## Perbandingan Berat Hati Tikus Spraque Dawley yang Diberikan Diet Kurang
Kalori, Cukup Kalori, dan Tinggi Kalori pada Masa Pertumbuhan
Jelita Inayah Sari*, Ahmad Aulia Jusuf**, Ening Krisnuhoni***
*Program Studi Pendidikan Dokter, FKIK UIN Alauddin **Departemen Histologi Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia ***Departemen Patologi Anatomi Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia

## ABSTRAK
Perlemakan hati merupakan penyakit degeneratif yang dapat berkembang pada masa pertumbuhan. Perlemakan hati dapat terjadi pada dua kondisi yang sangat berbeda jauh secara patofisiologi yaitu kondisi kekurangan kalori dan kelebihan kalori. Penelitian ini bertujuan untuk membandingkan ukuran berat hati pada pemberian diet tinggi kalori, cukup kalori, dan rendah kalori pada tikus selama masa pertumbuhan. Sampel penelitian menggunakan 15 organ  hati Spraque  Dawley usia  6  minggu  yang  diberi  asupan  kalori  berbeda  selama  8  minggu.  Penelitian  ini terdiri atas 3 (tiga) kelompok yaitu kelompok kurang kalori (KK), kelompok cukup kalori (CK), dan kelompok tinggi  kalori  (TK).  Parameter  penelitian  adalah  pemeriksaan  berat  hati  utuk  menilai hepatomegaly .  Hasil penelitian menunjukkan kelompok TK mengalami kenaikan berat hati  20% lebih besar dibandingkan dengan kelompok  CK  dan  kelompok  KK  (p<0,05).  Penelitian  ini  menyimpulkan  bahwa  diet  tinggi  kalori  dapat menyebabkan terjadinya hepatomegaly .
Kata kunci : perlemakan hati, hepatomegaly, diet tinggi kalori

## PENDAHULUAN
Malnutrisi  masih  menjadi  masalah kesehatan  anak  di  Indonesia  dengan prevalensi gizi lebih 8%, gizi kurang 13,8% dan  gizi  buruk  3,9%  (RISKESDA  2018). Malnutrisi didefinisikan sebagai terjadinya ketidakseimbangan  antara  asupan  dan kebutuhan  yang  diperlukan  oleh  tubuh. Kekurangan  kalori-protein  adalah  salah satu  jenis  malnutrisi  yang  banyak  terjadi pada  anak-anak  karena  kebutuhan  nutrisi yang  lebih  besar  dibandingkan  pada  orang dewasa.  Kekurangan  kalori-protein  akan mengganggu  proses  pertumbuhan  dan perkembangan. 1-3
Status  gizi  pada  masa  kecil  dapat berdampak  pada  kesehatan  anak  ketika dewasa.  Faktor-faktor  seperti  gaya  hidup,
perbaikan  ekonomi,  perubahan  pola  diet, dan  makanan  tinggi  kalori-lemak  yang semakin mudah ditemukan akan mengarah pada perkembangan penyakit-penyakit degeneratif.  Hal  ini  dapat  terjadi  pada berbagai kondisi, baik pada anak-anak yang masa  kecilnya  kekurangan  kalori,  normal, maupun  obesitas.  Salah  satu  penyakit degeneratif  yang  banyak  dikaitkan  dengan kondisi  ini  adalah  perlemakan  hati  non alkohol ( Non-Alcoholic Fatty Liver Disease , NAFLD).
Penelitian membuktikan,  NAFLD  berkaitan  dengan kondisi  kekurangan  kalori  maupun  diet tinggi  lemak  dan  obesitas.  Studi  yang dilakukan  oleh  Tim  van  Zutphen  dkk menunjukkan  hubungan  NAFLD  dengan defisiensi  protein.  Berkurangnya  jumlah
karbohidrat  dapat  membawa  konsekuensi timbulnya defisiensi  protein.  Hal  ini  dapat mengganggu pembentukan organel sel yang berperan  pada  proses  metabolisme,  seperti mitokondria dan peroksisom yang berperan pada  metabolisme  lemak.  Gangguan  ini akan  mengakibatkan  penurunan  oksidasi asam  lemak  dan  menyebabkan  akumulasi lemak (triasilgliserol) di hati. 4-7
NAFLD  juga  sering  dikaitkan dengan  diet  tinggi  lemak,  obesitas,  dan resistensi insulin yang akan mengarah pada gangguan  lipolisis  di  perifer,  sehingga uptake asam  lemak  ke  hati  meningkat.
Ketidakseimbangan antara sintesis, absorbsi  dan  sekresi  asam  lemak  akan menyebabkan akumulasi di hati membentuk NAFLD. NAFLD dapat memicu perubahan morfologi (bentuk) hati terutama hepatosit dan struktur di sekitarnya.  Secara  makroskopis,  NAFLD biasanya disertai dengan hepatomegali.
Sampai saat ini, yang banyak diteliti adalah  hubungan  NAFLD  dengan  diet kurang kalori-protein saja atau hubungannya dengan diet tinggi lemak saja, belum ada penelitian yang membandingkan hubungan  keduanya  terhadap  perubahan berat  hati.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk membandingkan  berat  hati  pada  tikus  usia pertumbuhan yang berbeda intake kalorinya (kurang, cukup, dan lebih). 2,3,9,11-12

