembeh Bitung menggunakan alat bantu  (masker,  snorkel,  fins  dan  tabung oksigen). Sampel yang diperoleh dimasukkan  ke  dalam zipper  lock  bag dan diletakkan  didalam cool  box ,  kemudian langsung dibawa ke Laboratorium Farmakognosi  dan  Fitokimia  Program  Studi Farmasi Universitas Sam Ratulangi. Sampel
difoto  dan  diberi  label  serta  nomor  sampel, untuk selanjutnya dideterminasi.

## Ekstraksi Sampel
Ekstrak alga Halimeda opuntia sebanyak  140,0  g  diekstraksi  dengan  cara maserasi.  Sampel  dibersihkan  dan  dipotong kecil-kecil  dimasukkan  ke  dalam  botol  600 ml,  kemudian  direndam  dengan  pelarut etanol  sampai  sampel  terendam  semuanya dan  dibiarkan  selama  24  jam.  Sampel  yang direndam  kemudian  disaring  menggunakan kertas  saring  menghasilkan  filtrat  1  dan debris  1.  Debris  1  kemudian  diremaserasi dengan  pelarut  etanol  sampai  terendam semuanya  dan  dibiarkan  selama  24  jam, sampel  tersebut  disaring  menggunakan kertas  saring  menghasilkan  filtrat  2  dan debris  2.  Debris  2  kemudian  diremaserasi dengan  pelarut  etanol  sampai  terendam semuanya  dan  dibiarkan  selama  24  jam, sampel  tersebut  disaring  menggunakan kertas  saring  menghasilkan  filtrat  3  dan debris  3.  Filtrat  1,  2,  dan  3  dicampur menjadi  satu  kemudian  disaring,  lalu dikeringkan  menggunakan  oven  dengan suhu  40˚C  dan  selanjutnya  ditimbang menggunakan  timbangan  analitik,  diperoleh ekstrak  etanol  sampel  sebanyak  0,42  g. Selanjutnya  ekstrak  kasar  alga Halimeda opuntia digunakan  dalam  fraksinasi  dan pengujian antimikroba.

## Fraksinasi Sampel
Sebanyak  0,25  g  ekstrak  kasar  alga Halimeda  opuntia dimasukkan  ke  dalam gelas  kimia,  kemudian  dilarutkan  dengan metanol  80%  sebanyak  100  mL.  Setelah larut,  dimasukan  kedalam  corong  pisah  dan ditambahkan pelarut n-heksan sebanyak 100
mL  setelah  itu  dikocok  dalam  corong  pisah sampai homogen. Dibiarkan sampai terbentuk  lapisan  metanol  dan  lapisan  n- heksan,  kemudian  masing-masing  lapisan ditampung  dalam  erlenmeyer  yang  berbeda. Lapisan  n-heksan  kemudian  dikeringkan menggunakan oven  dengan  suhu  40˚C,  lalu ditimbang  dan  diperoleh  fraksi  n-heksan sebanyak  0,90  g.  Selanjutnya,  lapisan metanol ditambahkan akuades sebanyak 100 mL  kemudian  dipartisi  dengan  pelarut kloroform  dengan  perbandingan  1:1  v/v dalam  corong  pisah,  setelah  itu  dikocok kembali sampai homogen. Dibiarkan sampai tebentuk  dua  lapisan  yaitu  lapisan  metanol dan  kloroform,  kemudian  masing-masing lapisan  ditampung  dalam  erlenmeyer  yang berbeda.  Lapisan  kloroform  selanjutnya dikeringkan  menggunakan oven  dengan suhu 40˚C, lalu ditimbang berat  sampel dan diperoleh fraksi kloroform sebanyak 1,20 g. Lapisan  metanol  kemudian  dikeringkan menggunakan oven  dengan  suhu  40˚C,  lalu ditimbang  dan  diperoleh  fraksi  metanol sebanyak  1,70  g.  Ketiga  fraksi  yang diperoleh  akan  digunakan  dalam  pengujian antimikroba.

## Sterilisasi Alat
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian aktivitas antimikroba ini disterilkan  terlebih  dahulu.  Alat-alat  gelas disterilkan dengan autoklaf pada suhu 121˚C selama  15  menit,  pinset  dibakar  dengan pembakaran  diatas  api  langsung  dan  media disterilkan  diautoklaf  pada  suhu  121˚C selama 15 menit (Mpila, 2012).

