## ANALISIS KADAR ASAM LEMAK ESENSIAL PADA KULIT BIJI JAMBU METE ( Annacardium occidentale L.)
Sari Indah Rahmawaty Botutihe 1) , Jemmy Abidjulu 1) , Paulina V. Y. Yamlean 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115
2) Jurusan Kimia FMIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
Cashew  nuts  are  type  of  nuts  which  is  most  favored  by  the  people  because  of  its  delicious taste.  To  be  processed  as  food,  cashew  nuts  must  first  be  separated  from  its  shell.  The  shell  of  the cashew  nut  can  produce  CNSL  or  Cashew  Nut  Shell  Liquid  which  is  oil  form.  Cashew  Nut  Shell Liquid  play  a  role  in  industries  such  as  wood  adhesives  or  raw  material  for  oil.  Cashew  Nut  Shell Liquid can be produced by extraction using chemical solvents. Some of the previous studies had been reported  about  the  fatty  acid  content  of  cashew  nuts.  The  purpose  of  this  study  was  to  determine whether there is an essential fatty acid in the cashew nut shell oil using Gas Chromatography. To be identified using Gas Chromatography, the oil must be converted into methyl ester compounds through the methylation process in advance. Gas Chromatography optimization was done using Helium gas. About seven peaks of chromatographic data were. One of the identified fatty acid compound was oleic acid.
Keywords : Essential Fatty Acids, Cashew, Gas Chromatography

## ABSTRAK
Kacang mete adalah jenis kacang yang paling digemari oleh masyarakat karena rasanya yang lezat. Untuk dapat diolah sebagai bahan makanan, kacang mete terlebih dahulu harus dipisahkan dari cangkangnya.  Cangkang  kulit  biji  mete  dapat  menghasilkan  CNSL  atau Cashew  Nut  Shell  Liquid yang  merupakan  minyak.  CNSL  memiliki  peranan  dalam  bidang  industri  seperti  perekat  kayu  atau bahan baku oli. CNSL dapat dihasilkan dengan cara ekstraksi menggunakan pelarut kimia. Beberapa penelitian  sebelumnya  telah  mengemukakan  kandungan  asam  lemak  pada  kacang  mete.  Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui ada tidaknya asam lemak esensial pada minyak kulit biji mete menggunakan  Kromatografi  Gas.  Untuk  dapat  diidentifikasi  menggunakan  Kromatografi  Gas  maka minyak harus diubah menjadi senyawa metil ester terlebih dahulu melalui proses metilasi. Optimasi Kromatografi  gas  dilakukan  dengan  menggunakan  gas  Helium.  Data  kromatogram  yang  diperoleh adalah sebanyak 7 puncak. Salah satu senyawa asam lemak yang teridentifikasi adalah Asam Oleat.
Kata kunci : Asam Lemak Esensial, Jambu Mete, Kromatografi Gas

## PENDAHULUAN
Kacang-kacangan  telah  lama  dikenal sebagai  sumber  protein  yang  saling melengkapi  dengan  biji-bijian,  seperti beras  dan  gandum.  Salah  satu  jenis kacang-kacangan  yang  paling  digemari sebagai  cemilan  adalah  kacang  mete. Sesuai  namanya,  jenis  kacang  ini  berasal dari  tanaman  jambu  mete  ( Annacardium occidentale L.).  Bagian  dari  jambu  mete yang  paling  sering  diolah  adalah  buah sejatinya  atau  kacangnya,  karena  kacang mete memiliki nilai jual yang tinggi karena rasanya  yang  lezat.  Kacang  mete  ini mengandung  lemak,  protein,  karbohidrat, dan  macam-macam  mineral.  Kandungan lemak inilah yang menyebabkan rasa lezat pada kacang mete. Namun dalam pengolahan  kacang  mete,  kulit  kacang  ini dibuang dan tidak digunakan lagi.
Lemak  tersusun  atas  asam  lemak  dan gliserol.  Menurut  O`keefe  (2002),  asam lemak  dibagi  menjadi  beberapa  macam, antara lain asam lemak jenuh, asam lemak tak  jenuh,  asam  lemak  asetilenik,  asam lemak  trans,  asam  lemak  bercabang,  asam lemak  siklik,  asam  lemak  epoksi  dan hipoksi,  dan  asam  lemak  furanoid.  Asam lemak  tak  jenuh  merupakan  asam  lemak yang  memiliki  ikatan  rangkap  pada struktur  kimianya.  Asam  lemak  tak  jenuh dibagi  menjadi  2  jenis,  yaitu  asam  lemak tak  jenuh  tunggal  (MUFA)  dan  asam lemak  tak  jenuh  ganda  (PUFA).  MUFA merupakan  asam  lemak  tak  jenuh  yang hanya  mempunyai  1  ikatan  rangkap, sedangkan  PUFA  merupakan  asam  lemak yang  mempunyai  lebih  dari  1  ikatan rangkap.  PUFA  terdiri  dari  asam  lemak omega-3 (n-3), omega-6 (n-6), dan omega- 9  (n-9).  Semakin  banyak  ikatan  rangkap pada lemak tak jenuh maka semakin rentan sifatnya  terhadap  oksidasi  lemak.  Selain
itu, asam lemak tak jenuh juga akan rusak apabila  terkena  panas.  Asam  lemak  tak jenuh  banyak  ditemukan  pada  kacang- kacangan,  biji-bijian,  ikan,  kekerangan, udang-udangan,  alga  (makroalga  dan mikroalga), dan daun yang berwarna hijau.
Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk mengetahui  kadar  asam  lemak  esensial yang terkandung di dalam kulit biji jambu mete ( Annacardium occidentale L.)

