ISSN: 1907-9931 (print), 2476-9991 (online)

## PEMANFAATAN EKSTRAK RUMPUT LAUT (Eucheuma cottonii) DARI PERAIRAN SUMENEP SEBAGAI ANTIOKSIDAN
UTILIZATION OF Eucheuma cottonii EXTRACTS FROM SUMENEP SEAWATERS AS

## ANTIOXIDANTS
Tartila Syafitri, Hafiludin*, Adyos Bobby Chandra
Program Studi Manajemen Sumberdaya Perairan  Jurusan Kelautan dan Perikanan Fakultas Pertanian Universitas Trunojoyo Madura
Jalan Raya Telang Kabupaten Bangkalan
*Corresponden author email: hafiludin@trunojoyo.ac.id
Submitted: 16 June 2022 / Revised: 22 July 2022 / Accepted: 27 July 2022
http://doi.org/10.21107/jk.v15i2.14905

## ABSTRACT
Seaweed is a plant that has the potential to be cultivated and has many benefits, one of which is as a natural  antioxidant  because  it  contains  bioactive  compounds  that  function  to  ward  off  free  radicals. One of the seaweeds that has the potential to be developed is Eucheuma cottonii.  This study aimed to  analyze  the  proximate  content,  bioactive  content  and  antioxidant  activity  of  Eucheuma  cottonii seaweed.  This research was carried out in several stages, namely: seaweed preparation, proximate analysis,  phytochemical  analysis,  and  antioxidant  activity  tests  carried  out  at  the  Marine Biotechnology Laboratory, Trunojoyo University Madura.  The proximate content of Eucheuma cottonii seaweed is rich in water content in fresh form and rich in ash content in dry form, while the total fat content  and  protein  content  are  very  low.    Bioactive  compounds  in  Eucheuma  cottonii  seaweed  are alkaloids,  flavonoids,  triterpenoids,  and  saponins.    Eucheuma  cottonii  seaweed  has  the  best antioxidant activity with methanol as a solvent with an IC 50 of 757.05 ppm.  The results of this study indicate  that  Eucheuma  cottonii  seaweed  has  the  potential  to  be  developed  in  the  functional  food sector.
Keywords: antioxidant, bioactive, Eucheuma cottonii, proximate.

## ABSTRAK
Rumput laut merupakan salah satu tanaman tingkat rendah yang berpotensi untuk dibudidayakan dan mengandung  senyawa  bioaktif  dengan  aktivitas  antioksidan  alami  untuk  menangkal  radikal  bebas. Salah  satu  jenis  rumput  laut  yang  berpotensi  dikembangkan  yaitu  Eucheuma  cottonii.  Penelitian  ini bertujuan untuk menganalisis kandungan proksimat, kandungan bioaktif dan aktivitas antioksidan dari rumput  laut  E.  cottonii.  Penelitian  ini  dilakukan  dalam  beberapa  tahap  yaitu:  preparasi  rumput  laut, analisis proksimat, analisis fitokimia, dan uji aktivitas antioksidan yang dilaksanakan di Laboratorium Bioteknologi  Laut,  Universitas  Trunojoyo  Madura.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  kandungan proksimat dari rumput laut E. cottonii kaya akan kadar air dalam bentuk segar dan kaya akan kadar karbohidrat dalam bentuk kering. Senyawa bioaktif yang terdeteksi dalam rumput laut E. cottonii yaitu alkaloid, flavonoid, triterpenoid, dan saponin. Rumput laut E. ottonii  mempunyai aktivitas antioksidan terbaik  dengan  pelarut  metanol  dengan  IC 50 sebesar  757,05  ppm.  Hasil  penelitian  ini  menunjukkan bahwa rumput laut Eucheuma cottonii mempunyai potensi untuk dikembangkan dalam bidang pangan fungsional.
Kata Kunci: antioksidan, bioaktif, Eucheuma cottonii, proksimat.

