Pengaruh  Asam  Hialuronat- Space  Peptide terhadap  Karakteristik,  Stabilitas  Fisik Gel  Amniotic  Membran- Stemcell Metabolite Product
Rina Mutya Suzliana 1 , Tristiana Erawati 1 , Cita Rosita Sigit Prakoeswa 2,3 , Fedik Abdul Rantam 4 , Widji Soeratri 1 * 1 Departemen Farmasetika, Fakultas Farmasi, Universitas Airlangga, Surabaya, Indonesia
2 Departemen Ilmu Penyakit Kulit dan Kelamin, RSUD Dr. Soetomo, Surabaya, Indonesia
3 Departemen Dermatology dan Venerology, Fakultas Kedokteran, Universitas Airlangga, Surabaya, Indonesia
4 Laboratorium Stem Cell, Institute Topical Diseases, Universitas Airlangga, Surabaya, Indonesia
*Corresponding author: widjisoeratri@yahoo.com
Submitted: 18 Januari 2020 Accepted: 18 Februari 2020 Published: 30 November 2020

## Abstract
Background : Amniotic membrane stem cell metabolite products (AMSC-MP) is the kind  of metabolite product obtained  from  isolated  amniotic  membranes  and  cultured  in  conditioned  medium.  AMSC-MP  contains  growth factors and cytokines  with aging treatment benefits. Growth factors and cytokines have molecular size which is larger  than  20  kDa  as  AMSC-MP,  thus,  requires  special  formulations  to  deliver  for  used  topical.  The formulation  of  hyaluronic  acid  is  used  as  combination  with  SPACE  peptide  functioning  as  an  enhancer macromolecule for AMSC-MP gel to improve as antiaging activity. To ensure a preparation quality and stability, evaluation  of  physical  characteristic  and  stability  is  needed. Objective :  To  evaluate  the  effect  of  added hyaluronic acid (0; 0.01; 0.02; 0.04%) combined with SPACE peptide on the characteristics and stability of the AMSC-MP gel  formulation. Methods : The physical  characteristics of AMSC-MP freeze dried gel  preparations with the addition of hyaluronic acid combined with SPACE peptide were evaluated by organoleptic test (colour, odor and texture), measuring the pH and deployment capacity. Physical stability testing was done by evaluating gel  physical  characterics  during  28  days  of  storage. Results :  All  of  the  formulas  generally  showed  good appearance. Specifically, the gel observed  was transparent, had thick consistency and had smooth texture with specific odour. pH Value was around 5.37 – 5.26 and deployment capacity was approximately in 6.50 – 6.13. All the  formulas  were  stable  during  28  days  of  storage. Conclusion :  The  combination  of  hyaluronic  acid  and SPACE peptide to the gel formula did not destroy the characteristic and physical stability of AMSC-MP gel on storage for 28 days.
Keywords: amniotic  membrane  stem  cell  metabolite  products  (AMSC-MP),  hyaluronic  acid  (HA),  SPACE peptide, physical characteristic, physical stability