## Pembuatan Media Cair B1
Pepton 0,5 g, beef extract 0,3 g, natrium klorida  0,3  g  dan  akuades  sebanyak  100  ml diaduk sampai homogen kemudian disterilkan  dalam  autoklaf  pada  suhu  121˚C selama 15 menit dan setelah itu didinginkan. Setelah  dingin,  media  cair  B1  di  tutup dengan aluminium  foil (Dwijendra et  al , 2014).

## Kultur Mikroba
Mikroba  yang  digunakan  yaitu  bakteri Escherichia  coli dan Staphylococcus aureus dan    jamur Candida  albicans .  Masing- masing  mikroba  diambil  dari  biakan  murni menggunakan  mikropipet  sebanyak  100  μL dan  dimasukkan  ke  dalam  masing-masing tabung  reaksi  yang  sudah  berisi  media  cair B1  sebanyak  1  ml  dan  kemudian  ditutup menggunakan aluminium  foil .  Setelah  itu, diinkubasi  dalam  inkubator  pada  suhu  37 0 C selama 1 x 24 Jam (Dwijendra et al , 2014).

## Pembuatan Media Uji
Pepton 0,5 g, beef extract 0,3 g, natrium klorida  0,3  g,  agar  1,5  g  dan  akuades sebanyak  100  ml  diaduk  sampai  homogen kemudian  disterilkan  di  autoklaf  pada  suhu 121˚C  selama  15  menit  (Dwijendra et  al , 2014).

## Pembuatan Larutan Uji
Larutan  uji  dibuat  dengan  cara  1  mg ekstrak  kasar  alga Halimeda  opuntia dilarutkan  dalam  200  μL  metanol  dan dikocok  hingga  homogen  menggunakan vortex. Perlakuan yang sama dilakukan pada fraksi  n-heksan,  fraksi  kloroform  dan  fraksi metanol (Ortez,2005).
Pembuatan  Kontrol  Positif  dan  Kontrol Negatif
Kontrol positif dalam pengujian aktivitas  antimikroba  ini  menggunakan kloramfenikol paper  disc .  Kontrol  negatif yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  yaitu menggunakan  pelarut  metanol,  dengan  cara membuat  larutan  stok  metanol  dengan mengambil  sebanyak  200  μL  metanol kemudian  di  totolkan  pada paper  disc (Lalamentik, 2017).

## Pengujian Aktivitas Antimikroba
Metode yang digunakan dalam penelitian  ini  yaitu  metode  difusi  agar  ( disc diffusion  Kirby  and  Bauer ).  Pada  pengujian aktivitas  antimikroba  ini,  cakram  ( paper disc )  yang  digunakan  berukuran  6  mm dengan  daya  serap  50  μL  tiap  cakram. Sebanyak  300  μL  mikroba  yang  telah dikultur, dipipet dan diinokulasi pada 30 ml media agar lalu diaduk hingga homogen dan kemudian  dituangkan  ke  dalam  cawan  petri dan  tunggu  sampai  media  agar  mengeras. Kemudian,  larutan  uji  yang  telah  disiapkan ditotolkan  pada  masing-masing  cakram dengan  menggunakan  mikropipet.  Setelah agar  mengeras,  kertas  cakram  yang  telah ditotolkan sampel Halimeda opuntia , kontrol positif dan kontrol negatif diletakkan ke  dalam  cawan  petri  dengan  menggunakan pinset.  Selanjutnya,  cawan  petri  diberi  label dan  diinkubasi  dalam  inkubator  pada  suhu 37 0 C selama 1 x 24 Jam (Ortez,2005).

## Pengamatan  dan  Pengukuran  Diameter Zona Hambat
Pengamatan  dilakukan  setelah  24  jam masa  inkubasi.  Daerah  pada  sekitaran cakram  menunjukkan  kepekaan  mikroba
terhadap  antibiotik  atau  bahan  antimikroba yang  digunakan  sebagai  bahan  uji  yang dinyatakan  dengan  diameter  zona  bening.
Diameter
zona bening diukur menggunakkan digital  caliper .  Kemudian zona bening yang telah diukur, dikategorikan  berdasarkan  pedoman  Davis dan Stout (1971).