## PENDAHULUAN
Perairan  Indonesia  memiliki  luas  sekitar  70% dari  wilayah  nusantara  dan  berpotensi  untuk usaha  budidaya  laut.  Rumput  laut  merupakan salah  satu  tanaman  laut  terbesar  yang
memiliki  potensi  untuk  dibudidayakan  (Sarita et  al .,  2021).  Rumput  laut  banyak  dibudidaya dan berpotensi untuk dimanfaatkan hasilnya di berbagai  Negara  di  Asia  Pasifik  termasuk salah  satunya  adalah  Indonesia.  Produksi rumput  laut  yang  telah  berkembang  secara
maksimal  di  Indonesia  hanya  terdapat  di wilayah  Bali,  Nusa  Tenggara  Barat,  dan Sulawesi Selatan.
Rumput  laut  yang  memiliki  potensi  namun masih  belum  terolah  secara  luas  dan  berhasil guna  yaitu  wilayah  Jawa  Timur.  Lokasi potensial  di  daerah  Jawa  Timur  yang  belum berkembang  yaitu  Pacitan,  Banyuwangi  dan Sumenep. Potensi pengembangan di Kabupaten  Sumenep  khususnya  tercatat 5.780  ha  dan  baru  dimanfaatkan  141,324  ha (Fatmawati  &  Wahyudi,  2016).    Kabupaten Sumenep  merupakan  salah  satu  daerah penghasil  rumput laut  terbesar  di  Jawa  Timur. Wilayah pantai yang  landai, ekosistem terumbu  karang  dan  perairan  laut  yang  relatif tenang memacu perkembangan usaha budidaya  rumput  laut,  dan  dengan  luas  areal budidaya  5.795  ha  dapat  menghasilkan 3.224,70  ton  rumput  laut  per  tahun  (Jailani et al ., 2015).
Rumput laut atau seaweed termasuk kelompok  makroalga  yang  terdiri  atas  alga hijau ( Cholorophyceae),  alga  hijau  biru (Cyanophyceae), alga coklat (Phaeophyceae), dan alga merah (Rhodophyceae). Rumput laut berdasarkan senyawa kimia yang dikandungnya terbagi menjadi penghasil karaginan  (karagenofit),  agar  (agarofit),  dan alginat  (alginofit).  (Kasran et  al .,  2021). E. cottonii termasuk  dalam  kelas Rhodophyceae atau alga merah (Hidayat et al ., 2018).
Rumput  laut  memiliki  banyak  manfaat,  salah satunya  yaitu  sebagai  antioksidan  alami. Antioksidan  berdasarkan  sumbernya  dibagi menjadi  dua  yaitu  antioksidan  alami  dan antioksidan sintesis. Antioksidan yang terkandung dalam rumput laut dapat dimanfaatkan  untuk menangkal  radikal  bebas. Penelitian  mengenai E.  cottonii telah  banyak dilaksanakan  salah  satunya  yaitu  uji  aktivitas antioksidan  pada  alga  merah  ( E.    cottonii )  di Perairan Dahi’ae  (Kore et al ., 2019).
Rumput  laut E.  cottonii diketahui  juga mengandung  senyawa  metabolit  sekunder yaitu  flavonoid,  alkaloid,  triterpenoid,  protein, karbohidrat  dan  lemak  (Maharany et  al ., 2017).  Safia et  al .,  (2020)  mengemukakan bahwa E.  cottonii mengandung  karbohidrat, protein, sedikit lemak, dan abu yang sebagian besar  merupakan  senyawa  garam  seperti natrium dan kalsium. E.  cottonii juga merupakan  sumber  vitamin  seperti  vitamin  A, B1,  B2,  B6,  B12,  dan  vitamin  C  serta mengandung  mineral  seperti  K,  Ca,  Na,  Fe, dan iodiu.
Penelitian  antioksidan  dari  berbagai  jenis rumput  laut  telah  banyak  dilakukan  ((Insani, 2022;  Podungge et  al .  2018;  Suryaningrum et al .,  2006).  Potensi  dan  manfaat  senyawa bioaktif pada E. cottonii masih perlu dikaji lebih komphrehensif.  Penelitian  kandungan  bioaktif dan  antioksidan  pada E.  cottonii dari  daerah perairan  Sumenep  Madura  masih  perlu dilakukan.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui  kandungan  nutrisi,  bioaktif  dan aktivitas antioksidan yang ada pada E. cottonii dalam  bentuk  segar  dan  kering  dari  Perairan Sumenep.

## MATERI DAN METODE Bahan dan Alat
Bahan utama yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  rumput  laut E.  cottoniii segar  dan  kering.  Bahan  yang  digunakan untuk  pengujian  berupa  DPPH  (1,1-  difenil-2- pikrilhidrazil ) merk  Sigma  Aldrich,  n-heksan, metanol dan akuades.
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah    tungku  pembakaran  (Muffle Furnace), rotary  evaporator  (Buchi),  hot  plate  (Drawell), blender (Maspion), erlenmeyer (Herma), spektrofotometer UV-Vis (Shimadzu).

## Metode Penelitian Preparasi Sampel
Rumput laut Eucheuma cottonii dicuci menggunakan  air  laut  untuk  menghilangkan kotoran  dan  pasir,  kemudian  dicuci  kembali menggunakan  air  mengalir  untuk  sampel segar.  Rumput  laut  yang  telah  bersih kemudian  dikeringkan  dibawah  sinar  matahari secara langsung selama 2-3 hari untuk sampel kering.

## Analisis Proksimat
Analisis Kadar Air (SNI 01-2534.1-2006)
Pengujian  kadar  air  menggunakan  wadah cawan porselin kosong yang sudah dipanaskan  dalam  oven  pada  suhu  105  ºC sedikitnya  2  jam  selanjutnya  didinginkan dalam desikator, kemudian ditimbang beratnya sampai  berat  konstan.  Timbang  masing- masing  2  g  sampel,  selanjutnya  cawan  yang telah berisi sampel dimasukkan kedalam oven bersuhu  105  ºC  sampai  beratnya  konstan. Pengujian  dilakukan  sebanyak  dua  kali ulangan.  Persentase  kadar  air  dapat  dihitung dengan rumus sebagai berikut :
Kadar air (%) = ((A+B)−C) B x 100%...................(1)
Keterangan :
A = Bobot wadah kosong (g); B = Bobot sampel (g); C = Bobot tetap wadah + sampel setelah pemanasan (g)

## Analisis Kadar Abu (SNI 01-2534.1-2006)
Pengujian dilakukan dengan memasukkan 2 g sampel  yang  telah  dihomogenkan  kedalam cawan  abu  porselin  kemudian  dimasukkan  ke dalam  oven  pada  suhu  100  ºC  selama  2  jam. Cawan abu porselin kemudian dipindahkan ke dalam tungku pengabuan dan naikkan temperatur  secara  bertahap  sampai mencapai kurang  lebih  550  ºC.  Pengujian  dilakukan sebanyak tiga kali ulangan. Perhitungan kadar abu adalah sebagai berikut :
Kadar Abu (%) = (C−A) B x 100%......................(2)
Keterangan : A = Bobot cawan kosong (g); B = Bobot sampel (g); C = Bobot tetap cawan + sampel setelah pemijaran (g)

## Analisis Kadar Lemak
Analisis  kadar  lemak  menggunakan  metode soxhlet. Dilakukan refluks terhadap 2 g sampel paling   tidak    selama    5   jam    hingga    pelarut yang turun  kembali  ke  labu  lemak  berwarna jernih.  Labu    lemak    berisi    hasil    ekstraksi dimasukkan    ke  dalam  oven  bersuhu  105°C kemudian  didinginkan  dalam    desikator    dan dilakukan penimbangan. Kadar  lemak menurut (AOAC 2005) dihitung dengan rumus :
Kadar Lemak (%)  = Berat Lemak(g) Berat sampel (g) x 100%....(3)