## Abstrak
Pendahuluan : Amniotic membran stem cell metabolite product (AMSC-MP) merupakan metabolit produk yang diperoleh  dari Amniotic  membrane yang  diisolasi  dan  dikultur  yang  kemudian  ditumbuhkan  dalam  medium terkondisi.  AMSC-MP  mengandung  banyak growth  factor  dan  sitokin yang  sangat  berguna  sebagai antiaging. Growth  factor dan  sitokin  yang  pada  umumnya  berukuran  besar  lebih  dari  20  KDa  menyebabkan  AMSC-MP membutuhkan  formulasi  khusus  untuk  penggunaannya  secara  topikal.  Pada  penelitian  ini  digunakan  asam hialuronat  dikombinasi  dengan SPACE  peptide yang  memiliki  fungsi  sebagai enhancer makromolekul  untuk formulasi  sediaan  gel  AMSC-MP  sebagai antiaging .  Untuk  memastikan  kualitas  dan  stabilitas  suatu  sediaan, maka  perlu  dilakukan  uji  karakteristik  fisik  dan  uji  stabilitas  fisik  sediaan  tersebut. Tujuan :  Mengevaluasi pengaruh  penambahan  asam  hialuronat  (0;  0,01;  0,02;  0,04  %)  yang  dikombinasi SPACE  peptide terhadap karakteristik dan stabilitas dari formulasi sediaan gel AMSC-MP. Metode : Karakteristik fisik sediaan gel freeze dried AMSC-MP  dengan  penambahan  asam  hialuronat  yang  dikombinasi SPACE  peptide dievaluasi  dengan menggunakan  parameter  organoleptis  (warna,  bau,  konsistensi  dan  tekstur),  pengukuran  pH  dan  kapasitas
penyebaran.  Pengujian  stabilitas  fisik  dievaluasi  dengan  pengukuran  pH  dan  kapasitas  penyebaran  sediaan setelah  penyimpanan  selama  28  hari. Hasil :  Hasil  uji  karakteristik  dan  stabilitas  fisik  sediaan  gel  AMSC-MP menunjukkan  penampilan  fisik  yang  baik,  gel  transparan  dengan  konsistensi  kental,  lembut  dengan  bau  yang khas. Nilai pH  sekitar 5,26  -  5,37 dan kapasitas  penyebaran pada 6,13  -  6,50. Semua  formula stabil selama 28 hari  penyimpanan. Kesimpulan: Penambahan  kombinasi  asam  hialuronat  dan SPACE  peptide pada formulasi tidak merusak karakteristik dan stabilitas fisik sediaan gel AMSC-MP pada penyimpanan selama 28 hari.
Kata kunci : amniotic membran stem cell metabolit produk (AMSC-MP), asam hialuronat (HA), SPACE peptide, karakteristik fisik, s tabilitas fisik

## PENDAHULUAN
Amniotic  Membran  Stem  Cell  Metabolite  Product (AMSC-MP)  merupakan  produk  metabolit stem  cell yang  kini  sedang  dikembangkan  sebagai  suatu  bahan yang  digunakan  dalam  terapi  seluler,  regeneratif  dan peremajaan  kulit  (Insausti  dkk., 2010).  AMSC-MP mengandung growth  factor dan  dan  sitokin  yang diketahui  dapat  mempengaruhi  biosintesis  kolagen serta  dapat  meningkatkan  proliferasi  keratinosit epidermal  dan fibroblast dermal  (Meenakshi  dkk ., 2017). Namun dalam hal ini, growth factor dan sitokin yang  terkandung  di  dalam  AMSC-MP  merupakan molekul  hidrofilik  yang  berukuran  lebih  besar  dari 20  kDa  sehingga  memiliki  penetrasi  yang  buruk. Molekul yang berukuran lebih besar dari 500 kDa sulit untuk  penetrasi  melalui stratum corneum  (Bos  & Meinardi , 2000).  Pada  penelitian  sebelumnya  (Pratiwi dkk,  2018),  AMSC-MP  secara  klinis  diaplikasikan menggunakan microneedle menunjukkan efek photoaging yang menjanjikan sebagai terapi peremajaan. Namun hal ini dianggap kurang menyenangkan karena penggunaan microneedle memiliki  keterbatasan  yaitu  harus  dengan  bantuan tenaga  ahli  dan  dapat  menimbulkan eritema setelah penggunaan (Pratiwi dkk., 2018).
SPACE  peptide dilaporkan  sebagai  suatu  bahan yang potensial untuk meningkatkan penghantaran pada kulit. SPACE  peptide telah  dikembangkan  sebagai peningkat  penetrasi  untuk  makromolekul  HA  (MW 200-325kDa)  (Chen  dkk ., 2013)  dan  (siRNA  MW 13  kDa)  (Mitragotri  &  Hsu , 2011)  (Chen  dkk ., 2014). SPACE  peptide diketahui  tidak  mengubah  barier  lipid kulit  namun  bekerja  dengan  cara  berinteraksi  dengan protein kulit dan menginduksi perubahan pada struktur sekunder  protein  kulit  dan  menginduksi  perubahan pada struktur sekunder protein kulit (α heliks, β-sheet,
turn dan  acak)  yang  dievaluasi  dengan  analisis  FTIR dan  dikonfirmasi  dengan in-silico  docking (Kumar dkk ., 2015).
Dalam  penelitian  lain,  (Murphy  dkk . ,  2017) penggunaan  AMSC-MP  dikombinasi  dengan  asam hialuronat  (HA)  dilaporkan  dapat  memperbaiki penyembuhan  luka  ( wound  healing ).  Kombinasi  ini memungkinkan  untuk  pengembangan  sebagai  sediaan antiaging dengan  pertimbangan  bahwa  HA  yang diketahui  memiliki  kemampuan  untuk  meningkatkan kualitas  kulit  dengan  cara  mengembalikan  matriks ektraseluler  dan  aktivasi fibroblast ,  seperti  produksi kolagen  dan  elastin  (Landau  &  Steven, 2015).  Selain itu,  HA  juga  dapat  berfungsi  sebagai enhancer biomakromolekul  yang  mungkin  dimediasi  oleh kombinasi co-transport, peningkatan  hidrasi  kulit  dan modifikasi sifat stratum korneum (Witting dkk ., 2015). Berdasarkan  beberapa  penelitian tersebut, AMSC- MP  diformulasi  dalam  bentuk  sediaan  gel antiaging dengan  beberapa  variasi  konsentrasi  HA  yang dikombinasi dengan SPACE peptide untuk memperoleh formula dengan karakteristik yang baik dan stabil pada penyimpanan.

