## UJI EFEKTIVITAS EKSTRAK DAUN TEMBAKAU DALAM MENGATASI PERTUMBUHAN JAMUR
Colletotrichum gloeosporiodes dan Lasiodiplodia theorobromae
Effectiveness Test Of Tobacco Leaves Extract in Resolving Growth of Colletotrichum gloeosporiodes and Lasiodiplodia theorobromae
Andrew Setiawan Rusdianto 1)* Andi Eko Wiyono 1) , Ndarin Dwi Kurniawati 1) , Desiyanti Rukmasari 1)
1 Program Studi Teknologi Industri Pertanian , Fakultas Teknologi Pertanian, Universitas Jember
DOI: http://dx.doi.org/10.21111/agrotech.v6i3.5013
Terima  15 September 2020                Revisi 17 Oktober 2020                   Terbit  31  Desember 2020
Abstrak: Tanaman tembakau merupakan salah satu tanaman yang melimpah  di Indonesia   dengan   jumlah   produksi   mencapai 197.250 ton pada tahun 2019. Pemanfaatan  tanaman  tembakau  umumnya  hanya  digunakan  bagian  daunnya saja  untuk  pembuatan  rokok  yang  mana  sangat  membahayakan  bagi  kesehatan tubuh manusia serta lingkungan. Penggunaan daun  tembakau sebagai fungisida nabati  dapat  dijadikan  sebagai  alternatif  untuk  mengatasi  serangan  jamur  pada komoditi  pertanian.  Salah  satu  kerusakan  komoditi  pertanian  adalah pembusukan  yang  disebabkan  oleh  serangan  jamur C.  gloeosporioides dan L. theorobromae .  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  pengaruh  efektivitas ekstrak daun tembakau terhadap pertumbuhan jamur C. gloeosporioides dan L. Theorobromae, mengetahui  Konsentrasi  Hambat  Minimum  (KHM),  dan Konsentrasi Bunuh Minimum (KBM) ekstrak daun tembakau terhadap jamur C. gloeosporioides dan L.  Theorobromae. Penelitian  ini  menggunakan  rancangan acak  lengkap  dengan ulangan  sebanyak  3  kali.  Hasil  penelitian  menunjukkan ekstrak  daun  tembakau  tidak  memberikan  dampak yang  signifikan  dalam menghambat  pertumbuhan  jamur C.  gloeosporioides dan L.  theorobromae. Uji Konsentrasi  Hambat  Minimum  (KHM)  menunjukkan  ekstrak  daun  tembakau konsentrasi  50%  merupakan  KHM  pada  jamur C.  gloeosporioides dan L.
* Korespondensi email: andrew.ftp@unej.ac.id Alamat : Fakultas Teknologi Pertanian Universitas Jember, Jalan Kalimantan No. 37, Jember, Indonesia 6812
theorobromae. Ekstrak  daun  tembakau  konsentrasi  100%  merupakan Konsentrasi Bunuh Minimum (KBM) pada jamur L. theorobromae. Konsentrasi Bunuh Minimum (KBM) pada jamur C. gloeosporioides tidak dapat ditentukan.
Kata Kunci: Tembakau, Fungisida Nabati, Flavonoid, Antijamur
Abstract :  Tobacco  plants  is  one  of  the  abundant  plants  in  Indonesia    with production  reaching  197.250  tons  by  2019.  The  use  of  tobacco  plants  is generally  limited  to  the  leaf  portion  used  for  making  cigarettes.  It  poses  a serious thread to the healt of the human body as well as the environment. Use of tobacco  leaves  as  vegetable  fungicides  can  be  used  as  an  alternative  to combating fungal attack on agricultural commodities. One cause of agricultural commodity  damage  is  the  decomposition  caused  by  the  fungus  of  C. gloeosporioides  and  L.  theorobromae  attack.  The  research  aims  to  learn  the effects  of  the  extract  of  tobacco  leaves  on  the  growth  of  the  mold C. gloeosporioides and L.  theorobromae ,  learn  to  know  the  minimum concentration  of  inhibition  (KHM)  and  the  minimum  killing  concentration (KBM) of tobacco leaves on the mold C. gloeosporioides and L. theorobromae . The research used a complete randomized design with a reated trial of 3 times. The  results  showed  that  the  extract  of  tobacco  leaves  no  significant  impact  in hinting  the  growth  of  the  mold  C.  gloeosporioides  and  L.  theorobromae. Minimum concentration testing of tobacco leaves (KHM) shows that the extract of 50% concentration of tobacco leaves is KHM of the C. gloeosporioides and L.  theorobromae .  The  extract  of  100%  concentrated  tobacco  leaves  is  the minimum  kill  concentrate  (KBM)  of  L.  theorobromae.  Minimum  kill concentration of fungus C. gloeosporioides cannot be determined.
Keywords: Tobacco, Vegetable Fungicides, Flavonoid, Antifungal