## BAHAN DAN METODE
Penelitian  ini  dilaksanakan  di
Laboratorium Histologi Fakultas
Kedokteran  Universitas  Indonesia  pada tahun 2018 . Subjek penelitian ini berupa 15 hati  tikus  jantan Spraque  Dawley usia  6 minggu  yang  diberikan  intake  kalori berbeda  selama  8 minggu.  Peneliti sebelumnya telah melakukan intervensi diet pada  hewan  coba  sampai  ke  tahap terminasi, sehingga kami hanya memproses organ  yang  akan  diteliti.  Berdasarkan intervensi diet yang telah dilakukan, sampel dibagi  menjadi  3  kelompok,  yaitu  : Kelompok  I  diberi  diet  kurang  kalori (dikurangi 30% dari diet standar), Kelompok  II  diberi  diet  standar  (BPOM), kelompok  III  diberi  diet  tinggi  lemak (mengandung  20%  lemak).  Setelah  hewan coba diterminasi, organ hati yang berlokasi di rongga abdomen segera dieksisi dengan hati-hati,  kemudian  ditimbang  dalam kondisi  segar.  Penelitian  ini  menggunakan desain  riset  eksperimental,  untuk  menilai perbandingan  berat  hati    antar  kelompok. Analisis stasitstik dilakukan dengan menggunakan program SPSS 20.0.0
version for mac .

## HASIL PENELITIAN
Pengukuran  berat  hati  dilakukan untuk  melihat  apakah  terdapat  kenaikan jika dibandingkan dengan kelompok pakan
standar.  Pengukuran  berat  hati  dilakukan pada  minggu  ke-8  setelah  perlakuan. Hasilnya  rerata  berat  hati  pada  kelompok TK  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan kelompok KK dan CK (Gambar 1).
Berdasarkan  uji  normalitas  berat hati  dengan  Saphiro-Wilk  didapatkan  data terdistribusi  tidak  normal  dan  homogen dengan p<0,05 ,  sehingga  dilakukan  uji nonparametrik Kruskal-Wallis .  Hasil  uji statistik Kruskal-Wallis menunjukkan terdapat perbedaan bermakna antar kelompok  dengan p<0,05  (p=0,002) , selanjutnya  untuk  mengetahui  kelompok mana  yang  memiliki  perbedaan  dilakukan uji post hoc dengan Mann-Witney
(Lampiran  6).    Hasil  uji Mann-Witney menunjukkan terdapat perbedaan bermakna antara kelompok KK dan CK, KK dan TK, serta  CK  dan  TK  dengan p  <  0,05 (p=0,008).

## PEMBAHASAN
Secara  klinis,  perlemakan  hati  non alkohol (NAFLD) biasanya disertai dengan hepatomegali.  Akumulasi  lemak  di  hati dapat  menyebabkan  kenaikan  berat  hati >20% dari berat hati normal. Pada NAFLD, hepatomegali  tidak  dapat  dijadikan  dasar diagnostik.  Standar  baku  yang  digunakan adalah  pemeriksaan  histopatologi.  Pada penelitian  ini,  pemeriksaan  berat  hati dilakukan sesaat setelah tikus dikorbankan, yaitu  dengan  menimbang  langsung  berat
organ  hati  segar.  Hasilnya,  terdapat perbedaan bermakna dengan rerata tertinggi pada  kelompok  TK  (tinggi  kalori).  Pada kelompok  TK  terjadi  kenaikan  berat  hati  20% dari kelompok CK (cukup kalori/pakan standar), sedangkan kelompok KK  (kurang  kalori)  memiliki  berat  hati yang lebih rendah  40% dari kelompok CK.
Studi  oleh  van  Zutphen  dkk  (2016) menunjukkan tikus yang diberi pakan tinggi kalori-protein  memiliki  berat  hati  lebih tinggi  dari  kelompok  kontrol,  sedangkan kelompok  yang  diberi  diet  rendah  protein selama 4 minggu, memiliki berat hati yang lebih rendah dari kelompok kontrol. 14