## BAHAN DAN METODE Bahan
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini memiliki kemurnian pharmaceutical grade , antara lain AMSC-MP  (dikultur  di  Laboratorium Stem  Cell dan Instalasi  Pusat  Biomaterial-Bank  Jaringan  RSUD  Dr. Soetomo), SPACE peptide (diimpor dari PT. MedChem express), asam hialuronat (PT. Evonic Industries), basis gel Carbopol 940 (PT. Adimitra Prima).
Alat
pH Meter Schott glass  mainz CG 842 dan alat uji daya  sebar  (Laboratorium  Farmasetika  Universitas Airlangga).
Metode Persiapan formulasi sediaan gel AMSC-MP HA Penelitian ini merupakan eksperimental laboratorium.  Gel  dibuat  dengan  menimbang  terlebih dahulu  semua  bahan  yang  akan  digunakan.    Carbopol 940 sebagai  basis gel  dikembangkan  menggunakan 10
ml  aquabidest.  Masukkan  bahan  aktif  AMSC-MP Freeze dry yang telah dilarutkan dengan menggunakan 1  ml  aquabidest. SPACE  peptide dan  HA yang  telah disiapkan,  dimasukkan  ke  dalam  basis  gel  dan dicampur  hingga  homogen  dengan  menggunakan homogenizer  Ultra  Turrax  High  Shear  Homogenizer dengan  kecepatan  100  rpm  selama  10  menit.  Sediaan
gel yang dibuat dilakukan replikasi sebanyak tiga kali. Dibuat  lima  formula  dengan  variasi  konsentrasi  HA yang berbeda dan dikombinasi dengan SPACE peptide . F I ,  F II ,  F III ,  F IV dan  F v .  Sediaan  gel  yang  dibuat dilakukan  replikasi  sebanyak  tiga  kali.  Komposisi setiap formula dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Formula sediaan gel Amniotic Membrane Stem Cell Metabolite Product (AMSC-MP) dengan beberapa konsentrasi HA dengan kombinasi SPACE peptide (F I, F II , F III, F IV dan F V ) Formula Konsentrasi Bahan (%) (b/b) AMSC-MP SPACE peptide HA Basis gel F I 0,08 - - ad 100 F II 0,08 0,016 - ad 100 F III 0,08 0,016 0,01 ad 100 F IV 0,08 0,016 0,02 ad 100 F V 0,08 0,016 0,04 ad 100

## Evaluasi karakteristik sediaan gel AMSC-MP Uji organoleptik
Uji  organoleptik  dilakukan  dengan  cara  visual dengan  mengamati  secara  langsung  penampilan sediaan  meliputi  warna,  bau,  konsistensi  dan  tekstur dari gel yang dibuat.

## Uji pH
Uji  pH  dilakukan  dengan    menimbang  1  gram sediaan  dan  diencerkan  dengan  10  mL  air  bebas  CO2 ke  dalam  beaker  gelas  lalu  diaduk  hingga  merata. Larutan  diukur  pH  nya  dengan  menggunakan  pH meter.  Pengukuran  diulangi  sebanyak  tiga  kali  (Rosita dkk., 2010).