## 1. Pendahuluan
Indonesia merupakan negara agraris dengan berbagai macam tanaman  dapat  tumbuh  subur  di  Indonesia,  salah  satunya  adalah tembakau.  Data  Statistik  Perkebunan  Indonesia Komoditi Tembakau  (2019)  menyatakan  bahwa  pada  tahun  2016  jumlah produksi  tembakau  mencapai  126.728  ton  dan  tahun  2019 mengalami  kenaikan  mencapai  197.250  ton.  70%  tanaman
tembakau  yang  dihasilkan  umumnya  hanya  digunakan  bagian daunnya saja untuk pembuatan rokok (Nugraha dan Agustiningsih, 2015).  Rokok  sangat  membahayakan  tubuh  manusia  serta lingkungan,  sehingga  perlu  diketahui  manfaat  lain  dari  tembakau agar bermanfaat positif dalam bidang lain, seperti bidang pertanian sebagai pembasmi berupa fungisida.
Fungisida  sudah  banyak  dikembangkan  salah  satunya fungisida  sintetik.  Fungisida  sintetik  memiliki  kekurangan yakni  bersifat  karsinogen  dan  berpotensi  menyebabkan  sel kanker (Idris dan Nurmansyah, 2015). Maka dari itu diperlukan alternatif  pengendalian  yang  aman  secara  ekologis  dengan penggunaan fungisida nabati. Fungisida nabati dapat diaplikasikan  pada  kerusakan  hasil  pertanian  yang  dapat menyebabkan pembusukan pada komoditi pertanian.
Pembusukan  komoditi  pertanian  umumnya  disebabkan oleh beberapa patogen seperti jamur Colletotrichum gloeosporioides dan Lasiodiplodia  theobromae. Serangan jamur  ini  dapat  ditanggulangi  dengan  penggunaan  fungisida nabati  ekstrak  daun  tembakau  yang  diketahui  dapat  merusak dinding  sel  jamur  dengan  cara  mendenaturasi  ikatan  hidrogen dalam  protein  pada  dinding  sel  jamur  sehingga,  kerusakan  ini membuat  matriks  intraseluler  jamur  akan  keluar  yang menyebabkan kematian sel jamur (Naufalin dkk., 2011).
Berdasarkan  uraian  diatas,  kerusakan  komoditi  pertanian disebabkan  oleh  jamur  diantaranya  jamur Colletotrichum gloeosporioides dan Lasiodiplodia  theobromae. Penggunaan daun  tembakau  sebagai  fungisida  nabati  dapat  menanggulangi kerusakan  pascapanen  tersebut.  Oleh  sebab  itu,  penelitian  ini akan  mengkaji  aktivitas  antibakteri  pada  ekstrak  daun tembakau  dan  pengaruhnya  terhadap  pertumbuhan  jamur Colletotrichum gloeosporioides dan Lasiodiplodia theobromae .
2. Bahan dan Metode

## 2.1 Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian  ini  dilaksanakan  di  Laboratorium  Manajemen Agroindustri,  Laboratorium  Mikrobiologi,  dan  Laboratorium Enjiniring  Hasil  Pertanian,  Fakultas  Teknologi  Pertanian Universitas  Jember  pada  bulan  Desember  2019  sampai  dengan Juli 2020.

