BioEksakta: Jurnal Ilmiah Biologi Unsoed Volume 5, Nomor 3 (2023): 138-143 E-ISSN: 2714-8564

## Efek Ekstrak Etanol Ganoderma lucidum Terhadap Kadar Ureum dan Kreatinin pada Tikus Model Inflamasi Terinduksi

## Completed Freund's Adjuvant (CFA)
Yasinta Nahdatulia, Nuniek Ina Ratnaningtyas * , Eko Setio Wibowo
Fakultas Biologi, Universitas Jenderal Soedirman, Jl. dr. Suparno 63 Purwokerto 53122 *Correspondent email : nuniek.ratnaningtyas@unsoed.ac.id
Rekam Jejak Artikel:
Diterima  : 22/05/2022
Disetujui  : 02/09/2023

## Abstract
Lingzhi  mushroom  ( Ganoderma  lucidum )  contains  bioactive  components  such  as  terpenoids, polysaccharides,  nucleotides,  sterols,  steroids,  fatty  acids  and  proteins/peptides  that  have medicinal potential. The bioactive compound G. lucidum as  an  anti-inflammatory  is  associated with suppression of  the expression  of  NF-κB  which are regulators  of inflammatory mediators gene expression. Uncontrolled release of inflammatory mediators has a negative impact on the kidneys  so  that  it  can  cause  kidney  dysfunction.  Increased  levels  of  urea  and  creatinine  is one  of  the  biomarkers  of kidney  dysfunction.  This  study  aimed  to  determine  the  effect  and effective dose of G. lucidum extract on reducing blood urea and creatinine levels of white male rat  ( Rattus  norvegicus )  Wistar  strain  which  was  induced  by  Complete  Freund's  Adjuvant (CFA). This research is an experimental study using Completely Randomized Design (CRD). The  treatment groups  (P1,  P2,  and  P3)  were  treated  with G.  lucidum mushroom  extract  with various doses of 250, 500, 750 mg.kg -1 BW  with  five  replications.  Parameters  observed  were urea  and  creatinine  levels  as  markers  of  kidney  function.  The measurement data of urea and creatinine levels were analyzed by ANOVA test, and continued with Duncan's test. The results showed  that  the  administration  of  the  ethanolic  extract  of G.  lucidum was  able  to  reduce creatinine  and  urea levels  in  rats  induced  by  CFA-induced  inflammation.  Ethanol  extract  of G.  lucidum with  a dose of  750 mg.kg -1 BW  can reduce urea and creatinine levels in rats with an  average  creatinine  level  of  0.75±0.32  mg.dL -1 and  urea  by  57.50±4.82  mg.dL -1 with  a decrease  in  creatinine and  urea  levels compared  to negative  controls by 60.93%  and 20.16%. Ethanol extract of G. lucidum at a dose of 750 mg.kg -1 BW was effective in reducing urea and creatinine levels in rats modeled by CFA-induced inflammation. Key Words : Ganoderma lucidum, inflammation, ethanol, CFA, creatinine, ureum

## Abstrak
Jamur  Lingzhi  ( Ganoderma  lucidum )  mengandung  komponen  bioaktif  seperti  terpenoid, polisakarida,  nukleotida,  sterol,  steroid,  asam  lemak  dan  protein/peptida  yang  memiliki  potensi obat. Senyawa bioaktif G.  Lucidum sebagai anti  inflamasi  berhubungan dengan  supresi  ekspresi NF-κB  yang  merupakan  regulator  ekspresi  gen  mediator  inflamasi.    Pelepasan    mediator inflamasi  yang  tidak  terkontrol  berdampak  negatif  pada  ginjal  sehingga  dapat menyebabkan disfungsi ginjal. Peningkatan kadar ureum dan kreatinin merupakan salah satu biomarker disfungsi ginjal. Penelitian  ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh  dan dosis  efektif ekstrak G.  lucidum terhadap  penurunan  kadar ureum dan kreatinin darah tikus putih jantan ( Rattus norvegicus ) galur Wistar  yang  diinduksi Complete  Freund's Adjuvant (CFA).  Penelitian  ini  merupakan  penelitian eksperimental dengan menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL). Kelompok perlakuan (P1, P2, dan  P3)  diberi perlakuan ekstrak jamur G. lucidum dengan  variasi  dosis 250, 500,    750 mg.kg-1  BB  dengan  lima  kali  ulangan.  Parameter  yang  diamati  adalah  kadar  ureum  dan kreatinin  sebagai  penanda fungsi  ginjal.  Data  pengukuran  kadar  ureum  dan  kreatinin  dianalisis dengan  uji  ANOVA,  dan  dilanjutkan  dengan  uji Duncan. Hasil penelitian menunjukkan bahwa pemberian ekstrak etanol G. lucidum mampu menurunkan kadar kreatinin dan ureum tikus yang diinduksi  inflamasi  CFA.  Ekstrak  etanol G.  lucidum dengan  dosis  750  mg.kg -1 BB  dapat menurunkan  kadar  ureum  dan  kreatinin  pada  tikus  dengan  rata-rata  kadar  kreatinin  0,75±0,32 mg.dL -1 dan  urea sebesar  57,50±4,82  mg.dL -1 dengan  penurunan  kadar  kreatinin  dan  ureum dibandingkan  kontrol  negatif  sebesar  60,93%  dan 20,16%.  Ekstrak  etanol G.  lucidum dengan dosis 750 mg.kg -1 BB efektif dalam menurunkan kadar ureum dan kreatinin pada tikus yang model inflamasi yang diinduksi CFA Kata kunci: Ganoderma lucidum, inflamasi, etanol, CFA, creatinine, ureum