## HASIL DAN PEMBAHASAN Ekstraksi
Alga Halimeda  opuntia yang  telah diambil  dari  Selat  Lembeh  Bitung  dipotong kecil-kecil, hal ini dilakukan karena semakin kecil  luas  permukaan  sampel  maka  akan semakin  memperluas  permukaan  yang  akan berinteraksi dengan pelarut, sehingga senyawa yang dapat ditarik oleh pelarut pun akan  semakin  banyak  (Sineke et  al ,  2016). Setelah  itu  dilakukan  proses  ekstraksi dengan  menggunakan  metode  maserasi. Metode  maserasi  dipilih  karena  cara pengerjaan  dan  peralatan  yang  digunakan sederhana  serta  mudah  untuk  dilakukan  dan cocok untuk mengekstrak komponen- komponen yang tidak tahan akan suhu tinggi (Kristiani, 2014).
Maserasi  sampel  dilakukan  dengan menggunakan  pelarut  etanol  96  %  karena pelarut  ini  memiliki  kemampuan  menyari dengan  tingkat  polaritas  yang  lebar  mulai dari  senyawa  non  polar  sampai  dengan senyawa  polar  (Saifudin et  al ,  2011).
Ekstraksi  dilakukan  selama  3x24  jam  dan setiap  24  jam  ekstrak  disaring  dan dimaserasi  kembali  dengan  pelarut  yang baru  hal  ini  disebut  dengan  remaserasi. Remaserasi  dilakukan  agar  senyawa  aktif dalam  sampel  dapat  ditarik  secara  optimum (Huliselan et  al ,  2015).  Massa  ekstrak
beserta  rendemen  yang  dihasilkan  dalam proses ekstraksi ditunjukkan pada Tabel 1.
Tabel 1. Rendemen ekstrak alga Halimeda opuntia

## Fraksinasi
Metode  fraksinasi  yang  digunakan dalam  penelitian  ini  yaitu  metode  partisi cair-cair yang merupakan metode pemisahan dengan  menggunakan  dua  cairan  pelarut yang  tidak  saling  bercampur  sehingga senyawa yang memiliki sifat non polar akan larut  dalam  pelarut  non  polar,  yang  semi polar  akan  larut  dalam  pelarut  semi  polar, dan  yang  bersifat  polar  akan  larut  ke  dalam pelarut polar (Harborne, 1998).
Pelarut  yang  digunakan  untuk  proses fraksinasi  ini  yaitu  n-heksan, kloroform  dan metanol.  Proses  fraksinasi  dilakukan  secara bertingkat  berdasarkan  tingkat  kepolaran pelarut  yaitu  mulai  dari  pelarut  non  polar selanjutnya  semi  polar  dan  terakhir  pelarut polar (Harborne, 1998). Massa fraksi beserta rendemen  yang  dihasilkan  dalam  proses fraksinasi ditunjukkan pada Tabel 2.
Tabel 2. Rendemen fraksi alga Halimeda opuntia
Perbedaan nilai rendemen ini disebabkan  oleh  perbedaan  jenis  pelarut
No.  Sampel Massa Ekstrak (g) Rendemen (%) Warna Sampel 1. Ektsrak Etanol 0, 42 0,3 Hijau Pekat No. Sampel Massa Ekstrak (g) Rendemen (%) Warna Sampel 1. Fraksi Heksan 0,009 3,6 Hijau Muda 2. Fraksi Kloroform 0,012 4,8 Coklat muda 3. Fraksi Metanol 0,030 12,0 Coklat tua
yang  digunakan.  Dimana,  pelarut  yang berbeda  akan  melarutkan  senyawa-senyawa yang  berbeda,  sehingga  jumlah  fraksi  yang dihasilkan  pun  juga  berbeda  (Mujipradhana et al , 2018).