## 2.2 Bahan dan Alat Penelitian
Bahan yang digunakan adalah daun tembakau, biakan jamur Colletotrichum  gloeosprioides dan Lasiodiplodia  theorobromae , media Potato  Dextrose  Agar,  Potato  Dextrose  Broth, kertas whatman  no.  42,  tissue,  etanol  70%,  H 2 SO 4 ,  kertas  label,  dan aquades.  Adapun  alat  yang  digunakan  antara  lain  timbangan analitik, bekker  glass 500 ml, dry blender, evaporator, pengaduk, erlenmeyer  50  ml,  erlenmeyer  250  ml,,  tabung  reaksi,  jarum  ose,
pipet pasteur, inkubator, penyaring, wadah steril, spektofotometer, moisture  meter ,  mikropipet, laminar  air  flow ,  cawan  petri,
autoclave , dan alat pelubang kertas .

## 2.3 Rancangan Penelitian
Rancangan  penelitian  ini  menggunakan  Rancangan  Acak Lengkap  (RAL)  dengan  3  kali  ulangan.  Rancangan  perlakukan yang dilakukan dapat dilihat pada tabel 1.

## Tabel 1. Rancangan Perlakuan
Kode Jenis perlakuan bahan A0 Potato Dextone Agar + C gloesporioides kontrol tanpa ekstrak B0
Potato Dextrose Agar + L. theorobromae kontrol tanpa ekstrak A1 L. theorobromae + pemberian 25% ekstrak daun tembakau B1 L. theorobromae + pemberian 25% ekstrak daun tembakau A2 C.  gloeosporioides+ pemberian 50% ekstrak daun tembakau
B2
L.  theorobromae + pemberian 50% ekstrak daun tembakau A3 C.  gloeosporioides + pemberian 75% ekstrak daun tembakau B3 L. theorobromae + pemberian 75% ekstrak daun tembakau A4 C. gloeosporioides + pemberian 100% ekstrak daun tembakau B4 L. theorobromae + pemberian 100% ekstrak daun tembakau

## 2.4 Prosedur Penelitian
Pada penelitian ini adapun tahapan prosedur ektraksi daun tembakau dengan metode esktraksi maserasi untuk memperoleh  ekstrak  daun  tembakau  dan  pengaplikasiannya adalah sebagai berikut :
Uji Efektivitas Ekstrak Daun Tembakau dalam Mengatasi Pertumbuhan Jamur Colletotrichum gloeosporiodes dan Lasiodiplodia theorobromae
Gambar 1. Prosedur penelitian metode ekstraksi maserasi ekstrak daun tembakau
4 kg daun tembakau Pengeringan Dihaluskan menggunakan dry blender Penimbangan
Maserasi pada suhu 25 o C  (3 x 24 jam) Pengadukan 1 x 24 jam Penyaringan Maserasi Etanol 70 % 500 ml Ekstrak tembakau A Ekstrak daun tembakau
Penguapan menggunakan rotary evaporator suhu 60 o C kecepatan putar 100 rpm, tekanan 0.06 – 0.08 mpa selama 5 jam
Ekstrak daun tembakau kental
Penimbangan
Penyimpanan dalam wadah steril

## 2.5 Prosedur Analisa Uji Flavonoid
Pengujian  dilakukan  dengan  mengambil  3  tetes  ekstrak daun  tembakau  menggunakan  pipet  tetes  kemudian  diletakkan pada  plat  tetes.  Ekstrak  ditambahkan  dengan  pereaksi  H 2 SO 4 .
Larutan yang mengandung flavonoid akan berubah warna menjadi kuning, merah, atau cokelat.