## PENDAHULUAN
Indonesia  memiliki  sumber  daya  alam  yang melimpah  dan  beraneka  ragam.  Pemanfaatan sumber  daya  alam  yang  berpotensi  sebagai  obat perlu  dilakukan  sebagai  alternatif  pengobatan dengan efek samping yang lebih sedikit dibandingkan dengan obat sintetik. Jamur Lingzhi ( Ganoderma
lucidum )
sudah banyak dibudidayakan di Indonesia dan bermanfaat dalam berbagai  macam  pengobatan. Penelitian  mengenai manfaat G.  lucidum yang  telah  banyak  dilakukan mengenai kandungan senyawa bioaktif pada jamur ini  seperti  terpenoid,  polisakarida,  steroid,  asam lemak dan ppeptida yang memiliki efek pengobatan yaitu  sebagai  antidiabetes,  antimikroba,  dan antioksidan  (Cherian et  al .,  2011).  Kemampuan jamur  ini  sebagai  agen  antiinflamasi  perlu  diteliti lebih lanjut sebagai alternatif pengobatan inflamasi (peradangan).
Pengobatan  inflamasi  yang  sering  digunakan yaitu
Non-Steroid Anti-Inflamatory Drugs (NSAID),  seperti  Natrium  Diklofenak.  Obat  ini bekerja dengan cara menghambat enzim siklooksigenase-1  (COX-1)  dan  siklooksigenase  2 (COX-2)  (Anggraini et  al .,  2016).  Kemampuan obat  ini  dalam  menghambat  COX-2  dapat mengurangi  produksi  prostaglandin  inflamasi. Sedangkan,  penghambatan  enzim  COX-1  berisiko menyebabkan  disfungsi  ginjal,  sebab  COX-1 berfungsi  untuk  menjaga  vasodilatasi  pembuluh darah aferen sehingga aliran darah pada ginjal dan laju  filtrasi  glomerulus  berjalan  dengan  normal (Kertia et  al .,  2011).  Berdasarkan  permasalahan tersebut, pengobatan inflamasi menggunakan bahan alam  berkhasiat  obat  seperti  jamur G.  lucidum ini perlu  dikembangkan  untuk  menghindari  efek samping  yang  berlebih  serta  mengeksplorasi manfaat dari jamur G. lucidum seperti halnya jamur lainnya.
Ginjal berperan penting dalam mempertahankan  kestabilan  lingkungan  tubuh, mengeluarkan sisa hasil metabolisme seperti ureum dan  kreatinin.  Saat  terjadi  inflamasi, Nitric  Oxide (NO) yang diproduksi oleh Inducible Nitric Oxide Synthase (iNOS)  akan  meningkat  sehingga  akan mengalami  stres  oksidatif  (Tjahjani et  al .,  2016). Stres oksidatif memicu terjadinya peroksidasi lipid pada membran sel endotel glomerulus, hal ini dapat menyebabkan  laju  filtrasi  glomerulus  menurun (Awdishu & Wu, 2017), sehingga akan menyebabkan  peningkatan  kadar  kreatinin  dan ureum  pada  darah  (Mohsenin,  2017).  Penelitian oleh Zhao et al. (2018) menunjukkan bahwa ekstrak metanol G. lucidum secara in vivo pada tikus yang diinduksi  cisplatin  dapat  menurunkan  kadar kreatinin  dan  ureum  pada  tikus  pada  dosis  460 mg.kg-1 BB. Penelitian terdahulu mengenai potensi G.  lucidum dapat  menurunkan  kadar  ureum  dan kreatinin  terbatas  pada  tikus  diinduksi  obat  yang memiliki  efek  samping  nefrotoksisitas.  Perlu  di
eksplorasi potensi G. lucidum sebagai nefroprotektif pada tikus model inflamasi.
Penelitian  ini  menggunakan  agen  inflamasi yaitu Complete  Freund’s  Adjuvant (CFA)  yang dapat menginduksi mediator inflamasi seperti TNF- α,  IL-1ß  dan  IL-6  berdampak  negatif  pada  ginjal sehingga  dapat  menyebabkan  disfungsi  ginjal (Chen et al ., 2020). Hewan uji yang digunakan pada penelitian ini yaitu tikus putih ( Rattus norvegicus ) galur  wistar.  Tikus  putih  ( R.  norvegicus )  dipilih karena  anatomis  dan  fisiologisnya  memiliki karakteristik  yang  mirip  dengan  manusia.  Tikus jantan  lebih  diutamakan  daripada  tikus  betina karena  kondisi  hormonal  tikus  jantan  relatif  stabil dibandingkan  tikus  betina  sehingga  tidak  banyak mempengaruhi  metabolisme  dalam  tubuhnya (Umboh et al ., 2019). Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh pengaruh pemberian ekstrak etanol G. lucidum terhadap penurunan kadar ureum dan kreatinin tikus model inflamasi diinduksi CFA serta  mengetahui  dosis  efektif  ekstrak  etanol G. lucidum yang efektif menurunkan kadar ureum dan kreatinin tikus model inflamasi terinduksi CFA.