## Uji Aktivitas Antimikroba
Pengujian aktivitas antimikroba dilakukan  dengan  menggunakan  metode difusi  agar.  Metode  ini  dipilih  karena  dapat digunakan untuk melihat sensitivitas berbagai jenis mikroba terhadap antimikroba pada konsentrasi tertentu (Akhyar, 2010).
Pada  pengujian  ini,  daya  antimikroba ditandai  dengan  adanya  zona  bening disekeliling  cakram  yang  berukuran  6  mm,
hal  ini  menunjukkan  adanya  kepekaan mikroba  terhadap  ekstrak  dan  fraksi  alga Halimeda  opuntia .  Konsentrasi  ekstrak  dan fraksi  yang  digunakan  yaitu  250  μg  pada setiap paper disc yang memiliki  daya serap 50  μL.  Pengamatan  dilakukan  setelah diinkubasi pada suhu 37 0 C selama 1x24 jam dengan  pengulangan  sebanyak  3  kali  pada masing-masing mikroba, pengulangan dilakukan  dengan  tujuan  untuk  lebih mengakuratkan hasil yang diperoleh.
Hasil  pengukuran  rata-rata  diameter daya  antimikroba  dari  ekstrak  etanol,  fraksi kloroform,  fraksi  metanol  dan  fraksi  n- heksan ditunjukkan pada Tabel 3.
Tabel 3. Hasil Pengukuran Rata-Rata Diameter Daya Antimikroba dari Ekstrak dan Fraksi Alga
Halimeda opuntia
Mikroba Rata- Rata Diameter (mm) EE FK FM FH + - Ec 6,20 0,00 0,00 0,00 20,15 0,00 Sa 6,40 7,53 7,10 0,00 17,42 0,00 Ca 0,00 0,00 0,00 0,00 12,45 0,00
Keterangan :
Ec : Escherichia coli FM : Fraksi Metanol Sa : Staphylococcus aureus FH : Fraksi Heksan Ca : Candida albicans + : Kontrol Positif EE : Ekstrak Etanol - : Kontrol Negatif FK : Fraksi Kloroform
Dalam  pengujian  ini  digunakan  kontrol positif dan kontrol negatif sebagai pembanding. Kontrol positif yang digunakan dalam penelitian ini yaitu kloramfenikol, hal ini  dikarenakan  kloramfenikol  memiliki spektrum  kerja  yang  luas  (Rahmawati, 2015).
Kontrol negatif berfungsi untuk mengetahui  ada  tidaknya  pengaruh  pelarut terhadap  pertumbuhan  mikroba  uji.  Kontrol negatif  yang  digunakan  adalah  metanol, karena  pelarut  yang  digunakan  untuk melarutkan  larutan  uji  adalah  metanol.  Dari hasil  yang  diperoleh  kontrol  negatif  tidak memiliki  daya  hambat  antimikroba  pada
bakeri Escherichia  coli dan Staphylococcus aureus dan  jamur Candida  albicans . Sehingga  dapat  diketahui,  bahwa  aktivitas yang  ditunjukkan  oleh  ekstrak  dan  fraksi sampel alga Halimeda opuntia adalah murni dari  senyawa  aktif  yang  terkandung  dalam sampel.
Pada  pengujian  aktivitas  antimikroba dari sampel alga Halimeda opuntia penggolongan  kekuatan  daya  antimikroba digolongkan  menurut  pedoman  Davis  and Stout (1971).