## METODE
Alat  yang  digunakan  antara  lain alat-alat  gelas,  pipet  mikro,  timbangan analitik,  blender,  oven,  ekstraktor  soxhlet, rotary  evaporator, microwave  digester , Kromatografi Gas.
Bahan  yang  digunakan  antara  lain, n-Heksana, KOH-Metanol 2 N, H 2 SO 4 1 N dalam metanol, NaCl, Mg 2 SO 4.
Sampel  yang  digunakan  adalah kulit  biji  jambu  mete.  Jambu  mete  yang diambil  adalah  jambu  mete  yang  berasal dari Tidore, Maluku Utara. Perlakuan pada sampel  antara  lain,  kulit  biji  jambu  mete dipisahkan  dari  bijinya  dan  dihancurkan menggunakan palu yang selanjutnya diserbuk  menggunakan  blender.  Ekstrak minyak  kulit  biji  mete  didapatkan  melalui ekstraksi  soxhlet  menggunakan  ekstraktor soxhlet.  Pelarut  yang  digunakan  dalam proses  ekstraksi  ini  adalah  n-Heksana. Nilai  rendemen  yang  didapatkan  dari ekstrak  minyak  biji  jambu  mete  adalah sebesar 22,5%.
Preparasi  sampel  yang  dilakukan sebelum  injeksi  adalah  metilasi  atau esterifikasi. Pelarut  yang digunakan dalam proses ini adalah KOH dalam metanol 2N.
Proses  metilasi  menggunakan  H 2 SO 4 sebagai katalis.
Kondisi operasi  yang diaplikasikan pada  Kromatografi  Gas  sebagai  berikut: Suhu  kolom  100 o C,  suhu  injeksi  225 o C, mode  injeksi  Splitless,  waktu  sampling  1 menit,  tekanan  89,7  kPa,  total  laju  alir 124,2  mL/min,  laju  alir  kolom  1.20 mL/min.  Suhu  awal  pembacaan  adalah 100 o C  selama  3  menit,  suhu  akhir  adalah 220 o C  selama  5  menit.  Total  waktu pembacaan  adalah  selama  48  menit. Menggunakan  detektor  FID  dan  gas pembawa Helium.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Ekstraksi  minyak  pada  kulit  biji jambu  mete  menggunakan  ekstraktor soxhlet  dengan  menggunakan  pelarut  n- heksana.  Penggunaan  n-heksana  sebagai pelarut  disebabkan  karena  minyak  yang akan  diekstrak  dari  kulit  biji  jambu  mete memiliki sifat non-polar, sehingga diperlukan  pelarut  non-polar  juga.  Selain n-heksana  dapat  digunakan  pelarut  lain tetapi  harus  merupakan  pelarut  organik, misalnya dietil eter.
Hidrolisis merupakan proses pemisahan  zat  yang  disebabkan  oleh molekul  air.  Hidrolisis  dapat  terjadi  pada kondisi  asam  maupun  basa.  Proses hidrolisis dalam penelitian ini berlangsung pada  kondisi  basa  dengan  menggunakan basa kuat KOH dalam metanol.
Penggunaan  basa  KOH  ini  disebabkan karena  air  tidak  dapat  menghidrolisis minyak  secara  sempurna.  Selain  KOH dapat digunakan basa kuat NaOH. Metanol digunakan  sebagai  pelarut  karena  metanol merupakan  pelarut  universal  yang  hampir dapat  melarutkan senyawa apapun. Reaksi antara  basa  dengan  minyak  ini  disebut
dengan  reaksi  saponifikasi  atau  yang sering  disebut  dengan  reaksi  penyabunan. Pemanasan  dengan  menggunakan  alat refluks  berfungsi  untuk  mempercepat reaksi  saponifikasi.  Reaksi  penyabunan pada  minyak  akan  menghasilkan  garam asam  lemak  atau  sabun.  Hasil  refluks kemudian  dimasukkan  kedalam  corong pisah  dan  ditambahkan  aquades  serta  n- heksana.  Campuran  tersebut  dikocok dengan  kuat  dan  didiamkan  sampai terbentuk 2 lapisan. 2 lapisan yang terlihat merupakan  lapisan  organik  (lapisan  atas) dan  lapisan  air  (lapisan  bawah).  2  lapisan ini  terjadi  karena  minyak  dan  air  tidak dapat  larut  seperti  teori like  dissolve  like. Lapisan organik tersebut merupakan larutan n-heksana yang telah menarik asam lemak  bebas,  sedangkan  air  menarik gliserol  yang  merupakan  penyusun  lipid. Gliserol dipisahkan dari asam lemak bebas karena  dapat  mengganggu  analisis  asam lemaknya.