.

## MATERI DAN METODE
Bahan yang digunakan pada penelitian ini antara lain  tubuh  buah  jamur  Lingzhi  ( G.  lucidum ),  Tikus Wistar  Jantan,  aquabides,  Dimetil  Sulfoksida  5% (DMSO 5%), natrium diklofenak, Complete Freund’s Adjuvant (CFA), Carboxy  Methyl  Cellulose (CMC), reagent  kit  ureum ,  dan reagent  kit  creatinine , sedangkan alat yang digunakan yaitu spektrofotometer  UV-vis.  Metode  yang  digunakan yaitu metode eksperimental dengan Rancangan Acak Lengkap  (RAL)  dengan  3  dosis  ekstrak  etanol G. lucidum yaitu  250,  500,  750  mg . kg -1 BB  meliputi enam perlakuan, masing-masing perlakuan sebanyak lima  ulangan.  Parameter  yang  diamati  adalah  kadar ureum dan kreatinin darah tikus. Penelitian dilakukan di Animal  house ,  Laboratorium  Mikologi  dan Fitopatologi,  dan  Laboratorium  Fisiologi  Tumbuhan Fakultas Biologi, Universitas Jenderal Soedirman.
Aklimasi  dan  persiapan  hewan  percobaan mengacu pada Millati et al . (2019), tikus di aklimasi selama 14 hari dan dilakukan pengaturan suhu, udara, dan pencahayaannya agar tikus tidak stres. Persiapan simplisia  jamur  dan  ekstraksi  senyawa G.  lucidum mengacu  pada  Surahmaida et  al .  (2018),  metode ekstraksi  yang  digunakan  yaitu  maserasi  dengan pelarut  etanol  Pro-Analys  (PA)  selama  1  x  24  jam dilanjutkan  dengan  remaserasi  selama  2  x  24  jam. Identifikasi  senyawa  bioaktif G.  lucidum mengacu pada  Kannan et  al .  (2016)  yaitu  menggunakan Gas Chromatography – Mass Spectrometry (GC-MS). Induksi  CFA  ke  hewan  uji  sebagai  agen inflamasi  mengacu  pada  Yahya et  al .  (2020),  CFA diinduksikan  satu  kali  secara  subkutan  pada  telapak kaki  tikus  dengan  dosis  CFA  sebanyak  0,1  mL. Pembuatan larutan sampel ekstrak etanol G. lucidum
dibuat dengan melarutkan ekstrak kental G. lucidum dilarutkan  pada  DMSO  5%.  Larutan  sampel  dibuat dengan variasi dosis yaitu 250, 500, 750 mg . kg -1 BB yang  kemudian  disesuaikan  dengan  rata-rata  bobot tikus  yaitu  ±200  gram  dan  diberikan  pada  tikus dengan  metode  sonde  lambung  ( oral  gavarage ) selama  14  hari  setelah  tikus  putih  jantan  dinyatakan terinflamasi.  Penggunaan  larutan  Na-Diklofenak sebagai  obat  referensi  standar  mengacu  pada Situngkir  &  Mambang  (2021)  yaitu  menggunakan dosis  0,012g/200gBB  yang  dilarutkan  dalam  CMC 0,5%.  Pengambilan  sampel  darah  tikus  dilakukan pada hari ke-21 dilakukan dengan menggunakan pipet kapiler heparin hematokrit yang diambil melaui vena orbitalis,  kemudian  disentrifus  hingga  didapatkan plasma.  Pemeriksaan  ureum  menggunakan  metode Berthelot dengan reagen dari Urea Liquicolor kit dan pemeriksaan  kreatinin  menggunakan  metode  Jaffe kinetik  dengan  reagen  dari  kit Glory  Diagnostics . Pemeriksaan kadar ureum dan kreatinin menggunakan  spektrofotometri.  Hewan  percobaan didekapitasi dengan teknik cervical dislocation yaitu dilakukan  dengan  cara  memisahkan  tengkorak  dan otak  dari  sumsum  tulang  belakang  dengan  cara memberikan tekanan ke bagian posterior dasar tulang
tengkorak dan sumsum tulang belakang.