## 2.6 Uji Antifungi (Suryadi dkk., 2016)
Uji antifungi dilakukan menggunakan metode cakram. Alat dan  bahan  yang  digunakan  dilakukan  sterilisasi  menggunakan autoclave selama  15  menit  pada  suhu  121 0 C.  Rumus  perhitungan diameter  rata-rata  zona  hambat  menurut  Pratiwi  (2010)  sebagai berikut:
Diameter zona hambat rata-rata (mm) =   ( 𝐴 1 + 𝐴 2 + 𝐴 3)
3
Keterangan  : A1=  daerah  zona  bening  ulangan  1  konsentrasi 25%;  B1=  daerah  zona  bening  ulangan  1  konsentrasi  50%;  C1= daerah zona bening ulangan 1 konsentrasi 75%;  D1= daerah zona bening  ulangan  1  konsentrasi  100%;  A2=  daerah  zona  bening ulangan  2  konsentrasi  25%;  B2=  daerah  zona  bening  ulangan  2 konsentrasi  50%;  C2=  daerah  zona  bening  ulangan  2  konsentrasi 75%;  D2=  daerah  zona  bening  ulangan  2  konsentrasi  100%;  A3= daerah zona bening ulangan 3 konsentrasi  25%;  B3= daerah zona bening  ulangan  3  konsentrasi  50%;  C3=  daerah  zona  bening
ulangan  3  konsentrasi  75%;    D3=  daerah  zona  bening  ulangan  3 konsentrasi 100%.

## 2.7 Uji Konsentrasi Hambat Minimum (KHM) (Pratiwi, 2010)
Uji  Konsentrasi  Hambat  Minimum  (KHM)  dilakukan menggunakan  metode  dilusi  tabung.  Pengukuran  nilai  absorbansi dilakukan  spektrofotometer pada panjang gelombang 600 nm.

## 2.8 Uji Konsentrasi Bunuh Minimum (Pratiwi, 2010)
Uji  Konsentrasi  Bunuh  Minimum  (KBM)  dilakukan menggunakan  metode  dilusi  agar  dengan  cara  penanaman jamur  dengan  konsentrasi  ekstrak  daun  tembakau  yang diketahui  merupakan  nilai  KHM  pada  media  PDA  ( Potato Dextrose  Agar )  pada  cawan  petri  kemudian  diinkubasi  pada suhu  30 0 C  selama  24  jam.  KBM  ditunjukkan  dengan  tidak adanya koloni jamur yang tumbuh pada media.

## 3. Hasil dan Pembahasan

## Uji flavonoid
Berdasarkan  penelitian  yang  dilakukan,  ekstrak  daun tembakau  yang  telah  ditetesi  H 2 SO 4 diketahui  mengalami perubahan warna dari warna hijau kekuning-kuningan berubah menjadi coklat tua. Penambahan H 2 SO 4 berfungsi menghidrolisis  flavonoid  menjadi  aglikonnya,  yaitu  dengan menghidrolisis  O - glikosil  dan  tergantikan  oleh  gugus  H + dari
8.33ab 7.67ab
6.00ab
4.33ab 4.00ab 2.00a
asam  karena  sifatnya  elektrofilik.  Reduksi  ini  akan menghasilkan senyawa kompleks yang berwarna jingga, merah hingga  coklat  pada  flavonol,  flavanon,  flavanonol  dan  xanton (Ikalinus dkk., 2015).
10.00 8.00 6.00 4.00 2.00 0.00      25% 50% 75% 100% 25% 50% 75% 100% colletotrichum
lasiodiplodia
Gambar 2. Hasil Rata-Rata Zona Hambat Ekstrak Daun Tembakau
Berdasarkan hasil ANOVA, rata-rata diameter zona hambat ekstrak  daun  tembakau  didapatkan  nilai  sig.(p<0,05)  sehingga dilanjutkan  dengan  uji  Duncan’s  Multiple  Range  Test  (DMRT).
Hasil uji Duncan menunjukkan ekstrak daun tembakau konsentrasi 25%  berbeda  nyata  dalam  menghambat  pertumbuhan  jamur L. theorobromae ditunjukan  dengan  notasi  yang  berbeda.  Namun, pada  perlakuan  25%  ekstrak  daun  tembakau  terhadap  jamur C. gloeosporioides, ekstrak  daun  tembakau  konsentrasi  50%,  75% dan  100%  terhadap  jamur C.  gloeosporioides dan Lasiodiplodia tidak  menunjukkan  adanya  perbedaan  yang  nyata.  Hal  tersebut menunjukan  bahwa  ekstrak  daun  tembakau  tidak  memberikan pengaruh  signifikan  dalam  menghambat  pertumbuhan  jamur C.