## KESIMPULAN DAN SARAN
Terdapat perbedaan berat hati antar kelompok  perlakuan,  dimana  pemberian diet  tinggi  kalori  dapat  menyebabkan peningkatan berat hati. Sebaliknya, pemberian diet rendah kalori menunujukkan berat hati yang lebih rendah dari kelompok pakan standar.

## DAFTAR PUSTAKA
1.   Niwa  H.  Hasil  Riskesda  2018.  Jakarta: Kementrian Kesehatan
RI; 2018;134(4):635–46p.
2.   Müller O, Krawinkel M. Malnutrition And Health In Developing Countries. Can Med Assoc J. 2005;173(3):2000–3.
3.   Maleta K.
Undernutrition. 2006;18(December):189–205p.
4.   Guyton L, Hall F, Training O, Training P,
Darin  C,  Training  RO,  et  al.  Guyton  and Hall  Textbook  of  Medical  Physiology. Igarss 2014. 2014. 1129 p.
5.   Johnson,  Bruce  R.  Ober,  William  C. Silverthrone  AC.  Human  Physiology  An Integrated Approach. 7th ed. 2013.
6.   Gartner  L,  Hiatt  J.  Buku  Ajar  Histologi Berwarna. 3rd ed. Suryono I, Damayanti L, Wonodirekso  S,  editors.  Indonesia;  2010. 408-418 p.
7.   Fawcett  DW.  Buku  Ajar  Histologi.  12th ed. Hartanto H, editor. Jakarta; 1994. 583- 605 p.
8.   Wood EJ. Marks’ basic medical biochemistry: A clinical approach (second edition)  [Internet].  Vol.  34,  Biochemistry and  Molecular  Biology  Education.  2006. 395-395 p.
9.   Takahashi Y, Fukusato T. Histopathology of  nonalcoholic  fatty  liver  disease  / nonalcoholic  steatohepatitis.  World  J Gastroenterol. 2014;20(42):15539–48.
10.   Brunt  EM,  Tiniakos  DG.  Histopathology of nonalcoholic fatty liver disease. World J Gastroenterol. 2010;16(42):5286–96.
11.   Cahyono,  JB.  Suharjo  B.  Hepatitis  A. Yogyakarta: Kanisius; 2009.
12.   Krisnansari  D.  Nutrisi  dan  Gizi  Buruk.
Mandala Heal. 2010;4((1)).
13.   Keenan K. Diet, caloric restriction, and the rodent bioassay. Toxicol Sci.
1999;52(90001):24–34.
14.   van  Zutphen  T,  Ciapaite  J,  Bloks  VW, Ackereley C, Gerding A, Jurdzinski A, et al.  Malnutrition-associated  liver  steatosis and  ATP  depletion  is  caused  by peroxisomal and mitochondrial dysfunction. J  Hepatol.  2016;65(6):1198– 208. 15.   Manaf A. Insulin Resistance as a Predictor of Worsening of GlucoseTolerance inType 2 Diabetes Mellitus. Medicinus. 2014;27(8):3–8.
16.   Sianturi  M.  NON  ALKOHOL  TIKUS SPRAGUE  DAWLEY  (  The  Effect  of Trans  Fatty  acid  on  Non  alcoholic  Fatty Liver  Disease  in  Sprague  Dawley  Rats  ). 2012;1–17.
17.   Asgharpour  A,  Cazanave  SC,  Pacana  T, Seneshaw M, Vincent R, Banini BA, et al.
A  diet-induced  animal  model  of  non- alcoholic fatty liver disease and hepatocellular cancer. J Hepatol. 2016 Sep 1;65(3):579–88.
Gambar 1. Grafik batang berat hati tikus menunjukkan mean TK (tinggi kalori) lebih tinggi dibanding kelompok KK (kurang kalori) dan kelompok CK (cukup kalori/pakan standar)
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 KK CK TK B e ra t h a ti ( g ) *