## Analisis Protein
Pengukuran kandungan protein menggunkaan metode  titrasi  formol.  2  g  sampel  alga  merah yang  sudah  lolos  air  dimasukkan  ke  dalam labu  erlenmeyer,  kemudian  ditambahkan beberapa  tetes  indicator  fenolflatelin  1%. Selanjutnya ditambahkan kalium oksalat jenuh sebanyak  0,4  ml.  titrasi  dilakukan  dengan larutan  NaOH  0,1  N  sampai  timbul  warna merah  muda,  banyaknya  NaOH  0,1  N  yang terpakai dicatat, misalnya p ml. Titrasi blangko dibuat  dengan  cara  menambahkan  10  ml aquades  dengan  0,4  ml  kalium  oksalat  jenuh, 1  ml  formaldehyde  atau  formalin  40%  + beberapa  tetes  fenolftalein  1%,  kemudian dititrasi dengan NaOH 0,1 N sampai terbentuknya  warna  merah  muda,  banyaknya NaOH yang terpakai dicatat (Vionita & Insafitri, 2020).  Berikut  ini  rumus  perhitungan  kadar protein  metode  formol  menurut  (Khasanah, 2013) :
Kadar  Protein  (%)  =  ( mL titrasi gr x 10 )  x N/  NaOH  x 14,008 ………………..(4)
Keterangan: mL.  titrasi  =  Volume  titrasi  1  +  Titrasi;  N  = Normalitas  NaOH;  2  g  =  Berat  sampel  yang digunakan (g)

## Analisis Serat Kasar
Ditimbang 2 g contoh bebas lemak, dikeringkan dan dimasukkan kedalam Erlenmeyer  500  mL.  Ditambahkan  50  ml larutan  H 2 SO 4 1,25%,  kemudian  didihkan selama  30  menit  dengan  menggunakan pendingin  tegak.  ditambahkan  50  ml  larutan NaOH  3,25%  dan  didihkan  lagi  selama  30 menit.  Dalam  keadaan  panas  kemudian disaring  dengan  corong  Bucher  yang  berisi kertas saring tak berabu Whatman no 41 yang telah  dikeringkan  dan  diketahui  bobotnya. Dicuci  endapan  yang  terdapat  pada  kertas saring  dengan  menggunakan  H 2 SO 4 1,25% panas,  air  panas  dan  etanol  96%.  Kemudian diangkat kertas saring beserta isinya dimasukkan  ke  dalam  kotak  timbang  yang telah  diketahui  bobotnya,  dikeringkan  pada suhu  105°C,  dinginkan  dan  timbang  sampai bobot  tetap.  Bila  ternyata  kadar  serat  kasar lebih  dari  1%,  dilanjutkan  dengan  proses diabukan kertas saring beserta isinya, kemudian dtimbang sampai bobot tetap.
Kadar Serat Kasar (%) = W−W1 W2 x 100%........(5)
Keterangan : W = bobot contoh (g); W1 = bobot abu (g); W2 = bobot endapan pada kertas saring

## Analisis Karbohidrat
Analisis  kadar  karbohidrat  (by  diference) dilakukan dengan metode pengurangan (Novianti  &  Arisandi,  2021).  Rumus  dalam perhitungan  kadar  karbohidrat  adalah  sebagai berikut :
Kadar  Karbohidrat  (%)  = 100  - (  Kadar air  +  Kadar Abu + Kadar Lemak + Kadar Protein) …………..(6)

## Ekstraksi Sampel
Rumput  laut E.  cottonii dipotong-  potong menggunakan  gunting,  kemudian  dihaluskan menggunakan  blender  hingga  menjadi  kecil- kecil.  Bahan  sampel  kemudian  ditimbang masing-masing sebanyak 1,5 kg dan dimasukan    ke    dalam    3  toples.  Tambahkan pelarut  n-heksana,  metanol,  dan  akuades hingga terendam ke dalam toples. Perendaman  dilakukan  sebanyak  3  kali sampai  filtrat  mendekati  bening.  Perendaman
pertama menggunakan pelarut volume 650 mL dengan perbandingan
1:1,3
(w/v), perendaman  kedua  mencapai  volume  akhir 550 mL dengan perbandingan 1:1,1 (w/v), dan perendaman  ketiga  mencapai  volume  akhir 500  mL  dengan  perbandingan  1:1  (w/v).  Hasil maserasi  kemudian  disaring  dengan  kertas saring  Whatman  41 untuk pelarut n-heksana, metanol,  dan  akuades  sehingga    dihasilkan filtrat  dan  residu.  Filtrat    yang    diperoleh kemudian  dipekatkan  menggunakan  rotary evaporator .

## Analisis Fitokimia

## Alkaloid
Sebanyak 50 g sampel dilarutkan dalam asam sulfat  (H 2 SO 4 )  2  N  sebanyak  2  tetes.  Larutan sampel  diletakkan  pada  plat tetes  dan  ditetesi pereaksi. Pengujian menggunakan tiga pereaksi  alkaloid  yaitu  Dragendorff,  Meyer, dan Wagner. Hasil uji positif apabila terbentuk endapan merah hingga jingga dengan pereaksi Dragendorff, endapan putih kekuningan  dengan  dengan  pereaksi  Meyer, dan  endapan  coklat  dengan  pereaksi  Wagner (Purwaningsih & Deskawati, 2021).

## Flavonoid
Sebanyak  50  mg  sampel  ditambah  dengan 0,05  mg  serbuk  magnesium  dan  dilarutkan menggunakan  0,2 mL  amil  alkohol  (campuran HCl 37% dan etanol 95% dengan volume yang sama)  dan  4  mL  alkohol  70%.  Hasil  uji  positif apabila  terbentuk  warna  merah,  kuning  atau jingga pada lapisan amil alkohol.

## Tanin
Sebanyak 50 mg sampel ditambah dengan 20 mL  air  panas  lalu  disaring  dan  ditetesi  FeCl 3 1%  sebanyak  2  tetes.  Hasil  uji  positif  apabila larutan berwarna biru atau hijau kehitaman.