## Uji kapasitas penyebaran
Evaluasi  kapasitas  penyebaran  dilakukan  dengan menimbang  sediaan  gel  sebanyak  1  g  dan  diletakkan pada lempeng kaca berskala, kemudian ditutup dengan lempeng  kaca  yang  lainnya  dengan  ukuran  masing- masing  yaitu  20  cm  x  17  cm,  tebal  5  mm  dan  berat 404,5  g.  Selanjutnya  di  atas  lempeng  kaca  tersebut ditambahkan  beban  yang  secara  teratur  ditingkatkan beratnya.  Setiap  3  menit,  diukur  diameter  penyebaran sediaan  dan  dicatat.  Beban  ditingkatkan  tiap  5  gram sampai  diperoleh  diameter  penyebaran  yang  konstan pada 25 gram (Rosita dkk, 2010).

## Evaluasi stabilitas fisik sediaan
Sediaan  disimpan  pada  suhu  kamar  25 o C  ±  0,5 o C selama  28  hari  dan  RH  70  ±  2%.  Dilakukan  evaluasi
pH dan kapasitas penyebaran pada hari ke-0, ke-14 dan ke-28.

## Analisis statistika
Data  yang  diperoleh  dalam  penelitian  diolah dengan  analisis  dengan  metode  statistik One  Way Anova .  Apabila  hasil  yang  diperoleh  (P  <  0,05)  maka ada perbedaan bermakna antar formula dan dilanjutkan dengan  uji Post Hoc  Tukey HSD  untuk  mengetahui kelompok formula mana saja yang berbeda.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Karakterisasi sediaan gel AMSC-MP Hasil uji organoleptis
Hasil uji organoleptis sediaan gel AMSC-MP pada masing-masing  formula  diperoleh  konsistensi  yang cenderung sama, tekstur lembut dengan bau yang khas amis  seperti  bau  telur.  Hal  tersebut  disebabkan  oleh bau  dari  bahan  aktif  AMSC-MP freeze  dried . Perbedaan mendasar hanya terlihat pada warna sediaan dimana  F I dan  F II yang  tidak  mengandung  HA  tidak memiliki  warna  dan  jernih  transparan  sedangkan  F III , F IV dan  F V dengan  peningkatan  konsentrasi  HA memberikan  peningkatan  warna  yang  menjadi  lebih kuning hingga kuning kecoklatan yang disebabkan oleh warna  dari  HA.  Hasil  evaluasi  organoleptis  dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2. Hasil pemeriksaan organoleptis sediaan gel AMSC-MP dengan beberapa variasi konsentrasi HA dengan kombinasi SPACE peptide F I, F II , F III, F IV dan F V Formula Pemeriksaan Organoleptis Warna Bau Konsistensi Tekstur F I Tidak Berwarna Berbau amis seperti telur Kental Lembut F II Tidak Berwarna Berbau amis seperti telur Kental Lembut F III Jernih kekuningan Berbau amis seperti telur Kental Lembut F IV Kuning kecoklatan Berbau amis seperti telur Kental Lembut F V Coklat kekuningan Berbau amis seperti telur Kental Lembut