Data  yang  diperoleh  dianalisis  menggunakan analisis  sidik  ragam  (ANOVA)  pada  taraf  uji  0,05 yang  dilanjutkan  dengan  uji  lanjut  Duncan  untuk mengetahui letak perbedaan masing-masing perlakuan  dan  dosis  efektif  dari  ekstrak  etanol G. Lucidum.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pengukuran  kadar  kreatinin  dan  ureum  tikus model  inflamasi  dilakukan  pada  hari  ke  21  setelah tikus  diinduksi  CFA,  kemudian  diberikan  ekstrak etanol G.  lucidum ataupun  Na-Diklofenak  (kontrol positif). Kadar kreatinin dan ureum dianalisis secara statistik,  diperoleh  bahwa  data  teridistribusi  secara normal  berdasarkan  uji  Shapiro-Wilk  dan  homogen berdasarkan  uji  Levene.  Data  kadar  kreatinin  dan ureum  dianalisis  menggunakan  metode  ANOVA. Hasil ANOVA didapatkan hasil yang berbeda nyata (p<0,05)  pada  kadar  kreatinin  dan  berbeda  sangat nyata  (p<0,01)  pada  kadar  ureum.  Analisis  data dilanjutkan  dengan  uji  Duncan  pada  tingkat kepercayaan  95%,  untuk  mengetahui  perbedaan setiap perlakuan masing-masing parameter.
Tabel 1. Rata-rata Kadar Ureum dan Kreatinin pada Tikus Putih Model Inflamasi
Perlakuan Kadar Ureum (mg.dl -1 ) Kadar Kreatinin (mg.dl -1 ) KS 54,5±2,11 a 0,67±0,27 a KN 72,02±2,78 d 1,92±0,57 c KP 60,30±1,20 b 0,83±0,42 ab P1 68,39±1,48 cd 1,33±0,27 bc P2 65,18±2,58 c 1,25±0,41 ab P3 57,50±4,82 ab 0,75±0,32 ab
Keterangan  :  Angka  yang  diikuti  oleh  huruf  yang  sama tidak berbeda secara signifikan pada taraf nyata p<0,05. KS = kontrol sehat, KN = kontrol negatif, KP = kontrol positif, P1 = G. lucidum 250 mg/kg BB, P2 = G. lucidum 500 mg/kg BB, P3 = G. lucidum 750 mg/kg BB
Hasil  rata-rata  kadar  ureum  disajikan  pada Tabel  1,  Kadar  ureum  kontrol  sehat  (KS)  sebesar 54,5±2,11  mg.dL -1 merupakan  kadar  terendah dibandingkan  perlakuan  lain.  Kadar  ureum  kontrol sehat  ini  cukup  tinggi  sebab  menurut  Derelanko (2000), kadar ureum normal pada tikus putih adalah 25,71-38,57  mg.dL -1 .  Kadar  ureum  dalam  darah tergantung  dengan  jenis  pakan  yang  dikonsumsi. Menurut Wientarsih et al. (2012), kadar ureum yang tinggi dapat diakibatkan oleh pemberian pakan yang kaya  akan  protein.  Pakan  yang  tinggi  protein  dapat memengaruhi distribusi  asam  amino  di  dalam darah sehingga  memengaruhi  kadar  ureum  plasma. Perlakuan  kontrol  negatif  (KN)  memiliki  rata-rata kadar  ureum  tertinggi  sebesar  72,02±2,78  mg.dL -1 . Kadar ureum kelompok perlakuan ekstrak etanol G. lucidum dengan  variasi  dosis  250,  500,  dan    750 mg.kg -1 BB  (P1,  P2,  dan  P3)  secara  berurutan  yaitu 68,39±1,48;  65,18±2,58;  dan  57,50±4,82  mg.dL -1 .
Kelompok  kontrol  positif  (KP)  memiliki  rata-rata kadar  ureum  sebesar  60,30±1,20  mg.dL -1 .  Kadar ureum pada kelompok perlakuan ekstrak dan kontrol positif  lebih  kecil  dibandingkan  kelompok  kontrol negatif,  hal    ini  menunjukkan  bahwa  terdapat penurunan  rata-rata  kadar  ureum  mendekati  kadar ureum kontol sehat.