## Saponin
Sampel  sebanyak  50  g  dalam  tabung  reaksi ditambahkan  air  panas  20  mL  lalu  dikocok. Hasil  uji  positif  apabila  busa  yang  terbentuk stabil  selama  30  menit  dan  tidak  hilang  pada penambahan 1 tetes HCl 2 N.

## Triterpenoid dan Steroid
Sebanyak  50  mg  sampel  ditambah  dengan  2 mL  kloroform  kemudian  ditetesi  dengan anhidrida  asam  asetat  sebanyak  5  tetes  dan asam  sulfat  pekat  (H 2 SO 4 )  2  N  sebanyak  3 tetes.  Hasil  uji  positif  ditunjukkan  dengan terbentuknya larutan berwarna merah
kecokelatan untuk petama kali yang kemudian berubah  menjadi  biru  dan  hijau.  Warna  biru pada  larutan menandakan  adanya  kandungan steroid  sedangkan  warna  merah  kecokelatan menandakan adanya kandungan triterpenoid.

## Fenol Hidrokuinon
Sebanyak  50  mg  sampel  dilarutkan  dalam 0,25  mL  etanol  70%.    Larutan  ditambahkan FeCl  5%  sebanyak  2  tetes.  Hasil  uji  positif apabila terbentuk warna hijau atau hijau biru.

## Uji Aktivitas Antioksidan
Uji aktivitas antioksidan menggunakan beberapa  tahapan  menurut  (Syafrinal  & Ramadhani, 2019) yaitu:
Pembuatan
Larutan 1,1- difenil-2-
pikrilhidrazil (DPPH)
Sebanyak  1,97  mg  DPPH  dilarutkan  dengan metanol  dalam  labu  ukur  sampai  100  mL sehingga diperoleh larutan dengan konsentrasi 50 µM.

## Pengujian Aktivitas Antioksidan
Penentuan  absorban  dari  larutan  DPPH dilakukan  dengan  dipipet  4  mL  larutan  1,1- difenil-2-pikrilhidrazil  50  µM  dan  ditambahkan 1 mL methanol. Setelah itu dibiarkan 30 menit ditempat  gelap,  kemudian  diukur  serapannya dengan  alat  spektrofotometer  UV-Vis  pada panjang  gelombang  513  nm,  absorban  yang diperoleh digunakan sebagai kontrol.
Pemeriksaan  aktivitas  antioksidan,  dilakukan dengan  menimbang  ekstrak  sebanyak  2,5  mg dan  larutkan  dengan  methanol  dalam  labu ukur  25  mL  sampai  tanda  batas,  sehingga diperoleh  konsentrasi  sampel  100  ppm,  lalu diencerkan menjadi konsentrasi 40, 20, 10 dan 5  ppm.  Kemudian  untuk  penentuan  aktivitas antioksidan  dipipet  sebanyak  1  mL  larutan sampel  dengan  pipet  mikro  dan  masukkan  ke dalam botol vial, kemudian ditambahkan 4 mL larutan 1,1-difenil-2-pikrilhidrazil 50 µM. campuran dihomogenkan dan dibiarkan selama  30  menit  ditempat  gelap,  serapan diukur  dengan  spektrofotometer  UV-Vis  pada panjang gelombang 513 nm.
Aktivitas  antioksidan  sampel  ditentukan  oleh besarnya  hambatan  serapan  radikal  bebas melalui perhitungan persentase inhibisi serapan 1,1-difenil-2-pikrilhidrazil dengan menggunakan rumus :
% Inhibisi = Absorban blanko−Absorban sampel Absorban blanko ×
100% ...........................................................(7)