## Hasil uji pH
Pengujian  pH  sediaan  bertujuan  untuk  memenuhi kenyamanan  dalam  penggunaan  secara  topikal.  Nilai pH  gel  yang  baik  adalah  pH  yang  hampir  sama  atau berada pada rentang pH kulit yang berkisar antara 4,5 - 6,5.  Apabila  sediaan  gel  terlalu  asam  maka  dapat menyebabkan  iritasi, tetapi apabila pH gel terlalu basa maka  kulit  dapat  menjadi  kering  dan  bersisik (Tranggono, 2007).
Pengujian  pH  pada  penelitian  ini  juga  dilakukan untuk mengetahui apakah penambahan asam hialuronat yang dikombinasi dengan SPACE peptide memberikan pengaruh  terhadap  pH  sediaan  gel  AMSC-MP.  Basis sediaan  gel  yang  telah  dikembangkan  berada  pada
rentang  pH  5,1  -  5,3. SPACE  peptide memiliki  pH sekitar  7,2  dan  HA  memiliki  pH  4,5  -  8,5.  Hasil  uji diperoleh  seluruh  sediaan  gel  AMSC-MP  berada  pada isaran 5,37 - 5,26. Hasil analisis statistik menggunakan One  Way  Anova menunjukkan  tidak  ada  perbedaan yang bermakna antara pH dalam setiap formula sediaan gel AMSC-MP (P > 0,05) dan berada pada rentang pH kulit  yaitu  4,5  -  6,5.  Sehingga  dapat  disimpulkan bahwa peningkatan variasi konsentrasi asam hialuronat tidak  mempengaruhi  nilai  pH  sediaan  gel  AMSC-MP karena  jumlah  HA  yang  ditambahkan  sangat  sedikit (0,01  -  0,04%).  Nilai  pH  rata-rata  pada  beberapa formula  sediaan  gel  AMSC-MP  dapat  dilihat  pada Tabel 3 dan histogram Gambar 1.
Tabel 3. Hasil pemeriksaan nilai pH gel AMSC-MP dengan berbagai variasi konsentrasi HA dengan kombinasi SPACE peptide F I, F II , F III, F IV dan F V Formula Replikasi Rata-rata ± SD I II III F I 5,37 5,36 5,32 5,37 ± 0,03 F II 5,34 5,33 5,35 5,34 ± 0,01 F III 5,29 5,34 5,30 5,31 ± 0,03 F IV 5,30 5,32 5,29 5,30 ± 0,02 F V 5,28 5,25 5,27 5,26 ± 0,02
Gambar 1. Histogram hasil uji pH gel AMSC-MP dengan beberapa variasi konsentrasi HA dengan kombinasi SPACE peptide (F I, F II , F III, F IV dan F V ) 3 3,5 4 4,5 5 5,5 6 FI FII FIII FIV FV pH Formula

## Hasil uji kapasitas penyebaran
Suatu  sediaan  lebih  disukai  bila  dapat  menyebar dengan mudah dikulit. Pengujian kapasitas penyebaran sediaan  dilakukan  untuk  mengetahui  pengaruh  HA yang dikombinasi SPACE peptide terhadap kemampuan  menyebar  sediaan  gel  AMSC-MP.  Hasil uji  kapasitas  penyebaran  pada  beban  konstan  25  gram diperoleh  bahwa  semakin  tinggi  konsentrasi  HA, kapasitas  penyebaran  cenderung  menurun  dan  berada pada kisaran nilai 6,50 - 6,13 cm.
Namun  hasil  analisis  statistik  menggunakan one way  anova menunjukkan  bahwa  tidak  ada  perbedaan
yang signifikan (P > 0.05) antara kapasitas penyebaran masing-masing  formula  sediaan  gel  AMSC-MP  dan berada  pada  rentang  yang  diharapkan  untuk  sediaan topikal yaitu berkisar pada 5 - 7 cm (Garg dkk ., 2002). Pada  Hasil  tersebut,  dapat  disimpulkan  bahwa peningkatan variasi konsentrasi HA tidak mempengaruhi  kapasitas  penyebaran  gel  AMSC-MP. Hal  tersebut  karena  jumlah  HA  yang  ditambahkan sangat  sedikit  (0,01  -  0,04%).  Hasil  uji  kapasitas penyebaran untuk masing-masing formula dapat dilihat pada Tabel 4 dan histogram Gambar 2.
Tabel 4. Hasil uji kapasitas penyebaran gel AMSC-MP dengan berbagai variasi konsentrasi HA dengan kombinasi SPACE peptide (F I, F II , F III, F IV dan F V ) Formula Kapasitas Penyebaran (cm) Replikasi Rata-rata ± SD I II III F I 6,5 6,3 6,7 6,50 ± 0,10 F II 6,6 6.2 6,4 6,40 ± 0,20 F III 6,3 6,3 6,1 6,23 ± 0,12 F IV 6,2 6,1 6,2 6,17 ± 0,16 F V 6.1 6.1 6.2 6.13 ± 0,06
Gambar 2. Histogram hasil uji kapasitas penyebaran gel AMSC-MP dengan beberapa variasi konsentrasi HA yang dikombinasi SPACE peptide (F I, F II , F III, F IV dan F V ) pada hari ke 0,14 dan 28