## Uji Efektivitas Ekstrak Daun Tembakau dalam Mengatasi Pertumbuhan
gloeosporioides dan L.  theorobromae ditunjukkan  dengan  notasi yang sama pada tabel hasil Uji Duncan.
Menurut  Putri  dkk.  (2014)  ekstrak  daun  tembakau  tidak berpengaruh  secara  nyata  karena  ekstrak  tembakau  yang digunakan  merupakan  ekstrak  kasar  sehingga  mengakibatkan menurunnya  aktivitas  antimikroba  dari  ekstrak  yang  dihasilkan. Faktor  lain  yang  diduga  berpengaruh  terhadap  zona  hambat  yang dihasilkan  adalah  umur  mikroba.  Mikroba  yang  berumur  muda akan  lebih  mudah  mengalami  denaturasi  protein  sehingga  daya hambat  yang  dihasilkan  oleh  ekstrak  akan  besar.  Sebaliknya, mikroba  yang  berumur  tua  lebih  rentan  terhadap  senyawa  lain yang dapat merusak dinding selnya sehingga ketika diberi ekstrak zona hambat yang dihasilkan akan kecil (Octarya, 2015).

## Uji Konsentrasi Hambat Minimum dan Uji Konsentrasi Bunuh Minimum
Tabel  2.  Hasil  uji  KHM  ekstrak  tembakau  terhadap  jamur
Lasiodiplodia theobromae No Larutan uji Rata-rata Keterangan Sebelum Sesudah 1 100% 1.575 1.545 Turun 2 75% 1.672 1.534 Turun 3 50% 1.387 1.325 Turun 4 25% 0.801 1.029 Naik 5 Kontrol + 0.239 1.106 Naik 6 Kontrol - 1.710 1.710 Tetap
Tabel  3.  Hasil  uji  KHM  ekstrak  tembakau  terhadap  jamur C.

## gloeosporioides
No Larutan uji Rata-rata Keterangan Sebelum Sesudah 1 100% 1.443 1.169 Turun 2 75% 1.440 1.437 Turun 3 50% 1.339 1.295 Turun 4 25% 0.807 0.885 Naik 5 Kontrol + 0.316 1.005 Naik 6 Kontrol - 1.710 1.710 Tetap
Berdasarkan  data  diketahui  nilai  OD  pada  uji  KHM jamur L.  theorobromae dan C.  gloeosporioides sama-sama mengalami  penurunan  nilai  absorbansi  pada  konsentrasi  50%, 75%,  dan  100%  sedangkan  pada  konsentrasi 25%  nilai OD masih  tetap  naik.  Hal  tersebut  menunjukkan  bahwa  semakin tinggi  konsentrasi  ekstrak  menyebabkan  nilai  OD  turun, sehingga  penghambatan  pada  pertumbuhan  jamur  dibuktikan dengan  nilai  jumlah  sel  jamur  yang  tumbuh.  Hal  ini  sesuai dengan  pernyataan  Gharnita  dkk.  (2019)  yang  menyatakan bahwa,  semakin  tinggi  konsentrasi  ekstrak  yang  digunakan maka  semakin  rendah  pula  jumlah  koloni  jamur  yang dihasilkan.
Nilai  OD  yang  masih  mengalami  kenaikan  (≥  0)  dapat dimungkinkan  karena  ekstrak  daun  tembakau  yang  digunakan belum  bisa  menghambat  pertumbuhan  jamur  dikarenakan konsentrasinya  yang  kurang  tinggi.  Menurut  penelitian  Duila
(2017)  ekstrak  tembakau  konsentrasi  25%  merupakan konsentrasi  terendah  dimana  memiliki  campuran  aquadest terbanyak  dibandingkan  konsentrasi  lainnya,  sehingga  lebih banyak  memiliki  kandungan  air  dibandingkan  kandungan senyawa  aktif  yang  dapat  berpengaruh  terhadap  pertumbuhan jamur C. gloeosporioides dan L. theorobromae.
Berdasarkan  penelitian  yang  dilakukan,  konsentrasi ekstrak  daun  konsentrasi  50%  merupakan  konsentrasi  hambat minimum  dalam  menghambat  pertumbuhan  jamur C. gloeosporioides dan L.  theorobromae. Sedangkan  untuk Konsentrasi  Bunuh  Minimum  (KBM),  ekstrak  daun  tembakau konsentrasi  100%  merupakan  nilai  KBM  dalam  membunuh pertumbuhan  jamur L.  theorobromae karena  dapat  membunuh pertumbuhan jamur secara maksimal ditunjukkan tidak adanya koloni  jamur  pada  media  agar.  Ekstrak  daun  tembakau konsentrasi  50%,  75%,  dan  100%  tidak  menunjukkan  adanya pengaruh dalam membunuh pertumbuhan jamur C. gloeosporioides sehingga Konsentrasi Bunuh Minimum (KBM) tidak  dapat  ditentukan  Spesies  mikroorganisme  sangat berpengaruh ketika diberi ekstrak tanaman. Senyawa aktif yang terkandung  dalam  ekstrak  daun  tembakau  belum  bisa mengimbangi pertumbuhan jamur C. gloeosporioides sehingga belum dapat menentukan nilai KBM. Hal tersebut dimungkinkan  karena  adanya  perbedaan  komponen  penyusun
Gontor AGROTECH Science Journal                                                485
dinding  sel  pada  jamur C.  gloeosporioides dan L. theorobromae . Dinding sel dengan struktur lebih komplek atau tebal  akan  meyebabkan  senyawa  antimiroba  yang  diuji  tidak dapat  masuk  sehingga  tidak  dapat  menghambat  laju pertumbuhan jamur (Yeni dkk., 2010).