## Analisa Data
Penelitian ini  dilakukan  dengan menggunakan metode Rancangan Acak Lengkap (RAL) yang terdiri  dari  2  faktor  perlakuan  berbeda  yaitu sampel  basah  dan  sampel  kering.  Setiap perlakuan  dilakukan  3  kali  pengulangan.  Data hasil  pengujian  analisa  proksimat  yang diperoleh  kemudian  dianalisa  lebih  lanjut menggunakan uji T berpasangan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Kandungan Proksimat  Eucheuma cottonii
Analisis  proksimat  meliputi  uji  kadar  air,  abu, lemak,  serat  kasar,  protein  dan  karbohidrat. Analisis  proksimat  dilakukan  menggunakan sampel  rumput  laut E.  cottonii dengan  dua perlakuan  yang  berbeda  yaitu  segar  dan kering.  Perolehan  hasil  kandungan  prosimat pada E. cottonii segar dan kering berbeda dan bervariasi.
Table 1 . Eucheuma cottonii proximate content Proximate Eucheuma cottonii Fresh Dry Water 82,73 ± 0,66 16,03 ± 0,28 Ash 7,52 ± 1,05 24,74 ± 1,26 Lipid 0,32 ± 0,00 0,11 ± 0,01 Crude fiber 0,33 ± 0,13 0,31 ± 0,18 Protein 0,25 ± 0,00 0,27 ± 0,00 Carbohydrate 8,85 ± 0,99 58,54 ± 1,34 Table  1 menunjukkan  bahwa  kandungan proksimat E.  cottonii segar  tertinggi  yaitu diperoleh  pada  kadar  air  sebesar  82,73%  dan terendah  kadar  protein  sebesar  0,25%.  Hasil kandungan  proksimat Eucheuma  cottonii kering  tertinggi  yaitu  terdapat  pada  kadar karbohidrat  sebesar  58,54%  dan  terendah kadar lemak sebesar 0,11%.
Berdasarkan  nilai  t  stat  >  t  critical,  sehingga kadar air pada E. cottonii perlakuan segar dan kering  terdapat  perbedaan  yang  signifikan. Perbedaan  nilai  antara  bahan  segar  dan kering  diakibatkan  oleh  proses  penguapan saat  melakukan  pengeringan.  Kadar  air  pada penelitian ini lebih tinggi dibandingkan dengan Maharany et  al. ,  (2017)  yang  mendapatkan kadar  air  sebesar  76,15%  pada E.  cottonii kering.  Hasil  ini  lebih  rendah  dibandingkan dengan  Yanuarti et  al .,  (2017)  sebesar 93,04%.  Kadar  air  yang  diperoleh  pada penelitian  ini  lebih  tinggi  jika  dibandingkan dengan  (Nosa et  al .,  2020)  sebesar  14,23%. Kadar  air  rumput  laut E.  cottonii kering maksimum  sesuai  dengan  Standard  Nasional Indonesia  (SNI)  2690-2015  sebesar  30,0%, maka  dengan  demikian E.  cottonii pada penelitian  ini  masih  tergolong  memenuhi Standard Nasional Indonesia (SNI) rumput laut kering.
Perbedaan  nilai  kadar  air  yang  didapatkan dalam  suatu  bahan  segar  diakibatkan  oleh kondisi  lingkungan,  lama  penyimpanan,  suhu dan  kelembaban  (Yanuarti et  al .,  2017). Dolorosa et al ., (2017) mengemukakan bahwa
perbedaan  nilai  yang  diperoleh  pada  bahan kering  dapat  diakibatkan  oleh  perbedaan waktu dan proses pengeringan yang dilakukan.  Teknik  dan  metode  pengeringan, perbedaan bahan baku yang digunakan dalam bentuk segar dan kering juga akan berpengaruh  pada  kadar  air  yang  dihasilkan setelah pengeringan.
Kadar  abu  bahan  segar E.  cottonii diperoleh sebesar  7,52%,  lebih  rendah  dibandingkan kadar abu bahan kering yaitu sebesar 24,74%. Nilai t stat > t critical, sehingga kadar abu pada E. cottonii perlakuan segar dan kering memiliki perbedaan  yang  signifikan.  Perbedaan  tinggi rendahnya  kadar  abu  oleh  masing-masing bahan  dipengaruhi  oleh  habitat  dan  sumber hara  mineral  dalam  lingkungan.  Penempelan permukaan thallus pada subtrat menyebabkan sejumlah  mineral  terserap  dalam  rumput  laut. Jumlah  hara  mineral  yang  diserap  tersebut akan  mempengaruhi  kadar  abu  pada  jaringan rumput laut (Yanuarti et al ., 2017). Hasil kadar abu  bahan  segar  pada  penelitian  ini  lebih tinggi  jika  dibandingkan  dengan  penelitian Maharany et al.,  (2017)  sebesar  5,62%  pada E.  cottonii kering;  dan  penelitian  Yanuarti et al .,  (2017)  sebesar  2,34%  pada E.  cottonii kering  .  Kadar  abu  bahan  kering  yang dihasilkan  oleh  penelitian  ini  lebih  rendah  jika dibandingkan  dengan  penelitian  (Nosa et  al .,
2020) sebesar 38,63%.
Kadar lemak yang didapatkan E. cottonii segar pada penelitian ini sebesar 0,32%, sedangkan rumput  laut E.  cottonii kering  sebesar  0,11%.
Nilai  t  stat  >  t  critical  serta  nilai  P  two-tail  < 0,05,  sehingga  kadar  lemak  pada E.  cottonii perlakuan  segar  dan  kering  ini  kandungannya memiliki  perbedaan  yang  signifikan.  Secara umum,  kadar  lemak  yang  diperoleh  oleh bahan  segar  dan  kering  cenderung  rendah sesuai  dengan  yang  disampaikan  oleh  (Safia, 2020),  bahwa  rumput  laut  tidak  kaya  akan lemak  atau  tergolong  rendah.  Rendahnya kandungan  lemak  tersebut  dikarenakan  pada umumnya rumput laut dan tanaman menyimpan cadangan makanan dalam bentuk karbohidrat  terutama  polisakarida  (Yanuarti et al .,  2017).  Kadar  lemak  bahan  segar  yang diperoleh  penelitian  ini  lebih  rendah  jika dibandingkan  dengan  penelitian  Yanuarti et al .,  (2017)  sebesar  0,58%  pada E.  cottonii kering;  dan  penelitian  Maharany et al.,  (2017) sebesar  0,58%  pada E.  cottonii kering, sedangkan  perolehan  kadar  lemak  bahan kering penelitian  ini  lebih  rendah jika dibandingkan  dengan  (Nosa et  al .,  2020) sebesar 0,81%.
Kadar  protein  rumput  laut  segar E.  cottonii didapatkan  hasil  sebesar  0,25%,  hasil  kadar tersebut  lebih  rendah  dibandingkan  dengan penelitian  Yanuarti et  al .  (2017)  1,02%;  dan Maharany et al . (2017) sebesar 2,32% pada E. cottonii kering.  Kadar  protein  pada  bahan kering  rumput  laut E.  cottonii hasil  yang
didapatkan  sebesar  0,27%,  dibandingkan penelitian  (Nosa et  al .,  2020)  22,18%  hasil tersebut jauh lebih kecil.
Hasil  analisis  kadar  karbohidrat E.  cottonii dalam bentuk segar sebesar 8,85%, sedangkan  dalam  bentuk  kering  sebesar 58,54%. Nilai t stat > t critical dan P two-tail < 0,05, maka  kadar  karbohidrat  pada E.  cottonii perlakuan  segar  dan  kering  ini  memiliki perbedaan  yang  cukup  nyata.  Nilai  kadar karbohidrat  bahan  segar  setara  dengan penelitian  (Maharany et  al .,  2017)  sebesar 8,78%  dalam  bentuk  kering.  Namun,  lebih tinggi  dibandingkan  dengan  hasil  penelitian Yanuarti et  al .  (2017)  sebesar  3,02%  pada E. cottonii dalam bentuk kering. Kadar karbohidrat  rumput  laut Eucheuma  cottonii kering memperoleh hasil lebih besar dibandingkan  dengan  pnelitian  (Nosa et  a l., 2020) sebesar 32,47%.