Lapisan organik tadi diberi perlakuan  selanjutnya  yakni  ditambahkan KOH-Metanol  2  N  yang  kemudian  akan dimasukkan ke dalam  microwave digester untuk  dilakukan  proses  ekstraksi  kembali. Keuntungan  penggunaan  alat  ini  adalah proses  ekstraksi jauh  lebih  singkat dibanding  alat  ekstraksi  lainnya.  Alat  ini sebenarnya  lebih  sering  digunakan  untuk proses  destruksi  logam.  Penggunaan  alat ini  tidak  akan  menghilangkan  unsur-unsur volatil yang ada dalam campuran. Campuran  kemudian  didinginkan  dan ditambahkan  H 2 SO 4 1  N  dalam  metanol. Penambahan  asam  sulfat  ini  tidak  bisa dilakukan  dalam  keadaan  panas  karena mengandung  unsur  volatil,  yang  mana akan  menguap  dalam  keadaan  panas. Penambahan  asam  sulfat  ini  dinamakan dengan  proses  metilasi.  Proses  metilasi
bisa juga disebut dengan proses esterifikasi dimana  proses  ini  akan  menghasilkan senyawa  metil  ester.  Karena  untuk  dapat dianalisis  menggunakan  kromatografi  gas, suatu senyawa harus bersifat volatil.
Campuran  kemudian  dimasukkan kembali  kedalam  Microwave  digester. Setelah  selesai  di  ekstraksi  menggunakan microwave  digester,  campuran  kemudian ditambahkan  dengan  n-heksana  kemudian di aduk. NaCl jenuh ditambahkan kedalam campuran  bertujuan  untuk  membantu memisahkan  metil  esternya  dengan  air.  2
lapisan  terbentuk  setelah  penambahan NaCl  jenuh,  kemudian  lapisan  atasnya dipipet  kedalam  vial  yang  berisi  Mg 2 SO 4 . Penggunaan  Mg 2 SO 4 ini  bertujuan  untuk menarik  sisa-sisa  air  yang  mungkin  masih terkandung di dalam larutan tersebut.
Hasil pemeriksaan (analisis)
dengan kromatografi gas untuk metil ester dari  asam  lemak  hasil  hidrolisis  (minyak kulit biji mete) menghasilkan kromatogram  dengan  7  puncak  ( peak ) seperti yang ditampilkan pada gambar 1.
Gambar 1. Kromatogram sampel Metil Ester Kulit Biji Mete
Interpretasi  ke-7  senyawa  hasil  analisis kromatografi  gas  dapat  dilihat  pada  tabel 1.
Tabel 1. Spektrum Massa untuk Metil Ester Kulit Biji Mete
Peak tR (menit) % Area Nama Senyawa 1 10.457 3.87 Capric Acid Methyl Ester 2 17.732 46.38 Lauric Acid Methyl Ester 3 24.973 21.49 Myristic Acid Methyl Ester 4 31.733 16.43 Palmitic Acid Methyl Ester 5 37.122 1.91 Elaidic Acid Methyl Ester 6 37.341 5.02 Oleic Acid Methyl Ester 7 37.945 4.90 Stearic Acid Methyl Ester Dari tabel tersebut dapat
disimpulkan bahwa terdapat 7
kemungkinan  senyawa  yang  ada  pada sampel minyak kulit biji jambu mete yang
sudah  di  esterifikasi  dengan  retensi  waktu yang  berbeda-beda  serta  luas  dan  persen area yang berbeda pula. Luas area terbesar terdapat pada puncak ke 2 yaitu 47423640 sebesar  46.38  %  dengan  waktu  retensi 17.732  menit  merupakan  senyawa Lauric Acid  Methyl  Ester atau  Metil  ester  Asam Laurat  dan  merupakan  jenis  Asam  Lemak Jenuh ( saturated fatty acid / SFA).

## KESIMPULAN DAN SARAN
Dari ke tujuh senyawa asam lemak yang  terdeteksi,  tidak  ada  satupun  yang merupakan  jenis  asam  lemak  esensial. Asam  Oleat  adalah salah satu  asam  lemak yang  terdeteksi  pada  alat  Kromatografi Gas.  Nama  lain  dari  asam  oleat  adalah Omega-9. Asam oleat ini bukan merupakan  asam  lemak  esensial  karena asam lemak bisa dihasilkan oleh tubuh.

## DAFTAR PUSTAKA
O’Keefe,  S.F.  2002. Nomenclature  and Classification  of  Lipids.  Dalam: Food  Lipids:  Chemistry,  Nutrition, and  Biotechnology .  Edisi  II.  New York:  Marcel  Dekker  Inc.  Hal.  19- 56.