## 4. Kesimpulan
Ekstrak  daun  tembakau  berpengaruh  secara  nyata  dalam mengahambat  pertumbuhan  jamur C.  gloeosporioides dan L. theorobromae. Konsentrasi  Hambat  Minimum  (KHM)  ekstrak daun  tembakau  terhadap  jamur C.  gloeosporioides dan L. theorobromae. adalah  konsentrasi  50%.  Ekstrak  daun  tembakau konsentrasi  100%  merupakan  Konsentrasi  bunuh  minimum (KBM)  dalam  membunuh  pertumbuhan  jamur L.  theorobromae.
Konsentrasi bunuh minimum (KBM) ekstrak daun tembakau pada jamur C.  gloeosporioides tidak  dapat  ditentukan  karena  masih adanya koloni jamur yang tumbuh pada media agar.

## 5. Acknowledgement
Dalam  pelaksanaan  penelitian    ini  tidak  terlepas  dari dukungan  berbagai  pihak.  Peneliti  secara  khusus  mengucapkan terima kasih kepada semua pihak yang membantu, yang memberi dukungan,  petunjuk  dan  bantuan  serta  dorongan  dari  berbagai
Wildan Fajar Bachtiar, Galih Kusuma Aji , Diklusari Isnarosi Norsita
pihak baik  yang bersifat moral maupun material. Oleh karena itu, peneliti ingin menyampaiakan terima kasih kepada
a. Dr.  Siswoyo  S,  S.TP.,  M.  Eng.,  selaku  Dekan  Fakultas Farmasi Universitas Jember
b. Andrew  Setiawan,  S.  TP.,  M.Si.,  selaku  Dosen  Pembimbing
Utama  dan  Andi  Eko  Wiyono,  S.TP.,  M.Sc  selaku  Dosen Pembimbing  Anggota dengan  penuh kesabaran  memberi bimbingan, dorongan, perhatian, dan saran kepada peneliti.
c. Dr.  Ir.  Sony  Suwarsono,  M.  App,  Sc.,  selaku  Dosen  Penguji Utama  dan  Winda  Amalia,  S.TP.,  M.Sc.,  selaku  Dosen Penguji  Anggota  yang  telah  memberikan  saran  dan  kritik yang membangun.
d. Semua pihak yang terlibat baik secara langsung maupun tidak langsung  memberikan  bantuan  dan  dukungan  dalam penyelesaian penelitian ini.