## Kandungan Biaoktif Eucheuma cottonii
Senyawa  bioaktif makroalga merupakan  salah satu  kandungan  yang  dapat  diaplikasikan dalam  bidang  kesehatan  seperti  antioksidan, antibakteri, antijamur, dan antivirus (Ndahawaly,  2021).  Senyawa  bioaktif    terdiri dari  alkaloid,  flavonoid,  fenol  hidrokuinon, saponin, tanin dan steroid/triterpenoid.
Table 2 . Eucheuma cottonii phytocemical content Phytocemical Solvent N- Hexane Methanol Aquades Alkaloids + - - Flavonoids + - - Tannins - - - Saponins - + + Triterpenoids + - - Steroids - - - Phenol Hydroquione - - -
Table  2 menunjukkan  hasil  analisis  fitrokimia secara  kualitatif,  diketahui  bahwa E.  cottonii mengandung  komponen  aktif  antara  lain alkaloid,  flavonoid,  saponin,  dan  triterpenoid. Komponen positif terbanyak yaitu menggunakan  pelarut  n-heksan,  sedangkan untuk  metanol  dan  akuades  memperoleh komponen positif sama. Hasil senyawa bioaktif pada  penelitian  ini  dibandingkan  dengan penelitian  (Maharany et  al .,  2017),  yang menyatakan  bahwa  senyawa  bioaktif E. cottonii yang  terkandung  yaitu  flavonoid, triterpenoid  dan  fenol  hidrokuinon;  sedangkan (Safia,  2020),  menyatakan  bahwa E.  cottonii mengandung alkaloid, flavonoid, fenol hidrokuinon, dan tanin.
Kandungan  ekstrak E.  cottonii dengan  pelarut n-heksan  dihasilkan  alkaloid  dan  flavonoid, dengan  menunjukkan  hasil  yang  positif  yaitu terbentuknya  warna  kuning  atau  jingga. Senyawa  flavonoid  bersifat  non  polar,  maka dari  itu  sangat  mudah  larut  dengan  pelarut  n- heksan.    Senyawa  flavonoid  dan  alkaloid dapat  digunakan  sebagai  antioksidan  dan antibakteri (Meiyasa et al ., 2021).
Kandungan  triterpenoid  pada E.  cottonii dengan  pelarut  n-heksan  menunjukkan  hasil yang  positif  dengan  terbentuknya  warna merah  kecokelatan.  Yanuarti et  al .,  (2017) menyatakan bahwa prinsip tersebut berdasarkan kemampuan senyawa triterpenoid membentuk warna jika direaksikan
dengan  H 2 SO 4 pekat. Triterpenoid merupakan salah  satu  senyawa  yang  berpotensi  sebagai antioksidan,  dan  biasanya  larut  dalam  pelarut non-polar.
Kandungan saponin pada E. cottonii menggunakan  pelarut  metanol  dan  akuades dapat  dilihat  dengan  terbentuknya  busa.  Hal ini  sesuai  pendapat  (Purwaningsih  dan Deskawati,  2020),  yang  menyatakan  bahwa saponin  merupakan  senyawa  glikosida  yang tidak larut dalam pelarut non polar. Perbedaan kepolaran pelarut merupakan salah satu faktor yang menyebabkan tidak terdeteksinya saponin  pada  ekstrak  dengan  pelarut  non polar seperti n-heksan.