Hasil  rata-rata  kadar  kreatinin  disajikan  pada Tabel  1  menginterpretasikan  bahwa  terdapat perbedaan  pada  setiap  perlakuan.  Kadar  kreatinin terendah yaitu pada kontrol sehat sebesar 0,67±0,27 mg.dL -1 .  Menurut  Derelanko  (2000),  bahwa  kadar kreatinin normal tikus Wistar sebesar 0,3-0,8 mg.dL - 1 . Berdasarkan pernyataan tersebut maka disimpulkan bahwa  kondisi  tikus  dalam  keadaan  sehat.  Kadar kreatinin  tertinggi  yaitu  pada  kelompok  kontrol negatif  yaitu  sebesar  1,92±0,57  mg.dL -1 .  Kadar kreatinin perlakuan ekstrak etanol G. lucidum dengan variasi dosis 250, 500, dan 750 mg.kg -1 BB (P1, P2, dan P3) secara berurutan yaitu 1,33±0,27; 1,25±0,41; dan  0,75±0,32  mg.dL -1 .  Penurunan  kadar  kreatinin linear dengan peningkatan dosis ekstrak G. lucidum . Hal  ini  menunjukkan  bahwa  pemberian  ekstrak G. lucidum dapat  menurunkan  kadar  kreatinin  tikus model  inflamasi  terinduksi  CFA.  Kelompok  negatif yang  hanya  diinduksi  CFA  menunjukkan  hasil tertinggi  dibandingkan  perlakuan  lainnya.  Induksi CFA sangat berpengaruh terhadap peningkatan kadar ureum  dan  kreatinin.  Hal  ini  mengindikasi  adanya gangguan  fungsi  pada  ginjal  karena  kreatinin  dan ureum  yang  seharusnya  difiltrasi  oleh  ginjal  dan diekskresikan dalam bentuk urin (Hedge et al ., 2018). Hasil  uji  Duncan  kadar  ureum  dan  kreatinin pada tingkat kepercayaan 95% disajikan pada Tabel 2. Hasil uji Duncan kadar ureum menunjukkan bahwa
kelompok P3 tidak berbeda nyata dengan kelompok KS dan KP namun berbeda nyata dengan KN, P1 dan P2. Hal tersebut menginterpretasikan bahwa pemberian  ekstrak  etanol G.  lucidum dengan  dosis 750 mg.kg -1 BB mampu menurunkan kadar ureum ke arah kadar ureum kelompok kontrol sehat dan kontrol positif  dibandingkan  dengan  KN,  P1,  dan  P2.  Hasil uji  Duncan  kadar  kreatinin  menunjukkan  bahwa kelompok KS tidak berbeda nyata dengan kelompok KP, P2, dan P3 dan berbeda nyata dengan KN dan P1. Perlakuan  P3  pada  hasil  uji  Duncan  kadar  ureum maupun  kreatinin  berbeda  nyata  dengan  kelompok kontrol  negatif  atau  tikus  yang  sakit,  namun  tidak berbeda  nyata  denganperlakuan  kontrol  sehat  dan kontrol  positif  yang  diberikan  Natrium  Diklofenak. Dosis 750 mg.kg -1 BB merupakan dosis efektif dalam menurunkan  kadar  ureum  dan  kreatinin  karena cenderung  menurunkan    kadar  ureum  ke  arah  nilai kontrol  sehat  dan  kontrol  positif.  Penelitian sebelumnya dilakukan oleh Chan et al . (2021) yaitu pemberian  ekstrak  ekstrak  metanol G.  lucidum sebanyak 500 dan 1000 mg.kg -1 BB pada tikus yang diinduksi  karagenan,  dapat  menurunkan  kadar kreatinin  dan  ureum  tikus  mendekati  kontrol  positif yang  diberikan  obat  referensi  standar  yaitu  natrium diklofenak.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  dosis  750 mg.kg -1 BB  cukup  efektif  dalam  menurunkan  kadar ureum dan kreatinin tikus model inflamasi.
Ekstrak G.  lucidum tidak  secara  langsung berpengaruh  pada  ginjal,  namun  untuk  mengurangi stres  oksidatif  yang  disebabkan  oleh  inflamasi melalui  penghambatan  aktivitas  dari  NF-κB  yang merupakan  faktor  transkripsi  pengatur  ekspresi  gen proinflamasi selama inflamasi. Proses inflamasi juga akan  mengaktivasi  makrofag  yang  berperan  penting dalam produksi ROS yaitu O 2 - dan produksi Reactive Nitrogen Spesies (RNS) berupa ONOO -. Berdasarkan penelitian (Dabdoub et al ., 2020), level ROS setelah diinduksi CFA ke telapak kaki tikus akan meningkat sebesar 73% setelah 7 hari. ROS meningkat terutama Anion superoksida (O 2 - ). Peningkatan ROS memicu peroksidasi  lipid  yang  menyebabkan  stres  oksidatif. Peroksidasi  lipid  juga  dapat  menyebabkan  aktivasi Inducible  Nitrite  Oxide  Synthase (iNOS)  oleh makrofag  yang  mengakibatkan  meningkatnya Nitrit Oxide (NO).  NO  apabila  bertemu  dengan  radikal bebas  anion  superoksida  (O 2 - )  akan  membentuk peroksinitrit (ONOO-). Peroksinitrit akan menggangu aktivitas Endothel Nitrite Oxide Synthase (eNOS) sehingga NO dari eNOS menurun dan terjadi disfungsi endotel yang salah satu efeknya yaitu fungsi filtrasi dari glomerulus menurun (Tandi et al ., 2017). Berdasarkan  hasil  persentase  penurunan  kadar kreatinin  dan  ureum  darah  dibandingkan  kontrol negatif  (Tabel  2),  pemberian  ekstrak  etanol G. lucidum dengan  dosis  750  mg.kg -1 BB  memiliki persentase  penurunan  kadar  kreatinin  dan  ureum sebesar 20,16% dan kreatinin sebesar 60,93% .