## Stabilitas fisik sediaan gel AMSC-MP Organoleptis pada penyimpanan 28 hari
Sediaan  farmasi dikatakan stabil apabila tidak ada perubahan dari karakteristik sediaan . Evaluasi stabilitas fisik sediaan gel AMSC-MP pada penyimpanan selama 28  hari  yang  dilakukan  dengan  mengamati  perubahan organoleptis secara visual yang dilakukan pada hari ke- 0,  ke-14  dan  ke-28  didapatkan  gel  dengan  konsistensi cenderung lebih kental dan meningkat pada hari ke-28. Hal ini dapat disebabkan karena adanya penguapan air
selama  proses  penyimpanan.  Untuk  menghindari  hal tersebut  sebaiknya  ditambahkan  humektan  (Rosita dkk ., 2010).

## Stabilitas fisik pH sediaan
Evaluasi  stabilitas  fisik  sediaan  gel  AMSC-MP selama  penyimpanan  selama  28  hari  dilakukan pengukuran pH pada hari ke-0, ke-14 dan ke-28.
Hasil pengujian  nilai pH dengan  metode statistika One Way Anova tidak menunjukkan adanya perbedaan yang  signifikan  (p  >  0.05)  yang  berarti  bahwa
0 1 2 3 4 5 6 7 FI FII FIII FIV FV Kap as it as Pe n yeb ar an (c m) Formula
penambahan  HA  yang  dikombinasi  dengan SPACE
peptide tidak  berpengaruh  terhadap  pH  sediaan  gel AMSC-MP  dan  stabil  pada  penyimpanan  selama  28
hari.  Nilai pH rata-rata pada beberapa formula sediaan gel  AMSC-MP  setelah  penyimpanan  selama  28  hari dapat dilihat pada Tabel 5 dan grafik pada Gambar 3.
Tabel  5. Hasil  uji  kapasitas  penyebaran  gel  AMSC-MP  dengan  berbagai  variasi konsentrasi  HA  yang  dikombinasi SPACE peptide (F I, F II , F III, F IV dan F V ) selama penyimpaanan pada hari ke 0, 14 dan 28
Formula Hari Replikasi Rata-rata ± SD I II III FI 0 5,37 5,36 5,32 5,35 ± 0,03 14 5,31 5,33 5,33 5,32 ± 0,01 28 5,30 5,28 5,31 5,29 ± 0,02 FII 0 5,34 5,33 5,35 5,34 ± 0,01 14 5,30 5,29 5,31 5,30 ± 0,01 28 5,32 5,27 5,25 5,28 ± 0,04 FIII 0 5,29 5,34 5,30 5,31 ± 0,03 14 5,27 5,29 5,30 5.28 ± 0,02 28 5,27 5,25 5,28 5.26 ± 0,02 FIV 0 5,30 5,32 5,29 5,30 ± 0,02 14 5,28 5,26 5,28 5,27 ± 0,01 28 5,22 5,21 5,25 5,22 ± 0,02 FV 0 5,28 5,25 5,27 5.26 ± 0,02 14 5,25 5,26 5,24 5,25 ± 0,01 28 5,23 5,20 5,22 5,21 ± 0,02
Gambar 3. Grafik hasil pengukuran pH sediaan gel AMSC-MP dengan beberapa variasi konsentrasi asam hialuronat yang dikombinasi SPACE peptide F I, F II , F III, F IV dan F V pada hari ke 0,14 dan 28
Hasil uji stabilitas kapasitas penyebaran gel AMSC- MP
Kestabilan
kapasitas penyebaran selama
penyimpanan merupakan salah satu parameter akseptabilitas  suatu  sediaan  (Martin  dkk ., 1993). Evaluasi  pada  penelitian  ini  untuk  mengetahui  apakah HA  yang  dikombinasi  dengan SPACE  peptide berpengaruh terhadap kapasitas penyebaran sediaan gel AMSC-MP  pada  penyimpanan  selama  28  hari  dan dilakukan  pengukuran  pada  hari  ke-0,  hari  ke-14  dan hari ke-28.
Dari  hasil  analisis  statistik One  way  Anova , kapasitas  penyebaran  sediaan  gel  AMSC-MP  pada masing-masing  formula  tidak  menunjukkan  adanya perbedaan  yang  signifikan  (P  >  0.05).  Hal  tersebut menunjukkan bahwa penambahan HA yang dikombinasi SPACE  peptide tidak  mempengaruhi stabilitas  kapasitas  penyebaran  gel  AMSC-MP  pada penyimpanan  selama  28  hari.  Hasil  uji  kapasitas penyebaran pada beberapa formula sediaan gel AMSC- MP  setelah  penyimpanan  selama  28  hari  dapat  dilihat pada Tabel 6 dan grafik pada Gambar 4.
5,2 5,25 5,3 5,35 5,4 5,45 5,5 0 14 28 pH Storage (Days) FI FII FIII FIV FV
Tabel 6. Hasil pengukuran kapasitas penyebaran sediaan gel AMSC-MP dengan beberapa variasi konsentrasi HA yang dikombinasi SPACE peptide (F I, F II , F III, F IV , F V ) pada hari ke 0,14 dan 28 Formula Hari Replikasi Rata-rata  ± SB I II III I 0 6,5 6,3 6,7 6,50 ± 0,20 14 6,9 6,7 6,7 6,77 ± 0,12 28 6,9 7,0 6,9 6,93 ± 0,06 II 0 6,6 6,2 6,4 6,40 ± 0,20 14 6,6 6,5 6,6 6,57 ± 0,06 28 6,7 6,7 6,8 6,73 ± 0,06 III 0 6,3 6,3 6,1 6,23 ± 0,12 14 6,5 6,4 6,7 6,53 ± 0,15 28 6,5 6,7 6,8 6,66 ± 0,15 IV 0 6,2 6,1 6,2 6,17 ± 0,16 14 6,3 6,4 6,5 6,40 ± 0,30 28 6,6 6,7 6,4 6,56 ± 0,15 V 0 6,1 6,1 6,2 6,13 ± 0,06 14 6,3 6,4 6,2 6,30 ± 0,10 28 6,5 6,3 6,5 6,43 ± 0,12
Gambar 4. Grafik hasil pengukuran kapasitas penyebaran sediaan gel AMSC-MP dengan beberapa variasi konsentrasi HA dengan kombinasi SPACE peptide F I, F II , F III, F IV dan F V pada hari ke 0,14 dan 28
Perubahan  pH  sangat  mempengaruhi  stabilitas kimia  bahan  aktif  dalam  hal  ini  sitokin  dan growth factor dan  stabilitas  fisik  sediaan  gel,  menyebabkan perubahan  karakteristik  dan  kapasitas  penyebaran. Hasil  pengujian  ini  diperoleh  bahwa  penambahan  HA (0,01  -  0,04%)  yang  dikombinasi  dengan SPACE peptide tidak  berpengaruh  terhadap  nilai  pH  sediaan sehingga  diharapkan  stabilitas  bisa  terjaga  hal  ini  di dukung  oleh  tidak  adanya  perubahan  kapasitas  daya sebar sehingga sediaan gel tetap stabil.