## Aktivitas Antioksidan
Analisis antioksidan ekstrak Eucheuma cottonii dilakukan  dengan  menggunakan  metode DPPH, yang merupakan metode paling umum untuk  digunakan  menguji  aktivitas  antioksidan karena metode ini tergolong cepat, sederhana, dan  bahan  yang  digunakan  hanya  sedikit. Analisis  ini  dilakukan  dengan  mengukur  nilai aiktivitas  inhibisi  atau  penghambat  terhadap radikal bebas DPPH menggunakan spektrofotometri  UV-Vis.  Gambar  1,  2  dan  3 menjelaskan  regresi  linier  asam  askorbat  dan ekstrak Eucheuma cottonii dengan menggunakan  3  pelarut  berbeda  yaitu  n- heksan, metanol, dan akuades.
Figure 1 . Graph of the relationship between inhibition and ascorbic acid concentration
Figure 2. Graph of the relationship between inhibition and n-hexana concentration
Figure 3 . Graph of the relationship between inhibition and methanol concentration
Figure 4 . Graph of the relationship between inhibition and aquades concentration
Nilai IC 50 ditentukan menggunakan persamaan regresi  linier  yang  telah  diperoleh.  Semakin kecil  nilai  IC 50 maka  semakin  besar  aktivitas antioksidan.
Table  3 .  IC 50 value  of  ascorbic  acid  and Eucheuma cottonii
Sample IC 50 (ppm) Ascorbic acid 347,45 N-hexana 770,81 Methanol 757,05 Aquades 1.751,97
Table  3 menunjukkan  bahwa  nilai  IC 50 larutan asam askorbat diperoleh sebesar 347,45 ppm. Nilai  IC 50 pada  ekstrak  rumput laut Eucheuma cottonii menggunakan pelarut n-heksan sebesar 770,81 ppm, pelarut metanol sebesar 757,05  ppm,  dan  pelarut  akuades  1.751,97 ppm. Ekstrak n-heksan rumput laut Eucheuma cottonii pada  penelitian  ini  lebih  rendah dibandingkan pada penelitian (Melinda, 2021), sebesar  287587,50  μg/mL.Nilai  IC 50 ekstrak metanol  pada  penelitian  ini  lebih  rendah dibandingkan  penelitian  (Lantah  et  al.,  2017), Kappaphycus alvarezii ekstrak metanol sangat lemah  yakni  163.819,99  ppm.  Dolorosa et  al .,
(2017) memperoleh  nilai  IC 50 ekstrak  akuades sebesar  130,62,  hal  tersebut  menunjukkan bahwa  nilai  yang  diperoleh  lebih  rendah dibandingkan penelitian ini. 28 7.587,50 μg/mL.
Aktivitas  antioksidan  asam  askorbat  tergolong
y = 0,0451x + 34,33 R² = 0,9994 35 36 37 38 39 0 20 40 60 80 100 % I n h ibi ti o n Concentration  (ppm) Ascorbic acid y = 0,0111x + 41,444 R² = 0,986 42 43 44 45 0 100 200 300 % I n h ibi ti o n Concentartion  (ppm) N-hexana
y = 0,0129x + 40,234 R² = 0,9037 41 41,5 42 42,5 43 43,5 44 0 100 200 300 % I n h ibi ti o n Concentration  (ppm) M ethanol y = 0,0198x + 15,311 R² = 0,9287 17 18 19 20 21 0 100 200 300 % I n h ibi ti o n Concentration  (ppm) Aquades
lemah,  hal  ini  mungkin  diakibatkan  kondisi penyimpanan  asam  askorbat  yang  kurang sesuai sehingga aktivitasnya menurun, sedangkan  pada  rumput  laut E.  cottonii dengan  tiga  pelarut  berbeda  tergolong  sangat lemah.  Perbedaan  senyawa  bioaktif  dalam rumput  laut  yang  diakibatkan  oleh  efektivitas dari  pelarut  yang  digunakan  dan  metode pengeringan  yang  dilakukan  menyebabkan perbedaan aktivitas antioksidan yang dihasilkan (Amelia dan Tanod, 206). Edison et al .,  (2020)  menjelaskan  bahwa  aktivitas antioksidan  sangat  kuat  apabila  memperoleh nilai  IC 50 50-100  ppm,  kuat  101-250  ppm, lemah  251-500  ppm  dan  sangat  lemah  >500 ppm.
Aktivitas  antioksidan  rumput  laut Eucheuma cottonii sangat rendah dengan nilai IC 50 sangat kecil dibandingkan dengan asam askorbat, hal ini  karena  ekstrak  yang  diuji  masih  berupa campuran senyawa sedangkan asam askorbat sudah  berupa  senyawa  murni  yang  bertindak sebagai  antioksidan.  Nilai  IC 50 yang  diperoleh pada  penelitian  ini  sangat  rendah  diduga karena  adanya  pengaruh  konsentrasi  pelarut. Lantah et  al .  (2017),  konsentrasi  pelarut  yang digunakan  memiliki  polaritas  yang  berbeda- beda  dan  berhubungan  dengan  kandungan metabolit sekunder yang terikat saat ekstraksi. Kandungan  metabolit  sekunder  yang  terikat saat  ekstraksi  diduga  senyawa  yang  memiliki aktivitas antioksidan seperti golongan flavonoid.
Nilai IC 50 asam askorbat sebagai kontrol positif memiliki  nilai  IC 50 terendah  yaitu  347,45  ppm, dibandingkan  dengan  ekstrak  rumput  laut E. cottonii menggunakan  tiga  pelarut  berbeda yaitu  n-heksan,  metanol  dan  akuades.  Hal tersebut  menunjukkan  bahwa  asam  askorbat sebagai  kontrol  positif  memiliki  daya  hambat terhadap  radikal  bebas  lebih  baik  daripada ekstrak E.  cottonii menggunkan  pelarut  n- heksan, metanol maupun akuades. Ekstrak E. cottonii menggunakan  pelarut  methanol  juga memiliki  daya  hambat  lebih  baik  daripada ekstrak E.  cottonii menggunakan  pelarut  n- heksan maupun akuades.

## KESIMPULAN DAN SARAN
Hasil  kandungan  nutrisi  yang  diperoleh E. cottonii segar  baik  segar  dan  kering  tinggi akan kadar air dan abu. Senyawa bioaktif yang terkandung  pada  rumput  laut E.  cottonii yaitu senyawa  alkaloid,  flavonoid,  dan  triterpenoid serta  saponin.  Nilai  IC 50 antioksidan  pada rumput  laut E.  cottonii diperoleh  nilai  IC 50 menggunakan pelarut n-heksan sebesar
770,81  ppm;  metanol  757,05  ppm;  akuades
1.751,97  ppm.  Hasil  tersebut  menunjukkan bahwa  aktivitas  antioksidan  pada  rumput  laut E.  cottonii masih  tergolong  sangat  lemah.
Senyawa  bioaktif  pada E.  cottonii perlu dikarakterisasi lebih lanjut untuk pengembangan  pada  bebbagai  bidang  di masa yang akan datang.