Tabel 2. Persentase Penurunan Kadar Kreatinin dan Ureum Darah  Dibandingkan  Kontrol  Negatif  Tikus  Putih  Model Inflamasi
Perlakuan Persentase Penurunan (%) Kadar Ureum Kadar Kreatinin KP 16,27 c 56,77 c P1 5,04 bc 30,72 bc P2 9,49 b 34,89 b P3 20,16 a 60,93 a
Keterangan:  KP:  Kontrol  positif  (diinduksi  CFA  dan  Na- Diklofenak);  P1:  perlakuan  1  (diinduksi  CFA  dan  diberi 250  mg/kgBB  ekstrak G.  lucidum );  P2:  perlakuan  2 (diinduksi  CFA  dan  diberi  500  mg/kgBB  ekstrak G. lucidum );  P3: perlakuan  3  (diinduksi  CFA  dan  diberi  750 mg/kgBB ekstrak G. lucidum ).
Persentase  penurunan  kadar  ureum  dan kreatinin ini lebih tinggi dibanding perlakuan lainnya. Penurunan persentase penurunan kadar kreatinin dan ureum  tikus  yang  diberikan  dosis  750  mg.kg -1 BB (P3)  menunjukkan  hasil  yang  berbeda nyata dengan perlakuan  lainnya.  Dosis  750  mg.kg -1 BB  ini berdasarkan  uji  Duncan  menunjukkan  hasil  yang paling  efektif.  Dosis  ini  selain  efektif  juga  di  nilai aman  bagi  ginjal  tikus  karena  tidak  menyebabkan kenaikan  kadar  ureum  dan  kreatinin.  Berdasarkan hasil dan pembahasan di atas, Dosis 750 mg.kg -1 BB dapat  menurunkan  kadar  ureum  dan  kreatinin  yang lebih  tinggi  dibandingkan  dosis  500  mg.kg -1 BB, sehingga  disimpulkan  bahwa  dosis  750  mg.kg -1 BB merupakan dosis yang efektif dan aman bagi ginjal. Penelitian oleh Orole & Adejumo (2017) menyebutkan  bahwa  uji  toksisitas  yang  dilakukan pada tikus yang diberikan ekstrak etanol G. lucidum dosis  100-800  mg.kg -1 BB  selain  dapat  menurunkan kreatinin dan ureum, namun juga tidak bersifat toksik bagi ginjal, hati dan jantung tikus.
Hasil identifikasi senyawa ekstrak etanol tubuh buah G.  lucidum menggunakan  metode  GC-MS, teridentifikasi  10  senyawa  dominan  pada  ekstrak tersebut yang disajikan pada Tabel 3.
Berdasarkan  hasil  pembacaan  senyawa  ekstrak etanol G.  lucidum menggunakan  GC-MS,  ekstrak jamur  ini  mengandung  berbagai  senyawa  seperti terpenoid,  asam  asetat,  asam  amino,  keton,  peptida, dan asam lemak. Diantara senyawa tersebut, senyawa asam  lemak  merupakan  senyawa  yang  paling dominan.  Berdasarkan  Zhang et  al .  (2021),  asam lemak  yang  terkandung  pada  ganoderma  lebih dominan asam lemak tak jenuh yaitu sebesar 80,26% dibandingkan  asam  lemak  jenuh  sebesar  19,74%. Asam  lemak  tak  jenuh  pada  ekstrak G.  lucidum terutama  adalah  asam  oleat  dan  asam  linoleat  dapat meminimalkan  stres  oksidatif.    Wei et  al .  (2016) menambahkan  bahwa  asam  oleat  dan  asam  linoleat dapat  menurunkan  ROS  seperti  Nitrit    Oksida  (NO) dan    Anion  superoksida  (O 2 - ). Cholesta-5,20,24-
Tabel 3 . Senyawa teridentifikasi pada ekstrak etanol G. lucidum
Puncak Waktu retensi Nama Senyawa Konsentrasi (%) Golongan senyawa 1 3,575 N-(2-Fluoro-benzyl)-3,4,5-trimethoxy- benzamide 8,79 Asam lemak 2 4,315 N-(4-Cyanomethyl-phenyl)-2-(3,5- dimethyl-phenoxy)-acetamide 9,76 Asam asetat 3 7,24 Cholesta-5,20,24-trien-3-ol,(3.beta.)- (CAS) 8,79 Terpenoid 4 11,679 6-Oxo-1,6-dihydro-pyridine-3-carboxylic acid (2-methoxy-dibenzofuran-3-yl)-amide 11,31 Asam lemak 5 13,34 Tungsten, tris(.eta.-4-3-methyl-3-buten-2- one) 8,92 Keton 6 13,485 Methyl N-4-bromobenzoyl-l-valyl-2- methylalanyl-2-methylalaninate 9,26 Asam amino 7 13,775 Acetic acid, 8-acetoxy-6-benzenesulfonyl- 2- thia-6-aza-adamantan-4-yl ester 8,90 Asam asetat 8 15,397 9,19-Cyclolanost-23-en-3-ol, 25-methoxy- , acetate, (3.beta.,23E)- (CAS) 11,00 Terpenoid 9 18,256 6-(N,N-Dimethylamino)-4-cyano-1,3- dimethyl-4-hexen-3-ol 13,91 Asam lemak 10 21,28 Trisulfide, dipropyl (CAS) 9,36 Peptida
trien-3-ol,(3.beta.)- dan 9,19-Cyclolanost-23-en-3- ol,25-methoxy-,acetate,  (3.beta.,23E)- merupakan tritepenoid  yang  merupakan  senyawa  metabolit sekunder  turunan  terpenoid.  Terpenoid  sebagai senyawa  aktif  termasuk  dalam  jenis  antioksidan dengan  cara  menangkap Reactive  Oxygen  Species (ROS),  seperti  anion  superoksida  serta  dapat menghambat peroksidasi lipid (Masriany & Sukmawaty,  2021).  Selain  sebagai  antioksidan, terpenoid mempunyai kemampuan sebagai antiinflamasi.  Terpenoid  sebagai  antiinflamasi dengan cara menghambat biosintesis eikosanoid dan leukotrien  pada  jalur  siklooksigenase  (COX) (Parawansah et al ., 2022).