## KESIMPULAN
Penambahan HA (0,01 - 0,04%) dengan kombinasi SPACE  peptide tidak  mempengaruhi  karakteristik
(organoleptis,  pH  dan  kapasitas  penyebaran)  sediaan gel Amniotic  Membran  Stem  Cell Metabolit  Produk (AMSC-MP). Gel yang diperoleh memiliki warna yang jernih  (transparan)  hingga  kuning  kecoklatan  dengan konsistensi kental dan berbau amis seperti telur dengan pH  gel  berkisar  antara  5,26  -  5,37 dan  diameter kapasitas penyebaran 6,13 - 6,50 cm masih berada pada rentang  yang  dipersyaratkan.  Sediaan  gel  AMSC-MP dengan HA dan SPACE peptide stabil secara fisik (pH dan  kapasitas  penyebaran)  pada  penyimpanan  selama 28  hari.  Perlu  dilakukan  penelitian  lebih  lanjut mengenai  pengaruh  penambahan  HA  dan SPACE peptide terhadap  stabilitas  kimia  (penetapan  kadar
5 5,5 6 6,5 7 7,5 0 14 28 K ap asi ta s p e n ye b ar an ( cm ) Lama Penyimpanan (Hari) FI FII FIII FIV FV
sitokin dan growth factor) pada sediaan gel freeze dried AMSC-MP.