## DAFTAR PUSTAKA
Amelia, R., & Tanod, W. A. (2016). Kandungan antioksidan alga merah Eucheuma cottonii dengan  metode  pengeringan yang berbeda. Kauderni: Journal of Fisheries, Marine and Aquatic Science , 1 (1), 14-20 Dolorosa,  M.  T.,  Nurjanah,  Purwaningsih,  S., Anwar,  E.,  &  Hidayat,  T.  (2017). Kandungan senyawa bioaktif bubur rumput  laut Sargassum  plagyophyllum dan Eucheuma  cottonii sebagai  bahan baku krim pencerah kulit. Jurnal Pengolahan  Hasil  Perikanan  Indonesia,
20 (3), 633 –644. Edison.,  Diharmi,  A.,  Ariani,  N.  M.,  &  Ilza,  M. (2020).  Komponen  bioaktif  dan  aktivitas antioksidan  ekstrak  kasar Sargassum plagyophyllum . Jurnal  Pengolahan  Hasil Perikanan Indonesia, 23 (1), 58 –66. Fatmawati, & Wahyudi. (2016). Potensi rumput laut  di  Kabupaten  Sumenep. Jurnal Pertanian Cemara , 12 (1), 1 –9.
Hidayat, T., Nurjanah, Nurilmala, M., & Anwar,
E.  (2018).  Karakterisasi  rumput  laut tropika  dari  kepulauan  seribu  sebagai sumber  bahan  baku  kosmetik. CR Journal , 4 (3), 49 –62.
Insani,  N.  A.,  Hafiludin.,  Chandra,  B.  A.  2022. Pemanfaatan  Ekstrak Gracilaria sp.  dari Perairan Pamekasan sebagai Antioksidan. Juvenil Jurnal Ilmiah
Kelautan dan Perikanan , 3(2), 16-25. Sarita,  I.  D.  A.A.  D.,    I.  M.  S.,  Sumaryani,  N. P.,  &  Rai,  I.  G.  A.  (2021).  Identifikasi jenis  rumput  laut  yang  terdapat  pada ekosistem  alami  perairan  nusa  penida  I. Jurnal  Edukasi  Matematika  Dan  Sains, 10 , 141 –154. Jailani,  A.  Q.,  Herawati,  E.  Y.,  &  Semedi,  B.
(2015).  Studi  kelayakan  lahan  budidaya rumput laut Eucheuma cottonii di Kecamatan  Bluto  Sumenep  Madura
Jawa Timur ( Feasibility study of Eucheuma  cottonii  seaweed  farming  in Bluto  subdistric  of  Sumenep  Madura East Java ). Jurnal Manusia Dan Lingkungan, 22 (2), 211.
Kasran,  Tribuana,  H.,  &  Patahiruddin.  (2021). Kajian  kandungan  klorofil  rumput  laut Eucheuma  cottonii dengan  bobot  bibit
berbeda  terhadap  laju  pertumbuhan menggunakan  jaring  trawl  di  Kabupaten Luwu , 2 (1).
Kore,  M.  M.,  Nitsae,  M.,  &  Nge,  S.  T.  M.
(2019).  Uji  aktivitas  antioksidan  pada ganggang cokelat ( Sargassum polycystum ) dan gangang hijau ( Euchema  cottonii )  pada  Perairan Dahi’ ae. Indigenous
Biologi : Jurnal
Pendidikan Dan Sains Biologi, 1 (3), 1 –9. Lantah,  P.  L.,  Montolalu,  L.  A.,  &  Reo,  A.  R. (2017). Kandungan fitokimia dan aktivitas antioksidan  ekstrak  metanol  rumput  laut Kappaphycus  alvarezii . Media  Teknologi Hasil Perikanan, 5 (3), 73.
Maharany  F,  Nurjanah,  Suwandi  R,  Anwar  E, H.  T.  K.  (2017).  Kandungan  senyawa bioaktif  rumput  laut Padina  australis dan Eucheuma  cottonii sebagai  bahan  baku krim tabir surya. JPHPI , 20 (1), 10 –17. Ndahawali,  S.,  Tarigan,  N.,  Tega,  Y.  R., Henggu,  K.  U.,  &  Meiyasa,  F.  (2021).
Analisis  Kandungan  Fitokimia  Beberapa Jenis  Makroalga  Dari  Perairan  Pantai Londalima Kabupaten Sumba Timur. Jambura Fish Processing
Journal , 3 (2), 46-50. Melinda,  A.  (2021).  Kandungan  senyawa fenolik  dan  aktivitas  antioksidan  pada rumput  laut Eucheuma  cottonii dari
Perairan Ketapang, Lampung. Nosa, S. P., Karnila, R., & Diharmi, A. (2020). Potensi  kappa  karaginan  rumput  laut ( Eucheuma  cottonii )  sebagai  antioksidan dan inhibito r enzim α -glukosidase. 1–10.
Podungge, A., Damongilala, L. J., &
Mewengkang,  H.  W.  (2017).  Kandungan antioksidan  pada  rumput  laut Eucheuma spinosum yang diekstrak dengan metanol  dan  etanol. Media  Teknologi Hasil Perikanan , 6 (1), 1-5. Purwaningsih,  S.,  &  Deskawati,  E.  (2021). Karakteristik  dan  aktivitas  antioksidan rumput  laut Gracilaria  sp. asal  Banten. Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan
Indonesia, 23 (3), 503 –512. Safia,  W.,  Budiyanti,  &  Musrif.  (2020). Kandungan  Nutrisi  dan  Bioaktif  Rumput Laut  ( Euchema  cottonii )  dengan  Metode Rakit Gantung pada
Kedalaman Berbeda. Jurnal Pengolahan Hasil
Perikanan Indonesia, 23 (2), 261 –271.
Novianti,  S.,  &  Arisandi,  A.  (2021).  Analisis
Kosentrasi  Kadar  Lemak,  Protein,  Serat
Dan Karbohidrat Alga Coklat ( Sargassum Crassifolium ) Pada Lokasi
Yang Berbeda. Juvenil:  Jurnal  Ilmiah  Kelautan dan Perikanan , 2 (1), 32-38.
Suryaningrum,  D.,  Wikanta,  T.,  dan  Kristiana,
H. (2006). Uji aktivitas senyawa
antioksidan  dari  rumput  laut Halymenia harveyana dan Eucheuma cottonii . J urnal  Pascapanen  dan  Bioteknologi Kelautan dan Perikanan, 1 (1), 51-63 . Syafrinal,  S.,  &  Ramadhani,  S.  (2019).  Uji
Aktivitas Antioksidan Ekstrak Kulit Batang  Dalu –Dalu  ( Salix  tetrasperma Roxb ) Menggunakan Metode Dpph (1, 1- Difenil-2-Pikrilhidrazil). Jurnal  Teknologi Pertanian , 8 (1), 1-7.
Vionita,  N.  N.  T.,  & Insafitri, I.  (2020).  Analisis Proksimat Daun dan Propagul Mangrove ( Avicennia  marina dan Avicennia  lanata )
Di Ekowisata Mangrove Wonorejo Surabaya. Juvenil: Jurnal Ilmiah Kelautan Dan Perikanan , 1 (1), 47-57.
Yanuarti,  R.,  Nurjanah,  N.,  Anwar,  E.,  & Pratama, G. (2017). Kandungan senyawa penangkal  sinar  ultra  violet  dari  ekstrak rumput  laut Eucheuma  cottonii dan Turbinaria conoides . Majalah Ilmiah Biologi BIOSFERA: A Scientific
Journal , 34 (2), 51-58.