Pada  ekstrak  etanol,  berdasarkan  hasil yang diperoleh, menunjukkan bahwa diameter  zona  bening  yang  terbentuk  pada Staphylococcus aureus dikategorikan sedang (6,40  mm)  dan  pada Escherichia  coli juga dikategorikan  sedang  (6,20  mm)  sedangkan pada Candida  albicans tidak  menunjukkan adanya  aktivitas.  Hal  ini  menunjukkan bahwa  ekstrak  etanol  memiliki  senyawa aktif  yang  hanya  dapat  menghambat pertumbuhan  bakteri Escherichia  coli serta Staphylococcus  aureus dan  tidak  memiliki aktivitas  untuk  menghambat  pertumbuhan jamur Candida  albicans ,  namun  untuk aktivitas antibakteri, ekstrak etanol memiliki spektrum  kerja  yang  luas  karena  dapat menghambat  pertumbuhan  bakteri  baik Gram positif maupun Gram negatif.
Pada  fraksi  kloroform,  berdasarkan hasil  yang  diperoleh,  menunjukkan  bahwa diameter  zona  bening  yang  terbentuk  pada bakeri Staphylococcus  aureus memiliki kekuatan  antimikroba  yang  sedang  (7,53 mm)  namun  tidak  menunjukkan  adanya aktivitas antimikroba pada bakteri Escherichia  coli dan  jamur Candida albicans . Hal ini menunjukkan bahwa fraksi kloroform  memiliki  senyawa  aktif  yang
hanya  dapat  menghambat  pertumbuhan bakteri Staphylococcus  aureus saja  dan memiliki spektrum kerja yang sempit karena hanya  dapat  menghambat  pertumbuhan bakteri  Gram  positif  dan  tidak  memiliki aktivitas  untuk  menghambat  bakteri  Gram negatif dan jamur.
Pada  fraksi  metanol,  berdasarkan  hasil yang diperoleh, menunjukkan bahwa diameter  zona  bening  yang  terbentuk  pada bakteri Staphylococcus  aureus memiliki kekuatan  antimikroba  yang  sedang  (7,10 mm)  namun  tidak  menunjukkan  adanya aktivitas antimikroba pada bakteri Escherichia  coli dan  jamur Candida albicans . Hal ini menunjukkan bahwa fraksi metanol memiliki senyawa aktif yang hanya dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  aureus saja  dan    memiliki spektrum  kerja  yang  sempit  karena  hanya dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri Gram  positif  dan  tidak  memiliki  aktivitas untuk menghambat bakteri Gram negatif dan jamur.
Pada fraksi n-heksan, berdasarkan hasil yang  diperoleh,  tidak  menunjukkan  adanya aktivitas  antimikroba  pada  mikroba  uji Escherichia coli, Staphylococcus aureus dan Candida  albicans .  Ketidak-reaktifan  fraksi n-heksan  dalam  menghambat  pertumbuhan mikroba  uji  menunjukkan  bahwa  senyawa metobolit  sekunder  yang  larut  dalam  n- heksan  tidak  memiliki  aktivitas  antimikroba (Zakaria et al , 2017).
Dari hasil yang diperoleh menunjukkan bahwa  ekstrak  etanol  hanya  memiliki aktivitas untuk menghambat bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus , sedangkan  fraksi  kloroform  dan  fraksi metanol  hanya  memiliki  aktivitas  untuk
menghambat  bakteri Staphylococcus  aureus saja dan untuk ekstrak dan semua fraksi alga Halimeda  opuntia tidak  memiliki  aktivitas untuk menghambat jamur Candida albicans . Selain  itu, Staphylococcus  aureus lebih sensitif  terhadap  ekstrak  dan  fraksi  sampel, hal  ini  disebabkan  karena  struktur  dinding sel  bakteri  Gram  positif  lebih  sederhana sehingga memudahkan senyawa antimikroba untuk  masuk  ke  dalam  sel  dan  menemukan sasaran  untuk  bekerja  (Kumayas et  al , 2015).