## DAFTAR PUSTAKA
Bos,  J.  D.  &  Meinardi,  M.  (2000).  The  500  Dalton Rule  for  the  Skin  Penetration  and  of  Chemical
Compounds and Drugs. Experimental Dermatology; 9; 165–169.
Chen,  M.,  Vivek,  G.,  Aaron,  C.,  Anselmo,  J.  A.  &
Muraski,  S.  M.  (2013).  Topical  Delivery  of Hyaluronic  Acid  into  Skin  Using  SPACE- Peptide Carriers. Journal of Controlled Release;
173; 67–74.
Chen, M., Zakrewsky, M., Gupta, V., Anselmo, A. C., Slee,  D.  H.,  Muraski,  J.  A.  &  Mitragotri,  S. (2014).  Topical  Delivery  of  siRNA  into  Skin Using  SPACE-Peptide  Carriers. Journal  of Controlled Release; 179; 33–41.
Garg, A., Anggarwal, D. & Sigla, A. (2002). Spreading of Semisolid Formulation: An Update. Pharmaceutical  Technology  North  America;  2; 84-102.
Insausti,  C.  L.,  Blanquer,  M.,  Bleda,  P.,  Iniesta,  P., Majado,  M.  J.,  Castellanos,  G.  &  Moraleda,  J. M. (2010). The Amniotic Membrane as a Source of  Stem  Cells. Histology  and  Histopathology;
25; 91–98
Kumar,  S.,  Zakrewsky,  M.,  Chen,  M.,  Menegatti,  S., Muraski, J. A. & Mitragotri, S. (2015). Peptides as  Skin  Penetration  Enhancers:  Mechanisms  of action. Journal  of  Controlled  Release;  199;
168–178.
Landau, M. & Steven, F. (2015). Science of Hyaluronic
Acid  Beyond  Filling:  Fibroblasts  and  Their Response  to  the  Extracellular  Matrix. Plastic and Reconstructive Surgery; 136; 188S-195S.
Martin,  A.,  Swarbick,  J.  &  Cammarata,  A.  (1993).
Physical Pharmacy: Physical Chemical
Principles  in  the  Pharmaceutical  Sciences  (3rd ed.). Philadelphia: Lea & Febiger.
Meenakshi,  G.,  Marek,  D.  &  Victoria,  V.  L.  (2017).
Mesenchymal  Stem  Cells  from  Adipose  Tissue in  Clinical  Applications  for  Dermatological Indications  and  Skin  Aging. International Journal of Molecular Sciences; 18; 208.
Mitragotri,  S.  &  Hsu,  T.  (2011).  Delivery  of  siRNA and  Other  Macromolecules  into  Skin  and  Cells Using  a  Peptide  Enhancer. Proceedings  of  the National  Academy  of  Sciences;  108; 15816-
15821.
Murphy, S., Aleksander, S., Lujie, S. & Khiry, S. R. H.
(2017). Solubilized Amnion Membrane
Hyaluronic  Acid  Hydrogel  Accelerates  Full- Thickness Wound Healing. Stem Cells Translational Medicine; 6; 2020-2032. Pratiwi, F. D., Murtiastutik, D. & Prakoeswa, C. R. S. (2018).  Efek  Pemberian  Topikal  Produk Metabolit  Amniotic  Membrane  Stem  Cell  (PM- AMSC)  pada  Penuaan  Kulit. Berkala  Ilmu Kesehatan Kulit dan Kelamin; 30; 95-101.
Rosita,  N.,  Tutiek,  P.  &  Agustin.  (2010).  Stabilitas
Fisik  dan  Efektivitas  Sediaan  Tabir  Surya Kombinasi Oksibenson dan Oktil Metoksisinamat dalam Basis Gel Carbomer 940 dengan  Penambahan  Asam  Glikolat. Majalah
Ilmu Kefarmasian; 7; 16-26 Tranggono, L. (2007). Buku Pegangan Ilmu Pengetahuan  Kosmetika.  Jakarta:  PT.  Gramedia Pustaka Utama.
Witting, M., Alexander, B., Robert, B. & Katerina, V.
(2015). Interactions of Hyaluronic Acid with the Skin  and  Implications  for  the  Dermal  Delivery of Biomacromolecules.
Molecular
Pharmaceutics; 12; 1391-1401.