## SIMPULAN
Ekstrak  etanol G.  lucidum dengan  berbagai dosis dapat menurunkan kadar ureum kreatinin darah tikus  model  inflamasi  yang  terinduksi  CFA,  serta dosis  ekstrak  etanol G.  lucidum sebagai  agen inflamasi  yaitu  750  mg.kg -1 BB  yang  merupakan dosis  efektif  untuk  menurunkan  kadar  ureum  dan kreatinin dalam darah tikus model inflamasi. Hal ini dapat  menjadi  rekomendasi  pembuatan  produk pengobatan menggunakan jamur G. lucidum sebagai antiinflamasi.

## DAFTAR PUSTAKA
Anggriani,  A.,  Lisni,  I.,  &  Faujiah,  D.  S.  R.,  2016.
Analisis  Masalah  Terkait  Obat  pada  Pasien Lanjut  Usia  Penderita  Osteoartritis  di  Poli Ortopedi  di  salah  satu  Rumah  Sakit  di Bandung. Kartika:  Jurnal  Ilmiah  Farmasi , 4(2), pp. 13-20.
Awdishu  &  Wu,  2017. Acute  Kidney  Injury:  Renal Pulmonary  Critical  Care .  Lenexa  :  Critical Care Safe- Assessment Program (CCSAP).
Chen,  G.,  Song,  Y.,  Ma,  F., &  Ma,  Y.,  2020.  Anti- Arthritic  Activity  Of  D-Carvone  Against Complete Freund’s Adjuvant-Induced Arthritis  In  Rats  through  Modulation  of Inflammatory Cytokines . The Korean Journal of  Physiology  &  Pharmacology:  Official Journal  of  the  Korean  Physiological  Society and  the  Korean  Society  of  Pharmacology , 24(6), pp. 453-462.
Chan, S. W., Tomlinson, B., Chan, P., & Lam, C. W. K.  (2021).  The  Beneficial  Effects  of Ganoderma  lucidum on  Cardiovascular  And Metabolic  Disease  Risk. Pharmaceutical Biology , 59(1), 1161-1171.
Cherian,  E.  Sudheesh,  N.  P.  Janardhanan,  K.  K. Patani, G., 2011. Free Radical Scavenging and Mitochondrial  Antioxidant  Activities  of Reishi- Ganoderma  lucidum . J.  Basic  Clin. Physiol. Pharmacol. vol. 20, pp. 289–308.
Dabdoub, B. R., Mohammed, R. H., & Abdulhadi, H.
L., 2020. Ganoderma lucidum Attenuates and Prevents  CCl4-Induced  Hepatic  and  Renal Damage In Sprague–Dawley Rats. Systematic Reviews in Pharmacy , 11(12), pp. 1704-1709
Derelanko,  M.  J.,  2008. The  Toxicologist's  Pocket Handbook . Boca Raton : CRC Press.
Hegde,  B.,  Bodduluri,  S.  R.,  Satpathy,  S.  R., Alghsham, R. S., Jala, V. R., Uriarte, S. M., & Haribabu, B., 2018. Inflammasome-
Independent  Leukotriene  B4  Production Drives  Crystalline  Silica–Induced  Sterile Inflammation. The  Journal  of  Immunology ,
200 (10), pp. 3556-3567.
Kertia,  N.,  Hemas,  N.  M.  &  Ayu,  D.  G.  N.,  2011. Pengaruh  Kombinasi  Ekstrak  Temulawak, Jahe,  Kedelai,  Dan  Kulit  Udang  Terhadap Fungsi Hati dan Ginjal Dibandingkan dengan
Natrium Diklofenak pada penderita
Osteoartritis .  Majalah  Obat  Tradisional , 16(2), pp. 51-62.
Masriany, M., & Sukmawaty, E., 2021. Uji Fitokimia Ekstrak Etanol Bunga Pohon Hujan ( Spathodea  campanulata )  secara  In  Vitro.