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  telah dilakukan dapat disimpulkan bahwa  ekstrak etanol  dari  sampel  alga Halimeda  opuntia yang  diperoleh  dari  Selat  Lembeh  Bitung memiliki aktivitas untuk menghambat bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus dengan kategori daya hambat sedang, sedangkan untuk fraksi kloroform dan fraksi metanol  hanya  memiliki  aktivitas  untuk menghambat  bakteri Staphylococcus  aureus dengan  kategori  daya  hambat  sedang  dan ekstrak  serta  semua  fraksi  tidak  memiliki aktivitas  untuk  menghambat  jamur Candida albicans .

## DAFTAR PUSTAKA
Akhyar,  2010.  Uji  Daya  Hambat  dan Analisis  KLT  Bioautografi  Ekstrak Akar  dan  Buah  Bakau  ( Rhizophora stylosa Griff.) Terhadap Vibrio
Harveyi    [skripsi].  Fakultas  Farmasi Universitas Hasanuddin, Makassar.
Basir,  A., et  al .  2017.  Aktivitas  Antibakteri
dan Antioksidan Alga Hijau Halimeda gracilis dari  Kabupaten Kepulauan Seribu. Jurnal
Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia . 20 : (2) , 211-218.
Dwijendra,  I.  M., et  al .  2014.  Aktivitas Antibakteri dan Karakterisasi Senyawa Fraksi Spons Lamellodysidea herbacea yang diperoleh dari Teluk Manado.
Pharmacon . 3: (4) , 1-9. Harborne, J.B. 1998. Phytochemical
Methods:  A  Guide  to Modern
Techniques  of  Plant  Analysis .  Third Edition. UK : Chapman & Hall.
Huliselan,  Y.  M., et  al .  2015.  Aktivitas Antioksidan  Ekstrak  Etanol,  Etil Asetat  dan  N-Heksan  dari  Daun Sesewanua ( Clerodendron squamatum Vahl.). Pharmacon .  4:
(3) , 155-163.
Ismet,  M.  S.  2007.  Penapisan  Senyawa Bioaktif  Spons Aaptops dan Petrosia sp. dari  Lokasi  yang  Berbeda  [tesis]. Pasca  sarjana,  Institut  Teknologi Bandung, Bandung.
Kristiani,  V.  2014.  Pengaruh  Konsentrasi Etanol dan Waktu Maserasi Terhadap Perolehan  Fenolik,  Flavonoid,  dan Aktivitas Antioksidan Ekstrak Rambut  Jagung  [skripsi].  Fakultas Teknik,  Universitas  Katolik  Widya Mandala, Surabaya.
Kumayas,  A.  R., et  al .  2015.  Aktifitas Antibakteri  dan  Karateristik  Gugus Fungsi  dari  Tunikata Polycarpa aurata . Pharmacon . 4: (1) , 32-44.
Lalamentik,  G.  2017.  Aktivitas  Antibakteri Ekstrak  Karang  Lunak Klyxum  sp. yang  Diperoleh  dari  Teluk  Manado [skripsi].  Fakultas  Matematika  dan Ilmu  Pengetahuan  Alam,  Universitas Sam Ratulangi, Manado.
Mishra, J., et al . 2016. Antibacterial Activity Of  Seaweed Halimeda  opuntia from The  Coasts  of  South  Andaman. Global  Journal  of  Bio-Science  and Biotechnology . 5: (3) , 345-348.
Mpila, D. A. 2012. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Mayana (Coleus atropurpureus benth) Terhada p Staphylococcus  aureus,  Escherichia coli dan Pseudomas  aeruginosa
Secara  Invitro [skripsi].  Fakultas
Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan Alam,  Universitas  Sam  Ratulangi, Manado.
Mujipradhana,  V.  N., et  al .  2018.  Aktivitas Antimikroba  dari  Ekstrak  Ascidian Herdmania  momus pada  Mikroba Patogen Manusia. Pharmacon . 7: (3) , 338-347.
Ortez,  J.  H.  2005. Disk  Diffusion  testing  in manual of antimicrobial susceptibility testing .  Marie  B.  Coyle  (Coord.  Ed).
American society for Microbiology.
Perez,  M.  J., et  al .  2016.  Antimicrobial
Action  of  Compounds  from  Marine Seaweed-A  Review. Marine  Drugs .
14: (52) , 1-38.
Rahmawati, M. 2015. Uji Aktivitas
Antimikroba  Ekstrak  Etanol  dan  Air
Rimpang  Pacing  ( Costus  spiralis ) Terhadap  Bakteri Escherichia  coli ,
Shigella dysenteriae , Salmonella typhimurium , Bacillus subtilis ,
Staphylococcus  aureus Serta  Fungi
Candida  albicans [skripsi].  Fakultas Kedokteran  dan  Ilmu  Kesehatan, Universitas  Islam  Negeri  Syarif Hidayatullah, Jakarta.
Saifudin, A., et al . Teruna. 2011.
Standarisasi  Bahan  Obat  Alam . Yogyakarta: Graha Ilmu.
Sineke,  F.  U., et  al .  2016.  Penentuan
Kandungan
Fenolik dan Sun
Protection  Factor  (SPF)  dari  Ekstrak Etanol dari Beberapa Tongkol Jagung ( Zea  mays L.). Pharmacon .  5: (1) , 275-283.
Zakaria., et  al .  2017.  Aktivitas  Antibakteri dari Fraksi Artocarpus Integer (Thunb.) Merr. dengan Metode Difusi Agar. Jurnal Industri Hasil Perkebunan . 12: (2) , 1-6