## 6. Referensi
Badan Pusat Statistik. 2019. Statistik Indonesia. Jakarta : Pustaka
Sinar Harapan.
Duila,  M.  I.  2017.  Ekstrak  Tembakau  ( Nicotiana  Tabacum  L .)
Sebagai  Fungisida  Nabati  Pada  Antraknosa  Cabai  Merah Yang  Disebabkan  Jamur  Colletotrichum  Sp  Secara  In  Vitro.
Fakultas Pertanian Universitas Muhammadiyah Jember.
Gharnita,  Y.  S.,  Lelyana,  S.,  Sugiaman,  V.  K.  2019.  Kadar
Hambat Minimum (KHM) Dan
Kadar  Bunuh  Minimum  (KBM)  Ekstrak  Etanol  Daun Ketepeng  Cina  ( Cassia  Alata  L.) Terhadap  Pertumbuhan Candida  Albicans.  Sound  Of  Dentistry  e-ISSN  2685-1822. 4
(1) : 1- 57
Idris,  H.  Dan  Nurmansyah.  2015.  Efektivitas  Ekstrak  Etanol
Beberapa  Tanaman  Obat  Sebagai  Bahan  Baku  Fungisida Nabati Untuk Mengendalikan Colletotrichum
gloeosporioides. Balai  Penelitian  Tanaman  Rempah  dan Obat. Bul. Littro. 26(2) : 117-124.
Ikalinus,  R.,  Widyastuti,  S.  K.,  Setiasih,  N.  L.  E.  2015.  Skrining Fitokimia  Ekstrak  Etanol  Kulit  Batang  Kelor  ( Moringa Oleifera ). Indonesia  Medicus  Veterinus  ISSN  2301-7848.
4(1): 71-79.
Naufalin,  R.,  Santi,  D.  A.  Dan  Rumpoko  W.  2011.  Produksi Coating Antimikroba Berbasis Lilin Alami Dan Kompisit Pati Dengan  Senyawa  Antimikroba  Ekstrak  Limbah  Daun Tembakau Untuk Penanganan Pascapanen Buah dan Sayuran. Purwokerto:
Lembaga Penelitian Dan Pengabdian
Masyarakat, Universitas Jenderal Soedirman.
Nugraha,  S.  dan  Agustiningsih,  W.  2015.  Pelatihan  Pemanfaatan
Limbah  Tembakau  Sebagai  Bahan  Pembuatan  Biopestisida Nabati. Jurnal Inovasi dan Kewirausahaan. 4(1) : 63-67.
Octarya,  Z.,  Dan  R.  Saputra.  2015.  Pengaruh  Jenis  Pelarut Terhadap  Jumlah  Ekstrak  Dan  Daya  Antifungi  Daun
Uji Efektivitas Ekstrak Daun Tembakau dalam Mengatasi Pertumbuhan Jamur Colletotrichum gloeosporiodes dan Lasiodiplodia theorobromae
Ketepeng Cina ( Cassia  alata) Terhadap Jamur Trychophyton sp. Jurnal Photon. 5 (2) : 15 – 21.
Pratiwi, S. T. 2010. Mikrobiologi Farmasi. Jakarta : Erlangga.
Putri,  R.  H.  Barid,  I.  Kusumawardani,  B.  2014.  Daya  Hambat Ekstrak  Daun  Tembakau  Terhadap  Pertumbuhan  Mikroba Rongga Mulut. Stomatognatic (J. K. G Unej). 11 (2) : 27-31.
Yeni,  D.  S.,  Siti,  N.  D.,  Laela,  H.  N.  2010.  Uji  Aktivitas Antibakteri  Infusa Daun Sirsak ( Annona  muricata  L.) Secara In  Vitro  Terhadap Staphyllococcus  aureus ATCC  25923  dan Eschericia Coli ATCC 35218 Serta Profil Kromatografi Lapis
Tipisnya. Jurnal ISSN : 1978-0575. 4(3) : 144-239.