Prosiding Biotik , 8 (1), pp. 328-334
Millati, A., Bahar, Y., & Kusumawinakhyu, T., 2019. Pengaruh Sediaan Dekok Daun Zaitun ( Olea europaea L.) terhadap Kadar Glukosa Darah pada  Tikus  Putih  Galur  Wistar  ( Rattus norvegicus )  Galur  Wistar  Jantan  yang diinduksi  Aloksan. Herb-Medicine  Journal , 2(2), 20-26.
Mohsenin, V., 2017. Practical Approach to Detection and  Management  of  Acute  Kidney  Injury  in Critically Ill Patient. Journal of intensive care , 5(1), pp. 1-8.
Orole, O. O., & Adejumo, T. O., 2017. Toxicological Study  of  Extracts  of Lippia  alba and Ganoderma lucidum . Sci Lett , 5(3), pp 1-8
Parawansah,  P.,  Nuralifah,  N.,  &  Yulfa,  Y.,  2022.
Fraksi Ekstrak Etanol Buah Pare ( Mommordica charantia L.) sebagai
Antiinflamasi terhadap Kadar Tumor Necrosis Factor Alpha (TNF-α). Journal Syifa Sciences  and  Clinical  Research  (JSSCR) , 4(1), pp. 32-40.
Situngkir,  R.,  &  Mambang,  D.  E.  P.,  2021.  Uji Aktivitas  Antiinflamasi  Ekstrak  Etil  Asetat Daun Tekelan ( Chromolaena odorata (L.) R.
King  &  H.  Rob)  pada  Tikus  Putih  Jantan ( Rattus  norvegicus ). Farmasainkes:  Jurnal Farmasi, Sains, dan Kesehatan , 1(1), pp. 79- 89.
Surahmaida, S., Sudarwati, T. P. L., & Junairiah, J., 2018.  Analisis  GCMS  terhadap  Senyawa Fitokimia  Ekstrak  Metanol Ganoderma lucidum . Jurnal  Kimia  Riset ,  3(2),  pp.  147- 155.
Tandi,  J.,  Wulandari,  A.,  &  Asrifa,  A.,  2017.  Efek Ekstrak Etanol Daun Gendola Merah ( Basella alba L.) terhadap Kadar Kreatinin, Ureum dan Deskripsi  Histologis  Tubulus  Ginjal  Tikus Putih  Jantan  ( Rattus  norvegicus )  Diabetes yang Diinduksi Streptozotocin. Jurnal Farmasi  Galenika  (Galenika  Journal  of Pharmacy)(E-Journal) , 3 (2), pp. 93-102.
Tjahjani, N. P., Kristina, T. N., & Lestari, E. S., 2016. Efektivitas  Ekstrak  Etanol  Daun  Ungu ( Gratophyllum pictum L.) untuk menurunkan Kadar TNF-α dan NO. Pharmaciana , 6(2), pp.
191-200.
Umboh,  D.  Y.,  de  Queljoe,  E.,  &  Yamlean,  P.  V.,
2019. Uji Aktivitas Antihiperurisemia Ekstrak Etanol  Daun  Gedi  Hijau  ( Abelmoschus manihot (L.) Medik) pada Tikus Putih Jantan Galur Wistar ( Rattus norvegicus ).
Pharmacon , 8(4), pp. 878-887.
Wei,  C.  C.,  Yen,  P.  L.,  Chang,  S.  T.,  Cheng,  P.  L., Lo,  Y.  C.,  &  Liao,  V.  H.  C.,  2016. Antioxidative  Activities  of  Both  Oleic  Acid and Camellia  tenuifolia Seed  Oil  are Regulated  by  the  Transcription  Factor  DAF- 16/FOXO  In Caenorhabditis  elegans . PloS one , 11(6), pp. 1-15
Wientarsih,  I.,  Madyastuti,  R.,  Prasetyo,  B.  F.,  & Firnanda, D., 2012. Gambaran Serum Ureum dan  Kreatinin  pada  Tikus  Putih  yang  Diberi Fraksi  Etil  Asetat  Daun  Alpukat. Jurnal veteriner , 13 (1), pp. 57-62.
Yahya, A. D. A., Suyanto, E., & Fatchiyah, F., 2020. Pengaruh  Protein  CSN1S2  dari  Susu  dan Yogurt Kambing Peranakan Ethawah Terhadap  Komposisi  Mikrobiota  pada  Feses Tikus  RA-CFA. Biotropika:  Journal  of Tropical Biology , 8(2), pp. 106-115.
Zhang, Y., Cai, H., Tao, Z., Yuan, C., Jiang, Z., Liu, J.,  &  Xu,  W.,  2021. Ganoderma  lucidum Spore  Oil  (GLSO),  A  Novel  Antioxidant, Extends  The  Average  Life  Span  In Drosophila Melanogaster . Food Science and Human Wellness , 10(1), pp. 38-44.
Zhao, R., Chen, Q., & He, Y. M., 2018. The Effect of
Ganoderma
lucidum Extract on Immunological Function and Identify its Anti- tumor  Immunostimulatory  Activity  based  on The  Biological  Network. Scientific  reports , 8(1), pp. 1-14